FI114799B - Uusi 7-substituoitu oksasteroidiyhdiste - Google Patents

Description

114799

Uusi 7-substituoitu oksasteroidiyhdiste Tekninen alue Tämän keksinnön kohteena on menetelmä terapeutti-5 sesti käyttökelpoisten 7-substituoitujen D-homo-17-oksa-steroidiyhdisteiden valmistamiseksi, joilla on kaava (I) R4 T (I) 10 jossa R1 on -S-R2 tai bentsyyliryhmä, jossa R2 on vetyatomi, alkyyliryhmä, jossa on enintään 6 hiiliatomia, bentsyyliryhmä, fenyyliryhmä, joka on mahdollisesti substituoitu aminoryhmällä/-ryhmillä, al-15 kanoyyliryhmä, jossa on enintään 6 hiiliatomia, bentsoyy-liryhmä tai N,N-dimetyylikarbamoyyliryhmä, • R4 on vetyatomi tai -S-R5, : jossa R5 on alkyyliryhmä, jossa on enintään 6 hii- j : liatomia, bentsyyliryhmä, fenyyliryhmä, joka on mahdolli- ·,: · 20 sesti substituoitu aminoryhmällä/-ryhmillä, alkanoyyliryh- • mä, jossa on enintään 6 hiiliatomia, bentsoyyliryhmä tai ,· ·, N, N-dimetyylikarbamoyyliryhmä, X on C=0 tai CH2, ja katkoviivat steroidirungon 1- ja 2-asemien ja 6-25 ja 7-asemien välillä tarkoittavat, että niissä voi olla * 1 'y' kaksoissidokset, sillä edellytyksellä, että : (a) kun R1 on -S-R2, niin 6- ja 7-asemien välinen sidos on yksinkertainen sidos, ja (b) kun R4 on -S-R5, niin 1- ja 2-asemien välinen 30 sidos on yksinkertainen sidos, ja jossa substituentit R1 ja R4 ovat toisistaan riippumatta joko a- tai /3-asemassa.

2 114799

Tekniikan tausta

Estrogeenien biosynteesi voidaan suorittaa saattamalla androgeenit hapettumaan ja poistamalla muurahaishappo aromataasi-nimisellä entsyymillä ja aromatisoimalla. Siten, 5 jos aromataasin vaikutus voidaan tehokkaasti estää, on odotettavissa, että tätä voidaan käyttää estrogeenien aiheuttamien sairauksien käsittelemiseen, ja näiden odotusten mukaisesti useiden aromataasi-inhibiittorien onkin jo havaittu olevan tehokkaita rintasyövän ja eturauhasen liikakasvun 10 käsittelyssä.

Aromataasi-inhibiittorit ovat myös tehokkaita muiden estrogeenin aiheuttamien sairauksien käsittelemisessä, esimerkiksi kohtusyövän, munasarjasyövän, endometrioosin, miehen naisnisäisyyden siittiöiden harvalukuisuudesta joh-15 tuvan miehen hedelmättömyyden jne. käsittelemiseen.

Tunnettuja steroidien aromataasi-inhibiittoreina ovat esimerkiksi testolaktoni (Merck Index, 10. painos, 8999), 4-hydroksi-4-androsteeni-3,17-dioni ja sen esterit (US-patenttijulkaisu 4 235 893), 1-alkyyliandrosta-l,4-di- 20 eeni-3,17-dioni-johdannaiset (JP-julkaisu 13 796/1985), 4- , substituoidut androsteeni-3,17-dioni-johdannaiset (JP-jul- . kaisu 189 295/1986), 6-metyleeniandrosta-l,4-dieeni-3,17- : ·. dioni-johdannaiset (julkaisu JP 12 797/1987), 16-oksa- « · ! androsta-l,4-dieeni-3,17-dioni (Journal of Medicinal Che- , 25 mistry, 3_2, 651 (1989) ) , 7a-substituoidut tioandrosteeni- \ ,* dionijohdannaiset (Journal of Medicinal Chemistry, 21, 1007 ’ j ne .

Kuitenkin kun näitä steroidien aromataasi-inhibiit-toreita annostetaan elävään ruumiiseen, ne ovat taipuvaisia :,t 30 menettämään aktiivisuutensa metaboloitumalla, joten ne ei- vät vielä soveltuneet tyydyttävästi kliiniseen käyttöön.

, >·>, Esillä olevat keksijät ovat havainneet, että sar- '!* jalla steroidiyhdisteitä, joissa steroidirungon D-renkaa- ; ’.· seen sisältyy heteroatomi ja 7-asema on substituoitu eri- "· 35 tyisellä substituentilla, on erittäin hyvä aromataasia eh- • 1 14799 3 käisevä aktiivisuus, ja että ne lisäksi metabolismin vaikutuksesta inaktivoituvat hitaasti.

Keksinnön kuvaus Tässä kuvauksessa termi "alempi" tarkoittaa, että 5 hiiliatomien lukumäärä ryhmissä tai yhdisteissä, joihin tämä termi viittaa, on 6 tai vähemmän, edullisesti 4 tai vähemmän .

Edellä olevassa kaavassa (I) "alempi alkyyliryhmä" käsittää esimerkiksi metyyli-, etyyli-, n-propyyli-, iso-10 propyyli-, n-butyyli-, sek-butyyli-, tert-butyyli-, n-pen-tyyli-, n-heksyyliryhmät jne., "alempi alkoksiryhmä" käsittää esimerkiksi metoksi-, etoksi-, n-propoksi, n-butoksi-ryhmät jne., alempi alkenyyliryhmä" käsittää esimerkiksi vinyyli- ja allyyliryhmät jne., "alempi alkoksikarbonyyli-15 ryhmä" käsittää esimerkiksi metoksikarbonyyli-, etoksikar- bonyyli-, isopropoksikarbonyyliryhmät jne., ja "aralkyyli-ryhmä" käsittää esimerkiksi bentsyyli-, 4-metoksibentsyy-li-, fenetyyliryhmät jne.

"Alempi alkyyliryhmä, joka on mahdollisesti substi-20 tuoitu hydroksyyli-, amino tai alempi alkoksikarbonyyliryh- • mällä" käsittää esimerkiksi edellä mainittujen substituoi- . \ mattomien alempi aikyyliryhmien lisäksi 2-hydroksietyyli-, ; ·, 3-hydroksipropyyli-, 2-aminoetyyli-, 3-aminopropyyli-, me- • · i toksikarbonyylimetyyli-, metoksikarbonyylietyyli-, etoksi- . . 25 karbonyylimetyyli-, etoksikarbonyylietyyliryhmät jne., ja *; * "aryyliryhmä, joka on mahdollisesti substituoitu halo- *· * geeniatom(e)illa tai amino-, di(alempi alkyyli)amino-, alempi alkoksi- tai alempi aikyyliryhmällä tai -ryhmillä, käsittää esimerkiksi fenyyli-, 1-naftyyli-, 2-naftyyli-, 4-30 kloorifenyyli-, 2-aminofenyyli, 4-aminofenyyli-, 4-amino-l- naf tyyli-, 4-dimetyyliaminof enyyli - , 4-ai koksi fenyyli-, 4- ,···, alkyylifenyyliryhmät jne.

"Asyyliryhmä" on orgaanisesta haposta, kuten mono-: tai polykarboksyylihaposta jäljelle jäänyt osa, kun haposta ' * 35 poistetaan vähintään yksi OH-ryhmä, ja se käsittää erityi sesti kaavan -COR6 mukaisia ryhmiä. R6 merkitsee siinä ve- 4 114799 tyatomia; alempi aikyyliryhmää, joka on mahdollisesti sub-stituoitu halogeeniatomilla, aminoryhmällä, karboksyyliryh-mällä, alempi alkoksikarbonyyliryhmällä, alempi alkanoyy-lioksiryhmällä, karbamoyyliryhmällä tai aryyliryhmällä; 5 alempaa alkenyyliryhmää, joka mahdollisesti substituoitu aryyliryhmällä; alempaa sykloalkyyliryhmää; aryyliryhmää, joka on mahdollisesti substituoitu alempi alkyyliryhmällä tai -ryhmillä, alempi aikoksiryhmällä tai -ryhmillä tai ha-logeeniatom(e)illa; aminoryhmää, joka on mahdollisesti 10 susbtituoitu yhdellä tai useammalla alempi alkyyliryhmällä; j ne.

Erityisiä esimerkkejä "asyyliryhmistä" ovat formyy-li, asetyyli, propionyyli, butyryyli, trifluoriasetyyli, glysyyli, 3-karboksipropionyyli, 3-etoksikarbonyylipropio- 15 nyyli, asetoksiasetyyli, fenyyliasetyyli, akryloyyli, bent-soyyli, p-metoksibentsoyyli, p-metyylibentsoyyli, p-kloori-bentsoyyli, karbamoyyli, N,N-dimetyylikarbamoyyli, N,N-di-etyylikarbamoyyli jne.

Edullisen edellä olevan kaavan (I) mukaisten yhdis-20 teiden ryhmän muodostavat kaavan (I) mukaiset yhdisteet, joissa R1 on -S-R2.

Kun yhdisteissä edellä olevassa kaavassa (I) 1- ja : ,·, 2-asemien välinen sidos ja/tai 6- ja 7-asemien välinen si- dos on yksinkertainen sidos, niin substituentit R1 ja -S-R5 . 25 voivat olla valinnaisesti a- tai β-asemassa, mutta farmako- » gisten aktiivisuuksien kannalta α-asemassa olevat susbti- • · ' ’ tuentit ovat erityisen edullisia (tässä selityksessä on kaikissa kemiallisissa kaavoissa sidokset merkitty yhtenäi-. sillä viivoilla riippumatta siitä, ovatko 1- ja 7-asemissa ·,,,· 30 olevat substituentit a- tai /^-asemassa) .

.V. Tämän keksinnön edellä olevan kaavan (I) mukaisten * * · yhdisteiden edustavina esimerkkeinä voidaan myöhemmin kuva-tuissa esimerkeissä kuvattujen yhdisteiden lisäksi mainita : .· seuraavat.

* · 5 114799 7a-merkapto-D-homo-17-oksa-androst-4-en-3-oni, 7α-(metyylitio)-D-homo-17-oksa-androst-4-eeni-3,17a-dioni, la-(butyylitio)-D-homo-17-oksa-androsta-l,4-dieeni-5 3,17a-dioni, la-[(2-hydroksietyyli)tio]-D-homo-17-oksa-androsta- 1.4- dien-3-oni, la-(bentsyylitio)-D-homo-17-oksa-androsta-l,4-di-eeni-3,17a-dioni, 10 la-[(1-naftyyli)tio]-D-homo-17-oksa-androst-4-eeni- 3,17a-dioni, la-[(4-kloorifenyyli)tio]-D-homo-17-oksa-androsta- 1.4- dieeni-3,17a-dioni, la-[(2-aminofenyyli)tio]-D-homo-17-oksa-androst-4-15 eeni-3,17a-dioni, la-[(4-aminofenyyli)tio]-D-homo-17-oksa-androsta- 1.4- dieeni-3,17a-dioni, la-[(4-dimetyyliaminofenyyli)tio]-D-homo-17-oksa-androsta-1,4-dien-3-oni, 20 la-[(4-metoksifenyyli)tio]-D-homo-17-oksa-androsta- 1.4- dieeni-3,17a-dioni, 4 t la- [ (4-metyylifenyyli) tio] -D-homo-17-oksa-androst-4-eeni-3,17a-dioni, * * ; la-(propionyylitio)-D-homo-17-oksa-androsta-l,4-di- 25 en-3-oni, >'· · la- (etyylisulf inyyli) -D-homo-17-oksa-androsta-l, 4- · dieeni-3,17a-dioni, 7a-merkapto-16-oksa-androsta-l,4-dieeni-3,17-dioni, _ ’7a-merkapto-16 -oksa-androsta -1,4 -dien-3 - oni, 30 7a-(etyylitio)-16-oksa-androsta-1,4-dieeni-3,17- dioni, » · · I.; la- [ (2-hydroksietyyli) tio] -16-oksa-androst-4-eeni- *;·’ 3,17-dioni, I ‘ la- [ (4-aminofenyyli) tio] -16-oksa-androst-4-en-3- *:·*: 35 oni, G 114799

O

7α- [ (4-metoksifenyyli)tio]-16-oksa-androsta-l,4-di-eeni-3,17-dioni, 7a-(asetyylitio)-16-oksa-androst-4-eeni-3,17-dioni, 7a-(asetyylitio)-16-oksa-androsta-l, 4-dien-3-oni, 5 7a-(N,N-dimetyylikarbamoyylitio)-16-oksa-androsta- 1,4-dieeni-3,17-dioni, 7a-(metyylisulfinyyli)-16-oksa-androsta-l,4-dieeni-3,17-dioni, la-(asetyylitio)-7a-merkapto-D-homo-17-oksa-an-10 drost-4-eeni-3,17a-dioni, la- (asetyylitio) -lot- [ (4-aminofenyyli) tio] -D-homo-17-oksa-androst-4-eeni-3-oni, la,7a-bis[(2-hydroksietyyli)tio]-D-homo-17-oksa-androst-4-eeni-3,17a-dioni, 15 la,7a-bis[(2-aminoetyyli)tio]-D-homo-17-oksa-an- drost-4-en-3-oni, la,7a-bis(etoksikarbonyylimetyylitio)-D-homo-17-oksa-androst-4-eeni-3,17a-dioni, la,7a-bis[(4-diraetyyliaminofenyyli)tio]-D-homo-17-20 oksa-androst-4-en-3-oni, : ,·. la,7a-bis [ (4-metoksifenyyli)tio]-D-homo-17-oksa-an- drost-4-eeni-3,17a-dioni, "! la,7a-bis(N,N-dimetyylikarbamoyylitio)-D-homo-17- * oksa-androst-4-eni-3-oni, 25 7a-merkapto-16-atsa-androsta-l,4-dieeni-3,17-dioni , *’ lot- (metyylitio) -16-atsa-androsta-l, 4-dieeni-3,17- dioni, lot- [ (4-aminofenyyli) tio] -16-atsa-androst-4-eeni-I* 3,17-dioni , : 30 7a-(asetyylitio)-16-atsa-androsta-l,4-dieeni-3,17- ,Λ dioni,

* » I

7a- (bentsoyylitio) -16-atsa-androst-4-eeni-3,17-di- • · oni, ) 7a-merkapto-17-atsa-D-homoandrosta-l, 4-dieeni- y'i 35 3,17a-dioni, 7 114799 la-(asetyylitio)-17-atsa-D-homoandrost-4-eeni-3,17a-dioni.

