HU217843B - Paratiroid hormon (PTH) rokon polipeptidek, eljárások ezek előállítására és az ezeket tartalmazó gyógyszerek osteoporosis kezelésére - Google Patents
Paratiroid hormon (PTH) rokon polipeptidek, eljárások ezek előállítására és az ezeket tartalmazó gyógyszerek osteoporosis kezelésére Download PDFInfo
- Publication number
- HU217843B HU217843B HU9500110A HU9500110A HU217843B HU 217843 B HU217843 B HU 217843B HU 9500110 A HU9500110 A HU 9500110A HU 9500110 A HU9500110 A HU 9500110A HU 217843 B HU217843 B HU 217843B
- Authority
- HU
- Hungary
- Prior art keywords
- leu
- xaa
- glu
- arg
- ser
- Prior art date
Links
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 title claims abstract description 165
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 title claims abstract description 96
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 title claims abstract description 88
- 108090000445 Parathyroid hormone Proteins 0.000 title claims abstract description 62
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 31
- 230000008569 process Effects 0.000 title claims abstract description 11
- 239000000199 parathyroid hormone Substances 0.000 title claims description 61
- 102000003982 Parathyroid hormone Human genes 0.000 title claims description 60
- 229960001319 parathyroid hormone Drugs 0.000 title claims description 55
- 208000001132 Osteoporosis Diseases 0.000 title claims description 19
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 title claims description 7
- 238000011282 treatment Methods 0.000 title abstract description 15
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims abstract description 331
- 108700020797 Parathyroid Hormone-Related Proteins 0.000 claims abstract description 68
- 102000043299 Parathyroid hormone-related Human genes 0.000 claims abstract description 45
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims abstract description 32
- 238000010532 solid phase synthesis reaction Methods 0.000 claims abstract description 7
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims abstract description 3
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 claims description 255
- QNBVTHNJGCOVFA-AVGNSLFASA-N Leu-Leu-Glu Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O QNBVTHNJGCOVFA-AVGNSLFASA-N 0.000 claims description 164
- LAFKUZYWNCHOHT-WHFBIAKZSA-N Ser-Glu Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O LAFKUZYWNCHOHT-WHFBIAKZSA-N 0.000 claims description 108
- UXJCMQFPDWCHKX-DCAQKATOSA-N Arg-Arg-Glu Chemical compound NC(N)=NCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O UXJCMQFPDWCHKX-DCAQKATOSA-N 0.000 claims description 94
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 86
- KYIIALJHAOIAHF-KKUMJFAQSA-N Leu-Leu-His Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CN=CN1 KYIIALJHAOIAHF-KKUMJFAQSA-N 0.000 claims description 80
- YBAFDPFAUTYYRW-UHFFFAOYSA-N N-L-alpha-glutamyl-L-leucine Natural products CC(C)CC(C(O)=O)NC(=O)C(N)CCC(O)=O YBAFDPFAUTYYRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 65
- AIRZWUMAHCDDHR-KKUMJFAQSA-N Lys-Leu-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O AIRZWUMAHCDDHR-KKUMJFAQSA-N 0.000 claims description 48
- 108010092854 aspartyllysine Proteins 0.000 claims description 44
- 101100342977 Neurospora crassa (strain ATCC 24698 / 74-OR23-1A / CBS 708.71 / DSM 1257 / FGSC 987) leu-1 gene Proteins 0.000 claims description 42
- 229920005989 resin Polymers 0.000 claims description 40
- 239000011347 resin Substances 0.000 claims description 40
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 claims description 39
- LBOVBQONZJRWPV-YUMQZZPRSA-N Asp-Lys-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)NCC(O)=O LBOVBQONZJRWPV-YUMQZZPRSA-N 0.000 claims description 36
- 108010015792 glycyllysine Proteins 0.000 claims description 35
- BXLYSRPHVMCOPS-ACZMJKKPSA-N Ser-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CO BXLYSRPHVMCOPS-ACZMJKKPSA-N 0.000 claims description 31
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 30
- OHZIZVWQXJPBJS-IXOXFDKPSA-N Leu-His-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O OHZIZVWQXJPBJS-IXOXFDKPSA-N 0.000 claims description 29
- JOSAKOKSPXROGQ-BJDJZHNGSA-N Lys-Ser-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O JOSAKOKSPXROGQ-BJDJZHNGSA-N 0.000 claims description 26
- VIKZGAUAKQZDOF-NRPADANISA-N Val-Ser-Glu Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O VIKZGAUAKQZDOF-NRPADANISA-N 0.000 claims description 26
- MWMJCGBSIORNCD-AVGNSLFASA-N Glu-Leu-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O MWMJCGBSIORNCD-AVGNSLFASA-N 0.000 claims description 24
- 206010029897 Obsessive thoughts Diseases 0.000 claims description 21
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 claims description 18
- HQIZDMIGUJOSNI-IUCAKERBSA-N Arg-Gly-Arg Chemical compound N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O HQIZDMIGUJOSNI-IUCAKERBSA-N 0.000 claims description 17
- ILWHFUZZCFYSKT-AVGNSLFASA-N Glu-Lys-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O ILWHFUZZCFYSKT-AVGNSLFASA-N 0.000 claims description 17
- 108010050848 glycylleucine Proteins 0.000 claims description 15
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 claims description 14
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 claims description 13
- 108010025306 histidylleucine Proteins 0.000 claims description 11
- NTBOEZICHOSJEE-YUMQZZPRSA-N Gly-Lys-Ser Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O NTBOEZICHOSJEE-YUMQZZPRSA-N 0.000 claims description 10
- UICKAKRRRBTILH-GUBZILKMSA-N Ser-Glu-His Chemical compound C1=C(NC=N1)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)N UICKAKRRRBTILH-GUBZILKMSA-N 0.000 claims description 9
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 9
- XPSGESXVBSQZPL-SRVKXCTJSA-N Arg-Arg-Arg Chemical compound NC(N)=NCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(O)=O XPSGESXVBSQZPL-SRVKXCTJSA-N 0.000 claims description 8
- APFJUBGRZGMQFF-QWRGUYRKSA-N Leu-Gly-Lys Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN APFJUBGRZGMQFF-QWRGUYRKSA-N 0.000 claims description 8
- XWOBNBRUDDUEEY-UWVGGRQHSA-N Leu-His Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CNC=N1 XWOBNBRUDDUEEY-UWVGGRQHSA-N 0.000 claims description 8
- BAONJAHBAUDJKA-BZSNNMDCSA-N Phe-Tyr-Asp Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 BAONJAHBAUDJKA-BZSNNMDCSA-N 0.000 claims description 8
- XZKQVQKUZMAADP-IMJSIDKUSA-N Ser-Ser Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O XZKQVQKUZMAADP-IMJSIDKUSA-N 0.000 claims description 8
- CEXFELBFVHLYDZ-XGEHTFHBSA-N Thr-Arg-Ser Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O CEXFELBFVHLYDZ-XGEHTFHBSA-N 0.000 claims description 8
- KKCUFHUTMKQQCF-SRVKXCTJSA-N Glu-Arg-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O KKCUFHUTMKQQCF-SRVKXCTJSA-N 0.000 claims description 7
- UPOJUWHGMDJUQZ-IUCAKERBSA-N Gly-Arg-Arg Chemical compound NC(=N)NCCC[C@H](NC(=O)CN)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O UPOJUWHGMDJUQZ-IUCAKERBSA-N 0.000 claims description 7
- IUKIDFVOUHZRAK-QWRGUYRKSA-N Gly-Lys-His Chemical compound NCCCC[C@H](NC(=O)CN)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CN=CN1 IUKIDFVOUHZRAK-QWRGUYRKSA-N 0.000 claims description 7
- JWTKVPMQCCRPQY-SRVKXCTJSA-N His-Asn-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O JWTKVPMQCCRPQY-SRVKXCTJSA-N 0.000 claims description 7
- ATIPDCIQTUXABX-UWVGGRQHSA-N Lys-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCCCN ATIPDCIQTUXABX-UWVGGRQHSA-N 0.000 claims description 7
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims description 7
- 108010013835 arginine glutamate Proteins 0.000 claims description 7
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 claims description 6
- FYRVDDJMNISIKJ-UWVGGRQHSA-N Asn-Tyr Chemical compound NC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 FYRVDDJMNISIKJ-UWVGGRQHSA-N 0.000 claims description 6
- 125000006297 carbonyl amino group Chemical group [H]N([*:2])C([*:1])=O 0.000 claims description 6
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims description 5
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 claims description 5
- 150000003951 lactams Chemical class 0.000 claims description 5
- YBAFDPFAUTYYRW-YUMQZZPRSA-N Glu-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O YBAFDPFAUTYYRW-YUMQZZPRSA-N 0.000 claims description 4
- DSFYPIUSAMSERP-IHRRRGAJSA-N Leu-Leu-Arg Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N DSFYPIUSAMSERP-IHRRRGAJSA-N 0.000 claims description 4
- RXGLHDWAZQECBI-SRVKXCTJSA-N Leu-Leu-Ser Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O RXGLHDWAZQECBI-SRVKXCTJSA-N 0.000 claims description 4
- VMLONWHIORGALA-SRVKXCTJSA-N Ser-Leu-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C([O-])=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H]([NH3+])CO VMLONWHIORGALA-SRVKXCTJSA-N 0.000 claims description 4
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 4
- 150000002596 lactones Chemical class 0.000 claims description 4
- JPZXHKDZASGCLU-LBPRGKRZSA-N β-(2-naphthyl)-alanine Chemical compound C1=CC=CC2=CC(C[C@H](N)C(O)=O)=CC=C21 JPZXHKDZASGCLU-LBPRGKRZSA-N 0.000 claims description 4
- UISQLSIBJKEJSS-GUBZILKMSA-N Arg-Arg-Ser Chemical compound NC(N)=NCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O UISQLSIBJKEJSS-GUBZILKMSA-N 0.000 claims description 3
- DYFJZDDQPNIPAB-NHCYSSNCSA-N Glu-Arg-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O DYFJZDDQPNIPAB-NHCYSSNCSA-N 0.000 claims description 3
- FSXRLASFHBWESK-HOTGVXAUSA-N Phe-Tyr Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 FSXRLASFHBWESK-HOTGVXAUSA-N 0.000 claims description 3
- FSXRLASFHBWESK-UHFFFAOYSA-N dipeptide phenylalanyl-tyrosine Natural products C=1C=C(O)C=CC=1CC(C(O)=O)NC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 FSXRLASFHBWESK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 3
- MHXKHKWHPNETGG-QWRGUYRKSA-N Gly-Lys-Leu Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O MHXKHKWHPNETGG-QWRGUYRKSA-N 0.000 claims description 2
- WSDOHRLQDGAOGU-BQBZGAKWSA-N His-Asn Chemical compound NC(=O)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 WSDOHRLQDGAOGU-BQBZGAKWSA-N 0.000 claims description 2
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 claims description 2
- AYFVRYXNDHBECD-YUMQZZPRSA-N Asp-Leu-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(O)=O AYFVRYXNDHBECD-YUMQZZPRSA-N 0.000 claims 1
- ITYRYNUZHPNCIK-GUBZILKMSA-N Glu-Ala-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O ITYRYNUZHPNCIK-GUBZILKMSA-N 0.000 claims 1
- NIKBMHGRNAPJFW-IUCAKERBSA-N His-Arg Chemical compound NC(N)=NCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 NIKBMHGRNAPJFW-IUCAKERBSA-N 0.000 claims 1
- 101000604197 Homo sapiens Neuronatin Proteins 0.000 claims 1
- WUGMRIBZSVSJNP-UHFFFAOYSA-N N-L-alanyl-L-tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(NC(=O)C(N)C)C(O)=O)=CNC2=C1 WUGMRIBZSVSJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 102100038816 Neuronatin Human genes 0.000 claims 1
- NFDYGNFETJVMSE-BQBZGAKWSA-N Ser-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CO NFDYGNFETJVMSE-BQBZGAKWSA-N 0.000 claims 1
- 230000001050 lubricating effect Effects 0.000 claims 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 abstract description 7
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 abstract description 7
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 abstract description 4
- 238000010188 recombinant method Methods 0.000 abstract description 2
- 101150071808 PTHLH gene Proteins 0.000 abstract 2
- 102100036893 Parathyroid hormone Human genes 0.000 abstract 2
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 abstract 1
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 254
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 234
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 197
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 167
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 description 144
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 description 123
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 121
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 121
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 116
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 75
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Chemical compound CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 63
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 57
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 55
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 55
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 43
- NKKFVJRLCCUJNA-QWRGUYRKSA-N Lys-Gly-Lys Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN NKKFVJRLCCUJNA-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 41
- QJPWUUJVYOJNMH-VKHMYHEASA-N L-homoserine lactone Chemical class N[C@H]1CCOC1=O QJPWUUJVYOJNMH-VKHMYHEASA-N 0.000 description 38
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 38
- YWYQSLOTVIRCFE-SRVKXCTJSA-N Leu-His-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O YWYQSLOTVIRCFE-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 38
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 37
- -1 glycol methyl ether radical Chemical class 0.000 description 37
- LRQKBLKVPFOOQJ-YFKPBYRVSA-N L-norleucine Chemical compound CCCC[C@H]([NH3+])C([O-])=O LRQKBLKVPFOOQJ-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 32
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 27
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 24
- UKAUYVFTDYCKQA-UHFFFAOYSA-N -2-Amino-4-hydroxybutanoic acid Natural products OC(=O)C(N)CCO UKAUYVFTDYCKQA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 21
- REWSWYIDQIELBE-FXQIFTODSA-N Ala-Val-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O REWSWYIDQIELBE-FXQIFTODSA-N 0.000 description 20
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 20
- UKAUYVFTDYCKQA-VKHMYHEASA-N L-homoserine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCO UKAUYVFTDYCKQA-VKHMYHEASA-N 0.000 description 19
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 18
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 17
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 17
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 17
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical group CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 14
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 12
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 12
- NKBQZKVMKJJDLX-SRVKXCTJSA-N Arg-Glu-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O NKBQZKVMKJJDLX-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 11
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 11
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 11
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 11
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 11
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 10
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 10
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 10
- 206010065687 Bone loss Diseases 0.000 description 9
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-Cysteine Chemical compound SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 description 9
- 235000011389 fruit/vegetable juice Nutrition 0.000 description 9
- 238000003752 polymerase chain reaction Methods 0.000 description 9
- 101100285688 Caenorhabditis elegans hrg-7 gene Proteins 0.000 description 8
- NTYJJOPFIAHURM-UHFFFAOYSA-N Histamine Chemical compound NCCC1=CN=CN1 NTYJJOPFIAHURM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- HQUXQAMSWFIRET-AVGNSLFASA-N Leu-Glu-Lys Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN HQUXQAMSWFIRET-AVGNSLFASA-N 0.000 description 8
- BTNXKBVLWJBTNR-SRVKXCTJSA-N Leu-His-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O BTNXKBVLWJBTNR-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 8
- JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N N,N-Diisopropylethylamine (DIPEA) Chemical compound CCN(C(C)C)C(C)C JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 8
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 8
- RDOXTESZEPMUJZ-UHFFFAOYSA-N anisole Chemical compound COC1=CC=CC=C1 RDOXTESZEPMUJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 8
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 description 8
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 8
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N methanoic acid Natural products OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 8
- OGBMKVWORPGQRR-UMXFMPSGSA-N teriparatide Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](CCSC)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)CO)C(C)C)[C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC=1N=CNC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=1N=CNC=1)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(O)=O)C1=CNC=N1 OGBMKVWORPGQRR-UMXFMPSGSA-N 0.000 description 8
- SCQIQCWLOMOEFP-DCAQKATOSA-N Asp-Leu-Arg Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(O)=O SCQIQCWLOMOEFP-DCAQKATOSA-N 0.000 description 7
- QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N Dicylcohexylcarbodiimide Chemical compound C1CCCCC1N=C=NC1CCCCC1 QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 7
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 description 7
- 210000002997 osteoclast Anatomy 0.000 description 7
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 7
- 239000000047 product Substances 0.000 description 7
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 7
- ZOWOHMFPXMYFKJ-WBTWNKCNSA-N (4S)-4-[[(2S)-2-[[(2S,3S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-5-amino-2-[[(2S,3S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-6-amino-2-[[2-[[(2S)-6-amino-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-5-amino-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-aminopropanoyl]amino]-3-methylbutanoyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]-4-carboxybutanoyl]amino]-3-(1H-imidazol-5-yl)propanoyl]amino]-5-oxopentanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]-3-(1H-imidazol-5-yl)propanoyl]amino]-3-carboxypropanoyl]amino]hexanoyl]amino]acetyl]amino]hexanoyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]-3-methylpentanoyl]amino]-5-oxopentanoyl]amino]-3-carboxypropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]-5-carbamimidamidopentanoyl]amino]-5-carbamimidamidopentanoyl]amino]-5-carbamimidamidopentanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]-3-(1H-imidazol-5-yl)propanoyl]amino]-3-(1H-imidazol-5-yl)propanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]-3-methylpentanoyl]amino]propanoyl]amino]-5-[[(2S,3S)-1-[[(2S)-1-[[(2S,3R)-1-[[(1S)-1-carboxyethyl]amino]-3-hydroxy-1-oxobutan-2-yl]amino]-3-(1H-imidazol-5-yl)-1-oxopropan-2-yl]amino]-3-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-5-oxopentanoic acid Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC=1NC=NC=1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC=1NC=NC=1)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC=1NC=NC=1)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC=1NC=NC=1)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C)N)C(C)C)[C@@H](C)CC)C1=CN=CN1 ZOWOHMFPXMYFKJ-WBTWNKCNSA-N 0.000 description 6
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 6
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N Piperidine Chemical compound C1CCNCC1 NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- BMKNXTJLHFIAAH-CIUDSAMLSA-N Ser-Ser-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O BMKNXTJLHFIAAH-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 6
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 6
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 description 6
- 238000013270 controlled release Methods 0.000 description 6
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 6
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 6
- 125000001360 methionine group Chemical group N[C@@H](CCSC)C(=O)* 0.000 description 6
- 210000000963 osteoblast Anatomy 0.000 description 6
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- NABSCJGZKWSNHX-RCWTZXSCSA-N Arg-Arg-Thr Chemical compound NC(N)=NCCC[C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@H](O)C)C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N NABSCJGZKWSNHX-RCWTZXSCSA-N 0.000 description 5
- 208000006386 Bone Resorption Diseases 0.000 description 5
- KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-N Fluorane Chemical compound F KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N L-arginine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 5
- RVVBWTWPNFDYBE-SRVKXCTJSA-N Leu-Glu-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O RVVBWTWPNFDYBE-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 5
- LESXFEZIFXFIQR-LURJTMIESA-N Leu-Gly Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)NCC(O)=O LESXFEZIFXFIQR-LURJTMIESA-N 0.000 description 5
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 5
- BRGQQXQKPUCUJQ-KBIXCLLPSA-N Ser-Glu-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O BRGQQXQKPUCUJQ-KBIXCLLPSA-N 0.000 description 5
- 230000009102 absorption Effects 0.000 description 5
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 5
- 108010068380 arginylarginine Proteins 0.000 description 5
- 230000024279 bone resorption Effects 0.000 description 5
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 5
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 description 5
- 230000001054 cortical effect Effects 0.000 description 5
- 238000010511 deprotection reaction Methods 0.000 description 5
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 5
- 229910000040 hydrogen fluoride Inorganic materials 0.000 description 5
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 5
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 5
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 5
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 5
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 5
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 5
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 125000003088 (fluoren-9-ylmethoxy)carbonyl group Chemical group 0.000 description 4
- ASOKPJOREAFHNY-UHFFFAOYSA-N 1-Hydroxybenzotriazole Chemical compound C1=CC=C2N(O)N=NC2=C1 ASOKPJOREAFHNY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 4-(3-methoxyphenyl)aniline Chemical compound COC1=CC=CC(C=2C=CC(N)=CC=2)=C1 OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- WMEVEPXNCMKNGH-IHRRRGAJSA-N Arg-Leu-His Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CN=CN1)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N WMEVEPXNCMKNGH-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 4
- URAUIUGLHBRPMF-NAKRPEOUSA-N Arg-Ser-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O URAUIUGLHBRPMF-NAKRPEOUSA-N 0.000 description 4
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 4
- WIDVAWAQBRAKTI-YUMQZZPRSA-N Asn-Leu-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(O)=O WIDVAWAQBRAKTI-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 4
- AXXCUABIFZPKPM-BQBZGAKWSA-N Asp-Arg-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(O)=O AXXCUABIFZPKPM-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 4
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 4
- MPZWMIIOPAPAKE-BQBZGAKWSA-N Glu-Arg Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCNC(N)=N MPZWMIIOPAPAKE-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 4
- GWCRIHNSVMOBEQ-BQBZGAKWSA-N Gly-Arg-Ser Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O GWCRIHNSVMOBEQ-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 4
- 241000546112 Infectious salmon anemia virus Species 0.000 description 4
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 4
- NFNVDJGXRFEYTK-YUMQZZPRSA-N Leu-Glu Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O NFNVDJGXRFEYTK-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 4
- 108700005078 Synthetic Genes Proteins 0.000 description 4
- TWLMXDWFVNEFFK-FJXKBIBVSA-N Thr-Arg-Gly Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(O)=O TWLMXDWFVNEFFK-FJXKBIBVSA-N 0.000 description 4
- 235000011054 acetic acid Nutrition 0.000 description 4
- 229960000583 acetic acid Drugs 0.000 description 4
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 4
- 229960003767 alanine Drugs 0.000 description 4
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 4
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 235000009697 arginine Nutrition 0.000 description 4
- 125000004057 biotinyl group Chemical group [H]N1C(=O)N([H])[C@]2([H])[C@@]([H])(SC([H])([H])[C@]12[H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 4
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 4
- 230000037176 bone building Effects 0.000 description 4
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 4
- 229940125904 compound 1 Drugs 0.000 description 4
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 4
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 4
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 4
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 4
- ATDGTVJJHBUTRL-UHFFFAOYSA-N cyanogen bromide Chemical compound BrC#N ATDGTVJJHBUTRL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 description 4
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 4
- 229960001340 histamine Drugs 0.000 description 4
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 description 4
- AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N isoleucine Natural products CCC(C)C(N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 4
- UZKWTJUDCOPSNM-UHFFFAOYSA-N methoxybenzene Substances CCCCOC=C UZKWTJUDCOPSNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 4
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 4
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 4
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 4
- 238000004007 reversed phase HPLC Methods 0.000 description 4
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 4
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 4
- FMKGJQHNYMWDFJ-CVEARBPZSA-N 2-[[4-(2,2-difluoropropoxy)pyrimidin-5-yl]methylamino]-4-[[(1R,4S)-4-hydroxy-3,3-dimethylcyclohexyl]amino]pyrimidine-5-carbonitrile Chemical compound FC(COC1=NC=NC=C1CNC1=NC=C(C(=N1)N[C@H]1CC([C@H](CC1)O)(C)C)C#N)(C)F FMKGJQHNYMWDFJ-CVEARBPZSA-N 0.000 description 3
- WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N Acetic anhydride Chemical compound CC(=O)OC(C)=O WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 3
- 206010017076 Fracture Diseases 0.000 description 3
- LLEUXCDZPQOJMY-AAEUAGOBSA-N Glu-Trp Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)N)C(O)=O)=CNC2=C1 LLEUXCDZPQOJMY-AAEUAGOBSA-N 0.000 description 3
- AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-N Glycolic acid Chemical compound OCC(O)=O AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 description 3
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 3
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 3
- HGNRJCINZYHNOU-LURJTMIESA-N Lys-Gly Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)NCC(O)=O HGNRJCINZYHNOU-LURJTMIESA-N 0.000 description 3
- OWRUUFUVXFREBD-KKUMJFAQSA-N Lys-His-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O OWRUUFUVXFREBD-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 3
- QKXZCUCBFPEXNK-KKUMJFAQSA-N Lys-Leu-His Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CN=CN1 QKXZCUCBFPEXNK-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 3
- 208000029725 Metabolic bone disease Diseases 0.000 description 3
- PXHVJJICTQNCMI-UHFFFAOYSA-N Nickel Chemical compound [Ni] PXHVJJICTQNCMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 3
- MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N Oxalic acid Chemical compound OC(=O)C(O)=O MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- METZZBCMDXHFMK-BZSNNMDCSA-N Phe-Leu-His Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CN=CN1)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC2=CC=CC=C2)N METZZBCMDXHFMK-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 3
- MCIXMYKSPQUMJG-SRVKXCTJSA-N Phe-Ser-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O MCIXMYKSPQUMJG-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 3
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 3
- 235000014680 Saccharomyces cerevisiae Nutrition 0.000 description 3
- 108010049264 Teriparatide Proteins 0.000 description 3
- QOLYAJSZHIJCTO-VQVTYTSYSA-N Thr-Pro Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(O)=O QOLYAJSZHIJCTO-VQVTYTSYSA-N 0.000 description 3
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- AIISTODACBDQLW-WDSOQIARSA-N Trp-Leu-Arg Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(O)=O)=CNC2=C1 AIISTODACBDQLW-WDSOQIARSA-N 0.000 description 3
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N [3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-hydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methyl [5-(6-aminopurin-9-yl)-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] hydrogen phosphate Polymers Cc1cn(C2CC(OP(O)(=O)OCC3OC(CC3OP(O)(=O)OCC3OC(CC3O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)C(COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3CO)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)O2)c(=O)[nH]c1=O JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000011543 agarose gel Substances 0.000 description 3
- 108010050025 alpha-glutamyltryptophan Proteins 0.000 description 3
- 238000007098 aminolysis reaction Methods 0.000 description 3
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 3
- TVFDJXOCXUVLDH-UHFFFAOYSA-N caesium atom Chemical compound [Cs] TVFDJXOCXUVLDH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000005277 cation exchange chromatography Methods 0.000 description 3
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 3
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 3
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229940127113 compound 57 Drugs 0.000 description 3
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N hydroxybenzotriazole Substances O=C1C=CC=C2NNN=C12 NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000007943 implant Substances 0.000 description 3
- 108010057821 leucylproline Proteins 0.000 description 3
- 108010064235 lysylglycine Proteins 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 3
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 3
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 3
- 230000011164 ossification Effects 0.000 description 3
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 3
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 3
- 108091008146 restriction endonucleases Proteins 0.000 description 3
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 3
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 3
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 210000000689 upper leg Anatomy 0.000 description 3
- WEAYSODFUHQOTI-VKHMYHEASA-N (2s)-2-amino-4-hydroxybutanamide Chemical compound NC(=O)[C@@H](N)CCO WEAYSODFUHQOTI-VKHMYHEASA-N 0.000 description 2
- IWZSHWBGHQBIML-ZGGLMWTQSA-N (3S,8S,10R,13S,14S,17S)-17-isoquinolin-7-yl-N,N,10,13-tetramethyl-2,3,4,7,8,9,11,12,14,15,16,17-dodecahydro-1H-cyclopenta[a]phenanthren-3-amine Chemical compound CN(C)[C@H]1CC[C@]2(C)C3CC[C@@]4(C)[C@@H](CC[C@@H]4c4ccc5ccncc5c4)[C@@H]3CC=C2C1 IWZSHWBGHQBIML-ZGGLMWTQSA-N 0.000 description 2
- UDQTXCHQKHIQMH-KYGLGHNPSA-N (3ar,5s,6s,7r,7ar)-5-(difluoromethyl)-2-(ethylamino)-5,6,7,7a-tetrahydro-3ah-pyrano[3,2-d][1,3]thiazole-6,7-diol Chemical compound S1C(NCC)=N[C@H]2[C@@H]1O[C@H](C(F)F)[C@@H](O)[C@@H]2O UDQTXCHQKHIQMH-KYGLGHNPSA-N 0.000 description 2
- OMBVEVHRIQULKW-DNQXCXABSA-M (3r,5r)-7-[3-(4-fluorophenyl)-8-oxo-7-phenyl-1-propan-2-yl-5,6-dihydro-4h-pyrrolo[2,3-c]azepin-2-yl]-3,5-dihydroxyheptanoate Chemical compound O=C1C=2N(C(C)C)C(CC[C@@H](O)C[C@@H](O)CC([O-])=O)=C(C=3C=CC(F)=CC=3)C=2CCCN1C1=CC=CC=C1 OMBVEVHRIQULKW-DNQXCXABSA-M 0.000 description 2
- PLVPPLCLBIEYEA-WAYWQWQTSA-N (z)-3-(1h-indol-3-yl)prop-2-enoic acid Chemical compound C1=CC=C2C(\C=C/C(=O)O)=CNC2=C1 PLVPPLCLBIEYEA-WAYWQWQTSA-N 0.000 description 2
- CHRJZRDFSQHIFI-UHFFFAOYSA-N 1,2-bis(ethenyl)benzene;styrene Chemical class C=CC1=CC=CC=C1.C=CC1=CC=CC=C1C=C CHRJZRDFSQHIFI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KBPLFHHGFOOTCA-UHFFFAOYSA-N 1-Octanol Chemical compound CCCCCCCCO KBPLFHHGFOOTCA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- TVTJUIAKQFIXCE-HUKYDQBMSA-N 2-amino-9-[(2R,3S,4S,5R)-4-fluoro-3-hydroxy-5-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]-7-prop-2-ynyl-1H-purine-6,8-dione Chemical compound NC=1NC(C=2N(C(N(C=2N=1)[C@@H]1O[C@@H]([C@H]([C@H]1O)F)CO)=O)CC#C)=O TVTJUIAKQFIXCE-HUKYDQBMSA-N 0.000 description 2
- 125000006282 2-chlorobenzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C(Cl)=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])* 0.000 description 2
- 125000001622 2-naphthyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C2C([H])=C(*)C([H])=C([H])C2=C1[H] 0.000 description 2
- 206010001928 Amenorrhoea Diseases 0.000 description 2
- OMLWNBVRVJYMBQ-YUMQZZPRSA-N Arg-Arg Chemical compound NC(N)=NCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(O)=O OMLWNBVRVJYMBQ-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 2
- XEPSCVXTCUUHDT-AVGNSLFASA-N Arg-Arg-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N XEPSCVXTCUUHDT-AVGNSLFASA-N 0.000 description 2
- AIFHRTPABBBHKU-RCWTZXSCSA-N Arg-Thr-Arg Chemical compound NC(N)=NCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@H](O)C)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(O)=O AIFHRTPABBBHKU-RCWTZXSCSA-N 0.000 description 2
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 2
- OMSMPWHEGLNQOD-UWVGGRQHSA-N Asn-Phe Chemical compound NC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 OMSMPWHEGLNQOD-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 2
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000001433 C-terminal amino-acid group Chemical group 0.000 description 2
- RGHNJXZEOKUKBD-SQOUGZDYSA-N D-gluconic acid Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O RGHNJXZEOKUKBD-SQOUGZDYSA-N 0.000 description 2
- 241001131785 Escherichia coli HB101 Species 0.000 description 2
- IAYPIBMASNFSPL-UHFFFAOYSA-N Ethylene oxide Chemical group C1CO1 IAYPIBMASNFSPL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N Fumaric acid Chemical compound OC(=O)\C=C\C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N 0.000 description 2
- SNFUTDLOCQQRQD-ZKWXMUAHSA-N Glu-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O SNFUTDLOCQQRQD-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 2
- QIQABBIDHGQXGA-ZPFDUUQYSA-N Glu-Ile-Arg Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(O)=O QIQABBIDHGQXGA-ZPFDUUQYSA-N 0.000 description 2
- BBBXWRGITSUJPB-YUMQZZPRSA-N Glu-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O BBBXWRGITSUJPB-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 2
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 2
- 108010010369 HIV Protease Proteins 0.000 description 2
- 229910004373 HOAc Inorganic materials 0.000 description 2
- BDHUXUFYNUOUIT-SRVKXCTJSA-N His-Asp-Lys Chemical compound C1=C(NC=N1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)N BDHUXUFYNUOUIT-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 2
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- CQQGCWPXDHTTNF-GUBZILKMSA-N Leu-Ala-Glu Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O CQQGCWPXDHTTNF-GUBZILKMSA-N 0.000 description 2
- NTRAGDHVSGKUSF-AVGNSLFASA-N Leu-Arg-Arg Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(O)=O NTRAGDHVSGKUSF-AVGNSLFASA-N 0.000 description 2
- LXKNSJLSGPNHSK-KKUMJFAQSA-N Leu-Leu-Lys Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)N LXKNSJLSGPNHSK-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 2
- VTJUNIYRYIAIHF-IUCAKERBSA-N Leu-Pro Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(O)=O VTJUNIYRYIAIHF-IUCAKERBSA-N 0.000 description 2
- DKTNGXVSCZULPO-YUMQZZPRSA-N Lys-Gly-Cys Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CS)C(O)=O DKTNGXVSCZULPO-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 2
- NNKLKUUGESXCBS-KBPBESRZSA-N Lys-Gly-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O NNKLKUUGESXCBS-KBPBESRZSA-N 0.000 description 2
- 125000001429 N-terminal alpha-amino-acid group Chemical group 0.000 description 2
- 206010049088 Osteopenia Diseases 0.000 description 2
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N Propanedioic acid Natural products OC(=O)CC(O)=O OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 2
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 2
- 238000005377 adsorption chromatography Methods 0.000 description 2
- 150000003973 alkyl amines Chemical class 0.000 description 2
- KOSRFJWDECSPRO-UHFFFAOYSA-N alpha-L-glutamyl-L-glutamic acid Natural products OC(=O)CCC(N)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(O)=O KOSRFJWDECSPRO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 2
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 2
- AVKUERGKIZMTKX-NJBDSQKTSA-N ampicillin Chemical compound C1([C@@H](N)C(=O)N[C@H]2[C@H]3SC([C@@H](N3C2=O)C(O)=O)(C)C)=CC=CC=C1 AVKUERGKIZMTKX-NJBDSQKTSA-N 0.000 description 2
- 229960000723 ampicillin Drugs 0.000 description 2
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 description 2
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 description 2
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 2
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 2
- 125000001797 benzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])* 0.000 description 2
- 125000001584 benzyloxycarbonyl group Chemical group C(=O)(OCC1=CC=CC=C1)* 0.000 description 2
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 2
- 230000008416 bone turnover Effects 0.000 description 2
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 2
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 2
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 2
- 229940125810 compound 20 Drugs 0.000 description 2
- 229940125851 compound 27 Drugs 0.000 description 2
- 229940126214 compound 3 Drugs 0.000 description 2
- 229940126540 compound 41 Drugs 0.000 description 2
- 229940125936 compound 42 Drugs 0.000 description 2
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 2
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KXGVEGMKQFWNSR-UHFFFAOYSA-N deoxycholic acid Natural products C1CC2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(CCC(O)=O)C)C1(C)C(O)C2 KXGVEGMKQFWNSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 2
- 125000002147 dimethylamino group Chemical group [H]C([H])([H])N(*)C([H])([H])[H] 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 238000012377 drug delivery Methods 0.000 description 2
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 2
- 230000006870 function Effects 0.000 description 2
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 2
- 238000001502 gel electrophoresis Methods 0.000 description 2
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010055341 glutamyl-glutamic acid Proteins 0.000 description 2
- JAXFJECJQZDFJS-XHEPKHHKSA-N gtpl8555 Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)N[C@H](B1O[C@@]2(C)[C@H]3C[C@H](C3(C)C)C[C@H]2O1)CCC1=CC=C(F)C=C1 JAXFJECJQZDFJS-XHEPKHHKSA-N 0.000 description 2
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 2
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 2
- PLVPPLCLBIEYEA-UHFFFAOYSA-N indoleacrylic acid Natural products C1=CC=C2C(C=CC(=O)O)=CNC2=C1 PLVPPLCLBIEYEA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 2
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 2
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 2
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 2
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 2
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010009298 lysylglutamic acid Proteins 0.000 description 2
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 2
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 2
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 2
- 125000000956 methoxy group Chemical group [H]C([H])([H])O* 0.000 description 2
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 2
- 238000010369 molecular cloning Methods 0.000 description 2
- 239000007923 nasal drop Substances 0.000 description 2
- 229940100662 nasal drops Drugs 0.000 description 2
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 2
- 238000009806 oophorectomy Methods 0.000 description 2
- 238000004810 partition chromatography Methods 0.000 description 2
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 2
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 description 2
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 2
- 238000002953 preparative HPLC Methods 0.000 description 2
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 2
- 230000002685 pulmonary effect Effects 0.000 description 2
- 230000011514 reflex Effects 0.000 description 2
- 238000007127 saponification reaction Methods 0.000 description 2
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 2
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 2
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 2
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 2
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 2
- 230000002459 sustained effect Effects 0.000 description 2
- 101150075675 tatC gene Proteins 0.000 description 2
- WROMPOXWARCANT-UHFFFAOYSA-N tfa trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F.OC(=O)C(F)(F)F WROMPOXWARCANT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000002088 tosyl group Chemical group [H]C1=C([H])C(=C([H])C([H])=C1C([H])([H])[H])S(*)(=O)=O 0.000 description 2
- VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N trans-butenedioic acid Natural products OC(=O)C=CC(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 2
- ASGMFNBUXDJWJJ-JLCFBVMHSA-N (1R,3R)-3-[[3-bromo-1-[4-(5-methyl-1,3,4-thiadiazol-2-yl)phenyl]pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-6-yl]amino]-N,1-dimethylcyclopentane-1-carboxamide Chemical compound BrC1=NN(C2=NC(=NC=C21)N[C@H]1C[C@@](CC1)(C(=O)NC)C)C1=CC=C(C=C1)C=1SC(=NN=1)C ASGMFNBUXDJWJJ-JLCFBVMHSA-N 0.000 description 1
- UAOUIVVJBYDFKD-XKCDOFEDSA-N (1R,9R,10S,11R,12R,15S,18S,21R)-10,11,21-trihydroxy-8,8-dimethyl-14-methylidene-4-(prop-2-enylamino)-20-oxa-5-thia-3-azahexacyclo[9.7.2.112,15.01,9.02,6.012,18]henicosa-2(6),3-dien-13-one Chemical compound C([C@@H]1[C@@H](O)[C@@]23C(C1=C)=O)C[C@H]2[C@]12C(N=C(NCC=C)S4)=C4CC(C)(C)[C@H]1[C@H](O)[C@]3(O)OC2 UAOUIVVJBYDFKD-XKCDOFEDSA-N 0.000 description 1
- ABJSOROVZZKJGI-OCYUSGCXSA-N (1r,2r,4r)-2-(4-bromophenyl)-n-[(4-chlorophenyl)-(2-fluoropyridin-4-yl)methyl]-4-morpholin-4-ylcyclohexane-1-carboxamide Chemical compound C1=NC(F)=CC(C(NC(=O)[C@H]2[C@@H](C[C@@H](CC2)N2CCOCC2)C=2C=CC(Br)=CC=2)C=2C=CC(Cl)=CC=2)=C1 ABJSOROVZZKJGI-OCYUSGCXSA-N 0.000 description 1
- SZUVGFMDDVSKSI-WIFOCOSTSA-N (1s,2s,3s,5r)-1-(carboxymethyl)-3,5-bis[(4-phenoxyphenyl)methyl-propylcarbamoyl]cyclopentane-1,2-dicarboxylic acid Chemical compound O=C([C@@H]1[C@@H]([C@](CC(O)=O)([C@H](C(=O)N(CCC)CC=2C=CC(OC=3C=CC=CC=3)=CC=2)C1)C(O)=O)C(O)=O)N(CCC)CC(C=C1)=CC=C1OC1=CC=CC=C1 SZUVGFMDDVSKSI-WIFOCOSTSA-N 0.000 description 1
- GHYOCDFICYLMRF-UTIIJYGPSA-N (2S,3R)-N-[(2S)-3-(cyclopenten-1-yl)-1-[(2R)-2-methyloxiran-2-yl]-1-oxopropan-2-yl]-3-hydroxy-3-(4-methoxyphenyl)-2-[[(2S)-2-[(2-morpholin-4-ylacetyl)amino]propanoyl]amino]propanamide Chemical compound C1(=CCCC1)C[C@@H](C(=O)[C@@]1(OC1)C)NC([C@H]([C@@H](C1=CC=C(C=C1)OC)O)NC([C@H](C)NC(CN1CCOCC1)=O)=O)=O GHYOCDFICYLMRF-UTIIJYGPSA-N 0.000 description 1
- GCTFTMWXZFLTRR-GFCCVEGCSA-N (2r)-2-amino-n-[3-(difluoromethoxy)-4-(1,3-oxazol-5-yl)phenyl]-4-methylpentanamide Chemical compound FC(F)OC1=CC(NC(=O)[C@H](N)CC(C)C)=CC=C1C1=CN=CO1 GCTFTMWXZFLTRR-GFCCVEGCSA-N 0.000 description 1
- IUSARDYWEPUTPN-OZBXUNDUSA-N (2r)-n-[(2s,3r)-4-[[(4s)-6-(2,2-dimethylpropyl)spiro[3,4-dihydropyrano[2,3-b]pyridine-2,1'-cyclobutane]-4-yl]amino]-3-hydroxy-1-[3-(1,3-thiazol-2-yl)phenyl]butan-2-yl]-2-methoxypropanamide Chemical group C([C@H](NC(=O)[C@@H](C)OC)[C@H](O)CN[C@@H]1C2=CC(CC(C)(C)C)=CN=C2OC2(CCC2)C1)C(C=1)=CC=CC=1C1=NC=CS1 IUSARDYWEPUTPN-OZBXUNDUSA-N 0.000 description 1
- YJLIKUSWRSEPSM-WGQQHEPDSA-N (2r,3r,4s,5r)-2-[6-amino-8-[(4-phenylphenyl)methylamino]purin-9-yl]-5-(hydroxymethyl)oxolane-3,4-diol Chemical compound C=1C=C(C=2C=CC=CC=2)C=CC=1CNC1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H]1O YJLIKUSWRSEPSM-WGQQHEPDSA-N 0.000 description 1
- WWTBZEKOSBFBEM-SPWPXUSOSA-N (2s)-2-[[2-benzyl-3-[hydroxy-[(1r)-2-phenyl-1-(phenylmethoxycarbonylamino)ethyl]phosphoryl]propanoyl]amino]-3-(1h-indol-3-yl)propanoic acid Chemical compound N([C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)O)C(=O)C(CP(O)(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)OCC=1C=CC=CC=1)CC1=CC=CC=C1 WWTBZEKOSBFBEM-SPWPXUSOSA-N 0.000 description 1
- STBLNCCBQMHSRC-BATDWUPUSA-N (2s)-n-[(3s,4s)-5-acetyl-7-cyano-4-methyl-1-[(2-methylnaphthalen-1-yl)methyl]-2-oxo-3,4-dihydro-1,5-benzodiazepin-3-yl]-2-(methylamino)propanamide Chemical compound O=C1[C@@H](NC(=O)[C@H](C)NC)[C@H](C)N(C(C)=O)C2=CC(C#N)=CC=C2N1CC1=C(C)C=CC2=CC=CC=C12 STBLNCCBQMHSRC-BATDWUPUSA-N 0.000 description 1
- QFLWZFQWSBQYPS-AWRAUJHKSA-N (3S)-3-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[5-[(3aS,6aR)-2-oxo-1,3,3a,4,6,6a-hexahydrothieno[3,4-d]imidazol-4-yl]pentanoylamino]-3-methylbutanoyl]amino]-3-(4-hydroxyphenyl)propanoyl]amino]-4-[1-bis(4-chlorophenoxy)phosphorylbutylamino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound CCCC(NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](Cc1ccc(O)cc1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CCCCC1SC[C@@H]2NC(=O)N[C@H]12)C(C)C)P(=O)(Oc1ccc(Cl)cc1)Oc1ccc(Cl)cc1 QFLWZFQWSBQYPS-AWRAUJHKSA-N 0.000 description 1
- BHQCQFFYRZLCQQ-UHFFFAOYSA-N (3alpha,5alpha,7alpha,12alpha)-3,7,12-trihydroxy-cholan-24-oic acid Natural products OC1CC2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(CCC(O)=O)C)C1(C)C(O)C2 BHQCQFFYRZLCQQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OOKAZRDERJMRCJ-KOUAFAAESA-N (3r)-7-[(1s,2s,4ar,6s,8s)-2,6-dimethyl-8-[(2s)-2-methylbutanoyl]oxy-1,2,4a,5,6,7,8,8a-octahydronaphthalen-1-yl]-3-hydroxy-5-oxoheptanoic acid Chemical compound C1=C[C@H](C)[C@H](CCC(=O)C[C@@H](O)CC(O)=O)C2[C@@H](OC(=O)[C@@H](C)CC)C[C@@H](C)C[C@@H]21 OOKAZRDERJMRCJ-KOUAFAAESA-N 0.000 description 1
- HUWSZNZAROKDRZ-RRLWZMAJSA-N (3r,4r)-3-azaniumyl-5-[[(2s,3r)-1-[(2s)-2,3-dicarboxypyrrolidin-1-yl]-3-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-5-oxo-4-sulfanylpentane-1-sulfonate Chemical compound OS(=O)(=O)CC[C@@H](N)[C@@H](S)C(=O)N[C@@H]([C@H](C)CC)C(=O)N1CCC(C(O)=O)[C@H]1C(O)=O HUWSZNZAROKDRZ-RRLWZMAJSA-N 0.000 description 1
- MPDDTAJMJCESGV-CTUHWIOQSA-M (3r,5r)-7-[2-(4-fluorophenyl)-5-[methyl-[(1r)-1-phenylethyl]carbamoyl]-4-propan-2-ylpyrazol-3-yl]-3,5-dihydroxyheptanoate Chemical compound C1([C@@H](C)N(C)C(=O)C2=NN(C(CC[C@@H](O)C[C@@H](O)CC([O-])=O)=C2C(C)C)C=2C=CC(F)=CC=2)=CC=CC=C1 MPDDTAJMJCESGV-CTUHWIOQSA-M 0.000 description 1
- UHPQFNXOFFPHJW-UHFFFAOYSA-N (4-methylphenyl)-phenylmethanamine Chemical compound C1=CC(C)=CC=C1C(N)C1=CC=CC=C1 UHPQFNXOFFPHJW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YQOLEILXOBUDMU-KRWDZBQOSA-N (4R)-5-[(6-bromo-3-methyl-2-pyrrolidin-1-ylquinoline-4-carbonyl)amino]-4-(2-chlorophenyl)pentanoic acid Chemical compound CC1=C(C2=C(C=CC(=C2)Br)N=C1N3CCCC3)C(=O)NC[C@H](CCC(=O)O)C4=CC=CC=C4Cl YQOLEILXOBUDMU-KRWDZBQOSA-N 0.000 description 1
- BJEPYKJPYRNKOW-REOHCLBHSA-N (S)-malic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](O)CC(O)=O BJEPYKJPYRNKOW-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- DEVSOMFAQLZNKR-RJRFIUFISA-N (z)-3-[3-[3,5-bis(trifluoromethyl)phenyl]-1,2,4-triazol-1-yl]-n'-pyrazin-2-ylprop-2-enehydrazide Chemical compound FC(F)(F)C1=CC(C(F)(F)F)=CC(C2=NN(\C=C/C(=O)NNC=3N=CC=NC=3)C=N2)=C1 DEVSOMFAQLZNKR-RJRFIUFISA-N 0.000 description 1
- BDNKZNFMNDZQMI-UHFFFAOYSA-N 1,3-diisopropylcarbodiimide Chemical compound CC(C)N=C=NC(C)C BDNKZNFMNDZQMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KKHFRAFPESRGGD-UHFFFAOYSA-N 1,3-dimethyl-7-[3-(n-methylanilino)propyl]purine-2,6-dione Chemical compound C1=NC=2N(C)C(=O)N(C)C(=O)C=2N1CCCN(C)C1=CC=CC=C1 KKHFRAFPESRGGD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KQZLRWGGWXJPOS-NLFPWZOASA-N 1-[(1R)-1-(2,4-dichlorophenyl)ethyl]-6-[(4S,5R)-4-[(2S)-2-(hydroxymethyl)pyrrolidin-1-yl]-5-methylcyclohexen-1-yl]pyrazolo[3,4-b]pyrazine-3-carbonitrile Chemical compound ClC1=C(C=CC(=C1)Cl)[C@@H](C)N1N=C(C=2C1=NC(=CN=2)C1=CC[C@@H]([C@@H](C1)C)N1[C@@H](CCC1)CO)C#N KQZLRWGGWXJPOS-NLFPWZOASA-N 0.000 description 1
