HU184769B

HU184769B - Process for preparing new d-homo-steroids

Info

Publication number: HU184769B
Application number: HU80306A
Authority: HU
Inventors: Leo Alig; Andor Fuerst; Marcel Mueller; Ulrich Kerb
Original assignee: Hoffmann La Roche
Priority date: 1976-09-03
Filing date: 1977-08-31
Publication date: 1984-10-29
Also published as: YU227782A; DK140947B; DK140947C; NO145621C; FI57600C; AR220320A1; NL182314B; ES469573A1; JPS5910680B2; CH629827A5; MC1166A1; CH629828A5; CA1098897A; ATA656076A; NL7709585A; NO145621B; SE440783B; PT66983A; FI772599A; PT66983B

Description

Találmányunk tárgya eljárás (I) általános képletű új D-homo-szteroidok előállítására (mely képletben a pontozott vonal jelentése az 1,2-helyzetben adott esetben jelenlevő szén-szén kötés;

R⁶ jelentése hidrogén-, fluor- vagy klóratom vagy metilcsoport;

R¹⁷“ jelentése hidroxil- vagy 1-7 szénatomos alkanoil oxi-csoport; \ azzal a feltétellel, hogy az (I) általános képletű 11,17adihidroxi-vegyületek esetében R⁶ klóratomot vagy metilcsoportot képvisel).

A leírásban használt „1-7 szénatomos alkanoiloxi-csoport” kifejezésben telített vagy telítetlen karbonsavakból leszármaztatható csoportokat értünk. E csoport előnyösen pl. valamely alábbi karbonsavból származtataható le: hangyasav, ecetsav, trifluorecetsav, pivalinsav, propinsav, vajsav, kapronsav, önántsav.

Előnyös tulajdonságokkal rendelkeznek az 1,2-helyzetben kettőskötést tartalmazó (I) általános képletű vegyületek.

Az (I) általános képletű vegyületek különösen előnyös képviselői az alábbi származékok:

17-butiriloxi-ll a-hidroxi-D-homo-pregna-1,4-dién-3,20-dion;

6a-klór-ll|S-17a-dihidroxi-D-homo-pregna-l,4-dién-3,20-dion;

17a-butiriloxi-6a-fluor-ll/3-hidroxi-D-homo-pregna-l,4-dién-3,20-dion;

17a-valeroiloxi-6a-klór-ll/3-hidroxi-D-homo-pregna-l,4-dién-3,20-dion;

ll|3,17a-dihidroxi-6a-metil-D-homo-pregna-4-én-3,20-dion;

17a-butiriloxi-ll/3-dihidroxi-6a-metil-D-homo-pregnal,4-dién-3,20-dion;

a,17a-dihidroxi-6a-metil-D-homo-pregna-l ,4-dién-3,20-dion;

17a-butiriloxi-l l/3-dihidroxi-6a-metil -D-homo-pregna-1,4-dién-3,20-dion;

A találmányunk tárgyát képező eljárás szerint az (I) általános képletű D-homo-szteroidokat oly módon állíthatjuk elő, hogy valamely (Π) általános képletű D-homoszeroidot (mely képletben R⁶ és R*⁷ jelentése a fent megadott) valamely, a Curvularia lunata specieshez, például C. lunata NRRL 2380 és NRRL 2178, ATCC 13633, 13432, 14678, IMI 77007, IFO 2811, tartozó mikroorganizmus felhasználásával a 11/3-helyzetben hidroxilezünk; kívánt esetben egy, az 1,2-helyzetben telített (I) általános képletű D-homo-szteroidot valamely, az Arthrobacter simplex specieshez (például A. simplex ATCC 6946) vagy a Bacillus genushoz, például B. lentus ATCC 13805 és B. sphaericus ATCC 7055, tartozó mikroorganizmus felhasználásával az 1,2-helyzetben dehidrogénezünk.

A (II) általános képletű vegyületek hidroxilezését szeroidok 11-hidroxilezésére önmagukban ismert mikrobiológiai módszerekkel végezhetjük el. A 11/3-hidroxilezést az alábbi mikroorganizmusokkal hajtjuk végre: Curvularia lunata speciels, pl. C. lunata NRRL 2380, és NRRL 2178, ATCC 13633, 13432, 14678, IMI 77007, IFO 2811.

