ITMI992520A1

ITMI992520A1 - Macrolidi

Info

Publication number: ITMI992520A1
Application number: IT1999MI002520A
Authority: IT
Inventors: Francois Navarro; Samuel Petit; Guy Stone
Original assignee: Novartis Ag
Priority date: 1998-12-07
Filing date: 1999-12-02
Publication date: 2001-06-02
Also published as: US7572804B2; IL143092A0; EP1743657A2; JP2005200429A; HK1038889B; BR9915986A; US20090270441A1; HU230174B1; AR026102A1; ES2288033T3; AU1657300A; HUP0104489A2; KR20060096477A; HK1038889A1; TWI270550B; KR100695834B1; NO334612B1; JP5043308B2; US7741338B2; CA2651609A1

Description

DESCRIZIONE DELL'INVENZIONE INDUSTRIALE

La presente invenzione riguarda la stabilizzazione di un ingrediente farmaceuticamente attivo sensibile all'ossidazione, per esempio un macrolide polienico, preferibilmente un .macrolide polienico avente proprietà immunosoppressive, in particolare riguarda rapamicine.

La manipolazione e lo stoccaggio, in particolare in forma sfusa, di ingredienti farmaceuticamente attivi che sono sensibili all'ossidazione sono difficoltosi. E' necessaria una speciale manipolazione e spesso l'ingrediente sensibile all'ossidazione viene stoccato in un confezionamento a tenuta di aria, sotto un gas protettivo. Si aggiungono sostanziali quantità di stabilizzanti durante il procedimento di formulazione di tali ingredienti farmaceuticamente attivi.

Macrolidi polienici hanno proprietà di stabilità soddisfacenti. Tuttavia, si è ora trovato che la loro stabilità all'ossigeno può venire sostanzialmente migliorata mediante l'aggiunta di un agente stabilizzante, per esempio, un antiossidante, durante il loro stadio di isolamento.

Secondo la presente invenzione, viene messo a disposizione:

1. Un procedimento per stabilizzare un macrolide poiienico che consiste ne ll'aggiungere un antiossidante al macrolide purificato, preferibilmente all'inizio del suo stadio di isolamento.

Questo procedimento è particolarmente utile per la produzione di un macrolide poiienico stabilizzato sotto forma di prodotto sfuso. La quantità di antiossidante, opportunamente, può arrivare fino a 1%, più preferibilmente è compresa tra 0,01 e 0,5% (riferito al peso del macrolide). Tale piccola quantità qui di seguito viene denominata quantità catalitica.

Come alternative, la presente invenzione inoltre mette a disposizione:

2. Una miscela, per esempio una miscela di prodotto sfuso, che comprende un macrolide poiienico e un antiossidante, preferibilmente una sua quantità catalitica, preferibilmente in forma solida.

La miscela può essere sotto forma di particelle, per esempio cristallizzata oppure amorfa. Come alternativa, essa può essere in uno stato sterile oppure sostanzialmente sterile, per esempio in uno snato adatto per l'impiego farmaceutico.

3. Impiego di una miscela come definita sopra in 2.

nella produzione di una composizione farmaceutica. Esempi di macrolidi polienici sono per esempio molecole che contengono doppi legami, preferibilmente doppi legami coniugati, per esempio molecole aventi proprietà antibiotiche e/o immunosoppressive, per esempio macrolidi che contengono un legame lattarne oppure un legame lattone e loro derivati, per esempio composti che hanno un'attività biologica qualitativamente simile a quella del macrolide naturale, per esempio macrolidi chimicamente sostituiti. Tra gli esempi adatti sono compresi, per esempio, rapamicine e ascomicine. Un macrolide polienico preferito è un macrolide che contiene almeno 2 doppi legami coniugati, per esempio 3 doppi legami coniugati.

La rapamicina è un macrolide lattamico noto che può venire prodotto, per esempio, da Streptomyces hygroscopicus. La struttura della rapamicina è descritta in Kessler, H. et al.; 1993; Helv. Chim. Acta, 76 :117. La rapamicina ha proprietà antibiotiche e immunosoppressive. Derivati della rapamicina sono noti, per esempio rapamicine 16-O-sostituite, per esempio come descritte in WO 94/02136 e WO 96/41807, rapamicine 40-O-sostituite, per esempio come descritte in WO 94/09010, WO 92/05179, WO 95/14023, 94/02136, WO 94/02385 e WO 96/13273, tutti riportati qui come riferimento. Derivati di rapamicine preferiti sono, per esempio, rapamicine nelle quali il gruppo ossidrilico in posizione 40 nella formula A illustrata a pagina 1 di WO 94/09010 è sostituito da -OR, in cui R è idrossialchile, idrossialcossialchile, acilamminoalchile oppure amminoalchile, per esempio 40-0-(2-idrossi)etilrapamicina, 40-0- (3-idrossi )propil-rapamicina, e 40-0- [2-{2-idrossi)etossi]etil-rapamicina.

