HU211348A9 - Analogs of parathyroid hormone and parathyroid hormone related peptide: synthesis and use for the treatment of osteoporosis - Google Patents
Analogs of parathyroid hormone and parathyroid hormone related peptide: synthesis and use for the treatment of osteoporosis Download PDFInfo
- Publication number
- HU211348A9 HU211348A9 HU95P/P00281P HU9500281P HU211348A9 HU 211348 A9 HU211348 A9 HU 211348A9 HU 9500281 P HU9500281 P HU 9500281P HU 211348 A9 HU211348 A9 HU 211348A9
- Authority
- HU
- Hungary
- Prior art keywords
- leu
- xaa
- glu
- lys
- arg
- Prior art date
Links
- 108700020797 Parathyroid Hormone-Related Proteins 0.000 title claims abstract description 73
- 108090000445 Parathyroid hormone Proteins 0.000 title claims abstract description 60
- 102000043299 Parathyroid hormone-related Human genes 0.000 title claims abstract description 53
- 238000011282 treatment Methods 0.000 title claims abstract description 17
- 239000000199 parathyroid hormone Substances 0.000 title claims description 57
- 102000003982 Parathyroid hormone Human genes 0.000 title claims description 54
- 229960001319 parathyroid hormone Drugs 0.000 title claims description 53
- 208000001132 Osteoporosis Diseases 0.000 title claims description 19
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 title description 15
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 title description 12
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims abstract description 111
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims abstract description 107
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims abstract description 77
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 claims abstract description 71
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 37
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims abstract description 33
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 claims abstract description 9
- 230000008569 process Effects 0.000 claims abstract description 9
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 claims abstract description 7
- 238000010532 solid phase synthesis reaction Methods 0.000 claims abstract description 7
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 claims description 102
- KYIIALJHAOIAHF-KKUMJFAQSA-N Leu-Leu-His Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CN=CN1 KYIIALJHAOIAHF-KKUMJFAQSA-N 0.000 claims description 87
- QNBVTHNJGCOVFA-AVGNSLFASA-N Leu-Leu-Glu Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O QNBVTHNJGCOVFA-AVGNSLFASA-N 0.000 claims description 76
- LBOVBQONZJRWPV-YUMQZZPRSA-N Asp-Lys-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)NCC(O)=O LBOVBQONZJRWPV-YUMQZZPRSA-N 0.000 claims description 71
- YBAFDPFAUTYYRW-UHFFFAOYSA-N N-L-alpha-glutamyl-L-leucine Natural products CC(C)CC(C(O)=O)NC(=O)C(N)CCC(O)=O YBAFDPFAUTYYRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 70
- UXJCMQFPDWCHKX-DCAQKATOSA-N Arg-Arg-Glu Chemical compound NC(N)=NCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O UXJCMQFPDWCHKX-DCAQKATOSA-N 0.000 claims description 69
- OHZIZVWQXJPBJS-IXOXFDKPSA-N Leu-His-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O OHZIZVWQXJPBJS-IXOXFDKPSA-N 0.000 claims description 66
- UICKAKRRRBTILH-GUBZILKMSA-N Ser-Glu-His Chemical compound C1=C(NC=N1)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)N UICKAKRRRBTILH-GUBZILKMSA-N 0.000 claims description 66
- 108010015792 glycyllysine Proteins 0.000 claims description 65
- SCQIQCWLOMOEFP-DCAQKATOSA-N Asp-Leu-Arg Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(O)=O SCQIQCWLOMOEFP-DCAQKATOSA-N 0.000 claims description 64
- JOSAKOKSPXROGQ-BJDJZHNGSA-N Lys-Ser-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O JOSAKOKSPXROGQ-BJDJZHNGSA-N 0.000 claims description 63
- AIRZWUMAHCDDHR-KKUMJFAQSA-N Lys-Leu-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O AIRZWUMAHCDDHR-KKUMJFAQSA-N 0.000 claims description 54
- 229920005989 resin Polymers 0.000 claims description 40
- 239000011347 resin Substances 0.000 claims description 40
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 claims description 37
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 32
- ILWHFUZZCFYSKT-AVGNSLFASA-N Glu-Lys-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O ILWHFUZZCFYSKT-AVGNSLFASA-N 0.000 claims description 16
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 16
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 claims description 15
- MWMJCGBSIORNCD-AVGNSLFASA-N Glu-Leu-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O MWMJCGBSIORNCD-AVGNSLFASA-N 0.000 claims description 14
- 206010065687 Bone loss Diseases 0.000 claims description 11
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 9
- 229920001427 mPEG Polymers 0.000 claims description 9
- VIKZGAUAKQZDOF-NRPADANISA-N Val-Ser-Glu Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O VIKZGAUAKQZDOF-NRPADANISA-N 0.000 claims description 8
- 108010092854 aspartyllysine Proteins 0.000 claims description 8
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims description 8
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 8
- ATIPDCIQTUXABX-UWVGGRQHSA-N Lys-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCCCN ATIPDCIQTUXABX-UWVGGRQHSA-N 0.000 claims description 7
- RXGLHDWAZQECBI-SRVKXCTJSA-N Leu-Leu-Ser Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O RXGLHDWAZQECBI-SRVKXCTJSA-N 0.000 claims description 6
- BAONJAHBAUDJKA-BZSNNMDCSA-N Phe-Tyr-Asp Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 BAONJAHBAUDJKA-BZSNNMDCSA-N 0.000 claims description 6
- BXLYSRPHVMCOPS-ACZMJKKPSA-N Ser-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CO BXLYSRPHVMCOPS-ACZMJKKPSA-N 0.000 claims description 6
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 6
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims description 4
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 4
- BBBXWRGITSUJPB-YUMQZZPRSA-N Glu-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O BBBXWRGITSUJPB-YUMQZZPRSA-N 0.000 claims description 3
- XWOBNBRUDDUEEY-UWVGGRQHSA-N Leu-His Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CNC=N1 XWOBNBRUDDUEEY-UWVGGRQHSA-N 0.000 claims description 3
- VTJUNIYRYIAIHF-IUCAKERBSA-N Leu-Pro Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(O)=O VTJUNIYRYIAIHF-IUCAKERBSA-N 0.000 claims description 3
- 101100342977 Neurospora crassa (strain ATCC 24698 / 74-OR23-1A / CBS 708.71 / DSM 1257 / FGSC 987) leu-1 gene Proteins 0.000 claims description 3
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 3
- 108010057821 leucylproline Proteins 0.000 claims description 3
- JPZXHKDZASGCLU-LBPRGKRZSA-N β-(2-naphthyl)-alanine Chemical compound C1=CC=CC2=CC(C[C@H](N)C(O)=O)=CC=C21 JPZXHKDZASGCLU-LBPRGKRZSA-N 0.000 claims description 3
- 125000004178 (C1-C4) alkyl group Chemical group 0.000 claims description 2
- KKCUFHUTMKQQCF-SRVKXCTJSA-N Glu-Arg-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O KKCUFHUTMKQQCF-SRVKXCTJSA-N 0.000 claims description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 2
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims description 2
- 125000004435 hydrogen atom Chemical class [H]* 0.000 claims description 2
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 claims description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 2
- 206010029897 Obsessive thoughts Diseases 0.000 claims 1
- 125000000956 methoxy group Chemical group [H]C([H])([H])O* 0.000 claims 1
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 claims 1
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 abstract description 4
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract description 2
- 238000010188 recombinant method Methods 0.000 abstract description 2
- 101150071808 PTHLH gene Proteins 0.000 abstract 2
- 102100036893 Parathyroid hormone Human genes 0.000 abstract 2
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 abstract 1
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 156
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 122
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 105
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 104
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 91
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 description 90
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 84
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 description 69
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 68
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 67
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Natural products CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 67
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 57
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 36
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 36
- -1 (protected) amino Chemical class 0.000 description 31
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 27
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 27
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 25
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 24
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 20
- QJPWUUJVYOJNMH-VKHMYHEASA-N L-homoserine lactone Chemical class N[C@H]1CCOC1=O QJPWUUJVYOJNMH-VKHMYHEASA-N 0.000 description 18
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 17
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 17
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 17
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical group CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 15
- LRQKBLKVPFOOQJ-YFKPBYRVSA-N L-norleucine Chemical compound CCCC[C@H]([NH3+])C([O-])=O LRQKBLKVPFOOQJ-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 14
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 12
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 12
- AXXCUABIFZPKPM-BQBZGAKWSA-N Asp-Arg-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(O)=O AXXCUABIFZPKPM-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 10
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 10
- UKAUYVFTDYCKQA-UHFFFAOYSA-N -2-Amino-4-hydroxybutanoic acid Natural products OC(=O)C(N)CCO UKAUYVFTDYCKQA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- REWSWYIDQIELBE-FXQIFTODSA-N Ala-Val-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O REWSWYIDQIELBE-FXQIFTODSA-N 0.000 description 9
- HQUXQAMSWFIRET-AVGNSLFASA-N Leu-Glu-Lys Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN HQUXQAMSWFIRET-AVGNSLFASA-N 0.000 description 9
- BRGQQXQKPUCUJQ-KBIXCLLPSA-N Ser-Glu-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O BRGQQXQKPUCUJQ-KBIXCLLPSA-N 0.000 description 9
- 239000000047 product Substances 0.000 description 9
- URAUIUGLHBRPMF-NAKRPEOUSA-N Arg-Ser-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O URAUIUGLHBRPMF-NAKRPEOUSA-N 0.000 description 8
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 8
- UKAUYVFTDYCKQA-VKHMYHEASA-N L-homoserine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCO UKAUYVFTDYCKQA-VKHMYHEASA-N 0.000 description 8
- JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N N,N-Diisopropylethylamine (DIPEA) Chemical compound CCN(C(C)C)C(C)C JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 8
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 8
- RDOXTESZEPMUJZ-UHFFFAOYSA-N anisole Chemical compound COC1=CC=CC=C1 RDOXTESZEPMUJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 8
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 8
- 108010025306 histidylleucine Proteins 0.000 description 8
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N methanoic acid Natural products OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 238000003752 polymerase chain reaction Methods 0.000 description 8
- IUKIDFVOUHZRAK-QWRGUYRKSA-N Gly-Lys-His Chemical compound NCCCC[C@H](NC(=O)CN)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CN=CN1 IUKIDFVOUHZRAK-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 7
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-Cysteine Chemical compound SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 description 7
- BTNXKBVLWJBTNR-SRVKXCTJSA-N Leu-His-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O BTNXKBVLWJBTNR-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 7
- BMKNXTJLHFIAAH-CIUDSAMLSA-N Ser-Ser-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O BMKNXTJLHFIAAH-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 7
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 description 7
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 7
- 210000002997 osteoclast Anatomy 0.000 description 7
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 7
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 7
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 6
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-N Fluorane Chemical compound F KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- JWTKVPMQCCRPQY-SRVKXCTJSA-N His-Asn-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O JWTKVPMQCCRPQY-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 6
- OWRUUFUVXFREBD-KKUMJFAQSA-N Lys-His-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O OWRUUFUVXFREBD-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 6
- NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N Piperidine Chemical compound C1CCNCC1 NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- XZKQVQKUZMAADP-IMJSIDKUSA-N Ser-Ser Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O XZKQVQKUZMAADP-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 6
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 6
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 description 6
- 238000013270 controlled release Methods 0.000 description 6
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 6
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 6
- 108010050848 glycylleucine Proteins 0.000 description 6
- 229910000040 hydrogen fluoride Inorganic materials 0.000 description 6
- 210000000963 osteoblast Anatomy 0.000 description 6
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 6
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 6
- OGBMKVWORPGQRR-UMXFMPSGSA-N teriparatide Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](CCSC)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)CO)C(C)C)[C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC=1N=CNC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=1N=CNC=1)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(O)=O)C1=CNC=N1 OGBMKVWORPGQRR-UMXFMPSGSA-N 0.000 description 6
- 125000003088 (fluoren-9-ylmethoxy)carbonyl group Chemical group 0.000 description 5
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- WIDVAWAQBRAKTI-YUMQZZPRSA-N Asn-Leu-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(O)=O WIDVAWAQBRAKTI-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 5
- 208000006386 Bone Resorption Diseases 0.000 description 5
- DYFJZDDQPNIPAB-NHCYSSNCSA-N Glu-Arg-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O DYFJZDDQPNIPAB-NHCYSSNCSA-N 0.000 description 5
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 5
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 5
- VMLONWHIORGALA-SRVKXCTJSA-N Ser-Leu-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C([O-])=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H]([NH3+])CO VMLONWHIORGALA-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 5
- ZVDPYSVOZFINEE-BQBZGAKWSA-N alpha-Asp-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O ZVDPYSVOZFINEE-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 5
- 230000024279 bone resorption Effects 0.000 description 5
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 5
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 description 5
- 230000001054 cortical effect Effects 0.000 description 5
- 238000010511 deprotection reaction Methods 0.000 description 5
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 description 5
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 5
- 238000004007 reversed phase HPLC Methods 0.000 description 5
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 5
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 5
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 5
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- ZOWOHMFPXMYFKJ-WBTWNKCNSA-N (4S)-4-[[(2S)-2-[[(2S,3S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-5-amino-2-[[(2S,3S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-6-amino-2-[[2-[[(2S)-6-amino-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-5-amino-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-aminopropanoyl]amino]-3-methylbutanoyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]-4-carboxybutanoyl]amino]-3-(1H-imidazol-5-yl)propanoyl]amino]-5-oxopentanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]-3-(1H-imidazol-5-yl)propanoyl]amino]-3-carboxypropanoyl]amino]hexanoyl]amino]acetyl]amino]hexanoyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]-3-methylpentanoyl]amino]-5-oxopentanoyl]amino]-3-carboxypropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]-5-carbamimidamidopentanoyl]amino]-5-carbamimidamidopentanoyl]amino]-5-carbamimidamidopentanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]-3-(1H-imidazol-5-yl)propanoyl]amino]-3-(1H-imidazol-5-yl)propanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]-3-methylpentanoyl]amino]propanoyl]amino]-5-[[(2S,3S)-1-[[(2S)-1-[[(2S,3R)-1-[[(1S)-1-carboxyethyl]amino]-3-hydroxy-1-oxobutan-2-yl]amino]-3-(1H-imidazol-5-yl)-1-oxopropan-2-yl]amino]-3-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-5-oxopentanoic acid Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC=1NC=NC=1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC=1NC=NC=1)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC=1NC=NC=1)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC=1NC=NC=1)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C)N)C(C)C)[C@@H](C)CC)C1=CN=CN1 ZOWOHMFPXMYFKJ-WBTWNKCNSA-N 0.000 description 4
- ASOKPJOREAFHNY-UHFFFAOYSA-N 1-Hydroxybenzotriazole Chemical compound C1=CC=C2N(O)N=NC2=C1 ASOKPJOREAFHNY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 4-(3-methoxyphenyl)aniline Chemical compound COC1=CC=CC(C=2C=CC(N)=CC=2)=C1 OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- HQIZDMIGUJOSNI-IUCAKERBSA-N Arg-Gly-Arg Chemical compound N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O HQIZDMIGUJOSNI-IUCAKERBSA-N 0.000 description 4
- WMEVEPXNCMKNGH-IHRRRGAJSA-N Arg-Leu-His Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CN=CN1)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N WMEVEPXNCMKNGH-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 4
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 4
- UPOJUWHGMDJUQZ-IUCAKERBSA-N Gly-Arg-Arg Chemical compound NC(=N)NCCC[C@H](NC(=O)CN)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O UPOJUWHGMDJUQZ-IUCAKERBSA-N 0.000 description 4
- CQQGCWPXDHTTNF-GUBZILKMSA-N Leu-Ala-Glu Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O CQQGCWPXDHTTNF-GUBZILKMSA-N 0.000 description 4
- 108700005078 Synthetic Genes Proteins 0.000 description 4
- 230000009102 absorption Effects 0.000 description 4
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 4
- 235000011054 acetic acid Nutrition 0.000 description 4
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 4
- 238000007098 aminolysis reaction Methods 0.000 description 4
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 4
- 230000037176 bone building Effects 0.000 description 4
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 4
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 4
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 4
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 4
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 4
- ATDGTVJJHBUTRL-UHFFFAOYSA-N cyanogen bromide Chemical compound BrC#N ATDGTVJJHBUTRL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 description 4
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 4
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 4
- UZKWTJUDCOPSNM-UHFFFAOYSA-N methoxybenzene Substances CCCCOC=C UZKWTJUDCOPSNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 4
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 4
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 4
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 4
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 4
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 4
- WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N Acetic anhydride Chemical compound CC(=O)OC(C)=O WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- BTJVOUQWFXABOI-IHRRRGAJSA-N Arg-Lys-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@@H](N)CCCNC(N)=N BTJVOUQWFXABOI-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 3
- 102100021277 Beta-secretase 2 Human genes 0.000 description 3
- 101710150190 Beta-secretase 2 Proteins 0.000 description 3
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 3
- 206010017076 Fracture Diseases 0.000 description 3
- HGJREIGJLUQBTJ-SZMVWBNQSA-N Glu-Trp-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O HGJREIGJLUQBTJ-SZMVWBNQSA-N 0.000 description 3
- AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-N Glycolic acid Chemical compound OCC(O)=O AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 3
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 3
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 3
- PBGDOSARRIJMEV-DLOVCJGASA-N Leu-His-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O PBGDOSARRIJMEV-DLOVCJGASA-N 0.000 description 3
- YWYQSLOTVIRCFE-SRVKXCTJSA-N Leu-His-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O YWYQSLOTVIRCFE-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 3
- LXKNSJLSGPNHSK-KKUMJFAQSA-N Leu-Leu-Lys Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)N LXKNSJLSGPNHSK-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 3
- HVHRPWQEQHIQJF-AVGNSLFASA-N Leu-Lys-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O HVHRPWQEQHIQJF-AVGNSLFASA-N 0.000 description 3
- POMXSEDNUXYPGK-IHRRRGAJSA-N Leu-Met-His Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC1=CN=CN1)C(=O)O)N POMXSEDNUXYPGK-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 3
- NKKFVJRLCCUJNA-QWRGUYRKSA-N Lys-Gly-Lys Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN NKKFVJRLCCUJNA-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 3
- 208000029725 Metabolic bone disease Diseases 0.000 description 3
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 3
- MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N Oxalic acid Chemical compound OC(=O)C(O)=O MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- METZZBCMDXHFMK-BZSNNMDCSA-N Phe-Leu-His Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CN=CN1)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC2=CC=CC=C2)N METZZBCMDXHFMK-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 3
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 3
- 235000014680 Saccharomyces cerevisiae Nutrition 0.000 description 3
- LAFKUZYWNCHOHT-WHFBIAKZSA-N Ser-Glu Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O LAFKUZYWNCHOHT-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 3
- 108010049264 Teriparatide Proteins 0.000 description 3
- CEXFELBFVHLYDZ-XGEHTFHBSA-N Thr-Arg-Ser Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O CEXFELBFVHLYDZ-XGEHTFHBSA-N 0.000 description 3
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N [3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-hydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methyl [5-(6-aminopurin-9-yl)-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] hydrogen phosphate Polymers Cc1cn(C2CC(OP(O)(=O)OCC3OC(CC3OP(O)(=O)OCC3OC(CC3O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)C(COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3CO)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)O2)c(=O)[nH]c1=O JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000011543 agarose gel Substances 0.000 description 3
- 229960003767 alanine Drugs 0.000 description 3
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 3
- 108010068380 arginylarginine Proteins 0.000 description 3
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 3
- 125000004057 biotinyl group Chemical group [H]N1C(=O)N([H])[C@]2([H])[C@@]([H])(SC([H])([H])[C@]12[H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 3
- 125000006297 carbonyl amino group Chemical group [H]N([*:2])C([*:1])=O 0.000 description 3
- 238000005277 cation exchange chromatography Methods 0.000 description 3
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 3
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 3
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N hydroxybenzotriazole Substances O=C1C=CC=C2NNN=C12 NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000007943 implant Substances 0.000 description 3
- 150000002596 lactones Chemical class 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 3
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 3
- 238000009806 oophorectomy Methods 0.000 description 3
- 230000011164 ossification Effects 0.000 description 3
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 3
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 3
- 108091008146 restriction endonucleases Proteins 0.000 description 3
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 3
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 3
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 3
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 3
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- WEAYSODFUHQOTI-VKHMYHEASA-N (2s)-2-amino-4-hydroxybutanamide Chemical compound NC(=O)[C@@H](N)CCO WEAYSODFUHQOTI-VKHMYHEASA-N 0.000 description 2
- IWZSHWBGHQBIML-ZGGLMWTQSA-N (3S,8S,10R,13S,14S,17S)-17-isoquinolin-7-yl-N,N,10,13-tetramethyl-2,3,4,7,8,9,11,12,14,15,16,17-dodecahydro-1H-cyclopenta[a]phenanthren-3-amine Chemical compound CN(C)[C@H]1CC[C@]2(C)C3CC[C@@]4(C)[C@@H](CC[C@@H]4c4ccc5ccncc5c4)[C@@H]3CC=C2C1 IWZSHWBGHQBIML-ZGGLMWTQSA-N 0.000 description 2
- UDQTXCHQKHIQMH-KYGLGHNPSA-N (3ar,5s,6s,7r,7ar)-5-(difluoromethyl)-2-(ethylamino)-5,6,7,7a-tetrahydro-3ah-pyrano[3,2-d][1,3]thiazole-6,7-diol Chemical compound S1C(NCC)=N[C@H]2[C@@H]1O[C@H](C(F)F)[C@@H](O)[C@@H]2O UDQTXCHQKHIQMH-KYGLGHNPSA-N 0.000 description 2
- OMBVEVHRIQULKW-DNQXCXABSA-M (3r,5r)-7-[3-(4-fluorophenyl)-8-oxo-7-phenyl-1-propan-2-yl-5,6-dihydro-4h-pyrrolo[2,3-c]azepin-2-yl]-3,5-dihydroxyheptanoate Chemical compound O=C1C=2N(C(C)C)C(CC[C@@H](O)C[C@@H](O)CC([O-])=O)=C(C=3C=CC(F)=CC=3)C=2CCCN1C1=CC=CC=C1 OMBVEVHRIQULKW-DNQXCXABSA-M 0.000 description 2
- PLVPPLCLBIEYEA-WAYWQWQTSA-N (z)-3-(1h-indol-3-yl)prop-2-enoic acid Chemical compound C1=CC=C2C(\C=C/C(=O)O)=CNC2=C1 PLVPPLCLBIEYEA-WAYWQWQTSA-N 0.000 description 2
- CHRJZRDFSQHIFI-UHFFFAOYSA-N 1,2-bis(ethenyl)benzene;styrene Chemical class C=CC1=CC=CC=C1.C=CC1=CC=CC=C1C=C CHRJZRDFSQHIFI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KBPLFHHGFOOTCA-UHFFFAOYSA-N 1-Octanol Chemical compound CCCCCCCCO KBPLFHHGFOOTCA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FMKGJQHNYMWDFJ-CVEARBPZSA-N 2-[[4-(2,2-difluoropropoxy)pyrimidin-5-yl]methylamino]-4-[[(1R,4S)-4-hydroxy-3,3-dimethylcyclohexyl]amino]pyrimidine-5-carbonitrile Chemical compound FC(COC1=NC=NC=C1CNC1=NC=C(C(=N1)N[C@H]1CC([C@H](CC1)O)(C)C)C#N)(C)F FMKGJQHNYMWDFJ-CVEARBPZSA-N 0.000 description 2
- VVCMGAUPZIKYTH-VGHSCWAPSA-N 2-acetyloxybenzoic acid;[(2s,3r)-4-(dimethylamino)-3-methyl-1,2-diphenylbutan-2-yl] propanoate;1,3,7-trimethylpurine-2,6-dione Chemical compound CC(=O)OC1=CC=CC=C1C(O)=O.CN1C(=O)N(C)C(=O)C2=C1N=CN2C.C([C@](OC(=O)CC)([C@H](C)CN(C)C)C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 VVCMGAUPZIKYTH-VGHSCWAPSA-N 0.000 description 2
- TVTJUIAKQFIXCE-HUKYDQBMSA-N 2-amino-9-[(2R,3S,4S,5R)-4-fluoro-3-hydroxy-5-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]-7-prop-2-ynyl-1H-purine-6,8-dione Chemical compound NC=1NC(C=2N(C(N(C=2N=1)[C@@H]1O[C@@H]([C@H]([C@H]1O)F)CO)=O)CC#C)=O TVTJUIAKQFIXCE-HUKYDQBMSA-N 0.000 description 2
- 125000006282 2-chlorobenzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C(Cl)=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])* 0.000 description 2
- HMRWQTHUDVXMGH-GUBZILKMSA-N Ala-Glu-Lys Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN HMRWQTHUDVXMGH-GUBZILKMSA-N 0.000 description 2
- UISQLSIBJKEJSS-GUBZILKMSA-N Arg-Arg-Ser Chemical compound NC(N)=NCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O UISQLSIBJKEJSS-GUBZILKMSA-N 0.000 description 2
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 2
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical class OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 2
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000010392 Bone Fractures Diseases 0.000 description 2
- 125000001433 C-terminal amino-acid group Chemical group 0.000 description 2
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- RGHNJXZEOKUKBD-SQOUGZDYSA-N D-gluconic acid Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O RGHNJXZEOKUKBD-SQOUGZDYSA-N 0.000 description 2
- QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N Dicylcohexylcarbodiimide Chemical compound C1CCCCC1N=C=NC1CCCCC1 QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241001131785 Escherichia coli HB101 Species 0.000 description 2
- IAYPIBMASNFSPL-UHFFFAOYSA-N Ethylene oxide Chemical group C1CO1 IAYPIBMASNFSPL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N Fumaric acid Chemical compound OC(=O)\C=C\C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N 0.000 description 2
- QIQABBIDHGQXGA-ZPFDUUQYSA-N Glu-Ile-Arg Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(O)=O QIQABBIDHGQXGA-ZPFDUUQYSA-N 0.000 description 2
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 2
- 108010010369 HIV Protease Proteins 0.000 description 2
- 229910004373 HOAc Inorganic materials 0.000 description 2
- XJQDHFMUUBRCGA-KKUMJFAQSA-N His-Asn-Phe Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O XJQDHFMUUBRCGA-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 2
- BRQKGRLDDDQWQJ-MBLNEYKQSA-N His-Thr-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O BRQKGRLDDDQWQJ-MBLNEYKQSA-N 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- WRLPVDVHNWSSCL-MELADBBJSA-N Leu-His-Pro Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CN=CN1)C(=O)N2CCC[C@@H]2C(=O)O)N WRLPVDVHNWSSCL-MELADBBJSA-N 0.000 description 2
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WUGMRIBZSVSJNP-UHFFFAOYSA-N N-L-alanyl-L-tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(NC(=O)C(N)C)C(O)=O)=CNC2=C1 WUGMRIBZSVSJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000001429 N-terminal alpha-amino-acid group Chemical group 0.000 description 2
- PXHVJJICTQNCMI-UHFFFAOYSA-N Nickel Chemical compound [Ni] PXHVJJICTQNCMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010049088 Osteopenia Diseases 0.000 description 2
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NFDYGNFETJVMSE-BQBZGAKWSA-N Ser-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CO NFDYGNFETJVMSE-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 2
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 2
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 2
- 238000005377 adsorption chromatography Methods 0.000 description 2
- 150000003973 alkyl amines Chemical class 0.000 description 2
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 2
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 2
- AVKUERGKIZMTKX-NJBDSQKTSA-N ampicillin Chemical compound C1([C@@H](N)C(=O)N[C@H]2[C@H]3SC([C@@H](N3C2=O)C(O)=O)(C)C)=CC=CC=C1 AVKUERGKIZMTKX-NJBDSQKTSA-N 0.000 description 2
- 229960000723 ampicillin Drugs 0.000 description 2
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000009697 arginine Nutrition 0.000 description 2
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 description 2
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 2
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 2
- WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N benzoic acid Chemical class OC(=O)C1=CC=CC=C1 WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000001584 benzyloxycarbonyl group Chemical group C(=O)(OCC1=CC=CC=C1)* 0.000 description 2
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 2
- 230000008416 bone turnover Effects 0.000 description 2
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 2
- TVFDJXOCXUVLDH-UHFFFAOYSA-N caesium atom Chemical compound [Cs] TVFDJXOCXUVLDH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 2
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 2
- 229940125904 compound 1 Drugs 0.000 description 2
- 229940125810 compound 20 Drugs 0.000 description 2
- 229940125851 compound 27 Drugs 0.000 description 2
- 229940126214 compound 3 Drugs 0.000 description 2
- 229940126540 compound 41 Drugs 0.000 description 2
- 229940125936 compound 42 Drugs 0.000 description 2
- 229940127113 compound 57 Drugs 0.000 description 2
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 2
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 2
- 125000002147 dimethylamino group Chemical group [H]C([H])([H])N(*)C([H])([H])[H] 0.000 description 2
- 238000012377 drug delivery Methods 0.000 description 2
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 2
- 230000006870 function Effects 0.000 description 2
- 238000001502 gel electrophoresis Methods 0.000 description 2
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 2
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 2
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000004554 glutamine Nutrition 0.000 description 2
- JAXFJECJQZDFJS-XHEPKHHKSA-N gtpl8555 Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)N[C@H](B1O[C@@]2(C)[C@H]3C[C@H](C3(C)C)C[C@H]2O1)CCC1=CC=C(F)C=C1 JAXFJECJQZDFJS-XHEPKHHKSA-N 0.000 description 2
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 2
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 2
- PLVPPLCLBIEYEA-UHFFFAOYSA-N indoleacrylic acid Natural products C1=CC=C2C(C=CC(=O)O)=CNC2=C1 PLVPPLCLBIEYEA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 2
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 2
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 2
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 2
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 2
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 description 2
- AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N isoleucine Natural products CCC(C)C(N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000003951 lactams Chemical class 0.000 description 2
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 2
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 2
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 2
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 2
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 2
- 238000010369 molecular cloning Methods 0.000 description 2
- 239000007923 nasal drop Substances 0.000 description 2
- 229940100662 nasal drops Drugs 0.000 description 2
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 2
- 230000002611 ovarian Effects 0.000 description 2
- JMANVNJQNLATNU-UHFFFAOYSA-N oxalonitrile Chemical compound N#CC#N JMANVNJQNLATNU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000004810 partition chromatography Methods 0.000 description 2
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 2
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920002401 polyacrylamide Polymers 0.000 description 2
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 2
- 238000002953 preparative HPLC Methods 0.000 description 2
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 2
- 230000002685 pulmonary effect Effects 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- 230000011514 reflex Effects 0.000 description 2
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 2
- 238000007127 saponification reaction Methods 0.000 description 2
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 2
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 2
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 2
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 2
- 230000002459 sustained effect Effects 0.000 description 2
- WROMPOXWARCANT-UHFFFAOYSA-N tfa trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F.OC(=O)C(F)(F)F WROMPOXWARCANT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N trans-butenedioic acid Natural products OC(=O)C=CC(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000000689 upper leg Anatomy 0.000 description 2
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 2
