ES2718218T3

ES2718218T3 - Derivados de 4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]pirazina sustituidos como inhibidores de caseína cinasa 1 D/E

Info

Publication number: ES2718218T3
Application number: ES14802796T
Authority: ES
Inventors: Upender Velaparthi; Chetan Padmakar Darne; Peiying Liu; Mark D Wittman; Bradley C Pearce; Erika M V Araujo; Bireshwar Dasgupta; Jalathi Surendran Nair; Sakthi Kumaran Janakiraman; Chandrasekhar Reddy Rachamreddy; Mettu Mallikarjuna Rao; Arul Mozhi Selvan Subbiah Karuppiah; Bandreddy Subba Reddy; Pulicharla Nagalakshmi; Rajesh Onkardas Bora; Shilpa Holehatti Maheshwarappa; Selvakumar Kumaravel; Dibakar Mullick; Ramesh Sistla
Original assignee: Bristol Myers Squibb Co
Current assignee: Bristol Myers Squibb Co
Priority date: 2013-11-14
Filing date: 2014-11-14
Publication date: 2019-06-28
Anticipated expiration: 2034-11-14
Also published as: ES2744636T3; US20160122358A1; TW201605859A; JP6494622B2; EP3068784B1; CN105916855A; US20160311824A1; EP3068784A1; JP2016537369A; WO2015073767A1; AR098414A1; JP6494624B2; CN105916855B; US9273058B2; UY35834A; CN105916856A; JP2016537366A; US20150133428A1; CN105916856B; WO2015073763A1

Description

DESCRIPCIÓN

Derivados de 4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]pirazina sustituidos como inhibidores de caseína cinasa 1 D/E

Campo de la invención

La invención se refiere a nuevos pirazoles sustituidos útiles como inhibidores de proteína cinasa. La invención también se refiere a los compuestos para su uso en el tratamiento de enfermedades proliferativas y de otros tipos y a composiciones farmacéuticas que contienen los compuestos.

Antecedentes de la invención

La invención se refiere a compuestos de pirazol sustituidos que inhiben a enzimas proteína cinasa, a composiciones que contienen compuestos inhibidores de proteína cinasa y a métodos para usar inhibidores de enzimas proteína cinasa para tratar enfermedades que se caracterizan por una sobreexpresión o regulación positiva de proteína cinasas. Las proteína cinasas median la transducción de señales intracelulares efectuando una transferencia de fosforilo desde un nucleósido trifosfato a un aceptor de proteína que está implicado en una vía de señalización. Existe una serie de cinasas y vías a través de las cuales los estímulos extracelulares y de otro tipo hacen que se produzca varias respuestas dentro de la célula. Un estímulo extracelular puede afectar a una o más respuestas celulares relacionadas con el crecimiento, la migración, la diferenciación, la secreción de hormonas, la activación de factores de transcripción, la contracción muscular, el metabolismo de la glucosa, el control de la síntesis de proteínas y la regulación del ciclo celular.

Muchas enfermedades se asocian a respuestas celulares anormales desencadenadas por acontecimientos mediados por proteínas cinasas. Estas enfermedades incluyen enfermedades autoinmunitarias, enfermedades inflamatorias, enfermedades neurológicas y neurodegenerativas, cáncer, enfermedades cardiovasculares, alergias y asma, enfermedad de Alzheimer o enfermedades relacionadas con hormonas. Por consiguiente, se han realizado considerables esfuerzos en la química médica para identificar inhibidores de proteína cinasas que son eficaces como agentes terapéuticos.

Las serina/treonina cinasas son una clase de proteína cinasas que se encuentran entre las dianas farmacológicas más prometedoras para los futuros inhibidores de molécula pequeña. Es probable que la inhibición de las serina/treonina cinasas tenga relevancia para el tratamiento del cáncer, la diabetes y varios trastornos inflamatorios. El desarrollo con éxito de GLEEVEC® como inhibidor de Bcr/Abl proteína cinasa ha proporcionado pruebas adicionales de que las proteína cinasas son dianas farmacológicas válidas para potenciales terapias contra el cáncer.

La caseína cinasa 1 (CK1) pertenece a la familia de serina/treonina cinasa. En mamíferos, la enzima existe en siete formas de isozima: a, p, ^{y 1 , y 2 , y 3 ,}5 y £. Al fosforilar diferentes sustratos de proteínas, estas isoformas son capaces de activar, inactivar, estabilizar o desestabilizar las funciones de las proteínas, regulando las funciones de diversos tipos de organismos diferentes. Por ejemplo, un factor de supresión tumoral, p53 y un oncogén, mdm2, que son ambas proteínas importantes para controlar el crecimiento celular anormal, son sustratos de caseína cinasa 1.

La caseína cinasa l5 y la caseína cinasa ^{1 e}de mamífero son reguladores clave de diversos procesos de crecimiento y supervivencia celular, incluyendo la señalización de Wnt, la reparación del ADN y los ritmos circadianos. Tienen un dominio de cinasa que es similar a los de otras isoformas. Sin embargo, los dominios N-terminal y C-terminal de los mismos son diferentes a los de otras isoformas. El dominio C-terminal tiene una pluralidad de sitios de autofosforilación y se considera que está implicado en la regulación de la actividad autoenzimática. La fosforilación de p53 por caseína cinasa 15 o caseína cinasa ^{1 e}provoca un cambio consiguiente en la interacción entre p53 y mdm2. También se sabe que la caseína cinasa ^{1 e}o la caseína cinasa 15 está implicada en una proteína reguladora asociada a la formación de un huso como cuerpo central durante la división celular y que la caseína cinasa 15 o la caseína cinasa ^{1 e}está implicada en la apoptosis mediada por TRAIL (factor inductor de apoptosis relacionado con el factor de necrosis tumoral) y FAS. Además, se ha comunicado que la inhibición de caseína cinasa ^{1 e}o de caseína cinasa 15 por un compuesto inhibidor de caseína cinasa 1, IC261, reduce el crecimiento de tumores pancreáticos in vitro e in vivo (Brockschmidt et al., Gut, 57(6):799-806 (2008)). Por lo tanto, podría esperarse que un medicamento que inhiba la función de caseína cinasa 15 o de caseína cinasa ^{1 e}ejerza efectos fenotípicos y terapéuticos importantes de manera general el desarrollo y enfermedades, especialmente el cáncer. El documento FR2960876 divulga compuestos que inhiben a la caseína cinasa 15 y la caseína cinasa 1 ^{e .}

La presente invención se refiere a una nueva clase de pirazoles sustituidos que se ha observado que son eficaces para inhibir a la caseína cinasa 15 o la caseína cinasa ^{1 e .}Estos nuevos compuestos se proporcionan como útiles como agentes farmacéuticos con valores de estabilidad, biodisponibilidad, índice terapéutico y toxicidad deseables que son importantes para que puedan emplearse como fármacos.

Sumario de la invención

La invención se refiere a compuestos de pirazol sustituidos de fórmula (III) o a estereoisómeros, tautómeros, sales farmacéuticamente aceptables o solvatos de los mismos, que inhiben a enzimas proteína cinasa, especialmente proteína cinasa CK1 para el tratamiento del cáncer.

La presente invención también proporciona procesos e intermedios para fabricar los compuestos de la presente invención o estereoisómeros, tautómeros, sales farmacéuticamente aceptables o solvatos de los mismos.

La presente invención también proporciona composiciones farmacéuticas que comprenden un vehículo farmacéuticamente aceptable y al menos uno de los compuestos de la presente invención o estereoisómeros, tautómeros, sales farmacéuticamente aceptables o solvatos de los mismos.

La presente invención también proporciona compuestos de la presente invención o estereoisómeros, tautómeros, sales o solvatos farmacéuticamente aceptables de los mismos para su uso en la inhibición de la actividad de la proteína cinasa CK1.

La presente invención también proporciona compuestos de la presente invención o estereoisómeros, tautómeros, sales o solvatos farmacéuticamente aceptables de los mismos para su uso en el tratamiento de cánceres.

La presente invención también proporciona los compuestos de la presente invención o estereoisómeros, tautómeros, sales farmacéuticamente aceptables o solvatos de los mismos, para su uso en terapia.

Estas y otras características de la invención se explicarán de forma desarrollada conforme continúa la divulgación.

Descripción detallada de la invención

La invención proporciona nuevos compuestos de pirazol sustituidos útiles como agentes terapéuticos, composiciones farmacéuticas que emplean dichos nuevos compuestos y dichos compuestos para su uso en terapia. De acuerdo con la invención, se divulgan compuestos de fórmula (III), incluyendo enantiómeros, diastereómeros, tautómeros, sales, hidratos o solvatos farmacéuticamente aceptables de los mismos,

o un estereoisómero, tautómero, sal o solvato farmacéuticamente aceptable de los mismos donde:

R2 se selecciona independientemente entre

R^3ay R^3bse seleccionan independientemente entre H, CH²CH³, CH³, CH²OH, CH²CH²OH, CH²CH²Oalquilo C^1-4, CH²F, CHF², CH²CH²F, CF³, CH²OCHF², CH²CN, CH²CH²CN, CH²Oalquilo C^1-4, C(CH³)³, CH(CH³)², C(CH³)²OH, C(CH³)²F, C(=O)NH-cicloalquilo C^3-6, C(=O)NH-heterociclilo y-CH²-heterociclilo, donde el heterociclilo se selecciona independientemente entre

R^3cy R^3dse seleccionan independientemente entre H, CH³, CH(CH³)², CF³y cicloalquilo C^3-6;

R⁵, en cada caso, se selecciona independientemente entre H, alquilo C^1-4sustituido con de 0 a 3 R^e, F, Cl, Br, -S(O)^pR^c, -CN, -OR^b, NR^aR^a, cicloalquilo C^3-6y arilo sustituido con de 0 a 3 R^e;

R⁶se selecciona independientemente entre H y alquilo^{i -6}sustituido con de 0 a 5 R^e;

R⁷, en cada caso, se selecciona independientemente entre H, F, Cl, Br, -(CH²)^rCN, NO², -(CH²)^rOR^b, -S(O)^pR^c, -C(=O)R^b, -NR^aR^a, -C(=O)NR^aR^a, -NHC(=O)R^b, -NHC(=O)OR^b, -OC(=O)NR^aR^a, -NHC(=O)NR^aR^a, -C(=O)OR^b, -S(O)²NR^aR^a, -NH S(O)²NR^aR^a, -NHS(O)²R^c, alquilo C^1-6sustituido con de 0 a 5 R^e, cicloalquilo C^3-6sustituido con de 0 a 5 R^e, arilo sustituido con de 0 a 5 R^ey heterociclilo sustituido con de 0 a 5 R^e;

R⁸, en cada caso, se selecciona independientemente entre H, F, Cl, Br, CN, alquilo C^1-6sustituido con de 0 a 5 R^e, -(CH²)^r-cicloalquilo C^3-6sustituido con de 0 a 5 R^e, -(CH²)^r-arilo sustituido conde 0 a 5 R^e, -(CH²)^r-heterociclilo sustituido con de 0 a 5 R^e, CO²H, -(CH²)^rOR^by -(CH²)^rNR^aR^a;

R^a, en cada caso, se selecciona independientemente entre H, CN, alquilo C^1-6sustituido con de 0 a 5 R^e, alquenilo C^2-6sustituido con de 0 a 5 R^e, alquinilo C^2-6sustituido con de 0 a 5 R^e, -(CH²)^r-carbociclilo C^3-losustituido con de 0 a 5 R^ey -(CH²)r-heterociclilo sustituido con de 0 a 5 R^e; o R^ay R^ajunto con el átomo de nitrógeno al que ambos están unidos forman un anillo heterocíclico sustituido con de 0 a 5 R^e;

R^b, en cada caso, se selecciona independientemente entre H, alquilo C^{i -6}sustituido con de 0 a 5 R^e, alquenilo C^2-6sustituido con de 0 a 5 R^e, alquinilo C^2-6sustituido con de 0 a 5 R^e, arilo sustituido con de 0 a 5 R^ey heterociclilo sustituido con de 0 a 5 R^e;

R^c, en cada caso, se selecciona independientemente de alquilo C^1-6sustituido con de 0 a 5 R^e, carbociclilo C^3-6y heterociclilo;

R^e, en cada caso, se selecciona independientemente entre F, Cl, Br, CN, NO², =O, CO²H, alquilo C^1-6, alquenilo

C^2-6, alquinilo C^2-6y -(CH²)^r-cicloalquilo C^3-6;

p, en cada caso, se selecciona independientemente entre cero, 1 y 2; y

r, en cada caso, se selecciona independientemente entre cero, 1,2, 3 y 4.

En otra realización, se divulgan compuestos de fórmula (III), incluyendo enantiómeros, diastereómeros, tautómeros, sales, hidratos, o solvatos farmacéuticamente aceptables de los mismos, donde:

R²es

R⁸, en cada caso, se selecciona independientemente entre H, F, Cl, Br, CN, alquilo C^1-6sustituido con de 0 a 5

R^e, -(CH²)^r-cicloalquilo C^3-6sustituido con de 0 a 5 R^e, -(CH²)^r-arilo sustituido conde 0 a 5 R^e, -(CH²)^r-heterociclilo sustituido con de 0 a 5 R^e, CO²H, -(CH²)^rOR^by -(CH²)^rNR^aR^a;

R^a, en cada caso, se selecciona independientemente entre H, CN, alquilo C^1-6sustituido con de 0 a 5 R^e, alquenilo C^2-6sustituido con de 0 a 5 R^e, alquinilo C^2-6sustituido con de 0 a 5 R^e, -(CH²)^r-carbociclilo ^losustituido con de 0 a 5 R^ey -(CH²)r-heterociclilo sustituido con de 0 a 5 R^e; o R^ay R^ajunto con el átomo de nitrógeno al que ambos están unidos forman un anillo heterocíclico sustituido con de 0 a 5 R^e;

R^b, en cada caso, se selecciona independientemente entre H, alquilo C^1-6sustituido con de 0 a 5 R^e, alquenilo C^2-6sustituido con de 0 a 5 R^e, alquinilo C^2-6sustituido con de 0 a 5 R^e, arilo sustituido con de 0 a 5 R^e, y heterociclilo sustituido con de 0 a 5 R^e;

C^2-6, alquinilo C^2-6y -(CH²)^r-cicloalquilo C^3-6;

p, en cada caso, se selecciona independientemente entre cero, 1 y 2; y

r, en cada caso, se selecciona independientemente entre cero, 1,2, 3 y 4;

y otras variables son como se definen en la fórmula (III) anterior.

R2 es

R⁷, en cada caso, se selecciona independientemente entre H, F, Cl, Br, CN, -Oalquilo C^1-4

sustituido con de 0 a 5 R^e, -S(O)²alquilo C^1-4, -C(=O)R^b, -NR^aR^a, -C(=O)NR^aR^a, alquilo C^1-4sustituido con de 0 a 5 R^e, cicloalquilo C^3-6sustituido con 0-5 R^e, arilo sustituido con de 0 a 5 R^e, y heterociclilo sustituido con de 0 a 5 R^e;

R^a, en cada caso, se selecciona independientemente entre H, alquilo C^1-6sustituido con de 0 a 5 R^e, alquenilo C^2-6sustituido con de 0 a 5 R^e, alquinilo C^2-6sustituido con de 0 a 5 R^e, -(CH²)^r-carbociclilo C^{3- io}sustituido con de 0 a 5 R^ey -(CH²)r-heterociclilo sustituido con de 0 a 5 R^e; o R^ay R^ajunto con el átomo de nitrógeno al que ambos están unidos forman un anillo heterocíclico sustituido con de 0 a 5 R^e; donde el anillo heterocíclico se selecciona independientemente entre

y

R^e, en cada caso, se selecciona independientemente entre F, Cl, Br, CN, NO², =O, CO²H, alquilo C^1-6, alquenilo C^2-6, alquinilo C^2-6y -(CH²)^r-cicloalquilo C^3-6;

y otras variables son como se definen en la fórmula (III) anterior.

R²se selecciona independientemente entre

R⁶, en cada caso, se selecciona independientemente entre H, alquilo C^1-4sustituido con de 0 a 3 R^e;

R^e, en cada caso, se selecciona independientemente entre F, Cl, Br, CN, NO², =O, CO²H alquilo C^1-6, alquenilo C^2-6, alquinilo C^2-6y -(CH²)^r-cicloalquilo C^3-6;

p, en cada caso, se selecciona independientemente entre cero, 1 y 2; y

r, en cada caso, se selecciona independientemente entre cero, 1,2, 3 y 4; y otras variables son como se definen en la fórmula (III) anterior.

Debe entenderse además que los solvatos (por ejemplo, hidratos) de los compuestos de fórmula (III) también se encuentran dentro del alcance de la invención. Los métodos de solvatación se conocen generalmente en la técnica. Los compuestos de la invención pueden estar tanto en forma libre como en forma hidratada.

Los compuestos de la presente invención pueden tener uno o más centros asimétricos. A menos que se indique de otro modo, todas las formas quirales (enantioméricas y diastereoméricas) y racémicas de los compuestos de la presente invención están incluidas en la presente invención. Muchos isómeros geométricos de las olefinas, dobles enlaces C=N y similares también pueden estar presentes en los compuestos y todos estos isómeros estables están contemplados en la presente invención. Los isómeros geométricos cis- y trans de los compuestos de la presente invención se describen y pueden aislarse en forma de una mezcla de isómeros o como formas isoméricas separadas. Los presentes compuestos pueden aislarse en formas ópticamente activas o racémicas. En la técnica se sabe bien cómo preparar formas ópticamente activas, tales como por resolución de formas racémicas o por síntesis de materiales de partida ópticamente activos. Todas las formas quirales (enantioméricas y diastereoméricas) y racémicas y todas las formas isoméricas geométricas de una estructura están incluidas, salvo que se indique de forma específica la estereoquímica o forma isomérica concreta. Cuando no se hace mención específica de la configuración (cis, trans o R o S) de un compuesto (o de un carbono asimétrico), entonces se pretende uno cualquiera de los isómeros o una mezcla de más de un isómero. Los procesos para la preparación pueden usar racematos, enantiómeros o diastereómeros como materiales de partida. Todos los procesos usados para preparar los compuestos de la presente invención y los intermedios fabricados en los mismos se considera que forman parte de la presente invención. Cuando se preparan productos enantioméricos o diastereoméricos, pueden separarse por métodos convencionales, por ejemplo, por cromatografía o cristalización fraccionada. Los compuestos de la presente invención, y sus sales, pueden existir en múltiples formas tautoméricas, en las cuales los átomos de hidrógeno se transponen a otras partes de las moléculas y los enlaces químicos entre los átomos de las moléculas, se reordenan en consecuencia. Debería entenderse que todas las formas tautoméricas, en la medida en que puedan existir, están incluidas dentro de la invención.

Definiciones

Las siguientes son definiciones de términos usados en la presente memoria descriptiva y en las reivindicaciones adjuntas. La definición inicial proporcionada para un grupo o término en el presente documento se aplica a ese grupo o término a lo largo de la memoria descriptiva y de las reivindicaciones, individualmente o como parte de otro grupo, a menos que se indique de otro modo.

De acuerdo con una convención usada en la técnica, en el presente documento 1 se usa en las fórmulas estructurales para representar el enlace que es el punto de unión del resto o sustituyente al núcleo o a la estructura principal.

Se usa un guion "-" que no está entre dos letras o símbolos para indicar un punto de unión para un sustituyente. Por ejemplo, -CONH²está unido a través del átomo de carbono.

Como se usa en el presente documento, el término "alquilo" o "alquileno" pretende incluir grupos hidrocarburo alifáticos saturados tanto de cadena ramificada como lineal que tienen el número especificado de átomos de carbono. Por ejemplo, "alquilo C^1-10" (o alquileno), pretende incluir los grupos alquilo Cⁱ, C², C³, C⁴, C⁵, C⁶, C⁷, C⁸, C⁹y C¹⁰. Adicionalmente, por ejemplo, " alquilo Cⁱ-C^s" representa un alquilo que tiene de 1 a 6 átomos de carbono. Los grupos alquilo pueden estar sin sustituir o sustituidos de forma que uno o más de sus átomos de hidrógeno se sustituyen por otro grupo químico. Los ejemplos de grupos alquilo incluyen, pero sin limitación, metilo (Me), etilo (Et), propilo (por ejemplo, n-propilo e isopropilo), butilo (por ejemplo, n-butilo, isobutilo, t-butilo), pentilo (por ejemplo, npentilo, isopentilo, neopentilo) y similares.

"Haloalquilo" pretende incluir grupos hidrocarburo alifáticos saturados tanto de cadena ramificada como lineal que tienen el número especificado de átomos de carbono, sustituidos con 1 o más halógenos. Los ejemplos de haloalquilo incluyen, pero sin limitación, fluorometilo, difluorometilo, trifluorometilo, triclorometilo, pentafluoroetilo, pentacloroetilo, 2,2,2-trifluoroetilo, heptafluoropropilo y heptacloropropilo. Los ejemplos de haloalquilo también incluyen "fluoroalquilo" que pretende incluir grupos hidrocarburo alifáticos saturados tanto de cadena ramificada como lineal que tienen el número especificado de átomos de carbono, sustituidos con 1 o más átomos de flúor. El término "halógeno" o "halo" se refiere a flúor (F), cloro (Cl), bromo (Br) y yodo.

"Haloalcoxi" o "haloalquiloxi" representa un grupo haloalquilo como se ha definido anteriormente con el número indicado de átomos de carbono, unido a través de un puente de oxígeno. Por ejemplo, "haloalcoxi C^1-6" pretende incluir los grupos haloalcoxi Cⁱ, C², C³, C⁴, C⁵y C⁶. Los ejemplos de haloalcoxi incluyen, pero sin limitación, trifluorometoxi, 2,2,2-trifluoroetoxi, pentafluorotoxi y similares. De manera similar, "haloalquiltio" o "tiohaloalcoxi" representa un grupo haloalquilo como se ha definido anteriormente con el número indicado de átomos de carbono unido a través de un puente de azufre; por ejemplo trifluorometil-S-, pentafluoroetil-S- y similares.

Como se usa en el presente documento, "carbociclo", "resto carbocíclico" o "carbociclilo" pretende indicar cualquier anillo hidrocarburo monocíclico o bicíclico de 3, 4, 5, 6 o 7 miembros o bicíclico o tricíclico de 7, 8, 9, 10, 11, 12 o 13 miembros, cualquiera de los cuales puede ser saturado, parcialmente insaturado, insaturado o aromático. Los ejemplos de tales carbociclos incluyen, pero sin limitación, ciclopropilo, ciclobutilo, ciclobutenilo, ciclopentilo, ciclopentenilo, ciclohexilo, cicloheptenilo, cicloheptilo, cicloheptenilo, adamantilo, ciclooctilo, ciclooctenilo, ciclooctadienilo, [3.3.0]biciclooctano, [4.3.0]biciclononano, [4.4.0]biciclodecano, [2.2.2]biciclooctano, fluorenilo, fenilo, naftilo, indanilo, adamantilo, antracenilo y tetrahidronaftilo (tetralina). Como se ha mostrado anteriormente, los anillos puenteados también están incluidos en la definición de carbociclo (por ejemplo, [2,2,2]biciclooctano). Los carbociclos preferidos, a menos que se especifique de otro modo, son ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, fenilo e indanilo. Cuando el término "carbociclo", "resto carbocíclico" o "carbociclilo" se usa, pretende incluir "arilo”. Un anillo puenteado se produce cuando uno o más átomos de carbono conectan dos átomos de carbono no adyacentes. Los puentes preferidos son uno o dos átomos de carbono. Nótese que un puente siempre convierte un anillo monocíclico en un anillo tricíclico. Cuando un anillo está puenteado, los sustituyentes citados para el anillo también pueden estar presentes en el puente.

El término "arilo" se refiere a grupos hidrocarburo aromáticos, monocíclicos, bicíclicos o tricíclicos que tienen de 6 a 15 átomos de carbono en la parte del anillo, tales como los grupos fenilo, naftilo, bifenilo y difenilo, cada uno de los cuales puede estar sustituido. Los grupos arilo que son bicíclicos o tricíclicos deben incluir al menos un anillo completamente aromático, pero el otro anillo o anillos condensados pueden ser aromáticos o no aromáticos. Cuando un arilo está sustituido con otro anillo heterocíclico, dicho anillo puede estar unido al arilo a través de un átomo de carbono o un heteroátomo y dicho anillo a su vez está opcionalmente sustituido con uno o dos sustituyentes según lo permita la valencia.

Los términos "ariloxi", "arilamino", "arilalquilamino", "ariltio", "arilalcanoilamino", "arilsulfonilo", "arilalcoxi", "arilsulfinilo", "arilheteroarilo", "arilalquiltio", "arilcarbonilo", "arilalquenilo" o "arilalquilsulfonilo" se refieren a un arilo o arilo sustituido unido a un oxígeno; un amino; un alquilamino; un tio; un alcanoilamino; un sulfonilo; un alcoxi; un sulfinilo; un heteroarilo o heteroarilo sustituido; un alquiltio; un carbonilo; un alquenilo o un alquilsulfonilo, respectivamente.

El término "alquenilo" se refiere a grupos hidrocarburo de cadena lineal o ramificada de 2 a 20 átomos de carbono, preferentemente de 2 a 15 átomos de carbono y más preferentemente de 2 a 8 átomos de carbono, que tiene de uno a cuatro dobles enlaces.

El término "alquinilo" se refiere a grupos hidrocarburo de cadena lineal o ramificada de 2 a 20 átomos de carbono, preferentemente de 2 a 15 átomos de carbono y más preferentemente de 2 a 8 átomos de carbono, que tienen de uno a cuatro triples enlaces.

El término "cicloalquilo" se refiere a un sistema de anillo hidrocarburo cíclico, saturado, opcionalmente sustituido, que preferentemente contiene de 1 a 3 anillos y de 3 a 7 carbonos por anillo. Los grupos a modo de ejemplo incluyen ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, cicloheptilo, ciclooctilo, ciclodecilo, ciclododecilo y adamantilo. Los sustituyentes a modo de ejemplo incluyen uno o más grupos alquilo tal como se han descrito anteriormente, o uno o más grupos descritos anteriormente como sustituyentes alquilo. Por consiguiente, en los compuestos de fórmula I, el término "cicloalquilo" incluye ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, cicloheptilo, biciclooctilo, etc., así como los siguientes sistemas de anillo,

y similares, que opcionalmente pueden estar sustituidos en cualquier átomo disponible del anillo o de los anillos. Los grupos cicloalquilo preferidos incluyen ciclopropilo, ciclopentilo, ciclohexilo,

Como se usa en el presente documento, la expresión "heterocido", "heterocidilo", "anillo heteroddico" o "grupo heteroddico" pretende indicar un anillo heteroddico, monocíclico o bicíclico de 4, 5, 6 o 7 miembros o bicíclico de 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13 o 14 miembros, estable, que está saturado, parcialmente insaturado o totalmente insaturado o aromático y que consiste en átomos de carbono y 1,2, 3 o 4 heteroátomos seleccionados independientemente entre N, O y S; e incluyen cualquier grupo bicíclico en el que cualquiera de los anillos heterocíclicos anteriormente definidos está condensado a un anillo de benceno. Los heteroátomos de nitrógeno y azufre opcionalmente pueden estar oxidados (es decir, N ^O y S(O)^p). El átomo de nitrógeno puede estar sustituido o sin sustituir (es decir, N o NR, en donde R es H u otro sustituyente, en caso de estar definido). El anillo heterocíclico puede estar unido a su grupo colgante en cualquier heteroátomo o átomo de carbono que dé como resultado una estructura estable. Los anillos heterocíclicos descritos en el presente documento pueden estar sustituidos en un átomo de carbono o en un átomo de nitrógeno si el compuesto resultante es estable. Opcionalmente, puede cuaternizarse un átomo de nitrógeno en el heterociclo. Se prefiere que cuando el número total de átomos S y O en el heterociclo exceda de 1, entonces estos heteroátomos no sean adyacentes entre sí. Se prefiere que el número total de átomos de S y O en el heterociclo no sea mayor de 1. Cuando el término "heterociclo", "heterociclilo", "anillo heterocíclico" o "grupo heterocíclico" se usa, se pretende incluir heteroarilo.

Los ejemplos de heterociclos incluyen, pero sin limitación, acridinilo, azocinilo, benzoimidazolilo, benzofuranilo, benzotiofuranilo, benzoxazolilo, benzoxazolinilo, benzotiazolilo, benzotriazolilo, benzotetrazolilo, benzoisoxazolilo, benzoisotiazolilo, benzoimidazolinilo, carbazolilo, 4aH-carbazolilo, carbolinilo, cromanilo, cromenilo, cinolinilo, decahidroquinolinilo, 2H,6H-1,5,2-ditiazinilo, dihidrofuro[2,3-b]tetrahidrofurano, furanilo, furazanilo, imidazolidinilo, imidazolinilo, imidazolilo, H-indazolilo, indolenilo, indolinilo, indolizinilo, indolilo, 3H-indolilo, isatinoílo, isobenzofuranilo, isocromanilo, isoindazolilo, isoindolinilo, isoindolilo, isoquinolinilo, isotiazolilo, isotiazolopiridinilo, isoxazolilo, isoxazolopiridinilo, metilenodioxifenilo, morfolinilo, naftiridinilo, octahidroisoquinolinilo, oxadiazolilo, 1,2,3-oxadiazolilo, 1,2,4-oxadiazolilo, 1,2,5-oxadiazolilo, 1,3,4-oxadiazolilo, oxazolidinilo, oxazolilo, oxindolilo, pirimidinilo, fenantridinilo, fenantrolinilo, fenazinilo, fenotiazinilo, fenoxatinilo, fenoxazinilo, ftalazinilo, piperazinilo, piperidinilo, piperidonilo, 4-piperidonilo, piperonilo, pteridinilo, purinilo, piranilo, pirazinilo, pirazolidinilo, pirazolinilo, pirazolilo, piridazinilo, piridooxazol, piridoimidazol, piridotiazol, piridinilo, pirimidinilo, pirrolidinilo, pirrolinilo, 2-pirrolidonilo, 2H-pirrolilo, pirrolilo, quinazolinilo, quinolinilo, 4H-quinolizinilo, quinoxalinilo, quinuclidinilo, tetrahidrofuranilo, tetrahidroisoquinolinilo, tetrahidroquinolinilo, tetrazolilo, 6H-1,2,5-tiadiazinilo, 1,2,3-tiadiazolilo, 1,2,4-tiadiazolilo, 1,2,5-tiadiazolilo, 1,3,4-tiadiazolilo, tiantrenilo, tiazolilo, tienilo, tienotiazolilo, tienooxazolilo, tienoimidazolilo, tiofenilo, triazinilo, 1,2,3-triazolilo, 1,2,4-triazolilo, 1,2,5-triazolilo, 1,3,4-triazolilo y xantenilo. También se incluyen anillos condensados y compuestos espiro que contienen, por ejemplo, los heterociclos anteriores.

Los heterociclos de 5 a 10 miembros, pero sin limitación, piridinilo, furanilo, tienilo, pirrolilo, pirazolilo, pirazinilo, piperazinilo, piperidinilo, imidazolilo, imidazolidinilo, indolilo, tetrazolilo, isoxazolilo, morfolinilo, oxazolilo, oxadiazolilo, oxazolidinilo, tetrahidrofuranilo, tiadiazinilo, tiadiazolilo, tiazolilo, triazinilo, triazolilo, benzoimidazolilo, 1 H-indazolilo, benzofuranilo, benzotiofuranilo, benzotetrazolilo, benzotriazolilo, benzoisoxazolilo, benzoxazolilo, oxindolilo, benzoxazolinilo, benzotiazolilo, benzoisotiazolilo, isatinoílo, isoquinolinilo, octahidroisoquinolinilo, tetrahidroisoquinolinilo, tetrahidroquinolinilo, isoxazolopiridinilo, quinazolinilo, quinolinilo, isotiazolopiridinilo, tiazolopiridinilo, oxazolopiridinilo, imidazolopiridinilo y pirazolopiridinilo.

Los heterociclos de 5 a 6 miembros, pero sin limitación, piridinilo, furanilo, tienilo, pirrolilo, pirazolilo, pirazinilo, piperazinilo, piperidinilo, imidazolilo, imidazolidinilo, indolilo, tetrazolilo, isoxazolilo, morfolinilo, oxazolilo, oxadiazolilo, oxazolidinilo, tetrahidrofuranilo, tiadiazinilo, tiadiazolilo, tiazolilo, triazinilo y triazolilo. También se incluyen anillos condensados y compuestos espiro que contienen, por ejemplo, los heterociclos anteriores.

Los anillos puenteados también se incluyen en la definición de heterociclo. Un anillo puenteado se da cuando uno o más átomos (es decir, C, O, N o S) enlazan dos átomos de carbono o nitrógeno no adyacentes. Los puentes preferidos incluyen, pero sin limitación, un átomo de carbono, dos átomos de carbono, un átomo de nitrógeno, dos átomos de nitrógeno y un grupo carbono-nitrógeno. Nótese que un puente siempre convierte un anillo monocíclico en un anillo tricíclico. Cuando un anillo está puenteado, los sustituyentes citados para el anillo también pueden estar presentes en el puente.

El término "heteroarilo" se refiere a grupos monocíclicos sustituidos y no sustituidos aromáticos de 5 o 6 elementos, grupos bicíclicos de 9 o 10 miembros y grupos tricíclicos de 11 a 14 miembros que tienen al menos un heteroátomo (O, S o N) en al menos uno de los anillos, teniendo dicho anillo que contiene heteroátomos preferentemente 1,2 o 3 heteroátomos seleccionados entre O, S y N. Cada anillo del grupo heteroarilo que contiene un heteroátomo puede contener uno o dos átomos de oxígeno o de azufre y/o de uno a cuatro átomos de nitrógeno siempre que el número total de heteroátomos de cada anillo sea de cuatro o inferior y cada anillo tenga al menos un átomo de carbono. Los grupos heteroarilo pueden estar sustituidos o sin sustituir. El átomo de nitrógeno puede estar sustituido o sin sustituir (es decir, N o NR en donde R es H u otro sustituyente, si se define). Los heteroátomos de nitrógeno y azufre opcionalmente pueden estar oxidados (es decir, N ^O y S(O)^p) y opcionalmente, los átomos de nitrógeno pueden cuaternizarse.

Los grupos heteroarilo que son bicíclicos o tricíclicos deben incluir al menos un anillo completamente aromático, pero el otro anillo o anillos condensados pueden ser aromáticos o no aromáticos. El grupo heteroarilo puede unirse a cualquier átomo de nitrógeno o de carbono disponible de cualquier anillo. El sistema de anillo heteroarilo puede contener cero, uno, dos o tres sustituyentes.

Los grupos heteroarilo monocíclicos a modo de ejemplo incluyen pirrolilo, pirazolilo, pirazolinilo, imidazolilo, oxazolilo, isoxazolilo, tiazolilo, tiadiazolilo, isotiazolilo, furanilo, tienilo, oxadiazolilo, piridilo, pirazinilo, pirimidinilo, piridazinilo, triazinilo y similares.

Los grupos heteroarilo bicíclicos ilustrativos incluyen indolilo, benzotiazolilo, benzodioxolilo, benzoxazolilo, benzotienilo, quinolinilo, dihidroisoquinolinilo, tetrahidroquinolinilo, isoquinolinilo, benzoimidazolilo, benzopiranilo, benzoxazinilo, indolizinilo, benzofuranilo, cromonilo, cumarinilo, benzopiranilo, cinolinilo, quinoxalinilo, indazolilo, pirrolopiridilo, furopiridilo, dihidroisoindolilo y similares.

Los ejemplos de grupos heteroarilo tricíclicos incluyen carbazolilo, benzidolilo, fenantrolinilo, acridinilo, fenantridinilo, xantenilo y similares.

El término "heteroátomos" debe incluir oxígeno, azufre y nitrógeno.

Como se cita en el presente documento, el término "sustituido" significa que uno o más átomos de hidrógeno se sustituyen con un grupo distinto de hidrógeno, con la condición de que las valencias normales se mantengan y que la sustitución dé como resultado un compuesto estable. Cuando un sustituyente es ceto (es decir, =O), entonces se sustituyen 2 hidrógenos en el átomo. Los sustituyentes ceto no están presentes en restos aromáticos. Cuando un sistema de anillo (por ejemplo, carbocíclico o heterocíclico) se dice que está sustituido con un grupo carbonilo o un doble enlace, se pretende que el grupo carbonilo o el doble enlace sean parte (es decir, estén dentro) del anillo. Los dobles enlaces de anillo, como se usa en el presente documento, son dobles enlaces que se forman entre dos átomos en el anillo adyacentes (por ejemplo, C=C, C=N o N=N).

Cuando aparece cualquier variable más de una vez en cualquier constituyente o fórmula de un compuesto, su definición cada vez que aparece es independiente de su definición en cualquier otra aparición. Por lo tanto, por ejemplo, si se muestra que un grupo está sustituido con de 0 a 3 R^e, entonces dicho grupo opcionalmente puede estar sustituido con hasta tres grupos R^ey R^een cada caso se selecciona independientemente de la definición de R^e. Asimismo, solo se permiten las combinaciones de sustituyentes y/o variables en caso de que dichas combinaciones den como resultado compuestos estables.

UTILIDAD

Los compuestos de la invención pueden usarse para modular las actividades de cinasa.

Los solicitantes han descubierto que los compuestos de fórmula (111) tienen una utilidad particular en el tratamiento de afecciones proliferativas asociadas a la modulación de la actividad de cinasa y en particular, la inhibición de las actividades de serina/treonina cinasa. Los compuestos de la presente invención pueden usarse para tratar enfermedades proliferativas asociadas a la actividad de cinasa anormal. Como se usan en el presente documento, los términos "tratar" y "tratamiento" abarcan medidas tanto de respuesta como profilácticas, por ejemplo, medidas diseñadas para inhibir o retrasar la aparición de la enfermedad o el trastorno, lograr una reducción total o parcial de los síntomas o la patología y/o para aliviar, mejorar, reducir o curar la enfermedad o trastorno y/o sus síntomas. De acuerdo con una característica adicional de la invención, se proporciona un compuesto de fórmula (111) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo como se ha definido anteriormente en el presente documento, para su uso en la producción de un efecto antiproliferativo en un animal de sangre caliente, tal como un ser humano.

El tratamiento antiproliferativo definido anteriormente en el presente documento pueden aplicarse como una terapia individual o puede implicar, además de un compuesto de la invención, una o más sustancias y/o tratamientos diferentes. Dicho tratamiento puede lograrse mediante la administración simultánea, secuencial o por separado de los componentes individuales del tratamiento. Los compuestos de la presente invención también pueden ser útiles en combinación con agentes y tratamientos anticáncer y citotóxicos conocidos, incluyendo radiación. Los compuestos de fórmula (III) pueden usarse de manera secuencial con agentes y tratamientos anticáncer y citotóxicos conocidos, incluyendo radiación, cuando no es adecuada una formulación combinada.

El término agente "anticáncer" incluye cualquier agente conocido que sea útil para el tratamiento del cáncer, incluyendo cualquiera de los siguientes: 17a-etinilestradiol, dietilestilbestrol, testosterona, prednisona, fluoximesterona, propionato de dromostanolona, testolactona, acetato de megestrol, metilprednisolona, metiltestosterona, prednisolona, triamcinolona, clorotrianiseno, hidroxiprogesterona, aminoglutetimida, estramustina, acetato de medroxiprogesterona, leuprolida, flutamida, toremifeno, ZOLADEX®; inhibidores de metaloproteinasa de matriz; inhibidores de VEGF, tales como anticuerpos anti-VEGF (AVASTIN®) y moléculas pequeñas, tales como ZD6474 y SU6668; Vatalanib, BAY-43-9006, SU11248, CP-547632 y CEP-7055; inhibidores de HER 1 y HER 2, incluyendo anticuerpos anti-HER2 (HERCEPTIN®); inhibidores de ^eG^fR, incluyendo gefitinib, erlotinib, A^bX-EGF, EMD72000, 11F8 y cetuximab; inhibidores de Eg5, tales como SB-715992, SB-743921 y MKI-833; inhibidores pan Her, tal como canertinib, EKB-569, CI-1033, AEE-788, XL-647, mAb 2C4 y GW-572016; Dichos inhibidores, por ejemplo, GLEEVEC® y dasatinib; CASODEX® (bicalutamida, Astra Zeneca), Tamoxifeno; inhibidores de MEK-1 cinasa, inhibidores de MAPK cinasa, inhibidores de PI3 cinasa; inhibidores de PDGF, tales como imatinib; agentes antiangiogénicos y antivasculares que, mediante la interrupción del flujo sanguíneo a los tumores sólidos, hacen que las células cancerosas queden quiescentes, privándolas de nutrición; castración, que hace que los carcinomas dependientes de andrógenos sean no proliferativos; inhibidores de tirosina cinasas no receptoras y receptoras; inhibidores de la señalización de integrinas; agentes que actúan con la tubulina, tales como vinblastina, vincristina, vinorelbina, vinflunina, paclitaxel, docetaxel, 7-O-metiltiometilpaclitaxel, 4-desacetil-4-metilcarbonatopaclitaxel, 3'-ferc-butil-3'-N-fen>butiloxicarbonil-4-desacetil-3'-desfenil-3'-N-desbenzoil-4-O-metoxicarbonil-paclitaxel, C-4 metil carbonato paclitaxel, epotilona A, epotilona B, epotilona C, epotilona D, [1S-[1R*,3R*(E),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-7-11-dihidroxi-8,8,10,12,16-pentametil-3-[1-metil-2-(2-metil-4-tiazolil)etenil]-4-aza-17-oxabiciclo[14.1.0]heptadecano-5,9-diona (ixabepilona), [1S- [1R*,3R*(E),7R*,10S*,llR*,12R*,16S*]]-3-[2-[2-(aminometil)-4-tiazolil]-1-metiletenil]-7,11-dihidrox-8,8,10,12,16-pentametil-4-17-dioxabiciclo[14.1.0]-heptadecano-5,9-diona y derivados de los mismos; otros inhibidores de CDK, inhibidores antiproliferativos del ciclo celular, epidofilotoxina, etopósido, VM-26; enzimas antineoplásicas, por ejemplo, inhibidores de topoisomerasa I, camptotecina, topotecán, SN-38; procarbazina; mitoxantrona; complejos de coordinación con platino, tales como cisplatino, carboplatino y oxaliplatino; modificadores de la respuesta biológica; inhibidores del crecimiento; agentes terapéuticos antihormonales; leucovorina; tegafur; antimetabolitos, tales como antagonistas de purina (por ejemplo, 6-tioguanina y 6-mercaptopurina; antagonistas de glutamina, por ejemplo, DON (AT-125; d-oxo-norleucina); inhibidores de ribonucleótido reductasa; inhibidores de mTOR; y factores de crecimiento hematopoyético.

Los agentes citotóxicos adicionales incluyen, ciclofosfamida, doxorrubicina, daunorubicina, mitoxantrona, melfalán, hexametilmelamina, tiotepa, citarabina, idatrexato, trimetrexato, dacarbazina, L-asparaginasa, bicalutamida, leuprolida, derivados de piridobenzoindol, interferones e interleucinas.

En el campo de la oncología médica, es práctica normal usar una combinación de diferentes formas de tratamiento para tratar a cada paciente con cáncer. En oncología médica, los otros componentes de dicho tratamiento, además del tratamiento antiproliferativo definido en el presente documento, puede ser cirugía, radioterapia o quimioterapia. Dicha quimioterapia puede abarcar tres categorías de agente terapéutico principales:

(i) agentes antiangiogénicos que pueden funcionar mediante mecanismos diferentes a los definidos anteriormente en el presente documento (por ejemplo, linomida, inhibidores de la función de la integrina avp3, angiostatina, razoxano);

(ii) agentes citostáticos, tales como antiestrógenos (por ejemplo, tamoxifeno, toremifeno, raloxifeno, droloxifeno, yodoxifeno), progestógenos (por ejemplo, acetato de megestrol), inhibidores de aromatasa (por ejemplo, anastrozol, letrozol, borazol, exemestano), antihormonas, antiprogestógenos, antiandrógenos (por ejemplo, flutamida, nilutamida, bicalutamida, acetato de ciproterona), agonistas y antagonistas de LHRH (por ejemplo, acetato de goserelina, leuprolida), inhibidores de testosterona 5a-dihidrorreductasa (por ejemplo, finasterida), inhibidores de farnesiltransferasa, agentes antiinvasivos (por ejemplo, inhibidores de metaloproteinasa, tales como marimastat e inhibidores de la función de receptor de activador de urocinasa y plasminógeno) e inhibidores de la función de factor de crecimiento, (dichos factores de crecimiento incluyen, por ejemplo, EGF, FGF, factor de crecimiento derivado de plaquetas y factor de crecimiento de hepatocitos, dichos inhibidores incluyen anticuerpos para factores de crecimiento, anticuerpos para receptores de factores de crecimiento, tales como AVASTIN® (bevacizumab) y ERBITUX® (cetuximab); inhibidores de tirosina cinasa e inhibidores de serina/treonina cinasa); y

(iii) fármacos antiproliferativos/antineoplásicos y combinaciones de los mismos, como se usa en oncología médica, tales como antimetabolitos (por ejemplo, antifolatos, tales como metotrexato, fluoropirimidinas, tales como 5-fluorouracilo, análogos de purina y adenosina, arabinósido de citosina); antibióticos antitumorales intercalantes (por ejemplo, antraciclinas, tales como doxorrubicina, daunomicina, epirrubicina e idarrubicina, mitomicina-C, dactinomicina, mitramicina); derivados de platino (por ejemplo, cisplatino, carboplatino); agentes alquilantes (por ejemplo, mostaza de nitrógeno, melfalán, clorambucilo, busulfán, ciclofosfamida, ifosfamida, nitrosoureas, tiotepa; agentes antimitóticos (por ejemplo, alcaloides de la vinca, tales como vincristina, vinorelbina, vinblastina y vinflunina) y taxoides, tales como TAXOL® (paclitaxel), Taxotere (docetaxel) y nuevos agentes contra microtúbulos, tales como análogos de epotilona (ixabepilona), análogos de discodermolida y análogos de eleuterobina; inhibidores de topoisomerasa (por ejemplo, epipodofilotoxinas, tales como etopósido y tenipósido, amsacrina, topotecán, irinotecán); inhibidores del ciclo celular (por ejemplo, flavopiridoles); modificadores de la respuesta biológica e inhibidores del proteasoma, tales como ^vE^lC^aD^e® (bortezomib).

Como se ha indicado anteriormente, los compuestos de la invención son interesantes por sus efectos antiproliferativos. Se espera que dichos compuestos de la invención sean útiles en una gran variedad de patologías, incluyendo cáncer, psoriasis y artritis reumatoide.

Más específicamente, los compuestos de fórmula (III) son útiles en el tratamiento de varios cánceres, incluyendo (pero sin limitación) los siguientes:

- carcinoma, incluyendo el de próstata, adenocarcinoma ductal pancreático, mama, colon, pulmón, ovario, páncreas y tiroides;

- tumores del sistema nervioso central y periférico, incluyendo neuroblastoma, glioblastoma y meduloblastoma; y - otros tumores, incluyendo melanoma y mieloma múltiple.

Debido al papel clave de las cinasas en la regulación en general de la proliferación celular, los inhibidores pueden actuar como agentes citostáticos reversibles que pueden ser útiles en el tratamiento de cualquier proceso patológico que presente una proliferación celular anormal, por ejemplo, hiperplasia prostática benigna, poliposis adenomatosa familiar, neurofibromatosis, fibrosis pulmonar, artritis, psoriasis, glomerulonefritis, reestenosis después de una angioplastia o cirugía vascular, formación de cicatrices hipertróficas y enfermedad inflamatoria del intestino.