- WZZBNLYBHUDSHF-DHLKQENFSA-N 1-[(3s,4s)-4-[8-(2-chloro-4-pyrimidin-2-yloxyphenyl)-7-fluoro-2-methylimidazo[4,5-c]quinolin-1-yl]-3-fluoropiperidin-1-yl]-2-hydroxyethanone Chemical compound CC1=NC2=CN=C3C=C(F)C(C=4C(=CC(OC=5N=CC=CN=5)=CC=4)Cl)=CC3=C2N1[C@H]1CCN(C(=O)CO)C[C@@H]1F WZZBNLYBHUDSHF-DHLKQENFSA-N 0.000 description 1
- ONBQEOIKXPHGMB-VBSBHUPXSA-N 1-[2-[(2s,3r,4s,5r)-3,4-dihydroxy-5-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]oxy-4,6-dihydroxyphenyl]-3-(4-hydroxyphenyl)propan-1-one Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1=CC(O)=CC(O)=C1C(=O)CCC1=CC=C(O)C=C1 ONBQEOIKXPHGMB-VBSBHUPXSA-N 0.000 description 1
- UNILWMWFPHPYOR-KXEYIPSPSA-M 1-[6-[2-[3-[3-[3-[2-[2-[3-[[2-[2-[[(2r)-1-[[2-[[(2r)-1-[3-[2-[2-[3-[[2-(2-amino-2-oxoethoxy)acetyl]amino]propoxy]ethoxy]ethoxy]propylamino]-3-hydroxy-1-oxopropan-2-yl]amino]-2-oxoethyl]amino]-3-[(2r)-2,3-di(hexadecanoyloxy)propyl]sulfanyl-1-oxopropan-2-yl Chemical compound O=C1C(SCCC(=O)NCCCOCCOCCOCCCNC(=O)COCC(=O)N[C@@H](CSC[C@@H](COC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC)C(=O)NCC(=O)N[C@H](CO)C(=O)NCCCOCCOCCOCCCNC(=O)COCC(N)=O)CC(=O)N1CCNC(=O)CCCCCN\1C2=CC=C(S([O-])(=O)=O)C=C2CC/1=C/C=C/C=C/C1=[N+](CC)C2=CC=C(S([O-])(=O)=O)C=C2C1 UNILWMWFPHPYOR-KXEYIPSPSA-M 0.000 description 1
- QXOGPTXQGKQSJT-UHFFFAOYSA-N 1-amino-4-[4-(3,4-dimethylphenyl)sulfanylanilino]-9,10-dioxoanthracene-2-sulfonic acid Chemical compound Cc1ccc(Sc2ccc(Nc3cc(c(N)c4C(=O)c5ccccc5C(=O)c34)S(O)(=O)=O)cc2)cc1C QXOGPTXQGKQSJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SNDUAWDCUKVWFQ-UHFFFAOYSA-N 1-bis(2,2,2-trifluoroacetyl)boranyl-2,2,2-trifluoroethanone Chemical compound FC(F)(F)C(=O)B(C(=O)C(F)(F)F)C(=O)C(F)(F)F SNDUAWDCUKVWFQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WGFNXGPBPIJYLI-UHFFFAOYSA-N 2,6-difluoro-3-[(3-fluorophenyl)sulfonylamino]-n-(3-methoxy-1h-pyrazolo[3,4-b]pyridin-5-yl)benzamide Chemical compound C1=C2C(OC)=NNC2=NC=C1NC(=O)C(C=1F)=C(F)C=CC=1NS(=O)(=O)C1=CC=CC(F)=C1 WGFNXGPBPIJYLI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FQMZXMVHHKXGTM-UHFFFAOYSA-N 2-(1-adamantyl)-n-[2-[2-(2-hydroxyethylamino)ethylamino]quinolin-5-yl]acetamide Chemical compound C1C(C2)CC(C3)CC2CC13CC(=O)NC1=CC=CC2=NC(NCCNCCO)=CC=C21 FQMZXMVHHKXGTM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VCUXVXLUOHDHKK-UHFFFAOYSA-N 2-(2-aminopyrimidin-4-yl)-4-(2-chloro-4-methoxyphenyl)-1,3-thiazole-5-carboxamide Chemical compound ClC1=CC(OC)=CC=C1C1=C(C(N)=O)SC(C=2N=C(N)N=CC=2)=N1 VCUXVXLUOHDHKK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PYRKKGOKRMZEIT-UHFFFAOYSA-N 2-[6-(2-cyclopropylethoxy)-9-(2-hydroxy-2-methylpropyl)-1h-phenanthro[9,10-d]imidazol-2-yl]-5-fluorobenzene-1,3-dicarbonitrile Chemical compound C1=C2C3=CC(CC(C)(O)C)=CC=C3C=3NC(C=4C(=CC(F)=CC=4C#N)C#N)=NC=3C2=CC=C1OCCC1CC1 PYRKKGOKRMZEIT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VVCMGAUPZIKYTH-VGHSCWAPSA-N 2-acetyloxybenzoic acid;[(2s,3r)-4-(dimethylamino)-3-methyl-1,2-diphenylbutan-2-yl] propanoate;1,3,7-trimethylpurine-2,6-dione Chemical compound CC(=O)OC1=CC=CC=C1C(O)=O.CN1C(=O)N(C)C(=O)C2=C1N=CN2C.C([C@](OC(=O)CC)([C@H](C)CN(C)C)C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 VVCMGAUPZIKYTH-VGHSCWAPSA-N 0.000 description 1
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YSUIQYOGTINQIN-UZFYAQMZSA-N 2-amino-9-[(1S,6R,8R,9S,10R,15R,17R,18R)-8-(6-aminopurin-9-yl)-9,18-difluoro-3,12-dihydroxy-3,12-bis(sulfanylidene)-2,4,7,11,13,16-hexaoxa-3lambda5,12lambda5-diphosphatricyclo[13.2.1.06,10]octadecan-17-yl]-1H-purin-6-one Chemical compound NC1=NC2=C(N=CN2[C@@H]2O[C@@H]3COP(S)(=O)O[C@@H]4[C@@H](COP(S)(=O)O[C@@H]2[C@@H]3F)O[C@H]([C@H]4F)N2C=NC3=C2N=CN=C3N)C(=O)N1 YSUIQYOGTINQIN-UZFYAQMZSA-N 0.000 description 1
- 125000000022 2-aminoethyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])N([H])[H] 0.000 description 1
- HBAHZZVIEFRTEY-UHFFFAOYSA-N 2-heptylcyclohex-2-en-1-one Chemical compound CCCCCCCC1=CCCCC1=O HBAHZZVIEFRTEY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LFOIDLOIBZFWDO-UHFFFAOYSA-N 2-methoxy-6-[6-methoxy-4-[(3-phenylmethoxyphenyl)methoxy]-1-benzofuran-2-yl]imidazo[2,1-b][1,3,4]thiadiazole Chemical compound N1=C2SC(OC)=NN2C=C1C(OC1=CC(OC)=C2)=CC1=C2OCC(C=1)=CC=CC=1OCC1=CC=CC=C1 LFOIDLOIBZFWDO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KWPQTFXULUUCGD-UHFFFAOYSA-N 3,4,5,7,8,9,10,10a-octahydropyrido[1,2-a][1,4]diazepine Chemical compound C1CCN=CC2CCCCN21 KWPQTFXULUUCGD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OHXPGWPVLFPUSM-KLRNGDHRSA-N 3,7,12-trioxo-5beta-cholanic acid Chemical compound C1CC(=O)C[C@H]2CC(=O)[C@H]3[C@@H]4CC[C@H]([C@@H](CCC(O)=O)C)[C@@]4(C)C(=O)C[C@@H]3[C@]21C OHXPGWPVLFPUSM-KLRNGDHRSA-N 0.000 description 1
- QBWKPGNFQQJGFY-QLFBSQMISA-N 3-[(1r)-1-[(2r,6s)-2,6-dimethylmorpholin-4-yl]ethyl]-n-[6-methyl-3-(1h-pyrazol-4-yl)imidazo[1,2-a]pyrazin-8-yl]-1,2-thiazol-5-amine Chemical compound N1([C@H](C)C2=NSC(NC=3C4=NC=C(N4C=C(C)N=3)C3=CNN=C3)=C2)C[C@H](C)O[C@H](C)C1 QBWKPGNFQQJGFY-QLFBSQMISA-N 0.000 description 1
- BMYNFMYTOJXKLE-UHFFFAOYSA-N 3-azaniumyl-2-hydroxypropanoate Chemical compound NCC(O)C(O)=O BMYNFMYTOJXKLE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OWSRLHPWDZOHCR-UHFFFAOYSA-N 4,4-diaminobutanoic acid Chemical compound NC(N)CCC(O)=O OWSRLHPWDZOHCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WYFCZWSWFGJODV-MIANJLSGSA-N 4-[[(1s)-2-[(e)-3-[3-chloro-2-fluoro-6-(tetrazol-1-yl)phenyl]prop-2-enoyl]-5-(4-methyl-2-oxopiperazin-1-yl)-3,4-dihydro-1h-isoquinoline-1-carbonyl]amino]benzoic acid Chemical compound O=C1CN(C)CCN1C1=CC=CC2=C1CCN(C(=O)\C=C\C=1C(=CC=C(Cl)C=1F)N1N=NN=C1)[C@@H]2C(=O)NC1=CC=C(C(O)=O)C=C1 WYFCZWSWFGJODV-MIANJLSGSA-N 0.000 description 1
- XFJBGINZIMNZBW-CRAIPNDOSA-N 5-chloro-2-[4-[(1r,2s)-2-[2-(5-methylsulfonylpyridin-2-yl)oxyethyl]cyclopropyl]piperidin-1-yl]pyrimidine Chemical compound N1=CC(S(=O)(=O)C)=CC=C1OCC[C@H]1[C@@H](C2CCN(CC2)C=2N=CC(Cl)=CN=2)C1 XFJBGINZIMNZBW-CRAIPNDOSA-N 0.000 description 1
- RSIWALKZYXPAGW-NSHDSACASA-N 6-(3-fluorophenyl)-3-methyl-7-[(1s)-1-(7h-purin-6-ylamino)ethyl]-[1,3]thiazolo[3,2-a]pyrimidin-5-one Chemical compound C=1([C@@H](NC=2C=3N=CNC=3N=CN=2)C)N=C2SC=C(C)N2C(=O)C=1C1=CC=CC(F)=C1 RSIWALKZYXPAGW-NSHDSACASA-N 0.000 description 1
- GGNHBHYDMUDXQB-KBIXCLLPSA-N Ala-Glu-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C)N GGNHBHYDMUDXQB-KBIXCLLPSA-N 0.000 description 1
- 208000007848 Alcoholism Diseases 0.000 description 1
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O Ammonium Chemical compound [NH4+] QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- 208000000103 Anorexia Nervosa Diseases 0.000 description 1
- XUUXCWCKKCZEAW-YFKPBYRVSA-N Arg-Gly Chemical compound OC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N XUUXCWCKKCZEAW-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- KMFPQTITXUKJOV-DCAQKATOSA-N Arg-Ser-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O KMFPQTITXUKJOV-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- NYGILGUOUOXGMJ-YUMQZZPRSA-N Asn-Lys-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)NCC(O)=O NYGILGUOUOXGMJ-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- SONUFGRSSMFHFN-IMJSIDKUSA-N Asn-Ser Chemical compound NC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O SONUFGRSSMFHFN-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 1
- CJUKAWUWBZCTDQ-SRVKXCTJSA-N Asp-Leu-Lys Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O CJUKAWUWBZCTDQ-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- OAMLVOVXNKILLQ-BQBZGAKWSA-N Asp-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O OAMLVOVXNKILLQ-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 102100021277 Beta-secretase 2 Human genes 0.000 description 1
- 101710150190 Beta-secretase 2 Proteins 0.000 description 1
- 229940122361 Bisphosphonate Drugs 0.000 description 1
- 208000010392 Bone Fractures Diseases 0.000 description 1
- JQUCWIWWWKZNCS-LESHARBVSA-N C(C1=CC=CC=C1)(=O)NC=1SC[C@H]2[C@@](N1)(CO[C@H](C2)C)C=2SC=C(N2)NC(=O)C2=NC=C(C=C2)OC(F)F Chemical compound C(C1=CC=CC=C1)(=O)NC=1SC[C@H]2[C@@](N1)(CO[C@H](C2)C)C=2SC=C(N2)NC(=O)C2=NC=C(C=C2)OC(F)F JQUCWIWWWKZNCS-LESHARBVSA-N 0.000 description 1
- ISMDILRWKSYCOD-GNKBHMEESA-N C(C1=CC=CC=C1)[C@@H]1NC(OCCCCCCCCCCCNC([C@@H](NC(C[C@@H]1O)=O)C(C)C)=O)=O Chemical compound C(C1=CC=CC=C1)[C@@H]1NC(OCCCCCCCCCCCNC([C@@H](NC(C[C@@H]1O)=O)C(C)C)=O)=O ISMDILRWKSYCOD-GNKBHMEESA-N 0.000 description 1
- KCBAMQOKOLXLOX-BSZYMOERSA-N CC1=C(SC=N1)C2=CC=C(C=C2)[C@H](C)NC(=O)[C@@H]3C[C@H](CN3C(=O)[C@H](C(C)(C)C)NC(=O)CCCCCCCCCCNCCCONC(=O)C4=C(C(=C(C=C4)F)F)NC5=C(C=C(C=C5)I)F)O Chemical compound CC1=C(SC=N1)C2=CC=C(C=C2)[C@H](C)NC(=O)[C@@H]3C[C@H](CN3C(=O)[C@H](C(C)(C)C)NC(=O)CCCCCCCCCCNCCCONC(=O)C4=C(C(=C(C=C4)F)F)NC5=C(C=C(C=C5)I)F)O KCBAMQOKOLXLOX-BSZYMOERSA-N 0.000 description 1
- BQXUPNKLZNSUMC-YUQWMIPFSA-N CCN(CCCCCOCC(=O)N[C@H](C(=O)N1C[C@H](O)C[C@H]1C(=O)N[C@@H](C)c1ccc(cc1)-c1scnc1C)C(C)(C)C)CCOc1ccc(cc1)C(=O)c1c(sc2cc(O)ccc12)-c1ccc(O)cc1 Chemical compound CCN(CCCCCOCC(=O)N[C@H](C(=O)N1C[C@H](O)C[C@H]1C(=O)N[C@@H](C)c1ccc(cc1)-c1scnc1C)C(C)(C)C)CCOc1ccc(cc1)C(=O)c1c(sc2cc(O)ccc12)-c1ccc(O)cc1 BQXUPNKLZNSUMC-YUQWMIPFSA-N 0.000 description 1
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 1
- 229920002134 Carboxymethyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 239000004380 Cholic acid Substances 0.000 description 1
- 229940126639 Compound 33 Drugs 0.000 description 1
- 229940127007 Compound 39 Drugs 0.000 description 1
- RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N Copper Chemical compound [Cu] RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XFXPMWWXUTWYJX-UHFFFAOYSA-N Cyanide Chemical compound N#[C-] XFXPMWWXUTWYJX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RGHNJXZEOKUKBD-UHFFFAOYSA-N D-gluconic acid Natural products OCC(O)C(O)C(O)C(O)C(O)=O RGHNJXZEOKUKBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000004544 DNA amplification Effects 0.000 description 1
- 238000007400 DNA extraction Methods 0.000 description 1
- 238000001712 DNA sequencing Methods 0.000 description 1
- 101100031571 Danio rerio pth4 gene Proteins 0.000 description 1
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N Dextrotartaric acid Chemical compound OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000283086 Equidae Species 0.000 description 1
- 108090000371 Esterases Proteins 0.000 description 1
- KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-M Fluoride anion Chemical compound [F-] KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- HKTRDWYCAUTRRL-YUMQZZPRSA-N Glu-His Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CN=CN1 HKTRDWYCAUTRRL-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- IRXNJYPKBVERCW-DCAQKATOSA-N Glu-Leu-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O IRXNJYPKBVERCW-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- YGLCLCMAYUYZSG-AVGNSLFASA-N Glu-Lys-His Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CN=CN1 YGLCLCMAYUYZSG-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- HGJREIGJLUQBTJ-SZMVWBNQSA-N Glu-Trp-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O HGJREIGJLUQBTJ-SZMVWBNQSA-N 0.000 description 1
- JLXVRFDTDUGQEE-YFKPBYRVSA-N Gly-Arg Chemical compound NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N JLXVRFDTDUGQEE-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- OGCIHJPYKVSMTE-YUMQZZPRSA-N Gly-Arg-Glu Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O OGCIHJPYKVSMTE-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- IKAIKUBBJHFNBZ-LURJTMIESA-N Gly-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CN IKAIKUBBJHFNBZ-LURJTMIESA-N 0.000 description 1
- ZIMTWPHIKZEHSE-UWVGGRQHSA-N His-Arg-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(O)=O ZIMTWPHIKZEHSE-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 1
- LYSMQLXUCAKELQ-DCAQKATOSA-N His-Asp-Arg Chemical compound C1=C(NC=N1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)O)N LYSMQLXUCAKELQ-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- YAALVYQFVJNXIV-KKUMJFAQSA-N His-Leu-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 YAALVYQFVJNXIV-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- RNMNYMDTESKEAJ-KKUMJFAQSA-N His-Leu-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 RNMNYMDTESKEAJ-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- 101001135770 Homo sapiens Parathyroid hormone Proteins 0.000 description 1
- 101001135995 Homo sapiens Probable peptidyl-tRNA hydrolase Proteins 0.000 description 1
- 208000037147 Hypercalcaemia Diseases 0.000 description 1
- URWXDJAEEGBADB-TUBUOCAGSA-N Ile-His-Thr Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CN=CN1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)O)N URWXDJAEEGBADB-TUBUOCAGSA-N 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 150000008575 L-amino acids Chemical class 0.000 description 1
- SENJXOPIZNYLHU-UHFFFAOYSA-N L-leucyl-L-arginine Natural products CC(C)CC(N)C(=O)NC(C(O)=O)CCCN=C(N)N SENJXOPIZNYLHU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- SENJXOPIZNYLHU-IUCAKERBSA-N Leu-Arg Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N SENJXOPIZNYLHU-IUCAKERBSA-N 0.000 description 1
- YOZCKMXHBYKOMQ-IHRRRGAJSA-N Leu-Arg-Lys Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)N YOZCKMXHBYKOMQ-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- VZBIUJURDLFFOE-IHRRRGAJSA-N Leu-His-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O VZBIUJURDLFFOE-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- CSFVADKICPDRRF-KKUMJFAQSA-N Leu-His-Leu Chemical compound CC(C)C[C@H]([NH3+])C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C([O-])=O)CC1=CN=CN1 CSFVADKICPDRRF-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- WRLPVDVHNWSSCL-MELADBBJSA-N Leu-His-Pro Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CN=CN1)C(=O)N2CCC[C@@H]2C(=O)O)N WRLPVDVHNWSSCL-MELADBBJSA-N 0.000 description 1
- YOKVEHGYYQEQOP-QWRGUYRKSA-N Leu-Leu-Gly Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(O)=O YOKVEHGYYQEQOP-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- HVHRPWQEQHIQJF-AVGNSLFASA-N Leu-Lys-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O HVHRPWQEQHIQJF-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- BGZCJDGBBUUBHA-KKUMJFAQSA-N Leu-Lys-Leu Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O BGZCJDGBBUUBHA-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- BRTVHXHCUSXYRI-CIUDSAMLSA-N Leu-Ser-Ser Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O BRTVHXHCUSXYRI-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- ZDJQVSIPFLMNOX-RHYQMDGZSA-N Leu-Thr-Arg Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N ZDJQVSIPFLMNOX-RHYQMDGZSA-N 0.000 description 1
- WVJNGSFKBKOKRV-AJNGGQMLSA-N Lys-Leu-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O WVJNGSFKBKOKRV-AJNGGQMLSA-N 0.000 description 1
- HVAUKHLDSDDROB-KKUMJFAQSA-N Lys-Lys-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O HVAUKHLDSDDROB-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- 101100177977 Magnaporthe oryzae (strain 70-15 / ATCC MYA-4617 / FGSC 8958) PTH3 gene Proteins 0.000 description 1
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000030136 Marchiafava-Bignami Disease Diseases 0.000 description 1
- 229920001367 Merrifield resin Polymers 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 229920000881 Modified starch Polymers 0.000 description 1
- NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N N-Hydroxysuccinimide Chemical compound ON1C(=O)CCC1=O NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SECXISVLQFMRJM-UHFFFAOYSA-N N-Methylpyrrolidone Chemical compound CN1CCCC1=O SECXISVLQFMRJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LVDRREOUMKACNJ-BKMJKUGQSA-N N-[(2R,3S)-2-(4-chlorophenyl)-1-(1,4-dimethyl-2-oxoquinolin-7-yl)-6-oxopiperidin-3-yl]-2-methylpropane-1-sulfonamide Chemical compound CC(C)CS(=O)(=O)N[C@H]1CCC(=O)N([C@@H]1c1ccc(Cl)cc1)c1ccc2c(C)cc(=O)n(C)c2c1 LVDRREOUMKACNJ-BKMJKUGQSA-N 0.000 description 1
- QOVYHDHLFPKQQG-NDEPHWFRSA-N N[C@@H](CCC(=O)N1CCC(CC1)NC1=C2C=CC=CC2=NC(NCC2=CN(CCCNCCCNC3CCCCC3)N=N2)=N1)C(O)=O Chemical compound N[C@@H](CCC(=O)N1CCC(CC1)NC1=C2C=CC=CC2=NC(NCC2=CN(CCCNCCCNC3CCCCC3)N=N2)=N1)C(O)=O QOVYHDHLFPKQQG-NDEPHWFRSA-N 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 101100205189 Neurospora crassa (strain ATCC 24698 / 74-OR23-1A / CBS 708.71 / DSM 1257 / FGSC 987) leu-5 gene Proteins 0.000 description 1
- GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N Nitric acid Chemical compound O[N+]([O-])=O GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010067482 No adverse event Diseases 0.000 description 1
- 238000012408 PCR amplification Methods 0.000 description 1
- 238000010222 PCR analysis Methods 0.000 description 1
- 229920002230 Pectic acid Polymers 0.000 description 1
- KDYPMIZMXDECSU-JYJNAYRXSA-N Phe-Leu-Glu Chemical compound OC(=O)CC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 KDYPMIZMXDECSU-JYJNAYRXSA-N 0.000 description 1
- AXIOGMQCDYVTNY-ACRUOGEOSA-N Phe-Phe-Leu Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 AXIOGMQCDYVTNY-ACRUOGEOSA-N 0.000 description 1
- RZKYEQDPDZUERB-UHFFFAOYSA-N Pindone Chemical group C1=CC=C2C(=O)C(C(=O)C(C)(C)C)C(=O)C2=C1 RZKYEQDPDZUERB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010020346 Polyglutamic Acid Chemical class 0.000 description 1
- 102000003946 Prolactin Human genes 0.000 description 1
- 108010057464 Prolactin Proteins 0.000 description 1
- 108020005091 Replication Origin Proteins 0.000 description 1
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 description 1
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 description 1
- 238000012300 Sequence Analysis Methods 0.000 description 1
- SMIDBHKWSYUBRZ-ACZMJKKPSA-N Ser-Glu-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O SMIDBHKWSYUBRZ-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- JGUWRQWULDWNCM-FXQIFTODSA-N Ser-Val-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O JGUWRQWULDWNCM-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000692 Student's t-test Methods 0.000 description 1
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N Succinic acid Natural products OC(=O)CCC(O)=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010006785 Taq Polymerase Proteins 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N Tartaric acid Natural products [H+].[H+].[O-]C(=O)C(O)C(O)C([O-])=O FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WBWWGRHZICKQGZ-UHFFFAOYSA-N Taurocholic acid Natural products OC1CC2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(CCC(=O)NCCS(O)(=O)=O)C)C1(C)C(O)C2 WBWWGRHZICKQGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VPZKQTYZIVOJDV-LMVFSUKVSA-N Thr-Ala Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O VPZKQTYZIVOJDV-LMVFSUKVSA-N 0.000 description 1
- HYLXOQURIOCKIH-VQVTYTSYSA-N Thr-Arg Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCNC(N)=N HYLXOQURIOCKIH-VQVTYTSYSA-N 0.000 description 1
- WCRFXRIWBFRZBR-GGVZMXCHSA-N Thr-Tyr Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 WCRFXRIWBFRZBR-GGVZMXCHSA-N 0.000 description 1
- STTYIMSDIYISRG-UHFFFAOYSA-N Valyl-Serine Chemical compound CC(C)C(N)C(=O)NC(CO)C(O)=O STTYIMSDIYISRG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002441 X-ray diffraction Methods 0.000 description 1
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LJOOWESTVASNOG-UFJKPHDISA-N [(1s,3r,4ar,7s,8s,8as)-3-hydroxy-8-[2-[(4r)-4-hydroxy-6-oxooxan-2-yl]ethyl]-7-methyl-1,2,3,4,4a,7,8,8a-octahydronaphthalen-1-yl] (2s)-2-methylbutanoate Chemical compound C([C@H]1[C@@H](C)C=C[C@H]2C[C@@H](O)C[C@@H]([C@H]12)OC(=O)[C@@H](C)CC)CC1C[C@@H](O)CC(=O)O1 LJOOWESTVASNOG-UFJKPHDISA-N 0.000 description 1
- SPXSEZMVRJLHQG-XMMPIXPASA-N [(2R)-1-[[4-[(3-phenylmethoxyphenoxy)methyl]phenyl]methyl]pyrrolidin-2-yl]methanol Chemical compound C(C1=CC=CC=C1)OC=1C=C(OCC2=CC=C(CN3[C@H](CCC3)CO)C=C2)C=CC=1 SPXSEZMVRJLHQG-XMMPIXPASA-N 0.000 description 1
- LNUFLCYMSVYYNW-ZPJMAFJPSA-N [(2r,3r,4s,5r,6r)-2-[(2r,3r,4s,5r,6r)-6-[(2r,3r,4s,5r,6r)-6-[(2r,3r,4s,5r,6r)-6-[[(3s,5s,8r,9s,10s,13r,14s,17r)-10,13-dimethyl-17-[(2r)-6-methylheptan-2-yl]-2,3,4,5,6,7,8,9,11,12,14,15,16,17-tetradecahydro-1h-cyclopenta[a]phenanthren-3-yl]oxy]-4,5-disulfo Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](COS(O)(=O)=O)O[C@@H]([C@@H]([C@H]1OS(O)(=O)=O)OS(O)(=O)=O)O[C@@H]1[C@@H](COS(O)(=O)=O)O[C@@H]([C@@H]([C@H]1OS(O)(=O)=O)OS(O)(=O)=O)O[C@@H]1[C@@H](COS(O)(=O)=O)O[C@H]([C@@H]([C@H]1OS(O)(=O)=O)OS(O)(=O)=O)O[C@@H]1C[C@@H]2CC[C@H]3[C@@H]4CC[C@@H]([C@]4(CC[C@@H]3[C@@]2(C)CC1)C)[C@H](C)CCCC(C)C)[C@H]1O[C@H](COS(O)(=O)=O)[C@@H](OS(O)(=O)=O)[C@H](OS(O)(=O)=O)[C@H]1OS(O)(=O)=O LNUFLCYMSVYYNW-ZPJMAFJPSA-N 0.000 description 1
- PSLUFJFHTBIXMW-WYEYVKMPSA-N [(3r,4ar,5s,6s,6as,10s,10ar,10bs)-3-ethenyl-10,10b-dihydroxy-3,4a,7,7,10a-pentamethyl-1-oxo-6-(2-pyridin-2-ylethylcarbamoyloxy)-5,6,6a,8,9,10-hexahydro-2h-benzo[f]chromen-5-yl] acetate Chemical compound O([C@@H]1[C@@H]([C@]2(O[C@](C)(CC(=O)[C@]2(O)[C@@]2(C)[C@@H](O)CCC(C)(C)[C@@H]21)C=C)C)OC(=O)C)C(=O)NCCC1=CC=CC=N1 PSLUFJFHTBIXMW-WYEYVKMPSA-N 0.000 description 1
- SMNRFWMNPDABKZ-WVALLCKVSA-N [[(2R,3S,4R,5S)-5-(2,6-dioxo-3H-pyridin-3-yl)-3,4-dihydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl] [[[(2R,3S,4S,5R,6R)-4-fluoro-3,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxy-hydroxyphosphoryl]oxy-hydroxyphosphoryl] hydrogen phosphate Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](OP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(=O)OC[C@H]2O[C@H]([C@H](O)[C@@H]2O)C2C=CC(=O)NC2=O)[C@H](O)[C@@H](F)[C@@H]1O SMNRFWMNPDABKZ-WVALLCKVSA-N 0.000 description 1
- 125000002777 acetyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 230000010933 acylation Effects 0.000 description 1
- 238000005917 acylation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000003044 adaptive effect Effects 0.000 description 1
- 238000005273 aeration Methods 0.000 description 1
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 1
- 201000007930 alcohol dependence Diseases 0.000 description 1
- 239000000783 alginic acid Chemical class 0.000 description 1
- 229920000615 alginic acid Chemical class 0.000 description 1
- 235000010443 alginic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229960001126 alginic acid Drugs 0.000 description 1
- 150000004781 alginic acids Chemical class 0.000 description 1
- 125000001931 aliphatic group Chemical group 0.000 description 1
- BJEPYKJPYRNKOW-UHFFFAOYSA-N alpha-hydroxysuccinic acid Natural products OC(=O)C(O)CC(O)=O BJEPYKJPYRNKOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052782 aluminium Inorganic materials 0.000 description 1
- XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N aluminium Chemical compound [Al] XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000012197 amplification kit Methods 0.000 description 1
- 150000008064 anhydrides Chemical class 0.000 description 1
- 239000003957 anion exchange resin Substances 0.000 description 1
- 230000000692 anti-sense effect Effects 0.000 description 1
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 108010080488 arginyl-arginyl-leucine Proteins 0.000 description 1
- 108010062796 arginyllysine Proteins 0.000 description 1
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 description 1
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 description 1
- XRWSZZJLZRKHHD-WVWIJVSJSA-N asunaprevir Chemical compound O=C([C@@H]1C[C@H](CN1C(=O)[C@@H](NC(=O)OC(C)(C)C)C(C)(C)C)OC1=NC=C(C2=CC=C(Cl)C=C21)OC)N[C@]1(C(=O)NS(=O)(=O)C2CC2)C[C@H]1C=C XRWSZZJLZRKHHD-WVWIJVSJSA-N 0.000 description 1
- 229910052788 barium Inorganic materials 0.000 description 1
- DSAJWYNOEDNPEQ-UHFFFAOYSA-N barium atom Chemical compound [Ba] DSAJWYNOEDNPEQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002146 bilateral effect Effects 0.000 description 1
- 239000003833 bile salt Substances 0.000 description 1
- 229940093761 bile salts Drugs 0.000 description 1
- 230000008827 biological function Effects 0.000 description 1
- 229910052797 bismuth Inorganic materials 0.000 description 1
- JCXGWMGPZLAOME-UHFFFAOYSA-N bismuth atom Chemical compound [Bi] JCXGWMGPZLAOME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000004663 bisphosphonates Chemical class 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 238000006664 bond formation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000010072 bone remodeling Effects 0.000 description 1
- 108700027323 bovine parathyroid hormone Proteins 0.000 description 1
- 108700003690 bovine parathyroid hormone (1-34) Proteins 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- KDYFGRWQOYBRFD-NUQCWPJISA-N butanedioic acid Chemical compound O[14C](=O)CC[14C](O)=O KDYFGRWQOYBRFD-NUQCWPJISA-N 0.000 description 1
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 1
- 230000001275 ca(2+)-mobilization Effects 0.000 description 1
- WLZRMCYVCSSEQC-UHFFFAOYSA-N cadmium(2+) Chemical compound [Cd+2] WLZRMCYVCSSEQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052792 caesium Inorganic materials 0.000 description 1
- GMRQFYUYWCNGIN-NKMMMXOESA-N calcitriol Chemical compound C1(/[C@@H]2CC[C@@H]([C@]2(CCC1)C)[C@@H](CCCC(C)(C)O)C)=C\C=C1\C[C@@H](O)C[C@H](O)C1=C GMRQFYUYWCNGIN-NKMMMXOESA-N 0.000 description 1
- 229960005084 calcitriol Drugs 0.000 description 1
- 235000020964 calcitriol Nutrition 0.000 description 1
- 239000011612 calcitriol Substances 0.000 description 1
- CJZGTCYPCWQAJB-UHFFFAOYSA-L calcium stearate Chemical compound [Ca+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O CJZGTCYPCWQAJB-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 235000013539 calcium stearate Nutrition 0.000 description 1
- 239000008116 calcium stearate Substances 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 150000001718 carbodiimides Chemical class 0.000 description 1
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 1
- 239000001768 carboxy methyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010948 carboxy methyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 239000008112 carboxymethyl-cellulose Substances 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 description 1
- 230000024245 cell differentiation Effects 0.000 description 1
- 239000013592 cell lysate Substances 0.000 description 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 1
- 229920001429 chelating resin Polymers 0.000 description 1
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 1
- BHQCQFFYRZLCQQ-OELDTZBJSA-N cholic acid Chemical compound C([C@H]1C[C@H]2O)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(O)=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 BHQCQFFYRZLCQQ-OELDTZBJSA-N 0.000 description 1
- 235000019416 cholic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229960002471 cholic acid Drugs 0.000 description 1
- 238000011210 chromatographic step Methods 0.000 description 1
- 238000002983 circular dichroism Methods 0.000 description 1
- 235000015165 citric acid Nutrition 0.000 description 1
- 229920006026 co-polymeric resin Polymers 0.000 description 1
- 229910017052 cobalt Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010941 cobalt Substances 0.000 description 1
- GUTLYIVDDKVIGB-UHFFFAOYSA-N cobalt atom Chemical compound [Co] GUTLYIVDDKVIGB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000002131 composite material Substances 0.000 description 1
- 229940125773 compound 10 Drugs 0.000 description 1
- 229940125797 compound 12 Drugs 0.000 description 1
- 229940126543 compound 14 Drugs 0.000 description 1
- 229940126142 compound 16 Drugs 0.000 description 1
- 229940125782 compound 2 Drugs 0.000 description 1
- 229940126208 compound 22 Drugs 0.000 description 1
- 229940125833 compound 23 Drugs 0.000 description 1
- 229940125961 compound 24 Drugs 0.000 description 1
- 229940125846 compound 25 Drugs 0.000 description 1
- 229940127204 compound 29 Drugs 0.000 description 1
- 229940125877 compound 31 Drugs 0.000 description 1
- 229940125878 compound 36 Drugs 0.000 description 1
- 229940125807 compound 37 Drugs 0.000 description 1
- 229940127573 compound 38 Drugs 0.000 description 1
- 229940125844 compound 46 Drugs 0.000 description 1
- 229940127271 compound 49 Drugs 0.000 description 1
- 229940125898 compound 5 Drugs 0.000 description 1
- 229940126545 compound 53 Drugs 0.000 description 1
- 229940125900 compound 59 Drugs 0.000 description 1
- 238000009833 condensation Methods 0.000 description 1
- 230000005494 condensation Effects 0.000 description 1
- 239000000599 controlled substance Substances 0.000 description 1
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010949 copper Substances 0.000 description 1
- 239000003246 corticosteroid Substances 0.000 description 1
- 229960001334 corticosteroids Drugs 0.000 description 1
- 239000007822 coupling agent Substances 0.000 description 1
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 1
- 125000000113 cyclohexyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])C1([H])[H] 0.000 description 1
- 125000001511 cyclopentyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C1([H])[H] 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 229960002997 dehydrocholic acid Drugs 0.000 description 1
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 1
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 1
- 229960003964 deoxycholic acid Drugs 0.000 description 1
- KXGVEGMKQFWNSR-LLQZFEROSA-N deoxycholic acid Chemical compound C([C@H]1CC2)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(O)=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 KXGVEGMKQFWNSR-LLQZFEROSA-N 0.000 description 1
- 239000007933 dermal patch Substances 0.000 description 1
- 238000013461 design Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 150000004985 diamines Chemical class 0.000 description 1
- ZZVUWRFHKOJYTH-UHFFFAOYSA-N diphenhydramine Chemical group C=1C=CC=CC=1C(OCCN(C)C)C1=CC=CC=C1 ZZVUWRFHKOJYTH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MGHPNCMVUAKAIE-UHFFFAOYSA-N diphenylmethanamine Chemical compound C=1C=CC=CC=1C(N)C1=CC=CC=C1 MGHPNCMVUAKAIE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 239000006196 drop Substances 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- 229940011871 estrogen Drugs 0.000 description 1
- 239000000262 estrogen Substances 0.000 description 1
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 1
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 1
- 210000003722 extracellular fluid Anatomy 0.000 description 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 1
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 1
- 238000001917 fluorescence detection Methods 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 239000001530 fumaric acid Substances 0.000 description 1
- 235000011087 fumaric acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 239000000174 gluconic acid Substances 0.000 description 1
- 235000012208 gluconic acid Nutrition 0.000 description 1
- 101150089730 gly-10 gene Proteins 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 229940093915 gynecological organic acid Drugs 0.000 description 1
- IPCSVZSSVZVIGE-UHFFFAOYSA-N hexadecanoic acid Chemical class CCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O IPCSVZSSVZVIGE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000703 high-speed centrifugation Methods 0.000 description 1
- 108010040030 histidinoalanine Proteins 0.000 description 1
- 210000004124 hock Anatomy 0.000 description 1
- 230000003054 hormonal effect Effects 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 102000058004 human PTH Human genes 0.000 description 1
- 125000004356 hydroxy functional group Chemical group O* 0.000 description 1
- 230000000148 hypercalcaemia Effects 0.000 description 1
- 208000031424 hyperprolactinemia Diseases 0.000 description 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 1
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 1
- 239000007972 injectable composition Substances 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 1
- 238000005342 ion exchange Methods 0.000 description 1
- 238000004255 ion exchange chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 125000001449 isopropyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- ZLVXBBHTMQJRSX-VMGNSXQWSA-N jdtic Chemical compound C1([C@]2(C)CCN(C[C@@H]2C)C[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@@H]2NCC3=CC(O)=CC=C3C2)=CC=CC(O)=C1 ZLVXBBHTMQJRSX-VMGNSXQWSA-N 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 description 1
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 108010034529 leucyl-lysine Proteins 0.000 description 1
- 108010000761 leucylarginine Proteins 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 1
- 239000006193 liquid solution Substances 0.000 description 1
- 239000006194 liquid suspension Substances 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 229920001427 mPEG Polymers 0.000 description 1
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 1
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N maleic acid Chemical compound OC(=O)\C=C/C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N 0.000 description 1
- 239000011976 maleic acid Substances 0.000 description 1
- 239000001630 malic acid Substances 0.000 description 1
- 235000011090 malic acid Nutrition 0.000 description 1
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000002175 menstrual effect Effects 0.000 description 1
- 230000036630 mental development Effects 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- NBTOZLQBSIZIKS-UHFFFAOYSA-N methoxide Chemical compound [O-]C NBTOZLQBSIZIKS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZBELDPMWYXDLNY-UHFFFAOYSA-N methyl 9-(4-bromo-2-fluoroanilino)-[1,3]thiazolo[5,4-f]quinazoline-2-carboximidate Chemical compound C12=C3SC(C(=N)OC)=NC3=CC=C2N=CN=C1NC1=CC=C(Br)C=C1F ZBELDPMWYXDLNY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000693 micelle Substances 0.000 description 1
- 239000003094 microcapsule Substances 0.000 description 1
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 125000000896 monocarboxylic acid group Chemical group 0.000 description 1
- ACTNHJDHMQSOGL-UHFFFAOYSA-N n',n'-dibenzylethane-1,2-diamine Chemical compound C=1C=CC=CC=1CN(CCN)CC1=CC=CC=C1 ACTNHJDHMQSOGL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YCJZWBZJSYLMPB-UHFFFAOYSA-N n-(2-chloropyrimidin-4-yl)-2,5-dimethyl-1-phenylimidazole-4-carboxamide Chemical compound CC=1N(C=2C=CC=CC=2)C(C)=NC=1C(=O)NC1=CC=NC(Cl)=N1 YCJZWBZJSYLMPB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YZMHQCWXYHARLS-UHFFFAOYSA-N naphthalene-1,2-disulfonic acid Chemical class C1=CC=CC2=C(S(O)(=O)=O)C(S(=O)(=O)O)=CC=C21 YZMHQCWXYHARLS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000002790 naphthalenes Chemical class 0.000 description 1
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 1
- 229910052759 nickel Inorganic materials 0.000 description 1
- FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N ninhydrin Chemical compound C1=CC=C2C(=O)C(O)(O)C(=O)C2=C1 FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910017604 nitric acid Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940054441 o-phthalaldehyde Drugs 0.000 description 1
- 125000002347 octyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 1
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 1
- 229940046166 oligodeoxynucleotide Drugs 0.000 description 1
- PIDFDZJZLOTZTM-KHVQSSSXSA-N ombitasvir Chemical compound COC(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)NC1=CC=C([C@H]2N([C@@H](CC2)C=2C=CC(NC(=O)[C@H]3N(CCC3)C(=O)[C@@H](NC(=O)OC)C(C)C)=CC=2)C=2C=CC(=CC=2)C(C)(C)C)C=C1 PIDFDZJZLOTZTM-KHVQSSSXSA-N 0.000 description 1
- 238000001543 one-way ANOVA Methods 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 1
- 150000002892 organic cations Chemical class 0.000 description 1
- 230000003204 osmotic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001582 osteoblastic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001009 osteoporotic effect Effects 0.000 description 1
- 230000002611 ovarian Effects 0.000 description 1
- 210000001672 ovary Anatomy 0.000 description 1
- 238000013021 overheating Methods 0.000 description 1
- 235000006408 oxalic acid Nutrition 0.000 description 1
- 150000002923 oximes Chemical class 0.000 description 1
- 125000000636 p-nitrophenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C(=C([H])C([H])=C1*)[N+]([O-])=O 0.000 description 1
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 1
- 125000000538 pentafluorophenyl group Chemical group FC1=C(F)C(F)=C(*)C(F)=C1F 0.000 description 1
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 210000004303 peritoneum Anatomy 0.000 description 1
- UYWQUFXKFGHYNT-UHFFFAOYSA-N phenylmethyl ester of formic acid Natural products O=COCC1=CC=CC=C1 UYWQUFXKFGHYNT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 229940085991 phosphate ion Drugs 0.000 description 1
- ZWLUXSQADUDCSB-UHFFFAOYSA-N phthalaldehyde Chemical compound O=CC1=CC=CC=C1C=O ZWLUXSQADUDCSB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000004962 physiological condition Effects 0.000 description 1
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 1
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 1
- 239000002798 polar solvent Substances 0.000 description 1
- 229920002401 polyacrylamide Polymers 0.000 description 1
- 229920001515 polyalkylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 239000010318 polygalacturonic acid Substances 0.000 description 1
- 229920002643 polyglutamic acid Chemical class 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 230000000750 progressive effect Effects 0.000 description 1
- 229940097325 prolactin Drugs 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 1
- GRJJQCWNZGRKAU-UHFFFAOYSA-N pyridin-1-ium;fluoride Chemical compound F.C1=CC=NC=C1 GRJJQCWNZGRKAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 1
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- 125000000467 secondary amino group Chemical group [H]N([*:1])[*:2] 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 1
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000010898 silica gel chromatography Methods 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 238000013223 sprague-dawley female rat Methods 0.000 description 1
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 1
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 1
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 150000003460 sulfonic acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 238000013268 sustained release Methods 0.000 description 1
- 238000012353 t test Methods 0.000 description 1
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 1
- 239000011975 tartaric acid Substances 0.000 description 1
- 235000002906 tartaric acid Nutrition 0.000 description 1
- WBWWGRHZICKQGZ-GIHLXUJPSA-N taurocholic acid Chemical compound C([C@@H]1C[C@H]2O)[C@@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@@H]([C@@H](CCC(=O)NCCS(O)(=O)=O)C)[C@@]2(C)[C@H](O)C1 WBWWGRHZICKQGZ-GIHLXUJPSA-N 0.000 description 1
- 125000000999 tert-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- ILMRJRBKQSSXGY-UHFFFAOYSA-N tert-butyl(dimethyl)silicon Chemical group C[Si](C)C(C)(C)C ILMRJRBKQSSXGY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000004187 tetrahydropyran-2-yl group Chemical group [H]C1([H])OC([H])(*)C([H])([H])C([H])([H])C1([H])[H] 0.000 description 1
- QEMXHQIAXOOASZ-UHFFFAOYSA-N tetramethylammonium Chemical compound C[N+](C)(C)C QEMXHQIAXOOASZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 210000002303 tibia Anatomy 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 230000002103 transcriptional effect Effects 0.000 description 1
- 238000005809 transesterification reaction Methods 0.000 description 1
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-O triethylammonium ion Chemical compound CC[NH+](CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- 125000000026 trimethylsilyl group Chemical group [H]C([H])([H])[Si]([*])(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 125000002221 trityl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C1C([*])(C1=C(C(=C(C(=C1[H])[H])[H])[H])[H])C1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C1[H] 0.000 description 1
- 101150044170 trpE gene Proteins 0.000 description 1
- 230000010245 tubular reabsorption Effects 0.000 description 1
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 1
- 239000004474 valine Substances 0.000 description 1
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 1
- 239000003643 water by type Substances 0.000 description 1
- 210000000707 wrist Anatomy 0.000 description 1
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011701 zinc Substances 0.000 description 1
- MJIBOYFUEIDNPI-HBNMXAOGSA-L zinc 5-[2,3-dihydroxy-5-[(2R,3R,4S,5R,6S)-4,5,6-tris[[3,4-dihydroxy-5-(3,4,5-trihydroxybenzoyl)oxybenzoyl]oxy]-2-[[3,4-dihydroxy-5-(3,4,5-trihydroxybenzoyl)oxybenzoyl]oxymethyl]oxan-3-yl]oxycarbonylphenoxy]carbonyl-3-hydroxybenzene-1,2-diolate Chemical class [Zn++].Oc1cc(cc(O)c1O)C(=O)Oc1cc(cc(O)c1O)C(=O)OC[C@H]1O[C@@H](OC(=O)c2cc(O)c(O)c(OC(=O)c3cc(O)c(O)c(O)c3)c2)[C@H](OC(=O)c2cc(O)c(O)c(OC(=O)c3cc(O)c(O)c(O)c3)c2)[C@@H](OC(=O)c2cc(O)c(O)c(OC(=O)c3cc(O)c(O)c(O)c3)c2)[C@@H]1OC(=O)c1cc(O)c(O)c(OC(=O)c2cc(O)c([O-])c([O-])c2)c1 MJIBOYFUEIDNPI-HBNMXAOGSA-L 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
- A61K9/0043—Nose
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
- A61P19/10—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease for osteoporosis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/575—Hormones
- C07K14/635—Parathyroid hormone, i.e. parathormone; Parathyroid hormone-related peptides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/28—Steroids, e.g. cholesterol, bile acids or glycyrrhetinic acid
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
- A61K47/36—Polysaccharides; Derivatives thereof, e.g. gums, starch, alginate, dextrin, hyaluronic acid, chitosan, inulin, agar or pectin
- A61K47/40—Cyclodextrins; Derivatives thereof
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2319/00—Fusion polypeptide
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Physical Education & Sports Medicine (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Zoology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Otolaryngology (AREA)
- Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
- Obesity (AREA)
- Hematology (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Immunology (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Superconductors And Manufacturing Methods Therefor (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
Abstract
A találmány a paratiroid hormonnal (PTH) rokon új polipeptidekre,továbbá gyógyszerészetileg megfelelő sóikra vonatkozik. A találmányfoglalkozik a nevezett polipeptideket tartalmazógyógyszerkészítményekkel, amelyek emlősökben hasznosak a csontritkulásmegelőzésére és kezelésére. A találmányban eljárásokat írnak le anevezett polipeptidek szilárd fázisú és rekombináns módszerekkeltörténő előállítására. ŕ
Description
A találmány paratiroid hormonnal (parathormon) rokon új polipeptidekre, ezek szilárd fázisú vagy rekombináns technikákkal történő szintézisére, valamint ezeket tartalmazó gyógyszerekre és emlősök csonttömegének gyarapításában való alkalmazásra vonatkozik.
A csontritkulás (oszteoporózis) az anyagcsere-eredetű csontbetegségek legáltalánosabb formája, s a csontleépülés (oszteopenia) tüneti, töréses stádiumával jellemezhető. Bár a csontritkulás számos betegség következtében másodlagosan is előfordulhat, az esetek 90%-ában elsődleges. A klimax utáni életszakaszban lévő nők az elsődleges csontritkulást (posztklimakteriális vagy I. típusú csontritkulás) illetően különösen veszélyeztetettek. Az elsődleges csontritkulást illetően veszélyeztetett másik csoportot - nemtől függetlenül - az idősek képezik (öregkori vagy II. típusú csontritkulás). A csontritkulás kapcsolatban állhat a kortikoszteroidok alkalmazásával, mozgásképtelenséggel vagy hosszú ideig tartó ágyhoz kötöttséggel, alkoholizmussal, cukorbetegséggel, emelkedett prolaktinszinttel (hyperprolactinaemia), idegi eredetű étvágytalansággal, a menstruáció elsődleges vagy másodlagos elmaradásával (amenorrhoea) és a petefészek eltávolításával (oophorectomia).
A csontritkulás különböző formáiban a mechanikai gyengeséget eredményező csontleépülés miatt csonttörések gyakran előfordulnak. A posztklimakteriális csontritkulás a csukló és a gerinc töréseivel jellemezhető, míg az öregkori csontritkulás esetén a nyaktörés fordul elő leggyakrabban.
Úgy tartják, a csontritkulásban szenvedőkben a csontleépülés mechanizmusa a csontváz önmegújítási folyamatának egyensúlyzavarával áll kapcsolatban. Ezt a folyamatot csontátépítésnek nevezték el, amely több különálló, a működést hordozó üregben zajlik. Ezek az üregek a csont alapállományában egy adott felületen, a csontfelszívódás helyszíneként spontán jelennek meg. Az oszteoklasztok (csontfaló vagy csontfelszívó sejtek) felelősek az időátlagban állandó alakú csont egyes részeinek felszívódásáért. Ezt a felszívódási folyamatot az oszteoblasztok (csontképző sejtek) megjelenése követi, amelyek az oszteoklasztok által kialakított üregeket új csontszövettel töltik ki.
Egészséges felnőttben az oszteoklasztok és oszteoblasztok oly módon alakulnak ki, hogy a csontképződés és a csontfelszívódás egyensúlyban marad. A csontritkulásban szenvedőkben a csontátépítés folyamatának egyensúlya eltolódik, ami azt eredményezi, hogy a csont gyorsabban szívódik fel, mint ahogy felépül. Annak ellenére, hogy ez az egyensúlyzavar az életkor előrehaladtával bizonyos mértékben a legtöbb embernél előfordul, a posztklimakterikus csontritkulásban szenvedőknél ez fiatalabb életkorban és sokkal súlyosabb mértékben fordul elő.
A csontritkulás kezelésére számos kísérlet történt, amelyek egyrészt arra irányultak, hogy lassítsák a csont további leépülését, másrészt - ami sokkal kívánatosabb hPTH(l-34):
Ser Val Ser Glu I le Gin Leu 1 5
- hogy a csont tömegének tiszta gyarapodását érjék el. Bizonyos anyagokról, mint az ösztrogén és a bifoszfonátok, úgy tűnik, lassítják a csontritkulásban szenvedő betegek csontjának további leépülését. A csontleépülést lassító anyagok a csontfelszívódás és a csontképződés eltérő időtartama miatt növelhetik a csont tömegét (3-7%os nagyságrendben). Ez a látszólagos növekedés azonban időben korlátozott, nem előrehaladó, s az úgynevezett „csontátépítési tér” csökkenéséhez vezet. Ráadásul a felszívódás és a képződés közötti szoros kapcsoltság miatt a csontfelszívódást gátló kezelések végeredményben a csontképződést is gátolják.
Felvetették azt a lehetőséget, hogy a parathormonnal (PTH) végzett kezelés a csontátépülési ciklus serkentését és pozitív kalciumegyensúlyt eredményezne. Humán klinikai kísérletekkel azonban kimutatták, hogy a trabekuláris csont mindenféle növekedését a kortikális (corticalis) réteg csökkenése követi, s így a teljes csontot tekintve nincs nettó gyarapodás.
Hefti és munkatársai (Clinical Science, 62, 389-396, 1982) arról számoltak be, hogy akár a bPTH(l -84), akár a hPTH(l-34) naponkénti szubkután adagolása mind a normális, mind a csontritkulásban szenvedő nőstény patkányokban növelte az egyes csontok összes kalcium- és hamutömegét.
Liu és munkatársai (J. Boné Miner. Rés., 6:10, 1071-1080, 1991) leírták, hogy kifejlett nőstény patkányok petefészkének eltávolítása a tibia proximális metafízisében a trabekuláris csontszövet arányának 47%-os csökkenését eredményezte, amit az oszteoblasztok és trabekuláris oszteoklasztok számának jelentős gyarapodása követett. A hPTH(l-34) naponkénti szubkután injektálása a trabekuláris csont leépülését teljes mértékben megfordította, s olyan mértékű gyarapodást eredményezett, hogy a trabekuláris csont mennyisége meghaladta a látszatkezelt kontroliban tapasztalhatóét. Az oszteoblasztok száma nőtt, az oszteoklasztoké csökkent.
Hock és munkatársai (J. Boné Miner. Rés., 7:1, 65-71, 1992) leírták, hogy egészséges, kifejlett hím patkányokat 12 napig naponta hPTH(l-34) szubkután injektálással kezelve a trabekuláris és kortikális csont kalcium- és száraztömege nőtt. Növekedett a teljes csonttömeg, a trabekuláris csont térfogata, a gerendák (trabekulák) falvastagsága és száma, valamint az oszteoblasztos felületek nagysága.
