FI101486B - Menetelmä hydroksyloitujen pyratsiinien ja kinoksaliinien valmistamise ksi sekä menetelmässä käytettävät mikro-organismit - Google Patents

Menetelmä hydroksyloitujen pyratsiinien ja kinoksaliinien valmistamise ksi sekä menetelmässä käytettävät mikro-organismit Download PDF

Info

Publication number
FI101486B
FI101486B FI914477A FI914477A FI101486B FI 101486 B FI101486 B FI 101486B FI 914477 A FI914477 A FI 914477A FI 914477 A FI914477 A FI 914477A FI 101486 B FI101486 B FI 101486B
Authority
FI
Finland
Prior art keywords
general formula
hydroxylated
pyrazines
quinoxaline
dimethylpyrazine
Prior art date
Application number
FI914477A
Other languages
English (en)
Swedish (sv)
Other versions
FI101486B1 (fi
FI914477A0 (fi
FI914477A7 (fi
Inventor
Andreas Kiener
Michael Bokel
Gameren Yvonne Van
Original Assignee
Lonza Ag
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Lonza Ag filed Critical Lonza Ag
Publication of FI914477A0 publication Critical patent/FI914477A0/fi
Publication of FI914477A7 publication Critical patent/FI914477A7/fi
Application granted granted Critical
Publication of FI101486B1 publication Critical patent/FI101486B1/fi
Publication of FI101486B publication Critical patent/FI101486B/fi

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P17/00—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms
    • C12P17/10—Nitrogen as only ring hetero atom
    • C12P17/12—Nitrogen as only ring hetero atom containing a six-membered hetero ring
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
    • C12N1/205—Bacterial isolates
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
    • C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
    • C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
    • C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
    • C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
    • C12R2001/06—Arthrobacter
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
    • Y10S435/8215—Microorganisms
    • Y10S435/822—Microorganisms using bacteria or actinomycetales
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
    • Y10S435/8215—Microorganisms
    • Y10S435/822—Microorganisms using bacteria or actinomycetales
    • Y10S435/83—Arthrobacter

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Physical Or Chemical Processes And Apparatus (AREA)