Tämän keksinnön mukaisesti edellä olevan kaavan (I) mukainen yhdiste, jossa symboli R1 on -S-R2, voidaan val-5 mistaa menetelmällä, joka käsittää seuraavat vaiheet: (a) saatetaan yhdiste, jolla on kaava (II) (II) 10 jossa X merkitsee samaa kuin edellä, reagoimaan kaavan (III) mukaisen yhdisteen kanssa HS-R21 (III) 15 jossa R21 on alkyyliryhmä, jossa on enintään 6 hii liatomia, bentsyyliryhmä, fenyyliryhmä, joka on mahdolli- • ;*. sesti substituoitu aminoryhmällä/-ryhmillä, alkanoyyliryh- • > * · mä, jossa on enintään 6 hiiliatomia, bentsoyyliryhmä tai • $ ; ·# Ν,Ν-dimetyylikarbamoyyliryhmä; ja jos halutaan * * 20 (b) saadulle kaavan (I-a) mukaiselle yhdisteelle t · * ·

* ♦ * · ^ Y

;y; f | (I -a) : ’": r21 jossa R21, R4 ja X merkitsevät samaa kuin edellä, * · 25 suoritetaan jokin seuraavista reaktioista : ·’: (i) reaktio 7-aseman muuttamiseksi merkaptoryhmäk- ·;*·: si, jossa suoritetaan hydrolyysi kaavan (I-a) mukaiselle yhdisteelle, jonka 7-asemassa on alkyylitioryhmä, 8 114799 (ii) reaktio 7-aseman muuttamiseksi merkaptoryh-mäksi, kuten on määritelty edellä vaiheessa (i) , ja sen jälkeen sen edelleen muuttamiseksi alkyylitioryhmäksi, jossa on enintään 6 hiiliatomia käsittelemällä se alky-5 lointireagenssilla inertissä liuottimessa alkalin läsnäollessa, tai alkyylitioryhmäksi käsittelemällä se happohali-dilla, alkyylihalogeenikarbonaatilla, jossa on korkeintaan 6 hiiliatomia tai happoanhydridillä inertissä liuottimessa alkalin läsnäollessa, ja 10 (iii) reaktio 1-asemassa olevan ryhmän R4 poista miseksi kaksoissidoksen muodostamiseksi 1- ja 2-asemien välille, joka reaktio käsittää, kun substituentti R4 1-asemassa on vetyatomi, yhdisteen (I-a) dehydrogenoinnin inertissä liuottimessa käyttäen 2,3-dikloori-5,6-disyano-15 1,4-bentsokinonia, DDQ:ta, tai, kun substituentti R4 1- asemassa on -S-R5, substituentin -S-R5 poistamisen kuumentamalla kaavan (I-a) mukaista yhdistettä inertissä liuottimessa palautusjäähdyttäen, jos halutaan hapon läsnäollessa tai käsittelemällä se alkalilla inertissä liuotti-20 messa; tai I (c) kaavan (IV) mukaiselle yhdisteelle : :· : : ^ i; : (iv) 25 jossa X merkitsee samaa kuin edellä, :,..ί suoritetaan jokin seuraavista reaktioista (iv) reaktio bent syyli ryhmän muodostamiseksi 7- » t » ,···_ asemaan muodostamalla ensin kaksoissidos kaavan (IV) mu kaisen yhdisteen 6- ja 7-asemien välille dehydrogenoimalla ; 30 yllä annetun kaavan (IV) mukainen yhdiste joko tert- butanolin tai ksyleenin ollessa liuottimena palautusjäähdyttäen, käyttäen 2,3,5,6-tetrakloori-1,4-bentsokinonia, 9 114799 ja sitten bentsyloimalla tulokseksi saatu yhdiste käsittelemällä dehydrogenoitu yhdiste bentsyylimagnesiumhalidilla kuparipitoisen kloridin läsnäollessa, ja (v) reaktio bentsyyliryhmän muodostamiseksi 7-ase-5 maan ja kaksoissidoksen muodostamiseksi 6- ja 7-asemien välille suorittamalla ensin kaavan (IV) mukaiselle yhdisteelle reaktio oksoryhmän suojelemiseksi ja isomerointire-aktio, suorittamalla tulokseksi saadulle yhdisteelle hape-tusrektio oksoryhmän muodostamiseksi 7-asemaan ja sitten 10 suorittamalla tulokseksi saadulle yhdisteelle bentsyloin-tireaktio, jota seuraa oksoryhmän suojaryhmän poistaminen; ja jos halutaan (d) saadulle kaavan (I-d) mukaiselle yhdisteelle T (I-d) 15 1 t jossa R11 on bent syyli ryhmä ja X merkitsee samaa kuin edellä, ; suoritetaan jokin seuraavista reaktioista, : 20 (vi) reaktio kaksoissidoksen muodostamiseksi 1- ja * 2-asemien välille suoritettuna dehydrogenoimalla kaavan i (I-d) mukainen yhdiste joko dioksaanin tai bentseenin ol- lessa liuottimena palautus j äähdyttäen, käyttäen 2,3-di-kloori-5,6-disyano-l,4-bentsokinonia, ja ;· 25 (vii) reaktio kaksoissidoksen muodostamiseksi 1- ja 2-asemien välille kuten on määritelty vaiheessa (vi) ja muuttamiseksi 1-asema ryhmäksi -S-R5 samalla tavalla kuin kaavan (II) mukaisen yhdisteen reaktiossa kohdan (a) mu-·’ kaisessa menetelmässä; tai ·’; 30 (e) valmistetaan kaavan (I) mukainen yhdiste, jos- Ί sa X on CH2/ jolloin 10 114799 (viii) pelkistetään kaavan (I) mukainen yhdiste, jossa X on C=0 inertissä liuottimessa X-ryhmän muuttamiseksi hydroksyyliryhmäksi, ja (ix) edelleen pelkistetään tulokseksi saatu hyd-5 roksiyhdiste trietyylisilaanilla ja booritrifluoridi-di- etyylieetterikompleksilla metyleenikloridissa.

Edellä olevassa menetelmässä (a) kaavan (II) mukaisen yhdisteen reaktio kaavan (III) mukaisen yhdisteen kanssa, kun R21 on alkanoyyliryhmä, jossa on enintään 6 hii-10 liatomia, bentsoyyliryhmä tai N,N-dimetyylikarbamoyyliryh-mä, voidaan tavallisesti suorittaa ilman liuotinta tai liuottimen, kuten etikkahapon läsnä ollessa, lämpötilassa huoneenlämpötilan ja reaktioseoksen kiehumispisteen välillä, edullisesti reaktioseoksen kiehumispisteessä. Toisaalta, 15 kun R21 on jokin muu kuin edellä mainittu ryhmä, reaktio voidaan tavallisesti suorittaa inertissä liuottimessa kuten dioksaanissa, tetrahydrofuraanissa, metanolissa tai etanolissa, alkalimetallialkoksidin (kuten natriummetoksidin tai natriumetoksidin); alkalimetallin (kuten natriumin tai ka-20 liumin); alkalimetallihydridin (kuten natrium- tai kalium-• .·, hydridin) läsnä ollessa. Sopiva reaktiolämpötila tässä ta- pauksessa on yleensä 0 °C:sta reaktioseoksen palautujäähdy-'1 tyslämpöt il aan.

j Koskien kaavan (III) mukaisen yhdisteen ja kaavan t 25 (II) mukaisen yhdisteen käytettyä moolisuhdetta, yleensä on i edullista käyttää kaavan (III) mukaista yhdistettä vähin- V · tään 1 mooli, tavallisesti noin 2-20 moolia kaavan (II) mukaisen yhdisteen 1 moolia kohti. Alkalimetalleja käyte-' tään sopivasti noin 1,5 - 15 moolia kaavan (III) mukaisen 30 yhdisteen yhtä moolia kohti.

Näin saadaan kaavan (I-a) mukainen yhdiste.

f 1 A

Kun tämä reaktio suoritetaan lievissä olosuhteissa, esimerkiksi lämpötilassa 0 °C:n ja noin huoneenlämpötilan välillä, käyttäen lähtöaineena kaavan (I) mukaista yhdis-.1 35 tettä, jossa on kaksoissidos 1- ja 2-asemien välillä, saa- 11 114799 daan edellä olevan kaavan (I-a) mukaisen yhdisteen ohella myös yhdiste, jonka kaava on r 21 — s "° (CH2)2 (V) 5 21 jossa R ja X merkitsevät samaa kuin edellä.

Saatu kaavan (I-a) mukainen yhdiste voidaan haluttaessa muuttaa muuksi tämän keksinnön kohteena olevaksi yhdisteeksi saattamalla ensin mainittu yhdiste johonkin edel-10 lä mainituista reaktioista (i), (ii) ja (iii).

Edellä mainitun reaktion (i) mukainen 7-aseman muuttaminen merkaptoryhmäksi voidaan helposti suorittaa hydrolysoimalla yhdiste, jonka 7-asemassa on asyylitioryh-mä. Hydrolyysi voidaan suorittaa sinänsä tunnetulla taval-15 la, esimerkiksi käsittelemällä yhdistettä alkalilla, kuten natriumhydroksidilla tai kaliumhydroksidilla, liuottimessa, kuten tetrahydrofuraanissa, metanolissa tai etanolissa.

; *t Edellä mainitun reaktion (i) mukainen 7-aseman muuttaminen merkaptoryhmästä mahdollisesti substituoiduksi * * · , , 20 alempi alkyylitioryhmäksi voidaan helposti suorittaa esi merkiksi käsittelemällä lähtöaineyhdistettä alempi alky- < · '· * lointireagenssilla, kuten mahdollisesti substituoidulla alempi alkyylihalogenidilla, inertissä liuottimessa, kuten ,, dimetyyliformamidissa, dimetyylisulfoksidissa tai tetrahyd- !fi I 25 rofuraanissa, alkalin kuten natriumhydridin tai natriumme-toksidin läsnä ollessa. 7-aseman muuttaminen merkaptoryh-•\ _ mästä asyylitioryhmäksi tai alempi alkoksikarbonyylitioryh- = i T mäksi voidaan helposti suorittaa esimerkiksi käsittelemällä lähtöaineyhdistettä happohalogenidilla, alempi alkyylihalo-30 geenikarbonaatilla, happoanhydridillä tms. inertissä liuottimessa, kuten kloroformissa, dikloorimetaanissa tai dok- 12 114799 saanissa, alkalin kuten pyridiinin, natriumhydridin tai netriummetoksidin läsnä ollessa.

Reaktiossa (iii) kaksoissidoksen muodostamimseksi 1- ja 2-asemien väliin voidaan käyttää erilaisia reaktioo-5 losuhteita silloin, kun 1-asemassa oleva substituentti R4 on vetyatomi, ja silloin, kun R4 on -S-R5.

Nimittäin, kun 1-asemassa R4 on vetyatomi, reaktio voidaan tavallisesti suorittaa dehydrogenoimalla kaavan (I-a) mukainen yhdiste inertissä liuottimessa, kuten dioksaa-10 nissa tai bentseenissä, palautusjäähdytyslämpötilassa käyttäen 2,3-dikloori-5,6-disyaani-l,4-bentsokinonia (DDQ).

Toisaalta, kun 1-asemassa substituentti R4 on -S-R5, niin 1-asemassa oleva ryhmä -S-R5 voidaan poistaa kuumentamalla kaavan (I-a) mukaista yhdistettä tai käsittele-15 mällä sitä alkalilla.

Kuumennuskäsittely voidaan suorittaa esimerkiksi inertissä liuottimessa, kuten dimetyyliformamidissa, dime-tyylisulfoksidissa tai tolueenissa, palautusjäähdyttäen, ja haluttaessa hapon kuten etikkahapon tai p-tolueensulfo-20 nihapon läsnä ollessa.

. Käsittely alkalilla voidaan suorittaa esimerkiksi inertissä liuottimessa, kuten tetrahydrof uraanissa, diok-;* saanissa tai metanolissa, alkalin kuten natriummetoksidin ί tai natriumhydroksidin läsnä ollessa. Kun tässä reaktiossa * 25 käytetään kaavan (I-a) mukaista yhdistettä, jossa R on ; · asyyliryhmä, niin sen lisäksi, että 1-asemassa oleva ryhmä '< : -S-R5 poistuu, myös 7-asemassa oleva asyylitioryhmä muuttuu merkaptoryhmäksi alkalin hydrolyysin vaikutuksesta.

Edellä mainitun menetelmän (c) mukaisesti kaavan λ 30 (I-d) mukainen yhdiste, jossa 7-asema on substituoitu bent- syyliryhmällä, voidaan valmistaa suorittamalla edellä ole-van kaavan (IV) mukaiselle yhdisteelle joko reaktio (iv) tai reaktio (v) .

Bent syyli ryhmän liittäminen 7-asemaan edellä ole-35 valla reaktiolla (iv) voidaan suorittaa muodostamalla ensin » » kaksoissidos edellä olevan kaavan (IV) mukaisen yhdisteen 13 114799 6- ja 7-asemien välille ja sitten bentsyloimalla saatu yhdiste .

Kaksoissidoksen muodostaminen 6- ja 7-asemien välille voidaan tavallisesti suorittaa dehydrogenoimalla 5 edellä olevan kaavan (IV) mukainen yhdiste 2,3,5,6- tetrakloori-1,4-bentsokinonilla (kloraniili) tert-butano-lissa tai ksyleenissä palautusjäähdytyslämpötilassa. Tämän jälkeen bentsylointi voidaan suorittaa helposti esimerkiksi käsittelemällä saatua yhdistettä bentsyylimagnesiumklori-10 dilla inertissä liuottimessa, kuten tetrahydrofuraanissa, dioksaanissa tai dietyylieetterissä, kuprokloridin läsnä ollessa.

