JP2000510814A

JP2000510814A - 新規なベンゾフラン医薬化合物

Info

Publication number: JP2000510814A
Application number: JP08527728A
Authority: JP
Inventors: ブライアント，ヘンリー・ユー; ドッジ，ジェフリー・エイ
Original assignee: Eli Lilly and Co
Current assignee: Eli Lilly and Co
Priority date: 1995-03-10
Filing date: 1996-03-07
Publication date: 2000-08-22
Also published as: MX9706738A; ATE189678T1; US5523309A; PT731097E; CA2214450A1; EP0731097B1; DE69606566T2; DK0731097T3; AU692690B2; AU5187396A; BR9607774A; IL117396A; ES2142021T3; EP0731097A1; GR3033326T3; IL117396A0; WO1996028152A1; ZA961882B; DE69606566D1

Abstract

(57)【要約】本発明は、式（I）：

Description

【発明の詳細な説明】新規なベンゾフラン医薬化合物発明の背景本発明は、薬化学および有機化学の領域に関し、閉経後症候群、子宮類線維腫疾患、子宮内膜炎、および平滑筋細胞増殖に関連する様々な医学的兆候の治療に有用な新規のベンゾフラン化合物を提供する。「閉経後症候群」なる用語は、閉経として知られる生理学的変化に差しかかったかまたは完了した女性にしばしば影響を及ぼす様々な病理学的状態を記載するために用いられる。多くの病状が、この用語の使用によって意図されるけれども、閉経後症候群の３つの主な影響が最も長期間医学において使用されてきた：骨粗鬆症、高脂質血症のような心臓血管の影響、およびエストロゲン依存性の癌、特に乳癌および子宮癌。骨粗鬆症は、様々な病因から生じる一群の疾患をいい、単位体積当たりの骨の質量の正味の損失によって特徴付けられる。骨質量のこの損失とその結果生じる骨折の結果、構造上十分に体を支えている骨格が衰弱する。最も一般的なタイプの骨粗鬆症の１つは、閉経に関連するものである。大部分の女性は、月経停止後３年から６年以内に骨の小柱の構成部分において骨質量の約２０％から約６０％を損失する。この急速な損失は、一般に骨の吸収および形成の増加に関連するが、骨の吸収のサイクルがより支配的であり、その結果は骨質量の正味の減少である。骨粗鬆症は閉経後の女性にとっては一般的で深刻な病気である。米国だけでも、これらの病気に悩まされている女性だけでも２５００万人いると見積もられる。骨粗鬆症の結果は個人的な損害となり、またその慢性のために大きい経済的な損失を計上し、その病気の後遺症により広範囲で長期間の介護（入院および在宅医療での看護）を必要とする。年長の患者ほど、このことについては特に確かなことである。さらに、骨粗鬆症は生命を脅かす状態であるとは一般に考えられていないが、老人女性の２０％から３０％の死亡率が股関節の骨折に関連する。この高い死亡率のパーセントは閉経後の骨粗鬆症に関連し得る。骨において、閉経後の骨粗鬆症の影響を最も受け易い組織は小柱である。この組織はしばしば、海綿状のまたは網状の骨を指し、特に骨の末端近く（関節の近く）、および脊柱の椎骨に集中している。小柱組織は、他の小柱組織と互いに相互連結する小さな骨状の組織、並びに骨の表面および中心幹を形成するより堅く密な皮質性の組織よって特徴づけられる。小柱のこの相互に連結した網状組織は、外部皮質性構造を側方から支持し、構造全体にわたる生体力学的強度にとって決定的なものである。閉経後の骨粗鬆症においては、骨の不全および骨折をもたらすのは小柱の正味の吸収および損失である。閉経後の女性における小柱の損失からみれば、最も一般的な骨折が、小柱の支持に大いに依存する骨、例えば椎骨、大腿および前腕のような重量を支える骨の頸に関連した骨折であるということは意外なことではない。確かに、股関節の骨折、コリーズ（collies）骨折、および脊柱の粉砕骨折は、閉経後の骨粗鬆症の際立った特質である。現時点で、閉経後の骨粗鬆症の処置の最も一般に用いられる方法は、エストロゲン置換療法である。治療は通常はうまく行くが、患者のこの治療に対する同意は低いものである。主として、エストロゲン療法はしばしば好ましくない副作用を生ずるからである。閉経前の時期にわたって、大部分の女性は、同年齢の男性よりも心臓血管の病気の発生率が低い。しかし、閉経後は女性の心臓血管の病気の発生率は男性にみられる割合に匹敵してゆっくりと増加する。この保護の損失は、エストロゲンの損失、特に、血清脂質レベルを調節するエストロゲンの能力の損失に関連している。血清脂質を調節するエストロゲンの能力の性質はよく理解さていないが、現在までのところ、エストロゲンが過剰のコレステロールを除去する肝臓の低密度脂質（ＬＤＬ）レセプターを上方調節し得ることを示す証拠はある。さらに、エストロゲンは、コレステロールの生合成にある影響を及ぼし、心臓血管の健康にとって別の有益な影響を及ぼしているようである。エストロゲン置換療法を受けている閉経後の女性において、血清脂質の濃度レベルが閉経前にみられた濃度に戻ることが文献に報告されている。したがって、エストロゲンは、この状態のための合理的な処置であるように思われよう。しかし、エストロゲン置換療法の副作用は、多くの女性にとっては受け入れられないものであり、したがって、この療法の使用が制限される。この状態のための理想的な治療は、エストロゲンと同様に血清脂質レベルを調節するが、副作用およびエストロゲン療法に関連した危険性が全くない薬剤による治療であろう。閉経後症候群に関連する第３の主な病状は、エストロゲン依存性の乳癌、およびより低い程度でのエストロゲン依存性の他の器官の癌、特に子宮癌である。このような腫瘍は、閉経後の女性だけに限られるものではないが、年長の閉経後の女性の群により一般的なものである。これらの癌の現在の化学療法は、タモキシフェンのような抗エストロゲン化合物の使用に大いに依存している。このような混成アゴニスト−アンタゴニストは、これらの癌の処置において有益な効果を有し、エストロゲンの副作用は生命が脅かされる緊急の状態においては許容できるものの、理想的ではない。例えば、これらの薬剤は、それらが有するエストロゲン（アゴニスト）の特性のために、子宮におけるある癌細胞の群に対して刺激的影響を及ぼすことがあり、したがって、ある場合には反対の効果を有することがある。これらの癌の処置のためのより良い治療は、繁殖する組織に対してエストロゲンアゴニスト特性が無視し得るかまたは全く存在しない抗エストロゲン化合物による治療であろう。特に閉経後症候群の症状を緩和することが可能な新規薬剤に対する明確な必要性に応えるべく、本発明はベンゾフラン化合物、該化合物を含む医薬組成物、および閉経後症候群および他のエストロゲンが関与する病状の処置のための、このような化合物の使用方法を提供する。子宮線維症（子宮類線維腫疾患）は、子宮類線維腫疾患、子宮肥大、子宮平滑筋腫、子宮筋層肥大、線維増多子宮および子宮筋層炎を含む様々な病名で呼ばれている古くから存在する臨床的問題である。本質的には子宮線維症は子宮の壁に不適当な類線維組織の沈着が存在する状態である。この状態は女性の月経困難および不妊症の原因である。この原因は、エストロゲンに対する類線維組織の不適切な応答であるという証拠が示唆されていることを除けば、この状態の正確な原因は十分には分かってはいない。このような状態はウサギにエストロゲンを３ヶ月間毎日投与すると起こる。モルモットは４ヶ月間の毎日の投与でこの状態になる。さらに、ラットにおいてはエストロゲンは同様の肥大を起こす。