CN109952305B

CN109952305B - 哌嗪并杂芳基类衍生物、其制备方法及其在医药上的应用

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Publication number: CN109952305B
Application number: CN201880004423.7A
Authority: CN
Inventors: 李心; 何威; 陈阳; 贺峰; 陶维康
Original assignee: Jiangsu Hengrui Medicine Co Ltd; Shanghai Hengrui Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Jiangsu Hengrui Medicine Co Ltd; Shanghai Hengrui Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 2017-07-27
Filing date: 2018-07-26
Publication date: 2022-06-21
Anticipated expiration: 2038-07-26
Also published as: US20200157111A1; JP2020528062A; AU2018305614B2; EP3660018A1; CA3070004A1; RU2745431C1; BR112020001299A2; EP3660018A4; KR20200032702A; US11247998B2; ZA201908609B; AU2018305614A1; WO2019020070A1; CN109952305A

Abstract

本发明涉及哌嗪并杂芳基类衍生物、其制备方法及其在医药上的应用。特别地，本发明涉及通式(I)所示的哌嗪并杂芳基类衍生物、其制备方法、含有该衍生物的药物组合物，以及其作为衣壳蛋白抑制剂，特别是在预防和/或治疗乙型肝炎、流感、疱疹和艾滋病等疾病中的用途。其中通式(I)中的各基团的定义与说明书中的定义相同。

Description

哌嗪并杂芳基类衍生物、其制备方法及其在医药上的应用

技术领域

本发明属于医药领域，涉及哌嗪并杂芳基类衍生物、其制备方法及其在医药上的应用。特别地，本发明涉及通式(I)所示的哌嗪并杂芳基类衍生物、其制备方法、含有该衍生物的药物组合物，以及其作为衣壳蛋白抑制剂，特别是在预防和/或治疗乙型肝炎、流感、疱疹和艾滋病等疾病中的用途。

背景技术

慢性B型肝炎病毒(HBV)感染已经是一种全球健康问题，据世界卫生组织报道，全球约20亿人曾感染HBV，其中2.4亿人为慢性HBV感染者，每年约有65万人死于HBV感染所致的肝衰竭、肝硬化和肝细胞癌(HCC)。全球肝硬化和HCC患者中，由HBV感染引起的比例分别为30％和45％。尽管可以使用预防性的HBV疫苗，但由于缺乏有效治药物，致使慢性HBV感染已成为全世界医疗问题。

目前，治疗慢性HBV的药物主要有两类：α-干扰素制剂(如聚乙二醇化α-干扰素)和抑制HBVDNA聚合酶的核苷类似物(如拉米夫定、阿德福韦等)。但是，干扰素类制剂具有严重的副作用，耐受性差，并且只有小部分患者可能对干扰素治疗具有持续的临床响应(Lancet.2005 Jan 8-14；365(9454)：123-9.；N Engl J Med.2005 Jun 30；352(26)：2682-95.；Hepatology.2009 May；49(5 Suppl)：S103-11)。作为逆转录酶的竞争性抑制剂，核苷类似物药物通过阻碍HBV DNA链的合成从而发挥抗病毒疗效。但现有核苷类似物药物也存在诱导逆转录酶产生耐药突变、对耐药株疗效不佳等问题。此外，这类药物通常难以彻底清除HBV感染，即使是长期服药也无法根治；一旦停药，还可能导致严重的停药反跳，因此常常需要终身服药(Hepatology.2009 May；49(5 Suppl)：S112-21)。因此，迫切需要开发用于慢性乙型肝炎的新型、安全且有效的药物。

慢性HBV感染治愈率低的原因与乙型肝炎病毒(HBV)的特性有很大关系，HBV是嗜肝DNA病毒家族(Hepadnaviridae)的一种包膜、部分双链DNA(dsDNA)病毒。成熟的HBV病毒颗粒最外层为包膜蛋白，包裹着HBV核衣壳(Nucleocapsid)。核衣壳又称核心颗粒(Coreparticle)，由衣壳蛋白(Capsid protein)、HBV松弛环状DNA(Relaxed circular DNA，rcDNA)及结合在rcDNA负链5’端的HBV逆转录酶构成。在感染时，rcDNA在宿主细胞核中转变为共价闭环DNA(cccDNA)，作为HBV复制模板。HBV复制过程中，1个重要步骤就是衣壳装配(Encapsidation)。cccDNA转录出的前基因组RNA(Pregenomic RNA，pgRNA)需要同HBV逆转录酶一起被包裹在衣壳蛋白中，完成装配步骤，才能促发后续逆转录。在逆转录以前，HBV逆转录酶，pgRNA需要被衣壳蛋白正确包裹。因此，阻断衣壳蛋白装配，或加快衣壳蛋白降解，都会阻断衣壳装配过程，从而影响病毒复制。此外，构成核心蛋白二聚化基序(Dimerization motif)及装配结构域(Assemblydomain)的N-端149个氨基酸残基(Cp149)没有人体蛋白质同源序列。因此，衣壳蛋白装配抑制剂被视为抗乙肝药物开发的新靶点。由于与传统抗病毒药物作用机理不同，衣壳蛋白抑制剂可与DNA聚合酶抑制剂的组合疗法应协同遏制HBV复制，并且防止出现耐药性，提供对慢性乙型肝炎感染的更安全且更有效治疗。

目前，衣壳蛋白抑制剂的药物主要有两类：杂芳基二氢嘧啶类(HAPs)和苯基丙烯酰胺类，如GLS-4、NVR-3778等。有关专利如：WO2001068642、WO2014029193、WO2015011281、WO2016016196、WO 2017076791和WO2016113273等，但针对该靶点的化合物大都处于临床研究阶段，并没有上市药物出现。因此，还需要继续开发针对衣壳蛋白抑制剂的药物，以提高药物的安全性和有效性，早日攻克慢性HBV感染的难题。

衣壳蛋白抑制剂通过结合到核心蛋白二聚化基序的装配结构域来干扰衣壳蛋白的正常装配，从而影响HBV的复制。因此，好的药代吸收和高的生物利用度(可以使得体内具有较高浓度的化合物)，能更加有效的阻断HBV的复制。

本发明提供了一种通式(I)所示的新型结构的衣壳蛋白抑制剂，其杂芳基上的取代基为酰胺，优选为酰胺基中的胺基为二级胺，本发明设计了对比例(实施例59)相当于通式(1)中NR¹R²部分，R¹R²与氮原子一起成环形成三级胺，通过对比例验证了杂芳基上酰胺基中的胺基为二级胺时，生物活性有显著提升，其对HBV衣壳蛋白正常装配具有明显的抑制作用，并且其药代吸收良好，生物利用度高。同时通式(I)所示的新型结构的化合物对HepG2细胞体外增殖抑制没有影响或影响较小，表现出较好的安全性。

发明内容

本发明的目的在于提供一种通式(I)所示的化合物：

或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体或其混合物形式，或其可药用的盐，

其中：

环A为芳基和杂芳基；

Y为N或CR⁵；

Q为N或CH；

R¹选自烷基、卤代烷基、羟烷基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基，其中所述的烷基、卤代烷基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基各自独立地任选进一步被选自卤素、烷基、卤代烷基、烷氧基、卤代烷氧基、氰基、氨基、硝基、羟基、羟烷基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、-OR⁶、-C(O)R⁶、-C(O)OR⁶和-S(O)_mR⁶中的一个或多个取代基所取代；

R²选自氢原子、烷基、卤代烷基、羟烷基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基，其中所述的烷基、卤代烷基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基各自独立地任选进一步被选自卤素、烷基、卤代烷基、烷氧基、卤代烷氧基、氰基、氨基、硝基、羟基、羟烷基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、-OR⁶、-C(O)R⁶、-C(O)OR⁶和-S(O)_mR⁶中的一个或多个取代基所取代；

