FI92334B - Menetelmä syklosporiinien tuottamiseksi ja menetelmässä käytettävä uusi Tolypocladium-kanta - Google Patents
Menetelmä syklosporiinien tuottamiseksi ja menetelmässä käytettävä uusi Tolypocladium-kanta Download PDFInfo
- Publication number
- FI92334B FI92334B FI925940A FI925940A FI92334B FI 92334 B FI92334 B FI 92334B FI 925940 A FI925940 A FI 925940A FI 925940 A FI925940 A FI 925940A FI 92334 B FI92334 B FI 92334B
- Authority
- FI
- Finland
- Prior art keywords
- tolypocladium
- cyclosporin
- strain
- cyclosporins
- lea3
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P21/00—Preparation of peptides or proteins
- C12P21/02—Preparation of peptides or proteins having a known sequence of two or more amino acids, e.g. glutathione
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K7/64—Cyclic peptides containing only normal peptide links
- C07K7/645—Cyclosporins; Related peptides
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/14—Fungi; Culture media therefor
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Virology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Botany (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Steroid Compounds (AREA)
Description
92334
Menetelmä syklosporiinien tuottamiseksi ja menetelmässä käytettävä uusi Tolypocladium-kanta 5 Tässä keksinnössä esitetään uusi Tolypocladium-mikrobila-ji ja menetelmä syklosporiinien, erityisesti syklosporii-ni A:n tuottamiseksi fermentoimalla tämän lajin kantaa aerobisesti.
10 Syklosporiinit ovat neutraaleja, voimakkaasti lipofiili-siä, syklisiä undekapeptidejä, joiden aminohappokoostumus vaihtelee. Nykyisin tunnetaan 25 erilaista syklosporiini-muotoa (A-Z). Näistä A-muoto on osoittautunut kliinisesti arvokkaimmaksi (ftehäöek ja De-xiu, Process Biochem. 1991, 15 26, 157-166).
Syklosporiini eristettiin alun perin 1970-luvulla sieni-kannoista Cylindrocarpon lucidum Booth ja Tolypocladium inflatum Gams, jotka oli eristetty maanäytteistä USA:sta 20 ja Norjasta. Tolypocladium inflatum -tuottokanta (NRRL
8044) identifioitiin aluksi kannaksi Trichoderma polyspo-rum (Link ex Pers) Rifai. Tämä kanta ja sen tuottamat antibioottiset aineet kuvataan mm. FI-patentissa 54606. Kannan kasvuolosuhteista ja taksonomiasta raportoidaan 25 myös artikkelissa Dreyfuss et ai., Eur. J. Appi. Microbiol., 1976, 3, 125.
Edellä mainittu kanta Cylindrocarpon lucidum Booth (NRRL 5760) kuvataan FI-patentissa 52851. Muita kirjallisuudes-30 ta löytyviä syklosporiineja tuottavia mikrobikantoja ovat mm. DD-patentissa 298 276 kuvattu Tolypocladium inflatum -kanta SF 136, joka tuottaa ainakin syklosporiini A:ta, ja GB-patenttihakemuksessa 2 227 489 kuvattu Tolypocladium varium, joka tuottaa mm. syklosporiinien A, B ja C 35 seosta. JP-hakemuksessa 826 3093 A2 esitetään kaksi Fusa-rium-kantaa, joiden mainitaan tuottavan syklosporiineja.
92334 2
Kokooma-artikkelissaan Isaac et ai. (Antimicr. Agents Chemoter., 1990, 34, 121-127) vertailevat joidenkin tunnettujen Tolypocladium-kantojen syklosporiinien tuottoa.
5 Syklosporiini A löydettiin alun perin antifungaalisena antibioottisena yhdisteenä. Vasta myöhemmin selvisi sen erinomainen vaikutus immunosuppressiivina (Borel et ai., Immunology, 1977, 32, 1017). Syklosporiinia käytetäänkin nykyisin elintensiirtoleikkausten jälkihoidossa, ja se on 10 lähes ainoa lääke tähän tarkoitukseen. Tästä on raportoitu ensimmäisen kerran munuaisen siirron (Caine; Lancet, 1978, 2, 1323) ja luuytimen siirron yhteydessä (Powles, Lancet, 1978, 2, 1327). Elintensiirtoleikkausten lisäksi syklosporiinia voidaan käyttää erilaisten autoimmuunisai-15 rauksien, kuten esim. reuman ja psoriasiksen hoitoon.
