HU228208B1 - Palladium-substituted bacteriochlorophyll derivatives and use thereof - Google Patents
Palladium-substituted bacteriochlorophyll derivatives and use thereof Download PDFInfo
- Publication number
- HU228208B1 HU228208B1 HU0105411A HUP0105411A HU228208B1 HU 228208 B1 HU228208 B1 HU 228208B1 HU 0105411 A HU0105411 A HU 0105411A HU P0105411 A HUP0105411 A HU P0105411A HU 228208 B1 HU228208 B1 HU 228208B1
- Authority
- HU
- Hungary
- Prior art keywords
- compound
- formula
- compounds
- pharmaceutical composition
- bpheid
- Prior art date
Links
- DSJXIQQMORJERS-AGGZHOMASA-M bacteriochlorophyll a Chemical class C1([C@@H](C(=O)OC)C(=O)C2=C3C)=C2N2C3=CC([C@H](CC)[C@H]3C)=[N+]4C3=CC3=C(C(C)=O)C(C)=C5N3[Mg-2]42[N+]2=C1[C@@H](CCC(=O)OC\C=C(/C)CCC[C@H](C)CCC[C@H](C)CCCC(C)C)[C@H](C)C2=C5 DSJXIQQMORJERS-AGGZHOMASA-M 0.000 title claims description 11
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 132
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims description 57
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 46
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 35
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 29
- 238000002428 photodynamic therapy Methods 0.000 claims description 28
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims description 28
- 108010013121 palladium-bacteriopheophorbide Proteins 0.000 claims description 27
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 25
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 23
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 17
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 claims description 14
- 229910052740 iodine Inorganic materials 0.000 claims description 14
- 238000002347 injection Methods 0.000 claims description 11
- 239000007924 injection Substances 0.000 claims description 11
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 claims description 10
- 206010027476 Metastases Diseases 0.000 claims description 9
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 claims description 9
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims description 9
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 claims description 9
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 8
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 claims description 8
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims description 7
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 claims description 7
- 108010070075 Bacteriochlorophyll A Proteins 0.000 claims description 6
- 241000700605 Viruses Species 0.000 claims description 6
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 claims description 6
- 125000004429 atom Chemical group 0.000 claims description 6
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 6
- 230000003301 hydrolyzing effect Effects 0.000 claims description 6
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 claims description 6
- 239000002105 nanoparticle Substances 0.000 claims description 6
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 claims description 5
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 claims description 5
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 5
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 claims description 5
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 claims description 5
- 239000000543 intermediate Substances 0.000 claims description 5
- 239000002502 liposome Substances 0.000 claims description 5
- 108010003118 Bacteriochlorophylls Proteins 0.000 claims description 4
- 208000032612 Glial tumor Diseases 0.000 claims description 4
- 206010018338 Glioma Diseases 0.000 claims description 4
- 229940072107 ascorbate Drugs 0.000 claims description 4
- 230000008901 benefit Effects 0.000 claims description 4
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 claims description 4
- 239000000499 gel Substances 0.000 claims description 4
- 125000002686 geranylgeranyl group Chemical group [H]C([*])([H])/C([H])=C(C([H])([H])[H])/C([H])([H])C([H])([H])/C([H])=C(C([H])([H])[H])/C([H])([H])C([H])([H])/C([H])=C(C([H])([H])[H])/C([H])([H])C([H])([H])C([H])=C(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 claims description 4
- 239000002960 lipid emulsion Substances 0.000 claims description 4
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 4
- 230000009401 metastasis Effects 0.000 claims description 4
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 claims description 4
- 241000233866 Fungi Species 0.000 claims description 3
- -1 Hposomes Substances 0.000 claims description 3
- QAQJMLQRFWZOBN-LAUBAEHRSA-N L-ascorbyl-6-palmitate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O QAQJMLQRFWZOBN-LAUBAEHRSA-N 0.000 claims description 3
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims description 3
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims description 3
- 230000002147 killing effect Effects 0.000 claims description 3
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 239000002184 metal Substances 0.000 claims description 3
- 244000045947 parasite Species 0.000 claims description 3
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 125000001189 phytyl group Chemical group [H]C([*])([H])/C([H])=C(C([H])([H])[H])/C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[C@@](C([H])([H])[H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[C@@](C([H])([H])[H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C(C([H])([H])[H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 claims description 3
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 claims description 3
- 238000011200 topical administration Methods 0.000 claims description 3
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 claims description 3
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 2
- 239000011786 L-ascorbyl-6-palmitate Substances 0.000 claims description 2
- 239000010836 blood and blood product Substances 0.000 claims description 2
- 229940125691 blood product Drugs 0.000 claims description 2
- 229910052794 bromium Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 229910052793 cadmium Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 229910052801 chlorine Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 230000003111 delayed effect Effects 0.000 claims description 2
- 229910052731 fluorine Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 claims description 2
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 claims description 2
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 claims 2
- 230000001335 demethylating effect Effects 0.000 claims 2
- 125000004642 (C1-C12) alkoxy group Chemical group 0.000 claims 1
- 125000004400 (C1-C12) alkyl group Chemical group 0.000 claims 1
- 241000208152 Geranium Species 0.000 claims 1
- ATJFFYVFTNAWJD-UHFFFAOYSA-N Tin Chemical compound [Sn] ATJFFYVFTNAWJD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 241000607479 Yersinia pestis Species 0.000 claims 1
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 claims 1
- 125000002350 geranyl group Chemical group [H]C([*])([H])/C([H])=C(C([H])([H])[H])/C([H])([H])C([H])([H])C([H])=C(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 claims 1
- 230000035939 shock Effects 0.000 claims 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 75
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 45
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 36
- KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N palladium Substances [Pd] KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 23
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 21
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 15
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 14
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 14
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 13
- 239000000463 material Substances 0.000 description 13
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 11
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 11
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 9
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 9
- 239000000047 product Substances 0.000 description 9
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 238000000862 absorption spectrum Methods 0.000 description 8
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 8
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 8
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 7
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 7
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 7
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 7
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 7
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 7
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 6
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 6
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 6
- 230000004044 response Effects 0.000 description 6
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 6
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 6
- UJKPHYRXOLRVJJ-MLSVHJFASA-N CC(O)C1=C(C)/C2=C/C3=N/C(=C\C4=C(CCC(O)=O)C(C)=C(N4)/C=C4\N=C(\C=C\1/N\2)C(C)=C4C(C)O)/C(CCC(O)=O)=C3C Chemical class CC(O)C1=C(C)/C2=C/C3=N/C(=C\C4=C(CCC(O)=O)C(C)=C(N4)/C=C4\N=C(\C=C\1/N\2)C(C)=C4C(C)O)/C(CCC(O)=O)=C3C UJKPHYRXOLRVJJ-MLSVHJFASA-N 0.000 description 5
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 5
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 5
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 5
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 5
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 description 5
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 5
- 239000008389 polyethoxylated castor oil Substances 0.000 description 5
- 150000004032 porphyrins Chemical class 0.000 description 5
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 5
- 230000001235 sensitizing effect Effects 0.000 description 5
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 5
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 5
- XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N Argon Chemical compound [Ar] XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 4
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229920002684 Sepharose Polymers 0.000 description 4
- 244000269722 Thea sinensis Species 0.000 description 4
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 4
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 4
- 239000003833 bile salt Substances 0.000 description 4
- ATNHDLDRLWWWCB-AENOIHSZSA-M chlorophyll a Chemical compound C1([C@@H](C(=O)OC)C(=O)C2=C3C)=C2N2C3=CC(C(CC)=C3C)=[N+]4C3=CC3=C(C=C)C(C)=C5N3[Mg-2]42[N+]2=C1[C@@H](CCC(=O)OC\C=C(/C)CCC[C@H](C)CCC[C@H](C)CCCC(C)C)[C@H](C)C2=C5 ATNHDLDRLWWWCB-AENOIHSZSA-M 0.000 description 4
- 239000003599 detergent Substances 0.000 description 4
- 235000011389 fruit/vegetable juice Nutrition 0.000 description 4
- 229910052736 halogen Inorganic materials 0.000 description 4
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 4
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 4
- 229910052763 palladium Inorganic materials 0.000 description 4
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 4
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 4
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 4
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 4
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 4
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 4
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 4
- 239000004575 stone Substances 0.000 description 4
- WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N Acetic anhydride Chemical compound CC(=O)OC(C)=O WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241001463014 Chazara briseis Species 0.000 description 3
- RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N Copper Chemical compound [Cu] RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229920002271 DEAE-Sepharose Polymers 0.000 description 3
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102000007330 LDL Lipoproteins Human genes 0.000 description 3
- 108010007622 LDL Lipoproteins Proteins 0.000 description 3
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 3
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 3
- 150000001732 carboxylic acid derivatives Chemical group 0.000 description 3
- 235000021466 carotenoid Nutrition 0.000 description 3
- 150000001747 carotenoids Chemical class 0.000 description 3
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 3
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 3
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000010949 copper Substances 0.000 description 3
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 3
- 239000012737 fresh medium Substances 0.000 description 3
- 150000002367 halogens Chemical class 0.000 description 3
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 3
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 description 3
- 230000004660 morphological change Effects 0.000 description 3
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 3
- 231100000760 phototoxic Toxicity 0.000 description 3
- 239000000049 pigment Substances 0.000 description 3
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 3
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 3
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 3
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 3
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 3
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 3
- 238000007910 systemic administration Methods 0.000 description 3
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 3
- 230000036962 time dependent Effects 0.000 description 3
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 3
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 3
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 3
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 206010002091 Anaesthesia Diseases 0.000 description 2
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 2
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 2
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 description 2
- 206010010071 Coma Diseases 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000764238 Isis Species 0.000 description 2
- 102000004895 Lipoproteins Human genes 0.000 description 2
- 108090001030 Lipoproteins Proteins 0.000 description 2
- WMFOQBRAJBCJND-UHFFFAOYSA-M Lithium hydroxide Chemical compound [Li+].[OH-] WMFOQBRAJBCJND-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical group [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000699660 Mus musculus Species 0.000 description 2
- 244000046052 Phaseolus vulgaris Species 0.000 description 2
- 235000010627 Phaseolus vulgaris Nutrition 0.000 description 2
- OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N Phosphorus Chemical compound [P] OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010034972 Photosensitivity reaction Diseases 0.000 description 2
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 description 2
- 206010070834 Sensitisation Diseases 0.000 description 2
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 2
- 230000037005 anaesthesia Effects 0.000 description 2
- 229910052786 argon Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000012298 atmosphere Substances 0.000 description 2
- 229940093761 bile salts Drugs 0.000 description 2
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 2
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 2
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 2
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 2
- 235000013351 cheese Nutrition 0.000 description 2
- 229930002875 chlorophyll Natural products 0.000 description 2
- 235000019804 chlorophyll Nutrition 0.000 description 2
- 229930002868 chlorophyll a Natural products 0.000 description 2
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 2
- 210000001072 colon Anatomy 0.000 description 2
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 2
- 230000034994 death Effects 0.000 description 2
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 2
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 2
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 2
- 230000001605 fetal effect Effects 0.000 description 2
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 2
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 2
- 230000035876 healing Effects 0.000 description 2
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 2
- 150000002431 hydrogen Chemical class 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 2
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 2
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 2
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 2
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 2
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 2
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 2
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 2
- VNWKTOKETHGBQD-UHFFFAOYSA-N methane Chemical compound C VNWKTOKETHGBQD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 2
- 201000000050 myeloid neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 2
- 238000011580 nude mouse model Methods 0.000 description 2
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 2
- 239000002674 ointment Substances 0.000 description 2
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 2
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 2
- 230000035515 penetration Effects 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 239000011574 phosphorus Substances 0.000 description 2
- 239000003504 photosensitizing agent Substances 0.000 description 2
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 2
- 230000008313 sensitization Effects 0.000 description 2
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 2
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 2
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 2
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 2
- IWZSHWBGHQBIML-ZGGLMWTQSA-N (3S,8S,10R,13S,14S,17S)-17-isoquinolin-7-yl-N,N,10,13-tetramethyl-2,3,4,7,8,9,11,12,14,15,16,17-dodecahydro-1H-cyclopenta[a]phenanthren-3-amine Chemical compound CN(C)[C@H]1CC[C@]2(C)C3CC[C@@]4(C)[C@@H](CC[C@@H]4c4ccc5ccncc5c4)[C@@H]3CC=C2C1 IWZSHWBGHQBIML-ZGGLMWTQSA-N 0.000 description 1
- FTAPDLRVRYASRX-UHFFFAOYSA-N 1,3-oxazolidine-2-carboxamide Chemical compound NC(=O)C1NCCO1 FTAPDLRVRYASRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WURBVZBTWMNKQT-UHFFFAOYSA-N 1-(4-chlorophenoxy)-3,3-dimethyl-1-(1,2,4-triazol-1-yl)butan-2-one Chemical compound C1=NC=NN1C(C(=O)C(C)(C)C)OC1=CC=C(Cl)C=C1 WURBVZBTWMNKQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YMHOBZXQZVXHBM-UHFFFAOYSA-N 2,5-dimethoxy-4-bromophenethylamine Chemical compound COC1=CC(CCN)=C(OC)C=C1Br YMHOBZXQZVXHBM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NGNBDVOYPDDBFK-UHFFFAOYSA-N 2-[2,4-di(pentan-2-yl)phenoxy]acetyl chloride Chemical compound CCCC(C)C1=CC=C(OCC(Cl)=O)C(C(C)CCC)=C1 NGNBDVOYPDDBFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CFKMVGJGLGKFKI-UHFFFAOYSA-N 4-chloro-m-cresol Chemical compound CC1=CC(O)=CC=C1Cl CFKMVGJGLGKFKI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MSLKMRUEVOYOOZ-VBYMZDBQSA-L 519-62-0 Chemical compound [Mg+2].[N-]1C2=C(C=3[C@H]([C@H](C)C(=CC=4C(=C(C=C)C(=C5)N=4)C)N=3)CCC(=O)OC\C=C(/C)CCC[C@H](C)CCC[C@H](C)CCCC(C)C)[C@@H](C(=O)OC)C([O-])=C2C(C)=C1C=C1C(CC)=C(C=O)C5=N1 MSLKMRUEVOYOOZ-VBYMZDBQSA-L 0.000 description 1
- RZVAJINKPMORJF-UHFFFAOYSA-N Acetaminophen Chemical compound CC(=O)NC1=CC=C(O)C=C1 RZVAJINKPMORJF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 1
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 1
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 1
- XKJMBINCVNINCA-UHFFFAOYSA-N Alfalone Chemical compound CON(C)C(=O)NC1=CC=C(Cl)C(Cl)=C1 XKJMBINCVNINCA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000193738 Bacillus anthracis Species 0.000 description 1
- 206010005003 Bladder cancer Diseases 0.000 description 1
- 108010017384 Blood Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000004506 Blood Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 101100162703 Caenorhabditis elegans ani-1 gene Proteins 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000282994 Cervidae Species 0.000 description 1
- KZBUYRJDOAKODT-UHFFFAOYSA-N Chlorine Chemical compound ClCl KZBUYRJDOAKODT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101100272852 Clostridium botulinum (strain Langeland / NCTC 10281 / Type F) F gene Proteins 0.000 description 1
- 229920000742 Cotton Polymers 0.000 description 1
- 206010011224 Cough Diseases 0.000 description 1
- 206010011878 Deafness Diseases 0.000 description 1
- YZCKVEUIGOORGS-OUBTZVSYSA-N Deuterium Chemical compound [2H] YZCKVEUIGOORGS-OUBTZVSYSA-N 0.000 description 1
- MYMOFIZGZYHOMD-UHFFFAOYSA-N Dioxygen Chemical compound O=O MYMOFIZGZYHOMD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 239000004593 Epoxy Substances 0.000 description 1
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PIICEJLVQHRZGT-UHFFFAOYSA-N Ethylenediamine Chemical class NCCN PIICEJLVQHRZGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 1
- 244000182067 Fraxinus ornus Species 0.000 description 1
- 102000015779 HDL Lipoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108010010234 HDL Lipoproteins Proteins 0.000 description 1
- 239000007995 HEPES buffer Substances 0.000 description 1
- 241001397809 Hakea leucoptera Species 0.000 description 1
- 206010019909 Hernia Diseases 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 241000256602 Isoptera Species 0.000 description 1
- 239000002211 L-ascorbic acid Substances 0.000 description 1
- 235000000072 L-ascorbyl-6-palmitate Nutrition 0.000 description 1
- 241000272168 Laridae Species 0.000 description 1
- 240000006240 Linum usitatissimum Species 0.000 description 1
- 231100000002 MTT assay Toxicity 0.000 description 1
- 238000000134 MTT assay Methods 0.000 description 1
- 206010030113 Oedema Diseases 0.000 description 1
- BPQQTUXANYXVAA-UHFFFAOYSA-N Orthosilicate Chemical compound [O-][Si]([O-])([O-])[O-] BPQQTUXANYXVAA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 241000030360 Peromyscus truei Species 0.000 description 1
- 102000004160 Phosphoric Monoester Hydrolases Human genes 0.000 description 1
- 108090000608 Phosphoric Monoester Hydrolases Proteins 0.000 description 1
- 231100000674 Phytotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 235000008331 Pinus X rigitaeda Nutrition 0.000 description 1
- 235000011613 Pinus brutia Nutrition 0.000 description 1
- 241000018646 Pinus brutia Species 0.000 description 1
- 229920001609 Poly(3,4-ethylenedioxythiophene) Polymers 0.000 description 1
