FI70592B - Foerfarande foer framstaellning av uricase - Google Patents
Foerfarande foer framstaellning av uricase Download PDFInfo
- Publication number
- FI70592B FI70592B FI812868A FI812868A FI70592B FI 70592 B FI70592 B FI 70592B FI 812868 A FI812868 A FI 812868A FI 812868 A FI812868 A FI 812868A FI 70592 B FI70592 B FI 70592B
- Authority
- FI
- Finland
- Prior art keywords
- uricase
- preparation
- medium
- uric acid
- negative
- Prior art date
Links
- 108010092464 Urate Oxidase Proteins 0.000 claims description 17
- 244000005700 microbiome Species 0.000 claims description 9
- 241000191948 Kocuria rosea Species 0.000 claims description 8
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 8
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical class N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 6
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical class [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims description 3
- OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N Phosphorus Chemical class [P] OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229910052500 inorganic mineral Chemical class 0.000 claims description 2
- 239000011707 mineral Chemical class 0.000 claims description 2
- 239000011574 phosphorus Chemical class 0.000 claims description 2
- 229910052698 phosphorus Chemical class 0.000 claims description 2
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 2
- LEHOTFFKMJEONL-UHFFFAOYSA-N Uric Acid Chemical compound N1C(=O)NC(=O)C2=C1NC(=O)N2 LEHOTFFKMJEONL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- TVWHNULVHGKJHS-UHFFFAOYSA-N Uric acid Natural products N1C(=O)NC(=O)C2NC(=O)NC21 TVWHNULVHGKJHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 229940116269 uric acid Drugs 0.000 description 10
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 6
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 6
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 6
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 5
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 5
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 4
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 4
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 4
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 4
- 241000220317 Rosa Species 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 3
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 3
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- ROWKJAVDOGWPAT-UHFFFAOYSA-N Acetoin Chemical compound CC(O)C(C)=O ROWKJAVDOGWPAT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N D-xylopyranose Chemical compound O[C@@H]1COC(O)[C@H](O)[C@H]1O SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N 0.000 description 2
- SIKJAQJRHWYJAI-UHFFFAOYSA-N Indole Chemical compound C1=CC=C2NC=CC2=C1 SIKJAQJRHWYJAI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 2
- 241000192041 Micrococcus Species 0.000 description 2
- 108010009736 Protein Hydrolysates Proteins 0.000 description 2
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 2
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 2
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- POJWUDADGALRAB-UHFFFAOYSA-N allantoin Chemical compound NC(=O)NC1NC(=O)NC1=O POJWUDADGALRAB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 2
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- POJWUDADGALRAB-PVQJCKRUSA-N Allantoin Natural products NC(=O)N[C@@H]1NC(=O)NC1=O POJWUDADGALRAB-PVQJCKRUSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical class N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 102000016938 Catalase Human genes 0.000 description 1
- 108010053835 Catalase Proteins 0.000 description 1
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 description 1
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 description 1
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N Fumaric acid Chemical compound OC(=O)\C=C\C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- LKDRXBCSQODPBY-AMVSKUEXSA-N L-(-)-Sorbose Chemical compound OCC1(O)OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O LKDRXBCSQODPBY-AMVSKUEXSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 241000364057 Peoria Species 0.000 description 1
- 102000015439 Phospholipases Human genes 0.000 description 1
- 108010064785 Phospholipases Proteins 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- 108010046334 Urease Proteins 0.000 description 1
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 1
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 1
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 1
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 1
- 238000013019 agitation Methods 0.000 description 1
- 229960000458 allantoin Drugs 0.000 description 1
- PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N arabinose Natural products OCC(O)C(O)C(O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N beta-D-Pyranose-Lyxose Natural products OC1COC(O)C(O)C1O SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N beta-maltose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 235000014121 butter Nutrition 0.000 description 1
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 1
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 1
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 1
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 1
- 239000000287 crude extract Substances 0.000 description 1
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 230000003111 delayed effect Effects 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- GFAZHVHNLUBROE-UHFFFAOYSA-N hydroxymethyl propionaldehyde Natural products CCC(=O)CO GFAZHVHNLUBROE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PZOUSPYUWWUPPK-UHFFFAOYSA-N indole Natural products CC1=CC=CC2=C1C=CN2 PZOUSPYUWWUPPK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RKJUIXBNRJVNHR-UHFFFAOYSA-N indolenine Natural products C1=CC=C2CC=NC2=C1 RKJUIXBNRJVNHR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001788 irregular Effects 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 1
- CEQFOVLGLXCDCX-WUKNDPDISA-N methyl red Chemical compound C1=CC(N(C)C)=CC=C1\N=N\C1=CC=CC=C1C(O)=O CEQFOVLGLXCDCX-WUKNDPDISA-N 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 1
- 239000012452 mother liquor Substances 0.000 description 1
- 108010068186 nitratase Proteins 0.000 description 1
- 150000002823 nitrates Chemical class 0.000 description 1
- 239000006916 nutrient agar Substances 0.000 description 1
- 239000004006 olive oil Substances 0.000 description 1
- 235000008390 olive oil Nutrition 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000020477 pH reduction Effects 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 1
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N trans-butenedioic acid Natural products OC(=O)C=CC(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 1
- 210000001835 viscera Anatomy 0.000 description 1
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 1
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 1
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 1
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/0004—Oxidoreductases (1.)