Kun tässä reaktiossa lähtöaineena käytetään kaavan (IV) mukaista yhdistettä, jossa X on C=0, niin bentsyloin- 15 nissa on edullista joko etukäteen suojata 17- tai 17a- asemassa oleva oksoryhmä etyleenidioksiryhmällä jne., tai muuttaa ensin oksoryhmä hydroksyyliryhmäksi pelkistämällä litiumtri-tert-butoksialuminiumhydridillä jne. inertissä liuotimessa kuten tetrahydrofuraanissa, suojata sitten saa- 20 tu hydroksiyhdiste asetyyliryhmällä, metoksimetyyliryhmäl- lä, tetrahydropyranyyliryhmällä, tert-butyylidimetyylisi- lyyliryhmällä jne. ja sitten suorittaa aralkylointi. Tässä tapauksessa bentsyyliryhmän liittämisen jälkeen 17- tai ! 17a-asemaan oksoryhmä muodostetaan uudestaan poistamalla , 25 suojaryhmä tai poistamalla suojaryhmä ja sitten hapettamal- ' · la Jones-reagenssilla.

» ’’ ‘ Edellä olevassa reaktiossa (v) bentsyyliryhmän liittäminen 7-asemaan ja kaksoissidoksen muodostaminen 6-, ’’ ja 7-asemien välille voi tapahtua suorittamalla ensin edel- _ : 30 lä olevan kaavan (IV) mukaiselle yhdisteelle oksoryhmän ,v, suojaamisreaktio ja isomerointireaktio, saattamalla sitten

» I I

saatu yhdiste hapetusreaktioon oksoryhmän muodostamiseksi ’ ♦ 17-asemaan ja suorittamalla saadulle yhdisteelle sitten , '.· bentsylointireaktio. Tässä tapauksessa bent syyli ryhmän : 35 liittämisen jälkeen oksoryhmän suojaryhmä poistetaan esi- 14 114799 merkiksi käsittelemällä bentsyloitua yhdistettä rikkihapolla dioksaanissa.

Edellä olevan kaavan (I-d) mukainen yhdiste voidaan haluttaessa muuttaa muuksi keksinnön mukaiseksi yhdisteeksi 5 saattamalla se reaktioon (vi) tai (vii).

Kaksoissidoksen muodostaminen 1- ja 2-asemien välille edellä olevassa reaktiossa (vi) voidaan tavallisesti suorittaa dehydrogenoimalla kaavan (I-d) mukainen yhdiste 2,3-dikloori-5,6-diasyaani-l,4-bentsokinonilla (DDQ) diok-10 saanissa tai bentseenissä palautusjäähdytyslämpötilassa.

1-asemassa olevan vetyatomin muuttaminen ryhmäksi -S-R5 edellä olevassa reaktiossa (vii) voidaan suorittaa samalla tavalla kuin kaavan (II) mukaisen yhdisteen reaktio kaavan (III) mukaisen yhdisteen kanssa edellä olevassa me-15 netelmässä (a).

Kaavan (I) mukainen yhdiste, jossa X on CH2, voidaan myös muodostaa pelkistämällä inertissä liuottimessa, kuten tetrahydrofuraanissa, dioksaanissa tai tolueenissa 1it iumtri-tert-butoksialuminiumhydridillä, di-isobutyyli- 20 aluminiumhydridillä jne. kaavan (I) mukainen yhdiste, jossa *. X on C=0, ja edelleen pelkistämällä saatu hydroksiyhdiste trietyylisilaanilla ja booritrifluoridi-dietyylieetterikom-·, pleksilla metyleenikloridissa.

Tämän keksinnön mukaisilla menetelmillä valmistetut 25 edellä olevan kaavan (I) mukaiset yhdisteet voidaan eristää ‘ (* reaktioseoksesta ja puhdistaa sinänsä tunnetuilla menetel millä, esimerkiksi kiteyttämällä, tislaamalla, pylväskroma-tografiällä ja/tai ohutkerroskromatografiällä.

. : * Keksinnön teho 30 Edellä kuvatut 7-substituoidut oksa- tai atsastero- idi-yhdisteet, joiden kaava on (I), ovat erittäin voimak-kaasti vaikuttavia aromataasia estäviä aineita ja tehokkai-T ta estrogeenin aiheuttamien sairauksien käsittelemisessä, esimerkiksi rintasyövän, kohtusyövän, munasarjasyövän, en-35 dometrioosin, miehen naisnisäisyyden, siittiöiden harvalu- 15 114799 kuisuudesta johtuvan miehen hedelmättömyyden jne. käsittelemisessä .

Kaavan (I) mukaisten yhdisteiden aromataasia estävän vaikutuksen in vitro ja in vivo -kokeiden tulokset esi-5 tetään seuraavassa.

(1) Aromataasia estävän vaikutuksen koe (in vitro)

Ihmisen istukan mikrosomeja valmistettiin (linkous 105 000 x g, 60 minuuttia) Ryan'in (The Journal of Biological Chemistry, 234, 268 - 272 (1959)) menetelmällä. Ennen 10 käyttöä mikrosomit pestiin 2 kertaa 0,5 mM ditiotreitoli-liuoksella, pakastekuivattiin ja säilytettiin -20 °C:ssa.

Aromataasia estävä vaikutus testattiin Tompsonin ja Siiterin (Journal of Biological Chemistry, 249, 5373 - 5378 (1974)) kehittämällä menetelmällä. Tässä menetelmässä mää-15 ritetään kvantitatiivisesti aromatisoinnin [1,2-3H]andros- teenidionista vapauttama 3H20. Entsyymiä käyttävä testi suoritettiin 67 mM fosfaattipuskurissa (pH 7,5), jonka määrä oli sellainen, että lopullisen inkubaatioliuoksen tilavuus oli 0,5 ml. Inkubaatioliuos sisälsi 180 μΜ NADPH:ta, 20 2 μΜ [1,2-3H] androsteenidionia, 150 μg pakastekuivattuja ihmisen istukan mikrosomeja, 25 μΐ metanolia ja koeyhdis-··. tettä erilaisina konsentraatioina. Inkubointi suoritettiin 37°C:ssa 20 minuutin ajan, reaktio keskeytettiin lisäämällä 3 ml kloroformia ja seosta sekoitettiin 40 sekuntia. Seosta 25 lingottiin (700 x g) 10 minuuttia, päällä olevasta vesiliu- • oksesta otettiin 0,3 ml, tuikeseos lisättiin ja muodostunut * 3H20 mitattiin.

Tulokset nähdään seuraavassa taulukossa 1.

> · 1 3 0 Taulukko 1 • » » • · » #.! Yhdiste IC50 (μΜ) *!' Esimerkki 1 2,3 j ’ 1 Esimerkki 8 0,4 35 Esimerkki 16 0,5 16 114799 (2) Aromataasia estävän vaikutuksen koe (in vivo)

Aromataasia estävä vaikutus testattiin G.H. Decker-sin ja A.H.W.M. Schuurs'in (Journal of Steroid Biochemist-ry, :32, 625 - 631 (1989)) kehittämällä menetelmällä.

5 Kokeessa käytettiin 8-10 sukukypsästä naarasro- tasta koostuvaa ryhmää viikon kuluttua rottien aivolisäkkeen poistamisesta. Rotille annettiin suun kautta kerran päivässä neljänä peräkkäisenä päivänä 16 mg/kg dehyd-roepiandrosteronisulfaattia (DHEAS) ja 5 ml/kg kuljetinta 10 (fysiologinen suolaliuos + 2 % polysorbaatti 80) tai dehyd-roepiandrosteronisulfaattia (DHEAS) ja 2 mg/kg koeyhdistet-tä suspendoituna kuljettimeen. Kuutena päivänä alkaen ensimmäisen annostuksen jälkeisestä päivästä emättimen pinnasta otettiin sivelynäyte, jota värjättynä Giemsa-värjäys-15 liuoksella tutkittiin mikroskoopilla. Emättimen sivelynäyt-teen sarveistumista havaittiin DHEAS:n ensimmäisen antamisen jälkeen kolmannesta päivästä lähtien, ja sen vaikutus lakkasi kuusi päivää ensimmäisen antamisen jälkeen. Siten sarveistumista esiintyi kaikkiaan kolmena päivänä: kolman-20 nesta päivästä viidenteen päivään DHEAS:n antamisen alusta.

• *. Koeyhdisteen sarveistumista ehkäisevä vaikutus ilmoitetaan > · . ·, koeyhdistettä saaneen ryhmän ja kuljetinta saaneen ryhmän ’ · ; *t sarveistumisen estymisen suhteena.

Tässä yhteydessä emättimen sivelynäytteen sarveis- 1 · · , 25 tumisen aiheuttavat aromataasin DHEAS:stä biosyntetisoimat * · *; · estrogeenit, ja siten estämällä aromataasin vaikutus havai- • · '· ‘ taan sarveistumisen estyminen. Tulokset nähdään seuraavassa taulukossa 2.

* 3 0 Taulukko 2 _/ Yhdiste Estosuhde (%)

Esimerkki 8 68,2 + 13,6 • Esimerkki 16 7 0,6 ± 15,6 Ί": 35 Esimerkki 43 70,6 ± 15,6 17 114799

Siten kaavan (I) mukaisia yhdisteitä voidaan antaa lääkkeeksi ihmisten ja muiden nisäkkäiden käsittelyssä suun kautta tai ruuansulatuskanavan ulkopuolisesta (esim. lihaksensisäisesti tai suonensisäisesti injektiolla, peräsuolen 5 kautta, ihon läpi jne.) estämään estrogeenien biosynteesiä.

Kun tämän kaavan (I) mukaisia yhdisteitä käytetään lääkkeinä, ne voidaan muodostaa farmaseuttisesti hyväksyttävien myrkyttömien lisäaineiden kanssa käyttötarkoituksesta riippuen mihin tahansa kiinteään annosmuotoon (esim.

10 tabletit, kovageltiinikapselit, pehmeäkapselit, rakeet, jauheet, hienot rakeet, pillerit, lääkenapit jne.), puoli-kiinteään annosmuotoon (esim. suppositorit, voiteet jne.) ja nestemäiseen annosmuotoon (esim. injektionesteet, emulsiot, suspensiot, lotionit, suihkeet jne.).

15 Edellä oleviin valmisteisiin käytettäviksi sopivia myrkyttömiä lisäaineita ovat esimerkiksi tärkkelykset, gelatiini, glukoosi, laktoosi, fruktoori, maltoosi, magnesium karbonaatti, talkki, magnesiumstearaatti, metyyliselluloo-sa, karboksimetyyliselluloosa ja sen suolat, arabikumi, po-20 lyetyleeniglykoli, p-hydroksibentsoehapon alkyyliesterit, ' siirapit, etanoli, propyleeniglykoli, vaseliinit, karboksi- > ' l · , '·. vahat, glyseroli, natriumkloridi, natriumsulfiitti, natri- ; umfosfaatti, sitruunahappo jne. Farmaseuttiset valmisteet voivat myös sisältää muita terapeuttisesti käytettäviä lää-. . 25 keaineita. Kaavan (I) mukaisten yhdisteiden määrä far- * t ·; : maseuttisissa valmisteissa vaihtelee riippuen annosmuodosta ’· * jne., jolloin kuitenkin kaavan (I) mukaisia yhdisteitä si sältyy kiinteisiin ja puolikiinteisiin annosmuotoihin edul-,, lisesti konsentraatioina 0,1 - 50 paino-% ja nestemäisiin •’t : 3 0 annosmuotoihin 0,05 - 10 paino-%.

Kaavan (I) mukaisten yhdisteiden annokset vaihtele-t*.it vat laajalti riippuen hoidon kohteena olevasta nisäkkäästä (myös ihminen), lääkkeenantotavasta, oireiden vakavuudesta, * V* lääkärin tekemästä diagnoosista jne.; yleisesti annokset 35 voivat olla alueella 0,1 - 100 mg/kg, edullisesti 1-50 mg/kg. Kuitenkin on myös mahdollista antaa edellä olevan 18 114799 annosalueen alarajan alittavia annoksia tai ylärajan ylittäviä annoksia riippuen potilaan oireiden vakavuudesta, lääkärin diagnoosista ym. Edellä esitetyt annokset voidaan antaa kerran päivässä tai useampia kertoja päivässä jaet-5 tuina annoksina.

Esimerkit Tätä keksintöä valaistaan edelleen seuraavassa erityisesti kuvattujen esimerkkien ja valmistusesimerkkien avulla.

10 Esimerkki 1 D-homo-17-oksa-androsta-4,6-dieeni-3,17a-dionin (100 mg), 4-aminotiofenolin (0,15 ml) ja dioksaanin (1,5 ml) seokseen lisättiin 5 mg Na-metallia ja seosta sekoitettiin typpikehässä huoneenlämpötilassa 5 päivää. Reak-15 tioseokseen lisättiin vettä ja tuote uutettiin etyyliase taatilla. Uute pestiin kyllästetyllä NaCl-liuoksella ja kuivattiin vedettömällä magnesiumsulfaatilla. Liuotin tislattiin pois ja jäännöksenä saatu raakatuote puhdistettiin TLC:llä [kehiteliuotin: kloroformi:asetoni (19:1)], jolloin 20 saatiin 42 mg 7a-[(4-aminofenyyli)tio]-D-homo-17-oksa-an-drost-4-eeni-3,17a-dionia.

XH-NMR (CDC13, δ): 1,20 (3H, s), 1,26 (3H, s), 3,43 * '·, (1H, m), 4,0 ~ 4,7 (2H, m), 5,67 (1H, s), 6,8 ~ 7,5 (4H, .* m) .

* 25 MS (m/z) : 425 (M+) , 409.

* Esimerkki 2 ‘ 0,13 ml Jones-reagenssia lisättiin tipoittain 0 °C:ssa 7a;-bentsyyli-17a£-hydroksi-D-homo-17-oksa-androst-4-en-3-onin (100 mg) ja asetonin (8,5 ml) seokseen, ja .* 30 seosta sekoitettiin 10 minuuttia. Reaktioseokseen lisättiin , vettä ja tuote uutettiin etyyliasetaatilla. Uute pestiin 5- %:isella NaHCCb-vesiliuoksella ja kyllästetyllä NaCl-liuoksella ja kuivattiin vedettömällä magnesiumsulfaatilla.

* Liuotin tislattiin pois ja jäännöksenä saatu raakatuote : 35 puhdistettiin TLC:llä [kehiteliuotin: kloroformi:asetoni 19 114799 (19:1)], jolloin saatiin 48 mg a-bentsyyli-D-homo-17-oksa-androst-4-eeni-3,17a-dionia.

^-NMR (CDC13, δ): 1,22 (3H, s), 1,30 (3H, s) , 4,0 - 4,7 (2H, m), 5,72 (1H, s), 6,9 ~ 7,5 (5H, m).