- ASGMFNBUXDJWJJ-JLCFBVMHSA-N (1R,3R)-3-[[3-bromo-1-[4-(5-methyl-1,3,4-thiadiazol-2-yl)phenyl]pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-6-yl]amino]-N,1-dimethylcyclopentane-1-carboxamide Chemical compound BrC1=NN(C2=NC(=NC=C21)N[C@H]1C[C@@](CC1)(C(=O)NC)C)C1=CC=C(C=C1)C=1SC(=NN=1)C ASGMFNBUXDJWJJ-JLCFBVMHSA-N 0.000 description 1
- UAOUIVVJBYDFKD-XKCDOFEDSA-N (1R,9R,10S,11R,12R,15S,18S,21R)-10,11,21-trihydroxy-8,8-dimethyl-14-methylidene-4-(prop-2-enylamino)-20-oxa-5-thia-3-azahexacyclo[9.7.2.112,15.01,9.02,6.012,18]henicosa-2(6),3-dien-13-one Chemical compound C([C@@H]1[C@@H](O)[C@@]23C(C1=C)=O)C[C@H]2[C@]12C(N=C(NCC=C)S4)=C4CC(C)(C)[C@H]1[C@H](O)[C@]3(O)OC2 UAOUIVVJBYDFKD-XKCDOFEDSA-N 0.000 description 1
- ABJSOROVZZKJGI-OCYUSGCXSA-N (1r,2r,4r)-2-(4-bromophenyl)-n-[(4-chlorophenyl)-(2-fluoropyridin-4-yl)methyl]-4-morpholin-4-ylcyclohexane-1-carboxamide Chemical compound C1=NC(F)=CC(C(NC(=O)[C@H]2[C@@H](C[C@@H](CC2)N2CCOCC2)C=2C=CC(Br)=CC=2)C=2C=CC(Cl)=CC=2)=C1 ABJSOROVZZKJGI-OCYUSGCXSA-N 0.000 description 1
- GLGNXYJARSMNGJ-VKTIVEEGSA-N (1s,2s,3r,4r)-3-[[5-chloro-2-[(1-ethyl-6-methoxy-2-oxo-4,5-dihydro-3h-1-benzazepin-7-yl)amino]pyrimidin-4-yl]amino]bicyclo[2.2.1]hept-5-ene-2-carboxamide Chemical compound CCN1C(=O)CCCC2=C(OC)C(NC=3N=C(C(=CN=3)Cl)N[C@H]3[C@H]([C@@]4([H])C[C@@]3(C=C4)[H])C(N)=O)=CC=C21 GLGNXYJARSMNGJ-VKTIVEEGSA-N 0.000 description 1
- SZUVGFMDDVSKSI-WIFOCOSTSA-N (1s,2s,3s,5r)-1-(carboxymethyl)-3,5-bis[(4-phenoxyphenyl)methyl-propylcarbamoyl]cyclopentane-1,2-dicarboxylic acid Chemical compound O=C([C@@H]1[C@@H]([C@](CC(O)=O)([C@H](C(=O)N(CCC)CC=2C=CC(OC=3C=CC=CC=3)=CC=2)C1)C(O)=O)C(O)=O)N(CCC)CC(C=C1)=CC=C1OC1=CC=CC=C1 SZUVGFMDDVSKSI-WIFOCOSTSA-N 0.000 description 1
- GHYOCDFICYLMRF-UTIIJYGPSA-N (2S,3R)-N-[(2S)-3-(cyclopenten-1-yl)-1-[(2R)-2-methyloxiran-2-yl]-1-oxopropan-2-yl]-3-hydroxy-3-(4-methoxyphenyl)-2-[[(2S)-2-[(2-morpholin-4-ylacetyl)amino]propanoyl]amino]propanamide Chemical compound C1(=CCCC1)C[C@@H](C(=O)[C@@]1(OC1)C)NC([C@H]([C@@H](C1=CC=C(C=C1)OC)O)NC([C@H](C)NC(CN1CCOCC1)=O)=O)=O GHYOCDFICYLMRF-UTIIJYGPSA-N 0.000 description 1
- GCTFTMWXZFLTRR-GFCCVEGCSA-N (2r)-2-amino-n-[3-(difluoromethoxy)-4-(1,3-oxazol-5-yl)phenyl]-4-methylpentanamide Chemical compound FC(F)OC1=CC(NC(=O)[C@H](N)CC(C)C)=CC=C1C1=CN=CO1 GCTFTMWXZFLTRR-GFCCVEGCSA-N 0.000 description 1
- IUSARDYWEPUTPN-OZBXUNDUSA-N (2r)-n-[(2s,3r)-4-[[(4s)-6-(2,2-dimethylpropyl)spiro[3,4-dihydropyrano[2,3-b]pyridine-2,1'-cyclobutane]-4-yl]amino]-3-hydroxy-1-[3-(1,3-thiazol-2-yl)phenyl]butan-2-yl]-2-methoxypropanamide Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@@H](C)OC)[C@H](O)CN[C@@H]1C2=CC(CC(C)(C)C)=CN=C2OC2(CCC2)C1)C(C=1)=CC=CC=1C1=NC=CS1 IUSARDYWEPUTPN-OZBXUNDUSA-N 0.000 description 1
- YJLIKUSWRSEPSM-WGQQHEPDSA-N (2r,3r,4s,5r)-2-[6-amino-8-[(4-phenylphenyl)methylamino]purin-9-yl]-5-(hydroxymethyl)oxolane-3,4-diol Chemical compound C=1C=C(C=2C=CC=CC=2)C=CC=1CNC1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H]1O YJLIKUSWRSEPSM-WGQQHEPDSA-N 0.000 description 1
- VIJSPAIQWVPKQZ-BLECARSGSA-N (2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-acetamido-5-(diaminomethylideneamino)pentanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]-4,4-dimethylpentanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]propanoyl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)pentanoic acid Chemical compound NC(=N)NCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(C)=O VIJSPAIQWVPKQZ-BLECARSGSA-N 0.000 description 1
- WWTBZEKOSBFBEM-SPWPXUSOSA-N (2s)-2-[[2-benzyl-3-[hydroxy-[(1r)-2-phenyl-1-(phenylmethoxycarbonylamino)ethyl]phosphoryl]propanoyl]amino]-3-(1h-indol-3-yl)propanoic acid Chemical compound N([C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)O)C(=O)C(CP(O)(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)OCC=1C=CC=CC=1)CC1=CC=CC=C1 WWTBZEKOSBFBEM-SPWPXUSOSA-N 0.000 description 1
- STBLNCCBQMHSRC-BATDWUPUSA-N (2s)-n-[(3s,4s)-5-acetyl-7-cyano-4-methyl-1-[(2-methylnaphthalen-1-yl)methyl]-2-oxo-3,4-dihydro-1,5-benzodiazepin-3-yl]-2-(methylamino)propanamide Chemical compound O=C1[C@@H](NC(=O)[C@H](C)NC)[C@H](C)N(C(C)=O)C2=CC(C#N)=CC=C2N1CC1=C(C)C=CC2=CC=CC=C12 STBLNCCBQMHSRC-BATDWUPUSA-N 0.000 description 1
- QFLWZFQWSBQYPS-AWRAUJHKSA-N (3S)-3-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[5-[(3aS,6aR)-2-oxo-1,3,3a,4,6,6a-hexahydrothieno[3,4-d]imidazol-4-yl]pentanoylamino]-3-methylbutanoyl]amino]-3-(4-hydroxyphenyl)propanoyl]amino]-4-[1-bis(4-chlorophenoxy)phosphorylbutylamino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound CCCC(NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](Cc1ccc(O)cc1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CCCCC1SC[C@@H]2NC(=O)N[C@H]12)C(C)C)P(=O)(Oc1ccc(Cl)cc1)Oc1ccc(Cl)cc1 QFLWZFQWSBQYPS-AWRAUJHKSA-N 0.000 description 1
- RUDATBOHQWOJDD-UHFFFAOYSA-N (3beta,5beta,7alpha)-3,7-Dihydroxycholan-24-oic acid Natural products OC1CC2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(CCC(O)=O)C)C1(C)CC2 RUDATBOHQWOJDD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OOKAZRDERJMRCJ-KOUAFAAESA-N (3r)-7-[(1s,2s,4ar,6s,8s)-2,6-dimethyl-8-[(2s)-2-methylbutanoyl]oxy-1,2,4a,5,6,7,8,8a-octahydronaphthalen-1-yl]-3-hydroxy-5-oxoheptanoic acid Chemical compound C1=C[C@H](C)[C@H](CCC(=O)C[C@@H](O)CC(O)=O)C2[C@@H](OC(=O)[C@@H](C)CC)C[C@@H](C)C[C@@H]21 OOKAZRDERJMRCJ-KOUAFAAESA-N 0.000 description 1
- HUWSZNZAROKDRZ-RRLWZMAJSA-N (3r,4r)-3-azaniumyl-5-[[(2s,3r)-1-[(2s)-2,3-dicarboxypyrrolidin-1-yl]-3-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-5-oxo-4-sulfanylpentane-1-sulfonate Chemical compound OS(=O)(=O)CC[C@@H](N)[C@@H](S)C(=O)N[C@@H]([C@H](C)CC)C(=O)N1CCC(C(O)=O)[C@H]1C(O)=O HUWSZNZAROKDRZ-RRLWZMAJSA-N 0.000 description 1
- MPDDTAJMJCESGV-CTUHWIOQSA-M (3r,5r)-7-[2-(4-fluorophenyl)-5-[methyl-[(1r)-1-phenylethyl]carbamoyl]-4-propan-2-ylpyrazol-3-yl]-3,5-dihydroxyheptanoate Chemical compound C1([C@@H](C)N(C)C(=O)C2=NN(C(CC[C@@H](O)C[C@@H](O)CC([O-])=O)=C2C(C)C)C=2C=CC(F)=CC=2)=CC=CC=C1 MPDDTAJMJCESGV-CTUHWIOQSA-M 0.000 description 1
- UHPQFNXOFFPHJW-UHFFFAOYSA-N (4-methylphenyl)-phenylmethanamine Chemical compound C1=CC(C)=CC=C1C(N)C1=CC=CC=C1 UHPQFNXOFFPHJW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YQOLEILXOBUDMU-KRWDZBQOSA-N (4R)-5-[(6-bromo-3-methyl-2-pyrrolidin-1-ylquinoline-4-carbonyl)amino]-4-(2-chlorophenyl)pentanoic acid Chemical compound CC1=C(C2=C(C=CC(=C2)Br)N=C1N3CCCC3)C(=O)NC[C@H](CCC(=O)O)C4=CC=CC=C4Cl YQOLEILXOBUDMU-KRWDZBQOSA-N 0.000 description 1
- BJEPYKJPYRNKOW-REOHCLBHSA-N (S)-malic acid Chemical class OC(=O)[C@@H](O)CC(O)=O BJEPYKJPYRNKOW-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- DEVSOMFAQLZNKR-RJRFIUFISA-N (z)-3-[3-[3,5-bis(trifluoromethyl)phenyl]-1,2,4-triazol-1-yl]-n'-pyrazin-2-ylprop-2-enehydrazide Chemical compound FC(F)(F)C1=CC(C(F)(F)F)=CC(C2=NN(\C=C/C(=O)NNC=3N=CC=NC=3)C=N2)=C1 DEVSOMFAQLZNKR-RJRFIUFISA-N 0.000 description 1
- DJMOXMNDXFFONV-UHFFFAOYSA-N 1,3-dimethyl-7-[2-(n-methylanilino)ethyl]purine-2,6-dione Chemical compound C1=NC=2N(C)C(=O)N(C)C(=O)C=2N1CCN(C)C1=CC=CC=C1 DJMOXMNDXFFONV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KKHFRAFPESRGGD-UHFFFAOYSA-N 1,3-dimethyl-7-[3-(n-methylanilino)propyl]purine-2,6-dione Chemical compound C1=NC=2N(C)C(=O)N(C)C(=O)C=2N1CCCN(C)C1=CC=CC=C1 KKHFRAFPESRGGD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- TUSDEZXZIZRFGC-UHFFFAOYSA-N 1-O-galloyl-3,6-(R)-HHDP-beta-D-glucose Chemical class OC1C(O2)COC(=O)C3=CC(O)=C(O)C(O)=C3C3=C(O)C(O)=C(O)C=C3C(=O)OC1C(O)C2OC(=O)C1=CC(O)=C(O)C(O)=C1 TUSDEZXZIZRFGC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KQZLRWGGWXJPOS-NLFPWZOASA-N 1-[(1R)-1-(2,4-dichlorophenyl)ethyl]-6-[(4S,5R)-4-[(2S)-2-(hydroxymethyl)pyrrolidin-1-yl]-5-methylcyclohexen-1-yl]pyrazolo[3,4-b]pyrazine-3-carbonitrile Chemical compound ClC1=C(C=CC(=C1)Cl)[C@@H](C)N1N=C(C=2C1=NC(=CN=2)C1=CC[C@@H]([C@@H](C1)C)N1[C@@H](CCC1)CO)C#N KQZLRWGGWXJPOS-NLFPWZOASA-N 0.000 description 1
- WZZBNLYBHUDSHF-DHLKQENFSA-N 1-[(3s,4s)-4-[8-(2-chloro-4-pyrimidin-2-yloxyphenyl)-7-fluoro-2-methylimidazo[4,5-c]quinolin-1-yl]-3-fluoropiperidin-1-yl]-2-hydroxyethanone Chemical compound CC1=NC2=CN=C3C=C(F)C(C=4C(=CC(OC=5N=CC=CN=5)=CC=4)Cl)=CC3=C2N1[C@H]1CCN(C(=O)CO)C[C@@H]1F WZZBNLYBHUDSHF-DHLKQENFSA-N 0.000 description 1
- ONBQEOIKXPHGMB-VBSBHUPXSA-N 1-[2-[(2s,3r,4s,5r)-3,4-dihydroxy-5-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]oxy-4,6-dihydroxyphenyl]-3-(4-hydroxyphenyl)propan-1-one Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1=CC(O)=CC(O)=C1C(=O)CCC1=CC=C(O)C=C1 ONBQEOIKXPHGMB-VBSBHUPXSA-N 0.000 description 1
- UNILWMWFPHPYOR-KXEYIPSPSA-M 1-[6-[2-[3-[3-[3-[2-[2-[3-[[2-[2-[[(2r)-1-[[2-[[(2r)-1-[3-[2-[2-[3-[[2-(2-amino-2-oxoethoxy)acetyl]amino]propoxy]ethoxy]ethoxy]propylamino]-3-hydroxy-1-oxopropan-2-yl]amino]-2-oxoethyl]amino]-3-[(2r)-2,3-di(hexadecanoyloxy)propyl]sulfanyl-1-oxopropan-2-yl Chemical compound O=C1C(SCCC(=O)NCCCOCCOCCOCCCNC(=O)COCC(=O)N[C@@H](CSC[C@@H](COC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC)C(=O)NCC(=O)N[C@H](CO)C(=O)NCCCOCCOCCOCCCNC(=O)COCC(N)=O)CC(=O)N1CCNC(=O)CCCCCN\1C2=CC=C(S([O-])(=O)=O)C=C2CC/1=C/C=C/C=C/C1=[N+](CC)C2=CC=C(S([O-])(=O)=O)C=C2C1 UNILWMWFPHPYOR-KXEYIPSPSA-M 0.000 description 1
- SNDUAWDCUKVWFQ-UHFFFAOYSA-N 1-bis(2,2,2-trifluoroacetyl)boranyl-2,2,2-trifluoroethanone Chemical compound FC(F)(F)C(=O)B(C(=O)C(F)(F)F)C(=O)C(F)(F)F SNDUAWDCUKVWFQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WGFNXGPBPIJYLI-UHFFFAOYSA-N 2,6-difluoro-3-[(3-fluorophenyl)sulfonylamino]-n-(3-methoxy-1h-pyrazolo[3,4-b]pyridin-5-yl)benzamide Chemical compound C1=C2C(OC)=NNC2=NC=C1NC(=O)C(C=1F)=C(F)C=CC=1NS(=O)(=O)C1=CC=CC(F)=C1 WGFNXGPBPIJYLI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FQMZXMVHHKXGTM-UHFFFAOYSA-N 2-(1-adamantyl)-n-[2-[2-(2-hydroxyethylamino)ethylamino]quinolin-5-yl]acetamide Chemical compound C1C(C2)CC(C3)CC2CC13CC(=O)NC1=CC=CC2=NC(NCCNCCO)=CC=C21 FQMZXMVHHKXGTM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VCUXVXLUOHDHKK-UHFFFAOYSA-N 2-(2-aminopyrimidin-4-yl)-4-(2-chloro-4-methoxyphenyl)-1,3-thiazole-5-carboxamide Chemical compound ClC1=CC(OC)=CC=C1C1=C(C(N)=O)SC(C=2N=C(N)N=CC=2)=N1 VCUXVXLUOHDHKK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SBASXUCJHJRPEV-UHFFFAOYSA-N 2-(2-methoxyethoxy)ethanol Chemical compound COCCOCCO SBASXUCJHJRPEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PYRKKGOKRMZEIT-UHFFFAOYSA-N 2-[6-(2-cyclopropylethoxy)-9-(2-hydroxy-2-methylpropyl)-1h-phenanthro[9,10-d]imidazol-2-yl]-5-fluorobenzene-1,3-dicarbonitrile Chemical compound C1=C2C3=CC(CC(C)(O)C)=CC=C3C=3NC(C=4C(=CC(F)=CC=4C#N)C#N)=NC=3C2=CC=C1OCCC1CC1 PYRKKGOKRMZEIT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YSUIQYOGTINQIN-UZFYAQMZSA-N 2-amino-9-[(1S,6R,8R,9S,10R,15R,17R,18R)-8-(6-aminopurin-9-yl)-9,18-difluoro-3,12-dihydroxy-3,12-bis(sulfanylidene)-2,4,7,11,13,16-hexaoxa-3lambda5,12lambda5-diphosphatricyclo[13.2.1.06,10]octadecan-17-yl]-1H-purin-6-one Chemical compound NC1=NC2=C(N=CN2[C@@H]2O[C@@H]3COP(S)(=O)O[C@@H]4[C@@H](COP(S)(=O)O[C@@H]2[C@@H]3F)O[C@H]([C@H]4F)N2C=NC3=C2N=CN=C3N)C(=O)N1 YSUIQYOGTINQIN-UZFYAQMZSA-N 0.000 description 1
- GRWKNBPOGBTZMN-UHFFFAOYSA-N 2-benzyl-3-phenylpropane-1,2-diamine Chemical compound C=1C=CC=CC=1CC(N)(CN)CC1=CC=CC=C1 GRWKNBPOGBTZMN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HBAHZZVIEFRTEY-UHFFFAOYSA-N 2-heptylcyclohex-2-en-1-one Chemical compound CCCCCCCC1=CCCCC1=O HBAHZZVIEFRTEY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LFOIDLOIBZFWDO-UHFFFAOYSA-N 2-methoxy-6-[6-methoxy-4-[(3-phenylmethoxyphenyl)methoxy]-1-benzofuran-2-yl]imidazo[2,1-b][1,3,4]thiadiazole Chemical compound N1=C2SC(OC)=NN2C=C1C(OC1=CC(OC)=C2)=CC1=C2OCC(C=1)=CC=CC=1OCC1=CC=CC=C1 LFOIDLOIBZFWDO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001622 2-naphthyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C2C([H])=C(*)C([H])=C([H])C2=C1[H] 0.000 description 1
- KWPQTFXULUUCGD-UHFFFAOYSA-N 3,4,5,7,8,9,10,10a-octahydropyrido[1,2-a][1,4]diazepine Chemical compound C1CCN=CC2CCCCN21 KWPQTFXULUUCGD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OHXPGWPVLFPUSM-KLRNGDHRSA-N 3,7,12-trioxo-5beta-cholanic acid Chemical compound C1CC(=O)C[C@H]2CC(=O)[C@H]3[C@@H]4CC[C@H]([C@@H](CCC(O)=O)C)[C@@]4(C)C(=O)C[C@@H]3[C@]21C OHXPGWPVLFPUSM-KLRNGDHRSA-N 0.000 description 1
- QBWKPGNFQQJGFY-QLFBSQMISA-N 3-[(1r)-1-[(2r,6s)-2,6-dimethylmorpholin-4-yl]ethyl]-n-[6-methyl-3-(1h-pyrazol-4-yl)imidazo[1,2-a]pyrazin-8-yl]-1,2-thiazol-5-amine Chemical compound N1([C@H](C)C2=NSC(NC=3C4=NC=C(N4C=C(C)N=3)C3=CNN=C3)=C2)C[C@H](C)O[C@H](C)C1 QBWKPGNFQQJGFY-QLFBSQMISA-N 0.000 description 1
- BMYNFMYTOJXKLE-UHFFFAOYSA-N 3-azaniumyl-2-hydroxypropanoate Chemical compound NCC(O)C(O)=O BMYNFMYTOJXKLE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WYFCZWSWFGJODV-MIANJLSGSA-N 4-[[(1s)-2-[(e)-3-[3-chloro-2-fluoro-6-(tetrazol-1-yl)phenyl]prop-2-enoyl]-5-(4-methyl-2-oxopiperazin-1-yl)-3,4-dihydro-1h-isoquinoline-1-carbonyl]amino]benzoic acid Chemical compound O=C1CN(C)CCN1C1=CC=CC2=C1CCN(C(=O)\C=C\C=1C(=CC=C(Cl)C=1F)N1N=NN=C1)[C@@H]2C(=O)NC1=CC=C(C(O)=O)C=C1 WYFCZWSWFGJODV-MIANJLSGSA-N 0.000 description 1
- XFJBGINZIMNZBW-CRAIPNDOSA-N 5-chloro-2-[4-[(1r,2s)-2-[2-(5-methylsulfonylpyridin-2-yl)oxyethyl]cyclopropyl]piperidin-1-yl]pyrimidine Chemical compound N1=CC(S(=O)(=O)C)=CC=C1OCC[C@H]1[C@@H](C2CCN(CC2)C=2N=CC(Cl)=CN=2)C1 XFJBGINZIMNZBW-CRAIPNDOSA-N 0.000 description 1
- RSIWALKZYXPAGW-NSHDSACASA-N 6-(3-fluorophenyl)-3-methyl-7-[(1s)-1-(7h-purin-6-ylamino)ethyl]-[1,3]thiazolo[3,2-a]pyrimidin-5-one Chemical compound C=1([C@@H](NC=2C=3N=CNC=3N=CN=2)C)N=C2SC=C(C)N2C(=O)C=1C1=CC=CC(F)=C1 RSIWALKZYXPAGW-NSHDSACASA-N 0.000 description 1
- 208000004998 Abdominal Pain Diseases 0.000 description 1
- WGDNWOMKBUXFHR-BQBZGAKWSA-N Ala-Gly-Arg Chemical compound C[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N WGDNWOMKBUXFHR-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- DXTYEWAQOXYRHZ-KKXDTOCCSA-N Ala-Phe-Tyr Chemical compound C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CC2=CC=C(C=C2)O)C(=O)O)N DXTYEWAQOXYRHZ-KKXDTOCCSA-N 0.000 description 1
- 208000007848 Alcoholism Diseases 0.000 description 1
- 201000000736 Amenorrhea Diseases 0.000 description 1
- 206010001928 Amenorrhoea Diseases 0.000 description 1
- 102000015404 Amino Acid Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010025177 Amino Acid Receptors Proteins 0.000 description 1
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O Ammonium Chemical compound [NH4+] QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- XPSGESXVBSQZPL-SRVKXCTJSA-N Arg-Arg-Arg Chemical compound NC(N)=NCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(O)=O XPSGESXVBSQZPL-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- XEPSCVXTCUUHDT-AVGNSLFASA-N Arg-Arg-Leu Natural products CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N XEPSCVXTCUUHDT-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- PVSNBTCXCQIXSE-JYJNAYRXSA-N Arg-Arg-Phe Chemical compound NC(=N)NCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 PVSNBTCXCQIXSE-JYJNAYRXSA-N 0.000 description 1
- NABSCJGZKWSNHX-RCWTZXSCSA-N Arg-Arg-Thr Chemical compound NC(N)=NCCC[C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@H](O)C)C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N NABSCJGZKWSNHX-RCWTZXSCSA-N 0.000 description 1
- NKBQZKVMKJJDLX-SRVKXCTJSA-N Arg-Glu-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O NKBQZKVMKJJDLX-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- YKZJPIPFKGYHKY-DCAQKATOSA-N Arg-Leu-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O YKZJPIPFKGYHKY-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- KXOPYFNQLVUOAQ-FXQIFTODSA-N Arg-Ser-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O KXOPYFNQLVUOAQ-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- AIFHRTPABBBHKU-RCWTZXSCSA-N Arg-Thr-Arg Chemical compound NC(N)=NCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@H](O)C)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(O)=O AIFHRTPABBBHKU-RCWTZXSCSA-N 0.000 description 1
- PPMTUXJSQDNUDE-CIUDSAMLSA-N Asn-Glu-Arg Chemical compound NC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N PPMTUXJSQDNUDE-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- NYGILGUOUOXGMJ-YUMQZZPRSA-N Asn-Lys-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)NCC(O)=O NYGILGUOUOXGMJ-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- AYFVRYXNDHBECD-YUMQZZPRSA-N Asp-Leu-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(O)=O AYFVRYXNDHBECD-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- CJUKAWUWBZCTDQ-SRVKXCTJSA-N Asp-Leu-Lys Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O CJUKAWUWBZCTDQ-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 239000005711 Benzoic acid Chemical class 0.000 description 1
- 229940122361 Bisphosphonate Drugs 0.000 description 1
- JQUCWIWWWKZNCS-LESHARBVSA-N C(C1=CC=CC=C1)(=O)NC=1SC[C@H]2[C@@](N1)(CO[C@H](C2)C)C=2SC=C(N2)NC(=O)C2=NC=C(C=C2)OC(F)F Chemical compound C(C1=CC=CC=C1)(=O)NC=1SC[C@H]2[C@@](N1)(CO[C@H](C2)C)C=2SC=C(N2)NC(=O)C2=NC=C(C=C2)OC(F)F JQUCWIWWWKZNCS-LESHARBVSA-N 0.000 description 1
- ISMDILRWKSYCOD-GNKBHMEESA-N C(C1=CC=CC=C1)[C@@H]1NC(OCCCCCCCCCCCNC([C@@H](NC(C[C@@H]1O)=O)C(C)C)=O)=O Chemical compound C(C1=CC=CC=C1)[C@@H]1NC(OCCCCCCCCCCCNC([C@@H](NC(C[C@@H]1O)=O)C(C)C)=O)=O ISMDILRWKSYCOD-GNKBHMEESA-N 0.000 description 1
- KCBAMQOKOLXLOX-BSZYMOERSA-N CC1=C(SC=N1)C2=CC=C(C=C2)[C@H](C)NC(=O)[C@@H]3C[C@H](CN3C(=O)[C@H](C(C)(C)C)NC(=O)CCCCCCCCCCNCCCONC(=O)C4=C(C(=C(C=C4)F)F)NC5=C(C=C(C=C5)I)F)O Chemical compound CC1=C(SC=N1)C2=CC=C(C=C2)[C@H](C)NC(=O)[C@@H]3C[C@H](CN3C(=O)[C@H](C(C)(C)C)NC(=O)CCCCCCCCCCNCCCONC(=O)C4=C(C(=C(C=C4)F)F)NC5=C(C=C(C=C5)I)F)O KCBAMQOKOLXLOX-BSZYMOERSA-N 0.000 description 1
- BQXUPNKLZNSUMC-YUQWMIPFSA-N CCN(CCCCCOCC(=O)N[C@H](C(=O)N1C[C@H](O)C[C@H]1C(=O)N[C@@H](C)c1ccc(cc1)-c1scnc1C)C(C)(C)C)CCOc1ccc(cc1)C(=O)c1c(sc2cc(O)ccc12)-c1ccc(O)cc1 Chemical compound CCN(CCCCCOCC(=O)N[C@H](C(=O)N1C[C@H](O)C[C@H]1C(=O)N[C@@H](C)c1ccc(cc1)-c1scnc1C)C(C)(C)C)CCOc1ccc(cc1)C(=O)c1c(sc2cc(O)ccc12)-c1ccc(O)cc1 BQXUPNKLZNSUMC-YUQWMIPFSA-N 0.000 description 1
- 101100285688 Caenorhabditis elegans hrg-7 gene Proteins 0.000 description 1
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 1
- 229920002134 Carboxymethyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 208000002881 Colic Diseases 0.000 description 1
- 229940126639 Compound 33 Drugs 0.000 description 1
- 229940127007 Compound 39 Drugs 0.000 description 1
- RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N Copper Chemical compound [Cu] RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920000858 Cyclodextrin Polymers 0.000 description 1
- RGHNJXZEOKUKBD-UHFFFAOYSA-N D-gluconic acid Natural products OCC(O)C(O)C(O)C(O)C(O)=O RGHNJXZEOKUKBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000004544 DNA amplification Effects 0.000 description 1
- 238000007400 DNA extraction Methods 0.000 description 1
- 238000001712 DNA sequencing Methods 0.000 description 1
- 101100031571 Danio rerio pth4 gene Proteins 0.000 description 1
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N Dextrotartaric acid Chemical compound OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N 0.000 description 1
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000283086 Equidae Species 0.000 description 1
- 108090000371 Esterases Proteins 0.000 description 1
- PIICEJLVQHRZGT-UHFFFAOYSA-N Ethylenediamine Chemical compound NCCN PIICEJLVQHRZGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000001263 FEMA 3042 Chemical class 0.000 description 1
- MPZWMIIOPAPAKE-BQBZGAKWSA-N Glu-Arg Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCNC(N)=N MPZWMIIOPAPAKE-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- WOMUDRVDJMHTCV-DCAQKATOSA-N Glu-Arg-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O WOMUDRVDJMHTCV-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- SNFUTDLOCQQRQD-ZKWXMUAHSA-N Glu-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O SNFUTDLOCQQRQD-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 1
- 108010035713 Glycodeoxycholic Acid Proteins 0.000 description 1
- WVULKSPCQVQLCU-UHFFFAOYSA-N Glycodeoxycholic acid Natural products C1CC2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(CCC(=O)NCC(O)=O)C)C1(C)C(O)C2 WVULKSPCQVQLCU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZIMTWPHIKZEHSE-UWVGGRQHSA-N His-Arg-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(O)=O ZIMTWPHIKZEHSE-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 1
- WSDOHRLQDGAOGU-BQBZGAKWSA-N His-Asn Chemical compound NC(=O)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 WSDOHRLQDGAOGU-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- LYSVCKOXIDKEEL-SRVKXCTJSA-N His-Asn-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 LYSVCKOXIDKEEL-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- VOKCBYNCZVSILJ-KKUMJFAQSA-N His-Asn-Tyr Chemical compound C1=CC(=CC=C1C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)NC(=O)[C@H](CC2=CN=CN2)N)O VOKCBYNCZVSILJ-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- YAALVYQFVJNXIV-KKUMJFAQSA-N His-Leu-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 YAALVYQFVJNXIV-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- 101001135770 Homo sapiens Parathyroid hormone Proteins 0.000 description 1
- 101001135995 Homo sapiens Probable peptidyl-tRNA hydrolase Proteins 0.000 description 1
- 208000037147 Hypercalcaemia Diseases 0.000 description 1
- URWXDJAEEGBADB-TUBUOCAGSA-N Ile-His-Thr Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CN=CN1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)O)N URWXDJAEEGBADB-TUBUOCAGSA-N 0.000 description 1
- 150000008575 L-amino acids Chemical class 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N L-arginine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 description 1
- SENJXOPIZNYLHU-UHFFFAOYSA-N L-leucyl-L-arginine Natural products CC(C)CC(N)C(=O)NC(C(O)=O)CCCN=C(N)N SENJXOPIZNYLHU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- 101150118523 LYS4 gene Proteins 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- YOZCKMXHBYKOMQ-IHRRRGAJSA-N Leu-Arg-Lys Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)N YOZCKMXHBYKOMQ-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- RVVBWTWPNFDYBE-SRVKXCTJSA-N Leu-Glu-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O RVVBWTWPNFDYBE-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- APFJUBGRZGMQFF-QWRGUYRKSA-N Leu-Gly-Lys Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN APFJUBGRZGMQFF-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- VZBIUJURDLFFOE-IHRRRGAJSA-N Leu-His-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O VZBIUJURDLFFOE-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- CSFVADKICPDRRF-KKUMJFAQSA-N Leu-His-Leu Chemical compound CC(C)C[C@H]([NH3+])C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C([O-])=O)CC1=CN=CN1 CSFVADKICPDRRF-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- IEWBEPKLKUXQBU-VOAKCMCISA-N Leu-Leu-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O IEWBEPKLKUXQBU-VOAKCMCISA-N 0.000 description 1
- BRTVHXHCUSXYRI-CIUDSAMLSA-N Leu-Ser-Ser Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O BRTVHXHCUSXYRI-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- DCRWPTBMWMGADO-AVGNSLFASA-N Lys-Glu-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O DCRWPTBMWMGADO-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- WVJNGSFKBKOKRV-AJNGGQMLSA-N Lys-Leu-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O WVJNGSFKBKOKRV-AJNGGQMLSA-N 0.000 description 1
- HVAUKHLDSDDROB-KKUMJFAQSA-N Lys-Lys-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O HVAUKHLDSDDROB-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- 101100177977 Magnaporthe oryzae (strain 70-15 / ATCC MYA-4617 / FGSC 8958) PTH3 gene Proteins 0.000 description 1
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000030136 Marchiafava-Bignami Disease Diseases 0.000 description 1
- 229920001367 Merrifield resin Polymers 0.000 description 1
- KZKVVWBOGDKHKE-QTKMDUPCSA-N Met-Thr-His Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CNC=N1 KZKVVWBOGDKHKE-QTKMDUPCSA-N 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 229920000881 Modified starch Polymers 0.000 description 1
- NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N N-Hydroxysuccinimide Chemical compound ON1C(=O)CCC1=O NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SECXISVLQFMRJM-UHFFFAOYSA-N N-Methylpyrrolidone Chemical compound CN1CCCC1=O SECXISVLQFMRJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LVDRREOUMKACNJ-BKMJKUGQSA-N N-[(2R,3S)-2-(4-chlorophenyl)-1-(1,4-dimethyl-2-oxoquinolin-7-yl)-6-oxopiperidin-3-yl]-2-methylpropane-1-sulfonamide Chemical compound CC(C)CS(=O)(=O)N[C@H]1CCC(=O)N([C@@H]1c1ccc(Cl)cc1)c1ccc2c(C)cc(=O)n(C)c2c1 LVDRREOUMKACNJ-BKMJKUGQSA-N 0.000 description 1
- QOVYHDHLFPKQQG-NDEPHWFRSA-N N[C@@H](CCC(=O)N1CCC(CC1)NC1=C2C=CC=CC2=NC(NCC2=CN(CCCNCCCNC3CCCCC3)N=N2)=N1)C(O)=O Chemical compound N[C@@H](CCC(=O)N1CCC(CC1)NC1=C2C=CC=CC2=NC(NCC2=CN(CCCNCCCNC3CCCCC3)N=N2)=N1)C(O)=O QOVYHDHLFPKQQG-NDEPHWFRSA-N 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N Nitric acid Chemical compound O[N+]([O-])=O GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010067482 No adverse event Diseases 0.000 description 1
- 238000012408 PCR amplification Methods 0.000 description 1
- 238000010222 PCR analysis Methods 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 229920002230 Pectic acid Chemical class 0.000 description 1
- LRBQNJMCXXYXIU-PPKXGCFTSA-N Penta-digallate-beta-D-glucose Chemical class OC1=C(O)C(O)=CC(C(=O)OC=2C(=C(O)C=C(C=2)C(=O)OC[C@@H]2[C@H]([C@H](OC(=O)C=3C=C(OC(=O)C=4C=C(O)C(O)=C(O)C=4)C(O)=C(O)C=3)[C@@H](OC(=O)C=3C=C(OC(=O)C=4C=C(O)C(O)=C(O)C=4)C(O)=C(O)C=3)[C@H](OC(=O)C=3C=C(OC(=O)C=4C=C(O)C(O)=C(O)C=4)C(O)=C(O)C=3)O2)OC(=O)C=2C=C(OC(=O)C=3C=C(O)C(O)=C(O)C=3)C(O)=C(O)C=2)O)=C1 LRBQNJMCXXYXIU-PPKXGCFTSA-N 0.000 description 1
- KDYPMIZMXDECSU-JYJNAYRXSA-N Phe-Leu-Glu Chemical compound OC(=O)CC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 KDYPMIZMXDECSU-JYJNAYRXSA-N 0.000 description 1
- RZKYEQDPDZUERB-UHFFFAOYSA-N Pindone Chemical group C1=CC=C2C(=O)C(C(=O)C(C)(C)C)C(=O)C2=C1 RZKYEQDPDZUERB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 1
- 108010020346 Polyglutamic Acid Chemical class 0.000 description 1
- 102000003946 Prolactin Human genes 0.000 description 1
- 108010057464 Prolactin Proteins 0.000 description 1
- OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N Propanedioic acid Natural products OC(=O)CC(O)=O OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 description 1
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 description 1
- 238000012300 Sequence Analysis Methods 0.000 description 1
- IDCKUIWEIZYVSO-WFBYXXMGSA-N Ser-Ala-Trp Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)CO)C)C(O)=O)=CNC2=C1 IDCKUIWEIZYVSO-WFBYXXMGSA-N 0.000 description 1
- SMIDBHKWSYUBRZ-ACZMJKKPSA-N Ser-Glu-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O SMIDBHKWSYUBRZ-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- HZNFKPJCGZXKIC-DCAQKATOSA-N Ser-His-Met Chemical compound CSCC[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CN=CN1)NC(=O)[C@H](CO)N HZNFKPJCGZXKIC-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- AABIBDJHSKIMJK-FXQIFTODSA-N Ser-Ser-Met Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(O)=O AABIBDJHSKIMJK-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- JGUWRQWULDWNCM-FXQIFTODSA-N Ser-Val-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O JGUWRQWULDWNCM-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000692 Student's t-test Methods 0.000 description 1
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N Succinic acid Natural products OC(=O)CCC(O)=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010006785 Taq Polymerase Proteins 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N Tartaric acid Natural products [H+].[H+].[O-]C(=O)C(O)C(O)C([O-])=O FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AIISTODACBDQLW-WDSOQIARSA-N Trp-Leu-Arg Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(O)=O)=CNC2=C1 AIISTODACBDQLW-WDSOQIARSA-N 0.000 description 1
- QPOUERMDWKKZEG-HJPIBITLSA-N Tyr-Ser-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 QPOUERMDWKKZEG-HJPIBITLSA-N 0.000 description 1
- RKIGNDAHUOOIMJ-BQFCYCMXSA-N Val-Glu-Trp Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)C(C)C)C(O)=O)=CNC2=C1 RKIGNDAHUOOIMJ-BQFCYCMXSA-N 0.000 description 1
- 238000002441 X-ray diffraction Methods 0.000 description 1
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LJOOWESTVASNOG-UFJKPHDISA-N [(1s,3r,4ar,7s,8s,8as)-3-hydroxy-8-[2-[(4r)-4-hydroxy-6-oxooxan-2-yl]ethyl]-7-methyl-1,2,3,4,4a,7,8,8a-octahydronaphthalen-1-yl] (2s)-2-methylbutanoate Chemical compound C([C@H]1[C@@H](C)C=C[C@H]2C[C@@H](O)C[C@@H]([C@H]12)OC(=O)[C@@H](C)CC)CC1C[C@@H](O)CC(=O)O1 LJOOWESTVASNOG-UFJKPHDISA-N 0.000 description 1
- SPXSEZMVRJLHQG-XMMPIXPASA-N [(2R)-1-[[4-[(3-phenylmethoxyphenoxy)methyl]phenyl]methyl]pyrrolidin-2-yl]methanol Chemical compound C(C1=CC=CC=C1)OC=1C=C(OCC2=CC=C(CN3[C@H](CCC3)CO)C=C2)C=CC=1 SPXSEZMVRJLHQG-XMMPIXPASA-N 0.000 description 1
- LNUFLCYMSVYYNW-ZPJMAFJPSA-N [(2r,3r,4s,5r,6r)-2-[(2r,3r,4s,5r,6r)-6-[(2r,3r,4s,5r,6r)-6-[(2r,3r,4s,5r,6r)-6-[[(3s,5s,8r,9s,10s,13r,14s,17r)-10,13-dimethyl-17-[(2r)-6-methylheptan-2-yl]-2,3,4,5,6,7,8,9,11,12,14,15,16,17-tetradecahydro-1h-cyclopenta[a]phenanthren-3-yl]oxy]-4,5-disulfo Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](COS(O)(=O)=O)O[C@@H]([C@@H]([C@H]1OS(O)(=O)=O)OS(O)(=O)=O)O[C@@H]1[C@@H](COS(O)(=O)=O)O[C@@H]([C@@H]([C@H]1OS(O)(=O)=O)OS(O)(=O)=O)O[C@@H]1[C@@H](COS(O)(=O)=O)O[C@H]([C@@H]([C@H]1OS(O)(=O)=O)OS(O)(=O)=O)O[C@@H]1C[C@@H]2CC[C@H]3[C@@H]4CC[C@@H]([C@]4(CC[C@@H]3[C@@]2(C)CC1)C)[C@H](C)CCCC(C)C)[C@H]1O[C@H](COS(O)(=O)=O)[C@@H](OS(O)(=O)=O)[C@H](OS(O)(=O)=O)[C@H]1OS(O)(=O)=O LNUFLCYMSVYYNW-ZPJMAFJPSA-N 0.000 description 1
- PSLUFJFHTBIXMW-WYEYVKMPSA-N [(3r,4ar,5s,6s,6as,10s,10ar,10bs)-3-ethenyl-10,10b-dihydroxy-3,4a,7,7,10a-pentamethyl-1-oxo-6-(2-pyridin-2-ylethylcarbamoyloxy)-5,6,6a,8,9,10-hexahydro-2h-benzo[f]chromen-5-yl] acetate Chemical compound O([C@@H]1[C@@H]([C@]2(O[C@](C)(CC(=O)[C@]2(O)[C@@]2(C)[C@@H](O)CCC(C)(C)[C@@H]21)C=C)C)OC(=O)C)C(=O)NCCC1=CC=CC=N1 PSLUFJFHTBIXMW-WYEYVKMPSA-N 0.000 description 1
- SMNRFWMNPDABKZ-WVALLCKVSA-N [[(2R,3S,4R,5S)-5-(2,6-dioxo-3H-pyridin-3-yl)-3,4-dihydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl] [[[(2R,3S,4S,5R,6R)-4-fluoro-3,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxy-hydroxyphosphoryl]oxy-hydroxyphosphoryl] hydrogen phosphate Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](OP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(=O)OC[C@H]2O[C@H]([C@H](O)[C@@H]2O)C2C=CC(=O)NC2=O)[C@H](O)[C@@H](F)[C@@H]1O SMNRFWMNPDABKZ-WVALLCKVSA-N 0.000 description 1
- 125000002777 acetyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-N acrylic acid group Chemical group C(C=C)(=O)O NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000010933 acylation Effects 0.000 description 1
- 238000005917 acylation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000003044 adaptive effect Effects 0.000 description 1
- 238000005273 aeration Methods 0.000 description 1
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 1
- 108010047495 alanylglycine Proteins 0.000 description 1
- 108010087924 alanylproline Proteins 0.000 description 1
- 201000007930 alcohol dependence Diseases 0.000 description 1
- 239000000783 alginic acid Chemical class 0.000 description 1
- 229920000615 alginic acid Chemical class 0.000 description 1
- 235000010443 alginic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229960001126 alginic acid Drugs 0.000 description 1
- 150000004781 alginic acids Chemical class 0.000 description 1
- 125000001931 aliphatic group Chemical group 0.000 description 1
- KOSRFJWDECSPRO-UHFFFAOYSA-N alpha-L-glutamyl-L-glutamic acid Natural products OC(=O)CCC(N)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(O)=O KOSRFJWDECSPRO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BJEPYKJPYRNKOW-UHFFFAOYSA-N alpha-hydroxysuccinic acid Natural products OC(=O)C(O)CC(O)=O BJEPYKJPYRNKOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052782 aluminium Inorganic materials 0.000 description 1
- XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N aluminium Chemical compound [Al] XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 231100000540 amenorrhea Toxicity 0.000 description 1
- 238000012197 amplification kit Methods 0.000 description 1
- 150000008064 anhydrides Chemical class 0.000 description 1
- 239000003957 anion exchange resin Substances 0.000 description 1
- 208000022531 anorexia Diseases 0.000 description 1
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 description 1
- 230000000692 anti-sense effect Effects 0.000 description 1
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 108010013835 arginine glutamate Proteins 0.000 description 1
- 108010018691 arginyl-threonyl-arginine Proteins 0.000 description 1
- 108010062796 arginyllysine Proteins 0.000 description 1
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011668 ascorbic acid Chemical class 0.000 description 1
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 description 1
- XRWSZZJLZRKHHD-WVWIJVSJSA-N asunaprevir Chemical compound O=C([C@@H]1C[C@H](CN1C(=O)[C@@H](NC(=O)OC(C)(C)C)C(C)(C)C)OC1=NC=C(C2=CC=C(Cl)C=C21)OC)N[C@]1(C(=O)NS(=O)(=O)C2CC2)C[C@H]1C=C XRWSZZJLZRKHHD-WVWIJVSJSA-N 0.000 description 1
- 229910052788 barium Inorganic materials 0.000 description 1
- DSAJWYNOEDNPEQ-UHFFFAOYSA-N barium atom Chemical compound [Ba] DSAJWYNOEDNPEQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000010233 benzoic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229960004365 benzoic acid Drugs 0.000 description 1
- WGNZRLMOMHJUSP-UHFFFAOYSA-N benzotriazol-1-yloxy(tripyrrolidin-1-yl)phosphanium Chemical compound C1CCCN1[P+](N1CCCC1)(N1CCCC1)ON1C2=CC=CC=C2N=N1 WGNZRLMOMHJUSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001797 benzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 230000002146 bilateral effect Effects 0.000 description 1
- 239000003833 bile salt Substances 0.000 description 1
- 229940093761 bile salts Drugs 0.000 description 1
- 230000008827 biological function Effects 0.000 description 1
- 229910052797 bismuth Inorganic materials 0.000 description 1
- JCXGWMGPZLAOME-UHFFFAOYSA-N bismuth atom Chemical compound [Bi] JCXGWMGPZLAOME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000004663 bisphosphonates Chemical class 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 238000006664 bond formation reaction Methods 0.000 description 1
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 1
- 230000010072 bone remodeling Effects 0.000 description 1
- 108700027323 bovine parathyroid hormone Proteins 0.000 description 1
- 108700003690 bovine parathyroid hormone (1-34) Proteins 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- KDYFGRWQOYBRFD-NUQCWPJISA-N butanedioic acid Chemical compound O[14C](=O)CC[14C](O)=O KDYFGRWQOYBRFD-NUQCWPJISA-N 0.000 description 1
- 230000001275 ca(2+)-mobilization Effects 0.000 description 1
- 229910052793 cadmium Inorganic materials 0.000 description 1
- BDOSMKKIYDKNTQ-UHFFFAOYSA-N cadmium atom Chemical compound [Cd] BDOSMKKIYDKNTQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052792 caesium Inorganic materials 0.000 description 1
- GMRQFYUYWCNGIN-NKMMMXOESA-N calcitriol Chemical compound C1(/[C@@H]2CC[C@@H]([C@]2(CCC1)C)[C@@H](CCCC(C)(C)O)C)=C\C=C1\C[C@@H](O)C[C@H](O)C1=C GMRQFYUYWCNGIN-NKMMMXOESA-N 0.000 description 1
- 229960005084 calcitriol Drugs 0.000 description 1
- 235000020964 calcitriol Nutrition 0.000 description 1
- 239000011612 calcitriol Substances 0.000 description 1
- CJZGTCYPCWQAJB-UHFFFAOYSA-L calcium stearate Chemical compound [Ca+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O CJZGTCYPCWQAJB-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 235000013539 calcium stearate Nutrition 0.000 description 1
- 239000008116 calcium stearate Substances 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 150000001718 carbodiimides Chemical class 0.000 description 1
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 1
- 239000001768 carboxy methyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010948 carboxy methyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 239000008112 carboxymethyl-cellulose Substances 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 description 1
- 230000024245 cell differentiation Effects 0.000 description 1
- 239000013592 cell lysate Substances 0.000 description 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 1
- 229920001429 chelating resin Polymers 0.000 description 1
- RUDATBOHQWOJDD-BSWAIDMHSA-N chenodeoxycholic acid Chemical compound C([C@H]1C[C@H]2O)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(O)=O)C)[C@@]2(C)CC1 RUDATBOHQWOJDD-BSWAIDMHSA-N 0.000 description 1
