DE69104291T2

DE69104291T2 - Spergulinähnliche Verbindungen und ihre Verwendung.

Info

Publication number: DE69104291T2
Application number: DE69104291T
Authority: DE
Inventors: Takako Mae; Tetsushi Saino; Tsugio Tomiyoshi; Yoshihisa Umeda
Original assignee: Takara Shuzo Co Ltd; Nippon Kayaku Co Ltd
Current assignee: Takara Shuzo Co Ltd; Nippon Kayaku Co Ltd
Priority date: 1990-07-20
Filing date: 1991-07-16
Publication date: 1995-05-18
Anticipated expiration: 2011-07-17
Also published as: CA2047341A1; JPH05320118A; DE69104291D1; US5137917A; EP0467280A1; AU8110191A; EP0467280B1; KR920002531A

Description

Hintergrund der Erfindung

Gebiet der Erfindung

Die Erfindung betrifft eine neue mit Spergualin verwandte Verbindung, die als Immunopotentiator nützlich ist und eine hohe Spezifität hat, und die medizinische Verwendung der Verbindung.

Feststellung der verwandten Technik

Spergualin ist eine Verbindung, die eine anti-Tumoraktivität und immunosuppressive Aktivität hat, die aus der Kulturflüssigkeit von Bacillus laterosporus (USP 4,416,899) erhalten wird, und viele Derivate von Spergualin sind synthetisiert worden (vgl. USP 4,430,346, USP 4,518,532, USP 4,529,549, USP 4,556,735, USP 4,851,446, EP-A-213526, EP-A-241,797). Von diesen Verbindungen wird erwartet, daß sie Medikamente als karzinostatische Mittel oder Immunsuppressiva sind.
Gegenwärtig sind einige Immunopotentiatoren entwickelt warden; neue Immunopotentiatoren, die eine höhere Spezifität besitzen, werden jedoch immer noch benötigt.

Zusammenfassung der Erfindung

Daher ist eine Aufgabe der Erfindung, eine neue als Immunopotentiator nützliche Verbindung zur Verfügung zu stellen.
Eine weitere Aufgabe der Erfindung liegt darin, eine pharmazeutische Zusammensetzung zur Verfügung zu stellen, die die neue Verbindung als aktiven Bestandteil enthält, die besonders nützlich als Immunopotentiator ist.
Eine weitere Aufgabe der Erfindung liegt darin, eine Methode zur Immunopotenzierung zur Verfügung zu stellen, die Gabe der neuen Verbindung bei einem warmblütigen Tier umfaßt.
Eine weitere Aufgabe der Erfindung liegt darin, die Verwendung der neuen Verbindung als Immunopotentiator zur Verfügung zu stellen.
Ein erster Aspekt der Erfindung betrifft ein durch die allgemeine Formel (I) dargestelltes neues Spergualin-Derivat:
worin X -(CH&sub2;)&sub1;&submin;&sub5;- oder eine Phenylengruppe darstellt, die substituiert sein kann; m 0, 1 oder 2 darstellt; n 1 oder 2 darstellt; und R&sub1; -(CH&sub2;)&sub1;&submin;&sub3;-COOH darstellt; und ein pharmakologisch verträgliches salz davon.
Ein zweiter Aspekt der Erfindung betrifft eine pharmazeutische Zusammensetzung zur Immunopotenzierung, umfassend als aktiven Bestandteil das neue durch die allgemeine Formel (I) dargestellte Spergualinderivat oder die pharmazeutisch verträglichen Salze davon, gemeinsam mit einem pharmazeutisch verträglichen Träger.
Ein dritter Aspekt der Erfindung betrifft eine Methode zur Immunopotenzierung, die die Gabe einer wirksamen Menge des durch die allgemeine Formel (I) dargestellten neuen Spergualin-Derivats oder des pharmazeutisch verträglichen Salzes davon bei einem warmblütigen Tier mit einer reduzierten Immunität umfaßt.
Ein vierter Aspekt der Erfindung betrifft die Verwendung des neuen durch die allgemeine Formel (I) dargestellten spergualin-Derivats oder des pharmazeutisch verträglichen Salzes davon für die Herstellung einer pharmazeutischen Zusammensetzung zur Immunopotenzierung.

Detaillierte Beschreibung der bevorzugten Ausführungsformen.