Az emlősparathormonok, például a humán (hPTH), a szarvasmarha- (bPTH) és a sertés- (pPTH) parathormonok 84 aminosavból álló egyszálú polipeptidláncok, melyeknek molekulatömege hozzávetőleg 9500. A biológiai aktivitás az N-terminális résszel, az 1-34. aminosavakkal kapcsolatos, melyekről úgy tűnik, az aktivitáshoz minimálisan szükséges szakaszt képviselik.
A humán PTH N-terminális szegmense a szarvasmarha- és a sertéshormon N-terminális szegmensétől csak három, illetve két aminosavban különbözik:
His Asn Leu Gly Lys His Leu 10 15
HU 217 843 Β
As n | Ser | Me t | Glu | Arg Va | 1 | Glu | Trp |
20 | |||||||
Va 1 | Hi s | As n | Phe | (1. számú | sz | :ekvencia); | |
bPTH | [(1-34 | ): | |||||
Al a | Va 1 | Ser | Glu | I le GI | n | Phe | Me t |
1 | 5 | ||||||
Ser | Ser | Me t | Glu | Ar g Va | 1 | Glu | Trp |
20 | |||||||
Va 1 | Hi s | As n | Phe | (2. számú | sz | :ekvencia); |
Leu Arg Lys | Lys Leu Gin Asp |
25 | 30 |
Hi s | Asn 10 | Leu | Gly | Ly s | Hi s | Leu 15 |
Leu | Arg 25 | Ly s | Ly s | Leu | Gin | As p 30 |
pPTH(l-34):
Ser | Va 1 | Ser | Glu | I le GI | n | Leu | Me t |
1 | 5 | ||||||
Ser | Ser | Leu | Glu | Ar g Va | 1 | Glu | Trp |
20 | |||||||
Va 1 | Hi s | As n | Phe | (3. számú | sz | ekvencia). |
Hi s | Asn 10 | Leu | Gly | Ly s | Hi s | Le u 1 5 |
Leu | Arg 25 | Ly s | Ly s | Leu | Gin | As p 30 |
A PTH elsődleges funkciója azoknak az adaptív változásoknak a kiváltása, amelyek arra szolgálnak, hogy az extracelluláris folyadékban fenntartsák a Ca2+ állan- 20 dó koncentrációját. A PTH hat a vesére, növelve a Ca2+ vizeletből történő tubuláris reabszorpcióját, valamint serkentve a kalciferdiol kalcitriollá való átalakulását, amely a Ca2+ belekből történő abszorpciójáért felelős.
A PTH egyik kiemelkedő hatása a csontokból történő 25 Ca2+-mobilizáció. A PTH növeli a csont kalcium- és foszfátion-visszaszívásának arányát, továbbá serkenti az oszteoklasztok által megvalósuló csontfelszívódást arányát, növeli a mezenchimasejtek oszteoklasztokká differenciálódásának arányát, s meghosszabbítja ezen 30 utóbbi sejtek felezési idejét. A PTH tartós működésével nő a csontképző oszteoblasztok száma is, így fokozódik a csontátépülés körfolyamatának mértéke. A különálló oszteoblasztok azonban kevésbé mutatkoznak aktívnak, mint a normálisak.
Rosenblatt és munkatársai (4 423 037,4 968 669 és 5 001 223 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírások) a PTH N-terminális (1-6) aminosavainak deléciójával és a Phe7, Met8>18 és Gly12 szelektív helyettesítésével előállított PTH-antagonistákat írtak le. A Tyr34-NH beépítése a leírás szerint növelte ezen vegyületek aktivitását és stabilitását.
Rokon, de eltérő szerkezetű paratiroid hormon antagonista hatású peptideket ír le az EP 451,867 számú szabadalom.
A parathormonnal rokon peptid (PTHrp) - egy 140+ aminosavas peptid -, valamint annak ffagmensei a PTH fő biológiai működéseit mutatják. A PTHrp-t számos humán és állati tumor- és egyéb szövet feldolgozza, s szerepet játszhat a rosszindulatú hiperkalcémia (emelkedett vérkalciumszint) kialakulásában. A hPTHrp(l-34) szekvenciája a következő:
Al a | Var | Ser | Glu | His Gin | Leu Leu | Hi s | Asp | Lys | Gly | Ly s | Ser | I 1 e |
1 | 5 | 10 | 15 | |||||||||
Gin | As p | Le u | Arg | Arg Arg | Phe Phe | Leu | His | Hi s | Leu | I le | Al a | GI u |
20 | 25 | 30 | ||||||||||
I le | Hi s | Thr | Alá | (4. számú sz | ekvencia). |
A hPTH és a hPTHrp közötti szekvenciahomológia nagyrészt a 13 N-terminális aminosavra korlátozódik, melyek közül 8 azonos; a pPTH 25.-től 34. aminosavig 45 teijedő receptorkötő régiójában 10 aminosav közül csak egy konzerválódik a pPTHrp-ben. A konformációbeli hasonlóság szolgálhat a közös aktivitás alapjául. Cohen és munkatársai (J. Bioi. Chem., 266.3, 1997-2004, 1991) arra következtettek, hogy a PTH( 1 - 34) és PTHrp( 1-34) 50 szekvenciájának nagy része, különösen az 5-18. aminosavból, illetve a 21-34. aminosavból álló régiók alfahelikális konfigurációt vesznek fel. Megjegyezték, hogy vannak bizonyos problémák annak eldöntését illetően, hogy ez a konfiguráció fiziológiai körülmények között a 55 karboxi-terminális végre jellemző-e. Az ilyen másodlagos szerkezet fontos lehet a lipid- és receptor-kölcsönhatásokban és/vagy a szerkezet stabilizálásában.
PTH és PTHrp analógokat szintetizáltunk azzal a céllal, hogy tökéletesített gyógyszereket fejlesszünk ki 60 a csont tömegének fenntartására emlősökben, beleértve a csontritkulásban szenvedőket is.
A találmány a paratiroid hormon [parathormon (PTH)], parathormonnal rokon polipeptid (PTHrp), valamint a PTH és PTHrp fiziológiailag aktív, rövidített homológjainak és analógjainak szintetikus polipeptidanalógjaira, valamint azok sóira vonatkozik, melyben a 22-31. aminosavgyökök amfipatikus alfa-hélixet képeznek, s az említett 22-31. aminosavak hidrofil aminosavak (Haa) és lipofil aminosavak (Laa) közül valók, melyek az alábbi sorrendben rendeződnek el:
Haa (Laa Laa Haa Haa)2 Laa.
Pontosabban a találmány tárgya módosított paratiroid hormonnal rokon polipeptid (PTHrp), azzal jellemezve, hogy az alábbi képlettel bír:
Xaa1 Xaa2 Xaa3 Xaa4 Xaa5 Xaa6 Xaa7 Leu His Xaa10
Xaa1 i Gly Xaa'3 Ser He Gin Xaa'7 Leu Xaa'9 Xaa29 Xaa21
HU 217 843 Β
Xaa22-3i Xaa32 Xaa33 Xaa34 Xaa35 Xaa36 Xaa37 Xaa38 Term, ahol a képletben
Xaa1 nincs jelen, vagy jelentése Alá;
Xaa2 nincs jelen, vagy jelentése Val;
Xaa3 nincs jelen, vagy jelentése Ser;
Xaa4 nincs jelen, vagy jelentése Glu vagy Glu(OCH3); Xaa5 nincs jelen, vagy jelentése His vagy Alá;
Xaa6 nincs jelen, vagy jelentése Gin;
Xaa7 nincs jelen, vagy jelentése Leu;
Xaa10 és Xaa17 jelentése egymástól függetlenül Asp vagy Asp(OCH3);
Xaa11 jelentése Lys, Arg vagy Leu;
Xaa13 jelentése Lys, Arg, Tyr, Cys, Leu, Cys [CH2CONH(CH2)2NH-biotinil]-, Lys (7-dimetilamino-2-oxo-2H-l-benzopirán-4-acetil)- vagy Lys (dihidrocinnamoil)-csoport;
Xaa20 jelentése Arg vagy Leu;
Xaa19 és Xaa21 jelentése egymástól függetlenül Lys,
Alá vagy Arg;
Xaa22-31 jelentése az alábbiak valamelyike:
a) Xaa22 Xaa23 Leu Xaa25 Xaa26 Leu Xaa28 Xaa29
Xaa30 Xaa31 ahol a képletben
Xaa22 és Xaa25 jelentése egymástól függetlenül Glu, Glu(OCH3), His vagy Phe;
Xaa23 jelentése Leu vagy Phe;
Xaa26 jelentése Lys vagy His;
Xaa28 és Xaa31 jelentése egymástól függetlenül Leu vagy Ile;
Xaa29 jelentése Alá, Arg vagy Glu; és
Xaa30 jelentése Lys vagy Glu (85. számú szekvencia);
az a) előnyösen
Glu Leu Leu Gly Lys Leu Leu Xaa29 Lys Leu 1 5 10 ahol a képletben
Xaa29 jelentése Glu vagy Arg (26. számú szekvencia); vagy
b) Xaa22 Xaa23 Leu Xaa25 Arg Leu Leu Xaa29 Arg
Leu, ahol a képletben
Xaa22 és Xaa25 jelentése egymástól függetlenül Glu, G1u(OCH3), His vagy Phe;
Xaa23 jelentése Leu vagy Phe;
Xaa29 jelentése Glu, Lys vagy Lys(COCH2PEGX), ahol a PEGX egy polietilénglikol-metil-étergyök 100 és 10 000 közti molekulatömeggel (86. számú szekvencia);
a b) előnyösen
Glu Leu Leu Glu Arg Leu Leu Xaa29 Arg Leu 1 5 10 ahol a képletben
Xaa29 jelentése Glu, Lys vagy Lys(COCH2PEGX), ahol a PEGX egy polietilénglikol-metil-étergyök 100 és 10 000 közti molekulatömeggel (27. számú szekvencia); vagy
c) Alá Leu Alá Glu Alá Leu Alá Glu Alá Leu
5 10 (28. számú szekvencia); vagy
d) Ser Leu Leu Ser Ser Leu Leu Ser Ser Leu
5 10 (29. számú szekvencia); vagy
e) Alá Phe Tyr Asp Lys Val Alá Glu Lys Leu
5 10 (30. számú szekvencia);
Xaa32 jelentése His, Pro vagy Lys;
Xaa33 nincs jelen, vagy jelentése Pro, Thr, Glu vagy Alá; Xaa34 nincs jelen, vagy jelentése Pro, Arg, Met, Alá, hSer, hSer lakton, Tyr, Leu vagy 1,4-diaminobutiril-laktám;
Xaa35 nincs jelen, vagy jelentése Pro, Glu, Ser, Alá vagy Gly;
Xaa36 nincs jelen, vagy jelentése Alá, Arg vagy Ile; Xaa37 nincs jelen, vagy jelentése Arg, Trp vagy 3-(2naftil)-L-alanin;
Xaa38 nincs jelen, vagy jelentése Alá vagy hSer, vagy
Xaa38*42 jelentése Thr Arg Ser Alá Trp; és Term jelentése OR vagy NR2, ahol az egyes R-ek jelentése egymástól függetlenül hidrogénatom vagy
1-4 szénatomos alkil- vagy fenil-(l-4 szénatomos alkilj-csoport;
valamint mindezek gyógyászatilag elfogadható sói, azzal a feltétellel, hogy az alábbi jelentések nem fordulhatnak elő egyidejűleg: Xaa22 jelentése Phe, Xaa23 jelentése Phe, Xaa25 jelentése His, Xaa26 jelentése Lys vagy His, Xaa28 jelentése Ile, Xaa29 jelentése Alá, Xaa30 jelentése Glu és Xaa31 jelentése Ile.
Ha e szekvencia specifikus, valóságos példáit inszertáljuk a PTH-ba, a PTHrp-be, valamint ezek fiziológiailag aktív, rövidített analógjaiba és homológjaiba, eredményül hatékony csontépítési szerként alkalmazható polipeptideket kapunk.
Ilyenformán egyik vonatkozásában a találmány tárgya a PTH és a PTHrp, valamint a PTH és a PTHrp fiziológiailag aktív, rövidített analógjainak és homológjainak analógjai, melyekben a 22-31. aminosavak amfipatikus alfa-hélixet képeznek, s ezen aminosavak az alábbi szekvenciák szerint rendeződhetnek el:
a) Xaa1 Xaa2 Leu Xaa4 Xaa5 Leu Xaa7 Xaa8 Xaa9 Xaa10
5 10 ahol
Xaa1 és Xaa4 jelentése - egymástól függetlenül - Glu, G1u(OCH3), His vagy Phe;
Xaa2 jelentése Leu vagy Phe;
Xaa5 jelentése Lys vagy His;
Xaa7 és Xaa10 jelentése egymástól függetlenül Leu vagy Ile;
Xaa8 jelentése Alá, Arg vagy Glu; és
Xaa9 jelentése Lys vagy Glu (85. számú szekvencia); előnyösen:
Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Xaa Lys Leu;
5 10 ahol
Xaa jelentése Glu vagy Arg (26. számú szekvencia);
b) Xaa1 Xaa2 Leu Xaa4 Arg Leu Leu Xaa8 Arg Leu,
5 10 ahol
Xaa1 és Xaa4 jelentése - egymástól függetlenül - Glu, Glu(OCH3), His vagy Phe;
HU 217 843 Β
Xaa2 jelentése Leu vagy Phe;
Xaa8 jelentése Glu, Lys vagy Lys(COCH2PEGX) (PEGX=poli(etilénglikol-metil-éter)-gyök, melynek molekulatömege 100-10 000) (86. számú szekvencia); előnyösen:
Glu Leu Leu Glu Arg Leu Leu Xaa Arg Leu;
5 10 ahol
Xaa jelentése Glu, Lys vagy Lys(COCH2PEGX) (PEGX=polietilénglikol-metil-éter-gyök, melynek molekulatömege 100-10 000) (27. számú szekvencia);
c) Alá Leu Alá Glu Alá Leu Alá Glu Alá Leu
5 10 (28. számú szekvencia);
d) Ser Leu Leu Ser Ser Leu Leu Ser Ser Leu
5 10 (29. számú szekvencia);
e) Alá Phe Tyr Asp Lys Val Alá Glu Lys Leu
5 10 (30. számú szekvencia)
A találmány másik tárgya a PTH és PTHrp, valamint a PTH és PTHrp fiziológiailag aktív, rövidített homológjainak és analógjainak analógjai, illetve azok sói, melyekben a 22-31. aminosavak amfipatikus alfahélixet képeznek, s ezen aminosavak szekvenciáit az alábbi szekvenciák közül választjuk ki:
a) Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Xaa Lys Leu;
5 10 ahol
Xaa jelentése Glu vagy Arg (26. számú szekvencia);
b) Glu Leu Leu Glu Arg Leu Leu Xaa Arg Leu;
5 10 ahol
Xaa jelentése Glu, Lys vagy Lys(COCH2PEGX) (PEGX=polietilénglikol-metil-éter-gyök, melynek molekulatömege 100-10 000) (27. számú szekvencia);
c) Alá Leu Alá Glu Alá Leu Alá Glu Alá Leu
5 10 (28. számú szekvencia);
d) Ser Leu Leu Ser Ser Leu Leu Ser Ser Leu
5 10 (29. számú szekvencia);
e) Alá Phe Tyr Asp Lys Val Alá Glu Lys Leu
5 10 (30. számú szekvencia).
A találmány további tárgya gyógyszerkészítmények a csont tömegének csökkenésével jellemezhető betegségek megelőzésére vagy kezelésére, melyek gyógyszerészetileg megfelelő hordozóval együtt a csontok tömegének növeléséhez hatásos mennyiségben tartalmazzák a parathormon (PTH), a parathormonnal rokon polipeptid (PTHrp) és a PTH és a PTHrp fiziológiailag aktív, rövidített homológjainak és analógjainak polipeptidanalógját, valamint annak sóit, melyben a 22-31. aminosavgyökök amfipatikus alfa-hélixet képeznek, s a hidrofil aminosavak (Haa) és lipofil aminosavak (Laa) közül kiválasztott 22-31. aminosavak, melyek az alábbi sorrendben rendeződnek el: Haa (Laa Laa Haa Haa)2 Laa. A találmány további tárgya eljárások gyógyszerkészítmények előállítására, melyek során a fentebb leírt vegyületeket gyógyszerészetileg megfelelő hordozóval elegyítjük.
A szabadalmi leírás ismerteti a csont tömegének csökkenésével jellemezhető emlősbetegségek kezelését, melynek során a rászoruló emlősnek a csont tömegének növeléséhez hatásos mennyiségben a PTH, PTHrp vagy a PTH, illetve PTHrp fiziológiailag aktív, rövidített homológjának vagy analógjának polipeptidanalógját vagy annak sóját adjuk, amelyben a 22-31. aminosavak amfipatikus alfa-hélixet képeznek, és ezek az aminosavak hidrofil aminosavak (Haa) és a lipofil aminosavak (Laa) közül valók, melyek az alábbi sorrendben rendeződnek el: Haa (Laa Laa Haa Haa)2 Laa.
A szabadalmi leírás közelebbről eljárásokat ismertet a csont tömegének csökkenésével jellemezhető emlősbetegségek kezelésére, melyek során a rászoruló emlősnek a csont tömegének növeléséhez hatásos mennyiségben a PTH, PTHrp vagy a PTH, illetve PTHrp fiziológiailag aktív, rövidített homológjának vagy analógjának polipeptidanalógját vagy annak sóját adjuk, amelyben a 22-31. aminosavak amfipatikus alfa-hélixet képeznek, és ezen aminosavaknak megfelelő szekvenciát a 26., 27., 28., 29. és 30. számú szekvencia közül választjuk ki.
A találmány további tárgya eljárások a PTH, PTHrp és a PTH, illetve PTHrp fiziológiailag aktív, rövidített homológjai vagy analógjai polipeptidanalógjainak [melyekben a 22-31. aminosavak amfipatikus alfa-hélixet képeznek, és ezek az aminosavak hidrofil aminosavak (Haa) és lipofil aminosavak (Laa) közül valók, melyek a Haa (Laa Laa Haa Haa)2 Laa sorrendben rendeződnek el], és azok sóinak szilárd fázisú szintézisére, melyek során a védett (védőcsoporttal ellátott) aminosavakat egymás után megfelelő gyantahordozóhoz kapcsoljuk, az oldallánc- és Na-védőcsoportokat eltávolítjuk, s a peptidet lehasítjuk a gyantáról.
A találmány további tárgya eljárások a PTH, PTHrp és a PTH, illetve PTHrp fiziológiailag aktív, rövidített homológjai vagy analógjai polipeptidanalógjainak (amelyekben a 22-31. aminosavak amfipatikus alfahélixet képeznek, és ezen aminosavaknak megfelelő szekvenciát a 26., 27., 28., 29. és 30. számú szekvencia közül választjuk ki), és azok sóinak szilárd fázisú szintézisére, melyek során a védett aminosavakat egymás után megfelelő gyantahordozóhoz kapcsoljuk, az oldallánc- és Na-védőcsoportokat eltávolítjuk, s a peptidet lehasítjuk a gyantáról.
A találmány további tárgya eljárások a PTH, PTHrp vagy PTH, illetve PTHrp fiziológiailag aktív, rövidített homológjai vagy analógjai polipeptid-analógjainak [melyekben a 22-31. aminosavak amfipatikus alfa-hélixet képeznek, és ezek az aminosavak hidrofil aminosavak (Haa) és lipofil aminosavak (Laa) közül valók, melyek a Haa (Laa Laa Haa Haa)2 Laa sorrendben rendeződnek el], és azok sóinak rekombináns szintézisére.
A szabadalmi leírás ismerteti az említett polipeptidanalógok rekombináns szintéziséhez alkalmazható DNS-szekvenciákat, vektorokat és plazmidokat. Közelebbről a szabadalmi leírás e vonatkozásban ismerteti a PTH, PTHrp és a PTH, illetve PTHrp fiziológiailag ak5
HU 217 843 Β tív, rövidített homológjai vagy analógjai polipeptidanalógjainak (amelyekben a 22-31. aminosavak amfipatikus alfa-hélixet képeznek, és ezen aminosavaknak megfelelő szekvenciát a 26., 27., 28., 29. és 30. számú szekvencia közül választjuk ki), és azok sóinak rekombináns szintéziséhez alkalmazható DNS-szekvenciákat, vektorokat és plazmidokat.
Az ábrák rövid leírása
Az 1. ábrán a találmány szerinti PTHrp(l-34) analógot kódoló szintetikus gén nukleotidszekvenciáját és restrikciós enzimes hasítási helyeit mutatjuk be (hPTH PCR-amplifikáció).
A 2. ábrán vázlatosan mutatjuk be a PTHrp(l-34)analóg génjét magában foglaló plazmid [Trp LE 18 hPTHrp(l-34)l konstrukció] előállítását.
A 3. ábrán vázlatosan mutatjuk be a PTHrp(l-34)analóg génjének két példányát magában foglaló plazmid [Trp LE 18 hPTHrp(l-34)2 konstrukció] előállítását
A 4. ábrán vázlatosan mutatjuk be a PTHrp(l-34)analóg génjének négy példányát magában foglaló plazmid [Trp LE 18 hPTHrp(l-34)4 konstrukció] előállítását.
Találmányunk leírásában a különböző, általános nukleotidok és aminosavak egy- és hárombetűs rövidítéseit a Pure Appl. Chem., 31, 639-645 (1972) és 40, 2TJ-290 (1974) ajánlása szerint, valamint a 37 CFR 1.822 paragrafusnak (55 FR 18 245, 1990. 05. 01.) és a PCT-törvényeknek (WIPO Standard ST.23: Recommendation far the Presentation of Nucleotide and Amino Acid Sequences in Patent Applications and in Published Patent Documents) eleget téve használjuk. Az egy- és hárombetűs rövidítések a következők:
Aminosavrövidítések
Aminosav | Hárombetűs | Egybetűs |
Alanin | Ala | A |
Arginin | Arg | R |
Aszparagin | Asn | N |
Aszparaginsav | Asp | D |
Asn+Asp | Asx | B |
Cisztein | Cys | C |
Glutamin | Gin | Q |
Glutaminsav | Glu | E |
Gin+Glu | Glx | z |
Glicin | Gly | G |
Hisztidin | His | H |
Izoleucin | Ile | I |
Leucin | Leu | L |
Lizin | Lys | K |
Metionin | Met | M |
Fenilalanin | Phe | F |
Prolin | Pro | P |
Szerin | Ser | s |
Treonin | Thr | T |
Triptofán | Trp | w |
Tirozin | Tyr | Y |
Valin | Val | V |
Egyéb aminosav | Xaa | X |
A rövidítések, ha másképpen nem jelöljük (például D- vagy D,L-), L-aminosavakat jelölnek. Bizonyos természetes vagy nem természetes aminosavak akirálisak, mint például a glicin. Valamennyi peptid szekvenciáját úgy mutatjuk be, hogy az N-terminális aminosavak a bal oldalon, a C-terminális aminosavak a jobb oldalon helyezkednek el.
A találmányban használt egyéb aminosavak és vegyületek rövidítései a következők:
hSer homoszerin hSerlac homoszerin-lakton Nle norleucin
PEG2 dietilénglikol-metil-éter-gyök, metoxidi(etilén-oxi)-CH3O(CH2CH2O)2-, (M=119)
PEG5000 polietilénglikol-metil-éter-gyök, metoxipoli(etilén-oxi) - CH3O(CH2CH2O) 110(átlagos M=5000)
PEGX polietilénglikol-metil-éter-gyök,
CH3O(CH2CH2O)n-, n=2-225 (átlagos M= 100-10 000)
A „hidrofil aminosav (Haa)” kifejezés olyan aminosavra vonatkozik, amely a peptidkötés kialakításához szükséges csoportokon kívül legalább egy hidrofil funkciós csoporttal rendelkezik; ilyen az arginin, az aszparagin, az aszparaginsav, a glutaminsav, a glutamin, a hisztidin, a lizin, a szerin, a treonin és homológjaik.
A „lipofil aminosav (Laa)” kifejezés töltés nélküli, alifás vagy aromás aminosavra vonatkozik, mint amilyen az izoleucin, a leucin, a metionin, a fenilalanin, a triptofán, a tirozin, a valin és homológjaik.
A találmány céljait illetően az alanint „amfifil” aminosavként soroljuk be, azaz olyan aminosavként, amely hidrofil és lipofil módon is képes működni.
A „PTH vagy PTHrp fiziológiailag aktív, rövidített homológja és analógja” kifejezés olyan polipeptidre vonatkozik, amely a PTH vagy PTHrp teljes szekvenciájában található aminosavak számánál kevesebb aminosavból álló szekvenciát tartalmaz, miközben hasonló fiziológiai reakciót mutat. A rövidített PTH-nak vagy PTHrp-nek nem szükséges a PTH-val vagy a PTHrpvel teljesen homológnak lenni ahhoz, hogy hasonló fiziológiai reakciót mutasson. E csoport előnyben részesített, de nem kizárólagos képviselője a PTH(l-34) és a PTHrp(l-34).
Az „amfipatikus alfa-hélix” kifejezés olyan, bizonyos polipeptidekre jellemző másodlagos szerkezetre vonatkozik, amelyben az aminosavak alfa-helikális konfigurációt vesznek fel, mely a hélix hosszanti tengelye mentén elhelyezkedő, egymással szemben álló poláris és apoláris oldalakkal rendelkezik. Egy adott polipeptidben az alfa-helikális szerkezet létezésének lehetősége bizonyos mértékig kimutatható a hélix megfelelő magasságában úgynevezett „Schiffer-Edmundson-kerék” kialakításával (M. Schiffer és A. B. Edmundson, Biophys. J., 7, 121, 1967), s a hélixet körülvevő henger szemközti oldalam a hidrofil és lipofil gyökök elkülönülésének megfigyelésével. Más módon, egy adott polipeptidben az alfa-helikális régió jelenlétére empirikus bizonyítékokat szerezhetünk, például cirkuláris dikroizmus vagy röntgensugárzásdiffrakció-adatok alapján. Az ideális alfa-hélix menetenként 3,6 aminosavból áll, s a szomszédos oldalláncok 100°-os körívenként különülnek el.
HU 217 843 Β
Eisenberg és munkatársai (Natúré, 299, 371-374, 1982; Proc. Nat. Acad. Sci. USA, 81, 140-144, 1984) az amfipatikus hélixek kvantitatív jellemzéséhez a hidrofobitási skálát a helikális körrel kombinálták. Az átlagos hidrofobitási momentum (definíciója szerint): a hélixet felépítő aminosavak hidrofobitásának vektorösszege. A következőkben Eisenberg (1984) által leírt aminosav-hidrofobitási értékeket adunk meg (,,konszenzus”-skála).
Ile: 0,73; Phe: 0,61; Val: 0,54; Leu: 0,53; Trp: 0,37; Met: 0,26; Alá: 0,25; Gly: 0,16; Cys: 0,04; Tyr: 0,02; Pro: -0,07; Thr: -0,18; Ser: -0,26; His: -0,40; Glu: -0,62; Asn: -0,64; Gin: -0,69; Asp: -0,72; Lys: -1,10; Arg: -1,76.
A menetenként 3,6 gyököt [illetve az oldalláncok közötti 100°-os körívet (360°/3,6)] tartalmazó ideális alfa-hélix hidrofobitási momentuma (μΗ) a következő összefüggés szerint számítható:
μΗ=[(ZHNsinö(N -1 ))2+(XHNcosö(N-1 ))2]' /2 melyben HN az N-edik aminosav hidrofobitási értéke, az összegzések (Σ) pedig a hélix szekvenciájában az egymást 100°-onként (delta-szög) követő N számú aminosavakra vonatkoznak. A hidrofobitási momentum az aminosavgyökönkénti átlagos hidrofobitási momentumként (<μΗ>) is kifejezhető. Ebben az esetben <μΗ> = μΗ/Ν. 100°±20° delta-szögnél a 0,20 vagy annál nagyobb <μΗ> értékből amfipatikus hélix kialakulására következtethetünk. A hPTHrp(22-31) és hPTH(22-31) esetében 100° delta-szögnél a <μΗ> értéke 0,19, illetve 0,37.
Comett és munkatársai (J. Mól. Bioi., 195, 659-685, 1987) az „amfipatikus index” bevezetésével - melyből következtetni lehet az amfipatikus tulajdonságra - kiterjesztették az amfipatikus alfa-hélixek vizsgálatát. Megállapították, hogy az ismert alfa-hélixeknek hozzávetőleg a fele amfipatikus, és az aminosavak ismétlődése inkább 97,5 “-ónként, mint 100°-onként tapasztalható, miközben az aminosavgyökök menetenkénti száma közelebb van a 3,7-hez, mint a 3,6-hoz. Bár az ilyen pontosítások tudományosan érdekesek, Eisenberg és munkatársai alapul szolgáló megközelítése megfelelő egy adott szekvencia amfipatikus tulajdonságának eldöntéséhez, különösen, ha egy szekvenciából ab initio szándékozunk amfipatikus alfa-hélixet kialakítani.
Egy nem természetes, amfipatikus alfa-helikális aminosavszekvencia nem feltétlenül homológ a természetesen előforduló polipeptid megfelelő szakaszával, de fiziológiai környezetben hasonló másodlagos szerkezettel (például poláris és apoláris szemközti oldalakkal rendelkező amfipatikus alfa-hélix) rendelkezik. A természetesen előforduló aminosavszekvencia módosított szekvenciával történő helyettesítése előnyösen befolyásolhatja az eredeti polipeptid fiziológiai aktivitását, stabilitását vagy más tulajdonságát. Az ilyen szekvenciák tervezéséhez és kiválasztásához Krstenansky és munkatársai (FEBS Letters, 242:2, 409-413, 1989) és J. P. Segrest és munkatársai (Proteins: Structure, Function and Genetics, 8, 103, 117, 1990) írtak le útmutatást.
A találmány szerinti, tíz aminosavból álló amfipatikus alfa-hélix a következő képlettel írható le:
Haa (Laa Laa Haa Haa)2 Laa, melyben a Haa aminosavak hidrofil aminosavak közül, az Laa aminosavak pedig lipofil aminosavak közül valók (amelyeket fentebb definiáltunk). Ideális alfa-hélixet feltételezve, az L, 4., 5., 8. és 9. gyök a hélix „A” oldalán, 140°-os körív mentén helyezkedik el, míg a 2., 3., 6., 7. és 10. gyökök a hélix szemközti „B” oldalának 140°-os körívét foglalják el. Az egyik oldalon elhelyezkedő gyökök előnyösen egymással azonos polaritással rendelkeznek, míg a szemközti oldal gyökei ellentétes polaritásúak; azaz, ha az A oldal teljesen hidrofil, a B oldal teljesen lipofil és fordítva. A szakemberek észre fogják venni, hogy a találmány szerinti hélixek leírására használt
Haa (Laa Laa Haa Haa)2 Laa szekvenciával ellenkező aminosav-sorrendű
Laa (Haa Haa Laa Laa)2 Haa szekvencia szintén megfelel a gyökmegoszlás kritériumainak, s egyenértékű leírását adja a találmány szerinti alfa-hélixeknek.
Az alanin egyaránt helyettesítheti a hidrofil vagy a lipofil aminosavakat, mivel az amfipatikus alfa-hélix bármelyik oldalán elhelyezkedhet, bár az Ala10 nem képez amfipatikus alfa-hélixet. A prolint, ciszteint és a tirozint általában nem alkalmazzuk; ezen aminosavak és más véletlenszerű hibák (például hidrofil gyök a lipofil oldalon) előfordulása azonban megengedhető mindaddig, míg a szegmensen belüli többi aminosav megfelelően alkalmazkodik a hidrofil oldal-lipofil oldal elrendeződéshez. A fentebb meghatározott hidrofobitási momentum kiszámításával könnyen meghatározhatjuk, hogy egy szekvencia megfelelő mértékben amfipatikus-e ahhoz, hogy a találmány szerinti szekvenciának minősíthessük. Ha az aminosavgyökönkénti maximális momentum 100° ±20° értéknél körülbelül 0,20 fölött van, úgy a szekvencia amfipatikus hélixet alakít ki, s megfelel a találmány céljainak.
Például a 26. számú szekvencia (Xaa=Glu) gyökönkénti átlagos hidrofobitási momentuma (100°-nál) a következők szerint számítható ki:
Aminosav E | Hn -0,62 | δ(Ν—1) Hsinö(N-l) HcosŐ(N-l) | ||
0 | 0 | -0,62 | ||
L | 0,53 | 100 | 0,52 | -0,17 |
L | 0,53 | 200 | -0,18 | -0,50 |
E | -0,62 | 300 | 0,34 | -0,31 |
K | -1,1 | 400 | -0,70 | -0,85 |
L | 0,53 | 500 | 0,34 | -0,41 |
L | 0,53 | 600 | -0,46 | -0,27 |
E | -0,62 | 700 | 0,21 | -0,58 |
K | -1,1 | 800 | -1,08 | -0,19 |
L | 0,53 | 900 | 0 Σ=0,81 | -0,53 Σ = -4,43 |
μΗ =[(0,81)2+(-4,43)2]>/2=4,50 <μΗ> =4,50/10=0,45
E szekvencia esetén a maximális átlagos hidrofobitási momentum 92°-nál tapasztalható, s értéke 0,48.
Ennek az elméletnek a parathormon és a parathormonnal rokon peptid esetében való alkalmazását illetően feltételeztük, hogy a (7 -16) és (22-31) régió valamelyike (vagy mindkettő) alfa-helikális másodlagos szerkezettel rendelkezik, s hasonló szerkezeti tulajdon7
HU 217 843 Β
Ságokkal rendelkező, nem homológ szekvenciával helyettesíthető anélkül, hogy a biológiai aktivitás, illetve immunreakciót indukáló képesség csökkenne.
A találmány egyik tárgya a PTH, PTHrp, valamint a PTH és PTHrp fiziológiailag aktív, rövidített analógjainak és homológjainak (vagy ezek sóinak) analógjai, melyekben a 22-31. aminosavak amfipatikus alfa-hélixet képeznek, s ezen aminosavak (22-31.) szekvenciáját a következő szekvenciák közül választjuk ki:
a) Xaa1 Xaa2 Leu Xaa4 Xaa5 Leu Xaa7 Xaa8 Xaa9 Xaa10
5 10 ahol
Xaa1 és Xaa4 jelentése - egymástól függetlenül - Glu, Glu(OCH3), His vagy Phe;
Xaa2 jelentése Leu vagy Phe;
Xaa5 jelentése Lys vagy His;
Xaa7 és Xaa10 jelentése - egymástól függetlenül - Leu vagy IIe;
Xaa8 jelentése Alá, Arg vagy Glu, és
Xaa9 jelentése Lys vagy Glu (85. számú szekvencia); előnyösen:
Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Xaa Lys Leu,
5 10 ahol
Xaa jelentése Glu vagy Arg (26. számú szekvencia);
b) Xaa1 Xaa2 Leu Xaa4 Arg Leu Leu Xaa8 Arg Leu,
5 10 ahol
Xaa1 és Xaa4 jelentése - egymástól függetlenül - Glu, G1u(OCH3), His vagy Phe;
Xaa2 jelentése Leu vagy Phe;
Xaa8 jelentése Glu, Lys vagy Lys(COCH2PEGX) (PEGX=polietilénglikol-metil-éter-gyök, melynek molekulatömege 100-10 000) (86. számú szekvencia); előnyösen:
Glu Leu Leu Glu Arg Leu Leu Xaa Arg Leu,
5 10 ahol
Xaa jelentése Glu, Lys vagy Lys(COCH2PEGX) (PEGX=polietilénglikol-metil-éter-gyök, melynek molekulatömege 100-10 000) (27. számú szekvencia);
c) Alá Leu Alá Glu Alá Leu Alá Glu Alá Leu
5 10 (28. számú szekvencia);
d) Ser Leu Leu Ser Ser Leu Leu Ser Ser Leu
5 10 (29. számú szekvencia);
e) Alá Phe Tyr Asp Lys Val Alá Glu Lys Leu
5 10 (30. számú szekvencia).
Egy másik vonatkozásban a találmány tárgya a PTH, PTHrp, valamint a PTH és PTHrp fiziológiailag aktív, rövidített analógjainak és homológjainak, illetve ezek sóinak analógjai, melyek a következő képlettel írhatók le:
Xaa1 Xaa2 Xaa3 Xaa4 Xaa5 Xaa6 Xaa7 Leu His Xaa10 Xaa11 Gly Xaa13 Ser IIe Gin Xaa17 Leu Xaa19 Xaa20 Xaa21 Xaa22-31 Xaa32 Xaa33 Xaa34 Xaa35 Xaa36 Xaa37 Xaa38 Term., melyben
Xaa1: hiányzik vagy Alá;
Xaa2: hiányzik vagy Val;
Xaa3: hiányzik vagy Ser;
Xaa4: hiányzik vagy Glu vagy Glu(OCH3);
Xaa5: hiányzik vagy His vagy Alá;
Xaa6: hiányzik vagy Gin;
Xaa7 hiányzik vagy Leu;
Xaa10 és Xaa17: (egymástól függetlenül) Asp vagy Asp(OCH3);
Xaa11: Lys, Arg vagy Leu;
Xaa13: Lys, Arg, Tyr, Cys, Leu, [CH2CONH(CH2)2NH-(biotinil)]-Cys, (7-dimetilamino-2-oxo-2H-1 -benzopirán-4-acetil) - Lys vagy (dihidrocinnamoil)-Lys;
Xaa20: Arg vagy Leu;
Xaa19 és Xaa21: (egymástól függetlenül) Lys, Alá vagy Arg';
Xaa22-31: a 26., 27., 28., 29. vagy 30. számú szekvencia valamelyike;
Xaa32: His, Pro vagy Lys;
Xaa33: hiányzik vagy Pro, Thr, Glu vagy Alá;
Xaa34: hiányzik vagy Pro, Arg, Met, Alá, hSer, hSerlakton, Tyr, Leu vagy 1,4-diamino-butiril-laktám;
Xaa35: hiányzik vagy Pro, Glu, Ser, Alá vagy Gly; Xaa36: hiányzik vagy Alá, Arg vagy IIe;
Xaa37: hiányzik vagy Arg, Trp vagy 3-(2-naftil)-Lalanin;
Xaa38: hiányzik vagy Alá vagy hSer; vagy
Xaa38-42: Thr Arg Ser Alá Trp; és
Term.: OR vagy NR2, melyekben R egymástól függetlenül lehet hidrogén, 1 -4 szénatomos alkil- vagy fenil(C,_4)-alkil-csoport; valamint ezek gyógyszerészetileg megfelelő sói.
A találmány egy további tárgya az alábbi I. képlet szerinti, fiziológiailag aktív, rövidített hPTHrp(l-34) homológ:
Alá Val Ser Glu Xaa5 Gin Leu His Asp Xaa11 Gly Xaa13 Ser IIe Gin Asp Leu Xaa19 Arg Xaa21 Xaa22-31 Xaa32 Xaa33 Xaa34 Term., melyben
Xaa5 jelentése His vagy Alá;
Xaa11 és Xaa13: (egymástól függetlenül) Lys, Arg vagy Leu;
Xaa19 és Xaa21: (egymástól függetlenül) Alá vagy Arg; Xaa22-31 jelentése az alábbi szekvenciák valamelyike :
a) Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Xaa Lys Leu,
5 10 ahol
Xaa jelentése Glu vagy Arg (26. számú szekvencia);
b) Glu Leu Leu Glu Arg Leu Leu Xaa Arg Leu,
5 10 ahol
Xaa jelentése Glu, Lys vagy Lys(COCH2PEGX) (PEGX=polietilénglikol-metil-éter-gyök, melynek molekulatömege 100-10 000) (27. számú szekvencia);
c) Alá Leu Alá Glu Alá Leu Alá Glu Alá Leu
5 10 (28. számú szekvencia)
d) Ser Leu Leu Ser Ser Leu Leu Ser Ser Leu
5 10 (29. számú szekvencia);
HU 217 843 Β
e) Alá Phe Tyr Asp Lys Val Alá Glu Lys Leu 1 5 10 (30. számú szekvencia); továbbá Xaa32: His vagy Lys;
Xaa33: Thr, Glu vagy Alá;
Xaa34: Alá, hSer, Tyr vagy Leu; és Term.: Gly Arg Arg, lakton, OH vagy NR2 (melyben mindkét R lehet H vagy 1 -4 szénatomos alkilcsoport), továbbá gyógyszerészetileg megfelelő sóik (I. képlet).
A találmány közelebbi tárgyát azok az I. képlet szerinti polipeptidek képezik, melyekben az Xaa22-31 szekvencia a 26. számú szekvencia, melynek átlagos hidrofobitási momentuma (<μΗ>) 100°-nál több, mint 0,45. A találmány még specifikusabb tárgyát azok az I. képlet szerinti polipeptidek képezik, melyekben az
Xaa22-31 szekvencia a 26. számú szekvencia, és melyekben Xaa11 és Xaa13 jelentése egyaránt Lys, továbbá Xaa19 és Xaa21 jelentése egyaránt Arg.
A jellemző polipeptidek közé tartoznak (nem kizárólagosan) az alábbi szekvenciák:
Al a 1 | Va 1 | Ser | Glu | Hi s 5 | G1 n | Leu | Leu His | Asp 10 | Ly s | Gly | Ly s | Ser | I le 15 |
Gin | Asp | Leu | Arg | Arg | Arg | Glu | Leu Leu | Glu | Ly s | Leu | Leu | Arg | Ly s |
20 | 25 | 30 | |||||||||||
Leu | Hi s | Thr | Al a | OH | | [5. számú szekvencia); | ||||||||
Al a | Va 1 | Ser | Glu | Hi s | Gin | Leu | Leu His | As p | Ly s | Gly | Ly s | Ser | 11 e |
1 | 5 | 10 | 15 | ||||||||||
Gin | As p | Leu | Arg | Arg | Arg | Glu | Leu Leu | Glu | Ly s | Leu | Leu | Glu | Ly s |
20 | 25 | 30 | |||||||||||
Leu | Hi s | Thr | Al a | OH I | 6. számú szekvencia); | ||||||||
Alá | Va 1 | Ser | Glu | Hi s | Gin | Leu | Leu Hi s | As p | Ly s | Gly | Ly s | Ser | I le |
1 | 5 | 10 | 15 | ||||||||||
Gin | As p | Leu | Arg | Arg | Arg | Glu | Leu Leu | Glu | Ly s | Leu | Leu | Glu | Ly s |
20 | 25 | 30 | |||||||||||
Leu | Hi s | Thr | Al a | nh2 | (7. számú szekvencia); | ||||||||
Al a | Va 1 | Ser | Glu | Hi s | Gin | Leu | Leu His | As p | Ly s | Gly | Ly s | Ser | I le |
1 | 5 | 10 | 15 | ||||||||||
Gin | As p | Leu | Arg | Arg | Arg | Glu | Leu Leu | Glu | Ly s | Leu | Leu | Glu | Ly s |
20 | 25 | 30 | |||||||||||
Le u | Hi s | Thr | hSe: | r NH | 2 (8. számú szekvencia); | ||||||||
Al a | Va 1 | Ser | Glu | Hi s | Gin | Leu | Leu His | As p | Ly s | Gly | Ly s | Ser | I le |
1 | 5 | 10 | 15 | ||||||||||
Gin | As p | Leu | Arg | Arg | Arg | Glu | Leu Leu | Glu | Ly s | Leu | Leu | G1 u | Ly s |
20 | 25 | 30 | |||||||||||
Leu | Hi s | Thr | hSe r-lakton | (9. számú szekvencia); | |||||||||
Al a | Va 1 | Ser | Glu | Hi s | Gin | Leu | Leu His | As p | Ly s | Gly | Lys | Ser | I 1 e |
1 | 5 | 10 | 1 5 | ||||||||||
Gin | As p | Leu | Arg | Arg | Arg | G1 u | Leu Leu | Glu | Ly s | Leu | Leu | Glu | Ly s |
20 | 25 | 30 | |||||||||||
Leu | Hi s | Thr | Al a | Gly | Arg | Arg | OH (10. számú szekvencia); és | ||||||
35 | |||||||||||||
Al a | Va 1 | Ser | Glu | Hi s | Gin | Leu | Leu His | As p | Ly s | Gly | Ly s | Ser | 11 e |
1 | 5 | 10 | 15 | ||||||||||
Gin | As p | Leu | Arg | Arg | Arg | Glu | Leu Leu | Glu | Ly s | Leu | Leu | Glu | Ly s |
20 | 25 | 30 | |||||||||||
Leu | Ly s | Glu | Leu | NH2 | (11. számú szekvencia). |
A találmány egy másik tárgyát azok az I. képlet szerinti polipeptidek képezik, melyekben az Xaa22 31 szekvencia a 26. számú szekvencia, és melyekben Xaa11 és Xaa13 jelentése egyaránt Lys, továbbá Xaa19 és Xaa21 egyikének jelentése Arg, míg a másiké Alá. Ezen alcsoportjellemző polipeptidjei közé tartoznak (nem kizárólagosan) az alábbi szekvenciák:
Al a | Va | 1 | Ser | G1 | u | Hi s |
1 | 5 | |||||
Gin | As | P | Leu | Al | a | Arg |
20 | ||||||
Le u | Hi | s | Thr | Al | a | nh2 |
Gin | Leu | Leu | Hi s | As p 10 |
Arg | Glu | Leu | Leu | Glu 25 |
(12. számú szekvencia);
Ly s | Gly | Ly s | Ser | I le 1 5 |
Ly s | Leu | Leu | Glu | Ly s 30 |
HU 217 843 Β
Alá 1 | Va 1 | Ser | Glu | Hi s 5 |
Gin | Asp | Leu | Arg | Arg 20 |
Leu | Hi s | Thr | Al a | nh2 |
(13. számú szekvencia).
G1 n | Leu | Leu | Hi s | As p 10 |
Al a | Glu | Le u | Leu | Glu 25 |
Lys Gly Lys Ser Ile 15
Lys Leu Leu Glu Lys 30
A találmány egy másik tárgyát azok az I. képlet szerinti polipeptidek képezik, melyekben az Xaa22 31 szekvencia a 26. számú szekvencia, és melyekben az Xaa11 és az Xaa13 egyikének j elentése Leu, míg a másik j elen- 10 tése Lys, továbbá Xaa19 és Xaa21 jelentése egyaránt Arg. Ezen alcsoport jellemző polipeptidjei közé tartozik (nem kizárólagosan) az alábbi szekvencia:
Al a 1 | Va 1 | Ser | Glu | Al a 5 | Gin Leu | Leu His | Asp 10 | Leu | Gly | Lys | Ser | Ile 15 |
Gin | As p | Leu | Arg | Arg | Arg Glu | Leu Leu | Glu | Ly s | Leu | Le u | Glu | Ly s |
20 | 25 | 30 | ||||||||||
Leu | Hi s | Al a | Leu | OH | (14. számú szekvencia). |
A találmány egy további tárgyát azok az I. képlet szerinti polipeptidek képezik, melyekben az Xaa22-31 szekvencia a 27. számú szekvencia, melynek átlagos hidro- 20 fobitási momentuma (<μΗ>) 100°-nál több mint 0,50.
A találmány egy további tárgyát azok az I. képlet szerinti polipeptidek képezik, melyekben az Xaa22'31 szekvencia a 27. számú szekvencia, és melyekben Xaa11 és Xaa13 jelentése egyaránt Lys vagy egyaránt Arg, továbbá Xaa19 és Xaa21 jelentése egyaránt Arg. Ezen alcsoport jellemző polipeptidjei közé tartoznak (nem kizárólagosan) az alábbi szekvenciák:
Al a 1 | Va 1 | Ser | Glu | Hi s 5 | Gin Leu | Leu His | As p 10 | Ly s | Gly | Ly s | Ser | Ile 15 |
Gin | As p | Leu | Arg | Arg | Arg G1u | Leu Leu | Glu | Arg | Leu | Leu | Glu | Arg |
20 | 25 | 30 | ||||||||||
Leu | Hi s | Thr | Al a | OH (15. számú szekvencia); | ||||||||
Al a | Va 1 | Ser | G1 u | Hi s | Gin Leu | Leu His | As p | Arg | Gly | Arg | Ser | Ile |
1 | 5 | 10 | 15 | |||||||||
Gin | As p | Leu | Arg | Arg | Arg Glu | Leu Leu | Glu | Arg | Leu | Leu | Glu | Arg |
20 | 25 | 30 | ||||||||||
Leu | Hi s | Thr | Al a | OH ' | (16. számú szekvencia); | |||||||
AI a | Va 1 | Ser | G1 u | Hi s | Gin Leu | Leu His | As p | Arg | Gly | Arg | Ser | I 1 e |
1 | 5 | 10 | 15 | |||||||||
Gin | As p | Leu | Arg | Arg | Arg Glu | Leu Leu | Glu | Arg | Leu | Leu | Ly s | Arg |
20 | 25 | 30 | ||||||||||
Leu | Hi s | Thr | Al a | OH | (17. számú szekvencia); | |||||||
Al a | Val | Ser | Glu | Hi s | Gin Leu | Leu Hi s | As p | Arg | Gly | Arg | Ser | 11 e |
1 | 5 | 10 | 15 | |||||||||
Gin | As p | Leu | Arg | Arg | Arg Glu | Leu Leu | G1 u | Arg | Leu | Leu |
25
Ly s (COCH2PEG2) Arg Leu His Thr Alá OH (18. számú szekvencia);
Al a | Va 1 | Ser | 30 Glu His | Gin | Leu | Leu | Hi s | As p | Arg | Gly | Arg Ser | Ile |
1 Gin | As p | Leu | 5 Arg Arg | Arg | Glu | Leu | Leu | 10 Glu | Arg | Leu | Leu | 1 5 |
25
Ly s (COCH2PEG5000) Arg Leu His Thr Alá OH (19. számú szekvencia). 30
A találmány egy további tárgyát azok az I. képlet szerinti polipeptidek képezik, melyekben az Xaa22~31 szekvencia a 28. számú szekvencia, melynek átlagos hidrofobitási momentuma (<μΗ>) 100°-nál körülbelül 0,25. Ezen alcsoport jellemző polipeptidjei közé tartozik (nem kizárólagosan) az alábbi szekvencia:
Al a | Va 1 | Ser | Glu | Hi s | Gin | Leu | Leu | Hi s | As p | Ly s | Gly | Arg | Ser | I 1 e |
1 | 5 | 10 | 15 | |||||||||||
Gin | As p | Leu | Arg | Arg | Arg | Al a | Leu | Al a | Glu | Al a | Leu | Al a | Glu | Al a |
20 | 25 | 30 | ||||||||||||
Le u | Hi s | Thr | Al a | nh2 | (20. számú s: | zekven | icia). |
HU 217 843 Β
A találmány egy további tárgyát azok az I. képlet szerinti polipeptidek képezik, melyekben az Xaa22-31 szekvencia a 29. számú szekvencia, melynek átlagos hidrofobitási momentuma (<μΗ>) 100°-nál körülbelül 0,28. Ezen alcsoport jellemző polipeptidjei közé tartozik (nem kizárólagosan) az alábbi szekvencia:
Al a | Va 1 | Ser | Glu | Hi s | Gin Leu Leu His | As p | Ly s | Gly | Ly s | Ser | I 1 e |
1 | 5 | 10 | 1 5 | ||||||||
G1 n | As p | Leu | Arg | Arg | Arg Ser Leu Leu | Ser | Ser | Leu | Leu | Ser | Ser |
20 | 25 | 30 | |||||||||
Le u | Hi s | Thr | Al a | nh2 | (21. számú szekvencia). |
A találmány egy további tárgyát azok az I. képlet szerinti polipeptidek képezik, melyekben az Xaa22 31 szekvencia a 30. számú szekvencia, melynek átlagos hidrofobitási momentuma (<μΗ>) 100°-nál körülbelül 0,29. Ezen alcsoport jellemző polipeptidjei közé tartozik (nem kizárólagosan) az alábbi szekvencia:
Al | a | Va | 1 | Ser | G1 | u | Hi s |
1 | 5 | ||||||
G1 | n | As | P | Leu | Ar | g | Arg |
20 | |||||||
Le | u | Hi | s | Thr | Al | a | nh2 |
Gin | Leu | Leu | Hi s | Asp 10 |
Arg | Al a | Phe | Tyr | As p 25 |
(22. számú szekvencia).