- C12N9/0012—Oxidoreductases (1.) acting on nitrogen containing compounds as donors (1.4, 1.5, 1.6, 1.7)
- C12N9/0044—Oxidoreductases (1.) acting on nitrogen containing compounds as donors (1.4, 1.5, 1.6, 1.7) acting on other nitrogen compounds as donors (1.7)
- C12N9/0046—Oxidoreductases (1.) acting on nitrogen containing compounds as donors (1.4, 1.5, 1.6, 1.7) acting on other nitrogen compounds as donors (1.7) with oxygen as acceptor (1.7.3)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
- C12N1/205—Bacterial isolates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/62—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving uric acid
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
- C12R2001/265—Micrococcus
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/8215—Microorganisms
- Y10S435/822—Microorganisms using bacteria or actinomycetales
- Y10S435/859—Micrococcus
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Immunology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Virology (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Description
1 70592 U r i k a a s i n valmistusmenetelmä Förfarande för framställning av uricase Tämä keksintö koskee menetelmää, jolla voidaan valmistaa hyvin aktiivista urikaasientsyymiä (EC 1.7.3.3.), jota voidaan käyttää kliinisessä diagnostiikassa virtsaha-pon määrittämiseen veriseerumista tai virtsasta.
5 Urikaasi on entsyymi, joka katalysoi virtsahapon hapettumista allantoiiniksi, ja sitä ei ole läsnä korkeampien nisäkkäiden kuten ihmisen kudoksissa, mutta sen sijaan sitä on alempien nisäkkäiden kudoksissa, varsinkin sisäelimissä, ja myös enemmän ja vähemmän eräissä mikro-10 organismeissa. Uusi havainto, joka onkin tämän keksinnön ensimmäisenä kohteena, on se, että urikaasia voidaan tuot-ttaa Micrococcus roseus -mikro-organismilla, jonka ei ole aikasemmin tiedetty voivan tuottaa mainittua entsyymiä, ja lisäksi sillä on muihin tunnetun tyyppisiin mikro-orqanis-15 meihin verrattuna se etu, että se tuottaa suuria urikaasi-määriä e 1 atusaineissa , jotka sisältävät virtsahappoa pieninä väkevyyksinä. Edelleen on yllättäen havaittu, että Micrococcus roseus NRRL B 12196 -kannalla tuotetun urikaasin optimaalinen aktiivisuusalue eroaa muilla bakteereilla tuo-20 tetun urikaasin vastaavsta ollen lähellä fysiologisten nesteiden pH-arvoja, ja tämä onkin edullista, koska näin ollen pH:ta ei tarvitse säätää niissä biologisissa näytteissä, joista virtsahappo halutaan määrittää, ja täten vältytään säädön näytteeseen mahdollisesti aiheuttamilta kemiat li-25 silta muutoksilta. Kyseinen mi kro-organismi on eristetty viljelysmaasta Monterotondosta (Rooma) ja sillä on seuraa-vat morfologiset ominaisuudet:
Mikroskooppinen morfologia
Palloja, joiden halkaisija on 1-2,5 mikronia, ja 30 jotka ovat liikkumattomia ja Gram-positiivisia , jakautuvat useammassa kuin yhdessä tasossa ja esiintyvät kuutiomaisissa paakuissa tai epäsäännöllisissä ryhmissä ja joskus pareina tai yksinään.
