HU187417B - Process for producing spergualine derivatives in form of salts - Google Patents

Process for producing spergualine derivatives in form of salts Download PDF

Info

Publication number
HU187417B
HU187417B HU823215A HU321582A HU187417B HU 187417 B HU187417 B HU 187417B HU 823215 A HU823215 A HU 823215A HU 321582 A HU321582 A HU 321582A HU 187417 B HU187417 B HU 187417B
Authority
HU
Hungary
Prior art keywords
formula
compound
guanidino
compounds
acid
Prior art date
Application number
HU823215A
Other languages
English (en)
Inventor
Hamao Umezawa
Tomio Takeuchi
Shinichi Kondo
Hironobu Iinuma
Daishiro Ikeda
Teruya Nakamura
Akio Fujii
Original Assignee
Zaiden Hojin Biseibutsu Kagaku Kenkyu Kai,Jp
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Zaiden Hojin Biseibutsu Kagaku Kenkyu Kai,Jp filed Critical Zaiden Hojin Biseibutsu Kagaku Kenkyu Kai,Jp
Publication of HU187417B publication Critical patent/HU187417B/hu

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C277/00—Preparation of guanidine or its derivatives, i.e. compounds containing the group, the singly-bound nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups
    • C07C277/08—Preparation of guanidine or its derivatives, i.e. compounds containing the group, the singly-bound nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups of substituted guanidines
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D209/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D209/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom condensed with one carbocyclic ring
    • C07D209/44—Iso-indoles; Hydrogenated iso-indoles
    • C07D209/48—Iso-indoles; Hydrogenated iso-indoles with oxygen atoms in positions 1 and 3, e.g. phthalimide
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C279/00—Derivatives of guanidine, i.e. compounds containing the group, the singly-bound nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups
    • C07C279/04—Derivatives of guanidine, i.e. compounds containing the group, the singly-bound nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups having nitrogen atoms of guanidine groups bound to acyclic carbon atoms of a carbon skeleton
    • C07C279/12—Derivatives of guanidine, i.e. compounds containing the group, the singly-bound nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups having nitrogen atoms of guanidine groups bound to acyclic carbon atoms of a carbon skeleton being further substituted by nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C279/00—Derivatives of guanidine, i.e. compounds containing the group, the singly-bound nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups
    • C07C279/04—Derivatives of guanidine, i.e. compounds containing the group, the singly-bound nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups having nitrogen atoms of guanidine groups bound to acyclic carbon atoms of a carbon skeleton
    • C07C279/14—Derivatives of guanidine, i.e. compounds containing the group, the singly-bound nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups having nitrogen atoms of guanidine groups bound to acyclic carbon atoms of a carbon skeleton being further substituted by carboxyl groups
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P13/00—Preparation of nitrogen-containing organic compounds
    • C12P13/02—Amides, e.g. chloramphenicol or polyamides; Imides or polyimides; Urethanes, i.e. compounds comprising N-C=O structural element or polyurethanes