Ly s | Gly | Ly s | Ser | lle 15 |
Ly s | Va 1 | Al a | Glu | Ly s 30 |
A találmány további tárgyát képezik a fiziológiailag aktív, rövidített bPTH(l-34) homológ II. képlet szerinti polipeptidanalógjai:
Xaa1 Val Ser Glu lle Gin Xaa7 Xaa8 His Asn Leu Gly Lys His Leu Xaa16 Ser Xaa18 Xaa19 Arg Xaa21 Xaa22-31 His Asn Xaa34 Term., melyben
Xaa1 jelentése Ser vagy Alá;
Xaa7 jelentése Leu vagy Phe;
Xaa8 jelentése Met vagy Nle;
Xaa16 jelentése Asn vagy Ser;
Xaa18 jelentése Leu, Met vagy Nle;
Xaa19 jelentése Glu vagy Arg;
Xaa21 jelentése Val vagy Arg;
Xaa22-31 jelentése a 26., 27., 28., 29. és 30. szekvenciák valamelyike;
Xaa34 jelentése Phe vagy Tyr;
Term. jelentése OH vagy NR2 (melyben R jelentése H vagy 1-4 szénatomos alkilcsoport), továbbá ezek gyógyszerészetileg megfelelő sói (II. képlet).
A jellemző polipeptidek közé tartoznak (nem kizárólagosan) az alábbi szekvenciák:
Al a | Va 1 | Ser | Glu | lle | Gin Phe Nle | Hi s | Asn | Leu | Gly | Ly s | Hi s | Leu |
1 | 5 | 10 | 15 | |||||||||
Ser | Ser | NI e | Glu | Arg | Val Glu Leu | Leu | Glu | Ly s | Leu | Leu | Glu | Ly s |
20 | 25 | 30 | ||||||||||
Leu | H i s | Asn | Tyr | nh2 | (23. szekvencia); és | |||||||
Al a | Va 1 | Ser | Glu | I 1 e | Gin Phe Nle | Hi s | Asn | Leu | Gly | Ly s | Hi s | Leu |
1 | 5 | 10 | 15 | |||||||||
Ser | Ser | NI e | Arg | Arg | Arg Glu Leu | Leu | Glu | Ly s | Leu | Leu | Glu | Ly s |
20 | 25 | 30 | ||||||||||
Leu | Hi s | As n | Tyr | nh2 | (24. szekvencia). |
A találmány egy további tárgyaként, meglepő módon, azt találtuk, hogy a PTH és PTHrp 34 aminosavnál kevesebb gyököt tartalmazó homológjai és analógjai szintén hatásos csontátépítési szerek. Ezek az alábbi általános képlettel írhatók le:
Alá Val Ser Glu Xaa5 Gin Leu Leu His Asp Xaa11 Gly Xaa13 Ser lle Gin Asp Leu Xaa19 Xaa21 Arg Xaa22-31 50 Xaa32 Xaa33 Xaa34 Term.
A jellemző polipeptidek közé tartoznak (nem kizáró45 lagosan) az alábbi szekvenciák:
41. vegyület: AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK LHP-NH2 (55. számú szekvencia)
Al a | Va 1 | Ser | Glu | Hi s | Gin | Le u | Leu | Hi s | As p | Ly s | Gly | Ly s | Ser | I 1 e |
1 | 5 | 10 | 15 | |||||||||||
G1 n | As p | Leu | Arg | Arg | Arg | Glu | Leu | Leu | Glu | Ly s | Leu | Leu | Glu | Ly s |
20 | 25 | 30 | ||||||||||||
Leu | H i s | Pro | nh2 | (55. számú s; | zekven | cia). |
HU 217 843 Β
Fizikai adatok:
Olvadáspont: 142,8-166,1 °C [a]2D5 =-53,80 (c=0,38, H2O)
FAB (C173H295N55O49): [M+H]+ =3929 AAA: Asx 2,0 (2) Glx 5,7 (6) Ser 1,8 (2)
Al a 1 | Va 1 | Ser | Glu | Hi s 5 | GI n | Leu |
G1 n | As p | Leu | Arg | Arg 20 | Arg | Glu |
Leu | Pro | nh2 | (56. számú szekvencia). |
Fizikai adatok:
Olvadáspont: 161,0-177,0 °C [a]2D5 = -61,97 (c=0,19, H2O)
FAB (C167H288N52O48): [M+H]+=3792,0
AAA: Asx 2,2 (2) Glx 5,9 (6) Ser 1,9 (2)
His 2,1 (2) Gly 1,1(1) Alá 1,0(1)
Arg 3,0 (3) Val 1,1 (1) Ile 1,0(1)
Leu 7,9 (8) Lys 4,3 (4) Pro 0,9(1)
A szakemberek számára nyilvánvaló lesz, hogy számos megváltoztatott aminosav-sorrendű polipeptid szintetizálható, amelyek a leírt, kívánt tulajdonságokkal rendelkeznek, azzal a kikötéssel, hogy a 22-31. aminosavaknak megfelelő helyen egy olyan aminosavszekvencia helyezkedik el, melynek aminosavgyökönkénti átlagos hidrofobitási momentuma 100°±20°-nál nagyobb, mint körülbelül 0,20.
A polipeptidek klasszikus szintézise
A találmányunk szerinti polipeptidek olyan eljárásokkal szintetizálhatok, mint amilyeneket (a szilárd fázisú szintézissel kapcsolatban) J. M. Stewart és J. D Young (Solid Phase Synthesis, 2. kiadás, Pierce Chemical Co., Rockford, Illinois, 1984) és J. Meienhofer (Hormonal Proteins and Peptides, 2. kötet, Academic Press, New York, 1973), illetve - az oldatban végzett szintézissel kapcsolatban - E. Schroder és K. Lubke (The Peptides, 1. kötet, Academic Press, New York, 1965) írtak le.
Ezek az eljárások általában a védett aminosavak növekvő peptidlánchoz való egymás utáni hozzáadását foglalják magukban. Rendszerint az első aminosav amino- vagy karboxilcsoportja, illetve a reaktív oldallánccsoportok védettek. Ezt a védett aminosavat inért szilárd hordozóhoz kapcsolják, vagy oldatban alkalmazzák, s a szekvenciában következő, szintén megfelelően védett aminosavat az amidkötés kialakításához alkalmas körülmények között adják az előző aminosavhoz. Miután valamennyi kívánt aminosavat a helyes sorrendben összekapcsolták, a védőcsoportokat és a szilárd hordozót eltávolítják, miáltal a nyers polipeptidet kapják. A végtermék előállításához a polipeptidet sótalanítják és tisztítják - lehetőleg kromatográfiás úton.
A negyven aminosavnál kevesebbet tartalmazó, fiziológiailag aktív, rövidített polipeptidek analógjainak előnyben részesített előállítási módja a szilárd fázisú peptidszintézis. Ebben az eljárásban az alfa-amino (N“) funkciós csoportokat és valamennyi reaktív oldalláncot sav- vagy bázisérzékeny védőcsoporttal látjuk el. A védőcsoportoknak a peptidkötés kialakításának
His 3,0 (3) Gly 1,1(1) Alá 0,9(1) Arg 2,8 (3) Val 1,2(1) Ile 0,9(1)
Leu 7,4 (8) Lys 4,4 (4) Pro 0,9 (1)
42. vegyület: AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK LP-NH2 (56. számú szekvencia)
His Asp Lys Gly Lys Ser Ile 10 15
Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys 25 30 körülményei között stabilnak kell lenni, s a meglévő polipeptidlánc befolyásolása nélkül könnyen eltávolíthatónak is kell lenni. Az alkalmas alfa-amino védőcsoportok közé tartoznak (nem kizárólagosan) a í-butoxi-karbonil- (Boc), a benzil-oxi-karbonil- (Cbz), az o-klór-benzoil-oxi-karbonil-, a bifenil-izopropil-oxikarbonil-, a í-amil-oxi-karbonil- (Amoc), az izobomiloxi-karbonil-, az alfa,alfa-dimetil-3,5-(dimetoxi)-benzil-oxi-karbonil-, az ο-nitro-fenil-szulfenil-, a 2-cianoί-butoxi-karbonil-, a 9-fluorenil-metoxi-karbonil(Fmoc) és hasonló védőcsoportok, melyek közül a Z-butoxi-karbonil-csoport az előnyben részesített. Az alkalmas oldallánc védőcsoportok közé tartoznak (nem kizárólagosan) az acetil-, benzil- (Bzl), benzil-oximetil- (Bőm), o-bróm-benzil-oxi-karbonil-, í-butil-, f-butil-dimetil-szilil-, 2-klór-benzil- (Cl-z), 2,6-diklórbenzil-, ciklohexil-, ciklopentil-, izopropil-, pivalil-, tetrahidropirán-2-il-, tozil- (Tos), trimetil-szilil- és tritilcsoportok.
A szilárd fázisú szintézis során a C-terminális aminosavat először megfelelő gyantahordozóhoz kapcsoljuk. A megfelelő gyantahordozók olyan anyagok, amelyek a reagensekkel és a lépésenkénti kondenzációs és védőcsoport eltávolítási körülményekkel szemben mertek, és az alkalmazott oldószerben nem oldódnak. A kereskedelmileg beszerezhető gyanták közé tartoznak a reaktív csoporttal módosított sztirol/divinil-benzol kopolimer gyanták, például a klór-metilezett sztirol-divinilbenzol kopolimer, a hidroxi-metilezett sztirol-divinilbenzol kopolimer és hasonlók. A benzilezett, hidroximetilezett fenil-acetamido-metil (PAM)-gyanta az előnyben részesített. Ha a vegyület C-terminálisa egy amid, úgy az előnyben részesített gyanta a p-metil-benzhidril-amino-(sztirol - divinil-benzol) kopolimer.
Az aminosav PAM-gyantához való kapcsolását az N“-védett aminosav (lehetőleg Boc-aminosav) ammónium-, cézium-, trietil-ammónium-, 1,5-diaza-biciklo[5.4.0]undec-5-én-, tetrametil-ammónium- vagy hasonló sójának etanolban, acetonitrilben, N,N-dímetil-formamidban (DMF) és hasonlókban a gyantával végzett reakciójával valósítjuk meg. Előnyösen a céziumsót reagáltatjuk DMF-ben a gyantával, emelt hőmérsékleten, például 40-60 °C-on, lehetőleg 50 °C-on, körülbelül 12-72 órán keresztül, lehetőleg körülbelül 48 óráig.
Az N“-Boc-aminosav például N,N’-diizopropilkarbodiimid (DIC)/l-hidroxi-benzotriazol (HOBt) közvetett kapcsolással erősíthető a benzhidrilgyantához, mely reakciót körülbelül 2 órától körülbelül 24 óráig
HU 217 843 Β terjedő ideig, előnysöen körülbelül két órán keresztül körülbelül 10 °C-tól körülbelül 50 °C-ig terjedő hőmérsékleten, előnyösen 25 °C-on, diklór-metán vagy dimetil-formamid oldószerben (lehetőleg diklór-metánban) végezzük.
A védett aminosavak egymás utáni összekapcsolása a tudományban jól ismert eljárásokkal végezhető, jellemzően automatizált peptidszintetizátorban. Trietil-aminnal vagy más, hasonló bázissal végzett semlegesítés után a védett aminosavakat előnyösen körülbelül 1,5-2,5-szeres moláris feleslegben adjuk, s az összekapcsolt inért, nemvizes, poláris oldószerben, például diklór-metánban, DMF-ben vagy ezek elegyében, előnyösen diklór-metánban, környezeti hőmérsékleten végezzük. A jellemző összekapcsolási szerek az N,N’-diciklohexil-karbodiimid (DCC), az Ν,Ν’-diizopropil-karbodiimid (DIC) és más karbodiimidek, akár önmagukban, akár 1-hidroxibenzotriazol (HOBt), O-acil-karbamidok, benzotriazoll-il-oxi-trisz(pirrolidino)-foszfónium-hexafluoro-foszfát (PyBop), N-hidroxi-szukcinimid, egyéb N-hidroxi-imidek vagy oximok jelenlétében. Más lehetőség szerint a védett aminosav aktív észterei (például p-nitro-fenil-, pentafluor-fenil-észterek és hasonlók) vagy szimmetrikus anhidridek is alkalmazhatók.
A szilárd fázisú szintézis végén a teljesen védett peptidet eltávolítjuk a gyantáról. Ha a szilárd gyantahordozóhoz való kötődés benzil-észter típusú, akkor az alkilamid C-terminálissal rendelkező peptidek esetén a lehasítást alkil-aminnal vagy fluor-alkil-aminnal végzett aminolízissel, szubsztituálatlan amid C-terminálissal rendelkező peptidek esetében pedig ammónia/metanol vagy ammónia/etanol eleggyel végzett aminolízissel, körülbelül -10 °C és 50 °C közötti hőmérsékleten (lehetőleg körülbelül 25 °C-on), körülbelül 12-24 (lehetőleg körülbelül 18) órán keresztül hajtjuk végre. A hidroxi C-terminálissal rendelkező peptidek HF-dal vagy más erősen savas védőcsoport-eltávolítóval vagy elszappanosítással hasíthatok le. Más módon, a peptidek például metanollal végzett transz-észteresítéssel, majd az azt követő aminolízissel vagy elszappanosítással is eltávolíthatók a gyantáról. A védett peptid szilikagéloszlop-kromatográfiával tisztítható.
A peptidről az oldallánc védőcsoportok az aminolízissel nyert termék, például anizol vagy egyéb karbóniumion-eltávolító anyag jelenlétében, vízmentes folyékony hidrogén-fluoriddal végzett kezelésével, hidrogénfluorid/piridin komplexszel, trisz(trifiuor-acetil)-boronnal és trifluor-ecetsavval végzett kezelésével vagy folyékony ammóniában nátriummal végzett redukciójával távolítható el; előnyösen folyékony hidrogén-fluoriddal és anizollal körülbelül -10 °C és +10 °C közötti (lehetőleg 0 °C) hőmérsékleten körülbelül 15 perc és 2 óra közötti (lehetőleg 1,5 óra) ideig végzett kezeléssel.
Benzhidril-amin-gyantán lévő peptidek esetében a gyantáról való lehasítás és a védőcsoportok eltávolításának lépései a fent leírt folyékony hidrogén-fluorid és anizol alkalmazásával egy lépésben végezhetők.
Az oldatot sótalaníthatjuk (például BioRad AG-3® anioncserélő gyantával), s a peptid kromatográfiás lépések sorozatával tisztítható, melynek során az alábbi módszerek bármelyikét (vagy mindet) alkalmazhatjuk: ioncsere gyengén bázisos gyantán, acetát alakban; hidrofób adszorpciós kromatográfia szubsztituálatlan sztirol-divinil-benzol kopolimeren, például Amberlite® XAD-n; szilikagél-adszorpciós kromatográfia; karboxi-metil-cellulózon végzett ioncserélő kromatográfia; megoszlásos kromatográfia, például Sephadex® G-25 oszlopon; ellenáramú megoszlásos kromatográfia, illetve nagy teljesítményű folyadékkromatográfia (HPLC), különösen oktil- vagy oktadecil-szilil-szilikát (ODS) kötött fázisú oszlopon végzett reverz fázisú HPLC.
Fentieknek megfelelően a találmány egy további tárgya eljárások polipeptid és gyógyszerészetileg megfelelő sóik előállítására, melynek során a védett aminosavakat egymást követően alkalmas gyantahordozón kondenzáljuk, majd eltávolítjuk a védőcsoportokat és a gyantahordozót, s a terméket tisztítjuk, miáltal a PTH és PTHrp fiziológiailag aktív, rövidített homológjainak és analógjainak [előnyösen a PTH(l-34) és PTHrp(l-34)j analógjait állítjuk elő, melyekben a 22-31. helyen lévő aminosavak amfipatikus alfa-helikális peptidszekvenciát képeznek (amit fentebb leírtunk).
Polipeptidek rekombináns szintézise
A találmány szerinti polipeptidek előállításának másik módja a kívánt polipeptidet kódoló gén klónozása és expresszálása.
Ebben az eljárásban olyan plazmidot készítünk, amely a kívánt DNS-szekvenciát tartalmazza, és megfelelő mikroorganizmusgazdába, általában baktériumba, például E. coli-ba vagy élesztőkbe, például Saccharomyces cerevisiae-be inszertáljuk, miáltal a mikroorganizmust a plazmid - s ilyenformán a találmány szerinti polipeptidanalógokat kódoló cDNS másolatainak - termelésére indukáljuk.
Az eljárás során először - a későbbiek során végzett változtatások elősegítéséhez - restrikciós hasítási helyek alapján a kiválasztott PTH- vagy PTHrp-analógot kódoló szintetikus gént szerkesztünk. A szekvencia amplifikálásához polimeráz láncreakciót (PCR) alkalmazhatunk (lásd Mullis, 4 683 195 és 4 683 202 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás).
Az amplifikált szintetikus gént izoláljuk és alkalmas plazmidba ligáljuk, például Trp LE plazmidba, melybe egymás után a gén négy példánya inszertálható. A Trp LE plazmidokat a 4 738 921 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírásban és a 0 212 532 számú európai közrebocsátási iratban írták le. A Trp LE plazmidok általában 8-10-szer több proteint termelnek, mint a Trp E plazmidok. A többpéldányú gén megfelelő gazdában, például E. coli-ban vagy Saccharomyces cerevisiae-bert expresszálható.
Az alkalmazott expressziós vektor a Trp LE 18 Prot (Ile3, Pro5) volt, amely az ampicillinrezisztencia-gént és a plazmid replikációs kezdőpontját tartalmazó pBR322 fragmensből (EcoRI-BamHI), a trp promotert és a trpE gént tartalmazó EcoRl-SacII fragmensből, HIV-proteáz (Ile3, Pro5) génfragmensből (SacII-HindlII), bGRF génfragmensből (HindlII-BamHI) és az E. coli rpoc génjéből származó transzkripciós terminátorból áll. A HIV-proteáz és a
HU 217 843 Β bGRF génfragmensek nem feltétlenül szükségesek, s szükség szerint egyéb kódolószekvenciákkal helyettesíthetők.
Az expresszált multimer fúziós proteinek intracellulárisan stabil befogadótestekben gyűlnek össze, s centrifugálással elkülöníthetők a többi celluláris proteintől. Az izolált fúziós proteint monomer PTH- vagy PTHrp-analóggá alakítjuk és kationcserélő és/vagy reverz fázisú HPLC-vel tisztítjuk.
A klónozás, amplifikálás, expresszálás és tisztítás különböző módjai a szakemberek számára nyilvánvalóak. A jellemző eljárásokat Manietis és munkatársai írták le (Molecular Cloning, A Laboratory Manual, 2. kiadás, Cold Spring Harbor Laboratory, 1989).
Alkalmazhatóság és alkalmazás
A találmány szerinti polipeptidek a csont tömegének leépülésében megnyilvánuló számos emlősbetegség megelőzéséhez és kezeléséhez alkalmasak. A találmány szerinti vegyületek különösen az oszteoporózis és az oszteopenia megelőző (profilaktikus) és terápiás kezeléséhez alkalmasak.
A találmány szerinti polipeptideket vagy sóikat rendszerint naponta körülbelül 0,002-1 pg/testtömegkilogramm mennyiségben, lehetőleg naponta körülbelül 0,04 pg/testtömeg-kilogramm mennyiségben alkalmazzuk. 50 kg testtömegű nő esetében az aktív összetevő napi adagja körülbelül 0,1 pg-tól körülbelül 50 pg-ig, lehetőleg körülbelül 2,0 pg-tól körülbelül 10 pg-ig terjed. Más emlősök, például lovak, kutyák, szarvasmarhák esetében nagyobb dózisokra lehet szükség. Ezek a dózisok hagyományos gyógyszerkészítményekben egyszeri, többszöri beadással vagy kontrollált kibocsátással vihetők be, attól függően, hogy melyikkel érhető el a legjobb eredmény. Az előnyben részesített beadási mód a napi egyszeri vagy kétszeri injektálás.
A pontos adagolás, a készítmény és a legmegfelelőbb beviteli rendszer kiválasztását befolyásolhatják - többek között - a kiválasztott polipeptid gyógyszerészeti tulajdonságai, a kezelni kívánt betegség természete és súlyossága, valamint a kezelt páciens fizikai állapota és mentális fejlettsége.
A jellemző beadási rendszerek közé tartozik az orális, parenterális (beleértve a szubkután, intramuszkuláris és intravénás beadást), rektális, bukkális (beleértve a szublingvális beadást), pulmonáris, transzdermális és intranazális beadás.
A gyógyszerészetileg megfelelő sók toxikus mellékhatások nélkül megtartják az eredeti polipeptid biológiai aktivitását. Az ilyen sók példái
a) a szervetlen savakkal (például sósav, hidrogénbromid, kénsav, foszforsav, salétromsav és hasonlók), valamint a szerves savakkal (például ecetsav, oxálsav, borkősav, borostyánkősav, maleinsav, fumársav, glükonsav, citromsav, almasav, aszkorbinsav, benzoesav, csersav, palmoinsav, alginsav, poliglutaminsav, naffalinszulfonsavak, naftalindiszulfonsavak, poligalakturonsav és hasonlók) készített savaddíciós sók;
b) többértékű fémkationokkal (például cink-, kalcium-, bizmut-, bárium-, magnézium-, alumínium-, réz-, kobalt-, nikkel-, kadmiumionok és hasonlók) vagy N,N’dibenzil-etilén-diaminból vagy etilén-diaminból képezett szerves kationnal kialakított bázisaddíciós sók; és
c) az a) és b) pontban felsorolt sók kombinációi, mint például a cink-tannát-só és hasonlók.
A találmány további tárgya gyógyszerkészítményekre vonatkozik, amelyek aktív alkotórészként a találmány szerinti polipeptidek valamelyikét vagy gyógyszerészetileg megfelelő sóját gyógyszerészetileg megfelelő, nem toxikus hordozóval keverve tartalmazzák. Amint fentebb említettük, az ilyen készítmények parenterális (szubkután, intramuszkuláris, intravénás) alkalmazáshoz (folyékony oldatok vagy szuszpenziók formájában), orális vagy bukkális alkalmazáshoz (elsősorban tabletták és kapszulák formájában), pulmonáris vagy intranazális alkalmazáshoz (elsősorban porok, orrcseppek és aeroszolok formájában), valamint rektális és transzdermális alkalmazáshoz alakíthatók ki.
A készítmények alkalmas módon egységdózis formában alkalmazhatók, s a gyógyszerészettudományban jól ismert, például a Remington ’s Pharmaceutical Sciences-loen (Mack Publishing Company, Easton, PA,
17. kiadás, 1985) leírt eljárásokkal állíthatók elő. A parenterális alkalmazáshoz való készítmények kötőanyagként (excipiens) tartalmazhatnak steril vizet vagy sóoldatot, alkilénglikolokat (például propilénglikolt), polialkilénglikolokat (például polietilénglikolt), növényi eredetű olajokat, hidrogénezett naftalinokat és hasonlókat. Az orális alkalmazáshoz való készítmények epesavas sók vagy acil-kamitinek hozzáadásával egészíthetők ki. A nazális alkalmazáshoz való készítmények lehetnek szilárdak és tartalmazhatnak kötőanyagokat, például laktózt vagy dextránt, vagy orrcseppek, illetve pontos adagolású sprayk formájában való alkalmazáshoz lehetnek vizes vagy olajos oldatok. A bukkális alkalmazáshoz való jellemző kötőanyagok közé tartoznak a cukrok, a kalcium-sztearát, magnézium-sztearát, az előre zselatinezett keményítő és hasonlók.
Ha a készítményt nazális alkalmazáshoz alakítjuk ki, az ormyálkahártyán keresztül történő felszívódás felületaktív savakkal, mint például glikokólsavval, kólsawal, taurokólsawal, etokólsavval, dezoxikólsavval, kenodezoxikólsavval, dehidrokólsavval, gliko-dezoxikólsawal, ciklodextrinekkel és hasonlókkal fokozható, amelyeket körülbelül 0,2-15 m/m%, lehetőleg körülbelül 0,5 és 4 m/m%, leginkább 2 m/m% arányban alkalmazunk.
A kezelt beteg találmány szerinti vegyületekkel hosszú időn keresztül, például egy héttől egy évig terjedő ideig tartó ellátása kontrollált kibocsátású, a kívánt kibocsátási időtartam biztosításához megfelelő mennyiségű aktív anyagot tartalmazó rendszer egyszeri alkalmazásával valósítható meg. E célból különféle kontrollált kibocsátású rendszerek, mint például egy részből álló vagy rezervoár típusú mikrokapszulák, raktározóimplantátumok, ozmotikus pumpák, vezikulák, micellák, liposzómák, bőrtapaszok, iontoforetikus eszközök és más, injektálható dóziskészítmények alkalmazhatók. Néhány kontrollált gyógyszerkibocsátási eszköz az aktív összetevő megkívánt bejuttatási helyén való elhelyezkedéssel is jellemezhető, amely hasznos bizonyos betegségek kezelésében.
HU 217 843 Β
A kontrollált kibocsátási készítmények egyik típusa a polipeptidet vagy sóját lassan lebomló, nem toxikus, nem antigén hatású polimerben diszpergálva vagy ilyen polimerből készített kapszulában tartalmazza. Ilyen polimer például a tejsav/glikolsav kopolimer, amelyet úttö- 5 ró munkájukban Kent, Lewis, Sanders és Tice írtak le (4 675 189 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás). A találmány szerinti vegyületek vagy még inkább viszonylag oldhatatlan sóik koleszterin vagy más lipid kötőanyagú pirulákká, illetve szilasztomer kötő- 10 anyagú implantátumokká alakíthatók. A szakemberek számára egyéb lassú kibocsátású raktározóimplantátumok vagy injektálható készítmények is ismertek (lásd például: Sustained and Controlled Release Drug Delivery Systems, szerkesztő: J. R. Robinson, Marcel Dek- 15 kér, Inc., New York, 1978; és R. W. Baker, Controlled Release of Biologically Active Agents, John Wiley & Sons, New York, 1987).
A következőkben leírt példákat a találmány szerinti vegyületek szintézisének és tesztelésének jellemzésére 20 és semmiképpen nem az igénypontok körének korlátozására szánjuk. A példákban „op.” jelentése olvadáspont, ,,[a] jf ’ jelentése a feltüntetett oldószerben, adott koncentrációnál, 25 °C-on mért optikai aktivitás, „FAB” jelentése gyors elektronbombázásos tömegspektrometria, és 25 „AAA” jelentése aminosavanalízis (a mért értékek után zárójelben a várt értékek szerepelnek). Az aminosavanalízist a gyártó útmutatásai szerint Hewlett-Packard AminoQuant Analyzeren végeztük. A primer aminosavakat o-ftálaldehiddel, a szekunder aminosavakat Fmoc- 30 val származtattuk. A mennyiségi meghatározáshoz a leszármaztatott aminosavak fluoreszcenciás detektálását alkalmaztuk. A védett aminosavakat az Applied Biosystem Inc.-tól (Foster City, CA) szereztük be.
1. példa
Az 1. vegyületet (7. számú szekvencia) automatizált Applied Biosystems Model 430A peptidszintetizátor alkalmazásával, 4-metil-benzhidril-amin-gyantán, szilárd fázisú eljárással 0,5 mmol nagyságrendben állítottuk elő. Az alfa-aminocsoportokat í-butoxi-karbonil-csoporttal (Boc) védtük. Az oldalláncok védéséhez az Asp, Glu és Ser esetében benzilcsoportot (Bzl), az Arg esetében tozilcsoportot (Tos), a His esetében benzil-oxi-metil-csoportot (Bőm), a Lys esetében pedig 2klór-benzil-csoportot (Cl-z) alkalmaztunk. Az aminosavakat Stewart és Young (lásd fentebb) módszerével N,N-diciklohexil-karbodiimid/l-hidroxi-benzotriazol (DCC/HOBt) alkalmazásával egymás után kapcsoltuk össze. Miután valamennyi aminosavat összekapcsoltuk, a peptidet ecetsavanhidrid és diizopropil-etil-amin elegyével N-metil-pirrolidonban acetileztük. Az elkészült peptidet az oldalláncok védöcsoportjainak egyidejű eltávolításával anizol (2,5 ml) jelenlétében vízmentes hidrogén-fluoriddal (25 ml) -10 °C-on 30 percig és 0 °C-on 60 percig végzett kezeléssel hasítottuk le a gyantáról. A HF in vacuo elpárologtatása után a maradékot vízmentes éténél mostuk, és a nyerspeptidet 10%-os ecetsavval extraháltuk. A 10%-os ecetsavas extraktum liofilizálásával 900 mg nyersterméket kaptunk. A peptidet 0,1 %-os TFA-ban 22-45% CH3CN gradiens alkalmazásával közegnyomásos ODS reverz fázisú oszlopkromatográfiával tisztítottuk. A termék három frakcióban eluálódott, melyeket bekoncentráltunk és liofilizáltunk, miáltal 130 mg, 98%-osnál nagyobb tisztaságú fehér, szilárd anyagot kaptunk.
1. vegyület: AVSEHQLLHDKGKSIQDLRRELLEKLLEKLHTA-NH2 (7. számú szekvencia)
Al a | Va 1 | Ser | G1 u | His Gin Leu | Leu His Asp | Ly s | Gly Lys Ser Ile |
1 | 5 | 10 | 15 | ||||
Gin | As p | Leu | Arg | Arg Arg Glu | Leu Leu G1u | Ly s | Leu Leu Gly Lys |
20 | 25 | 30 | |||||
Leu | H i s | Thr | Al a | NH2 (7. számú szekvencia) | |||
Fizikai adat | ok: | A 2., 5-1 | 8., 21. | ., 24-27., 29-36., 38-48., 50-54., | |||
op.: 150-L | 59°C[ | α]ο = - | -34,88 | 0 (c=0,16, H2O) | 58-64. és 66 | -70. v | együleteket hasonlóan állítottuk elő |
FAB (C|75H300N56O5|): [M+H]+=4005,5 45 és jellemeztük, s a hidroxi-terminális polipeptidek szinAAA: Asp, 1,9 (2); Glu, 5,6 (6); Ser, 1,6 (2); His téziséhez PAM-gyantát alkalmaztunk.
2.7 (3); Gly, 1,0 (1); Thr, 0,9 (1); Alá, 1,9 (2); Arg,
2.8 (3); Val, 1,0 (1); Ile, 0,9 (1); Leu, 7,3 (8); Lys, 4,0 (4).
16. vegyület: AVSEHQLLHDKGKSIQDLRRAELLEKLLEKLHTA-NH2 (13. számú szekvencia)
Alá Val Ser Glu His Gin Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile 15 10 15
Gin Asp Leu Alá Arg Alá Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys
25 30
Leu His Thr Alá NH2 (13. számú szekvencia)
Fizikai adatok:
op.: 190-195 °C [a]2D5 =-50,50° (c=0,4, H2O) FAB (C|72H293N53O5I): [M + H] +=3919,0
AAA: Asp, 2,1 (2); Glu, 6,0 (6); Ser, 1,8 (2); His
3.1 (3); Gly, 1,0 (1); Thr, 1,0 (1); Alá, 3,0 (3); Arg,
2.1 (2); Val, 1,1 (1); Ile, 1,0 (1); Leu, 7,5 (8); Lys, 60 4,2(4).
HU 217 843 Β
77. vegyület: AVSEHQLLHDKGK.SIQDLRRRSLLSSLLSSLHTA—NH2 (21. számú szekvencia)
Alá Val Ser Glu His Gin Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile
10 15
Gin Asp Leu Alá Arg Arg Ser Leu Leu Ser Ser Leu Leu Ser Ser
25 30
Leu Hi s Thr Alá NH2 (21. számú szekvencia)
Fizikai adatok: AAA: Asp, 2,1 (2); Glu, 2,9 (3); Ser, 6,8 (7); His op.: 195-204°C [a]i’=-67,l 1° (c=0,3, H2O) 3,1 (3); Gly, 1,2 (1); Thr, 1,0 (1); Alá, 2,0 (2); Arg,
FAB (Cl63H280N54O50): [M+H]+=3796,0 10 3,0 (3); Val, 1,0 (1); Ile, 1,0 (1); Leu, 8,2 (8); Lys,
2,0 (2).
18. vegyület: AVSEHQLLHDKGKSIQDLRRRAFYDKVAEKLHTA-NH2 (22. számú szekvencia)
Alá Val Ser Glu His Gin Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile
10 15
Gin Asp Leu Arg Arg Arg Alá Phe Tyr Asp Lys Val Alá Glu Lys
25 30
Leu His Thr Alá NH2 (22. számú szekvencia)
Fizikai adatok: 20 AAA: Asp, 2,9 (3); Glu, 3,5 (4); Ser, 1,4 (2); His, op.: 200-207 °C [«$=-60,26° (c=0,6, H2O) 2,6 (3); Gly, 0,9 (1); Thr, 1,0 (1); Alá, 4,0 (4); Arg,
FAB (CI74H284N56O50): [M+H? =3960,0 3,0 (3); Tyr, 0,9 (1); Val, 1,9 (2); Phe, 1,1 (1); Ile,
0,9(1); Leu, 3,6 (4); Lys, 4,1(4).
27. vegyület: AVSEIQFLHN LGKHLSSLRR RELLEKLLEK LHNY-NH2 (35. számú szekvencia)
Alá Val Ser Glu Ile Gin Phe Leu His Asn Leu Gly Lys His Leu
10 15
Ser Ser Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys
25 30
Leu His Asn Tyr NH2 (35. számú szekvencia)
Fizikai adatok: AAA: Asx, 2,1 (2); Glx, 5,0 (5); Ser, 2,7 (3); His, op.: 148-155 °C [a]2D5=-45,97° (c=0,26, H2O) 3,0 (3); Gly, 1,0 (1); Alá, 0,9 (1); Arg, 3,1 (3); Tyr,
FAB (C184H304N56O49): [M+H]+=4084 0,9 (1); Val, 1,0 (1); Phe, 0,9 (1); Ile, 0,9 (1); Leu
9,3 (9); Lys, 3,2 (3).
24. vegyület: AVSEHQLLHD KGKSIQDLKL KELLEKLLEK LHTA-NH2 (38. számú szekvencia)
Alá Val Ser Glu His Gin Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile
10 15
Gin Asp Leu Lys Leu Lys Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys
25 30
Leu His Thr Alá NH2 (38. számú szekvencia)
Fizikai adatok: AAA: Asx, 2,1 (2); Glx, 6,5 (6); Ser, 1,8 (2); His, op.: 175-182 °C [«$=-49,99° (c=0,47, H2O) 45 3,1 (3); Gly, 1,1 (1); Thr, 1,0 (1); Alá, 2,1 (2); Val, FAB (Cl75H299N49Osl):[M+H]+=3906,5 1,1 (1); Ile, 1,0 (1); Leu, 9,1 (9); Lys, 6,5 (6).
25. vegyület: AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLERLLER LHTA-NH2 (39. számú szekvencia) | ||||||||
Al a | Va 1 | Ser | Glu | Hi s | Gin Leu Leu His | As p | Lys Gly Lys Ser | Ile |
1 | 5 | 10 | 1 5 | |||||
Gin | As p | Leu | Arg | Arg | Arg Glu Leu Leu | Glu | Arg Leu Leu Glu | Arg |
20 | 25 | 30 | ||||||
Leu | H i s | Thr | Al a | nh2 | (39. számú szekvencia) |
Fizikai adatok:
op.: 136,5-153,5 °C [«$ = -32,57° (c = 0,13, H,O)
FAB (C175H300N60O51): [M+H]+=4060,8
AAA: Asx, 2,2 (2); Glx, 6,2 (6); Ser, 1,8 (2); His,
3.2 (3); Gly, 1,1 (1); Thr, 1,0 (1); Alá, 2,1 (2); Arg,
5.2 (5); Val, 1,1 (1); Ile, 1,1 (1); Leu, 8,4 (8); Lys, 60 2,2(2).
HU 217 843 Β
26. vegyület. | AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLERLLER LHTAP-NH2 | (40. számú szekvencia) | ||||||||
Al a | Va 1 | Ser | Glu | Hi s | Gin | Leu Leu His Asp | Ly s Gly | Ly s | Ser | I le |
1 | 5 | 10 | 15 | |||||||
Gin | As p | Leu | Arg | Arg | Arg | Glu Leu Leu Glu | Arg Leu | Leu | Glu | Arg |
20 | 25 | 30 | ||||||||
Leu | Hi s | Thr | Al a | Pro 35 | nh2 | (40. számú szekvencia) |
Fizikai adatok: AAA: Asx, 2,1 (2); Glx, 6,2 (6); Ser, 1,8 (2); His, op.: 125,8-127,2 °C [a]V=-54,62° (c=0,23, 10 2,9 (3); Gly, 1,1 (1); Thr, 8,0 (8); Alá, 2,0 (2); Arg,
H2O) 5,1 (5); Val, 1,0 (1); IIe, 1,0 (1); Leu, 8,0 (8); Lys,
FAB (C180H306N60O53): [M+H]+=4158,0 2,1 (2); Pro, 1,1 (1).
27. vegyület. | • AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLERLLER LHTAGRR-OH (41 | . számú szekvencia) | ||||||
Al a | Va 1 | Ser | Glu | Hi s | Gin | Leu | Leu His Asp Lys Gly Lys | Ser I 1e |
1 | 5 | 10 | 15 | |||||
G1 n | As p | Leu | Arg | Arg | Arg | Glu | Leu Leu Glu Arg Leu Leu | Glu Arg |
20 | 25 | 30 | ||||||
Leu | Hi s | Thr | Al a | Gly 35 | Arg | Arg | OH (41. számú szekvencia) |
Fizikai adatok: AAA: Asx, 2,1 (2); Glx, 5,9 (6); Ser, 1,6 (2); His, op.: 106-137,3° [a]2D5=-39,55° (c=0,67, H2O) 2,7 (3); Gly, 2,2 (2); Thr, 1,0 (1); Alá, 1,8 (2); Arg,
FAB (C189H326N68O55): [M+H]+=4430,5 7,3 (7); Val, 0,8 (1); IIe, 1,0 (1); Leu, 8,1 (8); Lys,
2,1 (2).
29. vegyület: AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK LHTY-NH2 (43. számú szekvencia)
Alá Val Ser Glu His Gin Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser I1e
10 15
Gin Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys
25 30
Leu His Thr Tyr NH2 (43. számú szekvencia)
Fizikai adatok: AAA: Asx, 2,0 (2); Glx, 5,6 (6); Ser, 1,7 (2); His, op.: 160-172 °C[a]2D5=-49,85° (c=0,34, H2O) 3,1 (3); Gly, 1,1 (1); Thr, 0,9 (1); Alá, 0,9 (1); Arg,
FAB (C181H304N56O52): [M+H]+=4096,9 35 3,0 (3); Tyr, 0,9 (1); Val, 1,0 (1); He, 1,0 (1); Leu,
7,7 (8); Lys, 4,4 (4).
30. vegyület: AVSEHQLLHD KGYSIQDLRR RELLEKLLEK LHTA-NH2 (44. számú szekvencia)
Alá Val Ser Glu His Gin Leu Leu His Aps Lys Gly Tyr Ser I1e
10 15
Gin Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys
25 30
Leu His Thr Alá NH2 (44. számú szekvencia)
Fizikai adatok: 45 AAA: Asx, 2,0 (2); Glx, 5,5 (6); Ser, 1,8 (2); His, op.: 130-171 °C [a]2D5=-40,65° (c=0,34, H2O) 3,4 (3); Gly, 1,1 (1); Thr, 1,0 (1); Alá, 2,0 (2); Arg,
FAB (C178H?97N55O52): [M+H]+=4039,4 2,9 (3); Tyr, 0,8 (1); Val, 1,0 (1); IIe, 0,9 (1); Leu,
7,9 (8); Lys, 3,4 (3).
31. vegyület: AVSEHQLLHD KGCSIQDLRR RELLEKLLEK LHTA-NH2 (45. számú szekvencia) | ||||||||
Al a | Va 1 | Ser | Glu | Hi s | Gin Leu Leu His | As p | Lys Gly Cys Ser | 1 le |
1 | 5 | 10 | 15 | |||||
G1 n | As p | Leu | Arg | Arg | Arg Glu Leu Leu | Glu | Lys Leu Leu Glu | Ly s |
20 | 25 | 30 | ||||||
Leu | Hi s | Thr | Al a | NH2 | (45. számú szekvencia) |
Fizikai adatok: AAA: Asx+Cys, 3,0 (2+1); Glx, 5,6 (6); Ser, op.: 140-160 °C [a]2D5 = -44,48° (c=0,25, H2O) 1,7 (2); His, 3,0 (3); Gly, 1,0 (1); Thr, 0,9 (1); Alá,
FAB(C177H293N55O5IS,): [M+H]+=3979 1,9 (2); Arg, 2,5 (3); Val, 1,0 (1); IIe, 0,9 (1); Leu,
7,5 (8); Lys, 3,3 (3):
HU 217 843 Β
32. vegyület: AVSEHQLLHD KGXSIQDLRR RELLEKLLEK LHTA-NH2 (46. számú szekvencia), X=Cys[CH2CONH(CH2)2NH(biotinil)]
Al a | Va 1 | Ser | Glu | Hi s | Gin | Leu | Leu His | Asp Lys | Gly Xaa | Ser Ile |
1 | 5 | 10 | 1 5 | |||||||
Gin | As p | Leu | Arg | Arg | Arg | Glu | Leu Leu | Glu Lys | Leu Leu | Glu Lys |
20 | 25 | 30 | ||||||||
Leu | Hi s | Thr | Al a | nh2 | (46. számú szekvencia) (Xaa=[CH2CONH(CH2)2NH(biotinil)]Cys) |
Fizikai adatok: AAA: Asx, 2,2 (2); Glx, 6,1 (6); Ser, 1,8 (2); His, op.: (nem meghatározott) [a]2D5=(nem meghatáro- 10 3,8 (3); Gly, 1,0 (1); Thr, 1,0 (1); Alá, 2,0 (2); Arg, zott) 3,1 (3); Val, 1,1 (1); Ile, 0,9 (1); Leu, 8,3 (8); Lys,
FAB (C186H3I6N59O54S2): [M+H? =4306,6 3,3 (3).
33. vegyület: AVSEHQLLHD KGXSIQDLRR RELLEKLLEK LHTA-NH2 (47. számú szekvencia), X=[7-(dimetil-amino)-2-oxo-2H-l -benzopirán-4-acetil]-Lys
Al a 1 | Va 1 | Ser | Glu | Hi s 5 | Gin | Leu | Leu | H i s | Asp Lys 10 | Gly Xaa Ser Ile 15 |
Gin | As p | Leu | Arg | Arg 20 | Arg | Glu | Leu | Leu | Glu Lys 25 | Leu Leu Glu Lys 30 |
Leu | Hi s | Thr | Al a | nh2 | (47. számú szekvencia) (Xaa=[7-(dimetil-amino)-2-oxo-2H-l-benzopirán- |
4-acetil]-Lys)
Fizikai adatok: AAA: 1,9 (2); Glx, 6,3 (6); Ser, 1,7 (2); His, op.: 135-205 °C [a]2D5=-26,92° (c=0,104, 50% 3,2 (3); Gly, 1,0 (1); Thr, 1,1 (1); Alá, 2,0 (2); Arg, aq. HOAc) 25 3,2 (3); Val, 1,1 (1); Ile, 0,9 (1); Leu, 8,2 (8); Lys,
FAB (Clg8H311N57O54): [M+H]+=4233 4,5 (4).
34. vegyület. | • AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK LHTAG-OH (48. számú szekvencia) | ||||||||||
Al a | Va 1 | Ser | Glu | Hi s | Gin Leu Leu His | As p | Ly s | Gly | Ly s | Ser | Ile |
1 | 5 | 10 | 15 | ||||||||
Gin | As p | Leu | Arg | Arg | Arg Glu Leu Leu | Glu | Ly s | Leu | Leu | Glu | Ly s |
20 | 25 | 30 | |||||||||
Leu | Hi s | Thr | Al a | Gly 35 | (48. számú szekvencia) |
Fizikai adatok: AAA: Asx, 2,0 (2); Glx, 5,7 (6); Ser, 1,8 (2); His, op.: 92,1-146,6 °C [a]» = -40,76° (c=0,34, H,O) 3,0 (3); Gly, 2,2 (2); Thr, 0,9 (1); Alá, 1,9 (2); Arg,
FAB (C177H302N56O53): [M+H]+=4062,0 2,8 (3); Val, 1,2 (1); Ile, 0,9 (1); Leu, 7,5 (8); Lys,
4,2 (4).
35. vegyület: AVSX,HQLLHX2 KGKSIQX2LLR RX,LLX,KLLX,-K LHA-OH (49. számú szekvencia); X,=Glu(OCH3); X2=Asp(OCH3)
Alá Val Ser Xaa! His Gin Leu Leu His Xaa2 Lys Gly Lys Ser Ile 1 5 10 15
Gin Xaa2 Leu Arg Arg Arg Xaaj Leu Leu Xaat Lys Leu Leu Xaa!
25
Lys Leu His Alá OH (49. számú szekvencia), Xaa, =Glu(OCH3); Xaa2=Asp(OCH3)
Fizikai adatok: 50 AAA: Asx, 2,1 (2); Glx, 6,3 (6); Ser, 1,8 (2); His, op.: (nem meghatározott) [a]2D5 = -21,96° 3,3 (3); Gly, 1,1 (1); Thr, 1,0 (1); Alá, 2,0 (2); Arg, (c=0,132, HjO) 3,1 (3); Val, 1,1 (1), Ile, 0,9 (1); Leu, 8,0 (8); Lys,
FAB (C188H3„N55O52): [M+H] + =4089,0 4,2 (4).
36. vegyület: AVSX,HQLLHX2 KGKSIQX2LRR RX,LLX,KLLX1K LHA-OCH3 (50. számú szekvencia); X,=Glu(OCH3); X2=Asp(OCH3)
Alá Val Ser Xaa! His Gin Leu Leu His Xaa2 Lys Gly Lys Ser Ile
5 10 15
HU 217 843 Β
Gin Xaa2 Leu Arg Arg Arg Xaa] Leu Leu Xaa] Lys Leu Leu Xaa]
25
Lys Leu His Alá OCH3 (50. számú szekvencia); Xaa[=Glu(OCH3); Xaa2=Asp(OCH3)
Fizikai adatok: AAA: Asx, 2,1 (2); Glx, 6,2 (6); Ser, 1,4 (2); His, op.: (nem meghatározott) [a]2J=-46,80° (c=0,07, 3,0 (3); Gly, 1,1 (1); Thr, 1,1 (1); Alá, 1,7 (2); Arg,
H2O) 3,2 (3); Val, 0,6 (1); Ile, 0,9 (1); Leu, 8,0 (8); Lys,
FAB (C,82H3I3N55O52): [M+H]+=4103 4,1 (4).
38. vegyület: AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK LHTAP—OH (52. számú szekvencia)
Alá Val Ser Glu His Gin Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile 15 10 15
Gin Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys
25 30
Leu His Thr Alá Pro OH (52. számú szekvencia)
Fizikai adatok: AAA: Asx, 2,0 (2); Glx, 5,6 (6); Ser, 1,7 (2); His, op.: 152,1-186,5 °C [a]2D5 = -55,91° (c=0,33, 20 2,9 (3); Gly, 1,1 (1); Thr, 0,9 (1); Alá, 1,9 (2); Arg,
H2O) 2,9 (3); Val, 1,2 (1); Ile, 1,0 (1); Leu, 7,7 (8); Lys,
FAB (C,80H306N56O53): [M+H]+=4102,6 4,3 (4).
39. vegyület: AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK LHTP-OH (53. számú szekvencia) | |||||||||
Al a | Va 1 | Ser | Glu | His Gin Leu Leu His | As p | Lys Gly | Ly s | Ser | Ile |
1 | 5 | 10 | 15 | ||||||
Gin | As p | Leu | Arg | Arg Arg Glu Leu Leu | Glu | Lys Leu | Leu | Glu | Ly s |
20 | 25 | 30 | |||||||
Leu | Hi s | Thr | Pro | OH (53. számú szekvencia) |
Fizikai adatok: AAA: Asx, 2,0 (2); Glx, 5,6 (6); Ser, 1,8 (2); His, op.: 120-148,2 °C [a]2D5=-52,78° (c=0,47, H2O) 2,9 (3); Gly, 1,0 (1); Thr, 7,5 (8); Alá, 0,9 (1); Arg,
FAB (C]77H30,N55O52): [M+H]+=4031,0 2,9 (3); Val, 1,2 (1); Ile, 0,9 (1); Leu, 7,5 (8); Lys,
3,6 (4); Pro, 0,9 (1).
40. vegyület: AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK LHTP-NH2 (54. számú szekvencia)
Alá Val Ser Glu His Gin Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile
10 15
Gin Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys
25 30
Leu His Thr Pro NH2 (54. számú szekvencia)
Fizikai adatok: AAA: Asx, 2,0 (2); Glx, 5,6 (6); Ser, 1,9 (2); His, op.: 133,9-155,1 °C [a]2D5 =-54,22° (c=0,37, 2,9 (3); Gly, 1,1 (1); Thr, 0,9 (1); Alá, 0,9 (1); Arg,
H2O) 45 2,8 (3); Val, 1,2 (1); Ile, 1,1 (1); Leu, 7,8 (8); Lys,
FAB (C,77H302N56O51): [M + H] + =4030,7 4,2 (4); Pro, 0,9 (1).
41. vegyület: AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK LHP-NH, (55. számú szekvencia) Alá Val Ser Glu His Gin Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile 15 10 15
Gin Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys
25 30
Leu His Pro NH2 (55. számú szekvencia)
AAA: Asx, 2,0 (2); Glx, 5,7 (6); Ser, 1,8 (2); His, 3,0 (3); Gly, 1,1 (1); Alá, 0,9 (1); Arg, 2,8 (3); Val,
1,2 (1); Ile, 0,9 (1); Leu, 7,4 (8); Lys, 4,4 (4); Pro,
0,9(1).
