FI65257B - Foerfarande foer framstaellning av nya 6-metoxi-alfa-karboxipenicillin estrar - Google Patents

Description

RS^TI ΓβΙ rn\ KUULUTUSJULKAISU rroc n m V1) UTLACG N I NGSSKRI FT 6525 7

Patent no Helat ^ ^ (51) κ*.ι^ /int.a.3 C 07 D 499/72 SUOM I —FIN LAND (21) Pwunttlhukemu* — PttentannBknlni 760039 (22) Htkumtopilv» — Antöknlnpdtj 0 8. 01. 7 6 (23) Alkupttvt—GIMfhcttdaf 08.01. 76 (41) Tullut luikituksi — Bllvlt offuntHf 18. 07.76

Patentti· ja rekitterlhallltus ... ......... ,, ,. „ _ ' . (44) Nihti vilu! panon Jt kuuLlulkaisuti pwm. —

Patent· och reglsterstyreleen AnaOkin utlifd oeh uil-akrtftun puMkwarf 30.12.83 (32)(33)(31) utuolksu»—8uf*rd priorttet 17.01.75 i7.O6.75, l6.O8.75 Iso-Britannia-Storbritannien(GB) 2021/75, 25669/75, 3I+I82/75 (71) Beecham Group Limited, Beecham House, Great West Road, Brentford, Middlesex, Iso-Britannia-Storbritannien(GB) (72) John Peter Clayton, Horsham, Sussex, Peter Hubert Bentley, Rudgwick, Sussex, Iso-Britannia-Storbritannien(GB) (7I+) Berggren Oy Ab (5I+) Menetelmä uusien 6-metoksi-o(-karboksipenisilliinien estereiden valmistamiseksi - Förfarande för framställning av nya 6-metoxi-oi-karb-oxipenicillin estrar

Esillä oleva keksintö koskee menetelmää uusien 6-metoksi-a-karbok-sipenisilliinien estereiden valmistamiseksi. 6-metoksi-a-karbok-sipenisilliineiilä on bakteereja tappava aktiivisuus, joka on arvokas käsiteltäessä sellaisia infektioita eläimissä, ihmiset ja siipikarja mukaanlukien, jotka aiheutuvat erilaisista gram-negatiivisista organismeista.

Brittiläisessä patenttijulkaisussa n:o 1 339 007 on esitetty mm. luokka 6-substituoituja asyyliaminopenisilliinejä, joilla on yleinen kaava (A) H Rr I /s\

Ra - N--f X — A (A)

(Γ N ^C02RC

jossa Ra on asyyliryhmä, Rg on hydroksi- tai merkaptoradikaali, substituoitu tai substituoimaton metoksi-, etoksi- metyyli-, 65257 etyyli-, metyylitio- tai etyylitioradikaali, karbamoyylioksi-, karbamoyylitio-, C^_g alkanoyylioksi-, alkanoyylitio-, syano- tai karboksiradikaali, tai karboksiradikaali-johdannainen, kuten karbamoyyli, ja F?c on vetyatomi tai farmaseuttisesti sopiva esteröityvä radikaali tai kationi.

Tämän patenttijulkaisun selityksessä ainoa a-karboksi-substituoi-tu asyyliryhmä R^, joka on spesifisesti määritelty, on 2-karboksi-fenyyliasetamido, ja tällaisen sivuketjun erikoisesimerkkejä ovat esimerkiksi seuraavat Rg-ryhmät: metyyli, syano, aminometyyli ja 2-karboksi-2-aminoetoksi. Sellaista 6-metoksi-substituoitua penisilliiniä, jossa olisi α-karboksisubstituoitu asyylisivuketju, ei ole esitetty.

Tiivistelmässä n:o 368 konferenssissa "Program and Abstracts of the liJth Interscience conference on Antimicrobial Agents and Chemotherapy", joka pidettiin 11-13 syyskuuta 197^ San Franciscossa, Kaliforniassa, USA:ssa, on mainittu yksi ainoa 6-metoksi-penisillii-ni, jolla on kaava (A), nimittäin 6o-metoksi-6e-(2-karboksifenyyli-asetamido)penisillaanihappo.

Esillä olevan keksinnön avulla on aikaansaatu menetelmä uusien 6-metoksi-a-karboksipenisilliinien estereiden valmistamiseksi, joilla on kaava (I): 0CH

. 3

R.CH.CO.NH —-f N— , N

In (I) CO~Rx 2 -N---'s. 2 ^ co2r . . . 2 jossa kaavassa R on 2- tai 3-tienyyli ja R on vety tai farmaseuttisesti sopiva suolanmuodostusioni, ja R1 on alempialkyyli, fenyyli, fenyyli, joka on substituoitu monoalempialkyylillä, ftalidyyli, indanyyli, alkanoyylioksialempialkyyli tai alempialkoksialempi-alkyyli, ja menetelmälle on tunnusomaista, että se käsittää: a) kaavan (III) mukaisen yhdisteen och3 ch3 h2H—-|/,SVs~ch3 (ITT) i-N-l 0 \o2»y· 3 65257 jossa kaavassa Rx on vety tai karboksyylisuojaryhmä, tai sen N-silyyli- tai N-fosforyloidun johdannaisen saattamisen reagoimaan kaavan (IV) mukaisen hapon N-asyloimisjohdannaisen kanssa R - CH.C02H (iv) I 1 C02Rx jossa kaavassa R ja R1 on määritelty edellä kaavan (I) yhteydessä, ja mahdollisten silyyli- tai fosforyyliryhmien poistamisen hydro-lyysin tai alkoholyysin avulla; tai b) kaavan (XI) mukaisen yhdisteen

Otti, 1 3 r . CH - CO.NH r-f X- CHj (XI) C02H J-N-^ χ

U ^C02RX

jossa kaavassa R ja Rx merkitsevät samaa kuin edellä, tai sen reaktiokykyisen esteröityvän johdannaisen, esteröimisen kaavan 1 ....

R OH mukaisen hapon esteröimisjohdannaisen kanssa; tai e) kaavan XIII mukaisen yhdisteen sr3 ch, R - CH.CO.NH--f X — CH3 (XIII) CO.H1 J,-N -^

O x CO,R

1 x .. λ jossa R, R ja R merkitsevät samaa kuin edellä ja R on alempi alkyyli tai bentsyyli, saattamisen reagoimaan metanolin kanssa metalli-ionin läsnäollessa; ja vaiheen a, b tai c jälkeen yhden tai useamman seuraavan vaiheen suorittamisen mikäli tarpeellista: (1) mahdollisten karboksyylisuojaryhmien poistaminen; (2) tuotteen muuttaminen sen suolaksi.

p

Sopivia suolanmuodostusioneja ryhmää R varten ovat metalli-ionit, esim. aluminiumionit, alkalimetalli-ionit, kuten natrium tai kalium, maa-alkalimetalli-ionit, kuten kalsium tai magnesium, ja ammonium-tai substituoidut ammoniumionit, esim. sellaiset, jotka on johdettu il 65257 alemmista alkyyliamiineista, kuten trietyyliamiinista, hydroksi-alempi-alkyyliamiineista, kuten 2-hydroksietyyliamiini, bis-(2-hydroksietyyli)-amiini tai tri-(2-hydroksietyyli)-amiini, syklo-alkyyliamiineista, kuten bisykloheksyyliamiini, tai prokaiinista, dibentsyytiamiinista, N,N-dibentsyylietyleenidiamiinista, 1-efen-amiinista, N-etyylipiperidiinistä, N-bentsyyli-g-fenetyytiamiinista, dehydroabietyytiamiinista, N,N'-bis-dehydroabietyylietyleenidi-amiinista, tai pyridiinityyppiset emäkset, kuten pyridiini, kolli-diini tai kinoliini, tai muut amiinit, joita on käytetty suolojen muodostamiseen bentsyylipenisilliinin kanssa.

1 ...

Alempi-alkyyli R on metyyli, etyyli, n- ja iso-propyyli, n-, sek-, iso- ja tert-butyyli tai pentyyli.

Kaavan (I) mukaiset yhdisteet voidaan siis valmistaa saattamalla yhdiste, jolla on kaava (III), tai sen N-silyyli- tai N-fosforyloitu j ohdannainen: °;CH3 S CH3 H2N — —-( ^ — CH3 I (III) ^-N - o co2rx jossa kaavassa Rx on vety tai karboksyylisuojaryhmä, reagoimaan kaavan (IV) mukaisen hapon N-asyloimisjohdannaisen kanssa:

R - CH.COpH

COjR1 (IV) \ jossa kaavassa R ja R on määritelty edellä kaavan (I) yhteydessä, ja suorittamalla tämän jälkeen, mikäli tarpeellista, yksi tai useampi seuraavista vaiheista: (1) mahdollisten silyyli- tai fosforyyliryhmien poistaminen hydro- lyysin tai alkoholyysin avulla; (2) mahdollisten karboksyylisuojaryhmien poistaminen; (3) tuotteen muuttaminen suolakseen.

Termillä yhdisteen (III) "N-silyylijohdannainen" tarkoitetaan yhdisteen (III) 6-amino-ryhmän reaktiotuotetta silyloimisaineen, kuten halosilaanin tai silatsaanin, kanssa, joilla on kaava:

Si U; L2 Si U2; L3 Si NL2; L, Si NH Si L,; L, Si.NH.COL; L, Si, NH.CO,NH.Si L,; 3 3 3 3 3 L NH.CO.NH.Si ; LC.OSi L, 3 i 3 NSiL3 joissa kaavoissa U on halogeeni ja eri ryhmät L, jotka voivat olla samanlaisia tai erilaisia, ovat kukin vety tai alkyyli, alkoksi, 5 65257 aryyli tai aralkyyli. Edullisimpia silyloimisaineita ovat silyyli-kloridit, erikoisesti trimetyylikloorisilaani.