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Description

Az új vegyületek karcinosztatikus hatásúak.
A találmány tárgya eljárás spergualin-származékok, azaz az új (I) általános képletű N-[4-(3-aminopropil)-amino-butil]-2-(omega-guanidino-zsírsavamido)-2-szubsztituált-etánsavamid-származékok - a képletben
Y jelentése—CH2—CH2—,—CH=CH— vagy—CH(OH)—CH2—csoport,
R jelentése hidrogénatom vagy adott esetben hidroxiicsoporttal helyettesített 1-4 szénatomot tartalmazó alkilesoport vagy benzilcsoport, n értéke 1 és 8 közötti egész szám, azzal a megkötéssel, hogy ha Y jelentése—CH(OH)—CH2—csoport, és n értéke 4, akkor R jelentése hidrogénatomtól eltérő.- előállítására gyógyászatilag elfogadható sóik formájában. Az (1) általános képletű vegyületek karcinosztatikus hatásúak.
Karcinosztatikus hatású vegyületek szisztematikus kutatása során korábban már találtunk egy új karcinosztatikus hatású antibiotikumot, a BMG 162-aF2 jelzésű vegyületet - amelyet spergualinnak neveztünk el - a Bacillus genuszba tartozó, FERM P-5230 vagy ATCC 31 932 deponálási számú Bacillus laterosporus BMG 162-aF2 törzs tenyészetében [Journal of Antibiotics, 34. 1619 és 1622 (1981)]. A spergualin a (XII) képlettel jellemezhető. A 15-helyzetű konfiguráció S-konfiguráció, a 11-helyzetnél a konfiguráció még nem lett meghatározva [Journal of Antibiotics, 34. 1622 (1981)]. Ez a vegyület a megfelelő savamid és glioxilil-spermidin kondenzálása útján állítható elő. A kapott epimer vegyületet természetes (-)-spergualinná és nem természetes (+ )-spergualinná rezoválhatjuk [Journal of Antibiotics, 34. 1625 (1981)].
Intenzív kutatást végeztünk a spergualinnal rokon szerkezetű vegyületek között, és felismertük, hogy az új (I) általános képletű vegyületek kiváló karcinosztatikus hatásúak és - különösen, ha R jelentése hidrogénatomtól eltérő - kiváló stabilitásúak.
Az (I) általános képletű vegyületeket a következőkben ismertetett módon állíthatjuk elő.
Az R helyén hidrogénatomot tartalmazó (I) általános képletű vegyületek valamely (II) általános képletű ontega-guanidino-zsírsav-amid - a képletben Y és n jelentése az (I) általános képletnél megadott - és a (III) képletű N-[4-(3-amino-propil)am'.no-butil]-2,2-dihidroxi-etán-amid kondenzálása útján állíthatók elő.
Az R helyén hidrogénatomtól eltérő helyettesítőt tartalmazó (I) általános képletű vegyületek előállíthatók a fenti kondenzációs reakcióban képződött vegyület vagy mikrohiális tenyészetből elkülönített spergualin és egy alifás 1-4 szénatomos mono- vagy dibázisos alkohol, 1-4 szénatomos diazo-paraffin vagy benzilalkohol reagáltatása útján. A kondenzálással kapott köztitermék vagy a spergualin amino- és iminocsoportjait kívánt esetben védhetjük, majd az említett reagáltatást követően a védőcsoportokat eltávolíthatjuk.
Az (I) általános képletű vegyületeket gyógyászatilag elfogadható savaddíciós sóik formájában hasznosítjuk. Ilyen savaddíciós sókra példaképpen megemlíthetünk szervetlen savakkal, például sósavval, kénsavval, foszforsavval és bórsavval, valamint szerves'savakkal, például ecetsavval, citromsavval, borkősavval és glutársavval képzett sókat.
A szabatosabban (Γ) általános képlettel - a képletben Y, R és n jelentése az (I) általános képletnél megadott - jellemezhető találmány szerinti vegyületek mindegyikénél a 11-helyzetben aszimmetriacentrum van, és így a 11-helyzetű szénatomra vonatkoztatva epimerek, mégpedig a balraforgató epimer [ezentúl (—) jelzéssel említjük] és a jobbraforgató epimer [ezentúl ( + ) jelzéssel említjük] formájában lehetnek. Hacsak másképpen nem jelezzük, a találmány szerinti eljárással előállított (I) általános képletű vegyületek egy epimer-pár 1 ; 1 arányú keverékei, így szükséges esetben (±) jelzéssel említhetők. Ha Y jelentése —CH(OH)—CH2— csoport (a hidroxilcsoportot hordozó szénatom a 15-ös szénatom, míg a másik a 14-es), akkor a megfelelő (I) általános képletű vegyületek a 15-helyzetben is aszimmetriacentrumot tartalmiznak, és így az egyik lehetséges epimer a 15-helyzetben S-konfigurációjú, míg a másik lehetséges epimer a 15-helyzetben R-konfigurációjú. Hacsak másképpen nem jelezzük, a találmány szerinti eljárással előállított vegyületek az S- és az R-epimerek közel 1 :1 arányú elegyei.
A találmány szerinti eljárással előállítható vegyületek közül néhány jellegzetes vegyület fizikokémiai és biológiai tulajdonságait a következőkben ismertetjük.
(1) Fizikokémiai tulajdonságok
Néhány jellegzetes (I) általános képletű vegyület nevét az 1. táblázatban soroljuk fel. A 2. táblázatban adjuk meg a vegyületek hidrökloridjainak öszszegképletét és elemzési adatait, míg a 3. táblázatban infravörös spektrumát (kálium-bromid pasztillában felvéve) és mágneses magrezonanciaspektrumát, rövidítve proton-NMR spektrumát (a spektrumokat deuterometanolban, belső standardként tetrametil-szilánt - rövidítve TMS - használva vettük fel). A 4. táblázatban számos (I) általános képletű vegyület optikai forgatóképességi adatait foglaljuk össze.
Az (I) általános képletű vegyületek kémiai stabilitását úgy értékeljük ki, hogy meghatározzuk a 60 °C-on 4 órán át végzett melegítést követően viszszamaradó anyag százalékos mennyiségét. A kapott eredményeket az 5. táblázatban adjuk meg, a referenciaanyagként használt spergualin eredményeivel együtt. A visszamaradt anyag mennyiségét nagy nyomású folyadékkromatográfiás módszerrel· .187 417 (rövidítve: HPLC) határozzuk meg. Az oszlopot Nucleosil 5C18 márkanév alatt forgalomba hozott töltettel töltjük. A spergualin esetén eluáló folyadékként acetonitril, valamint nátrium-pentán-szulfonátra vonatkoztatva 0,01 mólos és dinátriumhidrogén-foszfátra vonatkoztatva 0,01 mólos, 3-as pH-jú vizes oldat 6 : 94 térfogatarányú elegyét, míg a találmány szerinti eljárással előállított vegyületek esetén eluálószerként acetonitril, valamint nátriumpentán-szulfonátra vonatkoztatva 0,005 mólos és dinátrium-hidrogén-foszfátra vonatkoztatva 0,01 mólos, 3-as pH-jú vizes oldat elegyét használjuk.
5 Άζ elegyítés! arány az utóbb említett elegynél minden egyes vegyület esetén változik. így például a 9. esetén az elegyítési arány 10: 90, míg a 22. vegyület esetén 7:93.
1. Tabtaza’ (I) általános képletű vegyületek
A vegyület n γ R sorszáma
A vegyület neve
1. 1 — CH2CH2 — H
2. 2 — ch2ch2 — H
3 3 — ch2ch2 — H
4. 4 — ch2ch2 — H
5. 5 — ch2ch2 — H
6. 6 — ch2ch2 — H
7. 1 — ch2ch2 — -ch3
8. 3 — ch2ch2 — -ch3
9. 4 — ch2ch2 — -ch3
10. 5 — ch2ch2 — -ch3
11. 6 — ch2ch2 — -ch3
12. 4 — ch2ch2 — — ch2ch3
13. 4 — ch2ch2 — — ch2ch2 — — ch2ch3
14. 4 — ch2ch2 — — ch2ch2oh
15. 4 — ch2ch2 — -ch2 —c6h5
16. 4 —CH=CH— Η
17. 5 —CH=CH— H
18. 6 —CH—CH— H
19. 4 —CH=CH— -ch3
20. 5 —chch2— Óh H
21. 6 —chch2— oh H
22.* 4 (S) —chch2— 1 OH -ch3
N-[4-(3-amino-propil)-amino-butil]-2-(4-guanidinobutánsav-amido)-2-hidroxi-etánamid
N -[4-(3-amino-propil)-amino- butil]-2-(5-guanidinopentánsavamido)-2-hidroxi-etánsavamid N-[4-(3-amino-propil)-amino-butil]-2-(6-guanidinohexánsavamido)-2-hidroxi-etánsavamid N-[4-(3-amino-propil)-amino-butil]-2-(7-guanidinohep'ánsavamido)-2-hidroxi-etári savamid
N -[4-(3-amino-propil)-amino- butil]-2-(8-guanidino5 oktansavamido)-2-hidroxi-etánsavamid
N-[4-(3-amino-propil)-amino-butil]-2-9-guanidinononánsavamido)-2-hidroxi-etánsavamid
N-[4-(3-amino-propil)-amino-butil]-2-(4-guanidinobutánsavamido)-2-metoxi-etánsavamid
N-[4-(3-amino-propil)-amino-butil]-2-(6-guanidinohexánsavamido)-2-metoxi-etánsavamid
N-[4-(3(-amino-propil)-amino-butil]-2-(7-guanidinoheptánsavamido)-2-metoxi-etánsavamid
N-[4-(3-amino-propil)-amino-butil]-2-(8guanidinooktánsavamido)-2-metoxi-etánsavamid
N-[4-(3amino-propil)-amino-butil]-2-(9-guanidinononánsavamido)-2-metoxi-etánsavamid
N-[4-(3-amino-propil)-amino-butil]-2-(7-guanidÍnoheptánsavamido)-2-etoxi-etánsavamid
N-[4-(3-amino-propil)-amino-butil]-2-(7-guanidinoheptánsavamido)-2-butoxi-etárisavamid
N-[4-(3-amino-propil)-amino-butil]-2-(7-guanidinohepiánsavamido)-2-(2-hidroxi-etoxi)-etánsavamid
N-[4-(3-amino-propil)-amino-butil]-2-(7-guanidino5 hept ánsavamido)-2-benziloxi-etánsavamid
N-j4-(3-amino-propil)-amino-butil]-2-(7-guanidino-2hepiánsavamido)-2-hidroxi-etánsavamid
N-j4-(3-amino-propil)-amino-butil]-2-(8-guanidino-2okténsavamido)-2-hidroxi-etánsavamid
N-[4-(3-amino-propil)-amino-butil]-2-(9-guanidino2-ncnénsavamido)-2-hidroxi-etánsavamid
N-[4-(3-amino-propil)-amino-butil]-2-(7-guanidino2- hepténsavamido)-2-metoxi-etánsavamid N-[4-(3-amino-propil)-amino-butil]-2-(8-giianidino
3- hidroxi-oktánsavamido)-2-hidroxi-etánsavamid
N-[4-(3-amino-propil)-amino-butil]-2-(9-guanidino3-hidroxi-nonánsavamido)-2-hidroxi-etánsavannd
N-[4-(3-amino-propil)-amino-butil]-2-(7-guanidino
3-hidroxi-heptánsavamido)-2-metoxi-etánsavainul
-3187 417
A vegyület sorszáma
A vegyület neve
23.
(S)
-CHCH,
CH2CH3 N-[4-(3-amino-propil)-amino-butil]-2-(7-guanidino3-hidroxi-heptánsavamido)-2-etoxi-etánsavamid
24.
25/
26/
OH (S)
-chch2OH (S)
-chch2I
OH (S)
-chch2— CH2CH3 N-[4-(3-amino-propiI)-amino-butil]-2-(7-guanidino3-hidroxi-heptánsavamido)-2-butoxi-etánsavamid
CH2CH2OH N-[4-(3-amino-propil)-amino-butil]-2-(7-guanidino-3heptánsavamido)-2-(2-hidroxi-etoxi)-etánsavamid
CH2C6H5 N-[4-(3-amino-propil)-amino-butil]-2-(7-guanidino3-hidroxi-heptánsavamido)-2-benziloxi-etánsavamid
OH
Megjegyzés: a csillaggal jelölt, vagyis Y helyén (S) — CH(OH) — CH2 — és R helyén hidrogénatomtól eltérő csoportot tartalmazó, n =4 értékű (I) általános képletű vegyületeket a továbbiakban „11-O-(R neve)-spergualin”-ként fogjuk nevezni.
2. táblázat
A vegyület sorszáma összegképlet Elemzési eredmények
C 14 N Cl
1. C14H31N7O3 · 3HC1 számított: 34,90 7,74 20,35 22,07
• %H2O talált: 34,92 7,87 20,21 21,96
2. C15H33N7O3 · 3HC1 · számított: 36,33 7,93 19,77 21,45
• 3/2H2O talált: 36,27 8,05 19,68 21,30
3. C16H35N7O3 3HC1 · számított: 37,69 8,10 19,23 20,86
• 3/2H2O talált: 37,83 8,38 19,18 20,67
4. C17H37N7O3 · 3HC1 · számított: 38,97 8,27 18,71 20,30
• 3ΛΗ2Ο talált: 39,10 8,42 18,57 20,18
5. C18H39N7O3 · 3HC1 · számított: 40,19 8,43 18,23 19,77
3/2H2O talált: 40,31 8,74 17,96 19,51
6. C19H41N7O3 · 3HC1 · számított: 41,34 8.58 17,76 19,27
• 3/2H2O talált: 41,32 8,79 17,65 19,13
7. C15H33N7O3 · 3HC1 · számított: 36,33 7,93 19,77 21,45
• 3/2H2O talált: 36,41 8,10 19,46 21,32
8. C17H37N7O3 · 3HC1 · számított: 38,97 8,27 18,71 20,30
• %h2o talált: 39,20 8,31 18,48 20,11
9. C18H39N7O3 · 3HC1 · számított: 40,19 8,43 18,23 19,77
•3/2H2O talált: 40,33 8,51 18,08 20,11
10. C19H41N7O3 · 3HC1 · számított: 41,34 8,58 17,76 19,27
• %H2O talált: 41,39 8,82 17,62 19,15
11. C20H43N7O3 · 3HC1 · számított: 42,44 8,73 17,32 - 18,79
• 3/2H2O talált: 42,51 8,92 17,33 18,50
12. C19H4,N7O3 · 3HC1 számított: 41,34 8,58 17,76 19,27
• 3/2H2O talált: 41,44 8,75 17,59 19,11
13. C21H45N7O3 3HC1 számított: 43,48 8,86 16,90 18,34
• 3/2H2O talált: 43,61 9,04 16,78 18,43
14. C19H4,N7Ö4 · 3HCI · számított: 40,18 8,34 17,26 18,73
• 3/2H2O talált: 40,07 8,39 17,31 18,58
15. -C21H43N7O3 3HC1 · számított: 46,94 8,04 15,97 17,32
3/2H2O talált: 47,03 8,20 15,76 17,12
-4187 417
A vegyület sorszáma Összegképlet Elemzési eredmények
C H N Cl
16. C17H35N7O3 · 3HC1 · 3/ζΗ2Ο számított: 39,12 7,92 18,79 20,38
talált: 39,10 8,02 19,05 20,07
17. C18H37N7O3 · 3HC1 · számított: 40,34 8,09 18,29 19,85
%H2O talál·: 40,53 8,22 18,26 19,69
18. C19H39N7O3 · 3HC1 · számított: 41,49 8,25 17,83 19,34
• 3/2H2O talál·: 41,46 8,07 17,93 19,20
19. C18H37N7O3-3HC1·· számított: 40,34 8,09 18,29 19,85
%h2o talál : 40,09 7,86 18,11 19,71
20. C18H39N7O4 · 3HC1 számított: 39,03 8,19 17,70 19,20
%H2O talál·:: 38,77 8,05 17,64 20,41
21. C19H41N7O4 3HC1 · számított: 40,18 8,34 17,26 18,73
3/2H2O talál:: 40,41 8,60 - 17,35 18,58.
22. C,8H39N7O4 · 3HC1 · számított: 39,03 8,19 17,70 19,20
3/2H2O talál·: 39,03 8,50 . 17,49 19,15
23. C19H41N7O4 3HC1 · számított: 40,18 8,34 17,26 18,73
W talál·: 40,23 8,75 17,17 18,35
24. C21H45N7O4 · 3HC1 · számított: 42,32 8,62 16,45 17,84
3/2H2O talál·: 42,37 8,90 16,31 17,74
25. C19H4,N7O5 '· 3HC1 · számított: 39,08 8,11- 16,79 1'8,21
• 3/2H2O talál·: 39,15 8,26 16,42 18,10
26. C24H43N7O4 3HC1 · számított: 45,75 7,84 15,56 16,88
3/2H2O talált: 45,77 7,93 15,39 16,64
3. táblázat
A vegyület sorszáma Infravörös abszorpció spektrum (cm ') Proton-NMR spektrum (δ érték)
1. 3320, 2950, 1655, 1525, 1460, 1365, 1260, 1160, 1115, 1070 1,4-2,4 (CH2 x 4), 2,40 (CHJ 2,9-3,4 (NCH2 x 5), 5,55 (CH)
2. 3400, 2950, 1660, 1530, 1465, 1170, 1120, 1080, 1020 1.9- 2,0 (CH2x4), 2,0-2,5 (CH2 x 2), 2.9- 3,4 (NCH2 x 5), 5,53 (CH)
3. 3270, 2950, 1560, 1530,1460, 1370,1240,1165,1120,1080 1,4-2,0 (CH2 x 5), 2,0-2,5 (CH2 x 2), 2,9-3,4 (NCH2 x 5), 5,52 (CH)
4. 3400, 2950, 1653, 1525, 1460, 1360, 1160, J120, 1030 1,2-2,0 (CH2x 6),
2,24 (CHJ, 2,30 (CHJ, 2,9-3,4 (NCH2 x 5), 5,56 (CH)
5. 3330, 2950, 1655, 1520, 1460, 1360, 1160, 1120, 1080 1,20-2,0 (CH2 x 7), 2,0-2,4 (CH2 x 2), 2,9-3,4 (NCH2 x 5) 5,52 (CH)
6. 3370, 2925, 1655, 1520, 1460, 1155, 1115, 1080 1,2-2,0 (CH2 x 8), 2,0-2,4 (CH2 x 2), 2,9-3,4 (NCH2 x 5), 5,50 (CH)
-5187417
A vegyület sorszáma Infravörös abszorpció spektrum (cm ') Proton-NMR spektrüm (δ érték)
7. 3400, 2930, 1650, 1520, 1460, 1360, 1190, 1160, 1090 1,4-2,4 (CH2 x 4), 2,40 (CHJ, 2,8-3,4 (NCH2 x 5), 3,38 (OCH3), 5,30 (CH)
8. 3420,2940,1650,1520,1460, 1355, 1190, 1160, 1090 1,4-2,0 (CH2 x 5), 2,0-2.5 (CH2 x 2), 2,9-3.4 (NCH2 x 5), 3,38 (OCHJ, 5,29 (CH)
9. 3420, 2950, 1650, 1520, 1460, 1360, 1190, 1160, 1090 1,2-2.,0 (CH2 x 6), 2,0-2,5 (CH2 x 2), 2,9-3,4 (NCH2 x 5), 3,37 (0CH3, 5,26 (CH)
10. 3400,2925,1650,1520,1455, 1355,1250,1190,1160,1090 1,2-2,0 (CH2 x 7), 2,0-2,5 (CH2 x 2), 2,9-3,4 (NCH x 5), 3,37 (OCHJ, 5,28 (CH)
11. 3400, 2930, 1655, 1520, 1460, 1360,1190,1160,1090, 1,2-2,0 (CH2 x 8), 2,0-2,5 (CH2 x 2), 2,9-3,4 (NCH2 x 5), 3,37 (OCHJ, 5,29 (CH)
12. 3400, 2930, 1655, 1520, 1460, 1360, 1160, 1085 1,23 (CHJ, 1,3-2,0 (CH2x 6), 2,0-2,5 (CH2 x 2), 2,9-3,4 (NCH2 x 5), 3,64 (CHJ, 5,42 (CH)
13. 3380, 2925, .1655, 1520, 1455, 1360, 1155, 1080 0,92 (CHJ, 1,2-2,0 (CH? x 8), 2,0-2,5 (CH2 x 2), 2,9-3,4 (NCH2 x 5), 3,61 (CHJ, 5,41(CH)
14. 3370, 2930, 1655, 1520, 1455, 1355,1165,1110,1060 1,2-2,0 (CH2 x 6), 2,0-2,5 (CH2 x 2), 2,9-3,4 (NCH2 x 5), 3,70 (CH2 x 2), 5,45 (CH)
15. 3340, 2930, 1655, 1520, 1450, 1160,1065,1020,740,695 1,2-2,0 (CH2 x 6), 2,0-2,5 (CH2 x 2), 2,9-3,4 (NCH2 x 5)., 4,64 (CHJ, 5,51 (CH),' 7,32 (C6HJ
16. 3350, 2930, 1660, 1520, 1460, 1355 1,4-2,5 (CH2 x 6), 2,9-3,4 (NCH2 x 5), 5,56 (CH), 6,81(CH) ·
17. 3400, 2925, 1660, 1530, 1460, 1360, 1165, 1115, 1080 1,4-2:,5 (CH2 x 7), 2,9-3,4 (NCH2 x 5), 5,60 (CH), 6,02(CH), 6,85 (CH)
18. 3400, 2940, 2850, 1660, 1530, - · 1460,1360,1225,1115,1080 1,2-2,5 (CH2 x 8), 2,9-3,4 (NCH2 x 5), 5,56 (CH), 6,01 (CH), 6,81 (CH)
19. '· 3400, 2940, 1665, 1520, 1455, 1350, 1195, 1095,985 1,4-2,5 (CH2x 6), 2,9-3,4 (NCHZ x 5), 3,4 (OCHJ, 5,39 (CH), 6,09 (CH), 6,90 (CH)
20. 3450, 2925, 1650, 1525, 1460, 1160,1110,1075 -,----1 1,4-2,3 (CH2 x 7), 2,38 (CHJ, 2,9-3,4(NCH2 x 5), 4,0 (CH),. 5,52 (CH)
-6187 417
A vegyület sorszáma Infravörös abszorpció spektrum (cm *) Proton-NMR spektrum (δ érték)
21. 3400, 2950, 1655, 1520, 1460, 1165,1110,1075 1,2-2,4 (CH:íx8), 2,41 (CH2), 2,9-3,4 (NCH2 x 5), 4,0(CH), 5,58 (CH)
22. 3330, 2930, 1655, 1520, 1460, Ι,Φ-1,9 (CH2x5), 2,19 (CH2),
1360, 1190, 1160, 1090, 1020 2,49 (CH2), 2,9-3,4 (NCH2 x 5), 3,41 (CH3), 4,04 (CH), 5,35(CH)
23. 3350, 2925, 1655, 1520, 1460, 1360,1160,1085,1020 _ , * 1,23 (CH3), 1,4-1,9 (CH2 x 5), 2,16 (CH2), 2,46 (CH3), 2,9-3,4 (NCH2 x 5), 3,64 (CH2) 4,02 (CH2), 5,43 (CH)
24. 3380, 2925, 1655, 1520, 1455, 0,92 (CH3), 1,2-1,9(CH2x7),
1370,1155,1080,1020 , 2,09 (CH2), 2,43 (CH2), 2,9-3,4 (NCH2 x 5), 3,61 (CH2), 4,01 (CH); 5,41. (CH)
25. 3375, 2930, 1655, 1520, 1450, 1165, 1115, 1060 1,4-1,9 (CH2x5), 2,13 (CH2), 2,45 (CH2), 2,9-3,4 (NCH2 x 5), 3,70 (CH2 x 2), 4,02 (CH), 5,44 (CH)
26. 3330, 2930, 1655, 1520, 1445, 1,4-1,9 (CH2x5), 2,12 (CH2),
1360, 1160, 1065, 1020, 740, 695 2,46 (CH2), 2,9-3,4 (NCH2 x 5), 4,00(CH), 4,64 (CH2), 5,50· (CH) ' 7,32 (C6H5)
4. Táblázat
A vegyület sorszáma: 15-heIyzet 11-helyzet fajlagos forgatóképesség (a)“
9. (±) 0,0’ (Cl, H2O)
(-) -30,4’ (Cl, H2O)
( + ) + 29,5° (Cl, H2O)
22. (S) (±) -1,0’- (Cl, H2O)
(-) 27,3° (Cl, H2O)
. ( + ) -25,5’ (Cl, H2O)
23. (S) (±) -0,2° (ci, h2o)
(-) - 25,0’ (Cl, H2O)
( + ) + 24,2’ (Cl, H2O)
24. (S) (±) + 0,5’ (Cl, H2O)
(-) - 22,9° (Cl, H2O)
( + ) + 23,5’ (Cl, H2O)
25. (S) (±) -2,1’ (Cl, H2O)
(-) -18,7’ · (Cl, H2O)
( + ) + 15,8’ (Cl, H2O)
26. (S) (±) -3,1’ (a, h2o)
(-) -24,3’ (a, h2o)
( + ) + 21,0’ (Cl, H2O)
187 417
5. Táblázat
A vegyüld sorszáma PH 2 3 4 5 6 7 8 9 10
9. 69,3 89,3 100 J00 100 100 100 97,5 97,9
13. 72,4 90,1 100 - 100 - 100 98,0 96,0
14. 71,8 90,6 100 - 100 - 100 97,5 97,3
15. 76,5 91,4 100 100 100 99,0 96,2
22. (- 79,7 100 100 100 100 100 97,6 ‘ 95.7
( + ) 79,7 - 100 100 100 100 100 100 95,6
24. 76,3 - 100 100. 100 100 100 97,1 94,8
25. 68.9 - 100 100 100 100 100 97,7 95,5
26. 77,2 - 100 100 100 100 100 95,9 94,5
1 ) - sperguulin 88,1 88,0 87,8 82,5 46,5 12,6 6,1 0
ι υ (2) biológiai tulajdonságok
A tanulmány szerinti eljárással előállított összes (I) általános képletű vegyüiet jól kimutatható karéi nosztatikus hatást, így in vitro körülmények között rákos sejteknél erős növekedésgátló hatást és implantált rákos sejteket hordozó egereknél élettartam növelő hatást fejt ki, miként ez a következőkben ismertetett kísérletekből kitűnik.
1. Rákos sejteknél in vitro kifejtett növekedésgátló hatás
DBA/2 törzsbeli egerek mindegyiknél 105 egér L 1210 leukémia sejtet implantálunk. 4 napos etetést követően az egerektől aszpetikus körülmények közöli elvett hasvizet háromszor átmossuk fiziológiás konyhasóoldattal az L—1210 sejtek elkülönítése céljából, majd a sejteket RPMI 1640 tápatalajban (moore, G. E.: Journal of the Amercan Medical Assosiation, 199. 519 (1967) vagy Morton, H. J.: In Vitro, 6. 89 (1970)/ szuszpendáljuk. A szuszpenzióhoz 10,, borjúembrió-széramot és 5gmól 2-merkapto-etanolt adunk, majd a szuszpenziót úgy hígítjuk, hogy 0,9 ml-je 5 · 104 számú L l 210 sejtet tartalmazzon. Mikrolemezre az így kapott sejtszuszpenzióból 0,9 ml-t továbbá a viszgálandó mintát tartalmazó táptalajból 0,1 ml-t viszünk fel, majd a mikrolemezt szén-dioxiddal töltött inkubátorban 37 °C-on tartjuk 48 órán át. Eztuán a sejtek számát Coulter Counter típusú számláló-berendezésben (a Coulter Electronics, Inc. Amerikai Egyesült Államok-beli cég szállítja) mérjük és a százalékos növekedésgátlást a növekedésgátlás (%) — (1—T/
C) · 100 képlet alapján - a képletben.
T = a vizsgálandó mintát tartalmazó táptalajban növekvő sejtek száma, és
C = a kontroll táptalajban növekvő sejtek száma kiszámítjuk. Különböző mennyiségekben vett mintákkal kapott növekedésgátlási értékekből ki tudjuk számítani az 50%-os növekedésgátláshoz szükséges koncentrációt. Néhány jellegzetes (I) általános képletű vegyülettel az L—1210 sejtek növekedésgátlása vonatkozásában végzett kísérletek eredményeit a 6. táblázatban adjuk meg.
6. Táblázat
A vegyüiet sorszáma Növekedésgátlás (%), (1-T/C) · 100 50%-os növekedésgátláshoz szükséges koncentráció (gg/ml)
A kísérleti vegyüiet koncentrációja, gg/ml
1,25 2,5 5 10 20 40 80 160
1. - 52,2 89,3 101 100 - - - 2,4
2. 9,6 30,5 46,9 69,5 77,6 79,6 79,6 - 5,0
3. 20,6 36,7 64,2 81,6 86,7 - - '3,7
4. 20,0 27,5 29,9 58,4 75,5 78,7 - - 8,1
5. - 24,9 29,1 40,0 54,2 66,0 88,5 96,8 18
6. 38,0 40,3 45,5 50,3 57,5 ' - - - 8,0
7. 38,7 80,.7 98,5 99,8 99,9 99,3 - - • 1,5
8. — - 33,2 38,1 46,8 53,5 66,3 88,2 28
9. - - 35,5 45,9 62,3 78,1 90,9 96,0 12
10. - . - 19,9 28,5 36,5 52,4 62,4 79,5 39
11. - 35,0 52,2 59,4 71,8 77,9 - 10
12. ... - 21,5 31,1 38,4 47,3 58,6 73,5 - 21
13. 17,0 21,3 24,0 33,2 65,7 72,5 _ - 14
14. - - 22,3 24,6 29,9. 42,7 58,6 - 52
15. 27,1 . 39,0 71,0 94,5 97,7 100 - - 3,1
16. - 22,6 31,1 32,5' 56,3 - - - 17
17. 2,1 4,5 13,3 16,5 33,7 52,53 - - 70 ·
18. - - 15,7 20,9 29,5 32,3 47,8 - 90
-8187417
Növekedésgátlás (%), (1 -T/C) · 100 50%-os
A vegyület A kísérleti vegyület koncentrációja, gg/ml növekedésgát-
sorszáma koncentráció
1,25 2,5 5 10 20 40 80 160 (úg/m0
19. 29,9 32,2 46,4 56,4 75,6 85,4 93,1 - 6,3
20. 17,2 20,1 28,9 30,7 45,7 - - - 27
21. 14,6 21,5 29,7 37,5 51,6 84,0 94,5 - 18
22. - 60,8 82,6 94,5 96,9 988,3 - - 1,8
23. - 58,5 '85,5 93,0 96,1 96,4 - - 2,2
24. - 47,3 . 75,6 89,5-· 95,0 ‘972 - — 2,6
25. - 9,0 20,0 42,0 63,5 74,7 -' - 7,2
26. - 54,2 79,0 90,2 96,6 97,3 - - 2,2
II. Egereknél implantált rákra kifejtett terápiás hatás
BDF, törzsbe tartozó, 5 hetes hím egereket egyenként intrapritoneálisan beoltunk 105 számú egér L1210 leukémia sejttel, majd naponta egyszer a sejtek beoltását követő hat napon át intraperitoneálisan beadjuk á kísérleti vegyület fiziológiás 25 konyhasóoldattal készült oldatát. Megfelelő tartás mellett az egereket 30 napon át megfigyeljük a túlélési priódus meghosszabbodásának százalékos 20 aránya megállapítása céljából. Ezt a 100 T/C egyenlőséggel - ahol T a kezelt csoportnál az átlagos túlélési idő napokban és C a kontrollcsoportnál az átlagos túlélési idő napokban - számoljuk ki. Néhány jellegzetes (I) általános képletű vegyületnek az egér L—1210 leukémiára kifejtett terápiás hatását a 7. táblázatban mu tatjuk be.
7. Táblázat
