FI81807C - Foerfarande foer framstaellning av 2,3-diamino-2,3-didesoxyhexosderivativer. - Google Patents
Foerfarande foer framstaellning av 2,3-diamino-2,3-didesoxyhexosderivativer. Download PDFInfo
- Publication number
- FI81807C FI81807C FI855132A FI855132A FI81807C FI 81807 C FI81807 C FI 81807C FI 855132 A FI855132 A FI 855132A FI 855132 A FI855132 A FI 855132A FI 81807 C FI81807 C FI 81807C
- Authority
- FI
- Finland
- Prior art keywords
- formula
- compounds
- diamino
- group
- hydrogen
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H5/00—Compounds containing saccharide radicals in which the hetero bonds to oxygen have been replaced by the same number of hetero bonds to halogen, nitrogen, sulfur, selenium, or tellurium
- C07H5/04—Compounds containing saccharide radicals in which the hetero bonds to oxygen have been replaced by the same number of hetero bonds to halogen, nitrogen, sulfur, selenium, or tellurium to nitrogen
- C07H5/06—Aminosugars
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D207/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
- C07D207/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
- C07D207/30—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having two double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
- C07D207/34—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having two double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D207/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
- C07D207/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
- C07D207/30—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having two double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
- C07D207/34—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having two double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
- C07D207/36—Oxygen or sulfur atoms
- C07D207/40—2,5-Pyrrolidine-diones
- C07D207/416—2,5-Pyrrolidine-diones with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to other ring carbon atoms
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H11/00—Compounds containing saccharide radicals esterified by inorganic acids; Metal salts thereof
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H11/00—Compounds containing saccharide radicals esterified by inorganic acids; Metal salts thereof
- C07H11/04—Phosphates; Phosphites; Polyphosphates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H13/00—Compounds containing saccharide radicals esterified by carbonic acid or derivatives thereof, or by organic acids, e.g. phosphonic acids
- C07H13/02—Compounds containing saccharide radicals esterified by carbonic acid or derivatives thereof, or by organic acids, e.g. phosphonic acids by carboxylic acids
- C07H13/04—Compounds containing saccharide radicals esterified by carbonic acid or derivatives thereof, or by organic acids, e.g. phosphonic acids by carboxylic acids having the esterifying carboxyl radicals attached to acyclic carbon atoms
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H13/00—Compounds containing saccharide radicals esterified by carbonic acid or derivatives thereof, or by organic acids, e.g. phosphonic acids
- C07H13/02—Compounds containing saccharide radicals esterified by carbonic acid or derivatives thereof, or by organic acids, e.g. phosphonic acids by carboxylic acids
- C07H13/04—Compounds containing saccharide radicals esterified by carbonic acid or derivatives thereof, or by organic acids, e.g. phosphonic acids by carboxylic acids having the esterifying carboxyl radicals attached to acyclic carbon atoms
- C07H13/06—Fatty acids
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H15/00—Compounds containing hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
- C07H15/02—Acyclic radicals, not substituted by cyclic structures
- C07H15/04—Acyclic radicals, not substituted by cyclic structures attached to an oxygen atom of the saccharide radical
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H15/00—Compounds containing hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
- C07H15/18—Acyclic radicals, substituted by carbocyclic rings
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Pyrrole Compounds (AREA)
- Hydrogenated Pyridines (AREA)
Description
81 807
MENETELMÄ 2,3-DIAMINO-2,3-DIDESOKSIHEKSOOSIJOHDANNAISTEN VALMISTAMISEKSI - FÖRFARANDE FÖR FRAMSTÄLLNING AV
2,3-DIAMINO-2,3-DIDESOXYHEXOSDERIVATIVER
5 Keksintö koskee 2,3-diamino-2,3-didesoksihek- soosijohdannaisia ja erityisesti menetelmiä niiden valmistamiseksi.
Keksintö koskee kaavan (I) mukaisia yhdisteitä, HO -\ r3hnnhr2 15 jossa Ra ja R3 ovat samanlaisia tai erilaisia ja ovat Cia—ie alkyylikarbonyyliryhmä, joka on valinnaisesti substituoitu 3-asemassa OH:11a, asetoksilla tai Cia—ie alkyylikarbonyylioksiryhmällä; Rx on vety, alempi alkyyli, aralkyyli tai fosfaatti-, pyrofosfaat- 20 ti-, fosforyylietanoliamiini- tai pyrofosforyylietanoli-amiiniryhmä; ja R* on vety, fosfaatti-, pyrofosfaatti-, fosforyylietanoliamiini- tai pyrofosforyylietanoli-miiniryhmä vapaassa muodossa tai, kun jompikumpi Rx tai R* on ryhmä, jossa on vapaa fosforihappofunktio, 25 suolojen tai estereiden muodossa.
Kaavan (Ia) mukaisia yhdisteitä, HO—v
30 HO—Y—OR* U
R3HN NHR2 jossa Ra ja R3 ovat samanlaisia, voidaan valmistaa keksinnön mukaisesti asyloimalla vastaavat kaavan (II) 35 81 807 2 mukaiset yhdisteet, HO~V-o t H° —\ /~°R1 11 H2N nh2 jossa Ra ja R3 ovat samanlaisia ja tarkoittavat samaa kuin yllä ja Ra.1 on vety, alempi alkyyli tai aralkyyli, 10 b) kaavan (Ia) mukaisten yhdisteiden valmistamiseksi, jossa Ra ja Ra ovat erilaisia, asyloidaan kaavan (Ha) mukaiset yhdisteet, HO-v 15 Π» r3hn' NH2 jossa Rx1 ja R3 tarkoittavat samaa kuin yllä, tai 20 c) kaavan (Ib) mukaisten yhdisteiden valmistamiseksi, HO —y R3Ht/ NHR2 25 jossa Ra-R* tarkoittavat samaa kuin yllä, ja Rxxx on vety, alempi alkyyli, aralkyyli tai fosfaatti-, pyro-fosfaatti-, fosforyylietanoliamiini- tai pyrofosforyyli-etanoliamiiniryhmä, joissa Rxxx ja R* eivät ole saman-30 aikaisesti vety, saattamalla kaavan (Ie) mukaiset yhdisteet reagoimaan,
Rs°-v_ „ R Jo—<CI1^>~0RT111 Ie 35 r3hn nhr2
II
81 807 3 jossa Ra ja Ra tarkoittavat samaa kuin kaavassa (I) , Ri111 on vety, alempi alkyyli, aralkyyli tai suojaava ryhmä; ja R.*1 on vety tai suojaava ryhmä, jolloin Rx111 ja R«x eivät ole samanaikaisesti suojaavia ryhmiä, ja 5 Re1 on suojaava ryhmä; yhdessä vastaavan fosforiyhdis-teen kanssa, ja tarvittaessa poistetaan suojaavat ryhmät saaduista yhdisteistä ja saadut yhdisteet otetaan talteen vapaassa muodossa tai, tarvittaessa, suolan tai esterin muodossa.
10 Menetelmät a) ja b) voidaan suorittaa esim.
liuottamalla kaavan (II) tai (Ha) mukainen yhdiste yhdessä asyloimisaineen kanssa liuottimeen, joka on inertti käytetyissä reaktio-olosuhteissa, esim. di-(alempi)alkyylikarboksyylihappoamidi, kuten 15 dimetyyliformamidi, ja antamalla aineiden reagoida huoneen lämpötilassa.
Menetelmä c) voidaan suorittaa esim. liuottamalla kaavan (Ie) mukainen yhdiste luiottimeen, joka on inertti käytetyissä reaktio-olosuhteissa, 20 esim. syklinen eetteri, kuten tetrahyhdrofuraani, antaen sen reagoida alhaisessa lämpötilassa esim. -70 °C yhdessä butyylilitiumin kanssa alifaattisessa hiilivedyssä, esim. heksaanissa, ja lisäämällä sitten fosforokloridaattia. Fosfaattiradikaalin vapaat 25 OH-ryhmät voidaan myös suojata, esim. bentsyyIillä, ja nämä suojaavat ryhmät voidaan poistaa reaktion jälkeen, esim. hydrogenolyyttisesti.
Muut suojaavat ryhmät voidaan poistaa tunnetulla tavalla. Täten esim., suojaavat ryhmät kuten Rx111 30 tai R«z poistetaan tavallisesti hapolla, esim. vesipitoisen hapon avulla (ioninvaihtaja).
Lopputuotteet voidaan eristää ja puhdistaa tunnetulla tavalla.
Kaavan (II) mukaiset yhdisteet ovat myös uusia 35 ja muodostavat osan keksinnöstä. Ne voidaan valmistaa esim. seuraavan reaktiokaavion mukaisesti 81 807 4
AcO-v /-=^ /° \ v /“Ov ® C //\ y~~~Q AcO —/— OAc V-/ 0-/_VoRjV >-< 111 Λ 'il * Na °2N N3 IVc ψ \f 10 HO—N. HO \ κο-^Λ-ο^ „ο_ΛΑ_οη
15 0,N N, / N
2 \3 02N 3 IVa \ / - pelkistys : 20
·. HO
HO -~\~y—«Rl 25 H2N NH2
II
30 jolloin RiIV on alempi alkyyli tai aralkyyli, Ac on asetyyli. Kaavojen (IVa) ja (IVb) mukaiset yhdisteet voidaan pelkistää suoraan kaavan (II) mukaisiksi yhdisteiksi.
35 Ohjaamalla reaktio-olosuhteita (esim. aika, katalysaattorin määrä) on mahdollista valmistaa kaavan (Ha) mukaisia yhdisteitä pelkistämällä atsidoryhmä 5 81807 ensimmäisessä vaiheessa. Sen jälkeen, kun syntynyt aminoryhmä on suojattu, voidaan nitroryhmä pelkistää. Tällä tavalla voidaan valmistaa kaavan (Ha) mukaisten yhdisteiden lähtöaineita, joista voidaan 5 valmistaa lopputuotteita, joissa Ra ja R3 ovat erilaisia.
HO-v HO-s.
