CZ298366B6 - Zpusob snižování fosfor obsahujících podílu v rostlinných olejích - Google Patents
Zpusob snižování fosfor obsahujících podílu v rostlinných olejích Download PDFInfo
- Publication number
- CZ298366B6 CZ298366B6 CZ0022498A CZ22498A CZ298366B6 CZ 298366 B6 CZ298366 B6 CZ 298366B6 CZ 0022498 A CZ0022498 A CZ 0022498A CZ 22498 A CZ22498 A CZ 22498A CZ 298366 B6 CZ298366 B6 CZ 298366B6
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- oil
- enzyme
- phospholipase
- activity
- less
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 62
- OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N Phosphorus Chemical compound [P] OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 29
- 239000011574 phosphorus Substances 0.000 title claims abstract description 29
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 title claims abstract description 29
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 title claims abstract description 11
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 title claims abstract description 11
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims abstract description 79
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims abstract description 79
- 239000003921 oil Substances 0.000 claims abstract description 59
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 claims abstract description 58
- 102000015439 Phospholipases Human genes 0.000 claims abstract description 54
- 108010064785 Phospholipases Proteins 0.000 claims abstract description 54
- ZIIUUSVHCHPIQD-UHFFFAOYSA-N 2,4,6-trimethyl-N-[3-(trifluoromethyl)phenyl]benzenesulfonamide Chemical compound CC1=CC(C)=CC(C)=C1S(=O)(=O)NC1=CC=CC(C(F)(F)F)=C1 ZIIUUSVHCHPIQD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 43
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims abstract description 25
- 108020002496 Lysophospholipase Proteins 0.000 claims abstract description 21
- 102100037611 Lysophospholipase Human genes 0.000 claims abstract description 20
- 241000228212 Aspergillus Species 0.000 claims abstract description 14
- 230000007515 enzymatic degradation Effects 0.000 claims abstract description 4
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 48
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 claims description 12
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 claims description 6
- 230000007017 scission Effects 0.000 claims description 6
- -1 acyl phospholipase Chemical compound 0.000 claims description 4
- 235000012424 soybean oil Nutrition 0.000 claims description 4
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 239000003549 soybean oil Substances 0.000 claims description 3
- 235000019484 Rapeseed oil Nutrition 0.000 claims description 2
- 235000019486 Sunflower oil Nutrition 0.000 claims description 2
- 240000002791 Brassica napus Species 0.000 claims 1
- 102100031415 Hepatic triacylglycerol lipase Human genes 0.000 claims 1
- 108010013563 Lipoprotein Lipase Proteins 0.000 claims 1
- 239000002600 sunflower oil Substances 0.000 claims 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract description 10
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 abstract description 7
- 235000013305 food Nutrition 0.000 abstract description 7
- 102100035200 Phospholipase A and acyltransferase 4 Human genes 0.000 abstract description 2
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 abstract 1
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 72
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 18
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 10
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- ASWBNKHCZGQVJV-UHFFFAOYSA-N (3-hexadecanoyloxy-2-hydroxypropyl) 2-(trimethylazaniumyl)ethyl phosphate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(O)COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C ASWBNKHCZGQVJV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 238000004821 distillation Methods 0.000 description 7
- 239000000047 product Substances 0.000 description 7
- 241000228245 Aspergillus niger Species 0.000 description 5
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 5
- 125000002252 acyl group Chemical group 0.000 description 5
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 5
- 239000004927 clay Substances 0.000 description 5
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 5
- 102100037883 Phospholipase B1, membrane-associated Human genes 0.000 description 4
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 4
- 238000004061 bleaching Methods 0.000 description 4
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 4
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 4
- IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 1-palmitoyl-2-arachidonoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCCC IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 0.000 description 3
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 3
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 3
- 239000000787 lecithin Substances 0.000 description 3
- 229940067606 lecithin Drugs 0.000 description 3
- 235000010445 lecithin Nutrition 0.000 description 3
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 3
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 3
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 description 3
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 3
- 239000010802 sludge Substances 0.000 description 3
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 3
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 108010002176 Phospholipases A Proteins 0.000 description 2
- 102000000571 Phospholipases A Human genes 0.000 description 2
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 2
- 241000187747 Streptomyces Species 0.000 description 2
- 238000010306 acid treatment Methods 0.000 description 2
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 2
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 2
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 2
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 2
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 2
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 2
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 2
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 2
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 2
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 2
- 210000004907 gland Anatomy 0.000 description 2
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 2
- 238000010979 pH adjustment Methods 0.000 description 2
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 238000007670 refining Methods 0.000 description 2
- JLPULHDHAOZNQI-ZTIMHPMXSA-N 1-hexadecanoyl-2-(9Z,12Z-octadecadienoyl)-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCC\C=C/C\C=C/CCCCC JLPULHDHAOZNQI-ZTIMHPMXSA-N 0.000 description 1
- 240000006439 Aspergillus oryzae Species 0.000 description 1
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 description 1
- 241001158232 Bacillus magaterium Species 0.000 description 1
- 244000063299 Bacillus subtilis Species 0.000 description 1
- 235000014469 Bacillus subtilis Nutrition 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 244000060011 Cocos nucifera Species 0.000 description 1
- 206010011416 Croup infectious Diseases 0.000 description 1
- 102000002322 Egg Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010000912 Egg Proteins Proteins 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 1
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 1
- 108010073178 Glucan 1,4-alpha-Glucosidase Proteins 0.000 description 1
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 description 1
- 244000020551 Helianthus annuus Species 0.000 description 1
- 241000235649 Kluyveromyces Species 0.000 description 1
- 240000006240 Linum usitatissimum Species 0.000 description 1
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000014171 Milk Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010011756 Milk Proteins Proteins 0.000 description 1
- 235000019482 Palm oil Nutrition 0.000 description 1
- 241000228150 Penicillium chrysogenum Species 0.000 description 1
- 102000057297 Pepsin A Human genes 0.000 description 1
- 108090000284 Pepsin A Proteins 0.000 description 1
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- 108010059820 Polygalacturonase Proteins 0.000 description 1
- 108010005991 Pork Regular Insulin Proteins 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 240000005384 Rhizopus oryzae Species 0.000 description 1
- 235000013752 Rhizopus oryzae Nutrition 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- 241000239226 Scorpiones Species 0.000 description 1
- 241000270295 Serpentes Species 0.000 description 1
- DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M Sodium laurylsulphate Chemical compound [Na+].CCCCCCCCCCCCOS([O-])(=O)=O DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 1
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 1
- 102000014384 Type C Phospholipases Human genes 0.000 description 1
- 108010079194 Type C Phospholipases Proteins 0.000 description 1
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002250 absorbent Substances 0.000 description 1
