FI67403C - Foerfarande foer framstaellning av antibiotfoereningar med antitumoereffekt - Google Patents
Foerfarande foer framstaellning av antibiotfoereningar med antitumoereffekt Download PDFInfo
- Publication number
- FI67403C FI67403C FI800973A FI800973A FI67403C FI 67403 C FI67403 C FI 67403C FI 800973 A FI800973 A FI 800973A FI 800973 A FI800973 A FI 800973A FI 67403 C FI67403 C FI 67403C
- Authority
- FI
- Finland
- Prior art keywords
- bbm
- methanol
- butanol
- chloroform
- leukemia
- Prior art date
Links
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 61
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 41
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 40
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 40
- UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N Benzene Chemical compound C1=CC=CC=C1 UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 39
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 36
- IOLCXVTUBQKXJR-UHFFFAOYSA-M potassium bromide Chemical compound [K+].[Br-] IOLCXVTUBQKXJR-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 30
- FSYKKLYZXJSNPZ-UHFFFAOYSA-N sarcosine Chemical compound C[NH2+]CC([O-])=O FSYKKLYZXJSNPZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 30
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 28
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims description 28
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 claims description 27
- QMZVWFQMMLKHLS-LPQVFZKKSA-N luzopeptin a Chemical compound C([C@H](C(N1N=CC[C@@H]([C@H]1C(=O)NCC(=O)N(C)CC(=O)N(C)[C@H](C(=O)OC1)C(C)(C)O)OC(C)=O)=O)NC(=O)C2=NC3=CC=C(C=C3C=C2O)OC)OC(=O)[C@H](C(C)(C)O)N(C)C(=O)CN(C)C(=O)CNC(=O)[C@@H]2[C@@H](OC(C)=O)CC=NN2C(=O)[C@@H]1NC(=O)C1=NC2=CC=C(OC)C=C2C=C1O QMZVWFQMMLKHLS-LPQVFZKKSA-N 0.000 claims description 27
- HEDRZPFGACZZDS-MICDWDOJSA-N Trichloro(2H)methane Chemical compound [2H]C(Cl)(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-MICDWDOJSA-N 0.000 claims description 24
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 24
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 claims description 23
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 22
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 claims description 20
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 19
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 claims description 19
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 claims description 19
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 18
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 17
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims description 17
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 claims description 16
- HIWMCVYLBVFQQN-VBOHDVKSSA-N luzopeptin b Chemical compound C([C@H](C(N1N=CC[C@H](O)[C@H]1C(=O)NCC(=O)N(C)CC(=O)N(C)[C@H](C(=O)OC1)C(C)(C)O)=O)NC(=O)C2=NC3=CC=C(C=C3C=C2O)OC)OC(=O)[C@H](C(C)(C)O)N(C)C(=O)CN(C)C(=O)CNC(=O)[C@@H]2[C@@H](OC(C)=O)CC=NN2C(=O)[C@@H]1NC(=O)C1=NC2=CC=C(OC)C=C2C=C1O HIWMCVYLBVFQQN-VBOHDVKSSA-N 0.000 claims description 16
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 15
- 108010077895 Sarcosine Proteins 0.000 claims description 15
- KEKNHSVGJZJNFK-KFCKXDMLSA-N antibiotic bbm 928c Chemical compound C([C@H](C(N1N=CC[C@H](O)C1C(=O)NCC(=O)N(C)CC(=O)N(C)[C@H](C(=O)OC1)C(C)(C)O)=O)NC(=O)C2=NC3=CC=C(C=C3C=C2O)OC)OC(=O)[C@H](C(C)(C)O)N(C)C(=O)CN(C)C(=O)CNC(=O)C2[C@@H](O)CC=NN2C(=O)[C@@H]1NC(=O)C1=NC2=CC=C(OC)C=C2C=C1O KEKNHSVGJZJNFK-KFCKXDMLSA-N 0.000 claims description 15
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims description 15
- FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N ninhydrin Chemical compound C1=CC=C2C(=O)C(O)(O)C(=O)C2=C1 FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 15
- 229940043230 sarcosine Drugs 0.000 claims description 15
- 229910021578 Iron(III) chloride Inorganic materials 0.000 claims description 13
- 238000000921 elemental analysis Methods 0.000 claims description 13
- RBTARNINKXHZNM-UHFFFAOYSA-K iron trichloride Chemical compound Cl[Fe](Cl)Cl RBTARNINKXHZNM-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims description 13
- 238000002844 melting Methods 0.000 claims description 13
- 230000008018 melting Effects 0.000 claims description 13
- 238000000425 proton nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 claims description 13
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims description 12
- SMWDFEZZVXVKRB-UHFFFAOYSA-N Quinoline Chemical compound N1=CC=CC2=CC=CC=C21 SMWDFEZZVXVKRB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 238000002329 infrared spectrum Methods 0.000 claims description 12
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims description 12
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 claims description 12
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 claims description 11
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 claims description 11
- IQMUMKJNLGYVNS-UHFFFAOYSA-N butan-1-ol;methanol;hydrate Chemical compound O.OC.CCCCO IQMUMKJNLGYVNS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 11
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 11
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 10
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims description 10
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 10
- 208000006552 Lewis Lung Carcinoma Diseases 0.000 claims description 9
- 239000003972 antineoplastic antibiotic Substances 0.000 claims description 9
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- JYVHOGDBFNJNMR-UHFFFAOYSA-N hexane;hydrate Chemical compound O.CCCCCC JYVHOGDBFNJNMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 238000005903 acid hydrolysis reaction Methods 0.000 claims description 8
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 claims description 8
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims description 8
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims description 8
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 claims description 8
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 claims description 8
- 208000001382 Experimental Melanoma Diseases 0.000 claims description 7
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 7
- 206010003445 Ascites Diseases 0.000 claims description 6
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 claims description 6
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 claims description 6
- OMDFZKXSWRGNGX-SCSAIBSYSA-N (2s)-3-hydroxy-3-methyl-2-(methylamino)butanoic acid Chemical compound CN[C@H](C(O)=O)C(C)(C)O OMDFZKXSWRGNGX-SCSAIBSYSA-N 0.000 claims description 5
- 241000186361 Actinobacteria <class> Species 0.000 claims description 5
- 208000006268 Sarcoma 180 Diseases 0.000 claims description 5
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 5
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 4
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 claims description 4
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 4
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 claims description 3
- 125000003630 glycyl group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C(*)=O 0.000 claims description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 3
- NIQQIJXGUZVEBB-UHFFFAOYSA-N methanol;propan-2-one Chemical compound OC.CC(C)=O NIQQIJXGUZVEBB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- -1 anti-tumor effect Substances 0.000 claims description 2
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 claims description 2
- 238000002513 implantation Methods 0.000 claims description 2
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 claims description 2
- 125000003607 serino group Chemical group [H]N([H])[C@]([H])(C(=O)[*])C(O[H])([H])[H] 0.000 claims description 2
- OLAWRZDVZPFZTA-YFKPBYRVSA-N (2s)-2-[hydroxy(methyl)amino]-3-methylbutanoic acid Chemical compound CC(C)[C@H](N(C)O)C(O)=O OLAWRZDVZPFZTA-YFKPBYRVSA-N 0.000 claims 4
- 150000002431 hydrogen Chemical class 0.000 claims 4
- CTQNGGLPUBDAKN-UHFFFAOYSA-N O-Xylene Chemical compound CC1=CC=CC=C1C CTQNGGLPUBDAKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 3
- 239000008096 xylene Substances 0.000 claims 3
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- 239000005862 Whey Substances 0.000 claims 2
- 102000007544 Whey Proteins Human genes 0.000 claims 2
- 108010046377 Whey Proteins Proteins 0.000 claims 2
- 150000001336 alkenes Chemical class 0.000 claims 2
- ZWLQACFYTXLLEJ-UHFFFAOYSA-N butan-1-ol;methanol Chemical compound OC.CCCCO ZWLQACFYTXLLEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- AKCRVYNORCOYQT-YFKPBYRVSA-N N-methyl-L-valine Chemical compound CN[C@@H](C(C)C)C(O)=O AKCRVYNORCOYQT-YFKPBYRVSA-N 0.000 claims 1
- 241001522306 Serinus serinus Species 0.000 claims 1
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 claims 1
- UVZGOOXAARJPHD-UHFFFAOYSA-N butan-2-one;methanol Chemical compound OC.CCC(C)=O UVZGOOXAARJPHD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 239000003086 colorant Substances 0.000 claims 1
- 239000003337 fertilizer Substances 0.000 claims 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 claims 1
- ZWEHNKRNPOVVGH-UHFFFAOYSA-N methyl ethyl ketone Substances CCC(C)=O ZWEHNKRNPOVVGH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 125000000325 methylidene group Chemical group [H]C([H])=* 0.000 claims 1
- 201000003651 pulmonary sarcoidosis Diseases 0.000 claims 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims 1
- 239000006188 syrup Substances 0.000 claims 1
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 claims 1
- 239000004474 valine Substances 0.000 claims 1
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 21
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 21
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 17
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 13
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 13
- NWIBSHFKIJFRCO-WUDYKRTCSA-N Mytomycin Chemical compound C1N2C(C(C(C)=C(N)C3=O)=O)=C3[C@@H](COC(N)=O)[C@@]2(OC)[C@@H]2[C@H]1N2 NWIBSHFKIJFRCO-WUDYKRTCSA-N 0.000 description 12
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 9
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 9
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 9
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 9
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 8
- 238000000034 method Methods 0.000 description 8
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 8
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 8
- 229910002651 NO3 Inorganic materials 0.000 description 7
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 7
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 7
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 6
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N Nitrate Chemical compound [O-][N+]([O-])=O NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 229960004857 mitomycin Drugs 0.000 description 6
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 6
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 5
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 5
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 5
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 5
- 239000000049 pigment Substances 0.000 description 5
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 5
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 5
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 4
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 4
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 4
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 4
- 238000000862 absorption spectrum Methods 0.000 description 4
- 230000000845 anti-microbial effect Effects 0.000 description 4
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 description 4
- 125000004435 hydrogen atom Chemical class [H]* 0.000 description 4
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 4
- XSCHRSMBECNVNS-UHFFFAOYSA-N quinoxaline Chemical compound N1=CC=NC2=CC=CC=C21 XSCHRSMBECNVNS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 4
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241001446247 uncultured actinomycete Species 0.000 description 4
- WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N Acetic anhydride Chemical compound CC(=O)OC(C)=O WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N D-mannopyranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N 0.000 description 3