- 229920002565 Polyethylene Glycol 400 Polymers 0.000 description 1
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 1
- 229920002685 Polyoxyl 35CastorOil Polymers 0.000 description 1
- 241000204357 Porites Species 0.000 description 1
- 240000001987 Pyrus communis Species 0.000 description 1
- 241000283984 Rodentia Species 0.000 description 1
- 101150054451 Rtel1 gene Proteins 0.000 description 1
- 241001481789 Rupicapra Species 0.000 description 1
- 108010071390 Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 102000007562 Serum Albumin Human genes 0.000 description 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N Sulfur Chemical compound [S] NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000844671 Taraba Species 0.000 description 1
- 244000299461 Theobroma cacao Species 0.000 description 1
- 235000009470 Theobroma cacao Nutrition 0.000 description 1
- RTAQQCXQSZGOHL-UHFFFAOYSA-N Titanium Chemical compound [Ti] RTAQQCXQSZGOHL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GSEJCLTVZPLZKY-UHFFFAOYSA-N Triethanolamine Chemical compound OCCN(CCO)CCO GSEJCLTVZPLZKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000007097 Urinary Bladder Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 241000545067 Venus Species 0.000 description 1
- 239000005862 Whey Substances 0.000 description 1
- 102000007544 Whey Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010046377 Whey Proteins Proteins 0.000 description 1
- 229910021536 Zeolite Inorganic materials 0.000 description 1
- JWFFDNVGFHXGIB-UHFFFAOYSA-N [F].[Xe] Chemical compound [F].[Xe] JWFFDNVGFHXGIB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000001015 abdomen Anatomy 0.000 description 1
- 206010000269 abscess Diseases 0.000 description 1
- 238000004847 absorption spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 125000002777 acetyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000008186 active pharmaceutical agent Substances 0.000 description 1
- 150000001263 acyl chlorides Chemical class 0.000 description 1
- 230000001464 adherent effect Effects 0.000 description 1
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 1
- 239000003570 air Substances 0.000 description 1
- 125000003545 alkoxy group Chemical group 0.000 description 1
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 239000012080 ambient air Substances 0.000 description 1
- 230000036592 analgesia Effects 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 150000008064 anhydrides Chemical class 0.000 description 1
- 230000006023 anti-tumor response Effects 0.000 description 1
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 1
- 239000013011 aqueous formulation Substances 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000011888 autopsy Methods 0.000 description 1
- 244000052616 bacterial pathogen Species 0.000 description 1
- XZSVAMUZTKNGDN-JBRJOJLESA-L bacteriochlorophylls Chemical compound [Mg+2].[N-]1C2=C(C=3C(C(C)C(=CC=4C(=C(C(C)=O)C(=C5)N=4)C)N=3)CCC(=O)OC\C=C(/C)CCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)C)C(C(=O)OC)C([O-])=C2C(C)=C1C=C1C(CC)C(C)C5=N1 XZSVAMUZTKNGDN-JBRJOJLESA-L 0.000 description 1
- KWOZSBGNAHVCKG-WFDCHTCOSA-N bacteriopheophytin a Chemical compound N1C(C=C2[C@H]([C@H](CCC(=O)OC\C=C(/C)CCC[C@H](C)CCC[C@H](C)CCCC(C)C)C(=N2)C2=C3NC(=C4)C(C)=C3C(=O)[C@@H]2C(=O)OC)C)=C(C)C(C(C)=O)=C1C=C1[C@H](C)[C@@H](CC)C4=N1 KWOZSBGNAHVCKG-WFDCHTCOSA-N 0.000 description 1
- 210000003323 beak Anatomy 0.000 description 1
- 210000000941 bile Anatomy 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 239000013060 biological fluid Substances 0.000 description 1
- 239000012472 biological sample Substances 0.000 description 1
- 238000001574 biopsy Methods 0.000 description 1
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 1
- 238000007664 blowing Methods 0.000 description 1
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 1
- 201000008275 breast carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 1
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 1
- 239000012267 brine Substances 0.000 description 1
- 244000309464 bull Species 0.000 description 1
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 244000309466 calf Species 0.000 description 1
- 150000001721 carbon Chemical group 0.000 description 1
- 239000001569 carbon dioxide Substances 0.000 description 1
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000001733 carboxylic acid esters Chemical class 0.000 description 1
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 description 1
- 230000022534 cell killing Effects 0.000 description 1
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 1
- 230000003833 cell viability Effects 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 1
- 239000003610 charcoal Substances 0.000 description 1
- 230000001055 chewing effect Effects 0.000 description 1
- 235000015111 chews Nutrition 0.000 description 1
- 150000001805 chlorine compounds Chemical class 0.000 description 1
- FIMJSWFMQJGVAM-UHFFFAOYSA-N chloroform;hydrate Chemical compound O.ClC(Cl)Cl FIMJSWFMQJGVAM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WORJEOGGNQDSOE-UHFFFAOYSA-N chloroform;methanol Chemical compound OC.ClC(Cl)Cl WORJEOGGNQDSOE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930002869 chlorophyll b Natural products 0.000 description 1
- 108010025790 chlorophyllase Proteins 0.000 description 1
- 210000003763 chloroplast Anatomy 0.000 description 1
- 210000003161 choroid Anatomy 0.000 description 1
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 1
- 230000008602 contraction Effects 0.000 description 1
- 239000003246 corticosteroid Substances 0.000 description 1
- 229960001334 corticosteroids Drugs 0.000 description 1
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 1
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000895 deafness Toxicity 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 230000017858 demethylation Effects 0.000 description 1
- 238000010520 demethylation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 230000001066 destructive effect Effects 0.000 description 1
- 229910052805 deuterium Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 235000021004 dietary regimen Nutrition 0.000 description 1
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 1
- HNPSIPDUKPIQMN-UHFFFAOYSA-N dioxosilane;oxo(oxoalumanyloxy)alumane Chemical compound O=[Si]=O.O=[Al]O[Al]=O HNPSIPDUKPIQMN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000008034 disappearance Effects 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 230000035622 drinking Effects 0.000 description 1
- 239000003651 drinking water Substances 0.000 description 1
- 235000020188 drinking water Nutrition 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 229940088679 drug related substance Drugs 0.000 description 1
- 239000003792 electrolyte Substances 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- 125000004494 ethyl ester group Chemical group 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 1
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 1
- 230000005284 excitation Effects 0.000 description 1
- 239000004744 fabric Substances 0.000 description 1
- 235000013410 fast food Nutrition 0.000 description 1
- 239000012894 fetal calf serum Substances 0.000 description 1
- 206010016531 fetishism Diseases 0.000 description 1
- 210000003754 fetus Anatomy 0.000 description 1
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 description 1
- 239000006260 foam Substances 0.000 description 1
- 210000002683 foot Anatomy 0.000 description 1
- 230000006870 function Effects 0.000 description 1
- LNTHITQWFMADLM-UHFFFAOYSA-N gallic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC(O)=C(O)C(O)=C1 LNTHITQWFMADLM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 1
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 1
- 210000004907 gland Anatomy 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 210000004013 groin Anatomy 0.000 description 1
- 208000016354 hearing loss disease Diseases 0.000 description 1
- 238000003929 heteronuclear multiple quantum coherence Methods 0.000 description 1
- 210000000548 hind-foot Anatomy 0.000 description 1
- 238000002513 implantation Methods 0.000 description 1
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 230000006882 induction of apoptosis Effects 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 1
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 description 1
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 1
- 210000004705 lumbosacral region Anatomy 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 210000001165 lymph node Anatomy 0.000 description 1
- 230000001926 lymphatic effect Effects 0.000 description 1
- 159000000003 magnesium salts Chemical class 0.000 description 1
- 230000036210 malignancy Effects 0.000 description 1
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 description 1
- 210000005075 mammary gland Anatomy 0.000 description 1
- 238000001819 mass spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 230000001394 metastastic effect Effects 0.000 description 1
- 206010061289 metastatic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 238000000386 microscopy Methods 0.000 description 1
- 230000002438 mitochondrial effect Effects 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 1
- 229910052754 neon Inorganic materials 0.000 description 1
- GKAOGPIIYCISHV-UHFFFAOYSA-N neon atom Chemical compound [Ne] GKAOGPIIYCISHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- PGSADBUBUOPOJS-UHFFFAOYSA-N neutral red Chemical compound Cl.C1=C(C)C(N)=CC2=NC3=CC(N(C)C)=CC=C3N=C21 PGSADBUBUOPOJS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 231100000956 nontoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 229920002113 octoxynol Polymers 0.000 description 1
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 description 1
- QUANRIQJNFHVEU-UHFFFAOYSA-N oxirane;propane-1,2,3-triol Chemical compound C1CO1.OCC(O)CO QUANRIQJNFHVEU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 150000002940 palladium Chemical class 0.000 description 1
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 description 1
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 1
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 1
- JLFNLZLINWHATN-UHFFFAOYSA-N pentaethylene glycol Chemical compound OCCOCCOCCOCCOCCO JLFNLZLINWHATN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 125000001095 phosphatidyl group Chemical group 0.000 description 1
- 230000036211 photosensitivity Effects 0.000 description 1
- 208000007578 phototoxic dermatitis Diseases 0.000 description 1
- 231100000018 phototoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 231100000119 phototoxicity / photoirritation testing Toxicity 0.000 description 1
- 239000002574 poison Substances 0.000 description 1
- 231100000614 poison Toxicity 0.000 description 1
- 229920000747 poly(lactic acid) Polymers 0.000 description 1
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 1
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 1
- 239000008057 potassium phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 230000035935 pregnancy Effects 0.000 description 1
- 239000003380 propellant Substances 0.000 description 1
- QQONPFPTGQHPMA-UHFFFAOYSA-N propylene Natural products CC=C QQONPFPTGQHPMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000004805 propylene group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([*:1])C([H])([H])[*:2] 0.000 description 1
- 235000004252 protein component Nutrition 0.000 description 1
- 235000021251 pulses Nutrition 0.000 description 1
- 239000002534 radiation-sensitizing agent Substances 0.000 description 1
- 238000001959 radiotherapy Methods 0.000 description 1
- 239000000376 reactant Substances 0.000 description 1
- 230000000246 remedial effect Effects 0.000 description 1
- 230000005070 ripening Effects 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 208000017520 skin disease Diseases 0.000 description 1
- 239000002002 slurry Substances 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 description 1
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 description 1
- 235000017550 sodium carbonate Nutrition 0.000 description 1
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- VILMUCRZVVVJCA-UHFFFAOYSA-M sodium glycolate Chemical compound [Na+].OCC([O-])=O VILMUCRZVVVJCA-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000012064 sodium phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M sodium;chloride;hydrate Chemical compound O.[Na+].[Cl-] HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 1
- 230000000392 somatic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 1
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 1
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011593 sulfur Substances 0.000 description 1
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 1
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 238000009965 tatting Methods 0.000 description 1
- 150000005622 tetraalkylammonium hydroxides Chemical class 0.000 description 1
- 229940073455 tetraethylammonium hydroxide Drugs 0.000 description 1
- LRGJRHZIDJQFCL-UHFFFAOYSA-M tetraethylazanium;hydroxide Chemical compound [OH-].CC[N+](CC)(CC)CC LRGJRHZIDJQFCL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 1
- 239000010936 titanium Substances 0.000 description 1
- 229910052719 titanium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000012049 topical pharmaceutical composition Substances 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 150000003626 triacylglycerols Chemical class 0.000 description 1
- GPRLSGONYQIRFK-MNYXATJNSA-N triton Chemical compound [3H+] GPRLSGONYQIRFK-MNYXATJNSA-N 0.000 description 1
- 238000002604 ultrasonography Methods 0.000 description 1
- 201000005112 urinary bladder cancer Diseases 0.000 description 1
- 229910052720 vanadium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 1
- 231100000747 viability assay Toxicity 0.000 description 1
- 238000003026 viability measurement method Methods 0.000 description 1
- 230000001755 vocal effect Effects 0.000 description 1
- 230000003313 weakening effect Effects 0.000 description 1
- 238000009941 weaving Methods 0.000 description 1
- 229910052724 xenon Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010457 zeolite Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
- C07D487/22—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains four or more hetero rings
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K41/00—Medicinal preparations obtained by treating materials with wave energy or particle radiation ; Therapies using these preparations
- A61K41/0057—Photodynamic therapy with a photosensitizer, i.e. agent able to produce reactive oxygen species upon exposure to light or radiation, e.g. UV or visible light; photocleavage of nucleic acids with an agent
- A61K41/0071—PDT with porphyrins having exactly 20 ring atoms, i.e. based on the non-expanded tetrapyrrolic ring system, e.g. bacteriochlorin, chlorin-e6, or phthalocyanines
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/10—Antimycotics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P33/00—Antiparasitic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
- A61P35/04—Antineoplastic agents specific for metastasis
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D491/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00
- C07D491/22—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00 in which the condensed system contains four or more hetero rings
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Oncology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Pain & Pain Management (AREA)
- Virology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
- Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
- Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
- Low-Molecular Organic Synthesis Reactions Using Catalysts (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Description
F&lládá.am-sz^sx'tituált bakteriokiorofxXl-sxáxró&zékok, előállítási eljárásaik, körtitermékeik és alkalmazásuk
A találmány tárgya: Pd~szubsztituált bakteriokiorofill-származékok, előállítási eljárásaik, köztitermékeik, ezeket tartalmazó gyógyszerkészítmények, ezek az in vivő fotodinamikus tumor terápia és a tumor diagnózis területén történő alkalmazása és vírusok es mikroorganizmusok in vitro fokodinamikus elpusztítása.
A SC&X jelentése bakteriokiorofí11 a (a 17J helyzetben fítil- vagy geranil-geranil-osoporttal, a 13z helyzetben COOCHj csoporttal, a 13z helyzetben hidrogénnel, a 3' helyzetben acet alcsoporttal és a 6. helyzetben etil-csoporttal rendelkező magnézium tartalmú , 8,l,T8~tetrahídroporfirin).
A Bchlide jelentése bakteriokiorofIliid a (a BChI a-ből származó 17 helyzetű szén nélküli karbonsav).
A BPhe jelentése bakterioneofitin a (olyan BChi molekula, amelyben a központi magnézium atomot két hidrogén atom helyettesíti) .
A BPheid jelentése baktarifeoforbíd a (a BPhe a-bői származó 172 helyzetű szén nélküli karbonsav),
A td-BPheid jelentése Pd-bakteríofeoforbid a (Pd. központi atommal, a Í3Z helyzetben COOCib-csopor tfcal, a 1.3'2 helyzetben hidrogén atommal, a 3-as helyzetben acetí1-csoporitai és a 8-as helyzetben etil-csoporttal rendelkező, a BPhe a-ből. származó, 172 γ t « * « « Β X « Μ *9φβ · » **«♦ »
Φ ♦ X » * X Φ· ν helyzetben szénmentes karbonsav).
A leírás egészében a bakterioklorofül származékok IUPAC szerinti számozását használjuk.. A nevezéktant felhasználva a természetes bakteriokiorofillek két karbonsav észtert hordoznak a 134 és a I?2 helyzetben, azonban ezek a 13 és 17J helyzetben észterezettek.
Napjainkban növekvő érdeklődés mutatkozik a fotoszenzibilizálo anyagok rák terápiás felhasználásában. A fotodinamikus terápiaként (PDT) Ismert technika alapján a fofoszenzibilizáló anyagokat például közvetlenül a tumoron alkalmazzák és az .ín sitn fotokémiai érzékenyités során olyan vegyüietek képződnek, amelyek megmérgezik a rosszindulatú sejteket ,
A porfirineket és rokon vegyülefeket alkalmazó fotodinamikus terápia mostanra meglehetősen nagy múlttal rendelkezik. A korai munkák az 194ö~os években bebizonyították, hogy a porfirin fluoreszcenciát idézett elő a besugárzott tumor-szövetben, ügy tűnik a porfirinek felhalmozódnak ezekben a szövetekben, és képesek in situ abszorbeálni a fényt, olyan eszközt biztosítva ezzel, amely a fluoreszcencia beazonositásával kimutatja a tumort. A kimutatásra és terápiára szolgáló fotodinamikus kezelés korai szakaszában széles körben használt készítmény volt a hematoporfírin nyers származéka, amelyet hematoporfirin származéknak, HpD-nek is neveztek, vagy Lioson és misei, (Lipson és mtsai., J Natl. Cancer Inst. (1961) 26Ü--8) által ismertetett módon elöállitott
Lipson származék, Figyelemre xnéltó· munkák születtek e készítmény felhasználásával, és Dougherty és mtsai. e származék felhasználásáról számoltak be a rosszindulatú daganatok kezelésében ««·♦ ««* ! 3 (hougherty és smsai., Cancer Rés. (1978) 38; 2628-2635; 3, háti.
Cancer Inat. (1379; 62; 231-23?).
Dougherty és mtsai,., a hematoporfírin származék hatékonyabb formáját állították elő, amely agy 16 k.D-nál. nagyobb aggregéi, tömeggel rendelkező Hpu egy adagját tartalmazta. A fotoöinamikus terápiában használható hatóanyag e formája a tárgya az US 4649151 számú amerikai, egyesült államokbeli szabadalmi leírásnak# amely kereskedelemben kapható és klinikai fázisban van.
A fény.elnyelő, különösen a porfirinekkel rokon vegyületek. alkalmazásának a tumorok kezelésében történő általános alapelveit e vegyületek szisztémás beadásával alapozták meg. E készítmények. különböző képessége a tumorok elpusztítására, a normái szövetekkel esőmben a készítmények szervezet számára kellemetlen sejtekhez történő célbajutásából fakad (Lásd, például Dougherty Ttu. és mtsai.# „Cancer; Principles and Praotice of Oncology (1982), V.T. de Vita Jr. és mtsai, szerkesztésében, 1836-1844). Próbálkozások történtek a óéiba jutása, képesség javítására a hematopörfirín származék antitestekkel történő konjugálásával (lásd, például Meu D, és mtsai. , J, immunoi (1383) 130; 1473147?). £ hatóanyagok működése a sejtek elpusztításában úgy tűnik, hogy magában foglalja a szingulett oxigén képződését a besugárzás során (Meishaupt K.R. és mtsai., Üancer Research (1976)
2326-2329).
Az US 4753958 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírásban szintén a hematoporfirin származék vagy annak aktív komponensének alkalmazását ismertették a bőrbetegségek helyi kezelésében. Továbbá a hatóanyagokat a fertőző szervezeteket, például baktériumokat és vírusokat tartalmazó biológiai minták ί I :
* * ♦ * X X « X *»«« X « »««« χ««χ « «XX ♦ X XX* sterilizálására is használták (Matthevs J.L, és misei,,
Transfusion <1988>: 51-83). E célból különféle más íötoszenzibilízáló vegyületeket is használtak, amint azt példa·.;! az US 4727027 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírásban megadták.
Általában a biológiai szubsztrátok .működésének mind in vivő, mind in vifc.ro szelektív gyengítésére a változatos szerkezeté sugárzást-érzékenyitö anyagok alkalmazási eljárásai a technika állásában ismertek. Az ilyen eljárásokban használható vegyülőbeknek különböző affinitással kell rendelkezniük a biológiai eélszubsztrácra nézve, hogy azt gyengíteni tudják vagy megsemmisítsék, illetve kénesnek kell lenniük a fény abszorbeáiására ügy, hogy a besugárzott hatóanyag olyan módon aktiválódjón, hogy romboló hatással bírjon a szomszédos kompozíciókra és anyagokra.
Mivel a terápiás szerek és diagnosstikumok hatásának optimalizálása mindig kívánatos, ezért a kezelésben és diagnózisban hagyományosan használt porfirin hatóanyagok különféle változatait keressük. A fotossenzibíiizáiö anyagok számos általános osztályát javasolták, beleértve a ftslocianinckat, pssoraién-rokon vegyületeket, és a rezonáns rendszerrel rendelkező többciklusos vegyületeket, Az itt ismertetett vegyüietekhez legközelebb álló vegyületek a különféle feoforbid származékok, amelyek alkalmazását a fotodlnamikus terápiában a Mihon Metaphysies Company által bejelentett EP 220686 számú európai szabadalmi bejelentésben ismertetik; a feoforbid etílén-diamín származékait ismertetik e célra a Tárná Seikayaku, K.K,, által bejelentett J85/0OÖ981 számú japán szabadalmi leírásban és a J88/004505 japán szabadalmi leírásban, amely a lu-hídroxí-feoforbid-a-ra vonatkozik. Továbbá neems, és mtsai., a khotochemistry és shotoóioiogy (1987)
46:639-643 publikációban ismertetik a bakteriokiorofIli-a bakteriokiorofiliin-a (bakteriofeoforbid-a-ként is ismert, amelyből hiányzik a bakteriokiorof Ill~a-ba.n dér Ivat izéit fetilalkohol? és bakterióklórin-a (amelyből hiányzik a fitil csoport ás a Mg-ion is? két származékának fotoszenzibilizálő anyagként történő alkalmazását, A szerzők felfigyeltek e származékokra, mivel fokozott vlzoldhatőságuk alapján előnyösebbek lehetnek a bakterioklorofili-a-hoz képest.