- 230000002745 absorbent Effects 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 239000010775 animal oil Substances 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 239000003659 bee venom Substances 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 238000001311 chemical methods and process Methods 0.000 description 1
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 1
- 235000019864 coconut oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000003240 coconut oil Substances 0.000 description 1
- 239000010779 crude oil Substances 0.000 description 1
- 238000005520 cutting process Methods 0.000 description 1
- 239000007857 degradation product Substances 0.000 description 1
- 230000001877 deodorizing effect Effects 0.000 description 1
- 230000006866 deterioration Effects 0.000 description 1
- 239000002270 dispersing agent Substances 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 235000013345 egg yolk Nutrition 0.000 description 1
- 210000002969 egg yolk Anatomy 0.000 description 1
- 238000004945 emulsification Methods 0.000 description 1
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 1
- 108010093305 exopolygalacturonase Proteins 0.000 description 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 1
- 235000019197 fats Nutrition 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 1
- 235000019634 flavors Nutrition 0.000 description 1
- 235000015203 fruit juice Nutrition 0.000 description 1
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 description 1
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 230000036571 hydration Effects 0.000 description 1
- 238000006703 hydration reaction Methods 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002452 interceptive effect Effects 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- 235000021388 linseed oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000000944 linseed oil Substances 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 1
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 1
- 159000000003 magnesium salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000008268 mayonnaise Substances 0.000 description 1
- 235000010746 mayonnaise Nutrition 0.000 description 1
- 239000000693 micelle Substances 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 235000021239 milk protein Nutrition 0.000 description 1
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 description 1
- 210000003097 mucus Anatomy 0.000 description 1
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 1
- 239000007764 o/w emulsion Substances 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000002540 palm oil Substances 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 229940111202 pepsin Drugs 0.000 description 1
- 150000008103 phosphatidic acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000015277 pork Nutrition 0.000 description 1
- 238000003825 pressing Methods 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 1
- 238000004064 recycling Methods 0.000 description 1
- 239000002795 scorpion venom Substances 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 229940083466 soybean lecithin Drugs 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 1
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 1
- 238000002604 ultrasonography Methods 0.000 description 1
- 238000011144 upstream manufacturing Methods 0.000 description 1
- 239000007762 w/o emulsion Substances 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- 239000002699 waste material Substances 0.000 description 1
- 229940100445 wheat starch Drugs 0.000 description 1
- 239000011701 zinc Substances 0.000 description 1
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
- C11B—PRODUCING, e.g. BY PRESSING RAW MATERIALS OR BY EXTRACTION FROM WASTE MATERIALS, REFINING OR PRESERVING FATS, FATTY SUBSTANCES, e.g. LANOLIN, FATTY OILS OR WAXES; ESSENTIAL OILS; PERFUMES
- C11B3/00—Refining fats or fatty oils
- C11B3/003—Refining fats or fatty oils by enzymes or microorganisms, living or dead
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
- C12P7/62—Carboxylic acid esters
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/8215—Microorganisms
- Y10S435/911—Microorganisms using fungi
- Y10S435/913—Aspergillus
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/8215—Microorganisms
- Y10S435/911—Microorganisms using fungi
- Y10S435/913—Aspergillus
- Y10S435/917—Aspergillus niger
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/8215—Microorganisms
- Y10S435/911—Microorganisms using fungi
- Y10S435/913—Aspergillus
- Y10S435/918—Aspergillus oryzae
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Zoology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
- Fats And Perfumes (AREA)
- Edible Oils And Fats (AREA)
Abstract
Zpusob snižování fosfor obsahujících podílu v rostlinných olejích enzymatickým odbouráním acyl štepící fosfolipázou, pri nemž se použije enzymu z Aspergillus, který obsahuje jak fosfolipázovou A.sub.2.n.-aktivitu (EC 3.1.1.4) a/nebo fosfolipázovou A.sub.1.n.-aktivitu (EC 3.1.1.32), tak také lysofosfolipázovou aktivitu (EC 3.1.1.5), pricemž použitýenzymový roztok je vodný. Zpusob je soucástí výroby potravinárských rostlinných oleju, pri níž se prednostne v predrazeném stupni odstraní hydratovatelné fosfatidy vodným odslizováním a poté se enzymaticky odstraní nehydratovatelné fosfatidy do té míry, že se oleje mohou podrobit fyzikální rafinaci.
Description
Způsob snižování fosfor obsahujících podílů v rostlinných olejích
Oblast techniky
Vynález se týká způsobu snižování fosfor obsahujících podílů v rostlinných olejích enzymatickým odbouráním acyl štěpící fosfolipázou. Způsob je součástí výroby potravinářských rostlinných olejů, při níž se přednostně v předřazeném stupni odstraní hydratovatelné fosfatidy vodným odslizováním a poté se enzymaticky odstraní nehydratovatelné fosfatidy do té míry, že se oleje mohou podrobit fyzikální rafinaci. Způsob je šetrný, nákladově nenáročný a nepoškozuje životní prostředí.
Dosavadní stav techniky
Uznávané rafinační postupy při výrobě potravinových olejů nejvyšší kvality zahrnují zpravidla operace zbavování slizu, zbavování kyselosti, bělení a desodoraci. Velké úsilí bylo v poslední době věnováno zvyšování účinnosti a nákladové nenáročnosti operace zbavování slizu. Cílem je zbavit olej slizu do té míry, aby mohl být návazně destilací zbaven kyselosti. Destilační postup zbavování kyselosti z poslední doby má oproti odkyselování neutralizací tu přednost, že při něm nevzniká žádný odpad. Předpokladem pro jeho provádění je však velmi nízký obsah fosfatidů, například má být obsah fosforu voleji nižší než 15 dílů hmotnostních na milion dílů hmotnostních (dále jen ppm), s výhodou nižší než 10 ppm. Ideální je obsah fosforu nižší než 5 ppm.
Slizová hmota rostlinných olejů sestává hlavně ze směsí fosfatidů, jejichž množství a složení závisí na olejnatém semenu a na způsobu získávání oleje. Do velké míry se dá největší obsah fosfatidů oddělit hydratací z jejich micelámích roztoků v surových olejích. Tento způsob se označuje jako odslizování na mokré cestě. Malá část fosfatidů není hydratovatelná a zůstane v oleji. Chemická povaha těchto „nehydratovatelných fosfatidů (NHP)“ není beze zbytku vysvětlena. Podle analýzy sestávají zvíce než 50 % ze solí vápníku a hořčíku fosfatidových kyselin (Herman Pardun, Die Pflanzenlecithine, Verlag fur chem. Industrie, str. 181, H. Ziolowski KG, Augsburg 1988).
Cílem běžných technických odslizovacích postupů je odstranit z oleje pokud možno nehydratovatelné fosfatidy. K současným postupům patří způsob „Superdegumming Verfahren“ a způsob „Degumming“ firmy Unilever, způsob „Total Degumming („TOP“) firmy Vandermoortele, „Alcon-Verfahren“ firmy Lurgi a „UF-Verfahren“ firmy Krupp Maschinentechnik GmbH. Často bývá do procesu zařazována klasická metoda zbavování slizu vodou a nebo je zařazována před proces.
Pro všechny tyto způsoby odslizování je typické, že se používá výhradně čistě mechanických nebo fyzikálně-chemických způsobů, které se ne vždycky optimálně hodí pro každý druh oleje. Náklady na strojní zařízení a nároky na energii jsou u těchto způsobů vysoké a při tom není zaručeno, že se dosáhne nízkých obsahů fosforu, které jsou nutné pro následné destilační odkyselení.
Při jedné části těchto odslizovacích způsobů se jako účinného řešení používá zpracování kyselinami. Je známo, že silně kyselá činidla se hodí k dodatečnému odstraňování slizu z olejů předběžně odslizených vodou (Herman Pardun, Die Pflanzenlecithine, Verlag fur chem. Industie, str. 185 až 189, H. Ziolkowski KG, Augsburg 1988 nebo patentový spis číslo US 4 698 185). Přednostně se při tom používá kyseliny citrónové.
V evropském patentovém spise číslo EP 0 513 709 je poprvé popsán účinný enzymatický způsob odslizování. Předběžně slizu zbavený potravinový olej se emulzuje ve vodném roztoku fosfolipázy (A2, Ab B) a potom se oddělí od této vodné fáze. Po tomto procesu obsahuje olej méně než 5 ppm fosforu a hodí se pro následující destilační odkyselení. Důležitými parametry procesu jsou emulgace enzym obsahující vodné fáze na kapičky o rozměru < 10 pm, přísada citrátu do vodného roztoku, teplota 50 až 70 °C a hodnota pH s výhodou 4 až 6. Toto nastavení hodnoty pH na kyselou hodnotu je překvapující, neboť optimální hodnota pH u všech známých fosfolipáz je 8.
-1 CZ 298366 B6
Enzymatický způsob zbavování slizu zavedla firma Lurgi do průmyslu potravinových olejů pod označením „EnzyMaX-Verfahren“.