10 s~ _ r ohjattu s~®\ nr^ NH0 suojaus ho—< >- or * . —^-* ho—< >~0Ri -—> \ / ' pelkistys \-r 0..N«3 0/ NHj 15 »O-, H0 HÖ-<l^0R! ho-^Λ-ηι} aS7l?·--^
NHX H2H NHX
20 (X ** suojaava ryhmä)
esim. BOC
H°—\ HO —v
unV \_ncjl suojauksen % /— 0V
0 YY 1 poll^-* ho-YVorI
R3Hf/ NHX R3hA2 11 a 30
Kaavan (Ie) mukaisia yhdisteitä voidaan valmistaa kaavan (Ia) tai (Ib) mukaisista yhdisteistä, 35 joissa R2 ja Ra ovat samanlaisia tai erilaisia, esim. seuraavan reaktiokaavion mukaisesti 81 807 6 5 HO-v 10 /—0 τ ho-ZV-or; R-,ΗΝ NHR? / ^ HO —v ^ HO \
HO —\^~0R’V HO—<^^>—OH
R HN NHR? M1^ NHR- ! „ 1
rJo—\ rJo ( y—OH H 0-^ >—OH
n__/~ V_0RIV /-\ /“Λ HO \ / UK1 R3HN NHR2 R3HN NHR2 r3hn nhr2 Ie If 25 Id 30
Yhdisteet (Id), (Ie), (If) voidaan haluttaessa suojata sopivalla tunnetulla tavalla.
Jäljelläolevat lähtöaineet ovat tunnettuja tai 35 ne voidaan valmistaa analogisesti samalla tavalla kuin tunnetut yhdisteet.
Ra ja Ra ovat samanlaisia tai erilaisia, edul- ti 81 807 7 lisesti samanlaisia ja ovat alkyylikarbonyyliryhmä, jossa on esim. 4-20 edullisesti 12-16 ja erityisesti 14 hiiliatomia, joka on valinnaisesti substituioitu 3-ase-massa OH:11a, asetoksilla tai alkyylikarbonyyliryhmäl-5 lä. Hiiliatomi 3-asemassa on edullisesti R-konfiguraa-tiossa.
Kuten on tuotu esille, kaavan (I) mukaiset yhdisteet, joissa asyylin 3-asema, erityisesti alkyyli-karbonyylisivuketju, on substituoitu, voivat esiintyä 10 R- ja S-antipodisissa muodoissa tai niiden raseemisina seoksina. Yhdisteiden yksittäisiä antipodisia muotoja voidaan muodostaa esim. käyttämällä itse asyloimisainei-ta isomeerisissa muodoissa. Kaavan (I) mukaiset yhdisteet voivat olla myös a- ja β-anomeerien muodossa hek-15 soosirenkaaseen nähden tai niiden seoksina. Keksintö kattaa yksittäiset isomeeriset muodot ja niiden seokset.
Kaavan (I) mukaiset yhdisteet, joissa vähintään joko Ra. tai R«, on fosfaatti-, pyrofosfaatti-, fosforyy-lietanoliamiini- tai pyrofosforyylietanoliamiiniradiaa-20 li, pidetään edullisina; erityisen edullisina pidetään kaavan (I) mukaisia yhdisteitä, joissa vähintään joko Ra. tai R« on fosfaattiradiaali.
Edullisena pidetty yksittäinen yhdiste on 2,3-diamino-2,3-didesoksi-2,3-di-N- [3(R)-hydroksitetra-25 dekanoyyli]-o-D-glukopyranosyylifosfaatti.
Yhdisteet, joissa vähintään joko Ra. tai R« on fosforia sisältävä ryhmä, jossa on vapaa hydroksi, voivat olla vapaassa muodossa tai suolojen tai esterei-den muodossa. Vapaat muodot voidaan muuttaa suola- tai 30 esterimuodoiksi tunnetulla tavalla. Yhdisteet, jotka ovat kykeneviä muodostamaan suoloja ja estereitä, voidaan ottaa talteen valmistuksen jälkeen vapaassa muodossa tai suolan tai esterin muodossa. Esimerkkejä sopivista suoloista on tuotu esille suoritusesimerkeis-35 sä.
Esilläolevan keksinnön kaavan (I) mukaisten yhdisteiden on havaittu olevan käyttökelpoisia 81 807 8 farmaseuttisina aineina, erityisesti immuunisuutta edistävinä aineina.
Esilläolevien yhdisteiden immuunisuutta edistävä aktiviteetti voidaan osoittaa standardikokeissa in 5 vitro ja in vivo havainnollistaen imusolujen ja/tai makrofagien uudiskasvua. Täten keksinnön mukaisten yhdisteiden immuunisuutta edistävä aktiviteetti osoitetaan esim. seuraavissa koemenetelmissä: 1. Bakteerien aiheuttama verenmyrkytys neutrosoluniuk- 10 kuutta potevassa hiiressä Tällä kokeella voidaan kokeilla bakteereilla infektoitujen neutrosoluniukkuutta potevien hiirien ko. yhdisteisiin yhteydessä olevan vastustuskyvyn paranemista. Neutrosoluniukuuden aiheuttamiseksi 20 naaras- 15 puolista BeDaFi-hiirtä saa päivänä nolla 1x200 mg/kg ruumiinpainon mukaan, syklofosfoamidia liuotettuna 0. 2 ml tisl.veteen. Kokeiltavaa yhdistettä, liuotettuna mikäli mahdollista fysiologiseen suolaliuokseen tai mikäli tämä ei ole mahdollista liuotettuna muulla taval- 20 la (0,3 ml), annetaan parenteraalisesti (ensisijaisesti 1. p.) tai myös oraalisesti 3. päivänä. Infektio seuraa 4. päivänä annettaessa i.v. ko. inokulointiainetta 0,2 ml (solumääränä/hiiri esim. Pseud, aeruginosa 12; 1x10®, E. coli 120; 2x10*). Koe-eläimiä seurataan aina 25 10. päivään asti infektion jälkeen ja kuolemat/päivä rekisteröidään. Seuraavat parametrit ilmaistaan lukuina verrattuna vertailukokeisiin ja standardeihin, a) keskimääräinen elinaika · b) kuolinnopeus 30 Kaavan (I) mukaiset yhdisteet osoittivat mer kittäviä parannuksia kummassakin parametrissä verrattuna hoitamattomiin vertailukokeisiin sekä kokeellisissa Pseudomonas- että E. coli infektiossa annettaessa ko. yhdisteitä parenteraalisesti.
35 2. Liuskatumaisten valkosolujen parantuneen bakteerin- tappokvvvn määritys in vitro Tämä koe auttaa löytämään aineita, jotka li- li 81 807 9 säävät neutrofiilien mikrobista aktiviteettia. Neutro-fiilien lähteenä on hiiren vatsaontelon tulehdusneste, jota on käsitelty 4 h ajan 5 % kaseiinilla, tioglyko-laatilla tai 0,1 % glykogeenilla. Kokeiltavaa yhdistettä 5 liuotetaan siinä määrin kuin on mahdollista Hanksin tasapainoitettuun suolaliuokseen. Veteen liukenemattomat yhdisteet liuotetaan pieneen määrään dimetyylisulfoksidia ja laimennetaan haluttuun tilavuuteen Hanksin liuoksella, inkuboitu seos sisältäen koeainetta, neutro-10 fiilejä ja bakteereja opsoniinille altistettuina, 10% homologisessa seerumissa ravistetaan 2 h ajan lämpötilassa 37 °C, jonka jälkeen eloonjääneiden bakteerien lukumäärä määritetään solulaskennalla. Erot valkosolujen tappamissa testisoluissa koeaineen ollessa 15 läsnä tai poissa ilmaistaan lukuina käyttäen t-koetta. Opsoniinille altistetut bakteerit kokeiltavien yhdisteiden ollessa läsnä poissaolevat neutrofiilit toimivat lisävertailukohteena.
3. Bakteerien tappaminen kokeiltavilla yhdisteillä 20 esikäsitellvistä hiiristä saaduilla neutrofllleillä Tämä koe havainnollistaa in vitro kokeiltavilla yhdisteillä käsitellyistä eläimistä saatujen neutrofiilien kasvanutta bakteerintappokykyä. 4:stä hiirestä muodostuvia ryhmiä käsitellään koeaineella joko s.c. tai 25 i.p. 24 h jälkeen vatsaontelon neutrofiilit pestään, 5 % kaseiinilla, tioglykolaatilla tai 0,1 % glykogeenilla suoritetun esikäsittelyn jälkeen. Inkuboidut seokset, jotka sisältävät sekä neutrofiileja käsitellyistä (tai vertailu) eläimistä että bakteereja opsoniinille altis-30 tettuina 10 % homologisessa seerumissa, ravistetaan 2 h ajan lämpötilassa 37 °C, jonka jälkeen eloonjääneiden bakteerien lukumäärä määritetään solulaskennalla. Ver-tailueläimistä ja koeaineella käsitellyistä eläimistä saatujen valkosolujen bakteerintappo-ominaisuutta ver-35 rataan käyttämällä t-koetta.
4. Koeaineiden endotoksiiniaktiviteetin määritys Limu-lusamebosvvttilvsaattikokeessa 81 807 10
Endotoksiini katalysoi entsyymin esiasteen aktivointia limulusamebosyyttilysaatin geelin muodostumisessa. p-nitroanilinin erotus väriä muodostavasta substraatista mitataan. Erotusaste määritetään fotomet-5 risesti, jolloin korrelaatio absorption ja endotoksiini-konsentraation välillä (tai analogisesti endotoksiiniak-tiviteetin välillä) on lineaarinen alueella 0,01-0,1 μg/ml (verrataan standardiendotoksiinin absorptioar-voihin). Sarja laimennuksia 1:10 valmistetaan jokaisesta 10 näytteestä (liuotettuna pyrogeeneista vapaaseen aqua bidestillata sterilis) ja jokaista sarjaa tutkitaan yhdessä vertailunäytteen kanssa. 100 μΐ näytettä tai standardia tai vertailunäytettä käsitellään 100 1 limulusamebosyyttilysaatilla ja reaktio pysäytetään 10. 15 minuutin kohdalla 200 1 50 % etikkahapolla. Kun näyt teet on ravistettu, mitataan absorptio, jota verrataan vertailuarvoon (tisl. HaO) 405 nm spektrofotometrissä. Näytteen endotoksiinipitoisuus (endotoksiiniaktiviteet-ti) , joka saadaan endotoksiiniyksikköinä (E.Y.), las-20 ketään lineaariregression avulla käyttäen standardiendotoksiinin arvoja.