R³相同或不同，且各自独立地选自氢原子、卤素、烷基、卤代烷基、烷氧基、卤代烷氧基、氰基、氨基、硝基、羟基、羟烷基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、-OR⁶、-C(O)R⁶、-C(O)OR⁶和-S(O)_mR⁶；

R⁴相同或不同，且各自独立地选自氢原子、卤素、烷基、卤代烷基、烷氧基、卤代烷氧基、氰基、氨基、硝基、羟基、羟烷基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、-OR⁶、-C(O)R⁶、-C(O)OR⁶和-S(O)_mR⁶；

R⁵选自氢原子、卤素、烷基、卤代烷基、烷氧基、卤代烷氧基、氰基、氨基、硝基、羟基、羟烷基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基；

R⁶选自氢原子、烷基、卤代烷基、氨基、羟基、羟烷基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基；

n为0、1、2或3；

m为0、1或2；且

s为0、1、2、3或4。

在本发明一个优选的实施方案中，根据本发明所述的通式(I)所示的化合物为通式(II)所示的化合物：

其中：

环A、Y、Q、R¹、R³、R⁴、s和n如通式(I)中所定义。

在本发明另一个优选的实施方案中，根据本发明所述的通式(I)所示的化合物通式(III)、通式(IV)、通式(V)和通式(VI)所示的化合物：

其中：

环A、R¹、R³、R⁴、s和n如通式(I)中所定义。

在本发明另一个优选的实施方案中，根据本发明所述的通式(I)所示的化合物，其中环A为苯基或吡啶基。

在本发明另一个优选的实施方案中，根据本发明所述的通式(I)所示的化合物为通式(VII)、通式(VIII)、通式(IX)和通式(X)所示的化合物：

其中：

G为C或N；

R¹、R³、R⁴、s和n如通式(I)中所定义。

在本发明另一个优选的实施方案中，根据本发明所述的通式(I)所示的化合物，其中R¹选自烷基、卤代烷基、环烷基、杂环基和芳基，其中所述的烷基、环烷基、杂环基和芳基任选进一步被选自卤素、烷基、烷氧基和羟基中的一个或多个取代基所取代。

在本发明另一个优选的实施方案中，根据本发明所述的通式(I)所示的化合物，其为通式(VII-A)、通式(VIII-A)、通式(IX-A)和通式(X-A)所示的化合物：

其中：

G为C或N；

R⁸为烷基，优选为甲基；

R⁹为烷基，其中所述的烷基任选进一步被一个或多个卤素所取代；

R³、R⁴、s和n如通式(I)中所定义。

在本发明另一个优选的实施方案中，根据本发明所述的通式(I)所示的化合物，其中R³为氢原子或烷基。

在本发明另一个优选的实施方案中，根据本发明所述的通式(I)所示的化合物，其中R⁴选自氢原子、卤素、卤代烷基或氰基。

典型的通式(I)的化合物，包括但不限于：

或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体或其混合物形式，或其可药用盐。

另一方面，本发明提供一种通式(IA)所示的化合物，：

或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体或其混合物形式，或其可药用盐，

其中：

R^a为氢原子或烷基；

环A为芳基和杂芳基；

Y为N或CR⁵；

Q为N或CH；

R³相同或不同，且各自独立地选自氢原子、卤素、烷基、卤代烷基、烷氧基、卤代烷氧基、氰基、氨基、硝基、羟基、羟烷基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、-OR⁶、-C(O)R⁶、-C(O)OR⁶和-S(O)_mR⁶；优选为氢原子或烷基；

n为0、1、2或3；

m为0、1或2；且

s为0、1、2、3或4；

另一方面，本发明提供一种通式(IC)所示的化合物：

其中：

环A为芳基和杂芳基；

Y为N或CR⁵；

Q为N或CH；

n为0、1、2或3；

m为0、1或2；且

s为0、1、2、3或4。

其为制备根据通式(I)所示的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用盐的中间体。

典型的通式(IA)的化合物，包括但不限于：

另一方面，本发明提供一种通式(IIIA)的所示化合物，：

其中：

M为三氟乙酸或盐酸；

t为0或1；且

n为0、1、2或3；

其为制备根据通式(III)化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用盐的中间体。

典型的中间体化合物，包括但不限于：

另一方面，本发明提供一种制备根据本发明所述的通式(I)所示的化合物的方法，该方法包括以下步骤：

将通式(IA)化合物与通式(IB)化合物或其盐反应，得到通式(I)化合物；

其中：

R^a为氢原子或烷基；

环A、Y、Q、R¹、R²、R⁴、s和n如通式(I)中所定义。

将通式(IC)化合物与通式(IB)化合物或其盐反应，得到通式(I)化合物；

其中：

环A、Y、Q、R¹、R²、R⁴、s和n如通式(I)中所定义。

另一方面，本发明提供一种制备根据本发明所述的通式(II)所示的化合物的方法，该方法包括以下步骤：

将通式(IA)化合物与通式(IIB)化合物或其盐反应，得到通式(II)化合物；

其中：

R^a为氢原子或烷基；

环A、Y、Q、R¹、R⁴、s和n如通式(II)中所定义。

将通式(IC)化合物与通式(IIB)化合物或其盐反应，得到通式(II)化合物；

其中：

环A、Y、Q、R¹、R⁴、s和n如通式(II)中所定义。

另一方面，本发明提供一种制备根据本发明所述的通式(III)、通式(IV))、通式(V)和通式(VI)所示的化合物的方法，该方法包括以下步骤：

将通式(III-a)化合物与通式(IIB)化合物或其盐反应，得到通式(III)化合物；

或

将通式(IV-a)化合物与通式(IIB)化合物或其盐反应，得到通式(IV)化合物；

将通式(V-a)化合物与通式(IIB)化合物或其盐反应，得到通式(V)化合物；

或

将通式(VI-a)化合物与通式(IIB)化合物或其盐反应，得到通式(VI)化合物；

其中：

R^a为氢原子或烷基；

环A、R¹、R⁴、s和n如通式(I)中所定义。

另一方面，本发明提供一种制备所述的通式(III)所示的化合物的方法，该方法包括以下：

将通式(IIIA)化合物或其盐与通式(IIB’)化合物或其盐和双(三氟甲基)碳酸酯反应，得到通式(III)化合物；

其中：

M为三氟乙酸或盐酸；

t为0或1；

环A、R¹、R⁴、s和n如通式(III)中所定义。

本发明的另一方面涉及一种药物组合物，其含有治疗有效剂量的通式(I)所示的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或可药用的盐，以及一种或多种药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。本发明还涉及一种制备上述组合物的方法，其包括将通式(I)所示的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐与药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂相混合。

本发明进一步涉及通式(I)所示的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体或其混合物形式，或其可药用盐，或包含其的药物组合物，在制备衣壳蛋白抑制剂中的用途。

本发明进一步涉及通式(I)所示的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体或其混合物形式，或其可药用盐，或包含其的药物组合物，在制备用于预防和/或治疗病毒性感染疾病的药物中的用途。所述病毒可以为乙型肝炎病毒、流感病毒、疱疹病毒和艾滋病毒，所述疾病可以为乙型肝炎、流感、疱疹和艾滋病。

本发明进一步涉及一种通式(I)所示的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体或其混合物形式、或其可药用盐，其用作药物。所述药物优选为用于预防和/或治疗病毒性感染疾病的药物。所述病毒可以为乙型肝炎病毒、流感病毒、疱疹病毒和艾滋病毒，所述疾病可以为乙型肝炎、流感、疱疹和艾滋病。

本发明还涉及通式(I)所示的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体或其混合物形式，或其可药用盐，或包含其的药物组合物，其用作衣壳蛋白抑制剂。

本发明还涉及一种预防和/或治疗病毒性感染疾病的方法，其包括向需要其的患者施用治疗有效剂量的作为衣壳蛋白抑制剂的通式(I)所示的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体或其混合物形式，或其可药用盐，或包含其的药物组合物。所述病毒可以为乙型肝炎病毒、流感病毒、疱疹病毒和艾滋病毒，所述疾病可以为乙型肝炎、流感、疱疹和艾滋病。