Le ascomicine, tra le quali FK-506 e la ascomicina, sono i prodotti meglio noti, formano un'altra classe di macrolidi lattamici, molti dei quali hanno una potente attività immunosoppressiva e anti-infiammatoria. FK506 è un macrolide lattamico prodotto da Streptomyces tsukubaensis. La struttura di FK506 viene riportata nell'appendice del Merck Index, 11- ed. (1989) come voce A5. La ascomicina viene descritta, per esempio, in USP 3.244.592. La ascomicina, FK506, altri macrolidi che si trovano in natura aventi un'attività biologica simile e loro derivati, per esempio analoghi sintetici e derivati sintetici vengono denominati globalmente "Ascomicine". Esempi di analoghi o di derivati sintetici sono, per esempio, ascomicine alogenate, per esempio 33-epi-cloro-33-desossiascomicina come descritta in EP-A-427.680, derivati del tetraidropirano, per esempio come descritti in EP-A-626.385.

Macrolidi particolarmente preferiti sono rapamicina e 40-0-(2-idrossi)etil-rapamicina.

Antiossidanti preferiti sono, per esempio, il 2,6-di-ter.-butil-4-metilfenolo (qui di seguito indicato BHT), la vitamina E oppure C, BHT essendo particolarmente preferito.

Una miscela particolarmente preferita della presente invenzione è una miscela di rapamicina ossia 40-0-(2-idrossi)etil-rapamicina e 0,2% (riferito al peso del macrolide) di un antiossidante, preferibilmente BHT.

Si può aggiungere l'antiossidante al macrolide polienico all'inizio degli stadi di isolamento, preferibilmente allo stadio di isolamento finale, più preferibilmente appena prima dello stadio di precipitazione finale. Preferibilmente, il macrolide è in uno stato purificato. Esso può venire sciolto in un solvente inerte e l'antiossidante viene aggiunto alla soluzione ottenuta, quindi si effettua uno stadio di precipitazione del macrolide stabilizzato, per esempio in una forma amorfa oppure nella forma di cristalli. Preferibilmente, la miscela della presente invenzione è in forma amorfa.

Il macrolide stabilizzato così ottenuto presenta, sorprendentemente, una migliorata stabilità all'ossidazione e la sua manipolazione e il suo stoccaggio, per esempio sotto forma di prodotto sfuso, prima dell'ulteriore lavorazione, per esempio per ottenere una composizione galenica, diventano molto più facili. Ciò è particolarmente interessante nel caso di macrolidi in forma amorfa.

Il macrolide stabilizzato secondo la presente invenzione può venire usato come tale per la produzione della formulazione galenica desiderata. Si possono preparare tali formulazioni secondo metodi noti nel settore, che comprendono l'aggiunta di uno o più diluenti o di una o più sostanze-veicolo farmaceuticamente accettabili, ivi compresa l'aggiunta di un ulteriore stabilizzante, se necessario.

Pertanto, inoltre viene messa a disposizione: 4. Una composizione farmaceutica che contiene, come ingrediente attivo, una miscela stabilizzata come descritta sopra, insieme con uno o più diluenti o sostanze-veicolo farmaceuticamente accettabili.

La composizione della presente invenzione può essere adatta per una somministrazione orale, parenterale, topica (per esempio applicazione sulla pelle) , oculare, nasale oppure mediante inalazione (per esempio polmonare). Una composizione preferita è una composizione per la somministrazione orale, preferibilmente una composizione anidra quando l'ingrediente attivo è un macrolide lattonico. Le composizioni farmaceutiche della presente invenzione possono contenere ulteriori eccipienti, per esempio un lubrificante, un disaggregante, un tensioattivo, una sostanza-veicolo, un diluente, una sostanza che fa aumentare il sapore, ecc. Essa può essere sotto forma di un liquido, per esempio soluzioni, sospensioni oppure emulsioni come microemulsioni, per esempio come descritto in USP 5.536.729, oppure può essere in forma solida, per esempio capsule, compresse, confetti, polveri (ivi comprese particelle micronizzate o altrimenti ridotte di dimensioni), dispersioni solide, granulati, ecc., per esempio come descritto in WO 97/03654, il cui contenuto viene qui riportato come riferimento, oppure forme semisolide, per esempio pomate, gel, creme e paste. Esse vengono adattate preferibilmente per essere in una forma adatta per la somministrazione orale. Preferibilmente esse sono in forma solida. Le composizioni farmaceutiche dell'invenzione possono venire preparate secondo metodi noti, mescolando il macrolide stabilizzato secondo la presente invenzione con gli ulteriori ingredienti sotto agitazione; gli ingredienti possono venire mescolati oppure macinati e, se si desidera, possono venire sottoposti a compressione, per esempio ottenendo compresse.