5. Endotoksiinishokin aiheuttaminen hiiressä Tämä koe havainnollistaa endotoksiinishokin tai kliinisesti samanlaisen tilan aiheuttamista, joka 25 johtaa kuolemaan, käyttämällä LPS-kaltaisia aineita galaktoosiamiini-(GalN)-herkistetyissä hiirissä. Urospuoliset C 57 bl. hiiret (6 eläintä/ryhmä) saavat samanaikaisesti i.p. 8 mg GalN:a liuotettuna 0,5 ml PBS ja 0,1 μς LPS, joka saatiin bakteerista salmonella abortus 30 equi (Sigma), liuotettuna 0,2 ml fysiologiseen suolaliuokseen. Tämä käsittely johtaa kaikkien eläinten kuolemaan 5-9 h aikana (C. Galanos, et. ai., Proc. Natl. Acad.Sci., USA, 76(1979) 5939-5943). Standardi- menetelmässä käytetyn LPS:n sijasta käytetään
35 koeaineita, joita annetaan erisuuruisina annoksina parenteraalisesti tai oraalisesti, joko samanaikaisesti GalN:n kanssa tai kerran tai useammin joko ennen GalN
II
81 807 11 käsittelyä tai tämän jälkeen. Tulos arvioidaan lukuina vertaamalla pienintä annosta, joka johtaa kaikkien eläinten kuolemaan ryhmässä, tai laskemalla LDeo arvo menetelmällä Speaman-Kärber.
5 6. LPS (endotoksiini)-vastustuskyvyn aikaansaaminen
Annettaessa hiirille LPS päivittäin paren-teraalisesti voidaan niissä aikaansaada nk. vastustuskykyä, joka suojaa eläimiä tappavalta vaikutukselta annettaessa LPS GalN jälkeen (vrt. koe 5). Käyttämällä 10 kaavan (I) mukaisia yhdisteitä kolmen päivän ajan i.p. annoksen ollessa 0,25 mg/päivä/hiiri, on mahdollista aikaansaada sellainen vastustuskyky, että kaikki eläimet säilyvät hengissä tappavasta LPS (0,1 ug/hiiri) annoksesta annettuna 3 päivää viimeisen 15 koeainekäsittelyn jälkeen koeaineella.
Täten kaavan (I) mukaiset yhdisteet ovat käyttökelpoisia immuunisuutta lisäävinä aineina esim. immuniteettisina adjuvantteina, systeemisinä immuunisuutta parantavina ja isännän ei-spesifisinä 20 vastustuskykyä lisäävinä aineina. Täten keksinnön mukaiset yhdisteet ovat sopivia esim. hoidettaessa tai vahvistavasti hoidettaessa (ts. yhdistettynä toisten spesifisten tai vahvistavien hoitomenetelmien kanssa) tiloja, jotka ovat yhteydessä immuniteetin huonone-25 miseen, erityisesti elimistön nesteiden immuniteetin huononemiseen ja/tai jälkeistyyppiseen liikaherkkyyteen ja hoidettaessa tiloja, joissa voidaan havaita kohonnutta immuniteettia. Erityisesti keksinnön mukaiset yhdisteet ovat käyttökelpoisia hoidettaessa tai vahvistavasti 30 hoidettaessa patologisia tiloja, jotka johtuvat varsinaisesta immuniteetin puutostilasta tai jota esiintyy iäkkäillä potilailla ja pahoja palovammoja tai yleisiä tulehduksia omaavilla potilailla. Keksinnön mukaisia yhdisteitä esitetään käytettäväksi myös hoidettaessa 35 tai vahvistavasti hoidettaessa virussairauksia (kuten hajapesäkkeistä herpestä, progressiivista rokkoa ja hajapesäkkeistä vesirokkoa) sekä Hodgkinsin tautia ja 12 81807 muita pahanlaatuisia kasvaimia.
Lisäksi kaavan (I) mukaiset yhdisteet ovat sopivia ennaltaehkäistessä endotoksiinishokkia, jota esiintyy esim. onnettomuuksien, palovammojen ja kirur-5 gisten leikkausten seurauksena.
Tarvittava annostus yllämainittuja käyttöjä varten vaihtelee luonnollisesti riippuen käytetystä yhdisteestä, annostustavasta ja halutusta hoidosta. Kuitenkin, yleisesti ottaen, tyydyttäviä tuloksia saadaan 10 silloin, kun annettu annos on 10 μ9-10 mg/kg kertaa kohti adjuvanttisia vaikutuksia varten, esim. vahvistavassa hoidossa, tai päivittäin. Päivittäistä annostusta varten yhdistettä annetaan sopivasti jaettuina annoksina 2-4 kertaa päivässä tai hidastetussa muodossa. 15 Suurempia nisäkkäitä varten yksittäinen kokonaiskerta-tai päivittäisannos on alueella n. 0,1-70 mg ja sopivat oraaliset annokset sisältävät n. 0,025 - 35 mg tai, kerta-annosten ollessa kyseessä, aina 70 mg aktiivista aineosaa sekoitettuna kiinteän tai nestemäisen farma-20 seuttisen kantajaaineen kanssa.
Mainittakoon, että keksinnön mukaisten yhdisteiden käyttökelpoisuuden lisäksi immuunisuutta lisäävinä aineina ne ovat käyttökelpoisia myös adjuvantteina rokotteissa. Tällaisessa käytössä saavutetaan tyydyt-25 täviä tuloksia annoksen ollessa 0,01-1,0 mg/kg rokotus-päivänä, jota annosta seuraa vaihtoehtoisesti sama annos 2-4 viikkoa myöhemmin. Suurempia nisäkkäitä varten sopiva annos oraalista annostusta varten rokotteen adjuvanttina sisältää n. 0,5-100 mg tai edullisesti 30 n. 70 mg aktiivista aineosaa.
Kuten on jo tähdennetty, sopiva päivittäinen keksinnön mukaisen yhdisteen annos riippuu, inter ai., tämän suhteellisesta aktiviteetin potentiaalista. Sopiva päivittäinen annos keksinnön mukaista edullista 35 yhdistettä, nimittäin 2,3-diamino-2,3-didesoksi2,3-di-N-[3(R)-hydroksitetradekanoyyli]-a-D-glukopyranosyyli-fosfaattia olisi 12,5 mg/kg.
Il 81 807 13
Kaavan (I) mukaiset yhdisteet, joissa R* ja/tai R* on fosforia sisältävä ryhmä yhdessä vapaan hydroksin kanssa, voidaan käyttää vapaassa muodossa tai farmaseuttisesti hyväksyttävän suolan tai esterin muodossa, jolla 5 on samansuuruinen aktiviteettiaste kuin vapailla muodoilla.
Yhdisteet voidaan antaa sisäisesti esim. oraalisesti tai parenteraalisesti, esim. injektioina.
Farmaseuttisia ainekokoomuksia, jotka sisältä-10 vät keksinnön mukaisia yhdisteitä, voidaan valmistaa tunnettujen galeenisten menetelmien avulla, esim. sekoittamalla tunnettujen farmaseuttisesti hyväksyttävien laimennusaineiden, kantaja-aineiden tai muiden täyteaineiden kanssa. Tällä tavalla aineista mudostetaan sopi-15 via yhdisteitä esim. tabletin tai kapselin muodossa tai injektioon sopivissa muodoissa.
Edellä esitetyn mukaisesti esillä oleva keksintö tuo esiin myös keksinnön mukaisen yhdisteen kuten yllä on määritelty, käytettäväksi famaseuttisena ainee-20 na, erityisesti immuunisuutta lisäävänä aineena, käytettäväksi erityisesti hoidossa tai vahvistavassa hoidossa, esim. sellaisten tilojen yhteydessä, joissa immuunisuus on heikentynyt, kuten on mainittu yllä, tai endotok-siinishokkia vastustavina ennaltehkäisevinä aineina.
25 Keksinnön eräässä sovellutuksessa tuodaan esiin myös menetelmä sellaisen yksilön immuunisuuden lisäämiseksi, joka tarvitsee tällaista hoitoa, ja jossa menetelmässä annostetaan tarvittava määrä keksinnön mukaista yhdistettä, kuten on määritelty yllä.
30 Vielä eräässä keksinnön sovellutuksessa tuodaan esiin myös farmaseuttinen ainekokooxnus, joka sisältää keksinnön mukaista yhdistettä, kuten on määritelty yllä, yhdessä sen farmaseuttisesti hyväsyttävän laimennus-tai kantaja-aineen kanssa.
35 Seuraavat suoritusesimerkit kuvaavat keksintöä.
Esimerkeissä lämpötilat on esitetty Celsius-asteina. Esimerkki 1 : 2.3-Diamino-2.3-didesoksi-2,3-di-N-r3(R)- 81 807 14 tetradekanovvlioksitetradekanoyylil-g-D-glukopvra-nosvvlifosfaatti (Menetelmä c): a) 2,3-diamino-2, 3-didesoksi-2,3-di-N-[3(R)-tetradekanoyylioksitetradekanoyyli]-4,6-O-isopropyy- 5 lideeni-g-D-glukopyranosyyli-dibentsyylifosfaatti 30 mg 2,3-diamino-2,3-didesoksi-2,3-di-N-[3(R)-tetradekanoyylioksitetradekanoyyli]-4,6-O-isopropyyli-deeni-D-glukoosin liuokseen 10 ml tetrahydrofuraanissa jäähdytettynä lämpötilaan -70 °C lisätään 20 μΐ 1,6 m 10 butyylilitiumia heksaanissa, ja seosta sekoitetaan 2 min ajan. Lisätään liuos dibentsyylifosforokloridaat-tia, jossa on 755 mg dibentsyylifosfiittia ja 365 mg N-klorosuksiini-imidiä 5 ml bentseenissä. Seoksen lämpötilan annetaan hiljaa nousta huoneen lämpötilaan, lisä-15 tään tippa etikkahappoa ja seos konsentroidaan tyhjiössä. Jäännös käsitellään kahdesti kromatografisesti silikageelillä, (kloroformi/metanoli = 98/2; tolueeni/e-tyyliasetaatti = 1/1), jolloin saadaan otsikon mukainen yhdiste, R* (kloroformi/metanoli = 95/5):0,72.