V patentovém spise číslo DE-A 43 39 556 je jako další varianta tohoto způsobu popsána recyklace enzymu, při níž se enzym oddělí od použité, sliz obsahující vodné fáze přísadou tenzidů nebo zprostředkovačů rozpouštění a regeneruje ve formě roztoku do značné míry zbaveného slizu, obsahujícího nejméně 10 % použitého enzymu.
Při způsobu „EnzymMaX-Verfahren“ je možno výhodného působení kyseliny citrónové využít k rozsáhlému odslizení zpracováním kyselinou citrónovou zařazeným před enzymové zpracování nebo za ně. Současné použití citrónové kyseliny a enzymu není možné.
Z japonského patentového spisu číslo JP-A 02-153997 je známo zpracování předběžně slizu zbaveného oleje enzymem, který vykazuje A-aktivitu fosfolipázy. Z tohoto stavu techniky je známo, že použitím fosfolipázy A se fosfatidy tak změní, že se dají snadno odstranit absorpčními činidly, jako je aktivní hlinka nebo bělicí hlinka. Tak je v příkladech 1 a 2 ze tří příkladů provedení kombinováno zpracování enzymem s ošetřením bělicí hlinkou. Ve třetím příkladu je od použití bělicí hlinky upuštěno. Místo toho je použito neobvykle velkého množství enzymu (2000 až 20 000 jednotek) svelkým množstvím vody (hmotnostně 100 až 1000% vztaženo koleji). Vytváří se emulze oleje ve vodě. Neuvádí se žádný pokyn k rozdělení oleje v enzymatické vodné fázi, k nastavení hodnoty pH, k současnému použití citrátu i k opětnému použití enzymu.
V japonském patentovém spise číslo JP-A 02-049593 je popsáno podobné ošetření oleje enzymy, přičemž není cílem odslizení oleje, nýbrž získání lysolecitinu. Přitom je nastavení hodnoty pH zbytečné.
Také při způsobu podle EP-A 0 328 789 jde o přeměnu lecitinu sojového oleje na lysolecitin fosfolipázou A k výrobě majonézových výrobků.
Evropský patentový spis EP-A 0 622 446 popisuje enzymatický způsob odslizování oleje a tuku, který sestává z několika operací. Po zpracování fosfolipázou se enzymový roztok odstředí, zbylý olej se promyje vodou s hodnotou pH 3 až 6 a nakonec se zpracuje bělicí hlinkou. Příznačné přitom je, že jak při enzymovém zpracování, tak také při promývací operaci se používá velké množství vody, hmotnostně 30 až 200 % vztaženo k použitému oleji. Také zde vznikají emulze oleje ve vodě. To znamená zvýšené nároky na aparaturu, neboť se musejí dopravovat velké objemy tekutin a spotřebuje se velké množství energie a vrůstají náklady na odrezení. K nastavování hodnoty pH vodného roztoku enzymu není uveden žádný pokyn.
Příprava potřebného množství enzymu k provádění enzymatického způsobu v průmyslovém měřítku je specifický problém v případě fosfolipázy. Dosažitelné množství je omezené. Fosfolipáza A] není obchodně dostupná, fosfolipáza B jen v laboratorním množství; zdroji jsou extrakty z krysích jater nebo z kultur Streptomyces. Fosfolipáza A2 se vyskytuje v hadím, ve škorpionovém a ve včelím jedu. Žádný tento zdroj se nehodí pro výrobu enzymu v technicky potřebných množstvích. Jediný, v současné době technický způsob výroby fosfolipázy A2 je extrakce z vepřových žláz pankreasu. V celém světě je však orientace na vhodné žlázy úzce omezena a v žádném případě není libovolně rozšiřitelná. Kromě toho je fosfolipáza při extrakčním způsobu jen podřadným vedlejším produktem. Hlavními produkty jsou proteázy pankreasu, obzvláště trypsin a vepřový inzulín. Odhaduje se, že současný - a sotva použitelný - obchodní objem fosfolipázy A2 by nestačil ani pro tři závody lisující olej, i kdyby se enzym používal opakovaně, jak je to popsáno v evropském patentovém spise číslo EP-A 0 513 709.
Je proto třeba získat zdroj, který by poskytoval enzym v neomezeném množství. Technické enzymy se získávají podle stavu techniky v neomezeném množství z mikroorganizmů, například z hub nebo bakterií. Pro fosfolipázy Ab A2 a B není v současné době znám žádný mikroorganizmus, z něhož by se vyplatila produkce tohoto enzymu s dostatečnou výtěžností. Fosfolipáza
-2CZ 298366 B6 byla izolována z Rhizopus arrhizus, Escherichia coli a Bacillus magaterium, fosfolipáza B z Penicillium notatum a z kmenů Streptomyces. S překvapením se v literatuře nenachází žádný odkaz, že fosfalipáza A,, A2 nebo B může být izolována z Aspergillu.
Naproti tomu jsou z patentového spisu číslo EP 0 219 269 známy lysofosfolipázy, získávané z Aspergillus niger. Lysofosfolipázy - zde označované jako fosfolipázy L! a L2 - se liší od jmenovaných fosfolipáz tím, že jsou schopny štěpit monocyklofosfatidy, jako například lysolecithin. Lysofosfolipázy se používají ve zcela odlišné oblasti potravinářské technologie, totiž ke zlepšení výtěžnosti při filtraci pšeničného škrobu.
Úkolem vynálezu je vyvinout šetrný, nákladově nenáročný způsob nepoškozující životní prostředí, ke zmenšení obsahu příměsí obsahujících fosfor v rostlinných olejích až do úrovně, která umožní další zpracování oleje destilačním odkyselením, tedy do obsahu fosforu menšího než 15 ppm, s výhodou menšího než 10 ppm a v nej lepším případě nižšího než 5 ppm. Tyto požadavky mohou být splněny enzymatickým způsobem.
Existuje při tom potřeba mikrobiálního zdroje, který umožní produkci enzymu fosfolipázy v neomezeném množství. Podle stavu techniky jsou ktomu použitelné výhradně enzymy se specifitou štěpení acylů, totiž fosfolipáza Ab A2 a B. Je nepodceňovatelnou předností, že se používá mikroorganizmu, který je v potravinářské technologii odedávna zaveden a je tudíž nezávadný. Příkladem pro to jsou různé kmeny kvasinek, jako Kluyveromyces cerivisae, kmeny Bacillus, jako je Bacillus subtilis nebo kmeny Aspergillus jako je Aspergillus niger nebo oryzae.
Dalším, dosud nevyřešeným problémem je sloučit v procesu zbavování slizu výhodné působení dvou známých procesů, totiž zpracování kyselinou a zpracování enzymy do jediné operace.
Nakonec je úkolem vystačit s pokud možno malým množstvím enzymu a kyseliny, aby byl způsob co možno nejhospodámější.
Podstata vynálezu
Předmětem vynálezu je způsob snižování fosfor obsahujících podílů v rostlinných olejích enzymatickým odbouráním acyl štěpící fosfolipázou, jehož podstata spočívá v tom, že se použije enzymu z Aspergillus, který obsahuje jak fosfolipázovou A2-aktivitu (EC 3.1.1.4) a/nebo fosfolipázovou A]-aktivitu (EC 3.1.1.32), tak také lysofosfolipázovou aktivitu (EC 3.1.1.5), přičemž použitý enzymový roztok je vodný.