Los compuestos de fórmula (III) son especialmente útiles en el tratamiento de tumores que tienen una alta incidencia de actividad de serina/treonina cinasa, tales como tumores de próstata, colon, pulmón, cerebro, tiroides y páncreas. Adicionalmente, los compuestos de la invención pueden ser útiles en el tratamiento de sarcomas y sarcomas pediátricos. Mediante la administración de una composición (o una combinación) de los compuestos de la presente invención, se reduce el desarrollo de tumores en un hospedador mamífero.

Los compuestos de fórmula (III) también pueden ser útiles en el tratamiento de otras enfermedades cancerosas (tales como leucemia mielógena aguda) que pueden estar asociadas a vías de transducción de señales que funcionan mediante cinasas, tales como DYRKla, CDK y GSK3p. Las composiciones de la invención pueden contener otros agentes terapéuticos como se han descrito anteriormente y se pueden formular, por ejemplo, empleando vehículos o diluyentes sólidos o líquidos convencionales, así como aditivos farmacéuticos de un tipo adecuado para el modo de administración deseado (por ejemplo, excipientes, aglutinantes, conservantes, estabilizantes, aromas, etc.) de acuerdo con técnicas tales como aquellas bien conocidas en el campo de la formulación farmacéutica.

Por consiguiente, la presente invención incluye además composiciones que comprenden uno o más compuestos de fórmula (III) y un vehículo farmacéuticamente aceptable.

Un "vehículo farmacéuticamente aceptable" se refiere a medios generalmente aceptados en la técnica para la administración de agentes biológicamente activos a animales, en particular, mamíferos. Los vehículos farmacéuticamente aceptables se formulan de acuerdo con una serie de factores que están dentro del alcance de los expertos en la técnica. Estos incluyen, sin limitación: el tipo y la naturaleza del principio activo que se vaya a formular; el sujeto al cual se vaya a administrar la composición que contiene el principio; la vía de administración prevista de la composición; y, la indicación terapéutica considerada como objetivo. Los vehículos farmacéuticamente aceptables incluyen medios líquidos tanto acuosos como no acuosos, así como varias formas de dosificación sólidas y semisólidas. Dichos vehículos pueden incluir una serie de ingredientes y aditivos diferentes además del principio activo, incluyéndose dichos ingredientes adicionales en la formulación por diversos motivos, por ejemplo, estabilización del principio activo, aglutinantes, etc., bien conocidos por los expertos en la técnica. Las descripciones de los vehículos farmacéuticamente aceptables adecuados y de los factores implicados en su selección, se encuentran en diversas fuentes fácilmente disponibles tales como, por ejemplo, “Remington's Pharmaceutical Sciences", 17a edición (1985).

Las composiciones farmacéuticas de la invención que contienen el principio activo pueden estar en una forma adecuada para su uso oral, por ejemplo, en forma de comprimidos, trociscos, pastillas, suspensiones acuosas u oleosas, polvos o gránulos dispersables, emulsiones, cápsulas duras o blandas, o jarabes o elixires. Las composiciones destinadas a uso oral pueden prepararse de acuerdo con cualquier método conocido en la técnica para la fabricación de composiciones farmacéuticas y dichas composiciones pueden contener uno o más agentes seleccionados entre el grupo que consiste en agentes edulcorantes, agentes aromatizantes, agentes colorantes y agentes conservantes a fin de proporcionar preparaciones sabrosas y farmacéuticamente elegantes.

Las formulaciones para uso oral también se pueden presentar en forma de cápsulas de gelatina dura donde el principio activo se mezcla con un diluyente sólido inerte, por ejemplo, carbonato de calcio, fosfato de calcio o caolín, o como cápsulas de gelatina blandas en las que el principio activo se mezcla con vehículos solubles en agua, tales como polietilenglicol o un medio oleoso, por ejemplo, aceite de cacahuete, parafina líquida o aceite de oliva.

Las composiciones farmacéuticas pueden estar en forma de soluciones acuosas estériles inyectables. Entre los vehículos y disolventes aceptables que pueden emplearse están el agua, solución de Ringer y solución isotónica de cloruro de sodio. El preparado estéril inyectable también puede ser una microemulsión de aceite en agua inyectable estéril donde el principio activo está disuelto en la fase oleosa. Por ejemplo, el principio activo puede disolverse primero en una mezcla de aceite de soja y lecitina. La solución oleosa se introduce después en una mezcla de agua y glicerol y se procesa para formar una microemulsión.

Las soluciones o microemulsiones inyectables pueden introducirse en el torrente sanguíneo de un paciente mediante inyección local en embolada. Como alternativa, puede ser ventajoso administrar la solución o microemulsión de modo que se mantenga una concentración en circulación constante del presente compuesto. Para mantener dicha concentración constante, se puede utilizar un dispositivo de suministro intravenoso continuo. Un ejemplo de dicho dispositivo es la bomba intravenosa Deltec CADD-PFUS®, modelo 5400.

Las composiciones farmacéuticas pueden estar en forma de una suspensión oleaginosa o acuosa inyectable estéril para administración intramuscular y subcutánea. Esta suspensión puede formularse de acuerdo con la técnica conocida usando los agentes dispersantes o humectantes adecuados y los agentes de suspensión que se han mencionado anteriormente.

Los compuestos de fórmula (III) pueden administrarse por cualquier medio adecuado para la afección a tratar, el cual puede depender de la necesidad de tratamiento específico de sitio o de la cantidad de fármaco a administrar. En general se prefiere la administración tópica para enfermedades relacionadas con la piel y el tratamiento sistémico se prefiere para afecciones cancerosas o precancerosas, aunque se contemplan otras vías de administración. Por ejemplo, los compuestos pueden administrarse por vía oral, tal como en forma de comprimidos, cápsulas, gránulos, polvos o formulaciones líquidas que incluyen jarabes; por vía tópica, tal como en forma de soluciones, suspensiones, geles o pomadas; por vía sublingual; por vía bucal; por vía parenteral, tal como por técnicas de inyección o infusión subcutánea, intravenosa, intramuscular o intraesternal (por ejemplo, en forma de soluciones o suspensiones inyectables acuosas); por vía nasal tal como mediante pulverizador de inhalación; por vía tópica, tal como en forma de una crema o pomada; por vía rectal tal como en forma de supositorios; o por vía liposómica. Pueden administrarse formulaciones de unidades de dosificación que contienen vehículos o diluyentes no tóxicos, farmacéuticamente aceptables. Los compuestos pueden administrarse en una forma adecuada para liberación inmediata o para liberación prolongada. La liberación inmediata o la liberación prolongada pueden conseguirse con composiciones farmacéuticas adecuadas o, en particular en el caso de la liberación prolongada, con dispositivos tales como implantes subcutáneos o bombas osmóticas.

Las composiciones a modo de ejemplo para administración tópica incluyen un vehículo tópico tal como Plastibase (aceite mineral gelificado con polietileno).

Las composiciones ilustrativas para administración oral incluyen suspensiones que pueden contener, por ejemplo, celulosa microcristalina para transmitir volumen, ácido algínico o alginato de sodio como agente de suspensión, metilcelulosa como potenciador de la viscosidad y agentes edulcorantes o aromatizantes tales como los conocidos en la técnica; y comprimidos de liberación inmediata que pueden incluir, por ejemplo, celulosa microcristalina, fosfato dicálcico, almidón, estearato de magnesio y/o lactosa y/u otros excipientes, aglutinantes, agentes de liberación prolongada, disgregantes, diluyentes y lubricantes tales como los conocidas en la técnica. Los compuestos de la invención también pueden administrarse mediante administración sublingual y/o bucal, por ejemplo, con comprimidos moldeados, fabricados por compresión o liofilizados. Las composiciones a modo de ejemplo pueden incluir diluyentes de disolución rápida tales como manitol, lactosa, sacarosa y/o ciclodextrinas. En dichas formulaciones también se pueden incluir excipientes de elevado peso molecular tales como celulosas (AVICEL®) o polietilenglicoles (PEG); un excipiente para ayudar a la adhesión a mucosas tal como hidroxipropilcelulosa (HPC), hidroxipropilmetilcelulosa (HPMC), carboximetilcelulosa sódica (SCMC) y/o copolímero de anhídrido maleico (por ejemplo, Gantrez); y agentes de control de la liberación tales como copolímero poliacrílico (por ejemplo, Carbopol 934). También pueden añadirse lubricantes, sustancias de deslizamiento, aromas, agentes colorantes y estabilizadores para facilitar la fabricación y el uso.

Las composiciones ilustrativas para administración nasal mediante aerosol o inhalación incluyen soluciones que pueden contener, por ejemplo, alcohol bencílico u otros conservantes adecuados, promotores de la absorción para potenciar la absorción y/o la biodisponibilidad y/u otros agentes de solubilización o dispersión tales como los conocidos en la técnica.

Las composiciones ilustrativas para administración parenteral incluyen soluciones o suspensiones inyectables que pueden contener, por ejemplo, diluyentes o disolventes aceptables para administración por vía parenteral, no tóxicos adecuados, tales como manitol, 1,3-butanodiol, agua, solución de Ringer, una solución isotónica de cloruro sódico u otros agentes dispersantes o humectantes, y agentes de suspensión, incluyendo monoglicéridos o diglicéridos sintéticos y ácidos grasos, incluido el ácido oleico.

Las composiciones a modo de ejemplo para administración rectal incluyen supositorios que pueden contener, por ejemplo, excipientes no irritantes adecuados, tal como manteca de cacao, ésteres de glicérido sintéticos o polietilenglicoles, que son sólidos a temperaturas normales pero que se licuan y/o se disuelven en la cavidad rectal para liberar el fármaco.

Cuando se administra un compuesto de acuerdo con la presente invención a un sujeto humano, la dosis diaria normalmente se determinará por prescripción médica, variando normalmente la dosis de acuerdo con la edad, el peso, el sexo y la respuesta del paciente individual, así como de la gravedad de los síntomas del paciente. A modo de ejemplo, las cantidades de dosis para un mamífero pueden incluir de aproximadamente 0,05 a 1000 mg/kg; de 1 a 1000 mg/kg; de 1 a 50 mg/kg; de 5 a 250 mg/kg; de 250 a 1000 mg/kg de peso corporal de principio activo al día, que se pueden administrar en una sola dosis o en forma de dosis individuales divididas, tales como de 1 a 4 veces por día. Se entenderá que el nivel de dosificación específico y la frecuencia de la dosificación para cualquier sujeto concreto se puede variar y dependerán de diversos factores, que incluyen la actividad del compuesto específico empleado, la estabilidad metabólica y la duración de la acción de ese compuesto, la especie, la edad, el peso corporal, el estado de salud general, el sexo y la alimentación del sujeto, el modo y la frecuencia de administración, la tasa de excreción, la combinación de fármacos y la gravedad de la afección particular. Los sujetos preferidos para el tratamiento incluyen animales, más preferentemente especias de mamífero tales como seres humanos y animales domésticos tales como perros, gatos, caballos y similares. Por lo tanto, cuando se usa el término "paciente" en el presente documento, este término pretende incluir todos los sujetos, más preferentemente especies de mamífero, que están afectados por la mediación de los niveles de la enzima proteína cinasa.

Si se formulan en forma de una dosis fija, un producto combinado puede, por ejemplo, utilizar una dosificación del compuesto de fórmula (III) dentro del intervalo de dosificación descrito anteriormente y la dosificación de otro agente/tratamiento contra el cáncer dentro del intervalo de dosificación aprobado para dicho agente/tratamiento contra el cáncer. Si el producto combinado es inapropiado, los compuestos de fórmula (III) y el otro agente/tratamiento contra el cáncer pueden, por ejemplo, administrarse de forma simultánea o secuencial. Si se administran de forma secuencial, la presente invención no se limita a ninguna secuencia particular de administración. Por ejemplo, los compuestos de fórmula (III) pueden administrarse tanto antes como después de la administración del agente o tratamiento contra el cáncer.

ENSAYOS BIOLÓGICOS

Ensayos de CK1e y CK15 cinasa

EL ensayo de cinasa se llevó a cabo en placas de 384 pocillos de fondo en V. El volumen final de ensayo fue de 30 |jl, preparado a partir de adiciones de enzima de 15 |jl, sustratos (péptido fluoresceinado FL-AHA-KRRRAL-PSER-VASLPGL-^oH y ATP) y compuestos de ensayo en tampón de ensayo (HEPES 20 mM, pH 7,4, MgCh 30 mM, Brij35 al 0,015 % y DTT 4 mM). La reacción se incubó a temperatura ambiente durante 22 horas y se terminaron añadiendo 45 j l de EDTA 35 mM a cada muestra. La mezcla de reacción se analizó en un instrumento Caliper LABCHIP®3000 (Caliper, Hopkinton, MA) mediante separación electroforética del sustrato no fosforilado y del producto fosforilado. Se calcularon los datos de la inhibición mediante comparación de las reacciones del control sin enzimas para una inhibición del 100 %, y las reacciones solo con vehículo para una inhibición del 0 %. La concentración final de los reactivos en el ensayo fue de CK1e o CKl5200 pM, ATP 50 jM , FL-AHA-KRRRAL-PSER-VASLPGL-OH 1,5 jM y DMSO al 1,6 %. Se generaron curvas de respuesta a la dosis para determinar la concentración necesaria para inhibir un 50 % de la actividad de cinasa (CI50). Los compuestos se disolvieron a 10 mM en dimetilsulfóxido (DMSO) y se evaluaron a once concentraciones. Los valores de CI50 se obtuvieron mediante análisis de regresión no lineal.

Se observó que los siguientes compuestos tenían la CI⁵⁰descrita en la tabla A, cuando se midieron en los ensayos descritos anteriormente. Los intervalos de CI⁵⁰contra CK1^ey CKl5 son los siguientes: A= 0,01 - 10 nM; B= 10,01 -100 nM; C= 100,01 - 2000 nM.

Tabla A

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MÉTODOS DE PREPARACIÓN

Los compuestos de la presente invención pueden prepararse por métodos tales como los ilustrados en los esquemas siguientes. Un experto en la técnica puede seleccionar fácilmente los disolventes, las temperaturas, las presiones y otras condiciones de reacción. Los materiales de partida están disponibles en el mercado o un experto en la técnica puede prepararlos con facilidad. Estos esquemas son ilustrativos y no pretenden limitar las posibles técnicas que un experto en la técnica puede usar para fabricar los compuestos desvelados en el presente documento. Diferentes métodos pueden ser evidentes para los expertos en la técnica. Adicionalmente, las diversas etapas de la síntesis pueden realizarse en una secuencia u orden alternativo para dar el compuesto o los compuestos deseados.

En general, el tiempo que lleva completar un procedimiento de reacción será juzgado por la persona que lleva a cabo el procedimiento, preferentemente con ayuda de la información obtenida al controlar la reacción por métodos tales como la HPLC o la TLC. Una reacción no tiene que completarse para ser útil en la presente invención. Los métodos para la preparación de diversos heterociclos usados en la presente invención pueden encontrarse en los libros de referencia de química orgánica habituales, por ejemplo, Katritzky, A. R. et al., eds., Comprehensive Heterociclic Chemistry, The Structure, Reactions, Synthesis and Uses, of Heterociclic Compounds, primera edición, Pergamon Press, Nueva York (1984) y Katritzky, A. R. et al., eds., Comprehensive Heterociclic Chemistry II, A Review of the Literature 1982-1995: The Structure, Reactions, Synthesis and Uses, of Heterociclic Compounds, Pergamon Press, Nueva York (1996).

A menos que se especifique de otro modo, los diversos sustituyentes de los compuestos son:

Métodos de HPLC: El tiempo de retención indicado por análisis por HPLC/lC-MS para cada ejemplo e intermedio usa uno de los métodos de análisis por HPLC/lC-MS siguientes:

Método A: SunFire C18 (4,6 x 150) mm, columna de 3,5 |j; caudal 1 ml/min; tiempo de gradiente 15 min; disolvente B al 10 % a disolvente B al 100 %; controlando a 254 nm y 220 nm (Disolvente A: acetonitrilo al 5 %, agua al 95 %, TFA al 0,05 %; Disolvente B: acetonitrilo al 95 %, agua al 5 %, T f A al 0,05 %).

Método B: XBridge Fenil (4,6 x 150) mm, columna de 3,5 j ; caudal 1 ml/min; tiempo de gradiente 15 min; disolvente B al 10 % a disolvente B al 100 %; controlando a 254 nm y 220 nm (Disolvente A: acetonitrilo al 5 %, agua al 95 %, TFA al 0,05 %; Disolvente B: acetonitrilo al 95 %, agua al 5 %, T f A al 0,05 %).

Método C: SunFire C18 (4,6 x 150) mm, columna de 3,5 j ; caudal 1 ml/min; tiempo de gradiente 23 min; disolvente A al 100 % a disolvente B al 100 % y manteniendo el disolvente B al 100 % durante 5 min; controlando a 254 nm y 220 nm (Disolvente A: acetonitrilo al 5 %, agua al 95 %, TFA al 0,05 %; Disolvente B: acetonitrilo al

95 %, agua al 5 %, TFA al 0,05 %).

Método D: XBridge Fenil (4,6 x 150) mm, columna de 3,5 j; caudal 1 ml/min; tiempo de gradiente 23 min; fase móvil A al 100 % a fase móvil B al 100 % y manteniendo el disolvente B al 100 % durante 5 min; controlando a

254 nm y 220 nm (Disolvente A: acetonitrilo al 5 %, agua al 95 %, TFA al 0,05 %; Disolvente B: acetonitrilo al

95 %, agua al 5 %, TFA al 0,05 %).

Método E: Columna: Ascentis Express C18 (50 x 2,1) mm, 2,7 jm; caudal 1,1 ml/min; tiempo de gradiente 3 min;

Temperatura: 50 °C, disolvente B al 0 % a disolvente B al 100 %; monitorizando a 220 nm (disolvente A: agua al 95%: acetonitrilo al 5 %; NH4OAc 10 mM; Disolvente B: agua al 5 %: acetonitrilo al 95 %; NH4OAc 10 mM).

Método F: SunFire C 18 (4,6 x 150) mm, columna de 3,5 j , caudal 1 ml/min; tiempo de gradiente 23 min; disolvente B al 10 % a disolvente B al 100 %; monitorizando a de 254 nm a 220 nm (Disolvente A: acetonitrilo al

5 %, agua al 95 %, TFA al 0,05 %; Disolvente B: acetonitrilo al 95 %, agua al 5 %, T f A al 0,05 %).

Método G: XBridge Fenil (4,6 x 150) mm, columna de 3,5 j , caudal 1 ml/min; tiempo de gradiente 23 min; disolvente B al 10 % a disolvente B al 100 %; monitorizando a de 254 nm a 220 nm (Disolvente A: acetonitrilo al

Método H: Columna: Waters BEH C18, 2,0 x 50 mm, partículas de 1,7 jm ; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo:agua con acetato amónico 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo:agua con acetato amónico

10 mM; Temperatura: 40 °C; Gradiente: parada de 0,5 min al 0 % de B, 0-100 % de B durante 4 minutos, después una parada de 0,5 minutos al 100 % de B; Caudal: 1 ml/min.

Método I: Columna: Waters BEH C18, 2,0 x 50 mm, partículas de 1,7 jm ; Fase móvil A: 5:95 de metanol:agua con acetato amónico 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol:agua con acetato amónico 10 mM; Temperatura:

40 °C; Gradiente: parada de 0,5 min al 0 % de B, 0-100 % de B durante 4 minutos, después una parada de 0,5 minutos al 100 % de B; Caudal: 0,5 ml/min.

Método J: Columna: Ascentis Express C18 (50 x 4,6) mm, 2,7 jm , caudal 4 ml/min; gradiente: disolvente B del 0 al 100 % durante 4 min; Temperatura: 50 °C. Monitorizado a 220 nm (Disolvente A: 95:05 agua: CH3CN con

10 mM NH4OAc y disolvente B: 05:95 agua: CH3CN con 10 mM NH4OAc).

Método K: Columna: Ascentis Express C18 (50 x 4,6) mm, 2,7 jm , caudal 4 ml/min; gradiente: disolvente B del 0 al 100 % durante 4 min; Temperatura: 50 °C; monitorizando a 220 nm (disolvente A: 95:05 agua:CH3CN con TFA al 0,1 % y disolvente B: 05:95 agua:CH3CN con TFA al 0.1 %).

Método L: Columna: Ascentis Express C18 (50 x 2,1) mm, 2,7 jm , caudal 1,1 ml/min; gradiente: disolvente B del

0 al 100 % durante 3 min; Temperatura: 50 °C; monitorizando a 220 nm (disolvente A: 95:05 agua:CH3CN con

TFA al 0,1 % y disolvente B: 05:95 agua:CH3CN con TFA al 0.1 %).

Método M: SunFire C18 (4,6 x 150) mm, columna de 5 j ; caudal 1 ml/min; tiempo de gradiente 15 min; disolvente

B al 10 % a disolvente B al 100 %; controlando a 254 nm y 220 nm (Disolvente A: acetonitrilo al 5 %, agua al

95 %, TFA al 0,05 %; Disolvente B: acetonitrilo al 95 %, agua al 5 %, t F a al 0,05 %).

ABREVIATURAS

Las abreviaturas siguientes se usan en la sección de ejemplos posterior y en otras partes del presente documento:

Ac Acetilo

AcOH Ácido acético

Aq. Acuoso

B₂Pin₂Bis(pinacolato)diboro

BAIB bis(acetoxi)yodobenceno

BMS dimetilsufuro de borano

BH3.THF tetrahidrofurano de borano

Bn Bencilo

Boc2O Di-terc-butil dicarbonato

n-BuLi n-butil litio

t-BuNCO 2-isocianato-2-metilpropano

CAN nitrato de amonio y cerio

CDI 1, 1 '-carbonildiimidazol

DAST trifluoruro de dietilaminoazufre

dba dibencilidenoacetona

DBU 1,8-diazabiciclo[5.4.0]undec-7-eno

DCM diclorometano

DCE 1,2-dicloroeteno

DEAD azodicarboxilato de dietilo

DEOXO-FLUOR® trifluoruro de bis(2-metoxietil)aminoazufre

DIAD Azodicarboxilato de diisopropilo

DIBAD di-terc-butilazodicarboxilato

diglima 1 -metoxi-2-(2-metoxietoxi)etano

DIPEA diisopropiletilamina

DMAP 4-dimetilaminopiridina

DMF dimetil formamida

DMSO dimetilsulfóxido

DPPA difenilfosforil azida

dppf 1, 1 '-bis(difenilfosfino)ferroceno

EtOAc Acetato de etilo

EtOH Etanol

EtI yodoetano

HATU (hexafluorofosfato de O-(7-azabenzotriazol-1-il)-W,W,W'W'-tetrametiluronio) HPLC cromatografía líquida de alto rendimiento

IPA Alcohol isopropílico

KHDMS bis(trimetilsilil)amida potásica

LAH diisopropilamida de litio

LDA hidruro de litio y aluminio

LHMDS bis(trimetilsilil)amida de litio

MeOH metanol

MeI yodometano

Ms metanosulfonilo

NBS N-bromosuccinimida

NIS N-yodosuccinimida

NMP N-metil-2-pirrolidona

PPh³o TPP trifenilfosfina

Pd(PPh³)⁴Tetraquis(trifenilfosfina)paladio (0)

Pd²(dba)³T ris(dibencilidenoacetona)dipaladio (0)

PdCh(dppf) [1,1'-Bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloropaladio (II)

PdCl²(PPh³)²dicloruro de bis(trifenilfosfina)paladio (II)

PTSA ácido p-toluenosulfónico

Py piridina

TA temperatura ambiente

SFC cromatografía de fluidos supercríticos

TBAF fluoruro de tetrabutilamonio

TLC cromatografía de capa fina

TEMPO 2,2,6,6-tetrametilpiperidiniloxi

TEA o Et³N trietilamina

TFA Ácido trifluoroacético

Tf²O anhídrido trifluorometanosulfónico

THF tetrahidrofurano

TBSC1 oTBDMS- Cloruro de terc-butildimetilsililo

Esquema 2 (referencia)

A una solución de etóxido sódico (123 g, 362 mmol) en etanol (300 ml) a 0 °C se le añadió una solución de oxalato dietilo (49,4 ml, 362 mmol) en etanol (25 ml) y la solución resultante se agitó durante 10 min. Se añadió 1-(3-fluorofenil)etanona (50 g, 362 mmol) en etanol (25 ml) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 16 h. Se eliminó el etanol por destilación a presión reducida y el residuo obtenido se inactivó con agua enfriada en hielo y el producto de color pardo se filtró. Este producto en bruto se purificó por ISCO usando una columna de 220 g de gel de sílice y acetato de etilo al 20 % en hexano como eluyente. Las fracciones combinadas se concentraron para proporcionar el intermedio 4A (62,5 g, 73 %). MS(ES): m/z = 239 [M+H]+; NMR 1H (400 MHz, CDCb) 5 ppm 15,13 (s a, 1H), 7,77 - 7,83 (m, 1H), 7,67 - 7,73 (m, 1H), 7,51 (td, J= 8,03, 5,48 Hz, 1H), 7,29 - 7,37 (m, 1H), 7,28 (s, 1H), 4,43 (c, J = 7,18 Hz, 2H), 1,40 - 1,47 (m, 3H).

Intermedio 4B: 3-(3-fluorofenil)-1H-pirazol-5-carboxilato de etilo

A una solución del intermedio 4A (100 g, 420 mmol) en etanol (250 ml) se le añadió hidrazina (13,83 ml, 441 mmol) en etanol (250 ml) para dar una solución de color pardo. La mezcla de reacción se agitó a 80 °C durante 2 h. Etanol se retiró a presión reducida y el residuo se diluyó con agua y se extrajo con acetato de etilo (3 x 100 ml). La capa orgánica combinada se lavó con agua (2 x 100 ml) y salmuera, se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró a presión reducida. El sólido de color pardo así obtenido se purificó por ISCO usando acetato de etilo al 20 % en hexano como eluyente. Las fracciones combinadas se concentraron para proporcionar el intermedio 4B (85 g, 86 %) MS(ES): m/z = 233 [M+H]+; RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 14,06 (s a, 1H), 7,68 - 7,75 (m, 2H), 7,45 - 7,55 (m, 1H), 7,36 (s, 1H), 7,20 (t, J= 7,53 Hz, 1H), 4,34 (c, J = 7,03 Hz, 2H), 1,34 (t, J = 7,03 Hz, 3H).

Intermedio 4C: 1-(2-((íerc-butoxicarbonil)amino)etil)-3-(3-fluorofenil)-1H-pirazol-5-carboxilato de etilo

A una solución de 4B (12 g, 51,2 mmol) y PPh3 (20,16 g, 77 mmol) en THF (10 ml) a 0 °C se le añadió DIAD (14,94 ml, 77 mmol) en THE (10 ml) y la mezcla de reacción resultante se agitó a la misma temperatura durante 30 min. Después se añadió (2-hidroxietil)carbamato de terc-butilo (9,91 g, 61,5 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 h. Los volátiles se evaporaron de la mezcla de reacción a presión reducida y el residuo resultante se inactivó con hielo. La capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (3 x 1000 ml). La capa orgánica combinada se lavó con HCl 1,5 N (2 x 100 ml) y salmuera, se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró para proporcionar el producto en bruto, que se purificó por ISCO (5:1 Hex/EtOAc; columna de 120 g). Las fracciones recogidas se concentraron juntas para proporcionar un sólido de color amarillo claro 4C (16 g, 83 %). MS(ES): m/z = 378 [M+H]+; NMR 1H (400 MHz, CDC13) 5 ppm 7,54 - 7,59 (m, 1H), 7,48 - 7,54 (m, 1H), 7,36 (td, J= 8,03, 6,02 Hz, 1H), 7,13 (s, 1H), 6,98 - 7,05 (m, 1H), 6,32 (s a, 1H), 4,98 (quint., J= 6,27 Hz, 2H), 4,37 (c, J = 7,19 Hz, 2^h), 3,64 (d, J= 5,02 Hz, 2H), 1,39 - 1,41 (m, 3H), 1,27 (s, 9H).

Intermedio 4D: 2-(3-fluorofenil)-6,7-dihidropirazolo[1,5-a]pirazin-4(5H)-ona

Se cargó un matraz de fondo redondo de 250 ml con 4C (14 g, 37,1 mmol) y HCl en 1,4-dioxano (185 ml, 185 mmol) para dar una solución de color amarillo. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 h. La mezcla de reacción se concentró a presión reducida y a este residuo se le añadió NaHCO3 al 10 % lentamente hasta que el pH llegó a 8,0. La capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (3 x 100 ml) y la capa orgánica combinada se lavó con agua (2 x 100 ml) y salmuera, se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró para dar el producto deseado 4D en forma de un sólido de color blanquecino, que se usó en la siguiente etapa sin purificación. MS(ES): m/z = 231 [M+H]+; NMR 1H (400 MHz, DMSO- d6) 5 ppm 8,26 (s a, 1 H), 7,70 - 7,75 (m, 1H), 7,63 - 7,69 (m, 1H), 7,47 (td, J= 8,03, 6,53 Hz, 1h), 7,11 - 7,20 (m, 1H), 4,32 - 4,40 (m, 2H), 3,65 (tt, J=4,64, 3,14 Hz, 2H).

Intermedio 4E: 2-(3-fluorofenil)-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]pirazina

A una solución del intermedio 4D (4,5 g, 19,46 mmol) en THF (100 ml) a -10 °C se le añadió LAH (16,22 ml, 2,4 M en THF, 38,9 mmol) gota a gota. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 16 h, se inactivó con NH4CI a 0 °C y la capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (3x50 ml). La capa orgánica combinada se lavó con agua (2x50 ml) y salmuera, se filtró a través de CELITE®, se secó sobre Na2SO4 y se concentró para proporcionar el compuesto 4E en bruto, en forma de un sólido de color blanquecino (4 g, 90 %), que se usó en la siguiente etapa sin purificación. MS(ES): m/z = 218 [M+H]+; NMR 1H (400 MHz, CDCh) 5 ppm 7,53 - 7,59 (m, 1H), 7,50 (ddd, J= 10,29, 2,55, 1,51 Hz, 1H), 7,35 (td, J = 7,93, 6,04 Hz, 1H), 6,99 (tdd, J= 8,40, 8,40, 2,64, 0,94 Hz, 1H), 6,29 (s, 1H), 4,19 (t, J= 5,67 Hz, 2H), 4,12 (s, 2H), 3,33 -3,40 (m, 2H).

Intermedio 4F: 2-(3-fluorofenil)-6,7-dihidropirazolo[1,5-a]]pirazin-5(4H)-carboxilato de terc-butilo

A una solución del intermedio 4E (4,0 g, 20,71 mmol) en diclorometano (150 ml) se le añadió trietilamina (7,70 ml, 55,2 mmol) y DMAP (0,225 g, 1,841 mmol) para dar una solución incolora. La reacción se enfrió a 0 °C y después se añadió Boc2O (4,82 g, 22,10 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 h. La mezcla de reacción se diluyó con diclorometano (100 ml), se lavó con agua (2 x 100 ml), se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró para proporcionar el compuesto en bruto en forma de un sólido de color blanquecino. El producto en bruto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (columna REDISEP® de 24 g, eluyendo con acetato de etilo al 30 % en hexano). Las fracciones recogidas se concentraron juntas para proporcionar el intermedio 4F (5 g, 86 %) en forma de un sólido de color blanco. MS(ES): m/z = 318 [M+H]+; RMN 1H (400 MHz, CDCh) 5 ppm 7,53 (dt, J= 7,53, 1,25 Hz, 1H), 7,47 (ddd, J= 10,54, 2,51, 1,51 Hz, 1H), 7,31 - 7,38 (m, 1H), 6,95 - 7,03 (m, 1H), 6,35 (s, 1H), 4,69 (s, 2H), 4,22 (t, J= 5,27 Hz, 2H), 3,92 (t, J= 5,52 Hz, 2H), 1,51 (s, 9H).

Intermedio 4G: 2-(3-fluorofenil)-3-yodo-6,7-dihidropirazolo[1,5-a]pirazin-5(4H)-carboxilato de terc-butilo

A una solución del intermedio 4F (5,0 g, 15,76 mmol) en diclorometano (25 ml) se le añadió NIS (5,32 g, 23,63 mmol) y se agitó a temperatura ambiente durante 2 h. La mezcla de reacción se diluyó con DCM y se lavó con agua. La capa orgánica se secó sobre Na2SO4 y se concentró para proporcionar el intermedio 4G (6 g, 86 %) en forma de un semisólido incoloro que se usó en la siguiente etapa sin más purificación. MS(ES): m/z = 444 [M+H]+; NMR 1H (400 MHz, CDCh) 5 ppm 7,61 - 7,66 (m, 1H), 7,56 (ddd, J= 10,04, 2,51, 1,51 Hz, 1H), 7,39 (td, J = 8,03, 6,02 Hz, 1H), 7,04 - 7,10 (m, 1H), 4,56 (s a, 2H), 4,22 (t, J= 5,52 Hz, 2H), 3,92 (t, J= 5,52 Hz, 2h), 1,52 (s, 9H).

Intermedio 4H: 3-ciano-2-(3-fluorofenil)-6,7-dihidropirazolo[1,5-a]pirazin-5(4H)-carboxilato de terc-butilo

A una solución del intermedio 4G (5,0 g, 11,28 mmol) en DMF (50 ml) se le añadió cianuro de cinc (1,722 g, 14,66 mmol) y cinc (0,221 g, 3,38 mmol) para dar una suspensión de color pardo. La mezcla de reacción se desgasificó en atmósfera de nitrógeno durante 15 min y se añadió Pd2(dba)3 (0,516 g, 0,564 mmol) y dppf (0,625 g, 1,128 mmol). La mezcla de reacción se agitó a 90 °C durante 18 h. La mezcla de reacción se inactivó con agua y la capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (3x 50 ml). La capa orgánica combinada se lavó con amoniaco acuoso (2 x 50 ml), agua, se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró para proporcionar el producto en bruto en forma de un semisólido de color pardo. El producto en bruto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (columna REDISEP® de 40 g, eluyendo con EtOAc al 50 % en hexano). Las fracciones recogidas se concentraron juntas para proporcionar el intermedio 4H (3 g, 78 %) en forma de un sólido de color blanco. MS(ES): m/z = 343 [M+H]+; N^mR 1H (400 MHz, CDCl3) 5 ppm 7,73 - 7,78 (m, 1H), 7,62 - 7,68 (m, 1H), 7,43 (td, J= 8,03, 5,52 Hz, 1H), 7,08 - 7,15 (m, 1H), 4,82 (s, 2H), 4,24 (t, J= 5,52 Hz, 2H), 3,96 (t, J = 5,27 Hz, 2H), 1,52 (s, 9H).

Intermedio 4I: 3-carbamoil-2-(3-fluorofenil)-6,7-dihidropirazolo[1,5-a]pirazin-5(4H)-carboxilato de tere-butilo

A una solución del intermedio 4H (3,0 g, 8,76 mmol) en MeOH (10 ml) se le añadió NaOH (10 ml, solución al 10 % de NaOH, 25 mmol) y H²O²(2,5 ml, 30 % p/v en H²O, 22 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 3 h. El metanol se eliminó de la mezcla de reacción y el residuo se diluyó con 10 ml de agua y se extrajo con acetato de etilo (3 x 15 ml). La capa orgánica combinada se lavó con agua (15 ml) y salmuera, se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró para proporcionar el intermedio 4I en bruto (3 g, 95 %) en forma de un sólido de color blanquecino, que se usó en la siguiente etapa sin purificación adicional. MS(ES): m/z = 361 [M+H]⁺; RMN 1H (300 MHz, DMSO-d^s) 5 ppm 7,53 (d, J= 1,51 Hz, 1H), 7,43 - 7,50 (m, 2H), 7,32 (s a, 1H), 7,18 - 7,24 (m, 1H), 7,14 (s a, 1H), 4,75 (s, 2H), 4,17 (t, J = 5,27 Hz, 2H), 3,85 (t, J =5,52 Hz, 2H), 1,41 - 1,49 (m, 8^h).

Intermedio 4J: 2-(3-fluorofenil)-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]pirazin-3-carboxamida

A una solución del intermedio 4I (3,0 g, 8,32 mmol) en diclorometano (20 ml) a 0 °C se le añadió TFA (10,26 ml, 133 mmol) gota a gota y se agitó a temperatura ambiente durante 1 h. El TFA se eliminó de la mezcla de reacción y el residuo se inactivó con solución al 10 % de NaHCO3. El sólido se filtró para obtener el intermedio 4J (2 g, 92 %) en forma de un sólido de color blanquecino, que se usó en la siguiente etapa sin purificación. MS(ES): m/z = 261 [M+H]⁺; NMR 1H (400 MHz, DMSO-d^s) 5 ppm 7,52 - 7,57 (m, 1H), 7,46 - 7,52 (m, 1H), 7,40 - 7,46 (m, 1H), 7,14 -7,27 (m, 2H), 7,08 (s a, 1H), 4,03 (d, J= 5,02 Hz, 4H), 3,13 (d, J= 5,02 Hz, 2H), 2,64 (d, J= 6,02 Hz, 1H).

Compuesto 4 (referencia): W5-(terc-butilo)-2-(3-fluorofenil)-6,7-dihidropirazolo[1,5-a]pirazin-3,5(4H)-dicarboxamida

A una solución del intermedio 4J (50 mg, 0,192 mmol) en DMF (2 ml) a 0 °C se le añadió terc-butilisocianato (38 mg, 0,384 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 12 h, se inactivó con agua y se extrajo con acetato de etilo (3 x 5 ml). La capa orgánica combinada se lavó con agua (2 x 5 ml) y salmuera, se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró para proporcionar el producto en bruto en forma de un semisólido de color pardo. El residuo se volvió a purificar por HPLC preparativa para proporcionar el producto 4 puro en forma de un polvo de color blanco(40 mg, 57 %). MS(ES): m/z = 360 [M+H]⁺; Tiempo de retención por HPLC 7,35 min. y 7,33 min. (Métodos de HPLC A y B); NMR 1H (400 MHz, DMSO-d^s) 5 ppm 7,51 - 7,54 (m, 1H), 7,47 - 7,50 (m, 1H), 7,44 - 7,46 (m, 1H), 7,18 - 7,24 (m, 1H), 4,74 (s, 2H), 4,17 (t, J = 5,52 Hz, 2H), 3,85 (t, J= 5,52 Hz, 2H), 1,45 - 1,48 (s, 9H).

Métodos generales para sintetizar urea:

Método A:

A una solución del intermedio 4J (30 mg, 0,115 mmol) en DMF (1 ml) se le añadió el correspondiente isocianato (0,288 mmol) a 0 °C y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 3 h. La mezcla de reacción se inactivó con agua y se extrajo con acetato de etilo (3 x 5 ml). La capa orgánica combinada se lavó con agua (2 x 5 ml) y salmuera, se secó sobre Na²SO⁴, se filtró y se concentró para proporcionar el producto en bruto. El producto en bruto se volvió a purificar por HPLC preparativa.

Método B:

A una solución de amina primaria (0,192 mmol) y trietilamina (0,480 mmol) en tetrahidrofurano (3 ml) a 0 °C se le añadió trifosgeno (0,096 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante 30 min. a la misma temperatura. Se añadió el intermedio 4J (25 mg, 0,096 mmol) en THF y la solución se agitó a temperatura ambiente durante 2 h. El progreso de la reacción se controló por TLC. La mezcla de reacción se inactivó con agua y se extrajo con acetato de etilo (3 x 5 ml). La capa orgánica combinada se lavó con NaHCO³al 10 % (2 x 5 ml), agua, se secó sobre Na²SO⁴y se concentró para proporcionar el producto en bruto en forma de un sólido de color blanquecino. El producto en bruto se volvió a purificar por HPLC preparativa.

Método C:

A una solución de ácido (0,192 mmol) y TEA (0,288 mmol) en tolueno (3 ml) se le añadió difenilfosforil azida (0,192 mmol) para dar una solución incolora. La mezcla de reacción se agitó a 90 °C durante 1,5 h y se enfrió a TA. Se añadió el intermedio 4J (25 mg, 0,096 mmol) en THF y la mezcla de reacción se agitó a 60 °C durante 4 h. El progreso de la reacción se controló por TLC. La mezcla de reacción se inactivó con agua y se extrajo con acetato de etilo (3 x 5 ml). La capa orgánica combinada se lavó con NaHCO³al 10 % (2 x 5 ml), agua, se secó sobre Na²SO⁴y se concentró para proporcionar el producto en bruto en forma de un sólido de color blanquecino. El producto en bruto se volvió a purificar por HPLC preparativa.

Método D:

A una solución de amina primaria (0,192 mmol) y trietilamina (0,480 mmol) en tetrahidrofurano (3 ml) a 0 °C se le añadió cloroformiato de fenilo (0,096 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante 60 min. a TA. La mezcla de reacción se inactivó con agua y se extrajo el carbamato de fenilo formado y el intermedio 4J (25 mg, 0,096 mmol) en THF se añadió al extracto y la solución resultante se agitó a temperatura ambiente durante 2 h. El progreso de la reacción se controló por TFC. La mezcla de reacción se inactivó con agua y se extrajo con acetato de etilo (3 x 5 ml). La capa orgánica combinada se lavó con NaHCO³al 10 % (2 x 5 ml), agua, se secó sobre Na²SO⁴y se concentró para proporcionar el producto en bruto en forma de un sólido de color blanquecino. El producto en bruto se volvió a purificar por HPLC preparativa.

Los compuestos descritos en la tabla 2 se sintetizaron de forma análoga al compuesto de referencia 4 haciendo reaccionar el compuesto 4J con los reactivos correspondientes.

Esquema 5

Intermedio 156A: 3-etil 2-yodo-6,7-d¡hidrop¡razolo[1,5-a]p¡razin-3,5(4/-/)-d¡carbox¡lato de 5-ferc-butilo

A una solución en agitación de 104F (0,7 g, 2,180 mmol) en diclorometano (10 ml) se le añadió trietilamina (0,912 ml, 6,54 mmol) y Boc²O (0,952 g, 4,36 mmol). La mezcla de reacción resultante se agitó a TA durante una noche y el progreso de la reacción se controló por LCMS. La mezcla de reacción se diluyó con diclorometano (20 ml), se lavó con agua, salmuera, se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró. El producto en bruto obtenido se purificó por ISCO (columna de gel de sílice de 24 g) usando mezcla de éter de petróleo y acetato de etilo (9:1) como eluyente. Las fracciones se recogieron y se concentraron para proporcionar el intermedio 156A (800 mg, 87 %). MS(ES): m/z = 422 [M+H]⁺; RMN 1H (400 MHz, CDC^b) 5 ppm 4,86 (s, 2H), 4,32 (c, J = 6,8 Hz, 2H), 4,20 (m, 2H), 3,87 (t, J= 5,6 Hz, 2H), 1,50 (s, 9H), 1,38 (t, J = 7,2 Hz, 3H).

Intermedio 156B: Ácido 5-(ferc-butoxicarbonil)-2-yodo-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]pirazin-3-carboxílico

A una solución en agitación de 156A (0,80 g, 1,899 mmol) en metanol (7 ml) se le añadió hidróxido sódico (0,760 g, 1,899 mmol) en agua (3 ml). La mezcla de reacción resultante se agitó a TA durante 6 h. Se eliminó el metanol a presión reducida y la capa acuosa se acidificó con solución 1,5 N de HCl. La capa acuosa se extrajo de nuevo con diclorometano (3 x 25 ml). La capa orgánica combinada se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró para dar el intermedio 156B deseado (700 mg, 94 %). MS(ES): m/z = 394 [M+H]+; RMN 1H (400 m Hz, CDCb) 5 ppm 4,89 (s, 2H), 4,22 (t, J= 5,2 Hz, 2H), 3,88 (t, J= 5,6 Hz, 2H), 1,51 (s, 9H).

Intermedio 156C: 3-carbamoil-2-yodo-6,7-dihidropirazolo[1,5-a]pirazin-5(4H)-carboxilato de terc-butilo

A una solución en agitación de 156B (0,700 g, 1,780 mmol) y cloruro de amonio (0,190 g, 3,56 mmol) en DMF (7 ml) se le añadió HATU (1,354 g, 3,56 mmol) y DIPEA (0,933 ml, 5,34 mmol). La mezcla de reacción resultante se agitó a TA durante una noche. La mezcla de reacción se diluyó con agua (20 ml) y la capa acuosa se extrajo de nuevo con acetato de etilo (2x30 ml). La capa orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre Na²SO⁴, se filtró y se concentró. El producto en bruto se purificó por ISCO (columna de gel de sílice de 24 g ) usando metanol al 2 % en cloroformo como eluyente para proporcionar el intermedio 156C puro (670 mg, 96 %). MS(ES): m/z = [M+H]⁺; RMN ¹H (400 MHz, DMSO-d^s) 5 ppm 7,38 (s a, 1H), 6,86 (s a, 1H), 4,72 (s, 2H), 4,12 (t, J= 5,2 Hz, 2H), 3,77 (t, J= 5,7 Hz, 2H), 1,43 (s, 9H).

Intermedio 156D: 3-carbamoil-2-(3-clorofenil)-6,7-dihidropirazolo[1,5-a]pirazin-5(4H)-carboxilato de terc-butilo

A una solución en agitación del intermedio 156C (500 mg, 1,275 mmol) y ácido (3-clorofenil)borónico (399 mg, 2,55 mmol) en 1,4-dioxano (5 ml) y agua (1 ml) se le añadió fosfato potásico tribásico (666 mg, 3,82 mmol). La mezcla de reacción se purgó con nitrógeno durante 5 min. Se añadió PdCl²(dppf)-CH²Cl²(52,1 mg, 0,064 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a 80 °C durante 12 h. La mezcla de reacción se diluyó con agua (20 ml) y se extrajo con acetato de etilo (3 x 25 ml). La capa orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre Na²SO⁴y se concentró. El producto en bruto se purificó por ISCO (columna de sílice de 24 g) usando metanol al 2 % en cloroformo. Las fracciones se recogieron y se concentraron para proporcionar el intermedio 156D (380 mg, 79 %). MS(ES): m/z = 377 [M+H]⁺; RMN ¹H (300 MHz, CDC^h) 5 ppm 7,60 (s, 1H), 7,46 (m, 3H), 5,32 (s a, 2H), 4,97 (s, 2H), 4,21 (t, J= 5,1 Hz, 2H), 3,94 (t, J= 5,7 Hz, 2H), 1,29 (s, 9H).

Intermedio 156E: 2-(3-clorofenil)-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]pirazin-3-carboxamida

A una solución en agitación de 156D (350 mg, 0,929 mmol) en DCM (10 ml) se le añadió gota a gota TFA (2 ml) a 0 °C y la mezcla de reacción se agitó a TA durante una noche. El TFA y el DCM se eliminaron a presión reducida, el producto en bruto se basificó con solución saturada de hidróxido sódico, el sólido resultante se filtró, se lavó con agua, se secó al vacío para proporcionar 156E (250 mg, 97 %). MS(ES): m/z = 277 [M+H]⁺; RMN ¹H (400 MHz, DMSO-d^s) 5 ppm 7,71 - 7,73 (m, 1H), 7,65 (dt, J= 7,04, 1,72 Hz, 1H), 7,37 - 7,45 (m, 2H), 7,20 (s a, 1H), 7,10 (s a, 1H), 4,00 - 4,05 (m, 4H), 3,12 (d, J= 4,83 Hz, 2H), 2,63 (s, 1H).

