ES2902036T3 - Una composición sinérgica como estimulante de la autofagia - Google Patents

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Abstract

Una composición sinérgica que comprende un extracto de una planta del género Galeopsis y un compuesto que estimula la autofagia seleccionado de R-N1-espermidina o una sal de la misma, en la que R es hidrógeno o metilo, biotina y mezclas de los mismos.

Description

DESCRIPCIÓN
Una composición sinérgica como estimulante de la autofagia
Campo de invención
La invención se refiere a composiciones sinérgicas y a su uso como estimulante de la autofagia en los campos nutricional, médico o cosmético.
Antecedente de la técnica
La autofagia (o autofagocitosis) es el mecanismo natural regulado de la célula que desmonta los componentes innecesarios o disfuncionales. La autofagia permite la degradación ordenada y el reciclaje de los componentes celulares. En la macroautofagia, los componentes citoplásmicos implicados se aíslan del resto de la célula dentro de una vesícula de doble membrana conocida como autofagosoma. El autofagosoma finalmente se fusiona con los lisosomas y el contenido se degrada y recicla. Habitualmente se describen tres formas de autofagia: macroautofagia, microautofagia y autofagia mediada por chaperona (“chaperone-mediated autophagy”, CMA), junto con mitofagia. En estados patológicos, la autofagia se ha considerado como una respuesta adaptativa al estrés, que estimula la supervivencia, mientras que en otros casos parece estimular la muerte y la morbilidad celular. En el caso extremo de inanición, la degradación de los componentes celulares estimula la supervivencia celular al mantener el nivel de energía celular. Por lo tanto, la autofagia desempeña un papel crucial en la salud, la enfermedad y el envejecimiento regulando procesos celulares fundamentales, tales como las respuestas adaptativas al estrés, la diferenciación, el desarrollo tisular y la homeostasis.
En Angeleen Fleming et al., "Chemical modulators of autophagy as biological probes and potential therapeutics", Nature Chemical Biology, 7, 9-17 (2011), los autores demostraron que la autofagia tiene funciones pleiotrópicas inesperadas que favorecen la supervivencia de la célula, incluido el aporte de nutrientes en situaciones de inanición, la limpieza del interior celular, la defensa contra infecciones y la presentación de antígenos. Por tanto, una autofagia defectuosa se asocia con una amplia gama de estados patológicos, que incluyen la neurodegeneración, el cáncer y la enfermedad de Crohn.
En Teng Yu et al., "Targeting autophagy in skin diseases”, J. Mol. Med. (2015), 93: 31-38, se estudian e indican los mecanismos de la autofagia sobre la patogenia de las enfermedades de la piel. Específicamente, se indica el papel de la autofagia en trastornos autoinmunes de la piel, tales como la psoriasis, el lupus eritematoso sistemático (LES) y el vitíligo, trastornos infecciosos de la piel, cáncer de piel, tales como carcinoma de células escamosas y melanoma.
Con el fin de modular terapéuticamente la autofagia para la investigación de supresores e inductores de la autofagia, se estudiaron modelos de órganos humanos.
Las solicitudes de patente internacional WO 2014/016407A1 y WO 03/063851A1 describen una composición que contiene espermidina y biotina para el tratamiento de la caída del cabello.
Yuval Ramot et al. en "Spermidine Promotes Human Hair Growth and Is a Novel Modulator of Human Epithelial Stem Cell Functions", Plos One, vol. 6, n.° 7, 27 de julio de 2011, p. 22564, describen el uso de espermidina para estimular el crecimiento del cabello humano. El documento WO 2015/063678A1 describe el uso de extractos de Galeopsis para el tratamiento de la caída del cabello. D. Pinto et al., "209 Galeopsis segetum Necker extracts for the prevention and treatment of hair loss", en The Journal of Investigative Dermatology: Revista oficial de la sociedad de dermatología de investigación y la sociedad europea de investigación dermatológica", vol. 136, n.° 9 , 1 de septiembre de 2016, p. S196, describen el uso de extractos de Galeopsis segetum Necker para la prevención y el tratamiento de la caída del cabello.
En Tobias Eiserberg et al., "Induction of autophagy by spermidine promotes longevity", Nature Cell Biology, vol. 11, n.° 11, noviembre de 2009, se estudiaron los efectos de la espermidina, una poliamina natural, en levaduras, moscas y gusanos. Los autores informaron que la administración de espermidina alargó la vida de los mismos. Además, la administración de espermidina inhibió potencialmente el estrés oxidativo en ratones envejecidos. Se demostró que la autofagia constituía la principal vía de degradación lisosomal para reciclar material celular dañado y potencialmente dañino.
Los inventores se dieron cuenta de que, como un (mini)órgano completo, remodelado cíclicamente, el cultivo de órganos de folículos pilosos (FP) del cuero cabelludo humano puede proporcionar un modelo de este tipo, ya que dichos folículos, después de una actividad de crecimiento masivo (anágena), entran espontáneamente en una involución de órganos impulsada por la apoptosis (catágena). Como es sabido, el ciclo de vida del bulbo piloso del folículo está fundamentalmente representado por tres fases posteriores: anágena (crecimiento), catágena (involución) y telógena (fase de reposo).
Sorprendentemente, los inventores descubrieron que el ciclo de vida del folículo piloso se puede modular mediante el mecanismo de autofagia y, basándose en el modelo de agentes estimulantes del folículo piloso del cuero cabelludo humano, estuvieron investigando.
En vista del estudio, los inventores plantearon la hipótesis de que es probable que los FP anágenos del cuero cabelludo en etapa tardía, cuyo epitelio de la matriz del cabello prolifera a una tasa más alta que la mayoría de los tumores malignos y está expuesto a una serie de factores estresantes, se vean sometidos a una presión cada vez mayor para mantener la homeostasis tisular y pueden requerir un flujo de autofagia sustancial para mantener su crecimiento. Como se sabe, diferentes factores estresantes afectan negativamente el ciclo de vida del folículo piloso, determinando así una reducción del número de cabellos y su adelgazamiento.
Por tanto, un objeto de la presente invención es proporcionar una composición adecuada como estimulante de la autofagia en células de folículos pilosos del cuero cabelludo humano.
Por tanto, otro objeto es proporcionar una composición para estimular el crecimiento del cabello y/o inhibir o retrasar la caída del cabello en el cuero cabelludo humano.
Otro objeto consiste en proporcionar una composición para el tratamiento de condiciones mediadas por la autofagia.
Sumario de la invención
A partir del estudio del cultivo de órganos de folículos pilosos (FP) del cuero cabelludo humano, los inventores descubrieron una combinación de compuestos que inducen la autofagia en el modelo estudiado y que muestran un efecto sinérgico en la estimulación de la autofagia, especialmente en las células de los folículos pilosos del cuero cabelludo humano.