20 ^H-NMR (CDCla); 7,37 (s, lOH, fenyyli); 6,44 [d, Ja.kh 8 HZ, 1H, NH-C<2>]; 6,03 [d, J3/tw = 8, 1Hz, NH-C(3) ]; 5.71 [dd, Ji,a = 3 Hz, J*,,» » 6 Hz, 1H, H-C(l)]; 5,08 (m, 6H, 2x-CHa-fenyyli, 2X-CH-0-C0-); 4,25 [ddd, Ja.a = 11 Hz, J3.* = 10 Hz, 1H, H-C(3)]; 25 4,03 [m, 1H, H-C(2)]/ 3,79 [m, 1H, H-C(5)]; 3,70 [m# 2H, H-C(6)]? 3,54 [t, J*,B = 9,5 Hz, 1H, H-C(4)].
b) 2,3-Diamino-2,3-didesoksi-2,3-di-N-[3(R)-tetradekanoyy1ioksitetradekanoyyli]-α-D-glukopyranosy-ylifosfaatti (suojauksen poisto): 30 10 mg 2,3-Diamino-2,3-didesoksi-2,3-di-N- [3(R)-tetradekanoyylioksitetradekanoyyl!]-4,6-O-isopro-pyylideeni-a-D-glukopyranosyyli-dibentsyylifosfaattia liuotetaan 5 ml tetrahydrofuraaniin ja hydrataan normaalipaineessa (10 % Pd/C 5 mg). Hydrauksen loppuunsaat- 35 tamisen jälkeen (n. 30 min) suodatetaan katalysaattori pois, ja suodokseen lisätään 2,5 ml vettä ja vahvasti hapanta ioninvaihtajaa. Seosta kuumennetaan n. 2 h ajan
II
81 807 15 lämpötilassa 45 °C. Tämän jälkeen ioninvaihtaja suoda tetaan pois ja tuote muutetaan vastaavaan suolamuotoon esim. Na-suolaksi Amberlite AG 50W-X8, Na"- avulla, tri-etyyliamiinisuolaksi 0,01 N aq. trietyyliamiiniliuoksen 5 avulla tai tris-hydroksimetyyliaminometaanisuolaksi 0,01 N tris-hydroksimetyyliaminometaaniliuoksen avulla. R* (n-butanoli/pyridiini/etikkahappo/vesi = 50/20/6/24): 0,65.
1H-NMR (CDCla/CDaOD = 3/1): 0,88 (t, J * 6,5 10 Hz, 12H, -CH3); 1,27 (m, 76H, -CHa-); 1,60 (m, 8H, CO-C-CHa-); 2.31 (t, J 6,5 Hz, 4H, C0-CHa-); 2,44 (m, 4H, CO-CHaCO); 3,20-4,20 [m, H-C(2) - H-C(6)]; 5,20 (m, 2H, CO-O-CH-); 5,55 [dd, Ji/P 6,2 Hz, Ji,3 - 3,0 HZ, 1H, H-C(1)].
15 Esimerkki 2: 2.3-Diamino-2.3-didesoksi-2.3-dl-N-r3(R)-hvdroskitetradekanovvlil-a-D-qlukopvranosvvli-fosfaatti (Menetelmä c): a) 2,3-Diamino-2,3-didesoksi-2,3-di-N-[3(R)-bentsyy1ioksitetradekanoyyli]-4,6-0-isopropyylideeni-a- . · 20 D-glukopyranosyylidibentsyylifosfaatti;
Analogisesti esimerkin la) mukaisesti käsitellään kromatografisesti kahdesti silikageelillä (kloroformi/metanoli = 98/2; tolueeni/etyyliasetaatti * 10/7). R* (tolueeni/etyyliasetaatti = 5/4); 0,38; [ct]aB 25 * +40,2° (c = 1,1, kloroformi).
b) 2,3-diamino-2,3-didesoksi-2,3-di-N-(3 (R) -hydroksitetradekanoyyli]-a-D-glukopyranosyyli-fosfaatti (suojauksen poisto):
Analogisesti esimerkin Ib) mukaisesti; R* 30 (kloroformi/metanoli/jääetikkahappo/vesi « 125/75/10/-20); 0,45.
Esimerkki 3: 2.3-Diamlno-2.3-dldesoksi-2.3-di-N-T3(R)-asetoksitetradekanovvlil-g-D-alukopvranosvvlifosfaatti (Menetelmä c); 35 a) 2,3-Diamino-2,3-didesoksi-2,3-di-N-[3(R) - asetoksitetradekanoyyli]-4,6-0-isopropyylideeni-o-D-glukopyranosyylidibentsyylifosfaatti: 16 81807
Analogisesti esimerkin la) kanssa? [α]δβ = 30,1° (c = 1, kloroformi).
b) 2,3-Diamino-2,3-didesoksi-2, 3-di-N-[3(R)-asetoksitetradekanoyyli]-a-D-glukopyranosyylifosfaatti 5 (suojauksen poisto).
Anologisesti esimerkin Ib) kanssa; R* (butano-li/pyridiini/jääetikkahappo/vesi = 50/20/6/24):0,55, [o]ä° = +37,9° (c = 0,5, kloroformi/metanoli =1/1). Esimerkki 4: Metvvli-2.3-diamino-2.3-didesoksi~2.3~di- 10 N-Γ3(Rl-tetradekanovvlioksiteradekanovvlil-4-O-fosfo-rvvli-fl-D-qlukopvranosidi (Menetelmä c): a) Metyyli-2,3-diamino-4-0-dibentsyylifosfo-ryyli-2,3-didesoksi-2,3-di-N-[3(R)-tetradekanoyylioksi-tetradekanoyyli]-6-0-tert.butyylidimetyylisilyyli-fi- lS -D-glukopyranosidi 640 mg metyyli-2,3-diamino-2,3-didesoksi-2,3-di-N-[3(R)-tetradekanoyylioksitetradekanoyyli]- 6-0-tert.butyylidimetyylisilyyli-fi-D-glukopyranosidi-1luokseen, -20 °c, 30 ml kuivassa tetrahydrofuraanissa 20 lisätään 0,375 ml 1,6 m butyylilitiumia heksaanissa ja n. 2 min jälkeen 180 mg dibentsyylifosforokloridaattia bentseenissä. Seoksen lämpötilan annetaan nousta huoneen lämpötilaan, sitten se jäähdytetään lämpötilaan -20 oC ja seos neutraloidaan etikkahapon avulla. Seos konsen-25 troidaan haihduttamalla ja jäännös käsitellään kromato-grafisesti silikageelillä (tolueeni/etyyliasetaatti * 4/1). R* (tolueeni/etyyliasetaatti = 3/1): 0,55; [a]ft° = -29,7° (c = 1, kloroformi).
b) Metyyli 2,3-diamino-2,3-didesoksi-2,3-di- 30 N-[3(R)-tetradekanoyylioksitetradekanoyylij^-O-fos- foryyli-fi-D-glukopyranosidi (suojauksen poisto):
400 mg metyyli-2,3-diamino-4-0-dibentsyylifos-foryyli-2,3-didesoksi-2,3-di-N-[3(R)-tetradekanoyyli-oks itetradekanoyyli]-6-0-tert.butyy1idimetyy1isilyyli-35 β-D-glukopyranosidiliuosta 100 ml tetrahydraofuraanissa hydrataan 1 h ajan normaalipaineessa 100 mg 10 % Pd/C
kanssa. Seos käsitellään 10 ml vedellä, suodatetaan ja
II
81 807 17 suodos kuumennetaan lämpötilaan 50 eC 10 min. ajan Amberlite AG 50W-X8H-1- kanssa. Sitten se suodatetaan ja suurin osa tetrahydrofuraanista haihdutetaan pois. Vesipitoinen suspensio lyofilisoidaan; pienempi osa jäte-5 tään neutraloimatta, ja pääosa neutraloidaan trietyyli-aminilla; R* (butanoli/pyridiini/jääetikka/vesi * 50/20/6/24): 0,75; [a]S° -103,6' (c = 1 kloro- formi/metanoli = 1/1).
Hapan lyofilisaatti liuotetaan kloroformi/me-10 tanoliin (1/1) ja käsitellään diatsometaanin eetteri-liuoksella. Haihduttamalla suoritetun konsentroimisen jälkeen saadaan otsikon mukaisen yhdisteen dimetyyli-esteri.
Esimerkki 5: Metvvli-2.3-diamino-2.3-didesoksi-2.3-di-15 Ν-Γ3(R)-hvdroksitetradekanoyvli1-4-0-fosforvvli-fi-D-qlu-kopvranosidi (Menetelmä c)
Analogisesti esimerkin 4 kanssa.
a) Metyyli-2,3-diamino-4-0-dibentsyylifosfo-ryyli-2,3-didesoksi-2,3-di-N-[3(R)-bentsyylioksitet- 20 radekanoyyli]-60-tert.butyylidimetyylisilyyli-fi-D-glu-kopyranosidi, R« (kloroformi/metanoli 95/5): 0,41, b) Metyyli-2,3-diamino-2,3-didesoksi-2,3-di-N-[3(R)-hydroksitetradekanoyyli]-4-0-fosforyyli-fi-D-glu-kopyranosidi (suojauksen poisto): R« (butanoli/pyridi- 25 ni/jääetikkahappo/vesi»50/20/6/24):0,55, [α]δ° = -56’ (C=o,5 kloroformi/metanolissa = 1/1).
Esimerkki_6: 2.3-diamino-2.3-didesoksi-3-N-r3 (R) - hvdr oks itet radekanovv liT-2-N-r3(R) -tetr adekanovv 1 ioks i -tetradekanovvlil-a-D-qlukopvranosvvlifosfaatti (Mene-30 telmä cl a) 2,3-Diamino-2,3-didesoksi-3-N-[3(R)-bent-syylioksitetradekanoyyli]-2-N-[3(R)-tetradekanoyylioksi-tetradekanoyyli]-4,6-0-isopropyylideeni-a-D-glukopyrano-syyli-dibentsyylifosfaatti.
