JPH0794424B2

JPH0794424B2 - 新スパガリン関連化合物およびその製造法

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Publication number: JPH0794424B2
Application number: JP62244260A
Authority: JP
Inventors: 富雄竹内; 次男富吉; 哲之才野; 克俊高橋; 輝也中村
Original assignee: Microbial Chemistry Research Foundation
Current assignee: Microbial Chemistry Research Foundation
Priority date: 1987-09-30
Filing date: 1987-09-30
Publication date: 1995-10-11
Anticipated expiration: 2010-10-11
Also published as: EP0309971A3; EP0309971A2; JPS6490164A

Description

【発明の詳細な説明】〔産業上の利用分野〕本発明の化合物は免疫調節作用を有し、医薬として期待
されるものである。

〔従来の技術〕

スパガリンは発明者らの一人である梅沢らにより発見さ
れた抗生物質であり、（特開昭57−48957号参照）、そ
の後、同発明者らにより関連化合物の合成が数多く行わ
れてきた。（特開昭59−42356号、同60−185758号など
参照）。

〔発明が解決しようとする問題点〕

従来免疫調節剤としては免疫賦活剤、免疫抑制剤など種
々知られているが満足すべきものはなく新しい免疫調節
剤が望まれている。

〔問題点を解決するための手段〕

本発明者らは種々研究の結果、一般式〔Ｉ〕（式中Ｘは−（CH₂）_３〜５−又はを示し、Ｒは−Ｈ又は−CH₂−OH,R₁及びR₂はアミノ酸も
しくはペプチドのカルボキシル基より水酸基を除いた残
基を示す。但しR₁およびR₂は同時にを示さない。）で表わされる新規なスパガリン関連化合
物又はその薬理学的に許容される塩が優れた免疫調節作
用、例えば免疫増強作用を有することを見出し、本発明
を完成した。

本発明の一般式（Ｉ）において、R₁及びR₂としては例え
ば下記アミノ酸もしくは下記ペプチドのカルボキシル基
より水酸基を除いた残基があげられる。なおアミノ酸残
基の立体配置はグリシン、β−アラニンおよびγ−アミ
ノ酪酸を除き、L,DあるいはDL型を示す。

（１）アミノ酸アラニン、アルギニン、オルニチン、アスパラギン酸、
アスパラギン、システイン、シスチン、グルタミン酸、
グルタミン、ピログルタミン酸、グリシン、ヒスチジ
ン、リジン、プロリン、ヒドロキシプロリン、イソロイ
シン、ロイシン、メチオニン、フエニルアラニン、フエ
ニル置換フエニルアラニン、セリン、スレオニン、トリ
プトフアン、ホモセリン、チロシン、バリン、フエニル
グリシン、パラヒドロキシフエニルグリシン、４−ヒド
ロキシメチル−３−ヒドロキシフエニルグリシン、β−
アラニン、γ−アミノ酪酸、３−アミノ−２−ヒドロキ
シ−４−フエニル酪酸等（２）ペプチド上記（１）のアミノ酸が単独あるいは組みあわさって２
〜３個のアミノ酸が縮合したジあるいはトリペプチドな
どが好ましい。例えばアラニルアラニン、ロイシルロイ
シン、バリルバリン、フエニルアラニルフエニルアラニ
ン、チロシルチロシン、フエニルグリシルフエニルグリ
シン、グリシルグリシン、イソロイシルイソロイシン、
ロイシルフエニルアラニン、フエニルアラニルロイシ
ン、ロイシルフエニルグリシン、フエニルグリシルロイ
シン、グリシルグリシルグリシン、フエニルグリシルフ
エニルグルシルフエニルグリシン、フエニルアラニルフ
エニルアラニルフエニルアラニンおよびロイシルロイシ
ルロイシン等があげられる。

好ましいアミノ酸もしくはペプチドとしてはフエニルグ
リシン、フエニルアラニン、ロイシン、アスパラギン
酸、トリプトフアン、アラニン及びこれらのアミノ酸が
２〜３個縮合したペプチド等である。