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 3
- SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N beta-D-Pyranose-Lyxose Natural products OC1COC(O)C(O)C1O SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 3
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 3
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 3
- 238000000655 nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 3
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 3
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 3
- 238000011218 seed culture Methods 0.000 description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-SVZMEOIVSA-N (+)-Galactose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-SVZMEOIVSA-N 0.000 description 2
- UQZSVIGPZAULMV-DKWTVANSSA-N (2s)-2,4-diamino-4-oxobutanoic acid;propane-1,2,3-triol Chemical compound OCC(O)CO.OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O UQZSVIGPZAULMV-DKWTVANSSA-N 0.000 description 2
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O Ammonium Chemical compound [NH4+] QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 2
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 2
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 2
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-Cysteine Chemical compound SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N L-sorbitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 2
- 241000544912 Melanoides Species 0.000 description 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 2
- 208000000175 Nail-Patella Syndrome Diseases 0.000 description 2
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 2
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000002777 acetyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 2
- PYMYPHUHKUWMLA-LMVFSUKVSA-N aldehydo-D-ribose Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-LMVFSUKVSA-N 0.000 description 2
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 2
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 2
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 2
- PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N arabinose Natural products OCC(O)C(O)C(O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 2
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 2
- WORJEOGGNQDSOE-UHFFFAOYSA-N chloroform;methanol Chemical compound OC.ClC(Cl)Cl WORJEOGGNQDSOE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 2
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 2
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 2
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 2
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 2
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 2
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 2
- AUJXLBOHYWTPFV-RQLJINDISA-N n-[(4s,7r,11s,17s,20r,24s)-2,4,12,15,17,25-hexamethyl-29-methylsulfanyl-3,6,10,13,16,19,23,26-octaoxo-11,24-di(propan-2-yl)-7-(quinoxaline-2-carbonylamino)-9,22-dioxa-28-thia-2,5,12,15,18,25-hexazabicyclo[12.12.3]nonacosan-20-yl]quinoxaline-2-carboxamide Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1C)NC(=O)C=2N=C3C=CC=CC3=NC=2)OC(=O)[C@H](C(C)C)N(C)C(=O)C2N(C)C(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](NC(=O)C=3N=C4C=CC=CC4=NC=3)COC(=O)[C@H](C(C)C)N(C)C(=O)C1CSC2SC AUJXLBOHYWTPFV-RQLJINDISA-N 0.000 description 2
- 239000006916 nutrient agar Substances 0.000 description 2
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 2
- 239000006877 oatmeal agar Substances 0.000 description 2
- FGIUAXJPYTZDNR-UHFFFAOYSA-N potassium nitrate Chemical compound [K+].[O-][N+]([O-])=O FGIUAXJPYTZDNR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 238000000638 solvent extraction Methods 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XPNGNIFUDRPBFJ-UHFFFAOYSA-N (2-methylphenyl)methanol Chemical compound CC1=CC=CC=C1CO XPNGNIFUDRPBFJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GMKMEZVLHJARHF-UHFFFAOYSA-N (2R,6R)-form-2.6-Diaminoheptanedioic acid Natural products OC(=O)C(N)CCCC(N)C(O)=O GMKMEZVLHJARHF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RMTFNDVZYPHUEF-JRTVQGFMSA-N (2r,3s,4s,5r)-2,4,5,6-tetrahydroxy-3-methoxyhexanal Chemical compound O=C[C@H](O)[C@@H](OC)[C@@H](O)[C@H](O)CO RMTFNDVZYPHUEF-JRTVQGFMSA-N 0.000 description 1
- JQIZHNLEFQMDCQ-UHFFFAOYSA-N 1,2,3,4-tetrahydropyridazine Chemical group C1CC=CNN1 JQIZHNLEFQMDCQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001644 13C nuclear magnetic resonance spectroscopy Methods 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- 241000193738 Bacillus anthracis Species 0.000 description 1
- 208000035143 Bacterial infection Diseases 0.000 description 1
- 229910014033 C-OH Inorganic materials 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L Carbonate Chemical compound [O-]C([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 102000016938 Catalase Human genes 0.000 description 1
- 108010053835 Catalase Proteins 0.000 description 1
- 229920002101 Chitin Polymers 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N Cysteine Chemical compound SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910014570 C—OH Inorganic materials 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-CUHNMECISA-N D-Cellobiose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-CUHNMECISA-N 0.000 description 1
- RFSUNEUAIZKAJO-VRPWFDPXSA-N D-Fructose Natural products OC[C@H]1OC(O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-VRPWFDPXSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 1
- SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N D-mannomethylose Natural products CC1OC(O)C(O)C(O)C1O SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N D-xylopyranose Chemical compound O[C@@H]1COC(O)[C@H](O)[C@H]1O SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N 0.000 description 1
- 229920001353 Dextrin Polymers 0.000 description 1
- 239000004375 Dextrin Substances 0.000 description 1
- QSJXEFYPDANLFS-UHFFFAOYSA-N Diacetyl Chemical group CC(=O)C(C)=O QSJXEFYPDANLFS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N Dihydrogen disulfide Chemical compound SS BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 description 1
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- 239000001828 Gelatine Substances 0.000 description 1
- SQUHHTBVTRBESD-UHFFFAOYSA-N Hexa-Ac-myo-Inositol Natural products CC(=O)OC1C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C1OC(C)=O SQUHHTBVTRBESD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 238000002768 Kirby-Bauer method Methods 0.000 description 1
- LKDRXBCSQODPBY-AMVSKUEXSA-N L-(-)-Sorbose Chemical compound OCC1(O)OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O LKDRXBCSQODPBY-AMVSKUEXSA-N 0.000 description 1
- 239000004201 L-cysteine Substances 0.000 description 1
- 235000013878 L-cysteine Nutrition 0.000 description 1
- PNNNRSAQSRJVSB-UHFFFAOYSA-N L-rhamnose Natural products CC(O)C(O)C(O)C(O)C=O PNNNRSAQSRJVSB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 241000219470 Mirabilis Species 0.000 description 1
- 241000187481 Mycobacterium phlei Species 0.000 description 1
- 241000187480 Mycobacterium smegmatis Species 0.000 description 1
- IOVCWXUNBOPUCH-UHFFFAOYSA-M Nitrite anion Chemical compound [O-]N=O IOVCWXUNBOPUCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- RMTFNDVZYPHUEF-UHFFFAOYSA-N O3-methyl-D-galactose Natural products O=CC(O)C(OC)C(O)C(O)CO RMTFNDVZYPHUEF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MUPFEKGTMRGPLJ-RMMQSMQOSA-N Raffinose Natural products O(C[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O[C@@]2(CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O1)[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-RMMQSMQOSA-N 0.000 description 1
- NGFMICBWJRZIBI-JZRPKSSGSA-N Salicin Natural products O([C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O1)c1c(CO)cccc1 NGFMICBWJRZIBI-JZRPKSSGSA-N 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 244000127759 Spondias lutea Species 0.000 description 1
- 241000193996 Streptococcus pyogenes Species 0.000 description 1
- 241000187747 Streptomyces Species 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N Sulfur Chemical compound [S] NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 description 1
- MUPFEKGTMRGPLJ-UHFFFAOYSA-N UNPD196149 Natural products OC1C(O)C(CO)OC1(CO)OC1C(O)C(O)C(O)C(COC2C(C(O)C(O)C(CO)O2)O)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010048222 Xerosis Diseases 0.000 description 1
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 1
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 1
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 1
- 230000021736 acetylation Effects 0.000 description 1
- 238000006640 acetylation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 238000005273 aeration Methods 0.000 description 1
- 241001148470 aerobic bacillus Species 0.000 description 1
- 238000002814 agar dilution Methods 0.000 description 1
- PNNNRSAQSRJVSB-BXKVDMCESA-N aldehydo-L-rhamnose Chemical compound C[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)C=O PNNNRSAQSRJVSB-BXKVDMCESA-N 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 description 1
- SRBFZHDQGSBBOR-MBMOQRBOSA-N alpha-D-arabinopyranose Chemical compound O[C@@H]1CO[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O SRBFZHDQGSBBOR-MBMOQRBOSA-N 0.000 description 1
- NGFMICBWJRZIBI-UHFFFAOYSA-N alpha-salicin Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1=CC=CC=C1CO NGFMICBWJRZIBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 1
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 150000001449 anionic compounds Chemical class 0.000 description 1
- QFWSIJKSJPEHCF-BTVCFUMJSA-N azane;(2r,3s,4r,5r)-2,3,4,5,6-pentahydroxyhexanal Chemical compound N.OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C=O QFWSIJKSJPEHCF-BTVCFUMJSA-N 0.000 description 1
- 208000022362 bacterial infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 238000005452 bending Methods 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- SRBFZHDQGSBBOR-KLVWXMOXSA-N beta-L-arabinopyranose Chemical compound O[C@H]1CO[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O SRBFZHDQGSBBOR-KLVWXMOXSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N beta-maltose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N 0.000 description 1
- 230000000975 bioactive effect Effects 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 239000002021 butanolic extract Substances 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000010216 calcium carbonate Nutrition 0.000 description 1
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 1
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 1
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- VHQSXIONDJVXHP-UHFFFAOYSA-N chloroform methanol tetrachloromethane hydrate Chemical compound O.OC.ClC(Cl)Cl.ClC(Cl)(Cl)Cl VHQSXIONDJVXHP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 description 1
- 230000015271 coagulation Effects 0.000 description 1
- 238000005345 coagulation Methods 0.000 description 1
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 1
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 1
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 1
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 1
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 1
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 1
- 239000012225 czapek media Substances 0.000 description 1
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 239000013530 defoamer Substances 0.000 description 1
- 239000007857 degradation product Substances 0.000 description 1
- 238000003795 desorption Methods 0.000 description 1
- 239000003599 detergent Substances 0.000 description 1
- 235000019425 dextrin Nutrition 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- DZGCGKFAPXFTNM-UHFFFAOYSA-N ethanol;hydron;chloride Chemical compound Cl.CCO DZGCGKFAPXFTNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 235000001727 glucose Nutrition 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 150000002402 hexoses Chemical class 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 229910001412 inorganic anion Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910001411 inorganic cation Inorganic materials 0.000 description 1
- CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N inositol Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N 0.000 description 1