Die neuen Spergualin-Derivate sind durch die allgemeine Formel (I) dargestellt:
worin X -(CH&sub2;)&sub1;&submin;&sub5;- oder eine Phenylengruppe darstellt, die substituiert sein kann; m 0, 1 oder 2 darstellt; n 1 oder 2 darstellt; und R&sub1; -(CH&sub2;)&sub1;&submin;&sub3;-COOH darstellt.
Die Phenylengruppe von X kann mit einem Halogenatom wie Chlor-, Fluor- und Braomatom substituiert sein; einer niedrigen Alkylgruppe wie Methyl-, Ethyl-, Propyl-, t-Butyl- und Pentylgruppe; oder einer niedrigen Alkoxygruppe, wie Methoxy-, Ethoxy-, Propoxy-, t-Butoxy- und Pentoxygruppe. X ist bevorzugt -(CH&sub2;)&sub3; oder -(CH&sub2;)&sub5;-, bevorzugter -(CH&sub2;)&sub3;-. m ist bevorzugt 0 oder 1. n ist bevorzugt 1. R&sub1; ist bevorzugt -(CH&sub2;)&sub2;-COOH oder -CH&sub2;)&sub3;-COOH.
Die durch die allgemeine Formel (I) dargestellten Verbindungen können Salze mit Säuren bilden. Als die Säuren zur Bildung der Salze können anorganische Säuren und arganische Säuren verwendet werden, solange sie nicht-toxisch sind. Für anorganische Säuren gibt es keine besondere Beschränkung, aber Salzsäure, Schwefelsäure, Salpetersäure und Phosphorsäure sind bevorzugt. Für organische Säuren existieren keine speziellen Beschränkungen, aber Essigsäure, Propionsäure, Bernsteinsäure, Fumarsäure, Maleinsäure, Malonsäure, Weinsäure, Glutarsäure, Citronensäure, Benzolsulfonsäure, Toluolsulfonsäure, Methansulfansäure, Ethansulfansäure, Propansulfansäure, Asparaginsäure und Glutaminsäure sind bevorzugt.
In dem Spergualin-Derivat der allgemeinen Formel (I) der Erfindung bedeutet die sterische Konfiguration des Kohlenstaffatoms, an das die Hydroxy-Gruppe gebunden ist, S-, R- oder RS-Form. Insbesondere sind S- oder RS-Formen bevorzugt. Die repräsentativen Verbindungen in der Erfindung sind in der folgenden Tabelle 1 aufgeführt. Tabelle 1 Verbindung Nr. sterische Konfiguration von C* Tablle 1 (ff) Tablle 1 (ff)
Unter den in Tabelle 1 aufgeführten Verbindungen ist die folgende Verbindung die am meisten bevorzugte Verbindung. Verbindung Nr. 2
Die sterische Konfiguration des asymmetrischen Kohlenstoffatoms in Verbindung Nr. 2 ist bevorzugt S-Form.
Die oben aufgeführten Verbindungen sind alle neu und können durch das folgende Verfahren hergestellt werden. Das heißt, die Verbindungen werden durch Entfernen einer Schutzgruppe von den durch Formel (II) dargestellten Verbindungen erhalten:
worin X, m und n wie oben definiert sind; R&sub2; -(CH&sub2;)&sub1;&submin;&sub3;-COO- darstellt; und P&sub1; eine Schutzgruppe der Carboxygruppe darstellt.
Die geschützten Verbindungen der allgemeinen Formel (II), die die Ausgangsverbindungen der Erfindung sind, können durch die folgende Methode hergestellt werden.
Durch die Formel (III) dargestellte geschützte Aminosäuren:
H&sub2;N-R&sub2;-P&sub1; (III)
worin R&sub2; und P&sub1; wie oben definiert sind; werden mit durch die Formel (IV) dargestellten reaktiven Derivaten von geschützten Aminosäuren umgesetzt:
P&sub2;-NH-(CH&sub2;)n- -(CH&sub2;)m-COOH (IV)
worin P&sub2; eine Schutzgruppe der Aminogruppe darstellt, die verschieden ist von P&sub1;; und n und m wie oben definiert sind. Dann wird die Aminoschutzgruppe P&sub2; entfernt und mit durch die allgemeine Formel (V) dargestellten Derivaten von ω-Guanidino-Fettsäuren umgesetzt:
worin X wie oben definiert ist. So werden die durch die Formel (II) dargestellten Verbindungen erhalten.
Die Kondensationsreaktion wie oben beschrieben kann durch allgemein in der Peptidchemie verwendete Methoden durchgeführt werden. Beispiele dieser Methoden schließen eine Carbodiimid-Methode unter Verwendung von Dicyclohexylcarbodiimid, 1-Ethyl-3-(3'-dimethylaminopropyl)-carbodiimid oder ähnliches ein; eine gemischte Säureanhydrid-Methode unter Verwendung von Ethylchlorocarbonat, Isobutylchlorocarbonat oder ähnlichem; eine aktivierte Estermethode unter Verwendung eines Cyanomethylesters, eines Vinylesters, eines substituierten oder unsubstituierten Phenylesters, eines Thiophenylesters oder eines Hydroxysuccinimidesters oder ähnlichem; eine O-Acylhydroxylamin-Derivatmethode unter Verwendung von Acetoxim, Cyclohexanonoxim oder ähnlichem; eine N- Acylverbindungsmethode unter Verwendung von Carbanyldiimidazol; und eine Carbonsäureaktivierungsmethode unter Verwendung von 1,3-Thiazalidin-2-thion oder ähnlichem.
Als Lösungsmittel für die Kondensationsreaktion kann jedes zu üblichen Peptidbindungs-bildenden Reaktionen angewandte Lösungsmittel verwendet werden. Beispiele eines solchen Lösungsmittels schließen Ether wie Diethylether, Tetrahydrofuran und Dioxan ein; Ester wie Ethylacetat, Ketone wie Aceton und Methylethylketon; halogenierte Kohlenwasserstoffe wie Methylenchlorid und Chloraform; Amide wie Dimethylformamid und Dimethylacetamid, Nitrile wie Acetonitril. Diese Lösungsmittel können einzeln oder in Kombination davon verwendet werden. Wo das Lösungsmittel mit Wasser mischbar ist, kann das Lösungsmittel als eine Mischung mit Wasser verwendet werden.
Als die Schutzgruppe, die in der Erfindung verwendet werden kann, gibt es niedrige Alkylgruppe, t-Butylgruppe, Benzylgruppe, eine substituierte Benzylgruppe und ähnliches.
Die Schutzgruppe in den durch allgemeine Formel (II) gezeigten Verbindungen kann durch Reaktionen, wie Reduktion, Hydrolyse und saure Zersetzung abgespalten werden. Solche Reaktionen werden allgemein in einem Lösungsmittel bei -60ºC bis zum Siedepunkt eines Lösungsmittels, bevorzugt bei -50 bis 100ºC durchgeführt. Beispiele des verwendeten Lösungsmittels schließen Wasser und hydrophile organische Lösungsmittel, beispielsweise einen niedrigen Alkohol wie Methanol und Ethanol; ein Keton wie Aceton und Methylethylketon; ein Amid wie Dimethylformamid und Dimethylacetamid; einen cyclischen Ether wie Tetrahydrofuran und Dioxan; eine niedrige Fettsäure wie Essigsäure und Trifluoressigsäure; flüssigen Ammoniak; und flüssigen Fluorwasserstoff ein. Diese Lösungsmittel können in geeigneter Weise verwendet werden.
Die Verbindungen der allgemeinen Formel (I) können aus der Reaktionslösung der Verbindungen, von denen die Schutzgruppe abgespalten wurde, durch übliche Reinigungsmethoden isoliert werden, z.B. wo die Schutzgruppe durch katalytische Reduktion unter Verwendung von Palladium-Schwarz entfernt wird, wird das durch Abfiltrieren des Katalysatars erhaltene Filtrat unter reduziertem Druck konzentriert, und der Rückstand wird durch bekannte Methoden unter Verwendung von Chromatographie unter Verwendung von CM-Sephadex (Na&spplus;) oder Sephadex LH-20 gereinigt. Wo die Schutzgruppe mit Trifluoressigsäure entfernt wird, wird die Reaktionslösung ebenfalls unter reduziertem Druck konzentriert, und der Rückstand wird durch die oben beschriebene Methode gereinigt. so können die gewünschten Verbindungen gereinigt werden.
Durch die oben beschriebene Reinigungsmethode können die Verbindungen der allgemeinen Formel (I) in Form des Hydrochlorids erhalten werden. Das Salz kann auch in andere Salze umgewandelt werden. Beispielsweise wird das Hydrochlorid in Wasser gelöst, und die resultierende wäßrige Lösung wird durch ein stark basisches Ionenaustauscherharz geleitet. Die die Verbindungen der allgemeinen Formel (I) enthaltende nichtadsorbierte Fraktion wird gesammelt, und eine gewünschte Säure wird zur Neutralisation dazugegeben. Die Mischung wird dann unter reduziertem Druck zur Trockne eingedampft. In diesem Fall wird Wasser oder, falls notwendig, ein hydrophiles organisches Lösungsmittel wie Methanol, Ethanol, Aceton, Tetrahydrofuran, Dioxan oder ähnliches zugegeben. Wenn das organische Lösungsmittel enthalten ist, wird das Lösungsmittel unter reduziertem Druck abdestilliert und gefriergetrocknet, um die gewünschten Salze zu ergeben. Die gewünschten Salze können ebenfalls erhalten werden, indem zur Neutralisierung von Salzsäure eine wäßrige Lösung van Silberhydroxid zum Hydrochlorid der Verbindungen der allgemeinen Formel (I) gegeben wird, unlösliches Silberchlorid abfiltriert wird, eine gewünschte Säure zur Bildung der Salze zum Filtrat gegeben wird, und gefriergetrocknet wird.
Die physiologische Aktivität der erfindungsgemäßen Verbindungen wird durch die folgenden Experimente demonstriert, worin die Wirkungen auf die Potenzierung der Antikörperproduktion bestimmt wurde.