- 229960001091 chenodeoxycholic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 1
- 238000011210 chromatographic step Methods 0.000 description 1
- 238000002983 circular dichroism Methods 0.000 description 1
- 238000005352 clarification Methods 0.000 description 1
- 229920006026 co-polymeric resin Polymers 0.000 description 1
- 229910017052 cobalt Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010941 cobalt Substances 0.000 description 1
- GUTLYIVDDKVIGB-UHFFFAOYSA-N cobalt atom Chemical compound [Co] GUTLYIVDDKVIGB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 1
- 239000002131 composite material Substances 0.000 description 1
- 229940125773 compound 10 Drugs 0.000 description 1
- 229940125797 compound 12 Drugs 0.000 description 1
- 229940126543 compound 14 Drugs 0.000 description 1
- 229940125758 compound 15 Drugs 0.000 description 1
- 229940126142 compound 16 Drugs 0.000 description 1
- 229940125782 compound 2 Drugs 0.000 description 1
- 229940126208 compound 22 Drugs 0.000 description 1
- 229940125833 compound 23 Drugs 0.000 description 1
- 229940125961 compound 24 Drugs 0.000 description 1
- 229940125846 compound 25 Drugs 0.000 description 1
- 229940127204 compound 29 Drugs 0.000 description 1
- 229940125877 compound 31 Drugs 0.000 description 1
- 229940125878 compound 36 Drugs 0.000 description 1
- 229940125807 compound 37 Drugs 0.000 description 1
- 229940127573 compound 38 Drugs 0.000 description 1
- 229940125844 compound 46 Drugs 0.000 description 1
- 229940127271 compound 49 Drugs 0.000 description 1
- 229940125898 compound 5 Drugs 0.000 description 1
- 229940126545 compound 53 Drugs 0.000 description 1
- 229940125900 compound 59 Drugs 0.000 description 1
- 238000009833 condensation Methods 0.000 description 1
- 230000005494 condensation Effects 0.000 description 1
- 239000000599 controlled substance Substances 0.000 description 1
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010949 copper Substances 0.000 description 1
- 239000003246 corticosteroid Substances 0.000 description 1
- 229960001334 corticosteroids Drugs 0.000 description 1
- 239000007822 coupling agent Substances 0.000 description 1
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 1
- 229940097362 cyclodextrins Drugs 0.000 description 1
- 125000000113 cyclohexyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])C1([H])[H] 0.000 description 1
- 125000001511 cyclopentyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C1([H])[H] 0.000 description 1
- 206010061428 decreased appetite Diseases 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 229960002997 dehydrocholic acid Drugs 0.000 description 1
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 1
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 1
- 229960003964 deoxycholic acid Drugs 0.000 description 1
- KXGVEGMKQFWNSR-LLQZFEROSA-N deoxycholic acid Chemical compound C([C@H]1CC2)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(O)=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 KXGVEGMKQFWNSR-LLQZFEROSA-N 0.000 description 1
- KXGVEGMKQFWNSR-UHFFFAOYSA-N deoxycholic acid Natural products C1CC2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(CCC(O)=O)C)C1(C)C(O)C2 KXGVEGMKQFWNSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007933 dermal patch Substances 0.000 description 1
- 238000013461 design Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 230000003467 diminishing effect Effects 0.000 description 1
- ZZVUWRFHKOJYTH-UHFFFAOYSA-N diphenhydramine Chemical group C=1C=CC=CC=1C(OCCN(C)C)C1=CC=CC=C1 ZZVUWRFHKOJYTH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MGHPNCMVUAKAIE-UHFFFAOYSA-N diphenylmethanamine Chemical compound C=1C=CC=CC=1C(N)C1=CC=CC=C1 MGHPNCMVUAKAIE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 239000006196 drop Substances 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- 229940011871 estrogen Drugs 0.000 description 1
- 239000000262 estrogen Substances 0.000 description 1
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 1
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 1
- 210000003722 extracellular fluid Anatomy 0.000 description 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 1
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 1
- 238000001917 fluorescence detection Methods 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 239000001530 fumaric acid Substances 0.000 description 1
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 1
- LRBQNJMCXXYXIU-QWKBTXIPSA-N gallotannic acid Chemical class OC1=C(O)C(O)=CC(C(=O)OC=2C(=C(O)C=C(C=2)C(=O)OC[C@H]2[C@@H]([C@@H](OC(=O)C=3C=C(OC(=O)C=4C=C(O)C(O)=C(O)C=4)C(O)=C(O)C=3)[C@H](OC(=O)C=3C=C(OC(=O)C=4C=C(O)C(O)=C(O)C=4)C(O)=C(O)C=3)[C@@H](OC(=O)C=3C=C(OC(=O)C=4C=C(O)C(O)=C(O)C=4)C(O)=C(O)C=3)O2)OC(=O)C=2C=C(OC(=O)C=3C=C(O)C(O)=C(O)C=3)C(O)=C(O)C=2)O)=C1 LRBQNJMCXXYXIU-QWKBTXIPSA-N 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 239000000174 gluconic acid Substances 0.000 description 1
- 235000012208 gluconic acid Nutrition 0.000 description 1
- 108010055341 glutamyl-glutamic acid Proteins 0.000 description 1
- WVULKSPCQVQLCU-BUXLTGKBSA-N glycodeoxycholic acid Chemical compound C([C@H]1CC2)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(=O)NCC(O)=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 WVULKSPCQVQLCU-BUXLTGKBSA-N 0.000 description 1
- XBGGUPMXALFZOT-UHFFFAOYSA-N glycyl-L-tyrosine hemihydrate Natural products NCC(=O)NC(C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 XBGGUPMXALFZOT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010087823 glycyltyrosine Proteins 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 229940093915 gynecological organic acid Drugs 0.000 description 1
- 238000000703 high-speed centrifugation Methods 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000004124 hock Anatomy 0.000 description 1
- 230000003054 hormonal effect Effects 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 102000058004 human PTH Human genes 0.000 description 1
- 125000004356 hydroxy functional group Chemical group O* 0.000 description 1
- 230000000148 hypercalcaemia Effects 0.000 description 1
- 208000031424 hyperprolactinemia Diseases 0.000 description 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 1
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 1
- 239000007972 injectable composition Substances 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 1
- 238000005342 ion exchange Methods 0.000 description 1
- 238000004255 ion exchange chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 125000001449 isopropyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- ZLVXBBHTMQJRSX-VMGNSXQWSA-N jdtic Chemical compound C1([C@]2(C)CCN(C[C@@H]2C)C[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@@H]2NCC3=CC(O)=CC=C3C2)=CC=CC(O)=C1 ZLVXBBHTMQJRSX-VMGNSXQWSA-N 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 description 1
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- SRCAXTIBNLIRHU-JJKPAIEPSA-N lantibiotic pep5 Chemical compound N([C@@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@H](CS)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N\C(=C/C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N\C(=C/C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N\C(=C(/C)S)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O)C(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)CNC(=O)[C@H](C)NC(=O)C(=O)CC SRCAXTIBNLIRHU-JJKPAIEPSA-N 0.000 description 1
- 108010000761 leucylarginine Proteins 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 1
- 239000006193 liquid solution Substances 0.000 description 1
- 239000006194 liquid suspension Substances 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 108010064235 lysylglycine Proteins 0.000 description 1
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 1
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N maleic acid Chemical compound OC(=O)\C=C/C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N 0.000 description 1
- 239000011976 maleic acid Substances 0.000 description 1
- 239000001630 malic acid Substances 0.000 description 1
- 235000011090 malic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229940099690 malic acid Drugs 0.000 description 1
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000005906 menstruation Effects 0.000 description 1
- 230000036630 mental development Effects 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 238000006140 methanolysis reaction Methods 0.000 description 1
- ZBELDPMWYXDLNY-UHFFFAOYSA-N methyl 9-(4-bromo-2-fluoroanilino)-[1,3]thiazolo[5,4-f]quinazoline-2-carboximidate Chemical compound C12=C3SC(C(=N)OC)=NC3=CC=C2N=CN=C1NC1=CC=C(Br)C=C1F ZBELDPMWYXDLNY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000693 micelle Substances 0.000 description 1
- 239000003094 microcapsule Substances 0.000 description 1
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 description 1
- YCJZWBZJSYLMPB-UHFFFAOYSA-N n-(2-chloropyrimidin-4-yl)-2,5-dimethyl-1-phenylimidazole-4-carboxamide Chemical compound CC=1N(C=2C=CC=CC=2)C(C)=NC=1C(=O)NC1=CC=NC(Cl)=N1 YCJZWBZJSYLMPB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YZMHQCWXYHARLS-UHFFFAOYSA-N naphthalene-1,2-disulfonic acid Chemical class C1=CC=CC2=C(S(O)(=O)=O)C(S(=O)(=O)O)=CC=C21 YZMHQCWXYHARLS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PSZYNBSKGUBXEH-UHFFFAOYSA-N naphthalene-1-sulfonic acid Chemical class C1=CC=C2C(S(=O)(=O)O)=CC=CC2=C1 PSZYNBSKGUBXEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000002790 naphthalenes Chemical class 0.000 description 1
- 210000002850 nasal mucosa Anatomy 0.000 description 1
- IOMMMLWIABWRKL-WUTDNEBXSA-N nazartinib Chemical compound C1N(C(=O)/C=C/CN(C)C)CCCC[C@H]1N1C2=C(Cl)C=CC=C2N=C1NC(=O)C1=CC=NC(C)=C1 IOMMMLWIABWRKL-WUTDNEBXSA-N 0.000 description 1
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 1
- 229910052759 nickel Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910017604 nitric acid Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940054441 o-phthalaldehyde Drugs 0.000 description 1
- 125000002347 octyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 1
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 1
- 229940046166 oligodeoxynucleotide Drugs 0.000 description 1
- PIDFDZJZLOTZTM-KHVQSSSXSA-N ombitasvir Chemical compound COC(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)NC1=CC=C([C@H]2N([C@@H](CC2)C=2C=CC(NC(=O)[C@H]3N(CCC3)C(=O)[C@@H](NC(=O)OC)C(C)C)=CC=2)C=2C=CC(=CC=2)C(C)(C)C)C=C1 PIDFDZJZLOTZTM-KHVQSSSXSA-N 0.000 description 1
- 238000001543 one-way ANOVA Methods 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 1
- 150000002892 organic cations Chemical class 0.000 description 1
- 230000003204 osmotic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001582 osteoblastic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001009 osteoporotic effect Effects 0.000 description 1
- 238000013021 overheating Methods 0.000 description 1
- 235000006408 oxalic acid Nutrition 0.000 description 1
- 150000002923 oximes Chemical class 0.000 description 1
- 125000005740 oxycarbonyl group Chemical group [*:1]OC([*:2])=O 0.000 description 1
- WLJNZVDCPSBLRP-UHFFFAOYSA-N pamoic acid Chemical class C1=CC=C2C(CC=3C4=CC=CC=C4C=C(C=3O)C(=O)O)=C(O)C(C(O)=O)=CC2=C1 WLJNZVDCPSBLRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 1
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 108010073025 phenylalanylphenylalanine Proteins 0.000 description 1
- UYWQUFXKFGHYNT-UHFFFAOYSA-N phenylmethyl ester of formic acid Natural products O=COCC1=CC=CC=C1 UYWQUFXKFGHYNT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 229940085991 phosphate ion Drugs 0.000 description 1
- ZWLUXSQADUDCSB-UHFFFAOYSA-N phthalaldehyde Chemical compound O=CC1=CC=CC=C1C=O ZWLUXSQADUDCSB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000004962 physiological condition Effects 0.000 description 1
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 1
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 1
- 239000002798 polar solvent Substances 0.000 description 1
- 229920001515 polyalkylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 239000010318 polygalacturonic acid Chemical class 0.000 description 1
- 229920002643 polyglutamic acid Chemical class 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 230000000750 progressive effect Effects 0.000 description 1
- 229940097325 prolactin Drugs 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 1
- GRJJQCWNZGRKAU-UHFFFAOYSA-N pyridin-1-ium;fluoride Chemical compound F.C1=CC=NC=C1 GRJJQCWNZGRKAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 1
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 125000000467 secondary amino group Chemical group [H]N([*:1])[*:2] 0.000 description 1
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 238000004904 shortening Methods 0.000 description 1
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 1
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000010898 silica gel chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 238000013223 sprague-dawley female rat Methods 0.000 description 1
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 1
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 1
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 1
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 238000013268 sustained release Methods 0.000 description 1
- 238000012353 t test Methods 0.000 description 1
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 1
- 229920002258 tannic acid Chemical class 0.000 description 1
- 235000015523 tannic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229940033123 tannic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000011975 tartaric acid Substances 0.000 description 1
- 235000002906 tartaric acid Nutrition 0.000 description 1
- 101150075675 tatC gene Proteins 0.000 description 1
- 125000000999 tert-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- ILMRJRBKQSSXGY-UHFFFAOYSA-N tert-butyl(dimethyl)silicon Chemical group C[Si](C)C(C)(C)C ILMRJRBKQSSXGY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QEMXHQIAXOOASZ-UHFFFAOYSA-N tetramethylammonium Chemical compound C[N+](C)(C)C QEMXHQIAXOOASZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 230000002103 transcriptional effect Effects 0.000 description 1
- 238000005809 transesterification reaction Methods 0.000 description 1
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-O triethylammonium ion Chemical compound CC[NH+](CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- 238000006227 trimethylsilylation reaction Methods 0.000 description 1
- 125000002221 trityl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C1C([*])(C1=C(C(=C(C(=C1[H])[H])[H])[H])[H])C1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C1[H] 0.000 description 1
- 101150044170 trpE gene Proteins 0.000 description 1
- 230000010245 tubular reabsorption Effects 0.000 description 1
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 1
- 239000004474 valine Substances 0.000 description 1
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 1
- 101150099695 vps11 gene Proteins 0.000 description 1
- 239000003643 water by type Substances 0.000 description 1
- 210000000707 wrist Anatomy 0.000 description 1
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011701 zinc Substances 0.000 description 1
- MJIBOYFUEIDNPI-HBNMXAOGSA-L zinc 5-[2,3-dihydroxy-5-[(2R,3R,4S,5R,6S)-4,5,6-tris[[3,4-dihydroxy-5-(3,4,5-trihydroxybenzoyl)oxybenzoyl]oxy]-2-[[3,4-dihydroxy-5-(3,4,5-trihydroxybenzoyl)oxybenzoyl]oxymethyl]oxan-3-yl]oxycarbonylphenoxy]carbonyl-3-hydroxybenzene-1,2-diolate Chemical class [Zn++].Oc1cc(cc(O)c1O)C(=O)Oc1cc(cc(O)c1O)C(=O)OC[C@H]1O[C@@H](OC(=O)c2cc(O)c(O)c(OC(=O)c3cc(O)c(O)c(O)c3)c2)[C@H](OC(=O)c2cc(O)c(O)c(OC(=O)c3cc(O)c(O)c(O)c3)c2)[C@@H](OC(=O)c2cc(O)c(O)c(OC(=O)c3cc(O)c(O)c(O)c3)c2)[C@@H]1OC(=O)c1cc(O)c(O)c(OC(=O)c2cc(O)c([O-])c([O-])c2)c1 MJIBOYFUEIDNPI-HBNMXAOGSA-L 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
- A61K9/0043—Nose
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
- A61P19/10—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease for osteoporosis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/575—Hormones
- C07K14/635—Parathyroid hormone, i.e. parathormone; Parathyroid hormone-related peptides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/28—Steroids, e.g. cholesterol, bile acids or glycyrrhetinic acid
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
- A61K47/36—Polysaccharides; Derivatives thereof, e.g. gums, starch, alginate, dextrin, hyaluronic acid, chitosan, inulin, agar or pectin
- A61K47/40—Cyclodextrins; Derivatives thereof
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2319/00—Fusion polypeptide
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Physical Education & Sports Medicine (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Zoology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Otolaryngology (AREA)
- Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
- Obesity (AREA)
- Hematology (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Immunology (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Superconductors And Manufacturing Methods Therefor (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
Description
A találmány a parathormon és a parathormonnal rokon pepiid új analógjaira, szilárd fázisú és rekombináns technikákkal történő szintézisükre, valamint emlősök csonttömegének gyarapításában való alkalmazásukra vonatkozik.
A csontritkulás (osteoporosis) az anyagcsere-eredetű csontbetegségek legáltalánosabb formája, s a csontleépülés (osteopenia) tüneti, töréses stádiumával jellemezhető. Bár a csontritkulás számos betegség következtében másodlagosan is előfordulhat, az esetek 90%ában elsődleges. A klimax utáni életszakaszban lévő nők az elsődleges csontritkulást (posztklimakteriális vagy I. típusú csontritkulás) illetően különösen veszélyeztelettek. Az elsődleges csontritkulást illetően veszélyeztetett másik csoportot - nemtől függetlenül - az idősek képezik (öregkori vagy Π. típusú csontritkulás). A csontritkulás kapcsolatban állhat a kortikoszteroidok alkalmazásával, mozgásképtelenséggel vagy hosszú ideig tartó ágyhoz kötöttséggel, alkoholizmussal, cukorbetegséggel. emelkedett prolaktinszinttel (hyperprolactinaemia), idegi eredetű étvágytalansággal, a menstruáció elsődleges vagy másodlagos elmaradásával (amenorrhoea) és a petefészek eltávolításával (oophorectomia).
A csontritkulás különöző formáiban a mechanikai gyengeséget eredményező csontleépülés miatt csonttörések gyakran előfordulnak. A posztklimakteriális csontritkulás a csukló és a gerinc töréseivel jellemezhető. míg az öregkori csontritkulás esetén a nyaktörés fordul elő leggyakrabban.
Úgy tartják, a csontritkulásban szenvedőkben a csontleépülés mechanizmusa a csontváz önmegújítási folyamatának egyensúlyzavarával áll kapcsolatban. Ezt a folyamatot csontátépítésnek nevezték el, amely több különálló, a működést hordozó üregben zajlik. Ezek az üregek a csont alapállományában egy adott felületen, a csontfelszívódás helyszíneként spontán jelennek meg. Az oszteoklasztok (csontfaló v. csontfelszívó sejtek) felelősek az időátlagban állandó alakú csont egyes részeinek felszívódásáért. Ezt a felszívódási folyamatot az oszteoblasztok (csontképző sejtek) megjelenése köveú, amelyek az oszteoklaszlok állal kialakított üregeket új csontszövettel töltik ki.
Egészséges felnőttben az oszteoklaszlok és oszteoblasztok oly módon alakulnak ki, hogy a csontképződés és a csontfelszívódás egyensúlyban marad. A csontritkulásban szenvedőkben a csontátépítés folyamatának egyensúlya eltolódik, ami azt eredményezi, hogy a csont gyorsabban szívódik fel, mint ahogy felépül. Annak ellenére, hogy ez az egyensúlyzavar az életkor előrehaladtával bizonyos mértékben a legtöbb embernél előfordul, a posztklimakterikus csontritkulásban szenvedőknél ez fiatalabb életkorban, és sokkal súlyosabb mértékben fordul elő.
A csontritkulás kezelésére számos kísérlet történt, amelyek egyrészt arra irányultak, hogy lassítsák a csont további leépülését, másrészt - ami sokkal kívánatosabb -, hogy a csont tömegének tiszta gyarapodását érjék el. Bizonyos anyagokról, mint az ösztrogén és a bifoszfonátok, úgy tűnik, lassítják a csontritkulásban szenvedő betegek csontjának további leépülését. A csontleépülést lassító anyagok a csontfelszívódás és a csontképződés eltérő időtartama miatt növelhetik a csont tömegét (3-7%-os nagyságrendben). Ez a látszólagos növekedés azonban időben korlátozott, nem előrehaladó, s az úgynevezett „csontátépítési tér csökkenéséhez vezet. Ráadásul, a felszívódás és a képződés közötti szoros kapcsoltság miatt, a csontfelszívódást gátló kezelések végeredményben a csontképződést is gátolják.
Felvetették azt a lehetőséget, hogy a parathormonnal (PTH) végzett kezelés a csontátépülési ciklus serkentését és pozitív kalciumegyensúlyt eredményezne. Humán klinikai kísérletekkel azonban kimutatták, hogy a trabekuláris csont mindenféle növekedését a kortikális (corticalis) réteg csökkenése követi, s így a teljes csontot tekintve nincs nettó gyarapodás.
Hefti és mtsi (Clinical Science, 62, 389-396, 1982) arról számoltak be, hogy akár a bPTH(l-84), akár a hPTH(l-34) naponkénti szubkután adagolása mind a normális, mind a csontritkulásban szenvedő nőstény patkányokban növelte az egyes csontok összes kálcium- és hamutömegét.
Liu és mtsi (J. Boné Miner. Rés., 6:10, 1071-1080, 1991) leírták, hogy kifejlett nőstény patkányok petefészkének eltávolítása a tibia proximális metafízisében a trabekuláris csontszövet arányának 47%-os csökkenését eredményezte, amit az oszteoblasztok és trabekuláris oszteoklaszlok számának jelentős gyarapodása követett. AhPTH(l-34) naponkénti szubkután injektálása a trabekuláris csont leépülését teljes mértékben megfordította, s olyan mértékű gyarapodást eredményezett, hogy a trabekuláris csont mennyisége meghaladta a látszatkezelt kontroliban tapasztalhatóét. Az oszteoblasztok száma nőtt, az oszteoklasztoké csökkent.
Hock és mtsi (J. Boné Miner. Rés., 7:1,65-71, 1992) leírták, hogy egészséges, kifejlett hím patkányokat 12 napig naponta hPTH(l-34) szubkután injektálással kezelve a trabekuláris és kortikális csont kalcium- és száraztömege nőtt. Növekedett a teljes csonttömeg, a trabekuláris csont térfogata, a gerendák (trabekulák) falvastagsága és száma, valamint az oszteoblasztos felületek nagysága.
Az emlős parathormonok, például a humán (hPTH), a szarvasmarha (bPTH) és a sertés (pPTH) parathormonok 84 aminosavból álló egyszálú polipeptid-láncok, melyeknek molekulatömege hozzávetőleg 9500. A biológiai aktivitás az N-terminális résszel, az 1-34. aminosavakkal kapcsolatos, melyekről úgy tűnik, az aktivitáshoz minimálisan szükséges szakaszt képviselik.
A humán PTH N-terminális szegmense a szarvasmarha és a sertés hormon N-terminális szegmensétől csak három, illetve két aminósavban különbözik:
hPTH (1-34) :
Ser Val Ser Glu Ile Gin Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu 15 10 15
HU 211 348 A9
Asn Val | Ser His | Met Asn | Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg | Lys | Lys | Leu | Gin | Asp 30 | ||
Phe | 20 (1. | 25 számú szekvencia); | ||||||||
bPTH(l- | 34) : | |||||||||
Ala | Val | Ser | Glu | He | Gin Leu Met His Asn | Leu | Gly | Lys | His | Leu |
1 | 5 | 10 | 15 | |||||||
Ser | Ser | Met | Glu | Arg | Val Glu Trp Leu Arg | Lys | Lys | Leu | Gin | Asp |
20 | 25 | 30 | ||||||||
Val | His | Asn | Phe | (2. | számú szekvencia); |
pPTH[l-34):
Ser | Val | Ser | Glu | He | Gin Leu Met His Asn | Leu | Gly | Lys | His | Leu |
1 | 5 | 10 | 15 | |||||||
Ser | Ser | Leu | Glu | Arg | Val Glu Trp Leu Arg | Lys | Lys | Leu | Gin | Asp |
20 | 25 | 30 | ||||||||
Val | His | Asn | Phe | (3. | számú szekvencia); |
A ΡΤΉ elsődleges funkciója azoknak az adaptív változásoknak a kiváltása, amelyek arra szolgálnak, 20 hogy az extracelluláris folyadékban fenntartsák a Ca2+ állandó koncentrációját. A PTH hat a vesére, növelve a Ca2+ vizeletből történő tubuláris reabszorpcióját, valamint serkentve a kalciferdiol kalcitriollá való átalakulását. amely a Ca2+ belekből történő abszorpciójáért 25 felelős. A PTH egyik kiemelkedő hatása a csontokból történő Ca2+-mobilizáció. A PTH növeli a csont kalcium- és foszfátion-visszaszívásának arányát, továbbá serkenti az oszteoklasztok által megvalósuló csontfelszívódás arányát, növeli a mezenchima-sejtek oszteok- 30 lasztokká differenciálódásának arányát, s meghosszabbítja ezen utóbbi sejtek felezési idejét. A PTH tartós működésével nő a csontképző oszteoblasztok száma is, így fokozódik a csontátépülés körfolyamatának mértéke. A különálló oszteoblasztok azonban kevésbé mutatkoznak aktívnak, mint a normálisak.
Rosenblatt és mtsi (4 423 037, 4 968 669 és 5 001 223 számú Amerikai Egyesült Államok-beli szabadalmi leírások) a PTH N-terminális (1-6) aminosavainak deléciójával, és a Phe 7, Met8· 18 és Gly12 szelektív helyettesítésével előállított PTH-antagonistákat írtak le. A Try34-NH2 beépítése a leírás szerint növelte ezen vegyületek aktivitását és stabilitását.
A parathormon rokon peptid (PTHrp) - egy 140+ aminosavas peptid - valamint annak fragmensei a PTH fő biológiai működéseit mutatják. A PTHrp-t számos humán és állati tumor- és egyéb szövet feldolgozza, s szerepet játszhat a rosszindulatú hiperkalcémia (emelkedett vérkalcium szint) kialakulásában. AhPTHrp (134) szekvenciája a következő:
Ala Val Ser Glu His Gin Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser lle 15 10 15
Gin Asp Leu Arg Arg Arg Phe Phe Leu His His Leu lle Ala Glu
25 30 lle His Thr Ala (4. számú szekvencia);
A hPTH és a hPTH-rp közötti szekvencia-homológia nagyrészt a 13 N-termimális aminosavra korlátozódik, melyek közül 8 azonos; a hPTH 25-től 34. aminosavig terjedő receptorkötő régiójában 10 aminosav közül csak egy konzerválódik a hPTHrp-ben. A konformációbeli hasonlóság szolgálhat a közös aktivitás alapjául. Cohen és mtsi. (7. Bioi. Chem., 266:3, 1997-2004, 1991) arra következtettek, hogy a PTH(l-34) és PTHrp(l-34) szekvenciájának nagy része, különösen az 5-18. aminosavból, illetve a 21-34. aminosavból álló régiók alfahelikális konfigurációt vesznek fel. Megjegyezték, hogy vannak bizonyos problémák annak eldöntését illetően, hogy ez a konfiguráció fiziológiai körülmények között a karboxi-terminális végre jellemző-e. Az ilyen másodlagos szerkezet fontos lehet a lipid- és receptor-kölcsönhatásokban, és/vagy a szerkezet stabilizálásában.
PTH és PTHrp analógokat szintetizáltunk azzal a céllal, hogy tökéletesített gyógyszereket fejlesszünk ki a csont tömegének fenntartására emlősökben, beleértve a csontritkulásban szenvedőket is.
A találmány a parathormon (PTH), parathormonnal rokon peptid (PTHrp), valamint a PTH és PTHrp fiziológiailag aktív, rövidített homológjainak és analógjainak szintetikus polipeptid analógjaira, valamint azok sóira vonatkozik, melyben a 22-31. aminosav gyökök amfipatikus alfa-hélixet képeznek, s az említett 22-31. aminosavak hidrofil aminosavak (Haa) és lipofil aminosavak (Laa) közül valók, amelyek az alábbi sorrendben rendeződnek el:
Haa (Laa Laa Haa Haa)2 Laa.
Ha e szekvencia specifikus, valóságos példáit inszertáljuk a PTH-ba, a PTHrp-be, valamint ezek fiziológiailag aktív, rövidített analógjaiba és homológjaiba, eredményül hatékony csontátépítési szerként alkalmazható polipeptideket kapunk.
Ilyenformán, egyik vonatkozásban a találmány tárgya a PTH és a PTHrp, valamint a PTH és a PTHrp
HU 211 348 A9 fiziológiailag aktív, rövidített analógjainak és homológjainak analógjai, melyekben a 22-31. aminosavak amfipatikus alfa-hélixet képeznek, s ezen aminosavak az alábbi szekvenciák szerint rendeződhetnek el:
a) Xaa1 Xaa2 Leu Xaa4 Xaa5 Leu Xaa7
5
Xaa8 Xaa9 Xaa10 ahol Xaa1 és Xaa4 jelentése - egymástól függetlenül Glu, Glu(OCHj), His vagy Phe;
Xaa2 jelentése Leu v. Phe;
Xaa5 jelentése Lys v. His;
Xaa7 és Xaa’°jelentése, egymástól függetlenül, Leu v. He;
Xaa8 jelentése Ala, Arg v. Glu; és
Xaa9 jelentése Lys v. Glu (85. számú szekvencia); előnyösen:
Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Xaa Lys Leu;
5 10, ahol
Xaa jelentése Glu vagy Arg (26. számú szekvencia); b) Xaa1 Xaa2 Leu Xaa4 Arg Leu Leu
5
Xaa8 Arg Leu; ahol
10,
Xaa1 és Xaa4 jelentése - egymástól függetlenül - Glu, Glu(OCHj), His vagy Phe;
Xaa2 jelentése Leu v. Phe;
Xaa3 jelentése Glu, Lys v. Lys (COCHjPEGX) [PEGX = poli(etilén-glikol-metil-éter)-gyök, melynek molekulatömege 100-10 000] (86. számú szekvencia); előnyösen:
Glu Leu Leu Glu Arg Leu Leu Xaa Arg Leu;
1 5 10 ahol
Xaa jelentése Glu, Lys v. Lys (COCHjPEGX) [PEGX = poli(etilén-glikol-metil-éter)-gyök, melynek molekulatömege 100-10 000] (27. szá20 mú szekvencia);
c) | Ala 1 | Leu | Ala | Glu | Ala 5 | Leu | Ala | Glu | Ala | Leu 10 | (28. | SZ . | szekv |
d) | Ser 1 | Leu | Leu | Ser | Ser 5 | Leu | Leu | Ser | Ser | Leu 10 | (29. | sz . | szekv |
e) | Ala 1 | Phe | Tyr | Asp | Lys 5 | Val | Ala | Glu | Lys | Leu 10 | (30. | sz. | szekv |
A találmány másik tárgya a PTH és PTHrp, valamint a PTH és PTHrp fiziológiailag aktív, rövidített homológjainak és analógjainak analógjai, illetve azok sói. melyekben a 22-31. aminosavak amfipatikus alfa30 hélixet képeznek, s ezen aminosavak szekvenciáit az alábbi szekvenciák közül választjuk ki:
a) Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Xaa Lys Leu; ahol
5 10
Xaa jelentése Glu v. Arg. (26. számú szekvencia);
b) Glu Leu Leu Glu Arg Leu Leu Xaa Arg Leu; ahol
10
Xaa jelentése Glu. Lys v. Lys (COCH2PEGX) [PEGX = poli(etilén-glikol-metil-éter)-gyök, melynek molekulatömege 100-10 000] (27. számú szekvencia);
c) | Ala | Leu | Ala | Glu Ala | Leu | Ala | Glu | Ala | Leu | (28 . | SZ . | szekv |
1 | 5 | 10 | ||||||||||
d) | Ser | Leu | Leu | Ser Ser | Leu | Leu | Ser | Ser | Leu | (29 . | sz. | szekv |
1 | 5 | 10 | ||||||||||
e) | Ala | Phe | Tyr | Asp Lys | Val | Ala | Glu | Lys | Leu | (30. | sz. | szekv |
1 | 5 | 10 |
A találmány további tárgya gyógyszerkészítmények a csont tömegének csökkenésével jellemezhető betegségek megelőzésére vagy kezelésére, melyek gyógyszerészetileg megfelelő hordozóval együtt a csontok tömegének növeléséhez hatásos mennyiségben tartalmazzák a parathormon (PTH), a parathormonnal rokon peptid (PTHrp), és a PTH és PTHrp fiziológiailag aktív, rövidített homológjainak és analógjainak polipeptid-analógját, valamint annak sóit, melyben a 22-31. aminosav gyökök amfipatikus alfa-hélixet képeznek, s a hidrofil aminosavak (Haa) és lipofil aminosavak (Laa) közül kiválasztott 22-31. aminosavak melyek az alábbi sorrendben rendeződnek el: Haa (Laa Laa Haa Haa)2 Laa. A találmány további tárgyas eljárások gyógyszerkészítmények előállítására, melyek során a fentebb leírt vegyületeket gyógyszerészetileg megfelelő hordozóval elegyítjük.
A találmány további tárgya eljárások a csont tömegének csökkenésével jellemezhető emlős betegségek kezelésére, melyek során a rászoruló emlősnek a csont
HU 211 348 A9 tömegének növeléséhez hatásos mennyiségben a PTH, PTHrp, vagy a PTH, illetve PTHrp fiziológiailag aktív, rövidített homológjának vagy analógjának polipeptidanalógját vagy annak sóját adjuk, amelyben a 22-31. aminosavak amfipatikus alfa-hélixet képeznek, és ezek az aminosavak hidrofil aminosavak (Haa) és a lipofil aminosavak (Laa) közül valók, melyek az alábbi sorrendben rendeződnek el: Haa (Laa Laa Haa Haa)2 Laa.
A találmány tárgya közelebbről eljárások a csont tömegének csökkenésével jellemezhető emlős betegségek kezelésére, melyek során a rászoruló emlősnek a csont tömegének növeléséhez hatásos mennyiségben a PTH, PTHrp, vagy a PTH, illetve PTHrp fiziológiailag aktív, rövidített homológjának vagy analógjának polipeptidanalógját vagy annak sóját adjuk, amelyben a 22-31. aminosavak amfipatikus alfa-hélixet képeznek, és ezen aminosavaknak megfelelő szekvenciát a 26., 27., 28., 29. és 30. számú szekvencia közül választjuk ki.
A találmány további tárgya eljárások a PTH, PTHrp, a PTH, illetve PTHrp fiziológiailag aktív, rövidített homológjainak vagy analógjainak polipeptid-analógjainak (melyekben a 22-31. aminosavak amfipatikus alfa-hélixet képeznek, és ezek az aminosavak hidrofil aminosavak (Haa) és lipofil aminosavak (Laa) közül valók, melyek a Haa (Laa Laa Haa Haa)2 Laa sorrendben rendeződnek el) és azok sóinak szilárd fázisú szintézisére, melyek során a védett (védőcsoportal ellátott) aminosavakat egymás után megfelelő gyanta hordozóhoz kapcsoljuk, az oldallánc: és N“-védőcsoportokat eltávolítjuk, s a peptidet lehasítjuk a gyantáról.
A találmány további tárgya eljárások a PTH, PTHrp, a PTH, illetve PTHrp fiziológiailag aktív, rövidített homológjainak vagy analógjainak polipeptidanalógjainak (amelyekben a 22-31. aminosavak amfipatikus alfa-hélixet képeznek, és ezen aminosavaknak megfelelő szekvenciát a 26., 27., 28., 29. és 30. számú szekvencia közül választjuk ki) és azok sóinak szilárd fázisú szintézisére, melyek során a védett aminosavakat egymás után megfelelő gyanta hordozóhoz kapcsoljuk, az oldallánc- és N°-védőcsoportokat eltávolítjuk, s a peptidet lehasítjuk a gyantáról.
A találmány további tárgya eljárások a PTH, PTHrp, vagy a PTH, illetve PTHrp fiziológiailag aktív, rövidített homológjai vagy analógjai polipeptid-analógjainak (melyekben a 22-31. amiosavak amfipatikus alfa-hélixet képeznek, és ezek az aminosavak hidrofil aminosavak (Haa) és lipofil aminosavak (Laa) közül valók, melyek a Haa (Laa Laa Haa Haa)2 Laa sorrendben rendeződnek el), és azok sóinak rekombináns szintézisére.
A találmány további tárgya az említett peptid-analógok rekombináns szintéziséhez alkalmazható DNS-szekvenciák, vektorok és plazmidok. Közelebbről, a találmány tárgya e vonatkozásban a PTH, PTHrp, vagy a PTH, illetve PTHrp fiziológiailag aktív, rövidített homológjainak vagy analógjainak polipeptid-analógjainak (amelyekben a 22-31. aminosavak amfipatikus alfa-hélixet képeznek, és ezen aminosavaknak megfelelő szekvenciát a 26., 27., 28., 29. és 30. számú szekvencia közül választjuk ki) és azok sóinak rekombináns szintéziséhez alkalmazható DNS-szekvenciák, vektorok és plazmidok.
Az ábrák rövid leírása Az 1.
ábrán a találmány szerinti PTHrp(l-34) analógot kódoló szintetikus gén nukleotid-szekvenciáját és restrikciós enzimes hasítási helyeit mutatjuk be (hPTH PCR-amplikáció).
A 2. ábrán vázlatosan mutatjuk be a PTHrp(l-34)-analóg génjét magában foglaló plazmid [Trp LE 18 hPTHrp( 1-34)1 konstrukció] előállítását.
A 3. ábrán vázlatosan mutatjuk be a PTHrp(l-34)-analóg génjének két magában foglaló plazmid [Trp LE 18 hPTHrp(l-34)2 konstrukció] előállítását.
A 4. ábrán vázlatosan mutatjuk be a PTHrp(l-34)-analóg génjének négy példányát magában foglaló plazmid [Trp LE 18 hPTHrp(l-34)4 konstrukció] előállítását.
Találmányunk leírásában a különböző, általános nukleotidok és aminosavak- egy; és hárombetűs rövidítéseit a Pure Appl. Chem., 31, 639-645 (1972) és 40, 277-290 (1974) ajánlása szerint, valamint a 37 CFR 1.822 paragrafusnak (55 FR 18245, 1990. 05. 01.) és a PCT törvényeknek (W1P0 Standard ST. 23: Recommendationfor the Presentation of Nucleotide and Amino Arid Sequences in Patent Applications and in Published Patent Documents) elegei téve használjuk. Az egy- és hárombetűs rövidítések a következők:
Aminosav rövidítések
Aminosav | Hárombetűs | Egybetűs |
Alanin | Alá | A |
Arginin | Arg | R |
Aszparagin | Asn | N |
Aszparaginsav | Asp | D |
Asn+Asp | Asx | B |
Cisztein | cys | C |
Glutamin | Gin | Q |
Glutaminsav | Glu | E |
Gln+Glu | Glx | Z |
Glicin | Gly | G |
Hisztidin | His | H |
Izoleucin | Ile | I |
Leucin | Leu | L |
Lizin | Lys | K |
Metionin | Met | M |
Fenilalanin | Phe | F |
Prolin | Pro | P |
Szerin | Ser | s |
Treonin | Thr | T |
Triptofán | Trp | w |
Tirozin | Tyr | Y |
Valin | Val | V |
Egyéb aminosav | Xaa | X |
HU 211 348 A9
A rövidítések, ha másképpen nem jelöljük (pl. D- v. D, L-), L-aminosavakat jelölnek. Bizonyos természetes vagy nem természetes aminosavak akrilálisak, mint pl. a glicin. Valamennyi peptid szekvenciáját úgy mutatjuk be, hogy az N-terminális aminosavak a bal oldalon, a C-terminális aminosavak a jobb oldalon helyezkednek el.
A találmányban használt egyéb aminosavak és vegyületek rövidítései a következők: hSer homoszerin hSerlac homoszerin-lakton Nle norleucin
PEG2 dietilén-glikol-meíil-éter-győk; metoxi-di(etilénoxi)-CH3O(CH2CH2O)2-,(M= 119)
PEG5000 poli(etilén-glikol-metil-éter)-gyök; metoxipoli(etilénoxi)-CH3O(CH2CH2O)i 10-, (átlagos M = 5000);
PEGX poli(etilén-glikol-metil-éter)-gyök;
CH3O(CH2Cri2O)„-, n = 2-225 (átl. M = 100-10 000) A „hidrofil aminosav (Haa)’’ kifejezés olyan aminosavra vonatkozik, amely a peptidkötés kialakításához szükséges csoportokon kívül legalább egy hidrofil funkciócsoporttal rendelkezik; ilyen az arginin, az aszparagin, az aszparaginsav, a glutaminsav, a glutamin, a hisztadin, a lizin, a szerin, a treonin és homológjaik.