A Yeda Research and Deveiopment Co. Ltd. által benyújtott E9 584552 számú európai szabadalmi leírás ős a WQ97/19031 számú PCT közzétételi irat klorofill és Oakteriokiorof111 származékokat és
PDT hatóanyagként történő alkalmazásukat, illetve fémtartalmú bakteriokioroflilékét és a megfelelő Cd-BChi származékokból, történő tranezmetalizáiássai végzett előállításukat ismerteti.
A probléma megmaradt, hogy olyan a fotodinamlkus terápiában és diagnózisban használható alkalmas fotoszenzibilazáié anyagokat találjunk, amelyek optimálisak a sajátos eélanyagokra és a sajátos környezetre. Tehát a találmány a fotoszenzibilizéié vegyúletek olyan további csoportját biztosítja, amelyek a jelöltek repertoárjának részévé válnak a specifikus terápiás és diagnosztikus helyzetekben történő alkalmazás céljából..
A találmánynak megfelelően azt találtuk, hogy a lenti I, 1' vagy 1 általános képletű vegyületek, ahol A jelentése hatékony plazma-szállításra, és sejtmembrán penetrációra képes szubsztituens, PDT hatóanyagként használhatók és fokozott oldhatóság, stabilitás és/vagy hatékonyság előnyeit mutatják az ismert vegyületebhez képest.
♦ ♦
A találmány tárgyát képezik tehát az I, képletü vegyületek, ahol A jelent ése -OH,
-OR;, »' *» «».»«. • ♦ · ♦ «« « β * * * «
X1 vagy I általános
-o- íCfchhy-y,
-S- {CH2)ri~Y, ~W~ (CH2)n~Y,
-O- (OHs)'2-OH, ~Na~ (CH2h~í7H~BOC vagy
-N- ÍCH3-CH-CH2}2 csoport, amely képletekben
Rí jelentése Na*, K*, íCa'ho.s. (Mg2*) Cl;s, 1-1, HR4 kation, lel.~C{CH2OH) j , *NK3~CH2~ (CHOH) *~CH2OH, +NH2.{CH3}-CH2-(CHOH>4-CH2OH vagy N ΐ OH.· ,:i) 4 csoport, sz I általános képletü vegyületben F.2 jelentése hidrogénatom, -OH vagy -COOR4 csoport ~ ahol R4 jelentése 1-12 szénatomos alkil.vagy 3-12 szénatomos oíkloalkii-csoport -, ínig az 1’ általános képletü vegyületben R2 jelentése hidrogénatom, az I általános képletü vegyületben R3 jelentése hidrogénatom, -OH vagy 1-12 .szénatomos alkoxi-csoport, míg az X' általános képletü vegyületben R2 jelentése hidrogénatom, n értéke 1,2,3,4,5 vagy 6,
Y jelentése -NR^Rh vagy 3.PY SR* 3,X. csoport, ahol R R'2 és
R'j jelentése egymástól függetlenül -CH3 vagy -C2:H5 csoport;
X jelentése F, Cl, Br vagy 1 atom, * egy aszimmetrikus szénatomot jelent, és
- - - jelentése egyszeres vagy telítetlen kettes kötés, * »
72.732/ΡΑ
P01Ö5411 2004, jfents
Továbbá a találmány tárgyát képezik a fenti új vegyüíetek előállítására szolgáló eljárások, így az egyik megközelítésben a leírás a biológiai célszubs-ztrát gyengítését vagy megsemmisítését eredményező eljárást ismertet, amely eljárás esetében a célszubsztrátot a szubsztrát fényérzékenyitésre hatékony mennyiségű I, T:f vagy I általános képletü vegyületteí kezeljük, majd az említett célszubsztrátot. annyi Ideig sugározzuk be az X, 1/ vagy X általános képletü vegyület által abszorbeált hullámhosszsávban lévő sugárzással, hogy az legyengítse vagy megsemmisítse a szubsztrátét,
Másik megközelítésben a találmány tárgya egy olyan gyógyszer készítmény, amely hatóanyagként az 1, I vagy 1 vegyüíetek legalább egyikét egy gyógyászatiiag elfogadható hordozóval együtt tartalmazza, A készítmények a tumorok ir vivő fotodinamikus terápiájára és diagnózisára és sejtek, vírusok, baktériumok, élősködők, illetve gombák mintákban és élő sejtekben jól ismert fotodinamikus technikákkal történő elpusztítására használhatók.
Továbbá a találmány tárgya az I, If vagy I általános képiétű vegyüíetek alkalmazása a fotodinamikus terápiában használható gyógyszerkészítmények előállítására.
A találmány tárgya továbbá a találmány szerinti vegyüíetek alkalmazása a baktériumok, élősködők, vírusok és gombák diagnózisában, és e.x vivő, mintákban való elpusztításában használható gyögyszerkészitmények előállítására.
A találmány tárgya továbbá a 11 és III. általános képletü savklorid, illetve anhidrid intermedierek.
Az 1. ábra a találmány szerinti I, I' és X általános képiétű vegyületeket mutatja be.
♦ ♦ X ♦·)(* «
Λ +* * * ***
Az 1, ábra a találmány szerinti 1, if és I” általános képleté vegyületeket mutatja be.
A 2, ábra az I, if és 1 általános képletű vegyületek előállításához szükséges II és III... általános képletű intermediereket mutatja be,
A 3. ábra a találmány előnyös megvalósításainak megfelelő IV és v, általános képletű vegyületeket ábrázolja.
A 4. ábra a RD-Boheid optikai abszorpciós spektrumát mutatja be aoeton és metanol/K-outfer-foszfát ©legyében.
Az 5, es 6. ábra a Pd-Bpheid kis illetve nagy felbontású tömegspektrumát mutatja, amelyet FAB-bS-sel végeztünk.
A 7. ábra mutatja az A431 sejtek Rd-Bphe.id vagy BChl-SerQbe vegyüietekkel végzett PÓT utáni időfüggő morfológiai változásait (Az ábrán Bchi-Ser jelöli a BChl-Seröbe-t, amely a BChi. szérumét .11 észtere),
A 8, ábra mutatja a Fd-Bpheid és BChi-SerOMe ECV-304 sejteken vizsgált titotoxioitását.
A 3. ábra mutatja a Pd-Bpheíd ás Bd-Bpheíd-etil észter fxtotoníeitását a tenyésztett MzR egér melanóma sejtekre. Az (A) festékanyagot 95 %-os etanolban oldottuk, és tápközeg a 10 % szérumban a jelzett koncentrációkig tovább hígítottuk 1 % etanollg. A (S) pigmenteket közvetlenül tápközeg + X0 % szérumban oldottuk fel,
A IQ. ábra mutatja a Pd-Spheid fitotoxlcítását a tenyésztett MfP. egér melanóma és a humán H29 vastagbél karcinoma sejtekre.
A 11. ábra mutatja az FAR egér melanóma sejtek Cremophorban feloldott, majd sóoldatban hígított Pá-Bpheid-vel (2,5 mg/kg) végzett zotodínamíkus terápiáját.
» ** **!* ♦•4* ** ♦ * * * ♦j·*.
sooIdátbán
A 12. ábra mutatja az tbe egér melanoma sejtek feloldott, majd Cremophorrai hígított Pd-űpherd-vei (2,5 mg/kg} végzett fotodinamikus terápiáját,
A 13. ábra mutatja az elsődleges C6 giioma tumorok gyógyulását a Pd~5pheíö vagy Pd-Bpheid-SerOMe (Az ábrán Pd-Bchl-Ser-rei jelöltük? vegyületekkel végzett fotodinamikus terápia után.
A 14« ábra mutatja a C6 glíoma metasztázís megjelenését a CDI csupasz egerekben műtét után (amputácló; vagy a Pd-Spherd vagy Pd-Spheid-SerOde (Az ábrán Pd-Schl-Ser-rel jelöltük} vegyeletekkel végzett £otodinamlkus terápia után.
Egy előnybe megvalósításban a találmány szerinti vegyületek a IV, általános képletnek megfelelő optikai társzerkezettel rendelkeznek, ahol A jelentése az előzőekben megadott szerinti.
Amikor a fenti szerkezetben a 7-es és 8-as, illetve a 17™es és 18-as kötést jelentő szaggatott vonal telített egyszeres kötés, a 7, 8, 17 és 18 számú szénatomok aszimmetrikus szénatomok. Amikor IP vagy P3 hidrogén a 13 szénatom aszimmetrikus szénatom,
Oxigén jelenlétében vagy környezeti levegő és fényhatás alatt a fenti 7-es és 8-as szén, illetve a 17-as és 18-as szén közötti kötés oxidációja következhet be, amely kettős kötéseket eredményez a vegyületekben az említett 7-es ás 8-as, illetve 17es és 18™as szénatomok kozott.
A találmány szerinti I' és I általános képletű vegyületek az 1 általános képletű vegyületek oxidált formái és a Soheer H. által szerkesztett Chlorophyli, CRC Press, 1991, 147-209 című kiadványban ismertetett eljárásokkal nyerhetők.
A találmány egy előnyösen megvalösitásában olyan vegyüietskét biztosit, amelyeknél A jelentése OFn.
72.732/PA lö : :.ϊ. Ζ P0IÖ541I *'· ’
2004. június
A legelőnyösebb megvalósításban a találmány szerinti vegyület a Pd-BPheíd (amelyet Pd-BChi-COOH-ként is jelölünk a leírásban) , amely V» általános képlettel rendelkésik és az X. általános képletű vegyületbol vezethető le, amennyiben A jelentése OH.
Az I általános képletű vegyületek, ahol A jelentése OH,, egyik előállítási eljárása legalább a következő lépéseket tartalmazza :
1) az M~Spheid~17J~Z vegyületet kombinált demetalizácionak és hidrolízisnek vetjük alá, ahol 1 jelentése fitil™, geranilgeraníl- (gg) vagy SerOMe-c.sopo.rt {szeril-O-metii észter) és. M jelentése Mg, Cd vagy Zn, il) a kapott vegyületbe egy Pd reagenssel beépítjük a Pd-ot és kívánt esetben, iii) a kapott Pd-BPheid-et ezt követően egy A-fí általános képletű vegyúlettel reagáítatjuk, melynek során egy olyan vegyület képződik, amelyben A jelentése nem OH.
Sgy előnyös megvalósításban az eljárás a Pd-BPheld előállítására irányul és a bakterioklorofill a (Bchla) vegyületet az a) lépésben demetallizáljuk és hidrolizáljuk, és a kapott bakteriéteoforbidot (Bpheid) egy Pd reagenssel reagáítatjuk a fej lésében, amelynek során a kívánt Pd-BPheld vegyületet állítjuk elő.
Az 1 általános képletű vegyület előállításának egy másik eljárása legalább a következő lépéseket tartalmazza:
i) a Bo.hl.ide~I7’s-2 transzmetailisáijuk, melynek során megfelelő Pd-BPheid-l?5-!) vegyületet kapunk, ahol S jelentése fitil, gg vagy SerOMe, ií) a kapott vegyületet hidrolizáljuk, és ♦ *
72.732/ΡΑ Ρ01054Η 2004. június φ φ «φ φ # ♦ «
iii) adott esetben a kapott Pd~BPheid~et ezt követően egy A-H általános képletü vegyülettel reagáltatjuk, melynek során egy olyan vegyület képződik, amelyben A. jelentése nem. OH.
Egy előnyös megval.ósitásban az eljárás a Pd-BPheíd előállítására irányul és a bakteriokiorofill a (Echia) vegyületet az a) lépésben transzmetallizáljuk, hogy az eredeti központi Mg atomot Ad atomra cseréljük, majd a kapott Pd~BPheíd~17 vegyületet a b) lépésben hidrolizáljuk, melynek során a kívánt Pd-SPheid vegyületet állítjuk elő, ahol Z jelentése f.itil-csoport,
Az Ϊ általános képletü vegyület egy másik előállítási eljárása legalább a következő lépéseket tartalmazza:
i) a Bchlíde-ll^-Z vegyületet enzimatikosán hidrolizáljuk, melynek során Bchlide vegyületet kapunk, ahol Z jelentése fitiivagy g e r ani 1 -ger a η í 1. - c s oport;
il) az i) lépésben kapott Bchlide vegyületet savas demetaliizácíönak vetjük alá;
iii) Pd atomot építünk be Pa reagenssel az ii) lépésben demetaliizál Bpheid vegyűleibe; és ív) adott esetben, a kapott Pd-SPheid vegyületet egy A-H általános képletü vegyülettel reagáltatjuk, melynek során egy olyan vegyület képződik, amelyben A jelentése nem OH.
A fenti eljárásokban az 1 általános képletü vegyüietek előállítására szolgáló Pd reagens bármilyen Pd-t biztosító megfelelő reaktív vegyület lehet, olyan szerkezettel, mint például a
Pd-acetát és a Pd-klorid.
A Pd atom beépítését a fenti eljárásokban Ns-aszkorbát vagy aszkorbinsav felhasználásával kétlépéses eljárással, vagy 6-0palmitoil-L-aszkorbinsav felhasználásával egylépéses eljárással
72.732/ΡΑ PÖÍ0541Í 2004. jüsüjs végezhetjük.
Az olyan találmány szerinti vegyületek, ahol A jelentése különbözik az OH-től, a Pd-BPheid. fPd-BChl-COOH) megfelelő A~H vegyülettel történő reakciójával nyerhetők,
A II és III általános képletű vegyületek a találmány szerinti I általános képletű vegyületek közti termékei. A II általános képletű savkloridok, a Pd-BPheid-COC.1, bármilyen acil-kioridok képzésére alkalmas szer, például a SOCI2 felhasználásával nyerhetők.
A 111 általános képlete savanhfdrldek az I, I' , I általános képletű vegyületek ecetsavanhidriddel történő dehidratálásával nyerhetők.
E II és III általános képletű közti termékek megfelelő A~h vegyülettel történő reagáltatásávai nyerhetők az 1, 1/, I' általános képletű vegyületek.
A találmány tárgyához tartoznak továbbá az I, I* , 1 általános képletű szabad savak gyógyászatilag elfogadható sói is, A sók a technika állásában jól ismert eljárásokkal állíthatók elő, ilyenek például a szabad sav vagy annak egy sójának szervetlen vagy szerves reagensekkel, például nem korlátozó jelleggel a NaOH, KOH, megfelelő kalcium vagy magnézium sók, LiOH, NH4ÖH, tetraalkil-ammőníum-hidroxíd, tetraetil-ammönium-hidroxid, vagy E-metil-glükamin, giükamin és trietanolsmin reagensekkel történő reagáltatása.
♦ X * ♦ X « Φ * * > -* *
ΦΦΦΧ Φ # ·»♦·<..« **#* 4 ♦ ·> X * * <4
A találmány szerint 1 vegyületek bioi· célszubsztrátokra vonatkozó fotodinamíkas terápiában és diagnózisban történő fölhasználásra szolgáinak. A „biológián, eélszubszt rác* kifejezés alatt bármilyen olyan sejtet, vírust vagy szövetet értünk, amely nem kívánatos abban a környezetben, amelyhez a terápiát vagy más javító hatást, például fertőtlenítést alkalmazzuk, vagy amelynek az elhelyezkedését kívánjuk megismerni egy olyan környezetben, amelyen a diagnózist alkalmazzuk .
A találmány alapján a hatóanyagot a betegbe fecskendezzük, és lehetővé tesszük, hegy elérje az optimális koncentrációt a célszübsztrátban. Ezután a célszabsztrátot a beadott vegyület abszorpciós spektrumának megfelelő hullámhosszánál besugározzuk. A vegyület hatását a célszubsztrát hőmérsékletének együttes növelésével fokozhatjuk.
A találmány szerinti eljárásban történő felhasználás céljából a találmány szerinti vegyületeket a kívánt alkalmazásnak megfelelő hagyományos kötőanyagokkal formulázzuk. Szisztémás beadás esetében, elegendő mennyiségű nem toxikus detergensekkei együtt általában pufferolt vizes készítményeket alkalmazunk a hatóanyag oldhatóvá tételének céljából, Mivel a találmány szerinti vegyületek nem igazán oldódnak vízben, ezért alkalmazható az ilyen őetergensek elegendő mennyisége. Alkalmas nem toxikus detergensek magukban foglaljak, nem korlátozó jelleggel, a Tween-SO-at, különféle epesökat, például, a nátrium~gi.fkolátot, különféle epesó analógokat, például a fűzIdátokat. Más készítmények eseten iíposzóma hordozókat használunk fel. Az oldatot kívánt pH-η hagyományos puffezekkel pufféróljak, ilyenek a Bankvele óidat, Ringer-féle oldat, vagy a foszfát-pof fér, Egyéb olyan, komponenseket is tartalmazhatnak a készítmények# amelyek nem hatnak a hatóanyag aktivitására, ilyenek a stabilizáló menynyiségben jelen lévő fehérjék, például a szérum albumin,, vagy a kis sűrűségű- vagy nagy sűrűségű lipoproteinek (LDL# illetve HOL) .
A szisztémás készítményeket befecskendezéssel,· például intravénásán (i.vu), intraperitoneálzsan (i.p,}, intramuszkulárisan, vagy szubkutén (s.c.) befecskendezéssel vagy transzmembrán illetve transzdermálís technikákkal adhatjuk be. A transzdefmálls vagy transzmembrán beadásnak megfelelő készítmények magukban foglalják a spray-két és az olyan penetránsokat tartalmazó végbélkúpokat, amelyek gyakran magok a fent ismertetett detergensek lehetnek.
A helyi beadás esetén a készítmény egy penetránst is tartalmazhat, és kenőcs, gyógyír, híg kenőcs, krém vagy olaj formában lehat jelen. A mind szisztémás, minő helyi beadásra szolgáló készítményeket a hemzngtonzs Pharmaoautica.l Sciences utolsó kiadásában (Mack Oufolishing Co., Saston, RA) találunk,
S.a vivő kezeléshez történő alkalmazás esetén például transzfúzióhoz szükséges vér vagy plazma, illetve vérkészítményekhez nincs különösebb készítményre szükség, de a találmány szerinti vegyületeket megfelelően összeférhető oldószerben, oldjuk fel, és a besugárzást megelőzően megfelelő koncentrációban keverjük a biológiai fluidumba, jellemzően 1-100 ug/ml nagyságrendben.