Experiment 1

1. Methode

Rote Blutzellen von Schafen (SRBC) wurden CDF&sub1;-SLC-Mäusen intravenös in einer Dosis von 1 x 10&sup8;/0.2 ml zum Sensibilisieren (booster) intravenös injiziert. Die erfindungsgemäße Verbindung wurde mit physiologischer Kochsalzlösung in verschiedenen Konzentrationen verdünnt. Jede verdünnte Lösung wurde einmal in einer täglichen Dosis von 0.1 ml/10 g Körpergewicht (0.1 ml/10 g/Tag) während 3 aufeinanderfolgenden Tagen vom Tag nach der Sensibilisierung an gegeben. Die Mäuse wurden 4 Tage nach der Sensibilisierung getötet. Die Anzahl von anti-SRBC-Antikörper-produzierenden Zellen (Plaque-bildende Zelle, PFC) in den Milz-Zellen wurde bestimmt und die PFC-Zahl wurde pro 10&sup6; g der Milz-Zellen berechnet. Wie in der folgenden Gleichung dargestellt ist, wird die Wirkung der erfindungsgemäßen Verbindung durch eine Potenzierungsrate (%) der PFC-Zahl in der Gruppe nach Gabe der erfindungsgemäßen Verbindung verglichen mit der PFC-Zahl in der Kontrollgruppe ausgedrückt.
Potenzierungsrate (%) = PFC-Zahl in der Gruppe mit Gabe/PFC-Zahl in der Kontrollgruppe x 100

2. Ergebnisse

Die Wirkungen der repräsentativen Beispiele der erfindungsgemäßen Verbindungen auf die Potenzierung der Antikörperproduktion ist in Tabelle 2 gezeigt. Tabelle 2 Wirkungen der Verbindungen dieser Erfindung auf die Potenzierung der Antikörperproduktion Potenzierungswirkung auf Antikörperproduktion (Kontrolle: 100 %) Dosis Verbindung Nr. Kontrolle: Physiologische Kochsalzlösung *Rs-Form

Experiment 2

1. Methode

Zur Herstellung von immun-unterdrückten Mäusen wurde Methylprednisolon BALB/C-Mäusen (weiblich, Alter 8 Wochen, Japan Kurea) in einer Dosis von 400 mg/kg während 9 Tagen intraperitoneal gegeben. Am Tag 6 wurden die Mäuse durch intravenöse Injektion von raten Blutzellen von Schafen (SRBC, Japan Biological Material Center) in einer Dosis von 1 x 10&sup6; Zellen sensibilisiert (boasted). Am Tag 6 nach der Sensibilisierung wurde die Zahl der Antikörper-produzierenden Zellen (Plaque-bildende Zelle, PFC) in den Milz-Zellen bestimmt. Eine Testverbindung wurde bereits am Tag nach der Sensibilisierung in jeder der in Tabelle 3 gezeigten Dosen intravenös gegeben.
Auf dieselbe Art wie in Experiment 1 wurde die Potenzierungsrate der PFC-Zahl bestimmt.
Die getesteten Verbindungen waren folgende: Verbindung Nr. 2 (RS-Form) Verbindung Nr. 2 (S-Form)

2. Ergebnisse

Die Wirkungen der getesteten Verbindungen auf die Potenzierung der Antikörperproduktion sind in Tabelle 3 dargestellt. Tabelle 3 Potenzierungsrate der PFC-Zahl Behandlung vs. Normal (%) vs. Methylprednisolon (%) Experiment 2-1 Normal Methylprednisolon Verbindung Nr. 2 (RS-Form) Experiment 2-2
Wie aus den vorstehend erwähnten experimentellen Ergebnissen klar wird, besitzen die erfindungsgemäßen Verbindungen eine hervorragende immunopotenzierende Aktivität und werden als Immunopotentiatoren und andere Medikamente angesehen.
Wo die erfindungsgemäßen Verbindungen als Medikament verwendet werden, werden die Verbindungen auf eine übliche Art zu pharmazeutischen Präparaten formuliert, falls notwendig, gemeinsam mit für pharmazeutische Präparate verwendeten Additiven. Die Präparate können oral oder parenteral gegeben werden. Die Additive wie Exzipienten oder Träger können aus den pharmazeutisch verträglichen ausgewählt werden. Die Art und Zusammensetzung der auszuwählenden Exzipienten oder Träger kann in Abhängigkeit von dem Weg oder der Methode der Gabe variieren. Als flüssige Träger können beispielsweise Wasser, ein Alkohol, tierisches und pflanzliches Öl, wie Sojabohnenöl, Olivenöl und Mineralöl; und synthetisches Öl verwendet werden. Als feste Träger können verwendet werden Zucker wie Maltose und Sucrose; Ammonisäuren; Cellulosederivate, wie Hydroxypropylcellulase; oder salze organischer Säuren, wie Magnesiumstearat.
Im Fall einer Injektion ist es erwünscht, als Verdünnungsflüssigkeit physiologische Kochsalzlösung, verschiedene Pufferlösungen, eine Lösung von Zucker wie Glucose, Inositol, Mannitol und Lactose oder ein Glykol wie Ethylenglykol und Polyethylenglykol zu verwenden. Alternativ können ein Zucker wie Inositol, Mannitol und Lactase oder eine Aminosäure wie Phenylalanin zur Herstellung eines gefriergetrockneten Präparats als Träger verwendet werden. Zur Verabreichung kann ein solches Präparat in einem zur Injektion geeigneten Lösungsmittel gelöst werden, wie einer Flüssigkeit zur intravenösen Gabe, beispielsweise sterilem Wasser, physiologischer Kochsalzlösung, einer Glucoselösung, einer Elektrolytlösung oder einer Aminosäurelösung, und die resultierende Lösung kann gegeben werden.
Ein Gehalt der erfindungsgemäßen Verbindung im pharmazeutischen Präparat kann in Abhängigkeit von der Art der Herstellung variieren, liegt jedoch allgemein in einem Bereich von 0.1 bis 100 Gew.-%, bevorzugt 1 bis 98 Gew.-%. Im Fall von beispielsweise einer Injektion ist es erwünscht, den aktiven Bestandteil allgemein in einem Bereich von 0.1 bis 30 Gew.- %, bevorzugt 1 bis 10 Gew.-% zu enthalten.
Wo es erwünscht ist, ein warmblütiges Tier (einschließlich Mensch) unter Verwendung der Verbindung der allgemeinen Formel (I) zu immunopotenzieren, kann eine wirksame Dosis der Verbindung der allgemeinen Formel (I) dem warmblütigen Tier gegeben werden, wodurch die Antikörperproduktion potenziert und die Immunität aktiviert wird.
Wo die Verbindung der allgemeinen Formel (I) oral gegeben wird, wird die Verbindung in Form einer Tablette, einer Kapsel, eines Pulvers, eines Granulats, einer Lösung oder eines Trockensirups gegeben, gemeinsam mit festen Trägern oder flüssigen Trägern, wie oben beschrieben. Die Kapsel, Granulat und Pulver enthalten allgemein 5 bis 100 Gew.-%, bevorzugt 25 bis 98 Gew.-% des aktiven Bestandteils.
Die Dosis kann in Abhängigkeit von Alter, Körpergewicht und Zustand des zu behandelnden Patienten und des therapeutischen Zwecks bestimmt werden, beträgt jedoch allgemein 1 bis 500 mg/kg/Tag, d.h., 1 bis 100 mg/kg/Tag bei parenteraler Gabe und 5 bis 500 mg/kg/Tag bei oraler Gabe.