R₁およびR₂の代表的な基を示すと下記の通りである。

式（式中ｎは０又は1,X₁は−Ｈ又は−OH,X₂は−Ｈ又は−C
H₂OHを示す。）で示される基、式（式中ｍは０〜４の整数、X₃は−H,−COOH,−OH,−NH₂
又は−CONH₂,X₄は−Ｈ又は−NH₂を示し、少なくともX₃
及びX₄のいずれか一方は−NH₂を示す。）で示される
基、式Ｈ−（Ａ）ｙ−（式中ｙは１又は２、Ａはを示し、ｙ＝２のとき、両者はペプチド結合しているも
のとする。）で示される基または、式で示される基などである。

一般式〔Ｉ〕の化合物の中で好ましい化合物としては一
般式〔Ｉ〕におけるＸがＲが−CH₂OH,R₁およびR₂がそれぞれ同一もしくは異なっ
てもよくである化合物又はその薬理学的に許容される塩、などが
あげられる。

一般式（Ｉ）で表わされる新規なスパガリン関連化合物
は酸と塩を形成するが、塩を形成するための酸として
は、非毒性のものであれば無機酸、有機酸のいずれでも
よい。無機酸としては特に制限はないが、塩酸、硫酸、
硝酸、リン酸などが好ましく、有機酸も特に制限はない
が、酢酸、プロピオン酸、コハク酸、フマル酸、マレイ
ン酸、リンゴ酸、酒石酸、グルタル酸、クエン酸、ベン
ゼンスルホン酸、トルエンスルホン酸、メタンスルホン
酸、エタンスルホン酸、プロパンスルホン酸、アスパラ
ギン酸、グルタミン酸などが好ましい。

一般式〔Ｉ〕の化合物の例示本発明の一般式〔Ｉ〕の化合物としては例えば次の第一
表の化合物があげられる。

本発明の一般式〔Ｉ〕の化合物は次のようにして合成さ
れる。

一般式〔II〕〔式中Ｘは−（CH₂）_３〜５−又はを示し、R₃は−Ｈ又は−CO₂−Ｏ−Ｙ（ここでＹは−Ｈ
又は水酸基の保護基を示す。）、R₄及びR₅は保護された
アミノ基を有するアミノ酸もしくはペプチドのカルボキ
シル基より水酸基を除いた残基（これらの残基は側鎖が
保護されていてもよい。）を示す。但しR₄およびR₅は同
時にＮ−保護フエニルグリシル基を示さない。）〕で表わされる保護基を有する化合物から保護基を除去す
ることによって得られる。

保護基の除去は還元、酸分解、加水分解等の方法によっ
て行うことができる。

反応は通常不活性溶媒中で−60℃〜溶媒の沸点、好まし
くは−50℃〜100℃程度で行われる。不活性溶媒として
は、水および親水性有機溶媒例えばメタノール、エタノ
ールなどの低級アルコール、アセトンおよびメチルエチ
ルケトンなどのケトン、ジメチルホルムアミドおよびジ
メチルアセトアミドなどのアミド類、テトラヒドロフラ
ン、ジオキサンなどの環状エーテル、酢酸、トリフルオ
ロ酢酸などの低級脂肪酸、液体アンモニア、液体フツ化
水素などである。

保護基を除去した反応液から一般式（Ｉ）の新規なスパ
ガリン関連化合物の単離は、例えばパラジウム黒での接
触還元により保護基を除去した場合は触媒を別し、
液を減圧濃縮し、残渣をCM−セフアデツクス（Na⁺）
およびセフアデツクスLH−20を用いる公知の精製法
（T.Takeuchi et.al.,J.Antibiotics,34,1619（1981）
参照）で精製することにより、また、トリフルオロ酢酸
により保護基を除去した場合は反応液を減圧で濃縮し、
残渣を上述と同様の公知の精製法で精製することにより
単離することができる。