La presente invenzione è particolarmente interessante per composizioni di rapamicine in forma liquida oppure in forma solida. Una composizione particolarmente preferita è una dispersione solida, per esempio una dispersione che contiene una rapamicina stabilizzata secondo la presente invenzione e una sostanzaveicolo, per esempio un polimero solubile in acqua come la idrossipropilmetilcellulosa, per esempio come descritto in WO 97/03654.

Le composizioni della presente invenzione sono utili per le indicazioni note per i macrolidi in quanto esse contengono per esempio dosaggi noti. Per esempio, quando il macrolide ha proprietà ,immunosoppressive, per esempio la rapamicina oppure un derivato della rapamicina, la composizione può essere utile per esempio nel trattamento o nella prevenzione di rigetto di allo-trapianto oppure di xeno-trapianto acuto di organi oppure di tessuti, nel trattamento di malattie autoimmuni o di stati infiammatori, di asma, di disordini di proliferazione, per esempio tumori, oppure malattie vascolari iperproliferative .

La quantità di macrolide e la composizione da somministrare dipendono da numerosi fattori, per esempio dall'ingrediente attivo usato, dalle condizioni da trattare, dalla durata del trattamento, ecc. Per esempio, per la rapamicina, ossia la 40-0-(2-idrossi)etilrapamicina, un'adatta forma di dosaggio giornaliero per una somministrazione orale è da 0,1 a 10 mg, da somministrare in una sola volta oppure in forma suddivisa.

Secondo un altro aspetto, la presente invenzione, inoltre, mette a disposizione la 40-0-(2-idrossi)etilrapamicina in forma cristallina, in particolare in forma sostanzialmente pura. Preferibilmente, la forma cristallina è caratterizzata dall'assenza o dalla sostanziale assenza di qualsiasi componente solvente; essa sotto forma di non-solvato.

La 40-0- (2-idrossi )etil-rapamicina in forma cristallina appartiene al sistema monoclinico. I cristalli ottenuti hanno un punto di fusione di 146°-147°C, in particolare 146,5°C. Per favorire l'identificazione della nuova forma cristallina, vengono forniti dati di analisi di diffrazione ai raggi-X. Le condizioni nelle quali questi dati vengono ottenuti sono le seguenti:

Si può preparare la 40-0-(2-idrossi)etil-rapamicina in forma cristallina sciogliendo il composto amorfo in un solvente per esempio etilacetato e aggiungendo un idrocarburo alifatico CnH2n+2 (n=5, 6 oppure 7). Dopo aggiunta dell'idrocarburo, la miscela ottenuta può venire riscaldata per esempio ad una temperatura di 25 fino a 50°C, per esempio fino a 30-35°C. Si può effettuare opportunamente lo stoccaggio della miscela ottenuta a bassa temperatura, per esempio ad una temperatura inferiore a 25°C, preferibilmente ad una temperatura compresa tra 0 e 25°C. I cristalli vengono filtrati ed essiccati. Si preferisce l'eptano come idrocarburo alifatico. Se si desidera, si possono fare iniziare procedimenti di formazione di nuclei cristallini, per esempio mediante trattamento con ultrasuoni oppure mediante "semina".

La presente invenzione inoltre mette a disposizione un procedimento per purificare la 40-0- (2-idrossi) etil-rapamicina che consiste nel catalizzare la 40-0- (2-idrossi)etil-rapamicina da un mezzo che contiene i cristalli, per esempio come descritto sopra, e isolare i cristalli così ottenuti. Il mezzo che contiene i cristalli può contenere uno o più componenti oltre a quelli indicati sopra. Si è trovato che un mezzo che contiene cristalli particolarmente adatto è un mezzo che contiene circa 2 parti di etilacetato e circa 5 parti di un idrocarburo alifatico, per esempio eptano.