5 MS (m/z) : 392 (M+) , 377, 301.

Esimerkki 3 D-homo-17-oksa-androsta-4,6-dien-3-onin (50 mg) ja tioetikkahapon (0,2 ml) seosta kuumennettiin palautusjääh-dyttäen 3 tuntia. Liuotin tislattiin pois ja jäännöksenä 10 saatu raakatuote puhdistettiin TLC:llä [kehiteliuotin-.hek-saani:etyyliasetaatti (2:1)], jolloin saatiin 62 mg 7a-(asetyylitio)-D-homo-17-oksa-androst-4-en-3-onia.

^-NMR (CDC13, δ): 1,03 (3H, s), 1,21 (3H, s), 2,33 (3H, s), 3,00, 3,39 (2H, ABq, J = 11 Hz), 3,33 (1H, m), 15 4,00 (2H, m), 5,7, 1 (1H, d, J = 2 Hz).

MS (m/z): 362 (M+) , 320, 305, 287.

Esimerkki 4

Toistettiin esimerkin 1 menetelmä käyttäen bentsyy-limerkaptaania 4-aminotiofenolin sijasta, reaktioseokseen 20 lisättiin 1 N rikkihappoa ja seosta sekoitettiin yön yli huoneenlämpötilassa. Tuote uutettiin etyyliasetaatilla ja uute pestiin kyllästetyllä NaCl-liuoksella ja kuivattiin ,·. vedettömällä natriumsulfaatilla. Liuotin tislattiin pois ja >t; jäännöksenä saatu raakatuote puhdistettiin TLC:llä [kehite- . . 25 liuotin: kloroformi:asetoni (39:1)], jolloin saatiin 7a- (bentsyylitio)-D-homo-17-oksa-androst-4-eeni-3,17a-dioni.

1H-NMR (CDCI3, δ): 1,16 (3H, s), 1,17 (3H, s), 2,83 (1H, m), 3,55, 3,70 (2H, ABq, J = 14 Hz), 3,8 - 4,5 (2H, m) , 5,78 (1H, br s), 7,1-7,4 (5H, m) .

30 MS (m/z): 424 (M+) , 409, 333, 302, 287.

Esimerkki 5 * * · D-homo-17-oksa-androsta-4,6-dien-3-onin (68 mg), 4-aminotiofenolin (150 mg) ja dioksaanin (2,5 ml) seokseen : .· lisättiin 15 mg kaliummetallia ja seosta ultraäänikäsitel- *"·’ 35 tiin huoneenlämpötilassa typpikehässä tunnin ajan. Kalium- metalli poistettiin, reaktioseokseen lisättiin vettä ja 20 114799 tuote uutettiin etyyliasetaatilla. Uute pestiin kyllästetyllä NaCl-liuoksella ja kuivattiin vedettömällä magnesium-sulfaatilla. Liuotin tislattiin pois ja jäännöksenä saatu raakatuote puhdistettiin TLC:llä [kehiteliuotin: bentsee- 5 ni:etyyliasetaatti (4:1)], jolloin saatiin 32 mg 7a-[(4-aminofenyyli)tio]-D-homo-17-oksa-androst-4-en-3-onia.

XH-NMR (CDC13, δ): 1,04 (3H, s), 1,20 (3H, s), 3,05 (1H, d, J = 11 Hz), 3,2 ~ 3,6 (3H, m), 4,05 (1H, m), 5,62 (1H, s), 7,0 ~ 7,4 (4H, m).

10 MS (m/z) : 411 (M+) , 395, 393.

Esimerkki 6

Bentsyylimagnesiumkloridin 2,0 M tetrahydrofuraani-liuoksen (6 ml), kuprokloridin (400 mg) ja tetrahydrofuraanin (15 ml) seosta sekoitettiin 0 °C:ssa typpikehässä 10 15 minuuttia. Tähän seokseen lisättiin D-homo-17-oksa-andros-ta-4,6-dien-3-onin (38 mg), kuprokloridin (5 mg) ja tetra-hydrofuraanin (2,5 ml) seos ja seosta sekoitettiin tunnin ajan huoneenlämpötilassa. Reaktioseokseen lisättiin dietyy-lieetteriä, vettä ja 5-%:ista kloorivetyhappoa ja orgaani-20 nen kerros pestiin 5-%:isella NaHC03-vesiliuoksella ja kyl-lästetyllä NaCl-liuoksella ja kuivattiin vedettömällä nat-riumsulfaatilla. Liuotin tislattiin pois ja jäännöksenä ,·, saatu raakatuote puhdistettiin TLC:llä [kehiteliuotin: klo roformi :asetoni (19:1)], jolloin saatiin 28 mg 7a-bents- , 25 yyli-D-homo-17-oksa-androst-4-en-3-onia.

> · 1H-NMR (CDCI3, δ): 1,07 (3H, s), 1,22 (3H, s) , 3,05, 3,44 (2H, ABq J = 11 Hz), 3,4, 2 (1H, m), 4,11 (1H, m), 5,72 (1H, s), 6,9 - 7,5 (5H, m).

Esimerkki 7 30 Toistettiin esimerkin 3 menetelmä käyttäen D-homo- 17-oksa-androsta-1,4,6-trien-3-onia (50 mg) D-homo-17-oksa-!.! androsta-4,6-dien-3-onin sijasta, ja saatu raakatuote puh- distettiin TLCbllä [kehiteliuotin: heksaani: etyyliasetaatti *,· (1:1)], jolloin saatiin 38 mg 7a- (asetyylitio) -D-homo-17- 35 oksa-androsta-1,4-dien-3-onia poolisempana tuotteena.

21 114799 1H-NMR (CDC13, δ): 1,06 (3H, s), 1,26 (3H, s), 2,32 (3H, s), 2,92 (1H, m), 2,99, 3,39 (2H, Abq, J = 11 Hz), 3,30 (1H, m), 4,05 (2H, m), 6,03 (1H, br, t, J = 2 Hz), 6,27 (1H dd, J = 2, 10 Hz), 7,0 (1H, d, J = 10 Hz).

5 MS (m/z) : 361 (M+) , 318, 284.

Lisäksi saatiin 12 mg la, 7a-bis (asetyylitio) -D-ho-mo-17-oksa-androst-4-en-3-onia vähemmän poolisena tuotteena .

1H-NMR (CDCls, δ): 1,02 (3H, s), 1,41 (3H, s), 10 2,3 ~ 3,6 (7H, m) 2,36 (3H, s), 2,37 (3H,s), 3,9 ~ 4,2 (3H, m) 5,72 (1H, br, s).

MS (m/z): 393 (M+-COCH3) , 361, 360, 318.

Edelleen saatiin 15 mg la-(asetyylitio)-D-homo-17-oksa-androsta-4,6-dien-3-onia vielä vähemmän poolisena 15 tuotteena.

1H-NMR (CDCI3, δ): 1,06 (3H, s), 1,30 (3H, s), 2,32 (3H ,s), 2,3 ~ 3,6 (5H, m), 3,9 - 4,3 (2H, m), 5,72 (1H, br s), 6,20 (2H, br s).

Esimerkki 8 20 la,7a-bis(asetyylitio)-D-homo-17-oksa-androst-4-en- 3-onin (42 mg), 28-%:isen natriummetylaatin metanoliliuok- * · sen (0,5 ml) ja metanolin (3 ml) seosta sekoitettiin typpi -.·, kehässä huoneenlämpötilassa 40 minuuttia. Reaktioseokseen j lisättiin etikkahappoa, liuotin tislattiin pois, jäännök- , 25 seen lisättiin kloroformia ja liukenematon aines suodatet tiin pois typpikehässä. Suodos konsentroitiin ja saatu raa-’· * katuote puhdistettiin TLC:llä [kehiteliuotin: heksaani: etyyliasetaatti (1:1)], jolloin saatiin 24 mg 7a-merkapto-.. :* D-homo-17-oksa-androsta-l,4-dien-3-onia. Sulamispiste: 225 ·*,,/ 30 - 229 °C (dikloorimetaani-etyyliasetaatti) .

.·!·, 1H - NMR (CDCI3, δ): 1,07 (3H, s), 1,24 (3H, s), 2,50 • * · (1H, dd, J = 2, 13 Hz), 3,02, 3,40 (2H, ABq J = 11 Hz), 3,03 (1H, m), 3,40 (2H, m), 4,05 (1H, m), 6,13 (1H, br, t, * J = 2 Hz ) , 6,29 (1H, dd, J = 2, 10 Hz), 7,03 (1H, d; 35 J = 10 Hz) .

MS (m/z) : 318 (M+) , 284 .

22 114799

Alkuaineanalyysi :

Laskettu kaavalle C19H26O2S: C 71,66; H 8,23

Saatu: C 71,87; H 8,39.

Esimerkki 9 5 Toistettiin esimerkin 5 menetelmä käyttäen D-homo- 17-oksa-androsta-l,4,6-trien-3-onia (136 mg) D-homo-17-ok-sa-androsta-4,6-dien-3-onin sijasta, ja saatu raakatuote puhdistettiin TLC:llä [kehiteliuotin: bentseeni:etyyliase taatti (1:1)], jolloin saatiin 68 mg Ια, 7a-bis [ (4-amino-10 fenyyli)tio]-D-homo-17-oksa-androst-4-en-3-onia poolisempa-na tuotteena.

1H-NMR (CDCI3, δ): 1,05 (3H, s), 1,32 (3H, s), 3,10 (1H, d, J = 11 Hz), 3,2 ~ 4,3 (7H, m), 5,74 (1H, s), 6,5 ~ 7,4 (8H, m) .

15 Lisäksi saatiin 7a-[ (4-aminofenyyli)tio]-D-homo-17- oksa-androsta-1,4-dien-3-onin ja la-[(4-aminofenyyli)tio]-D-homo-17-oksa-androsta-4,6-dien-3-onin seos vähemmän poo-lisesta osasta. Tämä seos puhdistettiin TLC:llä [kehiteliuotin: kloroformi:asetoni (9:1)], jolloin saatiin 5 mg 7a- 20 [(4-aminofenyyli)tio]-D-homo-17-oksa-androsta-l,4-dien-3- .·. onia poolisempana tuotteena.

1H-NMR (CDCI3, δ): 1,06 (3H, s), 1,23 (3H, s), '1 3,04, 3,40 (2H, ABq J = 11 Hz), 3,2 ~ 4,2 (3H, m), 6,05 ► · ;; (1H, br s), 6,29 (1H, dd, J = 2, 10 Hz), 7,03 (1H, d, 1 « · /25 J = 10 Hz), 6,4 ~ 7,3 (4H, m), i MS (m/z) : 409 (M+) , 285.

’ · Edelleen saatiin 9 mg la-[(4-aminofenyyli)tio]-D- homo-17-oksa-androsta-4,6-dien-3-onia vähemmän poolisena > j' tuotteena.

30 1H-NMR (CDCI3, δ): 1,10 (3H, s), 1,25 (3H, s), t. ,f 3,08, 3,44 (2H, ABq J = 11 Hz), 3,2 ~ 4,3 (3H, m), 5,76 I,)* (1H, s), 6,20 (2H, s), 6,4 - 7,4 (4H, m).

* · MS (m/z): 409 (M+) , 285, 284, 248.

• '/ Esimerkki 10 ·;· · 35 7£-bentsyyli-3 : 3 :17a, 17a-bis (etyleenidioksi) -D-ho- mo-17-oksa-androst-5-en-7£-olin (715 mg), 5-%:isen rikkiha- 23 1U799 pon (1,8 ml) ja dioksaanin (11 ml) seosta sekoitettiin huoneenlämpötilassa 3 tuntia. Reaktioseokseen lisättiin vettä ja 5-%:ista NaHC03-vesiliuosta ja tuote uutettiin etyyliasetaatilla. Uute pestiin kyllästetyllä NaCl-liuoksella ja 5 kuivattiin vedettömällä magnesiumsulfaatilla. Liuotin tislattiin pois ja jäännöksenä saatu raakatuote puhdistettiin TLC:llä [kehiteliuotin: kloroformi:asetoni (9:1)], jolloin saatiin 140 mg 7-bentsyyli-D-homo-17-oksa-androsta-4,6-di-eeni-3,17a-dionia.

10 1H-NMR (CDC13, δ): 1,03 (3H, s), 1,28 (3H, s), 3,66 (2H, s), 3,8 ~ 4,6 (2H, m), 5,63 (1H, s), 6,06 (1H, br s), 7,0 ~ 7,5 (5H, m).

MS (m/z) : 390 (M+) , 299.

Esimerkki 11 15 7 -bent syy1i-17 a ξ-hydroks i-D-homo-17-oksa-androst a- 4,6-dien-3-onin (30 mg), trietyylisilaanin (0,03 ml), boo-ritrifluoridi-dietyylieetterikompleksin (0,02 ml) ja mety-leenikloridin (0,8 ml) seosta sekoitettiin typpivirrassa 0 °C:ssa 2 minuuttia. Reaktioseokseen lisättiin 5-%:ista 20 NaHC03-vesiliuosta ja seosta sekoitettiin huoneenlämpöti lassa 10 minuuttia. Tuote uutettiin etyyliasetaatilla, uute t · ·*. pestiin kyllästetyllä NaCl-liuoksella ja kuivattiin vedet- ^ tömällä magnesiumsulfaatilla. Liuotin tislattiin pois ja I jäännöksenä saatu raakatuote puhdistettiin TLC:llä [kehite- 25 liuotin: kloroformi:asetoni (19:1)], jolloin saatiin 10 mg * · 7-bentsyyli-D-homo-17-oksa-androsta-4,6-dien-3-onia.

^U-NMR (CDCI3, δ): 0,95 (3H, s), 1,07 (3H, s), 3,02, 3,41 (2H, Abq, J = 11 Hz), 3,3 0 (1H, m), 3,59 (2H, I* s), 4,02 (1H, m), 5,5 9 (1H, s), 5,99 (1H, br s), 7,0 ~ 7,5 30 (5H, m).

MS (m/z): 376 (M+) , 285.