上記の精製法により、一般式（Ｉ）の新規なスパガリン
関連化合物は塩酸塩として得られるが、他の塩に導く場
合は、例えば塩酸塩を水に溶かし、その水溶液を強塩基
性イオン交換樹脂に通し、目的物を含むフラクシヨンを
集め、目的とする酸、それを含む水溶液またはメタノー
ル、エタノール、アセトン、テトラヒドロフラン、ジオ
キサンのような親水性有機溶媒溶液を加えて中和し、中
和液を減圧乾固するか、有機溶媒を含む場合は有機溶媒
を減圧留去後凍結乾燥することにより行うか、また一般
式（Ｉ）の化合物の塩酸塩に水酸化銀または酸化銀水溶
液を加えて塩酸を中和し、不溶の塩化銀を別後液に
所望の酸を加えて塩とし、凍結乾燥することにより行わ
れる。

上記の方法により得られる目的物は、処理条件により水
和物を有する場合がある。

本発明の原料である一般式〔II〕の保護されたスパガリ
ン関連化合物は次のようにして合成される。

（ａ）R₄およびR₅がともにＮ−保護アミノ酸残基又はＮ
−の保護ペプチド残基である化合物の合成一般式〔III〕（式中▲Ｒ^′ _４▼および▲Ｒ^″ _５▼はともにＮ−保護ア
ミノ酸残基又はＮ−保護ペプチド残基を表わす。）で表
わされる化合物に一般式〔IV〕（式中P₂は保護基を示し、R₃は前記と同じ意味を表わ
す。）で表わされる保護アミノ酸又はその反応性誘導体を縮合
させ、一般式〔Ｖ〕（式中P₂,R₃,▲Ｒ^′ _４▼および▲Ｒ^″ _５▼は前記と同じ
意味を表わす。）の化合物を得、保護基P₂を選択的に除去した後一般式〔VI〕（式中Ｘは前記と同じ意味を表わす。）で表わされるω−グアニジノ脂肪酸又はその反応性誘導
体を縮合させることにより、一般式〔II〕においてR₄お
よびR₅がともにＮ−保護アミノ酸残基又はＮ−保護ペプ
チド残基である化合物を得ることができる。

なお一般式〔III〕の化合物は常法に従って、次のよう
にして得られる。例えば、一般式〔VII〕 P₁−NH−（CH₂）_４−NH−（CH₂）₃NH₂ （式中P₁は保護基を表わす。）で表わされるＮ−保護スペルミジン１モルに対し、一般式〔VIII〕 ▲Ｒ^″ _５▼−OH （▲Ｒ^″ _５▼は前記と同じ意味を表わす。）Ｎ−保護アミノ酸と1,3−チアゾリジン−２−チオンと
から得られる反応性誘導体１モルの割合で縮合させた
後、次いで一般式〔IX〕 ▲Ｒ^′ _４▼−OH （式中▲Ｒ^′ _４▼は保護されたアミノ基を有するアミノ
酸（側鎖が保護されていてもよい。）から−OHを除いた
残基を示す。）で表わされるＮ−保護アミノ酸を反応させ、次いで保護
基P₁を選択的に除去することによって得ることができ
る。

また▲Ｒ^′ _４▼および▲Ｒ^″ _５▼が同一であるときは、
上記の方法によっても得られるが、一般式〔VII〕のＮ
−保護スペルミジン１モルに対し、２モル以上の一般式
〔VIII〕又は一般式〔IX〕の保護アミノ酸もしくはその
反応性誘導体を反応させ、次いで保護基P₁を選択的に除
去することによって得られる。

また一般式〔VII〕のＮ−保護スペルミジンは一般式
〔Ｘ〕 P₁−NH（CH₂）₄NH₂ （式中P₁は前記と同じ意味を表わす。）で表わされる化合物とアクリロニトリルを反応させたの
ちニトリル基を還元することにより得ることができる。