A „lipofil aminosav (Laa)” kifejezés töltés nélküli, alifás vagy aromás aminosavra vonatkozik, mint amilyen az izoleucin, a leucin, a metionin, a fenilalanin, a triptofán, a tirozin, a valin és homológjaik.
A találmány céljait illetően az alanint „amfifil” aminosavként soroljuk be, azaz olyan aminosavként, amely hidrofil és lipofil módon is képes működni.
A „PTH vagy PTHrp fiziológiailag aktív, rövidített homológja és analógja” kifejezés olyan polipeptidre vonatkozik, amely a PTH vagy PTHrp teljes szekvenciájában található aminosavak számának kevesebb aminosavból álló szekvenciát tartalmaz, miközben hasonló fiziológiai reakciót mutat. A rövidített PTH-nak vagy PTHrp-nek nem szükséges a PTH-val vagy a PTHrp-vel teljesen homológnak lenni ahhoz, hogy hasonló fiziológiai reakciót mutasson. E csoport előnyben részesített, de nem kizárólagos képviselője a PTH( 1 -34) és a PTHrp( 1 -34).
Az „amfipatikus alfa-hélix” kifejezés olyan, bizonyos polipeptidekre jellemző másodlagos szerkezetre vonatkozik, amelyben az aminosavak alfa-helikális konfigurációt vesznek fel, mely a hélix hosszanti tengelye mentén elhelyezkedő, egymással szemben álló poláris és apoláris oldalakkal rendelkezik. Egy adott polipeptidben az alfa-helikális szerkezet létezésének lehetősége bizonyos mértékig kimutatható a helix megfelelő magasságában ún. „Schiffer-Edmundson kerék” kialakításával (M. Schiffer és A. B. Edmundson, Biophys. J„ 7, 121, 1967), s a hélixet körülvevő henger szemközti oldalain a hidrofil és lipofil gyökök elkülönülésének megfigyelésével. Más módon, egy adott polipeptidben az alfa-helikális régió jelenlétére empirikus bizonyítékokat szerezhetünk, például cirkuláris dikroizmus vagy röntgensugárzás diffrakció adatok alapján. Az ideális alfa-hélix menetenként 3,6 aminosavból áll, s a szomszédos oldalláncok 100“-os körívenként különülnek el. Eisenberg és mtsi (Natúré. 299, 371-374, 1982; Proc. Nat. Acad. Sci. USA, 81, 140-144, 1984) az amfipatikus hélixek kvantitatív jellemzéséhez a hidrofóbitási skálát a helikális körrel kombinálták. Az átlagos hidrofóbitási momentum (definíciója szerint): a hélixet felépítő aminosavak hidrofóbitásának vektorösszege. A következőkben Eisenberg (1984) által leírt aminosav hidrofóbitási értékeket adunk meg („konszenzus” skála).
Ile: 0,73; Phe: 0,61; Val: 0,54; Leu: 0,53; Trp: 0,37; Met: 0,26; Alá: 0,25; Gly: 0,16; Cys: 0,04; Tyr: 0,02; Pro: -0,07; Thr: -0,18; Ser: -0,26; His: -0,40; Glu: -0,62; Asn: -0,64; Gin: -0,69; Asp: -0,72; Lys: -1,10; Arg:-1,76.
A menetenként 3,6 gyököt (illetve az oldalláncok között 100‘-os körívet [36073,6]) tartalmazó ideális alfa-hélix hidrofóbitási momentuma (μΗ) a következő összefüggés szerint számítható:
μΗ = [(ZHNsin5(N-l))2+(ZHNcosö(N-l))2]l/2 melyben HN az N-edik aminosav hidrofóbitási értéke, az összegzések (Σ) pedig a hélix szekvenciájában az egymást 100-onként (delta szög) követő N számú aminosavakra vonatkoznak. A hidrofóbitási momentum az aminosav-gyökönkénti átlagos hidrofóbitási momentumként (<μΗ>) is kifejezhető, Ebben az esetben <μΗ> = Hh/N· l00°±20’ delta szögnél a 0,20 vagy annál nagyobb <Ph> értékből amfipatikus hélix kialakulására következtethetünk. A hPTHrp (22-31) és hPTH(22-31) esetében 100” delta szögnél a <μΗ> értéke 0,19, illetve 0,37.
Comett és mtsi (J. Mól. Bioi., 195, 659-685,1987) az „amfipatikus index” bevezetésével - melyből következtetni lehet az amfipatikus tulajdonságra - kiterjesztették az amfipatikus alfa-hélixek vizsgálatát. Megállapították. hogy az ismert alfa-hélixeknek hozzávetőleg a fele amfipatikus, és az aminosavak ismétlődése inkább 97,5’-onként, mint 100“-onként tapasztalható, miközben az aminosav-gyökök menetenkénti száma közelebb van a 3,7-hez, mint a 3,6-hoz. Bár az ilyen pontosítások tudományosan érdekesek, Eisenberg és mtsi. alapul szolgáló megközelítése megfelelő egy adott szekvencia amfipatikus tulajdonságának eldöntéséhez, különösen, ha egy szekvenciából ab initio szándékozunk amfipatikus alfa-hélixet kialakítani.
Egy nem természetes, amfipatikus alfa-helikális aminosav-szekvencia nem feltétlenül homológ a természetesen előforduló polipeptid megfelelő szakaszával, de fiziológiai környezetben hasonló másodlagos szerkezettel (pl. poláris és apoláris szemközti oldalakkal rendelkező amfipatikus alfa-hélix) rendelkezik. A természetesen előforduló aminosav-szekvencia módosított szekvenciával történő helyettesítése előnyösen befolyásolhatja az eredeti polipeptid fiziológiai aktivitását, stabilitását vagy más tulajdonságát. Az ilyen szekvenciák tervezéséhez és kiválasztásához Krstenansky és mtsi (FEBS Letters, 242:2, 409-413, 1989) és J. P. Segrest és mtsi (Proteins: Structure, Function, and Genetics, 8, 103, 117, 1990) írtak le útmutatást.
A találmány szerinti, tíz aminosavból álló amfipatikus alfa-hélix a következő képlettel írható le:
HU 211 348 A9
Haa (Laa Laa Haa Haa)2 Laa;
melyben a Haa aminosavak hidrofil aminosavak közül, az Laa aminosavak pedig lipofil aminosavak közül valók (amelyeket fentebb definiáltunk). Ideális alfa-hélixet feltételezve, az 1., 4., 5., 8. és 9. gyök a hélix ,,A” oldalán, 140’-os körív mentén helyezkedik el, míg a 2., 3., 6., 7. és 10. gyökök a hélix szemközti „B” oldalának 140°-os körívét foglalják el. Az egyik oldalon elhelyezkedő gyökök előnyösen egymással azonos polaritással rendelkeznek, míg a szemközti oldal gyökei ellentétes polaritásúak; azaz, ha az A oldal teljesen hidrofil, a B oldal teljesen lipofil, és fordítva. A szakemberek észre fogják venni, hogy a találmány szerinti hélixek leírására használt
Haa (Laa Laa Haa Haa)2 Laa szekvenciával ellenkező aminosav-sorrendű Laa (Haa Haa Laa Laa)2 Haa szekvencia szintén megfelel a gyökmegoszlás kritériumainak. s egyenértékű leírását adja a találmány szerinti alfa-hélixeknek.
Az alanin egyaránt helyettesítheti a hidrofil vagy a lipofil aminosavakat, mivel az amfipatikus alfa-hélix bármelyik oldalán elhelyezkedhet, bár az Ala|0 nem képez amfipatikus alfa-hélixet. A prolint, ciszteint és a tirozint általában nem alkalmazzuk; ezen aminosavak és más véletlenszerű hibák (pl. hidrofil gyök a lipofil oldalon) előfordulása azonban megengedhető, mindaddig. míg a szegmensen belüli többi aminosav megfelelően alkalmazkodik a hidrofil oldal - lipofil oldal elrendeződéshez. A fentebb meghatározott hidrofóbitási momentum kiszámításával könnyen meghatározhatjuk, hogy egy szekvencia megfelelő mértékben amfipatikus-e ahhoz, hogy a találmány szerinti szekvenciának minősíthessük. Ha az aminosav-gyökönkénti maximális momentum 100‘±20° értéknél kb. 0,20 fölött van, úgy a szekvencia amfipatikus hélixet alakít ki, s megfelel a találmány céljainak.
Például, a 26. számú szekvencia (Xaa = Glu) gyökönkénti átlagos hidrofóbitási momentuma (]00°-nál) a következők szerint számítható ki:
Aminosav | — ΗΝδ(Ν-1) | H sin6 (N-l) | H cosö (N-l) | |
E | -0,62 | 0 | 0 | -0,62 |
L | 0,53 | 100 | 0,52 | -0,17 |
L | 0,53 | 200 | -0,18 | -0,50 |
E | -0,62 | 300 | 0,34 | -0,31 |
K | -1,1 | 400 | -0,70 | -0,85 |
L | 0,53 | 500 | 0,34 | -0,41 |
L | 0,53 | 600 | -0,46 | -0,27 |
E | -0,62 | 700 | 0,21 | -0,58 |
K -1.1 | 800 | -1,08 | -0,19 | |
L | 0,53 | 900 | 0 | -0,53 |
Σ = 0,8Ι | Σ = 4,43 |
μΗ = l(0.8Jr-h(-4.43)'],z! =4,50 <μΗ> = 4.5000 = 0.45
E szekvencia esetén a maximális átlagos hidrofóbitási momentum 92°-nál tapasztalható, s értéke 0,48.
Ennek az elméletnek a parathormon és a parathormonnal rokon peptid esetében való alkalmazását illetően, feltételeztük, hogy a (7-16) és (22-31) régió valamelyike (vagy mindkettő) alfa-helikális másodlagos szerkezettel rendelkezik, s hasonló szerkezeti tulajdonságokkal rendelkező, nem homológ szekvenciával helyettesítető anélkül, hogy a biológiai aktivitás, illetve immunreakciót indukáló képesség csökkenne.
A találmány egyik tárgya a ΡΊΉ, PTHrp, valamint a PTH és PTHrp fiziológiailag aktív, rövidített analógjainak és homológjainak (vagy ezek sóinak) analógjai, melyekben a 22-31. aminosavak amfipatikus alfa-hélixet képeznek, s ezen aminosavak (22-31.) szekvenciáját a következő szekvenciák közül választjuk ki:
a) Xaa1 Xaa2 Leu Xaa4 Xaa5 Leu Xaa7
5
Xaa8 Xaa9 Xaa10 ahol 10,
Xaa1 és Xaa4 jelentése - egymástól függetlenül - Glu,
Glu(OCH3), His vagy Phe;
Xaa2 jelentése Leu v. Phe;
Xaa5 jelentése Lys v. His;
Xaa7 és Xaa10 jelentése - egymástól függetlenül - Leu v. Ile;
Xaa8 jelentése Alá, Arg v. Glu;
és Xaa9 jelentése Lys v. Glu (85. számú szekvencia); előnyösen:
Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Xaa Lys Leu 1 5 10, ahol Xaa jelentése Glu vagy Arg (26. számú szekvencia);
b) Xaa1 Xaa2 Leu Xaa4 Arg Leu Leu
5
Xaa8 Arg Leu; ahol 10,
Xaa1 és Xaa4 jelentése - egymástól függetlenül - Glu,
Glu(OCH3), His vagy Phe;
Xaa2 jelentése Leu v. Phe;
Xaa3 jelentése Glu, Lys v. Lys (COCH2PEGX) [PEGX = poli(etilén-glikol-metil-éter)-gyök, melynek molekulatömege 100-10 000] (86. számú szekvencia); előnyösen;
Glu Leu Leu Glu Arg Leu Leu Xaa Arg Leu; 15 10 ahol
Xaa jelentése Glu, Lys v. Lys (COCH2PEGX) [PEGX = poli(etilén-glikol-metil-éter)-gyök, melynek molekulatömege 100-10 000] (27. számú szekvencia);
c) Alá Leu Alá Glu Alá Leu Alá Glu
5
Alá Leu (28. sz. szekv.);
d) Ser Leu Leu Ser Ser Leu Leu Ser
5
Ser Leu (29. sz. szekv.);
HU 211 348 A9
e) Alá Phe Tyr Asp Lys Val Alá Glu 1 5
Lys Leu (30. sz. szekv.);
Egy másik vonatkozásban a találmány tárgya a PTH, PTHrp, valamint a ΡΤΉ, és PTHrp fiziológiailag aktív, rövidített analógjainak és homológjainak, illetve ezek sóinak analógjai, melyek a következő képlettel írhatók le:
Xaa1 Xaa2 Xaa3 Xaa4 Xaa5 Xaa6 Xaa7 Leu His Xaa10 Xaa11 Gly Xaa13 Ser Ile Gin Xaa17 Leu Xaa19 Xaa20 Xaa21 Xaa22'31 Xaa32 Xaa33 Xaa34 Xaa35 Xaa36
Xaa·37 Xaa38 Term.; melyben Xaa1: hiányzik vagy Alá;
Xaa2: hiányzik vagy Val;
Xaa3: hiányzik vagy Ser;
Xaa4: hiányzik vagy Glu v. Glu (OCH3);
Xaa5: hiányzik vagy His v. Alá;
Xaa6: hiányzik vagy Gin;
Xaa7: hiányzik vagy Leu;
Xaa10 és Xaa17 (egymástól függetlenül): Asp v. Asp (OCH,);
Xaa11: Lys, Arg v. Leu;
Xaa13: Lys, Arg, Tyr, Cys, Leu, [CH2CONH(CH2)2NH(biotinil)j-Cys, (7-dimetil-amino-2-oxo-2H-l-ben- 25 zopirán-4-acetil)-Lys v. (dihidrocinnamoil)-Lys;
Xaa20: Arg v. Leu;
Xaa19 és Xaa21 (egymástól függetlenül): Lys, Alá v.
Arg:
Xaa22'31: a 26.. 27., 28., 29. v. 30. számú szekvencia 30 valamelyike;
Xaa32: His, Pro v. Lys;
Xaa33: hiányzik vagy Pro, Thr, Glu v. Alá;
Xaa34: hiányzik vagy Pro, Arg. Met, Alá, hSer, hSerlakton, Tyr, Leu v. ] .4-diamino-butiril-laktám;
Xaa35: hiányzik vagy Pro, Glu, Ser Alá v. Gly;
Xaa36: hiányzik vagy Alá, Arg v. Ile;
Xaa37: hiányzik vagy Arg. Trp v. 3(2-naftil)-L-alanin;
Xaa38: hiányzik vagy Alá v. hSer; vagy Xaa38 42: Thr, Arg, Ser, Alá, Trp; és
Term.: OR v. NR2, melyekben R egymástól függetlenül lehet hidrogén, 1-4 szénatomos alkil- vagy fenil(Cj.4) alkilcsoport; valamint ezek gyógyszerészetileg megfelelő sói.
A találmány egy további tárgya az alábbi I. képlet szerinti, fiziológiailag aktív, rövidített hPTHrp(l-34) homológ: Alá Val Ser Glu Xaa5 Gin Leu His Asp Xaa
Gly Xaa13 Ser He Gin Asp Leu Xaa19 Arg Xaa21 Xaa22’ jelentése His v. Alá;
Xaa11 és Xaa13: (egymástól függetlenül) Lys, Arg v. Leu;
Xaa19 és Xaa21: (egymástól függetlenül) Alav. Arg; Xaa22-31 jelentése az alábbi szekvenciák valamelyike:
a) Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Xaa
5
Lys Leu; ahol 10,
Xaa jelentése Glu vagy Arg (26. számú szekvencia);
b) Glu Leu Leu Glu Arg Leu Leu Xaa
5
Arg Leu; ahol 10
Xaa jelentése Glu, Lys v, Lys (COCH2PEGX) [PEGX = poli(etilén-glikol-metil-éter)-gyök, melynek molekulatömege 100-10 000] (27. számú szekvencia);
c} | Alá Leu Alá Glu Alá | Leu Alá | Glu | |||
1 | 5 | |||||
Alá Leu | (28 | . sz. szekv, | . ) ; | |||
10 | ||||||
d) | Ser | Leu | Leu Ser Ser | Leu | Leu | Ser |
1 | 5 | |||||
Ser | Leu | (29 | . sz. szekv, | .) ; | ||
10 | ||||||
e) | Alá | Phe | Tyr Asp Lys | Val | Alá | Glu |
1 | 5 |
Lys Leu (30. sz. szekv.);
továbbá Xaa32: His v. Lys;
Xaa33: Thr, Glu v. Alá;
Xaa34: Alá, hSer, Tyr v. Leu; és Term.: Gly, Arg. Arg, lakton, OH vagy NR2 (melyben 35 mindkét R lehet H vagy 1—4 szénatomos alkilcsoport), továbbá gyógyszerészetileg megfelelő sóik (I. képlet).
A találmány közelebbi tárgyát azok az I. képlet szerinti polipeptidek képezik, melyekben az Xaa22'31 40 szekvencia a 26. számú szekvencia, melynek átlagos hidrofóbitási momentuma (<μΗ>) 100”-nál több, mint 0,45. A találmány még specifikusabb tárgyát azok az I. képlet szerinti polipeptidek képezik, melyekben az Xaa22-31 szekvencia a 26. számú szekvencia, és me45 lyekben Xaa11 és Xaa13 jelentése egyaránt Lys; továbbá Xaa19 és Xaa21 jelentése egyaránt Arg.
A jellemző polipeptidek közé tartoznak (nem kizárólagosan) az alábbi szekvenciák:
31 Xaa32 Xaa33 Xaa34 Term., melyben Xaa5
Alá | Val | Ser | Glu | His | Gin Leu Leu His Asp | Lys | Gly | Lys | Ser | Ile |
1 | 5 | 10 | 15 | |||||||
Gin | Asp | Leu | Arg | Arg | Arg Glu Leu Leu Glu | Lys | Leu | Leu | Glu | Lys |
20 | 25 | 30 | ||||||||
Leu | His | Thr | Alá | OH | (5. számú szekvencia) | |||||
Alá | Val | Ser | Glu | His | Gin Leu Leu His Asp | Lys | Gly | Lys | Ser | Ile |
1 | 5 | 10 | 15 | |||||||
Gin | Asp | Leu | Arg | Arg | Arg Glu Leu Leu Glu | Lys | Leu | Leu | Glu | Lys |
20 | 25 | 30 | ||||||||
Leu | His | Thr | Alá | OH | (6. számú szekvencia) |
HU 211 348 A9
Alá | Val | Ser | Glu | His | Gin | Leu | Leu | His | Asp | Lys | Gly | Lys | Ser | Ile |
1 | 5 | 10 | 15 | |||||||||||
Gin | Asp | Leu | Arg | Arg | Arg | Glu | Leu | Leu | Glu | Lys | Leu | Leu | Glu | Lys |
20 | 25 | 30 | ||||||||||||
Leu | His | Thr | Alá | nh2 | (7. | számú szekvencia); | ||||||||
Alá | Val | Ser | Glu | His | Gin | Leu | Leu | His | Asp | Lys | Gly | Lys | Ser | Ile |
1 | 5 | 10 | 15 | |||||||||||
Gin | Asp | Leu | Arg | Arg | Arg | Glu | Leu | Leu | Glu | Lys | Leu | Leu | Glu | Lys |
20 | 25 | 30 | ||||||||||||
Leu | His | Thr | hSer NH2 | (8. | számú szekvencia); | |||||||||
Alá | Val | Ser | Glu | His | Gin | Leu | Leu | His | Asp | Lys | Gly | Lys | Ser | Ile |
1 | 5 | 10 | 15 | |||||||||||
Gin | Asp | Leu | Arg | Arg | Arg | Glu | Leu | Leu | Glu | Lys | Leu | Leu | Glu | Lys |
20 | 25 | 30 | ||||||||||||
Leu | His | Thr | hSer-lakton | (9. | számú szekvencia); | |||||||||
Alá | Val | Ser | Glu | His | Gin | Leu | Leu | His | Asp | Lys | Gly | Lys | Ser | Ile |
1 | 5 | 10 | 15 | |||||||||||
Gin | Asp | Leu | Arg | Arg | Arg | Glu | Leu | Leu | Glu | Lys | Leu | Leu | Glu | Lys |
20 | 25 | 30 | ||||||||||||
Leu | His | Thr | Alá | Gly | Arg | Arg | OH | (10. | számú szekvencia); | |||||
35 | ||||||||||||||
Alá | Val | Ser | Glu | His | Gin | Leu | Leu | His | Asp | Lys | Gly | Lys | Ser | Ile |
1 | 5 | 10 | 15 | |||||||||||
Gin | Asp | Leu | Arg | Arg | Arg | Glu | Leu | Leu | Glu | Lys | Leu | Leu | Glu | Lys |
20 | 25 | 30 | ||||||||||||
Leu | Lys | Glu | Leu | NH2 | (11. | számú szekvencia); |
A találmány egy másik tárgyát azok az I. képlet szerinti polipeptidek képezik, melyekben az Xaa22'31 szekvencia a 26. számú szekvencia, és melyekben
Xaa19 és Xaa21 egyikének jelentése Arg, míg a másiké Alá. Ezé alcsoport jellemző polipeptidjei közé tartoznak (nem kizárólagosan) az alábbi szekvenci-
Xaa' | 1 és | Xaa1· | 1 jelentése | egyaránt Lys; továbbá ák: | |||||
Alá | Val | Ser | Glu | His | Gin Leu Leu His Asp Lys | Gly | Lys | Ser | Ile |
1 | 5 | 10 | 15 | ||||||
Gin | Asp | Leu | Alá | Arg | Arg Glu Leu Leu Glu Lys | Leu | Leu | Glu | Lys |
20 | 25 | 30 | |||||||
Leu | His | Thr | Alá | NH2 | (12. számú szekvencia); | ||||
Alá | Val | Ser | Glu | His | Gin Leu Leu His Asp Lys | Gly | Lys | Ser | Ile |
1 | 5 | 10 | 15 | ||||||
Gin | Asp | Leu | Arg | Arg | Alá Glu Leu Leu Glu Lys | Leu | Leu | Glu | Lys |
20 | 25 | 30 | |||||||
Leu | His | Thr | Alá | NH2 | (13. számú szekvencia); |
A találmány egy másik tárgyát azok az I. képlet szerinti polipeptidek képezik, melyekben az Xaa22'31 45 szekvencia a 26. számú szekvencia, és melyekben az Xaa11 és az Xaa13 egyikének jelentése Leu, míg a
Alá | Val | Ser | Glu | Alá | Gin | Leu | Leu His Asp |
1 | 5 | 10 | |||||
Gin | Asp | Leu | Arg | Arg | Arg | Glu | Leu Leu Glu |
20 | 25 | ||||||
Leu | His | Alá | Leu | OH | (14. | számú szekvencia |
másik jelentése Lys; továbbá Xaa19 és Xaa21 jelentése egyaránt Arg. Ezen alcsoport jellemző polipeptidjei közé tartozik (nem kizárólagosan) az alábbi szekvencia:
Leu Gly Lys Ser Ile 15
Lys Leu Leu Glu Lys 30 ) ;
A találmány egy további tárgyát azok az I. képlet szerinti polipeptidek képezik, melyekben az Xaa22'31 szekvencia a 27. számú szekvencia, melynek átlagos hidrofóbitási momentuma (<μΗ>) 100°-nál több, mint 0,50.
A találmány egy további tárgyát azok az I. képlet szerinti polipeptidek képezik, melyekben az Xaa22'31 szekvencia a 27. számú szekvencia, és melyekben Xaa és Xaa13 jelentése egyaránt Lys vagy egyaránt Arg; továbbá Xaa19 és Xaa21 jelentése egyaránt Arg. Ezen alcsoport jellemző polipeptidjei közé tartoznak (nem kizárólagosan) az alábbi szekvenciák:
HU 211 348 A9
Alá | Val | Ser Glu His | Gin | Leu | Leu | His | Asp | Lys | Gly | Lys | Ser | Ile |
1 | 5 | 10 | 15 | |||||||||
Gin | Asp | Leu Arg Arg | Arg | Glu | Leu | Leu | Glu | Arg | Leu | Leu | Glu | Arg |
20 | 25 | 30 | ||||||||||
Leu | His | Thr Alá OH | (15. | számú szekvencia); | ||||||||
Alá | Val | Ser Glu His | Gin | Leu | Leu | His | Asp | Arg | Gly | Arg | Ser | Ile |
1 | 5 | 10 | 15 | |||||||||
Gin | Asp | Leu Arg Arg | Arg | Glu | Leu | Leu | Glu | Arg | Leu | Leu | Glu | Arg |
20 | 25 | 30 | ||||||||||
Leu | His | Thr Alá OH | (16. | számú szekvencia); | ||||||||
Alá | Val | Ser Glu His | Gin | Leu | Leu | His | Asp | Arg | Gly | Arg | Ser | Ile |
1 | 5 | 10 | 15 | |||||||||
Gin | Asp | Leu Arg Arg | Arg | Glu | Leu | Leu | Glu | Arg | Leu | Leu | Lys | Arg |
20 | 25 | 30 | ||||||||||
Leu | His | Thr Alá OH | (17 . | számú szekvencia); | ||||||||
Alá | Val | Ser Glu His | Gin | Leu | Leu | His | Asp | Arg | Gly | Arg | Ser | Ile |
1 | 5 | 10 | 15 | |||||||||
Gin | Asp | Leu Arg Arg | Arg | Glu | Leu | Leu | Glu | Arg | Leu | Leu | ||
20 | 25 | |||||||||||
Lys | (COCH2PEG2) Arg ο n | Leu | His | Thr | Alá | OH (18. | számú szekvencia | |||||
Alá | Val | Ser Glu His | Gin | Leu | Leu | His | Asp | Arg | Gly | Arg | Ser | Ile |
1 | 5 | 10 | 15 | |||||||||
Gin | Asp | Leu Arg Arg | Arg | Glu | Leu | Leu | Glu | Arg | Leu | Leu | ||
20 | 25 | |||||||||||
Lys | (CQCH2PEG5000) Arg Leu His Thr Alá OH (19. számú | sze | :kven |
A találmány egy további tárgyát azok az I. képlet hidrofóbitási momentuma (<μΗ>) 100'-nál körülbelül szerinti polipeptidek képezik, melyekben az Xaa22'31 30 0,25. Ezen alcsoport jellemző polipeptidjei közé tartószekvencia a 28. számú szekvencia, melynek átlagos zik (nem kizárólagosan) az alábbi szekvencia:
Alá | Val | Ser | Glu | His | Gin | Leu Leu His | Asp | Lys | Gly | Arg | Ser | Ile |
5 | 10 | 15 | ||||||||||
Gin | Asp | Leu | Arg | Arg | Arg | Alá Leu Alá | Glu | Alá | Leu | Alá | Glu | Alá |
20 | 25 | 30 | ||||||||||
Leu | His | Thr | Alá | NH2 | (20. | számú szekvenci | a) ; |
A találmány egy további tárgyát azok az I. képlet hidrofóbitási momentuma (<μΗ>) 100-nál körülbelül szerinti polipeptidek képezik, melyekben az Xaa22 ?l 40 0,28. Ezen alcsoport jellemző polipeptidjei közé tartószekvencia a 29. számú szekvencia, melynek átlagos zik (nem kizárólagosan) az alábbi szekvencia:
Alá | Val | Ser | Glu | His | Gin Leu Leu His Asp Lys | Gly | Lys | Ser | Ile |
1 | 5 | 10 | 15 | ||||||
Gin | Asp | Leu | Arg | Arg | Arg Ser Leu Leu Ser Ser | Leu | Leu | Ser | Ser |
20 | 25 | 30 | |||||||
Leu | His | Thr | Alá | nh2 | (21. számú szekvencia); |
A találmány egy további tárgyát azok az 1. képlet 50 hidrofóbitási momentuma (<μΗ>) 100°-nál körülbelül szerinti polipeptidek képezik, melyekben az Xaa22'31 0.29. Ezen alcsoport jellemző polipeptidjei közé tartószekvencia a 30. számú szekvencia, melynek átlagos zik (nem kizárólagosan) az alábbi szekvencia:
Alá | Val | Ser | Glu | His | Gin Leu Leu His Asp Lys | Gly | Lys | Ser | Ile |
1 | 5 | 10 | 15 | ||||||
Gin | Asp | Leu | Arg | Arg | Arg Alá Phe Tyr Asp Lys | Val | Alá | Glu | Lys |
20 | 25 | 30 | |||||||
Leu | His | Thr | Alá | nh2 | (22. számú szekvencia); |
HU 211 348 A9
A találmány további tárgyát képzeik a fiziológiailag aktív, rövidített bPTH(l-34) homológ II. képlet szerinti polipeptid analógjai:
Xaa1 Val Ser Glu He Gin Xaa7 Xaa8 His Asn Leu Gly Lys His Leu Xaa16 Ser Xaa18 Xaa19 Arg Xaa21 Xaa22·25 * * * * * 31 * His Asn Xaa34 Term.; melyben
Xaa! jelentése Ser v. Alá;
Xaa7 jelentése Leu v. Phe;
Xaa8 jelentése Met v. Nle;
Xaa16 jelentése Asn v. Ser;
Xaa18 jelentése Leu, Met v. Nle;
Alá | Val | Ser | Glu | Ile | Gin Phe Nle His | Asn | Leu | Gly | Lys | His | Leu |
1 | 5 | 10 | 15 | ||||||||
Ser | Ser | Nle | Glu | Arg | Val Glu Leu Leu | Glu | Lys | Leu | Leu | Glu | Lys |
20 | 25 | 30 | |||||||||
Leu | His | Asn | Tyr | nh2 | (23. számú szekvencia); | és | |||||
Alá | Val | Ser | Glu | Ile | Gin Phe Nle His | Asn | Leu | Gly | Lys | His | Leu |
1 | 5 | 10 | 15 | ||||||||
Ser | Ser | Nle | Arg | Arg | Arg Glu Leu Leu | Glu | Lys | Leu | Leu | Glu | Lys |
20 | 25 | 30 | |||||||||
Leu His Asn Tyr NH2 (24. | számú szekvencia). | Glu Lys Leu Leu Glt |
A találmány egy további tárgyaként, meglepő módon, azt találtuk, hogy a ΡΊΉ és PTHrp 34 aminosavnál kevesebb gyököt tartalmazó homológjai és analógjai szintén hatásos csontátépítési szerek. Ezek az alábbi általános képlettel írhatók le:
Alá Val Ser Glu Xaa5 Gin Leu Leu His Asp Xaa11 Gly Xaa13 Ser Ile Gin Asp Leu Xaa19 Arg Xaa21 Xaa22'31 Xaa33 Xaa34 Term.
A jellemző polipeptidek közé tartoznak (nem kizárólagosan) az alábbi szekvenciák:
41. vegyület: AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK LHP-NH2 (55. számú szekvencia)
Alá | Val | Ser | Glu | His | Gin | Leu | Leu | His |
1 | 5 | |||||||
Asp | Lys | Gly | Lys | Ser | Ile | |||
10 | 15 | |||||||
Gin | Asp | Leu | Arg | Arg | Arg | Glu | Leu | Leu |
20 | ||||||||
Glu | Lys | Leu | Leu | Glu | Lys |
30
Leu His Pro NH2 (55.számú szekvencia); és
Fizikai adatok:
O.p.: 142,8-166,1 ’C [a]g = -53,80 (c = 0,38,
H2O) FAB (C,7,H29jN55O49): [M+H]+ = 3929
AAA: Asx 2,0 (2) Glx 5,7 (6) Ser 1,8 (2)
His 3,0 (3) Gly 1,1 (1) Alá 0,9(1)
Arg 2,8 (3) Val 1,2(1) Ile 0,9(1) Leu 7,4 (8) Lys 4,4 (4) Pro 0,9 (1)
42. vegyület AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR
RELLEKLLEK LP-NH2 (56. számú szekvencia)
Alá | Val | Ser | Glu | His | Gin | Leu | Leu | His | 55 |
1 | 5 | ||||||||
Asp | Lys | Gly | Lys | Ser | Ile | ||||
10 | 15 | ||||||||
Gin | Asp | Leu | Arg | Arg | Arg | Glu | Leu | Leu | |
20 | 60 |
Xaa19 jelentése Glu v. Arg;
Xaa21 jelentése Val v. Arg;
Xaa22'31 jelentése a 26., 27., 28., 29. és 30. szekvenciák valamelyike;
Xaa34 jelentése Phe ν. Tyr;
Term. jelentése OH v. NR2 (melyben R jelentése H vagy 1-4 szénatomos alkilcsoport); továbbá ezek gyógyszerészetileg megfelelő sói. (Π. képlet).
A jellemző polipeptidek közé tartoznak (nem kizá10 rólagosan) az alábbi szekvenciák:
25 30
Leu Pro NH2 (56.számú szekvencia); és
Fizikai adatok:
O.p.: 161,0-177,0 C [cc]g = -61,97 (c = 0,19, H2O) FAB (Ο,^Η^ΝηΟ^): [M+H]+ = 3792,0
AAA: Asx 2,2 (2) Glx 5,9 (6) Ser 1,9 (2)
His2,1 (2) Gly 1,1 (1) Alá 1,0(1) Arg 3,0 (3) Val 1,1 (1) Ile 1,0(1) Leu 7,9 (8) Lys 4,3 (4) Pro 0,9 (1)
A szakemberek számára nyilvánvaló lesz, hogy számos megváltoztatott aminosav-sorrendű polipeptid szintetizálható, amelyek a leírt, kívánt tulajdonságokkal rendelkeznek, azzal a kikötéssel, hogy a 22-31. aminosavaknak megfelelő helyen egy olyan aminosavszekvencia helyezkedik el, melynek aminosav-gyökön40 kénti átlagos hidrofóbitási momentuma 100°±20‘-nál nagyobb, mint kb. 0,20.
A polipeptidek klasszikus szintézise A találmányunk szerinti polipeptidek olyan eljárá45 sokkal szintetizálhatók, mint amilyeneket (a szilárd fázisú szintézissel kapcsolatban) J. M. Stewart és J. D. Young (Solid Phase Synthesis, 2. kiadás, Perce Chemical Co., Rockford, Illinois, 1984) és J. Meinhofer (Hormonal Proteins and Peptides, 2. kötet, Academic Press,
New York, 1973), illetve - az oldatban végzett szintézissel kapcsolatban - E. Schröder és K. Lubke (The Peptides, 1. kötet, Academic Press, New York, 1965) írtak le.
Ezek az eljárások általában a védett aminosavak növekvő peptidlánchoz való egymás utáni hozzáadását foglalják magukban. Rendszerint az első aminosav aminovagy karboxilcsoportja, illetve a reaktív oldallánc-csoportok védettek, ezt a védett aminosavat inért szilárd hordozóhoz kapcsolják, vagy oldatban alkalmazzák, s a
HU 211 348 A9 aminosavat az amidkötés kialakításához alkalmas körülmények között adják az előző aminosavhoz. Miután valamennyi kívánt aminosavat a helyes sorrendben összekapcsolták, a védőcsoportokat és a szilárd hordozót eltávolítják, miáltal a nyers polipeptidet kapják. A végtermék előállításához a polipeptidet sótalanítják és tisztítják - lehetőleg kromatográfiás úton.
A negyven aminosavnál kevesebbet tartalmazó, fiziológiailag aktív, rövidített polipeptidek analógjainak előnyben részesített előállítási módja a szilárd fázisú peptidszintézis. Ebben az eljárásban az alfa-amino (N“) funkcióscsoportokat és valamennyi reaktív oldalláncot sav- vagy bázisérzékeny védőcsoportoknak a peptidkötés kialakításának körülményei között stabilnak kell lenni, s a meglévő polipeptid-lánc befolyásolása nélkül könnyen eltávolíthatónak is kell lenni. Az alkalmas alfa-amino védőcsoportok közé tartoznak (nem kizárólagosan) a í-butoxi-karbonil- (Boc), a benzil-oxi-karbonil (Cbz), az o-klór-benzoil-oxi-karbonil-, a bifenil-izopropil-oxi-karbonil-, a í-amiloxi-karbonil(Amoc). az izobomil-oxi-karbonil-, az alfa, alfa-dimetil-3.5-(dimetoxi)-benzil-oxi-karbonil-, az o-nitrofenilszulfenil-, a 2-ciano-r-butoxi-karbonil-, a 9-fluorenilmetoxi-karbonil- (Fmoc), és hasonló védőcsoportok, melyek közül a ?-butoxi-karbonilcsoport az előnyben részesített. Az alkalmas oldallánc védőcsoportok közé tartoznak (nem kizálólagosan) az acetil-, benzil- (Bzl), benzil-oxi-metil (Bőm), o-bróm-benzil-oxi-karbonil-, f-butil-, Ζ-butil-dimetil-szilil-, 2-klór-benzil- (Cl-z), 2,6-diklór-benzil-, ciklohexil-, ciklopentil-, izopropil-, pivalil, letrahidropirán-2-il-, lozil- (Tos), trimetil-szililés tritil-csoportok.
A szilárd fázisú szintézis során a C-terminális aminosavat először megfelelő gyanta hordozóhoz kapcsoljuk. A megfelelő gyanta hordozók olyan anyagok, amelyek a reagensekkel és a lépésenkénti kondenzációs és védőcsoportok eltávolítási körülményekkel szemben mertek, és az alkalmazott oldószerben nem oldódnak. A kereskedelmileg beszerezhető gyanták közé tartoznak a reaktív csoporttal módosított sztirol/divinil-benzol kopolimer gyanták, például a klórmetilezelt sztiroldivinilbenzol kopolimer, a hidroximetilezett sztirol-divinilbenzol kopolimer és hasonlók. A benzilezett, hidroximetilezett fenil-acetamidometil (PAM) gyanta az előnyben részesített. Ha a vegyület C-terminálisa egy amid. úgy az előnyben részesített gyanta a p-metilbenzhidril-amino-(sztirol-divinil-benzol) kopolimer.
Az aminosav PAM gyantához való kapcsolását az N“-védett aminosav (lehetőleg a Boc-aminosav) ammónium-, cézium-, trietil-ammónium-, 1,5-diaza-biciklo-[5.4.0]-undec-5-én-, tetrametil-ammónium- vagy hasonló sójának etanolban, acetonitrilben, N,N-dimetil-formamidban (DMF) és hasonlókban a gyantával végzett reakciójával valósítjuk meg. Előnyösen a cézium-sót reagáltatjuk DMF-ben a gyantával, emelt hőmérsékleten; például 40-60 ’C-on, lehetőleg 50 ’C-on, kb. 12-72 órán keresztül, lehetőleg kb. 48 óráig.
Az N“-Boc-aminosav például N.N’-diizopropilkarbodiimid (DIC/l-hidroxi-benzo-triazol (HOBt) közvetett kapcsolással erősíthető a benzhidril-gyantához, mely reakciót kb. 2 órától kb. 24 óráig teijedő ideig, előnyösen kb. két órán keresztül kb. 10 ’C-tól kb. 50 °C-ig terjedő hőmérsékleten, előnyösen 25 C-on. diklór-metán vagy dimetil-formamid oldószerben (lehetőleg diklór-metánban) végezzük.
A védett aminosavak egymás utáni összekapcsolása a tudományban jól ismert eljárásokkal végezhető, jellemzően automatizált peptid-szintetizátorban. Trietilaminnal vagy más, hasonló bázissal végzett semlegesítés után a védett aminosavakat előnyösen kb. 1,5-2,5szeres moláris feleslegben adjuk, s az összekapcsolást inért, nem vizes, poláris oldószerben pl. diklór-metánban, DMF-ben vagy ezek elegyében, előnyösen diklórmetánban, környezeti hőmérsékleten végezzük. A jellemző összekapcsolási szerek az N,N -diciklohexil-karbodiimid (DCC), az Ν,Ν'-diizopropil karbodiimid (DIC) és más karbodiimidek, akár önmagukban, akár 1-hidroxi-benzotriazol (HOBt), O-acil-karbamidok, benzotriazol-l-il-oxi-trisz-(pirrolidino)-foszfónium-h exa-fluoro-foszfát (PyBop), N-hidroxi-szukcinimid, egyéb N-hidroxi-imidek vagy oximok jelenlétében. Más lehetőség szerint a védett aminosav aktív észterei (pl. ρ-nitrofenil-, pentaíluor-fenil-észterek és hasonlók) vagy szimmetrikus anhidridek is alkalmazhatók.
