HU227760B1 - Vegetable oil enzymatic degumming process by means of aspergillus phospholipase - Google Patents

Vegetable oil enzymatic degumming process by means of aspergillus phospholipase Download PDF

Info

Publication number
HU227760B1
HU227760B1 HU9802813A HUP9802813A HU227760B1 HU 227760 B1 HU227760 B1 HU 227760B1 HU 9802813 A HU9802813 A HU 9802813A HU P9802813 A HUP9802813 A HU P9802813A HU 227760 B1 HU227760 B1 HU 227760B1
Authority
HU
Hungary
Prior art keywords
oil
enzyme
phospholipase
process according
ppm
Prior art date
Application number
HU9802813A
Other languages
English (en)
Inventor
Fridolin Loeffler
Hans Ottofrickenstein
Hermann Dr Plainer
Bruno Sproessler
Original Assignee
Ab Enzymes Gmbh
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Ab Enzymes Gmbh filed Critical Ab Enzymes Gmbh
Publication of HUP9802813A2 publication Critical patent/HUP9802813A2/hu
Publication of HUP9802813A3 publication Critical patent/HUP9802813A3/hu
Publication of HU227760B1 publication Critical patent/HU227760B1/hu

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
    • C11B—PRODUCING, e.g. BY PRESSING RAW MATERIALS OR BY EXTRACTION FROM WASTE MATERIALS, REFINING OR PRESERVING FATS, FATTY SUBSTANCES, e.g. LANOLIN, FATTY OILS OR WAXES; ESSENTIAL OILS; PERFUMES
    • C11B3/00—Refining fats or fatty oils
    • C11B3/003—Refining fats or fatty oils by enzymes or microorganisms, living or dead
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
    • C12P7/62—Carboxylic acid esters
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
    • Y10S435/8215—Microorganisms
    • Y10S435/911—Microorganisms using fungi
    • Y10S435/913—Aspergillus
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
    • Y10S435/8215—Microorganisms
    • Y10S435/911—Microorganisms using fungi
    • Y10S435/913—Aspergillus
    • Y10S435/917—Aspergillus niger
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
    • Y10S435/8215—Microorganisms
    • Y10S435/911—Microorganisms using fungi
    • Y10S435/913—Aspergillus
    • Y10S435/918—Aspergillus oryzae

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Fats And Perfumes (AREA)
  • Enzymes And Modification Thereof (AREA)
  • Edible Oils And Fats (AREA)