Herstellungsbeispiel 1

Destilliertes Wasser zur Injektion wird zu 30 Gew.-Teilen des Hydrochlorids der in Tabelle 1 gezeigten Verbindung Nr. 2 gegeben, um das Gesamtvolumen zu 2000 Teilen zu ergänzen. Nach Lösen des Hydrochlorids der Verbindung 2 wird die Lösung der zellfreien Filtration unter Verwendung eines Millipore-Filters von GS-Typ unterworfen. Das Filtrat (2 g) wird in einer Ampulle von 10 ml Volumen aufgenommen und gefriergetrocknet und ergibt eine gefriergetrocknete Injektion, enthaltend 30 mg des Hydrochlorids der Verbindung 2 pro Ampulle.

Herstellungsbeispsiel 2

50 Gew.-Teile des Hydrochlorids der in Tabelle 1 gezeigten Hydrochlorids der Verbindung Nr. 21, 600 Teile Lactase, 330 Teile kristalline Cellulose und 20 Teile Hydroxypropylcellulose werden gründlich miteinander verknetet, und die Mischung wird mit einem Rollenverdichter komprimiert. Durch Mahlen und Sieben durch ein Sieb von 16 bis 60 mesh wird Granulat erhalten.
Als nächstes wird die Erfindung spezifischer unter Bezug auf die folgenden Beispiele beschrieben, es ist jedoch nicht beabsichtigt, sie darauf zu beschränken.

Beispiel 1

Synthese von 16-Guanidino-7-(RS)-hydroxy-5,10-dioxo-4,9-diazahexadecansäure (Verbindung Nr. 2)

a) Synthese von Benzyl-9-t-butyloxycarbonyl-7-(RS)-hydroxy- 5-oxo-4,9-diazanonanoat

In 60 ml Dichlormethan wurden 2.5 g (11.40 mMol) γ-N-t-Butyloxycarbonyl-β-(RS)-hydroxybutansäure und 2.6 g (17.10 mMol) N-Hydroxybenzatriazol gelöst. Die Lösung wurde mit Eis gekühlt, und 3.5 g (17.1 mMol) N,N'-Dicyclohexylcarbodiimid wurden zu der Lösung gegeben. Die Mischung wurde während 15 Minuten unter Eiskühlung umgesetzt. Dann wurde eine Lösung von 4.0 g (11.40 mMol) β-Alaninbenzylester-p-toluolsulfonsäuresalz und 1.3 g (12.54 mMol) Triethylamin in Dichlormethan unter Eiskühlung zu der Lösung gegeben. Die Temperatur wurde dann auf Raumtemperatur gebracht und die Reaktion wurde während einiger Stunden durchgeführt. Unlösliche Bestandteile wurden abfiltriert, und das Filtrat wurde unter reduziertem Druck konzentriert. Der ölige Rückstand wurde in 150 ml Ethylacetat gelöst, gefolgt von Waschen mit nacheinander destilliertem Wasser, 5 %-iger Phospharsäure, 5 %-iger wäßriger Natriumcarbonatlösung und dann gesättigter wäßriger Natriumchloridlösung. Die organische Phase wurde über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet. Die überstehende Flüssigkeit wurde unter reduziertem Druck konzentriert und ergab 5.1 g eines leicht gelben öligen Produkts. Das ölige Produkt wurde der Säulenchromatagraphie unter Verwendung von Kieselgel 60 (hergestellt von Merck Inc.) unterworfen, und die Entwicklung wurde mit einer Lösungsmittelmischung aus Chloroform-Methanol (30:1, (V/V) durchgeführt und ergab 3.5 g (Ausbeute 80,83 %) des öligen Produkts.
NMR (CD&sub3;OD)
δ = 1.47 (s, 9H), 2.1-2.5 (d, 2H, J=6Hz), 2.4-2.8 (t, 2H, J=6Hz), 2.9-3.3 (d, 2H, J=6Hz), 3.2-3.7 (t, 2H, J=6Hz), 3.8-4.3 (q; H; J=6Hz), 5.15 (s, 2H), 7.37 (s, 5H)
Dünnschichtchromatogramm (Chloroform : Methanol = 10 :1, v/v)
Rf = 0.4

b) Synthese von Benzyl-8-amino-7-(RS)-hydroxy-5-oxo-4- azaoctanoat-hydrochlorid

Nachdem 3.5 g (9.2 mMol) Benzyl-9-t-butyl-oxycarbonyl-7- (RS)-hydroxy-5-oxo-4,9-diazanonanoat in 10 ml Dichlormethan gelöst worden waren, wurden unter Eiskühlung 10 ml 4N Salzsäure-Dioxanlösung zu der Lösung gegeben. Die Temperatur wurde auf Raumtemperatur gebracht und die Mischung wurde während 3 Stunden umgesetzt. Die Reaktionslösung wurde unter reduziertem Druck konzentriert. Der resultierende weiße Rückstand wurde der Dekantierung mit n-Hexan und Ether unterworfen. Konzentration unter reduziertem Druck ergab 2.9 g (Ausbeute 100 %) weiße Kristalle.
Dünnschichtchromatagraphie (Chloroform : Methanol : 17 %-iges Ammoniakwasser = 6 : 2.5 : 0.5, V/V)
Rf = 0.35

c) Synthese von Benzyl-16-guanidino-7-(RS)-hydroxy-5,10-dioxo-4,0-diazahexadecanoat-hydrochlorid