子宮線維症の最も一般的な治療には、高価で、時には腹部の癒着および感染などの合併症の原因になる外科手術が含まれる。患者の中には最初の手術が一時的な治療のみで類線維腫が再発する者もいる。このような場合、類線維腫を効果的に止める子宮摘出を行うが、その患者は生殖能力を失う。またゴナドトロピン放出ホルモン拮抗薬も投与できるが、骨粗鬆症を引き起こし得るということから使用が加減される。したがって、子宮線維症を処置するための新規の方法が必要とされており、本発明はこの要求を満足するものである。子宮内膜炎は鋭い痛み、子宮内膜塊内または腹膜内への出血を伴う深刻な月経困難の状態であり、しばしば不妊症につながる。この状態の症状の原因は、正常なホルモン制御に応答するものの、不適切な組織に存在する異所性の子宮内膜の成長であるとみられる。不適切な位置での子宮内膜の成長のために、組織は局所的な炎症性応答を開始し、マクロファージの浸潤および疼痛応答に至るカスケード様の事象を引き起こすと思われる。これらの疾患の厳密な病因はよくわかっておらず、ホルモン治療による処置も様々で、十分には明らかにされておらず、多くの望ましくない、そしておそらくは危険な副作用に注意しなければならない。この疾患の処置法の１つは、低用量のエストロゲンを用い、中枢のゴナドトロピン放出への負のフィードバック効果を通して子宮内膜の増殖を抑制し、次いで、卵巣のエストロゲン生産を抑制することである。しかし、症状のコントロールのためにエストロゲンの継続的使用が必要な場合がある。このようなエストロゲンの使用はしばしば望ましくない副作用を招き、子宮内膜癌の危険性さえ招くことがある。もう１つの処置は、卵巣のエストロゲン生成を抑制することによって無月経を誘導するプロゲスチンの継続的投与からなるが、子宮内膜の成長の退行を起こすことある。長期間のプロゲスチン治療の使用は、しばしばプロゲスチンの中枢神経系の不快なＣＮＳ副作用を伴い、卵巣の機能の抑制のために不妊症につながることが多い。第三の処置は、子宮内膜炎をコントロールするのに効果的な、弱いアンドロゲンの投与からなる。しかし、アンドロゲンは深刻な男性化を引き起こす。子宮内膜炎のためのこれら処置のいくつかは、継続的な使用によって軽い骨損失にも関係してくる。従って、子宮内膜炎の新しい治療の方法が望まれる。大動脈平滑筋細胞の増殖は、アテローム性動脈硬化症および再狭窄のような疾患において重要な役割をしている。経皮経管冠動脈形成（ＰＴＣＡ）後の血管の再狭窄は、初期および後期に特徴的な組織の応答であると示されている。ＰＴＣＡ後数時間〜数日の初期が、血管攣縮を伴う血栓症に起因する一方、後期は大動脈平滑筋細胞の過度の増殖および移動によって支配されるようである。細胞運動性の増加、およびこのような筋細胞およびマクロファージによる集落形成が、この疾患において重要な病因になっている。血管の大動脈平滑筋の過度の増殖および移動がＰＴＣＡ、レーザー血管形成術、および動脈バイパス移植手術後の、冠状動脈の再閉塞の主要な機構であろう（Austinら，“Intimal Proliferation of Smooth Muscle Cells as an Explanation for Recurrent Coronary Artery Ste nosis after Percutaneous Transluminal Coronary Angioplasty”，Journal of the American College of Cardiology，8：369〜375（1985年8月）を参照）。ＰＴＣＡ、アテローム切除術、レーザー血管形成術および動脈バイパス移植手術などの外科的介入による動脈遮断の後に血管再狭窄が長期間の合併症として存続する。ＰＴＣＡを受けた患者の約３５％は術後、３〜６ヶ月以内に再閉塞が起こる。血管再狭窄の処置のために現在用いられている方法には、ステントなどの器具による機械的介入、またはヘパリン、低分子量ヘパリン、クマリン、アスピリン、魚油、カルシウム拮抗薬、ステロイド類、プロスタサイクリンを含む薬理学的治療が含まれる。これらの方法は再閉塞率を抑制できず、血管再狭窄の治療および予防に効果がない（Hermansら，“Prevention of Restenosis after Perc utaneous Transluminal Coronary Angioplasty：The Serch for a‘Magic Bulle t'”，American Heart Journal，122：171〜187（1991年7月）を参照）。再狭窄の病因においては、血液内および損傷した動脈管壁内で細胞成分によってつくられる、血管再狭窄における平滑筋の増殖を媒介する成長因子の結果として、過度の細胞増殖および移動が起こる。平滑筋細胞の増殖および／または移動を阻害する薬剤は、再狭窄の治療および予防に有用である。本発明は大動脈平滑筋細胞増殖阻害剤としての、そして即ち再狭窄の阻害剤としてのこれら化合物の使用を提供する。本発明は式（I）：［式中、Ｒ₁は、Ｈ、ＯＨ、ハロ、ＯＣＯ（Ｃ₁−Ｃ₆アルキル）、ＯＣＯ（アリール）、ＯＳＯ₂（Ｃ₄−Ｃ₆アルキル）、ＯＣＯＯ（Ｃ₁−Ｃ₆アルキル）、ＯＣＯＯ（アリール）、ＯＣＯＮＨ（Ｃ₁−Ｃ₆アルキル）またはＯＣＯＮ（Ｃ₁−Ｃ₆ アルキル）₂であり；Ｒ₂は、アリール、Ｃ₁−Ｃ₆アルキル、Ｃ₃−Ｃ₆シクロアルキルまたは４−シクロヘキサノールであり；Ｒ₃は、Ｏ（ＣＨ₂）₂またはＯ（ＣＨ₂）₃であり；Ｒ₄およびＲ₅は、必要に応じて、ＣＯ（ＣＨ₂）₂ＣＨ₃、ＣＯ（ＣＨ₂）₃ＣＨ₃ 、Ｃ₁−Ｃ₆アルキルであるか、またはそれらが結合している窒素と共にピペリジン、モルホリン、ピロリジン、３−メチルピロリジン、３,３−ジメチルピロリジン３,４−ジメチルピロリジン、アゼピンまたはピペコリンを形成する；Ｒ₆は、＞Ｃ＝ＣＨ₂、＞ＣＨ（Ｃ₁−Ｃ₅アルキル）、＞ＣＨ（Ｃ₂−Ｃ₅アルケニル）、＞Ｃ＝ＣＨ（Ｃ₁−Ｃ₅アルキル）、＞ＣＨ（アリール）、＞Ｃ（ＯＨ）（Ｃ₁−Ｃ₅アルキル）、＞Ｃ（ＯＨ）（Ｃ₂−Ｃ₅アルケニル）、＞Ｃ（ＯＨ）（アリール）である］で示される化合物またはその医薬的に許容し得る塩に関する。本発明はさらに、閉経後症候群、特に骨粗鬆症、心臓血管に関わる病的状態およびエストロゲン依存の癌の症状を軽減するための、式（I）の化合物を含有し、必要に応じてエストロゲンまたはプロゲスチンを含む医薬組成物およびそのような化合物の単独あるいはエストロゲンまたはプロゲスチンとの組み合わせての使用に関する。本明細書で用いる語句“エストロゲン”には、１７β−エストラジオール、エストロン、複合エストロゲン（Premarin：登録商標）、ウマエストロゲン、１７β−エチニルエストロゲンなどのエストロゲン様活性をもつステロイド化合物が含まれる。本明細書で用いる語句“プロゲスチン”には、プロゲステロン、ノルエチルノドレル、ノンゲストレル、酢酸メゲストロール、ノルエチンドロンなどのプロゲステロン様活性をもつ化合物が含まれる。本発明化合物は、女性における子宮繊維症および子宮内膜炎の阻害、並びにヒトにおける平滑筋細胞増殖、特に再狭窄の阻害にも有用である。本発明のひとつの態様は、式(Ｉ)：［式中、Ｒ₁は、Ｈ、ＯＨ、ハロ、ＯＣＯ（Ｃ₁−Ｃ₆アルキル）、ＯＣＯ（アリール）、ＯＳＯ₂（Ｃ₄−Ｃ₆アルキル）、ＯＣＯＯ（Ｃ₁−Ｃ₆アルキル）、ＯＣＯＯ（アリール）、ＯＣＯＮＨ（Ｃ₁−Ｃ₆アルキル）またはＯＣＯＮ（Ｃ₁−Ｃ₆ アルキル）₂であり；Ｒ₂は、アリール、Ｃ₁−Ｃ₆アルキル、Ｃ₃−Ｃ₆シクロアルキルまたは４−シクロヘキサノールであり；Ｒ₃は、Ｏ（ＣＨ₂）₂またはＯ（ＣＨ₂）₃であり；Ｒ₄およびＲ₅は、必要に応じて、ＣＯ（ＣＨ₂）₂ＣＨ₃、ＣＯ（ＣＨ₂）₃ＣＨ₃ 、Ｃ₁−Ｃ₆アルキルであるか、またはそれらが結合している窒素と共にピペリジン、モルホリン、ピロリジン、３−メチルピロリジン、３,３−ジメチルピロリジン３,４−ジメチルピロリジン、アゼピンまたはピペコリンを形成する；Ｒ₆は、＞Ｃ＝ＣＨ₂、＞ＣＨ（Ｃ₁−Ｃ₅アルキル）、＞ＣＨ（Ｃ₂−Ｃ₅アルケニル）、＞Ｃ＝ＣＨ（Ｃ₁−Ｃ₅アルキル）、＞ＣＨ（アリール）、＞Ｃ（ＯＨ）（Ｃ₁−Ｃ₅アルキル）、＞Ｃ（ＯＨ）（Ｃ₂−Ｃ₅アルケニル）、＞Ｃ（ＯＨ）（アリール）である］で示される化合物またはその医薬的に許容し得る塩である。