Description

101486
Menetelmä hydroksyloitujen pyratsiinien ja kinokealiinien valmistamiseksi sekä menetelmässä käytettävät mikro-organismit 5 Keksintö koskee Rhodococcus erythropolis- ja
Arthrobacter sp. -mikro-organismeja, jotka kasvavat 2,5-dimetyylipyratsiinilla ja hydroksyloivat pyratsiineja tai kinoksaliineja, joiden yleinen kaava on: 10 *2·^ΝγΒι Κ3γ^γ*γκα
Rs
I II
15 sekä menetelmää hydroksyloitujen pyratsiinien tai kinoksa-liinien valmistamiseksi.
Hydroksyloidut pyratsiinit ovat esimerkiksi tärkeitä välituotteita metoksialkyylipyratsiinien valmistuksessa. Metoksialkyylipyratsiinit ovat aromiaineiden 20 oleellisia rakenneosia (Maga ja Sizer, J. Aaric. Food Chem. 21 (1973) 22 - 30) . Hydroksyloidut kinoksaliinit ovat esimerkiksi tärkeitä farmaseuttisia välituotteita (US 4 814 444).
Tähän asti on tunnettu vain kemiallisia menetelmiä 25 hydroksyloitujen kinoksaliinien ja hydroksyloitujen pyratsiinien valmistamiseksi. Esimerkiksi julkaisussa US 4 814 444 kuvataan menetelmää, jonka mukaan 6-kloori-2-hydroksikinoksaliini-4-oksidi pelkistetään katalyytin läsnä ollessa 6-kloori-2-hydroksikinoksaliiniksi. Tällä mene-30 telmällä on kuitenkin se huono puoli, ettei se ole toteutettavissa teollisessa mittakaavassa.
Kemiallista menetelmää hydroksyloitujen pyratsiinien valmistamiseksi kuvaavat esimerkiksi Karmas ja Spoerri julkaisussa J. Amer. Chem. 74 (1952) 1580 - 1584, 35 ja tämän menetelmän mukaan syntetisoidaan esimerkiksi 2 101486 2-hydroksi-5-metyylipyratsiinia käyttäen lähtöaineina me-tyyliglyoksaalia ja glysiiniamidihydrokloridia. Tällä menetelmällä on kuitenkin se huono puoli, että tuote on erittäin epäpuhdasta.
5 Lisäksi julkaisussa Matley ja Harle, Biochem. Soc.
Trans. 4 (1976) 492 - 493, kuvataan tutkimuksia 2-hydrok-sipyratsiinin biologisesta hajoamisesta, sekä julkaisussa Soini ja Pakarinen, FEMS Microbiol. Lett. 1985 167 - 171, tutkimuksia 2-pyratsiinikarboksamidista. Ei kuitenkaan 10 tunneta mikro-organismeja, jotka hydroksyloivat yleisen kaavan I tai II mukaisia pyratsiineja tai kinoksaliineja ja keräävät tuotteita kasvualustaan.
Keksinnön tehtävänä on uuden tyyppisen mikro-organismin löytäminen, joka kykenee yksinkertaisella tavalla 15 aluespesifisesti hydroksyloimaan yleisen kaavan I tai II
mukaisia substituoituja pyratsiineja tai kinoksaliineja, sekä menetelmän kehittäminen hydroksyloitujen pyratsiinien ja kinoksaliinien valmistamiseksi.
Tämä tehtävä ratkaistiin patenttivaatimuksen 1 rau-20 kaisesti. Keksinnön mukaiset mikro-organismit Rhodococcus erythropolis, DSM 6138, ja Arthrobacter sp., DSM 6137, kykenevät kasvamaan 2,5-dimetyylipyratsiini ainoana hiili-, typpi- ja energialähteenä, sekä muuttamaan substraattina yleisen kaavan I mukaisia pyratsiineja tai yleisen 25 kaavan II mukaisia kinoksaliineja: ;xj '*
3 R
30 K5
:. I II
joissa kaavoissa R, on CM-aikyyliryhmä tai halogeeniatomi ja R2, R3, R4 ja Rj ovat keskenään samanlaiset tai erilaisia 35 ja ovat kukin vetyatomi, CM-alkyyliryhmä tai halogeeni- atomi, yleisen kaavan III mukaiseksi hydroksyloiduksi py- ratsiiniksi tai yleisen kaavan IV mukaiseksi hydroksyloi duksi kinoksaliiniksi: 101486 3
5 X
RjXfXoH
R5
10 111 IV
joissa kaavoissa R], R2, R3, R4 ja R5 ovat kuten edellä määritelty, jolloin viimemainittuja yhdisteitä kerääntyy kasvualustaan.
15 Kuten tutkimukset maanäytteillä puhdistuslaitoksis ta, maaperästä, muurahaiskeoista ja komposteista osoittavat, kykenevät mikro-organismit, jotka hajottavat 2,5-di-metyylipyratsiinia, hydroksyloimaan kaavan I tai II mukaisia pyratsiineja tai kinoksaliineja. Keksinnön mukaan tä-20 hän hydroksylaatioon tulevat kyseeseen edellä mainitut kannat, jotka käyttävät 2,5-dimetyylipyratsiinia yksinomaisena hiili-, typpi- ja energialähteenä, ja kannat valitaan käyttäen tavanomaisia mikrobiologisia tekniikoita.
Koska mikro-organismien Rhodococcus erythropolis, 25 DSM 6138, ja Arthrobacter sp., DSM 6137, tarkka identifikaatio tapahtui vasta tämän patenttihakemuksen prioriteet-tipäivämäärän jälkeen, seuraavassa kuvataan mikro-organismia, jonka aiempi kuvaus oli Rhodococcus equi Heida (DSM 6138), nyt nimellä Rhodococcus erythropolis (DSM 6138), 30 sekä mikro-organismia, jonka aiempi kuvaus oli Micrococcus sp. YVG (DSM 6137), nyt nimellä Arthrobacter sp. (DSM 6137) .