Nachdem 2.47 g (11.04 mMol) 7-Guanidinoheptansäure in 40 ml Dimethylformamid gelöst worden waren, wurden unter Eiskühlen 1.53 g (13.25 mMol) N-Hydroxysuccinimid und 2.73 g (13.25 mMol) N,N'-Dicyclohexylcarbodiimid zu der Lösunmg gegeben. Die Mischung wurde bei Raumtemperatur über Nacht umgesetzt. Die Niederschläge wurden abfiltriert und das Filtrat wurde als solches für die nachfolgende Reaktion verwendet.
Nachdem 2.9 g (9.20 mMol) weißes kristallines Benzyl 8- Amino-7-(RS)-hydroxy-5-oxo-4-azaoctanoat-hydrochlorid in 40 ml Dimethylformamid gelöst worden waren, wurden unter Eiskühlen 1,02 g (10.12 mMol) Triethylamin zu der Lösung gegeben. Danach wurde die vorstehend erwähnte Lösung von 7-Guanidinoheptanoat-hydrochlorid N-Hydroxysuccinimidester in Dimethylformamid zu der Mischung gegeben, gefolgt von Umsetzung bei Raumtemperatur über Nacht. Die Reaktionslösung wurde abfiltriert und das Filtrat wurde unter reduziertem Druck konzentriert. Nach 2-maligem Dekantieren des resultierenden öligen Rückstands mit 100 ml n-Hexan wurde das System unter reduziertem Druck konzentriert. Das resultierende ölige Produkt wurde der Säulenchromatographie unter Verwendung von Kieselgel 60 (hergestellt von Merck Inc.) unterworfen, und die Entwicklung wurde mit einer Lösungsmittelmischung aus Chloroform-Methanol- 17 %-igem Ammoniakwasser (6 : 2.5 : 0.5, V/V) durchgeführt und ergab 4.1 g (Ausbeute 91.72 %) des öligen Produkts.
NMR (CD&sub3;OH)
δ = 0.9-2.1 (m, 8H), 2.1-3.0 (m, 6H), 3.0-3.9 (m, 6H), 3.9-4.4 (m, H), 5.23 (s, 2H), 7.46 (s, 5H)
IR (KBr)
ν (cm&supmin;¹) = 3300, 2940, 2600, 2500, 1730, 1650, 1540, 1170
Dünnschichtchromatagraphie (Chloroform : Methanol : 17 %-iges Ammoniakwasser = 6 : 2.5 : 0.5, V/V)
RF = 0.34

d) Synthese von 16-Guanidino-7-(RS)-hydroxy-5,10-dioxo-4,0- diazahexadecansäure

Nachdem 4.1 g (8.43 mMol) Benzyl-16-guanidino-7-(RS)-hydroxy-5,10-dioxo-4,9-diazahexadecanoat in 40 ml Methanol gelöst warden waren, wurden 10 ml Essigsäure und 0.4 g Palladium- Schwarz zu der Lösung gegeben, gefolgt von katalytischer Reduktion bei 50ºC während 4 Stunden unter Normaldruck. Der Katalysator wurde abfiltriert und das Filtrat wurde unter reduziertem Druck konzentriert und ergab 5.0 g des öligen Produkts. Dieses ölige Produkt wurde in 60 ml destilliertem Wasser gelöst, und die Lösung wurde durch eine mit 50 ml CM- Sephadex C-25 (Na&spplus;) gepackte Säule gegeben. Nach Eluieren mit destilliertem Wasser wurde die das gewünschte Produkt enthaltende Fraktion gesammelt, unter reduziertem Druck zur Trockne eingedampft und ergab 3.5 g des trockenen Feststoffs. Um eine kleine Menge Verunreinigungen zu entfernen, wurde der resultierende Feststoff in 40 ml destilliertem Wasser gelöst, und die Lösung wurde durch eine mit 300 ml HP-20 (hergestellt von Mitsubishi Chemical Industry Co., Ltd.) gepackte Säule gegeben. Durch Eluieren mit destilliertem Wasser wurde die das gewünschte Produkt enthaltende Fraktion gesammelt und unter reduziertem Druck konzentriert. Das resultierende ölige Produkt wurde in 20 ml destilliertem Wasser gelöst. Unlösliche Bestandteile wurden abfiltriert; und das Filtrat wurde gefriergetrocknet und ergab 1.34 g (Ausbeute 44.42 %) des gewünschten Produktes.
NMR (D&sub2;O, externes TMS)
δ = 1.5-2.5 (m, 8H), 2.5-3.2 (m, 6H), 3.4-4.1 (m, 6H), 4.3-4.8 (m, H)
IR (KBr)
ν (cm&supmin;¹) = 3320, 2940, 1635, 1550, 1410, 1185, 1095
Wie im folgenden beschrieben wird, wurden die verschiedenen durch die allgemeine Formel (I) dargestellten gewünschten Verbindungen in einer ähnlichen Art den Verfahren in d) im obigen Beispiel unter Verwendung der entsprechenden durch die allgemeine Formel (II) dargestellten Verbindungen erhalten. Die durch die allgemeine Formel (II) dargestellten Verbindungen können erhalten werden durch sequentielle Bildung einer Peptidbindung in einer üblichen Weise, in einer Weise ähnlich zu den Verfahren a) bis c) im oben beschriebenen Beispiel unter Verwendung der entsprechenden Aminosäure.

Synthese der Verbindung Nr. 1

i) Benzyl-15-guanidino-6-(RS)-hydroxy-4,9-dioxo-3,8-diazapentadecanoat-hydrochlorid (entsprechend der Verbindung der Formel (II))
NMR (CD&sub3;OD)
δ = 0.9-2.0 (m, 8H), 2.0-2.7 (m, 4H), 2.8-3.5 (m, 4H), 3.8-4.4 (m, H), 4.0 (s, 2H), 5.1 (s, 2H), 7.37 (s, 5H)
IR (KBr)
ν (cm&supmin;¹) = 3330, 2940, 1745, 1650, 1545, 1195, 1090, 1030
Dünnschichtchromatographie (Chloroform : Methanol : 17 %-iges Ammoniakwasser = 6 : 2.5 : 0.5, V/V)
Rf = 0,28
ii) 15-Guanidino-6(RS)-hydroxy-4,9-diaxo-3,8-diazapentadecansäure (Verbindung Nr. 1)
NMR (D&sub2;O, externes TMS)
δ = 1.5-2.5 (m, 8H), 2.5-3.3 (m, 4H), 3.4-4.0 (m, 4H), 4.3-4.9 (m, h), 4.47 (s, 2H)
IR (KBr)
ν (cm&supmin;¹) = 3340, 2930, 1640, 1540, 1410, 1230

Synthese der Verbindung Nr. 3

i) Benzyl-17-guanidino-8-(RS)-hydroxy-6,11-diaxa-5,10-diazaheptadecanoat-hydrochlorid (entsprechend Verbindung der Formel (II))
NMR (CD&sub3;OD)
δ = 0.9-2.0 (m, 10H), 2.0-2.7 (m, 6H), 2.8-3.5 (m, 6H), 3.8-4.2 (m, H), 5.07 (s, 2H), 7.28 (s, 5H)
IR (KBr)
ν (cm&supmin;¹) = 3300, 2940, 2360, 1735, 1640, 1460, 1165 1090 Dünnschichtchromatographie (Chloroform : Methanol : 17 %-iges Ammoniakwasser = 6 : 2.5 : 0.5, V/V)
Rf = 0.63
ii) 17-Guanidino-8-hydroxy-6,11-dioxo-5,10-diazaheptadecansäure (Verbindung Nr. 3)
NMR (D&sub2;O, eternes TMS)
δ = 1.5-2.5 (m, 10H), 2.5-3.1 (m, 6H), 3.3-4.0 (m, 6H), 4.2-4.8 (m, H)
IR (KBr)
ν (cm&supmin;¹) = 3320, 3150, 2930, 2860, 1670, 1640, 1540, 1400, 1305, 1110