Description

FÖSZFÖLIPÁZXAL
A találmány étkezési olajok előállításánál a nyáikátlanltási eljárási lépésre vonatkozik. amelynél·» növényi olajból - amelyből a hidratálható foszíátldokat előnyösen egy előzetes vizes nyáikátlaoítással túlnyomd részt eiíávohtöttuk - a nem hidratálható foszíatidofeat egy enzimes kezeléssel távolítja el úgy, hogy azt egy ősókas tisztítás; eljárásnak alá lehessen vetni. A találmány szerinti eljárás kiméig nem költséges és környezetbarát.
A jó minőségű étkezési olajok előállítására latoért tisztítási eljárások általában a nyálkátlarutáshöl, savaísmításból, valamint iéhérkésből és szagtalanításból állnak. Az utóbbi Időben számos próbálkozás történt arra, hogy különösen a nyálkátlanhási műveletet hatásosabban és költségkímélőbb módon végezzék. A kitűzött cél az, hogy az. olajat úgy nyálkátlardtsák, hogy azt utána egy desztillációs savtalanitásí műveletnek lehessen alávetni. ez utóbbi desztillációs savtalanitásí művelet előnye a szokásos, semlegesítéssel végzett savtalaniiási eljárással szemben, hogy nem keletkezik melléktermék. Ennek előfeltétele .azonban, hogy a. foszfetldtatlaiom kiesi legyen, így példáéi az olaj feszforíartarma kevesebb mint. 15 pprn, előnyösen kevesebb mint 10 ppra légyen.. Az ideális foszfortartalom <5 pgm,
A növényi olajokban levő nyá&aanyagokat töfcyomo részt foszfatidok keveréke alkotja, ezek mennyisége függ magától az. olajos magtól, valam int az olaj kinyerés módjától. A foszfetidok túlnyomó· részéi hidratálással lehet kinyerni mleoliáris oldatokból, majd ezt: a. nyers olajtól elválasztják és leoltin előállításához alkalmazzák. Ez az eljárás a nedves nyálkátlankás. A fó-szfátidők egy kisebb része nem. hidratk&iható és az olajban marad. Ezen ”nem hidrsúdálhaió Ibszfatídok fNl-íP) kémiai természete maradéktalanul még nem tisztázott. Vizsgálatokat végeztek, amelyek szerint ezek 50% feletti mennyiségben föszla:sósavak kalcium- és magnéziumsóibői állnak íHermann Pardon, Ede- Pőurtzenleeitnme, Verlag túr chem. Industrie H. Ziőlkowsky KG, Augsburg, 1988, 18;.)
A íiyálkátiamíási eljárások műszaki célja az, hogy a nem hidrat^álható löszfatidokat amennyire csak lehet az olajból eltávolítsák. A jelenleg ismert eljárásokhoz tartoznak például a következők: •“Soperdegumming. Veríáhren és Unibegummmg Vsríbhren (Unllever cég eljárásai), továbbá Totál Degummbg Verfehren” (TOP) (Vandemoorteie cég eljárása), az fokteoö-Veríáhren” (A Largi cég eljárása), valamint az UF-Vérfebren” (a Krupp Mascbitrenleebník GMbH cég eljárása).
A klasszikus vizes nyáikátlanltási eljárást a hidratálható foszfatidlk eltávolítására gyakran az eljárásba befoglalják vagy az eljárás után végzik.
Az .ismert nyálkátíamtási eljárásokra jellemző, hogy azoknál kizárólag tisztán mechanikus vagy Szíkai-kémiai módszereket alkalmaznak, amelyek nem minden olaj minőségnél alkalmazhatók megfelelőképpen, A berendezés és energia költsége -ezeknél az eljárásoknál magas és nem garantált, hogy egy következő desztillációs savtalanitásí művelettel a szükséges alacsony foszfortartalmat biztosítani lehet.
Ezen nyálkáílanlíásl eljárások egy részénél savas kezelést alkalmaznak, Ismert, hogy erős savak alkalmasak a. vízzel előnyálkátianituti: olajok utólagos nyáikátlanításához (Pardon, loc. cit., 185-189 vagy US-A 4698 IBS). Előnyösen ciíroms&vat alkalmaznak.
Az EP 513 7(19 számú szabadalmi leírásban ismertetnek először hatékony euzirnatikns eljárást a nyálkádanításra. Ennél az eljárásnál a vízzel előnyálkátianhett étkezési olajat egy foszícli-páz (A-, A;, S) vizes oldatával enruígeálják, majd a vizes fázist elválasztják. Ezután az eljárás után az olaj kevesebb mint 5 ppm foszfort tartalmaz és alkalmas az ezt követő desztílíádés savtáfefbfási lépéshez Fontos eljárási paraméterek az en8705Ő-3644 OE/Hol zim tartalmú vizes fázis < ÍO pm mérető cseppecskékké történő emalgeálása, a vizes oldathoz cítrát adagolása, 5<5-70°C hőmérséklet és 4-6 közhitt pH érték alkalmazása. Ez a pH érték savakban meglepő, mivel az optimális pH érték fbszfölípázok esetében pH 8 körök érték. Az enztmaílkus nyáikátlanitási eljárást a Lu-rgi- cég. az étkezési olajjíparban TnzyMax-Verfahren néven alkalmazza.
A DE-A 43 39 556 számú szabadalmi leírásban ezen eljárás egy további változataként az enzim újra alkalmazását ismertetik, amelynél az enzimet egy használt, nyáikaíartalmü vizes fázisból tenzidek vagy oldasközvetitők segítségével kiold ják, majd mi öt messzemenően nyálkatnentes oldatot, amely legalább 10% enzimet tartalmaz, újra kinvertk. «< ί .Π „Λ·ίΑά0,Μδ„ΗΑΐ5'.···
Az ”EnzyMaX’Vertáhfen:tt|éSetén hasznosítják a eítromsav előnyös hatását az Ígéri jő nyálkáílamtáshoz, mégpedig az enzimes kezelés: előtt vagy «tán végzett citromsavas kezeléssel. A eítromsav és enzim egyidejű alkalmazása nem lehetséges.
A JP-A-2-153 99? szántó szabadalmi leírásból ismert a nyers, vagy eiőnyálkátlatdtoö: olajok foszfolípázrArakíivitású enzimekkel való kezelése. A kitanitásból kitűnik, hogy a foszfolipáz A hatására a foszíatidok úgy változnak meg, hogy azok abszorbeáló anyagok, igy példán! aktív agyag vagy derítöföld alkalmazásával könnyeit eltávoiíthatók. Így például a leírás 1. példája ss a .2-3. kiviteli példája szerint az enzim kezelést derítőföldes kezeléssel kombinálják. A 3. példában daritőrökiet nem alkalmaznak. Ehelyett itt különösen
hogy hogyan nyerik ki az enzimet.
A JP-A-2-49 593 számú szabadalmi: leírásban olajok hasonló enzim kezelését ismertetik, ennek célja azonban nem az olajok nyál káli stílt ása, hanem a lizolecitia kinyerése. Itt különleges pH érték beállítása trem szükséges.
Az EP-Á 328 ?:S9 számú szabadalmi leírásban szójaolaj lecihryének Üzolecitinné való alakítását ismertetik foszfolipáz A alkalmazásával majonéz-szerű termékek előáll kásához.
Az EP-Á 622 446 szántó .szabadalmi: leírásban enziraatikus eljárást ismertetnek olaj és zsír nyálkáílanhására, amely töbh eljárási lépésből áll. A feszfoíipázzai való kezelés után az enzim oldatot kioentrifugálják, a visszamaradó olajat :pH~3-6 közötti értékig mossák, majd' derttótelddel kezelik. Az eljárás jellemzője, hogy mind az enzimes kezelésnél, mind a mosási lépésnél nagy mennyiségű vizet, 30-2GÖ tömeg% mennyiséget alkalmaznak az olaj tömegére számolva. Itt íis olaj-a-vlzben emulzió képződik. Ez fokozott berendezés igényű, mivel nagy mennyiségű folyadékot kell mozgató, valamint magasak az energia - és a környezetvédelemmel kapcsolatos költségek. A vizes enzim oldat pH beállítására vonatkozóan a leírás nem ad kiíaaitást.