Nämä kannat talletettiin 7.9.1990 talletuslaitokseen die Deutsche Sammlung von Mikroorganismen (DSM) und
N
101486 4
Zellkulturen GmbH, Mascherodeweg lb, 3300 Braunschweig/-BRD.
Tieteellinen kuvaus organismista Arthrobacter sp.
(DSM 6137): 5 Karakterisointi: nuorissa viljelmissä pleomorfisia sauvoja, vanhahkoissa viljelmissä pallomaisista kokkeihin; gram-positiivisia; tiukasti aerobeja, ei haponmuodostusta glukoosista;
Liike: 10 Itiöt:
Katalaasi:
Meso-diaminopimeliinihappoa soluseinässä: ei Peptidoglykaanityyppi: A3a, Lys-Ala2_3,· peptidi- alayksikön D-glutamiinihapon α-karboksyyliryhmä on subs-15 tituoitu glysiiniryhmällä.
Tieteellinen kuvaus organismista Rhodococcus eryth-ropolis (DSM 6138) :
Peptidoglykaanin aminohappo: diaminopimeliinihappo (DAP) + 20 Sokerit kokosoluhydrolysaateista: arabinoosi (ARA) + galaktoosi (GAL) + maduroosi (MAD) ksyloosi (XYL) 25 glukoosi (GLU) + riboosi (RIB) +
Rasvahapot: haarautumattomia tyydyttyneitä ja tyydyttymättömiä rasvahappoja sekä tuberkuloosisteariinihappoa esiintyy 30 15 - 30 %; ' Mykolihapot: mykolihappoja, joiden ketjupituus on C35-C40, esiin tyy;
Menakinonej a: 3 5 tyyppi MK-8 (H2) 93 % 101486 5
Fysiologiset kokeet mykolihappoa sisältävien mikro-organismien laji-identifikaatiota silmällä pitäen: N-asetyyliglukosamiini (NAG) + D-glukosamiinihappo (GAT) 5 D-turanoosi (TUR) 2-hydroksivaleraatti (o2V) + L-alaniini (ALA) + L-proliini (PRO)
Tyramiini (TYR) 10 4-aminobutyraatti (o4B) + 2- deoksitymidiini-s-pup-fosfaatti (CDP) +
Galaktoosi (GAL) L-ramnoosi (RHA)
Araliitti (ARA) + 15 2-oksoglutaraatti (o2G) 4-aminobutyraatti (a4B) L-seriini (SER) + asetamidi (ATA) + kinaatti (QUI) + 20 D-glukaraatti (GCT) D-riboosi (RiB) + inosiitti (INO) + pimelaasi (PIM) + L-aspartaatti (ASP) 25 L-valiini (VAL) + bentsoaatti (BEN) ρΝΡ-β-D-ksylosidi (CXY) + glukonaatti (GDT) + sakkaroosi (D-sakkaroosi; SUC) + 30 sitraatti (CIT) + *. sukkinaatti (SAT) + L-leusiini (LEU) + putreskiini (PUT) + 3- hydroksibentsoaatti (o3B) 35 pNP-fosforyylikoliini (CCH) +
X
6 101486 Värikoodit koryne-muotoisten organismien pesäkkeille: tyyppi nro 60 Sellerin mukaan (1983).
Keksinnön mukaiselle menetelmälle hydroksyloitujen 5 pyratsiinien tai kinoksaliinien valmistamiseksi on tunnusomaista että käyttäen em. mikro-organismeja pyratsiini, jolla on yleinen kaava I: VV1 10 R3^N^ tai kinoksaliini, jolla on yleinen kaava II: R3'rV,YRi 15 ί νΛ»#1 n R5 joissa kaavoissa R, on CM-alkyyliryhmä tai halogeeniatomi ja R2, R3, R4 ja R5 ovat samanlaiset tai erilaisia ja ovat 20 kukin vetyatomi, C,^-alkyyliryhmä tai halogeeniatomi, muutetaan hydroksyloiduksi pyratsiiniksi, jolla on yleinen kaava III: R2Y*Ny R1 25 R3^N^ OH 111 tai hydroksyloiduksi kinoksaliiniksi, jolla on yleinen kaava IV: 30 r2 R3Y*iS|/N’YRl
R4rVN<^‘0H IV
R5 35 101486 7 joissa kaavoissa R2, R3, R4 ja R5 ovat kuten edellä määritelty, ja kerääntynyt tuote eristetään.
Hydroksyloitavina pyratsiineina tai kinoksaliineina tulevat kyseeseen yleisen kaavan I tai II mukaiset yhdis-5 teet.
Edullisesti mikro-organismeilla hydroksyloidaan pyratsiinijohdannaisia tai kinoksaliinijohdannaisia, joissa Rj on metyyliryhmä, etyyliryhmä tai klooriatomi ja R2 ja R3 ovat keskenään samanlaiset tai erilaisia ja ovat kumpi-10 kin vetyatomi, metyyliryhmä tai klooriatomi.
Tavallisesti mikro-organismeja viljellään ennen varsinaisen menetelmän (substraatin käyttö) suorittamista kasvualustassa, joka sisältää kasvusubstraattia.
Kasvusubstraattia 2,5-dimetyylipyratsiinia käyte-15 tään tarkoituksenmukaisesti määrä 0,001 - 10 % (w/v) laskettuna kasvualustasta, edullisesti määrä 0,001 - 5 % (w/v) laskettuna kasvualustasta.
Mikro-organismin hydroksylaatiosta vastaavat entsyymit indusoidaan tarkoituksenmukaisesti käyttäen 2,5-20 dimetyylipyratsiinia.
Indusoinnissa käytetty yhdiste voi joko olla läsnä heterosyklisen substraatin konversion aikana tai sitten tämän yhdisteen lisääminen lopetetaan konversion ajaksi.
Edullisesti indusoinnissa käytetyn yhdisteen li-25 sääminen lopetetaan heterosyklisen substraatin konversion ajaksi joko keskeyttämällä lisääminen tai esimerkiksi sentrifugoimalla solut.