本明細書中の化合物の記載において使用される一般的な用語は、それらの通常の意味を有する。例えば、「アルキル」は、炭素原子２〜６の直鎖のまたは分枝した脂肪族鎖を意味し、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、ｎ−ブチル、ペンチル、イソペンチル、ヘキシル、イソヘキシル等が含まれる。同様に、「Ｃ₂−Ｃ₆アルケン」は、炭素原子２〜６の直鎖のまたは分枝したアルケンを意味し、プロピレン、エチレン、イソプロピレン、ブチレン、ｎ−ブチレン、ヘキシレン、ペンチレン等が含まれる。本発明の化合物は、ベンゾフランの誘導体であり、この化合物は以下のように、米国化学会のRing Indexにしたがって命名、番号付けされる。本発明化合物の製造方法において、出発物質は式（ＩＩ）：［式中、Ｒ₇は水酸基の保護基であり；およびＲ₃、Ｒ₄およびＲ₅は前記と同意義である］で示される化合物またはその塩である。化合物（ＩＩ）の遊離塩基は許容しうる出発物質であるけれども、酸付加塩、特に塩酸塩が都合がよいことが多い。化合物（ＩＩ）は、当技術分野で既知であり、本明細書の一部を構成する米国特許第４,１３３,８１４号、同第４,３８０,６３５号および同第４,４１８,０６８号の記載にしたがって本質的に合成し得る。一般に、式（ＩＩＩ）：で示されるベンゾフラン前駆体は、当技術分野で既知の手法により製造し得る。代表的には標準的フリーデル−クラフツ条件下でアシル化に抵抗しうる公知の水酸基の保護基で２つの水酸基を保護し（化合物（ＩＩ）のＲ₅保護基を形成）、続いて強還元剤で還元する。好ましい水酸基の保護基は、Ｃ₁−Ｃ₄アルキルであり、メチルが特に好ましい。たとえば、上記の本発明の一部を構成する米国特許、J.W.バートンの“Protective Groups in Organic Chemistry”,J.G.W.マコーミー（編）,プレナム・プレス,ニューヨーク,ＮＹ，１９７３，チャプター２およびT.W.グリーンの“Protective Groups in Organic Synthesis”,ジョン・ウイリー・アンド・サンズ,ニューヨーク,ＮＹ，１９８１，チャプター７を参照。所望の保護された前駆体（ＩＩＩ）を製造した後、標準的なフリーデル−クラフツ条件の下で、前駆体を、式（ＩＶ）で示される化合物でアシル化する。［式中、ｎ、Ｒ₃、Ｒ₄およびＲ₅は前記と同意義であり；Ｒは、クロロ、ブロモ、ヨードまたは活性化エステル基である］。化合物（ＩＶ）の製造法ならびに好ましいアシル化法は、前記米国特許に開示されている。Ｒ₄およびＲ₅がそれぞれＣ₁−Ｃ₄アルキルである場合、メチルおよびエチルが好ましい。Ｒ₄およびＲ₅を組み合わせて共に用いる場合、１−ピペリジニルおよび１−ピロリジニルが好ましい。したがって、アシル化および化合物（ＩＩ）を製造した後、適当な溶媒に、化合物（ＩＩ）またはその塩を加え、次いで、窒素などの不活性ガス下で水素化リチウムアルミニウム（ＬＡＨ）などの還元剤と反応させることにより、Ｒ₇が− ＯＨである本発明化合物を製造する。適当な溶媒は、還元条件下で不活性な溶媒またはその混合物である。好適な溶媒として、ジエチルエーテル、ジオキサンおよびテトラヒドロフラン（ＴＨＦ）が挙げられる。これらの溶媒の無水物が好ましく、無水ＴＨＦが特に好ましい。この段階での温度は、還元反応が完了するのに十分な温度を採用する。周囲温度、約１７℃から約２５℃の範囲が適切である。この段階の時間の長さは、該反応が起こるのに必要な長さである。代表的には、この反応は、約１時間から約２０時間を必要とする。慣例のクロマトグラフィー技術で反応の進行をモニターすることによって、最適時間を決定することができる。次いで、Ｒ₆が＞Ｃ（ＯＨ）（Ｃ₁−Ｃ₅アルキル）、＞Ｃ（ＯＨ）（Ｃ₂−Ｃ₅ アルケニル）または＞Ｃ（ＯＨ）（アリール）である場合、α炭素（カルボキシ）をＲ₆で定義される基に変更する。ＲＬｉ、ＲＭｇＸまたはその他の該炭素の求核種［ここで、ＲはＣ₁−Ｃ₅アルキル、Ｃ₂−Ｃ₅アルケニルまたはアリールである］などの基を、０〜８５℃の温度にて前記と同様の適当な溶媒中で化合物（ＩＩ）に加える。反応が完了するに十分な時間が経過した後（１５分から２０時間）、飽和重炭酸ナトリウム水溶液を加え、次いで、混合物を抽出し、有機抽出物を合わせて洗浄し、乾燥、濾過、濃縮し、精製して化合物（Ｉａ）を製造する。Ｒ₆が＞ＣＨ（Ｃ₁−Ｃ₅アルキル）、＞ＣＨ（Ｃ₂−Ｃ₅アルケニル）または＞ＣＨ（アリール）である場合、上記化合物（Ｉａ）のα−水酸基を還元剤で還元する。十分な時間が経過した後（１５分から２４時間）、酢酸エチル／飽和重炭酸ナトリウム混合水溶液を用いて反応を停止する。混合物を抽出し、有機層を洗浄し、乾燥、濾過、濃縮し、次いで、精製して化合物（Ｉｂ）を得る。この反応を行うための別法として、（ａ）Ｅｔ₂ＡｌＣｌ₂またはＢＦ₃・Ｅｔ₂Ｏなどのルイス酸とトリアルキルシラン；（ｂ）パラジウム／炭素などの触媒を用いる水添分解（Ｈ₂）を用いる方法が挙げられる。さらに、ジクロロメチルシラン、次いで、ヨウ化ナトリウムの使用が有効である。Ｒ₆が＞Ｃ＝ＣＨ（Ｃ₁−Ｃ₅アルキル）である場合、適当な溶媒中、適当な化合物（Ｉａ）を１０℃〜−２５℃に冷却する。その後、水酸基を除去する。このような除去は、ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）などの塩基を添加し、次いで、塩化メタンスルホニル、そして再度ＤＭＡＰを添加することによって遂行することができる。別法として、カルボニル化合物をＲ₂ ⁺Ｐ−ＣＨ（Ｃ₁−Ｃ₅アルキル）などのホスホニウムイリドと反応させることによって、所望のアルケンを製造することができる。Ａｒ₂Ｐ（Ｏ）ＣＨＲまたは（ＲＯ）₂Ｐ（Ｏ）ＣＨＲなどの他の有機リン（３価）化合物を用いることもできる［ボウタジーらのChem R eviews,74,87(1974)］。公知の操作により、Ｒ₁とＲ₂の水酸基を−Ｏ−ＣＯ−（Ｃ₁−Ｃ₆アルキル）、 −Ｏ−ＣＯ−Ａｒ［ここでＡｒは必要に応じて置換フェニル］、または−Ｏ−ＳＯ₂−（Ｃ₄−Ｃ₆アルキル）で置換することにより他の化合物が製造される。前記米国特許４３５８５９３号参照。たとえば、−Ｏ−ＣＯ−（Ｃ₁−Ｃ₆アルキル）または−Ｏ−ＣＯ−Ａｒを所望する場合。ジヒドロキシ化合物（Ｉ）塩化アシル、臭化物、シアン化物またはアジ化物などの作用剤と反応させる。反応は、ピリジン、ルチジン、キノリンまたはイソキノリンなどの塩基性溶媒中、あるいはトリエチルアミン、トリブチルアミン、メチルピペリジンなどの第３アミン中で慣例どおりに行う。、少なくとも１当量の酸スカベンジャー（第３アミンなど）を加えた、酢酸エチル、ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシド、ジオキサン、ジメトキシエタン、アセトニトリル、アセトン、メチルエチルケトンなどの不活性溶媒中で反応を行ってもよい。要すれば、４−ジメチルアミノピリジンまたは４−ピロリジノピリジンを用いてもよい。ハスラムらのTetrahedron,36:2409-2433(1980)を参照。前記Ｒ₁およびＲ₂を提供するアシル化反応は、約−２５℃〜約１００℃の範囲の適度の温度にて行うが、窒素ガスなどの不活性雰囲気下である場合も多い。しかし、通常は、周囲温度で行うのが適当である。このような水酸基のアシル化は、不活性有機溶媒中あるいは加熱下で適当なカルボン酸の酸一触媒反応によって行ってもよい。硫酸、リン酸、メタンスルホン酸などの酸触媒を用いる。