A szilárd fázisú szintézis végén a teljesen védett peptidet eltávolítjuk a gyantáról. Ha a szilárd gyanta hordozóhoz való kötődés benzil-észter típusú, akkor az alkil-amid C-terminálissal rendelkező peptidek esetén a lehasítást alkil-aminnal vagy fluor-alkil-aminnal végzett aminolízissel, szubsztituálatlan amid C-terminálissal rendelkező peptidek esetében pedig ammónia/metanol vagy ammónia/etanol eleggyel végzett aminolízissel, körülbelül -10 °C és 50 ’C közötti hőmérsékleten (lehetőleg kb. 25 ’C-on), kb. 12-24 (lehetőleg kb. 18) órán keresztül hajtjuk végre. A hidroxi C-terminálissal rendelkező peptidek HF-dal vagy más erősen savas védőcsoport eltávolítóval vagy elszappanosítással hasíthatók le. Más módon, a peptidek például metanollal végzett transz-észteresítéssel, majd az azt követő aminolízissel vagy elszappanosítással is eltávolíthatók a gyantáról. A védett peptid szilikagél oszlopkromatográfiával tisztítható.
A peptidről az oldallánc védőcsoportok az aminolízissel nyert termék, például anizol vagy egyéb karbóniumion-eltávolíló anyag jelenlétében, vízmentes folyékony hidrogén-fluoriddal végzett kezelésével, hidrogén-fluorid/piridin komplexszel, trisz(trifluor-acetiljboronnal és tirfluor-ecetsavval végzett kezelésével, vagy folyékony ammóniában nátriummal végzett redukciójával távolítható el; előnyösen folyékony hidrogén-fluoriddal és anizollal kb. -10 ’C és +10 ’C közötti (lehetőleg 0 ’C) hőmérsékleten kb. 15 perc és 2 óra közötti (lehetőleg 1,5 óra) ideig végzett kezeléssel.
Benzhidril-amin gyantán lévő peptidek esetében a gyantáról való lehasítás és a védőcsoportok eltávolításának lépései a fent leírt folyékony hidrogén-fluorid és anizol alkalmazásával egy lépésben végezhetők.
Az oldatot sótalaníthatjuk (pl. BioRad AG-3R anioncserélő gyantával), s a peptid kromatográfiás lépések sorozatával tisztítható, melynek során az alábbi mód12
HU 211 348 A9 szerek bármelyikét (vagy mindet) alkalmazhatjuk: ioncsere gyengén bázisos gyantán, acetát alakban; hidrofób adszorpciós kromatográfia szubsztituálatlan sztirol-divinil-benzol kopolimeren, pl. AmberliteR XAD-n; szilikagél adszorpciós kromatográfia; karboxi-metilcellulózon végzett ioncserélő kromatográfia; megoszlásos kromatográfia, pl. SephadexR G-25 oszlopon; ellenáramú megoszlásos kromatográfia; illetve nagy teljesítményű folyadék-kromatográfia (HPLC), különösen oktil- vagy oktadecilszilil-szilikát (ODS) kötött fázisú oszlopon végzett reverz fázisú HPLC:
Fentieknek megfelelően a találmány egy további tárgya eljárások polipeptidek és gyógyszerészetileg megfelelő sóik előállítására, melynek során a védett aminosavakat egymást követően alkalmas gyanta hordozón kondenzáljuk, majd eltávolítjuk a védőcsoportokat és a gyanta hordozót, s a terméket tisztítjuk, miáltal a PTH és PTHrp fiziológiailag aktív, rövidített homológjainak és analógjainak [előnyösen a PTH(l-34) és PTHrp(]-34)] analógjait állítjuk elő, melyekben a 2231. helyen lévő aminosavak amfipatikus alfa-helikális peptid-szekvenciát képeznek (amit fentebb leírtunk).
Polipeptidek rekombináns szintézise
A találmány szerinti polpeptidek előállításának másik módja a kívánt polipeptidet kódoló gén klónozása és expresszálása. Ebben az eljárásban olyan plazmidot készítünk, amely a kívánt DNS-szekvenciát tartalmazza, és megfelelő mikroorganizmus gazdába, általában baktériumba, például E. co/i-ba vagy élesztőkbe, például Saccharomyces cerevisiae-be inszertáljuk, miáltal a mikroorganizmust a plazmid - s ilyenformán a találmány szerinti polipeptid analógokat kódoló cDNS másolatainak - termelésére indukáljuk.
Az eljárás során először - a későbbiek során végzett változtatások elősegítéséhez - restrikciós hasítási helyek alapján a kiválasztott PTH vagy PTHrp analógot kódoló szintetikus gént szerkesztünk. A szekvencia amplifikálásához polimeráz láncreakciót (PCR) alkalmazhatunk (ld. Mullis, 4 683 195 és 4 683 202 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás).
Az amplifikált szintetikus gént izoláljuk és alkalmas plazmidba ligáljuk, pl. Trp LE plazmidba, melybe egymás után a gén négy példánya inszertálható. A Trp LE plazmidokoat a 4 738 921 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírásban és a 0212532 számú európai közrebocsátási iratban írták le. A Trp LE plazmidok általában 8-10-szer több proteint termelnek, mint a Trp E plazmidok. A több példányú gén megfelelő gazdában, például E. co/i-ban vagy Saccharomyces cerevisiae-ben expresszálható.
Az alkalmazott expressziós vektor a Trp LE 18 Prot (Ile3, Pro5) volt, amely az ampicillin-rezisztencia gént és a plazmmid replikációs kezdőpontját tartalmazó pBR322 fragmensből (EcoRI-BamHI), a trppromotert és a trpE gént tartalmazó EcoRI-SacII fragmensből, HIV-proteáz (He3, Pro5) génfragmensből (SacII-HindlII), bGRF génfragmensből (HidlII-BamHI), és az E. coli rpoc génjéből származó transzkripciós terminátorból áll. A HIV-proteáz és a bGRF génfragmensek nem feltétlenül szükségesek, s szükség szerint egyéb kódoló szekvenciákkal helyettesíthetők.
Az expresszált multimer fúziós proteinek intracelI uráli san stabil befogadó testekben gyűlnek össze, s centrifugálással elkülöníthetők a többi celluláris proteintől. Az izolált fúziós proteint monomer PTH vagy PTHrp analóggá alakítjuk, és kationcserélő és/vagy reverz fázisú HPLC-vel tisztítjuk.
A klónozás, amplifikálás, expresszálás és tisztítás különböző módjai a szakemberek számára nyilvánvalóak. A jellemző eljárásokat Manietis és mtsi írták le (Molecular Cloning, A Laboratory Manual, 2. kiadás, Cold Spring Harbor Laboratory, 1989).
Alkalmazhatóság és alkalmazás
A találmány szerinti polipeptidek a csont tömegének leépülésében megnyilvánuló számos emlős betegség megelőzéséhez és kezeléséhez alkalmasak. A találmány szerinti vegyületek különösen az oszteoporózis és az oszteopenia megelőző (profilaktikus) és terápiás kezeléséhez alkalmasak.
A találmány szerinti polipeptideket vagy sóikat rendszerint naponta kb. 0,002-1 gg/testtömegkilogramm mennyiségben, lehetőleg naponta kb. 0,04 gg/testtömegkilogramm mennyiségben alkalmazzuk. 50 kg testtömegű nő esetében az aktív összetevő napi adagja kb. 0,1 gg-tól kb. 50 gg-ig, lehetőleg kb. 2,0 gg-tól kb. 10 gg-ig teljed. Más emlősök, például lovak, kutyák, szarvasmarhák esetében nagyobb dózisokra lehet szükség. Ezek a dózisok hagyományos gyógyszerkészítményekben egyszeri, többszöri beadással vagy kontrollált kibocsátással vihetők be, attól függően, hogy melyikkel érhető el a legjobb eredmény. Az előnyben részesített beadási mód a napi egyszeri vagy kétszeri injektálás.
A pontos adagolás, a készítmény és a legmegfelelőbb beviteli rendszer kiválasztását befolyásolhatja többek között - a kiválasztott polipeptid gyógyszerészeti tulajdonságai, a kezelni kívánt betegség természete és súlyossága, valamint a kezelt páciens fizikai állapota és mentális fejlettsége.
A jellemző beadási rendszerek közé tartozik az orális, parenterális (beleértve a szubkután, intramuszkuláris és intravénás beadást), rektális, bukkális (beleértve a szublingvális beadást), pulmonáris, transzdermális és intranazális beadás.
A gyógyszerészetileg megfelelő sók toxikus mellékhatások nélkül megtartják az eredeti polipeptid biológiai aktivitását. Az ilyen sók példái (a) a szervetlen savakkal (pl. sósav, hidrogén-bromid, kénsav, foszforsav, salétromsav és hasonlók), valamint a szerves savakkal (pl. ecetsav, oxálsav, borkősav, borostyánkősav, maleinsav, fumársav, glükonsav, citromsav, almasav, aszkorbinsav, benzoesav, csersav, pamoinsav, alginsav, poliglutaminsav, naftalin-szulfonsavak, naftalin-diszulfonsavak, poligalakturonsav és hasonlók) készített savaddíciós sok;
(b) többértékű fém kationokkal (pl. cink-, kalcium-, bizmut-, bárium-, magnézium-, alumínium-, réz-, kobalt-, nikkel-, kadmiumionok és hasonlók) vagy N,N13
HU 211 348 A9 dibenzil-etilén-diaminból vagy etilén-diaminból képzett szerves kationnal kialakított bázis-addíciós sók; és (c) az (a) és (b) pontban felsorolt sók kombinációi, mint például a cink-tannát só és hasonlók.
A találmány további tárgya gyógyszerkészítményekre vonatkozik, amelyek aktív alkotórészként a találmány szerinti polipeptidek valamelyikét vagy gyógyszerészetileg megfelelő sóját gyógyszerészetileg megfelelő, nem toxikus hordozóval keverve tartalmazzák. Amint fentebb említettük, az ilyen készítmények parenterális (szubkután, intramuszkuláris, intravénás) alkalmazáshoz (folyékony oldatok vagy szuszpenziók formájában), orális vagy bukkális alkalmazáshoz (elsősorban tabletták és kapszulák formájában) pulmonáris vagy intranazális alkalmazáshoz (elsősorban porok, orrcseppek és aeroszolok formájában), valamint rektális és transzdermális alkalmazáshoz alakíthatók ki.
A készítmények alkalmas módon egységdózis formában alkalmazhatók, s a gyógyszerészet-tudományban jól ismert, például a Remington ’s Pharmaceutical Sciencesben (Mack Publishing Company, Easton, PA. 17. kiadás, 1985) leírt eljárásokkal állíthatók elő. A parenterális alkalmazáshoz való készítmények kötőanyagként (excipiens) tartalmazhatnak steril vizet vagy sóoldatot, alkilénglikolokat (pl. propilén-glikolt), polialkilén-glikolokat (pl. polietilén-glikolt), növényi eredetű olajokat, hidrogénezett naftalinokat és hasonlókat. Az orális alkalmazáshoz való készítmények epesavas sók vagy acil-kamitinek hozzáadásával egészíthetők ki. A nazális alkalmazáshoz való készítmények lehetnek szilárdak, és tartalmazhatnak kötőanyagokat, például laktózt vagy dextránt, vagy orrcseppek, illetve pontos adagolású spray-k formájában való alkalmazáshoz lehetnek vizes vagy olajos oldatok. A bukkális alkalmazáshoz való jellemző kötőanyagok közé tartoznak a cukrok, a kalcium-sztearát, magnézium-sztearát, az előre zselatinezett keményítő és hasonlók.
Ha a készítményt nazális alkalmazáshoz alakítjuk ki. az orr-nyálkahártyán keresztül történő felszívódás felületaktív savakkal, mint például glikokólsavval, kólsavval. taurokőlsavval, etokólsavval, dezoxikólsavval. kenodezoxikólsavval, dehidrokólsavval, gliko-dezoxikólsavval, ciklodextrinekkel és hasonlókkal fokozható, amelyeket körülbelül 0,2-15 m/m%, lehetőleg kb. 0,5 és 4 m/m%, leginkább 2 m/m% arányban alkalmazunk.
A kezelt beteg találmány szerinti vegyületekkel hosszú időn keresztül, például egy héttől egy évig terjedő ideig tartó ellátása kontrollált kibocsátású, a kívánt kibocsátási időtartam biztosításához megfelelő mennyiségű aktív anyagot tartalmazó rendszer egyszeri alkalmazásával valósítható meg. E célból különféle kontrollált kibocsátású rendszerek, mint például egy részből álló vagy rezervoár-típusú mikrokapszulák, raktározó implantátumok, ozmotikus pumpák, vezikulák, micellák, liposzómák, bőrtapaszok, iontoforetikus eszközök, és más, injektálható dóziskészítmények alkalmazhatók. Néhány kontrollált gyógyszerkibocsátási eszköz az aktív összetevő megkívánt bejuttatás] helyén való elhelyezkedéssel is jellemezhető, amely hasznos bizonyos betegségek kezelésében.
A kontrollált kibocsátási készítmények egyik típusa a polipeptidet vagy sóját lassan lebomló, nem toxikus, nem antigén hatású polimerben diszpergálva vagy ilyen polimerből készített kapszulában tartalmazza. Ilyen polimer például a tejsav/glikolsav kopolimer, amelyet úttörő munkájukban Kent, Lewis, Sanders és Tice írtak le (4 675 189 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás). A találmány szerinti vegyületek, vagy méginkább, viszonylag oldhatatlan sóik koleszterin vagy más lipid kötőanyagú pirulákká, illetve szilasztomer kötőanyagú implantátumokká alakíthatók. A szakemberek számára egyéb lassú kibocsátású raktározó implantátumok vagy injektálható készítmények is ismertek (ld. például; Sustained and Controlled Release Drug Delivery Systems, szerk.: J. R. Robinson, Marcel Dekker, Inc., New York, 1978; és R. W. Baker, Controlled Release of Biologically Aclive Agents, John Wiley & Sons, New York, 1987).
A következőkben leírt példákat a találmány szerinti vegyületek szintézisének és tesztelésének jellemzésére, és semmiképpen nem az igénypontok körének korlátozására szánjuk. A példákban „o.p.” jelentése olvadáspont, jelentése a feltüntetett oldószerben, adott koncentrációnál, 25 C-on mért optikia aktivitás, „FAB” jelentése gyors elektronbombázásos tömegspektrometria, és „AAA” jelentése aminosav-analízis (a mért értékek után zárójelben a várt értékek szerepelnek). Az aminosav-analízist a gyártó útmutatásai szerint Hewlett-Packard AminoQuant Analyzer-en végeztük. A primer aminosavakat o-ftálaldehiddel, a szekunder aminosavakat Fmoc-val származtattuk. A mennyiségi meghatározáshoz a leszármaztatott aminosavak fluoreszenciás detektálását alkalmaztuk. A védett aminosavakat az Applied Biosystem Inc.-tól (Foster City, CA) szereztük be.
I. példa
Az 1. vegyületet (7. számú szekvencia) automatizált Applied Biosystems Model 430A peptidszintetizátor alkalmazásával 4-metil-benzhidril-amin gyantán, szilárd fázisú eljárással 0,5 mmól nagyságrendben állítottuk elő. Az alfa-aminocsoportokat f-butoxikarbonilcsoporttal (Boc) védtük. Az oldalláncok védéséhez az Asp, Glu és Ser esetében benzilcsoportot (Bzl), az Arg esetében tozilcsoportot (Tos), a His esetében benzil-oxi-metilcsportot (Bőm), a Lys esetében pedig 2-klór-benzilcsoportot (Cl-z) alkalmaztunk. Az aminosavakat Stewart és Young (ld. fentebb) módszerével N.N-diciklohexil-karbodiimid/l-hidroxi-benzotriazol (DCC/HOBt) alkalmazásával egymás után kapcsoltuk össze. Miután valamennyi aminosavat összekapcsoltuk, a peptidet ecetsav-anhidrid és diizopropil-etil-amin elegyével N-metil-pirrolidonban acetileztük. Az elkészült peptidet az oldalláncok védőcsoportjainak egyidejű eltávolításával anizol (2,5 ml) jelenlétében vízmentes hidrogén-fluoriddal (25 ml) -10 ”C-on 30 percig, és 0 C-on 60 percig végzett kezeléssel hasítottuk le a gyantáról. A HF in vacuo elpárologtatása után a maradékot vízmentes éterrel mostuk, és nyers peptidet 10%-os ecetsavval
HU 211 348 A9 extraháltuk. A 10%-os ecetsavas extraktum liofilizálásával 900 mg nyers terméket kaptunk. A peptidet 0,1 %-os TFA-ban 22-45% CH3CN gradiens alkalmazásával közegnyomásos ODS reverz fázisú oszlopkromatográfiával tiszítottuk. A tennék három frakcióban eluálódott, melyeket bekoncentráltunk és liofilizáltunk, miáltal 130 mg, 98%-osnál nagyobb tisztaságú fehér, szilárd anyagot kaptunk.
I. vegyület: AVSEHQLLHDKGKSIQDLRRRELLEKLLEKLHTA-NH2 (7. sz. szekvencia)
Alá Val | Ser | Glu His | Gin Leu Leu His | Asp | Lys | Gly | Lys | Ser | Ile |
1 | 5 | 10 | 15 | ||||||
Gin Asp | Leu | Arg Arg | Arg Glu Leu Leu | Glu | Lys | Leu | Leu | Glu | Lys |
20 | 25 | 30 | |||||||
Leu His | Thr | Alá NH2 | (7. számú szekvencia | ) ; |
Fizikai adatok::
o.p.: 150,0-159 ’C [a]g = -34,88’ (c = 0,16, H2O) FAB (ΟπΛοοΝ^,): [M+H]+ = 4005,5 AAA: Asp, 1,9 (2); Glu, 5,6 (6); Ser, 1,6 (2); His, 2,7 (3); Gly, 1,0 (1);
Thr, 0,9 (1); Alá, 1,9 (2); Arg, 2,8 (3); Val, 1,0 (1); Ile, 0,9 (1); Leu,
7,3 (8) ; Lys, 4,0 (4).
A 2., 5-18., 21., 24-27., 29-36., 38-48., 50-54., 58-64. és 66-70. vegyületeket hasonlóan állítottuk elő és jellemeztük, s a hidroxi-terminális polipeptidek szintéziséhez PAM gyantát alkalmaztunk.
2. vegyület: AVSEHQLLHDKGKSIQDLRRRELLEKLLEKLHTA-OH (6. számú szekvencia):
Alá | Val | Ser | Glu | His | Gin | Leu | Leu | His | Asp | Lys | Gly | Lys | Ser | Ile |
1 | 5 | 10 | 15 | |||||||||||
Gin | Asp | Leu | Arg | Arg | Arg | Glu | Leu | Leu | Glu | Lys | Leu | Leu | Glu | Lys |
20 | 25 | 30 | ||||||||||||
Leu | His | Thr | Alá | OH | (6. : | számú | szekvencia) |
Fizikai adatok:
o.p.: 154-150 ‘C [a]g = -49,35' (c = 0,46, H2O) FAB (ε,,,Η,ο,Ν^Ο»): [M+H]+ = 4005,0 AAA: Asp, 2,1 (2); Glu, 5,9 (6); Ser, 1,7 (2); His, 2,9 (3); Gly, 1,1 (1); Thr, 1,0 (1); Alá, 1,9 (2); Arg, 3,0 (3); Val, 1,2 (1); Ile, 1,0 (1); Leu, 7,8 {8); Lys, 4,2 (4) .
5. vegyület: AVSEHQLLHDKGKS1QDLRRRELLERLLERLHTA-OH (15. sz. szekvencia);
Alá | Val | Ser | Glu | His | Gin | Leu | Leu | His | Asp Lys | Gly | Lys | Ser | Ile |
1 | 5 | 10 | 15 | ||||||||||
Gin | Asp | Leu | Arg | Arg | Arg | Glu | Leu | Leu | Glu Arg | Leu | Leu | Glu | Arg |
20 | 25 | 30 | |||||||||||
Leu | His | Thr | Alá | OH | (15. | számú szekvencia) |
Fizikai adatok:
o.p.: 147-165 ’C [a]g = -49,17' (c = 0,66, H2O) FAB (C,75H299N59O52): [M+H]+ = 4061 AAA: Asp, 2,1 (2); Glu, 6,1 (6); Ser, 1,8 (2); His, 3,1 (3); Gly, 1,1 (1); Thr, 1,0 (1); Alá, 2,0 (2); Arg, 5,0 (5); Val, 1,0 (1); Ile, 0,9 (1); Leu,
7,7 (8); Lys, 1,9 (2).
ó. vegyülei: AVSEHQLLHDRGRSIQLRRRELLERLLERLHTA-OH (16. sz. szekvencia);
Alá | Val | Ser | Glu | His | Gin | Leu | Leu His Asp Arg | Gly | Arg | Ser | Ile |
1 | 5 | 10 | 15 | ||||||||
Gin | Asp | Leu | Arg | Arg | Arg | Glu | Leu Leu Glu Arg | Leu | Leu | Glu | Arg |
20 | 25 | 30 | |||||||||
Leu | His | Thr | Alá | OH | (16. | számú szekvencia) |
Fizikai adatok:
o.p.: 150-170 ’C [<x]g = -48,65’ (c = 0,54, H2O) FAB (C173H299N63O52): [M+H]+ = 4118,0
AAA: Asp, 2,1 (2); Glu, 6,1 (6); Ser, 1,8 (2); His, 3,2 (3); Gly, 1,2 (1);
Thr, 1,0 (1); Alá, 2,0 (2); Arg, 6,9 (7); Val, 1,0 (1); Ile, 1,0 (1); Leu,
7,8 (8).
HU 211 348 A9
7. vegyület: AVSEHQLLHDRGRSIQDLRRRELLERLLKRLHTA-OH (17. sz. szekvencia);
Ala | Val | Ser | Glu | His | Gin | Leu Leu His Asp Arg | Gly | Arg | Ser | lle |
1 | 5 | 10 | 15 | |||||||
Gin | Asp | Leu | Arg | Arg | Arg | Glu Leu Leu Glu Arg | Leu | Leu | Lys | Arg |
20 | 25 | 30 | ||||||||
Leu | His | Thr | Ala | OH | (17. | számú szekvencia) |
Fizikai adatok:
o.p.: 177-182 C [oc]g = -46,17 (c = 0,14, H2O) FAB (C^H^N^Ojo): [M+H]+ = 4117 AAA: Asp, 2,0 (2); Glu, 4,8 (5); Ser, 1,8 (2); His, 3,2 (3); Gly, 1,1 (1); Thr, 0,9 (1); Ala, 1,9 (2): Arg, 6,7 (7); Val, 1,0 (1): lle, 1,0 (1); Leu,
7,7 ( 8 ) ; Lys, 0,9 (1 ) .
8. vegyület: AVSEHQLLHDKGKSIQDLRRRELLEKLLRKLHTA-OH (5. sz. szekvencia);
Ala | Val | Ser | Glu | His | Gin Leu Leu His Asp | Lys | Gly | Lys | Ser | lle |
1 | 5 | 10 | 15 | |||||||
Gin | Asp | Leu | Arg | Arg | Arg Glu Leu Leu Glu | Lys | Leu | Leu | Arg | Lys |
20 | 25 | 30 | ||||||||
Leu | His | Thr | Ala | OH | (5. számú szekvencia) |
Fizikai adatok:
o.p.: 147-165 ”C [a]g = -49.17’ (c =0,66, H2O) FAB (C176H305N59O49): [M+H]+ = 4033,0 AAA: Asp, 2,0 (2); Glu, 4,8 (5); Ser, 1,8 (2); His, 2,7 (3); Gly, 1,1 (1); Thr, 0,9 (1); Ala, 2,0 (2); Arg, 3,9 (4); Val, 1,0 (1); lle, 1,0 (1); Leu, 7,9 ( 8) ; Lys, 4,0 (4 ) .
9. vegyület: AVSEHQLLHDKGKSIQDLRRRELLEKLLEKLHTAGRR-OH (10. sz. szekvencia);
Ala | Val | Ser | Glu | His | Gin | Leu | Leu | His | Asp | Lys | Gly | Lys Ser | lle |
1 | 5 | 10 | 15 | ||||||||||
Gin | Asp | Leu | Arg | Arg | Arg | Glu | Leu | Leu | Glu | Lys | Len | Leu Glu | Lys |
20 | 25 | 30 | |||||||||||
Leu | His | Thr | Ala | Gly | Arg | Arg | OH | [10. | számú szekvencia) |
Fizikai adatok:
o.p.: 158-160 C [ot]g = -44,76° (c = 0,1, H2O) FAB (C,89H?26N64O„): [M+H]+ = 4375,0 AAA: Asp, 2,0 (2); Glu, 5,9 (6); Ser, 1,7 (2); His, 2,9 (3); Gly, 2,3 (2); Thr, 1,0 (1); Ala, 1,9 (2); Arg, 5,0 (5); Val, 1,2 (1); lle, 1,0 (1); Leu,
7,8 (8 ) ; Lys, 4,3 < 4) .
10. vegyület: AVSEAQLLHDLGKSIQDLRRRELLEKLLEKLHAL-OH (14. sz. szekvencia);
Ala | Val | Ser | Glu | Ala | Gin | Leu Leu His Asp Leu | Gly | Lys | Ser | He |
1 | 5 | 10 | 15 | |||||||
Gin | Asp | Leu | Arg | Arg | Arg | Glu Leu Leu Glu Lys | Leu | Leu | Glu | Lys |
20 | 25 | 30 | ||||||||
Leu | His | Ala | Leu | OH | (14. | számú szekvencia) |
Fizikai adatok:
o.p.: 170-175 “C [Oí]g = -31,59 (c = 0,54, H2O) FAB (C174H300N52O5,): [M+H]+ = 3936,0 AAA: Asp, 2,0 (2); Glu, 6,0 (6); Ser, 1,8 (2); His, 2,0 (2); Gly, 1,2 (1); Ala, 3,0 (3); Arg, 2,8 (3); Val, 1,1 (1); lle, 1,0 (1); Leu, 9,9 (10); Lys 3,0 (3) .
11. vegyület: AVSEHQLLHDKGKSIQDLRRRELLEKLLELLKEL-NH2 (11. sz. szekvencia);
Ala | Val | Ser | Glu | His | Gin Leu Leu His Asp Lys | Gly | Lys | Ser | lle |
1 | 5 | 10 | 15 | ||||||
Gin | Asp | Leu | Arg | Arg | Arg Glu Leu Leu Glu Lys | Leu | Leu | Glu | Lys |
20 | 25 | 30 | |||||||
Leu | Lys | Glu | Leu | nh2 | (11. számú szekvencia) |
HU 211 348 A9
Fizikai adatok:
o.p.: 172-174 ’C [<x]g = -43,29’ (c = 0,2, H2O) FAB (C„9H31,N3jO52): [M+H]+ = 4065,8 AAA: Asp, 2,2 (2); Glu, 7,7 (7); Ser, 1,7 (2); His, 2,0 (2); Gly, 1,0 (1); Alá, 1,0 (1); Arg, 3,0 (3); Val, 1,1 (1); Ile, 1,0 (1); Leu, 9,3 (9); Lys,
5,1 (5) .
12. vegyület: AVSEIQFXHNLGKHLSSXERVELLEKLLEKLHNY-NH2 (X = Nle; 23. sz. szekvencia);
Alá | Val | Ser | Glu | Ile | Gin Phe Nle His Asn Leu | Gly | Lys | His | Leu |
1 | 5 | 10 | 15 | ||||||
Ser | Ser | Nle | Glu | Arg | Val Glu Leu Leu Glu Lys | Leu | Leu | Glu | Lys |
20 | 25 | 30 | |||||||
Leu | His | Asn | Tyr | nh2 | (23. számú szekvencia) |
Fizikai adatok:
o.p.: 178 ’C [<x]g = -36,38’ (c = 0,4, H2O) FAB (C182H 293N30O3l): [M+Hf = 4001,6 AAA: Asp, 2,1 (2); Glu, 6,5 (6); Ser, 2,7 (3); His, 3,1 (3); Gly, 1,1 (1); Alá, 1,0 (1); Arg, 1,0 (1); Tyr, 0,8 (1); Val, 2,0 (2); Phe, 1,0 (1) Ile, 0,9 (1); Leu+Nle, 8,5 (7+2); Lys, 3,1 (3).
13. vegyület: AVSEIQFXHNLGKHLSSXRRRELLEKLLEKLHNY-NH2 (X = Nle; 24. sz. szekvencia);
Alá | Val | Ser | Glu | Ile | Gin Phe | Nle His Asn Leu | Gly | Lys | His | Leu |
1 | 5 | 10 | 15 | |||||||
Ser | Ser | Nle | Arg | Arg | Arg Glu | Leu Leu Glu Lys | Leu | Leu | Glu | Lys |
20 | 25 | 30 | ||||||||
Leu | His | Asn | Tyr | nh2 | (24. számú szekvencia) |
Fizikai adatok:
o.p.: 260 ’C [a]g = -37,02’ (c = 0,2, H2O) FAB (C,μΗ^μΝ^Ο^): (M+H]+ = 4084 AAA: Asp, 2,1 (2); Glu, 5,5 (5); Ser, 2,6 (3); His, 3,1 (3); Alá, 1,0 (1); Gly, 1,1 (1); Arg, 3,2 (3); Tyr, 1,0 (l);Val, 1,0 (1); Phe, 1,0 (1); Ile, 1,0 (1); Leu, 9,0 (9) ; Lys, 3,0 (3).
14. vegyület: AVSEHQLLHDKGKSIQDLRRRALAEALAEALHTA-NH2 (20. sz. szekvencia);
Alá | Val | Ser | Glu | His | Gin Leu Leu His Asp Lys | Gly | Lys | Ser | Ile |
1 | 5 | 10 | 15 | ||||||
Gin | Asp | Leu | Arg | Arg | Arg Alá Leu Alá Glu Alá | Leu | Alá | Glu | Alá |
20 | 25 | 30 | |||||||
Leu | His | Thr | Alá | nh2 | (20. számú szekvencia); |
Fizikai adatok:
o.p.: 190-225 ’C [ot]g = -56,58’ (c = 0,36 H2O) FAB (C16,H272N34O49): [M+H]+ = 3747,0 AAA: Asp, 2,1 (2); Glu, 4,9 (5); Ser, 1,7 (2); His, 2,6 (3); Gly, 1,1 (1);Thr, 1,0 (1); Alá, 7,6 (7); Arg, 2,8 (3); Val, 1,1 (1); Ile, 1,0 (1) ; Leu, 6,6 (6) ; Lys,1,9(2).
15. vegyület: AVSEHQLLHDKGKSIQDLARRELLEKLLEKLHTA-NH2 (12. sz. szekvencia);
Alá | Val | Ser | Glu | His | Gin Leu Leu His Asp Lys | Gly | Lys | Ser | Ile |
1 | 5 | 10 | 15 | ||||||
Gin | Asp | Leu | Alá | Arg | Arg Glu Leu Leu Glu Lys | Leu | Leu | Glu | Lys |
20 | 25 | 30 | |||||||
Leu | His | Thr | Alá | nh2 | (12. számú szekvencia); |
Fizikai adatok:
o.p.: 170-180 ’C [a]g = -48,19“ (c = 0,2 H2O) FAB (C172H293N33O5)): [M+H]+ = 3919,0
AAA: Asp, 2,1 (2); Glu, 6,1 (6); Ser, 1,7 (2); His, 3,1 (3); Gly, 1,1 (1);
Thr, 1,0 (1); Alá, 3,0 (3); Arg, 2,1 (2); Val, 1,1 (1); Ile, 1,0 (1); Leu,
8,0 (8) ; Lys, 4,4 (4).
HU 211 348 A9
16. vegyület: AVSEHQLLHDKGKSIQDLRRAELLEKLLEKLHTA-NH2 (13. sz. szekvencia);
Alá | Val | Ser | Glu | His | Gin Leu Leu His Asp Lys | Gly | Lys | Ser | Ile |
1 | 5 | 10 | 15 | ||||||
Gin | Asp | Leu | Alá | Arg | Alá Glu Leu Leu Glu Lys | Leu | Leu | Glu | Lys |
20 | 25 | 30 | |||||||
Leu | His | Thr | Alá | NH2 | (13. számú szekvencia). |
Fizikai adatok:
o.p.: 190-195 ’C [a]g = -50,50’ (c = 0,4 H2O) FAB (CI72H293N53O5I): [M+H]+ = 3919,0 AAA: Asp, 2,1 (2); Glu, 6,0 (6); Ser, 1,8 (2); His, 3,1 (3); Gly, 1,0 {1) ; Thr, 1,0 (1); Alá, 3,0 (3); Arg, 2,1 (2); Val, 1,1 (1); Ile, 1,0 (1) Leu, 7,5 (8); Lys, 4,2 (4) .
77. vegyület: AVSEHQLLHDKGKSIQDLRRRSLLSSLLSSLHTA-NH2 (21. sz. szekvencia);
Alá | Val | Ser | Glu | His | Gin Leu | Leu His Asp Lys | Gly | Lys | Ser | Ile |
1 | 5 | 10 | 15 | |||||||
Gin | Asp | Leu | Alá | Arg | Arg Ser | Leu Leu Ser Ser | Leu | Leu | Ser | Ser |
20 | 25 | 30 | ||||||||
Leu | His | Thr | Alá | NH2 | (21. számú szekvencia). |
Fizikai adatok:
o.p.: 195-204 ’C [a]g = -67,11’ (c = 0,3 H2O) FAB (C|63H280N54O5()): [M+H]+ = 3796,0 AAA: Asp, 2,1 (2); Glu, 2,9 (3); Ser, 6,8 (7); His, 3,1 (3); Gly, 1,2 (1); Thr, 1,0 (1); Alá, 2,0 (2): Arg, 3,0 (3); Val, 1,0 (1); Ile, 1,0 (1); Leu,
8,2 (8); Lys, 2,0 (2 ) .
18. vegyület: AVSEHQLLHDKGKSIQDLRRRAFYDKVAEKLHTA-NH2 (22. sz. szekvencia);
Alá | Val | Ser | Glu | His | Gin Leu Leu His Asp Lys | Gly | Lys | Ser | Ile |
1 | 5 | 10 | 15 | ||||||
Gin | Asp | Leu | Arg | Arg | Arg Alá Phe Tyr Asp Lys | Val | Alá | Glu | Lys |
20 | 25 | 30 | |||||||
Leu | His | Thr | Alá | nh2 | (22. számú szekvencia). |
Fizikai adatok:
o.p.: 200-207 ’C [a]g = -60,26’ (c = 0,6 H2O) FAB (C174H2g4N56O50): [M+H]+ = 3960,0 AAA: Asp, 2,9 (3); Glu, 3,5 (4); Ser, 1,4 (2); His, 2,6 (3); Gly, 0,9 (1); Thr, 1,0 (1); Alá, 4,0 (4); Arg, 3,0 (3); Tyr, 0,9 (1); Val, 1,9 (2); Phe,
1,1 (1); Ile, 0,9 (1); Leu, 3,6 (4); Lys, 4,1 (4).
27. vegyület: AVSEIQFLHN LGKHLSSLRR RELLEKLLEK LHNY-NH, (35. sz. szekvencia);
Alá | Val | Ser | Glu | Ile | Gin | Phe | Leu | His | Asn Leu | Gly | Lys | His | Leu |
1 | 5 | 10 | 15 | ||||||||||
Ser | Ser | Leu | Arg | Arg | Arg | Glu | Leu | Leu | Glu Lys | Leu | Leu | Glu | Lys |
20 | 25 | 30 | |||||||||||
Leu | His | Asn | Tyr | nh2 | (35. | számú s | zekvencia). |
Fizikai adatok:
o.p.: 148-155 ’C [a]g = —45,97 (c = 0,26 H2O) FAB (C184H3WN56O49): [M+H]+ = 4084 AAA: Asx, 2,1 (2); Glx, 5,0 (5); Ser, 2,7 (3); His, 3,0 (3); Gly, 1,0 (1); Alá, 0,9 (1); Arg, 3,1 (3);Tyr, 0,9 (1); Val, 1,0 (1); Phe, 0,9 (1); Ile, 0,9 (1); Leu, 9,3 (9); Lys, 3,2 (3).
24. vegyület: AVSEHQLLHD KGKSIQDLKL KELLEKLLEK LHTA-NH2 (38. számú szekvencia);
Alá | Val | Ser | Glu | His | Gin Leu Leu His Asp Lys | Gly Lys | Ser | Ile |
1 | 5 | 10 | 15 | |||||
Gin | Asp | Leu | Lys | Leu | Lys Glu Leu Leu Glu Lys | Leu Leu | Glu | Lys |
20 | 25 | 30 | ||||||
Leu | His | Thr | Alá | nh2 | (38. számú szekvencia). |
HU 211 348 A9
Fizikai adatok:
o.p.: 175-182 ’C [a]§ = -49,99’ (c = 0,47 H2O) FAB (C^H^N^Oj,): [M+H]+ = 3906,5 AAA: Asx, 2,1 (2); Glx, 6,5 (6); Ser, 1,8 (2); His, 3,1 (3); Gly, 1,1 (1); Thr, 1,0 (1); Alá, 2,1 (2); Val, 1,1 (1); Ile, 1,0 (1); Leu, 9,1 (9); Lys, 6,5 (6) .
25. vegyület: AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLERLLER LHTA-NH2 (39. számú szekvencia);
Alá | Val | Ser | Glu | His | Gin Leu Leu His Asp Lys | Gly | Lys | Ser | Ile |
1 | 5 | 10 | 15 | ||||||
Gin | Asp | Leu | Arg | Arg | Arg Glu Leu Leu Glu Arg | Leu | Leu | Glu | Arg |
20 | 25 | 30 | |||||||
Leu | His | Thr | Alá | NH2 | (39. számú szekvencia). |
Fizikai adatok:
o.p.: 136,5-153,5 ’C [a]g = -32,57 (c = 0,13 H2O) FAB (CpsHjooN^Os,): [M+H]+ = 4060,8 AAA: Asx, 2,2 (2); Glx, 6,2 (6); Ser, 1,8 (2); His, 3,2 (3); Gly, 1,1 (1); Thr, 1,0 (1); Alá, 2,1 (2); Arg, 5,2 (5); Val, 1,1 (1); Ile, 1,1 (1); Leu,
8,4 (8); Lys, 2,2 (2).
26. vegyület: AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLERLLER LHTAP-NH2 (40. számú szekvencia);
Alá | Val | Ser | Glu | His | Gin | Leu Leu | His Asp Lys Gly | Lys | Ser | Ile |
1 | 5 | 10 | 15 | |||||||
Gin | Asp | Leu | Arg | Arg | Arg | Glu Leu | Leu Glu Arg Leu | Leu | Glu | Arg |
20 | 25 | 30 | ||||||||
Leu | His | Thr | Alá | Pro | nh2 | (40. számú szekvencia). |
Fizikai adatok:
o.p.: 125.8-127,2 C [a]§ = -54,62’ (c = 0,23 H2O) FAB (ει^^Ν^Ο;,): [M+H]+ = 4158,0 AAA: Asx, 2,1 (2); Glx, 6,2 (6); Ser, 1,8 (2); His, 2,9 (3); Gly, 1,1 (1); Thr, 8,0 (8); Alá, 2,0 (2); Arg, 5,1 (5); Val, 1,0 (1); Ile, 1,0 (1); Leu, 8,0 (8); Lys, 2,1 (2) Pro, 1,1 (1).