Kirjallisuudessa esiintyvien mikrobikantojen syklosporiini A:n tuottoprosesseissa on ongelmana osin alhaiset tuotot ja pitkät fermentointiajät. Jos tuotto onkin saatu 20 suureksi, on syklosporiini A:n suhteellinen määrä usein ollut pieni. On myös todettu, että pienempituottoiset kannat muodostavat suhteessa suuria syklosporiini A -määriä. (De-xiu et ai., Folia Microbiol., 1991, 36(6) 549-556) .
25
Tarkoituksenamme oli löytää tuottokanta, joka antaisi mahdollisimman suuren tuoton lyhyessä fermentointiajassa sekä taloudellisissa olosuhteissa.
30 Etsittäessä mahdollisia tuottokantoja löydettiin erittäin nopeatuottoinen Tolypocladium-kanta, joka muodostaa huomattavia määriä syklosporiini A:ta, ja suhteellisen vähän muita syklosporiinimuotoja, mikä mahdollistaa syklosporiini A:n helpomman puhdistuksen. Tämä kanta on eristetty 35 maanäytteestä Venäjältä, läheltä Moskovaa.
3 9 2.6 δ 4
Tutkittaessa löydettyä kantaa Hollannissa (W. Gams, Cent-raalbureau voor Schimmelcultures, Baarn, Hollanti), mikrobi osoittautui uuden Tolypocladium-lajin edustajaksi. Kannalle annettiin koodiksi Tolypocladium sp. LeA3, ja 5 kanta on talletettu Budapestin sopimuksen mukaisesti
Centraalbureau voor Schimmelcultures -talletuslaitokseen, Hollantiin 7.12.1992 talletusnumerolla CBS 630.92.
Keksinnön kohteena on siten uusi korkea- ja nopeatuottoi-10 nen Tolypocladium-laji, ja sen käyttö kliinisesti tärkeän syklosporiini A:n tuottamiseksi.
W. Gams kuvasi ensimmäisen kerran Tolypocladium-suvun vuonna 1971 (W. Gams, Persoonia, 1971, voi. 6. osa 2, 15 185-191) Julkaisussa on tutkittu kolmea Tolypocladium- lajia, T. inflatum, T. geodes ja T. cylindrosporum. Tyypillistä Tolypocladium-lajeille on hidaskasvuisuus, valkoiset haituvaiset pesäkkeet sekä suuri itiöiden määrä.
20 Tämän keksinnön mukaista Tolypocladium sp. LeA3 -kantaa verrattiin em. lajeihin, ja se erottui selvästi niistä siten, että sillä oli heikompi itiöintikyky, tummemmat pesäkkeet ja paisuneet soluketjut. Näin muodoin kyseinen Tolypocladium-kanta luokiteltiin uuden Tolypocladium-la-25 jin edustajaksi.
Keksinnön mukaista Tolypocladium sp. LeA3 -kantaa voidaan kuvailla seuraavasti: Seitsemän päivän ikäinen pesäke mallasuute-hiivauute-maljalla on halkaisijaltaan noin 10 30 mm ja sitä peittää harmahtava, vähän itiöitä sisältävä myseeli. Tyypillinen piirre kannalla on sen epäsäännölliset konidiat ja paisuneet soluketjut. Erona Tolypocladium inflatumiin keksinnön mukainen kanta ei käytä raffinoo-sia, mutta pystyy käyttämään galaktoosia. Tolypocladium 35 sp. LeA3 -kannan kasvuominaisuudet verrattuna Tolypocladium inflatumin ja Cylindrocarpon lucidumin ominaisuuk-.. s iin on koottu taulukkoon I.
4 92354
Taulukko I Mikrobikantojen hiililähteiden käyttö
Kanta 5 Hiililähde 25 A 51 52
Glukoosi + + +
Glyseroli + + + 2KG + + + 10 L-arabinoosi + + + D-xyloosi + + +
Adonitoli + +
Xylitoli + +
Galaktoosi + - + 15 Inositoli + + +
Sorbitoli + + + MDG + NAG + + +
Sellobioosi + + + 20 Laktoosi --+
Maltoosi + + +
Sakkaroosi + + +
Trehaloosi + + +
MeLezitoosi + + + 25 Raffinoosi + + Käytetyt lyhenteet: 2KG = 2-keto-D-glukonaatti 30 MDG = a-metyyli-D-glukosidi NAG = N-asetyyli-D-glukosamiini
Kasvatusaika 4 vrk.