Sanontatapaan yhdisteen (III) "N-fosforyloitu" johdannainen sisältyvät myös sellaiset yhdisteet, joissa kaavan (III) 6-aminoryhmä on substituoitu sellaisella ryhmällä, jolla on kaava: - P*Ra Rb jossa kaavassa Ra on alkyyli-, halogeenialkyyli, aryyli-, aralkyyli-, alkoksi-, halogeenialkoksi-, aryylioksi-, aralkyylioksi- tai dial-kyyliaminoryhmä, Rb on sama kuin Ra tai on halogeeni, ja R& ja R5 muodostavat yhdessä renkaan.

Sopivia ryhmän -C02RX karboksyyli-suojaryhmiä kaavoissa (III) ja (IV) ovat karboksyylihapon suolat, esterit ja anhydridi-johdannaiset. Tämä johdannainen on edullisesti sellainen, joka voidaan helposti lohkaista pois reaktion myöhemmässä vaiheessa. Sopivia suoloja ovat mm. tertiääriset amiinisuolat, kuten sellaiset, jotka on muodostettu tri-alempi alkyyliamiinien, N-etyyli-piperidiinin, 2,6-lutidiinin, pyridiinin, N-metyylipyrrolidiinin ja dimetyylipiperatsiinin kanssa. Eräs edullinen suola on trietyyliamiini.

Sellaisia sopivia esteriryhmiä, joilla on kaava C02Rx> ovat seuraa-vat: (1) -COOCRcRdRe, jossa ainakin yksi ryhmistä Rc, Rd ja Re on elektronin luovuttaja, esimerkiksi p-metoksifenyyli, 2,4,6-trime-tyylifenyyli, 9-antryyli, metoksi, asetoksi, metoksimetyyli, bent-syyli tai fur-2-yyli. Jäljellä olevat Rc, Rd ja Re~ryhmät, voivat olla vety tai orgaanisia substituutioryhmiä. Sopivia tällaisia esteriryhmiä ovat mm. p-metoksibentsyylioksikarbonyyli, 2,4,6-trime-tyylibentsyylioksikarbonyyli, bis-(p-metoksifenyyli)metoksikarbo-nyyli, 3,5-di-t-butyyli-4-hydroksibentsyylioksikarbonyyli, metoksi-metoksikarbonyyli ja bentsyylioksikarbonyyli.

(2) -COOCRcRdRe, jossa ainakin yksi ryhmistä Rc, Rd ja Re on elektronin vastaanottava ryhmä, esimerkiksi bentsoyyli, p-nitrofe-nyyli, 4-pyridyyli, trikloorimetyyli, tribromimetyyli, jodimetyyli, syanometyyli, etoksikarbonyylimetyyli, aryylisulfonyylimetyyli, 2-dimetyylisulfoniumetyyli, o-nitrofenyyli tai syano. Jäljellä olevat Rc> Rd Ja Rg-ryhrnät voivat olla vety tai orgaanisia substituutio- 6 65257 ryhmiä. Sopivia tämäntyyppisiä estereitä ovat bentsoyylimetoksi-karbonyyli, p-nitrobentsyylioksikarbonyyli, 4-pyridyylimetoksikarbo-nyyli, 2,2,2-trikloorietoksikarbonyyli ja 2,2,2-tribromietoksikarbo-nyyli.

(3) -COOCRcRdRe, jossa ainakin kaksi ryhmistä R , Rd ja Re ovat hiilivety, kuten alkyyli, esimerkiksi metyyli tai etyyli, aryyli, esimerkiksi fenyyli, ja jäljelle jäävä RCJ Rd tai Re~ryhmä, mikäli tällainen esiintyy, on vety. Sopivia tämäntyyppisiä estereitä ovat t-butyylioksikarbonyyli, t-amyylioksikarbonyyli, difenyylimetoksi-karbonyyli ja trifenyylimetoksikarbonyyli.

(4) -COOR^,, jossa R^ on adamantyyli, 2-bentsyylioksifenyyli, 4-me-tyylitiofenyyli, tetrahydrofur-2-yyli, tetrahydropyran-2-yyli, penta-kloorifenyyli; (5) silyylioksikarbonyyliryhmät, jotka on saatu edellä kuvatun si-lyloimisaineen reagoidessa karboksyylihapporyhmän kanssa, (6) C02P.RaRb, jossa Ra ja Rb on määritelty edellä.

(7) In vivo hydrolysoituva esteriradikaali, esim. sellainen kuin edellä on määritelty.

Karbonyyliryhmä voidaan regeneroida jostain edellä mainitusta esteristä tavanomaisilla menetelmillä, esimerkiksi happo-emäs-katalysoi-dulla hydrolyysillä tai käyttäen entsymaattista, katalysoitua hydro-lyysiä. Vaihtoehtoisia lohkaisumenetelmiä ovat mm. seuraavat:

Reaktio Lewis-hapon, kuten trifluorietikkahapon, muurahaishapon etikkahapossa olevan kloorivetyhapon, bentseenissä olevan sinkkibro-midin ja elohopeayhdisteiden vesiliuosten tai suspensioiden kanssa. (Reaktiota Lewis-hapon kanssa voidaan edistää lisäämällä nukleofällistä ainetta, kuten anisolia); pelkistäminen sellaisten aineiden kanssa, kuten sinkki/etikkahappo, sinkki/muurahaishappo, sinkki/alempi alkoholi, sinkki/pyridiini, pal-ladisoitu hiili ja vety, ja natrium ja nestemäinen ammoniakki; käsittely nukleofiilisilla aineilla, kuten sellaisilla, jotka sisältävät nukleofiilisen happi- tai rikkiatomin, esimerkiksi alkoholeilla, merkaptaaneilla ja vedellä, hapettavissa menetelmillä, esimerkiksi sellaisilla, jotka käsittävät vetyperoksidin ja etikkahapon käytön, ja säteilyttämällä.

Edellä mainitussa menetelmässä käytetään reaktiokykyistä hapon (IV) N-asyloimisjohdannaista. Reaktiokykyisen johdannaisen valintaan vaikuttaa. luonnollisesti hapon substituenttien kemiallinen luonne.

7 65257

Sopivia N-asyloimisjohdannaisia ovat happohalidi, edullisesti happo-kloridi tai -bromidi. Asyloiminen happohalidin avulla voidaan toteuttaa happoa sitovan aineen, esimerkiksi tertiäärisen amiinin (kuten trietyyliamiinin tai dimetyylianiliinin), epäorgaanisen emäksen (kuten kalsiumkarbonaatin tai natriumbikarbonaatin) tai oksiraanin läsnäollessa, joka sitoo sen halogeenivedyn, joka on vapautunut asyloi-misreaktiossa. Tämä oksiraani on edullisesti (C2_g)-l,2-alkyleeniok-sidi, kuten etyleenioksidi tai propyleenioksidi- Asyloimisreaktio, käytettäessä happohalidia, voidaan toteuttaa lämpötila-alueella -50 ja +50°C, edullisesti välillä -20 ja +50°C, vettä sisältävässä tai vettä sisältämättömässä väliaineessa, kuten vesipitoisessa asetonissa, etyyliasetaatissa, dimetyyliasetamidissa, dimetyyliformamidissa, asetonitriilissä, dikloorimetaanissa, 1,2-dikloorietaanissa tai näiden seoksessa. Vaihtoehtoisesti reaktio voidaan toteuttaa veteen sekoittamattoman liuottimen pysymättömässä emulsiossa, esimerkiksi alifaattisessa esterissä tai ketonissa, kuten metyyli-isobutyylike-tonissa tai butyyliasetaatissa.

Happohalidi voidaan valmistaa saattamalla happo (IV) tai sen suola reagoimaan halogenoimisaineen (esimerkiksi klooraus- tai bromausai-neen), kuten fosforipentakloridin, tionyylikloridin tai oksalyyli-kloridin kanssa.

Vaihtoehtoisesti voi hapon (IV) N-asyloimisjohdannainen olla symmetrinen tai anhydridiseos. Sopivia anhydridiseoksia ovat alkoksi-muura-haishappoanhydridi tai -anhydridit, jotka on muodostettu esimerkiksi karbonihappomonoestereiden, trimetyylietikkahapon, tioetikkahapon, difenyylietikkahapon, bentsoehapon, fosforifcappojen (kuten fosfori-tai alifosforihapon), rikkihapon tai alifaattisten tai aromaattisten sulfonihappojen (kuten p-tolueenisulfonihapon) kanssa. Sekoitetut tai symmetriset anhydridit voidaan muodostaa in situ. Esimerkiksi anhydridiseos voidaan muodostaa käyttäen N-etoksikarbonyyli-2-etoksi- 1,2-dihydrokinoliinia. Symmetristä anhydridiä käytettäessä voidaan reaktio toteuttaa 2,i|-lutidiinin ollessa läsnä katalyyttinä.

Hapon (IV) vaihtoehtoisia N-asyloimisjohdannaisia ovat happoatsidi tai aktivoidut esterit, kuten esterit, jotka on muodostettu syano-metanolin, p-nitrofenolin, 2,4-dinitrofenolin, tiofenolin, halogeeni-fenolin, johon sisältyy pentakloorifenoli, monometoksifenolin tai 8-hydrokinoliinin kanssa, tai amidit, kuten N-asyylisakkariinit tai N-asyyliftaali-imidit, tai alkylideeni-iminoesteri, joka on valmis- 8 65257 tettu hapon (IV) reagoidessa oksiimin kanssa.