前記Ｒ₁およびＲ₂は、ジシクロヘキシルカルボジイミド、アシルイミダゾール、ニトロフェノール、ペンタクロロフェノール、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドおよび１−ヒドロキシベンゾトリアゾールなどの公知の試薬によって形成されるエステルなどの、適当な酸の活性エステルを形成することによって得ることもできる。たとえば、Bull．Chem．Soc．Japan,38:1979(1965)およびChem.Ber.788と 2024(1970)を参照。 −Ｏ−ＣＯ−（Ｃ₁−Ｃ₆アルキル）または−Ｏ−ＣＯ−Ａｒを得る上記方法のいずれも上述した溶媒中で行う。反応の過程で酸生成物を製造しないこれらの方法は、もちろん、反応混合物中に酸スカベンジャーの使用を必要としない。Ｒ₁およびＲ₂が−Ｏ−ＳＯ₂−（Ｃ₄−Ｃ₆アルキル）である化合物（Ｉ）を所望する場合、キングおよびモノーのJ．Am．Chem．Soc.,97:2566-2567(1975)に教示されているように、ジヒドロキシ化合物（Ｉ）を、たとえば、塩化スルホニル、臭化物またはスルホニルアンモニウム塩などの適当なスルホン酸の誘導体と反応させる。ジヒドロキシ化合物を適当な無水スルホンと反応させることもできる。このような反応は、前記の酸ハライドとの反応で述べたような条件下で行う。Ｒ₁およびＲ₂が異なる有機保護基を有するように、化合物（Ｉ）を製造することができるが、Ｒ₁およびＲ₂がそれぞれ同じ有機保護基を有するのが好ましい。好ましい保護基として、−ＯＣＨ₃、−Ｏ−ＣＯ−Ｃ（ＣＨ₃）₃、−Ｏ−ＣＯ− Ｃ₆Ｈ₅および-Ｏ−ＳＯ₂−（ＣＨ₂）₃−が挙げられる。化合物（Ｉ）の遊離塩基体を本発明方法に用いることはできるが、医薬的に許容しうる塩体を製造し、用いるのが好ましい。したがって、本発明の方法に使用される化合物は、主として、広範囲の有機及び無機の酸との医薬的に許容し得る酸付加塩を形成し、薬化学においてしばしば使用される生理学的に許容し得る塩を含む。このような塩もまた、本発明の一部を構成する。このような塩の形成に使用される典型的な無機の酸には、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硝酸、硫酸、リン酸、次リン酸などが含まれる。脂肪族のモノ及びジカルボン酸、フェニル置換されたアルカン酸、ヒドロキシアルカン酸及びヒドロキシアルカン二酸、芳香族の酸、脂肪族及び芳香族のスルホン酸などの有機の酸から誘導される塩もまた使用し得る。従って、このような医薬的に許容し得る塩には酢酸塩、フェニル酢酸塩、トリフルオロ酢酸塩、アクリル酸塩、アスコルビン酸塩、安息香酸塩、クロロ安息香酸塩、ジニトロ安息香酸塩、ヒドロキシ安息香酸塩、メトキシ安息香酸塩、メチル安息香酸塩、ｏ−アセトキシ安息香酸塩、ナフタレン−２−安息香酸塩、臭化物、イソ酪酸塩、フェニル酪酸塩、β−ヒドロキシ酪酸塩、ブチン−１，４−二酸塩、ヘキシン−１，４−二酸塩、カプリン酸塩、カプリル酸塩、塩化物、ケイ皮酸塩、クエン酸塩、ギ酸塩、フマル酸塩、グリコール酸塩、ヘプタン酸塩、馬尿酸塩、乳酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、ヒドロキシマレイン酸塩、マロン酸塩、マンデル酸塩、メシラート、ニコチン酸塩、イソニコチン酸塩、硝酸塩、シュウ酸塩、フタル酸塩、テレフタル酸塩、リン酸塩、リン酸一水素塩、リン酸二水素塩、メタリン酸塩、ピロリン酸塩、プロピオル酸塩、プロピオン酸塩、フェニルプロピオン酸塩、サリチル酸塩、セバシン酸塩、コハク酸塩、スベリン酸塩、硫酸塩、重硫酸塩、ピロ硫酸塩、亜硫酸塩、重亜硫酸塩、スルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、ｐ−ブロモフェニルスルホン酸塩、クロロベンゼンスルホン酸塩、エタンスルホン酸塩、２−ヒドロキシエタンスルホン酸塩、メタンスルホン酸塩、ナフタレン−１−スルホン酸塩、ナフタレン−２−スルホン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、キシレンスルホン酸塩、酒石酸塩などが含まれる。好ましい塩は塩酸塩である。医薬的に許容し得る酸付加塩は、典型的には式（Ｉ）の化合物を等モル又は過剰量の酸と反応させることによって形成する。反応成分は一般に、ジエチルエーテル又は酢酸エチルなどの相互溶媒中で混合する。塩は普通、約１時間から１０日以内に溶液から沈殿し、濾過によって分離するか又は慣用の方法によって溶媒を除去し得る。一般に、医薬的に許容しうる塩は、それらが誘導されるもとの化合物と比べて溶解度特性が高くなっており、したがって、それらは液剤または乳剤として、より容易に製剤しうることが多い。次の実施例により、本発明化合物の製造についてさらに詳しく説明する。次の実施例のいずれにおいても、本発明の範囲を制限することを企図するものではない。 ¹ＨＮＭＲおよび¹³ＣＮＭＲは、それぞれ３００および７５において測定する。¹ＨＮＭＲの化学シフトは、使用したＮＭＲ溶媒に対するδ値（ｐｐｍ）として記載する。¹ＨＮＭＲのカップリング定数は、ヘルツで記載し、みかけの多重性も併記する。多重性は、次のように表示する：ｓ（１重）；ｄ（２重）；ｔ（３重）；ｑ（４重）；ｍ（多重）；ｃｏｍｐ（複合）；ｂｒ（幅広）およびａｐｐ（みかけ）。ＥＭ・サイエンス・シリカゲル（２３０メッシュＡＳＴＭ）を用いる以外は、スティルの方法にしたがってカラムクロマトグラフィーを行う［スティル，Ｗ．Ｃ．；カーン，Ｍ．；ミトラ，Ａ．のJ．Org．Chem.,1978、43,2 943］。１，２または４mmプレートを用いて円形クロマトグラフィーを行う。すべての空気および／または湿度感受性反応は、アルゴンまたは窒素下において厳密に乾燥したガラス器具中で行う。すべてのケースにおいて、濃縮は、減圧下、回転蒸発機にて行う。製造例１ＴＨＦ(２０ml)中の水酸基が保護されていない化合物（ＩＩ）(１．００g)の溶液に、室温にて撹拌しながら、Ｎ,Ｎ−ジメチルアミノピリジン(１．００g)、次いでｔ−ブチルジメチルシリルクロリド(０．９０g)を加える。１２時間後、反応物を水で希釈し、クロロホルムで抽出する。有機抽出物を合わせ、乾燥(硫酸ナトリウム)し、濃縮する。油状物に酢酸エチルを加え、得られる沈殿を濾去する。濾液を濃縮し、フラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、酢酸エチル）に付して精製し、所望の生成物を得る。実施例１ＴＨＦ(１０ml)中の製造例１の生成物(２．０４g)の溶液に、ＭｅＬｉ(１．４Ｍジエチルエーテル溶液４．１６ml)を−７８℃にて撹拌しながら滴下する。１５分後、過剰の飽和重炭酸ナトリウム水溶液を加えて反応を停止し、酢酸エチルで抽出する。有機抽出物を合わせ、食塩水で洗浄し、乾燥(ＭｇＳＯ₄)し、濾過し、次いで、濃縮する。得られる物質を円形クロマトグラフィー（シリカゲル、４mm、ヘキサン：酢酸エチル：トリエチルアミン：ＭｅＯＨ＝２.５：２.５：０．１：０.１）にて精製し、所望生成物を得る。実施例２ＴＨＦ(５ml)中の実施例１の生成物(０．５０g)の溶液に、フッ化テトラブチルアンモニウム(１．０ＭＴＨＦ溶液１．７４ml)を０℃にて撹拌しながら加える。１５分後、飽和重炭酸ナトリウム水溶液を加えて反応を停止し、酢酸エチルで抽出する。有機抽出物を合わせ、食塩水で洗浄し、乾燥(ＭｇＳＯ₄)し、濾過し、次いで、濃縮する。得られる物質を円形クロマトグラフィー（シリカゲル、２ mm、ヘキサン：酢酸エチル：ＭｅＯＨ：トリエチルアミン＝２.５：２.５：０. １：０.１）にて精製し、当量収量の所望生成物を得る。実施例３ＣＨ₂Ｃｌ₂(５０ml)中の実施例１の生成物(１．７７g)の溶液に、トリエチルシラン(２．３６ml)、次いで、トリフルオロ酢酸(４．７２ml)を０℃にて撹拌しながら加える。