A fotodinamíkos terápiás és diagnosztikai alkalmazásokhoz a megfelelő dózis tartományok az alkalmazás módjával és a kiválasztott vegyülettel, valamint a kezelendő vagy diagnosziizálsnX Φ’Φ» dó állapot természetével összhangban fognak változni. Azonban, általánosan a megfelelő dózisok 0,01-50 mg/testsúly .kg, előnyösen 0,1-lC mg/kg nagyságrendnek, Helyi beadás esetén 5-100 mg nagyságrendű jellemző mennyiséget alkalmazunk.
Az ex vivő fotodinamikus kezelés általános eljárásai a Matthews, J.L. és mtsai. (Transfusion, fentiekben; által ismertetetteknek felelnek meg,
Röviden, a szisztémás beadás esetén a beadást követő megfelelő időtartamot, jellemzően néhány perctől két napig hagyunk eltelni azért, hogy lehetővé tegyük a találmány szerinti vegyületek optimális koncentrációjának elérését a biológiai célszubsztrétben, Általában ez a oéiszubsztrát egy tumor erezet, tumor sejt, vagy bármilyen más tumor komponens, és a vegyület elhelyezkedésének meghatározását a célszövet háttérhez viszonyított optikai abszorpciójának mérésévei figyelhetjük meg, Miután az optimális koncentráció kialakult a biológiai oéiszubsztrátot megfeleld hullámhosszsávú, vagyis 740-800 nm, vagy 500-600 nm, vagy 700-900 nm sugárzással, 5-7S0 mW/c-τΰ mértékben és 100-1000 J/crrd teljes energiával sugároztük be.
Helyi kezelés esetén a helymeghatározás azonnali, és a megfelelő sugárzás ezután biztosítható, A biológiai fluídumok ex vivő kezelése esetén a sugárzást a célszövet általi optimális kőtés/felvétel elérése után alkalmazzuk, A besugárzási sűrűség *
1-10 J/cmö nagyságrendű, Mivel nincs szükség a szöveten keresztüli áthatolásra, ezért alacsonyabb teljes energia alkalmazható.
A találmány szerinti készítmények a fentiekben ismertetett 1, Τ', I általános képietű vegyületek legalább egyikét egy fiziológiásán elfogadható hordozóanyaggal együtt tartalmazzak.
φ*
ϊ.
ΦΦΦΧ φ φ Φ-ΧφΦ φ ♦ φφ Φ « *ν&« izek a készítmények oldat, lipid emulzió, vagy géi formájában, illetve iiposzömák vagy nanorészecskék formájában lehetnek. A megfelelő hordozót a találmány szerinti vegyület koncentrációjának célszubsztrátban történő optimál ázásának lehetővé tételéhez választjuk. Az ilyen hordozók példái, nem korlátozó jelleggel a „Tween 80, poiietiiénglikol, például a PEG400, „Cremophor EL'% propílén-glikol, etanol, bassalikomolaj, epesók és epesó analógok, illetve ezek keverékei, A liposzöma-készitmények példáéi d Imi r i s z t o i 1 - f o s z £ a t i d i i - k ο 1inon vagy £osz £a f id i .1-g iicer i nen alapulhatnak. A hordozó tartalmazhat továbbá dipalmitoiifoszfatid.il-kel int is.
Amikor nanorészecskéket alkalmazunk, akkor ezek BEG-gei bevont poli-(tejsav)-nanorészecskek formájában lehetnek jelen, Lipid emulzió formájában rendszerint kis sűrűségű 1ípoproteinsket és triglícerideket használunk,
A találmány szerinti készítményben a találmány szerinti vegyület (ek) 0,01-20 tömeg %, előnyösen 0,05-5 tömeg % mennyiségben vannak jelen a készítmény teljes tömegére vonatkoztatva.
A találmányt a következő nem korlátozó jellegű példákkal £og j u k bemuta t ni.
1, PÉLDA. A éd-Spheld előállítása
A Pd-Bpheíd vegyületet a következő háromlépéses eljárással állítottuk elő Bchla-böl.
(a) A Bakterloklorofill a (BChla) izolálása
A BChla vegyületet liofiiizáit Afodovoiüm selfidophiium baktériumokból állítottuk elő a következők szerint:
A liofiiizáit sejteket (100 g) porrá őröltük, 5 alkalommal összesen 1250 ml acetonnal mostuk, hogy részlegesen kimossuk a
X karotinoidokat, a keverékek leszűrtük és a BChla vegyületek abszolút metanollal (- 1200 mi, 4-5 szűrés) extraháltak ki a szilárd részből. Szúrás után, a sőtetkékes-zöld oldatot vákuum eiatt részlegesen bepakoltuk, a foetöményített oldatot (*· 500 ml) '2-3' alkalommal benzin éterrel (forráspont SO~IGO°C, :í: 1300 m.z) extraháltük., hogy eltávoiltsuk a karót!noidőkar, majd a benzinéter-fázist kétszer tovább extraháltak metanollal (- 550 mi).
£zt a fázist azután kidobtuk, a kombinált metanol-fázist vákuum alatt bepároltuk, és a kékes zöld maradékot metanoi-aoeton ;1:3, v/v; elegyében újból feloldottuk és mezanoi-aeeton (1:3, v/v) el egyé vei ekv.il tóráit OEAE-Sepharose oszlopra (3 x 10 cm; vittük fel. A SChla vegyüietet metanoi-aoeton (1:3, v/v) elegyévei eiuáltuk, a metanoi-aoeton elegyét bepótoltuk és a száraz SChla vegyüíetet éter pontos mennyiségében (az abszorpciós spektrumhoz) újbői feloldottuk, majd vattán szűrtük át, hogy megszabaduljunk az oszlopról származó oldott anyagoktól. Az utolsó bepáriás után a szilárd pigmentet Argon alatt sötétben -áO^C-on tároltuk, Extrakoiós kihozatai: 100 g iiofiiizáit sejtből körülbelül 700 mg BChla vegyület,
A DEAE-Sepharose oszlopot az előzőleg megadottak szerint készítettük el (Omata és Murata, 1333, „Preparation of Chlorophyll a, Chlorophyll b and Baoterioohiorophyll a by coiurnn ohromatography with DEAE-Sepharose Ci-vB and Sepharose Cl~uB, Plánt Ceil Physíoi., voi, 24, pp, IÖ93-1100) . Röviden a DEAESepharose-t desztillált vízzel mostuk és annak 1 M nátriumaoetát poffórban (pH - 7) történő szuszpendálásával aoetát alakká alakítottuk át, A sűrű szuszpenzíót háromszor mostuk aoetonnal és végül metanoi-aoeton (1:3, v/v) szegyében szuszpendáltuk
5· **♦.«*♦ > : .1 ♦ * «««'-* w « «*ΨΧ * í **$* **»· ♦ «4 * * *-#»* az 5°G~on történő tároláshoz.
(b; A bakteriofsoforbid (Soheid) előáll!táa a
Az (a) lépés szerint kapott nyers BChla extraktumot (kevés ka rőt ion lő maradékot tartalmazó körülbelül 100 mg BChla) 80 1 vizes trifluorécétsavban {körülbelül 15 ml) oldottunk fel, amelyet 10 percig nitrogénnel bufcorékoitatunk át. Az oldatot 2 órán át környezeti hőmérsékleten kevertettük. Ezután a reakcióelegyet vízbe <250 ml) öntöttük, majd kloroformmal extraháltak. Az extraktumot kétszer mostuk vízzel, majd vízmentes NazSCM-en szárítottuk, Az oldószer bepáriása után a maradékot Silice oszlopon <3 cm x 15 cm oszlop, Kieselgel 60, Merck) kromatografáltuk és kloroformban lévő metanollal változó gradiens mellett: 2%, 51,
10%, 15% elváltuk. A kromatogram· elején mosódtak ki a karotinoidok és a bakteríofeofitin kis mennyisége, melyet az ailo-bakteriofeoíitin és a karotinoidok elueiója követ. A 10% .metanolt tartalmazó kloroform értéknél kezdtük el gyűjteni a terméket és TiC-vel CKieseXgel, kloroform-metanol,- 9:1? figyeltük a folyamatot. A terméket üC mg) bepótoltuk, majd a CHCl^-ban felvett maradékot VltraPore membránon szűrtük át, hogy eitávoIrtsuk a maradék szilikátot, amely különben oxidációt okozhat, (ο) A palládium beépítése a bakteriofeoforbldba ,,(¾
A (b) lépés szerint kapott Bpheid <100 mg) vegyületet és Pdacetátot (80 mg) diklórmetánban ü* 10 mi') oldottuk fel és adtuk a 200 mg nátrium-aszkordát 20 ml metanoios szuszpenziójához, A reakcióelegyet lezárt lombikban szobahőmérsékleten keverhettük, majd minden 15-20 percben mintát vettünk a reakcióelegyből és feljegyeztük az optikai abszorpciót, 4 óra elteltével a 35% nmes Bpheid abszorpció legnagyobb részét a 330 és 390 em-es Pd~
Bpheid abszorpció vél torra fel.
A reakcióelegyet kioroform/viz oldatba -2C0 ml; 50:50 v/v) vittük át, majd egy váiasztötölcsérben összeráztuk, A szervez fázist összegyűjtöttük, vízzel mostak, vízmentes nátriumkioridon szárítottuk, majd besároztuk. A szárított anyagot 80 mg Pd-aeetáthoz adtuk és a fenti lépéseket megismételtük, amíg a 357 nm-es maradék abszorpció teljesen eltűnik, és a 765 nm-es ía leginkább vörös eltolódás csúcsa) abszorpció és a 330 nm-es abszorpció mazrmum közötti arány eléri a körüibeiúi 2,4-es értéket {kloroformban).
A szárított reakcióelegyet 2:1 arányú kloroform:aceton elegy minimális térfogatában oldottuk fel, majd Cb-Sepharose oszlopra (150 mm x 25 mm) vittük fel, amelyet előzőleg aoetonnai ekvilibráitunk. Az oszlopot először acetonnái mostuk és az első eiuált frakciót kidobtuk. Az oszlopot ezután 3:1 arányú eceten: metanol eleggye! mostuk, két csúcsot különítettünk el és mostunk ki - az első volt maga a fötermék és a második egy aliomer melléktermék volt (kidobtuk), A terméket majdnem teljesen szárazra töményitettűk, majd egy váiasztötölcsérben lévő 50:50 kloroform-víz rendszerbe vittük át. Az elegyet alaposan összeráztuk, majd a szerves fázist elválasztottuk, vízmentes nátrium-szulfáton (vagy náfrinm-kíoribon) szárítottuk és szárazra bepereltük,
2, RBW&. A Fd-Bpheíd előállítása (a{ A BChla izolálása
Az eljárás e lépését a fenti l(a) példa szerint hajtottuk végre.
(b) A Fd-Bpheld -előáll itása *i ϊ *** ’«2* **** »$*» u-O-paimitorl-L-aszkorbinsavzit (2/6 mg, 593 zmol) metanolban (84 mi) oldottunk fel, majd nitrogént buborékolta ttunk át sz oldaton, Hpheid vegyületet (92 mg, 151 omol; és Pd (CHüOOö) 2-t (6 3 mg, 3?0 omol} oldottunk fel GHCla-ban (34 ml, nitrogénnel gázmentesített) és a metanolon oldathoz adtuk. Az elegyet inért atmoszféra alatt tartottuk keverés mellett és a reakció folyamatát néhány nercenként a kis reakoiérészletek abszorpciós spektrumának feljegyzésével figyeltük meg, Körülbelül 30 perc után a reakciót befejeztük és az oldószereket bepátoltuk..
(ο; a Pd-Bpheíd tiszti fása
Nyers Pd-Bpheidet oldottunk fel Cüüi^-ban és vittünk fel 15 g 0,4%-os Silíca-Aso-kaí feltöltött oszlopra, A Güül;s kis mennyiségét (- 30 ml) engedtük ét az oszlopon és ezután a pigmentet HeOHblHClj (1:99, ~2SÖ mi) felhasználásával eluáltuk. A frakciók tisztaságát TuC-vel és optikai abszorpciós spektroszkópiával határoztuk meg. A. jellegzetes mintákon tömegspektroszkóprát és NMR-t végeztük. Kihozatali 62,5 mg tiszte Pd-Spheíd (76%).
A 0,4%-os Silioa-Asc elkészítéséhez aszkorbinsaval. (240 mg: oldottunk fel 24 0 se EtOH: CÖCI3: deOö (66:60:120} eiegyben, Sri Ica gél 60-at (60 g, Merck, Katalógus szám 107734, 70-236 mesh; adtunk hozzá és a sűrű szuszpenzict 10 percig keverhettük, majd ezután vízsugár-szivattyűnál leszűrtük, A sárgás Silioa-Asc.-t végül 1 órán át szárítottuk 50*C-on, Ez a 0,4%-os Silrca Aso. szabályos szilikagélként felhasználva áll készen; a természete kevésbé poláris és némi antioxidáns tulajdonsággal, is rendelke3. PÉLDA. A Pd-Bpheid előállítása (a) A BChia izolálása * * **$·*
Ezt a lépést a fenti 1(a) példa szerint végeztük.
(b) A klorofilláz(Chlaseselőállítása
A klorof illázt (Chlase) Melle azedsraeh I., Azedarah-fa leveleinek kloroplasztjelből állítottuk elő. A frissen szedett leveleket (50 g) 2 percig őröltük egy ~2ö’C~ta lehűtött350 mi ecetont tartalmazó keverőben. A homogenizátumot négyretegü szüröszifán szűrtük át, majd a szűrletet összegyűjtöttük és éjszakán át 4*C~on hagytuk, hogy tovább ülepedjen. Az acetont szűréssel távolitóztuk el, és a visszamaradó port néhányszor hideg acetonnái addig mostuk, amíg a szűrlet színtelen lesz, hogy eltávolítsuk a Chlase és a karótínoidok nyomait, A Chlase aceton port liof iüzáié-készüiékben véglegesen megszárltottuk és a továbbiakban 'lö’C-on tároltok. Ilyen körülmények között az enzimkészítmény 1 évnél is tovább marad stabil anélkül, hogy aktivitása észrevehetően gyengülne, Kíhezatal: 1 kg levélből 20 g Chlase vegyületet nyertünk, (c) A baktsrioklörorIliid (Bchilde) szintéziseés tisztítása
Aszkorbinsavat <70 mg; Merck) vízben (9 ml) oldottunk tel, az oldat, pn-ját lö Μ KOH vizes oldatával 7,7-re állítottuk be, majd 1 mi 0,5 M nátrium-foszfát puffért (pH 7,7) adtunk hozzá a reakció ideje alatt a pH fenntartása érdekében. Ezután Triton X~ 10ö~at (körülbelül 00 pl-t) adtunk az oldathoz, hogy a végleges detergens koncentráció elérje a ö, 8 %-ot (v/v). A Chlase aceton port (200 mg) 6 ml oldatban homogenizáltuk Poiytron homogén!sátor alkalmazásával. A megmaradt oldatot a berendezés lemosására használtuk, majd ezt összekevertük a homogén!zátummai> Az enzimoldatot 20 mg, argonnal telített, szilárd BChla vegyülettel együtt szonikáituk, majd sötétben 6 érán φ
ί>
át ö'Ö-:m inkuba1 tűk keverés közben.
Tisztítás céljából a reakcióban résztvevő anyagot a 6 órás reakció után közvetlenül lefagyasztottuk (~-20’C-ra) , majd ezt követően liofiiizálfak, A. száraz maradékot acetonban oldottuk fel, szoníkáituk, majd az oldatot ezután acetormai ekvílibráit CM-Sepharose-ra vittük fel. Az oszlopot aoetonnal mostuk, hogy eluáljuk az eireagáöat lan anyagokat, majd ezután 5 % és 7 % metanolos scetonnal mostuk, hogy élőárjuk a bakteríokiorof11lödet (Béniidé) és a bakieriofeoforbidet (Bpheid). A terméket 2 5 % metanolos acetonnái előéltük. Az oldószert bepároltuk és a szilárd festékanyagot argon alatt -2'0’C-on sötétben tároltuk. Reakció kihozatali 30-55%.
Mielőtt oszlopba töltöttük a kromatográfiához szükséges CMSepharose-t, először vízzel, és ezután háromszor aoetonnal mostuk, majd aoetonnal ekvliibráituk. A kromatográfiás anyagot újra felhasználhatjuk 2M NaCl vizes oldatával történő kiöblítéssel, amíg színtelen nem lesz, vízzel történő mosással és acetonban történő új raszuszpendálással.
{d) A » a 11 á d lum beépítése a bakteriofeoforbld vegyületfce (Süheld)
Az eljárás a fenti l(c) példában megadottakkal egyezik meg, A száraz anyag HBOC eredménye azt mutatta, hogy a főtermék kémiailag azonos (a teljes keverék 88 %~a) két eplmer és maradék elismerek alakjában van jelen, A. kiindulási anyag, a Bpheid csekély szennyeződése (0,5 %i is kimutatható volt, (a) Afcszorbancía spektrum
A Rd-Bpheíd abszorbanoia spektrumát PM detektor (1 cm út_ ’ ’ ~ ο χ « * ♦ ·*♦ » ♦*«« fr “ ♦ · · .
hossz} alkalmazásával VVXCON spektrofotométerre} határoztok meg, amelyet az alapvonalra nozmalízártunk. Az érzékenysége 0,05 volt.
Az 1, táblázatban és az X. ábrán a Pd-Bpheid és a metanol/Kfoszfát puffer abszorbancla spektrumát tüntettük fel.
A Pd-Bpheid abszorbancla spektrumát a plazmában a 763 nm-es vörös szín felé teltük el.
r , ϊ a b r a z a t
| Ace tón | Hetanol/K-fosz£át 20 mb pH 6,59 | ||
| (70 %/30%5 | |||
| λ | Abszötbancia | λ | Abszorbancla |
| 753 nm | 2,43 | 758 nm | 1,25 |
| 530 nm | 0, 49 | 537 nm | 0, 32 4 |
| 385 nm | 1,25 | 384 nm | 0,535 |
| 331 nm | 1,4 3 | 329 nm | 0,777 |
A spektrumon az 1. ábra szerinti következő csúcsokat mutattuk ki; 758 nm-nei; 1,2502; 537 nm-néi: 0,3239; 384 nm-nél:
0,5351; és 329 nm-nél: 0,7760, (b) A Pd~8p.he.id vegyület HPLC-s kimutatása
Fordított fázisú HFLC-s eljárást fejleszteltünk ki a paliádium-Bpneid szennyezés profiljának jellemzésére és mennyiségi meghatározására.
