FI93105B

FI93105B - Menetelmä uusien, aromataasia inhiboivien 4(5)-imidatsolien valmistamiseksi

Info

Publication number: FI93105B
Application number: FI884497A
Authority: FI
Inventors: Arto Johannes Karjalainen; Kauko Oiva Antero Kurkela; Lauri Veikko Matti Kangas
Original assignee: Orion Yhtymae Oy
Priority date: 1987-10-09
Filing date: 1988-09-30
Publication date: 1994-11-15
Also published as: AU615482B2; GB2210875B; IE883055L; IL87969A0; IE61180B1; CN1033995A; KR890006593A; US5098923A; AU2349088A; HUT49582A; NZ226483A; NO172048B; DK550988A; NO884473L; DK550988D0; IL87969A; ES2043839T3; DE3874073D1; PT88717B; CN1036993C

Description

93105

Menetelmä uusien, aromataasia inhiboivien 4(5)-imidatsolien valmistamiseksi - Förfarande för framställning av nya aromatasinhiberande 4(5)-imi-dazoler

Esillä oleva keksintö koskee menetelmiä uusien substituoitujen imidatso-lijohdannaisten sekä niiden myrkyttömien, farmaseuttisesti hyväksyttävien happoadditiosuolojen valmistamiseksi.

Keksinnön mukaisesti valmistetuilla imidatsolijohdannaisilla on yleinen kaava: O Ri chr6-chr4-cr5-x-^^ n Y R2 (I) R’2 jossa Rp R2, R’, ja R’2, jotka voivat olla samanlaisia tai erilaisia, ovat H, CHj, C2Hs, OCH3 tai halogeeni; R’ on H tai -CH2 jossa R3 on H, CH3 tai halogeeni; R4 on H ja Rj on H tai OH ja Rf on H tai OH tai R4 ja Rs muodostavat keskenään sidoksen tai R4 ja R( muodostavat keskenään sidoksen ja X ja Y, jotka voivat olla samanlaisia tai erilaisia, ovat sidos tai suoraketjuinen Cj_2-alkyleeni.

Näiden yhdisteiden myrkyttömien, farmaseuttisesti hyväksyttävien happoadditiosuolo jen valmistaminen kuuluu myös keksinnön piiriin.

Kaavan (I) mukaiset yhdisteet muodostavat happoadditiosuoloja sekä orgaanisten että epäorgaanisten happojen kanssa. Ne muodostavat siten monia farmaseuttisesti käyttökelpoisia happoadditiosuoloja, kuten esimerkiksi klorideja, bromideja, sulfaatteja, nitraatteja, fosfaatteja, sulfonaatte-: ja, formaatteja, tartraatteja, maleaatteja, sitraatteja, bentsoaatteja, salisylaatteja, askorbaatteja ym.

Julkaisu EP-A1-168965 kuvaa imidatsolirenkaan 4(5)-asemaan diaryylimetyylisubstituoituja aromataasia inhiboivia yhdisteitä. Julkaisusta EP-A1-165777 tunnetaan samaan käyttöön tarkoitettuja imidatsolirenkaan 1-asemaan substituoituja diaryylimetyylijohdannaisia.

: Julkaisusta EP-A1-165783 tunnetaan aromataasi-inhibiittoreita, jotka ovat imidatsolirenkaan 1-asemaan substituoituja diaryylialkyylijohdannaisia, joissa alkyyliryhmä on etyyli- tai propyyliryhmä, kuten l,l-difenyyli-3-(l-imidatsolyyli)-l-propanoli. Julkaisussa EP-A1-165779 kuvataan 93105 aromataasia inhiboivia yhdisteitä, jotka on imidatsolirenkaan 4(5)-asemaan substituoitu diaryylietyyliryhmällä, kuten 4(5)-(2,2-difenyyli-etyyli)-imidatsoli.

Esillä olevan keksinnön mukaisesti valmistetaan esimerkiksi seuraavia kaavan (I) mukaisia yhdisteitä: 4-(3,3-difenyyli-3-hydroksipropyyli)-lH-imidatsoli 4-[3,3-bis(4-kloorifenyyli)-3-hydroksipropyyli]-1H-imidatsoli 4-[3,3-bis(2-metyylifenyyli)-3-hydroksipropyyli]-lH-imidatsoli 4-[3,3-bis(3-metyylifenyyli)-3-hydroksipropyyli]-lH-imidatsoli 4-(3,3-difenyylipropen-2-yyli)-lH-imidatsoli 4-[3,3-bis(4-kloorifenyyli)propen-2-yyli]-lH-imidatsoli 4-[3,3-bis(2-metyylifenyyli)propen-2-yyli]-lH-imidatsoli 4-[3,3-bis(3-metyylifenyyli)propen-2-yyli]-1H-imidatsoli 4-(3,3-difenyylipropyyli)-lH-imidatsoli 4-[3,3-bis(2-metyylifenyyli)propyyli]-lH-imidatsoli 4-[3,3-bis(3-metyylifenyyli)propyyli]-lH-imidatsoli 4-[3,3-bis(4-metyylifenyyli)propyyli]-lH-imidatsoli l-bentsyyli-5- f 3,3-bis (4-kloorif enyyli) -3-hydroksipropyyli ] -lH-imidatsoli l-bentsyyli-5- [ 5- (2,6-dimetyylif enyyli) -3- (2,6-dimetyylifenyylietyyli)-3-hydroksipentyyli]-1H-imidatsoli l-bentsyyli-5-[3,3-bis(4-kloorifenyyli)propen-2-yyli]-lH-imidatsoli 4-[3-fenyyli-3-hydroksi-3-(4-kloorifenyyli)propyyli]-lH-imidatsoli l-bentsyyli-4-(3,3-difenyylipropyyli)-lH-imidatsoli l-bentsyyli-5-(3,3-difenyylipropyyli)-lH-imidatsoli 4 - [ 5 - (2,6-dimetyylifenyyli)-3-(2,6-dimetyylifenyylietyyliJpentyyli]-lH-imidatsoli 4- (3,3-difenyylipropyyli)-1-(4-klooribentsyyli)-lH-imidatsoli 5- (3,3-difenyylipropyyli)-1-(4-klooribentsyyli)-lH-imidatsoli 4 - [ 5 - (2,6-dimetyylif enyyli) -3- (2,6-dimetyylifenyylietyyli)-3-hydroksi-pentyyli]-lH-imidatsoli 4-[3,3-bis(3-fluorifenyyli)propen-2-yyli]-lH-imidatsoli 4-[3,3-bis(3-fluorifenyyli)propyyli]-lH-imidatsoli 4-[3,3-bis(3,5-dimetyylifenyyli)propyyli]-lH-imidatsoli l-bentsyyli-5-(3,3-difenyylipropen-2-yyli)-lH-imidatsoli l-bentsyyli-5-[3,3-bis(3,5-dimetyylifenyyli)-3-hydroksipropyyli]-lH-imi- datsoli l-bentsyyli-5-[3,3-bis(3,5-dimetyylifenyyli)propen-2-yyli]-lH-imidatsoli l-bentsyyli-5-[3,3-bis(2-metoksifenyyli)propen-2-yyli]-lH-imidatsoli *. l-bentsyyli-5-[3,3-bis(3-metoksifenyyli)propen-2-yyli]-lH-imidatsoli l-bentsyyli-5-[3,3-bis(4-metoksifenyyli)propen-2-yyli]-lH-imidatsoli l-bentsyyli-5-[3,3-bis(2,3-dimetyylifenyyli)propen-2-yyli]-lH-imidatsoli ‘ l-bentsyyli-5-[3,3-bis(2-metyylifenyyli)propen-2-yyli]-lH-imidatsoli -3- 93105 l-bentsyyli-5-[3,3-bis(3-metyylifenyyli)propen-2-yyli]-lH-imidatsoli l-bentsyyli-5-[3,3-bis(4-metyylifenyyli)propen-2-yyli]-lH-imidatsoli l-bentsyyli-5-[3,3-bis(3,5-dimetyylifenyyli )propyyli]-lH-imidatsoli l-bentsyyli-5-[3,3-bis(3-metoksifenyyli)propyyli]-lH-imidatsoli 4-[3,3-bis(3,5-dimetyylifenyyli)propyyli]-lH-imidatsoli 4-[3,3-bis(2,3-dimetyylifenyyli)propyyli]-lH-imidatsoli 4- [ 3,3-bis(2-metoksifenyyli)propyyli]-lH-imidatsoli 4-[3,3-bis(3-metoksifenyyli)propyyli]-lH-imidatsoli 4-[3,3-bis(4-metoksifenyyli)propyyli]-lH-imidatsoli

Esillä olevan keksinnön yhdisteillä on havaittu olevan aromataasia inhiboivia ominaisuuksia, ja ne ovat sen tähden arvokkaita estrogeenistä riippuvaisten sairauksien, kuten rintasyövän, hoidossa. Näillä yhdisteillä on todettu olevan myös antimykoottisia ja antifungaalisia ominaisuuksia.

Erityisesti keksinnön mukaiset yhdisteet ovat selektiivisiä aromataasi-inhibiittoreita, toisin sanoen keksinnön mukaiset yhdisteet inhiboivat enemmän aromataasia kuin desmolaasia, joka aikaansaa kolesterolin sivuketjun pilkkoutumisen. Selektiivisyys on aromataasi-inhibiittorin tärkeä ominaisuus, josta on seurauksena potilailla vähemmän haitallisia sivuvaikutuksia.

Keksinnön mukaisessa menetelmässä kaavan (I) mukaiset yhdisteet, joiden sivuketjut -X -W ,R2 ja -Y—^—R’2 ovat samanlaisia, valmistetaan reaktiosarjalla, jonka ensimmäisenä reaktiona on Grignardin reaktio, jossa 4(5)-imidatsolipropaanihapon alkyyliesteri (II) tai sen 1-bentsyyli-johdannainen (III) saatetaan reagoimaan sopivan aryyli- tai aryylialkyylimagnesiumhalogenidin (IV) kanssa. Sitten suoritetaan veden poisto ja vedytys.

0 O

: n il H^^CH2CH2-C-OR CH2CH2C-°r H (II) CH2 R3 (III) : ^"^ViCH^gHal (iv)

Kaavoissa (II), (III) ja (IV) R on alkyyli, R3 on H, CH3 tai halogeeni, n 93105 - 4 - on 0-2 ja Rj ja R2, jotka voivat olla samanlaisia tai erilaisia, ovat H, CH3, C2H5, OCH3 tai Hai (Hai - halogeeni).