- 229960000367 inositol Drugs 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 239000010699 lard oil Substances 0.000 description 1
- 229940046892 lead acetate Drugs 0.000 description 1
- 230000001320 lysogenic effect Effects 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- GMKMEZVLHJARHF-SYDPRGILSA-N meso-2,6-diaminopimelic acid Chemical compound [O-]C(=O)[C@@H]([NH3+])CCC[C@@H]([NH3+])C([O-])=O GMKMEZVLHJARHF-SYDPRGILSA-N 0.000 description 1
- 238000004452 microanalysis Methods 0.000 description 1
- 235000013379 molasses Nutrition 0.000 description 1
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 238000006395 oxidase reaction Methods 0.000 description 1
- 150000002972 pentoses Chemical class 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 229920001467 poly(styrenesulfonates) Polymers 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000010333 potassium nitrate Nutrition 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000002943 quinolinyl group Chemical group N1=C(C=CC2=CC=CC=C12)* 0.000 description 1
- 229930183794 quinomycin Natural products 0.000 description 1
- 108700038839 quinomycin Proteins 0.000 description 1
- MUPFEKGTMRGPLJ-ZQSKZDJDSA-N raffinose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO[C@@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-ZQSKZDJDSA-N 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 238000010992 reflux Methods 0.000 description 1
- NGFMICBWJRZIBI-UJPOAAIJSA-N salicin Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1=CC=CC=C1CO NGFMICBWJRZIBI-UJPOAAIJSA-N 0.000 description 1
- 229940120668 salicin Drugs 0.000 description 1
- CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N scyllo-inosotol Natural products OC1C(O)C(O)C(O)C(O)C1O CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 229920002545 silicone oil Polymers 0.000 description 1
- 235000020183 skimmed milk Nutrition 0.000 description 1
- 239000000344 soap Substances 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- OVYTZAASVAZITK-UHFFFAOYSA-M sodium;ethanol;hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+].CCO OVYTZAASVAZITK-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 1
- 239000011877 solvent mixture Substances 0.000 description 1
- 229960002920 sorbitol Drugs 0.000 description 1
- 235000012424 soybean oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000003549 soybean oil Substances 0.000 description 1
- 230000003595 spectral effect Effects 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011593 sulfur Substances 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 239000012085 test solution Substances 0.000 description 1
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 239000012137 tryptone Substances 0.000 description 1
- 238000002211 ultraviolet spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- FBZONXHGGPHHIY-UHFFFAOYSA-N xanthurenic acid Chemical compound C1=CC=C(O)C2=NC(C(=O)O)=CC(O)=C21 FBZONXHGGPHHIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
- C07K7/06—Linear peptides containing only normal peptide links having 5 to 11 amino acids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
- C12N1/205—Bacterial isolates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P21/00—Preparation of peptides or proteins
- C12P21/02—Preparation of peptides or proteins having a known sequence of two or more amino acids, e.g. glutathione
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Oncology (AREA)
- Virology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Compounds Of Unknown Constitution (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
Description
I5SF1 M iM)*uu,LOTOS*uulA,su sld n -7 11 UTLAGGNINGSSKRIFT 0/4U0 (51) KvJk/fcit.CL^ C 12 P 1/06, 17/16 SUOMI—FINLAND pi)hii«»^-fwM*e^i 800973 (22) H»k«mbp*lvfl — AmBknJnftdaf 28.03.80 ' ' (23) Alk«ipilvt--Gltäffc*t»d*f 28.03.80 (41) Tullut JuUriMksI — Bllvlt ο€·μΧ| g, , g g g
Putantti- ja rekisterihallitut .......... „ ,_ _ . . ' , , (44) NMiMwMalfwon 1» fcuul|ufal—i prm.— -n
Patent- och registarstyralsan Ammuu ικΐφΐ odi ucLskrift·* puMiceratf 30.11.o4 (32)(33)(31) PjrjMeejr ueuoHcuu» BfV4 prtoricat 02.04.79 USA(US) 026488 Toteennäytetty-Styrkt (71) Bristol-Myers Company, 345 Park Avenue, New York, New York 10022, USA(US) (72) Hideo Koshiyama, Tokyo, Fumihide Sakai, Yokohama,
Hiroaki Ohkuma, Tokyo, Japani-Japan(jP) (74) Oy Kolster Ab (54) Menetelmä kasvainten vastaisten antibioottiyhdisteiden valmistamiseksi -Förfarande för framställning av antibiotföreningar med antitumöreffekt
Keksintö koskee menetelmää uusien kasvainten vastaisten, antibioottiyhdisteiden BBM-928A, BBM-928B, BBM-928C ja BBM-928D sekä niitä sisältävän BBM-928-kompleksin valmistamiseksi, jolloin (A) yhdisteellä BBM-928A on seuraavat ominaisuudet: (a) se liukenee kloroformiin ja metyleenikloridiin, jonkin verran bentseeniin, etanoliin, metanoliin ja n-buta-noliin, ja on olennaisesti liukenematon veteen ja n-heksaaniin; (b) se antaa positiivisen reaktion ferrikloridi- ja Ehrlich-reagenssien kanssa ja negatiivisen reaktion Tollens-, Sakaguchi- ja ninhydriinireagenssien kanssa; (c) se on tehokas kasvainten vastainen aine seuraavia hiiriin intraperitoneaalisesti istutettuja kasvaimia vastaan: P388 leukemia, L1210 leukemia, B16 melanooma, Lewis keuhko-karsinooma ja sarkooma 180 askiitit; (d) sen sulamispiste on 246-248°C; 67403 - 25 o (e) sen ominaiskiertokyky on /*7D - “27 (c 1, CHCl^); (f) sen molekyylipaino on 1427; (g) sen alkuaineanalyysi on noin 52,47 % hiiltä, 5,48 % vetyä, 13,81 % typpeä ja 28,24 % happea; (h) sen R^-arvo silikageeliohutkerroskromatografiässä on 0,71 liuotinsysteemillä n-butanoli-metanoli-vesi (63:27:10) ja 0,48 liuotinsysteemillä ksyleeni-metyylietyyliketoni-meta-noli (5:5:1); (i) happohydrolyysissä siitä saadaan vesiliukoisia nin-hydriini-positiivisia aineita, kuten /5-hydroksi-N-metyyli-valiinia, glysiiniä, seriiniä ja sarkosiinia; (j) emäshydrolyysissä siitä saadaan fragmentti, jonka kaava on “Tr^r08
Ser->X^ Gly-^s· Sar-^ HM-Val jossa Ser on seriini, Gly on glysiini, Sar on sarkosiini, HM-Val on β-hydroksi-N-metyylivaliini ja X on aminohappo-ryhmä, jonka bruttokaava peptimuodossa on C^Hg^C^; (k) sen infrapunaspektri kaliumbromidissa on oleellisesti kuviossa 1 esitetty; ja (l) liuotettuna deuteroituun kloroformiin sillä on oleellisesti kuviossa 5 esitetty protoni-NMR-spektri; (B) yhdisteellä BBM-928B on kinoliinikromofori ja happohydrolyysissä saadaan vesiliukoisia komponentteja, kuten seriiniä, glysiiniä, sarkosiinia ja p-hydroksi-N-metyyliva-liinia, ja oleellisesti puhtaassa muodossa sillä on seuraavat ominaisuudet: (a) se liukenee kloroformiin ja metyleenikloridiin, jonkin verran bentseeniin, etanoliin, metanoliin ja n-buta-noliin, ja on olennaisesti liukenematon veteen ja n-heksaaniin; (b) se antaa positiivisen reaktion ferrikloridi- ja Ehrlich-reagenssien kanssa ja negatiivisen reaktion Tollens-, Sakaguchi- ja ninhydriinireagenssien kanssa; (c) se on tehokas hiiriin intraperitoneaalisesti istutettua P 388 leukemiaa vastaan; (d) sen sulamispiste on 214-217°C; (e) sen ominaiskiertokyky on = -74° (c 1, CHCl^) ; 3 67403 (f) sen alkuaineanalyysi on noin 50,14 % hiiltä, 5,29 % vetyä, 12,34 % typpeä ja 32,23 % happea; (g) sen Rf-arvo silikageeliohutkerroskromatografiässä on 0,53 liuotinsysteemillä n-butanoli-metanoli-vesi (63:27:10) ja 0,26 liuotinsysteemillä ksyleeni-metyylietyyliketoni-meta-noli (5:5:1); (h) sen infrapunaspektri kaliumbromidissa on oleellisesti kuviossa 2 esitetty; ja (i) liuotettuna deuteroituun kloroformiin sillä on oleellisesti kuviossa 6 esitetty protoni-NMR-spektri; (C) yhdisteellä BBM-928C on kinoliinikromofori ja hap-pohydrolyysissä saadaan vesiliukoisia komponentteja, kuten seriiniä, glysiiniä, sarkosiinia ja p> -hydroksi-N-metyyliva-liinia, ja oleellisesti puhtaassa muodossa sillä on seuraavat ominaisuudet: (a) se liukenee kloroformiin ja metyleenikloridiin, jonkin verran bentseeniin, etanoliin, metanoliin ja n-buta-noliin, ja on olennaisesti liukenematon veteen ja n-heksaaniin; (b) se antaa positiivisen reaktion ferrikloridi- ja Ehrlich-reagenssin kanssa ja negatiivisen reaktion Tollens-, Sakaguchi- ja ninhydriinireagenssien kanssa; (c) se on tehokas hiiriin intraperitoneaalisesti istutettuja seuraavia kasvaimia vastaan: P388 leukemia, L1210 leukemia, B16 melanooma, Lewis-keuhkokarsinooma ja sarkooma 180 askiitit; (d) sen sulamispiste on 244-248°C; (e) sen ominaiskiertokyky on /ot_7p5 = -91° (c1, CHCl^) ; (f) sen molekyylipaino on noin 1470; (g) sen alkuaineanalyysi on noin 51,77 % hiiltä, 5,29 % vetyä, 13,55 % typpeä ja 29,39 % happea; (h) sen R^-arvo silikageeliohutkerroskromatografiässä on 0,27 liuotinsysteemillä n-butanoli-metanoli-vesi (63:27:10) ja 0,07 liuotinsysteemillä ksyleeni-metyylietyyliketoni-metanoli (5:5:1) ; (i) sen infrapunaspektri kaliumbromidissa on oleellisesti kuviossa 3 esitetty; ja (j) liuotettuna deuteroituun kloroformiin sillä on oleellisesti kuviossa 7 esitetty protoni-NMR-spektri; ja (D) yhdisteellä BBM-928D on seuraavat ominaisuudet: 4 67403 (a) se liukenee kloroformiin ja metyleenikloridiin, jonkin verran bentseeniin, etanoliin, metanoliin ja n-buta-noliin, ja on olennaisesti liukenematon veteen ja n-heksaaniin; (b) se antaa positiivisen reaktion ferrikloridi- ja Ehrlich-reagenssien kanssa ja negatiivisen reaktion Tollens-, Sakaguchi- ja ninhydriinireagenssien kanssa; (c) se on tehokas intraperitoneaalisesti hiiriin istutettua P388 leukemiaa vastaan; (d) sen sulamispiste on 224-227°C; (e) sen ominaiskiertokyky on &_7D = ~13° (c 1, CHCl^); (f) sen alkuaineanalyysi on noin 50,75 % hiiltä, 5,25 % vetyä, 12,58 % typpeä ja 31,42 % happea; (g) sen R^-arvo silikageeliohutkerroskromatografiässä on 0,73 liuotinsysteemillä n-butanoli-metanoli-vesi (63:27:10) ja 0,53 liuotinsysteemillä ksyleeni-met.yylietyyliketoni-me-tanoli (5:5:1) ; (h) sen infrapunaspektri kaliumbromidissa on oleellisesti kuviossa 4 esitetty; (i) liuotettuna deuteroituun kloroformiin sillä on oleellisesti kuviossa 8 esitetty protoni-NMR-spektri.
Esitettyjen spektrien ja saatavissa olevien fysiko-kemiallisten ominaisuuksien perusteella kyseessä olevat kasvainten vastaiset antibioottiyhdisteet ovat rakenteeltaan lähellä kinoksaliiniantibiootteja, kuten ekinomysiiniä, Dell et ai., J. Am. Chem. Soc., 97, 2497 (1975), kinomysiinejä,
Shoji et ai., J. Antibiotics, 14a, 335 (1961), ja triostiini C:tä, The Merck Index, 9. painos, 9399. Nyt kuvatut kasvainten vastaiset antibioottiyhdisteet eroavat näistä antibiooteista kuitenkin seuraavasti: 1. Nyt valmistettu antibioottikompleksi ja sen komponentit sisältävät kromoforina kinoliiniryhmän aktinoleukiini-ryhmän antibioottien sisältämän kinoksaliinin sijasta.
2. Nyt valmistettu antibioottikompleksi ja sen komponentit eivät sisällä rikkiä, kun sen sijaan aktinoleukiini-antibiooteissa on disulfidi- tai tioasetaalisilta.
3. Nyt valmistettu antibioottikompleksi ja sen komponentit ovat suhteellisen heikosti antimikrobisia verrattuna aktinoleukiineihin, joilla on vahva antibakteerinen vaikutus.
67403
Uudet kasvainten vastaiset antibioottiyhdisteet BBM-928A, BBM-928B, BBM-928C ja BBM-928D sekä niitä sisältävä BBM-928-kompleksi valmistetaan keksinnön mukaan siten, että Actino-mycetes-kantaa ATCC 31491 viljellään vesipitoisessa liuoksessa, joka sisältää assimiloituvan hiililähteen ja assimiloituvan typpilähteen, submerssisissa aerobisissa olosuhteissa kunnes muodostunutta BBM-928-kompleksia sisältävä liuos osoittaa oleellista kasvainten vastaista, antibioottista aktiivisuutta, minkä jälkeen BBM-928-kompleksi otetaan talteen vil-jelyväliaineesta ja haluttaessa yhdisteet BBM-928A, BBM-928B, BBM-928C ja BBM-928D erotetaan. BBM-928-kompleksin talteenoton jälkeen kompleksin sisältämät bioaktiiviset komponentit voidaan erottaa käyttäen vastavirtajakautuma- ja kromatogra-fiatekniikkaa.
Kuviossa 1 on BBM-928A:n infrapuna-absorptiospektri KBr:ssä.
Kuviossa 2 on BBM-928B:n infrapuna-absorptiospektri KBr:ssä.
Kuviossa 3 on BBM-928C:n infrapuna-absorptiospektri KBr:ssä.
Kuviossa 4 on BBM-928D:n infrapuna-absorptiospektri KBr:ssä.
Kuviossa 5 on deuteroituun kloroformiin liuotetun BBM-928A:n protoni-magneettinen-resonanssispektri määritettynä NMR-spektrometrillä, frekvenssi 90 MHz, käyttäen sisäisenä standardina TMS:aä.
Kuviossa 6 on deuteroituun kloroformiin liuotetun BBM-928B:n protoni-magneettinen-resonanssispektri määritettynä NMR-spektrometrillä, frekvenssi 90 MHz, käyttäen sisäisenä standardina TMS:ää.