·..! Esimerkki 12 7o;-merkapto-D-homo-17-oksa-androsta-l, 4 -dien-3 -onin (6 mg), 28-%:isen natriummetylaatin metanoliliuoksen (4 μΐ) ·; 35 ja dimetyyliformamidin (0,3 ml) seokseen lisättiin metyyli- jodidia (4 μΐ) ja seosta sekoitettiin huoneenlämpötilassa 24 114799 typpikehässä 5 minuuttia. Reaktioseokseen lisättiin vettä ja tuote uutettiin etyyliasetaatilla. Uute pestiin kyllästetyllä NaCl-liuoksella ja kuivattiin vedettömällä magnesiumsulfaatilla. Liuotin tislattiin pois ja jäännöksenä saatu 5 raakatuote puhdistettiin TLC:llä [kehiteliuotin: klorofor mi: asetoni (100:1)], jolloin saatiin 5 mg 7a-(metyylitio)-D-homo-17-oksa-androsta-l,4-dien-3-onia.

^-NMR (CDC13i δ): 1,05 (3H, s), 1,25 (3H, s), 2,01 (3H, s), 2,4 ~ 2,9 (2H, m), 3,00, 3,39 (2H, Abq, J = 11 10 Hz), 3,06 (1H, m), 3,40 (1H, m), 4,05 (1H, m), 6,11 (1H, br s), 6,27 (1H, dd, J = 2, 10 Hz), 7,01 (1H, d, J = 10 Hz).

MS (m/z) : 332 (M+) , 284.

Esimerkki 13

Toistettiin esimerkin 3 menetelmä käyttäen D-homo-15 17-oksa-androsta-4,6-dieeni-3,17a-onia (100 mg) D-homo-17-oksa-androsta-4,6-dien-3-onin sijasta, ja saatu raakatuote puhdistettiin TLC:llä [kehiteliuotin: kloroformi:asetoni (39:1)], jolloin saatiin 71 mg 7a-(asetyylitio)-D-homo-17-oksa-androst-4-eeni-3,17a-dionia.

20 1H-NMR (CDCI3, δ): 1,22 (3H, s), 1,26 (3H, s), 2,35 (3H, s), 2,83 (1H, m), 4,0 ~ 4,6 (3H, m), 5,73 (1H, d, J = 2 Hz).

MS (m/z): 376 (M+) , 334, 319, 301, 285.

I Esimerkki 14 25 7a-(asetyylitio)-D-homo-17-oksa-androst-4-eeni- 3,17a-dionin (33 mg), 1,4 N NaOH-vesiliuoksen (1 ml) ja ’ ' tetrahydrofuraanin (1 ml) seosta sekoitettiin 0 °C:ssa 25 minuuttia. Reaktioseokseen lisättiin 10-%:ista kloorivety-happoa ja seosta sekoitettiin tunnin ajan. Tuote uutettiin ; 30 etyyliasetaatilla ja uute pestiin kyllästetyllä NaCl-liuok- sella ja kuivattiin vedettömällä natriumsulfaatilla. Liuo- /; tin tislattiin pois ja jäännöksenä saatu kiteinen raaka- tuote puhdistettiin kiteyttämällä uudestaan asetonista, ' : jolloin saatiin 27 mg 7a-merkapto-D-homo-17-oksa-androst-4- , '· 35 eeni-3,17a-dionia.

25 114799 1H-NMR (CDC13/ δ): 1,20 (3H, s), 1,27 (3H, s), 2,93 (1H, m), 3,40 (1H, m), 4,1 ~ 4,7 (2H, m), 5,81 (1H, d, J = 2 Hz) .

MS (m/z) : 334 (M+) , 319, 301, 285.

5 Esimerkki 15

Toistettiin esimerkin 3 menetelmä käyttäen D-homo-17-oksa-androsta-l,4,6-trieeni-3,17a-onia (20 mg) D-homo-17-oksa-androsta-4,6-dien-3-onin sijasta, ja saatu raaka-tuote puhdistettiin TLC:llä [kehiteliuotin: kloroformi:ase-10 töni (50:1)] ja sen jälkeen TLC:llä [kehiteliuotin: bent- seeni:etyyliasetaatti (3:1)], jolloin saatiin 7 mg 7a-(asetyylitio)-D-homo-17-oksa-androsta-l,4-dieeni-3,17a-dio-nia.

1H-NMR (CDC13i δ): 1,26 (3H, s), 1,29 (3H, s), 2,35 15 (3H, s), 2,93 (1H, m), 4,0 ~ 4,6 (3H, m), 6,05 (1H, br t, J = 2 Hz), 6,29 (1H, dd, J = 2, 10 Hz), 7,01 (1H, d, J = 10 Hz) .

MS (m/z): 374 (M+) , 359, 332, 298, 283.

Esimerkki 16 20 Toistettiin esimerkin 14 menetelmä käyttäen 7a- (asetyylitio)-D-homo-17-oksa-androsta-l,4-dieeni-3,17a-dio- » · nia 7a-(asetyylitio)-D-homo-17-oksa-androst-4-eeni-3,17a-'1 dionin sijasta, ja saatu raakatuote puhdistettiin TLC:llä j [kehiteliuotin: bentseeni:etyyliasetaatti (3:1)], jolloin * 25 saatiin 1 mg 7a-merkapto-D-homo-17-oksa-androsta-l,4-diee- i ni-3,17a-dionia.

ί 1H-NMR (CDCI3, δ): 1,24 (3H, s), 1,30 (3H, s), 2,54 (1H, dd, J = 2, 14 Hz), 3,04 (1H, m), 3,43 (1H, m), ;· 4,0 - 4,6 (2H, m), 6,15 (1H, br t, J = 2 Hz), 6,30 (1H, dd, ; 30 J = 2, 10 Hz), 7,03 (1H, d, J = 10 Hz).

MS (m/z): 332 (M+) , 317, 298, 283.

I * ' Esimerkki 17 < · 7a-merkapto-D-homo-17-oksa-androst-4-eeni-3,17a-dionin (8 mg), pyridiinin (0,04 ml), bentsoyylikloridin 35 (0,02 ml) ja metyleenikloridin (0,2 ml) jäillä jäähdytettyä seosta sekoitettiin 60 minuuttia. Reaktioseokseen lisättiin 26 114799 vettä ja 5-%:ista kloorivetyhappoa ja tuote uutettiin etyyliasetaatilla. Uute pestiin vedellä ja kuivattiin vedettömällä magnesiumsulfaatilla. Liuotin tislattiin pois ja jäännöksenä saatu raakatuote puhdistettiin TLC:llä [kehite-5 liuotin: bentseeni:etyyliasetaatti (3:1)], jolloin saatiin 8 mg 7a-(bentsoyylitio)-D-homo-17-oksa-androst-4-eeni- 3,17a-dionia.

1H-NMR (CDC13, δ): 1,26 (3H, s), 1,28 (3H, s), 2,9 (1H, m), 3,9 ~ 4,6 (3H, m), 5,73 (1H, d, J = 2 Hz), 10 7,3-8,2 (5H, m).

Esimerkki 18 D-homo-17-oksa-androsta-l,4,6-trien-3-onin (50 mg), 28-%:isen natriummetylaatin metanoliliuoksen (0,05 ml) ja dioksaanin (2 ml) seokseen lisättiin 0,1 ml tiofenolia ja 15 seosta sekoitettiin huoneenlämpötilassa typpikehässä 5 minuuttia. Reaktioseokseen lisättiin vettä ja tuote uutettiin etyyliasetaatilla. Uute pestiin kyllästetyllä NaCl-liuok-sella ja kuivattiin vedettömällä magnesiumsulfaatilla. Liuotin tislattiin pois ja jäännöksenä saatu raakatuote puh-20 distettiin TLC:llä [kehiteliuotin: bentseeni:etyyliasetaat- ti (4:1)], jolloin saatiin 8 mg 7a-(fenyylitio)-D-homo-17-oksa-androsta-1,4-dien-3-onia poolisempana tuotteena.

: 1H-NMR (CDCI3, δ): 1,07 (3H, s), 1,24 (3H, s), ! 2,2 - 2,9 (2H, m), 3,03 (1H, d, J = 11 Hz), 3,2 - 3,7 (3H, • * . 25 m), 4,00 (1H, m), 6,00 (1H, br s), 6,29 (1H, dd, J = 2, 10 ;; / Hz) , 7,04 (1H, d, J = 10 Hz) , 7,2 - 7,5 (5H, m) .

'· ; MS (m/z) : 394 (M+) , 284.

Lisäksi saatiin 80 mg la,7a-bis(fenyylitio)-D-homo-17-oksa-androst-4-en-3-onia vähemmän poolisena tuotteena.

30 1H-NMR (CDCI3, δ): 1,06 (3H, s), 1,37 (3H, s), .V. 2,4 - 2,8 (4H, m), 3,07 (1H, d, J = 11 Hz), 3,2 - 3,7 (4H, • * » >!.!i m), 4,01 (1H, m), 5,71 (1H, br s), 7,1 - 7,6 (10H, m).

MS (m/z): 504 (M+) , 394, 284.

ί Esimerkki 19 * f”: 35 Toistettiin esimerkin 18 menetelmä käyttäen etaani- tiolia tiofenolin sijasta ja liuotinseosta dioksaani- 27 114799 dimetyyliformamidia dioksaanin sijasta, ja saatu raakatuote puhdistettiin TLC:llä [kehiteliuotin: heksaani:etyyliase taatti (1:1)], jolloin saatiin 12 mg la-(etyylitio)-D-homo-17-oksa-androsta-4,6-dien-3-onia vähemmän poolisena tuot-5 teenä.

^-NMR (CDC13, δ): 1,08 (3H, s), 1,23 (3H, t, J = 7

Hz), 1,26 (3H, s), 2,3 ~ 3,6 (8H, m), 4,07 (1H, m), 5,72 (1H, s), 6,17 (2H, s).

Poolisempi tuote puhdistettiin edelleen TLC:llä 10 [kehiteliuotin: kloroformi:asetoni (19:1)], jolloin saatiin 30 mg la,7a-bis(etyylitio)-D-homo-17-oksa-androst-4-en-3-onia vähemmän poolisena tuotteena.

1H-NMR (CDCI3, δ): 1,03 (3H, s), 1,23 (6H, t, J = 7

Hz), 1,35 (3H, s), 2,2 ~ 3,7 (13H, m), 4,03 (1H, m), 5,79 15 (1H, s).

MS (m/z) : 408 (M+) , 379, 346, 320, 284.

Lisäksi saatiin 19 mg 7a-(etyylitio)-D-homo-17-oksa-androsta-1,4-dien-3-onia poolisempana tuotteena.

1H - NMR (CDCI3, δ): 1,05 (3H, s), 1,22 (3H, t, J = 7 20 Hz), 1,24 (3H, s), 2,3 ~ 3,6 (8H, m), 4,02 (1H, m), 6,10 ’ (1H, br, s), 6,26 (1H, dd, J = 2, 10 Hz), 7,01 (1H, d, : J = 10 Hz.

.* *. MS (m/z) : 346 (M+) , 284 .

,, Esimerkki 2 0 * . . 25 Toistettiin esimerkin 19 menetelmä käyttäen 2-ami- * · noetaanitiolia etaanitiolin sijasta, ja saatu raakatuote puhdistettiin TLC:llä [kehiteliuotin: kloroformi:metanoli (9:1)], jolloin saatiin 10 mg 7a-[(2-aminoetyyli)tio]-D-ho- - · . mo-17-oksa-androsta-l,4-dien-3-onia.

·' 30 1H-NMR (CDCI3, δ): 1,05 (3H, s) , 1,24 (3H, s), 2,4 - 3,6 (12H, m), 4,00 (1H, m), 6,1, 5(1H, br s), 6,27 (1H, dd, J = 2, 10 Hz), 7,02 (1H, d, J = 10 Hz.

2s 1 14799

Esimerkki 21

Toistettiin esimerkin 18 menetelmä käyttäen metyy-litioglykolaattia tiofenolin sijasta ja dimetyyliformamidia dioksaanin sijasta, ja saatu raakatuote puhdistettiin 5 TLCillä [kehiteliuotin: heksaani:etyyliasetaatti (1:1)] ja sen jälkeen TLC:llä [kehiteliuotin: kloroformi:asetoni (19:1)], jolloin saatiin 7a-(metoksikarbonyylimetyylitio)-D-homo-17-oksa-androsta-l,4-dien-3-oni.

1H - NMR (CDC13, δ): 1,05 (3H, s), 1,25 (3H, s), 10 2,6 ~ 2,8 (2H, m), 3,00 (1H, d, J = 11 Hz), 3,16 (2H, d, J = 1 Hz, s), 3,2 ~ 3,6 (3H, m), 3,71 (3H, s), 4,01 (1H, m), 6,08 (1H, br s), 6,27 (1H, dd, J = 2, 10 Hz), 7,00 (1H, d, J = 10 Hz.

MS (m/z) : 390 (M+) , 331, 284.

15 Esimerkki 22 D-homo-17-oksa-androsta-l,4,6-trien-3-onin (50 mg) ja tiobentsoehapon (1 ml) seosta kuumennettiin 60 °C:ssa typpikehässä. Reaktioseokseen lisättiin vettä ja tuote uutettiin etyyliasetaatilla. Uute pestiin 5-%:isella NaHC03-20 vesiliuoksella ja kyllästetyllä NaCl-liuoksella ja kuivat-tiin vedettömällä magnesiumsulfaatilla. Liuotin tislattiin * · pois ja jäännöksenä saatu raakatuote puhdistettiin TLC:llä [kehiteliuotin: heksaani:etyyliasetaatti (2:1)], jolloin , saatiin 95 mg la,7a-bis(bentsoyylitio)-D-homo-17-oksa-an- ; 25 drost-4-en-3-onia poolisempana tuotteena.

*’ / 1H-NMR (CDCI3, δ): 1,04 (3H, s) , 1,51 (3H, s), • · '· ' 2,5 ~ 3,5 (7H, m), 3,8 ~ 4,5 (3H, m), 5,77 (1H, s), 7,3 ~ 8,1 (10H, m) .. MS (m/z): 422 (M+ -C6H5COSH) , 284.

30 Lisäksi saatiin 4 mg la- (bentsoyylitio) -D-homo-17- .V. oksa-androsta-4,6-dien-3-onia vähemmän poolisena tuotteena.

,·’··. 1H-NMR (CDCI3, δ): 1,06 (3H, s), 1,36 (3H, s), * · 2,5 - 3,6 (5H, m), 3,9 ~ 4,4 (2H, m), 5,77 (1H, s), 6,24 ί (2H, s) , 7,3 ~ 8,0 (5H, m) .