Fizikai adatok:
op.: 142,8-166,1 °C [a]2D5 = -53,80° (c=0,38,
H2O)
FAB (C]73H295N55O49): [M+H]+=3929
HU 217 843 Β
42. vegyület: AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK LP-NH2 (56. számú szekvencia)
Alá Val Ser Glu His Gin Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser I le 15 10 15
Gin Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys
25 30
Leu Pro NH2 (56. számú szekvencia)
Fizikai adatok: AAA: Asx, 2,2 (2); Glx, 5,9 (6); Ser, 1,9 (2); His, op.: 161,0-177,0 °C [a]2D5 = -61,97° (c=0,19, 2,1 (2); Gly, 1,1 (1); Alá, 1,0 (1); Arg, 3,0 (3); Val,
H2O) 10 1,1 (1); Ile, 1,0 (1); Leu, 7,9 (8); Lys, 4,3 (4); Pro,
FAB (C167H288N52O48): [M + H]+=3792,0 0,9(1).
43. vegyület: AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK LHTRSAW-OH (57. számú szekvencia)
Alá Val Ser Glu His Gin Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile 15 10 15
Gin Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys 20 25 30
Leu His Thr Arg Ser Alá Trp OH (57. számú szekvencia)
Fizikai adatok: 20 AAA : Asx, 2,0 (2); Glx, 5,8 (6); Ser, 2,8 (3); His, op.: 181-202 °C [a]2J=-45,14° (c=0,19,H2O) 2,8 (3); Gly, 1,1 (1); Thr, 0,9 (1); Alá, 1,9 (2); Arg,
FAB (C195H326N62O56): [M+H]+=4435,2 3,7 (4); Ile, 0,9 (1); Leu, 7,5 (8); Lys, 4,3 (4); Trp,
0,9(1).
44. vegyület: AVSEHQLLHD RGRSIQDLRR RELLERLLER LHTAGRRTRSAW-OH (58. számú szekvencia)
Al a 1 | Va 1 | Ser | Glu | Hi s 5 | Gin | Leu | Leu | Hi s | As p 10 | Arg | Gly | Arg | Ser | I 1 e 15 |
Gin | As p | Leu | Arg | Arg | Arg | Glu | Leu | Leu | Glu | Arg | Leu | Leu | Glu | Arg |
20 | 25 | 30 | ||||||||||||
Leu | H i s | Thr | Arg | Gly | Arg | Arg | Thr | Arg | Ser | Al a | Trp | OH |
(58. számú szekvencia)
40
Fizikai adatok: 35 AAA: Asx, 2,2 (2); Glx, 6,0 (6); Ser, 2,7 (3); His, op.: 130-132,2 °C [a]2D5=-46,66° (c=0,195, H2O) 3,0 (3); Gly, 2,2 (2); Thr, 2,1 (2); Alá, 3,0 (3); Arg,
FAB (C216H365N81O62): [M+H]+=5088,8 10,5 (10); Val, 0,9 (1); Ile, 1,0 (1); Leu, 8,2 (8); Trp,
LO(l).
45. vegyület: AVSEHQLLHD RGRSIQDLRR RELLERLLER LHTAGRRTRSAW-NH2 (59. számú szekvencia)
Al a 1 | Va 1 | Ser | Glu | Hi s 5 | Gin | Leu | Leu | Hi s | As p 10 | Arg | Gly | Arg | Ser | I 1 e 15 |
Gin | As p | Leu | Arg | Arg | Arg | Gl u | Leu | Leu | Glu | Arg | Leu | Leu | Glu | Arg |
20 | 25 | 30 | ||||||||||||
Leu | Hi s | Thr | Arg | Gly | Arg | Arg | Thr | Arg | Ser | Al a | Trp | nh2 |
(59. számú szekvencia)
40
Fizikai adatok: 50 AAA: Asx, 1,9 (2); Glx, 5,6 (6); Ser, 2,6 (3); His, op.: 158-174 °C[<x]2D5=-43,57° (c=0,53, H2O) 3,3 (3); Gly, 2,1 (2); Thr, 2,0 (2); Alá, 2,9 (3); Arg,
FAB (C216H366N82O61): [M + H]-=5087,4 10,1 (10); Val, 0,9 (1); Ile, 1,0 (1); Leu, 8,3 (8); Trp,
1,1(1).
46. vegyület: AVSEHQLLHD RGXSIQDLRR RELLERLLER LHTAGRRTRSAW-OH (60. számú szekvencia); X=(dihidro-cinnamoil)Lys
Alá Val Ser Glu His Gin Leu Leu His Asp Arg Gly Xaa Ser Ile
10 15
HU 217 843 Β
Gin | Asp | Leu | Arg | Arg 20 | Arg | Glu | Leu | Leu | Glu 25 | Arg | Leu | Le u | Glu Arg 30 |
Le u | Hi s | Thr | Arg | Gly | Arg | Arg | Thr | Arg | Ser | Al a | Trp | OH | |
35 | 40 |
(60. számú szekvencia) [Xaa=(dihidro-cinnamoil)Lys]
Fizikai adatok: AAA: Asx, 2,1 (2); Glx, 6,3 (6); Ser, 2,8 (3); His, op.: 165,4-175,2 °C [a]/3 = -40,43° (c=0,20, 3,2 (3); Gly, 2,1 (2); Thr, 2,0 (2); Alá, 3,2 (3); Arg,
H2O) 9,9 (9); Val, 1,0 (1); Ile, 0,9 (1); Leu, 8,6 (8); Lys,
FAB (C225H374N8()O62): [M+H]+=5191 10 1,1 (1); Trp, 1,1 (1).
48. vegyület. | AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK LHTMA-NH2 (62.: | számú szekvencia) | ||||||||
Al a | Va 1 | Ser | Glu | Hi s | Gin | Leu Leu His Asp | Ly s | Gly Lys | Ser | I 1 e |
1 | 5 | 10 | 15 | |||||||
GI n | As p | Leu | Arg | Arg | Arg | Glu Leu Leu Glu | Ly s | Leu Leu | Glu | Ly s |
20 | 25 | 30 | ||||||||
Leu | Hi s | Thr | Me t | Al a 35 | nh2 | (62. számú szekvencia) |
Fizikai adatok: 20 AAA: Asx, 2,3 (2); Glx, 6,6 (6); Ser, 1,4 (2); His, op.: 140-210 °C [ct]2D5=-47,75° (c=0,178, H2O) 3,2 (3); Gly, 1,1 (1); Thr, 1,0 (1); Alá, 2,0 (2); Arg,
FAB (Cl80H309N57O52St): [M+H]+=4135,0 3,1 (3); Val, 0,9 (1); Met, 1,1 (1); Ile, 1,0 (1); Leu,
8,8(8); Lys, 4,4(4).
2. vegyület: AVSEHQLLHDKGKSIQDLRRRELLEKLLEKLHTA-OH (6. számú szekvencia)
Al a | Va 1 | Ser | Glu | Hi s | Gin | Leu | Leu His | As p | Ly s | Gly | Ly s | Ser | Ile |
1 | 5 | 10 | 15 | ||||||||||
Gin | As p | Leu | Arg | Arg | Arg | Glu | Leu Leu | Glu | Ly s | Leu | Leu | Glu | Ly s |
20 | 25 | 30 | |||||||||||
Leu | Hi s | Thr | Al a | OH | (6. számú szekvencia) |
Fizikai adatok: AAA: Asp, 2,1 (2); Glu, 5,9 (6); Ser, 1,7 (2); His, op.: 154-170 °C [a](j=-49,35° (c=0,46, H2O) 2,9 (3); Gly, 1,1 (1); Thr, 1,0 (1); Alá, 1,9 (2); Arg,
FAB (C175H301N57O50): [M+H] + =4005,0 3,0 (3); Val, 1,2 (1); Ile, 1,0 (1); Leu, 7,8 (8); Lys,
4,2 (4).
5. vegyület: AVSEHQLLHDKGKSIQDLRRRELLERLLERLHTA-OH (15. számú szekvencia)
Al a | Va 1 | Ser | Glu | His Gin Leu | Leu | Hi s | As p | Lys Gly Lys Ser | Ile |
1 | 5 | 10 | 15 | ||||||
Gin | As p | Leu | Arg | Arg Arg Glu | Leu | Leu | Glu | Arg Leu Leu Glu | Arg |
20 | 25 | 30 | |||||||
Leu | Hi s | Thr | Al a | OH (15. számú szí | ekvenc | :ia) | |||
Fizikai adat | ok: | AAA: As | >P, 2,1 (2); Glu, 6,1 (6); S | ler, 1,8 (2); His, | |||||
op.: 147-11 | 55 °C[ | aPDs=- | -49,17 | ° (c=0,66, H2O) | 45 | 3,1 (3 | ); Gly, | 1,1 (1); Thr, 1,0 (1); Al | a, 2,0 (2); Arg, |
FAB (C175H299N59O52): [M+H]+=4061 5,0 (5); Val, 1,0 (1); Ile, 0,9 (1); Leu, 7,7 (8); Lys,
1,9 (2).
6. vegyület: AVSEHQLLHDRGRSIQDLRRRELLERLLERLHTA-OH (16. számú szekvencia)
Al a | Va 1 | Ser | Glu | Hi s | Gin Leu | Leu His | As p | Arg | GI y | Arg | Ser | Ile |
1 | 5 | 10 | 1 5 | |||||||||
Gin | As p | Leu | Arg | Arg | Arg Glu | Leu Leu | Glu | Arg | Leu | Leu | Glu | Arg |
20 | 25 | 30 | ||||||||||
Leu | Hi s | Thr | Al a | OH | (16. számú szí | ekvencia) |
AAA: Asp, 2,1 (2); Glu, 6,1 (6); Ser, 1,8 (2); His,
3,2 (3); Gly, 1,2 (1); Thr, 1,0 (1); Alá, 2,0 (2); Arg,
6,9 (7); Val, 1,0 (1); Ile, 1,0 (1); Leu, 7,8 (8).
Fizikai adatok:
op.: 150-170 °C [a]/5=-48,65° (c=0,54, H2O)
FAB (C|75H299N63O52): [M+Hp=4118,0
HU 217 843 Β
7. vegyület: AVSEHQLLHDRGRSIQDLRRRELLERLLKRLHTA-OH (17. számú szekvencia)
Ala Val Ser Glu His Gin Leu Leu His Asp Arg Gly Arg Ser Ile 15 10 15
Gin Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Arg Leu Leu Lys Arg
25 30
Leu His Thr Ala OH (17. számú szekvencia)
Fizikai adatok: AAA: Asp, 2,0 (2); Glu, 4,8 (5); Ser, 1,8 (2); His, op.: 177-182 °C[a]£=-46,17° (c=0,14, H2O) 3,2 (3); Gly, 1,1 (1); Thr, 0,9 (1); Ala, 1,9 (2); Arg,
FAB (C176H304N64O50): [M+H] + =4117 10 6,7 (7); Val, 1,0 (1); Ile, 1,0 (1); Leu, 7,7 (8); Lys,
0.9(1).
8. vegyület: AVSEHQLLHDKGKSIQDLRRRELLEKLLRKLHTA-OH (5. számú szekvencia)
Ala | Va 1 | Ser | Glu | Hi s | G1 n | Leu | Leu His | As p | Ly s | Gly | Ly s | Ser | Ile |
1 | 5 | 10 | 15 | ||||||||||
Gin | As p | Leu | Arg | Arg | Arg | Glu | Leu Leu | Glu | Ly s | Leu | Leu | Arg | Ly s |
20 | 25 | 30 | |||||||||||
Leu | Hi s | Thr | Al a | OH | (5. számú szekvencia) |
Fizikai adatok: 20 AAA: Asp, 2,0 (2); Glu, 4,8 (5); Ser, 1,8 (2); His, op.: 147-165 °C [a]2D5=-49,17° (c=0,66, H2O) 2,7 (3); Gly, 1,1 (1); Thr, 0,9 (1); Ala, 2,0 (2); Arg,
FAB (C176H305NS9O49): [M+Hp =4033,0 3,9 (4); Val, 1,0 (1); Ile, 1,0 (1); Leu, 7,9 (8); Lys,
4,0 (4).
9. vegyület: AVSEHQLLHDKGKSIQDLRRRELLEKLLEKLHTAGRR-OH (10. számú szekvencia)
Al a | Va 1 | Ser | Glu | Hi s | Gin | Leu | Leu | His Asp Lys Gly | Lys | Ser | Ile |
1 | 5 | 10 | 15 | ||||||||
Gin | As p | Leu | Arg | Arg | Arg | Glu | Leu | Leu Glu Lys Leu | Leu | Glu | Ly s |
20 | 25 | 30 | |||||||||
Leu | Hi s | Thr | Al a | Gly | Arg | Arg | OH | (10. számú szekvencia) | |||
35 |
Fizikai adatok: AAA: Asp, 2,0 (2); Glu, 5,9 (6); Ser, 1,7 (2); His, op.: 158-160 °C [a]2D5=-44,76° (c=0,l, H7O) 2,9 (3); Gly, 2,3 (2); Thr, 1,0 (1); Ala, 1,9 (2); Arg,
FAB (CI89H326N64O55): [M+H] + =4375,0 35 5,0 (5); Val, 1,2 (1); Ile, 1,0 (1); Leu, 7,8 (8); Lys,
4,3 (4).
10. vegyület: AVSEAQLLHDLGKSIQDLRRRELLEKLLEKLHAL-OH (14. számú szekvencia) | |||||||
Al a | Va 1 | Ser | Glu | Ala Gin Leu Leu His | As p | Leu Gly Lys Ser | Ile |
1 | 5 | 10 | 1 5 | ||||
Gin | As p | Leu | Arg | Arg Arg Glu Leu Leu | Glu | Lys Leu Leu Glu | Ly s |
20 | 25 | 30 | |||||
Leu | Hi s | Al a | Leu | OH (14. számú szekvencia) |
Fizikai adatok: 45 AAA: Asp, 2,0 (2); Glu, 6,0 (6); Ser, 1,8 (2); His, op.: 170-175 °C [a]2D5=-31,59° (c=0,54, H2O) 2,0 (2); Gly, 1,2 (1); Ala, 3,0 (3); Arg, 2,8 (3); Val,
FAB (C174H300N52O5l): [M + H] +=3936,0 1,1 (1); Ile, 1,0 (1); Leu, 9,9 (10); Lys, 3,0 (3).
11. vegyület: AVSEHQLLHDKGKSIQDLRRRELLEKLLELLKEL-NH2 (11. számú szekvencia)
Al a 1 | Va 1 | Ser | Glu | Hi s 5 |
Gin | As p | Leu | Arg | Arg 20 |
Leu | Ly s | Glu | Leu | NH2 |
Gin | Leu | Leu | His | As p 10 |
Arg | Glu | Leu | Leu | Glu 25 |
(11. számú szekvencia) |
Lys Gly Lys Ser Ile 15
Lys Leu Leu Glu Lys 30
AAA: Asp, 2,2 (2); Glu, 7,7 (7); Ser, 1,7 (2); His, 2,0 (2); Gly, 1,0 (1); Ala, 1,0 (1); Arg, 3,0 (3); Val,
1,1(1); Ile, 1,0 (1); Leu, 9,3 (9); Lys, 5,1 (5).
Fizikai adatok:
op.: 172-174 °C [a]2D5=-43,29° (c=0,2, H2O)
FAB (C179H311N55O52): [M+H]+=4065,8
HU 217 843 Β
12. vegyület: AVSEIQFXHNLGKHLSSXERVELLEKLLEKLHNY—NH2 (X=Nle; 23. számú szekvencia)
Ala Val Ser Glu Ile Gin Phe NIe His Asn Leu Gly Lys His Leu 15 10 15
Ser Ser Nle Glu Arg Val Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys 20 25 30
Leu His Asn Tyr NH2 (23. számú szekvencia)
Fizikai adatok: AAA: Asp, 2,1 (2); Glu, 6,5 (6); Ser, 2,7 (3); His, op.: 178 °C [a?D 5=-36,88° (c=0,4, H2O) 3,1 (3); Gly, 1,1 (1); Ala, 1,0 (1); Arg, 1,0 (1); Tyr,
FAB (C182H295N50O51): [M+H]+=4001,6 10 0,8 (1); Val, 2,0 (2); Phe, 1,0 (1); Ile, 0,9 (1); Leu+Nle,
8,5 (7+2); Lys, 3,1 (3).
13. vegyület: AVSEIQFXHNLGKHLSSXRRRELLEKLLEKLHNY-NH2 (X=Nle; 24. számú szekvencia)
Ala Val Ser Glu Ile Gin Phe Nle His Asn Leu Gly Lys His Leu 15 10 15
Ser Ser Nle Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys 20 25 30
Leu His Asn Tyr NH2 (24. számú szekvencia)
Fizikai adatok: 20 AAA : Asp, 2,1 (2); Glu, 5,5 (5); Ser, 2,6 (3); His, op.: 260 °C [«]()=-37,02° (c=0,2, H2O) 3,1 (3); Ala, 1,0 (1); Gly, 1,1 (1); Arg, 3,2 (3); Tyr,
FAB (C184H304N56O49): [M+H]+=4084 1,0 (1); Val, 1,0 (1); Phe, 1,0 (1); Ile, 1,0 (1); Leu,
9,0 (9); Lys, 3,0 (3).
14. vegyület: AVSEHQLLHDKGKSIQDLRRRALAEALAEALHTA-NH2 (20. számú szekvencia) | ||||||||
Al a | Va 1 | Ser | Glu | Hi s | Gin Leu Leu His | As p | Lys Gly Lys Ser | I 1 e |
1 | 5 | 10 | 15 | |||||
Gin | As p | Leu | Arg | Arg | Arg Ala Leu Ala | Glu | Ala Leu Ala Glu | Al a |
20 | 25 | 30 | ||||||
Le u | Hi s | Thr | Al a | NH2 | (20. számú szekvencia) |
Fizikai adatok: AAA: Asp, 2,1 (2); Glu, 4,9 (5); Ser, 1,7 (2); His, op.: 190-225 °C [a]2D5 =-56,58° (c=0,36, H2O) 2,6 (3); Gly, 1,1 (1); Thr, 1,0 (1); Ala, 7,6 (7); Arg,
FAB (CI61H272N54O49): [M + H]+=3747,0 2,8 (3); Val, 1,1 (1); Ile, 1,0 (1); Leu, 6,6 (6); Lys,
1,9(2).
75. vegyület: AVSEHQLLHDKGKSIQDLARRELLEKLLEKLHTA-NH2 (12. számú szekvencia)
Ala Val Ser Glu His Gin Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile 15 10 15
Gin Asp Leu Ala Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys
25 30
Leu His Thr Ala NH2 (12. számú szekvencia)
Fizikai adatok: AAA: Asp, 2,1 (2); Glu, 6,1 (6); Ser, 1,7 (2); His, op.: 170-180 °C [a]2D5= -48,19° (c=0,2, H2O) 45 3,1 (3); Gly, 1,1 (1); Thr, 1,0 (1); Ala, 3,0 (3); Arg,
FAB (C172H?93N53O51): [M+H] + =3919,0 2,1 (2); Val, 1,1 (1); He, 1,0 (1); Leu, 8,0 (8); Lys,
4,4 (4).
50. vegyület: AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RFFLEKLLEK LHTA-NH2 (64. számú szekvencia)
Ala Val Ser Glu His Gin Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile 15 10 15
Gin Asp Leu Arg Arg Arg Phe Phe Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys
25 30
Leu His Thr Ala NH2 (64. számú szekvencia)
AAA: Asx, 2,2 (2); Glx, 5,0 (5); Ser, 1,9 (2); His,
3,3 (3); Gly, 1,0 (1); Thr, 1,0 (1); Ala, 2,1 (2); Arg,
3,1 (3); Val, 1,0 (1); Phe, 2,0 (2); Ile, 0,9 (1); Leu,
7,2 (7); Lys, 3,5 (4).
Fizikai adatok:
op.: 136,5-156,8 °C [a]2D5 =-49,89° (c = 0,24,
H2O)
FAB (C182H300N56O49): [M+H] + =4056,0
HU 217 843 Β
57. vegyület: AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLHKLLEK LHTA-NH2 (65. számú szekvencia)
Alá Val Ser Glu His Gin Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser lle 15 10 15
Gin Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu His Lys Leu Leu Glu Lys
25 30
Leu His Thr Alá NH2 (65. számú szekvencia)
Fizikai adatok: AAA: Asx, 2,2 (2); Glx, 4,9 (5); Ser, 1,8 (2); His, op.: 80,7-141,0 °C [a]2D5=-55,38° (c=0,23, H2O) 4.3 (4); Gly, 1,1 (1); Thr, 1,0 (1); Alá, 2,0 (2); Arg, FAB (C176H300N58O49): [M+H]+=4012,8 10 3.1 (3); Val, 1,1 (1); lle, 1,0 (1); Leu, 8,1 (8); Lys,
3,9(4).
52. vegyület: AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEHLLEK LHTA-NH2 (66. számú szekvencia)
Alá Val Ser Glu His Gin Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser lle 15 10 15
Gin Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu His Leu Leu Glu Lys
25 30
Leu His Thr Alá NH2 (66. számú szekvencia)
Fizikai adatok: 20 AAA: Asx, 2,1 (2); Glx, 5,9 (6); Ser, 1,8 (2); His, op.: 134,3-157,9 °C [a]2D5 = -50,72° (c = 0,45, 4,2 (4); Gly, 1,1 (1); Thr, 1,0 (1); Alá, 2,0 (2); Arg,
H2O) 3,0 (3); Val, 1,1 (1); lle, 0,9 (1); Leu, 8,1 (8); Lys,
FAB (C175H295N57O51): [M+H]+=4012,8 3,1 (3).
53. vegyület: AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLIAK LHTA-NH2 (67. számú szekvencia)
Alá Val Ser Glu His Gin Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser lle 15 10 15
Gin Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu lle Alá Lys
25 30
Leu His Thr Alá NH2 (67. számú szekvencia)
Fizikai adatok: AAA: Asx, 2,2 (2); Glx, 4,9 (5); Ser, 1,8 (2); His, op.: 142,7-159,8 °C [a]2D5 = -54,01° (c = 0,21, 3,1 (3); Gly, 1,1 (1); Thr, 1,0 (1); Alá, 3,1 (3); Arg,
H2O) 3,1 (3); Val, 1,0 (1); lle, 1,9 (2); Leu, 7,0 (7); Lys,
FAB (C173H298N56O49): [M + H] +=3946,0 35 4,3(4).
54. vegyület: AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEE IHTA-NH, (68. számú szekvencia) | ||||||||
Al a | Va 1 | Ser | Glu | Hi s | Gin Leu Leu His | As p | Lys Gly Lys Ser | I 1 e |
1 | 5 | 10 | 15 | |||||
Gin | As p | Leu | Arg | Arg | Arg Glu Leu Leu | Glu | Lys Leu Leu Glu | Glu |
20 | 25 | 30 | ||||||
lle | Hi s | Thr | Al a | NH2 | (68. számú szekvencia) |
Fizikai adatok: AAA: Asx, 2,2 (2); Glx, 7,1 (7); Ser, 1,7 (2); His, op.: 138-185 °C[a]2D5=-50,17° (c=0,14, H2O) 45 2,8 (3); Gly, 1,0 (1); Thr, 1,0 (1); Alá, 2,1 (2); Arg, FAB (C174H295N55O53): [M+H] + =4005 3,1 (3); Val, 1,1 (1); lle, 1,7 (2); Leu, 7,1 (7); Lys,
2,7 (3).
58. vegyület: AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK LHTRSAW-NH, (72. számú szekvencia)
Al a | Va | 1 | Ser | Glu | Hi s | G1 | n | Le | u | Leu |
1 | 5 | |||||||||
Gin | As | P | Leu | Arg | Arg | Ar | g | G1 | u | Leu |
20 | ||||||||||
Leu | Hi | s | Thr | Arg | Ser | Al | a | Tr | P | nh2 |
His Asp Lys Gly Lys Ser lle 10 15
Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys 25 30 (72. számú szekvencia)
Fizikai adatok:
op.: 158-163 °C [a]2D5 =-46,06° (c=0,17, H2O)
FAB (C195H327N63O55): [M + Hp=4434,8
AAA: Asx, 2,0 (2); Glx, 5,5 (6); Ser, 2,7 (3); His,
3,1 (3); Gly, 1,0 (1); Alá, 1,8 (2); Arg, 4,0 (4); Thr, 0,9 (1); Val, 0,9 (1); lle, 0,9 (1); Leu, 7,5 (8); Lys, 3,9 (4); Trp, 1,0(1).
HU 217 843 Β
59. vegyület: AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK LHTRSAX—OH (73. számú szekvencia) [X=Nal(2)=3-(2-naftil)-L-alanin]
Al a | Va 1 | Ser | Glu | Hi s | Gin | Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser | Ile |
1 | 5 | 10 | 1 5 | ||||
Gin | As p | Leu | Arg | Arg | Arg | Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu | Ly s |
20 | 25 | 30 | |||||
Leu | His | Thr | Arg | Ser | Al a | 3-(2-naftil)-L-alanin-OH (73. számú szekvencia) | |
35 |
Fizikai adatok: 10 AAA; Asx, 2,1 (2); Glx, 5,5 (6); Ser, 2,8 (3); His, op.: 156-162 °C [¢^=-44,44° (c=0,189,H2O) 2,9 (3); Gly, 1,0 (1); Alá, 2,0 (2); Arg, 4,0 (4); Thr,
FAB (C197H328N62O55): [M+H]+ =4445,6 0,9 (1); Val, 1,0 (1); Ile, 0,9 (1); Leu, 7,5 (8); Lys,
4,2(4); Nal, 1,1 (1).
60. vegyület: AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK LHTASAW-OH (74. számú szekvencia)
Alá Val Ser Glu His Gin Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile 15 10 15
Gin Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys 20 25 30
Leu His Thr Alá Ser Alá Trp OH (74. számú szekvencia)
Fizikai adatok: AAA: Asx, 2,0 (2); Glx, 5,6 (6); Ser, 2,7 (3); His, op.: 159-164 °C [α]£=-50,94° (c=0,29, H2O) 3,2 (3); Gly, 1,0 (1); Alá, 3,1 (3); Arg, 2,8 (3); Thr,
FAB (C192H320N60O55): [M+H]+=4349,0 25 1,0 (1); Val, 1,1 (1); Ile, 0,9 (1); Leu, 7,6 (8); Lys,
4,0 (4); Trp, 1,0(1).
61. vegyület: AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK LHTAEIRA-OH (75. számú szekvencia)
Alá Val Ser Glu His Gin Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile 15 10 15
Gin Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys 20 25 30
Leu His Thr Alá Glu Ile Arg Alá OH (75. számú szekvencia)
Fizikai adatok: AAA: Asx, 2,2 (2); Glx, 6,9 (7); Ser, 1,7 (2); His, op.: 155-210 °C[a]2D5 = -46,15° (c=0,12, H2O) 3,2 (3); Gly, 1,1 (1); Alá, 3,1 (3); Arg, 4,0 (4); Thr,
FAB (C195H334N6?O58): [M+H]+=4475,8 0,9 (1); Val, 1,1 (1); Ile, 1,9 (2); Leu, 8,1 (8); Lys,
4,1 (4).
62. vegyület: AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK LHTAEIR-OH (76. számú szekvencia) | ||||||||
Al a | Va 1 | Ser | Glu | Hi s | Gin | Leu | Leu His Asp Lys Gly Lys | Ser Ile |
1 | 5 | 10 | 15 | |||||
Gin | As p | Leu | Arg | Arg | Arg | Glu | Leu Leu Glu Lys Leu Leu | Glu Lys |
20 | 25 | 30 | ||||||
Leu | Hi s | Thr | Al a | G1 u 35 | Ile | Arg | OH (76. számú szekvencia) |
Fizikai adatok: AAA: Asx, 2,0 (2); Glx, 6,6 (7); Ser, 1,9 (2); His, op.: 186-218 °C [a]2J=-52,73° (c=0,265, H2O) 50 3,4 (3); Gly, 1,1 (1); Alá, 2,0 (2); Arg, 3,8 (4); Thr, FAB (CI92H329N61O57): [M+H] + =4404,4 1,0 (1); Val, 1,1 (1); Ile, 1,7 (2); Leu, 7,9 (8); Lys,
4,0 (4).
63. vegyület: AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK LHTAEI-OH (77. számú szekvencia)
Alá Val Ser Glu His Gin Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile 15 10 15
Gin Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys
25 30
Leu His Thr Alá Glu Ile OH (77. számú szekvencia)
HU 217 843 Β
Fizikai adatok:
op.: 169-205 °C [a]2D5 =-50,78° (c=0,51, H2O) FAB(C186H317N57O56): [M + H^ =4248,0
AAA: Asx, 2,2 (2); Glx, 6,8 (7); Ser, 1,8 (2); His,
3,3 (3); Gly, 1,0 (1); Alá, 2,0 (2); Arg, 3,0 (3); Thr, 1,0 (1); Val, 1,0 (1); Ile, 1,8 (2); Leu, 7,8 (8); Lys,
3,6 (4).
64. vegyület. | • AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK LHTAE-OH (78. számú szekvencia) | ||||||||
Al a | Va 1 | Ser | Glu | Hi s | Gin | Leu Leu His Asp | Lys Gly | Lys Ser | Ile |
1 | 5 | 10 | 15 | ||||||
Gin | As p | Leu | Arg | Arg | Arg | Glu Leu Leu Glu | Lys Leu | Leu Glu | Ly s |
20 | 25 | 30 | |||||||
Leu | Hi s | Thr | Al a | Glu 35 | OH | (78. számú szekvencia) |
Fizikai adatok:
op.: 199-205 °C [a]2D5=-52,47° (c=0,41, H2O) FAB (Cl80H306N56O55): [M+H]+=4135,0
AAA: Asx, 2,0 (2); Glx, 6,6 (7); Ser, 1,9 (2); His,
3,3 (3); Gly, 1,1 (1); Alá, 2,0 (2); Arg, 2,9 (3); Thr, 15 1,0 (1); Val, 1,1 (1); Ile, 1,0 (1); Leu, 8,2 (8); Lys,
3,8 (4).
66. vegyület: SEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK LHTA-NH2 (80. számú szekvencia) Ser Glu His Gin Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile Gin Asp 1 5
Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys Leu His
Thr Alá NH2 (80. számú szekvencia)
Fizikai adatok:
op.: 134,2 °C [a]2D5 = -48,12° (c=0,36, H2O) FAB (C167H286N54O49): [M+H]+=3834,4
AAA: Asx, 2,0 (2); Glx, 5,7 (6); Ser, 1,7 (2); His, 2,9 (3); Gly, 1,0 (1); Thr, 0,9 (1); Alá, 1,0 (1); Arg, 2,8 (3); Ile, 1,0 (1); Leu, 8,2 (8); Lys, 3,8 (4).
67. vegyület: LLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK LHTA-NH2 (81. számú szekvencia)
Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile Gin Asp Leu Arg Arg Arg 15 10 15
Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys Leu His Thr Alá NH2
25 (81. számú szekvencia)
Fizikai adatok: AAA: Asx, 2,0 (2); Glx, 4,1 (4); Ser, 0,9 (1); His, op.: 128,5-184,5 °C [a]2D5 = -6,53° (c = 0,69, 2,1 (2); Gly, 1,0 (1); Thr, 0,9 (1); Alá, 1,0 (1); Arg,
MCOH) 3,0 (3); Ile, 1,0 (1); Leu, 8,1 (8); Lys, 4,2 (4).
FAB (C148H259N47O41): [M + H] +=3353 40
68. vegyület: LHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK LHTA-NH2 (82. számú szekvencia)
Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile Gin Asp Leu Arg Arg Arg Glu 15 10 15
Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys Leu His Thr Alá NH2 (82. számú szekvencia)
Fizikai adatok:
op.: 165-210 °C [a]2D5=-36,05° (c=0,12, H2O) FAB (C142H248N46O40): [M+H]+=3239,0
AAA: Asx, 2,0 (2); Glx, 3,9 (4); Ser, 0,9 (1); His, 50 1,9 (2); Gly, 1,0 (1); Thr, 1,0 (1); Alá, 1,0 (1); Arg,
2,9 (3); Ile, 0,9 (1); Leu, 6,8 (7); Lys, 4,2 (4).
69. vegyület: | SEHQLLHD RGRSIQDLRR RELLERLLER | |||||||
Ser | Glu | Hi s | Gin | Leu | Leu | Hi s | As p | Arg |
1 | 5 | |||||||
Leu | Arg | Arg | Arg | Glu | Leu | Le u | Gl u | Arg |
20 | ||||||||
Leu | Hi s | Arg | Gly | Arg | Arg | Thr | Arg | Ser |
35 |
Lei
Ali
5 Hi ! 30
HU 217 843 Β
Fizikai adatok:
op.: 150-210 °C [a]2D4 5=-18,0° (c=0,64, H2O) FAB (C208H351N79O60): [M + H] + =4918,6
AAA: Asx, 2,2 (2); Glx, 6,2 (6); Ser, 2,8 (3); His,
3,1 (3); Gly, 2,2 (2); Thr, 2,2 (2); Alá, 2,2 (2); Arg, 10,4(10); Ile, 1,0(1); Leu, 8,0 (8); Trp, 1,1 (1).
70. vegyület. | • LLHD RGRSIQDLRR RELLERLLER LHAGRRTRSAW—OH (84. számú szekvencia) | ||||||||
Leu | Leu | Hi s | As p | Arg | Gly | Arg | Ser Ile Gin Asp Leu | Arg Arg | Arg |
1 | 5 | 10 | 15 | ||||||
Glu | Leu | Leu | Glu | Arg | Leu | Leu | Glu Arg Leu His Leu | His Arg | Gly |
20 | 25 | 30 | |||||||
Arg | Arg | Thr | Arg | Ser 35 | Alá | Trp | OH (84. számú szekvencia) |
Fizikai adatok:
op.: 150-210 °C[a]2D5=-41,70° (c=0,36, H2O) 15
FAB (C189H324N72O52): [M+H]+=4437,14
AAA: Asx, 2,1 (2); Glx, 4,1 (4); Ser, 1,9 (2); His,
2,0 (2); Gly, 2,1 (2); Thr, 2,0 (2); Alá, 2,1 (2); Arg,
9,7 (10); Ile, 0,9 (1); Leu, 7,4 (8).
Az oldalláncaival ciklizált analógot (57. vegyület) 20 szintén a fentiek szerint szintetizáltuk, azzal a különbséggel, hogy a 13. és 17. helyre Nu-Boc-Nf—Fmoc-Lys-t és Na-Boc-NY-Fmoc-Asp-t helyeztünk. A Boc aminosavszintézisének elvégzése után a gyantát szobahőmérsékleten 30 percig DMF-ben 20%-os piperidinnel 25 kezeltük. A gyantát leszűrtük, DMF-fel, metanollal és diklór-metánnal (CH2C12) mostuk. A gyantát (1,1 g) 250 mg PyBOP-t tartalmazó 10 ml DMF-ben szuszpendáltuk. A pH-t DIEA-val 8-9 értékre állítottuk be, és a gyantát egy órán keresztül kevertük, majd leszűrtük, DMF-fel és diklór-metánnal mostuk, s DMF-ben reszuszpendáltuk. Az összekapcsolást 125 mg ByBOP alkalmazásával megismételtük. A gyantát szűrtük, DMFfel, metanollal és diklór-metánnal mostuk, majd szárítottuk. A gyantát végül hidrogén-fluoriddal kezeltük, s a peptidet a fentebb leírtak szerint tisztítottuk.
57. vegyület: AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK LHTA-NH2 (71. számú szekvencia) Alá Val Ser Glu His Gin Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile 15 10 15
Gin Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys
25 30
Leu His Thr Alá NH2 (71. számú szekvencia)
Fizikai adatok:
op.: 142,5-163,5 °C [a]2D5 = -34,31° (c = 0,17, H2O)
FAB (Ci75H298N56O50): [M+H]+=3986,4
AAA: Asx, 1,9 (2); Glx, 5,9 (6); Ser, 1,8 (2); His,
3,2 (3); Gly, 1,1 (1); Alá, 2,0 (2); Arg, 3,0 (3); Thr, 1,0 (1); Val, 1,1 (1); Ile, 0,9 (1); Leu, 8,0 (8); Lys, 4,0 (4).
2. példa
Az 1. vegyületet [Met34, Alá35] [AVSEHQLLHDKGKSIQDLRRRELLEKLLEKLHTMA-NH2 (25. számú szekvencia)] az 1. példa szerinti eljárással szintetizáltuk és tisztítottuk. Ezt a polipeptidet az alábbi eljárással homoszerin-laktonná alakítottuk. A tisztított peptidet (160 mg) 44%-os hangyasavban (4 ml) feloldottuk, majd ezt az oldatot 0 °C-on 44%-os hangyasavban (4 ml) készített cián-bromid (700 mg) és fenol (1,6 mg) oldatával elegyítettük. A kapott oldatot 0 °C-on két óráig és szobahőmérsékleten szintén két óráig kevertük. A termék kialakulását HPLC-vel ellenőriztük (Vydac® C-18, 300 Á, 4,6 χ 250 mm, 1,2 ml/perc átfolyási sebesség, 0,1% TFA-ban 25-45%-os acetonitril gradiens, 10 perces időtartam). A reakció négy órán belül lejátszódott. A minta felét bekoncentráltuk és preparatív RP-HPLC-n tisztítottuk (Vydac® C-18, 0,1% TFAban 25-45%-os acetonitril gradiens). A homoszerinlakton peptidfrakciókat összegyűjtöttük és liofílizáltuk, miáltal 28 mg, 95%-osnál nagyobb tisztaságú fehér, szilárd terméket (4. vegyület) kaptunk.
4. vegyület: AVSEHQLLHDKGKSIQDLRRRELLEKLLEKLHTX (X=hSerlac; 9. számú szekvencia) Alá Val Ser Glu His Gin Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile 15 10 15
Gin Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys
25 30
Leu His Thr hSerlac (9. számú szekvencia)
Fizikai adatok: AAA: Asp, 2,1 (2); Glu, 6,1 (6); Ser, 1,8 (2); His, op.: 138-142 °C [a]2D5 = -50,66° (c=0,l,H2O) 3,0 (3); Thr, 1,1 (1); Alá, 1,1 (1); Arg, 2,7 (3); Val,
FAB(C,76H299N55O5,): [M+H]+=40l7,61 1,0 (1); Ile, 1,0 (1); Leu, 8,2 (8); Lys, 3,8 (4); Gly,
1,09 (1); hSer, 1,09(1).
HU 217 843 Β
A 65. vegyületet szintén a fenti eljárással állítottuk elő.
3. példa
Homoszerinamid előállításához a nyers homosze- 5 rin-lakton analógot (4. vegyület) bekoncentráltuk és metanolban 25 ml telített ammóniával kezeltük. Az oldatot 0 °C-on két óráig és szobahőmérsékleten 16 óráig kevertük. A reakciót HPLC-vel ellenőriztük (Vydac®
3. vegyület: AVSEIHQLLHDKGKSIQDLRRRELLEKLLEKLHTX-NH-, (X=hSer; 8. számú szekvencia)
C-18, 300 Á, 4,6 χ 250 mm, 1,2 ml/perc átfolyási sebesség, 0,1% TFA-ban 25-45%-os acetonitril gradiens) és 18 órán belül befejeztük. Az oldatot bekoncentráltuk és preparatív RP-HPLC-vel (Vydac® C-18, 0,1% TFAban 25-45%-os acetonitril gradiens) tisztítottuk. A homoszerinamid peptidfrakciókat összegyűjtöttük és liofilizáltuk, miáltal 30 mg, 98%-osnál nagyobb tisztaságú fehér, szilárd terméket (3. vegyület) kaptunk.
Al a | Va 1 | Ser | Glu His Gin Leu | Leu His Asp Lys Gly Lys | Ser | Ile |
1 | 5 | 10 | 1 5 | |||
Gin | As p | Leu | Arg Arg Arg Glu | Leu Leu Glu Lys Leu Leu | Glu | Ly s |
20 | 25 | 30 | ||||
Le u | Hi s | Thr | h S e r NH2 (8. számú szekvencia) | |||
Fizikai adatok: | 1,0 (1); Arg, 2,9 (3); Val, 1,0 (1); Ile, 1,0 (1); Leu, | |||||
op.: 138-142 °C[a]2D5= | -45,97° (c=0,25, H2O) | 7,6 (8); Lys, 3,9 (4). |
FAB (C176H302N56O52): [M+H]+=4033,9 20 A 22., 23. és 28. vegyületet hasonló módon szintén
AAA: Asp, 2,1 (2); Glu, 6,1 (6); Ser, 1,6 (2); His, a fenti eljárás szerint állítottuk elő.
2,8 (3); Gly, 0,97 (1); hSer, 0,97 (1); Thr, 1,0 (1); Alá,
22. vegyület: AVSEIQFLHN LGKHLSSLRR RELLEKLLEK LHNX-NH2 (X=homoszerin; 36. számú szekvencia)
Alá Val Ser Glu Ile Gin Phe Leu His Asn Leu Gly Lys His Leu 15 10 15
Ser Ser Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys
25 30
Leu His Asn hSer NH2 (36. számú szekvencia)
Fizikai adatok: AAA: Asx, 2,0 (2); Glx, 4,9 (5); Ser, 2,6 (3); His, op.: 69,4-128 °C [a]2D5=-43,93° (e=0,15 H2O) 2,8 (3); Gly, 1,0 (1); Alá, 1,0 (1); Arg, 3,0 (3); Val,
FAB (C179H302N56O49): [M+H]+=4022,9 35 1,0 (1); Phe, 1,0 (1); Ile, 0,9 (1); Leu, 8,8 (9); Lys,
3,4 (3).
23. vegyület: AVSEIQFLHN KGKHLSSLRR RELLEKLLEK LHNX-NH2 (X=homoszerin; 37. számú szekvencia)
Alá Val Ser Glu Ile Gin Phe Leu His Asn Lys Gly Lys His Leu 15 10 15
Ser Ser Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys
25 30
Leu His Asn hSer NH2 (37. számú szekvencia)
Fizikai adatok: AAA: Asx, 2,1 (2); Glx, 4,9 (5); Ser, 2,7 (3); His, op.: 87,1-142,1 °C [a]2D5=-52,14° (c=0,41, H2O) 2,8 (3); Gly, 1,0 (1); hSer, 1,0 (1); Alá, 1,0 (1); Arg,
FAB (C179H303N57O49): [M + H]+=4038 3,0 (3); Val, 1,1 (1); Phe, 0,9 (1); Ile, 0,9 (1); Leu,
7,9 (8); Lys, 3,7 (4).
28. vegyület: AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLERLLER LHTAGRRX-NH2 (X=homoszerin; 42. számú szekvencia)
Al a | Va 1 | Ser | Glu | Hi s | Gin | Leu | Leu His Asp Lys Gly Lys | Ser | Ile |
1 | 5 | 10 | 1 5 | ||||||
Gin | As p | Leu | Arg | Arg | Arg | Glu | Leu Leu Glu Arg Leu Leu | Glu | Arg |
20 | 25 | 30 | |||||||
Leu | Hi s | Thr | Al a | Gly | Arg | Arg | hSer NH2 (42. számú szekvencia) | ||
35 |
HU 217 843 Β
Fizikai adatok:
op.: 80 °C [a]2D4 5=-48,64° (c=0,09, H2O)
FAB (Cl93H334N70O56): [M+Hp=4530,0 AAA: Asx, 2,2 (2); Glx, 6,1 (6); Ser, 1,7 (2); His,
3,0 (3); Gly, 1,9 (2); hSer, 1,0 (1); Thr, 1,0 (1); Ala,
2,1 (2); Arg, 7,2 (7); Val, 0,8 (1); Ile, 1,0 (1); Leu,
8,4 (8); Lys, 2,1 (2).
A homoszerin-alkilamidokat hasonlóan homoszerin-laktonból állítottuk elő oly módon, hogy azt a megfelelő alkil-amin feleslegét tartalmazó DMF-ben oldottuk fel, és szobahőmérsékleten néhány napig végzett ke5 verést követően (a reakciót analitikai HPLC-vel ellenőriztük) az elegyet szárazra pároltuk, majd a peptidet preparatív HPLC-vel tisztítottuk. A jellemző homoszerin-alkilamidok az 55. és 56. vegyületek.
55. vegyület: AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK LHTX-NHCH2CH3 (X=homoszerin; 69. számú szekvencia)
Al a 1 | Va 1 | Ser | Glu | Hi s 5 | Gin | Leu Leu His | As p 10 | Lys | Gly | Ly s | Ser | I 1 e 1 5 |
Gin | As p | Leu | Arg | Arg | Arg | Glu Leu Leu | Glu | Ly s | Leu | Leu | Glu | Ly s |
20 | 25 | 30 | ||||||||||
Leu | Hi s | Thr | hSe | r NHCH2CH | 3 (69. számú szekvencia) |
Fizikai adatok: AAA: Asx, 2,1 (2); Glx, 5,8 (6); Ser, 1,7 (2); His, op.: (nem meghatározott) [a]2D5=(nem meghatáro- 3,1 (3); Gly, 0,9 (1); Thr, 1,0 (1); Ala, 0,9 (1); Arg, zott) 20 3,0 (3); Val, 1,1 (1); Ile, 1,0 (1); Leu, 8,4 (8); Lys,
FAB (C178H306N56O52): [M+H]-=4063,0 3,7 (4); hSer, 0,9 (1).
56. vegyület: AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK LHTX-NHCH2-CH2C6H5 (X=homoszerin; 70. számú szekvencia)
Ala Val Ser Glu His Gin Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile 15 10 15
Gin Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys
Leu His Thr hSer NHCH2CH2C6H5
Fizikai adatok:
op.: (nem meghatározott) [a]2D5=(nem meghatározott)
FAB (C184H310N56O52): [M+H]+=4138,8 AAA: Asx, 2,0 (2); Glx, 5,9 (6); Ser, 1,7 (2); His,
2,9 (3); Gly, 0,9 (1); Thr, 1,0 (1); Ala, 0,9 (1); Arg, 3,0 (3); Val, 1,0 (1); Ile, 0,9 (1); Leu, 8,0 (8); Lys,
4,1 (4); hSer, 0,9(1).
4. példa
Az 1. példában alkalmazott Boc-Ala gyanta helyett Merrifield-gyantához (DMF-ben 50 °C-on, 48 órás ke25 30 (70. számú szekvencia) zeléssel) kapcsolt Na-Boc-Ni'-Fmoc-L-2,4-diamino-vajsav céziumsót használtunk. A szintézis befejezésével az Fmoc oldallánc-védőcsoport eltávolítása érdekében a peptidet 30 percig, szobahőmérsékleten,
DMF-ben 20%-os piperidinnel kezeltük. A védett peptid spontán laktámmá ciklizálódott, miáltal lehasadt a gyantáról. Az oldatot leszűrtük a gyantáról és vákuum alatt bepároltuk, s így olaj maradt vissza. Ezt a maradékot az 1. példában leírtak szerint folyékony hidrogén40 fluoriddal kezeltük, miáltal védőcsoport nélküli nyerspeptidet kaptunk. A peptidet az 1. példában leírt módon kezeltük és tisztítottuk.
49. vegyület: AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK LHTX (X=L-2,4-diamino-butiril-laktám; 63. számú szekvencia)
Ala Val Ser Glu His Gin Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile 15 10 15
Gin Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys
25 30
Leu His Thr L-2,4-diamino-butiril-laktám (63. számú szekvencia)
Fizikai adatok:
op.: 161-181 °C [a]2D5 =-48,38° (c=0,25, H2O) FAB (C176H300N56O51): [M+H]+=4016,8 AAA: Asx, 2,1 (2); Glx, 6,3 (6); Ser, 1,7 (2); His,
3,3 (3); Gly 1,1 (1); Thr, 1,0 (1); Ala, 2,1 (2); Arg,
2,9 (3); Val, 0,9 (1); Ile, 0,9 (1); Leu, 8,0 (8); Lys,
3,8 (4).
5. példa
A 2. példában előállított homoszerin-lakton analóg vizes oldatát sertésmájészterázzal (Sigma Chemical Company, St. Louis, MO) kezeltük. A lakton Cterminális homoszerint eredményező hidrolízisét analitikai HPLC-vel ellenőriztük. Amikor úgy ítéltük, hogy a hidrolízis befejeződött, az anyagot az 1. példában leírtak szerint preparatív HPLC-vel tisztítottuk.
HU 217 843 Β
37. vegyület szekvencia) Alá Val 1
Gin Asp
Leu Hi s
AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK LHTX-OH (X=homoszerin; 51. számú
Ser Glu His Gin Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile 5 10 15
Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys 20 25 30
Thr hSer OH (51. számú szekvencia)
Fizikai adatok:
op.: (nem meghatározott) [a]2D5=(nem meghatározott)
FAB (C176H301N55O53): [M+H]+=4035,l
AAA: Asx, 2,1 (2); Glx, 5,9 (6); Ser, 2,0 (2); His,
3,1 (3); Gly, 0,8 (1); hSer, 0,8 (1); Thr, 1,0 (1); Alá, 1,0 (1); Arg, 3,0 (3); Val, 1,3 (1); Ile, 1,0 (1); Leu, 8,1(8); Lys, 3,8 (4).
6. példa
Az 1. példa szerint, 0,35 mmol mennyiségben a BocAVS(Bzl)E(OBz)H(Bom)QLLHD(OBzl)R(Ts)GR(Ts)S(Bzl)IQD(OBz)LR(Ts)R(Ts)E(OBz)LLE(OBzl)R(Ts)LLK(Fmoc)R(Ts)LH(Bom)T(Bzl)A-O-PMA védett peptid-gyanta komplexumot szintetizáltuk. Valamennyi N“-csoportot /-butoxi-karbonil- (Boc) védőcsoporttal védtük, az oldalláncok védőcsoportjait pedig feltüntettük. A szintézis befejezése után a peptid-gyanta komplexumot a lizin fluorenil-metoxi-karbonil-védőcsoportja eltávolítása érdekében, szobahőmérsékleten 30 percig dimetil-formamidban (DMF) készített 50 ml 20%-os piperidinnel kezeltük. A lizint egymást után DMF-fel, metanollal, diklór-metánnal mostuk, majd szárítottuk, miáltal 1,6 g részlegesen védett pepiidet kaptunk. A részlegesen védett peptid 0,8 g-ját (0,175 mmol) (a lizin aminosavon) szobahőmérsékleten 5 órán keresztül 20 ml DMF-ben, 0,16 g (0,3 mmol) benzo-triazoloxi-trisz(pirrolidino)-foszfónium-hexafluor-foszfát (PyBop) és 0,067 g (0,525 mmol) diizopropil-etil-amin (DIEA) jelenlétében 0,44 g (0,3 mmol) metoxi-di(etilén-oxi)-ecetsavval [PEG(2)CH2COOH] acileztük. Öt óra elteltével a gyantát leszűrtük, és egymás után DMFfel, metanollal, diklór-metánnal mostuk. Az acilezéses lépést kétszer ismételtük, míg a gyantán negatív ninhidrinreakciót nem kaptunk. A kész peptídet az 1. példában leírt módon az oldallánc-védőcsoportok eltávolításával és tisztítással hasítottuk le a gyantáról, s termékként a 19. vegyület 100 mg-ját kaptuk.