Ensimmäinen reaktiovaihe, Grignardin reaktio, johtaa seuraaviin kaavan (I) mukaisiin yhdisteisiin:

Oho Rl — CHjCHjC- (CH,) ,-(O/

Em. reaktiossa aryylialkyylimagnesiumhalogenidijohdannainen voi olla esimerkiksi aryylialkyylimagnesiumbromidijohdannainen, joka valmistetaan antamalla vastaavan aryylialkyylibromidin reagoida magnesiumin kanssa. Sopivia liuottimia reaktiossa ovat erilaiset eetterit, erityisesti tetra-hydrofuraani.

Aryylialkyylimagnesiumhalogenidijohdannainen valmistetaan tavanomaisella tavalla tiputtamalla aryylialkyylihalogenidijohdannainen sopivassa liuot-timessa, esim. tetrahydrofuraanissa, tetrahydrofuraanilla peitettyjen magnesiumlastujen päälle reaktioseoksen kiehumispisteessä. Kun magnesium-lastut ovat reagoineet, seosta jäähdytetään jonkinverran ja 4(5)-imidat-solipropaanihapon alkyyliesteri tai sen 1-bentsyylisubstituoitu johdannainen lisätään kiinteässä muodossa pienissä erissä tai pisaroittain tetrahydrofuraanissa. Lisäyksen jälkeen seosta refluksoidaan, kunnes 4(5)-imidatsolijohdannainen on reagoinut. Reaktioaika vaihtelee yhden ja viiden tunnin välillä.

Edelleen keksinnön mukaisessa menetelmässä kaavan (I) mukaiset yhdisteet, \ jossa R4 ja Rs ovat vetyjä tai muodostavat keskenään sidoksen, valmiste taan poistamalla vettä kaavan (I) mukaisista yhdisteistä, joissa R$on OH, ja suorittamalla seuraavassa vaiheessa katalyyttinen vedytys. Vesi pois-: tetaan tavanomaisilla menetelmillä, toisin sanoen kuumentamalla väkevän suolahapon tai kaliumvetysulfaatin kanssa. Tyydyttämättömät johdannaiset (V) (kaavan (I) mukaiset yhdisteet, joissa R4 ja R5 muodostavat keskenään sidoksen) eristetään ja vedytetään. Vaihtoehtoisesti ne voidaan vedyttää suoraan happamissa olosuhteissa ilman eristystä. Vedytys suoritetaan kätevästi huoneenlämpötilassa hyvin sekoitetussa alkoholissa, esim. etanolissa, katalysaattorin läsnäollessa vetyatmosfäärissä. Sopivia kataly-: saattoreita ovat esim. platinaoksidi, palladium-hiili tai Raney-nikkeli.

Em. vaiheiden reaktioyhtälöt voidaan esittää seuraavasti: 93105 - 5 -

Oho JR! n __*i CH2CH2C- (CH2) 1,-^¾ KHSO^ ^ J- CH2CH“C- < CHZ) „ n (CH2)„ *2 2 \ (CH2)b R, φΚ R fQ}—R‘

Ri R^^ (V)

N

H2, Pd/C^ CH2CH2-CH-(CH2)n—^^-R, lr (CH2)„ R2 *' Φ* r2

Jos R’ on substituoitu tai substituoimaton bentsyyliryhmä, se voidaan myös poistaa vedyttämällä. Tässä tapauksessa vedytys suoritetaan happa-missa olosuhteissa, kuten suolahappo-etanoli-seoksessa, korkeammassa lämpötilassa.

Tämä vedytys, joka johtaa kaavan (I) mukaisiin yhdisteisiin, joissa R4 ja Rs ovat vetyjä, voidaan esittää reaktioyhtälöllä seuraavasti: ,N R, H R, H? > -+)—CH2CH2CH-(CH2),,-^^

Nn (CH2)n iT (CH2)n R2 4’ 11

Rl R2 (VI) ; Yhdisteet (VI) voidaan myös valmistaa suoraan yhdisteistä (V) vedyttämäl lä sekä kaksoissidos että bentsyyliryhmä samanaikaisesti.

Kaavan (I) mukaisia yhdisteitä, joissa R’ on bentsyyliryhmä, voidaan valmistaa toisella tavalla bentsyloimalla vastaava yhdiste, jossa R* on vety. Lähtöaine käsitellään ensin vahvalla emäksellä, kuten natriumhyd-roksidin vesiliuoksella tai natriumhydridillä sopivassa liuottimessa, • esim. dimetyyliformamidissa, jolloin saadaan imidatsolin alkalimetalli-suola. Seuraavassa vaiheessa tähän lisätään bentsyylihalogenidi. Reaktio-yhtälö voidaan esittää seuraavasti: 93105 N ®·ι 1) vahva emäs H R3 yN __ Ri -jj- chr6chr4-cr5-x~^^r

Jh2 (^R3 ^R*2

Edelleen kaavan (I) mukaiset yhdisteet, joiden sivuketjut -X—R? ja -Y^Q^TR*2 ovat erilaiset, valmistetaan suorittamalla ensin kaksi Grignardin reaktiota käyttäen lähtöaineena 4(5)-imidatsoli-propaanihapon alkyyliesteriä tai l-bentsyyli-4(5)-imidatsolipropaanihapon alkyyliesteriä kuten edellä on kerrottu. Nyt kuitenkin Grignardin rea-genssin määrää pienennetään ja reaktiolämpötilaa lasketaan, jotta reaktio pysähtyisi ketonivaiheeseen, jolloin saadaan 4(5)-imidatsoyylipropyyli-aryyliketoni tai -aryylialkyyliketoni (VII). Tämä yhdiste reagoi edelleen toisen Grignardin reagenssin (VIII) kanssa, jolloin muodostuu kaavan (I) mukainen yhdiste, jossa Rs on OH. Reaktiot kuvataan seuraavasti: N O Ri2S^^-(CH2)nMgHal N O R, 4}" CH2CH2C-OR -> CH2CH2-C-(CH2)n— N N R2 ; R’ R’ (VII) R’J-^)\ (CH2),-MgHal r’2 h? Rl (VIII)_^ ^-CH2CH2-C-(CH2)n-(( XN^ (CHj). ^

R’ XX

93105

Yllä olevassa reaktlokaavassa m ja n, jotka voivat olla samanlaisia tai erilaisia, ovat 0, 1 tai 2.

Edellä esitetyissä menetelmissä 4(5)-imidatsolipropaanihapon esterit (II) ja (III) voidaan valmistaa esimerkiksi lähtien l-bentsyyli-5-imidatsoli-karbaldehydistä ja malonihaposta, joiden kondensoituessa muodostuu 5-(l-bentsyyli-imidatsoli)akryylihappoa. Kun tämä yhdiste vedytetään happamis-sa olosuhteissa korotetussa lämpötilassa (70-80°C) katalysaattorin läsnäollessa, muodostuu 4-imidatsolipropaanihappoa. Kun tätä käsitellään alkoholilla, esim. metanolilla, kuivan suolahapon läsnäollessa, saadaan 4-imidatsolipropaanihapon alkyyliesteri, jota käytetään lähtöaineena Grig-nardin reaktiossa: ^ N malonihappo 1) vedytys ^ (I pyridiini ^ |1 2) esteröinti

(katalysaattori) N CH“CH-COOH

I I

ch2 ch2 %-f^) RJ-^) o

II

N.____CHo-CHj-COR

<J

x Mtr (II)

H

Kun 5-(l-bentsyyli-imidatsoli)akryylihappo (bentsyyliryhmä voi olla subs-tituoitu tai substituoimaton) vedytetään huoneenlämpötilassa alkoholi liuottimena, saadaan l-bentsyyli-5-imidatsolipropaanihappoa.

‘ Kun tätä yhdistettä edelleen käsitellään alkoholilla kuivan suolahapon läsnäollessa korotetussa lämpötilassa, muodostuu toinen mahdollinen lähtöaine Grignardin reaktioon, nimittäin l-bentsyyli-5-imidatsoli-propaanihapon alkyyliesteri. Esitetyt reaktiot voidaan suorittaa myös päinvastaisessa järjestyksessä. Reaktioyhtälöt ovat seuraavat: 93105 ^N>jl vedytys ^jl CH-CH-COOH * Ν^ΧΗ2ΟΗ2ΟΟΟΗ CH2 K-3 ΟΗ,-^-ΙΙ, ^ esteröinti esteröinti \\ s -edytys-> K\ s

N CH-CH-COR N CH2CH2COR

ch2 ~©~ r3 ch2

Edelleen voidaan kaavan (I) mukaisia yhdisteitä valmistaa Grignardin reaktiolla, jossa 4(5)-imidatsolialdehydi (IX) saatetaan reagoimaan Grignardin reagenssin (XIV) kanssa, jolloin muodostuu kaavan (I) mukainen yhdiste, jossa Rj on OH (XV). Grignardin reagenssi valmistetaan antamalla vastaavan halogenoidun hiilivedyn reagoida magnesiumlastujen kanssa tavalliseen tapaan. Yhdisteestä (XV) poistetaan edelleen vettä kuumentamalla kaliumvetysulfaatin kanssa tai refluksoimalla happamassa alkoholi-liuoksessa, jolloin saadaan kaavan (I) mukaisia yhdisteitä (XII), joissa R4 ja Rg muodostavat keskenään sidoksen. Tyydyttymättömät johdannaiset ve-dytetään, jolloin syntyy kaavan (I) mukaisia yhdisteitä, joissa R4 ja R$ ovat vetyjä. Nämä vaiheet voidaan esittää reaktioyhtälöin seuraavasti: N.

-jj-CHO + HalMgCH2-CH-X_/(^^--Ri fT Y R2 ; *' (IX> j&hR’· R’P^T^ (XIV)

N OH

-} ^CH-CH2-CH-X-/^^R1 W Y r2 (XV) 93105 - 9 - -H20 N.

) ^ -ί-CH-CH-CH-X-.^^^— Rj Vk Y Rz R (tPrl·'*’1 R’pi^ (XII) VPd „

Vk Y R?

Kaavan (I) mukaiset yhdisteet, niiden myrkyttömät farmaseuttisesti hyväksyttävät suolat tai niiden seokset, voidaan antaa parenteraalisesti, int-ravenöösisesti tai oraalisesti. Vaikuttava määrä johdannaista on yleensä yhdistetty sopivaan farmaseuttiseen kantaja-aineeseen. Tässä käytetty termi "vaikuttava määrä" tarkoittaa sellaisia määriä, joilla saavutetaan toivottu vaikutus ilman sivuvaikutuksia. Käytetty tarkka määrä tietyssä tilanteessa riippuu monesta seikasta, kuten esim. annostustavasta, imet-täväistyypistä, sairaudesta, johon ainetta annetaan, jne., sekä tietenkin johdannaisten rakenteesta.