Compuesto 156: 2-(3-clorofenil)-W5-(3,4-difluorofenil)-6,7-dihidropirazolo[1,5-a]pirazin-3,5(4H)-dicarboxamida

A una solución en agitación de 3,4-difluoroanilina (23,33 mg, 0,181 mmol) en DCM (2 ml) en atmósfera de nitrógeno se le añadió trietilamina (0,025 ml, 0,181 mmol) y la mezcla de reacción se enfrió a 0 °C y se añadió trifosgeno (26,8 mg, 0,090 mmol) en DCM (1 ml), se agitó a la misma temperatura durante 10 min. Se añadió gota a gota una solución de 156E (25 mg, 0,090 mmol) en DMF (1 ml) y la mezcla de reacción resultante se agitó a TA durante una noche. Se diluyó con agua y la capa acuosa se extrajo de nuevo con acetato de etilo (3 x 10 ml). La capa orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre Na²SO⁴y se concentró. El producto en bruto obtenido se purificó por HPLC preparativa de fase inversa para proporcionar el producto 156 puro en forma de un sólido de color blanquecino (10 mg, 25 %). MS(ES): m/z = 432 [M+H]⁺; Tiempo de retención de HPLC 9,92 min y 8,82 min. (Métodos de HPLC A y B); RMN ¹H (400 MHz, CD³OD) 5 ppm 7,68 - 7,71 (m, 1H), 7,60 (ddd, J= 5,32, 3,47, 1,63 Hz, 1H), 7,48 - 7,53 (m, 1H), 7,44 - 7,48 (m, 2H), 7,16 - 7,20 (m, 2H), 5,01 (s, 2H), 4,31 (t, J= 5,40 Hz, 2H), 4,08 (t, J= 5,40 Hz, 2H).

Métodos generales para la síntesis de ureas:

Método A:

A una solución del intermedio 156E (30 mg, 0,115 mmol) en DMF (1 ml) se le añadió el correspondiente isocianato (0,288 mmol) a 0 °C. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 3 h. La mezcla de reacción se inactivó con agua y se extrajo con acetato de etilo (3 x 5 ml). La capa orgánica combinada se lavó con agua (2 x 5 ml) y solución de salmuera, se secó sobre Na²SO⁴, se filtró y se concentró para proporcionar el producto en bruto que se purificó por HPLC preparativa.

Método B:

A una solución de amina primaria (0,192 mmol) y trietilamina (0,480 mmol) en tetrahidrofurano (3 ml) a 0 °C se le añadió trifosgeno (0,096 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante 30 min a la misma temperatura. Se añadió el intermedio 156E (25 mg, 0,096 mmol) en DMF y la solución se agitó a TA durante 2 h. La mezcla de reacción se inactivó con agua y se extrajo con acetato de etilo (3 x 5 ml). La capa orgánica combinada se lavó con NaHCO³al 10 % (2 x 5 ml), agua, se secó sobre Na²SO⁴y se concentró para proporcionar el producto en bruto, que se purificó otra vez por HPLC preparativa.

Método C:

A una solución de amina primaria (0,192 mmol) y trietilamina (0,480 mmol) en tetrahidrofurano (3 ml) a 0 °C se le añadió cloroformiato de fenilo (0,096 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante 60 min a TA. La mezcla de reacción se inactivó con agua y el carbamato de fenilo formado se extrajo y el intermedio 156E (25 mg, 0,096 mmol) en THF se añadió al extracto y la solución resultante se agitó a temperatura ambiente durante 2 h. La mezcla de reacción se inactivó con agua y se extrajo con acetato de etilo (3 x 5 ml). La capa orgánica combinada se lavó con NaHCO³al 10 % (2 x 5 ml), agua, se secó sobre Na²SO⁴y se concentró para proporcionar el producto en bruto que se purificó otra vez por HPLC preparativa.

Los compuestos descritos en la tabla 5 se sintetizaron de forma análoga al compuesto 156 haciendo reaccionar el compuesto 156E con los correspondientes reactivos.

Esquema 6

Intermedio 172A: 3-carbamoil-2-(3-cloro-4-fluorofenil)-6,7-dihidropirazolo[1,5-a]pirazin-5(4/-/)-carboxilato de terc-butilo

A una solución en agitación del intermedio 156C (5 g, 12,7 mmol), ácido (3-doro-4-fluorofenil)borónico (3,33 g, 19,12 mmol) en 1,4-dioxano (75 ml) y agua (7,5 ml) se le añadió K3PO4(8,12 g, 38,2 mmol) y la mezcla de reacción se purgó con nitrógeno durante 5 min. PdCl2(dppf)-CH2Cl2 (0,521 g, 0,637 mmol) se añadió y la mezcla de reacción se agitó a 80 °C durante 12 h. La mezcla de reacción se diluyó con agua (75 ml) y se extrajo con EtOAc (3 x 75 ml). La capa orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4, se filtró y el filtrado se concentró. La mezcla de reacción en bruto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (columna REDISEP® de 24 g, eluyendo con MeOH al 2 % en CHCh). Las fracciones se recogieron y se concentraron para proporcionar el intermedio 172A (4,2 g, 78 %) en forma de un sólido de color blanco. MS(ES): m/z = 395 [M+H]+; NMR 1H (300 MHz, DMSO-de) 5 ppm 7,81 - 7,87 (m, 1H), 7,63 - 7,72 (m, 1H), 7,47 (s, 1H), 7,15 - 7,37 (m, 2H), 4,74 (s, 2H), 4,16 (s, 2H), 3,80 -3,88 (m, 2H), 1,45 (s, 9H).

Intermedio 172B: 2-(3-cloro-4-fluorofenil)-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]pirazin-3-carboxamida

A una solución en agitación del intermedio 172A (4,2 g, 10,64 mmol) en DCM (15 ml) se le añadió TFA (12,29 ml, 160 mmol) gota a gota a 0 °C y la mezcla de reacción se agitó a TA durante 12 h. La mezcla de reacción se concentró a presión reducida y el producto en bruto se basificó con una solución ac. saturada de NaOH y se agitó durante 10 min. El producto sólido se filtró, se lavó con agua y se secó al vacío para proporcionar 172B en forma de un sólido de color blanco (2,8 g, 87 %). MS(ES): m/z = 295 [M+H]+; RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 7,86 (dd, J= 7,53, 2,01 Hz, 1H), 7,69 (ddd, J= 8,66, 4,89, 2,01 Hz, 1H), 7,44 (t, J= 8,78 Hz, 1H), 7,11 - 7,20 (m, 2H), 3,99 -4,04 (m, 4H), 3,12 (d, J = 6,02 Hz, 2H), 2,62 (s, 1H).

Compuesto 172: 2-(3-cloro-4-fluorofen¡l)-W5-(4-c¡anofen¡l)-6,7-d¡h¡drop¡razolo[1,5-a]p¡raz¡n-3,5(4H)-d¡carboxam¡da

A una soluc¡ón del ¡ntermed¡o 172B (0,20 g, 0,679 mmol) en THF (5 ml) se le añad¡ó 4-¡soc¡anatobenzon¡tr¡lo (0,117 g, 0,814 mmol) y la mezcla de reacc¡ón se ag¡tó a TA durante 14 h. La mezcla de reacc¡ón se ¡nact¡vó con agua y se extrajo con acetato de et¡lo (3 x 5 ml). La capa orgán¡ca comb¡nada se lavó con una soluc¡ón acuosa al 10 % de NaHCO3, salmuera, se secó sobre Na2SO4, se f¡ltró y el f¡ltrado se concentró. El producto en bruto se purificó por HPLC preparat¡va para proporc¡onar el compuesto 172 en forma de un sól¡do de color blanquec¡no (147 mg, 50 %). T¡empos de retenc¡ón de HPLC 8,99 m¡n. y 8,73 m¡n. (Métodos A y B respect¡vamente). MS(ES): m/z = 439 [M+H]⁺; RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 9,45 (s a, 1H), 7,85 (m, 1H), 7,65 - 7,76 (m, 5H), 7,44 - 7,57 (m, 1H), 7,38 (s a, 1H), 7,16 (s a, 1H), 4,92 (s, 2H), 4,26 (t, J= 5,27 Hz, 2H), 4,01 (t, J = 5,52 Hz, 2H).

Los compuestos mostrados en la tabla 6 se han preparado de forma s¡m¡lar a la del compuesto 172 med¡ante acoplam¡ento del ¡ntermed¡o 172B con d¡versos ¡soc¡anatos fác¡lmente d¡spon¡bles o generados in-situ a part¡r de las respect¡vas an¡l¡nas.

Esquema 7

Intermedio 205A: 3-carbamoil-2-(3,4-d¡clorofen¡l)-6,7-d¡h¡drop¡razolo[1,5-a]pirazin-5(4/-/)-carboxilato de ferc-butilo

A una solución en agitación del intermedio 156C (9 g, 23 mmol), se le añadió ácido (3,4-didorofenil)borónico (6,57 g, 34,4 mmol) en 1,4-dioxano (150 ml) y agua (10 ml) se le añadió K³PO⁴(14,61 g, 68,8 mmol) y la mezcla de reacción se purgó con nitrógeno durante 15 min. Se añadió PdCl²(dppf)-CH²Cl²(1,124 g, 1,377 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a 80 °C durante 12 h. La mezcla de reacción se diluyó con agua (300 ml) y se extrajo con EtOAc (3 x 80 ml). La capa orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre Na²SO⁴, se filtró y el filtrado se concentró. La mezcla de reacción en bruto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (columna REDISEP® de 40 g, eluyendo con EtOAc al 65 % en hexanos). Las fracciones se recogieron y se concentraron para proporcionar el intermedio 205A en forma de un sólido de color amarillo claro (8 g, 85 %). MS(ES): m/z = 411,0 [M+1 ]⁺; RMN ¹H: (400 MHz, DMSO-d^s) 5 ppm 7,92 - 7,87 (m, 1H), 7,69 - 7,64 (m, 2H), 7,44 - 7,18 (m, 2H), 4,74 (s, 2H), 4,17 (t, 2H), 3,84 (t, 2H), 1,45 (s, 9H).

Intermedio 205B: 2-(3,4-diclorofenil)-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]pirazin-3-carboxamida

A una solución en agitación de 205A (9 g, 21,88 mmol) en DCM (20 ml) se le añadió gota a gota TFA (15 ml, 21,88 mmol) a 0 °C y la mezcla de reacción se agitó a TA durante 12 h. Los volátiles se eliminaron a presión reducida y el producto en bruto se basificó con una solución ac. al 10 % de NaOH y se agitó durante 10 min. El producto sólido separado se filtró, se lavó con agua y se secó al vacío para proporcionar 205B en forma de un sólido de color blanquecino (5,2 g, 76 %). MS(ES): m/z = 311,0 [M+1]⁺; RMN ¹H: (400 MHz, DMSO-d^s) 5 ppm 7,92 (s, 1H), 7,67 (m, 2H), 7,32 - 7,09 (m, 2H), 4,02 (s, 4H), 3,12 (s a, 2H), 2,70 - 2,58 (m, 1H).

Compuesto 205: W5-(4-c¡anofen¡l)-2-(3,4-d¡clorofen¡l)-6,7-d¡h¡drop¡razolo[1,5-a]p¡raz¡n-3,5(4H)-d¡carboxam¡da

A una soluc¡ón del ¡ntermed¡o 205B (0,20 g, 0,643 mmol) en THF (5 ml) se le añad¡ó 4-¡soc¡anatobenzon¡tr¡lo (0,111 g, 0,771 mmol) y la mezcla de reacc¡ón se ag¡tó a TA durante 14 h. La mezcla de reacc¡ón se ¡nact¡vó con agua y se extrajo con acetato de et¡lo (3x5 ml). La capa orgán¡ca comb¡nada se lavó con una soluc¡ón acuosa al 10 % de NaHCO3, salmuera, se secó sobre Na2SO4, se f¡ltró y el f¡ltrado se concentró. El producto en bruto se pur¡f¡có por HPLC preparat¡va para proporc¡onar el compuesto 205 en forma de un sól¡do de color blanquec¡no (135 mg, 46 %). T¡empos de retenc¡ón de HPLC 9,44 m¡n. y 9,06 m¡n. (Métodos A y B respect¡vamente). MS(ES): m/z = 405 [M+H]+; RMN 1H (400 MHz, DMSO-ds) d ppm 9,50 (s a, 1H), 7,91 (s, 1H), 7,65 - 7,75 (m, 6h), 7,25 - 7,45 (d, 2H), 4,92 (s, 2H), 4,26 (t, J = = 5,27 Hz, 2H), 4,01 (t, J = 5,52 Hz, 2H).

Los compuestos mostrados en la tabla 7 se han preparado de forma s¡m¡lar a la del compuesto 205 med¡ante acoplam¡ento del ¡ntermed¡o 205B con d¡versos ¡soc¡anatos fác¡lmente d¡spon¡bles o generados in-situ a part¡r de las respect¡vas an¡l¡nas.

Esquema 8

Intermedio 215A: 2-(3-doro-5-fluorofenil)-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolano

A una solución de 1-bromo-3-cloro-5-fluorobenceno (1,5 g, 7,16 mmol) y bis(pinacolato)diboro (2,182 g, 8,59 mmol) en dioxano (5 ml) se le añadió KOAc (2,109 g, 21,49 mmol) y la mezcla de reacción se desgasificó con N2 gaseoso durante 15 min. Se añadió Pd2(PPh3)2Cl2 (0,302 g, 0,430 mmol) y la mezcla de reacción se calentó a 100 °C y se agitó durante 12 h. La mezcla de reacción se filtró a través de un lecho de CELITE® y se concentró. El producto en bruto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (columna REDISEP® de 12 g, eluyendo con EtOAc al 1 % en hexanos). Las fracciones que contenían el producto se combinaron y se evaporaron para proporcionar el intermedio 215A en forma de un líquido incoloro (1,3 g, 71 %). RMN 1H (400 MHz, DMSO-de) 5 ppm 7,59 (td, J= 2,3, 9,0 Hz, 1H), 7,46 (dd, J = 1,0, 2,0 Hz, 1H), 7,34 (ddd, J= 1,0, 2,5, 8,5 Hz, 1H), 1,31 (s, 12H).

Intermedio 215B: 3-carbamoil-2-(3-cloro-5-fluorofenil)-6,7-dihidropirazolo[1,5-a]pirazin-5(4H)-carboxilato de terc-butilo

A una solución en agitación del intermedio 156C (1 g, 2,55 mmol), se le añadió el intermedio 215A (981 mg, 3,82 mmol) en 1,4-dioxano (20 ml) K³PO⁴(1624 mg, 7,65 mmol) en agua (1,0 ml) y la mezcla de reacción se purgó con nitrógeno durante 5 min. Se añadió PdC^h(dppf)-CH²Cl²(125 mg, 0,153 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a 80 °C durante 12 h. La mezcla de reacción se diluyó con agua (25 ml) y se extrajo con EtOAc (3 x 25 ml). La capa orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre Na²SO⁴, se filtró y el filtrado se concentró. La mezcla de reacción en bruto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (columna REDISEP® de 24 g, eluyendo con EtOAc al 70 % en hexanos). Las fracciones se recogieron y se concentraron para proporcionar el intermedio 215B en forma de un sólido de color blanquecino (850 mg, 84 %). MS(ES): m/z = 575 [M+H]⁺; RMN ¹H (300 MHz, DMSOd6) 5 ppm 7,60 (t, J= 1,5 Hz, 1H), 7,54 - 7,47 (m, 1H), 7,47 - 7,32 (m, 3H), 4,74 (s, 2H), 4,18 (t, J= 5,5 Hz, 2H), 3,84 (t, J= 5,3 Hz, 2H), 1,45 (s, 9H).

Intermedio 215C: 2-(3-doro-5-fluorofenil)-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]pirazin-3-carboxamida

A una solución del intermedio 215B (850 mg, 2,153 mmol) en DCM (7 ml) se le añadió TFA (5 ml) a 0 °C y la solución resultante se dejó calentar a TA y se agitó durante 2 h. Los volátiles se eliminaron a presión reducida y el residuo se trituró con Et2O. El producto sólido separado se trató con una solución acuosa al 10 % de NaOH a TA y se agitó vigorosamente durante 2 h. El producto sólido separado se filtró, se lavó con agua y se destiló azeotrópicamente con tolueno para proporcionar el intermedio 215C en forma de un sólido de color blanquecino (500 mg, 79 %). MS(ES): m/z = 295,2 [M+H]+; RMN 1H (400 MHz, DMSO- d6) 5 ppm 7,63 (t, J= 1,5 Hz, 1H), 7,56 -7,50 (m, 1H), 7,40 (td, J= 2,1,8,8 Hz, 1H), 7,27 (s a, 2H), 4,07 -3,99 (m, 4H), 3,13 (c, J = 5,5 Hz, 2H), 2,68 - 2,60 (m, 1H).

Compuesto 215: 2-(3-cloro-5-fluorofenil)-W5-(4-ciano-3-fluorofenil)-6,7-dihidropirazolo[1,5--a]pirazin-3,5(4H)-dicarboxamida

A una solución del intermedio 215C (30 mg, 0,102 mmol) en DMSO (1 ml) se le añadió (4-ciano-3-fluorofenil)carbamato de fenilo (39,1 mg, 0,153 mmol) y la solución resultante se agitó a TA durante 12 h. La mezcla de reacción se diluyó con agua y el producto sólido se filtró y se secó. El producto en bruto se purificó por HPLC preparativa para proporcionar el compuesto 215 en forma de un sólido de color blanquecino. Tiempos de retención de HPLC 9,31 min. y 9,25 min. (Métodos A y B respectivamente). MS(ES): m/z = 457 [M+H]⁺; RMN ¹H: (400 MHz, DMSO-d⁶) 5 ppm 9,62 (s, 1H), 7,75 - 7,84 (m, 1H), 7,70 (dd, J= 12,80; 1,76 Hz, 1H), 7,62 (t, J= 1,51 Hz, 1H), 7,31 -7,56 (m, 5H), 4,92 (s, 2H), 4,27 (t, J= 5,27 Hz, 2H), 4,01 (t, J = 5,27 Hz, 2H).

Los compuestos mostrados en la tabla 8 se han preparado de forma similar a la del compuesto 215 por reacción del intermedio 215C con los respectivos fenilcarbamatos de anilinas o con isocianatos fácilmente disponibles.

Esquema 9

Intermedio 223A: 3-carbamo¡l-2-(3-fluoro-5-metilfen¡l)-6,7-d¡h¡drop¡razolo[1,5-a]p¡raz¡n-5(4H)-carbox¡lato de terc-butilo

A una soluc¡ón del ¡ntermed¡o 156C (500 mg, 1,275 mmol) y ác¡do (3-fluoro-5-met¡lfen¡l)borón¡co (294 mg, 1,912 mmol) en 1,4-d¡oxano (10 ml) se le añad¡ó K³PO⁴(812 mg, 3,82 mmol) en agua (1 ml) y mezcla de reacc¡ón se desgas¡f¡có con N²durante 15 m¡n. Se añad¡ó PdCl²(dppf)CH²Cl²(62,5 mg, 0,076 mmol) y la mezcla de reacc¡ón se calentó a 85 °C y se ag¡tó durante 12 h. La mezcla de reacc¡ón se concentró a pres¡ón reduc¡da y el producto en bruto se pur¡f¡có por cromatografía sobre gel de síl¡ce (columna REDISEP® de 24 g, eluyendo con EtOAc al 65 % en hexanos). Las fracc¡ones que contenían el producto se comb¡naron y se evaporaron para proporc¡onar el ¡ntermed¡o 223A en forma de un sólido de color amar¡llo claro (0,4 g, 84 %). MS(ES): m/z = 375,2 [M+H]⁺; RMN ¹H (300 MHz, DMSO-d⁶) 5 ppm 7,34 (d, J= 0,8 Hz, 2H), 7,28 - 7,21 (m, 1H), 7,15 - 7,07 (m, 1H), 7,07 - 7,00 (m, 1H), 4,73 (s, 2H), 4,15 (t, J= 5,3 Hz, 2H), 3,88 -3,80 (m, 2H), 2,35 (s, 3H), 1,45 (s, 9H).

Intermed¡o 223B: 2-(3-fluoro-5-met¡lfen¡l)-4,5,6,7-tetrah¡drop¡razolo[1,5-a]p¡raz¡n-3-carboxam¡da

A una soluc¡ón del ¡ntermed¡o 223A (400 mg, 1,068 mmol) en DCM (4 ml) se le añad¡ó TFA (2,5 ml) a 0 °C y la soluc¡ón resultante se dejó calentar a TA y se agitó durante 2 h. Los volát¡les se ret¡raron a pres¡ón reduc¡da y el producto en bruto se trituró con Et²O (2 x 20 ml). La sal de TFA se suspend¡ó en una soluc¡ón acuosa al 10 % de NaOH y se agitó v¡gorosamente a TA durante 2 h. El producto sólido separado se filtró, se lavó con agua, se destiló azeotróp¡camente con tolueno para proporcionar el intermedio 223B en forma de un sólido de color blanquecino (0,210 g, 71 %). MS(ES): m/z = 275,1 [M+H]⁺; RMN ¹H (300 MHz, DMSO-d⁶) 5 ppm 9,38 (s a, 1H), 7,42 (s a, 1H), 7,33 (s, 1H), 7,24 (d, J= 9,4 Hz, 1H), 7,08 (d, J= 9,4 Hz, 2H), 4,55 (s, 2H), 4,36 (t, J= 5,7 Hz, 2H), 3,69 (t, J= 5,7 Hz, 2H), 2,36 (s, 3H).

Compuesto 223: 2-(3-fluoro-5-met¡lfen¡l)-W5-(4-(tr¡fluoromet¡l)fen¡l)-6,7-d¡h¡drop¡razolo[1,5-a]p¡raz¡n-3,5(4H)-d¡carboxam¡da

A una soluc¡ón de 4-(tr¡fluoromet¡l)an¡l¡na (29,0 mg, 0,180 mmol) y TEA (0,063 ml, 0,449 mmol) en THF (3 ml) se le añad¡ó tr¡fosgeno (26,7 mg, 0,090 mmol) a 0 °C y la soluc¡ón resultante se ag¡tó a la m¡sma temperatura durante 30 m¡n. Se añad¡ó una soluc¡ón del ¡ntermed¡o 223B (25 mg, 0,090 mmol) en THF (2 ml) y la mezcla de reacc¡ón se ag¡tó a TA durante 3 h. La mezcla de reacc¡ón se ¡nact¡vó con agua y se extrajo con acetato de et¡lo (3x5 ml). La capa orgán¡ca comb¡nada se lavó con una soluc¡ón acuosa al 10 % de NaHCO3, salmuera, se secó sobre Na2SO4, se f¡ltró y el f¡ltrado se concentró. El producto en bruto se pur¡f¡có por HPLC preparat¡va para proporc¡onar el compuesto 223 en forma de un sól¡do de color blanco (22 mg, 51 %). T¡empos de retenc¡ón de HPLC 1,65 m¡n. (Método E). MS(ES): m/z = 462 [M+H]+; RMN 1H (400 MHz, DMSO-ds) 5 ppm 9,30 (s, 1H), 7,67 - 7,74 (m, 2H), 7,59 -7,66 (m, 2H), 7,36 (s, 2H), 7,28 (d, J= 10,04 Hz, 1H), 7,13 (s a, 1H), 7,04 (d, J= 9,54 Hz, 1H), 4,91 (s, 2H), 4,24 (t, J= 5,27 Hz, 2H), 4,01 (t, J= 5,27 Hz, 2H), 2,30-2,35 (s, 3h).

Los compuestos mostrados en la tabla 9 se han preparado de forma s¡m¡lar a la del compuesto 223 por reacc¡ón del ¡ntermed¡o 223B con los respect¡vos fen¡lcarbamatos de an¡l¡nas o con ¡soc¡anatos fác¡lmente d¡spon¡bles o generados in-situ.

Tabla 9

(continuación)

(continuación)

Esquema 10

Intermedio 231A: 3-carbamoil-2-(3,4-difluorofenil)-6,7-dihidropirazolo[1,5-a]pirazin-5(4H)-carboxNato de terc-butilo

A una solución del intermedio 156C (1,0 g, 2,55 mmol) y ácido (3,4-difluorofenil)borón¡co (0,604 g, 3,82 mmol) en 1,4-dioxano (10 ml) se le añadió K³PO⁴(1,624 g, 7,65 mmol) en agua (2 ml) y la mezcla de reacción se purgó con nitrógeno durante 5 min. Se añadió PdCl²(dppf)-CH²Cl²(0,125 g, 0,153 mmol), la mezcla de reacción se calentó a 80 °C y se agitó durante 5 h. La mezcla de reacción se inactivó con agua y se extrajo con acetato de etilo (3 x 25 ml). Se lavó la capa orgánica combinada con agua, salmuera, se secó sobre Na²SO⁴, se filtró y el filtrado se concentró. El producto en bruto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (columna REDISEP® de 40 g, eluyendo con MeOH al 5 % en CHCh). Las fracciones que contenían el producto se combinaron y se evaporaron para proporcionar el intermedio 231A en forma de un sólido de color blanco (0,6 g, 62 %). MS(ES): m/z = 379 [M+H]⁺; RMN ¹H (400 MHz, DMSO-d^s) 5 ppm 7,69 (ddd, J= 12,30, 8,03, 1,76 Hz, 1H), 7,42 - 7,58 (m, 2H), 7,30 (s a, 1H), 7,16 (s a, 1H), 4,74 (s, 2H), 4,11 - 4,22 (m, 2H), 3,85 (d, J= 5,52 Hz, 2H), 1,46 (s, 9).

Intermedio 231B: 2-(3,4-d¡ofluorofen¡l)-4,5,6,7-tetrah¡drop¡razolo[1,5-a]pirazin-3-carboxamida

A la solución del intermedio 231A (0,5 g, 1,321 mmol) en DCM (10 ml) a 0 °C se le añadió TFA (0,509 ml, 6,61 mmol) y la solución resultante se agitó a TA durante 3 h. Los volátiles se retiraron a presión reducida y el residuo se suspendió en una solución acuosa al 10 % de NaOH (10 ml) y se agitó durante 30 min. El sólido se filtró a través de un embudo Buchner, se aclaró con éter dietílico y se secó para proporcionar el intermedio 231B (0,32 g, 87 %). MS(ES): m/z = 279 [M+H]⁺; RMN ¹H (300 MHz, DMSO-d^s) 5 ppm 7,71 (ddd, J= 12,28, 7,93, 2,08 Hz, 1H), 7,39 -7,60 (m, 1H), 6,99 - 7,31 (m, 1H), 3,94 -4,07 (m, 2H), 3,26 -3,53 (m, 4H), 3,11 (c, J= 5,67 Hz, 1H).

Compuesto 231: 2-(3,4-d¡ofluorofen¡l)-W5-(4-(tr¡fluoromet¡l)fen¡l)-6,7-d¡h¡drop¡razolo[1,5-a]pirazin-3,5(4H)-dicarboxamida

A una solución de 4-(tr¡fluoromet¡l)an¡l¡na (29,0 mg, 0,180 mmol) y TEA (0,063 ml, 0,449 mmol) en THF (3 ml) se le añadió trifosgeno (26,7 mg, 0,090 mmol) a 0 °C y la solución resultante se agitó a la misma temperatura durante 30 min. Se añadió una solución del intermedio 231B (25 mg, 0,090 mmol) en THF (2 ml) y la mezcla de reacción se agitó a TA durante 3 h. La mezcla de reacción se inactivó con agua y se extrajo con acetato de etilo (3x5 ml). La capa orgánica combinada se lavó con una solución acuosa al 10 % de NaHCO3, salmuera, se secó sobre Na2SO4, se filtró y el filtrado se concentró. El producto en bruto se purificó por HPLC preparativa para proporcionar el compuesto 231 en forma de un sólido de color blanco (21 mg, 50 %). El tiempo de retención de la HPFC es 1,58 min. (Método E). MS(ES): m/z = 466 [M+H]+; RMN 1H (400 MHz, DMSO-ds) 5 ppm 9,31 (s, 1H), 7,66 - 7,78 (m, 3H), 7,62 (s, 2H), 7,44 - 7,59 (m, 2H), 7,37 (s a, 1H), 7,20 (s a, 1H), 4,92 (s, 2h), 4,25 (d, J= 10,54 Hz, 2H), 4,01 (d, J= 10,54 Hz, 2H).

Los compuestos mostrados en la tabla 10 se han preparado de forma similar a la del compuesto 231 mediante acoplamiento del intermedio 231B con diversos isocianatos fácilmente disponibles o generados in-situ a partir de las respectivas anilinas.

Tabla 10

(continuación)

Esquema 11

Intermedio 239A: 3-carbamoil-2-(4-fluoro-3-metilfenil)-6,7-dihidropirazolo[1,5-a]pirazin-5(4H)-carboxilato de tercbutilo

A una solución del intermedio 156C (500 mg, 1,275 mmol) y ácido (4-fluoro-3-metilfenil)borónico (294 mg, 1,912 mmol) en 1,4-dioxano (10 ml) se le añadió K3PO4 (812 mg, 3,82 mmol) en agua (0,4 ml) y la mezcla de reacción se desgasificó con N2 durante 15 min. Se añadió PdCl2(dppf)CH2Cl2 (62,5 mg, 0,076 mmol) y la mezcla de reacción se calentó a 85 °C y se agitó durante 14 h. La mezcla de reacción se concentró a presión reducida y el producto en bruto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (columna REDISEP® de 24 g, eluyendo con EtOAc al 65 % en hexanos). Las fracciones que contenían el producto se combinaron y se evaporaron para proporcionar el intermedio 239A en forma de un sólido de color amarillo claro (0,44 g, 92 %). RMN 1H (300 MHz, DMSO-ds) 5 ppm 7,54 (d, J= 7,2 Hz, 1H), 7,47 (ddd, J= 2,3, 5,4, 8,2 Hz, 1H), 7,24 (s a, 1H), 7,22 - 7,13 (m, 1H), 6,88 (s a, 1H), 4,73 (s, 2H), 4,14 (t, J= 5,5 Hz, 2H), 3,84 (t, J= 5,3 Hz, 2H), 2,26 (d, J= 1,5 Hz, 3H), 1,45 (s, 9H).

Intermedio 239B: 2-(4-fluoro-3-metilfenil)-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]pirazin-3-carboxamida

A una solución del intermedio 239A (440 mg, 1,175 mmol) en DCM (5 ml) se le añadió TFA (4 ml) a 0 °C y la solución resultante se dejó calentar a TA y se agitó durante 2 h. Los volátiles se retiraron bajo presión y el residuo se trituró con Et²O (2 x 20 ml). El compuesto sólido se suspendió en una solución acuosa al 10 % de NaOH y se agitó vigorosamente a TA durante 2 h. El sólido se filtró, se lavó con agua y se destiló azeotrópicamente con tolueno para proporcionar el intermedio 239B en forma de un sólido de color pardo (0,250 g, 77 %). MS(ES): m/z = 275,2 [M+H]⁺. RMN ¹H (300 MHz, DMSO-d^s) 5 ppm 7,56 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 7,49 (ddd, J= 2,3, 5,3, 8,3 Hz, 1H), 7,21 - 7,08 (m, 2H), 6,85 (s a, 1H), 4,06 -3,95 (m, 4H), 3,11 (d, J= 4,9 Hz, 2H), 2,62 (s a, 1H), 2,25 (d, J = 1,5 Hz, 3H).

Compuesto 239: W6-(4-ciano-3-metilfenil)-2-(4-fluoro-3-metilfenil)-6,7-dihidropirazolo[1,5-a]pirazin-3,5(4H)-dicarboxamida

A una solución en agitación del intermedio 239B (30 mg, 0,109 mmol) en DMSO (1 ml) se le añadió (4-ciano-3-metilfenil)carbamato de fenilo (41,4 mg, 0,164 mmol) y la solución resultante se agitó a TA durante 12 h. La mezcla de reacción se diluyó con agua y un producto sólido se separó, se aisló y se purificó por HPLC preparativa de fase inversa para proporcionar el compuesto 239 en forma de un sólido de color blanco (23 mg, 48 %). Los tiempos de retención de la HPLC son 8,47 min. y 8,96 min. (Métodos A y B respectivamente). ^mS(ES): m/z = 433 [M+H]+; RMN 1H: (400 MHz, DMSO-de) 5 ppm 9,32 (s, 1H), 7,65 (d, J= 8,53 Hz, 1H), 7,57 (s, 2H), 7,45 - 7,53 (m, 2H), 7,30 (s a, 1H), 7,14 - 7,23 (m, 1H), 6,91 (s a, 1H), 4,90 (s, 2H), 4,22 (t, J= 5,27 Hz, 2H), 4,00 (t, J= 5,27 Hz, 2H), 2,40 - 2,47 (m, 3h), 2,27 (d, J= 1,51 Hz, 3H).

Los compuestos mostrados en la tabla 11 se han preparado de forma similar a la del compuesto 239 por reacción del intermedio 239B con los respectivos fenilcarbamatos de anilinas o con isocianatos fácilmente disponibles o generados in-situ.

Esquema 12

Intermedio 249A: 3-carbamo¡l-2-(3-cloro-4-met¡lfen¡l)-6,7-d¡h¡drop¡razolo[1,5-a]p¡raz¡n-5(4H)-carbox¡lato de terc-butilo

A una soluc¡ón del ¡ntermed¡o 156C (1 g, 2,55 mmol) en 1,4-d¡oxano (15 ml) y agua (1,5 ml) se le añad¡ó ác¡do (3-^doro-4-met¡lfen¡l)borón¡co (0,652 g, 3,82 mmol), K³PO⁴(1,624 g, 7,65 mmol) y la mezcla de reacc¡ón se purgó con N²durante 5 m¡n. Se añad¡ó aducto de PdCl²(dppf)-CH²Cl²(0,125 g, 0,153 mmol) y la mezcla de reacc¡ón se calentó a 80 °C y se ag¡tó durante 5 h. La mezcla de reacc¡ón se enfr¡ó a TA, se f¡ltró a través de un lecho de CELITE® y el filtrado se concentró al vacío. El producto en bruto se d¡luyó con agua y se extrajo con acetato de et¡lo (3 x 25 ml). La capa orgán¡ca comb¡nada se lavó con salmuera, se secó sobre Na²SO⁴y se concentró. El producto en bruto se pur¡f¡có por cromatografía sobre gel de sílice (columna REDISEP® de 40 g, eluyendo con MeOH al 5 % en CHCh). Las fracc¡ones que contenían el producto se comb¡naron y se evaporaron para proporc¡onar el compuesto 249A en forma de un sól¡do de color pardo pálido (0,68 g, 70 %). MS(ES): m/z = 391 [M+1]⁺; RMN ¹H (300 MHz, DMSO-d^e) 5 ppm 7,69 (d, J= 1,5 Hz, 1H), 7,56 -7,51 (m, 1H), 7,40 (s, 1H), 7,34 - 7,26 (m, 1H), 7,16 - 7,06 (m, 1H), 4,73 (s, 2H), 4,15 (s, 2H), 3,84 (s, 2H), 2,35 (s, 3H), 1,45 (s, 9H).

Intermed¡o 249B: 2-(3-cloro-4-met¡lfen¡l)-4,5,6,7-tetrah¡drop¡razolo[1,5-a]p¡raz¡n-3-carboxam¡da

A una soluc¡ón del ¡ntermed¡o 249A (680 mg, 1,740 mmol) en DCM (5 ml) se le añad¡ó TFA (2,011 ml, 26,1 mmol) gota a gota a 0 °C y la soluc¡ón resultante se calentó a TA y se agitó durante 4 h. La mezcla de reacc¡ón se concentró y el producto en bruto se suspend¡ó en una soluc¡ón acuosa al 20 % de NaOH a 0 °C y se agitó a TA durante 2 h. El sólido separado se filtró y se secó para proporc¡onar el ¡ntermed¡o 249B en forma de un sólido de color gris (450 mg, 87 %). MS(ES): m/z = 291 [M+1]⁺; RMN ¹H (400 MHz, DMSO-d^e) 5 ppm 7,71 (d, J= 1,5 Hz, 1H), 7,55 (dd, J =7,8, 1,8 Hz, 1H), 7,36 (d, J= 8,0 Hz, 1H), 7,25 - 6 ,97 (m, 2H), 4 ,06 -3,91 (m, 4H), 3,12 (s a, 2H), 2 ,69 -2,58 (m, 1H), 2,35 (s, 3H).

Compuesto 249: 2-(3-cloro-4-met¡lfen¡l)-W5-(4-c¡ano-3-met¡lfen¡l)-6,7-d¡h¡drop¡razolo[1,5-a]p¡raz¡n-3,5(4H)-d¡carboxam¡da

A una soluc¡ón en ag¡tac¡ón del ¡ntermed¡o 249B (30 mg, 0,103 mmol) en DMSO (3 ml) se añad¡ó le (4-c¡ano-3-met¡lfen¡l)carbamato de fen¡lo (31,2 mg, 0,124 mmol) y la soluc¡ón resultante se ag¡tó a TA durante 8 h. La mezcla de reacc¡ón se d¡luyó con agua, se ag¡tó v¡gorosamente durante 5 m¡n y el producto en bruto separado se f¡ltró y se secó al vacío. El producto en bruto se pur¡f¡có por HPLC preparat¡va para proporc¡onar el compuesto 249 en forma de un sól¡do de color blanquec¡no (25,97 mg, 56 %). T¡empos de retenc¡ón de la HPLC 8,79 m¡n y 9,72 m¡n. (Métodos B y A respect¡vamente). MS(ES): m/z = 449 [M+1]+; RMN 1H: (400 MHz, DMSO-ds) 5 ppm 9,32 (s, 1H), 7,71 (d, J= 1,51 Hz, 1H), 7,65 (d, J= 8,53 Hz, 1H), 7,45 - 7,59 (m, 3H), 7,30 - 7,44 (m, 2H), 7,14 (s a, 1H), 4,90 (s, 2H), 4,24 (t, J= 5,27 Hz, 2H), 4,00 (t, J= 5,27 Hz, 2H), 2,43 (s, 3H), 2,31 - 2,39 (m, 3H).

Los compuestos mostrados en la tabla 12 se han preparado de forma s¡m¡lar a la del compuesto 249 por reacc¡ón del ¡ntermed¡o 249B con los respect¡vos fen¡lcarbamatos de an¡l¡nas o con ¡soc¡anatos fác¡lmente d¡spon¡bles o generados in-situ.

Tabla 12

(continuación)

(continuación)

Esquema 13

Intermedio 258A: 3-doro-4-cidopropilanilina

A una solución de 4-bromo-3-cloroanilina (3 g, 14,53 mmol) y ácido cidopropilborónico (1,872 g, 21,80 mmol) en 1,4-dioxano (30 ml) se le añadió Na²CO³(4,62 g, 43,6 mmol) en agua (0,4 ml) y la mezcla de reacción se desgasificó con N²durante 15 min. Se añadió PdCh(dppf}CH²Ch (1,187 g, 1,453 mmol) y la mezcla de reacción se calentó a 85 °C y se agitó durante 16 h. La mezcla de reacción se concentró a presión reducida y el producto en bruto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (columna REDISEP® de 40 g, eluyendo con EtOAc al 70 % en hexanos). Las fracciones que contenían el producto se combinaron y se evaporaron para proporcionar el intermedio 258A en forma de un semisólido incoloro (1,2 g, 49 %). RMN ¹H (400 MHz, DMSO-d^s) 5 ppm 6,70 (d, J= 8,5 Hz, 1H), 6,62 - 6,60 (m, 1H), 6,43 (dd, J= 2,3; 8,3 Hz, 1H), 5,15 (s, 2H), 1,90 (tt, J = 5,1, 8,4 Hz, 1H), 0,87 - 0,81 (m, 2H), 0,53 - 0,48 (m, 2H).

Intermedio 258B: 2-cloro-1-ciclopropil-4-yodobenceno

A una solución de 258A (1 g, 5,97 mmol) en HCl 6 N (5 ml) se le añadió NaNCO²(0,453 g, 6,56 mmol) en agua (1 ml) a 0 °C y la mezcla de reacción se agitó a la misma temperatura durante 45 min. Se añadió KI (1,981 g, 11,93 mmol) y la mezcla de reacción y se agitó a 0 °C durante otros 15 min. La mezcla de reacción se calentó a TA y se extrajo con Et²O (3x10 ml). La capa orgánica combinada se lavó con una solución saturada acuosa de NaHSO³, se secó sobre Na²SO⁴, se filtró y el filtrado se concentró para proporcionar el intermedio 258B en forma de un semisólido de color pardo (1,3 g, 78 %). RMN ¹H (400 MHz, DMSO-d^s) 5 ppm 7,77 (d, J= 2,0 Hz, 1H), 7,58 (dd, J= 1,5; 8,0 Hz, 1H), 6,84 - 6,79 (m, 1H), 2,09 (tt, J = 5,4, 8,4 Hz, 1H), 1,04 - 0,98 (m, 2H), 0,72 - 0,66 (m, 2H).

Intermedio 258C: 2-(3-cloro-4-ciclopropilfenil)-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolano

A una solución del intermedio 258B (1,3 g, 4,67 mmol) y bis(pinacolato) diboro (1,422 g, 5,60 mmol) en dioxano (20 ml) se le añadió KOAc (1,374 g, 14,00 mmol) y la mezcla de reacción se desgasificó con N²gaseoso durante 15 min. Se añadió PdC^h(PPh³)²(0,197 g, 0,280 mmol) y mezcla de reacción se calentó a 100 °C y se agitó durante 12 h. La mezcla de reacción se concentró a presión reducida y el producto en bruto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (columna REDISEP® de 40 g, eluyendo con EtOAc al 8 % en hexanos). Las fracciones que contenían el producto se combinaron y se evaporaron para proporcionar el intermedio 258C en forma de un semisólido incoloro (1,2 g, 92 %). RMN ¹H (400 MHz, DMSO-d^s) 5 ppm 7,60 - 7,58 (m, 1H), 7,53 - 7,48 (m, 1H), 7,02 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 2,19 (tt, J = 5,1,8,4 Hz, 1H), 1,17 (s, 12H), 1,08 - 1,02 (m, 2H), 0,76 - 0,70 (m, 2H).

Intermedio 258D: 3-carbamo¡l-2-(3-cloro-4-c¡cloprop¡lfen¡l)-6,7-d¡h¡drop¡razolo[1,5-a]p¡raz¡n-5(4H)-carbox¡lato de terc-butilo

A una solución del intermedio 156C (500 mg, 1,275 mmol) y 258C (533 mg, 1,912 mmol) en 1,4-dioxano (3 ml) se le añadió K³PO⁴(812 mg, 3,82 mmol) en agua (0,4 ml) y la mezcla de reacción se desgasificó con N²durante 15 min. Se añadió aducto de PdC^h(dppf)CH²Cl²(62,5 mg, 0,076 mmol) y la mezcla de reacción se calentó a 85 °C y se agitó durante 12 h. La mezcla de reacción se concentró a presión reducida y el producto en bruto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (columna REDISEP® de 24 g, eluyendo con EtOAc al 60 % en hexanos). Las fracciones que contenían el producto se combinaron y se evaporaron para proporcionar el intermedio 258D en forma de un sólido de color blanquecino (350 mg, 66 %). MS(ES): m/z = 417,2 [M+H]⁺; RMN ¹H (400 MHz, DMSO-d⁶) 5 ppm 7,69 (d, J= 2,0 Hz, 1H), 7,53 (dd, J = 2,0, 8,0 Hz, 1H), 7,35 - 7,09 (m, 2H), 7,06 (d, J= 8,0 Hz, 1H), 4,73 (s, 2H), 4,15 (t, J= 5,5 Hz, 2H), 3,87 -3,81 (m, 2H), 2,21 - 2,12 (m, 1H), 1,45 (s, 9h), 1,06 - 1,00 (m, 2H), 0,77 - 0,71 (m, 2H).

Intermedio 258E: Sal del TFA de la 2-(3-cloro-4-cicloprop¡lfen¡l)-4,5,6,7-tetrah¡drop¡razolo[1,5-a]p¡raz¡n-3-carboxamida

A una solución del intermedio 258D (350 mg, 0,840 mmol) en DCM (7 ml) se le añadió TFA (5 ml) a 0 °C y la solución resultante se dejó calentar a TA y se agitó durante 2 h. Los volátiles se retiraron a presión reducida y el residuo se trituró con Et²O para proporcionar la sal del TFA del intermedio 258E en forma de un sólido de color blanquecino (300 mg, 83 %). MS(ES): m/z = 317,2 [M+H]⁺; RMN ¹H (300 MHz, DMSO-d⁶) 5 ppm 9,43 (s a, 1H), 7,68 (d, J= 1,9 Hz, 1H), 7,52 (dd, J= 1,7; 8,1 Hz, 1H), 7,40 (s a, 1H), 7,15 (s a, 1H), 7,08 (d, J= 8,3 Hz, 1H), 4,55 (s, 2H), 4,40 - 4,32 (m, 2h), 3,69 (t, J= 5,9 Hz, 2H), 2,22 - 2,12 (m, 1H), 1,08 - 1,00 (m, 2H), 0,78 - 0,70 (m, 2H).

Compuesto 258: 2-(3-cloro-4-c¡cloprop¡lfen¡l)-W5-(4-c¡anofen¡l)-6,7-d¡h¡drop¡razolo[1,5-a]p¡raz¡n-3,5(4H)-dicarboxamida

A una solución del intermedio 258E (80 mg, 0,186 mmol) en THF (5 ml) se le añadió TEA (0,259 ml, 1,857 mmol) y la solución resultante se agitó a TA durante 30 min. Se añadió 4-isocianatobenzonitrilo (26,8 mg, 0,186 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a TA durante 14 h. La mezcla de reacción se diluyó con EtOAc, se lavó con agua, salmuera, se secó sobre Na²SO⁴, se filtró y el filtrado se concentró. El producto en bruto se purificó por HPLC preparativa para proporcionar el compuesto 258 en forma de un sólido de color blanquecino (0,02 g, 22 %). Tiempos de retención de la HPLC 1,571 min. y 1,556 min. (Métodos J y K respectivamente). ^{M S ( e S ) :}m/z = 461,2 [M+H]⁺; RMN ¹H (400 MHz, DMSO-d^s) 5 ppm 9,39 (s, 1H), 7,62 - 7,80 (m, 5H), 7,52 - 7,59 (m, 1H), 7,37 (s a, 1H), 7,17 (s a, 1H), 7,06 (d, J= 8,03 Hz, 1H), 4,90 (s, 2H), 4,24 (t, J= 5,27 Hz, 2H), 4,00 (t, J= 5,27 Hz, ^{2 h ) ,}2,17 (ddd, J = 13,55, 8,28, 5,27 Hz, 1H), 0,93 - 1,10 (m, 2H), 0,66 - 0,82 (m, 2H).

Esquema 14

Intermedio 259A: 2-(3,5-dicloro-4-fluorofenil)-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolano

A una solución en agitación de 5-bromo-1,3-dicloro-2-fluorobenceno (1,5 g, 6,15 mmol) en 1,4-dioxano (3,0 ml) se le añadió B²Pin²(2,343 g, 9,23 mmol), PdC^h(dppf}-CH²C^h(0,301 g, 0,369 mmol), KOAc (1,509 g, 15,38 mmol) y la mezcla de reacción se desgasificó con nitrógeno durante 10 min. Después, la mezcla de reacción se calentó a 100 °C y se agitó durante 4 h. La mezcla de reacción se diluyó con acetato de etilo, se filtró a través de CELITE® y el filtrado se lavó con agua, se secó sobre sulfato sódico, se filtró y el filtrado se concentró. El compuesto en bruto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (columna REDISEP® de 24 g, eluyendo con EtOAc al 3 % en hexanos). Las fracciones que contenían el producto se combinaron y se evaporaron para proporcionar el intermedio 259A en forma de un aceite incoloro (1,3 g, 72 %). RMN ¹H (400 MHz, DMSO-d^s) 5 ppm 7,71 (d, J= 6,53 Hz, 2H), 1,29 - 1,32 (m, 12H).