A vegyület Dózis sorszáma: (mg/kg/nap) A túlélési periódus meghoszszabbodása .(%), T/C 100 30 napot . túlélőegerek 35 száma A vegyület sorszáma: (r Dózis ng/kg/nap) A túlélési periódus meghoszszabbodása (%), T/C · 100 30 napot túlélőegerek száma
4 50 0 0/4 40 9. 50 . 0 0/4
25 336 0/4 (±) 25 0 0/4
12,5 >357 2/4 12,5 >429 ' 4/4
6,25 >369 1/4 6,25 >429 4/4
3,13 >364 2/4 3,13 >429 4/4
1,56 >429 4/4 45 1,56 >411 1/4
0,78 >429 4/4 0,78 >300 2/4
0,39 >390 3/4 .. 0,39 171 0/4
0,20 197 0/4 0,20 114 0/4
5. 50 0 0/4 éo 9. 25 0 0/4
25 306 0/4 (-) 12,5 >390 2/4
12,5 181 0/4 6,25 >336 1/4
6,25 125 0/4 3,13 >411 3/4
3,13 118 0/4 1,56 >356 2/4
1,56 ' 104 0/4 55 0,78 0,39 >370 >342 2/4
6. 50 0 0/4 0/4 . 4/4 4/4 2/4
25 12,5 0 >429 0,20 0,10 127 110 0/4 0/4
6,25 >429 10. 50 0 0/4
3,13 >386 2/4 60 25 0 0/4
1,56 >393 3/4 12,5 129 0/4
0,78 >429 · 4/4 6,25 107 0/4
0,39 >383 2/4 3,13 100 0/4
0,20 >354 2/4 1,56 100 0/4
187 417
A vegyület sorszáma: Dózis (mg/kg/nap) A túlélési periódus meghoszszabbodása (%), T/C · 100 30 napot · túlélő egerek száma
11. 50 0 0/4
25 0 0/4
12,5 >357 2/4
6,25 >393 3/4
3,13 >357 2/4
1,56 200 0/4
0,78 200 0/4
0,39 143 0/4
0,20 107 0/4
I6. 50 0 0/4
25 236 0/4
12,5 >354 2/4
6,25 >350 2/4'
3,13 >343 2/4 ·
1,56 233 0/4
0,78 129 0/4
18. 12,5 0 0/4
6,25 >350 2/4
3,13 >429 4/4
1,56 >429 3/4
0,78 200 0/4
0,39 157 0/4
0,20 136 0/4
0,10 129 0/4
19. 25 0 0/4
12,5 >364 2/4
6,25 >429 3/4
3,13 >321 2/4
1,56 >350 2/4
0,78 164 0/4
0,39 107 0/4
0,20 100 0/4
21. 50. 0 0/4
25 229 0/4
12,5 200 0/4
6,25 164 0/4
3,13 129 0/4
1,56 114 0/4
0,78 100 0/4
0,39 100 0/4
0,20 100 0/4
22. 50 7 0/8
(S) 25 >414 6/8
(±) 12,5 >380 5/8
6,25 >332 4/8
3,13 163 0/8
1,56 117 Ö/8
22. 25 >423 . 5/5
(S) 12,5 >408 4/5
' (-) 6,25 >400 4/5
3,13 >290 1/5
1,56 177 0/5
A vegyület sorszáma: (r Dózis ng/kg/nap) A túlélési periódus meghoszszabbodása (7„), T/C · 100 30 napot túlélő egerek száma
23. 25 200 0/4
12,5 129 0/4
6,25 119 0/4
3,13 104 0/4
25. 50 >429 4/4
25 229 0/4
12,5 193 0/4
6,25 107 0/4
III. Toxicitás
A találmány szerinti eljárással előállított (I) általánosképletű vegyületeknek kivétel nélkül alacsony a toxicitása. Jellemző rájuk továbbá, hogy folyamatos alkalmazásukkor is viszonylag kis mértékben kumulálódik toxikus hatásuk. A 8. Táblázatban megádjuk néhány jellegzetes (I) általános képletű vegyület LD50 értékét, amelyet egéren egyszeri intraperitneális beadással állapítottunk meg. Megadjuk továbbá a maximális tolerálható dózist olyan összdózisban kifejezve, amelyet egérnek hat egymást követő napon át naponta egyszer állandó mennyiségben intraperitoneálisan adtunk be.
8. Táblázat
A vegyület száma: sorLD50*(mg/kg) Maximálisan tolerálható dózis (mg/kg)**
1. 50 < 300 <
2. 50 < 300 <
3. 50 < 300 <
4. 25-50 150 <
5. 25-50 150 <
6. 12,5-25 75 <
8. 25-50 150 <
9. 12,5-25 75 <
10. 12,5-25 75<
11. 12,5-25 75 <
12. 12,5-25 75<
. 14. 25-50 150 <
15. 12,5-25 75 <
16. 25-50 150 <
17. 12,5-25 . 75<
18. 6,25-12,5 37,5 <
19. 12,5-25 75 <
20. 50 < 300 <
21. 25-50 150<
22. 25-50 150<
23. 25 < 150 <
24. 50 < 300 <
25. 50 < 300 < .
26. 12,5-25 75<
-101
187 417
Megjegyzés: * Átlagos letális dózis egyszeri beadásnál ** Maximális értéke annak az összadózisnak, amely nem okoz halált, ha 6 egymást követő napon át naponta az egérnek állandó mennyiségű (egységnyi testsúlyra vonatkoztatva) hatóanyagot adunk be.
A fentiekben ismertetettből tehát látható, hogy a találmány szerinti előállított (I) általános képletű vegyületek karcionasztatikus vegyületekként használhatók. A korábbiakban felsorolt vegyületek mindegyike kiváló növekedésgátló hatást fejt ki egér L-1210 leukémia sejtek vonatkozásában. Ezek közül a vegyületek közül különösen azok hatásosak, amelyek (I) általános képletben R hidrogénatomot vagy adott esetben hidroxilcsoporttal helyettesített, 1-4 szénatomot tartalmazó alkilcsoportot vagy helyettesítetlen benzilcsoportot jelent, n értéké 1 és 6 közötti egész szám, azzal a megkötéssel, hogy ha Y jelentése — CH(OH) — CH2 — csoport, akkor R jelentése hidrogénatomtól eltérő. Implantált rákban szenvedő egereknél kiváló terápiás hatást fejtettek ki továbbá azok az (I) általános képletű vegyületek, amelyek képletében R jelentése hidrogénatom vagy adott esetben hidroxilesoporttal helyettesített, 1 vagy 2, előnyösen 1 szénatomot tartalmazó alkilcsoport és n értéke 4, 5 vagy 6. Ezek közül a legutoljára említett vegyületek közül az R helyén metilcsoportot tartalmazónak a kémiai stabilitása is kiváló, így a 9., 19. és 22. vegyületek a leginkább előnyösek.
A követklezőkben a találmány szerinti eljárást ismertetjük részletesen.
Bár szerves oldószerekben is végrehajtható, valamely (II) általános képletű omega-guanidino-zsírsav-amid a (III) általános képletű dihidroxi-etánamid kondenzálását általában kis mennyiségű víz jelenlétében végezzük, minthogy mindkét vegyületet rendszerint savvaddíciós só formájában használjuk, és ezek vízben jól oldódnak.
Ha szerves oldószert kell használnunk, akkor célszerűen acetont vagy dimetil-formalmidot használunk, de a kondenzálást rendszerint kis mennyiségű víz jelenlétében, szerves oldószerek alkalmazása nélkül hajtjuk végre. Az alkalmazott vízmenynyiségnek legalább a kiindulási anyagok feloldásához elegendőnek kell lennie. Általában egy mól (II) általános képletű omega-guanidino-zsírsav-ámidra vonatkoztatva 2-60 mól, előnyösen 4-40 mkól vizet használunk. Minthogy a (II) és a (III) képletű vegyületeket rendszerint savaddiciós só formájában hasznosítjuk, nincs szükség sav adagolására a reakcióelegyhez. Ugyanakkor azonban a kondenzációs reakció hozamának javítása céljából előnyös savkatalizátorok közé tartoznak szervetlen savak, például sósav, kénsav, foszforsav és bórsav valamint szerves savak, például az ecetsav, citromsav, borkősav, borostyánkősav, glutársav és az dipinsav,. Előnyös egy dikarbonsav például glutársav alkalmazása. Az alkalmazott savmennyiség I mól (II) általános képletű ómega- guanidino-zsírsavamidra vonatkoztatva 0-10, előnyösen 0,5-4 mól. A reakcióhőmérséklet 0 °C és 100°C közötti lehet rendszerint szobahőmérséklettől függően változik.
A hozam növelése céljából előnyös az 1-2 napos reakcióidő. Bár a (II) általános képletű omegaguanidino-zsírsav-amidnak a (III) képletű dihidroxi-etánamidra vonatkoztatott mólaranya nem lényeges, általában az utóbbiból 0,5-4 mólt, előnyösen 0,8-1,5 mólt használunk 1 mól előbbire. így egy (la) általános képletű vegyüle tet - a képletben Y és n jelentése a korábban megadott vagyis egy, R helyén hidrogénatomot tartalmazó (I) általános képletű vegyületet kapunk.
Az R helyén hidrogénatomtól eltérő helyettesítőt tartalmazó (I) általános képletű vegyületek valamely (la) képletű vegyület 11-helyzetű hidroxilcsoportjának egy megfelelő alifás alkohollal, diazoρε raffinnal vagy benzilalkohollal végzett alkilezése útján állíthatók elő. (la) általános képletű vegyületként használhatunk tehát az előzőekben ismertetett kondenzáció útján kapott vegyületet vagy mikrobiális tenyésztéssel kapott fermentléből elkülönített spergualint.
Az alkilezéssel kapott vegyületek az (Ib) általános képletű N-[4-(3-amino-propil)-amino-butil]-2(omega-guanidino-zsírsav-amido)-2-alkoxi-etánamid-származékok - a képletben Y és n jelentése az (I i általános képletnél megadott, míg R’ jelentése adott esetben hidroxilcsoporttal helyettesített, 1-4 szénatomot tartalmazó alkilcsoport vagy helyettesíl etlen benzílcsoport.
Az alkilezést a következőképpen hajtjuk végre.
Valamely (la) általános képletű vegyület és egy alkohol közötti reakciót rendszerint egy savas katalizátor jelenlétében hajtjuk végre. A reakciót megelőzően az (la) általános képletű vegyületek guanidino- és aminocspportjait - ha nem is szükségszerűer - megvédhetjük. Áz alkohol a (IV) általános képlettel - a képletben'R’ jelentése az (Ib) általános képletnél megadott - jellemezhető. Az ilyen alkoholok közé tartoznak rövidszénlkáncú alkanolok, például metanol, etanol, propanol és butanol; glikolok, például etilén-glikol és propilén-glikol, valamint benzilalkohol. A reagáltatást előnyösen magát a (IV) általános képletű; alkoholt mint oldószert használva hajtjuk végre, bár használhatunk egy közömbös oldószert is. Az alkalmazható savas katalizátorok közé tartoznak szervetlen savak, például sósav és a kénsav, szerves savak, például az ecetsav és a p-toluol-szulfonsav, valamint kationcserélő gyanták. A reakcióhőmérséklet 0 °C és 100 °C közöztt, rendszerint 80 °C között változhat, előnyösen szobahőmérséklet megfelelő. A reakcióidő a reakcióhőmérséklettől függően változhat. így 1 óra és 10 nap közötti lehet, előnyösen 1-2 nap.
Ha valamely (la) általános képletű hidroxietánamid-származéknak egy (IV) általános képletű alkoholban alacsony az oldékonységa, akkor a hozam növelése céljából előnyösnek bizonyul az (la) általános képletű vegyület amino-és iminocsoportjainak védőcsoportokkal való megvédése. Alkalmas védőcsoportok kiválaszthatók a szakirodalomban, például a Mcomie, J. F. W. szerkesztésében 1973-ban New York-ban. megjelent „Protective Groups in Organic Chemistry” c. könyvben ismertetettek alapján. Amino-védőcsoportokat hasznosí.hatjuk. Az egyvegyértékű védőcsoportokra példaképpen a benziloxi-karbonil-, 4-metoxi-benzil11
-111
187 oxi-karbonil-, terc-butoxi-karbonil- és az izoborniloxi-karbonilcsoportot, míg kétvegyértékű védőcsoportként például a ftaloil- és a szukcinilcsoportot említhetjük. Ezek közül a védőcsoportok közül ( bevitelük és eltávolításuk egyszerűségére tekintettel · előnyösek az aralkoxi-karbonilcsoportok, például a benziloxi-karbonil- vagy 4-metoxi-benziloxikarbonilcsoport. E védőcsoportok bevitelét ismért módszerekkel hajtjuk végre, előnyösen az úgynevezett reakcióképes észter módszert használva. 1(
E módszer során az (la) általános képletű vegyületek guanidinocsoportja változatlan marad.
Az (la) általános képletű vegyületek 11-helyzetű hidroxilcsoportjának egy diazo-paraffinnel végzett reagáltatás útján végrehajtott alkilezését a következőképpen végezzük.
Általában először az (la) általános képletű vegyület amino- és iminocsoportjait a fentiekben említett védőcsoportok valamelyikével megvédjük, 2 majd a védett származékot egy diazo-paraffinnel reagáltatjuk egy közömbös oldószerben, például metilén-kloridban vagy tetrahidrofurában — 20°C és + 20 °C, rendszerint - 10 °C és +10 °C, előnyösen -3 °C és +3 °C közötti hőmérsékleten, 1-15, 2 rendszerint 2-8 órán át. A reagáltatához nem szükséges feltétlenül katalzátor alkalmazása, de a reakciót segíti egy Lewis-sav típusú katalizátor, például bór-trifluorid', alumínium-klorid, hidrofluorbórsav vagy szelén-dioxid jelenléte. 1-4 szénatomot tartalmazó diazo-paraffinokra példaképpen a diazometánt, diazo-etánt, diazo-propánt és a diazobutánt említhetjük. Ezek a diazo-paraffinok a megfelelő N-nitrozó-alkil-karbamidokból, N-nitrozóalkil-uretánsokból, N-nitrozó-alkil-szulfamidokból és N-nitrozó-alkil-N’-nitro-gaunidinekból állíthatók elő ismert módszerekkel, például a következő szakirodalmi helyeken ismertetett módszerekkel: „Organic Synthesis”, II. kiadás, 165. o. (1943) és III. kiadás, 119. o. (1955), a könyv a John Wiley and Sons, Inc. Amerikai Egyesült Államok-beli 4 kiadó gondozásában jelent meg; Journal of Orga- s nic Chemistry, 13. 763 (1948); „Organic Synthesis”,
IV. kiadás, 250. o. (1963); Chemische Berichte, 94. 2547 (1961); Canadian Journal of Research, 28B.
683 (1950); „Organic Synthesis”, III. kiadás, 244. o. 45 (1955) és Journal of Chemical Society, 1935, 286.
Egy diazo-paraffinnel végzet alkilezés lehetővé teszi a 11-helyzetű hidroxilcsoportnak olyan módon történő alkileződését, hogy az (la) általános képletű vegyületek 11-helyzetű konfigurációja ne 50 változzék meg. így például egy (la) általános képletű (- )-hidroxi-etánamid-származék így a megfelelő (Ib) általános képletű (— )-elkoxi-etánamid-származékká alakítható. Ugyanakkor a 11-helyzetre vontakoztatva egy (- )-alkoxi-etánamid-származé- 55 kot vagy egy (± )-epimerelegyet kapunk egy\ + )hidroxi-etánamid-száTmazékból vagy egy (±)-epimerelegyből. .
Az (la) általános képletű vegyületek a 11- és a 15-helyzetben egyaránt hidroxilcsoportot hordoz- 60 nak abban az esetben, ha Y jelentése — CH(OH)— CH/— csoport. Ebben az esetben a kétféle hidroxilcsoport eltérő reakcióképességére tekintettel lehetséges a 11-helyzetben levő hidroxilcsoportot szelektíven alkilezni. * 65
417
Az alkilezett termék védett amino- és iminöcsoportjairól a védőcsoportokat szokásos módon távolíthatjuk el, egy (lb) általános képletű alkoxietánamid-származékot kapva. így például ha a védőcsoport egy aralkoxi-karbonilcsoport, akkor eltávolítható szokásos katalitikus hidrogénezéssel atmoszférikus nyomáson. A reagáltatást egy alkalmas oldószerben, például metanolban, etanolban, dioxánban vagy ezek elegyében katalizátorként palládium vagy platina jelenlétében hajtjuk végre. A reagáltatás egy sav, például sósav vagy ecetsav adagolásával gyorsítható.
Ha Y jelentése — CH(OH) — CH2 — csoport, akkor az (I) általános képletű vegyületek N-[4-(3amino-propil)-amino-butiI]-2-(omega-guanidinobéta-hidroxi-zsírsav-amido)-2-helyettesített-etánamid-származékok, vagyis az (Ic) általános képlettel - a képletben R és n jelentése a korábban megadott, azzal a megkötéssel, hogy ha n értéke 4, akkor R jelentése hidrogénatomtól eltérő - jellemezhető vegyületek. Ha valamely (Ic) guanidinoű vegyület 15-helyzetű konfigurációja (S)- vagy (R)és a vegyület a. 11-helyzetre vonatkoztatva epimerelegy, akkor a vegyület kromatográfiásan a kétféle epimerre. azaz a ( + )-formára és a (-)-formára szeparálható. E célra HPLC alkalmas. Jó eredményeket kapunk, ha például oszloptöltetként a M. Nagel Co. által Nucleosil C18 márkanév alatt szállított anyagot, míg eluálószerként acetonitrilt és nátrium-pentán-szulfonátot tartalmazó foszfátpuffért használunk.
Miként a korábbiakban ismertettüik, a 11-helyzetü hidroxilcsoport diazo-paraffinnel végzett alkilezése, majd HPLC-val végrehajtott szeparálás útján egy optikailag aktív (Id)általános képletű N-[4(3-amino-propil)-amino-hutil]-2-(omega-guanidino-béta-hidroxi-zsíirsav-amido)-2-alkoxi-etánamid-származékot - a képletben R’ és n jelentése a korábban megadott - állíthatunk elő. Ha egy így kapott (Id) általános képletű vegyület 15-helyzetű hidroxilcsoportját dehidratálás útján eltávolítjuk vagy dezoxidáljuk, akkor egy optikailag aktív (le) általános képletű N-[4-(3-amíno-propil)-aminobutil]-2-[omega-guanidino-(alfa,béta-telítetlen)zsírsav-amido]-2-alkoxi-etánamid-származékot - a képletben R’ és n jelentése a korábban megadott vagy egy optikailag aktív (If) csoportú N-[4-(3amino-propil)-amino-butíl]-2-[omega-guanidino(telített)-zsírsav-amiido]-2-alkoxi-etánamid-származékot - a képletben R’ és n jelentése a korábban megadott - kapunk.
Az (le) általános képletű vegyületek előállítása során közelebbről úgy járunk el, hogy valamely (Id) általános képletű vegyület amino- és iminocsoportjait a korábbiakban említett védőcsoportokkal megvédjük, az így kapott védett származékot dehidrátálásnak vetjük alá és a védőcsoportokat eltávolítjuk. A dehidratálást például azzal az ismert módszerrel hajthatjuk végre, amikot diciklohexilkarbodiimidet használunk réz(I)- vagy réz(II)klorid jelenlétében [Journal of the American Chemical Society, 90. 3245 (1965)]. Ez a módszer azért előnyös, mert enyhe semleges körülmények között hajtható végre. A diciklohexil-karbodiimid fölöslege a reakcióidőt csökkenti. A kiindulási anyagok
-1287 417 oldhatóságát figyelembe véve az alkalmazható oldószerekre példaként az N,N-dimetil-formamidot említhetjük. A reakcióhőmérséklet rendszerint szobahőmérséklet és 100 °C között változhat. A reakcióidő a reakcióhőmérséklettől függően néhány óra 5 és néhány nap között változhat.
Az (Id) általános képletű vegyületekből a 15helyzetű hidroxilcsoport dezoxidálása útján is előállítható (If) általános képletű vegyületeket előnyösen azonban az (le) általános képletű vegyületek- 10 bői, azok kettőskötésének redukálása útján állítjuk elő. A kettőskötés redukálását szokásos módon, például katalitikus redukcióval végezzük. Ha az amino- és iminocsoportok védőcsoportja araloxikarbonilcsoport, akkor a kettős redukálást és a 15 védőcsoportok eltávolítását egyidejűleg katalitikus redukálással végezhetjük.
Ha valamely (Ib) általános képletű alkoxi-etánamid-származék R’ csoportja benzilcsoport, akkor a benzilcsoportot katalitikus redukálással eltávolít- 20 hatjuk és így a megfelelő (la) általános képletű hidroxi-etánamid-szarmazékká alakíthatjuk úgy, hogy a 11-helyzetben a konfiguráció változatlan marad. Ebben az esetben a védőcsoportként használt aralkoxi-karbonilcsoport elávolítása céljából 25 végzett katalitikus redukálás atmoszférikus nyomáson alacsony reakciósebességgel megy végbe, viszont kielégítő eredményeket kapunk csökkent reakcióidővel, ha a reagáltatást vizes-ecetsavas oldatban hajtjuk végre megnövelt nyomáson, azaz 3θ néhány atmoszféra és néhány tíz atmoszféra közötti nyomáson.
Az (la) általános képletű végtermékek előállításához kiindulási anyagként használt (II) általános , képletű omega-guanidino-zsírsav-amidokat - a 35 képletben Y és n jelentése a korábban megadott következőképpen állíthatjuk elő.
(i) Az Y helyén — CH2CH2 — csoportot tartalmazó (II) általános képletű vegyületek előállítása.
Ezek a vegyületek a (Ha) általános képlettel - a 40 képletben n értéke a korábban megadott - jellemezhetők. A (Ha) általános képletű telített omegaguanidino-zsírsav-amidok ismert vegyületek és kereskedelmi forgalomban beszerezhető nyersanyagokból ismert reakciókban állíthatók elő. így pél- 45 dául úgy járunk el, hogy valamely (V) általános képletű omega-amino-zsírsav - a képletben n értéke a korábban megadott - aminocsoportjára védőcsoportot viszünk fel, majd a karboxilcsoportot észterezzük, a kapott észtert ammóniával kezelve 30 amiddá alakítjuk, az amino-védöcsoportot eltávolítjuk és az aminocsoportot guanidinocsoportá alakítjuk.
A (Ha) általános képletű'vegyületek úgy is előállíthatok, hogy egy diamint egy megfelelő (IV) álta- 55 lános képletű nitril-származékká - árképletben n értéke a korábban megadott - oxidáljuk, majd a nitrilcsoportot hidrolizálva amidot képzünk és végül az aminocsoportot zsírsavcsoporttá alakítjuk.
A (Ila) általános képletű telített omega-guanidino- 60 zsírsav-amidokra példaképpen megemlíthetjük a
4-guanidino-butánamidot, 5-guanidinó-pentánamidot, 6-guanidino-hexánamidot, 7-guanidinoheptánamidot, 8-guanidino-oktánamidot, 9-guanidino-nonánamidot, 10-guanidino-dekánamidot és a 11-guanidino-undekánamidot.
(ii) Az Y helyén —CH(OH — CH2 — csoportot tartalmazó (II) általános képletű vegyületek előállítása
Ezek az omega-guanidino -béta-hidroxi-zsírsavamid-származékok a (llb) általános képlettel - a képletben n értéke a korábban megadott-jellemezhetők és különböző ismert módszerekkel állíthatók elő. így például úgy járunk el, hogy valamely(VH) általános képletű omega-amino-zsírsav-származék - a képletben n értéke a korábban megadott aminocsoportjára védőcsoportot viszünk fel, ezután ajáncot két további szénbatommal megnöveljük, a kapott vegyületet a béta-hidroxi-karbonsavszármazékok előállítására szokásosan alkalmazott reakciósorozattal béta-hidroxi-zsírsav-amiddá alakítjuk, a védőcsoportot az aminocsoportról lehasítjuk és végül az aminocsoportot guanidinocsoporttá alakítjuk. Az eljárást részletesen' fogjuk majd később kivitel példában ismertetni.
Egy (llb) általános képletű vegyület úgy is előállítható, hogy egy (VII) általános képletű omegaamino-zsírsav-származék aminocsoportját egy amino-védőcsoporttal, így például benziloxikarbonilcsoporttal védjük, a zsírsav-származékot ezután reakcióképes származékká, például savimidazoliddá alakítjuk, az így kapott reakcióképes származékot a Buletin de la Société Chimique de Francé, 945 (1964) szakirodalmi helyen ismertetett (VIII) képletű monoetil- malonát-magnéziumenoláttal kondenzáljuk, egy így kapott (IX) általános képletű béta-ketoészter - a képletben X’ jelentése amino-védőcsoport, míg n értéke az korábban megadott - ketonős karbonilcsoportját redukáljuk, a kapott béta-hidroxi-észtert ammóniával kezelve amiddá alakítjuk, az amino védőcsoportot eltávolítjuk és végül az aminocsoportot guanidinocsoporttá alakítjuk. Az így előállítható (llb) általános képletű vegyületekre példaképpen,megemlíthetjük a 4-guanidino-3-hidroxi-butánamidot, 5-guanidino-3-hidroxi-pentánamidot, 6-guanidino-3hiőroxi-hexánamidot, 7-guanidino-3-hidroxiheptánamidot, 8-guanidino-3-hidroxi-oktánamidot és a 9-guanidino-3-hidroxi-nonánamidot.
(S)-7-guanidino-3-hidroxi-heptánamid előállítható úgy is, hogy a (XII) képletű spergualint savval vagy bázissal hidrolizálásnak vetjük alá. A (XII) képletű vegyületet a Bacillus genushoz tartozó mikroorganizmus, például a FERM-P5230 vagy ATCC 31192 deponálási számú Bacillus BMG162-aF2 tenyésztése útján kapott fermentléből különíthetjük el. Előállíthatjuk továbbá a Journal of Antibiötics, 34. 1625 (1981) szakirodalmi helyen ismertetett szintetikus módszerrel úgy, hogy L-lizinből Amdt-Eistert reakcióban [Journal of Organic Chemistry, 17. 347 (1952)] (S)-3,7-diamino. heptán-karbonsavat állítunk elő, a béta-aminocsoportot salétromsavval dezamináljuk, a karboxilcsoportot amidcsoporttá alakítjuk és végül az aminocsoportot guanidinocsoporttá alakítjuk.