Příprava technických enzymů kultivací kmenů Aspergillus je důležitým a vysoce rozvinutým oborem biotechnologie. Vyrábějí se ve velkém měřítku enzymy z Aspergillus niger kromě jiného ve škrobárenském průmyslu (amyloglukosidázy), v průmyslu ovocných šťáv (pektinázy) a v pečivářském průmyslu (xylázy). Enzymy z Aspergillu, obzvláště z Aspergillus niger jsou v potravinářské technologii už dávno zavedeny a uznávány jako nepostradatelné. Fosfolipázy Ab A2 a B z tohoto zdroje nejsou známy. Použití fosfolipáz tohoto původu v odslizovacím procesu je důležitým význakem tohoto vynálezu. Při hledání kmenů obsahujících fosfolipázu byla nalezena fosfolipáza A2 s dostatečnou aktivitou v komerčních produktech VERON® 191 nebo ROHAPECT® 7104 (přihlašovatele tohoto vynálezu). Vyšší aktivitu vykazuje o sobě známý způsob skíningu ke zlepšování kmenů mutací a selekcí se zřetelem na vyšší aktivitu fosfolipázy (W. Gerhartz „Enzymes in Industry“, nakladatelství VCH mbH, str. 35, 1990).
Specifičnost fosfolipázy, získané z těchto zdrojů, může být mnohostranná a komplexní. Jinak než u fosfolipázy A2 z pankreasu, známé ze stavu techniky, která podle definice štěpí jenom acylovou skupinu na C2-atomu fosfolipázové molekuly, obsahují fosfolipázy z Aspergillu současně většinou rozdílné specificity štěpící acylovou skupinu. Vedle specificity A] a A2 se zjistila také lysofofolipázová aktivita. Jmenovaným specifícitám odpovídají E. C. čísla 3.1.1.32, 3.1.1.4 a 3.1.1.5.
-3CZ 298366 B6
Lysofosfolipáza (E.C. číslo 3.1.1.5) se také označuje jako fosfolipáza B: podle poznatků z literatury ((Herman Pardun, Die Pflanzenlecithine, Verlag fur chem. Industie, str. 140, H. Ziolkowski KG, Augsburg 1988) není však jasné, zda se musí rozlišovat mezi lysofosfolipázou a fosfolipázou Β. V každém případě je jim však společné, že jsou schopny dále štěpit lysolecitin až na glycerofosforylchlorid. Jelikož fosfolipáza podle vynálezu má obě tyto specifické vlastnosti, totiž jak pro substrát lecitin, tak pro substrát lysolecitin, bylo by možné označovat ji jako fosfolipáza B. Čisté lysofosfolipázy zAspergillu, které jsou schopné štěpit pouze lysolecitin, jsou v předkládaném odslizovacím procesu, obzvláště za kyselých podmínek reakce, podle dosavadních poznatků neúčinné. To platí i o acyl neštěpicích fosfolipázách C a D.
Tak se stává specifičnost pro lecitin, tedy aktivita fosfolipázy A] a/nebo A2 - je obtížné mezi nimi analyticky rozlišovat - podstatným význakem enzymu podle vynálezu. Současný výskyt těchto různých specifických vlastností by mohl být důvodem výhodného působení enzymu podle vynálezu. I když se musí v mnoha případech označovat jako jediný enzym, má působnost komplexu enzymů.
Při používání tohoto enzymu podle vynálezu má velký význam stupeň jeho čistoty. Je možno například aplikovat fermentační tekutinu samotnou, ultrafiltrací získaný enzymem bohatý produkt, nebo z něho vysrážený enzymový protein.
Vynález zahrnuje používání místo enzymu získaného konvenčním způsobem z produkčního kmene Aspergillu, enzymu z produkčního kmene pozměněného genovou technikou. Genová technika nabízí kromě toho mnoho možností klonování genu z Aspergillu potřebného k vytvoření fosfolipázy a expresování ve vhodném hostujícím kmeni s velkou výtěžností. Jako hostující kmeny přicházejí v úvahu například opět kmeny Aspergillus nebo i jiné kmeny hub a dokonce bakterií.
Použitá množství enzymu mohou být podle stupně jeho čistoty hmotnostně 0,0001 až 1 % vztaženo k odslizovanému oleji.
Velkou předností a neočekávaným účinkem enzymů používaných podle vynálezu je aktivita potřebná k odstranění slizu. Taje neobyčejně malá. Zatímco při použití fosfolipázy A2 z pankreasu podle dosavadního stavu techniky je potřeba aktivity přibližně 1000 lecitázových jednotek (LU) na litr oleje, (příklad 1 evropského patentového spisu číslo EP-A 0 513 709), postačí při použití enzymů z Aspergillu podle vynálezu za shora popsaných podmínek aktivita jen 5 až 50 LU na litr oleje. Při příslušně prodloužené době reakce je cílem dosáhnout nasazených množství až pod 5 LU na litr oleje. Aktivita lysofosfolipázy, nalezená u vyčištěných] Aspergillusfosfolipáz je dokonce 1 až 100-násobně vyšší než aktivita fosfolipázy A2. Z toho vycházejí použitá množství 5 až 5000 lysolecitázových jednotek (LLU) na litr oleje, s výhodou 50 až 1000 LLU. Tyto údaje o aktivitě platí pro odslizovací násady prováděné po dávkách. Při opakovaném použití enzymu jsou potřebné násady enzymu, vztažené na litr oleje, dokonce podstatně nižší, například pětinové až desetinové oproti udaným hodnotám. Tato nepatrná množství umožňují upustit od opětného používání enzymu.
Aspergillovou fosfolipázou podle vynálezu je možno záměrně směšovat i s jinými acyl štěpícími fosfolipázami, například s dalšími fosfolipázami z Aspergillu, nebo s fosfolipázou A2 z pankreasu. V případě fosfolipázou A2 z pankreasu je však nutno upravit hodnotu pH, blížící se optimu obou hodnot, tedy přibližně pH 2 až 5.
S překvapením umožňuje použití fosfolipázy z Aspergillu vyřešit i další stanovené úkoly. Tak je možno použít enzymu v roztoku kyseliny citrónové ke sloučení účinku enzymu a kyseliny citrónové. Použití enzymu v poměrně koncentrovaných roztocích kyseliny citrónové není obvyklé. V enzymologii jsou sotva známy enzymy, které jsou stabilní při tak nízkých hodnotách pH a zde mají dokonce optimum působení. Jedním z nemnoha příkladů takového spektra vlastností je pepsin zažívacího ústrojí. Enzym se rozpustí v 1 až 20% roztoku kyseliny citrónové. Přitom se
-4CZ 298366 B6 zjistí hodnota pH < 4, s výhodou pH <3. Použije-li se například 5% roztoků kyseliny citrónové, vychází hodnota pH na přibližně 2,3.
Místo citrónové kyseliny je možno použít jiných kyselin, například kyseliny mléčné, octové, mravenčí, fosforečné i jiných organických a anorganických kyselin. Přednost se dává ovšem chuťovým kyselinám, zejména kyselině citrónové. Připomíná se, že samotnými zředěnými kyselinami bez použití enzymu se nedosáhne dostatečně nízkých obsahů fosforu, obzvláště u olejů předběžně zbavených slizu.
Optimální hodnota pH 2 až 3 pro způsob podle vynálezu, nesouhlasí s optimem zjištěným obvyklými analytickými metodami. Ta je okolo pH 8, při které se bílkovina jako substrát v emulzním roztoku při teplotě 40 °C emulguje a aktivita se stanoví v závislosti na hodnotě pH. Překvapivě nízkou optimální hodnotu pH by bylo možno vysvětlit zvláštními podmínkami na rozhraní fází, kde se možná nastaví vyšší hodnota pH, než jakou lze naměřit ve vodné fázi („bulk-Phase“).
Enzym je v této kyselé vodné fázi s olejem důkladně promísen. Přitom by mělo být snahou udržovat objem vodné fáze v porovnání s olejovou fází co možno nízký, aby se při následném odlučování nemusely dopravovat velké objemy. Zpravidla se vystačí s objemem menším než 10 %, vztaženo k olejové fázi, s výhodou s objemem menším než 5 %. V každém případě vznikne emulze vody v oleji.
Zpracovávanou olejovou fází může být sojový, slunečnicový nebo řepkový olej. Nejdůležitějším produktem je sojový olej. Ostatní rostlinné oleje, jako lněný, kokosový nebo palmový olej, i živočišné oleje obsahující rušivé fosfatidy, lze rovněž zpracovávat způsobem podle vynálezu.