上記（ａ）における縮合は、ペプチド結合に使用される
通常の方法が使用できる。

即ち、ジシクロヘキシルキルボジイミド、１−エチル−
８−（３−ジメチルアミノプロピル）−カルボジイミド
などを用いるカルボジイミド法、ヒドラジドからのアジ
ド法、クロル炭酸エチル、クロル炭酸イソブチルなどを
用いる混合酸無水物法、シアノメチルエステル、ビニル
エステル、置換および未置換フエニルエステル、チオフ
エニルエステル、ヒドロキシコハク酸イミドエステルな
どの活性エステル法、アセトキシム、シクロヘキサノン
オキシムなどを用いるＯ−アシルヒドロキシルアミン誘
導体法、カルボニルジイミダゾールなどを用いるＮ−ア
シル化合物法および1,3−チアゾリジン−２−チオンを
用いるカルボン酸活性化法などがあげられる。また縮合
に用いる溶媒としては通常のペプチド縮合に用いられる
溶媒を使用できる。たとえばジエチルエーテル、テトラ
ヒドロフラン、ジオキサンなどのエーテル類、酢酸エチ
ルなどのエステル類、アセトン、メチルエチルケトンな
どのケトン類、塩化メチレン、クロロホルムなどのハロ
ゲン化炭化水素類、ジメチルホルムアミド、ジメチルア
セトアミド、などのアミド類、アセトニトリルなどのニ
トリル類などを単独であるいは水と混ざる溶媒の場合は
水との混合溶媒として使用できる。

本発明で使用できるアミノ基の保護基としてはベンジル
オキシカルボニル基、ｐ−メトキシベンシルオキシカル
ボニル基のような置換ベンジルオキシカルボニル基、ｔ
−ブチルオキシカルボニル基、ｔ−アミルオキシカルボ
ニル基、ホルミル基、トリチル基、Ｏ−ニトロフエニル
スルフエニル基などがあげられる。

また、アミノ酸側鎖の保護基としてのカルボキシル基の
保護基としては低級アルキル基、ｔ−ブチル基、ベンジ
ル基、置換ベンジル基、水酸基の保護基としてｔ−ブチ
ル、ベンジル基、メルカプト基の保護基としてベンジル
基、ｐ−メトキシベンジン基、イミダゾール基の保護基
としてベンジルオキシカルボニル基、ベンジル基、トシ
ル基およびグアニジン基の保護基としてニトロ基、トシ
ル基、ｔ−ブチルオキシカルボニル基等があげられるが
必ずしもこれらに限定されるものではない。

原料として使用される一般式〔II〕の代表的化合物を第
２表に示す。第２表中のアミノ酸残基、保護基および保
護基を含むアミノ酸残基の略号は以下の通りである。な
おアミノ酸残基の立体配置はグリシン、β−アラニン、
γ−アミノ酪酸を除きL,DあるいはDL型を示す。

アミノ酸残基 Ala: アラニル残基 Leu: ロイシル残基 Phe: フエニルアラニル残基 Asp: アスパルチル残基 Asn: アスパラギニル残基 Lys: リジル残基 PhG: フエニルグリシル残基 Pro: プロリル残基 Tyr: チロシル残基 Ser: セリル残基 β−Ala:ベータアラニル残基 AHPA: ３−アミノ−２−ヒドロキシ−４−フエニルブ
チリル残基 Gly: グリシル残基 Glu ：グルタミル残基 γ−ABA: γ−アミノブタノイル残基保護基Ｚ：ベンジルオキシカルボニル基 Boc ：ｔ−ブチルオキシカルボニル基 pMz ：パラメトキシベンジルオキシカルボニル基 Aoc ：ｔ−アミルオキシカルボニル基保護基を含むアミノ酸残基 Asp（OBz1）： β−ベンジルアスパルチル Asp（OBu^t）： β−ｔ−ブチルアスパルチル Ser（Bz1） : Ｏ−ベンジルセリル Ser（Bu^t） : Ｏ−ｔ−ブチルセリル Tyr（Bu^t） : Ｏ−ｔ−ブチルチロシル以上のようにして得られた本発明化合物を医薬として使
用する場合、必要に応じ医薬用担体とともに常法により
製剤化し、経口投与または非経口投与すればよい。

注射液の場合には、通常0.1乃至30重量％、好ましくは
１乃至10重量％の有効成分を含むようにすることがよ
い。経口投与する場合には、錠剤、カプセル剤、粉剤、
顆粒剤、液剤、ドライシロツプ剤等の形態で用いられ
る。カプセル、顆粒、粉剤は一般に５乃至100重量％、
好ましくは25乃至100重量％の有効成分を含む。

