CZ282939B6 - Mikrobiologický způsob hydroxylace dusíkatých heterocyklických karboxylových kyselin - Google Patents

Mikrobiologický způsob hydroxylace dusíkatých heterocyklických karboxylových kyselin Download PDF

Info

Publication number
CZ282939B6
CZ282939B6 CZ93272A CZ27293A CZ282939B6 CZ 282939 B6 CZ282939 B6 CZ 282939B6 CZ 93272 A CZ93272 A CZ 93272A CZ 27293 A CZ27293 A CZ 27293A CZ 282939 B6 CZ282939 B6 CZ 282939B6
Authority
CZ
Czechia
Prior art keywords
acid
nitrogen
hydroxy
atom
carboxylic acids
Prior art date
Application number
CZ93272A
Other languages
English (en)
Other versions
CZ27293A3 (en
Inventor
Andreas Dr. Kiener
Andreas Dr. Tschech
Andreas Dipl. Biol. Tinschert
Klaus Heinzmann
Original Assignee
Lonza A.G.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Lonza A.G. filed Critical Lonza A.G.
Publication of CZ27293A3 publication Critical patent/CZ27293A3/cs
Publication of CZ282939B6 publication Critical patent/CZ282939B6/cs

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P17/00—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms
    • C12P17/10—Nitrogen as only ring hetero atom
    • C12P17/12—Nitrogen as only ring hetero atom containing a six-membered hetero ring
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/60—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D213/78—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms, with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C07D213/79—Acids; Esters
    • C07D213/80—Acids; Esters in position 3
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D241/00—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings
    • C07D241/02—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings
    • C07D241/10—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D241/14—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D241/24—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
    • C12N1/205—Bacterial isolates
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
    • C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
    • C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
    • Y10S435/8215—Microorganisms
    • Y10S435/822—Microorganisms using bacteria or actinomycetales

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Pyridine Compounds (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Nitrogen And Oxygen As The Only Ring Hetero Atoms (AREA)

Abstract

Mikrobiologický způsob přípravy dusíkatých hydroxyheterocyklických karboxylových kyselin nebo jejich rozpustných solí obecného vzorce I. Výchozí látkou jsou dusíkaté heterocyklické karboxylové kyseliny. Vynález se dále týká nových pro způsob vhodných mikroorganismů.ŕ