Jelikož by fosfolipáza napadala lecitin, není účelné používat při způsobech podle vynálezu olejů s vysokým obsahem lecitinu, jako je sojový olej. Výchozími surovinami jsou tedy předběžně slizu zbavené oleje, vyznačující se obsahem fosforu 50 až 300 ppm. Jenom výjimečně mají předběžně slizu zbavené oleje větší obsahy fosforu až 500 ppm. Oleje kolísající jakosti lze zpracovávat v téže jednotce. Je také možno zařazovat částečně slizu zbavené oleje, jako jsou lisované nebo extrakční oleje, a to ve směsi s předběžně slizu zbavenými oleji. Výjimečně pak může obsah fosforu být rovněž větší než 500 ppm. Od předběžného vysoušení oleje lze upustit.
Aby se nechal enzym působit, musejí být obě fáze, olejová a enzym obsahující vodná fáze, navzájem důkladně promíseny. Pouhé zamíchání zdaleka nestačí.
Dobrého rozdělení enzymu v oleji se dosáhne, jestliže je rozpuštěn v malém množství vody 0,5 až 5 % (vztaženo k oleji) a v této formě se emulguje přikapáváním do oleje po kapkách s průměrem menším než 10 pm (hmotnostní průměr). Osvědčilo se turbulentní míšení s radiální složkou rychlosti přes 100 cm/s. Olej může být také uváděn do pohybu v reaktoru externím oběhovým čerpadlem. Také působením ultrazvuku se dá vodná fáze jemně rozptýlit. Obvyklým zařízením je dispergátor jako například Ultraturax.
K. enzymatické reakci by mělo docházet na rozhraní mezi vodnou a olejovou fází. Cílem všech těchto opatření kpromísení je vytvoření co největšího povrchu enzym obsahující vodné fáze. Přísada tenzidů zesiluje jemné rozdělení vodné fáze. Občas se tedy do roztoku enzymu přidávají tenzidy s hodnotami HLB větší než 9, jako dodecylsulfát sodný (evropský patentový spis číslo EP-A 0 513 709). Podobně působící ke zlepšení emulgovatelnosti je přísada lysolecitinu. Přidávané množství může dosahovat 0,001 až 1 % vztaženo koleji. Ve všech případech se vytvářejí při způsobu podle vynálezu vysoce disperzní emulze vody v oleji.
Teplota není při zpracování enzymu rozhodující. Vhodné jsou teploty 20 až 80 °C, poslední z nich lze však použít jen krátkodobě. Fosfolipáza podle vynálezu se vyznačuje celkem dobrou
-5 CZ 298366 B6 odolností vůči teplotě. Nízkou použitou hodnotou pH není nepříznivě ovlivňována. Optimální jsou použité teploty 30 až 50 °C.
Doba zpracování závisí na teplotě a při rostoucí teplotě může být kratší. Zpravidla postačí doby 0,1 až 10, s výhodou 1 až 5 hodin. Reakce probíhá v odslizovacím reaktoru, který může být rozdělen do pater, jak to popisuje DE-A 43 39 556. Tím se umožní vedle zpracování po dávkách také kontinuální provoz. Reakce při tom může probíhat za různých odstupňovaných teplot. Tak se může inkubace provádět například 3 hodiny při teplotě 40 °C, pak 1 hodinu při 60 °C. Stupňovitý průběh reakce také umožňuje nastavování různých hodnot pH. Tak může být například v prvním stupni pH hodnota roztoku nastavena na 7, ve druhém stupni přísadou kyseliny citrónové na 2,5. Nejméně v jednom stupni však musí být hodnota pH pod 4, s výhodou pod 3. Při dalším nastavování hodnoty pH pod tuto hodnotu podle vynálezu se pozoruje zhoršení účinnosti. Proto se kyselina citrónová přidává do roztoku enzymu před zamícháním do oleje.
Po ukončení zpracování enzymem se roztok enzymu spolu s odbouranými produkty NHP od olejové fáze oddělí - po dávkách nebo kontinuálně - s výhodou odstředěním. Jelikož se enzymy vyznačují velkou stálostí, a množství přijímaných odbouraných produktů je nepatrné (vypadávají v podobě kalu) je možno enzymové fáze několikrát znovu použít. Existuje také možnost enzym od kalu oddělit, jak je to popsáno v patentovém spise číslo DE-A 43 39 556, takže lze znovu použít enzymový roztok do značné míry zbavený kalu.
Způsobem oddělování slizu podle vynálezu se získají oleje, které obsahují fosforu méně než 15 ppm. Cílem je vlastně snížení obsahu fosforu pod 10 ppm; v ideálním případě by to mělo být méně než 5 ppm. S obsahem fosforu pod 10 ppm je další zpracování oleje destilačním odkyselením bez dalších opatření možné. V průběhu způsobu podle vynálezu se odstraní ve velké míře také celá řada jiných iontů, jako hořčíku, vápníku, zinku a také železa. Díky nízkému dosahovanému obsahu železa, většinou pod 0,1 ppm, má produkt ideální předpoklady pro dobrou odolnost vůči oxidaci při dalším zpracování a skladování.
Vynález objasňují, nijak však neomezují následující příklady praktického provedení. Procenta a díly jsou míněny hmotnostně, pokud není uvedeno jinak.
Příklady provedení vynálezu
Příklad 1
V baňce s kulatým dnem se zahřeje na teplotu 40 °C 500 g za mokra slizu zbaveného oleje se zbytkovým obsahem fosforu 190 ppm. Přidá se 20 g vody, ve které bylo rozpuštěno 5 g citrónové kyseliny a 0,19 g práškového enzymového prostředku. Enzymový prostředek pochází z výrobní šarže fermentace Aspergillus niger a obsahuje 60 jednotek fosfolipázy (= lecitázových jednotek, LU) na 1 gram. Lecitázová jednotka (LU) je takové množství enzymu, které při teplotě 40 °C a při hodnotě pH 8 uvolní za minutu z vaječného žloutku 1 mikromol mastné kyseliny. Enzymový prostředek je přezkoušen také na aktivitu lysofosfolipázy. Bylo naměřeno 1001 lysofosfolipázových jednotek (= lysolecitázových jednotek, LLU) na gram. 1 lysolecitázová jednotka je takové množství enzymu, které při teplotě 55 °C a při hodnotě pH= 4,5 uvolní z lysolecitinové emulze za minutu 1 mikromol mastné kyseliny. Enzymový prostředek, který nebyl zvlášť čištěn z hlediska obsahu fosfolipázy, obsahuje tedy vedle fosfolipázy A2 také pozoruhodně vysokou aktivitu lysofosfolipázy a je ji možno označit jako fosfolipázu B.
Obsah baňky s kulatým dnem se externím oběhovým čerpadlem intenzivně disperguje. Při tom proběhne čerpadlem obsah baňky přibližně jednou za minutu. Vodná fáze má velikost částic pod 1 pm. V časových intervalech se odebírají vzorky a podrobí se zkoušce na obsah fosforu. Získají se následující hodnoty:
-6CZ 298366 B6
| Čas v hodinách: 0 2 | 4 | 6 | 20 |
| Obsah fosforu v ppm: 190 81 | 27,9 | 5,4 | 4,2 |
Nízkého obsahu fosforu pod 10 ppm, potřebného pro následné odstranění kyseliny se dosáhne způsobem podle vynálezu za 6 hodin.
Porovnávací zkouška 1
Postupuje se stejně jako podle příkladu 1, jen s tím rozdílem, že se místo enzymového prostředku přidá odpovídající množství mléčného proteinu, tedy proteinu bez enzymu. Vzorky odebrané stejně jako v prvním případě ukazují, že obsahy fosforu zpracováním bez enzymu nepoklesnou pod 121 ppm. Samotná přísada citrónové kyseliny tedy nestačí. Získaný olej se k destilačnímu odkyselení nehodí.