投与量は、患者の年齢、体重、症状、治療目的等により
決定されるが治療量は一般に、非経口投与で１乃至100m
g/Kg/日、経口投与で５〜500mg/Kg/日である。

〔作用〕

次に本発明化合物の生理活性を実験例により示す。

1. 実験方法（ａ）抗体産生増強作用 CDF₁−SLC系雌性マウス（１群５匹）に羊赤血球（SRB
C）１×10⁸/0.2mlをi.V.感作する。本発明化合物を生理
食塩水で各種濃度に希釈し、感作した翌日から１日１回
体重10g当り0.1ml（0.1ml/10g/1日）ずつ３日間連続投
与する。対照群には生理食塩水を投与する。

感作後４日目にマウスを屠殺し脾細胞中の抗SRBC抗体産
生細胞（plague−formingcell,PFC）数を測定し、脾細
胞10⁶個あたりのPFC数を算出した。本発明化合物の効果
は対照群のPFC数に対する本発明の化合物投与群のPFC数
の増強率（％）で表わした。

2. 実験結果本発明化合物の代表例の抗体産生増強作用を第３表に示
す。対照物質としては生理食塩液を用いた。

以上の試験例から明らかなように、本発明化合物は優れ
た免疫増強活性を有し、各種感染症の治療並びに予防剤
もしくは抗腫瘍剤などの医薬として期待されるものであ
る。

次に実施例により本発明を具体的に説明する。なお、実
施例中に記載した薄層クロマトグラフイー（TLC）のRf
値はシリカゲル60F₂₅₄プレート（厚さ0.25mm;メルク社
製）を用い、記載の展開溶媒で約8cm展開し、原点から
目的物のスポツトの中心までの距離を原点から展開溶媒
の先端までの距離で割って算出した。検出はUV（2537
Å）、ニンヒドリン及び坂口試薬を用いて行った。

実施例１ 10−｛Ｎ−〔４−（４−グアニジノフエニル）ブタノイ
ル〕−Ｌ−セリル｝−1,5−ジ−Ｌ−ロイシル−1,5,10
−トリアザデカン・３塩酸塩（化合物No.1）油状の10−
｛Ｎ−〔４−（４−グアニジノフエニル）ブタノイル〕
−Ｏ−ベンジル−Ｌ−セリル｝−1,5−ジ−（Ｎ−ベン
ジルオキシカルボニル−Ｌ−ロイシル）−1,5,10−トリ
アザデカン・塩酸塩5.92g（5.24mmol）をメタノール50m
lおよび酢酸30mlの混液に溶かし、パラジウム黒0.6gを
加えて55℃に加熱し、常圧で６時間接触還元を行う。反
応後触媒を別し、液を減圧濃縮し、油状の残渣をア
セトン50mlに懸濁させ、上澄みを２回デカンテーシヨン
する。

次いで減圧濃縮すると白色結晶4.8gが得られる。この白
色結晶を蒸留水70mlに溶かし、CM−セフアデツクス
（Na⁺）500mlを充填したカラムに付し、蒸留水2.5
と1.3M塩化ナトリウム水溶液2.5との間のグラジエン
ト溶出法で溶出する。目的物を含むフラクシヨンを集め
減圧で濃縮乾固し、乾固物にメタノールを加えて不溶物
の塩化ナトリウムを別する。得られた油状物からの目
的物の精製は、次のようにして行う。残存する少量の塩
化ナトリウムを除去するために得られた油状物をメタノ
ール30mlに溶かし、セフアデツクスLH−20 210mlを
充填したカラムに付し、メタノールで溶出し、目的物を
含むフラクシヨンを集め、減圧で濃縮する。さらに少量
の不純物を除去するために得られた油状物を蒸留水20ml
に溶かし三菱化成HP−20180mlを充填したカラムに付
す。蒸留水270mlで洗滌したのち、次いで20〜30％メタ
ノール溶液で溶出する。目的物を含むフラクシヨンを集
め、減圧で濃縮する。得られた油状物を蒸留水12mlに溶
かし、不溶物を別後凍結乾燥すると目的物1.73g（収
率37.4％）が得られる。