含活性成分的药物组合物可以是适用于口服的形式，例如片剂、糖锭剂、锭剂、水或油混悬液、可分散粉末或颗粒、乳液、硬或软胶囊，或糖浆剂或酏剂。可按照本领域任何已知制备药物组合物的方法制备口服组合物，此类组合物可含有一种或多种选自以下的成分：甜味剂、矫味剂、着色剂和防腐剂，以提供悦目和可口的药用制剂。片剂含有活性成分和用于混合的适宜制备片剂的无毒的可药用的赋形剂。这些赋形剂可以是惰性赋形剂、造粒剂、崩解剂、粘合剂、和润滑剂。这些片剂可以不包衣，或可通过掩盖药物的味道或在胃肠道中延迟崩解和吸收因而在较长时间内提供缓释作用的已知技术将其包衣。

也可用其中活性成分与惰性固体稀释剂或其中活性成分与水溶性载体或油溶媒混合的软明胶胶囊提供口服制剂。

水混悬液含有活性物质和用于混合的适宜制备水混悬液的赋形剂。此类赋形剂是混悬剂、分散剂或湿润剂。水混悬液也可以含有一种或多种防腐剂、一种或多种着色剂、一种或多种矫味剂和一种或多种甜味剂。

油混悬液可通过使活性成分悬浮于植物油或矿物油配制而成。油悬浮液可含有增稠剂。可加入上述的甜味剂和矫味剂，以提供可口的制剂。可通过加入抗氧化剂保存这些组合物。

本发明的药物组合物也可以是水包油乳剂的形式。油相可以是植物油、或矿物油或其混合物。适宜的乳化剂可以是天然产生的磷脂，乳剂也可以含有甜味剂、矫味剂、防腐剂和抗氧剂。此类制剂也可含有缓和剂、防腐剂、着色剂和抗氧剂。

本发明的药物组合物可以是无菌注射水溶液形式。可以使用的可接受的溶媒或溶剂有水、林格氏液和等渗氯化钠溶液。无菌注射制剂可以是其中活性成分溶解于油相的无菌注射水包油微乳，可通过局部大量注射将注射液或微乳注入患者的血流中。或者，最好按可保持本发明化合物恒定循环浓度的方式给予溶液和微乳。为保持这种恒定浓度，可使用连续静脉内药物递送装置。这种装置的实例是Deltec CADD-PLUS.TM.5400型静脉注射泵。

本发明的药物组合物可以是用于肌内和皮下给药的无菌注射水或油混悬液的形式。可按已知技术，用上述那些适宜的分散剂或湿润剂和混悬剂配制该混悬液。无菌注射制剂也可以是在肠胃外可接受的无毒稀释剂或溶剂中制备的无菌注射溶液或混悬液。此外，可方便地用无菌固定油作为溶剂或悬浮介质。为此目的，可使用任何调和固定油。此外，脂肪酸也可以制备注射剂。

可按用于直肠给药的栓剂形式给予本发明化合物。可通过将药物与在普通温度下为固体但在直肠中为液体，因而在直肠中会溶化而释放药物的适宜的无刺激性赋形剂混合来制备这些药物组合物。

如本领域技术人员所熟知的，药物的给药剂量依赖于多种因素，包括但并非限定于以下因素：所用具体化合物的活性、患者的年龄、患者的体重、患者的健康状况、患者的行为、患者的饮食、给药时间、给药方式、排泄的速率、药物的组合等；另外，最佳的治疗方式如治疗的模式、本发明化合物的日用量或可药用的盐的种类可以根据传统的治疗方案来验证。

发明的详细说明

除非有相反陈述，在说明书和权利要求书中使用的术语具有下述含义。

术语“烷基”指饱和脂肪族烃基团，其为包含1至20个碳原子的直链或支链基团，优选含有1至12个碳原子的烷基，更优选含有1至6个碳原子的烷基。非限制性实例包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、仲丁基、正戊基、1，1-二甲基丙基、1，2-二甲基丙基、2，2-二甲基丙基、1-乙基丙基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、正己基、1-乙基-2-甲基丙基、1，1，2-三甲基丙基、1，1-二甲基丁基、1，2-二甲基丁基、2，2-二甲基丁基、1，3-二甲基丁基、2-乙基丁基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、4-甲基戊基、2，3-二甲基丁基、正庚基、2-甲基己基、3-甲基己基、4-甲基己基、5-甲基己基、2，3-二甲基戊基、2，4-二甲基戊基、2，2-二甲基戊基、3，3-二甲基戊基、2-乙基戊基、3-乙基戊基、正辛基、2，3-二甲基己基、2，4-二甲基己基、2，5-二甲基己基、2，2-二甲基己基、3，3-二甲基己基、4，4-二甲基己基、2-乙基己基、3-乙基己基、4-乙基己基、2-甲基-2-乙基戊基、2-甲基-3-乙基戊基、正壬基、2-甲基-2-乙基己基、2-甲基-3-乙基己基、2，2-二乙基戊基、正癸基、3，3-二乙基己基、2，2-二乙基己基，及其各种支链异构体等。更优选的是含有1至6个碳原子的低级烷基，非限制性实施例包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、仲丁基、正戊基、1，1-二甲基丙基、1，2-二甲基丙基、2，2-二甲基丙基、1-乙基丙基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、正己基、1-乙基-2-甲基丙基、1，1，2-三甲基丙基、1，1-二甲基丁基、1，2-二甲基丁基、2，2-二甲基丁基、1，3-二甲基丁基、2-乙基丁基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、4-甲基戊基、2，3-二甲基丁基等。烷基可以是取代的或非取代的，当被取代时，取代基可以在任何可使用的连接点上被取代，所述取代基优选为一个或多个以下基团，其独立地选自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、巯基、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基、氧代基、羧基、羧酸酯基、-OR⁶、-C(O)R⁶、-C(O)OR⁶和-S(O)_mR⁶。

术语“烷氧基”指-O-(烷基)和-O-(非取代的环烷基)，其中烷基和环烷基的定义如上所述。烷氧基的非限制性实例包括：甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基、环丙氧基、环丁氧基、环戊氧基、环己氧基。烷氧基可以是任选取代的或非取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个以下基团，其独立地选自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、巯基、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基、羧基、羧酸酯基、-OR⁶、-C(O)R⁶、-C(O)OR⁶和-S(O)_mR⁶。

术语“环烷基”指饱和或部分不饱和单环或多环环状烃取代基，环烷基环包含3至20个碳原子，优选包含3至12个碳原子，更优选包含3至6个碳原子。单环环烷基的非限制性实例包括环丙基、环丁基、环戊基、环戊烯基、环己基、环己烯基、环己二烯基、环庚基、环庚三烯基、环辛基等；多环环烷基包括螺环、稠环和桥环的环烷基。

术语“螺环烷基”指5至20元的单环之间共用一个碳原子(称螺原子)的多环基团，其可以含有一个或多个双键，但没有一个环具有完全共轭的π电子系统。优选为6至14元，更优选为7至10元。根据环与环之间共用螺原子的数目将螺环烷基分为单螺环烷基、双螺环烷基或多螺环烷基，优选为单螺环烷基和双螺环烷基。更优选为4元/4元、4元/5元、4元/6元、5元/5元或5元/6元单螺环烷基。螺环烷基的非限制性实例包括：

术语“稠环烷基”指5至20元，系统中的每个环与体系中的其他环共享毗邻的一对碳原子的全碳多环基团，其中一个或多个环可以含有一个或多个双键，但没有一个环具有完全共轭的π电子系统。优选为6至14元，更优选为7至10元。根据组成环的数目可以分为双环、三环、四环或多环稠环烷基，优选为双环或三环，更优选为5元/5元或5元/6元双环烷基。稠环烷基的非限制性实例包括：