Käytettävä farmaseuttinen kantaja-aine voi olla kiinteä tai nestemäinen, ja se voidaan valita annostusmuodon mukaan. Siten kiinteänä kantaja-aineena voidaan käyttää esimerkiksi laktoosia, sukroosia, gelatiinia ja agaria, ja nestemäisenä esimerkiksi vettä, siirappia, maapähkinäöljyä ja oliiviöljyä. Muut sopivat kantaja-aineet ovat tunnettuja niille, jotka työskentelevät farmaseuttisten formulointien parissa. Johdannaisen ja kantaja-aineen yhdistäminen voi tapahtua monessa muodossa, kuten tabletti-, kapseli-, suppositorio-, liuos-, emulsio- ja pulverimuodossa.

i

Keksinnön mukaisesti valmistetuilla imidatsolijohdannaisilla on arvokas aromataasia inhiboiva vaikutus, minkä takia ne ovat käyttökelpoisia estrogeenistä riippuvaisten sairauksien, kuten rintasyövän, hoidossa.

Estrogeenit ovat steroideja, jotka olennaisesti vaikuttavat naisten rintojen ja sukupuolielinten fysiologian ja toiminnan normaaliin kehittymi-. seen. Toisaalta estrogeenien tiedetään stimuloivan estrogeenistä riippu-veisten syöpien, erityisesti rintasyövän ja kohdun runko-osan syövän, kasvua ja ne voivat lisätä rintasyövän kehittymisen vaaraa, jos niitä annetaan farmakologisina annoksina pitkän ajan kuluessa. Lisääntynyt estra- 93105 diolin tuotanto voi aiheuttaa myös hyvänlaatuisiksi luokiteltavia vaurioita hormoneista riippuvaisissa elimissä. Estrogeenien merkitys syövän kasvun stimuloivana ja/tai säätelevänä tekijänä on selvästi korostunut sen tosiasian myötä, että antiestrogeeneilla on havaittu olevan keskeinen asema niiden rintasyöpien hoidossa, joissa on runsaasti estrogeeniresep-toreita. Antiestrogeenit toimivat sitoutumalla estrogeenireseptoreihin ja siten inhiboivat estrogeenien biologisia vaikutuksia. Estrogeenien vaikutus voidaan estää myös toisella tavalla, inhiboimalla niiden biosynteesi. Tämä on saavutettu kliinisesti epäspesifisellä steroidien synteesin inhibiittorilla, aminoglutetimidillä. Estrogeenien synteesi voidaan estää spesifisesti, ts. vaikuttamatta muuhun steroidimetaboliaan, inhiboimalla aromataasientsyymiä, joka on avainentsyymi estrogeenien biokemiallisessa synteesireitissä, ja joka on vastuusssa kaikesta estrogeenibiosynteesistä in vivo. Aromataasin inhibitio näyttää hyvin lupaavalta, koska useat rin-tasyöpäkasvaimet syntetisoivat estradiolia ja estronia in situ ja stimuloivat täten itse omaa kasvuaan autokriinisesti (Alan Lipton et ai., Cancer 59: 779-782, 1987).

Keksinnön mukaisesti valmistettujen aineiden kyky inhiboida aromataasientsyymiä on tutkittu in vitro -kokeissa M. Pasasen julkaisun mukaan (Biological Research in Pregnancy, Voi. 6, No. 2, 1985, pp. 94-99). Kokeissa käytettiin ihmisen aromataasientsyymiä. Entsyymi eristettiin ihmisen istukasta, jossa sitä on runsaasti. Mikrosomaalinen fraktio (100000 x g sakka) valmistettiin sentrifugoimalla. Entsyymipreparaattiin, jota käytettiin ilman jatkopuhdistusta, lisättiin tutkittavia yhdisteitä, 100000 dpm l,2[3H]-androsteeni-3,17-dionia sekä NADPH:n tasoa ylläpitäviä reagensseja. Tutkittavien yhdisteiden konsentraatiot olivat 0,001; 0,01; 0,1 ja 1,0 mM. Inkubointiaika oli 40 min 37°C:ssa. l,2[3H]-androsteeni-3,17-dionin aromatisoinnin tuloksena syntyy 3H20:a. Tritiumvesi ja tri-tiumsubstraatti erotetaan helposti Sep-PakR minikolonnilla, joka absorboi steroidin, mutta päästää läpi veden. Radioaktiivisuus mitattiin neste-tuikelaskijalla. Aromataasin inhibitio laskettiin vertaamalla inhibiittorilla käsiteltyjen näytteiden 3H20-radioaktiivisuutta kontrollinäytteisiin, joissa ei ollut inhibiittoria. Lasketut IC-10-, IC-50- ja IC-90-arvot ovat konsentraatioita, jotka inhiboivat entsyymin aktiivisuutta vastaavasti 10 Z, 50 Z ja 90 Z. Nämä konsentraatiot esitetään taulukossa 2.

li 93105 - 11 -

Taulukko 1: Tutkitut yhdisteet

Nro Nimi 1. 4- [ 5-(2,6-dimetyylifenyyli)-3-(2,6-dimetyylifenyylietyyli)-3-hydroksipentyyli]-lH-imidatsoli 2. 4-[3,3-bis(4-kloorifenyyli)-3-hydroksipropyyli]-lH-imidatsoli 3. 4-(3,3-difenyyli-3-hydroksipropyyli)-lH-imidatsoli 4. 4-(3,3-difenyylipropen-2-yyli)-lH-imidatsoli 5. 4-(3,3-difenyylipropyyli)-lH-imidatsoli 6. 4-[3,3-bis(2-metyylifenyyli)-3-hydroksipropyyli]-lH-imidatsoli 7. 4-[3,3-bis(4-kloorifenyyli)propen-2-yyli]-lH-imidatsoli 8. 4-[3,3-bis(2-metyylifenyyli)propen-2-yyli]-lH-imidatsoli 9. 4-[3,3-bis(2-metyylifenyyli)propyyli]-lH-imidatsoli 10. l-bentsyyli-5-(3,3-difenyylipropyyli)-lH-imidatsoli 11. 4-[3,3-bis(3-metyylifenyyli)propyyli]-lH-imidatsoli 12. 4-[3,3-bis(3-metyylifenyyli)propen-2-yyli]-lH-imidatsoli 13. 4-[3,3-bis(3-metoksifenyyli)propyyli]-lH-imidatsoli 14. 4-[3,3-bis(2,3-dimetyylifenyyli)propyyli]-lH-imidatsoli 15. l-bentsyyli-5-[3,3-bis(3-metoksifenyyli)propyyli]-lH-imidatsoli 16. l-bentsyyli-5- [3,3-bis (3-metoksif enyyli )propen-2-yyli]-lH-imidatsoli 17. 4-[3,3-bis(3 f 5-dimetyylifenyyli)propyyli]-iH-imidatsoli 18. 4-[3,3-bis(4-metyylifenyyli)propyyli]-lH-imidatsoli 19. 4-[3,3-bis(3-fluorifenyyli)propyyli]-lH-imidatsoli 20 . l-bentsyyli-5-(3,3-difenyylipropen-2-yyli)-iH-imidatsoli 93105

Taulukko 2; Tutkittavien yhdisteiden vaikutus ihmisen aromataasient- syymin inhibitioon. IC-10, IC-50 ja IC-90 vastaavat kon-sentraatioita, jotka inhiboivat entsyymiä 10 Z , 50 2 ja 90 Z.

Yhdisteen IC-10 IC-50 IC-90 nro mmol/1 mmol/1 mmol/1 1 0,02 1,0 > 1 2 0,004 0,06 1,0 3 0,004 0,07 1,0 4 < 0,001 0,006 0,10 5 0,0015 0,015 0,40 6 0,015 0,30 > 1 7 0,002 0,030 0,6 8 0,0015 0,080 > 1 9 0,002 0,030 0,6 10 ~ 0,0006 0,004 0,10 11 ~ 0,0006 0,006 0,10 12 0,001 0,080 1 13 0,003 14 0,044 15 0,004 16 0,014 17 0,130 18 0,014 19 0,019 20 0,050

Potilaan päiväannos on 20-200 mg.

Keksinnön mukaisesti valmistettujen imidatsolijohdannaisten myrkyllisyys tutkittiin rotilla. Kukin yhdiste testattiin ryhmällä, jossa oli 5 naa-rasrottaa. Yhdistettä annettiin 8 päivän ajan. Käytetty annostus oli 10 mg/kg/päivä oraalisesti. Testattavat johdannaiset olivat 4-(3,3-di-fenyylipropen-2-yyli)-lH-imidatsoli, 4-(3,3-difenyylipropyyli)-1H- imidatsoli, 4-[3,3-bis(2-metyylifenyyli)propyyli]-lH-imidatsoli, 1-bentsyyli-5-(3,3-difenyylipropyyli)-lH-imidatsoli ja l-bentsyyli-5-(3,3-difenyylipropen-2-yyli)-lH-imidatsoli.

Eläinten käyttäytymistä, ulkomuotoa ja kuolleisuutta seurattiin päivittäin. Kuolleisuutta ei ilmennyt. Eläimet punnittiin ennen ja jälkeen annostus jakson. Elimet tutkittiin makroskooppisesti ruumiinavauksessa. Maksa, kohtu ja munasarjat punnittiin. Kasvun kehitys oli normaali jokaises- n 93105 - 13 - sa ryhmässä. Niissä ryhmissä, joita käsiteltiin 4-(3,3-difenyylipropen-2-yyli)-lH-imidatsolilla ja l-bentsyyli-5-(3,3-difenyylipropen-2-yyli) -1H-imidatsolilla, havaittiin vähäistä piloerektiota, joka johtui ilmeisesti aineiden farmakologisista vaikutuksista. Elinten painossaja makroskooppisessa patologiassa ei havaittu mitään tutkittavista yhdisteistä aiheutuvia muutoksia. Kaiken kaikkiaan koe-eläimet sietivät hyvin tutkittuja yhdisteitä.

Keksintöä kuvataan lähemmin seuraavissa esimerkeissä.