35 25 A = Tolypocladium sp. LeA3 ’ 51 = Tolypocladium inflatum 52 = Cylindrocarpon lucidum Tämän keksinnön mukaisessa menetelmässä syklosporiinien, 40 erityisesti syklosporiini A:n tuottamiseksi kasvatetaan uuden Tolypocladium sp. lajin kantaa LeA3, jolla on tal-letusnumero CBS 630.92, aerobisesti lämpötilassa 20 - 30 °C ravintoliuoksessa, jossa on hiililähteitä, typpiläh-teitä sekä mineraalisuoloja, ja haluttaessa eristetään ja 45 puhdistetaan syntyneet syklosporiinit.
» »
II
5 92 334
Tolypocladium sp. LeA3 -kanta CBS 630.92 on erityisen edullinen keksinnön tarkoituksiin, koska se tuottaa syk-losporiineja runsaasti jo 5-6 vuorokauden (120-144 h) kasvatuksen jälkeen. Lisäksi se tuottaa suhteessa paljon 5 syklosporiini A:ta. Vaikkakin kanta tuottaa myös muita syklosporiinimuotoja, (B, c, D ja G), niin niiden määrä on huomattavasti pienempi kuin useimmilla tunnetuilla kannoilla (vrt. Isaac et ai., supra). Kanta tuottaa ainoastaan 10 % C-muotoa, 4 % B-muotoa ja 2 % D- ja G-muotoja 10 yhteensä. Näin siitäkin huolimatta, että A-muodon tuotto on suuri, jopa 1,5 g/1.
Em. keksinnön mukainen kanta on edullinen myös siinä suhteessa, että se kasvaa nopeasti ja hyvin tavanomaisilla 15 kasvualustoilla. Kanta kykenee käyttämään mm. glukoosia, sakkaroosia, arabinoosia, ksyloosia ja galaktoosia (vrt. taulukko I) hiililähteinä ja useita sekä orgaanisia että epäorgaanisia typpilähteitä, kuten peptonia, soijajauhoa, kalajauhoa, puuvillasiemenjauhoa ja (NH4)2S04:a.
20 Näiden lisäksi käytettävät elatusaineet tavallisesti sisältävät mineraalisuoloja, kuten magnesiumsulfaattia tai kaliumdivetyfosfaattia.
25 Erityisesti hiililähteenä voidaan käyttää hinnaltaan edullista melassia, ja typpilähteenä soijajauhoa.
Edullisessa keksinnön mukaisessa menetelmässä esikasva-tuselatusaineeseen inokuloidaan itiö- ja myseeliymppi, 30 joka on saatu suspendoimalla veteen Tolypocladium sp.
LeA3:n vinopinnalta kerätty kasvusto. Viljelmää esikasvatetaan 2-4 päivää ja tuotantoelatusaine inokuloidaan esi-kasvatusliuoksella. Varsinainen kasvatus suoritetaan noin 20 - noin 30 eC:ssa, edullisesti 25 - 30 °C:ssa, erityi-35 sesti 25 °C:ssa 5-7 päivän ajan, pitäen kasvuston pH
välillä 3-8, edullisesti välillä 4-7 lisäämällä tarvittaessa IM NaOH:a tai IM HCl:a.
6 92334
Aerobiset olosuhteet pidetään yllä ilmastamalla esimerkiksi 1 vol/min. (kasvuston tilavuuden verran ilmaa minuutissa) , ja kasvustoa sekoitetaan 200 - 350 rpm.
5 Fermentaation aikana syklosporiinimääriä seurataan korkean erotuskyvyn nestekromatografiällä (HPLC), kuten mm. Isaac et ai. (supra) ovat esittäneet. Fermentointia jatketaan, kunnes maksimimäärä syklosporiineja on muodostunut. Keksinnön mukainen kanta tuottaa kuudessa vuorokau-10 dessa (144 h) syklosporiini A:ta jopa 1500 mg/1, syklo-sporiini A:n suhteellisen osuuden ollessa jopa 84 %.
Syklosporiinimuotojen seos voidaan eristää ja puhdistaa tavanomaisilla menetelmillä. Myseeli erotetaan kasvuli-15 uoksesta joko suodattamalla tai sentrifugoimalla. Syklo-sporiinit uutetaan myseelistä alempialkanolilla, esimerkiksi metanolilla, etanolilla tai isopropanolilla, edullisesti metanolilla. Uute konsentroidaan ja uutetaan edelleen veteen sekoittumattomalla orgaanisella liuotti-20 mella, esimerkiksi butyyli- tai etyyliasetaatilla, edullisesti etyyliasetaatilla. Saadun uutteen haihdutusjäännös liuotetaan sopivaan orgaaniseen liuottimeen, esimerkiksi tolueeniin, ja syklosporiini A erotetaan pylväskro-matografiällä, esimerkiksi silikageelipylväässä. Ohutle-25 vykromatografiän avulla analysoidaan fraktiot, jotka si sältävät haluttua syklosporiini A:ta, fraktiot konsentroidaan ja syklosporiini A kiteytetään uudelleen sopivasta liuottimesta tai liuotinseoksesta, esimerkiksi eette-ri-heksaanista.