术语“桥环烷基”指5至20元，任意两个环共用两个不直接连接的碳原子的全碳多环基团，其可以含有一个或多个双键，但没有一个环具有完全共轭的π电子系统。优选为6至14元，更优选为7至10元。根据组成环的数目可以分为双环、三环、四环或多环桥环烷基，优选为双环、三环或四环，更有选为双环或三环。桥环烷基的非限制性实例包括：

所述环烷基环可以稠合于芳基、杂芳基或杂环烷基环上，其中与母体结构连接在一起的环为环烷基，非限制性实例包括茚满基、四氢萘基、苯并环庚烷基等。环烷基可以是任选取代的或非取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个以下基团，其独立地选自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、巯基、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基、氧代基、羧基、羧酸酯基、-OR⁶、-C(O)R⁶、-C(O)OR⁶和-S(O)_mR⁶。

术语“杂环基”指饱和或部分不饱和单环或多环环状烃取代基，其包含3至20个环原子，其中一个或多个环原子为选自氮、氧或S(O)_m(其中m是整数0至2)的杂原子，但不包括-O-O-、-O-S-或-S-S-的环部分，其余环原子为碳。优选包含3至12个环原子，其中1～4个是杂原子；最优选包含3至8个环原子，其中1～3是杂原子；最优选包含3至6个环原子，其中1～2是杂原子。单环杂环基的非限制性实例包括吡咯烷基、咪唑烷基、四氢呋喃基、四氢噻吩基、二氢咪唑基、二氢呋喃基、二氢吡唑基、二氢吡咯基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基、硫代吗啉基、高哌嗪基、吡喃基等，优选哌啶基、哌嗪基或吗啉基。多环杂环基包括螺环、稠环和桥环的杂环基。

术语“螺杂环基”指5至20元的单环之间共用一个原子(称螺原子)的多环杂环基团，其中一个或多个环原子为选自氮、氧或S(O)_m(其中m是整数0至2)的杂原子，其余环原子为碳。其可以含有一个或多个双键，但没有一个环具有完全共轭的π电子系统。优选为6至14元，更优选为7至10元。根据环与环之间共用螺原子的数目将螺杂环基分为单螺杂环基、双螺杂环基或多螺杂环基，优选为单螺杂环基和双螺杂环基。更优选为3元/6元、4元/4元、4元/5元、4元/6元、5元/5元或5元/6元单螺杂环基。螺杂环基的非限制性实例包括：

术语“稠杂环基”指5至20元，系统中的每个环与体系中的其他环共享毗邻的一对原子的多环杂环基团，一个或多个环可以含有一个或多个双键，但没有一个环具有完全共轭的π电子系统，其中一个或多个环原子为选自氮、氧或S(O)_m(其中m是整数0至2)的杂原子，其余环原子为碳。优选为6至14元，更优选为7至10元。根据组成环的数目可以分为双环、三环、四环或多环稠杂环基，优选为双环或三环，更优选为5元/5元或5元/6元双环稠杂环基。稠杂环基的非限制性实例包括：

术语“桥杂环基”指5至14元，任意两个环共用两个不直接连接的原子的多环杂环基团，其可以含有一个或多个双键，但没有一个环具有完全共轭的π电子系统，其中一个或多个环原子为选自氮、氧或S(O)_m(其中m是整数0至2)的杂原子，其余环原子为碳。优选为6至14元，更优选为7至10元。根据组成环的数目可以分为双环、三环、四环或多环桥杂环基，优选为双环、三环或四环，更有选为双环或三环。桥杂环基的非限制性实例包括：

所述杂环基环可以稠合于芳基、杂芳基或环烷基环上，其中与母体结构连接在一起的环为杂环基，其非限制性实例包括：

等。

杂环基可以是任选取代的或非取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个以下基团，其独立地选自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、巯基、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基、氧代基、羧基、羧酸酯基、-OR⁶、-C(O)R⁶、-C(O)OR⁶和-S(O)_mR⁶。

术语“芳基”指具有共轭的π电子体系的6至14元全碳单环或稠合多环(也就是共享毗邻碳原子对的环)基团，优选为6至10元，例如苯基和萘基。更优选苯基。所述芳基环可以稠合于杂芳基、杂环基或环烷基环上，其中与母体结构连接在一起的环为芳基环，其非限制性实例包括：

芳基可以是取代的或非取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个以下基团，其独立地选自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、巯基、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基、羧基或羧酸酯基。

术语“杂芳基”指包含1至4个杂原子、5至14个环原子的杂芳族体系，其中杂原子选自氧、硫和氮。杂芳基优选为5至10元，含1至3个杂原子；更优选为5元或6元，含1至2个杂原子；优选例如咪唑基、呋喃基、噻吩基、噻唑基、吡唑基、噁唑基、吡咯基、四唑基、吡啶基、嘧啶基、噻二唑、吡嗪基等，优选为咪唑基、四唑基、吡啶基、噻吩基、吡唑基或嘧啶基、噻唑基；更有选吡啶基。所述杂芳基环可以稠合于芳基、杂环基或环烷基环上，其中与母体结构连接在一起的环为杂芳基环，其非限制性实例包括：

杂芳基可以是任选取代的或非取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个以下基团，其独立地选自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、巯基、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基、羧基、羧酸酯基、-OR⁶、-C(O)R⁶、-C(O)OR⁶和-S(O)_mR⁶。

术语“氨基保护基”是为了使分子其它部位进行反应时氨基保持不变，用易于脱去的基团对氨基进行保护。非限制性实施例包含叔丁氧羰基、乙酰基、苄基、烯丙基和对甲氧苄基等。这些基团可任选地被选自卤素、烷氧基或硝基中的1-3个取代基所取代。所述氨基保护基优选为对甲氧苄基。

术语“卤代烷基”指被一个或多个卤素取代的烷基，其中烷基如上所定义。

术语“卤代烷氧基”指被一个或多个卤素取代的烷氧基，其中烷氧基如上所定义。

术语“羟烷基”指被羟基取代的烷基，其中烷基如上所定义。

术语“羟基”指-OH基团。

术语“卤素”指氟、氯、溴或碘。

术语“氨基”指-NH₂。

术语“氰基”指-CN。

术语“硝基”指-NO₂。

术语“氧代基”指＝O。

术语“羰基”指C＝O。

术语“羧基”指-C(O)OH。

术语“羧酸酯基”指-C(O)O(烷基)或-C(O)O(环烷基)，其中烷基、环烷基如上所定义。

术语“酰卤”指含有-C(O)-卤素的基团的化合物。

“任选”或“任选地”意味着随后所描述的事件或环境可以但不必发生，该说明包括该事件或环境发生或不发生的场合。例如，“任选被烷基取代的杂环基团”意味着烷基可以但不必须存在，该说明包括杂环基团被烷基取代的情形和杂环基团不被烷基取代的情形。

“取代的”指基团中的一个或多个氢原子，优选为最多5个，更优选为1～3个氢原子彼此独立地被相应数目的取代基取代。不言而喻，取代基仅处在它们的可能的化学位置，本领域技术人员能够在不付出过多努力的情况下确定(通过实验或理论)可能或不可能的取代。例如，具有游离氢的氨基或羟基与具有不饱和(如烯属)键的碳原子结合时可能是不稳定的。

“药物组合物”表示含有一种或多种本文所述化合物或其生理学上/可药用的盐或前体药物与其他化学组分的混合物，以及其他组分例如生理学/可药用的载体和赋形剂。药物组合物的目的是促进对生物体的给药，利于活性成分的吸收进而发挥生物活性。

“可药用盐”是指本发明化合物的盐，这类盐用于哺乳动物体内时具有安全性和有效性，且具有应有的生物活性。

R⁶和m如通式(I)中所定义。

本发明化合物的合成方法

为了完成本发明的目的，本发明采用如下技术方案：

方案一

本发明通式(I)所示的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体或其混合物形式，或其可药用的盐的制备方法，包括以下步骤：