Az 1,2-helyzetben telített (I) általános képletű D-homo-szteroidok dehidrogénezését önmagukban ismert módszerekkel mikrobiológiai úton végezhetjük el. Az 1,2-dehidrogénezést valamely alábbi mirkroorganizmussal végezhetjük el: Arthrobacter simplex species, pl. A.

simplex ATCC 6946; Bacillus genus, pl. B. lentus ATCC 13805 és B. sphaericus ATCC 7055.

Az (I) általános képletű vegyületeket a gyógyászatban gyulladásgátló hatásuk révén pl. gyulladásos betegségek (pl. ekcéma) kezelésére alkalmazhatjuk.

A találmányunk szerinti eljárással előállítható gyógyászati készítmények belsődleges adagolás esetén 0,01-5,0% (I) általános képletű D-homo-szteroidot tartalmazhatnak. A napi dózis a beteg állapotától és a kívánt kezelés időtartamától függően 0,05-10 mg lehet. Helyi kezelésre szolgáló gyógyászati készítmények általában 0,0001-5 súly%, előnyösen 0,001-0,5 súly%, különösen előnyösen 0,01-0,25 súly% (I) általános képletű hatóanyagot tartalmazhatnak.

A hatóanyagot enterális, perkutáns vagy parenterális adagolásra alkalmas gyógyászati készítmények alakjában formulázhatjuk. A készítmények hatóanyagot és iners, szilárd vagy folyékony gyógyászati hordozóanyagot tartalmaznak. Iners szervetlen vagy szerves hordozóanyagként pl. vizet, zselatint, gumi arabikumot, tejcukrot, keményítőt, magnézium-sztearátot, talkumot, növényi olajokat, polialkilénglikolokat, vazelint stb. alkalmazhatunk. A gyógyászati készítményeket pl. kenőcs vagy oldat, szuszpenzió, emulzió stb. alakjában formulázhatjuk. A készítmények adott esetben sterilezhetők illetve segédanyagokat (pl. konzerváló-, stabilizáló-, nedvesítő- vagy emulgeálószereket, az ozmózisnyomás változását előidéző sókat vagy puffereket) továbbá gyógyászatilag értékes anyagokat is tartalmazhatnak.

Találmányunk további részleteit a példákban ismertetjük anélkül, hogy azt a példákra korlátoznánk.

1. példa

1% kukoricalekvárt (víztartalom 52%, a mennyiség nedvessúlyra vonatkozik; gyártó cég: Roquette Fréres, Lilié, Franciaország), 1% szójaport (finomraőrölt termék, gyártó cég: Hafen-Mühlen-Werke, Bréma) és 0,005% szójaolajat tartamazó 500 ml táptalajt (pH = 6,2) autoklávban 120 °C-on 30 percen át sterilezünk, majd 2 literes Erlenmeyer-lombikba töltjük, Curvularia lunata (NRRL 2380) liofilizált tenyészetével beoltjuk és forgó rázatógépen 30 °C-on 72 órán át rázatjuk. Az előtenyészettel 20 literes rozsdamentes acél-fermentorban levő, 15 liter térfogatú, 1% kukoricalekvárt, 0,5% keményítőcukrot és 0,005% szójaolajat tartalmazó, 6,2 pH-jú, 1,1 att. nyomáson 121 °C-on sterilezett táptalajt beoltunk. Szilikonolaj (Szilikon SH, gyártó cég: Wacker-Chemie, München) habzásgátló hozzáadása mellett 29 °C-on levegőztetés (101/perc) közben 24 órán át tenyésztjük. 1 liter tenyészetet steril körülmények között 14 liter, 1% kukoricalekvárt, 1,25% szójaport (őrölt, gyártó cég: Hafen-Mühlen-Werke, Bréma) és 0,005% szójaolajat tartalmazó, sterilezett táptalajhoz adunk és a fenti körülmények között tenyésztjük. 12 óra múlva 4 g 17aa-acetoxi-D-homo-4-pregnén-3,20-dion és 100 ml dimetil-formamid oldatát adjuk hozzá. A fermentor tartalmát 52 óra múlva 2x10 1 metil-izobutil-ketonnal kikeverjük és az extraktumot 50 °C-os fíirdőhőmérsékleten vákuumban pároljuk. A maradékot a szilikonolaj eltávolítása céljából hexánnal többször mossuk, szilikagél-oszlopon kromatografaljuk és hexánnal, valamint 1:1 arányú hexán-etilacetát eleggyel végzett eluálással az átalakulatlan kiindulási anyagtól elválasztjuk. A kapott 17aa-acetoxi-ll/3-hidroxi-D-homo-4-prengén-3,20-dion izopropiléteres