30
Lopuksi saatu tuote karakterisoidaan esimerkiksi määrittämällä sen sulamispiste ja optinen kiertokyky.
Seuraavat esimerkit kuvaavat edelleen keksintöä.
35
II
92334 7
Esimerkki l
Itiö- ja myseeliymppi tehtiin Tolypocladium sp. LeA3:n vinopinnalta suspendoimalla kasvusto 5 ml:aan steriiliä 5 vettä. 1 ml tätä suspensiota käytettiin inokuloimaan 50 ml elatusainetta (El) 250 ml:n erlenmeyer-pullossa.
El-esikasvatuselatusaineen koostumus 10 glukoosi 30 g soijajauho 15 g kaliumdivetyfosfaatti 1 g magnesiumsulfaatti 0,5 g ammoniumsulfaatti 5 g 15 H20 ad 1 1
Seos steriloitiin 20 min 121 °C:ssa.
Viljelmää inkuboitiin 25 °C:ssa ravistelijassa (340 rpm) 20 2 vrk, jonka jälkeen esikasvatusliuos (50 ml) siirrettiin steriilisti 5 l:aan tuotantoelatusainetta (Tl) 10 l:n fermentorissa.
Tl-tuotantoelatusaineen koostumus 25 melassi 150 g soijajauho 17 g ammoniumsulfaatti 5 g kaliumdivetyfosfaatti 1 g 30 magnesiumsulfaatti 0,5 g H20 ad 11
Seos steriloitiin 20 min. 121 °C:ssa.
35 Kasvatus suoritettiin 25 °C:ssa, ilmastus 1 voi./min., sekoitus 200 rpm. Kasvatusliuoksen syklosporiinimääriä seurattiin koko kasvatuksen ajan HPLC-menetelmällä (Isaac 8 92.334 et ai., supra). Ferxnentointia jatkettiin 144 tuntia, jolloin syklosporiini A:n pitoisuus oli 1500 mg/1. Muiden muotojen pitoisuudet olivat seuraavat: C: 155 mg/1, B: 62 mg/1, D: 28 mg/1 ja G: 29 mg/1.
5
Syklosporiinimuotojen seos eristettiin ja puhdistettiin seuraavasti: 4,5 1 fermentointiliuosta suodatettiin ja kasvusto uutettiin kaksi kertaa 1 1:11a metanolia. Uutteet yhdistettiin ja konsentroitiin vakuumissa. Jäännök-10 sestä syklosporiinit uutettiin kaksi kertaa 300 ml:11a etyyliasetaattia. Etyyliasetaattiliuokset yhdistettiin ja kuivattiin natriumsulfaatilla. Liuos konsentroitiin edelleen ja jäännös liuotettiin 100 ml:aan tolueenia. Liuos ajettiin pylvääseen (5 cm x 40 cm), jossa oli täyteainee-15 na 200 g silikageeliä (Merck, 0,063 - 0,2 mm) tolueenis-sa. Pylvästä eluoitiin seoksella, jossa oli tolueenia ja asetonia suhteessa 4:1. Fraktiot, joissa oli puhdasta syklosporiini A:ta, otettiin jatkokäsittelyyn (analysointi TLC:llä, levy Kieselgel 60 F 254, kehitysliuos heksaa-20 ni/asetoni 1:1, detektointi jodihöyryllä). Yhdistetyt fraktiot konsentroitiin ja syklosporiini A kiteytettiin eetteri-heksaanista. Saanto oli 4,5 g. Syklosporiini A:n sp. oli 139-140 °c ja optinen kiertokyky -189° (0,5 MeOH).
25
Esimerkki 2
Itiö- ja myseeliymppi tehtiin samoin kuin esimerkissä 1.
1 ml tätä suspensiota käytettiin inokuloimaan 50 ml ela-30 tusainetta (E2) 200 ml:n erlenmeyer-pullossa.