Kuviossa 7 on deuteroituun kloroformiin liuotetun BBM-928C:n protoni-magneettinen-resonanssispektri määritettynä NMR-spektrometrillä, fekvenssi 90 MHz, käyttäen sisäisenä standardina TMS:ää.
Kuviossa 8 on deuteroituun kloroformiin liuotetun BBM-928D:n protoni-magneettinen-resonanssispektri määritettynä NMR-spektrometrillä, frekvenssi 90 MHz, käyttäen sisäisenä standardina TMS:ää.
6 67403
Uuden BBM-928-kompleksin uskotaan olevan rakenteellisesti lähellä aktinoleukiiniantibiootteja, ja sitä on valmistettu viljelemällä aktinomykeetteihin kuuluvan mikro-organismin kantaa n:o G455-101, joka on talletettu Bristol-Banyu'n viljelmäkokoelmaan. Mikro-organismi on eristetty Filippiineiltä peräisin olevasta maanäytteestä ja talletettu laitokseen American Type Culture Collection tunnuksella ATCC 31491.
Uusi kasvainten vastainen antibioottikompleksi sisältää vähintään kuusi komponenttia, joille on annettu nimitykset BBM-928A, B, C, D, E ja F. BBM-928 komponentit A, B, C ja D on eristetty kiteisinä, ja komponenttien A, B ja C rakenteet on identifioitu. Kompleksilla ja sen eri komponenteilla on kasvainten vastaista antibakteerista aktiivisuutta. Antibak-teerisen aktiivisuutensa vuoksi kompleksia ja sen komponentteja voidaan käyttää eläinrehujen lisäaineina ja terapeuttisina aineina nisäkkäiden bakteeri-infektioiden käsittelyssä. Lisäksi antibiootteja voidaan käyttää laboratoriolasitavaroi-den ja kirurgisten instrumenttien puhdistamiseen ja sterilointiin sekä yhdessä saippuoiden, pesuaineiden ja pesuliuosten kanssa puhdistustarkoituksiin. Kompleksilla ja sen komponenteilla on osoitettu olevan kasvainten vastaista aktiivisuutta erityisesti erilaisia intraperitoneaalisesti hiiriin istutettuja kasvaimia vastaan.
Aktinomykeettikanta n:o G455-101
Seuraavassa kuvataan yleisesti kasvainten vastaista an-tibioottikompleksia BBM-928 tuottavaa mikro-organismia. Havaintoja tehtiin mikro-organismin viljelyolosuhteista ja fysiologisista ja morfologisista ominaisuuksista taksonometristen standardimenetelmien mukaisesti, ks. esim. Shirling et ai.,
Int. J. Syst. Bacteriol. 16, 313 (1966) ja Lechevalier et ai., Biol. Actinomycetes Related Org. 11, 78 (1976).
Mikromorfologia - Kanta G455-101 muodostaa sekä viljely-väliaine- että ilmarihmastoa, ja viljelyväliainerihmasto on hyvin kehittynyttä, pitkää ja haarautunutta (paksuus 0,5-0,8 jm) . Viljelyväliainerihmastossa ei havaita selvää fragmenttien muodostumista. Poiketen tavallisista Streptomyces-lajeista G455-101-kannassa on vain lyhyitä, surkastuneita ilmarihmastoja, ja joillakin agar-väliaineilla se ei muodosta niitä lainkaan. Ilmarih-mastossa on lyhyitä ja pitkiä itiöketjuja, jotka sisältävät 2-50 soikeaa 7 67403 itiötä (useimmiten 5-20 itiötä) ketjussa. Itiöketjut ovat muodoltaan suoria, mutkaisia tai silmukkamaisia. Itiöt ovat muodoltaan pallomaisia (0,3 - 0,4 ^um), soikeita tai lieriömäisiä (0,3 x 1,5 - 3,0 ^um) ja niiden pinta on sileä. Itiöitä erottaa toisistaan usein tyhjät hyyfit. Ilmarihmastossa havaitaan toisinaan amorfinen sporanginkal-tainen rakkula, josta kehittyy lyhyitä kierteisiä itiöketjuja.
Soluseinämän koostumus ja koko solun sokerikomponentit - Kannan G455-101 soluseinämä sisältää meso-diaminopimeliinihappoa, mutta ei sisällä glysiiniä. Koko solun hydrolysaatissa on glukoosia, mannoosia ja maduroosia (3-0-metyyli-D-galaktoosi). Soluseinämäkoos-tumus ja koko solun sokerikomponentit osoittavat kannan G455-101 kuuluvan aktinomykeettien soluseinämätyyppiin IIIB.
Viljely- ja fysiologiset ominaisuudet - Kanta G455-101 kasvaa runsaasti, muodostaa vaaleanpunaista tai harmahtavan vaaleanpunaista ilmarihmastoa ja tuottaa punertavaa veteen liukenematonta pigmenttiä ravintorikkaissa agarväliaineissa, kuten hiivauute-mallas-uuteagarissa ja kaurajauhoagarissa. Sen kasvu on kuitenkin heikkoa epäorgaanisia suoloja sisältävässä tärkkelysagarissa, glyseroli-asparagiiniagarissa ja tyrosiiniagarissa, joissa se muodostaa valkeaa tai beigenväristä surkastunutta ilmarihmastoa ja tuottaa vähäisen määrän punertavaa pigmenttiä. Peptoni-hiiva-rauta-agarissa ja tyrosiiniagarissa ei muodostu melanoidipigmenttiä. Nitraatti pelkistyy nitraatiksi. Sen kasvu on runsasta lämpötiloissa 28°C, 37°C ja 45°C, mutta se ei kasva 10°C:ssa eikä 50°C:ssa. Kanta käyttää hyvin hyväkseen pentooseja ja heksooseja. Kannan G455-101 viljelyominaisuudet on esitetty taulukossa 1 ja fysiologiset ominaisuudet taulukossa 2. Hiililähteiden hyväksikäyttö on esitetty taulukossa 3.
Taulukko 1
Kannan G455-101A viljelytunnusmerkit
XX
1. Czapek-agar G ei kasvua tai heikko kasvu (Sakkaroosi-nitraatti) „ .
R tummanruusunpunamen A valkea tai vaaleanpunainen D ei ole 2. Tryptoni-hiivauuteliemi kohtalainen kasvu, höytymäi- (ISP nro 1) nen, sedimentoitunut, ei pigmenttiä 8 67403 3. Hiivauute - mallasuuteagar G runsas (ISP nro 2) „ ..
R syvanpunaisesta punertavan- ruskeaan A runsas, harmahtavan vaalean punaisesta vaaleanpurppuraan D ei ole 4. Kaurajauhoagar (ISP nro 3) G runsas R vahvan kellertävän punainen A kohtalainen, vaaleanpunainen D harmahtavankeltäinen 5. Epäorgaaniset suolat - G heikko tärkkelysagar (ISP nro 4) R vaalean keilertävtaruskeasta tummanpunaiseen A heikko, valkea tai beige D ei ole 6. Glyseroli-asparagiiniagar G heikko (ISP nro 5) R kellertävän vaaleanpunaisesta punertavaan A heikko, valkea D ei ole 7. Peptoni-hiivauute-rauta- G heikko, poimuinen agar (ISP nro 6) R vahva punertavanoranssi A ei ole D vaalean kellertävän oranssi 8. Tyrosiiniagar (ISP nro 7) G heikko R tummanpunainen A heikko, valkea D ei ole 9. Glukoosi-ammoniumsuo.lat- G heikko a<3ar r punertavanruskea A heikko, vaaleanharmaa D ei ole 10. Bennet1 in agar G kohtalainen R punertavanruskea A rajoittunut, harmahtavan vaa leanpunainen D ei ole 9 67403 χ havainnot suoritettu kolmen viikon inkuboinnin jälkeen 37°C:ssa xx Lyhenteet: G - kasvu R - substraattirihmaston alapuolen väri A - ilmarihmasto D - diffundoituvaa pigmenttiä
Taulukko 2
Kannan G455-101 fysiologiset ominaisuudet
Koe Tulos Menetelmä ja väliaine
Nitraatti nitriiliksi positiivinen epäorgaaninen väliaine: Czapek- sakkaroosi-nitraattiliemi
Nitraatti nitriitiksi positiivinen orgaaninen väliaine: 0,5 % hii- vauutetta, 1,0 % glukoosia, 0,5 % KN03, 0,1 % CaC03
Kaseiinin hydrolyysi heikosti Luedemann1 in agarväliaine agarväliaineessa positiivinen
Rasvattoman maidon positiivinen koaguloituminen
Gelatiinin nesteyty- negatiivinen tryptoni-hiivauuteliemi (ISP
minen nro 1 väliaine) + 15 % gela tiinia
H2S:n tuottaminen positiivinen tryptoni-hiivauutelieni (ISP
kysteiinistä nro 1 väliaine) + 0,1 % L-kys- teiiniä + agaria. H2S todettiin 10-%:ista lyijyasetaatti-liuosta sisältävällä paperi-liuskalla
Melanoidin muodostu- negatiivinen peptoni-hiivauute-rauta-agar minen (ISP nro 6) ja tyrosiiniagar (ISP nro 7)
Katalaasireaktio positiivinen H202~vesiliuos
Oksidaasireaktio positiivinen Kovacs'in reagenssi
Kasvulämpötila runsas kasvu Bennet'in agar lämpötiloissa 28, 37 ja 45°C Heikko kasvu 20°C:ssa. Ei kasva 10°C:ssa eikä 50°C:ssa 10 67403
Taulukko 3
Kannan G455-101 hiililähteiden hyväksikäyttö PG Lm 1. Glyseroli ++ + 2. D(-)-arabinoosi + + 3. L (+)-arabinoosi + + 4. D-ksyloosi ++ + 5. D-riboosi ++ + 6. L-ramnoosi ++ + 7. D-glukoosi + + 8. D-galaktoosi ++ + 9. D-fruktoosi ++ + 10. D-mannoosi ++ + 11. L(-)-sorboosi 12. Sakkaroosi 13. Laktoosi - 14. Sellobioosi + + 15. Melibioosi 16. Trehaloosi + + 17. Raffinoosi 18. D(+)-meletsitoosi 19. Liukoinen tärkkelys + 20. Dulsitoli 21. Inositoli + 22. D-mannitoli ++ + 23. D-sorbitoli 24. Salisiini 25. Selluloosa + + 26. Kitiini + + 27. Herätiini + +
Perusväliaine PG: Pridham-Gottlieb'in epäorgaaninen väline + 0,1 % hiivauutetta LM: Luedemann'in orgaaninen väliaine Inkubaatio kaksi viikkoa 37°C:ssa.
67403
Kasvainten vastaisen antibioottikompleksin BBM-928 valmistus
Kasvainten vastaisen antibiootin, BBM-928-kompleksin valmistamiseksi viljellään aktinomykeettikantaa, jolla on kannan G455-101 tunnusmerkit, vesipitoisessa liuoksessa, joka sisältää assimiloituvaa hiilenlähdettä ja assimiloituvaa ty-penlähdettä, submerssisissa aerobisissa olosuhteissa, kunnes tuotetun BBM-928-kompleksin muodostuksen ansiosta mainittu liuos on saanut kasvainten vastaista antibioottista aktiivisuutta. Aktinomykeettikannan G455-101 viljelyssä käytetään tavanomaisia fermentointimenetelmiä. Kasvainten vastaisten antibioottien valmistuksessa käytetään väliaineita, jotka sisältävät assimiloituvan hiilen lähteinä esimerkiksi tärkkelystä, glukoosia, dekstriiniä, maltoosia, laktoosia, sakkaroosia, fruktoosia, mannoosia, melassia, glyserolia tms. Ravintoväliaineen tulisi sisältää myös assimiloituvan typen lähdettä, kuten proteiinia, proteiinihydrolysaattia, poly-peptidejä, aminohappoja, maissin liuotuslientä, kaseiinia, ureaa tms., sekä epäorgaanisia ravinnesuoloja, joista saadaan epäorgaanisia anioneja ja kationeja, kuten kaliumia, natriumia, ammoniumia, kalsiumia, sulfaattia, karbonaattia, fosfaattia, kloridia, nitraattia ym.