Esimerkki 1 4- (3,3-difenyyli-3-hydroksipropyyli)-lH-imidatsoli a) 5-(1-bentsyyli-imidatsoli Jakryylihappo

Reaktioastiassa yhdistetään 18,6 g 5-(l-bentsyyli-imidatsoli)-karbalde-hydiä, 10,4 g malonihappoa ja 4,8 ml pyridiiniä. Seosta kuumennetaan kiehuvassa vesihauteessa 16 tunnin ajan, minkä jälkeen se jäähdytetään ja laimennetaan vedellä. Saostunut tuote suodatetaan ja pestään vedellä. Haluttua tuotetta saadaan 15 g. Sp. 221-226°C.

*H NMR: 5.15 (s, 1H), 5.64 (s, 2H), 6.58 (d, 1H), 7.3-7.5 (m, 5H), 7.61 (d, 1H), 8.08 (s, 1H), 9.07 (s, 1H) b) 4(5)-imidatsolipropaanihapon etyyliesteri 5- (l-bentsyyli-imidatsoli)akryylihappo (15 g) liuotetaan 50 ml:aan 4 N suolahappoa. Tähän lisätään noin 60 g palladium-hiiltä (Pd/C 10Z) ja seosta sekoitetaan voimakkaasti vetyatmosfäärissä noin 85°C:ssa kunnes vetyä ei enää kulu. Reaktioseos suodatetaan ja suodos haihdutetaan kuiviin. Jäännös liuotetaan 50 ml:aan absoluuttista etanolia ja liuokseen johdetaan kuivaa vetykloridikaasua 4 tunnin ajan. Reaktioseosta sekoitetaan koko ajan ja lämpötila pidetään refluksointilämpötilassa. Tämän jälkeen reaktioseos haihdutetaan kuiviin. Jäljelle jäävä öljymäinen raaka-tuote voidaan käyttää sellaisenaan seuraavassa Grignardin reaktiossa.

‘H NMRs 1.237 (t, 3H), 2.656 (t, 2H), 2.936 (t, 2H), 4.137 (q, 2H) , 6.804 (s, 1H), 7.559 (s, 1H) c) 4-(3,3-difenyyli-3-hydroksipropyyli)-lH-imidatsoli

Kuivat magnesiumiastut (3,3 g) peitetään 100 ml:11a kuivaa tetrahydrofu-raania. Tähän lisätään pisaroittaan 21,8 g bromibentseeniä 30 ml:ssa kui- 14 931 05 vaa tetrahydrofuraania sellaisella nopeudella, että reaktio etenee tasaisesti. Kun lisäys on suoritettu, reaktioseosta refluksoidaan vielä tunnin ajan. Reaktioseos jäähdytetään huoneen lämpötilaan ja tiputetaan ko. lämpötilassa liuokseen, jossa on 4(5)-imidatsolipropaanihapon etyy-liesteriä (7,8 g) 50 ml:ssa tetrahydrofuraania. Lisäyksen jälkeen seosta sekoitetaan vielä tunnin ajan 40-50°C:ssa. Seos jäähdytetään ja kaadetaan kylmään veteen. Tetrahydrofuraani haihdutetaan ja liuokseen lisätään väkevää suolahappoa (20 ml). Liuos jäähdytetään ja saostunut tuote, joka on hydrokloridisuolana, suodatetaan seoksesta, pestään ja kuivataan. Tuotetta, jonka sp. on 189-191°C, saadaan 11,2 g.

‘H NMR: 2.703 (s, 4H), 4.758 (s, 3H), 7.214-7.429 (m, UH), 8.457 (s, 1H)

Samalla tavalla Grignardin reaktiolla, jossa lähtöaineina ovat 4(5)-imi -datsolipropaanihapon etyyliesteri ja sopivasti substituoitu bromibentsee-ni, voidaan valmistaa muita keksinnön mukaisia tuotteita.

Valmistettiin esimerkiksi seuraavat substituoidut johdannaiset: 4-[3,3-bis(4-kloorifenyyli)-3-hydroksipropyyli]-lH-imidatsoli, hydro-kloridin sp. 85-89°C.

4-[3,3-bis(2-metyylifenyyli)-3-hydroksipropyyli]-1H-imidatsoli, hydro- kloridin sp. 211-213°C.

4- [ 3,3-bis(3-metyylifenyyli)-3-hydroksipropyyli]-lH-imidatsoli, hydro- kloridin sp. 170-172°C.

Esimerkki 2 4-(3,3-difenyylipropen-2-yyli)-lH-imidatsoli

Sekoitetaan 4-(3,3-difenyyli-3-hydroksipropyyli)-lH-imidatsoli (2,0 g) vedettömään kaliumvetysulfaattiin (20 g) ja seosta lämmitetään öljyhau-teessa 150-155°C:ssa 4 tuntia. Seos jäähdytetään ja siihen lisätään 20 ml vettä. Reaktioseos tehdään emäksiseksi natriumhydroksidiliuoksella ja jäähdytetään. Muodostunut sakka, joka on tuote, suodatetaan, pestään vedellä ja kuivataan. Tuotetta saadaan 1,25 g. Vesi-etanolista uudelleen kiteytetyn yhdisteen sp. on 124-128°C.

lH NMR: 3.42 (d, 2H), 4.756 (s, 1H), 6.284 (t, 1H), 6.768 (s, 1H), 7.2-7.4 (m, 10H), 7.559 (s, 1H)

Saman menetelmän mukaan valmistettiin esimerkiksi seuraavat substituoidut li 93105 johdannaiset: 4-[3,3-bis(4-kloorifenyyli)propen-2-yyli]-lH-imidatsoli, hydrokloridin sp. 158-163°C.

4-[3,3-bis(2-metyylifenyyli)propen-2-yyli]-lH-imidatsoli, hydrokloridin sp. 195-198°C.

4-[3,3-bis(3-metyylifenyyli)propen-2-yyli]-lH-imidatsoli, sp. 115-118°C.

4-[3,3-bis(3-fluorifenyyli)propen-2-yyli]-lH-imidatsoli, hydrokloridin sp. 125-128°C.

Esimerkki 3 4-(3,3-difenyylipropyyli)-lH-imidatsoli

Liuotetaan 4-(3,3-difenyylipropen-2-yyli)-lH-imidatsoli (0,7 g) etanoliin ja lisätään katalyyttinen määrä palladium-hiiltä (10 Z). Reaktioseosta sekoitetaan voimakkaasti huoneenlämpötilassa vetyatmosfäärissä kunnes vedyn kulutus lakkaa. Seos suodatetaan ja suodos haihdutetaan kuiviin. JäännOs kiteytetään uudelleen vesi-etanoli-seoksesta. Tuotetta, jonka sp. on 115-117°C, saadaan 0,4 g.

NMR: 2.3-2.5 (m, 4H), 3.919 (t, 1H), 4.752 (s, 1H), 6.708 (s, 1H), 7.1-7.3 (m, 10H), 7.532 (s, 1H)

Edellä esitetyn esimerkin mukaan valmistettiin esim. seuraavat substitu-oidut johdannaiset: 4-[3,3-bis(2-metyylifenyyli)propyyli]-lH-imidatsoli, hydrokloridin sp. 84-87°C.

4-[3,3-bis(3-metyylifenyyli)propyyli]-lH-imidatsoli, sp. 111-114°C.

1H NMR (emäs): 2.272 (s, 6H), 2.2-2.5 (m, 4H), 3.823 (t, 1H), 6.691 (s, 1H), 6.8-7.2 (m, 8H), 7.440 (s, 1H) 4-[3,3-bis (3-fluorifenyyli)propyyli]-lH-imidatsoli *H NMR (HCl-suola): 2.3-2.8 (m, 4H), 4.060 (t, 1H), 4.784 (s, 2H), 6.7-7.4 (m, 9H), 8.743 (s, 1H) - 16 - 93105

Esimerkki 4 l-bentsyyli-5- [ 3,3-bis (4-kloorif enyyli) -3-hydroksipropyyli ] -lH-imidatsoli a) l-bentsyyli-5-imidatsoliakryylihapon metyyliesteri

Yhdistetään 12,0 g 5-(l-bentsyyli-imidatsoli)akryylihappoa (valmistettu esimerkissä 1) ja 70 ml metanolia. Refluksoituvaan seokseen johdetaan 4 tunnin ajan kuivaa kloorivetykaasua. Reaktioseos haihdutetaan kuiviin ja jäännös liuotetaan kylmään veteen. Liuos tehdään emäksiseksi natriumkarbonaatilla ja saostunut tuote suodatetaan, pestään vedellä ja kuivataan. Tuotetta saadaan 12,2 g. Sp. 137-139°C.

*H NMR: 3.781 (s, 3H), 5.490 (s, 2H), 6.452 (d, 1H), 7.2-7.5 (m, 5H), 7.493 (d, 1H), 7.710 (s, 1H), 8.083 (s, 1H) b) l-bentsyyli-5-imidatsolipropaanihapon metyyliesteri

Sivuketjun kaksoissidos vedytetään absoluuttisessa etanolissa katalysaattorin Pd/C läsnäollessa. Kun vedyn kulutus lakkaa, reaktioseos suodatetaan ja suodos haihdutetaan kuiviin. Jäännös liuotetaan metyleeniklori-diin ja liuos pestään vedellä. Metyleenikloridifaasi kuivataan ja haihdutetaan kuiviin, jolloin saadaan tuote, joka käytetään sellaisenaan seu-raaviin Grignardin reaktioihin.

13C NMR: Alifaattiset hiilet havaitaan ppmsn arvoilla: 19.374, 32.573, 48.466, 51.675; aromaattiset hiilet havaitaan ppm:n arvoilla: 126.569, 128.022, 128.748, 128.960, 130.474, 136.074, 137.88; ja karbonyyli ppm:n arvolla 172.522 c) l-bentsyyli-5- [ 3,3-bis (4-kloorif enyyli) - 3-hydroksipropyyli ] -lH-imi-datsoli

Grignardin reagenssi valmistetaan magnesiumlastuista (2,4 g) ja j)-kloori-bromibentseenistä (19,1 g) tetrahydrofuraanissa kuten on esitetty esimerkissä 1 c).

Kuumennetaan l-bentsyyli-5-imidatsolipropaanihapon metyyliesteri (6,4 g) tetrahydrofuraanissa 60°C:een. Tähän lisätään pisaroittain edellä valmistettua jj-kloorifenyylimagnesiumbromidia. Lisäyksen jälkeen reaktioseosta refluksoidaan vielä 3 tunnin ajan, jäähdytetään ja kaadetaan kylmään veteen. Haihdutetaan THF, lisätään tolueenia ja seos tehdään happamaksi suolahapolla. Saostunut tuote suodatetaan, pestään eetterillä ja kuivataan. Näin saadun tuotteen saalis on 12,2 g ja sp. 210-213°C. Nitraatin

II

93105 sp. on 157-160°C (valmistetaan vesi-eetteri-seoksessa). Hydrokloridin (etyyliasetaatista) sp. on 178-187°C.

