JPS6075283A - 新菌株 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は新菌株に関する。

本発明者等は、デンプンを主炭素源としてこれを強力に
分解資化して生育し得ることの可能なエラセリシア・コ
リ（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ　ｃｏｌｉ　）に属する微
生物を広（自然界より検索した結果、土壌中より目的と
する微生物を単離することに成功し、本発明を完成した
。

すなわち、本発明はエラセリシア・コリに属し、デンプ
ン資１し性を肩する新菌株である。

以下、本発明の詳細な説明する。

先ず、本発明のエラセリシア・コリに属シ、デンプン資
化性を有する新菌株としては、例えばエラセリシア会コ
リ！４−に等が挙げられる〇上記エラセリシア・コリ２
４−には、本発明者等が土壌中より新たに検索して得た
山林で、その菌学的性質は以下に示−’ｒｓりである。

なお、菌学的性質はマニュアル・オブ・マイクロバイオ
ロジカルｅメソズ（１９６９年、マグロ−・ヒル・ブッ
ク・カンパニー社出版）記載の方法に準拠した０エツセ
リシアφコリλ＆−［の％　学的性質（ａ）形態 顕微鏡的観察（肉汁液体培地でＪ７Ｃで７＝時間培養〕 ■細胞の形及び大きさ：ｏ、ｓＸｉ、ｏμの桿菌である
。

■細胞の多形性のＭ無：細胞の多形性なＭし、球形ない
し桿形である。

■運動性のＭ無：周鞭毛を有し、運動性を肩する。

■胞子の■無：無し。

■ダラム染色性：陰性。

■抗酸性：陰性。

（ｂ）　各培地における生育状態 ■肉汁寒天平板層養 Ｊ７Ｃでコク時間の培養で、直径ｌ−ａ訓−の円形コロ
ニー。周辺は波状で、コロニーの色は白色を呈し、コロ
ニーは湿潤している。

■肉汁寒天斜面培養 ３２Ｃで−ＪＦ￥ｊ間の培養で、糸状に良好な生育を示
す。コロニーの色は白色又は黄白色を呈し、光沢がある
。

■肉汁液体培養 ３７Ｃで２グ時間の静置培養で、黄白色の混濁を有する
が、凝集性はない。

■肉汁ゼラチン穿刺培養 ３２Ｃで９６時間の静置培養により、培地上部表面付近
で良好な生育を示し、ゼラチンは液１しされない。

■リドマス番ミルク培養 ３７Ｃでｐｇ待時間静置培養で、培地は酸性となるが、
リドマス・ミルクは凝固シナい。

（ｃ）生理的性質 ■硝酸塩の還元：還元する。

■脱窒反応：陰性Ｏ ■ＭＲテスト：陽性。

■ｖｐテスト：陰性。

■インドールの生成：生成する０ ■硫化水素の生成：生成しない０ ■デンプンの加水分解：加水分解する０■クエンばの利
用：利用しない０ ■無機望索：利用する（塩化アンモニウム）。

［相］色素の生成：生成しない０ ０ウレアーゼ：陰性。

０オキシダーゼ：陰性。

［相］カタラーゼ：陽性。

■生育の範囲 温度：ｌＯ〜１２Ｃ ＰＨ：　６〜７．５ ［相］咳累に対゛する態度：好気性であるが、嫌気性で
も増殖できる。

［相］ｏ−ｐテスト（Ｈｕｇｈ　Ｌｅｉｆｓｏｎ法）：
発酵０＠糖類からば及びガスの生成 敵の生成　ガスの生成 Ｌ−アラビノース　＋　十 り−キシロース　＋　＋ Ｄ−グルコース　＋　＋ Ｄ−マンノース　＋　＋ Ｄ−フラクトース　＋　＋ Ｄ−ガラクトース　＋　＋ 麦芽糖　＋　＋ ショ糖　−− 乳　糖　＋　＋ トレハロース　士　＋ Ｄ−ンルビット　＋　＋ Ｄ−マンニット　＋　＋ イノジット　−− グリセリン　＋　＋ デンプン　＋　＋ 上記のエラセリシア・コリ２Ｇ−にの分類学的諸性質を
「パージエイズ・マニュアル・オブ慟デターミネイティ
ブ拳バクテリオロジー」第３版（／　９７＆年）の分類
と対比すると、本菌株はエラセリシア・コリの分類学的
諸性質と一致するが、デンプンの利用性の点において、
従来のエラセリシア・コＩＪ　Ｕデンプン資１し性が陰
性であるのに対し、本菌株はデンプン資１じ性が陽性で
あって：デンプンの利用性で両者は全く異なっているこ
とより、本菌株を新菌株と認め、エラセリシア・コリ、
１４−にと命名した。

なお、上記エラセリシア・コロニ＆　−には工業技術院
微生物工業技術研究所に微工研菌寄第２−６０号（ＦＥ
ＲＭ−Ｐ　封科７λ乙０つとして寄託されている０ つぎに本発明の新菌株、例えはエラセリシア・コリーグ
ーにの土壌よりの分離方法（集積培養法による）につい
て述べる。