Tuotettaessa BBM-928-kompleksia voidaan käyttää mitä tahansa viljelylämpötilaa, jossa organismi kasvaa tyydyttävästi. Viljely voidaan suorittaa noin 20-45°C:ssa, jolloin optimaalisen kasvun kannalta edullinen lämpötila-alue on 28-34°C ja edullisin 30-32°C. BBM-928-kompleksin maksimisaanto saadaan tavallisesti noin 4-6 vuorokaudessa. Fermentoinnissa käytetään tavanomaisia menetelmiä. Pieniä määriä valmistetaan esimerkiksi tavanomaisissa ravistuspulloissa tai pintaviljel-millä. Suurempien määrien valmistus suoritetaan edullisesti submerssisissa aerobisissa viljelyolosuhteissa steriileissä tankeissa. Tankkifermentaatiossa tuotetaan ensin vegetatirvinen ymppi viljelyliemessä ymppäämällä viljelyliemeen organismin itiöitä, jolloin saadaan nuori aktiivinen ymppiviljelmä, joka siirretään sitten aseptisesti fermentointitankissa olevaan väliaineeseen. Ilmastus tankissa ja pulloissa voidaan suorittaa johtamalla steriiliä ilmaa fermentointiväliaineeseen 12 67403 ja samalla sekoittamalla tankin sisältöä mekaanisella sekoit-timella. Tarvittaessa voidaan käyttää vaahdonestoainetta, kuten silikoniöljyä, soijaöljyä tai laardiöljyä.
Fermentointiliemen tai BBM-928-kompleksiuutteen anti-bioottitaso voidaan määrittää paperikiekko-agardiffuusioko-keella käyttäen koeorganismia Sareina lutea ja koeväliaineena ravintoagaria. Kasvuliemen parhaan tehon määrittämiseen käytetyn koesysteemin optimiherkkyyden saavuttamiseksi sen pH säädetään arvoon 9,0.
BBM-928-kompleksi eristetään fermentointiliemestä tavanomaisin menetelmin, kuten liuotinuutolla. Puhdistus suoritetaan sopivasti preparatiivisilla vastavirtajakautuma- ja kromatografiamenetelmillä, kuten jäljempänä esimerkeissä 2 ja 3 yksityiskohtaisemmin kuvataan, jolloin saadaan BBM-928-kompo-nentit A, B, C, D, E ja F.
Esimerkin 3 BBM-928 komponenttien A, B, C ja D fysiko- kemialliset ominaisuudet BBM-928:n yksittäisillä komponenteilla on kaikilla samankaltaiset liukoisuusominaisuudet ja värireaktiot. Ne liukenevat esimerkiksi helposti kloroformiin ja metyleeniklori-diin, jonkin verran bentseeniin, etanoliin, metanoliin ja n-butanoliin ja ovat liukenemattomia veteen ja n-heksaaniin. Ferrikloridi- ja Ehrlich-reagensseilla saadaan positiiviset reaktiot ja Tollens-, Sakaguchi- ja ninhydriini-reagensseilla negatiiviset reaktiot.
Esimerkin 3 BBM-928 komponenttien tyypilliset fysiko-kemialliset ominaisuudet on esitetty taulukossa 4.
J
13 67403
Taulukko 4 BBM-928 komponenttien A, B, C ja D fysikokemialllset ominaisuudet _ BBM-928__
A B C D
Sulamispiste 246-248°C 214-217°C 244-248°C 224-227°C
fO&p5 (c 1, CHC13) -27° -74° -91° -13°
Analyysi, saatu C: 53,19 50,14 51,77 50,75 H: 5,40 5,29 5,29 5,25 N: 12,92 12, 34 13,55 12,58 (erotuksesta) O: 28,49 32,23 29, 39 31,42 \naks' <E Ϊ L>
EtOH: ssa 235(586) 235(570) 235(638) 235(550) 264(415) 264(400) 264(442) 264(380) 345(165) 345(163) 345(173) 345(155)
EtOH-HCl: ssa 234(610) 234(556) 234(650) 234(565) 264(410) 264(446) 264(442) 264(405) 345(165) 349(188) 345(173) 345(165)
EtOH-NaOH: ssa 230(564) 230(530) 230(580) 230(650) 256(763) 256(775) 256(704) 256(930) 330(180) 330(116) 330(117) 330(140) 383(170) 383(122) · 83(122) 383(145)
Mol- p.
(osmometri, CHClj) 1,450 - 1,470
Komponenttien A, B, C ja D infrapuna- (IR) ja NMR-spektrit on esitetty kuvioissa 1-4 ja vastaavasti 5-8. BBM-928A:n (kuvio 5), BBM-928B:n (kuvio 6) ja BBM-928C:n (kuvio 7) NMR-spektrit ovat sangen samankaltaisia, ainoan eron ollessa komponenttien A ja B ase-tyyliryhmissä (A, &: 2,03 ppm, 2 molekv.) (B, &: 2,05 ppm, 1 molekv.), jollaista komponentissa C ei ole. Asetyloimalla etikkahappoanhydri-dillä pyridiinissä BBM-928 komponentteihin A, B ja C liitettiin vastaavasti 2, 3 ja 4 mooliekvivalenttia asetyyliryhmiä. Näin saaduilla asetyloiduilla yhdisteillä oli identtiset ominaisuudet ohutker- 14 67403 roskromatografiässä, UV-, IR- ja NMR-spektreissä, mikä osoittaa, että BBM-928A on BBM-928B:n monoasetyylijohdannainen ja BBM-928C:n diasetyylijohdannainen.
BBM-928A:n happohydrolyysissä saatiin viisi n-butanoliliu-koista, UV-absorboivaa fragmenttia (I, II, III, IV ja V) ja viisi vesiliukoista, ninhydriini-positiivista ainetta (NPS-1, 2, 3, 4 ja 5). Viimeksi mainitut erotettiin kromatografoimalla (Dowex 50 x 4) ja identifioitiin seuraaviksi aminohapoiksi:
Yhdiste Rf (S-123)x Identifiointi NPS-1 0,72 -hydroksi-N-metyyliväline (HM-Vai) NPS-2 0,49 glysiini (Gly) . NPS-3 0,46 seriini (Ser) NPS-4 0,45 sarkosiini (Sar) NPS-5 0,23 (ei määritelty) x TLC, silikageelilevy S-123: 10-%:inen ammoniumasetaatti-metanoli-10-%:inen ammoniakki (9:10:1)
Edellä mainituilla UV-absorboivina fragmenteilla osoitettiin olevan seuraavat rakenteet:
OH Fragmentti I
| CH-0H C H N 0 ' 2 l4M14N2 o N C0-NH-GH-C0-H , 1 MS: m/e 306 (M ) ^MeOH; 227 233 251 345
Max 15 67403
CH^ Fragmentti II
NH OH C20H25N3°8 0-CO-CH-C(CH3)2 MS; m/e 377 (M+-58)
If I ch2 C0-NH-CH-C02H λϋ^Η; 229 · 234 > 261 * 345 nm
Fragmentti III
CH 0 0H XMe0H: 230, 235, 262, 345 nm (NPS-5)
Fragmentti IV
C10H7NO4 Η0\ΓΧν^/^γ/°Η MS: m/e 205 (M+) kJ^^COjH 228, 260, 354 m»
H,C CH, Fragmentti V
3w 3 C-OH C H N 0 * ^23H30 4 9
CH 0H 0-C0-CH«N-C0-CH2NH
3 I T T CH2 CH3 CH3X^H: 230, 235, 262, 345 nm
N C0-M-CH-C02H
16 67403
Fragmenttien I, II, III ja V happohydrolyysissä (6-n HCl) saatiin seuraavat hajaantumistuötteet:
Hydrolyysiolosuhteet
Fragmentti Suliettu putki Kuumennus, 110°, 20 h palautusjäähdytys 110°C, 3 h I IV, Ser II IV, Ser, HM-Val I, HM-Val
III
V I, HM-Val, Sar
Ser: seriini HM-Val: /3-hydroksi-N-metyylivaliini Sar: sarkosiini BBM-928A:n tai BBM-928C:n emäshydrolyysissä 0,1-n NaOH:lla 25°C:ssa kolmen tunnin aikana saatiin fragmenttia VI (lyhenteet Ser, HM-Val ja Sar merkitsevät edellä määriteltyä, Gly on glysiini ja symboli "X" tarkoittaa määrittelemätöntä ryhmää) oh (_lj^ ^_CCH'Ser-'-X-+Gly-*-Sar-*'HM-Val
Fragmentti VI
Käsittelemällä fragmenttia VI o,l-n HCl:llä 110°C:ssa tunnin ajan saatiin fragmenttia VII + HM-Val.
0H
^—CCH-Ser-^X-KJly^Sar 67403
Fragmentti VII
Käsittelemällä fragmenttia VI 0,1-n NaOH:lla 37°C:ssa 40 tuntia saatiin fragmenttia VIII + fragmenttia I.
X —> Gly —> Sar —> HM —Ä/al
Fragmentti VIII
Käsittelemällä fragmenttia VII 0,1-n NaOHslla 37°C:ssa 40 tuntia, saatiin fragmenttia IX + fragmenttia I.
X —» Gly —> Sar
Fragmentti IX
Määrittelemättömällä ryhmällä X on bruttokaava C5HgN202 (peptidimuodossa) fragmentin IX ja muiden X:ää sisältävien fragmenttien mikroanalyysin ja spetraalianalyysien perusteella, jotka on esitetty alla olevassa taulukossa.
13C-NMR Protoni-NMR Ryhmä 30,14 (t) 2,36 ppm (2H, m) "CH2~ 4,2 - 4,5 (2H, m) 2 x -CH<^ 61/7 (d) ^(0 tai N) 140,7 (d) 6,76 (1H, t) -CH=N- 171 (s) - -CO- (amidi)
-OH
NH
Fragmenttien VIII ja IX spektritulosten ja esimerkin 4 BBM-928Ap:n protoni-NMR:n (360 MHz) perusteella määrittelemätön amino-happoryhmää X voidaan parhaiten esittää seuraavalla tetrahydropyri-datsiinirakenteella: a o-
OH
(X)
IB
67403
Edellä kuvattujen, hajaantumistuotteilla suoritettujen kokeiden, spektrien, mikroanalyysien ja molekyylipainomääritysten perusteella BBM-928A:n, B:n ja C:n rakenteita voitanee parhaiten kuvata seuraavalla kaavalla:
_ OH
y^)~0h C0-"Ser-*N—/ OGly-Sar-*HM-Val
0 On ^ HO
1 » ; 1 3 HM-Val«-Sar*-Gly-C v | V—n *^er<-C0 R2 R2 Ser 5 seriini
Gly : glysiini BBM-928 A Ac Ac Sar : sarkosiini BBM-928 B Ac H HM-Vai : /}-hydroksi-N-metyy- BBM-928 C H H livaliini
Antlmikrobinen aktiviteetti BBM-928 komponenttien antimikrobinen aktiviteetti määritettiin agarlaimennussarjamenetelmällä ravintoagarilla pH-arvossa 7 useita eri bakteereja ja sieniä vastaan käyttäen Steer'in moniymp- pgyslaitetta. Ympin koko oli standardisoitu 0,0025 ml:ksi koeorga- 4 nismisuspensiota, joka sisälsi noin 10 solua/ml, paitsi happoa kestävillä bakteereilla, joiden suspensio sisälsi 106 solua/ml. Mini-miestokonsentraatiot (MIC) määritettiin yön yli suoritetussa inku-boinnissa 37°C:ssa, ja ne on esitetty taulukossa 5. Tuloksista voidaan nähdä, että BBM-928 komponentit ovat kohtalaisen aktiivisia tai heikosti aktiivisia gram-positiivisia ja happoa kestäviä bakteereja vastaan, mutta käytännöllisesti katsoen inaktiivisia grara-negatiivisia bakteereja ja sieniä vastaan.