35 308 mg 2,3-diamino-2,3-didesoksi-3-N-[3(R)- bentsyylioksitetradekanoyyli]-2-[3(R)-tetradekanoyyli-oksitetradekanoyyli]-4,6-0-isopropyylideeni-D-glukopyra- 81 807 18 noosiliuosta 20 ml abs. tetrahydrofuraanissa jäähdytetään lämpötilaan -70 °C 0,6 ml, 1,6 m butyylilitiumia heksaanissa lisätään tipoittain, ja n. 5 min jälkeen lisätään 95 mg dibentsyylifosforokloridaattia bentsee-5 nissä. Liuosta sekoitetaan 30 min ajan lämpötilassa -20 °C, sen lämpötilan annetaan nousta huoneen lämpötilaan, se jäähdytetään uudelleen ja neutraloidaan etikkahapon avulla. Liuos konsentroidaan haihduttamalla ja jäännös käsitellään kromatogrofisesti silikageelillä, (toluee-10 ni/etyyliasetaatti = 2/1), R* (tolueeni/etyyliasetaatti = 1/1) : 0,7, [a]ä° = +23,3° (c = 1,2, kloroformi).
b) 2,3-Diamino-2,3-didesoksi-3-N-[3(R)-hydrok-sitetradekanoyyli]-2-N-[3(R)-tetradekanoyylioskitetra-dekanoyyli]-α-D-glukopyranosyylifosfaatti (suojauksen 15 poisto): 160 mg 2,3-diamino-2,3-didesoksi-3-N-[3(R)-bentsyylioksitetradekanoyyli]-2-N-[3(R)-tetradekanoyyli-oksitetradekanoyyli]-4,6-O-isopropyylideeni-a-gluko-pyranosyylidibentsyylifosfaattia liuotetaan 30 ml tet-20 rahydrofuraaniin, lisätään Pd/C (30 mg, 10 % Pd) lisätään ja seos hydrataan normaalipaineessa usean tunnin ajan. Sitten katalysaattori suodatetaan pois, 6 ml vettä ja Amberlite AG50W-X8H-1- lisätään, ja seosta sekoitetaan 5 h ajan lämpötilassa 40-50 °C. Ioninvahtaja poistetaan 25 ja pieni määrä liuosta käsitellään diatsometaanin eet-teriliuoksella, kunnes se muuttuu vaalean keltaiseksi, konsentroidaan haihduttamalla ja jäännös mitataan NMR-spekrtoskopialla. Pääosa liuoksesta neutraloidaan 0,01 N trietyyliamiiniliuoksella ja lyofilisoidaan. Täten 30 otsikon yhdiste saadaan bis-trietyyliamiinisuolan muodossa. R* (kloroformi/metanoli/vesi/etikkahappo = 25/15/4/2):0,58.
Esimerkki 7: 2.3-Diamino-2.3-didesoksi-2,3-dl-N-r3(R)-tetradekanovvljoksitetradekanovvlil-D-glukoosi fMenetel-35 mä a)
Asetetaan 28 mg 2,3-diamino-2,3-didesoksi-D-glukoosin ja 120 mg N-[3(R)-tetradekanoyylioksitetra-
II
81 807 19 dekanoyylioksi]suksiini-imidin liuoksen pH 8 di-isopro-pyylietyyliamiinin avulla, ja liuosta sekoitetaan 48 h ajan huoneen lämpötilassa. Sitten liuotin poistetaan ja jäännös käsitellään kromatografisesti silikageelillä, 5 (klorofromi/metanoli = 95/5). Otsikon mukainen yhdiste saadaan anomeerisena seoksea (α/β = 3/1); R* (klorofor-mi/metanoli = 9/1): 0,23; [a]S° = -2,1° (c = 1, kloro- formi/metanoli = 1/1).
Esimerkki 8: 2.3-Diamino-2.3-didesoksi-2,3-di-N-Γ3(R)-10 hvdroksitetradekanovvlil-D-qlukoosi (Menetelmä a):
Asetetaan 50 mg 2,3-diamino-2,3-didesoksi-D-glukoosin ja 136 mg N-[3(R)-hydroksitetradekanoyyIloksi] suksiini-imidin 15 ml dimetyyliformamidissa, pH 8 di-isopropyylietyyliamin kanssa ja sekoitetaan 15 h 15 ajan huoneen lämpötilassa. Reaktioseos kaadetaan veteen, sakka suodatetaan pois, pestään 2 kertaa 10 ml metano-lilla ja 2 kertaa 10 ml kloroformilla ja kuivataan, jolloin saadaan otsikon mukainen yhdiste: Sp. 200 °C (haj.).
20 Esimerkki 9: 2.3-Diamino-2.3-didesoksi-2.3-di-N-(3 (Rl -asetoksitetradekanovvlil-D-qlukoosi (Menetelmä ai:
Analogisesti esimerkin 8 kanssa; R* (klorofor-mi/metanoli « 9/1) : 0,25.
Esimerkki 10: Metvvli-2.3-diamino-2,3-didesoksi-2,3-di-25 N-Γ 3(Rl-hvdroksitetradekanovvlil-β-D-glukopvranosidi (Menetelmä a):
Liuos 96 mg metyyli-2,3-diamino-2,3-didesok-si-B-D-glukopyranosidiä ja 341 mg N-[3(R)hydroksitetra-dekanoyylioksi]suksiini-imidiä 15 ml dimetyyliformami-30 dia, sekoitetaan 24 h ajan huoneen lämpötilassa. Reaktioseos kaadetaan sitten 300 ml veteen ja sakka suodatetaan pois, pestään 3 kertaa 15 ml lämpimällä metano-lilla (40-50°), jolloin saadaan otsikon mukainen amorfinen yhdiste. R* (kloroformi/metanoli = 8/2) : 0,53 35 ^H-NMR (DMSO-de): 0,87 (t, J - 6,5 Hz, 6H, 2 x -CH3); 1,25 (m, 4OH, -CHa-); 2,12 ja 2,15 (kumpikin
Id,J = 6,5 Hz, kumpikin 2H, -CO-CHa-); 3,35 (s, 3H, 81 807 20 -OCHa); 3,0-3,9 (m)7 4,35 (m, 3H, 2 X O-CH-, -OH); 4,70 [d, Ji.a - 5Hz, 1H, H-C(1)3? 7/6 (τη, 2H, NH) .
Esimerkki 11: Metvvli-2.3-diamino-2.3-dldesoksi-2.3-di-N-Γ 3 fR)-tetradekanoyylioksitetradekanovvli1-β-D-qluko-5 pvranosidi (Menetelmä a): 23 mg metyyli-2,3-diamino-2,3-didesoksi-fi-D-glukopyranosidia ja 130 mg N-[3(R)-tetradekanoyylioksi-tetradekanoyylioksi]suksiini-imidiä liuotetaan 10 ml dimetyyliformamidiin ja sekoitetaan 48 h ajan huoneen 10 lämpötilassa. Seos konsentroidaan haihduttamalla ja jäännös käsitellään kromatografisesti silikageelillä, (kloroformi/metanoli = 95/5); R* (kloroformi/metanoli = 95/5): 0,45; [α]δ° = -22,0° (c = 1, kloroformi). Esimerkki 12: Metvvli-2.3-diamino-2.3-didesoksl-2.3-di-15 -Ν-Γ3(R.S)-tetradekanoyylioksitetradekanovvlil-β-D-qlu- kopvranosidi (Menetelmä a): 490 mg Metyyli-2,3-diamino-2,3-didesoksi-β-D-glukopyranosidiä ja 2,8 g N-[3(R,S)-tetradekanoyyli-oksitetradekanoyylioksi]suksiini-imidiä liuotetaan 20 dimetyyliformamidiin ja sekoitetaan 24 h ajan huoneen lämpötilassa. Seos konsentroidaan haihduttamalla ja jäännös käsitellään kromatografisesti silikageelillä, jolloin saadaan otsikon mukaisen yhdisteen seos sisältäen kaikki 4 mahdollista diastomeeria? 25 R*(kloroformi/metanoli = 95/5) : 0,42? [α]δ° = -18,2° (c = 1, kloroformi).
Esimerkki 13: 2.3-Diamino-2,3-didesoksl-2.3-di-N-T3 (R)-hvdroksltetradekanovvlil-4-0-fosforvvli-a-D-alukopvrano-svvlifosfaatti (Menetelmä c): 30 a) 2,3-Diamino-2,3-didesoksi-4-0-dibentsyyli- fosforyyli2,3-di-N-[3(R)-bentsyylioksitetradekano-yyli]-6-o-trityyli-a-D-glukopyranosyylidibentsyylifos-faatti 105 mg 2,3-diamino-2,3-didesoksi-2,3-di-N-[3 35 (R)-bentsyylioksitetradekanoyyli]-6-0-trityyli-D-gluko- pyranoosia fosforyloidaan analogisesti esimerkin 6 kanssa huoneen lämpötilassa 0,4 mmol butyylilitiumilla
II
81 807 21 ja 0,3 mmol dibentsyylifosforokloridaatilla. Silikagee-lillä (tolueeni/etyyliasetaatti = 7/3) suoritetun kroma-togfarisen puhdistuksen jälkeen saadaan otsikon mukainen yhdiste; R* (tolueeni/etyyliasetaatti = 7/3) : 0,22.
5 b) 2,3-Diamino-2,3-didesoksi-2,3-di-N-[3(R)- hydroksitetradekanoyyli]-4-O-fosforyyli-a-D-glukopyrano-syylifosfaatti 80 mg 2,3-diamino-2,3-didesoksi-4-0-dibentsyy-lifosforyyli-2,3-di-N-[3(R)-bentsyylioksitetradekano-10 yyli]-6-O-trityyli-o-D-glukopyranosyylidibentsyylifos-faattia liuotetaan 20 ml tetrahydrofuraaniin ja hydra-taan 20 mg 10% Pd/σ avulla. Katalysaattori suodatetaan pois, suodos käsitellään 5 ml vedellä ja lämmitetään Amberlite AG50W-X8H-·- avulla. Suodatuksen ja tetrahydro-15 furaanin olennaisen poistamisen jälkeen jäljelle jäävä seos laimennetaan vielä vedellä ja neutralloidaan 0.01 N trietyyliamiiniliuoksen avulla. Liukenemattomat aineosat poistetaan ja liuos kylmäkuivataan; R* (kloformi/-metanoli/jääetikkahappo/vesi = 125/75/10/20):0,35.
20 Tarvittavat lähtöaineet voidaan valmistaa seuraavasti.
k) 2.3-Diamino-2,3-didesoksi-2.3-di-N-Γ3(R)— tetradekanovvlioksitetradekanovvlil-4.6-0-isopropvvli-deeni-D-qlukoosi (esimerkkiä 1 varten!: 25 34 mg 2,3-diamino-2,3-didesoksi-2,3-di-N-[3(R)- tetradekanoyylioksitetradekanoyyli]-D-glukoosia 15 ml dimetyyliformamidissa lisätään 4 mg 2-propenyylime-tyylieetteriä ja katalyyttinen määrä p-tolueenisulfoni-happoa, ja reaktioseosta sekoitetaan huoneen lämpötilas-30 sa. 2 h jälkeen lisätään vielä 4 mg 2-propenyylimetyyli-eetteriä ja sekoittamista jatketaan 4 h ajan. Seos konsentroidaan haihduttamalla ja jäännös käsitellään kromatografilla, silikageeli, (kloroformi/metanoli 95/5), saadaan otsikon mukainen yhdiste; R« (klorofor-35 mi/metanoli = 95/59) : 0,51.