Ennen substraatin lisäämistä solut kasvatetaan tarkoituksenmukaisesti optiseen tiheyteen 100 650 nmrssä, 30 edullisesti optiseen tiheyteen 10 - 60 650 nm:ssä.
• * * Mikro-organismien kasvualustana voidaan sekä niiden viljelemiseksi että varsinaisen menetelmän suorittamiseksi käyttää ällällä tavallisesti käytettyjä, edullisesti käytetään kasvualustaa, jonka koostumus esitetään taulukossa 35 1.
8 101486
Varsinainen menetelmä (substraatin konversio) suoritetaan sitten tavallisesti lepotilassa olevilla soluilla.
Kaavan I mukainen pyratsiini tai kaavan II mukainen 5 kinoksaliini voidaan lisätä solulietteeseen kerralla tai jatkuvasti, edullisesti siten, ettei substraatin pitoisuus kasvualustassa ylitä 20 % (w/v). Erityisesti substraatin pitoisuus ei kasvualustassa ylitä 5 % (w/v).
Konversio suoritetaan pH-alueella 4 - 10, edulli-10 sesti 6-8.
Tavallisesti konversio suoritetaan lämpötilassa 0 -50 °C, edullisesti 20 - 40 °C.
Konversion jälkeen hydroksyloidut heterosykliset yhdisteet voidaan eristää tunnetulla tavalla, esim. uut-15 tamalla klooratuilla hiilivedyillä.
Esimerkki 1 2,5-dimetyylipyratsiinia metaboloivien mikro-organismien eristäminen
Aerobisia 2,5-dimetyylipyratsiinia metaboloivia 20 mikro-organismeja lisäännytettiin A+N-kasvualustassa (taulukko 1), johon oli lisätty 0,1 % (w/v) 2,5-dimetyylipyratsiinia ainoaksi hiili-, typpi- ja energialähteeksi. Yleisiä tekniikoita mikro-organismien eristämiseksi kuvataan esimerkiksi kirjassa G. Drews, "Mikrobiologisches 25 Praktikum", 4. painos, Springer Verlag, 1983.
Ymppeinä käytettiin näytteitä maaperästä, kirkas-tuslaitoksista, komposteista ja muurahaiskeoista. Lisään-nyttäminen suoritettiin ravistelukolveissa 30 °C:ssa. Kolmen uudelleensiirrostuksen tuoreeseen kasvualustaan 30 jälkeen lisäännyttämistä jatkettiin inkuboiden 30 °C:ssa pintaviljelmänä samalla kasvualustalla, johon oli lisätty 16 g agar-agaria litraa kohden. Monikertaisten levitysten agar-kasvualustapinnalle jälkeen voitiin eristää puhdas-viljelmiä.
35 101486 9
Taulukko 1 A+N-kasvualusta
Koostumus Pitoisuus (xng/litra) (NH4)2S04 2 0 0 0 5 Na2HP04 2 0 0 0 KH2P04 1 0 0 0
NaCl 3 000
MgCl2-6H20 4 00
CaCl2· 2H20 14,5 10 FeCl3· 6H20 0,8 pyridoksaali-hydrokloridi 10 x 10'3 riboflaviini 5 x 10'3 nikotiinihappoamidi 5 x 10‘3 tiamiini-hydrokloridi 2 x 10'3 15 biotiini 2 x 10'3 pantoteenihappo 5 x 10'3 p-aminobentsoaatti 5 x 10'3 foolihappo 2 x 10'3 vitamiini B12 5 x 10"3 20 ZnS04· 7H20 100 x 10’3
MnCl2 · 4H20 90 x 10'3 H3BO3 3 00 x 10'3
CoCl2 · 6H20 2 00 x ΙΟ'3
CuCl2 · 2H20 10 x 10‘3 25 NiCl2· 6H20 20 x 10'3
Na2Mo04 · 2H20 30 x 10'3 EDTANa2 · 2H20 5 x 10‘3
FeS04 · 7H20 2 x 10'3 (liuoksen pH säädettiin 7,0:ksi) . 30
Esimerkki 2 2,5-dimetyylipyratsiinin konversio 2,5-dimetyyli-3-hydroksipyratsi iniks i
Rhodococcus erythropolista (DSM 6138) kasvatettiin 35 A+N-kasvualustassa, johon oli lisätty 0,1 % (w/v) 2,5-di- 101486 10 metyylipyratsiinia, fermentorissa pH:ssa 7 ja 25 °C:n lämpötilassa. Sitten solut sentrifugoitiin eroon ja uudel-leenlietettiin A+N-kasvualustaan säätäen optiseen tiheyteen 10 650 nm:ssä. Tämä soluliete mitattiin ravistelukol-5 viin ja lisättiin 92 mmol 2,5-dimetyylipyratsiinia litraa kohden. Neljän tunnin inkuboinnin 25 °C:ssa ravis-telulaitteessa päätyttyä todettiin pitoisuus 83 mmol 2,5-dimetyyli-3-hydroksipyratsiinia litraa kohden, mikä vastaa 90 %:n saantoa.
10 Esimerkit 3-9 suoritettiin kuten esimerkki 2 ja niistä esitetään yhteenveto taulukossa 2.
Taulukko 2
Heterosyklin 15 pitoisuus, % Reaktio-
Esi- (w/v) kasvu- aika Saanto merkki Substraatti alustassa h Lopputuote % 3 2-metyyli- 0,2 1 3-hydroksi-2- 90 20 pyratsiini metyylipyrat- siini 4 2-kloori- 0,2 24 3-hydroksi-2- 60 pyratsiini klooripyrat- 25 siini 5 2-etyyli- 0,2 24 3-hydroksi-2- 80 pyratsiini etyylipyrat siini 30 6 2,6-dimetyy- 0,2 1 3-hydroksi- 90 lipyratsiini 2,6-dimetyyli- pyratsiini 35 7 2,5,6-trime- 0,2 6 3-hydroksi- 90 tyylipyrat- 2,5,6-trime- siini tyylipyrat- siini 40 8 6-kloori-2,5- 0,2 1 3-hydroksi-6- 90 dimetyyli- kloori-2,5-di- pyratsiini metyylipyrat siini 45 9 2-metyylikinok- 0,4 5 3-hydroksi-2- 50 saliini metyylikinok- saliini