Synthese der Verbindung Nr. 5

i) Benzyl-14-guanidino-7-(RS)-hydroxy-5,10-dioxo-4,9-diazatetradecanoat-hydrochlorid (entsprechend Verbindung der Formel (II))
NMR (CD&sub3;OD, externes TMS)
δ = 1.5-2.1 (m, 4H), 2.2-3.6 (m, 6H), 3.1-3.9 (m, 6H), 3.9-4.5 (m, H), 5.26 (s, 2H), 7.48 (s, 5H)
IR (KBr)
ν (cm&supmin;¹) = 3300, 3180, 1730, 1650, 1540, 1435, 1400, 1250, 1170, 1075
Dünnschichtchromatographie (Chloroform : Methanol : 17 %-iges Ammoniakwasser = 6 : 2.5 : 0.5, V/V)
Rf = 0.48
ii) 14-Guanidino-7-(RS)-hydroxy-5,10-dioxo-4,9-diazatetradecansäure (Verbindung Nr. 5)
NMR (D&sub2;O, externes TMS)
δ = 1.7-2.5 (m, 4H), 2.6-3.4 (m, 6H), 3.4-4.2 (m, 6H), 4.3-4.9 (m, H)
IR (KBr)
ν (cm&supmin;¹) = 3340, 3260, 1720, 1645, 1555, 1540, 1445, 1410, 1250, 1185

Synthese der Verbindung Nr. 8

i) Benzyl-15-guanidino-7-(RS)-hydroxy-5,10-dioxo-4,9-diazapentadecanoat-hydrochlorid (entsprechend Verbindung der Formel (II))
NMR (CD&sub3;OD, externes TMS)
δ = 1.4-2.1 (m, 6H), 2.1-3.0 (m, 6H), 3.2-3.9 (m, 6H), 4.0-4.5 (m, H), 5.28 (s, 2H), 7.50 (s, 5H)
IR (KBr)
ν (cm&supmin;¹) = 3310, 3180, 2940, 1730, 1645, 1540, 1400, 1170
Dünnschichtchromatographie (Chloroform : Methanol : 17 %-iges Ammoniakwasser = 6 : 2.5 : 0.5, V/V)
Rf = 0.48
ii) 15-Guaninidino-7-(RS)-hydroxy-5,10-dioxo-4,9-diazapentadecansäure (Verbindung Nr. 8)
NMR (D&sub2;O; externes TMS)
δ = 1.6-2.5 (m, 6H), 2.6-3.5 (m, 6H), 3.6-4.4 (m, 6H), 4.5-5.1 (m, H)
IR (KBr)
ν (cm&supmin;¹) = 3330, 2940, 1645, 1540, 1415, 1360, 1180, 1075

Synthese der Verbindung Nr. 14

i) Benzyl-18-guanidino-7-(RS)-hydroxy-5,10-dioxo-4,9-diazaoctadecanoat-hydrochlorid (entsprechend Verbindung der Formel (II))
NMR (CD&sub3;OD, externes TMS)
δ = 1.1-2.0 (m, 12H), 2.1-3.0 (m, 6H), 3.0-3.8 (m, 6H), 3.8-4.4 (m, H), 5.20 (s, 2H), 7.38 (s, 5H)
IR (KBr)
ν (cm&supmin;¹) = 3310, 2930, 2860, 2330, 1730, 1635, 1460, 1170
Dünnschichtchromatographie (Chloroform : Methanol : 17 %-iges Ammoniakwasser = (6 : 2.5 : 0.5 (V/V)
Rf = 0.48
ii) 18-Guanidino-7-(RS)-hydroxy-5,10-dioxo-4,9-diaza-octadecansäure (Verbindung Nr. 14)
NMR (D&sub2;O, externes TMS)
δ = 1.5-2.6 (m, 12H), 2.7-3,6 (m, 6H), 3.7-4.5 (m, 6H), 4.6-5.2 (m, H)
IR (KBr)
ν (cm&supmin;¹) = 3300, 3160, 2920, 2850, 1720, 1640, 1555, 1410, 1375, 1350, 1180, 1095

Synthese der Verbindung Nr. 21

i) Benzyl-15-guanidino-7-(RS)-hydroxy-6,10-dioxo-5,9-diazapentadecanoat-hydrochlorid (entsprechend Verbindung der Formel (II))
NMR (CD&sub3;OD, externes TMS)
δ = 1.1-2.9 (m, 12H), 3.1-3.9 (m, 6H), 4.1-4.5 (t, H, J=6Hz), 5.27 (s, 2H), 7.47 (s, 5H)
IR (KBr)
ν (cm&supmin;¹) = 3310, 2940, 1725, 1645, 1540, 1450, 1255, 1165, 1110
Dünnschichtchromatographie (Chloroform : Methanol : 17 %-iges Ammoniakwasser 6 : 2.5 : 0.5, V/V)
Rf = 0.3
ii) 15-Guanidino-7-(RS)-hydroxy-6,10-dioxo-5,9-diazapentadecansäure (Verbindung Nr. 21)
NMR (D&sub2;O, externes TMS)
δ = 1.5-2.5 (m, 8H), 2.5-3.1 (m, 4H), 3.4-4.2 (m, 6H), 4.5-4.9 (t, H, J=SHz
IR (KBr)
ν (cm&supmin;¹) = 3320, 2940, 1710, 1645, 1540, 1435, 1240, 1170, 1110

Synthese der Verbindung Nr. 24

i) Benzyl-16-guanidino-7-(RS)-hydroxy-6,10-dioxo-5,9-diazahexadecanoat-hydrochlorid (entsprechend Verbindung der Formel (II))
NMR (CD&sub3;OD, externes TMS)
δ = 1.1-3.0 (m, 14H), 3,1-4.0 (m, 6H), 4.2-4-6 (t, H, J=5Hz), 5.40 (s, 2H), 7.57 (s, 5H)
IR (KBr)
ν (cm&supmin;¹) = 3310, 2930, 1730, 1650, 1535, 1450, 1255, 1165, 1110
Dünnschichtchromatographie (Chloroform : Methanol : 17 %-iges Ammoniakwasser = 6 : 2.5 : 0.5, V/V)
Rf = 0.49
ii) 16-Guanidino-7-(RS)-hydroxy-6,10-dioxo-5,9-diazahexadecansäure (Verbindung Nr. 24)
NMR (D&sub2;O, externes TMS)
δ = 1.5-2.5 (m, 10H), 2.5-3.1 (m, 4H), 3.4-4.2 (m, 6H), 4.5-4.9 (t, H, J=5Hz)
IR (KBr)
ν (cm&supmin;¹) = 3310, 3170, 2930, 2860, 1715, 1645, 1540, 1435, 1170, 1110