第１表記載の液体デンプン培地ｔｏＯｍｂを振盪フラス
コ（容量：ｊ００ｍｂ容）に分注し、常法により滅菌し
たものに、束頁都北区滝野川の土壌ｌノを添加し、温度
、７７Ｃで２グ時間振盪培養して培養液を得た。

第１表 Ｎａ２ＨＰＯ，ｌｙノ　可溶性デンゾ７　１０ｆＮａＣ
１Ｏ，６ノ ＮＨ２Ｏｌ　／ノ　蒸　留　水　１１ Ｍｇ５Ｏ，ｏ　、　ｔノ　ｐＨ７、４ｔＣａＣ１２’　
ＯＴ’９ 次いで、以上の如くして得た培養液を予め滅菌された生
理的食塩水を用いて適宜希釈して得た布釈液を第２表記
載の平板寒天培地に接種し、温度、？７Ｃで一グ時間静
置培養を行なった。

第２表 ペプトン　ｌノ　蒸留水　ｌ！ 肉エキス　０．３ｉ！−ｐＨ７，０ ＮａＣ１Ｏ，５ノ 寒　天　ＩＪ−ｉｆ その後、以上の如くして平板寒天培地上に生成したコロ
ニーを第１表に記載の培地組成に寒天ｌ！ノを加えて調
製した平板寒天デンプン培地に常法により移植し、温度
３２ｃで３日間静置培養な行ない、コロニーの生じた平
板寒天デンプン培地にヨウ素蒸気を作用させてコロニー
の周囲に明白な透明な部分が生成したものをデンプン資
化性菌として分離した。

本発明の新菌株を培養するに際し、使用される培地とし
ては、炭素源、窒素源、無機イオン及び有機栄養源等よ
り選択されたものを適量含有する培地であれは、合成も
しくは天然培地等如何なるものでも使用可能である。

上記炭素源としては、例えはコーン、米、小麦、モモ類
由来等のデンプン、グルコース、マルトース、フラクト
ース等資１ｂされつるものであれば如何なるものでもよ
く、これらは単独でもしくは組み合せて用いることがで
きる。

なお、培地中のデンプン濃度は、例えは０．５〜グ％（
Ｗ／Ｖ）、好ましくは１％（Ｗ／Ｖ）前後である。また
、グルコース、マルトース、フラクトース等を炭素源と
する培地中のこれら糖類の濃度は０．−％（Ｗ／Ｖ）以
上、好ましくは０．ユ〜ｊ％（Ｗ／Ｖ）程度である。

また、窒素源としては、例えば塩化アンモニウム、硫酸
アンモニウム等が挙げられ、無機イオンとしてはリン酸
イオン、ナトリウムイオン、カリウムイオン、カルシウ
ムイオン、マグネシウムイオン等が必要により添加され
る。

更に、有機栄養源としては、例えばペプトン、肉エキス
、＃母エキス、トリプトン等が挙げられる０ 本発明の新菌株の培養条件は如何なる条件でもよ（、例
えｔｄ　ｐＨｂ〜ｇ、好ましくは２〜２　オ温度３ｏ−
グｏｃ、好ましくはＪ３〜り。Ｃで、好気的条件下に、
ｉｓ−グｇ時間、好ましくは２４時間程度培養が行なわ
れる。

次に、培養物より本発明の新菌株を採取するには、如何
なる手段でもよ（、例えは遠心分離、濾過等の通常の操
作法に従って分離し、必要により洗浄して菌体を得る。

以上の如く、本発明の新菌株は、安価で大量の供給が可
能なデンプンを主炭素源として生育可能なため、本発明
の新菌株を安価に培養して菌体を多量に得ることが出来
、遺伝子組み換え技術への利用、その他においてその有
用性は産業上極めて意義深いものである。

以下に、実施例を挙げて本発明を更に具体的に説明する
。

実施例 前記第１表記載の液体デンプン培地−ｋをジャーファー
メンタ−（！！容〕に分注したものを、常法により殺菌
したのち、これにペプトン１ｙ−１肉エキス０　、　Ｊ
ｊｉｌ−１ＮａＣ１Ｏ、ｉｆ　、蒸ｆｉｉ水１ｐｃＤ液
坏培地（ｐＨ７，ｏ）を用いて温度、？７ｃでｌ一時間
通気培養して得たエラセリシア・コロニ４−Ｋ（ＦＥＲ
Ｍ　−Ｐ　織７ａ　ｂ　ｏ　）の培養液−ｏ　ｍｔを接
種し、温度Ｊ７Ｃ，！気量−！／分、ｊ　００　ｒ−ｐ
、ｍ。

で攪拌しつつ−り時間ｆ＠養を行なって培養液を（また
０ 次いで、この培養液を常法により、？　０００　ｒ、ｐ
ｌｍ。

で２０分間遠心分離して集菌したものを常法により洗浄
を行ない湿潤菌体ｇｉ！−を得た。

第１頁の続き ＠発明者　波谷　一部 ０発　明　者　松　山　旭 ＠発明者山本　舌部 東京都港区南青山５の４の３１　ニッカウヰスキー株式
会社内

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. エラセリシア・コリに属し、デンプン資化性をＭするｌ
   ？菌株。