*H NMRs 2.985 (s, 4H) , 4.854 (s, 2H) , 5.330 (s. 2H), 7.06-7.46 (m, 14H), 8.993 (s, 1H)

Muita 1-bentsyyli-substituoituja johdannaisia valmistetaan myös samalla tavoin. Esimerkiksi: l-bentsyyli-5- [ 5- (2,6-dimetyylif enyyli )-3-(2,6-dimetyylif enyylie tyyli ) -3-hydroksipentyyli]-lH-imidatsoli l-bentsyyli-5-imidatsolipropaanihapon metyyliesteristä ja 2-(2,6-dimetyylifenyyli)etyylimagnesiumbromidista. Hydrokloridin sp. on 67-71°C.

Esimerkki 5 l-bentsyyli-5-[3,3-bis(4-kloorifenyyli)propen-2-yyli]-lH-imidatsoli

Kuumennetaan 4,1 g l-bentsyyli-5- [ 3,3-bis (4-kloorif enyyli) -3-hydroksipro-pyyli]-lH-imidatsolia ja 22,0 g vedetöntä kaliumvetysulfaattia 150°C:ssa 4 tunnin ajan. Seos jäähdytetään ja lisätään 100 ml etanolia tuotteen liuottamiseksi. Seos suodatetaan ja suodos haihdutetaan pieneen tilavuuteen. Lisätään vettä ja seos tehdään emäksiseksi natriumhydroksidilla. Saostunut tuote suodatetaan, pestään vedellä ja kuivataan. Tuote kiteytetään uudelleen vesi-etanoli-liuoksesta. Haluttua tuotetta saadaan 2,3 g. Nitraatti tehdään vedessä typpihapolla.

lH NMR: 3.293 (d, 2H), 5.287 (s, 1H), 6.010 (t, 1H), 6.9-7.4 (m, 14H), 9.330 (s, 1H)

Esimerkki 6 4-[3-fenyyli-3-hydroksi-3-(4-kloorifenyyli)propyyli]-lH-imidatsoli a) 2-(4-imidatsoyyli)etyyli-4-kloorifenyyliketoni

Peitetään 0,85 g magnesiumlastuja 20 ml:11a kuivaa tetrahydrofuraania. Seos kuumennetaan kiehuvaksi ja lisätään 6,8 g 4-bromiklooribentseeniä tetrahydrofuraanissa sellaisella nopeudella, että reaktio etenee tasaisesti. Lisäyksen jälkeen reaktioseosta refluksoidaan vielä tunnin ajan. Reaktioseos jäähdytetään ja se tiputetaan huoneenlämpötilassa liuokseen, jossa on 4(5)-imidatsolipropaanihapon etyyliesteriä (4,0 g) tetrahydrofuraanissa. Lisäyksen jälkeen seosta sekoitetaan huoneenlämpötilassa tunnin ajan. Seos kaadetaan kylmään veteen ja tehdään happamaksi suolahapolla.

93105

Reaktioseos pestäään metyleenikloridilla, tehdään emäksiseksi natriumhyd-roksidilla ja tuote uutetaan metyleenikloridiin. Saalis on 2,2 g. Tuotteen hydrokloridisuola tehdään väkevässä suolahapossa. Hydrokloridin sp. on 160-161°C.

b) 4-[3-fenyyli-3-hydroksi-3-(4-kloorifenyyli)propyyli]-lH-imidatsoli

Fenyylimagnesiumbromidi valmistetaan tetrahydrofuraanissa 0,51 gssta Mg-lastuja ja 3,3 g:sta bromibentseeniä. Liuotetaan 2-(4-imidatsoyyli)-etyyli-4-kloorifenyyliketoni (2,3 g) tetrahydrofuraaniin, ja fenyylimagnesiumbromidi tiputetaan seokseen huoneenlämpötilassa. Lisäyksen jälkeen reaktioseosta sekoitetaan 40-50°C:ssa vielä 3 tunnin ajan. Reaktioseos jäähdytetään ja kaadetaan kylmään veteen. Vesi tehdään happamaksi suolahapolla. Tuote uutetaan metyleenikloridiin, joka haihdutetaan kuiviin. Tuote, joka on hydrokloridisuolana, kiteytetään uudelleen vesi-etanoli-liuoksesta. Haluttua tuotetta saadaan 3,2 g.

Esimerkki 7 l-bentsyyli-4-(3,3-difenyylipropyyli)-lH-imidatsoli ja l-bentsyyli-5-(3,3-difenyylipropyyli)-lH-imidatsoli 4-(3,3-difenyylipropyyli)-lH-imidatsoli (2,6 g) liuotetaan 6 ml:aan kuivaa dimetyyliformamidia. Tähän lisätään sekoittaen huoneeenlämpötilassa 0,5 g NaH:ä (60 Z) puolessa tunnissa. Lisäyksen jälkeen reaktioseosta sekoitetaan vielä tunnin ajan. Seokseen tiputetaan 1,7 g bentsyylibromidia 3 ml:ssa dimetyyliformamidia huoneenlämpötilassa ja sekoitusta jatketaan vielä 4 tunnin ajan. Reaktioseos kaadetaan kylmään veteen (30 ml) ja seos uutetaan tolueenilla. Yhdistetyt tolueeniuutteet pestään vedellä ja haihdutetaan kuiviin. Jäännös, joka on tuotteiden seos, puhdistetaan ja puhtaat isomeerit erotetaan pylväskromatografisesti (metyleenikloridi/meta-noli, 9,5/0,5).

Tuotteiden *H NMR-spektrit:

Toinen isomeeri: 2.57 (m, 4H), 3.52 (1H), 3.877 (t, 1H), 5.362 (s, 2H), 6.531 (s, 1H), 7.05-7.40 (m, 15H), 9.567 (s, 1H)

Toinen isomeeri: 2.375 (m, 4H), 3.858 (t, 1H), 5.253 (s, 2H), 7.01-7.36 (m, 16H), 9.441 (s, 1H) i - 3.9 - 93105

Esimerkki 8 4- (3,3-difenyylipropyyli)-1-(4-klooribentsyyli)-lH-imidatsoli ja 5- (3,3-difenyylipropyyli)-1-(4-klooribentsyyli)-lH-imidatsoli

Suoritetaan kuten esimerkki 7, mutta lähtöaineina käytetään 4-(3,3-di-fenyylipropyyli)-lH-imidatsolia ja 4-klooribentsyylikloridia.

Tuotteiden *H NMR-spektrit:

Toinen isomeeri: 2.48 (m, 4H), 3.934 (t, 1H), 4.999 (s, 2H), 6.514 (s, 1H), 7.0-7.3 (m, 14H), 7.517 (s, 1H)

Toinen isomeeri: 2.33 (m, 4H), 3.887 (t, 1H), 4.852 (s, 2H), 6.7-7.5 (m, 16H)

Esimerkki 9 4- [ 5-(2,6-dimetyylifenyyli)-3-(2,6-dimetyylifenyylietyyli)pentyyli]-lH-imidatsoli

Yhdistetään 4,0 g l-bentsyyli-5-[5-(2,6-dimetyylifenyyli)-3-(2,6-dime-tyylifenyylietyyli)-3-hydroksipentyyli]-lH-imidatsolin hydrokloridia ja 20 g kaliumvetysulfaattia ja seosta kuumennetaan 150°C:ssa 6 tuntia. Lisätään etanolia (40 ml) ja seos suodatetaan. Suodokseen lisätään 20 ml väkevää suolahappoa ja reaktioseosta vedytetään palladium-hiili (10 2) katalysaattorin läsnäollessa kunnes vedyn kulutus lakkaa. Reaktioseos suodatetaan, suodokseen lisätään vettä ja seos tehdään emäksiseksi nat-riumhydroksidilla. Tuote uutetaan tolueeniin, joka pestään vedellä ja haihdutetaan kuiviin. JäännOs, joka on tuote emäksenä, muutetaan nitraatiksi typpihapolla vedessä. Nitraatin sp. on 147-150°C.

* Esimerkki 10 4-[3,3-bis(3,5-dimetyylifenyyli)propyyli]-lH-imidatsoli a) 1-bentsyyli-5-[3,3-bis(3,5-dimetyyylifenyyli)-3-hydroksipropyyli]- lH-imidatsoli , 1,06 g Mg-lastuja peitetään 30 ml :11a kuivaa tetrahydrofuraania. Seokseen lisätään pisaroittaan 5-bromi-m-ksyleeniä (8,14 g) 10 ml:ssa kuivaa tetrahydrof uraania siten, että reaktio etenee tasaisesti. Lisäyksen jälkeen reaktioseosta refluksoidaan tunnin ajan ja sitten jäähdytetään huoneen- - 20 - 93105 lämpötilaan. Reaktioseos tiputetaan sitten liuokseen, jossa on 1-bentsyy-li-5-imidatsolipropaanihapon etyyliesteriä (5,0 g) 40 ml:ssa tetrahydro-furaania 60°C:ssa. Lisäyksen jälkeen seosta refluksoidaan 2 tunnin ajan, minkä jälkeen seos jäähdytetään ja kaadetaan kylmään veteen. Tetrahydro-furaani haihdutetaan ja liuokseen lisätään väkevää suolahappoa. Liuos jäähdytetään, siihen lisätään vähän eetteriä ja saostunut tuote, joka on hydrokloridisuolana, poistetaan suodattamalla. Tuote pestään ja kuivataan. Tuotteen saalis on 4,1 g ja sp. 120-124°C.

b) l-bentsyyli-5-[3,3-bis(3,5-dimetyylifenyyli)propen-2-yyli]-lH-imi- datsoli 4,0 g l-bentsyyli-5-[3,3-bis(3,5-dimetyylifenyyli)-3-hydroksipropyyli]-lH-imidatsolia liuotetaan 30 ml:aan etanolia ja tähän lisätäään 2 ml väkevää suolahappoa. Reaktioseosta refluksoidaan 4 tuntia ja sitten haihdutetaan kuiviin. Jäännös, joka on tuote, kiteytetään uudelleen etyyliasetaatista. Tuotteen saalis on 3,1 g ja sp. 170-176°C.