(iii) Az Y helyén—CH=CH—csoportot tartalmazó (II) általános képletű vegyületek előállítása
Ezek az omega-guanidino-alfa,béta-telítetienzsírsav-amidok a (IIc) általános képlettel - a kép13
-131 . 187 417 letben n értéke a korábban megadott - jellemezhetők. A (ÍIc) általános képletű vegyületek előnyösen állíthatók elő a korábbiakban ismertetett módon szintetizálható (Ilb) általános képletű omegaguanidino-béta-hidroxi -zsírsav-amidok dehidratálásával. Bár a dehidratálás a béta-hidroxi-zsírsavamidok dehidratálására szokásosan alkalmazott módszerekkel hajtható általában végre, előnyösen a reagáltatást enyhe, semleges reakciókörülmények között hajtjuk végre. Az egyik alkalmas módszer az, amikor a dehidratálást diciklohexil-karbodiimiddel réz(II)-klorid jelenlétében a Journal of the American Chemical Society, 90. 3245 (1968) szakirodalmi helyen ismertetett módszerrel hajtjuk végre. Tekintettel arra, hogy a (Ilb) általános képletű vegyületeket általában savaddíciós sóik formájában hasznosítjuk, előnyösen oldószerként a savaddíciós só oldékonyságát figyelembe véve N,Ndimetil-formamidot használunk. A reakcióhőmérséklet általában szobahőmérséklet és 100 ’C között, míg a reakcióidő a reakcióhőmérséklettől függően néhány óra és néhány nap között változhat. A reakcióidő csökkenthető a diciklohexil-karbodiimid fölöslegben használatával. Az így előállítható (IIc) általános képletű vegyületekre példaképpen a 4-guanidino-2-buténamidot, 5-guanidino-2-penténamidot, 6-guanidino-2-hexénamidot, 7-guanidino-2-hepténamidot, 8-guanidino-2-okténamidot és a 9-guanidino-2-nonénamidot említhetjük.
Ha valamely (IIc) általános képletű vegyület kettős kötését szokásos módon katalitikus hidrogénezésnek vetjük alá vagy pedig nátrium-bór-hidrid felhasználásával egy átmeneti fém vegyülete, például nikkel-klorid vagy kobalt-klorid jelenlétében a Chemical and Pharmaceutical Bulletin, 19. 817 (1971) szakirodalmi helyen ismertetett módon redukáljuk, akkor egy megfelelő (Ha) általános képletű vegyületet kapunk.
Az (la) általános képletű vegyületek előállításához kiindulási anyagként használt (III) képletű N[4-(3-amino-propil)-amino-butil]-2,2-dihidroxietánamidot a Journal of Antibiotics, 34. 1625 (1981) szakirodalmi helyen ismertetett módon állítjuk elő. így tehát valamely (X) általános képletű vegyület - a képletben X1 jelentése amino-védőcsoport - szabad aminocsoportját a glioxilsav valamely (XI) általános képletű dialkil-acetáljával - a képletben X2 jelentése 1-5 szénatomot tartalmazó alkilcsoport - vagy a glioxilsav egy másik reakcióképes származékával acilezünk, majd az X1 aminovédőcsoportot és adott esetben az X2 alkilcsoportokat eltávolítjuk, akkor a (III) általános képletű vegyületet kapjuk.
A (III) képletű vegyület előállítható továbbá magas hozammal a korábban említett spergualin hidrolizálása útján is.
A találmányt közelebbről a következő referenciapéldákkal és kiviteli példákkal kívánjuk megvilágítani.
I. Referencia példa (S)-7-guanidino-3-hidroxi-heptánsavamid előállítása *
a) lépés:
(S)-3,7-diamino-heptánsav előállítása g (82,15 millimól) L-lizin-hidroklorid 150 ml vízzel készült oldatához 8,7 g (82,15 millimól) nátrium-karbonátot és 43,2 g (200 millimól) N-(etoxikarbonil)-ftálimidet adunk, majd az így kapott reakcióelegyet szobahőmérsékleten 20 órán át keverjük. Ezt követően a reakcióelegyet 50 ml etilacetáttal mossuk, majd a vizes fázis pH-értékét 6 n sósavoldattal 3,0-ra beállítjuk és ezután 100-100 ml 2,0 pH-jú vízzel mossuk, majd vízmentes nátrium-szulfát fölött szárítjuk és csökkentett nyomáson szárazra pároljuk. így 27,95 g (84%) mennyiségben 71-72 ’C olvadáspontú (bomlik) fehér por formájában di-N-ftaloil-L-lizint kapunk. Fajlagos forgatóképessége [ujj/2 = -32° (c=l, metanol).
27,0 g (66,4 millimól) di-N-ftaloil-L-lizinhez 40 ml oxalil-kloridot adunk, majd az így kapott elegyet olajfürdőn 90 °C-on melegítjük. Ezután 40 ml 1,2-dimetoxi-etánt adagolunk és a kapott elegyet visszafolyató hűtő alkalmazásával 2 órán át forraljuk. Ezt követően a reakcióelegyet szárazra pároljuk, majd a maradékot 20 ml 1,2-dimetoxietánban újra oldjuk és cseppenként hozzáadjuk 500 ml olyan dietil-éteres oldathoz, amely 330 millimól diazo-metánt tartalmaz. Az adagolás során jeges-vizes fürdővel hűtést végzünk. Az adagolás befejezését követően a reakcióelegyet 1 órán át keverjük, majd szárazra pároljuk és a maradékot 250 ml vízmentes metanolba feloldjuk. Az így kapott oldathoz 50 ml olyan trietil-amin-oldatot adunk, amely 3,4 g (14,8 millimól) ezüst-benzoátot tartalmaz. A reakcióelegyet szobahőmérsékleten 15 órán át keverjük, majd a kívánt csapadékot kiszűrjük és 100 ml kloroformban oldjuk. Az oldatot szűrjük az oldhatatlan rész eltávolítása céljából, majd szárazra pároljuk. így 15,43 g (53%) mennyiségben a 118-119’C olvadáspontú (bomlik) (S)3,7-diftaloil-amino-heptánsav-metilésztert kapjuk. Fajlagos forgatóképessége [a]£ = -3’ (c = 2, kloroform).
15,0 g (34,5 millimól) (S)-3,7-diftaloil-aminoheptánsav-metilészterhez 100 ml 1 mólos etanolos hidrazin-hidrát-oldatot és 100 ml 95%-os etanolt adunk, majd az így kapott reakcióelegyet 90 ’C hőmérsékletű olajfürdő és visszafolyató hűtő alkalmazásával 1 órán át forraljuk. Ezt követően a reakcióelegyet szárazra pároljuk, majd a maradékot 250 ml 5%-os sósavoldatban feloldjuk. A kapott oldatot 80 ’C-on melegítjük 1 órán át, majd pHértékét 17%-os vizes ammónium-hidroxid-oldattal 7,1-re beállítjuk és átbocsátjuk egy 27'mm belső átmérőjű, 300 ml Amberlite CG-50 (70% NH4típús) márkanevű gyantával töltött oszlopon. Az oszlopot egymás után 900 ml vízzel, majd 900 ml 0,2 mólos vizes ammónium-hidroxid-oldattal mossuk, és 0,5 mólos vizes ammónium-hidroxid-oldattal eluáljuk. A ninhidrin-pozitív frakciókat összegyűjtjük, majd szárazra pároljuk, 3,15 g (57%) mennyiségben (S)-3,7-diamino-heptánsavat (C7Hi6N2O2 1/4H2CO3) kapva színtelen szirup formájában. Fajlagos forgatóképessége [ajp = + 2,9’ (c = 1, víz).
-141 , 187 417
b) lépés:
(S)-7-guanidino-3-hidroxi-heptánsavamid előállítása ml 10:10:1 térfogatarányú piridin-víz-trietil-amin elegyhez - amely az a) lépésben ismertetett módon előállított (S)-3,7-diamino-heptánsavból 3,1 g-ot (19,3 miHimél) tartalmaz - lassan 4,81 g (19,3 millimól) N-(benziloxi-karboniloxi)szukcinimidet adunk, majd az így kapott elegyet szobahőmérsékleten 5 órán át keverjük. Ezt követően szárazra pároljuk, majd 30 ml vízben oldjuk és a kapott vizes oldat pH-értékét 6 n sósavoldattal 6,4-re beállítjuk. Ezután az oldatot 16 mm belső átmérőjű és 100 ml Amberlite CG-50 (80% NH4típusú) márkanevű gyantával töltött oszlopon átbocsátjuk. Az oszlop eluálását 300 ml vízzel végezzük. Az összegyűjtött eluátumot 16 mm belső átmérőjű és 100 ml Dowex 50W-X4 (H-típusú) márkanevű gyantával töltött oszlopon bocsátjuk át. Az utóbbi oszlopot egymás után 300 ml vízzel és 300 ml 0,2 mólos vizes ammónium-hidroxid-oldattal eluáljuk, 10 ml-es frakciókat szedve. A 16-33. számú frakciókat összeöntjük, majd szárazra pároljuk, 2,73 g (48%) mennyiségben 143-147 °C olvadáspontú (bomlik) fehér por formájában (S)-3amino-7-(benziloxi-karbonil-amino)-heptánsavat (C15H22N2O4 - H2O) kapva. Fajlagos forgatóképessége [α]θ = + 14° (c= 1, metanol). Az Amberlite CG-50 márkanevű gyantával töltött oszlopot 0,5 n vizes ammónium-hidroxid-oldattal eluálva 746 mg (24%) (S)-3,7-diamino-heptánsavat nyerhetünk
Jeges hűtés közben 2,7 g (9,17 millimól) (S)-3amino-7-(benziloxi-karbonil-amino)-heptánsav
33%-os vizes ecetsav-oldattal készült oldatához 1 óra leforgása alatt cseppenként hozzáadjuk 1,9 g (27,51 millimól) nátrium-nitrit 10 ml vízzel készült oldatát. Az így kapott reakcióelegyet 1 órán át keverjük, majd 5 °C-on 24 órán át állni hagyjuk. 50 ml víz adagolását követően a reakcióelegyet 50-50 ml etil-acetáttal kétszer extraháljuk, majd az egyesített extraktumot vízmentes nátrium-szulfát fölött szárítjuk és szárazra pároljuk. így 2,16 g mennyiségben por alakú nyers terméket kapunk. Ezt azután 28 mm belső átmérőjű és 200 g Wakogel C-200 márkanevű gyantával töltött oszlopon kromatografálásnak vetjük alá, eluálószerként kloroform, metanol és tömény vizes ammónium-hidroxidoldat 30 : 10 : 1 térfogatarányú elegyét használva és 20 ml-es frakciókat szedve. Az 51-60. számú frakciókat összeöntjük, majd szárazra pároljuk, 460 mg (17%) mennyiségben 115-117 °C olvadáspontú (bomlik) fehér por formájában (S)-7-(benziloxikarbonil-amino)-3-hidroxi-heptánsavat kapva. Fajlagos forgatóképessége [α]ρ = +3° (c=2, metanol).
Jeges hűtés közben 450 ml (1,52 millimól) (S)-7(benziloxi-karbonil-amino)-3-hidroxi-heptánsavoldathoz (1,2-dimetoxi-etánnal készült) hozzáadunk cseppenként 7 ml (4,56 millimól) dietiléteres diazo-metán-oldatot, majd az így kapott reakcióelegyet 30 percen át keverjük és ezután szárazra pároljuk. így 461 mg (98%) mennyiségben (S)-7(benziloxi-karbonil-amino)-3-hidroxi-heptánsavmetilésztert kapunk. Fajlagos forgatóképessége [<'= + Γ·
-10°C-on 450 mg (1,45 millimól) (S)-7(benziloxi-karbonil-amino)-3-hidroxi-heptánsavmetilészter 50 ml vízmentes metanollal készült oldatát gázalakú ammóniával telítjük, majd lezárt edényben szobahőmérsékleten 3 napon át állni hagyjuk. Ezt követően a reakcióelegyet szárazra pároljuk, majd a maradékot 20 mm belső átmérőjű és 50 g Wakogel C-200 márkanevű szilikagélt tartalmazó oszlopon kromatografálásnak vetjük alá, az eluálást kloroform és metanol 100 : 9 : 1 térfogatarányú elegyével végezve és 10 ml-es frakcióki t szedve. A 82-106. számú frakciókat összeöntjük, majd szárazra pároljuk. így 371 mg (87%) mennyiségben 126-127°C olvadáspontú (bomlik) fehér por alakjában (S)-7-(benziloxi-karboftilariino)-3-hidroxi-heptánsavamidot kapunk. Fajlagos forgatóképessége [α]θ = -3° (c = 5, metanol).
ml 90%-os vizes metanol és 0,01 ml ecetsav elegyében feloldunk 350 mg (1,19 millimól) (S)-7(benziloxi-karbonil-amino)-3-hidroxi-heptánsavamidot majd a kapott oldathoz 50 mg 5% fémtarta’mú szénhordozós palládiumkatalizátort adunk és az így kapott reakcióelegyet szobahőmérsékleten hi Jrogéngáz-áramban 3 órán át keverjük. A katalizátor szűrés útján végzett eltávolítását követően a szűrletet bepároljuk, majd a maradékot kis térfogatmennyiségű vízben újraoldjuk és 12 mm belső átmérőjű, 30 ml Dowex 50W -X4 (H-típus) márkanevű gyantát tartalmazó oszlopon átbocsájtjuk. Az oszlopot 90 ml vízzel mossuk, majd 0,5 mólos vizes ammónium-hidroxid-oldattal eluáljuk, 3 ml-es frakciókat szedve. A 2'8-34. számú frakciókat öszszeöntjük, majd szárazra pároljuk, 201 mg (96%) mennyiségben (S)-7-amino-3-hidroxi-heptánsavamidot kapva. Fajlagos forgatóképessége [ajg=-2° (c = 2, víz).
190 mg (1,08 millimól) (S)-7-amino-3-hidroxiheptánsavamid 3 ml vízzel készült oldatához 0,54 ml 2 n vizes nátrium-hidroxid-oldatot, majd jeges hűtés közben 30 perc leforgása alatt cseppenkéat 1 ml olyan metanolos oldatot adunk, amely 129 mg (1,08 millimól) 2-melil-l-nitrozó-karbamidot tartalmaz. Az így kapott reakcióelegyet 5 órán át keverjük, majd pH-értékét 6 n sósavoldattal 6,0ra beállítjuk. Ezt követően a reakcióelegyet szárazra pároljuk, majd a maradékot 15 mm belső átmérőjű, 30 g Wakogel C-200 márkanevű szilikagélt tartalmazó oszlopon kromatográfiásan tisztítjuk, eluálószerként kloroform, metanol és tömény vizes airmónium-hidroxid-oldat 60 : 10 : 1 térfogatarányú elegyét használva és 6 ml-es frakciókat szedve. A 67-90. számú frakciókat összeöntjük, majd szárazra pároljuk, 187 mg (70%) mennyiségben 148-149 °C olvadáspontú (bomlik) fehér por alakjában (S)-7-(nitro-guanidino)· 3-hidroxi-heptánsavamidot kapva. Fajlagos forgatóképessége [a] > = -2° (c = 2, metanol).
ml víz, 15 ml metanol és 7,5 ml ecetsav elegyében feloldunk 170 mg (0,69 millimól) (S)-7-(nitro·
-151
187 417 guanidino)-3-hidroxi-heptánsavamidot, majd az így kapott reakcióelegyhez 50 mg 5% fémtartalmú szénhordozós palládiumkatalizátort adunk és a reakcióelegyet szobahőmérsékleten hidrogéngázáramban 1 órán át keverjük. A katalizátor szűréssel történő eltávolítását követően a szűrletet szárazra pároljuk, 165 mg mennyiségben por alakú nyers terméket kapva. Ezt azután 10 ml vízben felodjuk, majd a kapott oldatot 12 mm belső átmérőjű és 20 ml CM-Sephadex C-25 (Na-típusú) gyantával töltött oszlopon átbocsátjuk, 0,5 mólos vizes nátrium-klorid-oldattal eluálva és 2 ml-es frakciókat szedve. A 18—25. számú frakciókat összeöntjük, majd szárazra pároljuk és a kapott maradékot 10 -10 ml metanollal háromszor extraháljuk. A metanolos extraktumokat összeöntjük, majd 20 mm belső átmérőjű és 100 ml Sephadex LH-20 márkanevű gyantával töltött oszlopon átbocsátjuk, az oszlopot metanollal eluálva és 1 ml-es frakciókat szedve. A 28-46. számú frakciókat összeöntjük, 20 majd szárazra pároljuk. így 149 mg (91%) mennyiségben fehér por alakjában (S)-7-guanidino-3hidroxi-heptánsavamid-hidrokloridot (C8H18N4O2 HCI) kapunk. Fajlagos forgatóképessége [a]p = - 2° (c = 2, víz). 25
2. Referenciapélda
7-guanidino-2-heptánsavamid előállítása 30
955 mg (4 millimól) (S)-7-guanidino-3-hidroxiheptánsavamid-hidroklorid 20 ml vízmentes N,Ndimetil-formamiddal készült oldatához hozzáadunk 2,48 g (12 millimól) diciklohexil-karbodiimidet és 40 mg réz(H)-kloridot. Az így kapott reak- 35 cióelegyet szobahőmérsékleten 2 napon át keverjük, majd szűrjük a kivált csapadék eltávolítása céljából. A szűrletet csökkentett nyomáson bepároljuk, majd a maradékot feloldjuk 10 ml vízben és a vizes oldatot 10-10 ml etil-aeetáttal kétszer mos- 40 suk. A vizes fázist ezután szárazra pároljuk, majd a maradékot 5 ml vízben oldjuk, és a kapott oldatot * 20 mm belső átmérőjű és 50 ml CM-Sephadex C-25 (Na-típusú) márkanevű gyantával töltött oszlopon átbocsátjuk, az eluálást 200 ml 0,5 mólos 45 vizes nátrium-klorid-oldattal végezve és 10 ml-es frakciókat szedve. A 17-30. számú frakciókat öszszeöntjük, majd szárazra pároljuk és a maradékot háromszor metanollal extraháljuk. Az egyesített metanolos oldatokat 20 mm belső átmérőjű és 50 150 ml Sephadex LH-20 márkanevű gyantával töltött oszlopon bocsátjuk át, metanollal eluálva és 5 ml-es frakciókat szedve. A 9-16. számú frakciókat összeöntjük, majd szárazra pároljuk. A kapott 950 mg anyagot etanol és aceton elegyéből kristá- 55 lyosítjuk, 790 mg (89,5%) mennyiségben a 162-168’C olvadáspontú cím szerinti vegyületet kapva.
Ή—NMR (deuterometanol, delta): 1,4-1,8 (CH2 · 2), 2,27 (CH2), 3,20 (CH2), 5,98 (CH) és go 6,80 (CH).
IR-spektrum (KBr-tabletta, cm '): 3370, 3150, 1660, 1625, 1610, 1590, 1415, 1395, és 1370.
3. Referenciapélda
7-Guanidino-heptánsavamid-hidrokiorid előállítása
441 mg (2 millimól) 7-guanidino-2-heptén-savamid-hidroklorid 7 ml metanollal készült oldatához 47,5 mg (0,2 millimól) nikkel-kloridot, majd szobahőmérsékleten keverés közben kis adagokban ,189 mg (5 millimól) nátrium-bór-hidridet adunk. Az adagolás befejezését követően a reakcióelegyet
1,5 órán át keverjük, majd a kivált fekete csapadéktól szűrés útján megszabadítjuk és a szűrletet szárazra pároljuk. A maradékot 5 ml 0,5 mólos vizes nátrium-klorid-oldatban oldjuk,· majd 30 mm belső átmérőjű és 100 ml Diaion HP-20 márkanevű gyantával töltött oszlopon átbocsátjuk, az eluálást először 300 ml 0,5 mólos vizes nátrium-kloridoldattal, majd 300 ml vízzel végezve és 15 ml-es frakciókat szedve. A 25-33. számú frakciókat öszszeöntjük, majd szárazra pároljuk és a maradékot - 5-5 ml metanollal háromszor extraháljuk. Az egyesített metanolos extra ktumot 20 mm belső átmérőjű és 150 ml Sephadex LH-20 márkanevű gyantával töltött oszlopon bocsátjuk át, az eluálást metanollal végezve és 5 ml -es frakciókat szedve. A 8-13. számú frakciókat összeöntjük, majd szárazra pároljuk. A maradékot: etanol és aceton elegyéből kristályosítva 372 mg (83,5%) mennyiségben 140-141 ’C olvadáspontú színtelen kristályok alakjában a cím szerinti vegyületet kapjuk.
Ή—NMR (deuterometanol, delta): 1,2-1,9 (CH2 · 4), 2,23 (CHJ és 3,20 (CHJ. _
IR-spektrum (KBr-tabletta · cm-’): 3350, 3150, 2920,· 1655, 1630, 1590, 1455, 1430, 1400, 1220, 1165, 1130 és 1065.
4. Referenciapélda
8-Guanidino-3-hidroxi-oktánsavamid előállítása
a) lépés:
8-(BenziIoxi-karbonil-amino)-3-oxo-oktánsavetilészter előállítása
6,56 mg (50 millimól) 6-amino-hexánsav 25 ml 2 n vizes nátrium-hidroxid-oldattal készült oldatához 5 ml dietil-étert, majd jeges hűtés és keverés közben 30 perc leforgása alatt cseppenként 10 ml benziloxi-karbonil-kloríd és 37,5 ml 2 n vizes nátrium-hidroxid-oldat elegyét adjuk. Az adagolás befejezését kővetően a reakcióelegyet szobahőmérsékletre melegítjük, majd a keverést 2 órán át folytatjuk. Ezt követően a reakcióelegyet 20-20 ml dietiléterrel kétszer mossuk, majd a vizes fázist tömény sósavoldattal megsavanyítjuk és háromszor 50-50 ml etil-aeetáttal extraháljuk. Az extraktumokat egyesítjük, majd telített nátrium-klorid-oldattal mossuk, vízmentes nátrium-szulfát fölött szárítjuk és az oldószert elpárologtatjuk. így 12,16 g (92%) mennyiségben a 127-128 ’C qlvadáspontú 6-(benzüoxi-karbonil-amino)-hexánsava( kapjuk.
2,65 g(10 millimól) 6-(benziloxi-karbonilamino)-hexánsav és 1,62 g (10 millimól) kereskedelmi forgalomban beszerezhető l,l’-karbonildiimidazol 25 ml vízmentes tetrahidrofuránnal készült oldatát szobahőmérsékleten 15 percen át ke16
-161
187 417 verjük, majd hozzáadjuk 6,18 g (40 millimól) fehér por alakú monoetil-malonát-magnézium-enolát (5,28 g monoetil-malonátból és 972 mg magnéziumból állíthatjuk elő) 50 ml vízmentes tetrahidrofuránnal készült szuszpenzióját. Az így kapott reakcióelegyet szobahőmérsékleten 2 órán át keverjük, majd hozzáadunk 50 ml 1 n sósavoldatot és a keverést 10 percen át folytatjuk. Ezt követően a reakcióelegyet 50-50 ml kloroformmal háromszor extraháljuk, majd az egyesített kloroformos extraktumot egymás után 1 n sósavoldattal, telített vizes nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal és végül telített nátrium-klorid-oldattal mossuk, vízmentes nátrium-szulfát fölött szárítjuk és az oldószert elpárologtatjuk. Az így kapott maradékot 100 g „Silica Gél 60” márkanevű szilikagélen (a Merck and Co. amerikai egyesült államokbeli cég terméke) oszlopkromatografálásnak vetjük alá, kloroformmal eluálva és 20g-os frakciókat szedve. A 43-105. számú frakciókat összeöntjük, majd szárazra pároljuk, a lépés címadó vegyületét kapva 2,35 g (70%) mennyiségben.
—NMR (deuterokloroform, delta): 1,27 (CHJ, 1,1-1,9 (CHi · 3), 2,52 (CHJ, 3,17 (NCHJ, 3,40 (CHJ, 4,18 (CHJ, 5,05 (NH), 5,09 (CHJ és 7,32 (CÖH J.
IR-spektrum (KBr-tabletta, cm '): 3360, 2920, 1730, 1710, 1520 és 1240.
b) lépés:
8-Guanidino-3-hidroxi-oktánsavamid előállítása Az a) lépésben kapott 8-(benziloxi-karbonilamino)-3-oxo-oktánsav-etilészterből 2,01 g-ot (6 millimól) feloldunk 20 ml etanolban, majd a kapott oldathoz keverés közben szobahőmérsékleten kis adagokban hozzáadunk 227 mg (6 millimól) nátrium-bór-hidridet. Az így kapott reakcióelegyet ezután 30 percen át keverjük, majd néhány csepp ecetsavat keverünk hozzá és 100 ml vízbe öntjük. A kapott vizes elegyet 50-50 ml kloroformmal háromszor extraháljuk, majd a kloroformos extraktumokat egyesítjük, egymás után 1 n sósavoldattal, telített vizes nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal és végül telített nátrium-klorid-oldattal mossuk, vízmentes nátrium-szulfát fölött szárítjuk és az oldószert elpárologtatjuk. így 2,00 g (99%) mennyiségben a 47-50 °C olvadáspontú 8-(benziloxikarbonil-amino)-3-hidroxi-oktán-etilésztert kapjuk.
Az előző bekezdésben kapott vegyületből 1,69 got (5 millimól) feloldunk 40 ml, ammóniagázzal telített metanolban, majd az így kapott oldatot szobahőmérsékleten 3 napon át keverjük és ezután szárazra pároljuk. A maradékot etanolból kristályosítva 1,18 g (72,5%) mennyiségben a 100-101 °C olvadáspontú 8-(benzíloxi-karbonil-amino)-3hidroxi-oktánsavamidot kapjuk.
Az előző bekezdés szerinti vegyületből 1,04 g (3,2 millimól) 20 ml metanollal készült oldatához hozzáadunk 3,2 milliliter 1 n sósavoldatot és 200 ml 10% fémtartalmú szénhordozós palládiumkatalizátort. Az így kapott reakcióelegyet szobahőmérsékleten hidrogéngáz-áramban 3 órán át keverjük, majd a katalizátort kiszűrjük és a szűrletet szárazra pároljuk, 670 mg mennyiségben 8-amino-3-hidroxi-oktánsavamid-hidrokloridot kapva.
Az előző bekezdés szerinti vegyületből 670 mg 8 ml 1 n vizes nátrium-hidroxid-oldattal készült oldatához hozzáadunk 668 mg (2,4 millimól) S-metilizotiokarbamid-hemiszulfátot. Az így kapott reakcióelegyet szobahőmérsékleten 1 éjszakán át keverjük, majd pH-értékét 1 n sósavoldattal 6-ra beállítjuk és ezután szárazra pároljuk. A maradékot 5 ml 1 mólos vizes nátrium-klorid-oldatban feloldjuk, majd a kapott oldatot 160 ml Diaion HP-20 márkanevű gyantából (a Mitsubishi Chemical Co. japán cég terméke) álló oszlopon átbocsátjuk. Az eluálást 400 ml 1 mólos, 400 ml 0,8 mólos, majd 800 ml 0,6 mólos vizes nátrium-klorid-oldat egymás utáni átbocsájtásával végezzük, 15 g-os frakciókat szedve. A 4,1-87. számú frakciókat összeöntjük, majd szárazra pároljuk és a maradékot 10—10 ml metanollal háromszor extraháljuk. A metanolos extraktumot 300 ml Sephadex LH-20 márkanevű gyantából álló oszlopon átbocsátjuk, az oszlop eluálását a sótalanítás céljából metanollal végezve és 7 ml-es frakciókat szedve. A 25-35. számú frakciókat összeöntjük, majd szárazra pároljuk, 687 mg (85%) mennyiségben a lépés és egyben a példa címadó vegyületét kapva.