E2-esikasvatuselatusaineen koostumus maltoosi 40 g 35 ammoniumsulfaatti 5 g puuvillasiemenjauho 10 g kaliumdivetyfosfaatti 1 g * 9 92334 magnesiumsulfaatti 0,5 g H20 ad 11
Seos steriloitiin 20 min. 121 °C:ssa.
5
Viljelmää inkuboitiin 25 °C:ssa ravistelijassa (230 rpm) 2 vrk, jonka jälkeen esikasvatusliuos (50 ml) siirrettiin steriilisti 5 Iraan tuotantoelatusainetta (T2) 10 l:n fermentorissa.
10 T2-tuotantoelatusaineen koostumus glukoosi 10 g maltoosi 10 g 15 sakkaroosi 60 g puuvillasiemenjauho 10 g puuvillasiemenöljy 5 g ammoniumsulfaatti 5 g kaliumdivetyfosfaatti 1 g 20 magnesiumsulfaatti 0,5 g H20 ad 11
Seos steriloitiin 20 min 121 °C:ssa.
25 Kasvatus suoritettiin 24 °C:ssa, ilmastus 1 voi./min., sekoitus 200 rpm. Fermentointia jatkettiin 120 tuntia, jolloin syklosporiini A:n pitoisuus oli 1410 mg/1. Kasva-tusliuoksen syklosporiinimääriä seurattiin koko kasvatuksen ajan HPLC-menetelmällä (Isaac et ai., supra). Muiden 30 muotojen pitoisuudet olivat seuraavat: C: 135 mg/1, B: 50 mg/1, G ja D: 30 mg/1.
Syklosporiini A puhdistettiin samalla tavalla kuin esimerkissä 1.
35 t 10 9'^5o4
Talletetut mikro-organismit
Seuraava mikro-organismi talletettiin Budapestin sopimuksen mukaisesti Centraalbureau voor Schimmelcultures -tal-5 letuslaitokseen (CBS), Oosterstraat 1, NL-3742 SK Baarn, Hollanti
Mikro-organismi Talletusnumero Talletuspäivä 10 Tolypocladium sp. LeÄ3 CBS 630.92 7.12.1992 11 . ·
Claims (4)
1. Menetelmä syklosporiinien, erityisesti syklosporiini A:n tuottamiseksi, tunnettu siitä, että uuden
5 Tolypocladium sp. -lajin kantaa LeA3, jonka talletusnume-ro on CBS 630.92, kasvatetaan aerobisesti lämpötilassa 20 - 30 °C ravintoliuoksessa, jossa on hiililähteitä, typ-pilähteitä sekä mineraalisuoloja, ja haluttaessa eristetään ja puhdistetaan syntyneet syklosporiinit. 10
2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että hiililähteenä käytetään melassia ja typpilähteenä käytetään soijajauhoa.
3. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tun nettu siitä, että hiililähteenä käytetään sakkaroosia ja typpilähteenä käytetään puuvillansiemenjauhoa.
4. Tolypocladium sp. LeA3 -kanta, jonka talletusnumero on 20 CBS 630.92. 92334
Priority Applications (20)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
FI925940A FI92334C (fi) | 1992-12-30 | 1992-12-30 | Menetelmä syklosporiinien tuottamiseksi ja menetelmässä käytettävä uusi Tolypocladium-kanta |
US08/020,545 US5409816A (en) | 1992-12-30 | 1993-02-22 | Process for producing immunosuppressives and a novel microbial species to be employed therein |
DE69329500T DE69329500T2 (de) | 1992-12-30 | 1993-12-29 | Ein verfahren zur herstellung von immunosuppressiva und eine neuartige mikrobielle spezies, die dabei eingesetzt wird |
JP51571394A JP3530531B2 (ja) | 1992-12-30 | 1993-12-29 | 免疫抑制剤の製造方法およびそれに使用される新規微生物種 |
AU57014/94A AU674723B2 (en) | 1992-12-30 | 1993-12-29 | A process for producing immunosuppressives and a novel microbial species to be employed therein |
ES94902795T ES2150980T3 (es) | 1992-12-30 | 1993-12-29 | Un procedimiento para producir inmunosupresores y una nueva especie microbiana a emplear en el mismo. |
PCT/FI1993/000568 WO1994016091A1 (en) | 1992-12-30 | 1993-12-29 | A process for producing immunosuppressives and a novel microbial species to be employed therein |
HU9501951A HU217683B (hu) | 1992-12-30 | 1993-12-29 | Eljárás Cyclosporin A előállítására és az eljárásnál alkalmazott új mikrobafaj |