Description

(57) Anotace:
Vynález se týká nových dusíkatých hydroxyheterocyklických karboxylových kyselin vzorce I. Vynález se dále týká nového mikrobiologického způsobu přípravy těchto kyselin nebo jejich rozpustných solí. Výchozí látkou Jsou dusíkaté heterocyklické karboxylové kyseliny. Vynález se dále týká nových mikroorganismů s označením KilOl DSM 6920.
COOH
OH (I)
CZ 282 939 B6
Dusíkaté hydroxyheterocyklické karboxylové kyseliny, způsob jejich mikrobiologické přípravy a mikroorganismy KilOl DSM 6920.
Oblast techniky
Vynález se týká nového mikrobiologického způsobu přípravy dusíkatých hydroxyheterocyklických karboxylových kyselin nebo jejich rozpustných solí obecného vzorce I
(I), kdy se vychází z odpovídajících dusíkatých heterocyklických karboxylových kyselin. Vynález se rovněž týká nových mikroorganismů vhodných pro způsob přípravy.
V následujícím textu se jako dusíkaté heterocyklické karboxylové kyseliny, hydroxylované nebo nehydroxylované. rozumějí také jejich rozpustné soli, jako například jejich alkalické soli nebo amonné soli.
Dosavadní stav techniky
Dusíkaté 2-hydroxyheterocyklické karboxylové kyseliny jsou důležité meziprodukty při syntézách účinných látek. Například kyselina 2-hydroxynikotinová slouží jako výchozí látka pro přípravu kyseliny 2-chlomikotinové (US patentový spis 4 081 451), která je například důležitým meziproduktem pro výrobu farmaceutických prostředků (Ann. Pharm. Fr., 1980, 38 (3), str. 243252).
Až dosud nejsou známé žádné mikrobiologické způsoby přípravy dusíkatých hydroxyheterocyklických karboxylových kyselin.
Úkolem vynálezu je dát k použití jednoduchý a ekologický mikrobiologický způsob přípravy chemicky těžce dostupných dusíkatých 2-hydroxyheterocyklických karboxylových kyselin.
Podstata vynálezu
Úkol se řeší způsobem podle vynálezu podle patentového nároku 1 a novými mikroorganismy podle patentového nároku 6.
Způsob se podle vynálezu provádí tak, že se dusíkatá heterocyklická karboxylová kyselina obecného vzorce II
COOH
- 1 CZ 282939 B6 kde Ri a R2 jsou stejné nebo rozdílné a znamenají atom vodíku, atom halogenu nebo C1-C4alkylovou skupinu a X znamená atom dusíku nebo funkci CR3, kde R3 znamená atom vodíku nebo atom halogenu, jako substrát převede pomocí mikroorganismů, které zužitkují kyselinu 6-methylnikotinovou a které obsahují specifickou hydroxylázu, na dusíkatou hydroxyheterocyklickou karboxylovou kyselinu obecného vzorce I
X COOH
XX r2-^ ^oh (O, kde Rb R2 a X mají uvedený význam.
Pod pojmem mikroorganismy zužitkující kyselinu 6-methylnikotinovou, které obsahují specifickou hydroxylázu se rozumí následující:
Jestliže se například pěstuje biomasa z kalu čisticích zařízení jako inokulum s kyselinou 6methylnikotinovou, získají se mikroorganismy zužitkující kyselinu 6-methylnikotinovou, tzn. mikroorganismy, které rostou s kyselinou 6-methylnikotinovou jako jediným zdrojem uhlíku, dusíku a energie. Jestliže se metodami běžnými v oboru podrobí selekci mikroorganismy, které úplně odbourávají kyselinu 6-methylnikotinovou přes kyselinu 2-hydroxy-6-methylnikotinovou jako meziprodukt, získají se mikroorganismy, které obsahují specifickou hydroxylázu. To znamená, že se získají mikroorganismy, které specificky hydroxylují jediný atom uhlíku, který leží mezi kyselinovou funkcí a atomem dusíku.
Pro způsob jsou vhodné v podstatě všechny mikroorganismy, které se tímto způsobem podrobili selekci, například z kalů čistících zařízení nebo vzorků půdy. Tyto mikroorganismy nejsou v literatuře popsány a jsou součástí vynálezu.
Výhodně se pro postup používají mikroorganismy s označením KilOl (DSM 6920), stejně jako jejich descendenty amutanty. Mikroorganismy byly uloženy 10. 2. 1992 u Německé sbírky pro mikroorganismy a buněčné kultury GmbH, Mascheroderweg lb, D-3300 Braunschweig.
Vědecký popis mikroorganismů KilOl (DSM 6920):