Saman menetelmän mukaan valmistetaan esimerkiksi seuraavat substituoidut johdannaiset: l-bentsyyli-5-(3,3-difenyylipropen-2-yyli)-lH-imidatsoli, hydrokloridin sp. 173-175°C.

l-bentsyyli-5-[3,3-bis(2-metoksifenyyli)propen-2-yyli]-lH-imidatsoli, hydrokloridin sp. 191-194°C.

l-bentsyyli-5-[3,3-bis(3-metoksifenyyli)propen-2-yyli]-lH-imidatsoli, hydrokloridin sp. 132-135°C.

l-bentsyyli-5-[3,3-bis(4-metoksifenyyli)propen-2-yyli]-lH-imidatsoli, hydrokloridin sp. 157-163°C.

l-bentsyyli-5- [ 3,3-bis (2,3-dimetyylif enyyli) propen-2-yyli ] -lH-imidatsoli, hydrokloridi.

*H NMR (emäs): 2.055 (s, 3H), 2.159 (s, 3H), 2.251 (s, 6H), 3.467 (d, 2H), 4.781 (s, 1H), 5.281 (s, 2H), 5.761 (t, 1H), 6.8-7.4 (m, 12H), 9.97 (s, 1H) l-bentsyyli-5-[3,3-bis(2-metyylifenyyli)propen-2-yyli}-lH-imidatsoli, hydrokloridin sp. 84-87°C.

• .

It 93105 l-bentsyyli-5-[3,3-bis(3-metyylifenyyli)propen-2-yyli]-lH-imidatsoli, hydrokloridin sp. 115-117°C.

c) l-bentsyyli-5-[3,3-bis(metyylifenyyli)propyyli]-lH-imidatsoli

Liuotetaan l-bentsyyli-5-[3,3-bis(3,5-dimetyylifenyyli)-propen-2-yyli]-lH-imidatsolin hydrokloridi etanoliin. Lisätään joukkoon katalyyttinen määrä palladium-hiiltä (Pd/C 10 Z) ja reaktioseosta sekoitetaan voimakkaasti vetyatmosfäärissä huoneenlämpötilassa niin kauan kuin vetyä kuluu. Seos suodatetaan ja suodos haihdutetaan kuiviin. Jäännös, joka on tuote, puhdistetaan flash-kromatografisesti eluoimalla metyleenikloridi-metano-li-seoksella.

Samalla menetelmällä valmistetaan esimerkiksi l-bentsyyli-5-[3,3-bis(3-metoksifenyyli)propyyli]-lH-imidatsolin hydrokloridi (sp. 165-167°C) ja l-bentsyyli-5-[3,3-difenyylipropyyli]-lH-imidatsolin hydrokloridi (sp. 160-162°C).

d) 4-[3,3-bis(3,5-dimetyylifenyyli)propyyli]-lH-imidatsoli 2,0 g l-bentsyyli-5-[3,3-bis(3,5-dimetyylifenyyli)propyyliJ-lH-imidatso-lin hydrokloridi vedytetään 2 N suolahapon (30 ml) ja etanolin (10 ml) seoksessa 80°C:ssa katalysaattorin Pd/C (10 Z) läsnäollessa. Kun vedyn kulutus lakkaa, reaktioseos jäähdytetään, suodatetaan ja haihdutetaan kuiviin. Lisätään vettä ja seos tehdään emäksiseksi natriumhydroksidilla. Tuote uutetaan etyyliasetaattiin. Yhdistetyt etyyliasetaattiuutteet pestään vedellä, kuivataan natriumsulfaatilla ja haihdutetaan kuiviin. Jäännös, joka on tuote emäksenä, tehdään hydroklorisuolaksi etyyliasetaatissa kuivalla suolahapolla. Näin saadun tuotteen saalis on 0,6 g ja sp. 101-105°C.

*H NMR: 2.247 (s, 12H), 2.2-3.7 (m, 4H), 3.798 (t, 1H), 4.788 (s, 2H), 6.8-7.2 (m, 6H), 7.214 (s, 1H), 8.715 (s, 1H)

Samalla menetelmällä valmistetaan esimerkiksi seuraavat keksinnön mukaiset yhdisteet: 4-[3,3-bis(2,3-dimetyylifenyyli)propyyli]-lH-imidatsoli *H NMR (emäs): . 2.097 (s, 6H), 2.260 (s, 6H), 2.3 (m, 2H), 2.6 (m, 2H), 4.389 (s, 1H), 6.0 (s, 1H), 6.712 (s, 1H), 7.011 (s, 6H), 7.508 (s, 1H) - 22 - 93105 4- [ 3,3-bis(2-metoksifenyyli)propyyli]-lH-imidatsoli, hydrokloridin sp. 194-196°C.

4-[3,3-bis(3-metoksifenyyli)propyyli]-lH-imidatsoli *H NMR (emäs): 2.5 (m, 4H), 3.747 (s, 6H), 3.862 (t, 1H), 6.6-7.3 (m, 9H), 7.498 (s, 1H), 8.165 (s, 1H) 4-[3,3-bis(4-metoksifenyyliJpropyyli]-lH-imidatsoli 1H NMR (emäs): 2.5 (m, 4H), 3.744 (s, 6H), 3.815 (t, 1H), 6.1 (leveä signaali, 1H), 6.732-7.171 (m, 9H), 7.489 (s, 1H) 4-[3,3-bis(4-metyylifenyyli)propyyli]-lH-imidatsoli ^ NMR (HCl-suola): 2.260 (s, 6H), 2.5 (m, 4H), 3.879 (t, 1H), 4.907 (s, 2H), 6.9-7.2 (m, 9H), 8.727 (s, 1H) 4- [ 5- (2,6-dimetyylif enyyli )-3-(2,6-dimetyylif enyylietyyli) -3-hydroksipen-tyyli]-lH-imidatsoli, hydrokloridin sp. 178-180°C.

Esimerkki 11 1-bentsyyli-5-[3,3-bis(4-metyylifenyyli)propen-2-yyli]-lH-imidatsoli

Kuivaan reaktioastiaan punnitaan 4,8 g (0,2 mol) natriumhydridiä (pesty sykloheksaanilla), jonka päälle tiputetaan 100 ml kuivaa dimetyylisulfok-sidia. Reaktioastiaa lämmitetään 80°C:ssa kunnes vetyä ei enää vapaudu. Muodostunut metyylisulfinyylikarbanioniliuos jäähdytetään jää-vesi-hau-teessa ja tähän lisätään 54,1 g 2-(l-bentsyyli-5-imidatsoyyli)etyyli-trifenyylifosfoniumbromidia 200 ml:ssa dimetyylisulfoksidia. Reaktio-seosta sekoitetaan sitten huoneenlämpötilassa 0,5 tuntia ja siihen lisätään pienissä erissä 23,0 g 4,4’-dimetyylibentsofenonia. Reaktioseosta sekoitetaan huoneenlämmössä tunnin ajan ja osa dimetyylisulfoksidista tislataan. Jäännös kaadetaan veteen, joka on tehty emäksiseksi natrium-hydroksidilla. Tuote uutetaan tolueeniin ja yhdistetyt tolueeniuutteet pestään vedellä, kuivataan natriumsulfaatilla ja haihdutetaan kuiviin. Jäännös, joka on raakatuote emäksenä, tehdään hydrokloridisuolaksi etyyliasetaatissa. Haluttua tuotetta saadaan 32 g. Sp. 216-220°C.

Il 931 05 *H NMR: 2.289 (s, 3H). 2.370 (s, 3H), 3.467 (d, 2H). 4.764 (s, 1H), 5.302 (s, 2H), 6.030 (t, 1H), 6.8-7.4 (m, 9H), 8.9 (s, 1H)

Esimerkki 12 l-bentsyyli-5-(3,3-difenyylipropyyli)-lH-imidatsoli a) l-bentsyyli-5-(3,3-difenyyli-1-hydroksipropyyli)-lH-imidatsoli

Grignardin reagenssi, difenyylietanyylimagnesiumkloridi, valmistetaan tavalliseen tapaan difenyylietanyylikloridista (0,01 mol) ja magnesiumlastuista (0,01 mol) kuivassa dietyylieetterissä (30 ml). 1-bentsyyli-5-imidatsolialdehydi (0,005 mol) liuotetaan kuivaan dietyylieetteriin ja Grignardin reagenssi lisätään pisaroittain liuokseen. Reaktioseosta refluksoidaan 3 tunnin ajan. Reaktioseos kaadetaan sitten 2 N suolahappoon ja uutetaan dietyylieetterillä. Vesifaasi tehdään emäksiseksi natriumhydroksidilla ja uutetaan sitten etyyliasetaatilla. Etyyliasetaattifaasi kuivataan ja haihdutetaan. Jäännös, puhdistetaan flash-kromatografisesti eluoimalla metyleenikloridi-metanoli-seoksella (9,5:0,5). Tuotteen saalis emäksenä on 60 Z ja sp. 188-190°C.

NMR (emäs, CDC13): 2.53 (t, 2H), 4.16 (t, 1H), 4.38 (t, 1H), 4.99 ja 5.09 (ABq,2H), 6.9-6.95 (m, 2H), 7.02 (s, 1H), 7.14-7.27 (m, 13H), 7.43 (s, 1H) b) l-bentsyyli-5-(3,3-difenyyli-l-propenyyli)-lH-imidatsoli l-bentsyyli-5-(3,3-difenyyli-l-hydroksipropyyli)-lH-imidatsoli (O.Olmol) ja kaliumvetysulfaatti (0,135 mol) yhdistetään ja seosta kuumennetaan öljyhauteessa 155°C:ssa silloin tällöin sekoittaen 6 tunnin ajan. Reaktioseoksen annetaan jäähtyä, seos tehdään emäksiseksi 2 M * natriumhydroksidilla ja uutetaan metyleenikloridilla. Metyleeni- kloridifaasi kuivataan ja haihdutetaan. Jäännös puhdistetaan flash-kromatografisesti eluoimalla metyleenikloridi-metanoli-seoksella (9,5:0,5). Emäksinen tuote tehdään hydrokloridisuolaksi dietyylieetterissä kuivalla vetykloridikaasulla. Saalis 64 Z.