１５分後、反応混合物を酢酸エチル/飽和重炭酸ナトリウム混合水溶液中に注意深く加えて反応を停止する。２層混合物を酢酸エチルで抽出し、有機抽出物を合わせ、食塩水で洗浄し、乾燥(ＭｇＳＯ₄)し、濾過し、次いで、濃縮する。得られる物質を円形クロマトグラフィー（シリカゲル、４mm、ヘキサン：酢酸エチル：トリエチルアミン：ＭｅＯＨ＝２.５：２.５：０.１：０.１）にて精製し、所望生成物を得る。実施例４ＴＨＦ(５ml)中の実施例３の生成物(０．５０g)の溶液に、フッ化テトラブチルアンモニウム(１．０ＭＴＨＦ溶液１．７８ml)を０℃にて撹拌しながら加える。１５分後、飽和重炭酸ナトリウム水溶液を加えて反応を停止する。得られる混合物を酢酸エチルで抽出し、有機抽出物を合わせ、食塩水で洗浄し、乾燥(ＭｇＳＯ₄)し、濾過し、次いで、濃縮する。得られる物質を円形クロマトグラフィー（シリカゲル、２mm、ヘキサン：酢酸エチル：ＭｅＯＨ：トリエチルアミン＝２ .５：２.５：０.７５：０.２５）にて精製し、所望生成物を得る。実施例５ＣＨ₂Ｃｌ₂(20ml)中の実施例１の生成物(１．７０g)の溶液に、Ｎ,Ｎ−ジメチルアミノピリジン(４６１mg、３．７８ミリモル)、次いで、塩化メタンスルホニル(０．２７ml、３．５５ミリモル)を０℃にて撹拌しながら加える。０．５時間後、２回目のＮ,Ｎ−ジメチルアミノピリジン(４６１mg)を加え、溶液を室温まで暖める。２０時間後、反応混合物に食塩水を加え、次いで酢酸エチルで抽出する。有機抽出物を合わせ、食塩水で洗浄し、乾燥(ＭｇＳＯ₄)し、濾過し、次いで、濃縮する。得られる物質を円形クロマトグラフィー（シリカゲル、４mm、ヘキサン：酢酸エチル：トリエチルアミン：ＭｅＯＨ＝２.５：２.５：０.１：０. １）にて精製し、所望生成物を得る。実施例６ＴＨＦ(５ml)中の実施例５の生成物(０．４２g)の溶液に、フッ化テトラブチルアンモニウム(１．０ＭＴＨＦ溶液１．５１ml)を０℃にて撹拌しながら加える。１５分後、飽和重炭酸ナトリウム水溶液を反応物に加え、次いで、混合物を酢酸エチルで抽出する。有機抽出物を合わせ、食塩水で洗浄し、乾燥(ＭｇＳＯ₄) し、濾過し、次いで、濃縮する。得られる物質を円形クロマトグラフィー（シリカゲル、２mm、ヘキサン：酢酸エチル：ＭｅＯＨ：トリエチルアミン＝２.５：２.５：０.７０：０.３０）にて精製し、所望生成物を得る。実施例７製造例１の生成物(１．００g)の溶液に、ＰｈＬｉ(１．８Ｍ溶液１．６ml)を −７８℃にて撹拌しながら加える。１５分後、飽和重炭酸ナトリウム水溶液を加え、得られる混合物を酢酸エチルで抽出する。有機抽出物を合わせ、食塩水で洗浄し、乾燥(ＭｇＳＯ₄)し、濾過し、次いで、濃縮する。粗物質を円形クロマトグラフィー（シリカゲル、４mm、酢酸エチル：ヘキサン：トリエチルアミン：ＭｅＯＨ＝２.５：２.５：.０１：.００５）にて精製し、所望生成物を得る。実施例８ＴＨＦ(５ml)中の実施例７の生成物(０．５０ｇ)の溶液に、フッ化テトラブチルアンモニウム(１．０ＭＴＨＦ溶液１．６０ml、１．６０ミリモル)を０℃にて撹拌しながら加える。１５分後、飽和重炭酸ナトリウム水溶液を反応物に加え、次いで、得られる混合物を酢酸エチルで抽出する。有機抽出物を合わせ、食塩水で洗浄し、乾燥(ＭｇＳＯ₄)し、濾過し、次いで、濃縮する。得られる物質を円形クロマトグラフィー（シリカゲル、２mm、ヘキサン：酢酸エチル：ＭｅＯＨ：トリエチルアミン＝２.５：２.５：０．１：０.１）にて精製し、所望生成物を得る。試験手順一般的準備手順方法を説明する例においては、閉経後モデルを用いて、脂質循環における異なる治療方法の効果を測定した。７５日齢の老年雌性スプラーグドーリーラット（体重２００〜２２５ｇ）をチャールズ・リバー・ラボラトリーズ（ポーテージ、ＭＩ）から入手する。実験動物は、チャールズ・リバー・ラボラトリーズにおいて両側卵巣摘出（ＯＶＸ）または疑似的外科処置のいずれかを施したものである。実験動物が到着した後、金属製吊り下げケージに、１ケージ当たり３または４匹を収容し、１週間の常時給餌および給水を行う（カルシウム含量約０.５％）。室温２２．２±１．７℃および最小相対湿度４０％に維持する。室内の光周期は、明期１２時間および暗期１２時間にする。投薬規制および組織採取１週間の順化期間後（したがって、ＯＶＸの２週間後）、試験化合物の毎日投与を開始する。他に特記しない限り、１％カルボキシメチルセルロース中に懸濁させるかまたは２０％シクロデキストリン中に溶解させて、１７α−エチニルエストラジオールまたは試験化合物を経口投与する。実験動物に４日間投与する。投薬規制を行った後、動物の体重を測定し、ケタミン：キシラジン（２：１，Ｖ：Ｖ）混合物で麻酔し、心臓穿刺にて血液サンプルを採取する。次いで、ＣＯ₂ で窒息させて動物を屠殺し、中線切開により、子宮を摘出し、湿った子宮重量を測定する。コレステロール分析血液サンプルを室温で２時間凝固させ、３０００ｒｐｍで１０分間遠心分離することにより血清を得る。ベーリンガー・マンハイム・ダイアグノスティックス製高性能コレステロールアッセイ装置を用いて血清コレステロールを測定する。簡単に述べると、まずコレステロールが酸化されてコレスト−４−エン−３−オンと過酸化水素になる。次いで、ペルオキシダーゼの存在下で該過酸化水素がフェノールおよびＣ₄−アミノフェナゾンと反応してｐ−キノンイミン染料を生成し、これを分光光度計にて５００ｎｍで読み取る。次いで、コレステロール濃度を標準曲線に対して算出する。全アッセイが、Biomek Automated Workstationを用いて自動化されている。子宮好酸球ペルオキシダーゼ（ＥＰＯ）アッセイ酵素分析を始めるまで子宮は４℃にて保持する。次いで、０．００５％トリトンＸ−１００を含む５０ｍＭトリス緩衝液（ｐＨ−８．０）５０倍量中で、子宮をホモジナイズする。トリス緩衝液に０．０１％過酸化水素および１０ｍＭのＯ −フェニレンジアミン（最終濃度）を加えると、４５０ｎｍで１分間の吸光度の増加が観測される。子宮中の好酸球の存在は、化合物のエストロゲン様活性を示すものである。反応曲線の最初の直線部分から、１５秒間隔の最大速度を測定する。化合物の入手元１７α−エストラジオールは、シグマ・ケミカル・コーポレイション（セントルイス，ＭＯ）から入手した。骨粗鬆症試験操手順上述の一般的準備手順に続いて、ラットを３５日間毎日処置し（処置群当たり６匹のラット）、３６日目に二酸化炭素吸引させて屠殺する。３５日という期間は、ここで測定されるように、骨密度を最大に減少させるのに十分な期間である。屠殺時に、子宮を摘出し、他の組織を除去し、含まれる液体成分を取り除いてから湿重量を測定して、完全な卵巣摘出に伴うエストロゲンの欠失を確認する。卵巣摘出による子宮重量の減少は通例７５％である。次いで、次に行う組織学的分析に適するように、子宮を中性の１０％緩衝ホルマリン液に浸ける。右の大腿部を切除し、末梢の骨幹端において、デジタル化Ｘ線を発生させて造影分析プログラム（ＮＩＨ造影）により分析する。これらの動物の脛骨の近位の部分も、コンピュータ連動断層撮影により定量的に走査する。上記手順にしたがって、２０％ヒドロキシプロピルβ−シクロデキストリン中の本発明化合物およびエチニルエストラジオール（ＥＥ₂）を被検動物に経口投与する。要約すると、大腿部の骨密度は、無施術動物およびビヒクル処置対照と比べて、卵巣摘出した被検動物において有意に減少する。この骨損失はエチニルエストラジオール（ＥＥ₂）の経口投与により妨げられるが、子宮刺激のリスクは依然として存在する。本発明化合物は、通常の用量に依存した仕方で骨損失を妨げる。したがって、本発明化合物は、閉経後症候群、特に骨粗鬆症の治療に有用である。ＭＣＦ−７増殖アッセイＭＣＦ−７胸腺癌細胞（ＡＴＣＣＨＴＢ２２）を１０％（体積／体積）ウシ胎児血清（ＦＢＳ）、Ｌ−グルタミン（２ｍＭ）、ピルビン酸ナトリウム（１ｍＭ）、ＨＥＰＥＳ｛（Ｎ−［２−ヒドロキシエチル］ピペラジン−Ｎ'−［２ −エタンスルホン酸）１０ｍＭ｝、非必須アミノ酸及びウシインシュリン（１μ ｇ／ｍｌ）を添加したＭＥＭ（最小必須培地、フェノールレッド−フリ−，シグマ，セントルイス，ミズーリ州）中で保存する。