buněčná forma šířka pm délka pm pohyblivost mrskání Gram-reakce lyže 3% KOH aminopeptidáza (Cemy) spory oxidáza kataláza drobné tyčinky
0,4-0,5
1,0-1,5 +
+ +
+
Rod pomocí 16S rRNA-sekvenční analýzy nemohl být určen.
Selekce a pěstování těchto mikroorganismů s kyselinou 6-methylnikotinovou se uskutečňuje metodami obvyklými v oboru.
Účelně se během selekce uskuteční tzv. screening mikroorganismů za aerobních podmínek. Výhodně se mikroorganismy během procesu sreening pěstují v klidu (ne za třepání).
-2CZ 282939 B6
Množství kyseliny 6-methylnikotinové je během selekce a pěstování účelně až k 1 % hmotn., výhodně až k 0,5 % hmotn.
Selekce a pěstování se účelně provádějí při hodnotě pH od 5 do 9, výhodně od 6 do 8.
Teplota je během selekce a pěstování účelně mezi 15 a 50 °C, výhodně mezi 25 a 40 °C.
Obvykle se selekce a pěstování uskuteční v médiu obsahujícím minerální soli, výhodně v médiu s obsahem minerálních solí, jehož složení je popsáno v tabulce 1.
Když se dosáhne vhodné optické hustoty od 0,5 do 100 při 650 nm (OD650), mohou se mikroorganismy buď sbírat metodami obvyklými v oboru, nebo se může substrát, dusíkatá heterocyklická kyselina, přidat k mikroorganismům pro vlastní reakci (biotransformaci). Vlastní biotransformace se pak uskuteční metodami běžnými v oboru s nerostoucími buňkami.
Jako substráty obecného vzorce II mohou sloužit například kyselina nikotinová, kyselina pyrazinkarboxylová nebo jejich halogenderiváty nebo Ci-C4-alkylované deriváty.
Jako halogenované deriváty kyseliny nikotinové nebo kyseliny pyrazinkarboxylové se výhodně hydroxylují kyselina 6-chlomikotinová, kyselina 5,6-dichlomikotinová a kyselina 5-chlorpyrazinkarboxylová.
Jako derivát kyseliny Ci-C4-alkylpyrazinkarboxylové se výhodně hydroxyluje kyselina 5-methylpyrazinkarboxylová.
Substrát se pro biotransformaci může přidávat kontinuálně nebo jednorázově. Přidání substrátu se vhodně uskuteční tak, že koncentrace substrátu v kultivačním mediu nepřesáhne 10 % hmotn., výhodně 7 % hmotn.
Jako médium se mohou použít pro biotransformaci média běžná v oboru. Výhodně se biotransformace provádí v nízkomolámím fosfátovém pufru.
Obvykle se biotransformace provádí se suspenzí mikroorganismů, která má optickou hustotu od 0,5 do 100 při 650 nm (OD65o) výhodně od 5 do 50.
Biotransformace se vhodně provádí při teplotě od 15 do 50 °C výhodně od 25 do 35 °C a při pH od 5 do 9, výhodně od pH 6,5 do 7,5.
Po obvyklé reakční době od 5 h do 3 dnů se pak může hydroxylovaný produkt vzorce I izolovat v oboru běžnými metodami, například okyselením bezbuněčného supematantu.
Dusíkaté hydroxyheterocyklické karboxylové kyseliny připravené tímto způsobem obecného vzorce I
Ri\ pp COOH XX r2^ ydh (I), ve kterém když X znamená atom dusíku, R, a R2 jsou shodné nebo rozdílné a znamenají atom vodíku, atom halogenu nebo Ci-C4-alkylovou skupinu stou výjimkou, že Ri aR2 neznamenají společně atom vodíku, stejně jako když X znamená CH-funkci, R] aR2 znamenají atom halogenu, nejsou v literatuře popsány.
-3CZ 282939 B6
Výhodnými zástupci těchto nových sloučenin jsou kyselina 5,6-dichlor-2-hydroxynikotinová, kyselina 3-hydroxy-5-methylpyrazinkarboxylová a kyselina 3-hydroxy-5-chlorpyrazinkarboxylová.
Příklady provedení vynálezu
Příklad 1
Izolace mikroorganismů zužitkuj ících kyselinu 6-methylnikotinovou
300 ml Erlenmeyerova baňka se naplní 100 ml média obsahující minerální soli, které obsahuje 1 mmol kyseliny 6-methylnikotinové (tabulka 1) a smísí se s 10 ml kalu z čisticích zařízení firmy LONZA AG ve Visp, Švýcarsko nebo se smísí se vzorky půdy z podniku LONZA. Visp a inkubuje se v klidu při 30 °C. Po 10 dnech se v některých kulturách mohla prokázat spektrofotometricky kyselina 2-hydroxy-6-methylnikotinová. Tyto kultury se pak několikrát přeočkují do čerstvého média obsahujícího minerální soli. Pak se buněčné suspenze, které tvoří kyselinu 2-hydroxy-6-methylnikotinovou, rozprostřou na stejné médium, které obsahuje 1,6 % (hmotn./obj.) agaru. Agarové destičky se pak inkubují při 30 °C v atmosféře, která obsahuje 4 % O2 a 96 % N2. Jednotlivé kolonie se přenesou do kapalného média a inkubují se v klidu. Bakteriální kmen s označením Kil01 (DSM 6920) tvoří kyselinu 2-hydroxy-6-methylnikotinovou během růstu na kyselině 6-methylnikotinové.