NMR (HCl-suola, MeOH-d4): . 4.90 (d, 1H), 5.39 (s, 2H), 6.09 (d, 1H), 6.82 (dd, 1H), 7.0-7.4 (m, 15H), 7.74 (s, 1H), 9.03 (s, 1H) c) l-bentsyyli-5-(3,3-difenyylipropyyli)-lH-imidatsoli - 24 - 93105 l-bentsyyli-5-(3,3-difenyyli-l-propenyyli)-lH-imidatsoli hydrokloridin hydraus suoritetaan samalla tavalla kuin on esitetty esimerkissä 10 c). Raakatuote puhdistetaan flash-kromatografisesti eluoimalla metyleeni-kloridi-metanoli-seoksella. Hydrokloridisuolan sp. on 160-162°C ja saalis 81 Z.

Esimerkki 13 A-(3,3-difenyylipropyyli)-1-imidatsoli l-bentsyyli-5-(3,3-difenyyli-l-propenyyli)-lH-imidatsoli hydrokloridi (0,01 mol) liuotetaan etanoliin ja liuos tehdään happamaksi väkevällä suolahapolla. Seosta vedytetään katalysaattorin 10 Z Pd/C läsnäollessa kunnes vetyä ei enää kulu. Reaktioseos suodatetaan, lisätään vettä ja seos tehdään emäksiseksi natriumhydroksidilla. Sakka, joka on tuote, suodatetaan, pestään vedellä ja kuivataan. Saalis 83 Z. Vesi-etanolissa tehdyn uudelleenkiteytyksen jälkeen tuote sulaa 115-117°C:ssa.

Vertailukokeet

Keksinnön mukaisten yhdisteiden erityispiirre lähimpään tekniikan tasoon nähden osoitettiin vertaamalla 4(5)-(2,2-difenyylietyyli)-imidatsolin (EP-A1-165779) ja A-(3,3-difenyylipropyyli)-lH-imidatsolin (taulukko 1, yhdiste 5) aromataasi- ja desmolaasi-inhibitioaktiivisuuksia. 4(5)-(2,2-difenyylietyyli)imidatsolia merkitään kirjaimella A ja A-(3,3-difenyylipropyyli )-lH-imidatsolia kirjaimella B.

Yhdisteiden kyky inhiboida aromataasia mitattiin edellä kuvatun menetelmän mukaisesti. Yhdisteiden kyky inhiboida desmolaasia mitattiin Pasasen ja Pelkosen menetelmän mukaan (Steroids 43:517-527, 1984).

Inkubointi suoritettiin 1,5 ml:n Eppendorf koeputkissa, ja Eppendorf ravistelijaa, sentrifuugia ja inkubaattoria käytettiin yksikkönä. 300 μ1:η inkubointitilavuudessa valmistettiin substraatti (5 μΜ) Hanukoglun • ja Jefcoaten julkaisun mukaan (J. Chromatogr. 190:256-262, 1980), ja lisättiin lOOOOOdpm radioaktiivista 3H-4-kolesterolia (yhdisteen puhtaus tutkittiin TLC:llä) 0,5 Z Tween 20:ssa, 10 mM MgClz:a, 5 μΜ syaaniketonia ja 2 mM NADPHia. Kontrollinäytteissä oli kaikki edellä mainitut aineet, mutta entsyymipreparaatti inaktivoitiin ennen inkubointia lisäämällä 900 μΐ metanolia. Käytetty entsyymi eristettiin ihmisen istukan tai naudan lisämunuaisten mitokondriaalisesta fraktiosta (1 mg proteiinia). Kun oli ’ inkuboitu 30 min 37°C:ssa, reaktio lopetettiin lisäämällä 900 μΐ metanolia. Lisättiin 1500 dpm merkkiaineena käytettyä 14C-4-pregnenolonia jokaiseen inkubaattiin ja putkia sekoitettiin voimakkaasti. Seosten annettiin tasapainottua 10 min ajan, minkä jälkeen metanolilla saostetut

II

93105 proteiinit erotettiin sentrifugoimalla (8000 x g, 2 min) ja supernatantti imettiin 1 ml: n muoviseen injektioruiskuun ja imeytettiin esitasa-painotettuun (75 Z metanoli) minikoloimiin. Kolonni pestiin 1 ml:11a 75 Z metanolia ja sitten 3 ml :11a 80 Z metanolia. 80 Z metanolin eluaatti valutettiin astiaan, jossa laskenta tapahtui, ja lisättiin 10 ml tuikenestettä. Radioaktiivisuus mitattiin neste-tuikelaskijalla (LKB RackBeta) käyttäen kaksois-leima ohjelmaa. Istukan ja naudan lisämunuaisten entsyymi-preparaattien tyypilliset aktiivisuudet olivat vastaavasti 0,5-3 ja 50-100 pmol pregnenolonia muodostunut/mg proteiinia/min.

Inhibitiokokeissa aine (lopullinen konsentraatio 1-1000 μΜ) lisättiin inkubointiseokseen liuoksena, jonka tilavuus oli 10-20 μΐ, yleensä metanoli- tai etanoliliuoksena. Sama määrä liuotinta lisättiin kontrolli-inkubointiastiaan. IC-50-arvot (konsentraatio, joka inhiboi 50 Z entsyymin kontrolliaktiivisuudesta) määritettiin graafisesti.

Tulokset esitetään taulukossa 3.

Taulukko 3.

Yhdiste Aromataasi Desmolaasi IC-50 (μιηοΐ/ΐ) IC-50 (μιηοΐ/ΐ) A 49 9 B 15 36

Taulukon 3 tuloksista nähdään, että keksinnön mukainen yhdiste B inhiboi aromataasia paremmin kuin lähintä tekniikan tasoa edustava yhdiste A ja lisäksi yhdiste B inhiboi aromataasia selektiivisesti. Yhdiste A taas inhiboi selektiivisesti desmolaasia.

* »