Nagyipari enzimatíkus eljárásnál az: enzim szükséges mennyiségének előteremtése egy külön probléma foszfolipázok esetén. Itt a rendelkezésre álló mennyiség korlátozott. A foszfolipáz A, kereskedelmi forgalomban nem beszerezhető, a Ibszfoilpáz 8 csak labor mennyiségben áll rendelkezésre; forrásként pafkányraálből vagy Streptomyces tenyészetekből származó esíraktumok szolgálnak. A foszfolipáz Aj kígyó-, skorpió- és méfentéregben fordul; elő. Ezen források azonban nem. elegendők műszakilag megfelelő enzim mennyiségek előállításához. A foszfolipáz Aj előállítására jelenleg: Ismert egyetlen eljárás a sertés-hasnyálmirigyből történő exírakeló. Világviszonylatban azonban .a rendelkezésre álló mirigy mennyiség igen korlátozott és semmiképpen, sem növelhető tetszés szedni! mértékben. Ráadása! még. a foszfolipáz az extrakcfös eljárásnál csupán egy alárendelt melléktermék. A fő termék a pankreáz proteázek, különösen a .trlpszm, valamint, a sertés inzulin. Meg- 3 · becsülhető, hogy -a jelenlegi és aligha megsokszorozható ksrestedeimi mennyiség a fbszíblípáz A:í-feől nem több rí inf 2-3 olajmalomhöz lenne elegendő, még akkor is, ha az enzimet, mini azt az EP-A 5-13 709 számú szabadalmi leírásban ismertetik, újra hasznosítanák.
Az EP 057.5 133 számú szabadalmi leírásban az Áspergi Húsban található fbszíblípáz Ai-εΐ, valamint ezen enzim kinyerési eljárását Ismertetik. A dokumentum s-zenbaa nem tartalmaz utalást a növényi, olajban található foszíbrtartaknú alkotók csökkentéséire szolgáló eljárásra.
Az US P 5 314 706 számú szabadalmi leírásban, stabil olaj-a-vízben emulziók előállítását ismertetik, .amelyeknél emulgeáíorként tojássárgájából származó lizofeszfólipidék alkaljrtazhatók. Ezeket szójaleciíiaböl származó pankreázlipáz A, segítségével állítják elé. Ez az: eljárás nem. növényt olajok nyslkátlantósára szolgáló eljárás.
A Process Biochemistry Vol., 3Θ, Nr. S, 393-461 oldal, (1955) irodalmi helyen különböző lipázokat és foszfolipázokal hasonlítanak össze, amelyek Aspergilius n-igerből, Penicillinm cye'íopíyrüból és sertéspankreázbó! származnak. Leírják az enzimek katalitikus aktivitását, valamint fizikai tulajdonságaikat, Áz irat azonban nem tartalmaz semmi utalást a nyálkátlam'íásra az étolajok előállításánál.
A fentiek alapján fennáll az- igény olyan forrás iránt, amelynek segítségével az enzim korlátlan mennyiségben előállítható. Az ipari enzimeket a technika állása szerint ismert módon, tetszés szerinti mennyiségből mikroorganizmusokból, igy például gombákból vagy baktériumokból nyerik. Az Aj.,. A2 és B töszfolipázok előállításához azonban jelenleg nem Ismert míkrooragnizmus, amely ezeket az enzimeket kielégítő mennyiségben termelni lenne képes. Foszfelípáz Αι-et izoláltak a következő törzsekből: Rbizopus arrhizus, Escfeertchía coli és Bacilíus megaterittm, toszfőllpáz B-t pedig a kővetkezőkből: Penieílliam notatom és Streptotnyces. Meglepetésszerűen az irodalomban nincs, atalás arra, hogy a feszfelipáz At, Aj vagy 8 Aspergillusból izolálható lenne.
Ezzel szemben az EP 219 269 számú szabadalmi leírásból lizoföszfoilpázok ismertek, amelyeket
Aspergfílús nigeriből nyertek, ezeket a továbbiakban foszfolipáz tj, illetve Lrként jelöljük, ezek az ismert fefo j ÁrtruőnúgfeEséú.-ú íoszfoiipázoktól ehérőspeé<4*6ftáím«?enöefezoek, amennyiben ezek kizárólag csak a iúoaoacrl-fbszfetsdokat hasítják, így például a hzolecitte, A tiszta hzofosziölipázok az élelmiszer technológia egy teljesen más területén kerülnek felhasználásra, nevezetesen a búzakemenyiíő-szörés kihozatalának javításánál.
A találmányunk célja egy kíméletes, környezetbarát és kedvező költségű eljárás biztosítása növényi olajok íósziőnartafaú alkotóinak csökkentésére olyas mértékig, hogy az olaj további kezelése desztillációs-savtaíankássai lehetővé váljon, azaz, hogy a foszfortartalmat kisebb mist 15 ppts, előnyösen kisebb lö ppm, még eiőnyösebbes kisebb mint 5 port! mennyiségre csökkentsük. Ezt a követelményt egy enzimatikus eljárással érjük el.
Szükség van egy olyan mlkrubiális forrásra, amely lehetővé teszi a foszföiipáz engirp korlátlan mennyíHt,-kg rtő..gőfey-kfefe-·* séghen történő előállítását. A iecbmka állása szerisi erre a célra kizárólag acjl-hasitó'^pee»í«4tás*rgnkimek alkalmazhatók, nevezetesen feszfollpáz Aj, A? és B, Nem egy alábecsülendő előny, hogy olyan enzim termelő mikroorganizmusokat alkalmazunk, amelyek az élelmiszeriparban már régóta felhasználásra kerülnek és így elfogadhatók. Példaképpen említjük a különböző élesztő törzseket, igy például a Kluyveromyces ee^visias, a buci lus törzseket, mint például B. suőtilis vagy Aspergillus törzseket, mint az A. niger vagy oryzae törzseket.
különösért gazdaságossá válik.
Egy további, eddig nem megoldotl feladat, hogy a nyálkátlam'íási eljárásnál a kát ismert művelet, nevezetesen a savas kezelés és enzimes kezelés előnyös hatásait egyetlen jépésben hasznosítjuk.
Feladatunk továbbá a lehetőség szerinti csekélyÁszsh éTsav mennyiség felhasználása, miáltal az eljárás * * * * «
*
A fentiek alapján a találmányunk tárgya eljárás növényi olajokban tévő foszfortartalmá alkotók mennyiségének csökkentése acil-hasító töszfolipázokkal végzett enzimatikus lebontással, amely eljárásnál Aspergillus-ból származó enzimet alkalmazunk, amely mind foszfolipáz A2-aktívitást í EC szám· 3.1.1.4) és/vagy foszfolipáz A .-aktivitást (EC szám 3.1,1.32) mind Itzofösz-fólipáz-akrivitást (EC szám 3,1.1.5) tartalmaz és az alkalmazott enzinioldat pH-ját pH < 3 értékre állítjuk be,
Az ipari enzimek előállítása az Asperglílus törzsekből a biotechnológia egy igen fontos és nagy mértékben fejlesztett területe. Így például többek közötti Aspergillas mger-böi származó enzimet alkalmaznak a keményítő iparban -(amiloglükozfdázok), a gyümölcslé iparban (pekwnázok) és a sütőiparban (xilanázok). Az Aspergillas, különösen az A. nlger törzsből származó enzimeket az éleim i»zerjfö§fetoíogíáöa« már régóta .alkalmazzák és ismert, hogy teljesen elfogadhatók. Az: ebből a forrásból származó Aj, A:í és B foszfoiipázok nem ismertek. Ebből a forrásból származó foszfoiipázok alkalmazása a nyáíkátianítási eljárásnál a találmány egy igen fontos: jellemzője. A foszfoöpáz tartalmú törzsek keverését mutációval és ínegírövekedett foszfolipid aktivitásra történő szelekcióvá! végzett önmagában ismert szkriaelésí módszerek\ » iAézAvoky
Az ezen forrásokból kinyert foszfo!ípáz«3k.^peei&ításat.sokoldalú és k<, uvU’d'T'tóiósZ' t ux m ki Jl sa szerint ismert pankreázból -származó foszfolipáz Aj-től, amely definíciószerűen csak a foszolípíd molekula C2 •atomján lévő csoportot hasítja, A -találmány szerint fölhasználásra· kerülő, Aspergiliasból származó foszfollpázok egyidejűleg különböző acih-hasttó spéci ficiíásf mutatnak, igy az Aj és Aj speeiftcitás- mellett lizofoszfolipáz aktivitást is matatnak. Az említett enzim speeifisitása&k -megfelelnek a 3 1..32, 3.1,1.4 és 3.1.1.5 E.C. számok,