Makroskooppinen morfologia 55 Pesäkkeet ravintoagarilla: kohonnut, yhtenäinen reu na, ruusunhohtoinen väri, pehmeä pinta, halkaisija 1-2 mm.
_ _ ΤΓΓ.
2 70592
Vinopinta-agar: vaalea ruusunhohtoi nen ihonväri, sileä ja kiiltävä.
Biologiset ominaisuudet
Kasvu glukoosiliemessä: vähäistä sameutta, jossa 5 limaista sakkaa, väri hieman vaaleanpunainen, pH = 6,5.
Kasvu tapahtuu paremmin 10 °C kuin 45 °C:ssa optimaalisen alueen ollessa välillä 25-35 °C.
Mikro-organismi kasvaa glukoosi liuoksessa, joiden natriumklondipitoisuudet ovat 5¾ ja 103!, mutta ei liuoksessa, 10 jonka natriumkloridipitoisuus on 15%.
Ei kasva Simmonsin sitraattiagarissa.
Aerobinen happamuudenmuodostus sokereista "Purple Broth" -alustassa (Dl F CO): ksyloosi, glyseroli, mannitoli, lak toosi, maltoosi, sorboosi, rihoosi, a rahi nousi, rnffinoosi, sel-1S lobioosi negatiivisia; glukoosi, sakkaroosi ja fruktoosi aiheuttivat hieman viivästyneen happamuuden (7-10 vuorokautta).
Arginiinin hydrolyysi: negatiivinen Tärkkelyksen hydrolyysi: positiivinen
Gelatiinin hydrolyysi: negatiivinen 20 Ureaasi: positiivinen H^S: negatiivinen
Katalaasi: positiivinen
Nitrataasi: positiivinen
Indoli: negatiivinen 25 Asetoiini: negatiivinen
Metyylipuna: negatiivinen
Lesitinaasi: negatiivinen L i p a a s i (voi ja oliiviöljy): negatiivinen 30 Kun näitä tietoja verrattiin teoksessa Bergey's
Manual of Determinative Bacteriology, Vili painos, esitettyihin tietoihin, voitiin todeta, että tämän keksinnön sisältämä mikro-organismi kuuluu Micrococc ac e a e-heimoon, Micrococcus-sukuun ja roseus- lajiin. Se on taltioitu 35 Northern Regional Research Centeriin, Peoria, 111., U.5.A., jossa sille on annettu tunnus NRRl B-12196.
Micrococcus roseus NRIU B-12196 -kantaa voidaan viljellä millä tahansa tavanomaisella aerobiselle menetelmällä kuten pintavi 1 je 1mänä tai mieluummin pinnana 1 nisvi1je 1 mäna 3 70592 käyttämällä sekoitettuja fermentore i ta. Elatusalusta, joka voi olla joko kiinteä tai nestemäinen, sisältää assimiloituvan hiili- ja typpi lähteen, fosfori lähteen ja kivennäis-suoloja ja vitamiineja.
5 Viljely void a an suorittaa lämpötila-alueella ID - 40 °C, mielellään alueella 25-35 °C, kasva tuoajän ollessa 10-48 tuntia, mielellään 20-30 tuntia ja pH:n ollessa alueella 6-9, mielellään välillä 7-8.
Sopivia hiililäht. eitä ovat esim. glukoosi, laktaat-10 ti, asetaatti, sakkaroosi, fumaraatti, virtsahappo, maissi-liotusvesi, glyseroli.
Sopivia typpi lähteitä ovat esim. lihahydrolysaatit, kaseiini, soijahydrolysaatit, ammoniakkisuolat. virtsa-aine, nitraatit tai virtsahappo.
15 Urikaasin uuttaminen bakteerimassasta ja mahdollinen puhdistus voidaan suorittaa tavanomaisilla entsymologiassa tunnetuilla menetelmillä. Micrococcus rose us NRRl B -1.2196 -kannasta uutettu urikaasi voidaan immobilisoida polymeeri-matriiseihin kemiallisilla sidoksilla tai ionisidoksilla 20 tai pelkästään fysikaalisella tavalla.