Szilárd fázis;
Folyadék fázis;
Cg Intértsíi 5 um, 250 x 4,6 mm metanol:kálium-foszfát puffer 20 mM pH 6,59 (705:30%}
Áramlási sebesség:
m.l/pero
Injektálási térfogat
Detektálás;
100 pl
1-SpectrofIow783, Deutérium lámpa: 385nm
2-Speczrcflow757f Voi.fr ám lámpa: 'C. 3 r;m
Amint, .a .2. táblázat mutatja, a 3. példában kapott Pc-Bpheid termák HFLC analízise 7 csúcsot mutat., A. legnagyobb csúcs a teljes termék 64-70 %-át jelenti,
A -2öC-o-n acetcnban tárolt PD-Bpbeid oldat legalább 2 hónapig stabil maradt. Amikor a törzsoldatot 18 óráig szobahőmérséklet en tartottuk nem történt változás a HPLC-s kromatogromban, amely ezt mutatja, hogy e Pd-Bpheid stabil vegyület.
2. Táblázat, A Fd-Bpheid. HFLC-s kimutatása
| Csúcsok | Kimutatás 385 | Kimutatás 753 | Abszorpciós | spektrum (a |
| nm-en 3-ban | nm-en %-ban | maximális hullámhossz nm- | ||
| ben) | ||||
| föl | 0,7 | 0,78 | ||
| 82 | 3,4 | 4,31 | 754, 537, | 334, 330 |
| c | 1,07 | 1,25 | ||
| 0 | 2,49 | 2,7 6 | 758, 535, | 384, 330 |
| S | 64,11 | 63,98 | 758, 537, | 384, 325 |
| F | 9, 62 | 3,6,1 | 753, 531, 358 | |
| C | 13, 56 | 14,46 | 758, 537, | 384, 328 |
(c) θ.-Spheíd KMR-rel történő jellemzése
A 3, példa szerint előállított Fd-Bpheid tisztítási lépése után a legnagyobb csúcs aránya 20 % felett volt, A tisztítást preparativ HFLC Cg oszlopon végeztük. Ezt a tisztított vegyületet használtuk a termék NME-rsl és tömegspektrcmetfiával történő jellemzésére.
A Fd-Spheíd RMR vizsgálatát elvégeztük és a kémiai eltolódásokat a 3. táblázatban soroltuk fel:
- NMR és :3C NMR 'NMR tCOSY és ΗΟΕΟϊί ’R~;SC NMR (HMQC és HMSC: fordított kimutatás) 3. Táblázat. ’’H, :C kémiai eltolódások (ppm)
Metil Proton Szén
| 1-CH; | 3, 44 | 14,4 |
| 2-CH; | 3, 07 | 33,1 |
| 3-CH3 | 1, 75 | 33,6 |
| i-CH, | 1,08 | 10,3 |
| 5-CHj | 3, 36 | .12, 5 |
| 8-Cih | 1, 65 | 23, 5 |
| 1Ö---3H: | 3,55 | 53, 3 |
Mező
| 0 | 9, 1! | 101,5 |
| 6 | 8, 50 | 102, 3 |
| V | 8,4 5 | 98,7 |
| C-H | ||
| 3-R | 4,35 | 47,2 |
| 4~H | 4,03 | 55,2 |
| 7~H | 4,10 | 4 9,2 |
| 8-H | 4,34 | 49, 2 |
| 10 ~H | 5, 92 | 05,10 |
| Egyéb | ||
| i-CHj | 2,08; 2,22 | 30,5* |
| ! f ~Cn2 | 2,30; 2,52 | 30,5* |
| 7~CK2 | 2,15; 2,35 | 35* |
| Proton nélküli s | zén | |
| 2-C'O | 193 | 12~C 158,5 |
| S~Cö | 188 | 13-C 159,5 |
* ♦ * *Χ * X
| i 1 ~oo οι -- | d : á: ,,· | 4 | : 4. -C | 1 | 31, | 5 |
| iá -dőáio | ni, | 4 | 15-C | d d- Λ | ||
| ' ,·-* | 141 | 16-0 | 1 | '0 <v <« f | 6 | |
| 2 -·'.' | 13 5, | 6 | 17-C | 00, | ||
| 6~C | iát. | A | 13-0 | 0 X | ··> %.· « | 7 |
| 6-0 | md | 1. | io-0 | 1 | 66, | 6 |
| ..diád | lóié. | > |
íd; A ét-Bpheid vegyület_tömegspektrométriás jeilemuooo
A Pd-Opneid vegyület 0)3:00000010000001:00.00 ;u. zoqó ϊ.οόοο uo
6, Ábrán meg j no :. t 3 pék f. romol: eredsté nye-t be. ott k;.s -n A.: i. bont árú g ye re nf omlütket f otésoe mse ;. náciéve t (Ao 00 c 0
At :m
A ο ρ o k f r;.; m é t e r , .· ·!ο ’o 0 p <; c 14)0 c! -v..s l.
o m b a r b m ο n t, FA ö; v e geo t A 1 dburomass'' spektrométer voát; .n; ionizációs mőd: kniKA porit i.7; réstecskegyorslfás :
A kV; í;o r r u e homo r só k e; 4 4 t; ; . ·;
teihassnált oldószer; mHBA ímete-ni trobeno i L~a lkoho 1.) ; bemenőt:
oldalirányú.
eredmények: iont. ipott Híg képlet: 0 u4t;f,N,;O,;',;'?i?d; tómű.;:.
44.4.1670 2:1 mán, 00 elméleti 714.1640 mit értéket 714 . 1660-rok t alá it-.sk.
Etek at eredmények megerősítették at NMR 00.ttgu.iato ..: m/e ::: 714 eu megerősítették a palládium beépülését,
At dMA-rei és a tdmegspektrometerrei vizsgáit kémiai szerkótét a BChl vegyület szabad sav alakjának palládium származéka, azaz a Pd-BFheid volt.
5. Példa. A Pd-Bpheld biológiai aktivitása a rágcsáló L1210 és a 'mamán HT29 sejtek esetemen.
(ijS®jtvonaXak. A rágcsáló leukémia sejtvouaiat (L1210) iái lestérómmal, imái g.l otaminnsl,
IraR merkapfoetarolla 1
OS z-adna:;.aznzot x 1 a?z a s zz. no zz Fiséhoz féle Lépkozsgek t.; z :us zpen zz. is kda.taraba:t tarteffz;k fenn. A F1F ; súgó r zeni kálf fibroszerkóma 1 tumor sejteket Tzunetyman rvq adat Lak szerint kar főt Lak fant fletöe „A tódéi system íhlF-li tor oomparísot of end-point sZadahat!· Cancer Fnst., O, 595-604}. A tenyészeteket lat eo t j ászéranazt és gentamfolnf tartsimozo beymraith-féle k ad,fa 1 t z;mo r
·. ' / '
Ltd a a f 1 ,are o<a a a fa mi. sut.
tea aeas aavozz zteff.uk, a Ed d hűmén v-astagizél athato ka zc.rn ama se jteket fonyeszf??L :.0nz lenolvotbs nélküli és 10 a magzata, ha rjusze remet tartalmazó hada
Lead hézagban. A sejtek máseiliegozz fonyodzekéf trade;?: tea: lg2dz~ea trapéz io ö,02r~os FdTA-bao történd saétosz Izázusa vz:; 1 e.a, 1: a tanya has f hé s me 1 la 11 ü f Oá 1 1 fa 1 afa 1 1a i .
(il) In vitro foto-fc-OM.ic.it.as. Az híz 10 és RíF ;:<d‘.vk fetotexleikas i vizsgálatainak' etekében egy 10 cm
Ordaei ez;
egy az ia-sagarzés alt éveld, táséra szolgaié add am-ea végea;. hsa·· iámhosszai rendelkező szó réve i azért OOV 5 kvurz-halogén far teásai biztosi kották a tényt, A sávszélességek egy aa. arfetanéiz szaré fótiéi; segítségévei, tovább korlátoztak dOGlé am-re. A szuszpenziában léve vagy a 24 mm átmérőjű fedőlemezhez tapadó sejteket halaié) a szenzzoilizéié anyagok meghatározott szintjének jelenlétében 15 peroie tápközegben (a kiegészzto pufferkepecítás érdekében 20 mé óFFaE pH 1-tel cserélve a haHuGget) inkabáltuk, A sejteket ezután tisztára mostak a szenzibill.zálö anyagtól, majd friss közegbe helyeztük ét éket. A besugárzást 10®C-on végeztük· Vizsgálat céljából a sejteket fluoreszcens próbákkal jelöltük meg és kiértékeltük a tény által károsított helyeket. Egy má5d:k vizsgálatban a sejteket ezután. 00
sej tek epopfdzis.asek Lejátszódását. diefképesség vizsga intőtsz; vegeztönk do~lyuku Lemezek e L ke Lmeeésése L es 72 s L: dTTv L zsgá Le óta L,. ssv párbuzamos méréssel.
A HTz9 seseLL esezeben a sejteket 1 öten ét inkubűlfuk a Őzé keze is vegyület kuLdnbdzs koncentrációi vei, majd halogén lampávei vagy titán-tátit lézerrel eső mé/sm'' teljesItménnye1 Le és ke u/zm energiával sugároztak be őket, (iii) A sejtek életképessége., A se) fok ka Le Leset 1000-50000 sejt. 00-lyuké Lemezekbe történő eiheiyezáse után 3 néppé), veszet); ATT tea ke Lovai határoztak mos. A sz La i. szesz ). tás t a ka Len káló szarná kontrol sejteket tarts imázs standard görbével kason), tkották össze. Az abszerbazziáz x sm-en bisEad Fiaté LesLvezess 1 határoztuk meg, Az tik 10 sóstók esetében a követ kezd nézőm napban a sejteket friss közegben hagytak növekedni., majd a sejtszamot hasonlóan számoltak ki MTT-vizsga .lati eljárást alkslmazvs.
(iv? A Ixpop robajéhoz történő- kötődés. Mégha tá ro s f. g k a Oö aphoio kontrol humán plazma fehér jegéhez és I.ipoprotein vegye Létéhez történd kötődését. A 250 gi plazma· mintát a 3 gél vegye Lettel 30 percig O'T’C-on inkubáLtuk. szatén a lipoprotein és fehérje komponenseket su rüség-gradiensse.1. működd centrifugával választottak el. .A gradienseket frakciókba gyűjt.ötfák, a frakciókat 3 mi-re hígítottuk 10 mM Triton d-100 oetstgenssel. vagy meghatároztak a fluoreszcenciát 750-000 sm-en 40ö nm-es gerjesztés meIllett.
Sreáménvek .-.-.ás (vj A Bd-Spheid vegyület fototoxikus hatása az L1210 sejtekre
Az L1210 .rágcsáld leukémia sejteket luk; Pd-Spheid vegyület19
73913 om~on haszna ive '77 7-as sejts tek pasztuiásanek hesönló arányához ed/dnk fénydózisra volt szükség.
ezl a fény osztniast a a kié sejts redmésye z . A ’onnl esezéoer ki (vi) & Fd-Spheld vegyület fototoxikus hatása © HT29 sejtekre
A túlélési, arány lOői és 7sá kőzett változott, amisor ;a ébdo zaj tokot fény nélkül Pd-őphoid vegyoiettel znkubáituk. A sajtos túlélést arány csökkent amikor a Pd~Bpheid vegyület köszönt rác lója magasabb volt és amikor a bevitt csóróra donna..;
izoonovokedott - A Rj-öpheid SQ á halálozás:, arányt ekozé dm, fs.;.y todoazcs a rbn I lóriin dózisa 77 sM volt 25 A/osO ionja non moll est. A iao fontosabb iiototdxioitáat előidéző get posztosa. h u í. · láncossz 777 cm volt.
(vii) A fény á 1 tál okozott sérülésok h.elyoi
Az 1,1210 csér leukémia sejteket használva
Pd-Bphe i.d o résen speoittkus mitokondriális fotoszenz 1 be. 1 i.za ló anyag, amely som okez k 1 marta tható fény által.:. sérülési a plszmamembran vagy a Iirászórnák esetén, nz az eredmény ősszeleggésbos vas az apoptózis gyors beinduiásavai, (vili) A plaajKámlxpoprotein megkötése
A végrehajtott vizsgálatok azt mutatták, hogy a Pd-Ppseid az emberi szérumban léve fehérjéket vagy iipoproteineksé a következő erősséggel köti: HOL > Lói >>> Albumin, amely a PDT szelektivitás.egyik befolyásoló tényezőjének tudható be, géLDA, A Pd~Bphelá fg-mxxlásása& ffd-Bpheiá. oldhatósága és stabilitása az áiletkisérletekhez használt oldószerekben..
A Pd~Bpheid 0,05-2%-es koncentrációjú oldatait áll1 tettek össze különböző kés zz menyekben , “ί' η ·' e L ο a mg Pc-epneid vegyálafet 2 mi Oramophenr EL-bán fal egy száraz csőben vagy az livegose lassú forgatásava 1, arára a óidat ás 1; asa a ments sas válik a szemcsést öl, vagy rsages ka I tő kast a lék kis pulzusait felhaszná1va. A csövet ügy üli a jak is, hagy ásnák hőmérséklete ne emelkedjen lu'^C fölé, Azután a Inra anyag feioidddoáf, ö,u mi propilén-gdlkait adtunk hamsa es arra összekevertek vagy lassú forgatással, vagy szőni. ka 1 ő keszntek·· kei. hantán 4 ml áaijes zémfoguta izotóniás hadi oidoz-é: aörank hómmá 0.1 mi~es adagokban, Am elegynek minden homnaadns aram tismtának kell lennie csapadékképzddés 'íaleí nélkül, a készít·' monyt a 0,v's-os had 'omn.bmm után rövid ideig azon: kain készülékkel kezeltek vrgyámva, hogy a írómé rsák letek ζΟ-ΡΓ’ο -ab-atzr tartsuk. A hatóanyag konzfsnt ram Lé rák etanolos ha.giLnss kosra oon a 7y7 nm-nél mért abszorbanciából szémitoftuk.
Amikor 20 mg/kg rd-Ophefd vegyületek használtunk a kiséréstekben, ez 0, i mg/mö g egér felhasználását jementetka. hevei égi mi Cremophor-nái nagyobb mennyiség nem feeskendamhekd os; ,.: farokvénába, igy a hatóanyag koneenérácra 0.4 mg/mi adt.
Ibi hődosztott Cremophor készítményt állítóttunk elő a következők szerint: a mg Pd-bphaid vegyüietet e.,4 ml Cremophor obiéi kevertünk össze. Feloldódás után 0,12 ml propi lén-g 1 z ke lm adtunk hozzá. Ezután izotóniás söoldatot f 1,43 ml; adtunk hozzá kis adagokban, majd ugyanezt minden hozzáadás után megkevertük. A végső oldat teljesen átlátszó és szemesekéii mentes volt. ultrahang-készüléket használtunk a hatóanyag oldódásának segítésére, szükség szerint jégfürdőben történő· hűtéssel mö'X altét tartva annak hőmérsékletéé.
* X *
Λ Oc~Ophecd toiientrao.: ο meytate:;orne .6 lovp;x: 1:1/ :n metaneiie bigitássai venestük. le aas:oham epekt tanit. AttISO nm-en mentül. A osüeá értélét a Od-~bphetd isiid. lenien tt.·· o.l.ijébi( kapott eredményeiket hasmil tót tok értté.
|e( Totó éli késslémén veket késői tét tkok Tusén 8 0 és e tinit t te 1 nassol ive a td-Bpheid li mg Od-Bpheid/od. oldott oldnatova tété iene k cé1j ibd1.
7. PÉLDA. Γη vivő toxicitási vízagálafcok - & Pd-Bpheid hatása a.
ragnsáló tumor modellekre.
Rágcsáld tumor mideiieket sínében ioyteO.o kit kremli si~ oncotot ti::i ltunk a Oc-upheld fototox re btánuirk é 1 írtéin Leóé bee.
<e0 Sibssor a té-Bpheid fitoninamikas é rsekocynicit liinc·tuk mén kéé. réqooooé tumor midoii.dcn: OA - esdi o·.110.00.110 .1: Rll-1 sagártésta d indukált íLbrossarkoma.
fokod i.namrkas toréit,.! mms.orb: 5-0 mm atmerisi tumorokkal rondeikeod inereket hesené 1 ének a 80T kéoor intőkben. latom ?d~8pneid hatösnyeg dosíst (1,0 es 10 ng/bp is két tenydisist illő és 300 J/em'4; értékeltünk ki. 1 C remeié or bán oldott PdBöbéid késnitményt intravénás tarokinjékeiévé 1 adtuk be. A 001 tény besugárzást nagy 15 perccel, rogy 1 érével, vény 0 brévoi as injeked-őt követben betétük el. Minden késelési állapit alatt bárom egeret keceltünk, kivéve, ha a kiadat.i eredmények· haléi is toxioitást matattak vagy semmilyen érsékenységet nem mutattak 0 vegyülettel szemben. Egy 7 57 nm-re hangéit tatén-te fit lésért használtunk fényforrásként FDT céljából, A léser által létrehozott tényt kveressé 1 okba egyesítettük a fény tumorokhoz történd szállítása érdekében, 75 mW/cnb fényerősürűséget hassnáltank. A ♦ ·φ * φ Φ· Φ » Κ κ. φ * ΦΦ» Φ φ φφ*„ »'*Χ'Φ * * *♦ * *φ£»φ tumor méretet tetette hetemeeet mérkőz e top tetet eert' méretően es meghatározrok a tumor gyógz-o láss tét mért étet te tata lett követő 4ö napban nem ojui kő. a tumor) ,
In vivő PD? vét asz: A. 4. és t. táblázatban összegez tőt a Pb? kezelés eredményest a vagy BA emlőmre iáévá va i., vagy blb-é f id ros za r komé va i transzolantáit C3b egerek esetében. d i ndogy k táblázat a következő paramétereket ismerteti: i; .intravénás hatóanyag dérit mg/kg~ban kifejezve; 2) rézerkezelas pa rametero:., . i et a émct újból·, meg jelenése közötti napok száma) ét t) a Pd~ bpheid bba' frelukátt komor gyógyulást mutató egerek szama kot s z a z a z e t a í .
Am int az látható, a P d ~ 8 p he i d ke z v e t 1 t e t k P b ? ··· r ő i a z t t a Láttuk, hogy egyaránt kiasszikom és hatékony tumorellenes vái-aszt indukál minőkét egér tumor modsiiben. A PG? közveti kekk komorérzékenység közvetlenéi, összefüggésben van a hatóanyag.....dózissal.
| r t v e | a teljes | fenyőbe lat i |
| öz is | mé r te ke t | hab/cm'? ,· és |
| ezo i | esek közei | tűi. idői, 4) |
| de i | a keze les | után), 5} i |
i a tempótfenyhóziesai és a hatóanyag beadása es a fénnyel történd kezeién közötti iőö-intervallnmmai. Különösen a magasabb dózisok és/vagy magasabb fénydózisok eredményeztek tokozott válaszokat. A PA emlő karcinőmát érzékenyebbnek találtak a Pd-bpheid közvetített
Pb? kezelésre a b£F~l £ibroszarkoma PöT kezeléseihez képest. A
Pd-Bpheid közvetített PD? kezelés akkor volt hatékony, amikor a fénnyel történő kezelést a hatóanyag beadását követe 1 érán belül nemde tót t uk, ugyanakkor nem volt hatékony, amikor a na tóanyag beadása és a fénnyel történő kezelés között 4 órás inkerr'a 1 ί rnroz a 1 k a imazton k , db A másodok ki sér let,. sor ozat bon a 2a-öpne 1 .: tozobozreitását egy KT29 barnán vaszagbei adenoka roz.nömavzb aranszpiaoZáit agár 'ara: -modellben á 11 ap:. toz rak meg.