Después de la investigación, la composición que tenía un efecto sinérgico fue inesperadamente un extracto de una planta del género Galeopsis, combinado con un compuesto adicional que estimula la autofagia, especialmente en células de cuero cabelludo humano seleccionadas de R-N1-espermidina o su sal, en la que R es hidrógeno o metilo, biotina y una mezcla de los mismos.
Por tanto, los objetos anteriores se han conseguido mediante una composición sinérgica que comprende un extracto de una planta del género Galeopsis y R-N1-espermidina o una sal de la misma, en la que R es hidrógeno o metilo. Como alternativa, los objetos anteriores se han logrado mediante una composición sinérgica que comprende un extracto de una planta del género Galeopsis y biotina.
En una realización alternativa adicional, los objetos anteriores se han logrado mediante una composición sinérgica que comprende un extracto de una planta del género Galeopsis, biotina y R-N1-espermidina o una sal de la misma, en la que R es hidrógeno o metilo. Preferible y sorprendentemente, los inventores observaron que la administración de las composiciones anteriores, ya sea por vía tópica u oral, estimuló de manera sinérgica la autofagia en células, especialmente de folículos pilosos, en un sujeto que padecía adelgazamiento del cabello, determinando así un espesamiento progresivo de las zonas afectadas del cuero cabelludo.
Según un aspecto adicional, la presente invención proporciona por tanto el uso cosmético de las composiciones anteriores para estimular el crecimiento fisiológico del cabello como se define en la reivindicación 16.
Según otro aspecto más, la presente invención proporciona las composiciones anteriores para su uso en el tratamiento de una enfermedad del cuero cabelludo como se define en la reivindicación 17.
Descripción de las figuras
La figura 1 muestra imágenes representativas de células U2OS transducidas con una construcción que expresa la proteína autofágica LC3 fusionada con una proteína roja fluorescente (“Red Fluorescent Protein”, RFP) tratadas durante 6 horas con las sustancias indicadas. El inductor de la autofagia previamente caracterizado, espermidina, se utilizó como referencia positiva.
La figura 2 muestra imágenes representativas de células U2OS transducidas con una construcción que expresa la proteína SQSTM1/p62 fusionada con una proteína roja fluorescente (RFP) tratadas durante 6 horas con las sustancias indicadas. El recambio de SQSTM1/p62 depende principalmente del proceso de degradación mediado por la autofagia. La figura 3 muestra los niveles de LC3 lipidada y SQSTM1 en células U2OS humanas tratadas con dosis equimolares de N1-metilespermidina y espermidina como se indica en el ejemplo 14.
Descripción detallada de la invención
Por tanto, la invención se refiere a una composición sinérgica como se define en la reivindicación 1. En una realización preferida y ventajosa, la invención se refiere a una composición sinérgica de un extracto de una planta del género Galeopsis, R-N1-espermidina o una sal de la misma, en la que R es hidrógeno o metilo y biotina.
El extracto de las composiciones anteriores procede de una planta perteneciente al género Galeopsis.
En una realización, el extracto de Galeopsis es un extracto seco, en particular de la especie Galeopsis segetum, comúnmente conocida como galeopsis, es decir, una especie de planta con flores de la familia de la salvia, Lamiaceae. En otra realización, el extracto de Galeopsis es un extracto, en particular, de la especie Galeopsis tetrahit.
En determinadas realizaciones, el extracto de planta es una mezcla de extractos de Galeopsis segetum y Galeopsis tetrahit.
El extracto de la invención se obtiene por extracción de una parte de la planta, tales como raíces, hojas, frutos y flores, preferiblemente de las partes aéreas de la planta. Según algunas realizaciones, el extracto de una planta de la invención se obtiene mediante extracción de una parte de la planta, o de un tejido de la misma, utilizando un disolvente fisiológicamente aceptable como medio de extracción.
La expresión "disolvente fisiológicamente aceptable" significa un disolvente que no produce reacciones adversas significativas cuando se introduce en el cuerpo humano o se aplica al organismo humano. Normalmente, el término disolvente significa el disolvente utilizado para extraer los componentes biológicamente activos de una porción de la planta de Galeopsis.
Un disolvente adecuado para obtener el extracto de la planta es un líquido fisiológicamente aceptable en el que al menos algunos de los componentes biológicamente activos de la planta seleccionada sean solubles y en el que estos no sufran una alteración que les prive de actividad.
La parte morfológica preferida de la planta utilizada para realizar la extracción es el sistema de brotes que incluye tallos, hojas, flor y flores.
El disolvente utilizado para realizar la extracción puede ser un disolvente fisiológicamente aceptable. Los disolventes adecuados pueden ser disolventes no polares, tales como éter dietílico, cloroformo, disolventes apróticos polares, tales como acetato de etilo, dicloroetano y disolventes próticos polares, tales como alcoholes C1-C6 y disoluciones acuosas que los contengan. Se prefiere el uso de disolventes próticos polares. Los disolventes próticos polares típicos incluyen agua, etanol, propanol, alcohol isopropílico y mezclas de los mismos. Los disolventes preferidos son agua, alcohol etílico y una mezcla de los mismos.
En determinadas realizaciones, después de la extracción con un disolvente prótico polar, preferiblemente etanol, el extracto preferiblemente se filtra, se concentra y se aclara. A continuación, preferiblemente se purifica el extracto obtenido. La purificación se lleva a cabo más preferiblemente eluyendo en columna con un disolvente. El disolvente puede ser, por ejemplo, agua o etanol. A continuación, el extracto purificado preferiblemente se concentra y se seca. El extracto seco así obtenido opcionalmente se puede moler opcionalmente y opcionalmente se pueden añadir excipientes para producir el extracto seco final que se utilizará en las composiciones de la invención. Los excipientes opcionales comprendidos en el extracto seco se seleccionan preferiblemente del grupo que consiste en maltodextrina y gel de sílice coloidal anhidra.
Para obtener el extracto de una planta de Galeopsis tetrahit se pueden usar técnicas de extracción sólido-líquido para separar/extraer uno o más componentes biológicamente activos de los tejidos vegetales de la planta.
En determinadas realizaciones, la extracción de uno o más componentes biológicamente activos tiene lugar macerando una matriz o porción vegetal de Galeopsis tetrahit en un disolvente adecuado como se ha mencionado anteriormente.
Por ejemplo, se puede obtener un extracto adecuado sumergiendo o macerando una porción de partes aéreas de Galeopsis en una mezcla de agua y etanol, durante un tiempo adecuado para enriquecer el disolvente en uno o más componentes biológicamente activos contenidos en la porción de la planta. En estas condiciones, la extracción de los componentes biológicamente activos de los tejidos vegetales de la planta seleccionada se produce, sustancialmente, por difusión y/u ósmosis. El tiempo de maceración de las porciones de plantas en el disolvente es variable, por ejemplo, de 1 a 48 horas.