A íizofoszfolipázt (EC szám 5.1.15) foszfolipáz B-kést jelölik; az irodalomból (Pardon, Joc.eit, 140.), azonban nem tűnik ki, hogy a lizofoszfolipáz és foszfolipáz 8 között különbséget keli tenni. Közös -bennük mindenesetre, hogy a lizofecítíst tovább képesek hasifoiti és pedig egészen a glfoerofoszforilákolmíg, A foszfolipáz B képes továbbá a seeiíint is megtámadni. Mivel a találmány szerinti foszfoiipázok rendelkeznek -ezen mindkét specificltással, nevezetesen alkalmas szuhsztráfomok a lecítfo:, valamint a lizolecitin számára, ezeket .foszfolipáz B-ként jelölhetjük. Az Aspergílias-ból származó olyan tiszta Uzofoszfoitpázok, amelyek csak a iizoíeeitint, de nem a. lecitint képesek hasítani, a találmány szerinti nyáíkátianítási eljáráshoz, különösen a savas reakciókörülmények között, a bejelentő jelenlegi ismeret szerint határtalanok. Ez vonatkozik a nem acil-hasító C és. D foszfölipázokra is.
A lecitinre, valamint a foszfolipáz A( és/vagy Aj aktivitásra való specificitás - ezek között nehéz analitika ilag különbséget tenni - egy fontos jellemzője a találmány szerinti: enzimeknek. E különböző specificitás egyidejű jelenléte lehet az alapja a találmány szerinti enzimek előnyös hatásának. Bár a legtöbb esetben ezeket egyes enzimként kell jelölni, Itt enzim komplexek itatásáról van szó.
A találmány szerinti enzimek alkalmazásnál a tisztítási foknak-nincs különös jelentősége. Ez lehet például maga a fermentációs, folyadék, amely egy az ultraszűrés után nyert enzimben gazdag szőriét vagy lehet az ebből kicsapott enzim protein,
A találmány körébe tartozik az. is, ha szokásos Apergl?lus-förme4ő törzsekből nyert enzimek helyett egy génfechnikai úton megváltoztatott termelő sejtből nyert enzimet alkalmazunk. A géntechnika számos lehetőséget nyújt a foszfoiipázok Átalakításához szükséges gén .Aspergillas-böt való klónozására és egy alkalmas gazEgM (yM-é te zróáAí'C·, datörzsben nagy kihozaíalöaló ü*pr«¥fö+sísá#&. Gazdaíőrzskérrt példám Apergiííus törzsek jöhetnek számításba, de más goushatórzsek vagy akár baktériumtörzsek is fölhasználhatók.
Az enzimek fölhasznált mennyisége a tisztasági fokuktól függően például 0,01X11-1%. közötti érték a
Rválkátlanítanl kí vánt olaj tömegére számolva.
....
Egy igen nagy előnye és nera várt hatása a faíáímásy szerinti alkalmazásra kerülő enzimeknek a oyálkátlaniiás kivitelezéséhez szükséges aktivitás: ez különlegesen kicsi. Míg a technika állása szerinti megoldásoknál a pankreázből: származó foszfo-llpáz A? aktivitása kb. i-ÖOO lecitsz egység (LU)/f 1 ólai (lásd például az EP-A 513 ?(19 számú-szabadalmi íe-írás 1. példáját), a találmány szerinti Asper-giflushól· származó enzimek esetén ez az aktivitás 5-50 EUH ; olaj- Megfelelően meghosszabbított reakcióidő- esetén továbbá akár 5 LV/1 1 olaj alatti mennyiség is elegendő.
A tisztított Aspergiifas-foszfolipázokban léséi lizofeszfolipáz-aktivitás még nagyobb is lehet, mint a foszfollpáz Aj aktivitás és pedig annak 1-íOö-szorosa. Ebből adódóan a felhasznált mennyiség 5-5000 lízoieeltáz egység (LEU) I I olajra számolva, előnyősön 5Ö- i 000 LEL. Ezek az aktivitás adatok szakaszos nyalkátisnitásl műveletekre érvényesek.. Az. enzimek újrslelhasználásánál a szükséges eftzíntpőtl-ás 1 1 olajra számolva jelentősen alacsonyabb, például 1/5-1,-lő része a lenti értékeknek. Ezek a kis enzim mennyiségek lehetővé teszik, hogy az enzimek ismételt felhasználásáról fe lehessen mondani.
Lehetséges az is, hogy a találmány szerinti Aspergtlias feszfobpázokaí más aed-hasitó foszfeiipázokkal célzottan keverjük, így például további Aspergíllashöl származó ibszfoíipázokkal vagy pankrejlból szármázd foszfoiipáz Aj-vei kombinálhatok. Ez utóbbi esetben mindeneseire a pH értékei olyan értékre keli beállítani, oyE amely brhnfegyj^ optimális pH értéket megközelíti. Igy például: pH>3-5 értéket alkalmazunk.
Az Aspergí.llnsból származó foszfoiipázok alkalmazása meglepő módon lehetővé teszi további: feladatok megoldását is. így példán! lehetséges az enzimet ehtootsav oldattal- együttesen alkalmazni. így az: enzim és a citromsav hatását egyesíteni, Enzim alkalmazása relatíve koncentrált citromsav oldatban: szokatlan. Az enzimelógiánan alig ismertek -enzimek, amelyek ilyen alacsony pH értéken stabilak, mégpedig úgy, hogy a hatásuk optimális értékű.. Egyike a kevés példáknak az ilyen tulajdonság spektrumra az emésztő rendszer pepsziuje. Az enzimet 1-20%-os citromsav oldatban oldjuk. & pH értéket pH<3 értékre áilitjuk be. Ha például: óöé-os cí-trom-sav oldatot alkalmazunk, a pH érték kb. 2,3.
A citromsav helyett tejsavat, ecetsavat, nangyaaavat, foszforsavat, valamint más szervetlen vagy szerves feli -U. í'-.o sava- is aikalmazitatunk. Előnyösek azonban az '«évezetíl savak, különösen a citromsav. Megjegyezzük, hogy csupán sav oldattal, tehát enzim alkalmazása nélkül nem érünk el kielégítően alacsony foszertartalmat, különösen előny ál kát lan kod olajok esetén.
A találmány szerinti eljárásnál hsáiiítöb pH ©plitbum,. a pH-2-3 közöli; érték nem egyezik a szokásos analitikai eljárásokkal talált pH optimum értékekkel Ezen eljárásnál sznnsztráturnként tojássárgájái 4-Ő*C-08 az enzim oldatban eondgeáktak és az aktivitást a pH érték függvényében határozzák meg, A találmány szerinti meglepően alacsony pH -optitrtum értéket a fázis határfelületek különleges feltételével magyarázhatjuk, ahol feltehetően egy magasabb pH érték áll be, mint amilyet a vizes fázisban (tömeg-fázis) meghatározunk.
Az enzime; ebben a savas vizes oldatban az olajjal bensőségesen elkeverjük. Ennél biztosítani keli, hogy a vizes fázis az oldj fázishoz viszonyítva, lehetőség szerint kicsi legyen, hogy annak utólagos elválasztásánál lehetőség szerint kis térfogatot kelljen mozgatni. Általában ««nek térfogata kisebb mint IÖ% az olajfázisra vonatkoztatva, előnyösen kisebb trónt 5%. Minden esetben vfeaz-oí'ajban típusú emlüzíó képződik.
A kezelni kívánt olaj fázis lehet szójaolaj, napraforgóolaj vagy repceolaj:, ezek közül az elsőként említett a legfontosabb olaj termék. Más növényi olajok, így például lenoiaj, kökaszdióolaj vagy pálmaolaj, valamint állati olajok, amelyek zavaró íbszfártdokat tartalmaznak, szintén kezelhetők a találmány szerinti eljárással.
Mivel a foszfoiipázok a lecitint megtámadhatják, nincs értelme nagy leettmtartalmú olajokat, így például nyers szójaolajat a találmány szerinti eljárásnál alkalmazni. Kifedtsiási anyagként ezért elönyáikáíianltolt, külö6
nősen vízzel nyálkáílanított olajokat alkalmazunk, amelyeknél általában a foszfortartalom 50-309 ppm közötti érték. Csak kivételesen tartalmaznak az előnyáSkátlímitett olajok nagy mennyiségű foszfort, így például 500 ppm feletti mennyiséget.
Változó minőségű olajok szintén ugyanazon, berendezésben feldolgozhatok.. Lehetséges az is, hogy részben nyáíkátfenífott olajat, így például prés- vagy exuakelós olajat alkalmazzunk, és pedig az előnyálkátlanííofi olajjal elkeverve. Kivételszerűen a foszfortartalom 5Ö8 ppm feletti érték Is lehet.
Az olaj előzetes szárítása elhagyható.
Ahhoz, hogy az enzim hatni tudjon, mindkét fázist, az olaj-fözist és azenzlmtartalmü vizes fázist egymással jói el kell keverni,. Csupán egy összekeverés nem elegendő..