Příklad 2
Mikrobiologická oxidace kyseliny nikotinové na kyselinu 2-hydroxynikotinovou
Mikroorganismy s označením KilOl (DSM 6920) se inkubují v 800 ml média obsahujícího minerální soli (tabulka 1) za přídavku 8 mmol kyseliny 6-methylnikotinové v 1 litrové Fembachově baňce při 30 °C na třepačce při 100 UpM (otáčky za min.). Inokulum má 5 % (obj./obj.). Po 5 dnech je OD65o přibližně 0,5. Pak se buňky sklidí a promyjí se jednou s 50 molámím fosfátovým pufrem, pH 7,0. Pak se buňky resuspendují v 20 ml 50 mM fosfátovém pufru, pH 7,0, který obsahuje 200 mg (1,38 mmol) sodné soli kyseliny nikotinové. ODóso je 20. Po 6 hod. inkubace na třepačce při 30 °C se nedala zjistit žádná kyselina nikotinová pomocí chromatografie na tenké vrstvě. Pak se biomasa odstředí a supematant se okyselí na pH 2,5, aby se kyselina 2-hydroxynikotinová vysrážela. Pomocí ’Η-NMR (DMSO) analýzy se neprokázala žádná nečistota v izolovaném produktu. Dohromady se izolovalo 140 mg (1 mmol) kyseliny 2-hydroxynikotinové, což odpovídá výtěžku 72 %, vztaženo na kyselinu nikotinovou.
Tabulka 1
Zásobní roztoky media obsahujícího minerální soli
Zásobní roztok 1:
NaH2PO4.2H2O 156,0g
NH4Č1 10,0g
K2SO4 1,2g pH upravit KOH na7,0 destilovaná voda 500,0 ml
-4CZ 282939 B6
Zásobní roztok 2:
kyselina p-aminobenzoová D-biotin kyselina nikotinová Ca-D-panthothenát pyridoxalhydrochlorid thiamindichlorid kyanokobalamin 8,0 mg 2,0 mg 20,0 mg 10,0 mg 30,0 mg 20,0 mg 10,0 mg
destilovaná voda 100,0 ml, sterilně filtrovat
Zásobní roztok 3:
HC1 (37 %) FeCl2.4H2O ZnCl2 MnCÍ2.4H2O H3BO3 COC12.6H2O CuC12.7H2O NíC12.6H2O Na2MoO4.2H2O 7,0 ml 1,5 g 0,07 g 0,1 g 0,006 g 0,19 g 0,002 g 0,024 g 0,036 g
destilovaná voda 1000,0 ml, autoklávovat 121 °C 20 min.
Zásobní roztok 4:
NaOH Na2SeO3.5H2O Na2WO4.2H2O 0,5 g 0,003 g 0,004 g
destilovaná voda 1000,0 ml, autoklávovat 121 °C 20 min.
Zásobní roztok 5:
MgCl2.6H2O CaCl2.2H2O 40,0 g 5,0 g
destilovaná voda 200,0 ml, autoklávovat, 121 °C 20 min.
Kyselina 6-methylnikotinová (500 mM) sodná sůl kyseliny 6-methyInikotinové 80,0 g
destilovaná voda 1000,0 ml, autoklávovat, 121 °C 20 min
-5CZ 282939 B6
Růstové médium 10 mM kyselina 6-methylnikotinová
roztok 1 kyselina 6-methylnikotinová 25,0 ml 20,0 ml
destilovaná voda 1000,0 ml, autoklávovat, 121 °C 20 min.
Po sterilizaci se přidá roztok 2 roztok 3 roztok 4 roztok 5
0,5 ml
1,0 ml
1,0 ml
0,5 ml
Tabulka 2:
Příklady 3 až 7
Příklady 3 až 7 se provádí podle příkladu 2. Výsledky jsou shrnuty v tabulce 2.
Příklad Výchozí látka Koncentr. hm/ob θθ650 nm Čas [h] Produkt Výtěžek
3 sodná sůl kys. 6-chlornikotinové 1 % 20 16 kys. 6-chlor-2hydroxynikotinová 70 % izol.
4 sodná sůl kys. 5,6-dichlomikotinové 1 % 20 16 kys. 5,6-dichlor-2hydroxynikotinová 20 % anal.
5 sodná sůl kys. Pyrazinkarboxylové 0,3 % 5 24 kys. 3-hydroxypyrazinkarboxylová 70 % anal.
6 sodná sůl kys. 5-methylpyrazinkarboxylové 0,3 % 5 24 kys. 3-hydroxy-5methylpyrazinkarboxylová 80 % anal.
7 sodná sůl kys. 5-chlorpyrazinkarboxylové 0,3 % 5 24 kys. 3-hydroxy-5chlorpyrazinkarbo- 50 % anal.
xylová v tabulce 2: hm/ob znamená hmotnost/objem izol. znamená izolováno anal. znamená analyticky
Analytická data k příkladu 6:
(kyselina 3-hydroxy-5-methylpyrazinkarboxylová) ‘H-NMR: (DMSO, 400 MHz) δ v ppm
2,4, s; 2,6 s; 3,8, s; 7,8, s.
13C-NMR: (DMSO, 100,5 MHz) δ v ppm
20, t; 40, m; 130, s; 134 s; 155, s; 164, s; 170, s.
-6CZ 282939 B6
Analytická data k příkladu 7:
(kyselina 3-hydroxy-5-chlorpyrazinkarboxylová) 'H-NMR: (D2O a dioxan, 400 MHz) δ v ppm 3,8, s; 4,7, s; 8,0, s.
13C-NMR: (D2O a dioxan, 100,5 MHz) δ v ppm
132, s; 133, s; 145, s; 149, s; 164, s; 172, s.