De acuerdo con ciertas realizaciones, el extracto seco de Galeopsis se puede obtener mediante las siguientes etapas:
• moler al menos una parte de la planta de Galeopsis;
• extraer con un disolvente, preferiblemente un disolvente fisiológicamente aceptable;
• filtrar el extracto;
• purificar el extracto filtrado, preferiblemente eluyendo en columna con un disolvente;
• secar el extracto purificado;
• moler el extracto seco purificado.
En algunas realizaciones, la etapa de extracción se puede repetir dos o tres veces.
Cuando se elimina el disolvente, por ejemplo, por evaporación, opcionalmente se puede añadir un soporte sólido o excipiente, tales como, a modo de ejemplo no limitante, almidones o maltodextrinas, para obtener el extracto en forma de polvo seco. Normalmente, el extracto obtenido de Galeopsis tetrahit o segetum puede ser fluido, blando o seco y preferiblemente está seco.
Por ejemplo:
• en el extracto fluido, 1 ml de extracto contiene componentes biológicamente activos solubles en 1 g de fármaco vegetal;
• en el extracto blando, el disolvente se evapora parcialmente, en particular hasta que el extracto no moje un papel de filtro;
• en el extracto seco, el disolvente se evapora casi por completo para obtener un polvo.
Es posible preparar extractos de Galeopsis de diferente polaridad.
Por ejemplo, es posible obtener un extracto de alta polaridad usando un disolvente polar, tal como una disolución hidroalcohólica, un extracto de polaridad intermedia usando un disolvente menos polar, tal como acetato de etilo, o un extracto apolar usando CO2 supercrítico con el que es posible extraer fracciones de fitocomplejos activos.
En determinadas realizaciones, la extracción se lleva a cabo utilizando una proporción en peso entre el disolvente y la matriz vegetal que varía de 1:10 a 10:1.
Es posible extraer los componentes biológicamente activos de la planta de Galeopsis utilizando técnicas de extracción alternativas como, por ejemplo, por digestión, infusión, exprimido, decocción, percolación, extracción en contracorriente, extracción soxhlet, extracción con gases supercríticos o ultrasonidos.
Además del extracto de la planta, la composición sinérgica puede comprender R-N1-espermidina o su sal, en la que R es hidrógeno o metilo. La espermidina es una poliamina, que tiene el nombre IUPAC N'-(3-aminopropil)butan-1,4-diamina. La espermidina puede estar presente en la composición en forma de sal, preferiblemente una sal farmacéuticamente aceptable, más preferiblemente en forma de triclorhidrato.
Además del extracto de la planta, la composición sinérgica puede comprender biotina, una vitamina B soluble en agua, también llamada vitamina B7 y anteriormente conocida como vitamina H o coenzima R.
La biotina está compuesta por un anillo ureido fusionado con un anillo tetrahidrotiofeno que tiene el nombre IUPAC ácido 5-[(3aS,4S,6aR)-2-oxohexahidro-1H-tieno[3,4-d]imidazol-4-il]pentanoico (n.° CAS 58-85-5).
Los inventores descubrieron por primera vez la propiedad de la biotina de ser un estimulante de la autofagia en las células humanas, específicamente en las células de los folículos pilosos del cuero cabelludo humano.
Por tanto, la presente descripción se refiere a la biotina o a una composición que contiene biotina según cualquiera de las realizaciones descritas anteriormente, para un uso cosmético o nutracéutico o médico como estimulante de la autofagia en el tratamiento de enfermedades moduladas por la autofagia.
Las enfermedades moduladas por la autofagia se seleccionan, por ejemplo, del grupo que consiste en neurodegeneración, cáncer, enfermedad de Crohn y enfermedades de la piel. Específicamente, entre las enfermedades de la piel, se pueden citar los trastornos cutáneos autoinmunitarios, tales como psoriasis, lupus eritematoso sistemático (LES) y vitíligo, trastornos cutáneos infecciosos, trastornos del cáncer de piel, tal como el carcinoma de células escamosas y el melanoma.
Por primera vez se utiliza el extracto del género Galeopsis, preferiblemente de las especies Galeopsis segetum y Galeopsis tetrahit, como estimulante de la autofagia en el tratamiento de enfermedades de la piel.
Preferible y sorprendentemente, los inventores observaron que la administración de las composiciones anteriores, típicamente por la vía de administración tópica u oral, estimuló de manera sinérgica la autofagia en las células de los folículos pilosos del cuero cabelludo humano en un sujeto que padecía un adelgazamiento del cabello, determinando así un espesamiento progresivo de las zonas afectadas del cuero cabelludo.
Normalmente, la composición de la invención comprende un vehículo, diluyente o excipiente fisiológica y/o farmacéuticamente aceptable.
El vehículo, diluyente o excipiente fisiológica o farmacéuticamente adecuado puede seleccionarse basándose en la vía de administración a la que está destinada la composición farmacéutica resultante. Se contempla cualquier vehículo y/o excipiente adecuado para la forma de preparación deseada para la administración en los usos del extracto de una planta o los ingredientes activos descritos en este documento.
Dentro del alcance de la presente invención, el término "vehículo" se refiere a un excipiente, vehículo, diluyente o adyuvante, que puede estar presente en la composición de la invención.
La composición de la invención se puede formular en forma de aplicación tópica o en forma de administración oral.
En algunas realizaciones, la composición es para la aplicación tópica. En esta aplicación, la composición de la invención se puede aplicar, en una cantidad eficaz, directamente sobre el cuero cabelludo o la piel de un ser humano.
Por ejemplo, en el tratamiento de formas de caída o adelgazamiento del cabello, se puede aplicar una cantidad cosmética/fisiológicamente activa de composición directamente sobre el cuero cabelludo, una o más veces al día, de modo conveniente durante ciclos que duran 2-3 meses, alternados con períodos de ausencia de tratamiento.
Según estos aspectos, se describe en el presente documento un método de tratamiento cosmético que comprende la aplicación sobre el cuero cabelludo, o sobre parte del mismo, de una cantidad eficaz de una composición según una o más de las realizaciones descritas y/o reivindicadas en el mismo.
La cantidad del extracto seco de Galeopsis, preferiblemente en forma de especie Galeopsis segetum o Galeopsis tetrahit, en la formulación tópica de las composiciones de la invención está en el intervalo del 0,0003 % al 0,01 % en peso a peso con respecto al peso total de la formulación.