Nämä muutamat aktivoidut esterit, esimerkiksi esteri, joka on muodostettu 1-hydroksibentstriatsolin tai N-hydroksimeripihkahappoimi-din kanssa, voidaan valmistaa in situ saattamalla happo reagoimaan vastaavan hydroksiyhdisteen kanssa karbodi-imidin, edullisesti di-sykloheksyylikarbodi-imidin, läsnäollessa.

Muita hapon (IV) reaktiokykyisiä N-asyloimisjohdannaisia ovat sellainen reaktiokykyinen välituote, joka on muodostettu reaktion avulla in situ kondensoimisaineen, kuten karbodi-imidin, esimerkiksi N,N-dietyyli-dipropyyli- tai di-isopropyylikarbodi-imidin, Ν,Ν'-disyklo-heksyylikarbodi-imidin tai N-etyyli-N1-γ-dimetyyliaminopropyylikarbo-di-imidin kanssa, sopivan karbonyyliyhdisteen, esimerkiksi N,NT-karbo-nyyli-imidatsolin tai N,N'-karbonyyli-ditriatsolin, isoksatsolinium-suolan, esimerkiksi N-etyyli-5~fenyyli-isoksatsolinium-3-sulfonaatin tai N-t-butyyli-5-metyyli-isoksatsoliniumperkloraatin tai N-alkoksi-karbonyyli-2-alkoksi-l,2-dihydrokinoliinin, kuten N-etoksikarbonyyli- 2-etoksi-l,2-dihydrokinoliinin kanssa. Muita kondensoimisaineita ovat Lewis-hapot (esimerkiksi BBr^-CgHg) tai fosforihappo-kondensoi-misaine, kuten dietyylifosforyylisyanidi. Kondensaatioreaktio toteutetaan edullisesti orgaanisessa reaktioväliaineessa, esimerkiksi me-tyleenikloridissa, dimetyyliformamidissa, asetonitriilissä, alkoholissa, bentseenissä, dioksaanissa tai tetrahydrofuraanissa.

Yhdisteet (III) voidaan valmistaa esimerkiksi menetelmällä, jota ovat kuvanneet Jen ym. (J. Org. Chem. 1973, 38, 2857) sellaisen yhdisteen esteristä, jolla on kaava: fH3 s CH3 H2N -i-^ ^—CH3 0<κ N ^co2h joka yhdiste taas voidaan valmistaa vastaavasta 6-isosyanoyhdisteestä siten kuin saksalaisessa kuulutusjulkaisussa 2 407 000 on kuvattu.

9 65257

Kaavan (I) mukaisia yhdisteitä voidaan myös valmistaa esteröimällä kaavan (XI) mukainen yhdiste tai sen reaktiokykyinen esteröityvä johdannainen: OCH CH,

* g D

R - CH - CO.NH--S ^-CH, I 2 (XI)

C0oH

2 S7--N-\ x \o2r jossa kaavassa R ja R merkitsevät samaa kuin edellä, sellaisen kaavan R^OH mukaisen hapon esteröityvän johdannaisen kanssa, jossa kaavassa R1 on määritelty kaavan (I) yhteydessä, ja suorittamalla tämän jälkeen, mikäli tarpeellista, yksi tai useampi seu-raava vaihe: (1) mahdollisten karboksyyli-suojaryhmien poistaminen; (2) tuotteen muuttaminen suolakseen.

Kirjallisuudesta tunnetaan useita esteröimismenetelmiä, joissa käytetään useita erilaisia reaktiokykyisten esteröityvien johdannaisten yhdistelmiä. Edellä mainittu esteröimisreaktio voidaan toteuttaa esim. saattamalla yhdiste, jolla on kaava (XIA) PCH3 CH, p s ^ R - CH - CO - NH--S ^-CH5 (XIA) C0.0U* A-N-k

cr nC02RX

jossa R ja Rx on määritelty edellä, reagoimaan sellaisen yhdisteen kanssa, jolla on kaava (XII): R1 - VT (XII) jossa kaavassa R' on määritelty kaavassa (I), sellaisissa olosuhteissa, jotka aikaansaavat yhdisteen U'V' ainesosien eliminoitumi-sen, jolloin muodostuu sellainen esteri, jolla on kaava (I), jolloin U' ja V kaavassa (XIA) ja XII) ovat sellaiset, että joko U* on vety tai suolan muodostava ioni, ja V on hydroksiryhmä tai alkyy-lisulfonyylioksiryhmä tai aryylisulfonyylioksiryhmä tai halogeeni-atomi, tai U’ on orgaaninen asyyliryhmä ja V’ on hydroksiryhmä.

\

1C

65257

Tavallisesti on edullista saattaa yhdiste (XIA), jossa UT on natrium-tai kaliumioni, reagoimaan sellaisen yhdisteen (XII) kanssa, jossa V on halogeeniatomi, erikoisesti bromi tai kloori.

Siinä tapauksessa, että ryhmä U' reagenssissa (XIA) on orgaaninen asyyliryhmä, on selvää, että yhdiste (XIA) on yksinkertainen anhyd-ridiseos. Asyyliryhmä voi olla jokin hyvin erilaisista alifaatti-sista tai aromaattisista asyyliryhmistä, mutta yleensä alkoksikarbo-nyyliryhmät (esim. C2H^0C0-ryhmä), ovat tyydyttäviä.

Eräs toinen yhdisteen (XI) reaktiokykyinen esteriä muodostava johdannainen on happohalidi, erikoisesti happokloridi. Tämä yhdiste voidaan saattaa reagoimaan hydroksiyhdisteen R OH kanssa happoa sitovan aineen läsnäollessa keksinnön mukaisen halutun esterin valmistamiseksi.

Eräs toinen menetelmä kaavan (I) mukaisten yhdisteiden valmistamiseksi käsittää sellaisen yhdisteen, jolla on kaava (XIII):

SR3 CH

R - CH.CO.NH--( N-CH, I 1 3 (XIII) CO.R1 2 ^ N-k 0 ^co2rx 1 * x · * * 5 jossa R, R ja R tarkoittavat samaa kuin edellä ja R on alempi alkyyli tai bentsyyli, saattamisen reagoimaan metanolin kanssa metalli-ionin, kuten tellurium (III), lyijy (IV), vismutti (V), elohopea, lyijy, kadmium tai talliumsuolojen läsnäollessa ja poistamalla tämän jälkeen karboksyylisuojaryhmä.

Reaktio toteutetaan edullisesti lämpötilassa välillä -50 ja + 25°C liuottimessa.

Keksinnön mukaisia antibioottiyhdisteitä voidaan valmistaa annostelua varten millä hyvänsä sopivalla tavalla käyttöä varten lääketieteessä tai eläinlääketieteessä analogisesti muiden antibioottien kanssa.

On selvää, että kaavan (I) mukaisten penisilliinien sivuketju sisältää potentiaalisesti epäsymmetrisen hiiliatomin. Keksintö kä- li 11 65257 sittää tämän johdosta myös kaikki mahdolliset yhdisteiden (I) epimeerit sekä näiden seokset.

BIOLOGISET ARVOT

1. Bakteereja tappava vaikutus

Bakteereja tappava vaikutus MIC-arvoina joukolle keksinnön mukaisia yhdisteitä on esitetty taulukoissa 1 ja 2.

Taulukko 1 koskee 6-metoksitikarsilliinin α-estereitä (kaava (I), R = 3-tienyyli, R2 = H);

Taulukko 2 koskee βα-metoksi, 6$-(2-karboksi-2-tien-2’-yyliaset-amido)penisillaanihapon fenyyliesteriä (kaava (I), R = 2-tienyyli, R2 = H, R1 = Ph).

12 6 5 2 5 7 TAULUKKO 1 6-g-met oksi tikarsi niinin g-ester it Esimerkin numero 124579 °Pn3 s R1*Ph- R1= R1= R1= R1= r2- __^CH-COKH-4--f v~ ' CH, ^ ^ ^r1 0^- νΛ CHf %Η3θΟΟ P en,

d ' CHJCH

CH-CIL, CU-2 5 > M.I.C. (/ug/ml) ' E. coli JT1 2.5 25 5.0 5.0 2.5 0.5 E. coli JT4 12.5 50 5.0 5.0 5.0 2.5 E. coli JTA25 6.2 25 5.0 5.0 2.5 2.5

Salin typhi 6.2 50 2.5 5.0 2.5 2.5

Shig sonnei 125 5.0 2.5 2.5 0.5 0.5

Ps. aeruginosa 10662 125 >500 >100 250 250 500

Ps. aeruginosa 1C652(10“2) 125 500 >100 125 250 250

Serratia marcescens US32 25 >500 1C 12.5 12.5 5.0

Klebsiella aerogenes Λ 1.25 50 1.0 2.5 0.5 0.25

Enterobacter cloacae N1 6.2 50 5.0 5.0 2.5 1.25 P. mirabilis 0977 1.25 50 2.5 5.0 2.5 1.25 P. mirabilis 859 25 25 2.5 5.0 2.5 1.25 P. morganii 2.5 25 2.5 -.5-0 2.5 0.5 P. rettgeri 2.5 5.0 2.5 2.5 0.5 0.5 S, subtilis 125 125 >100 >500 250 >500

Staph, aureus Oxford 125 25 >100 500 250 250

Staph, aureus Russell >250 50 >100 500 500 500

Staph, aureus 1517 >250 250 >100 >500 >500 >500

Strep. Faecalis >250 >500 >100 >500 >500 >500 β-haemolytic Strep. CN10 25 1.25 50 125 12.5 50

Oarjalaimennus 5 %:sessa veri-agarissa 13 65257 TAULUKKO 2

Esimerkin numero 5 OOH, £ 5 g R-CH-CONH---j/ N~ R1=Ph- o n ~1ο2η . .irj.