’H—NMR (deuterometanol, delta): 1,4-1,8 (CH2 · 4), 2,36 (CHJ, 3,20 (NCHJ és 3,95 (CH).
IR-spektrum (KBr-tabletta, cm-1): 3350,*3170, 2930, 1655, 1400 és 1175.
5. Referenciapélda
8-Guanidino-2-okténsavarnid előállítása
A 2. referenciapéldában a 7-guanidino-2-hepténsavamid előállítására ismertetett módszerhez hasonló módon 270 mg 8-guanidino-3-hidroxi-okténsavamid-hidrokloridból 218 mg (86%) mennyiségben a 163-165 °C olvadáspontú 8-guanidino-2ol ténsavamid-hidroklorid állítható elő.
Ή—NMR (deuterometanol, delta): 1,4-1,9 (CH2 3), 2,25 (CHJ 3,19 (NCHJ, 5,94 (CH) és 6,79 (CH).
IR-spektrum (KBr-tabletta, cm-1): 3400, 3120, 2920, 1660, 1630 és 1400.
6. Referenciapélda
9-Guanidino-3-hidroxi-nonánsavamid előállítása
A 4. referenciapéldában a 8-guanidino-3-hidroxi oktánsavamid előállítására ismertetett módszerhez hasonló módon 2,56 g 7-amino-heptánkarbonsavból 892 mg 9-guanidino-3-hidroxi-nonánsavariid-hidroklorid állítható elő.
*H—NMR-spektrum (deuterometanol, delta): 1,2-1,9 (CH2 · 5), 2,35 (CHJ, 3,19 (NCHJ és 3,92 (CH).
IR-spektrum (KBr-tabletta, cm '): 3350, 3180, 2940, 1660, 1400 és 1175.
-171
187 417
7. Referenciapélda
9-Guanidino-2-nonénsavamid előállítása
A 2. referenciapéldában a 7-guanidino-2-hepténsavamid előállítására ismertetett módszerhez hasonló módon 361 mg 9-guanidino-3-hidroxinonén-savamid-hidrokloridból 253 mg (75%) mennyisében a 132-135 °C olvadáspontú 9-guanidino-2-nonén-savamid-hidroklorid állítható elő.'
Ή — NMR (deuterometanol, delta): 1,2-1,9 (CH2 · 4), 2,23 (CHJ, 3,20 (NCHJ, 5,97 (CH) és 6,80 (CH).
IR-spektrum (KBr-tabletta, cm-1): 3350, 3175, 2940, 1660, 1620 és 1420.
8. Referenciapélda
N-[4-(3-amino-propil)-amino-butil]-2,2-dihidroxi-etánsavamid előállítása
a) lépés:
Mono-N-(benziloxi-karbonil)-l,4-butil-diamin előállítása
1,76 g (20 millimól) 1,4-butil-diamin 30 ml 50%os vizes metanollal készült oldatához hozzáadunk 25 5,48 g (20 millimól) S-(4,6-dimetil-pirimid-2-il)tiokarbonsav-benzilésztert (a Kokusan-kagaku Co. japán cég terméke). Az így kapott reakcióelegyet szobahőmérsékleten 3 órán át keverjük, majd szűrjük a képződött csapadék eltávolítása céljából. 3θ [Ebből a csapadékból 2,08 g (29%) mennyiségben a di-N-(benziloxi-karbonil)-származék különíthető el ] A szűrletet ezután szárazra pároljuk, majd a maradékot 250 ml kloroformban feloldjuk, és az így kapott oldatot 100-100 ml vízzel ötször mos- 35 suk. A kloroformos fázist ezután vízmentes nátrium-szulfát fölött szárítjuk, majd szárazra pároljuk, így 1,0 g (23%) mennyiségben színtelen szirup formájában a lépés címadó vegyületét kapjuk.
b) lépés: 40
O-tozil-3-(terc-butoxi-karbonoil-amino)-l- » propanol előállítása
1,5 g (20 millimól) 3-amino-1-propanol 3Óml metanollal készült oldatához hozzáadunk 4,8 g (20 millimól) S-(4,6-dimetil-pirimid-2-il)-tiokarbon- 45 sav-terc-butilésztert, majd az így kapott reakcióelegyet 6 órán át keverjük és ezután szárazra pároljuk.
A maradékot 200 ml kloroformban oldjuk, majd a kapott oldatot 200 ml vízzel mossuk és ezután betöményítjük. A koncentrátumot 300 g Wakogel 50 C-200 márkanevű gyantából álló oszlopon kromatografálásnak vetjük alá, eluálószerként toluol és etil-acetát 1 : 1 térfogatarányú elegyét használva és 15 ml-es frakciókat szedve. A 82-151. számú frakciókat összeöntjük, majd szárazra pároljuk, 2,95 g 55 (84%) mennyiségben színtelen olaj formájában 3(terc-butoxi-karbonil-amino)-1 -propanolt kapva.
Argongáz-atmoszférában jeges hűtés közben 2,95 g (16,9 millimól) 3-(terc-butoxi-karbonilamino)-l-propanol 50 ml piridinnel készült oldata- 60 hoz 40 perc leforgása alatt cseppenként hozzáadjuk 3,36 g (17,7 millimól) p-toluol-szulfonil-klorid piridines oldatát. Az így kapott reakcióelegyet 7 °C-on egy éjszakán át állni hagyjuk, majd kis térfogatmennyiségű vízzel elegyítjük és szarazra pároljuk. 55
A kapott maradékot 200 ml kloroformban oldjuk, majd a kloroformos oldatot egymás után 5%-os vizes kálium-hidrogén-szulfát-oldattal, telített vizes nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal és végül vízzel mossuk, vízmentes nátrium-szulfát fölött szárítjuk és szárazra pároljuk. A maradékot 120 g Wakogel C-200 márkanevű szilikagélből álló oszlopon kromatografáljuk, eluálószerként toluol és etil-acetát 8 : 1 térfogatarányú elegyét használva és 15 ml-es frakciókat szedve. A 35-68. számú frakciókat öszszeöntjük, majd szárazra pároljuk, 3,06 g (55%) mennyiségben színtelen olajos anyag formájában a lépés címadó vegyületét kapva.
c) lépés:
N-(Terc-butoxi-karbonil)-N-(terc-butoxi-karbonil-amino-propil)-1,4-butil-diamin előállítása ml Ν,Ν-dimetil-formamidban feloldunk a b) lépés szerinti vegyületből 800 mg-ot (2,43 millimól), majd az így kapott oldathoz 510 mg (4,8 millimól) lítium bromidot (LiBr H2O) adunk és a kapott reakcióelegyet szobahőmérsékleten 24 órán át keverjük. A brómvegyületet tartalmazó reakcióelegyhez ezután hozzáadunk az a) lépés szerinti vegyületből 540 mg-ot (2,43 millimól) és 0,34 ml trietil-amint. Az így kapott reakcióelegyet szobahőmérséékleten 48 órán át keverjük, majd hozzáadunk 699 mg (2,9 millimól) S-(4,6-dimetil-pirimid-2-il)-tiokarbonsav-terc-butilésztert. A reakcióelegyet szobahőmérsékleten 13 órán át keverjük, majd szárazra pároljuk. A maradékot feloldjuk 100 ml kloroformban, majd a kapott oldatot 50 ml vízzel mossuk, vízmentes nátrium-szulfát fölött szárítjuk és szárazra pároljuk. A maradékot 200 g Wakogel C-200 márkanevű szilikagélből álló oszlopon kromatografáljuk, eluálószerként toluol és etil-acetát 4: 1 térfogatarányú elegyét használva és 12 ml-es frakciókat szedve. A 134-165. számú frakciókat összeöntjük, majd szárazra pároljuk, 608 mg (52%) mennyiségben színtelen szirup alakjában N(benziloxi-karbonil)-N’-(terc-butoxi-karbonil)-N”(terc-butoxi-karbonil-amino-propil)-1,4-butildiamint kapva.
Az előző bekezdés szerinti vegyületből 144 mg (0,3 millimól) 5 ml metanollal készült oldatához 100 mg 5% fémtartalmú, bárium-karbonát hordozó alkalmazásával készült palládiumkatalizátort adunk. Az így kapott reakcióelegyet szobahőmérsékleten hidrogéngáz-áramban 5 órán át keverjük, majd a katalizátort kiszűrjük és a szűrletet szárazra pároljuk. így 103 mg (100%) mennyiségben a lépés címadó vegyületét kapjuk.
d) lépés:
N-[4-(3-amino-propiI)-amino-butil]-2,2-dihidroxi-etánsavamíd előállítása ' 2 ml etil-acetátban feloldunk a c) lépés szerinti vegyületből 100 mg-ot (0,29 millimól) és 149 mg (1 millimól) 2,2-dietoxi-ecetsavat. Az így kapott oldathoz ezután hozzáadunk 135 mg (1 millimól) 1hidroxi-benztriazolt és 206 mg (1 millimól) diciklohexil-karbodiimidet. Az így kapott reakcióelegyet ezután szobahőmérsékleten 15 órán át keverjük, majd a kivált csapadékot kiszűrjük és hideg etilacetáttal mossuk. A szürletet és az etil-acetátos mosófolyadékot összeöntjük, majd 1 mólos vizes ammónium-hidroxid-oldattal, ezután pedig vízzel
-181
187 417 mossuk. Az etil-acetátos fázist vízmentes nátriumszulfát fölött szárítjuk, majd szárazra pároljuk és 20 g Wakogel C-200 márkanevű szilikagélből álló oszlopon kromatografálásnak vetjük alá, eluálószerként toluol és etil-acetát 1 : 2 térfogatarányú elegyét használva és 3 ml-es frakciókat szedve. A 14-21. számú frakciókat összeöntjük, majd szárazra pároljuk, 109 mg (79%) mennyiségben színtelen szirup formájában N-[4-(3-terc-butoxi-karbonil-amino-propil)-4-terc-butoxi-karbonil-aminobutil]-2,2-dietoxi-etánsavamidot kapva.
Az előző bekezdés szerinti vegyületből 44 mg (0,13 millímól) 1 ml dioxánnal készült oldatához hozzáadunk 2,5 ml 0,1 n sósavoldatot, majd az-így kapott reakcióelegyet olajfürdőben 100 °C-on 4 órán át melegítjük. Ezt követően a reakcióelegyet 0,2 n vizes nátrium-hidroxid-oldattal pH 6-ra semlegesítjük, majd szárazra pároljuk. A maradékot
1,5 ml metanollal extraháljuk, majd a kapott metanolos oldatot 16,5 mm belső átmérőjű és 100 ml Sephadex LH-20 márkanevű gyantával töltött oszlopon kromatografáljuk, metanollal eluálva és 2 ml-es frakciókat szedve. A 22-25. számú frakciókat - amelyek ninhidrin-pozitívak - összeöntjük, majd szárazra pároljuk, 13 mg (46%) mennyiségben a lépés és egyben a példa címadó vegyületét kapva színtelen szirup formájában. A termék dihidrokloridsó.
1. példa
N-[4-(3-Amino-propil)-amino-butil]-2-(4-guanidino-butánsavamido)-2-hidroxi-etánsavamid (1. vegyület) előállítása
360 mg (2 millimól) 4-guanidino-butánsavamidhidroklorid, 701 mg (2,4 millimól) N-[4-(3-aminopropil)-amino-butil]-2,2-dihidroxi-etánsavamiddihidroklorid, 264 mg (2 millimól) glutársav és 0,36 ml víz keverékét 60 °C-on melegítjük 24 órán át. A reakció befejeződését követően a reakcióelegyhez 5 ml vizet adunk, majd átbocsátjuk 20 mm belső átmérőjű és 150 ml CM-Sephadex C-25 (Na-, típusú) márkanevű gyantával töltött oszlopon. Az oszlopot 1,5 1 víz és 1,5 1 0,8 mólos vizes nátriumklorid-oldat elegyével gradiens-eluálásnak vetjük alá, 15 ml-es frakciókat szedve. A 0,48-0,56 mól nátrium-klorid-koncentrációknak megfelelő
125-137. számú frakciókat összeöntjük, majd bepároljuk és a maradékot 10-10 ml metanollal háromszor extraháljuk. Az egyesített metanolos extraktumot 20 mm belső átmérőjű és 150 ml Sephadex LH-20 márkanevű gyantával töltött oszlopon átbocsátjuk, metanollal elúálva és 7 ml-es frakciókat szedve. A 9-15. számú frakciókat összeöntjük, majd szárazra pároluk, 318 mg (35%) mennyiségben fehér por formájában a cím szerinti vegyületet kapva trihidrokloridsóként.
2. példa
N-[4-(3-Amino-propil)-amino-butil]-2-(5-guanidino-pentánsavamido)-2-hidroxi-etánsavamid (2. vegyület) előállítása
92,4 mg (0,48 millimól) 5-guanidino-pentánsavamid-hidroklorid, 166,5 mg (0,57 millimól) N-[4-(3amino-propil)-amino-butil]-2,2-dihidroxi-etánsavamid-dihidroklorid, 62,8 mg (0,48 millimól) glutársav és 0,1 ml víz keverékét 60 °C-on melegítjük 24 órán át. A reakció befejezése után a reakcióelegyhez 5 ml vizet adunk, majd a reakcióelegyet az 1. példában ismertetett módszerhez hasonló módon tisztítjuk, CM-Sephadex C-25 (Na-típusú) és Sephadex LH-20 márkanevű gyantákat használva. így
82,5 mg (37,1%) mennyiségben fehér por alakjában a cím szerinti vegyületet kapjuk trihidrokloridsóként.
3. példa
N-[4-(3-Amino-propil)-amino-butil]-2-(6-guanidino-hexánsavamido)-2-hidroxi-etánsavamid -(3. vegyület) előállítása
446 mg (2,14 millimól) 6-guanidino-hexánsavamid-hidroklorid, 750 mg (2,57 millimól) N-[4-(3arrino-propil)-amino-butil]-2,2-dihidroxi-etánsavamid-dihidroklorid, 283 mg (2,14 millimól) glutársav és 0,45 ml víz keverékét 60 °C-on 24 órán át melegítjük. A reakció befejeződése után a reakcióelegyhez 5 ml vizet adunk, majd az így kapott elegye) az 1. példában ismertetett módszerhez hasonló módon tisztítjuk, CM-Sephadex C-25 (Na-típusú) és Sephadex LH-20 márkanevű gyantákat használva. így 459 mg (44%) mennyiségben fehér por alakjában a cím szerinti vegyületet kapjuk trihidrokloridsóként.
4. példa
N-[4-(3-Amino-propil)-amino-butil]-2-(7-guanidino-heptánsavamido)-2-hidroxi-etánsavamid (4. vegyület) előállítása
360 mg (1,62 millimól) 7-guanidino-heptánsavamid-hidroklorid, 568 mg (1,94 millimól) N-[4-(3amino-propil)-amino-butil]-2,2-dihidroxi-etánsavamid-dihidroklorid, 214 mg (1,62 millimól) glutársav és 0,36 ml víz keverékét 60 °C-on 24 órán át melegítjük. A reakció befejeződése után a reakcióelegyhez 5 ml vizet adunk, majd az így kapott elegyet az 1. példában ismertetett módszerhez hasonló módon tisztítjuk, CM-Sephadex C-25 (Na-típusú) és Sephadex LH-20 márkanevű gyantákat használva. így 317 mg (39%) mennyiségben fehér por alakjában a cím szerinti vegyületet kapjuk trihidrokloridsóként.
. 5. példa
N-[4-(Amino-propil)-amino-butil]-2-(8-guanidino-oktánsavamido)-2-hidroxi-etánsavamid (5. vegyület) előállítása
500 mg (2,11 millimól) 8-guanidino-oktánsavamid-hidroklorid, 740 mg (2,53 millimól) N-[4-(3amino-propil)-amino-butil]-2,2-dihidroxi-etánsavamid-dihidroklorid, 335 mg (2,53 millimól) glutársav és 0,34 ml víz keverékét 60 °C-on 24 órán át melegítjük. A reakció befejeződése után 5 ml vizet
-191
187 417 adunk a reakcióelegyhez, majd az így kapott elegyet az 1. példában ismertetett módszerhez hasonló módon tisztítjuk, CM-Sephadex C-25 (Na-típusú) és Sephadex LH-20 márkanevű gyantákat használva. így 526 mg (49%) mennyiségben fehér por alakjában a cím szerinti vegyületet kapjuk trihidroklo ridsóként.
6. példa \
N-[4-(3-Amino-propil)-amino-butil]-2-(9-guanidino-nonánsavamido)-2-hidroxi-etánsavamid (6 vegyület) előállítása
316 mg (1,26 millímól) 9-guanidino-nonánsavamid-hidroklorid, 442 mg (1,51 millimól) N-[4-(3 amino-propil)-amino-butil]-2,2-dihidroxi-etánsavamid-dihidroklorid, 166 mg (1,26 millimól) glutár· sav és 0,01 ml viz keverékét 60 °C-on 24 órán át keverjük, majd a reakció befejeződése után 5 ml vizet adunk hozzá. Az így kapott elegyet ezután az 1. példában ismertetett módszerhez hasonló módor tisztítjuk, CH-Sephadex C-25 (Na-típusú) és Sephadex LH-20 márkanevű gyantákat használva. így 324 mg (49%) mennyiségben fehér por alakjában a cím szerinti vegyületet kapjuk trihidrokloridsóként.
7. példa
N-[4-(3-Amino-propil)-amino-butil]-2-(4-guanidino-butánsavamido)-2-metoxi-etánsavamid (7. vegyület) előállítása
45,5 mg (0,1 millimól) N-[4-(3-amino-propil)amino-butil]-2-(4-guanidino-butánsavamido)-2hidroxi-etánsavamid-trihidroklorid 1 ml vízmentes metanollal készült oldatához 0,1 ml metanolos 2 n sósavoldatot adunk, majd az így kapott reakcióelegyet szobahőmérsékleten 17 órán át keverjük. Ezt követően a reakcióelegyet csökkentett nyomáson bepároljuk, majd a maradékot 3 ml vízben feloldjuk. A kapott vizes oldatot 20 mm belső átmérőjű és 150 ml CM-Sephadex C-25 márkanevű gyantával töltött oszlopon átbocsátjuk. Az oszlopot egy liter 1 mólos nátrium-klorid-oldattal és egy liter vízzel gradiens-eluálásnak vetjük alá, 17 ml-es frakciókat szedve. A 67-71. számú frakciókat összeöntjük (ezek 0,63-0,67 mól nátrium-klorid-koncentrációnak felelnek meg), majd szárazra pároljuk és a kapott maradékot 5-5 ml metanollal háromszor extraháljuk. Az egyesített metanolos extraktumot 20 mm belső átmérőjű és 150 ml Sephadex LH-20 márkanevű gyantával töltött oszlopon átbocsátjuk, az oszlopot metanollal eluálva és 7 ml-es frakciókat szedve. A 10-14. számú frakciókat összeöntjük, majd szárazra pároljuk, 31,4 mg (67%) mennyiségben fehér por alakjában a cím szerinti vegyületet kapva trihidrokloridsóként.
8. példa
N-[4-(3-Amino-propil)-amino-butil]-2-(6-guanidino-hexánsavamido)-2-metoxi-etánsavamid (8. vegyület) előállítása
177 mg (0,37 millimól) N-[4-(3-amino-propil)amino-butil]-2-(6-guanidino-hexánsavamido)-2hidroxi-etánsavamid-trihidroklorid 3,6 ml vízmentes metanollal készült oldatához hozzáadunk 0,36 ml 2 n metanolos sósavoldatot, majd az így kapott reakcióelegyet szobahőmérsékleten 17 órán át keverjük. Ezt követően a reakcióelegyet csökkentett nyomáson bepároljuk, majd a kapott fehér port a 7. példában ismertetett módszerhez hasonló módon tisztítjuk, CM-Sephadex C-25 (Na-típusú) és Sephadex LH-20 gyantákat használva. így 110 mg (60%) mennyiségben fehér por alakjában a cím szerinti vegyületet kapjuk trihidrokloridsóként.
9. példa
N-[4-(3-Amino-propil)-amino-butil]-2-(7-guanidino-heptánsavamido)-2-metoxi-etánsavamid (9. vegyület) élőállítása
920 mg (1,85 millimól) N-[4-(3-amino-propil)amino-butil]-2-(7-guanidino-heptánsavamido)-2hidroxi-etánsavamid trihidroklorid 20 ml vízmentes metanollal készült oldatához hozzáadunk 2 ml 2 n metanolos sósavoldatot, majd az így kapott reakcióelegyet szobahőmérsékleten 15 órán át keverjük. Ezt követően a reakcióelegyet csökkentett nyomáson bepároljuk, majd a kapott fehér port 15 ml vízben feloldjuk. Az így kapott vizes oldat pH-értékét 1 n vizes nátrium-hidroxid-oldattal 6-ra beállítjuk, majd az oldatot 25 mm belső átmérőjű és 300 ml CM-Sephadex C-25 (Na-típusú) márkanevű gyantával töltött oszlopon átbocsátjuk. Az oszlopot ezután 2 liter vízzel és 2 liter 1 mólos vizes-nátrium-klorid-oldattal gradiens-eluálásnak vetjük alá, 17 ml-es frakciókat szedve. A 0,59-0,65 mól nátrium-klorid-koncentrációknak megfelelő 138-152. számú frakciókat összeöntjük, majd szárazra pároljuk és a maradékot 10—10 ml metanollal kétszer extraháljuk. Az így kapott extraktumot egyesítése után 25 mm belső átmérőjű és 300 ml Sephadex LH-20 márkanevű gyantával töltött oszlopon átbocsátjuk, az eluálást metanollal végezve és 7 ml-es frakciókat szedve. A 18-32. számú frakciókat összeöntjük, majd szárazra pároljuk, 607 mg (64%) mennyiségben fehér por alakjában a cím szerinti vegyületet kapva trihidrokloridsóként.
10. példa
N-[4-(3-Amino-propil)-amino-butil]-2-(8-guanidino-oktánsavamido) -2-metoxi-etánsavamid (10. vegyület) előállítása
220 mg (0,43 millimól) N-[4-(3-amino-propil)amino-butil]-2-(8-guanidino-oktánsavamido)-2hidroxi-etánsavamid-trihidroklorid 4,4 ml vízmentes metanollal készült oldatához 0,44 ml 2 n metanolos sósavoldatot ad unk, majd az így kapott reak20
-201
187 417 cióelegyet szobahőmérsékleten egy éjszakán át keverjük. Ezt kővetően a reakcióelegyet csökkentett nyomáson bepároljuk, majd a kapott fehér port a 7. példában ismertetett módszerhez hasonló módon tisztítjuk, CM-Sephadex C-25 (Na-típusú) és Sephadex LH-20 gyantákat használva. így 195 mg (86%) mennyiségben fehér por alakjában a cím szerinti vegyületet kapjuk trihidrokloridsóként.
11. példa
N-[4-(3-Amino-propil)-amino-butil]-2-(9-guanidino-nonánsavamido)-2-metoxi-etánsavamid (11. vegyület) előállítása
160 mg (0,31 millimól) N-[4-(3-Amino-propil)amino-butil]-2-(9-guanidino-nonánsav&mido)-2hidroxi-etánsavamid-trihidroklorid 3,2 ml vízmentes metanollal készült oldatához hozzáadunk 0,32 ml 2 n metanolos sósavoldatot, majd az így kapott reakcióelegyet szobahőmérsékleten egy éjszakán át keverjük. Ezt követően a reakcióelegyet csökkentett nyomáson bepároljuk, majd a kapott fehér port a 7. példában ismertetett módszerhez hasonló módon tisztítjuk, CM-Sephadex C-25 (Na-típusú) és Sephadex LH-20 márkanevű gyantákat használva. így 107 mg (65%) mennyiségben fehér por alakjában a cím szerinti vegyületet kapjuk trihidrokloridsóként.
12. példa
N-[4-(3-Amino-propil)-amino-butil]-2-(7-guanidino-heptánsavamido)-2-etoxi-etánsavamid (12. vegyület) előállítása
100 mg (0,2 millimól) N-[4-(3-amino-propil)amino-butil]-2-(7-guanidino-heptánsavamido)-2hidroxi-etánsavamid-trihidrokloridhoz hozzáadunk 10 ml vízmentes etanolt és 1 ml, gázalakú hidrogén-kloriddal telített vízmentes etanolt. Az így kapott reakcióelegyet szobahőmérsékleten 24 órán át keverjük, majd az oldhatatlan rész eltávolítása céljából szűrjük és a szűrletet csökkentett nyomáson bepároljuk. A kapott fehér port a 7. példában ismertetett módszerhez hasonló módon tisztítjuk, CM-Sephadex C-25 (Na-típusú) és Sephadex LH-20 márkanevű gyantákat használva. így 71 mg (68%) mennyiségben fehér por alakjában a cím szerinti vegyületet kapjuk trihidrokloridsóként.
13. példa
N-[4-(3-Amino-propil)-amino-butil]-2-(7-guanidino-heptánsavamido)-2-butoxi-etánsavamid (13. vegyület) előállítása
100 mg (0,2 millimól) N-[4-(3-amino-propil)amino-butil]-2-(7-guanidino-heptánsavamido)-2hidroxi-etánsavamid-trihidrokloridhoz hozzáadunk 10 ml n-butanolt és 1 ml, gázalakú hidrogén-kloriddal telített n-butanolt. Az így kapott reakcióelegyet szobahőmérsékleten 2 napon át keverjük, majd az oldhatatlan rész eltávolítása céljából szűrjük és a szűrietet 5-5 ml vízzel háromszor extraháljuk. Az így kapott vizes extraktumot Amberlite IR-410 márkanevű gyantával semlegesítjük, majd csökkentett nyomáson bepároljuk. A kapott maradékot a 7. példában ismertetett módszerhez hssonló módon tisztítjuk, Cm-Sephadex C-25 (Na-típusú) és Sephadex Lh -20 márkanevű gyantákat használva. így 15 mg (13,5%) menyiségben fehér por alakjában a cím szerinti vegyületet kapjuk trihidrokloridsóként.
14. példa
N-[4-(3-Amino-propil)-amino-butil]-2-(7-guanidino-heptánsayamido)-2-(2-hidroxi-etoxi)-etánsavamid (14. vegyület) előállítása
100 mg (0,2 millimpl) N-[4-(3-amino-propil)amino-butíl]-2-(7-guanidino-heptánsavamido)-2hi lroxi-etánsavamid-trihidroklorid 5 ml etilénglikollal készült oldatához hozzáadunk 0,5 ml, gáz alakú hidrogén-kloriddal telített etilén-glikolt, majd az így kapott reakcióelegyet szobahőmérsékleten egy éjszakán át keverjük. 25 ml víz hozzáadását követően a reakcióelegy pH-értékét 1 n vizes nátrium-hidroxid-oldat adagolásával 6-ra beállítjuk, majd a reakcióelegyet a 7. példában ismertetett módszerhez hasonló módon tisztítjuk, CM-Sephadex C-25 (Na-típusú) és Sephadex LH-20 márkanevű gyantákat használva. így 63 mg (58%) menynyiségben fehér por alakjában a cím szerinti vegyületet kapjuk trihidrokloridsóként.
75. példa
N-[4-(3-Amino-propil)-amino-butil]-2-(7-guanidino-heptánsavamido)-2-benziloxi-etánsavamid (15. vegyület) előállítása
100 mg (0,2, millimól) N-[4-(3-amino-propil)amino-butil]-2-(7-guanidino-heptánsavamido)-2hidroxi-etánsavamid-trihidrokloridhoz hozzáadunk 10 ml benzilalkoholt és 1 ml, gázalakú hidrogén-kloriddal telített benzilalkoholt. Az így kapott reakcióelegyet szobahőmérsékleten 18 órán át keverjük, majd az oldhatatlan rész eltávolítása céljából szűrjük és a szűrletet 5-5 ml vízzel háromszor extraháljuk. Ezt követően az így kapott vizes extraktumot Amberlite IR-410 márkanevű gyantával semlegesítjük, majd szárazra pároljuk és a kapott me radékot a 7. példában ismertetett módszerhez hasonló módon tisztítjuk, CM-Sephadex C-25 (Na-típusú) és Sephadex LH- 20 márkanevű gyantákat használva. így 61 mg (52%) mennyiségben fehér por alakjában a cím szerinti vegyületet kapjuk trihidrokloridsóként.