La cantidad de biotina en la formulación tópica de las composiciones de la invención está en el intervalo del 0,0006 % a, 0,075 % en peso a peso con respecto al peso total de la formulación.
En la forma tópica, la composición comprende preferiblemente N1-metilespermidina. En la forma tópica, la N1-metil espermidina o la espermidina está comprendida preferiblemente en el intervalo del 0,0005-0,1 % en peso a peso con respecto al peso total de la formulación.
Entre los excipientes habituales en la formulación tópica para un uso cosmético o para un uso farmacéutico, se pueden citar conservantes, agentes bactericidas, agentes emulsionantes, tampones, lubricantes, agentes humectantes, agentes acondicionadores y agentes colorantes.
La composición para la aplicación tópica puede estar en forma sólida, semisólida o fluida. Las formulaciones adecuadas en forma sólida incluyen cremas, geles, ungüentos, pastas, ungüentos.
En otras realizaciones, la formulación para la administración local está en forma fluida, por ejemplo, en forma de lociones, geles, champús, suspensiones, emulsiones.
En el caso de formulaciones fluidas o semifluidas, el extracto de la planta puede diluirse en un vehículo en forma líquida fisiológicamente aceptable, tal como agua, alcohol, disolución hidroalcohólica o glicérica, o mezclarse con otros líquidos adecuados para la aplicación local.
A modo de ejemplo, las composiciones de la invención en forma líquida se pueden preparar disolviendo los componentes en agua y/o alcohol. La composición líquida puede tamponarse para alcanzar un intervalo de pH convenientemente seleccionado de 5 a 7 para que sea compatible con el pH del cuero cabelludo, y luego filtrarse y envasarse en recipientes adecuados, tales como botellas o viales.
En algunas realizaciones, las composiciones de la invención pueden comprender excipientes habitualmente usados en la formulación de preparaciones cosméticas o farmacéuticas para un uso local, tales como conservantes, agentes bactericidas, estabilizantes, emulsionantes, tampones, agentes humectantes, tintes y otros excipientes habitualmente usados en las técnicas de preparación.
En una realización, la formulación para la aplicación local está en forma de una emulsión que contiene el extracto transportado en un excipiente adecuado. En algunas realizaciones, la composición para la aplicación tópica comprende un excipiente del tipo hidroximetilcelulosa y/o gelificante con HLB adecuado para la formulación y las sustancias.
Según otras realizaciones, la composición de la invención está en una forma para la administración oral. En estos casos, la composición contiene los componentes, tal como se definieron previamente, y uno o más vehículos o excipientes adecuados para la administración oral.
La cantidad de extracto de Galeopsis, preferiblemente en forma de la especie Galeopsis segetum o Galeopsis tetrahit, en la formulación oral de las composiciones de la invención está en el intervalo de 0,1 mg a 20 mg por dosis única.
La cantidad de biotina en la formulación oral de las composiciones de la invención está en el intervalo de 0,03 mg a 0,08 mg por dosis única.
En la forma oral, la composición comprende preferiblemente espermidina o una sal de la misma, más preferiblemente la espermidina está en forma de sal.
En la forma oral, la N1-met¡lespermid¡na (o su sal) o la espermidina (o su sal) está comprendida preferiblemente en el intervalo de 0,3 mg a 0,8 mg por dosis única.
A modo de ejemplo, los excipientes adecuados para la administración oral incluyen derivados de celulosa, tales como hidroximetilcelulosa, hidroxipropilmetilcelulosa, metilcelulosa, hidroxipropilcelulosa, hidroxietilcelulosa, carboxietilcelulosa, etilhidroxietilcelulosa, acetato butirato de celulosa, y acetato ftalato de celulosa y sus mezclas.
Otros ejemplos de excipientes adecuados incluyen los polímeros pertenecientes a la familia de las lactamas, tales como pirrolidona y sus derivados, por ejemplo, polivinilpirrolidona, polivinilpolipirrolidona y sus mezclas, sales inorgánicas, tales como calcio o fosfato dicálcico, lubricantes, tales como estearato de magnesio, triacilgliceroles y mezclas de los mismos.
Las composiciones para la administración oral pueden estar en forma sólida o líquida. Las composiciones típicas en forma sólida incluyen comprimidos, cápsulas, polvos, gránulos, píldoras. Los ejemplos de composiciones en forma líquida incluyen disoluciones, emulsiones, suspensiones, jarabes. Las composiciones también pueden estar en forma de liberación controlada de los componentes activos contenidos en ellas.
Los comprimidos comprenden generalmente un vehículo o excipiente adecuado en el que se dispersa el extracto de la planta, típicamente en forma seca.
Entre los excipientes o vehículos típicos para la administración oral, se pueden incluir agentes desintegrantes, cargas, conservantes, en la formulación de la composición. En determinadas realizaciones, la composición de la invención es un producto nutricional, un producto dietético o un producto nutracéutico.
La expresión suplemento nutricional significa un producto que mejora el estado nutricional y que puede usarse para apoyar o mejorar la actividad funcional de uno o más órganos o la funcionalidad del cuerpo humano dentro de los límites fisiológicos. Las composiciones de la invención que son estimulantes de la autofagia son, por tanto, nutracéuticos y cosmecéuticos estimulantes del crecimiento del cabello.
De acuerdo con un aspecto adicional, la presente invención, por lo tanto, proporciona el uso cosmético de las composiciones sinérgicas citadas anteriormente como se define en la reivindicación 16. De acuerdo con un aspecto específico adicional, en la presente se describe el uso de la formulación tópica u oral que comprende las composiciones citadas anteriormente para estimular el crecimiento fisiológico del cabello.
De acuerdo con otro aspecto más, la presente invención proporciona, por tanto, las composiciones sinérgicas citadas anteriormente para su uso en el tratamiento como se define en la reivindicación 17.
De acuerdo con un aspecto específico adicional, la presente invención, por lo tanto, proporciona el uso cosmético de la formulación tópica u oral que comprende las composiciones anteriores para estimular el crecimiento del cabello o para el tratamiento o la prevención de la caída del cabello.
El vínculo entre la estimulación de la autofagia y las actividades mencionadas anteriormente de las composiciones de la invención se demuestra mediante los ensayos descritos en el siguiente ejemplo 13. En particular, el artículo científico de Chiara Parodi et al., "Autophagy is essential for maintaining the growth of a human (mini-)organ: Evidence from scalp hair follicle organ culture", publicado en PLOS Biology, vol. 16(3), 2018, 28 de marzo, 10.1371/journal.pbio.2002864, demuestra que el ensayo realizado en células epiteliales de osteosarcoma óseo humano es un modelo establecido para demostrar la eficacia de la composición sobre la estimulación del crecimiento del cabello.