Claims

- 26- 93105 Pa tenttivaatimus Menetelmä terapeuttisesti arvokkaiden imidatsolijohdannaisten valmistamiseksi, joiden kaava on -fj-CHRe-CHR^CRs-X-^^/ y r2 (i) r*2 tai niiden farmaseuttisesti hyväksyttävien happoadditiosuolojen valmistamiseksi, jossa Rlt R2, R*j ja R*2, jotka voivat olla samanlaisia tai erilaisia, ovat H, CH3, C2Hs, OCH3 tai halogeeni; R* on H tai -CH2 -Rj, jossa R3 on H, CH3 tai halogeeni; R4 on H, Rj on H tai OH ja R6 on H tai OH tai R4 ja Rs muodostavat keskenään sidoksen tai R4 ja R6 muodostavat keskenään sidoksen ja X ja Y, jotka voivat olla samanlaisia tai erilaisia, ovat sidos tai suoraketjuinen Cj^-alkyleeni, tunnettu siitä, että a) 4(5)-imidatsolipropaanihapon alkyyliesteri, jonka kaava on >N 0 & -5- CH2CH2-C-OR R’ jossa R’ merkitsee samaa kuin aikaisemmin ja R on alkyyli, saatetaan rea-: goimaan Grignardin reagenssin kanssa, jonka kaava on Rj R2—a|)V(CH2)n Mg Hai jossa R1 ja R2 merkitsevät samaa kuin aikaisemmin, n on 0-2 ja Hai on ha-logeeniatomi, jolloin muodostuu kaavan (I) mukainen yhdiste, jonka kaava .* on - 27 - 931 05 N HO _ Rt <? ^-CH2CH2C-(CH2)b— XN (°Η2)^ jossa R', Rt ja R2 merkitsevät samaa kuin aikaisemmin ja n on 0-2, tai b) 4(5)-imidatsolipropaanihapon alkyyliesteri, jonka kaava on O \ 'H^ch2ch2-c-or I R’ jossa R’ merkitsee samaa kuin aikaisemmin ja R on alkyyli, saatetaan reagoimaan Grignardin reagenssin kanssa, jonka kaava on Ri R^^Hal jossa R] ja R2 merkitsevät samaa kuin aikaisemmin ja Hai on halogeeniato-mi, jolloin muodostuu yhdiste, jonka kaava on .N O Rl <? -i-CH2CH2-C-(CH2) _/QW2 N R’ joka edelleen saatetaan reagoimaan toisen Grignardin reagenssin kanssa, jonka kaava on R’i R» CH2).MgHal jossa R’t ja R’2 merkitsevät samaa kuin aikaisemmin, m on 0-2 ja Hai on halogeeniatorni, jolloin muodostuu kaavan (I) mukainen yhdiste, jonka „ kaava on 93105 N HO R2 <T -ί- GH2CH2|(CH2)n-^gC H (CH2)m Rz ^R, jossa R* , Rj, R2, R’, ja R’2 merkitsevät samaa kuin aikaisemmin ja m ja n, jotka voivat olla samanlaisia tai erilaisia, ovat 0-2, tai c) poistetaan vettä yhdisteestä, jonka kaava on N OH Rj 4)~ch2ch2-c-x—(c^r jolloin muodostuu kaavan (I) mukainen yhdiste, jonka kaava on N Rj y- ch2-ch-c-x-^^ N Y R2 jossa R*, Rj, Rz, R*lt R’2> X ja Y merkitsevät samaa kuin aikaisemmin, tai d) hydrataan katalyyttisesti yhdiste, jonka kaava on Rx 4)- ch2-ch-c-x-^^ nn y r2 ί .Λ"' jolloin muodostuu kaavan (I) mukainen yhdiste, jonka kaava on - 29 - 93105 .N R, <f ^CHrCH,-CH-X-^ft X N Y ^~Rz jossa R’t Rj, R2, R*,, R*2, X ja Y merkitsevät samaa kuin aikaisemmin, tai e) hydrataan katalyyttisesti yhdiste, jonka kaava on / N\ —Λ \ + ΟΗ,-ΟΗ-Ο-Χ-^ W Y ' r2 jolloin muodostuu kaavan (I) mukainen yhdiste, jonka kaava on .N R, J^ch2-ch2-ch-x_^^ 1 .rh’’ jossa Rj, R2, R’j, R’2, X ja Y merkitsevät samaa kuin aikaisemmin, tai f) hydrataan katalyyttisesti yhdiste, jonka kaava on yN Rj : -)-(-ch2-ch2-ch-x— Y R2 jolloin muodostuu kaavan (I) mukainen yhdiste, jonka kaava on t 93105 N Rj \ CH2-CHrCH-X-^^ N Y R2 ' .ν-Φ'" jossa Rj, R2> R’lf R’2, X ja Y merkitsevät samaa kuin aikaisemmin, tai g) saatetaan imidatsolijohdannainen, jonka kaava on .N __ Ri -i- CHRe-CHR.-CRs-X-ZQ^ Y Rz ‘ .νφ-·'· jossa Rj, R2, R’1( R’2, R4, R5, R6, X ja Y merkitsevät samaa kuin aikaisemmin, reagoimaan bentsyylihalogenidin kanssa, jonka kaava on CH2Hal jossa R3 merkitsee samaa kuin aikaisemmin ja Hai on halogeeniatomi, jolloin muodostuu kaavan (I) mukainen yhdiste, jonka kaava on / N\ Ri 4j- chr6-chr4-cr5-x—(nS N Y R2 (§-- ^ jossa Rj, R2, R3, R4, Rs, Rg, R*j, R’2, X ja Y merkitsevät samaa kuin aikaisemmin, tai h) 4(5)-imidatsolialdehydi, jonka kaava on 93105 - 31 - N ^ -ψ-CHO I R’ jossa R* merkitsee samaa kuin aikaisemmin, saatetaan reagoimaan Grignar-din reagenssin kanssa, jonka kaava on HalMgCH2-CH-X-^^^-- R! Y r2 jossa Rx, Rz, R’lt R*2, X ja Y merkitsevät samaa kuin aikaisemmin ja Hai on halogeeniatomi, jolloin muodostuu kaavan (1) mukainen yhdiste, jonka kaava on tl OH Rx ^ -4[- CH-CH2-CH-X—^^Hr2 *' jkr jossa R’, Rj, R2, R’j, R’2, X ja Y merkitsevät samaa kuin aikaisemmin, tai i) poistetaan vettä yhdisteestä, jonka kaava on . N OH Rx -jl·- CH-CH2-CH-X- Y jossa R’, Rx, R2, R’j, R’2, X ja Y merkitsevät samaa kuin aikaisemmin, jolloin muodostuu kaavan (I) mukainen yhdiste, jonka kaava on 93105 <f 4j- CH-0H-ca-x— Ntr γ ι· „&· jossa R’, Rlt R2, R’j, R’2, X ja Y merkitsevät samaa kuin aikaisemmin, tai j) hydrataan katalyyttisesti yhdiste, jonka kaava on .N __Ri -fj- CH=CH-CH-X-/QX-R2 jossa R*, Rj, R2, R’j, R’2, X ja Y merkitsevät samaa kuin aikaisemmin, jolloin muodostuu kaavan (I) mukainen yhdiste, jonka kaava on Rj -ί- ch2-ch2-ch-x —\^Δ) Α !Γ Y N-f jossa R’, Rj, R2, R’j, R’2, X ja Y merkitsevät samaa kuin aikaisemmin, tai k) hydrataan katalyyttisesti imidatsolijohdannainen, jonka kaava on .— *1 -η- ch-ch-ch-x-/(^S-r2 1 .-,-4-'·· jossa R*, Rlt R2, R’j, R’2, X ja Y merkitsevät samaa kuin aikaisemmin, jolloin muodostuu kaavan (1) mukainen yhdiste, jonka kaava on II 93105 4j— CH?-CH?-CH-X— XIT Y jossa R,, R2, R’j, R*2i X ja Y merkitsevät samaa kuin aikaisemmin, tai 1. fosfoniumsuola, jonka kaava on “H— CH2CH2P^—Ph Hai ° X w ^ Ph R’ jossa R* merkitsee samaa kuin aikaisemmin, saatetaan reagoimaan vahvan emäksen kanssa ja edelleen ketonin kanssa, jonka kaava on •t-@C jossa R1( R2, R*j, R’2> X ja Y merkitsevät samaa kuin aikaisemmin, jolloin saadaan kaavan (I) mukainen yhdiste, jonka kaava on <N_ __R! + CH2-CH-C-xVgC ΪΤ Y jossa R’, Rj, R2, R’j, R’2, X ja Y merkitsevät samaa kuin aikaisemmin, ja haluttaessa näin saatu lopputuote muutetaan farmaseuttisesti hyväksyttäväksi happoadditiosuolaksi. * · 95105 - 34 - Förfarande fOr framställning av terapeutiskt värdefulla imidazolderivat, vilkas allmänna formel Kr N Rj ^ ^-^-CRs-X-ZQN ^vr y r2 (i) R'2 eller deras farmaceutiskt acceptable syraadditionssalter, där R,, R2, R’, och R’2, som kan vara likadana eller olika, är H, CH3, C2H5, OCH3 eller halogen; R’ är H eller -CH2—R3. i vilken R3 är H, CH3 eller halogen; R4 är H, Rs är H eller OH och R^ är H eller OH eller R4 och Rj tillsammans bildar en bindning eller R4 och Rg tillsammans bildar en bindning och X och Y, som kan vara likadana eller olika, är en bindning eller en rak Cj_2-alkylengrupp, kännetecnat därav, att man a) liter 4(5)-imidazolpropansyra alkylester, vars formel är /N O 7 —|4-ch2ch2-c-or R’ : där R’ är samma som tidigare och R är en alkylgrupp, reagera med en Grignards reagens, vars formel är R, MgHal där Rj och R2 är samma som tidigare, n är 0-2 och Hai är halogenatom, ·' varvid man fir en förening av formeln (I), vars formel är 11 „ 93105 - 35 - N HO R, 4. ' πέ \ Tj^CH2CH2C- (ch2)„ —\Qy r2 i där R’, Rj och Rz är samma som tidigare och n är 0-2, eller b) liter 4(5)-imidazolpropansyra alkylester, vars formel är .N 0 & 4L 11 JJ'CHjCH^C-OR R’ där R’ är samma som tidigare och R är en alkylgrupp, reagera med en Grignards reagens, vars formel är Rz^^^>-(CH2)nMgHal där Rj och R2 är samma som tidigare och Hai är en halogenatom, varvid man fär en fOrening, vars formel är N O Rj -fj- ch2ch2-c- (ch2 \N/ N- R* som man vidare läter reagera med en annan Grignards reagens, vars formel * är där R’, och R’z är samma som tidigare, m är 0-2 och Hai är en halogenatom, varvid man fär en förening av formeln (I), vars formel är 93105 Oho r, CH2CHrC-<CH2)n-/5?£ N (CH2)m där R’, Rj, R2, R’j och R’2 är samma som tidigare och m och n, som kan vara likadana eller olika, är 0-2, eller c) avspjälker vatten frän en förening, vars formel är N OH R2 N Y '-R2 varvid man fär en förening av formeln (I), vars formel är <f ^-ch,-ch-o-xh^ NIT Y ' R2 där R’f Rj, R2, R’p R’z, X och Y är samma som tidigare, eller .. d) hydrerar katalytiskt en förening, vars formel är II 1 ,Λ"·" varvid man fär en förening av formeln (I), vars formel är 93105 N Rj ^-ch2-ch2-ch-x-^^ W Y r2 !' .,-4*'' där R’, Rj, R2, R’lt R’z, X är Y är saxnma som tidigare, eller e) hydrerar katalytiskt en förening, vars formel är \ -jr n y \ <,4r varvid man fär en förening av formeln (I), vars formel är N Rj ^-ch2-ch2-ch-x— I R* 1 ...-W· där Rj, R2, R’j, R’2, X och Y är samma som tidigare, eller f) hydrerar katalytiskt en förening, vars formel är /N R, -fi- ch2-ch2-ch-x— N Y R2 varvid man fär en förening av formeln (I), vars formel är • · 93105 .N Rl <f 4^CH2-CH2-CH-X-<^^ Y R2 där Rj, R2, R’j, R’2i X och Y är samma som tidigare, eller g) läter ett imidazolderivat, vars formel är O Ri CHRe-CHR^-CRs-X-ZQ) π Y '-'R-, där Rlt R2> R’i, R’2, R4, R5, R6i X och Y är samma som tidigare, reagera med en benzylhalogenid, vars formel är R3-^0)-CH2Hal där R3 är samma som tidigare och Hai är en halogenatom, varvid man fär en förening av formeln (I), vars formel är O Ri chr6-chr4-cr5-x_/qC y r2 ra- E> där Rj, R2, R3, R4, R5, Rg, R’j, R’2, X och Y är samma som tidigare, eller h) läter en 4(5)-imidazolaldehyd, vars formel är 9 .. * 9 93105 <^ Ifl- CHO I R’ där R’ är samma som tidigare, reagera med en Grignards reagens, vars formel är HalMgCH2-CH-X—Rj Y '—^R2 där Rj, R2, R’j, R12, X och Y är saonna som tidigare och Hal är en halogenatom, varvid man fär en förening av formeln (I), vars formel är oh Rl -W- ch-chz-ch-x—/Q^- r2 Y där R’, Rj, R2, R’j, R12, X och Y är samma som tidigare, eller i) avspjälker vatten frin en förening, vars formel är N OH Rj <ζ^ -U- ch-ch2-ch-xR? X1T Y '-' R> R,'-^}-R·1 där R’, Rj, R2, R1j, R12, X och Y är samma som tidigare, varvid man fir en förening av formeln (I), vars formel är » « 93105 N R, —H- CH-CH-CH-X //^SC- R2 Y ' ' där R’, Rp R2, R’p R'2, X och Y är saama som tidigare, eller j) hydrerar katalytiskt en förening, vars formel är N Rj —H~ CH-CH-CH-X -((3/ Rz Y '-' där R*, Rp R2, R’p R’2, X och Y är samma som tidigare, varvid man fär en förening av formeln (I), vars formel är N Rl ^-ch2-ch2-ch-x-(^Ä—r2 Y '-' där R’, Rp R2, R’p R’2, X och Y är samma som tidigare, eller k) hydrerar katalytiskt ett imidazolderivat, vars formel är N · Y '-' .’ där R’, Rp R2, R’p R’2, X och Y är samma som tidigare, varvid man fär en förening av formeln (I), vars formel är li tl 93105 - 41 - N Kx -Π- ch2-ch2-ch-x^(j£vr2 Y ! där Rj, R2, R’j, R’2, X och Y är samma som tidigare, eller 1. läter ett fosfoniumsalt, vars formel är -^-CH2CH2P ®—Ph Hal Θ ^ Ph I R’ där R’ är samma som tidigare, reagera med en stark bas och vidare med en keton, vars formel ar • t '^§C -R,‘ där Rj, R2, R’j, R’2, X och Y ar samma som tidigare, varvid man fär en fOrening av formeln (I), vars formel är <\ ch2-ch«c-x-/Q^ :* dar R’, Rj, R2, R’j, R’2, X och Y ar samma som tidigare, och, om s& Onskas, ändras slutprodukten till ett farmaceutiskt acceptabelt syraadditionssalt.