Claims (10)

  1. PATENTOVÉ NÁROKY
    1. Dusíkaté hydroxyheterocyklické karboxylové kyseliny obecného vzorce I
    R
    R (I), ve kterém když X znamená atom dusíku, R1 a R2 jsou stejné nebo rozdílné a znamenají atom vodíku, atom halogenu nebo Ci-C4-alkylovou skupinu, s výjimkou, že Rt aR2 neznamenají společně atom vodíku a když X znamená CH-funkci, Ri a R2 znamená atom chloru.
  2. 2. Kyselina 5, 6-dichlor-2-hydroxynikotinová.
  3. 3. Kyselina 3-hydroxy-5-methylpyrazinkarboxylová.
  4. 4. Kyselina 3-hydroxy-5-chlorpyrazinkarboxylová.
  5. 5. Mikrobiologický způsob přípravy dusíkatých hydroxyheterocyklických karboxylových kyselin nebo jejich rozpustných solí obecného vzorce I
    R
    R (I), kde Ri a R2 jsou shodné nebo rozdílné a znamenají atom vodíku, atom halogenu nebo C1-C4alkylovou skupinu a X znamená atom dusíku nebo CR3 funkci, kde R3 znamená atom vodíku nebo atom halogenu, vyznačující se tím, že se dusíkatá heterocyklická karboxylová kyselina nebo její rozpustné soli obecného vzorce II kde R], R2 aX mají uvedený význam, jako substrát přemění pomocí mikroorganismů
    5 zužitkujících kyselinu 6-methylnikotinovou a obsahujících specifickou hydroxylázu, na produkt vzorce I.
  6. 6. Způsob podle nároku 5, vyznačující se tím, že se jako substrát používají dusíkaté heterocyklické karboxylové kyseliny obecného vzorce II
    R
    R (II), kde Rt aR2 jsou stejné nebo rozdílné a znamenají atom vodíku, atom chloru nebo methylovou 15 skupinu a X znamená atom dusíku nebo CH funkci.
  7. 7. Způsob podle alespoň jednoho z nároků 5 a 6, vyznačující se tím, že se reakce provádí s mikroorganismy označenými KilOl DSM 6920 nebo s jejich descendenty a mutanty.
  8. 8. Způsob podle alespoň jednoho z nároků 5 až 7, vyznačující se tím, že se reakce provádí při jednorázovém nebo kontinuálním přidávání substrátu tak, že koncentrace substrátu v kultivačním médiu nepřesáhne 10 % hmotnostních.
    25
  9. 9. Způsob podle alespoň jednoho z nároků 5 až 8, vyznačující se tím, že se reakce provádí při teplotě od 15 do 50 °C a při pH od 5 do 9.
  10. 10. Mikroorganismy s označením KilOl DSM 6920, které zužitkují kyselinu 6-methylnikotinovou přes kyselinu 2-hydroxy-6-methylnikotinovou jako jediný zdroj uhlíku, dusíku 30 a energie.
CZ93272A 1992-03-04 1993-02-24 Mikrobiologický způsob hydroxylace dusíkatých heterocyklických karboxylových kyselin CZ282939B6 (cs)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CH67292 1992-03-04