27. vegyület: AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLERLLER LHTAGRR-OH (41. számú szekvencia);
Alá | Val | Ser | Glu | His | Gin | Leu | Leu | His | Asp Lys Gly Lys Ser | Ile |
1 | 5 | 10 | 15 | |||||||
Gin | Asp | Leu | Arg | Arg | Arg | Glu | Leu | Leu | Glu Arg Leu Leu Glu | Arg |
20 | 25 | 30 | ||||||||
Leu | His | Thr | Alá | Gly | Arg | Arg | OH | (41. | számú szekvencia). |
Fizikai adatok:
o.p.: 106-137,3 ’C [a]g = -39,55’ (c = 0,67 H2O) FAB (C189H326N58OJ5): [M+H]+ = 4430,5 AAA: Asx, 2,1 (2); Glx, 5,9 (6); Ser, 1,6 (2); His, 2,7 (3); Gly, 2,2 (2); Thr, 1,0 (1); Alá, 1,8 (2); Arg, 7,3 (7); Val, 0,8 (1); Ile, 1,0 (1); Leu,
8,1 (8); Lys, 2,1 (2).
29. vegyület: AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK LHTY-NH2 (43. számú szekvencia);
Alá Val | Ser Glu | His | Gin | Leu | Leu His Asp Lys | Gly Lys | Ser | Ile | |||
1 | 5 | 10 | 15 | ||||||||
Gin | Asp | Leu | Arg | Arg | Arg | Glu | Leu Leu Glu Lys | Leu | Leu | Glu | Lys |
20 | 25 | 30 | |||||||||
Leu | His | Thr | Tyr | nh2 | (43. | számú szekvencia). |
Fizikai adatok:
o.p.: 160-172 ’C [<x)g = -49,85’ (c = 0,34 H2O) FAB (ΰΙ8]Η3ΜΝ56Ο52): [M+H]+ = 4096,9
AAA: Asx, 2,0 (2); Glx, 5,6 (6); Ser, 1,7 (2); His, 3,1 (3); Gly, 1,1 (1);
Thr, 0,9 (1); Alá, 0,9 (1); Arg, 3,0 (3); Tyr, 0,9 (1): Val, 1,0 (1); Ile,
1,0 (1); Leu, 7,7 (8); Lys, 4,4 (4).
HU 211 348 A9
30. vegyület AVSEHQLLHD KGYSIQDLRR RELLEKLLEK LHTA-NH2 (44. számú szekvencia);
Ala | Val | Ser | Glu | His | Gin Leu Leu His Asp Lys | Gly Tyr | Ser | lle |
1 | 5 | 10 | 15 | |||||
Gin | Asp | Leu | Arg | Arg | Arg Glu Leu Leu Glu Lys | Leu Leu | Glu | Lys |
20 | 25 | 30 | ||||||
Leu | His | Thr | Ala | nh2 | (44. számú szekvencia). |
Fizikai adatok:
o.p.: 130-171 ’C [a]g = -40,65’ (c = 0,34 H2O) FAB (CneH^NjsC^): [M+H]+ = 4039,4 AAA: Asx, 2,0 (2); Glx, 5,5 (6); Ser, 1,8 (2); His, 3,4 (3); Gly, 1,1 (1);
Thr, 1,0 (1); Ala, 2,0 (2); Arg, 2,9 (3); Tyr, 0,8 (1); Val, 1,0 (1); Xle,
0,9 (1),- Leu, 7,9 (8); Lys, 3,4 (3).
31. vegyület: AVSEHQLLHD KGCSIQDLRR RELLEKLLEK LHTA-NH2 (45. számú szekvencia);
Ala | Val | Ser | Glu | His | Gin Leu Leu His Asp Lys | Gly | Cys | Ser | He |
1 | 5 | 10 | 15 | ||||||
Gin | Asp | Leu | Arg | Arg | Arg Glu Leu 1-5u Glu Lys | Leu | Leu | Glu | Lys |
20 | 25 | 30 | |||||||
Leu | His | Thr | Ala | NH2 | (45. számú szekvencia). |
Fizikai adatok:
o.p.: 140-160 ’C lotjg = -44.48’ (c = 0.25 H2O)FAB (C^H^N^O^S,): [M+H]+ = 3979 AAA: Asx+Cys, 3,0 (2+1); Glx, 5,5 (6); Ser, 1,7 (2); His, 3,0 (3); Gly, 1,0 (1); Thr, 0,9 (1); Ala, 1,9 (2); Arg, 2,5 (3); Val, 1,0 (1); He, 0,9 (1) Leu, 7,5 (8 > ; Lys, 3,3 (3).
32. vegyület: AVSEHQLLHD KGXSIQDLRR RELLEKLLEK LHTA-NH-, (46. számú szekvencia);
X = Cys[CH2CONH(CH2)2NH(biotinil)]
Ala | Val | Ser | Glu | His | Gin Leu Leu His Asp Lys | Gly | Xaa | Ser | He |
1 | 5 | 10 | 15 | ||||||
Gin | Asp | Leu | Arg | Arg | Arg Glu Leu Leu Glu Lys | Leu | Leu | Glu | Lys |
20 | 25 | 30 | |||||||
Leu | His | Thr | Ala | nh2 | (46. számú szekvencia); |
(Xaa = [CH2CONH(CH2)2NH(biotinil)]Cys)
Fizikai adatok:
o.p.: (nem meghatározott) ’C [a]§ = nem meghatározott) FAB (Ci86H?16N59O54S2): [M+H]+ = 4306,6 AAA: Asx, 2,2 (2); Glx, 6,1 (6); Ser, 1,8 (2); His, 3,8 (3); Gly, 1,0 (1);
Thr, 1,0 (1); Ala, 2,0 (2); Arg, 3,1 (3); Val, 1,1 (1); lle, 0,9 (1); Leu,
8,3 (8); Lys, 3,3 (3) 33. vegyület: AVSEHQLLHD KGXSIQDLRR RELLEKLLEK LHTA-NH2 (47. számú szekvencia); X = [7-(di metil-amino)-2-oxo-2H- l-benzo-pirán-4-acetil]-Lys
Ala Val Ser Glu His Gin Leu Leu His Asp Lys Gly Xaa Ser lle
10 15
Gin Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys 20 25 30
Leu His Thr Ala NH2 (47. számú szekvencia). (Xaa = X = [7-(dimetil-amino)-2-cxo-2H-l-benzo-pirán-4-acetil]-Lys)
Fizikai adatok:
o.p.: 135-205 ’C [a]g = -26,92’ (c = 0,104, 50% aq. HOAc) FAB (C188H3I]N57O54): [M+H]+ = 4233 AAA: Asx, 1,9 (2); Glx, 6,3 (6); Ser, 1,7 (2); His, 3,2 (3); Gly, 1,0 (1); Thr, 1,1 (1); Ala, 2,0 (2); Arg, 3,2 !3); Val, 1,1 (1); lle, 0,9 (1); Leu,
8,2 [8); Lys, 4,5 (4).
34. vegyület: AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK LHTAG-OH (48. számú szekvencia);
Ala Val Ser Glu His Gin Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser lle 15 10 15
Gin Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys
25 30
HU 211 348 A9
Leu His Thr Ala Gly (48. számú szekvencia).
Fizikai adatok:
o.p.: 92,1-146,6 ’C [o.]g = -10,76’ (c = 0,34 H2O) FAB (C177H302N56O53): [M+H]+ = 4062,0 AAA: Asx, 2,0 (2); Glx, 5,7 (6); Ser, 1,8 (2); His, 3,0 (3); Gly, 2,2 (2); Thr, 0,9 (1); Ala, 1,9 (2); Arg, 2,8 (3); Val, 1,2 (1); Ile, 0,9 (1); Leu,
7,5 (8); Lys, 4,2 (4).
35. vegyület: AVSX,HQLLHX2 KGKSIQX2LRR RX^LX.KLLXiK LHA-OH (49. számú szekvencia); X,
Glu (OCH3); X2 = Asp(OCH3)
Ala | Val | Ser | Xaa2 | His | Gin Leu Leu His Xaa2 Lys | Gly | Lys Ser Ile |
1 | 5 | 10 | 15 | ||||
Gin | Xaa2 | Leu | Arg | Arg | Arg Xaa, Leu Leu Xaa2 Lys | Leu | Leu Xaa2 Lys |
20 | 25 | 30 | |||||
Leu | His | Ala | OH ( | 49. | számú szekvencia) Xaa2 = Glu | (OCH3) ; |
Xaa2 = Asp(OCH3).
Fizikai adatok:
o.p.: (nem meghatározott) ’C [a]g = -21,96 (c = 0,132 H2O) FAB (C188H3]1N55Oj2): [M+H]+ = 4089,0 AAA: Asx, 2,1 (2); Glx, 6,3 (6); Ser, 1,8* (2); His, 3,3 (3); Gly, 1,1 (1); Thr, 1,0 (1); Ala, 2,0 (2); Arg, 3,1 (3); Val, 1,1 (1); Ile, 0,9 (1); Leu,
8,0 (8) ; Lys, 4,2 (4).
36. vegyület: AVSX,HQLLHX2 KGKSIQX2LRR RXjLLXjKLLXíK LHA-OCH3 (50. számú szekvencia); X,
Glu (OCH3); X2 = Asp(OCH3)
Ala | Val | Ser | Xaax | His | Gin | Leu Leu His Xaa2 Lys | Gly | Lys Ser Ile |
1 | 5 | 10 | 15 | |||||
Gin | Xaa2 | Leu | Arg | Arg | Arg | Xaa2 Leu Leu Xaa2 Lys | Leu | Leu Xaa2 Lys |
20 | 25 | 30 | ||||||
Leu | His | Ala | OHC3 | (50. | . számú szekvencia) Xaa2 = | Glu | (OCH3) ; |
Xaa2 = Asp(OCH3).
Fizikai adatok:
o.p.: (nem meghatározott) ’C [a]o = -46,80’ (c = 0,07 H2O) FAB (C|82H3]3N55O52): [M+H]+ = 4103 AAA: Asx, 2,1 (2); Glx, 6,2 (6); Ser, 1,4 (2); His, 3,0 (3); Gly, 1,1 (1); Thr, 1,1 (1); Ala, 1,7 (2); Arg, 3,2 (3); Val, 0,6 (1); Ile, 0,9 (1); Leu, 8,0 (8); Lys, 4,1 (4).
38. vegyület: AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK LHTAP-OH (52. számú szekvencia);
Ala | Val | Ser | Glu | His | Gin | Leu | Leu His Asp Lys | Gly | Lys | Ser | Ile |
1 | 5 | 10 | 15 | ||||||||
Gin | Asp | Leu | Arg | Arg | Arg | Glu | Leu Leu Glu Lys | Leu | Leu | Glu | Lys |
20 | 25 | 30 | |||||||||
Leu | His | Thr | Ala | Pro | OH | (52. | számú szekvencia). | ||||
35 |
Fizikai adatok:
o.p.: 152,1-186,5 ’C [a]g = -55,91’ (c = 0,33 H2O) FAB (Cl80H306N56O53): [M+H]+ = 4102,6 AAA: Asx, 2,0 (2); Glx, 5,6 (6); Ser, 1,7 (2); His, 2,9 (3); Gly, 1,1 (1); Thr, 0,9 (1); Ala, 1,9 (2); Arg, 2,9 (3); Val, 1,2 (1); Ile, 1,0 (1); Leu,
7,7 (8); Lys, 4,3 (4).
39. vegyület: AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK LHTP-OH (53. számú szekvencia);
Ala | Val | Ser | Glu | His | Gin | Leu Leu His Asp Lys | Gly | Lys | Ser | Ile |
1 | 5 | 10 | 15 | |||||||
Gin | Asp | Leu | Arg | Arg | Arg | Glu Leu Leu Glu Lys | Leu | Leu | Glu | Lys |
20 | 25 | 30 | ||||||||
Leu | His | Thr | Pro | OH | (53. | számú szekvencia). |
HU 211 348 A9
Fizikai adatok:
o.p.: 120-148,2 ’C [Ct]g = -52,78’ (c = 0,47 H2O) FAB (C|77H40,N55O52): [M+H]+ = 4031,0 AAA: Asx, 2,0 (2); Glx, 5,6 (6); Ser, 1,8 (2); His, 2,9 (3); Gly, 1,0 (1); Thr, 7,5 (8); Alá, 0,9 (1); Arg, 2,9 (3); Val, 1,2 (1); Ile, 0,9 (1); Leu,
7,5 (8); Lys, 3,6 (4); Pro, 0,9 (1).
40. vegyület: AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK LHTP-NH2 (54. számú szekvencia);
Alá | Val | Ser | Glu | His | Gin Leu Leu His Asp Lys | Gly | Lys | Ser | Ile |
1 | 5 | 10 | 15 | ||||||
Gin | Asp | Leu | Arg | Arg | Arg Glu Leu Leu Glu Lys | Leu | Leu | Glu | Lys |
20 | 25 | 30 | |||||||
Leu | His | Thr | Pro | nh2 | (54. számú szekvencia). |
Fizikai adatok:
o.p.: 133,9-155,1 ’C [a]^ = -54,22' (c = 0,37 H2O) FAB (Cp^jo^Oj,): [M+H]+ = 4030,7 AAA: Asx, 2,0 (2); Glx, 5,6 (6); Ser, 1,9 (2); His, 2,9 (3); Gly, 1,1 (1); Thr, 0,9 (1); Alá, 0,9 (1); Arg, 2,8 (3); Val, 1,2 (1); Ile, 1,1 (1); Leu,
7,8 (8); Lys, 4,2 (4); Pro 0,9 (1).
41. vegyület: AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK LHP-NH, (55. számú szekvencia);
Alá Val | Ser Glu | His | Gin | Leu Leu | His | Asp | Lys | Gly | Lys | Ser | Ile | ||
1 | 5 | 10 | 15 | ||||||||||
Gin | Asp | Leu | Arg | Arg | Arg | Glu Leu | Leu | Glu | Lys | Leu | Leu | Glu | Lys |
20 | 25 | 30 | |||||||||||
Leu | His | Pro | nh2 | (55 . | számú szekvencia). |
Fizikai adatok:
o.p.: 142,8-166,1 ’C [a]^ = -53,80’ (c = 0,38 H2O) FAB (Ε,,,Η^^Οψ,): [M+H]+ = 3929 AAA: Asx, 2,0 (2); Glx, 5,7 (6); Ser, 1,8 (2); His, 3,0 (3); Gly, 1,1 (1); Alá, 0,9 (1); Arg, 2,8 (3); Val, 1,2 (1); Ile, 0,9 (1); Leu, 7,4 (8); Lys,
4,4 (4); Pro, 0,9 (1).
42. vegyidet: AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK LP-NH2 (56. számú szekvencia);
Alá | Val | Ser | Glu His Gin Leu Leu His | Asp | Lys | Gly | Lys | Ser | Ile |
1 | 5 | 10 | 15 | ||||||
Gin | Asp | Leu | Arg Arg Arg Glu Leu Leu | Glu | Lys | Leu | Leu | Glu | Lys |
20 | 25 | 30 | |||||||
Leu | Pro | nh2 | (56. számú szekvencia). |
Fizikai adatok:
o.p.: 161,0-177,0 ’C [a]g = -61,97’ (c = 0,19 H2O) FAB (C167H288N52O48): [M+H]+ = 3792,0 AAA: Asx, 2,2 (2); Glx, 5,9 (6); Ser, 1,9 (2); His, 2,1 (2); Gly, 1,1 (1); Alá, 1,0 (1); Arg, 3,0 (3); Val, 1,1 (1); Ile, 1,0 (1); Leu, 7,9 (8); Lys,
4,3 (4); Pro, 0,9 {1) .
43. vegyület: AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK LHTRSAW-OH (57. számú szekvencia);
Alá | Val | Ser | Glu | His | Gin | Leu | Leu | His | Asp Lys Gly Lys Ser | Ile |
1 | 5 | 10 | 15 | |||||||
Gin | Asp | Leu | Arg | Arg | Arg | Glu | Leu | Leu | Glu Lys Leu Leu Glu | Lys |
20 | 25 | 30 | ||||||||
Leu | His | Thr | Arg | Ser | Alá | Trp | OH | (57. | számú szekvencia). |
Fizikai adatok:
o.p.: 181-202 ’C [a]§ = -45,14 (c = 0,19 H,O) FAB (Ο,,,Η,^Ν^Ο^): [M+H]+= 4435,2 AAA: Asx, 2,0 (2); Glx, 5,8 (6); Ser, 2,8 (3); His, 2,8 (3); Gly, 1,1 (1); Thr, 0,9 (1); Alá, 1,9 (2); Arg, 3,7 (4); Ile, 0,9 (1); Leu, 7,5 (8); Lys,
4,3 (4) : Trp, 0,9 (1) .
HU 211 348 A9
44. vegyület: AVSEHQLLHD RGRSIQDLRR RELLERLLER LHTAGRRTRSAW-OH (58. számú szekvencia)
Alá | Val | Ser | Glu | His | Gin | Leu |
1 | 5 | |||||
Gin | Asp | Leu | Arg | Arg 20 | Arg | Glu |
Leu | His 35 | Thr 40 | Arg | Gly | Arg | Arg |
Leu | His | Asp 10 | Arg | Gly | Arg |
Leu | Leu | Glu 25 | Arg | Leu | Leu |
Thr | Arg | Ser | Alá | Trp | OH |
Ser Ile 15
Glu Arg 30 (58. számú szekvencia).
Fizikai adatok:
o.p.: 130-132,2 ’C [a]g = -46,66 (c = 0,195 H2O) FAB (C216H365N81O62): [M+H]* = 5088,8 AAA: Asx, 2,2 (2); Glx, 6,0 (6); Ser, 2,7 (3); His, 3,0 (3); Gly, 2,2 (2);
Thr, 2,1 (1); Alá, 3,0 (3); Arg, 10,5 (10); Val, 0,9 (1); Ile, 1,0 (1); Leu,
8.2 (8) ; Trp, 1,0(1).
45. vegyület: AVSEHQLLHD RGRSIQDLRR RELLERLLER LHTAGRRTRSAW-NH2 (59. számú szekvencia);
Alá Val Ser Glu His Gin Leu Leu His Asp Arg Gly Arg Ser Ile
10 15
Gin Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Arg Leu Leu Glu Arg
25 30
Leu His Thr Arg Gly Arg Arg Thr Arg Ser Alá Trp NH2 (59. számú szekvencia).
40
Fizikai adatok:
o.p.: 158-174 C [<x]g = -43,57 (c = 0,53 H2O) FAB (C216H368N82O61): [M+H]+ = 5087,4
AAA: Asx, 1,9 (2); Glx, 5,6 (6); Ser, 2,6 (3); His, 3,3 (3); Gly, 2,1 (2);
Thr, 2,0 (2); Alá, 2,9 (3); Arg, 10,1 (10); Val, 0,9 (1); Ile, 1,0 (1); Leu,
8.3 (8); Trp, 1,1 (1).
46. vegyület: AVSEHQLLHD RGXSIQDLRR RELLERLLER LHTAGRRTSAW-OH (60. számú szekvencia);
X = (dihidro-cinnamoil)Lys
Alá Val | Ser | Glu | His | Gin | Leu | Leu His | Asp Arg | Gly Xaa | Ser | Ile |
1 | 5 | 10 | 15 | |||||||
Gin Asp | Leu | Arg | Arg | Arg | Glu | Leu Leu | Glu Arg | Leu Leu | Glu | Arg |
20 | 25 | 30 | ||||||||
Leu His | Thr | Arg | Gly | Arg | Arg | Thr Arg | Ser Alá | Trp OH | (60. | számú |
35 | 40 | |||||||||
[Xaa = | (dihidro-cinnamoil)Lys] |
Fizikai adatok:
o.p : 165,4-175,2 ’C í«]g = -40,43* (c = 0,20 H2O) FAB (C225H374N80O62): [M+H]+ = 5191 AAA: Asx, 2,1 (2); Glx, 6,3 (6); Ser, 2,8 (3); His, 3,2 (3); Gly, 2,1 (2); Thr, 2,0 (2); Alá, 3,2 (3); Arg, 9,9 (9); Val, 1,0 (1); Ile, 0,9 (1); Leu,
8,6 (8); Lys 1,1 (1); Trp, 1,1 (1).
47. vegyület: AVSEIQFXHN LGKHLSSXTR SAWLRKKLQD VHNY-NH2 (61. számú szekvencia); (X = norleucin)
Alá | Val | Ser Glu | Ile | Gin | Phe Nle His Asn Leu | Gly Lys | His | Leu |
1 | 5 | 10 | 15 | |||||
Ser | Ser | Nle Thr | Arg | Ser | Alá Trp Leu Arg Lys | Lys Leu | Gin | Asp |
20 | 25 | 30 | ||||||
Val | His | Asn Tyr | nh2 | (61. | számú szekvencia). |
Fizikai adatok:
o.p.: 140-160 ’C [ot]g = -56,88’ (c = 0,16 H2O) FAB (C|8oH287N55058): [M+H]* = 3989,8 AAA: Asx, 3,0 (3); Glx, 2,9 (3); Ser, 3,7 (4); His, 2,8 (3); Gly, 1,1 (1); Thr, 0,9 (1); Alá, 1,9 (2); Arg, 2,0 (2); Tyr, 1,0 (1); Val, 1,7 (2); Phe 0,9 (1); Ile, 0,9 (1); Leu+Nle, 5,8 (2+4); Lys, 3,4 (3); Trp, 1,1 (1).
HU 211 348 A9
48. vegyület: AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK LHTMA-NH2 (62. számú szekvencia);
Alá | Val | Ser | Glu | His | Gin | Leu Leu | His Asp Lys Gly | Lys | Ser | Ile |
1 | 5 | 10 | 15 | |||||||
Gin | Asp | Leu | Arg | Arg | Arg | Glu Leu | Leu Glu Lys Leu | Leu | Glu | Lys |
20 | 25 | 30 | ||||||||
Leu | His | Thr | Met | Alá | nh2 | (62. számú szekvencia). |
Fizikai adatok:
o.p.: 140-210 C [tx]g = -47,75 (c = 0,178 H2O) FAB (C180H309N57O52S|): [M+H]+ = 4135,0 | ||||||
AAA: | Asx, | 2,3 (2 ) ,- Glx, | 5,6 | (6); Ser, 1,4 (2); | His, 3,2 (3); Gly, | 1,1 |
Thr, | 1,0 | (1); Alá, 2,0 ( | 2) ; | Arg, 3,1 (3); Val, | 0,9 (1); Met, 1,1 | (1) ; |
1,0 ( | 1) ; | Leu, 8,8 (8) ; Lys, | 4,4 (4) . |
50. vegyület: AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RFFLEKLLEK LHTA-NHj (64. sz. szekvencia);
Alá | Val | Ser | Glu | His | Gin Leu Leu His Asp Lys | Gly | Lys | Ser | Ile |
1 | 5 | 10 | 15 | ||||||
Gin | Asp | Leu | Arg | Arg | Arg Phe Phe Leu Glu Lys | Leu | Leu | Glu | Lys |
20 | 25 | 30 | |||||||
Leu | His | Thr | Alá | NH2 | (64. számú szekvencia). |
Fizikai adatok:
o.p.: 136,5-156,8 ’C [ot]g = -49,89’ (c = 0,24 H2O) FAB (Cl23H300N56O49): [M+H]* = 4056,0 AAA: Asx, 2,2 (2); Glx, 5,0 (5); Ser, 1,9 (2); His, 3,3 (3); Gly, 1,0 (1) Thr, 1,0 (1); Alá, 2,1 (2); Arg, 3,1 (3); Val, 1,0 (1); Phe, 2,0 (2); Ile C,9 (1); Leu, 7,2 (7); Lys, 3,5 (4),
51. vegyidet: AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLHKLLEK LHTA-NH2 (65. sz. szekvencia);
Alá | Val | Ser | Glu | His | Gin Leu | Leu His Asp Lys | Gly | Lys | Ser | Ile |
1 | 5 | 10 | 15 | |||||||
Gin | Asp | Leu | Arg | Arg | Arg Glu | Leu Leu His Lys | Leu | Leu | Glu | Lys |
20 | 25 | 30 | ||||||||
Leu | His | Thr | Alá | nh2 | (65. számú szekvencia). |
Fizikai adatok:
o.p.: 80,7-141.0 ’C [a]g = -55,38’ (c = 0,23 H2O)FAB (C,76H3fl0NjgO49): [M+H]+ = 4012,8 AAA: Asx, 2,2 (2); Glx, 4,9 (5); Ser, 1,8 (2); His, 4,3 (4); Gly, 1,1 (1) Thr, 1,0 (1); Alá, 2,0 (2); Arg, 3,1 (3); Val, 1,1 (1); Ile, 1,0 (1); Leu
8,1 ( 8) ; Lys, 3,9 (4).
52. vegyület: AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEHLLEK LHTA-NH2 (66 sz. szekvencia);
Alá | Val | Ser | Glu | His | Gin Leu Leu His Asp Lys | Gly | Lys | Ser | Ile |
1 | 5 | 10 | 15 | ||||||
Gin | Asp | Leu | Arg | Arg | Arg Glu Leu Leu Glu His | Leu | Leu | Glu | Lys |
20 | 25 | 30 | |||||||
Leu | His | Thr | Alá | nh2 | (66. számú szekvencia). |
Fizikai adatok:
o.p.: 134,3-157,9 ’C [ot]g = -50,72’ (c = 0,45 H2O) FAB (C,75H29JN57Oj,): [M+H]+ = 4012,8 AAA: Asx, 2,1 (2); Glx, 5,9 (6); Ser, 1,8 (2); His, 4,2 (4); Gly, 1,1 (1) Thr, 1,0 (1); Alá, 2,0 (2); Arg, 3,0 (3); Val, 1,1 (1); Ile, 0,9 (1); Leu
8,1 (8) ; Lys, 3,1 (3) .
53. vegyület: AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLIAK LHTA-NH2 (67. sz. szekvencia);
Alá | Val | Ser | Glu | His | Gin Leu Leu His Asp Lys | Gly | Lys | Ser | Ile |
1 | 5 | 10 | 15 | ||||||
Gin | Asp | Leu | Arg | Arg | Arg Glu Leu Leu Glu Lys | Leu | Ile | Alá | Lys |
20 | 25 | 30 | |||||||
Leu | His | Thr | Alá | nh2 | (67. számú szekvencia). |
HU 211 348 A9
Fizikai adatok:
o.p.: 142,7-159,8 C [a]g = -54,01’ (c = 0,21 H2O) FAB (C173H298N56O49): [M+H]+ = 3946,0 AAA: Asx, 2,2 (2); Glx, 4,9 (5); Ser, 1,8 (2); His, 3,1 (3); Gly, 1,1 (1); Thr, 1,0 (1); Alá, 3,1 (3); Arg, 3,1 (3); Val, 1,1 (1); Ile, 1,9 (2); Leu, 7,0 (7) ; Lys, 4,3 (4).
54. vegyület: AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEE IHTA-NH2 (68. sz. szekvencia);
Alá | Val | Ser | Glu | His | Gin Leu Leu His Asp Lys | Gly | Lys | Ser | Ile |
1 | 5 | 10 | 15 | ||||||
Gin | Asp | Leu | Arg | Arg | Arg Glu Leu Leu Glu Lys | Leu | Leu | Glu | Glu |
20 | 25 | 30 | |||||||
Ile | His | Thr | Alá | nh2 | (68. számú szekvencia). |
Fizikai adatok:
o.p.: 138-185 ’C [ot]g = -50,17’ (c = 0,14 H2O) FAB (C^HmjNjjOjj): [M+H]+ = 4005 AAA: Asx, 2,2 (2); Glx, 7,1 (7); Ser, 1,7 (2); His, 2,8 (3); Gly, 1,0 (1); Thr, 1,0 (1); Alá, 2,1 (2); Arg, 3,1 P'; Val, 1,1 (1); Ile, 1,7 (2); Leu,
7,1 (7); Lys, 2,7 (3).
58. vegyület: AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK LHTRSAW-NH2 (72. sz. szekvencia);
Alá | Val | Ser | Glu | His | Gin | Leu | Leu | His Asp | Lys Gly Lys Ser | Ile |
1 | 5 | 10 | 15 | |||||||
Gin | Asp | Leu | Arg | Arg | Arg | Glu | Leu | Leu Glu | Lys Leu Leu Glu | Lys |
20 | 25 | 30 | ||||||||
Leu | His | Thr | Arg | Ser | Alá | Trp | NH2 | (72. számú szekvencia). |
Fizikai adatok:
o.p.: 158-163 ’C («]§ = -46,06’ (c = 0,17 H2O) FAB (ΟΙ95Η327Ν63Οη): [M+H]+ = 4434,8
AAA: Asx, | 2,0 | (2); Glx, | 5,5 | (6); Ser, | 2,7 | (3) ; | His, | 3,1 | (3) ; | Gly, | 1,0 | (1) ; |
Alá, 1,8 | (2) ; | Arg, 4,0 | (4) ; | Thr, 0,9 | < 1) ; | Val, | 0,9 | (1) ; | Ile, | 0,9 | (1) ; | Leu, |
7,5 ( 8); | Lys, | 3,9 (4); | Trp, | 1,0 (1) . |
59. vegyület: AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK LHTRSAX-OH (73. sz. szekvencia); [X = Nal(2) = 3-(2-naftil)-L-alanin]
Alá | Val | Ser | Glu | His | Gin | Leu Leu His | Asp | Lys Gly | Lys Ser Ile |
1 | 5 | 10 | 15 | ||||||
Gin | Asp | Leu | Arg | Arg | Arg | Glu Leu Leu | Glu | Lys Leu | Leu Glu Lys |
20 | 25 | 30 | |||||||
Leu | His | Thr | Arg | Ser | Alá | 3-(2-naftil) | -L- | alanin-OH | t (73. számú |
szekvencia).
Fizikai adatok:
o.p.; 156-162 ’C [a]g = -44,44’ (c = 0,189 H2O) FAB (C|97H32gN62O55): [M+H]+ = 4445,6 AAA: Asx, 2,1 (2); Glx, 5,5 (5); Ser, 2,8 (3); His, 2,9 (3); Gly, 1,0 (1); Alá, 2,0 (2); Arg, 4,0 (4); Thr 0,9 (1); Val, 1,0 (1); Ile, 0,9 (1); Leu,
7,5 (8); Lys, 4,2 (4); Nal, 1,1 (1).
60. vegyület: AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK LHTASAW-OH (74. sz. szekvencia);
Alá | Val | Ser | Glu | His | Gin | Leu | Leu | His | Asp Lys | Gly | Lys | Ser | Ile |
1 | 5 | 10 | 15 | ||||||||||
Gin | Asp | Leu | Arg | Arg | Arg | Glu | Leu | Leu | Glu Lys | Leu | Leu | Glu | Lys |
20 | 25 | 30 | |||||||||||
Leu | His | Thr | Alá | Ser | Alá | Trp | OH | (74. | számú szekvencia). |
Fizikai adatok:
o.p.: 159-164 ’C [a]§ = -50,94’ (c = 0,29 H2O) FAB (¢,9^3^^,055): [M+H]+ = 4349,0
AAA: Asx, 2,0 | (2); Glx, 5,6 | (6) ; | Ser, 2,7 (3); His, 3,2 (3); Gly, | 1,0 | (1) | ||
Alá, 3,1 | (3) ; | Arg, 2,8 | (3) ; | Thr | 1,0 (1); Val, 1,1 (1); Ile, 0,90 | (1) ; | Leu |
7,6 (8) ; | Lys, | 4,0 (4); | Trp, | 1,0 | (1) · |
HU 211 348 A9
61. vegyület: AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK LHTAEIRA-OH (75. sz. szekvencia);
Alá | Val | Ser | Glu | His | Gin | Leu | Leu | His | Asp | Lys | Gly Lys | Ser Ile |
1 | 5 | 10 | 15 | |||||||||
Gin | Asp | Leu | Arg | Arg | Arg | Glu | Leu | Leu | Glu | Lys | Leu Leu | Glu Lys |
20 | 25 | 30 | ||||||||||
Leu | His | Thr | Alá | Glu | Ile | Arg | Alá | OH | (75. | számú szekvencia). |
Fizikai adatok:
o.p.: 155-210 ’C [a]g = ^6,15' (c = 0,12 H2O) FAB (CI95H334N62O58): [M+H]+ = 4475,8 AAA: Asx, 2,2 (2); Glx, 5,9 (7); Ser, 1,7 (2); His, 3,2 (3); Gly, 1,1 (1) Alá, 3,1 (3); Arg, 4,0 (4); Thr, 0,9 (1); Val, 1,1 (1); Ile, 1,9 (2); Leu
8,1 (8) ; Lys, 4,1 (4) .
62. vegyület: AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK LHTAEIR-OH (76. sz. szekvencia);
Alá | Val | Ser | Glu | His | Gin | Leu | Leu | His | Asp Lys Gly Lys Ser | Ile |
1 | 5 | 10 | 15 | |||||||
Gin | Asp | Leu | Arg | Arg | Arg | Glu | Leu | Leu | Glu Lys Leu Leu Glu | Lys |
20 | 25 | 30 | ||||||||
Leu | His | Thr | Alá | Glu | Ile | Arg | OH | (76. | számú szekvencia). |
Fizikai adatok:
o.p.: 186-218 ’C [a]§ = -52,73° (c = 0,265 H2O) FAB (C,92H329N6)O57): [M+H]+ = 4404,4 AAA: Asx, 2,0 (2); Glx, 6,5 (7); Ser, 1,9 (2); His, 3,4 (3); Gly, 1,1 (1) Alá, 2,0 (2); Arg, 3,8 (4); Thr, 1,0 (1); Val, 1,1 (1); Ile, 1,7 (2); Leu
7,9 (8); Lys, 4,0 (4) .
63. vegyület: AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK LHTAEI-OH (77. sz. szekvencia);
Alá | Val | Ser | Glu | His | Gin | Leu | Leu | His Asp Lys Gly Lys | Ser | Ile |
1 | 5 | 10 | 15 | |||||||
Gin | Asp | Leu | Arg | Arg | Arg | Glu | Leu | Leu Glu Lys Leu Leu | Glu | Lys |
20 | 25 | 30 | ||||||||
Leu | His | Thr | Alá | Glu | Ile | OH | (77 . | számú szekvencia). |
Fizikai adatok:
o.p.: 169-205 ’C [a]g = -50,78’ (c = 0,51 H2O) FAB (C|86H„7N57O,6): [M+H]+ = 4248,0
AAA : | Asx, | 2,2 | (2) ; | Glx, | 6,8 | (7) ; | Ser, 1,8 | (2) ; | His, 3,3 | (3) ; | Gly, | 1,0 | (1) |
Alá, | 2,0 | (2) ; | Arg, | 3,0 | (3) ; | Thr, | 1,0 (1) ; | Val, | 1,0 (1); | Ile, | 1,8 | (2) ; | Leu |
7,8 (8); | Lys, | 3 , 6 | (4) . |
64. vegyület: AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK LHTAE-OH (78. sz. szekvencia);
Alá | Val | Ser | Glu | His | Gin | Leu | Leu His Asp Lys Gly | Lys | Ser | Ile |
1 | 5 | 10 | 15 | |||||||
Gin | Asp | Leu | Arg | Arg | Arg | Glu | Leu Leu Glu Lys Leu | Leu | Glu | Lys |
20 | 25 | 30 | ||||||||
Leu | His | Thr | Alá | Glu | OH | (78. | számú szekvencia). |
Fizikai adatok:
o.p.: 199-205 ’C [a]§ = -52,47 (c = 0,41 H2O) FAB (C18oH306N,6Oj5): [M+Hf = 4135,0 AAA: Asx, 2,0 (2); Glx, 6,6 (7); Ser, 1,9 (2); His, 3,3 (3); Gly, 1,1 (1) Alá, 2,0 (2); Arg, 2,9 (3); Thr, 1,0 (1); Val, 1,1 (1); Ile, 1,0 (1); Leu
8,2 (8); Lys, 3,8 (4).
66. vegyület: SEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK LHTA-NH, (80. sz szekvencia);
Ser | Glu | His | Gin | Leu Leu His Asp Lys | Gly | Lys | Ser | Ile | Gin | Asp |
1 | 5 | 10 | 15 | |||||||
Leu | Arg | Arg | Arg | Glu Leu Leu Glu Lys | Leu | Leu | Glu | Lys | Leu | His |
20 | 25 | 30 | ||||||||
Thr | Alá | NH- | (80 . | számú szekvencia). |
HU 211 348 A9
Fizikai adatok:
o.p.: 134,2 ’C [oc]g = -48,12’ (c = 0,36 H2O) FAB (CiA^O#): [M+H]+ = 3834,4 AAA: Asx, 2,0 (2); Glx, 5,7 (6); Ser, 1,7 (2); His, 2,9 (3); Gly, 1,0 (1); Thr, 0,9 (1); Ala, 1,0 (1); Arg, 2,8 (3); Ile, 1,0 (1) Leu, 8,2 (8); Lys, 3,8 (4) .
67. vegyület: LLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK LHTA-NH2 (81. sz. szekvencia);
Leu | Leu | His Asp Lys | Gly Lys | Ser | Ile | Gin | Asp | Leu | Arg | Arg | Arg |
1 | 5 | 10 | 15 | ||||||||
Glu | Leu | Leu Glu Lys | Leu Leu | Glu | Lys | Leu | His | Thr | Ala | nh2 | |
20 | 25 | 30 | |||||||||
(81. | . sz. | . szekvencia! | 1 . |
Fizikai adatok:
o.p.: 128,5-184,5 ’C [a]g = -6,53’ (c = 0,69 MeOH) FAB (C148H259N47O4,): [M+H]+ = 3353 AAA: Asx, 2,0 (2); Glx, 4,1 (4); Ser, 0,9 (1); His, 2,1 (2); Gly, 1,0 (1); Thr 0,9 (1); Ala, 1,0 (1); Arg, 3,0 (3); Ile, 1,0 (1); Leu, 8.1 (8); Lys,
4,2 (4).
68. vegyület: LHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK LHTA-NH2 (82. sz. szekvencia);
Leu His Asp Lys Gly | Lys | Ser | Ile | Gin | Asp | Leu | Arg | Arg | Arg Glu |
1 5 | 10 | 15 | |||||||
Leu Leu Glu Lys Leu | Leu | Glu | Lys | Leu | His | Thr | Ala | NH2 | |
20 | 25 | 30 | |||||||
(82. sz. szekvencia) | 1 . |
Fizikai adatok:
o.p.: 165-210 ’C [a]g = -36,05’ (c = 0,12 H2O) FAB (C^H^N^O^): [M+H]+ = 3239,0 AAA: Asx, 2,0 (2); Glx, 3,9 (4); Ser, 0,9 (1); His, 1,9 (2); Gly, 1,0 (1); Thr, 1,0 (1); Ala, 1,0 (1); Arg, 2,9 (3); Ile, 0,9 (1); Leu, 6,8 (7); Lys,
4,2 (4) .
69. vegyület: SEHQLLHD RGRS1QDLRR RELLERLLER LHAGRRTRSAW-OH (83. sz. szekvencia);
Ser | Glu | His | Gin | Leu | Leu | His | Asp | Arg | Gly | Arg | Ser | Ile | Gin | Asp |
1 | 5 | 10 | 15 | |||||||||||
Leu | Arg | Arg | Arg | Glu | Leu | Leu | Glu | Arg | Leu | Leu | Glu | Arg | Leu | His |
20 | 25 | 30 | ||||||||||||
Leu | His | Arg | Gly | Arg | Arg | Thr | Arg | Ser | Ala | Trp | OH | (83. | számú szekvencia) |
Fizikai adatok:
o.p.: 150-210 ’C [a]g = -18,0 (c = 0,64 H2O) FAB (^,Η,,,Ν,,Ο,»): [M+H]+ = 4918,6 AAA: Asx, 2,2 (2); Glx, 6,2 (6); Ser, 2,8 (3); His, 3,1 (3); Gly, 2,2 (2); Thr, 2,2 (2) Ala, 2,2 (2); Arg, 10,4 (10); Ile, 1,0 (1); Leu, 8,0 (8); Trp,
1,1 (1).