19 67403 BBM-928 komponenttien profaagi-induktioaktiviteetti lysogee-nisissa bakteereissa (ILB) määritettiin. BBM-928 komponenteilla A, B ja C ei aina konsentraatioihin 100 pg/ml asti vbitu osoittaa olennaista ILB-aktiviteettia.
Taulukko 5 BBM-928:n komponenttien antimikrobinen aktiviteetti aerobisia bakteereja vastaan in vitro BBRE BBM-928 komponentit (MIC ^g/ml)
Koodi Koeorganismi_ X ö 5 E-F—
Sa-1 S. aureus 209P 12,5 25 50 100 100 25
Sp-1 S. pyogenes S-23 6,3 12,5 25 50 50 · 12,5 S1-1 S. lutea PCI 1001 6,3 12,5 50 50 50 25
Mf-1 M. flaws D12 12,5 25 50 100 100 25
Cr-1 xerosis 53K-1 25 50 >100 >100 >100 50
Bs-1 B^ subtllis PCI 219 25 25 100 100 100 25
Bg-1 B^ megaterium D2 25 25 50 100 100 25
Ba-3 B. anthracis A9504 6,3 12,5 25 50 50 12,5 M6-1 M. smegmatis 607 D87 25 25 25 100 100 25
Mp-1 M. phlei D88 12,5 12,5 12,5 50 50 12,5
Ec-1 _E;_ coli NIHJ >100 >100 >100 >100 >100 >100
Kp-i K£_ pneumoniae D-ll >100 >100 >100 >100 >100 >100
Pa-3 aeruginosa A9930 >100 >100 >100 >100 >100 >100
Pv-1 P^ vulgaris A9436 >100 >100 >100 >100 >100 >100
Po-1 Ll mirabilis A9554 >100 >100 >100 >100 >100 >100
Pg-1 P^_ morganii A9553 >100 ' >100 >100 >100 >100 >100
Sm-1 marcescens A20019 >100 >100 >100 >100 >100 >100
Al-1 A. faecalls ATCC 8750 >100 >100 >100 >100 >100 >100
Ca-1 albicans IAM 4888 >100 >100 >100 >100 >100 >100
Cn-3 Cneoformans 100 >100 100 >100 >100 >100 20 67403 BBM-928 komponenttien A, B, C ja D ja mitomysiini C:n kas-vannaistenvastaista aktiviteettia tutkittiin istuttamalla hiiriin intraperitoneaalisesti seuraavia: P388 leukemia, L1210 leukemia, B16 melanooma, Lewis-keuhkokarsinooma (LL) ja sarkooma 180:n as-kiitteja (S180). BBM-928 komponenttien ja mitomysiini C:n koeliuok-sia 0,9-%:isessa suolaliuoksessa, joka sisälsi 10 % dimetyylisulfoksidia, annettiin koe-eläimille kerran vuorokaudessa annostusohjel-malla, joka käsitti yhdestä ainoasta useampaan päivittäiseen käsittelyyn. Vaihtelemalla annoksia määritettiin minimi-vaikuttava annos (MED), jolla käsiteltyjen eläinten keskimääräinen hengissäpysymis-aika kontrolliryhmään verrattuna oli vähintään 1,25-kertainen. Tätä aktiviteettitasoa pidetään merkitsevänä kasvaintenvastaisen aktiviteetin mittana. Tulokset on koottu taulukkoon 6, jossa on myös laskettu aktiviteettisuhteet, joista ilmenee, että BBM-928A on selvästi aktiivisempi kuin mitomysiini C, aktiviteettisuhteen ollessa kas-vairiajista riippuen 10-300. Intraperitoneaaliset LD^g-arvot BBM-928 komponenteille A, B, C ja D ja mitomysiini C:lle määritettiin menetelmällä, jonka on kuvannut Van der Waerden, Arch. Exp. Path. Pharmak., 195, 389 (1940). LD^g-arvot on esitetty myös taulukossa 6.
67403
Taulukko 6 BBM-928 komponenttien A, B ja C ja mitomysiini C:n kasvain-tenvastainen aktiviteetti ja myrkyllisyys
Minimi vaikuttava annos (MED, mg/kg/vrk) ^D50' *'p' P388 L1210 B16 LL S180 (mg/kg/vrk) Käsittely3 BBM-928A 0,003 >0,1 0,003 0,03 0,003 0,13 BBM-928B 0,1 - - - 0,18 BBM-928C ----- 0,81 BBM-928D 0f003 - - - 0,083
Mitomysiini C 0,1 3 1 0,3 0,3 9,3 Käsittelyt BBM-928A 0,001 0,003 0,003 0,003 0,0001 0,013
Mitcmysiini C 0,1 0,3 0,3 0,3 0.03 1,4
Aktiviteettisuhde (BBM-928A/bitanysilnl C) Käsittely3 30 - 300 10 100· Käsittelyt 100 100 100 100 100 a. yksi ainoa käsittely päivänä 1 b. päivittäiset käsittelyt päivinä 1-9
Esimerkki 1 BBM-928 kompleksin tuottaminen
Agar -fermentaatio - Aktinomykeetteihin kuuluvaa hyvin kasvanutta kannan G455-101 (ATOC 31491) agarvinoviljelmää käytettiin ymppäämään kas-vuväliaine, joka sisälsi 2 % liukoista tärkkelystä, 1 % glukoosia, 0,5 % Pharmamediaa, 0,5 % hiivauutetta, 0,5 % NZ-amiinia (tyyppi A) ja 0,1 % CaC03:a, ja jonka pH ennen sterilointia oli säädetty arvoon 7,2. Siemenviljelmää inkuboitiin 72 tuntia 32°C:ssa kiertora-vistimessa (250 rpm) ja 5 ml kasvuväliainetta siirrettiin sitten 67403 500 ml Erlenmeyer-pulloon, jossa oli 100 ml fermentointiväliai-netta, joka sisälsi 2 % liukoista tärkkelystä, 1 % Pharmamediaa, 0,003 % ZnSo^ · 7H20 ja 0,4 % CaCO^. RAvistusviljelmässä saatiin BBM-928 kompleksin maksimisaanto tavallisesti noin 5 vrk:ssa.
Tankkl-fermentaatio - Siemenviljelmää ravisteltiin Erlenmeyer-pulloissa 4 vrk, ja viljelmällä ympättiin sitten 200 litran tankki-fermentorissa oleva viljelyväliaine (100 1), joka sisälsi 2,0 % kaurajauhoa (Quaker Products, Australia), 0,5 % glukoosia, 0,2 % kuivaa hiivaa, 0,0008 % MnCl2 * 4H20' 0/0007 % CuS04 * 7H20, 0,0002 % ZnSO^ 7H20 ja 0,0001 % FeSO^ · 7H20, ja viljelylientä sekoitettiin kierrosnopeudella 200 rpm 30°C:ssa 54 tuntia. Tämän jälkeen 15 litraa siemenviljelmää käytettiin ymppäämään 400 litran tankkifermentorissa oleva 170 litraa fermentointiväliainetta, joka sisälsi 2,0 % liukoista tärkkelystä, 1,0 % Pharmamediaa, 0,003 % ZnSO^ '7H20 ja 0,4 % CaCO^, ja fermentointiväliainetta sekoitettiin 200 rpm 30°C:ssa ja johtaen ilmaa 150 1/min. Fermentoin-nin jatkuessa kasvuliemen pH vähitellen kohosi ja saavutti arvon 8,4 - 8,5 100-120 tunnissa, jolloin antibioottimäärä oli saavuttanut maksimiarvonsa 3 0 ug/ml.
Esimerkki 2 BBM-928 kompleksin eristäminen liuotinuutolla
Esimerkissä 1 valmistettu kasvuliemi (170 1, pH 8,5) suodatettiin käyttäen suodatinapuainetta. Sekä huovastokakussa että suo-doksessa todettiin aktiivisuutta. Huovastokakku uutettiin kaksi kertaa asetoni-metanoliseoksella (1:1, 30 1 x 2). Uutteet yhdistettiin ja haihdutettiin alennetussa paineessa, ja saatu vesipitoinen kon-sentraatti uutettiin n-butanolilla. Kasvuliemen suodos uutettiin kaksi kertaa n-butanolilla (40 1 x 2). Yhdistetyt n-butanoliuutteet haihdutettiin alennetussa paineessa ja lyofilisoitiin, jolloin saatiin raakatuote (21,4 g). Ohutkerroskromatografiän mukaan se oli kompleksi, joka sisälsi kolmea pääkomponenttia A, B ja C ja vähäisempiä komponentteja D, E ja F, joiden Rf-arvot nähdään seuraavassa taulukossa 7.
23 67403
Taulukko 7
BBM-928 komponenttien silikageeli-TLC
Rf-arvot
Systeemi N-118xx Systeemi N~103XXX
BBM-928A 0,71 0,48 BBM-928B 0,53 0,26 BBM-928C 0,27 0,07 BBM-928D 0,73 0,53 BBM-92 8E 0,56 0,34 BBM-928F 0,39 0,17 x osoitettiin UV-ilmaisimella {Shimadzu CS-910) aaltopituudella 345 nm xx n-butanoli-metanoli-vesi (63:27:10) xxx ksyleeni-metyylietyyliketoni-metanoli (5:5:1)
Esimerkki 3 BBM-928 kompleksin puhdistaminen
Esimerkissä 2 saatu raakakompleksi puhdistettiin preparatii-visella vastavirtajakautuma-laitteella (Mitamura, 100 ml/putki) käyttämällä liuotinsysteemiä hiilitetrakloridi-kloroformi-metanoli-vesi (5:2:5:1). 50 siirron jälkeen putkien 5-20 sisältö yhdistettiin ja haihdutettiin, jolloin saatiin komponentteja A, B, D, E ja F sisältävää vaaleankeltaista jauhetta (4,4 g). Tämä seos liuotettiin pieneen määrään kloroformia, ja liuos vietiin etyyliasetaatilla esikä-siteltyyn silikageelikolonniin (silikageeli C-200, 500 ml). Kolonni eluoitiin etyyliasetaatilla, joka sisälsi kasvavia määriä metanolia (2-5 %, tilav./tilav.) ja fraktioiden optista tiheyttä seurattiin aaltopituudella 345 nm. Ensin eluoitui vähäisempi komponentti D etyyliasetaatilla ja sitten komponentti A. 3 % metanolia sisältävällä liuotinseoksella eluoituivat komponentit E, B ja F tässä järjestyksessä. Kukin eri komponenttia sisältävä fraktio haihdutettiin alennetussa paineessa, ja jäännös kiteytettiin kloroformi-metanoliseok-sesta. Putkista 21-35 saatiin saunoin edellä kuvatulla vastavirtaja-kautumalaitteella epäpuhdasta komponenttia C. Komponentti C:n puhdistaminen suoritettiin kromatografoimalla silikageelillä ja kiteyttämällä kloroformimetanoliseoksesta. Komponenttien A, B, C, D, E ja 24 67403 F saannot olivat vastaavasti 988 mg, 420 mg, 843 mg, 130 mg, 119 mg ja 114 mg.
Esimerkki 4
Esimerkissä 3 saadun BBM-928A -komponentin lisäpuhdistus
Esimerkissä 3 saadun BBM-928A -komponentin ohutkerroskroma-tografia-analyysi (käytettiin systeemiä tolueeni-metanoli 9:1) osoitti, ettei se ollut täysin homogeenista, vaan sisälsi ainetta, joka oli kromatografia-ajossa hieman edellä. Komponentti A:n puhdistamiseksi suoritettiin seuraavat vaiheet: (1) Näyte kromatografoitiin silikageelillä käyttäen lineaarista gradienttia kloroformi-6 % metanolia kloroformissa. Fraktiot, jotka eluoituivat metanolipitoisuuksilla 2,4 - 3,3 % (jotka fraktiot sisälsivät BBM-928A:ta ja jonkin verran epäpuhtauksia) otettiin seu-raavaan puhdistusvaiheeseen.