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CZ27293A3 CZ27293A3 (en) 1994-01-19
CZ282939B6 true CZ282939B6 (cs) 1997-11-12

Family

ID=4192473

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ93272A CZ282939B6 (cs) 1992-03-04 1993-02-24 Mikrobiologický způsob hydroxylace dusíkatých heterocyklických karboxylových kyselin

Country Status (17)

Country Link
US (2) US5306630A (cs)
EP (1) EP0559116B1 (cs)
JP (1) JPH06199797A (cs)
KR (1) KR100274205B1 (cs)
CN (1) CN1077748A (cs)
AT (1) ATE153698T1 (cs)
CA (1) CA2091005C (cs)
CZ (1) CZ282939B6 (cs)
DE (1) DE59306547D1 (cs)
DK (1) DK0559116T3 (cs)
ES (1) ES2101887T3 (cs)
GE (1) GEP19991710B (cs)
GR (1) GR3024286T3 (cs)
LT (1) LT3114B (cs)
LV (1) LV10504B (cs)
RU (1) RU2122029C1 (cs)
SK (1) SK279322B6 (cs)

Families Citing this family (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB9426293D0 (en) * 1994-12-28 1995-02-22 Zeneca Ltd Composition,compound and use
US5763232A (en) * 1996-02-15 1998-06-09 Mitsubishi Chemical Corporation Method for producing 3-hydroxy nitrogen-containing six-membered cylic compound
US6767741B1 (en) * 1999-08-27 2004-07-27 Invitrogen Corporation Metal binding compounds and their use in cell culture medium compositions
JP4972261B2 (ja) * 1999-08-27 2012-07-11 ライフ テクノロジーズ コーポレーション 金属結合化合物および細胞培養培地組成物中でのそれらの使用
WO2002029021A2 (de) * 2000-10-06 2002-04-11 Lonza Ag Biotechnologisches verfahren zur herstellung von hydroxy-stickstoff-heterocyclus-carbonsäuren
WO2009041473A1 (ja) * 2007-09-27 2009-04-02 Toyama Chemical Co., Ltd. ６－フルオロ－３－ヒドロキシ－２－ピラジンカルボニトリルの有機アミン塩およびその製造法
ES2535341T3 (es) * 2010-11-12 2015-05-08 Fujifilm Corporation Derivado de pirazino[2,3-d]isoxazol

Family Cites Families (16)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4081451A (en) * 1975-03-20 1978-03-28 Schering Corporation Process for preparing 2-halogeno nicotinic acids
JPS6061567A (ja) * 1983-09-14 1985-04-09 ロンザ　リミテツド ２−ピリジンカルボン酸−ν−オキサイドから２−ヒドロキシピリジンを製造する方法
CH658866A5 (de) * 1984-02-21 1986-12-15 Lonza Ag Verfahren zur herstellung von 6-hydroxynikotinsaeure.
CH658867A5 (de) * 1984-02-22 1986-12-15 Lonza Ag Verfahren zur herstellung von 6-hydroxynikotinsaeure.
IN170700B (cs) * 1989-12-20 1992-05-02 Lonza Ag
US5236832A (en) * 1990-02-13 1993-08-17 Lonza, Ltd. Microbiological oxidation of methyl groups in heterocycles
US5242816A (en) * 1990-07-10 1993-09-07 Lonza Ltd. Microbiological oxidation of alkyl groups in heterocycles
CZ279464B6 (cs) * 1990-09-24 1995-05-17 Lonza A.G. Způsob hydroxylace methylových skupin v aromatických heterocyklech, hybridní plasmidy pL05 a p L04 uložené v mikroorganismech Pseudomonas putida a Escherichia coli
CZ279488B6 (cs) * 1990-09-25 1995-05-17 Lonza A.G. Způsob mikrobiologické výroby hydroxylovaných heterocyklů
KR100233330B1 (ko) * 1991-02-04 1999-12-01 하인즈 모제르 6-히드록시피콜린산을 제조하기 위한 미생물학적 방법
US5238830A (en) * 1991-02-04 1993-08-24 Lonza Ltd. Microbiological process for the production of 6-hydroxypicolinic acid
JPH0740951B2 (ja) * 1991-03-30 1995-05-10 池田食研株式会社 微生物による含窒素複素環化合物の水酸化物の製造方法
JPH0728750B2 (ja) * 1991-03-30 1995-04-05 池田食研株式会社 微生物によるピラジン酸の水酸化物の製造方法
FI922125A (fi) * 1991-06-21 1992-12-22 Lonza Ag Mikrobidogiskt foerfarande foer framstaellning av 5-hydroxipyrazinkarboxylsyra
MX9204902A (es) * 1991-08-30 1993-05-01 Lonza Ag Procedimiento microbiologico para la preparacion de acido 6-hidroxipirazincarboxilico.
JP2583719B2 (ja) * 1992-08-10 1997-02-19 株式会社日立製作所 ガス制御式出力安定化ガスレーザ装置