NMR（D₂O,external TMS） δ＝1.2〜1.8（bd,12H,J＝5Hz）,1.8〜3.4（m,18H）,3.
4〜4.1（m,8H）,4.1〜4.4（d,2H,J＝6Hz）,4.2〜5.0
（m,3H）,7.5〜8.0（m,4H） IR（KBr） ν（cm^-1）＝3240,2940,1635,1510,1460,1365,1255,117
0,1125,1060. TLC（クロロホルム：メタノール:17％アンモニア水＝6:
2.5:0.5v/v） Rf＝0.26 〔α▲〕²⁰ _D▼−4.9^o（Ｃ＝1.0,H₂O）以下、一般式〔II〕で表わされる化合物を実施例１と同
様に処理することによって一般式〔Ｉ〕で表わされる化
合物を得ることができる。

ただし、一般式〔II〕で表わされる化合物の１位のアミ
ノ酸のアミノ基の保護基としてベンジルオキシカルボニ
ル基の代わりにtert−ブチルオキシカルボニル基、ｐ−
メトキシベンジルオキシカルボニル基あるいは、ｔ−ア
ミルオキシカルボニル基、またカルボキシル基あるいは
ヒドロキシル基の保護基としてはtert−ブチル基にて実
施例を行ったが、その場合の処理法としては接触還元の
代わりにトリフルオロ酢酸で処理した後、あるいはベン
ジルオキシカルボニル基とtert−ブチル基の両方の保護
基を有している一般式〔II〕の化合物に対しては、まず
接触還元を行い、ついでトリフルオロ酢酸で処理した
後、実施例１と同様に処理することによって目的物を得
ることができる。

以下、次表に示す通り一般式〔II〕の化合物を用い一般
式〔Ｉ〕で表わされる化合物が得られた。

なお、一般式〔II〕の化合物は次に示す参考例もしくは
それに準じて合成した。

参考例１ 10−｛Ｎ−〔４−（４−グアニジノフエニル）ブタノイ
ル〕−Ｏ−ベンジル−Ｌ−セリル｝−1.5−ジ−（Ｎ−
ベンジルオキシカルボニル−Ｌ−ロイシル）−1,5,10ト
リアザデカン・塩酸塩の合成（１） 10−tert−ブチルオキシカルボニル−1,5,10−
トリアザデカンモノ−Ｎ−tert−ブチルオキシカルボニル−1.4−ブタ
ンジアミン（特開昭57−192347号参照）18.9g（100mmo
l）をクロロホルム150mlに溶かし、氷冷下アクリロニト
リル5.57g（105mmol）を加え、室温で３日間反応させ
る。反応液を減圧濃縮すると油状物23.4gが得られる。

この油状物23.4gをアンモニア飽和エタノール260mlに溶
かしラネーニツケル20gを加え、室温にて60気圧で５時
間水素添加する。

反応後触媒を別し、液を減圧濃縮すると、油状の目
的物23.7g（収率96.7％）が得られる。

NMR（D₂O,external TMS） δ＝1.6〜2.5（m,6H）,1.9（s,9H）,2.7〜3.3（m,6H）,
3.4〜3.8（m,3H）．（２） 10−tert−ブチルオキシカルボニル−1.5−ジ
−（Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−Ｌ−ロイシル）−
1,5,10−トリアザデカン油状の10−tert−ブチルオキシ
カルボニル−1,5,10−トリアザデカン4.0g（16.30mmo
l）とＮ−ベンジルオキシカルボニル−Ｌ−ロイシン8.6
5g（32.6mmol）をジクロロメタン50mlに溶かし、氷冷下
１−エチル−３−（３′−ジメチルアミノプロピル）−
カルボジイミド・塩酸塩6.87g（35.86mmol）を加え、室
温で一夜反応させる。反応液を減圧濃縮すると油状物が
得られる。得られた油状物を酢酸エチル200mlに溶か
し、５％炭酸ナトリウム水溶液、飽和食塩水で順次洗浄
する。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧濃縮
すると油状物10.0gが得られる。