16. példa
N-[4-(3-Amino-propil)-amino-butil]-2-(7-guanidino-2-hepténsav-amido)-2-hidroxi-etánsavamid (16. vegyület) előállítása
234,5 mg (1,06 millimól) 7-guanidino-hepténsavamid-hidroklorid, 372,3 mg (1,27 millimól) N-[4(3-amino-propil)-amino-butil]-2,2-dihidroxi-etán21
-211
187 417 savamid-dihidroklorid, 140,4 mg (1,06 millimól) glutársav és 0,2 ml víz keverékét 60 °C-on 24 órán át melegítjük. A reakció befejeződése után a reakcióelegyet az 1. példában ismertetett módszerhez hasonló módon feldolgozzuk, 1 CM-Sephadex C-25 (Na-típusú) és Sephadex LH-20 márkanevű gyantákat használva. így 244,6 mg (46,5%) menynyiségben fehér por alakjában a cím szerinti vegyületet kapjuk trihidrokloridsóként.
17. példa
N-[4-(3-Amino-propil)-amino-butil]-2-(8-guanidino-2-okténsavamido)-2-hidroxi-etánsavamid (17. vegyüiet) előállítása 202,4 mg (0,86 millimól) 8-guanidino-2-okténsavamid-hidroklorid, 302,4 mg (1,04 millimól) N[4-(3-amino-propil)-amino-butil]-2,2-dihidroxietánsavamid-dihidroklorid, 113,9 mg (0,86 millimól) glutársav és 0,2 ml víz keverékét 60’C-on melegítjük 24 órán át. A reakció befejeződése után a reakcióelegyet az 1. példában ismertetett módszerhez hasonló módon feldolgozzuk, CM-Sephadex C-25 (Na-típusú) és Sephadex LH-20 márkanevű gyantákat használva. így 128,3 mg (29,2%) mennyiségben a cím szerinti vegyületet kapjuk trihidrokloridsóként.
18. példa
N-[4-(3-Amino-propil)-amino-butil]-2-(9-guani· dino-2-nonénsavamido)-2-hidroxi-etánsavamid (18. vegyüiet) előállítása 206,2 mg (0,84 millimól) 9-guanidino-2-nonén savamid-hidroklorid, 291,0 mg (1,00 millimól) N [4-(3-amino-propÍl)-amino-butil]-2,2-dihidroxietánsavamid-dihidroklorid, 109,6 mg (0,84 millimól) glutársav és 0,2 ml víz keverékét 60 ’C-on melegítjük 24 órán át. A reakció befejeződése után a reakcióelegyet az 1. példában ismertetett módszerhez hasonló módon feldolgozzuk, CM-Sephadex C-25 (Na-típusú) és Sephadex LH-20 márkanevű gyantákat használva. így 135 mg (31,1%) mennyiségben fehér por alakjában a cím szerinti vegyületet kapjuk trihidrokloridsóként.
19. példa
N-[4-(3-Amino-propil)-amino-butil]-2-(7-guanidino-2-hepténsavamido)-2-metoxi-etánsavamid (19. vegyüiet) előállítása
50,3 mg (0,10 millimól) N-[4-(3-amino-propil)amino-butil]-2-(7-guanidino-2-hepténsavamido)-2hidroxi-etánsavamid-trihidroklorid 1 ml vízmentes metanollal készült oldatához 0,1 ml metanolos 2 n sósavoldatot adunk, majd az így kapott reakcióelegyet szobahőmérsékleten egy éjszakán át keverjük és ezután csökkentett nyomáson bepároljuk. A maradékot a 7. példában ismertetett módszerhez hasonló módon tisztítjuk, CM-Sephadex C-25 (Na-típusú) és Sephadex LH-20 márkanevű gyantákat használva. így 37,2 mg (72,4%) mennyiségben a cím szerinti vegyületet kapjuk trihidrokloridsó formájában.
20. példa
N-[4-(3-Amino-propil)-amino-butil]-2-(8-guanidino-3-hidroxi-oktán5avamido)-2-hidroxi-etánsavamid (20. vegyüiet) előállítása
150 mg (0,59 millimól) 8-guanidino-3-hidroxioktánsavamid-hidrok lórid, 208 mg (0,71 millimól) N-[4-(3-amino-propil)-amino-butil]-2,2-dihidroxietánsavamid-dihidroklorid, 78 mg (0,59 millimól) glutársav és 0,1 ml víz keverékét 60 ’C-on melegítjük 24 órán át. A reakció befejeződését követően a reakcióelegyet az 1. példában ismertetett módszerhez hasonló módon feldolgozzuk, CM-Sephadex C-25 (Na-típusú) és Sephadex LH-20 márkanevű gyantákat használva. így 120,7 mg (38,6%) menynyiségben fehér por alakjában a cím szerinti vegyületet kapjuk trihidrokloridsóként.
21. példa
N-[4-(3-Amino-propil)-amino-butil]-2-(9- guanidino-3-hidroxi-nonánsavamido)-2-hidroxi-etánsavamid (21. vegyüiet) előállítása
325,8 mg (1,23 millimól) 9-guanidino-3-hidroxinonánamid-hidroklorid, 428,1 mg (1,47 millimól) N-[4-(3-amino-propil)-amino-butil]-2,2-dihidroxietánsavamid-dihidroklorid, 161,4 mg (1,23 millimól) glutársav és 0,3 ml víz keverékét 60 ’C-on melegítjük 24 órán át. A reakció befejeződése után a reakcióelegyet az 1. példában ismertetett módszerhez hasonló módon feldolgozzuk, CM-Sephadex C-25 (Na-típusú) és Sephadex LH-20 márkanevű gyantákat használva. így 220,8 mg (33,4%) mennyiségben fehér por alakjában a cím szerinti vegyületet kapjuk trihidrokloridsóként.
22. példa ll-(0-metil)-spergaulin (22. vegyüiet) előállítása
1,8 g (3,51 millimól) (- )-spergaulin-trihidroklorid 35 ml vízmentes metanollal készült oldatához
3,5 ml metanolos 2 n sósavoldatot adunk, majd az így kapott reakcióelegyet szobahőmérsékleten 15 órán át keverjük. Ezt követően a reakcióelegyet szárazra pároljuk, majd a maradékot 30 ml vízben oldjuk és az így kapott vizes oldatot 600 ml CM-Sephadex C-25 (Na-típusú) márkanevű gyantából álló oszlopon átbocsátjuk. Az oszlopot 3 1 vízzel és 3 liter 1 mólos vizes nátrium-klorid-oldattal gradiens-eluálásnak vetjük alá, 17 g-os frakciókat szedve. A 208-230. számú frakciókat összeöntjük, majd szárazra pároljuk és a maradékot 10-10 ml metanollal háromszor extraháljuk. Az egyesített extraktumot 300 ml Sephadex LH-20 márkanevű gyantából álló oszlopon átbocsátjuk, majd az oszlopot a sómentesítés céljából metanqllal eluáljuk, 7 g-os frakciókat szedve. A 19-33. számú frakciókat összeöntjük, majd szárazra pároljuk,
-221
187 417
1528 g (82%) mennyiségben fehér por alakjában a cím szerinti vegyületet kapva trihidrokloridsó formájában.
A Il-(0-metil)-spergualin-trihidroklorid epimerekké történő szeparálása céljából nagynyomású folyadékkromatográfiás elválasztást alkalmazunk, e célra 2 cm átmérőjű és 25 cm hosszú, az M. Nagel Co. által gyártott Nucleosil 30C18 márkanevű gyantával (fordított fázisú töltőanyag) töltött oszlopot használva a következő paraméterek betartásával:
Átfolyási sebesség: 10 ml/perc nyomás: 30 kg/cm3 oldószer: acetonitril, továbbá 0,01 mólos nátrium-pentán-szulfonát-oldat és 0,01 mólos dinátrium-hidrogén-foszfát-oldat (pH 3) 9:91 térfogatarányú elegye bevitt kiindulási anyag mennyisége: 6 mg detektálás: 205 nm hullámhosszú ibolyántúli fény.
A nagynyomású folyadékkromatográfiás vizsgálat során először a (-)-l l-(0-metil)-spergualinnak megfelelő abszorpciós csúcs (a retenciós idő 48,3 perc), majd a ( + )-ll-(O-metil)-spérgualinnak megfelelő abszorpciós csúcs (a retenciós idő 56,5 perc) jelent meg az ibolyántúli spektrumban. Az ilyen módon történő frakcionálást tizenkétszer megismételjük. Minden egyes csúcsnak megfelelő frakciót elkülönítünk, majd az így nyert frakciókat összeöntjük és az 1. példában ismertetett módszerhez hasonló módon tisztítjuk, CM-Sephadex C-25 (Na-típusú) és Sephadex LH-20 márkanevű gyantákat használva. így 32,9 mg mennyiségben fehér por alakjában (— )-l l-lO-metilj-spergualin-trihidrokloridot és 24,5 mg mennyiségben fehér por alakjában ( + )-11 -(O-metil)-spergualin-trihidrokloridot kapunk.
23. példa ll-(0-Etil)-spergualin (23. vegyület) előállítása
484 mg (0,94 millimól) spergualin-dihidrokloridhoz [(-)-spergualin : ( + )-spergualin = 1:1], hozzáadunk 20 ml vízmentes etanolt és 2 ml etanolos 2 n sósavoldatot, majd az így kapott reakcióelegyet szobahőmérsékleten 2 napon át keverjük. Ezt követően a reakcióelegyet szárazra pároljuk, majd a maradékot 10 ml vízben feloldjuk. Az így kapott vizes oldat pH-értékét 1 n vizes nátrium-hidroxidoldattal 4-re beállítjuk, majd az oldatot a 22. példában ismertetett módszerrel lényegében egyező módon tisztítjuk, CM-Sephadex C-25 (Na-típusú) és Sephadex LH-20 márkanevű gyantákat használva, így 355,6 mg (70%) mennyiségben fehér por alakjában a cím szerinti vegyületet kapjuk trihidrokloridsóként.
Ezt a terméket ezután epimerjeire szeparáljuk a 22. példában ismertetett nagynyomású folyadékkromatográfiás módszerrel lényegében egyező módon, mindössze azzal a különbséggel, hogy oldószerként acetonitrilt, valamint 0,01 mólos nátriumpentán-szulfofiát-oldat és 0,01 mólos dinátriumhidrogén-foszfát-oldat (pH 3) 10,5 : 89,5 térfogatarányú elegyét használjuk. Összesen hatszor ismételt frakcionálás után 11 mg mennyiségben fehér por alakjában (- )-l l-(0-etil)-spergualin-trihidrokr loridot és 14,5 mg mennyiségben fehér por alakjában (+)-1 l-(0-etíl)-spergualin-trihidrokloridot kapunk.
24. példa ll-(0-n-Butil)-spergualin (24. vegyület) előállítása
493 mg (0,96 millimól) (- )-spergualin-trihidrokloridhoz hozzáadunk 30 ml n-butanolt és 3 ml, hidrogén-kloriddal telített n-butanolt, majd az így kapott reakcióelegyet szobahőmérsékleten 2 napon át keverjük. Ezt követően a reakcióelegynek a n-butalonban oldható részét szárazra pároljuk, majd a kapott maradékot 10 ml vízben oldjuk. Az így kapott vizes oldat pH-értékét 1 n vizes nátrium-hidroxij-oldattal 4-re beállítjuk, majd az oldatot a 22. példában ismertetett módszerrel lényegében egyező módon tisztítjuk, CM-Sephadex C-25 (Na-típusú) és Sephadex LH-20 márkanevű gyantákat használva. így 114,7 mg (21%) mennyiségben fehér por alakjában a cím szerinti vegyületet kapjuk trihidrokloridsóként.
Ezt a terméket epimerjeire szeparálhatjuk a 22. példában ismertetett nagynyomású folyadékkromatrográfiás módszerrel lényegében egyező módon, oldószerként azonban acetonitrilt, illetve 0,01 mólos nátrium-pentán-szulfcnát-oldat és 0,01 mólos dinátrium-hidrogén-foszfát-oldat (pH 3)
14,5 : 85,5 térfogatarányú elegyét használva. Öszsz;sen hatszoros ismételt frakcionálás után 15 mg mennyiségben fehér por alakjában (-)-ll-(O-nbutilj-spergualin-trihidrokloridot és 16 mg fehér por alakjában (+ )-l I-(O-n-butil)-sperguaIin-trihidrokloridot kapunk.
25. példa ll-[0-(2-hidroxi-etil)]-spergualin (25. vegyület) előállítása
2,88 g (5,61 millimól) (- )-spergualin-trihidroklorid 100 ml etilén-glikollal készült oldatához hozzáadunk 10 ml, hidrogén-kloriddal telített etilénglikolt, majd az így kapott reakcióelegyet szobahőmérsékleten 24 órán át keverjük. 200 ml víz adagolását követően a reakcióelegy pH-értékét 1 n vizes nátrium-hidroxid-oldattal 4-re beállítjuk, majd a reakcióelegyet a 22. példában ismertetett módszerrel lényegében azonos módon tisztítjuk, CM-Sephadex C-25 (Na-típusú) és Sephadex LH-20 gyantákat használva. így 2,7 g (73%) mennyiségben fehér por alakjában a cím szerinti vegyületet kapjuk trihidrokloridsóként.
Ezt a terméket azután epimerjeire szeparálhatjuk a 22. példában ismertetett nagynyomású folyadékkromatográfiás módszerrel, a következő különbségeket figyelembe véve:
-231
187 417
Oldószer: acetonitril, továbbá 0,01 mólos nátrium-pentán-szulfonát-oldat és 0,01 mólos dinátripm-hidrogén-foszfát-oldat (pH 3) 7 : 93 térfogatarányú elegye bevitt kiindulási anyag mennyisége: 20 mg összesen hatszor végrehajtott ismételt frakcionálás eredményekképpen 2,3 mg mennyiségben fehér por alakjában (-)-ll-[0-(2-hidroxi-etil)]-spergualin-trihidrokloridot és 2,5 mg mennyiségben fehér por alakjában (+ )-11 -[0-(2-hidroxi-etil)]-spergualin-trihidrokloridot kapunk.
26. példa l-(O-Benzil)-spergualin (26. vegyület) előállítása
2,36 g (4,6 millimól) (- )-spergualin-trihidrokloridhoz 90 ml benzilalkoholt és 9 ml, hidrogénkloriddal telített benzinalkoholt adunk, majd az így kapott reakcióelegyet szobahőmérsékleten egy éjszakán át keverjük. Az így kapott reakcióelegyet 350 ml vízben extraháljuk, majd a vizes fázis pHértékét 1 n vizes nátrium-hidroxid-oldattal 6,0-ra beállítjuk és ezután bepároljuk. A maradékot 20 ml 1 mólos vizes nátrium-klorid-oldatban feloldjuk, majd a kapott oldatot átbocsátjuk 500 ml Diaion HP-20 márkanevű gyantából álló oszlopon. Az oszlopot egymás után 1,5 liter 0,6 mólos vizes nátrium-klorid-oldattal, 1,5 liter 0,4 mólos vizes nátrium-klorid-oldattal és 1,5 liter vízzel eluáljuk. A vízzel eluálódó részt szárazra pároljuk, majd az 1. példában ismertetett módon Sephadex LH-20 márkanevű gyantán sómentesítjük. így 1,92 g (69%) mennyiségben fehér por alakjában a cím szerinti vegyületet kapjuk trihidrokloridsóként.
E vegyület epimerekre való szeparálása céljából a 22. példában ismertetett nagynyomású folyadékkromatográfiás módszerrel lényegében azonos módon járhatunk el, azzal a különbséggel, hogy oldószerként acetonitrilt, továbbá 0,01 mólos nátrium-pentán-szulfonát-oldat és 0,01 mólos dinátrium-hidrogén-foszfát-oldat (pH 3) 16 : 84 térfogatarányú elegyét használjuk.
összesen kilencszer végrehajtott ismételt frakcionálás eredményeképpen így 21,2 mg mennyiségben fehér por alakjában (-)-ll-(Ó-benzil)-spergualintrihidrokloridot és 18,8 mg mennyiségben fehér por alakjában (+)-11 -(O-benzil)-spergualin-trihidrokloridot kapunk.
27. példa (-)-1 l-(0-Metil)-spergualin előállítására
a) lépés (— )- l-N,4-bisz(benziloxi-karbonil)-spergualin előállítása
2,3 g (4,48 millimól) (- )-spergualin-trihidroklorid 11 mí Ν,Ν-dimetil-formamid és 11 ml víz elegyéből készült oldatához jeges hűtés közben 1,25 ml (8,96 millimól) trietil-amint, majd ezután 2,24 g (8,97 millimól) N-(benziloxi-karboniloxi)szukcinimid 11 ml Ν,Ν-dimetil-formamiddal készült oldatát adjuk. Az így kapott reakcióelegyet 5 °C-on 15 órán át keverjük, majd csökkentett nyo24 máson bepároljuk. A kapott maradékot 10 ml 0,5 mólos vizes nátrium-klorid-oldatban oldjuk és a kapott oldatot előzetesen 0,5 mólos vizes nátriumklorid-oldattal ekvilibrált Diaion HP-20 márkanevű gyanta 400 ml-nyi mennyiségéből álló oszlopon vezetjük át. Az oszlopot először 1 liter 0,5 mólos vizes nátrium-klorid-oldattal, majd 1 liter vízzel mossuk, ezt követően pedig metanollal eluáljuk, 15 g-os frakciókat szedve. A 21-30. számú frakciókat összeöntjük, majd szárazra pároljuk, 287 mg (82%) mennyiségben fehér por alakjában a lépés címadó vegyületét kapva hidrokloridsó formájában. Fajlagos forgatóképessége [α]^ = - 11° (c= 1, víz).
Ή—NMR (deuterometanol, delta): 1,3-2,0 (CH2-6), 2,38 (CHJ, 2,9-3,4 (NCH2 · 5), 4,0 (CH), 5,04 (CHJ, 5,07 (CHJ, 5,56 (CH) és 7,30 (C6H5 · 2).
b) lépés (-)-1 -[N,4-bisz(benziloxi-karbonil)]-11 -(0metil)-spergualin előállítása
Jeges hűtés közben az a) lépésben ismertetett módon előállított vegyületből 78 mg (0,484 millimól) 12 ml metilén-kloriddal készült oldatához hozzáadjuk 0,1 ml bór-trifluorid-dietil-éter komplex 4 ml metilén-kloriddal készült oldatát, majd az így kapott elegyhez hozzáadjuk diazo-metán metilén-kloridos oldatát, mégpedig 30 perc és 1 óra közötti intervallumokban 1-1-1 ml-eket adagolva, összesen 9 ml-t. (A diazo-metán-oldatot úgy állítjuk elő, hogy 30 ml 40%-os vizes kálium-hidroxidoldat és 100 ml metilén-klorid elegyéhez fokozatosan 10 g N-nitrózó-metil-karbamidot adagolunk, a kapott elegyet 40 °C-on tartva vizes hűtéssel, majd ezután a szerves fázist elválasztjuk és a vizes fázist 10 ml metilén-kloriddal extraháljuk, a szerves fázisokat egyesítjük és végül szemcsés kálium-hidroxid fölött 5 °C-on 3 órán át szárítjuk.) A reakció kezdete után 3,5 órával a keverést megszakítjuk, majd néhány csepp híg ecetsavoldat adagolását követően a reakcióelegyet csökkentett nyomáson szárazra pároljuk. A maradékot 3 ml 50%-os vizes metanolban oldjuk, majd az így kapott oldatot 100 ml Diaion HP-20 márkanevű gyantából álló oszlopon átbocsátjuk. Az oszlopot 300 ml 10%-os vizes metanollal mossuk, majd metanollal eluáljuk, 15 ml-es frakciókat szedve. A 25-28. számú frakciókat öszszeöntjük, majd szárazra pároljuk, 262,4 mg menynyiségben olyan fehér port kapva, amely a hidrokloridsó formájú címadó vegyület és a reagálatlan kiindulási anyag (a kihozatal 69,2%) keveréke. Ennek a keveréknek az összetételét nagynyomású folyadékkromatográfiás módszerrel 4,0 mm átmérőjű és 150 mm hosszú, Nucleosil 5C18 márkanevű anyaggal töltött oszlopon, eluálószerként acetonitril és 0,01 mólos diamino-hidrogén-foszfát-oldat 1 : 1 térfogatarányú elegyét és 0,8 ml/perc átfolyási sebességet használva határoztuk meg. Megállapítható volt, hogy a 10,47 perc retenciós idejű címadó vegyület és a 7,74 perc retenciós idejű kiindulási vegyület aránya 47 : 50.
Ebből a keverékből 78,5 mg-ot felviszünk 30 ml Silica Gél 60 márkanevű szilikagélből álló oszlopra, majd 10% metanol és 90% kloroform elegyével eluálást végzünk. Az eluátumot pontosan az előző
-241 . 187 417 bekezdésben ismertetett paramétereket tartva nagynyomású folyadékkromatográfiás módszerrel tisztítjuk. 10,47 perces retenciós időnél a 220 nm-en ibolyántúli abszorpciót mutató frakciókat összegyűjtjük, majd szárazra pároljuk, 28,6 mg mennyiségben fehér por alakjában a lépés címadó vegyületét kapva hidroklorídsóként. Fajlagos forgatóképessége [α]θ = - 14,4’ (c= 1, metanol).
’H—NMR (deuterometanol, delta): 1,3-2,0 (CH2 · 6), 2,42 (CH2), 2,9-3,4 (NCH2 5), 3,37 (OCHJ, 4,0 (CH), 5,03 (CHJ, 5,08 (CHJ, 5,34 (CH) és 7,29 (C6H5 · 2).
c) lépés (-)-11 -(O-Metil)-spergualin előállítása ml etanol, 5 ml víz és 0,36 ml 1 n sósavoldat elegyében feloldunk a b) lépésben említett, 47 : 50 arányú termékkéverékből 130mg-ot, majd az oldathoz 50 mg 10% fémtartalmú szénhordozós palládiumkatalizátort adunk. Ezt követően az így kapott reakcióelegyet szobahőmérsékleten hidrogéngáz-áramban 4 órán át keverjük, majd a katalizátort kiszűrjük és a szűrletet szárazra pároljuk. A maradékot ezután feloldjuk 3 ml vízben, majd az így kapott oldatot félvisszük 150 ml CM-Sephadex C-25 (Na-típusú) gyantájjŐÍáíló oszlopra. Az oszlopot 900 ml vízzel és 900 ml 1 mólos vizes nátrium-klorid-oldattal gradiens-eluálasnak vetjük alá, 17 g-os frakciókat szedve. A 76-81. számú frakciókat összeöntjük, majd a 22. példában ismertetett módon Sephadex LH-20 márkanevű gyantát használva sómentesítjük. így 25,4 mg (51%) mennyiségben fehér por alakjában a lépés és egyben a példa címadó vegyületét kapjuk trihidrokloridsóként. Fajlagos forgatóképessége [α]θ = — 27,1° (c=l, víz).
A. 83-86. számú frakciókat hasonló módon sómentesítve 24,5 mg (52%-os kihozatal) mennyiségben fehér por alakjában (- )-spergualin-trihidroklorid különíthető el.
28. példa (-)-l l-(0-Etil)-spergualin előállítására A 27. példa b) lépésében ismertetett módszerhez hasonló módon diazo-etán metilén-kloridos oldatát a 27. példa a) lépésében ismertetett módon előállított vegyületből 352 mg-mal (0,451 millimól) reagáltatva 217,0 mg mennyiségben olyan keveréket kápunk, amely (-)-l-[N,4-bisz(benziloxi-karbonil)]-l l-(0-etil)-spergualin-hidrokloridból és reagálatlan (- )-l-[N,4-bisz(benziloxi-karbonil)]-spergualin-hidrokloridból áll. Ezt a keveréket azután lényegében a 27. példa c) lépésében ismertetett módon szeparálásnak alávetve 41,7 mg (17,1%-os összhozamnak felel meg) mennyiségben fehér por alakjában a példa címadó vegyületét kapjuk trihidrokloridsóként. Fajlagos forgatóképessége [a]o = -24,8’ (c = 1, víz).
29. példa (- )-N-[4-(3-Amino-propil)-amino-butil]-2-(7gilanidino-heptánamido)-2-metoxi-etánsavamid előállítása
a) lépés (— )-N-[4-(3-benziloxi-karbonil-amino-propil)benziloxi-karbonil-amino-buril]-2-(7-guanidino-2hepténsavamido)-2-metoxi-etánsavamid előállítása
1,2 ml Ν,Ν-dimetil-formamidban feloldunk a 27. példa b) lépésében isn etetett vegyületből
134,8 mg-ot (0,187 millimól), majd az így kapott oldathoz hozzáadunk 192,9mg (0,935 millimól) diciklőhexil-karbodiímidet és 5,6 mg réz(I)-kloridot. Az így kapo.tt reakcióelegyet 70 ’C-on 3 órán át melegítjük, majd lehűtjük, a kivált csapadékot kiszűrjük és a szűrletet csökkentett nyomáson bepároljuk. A maradékot feloldjuk 5 ml, előzetesen pH 7-re beállított 30%-os vizes metanolban, majd az így kapott oldatot átbocsátjuk 80 ml Diaion HP-20 márkanevű gyantából álló oszlopon. Az oszlopot először 300 ml vízzel, majd 300 ml 10%-os vizes metanollal mossuk. Az: eluálást metanollal végezzük. A Sakaguchi-reakcióra pozitív frakciókat összegyűjtjük, majd csökkentett nyomáson bepároljuk, 114 mg mennyiségben a lépés nyers címadó vegyületét kapva hidrokloridsó formájában. E nyers tennék ’H—NMR-spektrumát deuterometanolban felvéve delta = 6,02 értéknél az olefinprotonra jellemző csúcs észlelhető.
h) lépés (- )-N-[4-(3-Amino-propil)-amino-butil]-2-(7guanidino-heptánsavamido)-2-metoxi-etánsavamid előállítása .
ml metanol és 5 ml víz elegyében feloldunk az a) lépésben kapott nyers termékből 114 mg-ot, majd a kapott oldathoz 0,32 ml 1 n sósavoldatot és 50 mg 10% fémtartalmú szénhordozós palládiumkatalizátort adunk. Az így kapott reakcióelegyet szobahőmérsékleten hidrogéngáz-áramban 1,5 órán át keverjük, majd a katalizátort kiszűrjük és a szűrletet csökkentett nyomáson bepároljuk. A maradékot átbocsátjuk 100 ml CM-Sephadex C-25 (Na-típusú) márkanevű gyantából álló oszlopon, majd az oszlopot 500 ml vízzel és 500 ml 1 mólos vizes nátrium-klorid-oldattal gradiens-eluálásnak vetjük alá, 10 g-os frakciókat szedve. A 69-74. számú frakciókat összeöntjük, majd csökkentett nyomáson bepároljuk és a maradékot 5-5 ml metanollal háromszor extraháljuk. Az egyesített metanolos extraktumot 150 ml Sephadex LH-20 márkanevű gyantából álló oszlopon átbocsátjuk, metanollal eluálva és 5 g-os frakciókat szedve. A 16-21, számú frakciókat összeöntjük:, majd szárazra pároljuk, 17,4 mg mennyiségben (16,7%-os összhozamnak felel meg) fehér por alakjában a lépés és egyben a példa címadó vegyületét kapva. Fajlagos forgatóképesség [α]θ = - 30,4’ (c= 1, víz).