分析の１０日前、ＭＣＦ−７細胞を、１０％ＦＢＳの代わりに、１０％のデキストリンコートされた木炭でストリップしたウシ胎児血清（ＤＣＣ−ＦＢＳ）を添加した保存培地（分析培地）と交換し、中に蓄えられているステロイドを放出させる。ＭＣＦ−７細胞を、１０ｍＭＨＥＰＥＳ及び２ｍＭＥＤＴＡを添加した細胞分離培地（Ｃａ＋＋／Ｍｇ＋＋を含まないＨＢＳＳ（フェノールレッド−フリ−））を用いて保存フラスコから取り出す。細胞を分析培地で２回洗浄し、８０,０００細胞／ｍｌに調整する。約１００μｌ（細胞数８,０００）を平底マイクロカルチャーウェル（コスター（Cost ar）３５９６）に加え、５％ＣＯ₂の湿潤インキュベーター中、３７℃で４８時間培養して、細胞を移植後に付着させ平衡させる。分析培地中で、薬物又は希釈剤対照としてのＤＭＳＯの連続希釈をし、５０μlを３つのマイクロカルチャーに移した後、５０μlの分析培地を加えて最終の体積を２００μlにする。さらに４８時間培養した後、マイクロカルチャーに三重水素を含むチミジン（１μＣｉ／ウェル）でパルスを４時間送る。培養細胞を−７０℃で２４時間凍結することにより培養を停止し、次いで解凍し、スケイトロン・セミオートマティック・セル・ハーベスター（Skatron Semiautomatic Cell Harvester）を用いてマイクロカルチャーを回収する。試料を、ワラック・ベータプレースβカウンター（Wall ac BetaPlace β counter）を用いる液体シンチレーションによって計測する。ＤＭＢＡ−誘発性乳房腫瘍阻害エストロゲン依存性の乳房腫瘍をハーラン・インダストリーズ（Harlan Indus tries）（インディアナポリス，インディアナ州）から購入した雌性スプラーグ・ドーリーラット中に発生させる。約５５日齢でラットに７,１２−ジメチルベンズ［ａ］アントラセン（ＤＭＢＡ）２０ｍｇを１回経口投与する。ＤＭＢＡ投与から約６週間後に、１週間毎に乳腺を触診し腫瘍の出現を診る。１つ又はそれ以上の腫瘍が現れたら、各腫瘍の最長と最短の直径をメートル法のカリパスで測定して測定値を記録し、実験のためにラットを選択する。腫瘍の平均の大きさが試験群の間で等しく分布するように処置群及び対照群の種々の腫瘍の大きさを均一に分布させる。各実験当たりの対照群および被検群の動物の数は、５〜９匹である。式（I）の化合物を２％アラビアゴム中での腹腔内注射投与か又は経口投与のいずれかで投与する。経口投与される化合物は、０.２ｍｌのコーン油中に溶解させるか又は懸濁させる。アラビアゴム及びコーン油の対照処置を含む各処置は、各ラットに毎日１回投与することにより行う。最初の腫瘍を測定し、試験用ラットを選択した後、前記の方法によって１週間毎に腫瘍を測定する。動物の処置及び測定は３から５週間続け、最終的な腫瘍の領域を決定する。各化合物及び対照について平均の腫瘍領域の変化を測定する。子宮線維症試験手順試験１子宮線維症にかかっていると診断されている３〜２０人の女性に本発明化合物を投与する。化合物の投与量は、１日につき、０.１〜１０００ｍｇであり、試験期間は３ヵ月である。投与期間中および投与終了後３カ月まで、女性の子宮線維症への効果を観察する。試験２投与期間が６カ月である以外は、試験１と同様な手順を行う。試験３投与期間が１年である以外は、試験１と同様な手順を行う。試験４Ａ．モルモットにおける類線維腫の誘導長期的なエストロゲン刺激を用いて性的に成熟したモルモットにおける平滑筋腫を誘導する。モルモットにエストラジオールを１週間当たり３〜５回、２〜４ヵ月間もしくは腫瘍が現れるまで注射によって投与する。式（I）の化合物又は賦形剤からなる投与を毎日３〜１６週間行い、次いで動物を屠殺し、子宮を採取し、腫瘍の縮小化を分析する。Ｂ．ヌードマウスにおけるヒト腫瘍組織の移植ヒト平滑筋腫から採取した組織を、性的に成熟し、卵巣を摘出した雌性ヌードマウスの腹膜へ移植する。移植組織の成育を促進するために外因エストロゲンを与える。いくつかのケースにおいては、採取した腫瘍細胞を移植前にインビトロで培養する。本発明化合物またはビヒクルを、毎日３〜１６週間、胃洗浄により投与し、移植片を取り出し、成長または縮小化を測定する。屠殺時に、子宮を採取し、臓器の状態を分析する。試験５Ａ．ヒト子宮類線維腫からの組織を採取し、インビボにて初代非形質転換培養物として維持する。外科標本を滅菌メッシュまたは篩に押し付けて通すか、あるいは別法として、周囲の組織から漉きとるようにして単細胞懸濁液を作成する。１０％血清および抗生物質を含む培地中に細胞を維持する。エストロゲンの存在下および不在下において成長速度を測定する。補体成分Ｃ３を産生する能力および成長因子ならびに成長ホルモンに対する応答について細胞を分析する。プロゲスチン、ＧｎＲＨ、本発明化合物およびビヒクルで処置した後の増殖応答についてインビトロ培養物を分析する。ステロイドホルモン受容体の濃度を１週間毎に分析して重要な細胞特性がインビトロで維持されるかどうかを決定する。５〜２５人の患者からの組織を採用する。少なくともひとつの上記試験で測定される活性から、本発明化合物が子宮線維症の治療に有用であることが示される。子宮内膜炎試験手順試験１および試験２では、体外移植された子宮内膜組織において、本発明化合物を１４日間および２１日間投与した場合の効果を審査することができる。試験１２０〜３０匹のＣＤ株雌性ラットを被検動物として用いる。該動物を同じ数の３つのグループに分ける。すべての動物の発情周期をモニターする。発情前期に、それぞれのラットに外科手術を施す。各グループのラットの左の子宮角を切除し、小さい四角体に刻み、該四角体を腸間膜の血管に近接する部位のいろいろなところへ緩く縫合する。さらに、第２グループのラットには、卵巣摘出を行う。外科手術を行った日から１４日間、グループ１および２の動物には水を腹腔内注入し、グループ３の動物には本発明化合物１.０mg／体重kgを腹腔内注入する。１４日間の処置を行った後、各動物を屠殺し、子宮内膜外植片、副腎、残りの子宮および卵巣（摘出していないグループのもの）を切除し、組織学的検査用に調製する。卵巣および副腎を秤量する。試験２２０〜３０匹のＣＤ株雌性ラットを被検動物として用いる。該動物を同じ数の２つのグループに分ける。すべての動物の発情周期をモニターする。発情前期に、それぞれのラットに外科手術を施す。各グループのラットの左の子宮角を切除し、小さい四角体に刻み、該四角体を腸間膜の血管に近接する部位のいろいろなところへ緩く縫合する。外科手術を行った日からおよそ５０日後から、グループ１の動物には２１日間水を腹腔内注入し、グループ２の動物には同じ期間本発明化合物１.０mg／体重k gを腹腔内注入する。２１日間の処置を行った後、各動物を屠殺し、子宮内膜外植片および副腎を切除し、秤量する。成長の指標として外植片を測定する。発情周期をモニターする。試験３Ａ．子宮内膜炎の外科的誘発子宮内膜組織のオートグラフを用いてラットおよび／またはウサギに子宮内膜炎を誘発する。性的に成熟した雌性動物の両方の卵巣を摘出し、外因的にエストロゲンを与え、ホルモンを特定レベルにする。５〜１５０匹の動物の腹膜に自己の子宮内膜組織を移植し、移植組織の成長を促進するためにエストロゲンを与える。本発明化合物を、毎日３〜１６週間、胃洗浄により投与し、移植片を取り出し、成長または縮小化を測定する。屠殺時に、無傷の子宮角を採取し、子宮内膜の状態を分析する。Ｂ．ヒト子宮内膜組織のヌードマウスへの移植ヒト子宮内膜病変部位から採取した組織を、性的に成熟し、卵巣を摘出した雌性ヌードマウスの腹膜へ移植する。移植組織の成長を促進するために外因エストロゲンを与える。いくつかのケースにおいては、採取した内膜細胞を移植前にインビトロで培養する。