Si è trovato che la 40-0- (2-idrossi)etilrapamicina in forma cristallina possiede attività immunosoppressiva in vitro e in vivo paragonabile a quella della forma amorfa. Nel GvHD localizzato, si ottiene la massima inibizione (70-80%) del gonfiore dei nodi linfatici con un dosaggio di 3 mg usando la 40-0- (2-idrossi)etil-rapamicina in forma cristallina. La 40-0- (2-idrossi)etil-rapamicina cristallino può essere utile per le medesime indicazioni note nel caso del composto amorfo, per esempio per prevenire o trattare un rigetto di allo-trapianto oppure di xeno-trapianto acuto e cronico, malattie autoimmuni oppure stati infiammatori, asma, anomalie di proliferazione, per esempio tumori, oppure disturbi vascolari di iperprolif erazione, per esempio come descritto in WO 94/09010 oppure in WO 97/35575, il cui contenuto viene qui riportato come riferimento. In generale, si ottengono risultati soddisfacenti effettuando una somministrazione orale a dosaggi dell'ordine di grandezza compreso tra 0,05 e 5 oppure fino a 70 mg/kg/giorno, per esempio dell'ordine di grandezza compreso tra 0,1 e 2 oppure fino a 7,5 mg/kg/giorno, somministrati in una sola volta oppure in dosi suddivise da 2 a 4 volte al giorno. Adatti dosaggi giornalieri per pazienti sono, così, dell'ordine di grandezza fino a 10 mg, per esempio compresi tra 0,1 e 10 mg.

Si può somministrare la 40-0- (2-idrossi)etilrapamicina in forma cristallina adottando qualsiasi metodo tradizionale, per esempio per via orale, per esempio compresse oppure capsule, oppure per via nasale o polmonare (mediante inalazione). Essa può venire somministrata sotto forma di unico ingrediente attivo oppure insieme con altri farmaci, per esempio sostanze immunosoppressive e/o immunomodulatorie e/o anti-inf iammatorie, per esempio come descritto in WO 94/09010.

Secondo quanto precedentemente indicato, la presente invenzione inoltre mette a disposizione: 5. Un metodo per prevenire o trattare un rigetto di allo-trapianto oppure di xeno-trapianto acuto oppure cronico, malattie autoimmuni oppure stati infiammatori, asma, anomalie di proliferazione oppure disturbi vascolari da iperproliferazione, in un soggetto che necessita di tale trattamento, detto metodo consistendo nel somministrare a detto soggetto una quantità terapeuticamente efficace di 40-0-(2-idrossi)etil-rapamicina in forma cristallina.

6. 40-0-(2-idrossi)etil-rapamicina in forma cristallina per l'impiego come prodotto farmaceutico; per esempio in un metodo come descritto sopra.

7. Una composizione farmaceutica che contiene la 40-0-(2-idrossi)etil-rapamicina in forma cristallina insieme con un suo diluente o una sua sostanzaveicolo farmaceuticamente accettabile.

3. Un kit o confezione per l'impiego nella "immunosoppressione oppure nelle forme infiammatorie, che contiene una composizione farmaceutica come descritta sopra e una composizione farmaceutica che comprende un farmaco immunosoppressivo o immunomodulante oppure una sostanza anti-infiammatoria .

Gli esempi che seguono illustrano la presente invenzione senza limitarla.

Esempio 1: Cristallizzazione

Si sciolgono 0,5 g di 40-0- (2-idrossi)etilrapamicina amorfa in 2,0 mi di etilacetato a 40°C. Si aggiungono 5,0 mi di eptano e la soluzione diventa "lattiginosa". Dopo riscaldamento a 30°C, la soluzione diventa nuovamente limpida. Raffreddando a 0°C e raschiando, si provoca la precipitazione di un olio dalla soluzione. Il tubo da saggio viene chiuso e conservato a 10°C durante la notte. Il prodotto solido voluminoso bianco così ottenuto viene quindi filtrato e lavato con 0,5 mi di una miscela di etilacetato/esano (1:2,5) e i cristalli ottenuti vengono essiccati a 40°C a 5 mbar per 16 ore. Si ottiene così la 40-0- (2-idrossi )etil-rapamìcina in forma cristallina avente un punto di fusione di 146,5°C.

Si può effettuare una cristallizzazione su grande scala nel modo che segue:

Si sciolgono 250 g di 40-0-(2-idrossi )etilrapamicina amorfa in 1,0 1 di etilacetato sotto argon, sotto lenta agitazione. Si riscalda questa soluzione a 30°C e quindi, nel corso di 45 minuti, si aggiungono goccia a goccia 1,5 1 di eptano. Si aggiungono, nelle medesime condizioni, a porzioni, 0,25 g di cristalli-seme preparati come descritto sopra. La miscela viene sottoposta ulteriormente ad agitazione a 30°C per un periodo di 2 ore e la miscela di cristallizzazione viene raffreddata a 25°C nel corso di 1 ora e quindi a 10°C per 30 minuti viene filtrata. I cristalli vengono lavati con 100 mi di una miscela di etilacetato/esano (2:3). Si effettua il successivo essiccamento a 50°C e a circa 5 mbar. Punto di fusione 146,5°C.