Čas v hodinách: 0 2 4 6 20
Obsah fosforu v ppm: 190 152 128 123 121
Porovnávací zkouška 2
Postupuje se stejně jako podle příkladu 1, jen s tím rozdílem, že se místo fosfolipázy z Aspergillu přidá čistá obchodně dostupná lysofosfolipáza (G-Zyme společnosti Enzyme Biosystems, Sp. st. a. 11782 LLU na g). Nemá žádnou aktivitu fosfolipázy A2. Vzorky odebrané při stejných dobách zpracování ukazují, že obsahy fosforu samotnou přísadou fosfolipázy za daných podmínek neklesnou pod 85. Získaný olej se k destilačnímu odkyselení nehodí.
Čas v hodinách: 0 2 4 6 20
Obsah fosforu v ppm: 190 138 124 119 85
Průmyslová využitelnost
Enzymy původu Aspergillus pro účinné zbavován jedlého oleje slizu do té míry, že jsou vhodné k odkyselovací operaci.
Claims (13)
- PATENTOVÉ NÁROKY1. Způsob snižování fosfor obsahujících podílů v rostlinných olejích enzymatickým odbouráním acyl štěpící fosfolipázou, vyznačující se tím, že se použije enzymu z Aspergillus, který obsahuje jak fosfolipázovou A2-aktivitu (EC 3.1.1.4) a/nebo fosfolipázovou Ai-aktivitu (EC 3.1.1.32), tak také lysofosfolipázovou aktivitu (EC 3.1.1.5), přičemž použitý enzymový roztok je vodný.
- 2. Způsob podle nároku 1, vyznačující se tím, že hodnota pH použitého enzymového roztoku se nastavuje na hodnotu nižší než 4, přednostně nižší než 3.
- 3. Způsob podle nároku 2, vyznačující se tím, že se hodnota pH nastavuje citrónovou kyselinou a enzym tedy působí za přítomnosti kyseliny citrónové.
- 4. Způsob podle alespoň jednoho z nároků laž3, vyznačující se tím, že se provádí při teplotě 20 až 80 °C, přednostně 30 až 50 °C.
- 5. Způsob podle alespoň jednoho z nároků 1 až 4, vyznačující se tím, že vodná fáze obsahující enzym je v oleji emulgována na kapičky o velikosti menší než 10 mikrometrů.-7CZ 298366 B6
- 6. Způsob podle alespoň jednoho z nároků laž5, vyznačující se tím, že se používá oleje alespoň částečně předběžně zbaveného slizu, zejména za mokra odslizeného oleje.
- 7. Způsob podle nároku 6, vyznačující se tím, že obsah fosforu v oleji hmotnostně 50 až 500 dílů na milion dílů se snižuje na méně než 15 dílů na milion dílů, přednostně na méně než 10 dílů na milion dílů a nejlépe na méně než 5 dílů na milion dílů.
- 8. Způsob podle nároku 7, v y z n a č u j í c í se t í m , že se zpracovává sojový olej.
- 9. Způsob podle nároku 7, vyznačující se tím, že se zpracovává řepkový nebo slunečnicový olej.
- 10. Způsob podle alespoň jednoho z nároků laž9, vyznačující se tím, že vodný roztok fosfolipázy se po svém působení od zpracovaného oleje odděluje a znovu se ho používá.
- 11. Způsob podle alespoň jednoho z nároků 1 až 10, vyznačující se tím, že se provádí po dávkách.
- 12. Způsob podle alespoň jednoho z nároků lažlO, vyznačující se tím, že se provádí kontinuálně.
- 13. Způsob podle alespoň jednoho z nároků 1 až 12, vyznačující se tím, že současně se snižováním obsahu fosfor obsahujících podílů dochází také ke snižování obsahu železa v oleji.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE19527274A DE19527274A1 (de) | 1995-07-26 | 1995-07-26 | Enzymatisches Verfahren zur Entschleimung von pflanzlichen Ölen mit Aspergillus-Phospholipase |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CZ22498A3 CZ22498A3 (cs) | 1998-06-17 |
| CZ298366B6 true CZ298366B6 (cs) | 2007-09-12 |
Family
ID=7767819
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CZ0022498A CZ298366B6 (cs) | 1995-07-26 | 1996-07-04 | Zpusob snižování fosfor obsahujících podílu v rostlinných olejích |
Country Status (17)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US6001640A (cs) |
| EP (1) | EP0906379B1 (cs) |
| JP (1) | JPH11510195A (cs) |
| CN (1) | CN1074455C (cs) |
| AR (1) | AR003052A1 (cs) |
| AT (1) | ATE238406T1 (cs) |
| BR (1) | BR9609816A (cs) |
| CA (1) | CA2227568C (cs) |
| CZ (1) | CZ298366B6 (cs) |
| DE (2) | DE19527274A1 (cs) |
| DK (1) | DK0906379T3 (cs) |
| ES (1) | ES2194997T3 (cs) |
| HU (1) | HU227760B1 (cs) |
| MX (1) | MX9800547A (cs) |
| PL (1) | PL185718B1 (cs) |
| TR (1) | TR199800066T1 (cs) |
| WO (1) | WO1997005219A1 (cs) |
Families Citing this family (68)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6406723B1 (en) | 1997-04-09 | 2002-06-18 | Danisco A/S | Method for preparing flour doughs and products made from such doughs using glycerol oxidase and lipase |
| US6936289B2 (en) | 1995-06-07 | 2005-08-30 | Danisco A/S | Method of improving the properties of a flour dough, a flour dough improving composition and improved food products |
| US6103505A (en) * | 1996-12-09 | 2000-08-15 | Novo Nordisk A/S | Method for reducing phosphorus content of edible oils |
| CN1148442C (zh) * | 1996-12-09 | 2004-05-05 | 诺维信公司 | 利用来自具有磷脂酶a和/或b活性的丝状真菌的磷脂酶降低含有大量非水合磷的食用油中的含磷成分 |
| DE19701348A1 (de) * | 1997-01-16 | 1998-07-23 | Roehm Gmbh | Protein mit Phospholipaseaktivität |
| AU752215B2 (en) | 1998-07-21 | 2002-09-12 | Dupont Nutrition Biosciences Aps | Foodstuff |
| JP4309137B2 (ja) | 2001-05-18 | 2009-08-05 | ダニスコ エイ／エス | 酵素を使用した練り粉の調製方法 |
| US7897186B2 (en) * | 2001-11-06 | 2011-03-01 | Novozymes North America, Inc. | Modified whey protein compositions having improved foaming properties |
| US7226771B2 (en) | 2002-04-19 | 2007-06-05 | Diversa Corporation | Phospholipases, nucleic acids encoding them and methods for making and using them |
| CN1659276A (zh) | 2002-04-19 | 2005-08-24 | 戴弗萨公司 | 磷脂酶,编码磷脂酶的核酸以及制备和应用磷脂酶的方法 |
| US7943360B2 (en) | 2002-04-19 | 2011-05-17 | Verenium Corporation | Phospholipases, nucleic acids encoding them and methods for making and using them |
| AU2003250528A1 (en) * | 2002-05-30 | 2003-12-19 | Council Of Scientific And Industrial Research | Process for the pre-treatment of vegetable oils for physical refining |
| US20050196766A1 (en) | 2003-12-24 | 2005-09-08 | Soe Jorn B. | Proteins |
| US7955814B2 (en) | 2003-01-17 | 2011-06-07 | Danisco A/S | Method |
| MXPA05007653A (es) | 2003-01-17 | 2005-09-30 | Danisco | Metodo. |
| WO2005032496A2 (en) | 2003-03-07 | 2005-04-14 | Diversa Corporation | Hydrolases, nucleic acids encoding them and mehods for making and using them |