Synthese der Verbindung Nr. 36

i) Benzyl-16-guanidino-6-(RS)-hydroxy-5,10-dioxo-4,9-diazahexaecanoat-hydrochlorid (entsprechend Verbindung der Formel (II))
NMR (CD&sub3;OD, externes TMS)
δ = 1.2-3.0 (m, 14H), 3.1-3.9 (m, 6H), 4.0-4.4 (m, H), 5.23 (s, 2H), 7.43 (s, 5H)
IR (KBr)
ν (cm&supmin;¹) = 3320, 3170, 2940, 1730, 1645, 1535, 1450, 1255, 1170
Dünnschichtchromatographie (Chloroform : Methanol : 17 %-iges Ammoniakwasser = 6 : 2.5 : 0.5, V/V)
Rf = 0.34
ii) 16-Guanidino-6-(RS)-hydroxy-5,10-dioxo-4,9-diazahexadecansäure (Verbindung Nr. 36)
NMR (D&sub2;O, externes TMS)
δ = 1.2-3.2 (m, 14H), 3.4-4.2 (m, 6H), 4.4-4.8 (m, H)
IR (KBr)
ν (cm&supmin;¹) = 3320, 2930, 2860, 1640, 1540, 1440, 1405, 1270, 1190, 1110, 1065

Beispiel 2

Synthese von 16-Guanidino-7-(S)-hydroxy-5,10-dioxo-4,9-diazahexadecansäure (S-Form der Verbindung Nr. 2)

a) Synthese von Benzyl-9-t-butyloxycarbonyl-7-(S)-hydroxy- 5-oxo-4,9-diazaanonanoat

In 70 ml Dichlormethan wurden 1.76 g (8.02 mMol) γ-N-t-Butyloxycarbonyl-β-(S)-hydroxybutansäure und 1.84 g (12.02 mMol) N-Hydroxybenzotriazol gelöst. Die Lösung wurde mit Eis gekühlt und 2.48 g (12.02 mMol) N,N'-Dicyclohexylcarbodiimid wurden zu der Lösung gegeben. Die Mischung wurde während 15 Minuten unter Eiskühlung umgesetzt. Dann wurde eine Lösung von 2.82 g (8.02 mMol) β-Alaninbenzylester-p-toluolsulfonsäuresalz und 0.89 g (8.79 mMol) Triethylamin in dichlormethan unter Eiskühlung zu der Lösung gegeben. Die Temperatur wurde dann auf Raumtemperatur erhöht und die Reaktion wurde während einiger Stunden durchgeführt. Unlösliche Bestandteile wurden abfiltriert und das Filtrat wurde unter reduziertem Druck konzentriert. Der ölige Rückstand wurde in 130 ml Ethylacetat gelöst, gefolgt von Waschen mit nacheinander destilliertem Wasser, 5 %-iger Phosphorsäure, 5 %-iger wäßriger Natriumcarbonatlösung und dann gesättigter wäßriger Natriumchloridlösung. Die organische Phase wurde über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet. Die überstehende Flüssigkeit wurde unter reduziertem Druck konzentriert und ergab 4.5 g leicht gelbes öliges Produkt. Das ölige Produkt wurde der Säulenchromatographie unter Verwendung von Kieselgel 60 (hergestellt von Merck Inc.) unterworfen, und die Entwicklung wurde mit einer Lösungsmittelmischung aus Chloroform- Methanol (30 : 1, v/v) durchgeführt und ergab 3.03 g (Ausbeute 100) des öligen Produkts.
NMR (CD&sub3;OD)
δ = 1.47 (s, 9H), 2.1-2.5 (d, 2H, J=6Hz), 2.4-2.8 (t, 2H, J=6Hz), 2.9-3,3 (d, 2H, J=6Hz), 3.2-3.7 (t, 2H, J=6Hz), 3.8-4.3 (g, H, J=6Hz), 5.15 (s, 2H), 7.37 (s, 5H)
Dünnschichtchromatographie (Chloroform : Methanol = 10 : 1, v/v)
Rf = 0.45

b) Synthese von Benzyl-8-amino-7-(S)-hydroxy-5-oxo-4- azaoctanoat-hydrochlorid

Nachdem 3.04 g (8.00 mMol) Benzyl-9-t-butyl-oxycarbonyl-7- (S)-hydroxy-5-oxo-4,9-diazanonanoat in 20 ml Dichlormethan gelöst worden waren, wurden 10 ml 4 N Salzsäure-Dioxan-Lösung unter Eiskühlung zu der Lösung gegeben. Die Temperatur wurde auf Raumtemperatur erhöht und die Mischung wurde während 3 Stunden umgesetzt. Die Reaktionslösung wurde unter reduziertem Druck konzentriert. Der resultierende weiße Rückstand wurde der Dekantierung mit n-Hexan und Ether unterworfen. Konzentrieren unter reduziertem Druck ergab 2.53 g (Ausbeute 100 %) des öligen Produkts.
Dünnschichtchromatographie (Chloroform : Methanol : 17 %-iges Ammoniakwasser = 6 : 2.5 : 0.5, v/v)
Rf = 0.35

c) Synthese von Benzyl-16-guanidino-7-(S)-hydroxy-5,10-dioxo-4,9-diazahexadecanoat-hydrochlorid

Nachdem 1.97 g (8.81 mMol) 7-Guanidino-heptanoat-hydrochlorid in 40 ml Dimethylformamid gelöst worden waren, wurden 1.22 g (10.60 mMol) N-Hydroxysuccinimid und 2.20 g (10.60 mMol) N,N'-Dicyclohexylcarbodiimid unter Eiskühlung zu der Lösung gegeben. Die Mischung wurde über Nacht bei Raumtemperatur umgesetzt. Die Niederschläge wurden abfiltriert und das Filtrat wurde als solches für die nachfolgende Reaktion verwendet.
Nachdem 2.53 g (8.00 mMol) des öligen Benzyl-8-amino-7-(S)- hydroxy-5-oxo-4-azaoctanoat-hydrochlorids in 40 ml Dimethylformamid gelöst worden waren, wurden 0.81 g (8.00 mMol) Triethylamin unter Eiskühlung zu der Lösung gegeben. Dann wurde die vorstehend erwähnte Lösung von 7-Guanidinoheptanoat-hydrochlorid-N-hydroxysuccinimidester in Dimethylformamid zu der Mischung gegeben, gefolgt von Umsetzung während 3 Stunden unter Eiskühlung. Die Reaktionslösung wurde abfiltriert und das Filtrat wurde unter reduzierendein Druck konzentriert. Nach 2-maligem Dekantieren des resultierenden öligen Rückstands mit 100 ml n-Hexan wurde das System unter reduziertem Druck konzentriert. Das resultierende ölige Produkt wurde der Säulenchromatographie unter Verwendung von Kieselgel 60 (hergestellt von Merck Inc.) unterworfen, und die Entwicklung wurde mit einer Lösungsmittelmischung aus Chloroform-Methanol-17 %-igem Ammoniakwasser (6 : 2.5 : 0.5, v/v) durchgeführt und ergab 2.6 g (Ausbeute 66.83 %) des öligen Produkts.
NMR (CD&sub3;OD)
δ = 0.9-2.1 (m, 8H), 2.1-3.0 (m, 6H), 3.0-3.9 (m, 6H), 3.9-4.4 (m, H), 5.23 (s, 2H), 7.46 (S, 5H)
Dünnschichtchromatographie (Chloroform . Methanol : 17 %-iges Ammoniakwasser = 6 : 2.5 0.5, v/v)
Rf = 0.34