第一步，通式(IIB′)化合物与通式(I-2)化合物和双(三氯甲基)碳酸酯在碱性条件下，发生反应得到通式(I-3)化合物；

第二步，通式(I-3)化合物和一氧化碳在碱性条件下，在催化剂存在下，发生反应得到通式(IA)化合物；

第三步，通式(IA)化合物与通式(IB)化合物或其盐进行反应，得到通式(I)化

合物；

提供碱性条件的试剂包括有机碱和无机碱类，所述的有机碱类包括但不限于三乙胺、1M双三甲基硅基胺基锂四氢呋喃溶液、N，N-二异丙基乙胺、正丁基锂、二异丙基氨基锂、醋酸钾、叔丁醇钠或叔丁醇钾，所述的无机碱类包括但不限于氢化钠、氢氧化钠、磷酸钾、碳酸钠、碳酸氢钠、碳酸钾或碳酸铯；

催化剂包括但不限于钯/碳、雷尼镍、二氧化铂、四-三苯基膦钯、二氯化钯、醋酸钯、2-二环己基磷-2，4，6-三异丙基联苯、[1，1′-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯、1，1’-双(二苄基磷)二氯二戊铁钯、三(二亚苄基丙酮)二钯或2-双环己基膦-2′，6′-二甲氧基联苯，优选为[1，1′-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯或2-双环己基膦-2′，6′-二甲氧基联苯。

缩合剂包括但不限于1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐、N，N′-二环己基碳化二亚胺、N，N′-二异丙基碳二酰亚胺、O-苯并三氮唑-N，N，N′，N′-四甲基脲四氟硼酸酯、1-羟基苯并三唑、1-羟基-7-偶氮苯并三氮唑、O-苯并三氮唑-N，N，N′，N′-四甲脲六氟磷酸酯、O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N，N，N′，N′-四甲基脲六氟磷酸酯、2-(7-氧化苯并三氮唑)-N，N，N′，N′-四甲基脲六氟磷酸酯、苯并三氮唑-1-基氧基三(二甲基氨基)磷鎓六氟磷酸盐或六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷基磷，优选为2-(7-氧化苯并三氮唑)-N，N，N′，N′-四甲基脲六氟磷酸酯；

上述反应优选在溶剂中进行，所用溶剂包括但不限于：乙酸、甲醇、乙醇、甲苯、四氢呋喃、二氯甲烷、石油醚、乙酸乙酯、正己烷、二甲基亚砜、1，4-二氧六环、水、N，N-二甲基甲酰胺及其混合物；

其中：

R^a为氢原子或烷基，优选为氢原子、甲基或乙基；

X为卤素，优选为溴；

环A、Y、Q、R¹、R²、R⁴、s和n如通式(I)中所定义。

方案二

第一步，通式(IIB′)化合物与通式(I-4)化合物和双(三氯甲基)碳酸酯在碱性条件下，发生反应得到通式(IA)化合物；

第二步，通式(IA)化合物在碱性条件下，发生水解反应得到通式(IC)化合物；

第三步，通式(IC)化合物与通式(IB)化合物或其盐，发生缩合反应，得到通式(I)化合物；

其中：

R^a为炕基，优选为甲基或乙基；

环A、Y、Q、R¹、R²、R⁴、s和n如通式(I)中所定义。

方案三

本发明通式(II)所示的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体或其混合物形式，或其可药用的盐的制备方法，包括以下步骤：

通式(IA)化合物与通式(IIB)化合物或其盐在碱性条件下发生反应，得到通式(II)化合物；

其中：

R^a为氢原子或烷基，优选为氢原子、甲基或乙基；

环A、Q、Y、R¹、R⁴、s和n如通式(II)中所定义。

方案四

通式(IC)化合物与通式(IIB)化合物或其盐在碱性条件下发生反应，得到通式(II)化合物；

其中：

环A、Q、Y、R¹、R⁴、s和n如通式(II)中所定义。

方案五

本发明通式(III)所示的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体或其混合物形式，或其可药用的盐的制备方法，包括以下步骤：

第一步，通式(IIB′)化合物与通式(III-1)化合物和双(三氯甲基)碳酸酯在碱性条件下，发生反应得到通式(III-a)化合物；

第二步，通式(III-a)化合物在碱性条件下，发生水解反应得到通式(III-b)化合物；

第三步，通式(III-b)化合物与通式(IIB)化合物或其盐发生反应，得到通式(III)化合物；

其中：

R^a为烷基，优选为甲基或乙基；

环A、R¹、R⁴、s和n如通式(III)中所定义。

方案六

本发明通式(IV)所示的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体或其混合物形式，或其可药用的盐的制备方法，包括以下步骤：

第一步，通式(IIB′)化合物与通式(IV-1)化合物和双(三氯甲基)碳酸酯在碱性条件下，发生反应得到通式(IV-a)化合物；

第二步，通式(IV-a)化合物在碱性条件下，发生水解反应得到通式(IV-b)化合物；

第三步，通式(IV-b)化合物与通式(IIB)化合物或其盐发生反应，得到通式(IV)化合物；

其中：

R^a为烷基，优选为甲基或乙基；

环A、R¹、R⁴、s和n如通式(I)中所定义。

方案七

第一步，通式(III-3)化合物和通式(IIB)化合物或其盐，在碱性条件下，在缩合剂存在下，发生反应得到通式(III-4)；

第二步，通式(III-4)化合物在酸性条件下，脱保护得到通式(IIIA)化合物或其盐；

第三步，通式(IIIA)化合物或其盐与通式(IIB′)的化合物或其盐和双(三氯甲基)碳酸酯发生反应，得到通式(III)化合物；

提供酸性的条件的试剂包括但不限于氯化氢、三氟乙酸、甲酸、乙酸、盐酸、硫酸、甲磺酸、硝酸、磷酸、对苯甲磺酸、Me₃SiCl和TMSOT_f；

其中：

M为三氟乙酸或盐酸；R^a为氢原子或烷基，优选为氢原子、甲基或乙基；

R^b为氨基保护基，优选为叔丁氧羰基；

t为0或1；环A、R¹、R⁴、s和n如通式(III)中所定义。

方案八

本发明通式(V)所示的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体或其混合物形式，或其可药用的盐的制备方法，包括以下步骤：

第一步，通式(IIB′)化合物和通式(V-1)化合物在碱性条件下，发生反应得到通式(V-2)化合物；

第二步，通式(V-2)化合物，在还原剂存在下，发生还原反应得到通式(V-3)化合物；

第三步，通式(V-3)化合物和氧化剂发生氧化反应，得到通式(V-4)化合物；

第四步，通式(V-4)化合物，在氧化剂存在下，发生氧化反应得到通式(V-a)化合物；

第五步，通式(V-a)化合物与通式(IIB)化合物或其盐发生缩合反应，得到通式(V)化合物；

还原剂包括但不限于氢化铝锂、NaBH₄、NaBH₄-ZnCl₂和二异丁基氢化铝(DIBAL-H)。

氧化剂包括但不限于氯铬酸吡啶盐(PCC)、Jones试剂、Collins试剂、重铬酸吡啶盐(PDC)、草酰氯(Swern氧化)、碳二亚胺、亚氯酸钠和高锰酸钾。

其中：

环A、R¹、R⁴、s和n如通式(V)中所定义。

方案九

本发明通式(VI)所示的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体或其混合物形式，或其可药用的盐的制备方法，包括以下步骤：

第一步，通式(IIB′)化合物与通式(VI-1)化合物和双(三氯甲基)碳酸酯在碱性条件下，发生反应得到通式(VI-2)化合物；

第二步，通式(VI-a)化合物与通式(IIB)化合物或其盐发生反应，得到通式(VI)化合物；

其中：

R^a为氢原子或烷基，优选为氢原子、甲基或乙基；

环A、R¹、R⁴、s和n如通式(I)中所定义。

方案十

本发明通式(VII)所示的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体或其混合物形式，或其可药用的盐的制备方法，包括以下步骤：