IR in KBr: 3452, 2931, 1746, 1717, 1617, 1453, 1376, 1241,

1191, 1163, 1094, 1072, 1010, 985, 896 cnf1 La singola struttura determinata mediante raggi-X con coordinate viene indicata nelle Figure da 1 a 3 che seguono.

Esempio 2: Produzione di 40-0-(2-idrossi)etil-rapamicina stabilizzata

Si sciolgono 100 g di 40-0- (2-idrossi)etilrapamicina in 600 1 di etanolo assoluto. Dopo aggiunta di 0,2 g di BHT, si aggiunge alla soluzione ottenuta, goccia a goccia sotto agitazione, a 3,0 1 di acqua entro.I ora. La sospensione ottenuta viene sottoposta ad agitazione ancora per 30 minuti. Effettuando la filtrazione e il successivo lavaggio (3x200 mi di acqua/etanolo con un rapporto v/v di.5:1) si ottiene un prodotto bianco, umido, che viene ulteriormente essiccato sotto vuoto (1 mbar) a 30°C per 48 ore. Il prodotto essiccato così ottenuto contiene 0,2% (p/p) di BHT.

Il prodotto che si ottiene presenta una migliorata stabilità alla conservazione. La somma di sottoprodotti e di prodotti di degradazione,, espressa in %, dopo una conservazione di 1 settimana, è la seguente:

Composto 50°C in flacone aperto Esempio 1 (0,2% BHT) 1,49

Senza BHT >10

Si può ripetere il procedimento dell'Esempio di cui sopra, usando, però, rapamicina come sostanza attiva.

Claims

RIVENDICAZIONI ,1. Procedimento per stabilizzare un macrolide polienico che consiste nell'aggiungere un antiossidante al macrolide purificato.
2. Procedimento secondo la rivendicazione 1, caratterizzato dal fatto che si aggiunge l'antiossidante in quantità fino a 1%, riferito al peso del macrolide.
3. Procedimento secondo la rivendicazione 1 oppure 2, caratterizzato dal fatto che l'antiossidante è il 2,6-di-ter ;-butil-4-metilfenolo . ;
4. Procedimento secondo ·una qualsiasi delle rivendicazioni da 1 a 3, caratterizzato dal fatto che il macrolide polienico è rapamicina ossia la 40-O-{2-idrossi.)etil-rapamicina .
5/ Miscela in forma solida che comprende un macrolide polienico e un antiossidante. .
6. Miscela secondo la rivendicazione 5, in cui l'antiossidante è presente in una quantità fino a 1% riferito al peso del macrolide.
7. Miscela secondo la rivendicazione 5, in cui l'antiossidante è presente in una quantità di 0,2% riferitó al peso del macrolide.
8. Miscela secondo la rivendicazione 5, 6 oppure 7, in cui l'antiossidante è il 2,6-di-ter .-butil-4-metilfenolo.
9. Miscela secondo una qualsiasi delle rivendicazioni da 5 a 8, in cui il macrolide polienico è rapamicina ossìa la 40-0- (2-ìdrossi)etil-rapamicina .
10. Composizione farmaceutica che contiene, come sostanza attiva, una miscela secondo una qualsiasi delle rivendicazioni da 5 a 9 insieme con una o più sostanze- veicolo oppure uno o più diluenti farmaceuticamente accettabili.
11. 40-0- {2-idrossi )etil- rapamicina in forma cristallina .
12. Composto secondo la rivendicazione 11, sotto forma di un non-solvato cristallino.
13. Composto secondo la rivendicazione 11 oppure 12, avente un reticolo cristallino a = 14,37 À, b = 11,24 À, c = 18,31 À, il volume essendo 2805 À3.
14. Composizione farmaceutica che contiene un composto secondo la rivendicazione 11 oppure 12, insieme con uno o più suoi diluenti oppure sue sostanze-veicolo farmaceuticamente accettabili.
15. Procedimento per purificare la 40-0- (2-idrossi)etil-rapamicina, che consiste nel cristallizzare la 40-0- (2-idrossi)etil-rapamicina da un mezzo che contiene cristalli e isolare i cristalli cosi ottenuti.