EP94902795A EP0677116B1 (en) | 1992-12-30 | 1993-12-29 | A process for producing immunosuppressives and a novel microbial species to be employed therein |
DK94902795T DK0677116T3 (da) | 1992-12-30 | 1993-12-29 | Fremgangsmåde til fremstilling af immunosuppressive midler og en ny mikroorganismeart til anvendelse deri |
AT94902795T ATE196655T1 (de) | 1992-12-30 | 1993-12-29 | Ein verfahren zur herstellung von immunosuppressiva und eine neuartige mikrobielle spezies, die dabei eingesetzt wird |
PT94902795T PT677116E (pt) | 1992-12-30 | 1993-12-29 | Processo para a producao de imuno-supressores e uma nova especie microbiana a ser utilizada para esse fim |
SG1996005777A SG49072A1 (en) | 1992-12-30 | 1993-12-29 | A process for producing immunosuppressives and a novel microbial species to be employed therein |
CA002152963A CA2152963C (en) | 1992-12-30 | 1993-12-29 | A process for producing immunosuppressives and a novel microbial species to be employed therein |
KR1019950702677A KR100283503B1 (ko) | 1992-12-30 | 1993-12-29 | 면역억제제의 제조방법 및 이에 사용되는 신규 미생물 |
RU95114383A RU2112807C1 (ru) | 1992-12-30 | 1993-12-29 | Способ получения иммунодепрессанта циклоспорина а и штамм tolypocladium species свs630.92, продуцирующий циклоспорин а |
PL93309613A PL177023B1 (pl) | 1992-12-30 | 1993-12-29 | Sposób wytwarzania cyklosporyny A |
EE9400184A EE03114B1 (et) | 1992-12-30 | 1994-11-16 | Meetod tsüklosporiin A tootmiseks |
HK98115143A HK1014035A1 (en) | 1992-12-30 | 1998-12-23 | A process for producing immunosuppressives and a novel microbial species to be employed therein |
GR20000402825T GR3035139T3 (en) | 1992-12-30 | 2000-12-22 | A process for producing immunosuppressives and a novel microbial species to be employed therein. |
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
FI925940 | 1992-12-30 | ||
FI925940A FI92334C (fi) | 1992-12-30 | 1992-12-30 | Menetelmä syklosporiinien tuottamiseksi ja menetelmässä käytettävä uusi Tolypocladium-kanta |
Publications (3)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
FI925940A0 FI925940A0 (fi) | 1992-12-30 |
FI92334B true FI92334B (fi) | 1994-07-15 |
FI92334C FI92334C (fi) | 1994-10-25 |
Family
ID=8536483
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
FI925940A FI92334C (fi) | 1992-12-30 | 1992-12-30 | Menetelmä syklosporiinien tuottamiseksi ja menetelmässä käytettävä uusi Tolypocladium-kanta |
Country Status (20)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US5409816A (fi) |
EP (1) | EP0677116B1 (fi) |
JP (1) | JP3530531B2 (fi) |
KR (1) | KR100283503B1 (fi) |
AT (1) | ATE196655T1 (fi) |
AU (1) | AU674723B2 (fi) |
CA (1) | CA2152963C (fi) |
DE (1) | DE69329500T2 (fi) |
DK (1) | DK0677116T3 (fi) |
EE (1) | EE03114B1 (fi) |
ES (1) | ES2150980T3 (fi) |
FI (1) | FI92334C (fi) |
GR (1) | GR3035139T3 (fi) |
HK (1) | HK1014035A1 (fi) |
HU (1) | HU217683B (fi) |
PL (1) | PL177023B1 (fi) |
PT (1) | PT677116E (fi) |
RU (1) | RU2112807C1 (fi) |
SG (1) | SG49072A1 (fi) |
WO (1) | WO1994016091A1 (fi) |
Families Citing this family (18)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP0725076B1 (en) * | 1995-02-01 | 2001-06-06 | National Research Development Corporation of India | A process for the preparation of cyclosporin A from tolypocladium species |
KR100360675B1 (ko) * | 1995-02-28 | 2003-01-14 | 내셔널 리서어치 디벨럽먼트 코포레이션 | 사이클로스포린a제조방법 |
US5709797A (en) * | 1996-06-05 | 1998-01-20 | Poli Industria Chimica S.P.A. | Method of isolating cyclosporins |
US5747330A (en) * | 1996-06-05 | 1998-05-05 | Poli Industria Chimica | Antibiotic producing microbe |