得られた油状物はシリカゲル60（メルク社製）によりカ
ラムクロマトグラフイーに付し、クロロホルム−アセト
ン（10:1v/v）の混液で展開すると油状物6.9g（収率57.
2％）が得られる。

NMR（CDCl₃） δ＝0.5〜1.1（d,12H,J＝5Hz）,1.1〜2.1（b,12H）1.4
（s,9H）,2.6〜3.9（b,8H）,3.9〜5.4（b,3H）,5.1（s,
4H）,5.4〜6.1（b,2H）,6.4〜8.1（b,H）,7.34（s,10
H） TLC（クロロホルム：アセトン＝10:1v/v） Rf＝0.16 （３） 1,5−ジ−（Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−
Ｌ−ロイシル）−1,5,10−トリアザデカン・塩酸塩 10−tert−ブチルオキシカルボニル−1,5−ジ−（Ｎ−
ベンジルオキシカルボニル−Ｌ−ロイシル）−1,5,10−
トリアザデカン5.4g（7.3mmol）をジクロロメタン5mlに
溶かし、氷冷下ジオキサン中の4N−塩酸10mlを加え、室
温で２時間反応させる。反応液を減圧で濃縮し、得られ
た油状物をｎ−ヘキサン50mlに懸濁させ、上澄みを２回
デカンテーシヨンする。次いで減圧濃縮すると、油状の
目的物5.1g（定量的）が得られる。

TLC（クロロホルム：メタノール＝10:1v/v） Rf＝0.2 （４） 10−（Ｎ−tert−ブチルオキシカルボニル−Ｏ
−ベンジル−Ｌ−セリル）−1,5−ジ−（Ｎ−ベンジル
オキシカルボニル−Ｌ−ロイシル−）1,5,10−トリアザ
デカン 1,5−ジ−（Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−Ｌ−ロイ
シル）−1,5,10−トリアザデカン塩酸塩4.5g（6.09mmo
l）をジクロロメタン50mlに溶かし、氷冷下トリエチル
アミン1.0g（10.05mmol）を加え、さらにＮ−tert−ブ
チルオキシカルボニル−Ｏ−ベンジル−Ｌ−セリン−Ｎ
−ヒドロキシコハク酸イミドエステル2.39g（6.09mmo
l）を加え、室温で一夜反応させる。反応液を減圧濃縮
し、残渣を酢酸エチル200mlに溶かし、５％リン酸、５
％炭酸ナトリウム水溶液、飽和食塩水で順次洗浄する。
有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、乾燥剤を別後
液を減圧濃縮すると、淡黄色油状物10gが得られる。
得られた油状物はシリカゲル60（メルク社製）によるカ
ラムクロマトグラフイーに付し、クロロホルム−アセト
ン（10:1v/v）の混液で展開する。次いでクロロホル
ム：メタノール（50:1v/v）の混液で展開すると淡黄色
油状の目的物5.0g（収率86.2％）が得られる。

NMR（CDCl₃） δ＝0.6〜1.1（d,12H,J＝5Hz）,1.1〜2.1（b,12H）,1.4
（s,9H）,2.5〜4.0（b,10H）,4.0〜8.0（b,6H）,4.5
（s,2H）,5.0（s,4H）,5.3〜5.9（b,2H）,7.3（s,15H） TLC（クロロホルム：メタノール＝40:1v/v） Rf＝0.28 （５） 10（Ｏ−ベンジル−Ｌ−セリル）−1,5−ジ−
（Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−Ｌ−ロイシル）−1,
5,10−トリアザデカン・塩酸塩 10−（Ｎ−tert−ブチルオキシカルボニル−Ｏ−ベンジ
ル−Ｌ−セリル）−1,5−ジ−（Ｎ−ベンジルオキシカ
ルボニル−Ｌ−ロイシル）−1,2,10−トリアザデカン5.
0g（5.24mmol）をジクロロメタン5mlに溶かし、氷冷下
ジオキサン中の4N−塩酸10mlを加え、２時間反応させ
る。反応液を減圧で濃縮し、得られた油状物をｎ−ヘキ
サン50mlに懸濁させ、上澄みをデカンテーシヨンする。
この操作を２回くり返した後、減圧濃縮すると、白色結
晶の目的物4.8g（定量的）が得られる。