Also Published As

Publication number Publication date
US5364940A (en) 1994-11-15
ES2101887T3 (es) 1997-07-16
KR100274205B1 (ko) 2000-12-15
LV10504A (lv) 1995-02-20
EP0559116B1 (de) 1997-05-28
JPH06199797A (ja) 1994-07-19
EP0559116A3 (en) 1994-07-06
SK279322B6 (sk) 1998-10-07
US5306630A (en) 1994-04-26
RU2122029C1 (ru) 1998-11-20
SK13793A3 (en) 1993-10-06
EP0559116A2 (de) 1993-09-08
GR3024286T3 (en) 1997-10-31
GEP19991710B (en) 1999-08-05
DE59306547D1 (de) 1997-07-03
CA2091005A1 (en) 1993-09-05
KR930019834A (ko) 1993-10-19
CZ27293A3 (en) 1994-01-19
CN1077748A (zh) 1993-10-27
ATE153698T1 (de) 1997-06-15
LTIP377A (en) 1994-06-15
CA2091005C (en) 2001-09-25
LV10504B (en) 1996-02-20
DK0559116T3 (da) 1997-06-16
LT3114B (en) 1994-12-27

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US5173412A (en) Microbiological process for the production of hydroxylated pyrazine derivatives
CZ282939B6 (cs) Mikrobiologický způsob hydroxylace dusíkatých heterocyklických karboxylových kyselin
JP3098310B2 (ja) ６−ヒドロキシピコリン酸の微生物学的製法
US5284767A (en) Microorganisms useful for the production of hydroxylated heterocycles
US5516661A (en) Microbiological process for the production of aromatic hydroxy-heterocyclic carboxylic acids
CZ279302B6 (cs) Mikrobiologický způsob výroby kyseliny 5-hydroxy pyrazinkarboxylové
US5270203A (en) Biologically pure culture of Alcaligenes faecalis DSM 6335
CZ279523B6 (cs) Mikrobiologický způsob přípravy derivátů kyseliny malonyl-7-aminocefalosporanové
US5264361A (en) Microbiological process for the production of 6-hydroxypicolinic acid
US5352592A (en) Microbiological process for the production of 5-hydroxypyrazinecarboxylic acid
US5266469A (en) Microbiological process for the production of 6-hydroxynicotinic acid
US5266482A (en) Agrobacterium useful for the microbiological process for the production of hydroxylated pyrazine derivatives
US5264362A (en) Microbiological process for the production of 6-hydroxynicotinic acid
SK278790B6 (sk) Mikrobiologický spôsob výroby kyseliny6-hydroxypyr
US5364939A (en) Process for the production of carboxylic acid chlorides of aromatic nitrogen heterocycles
JPH08332094A (ja) アルカリゲネス属の微生物を利用してヘテロ芳香族カルボン酸を製造する微生物学的方法

Legal Events

Date Code Title Description
IF00 In force as of 2000-06-30 in czech republic
MM4A Patent lapsed due to non-payment of fee

Effective date: 20030224