Intermedio 259B: 3-carbamo¡l-2-(3,5-d¡cloro-4-fluorofen¡l)-6,7-d¡h¡drop¡razolo[1,5-a]p¡raz¡n-5(4H)-carbox¡lato de terc-butilo

A una suspens¡ón en ag¡tac¡ón del ¡ntermed¡o 156C (1,2 g, 3,06 mmol) en 1,4-d¡oxano (10,0 ml) se le añad¡ó el ¡ntermed¡o 259A (1,335 g, 4,59 mmol), K³PO⁴(1,948 g, 9,18 mmol) y la mezcla de reacc¡ón se desgas¡f¡có durante 10 m¡n. Se añad¡ó PdCl2(dppf)-CH²Cl²(0,150 g, 0,184 mmol) y la mezcla de reacc¡ón se calentó a 80 °C y se ag¡tó durante 8 h. La mezcla de reacc¡ón se d¡luyó con acetato de et¡lo (20 ml), se lavó con agua, salmuera, se secó sobre Na²SO⁴, se f¡ltró y el f¡ltrado se concentró. El compuesto en bruto se pur¡f¡có por cromatografía sobre gel de síl¡ce (columna REDISE^p® de 24 g, eluyendo con EtOAc al 60 % en hexanos). Las fracc¡ones que contenían el producto se comb¡naron y se evaporaron para proporc¡onar el ¡ntermed¡o 259B en forma de un sól¡do de color blanco (1,1 g, 80 %). MS(ES): m/z = 429 [M+H]⁺; RMN ¹H (400 MHz, DMSO-d⁶) 5 ppm 7,85 (d, J= 6,53 Hz, 2H), 7,35 (s a, 2H), 4,75 (s, 2H), 4,17 (t, J= 5,52 Hz, 2H), 3,84 (t, J= 5,52 Hz, 2H), 1,45 (s, 9H).

Intermed¡o 259C: 2-(3,5-d¡cloro-4-fluorofen¡l)-4,5,6,7-tetrah¡drop¡razolo[1,5-a]p¡raz¡n-3-carboxam¡da

A una soluc¡ón del ¡ntermed¡o 259B (1,1 g, 2,56 mmol) en DCM (5,0 ml) se le añad¡ó TFA (10 ml, 130 mmol) y la soluc¡ón resultante se ag¡tó a TA durante 3 h. Los volát¡les se el¡m¡naron a pres¡ón reduc¡da. Al res¡duo se le añad¡ó una soluc¡ón saturada acuosa de NaHCO3 y se ag¡tó durante 1 h. El sól¡do se f¡ltró y se secó al vacío para proporc¡onar el ¡ntermed¡o 259C en forma de un sól¡do de color blanquec¡no (0,75 g, 89 %). MS(ES): m/z = 329 [M+H]- ; RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 7,89 (d, J= 6,53 Hz, 2H), 7,27 (s a, 2H), 3,95 - 4,13 (m, 4H), 3,13 (t, J= 5,52 Hz, 2H), 2,68 (s a, 1H).

Compuesto 259: N5-(4-c¡anofen¡l)-2-(3,5-d¡cloro-4-fluorofen¡l)-6,7-d¡h¡drop¡razolo[1,5-a]p¡raz¡n-3,5(4H)-d¡carboxam¡da

A una soluc¡ón del ¡ntermed¡o 259C (0,1 g, 0,304 mmol) en THF (2 ml) se le añad¡ó TEA (0,085 ml, 0,608 mmol) y la soluc¡ón resultante se ag¡tó a TA durante 30 m¡n. Se añad¡ó 4-¡soc¡anatobenzon¡tr¡lo (0,053 g, 0,365 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a TA durante 2 h. La mezcla de reacción se diluyó con EtOAc, se lavó con agua, salmuera, se secó sobre Na2SO4, se filtró y el filtrado se concentró. El producto en bruto se purificó por HPLC preparativa para proporcionar el compuesto 259 en forma de un sólido de color blanquecino (0,02 g, 22 %). Tiempos de retención de ^{H p L C}10,01 min. y 9,05 min. (Métodos A y B respectivamente). ^{M S ( E s ) :} m/z = 473 [M+H]+; RMN 1H (400 MHz, DMSO-de) 5 ppm 9,39 (s, 1H), 7,88 (d, J= 6,53 Hz, 2H), 7,63 - 7,76 (m, 4H), 7,26 - 7,51 (m, 2H), 4,93 (s, 2H), 4,26 (t, J= 5,52 Hz, 2H), 4,01 (t, J= 5,52 Hz, 2H).

Los compuestos mostrados en la tabla 13 se han preparado de forma similar al compuesto 259 mediante acoplamiento del intermedio 259C con diversos isocianatos fácilmente disponibles o generados in-situ a partir de las respectivas anilinas.

Esquema 15

Intermedio 265A: 3-bromo-5-doro-W,W-d¡met¡lan¡l¡na

A una solución en agitación de 3-bromo-5-cloroanilina (0,3 g, 1,453 mmol) en acetonitrilo (5,0 ml) se le añadió solución acuosa al 37 % de formaldehído (1,082 ml, 14,53 mmol) seguido de cianoborohidruro sódico (0,274 g, 4,36 mmol) a TA. Se añadió ácido acético (0,3 ml, 5,24 mmol) durante un periodo de 10 min y la mezcla de reacción se agitó a TA durante 16 h. A la mezcla de reacción se le añadió una solución acuosa al 10 % de NaOH y se extrajo con acetato de etilo (2 x 15 ml). Se lavó la capa orgánica combinada con agua, salmuera, se secó sobre sulfato sódico, se filtró y el filtrado se concentró. El compuesto en bruto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (columna REDISEP® de 12 g, eluyendo con EtOAc al 20 % en hexanos). Las fracciones que contenían el producto se combinaron y se evaporaron para proporcionar el intermedio 265A en forma de un sólido de color amarillo claro (0,25 g, 73 %). RMN 1H (300 MHz, cloroformo-d) 5 ppm 6,83 (t, J= 1,70 Hz, 1H), 6,68 - 6,72 (m, 1H), 6,56 - 6,60 (m, 1H), 2,96 (s, 6H).

Intermedio 265B: 3-cloro-W,W-5-(4,4,5,5-tetrametil-1 ^^-dioxaborolan^-i^anilina

A una solución en agitación del intermedio 265A (0,25 g, 1,066 mmol) en 1,4-dioxano (8 ml) se le añadió B2Pin2 (0,677 g, 2,67 mmol), KOAc (0,262 g, 2,67 mmol), aducto de PdCl2(dppf)2-CH2Ch (0,052 g, 0,064 mmol) y la mezcla de reacción se purgó con nitrógeno durante 5 min. Después, la mezcla de reacción se calentó a 90 °C y se agitó 16 h. La mezcla de reacción se concentró y el residuo se extrajo con acetato de etilo (3 x 15 ml). Se lavó la capa orgánica combinada con agua, salmuera, se secó sobre Na2SO4, se filtró y el filtrado se concentró. El producto en bruto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (columna REDISEP® de 24 g, eluyendo con EtOAc al 2 % en hexanos). Las fracciones que contenían el producto se combinaron y se evaporaron para proporcionar el intermedio 265B en forma de un sólido de color blanquecino (0,26 g, 87 %). MS(ES): m/z = 200 [M-82)]; RMN 1H (400 MHz, cloroformo-d) 5 ppm 7,11 (d, J= 2,01 Hz, 1H), 7,01 (d, J= 2,01 Hz, 1H), 6,70 - 6,78 (m, 1H), 2,96 (s, 6H), 1,31 - 1,35 (m, 12H).

Intermedio 265C: 3-carbamoil-2-(3-cloro-5-(dimetilamino)fenil)-6,7-dihidropirazolo[1,5-a]pirazin-5(4H)-carboxilato de tere-butilo

A una suspensión en agitación del intermedio 156C (1,0 g, 2,55 mmol) en 1,4-dioxano (20,0 ml) se le añadió el intermedio 265B (1,077 g, 3,82 mmol), K³PO⁴(1,624 g, 7,65 mmol), PdC^h(dppf)-CH²Cl²(0,125 g, 0,153 mmol) y la mezcla de reacción se purgó con nitrógeno durante 10 min. Después, la mezcla de reacción se calentó a 80 °C y se agitó durante 8 h. La mezcla de reacción se concentró y se extrajo con acetato de etilo (3 x 20 ml). Se lavó la capa orgánica combinada con agua, salmuera, se secó sobre Na²SO⁴, se filtró y el filtrado se concentró. El producto en bruto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (columna REDISEP® de 24 g, eluyendo con MeOH al 1 % en cloroformo). Las fracciones que contenían el producto se combinaron y se evaporaron para proporcionar el intermedio 265C en forma de un sólido de color pardo (0,55 g, 51 %). MS(ES): m/z = 420 [M+H]⁺; NMR ¹H (400 MHz, DMSO-d^s) 5 ppm 7,26 - 7,35 (m, 1H), 6,87 - 7,01 (m, 3H), 6,71 (t, J= 2,01 Hz, 1H), 4,73 (s, 2H), 4,15 (t, J =5,27 Hz, 2H), 3,84 (t, J= 5,52 Hz, 2H), 2,93 (s, 6H), 1,46 (s, 9H).

Intermedio 265D: 2-(3-cloro-5-(dimetilamino)fenil)-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]pirazin-3-carboxamida

A una solución del intermedio 265C (0,55 g, 1,310 mmol) en DCM (10 ml) se le añadió TFA (2,027 ml, 26,3 mmol) gota a gota a 0 °C y la solución resultante se calentó a TA y se agitó durante 4 h. La mezcla de reacción se concentró y al producto en bruto se le añadió una solución acuosa saturada de NaHCO³a 0 °C y se agitó a TA durante 1 h. El sólido separado se filtró y se secó para proporcionar el intermedio 265D en forma de un sólido de color pardo (0,24 g, 57 %). MS(ES): m/z = 320 [M+H]⁺; RMN ¹H (400 MHz, DMSO-d^s) 5 ppm 7,20 (s a, 1H), 6,86 -7,04 (m, 3H), 6,68 (t, J= 2,01 Hz, 1H), 3,88 - 4,04 (m, 4H), 3,12 (d, J = 4,02 Hz, 2H), 2,93 (s, 6 H) 2,50 (s a, 1H).

Compuesto 265: 2-(3-cloro-5-(d¡met¡lam¡no)fen¡l)-W5-(4-c¡anofen¡l)-6,7-d¡h¡drop¡razolo[1,5-a]pirazin-3,5(4H)-dicarboxamida

El compuesto 265 se sintetizó a partir del intermedio 265D usando una secuencia sintética análoga a la preparación del compuesto 259. Tiempos de retención de HPLC 8,19 min. y 8,53 min. (Métodos A y B respectivamente). MS(ES): m/z = 464 [M+H]+; RMN 1H (400 MHz, DMSO-ds) 5 ppm 9,41 (s, 1H), 7,79 - 7,62 (m, 4H), 7,37 (s a, 1H), 7,07 - 6,89 (m, 3H), 6,72 (t, J= 2,0 Hz, 1H), 4,90 (s, 2H), 4,24 (t, J= 5,3 Hz, 2H), 4,06 -3,94 (m, 2H), 3,01 -2,86 (s, 6H).

Los compuestos mostrados en la tabla 14 se han preparado de forma similar al compuesto 265 mediante acoplamiento del intermedio 265D con diversos isocianatos fácilmente disponibles o generados in-situ a partir de las respectivas anilinas.

Tabla 14

Intermedio 270A: 2-yodo-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]pirazin-3-carboxamida

A una solución en agitación del intermedio 156C (1,500 g, 3,82 mmol) en DCM (15 ml) se le añadió TFA (8 ml) lentamente a TA y la mezcla de reacción se dejó en agitación a TA durante 2 h. La mezcla de reacción se diluyó con una solución acuosa al 10 % de NaOH y el sólido formado se filtró a través de un embudo Buchner, se secó al vacío para proporcionar el intermedio 270A (0,95 g, 85 %) en forma de un sólido de color blanquecino. MS(ES): m/z = 293 [M+H]⁺; RMN ¹H (400 MHz, DMSO-d^s) 5 ppm 7,23 (s a, 1H), 6,78 (s a, 1H), 4,02 (d, J= 5,5 Hz, 2H), 3,97 (t, J= 5,5 Hz, 2H), 3,06 (c, J = 5,0 Hz, 2H), 2,59 (t, J = 5,5 Hz, 1H).

Intermedio 270B: W5-(4-cianofenil)-2-yodo-6,7-dihidropirazolo[1,5-a]pirazin-3,5(4H)-dicarboxamida

A una solución del intermedio 270A (2,5 g, 6,16 mmol) en THF (100 ml) se le añadió 4-cianofenilisocianato (1,065 g, 7,39 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 h. La mezcla de reacción se concentró a presión reducida y el residuo se disolvió en DCM (50 ml), se lavó con una solución acuosa saturada de NaHCO³, agua y salmuera. La capa orgánica se secó sobre Na²SO⁴, se filtró y el filtrado se concentró. El producto en bruto se trituró con éter dietílico (3 x 50 ml). El sólido se filtró a través de un embudo Buchner y se aclaró con hexano para proporcionar el intermedio 270B en forma de un sólido de color blanco (2,5 g, 93 %). MS(ES): m/z = 437 [M+H]⁺; RMN ¹H (400 MHz, DMSO-d^s) 5 ppm 9,36 (s, 1H), 7,59 - 7,77 (m, 4H), 7,43 (s a, 1H), 6,89 (s a, 1H), 4,90 (s, 2H), 4,21 (t, J= 5,27 Hz, 2H), 3,95 (d, J= 5,52 Hz, 2H).

Compuesto 270 (referencia): 2-(5-cloropiridin-3-il)-W5-(4-cianofenil)-6,7-dihidropirazolo[1,5-a]]pirazin-3,5(4H-dicarboxamida

A una solución del intermedio 270B (40 mg, 0,092 mmol), 3-cloro-5-(4,4,5,5- tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)piridina (32,9 mg, 0,138 mmol) en 1,4-dioxano (2 ml) se le añadió K³PO⁴(58,4 mg, 0,275 mmol) en agua (0,5 ml) y la mezcla de reacción resultante se purgó con N²durante 5 min. Se añadió aducto de PdCl²(dppf)-CH²Cl²(4,49 mg, 5,50 pmol), la mezcla de reacción se calentó a 80 °C y se agitó durante 5 h. La mezcla de reacción se inactivó con agua y se extrajo con acetato de etilo (3 x 5 ml). Se lavó la capa orgánica combinada con agua, salmuera, se secó sobre Na²SO⁴, se filtró y el filtrado se concentró para proporcionar el producto en bruto, el cual se purificó por HPLC preparativa para proporcionar el compuesto 270 en forma de un sólido de color blanquecino (20 mg, 51 %). Los tiempos de retención de la HPLC son 7,01 min. y 6,85 min. (Métodos A y B). MS(ES): m/z = 422 [M+H]⁺; r Mn ¹H (400 MHz, DMSO-d^s) 5 ppm 9,41 (s, 1H), 8,80 (d, J= 1,51 Hz, 1H), 8,63 (d, J = 2,51 Hz, 1H), 8,15 (t, J= 2,01 Hz, 1H), 7,71 (c, J = 9,04 Hz, 4H), 7,37 (s a, 2H), 4,95 (s, 2H), 4,29 (t, J= 5,27 Hz, 2H), 4,02 (t, J = 5,27 Hz, 2H).

Los compuestos mostrados en la tabla 15 se han preparado de forma similar a la del compuesto 270 mediante acoplamiento de Suzuki del intermedio 270B con diversos ácidos borónicos fácilmente disponibles.

Tabla 15

(continuación)

(continuación)

(continuación)

Esquema 19 (referencia)

Interm edio 299A: W5-(3,4-d¡clorofen¡l)-2-yodo-6,7-d¡h¡drop¡razolo[1,5-a]p¡raz¡n-3,5(4H)-d¡carboxam¡da

A una soluc¡ón del ¡ntermed¡o 270A (350 mg, 1,198 mmol) en THF (20 ml) se le añad¡ó TEA (0,501 ml, 3,59 mmol), 1,2-d¡doro-4-¡soc¡anatobenceno (270 mg, 1,438 mmol) y la mezcla de reacc¡ón se ag¡tó a temperatura amb¡ente durante 2 h. La mezcla de reacc¡ón se concentró a pres¡ón reduc¡da y el res¡duo se d¡solv¡ó en acetato de et¡lo (50 ml), se lavó con una soluc¡ón saturada acuosa de NaHCO³, agua y salmuera. La capa orgán¡ca se secó sobre Na²SO⁴, se f¡ltró y el f¡ltrado se concentró. El producto en bruto se tr¡turó con éter d¡etíl¡co (3 x 50 ml) y el sól¡do se f¡ltró a través de un embudo Buchner y se aclaró con hexano para proporc¡onar el ¡ntermed¡o 299A en forma de un sól¡do de color blanco (350 mg 59 %). MS(ES): m/z = 477,8 [M-H]^-; RMN ¹H (400 MHz, DMSO-d⁶) 5 ppm 9,17 (s, 1H), 7,81 (d, J= 2,5 Hz, 1H), 7,53 - 7,41 (m, 3H), 6,90 (s a, 1h), 4,89 (s, 2H), 4,24 - 4,15 (m, 2H), 3,92 (t, J = 5,3 Hz, 2H).

Compuesto 299 (referenc¡a): 2-(5-clorop¡r¡d¡n-3-¡l)-W5-(3,4-d¡clorofen¡l)-6,7-d¡h¡drop¡razolo [1,5-a]p¡raz¡n-3,5(4H)-d¡carboxam¡da

A una soluc¡ón del ¡ntermed¡o 299A (40 mg, 0,083 mmol), ác¡do (5-clorop¡r¡d¡n-3-¡l)borón¡co (19,67 mg, 0,125 mmol) en 1,4-d¡oxano (1,5 ml) se le añad¡ó K³PO⁴(53,1 mg, 0,250 mmol) en agua (0,5 ml) y la mezcla de reacc¡ón resultante se purgó con N²durante 5 m¡n. Se añad¡ó aducto de PdCl²(dppf)CH²Cl²(3,4 mg, 4,17 pmol), la mezcla de reacc¡ón se calentó a 80 °C y se ag¡tó durante 5 h. La mezcla de reacc¡ón se ¡nact¡vó con agua y se extrajo con acetato de et¡lo (3 x 5 ml). Se lavó la capa orgán¡ca comb¡nada con agua, salmuera, se secó sobre Na²SO⁴, se f¡ ltró y el f¡ltrado se concentró para proporc¡onar. El compuesto en bruto se pur¡f¡có med¡ante HPLC preparat¡va para proporc¡onar el compuesto 299 en forma de un sól¡do de color blanquec¡no (18 mg, 46 %). Los t¡empos de retenc¡ón de la HPLC son 1,357 m¡n. y 1,365 m¡n. (Métodos J y K respect¡vamente). MS(ES): m/z = 464,8 [^m+H]+; RMN ¹H (400 MHz, metanol-d⁴) 5 ppm 8,80 (d, J= 2,01 Hz, 1H), 8,58 (d, J= 2,51 Hz, 1H), 8,19 (t, J= 2,26 Hz, 1H), 7,74 (d, J= 2,51 Hz, 1H), 7,27 - 7,48 (m, 2H), 5,02 (s, 2H), 4,29 - 4,40 (m, 2H), 4,09 (t, J= 5,27 Hz, 2H).

Los compuestos mostrados en la tabla 18 se han preparado de forma s¡m¡lar a la del compuesto de referenc¡a 299 med¡ante acoplam¡ento del ¡ntermed¡o 299A con d¡versos ác¡dos borón¡cos fác¡lmente d¡spon¡bles.

Tabla 18

Esquema 32

Intermedio 329A: 1-(2-((ferc-butox¡carbon¡l)am¡no)prop¡l)-3-yodo-1H-p¡razol-4,5-d¡carbox¡lato de dietilo

A una suspens¡ón en ag¡tac¡ón de PPh3 (12,41 g, 47,3 mmol) en THF (100 ml) se le añad¡ó DIAD (9,20 ml, 47,3 mmol) a -10 °C y se dejó en ag¡tac¡ón a 0 °C durante 0,5 h. Se añad¡ó el ¡ntermed¡o 104C (8,0 g, 23,66 mmol) en forma de una soluc¡ón en THF (10 ml) a 0 °C y se ag¡tó a TA durante 45 m¡n. La mezcla de reacc¡ón se enfr¡ó otra vez a 0 °C y se añad¡ó (1-h¡drox¡propan-2-¡l)carbamato de terc-but¡lo (5,39 g, 30,8 mmol) en forma de una soluc¡ón en THF (10 ml) y la mezcla se ag¡tó a TA durante 16 h. La mezcla de reacc¡ón se diluyó con acetato de et¡lo (100 ml), se lavó con agua y salmuera. La capa orgán¡ca se secó sobre Na2SO4, se f¡ltró y el f¡ltrado se concentró a pres¡ón reduc¡da. El compuesto en bruto se pur¡f¡có por cromatografía sobre gel de síl¡ce (columna REDISEP® de 40 g, eluyendo con EtOAc al 15 % en hexano). Las fracc¡ones que contenían el producto se comb¡naron y se evaporaron para proporc¡onar el ¡ntermed¡o 329A en forma de un líqu¡do de color pardo (7,0 g) contam¡nado con ¡mpurezas der¡vadas de los react¡vos de acoplam¡ento. MS(ES): m/z = 496 [M+H]+. El ¡ntermed¡o en bruto se llevó a la siguiente etapa sin purificación adicional.

Intermedio 329B: 2-yodo-6-metil-4-oxo-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]pirazin-3-carboxilato de etilo

A una solución en agitación del intermedio 329A (7,0 g, 14,13 mmol) en 1,4-dioxano (10 ml) se le añadió HCl 4 M en dioxano (25 ml, 100 mmol) y la solución se agitó a TA durante 2 h. La mezcla de reacción se concentró y el residuo se diluyó con EtOAc (20 ml). La solución de EtOAc se lavó sucesivamente con agua, una solución ac. saturada de NaHCO³y salmuera. La capa orgánica se secó sobre Na²SO⁴, se filtró y se concentró a presión reducida. El residuo obtenido se calentó en un ROTAVAPOR® a 60 °C durante 5 h. El producto sólido se lavó con éter para proporcionar el intermedio 329B (4,0 g, 87 %). MS(ES): m/z = 350 [M+H]⁺; RMN ¹H (300 MHz, DMSO-d^s) 5 ppm 8,49 (s, 1H), 4,27 - 4,49 (m, 1H), 4,11 - 4,26 (m, 2H), 4,03 (d, J = 11,71 Hz, 2^h), 1,06 - 1,39 (m, 6H).

Intermedio 329C: 2-yodo-6-metil-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]pirazin-3-carboxilato de etilo

A una solución del intermedio 329B (4,0 g, 11,46 mmol) en THF (40 ml) se le añadió BH³THF (40,1 ml, 80 mmol, 1 M en THF) y la mezcla de reacción se agitó a 70 °C durante 16 h. Se añadió etanol (10 ml) y la mezcla de reacción se calentó a reflujo durante 1 h. La mezcla de reacción se concentró para proporcionar el intermedio 329C (1,9 g, 40 % de rendimiento) en forma de un líquido de color pardo claro. MS(ES): m/z = 336 [M+H]⁺. El compuesto en bruto se llevó a la siguiente etapa sin purificación adicional.

Intermedio 329D: 3-etil2-yodo-6-metil-6,7-dihidropirazolo[1,5-a]pirazin-3,5(4H)-dicarboxilato de 5-terc-butilo

A una solución en agitación del intermedio 329C (0,81 g, 2,417 mmol) en DCM (10 ml) se le añadió TEA (0,404 ml, 2,90 mmol) seguido de Boc²O (0,617 ml, 2,66 mmol) y la solución resultante se agitó a TA durante 16 h. Esta se diluyó después con DCM (10 ml),se lavó con agua y salmuera. El compuesto en bruto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (columna REDISEP® de 12 g, eluyendo con MeOH al 1 % en CHCh). Las fracciones que contenían el producto se combinaron y se evaporaron para proporcionar el intermedio 329D en forma de un semisólido incoloro (0,7 g, 67 %). MS(ES): m/z = 435 [M+H]⁺; RMN ¹H (400 MHz, DMSO-d^s) 5 ppm 5,07 (d, J= 18,57 Hz, 1H), 4,69 (s a, 1H), 4,39 (d, J= 18,57 Hz, 1H), 4,06 - 4,28 (m, 4H), 1,45 (s, 9H), 1,23 - 1,34 (m, 3H), 1,08 (d, J= 7,03 Hz, 3H).

Interm edio 329E: Ácido 5-(íerc-butox¡carbon¡l)-2-yodo-6-m et¡l-4,5,6,7-tetrah¡drop¡razolo[1,5-a]p irazin-3-carboxílico

A una soluc¡ón en ag¡tac¡ón del ¡ntermed¡o 329D (0,85 g, 1,953 mmol) en EtOH (2,0 ml) se le añad¡ó una soluc¡ón de NaOH (0,391 g, 9,76 mmol) en agua (1,0 ml) y la soluc¡ón resultante se ag¡tó a TA durante 16 h. La mezcla de reacc¡ón se concentró y el res¡duo se ac¡d¡f¡có med¡ante la ad¡c¡ón de una soluc¡ón acuosa 1 N de HCl (5 ml) que se dejó en ag¡tac¡ón durante 10 m¡n. El prec¡p¡tado generado se f¡ltró y se secó para proporc¡onar el ¡ntermed¡o 329E en forma de un sól¡do de color blanco (0,65 g, 82 %). MS(ES): m/z = 408 [M+H]⁺; RMN ¹H (300 MHz, DMSO-d^s) 5 ppm 5,05 (d, J= 18,89 Hz, 1H), 4,67 (s a, 1H), 4,36 (d, J = 18,13 Hz, 1H), 4,13 - 4,25 (m, 1H), 3,93 - 4,13 (m, 2H), 1,44 (s, 9H), 1,08 (t, J = 6,99 Hz, 3H).

Intermed¡o 329F: 3-carbamo¡l-2-yodo-6-met¡l-6,7-d¡h¡drop¡razolo[1,5-a]p¡raz¡n-5(4H)-carbox¡lato de terc-but¡lo

A una soluc¡ón en ag¡tac¡ón del ¡ntermed¡o 329E (0,65 g, 1,596 mmol) en DMF (3,0 ml) se le añad¡ó NH⁴Cl (0,427 g, 7,98 mmol), HATU (1,214 g, 3,19 mmol) y DIPEA (0,836 ml, 4,79 mmol) y la soluc¡ón resultante se dejó en ag¡tac¡ón a TA durante 3 h. Se d¡luyó con acetato de et¡lo (10 ml), se lavó con agua, salmuera, se secó sobre Na²SO⁴, se filtró y el f¡ltrado se concentró. El compuesto en bruto se pur¡f¡có por cromatografía sobre gel de síl¡ce (columna REDISEP® de 12 g, eluyendo con MeOH al 2 % en CHCh). Las fracc¡ones que contenían el producto se comb¡naron y se evaporaron para proporc¡onar el ¡ntermed¡o 329F en forma de un líqu¡do ¡ncoloro (0,38 g, 59 %). MS(ES): m/z = 407 [M+H]⁺; RMN ¹H (300 MHz, DMSO-d^s) 5 ppm 6,79 - 7,56 (m, 2H), 5,01 (d, J= 18,51 Hz, 1H), 4,66 (s a, 1H), 4,39 (d, J = 18,13 Hz, 1H), 3,96 -4,20 (m, 2H), 1,44 (s, 9H), 1,07 (d, J= 6,80 Hz, 3^h).

Intermed¡o 329G: 3-carbamo¡l-2-yodo-6-met¡l-6,7-d¡h¡drop¡razolo[1,5-a]p¡raz¡n-5(4H)-carbox¡lato de terc-but¡lo

A una suspens¡ón en ag¡tac¡ón del ¡ntermed¡o 329F (0,32 g, 0,788 mmol) en 1,4-d¡oxano (8,0 ml) se le añad¡ó ác¡do (3-cloro-4-fluorofen¡l)borón¡co (0,179 g, 1,024 mmol), K³PO⁴(1,292 g, 2,58 mmol) y el conten¡do del matraz se purgó con N²durante 10 m¡n. Después se añad¡ó PdCl2(dppf)-CH²C^h(0,042 g, 0,052 mmol) y la mezcla de reacc¡ón se ag¡tó a 80 °C durante 6 h. La mezcla de reacc¡ón se enfr¡ó a TA; se d¡luyó con acetato de et¡lo (10 ml), se lavó con agua, se secó sobre Na²SO⁴, se f¡ ltró y el f¡ltrado se concentró a pres¡ón reduc¡da. El compuesto en bruto se pur¡f¡có por cromatografía sobre gel de síl¡ce (columna REDISEP® de 12 g, eluyendo con MeOH al 2 % en CHCh). Las fracc¡ones que contenían el producto se comb¡naron y se evaporaron para proporc¡onar el ¡ntermed¡o 329G en forma de un sól¡do de color amar¡llo pál¡do (0,27 g, 84 %). MS(ES): m/z = 408 [M+H]⁺; NMR ¹H (300 MHz, DMSO-d^s) 5 ppm 7,85 - 7,92 (m, 1H), 7,71 (ddd, J= 8,69, 4,91,2,27 Hz, 1H), 7,46 (d, J= 17,75 Hz, 1H), 7,24 - 7,38 (m, 2H), 4,99 (d, J= 17,75 Hz, 1H), 4,72 (s a, 1H), 4,44 (d, J= 17,75 Hz, 1H), 4,08 - 4,28 (m, 2H), 1,46 (s, 9H), 1,15 (s, 3H).

Interm edio 329H: 2 -(3-doro-4-fluorofen il)-6-m etil-4 ,5 ,6 ,7-te trah idrop irazo lo[1,5-a]p irazin-3-carboxam ida, TFA

A una solución en agitación del intermedio 329G (0,09 g, 0,220 mmol) en DCM (3,0 ml) se le añadió TFA (0,017 ml, 0,220 mmol) y la solución resultante se agitó a TA durante 2 h. Esta se concentró después y el residuo se trituró con hexano para proporcionar el intermedio 329H en forma de un sólido de color blanco (0,1 g). MS(ES): m/z = 308 (M+H]+; NMR 1H (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 7,80 - 7,85 (m, 1H), 7,64 - 7,71 (m, 1H), 7,40 - 7,55 (m, 2H), 7,13 -7,27 (m, 1H), 4,71 (d, J= 16,06 Hz, 1H) 4,53 (dd, J= 13,55, 4,02 Hz, 2H), 3,90- 4,11 (m, 2H), 1,40 (d, J= 6,53 Hz, 3H).

Compuestos 329 y 330: 2-(3-cloro-4-fluorofenil)-W5-(4-cianofenil)-6-metil-6,7-dihidropirazolo[1,5-a]pirazin-3,5(4H)-dicarboxamida

Los compuestos 329 y 330 se sintetizaron a partir del intermedio 329H usando una secuencia sintética análoga a la preparación del compuesto 297. Se separaron los isómeros individuales mediante purificación por SFC quiral (Columna: CHIRAL^cE^l® OD-H (4,6 x 250) mm, 5 p, Caudal 4 ml/min; Isocrática: 40 %, fase móvil B. Temperatura: ambiente a 264 nm (fase móvil A: CO², Fase móvil B: dietilamina al 0,3 % en metanol), Contrapresión: 98 bar (9800 kPa), diluyentes: metanol).

Compuesto 329: (Tiempo transcurrido 2,52 min); MS(ES): m/z = 453 [M+H]⁺. Tiempos de retención de la HPLC 9.24 min. y 8,72 min (Métodos A y B respectivamente). RMN ¹H (400 MHz, DMSO-d⁶) 5 ppm 9,33 (s, 1H), 7,84 - 7,98 (m, 1H), 7,63 - 7,76 (m, 5H), 7,25 - 7,50 (m, 3H), 5,27 (s, 1H), 4,86 - 5,00 (m, 1H), 4,60 (s, 1H), 4,08 - 4,32 (m, 2H), 1,23 (s, 3H).

Compuesto 330: (Tiempo transcurrido 3,42 min); MS(ES): m/z = 453 [M+H]⁺. Tiempos de retención de la HPLC 9.25 min. y 8,74 min (Métodos A y B respectivamente). RMN ¹H (400 MHz, DMSO-d⁶) 5 ppm RMN ¹H (400 MHz, DMSO-d⁶) 5 ppm 9,33 (s, 1H), 7,84 - 7,98 (m, 1H), 7,63 - 7,76 (m, 5H), 7,25 - 7,50 (m, 3H), 5,27 (s, 1H), 4,86 - 5,00 (m, 1H), 4,60 (s, 1H), 4,08 - 4,32 (m, 2H), 1,23 (s, 3H).

Compuestos 331 y 332: 2-(3-dorofeml)-W5-(4-danofen¡l)-6-met¡l-6,7-d¡hidrop¡razolo[1,5-a]pirazin-3,5(4H)-dicarboxamida

Los compuestos 331 y 332 se sintetizaron a partir del intermedio 329F usando una secuencia sintética análoga a la preparación del compuesto 330 usando acoplamiento de Suzuki con ácido 3,4-dicloroborónico seguido de desprotección del grupo N-Boc y formación de urea con 4-isocianatobenzonitrilo. Se separaron los isómeros individuales mediante purificación por SFC quiral (Columna: CHIRALPAK® IC (250 x 4,6) mm, 5 p, Caudal 3 ml/min; Isocrática: 40 % fase móvil B. Temperatura: ambiente a 264 nm (fase móvil A: CO², Fase móvil B: dietilamina al 0,3 % en IPA), Contrapresión: 100 bar (10000 kPa), diluyentes: isopropanol).

Compuesto 331: (Tiempo transcurrido 3,94 min); MS(ES): m/z = 435 [M+H]⁺. Tiempos de retención de la HPLC 8.66 min. y 9,26 min (Métodos B y M respectivamente). R^mN ¹H (400 M^hz, DMSO-d^s) 5 ppm 9,33 (s, 1H), 7,66 -7,79 (m, 6H), 7,41 - 7,49 (m, 3H), 7,33 (s a, 1H), 5,25 (d, J= 17,57 Hz, 1H), 4,91 - 4,99 (m, 1H), 4,57 (d, J= 17,57 Hz, 1H), 4,18 - 4,33 (m, 2H), 1,19 - 1,27 (m, 3H).

Compuesto 332: (Tiempo transcurrido 11,35 min); MS(ES): m/z = 435 [M+H]⁺. Tiempos de retención de la HPLC 8.66 min y 9,26 min (Métodos B y M respectivamente). R^mN ¹H (400 MHz, DMSO-d⁶) 5 ppm 9,33 (s, 1H), 7,66 - 7,79 (m, 6H), 7,41 - 7,49 (m, 3H), 7,33 (s a, 1H), 5,25 (d, J= 17,57 Hz, 1H), 4,91 - 4,99 (m, 1H), 4,57 (d, J= 17,57 Hz, 1H), 4,18 - 4,33 (m, 2H), 1,19 - 1,27 (m, 3H).

Compuestos 333 y 334: N-^-danofenil^-p^-diclorofenil^-metN^y-dihidropirazolon ,5-a]pirazin-3,5(4H)-dicarboxamida

Los compuestos 333 y 334 se sintetizaron a partir del intermedio 329F usando una secuencia sintética análoga a la preparación del compuesto 330 usando acoplamiento de Suzuki con ácido 3,4-dicloroborónico seguido de desprotección del grupo A-Boc y formación de urea con 4-isocianatobenzonitrilo. Se separaron los isómeros individuales mediante separación por SFC quiral (Columna: CHIRALCEL® OJH (250 x 4,6) mm, 5 p, Caudal 3 ml/min; Isocrática: 30 % fase móvil B. Temperatura: ambiente a 263 nm (fase móvil A: CO², Fase móvil B: dietilamina al 0,3 % en metanol), Contrapresión: 100 bar (10000 kPa), diluyentes: metanol).

Compuesto 333: (Tiempo transcurrido 3,53 min); MS(ES): m/z = 469 [M+H]⁺. Tiempos de retención de la HPLC 9.27 min. y 10,05 min (Métodos B y A respectivamente). RMN ¹H (400 MHz, DMSO-d⁶) 5 ppm 9,32 (s, 1H), 7,95 (d, J= 2,01 Hz, 1H), 7,64 - 7,76 (m, 6H), 7,42 (s a, 2H), 5,24 (d, J= 17,57 Hz, 1H), 4,88 - 5,00 (m, 1H), 4,57 (d, J= 17,57 Hz, 1H), 4,12 - 4,32 (m, 2H), 1,18 - 1,24 (m, 3h).

Compuesto 334: (Tiempo transcurrido 4,15 min); MS(ES): m/z = 469 [M+H]⁺. Tiempos de retención de la HPLC 9.27 min. y 10,05 min (Métodos B y A respectivamente). RMN ¹H (400 MHz, DMSO-d⁶) 5 ppm 9,32 (s, 1H), 7,95 (d, J= 2,01 Hz, 1H), 7,64 - 7,76 (m, 6H), 7,42 (s a, 2H), 5,24 (d, J= 17,57 Hz, 1H), 4,88 - 5,00 (m, 1H), 4,57 (d, J= 17,57 Hz, 1H), 4,12 - 4,32 (m, 2H), 1,18 - 1,24 (m, 3h).

Esquema 33

Intermedio 335A: 1-(2-((íerc-butoxicarbonil)amino)-3,3,3-tnfluoropropil)-3-yodo-1H-pirazol-4,5-dicarboxilato de dietilo

A una solución en agitación de PPh3 (3,10 g, 11,83 mmol) en THF (50 ml) se le añadió DIAD (2,300 ml, 11,83 mmol) a 0 °C y la mezcla se agitó durante 15 min antes de la adición del intermedio 104C (2 g, 5,92 mmol) en THF (10 ml), que se dejó en agitación durante 15 min. Después se añadió una solución de (1,1,1-trifluoro-3-hidroxipropan-2-il)carbamato de terc-butilo (1,763 g, 7,69 mmol) en THF (10 ml) y la solución se agitó a TA durante 16 h. La mezcla de reacción se vertió en agua y se extrajo con EtOAc (2 x 100 ml). La capa orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre Na²SO⁴anhidro, se filtró y el filtrado se concentró a presión reducida. El compuesto en bruto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (columna REDISEP® de 24 g, eluyendo con EtOAc al 10 % en hexanos). Las fracciones que contenían el producto se combinaron y se evaporaron para proporcionar el intermedio 335A (3 g, 88 %) en forma de un aceite. RMN ¹H (400 MHz, DMSO-d^s) 5 ppm 7,94 - 7,84 (m, 1H), 4,87 - 4,80 (m, 1H), 4,79 - 4,67 (m, 1H), 4,40 - 4,31 (m, 3H), 4,30 - 4,21 (m, 2H), 1,33 (s, 9H), 1,30 - 1,25 (m, 6H).

Intermedio 335B: 2-yodo-4-oxo-6-(trifluorometil)-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]pirazin-3-carboxilato de etilo

El intermedio 335A (3 g, 5,46 mmol) se disolvió en HCl 4 M en 1,4-dioxano (50 ml) y se agitó a TA durante 2 h. Se eliminaron los volátiles a presión reducida y el residuo en bruto se disolvió en EtOAc (250 ml) y se lavó con una solución ac. de NaHCO³, después se secó sobre Na²SO⁴y se concentró a presión reducida. El producto en bruto se disolvió en EtOH (25 ml) y se agitó a 60 °C durante 16 h. El etanol se eliminó a presión reducida y el residuo resultante se agitó con hexanos durante 15 min. El sólido triturado se filtró y se secó para proporcionar el intermedio 335B (0,96 g, 41,4 %) en forma de un sólido de color blanquecino. MS(ES):-m/z = 404,0 [M+H]⁺; RMN ¹H (400 MHz, DMSO-d^s) 5 ppm 9,34 (d, J= 4,5 Hz, 1H), 4,84 - 4,73 (m, 2H), 4,71 - 4,60 (m, 1H), 4,34 - 4,20 (m, 2H), 1,32 - 1,23 (m, 3H).

Intermedio 335C: 2-yodo-6-(trifluorometil)-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]pirazin-3-carboxilato de etilo

A una solución en agitación del intermedio 335B (0,1 g, 0,248 mmol) en THF (1 ml) se le añadió complejo BH³DMS (0,236 ml, 2,481 mmol) en atmósfera de nitrógeno y la mezcla de reacción se agitó a TA durante 16 h. Después se enfrió la mezcla de reacción a 0 °C, se inactivó con metanol (1 ml) y se agitó durante 15 min a TA. Se eliminaron los volátiles a presión reducida y el compuesto en bruto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (columna REDISEP® de 12 g, eluyendo con EtOAc al 25 % en hexanos). Las fracciones que contenían el producto se combinaron y se evaporaron para proporcionar el intermedio 335C en forma de un sólido de color blanco (0,025 g, 25 %). MS(ES):-m/z = 390,4 [M+H]⁺; NMR ¹H (400 MHz, DMSO-d^s) 5 ppm 4,37 - 4,27 (m, 2H), 4,22 (c, J = 7,4 Hz, 3H), 4,12 - 4,00 (m, 3H), 1,33 - 1,26 (m, 3H).

Intermedio 335D: 3-etil2-yodo-6-(trifluorometil)-6,7-dihidropirazolo[1,5-a]pirazin-3,5(4H)-dicarboxilato de 5-terc-butilo

A una solución en agitación del intermedio 335C (0,025 g, 0,064 mmol) en DCM (5 ml) se le añadió TEA (0,027 ml, 0,193 mmol) y DMAP (0,785 mg, 6,42 pmol), seguido de Boc2O (0,018 ml, 0,077 mmol) y la solución resultante se dejó en agitación a TA durante 12 h. Después, la mezcla de reacción se diluyó con DCM (20 ml), se lavó con agua, se secó sobre Na2SO4 anhidro, se filtró y el filtrado se concentró a presión reducida. El compuesto en bruto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (columna REDISEP® de 12 g, eluyendo con EtOAc al 20 % en hexanos). Las fracciones que contenían el producto se combinaron y se evaporaron para proporcionar el intermedio 335D en forma de un sólido de color blanco (0,025 g, 76 %). MS(ES): m/z = 490,4 [M+H]⁺; NMR ¹H (400 MHz, DMSO-d^s) 5 ppm 5,55 - 5,38 (m, 1H), 5,18 - 5,08 (m, 1H), 4,54 (s a, 3H), 4,24 (d, J= 7,0 Hz, 2H), 1,48 (s, 9H), 1,31 (t, J= 7,3 Hz, 3H).

Intermedio 335E: Ácido 5-(terc-butoxicarbonil)-2-yodo-6-(trifluorometil)-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]pirazin-3-carboxílico

A una solución del intermedio 335D (0,22 g, 0,450 mmol) en etanol (2 ml) y agua (2 ml) se le añadió NaOH (0,036 g, 0,899 mmol) y la solución se agitó a TA durante 16 h. La mezcla de reacción se concentró a presión reducida y el pH del producto en bruto se ajustó a 2 con una solución acuosa de HCl 1,5 N y se extrajo con EtOAc (2 x 20 ml). La capa orgánica combinada se secó sobre Na²SO⁴anhidro, se filtró y el filtrado se concentró a presión reducida para proporcionar el intermedio 335E en forma de un sólido de color blanco (0,12 g, 55 %). MS(ES): m/z = 462,4 [M+H]⁺; RMN ¹H (400 MHz, DMSO-d^s) 5 ppm 12,4 (a, s., 1H), 5,55 - 5,38 (m, 1H), 5,18 - 5,08 (m, 1H), 4,54 (m, 3H), 1,48 (s, 9H).

Intermedio 335F: 3-carbamoil-2-yodo-6-(trifluorometil)-6,7-dihidropirazolo[1,5-a]pirazin-5(4H)-carboxilato de terc-butilo

A una solución del intermedio 335E (0,12 g, 0,260 mmol) en DMF (1 ml) se le añadió NH⁴Cl (0,028 g, 0,520 mmol), HATU (0,099 g, 0,260 mmol) y DIPeA (0,136 ml, 0,781 mmol) en atmósfera de nitrógeno y la solución resultante se agitó a TA durante 16 h. La mezcla de reacción se vertió en agua y la capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 25 ml). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na²SO⁴anhidro y se concentraron a presión reducida. El compuesto en bruto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (columna REDISEP® de 12 g, eluyendo con MeOH al 3 % en CHCh). Las fracciones que contenían el producto se combinaron y se evaporaron para proporcionar el intermedio 335F en forma de un sólido de color blanco (0,07 g, 50 %). MS(ES): m/z = 460,9 [M+H]⁺.

Intermedio 335G: 3-carbamoil-2-(3-cloro-4-fluorofenil)-6-(trifluorometil)-6,7-dihidropirazolo[1,5-a]pirazin-5(4H)-carboxilato de terc-butilo

A una solución del intermedio 335F (0,35 g, 0,761 mmol) y ácido (3-cloro-4-fluorofenil)borónico (0,215 g, 0,837 mmol) en DMF (2 ml) se le añadió una solución de Na2CO3 (0,242 g, 2,282 mmol) en agua (1 ml) y la mezcla de reacción se purgó con nitrógeno durante 5 min. Después se añadió Pd(PPh³)⁴(0,044 g, 0,038 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a 100 °C durante 18 h. La mezcla de reacción se enfrió a TA y se extrajo con EtOAc (2 x 50 ml). La capa orgánica combinada se secó sobre Na²SO⁴anhidro, se filtró y el filtrado se concentró a presión reducida. El compuesto en bruto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (columna REDISEP® de 12 g, eluyendo con MeOH al 5 % en CHCb). Las fracciones que contenían el producto se combinaron y se evaporaron para proporcionar el intermedio 335G en forma de un sólido de color blanco (0,25 g, 68 %). MS(ES): m/z = 464,5 [M+H]⁺; NMR ¹H (400 MHz, DMSO-d^s) 5 ppm 7,92 - 7,82 (m, 1H), 7,73 - 7,67 (m, 1H), 7,65 - 7,52 (m, 1H), 7,51 - 7,44 (m, 1H), 7,41 - 7,21 (m, 2H), 5,17 - 5,05 (m, 1H), 4,65 - 4,48 (m, 3H), 1,50 (s, 9H).

Intermedio 335H: 2-(3-cloro-4-fluorofenil)-6-(trifluorometil)-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]]pirazin-3-carboxamida. TFA

A una solución del intermedio 335G (0,3 g, 0,648 mmol) en DCM (5 ml) se le añadió TFA (0,499 ml, 6,48 mmol) en atmósfera de nitrógeno y la solución resultante se agitó a TA durante 2 h. Los volátiles se eliminaron a presión reducida y el producto en bruto se trituró con éter dietílico para proporcionar el intermedio 335H en forma de un sólido de color blanco (0,21 g, 54 %). MS(ES): m/z = 363,4 [M+H]+;

Compuestos 335 y 336: 2-(3-cloro-4-fluorofenil)-W6-(4-cianofenil)-6-(trifluorometil)-6,7-dihidropirazolo[1,5-a]pirazin-3,5(4H)-dicarboxamida

Los compuestos 335 y 336 se sintetizaron a partir del intermedio 335H usando una secuencia sintética análoga a la preparación del compuesto 297. Se separaron los isómeros individuales mediante purificación por SFC quiral (Columna: CHIRALpAk® IC (250 x 4,6) mm, 5 |j, Caudal 3 ml/min; Isocrática: 30 % fase móvil B. Temperatura: ambiente a 267 nm (fase móvil A: CO², Fase móvil B: dietilamina al 0,3 % en metanol), Contrapresión: 100 bar (10000 kPa), diluyentes: metanol).

Compuestos 335 (19 mg, 24 %); (Tiempo transcurrido 2,65 min); MS(ES): m/z = 507,0 [M+H]⁺; RMN ¹H (400 MHz, DMSO-d^s) 5 ppm 9,58 (s, 1H), 7,85 - 7,90 (m, 1H), 7,76 (s a, 2H), 7,64 - 7,73 (m, 3H), 7,41 - 7,52 (m, 2H), 7,31 (s a, 1H), 5,80 (s a, 1H), 5,35 (d, J= 17,07 Hz, 1H), 4,78 (d, J= 18,57 Hz, 1H), 4,62 (s a, 2H).