Az állat ás tumor modellek: kor vet lónál a halála uras a donor egérből. el távol lton t szilárd tumoros szövetet (z cm átmérőjűé moohani kasa:'; összezörtűnk I, ml 0,91-os séoldazban .·-- ar oldatot (Obi mii szubkután tecsfcenoeztük be minden egér rryb hát se lábába , Ar egereket akkor basználzuk a kísér letekhe z, ornrkor a tumor átmérő;o elérte a 8-10 mm-οζ. A tumorokat a 8~hezes má in. csupaszegotökbe 10 nappal a kísér hoz előtt srabi·.·tán -:d tortok be, boté tor re 1 Zás 1 v 1. zsgá la tok: 0,15 ml 15 mg/kg vd-Opnold vogyüiotet bocs banda rZánk be in z ravénásan. Ar egereket -10 -mr/ko z zopers ka 1 1 a i altazzuk el közvetlenül a besugárzás előzz, A be~ reoskeodozeo után 50 perccel, 1 órával, á órával és o-i étával az egereket egy tztán-zatrr lézerről 300 mWZcm dózissal sugároztuk be, majd lemértük az átlagos ézmérdz, hogy be tudjuk éilztano. -a besugárzás idejét 200 vagy 30-Q. ű/orb energia eléréséhez. A FdBghezá vegyületet ízem kapott kontrol egereket is hasonló körülmények között sugároztuk be, A FIAI kezelés által a tumor növekedésben indukált lelassulást a kísérleti radioterápiában megvalósított vizsgálatokkal ekvivalensen vizsgáitok. Az in vzvo vizsgálatok és minden egyes különálló kísérlet esetén az eredmények 2 vagy 3 különálló kísérlet átlagai, illetve minden különálló kísérlet esetén 2 egeret használtunk ménben kísérleti körülményhez ,
Ami a Zumor-növekedési vizsgálatokat illeti, az eredményeket φ
r azúr r - 1. r.eex e11eresok kent feyezrek ki a nem kezelt eoruvel szármázó kenet-indexnek meg felelő referenciává I ; :: d. I . A remorizédé>:sí a kever keze z sze r i e k s zámi róttuk ki :
Temet-i ndex - {legnagyobb remet érmére ; metél égésén ellentétes átmérő) /2 .
hőmérséklet-vá1 rezes vizsgálata : annak bzztositásera, hegy a hőhatás nem veik számottevő, hömersékietingadozásk mertünk a halogén lámpa és a titáz-zefir lézer besugárzás esetében sószóróé iémenres elominkum-oxiöda 1 bevert nzkrotetmssiemekko r .
A kzserietl eredm/inyek a következők:
( r) Mi; e/sró Ml) om-es besugárzás;
A komor növekedésének csökkenését la kontrckokhoz kócost) figyeltek meg a bekecskendezést követő 30 perc es 4 óra esetén.. A komor ~ index csökkenését 7 sápig f.igyeltük meg a be tecskendeuez utáni 1 órás ez 24 órás köre) imán yek esckére (ii) aoö J/em'· ’?kis nm-cs besugárzás·;
A tumor növekedésének csökkenések is kortroiokzoz képes-:.) figyeltük meg a be les s kende zést követe 30 perc és 4 éra eseten. A remer-index csökkenését 7 napig figyeltük meg a bekecskezdezes utáni 1 Írás es 4 órás körülmények esetsz,
Ilii) 300 d/end besugárzás i órával a befecskendezee után:
A tumor növekedésének csökkenését ke kent coli okhoz képest; 773 n.m-en 5 napig és 753 és 733 nm-en 11 esőig figyeltük meg. A tumor növekedés maximális csökkenését 733 nm-en figyeltük meg.
élv) 3017 J/esd besugárzás: 34 órával a befecskendezés után:
A tumor növekedésének csökkenését (a kontrolokhoz képest) 753 nm-en 4 napig és 703 és 773 nm-sz 12 napig figyeltük meg, A tumor növekedés maximális csökkenését 773 nm-en figyel tűk meg , * «
Az eseroi: ba.ksge:t lámpás es bA:áo-zutir léteses ssssssa ss sss átsüt sem thityeltunk sss sü szett semetséklot - isgadssásf .
E vizsgálatot összegezve a besugárzás opttoálrs hu 1 Aut;hu ss ·· szót 77 3 ts-ut találtuk. A h siess zenbeζ·.Α.ϊ és a besúgó t rés közötti késleltetésnek ven hatása a tenor-válaszra. 764 rao-en egy érás késleltetés bizonyult a leghatékonyabbnak. Amikor AH no-z hastnéltunk a leghatékonyabb késleltetés a si órás volt.
4. táblását
A. Ed-Bpheid hatása a C3H/8A. emlő kareiaómára
| itit | uso? | a tus s | 7) tasott | bee be í bús i7s | Λ:- ο : o | esbepn.·: ;7i.i '· a: .7a: | |
| a:su> | punt tűrte oh. | b s tubák | k-b /<? < AhoKi L | beeső | 0 ; 6ύ ί.; | : ; sünre: te; | |
| ί :u | AA | Λΐΐϋ | SüsseÍUnt | b: ssb.Uii | |||
| U.:;Uu.i huh | 'S'i'iUbS | 7 iUUsíssi | |||||
| kijhh | iüopUs '· | ||||||
| estben | i Sütő;.;; | ||||||
| ( | : . z. | uíb UAue | ! | fi | UUib | ||
| kis se | US ; b, : 77 3 | ||||||
| 7 ’j íSii! / SV | |||||||
| ;. 5 au SOS | |||||||
| h | L.. . | .itt u/sí-a | 3 | b | |||
| í'.ííi | i ·' 1 t b :r· : | ||||||
| 7 5 hí/tüt | 7 7 S : | ||||||
| i.7 UúfS | U7S 7 | ||||||
| A | i . v. | isbb SAOS | 7 | ...................ih.......... | Π a. | !Ut 5 | .........k |
| 7 5 7 uat | 3 i 7 7 sas; | ||||||
| 7 3 uw/OttO | k ·’ ·bő A | ||||||
| 1 érti | |||||||
| ib | .í , V | 300 s/ca | 3 | 0 | -k | ||
| i | 7 5 7 esi | AU onts | |||||
| 7S k;U kert | 5 kJ 5 nap: | ||||||
| l· óra | 1 ás e | ||||||
| A; | ϊ . V. | 300 07 sah | ··; | b | 2 ti. | nap! | ·· |
| 7 5 7 OS: | s iuoss tatás | ||||||
| 7 5 rsií/ | |||||||
| 4 ára | |||||||
| Is | i s V . | í S 0 07 sas | 2 | 3 | * | ||
| 75 7 S£H | Ah tag! | ||||||
| 7 5 núA ser | 1 71 sas i |
W Φ
*. í„;
•? 7: ·' ^7$ '?:P
Őr?
;0 oao
5. táblásait.
A ?d“Bph©id hatása a RXF-1 fxbxOsxaxkómáxa
| 7a 7: 21 | •11 n yuo .7.3 | A. :.00.7 pa ousá te oo 1 | 3. 7c7, a 0.1 Papok | i 'Ca k e | lelök;:.; ;a zo: 1.0000 0 | 7o aLoodiepAo | ; ppop | ?q ·.·:? : /ol ί...: 0 : | |
| Püa.oo | 7 OOP 0.1 | ||||||||
| C ??' | / >rp ? | .7 )123 | 3 3 | PPilOíppl | lloPvOol | 0 ípo!:.-2o7 | |||
| P | p-0ü00.; i | •i 1 Ο.;; 02 oiolioo; | |||||||
| 22 p:77.1 | »op 0- 7:- | ||||||||
| PaOPOOO· | . λ < ;· i · i.; | ||||||||
| 1 | . V .. | 300 | 7 | ó | 2 Pinapl | · | |||
| 30 7 piti | 7:; | ioikOo | |||||||
| ?0 isii / | |||||||||
| i. 0 po f < : | |||||||||
| 7 | - | ;·?<; J/íjfö· | í | (3 | 1 ; 0 | papi | i | ||
| 7:p? ttíít | 1717 | 3<Sp; | 1 73 Oí | 3.0.0 | |||||
| '0 isís/cKí | i 7 | ||||||||
| 00 pop-p | |||||||||
| 5 | . v | 3 00 ,?7οκΟ | 3 | íj: | 1 i 4 | •top; | : | ||
| 72? .ríjrt | 17’ | pap; | |||||||
| 7 0 iü2 ; et«' | 1 (7 | papi | |||||||
| l óra | |||||||||
| 10 | i.. - · | 3 00 07 | 7 | ο | |||||
| 300 η:;· | ·> | (. Poíp; | 1 :3 1 | oapi | |||||
| 7 5 mS7™:n ‘ | 1: : | 7 7 | |||||||
| 10 pi?··:::: | |||||||||
| 00 | i . V , | 3 00 ο7~πί ' | 4 | ··> | ;. í 20 | ;'7ip j | · | ||
| 7 0? PP | ·? | 01 pap; | 1; 4 0 | p a p ? | |||||
| 7 0 mai/' | 20, | 7; 7! X | |||||||
| 1 <;: a | |||||||||
| 00 | i, V . | 300 2/pitP | 1 | 0 | -- | ||||
| 70? piii | οΙϊρρ; | palpls | |||||||
| 7 5 mW7 cső | |||||||||
| 4 Óra | |||||||||
| 10 | 3. , V . | 00 0 07 mer | 3 | 0 | 2 717 | nap? | -Ϊ | ||
| 7 07' ra?5 | 1 7? | papi | |||||||
| 70 IHÍVpCKi' | |||||||||
| 70 perc | |||||||||
| 170 | i... ? - | 7.00 7/οκό | 3 | :7 | 2 iö | papi |
,*'*
ΐ. <:. ?<) : ;
ί................................................................................ΐ I........................................
8.. PÉLDA. Αζ Ά431 humán epxteiiális karolroid g®jfe®k morfológiai kiértékelés® Pö-Bpheld és SChl-sex: vegyülafceken alapuló PDT kezelések után.
Ezt a k 1 sétietet azért végeztük, négy megvizsgáljuk az A001 nemén epi.tel i.é ns karcinoi?á sejtek időfüggő morfológiai, váitozesait a kd~üpheld vagy Bébi-SerOde vegyüiettel történt été koraié?.? átér .
(i) Anyagok: Λ Pd-Epheid vegyületet a fenti 1. példa .szerint éli Írottak elő, mag a szer Ln-mot ii észter kahl-iarrOMe n?ry« ne. et az EE 551553 számé európai szabadalmi leírás alapján készítettük e;..
(li) Fényforrás: 4,5 om-ee vízszűrővel és 650 nm-nel nagyobb vágási. értékű szűrövei rendelkező balogén lámpa (Osram, Németország, iOú ki, A sejteket lé percig 15 md/czf tea jeni. tmeenyei, é á/em'· tel rés energia f iurussel negáreztek be. A Peeegarza?? végett e tenyésztdtáryérckat egy üvegasztalra helyeztük, (rogy a fényt a 1 eI tó i biztosit s a k.
(iii) Fototoxicitásí vizsgálat: A431 sejteket (5x10’ sejt) eltettank 3 om-es tányérokba párosával és HEPES-szel (25 mii, pH 3, A? palléréit, magzatr borjú szérumot (FCSí, penreiilizr (0,05 mg/mi; és sztreptomicint (0,1 mg/ml.i tartaimaző Dulbecco-féle médositet t Eagie-közeg (BíHEky és Ele közeg 1:1 arányú keverékében tenyésztettük őket 75 5 bősedet tségs.g, A Pö-3pheid vagy 5ühI-Ser vegyületeket az LD3C.~;nek megfelelő koncert rációban (0,1, illetve 1 rké adtuk a sejtekhez, 4 óra múlva a sejteket tápkcceggel mostuk, majd a fenti fényforrással besugároztuk. Fáziskoraraszt mikroszkópos vizsgálatot végeztünk különböző idöpontc;kban a be.su·* * $ » Φ Κ ,ί».
;: r ο s ζ köp ο s ν ζ ο ο η ά 1 ζ ζ ο t ' ·- 0 g e ζ ζ ο ; -< k ρ t 1 ο η b ζ ζ b ζ d,} ρ ζ ζ ζ ζ k b. ; ; ; j 1. ζ: λ η gáteást követően yá, ρ,ο, -4 ás 24 sző vak a bika ka sakk azt kévetőén; Centex kő mm SLR fényképezősáppá ; felszereli 2et.ss Axiö^rk35 lenymikroszkopoz (x320 nagy;, tas) zassr.alva. A másik edényoen lévő minden második példány esetén sajt életképességet vizsgéiZsznk 24 órával a 9RT tételest kővázáén semleges vörös életképes·sági vizsgálsz zihaag 32., 1390, Gáli Bioi Toxiool Bők:: 2 Izzik} a 1 ka ima a á s á va i, {i v > Eredmények : Mindkét szenz Ibi 1.;.siló anyag jelentős: válaszaazzal orozott a sejt merte légié pában. Λ Pd-Bpheid gyors étaiaka·Láss; okesott -a sejtek membránét toki 0 tő iában 134 pozob, a sebző; gyorsan ősszetomőrábbtex, és rostos kapasoiakoksZ Porták Mikre ősssekeposo Lvs a sejtek membránjait as eredeti fókáira sebez isis pontoknál Mrostos fertő ipaap . 4 óra elteltével a se prők 00 4 -a elvesztette a bek.se térfogatának legnagyobb részét és nagy részük levált es edényről, majd 24 óra elkeltével tovább;, váitz-zásokat nem f igyál tönk meg (3. ábra, jobb oszlop;. A 8b'hl-3er vegyelek az időfüggő morfológiai változások elzáró mintása tát mzzzatta, amely esek 4 óra elteltével volt megfigyeltetó. A membrán-hói yagosodás a sejZmembránbői kitüremkedó sötét ves.iknlumokként észlelhető, 24 óra alatt nem figyeltünk meg jelentős térfogaZ-onöpkenést és ex ide eltelte után a sejtek legnagyobb része as edényhez kapcsolódott, de üregesnek tant ('hó— lyagesodő fenotipss, 7. ábra, bal oszlop;. A besugárzás szán 24 órával semleges vörös festékkel történő élez képesség 1 vizsgáiétor végeztünk, amely 90±7s sejtossztsiást igazolt mindkét kísérleti csoportban. ,R 7. ábrán A rostos fene lapost a jobb zs zárórán, míg a hólyagosodé benotipnst a bal oszlopban mutatjuk be. A c-enér zo.i. la k mutatták a r;
* * * *v ><)· *2 * ·* í * * Z »«». >A<t« .«J, ►«£. >
:ck vagy a tályogok képzou:ásüz.,
9, PSLOA, & Bd-BBh®.id öa BChl-SerOMe foto toxikus hatása ax &CV304 hatan húgyhólyag xaroinóma sejtvonalra
Ezt a kísérletet a ?d~E9heio és AChi-SenGbe íotoszenzzbiHsáig agyagos EGVÜ04 humán húgyhólyag kancinoma sejtekre kifejtett fototexikút hatásának kiértékelése érdekében végesbük el,
U) Anyagok: A 8<u példa szerintiek.
(ii) Fényforrás: Λ 3 fi i ί t> é X a a szer X n ta k.
(ilí) Fototoxieltási vizsgálat: ECV304 sejteket (2xl0'! se j t/iyak; testes etet tan k OS-lyukú lemezben lévő· peaiciliink 10,11 mg/mi;
es szz rsptom Leint ka, 1 mg/miá tartalmazó· Μ-198, 10 k EGA közegben a sejtek egybe fo l yásáig: (~2xlír sejt/Lyuk), A sejtek 0d~ PPheid vagy PGhl-EerOHe növekvő kongenmrációivá 1 tbctosú 4 ósas inkába fásá t a friss tápközegcei törfé'nz mosás, majd a fonti, i, szakaszban ismertetett szerinti besugárzás követte, A besugárzás után 24 őravai sejt-éietképessegef mertünk semleges város festékkel történő éictképességi vrzsgálat alkalmazásával. .A kővetkező kontrolokat használtak: tény kontrol: besugárzott, s z e η z 1 b 111 z á 1 ő anya g g a 1 n cm k e z e 1. t sejtek, .fotót______k ο n t r e .1: n e m besugárzott a szénzibi1izéié anyaggal sötétben kezeit segtek.
Kezeletlen. kent rei : a szene ifoi 1 szálé anyaggal nem kezeit és nem besugárzott sejteket használtuk a 100 1-cs túlélés kiszámításához (Rosenbach-Belkín V. és mtsai.., 1996, Pbctochem. Pbotobrei (1) : 174-161} .
Giv; Eredmények; A Pd-BPtci.d ás BChl-SerOde vegyületek mindegyike dózis- és fény-függő citotexicitást mutatott az ECV304 orozok esetén (3., ábra:. A megfelelő LD«c értékek 19 és 1Ö00 nlm. A Ebi ;k
UüUUy· zozr? .;.est rtzze :;.c zo z te,,z,gr a ;.
tus esetében tett zzsgfigyeié θ:::ί;Μ mez:eeyaztn:. az λ-· :' ;, szar
'. (az adatokat nz:m menetnek; .
10, PSS.»DA. Az M2R egén me lemérne, sejtek Fd-BBhald ás Pd-BPheidetxl észterrel tórtánő PDT kezelése kísér ref célja az vert, négy né. regé éjek a sd~ Behord én rdBbhs i d-et r 1. észter vegyeletek betlsét ez M22 sejtekre.
{1} Anyagok: A Ad-Sthaid vegyületek a fenti 1, példa ?zzorint déli nettek ere, míg a rd-bakter iefeotzztbid a-ezzi eseznstt a 10
97/;. ege ϊ szemé zd’f közzétételi. iratban ismert.etettek szeznzz kén tétet bük el.
Cizs.) Fényforrás: A béli) példa szeatnzt, de a rejtőket 10 cérna g 12 mWcm tel jesdémonnyei, 7 u/c;g teljés atenne.aval sugáro/znzk be..