| MXPA06006762A (es) * | 2003-12-19 | 2007-01-26 | Bunge Oils Inc | Proceso para mejorar el desengomado enzimatico de aceites vegetales y reducir el atascamiento del equipo procesador descendente. |
| WO2008090395A1 (en) | 2007-01-25 | 2008-07-31 | Danisco A/S | Production of a lipid acyltransferase from transformed bacillus licheniformis cells |
| GB0716126D0 (en) | 2007-08-17 | 2007-09-26 | Danisco | Process |
| US7718408B2 (en) | 2003-12-24 | 2010-05-18 | Danisco A/S | Method |
| US7906307B2 (en) | 2003-12-24 | 2011-03-15 | Danisco A/S | Variant lipid acyltransferases and methods of making |
| GB0405637D0 (en) | 2004-03-12 | 2004-04-21 | Danisco | Protein |
| US20080070291A1 (en) | 2004-06-16 | 2008-03-20 | David Lam | Compositions and Methods for Enzymatic Decolorization of Chlorophyll |
| CN103173282A (zh) | 2004-06-16 | 2013-06-26 | 帝斯曼知识产权资产管理有限公司 | 对叶绿素进行酶促脱色的组合物和方法 |
| CA2572843A1 (en) | 2004-07-16 | 2006-01-26 | Danisco A/S | Lipolytic enzyme uses thereof in the food industry |
| WO2006031699A2 (en) | 2004-09-10 | 2006-03-23 | Diversa Corporation | Compositions and methods for making and modifying oils |
| US20070148311A1 (en) * | 2005-12-22 | 2007-06-28 | Bunge Oils, Inc. | Phytosterol esterification product and method of make same |
| WO2007092314A2 (en) | 2006-02-02 | 2007-08-16 | Verenium Corporation | Esterases and related nucleic acids and methods |
| CN100441668C (zh) * | 2006-06-09 | 2008-12-10 | 中国农业科学院油料作物研究所 | 超声波强化生物酶油脂脱胶的方法 |
| US8637290B2 (en) | 2006-09-21 | 2014-01-28 | Dsm Ip Assets B.V. | Phospholipases, nucleic acids encoding them and methods for making and using them |
| US8460905B2 (en) * | 2007-09-11 | 2013-06-11 | Bunge Oils, Inc. | Enzymatic degumming utilizing a mixture of PLA and PLC phospholipases with reduced reaction time |
| US8956853B2 (en) * | 2007-01-30 | 2015-02-17 | Bunge Oils, Inc. | Enzymatic degumming utilizing a mixture of PLA and PLC phospholipases |
| US20100209968A1 (en) * | 2007-05-04 | 2010-08-19 | Akermin, Inc. | Immobilized enzymes and uses thereof |
| US8076123B2 (en) * | 2007-10-26 | 2011-12-13 | Oilseeds Biorefinery Corporation | Emulsification-free degumming of oil |
| US8241876B2 (en) | 2008-01-07 | 2012-08-14 | Bunge Oils, Inc. | Generation of triacylglycerols from gums |
| US8911808B2 (en) | 2008-06-23 | 2014-12-16 | Cavitation Technologies, Inc. | Method for cavitation-assisted refining, degumming and dewaxing of oil and fat |
| GB0904787D0 (en) * | 2009-03-20 | 2009-05-06 | Desmet Ballestra Engineering Sa | Improved enzymatic oil recuperation process |
| US11247964B2 (en) | 2009-05-01 | 2022-02-15 | Rrip, Llc | Method of processing phospholipid based lipid materials |
| AR077042A1 (es) | 2009-06-12 | 2011-07-27 | Danisco | Metodo para tratar una composicion que contiene pirofiofitina |
| UA109884C2 (uk) | 2009-10-16 | 2015-10-26 | Поліпептид, що має активність ферменту фосфатидилінозитол-специфічної фосфоліпази с, нуклеїнова кислота, що його кодує, та спосіб його виробництва і застосування | |
| UA111708C2 (uk) | 2009-10-16 | 2016-06-10 | Бандж Ойлз, Інк. | Спосіб рафінування олії |
| CA2788148C (en) | 2010-03-12 | 2018-03-13 | Dupont Nutrition Biosciences Aps | An enzymatic process for refining a plant oil |
| US20130085287A1 (en) | 2010-06-17 | 2013-04-04 | Dupont Nutrition Biosciences Aps | Process |
| DE102010055159A1 (de) * | 2010-12-18 | 2012-06-21 | Lurgi Gmbh | Verfahren zur enzymatischen Reinigung von Ölen pflanzlicher oder tierischer Herkunft |
| CN107156333A (zh) | 2011-02-23 | 2017-09-15 | 杜邦营养生物科学有限公司 | 植物油的加工方法 |
| WO2012114232A1 (en) | 2011-02-23 | 2012-08-30 | Dupont Nutrition Biosciences Aps | Process |
| CN102586011B (zh) * | 2011-12-01 | 2013-10-30 | 华中农业大学 | 一种利用磷脂酶a2进行植物油脂脱胶的方法 |
| WO2013104660A1 (en) | 2012-01-13 | 2013-07-18 | Dupont Nutrition Biosciences Aps | Process for treating a plant oil comprising hydrolysing chlorophyll or a chlorophyll derivative and involving partial caustic neutralisation |
| WO2013104659A2 (en) | 2012-01-13 | 2013-07-18 | Dupont Nutrition Biosciences Aps | Process |
| WO2013160374A1 (en) | 2012-04-27 | 2013-10-31 | Dupont Nutrition Biosciences Aps | Process for refining crude plant oil involving enzymatic hydrolysis and gum recycling |
| WO2013160372A1 (en) | 2012-04-27 | 2013-10-31 | Dupont Nutrition Biosciences Aps | Process for treating plant oil involving addition of serial doses of chlorophyll or chlorophyll derivative degrading enzyme |
| CN104487558B (zh) | 2012-06-14 | 2018-07-17 | 邦吉全球创新有限责任公司 | 用于生产低饱和油的方法 |
| US10294463B2 (en) | 2013-07-03 | 2019-05-21 | Keclon Sa | Modified Bacillus cereus phospholipase C protein and method of processing vegetable oil |
| EP3119862B1 (en) | 2014-03-19 | 2022-09-07 | Novozymes A/S | Polypeptides having phospholipase c activity and polynucleotides encoding same |
| EP3126509A1 (en) | 2014-04-01 | 2017-02-08 | DuPont Nutrition Biosciences ApS | Method for increasing crude palm oil yields |
| US20170058235A1 (en) | 2014-05-15 | 2017-03-02 | Novozymes A/S | Compositions Comprising Polypeptides Having Phospholipase C Activity and Use Thereof |
| US9453180B2 (en) | 2014-10-15 | 2016-09-27 | Arisdyne Systems, Inc. | Process for degumming oils |
| US9290717B1 (en) | 2014-12-15 | 2016-03-22 | Arisdyne Systems, Inc. | Reactor for degumming |
| WO2016097264A1 (en) | 2014-12-19 | 2016-06-23 | Dupont Nutrition Biosciences Aps | Recovery of oil from palm sludge |
| US9340749B1 (en) | 2015-05-06 | 2016-05-17 | Arisdyne Systems, Inc. | Method for degumming triglyceride oils |
| JP6061119B1 (ja) * | 2016-02-03 | 2017-01-18 | 不二製油株式会社 | ココアバター |
| WO2018186734A1 (en) | 2017-04-06 | 2018-10-11 | Purac Biochem B.V. | Enzymatic degumming of unrefined triglyceride oil |
| WO2018217270A1 (en) | 2017-05-24 | 2018-11-29 | Arisdyne Systems, Inc. | Oil degumming systems |
| BR112020012272A2 (pt) * | 2017-12-21 | 2020-11-24 | Purac Biochem B.V. | processo para degomagem enzimática de óleo triglicerídeo não refinado e óleo triglicerídeo degomado |