S e u r a a v a f esimerkit v a 1 a i se v a t keksintöä:
Esimerkki 1
Elatusalustan koostumus oli seuraava:
Hiivauute 15g/J
25 virtsahappo 2 g/1 pH säädettiin natriumhydroksilla arvoon 7,2 ja jaettiin 200 m 1:n erissä 500 m 1 : n pulloihin. liuokset steriloitiin (116 °C, 30 m .in) ja pulloihin siirrostettiin NRRL.
B-12196 -kantaa agarvinopinnoilt.a, joissa oli samaa elatus-30 ainetta 2% agarissa, ja pulloja inkuboitiin 24 tuntia 30 °C:ssa orbitaalisekoituksessa nopeudella 200 ’ 1/min. Sen jälkeen solut sentrifugoitiin talteen ja saatiin 3 g massaa (märkäpaino) 200 m 1:s t a elatusliuosta. Saatu solumassa suspendo itiin 60 m 1:a a n fosfaattipuskuria (0,1 M; p H = 8,5 ) 35 ja solut rikottiin täydellisesti käsittelemällä suspensio
French Pressure Cell Press -laitteessa. Saadun uutteen entsyymiaktiivisuus osoitti, että 1 g märkää solumassaa sisälsi 100 urik a a siyk sik köä .
4 70592
Urikaasiaktiivisuus määriteltiin spektrofotometrisesti seuraamalla virtsahapon hajoamista 2 8 3 n m : s s a menetelmällä Mahler et ai.. J. Bin! - Chem. (1955), 2 1 6, 625, jota oli modifioitu seurasvassa kuvatulla tavalla. 7 ml liuosta, 5 joka sisälsi 20 mg virtsa happo a 100 m 1 : s s a fosfaattipuskuria ,0.1 M , p H = 8 , 5 ) , laitettiin 50 ml pulloon 30 aC : s s a sekoitetulle vesihauteelle. Reaktio käynnistettiin lisäämällä pieni määrä entsyymiuutetta. Heti uutel isäyksen jälkeen ja vielä 10 minuutin reaktioajan kuluttua r e a k t ι o s e ok s e s t. a otet-10 tiin 0,5 ml näytteet, jotka lisättiin 4 ml:a an 0,1 M H Cl.
Mäin saatujen liuosten absorbanssi t luettiin arvossa 28 3 nm.
Urikaas iyksikkci määriteltiin siksi määräksi entsyymiä. joka kykenee h a jo tk a maan 1 m i k r o m o o 1 in v i r t sah a p p o a minuutissa edellä kuvatuissa olosuhteissa.
11, Fsimerkki 2
Micrococcus roseus NRRI B-12196 -solu-uute valmiste t t t i i n esimerkin 1 mukaisesti.
Raakauute sent, rifug o itiin ja emäliu oksen sisältämä urikaasi aktiivisuus määriteltiin edellä kuvatulla tavalla 2f) käyttämällä reaktioliuosta, joissa virtsahappo oli liuotettu 0.1 M fosfaattipuskuriin, ja jotka oli säädetty eri pH-arvoihin. Samanaikaisesti määritettiin sellaisten ent-syymiuutteiden aktiivisuudet, jotka oli saatu Bacillus f as t i d i o siis -viljelmistä, samoissa kasvatusolosuhteissa.
2 <·, kuin Micrococcus roseus -kant.aa viljeltiin. Saadut tulokset on esitetty taulukossa 1, jossa kummankin mikro-orga-n i s m ι n vertailuarvoksi p H - a r v o s r> a 9 on merkitty 100.
taulukko 1
Urikaasiakt ii v isuus ptl:n funktiona B. fastidiosus-5C ja M. roseus -uutteissa.
Reaktio seoksen pH Uutettu mikro-organismi M . roseus B_._fast.idosus 6.5 71 13,5 7.0 94 35 357,5 103 57 8.0 106 85 8.5 103 95 9 . U 10 0 10 0
Claims (5)
1. Menetelmä urikaasin valmistamiseksi mikro-orqa- nismin avulla aerobisissa olosuhteissa elatusaineessa, joka sisältää assimiloituvan hiili-, typpi- ja fosforilähteen sekä kivennäissuoloja, t u n n e t t u s i i t ä , e t - 5 ta mikro-organismi on Micrococcus roseus NRRiB-12196.
2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä urikaasin valmistamiseksi, tunnettu siitä, että vil-jelylämpötila on välillä 10 - 40 °C.