Az enzimet az olajban jól sl tudjuk osziamí. ha azt egy kis vízmennyiségben, Így 0,5-5 tömeg% mennyiségben (az olajra számolva) feloldjuk és ebben a formában kisebb mint 10 Cm átmérőjű cseppek formájában (tömeg szerinti kőzépérték) az olajban emulgeáliuk. A cseppecskék mérete előnyösen kisebb mint 1 üts. Bevált a löt) cm/szekundmn sugár sebesség feletti turbulens: keverés. £ helyet;, az olajat egy külső forgó szivattyúval is megforgathatjuk a reaktorban. Az enzimtarislmú vizes fázis fotóm eloszlatását ultrahangos: kezeléssel is végezhettük. Például egy Ultraturrax típusú diszpergálét alkalmazhatunk
Az enzímafikus reakció az olajfázis és vizes fázis határfelületén megy végbe. Mindezen keverési műveleteknek a célja, hogy az enzlmtartalmö vizes fázisnak a lehető legnagyobb felületet biztosítsuk. Tenzidek alkalmazása erősíti a vizes fázis finom eloszlását. Esetenként az enzim· oldalhoz 9 feletti HLB értékű íenzádeket, így·· például Na-dödecílszalfűtot adagolhatunk, mint amilyet az EP-A513 709 számú szabadalmi leírásban Ismertetnek. Egy hasonlóan hatásos módszer az, omnlgsáíás elősegítésére lizolecítis adagolása. Az adagolt mennyiség például 0,091-19« az olaj tömegére számolva. Minden esetben a találmány szerinti eljárásnál nagy diazperzltású viz-az-olsjban emulziót nyerünk.
Az enzimes kezelés hűnséírsékiete nem kritikus. A hőmérséklet értéke áltálában fiÖ-SffiC körüli érték, az utóbbi értéket azonban csak rövid időre alkalmazzuk. A találmány szerinti fos-zfolipázok mindenesetre jó hőmérséklet-állósággal rendelkeznek. Működésűket az alacsony felhasználási pH' érték nem károsítja. Az optimális felhasználási hőmérséklet 3Ö-SI)CC közötti érték, .,. c v -. ,
A kezelési időtartam függ a hőmérséklettől és: növekvő hőmérséklettel foyeöb-éuáőküt Általában 9,1-19, előnyösen 1 -5 órás reakcióidő elegendő. A reakciót egy nyálkátlanitő reaktorban végezzük, amely emeletekre vart osztva, ilyent ismerteinek például a Ofi-Á 43 39 556 számú szabadalmi leírásban, A szakaszos üzemmód mellett folyamatos Széniben is végezhettük az eljárást. A reakciót fennéd különböző hőmérséklet-lépcsőkben iölytathatjuk fe. így például 3 órán át úö^C-öíí, ntajű I órán át őÖT-on- végezzük az Ínkubálást. A reakció lépcsőzetes lefutása lehetővé teszi, hogy az egyes lépésekben különböző pH -értékeket állítsunk be. így például az első lépcsőnél az oldat pH-ját például 7-re állítjuk be, a második lépésben citrofusav adagolásával pH-2,S-re. Legalább egy lépésnél azonhajt az enzim oldat pH. értéke a találmány ártchnében 3 alatti érték kell, hogy legyen. Utólagos pH beállítás esetén a találmány szerint; értékekre hatáscsökkenés figyelhető meg. fisért a citromsavaí előnyösen az enzim oldathoz annak az olajba való bekeverése előtt adagoljuk.
Az enzimes kezelés befejezése után az enzim oldatot az abban lévő NHP lebomlási termékkel együtt szakaszosan vagy folyamatosan az okíjfúzlstóf elválasztjuk, az. elválasztást előnyösen centrifogűlásshl végezzük.
Mivel az enzimre egy nagy stabilitás jellemző és a felvett lebomlási termék mennyisége csekély - ez iszítpkénf kicsapódik ugyanazon vizes enzim fázist többször is felhasználhatjuk, Eljárhatunk úgy is a DE-A 43 39 55b •‘“ί « « «ΦΧΦ Φ χ «*«r 4&<f
-7számú szabadalmi leírásban leírtaknak, megfelelően, hogy az enzimet az iszapból kioldjuk és így egy messzetmenően fezapmenles enzim oldatot alkalmazhatunk Isméteken.
A találmány szerinti nyálkáílanítási eljárással kisebb mint 15 ppm foszfortartalma olajat nyerünk. A .tulajdonképpeni cét hogy a foszfortartalmat kisebb mint lő ppm. ideális· esetben kisebb mint 5 ppm értekre állítsuk be. Ha a foszfortartalom 10 ppm alatt van, az olaj további feldolgozása desztillációs savtalanitássaf minden további nélkül lehetséges.
A találmány szerinti eljárás során egy egész sor egyéb iont, így például magnéziumot, kalciumot, cinket», valamint vasat is eltávolítunk az olajból. Hála az elért alacsony vastartómnak, amely általában 0,1 ppm alatti ének, a termék várhatóan igen jé ox Idádéval szembeni el lenállást mulat a továbbfel'dolgozás során, valamint a tárolás során.
1. példa
51)0 g. nedvesen nyáfkátíanltott szójaolajat, amelynek maradék foszfortartalma 190 ppm egy gömbiombikban 4öcC-ra melegítünk, majd hozzáadunk. 26 g vizet, amelyben 5 g citrömsavat és 0,19 g porformájú enzim készítményt: oldottunk. Az enzim készítmény Aspergillos fbger-fértneotációbói származik és 60 foszfo'lipáz egységet (“fecttáz egység, LU) tartalmaz grammonként Egy lecitáz egység (LU)· olyan enzim mennyiség, amely 4ö'°C-on pEW értekeiéi tojássárgájából 1 pere alatt 1 í2.mől zsírsavat .szabadít fel. Az enzim készítményt lizofosxfoíipáz-sktivításra ellenőrizzük, e szerint 1001 lízoíbszfolipáz-egységet (-lizoleeiíáz egység, LLU) tartalmaz grammonként. I llzolécítáz egység az az enzim mennyiség, amely 55“C-ot5 pH-4,5 értéknél IÍ2olecitin emulzióból I ómól zsírsavat szabadit fel 1 perc alatt. Az enzim készítmény, amely foszfoilpáz-tartafom vonatkozásábars. exbán nem lett tisztítva, a foszfoltpás A2 mellett tehát még jelentősen nagy Itzolószfobpáz aktivitást is tartalmaz és foszfolipáz B-ként jelölhető.
A gömbfombik tartalmát egy külső forgó szivattyúval intenziven diszpergáijtjk. Ennél a lombik tartalmát pereenkét egyszet átforgatjuk. A vizes fázis részeesketiagysága I óm alatti. 1 órás időközökben mintát veszünk és vizsgáljuk a foszfortartalmat. Ennél a kővetkező eredményeket nyerjük;
Idő órában 0 2 4 6 20
Foszfortártaiütn ppm-ben 190 81 27,9 5,4 d ·*?
Egy kővetkező- desztillációs savíalanitáshoz szükséges alacsony foszfortartalmat, ami kisebb mint lö ppm, a találmány szerinti eljárással 6 óra után érünk el.
1, összehasonlító példa
Az 1. példában leírtak szerint járunk el, csak az enzim készítmény helyett megfelelő mennyiségű tejsavó proteinkalkalmaztmk, tehát egy nem enztmatlkus psofeifoadagskmk. A fentiek szerinti kezelési idők után vett mintákban megbaíározzük a foszfortartalmat, e szerint az enzim mentes kezelésnél a foszfortartalom értéke 121 ppm alá nem csökken, önmagában a citromsav adagolása sem elegendő, A kapott olaj desztillációs savtalsnitásra nem alkalmas.
kló órában ő 2: 4 6 20
Foszfortartalom ppra-ben 190 152 128 122 121
r ϊ
2. összebasoalité példa
Az }. példában leínak .szerint járunk el, csak az Aspergíltos-ból származó foszfohpáz helyest kereskedelmi forgalomban beszerezhető lizofoszfoljpázt (G-Zynxe, Eazyme Siosystems, USA gyártmány, 1172 LELI program) alkalmaznak. Ez nem tartatom föszfolipáz A> aktivitást. A fentiek szerinti kezelési idők után tntoíákat veszünk, ezek foszfortartalma az egyedüli feszfolipázzal végzett kezelés; követően nem csökken 85 ppm alá. A kapott olaj desztí'llácto· savtalamíásra nem alkalmas.
Idő órában ö ·> 4 6 20
i Foszfortartalom ppm-ben 190 ns 124 11.9 85