第一步，通式(VII-1)化合物与通式(III-1)化合物和双(三氯甲基)碳酸酯在碱性条件下，发生反应得到通式(VII-a)化合物；

第二步，通式(IV-a)化合物在碱性条件下，发生水解反应得到通式(VII-b)化合物；

第三步，通式(VII-b)化合物与通式(IIB)化合物或其盐，发生缩合反应，得到通式(VII)化合物；

其中：

R^a为烷基，优选为甲基或乙基；

R¹、R⁴、s和n如通式(I)中所定义。

方案十一

本发明通式(VIII)所示的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体或其混合物形式，或其可药用的盐的制备方法，包括以下步骤：

第一步，通式(VII-1)化合物与通式(IV-1)化合物和双(三氯甲基)碳酸酯在碱性条件下，发生反应得到通式(VIII-a)化合物；

第二步，通式(VIII-a)化合物在碱性条件下，发生水解反应得到通式(VIII-b)化合物；

第三步，通式(VIII-b)化合物与通式(IIB)化合物或其盐，发生缩合反应，得到通式(VIII)化合物；

其中：

R^a为烷基，优选为甲基或乙基；

R¹、R⁴、s和n如通式(I)中所定义。

方案十二

本发明通式(VII-A)或通式(VIII-A)所示的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体或其混合物形式，或其可药用的盐的制备方法，包括以下步骤：

通式(VII-a)化合物与通式(VII-B)化合物或其盐发生反应，得到通式(VII-A)化合物；或通式(VIII-a)化合物与通式(VII-B)化合物或其盐发生反应，得到通式(VIII-A)化合物；

其中：

G为C或N；

R^a为氢原子或烷基，优选为氢原子、甲基或乙基；

R⁸为烷基，优选为甲基；

R⁴和s如通式(I)中所定义。

具体实施方式

以下结合实施例进一步描述本发明，但这些实施例并非限制着本发明的范围。

实施例

化合物的结构是通过核磁共振(NMR)或/和质谱(MS)来确定的。NMR位移(δ)以10^-6(ppm)的单位给出。NMR的测定是用Bruker AVANCE-400核磁仪，测定溶剂为氘代二甲基亚砜(DMSO-d₆)、氘代氯仿(CDCl₃)、氘代甲醇(CD₃OD)，内标为四甲基硅烷(TMS)。

MS的测定用FINNIGAN LCQAd(ESI)质谱仪(生产商：Thermo，型号：Finnigan LCQadvantage MAX)。

高效液相色谱法(HPLC)分析使用Agilent HPLC 1200DAD、Agilent HPLC 1200VWD和Waters HPLC e2695-2489高压液相色谱仪。

手性HPLC分析测定使用Agilent 1260 DAD高效液相色谱仪。

高效液相制备使用Waters 2767、Waters 2767-SQ Detecor2、Shimadzu LC-20AP和Gilson-281制备型色谱仪。

手性制备使用Shimadzu LC-20AP制备型色谱仪。

CombiFlash快速制备仪使用Combiflash Rf200(TELEDYNE ISCO)。薄层层析硅胶板使用烟台黄海HSGF254或青岛GF254硅胶板，薄层色谱法(TLC)使用的硅胶板采用的规格是0.15mm～0.2mm，薄层层析分离纯化产品采用的规格是0.4mm～0.5mm。

硅胶柱色谱法一般使用烟台黄海硅胶200～300目硅胶为载体。

激酶平均抑制率及IC₅₀值的测定用NovoStar酶标仪(德国BMG公司)。

本发明的已知的起始原料可以采用或按照本领域已知的方法来合成，或可购买自ABCR GmbH&Co.KG，Acros Organics，Aldrich Chemical Company，韶远化学科技(AccelaChemBio Inc)、达瑞化学品等公司。

实施例中无特殊说明，反应能够均在氩气氛或氮气氛下进行。

氩气氛或氮气氛是指反应瓶连接一个约1L容积的氩气或氮气气球。

氢气氛是指反应瓶连接一个约1L容积的氢气气球。

加压氢化反应使用Parr 3916EKX型氢化仪和清蓝QL-500型氢气发生器或HC2-SS型氢化仪。

氢化反应通常抽真空，充入氢气，反复操作3次。

微波反应使用CEM Discover-S 908860型微波反应器。

实施例中无特殊说明，溶液是指水溶液。

实施例中无特殊说明，反应的温度为室温，为20℃～30℃。

实施例中的反应进程的监测采用薄层色谱法(TLC)，反应所使用的展开剂，纯化化合物采用的柱层析的洗脱剂的体系和薄层色谱法的展开剂体系包括：A：二氯甲烷/甲醇体系，B：正己烷/乙酸乙酯体系，C：石油醚/乙酸乙酯体系，溶剂的体积比根据化合物的极性不同而进行调节，也可以加入少量的三乙胺和醋酸等碱性或酸性试剂进行调节。

实施例1

(R)-N⁷-(3，4，5-三氟苯基)-N¹-(1，1，1-三氟丙-2-基)-5，6-二氢咪唑并[1，5-a]吡嗪-1，7(8H)-二甲酰胺

第一步

1-溴-N-(3，4，5-三氟苯基)-5，6-二氢咪唑并[1，5-a]吡嗪-7(8H)-甲酰胺1c

将3，4，5-三氟苯胺1a(0.365g，2.48mmol，采用公知的方法“TetrahedronLetters，51(17)，2010，2265-2268”制备而得)和1-溴-5，6，7，8-四氢咪唑并[1，5-a]吡嗪1b(501.36mg，2.48mmol，上海书亚医药有限公司)溶解于30mL二氯甲烷中，再加入三乙胺(753.26mg，7.44mmol)和双(三氯甲基)碳酸酯(294.53mg，992.54μmol)，搅拌反应12小时。反应液减压浓缩，所得残余物用薄层色谱法以展开剂体系A纯化，得标题化合物1c(300mg，产率：32.2％)。

MS m/z(ESI)：376.1[M+1]。

第二步

7-((3，4，5-三氟苯基)氨基甲酰基)-5，6，7，8-四氢咪唑并[1，5-a]吡嗪-1-羧酸甲酯1d

一氧化碳气氛下，将八羰基二钴(525.03mg，1.54mmol)、碳酸钾(1.06g，7.68mmol)溶解于20mL甲醇中，60℃条件下，搅拌反应15分钟。再加入化合物1c(300mg，767.71μmol)和2-氯乙酸甲酯(499.88mg，4.61mmol)，搅拌反应8小时。反应液冷却至室温，过滤，滤液减压浓缩，所得残余物用薄层色谱法以展开剂体系A纯化，得标题化合物1d(70mg，产率：21.8％)。

MS m/z(ESI)：355.3[M+1]。

第三步

将化合物1d(70mg，197.58μmol)和(2R)-1，1，1-三氟丙基-2-胺盐酸盐1e(59.09mg，395.16μmol，采用专利申请“CN102875270A”公开的方法制备而得)溶解于10mL四氢呋喃中，于0℃，滴加0.988μL的1M双三甲基硅基胺基锂四氢呋喃溶液，加毕，缓慢升至室温，搅拌反应6小时。反应液减压浓缩，所得残余物中加入15mL水，用乙酸乙酯萃取(15mL×3)，合并有机相，减压浓缩，所得残余物用薄层色谱法以展开剂体系A纯化，得标题化合物1(15mg，产率：17.4％)。

MS m/z(ESI)：436.2[M+1]。

¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δ9.31(s，1H)，8.30(d，1H)，7.70(s，1H)，7.25-7.31(m，2H)，5.05(s，2H)，4.78-4.86(m，1H)，4.21-4.24(m，2H)，3.94-3.96(m，2H)，1.31-1.44(dd，3H)。