Claims (6)

1. Rhodococcus erythropolis- tai Arthrobacter sp. -mikro-organismi, tunnettu siitä, että se on
2. Menetelmä hydroksyloitujen pyratsiinien ja ki-noksaliinien valmistamiseksi, tunnettu siitä, että 101486 käyttäen patenttivaatimuksen 1 mukaista mikro-organismia pyratsiini, jolla on yleinen kaava I: Κ2γίΝγΚ1
3. Patenttivaatimuksen 2 mukainen menetelmä, 30 tunnettu siitä, että mikro-organismin vaikuttavat entsyymit indusoidaan 2,5-dimetyylipyratsiinilla.
4. Patenttivaatimuksen 2 tai 3 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että konversio suoritetaan lisäten substraattia kerran tai jatkuvasti siten, ettei substraa- 35 tin pitoisuus kasvualustassa ylitä 20 % (w/v). 101486
5. Jonkin patenttivaatimuksen 2-4 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että konversio suoritetaan pHrssa 4 - 10.
5 R3^N^ tai kinoksaliini, jolla on yleinen kaava II: Γ W 11 R
10 R4 R5 joissa kaavoissa Rj on CM-alkyyliryhmä tai halogeeniatomi ja R2, R3, R4 ja R5 ovat keskenään samanlaiset tai erilaisia ja ovat kukin vetyatomi, CM-alkyyliryhmä tai halogeeni-15 atomi, muutetaan hydroksyloiduksi pyratsiiniksi, jolla on yleinen kaava III: rv* R3^N^ oh 20 tai hydroksyloiduksi kinoksaliiniksi, jolla on yleinen kaava IV: Jh r κ3Υ^νΝΎ 1 LJL A IV
25 R4f ^ OH . R5 joissa kaavoissa RIf R2, R3, R4 ja Rs ovat kuten edellä määritelty, ja kerääntynyt tuote eristetään.
5 Rhodococcus erythropolis, DSM 6138, tai Arthrobacter sp., DSM 6137, ja kykenee kasvamaan 2,5-dimetyylipyratsiini ainoana hiili-, typpi- ja energialähteenä, sekä muuttamaan substraattina yleisen kaavan I mukaisia pyratsiineja tai yleisen kaavan II mukaisia kinoksaliineja: 10 "2TntRi R5
15. II joissa kaavoissa R, on CM-alkyyliryhmä tai halogeeniatomi ja R2, R3, R4 ja R5 ovat keskenään samanlaiset tai erilaisia ja ovat kukin vetyatomi, CM-aikyyliryhmä tai halogeeniato- 20 mi, yleisen kaavan III mukaiseksi hydroksyloiduksi pyrat-siiniksi tai yleisen kaavan IV mukaiseksi hydroksyloiduksi kinoksaliiniksi: ^rT1 RÄyi R3^N^ oh r4^Y^n 'oh Rg III IV 30 joissa kaavoissa Rlf R2, R3/ R4 ja R5 ovat kuten edellä mää-* ritelty, jolloin viimemainittuja yhdisteitä kerääntyy kas vualustaan.
6. Jonkin patenttivaatimuksen 2-5 mukainen mene-5 telmä, tunnettu siitä, että konversio suoritetaan lämpötiloissa 0 - 55 °C. « 101466
FI914477A 1990-09-25 1991-09-24 Menetelmä hydroksyloitujen pyratsiinien ja kinoksaliinien valmistamise ksi sekä menetelmässä käytettävät mikro-organismit FI101486B (fi)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CH309190 1990-09-25
CH309190 1990-09-25