Los datos experimentales muestran la sinergia en la estimulación de la autofagia en un modelo in vitro validado. Los datos y la publicación muestran que la autofagia es fundamental para el crecimiento del folículo piloso. La composición de la invención estimula la autofagia y, en consecuencia, es eficaz para estimular el crecimiento del cabello.
En ciertos aspectos, la invención proporciona la composición anterior para su uso en el tratamiento de trastornos en el crecimiento del cabello, tal como en el caso de la alopecia androgénica o defluvio.
En un aspecto adicional, la invención proporciona el uso de las composiciones anteriores como un estimulante de la autofagia como se define en las reivindicaciones 18 y 19.
Los inventores también descubrieron que una composición que comprende N1-metilespermidina y biotina era adecuada como estimulante de la autofagia en el tratamiento de enfermedades de la piel.
Las cantidades administradas y la frecuencia de la administración de la composición dependerán del tipo y la gravedad de las enfermedades a tratar.
La invención se detallará a continuación con referencia a realizaciones específicas que muestran los resultados sinérgicos logrados por las composiciones de la invención y no deben considerarse limitantes. Las cantidades de los componentes indicados se expresan como porcentajes (%) en peso a peso (en p/p) o en mg por dosis única de administración.
Partes experimentales
Ejemplo 1: Preparación del extracto de Galeopsis segetum
La preparación del extracto seco de Galeopsis segetum se realizó mediante extracción con etanol al 40 % seguido de una purificación en columna. Las etapas se describen en los siguientes párrafos.
Extracción
Las partes aéreas desecadas molidas de G. segetum se extrajeron dos veces a 50 °C durante 2 horas con etanol al 40 %. El sólido y el líquido se separaron mediante un decantador.
Los lixiviados se filtraron, se concentraron al vacío y luego se aclararon por centrifugación.
Purificación
Se cargo una columna con resina adsorbente de intercambio iónico XAD7HP que se empapó previamente en etanol al 95 % y se mantuvo en contacto durante 10 horas. A continuación, la columna cargada se lavó con agua y se continuó hasta que la conductividad del eluido alcanzó el mismo valor que el agua cargada.
La purificación del extracto se realizó en la columna cargada con XAD7HP eluyendo inicialmente con agua y luego con etanol al 70 %.
Los eluidos recogidos se concentraron al vacío.
Se añadió etanol a la disolución concentrada y luego la disolución se calentó a 70-75 °C durante 30 minutos para reducir el nivel de biocarga.
La disolución se concentró de nuevo al vacío, se secó a 50 °C durante 24 horas y luego se molió y se mezcló con excipientes (maltodextrina y gel de sílice coloidal anhidra 90/10) para producir el producto final.
Ejemplo 2: Preparación del extracto de Galeopsis tetrahit
La preparación del extracto seco de Galeopsis tetrahit se realizó siguiendo exactamente el mismo procedimiento descrito en los párrafos anteriores para la extracción de Galeopsis segetum.
Ejemplo 3: Champú revitalizante
Ingredientes % en p/p
Zetesol MGS/B 16-49
Lauroilsarcosinato de sodio 4-12
Mirasheen CP 820/G 2-6
Rewoderm LI S 80 1-4
Euxyl K 701 1-2
BC 2262 0,5-1,4
Cocamida MIPA 0,5-1,4
Proteína de trigo hidrolizada con undecilileno de potasio 0,5-1,4
Ácido cítrico monohidratado 0,4-1,2
Betaína monohidratada 0,2-0,7
Cloruro de lauril metil gluceth-10 hidroxipropildimonio 0,2-0,7
Gafquat 755 N-O 0,2-0,5
D-pantenol 0,1-0,3 Disuccinato de etilendiamina trisódico 0,1-0,3
BHA 0,01-0,02
Hialuronato de hidroxipropiltrimonio 0,01-0,02 Extracto seco de Galeopsis segetum 0,003-0,009 Biotina 0,001-0,03 Meditanox H-10 0,0005-0,0015 N1-metilespermidina 0,0005-0,1 Lecitina 0,0004-0,0011 Fomblin HC/PU-CAT5 0,0002-0,0005 Agua hasta 100 mL
Ejemplo 4: Champú reforzador
Ingredientes % en p/p Zetesol MGS/B 15-50 N-lauroilsarcosinato de sodio 4-12 Mirasheen CP 820/G 2-6 Rewoderm LI S 80 1-4 Euxyl K 701 1-2 Cocamida MIPA 0,5-1,4 Proteína de trigo hidrolizada con undecilileno de potasio 0,5-1,4 Ácido cítrico monohidratado 0,4-1,1 BC 2262 0,3-0,8 Betaína monohidratada 0,2-0,7 Cloruro de lauril metil gluceth-10 hidroxipropildimonio 0,2-0,7 Abil Soft AF 100 0,2-0,6 Gafquat 755 N-O 0,2-0,5 D-pantenol 0,1-0,3 Disuccinato de etilendiamina trisódico 0,1-0,3
BHA 0,01-0,02
Hialuronato de hidroxipropiltrimonio 0,01-0,02 Extracto seco de Galeopsis segetum 0,003-0,009 Biotina 0,001-0,003 Meditanox H-10 0,001-0,002 N1-metilespermidina 0,001-0,002 Lecitina NAT 8539 0,0004-0,0011 Fomblin HC/PU-CAT5 0,0002-0,0005 Agua hasta 100 mL
Ejemplo 5: Loción
Ingredientes % en p/p Etanol 9-27 Pantotenato de calcio 1-2
Aceite de ricino hidrogenado PEG-40 1-2 Disolución de ácido láctico al 80 % 0,1-0,4 Glicona de soja Lypobelle 0,04-0,13 Hialuronato de hidroxipropiltrimonio 0,03-0,1 N1-metilespermidina 0,03-0,09 Lecitina NAT 8539 0,02-0,07 Di-t-butil-4-hidroxihidrocinamato de octadecilo 0,02-0,07 Fomblin HC/PU-CAT5 0,009-0,027 Biotina 0,007-0,022 Meditanox H-10 0,0005-0,0015 Agua hasta 100 mL
Ejemplo 6: Acondicionador fortificante
Ingredientes % en p/p Cloruro de cetiltrimetilamonio 3-9
Alcohol cetil estearílico 3-8
Silsoft 8812 2-7 Arlacel 165-PA-(MV) 2-5 Estearato de glicerilo 2-5 Lactato de alquilo C12-13 1-3 Dow Corning CE 8401 1-2 Xilitol 1-2 BiosControl Synergy BAS 0,3-0,9 Hidroxietilcelulosa 0,3-0,9 D-pantenol 0,3-0,8 Uniglucan G-51 0,3-0,8 Ácido láctico líquido 0,1-0,4 Fitantriol 0,1-0,3 Benzoato de sodio 0,1-0,3 Deshidroacetato de sodio 0,1-0,3 Ciclopentasiloxano 0,1-0,2 EDTA disódico dihidratado 0,1-0,2 Sericina 0,1-0,2 Hialuronato de hidroxipropiltrimonio 0,01-0,02 Extracto seco de Galeopsis segetum 0-0,01 Biotina 0,01-0,03 Meditanox H-10 0,001-0,002 Lecitina NAT 8539 0,0004-0,0011 Fomblin HC/PU-CAT5 0,0002-0,0005 N1-metilespermidina 0,025-0,075 Agua hasta 100 mL