70. vegyület: LLHD RGRS1QDLRR RELLERLLER LHAGRRTRSAW-OH (84. sz. szekvencia);
Leu | Leu | His | Asp | Arg | Gly | Arg | Ser Ile | Gin Asp Leu Arg Arg | Arg |
1 | 5 | 10 | 15 | ||||||
Glu | Leu | Leu | Glu | Arg | Leu | Leu | Glu Arg | Leu His Leu His Arg | Gly |
20 | 25 | 30 | |||||||
Arg | Arg | Thr | Arg | Ser | Ala | Trp | OH (84. | számú szekvencia). |
Fizikai adatok:
o.p.: 150-210 C [a]g = -41,70’ (c = 0,36 H2O) FAB (CI89H324N72O52): [M+H]+ = 4437,14 AAA: Asx, 2,1 (2); Glx, 4,1 (4); Ser, 1,9 (2); His, 2,0 (2); Gly, 2,1 (2) ; Thr, 2,0 (2); Ala, 2,1 (2); Arg, 9,7 (10); Ile, 0,9 (1); Leu, 7,4 (8).
HU 211 348 A9
Az oldalláncaival ciklizált analógot (57. vegyület) szintén a fentiek szerint szintetizáltuk, azzal a különbséggel, hogy a 13. és 17. helyre N“-Boc-N8Fmoc-Lys-t és N“-Boc-N8-Fmoc-Asp-t helyeztünk. A Boc aminosav szintézisének elvégzése után a gyantát szobahőmérsékleten 30 percig DMF-ben 20%-os piperidinnel kezeltük. A gyantát leszűrtük, DMF-fel, metanollal és diklór-metánnal (CH2CI2) mostuk. A gyantát (1,1 g) 250 mg PyBOP-t tartalmazó 10 ml
DMF-ben szuszpendáltuk. A pH-t DIEA-val 8-9 értékre állítottuk be, és a gyantát egy órán keresztül kevertük, majd leszűrtük, DMF-fel és diklór-metánnal mostuk, s DMF-ben reszuszpendáltuk. Az össze5 kapcsolást 125 mg ByBOP alkalmazásával megismételtük. A gyantát szűrtük, DMF-fel, metanollal és diklór-metánnal mostuk, majd szárítottuk. A gyantát végül hidrogén-fluoriddal kezeltük, s a peptidet a fentebb leírtak szerint tisztítottuk.
57. vegyület: AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK LHTA-NH2 (71. sz. szekvencia)
Alá | Val | Ser | Glu | His | Gin Leu Leu His Asp Lys | Gly | Lys | Ser | Ile |
1 | 5 | 10 | 15 | ||||||
Gin | Asp | Leu | Arg | Arg | Arg Glu Leu Leu Glu Lys | Leu | Leu | Glu | Lys |
20 | 25 | 30 | |||||||
Leu | His | Thr | Alá | nh2 | (71. számú szekvencia). |
Fizikai adatok:
o.p.: 142,5-163,5 C [a]g =-34,31' (c = 0,17 H2O) FAB (C175H298N56O50): [M+H]+ = 3986,4 AAA: Asx, 1,9 (2); Glx, 5,9 (6); Ser, 1,8 (2); His, 3,2 (3); Gly, 1,1 (1); Alá, 2,0 (2); Arg, 3,0 (3); Thr 1,0 (1); Val, 1,1 (1); Ile, 0,9 (1) Leu, 8,0 (8); Lys, 4,0 (4).
2. példa
Az 1. vegyületet [Met34, Alá35] (AVSEHQLLH- 25 DKGKS1QDLRRRELLEKLLEKLHTMA-NH2 (25. számú szekvencia) az 1. példa szerinti eljárással szintetizáltuk és tisztítottuk. Ezt a polipeptidet az alábbi eljárással homoszerin-laktonná alakítottuk. A tisztított peptidet (160 mg) 44%-os hangyasavban (4 ml) feloldottuk, majd ezt az 30 oldatot 0 °C-on 44%-os hangyasavban (4 ml) készített cián-bromid (700 mg) és fenol (1,6 mg) oldatával elegyítettük. A kapott oldatot 0 C-on két óráig, és szobahőmérsékleten szintén két óráig kevertük. A tennék kialakulását HPLC-vel ellenőriztük (Vydac* C-18, 300 Á, 4,6x250 mm, 1,2 ml/perc átfolyási sebesség, 0,1% TFA-ban 2545%-os acetonitril gradiens, 10 perces időtartam). A reakció négy órán belül lejátszódott. A minta felét bekoncentráltuk és preparatív RP-HPLC-n tisztítottuk (VydaxR ΟΙ 8.0,1% TFA-ban 25-45%-os acetonitril gradiens). Ahomoszerin-lakton peptidffakciókat összegyűjtöttük és liofilizáltuk, miáltal 28 mg, 95%-osnál nagyobb tisztaságú fehér, szilárd terméket (4. vegyület) kaptunk.
4. vegyület: AVSEHQLLHDKGKSIQDLRRRELLEKLLEKLLHTX (X = hSerlac 9. számú szekvencia);
Alá | Val | Ser | Glu | His | Gin | Leu | Leu His | Asp | Lys | Gly | Lys | Ser | Ile |
1 | 5 | 10 | 15 | ||||||||||
Gin | Asp | Leu | Arg | Arg | Arg | Glu | Leu Leu | Glu | Lys | Leu | Leu | Glu | Lys |
20 | 25 | 30 | |||||||||||
Leu | His | Thr | hSerlac | (9. | számú szekvencia | ) |
Fizikai adatok:
o.p.: 138-142 'C [a]g = -50,66 (c = 0,1 H2O) FAB (C,76H299N55OS2): [M+H]+ = 4017,61 AAA: Asp, 2,1 (2); Glu, 6,1 (6); Ser, 1,8 (2); His, 3,0 (3); Thr, 1,1 (1); Alá, 1,1 (1); Arg, 2,7 (3); Val, 1,0 (1); Ile, 1,0 (1); Leu, 8,2 (8); Lys,
3,8 (4); Gly, 1,09 (1); hSer, 1,09 (1).
A 65. vegyületet szintén a fenti eljárással állítottuk elő.
65. vegyület: AVSEIQFX,HN KGKHLSSX,ER VEWLRKKLQD VHNXj (79. számú szekvencia) (X, = Enorleucin; X2 = homoszerin-lakton)
Alá | Val | Ser | Glu Ile | Gin Phe Nle His Asn Lys | Gly | Lys | His | Leu |
1 | 5 | 10 | 15 | |||||
Ser | Ser | Nle | Glu Arg | Val Glu Trp Leu Arg Lys | Lys | Leu | Gin | Asp |
20 | 25 | 30 | ||||||
Val | Hí s | Asn | hSerlac | (79. számú szekvencia). |
Fizikai adatok:
o.p.: 166-176 °C [a]g = -52,22 (c = 0,25 H2O) FAB (C180H288N5405o): [M+H]+ = 4008,6 AAA: Asx, 3,1 (3); Glx, 4,8 (5); Ser, 2,9 (3); His, 2,9 (3); Gly, 1,1 (1); Alá, 1,1 (1); Arg, 2,0 (2); Val, 2,7 (3); Ile, 1,0 (1); Leu+Nle, 5,9 (4+2); Lys, 2,8 (3) ; Phe, 1,0 (1) .
HU 211 348 A9
3. példa
Homoszerin-amid előállításához a nyers homoszerinlakton analógot (4. vegyület) bekoncentráltuk, és metanolban 25 ml telített ammóniával kezeltük. Az oldatot 0 C-on két óráig, és szobahőmérséklten 16 óráig kever- 5 tűk. A reakciót HPLC-vel ellenőriztük (VydacR C-l 8,
300 Á, 4,6x250 mm, 1,2 ml/perc átfolyási sebesség,
0,1% TFA-ban 25-45%-os acetonitril gradiens), és 18 órán belül befejeztük. Az oldatot bekoncentráltuk és preparatív RP-HPLC-vel (VydacR C-l 8, 0,1% TFA-ban 25-45%-os acetonitril gradiens) tisztítottuk. A homoszerin-amid peptid frakciókat összegyűjtöttük és liofilizáltuk, miáltal 30 mg, 98%-osnál nagyobb tisztaságú fehér, szilárd terméket (3. vegyület) kaptunk.
3. vegyület: AVSEHQLLHD KGKSIQDLRRRELLEKLLEKLHTX-NH2 (X = hSer; 8. sz. szekvencia);
Alá | Val | Ser | Glu | His Gin Leu | Leu His Asp Lys | Gly | Lys | Ser | Ile |
1 | 5 | 10 | 15 | ||||||
Gin | Asp | Leu | Arg | Arg Arg Glu | Leu Leu Glu Lys | Leu | Leu | Glu | Lys |
20 | 25 | 30 | |||||||
Leu | His | Thr | hSer NH2 (8. számú szekvencia). |
Fizikai adatok:
o.p.: 138-142 C [a]g = -45,97 (c = 0,25 H2O) FAB (Ci76H302NJ6O32): [M+H]+ = 4033,9 AAA: Asp, 2,1 (2); Glu, 6,1 (6); Ser, 1,6 (2); His, 2,8 (3); Gly, 0,97 (1); hSer, 0,97 (1); Thr, 1,0 (1); Alá, 1,0 (1); Arg, 2,9 (3); Val, 1,0 (1 > ;
Ile, 1,0 (1); Leu, 7,6 (8); Lys, 3,9 (4).
A 22., 23. és 28. vegyületet hasonló módon, szintén a fenti eljárás szerint állítottuk elő.
22. vegyület: AVSEIQFLHN LGKHLSSLRR RELLEKLLEK LHNX-NH2 (X = homoszerin; 36. sz. szekvencia);
Alá | Val | Ser | Glu | Ile | Gin | Phe | Leu His Asn Leu Gly Lys | His | Leu | |||
1 | 5 | 10 | 15 | |||||||||
Ser | Ser | Leu | Arg | Arg | Arg | Glu | Leu | Leu Glu Lys | Leu | Leu | Glu | Lys |
20 | 25 | 30 | ||||||||||
Leu | His | Asn | hSer | NH2 | (36 | . számú | szekvencia). |
Fizikai adatok:
o.p.: 69,4-128 C [a]g = -43,93' (c = 0,15 H2O) FAB (C,79H302N36O49): [M+H]+ = 4022,9 AAA: Asx, 2,0 (3); Glx, 4,9 (5); Ser, 2,6 (3); His, 2,8 (3); Gly, 1,0 (1):
Alá, 1,0; (1); Arg, 3,0 (3); Val, 1,0 (1); Phe, 1,0 (1); Ile, 0,9 (1) Leu,
8,8 (9); Lys, 3,4 (3) .
23. vegyület: AVSEIQFLHN KGKHLSSLRR RELLEKLLEK LHNX-NH2 (X = homoszerin; 37. sz. szekvencia);
Alá | Val | Ser | Glu | Ile Gin | Phe Leu | His Asn Lys | Gly | Lys | His | Leu |
1 | 5 | 10 | 15 | |||||||
Ser | Ser | Leu | Arg | Arg Arg | Glu Leu | Leu Glu Lys | Leu | Leu | Glu | Lys |
20 | 25 | 30 | ||||||||
Leu | His | Asn | hSer | NH2 (37 | . s zámú | szekvencia). |
Fizikai adatok:
o.p.: 87,1-142,1 C [a]g = -52,14’ (c = 0,41 H2O) FAB (C179H303N37O49): [M+H]+ = 4038 AAA: Asx, 2,1 (2); Glx, 4,9 (5); Ser, 2,7 (3); His, 2,8 (3); Gly, 1,0 (1); hSer, 1,0 (1); Alá, 1,0 (1); Arg, 3,0 (3); Val, 1,1 (1); Phe, 0,9 (1); Ile, 0,9 {11; Leu, 7,9 (8); Lys, 3,7 (4).
28. vegyület: AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLERLLER LHTAGRRX-NH2 (X = homoszerin; 42. sz. szekvencia);
Alá Val Ser Glu His Gin Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile
10 15
Gin Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Arg Leu Leu Glu Arg 20 25 30
Leu His Thr Alá Gly Arg Arg hSer NH2 (42. számú szekvencia).
Fizikai adatok:
o.p.: 80 C [Ot]g = -48,64 (c = 0,09 H2O) FAB (C193H334N70O56): [M+H]+ = 4530,0
AAA: Asx, 2,2 (2); Glx, 6,1 (6); Ser, 1,7 (2); His, 3,0 (3); Gly, 1,9 (2);
HU 211 348 A9 hSer, 1,0 (1); Thr, 1,0 (1); Alá,
2,1 (2); Arg, 7,2 (7); Val, 0,8 (1); Ile, 1,0 (1); Leu, 8,4 (8);
Lys, 2,1 (2).
A honoszerin-alkil-amidokat hasonlóan homoszerin-laktonből állítottuk elő, oly módon, hogy azt a megfelelő alkil-amin feleslegét tartalmazó DMF-ben oldottuk fel, és szobahőmérsékleten néhány napig végzett keverést követően (a reakciót analitikai HPLC-vel ellenőriztük) az elegyet szárazra pároltuk, majd a pep5 tidet preparatív HPLC-vel tiszítottuk. A jellemző homoszerin-alkil-amidok az 55. és 56. vegyületek.
55. vegyület: AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK LHTX-NHCH2CH3 (X = homoszerin; 69. sz. szekvencia):
Alá Val Ser Glu His Gin Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile
10 15
Gin Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys 20 25 30
Leu His Thr hSer NHCH2CH3 (69. számú szekvencia).
Fizikai adatok:
o.p.: (nem meghatározott) ’C [a]ő = nem meghatározott) FAB (Ci78H3o6N56052): [M+H]+ = 4063,0 .AAA: Asx, 2,± (2); Glx, 5,8 (6); Ser, 1,7 (2); His, 3,1 (3); Gly, 0,9 (1) ; Thr, 1,0 (1); Alá, 0,9 (1); Arg, 3,0 (3); Val, 1,1 (1); Ile, 1,0 (1); Leu, 8,4 (8); Lys, 3,7 (4); hSer 0,9 (1).
56. vegyület: AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK LHTX-NHCH2CH2C6H5 (X = homoszerin; 70. sz. szekvencia);
Alá | Val | Ser | Glu | His | Gin | Leu | Leu | His | Asp | Lys | Gly | Lys | Ser | Ile |
1 | 5 | 10 | 15 | |||||||||||
Gin | Asp | Leu | Arg | Arg | Arg | Glu | Leu | Leu | Glu | Lys | Leu | Leu | Glu | Lys |
20 | 25 | 30 | ||||||||||||
Leu | His | Thr | hSer | NHCH2CH | 2CeH5 | (70 | . számú | szekvencia). |
Fizikai adatok:
o.p.: (nem meghatározott) [a]^ = nem meghatározott) FAB (Ο]ΜΗ3|0Ν56θ52): [M+H]+ = 4138,8 AAA: Asx, 2,0 (2); Glx, 5,9 (6); Ser, 1,7 (2); His, 2,9 (3); Gly, 0,9 (1); Thr, 1,0 (1); Alá, 0,9 (1); Arg, 3,0 (3); Val, 1,0 (1); Ile, 0,9 (1) Leu, 8,0 (8); Lys, 4,1 (4); hSer 0,9 (1) .
4. példa
Az 1. példában alkalmazott Boc-Ala gyanta helyett Merrifield-gyantához (DMF-ben 50 ’C-on, 48 órás kezeléssel) kapcsolt Na-Boc-Nc-Fmoc-L-2,4-diaminovajsav céziumsót használtunk. A szintézis befejezésével az Fmoc oldallánc-védőcsoport eltávolítása érdekében a peptidet 30 percig, szobahőmérsékleten, DMFben 20%-os piperidinnel kezeltük. A védeti peptid spontán laktámmá ciklizálódott, miáltal lehasadt a gyantáról. Az oldatot leszűrtük a gyantáról, és vákuum alatt bepároltuk, s így olaj maradt vissza. Ezt a maradékot az 1. példában leírtak szerint folyékony hidrogénfluoriddal kezeltük, miáltal védőcsoport nélküli nyers peptidet kaptunk. A peptidet az 1. példában leírt módon kezeltük és tisztítottuk.
49. vegyület: AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK LHTX (X = L-2,4-diamino-butiril-laktám; 63. sz.
szekvencia); |
Alá Val Ser Glu His Gin Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile |
15 10 15 |
Gin Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys |
20 25 30 |
Leu His Thr L-2,4-diamino-butiril-laktam (63. számú szekvencia |
Fizikai adatok:
o.p.: 161-181 ’C [oc]g = -48,38’ (c = 0,25 H2O) FAB (C176H30oN56051): [M+H]+ = 4016,8 AAA: Asx, 2,1 (2); Glx, 6,3 (6); Ser, 1,7 (2); His, 3,3 (3); Gly, 1,1 (1); Thr, 1,0 (1); Alá, 2,1 (2); Arg, 2,9 (3); Val, 0,9 (1); Ile, 0,9 (1); Leu, 8,0 (8); Lys, 3,8 < 4) .
HU 211 348 A9
5. példa
A 2. példában előállított homoszerin-lakton analóg vizes oldatát sertésmáj észterázzal (Sigma Chemical Company, Sl. Louis, MO) kezeltük. A lakton C-terminális homoszerint eredményező hidrolízisét analitikai HPLC-vel ellenőriztük. Amikor úgy ítéltük, hogy a hidrolízis befejeződött, az anyagot az 1. példában leírtak szerint preparatív HPLC-vel tiszítottuk.
37. vegyület: AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK LHTX-OH (X = homoszerin; 51. sz. szekvencia);
Ala | Val | Ser | Glu | His | Gin | Leu | Leu His Asp Lys | Gly | Lys | Ser | He |
1 | 5 | 10 | 15 | ||||||||
Gin | Asp | Leu | Arg | Arg | Arg | Glu | Leu Leu Glu Lys | Leu | Leu | Glu | Lys |
20 | 25 | 30 | |||||||||
Leu | His | Thr | hSer OH | (51. | . számú szekvencia). |
Fizikai adatok:
o.p.: (nem meghatározott [a]§ = (nem meghatározott) FAB (Ci76H30|N55Oj3): [M+H]+ = 4035,1 AAA: Asx, 2,1 (2); Glx, 5,9 (6); Ser, 2,0 (2); His, 3,1 (3); Gly, 0,8 (1); hSer, 0,8 (1); Thr, 1,0 (1); Ala, 1,0 (1); Arg, 3,0 (3); Val, 1,3 (1); lle, 1,0 (1); Leu, 8,1 (8); Lys, 3,8 (4).
6. példa
Az 1. példa szerint, 0,35 mmól mennyiségben a 20 BocAVS(Bzl)-E(OBz)H(Bom)QLLHD(OBzl)R(Ts) GR(Ts)S(Bzi)IQD(OBz)LR(Ts)R(Ts)-E(OBz)LLE(O Bzl)R(Ts)LLK(Fmoc)R(Ts)LH(Bom)T(Bzl)A-O-PAM védett peplid-gyanta komplexumot szintetizáltuk. Valamennyi N“-csoportot t-butoxi-karbonil (Boc) védőcsoporttal védtük, az oldalláncok védőcsoportjait pedig feltüntettük. A szintézis befejezése után a peptid-gyanta komplexumot a lizin fluorenil-metoxi-karbonil védőcsoportja eltávolítása érdekében, szobahőmérsékleten 30 percig dimetil-formamidban (DMF) készített 50 30 ml 20%-os piperidinnel kezeltük. A lizint egymás után DMF-fel, metanollal, diklór-metánnal mostuk, majd szárítottuk, miáltal 1,6 g részletesen védett peptidet kaptunk. A részlegesen védett peptid 0,8 g-ját (0,175 mmól) (a lizin aminosavon) szobahőmérsékleten 5 órán keresztül 20 ml DMF-ben, 0,16 g (0,3 mmól) benzo-triazoloxi-trisz(pirrolidino)-foszfónium-hexafl uor-foszfát (PyBop) és 0,067 g (0,525 mmól) diizopropil-etil-amin (DIEA) jelenlétében 0,44 g (0,3 mmól 25 metoxi-di(etilén-oxi)-ecetsavval [PEG(2)CH2COOH] acileztük. Öt óra elteltével a gyantát leszűrtük, és egymás után DMF-fel, metanollal, diklór-metánnal mostuk. Az acilezéses lépést kétszer ismételtük, még a gyantán negatív hinhidrid-reakciót nem kaptunk. A kész peptidet az 1. példában leírt módon az oldalláncvédőcsoportok eltávolításával és tisztítással hasítottuk le a gyantáról, s termékként a 19. vegyület 100 mg-ját kaptuk.
19. vegyület: AVSEHQLLHDRGRSIQDLRRRELLERLLKRLHTA-OH (18. sz. szekvencia); ___I
CH,O(CHjCH2O)2CH2C = o
Ala Val Ser Glu His Gin Leu Leu His Asp Arg Gly Arg Ser lle 15 10 15
Gin Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Arg Leu Leu
25 30
Lys (COCH2PEG2) Arg Leu His Thr Ala OH (18. számú szekvencia).
Fizikai adatok:
o.p.: 145-195 ’C [a]§ = -44,60' (c = 0,2 H2O) FAB (C^H^N^O.*): [M+H]+ = 4276,2 AAA: Asp, 2,1 (2); Glu, 5,0 (5); Ser, 1,6 (2); His, 2,9 (3); Gly, 0,9 (1); Thr, 1,9 (2); Arg, 7,1 (7); Val, 1,1 (1); lle, 1,0 (1) Leu, 8,0 (8); Lys, 0,9 (1).
7. példa
A peptidet a 4. példában leírt módon szintetizáltuk, hasítottuk és tisztítottuk, azzal a különbséggel, hogy acilezőszerként 2-metoxi-poli(etilén-oxi)ecetsavat [PEG(5000)CH2C02H] alkalmaztunk. A részlegesen 50 védett peptid 0,8 g-jából (0,175 mmól) 300 mg tiszta peptidet (20. vegyület) állítottunk elő.
20. vegyület: AVSEHQLLHDRGRSIQDLRRRELLERLLKRLHTA-OH (19. sz. szekvencia); CH,O(CH2CH2O)„0CH2C = 0
Ala Val Ser Glu His Gin Leu Leu His Asp Arg Gly Arg Ser He 15 10 15
Gin Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Arg Leu Leu
25 30
HU 211 348 A9
Lys (COCH2PEG5000) Arg Leu His Thr Alá OH (19. számú szekvencia).
Fizikai adatok:
o.p.: 105 ’C [a]g = -22,95’ (c = 0,11 50%aq,HOAc)
AAA: Asp, | 2,0 | (2) ; | Glu, | 4,8 | (5) ; |
Ser, 1,6 | (2) ; | His, | 2,6 | (3) ; | Gly, |
1,1 (1); | Thr, | 1,1 | (2) ; | Arg, | 7,3 |
(7) Val, | 0,8 | (1) ; | Ile, | 0,9 | (1) ; |
Leu, 8,3 | (8) ; | Lys, | 1,8 | (2) ; | Alá, |
1,8 (2) . |
8. példa
A hPTHrpl 1-34) analóg génjének szintézise A hPTHrp(l-34) analógot (4. vegyület; 9. számú szekvencia) kódoló szintetikus gént szerkesztettünk, amely az 1. ábrán bemutatott nukleotid-szekvenciával és restrikciós enzimes hasítási helyekkel rendelkezik. A szükséges oligodezoxinukleotidokat Sinha és mtsi eljárásával (Nucleic Add Research, 12, 45394557, 1984) DNS-szintetizátoron (Milligen/Biosearch) készítettük. A védőcsoportok eltávolítása után a nyers oligonukleotidokat preparatív 15%-os poliakrilamid gélen gélelektroforézissel tisztítottuk. Az oligonukleotidok helyét UV-vel határoztuk meg; ezeket kivágtuk a gélből, majd Waters Cl8 Sep-pakR tölteten sótalanítottuk és liofilizáltuk.
A polimeráz láncreakcióval (PCR) végzett amplifikációt „GeneAmp” DNS amplifikációs kit (Perkin-Elmer Cetus) reagenseinek (köztük Taq-polimeráz) alkalmazásával Perkin-Elmer Cetus PCR-készüléken hajtottuk végre, 25 ciklussal (1 percig 90 ’C-on, 2 percig
50 ’C-on és 3 percig 72 ’C-on). A hPTHrp(l-34) analóg gén templát DNS-szekvenciájaként két átfedő oligonukleotidot állítottunk elő; az egyik egy 88mer (2 pg), a PTH3 (31. sz. szekvencia):
CCTCTAGATC TCCGCGGCGC TAGC | ATG | GCT | GTT | TCT | GAA | CAT | CAG | 45 |
Met | Alá | Val -1 | Ser | Glu | His | Gin c | ||
CTG CTT CAT GAC AAA GGT AAA | TCG | ATT | X CAA | GAT | CTG | AGA | X CGT | C 88 |
Leu Leu His Asp Lys Gly Lys | Ser | Ile | Gin | Asp | Leu | Arg | Arg | |
10 | 15 | 20 | ||||||
másik egy anti-szensz 90mer (2 | pg) , | a PTH4 | (32 . | . sz. | szekvencia); | |||
CCTCGAAGCT TATGCATCAT TATCTTAGA | CAT | AGT | ATG | CAG | CTT | TTC | 46 | |
Met | Thr | His | Leu | Lys | Glu |
AAG CAG TTT CTC CAG CAG CTC GCG ACG TCT CAG ATC TTG AAT CG 90 Leu Leu Lys Glu Leu Leu Glu Arg Arg Arg Leu Asp Gin Ile
20 15
A két szegélyező primer, a PTHPCR1: CCTCTAGATC TCCGCGGCGC
TAG (33. sz. szekvencia) és PTHPCR2: CCTCGAAGCT TATGCATCAT TATC (34. sz. szekvencia) alkalmazásával PCR-rel teljes gént amplifikáltunk. Az amplifikált DNS-terméket 4%-os NuSieveR agaróz gélen gélelektroforézissel tisztítottuk. A hozzávetőleg 150 bázis hosszúságú, szintetikus hPTHrp(l-34) analóg gént tartalmazó sávot kivágtuk a gélből, és Elu-QuickR üveg gél DNS extrakcióval (Schleicher & Schuell, Keene, NH) hozzávetőleg 200 ng DNS-t izoláltunk.
9. példa:
a hPTHrpl 1-34)1 analóg gén molekuláris klónozása
A 6. példa szerinti hPTHrp(l-34) analóg gén szubklónozásához az amplifikált DNS 200 ng-ját izoláltuk és HindlII és SacI restrikciós enzimekkel hasítottuk. Amint a 2. ábrán látható, a DNS-t 2 pg, előzetesen HindlII-mal és SacII-vel hasított Trp LE 18 Prot (Ile3, Pro5) Plazmidhoz ligáltuk.
A kapott, hPTHrp(l-34) analóg gén egy példányát tartalmazó Trp LE 18 hpPTHrp( 1-34)1 plazmidot kompetens E. coli HB 101 sejtekbe (CLONTECH, Palo Alto, CA) transzformáltuk. A transzformánsokat az inszerció igazolása érdekében PCR-analízisnek vetettük alá. Kiválasztottuk a transzformált sejttelepeket, és azokat 5 percig 200 pl vízben forraltuk, ebből 2 pl-t az inszertet szegélyező két primerrel együtt PCR-nek vetettük alá. A PCR terméket ezután 1%-os agaróz gélen analizáltuk, hogy igazoljuk a hPTHrp(l-34) gén inszert egy példányának jelenlétét. A Trp LE 18 hPTHrp(l-34) plazmidot automatizált DNS-szekventoron (Applied Biosystems Model 373A, Foster City, CA), a forgalmazó Dye Deoxy Terminator Sequering kit-jének felhasználásával azonosítottuk.
10. példa:
A hPTHrpl 1-34) analóg gén több példányát tartalmazó Trp LE 18 vektor előállítása Az egyedüli Nhel és Xbal restrikciós hasítási helyek a hPTHrpí 1-34) analóg gén szekvenciájának kezdetéhez és végéhez közel helyezkednek el. Ez a kél restrikciós hely, amely különböző szekvenciákat ismer fel, de azonos egyszálú kohéziós terminálisokat képez, lehetővé teszi a Trp LE 18 vektoron belül a hPTHrp(l34) gén több példányának kialakítását.
Az egymás utáni ismételt hPTHrp(l-34) szekvenciák kialakításának folyamatát a 3. ábrán vázoljuk. A gén egy példányát tartalmazó Trp LE 18 hPTHrp(l34)1 plazmid 5 pg-ját külön reakciókban BamHI+Nhel, valamint Xbal+BamHI enzimekkel hasítottuk. Mindegyik emésztésből a hPTHrp(l-34) analóg gént tartalmazó fragmens kb. 300 ng-ját izoláltuk. A
HU 211 348 A9 két fragmenst összekevertük és ligáltuk, miáltal a Trp LE 18 hPTHrp(l-34)2 plazmidot hoztuk létre, amelyet kompetens E. coli HB 101 sejtek transzformálásához használtunk. A hPTHrp(l-34) gén inszert két példánya jelenlétének meghatározásához a transzformált PCRtermékek 1%-os agaróz gélen végzett méret-meghatározását alkalmaztuk. A gén két példányát tartalmazó Trp LE 18 hPTHrp(l-34)2 plazmidot DNS-szekvenálással igazoltuk. A két hPTHrp(l-34) gén helyes kapcsolódása a kapcsolódási helynél az Nhel és Xbal helyek megszűnését eredményezi, miáltal a megmaradó Nhel és Xbal helyek a két tandem (egymás utáni) gént szegélyezik.
Az eljárás ismétlésével a hPTHrp(l-34) gén négy példányát tartalmazó Trp LE 18 hPTHrp( 1-34)4 plazmidot állítottuk eló (4. ábra) DNS-szekvencia analízissel megállapítottuk, hogy a Trp LE 18 hPTHrp( 1-34)4 plazmid szekvenciája helyes.
ll. példa:
A Trp LE 18 hPTHrpí 1-34)4 plazmid expresszálása és tisztítása
A Trp LE 18 hPTHrpí 1-34)4 plazmid indukálása pg/ml ampicillint és 100 pg/ml triptofánt tartalmazó 50 ml LB tápközeg [J. H. Miller, „Experiments in Molecular Genetics”, 431, oldal (1972); amelyet hivatkozásul említettünk] indító tenyészetet Trp LE 18 hPTHrp( 1-34)4 plazmidot tartalmazó E. coli sejtekkel oltottuk be, és a tenyészetet élénk keveréssel 37 ’C-on, egy éjszakán keresztül, kb. 6-os A550 érték eléréséig neveltük. Az előállításhoz az LB tápközeg két literét 37 ’C-ra előmelegítettük, majd 0,06-os A5J0 érték eléréséhez 20 ml indító tenyészettel oltottuk be. A tenyészetet élénk keveréssel 0,6 és 0.8 közötti A550 értékig neveltük, majd 2 ml 10 mg/ml indol-akrilsav (IAA) oldatot adtunk hozzá. A tenyésztést jó levegőztetéssel kb. 6-os A550 érték (jellemzően 4 és 10 között) eléréséig kb. 16 órán keresztül folytattuk. A sejteket centrifugálással koncentráltuk, és 50 mM Tris-HCI (pH = 7,5) és 0,1 mM EDTA puffer 500 ml oldatában (Tris puffer) reszuszpendáltuk.
A szuszpenziót (3/4 hangtölcsérrel felszerelt) Heat Systems-Ultrasonics, Inc. model 220P hangsugárzóval kezeltük, melyet a túlhevülés elkerülése érdekében 5%-os teljesítménnyel működtettünk.
Az indukció mértékének meghatározásához az ép sejteket SDS-PAGE módszerrel analizáltuk. A Trp LE 18 hPTHrp( I -34)4 plazmidból származó géntermékek hozzávetőleg 17 000 molekulatömegű fő sávként voltak láthatók. Ez az összes celluláris protein 10%-ának felel meg.
A fúziós protein izolálása és tisztítása
A Trp LE 18 hPTHrp( 1-34)4 fúziós protein pelletezéséhez a sejtlizátumot 15 percig kb. 3600 g-vel centrifugáltuk, a felülúszót eltávolítottuk, és a pelletet 200 ml Tris pufferben reszuszpendáltuk (jellemzően 40-80 A55O/mI koncentrációban).
12. példa: A fúziós protein kezelése, és a homoszerin-lakton hPTHrpí 1-34) peptid tisztítása A hPTHrp(l-34) multimer fúziós proteint szegélyező metionin gyökök CNBr-dal végzett lehasításával a kívánt homoszerin-lakton hPTHrp(l-34) polipeptidet szabadítottuk fel, amelyet az alábbiak szerint tisztítottunk.
A fúziós protein CNBr-os kezelése A Trp LE 18 hPTHrp( 1-34)4 fúziós protein mosott pelleteit óvatos keveréssel 60 ml 70%-os hangyasavban reszuszpendáltuk (kb. 20 mg/ml összes protein; jellemzően 1000 A550 sejtegységből származó anyagot 3 ml-ben oldottuk). Az elegyhez néhány csepp oktanolt adtunk, az oldaton nitrogént buborékoltattunk át, majd 5,5 g CNBr-t adtunk hozzá. A reakciót 25 ’C-on 6 órán keresztül végeztük, majd egyenlő térfogatban 50:50 arányú metanol:víz elegyet kevertünk a mintával, amit ventilációs párologtatással távolítottunk el. Az eljárás 2-4-szeri ismétlése után a hangyasav és a cián-bromid zömét eltávolítottuk, majd a mintát szárazra pároltuk, 200 ml vízben újra feloldottuk, s a tárolhatóság érdekében liofilizáltuk.
A homoszerin-lakton hPTHrpi 1-34) tisztítása A cián-bromiddal kezelt felülúszót 24 órán keresztül 50 mM K.H2PO4 oldattal (pH = 6,5) szemben dializáltuk, többszöri változtatással. A dializálás során a kémhatást 6,5 pH-n tartottuk. A dialízis után a csapadékokat nagy sebességű centrifugálással távolítottuk el. A felülúszót Gelman 0,45μ szűrőkészüléken (Acrodisc 4184) szűrtük.
Kationcseréió kromatográfia A kezdeti tisztítást Βίο-Gel TSK-SP-5PW HPLC oszlopon (21,5xmm) végzett kationcserélő kromatográfiával egészítettük ki. A kromatografálást 8 ml/perc átfolyási sebességgel és hozzávetőleg 12 mg nagymértékben tiszított homoszerin-lakton hPTHrp(l-34) peptid hozammal a következők szerint végeztük:
1. Az oszlopot 50 mM KH2PO4 oldattal (pH - 6,5) ekvilibráltuk.
2. Az oszlopra 10 ml leszűrt felülúszót töltöttünk (hozzávetőleg 1,5 1 tenyészet tápközeg vagy 2,4 g benne lévő anyag).
3. Az oszlopot az alapszint állandósulásáig 50 mM NaCl oldatot tartalmazó 50 mM KH2PO4 oldattal (pH = 6,5) mostuk.
4. Az oszlopot 90 mM NaCl oldatot tartalmazó 50 mM KH2PO4 oldattal (pH = 6,5) eluáltuk. A frakciókat kb. 45 percen át gyűjtöttük.
5. A 90 mM NaCl-os frakciókat C18 HPLC-vel homoszerin-lakton hPTHrp(l-34) tartalomra vizsgáltuk, majd összegyűjtöttük és tároltuk azokat.
Reverz fázisú HPLC kromatográfia A végső tisztítási lépéshez reverz fázisú Poros R/H
4,6x100 mm-es oszlopot (Perseptive Biosystems, Cambridge. MA) használtunk. A kromatográfia körülményei a következők voltak.
HU 211 348 A9 „A” mozgó fázis: 0,1 %-os trifluor-ecetsav (TFA)/víz „B” mozgó fázis: 0,1 %-os trifluor-ecetsav (TFA)/CH3CN a kezeletlen OVX kontrollokhoz képest szintén jelentősen növekedett.
A vizsgálat során az alábbi vegyületeket teszteltük:
Idő | Átfolyás | B% |
0 perc | 4 ml/perc | 15 |
5,0 perc | 4 ml/perc | 40 |
5,2 perc | 4 ml/perc | 100 |
6,8 perc | 4 ml/perc | 100 |
7,0 perc | 4 ml/perc | 15 |
A kalcium %-os gyarapodása az OVX csoporthoz képest
Vegyület | Tesztek száma | Trabekuláris csont | Egész csont |
1. (7. sz. sz.) | 6 | 101-128% | 88-138% |
2. (6. sz. sz.) | 3 | 87-102% | 66-114% |
4. (9. sz. sz.) | 3 | - | 88-114% |
A homoszerin-lakton hPTHrp(l-34) (4. vegyület) retencióideje hozzávetőleg 2,943 perc volt. A tisztított peptid 98%-os tisztaságú volt (amit tömegspektroszkópiával határoztunk meg).
13. példa
A találmány szerinti vegyületek eltávolított petefészkű patkányok csonttömegére gyakorolt hatását értékeltük, rendszerint Gunnes-Hey és Hock (Metab. Boné Dis., 5:177-181, 1984) eljárása szerint.
A felnőtt Sprague-Dawley nőstény patkányokat akklimatizáltuk, tömeg szerint csoportosítottuk (n = 9, 10 vagy 12), s kétoldali petefészek-eltávolítást (OVX) vagy látszat-műtétet végeztünk rajtuk. A vegyület adagolását a műtét után 17 nappal kezdtük, és 20 napon keresztül folytattuk. A tesztvegyületet naponta egyszer 2%-os patkány szérum/sóoldat vivőanyagban szubkután adtuk be.
napig végzett adagolás után a patkányokat leöltük, a jobb combcsontokat (femur) félbevágtuk, s a disztális combcsont feleket (DFH) a trabekulák (gerendák) átfúrásával tovább osztottuk trabekuláris csontra (TB) és kortikális csontra (CB). A kalciumot Calcette kalcium-analizátorral vontuk ki és mértük, és a csont átlagos kalciumtartalmát mg/DHF/100 g testtömeg értékben fejeztük ki.
Az OVX és a látszatkezelt csoportok összehasonlításához a kétmintás t-tesztet alkalmaztuk. Az OVX csoportok összehasonlításához az egyváltozós ANOVA tesztet használtuk, majd - a kezelt csoportok vivőanyaggal való összehasonlításához - Fisher-féle összetett LSD összehasonlítást végeztünk.
A petefészek-eltávolítás lényegében teljes csontleépülést okozott, elsősorban a trabekuláris csontban. Az egész csont kalcium-mennyisége a látszat-operáit kontrollokhoz képest 47-54%-kal kevesebb volt.
A bPTH(l-34) és a hPTHrp(l-34) 80 gg/kg/nap adagolásban a kezelt OVX patkányok esetében az egész csont kalciumtartalmát illetően statisztikusan jelentős növekedési eredményezett (53-95%-os, illetve 18-40%-os növekedés), a kortikális csont kalciumtartalmában azonban nem tapasztaltunk lényeges növekedést.
A találmány szerinti vegyületek 80 gg/kg/nap adagolásban az egész csont kalciumtartalmát 66-138%kal, a trabekuláris csont kalciumtartalmát pedig 87128%-kal növelték. A kortikális csont kalciumtartalma, a trabekulák (gerendák) vastagsága és a csont térfogata
Hasonló vizsgálatokban az eltávolított petefészkű patkányokat 5, 10 és 20 napon keresztül 40 gg/kg/nap adagolással kezeltük, az alábbi eredményekkel.
A kalcium %-os gyarapodása az OVX csoporthoz képest
Vegyület | Tesztek száma | Napok száma | Egész csont |
1. (7. sz. sz.) | 3 | 20 | 73-109% |
4. (9. sz. sz.) | 5 | 20 | 79-105% |
4. (9. sz. sz.) | 1 | 10 | 79% |
49. (63. sz. sz.) | 1 | 10 | 93% |
4. (9. sz. sz.) | 1 | 5 | 55% |
42. (56. sz. sz.) | 1 | 5 | 60% |
14. példa
Toxicitás
A fenti 11. példában a találmány szerinti vegyületek esetében nem tapasztaltunk toxikus hatásokat.