184 769 átkristályosítás után 234/235-237 °C-on olvad. _t242 = = 16700. Kitermelés: 1,7 g.

A fenti körülmények között végrehajtott eljárást más mikroorganizmusok felhasználásával is elvégezzük. A mikroorganizmusokat és a 17aa-acetoxi-ll/3-hidroxi-D- g -homo-4-pregnén-3,20-dion kitermelést az alábbi Táblázatban tüntetjük fel:

Mikroorganizmus Kitermelés

Curvularia lutana ATCC 13633 1,7 g ιθ

Curvularia lutana CMI 7707 1,4 g

2. példa

500 ml, 1,5% peptont, 1,2% kukoricalekvárt és 0,2% magnézium-szulfátot tartalmazó táptalajt — pH = 6,5 — 15 autoklávban 120 °C-on 30 percen át sterilezőnk, majd 2 literes Erlenmeyer lombikba töltjük. A táptalajt Bacillus lentus (ATCC 13805) liofilezett tenyészetével beoltjuk és 30 °C-on 24 órán át rázatjuk. A kapott előtenyészettel 20 literes rozsdamentes acél-fermentorban levő, 15 liter, 20 0,2% élesztőextraktot (sörélesztőből nyert, 85% szárazanyagtartalmú sejtextratum;, gyártó cég: Ohly GmbH, Hamburg), 1% kukoricalekvárt (víztartalom 52%, a mennyiség nedvessulyra vonatkozik, gyártó cég: Roquette Fréres, Lilié, Franciaország) és 0,1% keményítőcukrot 25 tartalmazó, 7,0 pH-jú, 121 °C-on 1,1 att. nyomáson sterilezett táptalajt beoltunk. Szilikonolaj (Szilikon SH) habzásgátló szer hozzáadása közben 29 °C-on levegőztetés és keverés közben tenyésztjük. 6 óra elteltével 1,6 g 17aa-acetoxi-ll/3-hidroxi-D-homo-pregn-4-én-3,20-dion 50 30 ml dimetil formamidos oldatát adjuk hozzá. A fermentor tartalmát 15 óra múlva 2 x 10 ml metil-izobutil-ketonnal extraháljuk és az extraktumot vákuumban bepároljuk. A maradékot a szilikonolaj eltávolítása céljából hexánnal mossuk és aceton-diizopropiléter elegyből aktív szén je- 35 lenlétében kristályosítjuk. A kapott 17aa-acetoxi-ll/3-hidroxi-D-homo-l,4-pregna-dién-3,20-dion 218-220 °Con olvad.

A fenti körülmények között végrehajtott dehidrogénezést más mikroorganizmusok felhasználásával is elvégez- 40 zük. A mikroorganizmusokat és a 17aa-acetoxi-ll/3-hidroxi-D-homo-l,4-pregna-dién-3,2Q-dion kitermelést az

alábbi Táblázatban adjuk meg.
Mikroorganizmus	Kitermelés
Bacillus sphaericus ATCC 7054	1,4 g
Bacillus subtilis NRRL B 558	1,3 g
Arthrobacter simplex ATCC 6946	1,4 g

3. példa 50

Az 1. és 2. példában ismertetett eljárással analóg módon az alábbi (I) általános képletű vegyületeket állítjuk elő: 17a-butiriloxi-ll/3-hidroxi-D-homo-pregna-l,4-dién-3,20-dion,

UV: e₂₄₄ = 13940; [a]_D = +22° (c = 0,1%, dioxán), ki- 55 termelés: 37%;