US6423233B1 (en) * | 2000-08-15 | 2002-07-23 | Biogal Gyogyszergyar Rt. | Purification process |
HU223054B1 (hu) * | 1997-03-25 | 2004-03-01 | BIOGAL Gyógyszergyár Rt. | Tisztítási eljárás nagytisztaságú ciklosporin A előállítására |
KR100496929B1 (ko) * | 1997-03-25 | 2005-09-30 | 테바 기오기스제르갸르 레스즈베니타르사사그 | 시클로스포린의정제방법 |
CA2298572C (en) | 1997-10-08 | 2002-04-09 | Isotechnika Inc. | Deuterated cyclosporine analogs and their use as immunomodulating agents |
US20030220234A1 (en) * | 1998-11-02 | 2003-11-27 | Selvaraj Naicker | Deuterated cyclosporine analogs and their use as immunodulating agents |
AU769429C (en) | 1998-12-30 | 2004-10-28 | Dexcel Limited | Dispersible concentrate for the delivery of cyclosporin |
US7732404B2 (en) * | 1999-12-30 | 2010-06-08 | Dexcel Ltd | Pro-nanodispersion for the delivery of cyclosporin |
AU3728001A (en) * | 2000-01-20 | 2001-07-31 | Basilea Pharmaceutica Ag | Nasally administrable cyclic peptide compositions |
CA2401700A1 (en) * | 2000-02-29 | 2001-09-07 | Biocon India Limited | Manufacture and purification of cyclosporin a |
KR100982466B1 (ko) | 2001-10-19 | 2010-09-16 | 이소테크니카 인코포레이티드 | 시클로스포린 유사체의 합성 |
US7862552B2 (en) * | 2005-05-09 | 2011-01-04 | Boston Scientific Scimed, Inc. | Medical devices for treating urological and uterine conditions |
EP2151450A1 (de) | 2008-07-29 | 2010-02-10 | Sandoz AG | Verfahren zur Aufarbeitung von mikrobiologisch hergestellten zyklischen Oligopeptiden |
WO2019067423A1 (en) * | 2017-09-29 | 2019-04-04 | Valent Biosciences Llc | NEW TOLYPOCLADIUM ALBUM STRAIN |
RU2679051C1 (ru) * | 2018-02-16 | 2019-02-05 | Федеральное государственное учреждение Федеральный исследовательский центр "Фундаментальные основы биотехнологии" Российской академии наук | Штамм streptomyces hygroscopicus bkm ac-2737d - продуцент антибиотика рапамицина и способ увеличения его продуктивности |
Family Cites Families (9)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DE295870C (fi) * | ||||
US3878047A (en) * | 1973-02-02 | 1975-04-15 | Upjohn Co | Process for production of AT-125 |
US4117118A (en) * | 1976-04-09 | 1978-09-26 | Sandoz Ltd. | Organic compounds |
US4215199A (en) * | 1978-06-05 | 1980-07-29 | Sandoz Ltd. | Antibiotic production |
DD298276A5 (de) * | 1988-10-11 | 1992-02-13 | Institut Fuer Mikrobiologie Und Experimentelle Therapie,De | Verfahren zur herstellung von cyclosporin a |
DD295870A5 (de) * | 1988-10-11 | 1991-11-14 | Arzneimittelwerk Dresden Gmbh,De | Verfahren zur mikrobiellen gewinnung von cyclosporinen |
HU201577B (en) * | 1988-12-20 | 1990-11-28 | Gyogyszerkutato Intezet | Process for producing cyclosporin antibiotics |
DE69222150T2 (de) * | 1991-01-25 | 1998-01-15 | Fujisawa Pharmaceutical Co | Prozess zur produktion von cyclosporin-a und/oder c |
DE59106428D1 (de) * | 1991-04-06 | 1995-10-12 | Dresden Arzneimittel | Verfahren zur fermentativen Herstellung und Isolierung von Cyclosporin A sowie neue Cyclosporin- bildende Stämme. |
-
1992
- 1992-12-30 FI FI925940A patent/FI92334C/fi not_active IP Right Cessation
-
1993
- 1993-02-22 US US08/020,545 patent/US5409816A/en not_active Expired - Fee Related
- 1993-12-29 AT AT94902795T patent/ATE196655T1/de not_active IP Right Cessation
- 1993-12-29 WO PCT/FI1993/000568 patent/WO1994016091A1/en active IP Right Grant