Compuesto 336 (23 mg, 29 %); (Tiempo transcurrido 5,43 min); MS(ES): m/z = 507,0 [M+H]⁺; RMN ¹H (400 MHz, DMSO-d^s) 5 ppm 9,58 (s, 1H), 7,85 - 7,90 (m, 1H), 7,76 (s a, 2h), 7,64 - 7,73 (m, 3H), 7,41 - 7,52 (m, 2H), 7,31 (s a, 1H), 5,80 (s a, 1H), 5,35 (d, J= 17,07 Hz, 1H), 4,78 (d, J= 18,57 Hz, 1H), 4,62 (s a, 2H).

Compuestos 337 y 338: 2-(3-dorofen¡l)-W5-(4-danofen¡l)-6-(tr¡fluoromet¡l)-6,7-d¡h¡drop¡razolo[1,5-a]p¡raz¡n-3,5(4H)-dicarboxamida

Los compuestos 337 y 338 se s¡ntet¡zaron a part¡r del ¡ntermed¡o 335F usando una secuenc¡a s¡ntét¡ca análoga a la preparac¡ón del compuesto 335 usando acoplam¡ento de Suzuk¡ con ác¡do 3-cloroborón¡co segu¡do de desprotecc¡ón del grupo N-Boc y formac¡ón de urea con 4-¡soc¡anatobenzon¡tr¡lo. Los ¡sómeros ¡nd¡v¡duales se separaron med¡ante SFC preparat¡va qu¡ral (Columna: CHIRALPAK® IC (250 x 4,6) mm, 5 p, Caudal 3 ml/m¡n; Isocrát¡ca: 40 % fase móv¡l B. Temperatura: amb¡ente a 267 nm (fase móv¡l A: CO², Fase móv¡l B: d¡et¡lam¡na al 0,3 % en metanol), Contrapres¡ón: 100 bar (10000 kPa), d¡luyentes: metanol.

Compuesto 337: (T¡empo transcurr¡do 1,65 m¡n); MS(ES): m/z = 489,5 [M+H]⁺; RMN ¹H (400 MHz, DMSO-d⁶) 5 ppm 9.58 (s, 1H), 7,82 - 7,64 (m, 6H), 7,49 - 7,43 (m, 3H), 7,30 (s a, 1H), 5,80 (d, J= 9,0 Hz, 1H), 5,33 (d, J= 17,1 Hz, 1H), 4.79 (d, J= 17,1 Hz, 1H), 4,63 (s a, 2H).

Compuesto 338: (T¡empo transcurr¡do 5,11 m¡n): MS(ES): m/z = 489,5 [M+H]⁺; RMN ¹H (400 MHz, DMSO-d⁶) 5 ppm 9.58 (s, 1H), 7,82 - 7,64 (m, 6H), 7,49 - 7,43 (m, 3H), 7,30 (s a, 1H), 5,80 (d, J= 9,0 Hz, 1H), 5,33 (d, J= 17,1 Hz, 1H), 4.79 (d, J= 17,1 Hz, 1H), 4,63 (s a, 2H).

Compuestos 339 y 340: W5-(4-danofen¡l)-2-(3,4-d¡dorofen¡l)-6-(tr¡fluoromet¡l)-6,7-d¡h¡drop¡razolo[1,5-a]p¡raz¡n-3,5(4H)-d¡carboxam¡da

Los compuestos 339 y 340 se s¡ntet¡zaron a part¡r del ¡ntermed¡o 335F usando una secuenc¡a s¡ntét¡ca análoga a la preparac¡ón del compuesto 335 usando acoplam¡ento de Suzuk¡ con ác¡do 3,4-d¡cloroborón¡co segu¡do de desprotecc¡ón del grupo N-Boc y formac¡ón de urea con 4-¡soc¡anatobenzon¡tr¡lo. Los ¡sómeros ¡nd¡v¡duales se separaron med¡ante SFC preparat¡va qu¡ral (Columna: CHIRALPAK® IC (250 x 4,6) mm, 5 p, Caudal 3 ml/m¡n; Isocrát¡ca: 40 %; fase móv¡l B. Temperatura: amb¡ente a 267 nm (fase móv¡l A: CO², Fase móv¡l B: d¡et¡lam¡na al 0,3 % en metanol), Contrapres¡ón: 100 bar (10000 kPa), d¡luyentes: metanol.

Compuesto 339: (T¡empo transcurr¡do 1,79 m¡n); MS(ES): m/z = 523,5 [M+H]⁺; RMN ¹H (400 MHz, DMSO-d⁶) 5 ppm 9.58 (s, 1H), 7,93 (s, 1H), 7,83 - 7,75 (m, 2H), 7,73 - 7,66 (m, 4H), 7,48 (s a, 1H), 7,38 (s a, 1H), 5,82 (s a, 1H), 5,34 (d, J= 17,1 Hz, 1H), 4,79 (d, J= 17,1 Hz, 1H), 4,64 (s a, 2H).

Compuesto 340: (T¡empo transcurr¡do 3,38 m¡n); MS(ES): m/z = 523,5 [M+H]⁺; RMN ¹H (400 MHz, DMSO-d⁶) 5 ppm 9.58 (s, 1H), 7,93 (s, 1H), 7,83 - 7,75 (m, 2H), 7,73 - 7,66 (m, 4H), 7,48 (s a, 1H), 7,38 (s a, 1H), 5,82 (s a, 1H), 5,34 (d, J= 17,1 Hz, 1H), 4,79 (d, J= 17,1 Hz, 1H), 4,64 (s a, 2H).

Esquema 34

Interm edio 341A: (1-c idoprop il-2 -h idrox ie til)carbam ato de terc-butilo

A una solución en agitación de (1-cidopropil-2-hidroxietil)carbamato de terc-butilo (6,5 g, 64,3 mmol) en DCM (10,0 ml) se le añadió TEA (10,75 ml, 77 mmol), seguido de Boc²O (16,41 ml, 70,7 mmol) y la solución resultante se agitó a T^adurante 16 h. La mezcla de reacción se concentró y el residuo se extrajo con DCM (50 ml). La capa orgánica se lavó con agua, salmuera, se secó sobre Na²SO⁴, se filtró y el filtrado se concentró a presión reducida. El compuesto en bruto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (columna REDISEP® de 120 g, eluyendo con EtOAc al 20 % en hexanos). Las fracciones que contenían el producto se combinaron y se evaporaron para proporcionar el intermedio 341A en forma de un líquido incoloro (6,2 g, 48 %). RMN ¹H (400 MHz, DMSO-d⁶) 5 ppm 6,47 (d, J = 7,03 Hz, 1H), 4,45 - 4,58 (m, 1H), 3,38 -3,45 (m, 2H), 2,98 (s a, 1H), 1,31 - 1,47 (m, 9H), 0,76 - 0,89 (m, 1H), 0,34 -0,45 (m, 1H), 0,18 - 0,32 (m, 2H), 0,07 - 0,15 (m, 1H).

Intermedio 341B: 1-(2-((terc-butoxicarbonil)amino)-2-ciclopropiletil)-3-yodo-1H-pirazol-4,5-dicarboxilato de dietilo

A una solución en agitación de PPh3 (15,52 g, 59,2 mmol) en THF (40,0 ml) enfriada a -10 °C se le añadió DIAD (11,50 ml, 59,2 mmol) y la solución resultante se agitó a 0 °C durante 0,5 h. Se añadió el intermedio 104C (10 g, 29,6 mmol) en forma de una solución en THF (10 ml) a 0 °C y se agitó a TA durante 45 min. Se añadió una solución del intermedio 341A (7,74 g, 38,5 mmol) en THF (10 ml) a 0 °C y la mezcla de reacción se dejó en agitación a TA durante 16 h. La mezcla de reacción se diluyó con EtOAc (50 ml), se lavó con agua y salmuera. La capa orgánica se secó sobre Na2SO4 y se concentró a presión reducida. El compuesto en bruto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (columna REDISEP® de 120 g, eluyendo con EtOAc al 15 % en hexanos). Las fracciones que contenían el producto se combinaron y se evaporaron para proporcionar el intermedio 341B junto con impurezas derivadas de los reactivos de acoplamiento (8,01 g, 84 %); el material en bruto se llevó a la siguiente etapa sin purificación adicional. MS(ES): m/z = 522 [M+H]+.

Intermedio 341C: 6-ciclopropil-2-yodo-4-oxo-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]pirazin-3-carboxilato de etilo

A una solución en agitación del intermedio 341B (8,0 g, 15,34 mmol) en 1,4-dioxano (10,0 ml) se le añadió HCl 4 M en dioxano (40,0 ml, 160 mmol) y la solución resultante se agitó a TA durante 2 h. La mezcla de reacción se concentró y se diluyó con EtOAc (50 ml). La capa orgánica se lavó sucesivamente con agua, una solución ac. saturada de NaHCO³y salmuera, después se secó sobre Na²SO⁴, se filtró y el filtrado se concentró a presión reducida. El residuo obtenido se calentó en un ROTAVAPOR® a 60 °C durante 5 h. El producto sólido se trituró con éter dietílico para proporcionar el intermedio 341C en forma de un sólido de color blanquecino (1,6 g, 28 %). MS(ES): m/z = 376 [M+H]⁺; RMN ¹H (300 MHz, DMSO-d⁶) 5 ppm 8,67 (d, J= 2,27 Hz, 1H), 4,47 (dd, J= 13,22; 4,53 Hz, 1H), 4,17 - 4,33 (m, 3H), 3,15 (d, J= 9,07 Hz, 1H), 1,28 (s, 3H), 0,90 (d, J= 8,69 Hz, 1H), 0,40 - 0,54 (m, 2H), 0,20 - 0,37 (m, 2H).

Interm edio 341D: 6-cidopropil-2-yodo-4 ,5 ,6 ,7-te trah idrop irazo lo [1 ,5-a ]p irazin-3-carboxila to de etilo

A una solución del intermedio 341C (1,3 g, 3,47 mmol) en THF (10 ml) se le añadió BH³THF (6,06 ml, 12,13 mmol, 1 M en THF) y la solución resultante se agitó a 60 °C durante 16 h. La mezcla de reacción se inactivó con etanol (10 ml) y se calentó a reflujo durante 1 h. La mezcla de reacción se concentró a presión reducida para proporcionar el intermedio 341D en bruto (1,2 g), que se llevó a la siguiente etapa sin purificación adicional. MS(ES): m/z = 362 [M+H]⁺.

Intermedio 341E: 3-etil6-ciclopropil-2-yodo-6,7-dihidropirazolo[1,5-a]pirazin-3,5(4H)-dicarboxilato de 5-terc-butilo

A una solución del intermedio 341D (1,2 g, 3,32 mmol) en DCM (10,0 ml) se le añadió TEA (0,556 ml, 3,99 mmol), seguido de Boc²O (0,849 ml, 3,65 mmol) y la solución se agitó a TA durante 16 h. La mezcla de reacción se diluyó con DCM (15 ml) y la capa orgánica se lavó con agua, salmuera, se secó sobre Na²SO⁴, se filtró y el filtrado se concentró. El compuesto en bruto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (columna REDlSEP® de 24 g, eluyendo con EtoAc al 25 % en hexano). Las fracciones que contenían el producto se combinaron y se evaporaron para proporcionar el intermedio 341E en forma de un semisólido incoloro (0,85 g, 55 %). MS(ES): m/z = 462 [M+H]⁺; RMN ¹H (300 MHz, DMSO-d^s) 5 ppm 5,13 (d, J= 18,89 Hz, 1H), 4,48 (d, J = 18,89 Hz, 1H), 4,13 - 4,31 (m, 4H), 3,84 (s a, 1H), 1,38 - 1,47 (m, 9H), 1,31 (s, 3H), 0,84 - 0,96 (m, 1H), 0,46 (d, J = 8,31 Hz, 2H), 0,38 (d, J= 4,91 Hz, 2H).

Intermedio 341F: Ácido 5-(ferc-butoxicarbonil)-6-ciclopropil-2-yodo-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]pirazin-3-carboxílico

A una solución en agitación del intermedio 341E (0,85 g, 1,843 mmol) en etanol (2 ml) y agua (1 ml) se le añadió NaOH (0,369 g, 9,21 mmol) y la solución resultante se agitó a TA durante 10 h. La mezcla de reacción se diluyó con DCM (10 ml) y se lavó sucesivamente con una solución acuosa de HCl 1 N, agua y salmuera. Después, la capa orgánica se secó sobre Na²SO⁴, se filtró y el filtrado se concentró a presión reducida para proporcionar el intermedio 341F en forma de un sólido de color blanquecino (0,75 g, 94 %). MS(ES): m/z = 434 [M+H]⁺; RMN ¹H (300 MHz, DMSO-d^s) 5 ppm 12,6 (s a, 1H), 5,11 (d, J= 18,89 Hz, 1H), 4,45 (d, J = 18,51 Hz, 1H), 4,16 - 4,25 (m, 2H), 3,82 (s a, 1H), 1,43 (s, 9H), 0,82 - 0,96 (m, 1H), 0,47 (d, J= 7,93 Hz, 2H), 0,35 (dd, J= 6,80, 4,91 Hz, 2H).

Intermedio 341G: 3-carbamo¡l-6-c¡cloprop¡l-2-yodo-6,7-d¡h¡drop¡razolo[1,5-a]p¡raz¡n-5(4H)-carbox¡lato de tere-butilo

A una solución en agitación del intermedio 341F (0,75 g, 1,731 mmol) en DMF (4,0 ml) se le añadió NH⁴Cl (0,463 g, 8,66 mmol), HATU (1,316 g, 3,46 mmol) y DIPEA (1,512 ml, 8,66 mmol) y la solución resultante se agitó a TA durante 16 h. La mezcla de reacción se diluyó con acetato de etilo (10 ml), se lavó con agua y salmuera. La capa orgánica se secó sobre Na²SO⁴, se filtró y el filtrado se concentró a presión reducida. El compuesto en bruto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (columna REDISEP® de 24 g, eluyendo con EtOAc al 65 % en hexanos). Las fracciones que contenían el producto se combinaron y se evaporaron para proporcionar el intermedio 341G en forma de un líquido incoloro (0,51 g, 68 %). MS(ES): m/z = 433 [M+H]⁺; NMR ¹H (300 MHz, DMSO-d^s) 5 ppm 6,83 - 7,50 (m, 2H), 5,07 (d, J= 18,13 Hz, 1H), 4,50 (d, J= 18,51 Hz, 1H), 4,20 (d, J= 2,27 Hz, 2H), 3,84 (s a, 1H), 1,43 (s, 9H), 0,89 (d, J= 9,82 Hz, 1H), 0,47 (d, J= 7,93 Hz, 2H), 0,27 - 0,40 (m, 2^h).

Intermedio 341H: 3-carbamo¡l-2-(3-cloro-4-fluorofen¡l)-6-c¡cloprop¡l-6,7-d¡h¡drop¡razolo[1,5-a]piraz¡n-5(4H)-carbox¡lato de terc-butilo

A una suspensión en agitación del intermedio 341G (0,47 g, 1,087 mmol) en 1,4-dioxano (5 ml) se le añadió K³PO⁴(1,631 ml, 3,26 mmol), ácido (3-cloro-4-fluorofenil)borón¡co (0,246 g, 1,414 mmol) y la mezcla de reacción se purgó con nitrógeno durante 10 min. Después se añadió PdCh(dppf}-CH²Ch (0,053 g, 0,065 mmol) y la mezcla de reacción se calentó a 80 °C y se agitó durante 6 h. La mezcla de reacción se filtró a través de CELITE® y el filtrado se diluyó con acetato de etilo (10 ml) y se lavó con agua y salmuera. La capa orgánica se secó sobre Na²SO⁴, se filtró y el filtrado se concentró a presión reducida. El compuesto en bruto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (columna REDISEP® de 12 g, eluyendo con MeOH al 2 % en CHCb). Las fracciones que contenían el producto se combinaron y se evaporaron para proporcionar el intermedio 341H en forma de un sólido de color blanquecino (0,4 g, 85 %). MS(ES): m/z = 435 [M+H]⁺; NMR ¹H (300 MHz, DMSO-d^s) 5 ppm 7,85 - 7,95 (m, 1H), 7,66 - 7,77 (m, 1H), 7,47 (t, J =9,07 Hz, 1H), 7,20 - 7,39 (m, 2H), 5,05 (d, J = 17,37 Hz, 1H), 4,55 (d, J= 17,37 Hz, 1H), 4,24 (s a, 2h), 3,89 (s a, 1H), 1,45 (s, 9H), 0,87 - 1,05 (m, 1H), 0,31 - 0,55 (m, 4H).

Interm edio 3411: 2-(3-doro-4-fluorofen il)-6 -c idoprop il-4 ,5 ,6 ,7-te trah idrop irazo lo [1 ,5-a ]p irazin-3-carboxam ida,

A una solución en agitación del intermedio 341H (0,43 g, 0,989 mmol) en DCM (8,0 ml) se le añadió TFA (4,0 ml, 51,9 mmol) y la solución resultante se agitó a TA durante 2 h. La mezcla de reacción se concentró y el residuo se extrajo con DCM (10 ml) y se lavó sucesivamente con agua, una solución ac. saturada de NaHCO³y salmuera. La capa orgánica se secó sobre Na²SO⁴, se filtró y el filtrado se concentró a presión reducida para proporcionar el intermedio 341I forma de un sólido de color blanquecino (0,3 g, 67 %). Ms (ES): m/z = 335 [M+h ]+; NMR ¹H (400 MHz, DMSO-d⁶) 5 ppm 7,80 - 7,91 (m, 1H), 7,64 - 7,70 (m, 1H), 7,35 - 7,50 (m, 1H), 7,02 - 7,29 (m, 2H), 4,12 -4,25 (m, 2H), 3,93 (d, J = 16,56 Hz, 1H), 3,68 -3,81 (m, 2H), 2,40 (s a, 1H), 0,82 - 0,98 (m, 1H), 0,48 (d, J = 8,03 Hz, 2H), 0,37 (d, J= 5,02 Hz, 2H).

Compuestos 341 y 342: 2-(3-cloro-4-fluorofenil)-6-ciclopropil-W5-(3,3-difluoro-1-metilciclobutil)-6,7-dihidropirazolo[1,5-a]pirazin-3,5(4H)-dicarboxamida

Los compuestos 341 y 342 se sintetizaron a partir del intermedio 341I usando una secuencia sintética análoga a la preparación del compuesto 297. Se separaron los isómeros individuales mediante purificación por SFC quiral (Columna: CHIRALpAk® IC (4,6 x 250) mm, 5 p, Caudal: 4 ml/min; Isocrática: 35 %; fase móvil B. Temperatura: ambiente a 267 nm (fase móvil A: CO², Fase móvil B: dietilamina al 0,2 % en metanol).

Compuesto 341: Transcurrido a 5,26 min; tiempos de retención de la HPLC 10,33 min. y 9,39 min. (Métodos M y B). MS(ES): m/z = 479 [M+H]⁺; RMN ¹H (400 MHz, DMSO-d⁶) 5 ppm 9,31 (s, 1H), 7,91 (dd, J= 7,28; 2,26 Hz, 1H), 7,69 -7,76 (m, 3H), 7,61 - 7,67 (m, 2H), 7,33 - 7,51 (m, 3H), 5,26 (d, J= 17,57 Hz, 1h), 4,73 (d, J= 17,57 Hz, 1H), 4,31 (d, J= 2,51 Hz, 2H), 4,11 (d, J= 9,54 Hz, 1H), 1,04- 1,15 (m, 1H), 0,35 - 0,61 (m, 4H).

Compuesto 342: Transcurrido a 9,02 min; tiempos de retención de la HPLC 10,33 min. y 9,39 min. (Métodos M y B). MS(ES): m/z = 479 [M+H]⁺; RMN ¹H (400 MHz, DMSO-d⁶) 5 ppm 9,31 (s, 1H), 7,91 (dd, J = 7,28, 2,26 Hz, 1H), 7,69 - 7,76 (m, 3H), 7,61 - 7,67 (m, 2H), 7,33 - 7,51 (m, 3H), 5,26 (d, J= 17,57 Hz, 1^h), 4,73 (d, J= 17,57 Hz, 1H), 4,31 (d, J= 2,51 Hz, 2H), 4,11 (d, J= 9,54 Hz, 1H), 1,04- 1,15 (m, 1H), 0,35 - 0,61 (m, 4H).

Esquema 38

Intermedio A1a: (2,3-dihidroxipropil)carbamato de terc-butilo

El intermedio anterior se sintetizó de acuerdo con un procedimiento de la bibliografía de patente presentado en la publicación de Estados Unidos n.° 2006/69156 A1 (2006).

A una solución de 3-aminopropan-1,2-diol (10,0 g, 110 mmol) en MeOH (407 ml) se le añadió Boc2O (35,9 g, 165 mmol) y TEA (55 ml, 395 mmol) y la mezcla de reacción se calentó a 50 °C durante 20 min, seguido de agitación a temperatura ambiente durante 12 h. Después, la reacción se concentró a presión reducida para proporcionar un residuo. Se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (columna REDISEP® de 330 g, eluyendo con MeOH al 5 % en DCM). Las fracciones que contenían el producto se combinaron y se evaporaron para proporcionar el intermedio A1A (20,14 g, 96 %) en forma de un aceite incoloro. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 6,61 (s a, 1H), 4,63 (d, J= 4,9 Hz, 1H), 4,47 (t, J= 5,6 Hz, 1H), 3,45 (d, J= 5,6 Hz, 1H), 3,31 -3,23 (m, 2H), 3,09 - 2,98 (m, 1H), 2,85 (d, J= 6,6 Hz, 1H), 1,38 (s, 9H).

Intermedio A1B: (3-((íerc-butildimetilsilil)oxi)-2-hidroxipropil) carbamato de terc-butilo

El intermedio anterior se sintetizó de acuerdo con un procedimiento de la bibliografía de patente presentado en la publicación de Estados Unidos n.° 2003/187026 A1 (2003).

A una solución del intermedio A1A (20,14 g, 105 mmol) en DCM (168 ml) se le añadió TEA (17,62 ml, 126 mmol), TBSCI (18,00 g, 116 mmol) y DMAP (0,515 g, 4,21 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 16 h. Después, la mezcla se diluyó con DCM (100 ml) y la capa orgánica se lavó con agua (3 x 100 ml) y salmuera, se secó sobre MgSO⁴anhidro, se filtró y el filtrado se concentró a presión reducida para proporcionar un residuo en bruto. Se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (columna REDISEP® de 330 g, eluyendo con un gradiente de 0 a 30 % de EtOAc en hexanos). Las fracciones que contenían el producto se combinaron y se evaporaron para proporcionar el intermedio A1B (24,46 g, 76 %) en forma de un aceite de color amarillo pálido. RMN ¹H (400 MHz, DMSO-d^s) 5 ppm 6,58 (s a, 1H), 4,69 (d, J= 4,4 Hz, 1H), 3,55 -3,42 (m, 3H), 1,37 (s, 9H), 0,92 - 0,82 (m, 9H).

Intermedio A1C: 4-(3-clorofenil)-2,4-dioxobutanoato de etilo

A una solución enfriada con hielo de 1-(3-clorofenil)etanona (16,79 ml, 129 mmol) y oxalato de dietilo (18,05 ml, 136 mmol) en DMF (78,0 ml) se le añadió, en porciones durante 30 min, NaH (6,09 g, 155 mmol, dispersión al 60 % en aceite mineral) y la mezcla resultante se agitó a esa temperatura durante 20 min. y después a temperatura ambiente durante 16 h. La mezcla de reacción se diluyó con agua y se acidificó a pH ~4-5 con HCl ac. 1 N. Después la mezcla se diluyó más con cantidades copiosas de agua. La capa acuosa se extrajo con EtOAc (4x100 ml) y la capa orgánica combinada se lavó con agua, salmuera, se secó sobre MgSO⁴anhidro, se filtró y el filtrado se concentró a presión reducida para proporcionar un residuo en bruto. Se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (columna REDISEP® de 220 g, eluyendo con un gradiente de 0 a 15 % de EtOAc en hexanos). Las fracciones que contenían el producto se combinaron y se evaporaron para proporcionar el intermedio A1C (27,1 g, 84 %) en forma de un sólido. MS(ES): m/z = 277,10 [M+Na]⁺; NMR ¹H (400 MHz, cloroformo-d) 5 ppm 7,99 (t, J=1,8 Hz, 1H), 7,95 -7,86 (m, 1H), 7,60 (ddd, J= 8,0, 2,1, 1,0 Hz, 1H), 7,48 (t, J= 7,9 Hz, 1H), 7,06 (s, 1H), 4,43 (c, J= 7,3 Hz, 2H), 1,44 (t, J= 7,2 Hz, 3H).

Intermedio A1D: 3-(3-clorofenil)-1H-pirazol-5-carboxilato de etilo

A una suspensión del intermedio A1C (14,57 g, 57,2 mmol) en EtOH (191 ml) se le añadió hidrazina hidrato (5,57 ml, 57,2 mmol, solución al 64 %) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 16 h. La reacción se homogeneizó con el tiempo y después se eliminó un sólido por precipitación. El precipitado espeso se retiró por filtración. La torta de filtro se lavó con un poco de EtOH para proporcionar el producto en forma de un sólido de color blanco. El filtrado se evaporó a sequedad por rotación para proporcionar el producto en bruto en forma de un sólido de color amarillo. Se suspendió en una cantidad mínima de EtOH o MeCN y se eliminó por filtración para dar más producto. El proceso de evaporación por rotación del filtrado a sequedad y la suspensión del sólido resultante en EtOH o MeCN se repitió 2-3 veces más para proporcionar más producto de color blanco durante cada ciclo de filtración. El sólido combinado se secó al vacío durante 3 h para proporcionar el intermedio AA1D (10,9 g, 76 %). MS(ES): m/z = 273 [M+Na]⁺; RMN ¹H (400 MHz, DMSO-d^s) 5 ppm 13,91 (s a, 1H), 7,97 (t, J= 1,8 Hz, 1H), 7,86 (dt, J= 7,8, 1,4 Hz, 1H), 7,55 - 7,33 (m, 4H), 4,34 (c, J= 7,2 Hz, 2H), 1,34 (t, J= 7,2 Hz, 3H).

Intermedio A1E: 3-(3-clorofenil)-1-(2,2,3,3,11,11-hexametil-9-oxo-4,10-dioxa-8-aza-3-siladodecan-6-il)-1H-pirazol-5-carboxilato de etilo

A una suspensión enfriada en hielo del intermedio A1D (7,0 g, 27,9 mmol) y PPh3 (10,99 g, 41,9 mmol) en THF (112 ml) se le añadió una solución de DIAD (8,57 ml, 41,9 mmol) en THF (15 ml). La mezcla de reacción se homogeneizó pronto. Se agitó a esa temperatura durante 30 min, seguido de la adición de una solución del intermedio A1B (10,24 g, 33,5 mmol) en THF (15 ml). La mezcla de reacción resultante se agitó a temperatura ambiente durante 2 h y después se diluyó con EtOAc (150 ml). La capa orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre MgSO4 anhidro, se filtró y el filtrado se concentró a presión reducida para proporcionar un aceite en bruto. Se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (columna REDISEP® de 220 g, eluyendo con de 0 a 15 % de EtOAc en hexanos). Las fracciones que contenían el producto se combinaron y se evaporaron para proporcionar el intermedio A1E (12,5 g, 83 %) en forma de un jarabe espeso. MS(ES): m/z = 438,1 [M-Boc]+; RMN 1H (400 MHz, cloroformo-d) 5 ppm 7,97 (s, 1H), 7,91 - 7,83 (m, 1H), 7,53 - 7,37 (m, 3H), 7,01 (s, 1H), 5,54 (s a, 1H), 4,32 (c, J= 7,0 Hz, 2H), 3,94 (d, J= 6,0 Hz, 2h), 3,48 (s, 1H), 3,39 (d, J= 7,5 Hz, 1H), 1,41 - 1,29 (m, 12H), 0,74 (s, 9H).

Intermedio A1F: 1-(1-amino-3-hidroxipropan-2-il)-3-(3-clorofenil)-1H-pirazol-5-carboxilato de etilo, 2 HCl

A una solución del intermedio A1E (21,0 g, 39 mmol) en 1,4-dioxano (156 ml) se le añadió una solución de HCl (166 ml, 663 mmol, 4 M en 1,4-dioxano) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 12 h. El precipitado de color blanco que se generó se eliminó por filtración y la torta de filtro se lavó con un poco de dioxano. El sólido se secó al vacío durante 4 h para proporcionar el intermedio A1F en forma de una sal bis HCl (11,9 g, 77 %). MS(ES): m/z = 324,0 [M+H]+.

Intermedio A1G: 2-(3-clorofenil)-7-(hidroximetil)-6,7-dihidropirazolo[1,5-a]pirazin-4(5H)-ona

A una suspensión del intermedio A1F (5,23 g, 13,18 mmol) en EtOH (132 ml) se le añadió NH⁴OH (171 ml, 1318 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a TA durante 16 h. La mezcla se homogeneizó pronto y durante la noche se formó un precipitado de color blanco. El sólido se eliminó por filtración y el filtrado se concentró a presión reducida para proporcionar más producto. El sólido de color blanco combinado se secó durante una noche para proporcionar el intermedio A1G (3,5 g, 96 %). MS(ES): m/z = 278,0 [M+H]⁺. RMN ¹H (400 MHz, DMSO-d⁶) 5 ppm 8,22 (s a, 1H), 7,94 (t, J= 1,6 Hz, 1H), 7,86 (dt, J=7,7, 1,3 Hz, 1H), 7,52 - 7,38 (m, 2H), 7,34 (s, 1H), 7,07 (s a, 1H), 5,29 (t, J= 5,8 Hz, 1H), 4,54 - 4,42 (m, 1H), 3,86 -3,71 (m, 3H), 3,65 (dt, J= 13,4, 4,1 Hz, 1H).

Intermedio A1H: 7-(((terc-butilditrietilsilil)oxi)metil)-2-(3-clorofenil)-6,7-dihidropirazolo[1,5-a]pirazin-4(5H)-ona

A una solución del intermedio A1G (4,365 g, 15,72 mmol) en DMF (157 ml) se le añadió imidazol (1,380 g, 20,28 mmol) y TBSCl (2,84 g, 18,86 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 h. La mayoría del DMF se concentró a presión reducida y el residuo se diluyó con agua para generar un precipitado de color blanco. Este sólido se retiró por filtración y la torta de filtro se secó al vacío durante 4 h para proporcionar el intermedio A1H (5,1 g, 83 %). MS(ES): m/z = 392,1 [M+H]⁺. RMN ¹H (400 MHz, DMSO-d⁶) 5 ppm 8,21 (s a, 1H), 7,94 (t, J= 1,6 Hz, 1H), 7,86 (dt, J= 7,5, 1,3 Hz, 1H), 7,52 - 7,37 (m, 2H), 7,35 (s, 1H), 4,58 (s a, 1H), 4,09 -3,92 (m, 2H), 3,63 (s, 1H), 0,91 - 0,79 (m, 9H).

Intermedio A lI: (2-(3-dorofenil)-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]pirazin-7-il)metanol

A una solución del intermedio A1H (4,945 g, 12,61 mmol) en THF (126 ml) se le añadió, gota a gota a -15 °C, una solución 1 M de LAH en THF (31,5 ml, 31,5 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a esa temperatura durante 3 h. La LC-MS muestra principalmente material de partida sin reaccionar. Por lo tanto, se añadió gota a gota más solución 1 M de La H en THF (6,31 ml, 6,31 mmol, 0,5 equivalente) a -15 °C y la RM se dejó calentar de forma gradual a temperatura ambiente y se agitó durante 16 h. La mezcla de reacción se inactivó cuidadosamente a -15 °C con la adición secuencial de H2O (31,5 ml), NaOH (solución ac. al 15 %, 31,5 ml) y H2O (92 ml). Después se dejó la suspensión en agitación a temperatura ambiente durante ~30 min, seguido de la adición de MgSO4 anhidro. La mezcla se agitó durante otros 15 min. y los inorgánicos se eliminaron por filtración. La torta de filtro se lavó con THF (150 ml). El filtrado bifásico se concentró a presión reducida para eliminar el THF. La capa ac. residual se extrajo con DCM (3x50 ml). La capa orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre MgSO4 anhidro, se filtró y se concentró a presión reducida para proporcionar el intermedio A1I (3,1 g, 93 %) escindido con TBS en forma de un sólido pegajoso de color amarillo ligeramente impuro. MS(ES): m/z = 264,0 [M+H]+.

Intermedio A1J: 7-(((íerc-butildimetilsilil)oxi)metil)-2-(3-clorofenil)-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]pirazina

A una solución del intermedio A1I (2,37 g, 8,97 mmol) en DCM (90 ml) se le añadió TBSCl (2,57 g, 17,05 mmol), DMAP (0,164 g, 1,346 mmol) y TEA (3,75 ml, 26,9 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 6 h. Después esta se diluyó con una solución saturada de NaHCO3 ac. y las dos capas se separaron. La capa ac. se extrajo de nuevo con DCM (2x50 ml). Se lavó la capa orgánica combinada con agua, salmuera, se secó sobre MgSO4 anhidro, se filtró y se concentró a presión reducida para dar un aceite. Se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (columna ^rE^dISEP® de 120 g, eluyendo con un gradiente del 40-65 % de EtOAc en hexanos). Las fracciones que contenían el producto se combinaron y se evaporaron para proporcionar el intermedio A1J (3,194 g, 94 %) en forma de un aceite incoloro. MS(ES): m/z = 378,1 [M+H]+.

Intermedio A1K: 7-(((íerc-butildimetilsilil)oxi)metil)-2-(3-clorofenil)-6,7-dihidropirazolo[1,5-a]pirazin-5(4H)-carboxilato de terc-butilo

A una solución del intermedio A1J (3,194 g, 8,45 mmol) en DCM (85 ml) se le añadió Boc2O (2,213 g, 10,14 mmol), DMAP (0,103 g, 0,845 mmol) y TEA (3,53 ml, 25,4 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 h. Esta se inactivó después con una solución saturada de NaHCO3 ac. y las dos capas se separaron. La capa ac. se extrajo de nuevo con DCM (2x50 ml). La capa orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre MgSO4 anhidro, se filtró y se concentró a presión reducida para dar un sólido. Se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (columna REDISEP® de 120 g, eluyendo con EtOAc al 20 % en hexanos). Las fracciones que contenían el producto se combinaron y se evaporaron para proporcionar el intermedio A1K (3,392 g, 84 %) en forma de un aceite. MS(ES): m/z = 478,08 [M+H]+.

Intermedio A1L: 7-(((terc-butildimetilsilil)oxi)metil)-2-(3-clorofenil)-3-yodo-6,7-dihidropirazolo[1,5-a]pirazin-5(4H)-carboxilato de terc-butilo

A una solución del intermedio A1K (3,392 g, 7,09 mmol) en DCM (37,8 ml) y MeOH (9,46 ml) se le añadió NIS (7,66 g, 34,1 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a TA durante 2 h. La solución se concentró después a presión reducida para proporcionar un sólido. Se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (columna REDISEP® de 120 g, eluyendo con un gradiente del 10 al 15 % de EtOAc en hexanos). Las fracciones que contenían el producto se combinaron y se evaporaron para proporcionar el intermedio A1L (4,28 g, >99 %) en forma de un semisólido. MS(ES): m/z = 604,08 [M+H]+.

Intermedio A1M: 7-(((terc-butildimetilsilil)oxi)metil)-2-(3-clorofenil)-3-ciano-6,7-dihidropirazolo [1,5-a]pirazin-5(4H)-carboxilato de terc-butilo

A una solución del intermedio A1L (1,0 g, 1,656 mmol) en DMF (16,56 ml) se le añadió CuCN (0,371 g, 4,14 mmol) y la mezcla de reacción se calentó en un tubo cerrado herméticamente en un baño de aceite a 120 °C durante 16 h. Los inorgánicos se eliminaron por filtración y la torta de filtro se lavó con EtOAc. El filtrado combinado se concentró a presión reducida para dar un residuo en bruto. Se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (columna REDISEP® de 80 g, eluyendo con un gradiente del 10 al 15 % de EtOAc en hexanos). Las fracciones que contenían el producto se combinaron y se evaporaron para proporcionar el intermedio A1M (0,425 g, 51 %) en forma de un aceite. MS(ES): m/z = 504,08 [M+H]+; NMR 1H (400 MHz, DMSO-ds) 5 ppm 7,90 - 7,78 (m, 2H), 7,69 - 7,50 (m, 2H), 4,88 (d, J= 17,6 Hz, 1H), 4,71 (d, J= 17,6 Hz, 1H), 4,48 (s a, 1H), 4,13 (s a, 1H), 4,00 -3,91 (m, 2H), 3,81 (s a, 1H), 1,53 - 1,43 (m, 9H), 0,88 - 0,77 (m, 9H).

Intermedio A1N: 3-carbamoil-2-(3-clorofenil)-7-(hidroximetil)-6,7-dihidropirazolo[1,5-a]]pirazin-5(4H)-carboxilato de terc-butilo

A una solución del intermedio A1M (1,4 g, 2,78 mmol) en DMSO (27 ml) se añadió una solución ac. 5 M de KOH (2,78 ml, 13,91 mmol) y H²O²(5,68 ml, 55,7 mmol, 30 % p/v en H²O) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 3 h. Esta se diluyó después con mucha agua y se extrajo la fase ac. con EtOAc (3x50 ml). Se lavó la capa orgánica combinada con agua, salmuera, se secó sobre MgSO4 anhidro, se filtró y se concentró a presión reducida para dar un sólido en bruto. Se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (columna REDISEP® de 80 g, eluyendo con 100 % de EtOAc). Las fracciones que contenían el producto se combinaron y se evaporaron para proporcionar el intermedio A1N (0,95 g, 84 %) escindido con TBS en forma de un sólido de color blanco. MS(ES): m/z = 407 [M+H]⁺.

Intermedio A1 O: 2-(3-dorofenil)-7-(hidroximetil)-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]pirazin-3-carboxamida

A una solución del intermedio A1N (0,17 g, 0,418 mmol) en DCM (4,18 ml) se le añadió TFA (0,644 ml, 8,36 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 1 h. Los volátiles se evaporaron después a presión reducida y el residuo se basificó con solución ac. saturada de NaHCO3. Las dos capas se separaron y la capa ac. se extrajo con DCM (3x10 ml). La capa orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre MgSO4 anhidro, se filtró y se concentró a presión reducida para dar un sólido en bruto. Se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (columna REDISEP® de 25 g, eluyendo con MeOH al 35 % en DCM). Las fracciones que contenían el producto se combinaron y se evaporaron para proporcionar el intermedio A1O (0,073 g, 57 %) en forma de un sólido de color blanco. MS(ES): m/z = 307 [M+H]+.

Compuesto A1: 2-(3-clorofenil)-W6-(4-cianofenil)-7-(hidroximetil)-6,7-dihidropirazolo[1,5-a]]pirazin-3,5(4H)-dicarboxamida

A una solución del intermedio A1O (0,027 g, 0,088 mmol) en DMF (1,76 ml) se le añadió 4-isocianatobenzonitrilo (0,019 g, 0,132 mmol) y TEA (0,037 ml, 0,264 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 h. Después, la mezcla se eliminó por filtración y el filtrado se purificó mediante LC/MS preparativa. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se evaporaron para proporcionar el compuesto A1 (0,029 g, 70 %). MS(ES): m/z = 451 [M+H]+; Tiempos de ret. de la HPLC 1,41 min. y 2,16 min. (Métodos de HPLC H e I); NMR 1H (600 MHz, DMSO-ds) 5 ppm 7,77 - 7,69 (m, 3H), 7,69 - 7,60 (m, 3H), 7,50 - 7,40 (m, 2H), 7,38 (s a, 1H), 7,23 (s a, 1 ^h), 4,99 - 4,84 (m, 2H), 4,38 - 4,28 (m, 1H), 4,12 - 4,01 (m, 2H), 3,96 -3,87 (m, 1H), 3,81 (dd, J= 1,0, 7,3 Hz, 1H), 1,91 (s, 1H).

Los compuestos descritos en la tabla 30 se sintetizaron haciendo reaccionar el intermedio A1O con la anilina correspondiente.

Tabla 30

(continuación)

Esquema 39

Intermedio A5A: 3-carbamoil-2-(3-dorofenil)-7-(fluorometil)-6,7-dihidropirazolo[1,5-a]pirazin-5(4H)-carboxilato de terc-butilo

A una suspensión del intermedio A1N (0,15 g, 0,369 mmol) en DCM (4,92 ml) enfriada a -78 °C, se le añadió DAST (0,073 ml, 0,553 mmol). La mezcla de reacción se homogeneizó pronto. La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 h. Esta se inactivó con solución ac. saturada de NaHCO3. La capa orgánica se separó y la capa ac. se extrajo con DCM (3x10 ml). La capa orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre MgSO4 anhidro, se filtró y el filtrado se concentró a presión reducida para dar un aceite. Se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (columna REDISEP® de 25 g, eluyendo con EtOAc al 55 % en hexanos). Las fracciones que contenían el producto se combinaron y se evaporaron para proporcionar el intermedio A5A (0,054 g, 35,8 %) en forma de un sólido de color blanco. MS(ES): m/z = 409 [M+H]+.

Intermedio A5B: 2-(3-clorofenil)-7-(fluorometil)-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]pirazin-3-carboxamida, 2 TFA

A una solución del intermedio A5A (0,054 g, 0,132 mmol) en DCM (1,321 ml) se le añadió TFA (0,102 ml, 1,321 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 1 h. Esta se concentró después a presión reducida para proporcionar un residuo. El residuo se secó al vacío para proporcionar el intermedio A5B en forma de la sal bis TFA (0,071 g, > 99 %). MS(ES): m/z = 309,0 [M+H]+.

Compuesto A5: 2-(3-clorofenil)-W6-(4-cianofenil)-7-(fluorometil)-6,7-dihidropirazolo[1,5-a]pirazin-3,5(4H)-dicarboxamida

A una solución del intermedio A5B (0,035 g, 0,065 mmol) en DMF (0,65 ml) se le añadió 4-isocianatobenzonitrilo (0,019 g, 0,130 mmol) y DIPEA (0,057 ml, 0,326 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 1 h. Después, la mezcla se eliminó por filtración y el filtrado se purificó mediante LC/MS preparativa. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se evaporaron para proporcionar el compuesto A5 (0,017 g, 59 %). MS(ES): m/z = 453,30 [M+H]+; Tiempos de ret. de la HPLC 1,44 min. y 2,31 min. (Métodos de HPLC H e I); RMN 1H (500 MHz, DMSO-de) 5 ppm 7,73 (d, J=7.6 Hz, 3H), 7,67 (d, J= 8,5 Hz, 3H), 7,51 - 7,38 (m, 3H), 7,31 (s a, 1H), 5,08 (d, J= 5,8 Hz, 1H), 5,04 - 4,86 (m, 3H), 4,81 (d, J= 7,9 Hz, 1H), 4,70 (s a, 1H), 4,65 (s a, 1H), 4,18 (d, J=10,1

Hz, 1H), 4,04 (dd, J=14,0, 6,4 Hz, 1H).

Los compuestos descritos en la tabla 31 se sintetizaron haciendo reaccionar el intermedio A5B con los reactivos correspondientes.

Esquema 40

Intermedio A12A: 3-carbamoil-2-(3-clorofenil)-7-formil-6,7-dihidropirazolo[1,5-a]pirazin-5(4H)-carboxilato de terc-butilo

A una suspensión del intermedio A1N (0,2 g, 0,492 mmol) en DCM (4,92 ml) se le añadió peryodinano de Dess-Martin (0,271 g, 0,639 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a TA durante 16 h. Después, la mezcla se inactivó con una solución saturada de NaHCO3 ac. Las dos capas se separaron y la capa ac. se extrajo con DCM (2 x 10 ml). La capa orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre MgSO4 anhidro, se filtró y el filtrado se concentró a presión reducida para dar un aceite. Este se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (columna REDISEP® de 40 g, eluyendo con un gradiente de EtOAc al 75 % en hexanos EtOAc al 100 %). Las fracciones que contenían el producto se combinaron y se evaporaron para proporcionar el intermedio A12A (0,054 g, 35,8 %) en forma de un sólido de color blanco. ^{m S ( E S ) :} m/z = 409 [M+H]+; RMN 1H (400 MHz, cloroformo-d) 5 ppm 9,75 (s, 1H), 7,65 - 7,54 (m, 1H), 7,54 - 7,33 (m, 4H), 5,50 (s a, 1H), 4,96 (d, J= 16,8 Hz, 2H), 4,77 (s a, 1H), 4,59 (d, J= 16,1 Hz, 1H), 3,65 (d, J= 12,3 Hz, 1H), 1,58 - 1,37 (m, 9H).

Intermedio A12B: 3-carbamoil-2-(3-clorofenil)-7-(difluorometil)-6,7-dihidropirazolo[1,5-a]pirazin-5(4H)-carboxilato de terc-butilo

A una solución del intermedio A12A (0,105 g, 0,259 mmol) en DCM (2,59 ml) a 0 °C se le añadió DAST (0,103 ml, 0,778 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 16 h. Después, la reacción se interrumpió con una solución ac. saturada de NaHCO³. Las dos capas se separaron y la capa ac. se extrajo con DCM (2x10 ml). La capa orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre MgSO⁴anhidro, se filtró y el filtrado se concentró a presión reducida para dar un aceite. Este se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (columna REDISEP® de 25 g, eluyendo con un gradiente del 55 al 65 % de EtOAc en hexanos). Las fracciones que contenían el producto se combinaron y se evaporaron para proporcionar el intermedio A12B en forma de un sólido de color amarillo. MS(ES): m/z = 427 [M+H]+.

Intermedio A12C: 2-(3-clorofenil)-7-(difluorometil)-4,5,6,7-tetrahidropirazolo [1,5-a]pirazin-3-carboxamida, 2 TFA

El intermedio A12C se sintetizó de manera análoga al intermedio A5B (Esquema 39) haciendo reaccionar el intermedio A12B con TFA. El intermedio A12C (0,029 g, 20 %) se sometió de manera análoga a la sal bis TFA. MS(ES): m/z = 327 [M+H]+.

Compuesto A12: 2-(3-clorofenil)-W5-(4-cianofenil)-7-(difluorometil)-6,7-dihidropirazolo[1,5-a]pirazin-3,5(4H)-dicarboxamida

El compuesto A12 se sintetizó análogo al compuesto A5 haciendo reaccionar el intermedio A12C con 4-isocianatobenzonitrilo. MS(ES): m/z = 471,08 [M+H]+; Tiempos de ret. de la HPLC 1,48 min. y 2,35 min. (Métodos de HPLC H e I respectivamente); RMN 1H (500 MHz, DMSO-ds) 5 ppm 7,96 (s, 1H), 7,78 - 7,70 (m, 3H), 7,67 (d, J= 8,5 Hz, 3H), 7,54 - 7,42 (m, 3H), 7,35 (s a, 1H), 6,55 (s a, 1H), 5,16 (d, J= 17,1 Hz, 1H), 4,93 (s a, 1H), 4,82 (d, J= 17,4 Hz, 1H), 4,50 (dd, J= 14,3, 3,1 Hz, 1H), 3,93 -3,79 (m, 1H).