Claims (10)

1 Eljárás az (I) általános képletű N-[4-(3-aminopropil)-amino-butil]-2-(omega-guanidino-zsírsav25
-251 .187 417 amido)-2-szubsztituált-etánsavamid-származékok
- a képletben
Y jelentése —CH2—CH2—CH=CH— vagy —CH(OH)—CH2— csoport,
R jelentése hidrogénatom vagy adott esetben hidroxilcsoporttal helyettesített 1-4 szénatomot tartalmazó alkilcsoport vagy benzilcsoport, n értéke 1 és 8 közötti egész szám, azzal a megkötéssel, hogy ha Y jelentése —CH(OH)—CH2.— csoport és n értéke 4, akkor R jelentése hidrogénatomtól eltérő - előállítására gyógyászatilag elfogadható sóik formájában, azzal jellemezve, hogy
a) az (I) általános képletű vegyületek szűkebb csoportját alkotó (la) általános képletű vegyületek
- a képletben Y és n jelentése a tárgyi körben megadott - előállítása céljából valamely (II) általáns képletű omega-guanidino-zsírsav-amidot - a képletben Y és n jelentése a tárgyi körben megadott
- a (III) képletű N-[4-(3-amino-propil)-aminobutil]-2,2-dihidroxi-etánsavamiddal reagáltatunk, vagy bt) az (I) általános képletű vegyületek szűkebb csoportját alkotó (Ib) általános képletű vegyületek
- a képletben Y és n jelentése a tárgyi körben megadott, míg R’jelentése azonos R tárgyi körben megadott jelentésével, azzal a megkötéssel, hogy hidrogénatomtól eltérő - előállítása céljából vala mely (II) általános képletű omega-guanidino-zsírsav-amidot - a képletben Y és n jelentése a tárgyi körben megadott - a (III) képletű N-[4-(3-aminopropil)-amino-butil]-2,2-dihidroxi-etánamiddal reagáltatunk, majd egy így kapott (la) általános képletű vegyületet - a képletben Y és n jelentése a tárgyi körben megadott - az amino- és iminocsoportok kívánt esetben való megvédését követően egy mono- vagy dibázisú, 1-4 szénatomot tartalmazó alifás alkohollal, egy 1-4 szénatomos diazoparafinnal vagy benzilalkohollal reagáltatunk, és adott esetben a védőcsoportokat eltávolítjuk, vagy b2) valamely (la) általános képletű vegyületet a képletben Y és n jelentése a tárgyi körben megadott - az amino- és iminocsoportok kívánt esetben való megvédését követően egy mono- vagy dibázisú, 1-4 szénatomot tartalmazó alifás alkohollal, egy 1-4 szénatomos diazo-parafinnal vagy benzilafkohollal reagáltatunk, és adott esetben a védőcscportokat eltávolítjuk, (Elsőbbsége: 1982. 10. 07.)
2. Eljárás az (I) általános képletű N-[4-(3-aminopropil)-amino-butil]-2-(omega-guanidino-zsírsavamido)-2-szubsztituá(t-etánsavamid-származékok
- a képletben
Y jelentése —CH2—CH2— csoport,
R jelentése hidrogénatom vagy adott esetben hidroxilcsoporttal helyettesített 1-4 szénatomot tartalmazó alkilcsoport vagy benzilcsoport, és n értéke 1 és 6 közötti egész szám - előállítására gyógyászatilag elfogadható sóik formájában, azzal jellemezve, hogy
a) az -(I) általános képletű vegyületek szűkebb csoportját alkotó (la) általános képletű vegyületek
- a képletben Y és n jelentése a tárgyi körben megadott - előállítása céljából valamely (II) általános képletű omega-guanidino-zsírsav-amidot - a képletben Y és n jelentése a tárgyi körben megadott
- a (III) képletű N-[4-(3-aminQrpropiI)-amino26 butil]-2,2-dihidroxi-etánsavamiddal reagáltatunk, vagy bx) az (I) általános képletű vegyületek szűkebb csoportját alkotó (Ib) általános képletű vegyületek 5 - a képletben Y és n jelentése a tárgyi körben megadott, míg R’ jelentése azonos R tárgyi körben megadott jelentésévell, azzal a megkötéssel, hogy hidrogénatomtól eltérő - előállítása céljából valamely (II) általános képletű omega-guanidino-zsírsav-amidot - a képletben Y és n jelentése a tárgyi körben megadott - a (III) képletű N-[4-(3-aminopropil)-amino-butil]-2,2-dihidroxi-etánamiddal reagáltatunk, majd egy így kapott (la) általános képletű vegyületet - a képletben Y és n jelentése a tárgyi körben megadott - az amino- és iminocsoportok kívánt esetben való megvédését követően egy mono- vagy dibázisú 1-4 szénatomot tartalmazó alifás alkohollal vagy benzilalkohollal reagáltatunk, és adott esetben a védőcsoportokat eltávolít- juk, vagy b2) valamely (la) általános képletű vegyületet a képletben Y és n jelentése a tárgyi körben megadott - az amino- és iminocsoportok kívánt esetben való megvédését követően egy mono- vagy dibázisú 23 1-4 szénatomot tartalmazó alifás alkohollal vagy benzilalkóhollal reagáltatunk, és adott esetben a védőcsoportokat eltávolítjuk. (Elsőbbsége: 1981.
10. 08.)
3. Az 1. vagy 2. igénypont szerinti a) vagy b,) 30 eljárás, azzal jellemezve, hogy valamely (II) általános képletű vegyület és a (III) képletű vegyület kondenzálását viz jelenlétében végezzük. (Elsőbbsége: 1981. 10. 08.)
4. Az 1. vagy 2. igénypont szerinti a) vagy bt) 35 eljárás vagy a 3. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy valamely (II) általános képletű vegyület és a (III) képletű vegyület kondenzálását savas katalizátor jelenlétében végezzük. (Elsőbbsége: 1981. 10. 08.)
40
5. Az 1, igénypont szerinti bj vagy b2) eljárás, azzal jellemezve, hogy valamely (la) általános képletű vegyület és egy alifás, 1-4 szénatomot tartalmazó mono- vagy dibázisos alkohol vagy a benzilalkohol reagáltatását az alkoholban, savas katali45 zátor jelenlétében végezzük. (Elsőbbsége: 1982. 10. 07.)
6. Az 1. vagy 2. igénypont szerinti a) vagy bj eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy kiindulási anyagként olyan (II) általános képletű
50 vegyületet használunk, amelynek képletében n értéke 4, 5 vagy 6 és Y jelentése az 1. igénypontban megadott. (Elsőbbsége: 1981. 10. 08.)
7. Az l. vagy 2. igénypont szerinti a) eljárás foganatosítási módja olyan (la) általános képletű ve55 gyületek előállításaira, amelyek képletében n értéke 4 és Y jelentése az 1. vagy 2. igénypontban megadott, azzal jellemezve, hogy a (III) képletű vegyülettel olyan (II) általános képletű vegyületet reagáltatunk, amelynek képletében n értéke lés Y jelen60 tése a tárgyi körben megadott. (Elsőbbsége: 1981.
10. 08.)
8. Az 1. vagy 2. igénypont szerinti bj vagy b2) eljárás olyan (Ib) á Italános képletű vegyületek előállítására, amelyek képletében n értéke 4, R’ metil65
-261 ,187 417 csoportot jelent és Y jelentése az 1. vagy 2. igénypontban megadott, azzal jellemezve, hogy olyan (la) általános képletű vegyületet, amelynek képletében n értéke 4 és Y jelentése a tárgyi körben megadott, az amino- és az iminocsoportok kívánt esetben végzett megvédését követően metanollal vagy diazo-metánnal reagáltatunk, majd a védőcsoportokat adott esetben lehasítjuk. (Elsőbbsége: 1981. 10. 08.)
9. Eljárás gyógyászati készítmények előállítására, azzal jellemezve, hogy valamely, az 1. igénypont szerinti a), bj vagy b2) eljárással előállított (I) általános képletű vegyület - a képletben
Y jelentése —CH2—CH2—, :—CH=CH— vagy—CH(OH)—CH2—csoport,
R jelentése hidrogénatom vagy adott esetben hidroxilcsoporttal helyettesített 1-4 szénatomot tartalmazó alkilcsoport vagy benzilcsoport, n értéke 1 és 8 közötti egész szám, azzal a megkötéssel, hogy ha Y jelentése —CH(OH)—CH2 — csoport és n értéke 4, akkor R jelentése hidrogénatomtól eltérő - gyógyászatilag elfogadható sóját a gyógyszergyártásban szokásosan használt hordozó- és/vagy segédanyagokkal összekeverve gyógyászati készítménnyé alakítjuk. (Elsőbbsége: 1982. 10. 07.)
10. Eljárás gyógyászati készítmények előállítására, azzal jellemezve, hogy valamely, a 2. igénypont szerinti a), b,) vagy b2) eljárással előállított (I) általános képletű vegyület - a képletben
Y jelentése —CH2—CH2 csoport,
R jelentése hidrogénatom vagy adott esetben hidroxilcsoporttal helyettesített 1-4 szénatomot tartalmazó alkilcsoport vagy benzilcsoport, és n éftéke 1 és 6 közötti egész szám - gyógyászatilag elfogadható sóját a gyógyszergyártásban szokásosan használt hordozó- és/vagy segédanyagokkal összekeverve gyógyászati készítménnyé alakítjuk.
HU823215A 1981-10-08 1982-10-07 Process for producing spergualine derivatives in form of salts HU187417B (en)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP56159503A JPS5862152A (ja) 1981-10-08 1981-10-08 Ｎ−〔４−（３−アミノプロピル）アミノブチル〕−２−（ω−グアニジノ脂肪酸アミド）−２−ヒドロキシエタンアミドおよびその誘導体ならびにその製造法