B) 2.3-Diamino-2.3-didesoksi-2.3-di-N-Γ3(R)-asetoksitetradekanovvlil-4.6-O-isopropvvlideeni-D-qlu- 81 807 22 koosi (esimerkkiä 3 varten):
Analogisesti A):n kanssa; R* (kloroformi/meta-noli = 9/1): 0,47; [α]δ° = -9,9° (c = 1, kloroformi/- metanoli = 1/1) 5 Cl Metvvli-2,3-diamino-2.3-didesoksi-2,3-di-N-f3(R)-tetradekanovvlioksitetradekanovvli1-6-0-tert.butvvlidi- metvvlisilvvli-fl-D-alukopvranosidi_(esimerkkiä_4.
varten):
Seosta, joka sisältää 1,12 g metyyli-2,3-diami-10 no-2,3-didesoksi-2,3-di-N-[3(R)-tetradekanoyylioksitet-radekanoyyli)-β-D-glukopyranosidia, 226 mg tert.butyyli-dimetyylisilyylikloridia ja 205 mg imidatsolia 20 ml dimetyyliformamidissa, sekoitetaan huoneen lämpötilassa 1,5 h ajan. Ylimääräinen reagenssi tuhotaan vedellä, 15 liuotin poistetaan haihduttamalla ja jäännös käsitellään kromatografilla, (tolueeni/etyyliasetaatti = 3/1);
Rir (tolueeni/etyyliasetaatti = 2/1): 0,63; [a]g° = 15,4° (c = 0,74, kloroformi).
D) Metvvli-2.3-Diamino-2,3-didesoksi-2.3-di-N-Γ3(R)-20 bentsvvlioksitetradekanovvlil-6-O-tert.butvvlidimetvvli-silvvli-fi-D-glukopvranosidi (esimerkkiä 5 varten): Anologiseti C):n kanssa; kromatografinen puhdistus silikageelillä kloroformi/metanolin (95/5) avulla antaa otsikon mukaisen yhdisteen; R* (kloroformi/metanoli = 25 95/5): 0,37.
E) 2.3-Diamino-2.3-didesoksi-3-N-r3(R)-bentsvv-lioksitetradekanovvli)-2-N-r3(R)-tetradekanovvljoksitet-radekanovvli1-4,6-0-isopropvvlideeni-D-qlukopvranoosi (esimerkkiä 6 varten), 30 a) 2-Amino-2,3-didesoksi-3-nitro-2-N-tert.bu- tyy1ioksikarbonyy1i-D-glukopyranoosi 2,5 g 2-atsido-2,3-didesoksi-3-nitro-D-glukopy-ranoosia 80 ml IN HCL sekoitetaan 2 h ajan vedyn alla normaalipaineessa olevan 500 mg 10 % Pd/c kanssa.
35 Sitten katalysaattori suodatetaan pois, liuos konsentroidaan haihduttamalla, jäännös liuotetaan veteen ja lyofilisoidaan. Lyofilisoitu jäännös liuotetaan 50 ml
II
81 807 23 dimetyyliformamidiin, lisätään 1,5 g trietyyliaminia ja 2,34 g di-tert.butyylidikarbonaattia, ja seosta sekoitetaan 5 h ajan huoneen lämpötilassa. Trietyyliamiini-hydrokloridi suodatetaan pois, suodos konsentroidaan 5 haihduttamalla ja jäännös käsitellään kromatografilla, (kloroformi/metanoli = 9/1); R* (kloroformi/metanoli = 9/1): 0,18 b) 2,3-Diamino-2,3-didesoksi-3-N-[3(R)-bent-syy1ioksitetradekanoyy1i]-2-N-tert.butyy1ioks ikarbo- 10 nyyli-D-glukopyranoosi 1,31 g 2-amino-2,3-didesoksi-3-nitro-2-N-tert.-butyylioksikarbonyyli-D-glukopyranoosia liuotetaan 200 ml metanoliin ja hydrataan 4 h ajan normaalipaineessa n. 500 mg vastavalmistetulla Raney-nikkelillä. Kataly-15 saattori suodatetaan pois, suodos konsentroidaan haihduttamalla ja jäännös kuivataan suuressa alipaineessa. Jäännös liuotetaan 30 ml kuivaan metyyliformamidiin, N-[3(R)-bentsyylioskitetradekanoyylioksi)suksiini-imidiä lisätään, ja liuoksen annetaan seistä 2 päivää huoneen 20 lämpötilassa. Käsiteltäessä tunnetulla tavalla ja kro-matograafisella puhdistuksella (kloroformi/metanoli = 95/5) saadaan otsikon mukaisen yhdisteen kummatkin anomeerit; R* (kloroformi/metanoli = 95/5): 0,3 ja 0,25.
c) 2,3-Diamino-2,3-didesoksi-3-N-[3(R)-bent-25 syylioksitetradekanoyyli]-2-N-[3(R)-tetradekanoyylioksi- tetradekanoyy1i]-D-glukopyranoosi
Seokseen, joka sisältää 520 mg 2,3-diamino-2,3-didesoksi-3-N-[3(R)-bentsyylioksitetradekanoyyli]-2-N-tert.butyy1ioksikarbonyyli-D-glykopyranoosia 20 ml 30 diklorometaanissa, lisätään 2 ml trifluorietikkahap-poa. 3 h jälkeen huoneen lämpötilassa saadaan kirkas liuos, joka konsentroidaan haihduttamalla ja kuivataan suuressa alipaineessa. Jäännös liuotetaan 20 ml dimetyyliformamidiin, 470 mg N-[3(R)-tetradekanoyylioksitetra-35 dekanoyylioksi]suksiini-imidiä lisätään ja asetetaan pH 8 di-isopropyylietyyliamiinin avulla. 40 ec lämpötilassa reaktio on lopussa 2 päivän jälkeen. Liuotin 81 807 24 haihdutetaan pois ja jäännös käsitellään kromatografilla (kloroformi/metanoli * 9/1) ; Rf (kloroformi/metanoli = 9/1): 0,43, [a]S° =0° (c = 2 kloroformissa), d) 2,3-Diamino-2,3-didesoksi-3-N-[(3(R)-bent-5 syylioksitetradekanoyyli]-2-N-[3(R)-tetradekanoyylioksi-tetradekanoyyli]-4,6-O-isopropyylideeni-D-glukopyranoosi 412 mg 2,3-diamino-2,3-didesoksi-3-N-[3(R)-ben-tsyylioksitetradekanoyyli]-2-N-[3(R)-tetradekanoyyliok-sitetradekanoyyli]-D-glukopyranoosia suspendoidaan 10 kuivaan dimetyyliformamidiin, katalyyttinen määrä, p-tolueenisulfonihappoa ja 43 mg isopropenyylimetyyli-eetteriä lisätään ja reaktioseosta sekoitetaan huoneen lämpötilassa. 2 h jälkeen kaikki aineet ovat liuenneet, ja reaktio lopetetaan lisäämällä kiinteää NaHC03:ia. 15 Liuotin haihdutetaan pois ja jäännös käsitellään krona-tografilla, (kloroformi/metanoli = 95/5); R* (kloroformi/metanoli = 95/5): 0,27; (a]ä° =0° (c = l, kloroformi) F) 2.3-Diamino-2,3-didesoksi-D-qlvkoosi (esimerkkejä 20 7-9 vartenΪ: a) 2-Atsido-2,3-didesoksi-3-nitro-l,4,6-tri-O-asetyyli-o-D-glukopyranoosi 6 g metyyli-2-atsido-4,6-0-bentsyylideeni- 2,3-didesoksi-3-nitro-fl-D-glukopyranosidia sekoitettuna 25 24 ml etikkahappoa, 24 ml etikkahappoanhydridiä ja 16 ml rikkihappoon, annetaan seistä 15 h ajan huoneen lämpötilassa, siihen lisätään 200 ml natriumasetaat-ti-etikkahappopuskuria, ja seos kaadetaan 2 1 jääkylmään 5 % natriumasetaattiliuokseen, jolloin osa tuotteesta 30 saostuu. Sakka suodatetaan pois ja liuotetaan kloroformiin. Vesifaasi kyllästetään NaCl:lla ja uutetaan kloroformin kanssa. Kloroformiliuos yhdistetään uutteen kanssa, pestään kyllästetyllä NaCl liuoksella, kuivataan (NaaSO*) ja liuotin haihdutetaan pois kiertohaiduttimel-35 la. Otsikon mukainen yhdiste saadaan etanolista kiteyt-tämisen jälkeen; Sp. 118-120 °C; [a]ä° = 129° (c * 1, kloroformi); R* (etanoli/petroolieetteri = 7/3): 0,50.
Il 81807 25 b) 2-Atsido-2,3-didesoksi-3-nitro-D-glukoosi 2,6 g 2-atsido-2,3-didesoksi-3-nitro-l,4,6-tri- O-asetyyli-a-D-glukopyranoosia palautetaan 130 ml 6N HC1 kanssa kunnes, kaikki on liuennut (n. 5 min).
5 Liuos konsentroidaan suuressa alipaineessa, jäännös liuotetaan veteen, lyofilisoidaan ja lyofilisoitu tuote kuivataan KOH päällä eksisaattorissa; R* (kloroformi/me-tanoli = 8/2): 0,62.
c) 2,3-Diamino-2,3-didesoksi-D-glukoosi 10 300 mg 2-atsido-2,3-didesoksi-3-nitro-D-glukoo- sia hydrataan normaalissa paineessa 1 h ajan 60 ml 0,5 N HC1 (10 % Pd/C, 40 mg). Suodatuksen ja 2 lyofolisoin-nin jälkeen saadaan otsikon mukainen yhdiste dihydro-kloridina; Sp. 180-185 °c (haj.); = 52,5° (c = 15 1,05, vesi).