| DK3790946T3 (da) | 2018-05-07 | 2024-11-25 | Dsm Ip Assets Bv | Fremgangsmåde til enzymatisk degummering af olie |
| CN109989115B (zh) * | 2019-04-28 | 2021-09-03 | 四川玉竹麻业有限公司 | 一种苎麻冷轧堆氧漂脱胶工艺 |
| CN110951621B (zh) * | 2019-11-18 | 2022-05-31 | 无锡优普克生物科技有限公司 | 一种产磷脂酶的黑曲霉菌株 |
| WO2023108233A1 (pt) * | 2021-12-16 | 2023-06-22 | Oliveira Jean Paulo De | Processo de reaproveitamento da lisogoma aplicado no pré-tratamento de óleos vegetais degomados para posterior tratamento enzimático e transesterificação do biodiesel |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5264367A (en) * | 1991-05-16 | 1993-11-23 | Rohm Gmbh | Enzymatic treatment of edible oils |
| EP0575133A2 (en) * | 1992-06-16 | 1993-12-22 | Sankyo Company Limited | Novel phospholipase A1, process for its preparation and the use thereof |
| US5314706A (en) * | 1991-12-12 | 1994-05-24 | Nestec S.A. | Heat-stable oil and water emulsion and preparation thereof |
Family Cites Families (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS61289884A (ja) * | 1985-06-14 | 1986-12-19 | Asahi Denka Kogyo Kk | リパ−ゼ類の製造方法 |
| GB8525012D0 (en) * | 1985-10-10 | 1985-11-13 | Cpc International Inc | Carbohydrate refining process |
| US5288619A (en) * | 1989-12-18 | 1994-02-22 | Kraft General Foods, Inc. | Enzymatic method for preparing transesterified oils |
| JPH04356192A (ja) * | 1990-07-10 | 1992-12-09 | Kanegafuchi Chem Ind Co Ltd | リン脂質の製造方法 |
| JPH04356191A (ja) * | 1990-07-10 | 1992-12-09 | Kanegafuchi Chem Ind Co Ltd | リン脂質の製造法 |
| JP2937746B2 (ja) * | 1993-04-25 | 1999-08-23 | 昭和産業株式会社 | 油脂の精製方法 |
| JP2657887B2 (ja) * | 1993-05-24 | 1997-09-30 | 日清製油株式会社 | 固定化酵素の調製方法 |
-
1995
- 1995-07-26 DE DE19527274A patent/DE19527274A1/de not_active Ceased
-
1996
- 1996-07-04 CA CA002227568A patent/CA2227568C/en not_active Expired - Fee Related
- 1996-07-04 WO PCT/DE1996/001190 patent/WO1997005219A1/de active IP Right Grant
- 1996-07-04 EP EP96921886A patent/EP0906379B1/de not_active Expired - Lifetime
- 1996-07-04 BR BR9609816A patent/BR9609816A/pt not_active Application Discontinuation
- 1996-07-04 PL PL96324648A patent/PL185718B1/pl not_active IP Right Cessation
- 1996-07-04 HU HU9802813A patent/HU227760B1/hu not_active IP Right Cessation
- 1996-07-04 DE DE59610388T patent/DE59610388D1/de not_active Expired - Lifetime
- 1996-07-04 CN CN96195847A patent/CN1074455C/zh not_active Expired - Fee Related
- 1996-07-04 TR TR1998/00066T patent/TR199800066T1/xx unknown
- 1996-07-04 DK DK96921886T patent/DK0906379T3/da active
- 1996-07-04 AT AT96921886T patent/ATE238406T1/de active
- 1996-07-04 ES ES96921886T patent/ES2194997T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1996-07-04 US US08/983,324 patent/US6001640A/en not_active Expired - Lifetime
- 1996-07-04 JP JP9507073A patent/JPH11510195A/ja active Pending
- 1996-07-04 CZ CZ0022498A patent/CZ298366B6/cs not_active IP Right Cessation
- 1996-07-26 AR ARP960103765A patent/AR003052A1/es unknown
-
1998
- 1998-01-19 MX MX9800547A patent/MX9800547A/es unknown
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5264367A (en) * | 1991-05-16 | 1993-11-23 | Rohm Gmbh | Enzymatic treatment of edible oils |
| US5314706A (en) * | 1991-12-12 | 1994-05-24 | Nestec S.A. | Heat-stable oil and water emulsion and preparation thereof |
| EP0575133A2 (en) * | 1992-06-16 | 1993-12-22 | Sankyo Company Limited | Novel phospholipase A1, process for its preparation and the use thereof |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| DE59610388D1 (de) | 2003-05-28 |
| HU227760B1 (en) | 2012-02-28 |
| TR199800066T1 (xx) | 1998-04-21 |
| ES2194997T3 (es) | 2003-12-01 |
| CZ22498A3 (cs) | 1998-06-17 |
| CA2227568C (en) | 2006-05-30 |
| HUP9802813A2 (hu) | 1999-03-29 |
| US6001640A (en) | 1999-12-14 |
| PL185718B1 (pl) | 2003-07-31 |
| DK0906379T3 (da) | 2003-08-11 |
| CN1192231A (zh) | 1998-09-02 |
| JPH11510195A (ja) | 1999-09-07 |
| HUP9802813A3 (en) | 2000-03-28 |
| EP0906379B1 (de) | 2003-04-23 |
| CN1074455C (zh) | 2001-11-07 |
| PL324648A1 (en) | 1998-06-08 |
| BR9609816A (pt) | 1999-07-06 |
| HK1015819A1 (en) | 1999-10-22 |
| MX9800547A (es) | 1998-11-30 |
| DE19527274A1 (de) | 1997-01-30 |
| EP0906379A1 (de) | 1999-04-07 |
| AR003052A1 (es) | 1998-05-27 |
| ATE238406T1 (de) | 2003-05-15 |
| WO1997005219A1 (de) | 1997-02-13 |
| CA2227568A1 (en) | 1997-02-13 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CZ298366B6 (cs) | Zpusob snižování fosfor obsahujících podílu v rostlinných olejích | |
| US5264367A (en) | Enzymatic treatment of edible oils | |
| JP2937746B2 (ja) | 油脂の精製方法 | |
| US7494676B2 (en) | Process for the pre-treatment of vegetable oils for physical refining | |
| US8956853B2 (en) | Enzymatic degumming utilizing a mixture of PLA and PLC phospholipases | |
| CA1250537A (en) | Enzymatic detergent additive, a detergent, and a washing method | |
| EP2118248B1 (en) | Enzymatic degumming utilizing a mixture of pla and plc phospholipases | |
| RU2680690C2 (ru) | Композиция для ферментативного дегуммирования масла | |
| Mukhtar et al. | Studies on the lipase production by Aspergillus niger through solid state fermentation | |
| CZ285164B6 (cs) | Způsob výroby holin, připravených k vyčinění | |
| JPH08507917A (ja) | 改良された脂肪分解方法 | |
| EP0070116A2 (en) | Enzymatically treated phosphatides | |
| EP0832183B1 (en) | Improved fat splitting process | |
| Dijkstra | Enzymatic degumming | |
| Sadeghi | Purification of soybean oil with phospholipase Al | |
| CN105308161A (zh) | 用于改善植物油的水性酶促脱胶的方法 | |
| JPH09296197A (ja) | 油脂の脱水、精製法 | |
| HK1015819B (en) | Vegetable oil enzymatic degumming process by means of aspergillus phospholipase | |
| WO2020245806A1 (en) | Enzyme assisted chemical refining of vegetable oils | |
| RU98103681A (ru) | Ферментативный способ рафинирования растительных масел с помощью фосфолипазы из штамма aspergillus |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PD00 | Pending as of 2000-06-30 in czech republic | ||
| MM4A | Patent lapsed due to non-payment of fee |
Effective date: 20140704 |