Claims (9)

  1. Szabadalmi igénypontok
    I. Eljárás növényi olajokban lévő fosziortartalmü alkotók mennyiségének csökkentésére acil-hasííó foszfohoázzal végzett enzimatikus lebontással azzal jellemezve, hogy Áspergillas-ból származó enzimet alkalmazunk, amely mind tőszfoíipáz Áj-aktívitást (EC szám 3.1.1.4),.és/vagy foszfoiipáz Ai-atóvitást (EC szát» 3,1,1,32),. 'tatod ifeofoszfcOpáz .aktivitást (EC szám 3.1.1.5> tartalmaz, és az alkalmazóit enzim oldat pH-jáí pH <3 értékre áliiíjxtk be.
  2. 3. Az 1. igénypont szerimi eljárás azzal- jellemezve, hogy a pH értéket citromsavval állítjuk be.
    3. Az I. vagy 2, igénypont szerinti eljátás azzal jellemezve, hogy 2ö-8ÖeC, előnyösen 30~5Ö“C hőmérsékletet alkalmazunk.
  3. 4. Az 1-3. igénypontok bármely ike szerinti eljárás azzal jellemezve, hogy az etwtniartaltná vizes fázist az olajban 10 ptn alatti részecskeméretre emulgeáljuk,
  4. 5. Az 1-4. igénypontok bármelyike szerinti eljárás azzal jellemezve, hogy legalább részben elösválkátlanltoö, különösen nedves eljárással slőnyálkátlantiéit olajat alkalmazunk.
  5. 6. Az 5, igénypont szerinti eljárás azzal jellemezve, hogy az olaj 50-500 ppm közötti foszfortartalmát kevesebb min; !5 ppm, előnyösen kevesebb mint 10 pptn, még előnyösebben kevesebb mint 5 ppm értékre csökkentjük.
  6. 7. A 6., igénypont szersnti eljárás azzal jellemezve, hogy növényi szójaolajai dolgozunk fék :
  7. 8. A 7, igénypont szerinti eljárás azzal jellemezve, hogy repce- vagy napraforgóolajat dolgozunk léi.
  8. 9. Az 1-8. igénypontok bármelyike szerinti eljárás azzal jellemezve, hogy a foszíolipáz vizes oldatát a kezeli olajtól elválasztjuk, majd ismételten felhasználjuk, lö. Az 1-9. igénypontok bármelyike szerinti eljárás azzal jellemezve, hogy szakaszosan végezzük,
    II. Az i-lö. igénypontok bármelyike szerinti eljárás azzal jellemezve, hogy folyamatosan végezzük,
  9. 12. Az 1-11. igényporrtok bármelyike szerinti eljárás azzal jellemezve, hogy a foszfortartahná alkotók mennyiségének, csökkentésével egyidejűleg az olajban lévő vastartaimat is csökkentjük.
HU9802813A 1995-07-26 1996-07-04 Vegetable oil enzymatic degumming process by means of aspergillus phospholipase HU227760B1 (en)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE19527274A DE19527274A1 (de) 1995-07-26 1995-07-26 Enzymatisches Verfahren zur Entschleimung von pflanzlichen Ölen mit Aspergillus-Phospholipase
PCT/DE1996/001190 WO1997005219A1 (de) 1995-07-26 1996-07-04 Enzymatisches verfahren zur entschleimung von pflanzlichen ölen mit aspergillus-phospholipase