G) 2.3-Diamino-2.3-dldesoksi-2,3-di-N-T3(R)bentsvvli-oksitetradekanovvlil-6-0-tritvvli-D-glukopvranoosi (esimerkkiä 13 varten):
Liuokseen 1,96 g 2,3-diamino-2,3-didesoksi-2,3-20 di-N-[3(R)-bentsyylioksitetradekanoyyli]-D-glukopyranoo- sia 100 ml pyridinissä huoneen lämpötilassa lisätään 4 g annoksina trityylikloridia 2 päivän ajan. Kun lähtöainetta ei ole enää läsnä, ylimääräinen trityylikloridi hydrolysoidaan ja liuos haihdutetaan kuiviin. Jäännös 25 hierotaan jauheeksi kuivana yhdessä 100 ml tolueeni/e-tyyliasetaatin 8/2 kanssa, liukenematon aine suodatetaan, ja suodos käsitellään silikageelikolonnissa ja eluoidaan samalla eluentilla. Saadaan otsikon mukaisen amorfisen yhdisteen anomeeriseos. R* (tolueeni/etyyli-30 asetaatti - 7/3): 0,53 ja 0,45; [a]ft° - +20° (c = 1, kloroformi).
H) 2,3-Dlamino-2,3-didesoksi-2.3-di-N-Γ3 (R) -bentsvvlioksltetradekanovvliT -4.6. -O-isopropvvlideeni--D-qlvkopvranoosi (esimerkkiä 2 varten); 35 a) 2,3-Diamino-2,3-didesoksi-2,3-di-N-[3(R)- bentsyylioksitetradekanoyyli]-D-glukopyranoosi
Analogisesti esimerkin 7 kanssa. Kromatograafi- 81 807 26 sesti puhdistettaessa käyttäen kloroformi/metanolia 9/1 eluenttina saadaan otsikon mukaisen yhdisteen ano-meerien seos; Rs (kloroformi/metanoli = 9/1): 0,44 ja 0,40.
5 b) 2,3-Diamino-2,3-didesoksi-2,3-di-N-[3(R)- bentsyylioksitetradekanoyyli]-4,6-O-isopropyylideeni-D-glukopyranoosi 1,66 g 2,3-diamino-2,3-didesoksi-2,3-di-N-[3- (R)-bentsyylioksitetradekanoyyli]-D-glukopyranoosia 10 suspendoidaan 100 ml dimetyyliformamidiin, katalyyttinen määrä p-tolueenisulfonihappoa ja 300 mg isoprope-nyylimetyylieetteriä lisätään, ja seosta sekoitetaan voimakkaasti 3 h ajan. Sitten se neutralisoidaan NaHCOa avulla ja dimetyyliformamidi tislataan pois.
15 Jäännös hierotaan jauheeksi kuivana diklorometaanin kanssa, liukenemattomat aineet suodatetaan pois ja luios haihdutetaan kuivaksi. Kromatograafisesti saadaan puhdas jäännös otsikon mukaisen yhdisteen anomeeriseoksena; R* (kloroformi/metanoli = 9/1): 0,68? [a]S° * -1,1° (c =» 20 1, klorofomi/metanoli = 1/1) I) Ν-Γ3 (R, S) -Tetradekanovvlioksitetradekanow-lioksil suksiini-imidi
Liuokseen 5,6 g N-[3(R,S)-hydroksitetradekano-yylioksi] suksiini-imidiä 150 ml pyridinissä jäähdytet-25 tynä lämpötilaan 0 °C lisätään 4,9 g tetradekanoyyliklo-ridia, ja reaktioseoksen annetaan seistä lämpötilassa 4 °C 12 h ajan. Ylimääräinen reagenssi tuhotaan vedellä, seos konsentroidaan haihduttamalla ja jäännös käsitellään kromatografisesti, silikageeli, (tolueeni/etyyli-30 asetaatti = 95/5), jolloin saadaan otsikon mukainen yhdiste siirappina; R* (tolueeni/etyyliasetaatti -8/2): 0,76.
1H-NMR (CDCla): 0,88 (t, J = 6,5 Hz, 6H, -CHa); 1.27 (m, 38H, -CH=-); 1,70 (m, 4H, CO-C-CHa- ja 35 0-C-CH2-); 2,34 (t, J = 7,0 Hz, 2H, C0-CHa); 2,83 (s, 4H, C0-CHa-CHa-C0)? 2,88 (d, J - 6,5 Hz, 2H, COCHa-C-O); 5,30 (qi, J = 6,5 Hz, 1H, C0-0-CH-).
Il 81807 27 J1 N-Γ 3(R)-Tetradekanovvlioksitetradekanovvli-oksilsuksiini-imidi
Analogisesti kohdan I) kanssa saadaan otsikon mukainen yhdiste. Sp. 44-45 eC; [a]B° = +2,2° (c = 1, 5 kloroformi).
K) N-Γ3(R)-Asetoksitetradekanoyvljoksi1suksii- ni-iroidi 340 mg N-[3(R)-Hydroksitetradekanoyylioksi]suksi ini-imidiä liuotetaan seokseen 40 ml pyridiniä ja 20 10 ml etikkahappo-anhydridiä ja annetaan seistä lämpötilassa 4 °C 15 h ajan. Reaktioseos konsentroidaan tyhjiössä ja haihdutetaan uudelleen 2 kertaa tolueenin kanssa. Saadaan kromatogafisesti puhdas otsikon mukainen yhdiste. ^H-NMR (CDC13): 0,88 (t, J = 6,5 Hz, 3H, -CH3); 15 1,27 (m, 18H, -CHa-)? 1,70 (m, 2H, CO-C-CHa-)? 2,09 (s, 3H, CO-CH3); 2,85 (s, 4H, CO-CHa-CHa-CO); 2,88 (d, J = 6,5 Hz, 2H, CO-CHa-C-O); 5,30 (qi, J = 6,5 Hz, 1H, C0-0-CH-).
20
Claims (4)
1. Menetelmä terapeuttisesti käytettävien yhdisteiden valmistamiseksi, joilla on kaava I:
5 HO R4° >~0R1 1 R3HN NHR2 10 jossa Ra ja R3 ovat samanlaisia tai erilaisia ja ovat C3.2-16 alkyylikarbonyyliryhmä, joka on valinnaisesti substituoitu 3-asemassa OH: 11a, asetoksilla tai Ca.a- 3.6 alkyylikarbonyylioksiryhmällä? Ri on vety, alempi alkyyli, aralkyyli tai fosfaatti-, pyrofosfaatti-, fos-15 foryylietanoliamiini- tai pyrofosforyylietanoliamiini-ryhmä; ja R4 on vety, fosfaatti-, pyrofosfaatti-, fos-foryylietanoliamiini- tai pyrofosforyylietanoliamiini-.ryhmä; vapaassa muodossa tai, kun jompikumpi Ri tai R« on 20 ryhmä, jossa on vapaa fosforihappofunktio, suolojen tai estereiden muodossa; tunnettu siitä, että menetelmässä: a) kaavan (Ia) mukaisten yhdisteiden valmistamiseksi, jossa Ra ja R3 ovat samanlaisia, 25 HO—v HO—^—OR J U ·. R3HN NHR2 30 asyloidaan vastaavat kaavan (II) mukaiset yhdisteet, jossa H0- 35 ΗΟ-χΛ-^ 11 H2N NH2 II 29 81807 Ra ja R3 ovat samanlaisia ja tarkoittavat samaa kuin yllä ja Ra.1 on vety, alempi alkyyli tai aralkyyli, b) kaavan (Ia) mukaisten yhdisteiden valmistamiseksi, jossa Ra ja R3 ovat erilaisia, asyloidaan kaavan (Ha) 5 mukaiset yhdisteet, HO—v / (
10 R3HN NH2 jossa Ri1 ja R3 tarkoittavat samaa kuin yllä, tai c) kaavan Ib mukaisten yhdisteiden valmistamiseksi, 15 HO -v ;· NHR2 20 jossa Ra-R-i tarkoittavat samaa kuin yllä ja Ra.11 on vety, alempi alkyyli, aralkyyli tai fosfaatti-, pyro-·*/ fosfaatti-, fosforyylietanoliamiini- tai pyrofosforyyli- : etanoliamiiniryhmä, joissa Ri1 ja Ra eivät ole saman aikaisesti vety, saatetaan kaavan (Ie) mukaiset yhdis-25 teet reagoimaan, R5°"^V_ •i ; 30 R3HN mZ ..." jossa Ra ja R3 tarkoittavat samaa kuin kaavassa I, ·”. Ri111 on vety, alempi alkyyli, aralkyyli tai suojaava ryhmä? ja Ra1 on vety tai suojaava ryhmä, jolloin Ri111 35 ja Ra1 eivät ole samanaikaisesti suojaavia ryhmiä ja Rsx on suojaava ryhmä; yhdessä vastaavan fosforiyhdis-teen kanssa, ja tarvittaessa poistetaan suojaavat ryhmät 30 81 807 saaduista yhdisteistä ja saadut yhdisteet otetaan talteen vapaassa muodossa tai, tarvittaessa, suolan tai esterin muodossa.
2. Menetelmä 2,3-diamino-2,3-didesoksi-2,3-di-5 N-[3(R)-hydroksitetradekanoyyli]-4-O-fosforyyli-a-D- glukopyranosyyli-fosfaatin valmistamiseksi vapaassa muodossa tai suolojen tai estereiden muodossa, tunnettu siitä, että annetaan kaavan (Ie) mukaisen yhdisteen, jossa R2 ja R3 ovat 3(R)-hydroksi-tetradeka-10 noyylejä suojatussa muodossa; Ro.111 on vety; R*1 on suojattu fosfaattiryhmä ja Rs1 on suojaryhmä ja rengas on α-D-glukopyranoosin konfiguraation muodossa, reagoida vastaavan fosforiyhdisteen kanssa ja poistetaan näin saadusta yhdisteestä siinä olevat suojaryhmät, sekä 15 otetaan talteen näin saatu yhdiste vapaassa muodossa tai, haluttaessa, suolamuodossa tai esterimuodossa.