Publications (4)

Publication Number Publication Date
FI914477A0 FI914477A0 (fi) 1991-09-24
FI914477A7 FI914477A7 (fi) 1992-03-26
FI101486B1 FI101486B1 (fi) 1998-06-30
FI101486B true FI101486B (fi) 1998-06-30

Family

ID=4248425

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
FI914477A FI101486B (fi) 1990-09-25 1991-09-24 Menetelmä hydroksyloitujen pyratsiinien ja kinoksaliinien valmistamise ksi sekä menetelmässä käytettävät mikro-organismit

Country Status (11)

Country Link
US (2) US5229278A (fi)
EP (1) EP0477829B1 (fi)
JP (1) JP3193412B2 (fi)
AT (1) ATE124449T1 (fi)
CA (1) CA2052063C (fi)
CZ (1) CZ279488B6 (fi)
DE (1) DE59105850D1 (fi)
DK (1) DK0477829T3 (fi)
ES (1) ES2073636T3 (fi)
FI (1) FI101486B (fi)
SK (1) SK278514B6 (fi)

Families Citing this family (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP3275353B2 (ja) * 1992-02-26 2002-04-15 三菱化学株式会社 ６−ヒドロキシ含窒素６員環化合物の製造方法
CZ282939B6 (cs) * 1992-03-04 1997-11-12 Lonza A.G. Mikrobiologický způsob hydroxylace dusíkatých heterocyklických karboxylových kyselin
US5565483A (en) * 1995-06-07 1996-10-15 Bristol-Myers Squibb Company 3-substituted oxindole derivatives as potassium channel modulators
JP3773449B2 (ja) * 1999-06-22 2006-05-10 独立行政法人農業環境技術研究所 単離した分解菌の集積方法及びその集積方法により得られた分解菌保持担体、その分解菌保持担体を利用する汚染土壌回復又は地下水汚染防止の方法
WO2002029021A2 (de) * 2000-10-06 2002-04-11 Lonza Ag Biotechnologisches verfahren zur herstellung von hydroxy-stickstoff-heterocyclus-carbonsäuren
BR112013027451A2 (pt) 2011-05-13 2019-09-24 Nfm Welding Eng Inc máquina de remoção de água aperfeiçoada e processo
DK3485730T3 (da) 2017-11-21 2021-09-06 Techtronic Cordless Gp Koldluftforstøverapparat