M.I.C. (μβ/ml) E. coli JT1 5*0 E. coli JT4 12.5 E. coli JT/+25 5.0

Salra typhi 12.5

Shig sonnei 2.5

Ps. aeruginosa 10662 250

Ps. aeruginosa 10662 (10~^) 250

Serratia narcescenc US32 12.5

Klebsiella aerogenes A 0.5

Enterobacter cloacae N1 5.0 P. niirabilis C977 2.5 P. mirabilis 389 2.5 P. niorganii 2.5 P. rettgeri 2.5 B. subtilis 250

Staph, aureus Oxford 50

Staph, aureus Russell 500

Staph, aureus 1517 >500

Strep, faecalis >500 β-haemoiytic Strep. CN10 25

Sarjalaimennus 5 irsessa veri-agarissa 65257 14 2. Oraalinen absorptio 6-metoksitikarsilliinin määrät hiirien veressä mitattiin sen jälkeen kun niille oli annettu oraalisesti estereitä. Muutamia yhdisteitä tutkittaessa otettiin myös virtsaa hiiristä ja käsiteltiin biokromatogrammin avulla sen seikan määräämiseksi, oliko erittynyt hydrolysoitumatonta esteriä. Estereiden hydrolyysiaste mikrobiologisen koekäsittelyn aikana mitattiin hiirien verestä ja suolaliuoksesta.

Käytettiin seuraavia menetelmiä:

Lajit: Urospuoliset albino-rotat, kanta CS1, paino 18-22 g.

Annostustapa: Oraalinen

Annostus: Kutakin esteriä annettiin niin, että vapaan penisil- liinihapon määräksi tuli 100 mg/kg.

Koe: Näytteet analysoitiin perus-penisilliinien suhteen käyttäen koeorganismia Neisseria catarrhalis. Kromatografia: Virtsaa otettiin talteen sellaisista hiiristä, joille oli annettu esimerkkien n:ot 2, 3 ja 4 mukaisia yhdisteitä. Näytteistä otettiin biokromatogrammit. Tällöin käytettiin butanoli:etanoli vesijärjestelmää (4:1:5) ja liuskoja tarkastettiin sellaisilla agar-levyillä, joihin oli ympätty kantaa Neisseria catarrhalis .

Hiirien veren kuvan tulokset on esitetty taulukossa 3.

6 5 2 5 7 15 TAULUKKO 3 6-metoksi-tikarsilliinin määrät hiiren veressä sen jälkeen^ kun oli oraalisesti annosteltu sarja α-karboksiestereitä annoksena 100 mg/kg p , · ö-^metoksi-tikarsilliinin väkevyys,ug/ml tsueri Hiiri m^n kuluttua annostuksen jälkeen 7

Esimerk- T · · n: o 10 20 30 60 120 '2h0 ki n: o J-,aji 2 isobutyyli 1 4.6 8.0 10.5 A.9 3.6 0.54 2 4.6 8.6 11.5 9.0 4.3 0.94 3 3.1 6.1 11.0 8.6 2.8 0.58 4 3.0 4.1 11.3 7.8 3.1 0.59 5 6.4 5.6 9.4 7.9 2.5 1.6 __arvo1’ 4.3 6.6 10.7 7.6 0.85 4 4-metyyli- 1 1.3 1.7 3.2 1.72 0.48~ 0.31 fenyyli 2 1.2 1.6 3.7 2.2 0.21 <0.10 3 0.99 1.95 3.0 2.1 0.50 0.2? 4 1.25 1.95 1.7 1.85 0.52 0.51 5 1.1 3.5 2.0 1.4

Keski- «j 2 2 14 ? 7 1 S5 0 A* * ~ ^ arvo ·»*. c., £-·/ *·o».hj j \j.c-z>

Mi ., I MH —M . . i — , . — — 3 5-inda- 1 4.5 8.1 8.5 2.8 0.62 0.^4 nyyli 2 3.8 ' 9.0 5.2 3.8 1.45 1.0 3 3.1 8.0 8.0 2.55 1.5 0.78 4 2.7 6.8 4.4 7.0 0.5 0.56 5 4.8 3.5 8.5 3.7 I l^1*” I 3.8 I 7.1 I 6.3 j 4.0 1.0 K ,.

16 65257 3. Vertailu 6-metoksikarbenisilliinin ja 6-metoksltikarsil-liinin välillä

Tulokset, jotka saatiin arvioitaessa mikrobiologisesti βα-metoksi-6 β-(2-karboksifenyyliasetamido)penisillaanihappo (6-metoksikarbeni-silliinia) ja 6-a-metoksi-66-(2-karboksitien-3'-yyliasetamido)-penisillaanihappo (6-metoksi-tikarsilliinia), on esitetty taulukossa 4, jossa on esitetty näiden kahden yhdisteen MIC-arvot (sar-jalaimennus elatusaineagarissa) käytettäessä sarjaa gram-negatii-visia bakteereja ja Strep. Faecalis’ta.

Taulukosta 4 voidaan todeta, että 3_tienyyli-yhdiste (6-metoksi-tikarsilliini) oli noin kaksi kertaa aktiivisempi kuin vastaava fenyyliyhdiste (6-metoksi-karbenisilliini). Tästä nähdään siis myös, että 6-metoksitikarsilliinin esterit ovat aktiivisempia kuin 6-metoksikarbenisilliini tai sen esterit.

I.

65257 17

Taulukko ;t MIC54 (/Ug/ml)

Organismi 6-metoksikar- 6-metoksitikar- benisilliini silliini E. coli JT1 5,0 2,5 JT103 5,0 2,5 JT147 12,5 5,0 JT20R+ 5,0 5,0 JT39R+ 12,5 5,0 JT56R+ 12,5 5,0 JT68R+ 12,5 5,0 JT454C+ 5,0 5,0 JT460C+ 12,5 5,0

Kelbsiella 1229 12,5 5,0 aerogenes T312 12,5 5,0 1281 12,5 5,0 E70 5,0 2,5 B195R+ 25 5,0

Serratia US1 5,0 2,5 marcescens US30 12,5 5,0 US39R+ 5,0 2,5

Citrobacer Wl8 12,5 2,5 freundii T745 5,0 2,5

Enterobacter T755 * 5,0 2,5 aerogenes T730 5,0 1,2 E. cloacae T629 5,0 2,5 T763 5,0 1,2

Proteus H-WF 5,0 2,5 mirabilis BS66 5,0 2,5 CT13 5,0 2,5 T251 5,0 2,5 P. morganii DU10 5,0 2,5 DU718 5,0 2,5 P. vulgaris C <0,5 <0,5 I 5,0 2,5 K 12,5 5,0 P. rettgeri R110 5,0 2,5 B 5,0 2,5 I 5,0 5,0

Streptococcus Weaver >500 >500 faecalis Page >500 >500 A >500 >500

Seuraavat esimerkit kuvaavat keksinnön mukaisten yhdisteiden valmistusta.

:S 65257

Esimerkki 1 (a) Bentsyyii-6g-metoksi, 6β-aminopenisillanaatti

Vastaava 6α -metyylitio-johdannainen (katso Saksan Liittotasavallan kuulutusjulkaisua n:o 2 407 000) muutettiin otsikossa mainituksi yhdisteeksi siten kuin Jen. ym. ovat esittäneet (J.Org.Chem. 1973, 38, 1857).

(8) Bentsyyli-6a-metoksi , 6B-(2'-fenoksikarbonyylitlen-3~yyli-asetamido)penisillanaatti

Liuosta, jossa oli bentsyyli-6a-metoksi, 66-aminopenisillanaattia (1,6 mmoolia) alkoholivapaassa metyleenikloridissa (15 ml) ja pyri-diinissä (0,2 ml), käsiteltiin lämpötilassa 0-5°C sellaisen happo-kloridin liuoksella, joka oli valmistettu fenyylivetytien-3~yyli~ malonaatista (2 mmoolia) metyleenikloridissa (4 ml). 2,5 tunnin kuluttua pestiin liuos vedellä, laimennettiin kloorivetyhapolla, vedellä, laimealla natriumbikarbonaatilla, kuivattiin ja haihdutettiin. Suoritettaessa kromatograafinen käsittely piidioksidigeelin avulla aikaansaatiin haluttu diesteri 52,2 %:n saannolla. N.m.r. (CDCl^) δ = 1,35 (6H, s, gem dimetyylit), 3,55 (3H, s, OCH^) 4,52 (1H, s, C3 protoni), 5,09 (1H, s, 2’-protoni), 5,27 (2H, s, OCH2Ph), 5,69 (1H, s, protoni), 7,09-7,88 (13H, m, fenyyli ja tienyyliprotonit).