TLC（クロロホルム：メタノール＝10:1v/v） Rf＝0.42 （６） 10−｛Ｎ−４−（４−グアニジノフエニル）ブ
タノイル〕−Ｏ−ベンジル−Ｌ−セリル｝−1,5−ジ−
（Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−Ｌ−ロイシル）−1,
5,10−トリアザデカン・塩酸塩４−（４−グアニジノフエニル）酪酸塩酸塩1.49g（5.7
8mmol）をジメチルホルムアミド20mlに溶かし、氷冷
下、Ｎ−ヒドロキシコハク酸イミド0.79g（6.9mmol）と
N,N′−ジシクロヘキシルカルボジイミド1.43g（6.9mmo
l）を加え、室温で一夜反応させる。析出したN,N′−ジ
シクロヘキシル尿素を別し、液はそのまま次の反応
に使用する。

白色結晶の10（Ｏ−ベンジル−Ｌ−セリル）−1,5−ジ
−（Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−Ｌ−ロイシル）−
1,5,10−トリアザデカン・塩酸塩4.8g（5.24mmol相当）
をジメチルホルムアミド40mlに溶かし、氷冷下トリエチ
ルアミン0.64g（6.3mmol）を加え、次いで上に述べた４
−（４−グアニジノフエニル）酪酸塩酸塩Ｎ−ヒドロキ
シコハク酸イミドエステルのジメチルホルムアミド溶液
を加え、室温で５時間反応させる。反応液を減圧濃縮
し、油状の残渣をジクロロメタン200mlに溶かし、飽和
食塩水で３回洗浄する。

有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、乾燥剤を別後
液を減圧濃縮すると淡黄色油状の目的物6.4g（定量
的）が得られる。

NMR（CD₃OD） δ＝0.6〜1.1（d,12H,J＝5Hz）,1.1〜3.9（m,28H）,3.9
〜4.9（m,3H）,3.9〜7.6（b,9H）,4.51（s,2H）,5.0
（s,4H）,6.8〜7.4（m,4H）,7.3（s,15H）． IR（KBr） ν（cm^-1）＝3260,3030,2930,1630,1525,1445,1245,110
0,1035. TLC（クロロホルム：メタノール:17％アンモニア水＝6:
1.5:0.25v/v） Rf＝0.28 以下本参考例に準じて、化合物No.2〜No.11の原料化合
物の一般式〔II〕の化合物を合成した。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号庁内整理番号ＦＩ技術表示箇所Ｃ０７Ｋ 5/06

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】一般式〔Ｉ〕（式中、Ｘは−（CH₂）_３〜５−又はを示し、Ｒは−Ｈ又は−CH₂−OH,R₁及びR₂はアミノ酸も
しくはペプチドのカルボキシル基より水酸基を除いた残
基を示す。但しR₁およびR₂は同時にを示さないものとする。）で表わされる新スパガリン関
連化合物又はその薬理学的に許容される塩。
【請求項２】一般式〔II〕〔式中Ｘは−（CH₂）_３〜５−又はを示し、R₃は−Ｈ又は−CH₂−Ｏ−Ｙ（ここでＹは−Ｈ
又は水酸基の保護基を示す。）、R₄及びR₅は保護された
アミノ基を有するアミノ酸もしくはペプチドのカルボキ
シル基より水酸基を除いた残基（これらの残基は側鎖が
保護されていてもよい。）を示す。但し、R₄およびR₅は
同時に、Ｎ−保護フエニルグリシル基を示さない。）〕
で表わされる保護基を有する化合物から保護基を除去す
ることを特徴とする一般式〔Ｉ〕（式中Ｘは前記と同じ基を示し、Ｒは−Ｈ又は−CH₂OH,
R₁及びR₂はアミノ酸もしくはペプチドのカルボキシル基
より水酸基を除いた残基を示す。但し、R₁およびR₂は同
時にを示さない。）で表わされる新スパガリン関連化合物又
はその薬理学的に許容される塩の製造法。