3. Patenttivaatimuksen 1 tai 2 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että annetaan kaavan ·: (Ie) mukaisen yhdisteen, jossa R2 ja R3 ovat 3(R)-bent- V 20 syylioksitetradekanoyylejä, Ri111 on vety, R*1 on di- **: bentsyylifosforyyli ja Rs1 on trityyli ja rengas on a- D-glukopyranoosin konfiguraation muodossa, reagoida dibentsyylifosforokloridaatin kanssa, ja poistetaan saadusta 2,3-diamino-2,3-didesoksi-4-0-dibentsyylifos-25 foryyli-2,3-di-N-[3(R)-bentsyylioksitetradekanoyyli]-6- O-trityyli-a-D-glukopyranosyyli-dibentsyylifosfaatista siinä olevat suojaryhmät, sekä otetaan talteen yhdiste vapaassa muodossa tai, haluttaessa, suolan tai esterin muodossa. : 30
4. Menetelmä farmaseuttisen ainekokoomuksen valmistamiseksi, jossa menetelmässä seostetaan jonkin patenttivaatimuksista 1 - 3 menetelmän mukaisesti val mistettu kaavan I mukainen yhdiste, joka on vapaassa : muodossa tai farmaseuttisesti hyväkstyttävän suolan tai : 35 esterin muodossa, farmaseuttisesti hyväksyttävään lai- mennusaineeseen tai kantajaan. il 31 81807
Applications Claiming Priority (6)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE19843415100 DE3415100A1 (de) | 1984-04-21 | 1984-04-21 | Neue 2,3-diamino-2,3-didesoxyhexosederivate, verfahren zu ihrer herstellung und ihre verwendung |
| DE3415100 | 1984-04-21 | ||
| DE3415102 | 1984-04-21 | ||
| DE19843415102 DE3415102A1 (de) | 1984-04-21 | 1984-04-21 | Neue 2,3-diamino-2,3-didesoxyhexosederivate, verfahren zu ihrer herstellung und ihre verwendung |
| EP8500171 | 1985-04-17 | ||
| PCT/EP1985/000171 WO1985004881A1 (en) | 1984-04-21 | 1985-04-17 | 2,3-dinamo-2,3-didesoxyhexose derivatives, processes for their preparation and their use |
Publications (4)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| FI855132A FI855132A (fi) | 1985-12-20 |
| FI855132A0 FI855132A0 (fi) | 1985-12-20 |
| FI81807B FI81807B (fi) | 1990-08-31 |
| FI81807C true FI81807C (fi) | 1990-12-10 |
Family
ID=25820628
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| FI855132A FI81807C (fi) | 1984-04-21 | 1985-12-20 | Foerfarande foer framstaellning av 2,3-diamino-2,3-didesoxyhexosderivativer. |
Country Status (16)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4698331A (fi) |
| EP (1) | EP0180608B1 (fi) |
| AT (1) | ATE54920T1 (fi) |
| AU (1) | AU580061B2 (fi) |
| CA (1) | CA1264739A (fi) |
| DE (1) | DE3578866D1 (fi) |
| DK (1) | DK600585D0 (fi) |
| ES (1) | ES8605531A1 (fi) |
| FI (1) | FI81807C (fi) |
| GR (1) | GR850955B (fi) |
| HU (1) | HU197584B (fi) |
| IL (1) | IL75042A (fi) |
| NZ (1) | NZ211846A (fi) |
| PH (1) | PH23127A (fi) |
| PT (1) | PT80320B (fi) |
| WO (1) | WO1985004881A1 (fi) |
Families Citing this family (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| NL8601551A (nl) * | 1985-06-28 | 1987-01-16 | Sandoz Ag | Nieuwe saccharides, hun bereiding en farmaceutische samenstellingen, die hen bevatten. |
| DE3731953A1 (de) | 1987-09-23 | 1989-04-06 | Sandoz Ag | Neue saccharide, verfahren zu ihrer herstellung und ihre verwendung |
| US5219843A (en) * | 1987-09-23 | 1993-06-15 | Sandoz Ltd. | Saccharide derivatives |
| US7038039B2 (en) * | 2000-02-10 | 2006-05-02 | Mitsui Chemicals, Inc. | Process for selectively producing 1-phosphorylated sugar derivative anomer and process for producing nucleoside |
Family Cites Families (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| GR78246B (fi) * | 1981-01-23 | 1984-09-26 | Ciba Geigy Ag | |
| US4384998A (en) * | 1981-03-30 | 1983-05-24 | Merck & Co., Inc. | Synthesis of thienamycin from D-glucose |
| DE3220426A1 (de) * | 1982-05-29 | 1983-12-01 | Behringwerke Ag, 3550 Marburg | Chemische verbindung, verfahren zu ihrer herstellung und ihre verwendung zur bekaempfung der malaria |
| JPS60501259A (ja) * | 1983-05-06 | 1985-08-08 | ウイスコンシン・アルムニ・リサ−チ・フアンデ−シヨン | 免疫刺激活性をもつ単糖類化合物 |
| US4481196A (en) * | 1983-08-31 | 1984-11-06 | Fujisawa Pharmaceutical Co., Ltd. | Glycoside phosphate derivatives, pharmaceutical composition of the same and method of use |
| DE3347163A1 (de) * | 1983-12-27 | 1985-07-04 | Behringwerke Ag, 3550 Marburg | Verwendung von oligosacchariden zur chemotherapie oder chemoprophylaxe der malaria |
| US4481198A (en) * | 1984-02-13 | 1984-11-06 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Vitamin D metabolism inhibitor |
-
1985
- 1985-04-17 WO PCT/EP1985/000171 patent/WO1985004881A1/en active IP Right Grant
- 1985-04-17 HU HU852162A patent/HU197584B/hu not_active IP Right Cessation
- 1985-04-17 DE DE8585902023T patent/DE3578866D1/de not_active Expired - Lifetime
- 1985-04-17 AU AU42380/85A patent/AU580061B2/en not_active Ceased
- 1985-04-17 US US06/815,097 patent/US4698331A/en not_active Expired - Fee Related
- 1985-04-17 AT AT85902023T patent/ATE54920T1/de not_active IP Right Cessation
- 1985-04-17 EP EP85902023A patent/EP0180608B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1985-04-19 GR GR850955A patent/GR850955B/el unknown
- 1985-04-19 PT PT80320A patent/PT80320B/pt not_active IP Right Cessation
- 1985-04-19 ES ES542416A patent/ES8605531A1/es not_active Expired
- 1985-04-19 CA CA000479636A patent/CA1264739A/en not_active Expired - Lifetime
- 1985-04-19 NZ NZ211846A patent/NZ211846A/xx unknown
- 1985-04-19 PH PH32164A patent/PH23127A/en unknown
- 1985-04-29 IL IL75042A patent/IL75042A/xx unknown
- 1985-12-20 DK DK600585A patent/DK600585D0/da not_active Application Discontinuation
- 1985-12-20 FI FI855132A patent/FI81807C/fi not_active IP Right Cessation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| US4698331A (en) | 1987-10-06 |
| HUT42099A (en) | 1987-06-29 |
| IL75042A0 (en) | 1985-08-30 |
| NZ211846A (en) | 1989-07-27 |
| ES542416A0 (es) | 1986-03-16 |
| IL75042A (en) | 1989-05-15 |
| DK600585A (da) | 1985-12-20 |
| AU4238085A (en) | 1985-11-15 |
| DE3578866D1 (de) | 1990-08-30 |
| GR850955B (fi) | 1985-11-25 |
| CA1264739A (en) | 1990-01-23 |
| ATE54920T1 (de) | 1990-08-15 |
| EP0180608A1 (en) | 1986-05-14 |
| AU580061B2 (en) | 1988-12-22 |
| EP0180608B1 (en) | 1990-07-25 |
| PT80320B (en) | 1987-02-16 |
| PT80320A (en) | 1985-05-01 |
| ES8605531A1 (es) | 1986-03-16 |
| HU197584B (en) | 1989-04-28 |
| FI855132A (fi) | 1985-12-20 |
| FI855132A0 (fi) | 1985-12-20 |
| DK600585D0 (da) | 1985-12-20 |
| PH23127A (en) | 1989-05-05 |
| FI81807B (fi) | 1990-08-31 |
| WO1985004881A1 (en) | 1985-11-07 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP3723227B2 (ja) | ジ（ウリジン５’）−テトラホスフェート及びその塩の大規模生産のための方法 | |
| US4728641A (en) | Ganglioside derivatives | |
| HU221342B1 (en) | Substituted liposaccharides useful in the treatment and prevention of endotoxemia | |
| HU210744B (en) | Process to prepare novel ganglioside derivs. and pharmaceutical compns. contg. them | |
| RU2170234C2 (ru) | Модифицированные углеводами цитостатические средства | |
| US7091334B2 (en) | Method for large-scale production of di(uridine 5′)-tetraphosphate and salts thereof | |
| HU205365B (en) | Process for producing lysosphingolipid derivatives and pharmaceutical compositions comprising such compounds | |
| US6319908B1 (en) | Method for large-scale production of di(uridine 5′-tetraphosphate) and salts thereof | |
| SU1604158A3 (ru) | Способ получени производных гризеоловой кислоты | |
| AU596800B2 (en) | Improvements in or relating to organic compounds | |
| FI81807C (fi) | Foerfarande foer framstaellning av 2,3-diamino-2,3-didesoxyhexosderivativer. | |
| FI89494C (fi) | Foerfarande foer framstaellning av nya sackaridderivat | |
| IE55838B1 (en) | Novel muramyl peptides and processes for their manufacture | |
| HU205129B (en) | Process for producing lysoganglioside derivatives, as well as pharmaceutical compositions comprising such derivatives as active ingredient | |
| HU208834B (en) | Process for producing dilysoganglioside derivatives and pharmaceutical compositions comprising such active ingredient | |
| JPS61501919A (ja) | ３−ジアミノ−２，３−ジデスオキシヘキソ−ス誘導体、その製造方法およびその使用 | |
| US6407072B1 (en) | Lysoganglioside derivatives | |
| JPH06500532A (ja) | 骨髄毒性を減少させるマイトマイシン誘導体、その製法およびその用途 | |
| GB2195338A (en) | 4-O-phosphono-glycosides | |
| JPS624297A (ja) | 新規糖類、その製法および医薬組成物 | |
| US3446792A (en) | 9-d-psicofuranosylpurine and 6-substituted derivatives | |
| GB2211503A (en) | New saccharides, their preparation and pharmaceutical compositions containing them | |
| JPH04364121A (ja) | リポソーム製剤 | |
| HU199861B (en) | Process for producing 1-0-phosphono-d-glycopyranose derivatives substituted by tetradecanoyl group and pharmaceutical compositions comprising same |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM | Patent lapsed |
Owner name: SANDOZ AG |