(c) 6a-metoksi, 6β-(2'-fenoksikarbonyylitien-3-yyliasetamido)-penisillaanihappo

Liuosta, jonka muodosti kohdasta (b) saatu diesteri (150 mg) absoluuttisessa etanolissa (10 ml), vesi (3 ml) ja N-natriumbikarbonaat-ti (1 ekvivalentti), käsiteltiin 10 %:sella Pd/C (200 mg) 2,5 tuntia paineessa 3,5 kp/cm2. Jäädytyskuivattaessa saatiin otsikossa mainittu yhdiste natriumsuolana 62 %\n saannolla. N.m.r. (DgO) δ = 1,4 ja 1,6 (6H, 2s gem dimetyylit)., 3,^5 ja 3,60 (3H, 2s, OCH^) 4,35 (1H, s, protoni) 5,1 (1H, s, 2'-protoni), 5,6 (1H, s, protoni), 7~7,7 (8h, m, fenyyli ja tienyyliprotonit).

Esimerkki 2 (a) Bentsyyli-6-S-/P,L-2-(iso-butyylioksikarbonyyli)tien-3_yyli-asetamido7-6-a-metoksipenisillanaatti Kuivassa, alkoholivapaassa metyleenidikloridissa (20 ml) kuumennettiin varovasti palautusjäähdyttäen 15 min iso-butyyli-vety-3“tienyy-limaJ onaattia (1,21 g) dimetyyliformamidin (2 tippaa) kanssa, johon o J i lisätty liuos, jossa oli t j < <nyy 1 i. k .1 ori dia (0,5 mi) kuivassa ai- i9 65257 koholivapaassa metyleenidikloridissa (10 ml). Palautusjäähdytystä jatkettiin vielä 45 min ja liuos jäähdytettiin ja haihdutettiin tyhjössä. Tolueenia (5 ml) lisättiin ja liuos haihdutettiin jälleen tyhjössä. Lisättiin lisää tolueenia (5 ml) ja haihduttaminen toistettiin. Bentsyyli-6-6-amino-6-a-metyylitiopenisillanaatin p-tolueeni-sulfonaattia (1,57 g) ravistettiin jääkylmän etyyliasetaatin (110 ml) ja 0,5-n natriumbikarbonaattiliuoksen (75 ml) kanssa. Kerrokset erotettiin ja orgaaninen faasi pestiin jääkylmällä vedellä (2 x 75 ml), kuivattiin ja haihdutettiin tyhjössä. Jäännös liuotettiin kuivaan tislattuun metanoliin (27 ml) ja lisättiin kuivaa tislattua dimetyy-liformamidia (12 ml). Liuos jäähdytettiin lämpötilaan -10°C ja sitä käsiteltiin pyridiinillä (0,57 ml). Kun oli jäähdytetty edelleen lämpötilaan -20°C, lisättiin elohopeakloridia (0,813 g) ja seosta sekoitettiin lämpötilassa -10°C 15 min. Lisättiin kuivaa eetteriä (110 ml) ja liuos suodatettiin "Celiten" lävitse. Kun oli laimennettu edelleen kuivalla eetterillä (450 ml) pestiin liuos vedellä (6 x 75 ml), kuivattiin ja haihdutettiin tyhjössä. Saatu bentsyyli-6-6-amino- 6-a-metoksipenisillanaatti liuotettiin kuivaan alkoholivapaaseen mety-leenidikloridiin (40 ml) ja pyridiiniin (0,45 ml) ja tämän jälkeen lisättiin happokloridia kuivassa alkoholivapaassa metyleenidikloridissa (10 ml). Seosta sekoitettiin lämpötilassa 0~5°C 2 tuntia. Lisättiin vettä (20 ml) ja metyleenidikloridi haihdutettiin tyhjössä. Jäännöstä ravistettiin etyyliasetaatin (75 ml) ja veden (55 ml) kanssa ja kerrokset erotettiin. Orgaaninen faasi pestiin 10 %:sella sirtuunahapolla (40 ml), vedellä (40 ml), 1-n natriumbikarbonaatti-liuoksella (40 ml), vedellä (3 x 40 ml), kuivattiin ja haihdutettiin tyhjössä, jolloin jäljelle jäi keltaisenruskea hartsi (1,44 g). Raakatuotetta käsiteltiin kromatograafisesti piidioksidigeelillä käyttäen etyyliasetaatti/60-80° petrolieetteriä (10-15-20 %), jolloin saatiin puhdasta esteriä vaahtona 910 mg saannolla. T.l.c.: Rf = 0,16 (Si02: etyyliasetaatti/60-80° petroli; 1:3). Rf = 0,91 (Si02: kloroformi/asetoni/etikkahappo - 50:50:7). ^maks (CCI4): 3310, 1780, 1753, 1710, 1498, 1325, 1264, 1199, 1173, 1108, 1018 ja 696 cm"1. N.m.r. (CCl/j), δ = o,92 /SH, d, (J = 17Hz), -CHC§f5_T, 1,28 (6H, s, gem-dimetyylit), 1,94 (1H, m, -CH2CHMe2), 3,42 (3H^ s, 6-a-metoksi), 4,01 (2H, d, β = 17Hz7 -OCH2CH< ), 4,40 (1H, s, C-3^protoni), 4,78 (1H, s, g- ^CH <), 5,25 (2H, s, -0CH2Ph), 5,56 (1H, s, C-5 protoni), 7,29 ja 7,42 (7H, m, -0CH2Ph, tienyyli-4-protoni, -C0NH-), 8,06 (2H, d, tienyyli-?- ja 5~protonit).

65257 20 7a ) 6-B-/D,L-2-(iso-butyylioksikarbonyyli)tien-3-yyliasetamido7- 6-a-metoksipenisilIaanihappo

Bentsyyli-6-B-/I7,L-2- ( iso-butyylioksikarbonyyli )-tien~3-yyliaset-amido/-6-a-metoksipenisillanaattia (0,9 g) tislatussa etanolissa (48 ml) käsiteltiin vedellä (11,5 ml) ja juuri valmistetulla 1-n natriumbikarbonaatti liuoksella (1,6 ml). Lisättiin 10 #:sta hiilellä olevaa palladiumia (0,29 g) ja seosta hydrattiin 1 tunti. Seos suodatettiin "Celiten" lävitse ja jäännös pestiin 50 %:sella etanolin vesiliuoksella (10 ml). Sitten lisättiin lisää katalyyttia (0,29 g) ja vedyllä hajottamista jatkettiin siksi, kunnes bentsyyliesterin poistuminen oli täydellinen, mikä voitiin todeta T.1.c.-analyysin perusteella piidioksidigeelissä kloroformi/asetoni/etikkahapolla 50:50:7. Seos suodatettiin "Celiten" lävitse, haihdutettiin tyhjössä etanolin poistamiseksi, pestiin eetterillä (20 ml) ja jäädytyskuivat-tiin, jolloin tuote saatiin natriumsuolana, 0,5 g. T.l.c.: Rf = 0,68 (Si02: kloroformi/asetoni/etikkahappo 50:50: 7 ) v kg (KBr): 1757, 1606, I505, 1335, 1102, 1012 ja 775 cm-1. N.m.r. (Do0) δ = 0,91 /FH, d, (J = 17Hz) -CH‘C^3_7 1,40 (6H, m, gem-dimetyylit), 1,92 (1H, m, -CH2CHMe2), 3,45“T^H, d, -OCH3), 4,07 /ZH, d, (J = 17Hz), -OCHpCH <7, 4,33 (1H, d, C-3 protoni), 5,20 ( <1H, s, pienenee nopeasti, ), 5,63 (1H, d, C-5 protoni) 7,32 ja 7,58 (3H, m, tienyyliprotonit).

Esimerkki 3 (a) Bentsyyli-6-B-/n,L-2-(indan-5-yylioksikarbonyyli)-tien-3- yyliasetamido7-6-a-metoksipenisillanaatti Samalla tavoin kuin esimerkissä 2 (a) asyloitaessa bentsyyli-6-β-amino-6-a-metoksipenisillanaatti happokloridin avulla, joka oli saatu indan-5-yyli-vety-3-tienyylimalonaatista, saatiin otsikossa mainittu yhdiste, joka puhdistettiin kromatograafisesti piidioksidi-geelillä 23 £:n saannolla. T.l.c.: Rf = 0,15 (Si02: etyyliasetaatti/-60-80° petrolieetteri-1: 3). Rf = 0,82 (SiC^: kloroformi/asetoni/-etikkahappo 50:50:7). vmaks (CC14): 3310, 1779, 1750, 1702, 1483, 1216, 1262, 1230, 1202, ll80, 1157, 1139, 1011 ja 699 cm'1. N.m.r.

(CCljj), δ = 1,23 (6H, s, gem-dimetyylit), 2,11 (2H, m, indaani-2-metyleeni), 2,90 /7H, t, (J = 8Hz), indaani-1- ja 3-metyleenit7, 5,42 (3H, d, 6-metoksi) 4,40 (1H, s, C-3 protoni), 5,06 (1H, d, n- -TrCH<) 5,18 (2H, s, “OOH2Ph), 5,60 (1H, s, C-5 protoni), 7,39 21 65257 (5H, s, -0CH2Ph), 6,7-7,6 ja 8,14 (7H, m, tienyyli- ja indaani aromaattiset protonit, -CONH-), (b ) 6-8-</n,L-2-(indan-5-yylioksikarbonyyli )-tien-3-yyliasetamido7- 6-a-metoksipenisillaanihappo

Bentsyyli-6-8L-2-(indan-5-yylioksikarbonyyli)-tien-3~yyliaset-amino7-6-a-metoksipenisillanaattia hydrattiin esimerkissä 2(b) kuvatulla tavalla, jolloin saatiin otsikossa esitetty yhdiste natrium-suolana. T.l.c.: Rf = 0,62 (SiC^: kloroformi/asetoni/etikkahappo -50:50:7).