实施例2

(R)-N⁵-(3，4-二氟苯基)-N³-(1，1，1-三氟丙-2-基)-6，7-二氢吡唑并[1，5-a]吡嗪-3，5(4H)-二甲酰胺

第一步

5-叔丁基3-甲基6，7-二氢吡唑并[1，5-a]吡嗪-3，5(4H)-二羧酸酯2b

一氧化碳气氛下，将八羰基二钴(2.26g，6.62mmol)、碳酸钾(4.57g，33.09mmol)溶解于20mL甲醇中，于60℃，搅拌反应15分钟。再加入3-溴-6，7-二氢吡唑并[1，5-a]吡嗪-5(4H)-羧酸叔丁酯2a(1g，3.31mmol，采用公知的方法“ACSMedicinal Chemistry Letters，2015，6(1)，37-41”制备而得)和2-氯乙酸甲酯(2.15g，19.86mmol)，搅拌反应16小时。反应液减压浓缩，加入100mL乙酸乙酯，过滤，用100mL乙酸乙酯洗涤，滤液减压浓缩，所得残余物用薄层色谱法以展开剂体系A纯化，得标题化合物2b(0.5g，产率：53％)。

MS m/z(ESI)：282.1[M+1]。

第二步

4，5，6，7-四氢吡唑并[1，5-a]吡嗪-3-羧酸甲酯三氟乙酸盐2c

将化合物2b(600mg，2.13mmol)溶解于10mL的二氯甲烷中，加入三氟乙酸(2.43g，21.33mmol)，加毕，搅拌反应12小时。反应液减压浓缩，得粗品标题化合物2c(250mg)，产物不经纯化，直接用于下一步反应。

MS m/z(ESI)：182.0[M+1]。

第三步

5-((3，4-二氟苯基)氨基甲酰基)-4，5，6，7-四氢吡唑并[1，5-a]吡嗪-3-羧酸甲酯2e

将粗品化合物2c(200mg，1.10mmol)、3，4-二氟苯胺2d(142.51mg，1.10mmol)和三乙胺(335.08mg，3.31mmol)溶解于10mL四氢呋喃中，于0℃，加入双(三氯甲基)碳酸酯(114.64mg，386.33μmol)，缓慢升至室温，搅拌反应3小时。反应液减压浓缩，所得残余物用薄层色谱法以展开剂体系A纯化，得标题化合物2e(100mg，产率：26.9％)。

MS m/z(ESI)：337.4[M+1]。

第四步

(R)-N⁵-(3，4-二氟苯基)-N³-(1，1，1-三氟丙-2-基)-6，7-二氢吡唑并[1，5-a]吡嗪-3，5(4H)-二甲酰胺2

将化合物2e(100mg，297.36μmol)和化合物1e(133.40mg，892.08μmol)溶解于20mL四氢呋喃中，于0℃，滴加4.46mL的1M双三甲基硅基胺基锂四氢呋喃溶液，加毕，缓慢升至室温，搅拌反应3小时。反应液中加入2mL饱和氯化铵、10mL水，用乙酸乙酯萃取(20mL×2)，合并有机相，减压浓缩，所得残余物用薄层色谱法以展开剂体系A纯化，所得粗品用高效液相制备(Waters 2767-SQ Detecor2，洗脱体系：碳酸氢铵，水，乙腈)纯化，得标题化合物2(15mg，产率：12.1％)。

MS m/z(ESI)：418.2[M+1]。

¹H NMR(400MHz，CD₃OD)δ8.07(s，1H)，7.51-7.46(m，1H)，7.22-7.16(m，2H)，5.05(s，2H)，4.88-4.82(m，1H)，4.29-4.26(m，2H)，4.05-4.02(m，2H)，1.42-1.40(m，3H)。

实施例3

(R)-N⁷-(3-氰基-4-氟苯基)-N¹-(1，1，1-三氟丙-2-基)-5，6-二氢咪唑并[1，5-a]吡嗪-1，7(8H)-二甲酰胺3

第一步

(R)-1-((1，1，1-三氟丙-2-基)氨基甲酰基)-5，6-二氢咪唑并[1，5-a]吡嗪-7(8H)-甲酸叔丁酯3b

氩气氛下，将7-叔丁基1-甲基5，6-二氢咪唑并[1，5-a]吡嗪-1，7(8H)-二甲酸酯3a(469.78mg，1.67mmol，采用专利申请“US20110034443A1”公开的方法制备而得)和化合物1e(249.74mg，1.67mmol)溶解于20mL四氢呋喃中，冰水浴下，滴加3.3mL的1M双三甲基硅基胺基锂四氢呋喃溶液，反应温度升至室温，搅拌反应1小时。反应液减压浓缩，所得残余物用薄层色谱法以展开剂体系A纯化，得标题化合物3b(130mg，产率：21.5％)。

MS m/z(ESI)：363.2[M+1]。

第二步

(R)-N-(1，1，1-三氟丙-2-基)-5，6，7，8-四氢咪唑并[1，5-a]吡嗪-1-甲酰胺三氟乙酸盐3c

依次将化合物3b(130mg，358.77μmol)和三氟乙酸(204.54mg，1.79mmol)溶解于2mL二氯甲烷中，搅拌反应2小时。反应液减压浓缩，得粗品标题化合物3c(135mg)，产物不经纯化，直接用于下一步反应。

第三步

将粗品化合物3c(50mg，190.67μmol)、5-氨基-2-氟苯甲腈3d(25.96mg，190.67μmol，采用公知的方法“Bioorganic&Medicinal Chemistry Letters，2006，16(19)，5176-5182”制备而得)和三乙胺(28.94mg，286.01μmol)溶解于10mL四氢呋喃中，冰水浴下，加入双(三氯甲基)碳酸酯(28.29mg，95.34μmol)，搅拌反应1小时。反应液减压浓缩，残余物用高效液相制备(Waters 2767-SQ Detecor2，洗脱体系：碳酸氢铵，水，乙腈)纯化，得标题化合物3(2mg，产率：2.5％)。

MS m/z(ESI)：425.1[M+1]。

¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δ9.22(s，1H)，8.32(d，1H)，7.95(d，1H)，7.81-7.77(m，2H)，7.47-7.43(m，1H)，4.96(s，2H)，4.81-4.74(m，1H)，4.17-4.10(m，2H)，3.89-3.86(m，2H)，1.39-1.35(dd，3H)。

实施例4

(R)-N⁵-(3，4，5-三氟苯基)-N³-(1，1，1-三氟丙-2-基)-6，7-二氢吡唑并[1，5-a]吡嗪-3，5(4H)-二甲酰胺4

第一步

5-((3，4，5-三氟苯基)氨基甲酰基)-4，5，6，7-四氢吡唑并[1，5-a]吡嗪-3-羧酸甲酯4a

将化合物2c(100mg，338.74μmol)、化合物1a(49.83mg，338.74μmol)和三氟乙酸(342.77mg，3.39mmol)溶解于10mL四氢呋喃中，于0℃，加入双(三氯甲基)碳酸酯(35.18mg，118.563μmol)，缓慢升至室温，搅拌反应3小时。反应液减压浓缩，所得残余物用薄层色谱法以展开剂体系A纯化，得标题化合物4a(50mg，产率：25.0％)。

MS m/z(ESI)：355.1[M+1]。

第二步

将化合物4a(50mg，141.13μmol)和1e(63.31mg，423.39μmol)溶解于20mL四氢呋喃中，于0℃，滴加2.12mL的1M双三甲基硅基胺基锂四氢呋喃溶液，加毕，缓慢升至室温，搅拌反应3小时。反应液中加入2mL饱和氯化铵、10mL水，用乙酸乙酯萃取(20mL×2)，合并有机相，减压浓缩，所得残余物用薄层色谱法以展开剂体系A纯化，所得粗品用高效液相制备(Waters 2767-SQ Detecor2，洗脱体系：碳酸氢铵，水，乙腈)纯化，得标题化合物4(5mg，产率：4％)。