35 MS (m/z): 422 (M+) , 284.

29 114799

Esimerkki 23 7a-merkapto-D-homo-17-oksa-androsta-l,4-dien-3-onin (50 mg), pyridiinin (0,4 ml) ja bentsoyylikloridin (0,2 ml) seosta sekoitettiin yön yli huoneenlämpötilassa. Reaktio-5 seokseen lisättiin vettä ja 5-%:ista HCl-vesiliuosta ja tuote uutettiin etyyliasetaatilla. Uute pestiin vedellä ja kuivattiin vedettömällä magnesiumsulfaatilla. Liuotin tislattiin pois ja jäännöksenä saatu raakatuote puhdistettiin TLC:llä [kehiteliuotin: heksaani:etyyliasetaatti (1:1)], 10 jolloin saatiin 57 mg la-(bentsoyylitio)-D-homo-17-oksa-an-drosta-1,4-dien-3-onia.

hl-NMR (CDC13, δ): 1,08 (3H, s) , 1,30 (3H, s), 2,55 (1H, dd, J = 3, 14 Hz, s), 2,8 - 3,5 (4H, m), 3,94 (1H, m), 4,34 (1H, m), 6,04 (1H, br s), 6,30 (1H, dd, J = 2, 10 Hz), 15 7,04 (1H, d, J = 10 Hz, 7,3 ~ 8,2 (5H, m).

MS (m/z) : 422 (M+) , 284.

Esimerkki 24 la-(metyylitio)-D-homo-17-oksa-androsta-l,4-dien-3-onin (10 mg) , m-klooriperbentsoehapon (5 mg) ja bentseenin 20 (0,6 ml) seosta sekoitettiin 10°C:ssa 10 minuuttia. Reak- tioseokseen lisättiin vettä ja tuote uutettiin etyyliase-'·. taatilla. Uute pestiin 5-%:isella NaHCCL-vesiliuoksella ja kyllästetyllä NaCl-liuoksella ja kuivattiin vedettömällä natriumsulfaatilla. Liuotin tislattiin pois ja jäännöksenä 25 saatu raakatuote puhdistettiin TLC:llä [kehiteliuotin:klo- * roformi : met anoi i (15:1)], jolloin saatiin 3 mg la- (metyyli -sulfinyyli)-D-homo-17-oksa-androsta-l,4-dien-3-onia pooli-sempana yhdisteenä.

. 1H-NMR (CDCI3, δ): 1,05 (3H, s), 1,30 (3H, s), 2,66 : .·* 30 (3H, s), 2,4 ~ 3,7 (6H, m), 3,97 (1H, m), 5,94 (1H, br s), 6,29 (1H, dd, J = 2, 10 Hz), 7,10 (1H, d, J = 10 Hz).

• * .···. MS (m/z): 348 (M+) , 285.

Lisäksi saatiin 1 mg la-(metyylisulfonyyli)-D-homo- : .* 17-oksa-androsta-l,4-dien-3-onia vähemmän poolisena yhdis- 3 5 teenä.

1 14799 30 1H-NiyiR (CDC13, δ): 1,05 (3H, s), 1,26 (3H, s), 2,89 (3H, s), 2,7 ~ 3,8 (5H, ra), 4,03 (1H, ra), 6,17 (1H, br s), 6,29 (1H, dd, J = 2, 10 Hz), 7,07 (1H, d, J = 10 Hz).

MS (m/z) : 364 (M+) , 284.

5 Esimerkki 25 7a-(metyylitio)-D-homo-17-oksa-androsta-1,4-dien-3-onin (10 mg) ja tioetikkahapon (0,2 ml) seosta sekoitettiin typpikehässä huoneenlämpötilassa tunnin ajan. Reaktioseok-seen lisättiin vettä ja tuote uutettiin etyyliasetaatilla.

10 Uute pestiin 5-%:isella NaHC03-vesiliuoksella ja kylläste tyllä NaCl-liuoksella ja kuivattiin vedettömällä magnesium-sulfaatilla. Liuotin tislattiin pois ja jäännöksenä saatu raakatuote puhdistettiin TLC:llä [kehiteliuotin: klorofor mi :asetoni (19:1)], jolloin saatiin 12 mg la-(asetyylitio)-15 la-(metyylitio)-D-homo-17-oksa-androst-4-en-3-onia.

1H-NMR (CDCI3, δ): 1,01 (3H, s), 1,40 (3H, s) , 2,05 (3H, s), 2,34 (3H, s), 2,4 ~ 3,6 (8H, m), 3,9 ~ 4,2 (2H, m), 5,80 (1H, br s).

MS (m/z) : 408 (M+) , 284 .

20 Esimerkki 26 7a-merkapto-D-homo - 17-oksa-androst-4 -eeni-3,17a-di-onin (15 mg), pyridiinin (0,75 ml) ja propionihappoanhydri-·. din (0,05 ml) seosta sekoitettiin yön yli typpikehässä huo- neenlämpötilassa. Reaktioseokseen lisättiin vettä ja 5-. . 25 %:ista HCl-vesiliuosta ja tuote uutettiin etyyliasetaatil la. Uute pestiin 5-%:isella NaHC03-vesiliuoksella ja kyl-* ’ lästetyllä NaCl-liuoksella ja kuivattiin vedettömällä nat- riumsulfaatilla. Liuotin tislattiin pois ja jäännöksenä .· ’ saatu raakatuote puhdistettiin TLC:llä [kehiteliuotin:hek- 30 saani:etyyliasetaatti (1:1)], jolloin saatiin 3 mg 7a- •V. (propionyylitio)-D-homo-17-oksa-androst-4-eeni-3,17a-di- ,*··, onia.

^-NMR (CDCI3, δ): 1,17 (3H, t, J = 7, 5 Hz), 1,22 : (3H, s), 1,26 (3H, s), 2,58 (2H, q, J = 7,5 Hz), 2,9 (1H, 35 m), 4,0 ~ 4,6 (3H, m), 5,72 (1H, d, J = 2 Hz).

MS (m/z): 390 (M+) , 357, 334.

31 114799

Esimerkki 27

Toistettiin esimerkin 26 menetelmä käyttäen dime-tyylikarbamoyylikloridia propionihappoanhydridin sijasta, jolloin saatiin 17 mg la- (N,N-dimetyylikarbamoyylitio)-D-5 homo-17-oksa-androst.-4-eeni-3 ,17a-dionia.

1H-N1VIR (CDC13, δ): 1,22 (3H, s), 1,27 (3H, s), 3,00 (6H, s), 4,0 - 4,6 (3H, m), 5,76 (1H, d, J = 1,5 Hz).

MS (m/z) : 405 (M+) , 390, 372, 333.

Esimerkki 28 10 Toistettiin esimerkin 26 menetelmä käyttäen etyyli- kloorikarbonaattia propionihappoanhydridin sijasta, jolloin saatiin 9 mg la-(etoksikarbonyylitio)-D-homo-17-oksa-an-drost-4-eeni-3,17a-dionia.

1H-NMR (CDCI3, δ): 1,22 (3H, s), 1,27 (3H, s), 1,31 15 (3H, t, J = 7Hz) , 2,57 (1H, dd, J = 3, 10 Hz), 2,88 (1H, ddd, J = 1,8, 4, 15 Hz), 3,8 ~ 4,0 (1H, m), 4,26 (2H, q, J = 7 Hz), 4,0 ~ 4,6 (2H, m), 5,78 (1H, m).

MS (m/z): 406 (M+) , 391, 362, 347.

Esimerkki 29 2 0 D-homo-17-oksa-androsta-4,6-dieeni-3,17a-dionin (15 mg), 28-%:isen natriummetylaatin metanoliliuoksen « (1 μΐ), allyylimerkaptaanin (30 μΐ) ja dioksaanin (0,23 ml) ·, seosta sekoitettiin typpikehässä huoneenlämpötilassa 3 päi- vää. Reaktioseokseen lisättiin vettä ja 5-%:ista HCl-vesi-, , 25 liuosta ja tuote uutettiin etyyliasetaatilla. Uute pestiin / 5-%:isella NaHC03-vesiliuoksella ja kyllästetyllä NaCl- • ‘ liuoksella ja kuivattiin vedettömällä natriumsulfaatilla.

Liuotin tislattiin pois ja jäännöksenä saatu raakatuote . · puhdistettiin TLCrllä [kehiteliuotin: heksaani:etyyliase- ,,,·' 30 taatti (1:1)], jolloin saatiin 10 mg la- (allyylitio) -D- V, homo-17-oksa-androst-4-eeni-3,17a-dionia.

'.1> 1H-NMR (CDCI3, δ): 1,20 (3H, s) , 1,25 (3H, s), 3,0 - 3,2 (3H, m), 4,1 - 4,7 (2H, m) 5,08 (1H, dd, J = 1, 3, 15 Hz), 5,11 (1H, dd, J = 1,8, 11 Hz), 5,4 - 6,1 (1H, 35 m) , 5,78 (1H, br , s) .

MS (m/z): 374 (M+) , 359, 341, 333.

32 114799

Esimerkki 30

Toistettiin esimerkin 29 menetelmä käyttäen etaani-tiolia allyylimerkaptaanin sijasta, ja saatu raakatuote puhdistettiin TLC:llä [kehiteliuotin: heksaani:etyyliase- 5 taatti (2:1)], jolloin saatiin 6 mg 7o?-(etyylitio)-D-homo-17-oksa-androst-4-eeni-3,17a-dionia.

1H-NMR (CDC13, δ): 1,21 (3H, s), 1,24 (3H, t, J = 7

Hz), 1,26 (3H, s), 2,3 ~ 2,7 (4H, m), 3,1 ~ 3,2 (1H, m), 4,1 ~ 4,6 (2H, m), 5,7 8 (1H, br ,s).

10 MS (m/z) : 362 (M+) , 347, 333.

Esimerkki 31

Toistettiin esimerkin 29 menetelmä käyttäen 2-mer-kaptoetanolia allyylimerkaptaanin sijasta, ja saatu raaka-tuote puhdistettiin TLC:llä [kehiteliuotin: kloroformi:me- 15 tanoli (9:1)], jolloin saatiin 4 mg 7a-[ (2-hydroksietyy-li)tio]-D-homo-17-oksa-androst-4-eeni-3,17a-dionia.

1H-NMR (CDC13/ δ): 1,21 (3H, s), 1,26 (3H, s), 2,70 (2H, t, J = 6 Hz) , 3,1 ~ 3,3 (1H, m), 3,74 (2H, t, J = 6

Hz), 4,1 ~ 4,7 (2H, m), 5,79 (1H, br ,s).

20 MS (m/z): 378 (M+) , 363, 360, 348.

Esimerkki 32 » « 7a-merkapto-D-homo-17-oksa-androsta-l,4-dieeni-3,17a-dionin (15 mg), pyridiinin (0,75 ml) ja bentsoyyli-kloridin (0,05 ml) seosta sekoitettiin yön yli typpikehässä , . 25 huoneenlämpötilassa. Reaktioseokseen lisättiin vettä ja 5- %:ista HCl-vesiliuosta ja tuote uutettiin etyyliasetaatil- • ’ la. Uute pestiin 5-%:isella NaHC03-vesiliuoksella ja kyl lästetyllä NaCl-liuoksella ja kuivattiin vedettömällä nat-.. ’ riumsulfaatilla. Liuotin tislattiin pois ja jäännöksenä ·’, ,·’ 30 saatu raakatuote puhdistettiin TLC:llä [kehiteliuotin:klo- .V, roformi:asetoni (19:1)] ja sitten TLC:llä [kehiteliuotin: I · • ! ,··>, heksaani: etyyliasetaatti (1:1)], jolloin saatiin 12 mg la- I 1 (bentsoyylitio)-D-homo-17-oksa-androsta-l,4-dieeni-3,17a-; ,· dionia.

35 1H-NMR (CDCI3, δ): 1,30 (3H, s), 1,31 (3H, s), 2,55 (1H, dd, J = 2,9, 14 Hz), 3,05 (1H, ddd, J = 1,5, 4, 14 114799 33

Hz), 2,9 ~ 3,6 (3H, m), 6,07 (1H, br, s), 6,30 (1H, dd, J = 2, 10 Hz), 7,06 (1H, d, J = 10 Hz), 7,3 ~ 7,7 (3H, m), 7,8 ~ 8,0 (2H, m) .

MS (m/z) : 436 (M+) , 421, 403.

5 Esimerkki 33

Toistettiin esimerkin 32 menetelmä käyttäen pro- pionihappoanhydridiä bentsoyylikloridin sijasta, jolloin saatiin 11 mg 7a- (propionyylitio) -D-homo-17-oksa-androsta- 1,4-dieeni-3,17a-dionia.

10 1H-NMR (CDC13, δ): 1,17 (3H, t, J = 8 Hz ), 1,26 (3H, s), 1,29 (3H, s), 2,58 (2H, q, J = 8 Hz) , 2,97 (1H, ddd, J = 1,5, 4, 14 Hz), 4,0 ~ 4,6 (3H, m), 6,05 (1H, t, J = 1, 5 Hz) , 6,27 (1H, dd, J = 2, 10 Hz), 7,02 (1H, d, J = 10 Hz).

15 MS (m/z): 389 (M+) , 360, 332.

Esimerkki 34

Toistettiin esimerkin 32 menetelmä käyttäen dime-tyylikarbamoyylikloridia bentsoyylikloridin sijasta, jol loin saatiin 17 mg 7a-(N,N-dimetyylikarbamoyylitio)-D-homo-2 0 17-oksa-androsta-1,4-dieeni-3,17a-dionia.

1H-NMR (CDCI3, δ): 1,26 (3H, s), 1,30 (3H, s), 2,99 1 · (6H, s), 4,0 ~ 4,6 (3H, m), 6,09 (1H, t, J = 1, 5 Hz), 6,27 (1H, dd, J = 2, 10 Hz), 7,04 (1H, d, J = 10 Hz).

MS (m/z): 403 (M+) , 388, 370, 332.

25 Esimerkki 35 *

Toistettiin esimerkin 32 menetelmä käyttäen etyyli- ‘ · ' ‘ kloorikarbonaattia bentsoyylikloridin sijasta, jolloin saa tiin 14 mg 7a-(etoksikarbonyylitio)-D-homo-17-oksa-andros-.. : ta-l, 4-dieeni-3,17a-dionia .