Ejemplo 7: Acondicionador fortificante
Ingredientes % en p/p Alcohol cetoestearílico 4-11 Cloruro de cetiltrimetilamonio 3-8 Disolución catiónica transparente Aquacat PF618 2-6
1,2-propandiol 2-5
SI-TEC AME 6057 1-3 Incroquat behenilo TMS 1-2
D-pantenol 0,4-1,2 Fenoxietanol 0,4-1,2 Estearato de glicerilo 0,4-1,2 Mycomplex 0,4-1,2 Ceraphyl 60 0,3-0,8 Collasurge-LQ-(WD) 0,3-0,8 Aceite de cártamo 0,2-0,5 Amipearl plata intenso 1161 0,1-0,3 Acetato de tocoferilo 0,1-0,3 Hidroxietilcelulosa 0,1-0,3 Uvinul A más B 0,1-0,2 Ciclopentasiloxano 0,1-0,2 Dekaben BL 0,1-0,2 EDTA disódico dihidratado 0,1-0,2 Rewoteric AM 2C NM 0,1-0,2 Ácido cítrico monohidratado 0,03-0,08 Hidroxitolueno butilado 0,03-0,08 Pantotenato de calcio 0,01-0,03 Hialuronato de hidroxipropiltrimonio 0,01-0,02 Biotina 0,001-0,02 SK-Influx V 0,001-0,003 Rutina 0,0006-0,0017 Extracto seco de Galeopsis tetrahit 0,001-0,002 Meditanox H-10 0,0005-0,0015 Extracto seco de semillas de Vitis vinifera 0,0005-0,0015 Lecitina NAT 8539 0,0004-0,0012 Disolución de aceite de zeaxantina al 20 % 0,0002-0,0006 Fomblin HC/PU-CAT5 0,0002-0,0005 N1-metilespermidina 0,0045-0,0135 Agua hasta 100 mL
Ejemplo 8: Gel fortificante
Ingredientes (INCI) % en p/p Polímero Fixate PLUS 2-5
Aceite de ricino hidrogenado PEG-40 1-3
Perfume Apollon 436/F 0505436F 1-2
Sorbitol no cristalizante al 70 % 1-2 Hidroximetilglicinato de sodio 0,5-1,5 Hidroxipropil guar 0,4-1,2 Benzofenona-4 0,15-0,45 Luviquat Polyquatenium 11 0,15-0,45
EDTA disódico dihidratado 0,05-0,15 Taurina 0,03-0,08 Pantotenato de calcio 0,01-0,03
N1-metilespermidina 0,00275-0,00825 Extracto seco de Galeopsis tetrahit 0,0003-0,0009 Biotina 0,00075-0,0025 Meditanox H-10 0,0001-0,0002 Agua hasta 100 mL
Ejemplo 9: Crema
Ingredientes % en p/p Octildodecanol 11.5- 15,5 Alcohol cetil estearílico 8.5- 11,5
Ingredientes % en p/p
Cera de ásteres cetílicos 2,6-3,5 Monoestearato de sorbitán 1,7-2,3 Polisorbato 60 1,3-1,7
Alcohol de bencilo 0,9-1,2
N1-metilespermidina 0,0428-0,058 Biotina 0,0119-0,0161 Agua hasta 100 mL
Ejemplo 10: Comprimidos
Ingredientes Cantidad (mg) Metionina 200-400 Vitamina C revestida 50-150 Celulosa microcristalina 40-160 Extracto seco de semillas de Vitis vinifera 30-90 Hidroxipropilmetilcelulosa K100 20-70 Zeaxantina al 5 % 20-70 Acetato de vitamina E al 50 % 20-50 Levadura de selenio 2000 ppm 20-40 Bisglicinato de zinc al 28,2 % 10-40 Dióxido de silicio coloidal 10-20 Extracto seco de hoja de Olea europaea L. 5-15 Pantotenato de calcio 5-11 Polietilenglicol 6000 4-12 Estearato de magnesio 4-12 Polivinilpirrolidona K30 3-10 Extracto seco de Galeopsis segetum 0,1-20 Bisglicinato de cobre 30 % 2-6 Rutina 1-4 Vitamina B6 1-4 Ácido hialurónico 1-2 Triclorhidrato de espermidina 0,3-0,8 Ácido fólico 0,1-0,3 Biotina 0,03-0,08 Ejemplo 11: Comprimidos
Ingredientes Cantidad (mg) Celulosa microcristalina 40-160 Hidroxipropilmetilcelulosa K100 20-70 Acetato de vitamina E al 50 % 20-50 Bisglicinato de zinc al 28,2 % 10-40 Dióxido de silicio coloidal 10-20 Polietilenglicol 6000 4-12 Estearato de magnesio 4-12 Polivinilpirrolidona K30 3-10 Bisglicinato de cobre al 30 % 2-6 Vitamina B6 1-4
Ácido hialurónico 1-2 Triclorhidrato de espermidina 0,3-0,8 Biotina 0,03-0,08
Ejemplo 12: Comprimidos
Ingredientes Cantidad (mg) Celulosa microcristalina 40-160 Hidroxipropilmetilcelulosa K100 20-70 Acetato de vitamina E al 50 % 20-50 Bisglicinato de zinc al 28,2 % 10-40 Dióxido de silicio coloidal 10-20 Extracto seco de Galeopsis segetum 5-20 Polietilenglicol 6000 4-12 Estearato de magnesio 4-12 Polivinilpirrolidona K30 3-10
Bisglicinato de cobre al 30 % 2-6
Vitamina B6 1-4
Ejemplo 13: Materiales y métodos
Análisis de inmunotransferencia
Las células U2OS se cultivaron hasta un 80 % de confluencia en medio de Eagle modificado por Dulbecco con alto contenido en glucosa (4,5 g/ID-glucosa) que contenía L-glutamina 4 mM, suero bovino fetal (“fetal bovine serum”, FBS) al 10 % y se trataron con espermidina (lote 2010112716), Galeopsis segetum (IDN 6781), biotina (lote 2014124160) o sus combinaciones. Las muestras de proteína se extrajeron en tampón RIPA como se informó anteriormente (De Mei C. , Ercolani L., Parodi C., Veronesi M., Vecchio C.L., Bottegoni G., etal., Dual inhibition of REV-ERBp and autophagy as a novel pharmacological approach to induce cytotoxicity in cancer cells, Oncogene, 2015, 34 (20):2597-2608). Los niveles de p62/SQSTM1 y GAPDH se analizaron con anticuerpos específicos anti-p62/SQSTM1 y anti-GADPH. Los experimentos de inmunotransferencia se realizaron en tampón TBS-T que contenía albúmina de suero bovino (“bovine serum albumin”, BSA) al 5 %. Los anticuerpos anti-LC3B y anti-GAPDH se diluyeron 1:1000 y 1:50000, respectivamente. Los anticuerpos secundarios complementarios conjugados con HPR se diluyeron 1:10000. Tras la reacción con el reactivo de detección de transferencia Western ECL, se adquirieron las señales quimioluminiscentes con un analizador de imágenes luminiscentes LAS-4000 y se calculó la densidad óptica de la señal de banda específica con el software de análisis de imágenes Photoshop. Se adoptó GAPDH como control de carga y se usaron las señales de GAPDH para normalizar los niveles de proteína p62 entre diferentes muestras.