(2) Kolmea astiaa käyttäen, joista kahdessa ensimmäisessä oli 2 % metanolia tolueenissa ja kolmannessa 6 % metanolia tolueenissa, saatiin aikaan kovera gradientti. Vaiheessa 1 saatu aine kromatografoitiin (silikageelikolonni) tällä gradientilla, jolloin ensin eluoitui vähäisempi komponentti ja heti sen perään puhdas BBM-928A-komponentti (josta käytetään tässä nimitystä BBM-928A ).
Γ BBM-928A :n molekyylipaino määritettiin Field-Desorptiomas-i» saspektrometrillä, ja se oli 1427, mikä vastaa bruttokaavaa C64H78N14°24 (mo^-e^yyliPa^no 1427,417).
Alkuaineanalyysi (näytteitä kuivattiin 100°C:ssa 18 tuntia) kaavasta C64H78N14024: laskettu: C 53,85 H 5,51 N 13,74 Oa 26,90 saatu*5: c 52,47 H 5,48 N 13,81 28,24a a. Laskettu erotuksesta b. Kolmen määrityksen keskiarvo
Claims (1)
- 6740 3 Patenttivaatimus Menetelmä kasvaintenvastaisten, antibioottiyhdisteiden BBM-928A, BBM-928B, BBM-928C ja BBM-928D sekä niitä sisältävän BBM-928-kompleksin valmistamiseksi, jolloin (A) yhdisteellä BBM-928A on seuraavat ominaisuudet: (a) se liukenee kloroformiin ja metyleenikloridiin, jonkin verran bentseeniin, etanoliin, metanoliin ja n-butanoliin, ja on olennaisesti liukenematon veteen ja n-heksaaniin; (b) se antaa positiivisen reaktion ferrikloridi- ja Ehrlich-reagenssien kanssa ja negatiivisen reaktion Tollens-, Sakaguchi-ja ninhydriinireagenssien kanssa; (c) se on tehokas kasvaintenvastäinen aine seuraavia hiiriin intraperitoneaalisesti istutettuja kasvaimia vastaan: P388 leukemia, L1210 leukemia, B16 melanooma, Lewis keuhkokarsinooma ja sarkooma 180 askiitit; (d) sen sulamispiste on 246-248°C; (e) sen ominaiskiertokyky on £*7^ ~ -27° (c 1, CHC13); (f) sen molekyylipaino on 1427; (g) sen alkuaineanalyysi on noin 52,47 % hiiltä, 5,48 % vetyä, 13,81 % typpeä ja 28,24 % happea; (h) sen R^-arvo silikageeliohutkerroskromatografiassa on 0,71 liuotinsysteemillä n-butanoli-metanoli-vesi (63:27:10) ja 0,48 liuotinsysteemillä ksyleeni-metyylietyyliketoni-metanoli (5:5:1); (i) happohydrolyysissä siitä saadaan vesiliukoisia ninhyd-riini-positiivisia aineita, kuten ,^-hydroksi-N-metyylivaliinia, glysiiniä, seriiniä ja sarkosiinia; (j) emäshydrolyysissä siitä saadaan fragmentti, jonka kaava on CH3<Y^\^W0H VI N __CO—* Ser * X—* Gly > Sar—» HM-Vai jossa Ser on seriini, Gly on glysiini, Sar on sarkosiini, HM-Val on £>-hydroksi-N-metyylivaliini ja X on aminohapporyhmä, jonka 26 67403 bruttokaava peptimuodossa on CgHg^C^; (k) sen infrapunaspektri kaliumbromidissa on oleellisesti kuviossa 1 esitetty; ja (l) liuotettuna deuteroituun kloroformiin sillä on oleellisesti kuviossa 5 esitetty protoni-NMR-spektri; (B) yhdisteellä BBM-928B on kinoliinikromofori ja happohyd-rolyysissä saadaan vesiliukoisia komponentteja, kuten seriiniä, glysiiniä, sarkosiinia ja -hydroksi-N-metyylivaliinia, ja oleellisesti puhtaassa muodossa sillä on seuraavat ominaisuudet: (a) se liukenee kloroformiin ja metyleeniklotidiin, jonkin verran bentseeniin, etanoliin, metanoliin ja n-butaholiin, ja on olennaisesti liukenematon veteen ja n-heksaaniin; (b) se antaa positiivisen reaktion ferrikloridi- ja Ehrlich-reagenssien kanssa ja negatiivisen reaktion Tollens-, Sakaguchi- ja ninhydriinireagenssien kanssa; (c) se on tehokas hiiriin intraperitoneaalisesti istutettua P 388 leukemiaa vastaan; (d) sen sulamispiste on 214-217°C; (e) sen ominaiskiertokyky on /X7^ = -74° (c 1, CHCl^) ; (f) sen alkuaineanalyysi on noin 50,14% hiiltä, 5,29% vetyä, 12,34% typpeä ja 32,23% happea; (g) sen R^-arvo silikageeliohutkerroskromatografiässä on 0,53 liuotinsysteemillä n-butanoli-metanoli-vesi (63:27:10) ja 0,26 liuotinsysteemillä ksyleeni-metyylietyyliketoni-metanoli (5:5:1); (h) sen infrapunaspektri kaliumbromidissa on oleellisesti kuviossa 2 esitetty; ja (i) liuotettuna deuteroituun kloroformiin sillä on oleellisesti kuviossa 6 esitetty protoni-NMR-spektri; (C) yhdisteellä BBM-928C on kinoliinikromofori ja happo-hydrolyysissä saadaan vesiliukoisia komponentteja, kuten seriiniä, glysiiniä, sarkosiinia ja -hydroksi-N-metyylivaliinia, ja oleellisesti puhtaassa muodossa sillä on seuraavat ominaisuudet: (a) se liukenee kloroformiin ja metyleenikloridiin, jonkin verran bentseeniin, etanoliin, metanoliin ja n-butanoliin, ja on olennaisesti liukenematon veteen ja n-heksaaniin; 27 67403 (b) se antaa positiivisen reaktion ferrikloridi- ja Ehrlich-reagenssin kanssa ja negatiivisen reaktion Tollens-, Sakaguchi- ja ninhydriinireagenssien kanssa; (c) se on tehokas hiiriin intraperitoneaalisesti istutettuja seuraavia kasvaimia vastaan: P388 leukemia, L1210 leukemia, B16 melanooma, Lewis-keuhkokarsinooma ja saikooma 180 askiitit; (d) sen sulamispiste on 244-248°C; (e) sen ominaiskiertokyky on /V(.7^5 = -91° (c1 , CHCl^) ; (f) sen molekyylipaino on noin 1470; (g) sen alkuaineanalyysi on noin 51,77% hiiltä, 5,29% vetyä, 13,55% typpeä ja 29,39% happea; (h) sen R^-arvo silikageeliohutkerroskromatografiässä on 0,27 liuotinsysteemillä n-butanoli-metanoli-vesi (63:27:10) ja 0,07 liuotinsysteemillä ksyleeni metyylietyyliketoni-metanoli (5:5:1) ; (i) sen infrapunaspektri kaliumbromidissa on oleellisesti kuviossa 3 esitetty; ja (j) liuotettuna deuteroituun kloroformiin sillä on oleellisesti kuviossa 7 esitetty protoni-NMR-spektri; ja (D) yhdisteellä BBM-928D on seuraavat ominaisuudet: (a) se liukenee kloroformiin ja metyleenikloridiin, jonkin verran bentseeniin, etanoliin, metanoliin ja n-butanoliin, ja on olennaisesti liukenematon veteen ja n-heksaaniin; (b) se antaa positiivisen reaktion ferrikloridi- ja Ehrlich-reagenssien kanssa ja negatiivisen reaktion Tollens-, Sakaguchi-ja ninhydriinireagenssien kanssa; (c) se on tehokas intraperitoneaalisesti hiiriin istutettua P388 leukemiaa vastaan; (d) sen sulamispiste on 224-227°C; 25 o (e) sen ominaiskiertokyky on = "13 (c 1, CHCl^) ; (f) sen alkuaineanalyysi on noin 50,75% hiiltä, 5,25% vetyä, 12,58% typpeä ja 31,42% happea; (g) sen Rf-arvo silikageeliohutkerroskromatografiässä on 0,73 liuotinsysteemillä n-butanoli-metanoli-vesi (63:27:10) ja 0,53 liuotinsysteemillä ksyleeni-metyylietyyliketoni-metanoli (5:5:1) ; 28 6 7 4 0 3 (h) sen infrapunaspektri kaliumbromidissa on oleellisesti kuviossa 4 esitetty; ja (i) liuotettuna deuteroituun kloroformiin sillä on olennaisesti kuviossa 8 esitetty protoni-NMR-spektri, tunnettu siitä, että Actinomycetes-kantaa ATCC 31491 viljellään vesipitoisessa liuoksessa, joka sisältää assimiloituvan hiililähteen ja assimiloituvan typpilähteen, submerssi-sissa aerobisissa olosuhteissa kunnes muodostunutta BBM-928-kompleksia sisältävä liuos osoittaa oleellista kasvainten-vastaista, antibioottista aktiivisuutta, minkä jälkeen BBM-928-kompleksi otetaan talteen viljelyväliaineesta ja haluttaessa yhdisteet BBM-928A, BBM-928B, BBM-928C ja BBM-928D erotetaan. 29 Patentkrav 6 74 0 3 Förfarande för framställning av antibiotikumföreningarna BBM-928A, BBM-928B, BBM-928C och BBM-928D samt ett BBM-928-komplex innehällande dessa, vilka har en antitumöreffekt, varvid (A) föreningen BBM-928A har följande egenskaper: (a) den löser sig i kloroform och metylenklorid, nägot i bensen, etanol, metanol och n-butanol, och är väsentligen olöslig i vatten och n-hexan; (b) den ger en positiv reaktion med ferriklorid- och Ehrlich-reagenser och en negativ reaktion med Tollens-, Sakaguchi- och ninhydrinreagenser; (c) den är ett effektivt antitumörmedel mot följande i i möss intraperitonealt implanterade tumörer: P388 leukemi, L1210 leukemi, B16 melanom, Lewis lungkarcinom och sarkoin 180 askites; (d) dess smältpunkt är 246-*248°C; (e) dess specif ikä vridningsförmäga är “27° (c 1, CHC13); (f) dess molekylvikt är 1427,· (g) dess elementaranalys är ca 52,47 % koi, 5,48 % väte, 13,81 % kväve och 28,24 % syre; (h) dess Rf-värde vid silikageltunnskiktskromatografi är 0,71 med lösningsmedelssystemet n-butanol-metanol-vatten (63:27:10) och 0,48 med lösningsmedelssystemet xylen-metyletylketon-metanol (5:5:1); (i) vid syrahydrolys erhälles frän den vattenlösliga nin-hydridin-positiva ämnen, säsom ^-hydroxi-N-metylvalin, glycin, serin och sarkosin? (j) vid bashydrolys erhälls fran denna ett fragment med formeln OH Ser-3 X-^ Gly-> Sar^ HM—Vai där Ser är serin, Gly är glycin, Sar är sarkosin, HM-Vai är ji- 30 67403 hydroxi-N-metylvalin och X är en aminosyragrupp, vars bruttoformel i peptidform är (k) dess infrarödspektrum i kaliumbromid är väsentligen det i figur 1 angivna; och (l) löst i deutererad kloroform har den väsentligen det i figur 5 angivna proton-NMR-spektrumet; (B) föreningen BBM-928B har en kinolinkromofor och via syra-hydrolys erhälles vattenlösliga komponenter, säsom serin, glycin, sarkosin och /i-hydroxi-N-metylvalin, och i väsentligen ren form har den följande egenskaper; (a) den loser sig i kloroform och metylenklorid, nägot i bensen, etanol, metanol och n-butanol, och är väsentligen olöslig i vatten och n-hexan; (b) den ger en positiv reaktion med ferriklorid- och Ehrlich-reagenser och en negativ reaktion med Tollens-, Sakaguchi- och ninhydrmreagenser; (c) den är effektiv mot i moss intraperitonealt implanterat P388 leukemi; (d) dess