•\ 30 1H-NMR (CDCI3, δ): 1,26 (3H, s), 1,30 (3H, s), 1,31 (3H, t, J = 7 Hz) , 2,61 (1H, dd, J = 3, 14 Hz), 2,97 (1H, • · ddd, J = 1, 3, 4, 14), 3,8-4,6 (3H, m), 4,28 (2H, q, J = 7 Hz) , 6,11 (1H, t, J = 1, 5 Hz), 6,27 (1H, dd, J = 2, ; 10 Hz), 7,02 (1H, d, J = 10 Hz).

j 35 MS (m/z): 405 (M+) , 375, 360.

4799 34

Esimerkki 36

Toistettiin esimerkin 29 menetelmä käyttäen D-homo-17-oksa-androsta-1,4,6-treeni-3,17a-dionia D-homo-17-oksa-androsta-4,6-dieeni-3,17a-dionin sijasta, ja saatu raaka-5 tuote puhdistettiin TLC:llä [kehiteliuotin: heksaani:etyy liasetaatti (1:1)], jolloin saatiin 1 mg 7a-(allyylitio)-D-homo-17-oksa-androsta-1,4-dieeni-3,17a-dionia poolisempana tuotteena.

1H-NMR (CDC13, δ): 1,24 (3H, s), 1,27 (3H, s), 2,53 10 (1H, dd, J = 3, 14 Hz), 2,80 (1H, ddd, J = 1, 3, 4, 14 Hz), 3,0 - 3,3 (3H, m), 4,1 - 4,6 (2H, m), 4,9 ~ 5,2 (2H, m), 5,5 - 6,1 (1H, m), 6,12 (1H, t, J = 1, 3 Hz), 6,27 (1H, dd, J = 2, 10 Hz), 7,02 (1H, d, J = 10 Hz).

MS (m/z) : 372 (M+) , 358, 339, 331.

15 Vähemmän poolinen osa puhdistettiin edelleen TLC:llä [kehiteliuotin: bentseeni:etyyliasetaatti (4:1)], jolloin saatiin 14 mg la,7a-bis(allyylitio)-D-homo-17-oksa-androst-4-eeni-3,17a-dionia poolisempana tuotteena.

1H-NMR (CDCI3, δ): 1,25 (3H, s), 1,34 (3H, s), 20 2,5 ~ 3,2 (10H, m), 4,1 ~ 4,7 (2H, m), 4,9 ~ 5,2 (4H, m), 5,4 ~ 6,0 (2H, m), 5, 81 (1H, br s).

·. Lisäksi saatiin 4 mg la-(allyylitio)-D-homo-17- oksa-androsta-4,6-dieeni-3,17a-dionia vähemmän poolisena i tuotteena.

* · 25 1H-NMR (CDCI3, δ): 1,25 (3H, s), 1,31 (3H, s), • 2,5 ~ 3,0 (2H, m), 3,0 ~ 3,2 (3H, m), 4,1 ~ 4,7 (2H, m), : 4,9 ~ 5,3 (2H, m), 5,5 ~ 6,1 (1H, m), 5,74 (1H, s), 6,18 (2H, br s) .

;* Esimerkki 37 : 30 7a-merkapto-D-homo-17-oksa-androsta-l,4-dieeni- 3,17a-dionin (21 mg), 28-%:isen natriummetylaatin metanoli-) liuoksen (19 μΐ) ja metanolin (0,45 ml) seokseen lisättiin ;* 4 μΐ etyylibromidia ja seosta sekoitettiin typpikehässä j huoneenlämpötilassa 5 minuuttia. Reaktioseokseen lisättiin 35 3,6-%:ista HC1-vesiliuosta ja tuote uutettiin etyyliasetaatilla. Uute pestiin 5-%:isella NaHC03-vesiliuoksella ja 35 114799 kyllästetyllä NaCl-liuoksella ja kuivattiin vedettömällä magnesiumsulfaatilla. Liuotin tislattiin pois ja jäännöksenä saatu raakatuote puhdistettiin TLC:llä [kehiteliuotin-, kloroformi:asetoni (19:1)], jolloin saatiin 8 mg 7a-(etyy-5 litio)-D-homo-17-oksa-androsta-l,4-dieeni-3,17a-dionia.

^-NMR (CDC13, δ): 1,24 (3H, s), 1,28 (3H, s), 2.3 - 3,0 (4H, m), 3,1 ~ 3,3 (1H, m), 4,1 ~ 4,7 (2H, m), 6,11 (1H, t, J = 1, 5 Hz), 6,26 (1H, dd, J - 2, 10 Hz), 7.03 (1H, d, J = 10 Hz).

10 MS (m/z) : 360 (M+) , 345, 332.

Esimerkki 38 7a-merkapto-D-homo-17-oksa-androsta-l,4-dieeni-3,17a-dionin (21 mg), 28-%:isen natriummetylaatin metanoli-liuoksen (14 μΐ) ja dimetyyliformamidin (1 ml) seokseen li-sättiin 30 μΐ etyleenibromihydriiniä ja seosta sekoitettiin typpikehässä huoneenlämpötilassa 5 minuuttia. Reaktioseok-seen lisättiin 3,6-%:ista HCl-vesiliuosta ja tuote uutettiin etyyliasetaatilla. Uute pestiin 5-%:isella NaHC03- vesiliuoksella ja kyllästetyllä NaCl-liuoksella ja kuivat-20 tiin vedettömällä magnesiumsulfaatilla. Liuotin tislattiin : pois ja jäännöksenä saatu raakatuote puhdistettiin TLC:llä [kehiteliuotin: kloroformi:asetoni (4:1)], jolloin saatiin 12 mg 7a-[(2-hydroksietyyli)tio]-D-homo-17-oksa-androsta-, 1,4-dieeni-3,17a-dionia .

; 25 1H-NMR (CDCI3, δ): 1,25 (3H, s) , 1,28 (3H, s), 2,70 " (2H, t J = 6 Hz), 2,3 - 3,0 (2H, m), 3,2 ~ 3,4 (2H, m), * · '· * 3,6 - 3,9 (2H, br m), 4,1 ~ 4,7 (2H, m), 6,12 (1H, t, J = 1, 3 Hz), 6,27 (1H, dd, J = 2, 10 Hz), 7,04 (1H, d, . J = 10 Hz) .

: 30 MS (m/z): 376 (M+) , 361, 346, 331.

, ·. Esimerkki 3 9 * ·

Toistettiin esimerkin 38 menetelmä käyttäen etyyli- » ‘ bromiasetaattia etyleenibromihydriinin sijasta, ja saatu raakatuote puhdistettiin TLC:llä [kehiteliuotin: klorofor- ·.· 35 mi:asetoni (19:1)], jolloin saatiin 2 mg 7a-(etoksikar- 36 114799 bonyylimetyylitio)-D-homo-17-oksa-androsta-l,4-dieeni-3,17a-dionia.

^-NMR (CDCls, δ): 1,25 (3H, s), 1,28 (3H, s), 2,61 (1H, dd, J = 3, 14 Hz), 2,86 (1H, ddd, J = 1,5, 3, 14 Hz), 5 3,18, 3,21 (2H, AB q J = 15 Hz), 3,4 ~ 3,6 (1H, m), 3,73 (3H, s), 4,1 ~ 4,7 (2H, m), 6,10 (1H, br m), 6,27 (1H, dd, J = 1,8, 10 Hz), 7,02 (1H, d, J = 10 Hz).

MS (m/z) : 404 (M+) , 389, 372, 345.

Esimerkki 40 10 Toistettiin esimerkin 38 menetelmä käyttäen metyy li jodidia etyleenibromihydriinin sijasta, ja saatu raaka-tuote puhdistettiin TLC:llä [kehiteliuotin: heksaani:etyyliasetaatti (1:1)], jolloin saatiin 15 mg 7a-(metyylitio)-D-homo-17-oksa-androsta-l,4-dieeni-3,17a-dionia.

15 1H-NMR (CDCls, δ): 1,25 (3H, s), 1,28 (3H, s), 2,04 (3H, s), 2,5 ~ 2,9 (2H, m), 3,0 ~ 3,2 (1H, m), 4,0 ~ 4,6 (2H, m), 6,12 (1H, br s), 6,27 (1H, dd, J = 1, 8, 10 Hz), 7,03 (1H, d, J = 10 Hz).

MS (m/z): 346 (M+) , 331, 300, 298.

20 Esimerkki 41 lot- (metyylitio) -D-homo-17-oksa-androsta-l, 4-dieeni-·. 3,17a-dionin (13 mg), m-klooriperbentsoehapon (6,5 mg) ja vedettömän bentseenin (0,8 ml) seosta sekoitettiin huoneen-’ lämpötilassa 20 minuuttia. Liuotin tislattiin pois ja jään- 25 nöksenä saatu raakatuote puhdistettiin TLC:llä [kehiteliuo-·; · tin: kloroformi: metanoii (9:1)], jolloin saatiin 7 mg 7a- *· * (metyylisulfinyyli)-D-homo-17-oksa-androsta-l,4-dieeni- 3,17a-dionia.

1H-NMR (CDCls, δ): 1,28 (3H, s), 1,30 (3H, s), 2,69 :* : 30 (3H, s), 3,2 - 3,4 (1H, m), 4,2 ~ 4,5 (2H, m), 5,9 ~ 6,0 (1H, m), 6,29 (1H, dd, J = 1,8, 10 Hz), 7,11 (1H, d, J = 10 • · ; Hz).

‘‘y‘ MS (m/z): 362 (M+) , 346, 344.

Esimerkki 42 35 28-%:isen natriummetylaatin metanoliliuoksen (14 μΐ) ja dimetyyliformamidin (1 ml) seos jäähdytettiin 37 114799 -20 °C: seen ja siihen lisättiin typpikehässä huomattavasti ylimäärin metaanitiolia ja sitten sekoitettiin 5 minuuttia.

Tähän reaktioseokseen lisättiin 15 mg D-homo-17-oksa-androsta-1,4,6-trieeni-3,17a-dionia ja seosta sekoitettiin 5 huoneenlämpötilassa 3 päivää. Reaktioseokseen lisättiin 5-%:ista HC1-vesiliuosta ja tuote uutettiin etyyliasetaatilla. Uute pestiin 5-%:isella NaHC03-vesiliuoksella ja kyllästetyllä NaCl-liuoksella ja kuivattiin vedettömällä nat-riumsulfaatilla. Liuotin tislattiin pois ja jäännökse-10 nä saatu raakatuote puhdistettiin TLC:llä [kehiteliuotin: heksaani:etyyliasetaatti (1:1)], jolloin saatiin 20 mg la, 7oi-bis (metyylitio) -D-homo-17-oksa-androst-4-eeni-3,17a-dionia.

1H-NMR (CDC13, δ): 1,26 (3H, s), 1,36 (3H, s), 2,07 15 (3H, s), 2,09 (3H, s), 2,4 - 3,2 (6H, m), 4,1 ~ 4,6 (2H, m), 5,82 (1H, br s).

MS (m/z) : 394 (M+) , 379, 347, 320.

Esimerkki 43 D-homo-17-oksa-androsta-l, 4,6-trieeni-3,17a-dionin 20 (2 g) ja tioetikkahapon (8 ml) seosta kuumennettiin palau- tusjäähdyttäen 4 tuntia. Reaktioseoksen annettiin jäähtyä ja se kaadettiin jääveteen, johon oli liuotettu 4,8 g nat- riumhydroksidia, ja tuote uutettiin etyyliasetaatilla. Uute pestiin 5-%:isella NaHCCb-vesiliuoksella ja kyllästetyllä , . 25 NaCl-liuoksella ja kuivattiin vedettömällä magnesiumsulfaa- » tiliä. Liuotin tislattiin pois ja jäännöksenä saatu raaka- » « · ' tuote kiteytettiin dietyylieetteri-etyyliasetaattiseokses- ta, jolloin saatiin 2,45 g la,7a-bis(asetyylitio)-D-homo-17-oksa-androst-4-eeni-3,17a-dionia.

30 1H-NMR (CDCI3, δ): 1,25 (3H, s), 1,40 (3H, s), 2,36 .·!·. (3H, s), 2,39 (3H, s), 4,0 ~ 4,7 (4H, m), 5,74 (1H, br s).

» * t MS (m/z): 451 (M+) , 407, 390, 375.

Saatu emäliuos puhdistettiin TLC:llä [kehiteliuo-; tin: heksaani:etyyliasetaatti (1:1)], jolloin saatiin 35 106 mg la-(asetyylitio)-D-homo-17-oksa-androsta-4,6-dieeni- 3,17a-dionia.

38 1 1 4799 1H-NMR (CDC13, δ): 1,30 (6H, s), 2,32 (3H, s), 2,67 (1H, ddd, J = 1, 2, 6 18 Hz), 3,1 2 (1H, dd, J = 4, 18 Mz), 4.0 ~ 4,2 (1H, m), 4,2 ~ 4,7 (2H, m), 5,74 (1H, s), 6,20 (2H, s) .

5 MS (m/z): 374 (M+) , 346, 341, 332.

Esimerkki 44 lo;, 7a-bis (asetyylitio) -D-homo-17-oksa-androst-4-eeni-3,17a-dionin (1 g), 28-%:isen natriummetylaatin me- tanoliliuoksen (1,8 ml) ja metanolin (10 ml) seosta sekoi-10 tettiin huoneenlämpötilassa typpikehässä 30 minuuttia. Re-aktioseos kaadettiin 3,6-%:iseen HCl-vesiliuokseen ja tuote uutettiin etyyliasetaatilla. Uute pestiin 5-%:isella NaH-C03-vesiliuoksella ja kyllästetyllä NaCl-liuoksella ja kuivattiin vedettömällä magnesiumsulfaatilla. Liuotin tislat-15 tiin pois ja jäännöksenä saatu raakatuote puhdistettiin si-likageelipylväskromatografiällä [eluointiliuotin kloroformi] , jolloin saatiin 694 mg 7a-merkapto-D-homo-17-oksa-androsta-1,4-dieeni-3,17a-dionia. Sulamispiste: 207 - 211 °C (dikloorimetaani-etyyliasetaatti) .

20 1H-NMR (CDCI3, δ): 1,24 (3H, s), 1,30 (3H, s), 2,54 : ·. (1H, dd, J = 2, 14 Hz), 3,04 (1H, m), 3,43 (1H, m), » · 4.0 ~ 4,6 (2H, m), 6,15 (1H, br t, J = 2 Hz), 6,30 (1H, dd * · . J = 2, 10 Hz), 7,03 (1H, d, J = 10 Hz).

I MS (m/z): 332 (M+) , 317, 298, 283.