Publications (3)

Publication Number Publication Date
HUP9802813A2 HUP9802813A2 (hu) 1999-03-29
HUP9802813A3 HUP9802813A3 (en) 2000-03-28
HU227760B1 true HU227760B1 (en) 2012-02-28

Family

ID=7767819

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
HU9802813A HU227760B1 (en) 1995-07-26 1996-07-04 Vegetable oil enzymatic degumming process by means of aspergillus phospholipase

Country Status (18)

Country Link
US (1) US6001640A (hu)
EP (1) EP0906379B1 (hu)
JP (1) JPH11510195A (hu)
CN (1) CN1074455C (hu)
AR (1) AR003052A1 (hu)
AT (1) ATE238406T1 (hu)
BR (1) BR9609816A (hu)
CA (1) CA2227568C (hu)
CZ (1) CZ298366B6 (hu)
DE (2) DE19527274A1 (hu)
DK (1) DK0906379T3 (hu)
ES (1) ES2194997T3 (hu)
HK (1) HK1015819A1 (hu)
HU (1) HU227760B1 (hu)
MX (1) MX9800547A (hu)
PL (1) PL185718B1 (hu)
TR (1) TR199800066T1 (hu)
WO (1) WO1997005219A1 (hu)

Families Citing this family (68)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6936289B2 (en) 1995-06-07 2005-08-30 Danisco A/S Method of improving the properties of a flour dough, a flour dough improving composition and improved food products
DE69716711T3 (de) * 1996-12-09 2010-06-10 Novozymes A/S Verringerung von phosphorhaltigen Substanzen in Speiseölen mit hohem Anteil an nicht-hydratisierbarem Phosphor unter Verwendung einer Phospholipase, eine Phospholipase aus fädenförmigen Pilz, welche eine Phospholipase A und/oder B-Aktivität aufweist
US6103505A (en) * 1996-12-09 2000-08-15 Novo Nordisk A/S Method for reducing phosphorus content of edible oils
DE19701348A1 (de) * 1997-01-16 1998-07-23 Roehm Gmbh Protein mit Phospholipaseaktivität
EP0973399B1 (en) 1997-04-09 2002-07-17 Danisco A/S Improved method for preparing flour doughs and products made from such doughs using glycerol oxidase
ES2188190T5 (es) 1998-07-21 2007-11-16 Danisco A/S Producto alimentario.
NZ528260A (en) 2001-05-18 2005-09-30 Danisco Method of improving dough and bread quality with the addition of an enzyme that hydrolyses a glycolipid and a phospholipid and incapable of hydrolysing a triglyceride or monoglyceride
DK1443825T3 (da) * 2001-11-06 2009-02-02 Novozymes North America Inc Modificerede valleproteinsammensætninger, der har forbedrede skumningsegenskaber
US7943360B2 (en) 2002-04-19 2011-05-17 Verenium Corporation Phospholipases, nucleic acids encoding them and methods for making and using them
US7226771B2 (en) * 2002-04-19 2007-06-05 Diversa Corporation Phospholipases, nucleic acids encoding them and methods for making and using them
CA2481411C (en) 2002-04-19 2016-06-14 Diversa Corporation Phospholipases, nucleic acids encoding them and methods for making and using them
WO2003102118A2 (en) * 2002-05-30 2003-12-11 Council Of Scientific And Industrial Research Process for the pre-treatment of vegetable oils for physical refining
US20050196766A1 (en) 2003-12-24 2005-09-08 Soe Jorn B. Proteins
US7955814B2 (en) 2003-01-17 2011-06-07 Danisco A/S Method
MXPA05007653A (es) 2003-01-17 2005-09-30 Danisco Metodo.
DK2853593T3 (en) 2003-03-07 2018-01-08 Dsm Ip Assets Bv Hydrolases, nucleic acids encoding them, and processes for their preparation and use
EP1711587B1 (en) * 2003-12-19 2013-04-10 Bunge Oils, Inc Process for improving enzymatic degumming of vegetable oils and reducing fouling of downstream processing equipment
US7906307B2 (en) 2003-12-24 2011-03-15 Danisco A/S Variant lipid acyltransferases and methods of making
GB0716126D0 (en) 2007-08-17 2007-09-26 Danisco Process
US7718408B2 (en) 2003-12-24 2010-05-18 Danisco A/S Method
GB0405637D0 (en) 2004-03-12 2004-04-21 Danisco Protein
CN103173282A (zh) 2004-06-16 2013-06-26 帝斯曼知识产权资产管理有限公司 对叶绿素进行酶促脱色的组合物和方法
US20080070291A1 (en) * 2004-06-16 2008-03-20 David Lam Compositions and Methods for Enzymatic Decolorization of Chlorophyll
WO2006008508A1 (en) 2004-07-16 2006-01-26 Danisco A/S Enzymatic oil-degumming method
WO2006031699A2 (en) 2004-09-10 2006-03-23 Diversa Corporation Compositions and methods for making and modifying oils
US20070148311A1 (en) * 2005-12-22 2007-06-28 Bunge Oils, Inc. Phytosterol esterification product and method of make same
WO2007092314A2 (en) 2006-02-02 2007-08-16 Verenium Corporation Esterases and related nucleic acids and methods
CN100441668C (zh) * 2006-06-09 2008-12-10 中国农业科学院油料作物研究所 超声波强化生物酶油脂脱胶的方法
MX2009003034A (es) 2006-09-21 2009-11-18 Verenium Corp Fosfolipasas, acidos nucleicos que las codifican, y metodos de hacerlas y usarlas.
BRPI0720801A2 (pt) 2007-01-25 2014-09-16 Dupont Nutrition Biosci Aps Produção de um lipídio aciltranfersase a partir de células transformadas de bacillus licheniformis.
US8956853B2 (en) * 2007-01-30 2015-02-17 Bunge Oils, Inc. Enzymatic degumming utilizing a mixture of PLA and PLC phospholipases
US8460905B2 (en) * 2007-09-11 2013-06-11 Bunge Oils, Inc. Enzymatic degumming utilizing a mixture of PLA and PLC phospholipases with reduced reaction time
CA2686161A1 (en) * 2007-05-04 2008-11-13 Akermin, Inc. Immobilized enzymes and uses thereof
US8076123B2 (en) * 2007-10-26 2011-12-13 Oilseeds Biorefinery Corporation Emulsification-free degumming of oil
US8241876B2 (en) 2008-01-07 2012-08-14 Bunge Oils, Inc. Generation of triacylglycerols from gums
US8911808B2 (en) 2008-06-23 2014-12-16 Cavitation Technologies, Inc. Method for cavitation-assisted refining, degumming and dewaxing of oil and fat
GB0904787D0 (en) * 2009-03-20 2009-05-06 Desmet Ballestra Engineering Sa Improved enzymatic oil recuperation process
US11247964B2 (en) 2009-05-01 2022-02-15 Rrip, Llc Method of processing phospholipid based lipid materials
AR077042A1 (es) 2009-06-12 2011-07-27 Danisco Metodo para tratar una composicion que contiene pirofiofitina
UA109884C2 (uk) 2009-10-16 2015-10-26 Поліпептид, що має активність ферменту фосфатидилінозитол-специфічної фосфоліпази с, нуклеїнова кислота, що його кодує, та спосіб його виробництва і застосування
UA111708C2 (uk) 2009-10-16 2016-06-10 Бандж Ойлз, Інк. Спосіб рафінування олії
EA201290903A1 (ru) 2010-03-12 2013-06-28 ДюПон НЬЮТРИШН БАЙОСАЙЕНСИЗ АпС Способ рафинирования растительного масла и рафинированное растительное масло, полученное указанным способом
CA2798152A1 (en) 2010-06-17 2011-12-22 Dupont Nutrition Biosciences Aps Process
DE102010055159A1 (de) * 2010-12-18 2012-06-21 Lurgi Gmbh Verfahren zur enzymatischen Reinigung von Ölen pflanzlicher oder tierischer Herkunft
WO2012114232A1 (en) 2011-02-23 2012-08-30 Dupont Nutrition Biosciences Aps Process
CA3004088A1 (en) 2011-02-23 2012-08-30 Dupont Nutrition Biosciences Aps Enzymatic treatment of plant oil
CN102586011B (zh) * 2011-12-01 2013-10-30 华中农业大学 一种利用磷脂酶a2进行植物油脂脱胶的方法
WO2013104660A1 (en) 2012-01-13 2013-07-18 Dupont Nutrition Biosciences Aps Process for treating a plant oil comprising hydrolysing chlorophyll or a chlorophyll derivative and involving partial caustic neutralisation
WO2013104659A2 (en) 2012-01-13 2013-07-18 Dupont Nutrition Biosciences Aps Process
WO2013160374A1 (en) 2012-04-27 2013-10-31 Dupont Nutrition Biosciences Aps Process for refining crude plant oil involving enzymatic hydrolysis and gum recycling
WO2013160372A1 (en) 2012-04-27 2013-10-31 Dupont Nutrition Biosciences Aps Process for treating plant oil involving addition of serial doses of chlorophyll or chlorophyll derivative degrading enzyme
CN104487558B (zh) 2012-06-14 2018-07-17 邦吉全球创新有限责任公司 用于生产低饱和油的方法
US10294463B2 (en) 2013-07-03 2019-05-21 Keclon Sa Modified Bacillus cereus phospholipase C protein and method of processing vegetable oil
CN106103704A (zh) 2014-03-19 2016-11-09 诺维信公司 具有磷脂酶c活性的多肽和编码这些多肽的多核苷酸
EP3126509A1 (en) 2014-04-01 2017-02-08 DuPont Nutrition Biosciences ApS Method for increasing crude palm oil yields
WO2015173426A1 (en) 2014-05-15 2015-11-19 Novozymes A/S Compositions comprising polypeptides having phospholipase c activity and use thereof
US9453180B2 (en) 2014-10-15 2016-09-27 Arisdyne Systems, Inc. Process for degumming oils
US9290717B1 (en) 2014-12-15 2016-03-22 Arisdyne Systems, Inc. Reactor for degumming
BR112017013040A2 (pt) 2014-12-19 2018-01-09 Dupont Nutrition Biosci Aps método para aprimorar rendimentos de óleo de palma a partir de fruto de palma ou líquido de fruto de palma
US9340749B1 (en) 2015-05-06 2016-05-17 Arisdyne Systems, Inc. Method for degumming triglyceride oils
BR112018015528B1 (pt) * 2016-02-03 2022-03-15 Fuji Oil Holdings Inc Método para produzir manteiga de cacau, método para obter resistência a fotodegradação, alimento semelhante a chocolate, e método para produzir o mesmo
WO2018186734A1 (en) * 2017-04-06 2018-10-11 Purac Biochem B.V. Enzymatic degumming of unrefined triglyceride oil
WO2018217270A1 (en) 2017-05-24 2018-11-29 Arisdyne Systems, Inc. Oil degumming systems
EP3728531A1 (en) * 2017-12-21 2020-10-28 Purac Biochem B.V. Enzymatic degumming of unrefined triglyceride oil
UA126992C2 (uk) 2018-05-07 2023-03-01 Дсм Айпі Асетс Б.В. Спосіб ферментативного дегумування олії
CN109989115B (zh) * 2019-04-28 2021-09-03 四川玉竹麻业有限公司 一种苎麻冷轧堆氧漂脱胶工艺
CN110951621B (zh) * 2019-11-18 2022-05-31 无锡优普克生物科技有限公司 一种产磷脂酶的黑曲霉菌株
WO2023108233A1 (pt) * 2021-12-16 2023-06-22 Oliveira Jean Paulo De Processo de reaproveitamento da lisogoma aplicado no pré-tratamento de óleos vegetais degomados para posterior tratamento enzimático e transesterificação do biodiesel