- 1993-12-29 ES ES94902795T patent/ES2150980T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1993-12-29 JP JP51571394A patent/JP3530531B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 1993-12-29 KR KR1019950702677A patent/KR100283503B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1993-12-29 DE DE69329500T patent/DE69329500T2/de not_active Expired - Fee Related
- 1993-12-29 DK DK94902795T patent/DK0677116T3/da active
- 1993-12-29 RU RU95114383A patent/RU2112807C1/ru not_active IP Right Cessation
- 1993-12-29 EP EP94902795A patent/EP0677116B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1993-12-29 PL PL93309613A patent/PL177023B1/pl not_active IP Right Cessation
- 1993-12-29 PT PT94902795T patent/PT677116E/pt unknown
- 1993-12-29 SG SG1996005777A patent/SG49072A1/en unknown
- 1993-12-29 AU AU57014/94A patent/AU674723B2/en not_active Ceased
- 1993-12-29 CA CA002152963A patent/CA2152963C/en not_active Expired - Fee Related
- 1993-12-29 HU HU9501951A patent/HU217683B/hu not_active IP Right Cessation
-
1994
- 1994-11-16 EE EE9400184A patent/EE03114B1/xx not_active IP Right Cessation
-
1998
- 1998-12-23 HK HK98115143A patent/HK1014035A1/xx not_active IP Right Cessation
-
2000
- 2000-12-22 GR GR20000402825T patent/GR3035139T3/el not_active IP Right Cessation
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
ES2150980T3 (es) | 2000-12-16 |
HU9501951D0 (en) | 1995-08-28 |
AU5701494A (en) | 1994-08-15 |
CA2152963C (en) | 2003-05-27 |
JP3530531B2 (ja) | 2004-05-24 |
HK1014035A1 (en) | 1999-09-17 |
RU2112807C1 (ru) | 1998-06-10 |
KR100283503B1 (ko) | 2001-03-02 |
DE69329500T2 (de) | 2001-06-07 |
US5409816A (en) | 1995-04-25 |
PL309613A1 (en) | 1995-10-30 |
FI925940A0 (fi) | 1992-12-30 |
AU674723B2 (en) | 1997-01-09 |
PT677116E (pt) | 2001-01-31 |
SG49072A1 (en) | 1998-05-18 |
JPH08505059A (ja) | 1996-06-04 |
KR960700346A (ko) | 1996-01-19 |
EP0677116B1 (en) | 2000-09-27 |
HU217683B (hu) | 2000-03-28 |
CA2152963A1 (en) | 1994-07-21 |
ATE196655T1 (de) | 2000-10-15 |
PL177023B1 (pl) | 1999-09-30 |
DK0677116T3 (da) | 2000-12-27 |
DE69329500D1 (de) | 2000-11-02 |
EE03114B1 (et) | 1998-08-17 |
EP0677116A1 (en) | 1995-10-18 |
WO1994016091A1 (en) | 1994-07-21 |
HUT72702A (en) | 1996-05-28 |
FI92334C (fi) | 1994-10-25 |
GR3035139T3 (en) | 2001-04-30 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
FI92334B (fi) | Menetelmä syklosporiinien tuottamiseksi ja menetelmässä käytettävä uusi Tolypocladium-kanta | |
FI92603C (fi) | Mikrobinen menetelmä syklosporiinien valmistamiseksi | |
WO1994016091A9 (en) | A process for producing immunosuppressives and a novel microbial species to be employed therein | |
JPH06339390A (ja) | Bu−4164e−a及びb、プロリルエンドペプチダーゼインヒビター | |
CA1183093A (en) | Macbecin derivatives and their production | |
EP0933422A1 (en) | Cyclic lipopeptide acylase | |
US5747330A (en) | Antibiotic producing microbe | |
EP0725076B1 (en) | A process for the preparation of cyclosporin A from tolypocladium species | |
EP0781348B1 (en) | Process for manufacturing cyclosporin a by highly productive fusant strain | |
JPH0641067A (ja) | 新規カルパイン阻害物質kp−1241及びその製造法 | |
US5426038A (en) | Process for production of an antibiotic compound with Zalerion arboricola | |
US6521600B1 (en) | Compound, WF002, production thereof and use thereof | |
GB2159150A (en) | Antibiotics do-248-a and b and their preparation | |
KR0161664B1 (ko) | 사이클로스포린에이의 제조방법 및 변이미생물 | |
US3986928A (en) | Antibiotic a-32390 and process for preparation thereof |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
BB | Publication of examined application | ||
PC | Transfer of assignment of patent |
Owner name: SANTEN OY |
|
MA | Patent expired |