Esquema 41

Intermedio A13A: 3-carbamoil-2-(3-clorofenil)-7-(((metilsulfonil)oxi)metil)-6,7-dihidropirazolo[1,5-a]pirazin-5(4/-/)carboxilato de terc-butilo

A una suspensión enfriada en hielo del intermedio A1N (0,3 g, 0,737 mmol) en DCM (7,37 ml) se le añadió TEA (0,123 ml, 0,885 mmol), seguido de una adición gota a gota de cloruro de metanosulfonilo (0,063 ml, 0,811 mmol). La mezcla de reacción homogénea resultante se agitó a temperatura ambiente durante 2 h. Después, la reacción se interrumpió con una solución ac. saturada de NaHCO3. Las dos capas se separaron y la capa ac. se extrajo con DCM (2x10 ml). La capa orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre MgSO4 anhidro, se filtró y el filtrado se concentró a presión reducida para dar un aceite. Este se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (columna REDISEP® de 40 g, eluyendo con un gradiente del 75 % al 85 % de EtOAc en hexanos). Las fracciones que contenían el producto se combinaron y se evaporaron para proporcionar el intermedio A13A (0,208 g, 58,2 %) en forma de una espuma de color blanco. MS(ES): m/z = 485 [M+H]+.

Intermedio A13B: 3-carbamoil-2-(3-clorofenil)-7-metil-6,7-dihidropirazolo[1,5-a]pirazin-5(4H)-carboxilato de terc-butilo

A una solución del intermedio A13A (0,08 g, 0,165 mmol) en THF (3,30 ml) se le añadió gota a gota a temperatura ambiente, una solución 1 M de LiEt³BH en THF (1,650 ml, 1,650 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante 2 h. Esta se inactivó cuidadosamente con agua y se extrajo con DCM (3x10 ml). La capa orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre MgSO⁴anhidro, se filtró y el filtrado se concentró a presión reducida para dar un aceite. Este se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (columna REDISEP® de 25 g, eluyendo con un 50 % de EtOAc en hexanos). Las fracciones que contenían el producto se combinaron y se evaporaron para proporcionar el intermedio A13B (0,053 g, 81 %) en forma de una espuma de color blanco. MS(ES): m/z = 391,1 [M+H]⁺.

Intermedio A13C: 2-(3-clorofenil)-7-metil-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]pirazin-3-carboxamida, 2 TFA

El intermedio A13C se sintetizó de forma análoga al intermedio A5B haciendo reaccionar Intermedio A13B con TFA. El intermedio A13C (0,07 g, >99 %) se sometió de manera análoga a la de la sal bis TFA. MS(ES): m/z = 291 [M+H]+.

Compuesto A13: 2-(3-clorofenil)-N5-(4-cianofenil)-7-metil-6,7-dihidropirazolo[1,5-a]pirazin-3,5(4H)-dicarboxamida

El compuesto A13 se sintetizó de manera análoga al compuesto A5 haciendo reaccionar el intermedio A13C con 4-isocianatobenzonitrilo. MS(ES): m/z = 435,0 [M+H]+; Tiempo de retención de la HPLC 1,48 min y 2,41 min. (Métodos H e I respectivamente); r Mn 1H (500 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 9,38 (s, 1H), 7,77 - 7,59 (m, 6H), 7,49 - 7,41 (m, 2H), 7,38 (s a, 1H), 7,22 (s a, 1H), 4,97 (d, J= 17,1 Hz, 1H), 4,86 (d, J= 17,1 Hz, 1H), 4,53 - 4,38 (m, 1H), 4,11 (dd, J= 13,7, 3,7 Hz, 1H), 3,72 (dd, J= 14,2, 6,9 Hz, 1H), 2,89 (s, 1H), 2,73 (s, 1H), 1,49 (d, J= 6,4 Hz, 3H).

Esquema 42

Intermedio A14A: 1-(2,2,3,3,11,11-hexametil-9-oxo-4,10-dioxa-8-aza-3-siladodecan-6-il)-3-yodo-1H-pirazol-4,5-dicarboxilato de dietilo

Una solución del intermedio 104C (1,0 g, 2,96 mmol), el intermedio A1B (1,13 g, 3,70 mmol), trifenilfosfina (0,78 g, 2,96 mmol) y TEA (0,41 ml, 2,96 mmol) en THF (14,79 ml) se enfrió a 0 °C y a esta se le añadió DTBAD (0,7 g, 2,96 mmol). Después la mezcla de reacción se dejó en agitación a temperatura ambiente durante 16 h y después se diluyó con agua y EtOAc. Las dos capas se separaron y la capa ac. se extrajo con EtOAc (2 x 20 ml). La capa orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre MgSO4 anhidro, se filtró y el filtrado se concentró para dar un aceite. Este se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (columna REDISEP® de 80 g, eluyendo con un gradiente del 0 al 15 % de EtOAc en hexanos). Las fracciones que contenían el producto se combinaron y se evaporaron para proporcionar el intermedio A14A (1,2 g, 65 %) en forma de un sólido. MS(ES): m/z = 648,1 [M+Na]+.

Intermedio A14B: 7-(hidroximetil)-2-yodo-4-oxo-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]pirazin-3-carboxilato de etilo

A una solución del intermedio A14A (21,5 g, 34,4 mmol) en DCM (344 ml) se le añadió TFA (47,7 ml, 619 mmol) y la mezcla de reacción se dejó en agitación a temperatura ambiente durante 48 h. Los volátiles se concentraron después a presión reducida. El residuo así obtenido se recogió directamente en EtOH (75 ml) y a este se le añadió hidróxido de amonio (581 ml, 447 mmol, 30 % ac.). Pronto se generó un precipitado. La agitación continuó durante 1 h a temperatura ambiente. El sólido generado se eliminó por filtración. La torta de filtro se aclaró con una pequeña cantidad de EtOH. El filtrado combinado se evaporó parcialmente a presión reducida para generar más precipitado. Este sólido se combinó con la torta de filtro iniciar y se secó al aire para proporcionar el intermedio A14B (18 g, 71,6 %) en forma de un sólido de color blanco. MS(ES): m/z = 365,8 [M+H]+.

Intermedio A14C: 7-(((íerc-butilditrietilsilil)oxi)metil)-2-yodo-4-oxo-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]pirazin-3-carboxilato de etilo

A una solución del intermedio A14B (16,79 g, 46,0 mmol) en DMF (230 ml) se le añadió TBSCl (8,32 g, 55,2 mmol), seguido de imidazol (4,70 g, 69,0 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 1 h. Después, la mezcla se concentró a sequedad, el residuo se diluyó con agua y se extrajo con DCM (2 x 200 ml). La capa orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre MgSO4 anhidro, se filtró y el filtrado se concentró para dar un aceite. Se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (REDISEP® 330 g, eluyendo con un gradiente del 10 al 55 % de EtOAc en hexanos). Las fracciones que contenían el producto se combinaron y se evaporaron para proporcionar el intermedio A14C (16 g, 72,6 %) en forma de un sólido. MS(ES): m/z = 479,9 [M+H]+.

Intermedio A14D: 3-etil 7-(((íerc-butildimetilsilil)oxi)metil)-2-yodo-4-oxo-6,7-dihidropirazolo[1,5-a]pirazin-3,5(4H)-dicarboxilato de 5-terc-butilo

A una solución del intermedio A14C (11,74 g, 24,49 mmol) en tolueno (188 ml) se le añadió DMAP (4,49 g, 36,7 mmol), seguido de Boc2O (6,41 g, 29,4 mmol) y la mezcla de reacción se calentó en un baño de aceite a 60 °C durante 1 h y después a temperatura ambiente durante 16 h. Después se concentró a sequedad para proporcionar un residuo sólido, que se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (REDISEP® 220 g, eluyendo con un gradiente del 5 al 25 % de EtOAc en hexanos). Las fracciones que contenían el producto se combinaron y se evaporaron para proporcionar el intermedio A14D (13,7 g, 96 %) en forma de un sólido de color blanco. MS(ES): m/z = 580,1 [M+H]+.

Intermedio A14E: 3-etil 7-(((terc-but¡ld¡met¡ls¡l¡l)ox¡)met¡l)-2-yodo- 6,7-d¡h¡drop¡razolo[1,5-a]p¡raz¡n-3,5(4H)-dicarboxilato de 5-terc-but¡lo

A una soluc¡ón a -10 °C del ¡ntermed¡o A14D (1,0 g, 1,726 mmol) en THF (4,31 ml), se le añad¡ó SUPER-HYDRIDE® (2,07 ml, 2,071 mmol, 1 M en THF) gota a gota durante 30 m¡n y la mezcla de reacc¡ón se ag¡tó a 0 °C durante 2 h. Después esta se ¡nact¡vó con agua y se extrajo con EtOAc (2 x 25 ml). La capa orgán¡ca comb¡nada se lavó con salmuera, se secó sobre MgSO4 anh¡dro, se f¡ltró y el f¡ltrado se concentró para proporc¡onar el ¡ntermed¡o parc¡almente reduc¡do en forma de una espuma. MS(ES): m/z = 604,15 [M+Na]+. Se usó en la s¡gu¡ente etapa s¡n pur¡f¡cac¡ón ad¡c¡onal.

A una soluc¡ón a -78 °C del ¡ntermed¡o anter¡or en DCM (~8 ml) se le añad¡ó tr¡et¡ls¡lano (0,85 ml, 5,18 mmol), segu¡do de BF3.OEt2 (0,65 ml, 5,18 mmol) y la mezcla de reacc¡ón se ag¡tó a esa temperatura durante 1 h. Poster¡ormente, se añad¡eron más tr¡et¡ls¡lano (0,852 ml, 5,18 mmol) y BF3.OEt2 (0,656 ml, 5,18 mmol) y la ag¡tac¡ón cont¡nuó a -78 °C durante 3 h. La reacc¡ón se ¡nterrump¡ó con una soluc¡ón ac. sat. de NaHCO3, las dos capas se separaron y la capa ac. se extrajo con DCM (2 x 15 ml). La capa orgán¡ca comb¡nada se lavó con salmuera, se secó sobre MgSO4 anh¡dro, se f¡ltró y el f¡ltrado se concentró para proporc¡onar un ace¡te. Este se pur¡f¡có por cromatografía sobre gel de síl¡ce (columna REDISEP® de 80 g, eluyendo con un grad¡ente del 5 al 15 % de EtOAc en hexanos). Las fracc¡ones que contenían el producto se comb¡naron y se evaporaron para proporc¡onar el ¡ntermed¡o A14E (0,42 g, 43 %) en forma de un sól¡do de color blanco. ^{M S ( e S ) :} m/z = 566,15 [M+H]+.

Intermed¡o A14F: Ác¡do 5-(terc-butox¡carbon¡l)-7-(h¡drox¡met¡l)-2-yodo-4,5,6,7-tetrah¡drop¡razolo[1,5-a]p¡raz¡n-3-carboxíl¡co

A una soluc¡ón del ¡ntermed¡o A14E (10,0 g, 17,68 mmol) en etanol (26,8 ml) y THF (53,6 ml) se le añad¡ó una suspens¡ón de L¡OH (6,05 g, 248 mmol) en agua (17,86 ml) y la mezcla de reacc¡ón se ag¡tó a temperatura amb¡ente durante 48 h. Los volát¡les se concentraron a pres¡ón reduc¡da y el res¡duo ac. se extrajo con Et2O. La capa de Et2O se descartó y la capa ac. se ac¡d¡f¡có con una soluc¡ón 1 N de HCl a pH = 2. Después, se extrajo con DCM (4 x 50 ml). La capa orgán¡ca comb¡nada se lavó con salmuera, se secó sobre MgSO4 anh¡dro, se f¡ltró y el f¡ltrado se concentró para proporc¡onar el ¡ntermed¡o A14F (6,87 g, 92 %) en forma de un sól¡do de color blanco, con la pérd¡da concomíante del grupo TBS. MS(ES): m/z = 446,1 [M+Na]+.

Intermed¡o A14G: 3-carbamo¡l-7-(h¡drox¡met¡l)-2-yodo-6,7-d¡h¡drop¡razolo[1,5-a]p¡raz¡n-5(4H)-carbox¡lato de terc-but¡lo

A una soluc¡ón del ¡ntermed¡o A14F (6,87 g, 16,23 mmol) en DMF (27,1 ml) se le añad¡ó DIPEA (11,34 ml, 64,9 mmol) y HATU (12,34 g, 32,5 mmol) y la mezcla se ag¡tó a temperatura amb¡ente durante 30 m¡n, segu¡do de la ad¡c¡ón de NH4Cl (3,47 g, 64,9 mmol). La mezcla resultante cont¡nuó con ag¡tac¡ón a temperatura amb¡ente durante 16 h. Se d¡luyó con agua (250 ml) y se extrajo con DCM (3 x 70 ml). La capa orgán¡ca comb¡nada se lavó con cant¡dades cop¡osas de agua, salmuera, se f¡ltró sobre MgSO4 anh¡dro y el f¡ltrado se concentró para proporc¡onar un ace¡te. Este se pur¡f¡có por cromatografía sobre gel de síl¡ce (columna REDISEP® de 120 g, eluyendo con EtOAc al 5 % en hexanos). Las fracc¡ones que contenían el producto se comb¡naron y se evaporaron para proporc¡onar el ¡ntermed¡o A9G (6,75 g, 98 %) en forma de un sól¡do. MS(ES): m/z = 423,1 [M+H]+.

Intermed¡o A14H: 3-carbamo¡l-2-(3-cloro-4-fluorofen¡l)-7-(h¡drox¡met¡l)-6,7-d¡h¡drop¡razolo[1,5-a]p¡raz¡n-5(4H) carboxilato de terc-butilo

A una solución desgasificada del intermedio A14G (5,1 g, 12,08 mmol) y ácido (3-cloro-4-fluorofenil)borónico (3,16 g, 18,12 mmol) en una solución acuosa 2 M de K3PO4 (18,12 ml, 36,2 mmol) y 1,4-dioxano (121 ml) se le añadió PdCh(dppf) (0,884 g, 1,208 mmol). La mezcla de reacción se desgasificó otra vez durante 5 min. y después se calentó en un tubo cerrado herméticamente en un baño de aceite a 85 °C durante 16 h. La mezcla se concentró a presión reducida hasta casi sequedad, el residuo se repartió entre DCM y agua, las dos capas se separaron y la capa ac. se extrajo con DCM (2 x 40 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre MgSO4 anhidro, se filtró y el filtrado se concentró para proporcionar un aceite. Este se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (columna REDISEP® de 120 g, eluyendo con un gradiente del 65 al 90 % de EtOAc en hexanos). Las fracciones que contenían el producto se combinaron y se evaporaron para proporcionar el intermedio A14H (5,08 g, >99 %) en forma de un sólido de color pardo pálido. MS(ES): m/z = 425,2 [M+^h]+.

Intermedio A14I: 3-carbamoil-2-(3-cloro-4-fluorofenil)-7-(fluorometil)-6,7-dihidropirazolo[1,5-a]pirazin-5(4H)-carboxilato de terc-butilo

A una solución a -78 °C del intermedio A14H (1,84 g, 4,33 mmol) en DCM (43,3 ml) se le añadió DAST (0,57 ml, 4,33 mmol) gota a gota y después la mezcla de reacción se dejó en agitación a temperatura ambiente durante 2 h. Esta se inactivó con una solución ac. sat. de NaHCO3, la capa orgánica se separó y la capa ac. se extrajo con DCM (2 x 20 ml). La capa orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre MgSO4 anhidro, se filtró y el filtrado se concentró a presión reducida para dar un sólido. Este se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (columna REDISEP® de 120 g, eluyendo con un gradiente del 10 al 55 % de EtOAc en hexanos). Las fracciones que contenían el producto se combinaron y se evaporaron para proporcionar el intermedio Al4l (0,56 g, 30,2 %) en forma de un sólido de color blanco. MS(ES): m/z = 427,2 [M+H]+.

Intermedio A14J: 2-(3-cloro-4-fluorofenil)-7-(fluorometil)-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]pirazin-3-carboxamida

A una solución del intermedio A14I (0,2 g, 0,466 mmol) en DCM (4,66 ml) se le añadió TFA (0,72 ml, 9,32 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 h. Los volátiles se evaporaron y el residuo se basificó con una solución ac. sat. de NaHCO3 y se extrajo con una solución al 5 % de MeOH en DCM (3 x 10 ml). La capa orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre MgSO4 anhidro, se filtró y el filtrado se concentró a presión reducida para dar Intermedio A14J (0,15 g, 100 %) en forma de un sólido de color blanquecino. MS(ES): m/z = 327,2 [M+H]+.

Compuestos A14 y A15: W5-(3-cloro-4-c¡anofen¡l)-2-(3-cloro-4-fluorofen¡l)-7-(fluoromet¡l)-6,7-d¡h¡drop¡razolo[1,5-a]p¡raz¡n-3,5(4H)-d¡carboxam¡da

Se añad¡ó gota a gota una soluc¡ón de 4-am¡no-2-clorobenzon¡tr¡lo (0,047 g, 0,306 mmol) y TEA (0,085 ml, 0,612 mmol) en THF (3,4 ml) a una soluc¡ón enfr¡ada en h¡elo de tr¡fosgeno (0,034 g, 0,115 mmol) en THF (3,4 ml). Esta mezcla cont¡nuó en ag¡tac¡ón a esa temperatura durante 30 m¡n, segu¡do de la ad¡c¡ón de una soluc¡ón del ¡ntermed¡o A14J (0,05 g, 0,153 mmol) en DMF (1,7 ml). La mezcla de reacc¡ón resultante se ag¡tó a temperatura amb¡ente durante 16 h. Los volát¡les se evaporaron a pres¡ón reduc¡da y el res¡duo se pur¡f¡có por HPFC preparat¡va para proporc¡onar una mezcla racém¡ca de los compuestos A14 y A15. Los enant¡ómeros ¡nd¡v¡duales A14 y A15 se separaron med¡ante pur¡f¡cac¡ón por SFC qu¡ral usando columna preparat¡va CHIRALPAK® IA (30 x 250) mm, columna de 5 pm, fase móv¡l MeOH al 40 % en CO², pres¡ón de retorno 150 bar (15000 kPa), temperatura de 35 °C, caudal 70,0 ml/m¡n durante 11 m¡n. UV controlado a 265 nm. El ¡sómero (S), compuesto A l4 , se eluyó a 7,24 m¡n. (12,2 mg, 100 % de ee, rend¡m¡ento = 15,78 %) y el ¡sómero (R), compuesto A15 se eluyó a 8,61 m¡n. (13,4 mg, 100 % de ee, rend¡m¡ento = 17,33 %). MS: m/z = 505,3 [M+H]⁺; T¡empo de retenc¡ón de la HPFC 1,73 m¡n. y 2,69 m¡n. (Métodos H e I respect¡vamente); NMR ¹H (500 MHz, DMSO-d⁶) 5 ppm 7,92 - 7,80 (m, 3H), 7,75 - 7,66 (m, 1H), 7,59 (d, J= 9,2 Hz, 1H), 7,49 (t, J= 9,0 Hz, 1H), 7,43 (s a, 1H), 7,31 (s a, 1H), 5,02 - 4,92 (m, 2H), 4,90 (d, J= 13,9 Hz, 1H), 4,80 (d, J= 9,9 Hz, 1H), 4,69 (s a, 1H), 4,65 (s a, 1H), 4,17 (dd, J= 14,3, 4,4 Hz, 1H), 4,05 (dd, J=14,1,6,8 Hz, 1H).

Los compuestos descr¡tos en la tabla 32 se s¡ntet¡zaron hac¡endo reacc¡onar el ¡ntermed¡o A14J con la an¡l¡na correspond¡ente.

Tabla 32

Esquema 43

Intermedio A18C: 2-(3-doro-4-fluorofenil)-7-(difluorometil)-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]pirazin-3-carboxamida

El intermedio A18C se sintetizó a partir del intermedio A14H siguiendo la secuencia sintética mostrada en el esquema 40 para la síntesis del intermedio A12C. MS(ES): m/z = 345,0 [M+H]+.

Compuestos A18 y A19: (S)-W5-(3-cloro-4-cianofenil)-2-(3-cloro-4-fluorofenil)-7-(difluorometil)-6,7-dihidropirazolo[1,5-a]pirazin-3,5(4H)-dicarboxamida

La mezcla racémica de los compuestos A18 y A19 se sintetizó de manera análoga a los compuestos A14 y A15 (esquema 42) haciendo reaccionar el intermedio A18C con 4-amino-2-clorobenzonitrilo. Los enantiómeros individuales A18 y A19 se separaron mediante purificación por SFC quiral usando columna preparativa CHIRALPAK® AS (21 x 250) mm, columna de 10 pm, disolvente A: dietilamina al 0,1 % en heptano, Disolvente B: EtOH al 100 %, % de partida de B: 30, isocrático, caudal 15,0 ml/min durante 32 min. UV controlado a 254 nm. El isómero (S), compuesto A18, se eluyó a 21,012 min. (10,4 mg, 100 % de ee, rendimiento = 12,65 %) y el isómero R, A19, se eluyó a 11,008 min. (10,6 mg, 100 % de ee, rendimiento = 12,76 %). MS(ES): m/z = 523,3 [M-H]⁺; Tiempos de retención de la HPLC 1,77 min. y 2,70 min. (Métodos H e I respectivamente); NMR ¹H (500 m Hz, DMSO-d⁶) 5 ppm 7,93 - 7,80 (m, 3H), 7,69 (d, J= 4,8 Hz, 1H), 7,60 (d, J= 8,1 Hz, 1H), 7,55 - 7,44 (m, 2H), 7,40 (s a, 1H), 5,18 (d, J= 17,2 Hz, 1H), 4,93 (s a, 1H), 4,82 (d, J= 16,9 Hz, 1H), 4,51 (d, J= 11,7 Hz, 1H), 3,88 (d, J= 13,6 Hz, 1H), 3,39 (s a, 1H).

Los compuestos descritos en la tabla 33 se sintetizaron de forma análoga a los compuestos A18 y A19 haciendo reaccionar el intermedio A18C con los reactivos correspondientes.

Tabla 33

Esquema 44

Intermedio A24A: 3-carbamo¡l-2-(3-cloro-4-fluorofen¡l)-7-(morfol¡nomet¡l)-6,7-d¡h¡dropirazolo[1,5-a]pirazin-5(4 H)-carboxilato de terc-butilo

A una solución del intermedio A18A (0,17 g, 0,402 mmol) en DCM (5,36 ml) y MeOH (2,68 ml) se le añadió morfolina (0,088 ml, 1,005 mmol), seguido de cianoborohidruro sódico (0,076 g, 1,21 mmol) y ácido acético glacial (0,023 ml, 0,402 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 8 h. Esta se inactivó con una solución ac. sat. de NaHCO3, las dos capas se separaron y la capa ac. se extrajo con DCM (2x10 ml). La capa orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre MgSO4 anhidro, se filtró y el filtrado se concentró a presión reducida para proporcionar un aceite. Este se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (columna REDISEP® de 24 g, eluyendo con un gradiente del 40 al 60 % de EtOAc en DCM). Las fracciones que contenían el producto se combinaron y se evaporaron para proporcionar el intermedio A24A (0,086 g, 43,3 %) en forma de una espuma de color blanquecino. ^{m S ( E S ) :}m/Z = 494,1 [M+H]+.

Intermedio A24B: 2-(3-cloro-4-fluorofenil)-7-(morfolinometil)-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]pirazin-3-carboxamida, 2 TFA

A una solución del intermedio A24A (0,086 g, 0,174 mmol) en DCM (1,74 ml) se le añadió TFA (0,134 ml, 1,741 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 1 h. Después esta se concentró a sequedad a presión reducida para proporcionar el intermedio A24B en bruto (0,105 g, >99 %) en forma de la sal bis TFA. MS(ES): m/z = 394,0.

Compuestos A24 y A25: 2-(3-cloro-4-fluorofen¡l)-W5-(4-c¡anofen¡l)-7-(morfol¡nomet¡l)-6,7-d¡h¡drop¡razolo[1,5-a]p¡raz¡n-3,5(4H)-d¡carboxam¡da

A una soluc¡ón del ¡ntermed¡o A24B (0,054 g, 0,087 mmol) en DMF (0,87 ml) se le añad¡ó DIPEA (0,091 ml, 0,521 mmol), segu¡do de 4-¡soc¡anatobenzon¡tr¡lo (0,038 g, 0,260 mmol) y la mezcla de reacc¡ón se agitó a temperatura amb¡ente durante 1 h. Se purificó por HPLC preparat¡va para proporc¡onar una mezcla racém¡ca de los compuestos A24 y A25. Los enant¡ómeros ¡nd¡v¡duales A24 y A25 se separaron med¡ante pur¡f¡cac¡ón por SFC qu¡ral usando columna preparat¡va CHIRALCEL® OD (21 x 250) mm, columna de 10 pm, d¡solvente A: d¡et¡lam¡na al 0,1 % en heptano, D¡solvente B: EtOH al 100 %, % de part¡da de B: 25, ¡socrát¡co, caudal 15,0 ml/m¡n durante 35 m¡n. UV controlado a 254 nm. El ¡sómero (S), compuesto A24, se eluyó a 25,022 m¡n. (9,7 mg, 100 % de ee, rend¡m¡ento = 20,56 %) y el ¡sómero (R), compuesto A25, se eluyó a 18,054 m¡n. (7,6 mg, 100 % de ee, rend¡m¡ento = 15,94 %). MS: m/z = 538,2 [M+H]+; T¡empos de retenc¡ón de la HPLC 1,57 m¡n. y 2,46 m¡n. (Métodos H e I respect¡vamente); RMN 1H (500 MHz, DMSO-ds) 5 ppm 7,85 (dd, J= 7,3, 1,8 Hz, 1H), 7,78 - 7,64 (m, 5H), 7,48 (t, J= 9,0 Hz, 1H), 7,41 (s a, 1H), 7,25 (s a, 1H), 5,20 (d, J= 17,2 Hz, 1H), 4,71 (d, J= 16,9 Hz, 1H), 4,61 - 4,50 (m, 1H), 4,45 (d, J= 14,7 Hz, 1H), 3,85 -3,71 (m, 1H), 3,55 (s a, 4H), 2,83 - 2,74 (m, 2H), 2,64 - 2,52 (m, 3H), 2,38 - 2,25 (m, 2H).

Esquema 45

Interm edio A26A: Ác ido 5-(ferc-butoxicarbonil)-3-carbam oil-2-(3-cloro-4-fluorofen il)-4 ,5 ,6 ,7-te trah idropirazo lo[1,5-a] p irazin-7-carboxílico

A una solución del intermedio A14H (2,0 g, 4,71 mmol) en DMF (47,1 ml) se le añadió dicromato de piridinio (12,40 g, 33,0 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 48 h. Esta se diluyó después con agua (250 ml) y se extrajo con EtOAc (3x50 ml) La capa orgánica combinada se lavó con agua, salmuera, se secó sobre MgSO4 anhidro, se filtró y el filtrado se concentró a presión reducida para proporcionar el intermedio A26A en bruto (1,47 g, 71,2 %) en forma de un sólido de color pardo. MS(ES): m/z = 439,3 [M+H]+.

Intermedio A26B: 7-metil 3-carbamoil-2-(3-cloro-4-fluorofenil)-6,7-dihidropirazolo[1,5-a]pirazin-5,7(4H)-dicarboxilato de 5-terc-butilo

A una solución del intermedio A26A en bruto (1,47 g, 3,35 mmol) en DCM (16,75 ml) y MeOH (16,75 ml) se le añadió TMS-diazometano (5,02 ml, 10,05 mmol, solución 2 M en THF) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 h. Después, la mezcla se concentró a sequedad a presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (columna REDISEP® de 40 g, eluyendo con un gradiente del 45 al 55 % de EtOAc en hexanos). Las fracciones que contenían el producto se combinaron y se evaporaron para proporcionar el intermedio A26B (0,9 g, 59,4 %) en forma de un sólido amorfo de color blanco. MS(ES): m/z = 451,3 [M-H]+.

Intermedio A26C: 3-carbamoil-2-(3-cloro-4-fluorofenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-6,7-dihidropirazolo[1,5-a]pirazin-5(4H)-carboxilato de terc-butilo

A una solución a -78 °C del intermedio A26B (0,9 g, 1,990 mmol) en THF (19,90 ml) se le añadió una solución de bromuro de metilmagnesio (3,32 ml, 9,95 mmol, 3 M en hexanos) gota a gota. Se dejó que la mezcla de reacción alcanzara gradualmente la temperatura ambiente y se agitó durante 16 h. Esta se inactivó con una solución ac. sat. de NH4Cl, las dos capas se separaron y la capa ac. se extrajo con EtOAc (2 x 60 ml). La capa orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre MgSO4 anhidro, se filtró y el filtrado se concentró a presión reducida para dar un aceite. Este se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (columna REDISEP® de 80 g, eluyendo con un gradiente del 60 al 70 % de EtOAc en DCM). Las fracciones que contenían el producto se combinaron y se evaporaron para proporcionar el intermedio A26C (0,84 g, 93 %) en forma de un sólido de color amarillo. (ES): m/z = 453,08 [M+H]+.

Interm edio A26D: 2 -(3-doro-4-fluorofen il)-7-(2-h idroxipropan-2-il)-4 ,5 ,6 ,7-te trah idrop irazo lo[1,5-a]p irazin-3-carboxam ida

A una solución del intermedio A26C (0,45 g, 0,994 mmol) en DCM (10,0 ml) se le añadió TFA (1,53 ml, 19,87 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 1 h. Los volátiles se concentraron a presión reducida y el residuo se neutralizó con una solución ac. sat. de NaHCO3 y se extrajo con una solución al 5 % de MeOH en DCM (3 x 20 ml). La capa orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre MgSO4 anhidro, se filtró y el filtrado se concentró a presión reducida para dar el intermedio A26D (0,34 g, 96 %) en forma de un sólido. (ES): m/z = 375,02 [M+Na]+.

Compuestos A26 y A27: 2-(3-cloro-4-fluorofenil)-W5-(4-cianofenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-6,7-dihidropirazolo[1,5-a]pirazin-3,5(4H)-dicarboxamida

Una solución del intermedio A26D (0,05 g, 0,142 mmol), 4-isocianatobenzonitrilo (0,051 g, 0,354 mmol) y DIPEA (0,087 ml, 0,496 mmol) en DMF (1,42 ml) se agitó a temperatura ambiente durante 1 h. La mezcla de reacción se purificó mediante HPLC preparativa para proporcionar una mezcla racémica de los compuestos A26 y A27. Los enantiómeros individuales A26 y A27 se separaron mediante separación por SFC quiral usando columna preparativa CHIRALPAK® IA (30 x 250) mm, columna de 5 pm, fase móvil: MeOH al 40 % en CO², presión de retorno 150 bar (15000 kPa), temperatura de 35 °C, caudal 70,0 ml/min durante 16 min. UV controlado a 265 nm. El isómero (S), compuesto A26 se eluyó a 5,71 min. (13,5 mg, 100 % de ee, rendimiento = 18,59 %) y el isómero (R), compuesto A27 se eluyó a 11,43 min. (13,6 mg, 100 % de ee, rendimiento = 19,12 %). MS(ES): m/z = 497,4 [M+H]⁺; Tiempos de retención de la HPLC 1,50 min. y 2,41 min. (Métodos H e I respectivamente); RMN ¹H (500 MHz, DMSO-d⁶) 5 ppm 7,87 (d, J= 7,3 Hz, 1H), 7,78 - 7,62 (m, 5H), 7,49 (t, J= 9,0 Hz, 1H), 7,43 (s a, 1H), 7,28 (s a, 1H), 5,02 (d, J= 16,9 Hz, 1H), 4,83 (d, J= 16,9 Hz, 1H), 4,43 (dd, J= 13,9, 3,7 Hz, 1H), 4,26 (t, J= 3.9 Hz, 1H), 3,71 (dd, J= 14,1, 4,2 Hz, 1H), 3,37 (d, J= 5,7 Hz, 1H), 1,32 (s, 3H), 1,08 (s, 3^h).

Esquema 46

Intermedio A28B: 2-(3-cloro-4-fluorofenil)-A/7-(tetrah¡dro-2/-/-p¡ran-4-il)-4,5,6,7-tetrah¡drop¡razolo[1,5-a]pirazin-3,7-dicarboxamida, 2 TFA

Una solución del intermedio A26A (0,103 g, 0,235 mmol), tetrahidro-2H-piran-4-amina, HCl (0,13 g, 0,939 mmol), HATU (0,18 g, 0,469 mmol) y DIPeA (0,164 ml, 0,939 mmol) en DMF (2,35 ml) se agitó a temperatura ambiente durante 16 h. La mezcla de reacción se diluyó con agua y se extrajo con EtOAc (3x10 ml). Se lavó la capa orgánica combinada con agua, salmuera, se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró para proporcionar la amida intermedia A28A. MS(ES): m/z = 544,1 [M+Na]+. El producto en bruto se sometió a desprotección del grupo Boc sin purificación.

A una solución del intermedio A28A en DCM (2 ml) se le añadió TFA (0,27 ml, 3,52 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 1 h. Después, la mezcla se concentró a sequedad para proporcionar el intermedio A28B en bruto (0,15 g, >99 %) en forma de la sal bis TFA. MS(ES): m/z = 422,0 [M+H]+.

Compuestos A28 y A29: 2-(3-doro-4-fluorofen¡l)-W5-(4-danofen¡l)-N7-(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)-6,7-d¡h¡drop¡razolo[1,5-a]p¡raz¡n-3,5,7(4H)-tr¡carboxam¡da

A una soluc¡ón del ¡ntermed¡o A28B (0,065 g, 0,100 mmol) en DMF (1,0 ml) se le añad¡ó DIPEA (0,087 ml, 0,500 mmol), segu¡do de 4-¡soc¡anatobenzon¡tr¡lo (0,036 g, 0,250 mmol) y la mezcla de reacc¡ón se ag¡tó a temperatura amb¡ente durante 1 h. Se pur¡f¡có med¡ante HPLC preparat¡va para proporc¡onar una mezcla racém¡ca de los compuestos A28 y A29. Los enant¡ómeros ¡nd¡v¡duales A28 y A29 se separaron med¡ante separac¡ón por SFC qu¡ral usando columna preparat¡va CHIRALPAK® IA (30 x 250) mm, columna de 5 pm, fase móv¡l: MeOH al 45 % en CO², temperatura de 35 °C, caudal 70,0 ml/m¡n durante 23 m¡n. UV controlado a 266 nm. El ¡sómero (S), compuesto A28, se eluyó a 5,43 m¡n. (5,1 mg, 100 % de ee, rend¡m¡ento = 8,92 %) y el ¡sómero (R), compuesto A29 se eluyó a 17,43 m¡n. (5,0 mg, 100 % de ee, rend¡m¡ento = 8,3 %). MS(ES): m/z = 566,3 [M+H]⁺; T¡empo de retenc¡ón de la HPLC 1,60 m¡n y 2,17 m¡n. (Métodos H e I respect¡vamente); RMN ¹H (500 MHz, DMSO-d⁶) 5 ppm 8,52 (d, J= 7,7 Hz, 1H), 7,82 (dd, J= 7,3, 1,8 Hz, 1H), 7,74 - 7,57 (m, 5H), 7,47 (t, J= 9,0 Hz, 1H), 7,40 (s a, 1H), 7,27 (s a, 1H), 5,19 (d, J= 17,2 Hz, 1H), 4,97 (s a, 1H), 4,76 (d, J= 17,2 Hz, 1H), 4,52 - 4,38 (m, 1H), 3,97 (d, J= 10,3 Hz, 1H), 3,84 -3,77 (m, 1H), 3,75 -3,60 (m, 2H), 3,41 (s a, 1H), 3,37 -3,27 (m, 1H), 3,27 -3,14 (m, 1H), 1,70 (d, J= 12,5 Hz, 1H), 1,58 (d, J= 12,5 Hz, 1H), 1,50 - 1,28 (m, 2H).

Esquema 47

Intermed¡o A30C: 2-(3,4-d¡clorofen¡l)-7-(fluoromet¡l)-4,5,6,7-tetrah¡drop¡razolo [1,5-a]p¡raz¡n-3-carboxam¡da

El ¡ntermed¡o A30C se s¡ntet¡zó de manera análoga al ¡ntermed¡o A14J pr¡mero med¡ante acoplam¡ento del intermedio A14G con ácido 3,4-didorofenilborónico, seguido de la secuencia sintética descrita en el esquema 42. MS(ES): m/z = 343,1 [M+H]+.

Compuestos A30 y A31: W5-(4-cianofenil)-2-(3,4-diclorofenil)-7-(fluorometil)-6,7-dihidropirazolo[1,5-a]pirazin-3,5(4H)-dicarboxamida

Una solución del intermedio A30C (0,05 g, 0,146 mmol), 4-isocianatobenzonitrilo (0,052 g, 0,364 mmol) y DIPEA (0,076 ml, 0,437 mmol) en DMF (1,46 ml) se agitó a temperatura ambiente durante 1 h. La mezcla de reacción se purificó por HPLC preparativa para proporcionar una mezcla racémica de los compuestos A30 y A31. Los enantiómeros individuales A30 y A31 se separaron mediante purificación por SFC quiral usando columna preparativa CHIRALPAK® IA (30 x 250) mm, columna de 5 pm, caudal 70,0 ml/min durante 16 min.; fase móvil: MeOH al 40 % en CO². Temperatura: 35 °C, presión de retorno 150 bar (15000 kPa), UV controlada a 265 nm, Contrapresión: 150 bar (15000 kPa). El isómero (S), compuesto A30 se eluyó a 9,23 min. (14,4 mg, 100 % de ee, rendimiento = 20,28 %) y el isómero (R), compuesto A31 se eluyó a 12,89 min. (14,0 mg, 100 % de ee, rendimiento = 19,72 %). MS(ES): m/z = 487,3 [M+H]⁺; Tiempos de retención de la HPFC 1,62 min y 2,49 min. (Métodos H e I respectivamente); RMN ¹H (500 MHz, DMSO-d⁶) 5 ppm 7,89 (s, 1H), 7,77 - 7,59 (m, 6H), 7,42 (s a, 1H), 7,38 (s a, 1H), 5,06 (d, J = 5,9 Hz, 1^h), 5,02 - 4,91 (m, 3H), 4,88 (d, J= 12,1 Hz, 1H), 4,78 (d, J= 10,3 Hz, 1H), 4,68 (s a, 1H), 4,63 (s a, 1H), 4,20 - 4,11 (m, 1H), 4,11 - 4,01 (m, 1H).

Esquema 48

Interm edio A32C: 2 -(3 ,4-d id oro fen il)-7-m etil-4 ,5 ,6 ,7-te trah idrop irazo lo[1,5-a]p irazin-3-carboxam ida

El intermedio A32C se sintetizó a partir del intermedio A30A usando una secuencia sintética análoga a la preparación del intermedio A13C (esquema 41). MS(ES): m/z = 325,1 [M+H]+.

Compuestos A32 y A33: W5-(ferc-butilo)-2-(3,4-diclorofenil)-7-metil-6,7-dihidropirazolo[1,5-a]pirazin-3,5(4H)-dicarboxamida

Una solución del intermedio A32C (0,05 g, 0,154 mmol), 4-isocianatobenzonitrilo (0,057 g, 0,384 mmol) y DIPEA (0,08 ml, 0,461 mmol) en DMF (1,54 ml) se agitó a temperatura ambiente durante 1 h. La mezcla de reacción se purificó por HPLC preparativa para proporcionar una mezcla racémica de los compuestos A32 y A33. Los enantiómeros individuales A32 y A33 se separaron mediante purificación por SFC quiral usando columna preparativa CHIRALPAK® AD (21 x 250) mm, columna de 10 pm, disolvente A: dietilamina al 0,1 % en heptano, Disolvente B: EtOH al 100 %, % de partida de B: 5,0, isocrático, caudal 15,0 ml/min durante 70 min. UV controlado a 254 nm. El isómero (S), compuesto A32, se eluyó a 38,833 min. (18,7 mg, 100 % de ee, rendimiento = 25,9 %) y el isómero (R), compuesto A33, se eluyó a 48,49 min. (18,3 mg, 100 % de ee, rendimiento = 25,4 %). MS(ES): m/z = 469,3; NMR 1H (500 MHz, DMSO-ds) 5 ppm 7,79 - 7,62 (m, 6H), 7,43 (s a, 1H), 7,33 (s a, 1H), 4,99 (d, J= 1,2 Hz, 1H), 4,86 (d, J= 16,9 Hz, 1H), 4,54 - 4,40 (m, 1H), 4,12 (dd, J= 13,9, 3,7 Hz, 1H), 3,72 (dd, J= 14,1,6,8 Hz, 1H), 3,38 (d, J= 4,8 Hz, 1H), 1,50 (d, J= 6,2 Hz, 3H).

Esquema 49

Intermedio A34D: 2-(3,4-d ic lorofen il)-7-(2-h idroxipropan-2-il)-4 ,5 ,6 ,7-te trah idrop irazo lo[1,5-a]p irazin-3-carboxam ida

El intermedio A34D se sintetizó a partir del intermedio A30A usando una secuencia sintética análoga a la preparación del intermedio A26D (esquema 45). MS(ES): m/z = 369,1 [M+H]+.

Compuestos A34 y A35: W5-(4-cianofenil)-2-(3,4-diclorofenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-6,7-dihidropirazolo[1,5-a]pirazin-3,5(4H)-dicarboxamida

La mezcla racémica de los compuestos A34 y A35 se sintetizó de forma análoga a los compuestos A26 y A27 (esquema 45) haciendo reaccionar el intermedio A34D con 4-isocianatobenzonitrilo. La mezcla de reacción se purificó mediante HPLC preparativa para proporcionar una mezcla racémica de los compuestos A34 y A35. Los enantiómeros individuales a 34 y A35 se separaron mediante separación por SFC quiral usando columna preparativa CHIRALPAK® IA (30 x 250) mm, columna de 5 qm, fase móvil: MeoH al 40 % en CO², temperatura de 35 °C, presión de retorno 150 bar (15000 kPa), caudal 70,0 ml/min durante 25 min. UV controlado a 265 nm. El isómero (S), compuesto A34 se eluyó a 7,45 min. (13,4 mg, 100 % de ee, rendimiento = 19,28 %) y el isómero (R), compuesto A35 se eluyó a 18,57 min. (12,8 mg, 100 % de ee, rendimiento = 18,41 %). MS(ES): m/z = 513,3 [M+H]⁺; Tiempo de retención de la HPLC 1,64 min y 2,54 min. (Métodos H e I respectivamente); R^mN ¹H (500 MHz, DMSo-d⁶) 5 ppm 7,90 (s, 1H), 7,77 - 7,59 (m, 7H), 7,43 (s a, 1H), 7,36 (s a, 1H), 5,01 (d, J= 16,9 Hz, 1H), 4,81 (d, J= 17,2 Hz, 1H), 4,43 (d, J= 14,3 Hz, 1H), 4,27 (s a, 1H), 3,69 (d, J = 9,5 Hz, 1H), 1,32 (s, 3H), 1,13-1,04 (m, 3H).

Esquema 51

Intermedio A37A: (3-bromo-4-cianofenil)carbamato de di-terc-butilo

A una solución de 4-amino-2-bromobenzonitrilo (4,68 g, 23,75 mmol) en THF (60 ml) se le añadió TEA (6,62 ml, 47,5 mmol), DMAP (0,290 g, 2,375 mmol) y BOC-anhídrido (5,63 ml, 24,23 mmol). La mezcla de reacción se dejó en agitación a TA durante una noche. Esta se concentró y el residuo se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (columna REDISEP® de 80 g, eluyendo con un gradiente del 0-15 % de EtOAc en hexanos). Las fracciones que contenían el producto se combinaron y se evaporaron para proporcionar el intermedio A37A (3,8 g, 40,3 %). MS(ES): m/z = 420,8 [M+Na]+; RMN 1H (400 MHz, cloroformo-d) 5 ppm 7,71 - 7,53 (m, 2H), 7,50 (d, J= 1,5 Hz, 1h), 1,48 (s, 18H).

Intermedio A37B: 4-amino-2-morfolinobenzonitrilo

A un vial se le añadió el intermedio A37A (300 mg, 0,755 mmol), morfolina (132 mg, 1,510 mmol), terc-butóxido sódico (109 mg, 1,133 mmol), Pd²(dba)³(69,2 mg, 0,076 mmol), Xantphos (87 mg, 0,151 mmol) y dioxano (8 ml). La mezcla de reacción se purgó con nitrógeno durante 5 min y se tapó. Se calentó a 105 °C durante 5 h. La mezcla de reacción se enfrió a TA y se diluyó con partes iguales de agua y DCM. La capa orgánica se separó y la capa acuosa se extrajo dos veces más con DCM. La capa orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre Na²SO⁴y se filtró. El filtrado se concentró. El material en bruto se disolvió en DCM (15 ml) y se trató con TFA (3 ml). La mezcla de reacción se agitó a TA durante una noche y se concentró. El residuo se diluyó con MeOH al 20 % en CHCb y se inactivó cuidadosamente con una solución ac. saturada de NaHCO³. La capa orgánica se separó y la capa acuosa se extrajo dos veces more con CHCI³. La capa orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre Na²SO⁴y se filtró. El filtrado se concentró. El producto en bruto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (columna REDISEP® de 40 g, eluyendo con un gradiente del 30-80 % de EtOAc en hexano). Las fracciones que contenían el producto se combinaron y se evaporaron para proporcionar el intermedio A37B (62 mg, 40,5 %). MS(ES): m/z = 204,1 [M+H]⁺.

Intermedio A37D: 4-amino-2-ciclopropilbenzonitrilo

A un recipiente de microondas se le añadió ácido ciclopropilborónico (441 mg, 5,14 mmol), el intermedio A37A (510 mg, 1,284 mmol), THF (8 ml), una solución ac. 2 M de hidróxido potásico (2,57 ml, 5,14 mmol) y Pd(Ph³P)⁴(148 mg, 0,128 mmol). La mezcla de reacción se purgó con nitrógeno durante 3 min, y se calentó a 100 °C en un microondas durante 2 h. La mezcla de reacción se enfrió a TA y se diluyó con partes iguales de agua y DCM. La capa orgánica se separó y la capa acuosa se extrajo dos veces más con DCM. La capa orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre Na²SO⁴y se filtró. El filtrado se concentró para proporcionar el intermedio A37C en bruto que se usó tal cual, sin purificación adicional.

A una solución del intermedio A37C en bruto en DCM (15 ml) se le añadió TFA (6 ml). La mezcla de reacción se agitó a TA durante una noche y se concentró. El residuo se purificó por HPLC preparativa. Las fracciones que contenían el producto se combinaron y se evaporaron para proporcionar el intermedio A37D (84 mg, 41,4 %). MS(ES): m/z = 159,2 [M+H]⁺. RMN ¹H (400 MHz, metanol-d⁴)) 5 ppm 7,22 (d, J= 8,3 Hz, 1H), 6,54 (d, J= 1,5 Hz, 1h), 6,39 (dd, J= 8,0, 1,5 Hz, 1H), 1,91 - 1,74 (m, 1H), 1,06 - 0,94 (m, 2H), 0,80 - 0,63 (m, 2H).

Compuesto A37: 2-(3-clorofen¡l)-W5-(4-c¡ano-3-morfol¡nofen¡l)-6,7-d¡h¡drop¡razolo[1,5-a]p¡raz¡n-3,5(4H)-d¡carboxam¡da

A una soluc¡ón de tr¡fosgeno (25 mg, 0,084 mmol) en THF (2 ml) enfr¡ado a 0 °C se le añad¡ó una soluc¡ón del ¡ntermed¡o A37B (35 mg, 0,172 mmol) y TEA (0,096 ml, 0,689 mmol) en THF (2 ml). La suspens¡ón resultante se dejó en ag¡tac¡ón a 0 °C durante 30 m¡n, antes de la ad¡c¡ón de una soluc¡ón del ¡ntermed¡o 156E (42,9 mg, 0,155 mmol) en DMF (1 ml). La mezcla de reacc¡ón se ag¡tó a TA durante una noche y se d¡luyó con partes ¡guales de agua y DCM. La capa orgán¡ca se separó y la capa acuosa se extrajo dos veces más con ^dC^m. La capa orgán¡ca comb¡nada se lavó con salmuera, se secó sobre Na²SO⁴y se f¡ltró. El f¡ltrado se concentró para proporc¡onar el mater¡al en bruto que se pur¡f¡có por HPLC preparat¡va. Las fracc¡ones que contenían el producto deseado se comb¡naron y se secaron al vacío para proporc¡onar el compuesto A37 (8,2 mg, 9,4 %). MS(ES): m/z = 506,3 [M+H⁺; T¡empos de retenc¡ón de la HPLC 1,57 m¡n, y 2,17 m¡n. (Métodos de la HPLC H e I); RMN ¹H (500 MHz, DMSO-d⁶) 5 ppm 9,09 (s, 1H), 7,73 (s, 1H), 7,66 (d, J= 7,0 Hz, 1H), 7,54 (d, J= 8,8 Hz, 1H), 7,50 - 7,42 (m, 2H), 7,39 (s a, 1H), 7,20 (s a, 1H), 6,90 (s, 1H), 6,84 (d, J= 8,8 Hz, 1H), 4,91 (s, 2H), 4,25 (s a, 2H), 4,01 (s a, 2H), 3,73 (s a, 4H), 3,28 (m., 3H), 3,34 (s a, 1h).