3. Patenttivaatimuksen 2 mukainen menetelmä urikaasin 10 valmistamiseksi, t u n n e t t u s i i t ä , että v i 1 - jelylärnpötila on välillä 2 5 - 35 °C.
4. Edellä olevien patenttivaatimusten mukainen menetelmä urikaasin valmistamiseksi, t u n n e t t u s i i -t ä , että elatusaineen pH on välillä 6-9. 15
5. Patenttivaatimuksen 4 mukainen menetelmä urikaasin valmistamiseksi, t u n n e t t u s i i t ä , että ela tusaineen pH on välillä 7 - 8.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| IT2475780 | 1980-09-19 | ||
| IT24757/80A IT1141061B (it) | 1980-09-19 | 1980-09-19 | Procedimento per la produzione di uricasi |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| FI812868L FI812868L (fi) | 1982-03-20 |
| FI70592B true FI70592B (fi) | 1986-06-06 |
| FI70592C FI70592C (fi) | 1986-09-24 |
Family
ID=11214644
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| FI812868A FI70592C (fi) | 1980-09-19 | 1981-09-15 | Foerfarande foer framstaellning av uricase |
Country Status (18)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4389485A (fi) |
| JP (1) | JPS57115177A (fi) |
| AR (1) | AR226750A1 (fi) |
| AT (1) | AT375398B (fi) |
| BE (1) | BE890413A (fi) |
| CA (1) | CA1160170A (fi) |
| CH (1) | CH650528A5 (fi) |
| DE (1) | DE3137049C2 (fi) |
| DK (1) | DK148360C (fi) |
| ES (1) | ES8302088A1 (fi) |
| FI (1) | FI70592C (fi) |
| FR (1) | FR2490673A1 (fi) |
| GB (1) | GB2084157B (fi) |
| IE (1) | IE51591B1 (fi) |
| IT (1) | IT1141061B (fi) |
| NL (1) | NL8104319A (fi) |
| NO (1) | NO159862C (fi) |
| PT (1) | PT73696B (fi) |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH0671425B2 (ja) * | 1985-06-05 | 1994-09-14 | サッポロビール株式会社 | ウリカ−ゼおよびその製造法 |
| US6913915B2 (en) * | 2001-08-02 | 2005-07-05 | Phoenix Pharmacologics, Inc. | PEG-modified uricase |
Family Cites Families (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| FR1529675A (fr) * | 1967-03-29 | 1968-06-21 | Applic Biochimiques Soc Et | Urate oxydase à haute activité et sa préparation |
| US4062731A (en) * | 1976-07-21 | 1977-12-13 | Eastman Kodak Company | Production of uricase from micrococcus luteus |
| JPS6031472B2 (ja) * | 1978-12-14 | 1985-07-22 | 協和醗酵工業株式会社 | 酸性ウリカ−ゼ |
-
1980
- 1980-09-19 IT IT24757/80A patent/IT1141061B/it active
-
1981
- 1981-08-20 US US06/294,510 patent/US4389485A/en not_active Expired - Fee Related
- 1981-09-01 DK DK387181A patent/DK148360C/da not_active IP Right Cessation
- 1981-09-02 GB GB8126627A patent/GB2084157B/en not_active Expired
- 1981-09-15 FI FI812868A patent/FI70592C/fi not_active IP Right Cessation
- 1981-09-16 FR FR8117475A patent/FR2490673A1/fr active Granted
- 1981-09-16 JP JP56146019A patent/JPS57115177A/ja active Granted
- 1981-09-17 DE DE3137049A patent/DE3137049C2/de not_active Expired
- 1981-09-17 NO NO813162A patent/NO159862C/no unknown
- 1981-09-18 BE BE0/206002A patent/BE890413A/fr not_active IP Right Cessation
- 1981-09-18 ES ES506360A patent/ES8302088A1/es not_active Expired
- 1981-09-18 IE IE2180/81A patent/IE51591B1/en not_active IP Right Cessation
- 1981-09-18 AR AR286811A patent/AR226750A1/es active
- 1981-09-18 PT PT73696A patent/PT73696B/pt not_active IP Right Cessation
- 1981-09-18 CH CH6051/81A patent/CH650528A5/it not_active IP Right Cessation
- 1981-09-18 NL NL8104319A patent/NL8104319A/nl not_active Application Discontinuation