Las inmunotransferencias se repitieron al menos 4 veces para expresar el valor como promedio ± MEE.
Análisis fluorescente de inhibición de la autofagia.
Se sembraron 3000 células/pocillo de células U2OS en placas de 48 pocillos, cubreobjetos n.° 1.5 sin revestimiento, 6 mm de diámetro de vidrio, previamente revestidas con una disolución de gelatina, y se transdujeron con 0,2 pl de baculovirus/10000 células que contienen una proteína quimérica de p62-proteína roja fluorescente (p62-RFP). A las 48 h posteriores a la transducción, las células se trataron con espermidina, biotina, Galeopsis o vehículo y se controlaron durante 24 h utilizando microscopía de imágenes de células vivas NIKON.
Actividad sinérgica de la espermidina, G. segetum y biotina para inducir la autofagia en células humanas
Para evaluar si la biotina y/o el extracto de Galeopsis segetum pueden afectar a la autofagia, los inventores controlaron la acumulación de autofagosomas en células U2OS cultivadas, mediante microscopía fluorescente de células vivas (Klionsky D.J., Abdelmohsen K., Abe A., Abedin M.J., Abeliovich H., Acevedo Arozena A., et al., Guidelines for the use and interpretation of assays for monitoring autophagy, Autophagy, 2016, 12(1 ):1 -222). Así, las células se transdujeron con la construcción que contenía la proteína de autofagia LC3, fusionada con una proteína roja fluorescente (“Red Fluorescent Protein”, RFP). Luego, se controló la acumulación de puntos fluorescentes de LC3 tras la adición de biotina (200 ng/ml) o extracto seco de Galeopsis (100 ng/ml) adquiriendo imágenes cada 30 min durante 6 h. Se adoptó a la espermidina (10 pM) como control positivo de un compuesto inductor de la autofagia (Pietrocola F., Lachkar S., Enot D. , Niso-Santano M., Bravo-San Pedro J., Sica V., et al., Spermidine induces autophagy by inhibiting the acetyltransferase EP300, Cell Death & Differentiation, 2015, 22(3): 509-516).
Este análisis reveló una acumulación marcada de puntos fluorescentes de LC3 en las células tratadas con biotina y Galeopsis (ver imágenes representativas en la figura 1). Como es evidente en la figura 1, el tratamiento con espermidina dio como resultado una acumulación marcada de puntos fluorescentes de LC3 (es decir, una acumulación de autofagosomas). Tanto la biotina como el extracto seco de Galeopsis segetum produjeron una acumulación similar de puntos rojos de LC3.
Debido a que los puntos de LC3-RFP también pueden acumularse tras un bloqueo del flujo autofágico, se controló la degradación dependiente de la autofagia de la proteína SQSTM1/p62 (Klionsky D.J., Abdelmohsen K., Abe A., Abedin M.J., Abeliovich H., Acevedo Arozena A., et al., Guidelines for the use and interpretation of assays for monitoring autophagy, Autophagy, 2016, 12(1 ):1 -222). La p62 actuó como conector entre LC3 y los sustratos ubiquitinados (Pankiv S., Clausen T.H., Lamark T., Brech A., Bruun J.-A., Outzen H., et al., p62/SQSTM1 binds directly to Atg8/LC3 to facilitate degradation of ubiquitinated protein aggregates by autophagy, Journal of Biological Chemistry, 2007, 282(33):24131-24145). Las proteínas poliubiquitinadas unidas a p62 y p62 se incorporaron al autofagosoma completo y se degradaron en los autolisosomas, sirviendo así como índice de degradación autofágica (Klionsky D.J., Abdelmohsen K., Abe A., Abedin M.J., Abeliovich H., Acevedo Arozena A., et al., Guidelines for the use and interpretation of assays for monitoring autophagy, Autophagy, 2016, 12(1 ):1 -222).
En consecuencia, se evaluaron los efectos de la biotina y Galeopsis sobre la degradación de p62 mediada por la autofagia analizando el número de autofagosomas de p62-RFP mediante microscopía fluorescente en vivo. Así, las células se transdujeron con una construcción que expresaba la proteína p62 fusionada con la RFP. Luego, se controlaron los puntos fluorescentes de p62 tras la adición de biotina, Galeopsis, espermidina o vehículo. Apoyando plenamente que tanto la biotina como Galeopsis actuaron como inductores de la autofagia, se observó una reducción drástica de los puntos de p62-RFP en las células tratadas en comparación con el vehículo (ver imágenes representativas en la figura 2).
Como se ve en la figura 2, el tratamiento con el inductor de autofagia previamente caracterizado, espermidina, redujo marcadamente los puntos fluorescentes y las señales fluorescentes de p62, lo que indica que tanto la biotina como el extracto de Galeopsis segetum actúan como inductores de la autofagia, y estos tratamientos produjeron una fuerte reducción de las señales fluorescentes de p62.
Una vez validada la actividad inductora de autofagia de biotina y Galeopsis, y habiendo validado el uso de p62 como marcador adecuado del proceso de la autofagia, se evaluaron los efectos de combinaciones de compuestos sobre los niveles de proteína p62 mediante análisis de inmunotransferencia con anticuerpos específicos anti-p62 (De Mei C., Ercolani L., Parodi C., Veronesi M., Vecchio C.L., Bottegoni G., etal., Dual inhibition of REV-ERBp and autophagy as a novel pharmacological approach to induce cytotoxicity in cancer cells, Oncogene, 2015, 34(20) :2597-608).