Los compuestos descr¡tos en la tabla 34 se s¡ntet¡zaron de forma análoga al compuesto A37 hac¡endo reacc¡onar el ¡ntermed¡o 156E con las am¡nas correspondentes.

Tabla 34

(continuación)

(continuación)

Los compuestos descritos en la tabla 35 se sintetizaron de forma análoga al compuesto A37 haciendo reaccionar el intermedio 172B con las correspondientes aminas.

Tabla 35

(continuación)

(continuación)

Los compuestos descritos en la tabla 36 se sintetizaron de forma análoga al compuesto A37 haciendo reaccionar el compuesto 185A con las aminas correspondientes.

(continuación)

Esquema 52

Intermedio A60A: 3-carbamoil-2-(3-doro-5-etoxifenil)-6,7-dihidropirazolo[1,5-a]pirazin-5(4H)-carboxilato de terc-butilo

A un recipiente se le añadió ácido (3-doro-5-etoxifenil)borónico (61 mg, 0,304 mmol), el intermedio 156C (119 mg, 0,304 mmol), una solución ac. 2 M de K3PO4 (0,46 ml, 0,913 mmol), dioxano (6 ml) y PdCh(dppf) (22,27 mg, 0,030 mmol). La mezcla de reacción se purgó con nitrógeno durante 1 min, y después se calentó a 80 °C durante una noche. La mezcla de reacción se diluyó con partes iguales de agua y DCM. La capa orgánica se separó y la capa acuosa se extrajo dos veces más con DCM. La capa orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4 y se filtró. El filtrado se concentró. El residuo se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (columna REDISEP® de 40 g, eluyendo con un gradiente del 20-80 % de EtOAc en hexanos). Las fracciones que contenían el producto se combinaron y se evaporaron para proporcionar el intermedio A60A (62 mg, 40,5 %). MS(ES): m/z = 421,2 [M+H]+; RMN 1H (400 MHz, cloroformo-d)) 5 ppm 7,16 (t, J= 1,6 Hz, 1H), 7,00 (d, J= 1,8 Hz, 2H), 4,99 (s, 2H), 4,23 (t, J= 5,3 Hz, 2H), 4,07 (c, J= 7,0 Hz, 2H), 3,96 (t, J= 5,3 Hz, 2H), 1,53 (s, 9^h), 1,44 (t, J = 7,0 Hz, 3H).

Compuesto A60: 2-(3-cloro-5-etoxifenil)-N5-(4-cianofenil)-6,7-dihidropirazolo [1,5-a]]pirazin-3,5(4H)-dicarboxamida

A una solución del intermedio A60A (60 mg, 0,143 mmol) en DCM (10 ml) se le añadió TFA (1 ml, 12,98 mmol). Después la mezcla de reacción se dejó en agitación a TA durante una noche antes de la eliminación de los volátiles para proporcionar el intermedio A60B en bruto en forma de una sal de TFA. Después se disolvió la sal de TFA en DMF (1 ml) y se trató con DIPEA (0,018 ml, 0,115 mmol). La mezcla resultante se dejó en agitación durante 5 min. antes de la adición de 4-isocianatobenzonitrilo (8,29 mg, 0,057 mmol). La mezcla de reacción se agitó durante 1 h, tras lo cual se filtró y se purificó mediante HPLC preparativa. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron al vacío para proporcionar el compuesto A60 (5,8 mg, 21,7 %). MS(ES): m/z = 463,3 [M-H]⁺; Tiempos de ret. de la HPLC 1,71 min. y 2,53 min. (Métodos de HPLC H e I); RMN ¹H (500 MHz, DMSO-d⁶)) 5 ppm 7,78 - 7,64 (m, 4H), 7,29 (s, 2H), 7,22 (s, 2H), 7,01 (s, 1H), 4,90 (s, 2H), 4,25 (s a, 2H), 4,07 (c, J = 7,0 Hz, 2H), 4,00 (s a, 2^h), 3,37 (d, J= 8,8 Hz, 2H), 3,18 (d, J= 4,4 Hz, 1H), 1,34 (t, J= 6,8 Hz, 3H).

Compuesto A61: W5-(3-cloro-4-c¡anofen¡l)-2-(3-cloro-5-etox¡fen¡l)-6,7-d¡h¡drop¡razolo[1,5-a]pirazin-3,5(4H)-dicarboxamida

A una solución de trifosgeno (23,13 mg, 0,078 mmol) en THF (4 ml) se le añadió una solución de 4-amino-2-clorobenzonitrilo (11,89 mg, 0,078 mmol) y TEA (0,043 ml, 0,312 mmol) en THF (1 ml) a 0 °C. La mezcla de reacción se dejó en agitación a 0 °C durante 30 min. antes de la adición la adición de una solución del intermedio A60B (25 mg, 0,078 mmol) en DMF (1 ML). La mezcla de reacción se agitó durante 1 h tras lo cual se filtró y se purificó por HPLC preparativa. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron al vacío para proporcionar el compuesto A61 (26,5 mg, 68,1 %). MS(ES): m/z = 497,3 [M-H]⁺; Tiempos de ret. de la HPLC 1,72 min. y 2,62 min. (Métodos de HPLC H e I); RMN ¹H (500 MHz, DMSO-d⁶) 5 ppm 9,57 (s, 1H), 7,91 (d, J= 1,8 Hz, 1H), 7,85 (d, J= 8,8 Hz, 1H), 7,61 (dd, J= 8,8; 1,8 Hz, 1H), 7,29 (s, 1H), 7,27 - 7,15 (m, 2H), 7,08 - 6,95 (m, 1H), 4,91 (s, 2H), 4,44 - 4,21 (m, 2h), 4,15 -3,92 (m, 4H), 1,34 (t, J = 7,0 Hz, 3H).

Compuesto A62: 2-(3-cloro-5-met¡lfen¡l)-W5-(4-c¡anofen¡l)-6,7-d¡h¡drop¡razolo[1,5-a]pirazin-3,5(4H)-d¡carboxam¡da

El compuesto A62 se sintetizó de forma análoga al compuesto A60 haciendo reaccionar el A62 desprotegido con 4-¡socianatobenzonitrilo. El compuesto se purificó por HPLC preparativa. MS(ES): m/z = 433,3 [M-H]⁺; Tiempos de ret. de la HPLC 1,65 min. y 2,51 min. (Métodos de la HPLC H e I). RMN ¹H (500 MHz, DMSO-d⁶)) 5 ppm 7,78 - 7,59 (m, 4H), 7,51 (s, 1H), 7,46 (s, 1H), 7,38 (s a, 1H), 7,27 (s, 1H), 7,21 (s a, 1h), 4,90 (s, 2H), 4,24 (s a, 2H), 4,01 (s a, 2H), 2,34 (s, 3H).

Compuesto A63: W5-(3-cloro-4-c¡anofen¡l)-2-(3-cloro-5-met¡lfen¡l)-6,7-d¡h¡drop¡razolo[1,5-a]pirazin-3,5(4H)-dicarboxamida

El compuesto A63 se sintetizó se sintetizó de forma análogo al compuesto A61 haciendo reaccionar el A62A con 4 amino-2-dorobenzonitrilo. El compuesto se purificó por HPLC preparativa. MS(ES): m/z = 467,2 [M-H]+; Tiempos de ret. de la HPLC 2,07 min. y 2,71 min. (Métodos de la HPLC H e I). RMN 1H (500 MHz, DMSO-ds) 5 ppm 9,58 (s, 1H), 7,91 (s, 1H), 7,85 (d, J= 8,8 Hz, 1H), 7,61 (d, J= 8,8 Hz, 1H), 7,51 (s, 1H), 7,47 (s, 1H), 7,40 (s a, 1H), 7,28 (s, 1^h), 7,18 (s a, 1H), 4,91 (s, 2H), 4,25 (t, J= 5,0 Hz, 2H), 4,07 -3,93 (m, 2H), 2,35 (s, 3H).

Esquema 54

Intermedio A66B: 4-((ferc-butoxicarbonil)amino)-3-hidroxibutanoato de metilo

A una suspensión de ácido 4-amino-3-hidroxibutanoico (17,8 g, 149 mmol) en MeOH (150 ml) y DMF (2 ml) a 0 °C se le añadió SOCl2 (23,99 ml, 329 mmol) gota a gota mediante un embudo de goteo. La mezcla de reacción se convirtió gradualmente en una solución transparente. Se agitó a TA durante 30 min y después se calentó a 60 °C durante 2 h. La mezcla de reacción se enfrió a TA y se concentró. El residuo se suspendió en dioxano (150 ml) y se añadió a una solución ac. saturada de bicarbonato sódico (74,7 ml, 149 mmol). Se añadió BOC-anhídrido (41,6 ml, 179 mmol). La mezcla de reacción se agitó a TA durante una noche tras lo cual esta se diluyó con partes iguales de agua y EtOAc. La capa orgánica se separó y la capa acuosa se extrajo dos veces más con EtOAc. La capa orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4 y se filtró. El filtrado se concentró. El producto en bruto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (columna REDISEP® de 330 g, eluyendo con un gradiente del 30-70 % de EtOAc en hexanos). Las fracciones que contenían el producto se combinaron y se evaporaron para proporcionar el intermedio A66B (25 g, 71,7 % en dos etapas). RMN 1H (400 MHz, cloroformo-d) 5 ppm 4,22 - 4,04 (m, 1H), 3,74 (s, 3H), 3,51 (d, J= 7,5 Hz, 1H), 3,20 -3,08 (m, 1H), 2,57 - 2,48 (m, 2H), 1,52 - 1,40 (m, 9H).

Intermedio A66C: (2,4-dihidroxibutil)carbamato de tere-butilo

A una solución del intermedio A66B (25 g, 107 mmol) en éter dietílico (200 ml) y MeOH (7,59 ml, 188 mmol) a 0 °C se le añadió LiBH⁴(3,50 g, 161 mmol) en porciones cuidadosamente. La reacción se agitó a TA durante 1 h y se calentó a 60 °C durante 1 h. La reacción se inactivó cuidadosamente con MeOH y se concentró. El residuo se diluyó con partes iguales de solución ac. saturada de NH⁴CI y EtOAc. La capa orgánica se separó y la capa acuosa se extrajo dos veces más con EtOAc. La capa orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4 y se filtró. El filtrado se concentró para proporcionar el intermedio A66C (19 g, 86 %) en forma de un sólido de color blanquecino. Se usó tal cual, sin purificación adicional. RMN 1H (400 MHz, cloroformo-d) 5 ppm 4,03 -3,77 (m, 3H), 3,30 (ddd, J= 14,1,6,1,3,1 Hz, 1H), 3,22 -3,03 (m, 1H), 1,78 - 1,65 (m, 2H), 1,46 (s, 9H).

Intermedio A66D: (4-((íen>butildimetilsilil)oxi)-2-hidroxibutil) carbamato de íerc--butilo

A una solución del intermedio A66C (10 g, 48,7 mmol) y TEA (2,55 ml, 18,30 mmol) en DCM (80 ml) se le añadió TBS-Cl (8,08 g, 53,6 mmol) y DMAP (0,060 g, 0,487 mmol). Se dejó en agitación a TA durante 4 h. La mezcla de reacción se diluyó con partes iguales de agua y EtOAc. La capa orgánica se separó y la capa acuosa se extrajo dos veces más con EtOAc. La capa orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4 y se filtró. El filtrado se concentró. El residuo se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (columna REDISEP® de 240 g, eluyendo con un gradiente del 10 - 50 % de EtOAc en hexano). Las fracciones que contenían el producto se combinaron y se evaporaron para proporcionar el intermedio A66D (12 g, 77 %). RMN 1H (400 MHz, cloroformo-d) 5 ppm 3,99 -3,72 (m, 3H), 3,41 -3,22 (m, 1H), 3,22 -3,03 (m, 1H), 1,78 - 1,60 (m, 2H), 1,46 (s, 9H), 0,96 - 0,84 (m, 9H), 0,19 - 0,06 (m, 6H).

Intermedio A66E: 4-(3-cloro-4-fluorofenil)-2,4-dioxobutanoato de etilo

El intermedio A66E se preparó de manera análoga al intermedio A1C haciendo reaccionar 1-(3-cloro-4-fluorofenil)etanona con oxalato de dietilo. MS(ES): m/z = 273,1 [M+H]+; RMN 1H (400 MHz, cloroformo-d) 5 ppm 8,10 (dd, J= 6,9, 2,1 Hz, 1H), 7,93 (ddd, J=8,8, 4,5, 2,3 Hz, 1H), 7,36 - 7,20 (m, 1H), 7,13 - 6,95 (m, 1H), 4,44 (c, J= 7,3 Hz, 2H), 1,45 (t, J= 7,2 Hz, 3H).

Intermedio A66F: 3-(3-cloro-4-fluorofenil)-1H-pirazol-5-carboxilato de etilo

El intermedio A66F se preparó de manera análoga al intermedio A1D haciendo reaccionar el intermedio A66E con hidrazina hidrato. MS(ES): m/z = 269,1 [M+H]+; RMN 1H (400 MHz, cloroformo-d) 5 ppm 7,91 (dd, J=7,0, 2,0 Hz, 1H), 7,70 (ddd, J= 8,5, 4,5, 2,3 Hz, 1H), 7,22 (t, J= 8,7 Hz, 1H), 7,11 (s, 1H), 4,45 (c, J= 7,2 Hz, 2H), 1,44 (t, J= 7,2 Hz, 3H).

Intermedio A66G: 3-(3-cloro-4-fluorofenil)-1-(2,2,3,3,12,12-hexametil-10-oxo-4,11-dioxa-9-aza-3-silatridecan-7-il)-1H-pirazol-5-carboxilato de etilo

A una solución del intermedio A66F (10,7 g, 40 mmol) en THF (100 ml) a 0 °C se le añadió el intermedio A66D (15,25 g, 48 mmol), TEA (5,6 ml, 40 mmol), trifenilfosfina (10,5 g, 40 mmol) y DTBAD (9,17 g, 40 mmol). La mezcla de reacción se agitó a TA durante 2 h y se concentró. El residuo se diluyó con partes iguales de agua y EtOAc. La capa orgánica se separó y la capa acuosa se extrajo dos veces más con EtOAc. La capa orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4 y se filtró. El filtrado se concentró. El producto en bruto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (columna REDISEP® de 330 g, eluyendo con un gradiente del 10 - 40 % de EtOAc en hexano). Las fracciones que contenían el producto se combinaron y se evaporaron para proporcionar el intermedio A66G (16,5 g, 73 %). MS(ES): m/z = 592,3 [M+Na]+.

Intermedio A66H: 1-(1-amino-4-hidroxibutan-2-il)-3-(3-cloro-4-fluorofenil)-1H-pirazol-5-carboxilato de etilo, sal bis HCl

A una solución del intermedio A66G (6,1 g, 10,70 mmol) en DMC (120 ml) se le añadió solución de HCl 4 M en dioxano (10,70 ml, 42,8 mmol). La mezcla de reacción se dejó en agitación a TA durante una noche. El intermedio A66H precipitado se recogió por filtración. Se usó tal cual, sin purificación adicional. MS(ES): m/z = 356,1 [M+H]+.

A66I: 2-(3-cloro-4-fluorofenil)-7-(2-hidroxietil)-6,7-dihidropirazolo[1,5-a]pirazin-4(5H)-ona

A una suspensión del intermedio A66H (4,20 g, 10,7 mmol) en etanol (80 ml) se le añadió una solución al 30 % en agua de (80 ml, 3697 mmol). Se agitó a TA durante 2 h y se concentró. El sólido se recogió por filtración, se lavó con agua y se secó. El intermedio A66I en bruto se usó tal cual, sin purificación adicional. MS(ES): m/z = 310,0 [M+H]⁺; RMN ¹H (400 MHz, DMSO-d⁶) 5 ppm 8,27 (s a, 1H), 8,07 (dd, J= 7,3, 2,3 Hz, 1H), 7,89 (ddd, J= 8,7, 4,8, 2,1 Hz, 1H), 7,48 (t, J= 9,0 Hz, 1H), 7,34 (s, 1H), 4,74 (t, J= 5,0 Hz, 1H), 4,67 - 4,47 (m, 1H), 3,79 (ddd, J= 13,3, 4,4, 2,4 Hz, 1 h), 3,66 -3,55 (m, 2H), 3,50 (ddd, J= 13,4, 5,6, 3,4 Hz, 1h), 2,17 (dd, J= 13,8, 6,0 Hz, 1H), 2,03 - 1,81 (m, 1H).

Intermedio A66J: 7-(2-((íen>butilditrietilsilil)oxi)etil)-2-(3-cloro-4-fluorofenil)-6,7-dihidropirazolo[1,5-a]pirazin-4(5H)-ona

A una suspensión del intermedio A66I en DCM (300 ml) y DMF (15 ml) se le añadió TEA (10,80 ml, 77 mmol), TBS-Cl (9,34 g, 62,0 mmol) y DMAP (0,316 g, 2,58 mmol). La suspensión se dejó en agitación a TA durante una noche. La mezcla de reacción se diluyó con partes iguales de agua y DCM. La capa orgánica se separó y la capa acuosa se extrajo dos veces más con ^dC^m. La capa orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4 y se filtró. El filtrado se concentró. El producto en bruto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (columna REDISEP® de 330 g, eluyendo con un gradiente del 0 - 40 % de EtOAc en DMC). Las fracciones que contenían el producto se combinaron y se evaporaron para proporcionar el intermedio A66J (17,8 g, 81 %). MS(ES): m/z = 446,2 [M+Na]+. RMN 1H (400 MHz, cloroformo-d) 5 ppm 7,91 (dd, J= 7,2, 2,1 Hz, 1H), 7,66 (ddd, J= 8,6, 4,6, 2,1 Hz, 1H), 7,27 - 7,10 (m, 2H), 6,25 (s a, 1H), 4,78 - 4,51 (m, 1H), 4,02 -3,79 (m, 3H), 3,72 (ddd, J= 13,1,5,5, 3,5 Hz, 1H), 2,47 - 2,23 (m, 1H), 2,23 1,96 (m, 1H), 1,00 - 0,88 (m, 9H), 0,18 - 0,05 (m, 6H).

Intermedio A66K: 7-(2-((íerc-but¡ld¡met¡ls¡l¡l)ox¡)et¡l)-2-(3-cloro-4-fluorofen¡l)-4-oxo-6,7-d¡h¡drop¡razolo[1,5-a]p¡raz¡n-5(4H)-carbox¡lato de íerc-but¡lo

A una suspens¡ón del ¡ntermed¡o A66J (13,64 g, 32,2 mmol) en tolueno (120 ml) se le añad¡ó DMAP (5,90 g, 48,3 mmol) y BOC-anhídr¡do (8,96 ml, 38,6 mmol). La mezcla de reacc¡ón se ag¡tó a TA durante 1 h y se conv¡rt¡ó en una soluc¡ón transparente tras 5 m¡n. La mezcla de reacc¡ón se concentró y el res¡duo se pur¡f¡có por cromatografía sobre gel de síl¡ce (columna REDISEP® de 240 g, eluyendo con un grad¡ente de 0-40 % de EtOAc en DCM). Las fracc¡ones que contenían el producto se comb¡naron y se evaporaron para proporc¡onar el ¡ntermed¡o A66K (17,8 g, 81 %). MS(ES): m/z = 524,4 [M+H]+; RMN 1H (400 MHz, cloroformo-d) 5 ppm 7,90 (dd, J= 7,0, 2,0 Hz, 1H), 7,66 (ddd, J= 8,5, 4,6, 2,1 Hz, 1H), 7,29 (s, 1H), 7,25 - 7,03 (m, 2H), 4,84 - 4,63 (m, 1H), 4,38 - 4,18 (m, 2H), 4,05 -3,79 (m, 2H), 2,51 - 2,24 (m, 1H), 2,03 (dtd, J=14,4, 7,2, 2,3 Hz, 1H), 1,61 (s, 9H), 0,95 (s, 9H), 0,14 (s, 3H), 0,12 (s, 3H).

Intermed¡o A66L: 7-(2-((íerc-but¡ld¡met¡ls¡l¡l)ox¡)et¡l)-2-(3-cloro-4-fluorofen¡l)-6,7-d¡h¡drop¡razolo[1,5-a]p¡raz¡n-5(4H)-carbox¡lato de terc-but¡lo

A una soluc¡ón del ¡ntermed¡o A66K (1,5 g, 2,86 mmol) en THF (15 ml) se le añad¡ó una soluc¡ón 2 M de BH3.Me2S en THF (4,29 ml, 8,59 mmol) gota a gota a TA. La mezcla de reacc¡ón se calentó a reflujo durante 4 h y se enfr¡ó a 0 °C. Esta se ¡nact¡vó cu¡dadosamente con MeOH. La mezcla de reacc¡ón se concentró. El res¡duo se d¡luyó con partes ¡guales de soluc¡ón ac. saturada de NH4CI y EtOAc. La capa orgán¡ca se separó y la capa acuosa se extrajo dos veces más con EtOAc. La capa orgán¡ca comb¡nada se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4 y se f¡ltró. El f¡ltrado se concentró para proporc¡onar el ¡ntermed¡o A66L (1,2 g, 82 %), que se usó tal cual, s¡n pur¡f¡cac¡ón ad¡c¡onal. MS(ES): m/z = 510,3 [M+H]+.

Intermed¡o A66M: 7-(2-((íerc-but¡ld¡met¡ls¡l¡l)ox¡)et¡l)-2-(3-cloro-4-fluorofen¡l)-3-yodo-6,7-d¡h¡drop¡razolo[1,5-a]p¡raz¡n-5(4H)-carbox¡lato de terc-but¡lo

A una soluc¡ón del ¡ntermed¡o A66L (3,53 g, 6,92 mmol) en DMC (25 ml) y MeOH (10 ml) se le añad¡ó NIS (1,868 g, 8,30 mmol). La mezcla de reacc¡ón se ag¡tó a TA durante 2 h y se concentró. El res¡duo se pur¡f¡có por cromatografía sobre gel de síl¡ce (columna REDISEP® de 80 g, eluyendo con un grad¡ente del 0-25 % de EtOAc en hexano). Las fracc¡ones que contenían el producto se comb¡naron y se evaporaron para proporc¡onar el ¡ntermed¡o A66M (3 g, 76 %). MS(ES): m/z = 636,2 [M+H]+.

Intermed¡o A66N: 7-(2-((íerc-but¡ld¡met¡ls¡l¡l)ox¡)et¡l)-2-(3-cloro-4-fluorofen¡l)-3-c¡ano-6,7-d¡h¡drop¡razolo[1,5-a]p¡raz¡n5(4H)-carboxilato de terc-butilo

A una solución del intermedio A66M (3 g, 4,72 mmol) en DMF (12 ml) se le añadió cianuro de cobre (I) (1,056 g, 11,79 mmol). La mezcla de reacción se purgó con nitrógeno durante 2 min y se calentó a 120 °C durante una noche. Se enfrió a TA, se diluyó con EtOAc, se pasó a través de una capa de CELITE®. La torta de filtro se lavó con EtOAc. El filtrado se concentró. El residuo se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (columna REDISEP® de 80 g, eluyendo con un gradiente del 0-35 % de EtOAc en hexano). Las fracciones que contenían el producto se combinaron y se evaporaron para proporcionar el intermedio 66N (1,2 g, 48 %). MS(ES): m/z = 557,2 [M+Na]+.

Intermedio A66O: 3-carbamoil-2-(3-cloro-4-fluorofenil)-7-(2-hidroxietil)-6,7-dihidropirazolo[1,5-a]pirazin-5(4H)-carboxilato de terc-butilo

A una solución del intermedio A66N (1,2 g, 2,242 mmol) en etanol (10 ml) y THF (10 ml) se le añadió una solución ac. 5 M de hidróxido potásico (2,242 ml, 11,21 mmol) y H2O2 (4,58 ml, 44,8 mmol). La mezcla de reacción se agitó a TA durante una noche y se concentró. El residuo se diluyó con partes iguales de agua y EtOAc. La capa orgánica se separó y la capa acuosa se extrajo dos veces más con EtOAc. La capa orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4, se filtró. El filtrado se concentró para proporcionar el intermedio A66O en bruto (820 mg, 83 %) en forma de un sólido de color blanquecino que se usó tal cual, sin purificación adicional. MS(ES): m/z = 439,1 [M+H]+.

Intermedio A66P: 2-(3-cloro-4-fluorofenil)-7-(2-hidroxietil)-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]pirazin-3-carboxamida, sal TFA

A una solución del intermedio A66O (95 mg, 0,216 mmol) en DCM (10 ml) se le añadió TFA (1 ml). La mezcla de reacción se agitó a TA durante 6 h y se concentró para proporcionar la sal TFA del intermedio A66P que se usó tal cual, sin purificación adicional. MS(ES): m/z = 339,1 [M+H]+.

Compuestos A66 y A67: 2-(3-cloro-4-fluorofen¡l)-W5-(4-c¡anofen¡l)-7-(2-h¡drox¡et¡l)-6,7-d¡h¡drop¡razolo[1,5-a]p¡raz¡n-3,5(4H)-d¡carboxam¡da

A una soluc¡ón del ¡ntermed¡o A66P (35 mg, 0,093 mmol) en DMF (1 ml) se le añad¡ó base de Hun¡g (0,033 ml, 0,187 mmol). La mezcla resultante se dejó en ag¡tac¡ón durante 5 m¡n. antes de la ad¡c¡ón de 4-¡soc¡anatobenzon¡tr¡lo (22,34 mg, 0,155 mmol). La mezcla de reacc¡ón se agitó a TA durante 1 h tras lo cual se filtró y se pur¡f¡có por HPLC preparat¡va para proporc¡onar una mezcla racém¡ca de los compuestos A66 y A67. El racemato se somet¡ó a separac¡ón qu¡ral usando SFC preparat¡va para proporc¡onar el enant¡ómero A66 (t¡empo de retenc¡ón 11,42 m¡n, 11,9 mg, 23,9 %) y el enant¡ómero A67 (t¡empo de retenc¡ón 13,16 m¡n, 12,8 mg, 25,7 %). Método de la HPLC qu¡ral: Columna preparat¡va IA 30 x 250 mm, 5 pm; Fase móv¡l: MeOH al 30 % en CO2, 130 bar (13000 kPa); Caudal: 70 ml/m¡n durante 16 m¡n.; MS(ES): m/z = 481,5 [M-H]+; T¡empo de ret. de la HPLC 1,32 m¡n. y MS(ES): m/z = 483,5 [M+H]+ T¡empo de ret. 2.22 m¡n. (Métodos de HPLC H e I); RMN 1H (500 MHz, DMSO-da) 5 ppm 7,85 (d, J= 6,6 Hz, 1H), 7,79 - 7,57 (m, 5H), 7,48 (t, J= 9,0 Hz, 1H), 7,40 (s a, 1H), 7,26 (s a, 1H), 5,04 (m, 1H), 4,80 (d, J= 17,2 Hz, 1H), 4,48 (d, J= 3,7 Hz, 1H), 4,21 - 4,05 (m, 1H), 3,90 (d, J= 10,3 Hz, 1H), 3,69 (d, J= 4,8 Hz, 2H), 2,15 - 2,19 (m, 1H), 1,91 - 1,78 (m, 1H).

Esquema 55

Intermed¡o A68A: 3-carbamo¡l-2-(3-cloro-4-fluorofen¡l)-7-(2-((met¡lsulfon¡l)ox¡)et¡l)-6,7-d¡h¡drop¡razolo[1,5-a]p¡raz¡n-5(4H)-carbox¡lato de ferc-but¡lo

A una soluc¡ón del ¡ntermed¡o A68O (500 mg, 1,139 mmol) en DCM (12 ml) a 0 °C en atmósfera de n¡trógeno se le añad¡ó TEA (0,206 ml, 1,481 mmol) y MsCl (0,107 ml, 1,367 mmol). La mezcla de reacc¡ón se dejó en ag¡tac¡ón a 0 °C durante 1 h antes de d¡lu¡rla con partes ¡guales de agua y DCM. La capa orgán¡ca se separó y la capa acuosa se extrajo dos veces más con DCM. La capa orgán¡ca comb¡nada se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4 y se filtró. El filtrado se concentró. El producto en bruto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (columna REDISEP® de 40 g, eluyendo con un gradiente del 35 - 80 % de EtOAc en hexano). Las fracciones que contenían el producto se combinaron y se evaporaron para proporcionar el intermedio A68A (380 mg, 65 %). MS(ES): m/z = 517,1 [M+H]+; RMN 1H (400 MHz, cloroformo-d) 5 ppm 7,68 (dd, J=7,0, 2,0 Hz, 1H), 7,49 (ddd, J= 8,5, 4,5, 2,3 Hz, 1H), 7,32-7,19 (m, 1H), 5,19 (d, J= 16,8 Hz, 1H), 4,73 (d, J= 18,8 Hz, 1H), 4,52 (t, J= 6,0 Hz, 3H), 4,31 - 4,16 (m, 1 ^h), 3,76 -3,59 (m, 1^h), 3,09 (s, 3H), 2,50 - 2,32 (m, 1H), 2,32 - 2,14 (m, 1^h), 1,56 - 1,47 (m, 9H).

Intermedio A68B: 3-carbamoil-2-(3-cloro-4-fluorofenil)-7-etil-6,7-dihidropirazolo[1,5-a]pirazin-5(4H)-carboxilato de terc-butilo

A una solución del intermedio A68A (200 mg, 0,387 mmol) en THF (6 ml) a 0 °C en atmósfera de nitrógeno se le añadió una solución 1 M en THF de SUPER-HYDRIDE® (1,934 ml, 1,934 mmol). La mezcla de reacción se dejó en agitación a TA durante 1 h antes de inactivarla con agua. La mezcla resultante se extrajo con EtOAc. La capa orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4 y se filtró. El filtrado se concentró. El producto en bruto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (columna REDISEP® de 40 g, eluyendo con un gradiente del 35-80 % de EtOAc en hexanos). Las fracciones que contenían el producto se combinaron y se evaporaron para proporcionar el intermedio A68B (128 m g, 78 %). ^{M s ( E S ) :} m/z = 423,1 [M+H]+.

Intermedio A68C: 2-(3-cloro-4-fluorofenil)-7-etil-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]pirazin-3-carboxamida, sal TFA

A una solución del intermedio A68B (160 mg, 0,378 mmol) en DCM (20 ml) se le añadió TFA (2 ml). La mezcla de reacción se agitó a TA durante 6 h y se concentró para proporcionar la sal TFA del intermedio 68C que se usó tal cual, sin purificación adicional. MS(ES): m/z = 323,1 [M+H]+.

Compuestos A68 y A69: 2-(3-cloro-4-fluorofenil)-W5-(4-cianofenil)-7-etil-6,7-dihidropirazolo[1,5-a]pirazin-3,5(4H)-dicarboxamida

A una solución del intermedio A68C (40 mg, 0,092 mmol) en DMF (1 ml) se le añadió base de Hunig (0,064 ml, 0,366 mmol). La mezcla resultante se dejó en agitación durante 5 min. antes de la adición de 4-isocianatobenzonitrilo (13,20 mg, 0,092 mmol). La mezcla de reacción se agitó a TA durante 1 h tras lo cual se filtró y se purificó por HPLC preparativa para proporcionar una mezcla racémica de los compuestos A68 y A69. El racemato se sometió a separación quiral usando SFC preparativa para proporcionar el enantiómero A68 (tiempo de ret. 18,9 min, 9,7 mg, 22,7 %) y el enantiómero A69 (tiempo de ret. 23,9 min, 10,1 mg, 23,6 %). Método de la HPLC quiral: Columna: CHIRALPAK® OD 21 x 250 mm, 10 pm; Fase móvil A: dietilamina al 0,1 %/heptano; Fase móvil B: etanol; Gradiente: mantenido a 20 % - B al 100 % durante 38 minutos; Caudal: 15 ml/min; MS(ES): m/z = 465,5 [M-H]+; Tiempo de ret.

de la HPLC 1,69 min. y MS(ES): m/z = 467,5 [M+H]⁺Tiempo de ret. 2.58 min. (Métodos de HPLC H e I); RMN ¹H (500 MHz, DMSO-d⁶) 5 ppm 7,85 (d, J= 7,0 Hz, 1H), 7,79 - 7,58 (m, 5H), 7,47 (t, J=92 Hz, 1H), 7,39 (s a, 1H), 7,25 (s a, 1H), 5,01 (d, J= 16,9 Hz, 1H), 4,88 (d, J= 16,9 Hz, 1H), 4,28 (s a, 1H), 4,04 (dd, J= 13,8, 5,0 Hz, 1H), 3,97 -3,85 (m, 1H), 3,43 -3,29 (m, 2H), 2,12 - 1,96 (m, 1H), 1,80 - 1,67 (m, 1H).

Intermedio A70A: 3-carbamoil-2-(3-doro-4-fluorofenil)-7-(2- metoxietil)-6,7-dihidropirazolo[1,5-a]pirazin-5(4H)-carboxilato de terc-butilo

A una solución del intermedio A68A (170 mg, 0,329 mmol) en MeOH (5 ml) se le añadió solución al 25 % de metóxido sódico en MeOH (426 mg, 1,973 mmol). La mezcla de reacción se agitó a TA durante una noche y se concentró. El residuo se diluyó con partes iguales de agua y DCM. La capa orgánica se separó y la capa acuosa se extrajo dos veces más con DCM. La capa orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4 y se filtró. El filtrado se concentró. El producto en bruto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (columna REDISEP® de 40 g, eluyendo con un gradiente del 35 - 80 % de EtOAc en hexano). Las fracciones que contenían el producto se combinaron y se evaporaron para proporcionar el intermedio A70A (120 mg, 81 %). MS(ES): m/z = 453,1 [M+H]+; RMN 1H (400 MHz, cloroformo-d) 5 ppm 7,77 - 7,64 (m, 1H), 7,55 - 7,44 (m, 1H), 7,34 - 7,16 (m, 1H), 5,44 - 5,27 (m, 1H), 4,79 (d, J= 17,8 Hz, 1H), 4,56 - 4,39 (m, 1H), 4,14 - 4,04 (m, 1H), 3,74 (dd, J= 13,8, 3,8 Hz, 1h), 3,62 (t, J= 6,1 Hz, 2H), 3,39 (s, 3h), 2,45 - 2,25 (m, 1H), 1,98 (ddt, J= 14,3, 8,5, 5,8 Hz, 1H), 1,59 - 1,48 (m, 9H).

Intermedio A70B: 2-(3-cloro-4-fluorofenil)-7-(2-metoxietil)-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]pirazin-3-carboxamida, sal TFA

A una solución del intermedio A70A (120 mg, 0,265 mmol) en DCM (15 ml) se le añadió TFA (1 ml). La mezcla de reacción se agitó a TA durante 6 h y se concentró para proporcionar la sal TFA del intermedio A70B que se usó tal cual, sin purificación adicional. MS(ES): m/z = 353,0 [M+H]+.

Compuestos A70 y A71: 2-(3-cloro-4-fluorofenil)-N5-(4-cianofenil)-7-(2-metoxietil)-6,7-dihidropirazolo[1,5-a]pirazin-3,5(4H)-dicarboxamida

A una solución del intermedio A70B (35 mg, 0,075 mmol) en DMF (1 ml) se le añadió base de Hunig (0,026 ml, 0,150 mmol). La mezcla resultante se dejó en agitación durante 5 min. antes de la adición de 4-isocianatobenzonitrilo (16,21 mg, 0,112 mmol). La mezcla de reacción se agitó a TA durante 1 h tras lo cual se filtró y se purificó por HPFC preparativa para proporcionar una mezcla racémica de los compuestos A70 y A71. El racemato se sometió a separación quiral usando SFC preparativa para proporcionar el enantiómero A70 (tiempo de retención 35,0 min, 7,2 mg, 19,3 %) y el enantiómero A71 (tiempo de retención 39,5 min, 7,5 mg, 20,1 %). Método de la HPLC quiral: Columna: CHIRALPAK® IC-H 30 x 250 mm, 5 ^m; Fase móvil: MeOH al 20 % en CO², 150 bar (15000 kPa); Caudal: 70 ml/min durante 42 min.; MS(ES): m/z = 495,5 [M-H]⁺; Tiempo de ret. de la HPLC 1,60 min. y MS(ES): m/z = 497,5 [M+H]⁺Tiempo de ret. 2.48 min. (Métodos de HPLC H e I); RMN ¹H (500 MHz, DMSO-d^e)) 5 ppm 7,85 (d, J= 7,3 Hz, 1H), 7,86 - 7,66 (m, 5H), 7,48 (t, J= 9,0 Hz, 1H), 7,40 (s a, 1H), 7,26 (s a, 1H), 5,02 (d, J= 17,2 Hz, 1H), 4,85 (d, J= 16,9 Hz, 1H), 4,44 (d, J= 3,7 Hz, 1H), 4,06 (dd, J= 14,1,4,6 Hz, 1H), 3,91 (d, J= 11,0 Hz, 1H), 3,56 (t, J= 5,9 Hz, 2H), 3,28 (s, 3H), 2,23 (dd, J= 13,8, 5,7 Hz, 1H), 2,00 - 1,82 (m, 1H).

Esquema 56

Intermedio A72A: 3-carbamoil-2-(3-cloro-4-fluorofenil)-7-(2-(tosiloxi)etil)-6,7-dihidropirazolo[1,5-a]pirazin-5(4H)-carboxilato de terc-butilo

A una solución del intermedio A66O (0,76 g, 1,732 mmol) en DCM (30 ml) se le añadió TEA (0,483 ml, 3,46 mmol), TsCl (0,220 ml, 2,078 mmol) y DMAp (10,58 mg, 0,087 mmol). La mezcla de reacción se agitó a TA durante una noche y se concentró. El residuo se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (columna REDISEP® de 40 g, eluyendo con un gradiente del 35-80 % de EtOAc en hexanos). Las fracciones que contenían el producto se combinaron y se evaporaron para proporcionar el intermedio A72^a(0,76 g, 76 %). MS(ES): m/z = 593,1 [M+H]+; RMN 1H (400 MHz, cloroformo-d) 5 ppm 7,85 - 7,78 (m, 2H), 7,64 (dd, J= 7,0, 2,0 Hz, 1H), 7,46 (ddd, J= 8,5, 4,5, 2,3 Hz, 1H), 7,39 - 7,18 (m, 3H), 5,12 (s a, 1H), 4,73 (d, J= 18,6 Hz, 1H), 4,43 (s a, 1H), 4,32 (t, J= 6,3 Hz, 2H), 4,06 (dd, J= 14,1,3,5 Hz, 1H), 3,67 (d, J= 12,0 Hz, 1H), 2,45 (s, 3H), 2,41 - 2,29 (m, 1H), 2,19 - 2,08 (m, 1H), 1,59 - 1,44 (m, 9H).

Intermedio A72B: 3-carbamoil-2-(3-cloro-4-fluorofenil)-7-(2-fluoroetil)-6,7-dihidropirazolo[1,5-a]pirazin-5(4H)-carboxilato de terc-butilo

A una solución del intermedio A72A (260 mg, 0,438 mmol) en THF (15 ml) a 0 °C en atmósfera de nitrógeno se le añadió una solución 1 M en THF de fluoruro de tetrabutilamonio (0,526 ml, 0,526 mmol). La mezcla de reacción se agitó a TA durante una noche y se concentró. El residuo se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (columna REDISEP® de 40 g, eluyendo con un gradiente del 35-80 % de EtOAc en hexanos). Las fracciones que contenían el producto se combinaron y se evaporaron para proporcionar el intermedio A72B (140 mg, 72 %). MS(ES): m/z = 441,1 [M+H]+.

Intermedio A72C: 2-(3-cloro-4-fluorofenil)-7-(2-fluoroetil)-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]pirazin-3-carboxamida, sal TFA

A una solución del intermedio A72B (140 mg, 0,318 mmol) en DCM (10 ml) se le añadió TFA (1 ml). La mezcla de reacción se agitó a TA durante 6 h y se concentró para proporcionar la sal TFA del intermedio A72C que se usó tal cual, sin purificación adicional. MS(ES): m/z = 341,1 [M+H]+.

Compuestos A72 y A73: 2-(3-cloro-4-fluorofenil)-W5-(4-cianofenil)-7-(2-fluoroetil)-6,7-dihidropirazolo[1,5-a]pirazin-3,5(4H)-dicarboxamida

A una solución del intermedio A72C (40 mg, 0,088 mmol) en DMF (1 ml) se le añadió base de Hunig (0,030 ml, 0,173 mmol). La mezcla resultante se dejó en agitación durante 5 min. antes de la adición de 4-isocianatobenzonitrilo (19,02 mg, 0,132 mmol). La mezcla de reacción se agitó a TA durante 1 h tras lo cual se filtró y se purificó por HPLC preparativa para proporcionar una mezcla racémica de los compuestos A72 y A73. El racemato se sometió a separación quiral usando SFC preparativa para proporcionar el enantiómero A72 (tiempo de retención 14,6 min, 12.3 mg, 28,8 %) y el enantiómero A73 (tiempo de retención 18,4 min, 11,1 mg, 26 %). Método de la HPLC quiral: Columna: CHIRALPAK® IC-H, 30 x 250 mm, 5 pm; Fase móvil: MeOH al 30 % en CO², 150 bar (15000 kPa); Caudal: 70 ml/min durante 22 min.; MS(ES): m/z = 483,5 [M-H]⁺; Tiempo de ret. de HPLC 1,61 min y MS(ES): m/z = 485,5 [M+H]⁺Tiempo de ret. 2.46 min. (Métodos de HPLC H e I); RMN 1H (500 MHz, DMSO-d⁶) 5 ppm 7,85 (d, J= 7.3 Hz, 1H), 7,79 - 7,58 (m, 5H), 7,48 (t, J= 9,0 Hz, 1H), 7,41 (s a, 1H), 7,26 (s a, 1H), 5,00 (d, J= 17,2 Hz, 1H), 4,91 (d, J= 17,2 Hz, 1H), 4,78 (dd, J= 12,5, 5,9 Hz, 1H), 4,67 (dd, J= 12,5, 5,5 Hz, 1h), 4,52 (s a, 1H), 4,07 -3,93 (m, 2H), 2,45 - 2,28 (m, 1H), 2,14 (d, J= 6,6 Hz, 1H).

Intermedio A74A: 3-carbamoil-2-(3-cloro-4-fluorofenil)-7-(2-cianoetil)-6,7-dihidropirazolo[1,5-a]pirazin-5(4H)-carboxilato de terc-butilo

A una solución del intermedio A72A (180 mg, 0,304 mmol) en DMSO (2 ml) se le añadió yoduro de tetrabutilamonio (11,21 mg, 0,030 mmol) y cianuro sódico (74,4 mg, 1,518 mmol). La mezcla de reacción se calentó a 85 °C durante 16 h y se enfrió a TA. Se diluyó con partes iguales de agua y ^dC^m. La capa orgánica se separó y la capa acuosa se extrajo dos veces más con DCM. La capa orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4 y se filtró. El filtrado se concentró. El producto en bruto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (columna REDISEP® de 40 g, eluyendo con un gradiente del 35 - 80 % de EtOAc en hexano). Las fracciones que contenían el producto se combinaron y se evaporaron para proporcionar el intermedio A74A (80 mg, 59 %). MS(ES): m/z = 448,1 [M+H]+.

Intermedio A74B: 2-(3-cloro-4-fluorofenil)-7-(2-cianoetil)-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]pirazin-3-carboxamida, sal TFA

A una solución del intermedio A74A (80 mg, 0,179 mmol) en DCM (10 ml) se le añadió TFA (1 ml, 12,98 mmol). La mezcla de reacción se agitó a TA durante 6 h y se concentró para proporcionar la sal TFA del intermedio A74B que se usó tal cual, sin purificación adicional. MS(ES): m/z = 348,1 [M+H]+.

Compuestos A74 y A75: 2-(3-cloro-4-fluorofenil)-7-(2-cianoetil)-W5-(4-cianofenil)-6,7-dihidropirazolo[1,5-a]piracinc-3,5(4H)-dicarboxamida

A una solución del intermedio A74B (40 mg, 0,087 mmol) en DMF (1 ml) se le añadió base de Hunig (0,030 ml, 0,173 mmol). La mezcla resultante se dejó en agitación durante 5 min. antes de la adición de 4-isocianatobenzonitrilo (18,73 mg, 0,130 mmol). La mezcla de reacción se agitó a TA durante 1 h tras lo cual se filtró y se purificó por HPLC preparativa para proporcionar una mezcla racémica de los compuestos A74 y A75. El racemato se sometió a separación quiral usando SFC preparativa para proporcionar el enantiómero A74 (tiempo de retención 48,0 min, 5 mg, 11,7 %) y el enantiómero a 75 (tiempo de retención 50,9 min, 5,5 mg, 12,9 %). Método de la HPLC quiral: Columna: CHlRALPAK® IC-H, 30 x 250 mm, 5 pm; Fase móvil: MeOH al 20 % en CO², 150 bar (15000 kPa); Caudal: 70 ml/min durante 60 min.; MS(ES): m/z = 490,5 [M-H]⁺; Tiempo de ret. de la HPLC 1,47 min. y MS(ES): m/z = 492,5 [M+H]⁺Tiempo de ret. 2.27 min. (Métodos de HPLC H e I); RMN ¹H (500 MHz, DMSO-d⁶) 5 ppm 7,87 (d, J= 7,3 Hz, 1H), 7,80 - 7,58 (m, 5H), 7,48 (t, J=92 Hz, 1H), 7,42 (s a, 1H), 7,24 (s a, 1H), 5,03 (d, J= 17,2 Hz, 1H), 4,87 (d, J= 17,2 Hz, 1H), 4,44 (s a, 1H), 4,07 (dd, J= 13,4, 4,6 Hz, 1^h), 3,91 (d, J= 11,4 Hz, 1H), 2,79 (s a, 2H), 2,22 (dd, J= 13,8, 7,2 Hz, 1 h), 2,11 (dd, J=13,8, 6,8 Hz, 1H).