19. vegyület: AVSEHQLLHDRGRSIQDLRRRELLERLLKRLHTA-OH (18. számú szekvencia) CH3O(CH2CH2O)2CH2C=O
Al a | Val Ser Glu Hi s | Gin | Leu | Leu | Hi s | Asp Arg Gly Arg Ser | I 1 e |
1 | 5 | 10 | 1 5 | ||||
Gin | Asp Leu Arg Arg | Arg | Glu | Le u | Leu | Glu Arg Leu Leu | |
20 | 25 | ||||||
Lys | (COCH7PEG2) Arg | Leu | Hi s | Thr | Al a | OH (18. számú szekvencia) | |
30 |
Fizikai adatok:
op.: 145-195 °C [a]2D5=-44,60° (c=0,2, H2O) 40
FAB (CI83H316N64O54): [M+H]+=4276,2
AAA: Asp, 2,1 (2); Glu, 5,0 (5); Ser, 1,6 (2); His,
2,9 (3); Gly, 0,9 (1); Thr, 1,9 (2); Arg, 7,1 (7); Val,
1,1 (1); Ile, 1,0 (1); Leu, 8,0 (8); Lys, 0,9 (1).
7. példa
A peptídet a 4. példában leírt módon szintetizáltuk, hasítottuk és tisztítottuk, azzal a különbséggel, hogy acilezőszerként 2-metoxi-poli(etilén-oxi)-ecetsavat [PEG(5000)CH2C02H] alkalmaztunk. A részlegesen védett peptid 0,8 g-jából (0,175 mmol) 300 mg tiszta peptídet (20. vegyület) állítottunk elő.
20. vegyület: AVSEHQLLHDRGRSIQDLRRRELLERLLKRLHTA-OH (19. számú szekvencia) i :'
CH3O(CH2CH2O),, 0ch2c=o
Alá Val Ser Glu His Gin Leu Leu His Asp Arg Gly Arg Ser Ile 15 10 15
Gin Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Arg Leu Leu 20 25
Ly s (COCH2PEG5000) Arg Leu His Thr Alá OH (19. számú szekvencia)
Fizikai adatok:
op.: 105 °C [a]2D5=-22,95° (c = 0,ll, 50% aq. HOAc)
AAA: Asp, 2,0 (2); Glu, 4,8 (5); Ser, 1,6 (2); His, 2,6 (3); Gly, 1,1 (1); Thr, 1,1 (2); Arg, 7,3 (7); Val, 0,8 (1); Ile, 0,9 (1); Leu, 8,3 (8); Lys, 1,8 (2); Alá, 1,8 (2).
HU 217 843 Β
8. példa
A pPTHrp(l-34) analóg génjének szintézise A pPTHrp(l-4) analógot (4. vegyület; 9. számú szekvencia) kódoló szintetikus gént szerkesztettünk, amely az 1. ábrán bemutatott nukleotidszekvenciával 5 és restrikciós enzimes hasítási helyekkel rendelkezik.
A szükséges oligodezoxinukleotidokat Sinha és munkatársai eljárásával (Nucleic Acid Research, 12, 4539-4557, 1984) DNS-szintetizátoron (Milligen/Biosearch) készítettük. A védőcsoportok eltávolítása után 10 a nyers oligonukleotidokat preparatív 15%-os poliakrilamid gélen gélelektroforézissel tisztítottuk. Az oligonukleotidok helyét UV-vel határoztuk meg; ezeket kivágtuk a gélből, majd Waters Cl8 Sep-pak® tölteten sótalanítottuk és liofilizáltuk.
A polimeráz láncreakcióval (PCR) végzett amplifikációt „GeneAmp” DNS-amplifikációs kit (Perkin-Elmer Cetus) reagenseinek (köztük Taq-polimeráz) alkalmazásával Perkin-Elmer Cetus PCR-készüléken hajtottuk végre, 25 ciklussal (1 percig 90 °C-on, 2 percig 50 °C-on és 3 percig 72 °C-on). A pPTHrp(l-34) analóg gén templát DNS-szekvenciájaként két átfedő oligonukleotidot állítottunk elő; az egyik egy 88mer (2 pg), a PTH3 (31. számú szekvencia):
CCTCTAGATC TCCGCGGCGC TAGC ATG GCT GTT TCT GAA CAT CAG 45
Me t Alá Val Ser Glu His Gin
5
CTG CTT CAT GAC AAA GGT AAA TCG ATT CAA GAT CTG AGA CGT C 88 Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser I le Gin Asp Leu Arg Arg
15 20 a másik egy anti-szensz 90mer (2 pg), a PTH4 (32. számú szekvencia):
CCTCGAAGCT TATGCATCAT TATCTAGA CAT AGT ATG CAG CTT TTC 46
AAG CAG TTT CTC CAG CAG CTC GCG Leu Leu Lys Glu Leu Leu Glu Arg
20 let inr His Leu Lys Glu
ACG TCT CAG ATC TTG ATT CG 90 Arg Arg Leu Asp Gin I le
A két szegélyező primer, a PTHPCR1: CCTCTAGATC TCCGCGGCGC TAG (33. számú szekven- 30 cia) és PTHPCR2: CCTCGAAGCT TATGCATCAT TATC (34. számú szekvencia) alkalmazásával PCR-rel teljes gént amplifikáltunk. Az amplifikált DNS-terméket 4%-os NuSieve® agarózgélen gélelektroforézissel tisztítottuk. A hozzávetőleg 150 bázis hosszúságú, szín- 35 tetikus hPTHrp(l -34) analóg gént tartalmazó sávot kivágtuk a gélből, és Elu-Quick® üveggél DNS-extrakcióval (Schleicher & Schuell, Keene, NH) hozzávetőleg 200 ng DNS-t izoláltunk.
9. példa
A pPTHrp(l-34)l analóg gén molekuláris klónozása
A 6. példa szerinti hPTHrp(l-34) analóg gén szubklónozásához az amplifikált DNS 200 ng-ját izoláltuk, és HindlII és Sacl restrikciós enzimekkel hasítottuk. Amint a 2. ábrán látható, a DNS-t 2 pg, előzetesen HindlII-mal és SacII-vel hasított TrpLE 18 Prot (He3, Pro5) plazmidhoz ligáltuk.
A kapott, hPTHrp(l-34) analóg gén egy példányát tartalmazó TrpLE 18 hpPTHrp( 1-34)1 plazmidot kompetens E. coli HB 101 sejtekben (CLONTECH, Palo Alto, CA) transzformáltuk. A transzformánsokat az inszerció igazolása érdekében PCR-analízisnek vetettük alá. Kiválasztottuk a transzformált sejttelepeket, és azokat 5 percig 200 pl vízben forraltuk, ebből 2 pl-t az inszertet szegélyező két primerrel együtt PCR-nek vetettük alá. A PCR-terméket ezután 1%-os agarózgélen analizáltuk, hogy igazoljuk a hPTHrp(l -34) gén inszert egy példányának jelenlétét. A Trp LE 18 hPTHrp(l-34) plazmidot automatizált DNS-szekvenátoron (Applied Biosystems Model 373A, Foster City, CA), a forgalmazó Dye Deoxy Terminátor sequencing kitjének felhasználásával azonosítottuk.
10. példa
A hPTHrp(l-34) analóg gén több példányát tartalmazó Trp LE 18 vektor előállítása Az egyedüli Nhel és Xbal restrikciós hasítási helyek a hPTHrp(l-34) analóg gén szekvenciájának kezdetéhez és végéhez közel helyezkednek el. Ez a két restrikciós hely, amely különböző szekvenciákat ismer fel, de azonos egyszálú kohéziós terminálisokat képez, lehetővé teszi a Trp LE 18 vektoron belül a hPTHrp(l-34) gén több példányának kialakítását.
Az egymás utáni ismételt hPTHrp(l-34) szekvenciák kialakításának folyamatát a 3. ábrán vázoljuk. A gén egy példányát tartalmazó Trp LE 18 hPTHrp(1-34)1 plazmid 5 pg-ját külön reakciókban BamHI -t-Nhel, valamint Xbal+BamHI enzimekkel hasítottuk. Mindegyik emésztésből a hPTHrp(l-34) analóg gént tartalmazó fragmens körülbelül 300 ng-ját izoláltuk. A két fragmenst összekevertük és ligáltuk, miáltal a Trp LE 18 hPTHrp(l-34)2 plazmidot hoztuk létre, amelyet kompetens E. coli HB 101 sejtek transzformálásához használtunk. A hPTHrp(l -34) gén inszert két példánya jelenlétének meghatározásához a transzformált PCR-termékek 1%-os agarózgélen végzett méretmeghatározását alkalmaztuk. A gén két példányát tartalmazó Trp LE 18 hPTHrp( 1-34)2 plazmidot DNS-szekvenálással igazoltuk. A két hPTHrp(l -34) gén helyes kapcsolódása a kapcsolódási helynél az Nhel és Xbal helyek
HU 217 843 Β megszűnését eredményezi, miáltal a megmaradó NehI és Xbal helyek a két tandem (egymás utáni) gént szegélyezik.
Az eljárás ismétlésével a hPTHrp(l-34) gén négy példányát tartalmazó Trp LE 18 hPTHrp( 1-34)4 plazmidot állítottuk elő (4. ábra). DNS-szekvencia-analízissel megállapítottuk, hogy a Trp LE 18 hPTHrp(1-34)4 plazmid szekvenciája helyes.
11. példa
A Trp LE 18 hPTHrp(l-34)4 plazmid expresszálása és tisztítása
A Trp LE 18 hPTHrpíl-34)4 plazmid indukálása pg/ml ampicillint és 100 pg/ml triptofánt tartalmazó 50 ml LB tápközeg [J. H. Miller, „Experiments in Molecular Genetics”, 431. oldal (1972); amelyet hivatkozásul említünk] indító tenyészetet Trp LE 18 hPTHrp( 1-34)4 plazmidot tartalmazó E. coli sejtekkel oltottuk be, és a tenyészetet élénk keveréssel 37 °C-on, egy éjszakán keresztül, körülbelül 6-os A55()-érték elérésig neveltük. Az előállításhoz az LB tápközeg két literét 37 °C-ra előmelegítettük, majd 0,06-os A550-érték eléréséhez 20 ml indítótenyészettel oltottuk be. A tenyészetet élénk keveréssel 0,6 és 0,8 közötti A550-értékig neveltük, majd 2 ml 10 mg/ml indol-akrilsav (IAA) oldatot adtunk hozzá. A tenyésztést jó levegőztetéssel körülbelül 6-os A550-érték (jellemzően 4 és 10 között) eléréséig körülbelül 16 órán keresztül folytattuk. A sejteket centrifugálással koncentráltuk, és 50 mM Tris-HCl (pH=7,5) és 0,1 mM EDTA-puffer 500 ml oldatában (Tris-puffer) reszuszpendáltuk.
A szuszpenziót (X” hangtölcsérrel felszerelt) Heat Systems-Ultrasonics, Inc. model 220F hangsugárzóval kezeltük, melyet a túlhevülés elkerülése érdekében 50%-os teljesítménnyel működtettünk.
Az indukció mértékének meghatározásához az ép sejteket SDS-PAGE módszerrel analizáltuk. A Trp LE 18 hPTHrp( 1-34)4 plazmidból származó géntermékek hozzávetőleg 17 000 molekulatömegű fősávként voltak láthatók. Ez az összes celluláris protein 10%-ának felel meg.
A fúziós protein izolálása és tisztítása
A Trp LE 18 hPTHrp( 1-34)4 fúziós protein pelletezéséhez a sejtlizátumot f5 percig körülbelül 3600 g-vel centrifugáltuk, a felülúszót eltávolítottuk, és a pelletet 200 ml Tris-pufferben reszuszpendáltuk (jellemzően 40-80 A550/ml koncentrációban).
12. példa
A fúziós protein kezelése és a homoszerin-lakton hPTHrp(l-34) peptid tisztítása A hPTHrp(l-34) multimer fúziós proteint szegélyező metioningyökök CNBr-dal végzett lehasításával a kívánt homoszerin-lakton hPTHrp(l-34) polipeptidet szabadítottuk fel, amelyet az alábbiak szerint tisztítottuk.
A fúziós protein CNBr-os kezelése
A Trp LE 18 hPTHrp(l -34)4 fúziós protein mosott pelleteit óvatos keveréssel 60 ml 70%-os hangyasavban reszuszpendáltuk (körülbelül 20 mg/ml összes protein; jellemzően 1000 A550 sejtegységből származó anyagot 3 ml-ben oldottunk). Az elegyhez néhány csepp oktanolt adtunk, az oldaton nitrogént buborékoltattunk át, majd 5,5 g CNBr-ot adtunk hozzá. A reakciót 25 °C-on 6 órán keresztül végeztük, majd egyenlő térfogatban 50:50 arányú metanol:víz elegyet kevertünk a mintával, amit ventilációs párologtatással távolítottunk el. Az eljárás 2-4-szeri ismétlése után a hangyasav és a cián-bromid zömét eltávolítottuk, majd a mintát szárazra pároltuk, 200 ml vízben újra feloldottuk, s a tárolhatóság érdekében liofilizáltuk.
A homoszerin-lakton hPTHrp(l-34) tisztítása
A cián-bromiddal kezelt felülúszót 24 órán keresztül 50 mM KH2PO4-oldattal (pH=6,5) szemben dializáltuk, többszöri változtatással. A dializálás során a kémhatást 6,5 pH-η tartottuk. A dialízis után a csapadékokat nagy sebességű centrifugálással távolítottuk el. A felülúszót Gelman 0,45 μ szűrőkészüléken (Acrodisc 4184) szűrtük.
Kationcserélő kromatográfia
A kezdeti tisztítást Bio-Gel TSK-SP-5PW HPLC oszlopon (21,5 χ 150 mm) végzett kationcserélő kromatográfiával egészítettük ki. A kromatografálást 8 ml/perc átfolyási sebességgel és hozzávetőleg 12 mg nagymértékben tisztított homoszerin-lakton hPTHrp(l-34) peptid hozammal a következők szerint végeztük:
1. Az oszlopot 50 mM KH2P04-oldattal (pH=6,5) ekvilibráltuk.
2. Az oszlopra 10 ml leszűrt felülúszót töltöttünk (hozzávetőleg 1,5 1 tenyészet tápközeg vagy 2,4 g benne lévő anyag).
3. Az oszlopot az alapszint állandósulásáig 50 mM NaCl-oldatot tartalmazó 50 mM KH2PO4-oldattal (pH=6,5) mostuk.
4. Az oszlopot 90 mM NaCl-oldatot tartalmazó 50 mM KH2PO4-oldattal (pH=6,5) eluáltuk. A frakciókat körülbelül 45 percen át gyűjtöttük.
5. A 90 mM NaCl-os frakciókat C18 HPLC-vel homoszerin-lakton hPTHrp(l-34) tartalomra vizsgáltuk, majd összegyűjtöttük és tároltuk azokat.
Reverz fázisú HPLC-kromatográfia
A végső tisztítási lépéshez reverz fázisú Poros R/H 4,6x100 mm-es oszlopot (Perseptive Biosystems, Cambridge, MA) használtunk. A kromatográfia körülményei a következők voltak.
„A” mozgó fázis: | 0,1 %-os | trifluor-ecetsav |
(TFA)/víz | ||
„B” mozgó fázis: | 0,1%-os | trifluor-ecetsav |
(TFA)/CH3CN | ||
Idő | Átfolyás | B% |
0 perc | 4 ml/perc | 15 |
5,0 perc | 4 ml/perc | 40 |
5,2 perc | 4 ml/perc | 100 |
6,8 perc | 4 ml/perc | 100 |
7,0 perc | 4 ml/perc | 15 |
A homoszerin-lakton hPTHrp(l- | 34) (4. vegyület) |
retencióideje hozzávetőleg 2,943 perc volt. A tisztított peptid 98%-os tisztaságú volt (amit tömegspektroszkópiával határoztunk meg).
HU 217 843 Β
13. példa
A találmány szerinti vegyületek eltávolított petefészkű patkányok csonttömegére gyakorolt hatását értékeltük, rendszerint Gunnes-Hey és Hock (Metab. Boné Dis., 5:177-181, 1984) eljárása szerint.
A felnőtt Sprague-Dawley nőstény patkányokat akklimatizáltuk, tömeg szerint csoportosítottuk (n=9, 10 vagy 12), s kétoldali petefészek-eltávolítást (OVX) vagy látszatműtétet végeztünk rajtuk. A vegyület adagolását a műtét után 17 nappal kezdtük, és 20 napon keresztül folytattuk. A tesztvegyületet naponta egyszer 2%-os patkány szérum/sóoldat vivőanyagban szubkután adtuk be.
napig végzett adagolás után a patkányokat leöltük, a jobb combcsontokat (femur) félbevágtuk, s a disztális combcsontfeleket (DHF) a trabekulák (gerendák) átfúrásával tovább osztottuk trabekuláris csontra (TB) és kortikális csontra (CB). A kalciumot Calcette kalciumanalizátorral vontuk ki és mértük, és a csont átlagos kalciumtartalmát mg/DHF/100 g testtömeg értékben fejeztük ki.
Az OVX és a látszatkezelt csoportok összehasonlításához a kétmintás t-tesztet alkalmaztuk. Az OVX-csoportok összehasonlításához az egyváltozós ANOVAtesztet használtuk, majd - a kezelt csoportok vivőanyaggal való összehasonlításához — Fisher-féle összetett LSD-összehasonlítást végeztünk.
A petefészek-eltávolítás lényegében teljes csontleépülést okozott, elsősorban a trabekuláris csontban. Az egész csont kalciummennyisége a látszatoperált kontrollokhoz képest 47-54%-kal kevesebb volt.
A bPTH(l-34) és a hPTHrp(l-34) 80 pg/kg/nap adagolásban a kezelt OVX patkányok esetében az egész csont kalciumtartalmát illetően statisztikusan jelentős növekedést eredményezett (53-95%-os, illetve 18-40%-os növekedés), a kortikális csont kalciumtartalmában azonban nem tapasztaltunk lényeges növekedést.
A találmány szerinti vegyületek 80 pg/kg/nap adagolásban az egész csont kalciumtartalmát 66-138%kal, a trabekuláris csont kalciumtartalmát pedig 87-128%-kal növelték. A kortikális csont kalciumtartalma, a trabekulák (gerendák) vastagsága és a csont térfogata a kezeletlen OVX-kontrollokhoz képest szintén jelentősen növekedett.
A vizsgálat során az alábbi vegyületeket teszteltük:
A kalcium %-os gyarapodása az OVX-csoporthoz képest | ||||
5 | Vegyület 1. (7. számú | Tesztek száma | Trabekuláris csont | Egész csont |
szekvencia) 2. (6. számú | 6 | 101-128% | 88-138% | |
szekvencia) 4. (9. számú | 3 | 87-102% | 66-114% | |
10 | szekvencia) | 3 | - | 88-114% |
Hasonló | vizsgálatokban az eltávolított petefészkű |
patkányokat 5, 10 és 20 napon keresztül 40 pg/kg/nap adagolással kezeltük, az alábbi eredményekkel.
A kalcium %-os | ||||
15 | Vegyület Tesztek | Napok | gyarapodása az OVX-csoporthoz képest Egész | |
20 | 1. (7. számú szekvencia) | száma 3 | száma 20 | csont 73-109% |
4. (9. számú szekvencia) | 5 | 20 | 79-105% | |
25 | 4. (9. számú szekvencia) | 1 | 10 | 79% |
49. (63. számú szekvencia) | 1 | 10 | 93% | |
4. (9. számú szekvencia) | 1 | 5 | 55% | |
30 | 42. (56. számú szekvencia) | 1 | 5 | 60% |
14. példa Toxicitás
A fenti 11. példában a találmány szerinti vegyületek esetében nem tapasztaltunk toxikus hatásokat.
SZEKVENCIALISTA
TUDNIVALÓK AZ 1. SZÁMÚ SZEKVENCIÁHOZ (i) SZEKVENCIAJELLEMZŐK (A) HOSSZÚSÁG: 34 aminosav (B) TÍPUS: aminosav (D)ALAK: lineáris (ii) MOLEKULA TÍPUSA: peptid (iii) HIPOTETIKUS: nem (v) FRAGMENS TÍPUSA: N-terminális (xi) SZEKVENCIALEÍRÁS: 1. számú szekvencia
Ser 1 | Va 1 | Ser | Glu | Ile 5 | Gin | Leu | Me t | Hi s | Asn 10 | Leu | Gly | Ly s | Hi s | Leu 15 |
Asn | Ser | Me t | Glu | Arg | Va 1 | Glu | Trp | Leu | Arg | Ly s | Ly s | Leu | Gin | As p |
20 | 25 | 30 | ||||||||||||
Va 1 | Hi s | Asn | Phe |
TUDNIVALÓK A 2. SZÁMÚ SZEKVENCIÁHOZ (i) SZEKVENCIAJELLEMZŐK (A) HOSSZÚSÁG: 34 aminosav (B) TÍPUS: aminosav (D)ALAK: lineáris (ii) MOLEKULA TÍPUSA: peptid (iii) HIPOTETIKUS: nem (v) FRAGMENS TÍPUSA: N-terminális (xi) SZEKVENCIALEÍRÁS:
2. számú szekvencia
HU 217 843 Β
Al | a | Va | 1 | Ser | Glu | Ile | Gin | Phe |
1 | 5 | |||||||
Se | r | Se | r | Me t | Glu | Arg | Va 1 | Glu |
20 | ||||||||
Va | 1 | Hi | s | Asn | Phe |
Me t | Hi s | As n 10 | Leu | Gly | Ly s | H i s | Le u 15 |
Trp | Leu | Arg | Ly s | Ly s | Leu | Gin | As p |
25 | 30 |
TUDNIVALÓK A 3. SZÁMÚ SZEKVENCIÁHOZ (i) SZEKVENCIAJELLEMZŐK (A) HOSSZÚSÁG: 34 aminosav
(B) | TÍPUS: | aminc | isav | ||||
(D) | ALAK: | lineár | is | ||||
Ser | Va 1 | Ser | Glu | I 1 e | Gin | Leu | |
1 | 5 | ||||||
Ser | Ser | Leu | Glu | Arg | Va 1 | Glu | |
20 | |||||||
Val | Hi s | As n | Phe |
TUDNIVALÓK A 4. SZÁMÚ SZEKVENCIÁHOZ (i) SZEKVENCIAJELLEMZŐK (A) HOSSZÚSÁG: 34 aminosav
(B) | TÍPUS: | amino | isav | ||||
(D) | ALAK: | lineár | is | ||||
Al a | Va 1 | Ser | Glu | Hi s | Gin | Leu | |
1 | 5 | ||||||
Gin | As p | Leu | Arg | Arg | Arg | Phe | |
20 | |||||||
Ile | Hi s | Thr | Al a |
(ii) MOLEKULA TÍPUSA: peptid (iii) HIPOTETIKUS: nem (v) FRAGMENS TÍPUSA: N-terminális 10 (xi) SZEKVENCIALEÍRÁS: 3. számú szekvencia
Me t His Asn Leu Gly Lys His Leu 10 15
Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gin Asp 25 30 (ii) MOLEKULA TÍPUSA: peptid 20 (iii) HIPOTETIKUS: nem (v) FRAGMENS TÍPUSA: N-terminális (xi) SZEKVENCIALEÍRÁS: 4. számú szekvencia
Le u | Hi s | As p 10 | Ly s | Gly | Ly s | Ser | Ile 15 |
Phe | Leu | Hi s | Hi s | Leu | I le | Al a | Glu |
25 | 30 |
TUDNIVALÓK AZ 5. SZÁMÚ SZEKVENCIÁHOZ (i) SZEKVENCIAJELLEMZŐK (A) HOSSZÚSÁG: 34 aminosav
(B) | TÍPUS: | amino | sav | ||||
(D) | ALAK: | lineár | is | ||||
Al a | Val | Ser | Glu | Hi s | Gin | Leu | |
1 | 5 | ||||||
Gin | As p | Leu | Arg | Arg | Arg | Glu | |
20 | |||||||
Leu | Hi s | Thr | Al a |
(ii) MOLEKULA TÍPUSA: peptid (iii) HIPOTETIKUS: nem (v) FRAGMENS TÍPUSA: N-terminális (xi) SZEKVENCIALEÍRÁS: 5. számú szekvencia
35 | |||||||
Leu | Hi s | As p | Ly s | Gly | Ly s | Ser | Ile |
10 | 15 | ||||||
Leu | Leu | Glu | Ly s | Leu | Leu | Arg | Ly s |
25 | 30 |
TUDNIVALÓK A 6. SZÁMÚ SZEKVENCIÁHOZ (i) SZEKVENCIAJELLEMZŐK (A) HOSSZÚSÁG : 34 aminosav
(B) | TÍPUS: | amino | >sav | ||||
(D) | ALAK: | lineár | is | ||||
Al a | Va 1 | Ser | Glu | Hi s | Gin | Leu | |
1 | 5 | ||||||
Gin | As p | Leu | Arg | Arg | Arg | Glu | |
20 | |||||||
Leu | Hi s | Thr | Al a |
(ii) MOLEKULA TÍPUSA: peptid (iii) HIPOTETIKUS: nem (v) FRAGMENS TÍPUSA: N-terminális (xi) SZEKVENCIALEÍRÁS: 6. számú szekvencia
Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile 10 15
Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys 25 30
TUDNIVALÓK A 7. SZÁMÚ SZEKVENCIÁHOZ (i) SZEKVENCIAJELLEMZŐK (A) HOSSZÚSÁG: 34 aminosav (B) TÍPUS: aminosav (D) ALAK: lineáris (ii) MOLEKULA TÍPUSA: peptid (iii) HIPOTETIKUS: nem (v) FRAGMENS TÍPUSA: N-terminális (xi) SZEKVENCIALEÍRÁS:
7. számú szekvencia
HU 217 843 Β
Alá 1 | Val | Ser | Glu | Hi s 5 | Gin | Leu |
Gin | Asp | Leu | Arg | Arg | Arg | Glu |
20 | ||||||
Leu | Hi s | Thr | Al a |
Leu | H i s | As p 10 | Ly s | Gly | Lys | Ser | Ile 1 5 |
Leu | Leu | Glu | Ly s | Leu | Leu | Glu | Ly s |
25 | 30 |
TUDNIVALÓK A 8. SZÁMÚ SZEKVENCIÁHOZ (i) SZEKVENCIAJELLEMZŐK (A) HOSSZÚSÁG: 34 aminosav (B) TÍPUS: aminosav (D) ALAK: lineáris (ii) MOLEKULA TÍPUSA: peptid
(iii) HIPOTETI | KUS: | nem | ||||
Al a | Va 1 | Ser | Glu | Hi s | Gin | Leu |
1 | 5 | |||||
Gin | As p | Leu | Arg | Arg | Arg | Glu |
20 | ||||||
Leu | Hi s | Thr | Xaa |
TUDNIVALÓK A 9. SZÁMÚ SZEKVENCIÁHOZ (i) SZEKVENCIAJELLEMZŐK (A) HOSSZÚSÁG: 34 aminosav (B) TÍPUS: aminosav (D)ALAK: lineáris (ii) MOLEKULA TÍPUSA: peptid
(iii) HIPOTETI | KUS: | nem | |||
Al a | Va 1 | Ser | Glu | Hi s | Gin Leu |
1 | 5 | ||||
Gin | As p | Leu | Arg | Arg | Arg Glu |
20 | |||||
Leu | Hi s | Thr | Xaa |
TUDNIVALÓKA 10. SZÁMÚ SZEKVENCIÁHOZ (i) SZEKVENCIAJELLEMZŐK (A) HOSSZÚSÁG: 37 aminosav (B) TÍPUS: aminosav
Al a | Va 1 | Ser | GI u | Hi s | G1 n | Le | u |
1 | 5 | ||||||
Gin | As p | Leu | Arg | Arg | Arg | GI | u |
20 | |||||||
Leu | Hi s | Thr | Al a | Gly | Arg | Ar | g |
(v) FRAGMENS TÍPUSA: N-terminális (ix) SAJÁTOS JELLEGZETESSÉG (A) NÉV: módosított hely 10 (B) ELHELYEZKEDÉS: 34 (D) MÁS TUDNIVALÓ: megjegyzés:
Xaa34 =homoszerin (xi) SZEKVENCIALEÍRÁS: 8. számú szekvencia
Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile 10 15
Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys 25 30 (v) FRAGMENS TÍPUSA: N-terminális (ix) SAJÁTOS JELLEGZETESSÉG (A) NÉV: módosított hely (B) ELHELYEZKEDÉS: 34 (D) MÁS TUDNIVALÓ: megjegyzés:
Xaa34=homoszerin-lakton (xi) SZEKVENCIALEÍRÁS: 9. számú szekvencia
Le u | Hi s | Asp 10 | Ly s | Gly | Ly s | Ser | Ile 15 |
Leu | Leu | Glu | Ly s | Leu | Leu | Glu | Ly s |
25 | 30 |
(D) ALAK: lineáris (ii) MOLEKULA TÍPUSA: peptid (iii) HIPOTETIKUS: nem (xi) SZEKVENCIALEÍRÁS: 10. számú szekvencia
Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile 10 15
Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys 25 30
TUDNIVALÓK All. SZÁMÚ SZEKVENCIÁHOZ (i) SZEKVENCIAJELLEMZŐK (A) HOSSZÚSÁG: 34 aminosav
(B) | TÍPUS: | amino | isav | ||||
(D) | ALAK: | lineár | is | ||||
Al a | Va 1 | Ser | Glu | Hi s | Gin | Leu | |
1 | 5 | ||||||
Gin | Asp | Leu | Arg | Arg | Arg | Glu | |
20 | |||||||
Leu | Ly s | Glu | Leu |
TUDNIVALÓKA 12. SZÁMÚ SZEKVENCIÁHOZ (i) SZEKVENCIAJELLEMZŐK (ii) MOLEKULA TÍPUSA: peptid (iii) HIPOTETIKUS: nem (v) FRAGMENS TÍPUSA: N-terminális 50 (xi) SZEKVENCIALEÍRÁS: 11. számú szekvencia
Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile 10 15
Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys 25 30 (A) HOSSZÚSÁG: 34 aminosav 60 (B) TÍPUS: aminosav
HU 217 843 Β (D) ALAK: lineáris (ii) MOLEKULA TÍPUSA: peptid (iii) HIPOTETIKUS: nem (v) FRAGMENS TÍPUSA: N-terminális (xi) SZEKVENCIALEÍRÁS: 12. számú szekvencia
Al a | Va | 1 | Ser | G1 | u | Hi s | Gin | Leu |
1 | 5 | |||||||
Gin | As | P | Leu | Al | a | Arg | Arg | Glu |
20 | ||||||||
Leu | Hi | s | Thr | Al | a |
TUDNIVALÓK A 13. SZÁMÚ SZEKVENCIÁHOZ (i) SZEKVENCIAJELLEMZŐK (A) HOSSZÚSÁG: 34 aminosav
(B) | TÍPUS: | amino | sav | ||||
(D) | ALAK: | lineár | is | ||||
Al a | Va 1 | Ser | Glu | Hi s | Gin | Leu | |
1 | 5 | ||||||
Gin | As p | Leu | Arg | Arg | Alá | Glu | |
20 | |||||||
Leu | Hi s | Thr | Al a |
TUDNIVALÓK A 14. SZÁMÚ SZEKVENCIÁHOZ (i) SZEKVENCIAJELLEMZŐK (A) HOSSZÚSÁG: 34 aminosav
(B) | TÍPUS: | amino | sav | |||
(D) | ALAK: | lineár | is | |||
Al a | Va 1 | Ser | Glu | Al a | Gin Leu | |
1 | 5 | |||||
Gin | As p | Leu | Arg | Arg | Arg Glu | |
20 | ||||||
Leu | Hi s | Al a | Leu |
TUDNIVALÓK A 15. SZÁMÚ SZEKVENCIÁHOZ (i) SZEKVENCIAJELLEMZŐK (A) HOSSZÚSÁG: 34 aminosav
(B) | TÍPUS: | amino | sav | |||
(D) | ALAK: | lineári | is | |||
Al a | Va 1 | Ser | Glu | Hi s | Gin Leu | |
1 | 5 | |||||
G1 n | Asp | Leu | Arg | Arg | Arg Glu | |
20 | ||||||
Leu | Hi s | Thr | Al a |
TUDNIVALÓKA 16. SZÁMÚ SZEKVENCIÁHOZ (i) SZEKVENCIAJELLEMZŐK (A) HOSSZÚSÁG: 34 aminosav
(B) | TÍPUS: | amino | sav | |||
(D) | ALAK: | lineár: | is | |||
Al a | Va 1 | Ser | Glu | Hi s | Gin Leu | |
1 | 5 | |||||
Gin | As p | Leu | Arg | Arg | Arg Glu | |
20 | ||||||
Le u | Hi s | Thr | Al a |
Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile 10 15
Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys 25 30 (ii) MOLEKULA TÍPUSA: peptid (iii) HIPOTETIKUS: nem (v) FRAGMENS TÍPUSA: N-terminális (xi) SZEKVENCIALEÍRÁS: 13. számú szekvencia
Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile 10 15
Leu Leu Glu Lys Leu Leu Gly Lys 25 30 (ii) MOLEKULA TÍPUSA: peptid (iii) HIPOTETIKUS: nem (v) FRAGMENS TÍPUSA: N-terminális (xi) SZEKVENCIALEÍRÁS: 14. számú szekvencia
Leu His Asp Leu Gly Lys Ser Ile 10 15
Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys 25 30 (ii) MOLEKULA TÍPUSA: peptid (iii)HIPOTETIKUS: nem (v) FRAGMENS TÍPUSA: N-terminális (xi) SZEKVENCIALEÍRÁS: 15. számú szekvencia
Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile 10 15
Leu Leu Glu Arg Leu Leu Glu Arg 25 30 (ii) MOLEKULA TÍPUSA: peptid (iii) HIPOTETIKUS: nem (v) FRAGMENS TÍPUSA: N-terminális 50 (xi) SZEKVENCIALEÍRÁS: 16. számú szekvencia
Leu His Asp Arg Gly Arg Ser Ile 10 15
Leu Leu Glu Arg Leu Leu Glu Arg 25 30
HU 217 843 Β (ii) MOLEKULA TÍPUSA: peptid (iii) HIPOTETIKUS: nem (v) FRAGMENS TÍPUSA: N-terminális
TUDNIVALÓRA 17. SZÁMÚ SZEKVENCIÁHOZ (i) SZEKVENCIAJELLEMZŐK (A) HOSSZÚSÁG: 34 aminosav
(B) | TÍPUS: | amino | sav | ||||
(D) | ALAK: | lineár | is | ||||
Al a | Va 1 | Ser | Glu | H i s | Gin | Leu | |
1 | 5 | ||||||
Gin | As p | Leu | Arg | Arg | Arg | G1 u | |
20 | |||||||
Leu | Hi s | Thr | Al a |
(xi) SZEKVENCIALEÍRÁS: 17. számú szekvencia
Le u | Hi s | Asp 10 | Arg | Gly | Arg | Ser | Ile 15 |
Leu | Leu | Glu | Arg | Leu | Leu | Lys | Arg |
25 | 30 |
TUDNIVALÓKA 18. SZÁMÚ SZEKVENCIÁHOZ (i) SZEKVENCIAJELLEMZŐK (A) HOSSZÚSÁG: 34 aminosav (B) TÍPUS : aminosav (D) ALAK: lineáris (ii) MOLEKULA TÍPUSA: peptid (iii) HIPOTETIKUS: nem (v) FRAGMENS TÍPUSA: N-terminális (ix) SAJÁTOS JELLEGZETESSÉG (A) NÉV: módosított hely (B) ELHELYEZKEDÉS: 29 (D) MÁS TUDNIVALÓ: megjegyzés:
Xaa29=lizin-OCCH2 - (OCH2CH2)2OCH3 (xi) SZEKVENCIALEÍRÁS: 18. számú szekvencia
Al a 1 | Va 1 | Ser | Glu | Hi s 5 | Gin | Leu | Leu | Hi s | Asp 10 | Arg | Gly | Arg | Ser | Ile 15 |
Gin | As p | Leu | Arg | Arg | Arg | G1 u | Leu | Leu | Glu | Arg | Leu | Leu | Xaa | Arg |
20 | 25 | 30 | ||||||||||||
Leu | Hi s | Thr | Al a |
TUDNIVALÓKA 19. SZÁMÚ SZEKVENCIÁHOZ (i) SZEKVENCIAJELLEMZŐK (A) HOSSZÚSÁG: 34 aminosav (B) TÍPUS: aminosav (D) ALAK: lineáris (ii) MOLEKULA TÍPUSA: peptid (iii) HIPOTETIKUS : nem (v) FRAGMENS TÍPUSA: N-terminális (ix) SAJÁTOS JELLEGZETESSÉG (A) NÉV: módosított hely 30 (B) ELHELYEZKEDÉS: 29 (D) MÁS TUDNIVALÓ: megjegyzés:
Xaa29=lizin-OCCH2 - (OCH2CH2), 10OCH3 (xi) SZEKVENCIALEÍRÁS: 19. számú szekvencia
Al a 1 | Va 1 | Ser | G1 u | Hi s 5 | Gin | Leu | Le u |
Gin | As p | Leu | Arg | Arg | Arg | Glu | Leu |
20 | |||||||
Leu | Hi s | Thr | Al a |
Hi s | Asp 10 | Arg | Gly | Arg | Ser | Ile 15 |
Leu | Glu | Arg | Leu | Leu | Xaa | Arg |
25 | 30 |
TUDNIVALÓK A 20. SZÁMÚ SZEKVENCIÁHOZ (i) SZEKVENCIAJELLEMZŐK (A) HOSSZÚSÁG: 34 aminosav (B) TÍPUS: aminosav (D) ALAK: lineáris (ii) MOLEKULA TÍPUSA: peptid (iii) HIPOTETIKUS: nem (v) FRAGMENS TÍPUSA: N-terminális (xi) SZEKVENCIALEÍRÁS: 20. számú szekvencia
Al a | Va | 1 | Ser | G1 | u | Hi s | Gin | Leu | Leu |
1 | 5 | ||||||||
Gin | As | P | Leu | Ar | g | Arg | Arg | Al a | Leu |
20 | |||||||||
Le u | Hi | s | Thr | Al | a |
His | As p 10 | Ly s | Gly | Arg | Ser | Ile 15 |
Al a | Glu | Al a | Leu | Al a | Glu | Al a |
25 | 30 |
TUDNIVALÓK A 21. SZÁMÚ SZEKVENCIÁHOZ (i) SZEKVENCIAJELLEMZŐK (A) HOSSZÚSÁG: 34 aminosav (B) TÍPUS: aminosav (D) ALAK: lineáris (ii) MOLEKULA TÍPUSA: peptid (iii) HIPOTETIKUS: nem (v) FRAGMENS TÍPUSA: N-terminális (xi) SZEKVENCIALEÍRÁS:
21. számú szekvencia
HU 217 843 Β
Al a 1 | Val | Ser | Glu | Hi s 5 | Gin Leu |
Gin | As p | Leu | Arg | Arg | Arg Ser |
20 | |||||
Leu | Hi s | Thr | Al a |
Leu | Hi s | As p 10 | Ly s | Gly | Ly s | Ser | I 1 e 15 |
Leu | Leu | Ser | Ser | Leu | Leu | Ser | Se r |
25 | 30 |
TUDNIVALÓK A 22. SZÁMÚ SZEKVENCIÁHOZ (i) SZEKVENCIAJELLEMZŐK (A) HOSSZÚSÁG: 34 aminosav
(B) TÍPUS: aminosav (D) ALAK: lineáris |
Alá Val Ser Glu His Gin Leu |
1 5 |
Gin Asp Leu Arg Arg Arg Alá |
20 |
Leu His Thr Alá |
TUDNIVALÓK A 23. SZÁMÚ SZEKVENCIÁHOZ |
(ii) MOLEKULA TÍPUSA: peptid (iii) HIPOTETIKUS: nem (v) FRAGMENS TÍPUSA: N-terminális
10 | (xi) SZEKVENCIALEIRAS: 22. | . számú szekvencia | ||||
Leu | Hi s | As p | Ly s | Gly | Ly s | Ser I 1 e |
10 | 15 | |||||
Phe | Tyr | As p | Ly s | Val | Al a | Glu Lys |
25 | 30 |
(i) SZEKVENCIAJELLEMZŐK (A) HOSSZÚSÁG: 34 aminosav (B) TÍPUS: aminosav (D) ALAK: lineáris (ii) MOLEKULA TÍPUSA: pepiid (iii) HIPOTETIKUS : nem (v) FRAGMENS TÍPUSA: N-terminális (ix) SAJÁTOS JELLEGZETESSÉG (A) NÉV: módosított hely (B) ELHELYEZKEDÉS: 8 20 (D) MÁS TUDNIVALÓ: megjegyzés:
Xaa8=norleucin (ix) SAJÁTOS JELLEGZETESSÉG (A) NÉV: módosított hely (B) ELHELYEZKEDÉS: 18 (D) MÁS TUDNIVALÓ: megjegyzés:
Xaa18=norleucin (xi) SZEKVENCIALEÍRÁS: 23. számú szekvencia
Al a | Va 1 | Ser | Glu | I 1 e | Gin | Ph e |
1 | 5 | |||||
Ser | Ser | Xaa | Glu | Arg | Va 1 | Glu |
20 | ||||||
Leu | Hi s | Asn | Tyr |
Xaa | H i s | As n 10 | Leu | Gly | Ly s | Hi s | Leu 15 |
Leu | Leu | Glu | Ly s | Leu | Leu | Glu | Ly s |
25 | 30 |
TUDNIVALÓK A 24. SZÁMÚ SZEKVENCIÁHOZ (i) SZEKVENCIAJELLEMZŐK (A) HOSSZÚSÁG: 34 aminosav (B) TÍPUS: aminosav (D)ALAK: lineáris (ii) MOLEKULA TÍPUSA: peptid (iii) HIPOTETIKUS: nem (v) FRAGMENS TÍPUSA: N-terminális (ix) SAJÁTOS JELLEGZETESSÉG (A) NÉV: módosított hely (B) ELHELYEZKEDÉS: 8 (D) MÁS TUDNIVALÓ: megjegyzés:
Xaa8=norleucin (ix) SAJÁTOS JELLEGZETESSÉG (A) NÉV: módosított hely (B) ELHELYEZKEDÉS: 18 (D)MÁS TUDNIVALÓ: megjegyzés:
Xaa18=norleucin (xi) SZEKVENCIALEÍRÁS: 24. számú szekvencia
Al a 1 | Va 1 | Ser | Glu | I le 5 | Gin Phe |
Ser | Ser | Xa a | Arg | Arg | Arg Glu |
20 | |||||
Le u | Hi s | Asn | Tyr |
Xaa His Asn Leu Gly Lys His Leu 10 15
Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys 25 30
TUDNIVALÓK A 25. SZÁMÚ SZEKVENCIÁHOZ (i) SZEKVENCIAJELLEMZŐK (A) HOSSZÚSÁG: 35 aminosav (B) TÍPUS: aminosav (D)ALAK: lineáris (ii) MOLEKULA TÍPUSA: peptid (iii) HIPOTETIKUS: nem (v) FRAGMENS TÍPUSA: N-terminális (xi) SZEKVENCIALEÍRÁS:
25. számú szekvencia
HU 217 843 Β
Al a 1 | Val | Ser | Glu | Hi s 5 | Gin | Leu |
Gin | As p | Leu | Arg | Arg | Arg | Glu |
20 | ||||||
Leu | Hi s | Thr | Me t | Al a | ||
35 |
Hi s | As p 10 | Ly s | Gly | Ly s | Ser | Ile 15 |
Leu | Glu | Ly s | Leu | Leu | Glu | Ly s |
25 | 30 |
TUDNIVALÓK A 26. SZÁMÚ SZEKVENCIÁHOZ (i) SZEKVENCIAJELLEMZŐK (A) HOSSZÚSÁG: 10 aminosav (B) TÍPUS: aminosav (D)ALAK: lineáris (ii) MOLEKULA TÍPUSA: peptid (iii) HIPOTETIKUS: nem (v) FRAGMENS TÍPUSA: belső (ix) SAJÁTOS JELLEGZETESSÉG (A) NÉV: módosított hely (B) ELHELYEZKEDÉS: 8 (D) MÁS TUDNIVALÓ: megjegyzés: Xaa8=glutaminsav vagy arginin (ix) SAJÁTOS JELLEGZETESSÉG (A) NÉV: régió (B) ELHELYEZKEDÉS: 1..10 (D) MÁS TUDNIVALÓ: megjegyzés: „a 26. szekvencia az 5., 6., 7., 8., 9., 10., 11., 12., 13. és 14. szekvenciák 22. és 31. helyei között helyezkedik el” (xi) SZEKVENCIALEÍRÁS: 26. számú szekvencia Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Xaa Lys Leu
5 10
TUDNIVALÓK A 27. SZÁMÚ SZEKVENCIÁHOZ (i) SZEKVENCIAJELLEMZŐK (A) HOSSZÚSÁG: 10 aminosav (B) TÍPUS: aminosav (D) ALAK: lineáris (ii) MOLEKULA TÍPUSA: peptid (iii) HIPOTETIKUS: nem (v) FRAGMENS TÍPUSA: belső (ix) SAJÁTOS JELLEGZETESSÉG (A) NÉV: módosított hely (B) ELHELYEZKEDÉS: 8 (D) MÁS TUDNIVALÓ: megjegyzés: Xaa8=glutaminsav, lizin vagy lizin-(OCCH2PEGX) (ix) SAJÁTOS JELLEGZETESSÉG (A) NÉV: régió (B) ELHELYEZKEDÉS: 1..10 (D) MÁS TUDNIVALÓ: megjegyzés: „a 27. szekvencia a 15., 16., 17., 18. és 19. szekvenciák 22. és 31. helyei között helyezkedik el” (xi) SZEKVENCIALEÍRÁS: 27. számú szekvencia Glu Leu Leu Glu Arg Leu Leu Xaa Arg Leu
5 10
TUDNIVALÓK A 28. SZÁMÚ SZEKVENCIÁHOZ (i) SZEKVENCIAJELLEMZŐK (A) HOSSZÚSÁG: 10 aminosav (B) TÍPUS: aminosav (D) ALAK: lineáris (ii) MOLEKULA TÍPUSA: peptid (iii) HIPOTETIKUS: nem (v) FRAGMENS TÍPUSA: belső (ix) SAJÁTOS JELLEGZETESSÉG (A) NÉV: peptid (B) ELHELYEZKEDÉS: 1..10 (D) MÁS TUDNIVALÓ: megjegyzés: „a 28. szekvencia a 20. szekvencia 22. és 31. helyei között helyezkedik el” (xi) SZEKVENCIALEÍRÁS: 28. számú szekvencia Alá Leu Alá Glu Alá Leu Alá Glu Alá Leu
5 10
TUDNIVALÓK A 29. SZÁMÚ SZEKVENCIÁHOZ (i) SZEKVENCIAJELLEMZŐK (A) HOSSZÚSÁG: 10 aminosav (B) TÍPUS: aminosav (D) ALAK: lineáris (ii) MOLEKULA TÍPUSA: peptid (iii) HIPOTETIKUS: nem (v) FRAGMENS TÍPUSA: belső (ix) SAJÁTOS JELLEGZETESSÉG (A) NÉV: peptid (B) ELHELYEZKEDÉS: 1..10 (D) MÁS TUDNIVALÓ: megjegyzés: „a 29. szekvencia a 21. szekvencia 22. és 31. helyei között helyezkedik el” (xi) SZEKVENCIALEÍRÁS: 29. számú szekvencia Ser Leu Leu Ser Ser Leu Leu Ser Ser Leu
5 10
TUDNIVALÓK A 30. SZÁMÚ SZEKVENCIÁHOZ (i) SZEKVENCIAJELLEMZŐK (A) HOSSZÚSÁG: 10 aminosav (B) TÍPUS: aminosav (D) ALAK: lineáris (ii) MOLEKULA TÍPUSA: peptid (iii) HIPOTETIKUS: nem (v) FRAGMENS TÍPUSA: belső (ix) SAJÁTOS JELLEGZETESSÉG (A) NÉV: peptid (B) ELHELYEZKEDÉS: 1..10 (D) MÁS TUDNIVALÓ: megjegyzés: „a 30. szekvencia a 22. szekvencia 22. és 31. helyei között helyezkedik el” (xi) SZEKVENCIALEÍRÁS: 30. számú szekvencia Alá Phe Tyr Asp Lys Val Alá Glu Lys Leu
5 10
TUDNIVALÓK A 31. SZÁMÚ SZEKVENCIÁHOZ (i) SZEKVENCIAJELLEMZŐK (A) HOSSZÚSÁG: 88 bázispár (B) TÍPUS: nukleinsav (C) SZÁL: egyszálú (D) ALAK: lineáris (ii) MOLEKULA TÍPUSA: cDNS (iii) HIPOTETIKUS: nem (iv) ANTI-SZENSZ: Nem (xi) SZEKVENCIALEÍRÁS: 31. számú szekvencia
HU 217 843 Β
CCTCTAGATC TCCGCGGCGC TAGCATGGCT GTTTCTGAAC ATCAGCTGCT 50 TCATGACAAA GGTAAATCGA TTCAAGATCT GAGACGTC 88
TUDNIVALÓK A 32. SZÁMÚ SZEKVENCIÁHOZ (D) ALAK: lineáris (i) SZEKVENCIAJELLEMZŐK 5 (ii) MOLEKULA TÍPUSA: cDNS (A) HOSSZÚSÁG: 90 bázispár (iii) HIPOTETIKUS: nem (B) TÍPUS: nukleinsav (iv) ANTI-SZENSZ: igen (C) SZÁL: egyszálú (xi) SZEKVENCIALEÍRÁS: 32. számú szekvencia
CCTCGAAGCT TATGCATCAT TATCTAGACA TAGTATGCAG CTTTTCAAGC 50 AGTTTCTCCA GCAGCTCGCG ACGTCTCAGA TCTTGAATCG 90
TUDNIVALÓK A 33. SZÁMÚ SZEKVENCIÁHOZ (i) SZEKVENCIAJELLEMZŐK (A) HOSSZÚSÁG: 23 bázispár (B) TÍPUS: nukleinsav (C) SZÁL: egyszálú (D) ALAK: lineáris (ii) MOLEKULA TÍPUSA: cDNS (iii) HIPOTETIKUS: nem (iv) ANTI-SZENSZ: nem (xi) SZEKVENCIALEÍRÁS: 33. számú szekvencia CCTCTAGATC TCCGCGCGCT AGC 23
TUDNIVALÓK A 34. SZÁMÚ SZEKVENCIÁHOZ (i) SZEKVENCIAJELLEMZŐK (A) HOSSZÚSÁG: 24 bázispár (B) TÍPUS: nukleinsav (C) SZÁL: egyszálú (D) ALAK: lineáris (ii) MOLEKULA TÍPUSA: cDNS (iii) HIPOTETIKUS: nem (iv) ANTI-SZENSZ: igen (xi) SZEKVENCIALEÍRÁS: 34. számú szekvencia CCTCGAAGCT TATGCATCAT TATC 24
TUDNIVALÓK A 35. SZÁMÚ SZEKVENCIÁHOZ 20 (i) SZEKVENCIAJELLEMZŐK (A) HOSSZÚSÁG: 34 aminosav (B) TÍPUS: aminosav (D)ALAK: lineáris (ii) MOLEKULA TÍPUSA: protein 25 (iii) HIPOTETIKUS: nem (v) FRAGMENS TÍPUSA: N-terminális (xi) SZEKVENCIALEÍRÁS: 35. számú szekvencia
Al a | Va 1 | Ser | Gl u | Ile | Gin | Phe |
1 | 5 | |||||
Ser | Ser | Leu | Arg | Arg | Arg | Glu |
20 | ||||||
Leu | Hi s | Asn | Tyr |
Leu His Asn Leu Gly Lys His Leu 10 15
Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys 25 30
TUDNIVALÓK A 36. SZÁMÚ SZEKVENCIÁHOZ (i) SZEKVENCIAJELLEMZŐK (A) HOSSZÚSÁG: 34 aminosav (B) TÍPUS: aminosav (D) ALAK: lineáris (ii) MOLEKULA TÍPUSA: protein (iii) HIPOTETIKUS: nem (v) FRAGMENS TÍPUSA: N-terminális (ix) SAJÁTOS JELLEGZETESSÉG (A) NÉV: módosított hely (B) ELHELYEZKEDÉS: 34 (D) MÁS TUDNIVALÓ: megjegyzés:
Xaa=homoszerin (xi) SZEKVENCIALEÍRÁS: 36. számú szekvencia
Al a | Va 1 | Ser | Glu | Ile | Gin | Phe |
1 | 5 | |||||
Ser | Ser | Leu | Arg | Arg | Arg | Glu |
20 | ||||||
Leu | Hi s | As n | Xaa |
Leu His Asn Leu Gly Lys His Leu 10 15
Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys 25 30
TUDNIVALÓK A 37. SZÁMÚ SZEKVENCIÁHOZ (i) SZEKVENCIAJELLEMZŐK (A) HOSSZÚSÁG: 34 aminosav (B) TÍPUS: aminosav (D) ALAK: lineáris (ii) MOLEKULA TÍPUSA: protein (iii) HIPOTETIKUS: nem (v) FRAGMENS TÍPUSA: N-terminális 55 (ix) SAJÁTOS JELLEGZETESSÉG (A) NÉV: módosított hely (B) ELHELYEZKEDÉS: 34 (D) MÁS TUDNIVALÓ: megjegyzés:
Xaa=homoszerin (xi) SZEKVENCIALEÍRÁS: 37. számú szekvencia
HU 217 843 Β
Al | a | Va | 1 | Se | r | Glu | lle | Gin | Phe |
1 | 5 | ||||||||
Se | r | Se | r | Le | u | Arg | Arg | Arg | Glu |
20 | |||||||||
Le | u | Hi | s | As | n | Xaa |
Leu | Hi s | Asn 10 | Ly s | Gly | Ly s | Hi s | Leu 15 |
Leu | Leu | Glu | Ly s | Leu | Leu | Glu | Ly s |
25 | 30 |
TUDNIVALÓK A 38. SZÁMÚ SZEKVENCIÁHOZ (i) SZEKVENCIAJELLEMZŐK (A) HOSSZÚSÁG: 34 aminosav
(B) | TÍPUS: | amino | sav | |||
(D) | ALAK: | lineár | is | |||
Al a | Va 1 | Ser | Glu | Hi s | Gin Leu | |
1 | 5 | |||||
Gin | As p | Leu | Lys | Leu | Lys Glu | |
20 | ||||||
Leu | Hi s | Thr | Al a |
TUDNIVALÓK A 39. SZÁMÚ SZEKVENCIÁHOZ (i) SZEKVENCIAJELLEMZŐK (A) HOSSZÚSÁG: 34 aminosav
(B) | TÍPUS: | amino | sav | |||
(D) | ALAK: | lineár | is | |||
Al a | Va 1 | Ser | Glu | Hi s | Gin Leu | |
1 | 5 | |||||
Gin | As p | Leu | Arg | Arg | Arg Glu | |
20 | ||||||
Leu | Hi s | Thr | Al a |
TUDNIVALÓK A 40. SZÁMÚ SZEKVENCIÁHOZ (i) SZEKVENCIAJELLEMZŐK (A) HOSSZÚSÁG: 35 aminosav (B) TÍPUS: aminosav (D) ALAK: lineáris
Al a 1 | Va 1 | Ser | Glu | Hi s 5 | Gin | Leu |
Gin | As p | Leu | Arg | Arg | Arg | Glu |
20 | ||||||
Leu | Hi s | Thr | Al a | Pro | ||
35 |
TUDNIVALÓK A 41. SZÁMÚ SZEKVENCIÁHOZ (i) SZEKVENCIAJELLEMZŐK (A) HOSSZÚSÁG: 37 aminosav (B) TÍPUS: aminosav (D) ALAK: lineáris (ii) MOLEKULA TÍPUSA: protein (iii) HIPOTETIKUS: nem (v) FRAGMENS TÍPUSA: N-terminális 10 (xi) SZEKVENCIALEÍRÁS: 38. számú szekvencia
Leu His Asp Lys Gly Lys Ser lle 10 15
Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys 25 30 (ii) MOLEKULA TÍPUSA: protein 20 (iii) HIPOTETIKUS: nem (v) FRAGMENS TÍPUSA: N-terminális (xi) SZEKVENCIALEÍRÁS: 39. számú szekvencia
Leu His Asp Lys Gly Lys Ser lle 10 15
Leu Leu Glu Arg Leu Leu Glu Arg 25 30 (ii) MOLEKULA TÍPUSA: protein (iii) HIPOTETIKUS: nem (v) FRAGMENS TÍPUSA: N-terminális (xi) SZEKVENCIALEÍRÁS: 40. számú szekvencia
Leu His Asp Lys Gly Lys Ser lle 10 15
Leu Leu Glu Arg Leu Leu Glu Arg 25 30 (ii) MOLEKULA TÍPUSA: protein 45 (iii) HIPOTETIKUS: nem (v) FRAGMENS TÍPUSA: N-terminális (xi) SZEKVENCIALEÍRÁS: 41. számú szekvencia
Al | a | Va | 1 | Ser | G1 | u | H i s | G1 | n | Le | u |
1 | 5 | ||||||||||
G1 | n | As | P | Leu | Ar | g | Arg | Ar | g | G1 | u |
20 | |||||||||||
Le | u | Hi | s | Thr | Al | a | Gly | Ar | g | Ar | g |
Leu His Asp Lys Gly Lys Ser lle 10 15
Leu Leu Glu Arg Leu Leu Glu Arg 25 30
TUDNIVALÓK A 42. SZÁMÚ SZEKVENCIÁHOZ (i) SZEKVENCIAJELLEMZŐK (A) HOSSZÚSÁG: 38 aminosav (B) TÍPUS : aminosav (D)ALAK: lineáris (ii) MOLEKULA TÍPUSA: protein (iii) HIPOTETIKUS: nem (v) FRAGMENS TÍPUSA: N-terminális
HU 217 843 Β (ix) SAJÁTOS JELLEGZETESSEG (A) NÉV: módosított hely (B) ELHELYEZKEDÉS: 38 (D) MÁS TUDNIVALÓ: megjegyzés: Xaa=homoszerin (xi) SZEKVENCIALEÍRÁS: 42. számú szekvencia
Al a 1 | Va 1 | Ser | Glu | Hi s 5 | Gin | Leu |
Gin | As p | Leu | Arg | Arg 20 | Arg | Glu |
Leu | Hi s | Thr | Al a | Gly 35 | Arg | Arg |
Leu | Hi s | As p 10 | Ly s | Gl y | Ly s | Ser | He 1 5 |
Leu | Leu | Glu | Arg | Leu | Leu | Glu | Arg |
25 | 30 | ||||||
Xaa |
TUDNIVALÓK A 43. SZÁMÚ SZEKVENCIÁHOZ (i) SZEKVENCIAJELLEMZŐK (A) HOSSZÚSÁG: 34 aminosav
(B) | TÍPUS: | amino | isav | |||
(D) | ALAK: | lineár | is | |||
Al a | Va 1 | Ser | Glu | H i s | Gin Leu | |
1 | 5 | |||||
Gin | As p | Leu | Arg | Arg | Arg Glu | |
20 | ||||||
Leu | Hi s | Thr | Tyr |
TUDNIVALÓK A 44. SZÁMÚ SZEKVENCIÁHOZ (i) SZEKVENCIAJELLEMZŐK (A) HOSSZÚSÁG: 34 aminosav
(B) TÍPUS: aminosav (D) ALAK: lineáris |
Alá Val Ser Glu His Gin Leu |
1 5 |
Gin Asp Leu Arg Arg Arg Glu |
20 |
Leu His Thr Alá |
TUDNIVALÓK A 45. SZÁMÚ SZEKVENCIÁHOZ |
(i) SZEKVENCIAJELLEMZŐK (A) HOSSZÚSÁG: 34 aminosav
(B) | TÍPUS: | amino | sav | |||
(D) | ALAK: | lineár | is | |||
Al a | Va 1 | Ser | Glu | Hi s | Gin Leu | |
1 | 5 | |||||
Gin | As p | Leu | Arg | Arg | Arg Glu | |
20 | ||||||
Le u | Hi s | Thr | Al a |
TUDNIVALÓK A 46. SZÁMÚ SZEKVENCIÁHOZ (i) SZEKVENCIAJELLEMZŐK (A) HOSSZÚSÁG : 34 aminosav (B) TÍPUS: aminosav (D) ALAK: lineáris (ii) MOLEKULA TÍPUSA: protein
(iii) HIPOTETI | KUS: | nem | |||
Al a | Va 1 | Ser | Glu | Hi s | Gin Leu |
1 | 5 | ||||
Gl n | As p | Leu | Arg | Arg | Arg Glu |
20 | |||||
Leu | H i s | Thr | Al a |
(ii) MOLEKULA TÍPUSA: protein (iii) HIPOTETIKUS: nem (v) FRAGMENS TÍPUSA: N-terminális 15 (xi) SZEKVENCIALEÍRÁS: 43. számú szekvencia
Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile 10 15
Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys 25 30 (ii) MOLEKULA TÍPUSA: protein 25 (iii) HIPOTETIKUS: nem (v) FRAGMENS TÍPUSA: N-terminális (xi) SZEKVENCIALEÍRÁS: 44. számú szekvencia
Leu His Asp Lys Gly Tyr Ser Ile 10 15
Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys 25 30 (ii) MOLEKULA TÍPUSA: protein (iii) HIPOTETIKUS: nem (v) FRAGMENS TÍPUSA: N-terminális (xi) SZEKVENCIALEÍRÁS: 45. számú szekvencia
Leu His Asp Lys Gly Cys Ser Ile 10 15
Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys 25 30 (v) FRAGMENS TÍPUSA: N-terminális (ix) SAJÁTOS JELLEGZETESSÉG (A) NÉV: módosított hely (B) ELHELYEZKEDÉS: 13 (D) MÁS TUDNIVALÓ: megjegyzés:
Xaa=Cy s [CH2CONH - (CH2)2NH(biotinil)] (xi) SZEKVENCIALEÍRÁS: 46. számú szekvencia
Leu His Asp Lys Gly Xaa Ser Ile 10 15
Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys 25 30
HU 217 843 Β
TUDNIVALÓK A 47. SZÁMÚ SZEKVENCIÁHOZ (i) SZEKVENCIAJELLEMZŐK (A) HOSSZÚSÁG: 34 aminosav (B) TÍPUS: aminosav (D) ALAK: lineáris (ii) MOLEKULA TÍPUSA: protein (iii) HIPOTETIKUS: nem (v) FRAGMENS TÍPUSA: N-terminális (ix) SAJÁTOS JELLEGZETESSÉG (A) NÉV: módosított hely (B) ELHELYEZKEDÉS: 13 (D) MÁS TUDNIVALÓ: megjegyzés: Xaa=[7 5 (dimetil-amino)-2-oxo-2H-l-benzopirán-4 acetil]-Lys (xi) SZEKVENCIALEÍRÁS: 47. számú szekvencia
Al a 1 | Va 1 | Ser | Glu | Hi s 5 | Gin | Leu | Leu |
Gin | As p | Leu | Arg | Arg | Arg | Glu | Leu |
20 | |||||||
Leu | Hi s | Thr | Al a |
Hi s | Asp 10 | Ly s | Gly | Xaa | Ser | Ile 15 |
Leu | Glu | Ly s | Leu | Leu | Glu | Ly s |
25 | 30 |
TUDNIVALÓK A 48. SZÁMÚ SZEKVENCIÁHOZ (i) SZEKVENCIAJELLEMZŐK (A) HOSSZÚSÁG: 35 aminosav (ii) MOLEKULA TÍPUSA: protein (iii) HIPOTETIKUS: nem (v) FRAGMENS TÍPUSA: N-terminális
(B) TÍPUS: (D) ALAK: | aminosav lineáris | 20 | (xi) SZEKVENCIALEÍRÁS: 48. | . számú szekvencia | ||||
Al a | Val Ser | G1 u | Hi s | G1 n | Leu | Leu | His Asp Lys Gly Lys | Ser Ile |
1 | 5 | 10 | 15 | |||||
Gin | Asp Leu | Arg | Arg | Arg | G1 u | Leu | Leu Glu Lys Leu Leu | Glu Lys |
20 | 25 | 30 | ||||||
Leu | Hi s Thr | Al a | Gly | |||||
35 |
TUDNIVALÓK A 49. SZÁMÚ SZEKVENCIÁHOZ (i) SZEKVENCIAJELLEMZŐK (A) HOSSZÚSÁG: 33 aminosav (B) TÍPUS: aminosav (D) ALAK: lineáris (ii) MOLEKULA TÍPUSA: protein (iii) HIPOTETIKUS: nem (v) FRAGMENS TÍPUSA: N-terminális (ix) SAJÁTOS JELLEGZETESSÉG (A) NÉV: módosított hely (B) ELHELYEZKEDÉS: 4 (D) MÁS TUDNIVALÓ: megjegyzés:
Xaa4= Glu(OCH3) (ix) SAJÁTOS JELLEGZETESSÉG (A) NÉV: módosított hely (B) ELHELYEZKEDÉS: 10 (D) MÁS TUDNIVALÓ: megjegyzés:
Xaa10= Asp(OCH3) (ix) SAJÁTOS JELLEGZETESSÉG (A) NÉV: módosított hely (B) ELHELYEZKEDÉS: 17 30 (D) MÁS TUDNIVALÓ: megjegyzés:
Xaa17= Asp(OCH3) (ix) SAJÁTOS JELLEGZETESSÉG (A) NÉV: módosított hely (B) ELHELYEZKEDÉS: 22 (D) MÁS TUDNIVALÓ: megjegyzés:
Xaa22= Glu(OCH3) (ix) SAJÁTOS JELLEGZETESSÉG (A) NÉV: módosított hely (B) ELHELYEZKEDÉS: 25 (D) MÁS TUDNIVALÓ: megjegyzés:
Xaa25= Glu(OCH3) (ix) SAJÁTOS JELLEGZETESSÉG (A) NÉV: módosított hely (B) ELHELYEZKEDÉS: 29 (D) MÁS TUDNIVALÓ: megjegyzés:
Xaa29= Glu(OCH3) (xi) SZEKVENCIALEÍRÁS: 49. számú szekvencia
Al a 1 | Val | Ser | Xaa | Hi s 5 | Gin | Leu | Leu |
Gin | Xa a | Leu | Arg | Arg | Arg | Xa a | Leu |
20 | |||||||
Le u | Hi s | Al a |
Hi s | Xa a 10 | Ly s | Gly | Ly s | Ser | Ile 15 |
Leu | Xaa | Ly s | Leu | Le u | Xaa | Ly s |
25 | 30 |
TUDNIVALÓK AZ 50. SZÁMÚ SZEKVENCIÁHOZ (i) SZEKVENCIAJELLEMZŐK (A) HOSSZÚSÁG: 33 aminosav (B) TÍPUS: aminosav (D) ALAK: lineáris (ii) MOLEKULA TÍPUSA: protein (iii) HIPOTETIKUS: nem (v) FRAGMENS TÍPUSA: N-terminális (ix) SAJÁTOS JELLEGZETESSÉG (A) NÉV: módosított hely
HU 217 843 Β (B) ELHELYEZKEDES: 4 (D) MÁS TUDNIVALÓ: megjegyzés:
Xaa4= Glu(OCH3) (ix) SAJÁTOS JELLEGZETESSÉG (A) NÉV: módosított hely (B) ELHELYEZKEDÉS: 10 (D) MÁS TUDNIVALÓ: megjegyzés: Xaa10= Asp(OCH3) (ix) SAJÁTOS JELLEGZETESSÉG (A) NÉV: módosított hely (B) ELHELYEZKEDÉS: 17 (D) MÁS TUDNIVALÓ: megjegyzés: XaaI7= Asp(OCH3) (ix) SAJÁTOS JELLEGZETESSÉG (A) NÉV: módosított hely
Al a 1 | Va 1 | Ser | Xaa | Hi s 5 | Gin | Leu |
Gin | Xaa | Leu | Arg | Arg | Arg | Xaa |
20 | ||||||
Leu | Hi s | Al a |
TUDNIVALÓK AZ 51. SZÁMÚ SZEKVENCIÁHOZ (i) SZEKVENCIAJELLEMZŐK (A) HOSSZÚSÁG: 34 aminosav (B) TÍPUS: aminosav (D) ALAK: lineáris (ii) MOLEKULA TÍPUSA: protein
(iii) HIPOTETI | KUS: | nem | ||||
Al a | Val | Se r | Glu | Hi s | Gin | Leu |
1 | 5 | |||||
Gin | As p | Leu | Arg | Arg | Arg | Glu |
20 | ||||||
Leu | Hi s | Thr | Xaa |
(B) ELHELYEZKEDES: 22 (D) MÁS TUDNIVALÓ: megjegyzés:
Xaa22= G1u(OCH3) (ix) SAJÁTOS JELLEGZETESSÉG (A) NÉV: módosított hely (B) ELHELYEZKEDÉS: 25 (D) MÁS TUDNIVALÓ: megjegyzés:
Xaa25 = G1u(OCH3) (ix) SAJÁTOS JELLEGZETESSÉG (A) NÉV: módosított hely (B) ELHELYEZKEDÉS: 29 (D) MÁS TUDNIVALÓ: megjegyzés:
Xaa29= G1u(OCH3) (xi) SZEKVENCIALEÍRÁS: 50. számú szekvencia
Leu His Xaa Lys Gly Lys Ser Ile 10 15
Leu Leu Xaa Lys Leu Leu Xaa Lys 25 30 (v) FRAGMENS TÍPUSA: N-terminális (ix) SAJÁTOS JELLEGZETESSÉG (A) NÉV: módosított hely (B) ELHELYEZKEDÉS: 34 (D) MÁS TUDNIVALÓ: megjegyzés: Xaa=homo szerin (xi) SZEKVENCIALEÍRÁS: 51. számú szekvencia
Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile 10 15
Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys 25 30
TUDNIVALÓK AZ 52. SZÁMÚ SZEKVENCIÁHOZ (i) SZEKVENCIAJELLEMZŐK (A) HOSSZÚSÁG: 35 aminosav (B) TÍPUS: aminosav (D) ALAK: lineáris
Al a 1 | Va 1 | Ser | Glu | Hi s 5 | Gin | Leu |
Gin | As p | Leu | Arg | Arg | Arg | Glu |
20 | ||||||
Leu | Hi s | Thr | Al a | Pro | ||
35 |
(ii) MOLEKULA TÍPUSA: protein (iii) HIPOTETIKUS: nem (v) FRAGMENS TÍPUSA: N-terminális 40 (xi) SZEKVENCIALEÍRÁS: 52. számú szekvencia
Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile 10 15
Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys 25 30
TUDNIVALÓK AZ 53. SZÁMÚ SZEKVENCIÁHOZ (i) SZEKVENCIAJELLEMZŐK (A) HOSSZÚSÁG: 34 aminosav
(B) | TÍPUS: | amino | sav | ||||
(D) | ALAK: | lineár: | is | ||||
Al a | Va 1 | Ser | Glu | Hi s | Gin | Leu | |
1 | 5 | ||||||
Gin | As p | Leu | Arg | Arg | Arg | Glu | |
20 | |||||||
Leu | Hi s | Thr | Pro |
(ii) MOLEKULA TÍPUSA: protein (iii) HIPOTETIKUS: nem (v) FRAGMENS TÍPUSA: N-terminális (xi) SZEKVENCIALEÍRÁS: 53. számú szekvencia
Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile 10 15
Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys 25 30
HU 217 843 Β
TUDNIVALÓK AZ 54. SZÁMÚ SZEKVENCIÁHOZ (i) SZEKVENCIAJELLEMZŐK (A) HOSSZÚSÁG: 34 aminosav (B) TÍPUS: aminosav (D)ALAK: lineáris (ii) MOLEKULA TÍPUSA: protein (iii) HIPOTETIKUS: nem (v) FRAGMENS TÍPUSA: N-terminális (xi) SZEKVENCIALEÍRÁS: 54. számú szekvencia
Al a | Va 1 | Ser | Glu | Hi s | G1 n | Le u |
1 | 5 | |||||
Gin | As p | Leu | Arg | Arg | Arg | Glu |
20 | ||||||
Leu | Hi s | Thr | Pro |
Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile 10 15
Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys 25 30
TUDNIVALÓK AZ 55. SZÁMÚ SZEKVENCIÁHOZ (i) SZEKVENCIAJELLEMZŐK (A) HOSSZÚSÁG: 33 aminosav (B) TÍPUS: aminosav (D) ALAK: lineáris (ii) MOLEKULA TÍPUSA: protein (iii) HIPOTETIKUS: nem (v) FRAGMENS TÍPUSA: N-terminális (xi) SZEKVENCIALEÍRÁS: 55. számú szekvencia
Al a | Va 1 | Ser | Glu | Hi s | Gin | Leu |
1 | 5 | |||||
Gin | As p | Leu | Arg | Arg | Arg | Glu |
20 | ||||||
Leu | Hi s | Pro |
Leu | His | As p 10 | Ly s | Gly | Lys | Ser | Ile 15 |
Leu | Leu | Glu | Ly s | Leu | Leu | Glu | Ly s |
25 | 30 |
TUDNIVALÓK AZ 56. SZÁMÚ SZEKVENCIÁHOZ (i) SZEKVENCIAJELLEMZŐK (A) HOSSZÚSÁG: 32 aminosav (B) TÍPUS: aminosav (D)ALAK: lineáris (ii) MOLEKULA TÍPUSA: protein (iii) HIPOTETIKUS : nem (v) FRAGMENS TÍPUSA: N-terminális 30 (xi) SZEKVENCIALEÍRÁS: 56. számú szekvencia
Al a 1 | Va 1 | Ser | Glu | Hi s 5 | Gin | Leu | Leu | Hi s | As p 10 | Ly s | G1 y | Ly s | Ser | I le 15 |
Gin | As p | Leu | Arg | Arg | Arg | Glu | Leu | Leu | Glu | Ly s | Leu | Leu | Glu | Ly s |
20 | 25 | 30 |
Leu Pro
TUDNIVALÓK AZ 57. SZÁMÚ SZEKVENCIÁHOZ (i) SZEKVENCIAJELLEMZŐK (A) HOSSZÚSÁG: 37 aminosav (B) TÍPUS: aminosav (D)ALAK: lineáris
Al a 1 | Va 1 | Ser | Glu | Hi s 5 | Gin | Leu |
Gin | As p | Leu | Arg | Arg 20 | Arg | Glu |
Leu | Hi s | Thr | Arg | Ser 35 | Al a | Trp |
(ii) MOLEKULA TÍPUSA: protein (iii) HIPOTETIKUS: nem (v) FRAGMENS TÍPUSA: N-terminális (xi) SZEKVENCIALEÍRÁS: 57. számú szekvencia
45 | |||||||
Leu | Hí s | Asp | Ly s | Gly | Ly s | Ser | Ile |
10 | 15 | ||||||
Leu | Leu | Glu | Ly s | Leu | Leu | Glu | Ly s |
25 | 30 |
TUDNIVALÓK AZ 58. SZÁMÚ SZEKVENCIÁHOZ (i) SZEKVENCIAJELLEMZŐK (A) HOSSZÚSÁG: 42 aminosav (B) TÍPUS: aminosav (D) ALAK: lineáris (ii) MOLEKULA TÍPUSA: protein (iii) HIPOTETIKUS: nem (v) FRAGMENS TÍPUSA: N-terminális (xi) SZEKVENCIALEÍRÁS:
58. számú szekvencia
HU 217 843 Β
Al a 1 | Va 1 | Ser | Glu | Hi s 5 |
Gin | As p | Leu | Arg | Arg 20 |
Leu | Hi s | Thr | Arg | Gly 35 |
Gin | Leu | Leu | Hi s | As p 10 |
Arg | Glu | Leu | Leu | Glu 25 |
Arg | Arg | Thr | Arg | Ser 40 |
Ar | g | Gly | Arg | Ser | I 1 e |
15 | |||||
Ar | g | Leu | Leu | Glu | Arg |
30 | |||||
Al | a | Trp |
TUDNIVALÓK AZ 59. SZÁMÚ SZEKVENCIÁHOZ (ii) MOLEKULA TÍPUSA: protein (i) SZEKVENCIAJELLEMZŐK (iii) HIPOTETIKUS: nem (A) HOSSZÚSÁG: 42 aminosav 10 (v) FRAGMENS TÍPUSA: N-terminális
(B) TÍPUS: (D) ALAK: | aminosav lineáris | (xi) SZEKVENCIALEÍRÁS: 59. | számú szekvencia | |||||
Al a | Val Ser | Glu | Hi s | Gin | Leu | Le u | His Asp Arg Gly Arg | Ser I 1e |
1 | 5 | 10 | 1 5 | |||||
Gin | Asp Leu | Arg | Arg | Arg | Glu | Leu | Leu Glu Arg Leu Leu | Glu Arg |
20 | 25 | 30 | ||||||
Leu | His Thr | Arg | Gly | Arg | Arg | Thr | Arg Ser Alá Trp | |
35 | 40 |
TUDNIVALÓK A 60. SZÁMÚ SZEKVENCIÁHOZ (i) SZEKVENCIAJELLEMZŐK (A) HOSSZÚSÁG: 42 aminosav (B) TÍPUS: aminosav (D) ALAK: lineáris (ii) MOLEKULA TÍPUSA: protein (iii) HIPOTETIKUS: nem (v) FRAGMENS TÍPUSA: N-terminális (ix) SAJÁTOS JELLEGZETESSÉG (A) NÉV: módosított hely (B) ELHELYEZKEDÉS: 13 (D) MÁS TUDNIVALÓ: megjegyzés:
Xaa13=(dihidrocinnamoil)Lys (xi) SZEKVENCIALEÍRÁS: 60. számú szekvencia
Al a | Va | 1 | Ser | Glu | Hi | s | Gl | n | Le | u |
1 | 5 | |||||||||
Gin | As | P | Leu | Arg | Ar | g | Ar | g | Gl | u |
20 | ||||||||||
Leu | Hi | s | Thr | Arg | Gl | y | Ar | g | Ar | g |
Leu | Hi s | As p 10 | Arg | Gly | Xaa | Ser | Ile 15 |
Leu | Leu | Glu | Arg | Leu | Leu | Glu | Arg |
25 | 30 | ||||||
Thr | Arg | Ser | Al a | Trp | |||
40 |
TUDNIVALÓK A 61. SZÁMÚ SZEKVENCIÁHOZ (i) SZEKVENCIAJELLEMZŐK (A) HOSSZÚSÁG: 34 aminosav (B) TÍPUS: aminosav (D) ALAK: lineáris (ii) MOLEKULA TÍPUSA: protein (iii) HIPOTETIKUS: nem (v) FRAGMENS TÍPUSA: N-terminális (ix) SAJÁTOS JELLEGZETESSÉG (A) NÉV: módosított hely (B) ELHELYEZKEDÉS: 8 (D) MÁS TUDNIVALÓ: megjegyzés:
Leu8=norleucin (ix) SAJÁTOS JELLEGZETESSÉG (A) NÉV: módosított hely (B) ELHELYEZKEDÉS: 18 (D) MÁS TUDNIVALÓ: megjegyzés: Leu18=norleucin (xi) SZEKVENCIALEÍRÁS: 61. számú szekvencia
Al a 1 | Va 1 | Ser | Glu | I 1 e 5 | Gl n | Phe |
Ser | Ser | Leu | Thr | Arg | Ser | Al a |
20 | ||||||
Va 1 | Hi s | As n | Tyr |
Leu His Asn Leu Gly Lys His Leu 10 15
Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gin Asp 25 30
TUDNIVALÓK A 62. SZÁMÚ SZEKVENCIÁHOZ (i) SZEKVENCIAJELLEMZŐK (A) HOSSZÚSÁG: 35 aminosav (B) TÍPUS: aminosav (D)ALAK: lineáris (ii) MOLEKULA TÍPUSA: protein (iii) HIPOTETIKUS: nem (v) FRAGMENS TÍPUSA: N-terminális (xi) SZEKVENCIALEÍRÁS:
62. számú szekvencia
HU 217 843 Β
Al a | Val | Ser | Glu | Hi s | GI n | Le u |
1 | 5 | |||||
Gin | As p | Leu | Arg | Arg | Arg | Glu |
20 | ||||||
Leu | Hi s | Thr | Me t | Al a |
Le u | H i s | As p 10 | Lys | Gly | Ly s | Ser | Ile 15 |
Leu | Leu | Glu | Ly s | Leu | Leu | Glu | Ly s |
25 | 30 |
TUDNIVALÓK A 63. SZÁMÚ SZEKVENCIÁHOZ (i) SZEKVENCIAJELLEMZŐK (A) HOSSZÚSÁG: 33 aminosav (B) TÍPUS: aminosav (D)ALAK : lineáris (ii) MOLEKULA TÍPUSA: protein
(iii) HIPOTETI | KUS: | nem | |||
Al a | Va 1 | Ser | Glu | Hi s | Gin Leu |
1 | 5 | ||||
Gin | As p | Leu | Arg | Arg | Arg Glu |
20 | |||||
Leu | Hi s | Xaa |
TUDNIVALÓK A 64. SZÁMÚ SZEKVENCIÁHOZ (i) SZEKVENCIAJELLEMZŐK (A) HOSSZÚSÁG: 34 aminosav
(B) TÍPUS: aminosav (D) ALAK: lineáris |
Alá Val Ser Glu His Gin Leu |
1 5 |
Gin Asp Leu Arg Arg Arg Phe |
20 |
Leu His Thr Alá |
TUDNIVALÓK A 65. SZÁMÚ SZEKVENCIÁHOZ |
(i) SZEKVENCIAJELLEMZŐK (A) HOSSZÚSÁG: 34 aminosav
(B) | TÍPUS: | amino | sav | ||||
(D) | ALAK: | lineári | is | ||||
Al a | Va 1 | Ser | Glu | Hi s | Gin | Leu | |
1 | 5 | ||||||
Gin | As p | Leu | Arg | Arg | Arg | Glu | |
20 | |||||||
Leu | Hi s | Thr | Al a |
TUDNIVALÓK A 66. SZÁMÚ SZEKVENCIÁHOZ (i) SZEKVENCIAJELLEMZŐK (A) HOSSZÚSÁG: 34 aminosav
(B) | TÍPUS: | amino | 'sav | ||||
(D) | ALAK: | lineár | is | ||||
Al a | Va 1 | Ser | Glu | Hi s | Gin | Leu | |
1 | 5 | ||||||
Gin | As p | Leu | Arg | Arg | Arg | Glu | |
20 | |||||||
Le u | Hi s | Thr | Al a |
TUDNIVALÓK A 67. SZÁMÚ SZEKVENCIÁHOZ (i) SZEKVENCIAJELLEMZŐK (A) HOSSZÚSÁG: 34 aminosav (v) FRAGMENS TÍPUSA: N-terminális (ix) SAJÁTOS JELLEGZETESSÉG (A) NÉV: módosított hely (B) ELHELYEZKEDÉS: 33 (D) MÁS TUDNIVALÓ: megjegyzés:
Xaa=Thr-1,4-diamino-butiril-laktám (xi) SZEKVENCIALEÍRÁS: 63. számú szekvencia
Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile 10 15
Glu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys 25 30 (ii) MOLEKULA TÍPUSA: protein (iii) HIPOTETIKUS: nem (v) FRAGMENS TÍPUSA: N-terminális 25 (xi) SZEKVENCIALEÍRÁS: 64. számú szekvencia
Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile 10 15
Phe Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys 25 30 (ii) MOLEKULA TÍPUSA: protein 35 (iii) HIPOTETIKUS: nem (v) FRAGMENS TÍPUSA: N-terminális (xi) SZEKVENCIALEÍRÁS: 65. számú szekvencia
Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile 10 15
Leu Leu His Lys Leu Leu Glu Lys 25 30 (ii) MOLEKULA TÍPUSA: protein (iii) HIPOTETIKUS: nem (v) FRAGMENS TÍPUSA: N-terminális (xi) SZEKVENCIALEÍRÁS: 66. számú szekvencia
Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile 10 15
Leu Leu Glu His Leu Leu Glu Lys 25 30 (B) TÍPUS: aminosav (D) ALAK: lineáris
HU 217 843 Β (ii) MOLEKULA TÍPUSA: protein (iii) HIPOTETIKUS: nem
Al a | Va | 1 | Ser | Glu | Hi s | Gin | Le u |
1 | 5 | ||||||
Gin | As | P | Leu | Arg | Arg | Arg | Glu |
20 | |||||||
Leu | Hi | s | Thr | Al a |
TUDNIVALÓK A 68. SZÁMÚ SZEKVENCIÁHOZ (i) SZEKVENCIAJELLEMZŐK
(A) HOSSZÚSÁG: 34 aminosav (B) TÍPUS: aminosav (D) ALAK: lineáris | ||||
Alá Val Ser | Glu | Hi s | Gin | Leu |
1 | 5 | |||
Gin Asp Leu | Arg | Arg | Arg | Glu |
20 | ||||
Ile His Thr | Al a |
TUDNIVALÓK A 69. SZÁMÚ SZEKVENCIÁHOZ (i) SZEKVENCIAJELLEMZŐK
(A) HOSSZÚSÁG: 34 aminosav (B) TÍPUS: aminosav | |||
(D) ALAK: lineáris (ii) MOLEKULA TÍPUSA: (iii) HIPOTETIKUS: nem | protein | ||
Alá Val | Ser | Glu | His Gin Leu |
1 | 5 | ||
Gin Asp | Leu | Arg | Arg Arg Glu 20 |
Leu Hi s | Thr | Xaa |
TUDNIVALÓK A 70. SZÁMÚ SZEKVENCIÁHOZ (i) SZEKVENCIAJELLEMZŐK (A) HOSSZÚSÁG: 34 aminosav (B) TÍPUS: aminosav (D)ALAK: lineáris (ii) MOLEKULA TÍPUSA: protein (iii) HIPOTETIKUS: nem
Al a 1 | Va 1 | Ser | Glu | Hi s 5 | Gin | Leu |
Gin | As p | Leu | Arg | Arg | Arg | Glu |
20 | ||||||
Le u | Hi s | Thr | Xa a |
TUDNIVALÓK A 71. SZÁMÚ SZEKVENCIÁHOZ (i) SZEKVENCIAJELLEMZŐK (A) HOSSZÚSÁG: 34 aminosav
(B) | TÍPUS: | amino | sav | ||||
(D) | ALAK: | lineári | is | ||||
Al a | Va 1 | Ser | Glu | Hi s | Gin | Leu | |
1 | 5 | ||||||
Gin | As p | Leu | Arg | Arg | Arg | Glu | |
20 | |||||||
Leu | Hi s | Thr | Al a |
(v) FRAGMENS TÍPUSA: N-terminális (xi) SZEKVENCIALEÍRÁS: 67. számú szekvencia
Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile 10 15
Leu Leu Glu Lys Leu Ile Alá Lys 25 30 (ii) MOLEKULA TÍPUSA: protein (iii) HIPOTETIKUS: nem (v) FRAGMENS TÍPUSA: N-terminális (xi) SZEKVENCIALEÍRÁS: 68. számú szekvencia
Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile 10 15
Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Glu 25 30 (v) FRAGMENS TÍPUSA: N-terminális (ix) SAJÁTOS JELLEGZETESSÉG (A) NÉV: módosított hely (B) ELHELYEZKEDÉS: 34 (D) MÁS TUDNIVALÓ: megjegyzés:
Xaa=homoszerin (xi) SZEKVENCIALEÍRÁS: 69. számú szekvencia
Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile 10 15
Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys 25 30 (v) FRAGMENS TÍPUSA: N-terminális (ix) SAJÁTOS JELLEGZETESSÉG (A) NÉV: módosított hely (B) ELHELYEZKEDÉS: 34 (D) MÁS TUDNIVALÓ: megjegyzés:
Xaa=homoszerin (xi) SZEKVENCIALEÍRÁS: 70. számú szekvencia
Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile 10 15
Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys 25 30 (ii) MOLEKULA TÍPUSA: protein (iii) HIPOTETIKUS: nem (v) FRAGMENS TÍPUSA: N-terminális (xi) SZEKVENCIALEÍRÁS.· 71. számú szekvencia
Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile 10 15
Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys 25 30
HU 217 843 Β
TUDNIVALÓK A 72. SZÁMÚ SZEKVENCIÁHOZ (i) SZEKVENCIAJELLEMZŐK (A) HOSSZÚSÁG: 37 aminosav (B) TÍPUS: aminosav (D) ALAK: lineáris (ii) MOLEKULA TÍPUSA: protein (iii) HIPOTETIKUS: nem (v) FRAGMENS TÍPUSA: N-terminális (xi) SZEKVENCIALEÍRÁS: 72. számú szekvencia
Al a | Va | 1 | Ser | G1 | u | Hi s | G1 | n | Leu | Le u | Hi s | As p | Ly s | Gly | Ly s | Ser | Ile |
1 | 5 | 10 | 1 5 | ||||||||||||||
Gin | As | P | Leu | Ar | g | Arg | Ar | g | Glu | Leu | Leu | G1 u | Ly s | Leu | Leu | Glu | Ly s |
20 | 25 | 30 | |||||||||||||||
Leu | Hi | s | Thr | Ar | g | Ser | Al | a | Trp |
TUDNIVALÓK A 73. SZÁMÚ SZEKVENCIÁHOZ (i) SZEKVENCIAJELLEMZŐK (A) HOSSZÚSÁG: 36 aminosav (B) TÍPUS: aminosav (D) ALAK: lineáris (ii) MOLEKULA TÍPUSA: protein (v) FRAGMENS TÍPUSA: N-terminális (ix) SAJÁTOS JELLEGZETESSÉG (A) NÉV: módosított hely (B) ELHELYEZKEDÉS : 36 (D) MÁS TUDNIVALÓ: megjegyzés: Xaa=Ala 3 -(2-naftil)-L-alanin
(iii) HIPOTETIKUS: | nem | 20 | (xi) SZEKVENCIALEÍRÁS: 73. | . számú szekvencia |
Ala Val | Ser Glu | His Gin Leu Leu | His Asp Lys Gly Lys | Ser Ile |
1 | 5 | 10 | 15 | |
Gin Asp | Leu Arg | Arg Arg Glu Leu | Leu Glu Lys Leu Leu | Glu Lys |
20 | 25 | 30 | ||
Leu His | Thr Arg | Ser Xaa | ||
35 |
TUDNIVALÓK A 74. SZÁMÚ SZEKVENCIÁHOZ (i) SZEKVENCIAJELLEMZŐK (A) HOSSZÚSÁG: 37 aminosav (B) TÍPUS: aminosav (D) ALAK: lineáris (ii) MOLEKULA TÍPUSA: protein 30 (iii)HIPOTETIKUS: nem (v) FRAGMENS TÍPUSA: N-terminális (xi) SZEKVENCIALEÍRÁS: 74. számú szekvencia
Al a | Va 1 | Ser | Glu | Hi s | Gin | Le | u |
1 | 5 | ||||||
Gin | As p | Leu | Arg | Arg | Arg | G1 | u |
20 | |||||||
Leu | Hi s | Thr | Al a | Ser | Al a | Tr | P |
Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile 10 15
Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys 25 30
TUDNIVALÓK A 75. SZÁMÚ SZEKVENCIÁHOZ (i) SZEKVENCIAJELLEMZŐK (A) HOSSZÚSÁG: 38 aminosav (B) TÍPUS: aminosav (D)ALAK: lineáris
Al a 1 | Va 1 | Ser | Glu | Hi s 5 | Gin | Leu |
Gin | As p | Leu | Arg | Arg 20 | Arg | Glu |
Leu | Hi s | Thr | Al a | Glu 35 | Ile | Arg |
(ii) MOLEKULA TÍPUSA: protein (iii) HIPOTETIKUS: nem (v) FRAGMENS TÍPUSA: N-terminális
45 | (xi) SZEKVENCIALEÍRÁS: 75. számú szekvencia | ||||
Leu | Hi s | As p | Ly s | Gly Lys | Ser Ile |
10 | 15 | ||||
Leu | Leu | Glu | Ly s | Leu Leu | Glu Lys |
25 | 30 | ||||
Al a |
TUDNIVALÓK A 76. SZÁMÚ SZEKVENCIÁHOZ (i) SZEKVENCIAJELLEMZŐK (A) HOSSZÚSÁG: 37 aminosav (B) TÍPUS: aminosav (D) ALAK: lineáris (ii) MOLEKULA TÍPUSA: protein (iii) HIPOTETIKUS: nem (v) FRAGMENS TÍPUSA: N-terminális (xi) SZEKVENCIALEÍRÁS:
76. számú szekvencia
HU 217 843 Β
Al a 1 | Va 1 | Ser | Glu | Hi s 5 | Gin | Leu | Leu | H i s | As p 10 | Ly s | Gly | Ly s | Ser | I 1 e 15 |
Gin | As p | Leu | Arg | Arg | Arg | Glu | Leu | Leu | Glu | Ly s | Leu | Leu | Glu | Ly s |
20 | 25 | 30 | ||||||||||||
Leu | Hi s | Thr | Al a | Glu | Ile | Arg | ||||||||
35 |
TUDNIVALÓK A ΊΊ. SZÁMÚ SZEKVENCIÁHOZ (i) SZEKVENCIAJELLEMZŐK (A) HOSSZÚSÁG: 36 aminosav (ii) MOLEKULA TÍPUSA: protein (iii) HIPOTETIKUS: nem (v) FRAGMENS TÍPUSA: N-terminális
(B) TÍPUS: aminosav (D)ALAK: lineáris | (xi) SZEKVENCIALEÍRÁS: 77. | számú szekvencia |
Ala Val Ser Glu His | Gin Leu Leu His Asp Lys Gly Lys | Ser Ile |
1 5 | 10 | 15 |
Gin Asp Leu Arg Arg | Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu | Glu Lys |
20 | 25 | 30 |
Leu His Thr Ala Glu | Ile | |
35 |
TUDNIVALÓK A 78. SZÁMÚ SZEKVENCIÁHOZ (i) SZEKVENCIAJELLEMZŐK (A) HOSSZÚSÁG: 35 aminosav (B) TÍPUS: aminosav (D)ALAK: lineáris
Al a 1 | Va 1 | Ser | Glu | Hi s 5 | Gin Leu |
Gin | As p | Leu | Arg | Arg 20 | Arg Glu |
Leu | Hi s | Thr | Al a | Glu 35 |
TUDNIVALÓK A 79. SZÁMÚ SZEKVENCIÁHOZ (i) SZEKVENCIAJELLEMZŐK (A) HOSSZÚSÁG: 34 aminosav (B) TÍPUS: aminosav (D) ALAK: lineáris (ii) MOLEKULA TÍPUSA: peptid (iii) HIPOTETIKUS: nem (v) FRAGMENS TÍPUSA: N-terminális (ix) SAJÁTOS JELLEGZETESSÉG (A) NÉV: módosított hely (B) ELHELYEZKEDÉS: 8 (D) MÁS TUDNIVALÓ: megjegyzés: Leu8=norleucin (ii) MOLEKULA TÍPUSA: protein (iii) HIPOTETIKUS: nem (v) FRAGMENS TÍPUSA: N-terminális
(xi) SZEKVENCIALEIRAS: 78. | , számi | ú szekvencia | ||
25 | ||||
Leu | Hi s | Asp Lys Gly Lys | Ser | Ile |
10 | 15 | |||
Leu | Leu | Glu Lys Leu Leu | Glu | Ly s |
25 | 30 | |||
(ix) SAJÁTOS JELLEGZETESS | ÉG |
(A) NÉV: módosított hely (B) ELHELYEZKEDÉS: 18 (D) MÁS TUDNIVALÓ: megjegyzés:
Leu18=norleucin (ix) SAJÁTOS JELLEGZETESSÉG 40 (A) NÉV: módosított hely (B) ELHELYEZKEDÉS: 34 (D) MÁS TUDNIVALÓ: megjegyzés:
Xaa=homoszerin-lakton (xi) SZEKVENCIALEÍRÁS: 79. számú szekvencia
Al a 1 | Va 1 | Ser | Glu | Ile 5 | Gin | Phe |
Ser | Ser | Leu | Glu | Arg | Va 1 | Glu |
20 | ||||||
Va 1 | Hi s | Asn | Xaa |
Leu | H i s | Asn 10 | Ly s | Gly | Lys | Hi s | Leu 15 |
Trp | Leu | Arg 25 | Ly s | Ly s | Leu | Gin | As p 30 |
TUDNIVALÓK A 80. SZÁMÚ SZEKVENCIÁHOZ (i) SZEKVENCIAJELLEMZŐK (A) HOSSZÚSÁG: 32 aminosav (B) TÍPUS: aminosav (D)ALAK: lineáris (ii) MOLEKULA TÍPUSA: protein (iii) HIPOTETIKUS: nem (v) FRAGMENS TÍPUSA: belső (xi) SZEKVENCIALEÍRÁS:
80. számú szekvencia
HU 217 843 Β
Ser | Glu | Hi s | Gin | Leu | Leu | Hi s |
1 | 5 | |||||
Leu | Arg | Arg | Arg | Glu | Leu | Leu |
20 | ||||||
Thr | Al a | |||||
TUDNIVALÓK A 81. | , SZÁMÚ SZEKVENCIÁHOZ |
(i) SZEKVENCIAJELLEMZŐK (A) HOSSZÚSÁG: 28 aminosav (B) TÍPUS: aminosav (D) ALAK: lineáris
Leu Leu His Asp Lys Gly Lys 1 5
Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu 20
TUDNIVALÓK A 82. SZÁMÚ SZEKVENCIÁHOZ (i) SZEKVENCIAJELLEMZŐK (A) HOSSZÚSÁG: 27 aminosav (B) TÍPUS: aminosav (D) ALAK: lineáris
Leu His Asp Lys Gly Lys Ser 1 5
Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu 20
TUDNIVALÓK A 83. SZÁMÚ SZEKVENCIÁHOZ (i) SZEKVENCIAJELLEMZŐK (A) HOSSZÚSÁG: 41 aminosav
(B) TÍPUS: aminosav (D) ALAK: lineáris | (xi) SZEKVENCIALEÍRÁS: 83. | . számú szekvencia |
Ser Glu His Gin Leu Leu His Asp | Arg Gly Arg Ser Ile | Gin Asp |
1 5 | 10 | 15 |
Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu | Arg Leu Leu Glu Arg | Leu His |
20 | 25 | 30 |
Leu His Arg Gly Arg Arg Thr Arg | Ser Alá Trp | |
35 | 40 |
As p | Ly s | Gly 10 | Ly s | Ser | Ile | Gin | As p 1 5 |
Gl u | Ly s | Leu 25 | Leu | Glu | Ly s | Leu | Hi s 30 |
(ii) MOLEKULA TÍPUSA: protein (iii) HIPOTETIKUS: nem (v) FRAGMENS TÍPUSA: belső 10 (xi) SZEKVENCIALEÍRÁS: 81. számú szekvencia
Ser Ile Gin Asp Leu Arg Arg Arg 10 15
Glu Lys Leu His Thr Alá 25 (ii) MOLEKULA TÍPUSA: protein (iii) HIPOTETIKUS: nem (v) FRAGMENS TÍPUSA: belső (xi) SZEKVENCIALEÍRÁS: 82. számú szekvencia
Ile Gin Asp Leu Arg Arg Arg Glu 10 15
Lys Leu His Thr Alá 25 (ii) MOLEKULA TÍPUSA: protein 30 (iii)HIPOTETIKUS: nem (v) FRAGMENS TÍPUSA: belső
TUDNIVALÓK A 84. SZÁMÚ SZEKVENCIÁHOZ (i) SZEKVENCIAJELLEMZŐK (A) HOSSZÚSÁG: 41 aminosav (B) TÍPUS: aminosav (D) ALAK: lineáris (ii) MOLEKULA TÍPUSA: protein (iii) HIPOTETIKUS: nem (v) FRAGMENS TÍPUSA: belső (xi) SZEKVENCIALEÍRÁS: 84. számú szekvencia
Leu 1 | Leu | Hi s | As p | Arg 5 | Gly | Arg |
Glu | Leu | Leu | Glu | Arg | Leu | Le u |
20 | ||||||
Thr | Arg | Ser | Al a | Trp | ||
35 |
Ser Ile Gin Asp Leu Arg Arg Arg 10 15
Glu Arg Leu His Alá Gly Arg Arg 25 30
TUDNIVALÓK A 85. SZÁMÚ SZEKVENCIÁHOZ (i) SZEKVENCIAJELLEMZŐK (A) HOSSZÚSÁG: 10 aminosav (B) TÍPUS: aminosav (D) ALAK: lineáris (ii) MOLEKULA TÍPUSA: peptid 60 (iii)HIPOTETIKUS: nem (v) FRAGMENS TÍPUSA: belső (ix) SAJÁTOS JELLEGZETESSÉG (D) MÁS TUDNIVALÓ: megjegyzés:
Xaa22=glutaminsav, Glu(OCH3), hisztamin vagy fenil-alanin;
HU 217 843 Β
Xaa23=leucin vagy fenil-alanin;
Xaa25 = glutaminsav, Glu(OCH3), hisztamin vagy fenil-alanin;
Xaa26=lizin vagy hisztidin;
Xaa28=leucin vagy izoleucin;
Xaa29=alanin, arginin vagy glutaminsav;
Xaa30=lizin vagy glutaminsav;
Xaa31=leucin vagy izoleucin (ix) SAJÁTOS JELLEGZETESSÉG (B) ELHELYEZKEDÉS: 1..10 (xi) SZEKVENCIALEÍRÁS: 85. számú szekvencia Xaa22 Xaa23 Leu Xaa25 Xaa26 Leu Xaa28 Xaa30 Xaa31 1 5 10
TUDNIVALÓK A 86. SZÁMÚ SZEKVENCIÁHOZ (i) SZEKVENCIAJELLEMZŐK (A) HOSSZÚSÁG: 10 aminosav (B) TÍPUS: aminosav (D) ALAK: lineáris (ii) MOLEKULA TÍPUSA: peptid (iii) HIPOTETIKUS: nem (v) FRAGMENS TÍPUSA: belső (ix) SAJÁTOS JELLEGZETESSÉG (D)MÁS TUDNIVALÓ: megjegyzés: Xaa22=glutaminsav, Glu(OCH3), hisztamin vagy fenil-alanin;
Xaa23=leucin vagy fenil-alanin;
Xaa25 = glutaminsav, Glu(OCH3), hisztamin vagy fenil-alanin;
Xaa29 = glutaminsav, lizin vagy lizin (COCH2PEGX), ahol a PEGX egy polietilénglikol-metil-észter-gyök 100 és 10 000 közti molekulatömeggel (ix) SAJÁTOS JELLEGZETESSÉG:
(B) ELHELYEZKEDÉS: 1..10 (xi) SZEKVENCIALEÍRÁS: 86. számú szekvencia Xaa2 Xaa23 Leu Xaa25 Arg Leu Leu Xaa29 Arg Leu
Claims (18)
- SZABADALMI IGÉNYPONTOK1. Módosított paratiroid hormonnal rokon polipeptid (PTHrp), amelynek képlete Xaa1 Xaa2 Xaa3 Xaa4 Xaa5 Xaa6 Xaa7 Leu His Xaa10 Xaa11 Gly Xaa13 Ser Ile Gin Xaa17 Leu Xaa19 Xaa2» Xaa21Xaa22-31 Xaa32 Xaa33 Xaa34 Xaa35 Xaa36 Xaa37 Xaa38 Term, ahol a képletbenXaa1 nincs jelen, vagy jelentése Alá;Xaa2 nincs jelen, vagy jelentése Val;Xaa3 nincs jelen, vagy jelentése Ser;Xaa4 nincs jelen, vagy jelentése Glu vagy Glu(OCH3); Xaa5 nincs jelen, vagy jelentése His vagy Alá;Xaa6 nincs jelen, vagy jelentése Gin;Xaa7 nincs jelen, vagy jelentése Leu;Xaa10 és Xaa17 jelentése egymástól függetlenül Asp vagy Asp(OCH3);Xaa11 jelentése Lys, Arg vagy Leu;Xaa13jelentése Lys, Arg, Tyr, Cys, Leu, Cys [CH2CONH(CH2)2NH-biotinil]-, Lys (7-dimetilamino-2-oxo-2H-l-benzopirán-4-acetil)- vagy Lys (dihidrocinnamoil)-csoport;Xaa20 jelentése Arg vagy Leu;Xaa19 és Xaa21 jelentése egymástól függetlenül Lys,Alá vagy Arg;Xaa22~31 jelentése az alábbiak valamelyike:a) Xaa22 Xaa23 Leu Xaa25 Xaa26 Leu Xaa28 Xaa29Xaa30 Xaa31 ahol a képletbenXaa22 és Xaa25 jelentése egymástól függetlenül Glu, Glu(OCH3), His vagy Phe;Xaa23 jelentése Leu vagy Phe;Xaa26 jelentése Lys vagy His;Xaa28 és Xaa31 jelentése egymástól függetlenül Leu vagy Ile;Xaa29 jelentése Alá, Arg vagy Glu; ésXaa30 jelentése Lys vagy Glu (85. számú szekvencia);az a) előnyösenGlu Leu Leu Gly Lys Leu Leu Xaa29 Lys Leu 1 5 10 ahol a képletbenXaa29 jelentése Glu vagy Arg (26. számú szekvencia); vagyb) Xaa22 Xaa23 Leu Xaa25 Arg Leu Leu Xaa29 Arg Leu, ahol a képletbenXaa22 és Xaa25 jelentése egymástól függetlenül Glu, Glu(OCH3), His vagy Phe;Xaa23 jelentése Leu vagy Phe;Xaa29 jelentése Glu, Lys vagy Lys(COCH2PEGX), ahol a PEGX egy polietilénglikol-metil-étergyök 100 és 10 000 közti molekulatömeggel (86. számú szekvencia);a b) előnyösenGlu Leu Leu Glu Arg Leu Leu Xaa29 Arg Leu 1 5 10 ahol a képletbenXaa29 jelentése Glu, Lys vagy Lys(COCH2PEGX), ahol a PEGX egy polietilénglikol-metil-étergyök 100 és 10 000 közti molekulatömeggel (27. számú szekvencia); vagyc) Alá Leu Alá Glu Alá Leu Alá Glu Alá Leu1 5 10 (28. számú szekvencia); vagyd) Ser Leu Leu Ser Ser Leu Leu Ser Ser Leu1 5 10 (29. számú szekvencia); vagye) Alá Phe Tyr Asp Lys Val Alá Glu Lys Leu1 5 10 (30. számú szekvencia);Xaa32 jelentése His, Pro vagy Lys;Xaa33 nincs jelen, vagy jelentése Pro, Thr, Glu vagy Alá; Xaa34 nincs jelen, vagy jelentése Pro, Arg, Met, Alá, hSer, hSer lakton, Tyr, Leu vagy 1,4-diamino-butiril-laktám;Xaa35 nincs jelen, vagy jelentése Pro, Glu, Ser, Alá vagy Gly;Xaa36 nincs jelen, vagy jelentése Alá, Arg vagy Ile;HU 217 843 ΒXaa37 nincs jelen, vagy jelentése Arg, Trp vagy 3-(2naftil)-L-alanin;Xaa38 nincs jelen, vagy jelentése Alá vagy hSer, vagy Xaa38-42 jelentése Thr Arg Ser Alá Trp; ésTerm jelentése OR vagy NR2, ahol az egyes R-ek jelen- 5 tése egymástól függetlenül hidrogénatom vagy 1-4 szénatomos alkil- vagy fenil-(l-4 szénatomos alkilj-csoport;valamint mindezek gyógyászatilag elfogadható sói, azzal a feltétellel, hogy az alábbi jelentések nem fordul- 10 hatnak elő egyidejűleg: Xaa22 jelentése Phe, Xaa23 jelentése Phe, Xaa25 jelentése His, Xaa26 jelentése Lys vagy His, Xaa28 jelentése Ile, Xaa29 jelentése Alá, Xaa30 jelentése Glu, és Xaa31 jelentése Ile.Elsőbbsége: 1994.07.01.