(111) Febotexicitási vizsgálat: H2H sejteket tenyésztett ank egy rétegben öelbeceo-féle módositotf regre ibHtkf; ;· biz 1:1. aranya közegében, amelyet abrée-sze 1. (25· mM, pH 7, tg per tereltaz;k, A közeg magzati, sza rvesnarbe-szeremet (létéig (10 ég, giatamiot (1 eke, oenlórii int (Önné mg/mi) es sttrepfomroint 10,1 mgémin tartalmazott és a sejteket 27G~on 8 0 CCg-t farta Íme te páredás légkörben növesztettük. A fototokicitasi vizsgálat ltot kasznált sejteket (ralid sejt/lyuk; or-iyupn lemezekben 24 érát át tenyésztettük körülbelül 2zl0; sejt/iyak sűrűségig. A festekanyagokat közvetlenül a tapközsgOen vagy 95 %-os etanolban oldottuk fel, és tovább hígítottuk a tápközsgfoen, hogy 1% etanol legyen a végső koncentráoröu A hígított festékanyagokat hozzáadtak a se jtszaszpenziohoz. és a sejteket sötétben 4 erén át 37cc-on lokabáltuk, A besugárzás előtt a sejteket egyszer kimostok és ttiss tápköteggei ezeré ifik ki a régit. A lemezeket ezatán aiaide z aga tz zt ork , majd .zen kontrol rendszert r e 1 10 z e rig s z oda h ómé r z é d1 et ο n .'dtdt-on lévé tenyész-inkubátorba bei érával később határoztuk non. A használtuk; Sötét kunt r o 1 ·· sötétben tartott kezeletlen sej tek;
Fény kent tol. - a szenzibüizáló anyaggal nem kezeit sejtek, amelyeket besugároztunk:? Sötét toxikusaág - a festékanyaggal kezelt, ee sötétben tartott sejtek. A sejtek túlélését a korábban ismertetett (WO 97/1908.1 SCI közzétételi irat) bKj-tisúdim beépítéssel haznároztok meg.
<.iv> Eredmények: Amint a 9A, ábrán látható, amikor a too Zokaoyn- yokat ©á -o etaneiban oldottak fel a kd-lzPhoid tt©;1 értőké 0,0) uM, mig a Pd-zoze nz-et i. L észter ial;lj érteke 0,07 μΜ veit.. Amikor a festékanyagokat közvetlenül a 10 á szeremet tartalmazó tápkdzegden oldottuk fel, csak a ed-öpboid volt teljese?; ezt le, mos a Pd-ürneld-etii észter egészen a legmagasabb v.rzsgáit koncentrációig, 1 pb-lg sem volt aktív (ú3. ab raj .
XX, PÉLDA.As M2 P. egér gaoXanőma. és a 8T29 fauxaán vastagbél karéi róna sejtek Pd-BFherd.~del bőr-ténő PDT kezelése ótok a kisérletek azt a célt szolgálták, hogy meghatározzuk a Pd-PPheid fo totoxikes hatását, két sejtvonal, az Fax egér melanóma és a ÜT29 vastagbél karoznöma sejtek irányában.
(i) Anyagok: A Pd-BFheid vegyületet a fenti 1, példa szerint állítottuk ele, (ii) Fényforrás: A fényforrás egy Xenon fluorin LS3-PBT lámpa (Pá.o-Spec, Russia} volt, amely lö cm.-es vízszűrővel és 720-850 nm fénysávval rendelkezik. A sejteket 10 percig, 12 mW/cnb teljesltménnyel, 7 dtrl teljes energia mellett sugároztuk be.
(ül) ffofcofcoxiclfcásl viasgálafe; A vizsgálatot a fent (10, példa;
♦ ♦ « * * * ♦ « »««« « φ· »»«« Χ«φφ » «♦ * * »»* isme t ο ζ·ζ 1 ζ non lazszzilo· :;: r rtokei t alapul véve, ζ 7'?·· - Ζ ka :k zaltoztazasokka1 végeztük: A rd—űshecé vagynlatez zzzr'e z kazo 1 a lét szérumot tartalmazó záekezegdezz öltötték fal, majd ezazao; adtak a sejtekhez. Az Azé sejtek találásét Í”H) ~tImréi.n beépüléssel, szag a Halé Pumán sejtek túlélését MIT vlzsgáiazzal (herlzn éh, es mZsaz,, 111), Sor. él lae-ser 111; 14 52-1 Ízt; határoztok meg, (iv) Eredmények; Amint az a lé, ábrán látható a üT-2 9 barnán voatagbei sejtek aiaosenyabb szenzitivitast mozatnak a tea zákány, rgokkal szemben (0,1 tét üo<,;> értéké, még az béé aa g izek tízzé::
é r z á k az y a ebe k v ο 1z k 1 éa 1 nt: L ο<;ίϊ é r t á k( .
12. PÉLDA, Az Ml A egér melaszome tunerek in vivő PÚT kezelése edBEheid vegyülettel a kzsériet oá Íja, hogy a eél csupasz egerzasbea leve hah egez meiaziáma tumorok 2, é mg/kg sd-zúlbe Íz: vegyél ez Zol tlrtea aof k e z e1és é t t a n a1mü n yo z za,
U) Anyagok: A td-Stheid vegyéieizet a lenti 1. példa szerint ál11 tettük e1ö, (mi) Egerek: Cél csupasz egerek (25 50 g tesZsaiyóakd,
Imiié. Altatás: 50 pl Kotamin/Kampon (05/15 · v/v) inz r aρe r11 οn eá11s betee s kendesés e, (mv) Tantor beültetés: Az egereket 1.0” M2R sejtekkel zmp Lanzá 1 lak szók hátán és 2“2 héten beiéi keletkezzek kezelheti.· merezzé (?~lé tömörek.
<v) Fényforrás; 300 mb/cné teljesítményű, λ^650-90ϋ réz soektráirs ablakkal felszerelt OsrsmláO W halogén rezoontzkos lámpa 54543
)./. Kellet és mtsaí,, Íréig int. a, Hvperthermia. 15, 457-471).
A besugárzás 30 perces veit, (vm) A gDT protdkol: Az elaltatott egérbe intravénásán festek
1$
ΐ. c c szén ο ο ζ. ζ ζϊη ζ,
X feVí'ZSS eazeztán a ege η az a géz ez zz izet zunk a tumor zúz a kezelés előtt és bizonyos idcconzck·
ζ. ζ·
1. Kísérlet;
A szenzibiliráló anyagok elkészítése: 2 mg Pd-BPheid vegyz; Íz zol 0, 25 ml zlremophor EL-ben oldottunk lel, melyet ző pezcas szonikálas kövez, Ehhez 0,375 szí 1,2-prcpiÍcn giikczt adtzubz eb a szomkabasZ tovább:. 15 perem zo lyzal zuk. Λ znzazab ;b ez-oz
13007 rpm~en (Epponzbiri-tana centül zugai Zuk... Λ idebbal zugo smőmizctz koncéntréz Leja a klorctotm spektrumul alapul vevő 0,5 mg/ml.
A tumor PöT kezeiébe: 2,5 mg/ke Pd-ö3heid—ct lak re vén,íze n lecskende zt zik be az M2 3 mélanéma tumort tordozt Ibik-őse pénz egérbe.
A tumort 33 percig 300 mW/cm teIjestöménnyel suzrlrozzuz be, Az emez bzirtemer-teiOtst ndriorsékiete 57,7-5300 volt. A tumor veba a Zíssmko izéjét zz kezeles után 1 és 7 napig kouuZluk. Az érceményéket a 5. ábrán mutatjuk be.
2. kísérlet:
A szenzibilxzáló· anyag előállítása; Két mg Pd-BPheid vegyulezez bidbttenk fel 0,1 ml metanol ée 0,1 mi 0, 1M ΚζΟΡ7.<, pu-8 és 0,3 mi 303· eiegyében, majd 10 percig szonikáituk az eéaazet. A metanolt Argonnal párologtattuk el és 25%-os Crerzophor Elei, 2propilén giikoi. (3:1) oldatát adtuk az oldathoz, melyet 15 perces szenikálás kovát. A mintát 8 percig 13000 rpm-en centrifugálták és a. PO-BPheld végső számolt koncentrációja a kiorcformcs spektrumot alapul véve a,5 mg/mi volt,
A tumor PDT kezelése; 2,5 mg/kg· (120 pl) Pd-BPheid vegyületet
M * ’·**·« * ♦ ♦ * * ♦ * • ♦ X X * * ψ * >*♦* ♦ * Φ»*« χ««« 0 • * ♦ * * ♦ χ*
| nézünk he int | t a venusz: :z Xz F zz I.zúzz | éra tumort koz | . dám é' ·? ' - C ;.:· : L Iá··: o <1 |
| ΟΖΖΖΖΟΖηοΟ. A t | . unor szövetet 82 pe: | ez tg 802 mé/zm | 1'un 1 <u ·< by;'zÓf· / |
| kugntóttűk be. | , At epét öbz tűmet- | fa tiki ez. hóméts | ék Le te 87,7 -Lhl'C |
| volt. A tumor | v á 1 a ezres ke .1. ö l;: t s | késelés uhun | és 8 nap tg ko~ |
| vetndk nyomon. | Az eredményeket a iz | 2. adtán mutatj | uk be, |
| Eredmények.: Amint a 11, és a 12, | ábta mutatja | az Fiáé mól,: netté |
tumorok fenn zsmeznefent 2,5 mg/kg Fd-hhheid vegye Len La 1 végzett
FoT kezelése a tömön 24 órán helnáé. e.hna lése ve L járó suiyeu goul .kazla sec vzí 1 ászt undokáé. „
1.3. PÉLDA. A Pd-Bgheid alapú g&T keaselés csökken ti, a C6 glioma.
metasztázás ki.a.la'kulás.át ar. egerekben: a műtéttől szanssm előny önöket e k .nebulótokét azért végeztük, hogy essz· eke oueáue; k e Fd-FFheLd ég a οΤό1-5οηΟοίθ alapé Fut kesetés közép tus Leheké·sézteuzt, ót a Fd-uuhei,d és dén i-áeuOdo aLapá FuT keooLée slloá.
k 1terjesztet t ne t as z 1 á z .1 s ve 1 ógz : nüvégé t · {í> Anyagok: 5 mg/kg Pd-fíPhied (1. példa $uoe.:T o Iont lé. tót t;
neon Fé-ooéold-SetoFlo 22 t Crtvkopnor hh-ben oldvo, (xi) Fényforrás: A ténytorrás Xenon fluor.in Lát-FéT Lomon (LnoSgeo, Fussiai volt 10 cm-eo v les nőimével és 728-8 88· om fény dúllámhossssávval .
(Ili) Egerek: CDI csupasz egerek, (ív) lésserok: Ae egereket iáé' cű silómé sejttel imolantáltuk a hátsó lábfejükön, A tumorokat akkor kezei tik, amikor elértek a
7-8 mm hosszúságot.
(v) Altatás: 50 pl Vetalsr//Lumpon (55/15 v/vi , (v4): : Fájdalomcsillapítás: Oxyeodooe-t (12 mg/ih adtunk az 5 t szacharózt tartalmazó itatóvízbe a kezeléstől (ampukáctd vagy FDT kezelési számított egy hétig.
Φ X * ν««Φ φ « * Φ Φ φ « 4 * * * * * « ♦ Φ »**Φ · » ΦΧ»Φ «««* ψ (vii). Protokoll: tar orz ,·· ύ r. ?.Ί;;;
rsg / k g a z e a z z b £ 1r z a I o a a ya g a t ( 9d - d 91: a i a: a a q y 9 q - n1 h a r a; - á a a 1ás a;' kocs-kcndezt un k be az arűzvaalanui a zaba a lé páráig zOá mik/ara te 1 jenizménnyel sugároztuk be őket, majd a kakaóéban hagytuk, kegy telépá1jaoak aa állatok. Az 1, és 2. csoport; utak az aíiátok Pd-nthoid, illetve ad-skee kd-SerOMe vegyületekke 1 köotlano kkT kezeiért kaptak., A tumor válaszreakciót r. a rsetssuto z la kj.a le kuissá t az ágyékban 7 teteti keresztel követtük nyoncn, á, csoport;: A Po ka i zu ke t no I. ampatu.lt ábrátokét (a;: I, oonpot t d,U garda állítva; és a metssztézis kialakulást 7 bekor kerozztt;:.
követtek nyomon. A PPT kezelésre adott válazz p., remet er g kezeik állatok dsszessógobdl a tumor elsorvadást én eltűnőnk matató állatok aránya veit. A metoaztá zr.sk a tartotok ágyékban vagy mástól korterd meg íoienésávo l matattak ka.. Végpontoknak a korok kezet tekintettek: 7 rrétc.g tartó meg rigyelés, birtokot ka la i , a tarsor mérete etette a 2 ott wbatt'tns. lantsat L radt amelyik e 1 ez ζ o r meg j ο l orr.:. k.
(v.i x x) Eredmények: A tumor e.l laposödás {eltűnés; eredményeit a Iák ábrát mutatják be, dia a iá napon a Pd;~dpoaid vegyaietre adott válaszreakció eresebb volt, mint a rd--8phos.rk-n-rtdde vegyuleté (100 lt elletve se 1 tarsor eiiapusoöss; , később a 10, napon a válaszreakció hasonlóan et '1 korúit volt. A tumor eileposodás hosszú kává hanyatlása a kezeit állatok némelyikében egyes tömörek újbóli növekedésének követ keménye, valószínűleg a tumorterület és a bevilágított mázd hibás illeszkedése miatt. A metasztézis megjelenésének eredményeit a 17. ábrán mutatjuk be.
A láb eltávolításéval végzett műtéti kezelés a motasztázis alapjában véve nagyobb százalékát eredményezte a ?DT kezeléshez ké-
Claims (38)
- ♦ ♦ φ ♦* »** **
pest ón aximum 78%·· < js) . Továbbá a Pd· •BPheid ve gyülettel történő PDT kéz elés utáni metasztázis volt. H XC'-JclÁcl’t r s onvabb (maximum 23%~osj . Az erectaé íny hasonló a Pd· •BPhe iá·· Sej r-Ome vegyülettel kapott eredményhez, és a Pd-BPheid vegyület legfőbb előnye & metasztázls megjelenésének késleltetése. A Pd-BPheid vagy PdBPheid-SerGMe vegyüietekkei történő PÓT kezelés gyógyító hatású volt a C6 glioma tumorok esetében. A metasztázís kialakulásának esélye a PDT kezelés után alapjában véve alacsonyabb a műtéti kezeléssel összehasonlítva.j»« « *X φ «* φ » ♦ ♦ φφφ φ *♦L Az I, Γ vagy Γ általános képletü vegyület aholA jelentése -OH,OE:-0~{CH2)n-Y, ~S~{CH2)n~Y,-NH~(CH2)2-NH-BOC vagy -N-(CH2~CH«CH2)2 csoport,Rí jelentése Hat Ky (Ca^Ks, (Mg2yaSj Liy HlhY +NH3-C(CH-20H)3, *HWCBHCHOH)4~CI-h0H, *NH2(CH3)~CHHCH0H>CH20H vagy *N (Cx/Hs-n’* ΐ }4 csoportRb jelentése . az 1 általános képletü vegyületekben - hidrogénatom., -OH vagy -CO0R.4 csoport, ahol Rt jelentése 1-12 szénatomos alkllcsoport vagy 3-12 szénatomos cikloalkíl-csoport, míg - .az Γ általános képletü vegyületekben - Ra jelentése hidrogénatom,Rs jelentése - az I általános képletü vegyületekben - hidrogénatom, OH vagy 1-12 szénatomos alkoxi-csoport, míg - az Γ általános képletü vegyületekben - R3 jelentése hidrogénatom, n értéke 1,2,3-,4,5 vagy 6-,Y jelentése --NRARh vagy' ~;NRáR aR’nX' csoport, ahol R\, R 2 és Rt jelentése egymástól függetlenül ~~CH3 vagy -C2H5. csoport;** »»», «« * *' * ♦ X * φ • ♦ ·X jelentése F, Cl, Br vagy I atom.ns értéke 1, 2, 3 vagy 4, és a * egy aszimmetrikus szénatomot jelez, és---jelentése telített egyszeres vagy telítetlen kettős kötés, - 2. Valamely IV általános képletnek és optikai konfigurációnak megfelelő vegyület, ahol A jelentése -OH- vagy ~ÖRi-csoport és JRi jelentése az 1. igénypontban megadott.
- 3. A V képletnek és optikai konfigurációnak megfelelő vegyület, amely a Pd~bakteriofeolbrbid~a /Pd-BPbeid/ és ahol A jelentése --OH csoport.
- 4. Az 1. igénypont szerinti I, Γ vagy P általános képletű vegyületek közül hatóanyagként legalább egyiket, egy gyógyászatilag elfogadható hordozóval együtt tartalmazó gyógyszerkészítmény,
- 5. A 4. igénypont szerinti -gyógyszerkészítmény, amely tumorok- ideértve a tumor áttéteket - fotodinamíkus terápiájában /PDT/ hasz
- 6, A 4. igénypont szerinti gyógyszerkészítmény, amely oldat, lipid emulzió, gél, liposzómák, vagy nanorészecskék formájában van kikészítve,
- 7. A 4. igénypont szerinti gyógyszerkészítmény, amelyben a vegyület vagy vegyületek 0,01-20 tömeg % mennyiségben vannak jelen a készítmény teljes tömegére vonatkoztatva.
- 8. A 2. vagy 3, igénypont szerinti vegyületek közül hatóanyagként legalább egyiket egy gyógyászatilag elfogadható hordozóval együtt tartalmazó gyógyszerkészítmény.
- 9, A 8. igénypont szerinti gyógyszerkészítmény, amely tumorok eértve a tumor áttéteket ·· fotodinamíkus terápiájában /PDT/ hasz49 nálhatö fel.lö. A 8, igénypont szerinti gyógyszerkészítmény, amely oldat, lipid emulzió, gél. líposzórnák, vagy nanorészecskék formájában van kikészítve.
- 11. A 8. .igénypont szerinti gyógyszerkészítmény, amelyben a vegyület vagy vegyületek 0,01-20 tömeg % mennyiségben vannak jelen a készítmény teljes tömegére vonatkoztatva.
- 12. Gyógyszerkészítmény, amely Pd-bakteriofeoforbid-a-t és egy gyógyászatilag elfogadható vivőanyagot tartalmaz.
- 13. A 1.2. igénypont szerinti gyógyszerkészítmény, amely tumorok - ideértve a tumor áttéteket - fotodinamikus terápiájában / PDT/ használható fel.
- 14. A. Pd-bakteriofeoforbid-a-t és egy gyógyászatilag elfogadható vivőanyagot tartalmazó gyógyszerkészítmény, amely oldat. Imid emulzió, gél, Hposzómák, vagy nanorészecskék formájában van kikészítve.
- 15. A 14. igénypont szerinti' gyógyszerkészítmény., amelyben a Pd-bakteriofeoforbid-a 0,01-20 tömeg % mennyiségben van jelen a készítmény teljes tömegére vonatkoztatva.