Esimerkki 4 (a) Bentsyyli-6-a-metoksi-6-g-/D,L-2-(4-metyyli-fenoksikarbonyyli)-tien-3-yyliasetamido7penisillanaatti

Samalla tavoin kuin esimerkissä 2(a) on esitetty saatiin asyloitaes-sa bentsyyli-6-B-amino-6-a-metoksipenisillanaattia happokloridilla, joka oli saatu 4-metyylifenyyli-vety-tien-3-yylimalonaatista, otsikossa mainittu yhdiste, joka puhdistettiin käsittelemällä kromatograa-fisesti piidioksidigeelillä, 67,4 %:n saannolla. T.l.c.: Rf = 0,11 (SiC^: 6Ο-8Ο0 petrolieetteri/etyyliasetaatti-3:1) Rf = 0,88 (SiC^: kloroformi/asetoni/etikkahappo - 50:50:7). v k3 (CClj^); 1778, 1752, 1701, 1501, 1315, 1194, 1162, 1019 ja 701 cm-5-. N.m.r. (CCl*,), δ = 1,24 (6H, s, gem-dimetyylit), 2,34 (3H, s, tolyyli-CH^) , 3,42 (3H, d, -OCH3), (1H» s> C"3 Protoni), 5,02 (1H, s, n—w-CHC), 5,21 (2H, s, -OCHgPh), 5,58 (1H, s., C-5· protoni), 7,0-8,1 (13H, m, fenyyli- ja tienyyli-aromaattiset, '-CONH-), (b) 6-a-metoksi-6-B-/TT,L-2-(4-metyylifenoksikarbonyyli)-tien-3_ yyliasetamido7penisillaanihappo — i~

Bentsyyli-6-a-metoksi-6-3->/D',L-2-( 4-metyylifenoksikarbonyyli )-tien-3~yyliasetamido7penisillanaattia (1,2 g) liuotettiin tislattuun etanoliin (60 ml) ja sitä käsiteltiin vedellä (6 ml). Sitten lisättiin hiilellä olevaa palladiumia 10 % (0,40 g) ja seosta hydrattiin 1 tunti. Seos suodatettiin "Celiten" lävitse ja jäännös pestiin tislatulla etanolilla (5 ml). Sitten lisättiin lisää katalyyttia (0,40 /') ja hydrausba jatkettiin siksi, kunnes bentsyyliesterin poistuminen oli täydellinen kuten T.1.c.-analyysi 11a piioksidigeeliä käyttäen voitiin todeta kloroformi/asetoni/etikkahapossa (50:50:7). Sitten lisättiin vettä (25 ml) ja etanoli poistettiin tyhjössä. Seos tehtiin juuri alkaliseksi natriumbikarbonaattiliuoksella, pestiin eetteril- “ 65257 I ...

! lä ja hapetettiin 5-n kloorivetyhapolla. Uutettaessa eetterillä ; (2 x 25 ml) 3 pestäessä uutteet vedellä (2 x 10 rr.l), kuivattaessa j'a haihdutettaessa tyhjössä saatiin otsikossa mainittu yhdiste vapaana happona. T.l.c.: Rf = 0,65 (SiO^: kloroformi/asetoni/etikka-happo - 50:50:7). N.n.r. (CDCl^) δ = 1,1*0 (6H, m, gem-dimetyylit), 2,38 (3H, s, tolyyli -CK^), 3,5? (3H, s, -OCH^, H,51 (1H, s, C-3 protoni), 5,17 (m, s, "__ CU 0, 5,71 (1H, s, C-5 protoni), 7,0-7,75 (5H, m, tolyyliaromaattiset aineet ja tienyyli-ä-protoni), 8,18 (3H, m, tienyyli 2- ja 5~protonit, -CONH-). Tämä materiaali liuotettiin kuivaan eetteriin ja sitä käsiteltiin 1 ekvivalentilla natrium-2-etyyliheksoaattia (noin 2-m liuos l*-metyylipentan-2-onis-sa), joka oli laimennettu kuivalla eetterillä. Kiinteä aine suodatettiin, pestiin eetterillä ja kuivattiin, jolloin saatiin haluttu yhdiste natriumsuolana 16 %:n saannolla. vmajcs (KBr): 3^10 (leveä), 2962, 1758, 1681*, 1602, 1501*, 11*02, 1335, 1196, 1167, 1130, 81*8 ja 779 cm-1.

Esimerkki 5 (&) Bentsyyli-6,q-metoksi-6,g-(D,L-2-fenoksikarbonyyli-2-tien- 2 *-yyliasetamido)penisillanaatti Eenyylivetytien-2-yylimalonaattia liuotettiin dikloorimetaaniin (75 ml), johon oli lisätty 3 tippaa dimetyyliformamidia. Tähän liuokseen lisättiin oksalyylikloridia (0,6 ml) ja sekoitettiin huoneen lämpötilassa 1 tunti. Liuos haihdutettiin tyhjössä, jolloin saatiin happokloridi, jota käytettiin bentsyyli-6,g-amino-6,a-metoksipenisillanaatin asyloimiseen esimerkissä 2(a) kuvatulla tavalla, jolloin saatiin puhdistettua materiaalia 1*1* %:n saannolla, t.l.c. (SiO^; etyyliasetaatti/kevyt petroli kp. 6Ο-8Ο0; 1:2) Rf = 0,26; N.N.R. (CDC1 ^), δ = 1,29 (6H, s, gem-dimetyylit), 3,1*9 (3H, d, -OCH3), H ,50 (1H, s, 3-H), 3,25 (2H, s, Ph-CH20-), 5,3** (1H, s, ^CHCONH-), 5,70 (1H, s, 5-H), 7,50 (13H, m, fenyyli- ja tienyyli-aromaattiset), 8,11 (1H, d, -CONH-) ; vrnaiiS (nujol monijuova) 3300, 1775, 1650, 1700, 1200, 770 cm"1.

(h) 6ta-metoksi-G,g-(u,L-2-fenoksikarbonyyli-2-tien-2 '-yyliasetamido ) peni:; il lääni happo 23 6525 7

Bentsyyli-6 , a-metoksi-6,β-(D,L-2-fenoksikarbonyyli-2-tien-2’-yyli-asetamido)penisillanaattia hydrattiin käyttäen esimerkissä 4(b) kuvattua menetelmää, jolloin saatiin vapaata happoa 67 %:n saannolla N.M.R. (CDCl^), 6 = 1,40 (6H, d, gem-dimetyylit), 3,42 (3H, s, -OCH^), 4,40 (1H, s, 3-H), 5,15 (1H, s, ^CHCONK-), 5,57 (1H, s, 5~H) , 7,24 (9H, m, tienyyli- ja fenyyli-aromaattiset, -C02H), 7,67 (1H, d, -C0NH-). Happo muutettiin natriumsuolaksi esimerkissä 4(b) kuvatulla tavalla 77,9 %'.n saannolla; t.l.c. (Si02; kloroformi/asetoni/etikka-happo; 50:50:7) Rf = 0,60.

Esimerkki 6 (a) ttentsyyli-6,a-metoksi-6-3-£D,L-2-(ftalid“3~yylioksikarbonyyli )-tien-3’-yyliasetamidoZ-penisillanaatti

Ftalid-3-yyli-vety-tien-3-yylimalonaattia (1,59 g) sekoitettiin huoneen lämpötilassa kuivassa metyleenidikloridissa (35 ml), ja lisättiin oksalyylikloridia (2,1 ml) ja dimetyyliformamidia (1 tippa). 1 1/2 tunnin kuluttua liuos haihdutettiin tyhjössä ja käytettiin bentsyyli- 6-3-amino-6-a-metoksipenisillanaatin asyloimiseen esimerkissä 2(a) kuvatulla tavalla.

Tuote saatiin kromatograafisen käsittelyn jälkeen 22 55:n saannolla. vmaks (CH2C12); 1782, 1750, 1708, 1218, 1133 cm"1; N.M.R. (CDClj), 6 = 1,37 (6H, gem-dimetyylit), 3,44 (3H, m, -OCH^), 4,28 (1H, s, C-3 protoni), 5,00 (1H, s, C H <) , 5,30 (2H, s, -OCHpPh), 5,67 (1H, s, C-5 protoni), 7,0-8,2 (14h, m, -CONH-, H CH< ,

0 H

-0CH2Ph; t.l.c. Rf = 0,12 (Si02; etyyliasetaatti/60-80° petroli - 1:2).

(b) Hydrattaessa esimerkissä 4(b) kuvatulla tavalla saadaan 6,a-metoksi-6,3-/D,L-2-(ftalid-3'-yylioksikarbonyyli)-2-tien-3'-yyli-asetamidoTpenisillaanihappo.

Esimerkki 7 (a) Bentsyyli-6, β-/Ρ,1»-2- (2-sek-butyylifenoksikarbonyy li )tien-3'-yyliasetamido7-6,a-metoksi-penisillanaatti Valmistus suoritettiin esimerkissä 2(a) kuvatulla tavalla, jolloin 2 4 65257 saatiin haluttu tuote 29,4 %:n saannolla kromatograafisen käsittelyn jälkeen, N.M.R. (CDClj), 6 = 1,1 (14H, m, gem dimetyylit, -CHCH_2CH3), 2,65 (1H, m, -CHCH2-), 4,55 (1H, s, C3 protoni), CH^ 4h3 5,15 (1H, s, - CHCONH-), 5,29 (2H, s, -CH2Ph), 5,73 (1H, s, C5 protoni), 6,9 - 8,2 (13H, m, aromaattiset ja tienyyliprotonit, -CONH-).