Este análisis indicó unos efectos sinérgicos significativos entre espermidina, biotina y Galeopsis en la inducción de la degradación de p62 mediada por la autofagia (tabla 1).
Tabla 1
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De hecho, la combinación de espermidina (0,5 pM) y biotina (19,91 ng/ml) dio como resultado una reducción de p62 casi dos veces mayor que la reducción esperada por los efectos aditivos (45 % frente al 26 %). Se obtuvieron resultados similares para la combinación de espermidina y Galeopsis (7,9 ng/ml) (51 % frente al 29 %) y la mezcla de biotina/Galeopsis (67 % frente al 45 %). Finalmente, una combinación de los tres compuestos (espermidina 0,5 pM Galeopsis 7,9 ng/ml biotina 19,91 ng/ml) generó una reducción notable del 78 % de los niveles de proteína p62.
Ejemplo 14
Se evaluaron los niveles de LC3 lipidada y SQSTM1 en células U2OS humanas tratadas con dosis equimolares de N1-metilespermidina y espermidina. Como resultado, en comparación con el vehículo, ambos compuestos aumentaron los niveles de la forma LC3-II lipidada y estimularon la degradación mediada por autofagia de SQSTM1. Se trataron células U2OS humanas específicamente cultivadas durante 6 h con vehículo o dosis equimolares de espermidina y N1-metilespermidina (100 pM). A continuación, se evaluaron los niveles de LC3 lipidada (LC3-II) y SQSTM1 mediante un análisis de inmunotransferencia como en el ejemplo 13 con un anticuerpo específico. Las señales de actina se adoptaron como control de carga. El análisis de densitometría de las señales de proteínas se indica como niveles de proteína relativos normalizados por actina. El valor de la muestra del vehículo se estableció en 1. Se muestra como promedio ± MEE, n = 3. *P <0,05 y **P <0,01, compuestos frente al vehículo. Los resultados se indican en la figura 3 (A y B) Estos resultados validan que la N1-metilespermid¡na conserva la actividad para inducir autofagia, así como su análogo desmetilado.

Claims (19)

  1. REIVINDICACIONES
    1 Una composición sinérgica que comprende un extracto de una planta del género Galeopsis y un compuesto que estimula la autofagia seleccionado de R-N1-espermidina o una sal de la misma, en la que R es hidrógeno o metilo, biotina y mezclas de los mismos.
  2. 2. - La composición sinérgica de la reivindicación 1, en la que el extracto de la planta del género Galeopsis se selecciona de las especies de Galeopsis segetum y Galeopsis tetrahity mezclas de las mismas.
  3. 3. - La composición sinérgica de la reivindicación 2, en la que el extracto de la planta del género Galeopsis es un extracto seco obtenible mediante el proceso que comprende las siguientes etapas:
    - moler al menos una parte de la planta del género Galeopsis;
    - extraer con un disolvente, preferiblemente un disolvente fisiológicamente aceptable;
    - filtrar el extracto;
    - purificar el extracto filtrado, preferiblemente eluyendo en una columna con un disolvente;
    - secar el extracto purificado;
    - moler el extracto seco purificado; y
    - opcionalmente añadir excipientes.
  4. 4. - La composición sinérgica de la reivindicación 3, en la que los excipientes comprenden maltodextrina y/o gel de sílice coloidal anhidro.
  5. 5. - La composición sinérgica de una cualquiera de las reivindicaciones 1 -4, en la que la espermidina está presente en la composición en forma de triclorhidrato.
  6. 6. - Una formulación tópica que comprende la composición sinérgica según una cualquiera de las reivindicaciones 1 -5 y al menos un excipiente adecuado para la administración tópica.
  7. 7. - La formulación tópica según la reivindicación 6, en la que la cantidad del extracto de la planta del género Galeopsis está en el intervalo del 0,0003 % al 0,01 % en peso con respecto al peso total de la composición.
  8. 8. - La formulación tópica según la reivindicación 6 o la reivindicación 7, en la que la cantidad de biotina está en el intervalo del 0,0006 % al 0,075 % en peso con respecto al peso total de la composición.
  9. 9. - La formulación tópica según una cualquiera de las reivindicaciones 6-8, en la que la composición comprende R-N1-espermidina o una sal de la misma, en la que R es metilo o hidrógeno, en el intervalo del 0,0005-0,1 % en peso con respecto al peso total de la composición.
  10. 10. - La formulación tópica según una cualquiera de las reivindicaciones 6-9, en la que la formulación está en una forma seleccionada del grupo que consiste en un champú, un gel, un acondicionador, una loción, un bálsamo, una emulsión, una espuma, un maquillaje y una crema.
  11. 11. - Una formulación oral que comprende la composición sinérgica según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5 y al menos un excipiente adecuado para la administración oral.
  12. 12. - La formulación oral de la reivindicación 11, en la que la cantidad del extracto seco de la planta del género Galeopsis en la formulación oral está en el intervalo de 0,1 mg a 20 mg por dosis única.
  13. 13. - La formulación oral de la reivindicación 11 o 12, en la que la cantidad de biotina en la formulación oral está en el intervalo de 0,03 mg a 0,08 mg por dosis única.
  14. 14. - La formulación oral de la reivindicación 11 o 12, en la que la composición comprende R-N1-espermidina o una sal de la misma, en la que R es metilo o hidrógeno, en el intervalo de 0,3 mg a 0,8 mg por dosis única.
  15. 15. - La formulación oral según una cualquiera de las reivindicaciones 11-14, en la que la formulación es una formulación sólida seleccionada del grupo que consiste en un comprimido, una cápsula, polvos, gránulos y una píldora.
  16. 16. - Un uso cosmético de la composición sinérgica según una cualquiera de las reivindicaciones 1-5 o una formulación tópica según una cualquiera de las reivindicaciones 6-10 o una formulación oral según una cualquiera de las reivindicaciones 11-15 para estimular el crecimiento del cabello y/o prevenir la caída del cabello.
  17. 17. - Una composición sinérgica según una cualquiera de las reivindicaciones 1 -5 o una formulación tópica según una cualquiera de las reivindicaciones 6-10 o una formulación oral según una cualquiera de las reivindicaciones 11-15 para su uso en el tratamiento de la alopecia androgénica o defluvio.
  18. 18. - Una composición sinérgica según una cualquiera de las reivindicaciones 1 -5 para su uso como estimulante de la autofagia en el tratamiento de una enfermedad modulada por la autofagia.
  19. 19. - La composición sinérgica para su uso según la reivindicación 18, en la que las enfermedades moduladas por la autofagia se seleccionan del grupo que consiste en neurodegeneración, cáncer, enfermedad de Crohn y enfermedades de la piel.
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