Esquema 57

Intermedio A76A: 3-(3-fluorofenil)-1-(2,2,3,3,11,11-hexametil-9-oxo-4,10-d¡oxa-8-aza-3-s¡ladodecan-6-¡l)-1H-pirazol-5-carboxilato de etilo

A un matraz cargado con trifenilfosfina (2,93 g, 11,16 mmol), cerrado herméticamente con un septo y purgado con una atmósfera seca de hidrógeno, se le añadió THF (20 ml) mediante una jeringa y la mezcla de reacción se enfrió a 0 °C. Después, se añadió DIAD (2,170 ml, 11,16 mmol) mediante una jeringa dando como resultado una solución espesa de color amarillo lechoso. Se añadió una solución del intermedio A1B (3,28 g, 10,73 mmol) en THF (5,0 ml) a la solución enfriada en hielo. Después de 15 minutos, se añadió pirazol 4B (2,01 g, 8,58 mmol) en forma de una solución en THF (5,0 ml). Después se dejó calentar la reacción a TA. Después de 18 h, la mezcla de reacción se diluyó con EtOAc (150 ml). La capa orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4 anhidro, se filtró y se concentró a presión reducida para proporcionar un aceite en bruto. La mezcla de reacción en bruto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (columna REDISEP® de 220 g, eluyendo con de 0 a 15 % de EtOAc en hexanos). Las fracciones que contenían el producto se combinaron y se evaporaron para proporcionar el intermedio A76A (4,5 g, 80 %) en forma de un jarabe espeso. MS(ES): m/z = 522,09 [M+H]+; RMN 1H (400 MHz, cloroformo-d) 5 ppm 7,49 -7,60 (2 H, m), 7,32 -7,41 (1 H, m), 7,12 (1 H, s), 6,99 -7,07 (1 H, m), 5,52 - 5,64 (1 H, m), 4,92 - 5,07 (1 H, m), 4,37 (2 H, c, J= 7,28 Hz), 3,97 (2 H, d, J= 6,53 Hz), 3,67 -3,83 (2 H, m), 1,37 - 1,50 (9 H, m), 0,75 - 0,86 (9 H, m), 0,04 - 0,11 (2 H, m), -0,12-0,00 (6 H, m).

Intermedio A76B: 1-(1-am¡no-3-h¡drox¡propan-2-¡l)-3-(3-fluorofen¡l)-1H-p¡razol-5-carbox¡lato de etilo

A una soluc¡ón enfr¡ada en h¡elo del ¡ntermed¡o A76A (4,35 g, 8,34 mmol) en DCM (50 ml) se le añad¡ó una soluc¡ón 4 M de HCl en 1,4-d¡oxano (12,5 ml, 50,0 mmol). La mezcla de reacc¡ón se dejó en ag¡tac¡ón a TA durante 2 h. El prec¡p¡tado de color blanco que se generó se el¡m¡nó por f¡ltrac¡ón y la torta de f¡ltro se lavó con éter d¡etíl¡co. El sól¡do se secó al vacío durante 16 h para proporc¡onar el ¡ntermed¡o A76B en forma de una sal de HCl (2,56 g, >98 %). MS(ES): m/z = 308,0 [M+H]+. RMN 1H (400 MHz, DMSO-ds) 5 ppm 8,04 (1 H, s a.), 7,72 - 7,80 (1 H, m), 7,44 -7,54 (1 H, m), 7,13 - 7,23 (1 H, m), 5,46 - 5,58 (1 H, m), 5,24 (1 H, s a), 4,35 (2 H, c, J= 7,11 Hz), 3,58 -3,80 (3 H, m), 3,40 (1 H, d, J= 11,29 Hz), 1,31 - 1,40 (2H, m).

Intermed¡o A76C: 2-(3-fluorofen¡l)-7-(h¡drox¡met¡l)-6,7-d¡h¡drop¡razolo[1,5-a]p¡raz¡n-4(5H)-ona

A una suspens¡ón del ¡ntermed¡o A76B (2,56 g, 8,34 mmol) en EtOH (50 ml) se le añad¡ó NH⁴OH (32,5 ml, 334 mmol, 40 % en peso). Después de unos momentos, se homogene¡zó la mezcla de reacc¡ón y la soluc¡ón se dejó en ag¡tac¡ón a TA durante 16 h. La mezcla de reacc¡ón en bruto se concentró al vacío y se d¡luyó con EtOAc. La soluc¡ón acuosa se neutral¡zó a pH =7 usando una soluc¡ón acuosa 1,0M de HCl. La capa orgán¡ca se separó y la capa acuosa se extrajo con EtOAc. Las capas orgán¡cas comb¡nadas se lavaron después con salmuera, se secaron sobre sulfato sód¡co y se concentraron para proporc¡onar el ¡ntermed¡o A76C (2,1 g, 96 %) en forma de un sól¡do de color blanco. MS(ES): m/z = 261,97 [M+H]⁺. RMN ¹H (400 MHz, cloroformo-d) 5 ppm 7,49 - 7,61 (2 H, m), 7,36 - 7,45 (1 H, m), 7,16-7,21 (1 H, s), 7,06 (1 H, tdd, J= 8,41, 8,41,2,51, 1,00 Hz), 6,28 (1 H, s a), 4,56 - 4,67 (1 H, m), 4,07 -4,23 (2 H, m), 3,72 -3,85 (2 H, m), 3,14 -3,37 (1 H, m).

Intermed¡o A76D: 7-(((íerc-but¡ld¡met¡ls¡l¡l)ox¡)met¡l)-2-(3-fluorofen¡l)-6,7-d¡h¡drop¡razolo[1,5-a]p¡raz¡n-4(5H)-ona

A una soluc¡ón del ¡ntermed¡o A76C (11,5 g, 44,1 mmol) en DMF (120 ml) se le añad¡ó ¡m¡dazol (3,66 g, 53,8 mmol) y TBSCl (7,64 g, 50,7 mmol) y la mezcla de reacc¡ón se ag¡tó a TA durante 14 h. La soluc¡ón se concentró y el mater¡al en bruto se d¡luyó con partes ¡guales de agua y DCM (250 ml cada una). La capa orgán¡ca se separó y se lavó var¡as veces más con agua antes de secarse sobre sulfato sód¡co y concentrarse para proporc¡onar el ¡ntermed¡o A76D (13,57 g, 82 %) en forma de un sól¡do de color blanco. MS(ES): m/z = 375,95 [M+H]+. RMN 1H (400 MHz, cloroformo-d) 5 ppm 7,52 - 7,63 (1 H, m), 7,35 - 7,46 (1 H, m), 7,13 - 7,20 (1 H, m), 6,99 - 7,11 (1 H, m), 6,01 - 6,25 (1 H, m), 4,48 - 4,62 (1 H, m), 4,10 (1 H, dd, J= 10,04, 4,27 Hz), 3,84 - 4,03 (3 H, m), 0,90 - 0,93 (9 H, m), 0,07 - 0,12 (6 H, m).

Intermedio A76E: (2-(3-fluorofenil)-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]pirazin-7-il)metanol

A una solución del intermedio A76D (5,162 g, 13,75 mmol) en THF (125 ml) enfriado a -15 °C, se introdujo una solución 1 M de LAH en THF (38,5 ml, 38,5 mmol) gota a gota. Se dejó que la mezcla de reacción alcanzara gradualmente la temperatura ambiente y se agitó durante otras 18 h. La mezcla de reacción se inactivó cuidadosamente a -15 °C con la adición secuencial de H2O (38,5 ml), NaOH (solución ac. al 15 %, 38,5 ml) y H2O (114 ml). Después se dejó la suspensión en agitación a TA durante 30 minutos, seguido de la adición de MgSO4 anhidro. La mezcla se dejó en agitación durante 15 minutos y después se eliminaron los inorgánicos por filtración. La torta de filtro se lavó con DCM (150 ml). El filtrado bifásico se concentró a presión reducida para eliminar el THF. La capa acuosa se extrajo después con DCM (3x50 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2SO4 anhidro, se filtraron y se concentraron a presión reducida para proporcionar el intermedio A76E (3,41 g, >98 %) en forma de un sólido pegajoso de color blanco. MS(ES): m/z = 247,94 [M+H]+. RMN (400 MHz, cloroformo-d) 5 ppm 7,55 (1 H, dt, J= 7,84, 1,10 Hz), 7,48 (1 H, ddd, J= 10,16, 2,51, 1,63 Hz), 7,31 - 7,40 (1 H, m), 6,96 - 7,04 (1 H, m), 6,32 (1 H, s), 4,26 - 4,35 (1 H, m), 4,07 - 4,15 (2 H, m), 4,01 - 4,07 (1 H, m), 3,91 -3,98 (1 H, m), 3,41 (1 H, dd, J= 13,30, 4,77 Hz), 3,12 (1 H, dd, J= 13,18, 7,15 Hz).

Intermedio A76F: 7-(((terc-butildimetilsilil)oxi)metil)-2-(3-fluorofenil)-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]pirazina

A un matraz cargado con el intermedio A76E (3,41 g, 13,79 mmol) se le añadió DMAP (0,084 g, 0,690 mmol) y trietilamina (2,307 ml, 16,55 mmol). La mezcla de reacción se disolvió en DCM (125 ml) y finalmente se añadió TBSCI (2,286 g, 15,17 mmol). La mezcla de reacción se dejó después en agitación a 22 °C durante 16 h, tras lo cual la mezcla se diluyó con una solución ac. saturada de NaHC0³y las dos capas se separaron. La fase acuosa se extrajo con DCM (2 x 50 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con agua, salmuera, se secaron sobre Na²SO⁴anhidro, se filtraron y se concentraron a presión reducida para proporcionar un aceite de color amarillo claro. El intermedio A76F (5,12 g, 92 %) se encontró que era 90 % puro y se llevó a la protección de amina con Bocanhídrido sin purificación adicional. MS(ES): m/z = 361,94 [M+H]⁺.

Intermedio A76G: 7-(((tenc-butildimetilsilil)oxi)metil)-2-(3-fluorofenil)-6,7-dihidropirazolo[1,5-a]pirazin-5(4H)-carboxilato de terc-butilo

A una solución del intermedio A76F (4,33 g, 11,98 mmol) en DCM (100 ml) se le añadió trietilamina (6,68 ml, 47,9 mmol) y DMAP (0,073 g, 0,599 mmol). A la solución incolora se le añadió después dicarbonato de di-terc-butilo (3,92 g, 17,97 mmol) dando como resultado la evolución del gas. La mezcla de reacción se dejó en agitación a 22 °C durante 24 h antes de inactivarse con una solución saturada acuosa de NaHCO³. Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo dos veces más con DCM. Las capas orgánicas combinadas se lavaron con agua, seguido de salmuera, se secaron sobre sulfato sódico y se concentraron al vacío. El producto en bruto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (columna ^rE^dISEP® de 120 g, eluyendo con EtOAc al 20 % en hexanos). Las fracciones que contenían el producto se combinaron y se evaporaron para proporcionar el intermedio A76G (4,87 g, 88 %) en forma de un aceite incoloro. MS(ES): m/z = 461,77 [M+H]⁺. Rm N ¹H (400 MHz, cloroformo-d) 5 ppm 7,45 -7,58 (1 H, m), 7,35 (1 H, td, J= 8,03, 6,02 Hz), 6,95 - 7,05 (1 H, m), 6,29 - 6,39 (1 H, m), 4,55 - 4,79 (2 H, m), 4,33 (1 H, s a), 4,06 - 4,22 (2 H, m), 3,74 - 4,03 (2 H, m), 1,49 - 1,54 (9 H, m), 0,83 - 0,95 (9 H, m), -0,01 - 0,14 (6 H, m).

Intermedio A76H: 7-(((terc-butildimetilsilil)oxi)metil)-2-(3-fluorofenil)-3-yodo-6,7-dihidropirazolo[1,5-a]pirazin-5(4H)-carboxilato de terc-butilo

A una solución del intermedio A76G (4,87 g, 10,6 mmol) en DCM (56 ml) y MeOH (14 ml) se le añadió NIS (7,12 g, 31,6 mmol) y la mezcla de reacción se dejó en agitación a TA durante 90 min. Después la solución se concentró a presión reducida para proporcionar un aceite de color rojo. La mezcla de reacción en bruto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (columna REDISEP® de 120 g, eluyendo con un gradiente del 0-30 % de EtOAc en hexanos). Las fracciones que contenían el producto se combinaron y se evaporaron para proporcionar el intermedio A76H (5,70 g, 92 %) en forma de un sólido pegajoso. MS(ES): m/z = 587,95 [M+H]+. RMN 1H (400 MHz, cloroformod) 5 ppm 7,65 (1 H, cd, J= 7,78, 0,84 Hz), 7,54 - 7,60 (1 H, m), 7,36 - 7,44 (1 H, m), 7,08 (1 H, tdd, J= 8,44, 8,44, 2,57, 0,88 Hz), 4,50 - 4,71 (1 H, m), 4,41 - 4,49 (1 H, m), 4,02 - 4,40 (3 H, m), 3,83 -3,99 (1 H, m), 3,75 -3,82 (1 H, m), 1,53 (8 H, s), 0,84 - 0,93 (10 H, m), -0,01 - 0,15 (6 H, m).

Intermedio A76I: 7-(((tenc-butildimetilsilil)oxi)metil)-2-(3-fluorofenil)-3-ciano-6,7-dihidropirazolo[1,5-a]pirazin-5(4H)-carboxilato de terc-butilo

A un matraz equipado con un condensador de reflujo y cargado con el intermedio A76H (3,84 g, 6,54 mmol) se le añadió DMF (43,6 ml) y cianuro de cobre (I) (1,463 g, 16,34 mmol). La mezcla de reacción heterogénea se calentó a 100 °C durante 18 h. La mezcla de reacción se enfrió a TA y la solución se filtró a través de una capa de CELITE®. La torta de filtro se lavó con EtOAc. El filtrado se concentró a presión reducida para proporcionar la mezcla de reacción en bruto en forma de un aceite de color verde oscuro. El producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (columna REDISEP® de 80 g, eluyendo con un gradiente del 5-30 % de EtOAc en hexanos). Las fracciones que contenían el producto se combinaron y se evaporaron para proporcionar el intermedio A76I (1,441 g, 45 %) en forma de un sólido de color blanco. ^{M S ( e S ) :} m/z = 431,0 [M+H²O-OtBu]⁺; RMN ¹H (400 MHz, cloroformo-d) 5 ppm 7,62 - 7,83 (2 H, m), 7,39 - 7,51 (1 H, m), 7,08 - 7,19 (1 H, m), 4,67 - 4,96 (2 H, m), 4,34 (1 H, s a), 3,84 - 4,19 (4 H, m), 1,47 - 1,54 (9 H, m), 0,79 - 0,91 (9 H, m), -0,02 - 0,10 (6 H, m).

Intermedio A76J: 3-carbamoil-2-(3-fluorofenil)-7-(hidroximetil)-6,7-dihidropirazolo[1,5-a]pirazin-5(4H)-carboxilato de terc-butilo

A una solución enfriada en hielo del intermedio A76I (1,44 g, 2,96 mmol) en DMSO (20 ml) se le añadió una solución ac. 5 M de KOH (2,96 ml, 14,8 mmol) y H²O²(6,05 ml, 59,2 mmol, 30 % p/v en H²O) y la mezcla de reacción se agitó a 22 °C durante 3 h. La mezcla de reacción se dividió después entre partes iguales de agua y EtOAc y se separaron las capas. La fase acuosa se extrajo dos veces más con EtOAc. Las capas orgánicas combinadas se lavaron con agua, salmuera, se secaron sobre MgSO⁴anhidro, se filtraron y se concentraron a presión reducida para proporcionar un sólido de color blanco. La mezcla de reacción en bruto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (columna REDISEP® de 120 g, eluyendo con un gradiente del 75-100 % de EtOAc en hexanos). Las fracciones que contenían el producto se combinaron y se evaporaron para proporcionar el intermedio A76J (0,997 g, 52 %) en forma de un sólido de color blanco contaminado con dimetil sulfona. MS(ES): m/z = 412,96 [M+Na]+.

Intermedio A76K: 3-carbamoil-7-(fluorometil)-2-(3-fluorofenil)-6,7-dihidropirazolo[1,5-a]pirazin-5(4H)-carboxilato de tere-butilo

Una suspensión del intermedio A76J (131,5 mg, 0,337 mmol) en DCM (5,5 ml) se dejó enfriar a -78 °C. Se añadió DAST (0,067 ml, 0,505 mmol) gota a gota a la solución que después se dejó enfriar TA. Después de agitar a TA durante 1 h, la reacción se interrumpió mediante la adición de una solución ac. saturada de NaHCO3 a 0 °C. Las dos capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con DCM (3x10 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre MgSO4 anhidro, se filtró y se concentró a presión reducida para proporcionar un aceite de color naranja. La mezcla de reacción en bruto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (columna REDISEP® de 24 g, eluyendo con EtOAc al 75 % en hexanos). Las fracciones que contenían el producto se combinaron y se evaporaron para proporcionar el intermedio A76K (52,8 mg, 40 %) en forma de un sólido de color blanco. MS(ES): m/z = 393,0 [M+H]+.

Compuestos A76 y A77: W5-(4-cianofenil)-7-(fluorometil)-2-(3-fluorofenil)-6,7-dihidropirazolo[1,5-a]pirazin-3,5(4H)-dicarboxamida

A una solución del intermedio A76K (0,053 g, 0,135 mmol) en DCM (3,0 ml) se le añadió ácido trifluoroacético (0,103 ml, 1,346 mmol). Después se dejó la mezcla de reacción en agitación a TA durante 3 h antes de eliminar los volátiles para proporcionar la sal bis TFA en bruto.

Después se disolvió la sal de TFA en DMF (1,3 ml) y se trató con DIPEA (0,117 ml, 0,673 mmol). La mezcla resultante se dejó en agitación durante 5 min. antes de la adición de 4-isocianatobenzonitrilo (0,039 g, 0,269 mmol). La reacción se dejó en agitación durante 2 h tras lo cual se filtró y se purificó mediante HPLC preparativa. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se evaporaron para proporcionar el compuesto deseado que se volvió a purificar mediante separación quiral usando SFC preparativa: CHIRALPAK® IA-H, 30 x 250 mm, 5 pm eluyendo con MeOH al 20 %: CO²al 80 % a 150 bar (15000 kPa) y 35 °C a 70 ml/min. El primer enantiómero eluyente, t^r= 23 min: compuesto (S)-A76 (0,0166 g, 28 %) y el segundo enantiómero eluyente, t^r= 35 min: compuesto (R)-A77 (0,0207 g, 34 %) se separaron de este modo. MS(ES), m/z = 437,4 [M+H]⁺; Tiempos de ret. de la H^pL^c1,44 min. y 2,18 min. (Métodos H e I respectivamente). RMN ¹H (600 MHz, DMSO-d⁶) 5 ppm 7,62 - 7,74 (4 H, m), 7,35 - 7,57 (4 H, m), 7,17 - 7,33 (2 H, m), 4,77 - 5,11 (4 H, m), 4,59 - 4,72 (1 H, m), 4,18 (1 H, d, J= 13,94 Hz), 4,04 (1 H, dd, J= 14,12, 6,42 Hz).

Esquema 58

Intermedio A78A: 3-carbamoil-2-(3-fluorofenil)-7-(((metilsulfonil)oxi)metil)-6,7-dihidropirazolo[1,5-a]pirazin-5(4H)-carboxilato de terc-butilo

A una suspensión enfriada en hielo del intermedio A76J (148,2 mg, 0,380 mmol) en DCM (3,8 ml) se le añadió trietilamina (0,063 ml, 0,456 mmol) seguido de la adición gota a gota de cloruro de metanosulfonilo (0,032 ml, 0,418 mmol). La mezcla de reacción homogénea resultante se dejó calentar a TA y continuó en agitación durante otras 2 h. Después, la reacción se interrumpió con una solución ac. saturada de NaHCO3. Las dos capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con DCM (2x10 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre MgSO4 anhidro, se filtraron y el filtrado se concentró a presión reducida para proporcionar un aceite incoloro. La mezcla de reacción en bruto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (columna REDISEP® de 24 g, eluyendo con un gradiente del 60-85 % de EtOAc en hexanos). Las fracciones que contenían el producto se combinaron y se evaporaron para proporcionar el intermedio A78A (0,0948 g, 33 %) en forma de un sólido de color blanco. MS(ES): m/z = 468,9 [M+H]+.

Intermedio A78B: 3-carbamoil-2-(3-fluorofenil)-7-metil-6,7-dihidropirazolo[1,5-a]pirazin-5(4H)-carboxilato de terc-butilo

A una solución del intermedio A78A (0,0948 g, 0,202 mmol) en THF (2,0 ml) a TA se le añadió gota a gota una solución 1 M de LiEt3BH en THF (2,02 ml, 2,02 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante 2 h. La reacción se inactivó después cuidadosamente con una solución ac. saturada de NaHCO3. La fase orgánica se separó y la capa acuosa se extrajo dos veces más con DCM. Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre sulfato sódico y se concentró para proporcionar un aceite de color amarillo claro. La mezcla de reacción en bruto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (columna REDISEP® de 24 g, eluyendo con un gradiente del 50-90 % de EtOAc en hexanos). Las fracciones que contenían el producto se combinaron y se evaporaron para proporcionar el intermedio A78B (0,029 g, 81 %) en forma de una espuma de color blanco. MS(ES): m/z = 375,08 [M+H]+.

Compuestos A78 y A79: W5-(4-c¡anofen¡l)-2-(3-fluorofen¡l)-7-met¡l-6,7-d¡h¡drop¡razolo[1,5-a]p¡raz¡n-3,5(4H)-dicarboxamida

Los compuestos A78 y A79 se s¡ntet¡zaron de forma análoga a los compuestos A76 y A77 hac¡endo reacc¡onar el A78B desproteg¡do con 4-¡soc¡anatobenzon¡tr¡lo. El compuesto se pur¡f¡có por HPLC preparat¡va y se volv¡ó a pur¡f¡car med¡ante separac¡ón qu¡ral usando HPLC preparat¡va: CHIRALCEL® OJ, 21 x 250 mm, 10 pm eluyendo con 65 % de d¡et¡lam¡na al 0,1 % en heptano: EtOH al 35 % a 15 ml/m¡n. El pr¡mer enant¡ómero eluyente, t^r= 12,3 m¡n: compuesto (S)-A78 (0,009 g, 32 %) y el segundo enant¡ómero eluyente, t^r= 22,2 m¡n: compuesto (R)-A19 (0,009 g, 32 %) se separaron de este modo. MS(ES): m/z = 419,1 [M+H]⁺; T¡empos de ret. de la HPLC 1,40 m¡n y 2,26 m¡n. (Métodos H e I respect¡vamente); RMN ¹H (500 MHz, DMSO-d⁶) 5 ppm 7,66 - 7,75 (4 H, m), 7,34 - 7,55 (4 H, m), 7,16 - 7,25 (2 H, m), 4,82 - 5,02 (2 H, m), 4,40 - 4,49 (1 H, m), 4,09 - 4,17 (1 H, m), 3,67 -3,74 (1 H, m), 1,49 (3 H, d, J= 6,60 Hz).

Esquema 59

En un tubo cerrado hermét¡camente a pres¡ón a TA se añad¡eron 2-(terc-but¡lo)ox¡rano (1,0 g, 9,98 mmol) y amon¡aco en metanol (7 N) (4,28 ml, 30,0 mmol). El rec¡p¡ente de reacc¡ón se cerró hermét¡camente y se calentó a 70 °C durante 4 h. La mezcla de reacc¡ón se enfr¡ó a TA y se concentró a pres¡ón reduc¡da. El ¡ntermed¡o A80A en bruto (0,968, 83 % de rend¡m¡ento) se usó tal cual s¡n más pur¡f¡cac¡ón. RMN ¹H (400 MHz, DMSO-d⁶) 53,15 - 2,88 (m, 1H), 2,66 - 2,46 (m, 1H), 2,42 - 2,21 (m, 1H), 0,88 - 0,73 (m, 9H).

Intermed¡o A80B: (2-h¡drox¡-3,3-d¡met¡lbut¡l)carbamato de terc-but¡lo

A una soluc¡ón del ¡ntermed¡o A80A (0,812 g, 6,93 mmol) en DCM (20 ml) se le añad¡ó TEA (2,414 ml, 17,32 mmol), DMAP (0,042 g, 0,346 mmol), y d¡carbonato de d¡-terc-but¡lo (2,268 g, 10,39 mmol). La mezcla de reacc¡ón se dejó en ag¡tac¡ón durante una noche a TA. La mezcla de reacc¡ón se d¡luyó con EtOAc (500 ml) y se lavó con salmuera, se secó (MgSO⁴) y se concentró. El producto en bruto se pur¡f¡có por cromatografía sobre gel de síl¡ce (columna REDISEP® de 80 g, eluyendo con un grad¡ente del 0-30 % de EtOAc en hexanos). Las fracc¡ones que contenían el producto se comb¡naron y se concentraron para proporc¡onar el ¡ntermed¡o A80B (1,2 g, 80 % de rend¡m¡ento). RMN ¹H (400 MHz, DMSO-d⁶) 54,07 -3,93 (m, 1H), 3,92 -3,80 (m, 1H), 3,62 (dd, J= 10,3, 7,8 Hz, 1H), 1,46 (s, 9H), 0,87 (s, 9H).

Esquema 60

Intermedio A80C: 7-(ferc-butilo)-3-carbamoil-2-(3-cloro-4-fluorofenil)-6,7-dihidropirazolo[1,5-a]pirazin-5(4H)-carboxilato de terc-butilo

Se preparó el intermedio A80C usando una estrategia de síntesis análoga a la empleada para la preparación del intermedio AIN (esbozada en el esquema 41). Se usó el intermedio A80B en sustitución del intermedio A1B en la reacción inicial de acoplamiento de Mitsunobu. MS(ES) m/z = 451 [M+H]+.

Compuestos A80 y A81: 7-(ferc-butilo)-2-(3-cloro-4-fluorofenil)-W5-(4-cianofenil)-6,7-dihidropirazolo[1,5-a]pirazin-3,5(4H)-dicarboxamida

A una solución del intermedio A80C (0,305 g, 0,676 mmol) en DCM (20 ml) se le añadió TFA (0,313 ml, 4,06 mmol) y la solución resultante se dejó en agitación a TA durante 18 h. Después, la reacción se concentró a presión reducida y la bis sal de TFA en bruto del intermedio A80D (0,314 g, >98 % de rendimiento) se usó en la siguiente reacción sin purificación. A una solución del intermedio A80D (0,05 g, 0,143 mmol) en DMF (2 ml) a TA en atmósfera de nitrógeno se le añadió DIPEA (0,124 ml, 0,713 mmol) y 2,4-isocianatobenzonitrilo (0,041 g, 0,285 mmol). La mezcla de reacción se agitó durante 1 h. La mezcla de reacción se filtró y se concentró. El material en bruto se purificó por HPLC preparativa. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron por evaporación centrífuga para obtener el producto racémico. El compuesto se volvió a purificar mediante separación quiral usando HPLC preparativa: CHIRALPAK® AS, 21 x 250 mm, columna de 10 pm eluyendo con heptanos al 80 % con dietilamina al 0,1 %: EtOH al 20 % a 15 ml/min y se monitorizó por UV a 254 nm. El primer enantiómero eluyente, t^r= 10,9 min: (S)-A80 y el segundo enantiómero eluyente, t^r= 17,1 min: (R)-A81 se separaron de este modo. MS(ES) m/z = 495 [M+H]⁺; Tiempos de ret. = 1,98 y 2,86 min. (Métodos H e I respectivamente). RMN ¹H (500 MHz, DMSO-d^s) 57,81 - 7,88 (1 H, m), 7,61 - 7,77 (6 H, m), 7,47 (1 H, t, J= 8,99 Hz), 7,20 - 7,45 (2 H, m), 5,07 - 5,18 (1 H, m), 4,71 - 4,84 (1 H, m), 4,53 - 4,64 (1 H, m), 4,17 (1 H, s a), 0,94 - 1,07 (9 H, m).

Esquema 61

Intermedio A82A: 3-carbamoil-2-(3-cloro-4-fluorofenil)-7-isopropil-6,7-dihidropirazolo[1,5-a]pirazin-5(4H)-carboxilato de terc-butilo

El intermedio A82A se preparó usando una estrategia de síntesis análoga a la empleada para la preparación del intermedio A80C. Se preparó un amino alcohol análogo al intermedio A80B comenzando con 2-(ferc-propil)oxirano y se usó en sustitución del intermedio A1B en la reacción inicial de acoplamiento de Mitsunobu. MS(ES) m/z = 437 [M+H]+.

Compuestos A82 y A83: 2-(3-cloro-4-fluorofenil)-W5-(4-cianofenil)-7-isopropil-6,7-dihidropirazolo[1,5-a]pirazin-3,5(4H)-dicarboxamida

Los compuestos A82 y A83 se prepararon se prepararon de manera análoga a los compuestos A80 y A81 usando el intermedio A82B. El compuesto racémico obtenido mediante HPLC preparativa se purificó adicionalmente mediante separación quiral usando HPLC preparativa: CHIRALPAK® AD, 21 x 250 mm, columna de 10 pm eluyendo con 80 % de heptano con dietilamina al 0,1 %: EtOH al 20 % a 15 ml/min. El primer enantiómero eluyente, t^r= 18,4 min: (S)-A82 y el segundo enantiómero eluyente, t^r= 25,1 min: (R)-A83 se separaron de este modo. MS(ES) m/z = 481 [M+H]⁺; Tiempos de ret. = 1,74 y 2,82 min. (Métodos H e I respectivamente). RMN ¹H (500 MHz, DMSO-d⁶) 5 ppm 7,78 - 7,90 (1 H, m), 7,61 - 7,76 (5 H, m), 7,47 (1 H, t, J= 8,99 Hz), 7,14 - 7,43 (2 H, m), 4,82 - 5,03 (2 H, m), 4,16 -4,24 (1 H, m), 4,12 (1 H, dd, J= 14,12, 4,95 Hz), 3,72 -3,84 (1 H, m), 2,40 (1 H, cd, J= 13,11, 6,51 Hz), 1,01 (3 H, d, J= 6,91 Hz), 0,80 - 0,92 (3 H, m).

Esquema 62

Intermedio A84A: 1,1,1-trifluoro-3-((4-metoxibencil)amino)propan-2-ol

A una solución de 2-(trifluorometil)oxirano (2,00 g, 17,8 mmol) en iso-propanol (20 ml) en un tubo a presión se le añadió (4-metoxifenil)metanamina (7,35 g, 53,5 mmol). El recipiente de reacción se tapó y se calentó a 80 °C durante 3 h. La mezcla de reacción se concentró y se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (columna REDISEP® de 80 g, eluyendo con un gradiente del 0-60 % de EtOAc en hexanos). Las fracciones requeridas se concentraron para obtener Intermedio A84A (3,1 g, 71 % de rendimiento) en forma de un sólido de color blanco. MS(ES) m/z = 287 [M+H]+. RMN 1H (400 MHz, DMSO-ds) 57,29 - 7,17 (m, 2H), 6,87 (d, J= 8,5 Hz, 2H), 6,25 (s a, 1H), 4,04 (td, J= 7,8, 3,3 Hz, 1H), 3,72 (s, 3H), 3,66 (d, J= 1,8 Hz, 2H), 2,74 - 2,55 (m, 2H), 2,08 (s a, 1H).

Intermedio A84B: Ácido 3-(3-doro-4-fluorofeml)-1H-p¡razol-5-carboxílico

A una solución del intermedio A66F (5,0 g, 18,6 mmol) en EtOH (10 ml) y THF (20 ml) a TA se le añadió una solución de LiOH (5,35 g, 223 mmol) en agua (6,67 ml). La mezcla de reacción se agitó a TA durante una noche. La mezcla de reacción se concentró y el residuo resultante se disolvió en agua (200 ml) y se extrajo con éter. La capa orgánica se separó y la capa acuosa se acidificó a un pH de 2 usando una solución ac. conc. de HCl. La capa acuosa se extrajo con EtOAc (3 x 200 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron (MgSO4) y se concentraron para obtener el intermedio A84B (3,02 g, 67,4 % de rendimiento). El producto se usó tal cual, sin purificación adicional. MS(ES) m/z = 241 [M+H]+.

Intermedio A84C: 3-(3-cloro-4-fluorofen¡l)-W-(4-metox¡benc¡l)-W-(3,3,3-trifluoro-2-l^¡drox¡prop¡l)-1H-p¡razol-5-carboxamida

A una solución del intermedio A84B (0,8 g, 3,32 mmol) en 1,4-dioxano calentada a 50 °C se le añadió CDI (0,593 g, 3,66 mmol). La reacción se calentó durante 30 min y se añadió el intermedio A84A (0,911 g, 3,66 mmol). La mezcla de reacción se dejó en agitación durante otros 30 min, a 50 °C. La mezcla de reacción se diluyó con agua, se enfrió a TA y se extrajo con EtOAc (3x100 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron (MgSO4) y se concentraron. El residuo se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (columna REDISEP® de 80 g, eluyendo con un gradiente del 0-30 % de EtOAc en hexanos). Las fracciones que contenían el producto se combinaron y se concentraron para proporcionar el intermedio A84C (1,015 g, 64,7 % de rendimiento). MS(ES) m/z = 472 [M+H]+.

Intermedio A84D: 2-(3-cloro-4-fluorofen¡l)-5-(4-metox¡benc¡l)-7-(tr¡fluoromet¡l)-6,7-d¡h¡drop¡razolo[1,5-a]pirazin-4(5H)-ona

A una solución en agitación enfriada en hielo de trifenilfosfina (0,733 g, 2,80 mmol) en THF (30 ml) se le añadió DIAD (0,544 ml, 2,80 mmol) dando como resultado una solución espesa de color amarillo lechoso. Después de 10 min, se añadió una solución del intermedio A84C (1,015 g, 2,151 mmol) en THF (5,0 ml). La reacción se dejó enfriar después a TA y se agitó durante una noche.

La mezcla de reacción se diluyó con EtOAc (200 ml) y se lavó con salmuera, se secó (MgSO4) y se concentró al vacío. El aceite de color amarillo en bruto se purificó mediante cromatografía BIOTAGE® (columna REDISEP® de 80 g, eluyendo con un gradiente del 0-40 % de EtOAc en hexanos). Las fracciones que contenían el producto se combinaron y se concentraron para proporcionar el intermedio A84D (0,614 g, 62,8 % de rendimiento). MS(ES) m/z = 454 [M+H]+. RMN 1H (400 MHz, cloroformo-d) 57,88 (dd, J=7,0, 2,0 Hz, 1H), 7,66 (ddd, J= 8,6, 4,6, 2,1 Hz, 1H), 7,31 - 7,14 (m, 4H), 6,94 - 6,85 (m, 2H), 5,01 - 4,89 (m, 1H), 4,72 (s, 2H), 4,06 -3,96 (m, 1h), 3,85 -3,74 (m, 4H).

Intermedio A84E: 2-(3-cloro-4-fluorofenil)-7-(trifluorometil)-6,7-dihidropirazolo[1,5-a]pirazin-4(5H)-ona

A una solución del intermedio A84D (0,405 g, 0,892 mmol) en acetonitrilo (5 ml) y agua (0,556 ml) a TA se le añadió CAN (1,957 g, 3,57 mmol). La mezcla de reacción se dejó en agitación a TA durante 24 h. La mezcla de reacción se concentró, el residuo se disolvió en metanol y se purificó por HPLC preparativa de fase inversa usando una columna de 30x100 mm XTERRA® eluyendo con 30-100 % de B, durante 20 min. (Disolvente A: agua al 90 %, metanol al 10 %, TFA al 0,1 %: Disolvente B: agua al 10 %, metanol al 90 %, TFA al 0,1 %). Las fracciones requeridas se combinaron y se concentraron para obtener el intermedio A84E ( (0,1 g, 34 % de rendimiento). MS(ES) m/z = 334 [M+H]+.

Intermedio A84F: 2-(3-cloro-4-fluorofenil)-7-(trifluorometil)-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]pirazina

A una solución del intermedio A84E (0,1 g, 0,300 mmol) en THF anhidro (10 ml) a 0 °C en atmósfera de nitrógeno se le añadió una solución de LAH (0,180 ml, 0,360 mmol, 2 M en THF). La mezcla de reacción se dejó calentar a TA y se agitó durante 4 h. La mezcla de reacción se enfrió a 0 °C y se añadió un equivalente adicional de FAH y la solución se calentó a TA y se agitó durante 5 h. La mezcla de reacción se enfrió de nuevo a 0 °C y se inactivó mediante la adición lenta de una solución ac. saturada de sal de Rochelle. Después, la solución se extrajo con EtOAc (3 x) y las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron (MgSO4) y se concentraron. El residuo en bruto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (columna REDISEP® de 24 g, eluyendo con un gradiente del 0-80 % de EtOAc en hexanos). Las fracciones que contenían el producto se combinaron y se concentraron para proporcionar el intermedio A84F (0,06 g, 63 % de rendimiento, contaminado con un 15 % del subproducto des-cloro). MS(ES) m/z = 320 [M+H]+.

Intermedio A84G: 2-(3-cloro-4-fluorofenil)-7-(trifluorometil)-6,7-dihidropirazolo[1,5-a]pirazin-5(4H)-carboxilato de terc-butilo

A una solución del intermedio A84F (0,06 g, 0,188 mmol) en DCM (10 ml) se le añadió TEA (0,065 ml, 0,469 mmol), DMAP (1,146 mg, 9,38 pmol) y B0C2O (0,061 g, 0,282 mmol). La mezcla de reacción se agitó durante una noche a TA. La mezcla de reacción se diluyó con EtOAc (300 ml) y se lavó con salmuera, se secó (MgSO4) y se concentró. El producto en bruto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice usando (columna REDISEP® de 24 g, eluyendo con un gradiente del 0-30 % de EtOAc en hexanos). Las fracciones que contenían el producto se combinaron y se concentraron para proporcionar el intermedio A84G (0,055 g, 70 % de rendimiento). MS(ES) m/z = 420 [M+H]+.

Intermedio A84H: 2-(3-cloro-4-fluorofenil)-3-yodo-7-(trifluorometil)-6,7-dihidropirazolo[1,5-a]pirazin-5(4H)-carboxilato de tere-butilo

A una solución del intermedio A84G (0,055 g, 0,131 mmol) en una mezcla 4:1 de CH²CI²(10 ml) y MeOH (2,5 ml) se le añadió NIS (0,088 g, 0,393 mmol). La mezcla de reacción se agitó a TA. Después de 90 min, se añadió otro equivalente de NIS y la solución resultante se agitó durante una noche a TA. La mezcla de reacción se concentró al vacío proporcionando el producto en bruto en forma de un aceite de color rojo. El producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice usando (columna REDISEP® de 24 g, eluyendo con un gradiente del 0-30 % de EtOAc en hexanos). Las fracciones que contenían el producto se combinaron y se concentraron para proporcionar el intermedio A84H (0,059 g, 83 % de rendimiento). MS(ES) m/z = 546 [M+H]⁺.

Intermedio A84I: 2-(3-cloro-4-fluorofenil)-3-ciano-7-(trifluorometil)-6,7-dihidropirazolo[1,5-a]pirazin-5(4H)-carboxilato de terc-butilo

A una solución del intermedio A84H (0,115 g, 0,245 mmol) en DMF (20 ml) se le añadió CuCN (0,055 g, 0,613 mmol). La mezcla de reacción se calentó en un tubo cerrado herméticamente a 120 °C durante 16 h. La mezcla de reacción se filtró a través de un lecho de CELITE®, la torta de filtro se lavó con EtOAc y el filtrado se concentró a presión reducida. La mezcla de reacción en bruto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (columna REDISEP® de 24 g, eluyendo con un gradiente del 0-40 % de EtOAc en hexanos). Las fracciones que contenían el producto se combinaron y se concentraron para proporcionar el intermedio A84I (0,075 g, 83 % de rendimiento). MS(ES) m/z = 369 [M+H]+.

Intermedio A84J: 3-carbamoil-2-(3-cloro-4-fluorofenil)-7-(trifluorometil)-6,7-dihidropirazolo[1,5-a]pirazin-5(4H)-carboxilato de terc-butilo

A una solución del intermedio A84I (0,061 g, 0,137 mmol) en EtOH (10 ml) a TA se le añadió una solución 5 M de KOH (0,137 ml, 0,686 mmol). La mezcla de reacción se enfrió a 0 °C y se añadió peróxido de hidrógeno (0,280 ml, 2,74 mmol, 30 % p/v en H2O) gota a gota. La mezcla de reacción se dejó calentar a TA y se agitó durante una noche. La mezcla de reacción se concentró y el residuo resultante se diluyó con EtOAc. La solución se lavó con agua y salmuera y después se secó (MgSO4) y se concentró. El producto en bruto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (columna REDISEP® de 24 g, eluyendo con un gradiente del 0-20 % de MeOH en DCM). Las fracciones requeridas se concentraron para obtener Intermedio A84J (0,046 g, 72 % de rendimiento) en forma de un sólido de color blanco. MS(ES) m/z = 463 [M+H]+.

Intermedio A84K: 2-(3-cloro-4-fluorofenil)-7-(trifluorometil)-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]pirazin-3-carboxamida, TFA

A una solución del intermedio A84J (0,141 g, 0,305 mmol) en DCM (10 ml) se le añadió TFA (0,141 ml, 1,828 mmol). La mezcla de reacción se agitó durante una noche a TA. La mezcla de reacción se concentró para obtener el intermedio A84K en bruto (0,145 g, 0,304 mmol, 100 % de rendimiento). Se asumió que el rendimiento era cuantitativo y el producto se usó tal cual, sin purificación adicional. MS(ES) m/z = 363 [M+H]+.

Compuestos A84 y A85: 2-(3-cloro-4-fluorofenil)-W5-(4-cianofenil)-7-(trifluorometil)-6,7-dihidropirazolo[1,5-a]pirazin-3,5(4H)-dicarboxamida

A una solución del intermedio A84K(0,036 g, 0,099 mmol) en DMF (2 ml) a TA en atmósfera de nitrógeno se le añadió DIPEA (0,087 ml, 0,496 mmol) y 2-isocianato-2-metilpropano (0,029 g, 0,199 mmol). La mezcla de reacción se agitó durante 1 h. La mezcla de reacción se filtró y se concentró. El material en bruto se purificó por HPLC preparativa. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron por evaporación centrífuga para obtener el producto racémico. El compuesto se volvió a purificar mediante separación quiral usando HPLC preparativa: CHIRALCEL® OD 21 x 250 mm, columna de 10 ^m eluyendo con 85 % de heptano con dietilamina al 0,1 %: EtOH 15 al % a 15 ml/min, controlado por UV a 254 nm. El primer enantiómero eluyente, tr = 29,3 min: (S)-A84 y el segundo enantiómero eluyente, tr = 38,5 min: (R)-A85 se separaron de este modo. MS(ES) m/z = 507 [M+H]+; Tiempos de ret. = 1,74 y 2,98 min. (Métodos H e I respectivamente). RMN 1H (500 MHz, DMSO-ds) 5 ppm 7,79 - 7,86 (1 H, m), 7,70 - 7,75 (2 H, m), 7,68 (1 H, td, J= 5,41,2,38 Hz), 7,64 (2 H, d, J= 8,80 Hz), 7,36 -7,57 (3 H, m), 7,35 - 7,37 (1 H, m), 5,50 (1 H, s a), 5,39 (1 H, d, J= 17,2 Hz), 4,86 (1 H, d, J= 14,3 Hz), 4,63 - 4,75 (1 H, m), 3,76 (1 H, d, J= 14,7 Hz).

Claims

REIVINDICACIONES

1. Un compuesto de acuerdo con la fórmula (III),

o un estereoisómero, un tautómero, una sal o un solvato farmacéuticamente aceptable de los mismos donde: R2 se selecciona independientemente entre

R^3ay R^3bse seleccionan independientemente entre H, CH²CH³, CH³, CH²OH, CH²CH²OH, CH²CH²Oalquilo C^1-4, CH²F, CHF², CH²CH²F, CF³, CH²OCHF², CH²CN, CH²CH²CN, CH²Oalquilo C^1-4, C(CH³)³, CH(CH³)², C(CH³)²OH, C(CH³)²F, C(=O)NH-cicloalquilo C^3-6, C(=O)NH-heterociclilo y CH²-heterociclilo, en donde el heterociclilo se

R⁵, en cada caso, se selecciona independientemente entre H, alquilo C^1-4sustituido con 0-3 R^e, F, Cl, Br, -S(O)^pR^c, -CN, -OR^b, NR^aR^a, cicloalquilo C^3-6y arilo sustituido con de 0 a 3 R^e;

R⁷, en cada caso, se selecciona independientemente entre H, F, Cl, Br, -(CH²)^rCN, NO², -(CH²)^rOR^b, -S(O)^pR^c, -C(=O)R^b, -NR^aR^a, -C(=O)NR^aR^a, -NHC(=O)R^b, -NHC(=O)OR^b, -OC(=O)NR^aR^a, -NHC(=O)NR^aR^a, -C(=O)OR^b, -S(O)²NR^aR^a, -NHS(O)²NR^aR^a, -NHS(O)²R^c, alquilo C^1-6sustituido con 0-5 R^e, cicloalquilo C^3-6sustituido con 0-5 R^e, arilo sustituido con de 0 a 5 R^ey heterociclilo sustituido con de 0 a 5 R^e;

R⁸, en cada caso, se selecciona independientemente entre H, F, Cl, Br, CN, alquilo C^1-6sustituido con de 0 a 5 R^e, -(CH²)^r-cicloalquilo C^3-6sustituido con de 0 a 5 R^e, -(CH²)^r-arilo sustituido con de 0 a 5 R^e, -(CH²)^r-heterociclilo sustituido con de 0 a 5 R^e, CO²H, -(CH²)^rOR^by -(CH²)^rNR^aR^a;

R^a, en cada caso, se selecciona independientemente entre H, CN, alquilo C^1-6sustituido 0-5 R^e, alquenilo C^2-6sustituido con 0-5 R^e, alquinilo C^2-6sustituido con 0-5 R^e, -(CH²)^r-carbociclilo C^3-10sustituido con de 0 a 5 R^ey -(CH²)^r-heterociclilo sustituido con de 0 a 5 R^e; o R^ay R^ajunto con el átomo de nitrógeno al que ambos están unidos forman un anillo heterocíclico sustituido con de 0 a 5 R^e;

R^b, en cada caso, se selecciona independientemente entre H, alquilo C^1-6sustituido con de 0 a 5 R^e, alquenilo C^2-6sustituido con 0-5 R^e, alquinilo C^2-6sustituido con 0-5 R^e, arilo sustituido con de 0 a 5 R^ey heterociclilo sustituido con de 0 a 5 R^e;

R^c, en cada caso, se selecciona independientemente entre alquilo C^1-6sustituido con de 0 a 5 R^e, carbociclilo C^3-6y heterociclilo;

R^e, en cada caso, se selecciona independientemente entre F, Cl, Br, CN, NO², =O, CO²H, alquilo C^1-6, alquenilo C^2-6, alquinilo C^2-6y -CH²)^r-cicloalquilo C^3-6;

p, en cada caso, se selecciona independientemente entre cero, 1 y 2; y

r, en cada caso, se selecciona independientemente entre cero, 1,2, 3 y 4.

2. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, donde:

R²es

R⁷, en cada caso, se selecciona independientemente entre H, F, Cl, Br, CN, -Oalquilo ^1-4sustituido con de 0 a 5 R^e, -S(O)²alquilo C^1-4, -C(=O)R^b, -NR^aR^a, -C(=O)NR^aR^a, alquilo C^1-4sustituido con de 0 a 5 R^e, cicloalquilo C^3-6sustituido con de 0 a 5 R^e, arilo sustituido con de 0 a 5 R^ey heterociclilo sustituido con de 0 a 5 R^e; y

R^a, en cada caso, se selecciona independientemente entre H, alquilo C^1-6sustituido con de 0 a 5 R^e, alquenilo C^2-6sustituido con de 0 a 5 R^e, alquinilo C^2-6sustituido con de 0 a 5 R^e, -(CH²)^r-carbociclilo C^3-10sustituido con de 0 a 5 R^ey -(CH²)^r-heterociclilo sustituido con de 0 a 5 R^e; o R^ay R^ajunto con el átomo de nitrógeno al que ambos están unidos forman un anillo heterocíclico sustituido con de 0 a 5 R^e; en donde el anillo heterocíclico se selecciona independientemente entre

3. Una composición farmacéutica que comprende uno o más compuestos de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 2 y un vehículo farmacéuticamente aceptable.

4. Un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 2, para su uso en terapia.

5. Un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 2, para su uso en el tratamiento de una enfermedad, en donde la enfermedad se selecciona entre un trastorno del ritmo circadiano, una enfermedad neurodegenerativa y cáncer.