- 2. Az 1. igénypont szerinti polipeptid, amelyben Xaa22 31 jelentése a 26. számú szekvencia.Elsőbbsége: 1994.07.01.
- 3. A 2. igénypont szerinti polipeptid, amelyben mind Xaa, mind Xaa13 jelentése Lys; és mind Xaa19, mind Xaa21 jelentése Arg.Elsőbbsége: 1994.07.01.
- 4. A 3. igénypont szerinti polipeptid, amelynek képlete az alábbiak valamelyike:
Al a Va 1 Ser Glu Hi s Gin Leu Leu His As p Ly s Gly Ly s Ser Ile 1 5 10 15 Gin As p Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Ly s Leu Leu Arg Ly s 20 25 30 Leu Hi s Thr Al a OH I [5. számú szekvencia); vagy Al a Val Ser Glu Hi s Gin Leu Leu His As p Ly s Gly Ly s Ser Ile 1 5 10 15 Gin As p Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Ly s Leu Leu Glu Ly s 20 25 30 Le u Hi s Thr Al a OH I [6. számú szekvencia); vagy Al a Va 1 Ser Glu Hi s Gin Leu Leu His As p Ly s Gly Ly s Ser Ile 1 5 10 15 Gin As p Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Ly s Leu Leu Glu Ly s 20 25 30 Leu Hi s Thr Al a nh2 (7. számú szekvencia); vagy Al a Va 1 Ser Glu Hi s Gin Leu Leu His Asp Ly s Gly Lys Ser Ile 1 5 10 15 Gin As p Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Ly s Leu Leu Glu Ly s 20 25 30 Leu Hi s Thr hSe r NH 2 (8. számú szekvencia); vagy Al a Va 1 Ser Glu Hi s Gin Leu Leu His As p Ly s Gly Ly s Ser Ile 1 5 10 15 G1 n As p Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Ly s Leu Leu Glu Ly s 20 25 30 Leu Hi s Thr hSe r 1 ak t on (9. számú szekvencia); vagy Al a Va 1 Ser Glu Hi s Gin Leu Leu His As p Ly s Gly Ly s Ser I 1 e 1 5 10 15 Gin As p Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Ly s Leu Leu Glu Ly s 20 25 30 Leu Hi s Thr Al a Gly Arg Arg OH (10. számú szekvencia); vagy 35 Al a Va 1 Ser Glu Hi s Gin Leu Leu Hi s As p Ly s Gly Ly s Ser Ile 1 5 10 15 Gl n As p Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Ly s Leu Leu Glu Ly s 20 25 30 Leu Ly s Glu Leu nh2 (11. számú szekvencia); vagy Al a Va 1 Ser Glu Hi s Gin Leu Leu Hi s As p Ly s Gly Ly s Ser Ile 1 5 10 15 Gl n As p Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Ly s Leu Leu Glu Ly s 20 25 30 Le u Pro nh2 (56. számú szekvencia); vagy Al a Va 1 Ser Glu Hi s Gl n Leu Leu His As p Ly s Gly Ly s Ser Ile 1 5 10 15 Gl n As p Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Ly s Leu Leu Glu Ly s 20 25 30 Le u Hi s Thr 1,4-diamino-butiril-laktám (63. számú szekvencia). Elsőbbsége: 1994. 07. 01. HU 217 843 Β - 5. A 2. igénypont szerinti polipeptid, amelyben Elsőbbsége: 1994.07.01.mind Xaa11, mind Xaa13 jelentése Lys; és Xaa19 és 6. Az 5. igénypont szerinti polipeptid, amelynekXaa21 egyike Arg és másika Alá. képlete az alábbiak valamelyike:
Al a Va 1 Ser Glu Hi s Gin Leu Leu Hi s As p Ly s Gly Ly s Ser Ile 1 5 10 1 5 Gin As p Leu Al a Arg Arg Glu Leu Leu Glu Ly s Leu Leu Glu Ly s 20 25 30 Leu Hi s Thr Al a nh2 (12. számú szekvencia); vagy Al a Va 1 Ser Glu Hi s Gin Leu Leu His As p Ly s Gly Ly s Ser Ile 1 5 10 15 Gin As p Leu Arg Arg Alá Glu Leu Leu Glu Ly s Leu Leu Glu Ly s 20 25 30 Leu H i s Thr Al a NH2 (13. számú szekvencia). Elsőbbsége: 1994. 07. 01. 8. A 7. igénypont szerinti polipeptid, amely az aláb7. A 2. igénypont szerinti polipeptid, amelyben bi képlettel bír:Xaa11 és Xaa13 egyikének jelentése Leu, és másikának jelentése Lys; és mind Xaa19, mind Xaa21 jelentése Arg. 20Elsőbbsége: 1994. 07. 01.Alá Val Ser Glu Alá Gin Leu Leu His Asp Leu Gly Lys Ser Ile15 10 15Gin Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys20 25 30Leu His Alá Leu OH (14. számú szekvencia).Elsőbbsége: 1994.07.01. 10. A 9. igénypont szerinti polipeptid, amelyben - 9. Az 1. igénypont szerinti polipeptid, amelyben 30 mind Xaa11, mind Xaa13 jelentése Lys; és mind Xaa19,Xaa22 31 jelentése a 85. számú szekvencia. mind Xaa21 jelentése Arg.Elsőbbsége: 1994.07.01. Elsőbbsége: 1994.07.01.
- 11. A 10. igénypont szerinti polipeptid, amely az alábbi képlettel bír:
Al a Va 1 Ser Glu Hi s G1 n Leu Leu Hi s As p Ly s Gly Lys Ser Ile 1 5 10 1 5 Gin As p Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Hi s Leu Leu Glu Ly s 20 25 30 Leu Hi s Thr Al a nh2 (66. számú s: zekven cia). Elsőbbsége: 1994. 07. 01. 13. A 12. igénypont szerinti polipeptid, amelyben - 12. Az 1. igénypont szerinti polipeptid, amelyben mind Xaa11, mind Xaa13 jelentése Lys, vagy mindketXaa22-31 jelentése a 27. számú szekvencia. tőé Arg; és mind Xaa19, mind Xaa21 jelentése Arg.Elsőbbsége: 1994.07.01. 45 Elsőbbsége: 1994.07.01.
- 14. A 13. igénypont szerinti polipeptid, amely az alábbiak valamelyike:
Al a Va 1 Ser Glu His Gin Leu Leu His Asp Ly s Gly Ly s Ser Ile 1 5 10 15 Gin As p Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Arg Leu Leu Glu Arg 20 25 30 Leu H i s Thr Al a OH (15. számú sz< :kvencia); va gy Al a Val Ser Glu His Gin Leu Leu His As p Arg Gly Arg Ser Ile 1 5 10 15 Gin As p Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Arg Leu Leu Glu Arg 20 25 30 Leu Hi s Thr Al a OH (16. számú sz< íkvencia); va gy HU 217 843 ΒAl a 1 Va 1 Ser Glu Hi s 5 Gin Le u Leu His As p 10 Arg Gly Arg Ser I le 15 Gin As p Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Arg Leu Leu Ly s Arg 20 25 30 Leu Hi s Thr Al a OH (17. számú szekvencia); vagy Al a Va 1 Ser Glu Hi s Gin Le u Leu His As p Arg Gly Arg Ser I 1 e 1 5 10 1 5 Gin As p Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Arg Leu Leu 20 25 Lys(COCH2PEG2) Arg Leu Hi s Thr Alá OH (18. számú szekvencia); vagy Al a Va 1 Ser Glu Hi s Gin Leu Le u Hi s As p Arg Gly Arg Ser I le 1 5 10 15 G1 n As p Leu Arg Arg Arg Glu Le u Le u Glu Arg Leu Leu 20 25 Ly s(COCH2PEG5 0 00) Arg Leu Hi s Thr Al a OH (19. számú szekvencia). Elsőbbsége: 1994. 07. 01. 16. A 15. igénypont szerinti polipeptid, amely az - 15. Az 1. igénypont szerinti polipeptid, amelyben 20 alábbi képlettel bír:Xaa22-31 jelentése a 28. számú szekvencia.
Elsőbbsége: 1994. 07.01. Al a Val Ser Glu His Gin Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser I le 1 5 10 15 Gin Asp Leu Arg Arg Arg Alá Leu Alá Glu Alá Leu Alá Glu Alá 20 25 30 Leu His Thr Alá NH2 (20. számú szekvencia). Elsőbbsége: 1994.07.01. 30 18. A 17. igénypont szerinti polipeptid, amely az - 17. Az 1. igénypont szerinti polipeptid, amelyben alábbi képlettel bír: Xaa22-31 jelentése a 29. számú szekvencia.Elsőbbsége: 1994.07.01.
Al a Va 1 Ser Glu Hi s Gin Leu Leu His Asp Ly s Gly Ly s Ser I le 1 5 10 15 Gin As p Leu Arg Arg Arg Ser Leu Leu Ser Ser Leu Leu Ser Ser 20 25 30 Leu Hi s Thr Al a NH, (21. számú szekvencia). Elsőbbsége: 1994.07.01. 20. A 19. igénypont szerinti polipeptid, amely az - 19. Az 1. igénypont szerinti polipeptid, amelyben alábbi képlettel bír:Xaa22-31 jelentése a 30. számú szekvencia.Elsőbbsége: 1994.07.01.
Al a Va 1 Ser Glu Hi s G1 n Leu Leu H i s As p Ly s Gly Ly s Ser I le 1 5 10 1 5 Gin As p Leu Arg Arg Arg Al a Phe Tyr As p Ly s Val Al a Glu Ly s 20 25 30 Leu Hi s Thr Al a NH2 (22. számú s; zekven icia). Elsőbbsége: 1994. 07. 01. - 21. Módosított paratiroid hormon (PTH) polipeptid, amely az alábbi képlettel bír:Xaa1 Val Ser Glu IIe Gin Xaa7 Xaa8 His Asn LeuGly Lys His Leu Xaa16 Ser Xaa18 Xaa19 Arg Xaa21 Xaa22 31 His Asn Xaa34 Term., ahol a képletben Xaa1 jelentése Ser vagy Alá;Xaa7 jelentése Leu vagy Phe;Xaa8 jelentése Met vagy Nle;Xaa16 jelentése Asn vagy Ser;55 Xaa18 jelentése Leu, Met vagy Nle;Xaa19 jelentése Glu vagy Arg;Xaa21 jelentése Val vagy Arg;Xaa22-31 jelentése a 26. számú, 27. számú, 28. számú, 29. számú, 30. számú, 85. számú vagy 86. számú60 szekvenciák valamelyike;HU 217 843 ΒXaa34 jelentése Phe vagy Tyr;Term. jelentése OH vagy NR2, ahol R jelentése hidrogénatom vagy 1-4 szénatomos alkilcsoport, és mindezek gyógyászatilag elfogadható sói.
Elsőbbsége: 1994.07. 01. 5 Al a Va 1 Ser Glu I 1 e Gin Phe Nle Hi s As n Leu Gly Lys His Leu 1 5 10 15 Ser Ser NI e Glu Arg Val Glu Leu Leu Glu Ly s Leu Leu Glu Ly s 20 25 30 Leu Hi s Asn Tyr nh2 (23. számú szekvencia); vagy Al a Va 1 Ser Glu I 1 e Gin Phe Nle Hi s As n Leu Gly Lys His Leu 1 5 10 15 Ser Ser NI e Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Ly s Leu Leu Glu Ly s 20 25 30 Le u Hi s Asn Tyr nh2 (24. számú szekvencia). Elsőbbsége: 1994. 07. 01. zal jellemezve, hogy ezeket emlősök csonttól - 23. Gyógyászati kompozíció csonttömeg csökkenésével jellemezhető állapotok megelőzésére vagy kezeié- 20 sére, azzal jellemezve, hogy valamely 1. vagy 21. igénypont szerinti polipeptidnek vagy gyógyászatilag elfogadható sójának gyógyászatilag hatásos mennyiségét tartalmazza valamely gyógyászatilag elfogadható hordozóval együtt. 25Elsőbbsége: 1994.07.01.
- 24. Gyógyászati kompozíció egységdózis formában csonttömeg csökkenésével jellemezhető állapotok kezelésére, azzal jellemezve, hogy egy dózis mintegy 0,5 pg és mintegy 50 pg közti mennyiséget tartalmaz vala- 30 mely 1. vagy 21. igénypontok szerinti polipeptidből vagy gyógyászatilag elfogadható sójából valamely gyógyászatilag elfogadható hordozóval együtt.Elsőbbsége: 1994.07.01.
- 25. Az 1. vagy 21. igénypont szerinti vegyületek 35 vagy gyógyászatilag elfogadható sóik alkalmazása, az22. A 21. igénypont szerinti polipeptid, amely az alábbiak valamelyike:kenésével jellemezhető állapotainak, elsősorban oszteoporózisnak kezelésére szolgáló gyógyszerek előállítására alkalmazzuk.Elsőbbsége: 1994.07.01.
- 26. Eljárás az 1. vagy 21. igénypont szerinti polipeptidek vagy gyógyászatilag elfogadható sóik előállítására szilárd fázisú szintézissel, azzal jellemezve, hogy egymás után összekapcsolunk védett aminosavakat megfelelő gyantahordozón, az oldallánc- és Na-védőcsoportokat eltávolítjuk, majd a polipeptidet a gyantahordozóról lehasítjuk.Elsőbbsége: 1992.07. 14.
- 27. Eljárás az 1. vagy 21. igénypont szerinti polipeptidek vagy gyógyászatilag elfogadható sóik előállítására, azzal jellemezve, hogy az említett polipeptidet hordozó gént expresszáljuk.
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US07/915,247 US5589452A (en) | 1992-07-14 | 1992-07-14 | Analogs of parathyroid hormone and parathyroid hormone related peptide: synthesis and use for the treatment of osteoporosis |
Publications (3)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
HU9500110D0 HU9500110D0 (en) | 1995-03-28 |
HUT69628A HUT69628A (en) | 1995-09-28 |
HU217843B true HU217843B (hu) | 2000-04-28 |
Family
ID=25435450
Family Applications (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
HU9500110A HU217843B (hu) | 1992-07-14 | 1993-07-13 | Paratiroid hormon (PTH) rokon polipeptidek, eljárások ezek előállítására és az ezeket tartalmazó gyógyszerek osteoporosis kezelésére |
HU95P/P00281P HU211348A9 (en) | 1992-07-14 | 1995-06-20 | Analogs of parathyroid hormone and parathyroid hormone related peptide: synthesis and use for the treatment of osteoporosis |
Family Applications After (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
HU95P/P00281P HU211348A9 (en) | 1992-07-14 | 1995-06-20 | Analogs of parathyroid hormone and parathyroid hormone related peptide: synthesis and use for the treatment of osteoporosis |
Country Status (17)
Country | Link |
---|---|
US (8) | US5589452A (hu) |
EP (2) | EP1094073A3 (hu) |
JP (1) | JP4106082B2 (hu) |
KR (3) | KR100461618B1 (hu) |
AT (1) | ATE202115T1 (hu) |
AU (1) | AU671851B2 (hu) |
CA (1) | CA2140281C (hu) |
DE (1) | DE69330347T2 (hu) |
DK (1) | DK0651765T3 (hu) |
ES (1) | ES2159293T3 (hu) |
FI (1) | FI120586B (hu) |
GR (1) | GR3036521T3 (hu) |
HU (2) | HU217843B (hu) |
MX (1) | MX9304226A (hu) |
NZ (1) | NZ254554A (hu) |
PT (1) | PT651765E (hu) |
WO (1) | WO1994001460A1 (hu) |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US6921750B2 (en) | 1995-07-13 | 2005-07-26 | Societe De Conseils De Recherches Et D'applications Scientifiques, S.A.S. | Analogs of parathyroid hormone |
US7410948B2 (en) | 1995-07-13 | 2008-08-12 | Societe De Conseils De Recherches Et D'applications Scientifiques, Sas | Analogs of parathyroid hormone |
Families Citing this family (117)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5814603A (en) * | 1992-06-12 | 1998-09-29 | Affymax Technologies N.V. | Compounds with PTH activity |
US5977070A (en) * | 1992-07-14 | 1999-11-02 | Piazza; Christin Teresa | Pharmaceutical compositions for the nasal delivery of compounds useful for the treatment of osteoporosis |
US5821225A (en) * | 1992-07-14 | 1998-10-13 | Syntex (U.S.A.) Inc. | Method for the treatment of corticosteroid induced osteopenia comprising administration of modified PTH or PTHrp |
US5589452A (en) * | 1992-07-14 | 1996-12-31 | Syntex (U.S.A.) Inc. | Analogs of parathyroid hormone and parathyroid hormone related peptide: synthesis and use for the treatment of osteoporosis |
AU672790B2 (en) * | 1992-07-15 | 1996-10-17 | Novartis Ag | Variants of parathyroid hormone and its fragments |
CN1070500C (zh) * | 1993-07-13 | 2001-09-05 | 森德克斯(美国)股份有限公司 | 甲状旁腺激素类似物和甲状旁腺激素相关肽:合成和治疗骨质疏松症的用途 |
US5955425A (en) * | 1996-08-02 | 1999-09-21 | National Research Council Of Canada | Parathyroid hormone analogues for the treatment of osteoporosis |
US6110892A (en) | 1994-06-20 | 2000-08-29 | National Research Council Of Canada | Parathyroid hormone analogues for the treatment of osteoporosis |
US5723577A (en) * | 1995-07-13 | 1998-03-03 | Biomeasure Inc. | Analogs of parathyroid hormone |
US5969095A (en) * | 1995-07-13 | 1999-10-19 | Biomeasure, Inc. | Analogs of parathyroid hormone |
US5955574A (en) * | 1995-07-13 | 1999-09-21 | Societe De Conseils De Recherches Et D'applications Scientifiques, S.A. | Analogs of parathyroid hormone |
EP1166796A3 (en) * | 1996-02-01 | 2002-03-06 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Agents for preventing and treating thrombocytopenia |
TW505654B (en) * | 1996-07-30 | 2002-10-11 | Hoffmann La Roche | Synthesis of analogs of PTH and PTHrP |
JP4142743B2 (ja) * | 1996-07-31 | 2008-09-03 | ザ・ジェネラル・ホスピタル・コーポレイション | 副甲状腺ホルモンに関連する新規ペプチド類似体 |
US6273634B1 (en) | 1996-11-22 | 2001-08-14 | Shell Oil Company | Connector for an expandable tubing string |
US6335195B1 (en) | 1997-01-28 | 2002-01-01 | Maret Corporation | Method for promoting hematopoietic and mesenchymal cell proliferation and differentiation |
US20020168718A1 (en) * | 1997-04-03 | 2002-11-14 | California Institute Of Technology | Enzyme-mediated modification of fibrin for tissue engineering |
AU7137798A (en) * | 1997-04-17 | 1998-11-11 | Glaxo Group Limited | Statistical deconvoluting of mixtures |
CA2290443A1 (en) * | 1997-05-14 | 1998-11-19 | Rhone-Poulenc Rorer Pharmaceuticals Inc. | Peptide parathyroid hormone analogs |
CZ298701B6 (cs) | 1997-09-09 | 2007-12-27 | F. Hoffman-La Roche Ag | Lécivo pro hojení kostí a reparaci zlomenin |
US6248587B1 (en) | 1997-11-26 | 2001-06-19 | University Of Southern Cailfornia | Method for promoting mesenchymal stem and lineage-specific cell proliferation |
US6239109B1 (en) | 1998-02-09 | 2001-05-29 | University Of Southern California | Method of promoting erythropoiesis |
US6455500B1 (en) | 1998-03-10 | 2002-09-24 | University Of Southern California | Radiation therapy methods |
US7173011B2 (en) * | 2000-11-20 | 2007-02-06 | University Of Southern California | Radiation therapy methods |
AU3077299A (en) | 1998-03-11 | 1999-09-27 | University Of Southern California | Method of promoting production of living tissue equivalents |
US7531621B1 (en) | 1998-05-05 | 2009-05-12 | Societe De Conseils De Recherches Et D'applications Scientifiques S.A.S. | PTH2 receptor selective compounds |
WO1999058140A1 (en) | 1998-05-11 | 1999-11-18 | University Of Southern California | Methods to increase white blood cell survival after chemotherapy |
US6762167B1 (en) | 1998-05-11 | 2004-07-13 | University Of Southern California | Methods for treating a patient undergoing chemotherapy |
US6916783B2 (en) | 1998-07-13 | 2005-07-12 | University Of Southern California | Methods for accelerating bone and cartilage growth and repair |
CA2328871C (en) | 1998-07-13 | 2002-10-01 | University Of Southern California | Methods for accelerating bone and cartilage growth and repair |
WO2000009144A1 (en) | 1998-08-13 | 2000-02-24 | University Of Southern California | Methods to increase blood flow to ischemic tissue |
US7601685B2 (en) * | 1998-08-27 | 2009-10-13 | Eidgenossische Technische Hochschule Zurich | Growth factor modified protein matrices for tissue engineering |
US6894022B1 (en) * | 1998-08-27 | 2005-05-17 | Eidgenossische Technische Hochschule Zurich | Growth factor modified protein matrices for tissue engineering |
US7241730B2 (en) | 1998-08-27 | 2007-07-10 | Universitat Zurich | Enzyme-mediated modification of fibrin for tissue engineering: fibrin formulations with peptides |
US6495662B1 (en) | 1998-10-22 | 2002-12-17 | The General Hospital Corporation | Bioactive peptides and peptide derivatives of parathyroid hormone (PTH) and parathyroid hormone-related peptide (PTHrP) |
AU1918300A (en) * | 1998-11-25 | 2000-06-13 | General Hospital Corporation, The | Amino-terminal modified parathyroid hormone (pth) analogs |
AU4217299A (en) * | 1998-11-30 | 2000-06-19 | General Hospital Corporation, The | Pth1r and pth3r receptors, methods and uses thereof |
US7820393B2 (en) * | 1999-01-14 | 2010-10-26 | Scantibodies Laboratory, Inc. | Methods, kits and antibodies for detecting parathyroid hormone |
US6689566B1 (en) * | 1999-01-14 | 2004-02-10 | Scantibodies Laboratory, Inc. | Methods, kits, and antibodies for detecting parathyroid hormone |
US6730775B1 (en) | 1999-03-23 | 2004-05-04 | University Of Southern California | Methods for limiting scar and adhesion formation |
US7338938B2 (en) * | 1999-05-10 | 2008-03-04 | University Of Southern California | Methods for treating a patient undergoing chemotherapy |
US6923968B2 (en) * | 2000-08-10 | 2005-08-02 | Scantibodies Laboratory, Inc. | Cyclase inhibiting parathyroid hormone antagonists or modulators and osteoporosis |
US20080108086A1 (en) * | 1999-06-02 | 2008-05-08 | Cantor Thomas L | Parathyroid hormone antagonists and uses thereof |
US7893021B2 (en) * | 1999-06-02 | 2011-02-22 | Scantibodies Laboratory, Inc. | Parathyroid hormone antagonists and uses thereof |
US7022815B1 (en) | 1999-09-29 | 2006-04-04 | The General Hospital Corporation | Polypeptide derivatives of parathyroid hormone (PTH) |
WO2001023521A2 (en) | 1999-09-29 | 2001-04-05 | The General Hospital Corporation | Polypeptide derivatives of parathyroid hormone (pth) |
ES2316354T3 (es) | 1999-09-29 | 2009-04-16 | The General Hospital Corporation | Derivados polipeptidos de la hormona paratiroidea (pth). |
GB9924351D0 (en) * | 1999-10-14 | 1999-12-15 | Brennan Frank | Immunomodulation methods and compositions |
CA2398583A1 (en) * | 2000-02-11 | 2001-08-16 | Cellomics, Inc. | Peptide biosensors for anthrax protease |
US20050124537A1 (en) * | 2000-04-27 | 2005-06-09 | Amgen Inc. | Modulators of receptors for parathyroid hormone and parathyroid hormone-related protein |
US6756480B2 (en) * | 2000-04-27 | 2004-06-29 | Amgen Inc. | Modulators of receptors for parathyroid hormone and parathyroid hormone-related protein |
DE60116520T2 (de) * | 2000-10-10 | 2006-08-31 | Microchips, Inc., Bedford | Microchip-reservoir-vorrichtungen mit drahtloser übertragung von energie und daten |
US7122523B2 (en) * | 2001-05-01 | 2006-10-17 | University Of Southern California | Methods for inhibiting tumor cell proliferation |
DE10123668A1 (de) * | 2001-05-16 | 2002-11-28 | Johein Harmeyer | Anwendung einer Hormonpräparation zur Induzierung und Stimulierung des intestinalen Calciumtransports |
US20030232324A1 (en) * | 2001-05-31 | 2003-12-18 | Chiron Corporation | Chimeric alphavirus replicon particles |
KR100491737B1 (ko) * | 2001-07-20 | 2005-05-27 | 주식회사 한국아이템개발 | 공기 정화 기능의 모기 퇴치기 |
JP4837888B2 (ja) | 2001-07-23 | 2011-12-14 | ザ ジェネラル ホスピタル コーポレイション | コンホメーションが拘束された副甲状腺ホルモン(pth)類似体 |
EP1437141A4 (en) * | 2001-09-17 | 2009-05-27 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | TREATMENTS OF BONE LOSS |
US7247609B2 (en) * | 2001-12-18 | 2007-07-24 | Universitat Zurich | Growth factor modified protein matrices for tissue engineering |
WO2003052091A1 (en) * | 2001-12-18 | 2003-06-26 | Eidgenossisch Technische Hochschule Zurich | Growth factor modified protein matrices for tissue engineering |
AU2003207512B2 (en) * | 2002-01-10 | 2008-06-12 | Osteotrophin Llc | Treatment of bone disorders with skeletal anabolic drugs |
EP1477496A4 (en) * | 2002-02-01 | 2006-08-02 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | PEG BINDING PTH OR PEG BINDING PTH DERIVATIVE |
WO2003099849A2 (en) * | 2002-05-23 | 2003-12-04 | Michael Holick | Use of a parathyroid hormone peptide analogs for the treatment of vaginal atrophy |
US7497855B2 (en) * | 2002-09-04 | 2009-03-03 | Microchips, Inc. | Method and device for the controlled delivery of parathyroid hormone |
US20040067526A1 (en) * | 2002-10-03 | 2004-04-08 | Cantor Thomas L. | Methods for diagnosing and guiding treatment of bone turnover disease |
US8263666B2 (en) | 2002-10-29 | 2012-09-11 | L'oreal | Composition in the form of an oil-in-water emulsion and uses thereof |
EP1567178A4 (en) * | 2002-11-01 | 2009-07-15 | Amgen Inc | MODULATORS OF RECEPTORS FOR NEUTRAL THERAPY HORMONE AND SIDE-HORSE HORMONE-RELATED PROTEINS |
US8088734B2 (en) * | 2003-01-21 | 2012-01-03 | Unigene Laboratories Inc. | Oral delivery of peptides |
EP1610813A4 (en) * | 2003-03-19 | 2009-07-01 | Gen Hospital Corp | PARATHYROIDAL HORMONES CONFORMALLY CONFORMALLY CONSTRAINED WITH PROPELLER STABILIZERS $ G (A) |
KR100540659B1 (ko) * | 2003-07-02 | 2006-01-10 | 삼성전자주식회사 | 이미지 확대 인쇄 방법과 장치 및 컴퓨터 프로그램을저장하는 컴퓨터로 읽을 수 있는 기록 매체 |
WO2005009358A2 (en) | 2003-07-17 | 2005-02-03 | The General Hospital Corporation | Conformationally constrained parathyroid hormone (pth) analogs |
US7044468B2 (en) * | 2003-10-15 | 2006-05-16 | Sklansky Games, Llc | System and method for playing community hand poker games utilizing dealer qualifying criteria |
US7562876B2 (en) * | 2003-10-15 | 2009-07-21 | Sklansky Games, Llc | System and method for playing community hand poker games utilizing mathematical dealer qualifying criteria |
US20050119183A1 (en) * | 2003-11-12 | 2005-06-02 | Nps Allelix Corp. | Method for treating bone loss using parathyroid hormone |
US20050215476A1 (en) * | 2004-01-21 | 2005-09-29 | Unigene Laboratories Inc. | Amidated parathyroid hormone fragments and uses thereof |
US7541140B2 (en) * | 2004-06-03 | 2009-06-02 | Scantibodies Laboratory, Inc. | Assessing risk for kidney stones using parathyroid hormone agonist and antagonist |
US20090170775A1 (en) * | 2004-10-08 | 2009-07-02 | Transition Therapeutics, Inc. | Vasoactive intestinal polypeptide compositions |
US20080214440A1 (en) * | 2004-10-08 | 2008-09-04 | Forbes Medi-Tech (Research), Inc. | Vasoactive intestinal polypeptide compositions |
US7595294B2 (en) * | 2004-10-08 | 2009-09-29 | Transition Therapeutics, Inc. | Vasoactive intestinal polypeptide pharmaceuticals |
MX2007004116A (es) * | 2004-10-08 | 2007-10-05 | Forbes Medi Tech Res Inc | Composiciones farmaceuticas de polipeptidos intestinales vasoactivos. |
US20070293429A1 (en) * | 2004-10-08 | 2007-12-20 | Therapei Pharmaceuticals, Inc. | Vasoactive Intestinal Polypeptide Compositions |
WO2006067221A2 (en) * | 2004-12-22 | 2006-06-29 | Kuros Biosurgery Ag | Michael-type addition reaction functionalised peg hydrogels with factor xiiia incorporated biofactors |
WO2006073711A2 (en) * | 2005-01-06 | 2006-07-13 | Kuros Biosurgery Ag | Use of a matrix comprising a contrast agent in soft tissues |
EP1833522B1 (en) * | 2005-01-06 | 2016-06-22 | Kuros Biosurgery AG | Supplemented matrices for the repair of bone fractures |
US8575101B2 (en) | 2005-01-06 | 2013-11-05 | Kuros Biosurgery Ag | Supplemented matrices for the repair of bone fractures |
US7488316B2 (en) * | 2005-01-25 | 2009-02-10 | Microchips, Inc. | Control of drug release by transient modification of local microenvironments |
CA2628945A1 (en) * | 2005-11-10 | 2007-05-24 | Board Of Control Of Michigan Technological University | Black bear parathyroid hormone and methods of using black bear parathyroid hormone |
AR056806A1 (es) | 2005-11-14 | 2007-10-24 | Amgen Inc | Moleculas quimericas de anticuerpo rankl- pth/ pthrp |
DE102006014579A1 (de) * | 2006-03-29 | 2007-10-04 | Epcos Ag | Verfahren zur Reinigung einer Monomer-Lösung und Herstellungsverfahren für ein elektrisches Bauelement umfassend das Reinigungsverfahren |
US20090022684A1 (en) * | 2006-05-09 | 2009-01-22 | Paul Morley | Methods for hematopoietic stimulation |
EP2054077A4 (en) * | 2006-08-04 | 2010-10-13 | Gen Hospital Corp | POLYPEPTIDE DERIVATIVES OF PARATHYROID HORMONE (PTH) |
US8012694B2 (en) * | 2006-09-14 | 2011-09-06 | Immutopics, Inc. | Assay for the detection of phosphorylated PTH |
USRE49444E1 (en) | 2006-10-03 | 2023-03-07 | Radius Health, Inc. | Method of treating osteoporosis comprising administration of PTHrP analog |
US7803770B2 (en) * | 2006-10-03 | 2010-09-28 | Radius Health, Inc. | Method of treating osteoporosis comprising administration of PTHrP analog |
DK2957278T3 (en) * | 2006-10-03 | 2017-07-31 | Radius Health Inc | STABLE COMPOSITION COMPREHENSIVE PTHRP AND APPLICATIONS THEREOF |
PL2084183T3 (pl) * | 2006-10-13 | 2010-10-29 | Lilly Co Eli | Pegylowane pth jako modulatory receptora pth i ich zastosowania |
ES2733276T3 (es) * | 2007-04-13 | 2019-11-28 | Kuros Biosurgery Ag | Sellante polimérico para tejidos |
CA2694667C (en) | 2007-08-01 | 2018-10-30 | The General Hospital Corporation | Screening methods using g-protein coupled receptors and related compositions |
JP2012512812A (ja) * | 2007-12-28 | 2012-06-07 | クロス・バイオサージェリー・アクチェンゲゼルシャフト | フィブリンフォームに組込まれたpdgf融合タンパク質 |
US20090227507A1 (en) * | 2008-03-10 | 2009-09-10 | University Of Southern California | Angiotensin (1-7) Dosage Forms and Uses Thereof |
US8563513B2 (en) | 2009-03-27 | 2013-10-22 | Van Andel Research Institute | Parathyroid hormone peptides and parathyroid hormone-related protein peptides and methods of use |
CA2782640A1 (en) | 2009-12-07 | 2011-06-16 | Michigan Technological University | Black bear parathyroid hormone and methods of using black bear parathyroid hormone |
CA2799183A1 (en) | 2010-05-12 | 2011-11-17 | Radius Health, Inc. | Therapeutic regimens |
CN103002906B (zh) | 2010-05-13 | 2017-12-29 | 总医院有限公司 | 甲状旁腺激素类似物及其应用 |
AU2011312490B2 (en) | 2010-09-28 | 2015-06-25 | Radius Pharmaceuticals, Inc. | Selective androgen receptor modulators |
WO2012123028A1 (en) | 2011-03-16 | 2012-09-20 | Kuros Biosurgery Ag | Pharmaceutical formulation for use in spinal fusion |
JP6148228B2 (ja) * | 2011-05-18 | 2017-06-14 | ユーメデリス ファーマシューティカルズ,インク. | 改善されたペプチド製剤 |
US20200354428A9 (en) | 2013-06-23 | 2020-11-12 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Analogues of parathyroid hormone (1-34) that function as agonists of the parathyroid hormone receptor-1 and display modified activity profiles |
IL255148B2 (en) | 2015-04-29 | 2023-04-01 | Radius Pharmaceuticals Inc | 1901 rad for use in a method to inhibit a cancerous growth or induce tumor regression in a patient who is resistant to the drug and/or has cancer positive for an estrogen receptor alpha mutation |
US10568937B2 (en) | 2016-04-18 | 2020-02-25 | Radius Health, Inc. | Formulations of abaloparatide, transdermal patches thereof, and uses thereof |
KR102397890B1 (ko) | 2016-06-22 | 2022-05-12 | 일립시스 파마 리미티드 | Ar+ 유방암 치료 방법 |
KR102322802B1 (ko) | 2017-01-05 | 2021-11-04 | 래디어스 파마슈티컬스, 인코포레이티드 | Rad1901-2hcl의 다형 형태 |
US10996208B2 (en) | 2017-04-28 | 2021-05-04 | Radius Health, Inc. | Abaloparatide formulations and methods of testing, storing, modifying, and using same |
CA3090807A1 (en) | 2018-02-21 | 2019-08-29 | AI Therapeutics, Inc. | Combination therapy with apilimod and glutamatergic agents |
IL279853B1 (en) | 2018-07-04 | 2024-09-01 | Radius Pharmaceuticals Inc | Polymorphic forms of RAD 1901-2HCL |
CN109734794A (zh) * | 2019-03-07 | 2019-05-10 | 苏州科技大学 | 一种阿巴帕肽的制备方法 |
CN114057863B (zh) * | 2020-08-06 | 2023-10-20 | 珠海联邦制药股份有限公司 | 一种甲状旁腺激素相关肽类似物及其应用 |
Family Cites Families (32)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4086196A (en) * | 1975-03-28 | 1978-04-25 | Armour Pharmaceutical Company | Parathyroid hormone |
US4423037A (en) * | 1982-05-13 | 1983-12-27 | The General Hospital Corporation | Inhibitors of peptide hormone action |
US4643988A (en) * | 1984-05-15 | 1987-02-17 | Research Corporation | Amphipathic peptides |
US4738921A (en) * | 1984-09-27 | 1988-04-19 | Eli Lilly And Company | Derivative of the tryptophan operon for expression of fused gene products |
ES2000859A6 (es) * | 1985-08-12 | 1988-03-16 | Syntex Inc | Un metodo para producir un vector de expresion bacteriana para la expresion de proteinas de fusion |
EP0273928B1 (en) * | 1986-07-18 | 1997-01-08 | The University Of Melbourne | A PROTEIN ACTIVE IN HUMORAL HYPERCALCEMIA OF MALIGNANCY-PTHrP |
EP0260350B1 (en) * | 1986-09-05 | 1992-02-12 | Cetus Oncology Corporation | Oxidation-resistant interferon-beta muteins and their production; formulations containing such muteins |
US5010010A (en) * | 1986-10-22 | 1991-04-23 | Selmer-Sande, A.S. | Production of human parathyroid hormone from microorganisms |
US4833125A (en) * | 1986-12-05 | 1989-05-23 | The General Hospital Corporation | Method of increasing bone mass |
US4835255A (en) * | 1987-03-26 | 1989-05-30 | Yale University | T-cell membrane protein |
EP0293160A3 (en) * | 1987-05-26 | 1990-05-09 | Merck & Co. Inc. | Parathyroid hormone antagonists with enhanced metabolic properties |
US4771124A (en) * | 1987-05-26 | 1988-09-13 | Merck & Co., Inc. | Parathyroid hormone antagonists with simplified synthetic methodology |
US5001223A (en) * | 1987-05-26 | 1991-03-19 | Merck & Co., Inc. | Parathyroid hormone antagonists with enhanced metabolic properties |
EP0293158A3 (en) * | 1987-05-26 | 1990-05-09 | Merck & Co. Inc. | Parathyroid hormone antagonists |
DE3725319A1 (de) * | 1987-07-30 | 1989-02-09 | Biotechnolog Forschung Gmbh | Pth-modifikationen und therapeutische zusammensetzungen, die sie enthalten und daraus bestehen |
DE3725320A1 (de) * | 1987-07-30 | 1989-02-09 | Biotechnolog Forschung Gmbh | Expressionsvektoren und verfahren unter deren verwendung zur gewinnung von cro/ss-galaktosidase/pth-fusionsproteinen und von pth |
US4861756A (en) * | 1988-03-08 | 1989-08-29 | Merrell Dow Pharmaceuticals Inc. | Synthetic pulmonary surfactant |
EP0341963A3 (en) * | 1988-05-09 | 1991-07-24 | Merck & Co. Inc. | Parathyroid hormone antagonists |
US4968669A (en) * | 1988-05-09 | 1990-11-06 | Merck & Co., Inc. | Parathyroid hormone antagonists |
US5457047A (en) * | 1989-02-23 | 1995-10-10 | Gesellschaft Fur Biotechnologische Forschung Mbh (Gbf) | DNA Sequences coding for PTH variants, PTH variants, expression vector, bacterial host, use and therapeutic composition |
EP1004595B1 (en) * | 1989-04-10 | 2003-06-18 | Helix BioMedix, Inc. | Lytic and proliferative peptides and their use as pharmaceutic and phytopharmaceutic agents |
CA2040264A1 (en) * | 1990-04-12 | 1991-10-13 | Tatsuhiko Kanmera | Parathyroid hormone antagonists |
US5093233A (en) * | 1990-04-25 | 1992-03-03 | Merck & Co., Inc. | Antagonists with position 13 modification |
US5087562A (en) * | 1990-04-25 | 1992-02-11 | Merck & Co., Inc. | Humoral hypercalcemic factor antagonists with modification at position 13 . . . |
WO1992000753A1 (en) * | 1990-07-13 | 1992-01-23 | The Regents Of The University Of California | PARATHYROID HORMONE ANALOGUES MODIFIED AT POSITIONS 3, 6 or 9 |
US5149779A (en) * | 1990-07-26 | 1992-09-22 | Merck & Co., Inc. | Humoral hypercalcemic factor antagonists |
JPH0532696A (ja) * | 1990-09-28 | 1993-02-09 | Takeda Chem Ind Ltd | 副甲状腺ホルモン誘導体 |
AU9103791A (en) * | 1990-12-21 | 1992-07-22 | Allelix Biopharmaceuticals Inc. | Oxidation resistant variants of parathyroid hormone |
US5317010A (en) * | 1991-10-10 | 1994-05-31 | Peter K. T. Pang | Parathyroid hormone analogues substituted at AA 25, 26, 27, and use in osteoporosis treatment |
US5434246A (en) * | 1992-03-19 | 1995-07-18 | Takeda Chemical Industries, Ltd. | Parathyroid hormone derivatives |
US5382658A (en) * | 1992-04-03 | 1995-01-17 | Allelix Biopharmaceuticals Inc. | Stability-enhanced variants of parathyroid hormone |
US5589452A (en) * | 1992-07-14 | 1996-12-31 | Syntex (U.S.A.) Inc. | Analogs of parathyroid hormone and parathyroid hormone related peptide: synthesis and use for the treatment of osteoporosis |
-
1992
- 1992-07-14 US US07/915,247 patent/US5589452A/en not_active Expired - Lifetime
-
1993
- 1993-07-13 ES ES93917060T patent/ES2159293T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1993-07-13 NZ NZ254554A patent/NZ254554A/en not_active IP Right Cessation
- 1993-07-13 AT AT93917060T patent/ATE202115T1/de active
- 1993-07-13 KR KR1019950700136A patent/KR100461618B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1993-07-13 EP EP00122853A patent/EP1094073A3/en not_active Withdrawn
- 1993-07-13 CA CA002140281A patent/CA2140281C/en not_active Expired - Lifetime
- 1993-07-13 DK DK93917060T patent/DK0651765T3/da active
- 1993-07-13 PT PT93917060T patent/PT651765E/pt unknown
- 1993-07-13 WO PCT/US1993/006465 patent/WO1994001460A1/en active Application Filing
- 1993-07-13 EP EP93917060A patent/EP0651765B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1993-07-13 JP JP50352794A patent/JP4106082B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1993-07-13 DE DE69330347T patent/DE69330347T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1993-07-13 KR KR10-2002-7001833A patent/KR100404008B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1993-07-13 AU AU46705/93A patent/AU671851B2/en not_active Expired
- 1993-07-13 KR KR10-2002-7001830A patent/KR100458350B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1993-07-13 MX MX9304226A patent/MX9304226A/es unknown
- 1993-07-13 HU HU9500110A patent/HU217843B/hu unknown
-
1994
- 1994-01-18 US US08/184,328 patent/US5874086A/en not_active Expired - Lifetime
-
1995
- 1995-01-13 FI FI950169A patent/FI120586B/fi not_active IP Right Cessation
- 1995-05-23 US US08/443,863 patent/US5693616A/en not_active Expired - Lifetime
- 1995-05-23 US US08/448,070 patent/US5695955A/en not_active Expired - Lifetime
- 1995-05-23 US US08/447,856 patent/US6051686A/en not_active Expired - Lifetime
- 1995-05-24 US US08/449,317 patent/US5807823A/en not_active Expired - Lifetime
- 1995-05-24 US US08/449,447 patent/US5840837A/en not_active Expired - Lifetime
- 1995-05-24 US US08/449,500 patent/US5798225A/en not_active Expired - Lifetime
- 1995-06-20 HU HU95P/P00281P patent/HU211348A9/hu unknown
-
2001
- 2001-09-05 GR GR20010401381T patent/GR3036521T3/el unknown
Cited By (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US6921750B2 (en) | 1995-07-13 | 2005-07-26 | Societe De Conseils De Recherches Et D'applications Scientifiques, S.A.S. | Analogs of parathyroid hormone |
US7410948B2 (en) | 1995-07-13 | 2008-08-12 | Societe De Conseils De Recherches Et D'applications Scientifiques, Sas | Analogs of parathyroid hormone |
USRE40850E1 (en) * | 1995-07-13 | 2009-07-14 | Societe De Conseils De Recherches Et D'applications Scientifiques, S.A.S. | Analogs of parathyroid hormone |
US7632811B2 (en) | 1995-07-13 | 2009-12-15 | Societe De Conseils De Recherches Et D'applications Scientifiques, Sas | Analogs of parathyroid hormone |
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
HU217843B (hu) | Paratiroid hormon (PTH) rokon polipeptidek, eljárások ezek előállítására és az ezeket tartalmazó gyógyszerek osteoporosis kezelésére | |
US5977070A (en) | Pharmaceutical compositions for the nasal delivery of compounds useful for the treatment of osteoporosis | |
EP0835262B1 (en) | Method for the treatment of corticosteroid induced osteopenia | |
US7494979B2 (en) | Method for treating congestive heart failure and other disorders | |
AU2005222387B2 (en) | Methods and compositions for the treatment of gastrointestinal disorders | |
WO1995002610A1 (en) | Analogs of parathyroid hormone and parathyroid hormone related peptide: synthesis and use for the treatment of osteoporosis | |
NO319848B1 (no) | Syntetiske peptidanaloger til PTH og PTHrp, fremgangsmate for fastfasesyntese derav, farmasoytiske preparater som omfatter dem, og anvendelse derav til fremstilling av medikamenter til behandling av reduksjoner i benmasse. | |
MXPA98001630A (en) | Pharmaceutical compositions of nasal administration of useful compounds for the treatment of osteoporo |