- 1981-09-18 AT AT0403481A patent/AT375398B/de not_active IP Right Cessation
- 1981-09-18 CA CA000386227A patent/CA1160170A/en not_active Expired
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| US4389485A (en) | 1983-06-21 |
| NO813162L (no) | 1982-03-22 |
| CA1160170A (en) | 1984-01-10 |
| BE890413A (fr) | 1982-03-18 |
| DK148360B (da) | 1985-06-17 |
| JPS57115177A (en) | 1982-07-17 |
| FI70592C (fi) | 1986-09-24 |
| ES506360A0 (es) | 1983-01-01 |
| IE51591B1 (en) | 1987-01-21 |
| AT375398B (de) | 1984-07-25 |
| PT73696B (en) | 1982-12-10 |
| AR226750A1 (es) | 1982-08-13 |
| FR2490673B1 (fi) | 1984-04-13 |
| GB2084157B (en) | 1983-11-02 |
| GB2084157A (en) | 1982-04-07 |
| CH650528A5 (it) | 1985-07-31 |
| ATA403481A (de) | 1983-12-15 |
| NL8104319A (nl) | 1982-04-16 |
| FI812868L (fi) | 1982-03-20 |
| DK387181A (da) | 1982-03-20 |
| ES8302088A1 (es) | 1983-01-01 |
| DE3137049A1 (de) | 1982-04-08 |
| IT8024757A0 (it) | 1980-09-19 |
| NO159862B (no) | 1988-11-07 |
| DK148360C (da) | 1985-11-11 |
| PT73696A (en) | 1981-10-01 |
| IE812180L (en) | 1982-03-19 |
| IT1141061B (it) | 1986-10-01 |
| FR2490673A1 (fr) | 1982-03-26 |
| DE3137049C2 (de) | 1983-01-20 |
| NO159862C (no) | 1989-02-15 |
| JPH0260313B2 (fi) | 1990-12-14 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US4283494A (en) | Microbial lipase, process for its preparation and microbiologically pure culture therefor | |
| JPS62289A (ja) | α−ケト酸からのＬ−α−アミノ酸の酵素学的製造方法 | |
| KR100339723B1 (ko) | 미생물을사용한아미드화합물의제조방법 | |
| FI70592C (fi) | Foerfarande foer framstaellning av uricase | |
| US4418146A (en) | Preparation of D-N-carbamyl-α-aminoacids and micro-organisms for carrying out this preparation | |
| US4385120A (en) | Thermostable glycerokinases and process for its production | |
| US4391910A (en) | Processes for producing thermophilic aspartase | |
| NAKAGAWA et al. | Terferol, an inhibitor of cyclic adenosine 3', 5'-monophosphate phosphodiesterase I. Isolation and characterization | |
| SU676177A3 (ru) | Способ получени биомассы микроорганизмов | |
| Schuster et al. | A synthetic medium for continuous culture of the S‐layer carrying Bacillus stearothermophilus PV 72 and studies on the influence of growth conditions on cell wall properties | |
| Hasegawa | Distribution in organisms and stereospecificity of β-hydroxyisobutyrate dehydrogenase | |
| CN102888377B (zh) | 一种铜绿假单胞菌用培养基 | |
| RU1549227C (ru) | Способ получения комплекса литических ферментов | |
| Karube et al. | Bacteriolysis by immobilized enzymes | |
| JPS61231996A (ja) | グアニジノ酢酸分解酵素の安定化法 | |
| CA1150654A (en) | Process for the production of citric acid | |
| JP3125954B2 (ja) | 新規なホスホエノールピルビン酸カルボキシラーゼ及びその製法 | |
| FR2472608A1 (fr) | Nouvelle glucose-6-phosphate-deshydrogenase, son procede de preparation et compositions coenzymatiques la contenant | |
| GB1571877A (en) | Microbial lipase and its preparation | |
| SU767196A1 (ru) | Способ выращивани продуцентов литических ферментов | |
| JPH0248231B2 (ja) | Shinkikishiranaazeoyobisonoseizoho | |
| SU1479513A1 (ru) | Способ получени формиатдегидрогеназы | |
| JPS6075283A (ja) | 新菌株 | |
| Bongaerts et al. | Stimulation of growth of Bacillus fastidiosus by amino acids | |
| JPH0525476B2 (fi) |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM | Patent lapsed | ||
| MM | Patent lapsed |
Owner name: ENI - ENTE NAZIONALE IDROCARBURI |