Family Cites Families (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS61289884A (ja) * 1985-06-14 1986-12-19 Asahi Denka Kogyo Kk リパ−ゼ類の製造方法
GB8525012D0 (en) * 1985-10-10 1985-11-13 Cpc International Inc Carbohydrate refining process
US5288619A (en) * 1989-12-18 1994-02-22 Kraft General Foods, Inc. Enzymatic method for preparing transesterified oils
JPH04356191A (ja) * 1990-07-10 1992-12-09 Kanegafuchi Chem Ind Co Ltd リン脂質の製造法
JPH04356192A (ja) * 1990-07-10 1992-12-09 Kanegafuchi Chem Ind Co Ltd リン脂質の製造方法
DE4115938A1 (de) * 1991-05-16 1992-11-19 Metallgesellschaft Ag Enzymatisches verfahren zur verminderung des gehaltes an phosphorhaltigen bestandteilen in pflanzlichen und tierischen oelen
EP0546215B1 (en) * 1991-12-12 1998-04-01 Societe Des Produits Nestle S.A. Heat stable oil-in-water emulsion and process for its preparation
DE69332217T3 (de) * 1992-06-16 2009-01-15 Sankyo Lifetech Co.Ltd. Phospholipase A1, Verfahren zu seiner Herstellung und Anwendung
JP2937746B2 (ja) * 1993-04-25 1999-08-23 昭和産業株式会社 油脂の精製方法
JP2657887B2 (ja) * 1993-05-24 1997-09-30 日清製油株式会社 固定化酵素の調製方法

Also Published As

Publication number Publication date
HUP9802813A3 (en) 2000-03-28
CN1192231A (zh) 1998-09-02
DE19527274A1 (de) 1997-01-30
HK1015819A1 (en) 1999-10-22
DE59610388D1 (de) 2003-05-28
HUP9802813A2 (hu) 1999-03-29
CA2227568C (en) 2006-05-30
EP0906379B1 (de) 2003-04-23
CZ298366B6 (cs) 2007-09-12
US6001640A (en) 1999-12-14
DK0906379T3 (da) 2003-08-11
BR9609816A (pt) 1999-07-06
PL324648A1 (en) 1998-06-08
CN1074455C (zh) 2001-11-07
PL185718B1 (pl) 2003-07-31
CA2227568A1 (en) 1997-02-13
ATE238406T1 (de) 2003-05-15
MX9800547A (es) 1998-11-30
WO1997005219A1 (de) 1997-02-13
TR199800066T1 (xx) 1998-04-21
CZ22498A3 (cs) 1998-06-17
ES2194997T3 (es) 2003-12-01
EP0906379A1 (de) 1999-04-07
JPH11510195A (ja) 1999-09-07
AR003052A1 (es) 1998-05-27

Similar Documents

Publication Publication Date Title
HU227760B1 (en) Vegetable oil enzymatic degumming process by means of aspergillus phospholipase
EP0622446B1 (en) Process for refining oil and fat
Eltaweel et al. An organic solvent-stable lipase from Bacillus sp. strain 42
AU667217B2 (en) Novel phospholipase A1, processes for its preparation and the use thereof
Wang et al. Effect of culture conditions on the production of ligninolytic enzymes by white rot fungi Phanerochaete chrysosporium (ATCC 20696) and separation of its lignin peroxidase
CN1034587C (zh) 降低植物油中含磷成分含量的方法
EP0948608A1 (en) Novel phospholipase, production and use thereof
US3697285A (en) Fish protein solubilization using alkaline bacterial protease
JPH11502401A (ja) フサリウム単離体およびそれから派生されるリパーゼ、クチナーゼ、および酵素組成物
WO2002000908A3 (en) Methods for processing crustacean material
HUT61446A (en) Method for producing egg-yolk of decreased cholesterol content
BRPI0509684B1 (pt) produção enzimática de produtos de lecitina hidrolisados
EP2531596A2 (en) A novel fungal strain beauveria sp. mtcc 5184 and a process for the preparation of enzymes therefrom
JP2794574B2 (ja) リゾレシチンの製造方法
JPH06306386A (ja) 油脂の精製方法
JPH0211234B2 (hu)
Dahlke An enzymatic process for the physical refining of seed oils
EP2494015B1 (de) Klonierung, expression und verwendung einer phospholipase von aspergillus fumigatus
EP0070116B1 (en) Enzymatically treated phosphatides
BRPI0710694A2 (pt) métodos para extrair um ou mais componentes de levedura e para produzir um extrato de levedura, e, uso de uma fosfolipase purificada
US3934039A (en) Process for the production of microorganism lysates
Sadeghi Purification of soybean oil with phospholipase Al
EP0832183B1 (en) Improved fat splitting process
JPH09296197A (ja) 油脂の脱水、精製法
JPH0398590A (ja) リン脂質の酵素改質方法

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Lapse of definitive patent protection due to non-payment of fees