- 16. A 14.-15. igénypontok bármelyike szerinti gyógyszerkészítmény, amely tumorok diagnosztizálására használható fel,
- 17. Eljárás az 1. igénypont szerinti 1 általános képletú vegyületek előállítására, ahol A jelentése OH-csoport, azzal jellemezve, hogyi) végrehajtjuk egy M-bakteríofeoforfeid-a az (BPheid) 173~Z vegyület kombinált demetallizálását és hidrolízisét, aholM jelentése egy fém, mégpedig Mg, Cd vagy Zn és Z jelentése litil-, géranil-geranil- vagy szerü-meti!észter (SerOMej csoport, és ií) a kapott vegyületbe egy Pd reagenssel beépítjük a Pd~t.φ»IS, A 17, igénypont szerinti eljárás Pd-bakteriofeoforbid-a (Pd~ heíd) előállítására, azzal jellemezve, hogy az í) lépésben a bakteriokiorofill a~t /Bchla/ demetallizáljuk és hidrolizáljuk, majd a kapott bakteriofeoforbld-a-t /B'Fheiá/' az fi) lépés szerint egy .fid reagenssel reagáltatjuk,
- 19, A 17. vagy 18. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy fid reagensként Fd-acetátot vagy fid-kloridot alkalmazunk.
- 20. A 19. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a Fel beépítését Ma-aszkorbátot vagy aszkorbin savat alkalmazó két ciklusban végzett eljárással, vagy egy ciklusban 6-O-palmitoü-L-aszkorbinsav alkalmazásával hajtjuk végre.
- 21, Eljárás az !. igénypont szerinti l általános képletü vegyület előállítására - ahol A jelentése OH-tól eltérő azzal jellemezve, hogy11 a bakteriokiorofill a~t ZBehlaZ demetallízá'lmk és hidrolizálíuk, maid fi) a kapott bakteriofeoforbid-a-t /BPheid / egy fid reagenssel reagáltatjuk és fii.) az ii) során kapott vegyületet egy megfelelő A-H általános képletü vegyülettel, ahol A jelentése OH-csoporttől eltérő, reagáltatjuk.
- 22. Eljárás az 1. igénypont szerinti 1 általános képletü vegyüietek előállítására, ahol A jelentése OH-esoport, azzal jellemezve, hogy1) a megfelelő Fd-BPheid- 173~Z vegyület előállítására, ahol Z jelentése fitii-, geranii-geranfi- vagy SerOMe csoport, transzmetallizáljuk. a Bchlide 173-Z vegyüietek és ii) a kapott vegyületet hidrolizáljuk..
- 23. A 22, igénypont szerinti eljárás Pd-BPheíd előállítására, azzal jellemezve, hogyi) a bakterioklorofill-a-t /Bchla/ transzmetallizáljuk az eredeti központi »φ X Φ Φ φ » * * φ φ φ φ φφ φ ΦΦΧ ** ·Mg atom Pd-re való kicserélésére, majd ii) a kapott Pd-BPheid- 173-Z vegyületet, ahol Z jelentése .ütik vagy geranü-geranil-csoport, hidrolizáljuk és így megkapjuk a Pd-bakteriofeoforbíd-a (PdBPheid) kívánt vegyületet.
- 24. A 22, vagy 23, igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy Pd reagensként Pd-aoetátot vagy Pd-kloridot alkalmazunk.
- 25. A 24. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a Pd beépítését Na-aszkorhátot vagy' aszkorbinsavat alkalmazó két ciklusban, végzett eljárással, vagy ó-O-palmitoil-L-aszkorbinsavat alkalmazó- egy ciklusban végzett eljárással hajtjuk végre.25. Eljárás valamely 2 . igénypont szerinti I általános képietű vegyület, ahol A jelentése OH-töl eltérő, előállítására, azzal jellemezve, hogy il a bakterioklorofili-a /Bchl-a/ transzmetaöizálásával az eredeti központi Mg atomot Ρά-vel cseréljük fel, ii) a kapott vegyületet hídroliző maja.iii) a kapott Pd-bakteriofeoforbid~a-t (Pd-BPbeid)--et egy megfelelő A-H általános képle tű vegyülettel, ahol A jelentése OH-csoporttől eltérő, reagáltatjuk.
- 27. Eljárás valamely 3, igénypont szerinti I általános képietű vegyület előállítására, azzal jellemezve, hogyi) a (bakterioklorolillid-a /Behlide/ - 173-Z vegyületet enzim atikusan hidrőlizáljuk, ahol Z jelentése fitil- vagy geranil-geranil-csoport, ii) a kapott Bchlide-t savas közegben demetaüizáljuk, és iii) a kapott demetallizálí vegyületbe egy Pd reagenssel beépítjük a Pd-t,
- 28. A 27. igénypont szerinti eljárás Pd-bakteriofeoforbid-a (PdBPheid) előállítására, azzal jellemezve, hogy * >·V «Χ^Φ ** ** *Φ* <· ,· * > *κ φ * κχ* χ* >φ « * <·*..· * ♦ *» » φφ ** * **i) a bakterioklorofíll-a-t /Bchla/ enzimatikusan hidrolizáljuk, ii) a kapott terméket demetallizáljuk, és iii) a kapott demetallizált vegyületbe egy Pd reagenssel beépítjük a Pd-t.
- 29. A. 27. vagy 28. igénypont. szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy Pd reagensként Pd-ace tatot vagy Pd-kloridot alkalmazunk.
- 30. A 29. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, .hogy a Pd beépítését Na-aszkorbátot vagy aszkorbinsavat alkalmazó két ciklusban végzett eljárással, vagy 6-O-palmitoü-L-aszkorbinsavat alkalmazó egy ciklusban végzett eljárással hajtjuk végre.
- 31. Eljárás az 2. igénypont szerinti I általános képletü vegyületek. ahol A jelentése -OH-tői különböző csoport, előállítására, azzal jellemezve, hogyi.) a bakterioklorofili-a-t /Bchla/ enzimatikusan hidrolizáljnk, ii) a kapott terméket savas közegben demetallizáljuk, ffi.) a kapott demelallizáit termékbe egy Pd reagenssel beépítjük a Pd-t, és ív) a kapott vegyületet egy megfelelő A-H általános képletü vegyüiettel reagálhatjuk, ahol A jelentése -OH-töl különböző csoport,
- 32. Valamely 1. igénypont szerinti I, P vagy Γ általános képletü vegyület alkalmazása gyógyszerkészítmény előállítására, amely tumorok ideértve a tumor áttéteket - fotodinamíkus terápiájában ZPDT/ használ
- 33, Valamely 2. igénypont szerinti vegyület alkalmazása gyógyszerkészítmény előállítására, amely tumorok - ideértve a tumor áttéteket fotodínamikus- terápiájában /PDT/ használható fel.
- 34, Valamely L igénypont szerinti h F vagy' P általános képletü vegyület alkalmazása gyógyszerkészítmény előállítására, amely tumorok diagnosztizálására használható fel.
- 35. A 33. vagy 34. igénypont szerinti alkalmazás, amelynek során 1 általános képletű vegyületként a Pd-bakteriofeoforbid--a-t alkalmazzuk.
- 36. A 32.-35. igénypontok bármelyike szerinti alkalmazás, amelynek során a gyógyszerkészítményt injekció· alakban készítjük ki.
- 37. A 32,-35. igénypontok bármelyike szerinti alkalmazás, amelynek során a gyógyszerkészítményt helyi, lokális bevitelre alkalmas alakban készítjük ki.
- 38. Az 1.-3. igénypontok bármelyike szerinti I, Γ vagy Γ általános képletű. vegyületek alkalmazása baktériumok, vírusok, élősködők és gombák mintákban, ex vívó elpusztítására, használható készítmények előállítására.
- 39. A 38. igénypont szerinti alkalmazás, amelynek során 1 általános képletű vegyületként a Pd-bakteriofeofórbid-a-t alkalmazzuk,
- 40. A 38. vagy' 39. igénypont szerinti alkalmazás, amelynek során a minta transzfúzióra szánt vérből vagy vérkészítmények előállítására szolgáló plazmából származik.
- 41. Π vagy III általános képletű vegyületek mint köztítermékek.A. meghatalmazott
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| EP98403110 | 1998-12-09 | ||
| PCT/IL1999/000673 WO2000033833A1 (en) | 1998-12-09 | 1999-12-09 | Palladium-substituted bacteriochlorophyll derivatives and use thereof |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| HUP0105411A2 HUP0105411A2 (hu) | 2002-04-29 |
| HUP0105411A3 HUP0105411A3 (en) | 2003-12-29 |
| HU228208B1 true HU228208B1 (en) | 2013-01-28 |
Family
ID=8235584
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| HU0105411A HU228208B1 (en) | 1998-12-09 | 1999-12-09 | Palladium-substituted bacteriochlorophyll derivatives and use thereof |
Country Status (22)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US6569846B1 (hu) |
| EP (1) | EP1137411B1 (hu) |
| JP (1) | JP4796227B2 (hu) |
| CN (1) | CN1160069C (hu) |
| AT (1) | ATE347554T1 (hu) |
| AU (1) | AU771292B2 (hu) |
| BR (1) | BRPI9916096B8 (hu) |
| CA (1) | CA2353554C (hu) |
| CY (1) | CY1106450T1 (hu) |
| DE (1) | DE69934328T2 (hu) |
| DK (1) | DK1137411T3 (hu) |
| ES (1) | ES2277454T3 (hu) |
| HK (1) | HK1040638B (hu) |
| HU (1) | HU228208B1 (hu) |
| IL (1) | IL143591A0 (hu) |
| NO (1) | NO331426B1 (hu) |
| NZ (1) | NZ512093A (hu) |
| PL (1) | PL201172B1 (hu) |
| PT (1) | PT1137411E (hu) |
| RU (1) | RU2234508C2 (hu) |
| SI (1) | SI1137411T1 (hu) |
| WO (1) | WO2000033833A1 (hu) |
Families Citing this family (20)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US7897140B2 (en) * | 1999-12-23 | 2011-03-01 | Health Research, Inc. | Multi DTPA conjugated tetrapyrollic compounds for phototherapeutic contrast agents |
| WO2002013820A1 (en) * | 2000-08-11 | 2002-02-21 | Ceramoptec Industries, Inc. | Photosensitizing ointment |
| EP1277470A1 (fr) * | 2001-07-17 | 2003-01-22 | Steba Biotech N.V. | Formulation galénique injectable pour utilisation dans un diagnostic ou une thérapie photodynamique et son procédé de préparation |
| AU2003230164B2 (en) * | 2002-05-08 | 2008-05-01 | Yeda Research And Development Co. Ltd. | Sensitized online BOLD-MRI imaging method |
| JP4529344B2 (ja) * | 2002-06-03 | 2010-08-25 | ニプロ株式会社 | 腫瘍組織の酸素濃度を上昇させるためのポルフィリン酸素輸液製剤 |
| DE60328496D1 (en) | 2002-06-27 | 2009-09-03 | Health Research Inc | Fluorinierte chlorin und bacteriochlorin photosensitizer für fotodynamische therapie |
| EP1606291A2 (en) * | 2002-07-02 | 2005-12-21 | Health Research, Inc. | Efficient synthesis of pyropheophorbide a and its dervatives |
| IL152900A0 (en) * | 2002-11-17 | 2003-06-24 | Yeda Res & Dev | Water-soluble bacteriochlorophyll derivatives and their pharmaceutical uses |
| EP2322173B1 (en) * | 2004-06-07 | 2016-08-10 | Yeda Research And Development Co., Ltd. | Cationic bacteriochlorophyll derivatives and uses thereof |
| US20060222592A1 (en) * | 2005-04-05 | 2006-10-05 | Clemens Burda | Nanoparticles and methods of manufacturing nanoparticles for electronic and non-electronic applications |
| US20110040170A1 (en) * | 2008-01-28 | 2011-02-17 | Yeda Research And Development Co., Ltd. | Endoscopic imaging photodynamic therapy system and methods of use |
| AU2009219682B2 (en) | 2008-02-27 | 2015-06-18 | Yeda Research & Development Co. Ltd | RGD-(bacterio)chlorophyll conjugates for photodynamic therapy and imaging of necrotic tumors |
| US20120034157A1 (en) * | 2010-08-03 | 2012-02-09 | Searete Llc, A Limited Liability Corporation Of The State Of Delaware | Artificial cells |
| GB0819594D0 (en) | 2008-10-24 | 2008-12-03 | Univ Coimbrra | Process |
| EP2425873A1 (fr) | 2010-09-07 | 2012-03-07 | Steba Maor SA | Modélisation de l'action d'une fibre optique dans un traitement par therapie photodynamique, et assistance à la planification d'un tel traitement |
| CN103405769A (zh) * | 2013-03-07 | 2013-11-27 | 北京亿仁赛博医疗科技研发中心有限公司 | 光敏剂在制备治疗疾病的病毒灭活药物中的应用 |
| CA2905109C (en) | 2013-03-11 | 2021-03-16 | Tookad Ip Sarl | Method for producing bacteriochlorophyll a |
| CA2907356C (en) | 2013-03-15 | 2022-07-12 | Sherri Ann MCFARLAND | Metal-based coordination complexes as photodynamic compounds and their use |
| AU2017250732B2 (en) | 2016-04-10 | 2022-11-10 | Memorial Sloan-Kettering Cancer Center | Combinational therapies for treatment of cancer comprising a bacteriochlorophyll derivative |
| US10933134B2 (en) | 2017-03-16 | 2021-03-02 | Memorial Sloan Kettering Cancer Center | Combination therapies for treatment of cancer |
Family Cites Families (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5002962A (en) | 1988-07-20 | 1991-03-26 | Health Research, Inc. | Photosensitizing agents |
| US5171741A (en) * | 1989-04-21 | 1992-12-15 | Health Research, Inc. | Bacteriochlorophyll-a derivatives useful in photodynamic therapy |
| IL102645A (en) | 1992-07-26 | 1998-02-22 | Yeda Res & Dev | Chlorophyll and bacteriochlorophyll derivatives, their preparation and pharmaceutical compositions comprising them |
| IL116126A0 (en) * | 1995-11-24 | 1996-01-31 | Yeda Res & Dev | Process for the preparation of bacteriochlorophyllis some novel compounds of this type and pharmaceutical compositions comprising them |
-
1999
- 1999-12-09 EP EP99958470A patent/EP1137411B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1999-12-09 NZ NZ512093A patent/NZ512093A/xx unknown
- 1999-12-09 RU RU2001118842/04A patent/RU2234508C2/ru active
- 1999-12-09 US US09/857,772 patent/US6569846B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1999-12-09 AT AT99958470T patent/ATE347554T1/de active
- 1999-12-09 CA CA2353554A patent/CA2353554C/en not_active Expired - Lifetime
- 1999-12-09 PL PL348201A patent/PL201172B1/pl unknown
- 1999-12-09 DE DE69934328T patent/DE69934328T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1999-12-09 HU HU0105411A patent/HU228208B1/hu unknown
- 1999-12-09 IL IL14359199A patent/IL143591A0/xx active IP Right Grant
- 1999-12-09 PT PT99958470T patent/PT1137411E/pt unknown
- 1999-12-09 CN CNB99816058XA patent/CN1160069C/zh not_active Expired - Lifetime
- 1999-12-09 DK DK99958470T patent/DK1137411T3/da active
- 1999-12-09 WO PCT/IL1999/000673 patent/WO2000033833A1/en active IP Right Grant
- 1999-12-09 JP JP2000586326A patent/JP4796227B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1999-12-09 SI SI9930949T patent/SI1137411T1/sl unknown
- 1999-12-09 AU AU15834/00A patent/AU771292B2/en not_active Expired
- 1999-12-09 BR BRPI9916096A patent/BRPI9916096B8/pt not_active IP Right Cessation
- 1999-12-09 ES ES99958470T patent/ES2277454T3/es not_active Expired - Lifetime
-
2001
- 2001-06-07 NO NO20012807A patent/NO331426B1/no not_active IP Right Cessation
-
2002
- 2002-03-28 HK HK02102403.5A patent/HK1040638B/zh unknown
-
2007
- 2007-02-15 CY CY20071100207T patent/CY1106450T1/el unknown
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| HU228208B1 (en) | Palladium-substituted bacteriochlorophyll derivatives and use thereof | |
| Li et al. | Role of ferroptosis in the process of acute radiation-induced lung injury in mice | |
| Dufour et al. | Antioxidant, anti-inflammatory and anticancer activities of methanolic extracts from Ledum groenlandicum Retzius | |
| Ma et al. | In vitro production of huperzine A, a promising drug candidate for Alzheimer’s disease | |
| KR100544376B1 (ko) | 면역증강성 및 전이억제성 발효된 식물성 추출물, 약제학적 조성물 및 이의 용도 | |
| KR101344303B1 (ko) | 표적 치료에 관한 종양에 선택성이 있는 콘쥬게이트 | |
| Ittadwar et al. | Novel umbelliferone phytosomes: development and optimization using experimental design approach and evaluation of photo-protective and antioxidant activity | |
| Mbiantcha et al. | Analgesic, anti-inflammatory and anticancer activities of Combretin A and Combretin B isolated from Combretum fragrans F. HOFFM (Combretaceae) leaves | |
| CN108070275A (zh) | 方酸染料类化合物、制备方法及用途 | |
| CN105482129A (zh) | 抗癌萃取物及化合物 | |
| PT92546B (pt) | Processo para a preparacao de composicoes farmaceuticas contendo derivados de arilo heterociclicos para o tratamento de tumores malignos da mama | |
| AU785489B2 (en) | Method for detecting and killing epithelial cancer cells | |
| Kaur et al. | Isolation of embelin from and evaluation of its anti-cancer potential in Embelia ribes breast cancer | |
| CN107213145A (zh) | 细锥香茶菜乙素在制备抑制食管鳞癌细胞增殖的产品中的应用 | |
| WO2021049850A2 (ko) | 혈관신생억제 및 저산소환경에 의해 활성화되는 항암 치료진단제 | |
| KR20070117373A (ko) | 청피로부터 추출한 항암, 항염증 치료제 및 ｈｊ001의추출방법 | |
| CN107137384A (zh) | 紫草素在制备治疗肺癌药物中的应用 | |
| CA2165836C (fr) | Utilisation des derives du rosmanol pour la fabrication des medicaments anti-radicalaires et/ou antilipoperoxydantes et/ou hepatotropes | |
| KR102117560B1 (ko) | 켈락톤 및 이의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 함유하는 암 예방 및 치료용 조성물 | |
| KR100396841B1 (ko) | 항암 기능성 단무지용 조미 조성물 및 이를 이용하여 조미된 항암기능성 단무지 | |
| Son et al. | Neuroprotective effect of scopoletin from Angelica dahurica on oxygen and glucose deprivation-exposed rat organotypic hippocampal slice culture | |
| CN107648221A (zh) | 大萼香茶菜乙素二乙酰化物的药物新用途 | |
| Peterka et al. | Light irradiation increases embryotoxicity of photodynamic therapy sensitizers (5-aminolevulinic acid and protoporphyrin IX) in chick embryos | |
| US20030017158A1 (en) | Method for detecting and killing epithelial cancer cells | |
| Kadiri et al. | Screening of fractions of endophytes of Catharanthusroseusagainst HT 29 induced Colon Cancer in Rats |