25 Alkuaineanalyysi: •'1 Laskettu kaavalle C19H24O3S: C 68,64; H 7,28 V : saatu: C 68,60; H 7,34.

Valmistusesimerkki 1 ’ D-homo-17-oksa-androsta-4,6-dieeni-3,17a-dionin 30 (2,0 g), litiumtri-tert-butoksialuminiumhydridin (4,6 g) ja tetrahydrofuraanin (100 ml) seosta sekoitettiin 0 °C:ssa 20 minuuttia. Reaktioseokseen lisättiin vettä ja 5-%:ista HC1-'·;·* vesiliuosta ja tuote uutettiin etyyliasetaatilla. Uute pes- : tiin 5-%:isella NaHC03-vesiliuoksella ja kyllästetyllä ;··· 35 NaCl-liuoksella ja kuivattiin vedettömällä magnesiumsulfaa- 39 114799 tiliä. Liuotin tislattiin pois, jolloin saatiin 1,8 g 17a£-hydroksi-D-homo-17-oksa-androsta-4,6-dien-3-onia.

Valmistusesimerkki 2 17a£-hydroksi-D-homo-17-oksa-androsta-4,6-dien-3-5 onin (1,8 g), pyridiinin (12 ml) ja etikkahappoanhydridin (6 ml) seosta sekoitettiin huoneenlämpötilassa 15 tuntia. Reaktioseokseen lisättiin vettä ja tuote uutettiin etyyliasetaatilla. Uute pestiin 3-%:isella HCl-vesiliuoksella, 5-%:isella NaHC03-vesiliuoksella ja kyllästetyllä NaCl-liuok-10 sella ja kuivattiin vedettömällä magnesiumsulfaatilla. Liuotin tislattiin pois ja saatu raakatuote puhdistettiin TLC:llä [kehiteliuotin: kloroformi:asetoni (39:1)], jolloin saatiin 1,73 g 17a£-asetoksi-D-homo-17-oksa-androsta-4,6-dien-3-onia.

15 Valmistusesimerkki 3

Toistettiin esimerkin 6 menetelmä käyttäen 17a£-asetoksi-D-homo-17-oksa-androsta-4,6-dien-3-onia (800 mg) D-homo-17-oksa-androsta-4,6-dien-3-onin sijasta, ja saatu raakatuote puhdistettiin TLC:llä [kehiteliuotin: bentsee- 20 ni: etyyliasetaatti (1:1)], jolloin saatiin 106 mg 7o:-bents-·. yyli-17 a ξ-hydroksi-D-homo-17-oksa-androst-4-en-3-onia.

·. Valmistusesimerkki 4 ; D-homo-17-oksa-androst-4-en-3-onin (2,0 g), etylee- ; niglykolin (100 ml), p-tolueenisulfonihapon (500 mg) ja 25 bentseenin (400 ml) seoksesta poistettiin vähitellen atseo- * • trooppisesti vettä Dean-Stark-laitteen avulla. Reaktioseok- ·, * seen lisättiin 5-%:ista NaHC03-vesiliuosta ja tuote uutet tiin etyyliasetaatilla. Uute pestiin kyllästetyllä NaCl-' liuoksella ja kuivattiin vedettömällä magnesiumsulfaatilla, i ; 30 Liuotin tislattiin pois, jolloin saatiin 2,4 g 3,3:17a,17a- . bis(etyleenidioksi)-D-homo-17-oksa-androst-5-eenia.

’1H-NMR (CDC13, δ): 1,02 (3H, s), 1,11 (3H, s), ’’ 3,6 ~ 4,3 (10H, m), 5,33 (1H, m).

MS (m/z) : 390 (M+) , 345, 302.

’ · S I

40 1 1 4799

Valmistusesimerkki 5

Kromioksidin (13,3 g), pyridiinin (22 ml) ja mety-leenikloridin (210 ml) seosta sekoitettiin typpikehässä huoneenlämpötilassa 20 minuuttia. Seokseen lisättiin 2,4 g 5 3,3:17a,17a-bis(etyleenidioksi)-D-homo-17-oksa-androst-5- eenia ja 88 ml metyleenikloridia ja seosta sekoitettiin 5 päivää. Reaktioseokseen lisättiin dietyylieetteriä, liukenematon aines suodatettiin pois ja suodos pestiin 3-%:isella HCl-vesiliuoksella, 5-%:isella NaHC03-vesiliuok-10 sella ja kyllästetyllä NaCl-liuoksella ja kuivattiin vedettömällä natriumsulfaatilla. Liuotin tislattiin pois ja jäännös kiteytettiin asetoni-dietyylieetteriseoksesta, jolloin saatiin 870 mg 3,3:17a,17a-bis(etyleenidioksi)-D-homo-17-oksa-androst-5-en-7-onia.

15 1H-NMR (CDC13, δ): 1,11 (3H, s), 1,22 (3H, s) , 3,5 - 4,4 (10H, m), 5,63 (1H, br s).

Valmistusesimerkki 6 2,0 M bentsyylimagnesiumkloridin tetrahydrofuraani-liuosta (1,25 ml) lisättiin tipoittaan 20 minuutin kuluessa 20 huoneenlämpötilassa typpikehässä 3,3:17a,17a-bis(etyleeni-. . dioksi)-D-homo-17-oksa-androst-5-en-7-onin (200 mg) ja tet- < j · rahydrofuraanin (17,6 ml) seokseen. Reaktioseos kaadettiin *;* kyllästettyyn NH4C1-vesiliuokseen ja tuote uutettiin di- :: etyylieetterillä. Uute pestiin kyllästetyllä NaCl-liuok- 25 sella ja kuivattiin vedettömällä natriumsulfaatilla. Liuo-• tin tislattiin pois, jolloin saatiin 240 mg 7£-bentsyyli- *, · 3,3:17a,17a-bis(etyleenidioksi)-D-homo-17-oksa-androst-5- en-7£-olia.

*· Valmistusesimerkki 7 30 Toistettiin valmistusesimerkin 1 menetelmä käyttäen , 7-bentsyyli-D-homo-17-oksa-androsta-4,6-dieeni-3,17a-dionia ;* (30 mg) D-homo-17-oksa-androsta-4,6-dieeni-3,17a-dionin si- jasta, jolloin saatiin 30 mg 7-bentsyyli-17af-hydroksi-D-homo-17-oksa-androsta-4,6-dien-3-onia.

35 Seuraavassa valmistusesimerkissä esitetään kaavan (I) mukaista yhdistettä sisältävän lääkkeen valmistus.

114799 41

Valmistusesimerkki A: Tabletti_mg/tabletti

Aktiivinen aineosa 100 Tärkkelys 20

Laktoosi 105,5 5 Ca-karboksimetyyliselluloosa 20

Talkki 3

Magnesiumstearaatti_1,5 2 50 mg 10 Aktiivinen aineosa jauhetaan hiukkaskokoon 70 μιη tai sen alle ja tähän lisätään tärkkelys, laktoosi ja Ca-karboksimetyyliselluloosa ja ainekset sekoitetaan hyvin. Hienojakoisten hiukkasten seokseen lisätään 10-%:ista tärk-kelystahnaa, seosta sekoitetaan ja siitä valmistetaan ra-15 keitä. Rakeet kuivataan, raekoko noin 1 000 μπι erotetaan, sekoitetaan talkin ja magnesiumstearaatin kanssa ja puristetaan tableteiksi.

Teollinen soveltuvuus

Edellä mainitun kaavan (I) mukaiset yhdisteet ovat 20 aromataasia estäviä aineita ja ne ovat käyttökelpoisia est-. rogeenien aiheuttamien sairauksien, esimerkiksi rintasyö- ,* vän, kohtusyövän, eturauhasen liikakasvun jne. ennaltaeh- käisyyn ja hoitoon.

* > * · ♦ i

Claims (3)

1. Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten 7-substituoitujen D-homo-17-oksasteroidiyhdisteiden valmis-5 tamiseksi, joilla on kaava (I) R4 ^ T (i) j ossa

10 R1 on -S-R2 tai bentsyyliryhmä, jossa R2 on vetyatomi, alkyyliryhmä, jossa on enintään 6 hiiliatomia, bentsyyliryhmä, fenyyliryhmä, joka on mahdollisesti substituoitu aminoryhmällä/-ryhmillä, al-kanoyyliryhmä, jossa on enintään 6 hiiliatomia, bentsoyy-15 liryhmä tai N,N-dimetyylikarbamoyyliryhmä, R4 on vetyatomi tai -S-R5, *. jossa R5 on alkyyliryhmä, jossa on enintään 6 hii- ·, liatomia, bentsyyliryhmä, fenyyliryhmä, joka on mahdolli- % sesti substituoitu aminoryhmällä/-ryhmillä/ alkanoyyliryh-20 mä, jossa on enintään 6 hiiliatomia, bentsoyyliryhmä tai N,N-dimetyylikarbamoyyliryhmä, * X on C=0 tai CH2, ja * ' ' katkoviivat steroidirungon 1- ja 2-asemien ja 6- ja 7-asemien välillä tarkoittavat, että niissä voi olla ’ 25 kaksoissidokset, sillä edellytyksellä, että : : (a) kun R1 on -S-R2, niin 6- ja 7-asemien välinen sidos on yksinkertainen sidos, ja r ‘ · M (b) kun R4 on -S-R5, niin 1- ja 2-asemien välinen > > 7 sidos on yksinkertainen sidos, ja jossa substituentit R1 : \· 30 ja R4 ovat toisistaan riippumatta joko cv- tai /3-asemassa, v*: tunnettu siitä, että menetelmä käsittää seu- raavat vaiheet: 1 1 4799 43 (a) saatetaan yhdiste, jolla on kaava (II) (II) 5 jossa X merkitsee samaa kuin edellä, reagoimaan kaavan (III) mukaisen yhdisteen kanssa HS-R21 (III) 10 jossa R21 on alkyyliryhmä, jossa on enintään 6 hii liatomia, bentsyyliryhmä, fenyyliryhmä, joka on mahdollisesti substituoitu aminoryhmällä/-ryhmillä, alkanoyyliryhmä, jossa on enintään 6 hiiliatomia, bentsoyyliryhmä tai N,N-dimetyylikarbamoyyliryhmä; ja jos halutaan 15 (b) saadulle kaavan (I-a) mukaiselle yhdisteelle : r4 • I | (I-a) 1 jossa R21, R4 ja X merkitsevät samaa kuin edellä, 20 suoritetaan jokin seuraavista reaktioista • (i) reaktio 7-aseman muuttamiseksi merkaptoryhmäksi, jossa suoritetaan hydrolyysi kaavan (I-a) mukaiselle ' yhdisteelle, jonka 7-asemassa on alkyylitioryhmä, » (ii) reaktio 7-aseman muuttamiseksi merkaptoryh-25 maksi, kuten on määritelty edellä vaiheessa (i) , ja sen jälkeen sen edelleen muuttamiseksi alkyylitioryhmäksi, jossa on enintään 6 hiiliatomia käsittelemällä se alky-lointireagenssilla inertissä liuottimessa alkalin läsnäol- 44 114799 lessa, tai alkyylitioryhmäksi käsittelemällä se happohali-dilla, alkyylihalogeenikarbonaatilla, jossa on korkeintaan 6 hiiliatomia tai happoanhydridillä inertissä liuottimessa alkalin läsnäollessa, ja 5 (iii) reaktio 1-asemassa olevan ryhmän R4 poista miseksi kaksoissidoksen muodostamiseksi 1- ja 2-asemien välille, joka reaktio käsittää, kun substituentti R4 1-asemassa on vetyatomi, yhdisteen (I-a) dehydrogenoinnin inertissä liuottimessa käyttäen 2,3-dikloori-5,6-disyano-10 1,4-bentsokinonia, DDQ:ta, tai, kun substituentti R4 1- asemassa on -S-R5, substituentin -S-R5 poistamisen kuumentamalla kaavan (I-a) mukaista yhdistettä inertissä liuottimessa palautusjäähdyttäen, jos halutaan hapon läsnäollessa tai käsittelemällä se alkalilla inertissä liuotti-15 messa; tai (c) kaavan (IV) mukaiselle yhdisteelle (IV) 45 114799 välille suorittamalla ensin kaavan (IV) mukaiselle yhdisteelle reaktio oksoryhmän suojelemiseksi ja isomerointire-aktio, suorittamalla tulokseksi saadulle yhdisteelle hape-tusrektio oksoryhmän muodostamiseksi 7-asemaan ja sitten 5 suorittamalla tulokseksi saadulle yhdisteelle bentsyloin-tireaktio, jota seuraa oksoryhmän suojaryhmän poistaminen; ja jos halutaan (d) saadulle kaavan (I-d) mukaiselle yhdisteelle I (I-d) 10 jossa R11 on bentsyyliryhmä ja X merkitsee samaa kuin edellä, suoritetaan jokin seuraavista reaktioista, 15 (vi) reaktio kaksoissidoksen muodostamiseksi 1- ja 2-asemien välille suoritettuna dehydrogenoimalla kaavan (I-d) mukainen yhdiste joko dioksaanin tai bentseenin ol- ·. lessa liuottimena palautusjäähdyttäen, käyttäen 2,3-di- kloori - 5,6-disyano-1,4-bentsokinonia, ja ' 20 (vii) reaktio kaksoissidoksen muodostamiseksi 1- » ja 2-asemien välille kuten on määritelty vaiheessa (vi) ja ; muuttamiseksi 1-asema ryhmäksi -S-R5 samalla tavalla kuin • " kaavan (II) mukaisen yhdisteen reaktiossa kohdan (a) mu kaisessa menetelmässä; tai 25 (e) valmistetaan kaavan (I) mukainen yhdiste, jos- 1. sa X on CH2, jolloin ,1t\ (viii) pelkistetään kaavan (I) mukainen yhdiste, * 1 » jossa X on C=0 inertissä liuottimessa X-ryhmän muuttami- * t * 1 seksi hydroksyyliryhmäksi, ja : 30 (ix) edelleen pelkistetään tulokseksi saatu hyd- roksiyhdiste trietyylisilaanilla ja booritrifluoridi-di-etyylieetterikompleksilla metyleenikloridissa. 46 114799

1 1 4799 42

2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan 7o;-merkapto-D-homo-17-oksa-androsta-l,4-dieeni-3,17a-dioni.

3. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, 5 tunnettu siitä, että valmistetaan 7of-merkapto-D-homo- 17-oksa-androsta-1,4-dien-3-oni. 1 ; · » · 47 114799