(t>) 6 ,β-/ρ ,L-2- (2-sek-butyy lifenoksikarbonyyli )tien-3 ’ -yyliaset- amido7~6,α-metoksi-penisillaanihappo Bentsyyli-6,β-/U,L-2- (2-sek-butyylifenoksikarbonyyli)tien-3-yyli-asetamido-6,α-metoksi-penisillanaattia nydrattiin esimerkissä 4(b) kuvatulla tavalla, jolloin saatiin otsikossa mainittu yhdiste, saanto 46 %. Tämä muutettiin natriumsuolaksi käyttäen natrium-2-atyyliheksoaattia, saanto 19 %> t.l.c. Rf = 0,65 (Si02; kloroformi/-asetoni/etikkahappo; 50:50:7). vmaks (KBr) 3410, 1965, 1755, 1600, 1175, 758 cm'1·

Esimerkki 8

Bentsyyli-6,B-/D,L-2-(2-etyylifenoksikarbonyyli)tien-31-yyli-asetamido7-6,α-metoksipenisillanaatti

Yhdiste valmistettiin esimerkissä 2(a) kuvatulla tavalla, jolloin saatiin 23,5 %:n saannolla otsikossa esitetty yhdiste kromatograa-fisen käsittelyn jälkeen, t.l.c. Rf = 0,29 (Si02; etyyliasetaatti/ 60-80° petroli; 1:2). (CHCI3); 2950, 1778, 1741, 1490, 1320, II65 cm 4, N.M.R. (CDCl^), δ = 1,25 (9H, m, gem-dimetyylit, -CH2CH3), 2,5 (2H, q, -CH2CH3); 3,51 (3H, s, -0CH3), 4,52 (1H, s, C3 protoni), 5,18 (1H, s, ^CHCONH-), 5,28 (2H, s, -CH2Ph), 5,75 (1H, s, C-5 protoni), 7,4 (12H, m, tienyyli- ja aromaattiset protonit), 8,07 (1H, d, -C0NH-).

Hydrattaessa esimerkissä 4(b) kuvatulla tavalla saatiin 6-β-/Π,Ιι-2-(2-etyylifenoksikarbonyyli)tien-3'-yyliasetamido7-6-a-metoksipeni-siliaanihappoa.

Esimerkki 9 ( % ) Bent syy li -6 ,α-me t oksi-6,β-/Ρ ,L-2- ( 4-isopropyylifenoksi-karbonyyli)tien-3'-yyliasetamido7-penisillanaatti Yhdiste valmistettiin esimerkissä 2(a) kuvatulla tavalla, jolloin saatiin 47,2 %:n saaliilla otsikossa mainittu yhdiste kromatograa-fisen käsittelyn jälkeen, t.l.c. Rf = 0,41 (Si02; etyyliasetaatti/- 25 6 5 2 5 7 60-80° petrolieetteri; 1:2); vmaks (CHClj); 2950, 1780, 1740, 1700, 1500, ll40 cm N.M.R. (CHCl^), 6 = 1,22 (12H, m, gem-dimetyylit, -CH(CH3)2), 2,95 (1H, m, -CHtCH^), 3,5 (3H, s, -OCHj), 4,51 (IK, s, C-3 protoni), 5,11 (1H, s, CHCONH-), 5,30 (2H, s, CH2Ph), 5,70 (1H, s, C-5 protoni), 7,5 (12H, m, tienyyli- ja aromaattiset protonit, -CONH-).

(b) 6,a-metoksi-6,B-/D,L-2-(4-isopropyylifenoksikarbonyyli)- tien-3'-yyliasetamido7penisillaanihappo

Bentsyyli-6,a-metoksi-6,g-/D,L-2-(4-isopropyylifenoksikarbonyyli )-tien-3’-yyliasetamido7penisillanaattia hydrattiin esimerkissä 4(b) kuvatulla menetelmällä, jolloin saatiin otsikossa mainittu yhdiste. Tämä muutettiin natriumsuolakseen käyttäen natrium-2-etyyliheksoaat-tia 4-metyylipentan-2-onissa. Saanto 37,2 %\ t.l.c. Rf = 0,66 (Si02; kloroformi/asetoni/etikkahappo; 50:50:7) v kg (KBr); 3400, 2960, 1765, 1600, 1200, 847 cm"1. N.M.R. (CDClj), 6 = 1,4 (12H, m, gem-dimetyylit, -CH(CH3)2), 3,0 (1H, m, -CH(CH3)2), 3,54 (3H, s, -OCHj), 4,5 (1H, s, c-3 protoni), 5,15 (1H, s,^ CHCONH-), 5,71 (1H, s, C-5 protoni), 7,4 (7H, m, tienyyli- ja aromaattiset protonit), 8,00 (1H, s, -CONH).

Esimerkki 10 (a) Bentsyy1i-6,q-metoksi-6,β-(D,L-2-pivaloyylioksimetoksi- karbonyyli-2-tien-3 *-yyli-asetamido)penisillanaatti Bentsyy1i-6,α-metoksi-6,8(D,L-2-karboksi-2-tien-3'-yyli-asetamido)-panisillanaatin natriumsuolaa (2,63 g; 5 mmol) ja pivaloyylioksi-metyylibromidia (1,17 g, 6 mmol) DMF:ssä (25 ml) sekoitettiin huoneenlämpötilassa 2,5 tuntia ja kaadettiin tämän jälkeen etyyliasetaattiin (60 ml), pestiin vedellä (3 x 30 ml) ja kyllästettiin suolaliuoksella (30 ml), kuivattiin (MgSO^) ja haihdutettiin, jolloin saatiin ruskea kumimainen tuote. Tätä tuotetta käsiteltiin kromatografisesta silikageelillä käyttäen eluointlaineena etyyli-asetaatti/60-80°:ista petrolieetteriä (20-25 %), jolloin saatiin otsikossa mainittu yhdiste. 1,04 g, 33,7 %’» t.l.c. (Si02; etyyliasetaatti /60-80°: ista petrolieetteriä; 3-7) Rf = 0,23; <5 = (CDC13) 1,17 (9H, s, -C(CH3)3), 1,2-1,5 (6H, m, 2 x 2-CHj), 3,42 ja 3,47 (3H, 2 X S, -OCH3), 4,47 (1H, s, 3H), 4,90 (1Η, s,r:CHCO-), 5,23 (2H, s, -CH2Ph), 5,62 (1H, s, 5H), 5,87 (2H, s, -0CH20-), 7,0-7,5 (8H, m, Ph- ja tienyyliprotonit), 7,92 ja 8,03 (1K, 2 x s, -C0NH-).

26 65257 (b) 6,g-metoksi-6, g-(D,L-2-pivaloyylioksimetoksikarbonyyli-2-tien-5*-yyli-asetamido)penisillaanihappo Liuosta, jossa oli bentsyyliesteriä (1,0¾ g), etanolia (25 ml) ja vettä (0,5 ml), hydrattiin 10 %:sen Pd/C:n (1,0 g) läsnäollessa 3 tuntia. Katalyytti suodatettiin pois ja liuokseen lisättiin uutta katalyyttiä (1,0 g) ja hydrausta jatkettiin yön yli. Katalyytti suodatettiin pois, suodos haihdutettiin kuiviin, jäännös liuotettiin eetteriin (100 ml), pestiin vedellä (2 x 50 ml), kuivattiin ja haihdutettiin tyhjössä, jolloin saatiin otsikossa mainittu yhdiste värittömänä vaahtona (0,53 g); t.l.c. (SiO^; kloroformi/ asetoni/etikkahappo; 7:7:1) Rf = 0,53; δ (CDCl-^) l, 05 (9H, s, -C(CH3)3), 1,3-1,6 (6H, m, 2 x 2-CHj), 3,48 ja 3,52 (3H, 2 x s, -OCHj), li,51 (1H, s, 3H), H,95 (1H, s,^CHC0-), 5,67 (1H, s, 5H), 5,93 (2H, s, 0CH20-), 7,2-7,6 (3H, m, tienyyli-protonit), 7,97 ja 8,08 (1H, 2 x s, -C0NH-), 9,17 (1H, bs, -COgH). Tämä vapaa happo liuotettiin eetteriin (25 ml) ja sitä käsiteltiin 2N-natrium-2-etyyliheksoaatilla 4-metyylipentan-2-onissa (0,5 ml) ja saostunut natriumsuola otettiin talteen, pestiin eetterillä ja kuivattiin tyhjössä, 0,1*5 g, 48,6 %.

Esimerkki 11 (a) Bentsyyli-6,q-metoksi-6,g-(D,L-2-metoksimetoksikarbonyyli- 2-tien-3'-yyli-asetamido)penisillanaatti

Bentsyyli-6,g-metoksi-6,g-(D,L-2-karboksi-2-tien-3’-yyliaset-amido)penisillanaatin natriumsuola (2,63 g; 5 mmol) ja klooridi-metyylieetteri (0,1*6 ml, 6 mmol) saatettiin reagoimaan keskenään esimerkissä 10(a) kuvatulla tavalla, jolloin saatiin otsikossa mainittu yhdiste, 1,70 g, 6l,0 % kromatografisen käsittelyn jälkeen; t.l.c. (SiO^; etyyliasetaatti/60-80°/petrolieetteri; 3:7)

Rf = 0,14; δ (CDClj) 1,27 (6H, s, 2 x 2-CHj), 3,42 (6H, s, 2 x -0CH3), 4,47 (1H, s, 3H), 4,87 (1H, s, j^CHCO-), 5,23 (2H, s, -CH2Ph), 5,35 (2H, s, -0CH20-), 5,62 (1H, s, 5H), 7,1-7,5 (8h, m, Ph- ja tienyyliprotonit), 7,83 ja 7,97 (1H, 2 x s, -C0NH-).