smältpunkt är 214-217°C (e) dess specif ikä vridningsförmäga är -74° (c 1, CHCl^) ; (f) dess elementaranalys är ca 50,14 % kol, 5,29 % väte, 12,34 % kväve och 32,23 % syre; (g) dess R^-värde vid silikageltunnskiktskromatografi är 0,53 med lösningsmedelsystemet n-butanol-metanol-vatten (63:27:10) och 0,26 med lösningsmedelsystemet xylen-metyletylketon-metanol (5:5:1) ; (h) dess infrarödspektrum i kaliumbromid är väsentligen det i figur 2 angivna; och (i) lost i deutererad kloroform har den väsentligen det i figur 6 angivna proton-NMR-spektrumet; (C) föreningen BBM-928C är en kinolinkromofor och vid syra-hydrolys erhälls vattenlösliga komponenter, säsom serin, glycin, sarkosin och /3-hydroxi-N-metylvalin, och i väsentligen ren form har den följande egenskaper; (a) den löser sig i kloroform och metylenklorid, nägot i bensen, etanol, metanol och n-butanol, och är väsentligen olöslig i vatten och n-hexan; 67403 31 (b) den ger en positiv reaktion med ferriklorid- och Ehrlich-reagenser och en negativ reaktion med Tollens-, Sakaguchi-och ninhydrinreagenser; (c) den är effektiv mot följande i moss intraperitonealt inplanterade tumörer: P3881eukemi, L1210 leukemi, B16 melanom, Lewis lungkarcinom och sarkom 180 askites; (d) dess smältpunkt är 244-248°C; 25 o (e) dess specifika vridningsförmäga är /*^D = -91 (c 1, CHCl^); (f) dess molekylvikt är ca 1470; (g) dess elementaranalys är ca 51,77 % kol, 5,29 % väte, 13,55 % kväve och 29,39 % syre; (h) dess R^-värde vid silikageltunnskiktskromatografi är 0,27 med lösningsmedelssystemet n-butanol-metanol-vatten (63:27:10) och 0,07 med lösningsmedelssystemet xylen-metyletylketon-metanol (5:5:1); (i) dess infrarödspektrum i kaliumbromid är väsentligen det i figur 3 angivna; (j) lost i deutererad kloroform har den väsentligen det i figur 7 angivna proton-NMR-spektrumet; (D) förenigen BBM-928D har följande egenskaper: (a) den löser sig i kloroform och metylenklorid, nägot i bensen, etanol, metanol och n-butanol, och är väsentligen olöslig i vatten och n-hexan; (b) den ger en positiv reaktion med ferriklorid- och Ehrlich-reagenser och en negativ reaktion med Tollens-, Sakaguchi- och ninhydrinreagenser, (c) den är effektiv mot i moss intraperitonealt inplanterat P388 leukemi; (d) dess smältpunkt är 224-227°C; (e) dess specifika vridningsförmäga är /«/^= -13° (c 1, CHCLj); (f) dess elementaranalys är ca 50,75 % kol, 5,25 % väte, 12,58 % kväve och 31,42 % syre; (g) dess R^-värde vid silikageltunnskiktskromatografi är 0,73 med lösningsmedelssystemet n-butanol-metanol-vatten (63:27:10) och 0,53 med lösningsmedelssystemet xylen-metyletylketon-metanol (5:5:1) ;
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US2648879A | 1979-04-02 | 1979-04-02 | |
| US2648879 | 1979-04-02 |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| FI800973A7 FI800973A7 (fi) | 1980-10-03 |
| FI67403B FI67403B (fi) | 1984-11-30 |
| FI67403C true FI67403C (fi) | 1985-03-11 |
Family
ID=21832125
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| FI800973A FI67403C (fi) | 1979-04-02 | 1980-03-28 | Foerfarande foer framstaellning av antibiotfoereningar med antitumoereffekt |
Country Status (24)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (3) | JPS55162752A (fi) |
| AR (1) | AR223372A1 (fi) |
| AT (1) | AT371144B (fi) |
| AU (1) | AU533672B2 (fi) |
| BE (1) | BE882574A (fi) |
| CH (1) | CH647247A5 (fi) |
| DE (1) | DE3012565A1 (fi) |
| DK (1) | DK153501C (fi) |
| ES (1) | ES8104411A1 (fi) |
| FI (1) | FI67403C (fi) |
| FR (1) | FR2452930A1 (fi) |
| GB (1) | GB2050384B (fi) |
| GR (1) | GR66663B (fi) |
| HU (1) | HU184256B (fi) |
| IE (1) | IE49191B1 (fi) |
| IL (1) | IL59746A (fi) |
| LU (1) | LU82318A1 (fi) |
| NL (1) | NL8001868A (fi) |
| NO (1) | NO155780C (fi) |
| PH (1) | PH16970A (fi) |
| SE (1) | SE441930B (fi) |
| SU (1) | SU999981A3 (fi) |
| YU (1) | YU41700B (fi) |
| ZA (1) | ZA801856B (fi) |
Families Citing this family (12)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4416874A (en) | 1982-03-05 | 1983-11-22 | Bristol-Myers Company | Injectable compositions of BBM-928A |
| AU566569B2 (en) * | 1983-01-31 | 1987-10-22 | Bristol-Myers Company | Luzopeptin e2 |
| DE3375076D1 (en) * | 1983-09-14 | 1988-02-11 | Bristol Myers Co | Injectable compositions of bbm-928a |
| US6749993B2 (en) | 2002-02-06 | 2004-06-15 | Konica Corporation | Planographic printing precursor and printing method employing the same |
| JP2003300382A (ja) | 2002-04-08 | 2003-10-21 | Konica Minolta Holdings Inc | 熱転写中間転写媒体を用いた画像形成方法 |
| JP2004188848A (ja) | 2002-12-12 | 2004-07-08 | Konica Minolta Holdings Inc | 印刷版材料 |
| JP2004322511A (ja) | 2003-04-25 | 2004-11-18 | Konica Minolta Medical & Graphic Inc | 印刷方法 |
| JP2006056184A (ja) | 2004-08-23 | 2006-03-02 | Konica Minolta Medical & Graphic Inc | 印刷版材料および印刷版 |
| CN101316721A (zh) | 2005-11-01 | 2008-12-03 | 柯尼卡美能达医疗印刷器材株式会社 | 平版印刷版材料、平版印刷版、平版印刷版的制备方法和平版印刷版的印刷方法 |
| JP4878612B2 (ja) * | 2008-07-16 | 2012-02-15 | スタンレー電気株式会社 | 車両用信号灯具 |
| RU2420568C2 (ru) * | 2009-05-20 | 2011-06-10 | Государственное учреждение научно-исследовательский институт по изысканию новых антибиотиков им. Г.Ф. Гаузе Российской академии медицинских наук | Штамм и способ получения антибиотика митомицина с путем биосинтеза |
| US9052217B2 (en) | 2012-11-09 | 2015-06-09 | Honeywell International Inc. | Variable scale sensor |
-
1980
- 1980-03-19 GB GB8009192A patent/GB2050384B/en not_active Expired
- 1980-03-21 PH PH23791A patent/PH16970A/en unknown
- 1980-03-24 IE IE598/80A patent/IE49191B1/en not_active IP Right Cessation
- 1980-03-24 YU YU812/80A patent/YU41700B/xx unknown
- 1980-03-26 GR GR58775A patent/GR66663B/el unknown
- 1980-03-28 NL NL8001868A patent/NL8001868A/nl not_active Application Discontinuation
- 1980-03-28 FI FI800973A patent/FI67403C/fi not_active IP Right Cessation
- 1980-03-28 ZA ZA00801856A patent/ZA801856B/xx unknown
- 1980-03-31 IL IL59746A patent/IL59746A/xx unknown
- 1980-03-31 DE DE19803012565 patent/DE3012565A1/de active Granted
- 1980-03-31 FR FR8007145A patent/FR2452930A1/fr active Granted
- 1980-03-31 DK DK138780A patent/DK153501C/da not_active IP Right Cessation
- 1980-03-31 AU AU57002/80A patent/AU533672B2/en not_active Ceased
- 1980-04-01 SU SU802906901A patent/SU999981A3/ru active
- 1980-04-01 LU LU82318A patent/LU82318A1/fr unknown
- 1980-04-01 CH CH2570/80A patent/CH647247A5/fr not_active IP Right Cessation
- 1980-04-01 HU HU80775A patent/HU184256B/hu not_active IP Right Cessation
- 1980-04-01 ES ES490209A patent/ES8104411A1/es not_active Expired
- 1980-04-01 NO NO800967A patent/NO155780C/no unknown
- 1980-04-01 SE SE8002521A patent/SE441930B/sv not_active IP Right Cessation
- 1980-04-01 BE BE0/200071A patent/BE882574A/fr not_active IP Right Cessation
- 1980-04-02 AR AR280558A patent/AR223372A1/es active
- 1980-04-02 JP JP4205180A patent/JPS55162752A/ja active Granted
- 1980-04-02 AT AT0180380A patent/AT371144B/de not_active IP Right Cessation
-
1987
- 1987-10-09 JP JP62253588A patent/JPS63139191A/ja active Granted
- 1987-10-09 JP JP62253589A patent/JPS63139192A/ja active Granted
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| EP0271581A1 (en) | Novel compounds dc-88a and dc-89a1 and process for their preparation | |
| FI67403C (fi) | Foerfarande foer framstaellning av antibiotfoereningar med antitumoereffekt | |
| US4360458A (en) | Antitumor antibacterial agents | |
| US4734493A (en) | Novel anthracycline antibiotics | |
| KR920001366B1 (ko) | 새로운 항암 항생복합체 bbm-1675의 제조방법 | |
| US4451456A (en) | Antitumor antibacterial agents | |
| US4521339A (en) | Ansatrienols | |
| US4631256A (en) | Fermentation process for BBM-928 | |
| US4550021A (en) | Antitumor antibiotic 81-484 and process for its production | |
| US4780416A (en) | Microorganism for BBM 928 production | |
| US4686308A (en) | Novel physiologically active substance MH435 | |
| EP0206138B1 (en) | Anthracycline compounds, a process for their preparation and their use as medicaments | |
| HU202284B (en) | Process for producing new azoxy derivatives and pharmaceutical compositions comprising same as active ingredient | |
| DK144658B (da) | Fremgangsmaade til fremstilling af antibiotikum c-15003 p-4 | |
| US5334613A (en) | Antibacterial substance BE-24566B | |
| EP0189330A2 (en) | Antitumor antibiotics and their production | |
| EP0205981B1 (en) | A novel anti-tumor and antimicrobial compound, its microbiological preparation and its use as medicament | |
| KR830002381B1 (ko) | 항종양 항생물질의 제조방법 | |
| US4701324A (en) | Novel cell-cidal antibiotic 82-85-8A and its production | |
| US5036010A (en) | BMY-40800 antitumor antibiotics | |
| JPH0625095B2 (ja) | 抗生物質ｓｆ−２４１５物質およびその製造法 | |
| KR0130473B1 (ko) | 새로운 항생물질, 베나노마이신 a와 b 및 덱실오실베나노마이신 b와 이들의 제조 방법과 용도 | |
| US4868117A (en) | BBM-1675, a new antitumor antibiotic complex | |
| GB2132604A (en) | Antitumor antibiotic awamycin | |
| HU212160B (en) | Process for producing antitumour compound be-13793c |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM | Patent lapsed | ||
| MM | Patent lapsed |
Owner name: BRISTOL-MYERS CO |