Claims (16)
- SZABADALMI IGÉNYPONTOK1. A parathormon (PTH), parathormonnal rokon peptid (PTHrp), illetve a parathormon vagy parathormonnal rokon peptid fiziológiailag aktív, rövidített homológjának vagy analógjának szintetikus polipeptid analógja vagy annak sója, melyben a 22-31. aminosav gyökök amfipatikus alfa-hélixet képeznek, s az említett 22-31. aminosavak hidrofil aminosavak (Haa) és lipofil aminosavak (Laa) közül valók, melyek az alábbi sorrendben rendeződnek el:Haa (Laa Laa Haa Haa)2 Laa.
- 2. Az 1. igénypont szerinti polipeptid vagy sója, amelyben a 22-31. aminosavak amfipatikus alfa-hélixet képeznek, és ezen aminosavak szekvenciáját az alábbi szekvenciák közül választjuk ki:a) Xaa1 Xaa* Leu Xaa4 Xaa5 Leu Xaa7 1 5Xaa8 Xaa9 Xaa10 10 ahol Xaa1 és Xaa4 jelentése - egymástól függetlenül Glu, Glu(OCH3), His vagy Phe; Xaa2 jelentése Leu v. Phe; Xaa5 jelentése Lys v. His; Xaa7 és Xaa10 jelentése,HU 211 348 A9 egymástól függetlenül, Leu v. Ile; Xaa8 jelentése Alá, Arg v. Glu; és Xaa9 jelentése Lys v. Glu (85. számú szekvencia); előnyösen:Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Xaa Lys Leu; ahol 15 10Xaa jelentése Glu vagy Arg (26. számú szekvencia); b) Xaa1 Xaa2 Leu Xaa4 Arg Leu Leu1 5Xaas Arg Leu; ahol10,Xaa1 és Xaa4 jelentése - egymástól függetlenül - Glu, Glu(OCH3), His vagy Phe; Xaa2 jelentése Leu v. Phe; Xaa8 jelentése Glu, Lys v. Lys (COCH2PEGX) [PEGX = poli(etilén-glikol-metil-éter)-gyök, melynek molekulatö5 mege 100-10 000] (86. számú szekvencia); előnyösen: Glu Leu Leu Glu Arg Leu Leu Xaa Arg Leu; ahol 15 10Xaa jelentése Glu, Lys v. Lys (COCH2PEGX) [PEGX = poli(etilén-glikol-metil-éter)-gyök, melynek molekii10 latömege 100-10000] (27. számú szekvencia);
c) Alá 1 Leu Alá Glu Alá 5 Leu Alá Glu Alá d) Ser 1 Leu Leu Ser Ser 5 Leu Leu Ser Ser e> Alá Phe Tyr Asp Lys Val Alá Glu Lys 1 5Leu (28. SZ . szekv 10 Leu 10 (29. sz . szekv Leu 10 (30. sz. szekv - 3. A 2. igénypont szerinti polipeptid, amely az alábbi képlettel írható le:Xaa1 Xaa2 Xaa3 Xaa4 Xaa5 Xaa6 Xaa7 Leu His Xaalfl Xaa11 Gly Xaa13 Ser Ile Gin Xaa17 Leu Xaa” Xaa20 Xaa21 Xaa22'31 Xaa32 Xaa33 Xaa34 Xaa35 Xaa36 Xaa37 Xaa38 Term.; melybenXaa1: hiányzik vagy Alá;Xaa2: hiányzik vagy Val;Xaa3: hiányzik vagy Ser;Xaa4: hiányzik vagy Glu v. Glu (OCH,);Xaa5: hiányzik vagy His v. Alá;Xaa6: hiányzik vagy Gin;Xaa7: hiányzik vagy Leu;Xaa10 és Xaa17 (egymástól függetlenül): Asp v. Asp (OCH,);Xaa11: Lys. Arg v. Leu;Xaa13: Lys, Arg. Tyr, Cys, Leu, Cys, [CHjCONHíCHj^NHTbiotinil)], (7-dimetil-amino-2-oxo-2H-l-benzopirán-4-acetil)-Lys v. (dihidrocinnamoil)-Lys;Xaa20: Arg v. Leu;Xaa” és Xaa21 (egymástól függetlenül): Lys, Alá v.Arg;Xaa22'31: a 26., 27., 28., 29. v. 30. számú szekvencia valamelyike;Xaa32: His, Pro v. Lys;Xaa33: hiányzik vagy Pro, Thr, Glu v. Alá;Xaa34: hiányzik vagy Pro, Arg, Met, Alá, hSer, hSerlakton, Tyr, Leu v. 1,4-diamino-butiril-laktám;Xaa35: hiányzik vagy Pro, Glu, Ser Alá v. Gly;Xaa36: hiányzik vagy Alá, Arg v. Ile;Xaa37: hiányzik vagy Arg, Trp v. 3(2-naftil)-L-alanin;Xaa38: hiányzik vagy Alá v. hSer; vagyXaa38 42: Thr, Arg, Ser, Alá, Trp; ésTerm.: OR v. NR2, melyekben R egymástól függetlenül lehet hidrogén, 1—4 szénatomos alkil- vagy fenil(C,_4) alkilcsoport; valamint ezek gyógyszerészetileg megfelelő sói.
- 4. A 3. igénypont szerinti polipeptid, melyben Xaa22'31 a 26. számú szekvencia, továbbá Xaa11 és Xaa13 jelentése egyaránt Lys, és Xaa” és Xaa21 jelentése egyaránt Arg.
- 5. A 4. igénypont szerinti polipeptid, amely a 7. számú szekvencia:
Alá Val Ser Glu His Gin Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile 1 5 10 15 Gin Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys 20 25 30 Leu His Thr Alá NH2. 6. A 4. igénypont szerinti polipeptid, amely az 56. számú szekvencia: Alá Val Ser Glu His Gin Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile 1 5 10 15 Gin Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys 20 25 30 Leu Pro NH2. 7. A 4. igénypont szerinti polipeptid, amely a 63. számú szekvencia: Alá Val Ser Glu His Gin Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile 1 5 10 15 Gin Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys 20 25 30 Leu His Thr 1,4-diamino- -bútiril-laktam. HU 211 348 A9 - 8. A 4. igénypont szerinti polipeptid, amely a 9. számú szekvencia:
Alá Val Ser Glu His Gin Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile 1 5 10 15 Gin Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys 20 25 30 Leu His Thr hSerlac - 9. Gyógyszerkészítmény, amely az 1. igénypont szerinti polipeptidnek vagy sójának hatékony csonttömeg-növelő mennyiségét tartalmazza egy gyógyszeré- 10 szetileg elfogadható hordozóval együtt.
- 10. Egy anyag vagy készítmény a csont tömegének csökkenésével jellemezhető emlős betegségek kezelési eljárásában való alkalmazására, ahol a nevezett szubsztancia vagy készítmény tartalmazza a parathormon 15 (PTH), a parathormonnal rokon peptid (PTHrp) vagy a PTH és a PTHrp fiziológiailag aktív, rövidített homológjának vagy analógjának egy szintetikus polipeptid analógját, valamint annak sóját, amelyben a 21-33. aminosav gyökök ampfipatikus alfa-hélixet képeznek, és ezek a 20 gyökök (22-31) a hidrofil aminosavak (Haa) és lipofil aminosavak (Laa) közül vannak kiválasztva, melyek az alábbi sorrendben rendeződnek el:Haa (Laa Laa Haa Haa)2 Laa, és amely eljárás magában foglalja az említett anyag 25 vagy készítmény hatékony csonttömeg-növelő menynyiségének a beadását egy rászoruló személynek.
- 11. Egy anyag vagy készítmény 10. igénypont szerinti alkalmazása egy kezelési eljárásban, amelyben a kezelt betegség oszteoporózis. 30
- 12. Eljárás a PTH, PTHrp polipeptid analógjának vagy a PTH, illetve PTHrp fiziológiailag aktív, rövidített homológja vagy analógja egy polipeptid analógjának vagy sójának szilárd fázisú szintézisére, ahol a 22-31. aminosav gyökök amfipatikus alfa-hélixet képeznek és ezek a gyökök (22-31) a hidrofil aminosavak (Haa) és a lipofil aminosavak (Laa) közül vannak kiválasztva, melyek az alábbi sorrendben rendeződnek el:Haa (Laa Laa Haa Haa)2 Laa, amely eljárás során a védett aminosavakat egy alkalmas gyanta hordozóval kapcsoljuk, az odallánc- és N“-védőcsoportokat eltávolítjuk és a peptidet a gyantáról lehasítjuk.
- 13. Egy 1. igénypont szerinti vegyület vagy egy gyógyszerészetileg elfogadható sójnak felhasználása a csont tömegének csökkenésével jellemezhető emlős betegségek, különösen oszteoporózis kezelésére szolgáló gyógyszerkészítmények előállítására.
- 14. Egy új polipeptid, lényegében amint itt leírtuk.
- 15. Egy új gyógyszerkészítmény, lényegében amint itt leírtuk.
- 16. Egy anyag vagy készítmény új alkalmazásra egy kezelési eljárásban, lényegében amint azt itt leírtuk.
- 17. Egy új eljárás a polipeptid szintézisére, lényegében amint azt leírtuk.
- 18. Egy 1. igénypont szerinti vegyület vagy gyógyszerészetileg elfogadható sójának új felhasználása, lényegében amint azt ismertettük.
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US07/915,247 US5589452A (en) | 1992-07-14 | 1992-07-14 | Analogs of parathyroid hormone and parathyroid hormone related peptide: synthesis and use for the treatment of osteoporosis |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
HU211348A9 true HU211348A9 (en) | 1995-11-28 |
Family
ID=25435450
Family Applications (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
HU9500110A HU217843B (hu) | 1992-07-14 | 1993-07-13 | Paratiroid hormon (PTH) rokon polipeptidek, eljárások ezek előállítására és az ezeket tartalmazó gyógyszerek osteoporosis kezelésére |
HU95P/P00281P HU211348A9 (en) | 1992-07-14 | 1995-06-20 | Analogs of parathyroid hormone and parathyroid hormone related peptide: synthesis and use for the treatment of osteoporosis |
Family Applications Before (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
HU9500110A HU217843B (hu) | 1992-07-14 | 1993-07-13 | Paratiroid hormon (PTH) rokon polipeptidek, eljárások ezek előállítására és az ezeket tartalmazó gyógyszerek osteoporosis kezelésére |
Country Status (17)
Country | Link |
---|---|
US (8) | US5589452A (hu) |
EP (2) | EP1094073A3 (hu) |
JP (1) | JP4106082B2 (hu) |
KR (3) | KR100461618B1 (hu) |
AT (1) | ATE202115T1 (hu) |
AU (1) | AU671851B2 (hu) |
CA (1) | CA2140281C (hu) |
DE (1) | DE69330347T2 (hu) |
DK (1) | DK0651765T3 (hu) |
ES (1) | ES2159293T3 (hu) |
FI (1) | FI120586B (hu) |
GR (1) | GR3036521T3 (hu) |
HU (2) | HU217843B (hu) |
MX (1) | MX9304226A (hu) |
NZ (1) | NZ254554A (hu) |
PT (1) | PT651765E (hu) |
WO (1) | WO1994001460A1 (hu) |
Families Citing this family (119)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5814603A (en) * | 1992-06-12 | 1998-09-29 | Affymax Technologies N.V. | Compounds with PTH activity |
US5977070A (en) * | 1992-07-14 | 1999-11-02 | Piazza; Christin Teresa | Pharmaceutical compositions for the nasal delivery of compounds useful for the treatment of osteoporosis |
US5821225A (en) * | 1992-07-14 | 1998-10-13 | Syntex (U.S.A.) Inc. | Method for the treatment of corticosteroid induced osteopenia comprising administration of modified PTH or PTHrp |
US5589452A (en) * | 1992-07-14 | 1996-12-31 | Syntex (U.S.A.) Inc. | Analogs of parathyroid hormone and parathyroid hormone related peptide: synthesis and use for the treatment of osteoporosis |
AU672790B2 (en) * | 1992-07-15 | 1996-10-17 | Novartis Ag | Variants of parathyroid hormone and its fragments |
CN1070500C (zh) * | 1993-07-13 | 2001-09-05 | 森德克斯(美国)股份有限公司 | 甲状旁腺激素类似物和甲状旁腺激素相关肽:合成和治疗骨质疏松症的用途 |
US5955425A (en) * | 1996-08-02 | 1999-09-21 | National Research Council Of Canada | Parathyroid hormone analogues for the treatment of osteoporosis |
US6110892A (en) | 1994-06-20 | 2000-08-29 | National Research Council Of Canada | Parathyroid hormone analogues for the treatment of osteoporosis |
US5723577A (en) * | 1995-07-13 | 1998-03-03 | Biomeasure Inc. | Analogs of parathyroid hormone |
US7410948B2 (en) * | 1995-07-13 | 2008-08-12 | Societe De Conseils De Recherches Et D'applications Scientifiques, Sas | Analogs of parathyroid hormone |
US5969095A (en) * | 1995-07-13 | 1999-10-19 | Biomeasure, Inc. | Analogs of parathyroid hormone |
US5955574A (en) * | 1995-07-13 | 1999-09-21 | Societe De Conseils De Recherches Et D'applications Scientifiques, S.A. | Analogs of parathyroid hormone |
US6544949B1 (en) * | 1995-07-13 | 2003-04-08 | Societe De Conseils De Recherches Et D'applications Scientifiques, S.A.S. | Analogs of parathyroid hormone |
EP1166796A3 (en) * | 1996-02-01 | 2002-03-06 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Agents for preventing and treating thrombocytopenia |
TW505654B (en) * | 1996-07-30 | 2002-10-11 | Hoffmann La Roche | Synthesis of analogs of PTH and PTHrP |
JP4142743B2 (ja) * | 1996-07-31 | 2008-09-03 | ザ・ジェネラル・ホスピタル・コーポレイション | 副甲状腺ホルモンに関連する新規ペプチド類似体 |
US6273634B1 (en) | 1996-11-22 | 2001-08-14 | Shell Oil Company | Connector for an expandable tubing string |
US6335195B1 (en) | 1997-01-28 | 2002-01-01 | Maret Corporation | Method for promoting hematopoietic and mesenchymal cell proliferation and differentiation |
US20020168718A1 (en) * | 1997-04-03 | 2002-11-14 | California Institute Of Technology | Enzyme-mediated modification of fibrin for tissue engineering |
AU7137798A (en) * | 1997-04-17 | 1998-11-11 | Glaxo Group Limited | Statistical deconvoluting of mixtures |
CA2290443A1 (en) * | 1997-05-14 | 1998-11-19 | Rhone-Poulenc Rorer Pharmaceuticals Inc. | Peptide parathyroid hormone analogs |
CZ298701B6 (cs) | 1997-09-09 | 2007-12-27 | F. Hoffman-La Roche Ag | Lécivo pro hojení kostí a reparaci zlomenin |
US6248587B1 (en) | 1997-11-26 | 2001-06-19 | University Of Southern Cailfornia | Method for promoting mesenchymal stem and lineage-specific cell proliferation |
US6239109B1 (en) | 1998-02-09 | 2001-05-29 | University Of Southern California | Method of promoting erythropoiesis |
US6455500B1 (en) | 1998-03-10 | 2002-09-24 | University Of Southern California | Radiation therapy methods |
US7173011B2 (en) * | 2000-11-20 | 2007-02-06 | University Of Southern California | Radiation therapy methods |
AU3077299A (en) | 1998-03-11 | 1999-09-27 | University Of Southern California | Method of promoting production of living tissue equivalents |
US7531621B1 (en) | 1998-05-05 | 2009-05-12 | Societe De Conseils De Recherches Et D'applications Scientifiques S.A.S. | PTH2 receptor selective compounds |
WO1999058140A1 (en) | 1998-05-11 | 1999-11-18 | University Of Southern California | Methods to increase white blood cell survival after chemotherapy |
US6762167B1 (en) | 1998-05-11 | 2004-07-13 | University Of Southern California | Methods for treating a patient undergoing chemotherapy |
US6916783B2 (en) | 1998-07-13 | 2005-07-12 | University Of Southern California | Methods for accelerating bone and cartilage growth and repair |
CA2328871C (en) | 1998-07-13 | 2002-10-01 | University Of Southern California | Methods for accelerating bone and cartilage growth and repair |
WO2000009144A1 (en) | 1998-08-13 | 2000-02-24 | University Of Southern California | Methods to increase blood flow to ischemic tissue |
US7601685B2 (en) * | 1998-08-27 | 2009-10-13 | Eidgenossische Technische Hochschule Zurich | Growth factor modified protein matrices for tissue engineering |
US6894022B1 (en) * | 1998-08-27 | 2005-05-17 | Eidgenossische Technische Hochschule Zurich | Growth factor modified protein matrices for tissue engineering |
US7241730B2 (en) | 1998-08-27 | 2007-07-10 | Universitat Zurich | Enzyme-mediated modification of fibrin for tissue engineering: fibrin formulations with peptides |
US6495662B1 (en) | 1998-10-22 | 2002-12-17 | The General Hospital Corporation | Bioactive peptides and peptide derivatives of parathyroid hormone (PTH) and parathyroid hormone-related peptide (PTHrP) |
AU1918300A (en) * | 1998-11-25 | 2000-06-13 | General Hospital Corporation, The | Amino-terminal modified parathyroid hormone (pth) analogs |
AU4217299A (en) * | 1998-11-30 | 2000-06-19 | General Hospital Corporation, The | Pth1r and pth3r receptors, methods and uses thereof |
US7820393B2 (en) * | 1999-01-14 | 2010-10-26 | Scantibodies Laboratory, Inc. | Methods, kits and antibodies for detecting parathyroid hormone |
US6689566B1 (en) * | 1999-01-14 | 2004-02-10 | Scantibodies Laboratory, Inc. | Methods, kits, and antibodies for detecting parathyroid hormone |
US6730775B1 (en) | 1999-03-23 | 2004-05-04 | University Of Southern California | Methods for limiting scar and adhesion formation |
US7338938B2 (en) * | 1999-05-10 | 2008-03-04 | University Of Southern California | Methods for treating a patient undergoing chemotherapy |
US6923968B2 (en) * | 2000-08-10 | 2005-08-02 | Scantibodies Laboratory, Inc. | Cyclase inhibiting parathyroid hormone antagonists or modulators and osteoporosis |
US20080108086A1 (en) * | 1999-06-02 | 2008-05-08 | Cantor Thomas L | Parathyroid hormone antagonists and uses thereof |
US7893021B2 (en) * | 1999-06-02 | 2011-02-22 | Scantibodies Laboratory, Inc. | Parathyroid hormone antagonists and uses thereof |
US7022815B1 (en) | 1999-09-29 | 2006-04-04 | The General Hospital Corporation | Polypeptide derivatives of parathyroid hormone (PTH) |
WO2001023521A2 (en) | 1999-09-29 | 2001-04-05 | The General Hospital Corporation | Polypeptide derivatives of parathyroid hormone (pth) |
ES2316354T3 (es) | 1999-09-29 | 2009-04-16 | The General Hospital Corporation | Derivados polipeptidos de la hormona paratiroidea (pth). |
GB9924351D0 (en) * | 1999-10-14 | 1999-12-15 | Brennan Frank | Immunomodulation methods and compositions |
CA2398583A1 (en) * | 2000-02-11 | 2001-08-16 | Cellomics, Inc. | Peptide biosensors for anthrax protease |
US20050124537A1 (en) * | 2000-04-27 | 2005-06-09 | Amgen Inc. | Modulators of receptors for parathyroid hormone and parathyroid hormone-related protein |
US6756480B2 (en) * | 2000-04-27 | 2004-06-29 | Amgen Inc. | Modulators of receptors for parathyroid hormone and parathyroid hormone-related protein |
DE60116520T2 (de) * | 2000-10-10 | 2006-08-31 | Microchips, Inc., Bedford | Microchip-reservoir-vorrichtungen mit drahtloser übertragung von energie und daten |
US7122523B2 (en) * | 2001-05-01 | 2006-10-17 | University Of Southern California | Methods for inhibiting tumor cell proliferation |
DE10123668A1 (de) * | 2001-05-16 | 2002-11-28 | Johein Harmeyer | Anwendung einer Hormonpräparation zur Induzierung und Stimulierung des intestinalen Calciumtransports |
US20030232324A1 (en) * | 2001-05-31 | 2003-12-18 | Chiron Corporation | Chimeric alphavirus replicon particles |
KR100491737B1 (ko) * | 2001-07-20 | 2005-05-27 | 주식회사 한국아이템개발 | 공기 정화 기능의 모기 퇴치기 |
JP4837888B2 (ja) | 2001-07-23 | 2011-12-14 | ザ ジェネラル ホスピタル コーポレイション | コンホメーションが拘束された副甲状腺ホルモン(pth)類似体 |
EP1437141A4 (en) * | 2001-09-17 | 2009-05-27 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | TREATMENTS OF BONE LOSS |
US7247609B2 (en) * | 2001-12-18 | 2007-07-24 | Universitat Zurich | Growth factor modified protein matrices for tissue engineering |
WO2003052091A1 (en) * | 2001-12-18 | 2003-06-26 | Eidgenossisch Technische Hochschule Zurich | Growth factor modified protein matrices for tissue engineering |
AU2003207512B2 (en) * | 2002-01-10 | 2008-06-12 | Osteotrophin Llc | Treatment of bone disorders with skeletal anabolic drugs |
EP1477496A4 (en) * | 2002-02-01 | 2006-08-02 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | PEG BINDING PTH OR PEG BINDING PTH DERIVATIVE |
WO2003099849A2 (en) * | 2002-05-23 | 2003-12-04 | Michael Holick | Use of a parathyroid hormone peptide analogs for the treatment of vaginal atrophy |
US7497855B2 (en) * | 2002-09-04 | 2009-03-03 | Microchips, Inc. | Method and device for the controlled delivery of parathyroid hormone |
US20040067526A1 (en) * | 2002-10-03 | 2004-04-08 | Cantor Thomas L. | Methods for diagnosing and guiding treatment of bone turnover disease |
US8263666B2 (en) | 2002-10-29 | 2012-09-11 | L'oreal | Composition in the form of an oil-in-water emulsion and uses thereof |
EP1567178A4 (en) * | 2002-11-01 | 2009-07-15 | Amgen Inc | MODULATORS OF RECEPTORS FOR NEUTRAL THERAPY HORMONE AND SIDE-HORSE HORMONE-RELATED PROTEINS |
US8088734B2 (en) * | 2003-01-21 | 2012-01-03 | Unigene Laboratories Inc. | Oral delivery of peptides |
EP1610813A4 (en) * | 2003-03-19 | 2009-07-01 | Gen Hospital Corp | PARATHYROIDAL HORMONES CONFORMALLY CONFORMALLY CONSTRAINED WITH PROPELLER STABILIZERS $ G (A) |
KR100540659B1 (ko) * | 2003-07-02 | 2006-01-10 | 삼성전자주식회사 | 이미지 확대 인쇄 방법과 장치 및 컴퓨터 프로그램을저장하는 컴퓨터로 읽을 수 있는 기록 매체 |
WO2005009358A2 (en) | 2003-07-17 | 2005-02-03 | The General Hospital Corporation | Conformationally constrained parathyroid hormone (pth) analogs |
US7044468B2 (en) * | 2003-10-15 | 2006-05-16 | Sklansky Games, Llc | System and method for playing community hand poker games utilizing dealer qualifying criteria |
US7562876B2 (en) * | 2003-10-15 | 2009-07-21 | Sklansky Games, Llc | System and method for playing community hand poker games utilizing mathematical dealer qualifying criteria |
US20050119183A1 (en) * | 2003-11-12 | 2005-06-02 | Nps Allelix Corp. | Method for treating bone loss using parathyroid hormone |
US20050215476A1 (en) * | 2004-01-21 | 2005-09-29 | Unigene Laboratories Inc. | Amidated parathyroid hormone fragments and uses thereof |
US7541140B2 (en) * | 2004-06-03 | 2009-06-02 | Scantibodies Laboratory, Inc. | Assessing risk for kidney stones using parathyroid hormone agonist and antagonist |
US20090170775A1 (en) * | 2004-10-08 | 2009-07-02 | Transition Therapeutics, Inc. | Vasoactive intestinal polypeptide compositions |
US20080214440A1 (en) * | 2004-10-08 | 2008-09-04 | Forbes Medi-Tech (Research), Inc. | Vasoactive intestinal polypeptide compositions |
US7595294B2 (en) * | 2004-10-08 | 2009-09-29 | Transition Therapeutics, Inc. | Vasoactive intestinal polypeptide pharmaceuticals |
MX2007004116A (es) * | 2004-10-08 | 2007-10-05 | Forbes Medi Tech Res Inc | Composiciones farmaceuticas de polipeptidos intestinales vasoactivos. |
US20070293429A1 (en) * | 2004-10-08 | 2007-12-20 | Therapei Pharmaceuticals, Inc. | Vasoactive Intestinal Polypeptide Compositions |
WO2006067221A2 (en) * | 2004-12-22 | 2006-06-29 | Kuros Biosurgery Ag | Michael-type addition reaction functionalised peg hydrogels with factor xiiia incorporated biofactors |
WO2006073711A2 (en) * | 2005-01-06 | 2006-07-13 | Kuros Biosurgery Ag | Use of a matrix comprising a contrast agent in soft tissues |
EP1833522B1 (en) * | 2005-01-06 | 2016-06-22 | Kuros Biosurgery AG | Supplemented matrices for the repair of bone fractures |
US8575101B2 (en) | 2005-01-06 | 2013-11-05 | Kuros Biosurgery Ag | Supplemented matrices for the repair of bone fractures |
US7488316B2 (en) * | 2005-01-25 | 2009-02-10 | Microchips, Inc. | Control of drug release by transient modification of local microenvironments |
CA2628945A1 (en) * | 2005-11-10 | 2007-05-24 | Board Of Control Of Michigan Technological University | Black bear parathyroid hormone and methods of using black bear parathyroid hormone |
AR056806A1 (es) | 2005-11-14 | 2007-10-24 | Amgen Inc | Moleculas quimericas de anticuerpo rankl- pth/ pthrp |
DE102006014579A1 (de) * | 2006-03-29 | 2007-10-04 | Epcos Ag | Verfahren zur Reinigung einer Monomer-Lösung und Herstellungsverfahren für ein elektrisches Bauelement umfassend das Reinigungsverfahren |
US20090022684A1 (en) * | 2006-05-09 | 2009-01-22 | Paul Morley | Methods for hematopoietic stimulation |
EP2054077A4 (en) * | 2006-08-04 | 2010-10-13 | Gen Hospital Corp | POLYPEPTIDE DERIVATIVES OF PARATHYROID HORMONE (PTH) |
US8012694B2 (en) * | 2006-09-14 | 2011-09-06 | Immutopics, Inc. | Assay for the detection of phosphorylated PTH |
USRE49444E1 (en) | 2006-10-03 | 2023-03-07 | Radius Health, Inc. | Method of treating osteoporosis comprising administration of PTHrP analog |
US7803770B2 (en) * | 2006-10-03 | 2010-09-28 | Radius Health, Inc. | Method of treating osteoporosis comprising administration of PTHrP analog |
DK2957278T3 (en) * | 2006-10-03 | 2017-07-31 | Radius Health Inc | STABLE COMPOSITION COMPREHENSIVE PTHRP AND APPLICATIONS THEREOF |
PL2084183T3 (pl) * | 2006-10-13 | 2010-10-29 | Lilly Co Eli | Pegylowane pth jako modulatory receptora pth i ich zastosowania |
ES2733276T3 (es) * | 2007-04-13 | 2019-11-28 | Kuros Biosurgery Ag | Sellante polimérico para tejidos |
CA2694667C (en) | 2007-08-01 | 2018-10-30 | The General Hospital Corporation | Screening methods using g-protein coupled receptors and related compositions |
JP2012512812A (ja) * | 2007-12-28 | 2012-06-07 | クロス・バイオサージェリー・アクチェンゲゼルシャフト | フィブリンフォームに組込まれたpdgf融合タンパク質 |
US20090227507A1 (en) * | 2008-03-10 | 2009-09-10 | University Of Southern California | Angiotensin (1-7) Dosage Forms and Uses Thereof |
US8563513B2 (en) | 2009-03-27 | 2013-10-22 | Van Andel Research Institute | Parathyroid hormone peptides and parathyroid hormone-related protein peptides and methods of use |
CA2782640A1 (en) | 2009-12-07 | 2011-06-16 | Michigan Technological University | Black bear parathyroid hormone and methods of using black bear parathyroid hormone |
CA2799183A1 (en) | 2010-05-12 | 2011-11-17 | Radius Health, Inc. | Therapeutic regimens |
CN103002906B (zh) | 2010-05-13 | 2017-12-29 | 总医院有限公司 | 甲状旁腺激素类似物及其应用 |
AU2011312490B2 (en) | 2010-09-28 | 2015-06-25 | Radius Pharmaceuticals, Inc. | Selective androgen receptor modulators |
WO2012123028A1 (en) | 2011-03-16 | 2012-09-20 | Kuros Biosurgery Ag | Pharmaceutical formulation for use in spinal fusion |
JP6148228B2 (ja) * | 2011-05-18 | 2017-06-14 | ユーメデリス ファーマシューティカルズ,インク. | 改善されたペプチド製剤 |
US20200354428A9 (en) | 2013-06-23 | 2020-11-12 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Analogues of parathyroid hormone (1-34) that function as agonists of the parathyroid hormone receptor-1 and display modified activity profiles |
IL255148B2 (en) | 2015-04-29 | 2023-04-01 | Radius Pharmaceuticals Inc | 1901 rad for use in a method to inhibit a cancerous growth or induce tumor regression in a patient who is resistant to the drug and/or has cancer positive for an estrogen receptor alpha mutation |
US10568937B2 (en) | 2016-04-18 | 2020-02-25 | Radius Health, Inc. | Formulations of abaloparatide, transdermal patches thereof, and uses thereof |
KR102397890B1 (ko) | 2016-06-22 | 2022-05-12 | 일립시스 파마 리미티드 | Ar+ 유방암 치료 방법 |
KR102322802B1 (ko) | 2017-01-05 | 2021-11-04 | 래디어스 파마슈티컬스, 인코포레이티드 | Rad1901-2hcl의 다형 형태 |
US10996208B2 (en) | 2017-04-28 | 2021-05-04 | Radius Health, Inc. | Abaloparatide formulations and methods of testing, storing, modifying, and using same |
CA3090807A1 (en) | 2018-02-21 | 2019-08-29 | AI Therapeutics, Inc. | Combination therapy with apilimod and glutamatergic agents |
IL279853B1 (en) | 2018-07-04 | 2024-09-01 | Radius Pharmaceuticals Inc | Polymorphic forms of RAD 1901-2HCL |
CN109734794A (zh) * | 2019-03-07 | 2019-05-10 | 苏州科技大学 | 一种阿巴帕肽的制备方法 |
CN114057863B (zh) * | 2020-08-06 | 2023-10-20 | 珠海联邦制药股份有限公司 | 一种甲状旁腺激素相关肽类似物及其应用 |
Family Cites Families (32)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4086196A (en) * | 1975-03-28 | 1978-04-25 | Armour Pharmaceutical Company | Parathyroid hormone |
US4423037A (en) * | 1982-05-13 | 1983-12-27 | The General Hospital Corporation | Inhibitors of peptide hormone action |
US4643988A (en) * | 1984-05-15 | 1987-02-17 | Research Corporation | Amphipathic peptides |
US4738921A (en) * | 1984-09-27 | 1988-04-19 | Eli Lilly And Company | Derivative of the tryptophan operon for expression of fused gene products |
ES2000859A6 (es) * | 1985-08-12 | 1988-03-16 | Syntex Inc | Un metodo para producir un vector de expresion bacteriana para la expresion de proteinas de fusion |
EP0273928B1 (en) * | 1986-07-18 | 1997-01-08 | The University Of Melbourne | A PROTEIN ACTIVE IN HUMORAL HYPERCALCEMIA OF MALIGNANCY-PTHrP |
EP0260350B1 (en) * | 1986-09-05 | 1992-02-12 | Cetus Oncology Corporation | Oxidation-resistant interferon-beta muteins and their production; formulations containing such muteins |
US5010010A (en) * | 1986-10-22 | 1991-04-23 | Selmer-Sande, A.S. | Production of human parathyroid hormone from microorganisms |
US4833125A (en) * | 1986-12-05 | 1989-05-23 | The General Hospital Corporation | Method of increasing bone mass |
US4835255A (en) * | 1987-03-26 | 1989-05-30 | Yale University | T-cell membrane protein |
EP0293160A3 (en) * | 1987-05-26 | 1990-05-09 | Merck & Co. Inc. | Parathyroid hormone antagonists with enhanced metabolic properties |
US4771124A (en) * | 1987-05-26 | 1988-09-13 | Merck & Co., Inc. | Parathyroid hormone antagonists with simplified synthetic methodology |
US5001223A (en) * | 1987-05-26 | 1991-03-19 | Merck & Co., Inc. | Parathyroid hormone antagonists with enhanced metabolic properties |
EP0293158A3 (en) * | 1987-05-26 | 1990-05-09 | Merck & Co. Inc. | Parathyroid hormone antagonists |
DE3725319A1 (de) * | 1987-07-30 | 1989-02-09 | Biotechnolog Forschung Gmbh | Pth-modifikationen und therapeutische zusammensetzungen, die sie enthalten und daraus bestehen |
DE3725320A1 (de) * | 1987-07-30 | 1989-02-09 | Biotechnolog Forschung Gmbh | Expressionsvektoren und verfahren unter deren verwendung zur gewinnung von cro/ss-galaktosidase/pth-fusionsproteinen und von pth |
US4861756A (en) * | 1988-03-08 | 1989-08-29 | Merrell Dow Pharmaceuticals Inc. | Synthetic pulmonary surfactant |
EP0341963A3 (en) * | 1988-05-09 | 1991-07-24 | Merck & Co. Inc. | Parathyroid hormone antagonists |
US4968669A (en) * | 1988-05-09 | 1990-11-06 | Merck & Co., Inc. | Parathyroid hormone antagonists |
US5457047A (en) * | 1989-02-23 | 1995-10-10 | Gesellschaft Fur Biotechnologische Forschung Mbh (Gbf) | DNA Sequences coding for PTH variants, PTH variants, expression vector, bacterial host, use and therapeutic composition |
EP1004595B1 (en) * | 1989-04-10 | 2003-06-18 | Helix BioMedix, Inc. | Lytic and proliferative peptides and their use as pharmaceutic and phytopharmaceutic agents |
CA2040264A1 (en) * | 1990-04-12 | 1991-10-13 | Tatsuhiko Kanmera | Parathyroid hormone antagonists |
US5093233A (en) * | 1990-04-25 | 1992-03-03 | Merck & Co., Inc. | Antagonists with position 13 modification |
US5087562A (en) * | 1990-04-25 | 1992-02-11 | Merck & Co., Inc. | Humoral hypercalcemic factor antagonists with modification at position 13 . . . |
WO1992000753A1 (en) * | 1990-07-13 | 1992-01-23 | The Regents Of The University Of California | PARATHYROID HORMONE ANALOGUES MODIFIED AT POSITIONS 3, 6 or 9 |
US5149779A (en) * | 1990-07-26 | 1992-09-22 | Merck & Co., Inc. | Humoral hypercalcemic factor antagonists |
JPH0532696A (ja) * | 1990-09-28 | 1993-02-09 | Takeda Chem Ind Ltd | 副甲状腺ホルモン誘導体 |
AU9103791A (en) * | 1990-12-21 | 1992-07-22 | Allelix Biopharmaceuticals Inc. | Oxidation resistant variants of parathyroid hormone |
US5317010A (en) * | 1991-10-10 | 1994-05-31 | Peter K. T. Pang | Parathyroid hormone analogues substituted at AA 25, 26, 27, and use in osteoporosis treatment |
US5434246A (en) * | 1992-03-19 | 1995-07-18 | Takeda Chemical Industries, Ltd. | Parathyroid hormone derivatives |
US5382658A (en) * | 1992-04-03 | 1995-01-17 | Allelix Biopharmaceuticals Inc. | Stability-enhanced variants of parathyroid hormone |
US5589452A (en) * | 1992-07-14 | 1996-12-31 | Syntex (U.S.A.) Inc. | Analogs of parathyroid hormone and parathyroid hormone related peptide: synthesis and use for the treatment of osteoporosis |
-
1992
- 1992-07-14 US US07/915,247 patent/US5589452A/en not_active Expired - Lifetime
-
1993
- 1993-07-13 ES ES93917060T patent/ES2159293T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1993-07-13 NZ NZ254554A patent/NZ254554A/en not_active IP Right Cessation
- 1993-07-13 AT AT93917060T patent/ATE202115T1/de active
- 1993-07-13 KR KR1019950700136A patent/KR100461618B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1993-07-13 EP EP00122853A patent/EP1094073A3/en not_active Withdrawn
- 1993-07-13 CA CA002140281A patent/CA2140281C/en not_active Expired - Lifetime
- 1993-07-13 DK DK93917060T patent/DK0651765T3/da active
- 1993-07-13 PT PT93917060T patent/PT651765E/pt unknown
- 1993-07-13 WO PCT/US1993/006465 patent/WO1994001460A1/en active Application Filing
- 1993-07-13 EP EP93917060A patent/EP0651765B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1993-07-13 JP JP50352794A patent/JP4106082B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1993-07-13 DE DE69330347T patent/DE69330347T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1993-07-13 KR KR10-2002-7001833A patent/KR100404008B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1993-07-13 AU AU46705/93A patent/AU671851B2/en not_active Expired
- 1993-07-13 KR KR10-2002-7001830A patent/KR100458350B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1993-07-13 MX MX9304226A patent/MX9304226A/es unknown
- 1993-07-13 HU HU9500110A patent/HU217843B/hu unknown
-
1994
- 1994-01-18 US US08/184,328 patent/US5874086A/en not_active Expired - Lifetime
-
1995
- 1995-01-13 FI FI950169A patent/FI120586B/fi not_active IP Right Cessation
- 1995-05-23 US US08/443,863 patent/US5693616A/en not_active Expired - Lifetime
- 1995-05-23 US US08/448,070 patent/US5695955A/en not_active Expired - Lifetime
- 1995-05-23 US US08/447,856 patent/US6051686A/en not_active Expired - Lifetime
- 1995-05-24 US US08/449,317 patent/US5807823A/en not_active Expired - Lifetime
- 1995-05-24 US US08/449,447 patent/US5840837A/en not_active Expired - Lifetime
- 1995-05-24 US US08/449,500 patent/US5798225A/en not_active Expired - Lifetime
- 1995-06-20 HU HU95P/P00281P patent/HU211348A9/hu unknown
-
2001
- 2001-09-05 GR GR20010401381T patent/GR3036521T3/el unknown
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
HU211348A9 (en) | Analogs of parathyroid hormone and parathyroid hormone related peptide: synthesis and use for the treatment of osteoporosis | |
US5977070A (en) | Pharmaceutical compositions for the nasal delivery of compounds useful for the treatment of osteoporosis | |
ES2197946T3 (es) | Metodo para el tratamiento de la osteopenia inducida por corticosteroides. | |
US7494979B2 (en) | Method for treating congestive heart failure and other disorders | |
WO1995002610A1 (en) | Analogs of parathyroid hormone and parathyroid hormone related peptide: synthesis and use for the treatment of osteoporosis | |
MXPA06010205A (es) | Metodo y composiciones para el tratamiento de trastornos gastrointestinales. | |
HU229220B1 (hu) | Humán növekedési hormont felszabadító hormon-analógok | |
NO319848B1 (no) | Syntetiske peptidanaloger til PTH og PTHrp, fremgangsmate for fastfasesyntese derav, farmasoytiske preparater som omfatter dem, og anvendelse derav til fremstilling av medikamenter til behandling av reduksjoner i benmasse. | |
MXPA98001630A (en) | Pharmaceutical compositions of nasal administration of useful compounds for the treatment of osteoporo | |
WO2002060163A9 (en) | Methods for increasing bone formation and enhancing bone accretion |