本発明化合物を、毎日３〜１６週間、胃洗浄により投与し、移植片を取り出し、成長または縮小化を測定する。屠殺時に、子宮を採取し、無傷の子宮内膜の状態を分析する。試験４Ａ．ヒト子宮内膜病変部位からの組織を採取し、インビボにて初代非形質転換培養物として維持する。外科標本を滅菌メッシュまたは篩に押し付けて通すか、あるいは別法として、周囲の組織から漉きとるようにして単細胞懸濁液を作成する。１０％血清および抗生物質を含む培地中に細胞を維持する。エストロゲンの存在下および不在下において成長速度を測定する。補体成分Ｃ３を産生する能力および成長因子ならびに成長ホルモンに対する応答について細胞を分析する。プロゲスチン、ＧｎＲＨ、本発明化合物およびビヒクルで処置した後の増殖応答についてインビトロ培養物を分析する。ステロイドホルモン受容体の濃度を１週間毎に分析して重要な細胞特性がインビトロで維持されるかどうかを決定する。５〜２５人の患者からの組織を採用する。いずれの上記試験における活性からも、本発明化合物が子宮内膜症の治療に有用であることが示される。大動脈平滑細胞の増殖／再狭窄阻害の試験手順本発明化合物は大動脈平滑細胞の増殖を阻害する能力を有する。このことは、ウサギ大動脈由来の培養平滑細胞を用い、そのＤＮＡ合成を測定して増殖を分析することによって実証される。ロスのJ．of Cell Bio.50:172(1971)に記載の外植法によって細胞を得る。細胞を５日間９６ウエルのマイクロタイタープレートに置く。培養物は集密的になり、成長が停止する。次いで、０．５〜２％貧血小板血漿、２ｍＭのＬ−グルタミン、１００Ｕ／ｍｌのペニシリン、１００ｍｇ／ｍｌのストレプトマイシン、１ｍＣ／ｍｌの³Ｈ−チミジン、２０ｎｇ／ｍｌの血小板由来増殖因子および種々の濃度の本発明化合物を含むダルベッコ変法イーグル培地（ＤＭＥＭ）中に細胞を移す。ジメチルスルホキシド溶液として本発明化合物のストック溶液を調製し、次いで、上記アッセイ培地中、適当な濃度（０．０１〜３０ｍＭ）に希釈する。次いで、５％ＣＯ₂／９５％空気下にて３７℃ で２４時間インキュベートする。２４時間経過したら、細胞をメタノールで固定する。次いで、ボーニンらのExp.Cell．Res.181:475〜482(1989)に記載されている方法にしたがって、ＤＮＡに取り込まれた³Ｈ−チミジンを液体シンチレーションカウンターで測定する。本発明化合物による大動脈平滑筋細胞増殖の阻害は、指数増殖細胞における影響を検定することによってさらに実証される。ウサギ大動脈由来の平滑筋細胞を、１０％ウシ胎児血清、２ｍＭのＬ−グルタミン、１００Ｕ／ｍｌのペニシリンおよび１００ｍｇ／ｍｌのストレプトマイシンを含むＤＭＥＭを入れた１２ウエルの組織培養プレートに植える。２４時間後、細胞を剥がし、培地を１０％血清、２ｍＭのＬ−グルタミン、１００Ｕ／ｍｌのペニシリン、１００ｍｇ／ｍｌのストレプトマイシンおよび所望濃度の本発明化合物を含むＤＭＥＭと交換する。細胞を４日間増殖させる。細胞をトリプシンで処理し、ＺＭ−クールターカウンターを用いて細胞の数を計数する。上記試験における活性から、本発明化合物が再狭窄の治療に有用であることが示される。さらに、本発明は、本発明化合物（Ｉ）を用いる前記方法を特徴とし、さらに有効量のエストロゲンまたはプロゲスチンを女性に投与することを特徴とする、女性の閉経後症候群を軽減する方法を提供する。本発明化合物が、患者を有効に治療すると同時に、エストロゲンおよびプロゲスチンの望ましくない副作用を阻止するので、これらの処置は、骨粗鬆症の治療および血清コレステロールの低下において特に有用である。どの閉経後試験においても、このような組み合わせ処置の活性は、該組み合わせ処置が女性の閉経後の症状を軽減するのに有用であることを示している。種々の形体のエストロゲンおよびプロゲスチンが商業的に入手可能である。エストロゲンをベースとする薬剤には、例えばエチニルエストロゲン（０.０１〜０.０３ｍｇ／日）、メストラノール（０.０５〜０.１５ｍｇ／日）、及びプレマリン（登録商標）（Wyeth-Ayerst社；０.３〜２.５ｍｇ／日）のような複合エストロゲンホルモンが含まれる。プロゲスチンをベースとする薬剤には、例えばプロベラ（登録商標）（Upjohn社；２.５〜１０ｍｇ／日）等のメドロキシプロゲステロン、ノルエチルノドレル（１.０〜１０.０ｍｇ／日）、及びノルエチンドロン（０.５〜２.０ｍｇ／日）が含まれる。エストロゲンをベースとする好ましい化合物はプレマリン（登録商標）であり、ノルエチルノドレル及びノルエチンドロンは、プロゲスチンをベースとする好ましい薬剤である。各エストロゲン及びプロゲスチンをベースとする薬剤の投与の方法は、当業者に公知の方法と一致する。本発明方法の大部分において、化合物（Ｉ）は、継続的に１日１〜３回投与される。しかし、子宮内膜炎の治療においては周期的投与が特に有用であり、あるいは該疾患の急性の痛み発作に対してこの投与法を用いてもよい。再狭窄の場合、投与は、血管形成術後の短期間（１〜６カ月）に限定される。本明細書中に使用される「有効量」なる語句は、本明細書に記載した種々の病的状態の症状を軽減しうる、本発明化合物の量を意味する。本発明にしたがって投与される化合物の特定の用量はもちろん、投与される化合物、投与経路、患者の状態および治療される病的状態などのケースごとの特別の周囲条件によって決定される。本発明化合物の代表的な１日用量は、約５ｍｇ〜約６００ｍｇ／日の範囲の非中毒性の量である。約１５ｍｇ〜約８０ｍｇ/日が一般的に好ましい。本発明化合物は、経口、経腸、経皮、皮下、静脈内、筋肉内または鼻腔内などの種々の経路で投与することができる。本発明化合物は投与前に製剤するのが好ましく、化合物の選択は担当の医師によって決定される。したがって、本発明の他の態様は、有効量の本発明化合物（Ｉ）またはその医薬的に許容しうる塩を特徴とし、必要に応じて有効量のエストロゲンまたはプロゲスチン、ならびに医薬的に許容しうる担体、希釈剤または賦形剤を含む医薬製剤である。製剤中の有効成分の総量は、製剤の０．１〜９９．９重量％である。「医薬的に許容しうる」とは、担体、希釈剤、賦形剤および塩が、他の製剤成分と共存しなければならず、被験者にとって無毒でなければならないことを意味する。医薬製剤は当技術分野において知られている手法によって製造することができる。例えば、本発明化合物（Ｉ）は、エストロゲンまたはプロゲスチンを含むかまたは含まずに、通例の賦形剤、希釈剤、又は担体と共に製剤化することができ、錠剤、カプセル剤、懸濁液、散剤などに形成することができる。このような製剤に適当な賦形剤、希釈剤、及び担体の例には次のものが含まれる：デンプン、糖類、マンニトール及びケイ酸誘導体などの充填剤及び展開剤、カルボキシメチルセルロース及び他のセルロース誘導体、アルギン酸塩、ゼラチン、及びポリビニルピロリドンなどの結合剤、グリセリンなどの湿潤剤、寒天、炭酸カルシウム及び重炭酸ナトリウムなどの崩壊剤、パラフィンなどの溶出遅延剤、第四級アンモニウム化合物などの吸収促進剤、セチルアルコール、グリセリンモノステアレートなどの界面活性剤、カオリン及びベントナイトなどの吸着担体、タルク、ステアリン酸カルシウム及びステアリン酸マグネシウム、及び固体のポリエチレングリコールなどの滑沢剤。本発明化合物は、経口投与用のエリキシル剤または液剤として、あるいは筋肉内、皮下または静脈内などの非経口投与に適した溶液として製剤することもできる。さらに本発明化合物は、徐放性製剤などに製剤することもできる。製剤は、特定の身体の位置のみにおいて、または好ましくは特定の身体に位置において、できる限り一定の期間有効成分を放出するように、構成することができる。コーティング、薬袋、又は保護マトリックスは、高分子物質又はワックス類から製造し得る。本発明化合物（Ｉ）は、それ単独または本発明の組み合わせ薬剤として、一般に慣例の剤型で投与される。