d) Synthese von 16-Guanidino-7-(S)-hydroxy-5,10-dioxo-4,9- diazahexadecansäure

Nachdem 2.6 g (5.35 mMol) Benzyl-16-guanidino-7-(S)-hydroxy- 5,10-dioxo-4,9-diazahexadecanoat in 40 ml Methanol gelöst worden waren, wurden 10 ml Essigsäure und 0.4 g Palladium- Schwarz zu der Lösung gegeben, gefolgt von katalytischer Reduktion bei 50ºC während 4 Stunden unter Normaldruck. Der Katalysator wurde abfiltriert und das Filtrat wurde unter reduzierendem Druck konzentriert und ergab 2.8 g des öligen Produkts.
Dieses ölige Produkt wurde in 40 ml destilliertem Wasser gelöst, und die Lösung wurde durch eine mit 300 ml CM- Sephadex C-25 (Na&spplus;) gepackte Säule gegeben. Nach Eluieren mit destilliertem Wasser wurde die das gewünschte Produkt enthaltende Fraktion gesammelt, unter reduziertem Druck zur Trockene eingedampft und ergab 1.8 g des trockenen Feststoffs. Um eine kleine Menge Verunreinigungen zu entfernen, wurde der resultierende trockene Feststoff in 30 ml destilliertem Wasser gelöst und die Lösung durch eine mit 110 ml HP-20 (hergestellt von Mitsubishi Chemical Industry Co., Ltd.) gepackte Säule gegeben. Durch Eluieren mit destilliertem Wasser wurde die das gewünschte Produkt enthaltende Fraktion gesammelt und unter reduziertein Druck konzentriert. Das resultierende ölige Produkt wurde in 20 ml destilliertem Wasser gelöst. Unlösliche Bestandteile wurden abfiltriert, und das Filtrat wurde gefriergetrocknet und ergab 1.25 g (Ausbeute 65.10 %) des gewünschten Produkts.
NMR (D&sub2;O, externes TMS)
δ = 1.4-2.4 (m, 8H), 2.5-3.1 (m, 6H), 3.3-4.1 (m, 6H), 4.2-4.7 (m, H)
IR (KBr)
ν (cm&supmin;¹) = 3330, 2940, 2870, 1640, 1545, 1400, 1355, 1170, 1090
[α]20D -3.1º (c =1.00, H&sub2;O)

Beispiel 3

Synthese von 16-Guanidino-7-(R)-hydroxy-5,10-dioxo-4,9-diazahexadecansäure (R-Form der Verbindung Nr. 2)

Das Verfahren wurde auf eine Weise ausgeführt ähnlich wie Beispiel 2. Die physikalischen Eigenschaften sind unten angegeben.

a) Benzyl-16-guanidino-7-(R)-hydroxy-5,10-dioxo-4,9-diazanonaoat-hydrochlorid

NMR (CD&sub3;OD)
δ = 0.9-2.1 (m, 8H), 2.1-3.0 (m, 6H), 3.0-3.9 (m, 6H), 3.9-4.4 (m, H), 5.23 (s, 2H), 7.46 (s, 5H)
Dünnschichtchromatographie (Chloroform : Methanol : 17 %-iges Ammoniakwasser = 6 : 2.5 : 0.5, v/v)
Rf = 0.34

b) 16-Guanidino-7-(R)-hydroxy-5,10-dioxo-4,9-diazahexadecansäure

NMR (D&sub2;O, externes TMS)
δ = 1.4-2.4 (m, 8H), 2.5-3.2 (m, 6H), 3.3-4.1 (m, 6H), 4.2-4.8 (m, H)
IR (KBr)
ν (cm&supmin;¹) = 3330, 2950, 2870, 1650, 1545, 1400, 1190
[α]20D + 1.6º (c = 1.00, H&sub2;O)

Claims

1. Durch die allgemeine Formel (I) dargestelltes neues Spergualin-Derivat:

worin X -(CH&sub2;)&sub1;&submin;&sub5;- oder eine Phenylengruppe darstellt, die substituiert sein kann; m 0, 1 oder 2 darstellt; n 1 oder 2 darstellt, und R&sub1; -(CH&sub2;)&sub1;&submin;&sub3;-COOH darstellt; und ein pharmakologisch verträgliches Salz davon.

2. Ein Spergualin-Derivat entsprechend Anspruch 1, worin X -(CH&sub2;)&sub3;- oder -(CH&sub2;)&sub5;- ist; m 0 oder 1 ist; n 1 ist; und R&sub1; -(CH&sub2;)&sub2;-COOH oder -(CH&sub2;)&sub3;-COOH ist.

3. Ein Spergualin-Derivat nach Anspruch 2, worin X -(CH&sub2;)&sub3;- ist.

4. Ein Spergualin-Derivat entsprechend Anspruch 2, worin die sterische Konfiguration des asymmetrischen Kohlenstoffatoms die RS-Form oder S-Form ist.

5. Ein durch die folgende Formel dargestelltes Spergualinderivat:

oder ein pharmakologisch verträgliches Salz davon.

6. Ein Spergualin-Derivat entsprechend Anspruch 5, worin die sterische Konfiguration des asymmetrischen Kohlenstoffatoms S-Form ist.

7. Pharmazeutische Zusammensetzung, umfassend als aktiven Bestandteil ein neues Spergualin-Derivat nach Anspruch 1 oder ein pharmazeutisch verträgliches Salz davon zusammen mit einem pharmazeutisch verträglichen Träger.

8. Eine pharmazeutische Zusammensetzung entsprechend Anspruch 7, die für Immunopotenzierung ist.

9. Pharmazeutische Zusammensetzung, umfassend als aktiven Bestandteil ein Spergualin-Derivat entsprechend Anspruch 5 oder ein pharmazeutisch verträgliches Salz davon gemeinsam mit einein pharmazeutisch verträglichen Träger.

10. Pharmazeutische Zusammensetzung entsprechend Anspruch 9, die für Immunopentenzierung ist.

11. Verwendung eines neuen Spergualin-Derivats entsprechend Anspruch 1 als ein pharmazeutisch aktiver Bestandteil

12. Verwendung eines neuen Spergualin-Derivats oder pharmakologisch verträglichen Salzes davon entsprechend Anspruch 1 für die Herstellung einer pharmazeutischen Zusammensetzung zur Immunopotenzierung.