Publications (1)

Publication Number Publication Date
HU187417B true HU187417B (en) 1986-01-28

Family

ID=15695187

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
HU823215A HU187417B (en) 1981-10-08 1982-10-07 Process for producing spergualine derivatives in form of salts

Country Status (19)

Country Link
US (3) US4518532A (hu)
JP (1) JPS5862152A (hu)
KR (1) KR870000656B1 (hu)
AT (1) AT393680B (hu)
AU (1) AU554489B2 (hu)
BE (1) BE894651A (hu)
CA (1) CA1187513A (hu)
CH (1) CH653015A5 (hu)
CS (1) CS268654B2 (hu)
DE (1) DE3236725A1 (hu)
DK (1) DK166080C (hu)
ES (2) ES516258A0 (hu)
FR (1) FR2514350B1 (hu)
GB (1) GB2111480B (hu)
HU (1) HU187417B (hu)
IT (1) IT1189373B (hu)
NL (1) NL193107C (hu)
SE (1) SE452006B (hu)
YU (1) YU44678B (hu)

Families Citing this family (29)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS5862152A (ja) * 1981-10-08 1983-04-13 Microbial Chem Res Found Ｎ−〔４−（３−アミノプロピル）アミノブチル〕−２−（ω−グアニジノ脂肪酸アミド）−２−ヒドロキシエタンアミドおよびその誘導体ならびにその製造法
JPS60181056A (ja) * 1984-02-29 1985-09-14 Takara Shuzo Co Ltd Ν−〔４−（３−アミノプロピル）アミノブチル〕−２，２−ジヒドロキシエタンアミドの製造法
JPS60185758A (ja) * 1984-03-02 1985-09-21 Microbial Chem Res Found フエニレン基を有するスパガリン関連化合物およびその製造法
JPS61129119A (ja) * 1984-11-13 1986-06-17 Microbial Chem Res Found 新規免疫抑制剤
JPS61165322A (ja) * 1985-01-14 1986-07-26 Microbial Chem Res Found スパガリン類の注射用凍結乾燥製剤
JPH0742268B2 (ja) * 1985-08-27 1995-05-10 財団法人微生物化学研究会 フエニレン基を有するスパガリン類縁化合物及びその製造法
ES2039213T3 (es) * 1986-04-04 1993-09-16 Microbial Chemistry Research Foundation Procedimiento para producir nuevos compuestos relacionados con espergualina.
JP2605762B2 (ja) * 1986-12-10 1997-04-30 武田薬品工業株式会社 δ−ハイドロキシ−β−リジン誘導体およびその製造法
US5061787A (en) * 1988-06-24 1991-10-29 Nippon Kayaku Kabushiki Kaisha Novel spergualin-related compounds and compositions
JPH0776204B2 (ja) * 1988-07-01 1995-08-16 寳酒造株式会社 スパガリン類の精製法
US4990536A (en) * 1989-04-03 1991-02-05 Nippon Kayaku Kabushiki Kaisha Immunopotentiator and spergualin-related compound therefor
US5196453A (en) * 1989-05-29 1993-03-23 Takara Shuzo Co., Ltd. Crystalline deoxyspergualin, process for its preparation and suppository containing the same
US5162581A (en) * 1989-05-29 1992-11-10 Takaru Shuzo Co., Ltd. Crystalline deoxyspergualin, process for its preparation and suppository containing the same
JPH078846B2 (ja) * 1989-05-29 1995-02-01 寳酒造株式会社 塩酸デオキシスパガリンのβ型結晶及びその製造方法
YU48230B (sh) * 1989-05-29 1997-08-22 Takara Shuzo Co.Ltd. Kristalni deoksispergvalin i postupak za njegovo pripremanje
DE69104291T2 (de) * 1990-07-20 1995-05-18 Nippon Kayaku Kk Spergulinähnliche Verbindungen und ihre Verwendung.
WO1994004140A1 (en) * 1992-08-19 1994-03-03 Nippon Kayaku Kabushiki Kaisha Antiprotozoan drug
CA2183917A1 (en) * 1995-09-26 1997-03-27 Xuebao Wang Preparation of optically active (s)-(-) and (r)-(+)- deoxyspergualin and novel intermediates thereof
AP1224A (en) 1998-03-19 2003-11-14 Bristol Myers Squibb Co Biphasic controlled release delivery system for high solubility pharmaceuticals and method.
US20020142000A1 (en) * 1999-01-15 2002-10-03 Digan Mary Ellen Anti-CD3 immunotoxins and therapeutic uses therefor
US8716558B2 (en) 1999-06-30 2014-05-06 Marker Gene Technologies, Inc. Method of altering glycosylation of proteins in response to nojirimycin glucuronide in a plant cell expressing glucuronidase
US6656917B1 (en) * 1999-06-30 2003-12-02 Marker Gene Technologies, Inc. Compositions and methods for targeted enzymatic release of cell regulatory compounds
JP2005531391A (ja) * 2002-06-27 2005-10-20 微創医療器械（上海）有限公司 薬剤放出ステント
US7635773B2 (en) 2008-04-28 2009-12-22 Cydex Pharmaceuticals, Inc. Sulfoalkyl ether cyclodextrin compositions
MY161846A (en) 2010-07-09 2017-05-15 James Trinca Green Combination immediate/delayed release delivery system for short half-life pharmaceuticals including remogliflozin
US9751957B2 (en) 2012-02-15 2017-09-05 Cydex Pharmaceuticals, Inc. Manufacturing process for cyclodextrin derivatives
CN104704007A (zh) 2012-02-28 2015-06-10 锡德克斯药物公司 烷基化环糊精组合物及其制备和使用方法
WO2014066274A1 (en) 2012-10-22 2014-05-01 Cydex Pharmaceuticals, Inc. Alkylated cyclodextrin compositions and processes for preparing and using the same
FI3183295T3 (fi) 2014-08-22 2023-09-25 Cydex Pharmaceuticals Inc Fraktioidut alkyloidut syklodekstriinikoostumukset ja menetelmät niiden valmistamiseksi ja käyttämiseksi

Family Cites Families (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2051495B1 (hu) * 1969-04-02 1974-08-30 Taiho Pharmaceutical Co Ltd
JPS5748957A (en) * 1980-09-08 1982-03-20 Microbial Chem Res Found Novel antibiotic bmg 162-af2, its preparation and carcinostatic agent comprising it as active ingredient
JPS57185254A (en) * 1981-05-11 1982-11-15 Microbial Chem Res Found Novel carcinostatic substances and their preparation
JPS57192347A (en) * 1981-05-18 1982-11-26 Microbial Chem Res Found N-(4-(3-aminopropyl)aminobutyl)-2,2-dihydroxyethanamide and its synthesis
JPS5862152A (ja) * 1981-10-08 1983-04-13 Microbial Chem Res Found Ｎ−〔４−（３−アミノプロピル）アミノブチル〕−２−（ω−グアニジノ脂肪酸アミド）−２−ヒドロキシエタンアミドおよびその誘導体ならびにその製造法
JPS5942356A (ja) * 1982-09-02 1984-03-08 Microbial Chem Res Found スパガリン関連化合物およびその製造法
US4525299A (en) * 1983-05-10 1985-06-25 Zaidan Hojin Biseibutsu Kagaku Kenkyu Kai (-)-15-Deoxyspergualin, process for the preparation thereof, and intermediate of the same

Also Published As

Publication number Publication date
IT8249228A0 (it) 1982-10-07
NL8203874A (nl) 1983-05-02
AT393680B (de) 1991-11-25
DK445182A (da) 1983-04-09
IT1189373B (it) 1988-02-04
YU227682A (en) 1985-06-30
JPS5862152A (ja) 1983-04-13
BE894651A (fr) 1983-01-31
US4983328A (en) 1991-01-08
SE452006B (sv) 1987-11-09
NL193107C (nl) 1998-11-03
SE8205698L (sv) 1983-04-09
KR840001952A (ko) 1984-06-07
ES8402558A1 (es) 1984-02-01
ES526501A0 (es) 1985-04-16
JPS6123183B2 (hu) 1986-06-04
CS717982A2 (en) 1989-08-14
AU8912182A (en) 1983-04-14
DK166080C (da) 1993-08-02
US4518532A (en) 1985-05-21
CS268654B2 (en) 1990-04-11
GB2111480A (en) 1983-07-06
ES516258A0 (es) 1984-02-01
US4658058A (en) 1987-04-14
CH653015A5 (de) 1985-12-13
DE3236725A1 (de) 1983-04-28
FR2514350B1 (fr) 1985-10-25
ES8504690A1 (es) 1985-04-16
GB2111480B (en) 1985-03-13
ATA369682A (de) 1991-05-15
YU44678B (en) 1990-12-31
DK166080B (da) 1993-03-08
NL193107B (nl) 1998-07-01
AU554489B2 (en) 1986-08-21
FR2514350A1 (fr) 1983-04-15
KR870000656B1 (ko) 1987-04-04
SE8205698D0 (sv) 1982-10-06
DE3236725C2 (hu) 1991-01-24
CA1187513A (en) 1985-05-21

Similar Documents

Publication Publication Date Title
HU187417B (en) Process for producing spergualine derivatives in form of salts
Ludwig et al. Some anticonvulsant agents derived from 1, 3-propanediols
HU190730B (en) Process for producing spergualine derivatives and pharmaceutical compositions containing them as active agents
AU636429B2 (en) Intermediates for morpholinyl derivatives of doxorubicin
US4430346A (en) Novel carcinostatic substance and process for synthesis thereof
KR900001076B1 (ko) N-[4-(3-아미노프로필)아미노부틸]-2,2-디히드록시에탄아미드의 제조방법
US4393052A (en) Antitumor anthracycline glycosides, their preparation, intermediates therefor, and compositions and use thereof
US5696244A (en) Method for preparing 1-N-ethylsisomicin
IE54926B1 (en) (-)-15-deoxyspergualin, a process for the preparation of the same, and a pharmaceutical composition containing the same
US4892939A (en) Oligopeptidyl-5-fluorouridine compounds and process for preparing the same
AU658728B2 (en) N-methyldeacetylcolchiceinamide derivatives
AU634921B2 (en) Deacetylcolchicine derivatives
JPS6260393B2 (hu)
US4868211A (en) Derivatives of L-amino acyl L-carnitine, process for their preparation pharmaceutical compositions having hepatoprotecting activity containing same
Shin et al. Dehydrooligopeptides. VIII. Convenient syntheses of various dehydrotyrosine derivatives protected with useful N, O-protecting groups via N-carboxy dehydrotyrosine anhydrides.
CA2322424A1 (en) 5-imino-13-deoxy anthracycline derivatives, their uses, and processes for preparing them
US4537880A (en) Aminopropylaminobleomycin derivatives and process for preparation thereof
US5137917A (en) Spergualin-related compound and use thereof
CA1197237A (en) Daunorubicin and doxorubicin analogues, their preparation and use thereof
JPH0149257B2 (hu)
CA1083175A (en) .alpha.-SUBSTITUTED NEGAMYCIN DERIVATIVES AND SYNTHESES
EP0212606B1 (en) Spergualin-related nitrile compounds containing a phenylene group and a process for producing the same
JPH0254823B2 (hu)
JPH0343261B2 (hu)

Legal Events

Date Code Title Description
HU90 Patent valid on 900628