17a-butiriloxi-6a-fluor-ll/3-hidroxi-D-homo-pregna-l,4-dién-3,20-dion, op.: 168-169 °C; UV: e₂₄₂ = 16600;

[a]_p = +13° (c = 0,1%, dioxán); kitermelés: 28%;

β, 17a-dihidroxi-6a-metil-D-homo-pregn-4-én-3,20- θθ

-dión, op.: 223-225 °C; UV: e₂₄₂ = 14100; [a]_p = +46° (c = 0,1%, dioxán: kitermelés:.30%;

6a-klór-ll(3,17a-dihidroxi-D-homo-pre^r.-4-én-3,20-dion, op.: 197-198 °C; kLCrjaeíes: 7%.

4. példa , ' (I) általános képletű D-homo-szteroidot tartalmazó kenőcsöt pl. a következőképpen készíthetünk:

(I) általános képletű vegyület ⁵ 0,01-1 súly%

Folyékony paraffin 10,00 súly%

Lágy fehér paraffinnal kiegészítve 100,00 súlyrészre a hatóanyagot golyósí malómbánTiévés’folyékony paraffinnal összeőröljük, míg 5 μ-nál kisebb részecskenagyságokat érünk el. A kapott pasztát hígítjuk és a malmot a maradék folyékony paraffin viasszal utánöblítjük. A szuszpenziót megolvasztott színtelen lágy paraffinhoz adjuk 50 °C-on és lehűlésig keverjük. Homogén kenőcsöt kapunk.

Claims

SZABADALMI IGÉNYPONTOK

1. Eljárás (I) álalános képletű D-homo-szteroidok előállítására (mely képletben a pontozott vonal jelentése az 1,2-helyzetben adott esetben jelenlevő szén-szén kötés;

R⁶ jelentése hidrogén-, fluor- vagy klóratom vagy metilcsoport és

R¹⁷“ jelentése hidroxil- vagy 1-7 szénatomos alkanoiloxi-csoport;

azzal a feltétellel, hogy az (I) általános képletű 11,17a-dihidroxi-vegyületek esetében R⁶ klóratomot vagy metilcsoportot képvisel) azzal jellemezve, hogy valamely (Π) általános képletű D-homo-szteroidot (mely képletben R⁶ és R^,7“ jelentése a fent megadott) valamely Curvularia lutana specieshez, például C. lutana NRRL 2380 és NRRL 2178, ATCC 13633, 13432, 14678, IMI 77007, IFO 2811, tartozó mikroorganizmus felhasználásával a 11/3-helyzetben hidroxilezünk;

kívánt esetben egy, az 1,2-helyzetben telített (I) általános képletű D-homo-szteroidot valamely, az Arthrobacter simplex specieshez, például B. lentus ATCC 13805 és B. sphaericus ATCC 7055, tartozó mikroorganizmus felhasználásával az 1,2-helyzetben dehidrogénezünk.
2. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja 17a-butiriloxi-llj3-hidroXi-D-homo-pregna-l,4-dién-3,20-dion előállítására, azzal jellemezve, hogy (Π) általános képletű kiindulási anyagként 17a-butiriloxi-D-homo-pregna-l,4-dién-3,20-diont az 1. igénypontban meghatározott valamely mikroorganizmus felhasználásával a 11/3-helyzetben hidroxilezünk; vagy 17a-butiriloxi-ll/3-hidroxi-D-homo-pregn-4-én-3,20-diont az 1. igénypontban meghatározott valamely mikroorganizmus felhasználásával az 1,2-helyzetben dehidrogénezünk.
3. Eljárás gyulladásgátló hatású gyógyászati készítmények előállítására, azzal jellemezve, hogy valamely, az 1. igénypont szerinti eljárással előállított (I) általános képletű vegyületet (mely képletben R⁶, R¹⁷“ és a pontozott vonal jelentése az 1. igénypontban megadott) mint hatóanyagot gyógyászatilag alkalmas, iners, szilárd vagy folyékony gyógyászati hatóanyagokkal összekeverünk gyógyászati felhasználásra alkalmas formában jkikéssl·/ tünk. .—....- . z .