以下の製剤例は、説明を目的として記載するものであって、いかなる限定をも意図するものではない。製剤例「有効成分」なる語は、式（I）の化合物またはその塩あるいは溶媒和物を意味する。製剤例１：ゼラチンカプセル下記成分を用いて硬ゼラチンカプセルを製造する。成分量（ｍｇ/カプセル）有効成分０.１−１０００デンプン（ＮＦ：米国国民医薬品集）０−６５０デンプン（流動性粉末）０−６５０シリコーン油３５０センチストーク０−１５上記製剤は、種々の合理的な要請に応じて変更を加えてもよい。下記成分を用いて錠剤を製造する。製剤例２：錠剤成分量（ｍｇ／錠剤）有効成分２.５−１０００セルロース（微結晶）２００−６５０二酸化ケイ素１０−６５０ステアリン酸５−１５成分を混合し、打錠して錠剤に成形する。有効成分２.５−１０００ｍｇを含む下記の別組成の錠剤を製造する。製剤例３：錠剤成分量（ｍｇ／錠剤）有効成分２５−１０００デンプン４５セルロース（微結晶）３５ポリビニルピロリドン（１０％水溶液）４ナトリウムカルボキシメチルセルロース４.５ステアリン酸マグネシウム０.５タルク１有効成分、デンプン及びセルロースをNo.４５メッシュＵ.Ｓ.シーブに通し、十分に混合する。この粉末とポリビニルピロリドンの溶液を混合し、No.１４メッシュＵ.Ｓ.シーブに通す。得られた顆粒を５０〜６０℃で乾燥し、No.１８メッシュＵ．Ｓ.シーブに通す。あらかじめNo.６０メッシュＵ.Ｓ.シーブに通したナトリウムカルボキシメチルセルロース、ステアリン酸マグネシウム、及びタルクを上記顆粒に加え、十分に混合する。得られた物質を、錠剤形成機で打錠して錠剤を得る。５ｍＬ用量あたり、薬物を０.１〜１０００ｍｇ含有する懸濁剤を以下のとおり製造する。製剤例４：懸濁剤成分量（ｍｇ／５ｍＬ）有効成分０.１〜１０００ｍｇナトリウムカルボキシメチルセルロース５０ｍｇシロップ１.２５ｍＬ安息香酸溶液（０．ＩＭ）０.１０ｍＬ風味剤ｑ.ｖ．着色剤ｑ.ｖ．精製水を加えて５ｍＬとする薬物をNo.４５メッシュＵ.Ｓ.シーブに通し、ナトリウムカルボキシメチルセルロース及びシロップと混合してなめらかなペーストにする。安息香酸溶液、香料、及び着色料を水で希釈して加え、混合物を十分に撹拌する。さらに水を最終の容量まで加えて製剤を得る。下記成分を含有するエアロゾル溶液を製造する。製剤例５：エアロゾル剤成分量（重量％）有効成分０.２５エタノール２５.７５プロペラント２２（クロロジフルオロメタン）７０.００有効成分をエタノールと混合し、この混合物を一部のプロペラント２２に加え、−３０℃に冷却して充填機に移す。次いで必要量をステンレススチールの容器に入れて残りのプロペラントで希釈する。次にバルブユニットをこの容器に取り付ける。坐剤を以下のとおり製造する。製剤例６：坐剤成分量（ｍｇ）有効成分２５０飽和脂肪酸グリセリド２０００有効成分をNo.６０メッシュＵ.Ｓ.シーブに通して、必要最小限の加熱によりあらかじめ融解した脂肪酸グリセリドに懸濁する。混合物を公称２ｇ容の坐剤用の型に入れ、放冷する。静注用製剤を以下のとおり製造する。製剤例７：静注用液剤成分量有効成分５０ｍｇ等張生理的食塩水１０００ｍＬ上記成分の溶液を約１ｍＬ／分の速さで患者に静脈内投与する。製剤例８：配合カプセルＩ成分量（ｍｇ／カプセル）有効成分５０プレマリン１アビセルｐＨ１０１５０デンプン１５００１１７.５０シリコーン油２ Tween８００.５０Ｃａｂ−Ｏ−Ｓｉｌ０.２５製剤例９：配合カプセルＩＩ成分量（ｍｇ／カプセル）有効成分５０ノルエチルノドレル５アビセルｐＨ１０１８２.５０デンプン１５００９０シリコーン油２ Tween８００.５０製剤例１０：配合錠剤成分量（ｍｇ／カプセル）有効成分５０プレマリン１コーンスターチＮＦ５０ポビドン，Ｋ２９−３２６アビセルｐＨ１０１４１.５０アビセルｐＨ１０２１３６.５０クロスポビドンＸＬ１０２.５０ステアリン酸マグネシウム０.５０Ｃａｂ−Ｏ−Ｓｉｌ０.５０

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号ＦＩテーマコート゛(参考）Ａ６１Ｐ 19/10 Ａ６１Ｐ 19/10 35/00 35/00 Ｃ０７Ｄ 405/10 Ｃ０７Ｄ 405/10 413/10 413/10 (81)指定国ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ )，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＬ，ＡＭ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＮ，ＣＺ，ＥＥ，ＧＥ，ＨＵ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ

Claims

【特許請求の範囲】１．式（I）：［式中、Ｒ₁は、Ｈ、ＯＨ、ハロ、ＯＣＯ（Ｃ₁−Ｃ₆アルキル）、ＯＣＯ（アリール）、ＯＳＯ₂（Ｃ₄−Ｃ₆アルキル）、ＯＣＯＯ（Ｃ₁−Ｃ₆アルキル）、ＯＣＯＯ（アリール）、ＯＣＯＮＨ（Ｃ₁−Ｃ₆アルキル）またはＯＣＯＮ（Ｃ₁−Ｃ₆ アルキル）₂であり；Ｒ₂は、アリール、Ｃ₁−Ｃ₆アルキル、Ｃ₃−Ｃ₆シクロアルキルまたは４−シクロヘキサノールであり；Ｒ₃は、Ｏ（ＣＨ₂）₂またはＯ（ＣＨ₂）₃であり；Ｒ₄およびＲ₅は、必要に応じて、ＣＯ（ＣＨ₂）₂ＣＨ₃、ＣＯ（ＣＨ₂）₃ＣＨ₃ 、Ｃ₁−Ｃ₆アルキルであるか、またはそれらが結合している窒素と共にピペリジン、モルホリン、ピロリジン、３−メチルピロリジン、３,３−ジメチルピロリジン３,４−ジメチルピロリジン、アゼピンまたはピペコリンを形成する；Ｒ₆は、＞Ｃ＝ＣＨ₂、＞ＣＨ（Ｃ₁−Ｃ₅アルキル）、＞ＣＨ（Ｃ₂−Ｃ₅アルケニル）、＞Ｃ＝ＣＨ（Ｃ₁−Ｃ₅アルキル）、＞ＣＨ（アリール）、＞Ｃ（ＯＨ）（Ｃ₁−Ｃ₅アルキル）、＞Ｃ（ＯＨ）（Ｃ₂−Ｃ₅アルケニル）、＞Ｃ（ＯＨ）（アリール）である］で示される化合物またはその医薬的に許容し得る塩。２．Ｒ₃が−Ｏ（ＣＨ₂）₂である請求項１に記載の化合物。３．Ｒ₄およびＲ₅がピペリジノを形成する請求項２に記載の化合物。４．Ｒ₁が−ＯＨであり、Ｒ₂が４−ヒドロキシフェニルである請求項３に記載の化合物。５．Ｒ₆が＞Ｃ（ＯＨ）（メチル）、＞Ｃ＝ＣＨ₂、＞Ｃ（ＯＨ）フェニル、＞ＣＨフェニルまたは＞ＣＨ（Ｃ₂Ｈ₅）である請求項４に記載の化合物。６．請求項１に記載の化合物またはその医薬的に許容し得る塩、および必要に応じて有効量のエストロゲンまたはプロゲスチンを含み、医薬的に許容し得る担体、希釈剤または賦形剤を組み合わせてなる医薬組成物。７．治療を必要とする女性に、有効量の請求項１の化合物またはその医薬的に許容し得る塩を投与することを特徴とする閉経後症候群の症状の軽減方法。８．閉経後症候群の病的状態が骨粗鬆症である請求項７に記載の化合物。９．閉経後症候群の病的状態が心臓血管疾患に関連するものである請求項７に記載の化合物。１０．心臓血管疾患が高脂血症である請求項９に記載の化合物。１１．閉経後症候群の病的状態がエストロゲン依存性癌である請求項７に記載の化合物。１２．治療を必要とする女性に、有効量の請求項１の化合物またはその医薬的に許容し得る塩を投与することを特徴とする子宮線維症の阻害方法。１３．治療を必要とする女性に、有効量の請求項１の化合物またはその医薬的に許容し得る塩を投与することを特徴とする子宮内膜炎の阻害方法。１４．治療を必要とするヒトに、有効量の請求項１の化合物またはその医薬的に許容し得る塩を投与することを特徴とする大動脈平滑筋細胞増殖の阻害方法。１５．治療を必要とするヒトに、有効量の請求項１の化合物またはその医薬的に許容し得る塩を投与することを特徴とする再狭窄の阻害方法。１６．請求項７の方法を特徴とし、さらに、該女性に有効量のエストロゲンを投与することを特徴とする閉経後症候群の症状の軽減方法。１７．請求項７の方法を特徴とし、さらに、該女性に有効量のプロゲスチンを投与することを特徴とする閉経後症候群の症状の軽減方法。