(b) 6,q-metoksi-6,g-(D,L-2-metoksimetoksikarbonyyli-2-tien-3 T-yyli-asetamido)penisillaanihappo

Rentsyyliesteri (1,70 g) hydrattiin 10 #:sen Pd/C:n läsnäollessa esimerkissä 10(b) kuvatulla tavalla, jolloin saatiin otsikossa mainittua yhdistettä värittömänä vaahtona (0,8? g); t.l.c. (Si02» k! oroformi/asetoni/et :i kkahapno; 7:7:1) Rf = 0,44; δ (CDCl^) 65257 27 1,3-1,6 (6H, m, 2 x 2-CH3), 3,47 (6H, s, 2 x -OCH ), 4,48 (1H, s, 3H), A ,93 (1H, s.^CHCO-), 5,4ο (2H, s, -0CH20) , 5,65 (1H, s, 5H) , 7,2-7,6 (3H, m, tienyyliprotonit), 7,95 ja 8,12 (1H, 2 x s, -CONH-), 8,53 (1H, bs, -C02H). Vapaa happo muutettiin natriumsuolaksi esimerkissä 10(b) kuvatulla tavalla, 0,6l g, 40,1 %.

65257 28

Esimerkki 12

Yhdisteen AB 26261 valmistus

O O

K II

CH-C-NH SMe AgNO _ CH-C-NH OMe ^/co2 ^f~T"S\/ pyridiinS co2 —T^s\/ o ö C02CH 2\_J C02CH2Ph 3entsyyli-6a-tiometyyli-63-fenoksikarbonyyli-2-tien-3'-yyliaset-amidopenisillanaattia (7,5 g, 0,0125 m) liuotettiin isopronyyli-asetaattiin (30 cut) ja met ano li in (70 cm'') ja liuos lämmitettiin 30°C:seen. Hopeanitraattia (2,2 g, 5 %:nen ylimäärä) liuotettiin pyridiiniin (10 cm"1), minkä jälkeen tämä liuos lisättiin reaktio-seokseen, jota sekoitettiin 20 minuuttia lämpötilassa 30°C, jolloin muodostui keltainen saostuma. Reaktioseos suodatettiin "celiten" lävitse ja suodatinkerros pestiin huolellisesti iso-propyyliasetaatilla. Orgaaninen suodos pestiin tämän jälkeen vedellä (80 cm^; h o cm''), natriumsulfidilla (1 % 50 cm^; 0,2 % 3 x *40 cm^), vedellä (3 x *40 cm^), sitten suolaliuoksella (*40 cm^), kuivattiin tämän jälkeen MgSO^llä ja säilytettiin yön yli lämpötilassa *J°C:ssa.

Kuivaava aine suodatettiin pois ja orgaaninen liuos haihdutettiin tyhjössä, jolloin saatiin keltainen vaahto.

Saanto = *1,6 g, 63,*4 %.

0

II

CH-C-NH nMp _.CH-C-NHA OMe Y» 5. YrV"> s-, pYY 6 6

Yhdiste AB 26261 liuotettiin etanoliin (100 cm^). Tämä liuos lisättiin vedellä (10 cm^) kostutettuun 10 $:seen Pd/C-kata-lyyttiin (3,6 g) ja hydmttiin normaalipaineessa jatkuvasti sako i tiu' ·η 2 tuntia. T.l.e. käyttäen kloroformi/asetoni/ oi i kkahanpoa rajoitti, että rv»,aktio tässä vaiheessa oli epätäydellinen. Hydrattu seos suodatettiin ja suodos lisättiin uuteen vedellä (10 cm ) kostutettuun 10 %:sen Pd/C-katalyyttiin 65257 29 (3,6 g). Tätä seosta hydrattiin normaalipaineessa jatkuvasti sekoittaen vielä yksi tunti. T.l.c. käyttäen kloroformi/asetoni/ etikkahappoa (7:7:1) osoitti, että reaktio tässä vaiheessa oli täydellinen. Katalyytti suodatettiin pois ja suodos haihdutettiin tyhjössä, jolloin saatiin tahmea vihreänvalkoinen kiinteä aine, saanto = 4,7 g.

Kiinteä aine liuotettiin natriumbikarbonaattiin (0,5 : 25 cm^) ja eetteriin (5 cm^). Muodostuneet kerrokset erotettiin ja vesikerros pestiin eetterillä (2x5 cm ). Vesikerros peitettiin metyleeni-kloridilla (10 cm ) ja hapotettiin tämän jälkeen pH-arvoon 2 hydro-kloridihapolla (2N). Muodostuneet kerrokset erotettiin ja vesikerros uutettiin uudelleen metyleenikloridilla (2 x 10 cn^). Orgaaniset kerrokset yhdistettiin ja pestiin vedellä (2 x 10 cm^), sitten suolaliuoksella (10 cm ), kuivattiin tämän jälkeen MgSO^rllä, suodatettiin ja haihdutettiin, jolloin saatiin valkoinen vaahto, saanto = 1,5 g.

Tämä tuote liuotettiin vedettömään eetteriin (7 cm^) ja liuosta sekoitettiin huoneenlämpötilassa. Valkoinen suola saostui ja se suodatettiin pois ja kuivattiin suurtyhjössä.

Claims (3)

1. 65257 30 Patenttivaatimus Menetelmä 6-metoksi-a-karboksipenisilliinien estereiden valmistamiseksi, joilla on kaava (I): 0CH3 CH =1 /S \| R.CH.CO.NH---f ^— CH, (I) I j. 3 COpR"1 - N-k 2

   0 C02R .
2. . . 2 jossa kaavassa R on 2- tai 3-tienyyli ja R on vety tai farmaseuttisesti sopiva suolanmuodostusioni, ja R^ on alerr.pialkyyli, fenyyli, fenyyli, joka on substitutoitu monoalempialkyy-lillä, ftalidyyli, indanyyli. alkanoyylioksialempialkyyli tai alempialkoksialempialkyyli, tunnett'u siitä, että se käsittää: a) kaavan (III) mukaisen yhdisteen OCH ; 9 CH, r2n —-r N—CH (in) J_N __ 0^ \ x C02R jossa kaavassa Rx on vety tai karboksyylisuojaryhmä, tai sen N-silyyli- tai N-fosforyloidun johdannaisen saattamisen reagoimaan kaavan (IV) mukaisen hapon N-asyloimisjohdannaisen kanssa R - CH.C02H CO^R1 (IV) jossa kaavassa R ja R^ on määritelty edellä kaavan (I) yhteydessä, ja mahdollisten silyyli- tai fosforyyliryhmien poistamisen hydro-lyysin tai alkoholyysin avulla; tai b) kaavan (XI) mukaisen yhdisteen 0CH3 CH C g i R - CH - CO.NH --/ ^-CH, | ^ (XI) CO H · ^ J-N -\ o · co2rx 31 652 5 7 jossa kaavassa R ja Rx merkitsevät samaa kuin edellä, tai sen reaktiokykyisen esteröityvän johdannaisen, esteröimisen kaavan R OH mukaisen hapon esteröimisjohdannaisen kanssa; tai c) kaavan XIII mukaisen yhdisteen f3 s CHj R - CH.CO.NH--Z N-CH, (XIII) ' 1
3. 3 COnRx ^-N -V _ Dx

   0 C02R - 1.x. t jossa R, R ja R merkitsevät samaa kuin edellä ja R^ on alempi alkyyli tai bentsyyli, saattamisen reagoimaan metanolin kanssa metalli-ionin läsnäollessa; ja vaiheen a, b tai c jälkeen yhden tai useamman seuraavan vaiheen suorittamisen mikäli tarpeellista: (1) mahdollisten karboksyylisuojaryhmien poistaminen; (2) tuotteen muuttaminen sen suolaksi. >·#·. 3? 6 5 2 5 7 Förfarande för framställning av β-metoxi-a-karboxipenicillin estrar raed formeIn (I): OCH3 CH3 I / ' \ R.CH.CO.NH--f x-CH I 3 (I) CO?R ^ N ^-COpR2 2 där R är 2- eller 3-tienyl och R är väte eller en farmaceutiskt lämplig saltbildande jon, och R1 är lägrealkyl, fenyl, fenyl substituerad med monolägrealkyl, ftalidyl, indanyl, alkanoyloxilagre-alkyl eller lägrealkoxilägrealkyl, k ännetecknat av att den innefattar: a) omsättning av en förening med formeln (III), eller ett N-silyl- eller N-fosforyliserat derivat därav OCH3 ch3 HgN j ^SS-CH3 <m> 0J-" kC02„x där Rx är väte eller en karboxyl-skyddsgrupp, med ett N-acylerings-derivat av en syra med formeln (IV) R - CH.C0oH ,T,.v i \ <IV) C02R där R och R1 betecknar detsamma som i formeln (I),.och avlägsnande av möjligen förekommande silyl- eller fosforylgrupper genom hydrolys eller alkoholys; eller b) förestring av en förening med formeln (XI) OCH, CH3 f 3 /s\ R - CH - CO. NM- f CH3 | (Xi) C°;'" )-«-k x

   0 COpR i.