Family Cites Families (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3720768A (en) * 1971-11-22 1973-03-13 Abbott Lab Aspergillic acid as an antihypertensive agent
US4181724A (en) * 1978-09-11 1980-01-01 The Upjohn Company Quinoxalinone compounds useful for expanding the lumina or air passages in mammals
DE3242266A1 (de) * 1982-11-15 1984-05-17 Basf Ag, 6700 Ludwigshafen Neue 2-halogen- und 2-cyanpyrazine und verfahren zur herstellung von 2-halogen- und 2-cyanpyrazinen
US4738934A (en) * 1986-05-16 1988-04-19 American Telephone And Telegraph Company, At&T Bell Laboratories Method of making indium phosphide devices
US4814444A (en) * 1987-06-19 1989-03-21 Uniroyal Chemical Company, Inc. Process for the selective reduction of 2-hydroxyquinoxaline-4-oxides
DE3903759A1 (de) * 1989-02-09 1990-08-16 Ruetgerswerke Ag Verfahren zur herstellung von 2-oxochinolin
IE70430B1 (en) * 1990-02-13 1996-11-27 Lonza Ag Microbiological oxidation of methyl groups in heterocyclic compounds

Also Published As

Publication number Publication date
FI101486B1 (fi) 1998-06-30
EP0477829B1 (de) 1995-06-28
JPH04335884A (ja) 1992-11-24
CS282491A3 (en) 1992-04-15
DK0477829T3 (da) 1995-08-14
FI914477A0 (fi) 1991-09-24
SK278514B6 (en) 1997-08-06
EP0477829A2 (de) 1992-04-01
EP0477829A3 (en) 1993-04-07
ATE124449T1 (de) 1995-07-15
DE59105850D1 (de) 1995-08-03
CA2052063A1 (en) 1992-03-26
JP3193412B2 (ja) 2001-07-30
ES2073636T3 (es) 1995-08-16
CZ279488B6 (cs) 1995-05-17
CA2052063C (en) 2000-03-28
FI914477A7 (fi) 1992-03-26
US5284767A (en) 1994-02-08
US5229278A (en) 1993-07-20

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Kinoshita et al. Utilization of a cyclic dimer and linear oligomers of ε-aminocaproic acid by Achrornobacter guttatus KI 72
KR960016135B1 (ko) L-이소로이신(l-isoleucine)의 제조법
JP3966583B2 (ja) 発酵法によるｌ−アミノ酸の製造法
US5173412A (en) Microbiological process for the production of hydroxylated pyrazine derivatives
FI101486B (fi) Menetelmä hydroksyloitujen pyratsiinien ja kinoksaliinien valmistamise ksi sekä menetelmässä käytettävät mikro-organismit
EP0422187A1 (en) Production of amino acids by methylotrophic bacillus.
CA1219828A (en) Phenylalanine ammonia lyase-producing microbial cells
JP3717970B2 (ja) 発酵法によるｌ−イソロイシンの製造法
HU216652B (hu) Eljárás amidszármazékok előállítására mikroorganizmusok felhasználásával
JPH06133787A (ja) 発酵法によるｌ−イソロイシンの製造法
CN100357448C (zh) 伊枯草菌素a及其同系物的产生方法
KR100880143B1 (ko) 아미드의 미생물학적 제조 방법
JP6483253B2 (ja) Ｌ−グルタミンを生産する微生物、及びそれを利用したｌ−グルタミン生産方法
CH636078A5 (it) Complessi enzimatici atti a trasformare idantoine raceme in amminoacidi otticamente attivi e loro applicazioni.
JP4302876B2 (ja) アミドの調製方法
KR20010040960A (ko) 신규한 미생물 및 아미드 화합물의 제조 방법
KR880002417B1 (ko) 구아노신의 제조법
JP4087919B2 (ja) ｄ−ビオチンの発酵による製造
US5266482A (en) Agrobacterium useful for the microbiological process for the production of hydroxylated pyrazine derivatives
US5352592A (en) Microbiological process for the production of 5-hydroxypyrazinecarboxylic acid
JPH089982A (ja) 発酵法によるｌ−アミノ酸の製造法
CA2062667C (en) Microbiological process for the production of 6-hydroxynicotinic acid
JPS5894391A (ja) 発酵法によるｌ−トリプトフアンの製造法
JPH028718B2 (fi)