MS m/z(ESI)：436.0[M+1]。

¹H NMR(400MHz，CD₃OD)δ8.07(s，1H)，7.30-7.26(m，2H)，5.04(s，2H)，4.88-4.82(m，1H)，4.28-4.26(m，2H)，4.04-4.01(m，2H)，1.42-1.40(m，3H)。

实施例5

(R)-N⁷-(3，4-二氟苯基)-N¹-(1，1，1-三氟丙-2-基)-5，6-二氢咪唑并[1，5-a]吡嗪-1，7(8H)-二甲酰胺5

第一步

7-((3，4-二氟苯基)氨基甲酰基)-5，6，7，8-四氢咪唑并[1，5-a]吡嗪-1-羧酸乙酯5b

将5，6，7，8-四氢咪唑并[1，5-a]吡嗪-1-羧酸乙酯5a(100mg，512.25μmol，采用专利申请“CN102464661A”公开的方法制备而得)和化合物2d(79.36mg，614.70μmol)加入20mL四氢呋喃中，冰水浴条件下，加入双(三氯甲基)碳酸酯(76.01mg，256.13μmol)，升至室温搅拌反应1小时。反应液减压浓缩，所得残余物用薄层色谱法以展开剂体系A纯化，得标题化合物5b(110mg，产率：61.3％)。

MS m/z(ESI)：351.1[M+1]。

第二步

将化合物5b(75mg，214.09μmol)和化合物1e(48.02mg，321.14μmol)加入至20mL四氢呋喃中，冰水浴条件下，加入双三甲基硅基胺基锂(107.47mg，642.27μmol)，搅拌反应1小时。反应液减压浓缩，所得残余物用薄层色谱法以展开剂体系A纯化，所得粗品用高效液相制备(Waters 2767-SQ Detecor2，洗脱体系：碳酸氢铵，水，乙腈)纯化，得标题化合物5(20mg，产率：30.4％)。

MS m/z(ESI)：418.2[M+1]。

¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δ9.09(s，1H)，8.31(d，1H)，7.76(s，1H)，7.64-7.60(m，1H)，7.34-7.23(m，2H)，4.94(s，2H)，4.79-4.77(m，1H)，4.16-4.14(m，2H)，3.88-3.85(m，2H)，1.37-1.35(dd，3H)。

实施例6

(S)-N⁷-(3，4-二氟苯基)-6-甲基-N¹-((R)-1，1，1-三氟丙-2-基)-5，6-二氢咪唑并[1，5-a]吡嗪-1，7(8H)-二甲酰胺6

第一步

(S)-5-(((1-羟丙基-2-基)(4-甲氧基苄基)氨基)甲基)-1H-咪唑-4-羧酸甲酯6c

将(S)-2-((4-甲氧基苄基)氨基)丙-1-醇6a(34.92g，179.08mmol，采用公知的方法“Bioorganic&Medicinal Chemistry Letters，2015，25(5)，1086-1091”制备而得)溶解于600mL四氢呋喃中，再加入5-醛基咪唑-4-甲酸甲酯6b(23g，149.23mmol，采用专利申请“US2008/318935”公开的方法制备而得)，分批加入三乙酰氧基硼氢化钠(47.44g，223.85mmol)，搅拌反应12小时。反应液过滤，滤液减压浓缩，所得残余物中加入600mL乙酸乙酯，用水洗涤(200mL×2)，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，得粗品标题化合物6c(40g)，产物不经纯化直接用于下一步反应。

MS m/z(ESI)：334.2[M+1]。

第二步

(S)-7-(4-甲氧基苄基)-6-甲基-5，6，7，8-四氢咪唑并[1，5-a]吡嗪-1-羧酸甲酯6d

将粗品化合物6c(11g，33.03mmol)和三苯基膦(12.98g，49.49mmol)(国药试剂)溶解于400mL四氢呋喃中，冰浴下缓慢滴加入偶氮二甲酸二异丙酯(10g，49.45mmol，上海韶远试剂有限公司)，缓慢升至室温，搅拌反应12小时。反应液减压浓缩，所得残余物中加入400mL乙酸乙酯，用水洗涤(100mL×2)，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，所得残余物用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系A纯化，得标题化合物6d(4.5g，产率：43.2％)。

MS m/z(ESI)：315.9[M+1]。

第三步

(S)-6-甲基-5，6，7，8-四氢咪唑并[1，5-a]吡嗪-1-羧酸甲酯三氟乙酸盐6e

将化合物6d(0.6g，2.33mmol)溶解于2mL三氟乙酸中，微波加热至100℃，反应5分钟。反应液冷却至室温，减压浓缩，得粗品标题化合物6e(0.6g)，产物不经纯化直接用于下一步反应。

MS m/z(ESI)：196.1[M+1]。

第四步

(S)-7-((3，4-二氟苯基)氨基甲酰基)-6-甲基-5，6，7，8-四氢咪唑并[1，5-a]吡嗪-1-羧酸甲酯6f

将粗品化合物6e(240mg，776.09μmol)溶解于15mL四氢呋喃中，加入化合物2d(150.3mg，1.16mmol)和三乙胺(314.13mg，3.10mmol)，冰浴下加入双(三氯甲基)碳酸酯(92.12mg，310.44μmol)，升至室温搅拌反应12小时。反应液减压浓缩，所得残余物用薄层色谱法以展开剂体系A纯化，得标题化合物6f(0.19g，产率：69.9％)。

MS m/z(ESI)：351.1[M+1]。

第五步

将化合物6f(190mg，542.36μmol)溶解于20mL四氢呋喃中，加入化合物1e(121.66mg，813.54μmol)，冰浴下滴加4mL的1M双三甲基硅基胺基锂四氢呋喃溶液，加毕，搅拌反应2小时。反应液中加入10mL水，用乙酸乙酯萃取(20mL×2)，合并有机相，减压浓缩，所得残余物用高效液相制备(Waters 2767-SQ Detecor2，洗脱体系：碳酸氢铵，水，乙腈)纯化，得标题化合物6(25mg，产率：10.6％)。MS m/z(ESI)：432.1[M+1]。

¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δ9.28(s，1H)，8.25(d，1H)，7.73(s，1H)，7.54-7.45(m，1H)，7.21-7.15(m，2H)，5.27(s，1H)，4.95-4.92(m，1H)，4.86-4.80(m，2H)，4.28-4.22(m，2H)，1.50-1.45(m，3H)，1.20(d，3H)。

实施例7

(S)-N⁵-(3，4-二氟苯基)-6-甲基-N³-((R)-1，1，1-三氟丙-2-基)-6，7-二氢吡唑并[1，5-a]吡嗪-3，5(4H)-二甲酰胺7

第一步

(S)-5-叔丁基3-甲基6-甲基-6，7-二氢吡唑并[1，5-a]吡嗪-3，5(4H)-二羧酸酯7b

一氧化碳气氛下，将(S)-3-碘-6-甲基-6，7-二氢吡唑并[1，5-a]吡嗪-5(4H)-羧酸叔丁酯7a(8.3g，22.85mmol，采用专利申请“WO2016113273A1”公开的方法制备)、醋酸钯(1.03g，4.57mmol)、1，1′-双(二苯基膦)二茂铁(2.53g，4.57mmol)和三乙胺(9.64mL，68.56mmol)溶解于150mL甲醇中，于55℃，搅拌反应15小时。反应液通过硅藻土过滤，滤液减压浓缩，残余物用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系C纯化，得标题化合物7b(6.3g，产率：93.34％)。

第二步

(S)-6-甲基-4，5，6，7-四氢吡唑并[1，5-a]吡嗪-3-羧酸甲酯三氟乙酸盐7c

将化合物7b(6.3g，21.33mmol)溶解于20mL二氯甲烷，加入三氟乙酸(14.1mL，190.91mmol)，搅拌反应2小时。反应液减压浓缩，得粗品标题化合物7c(14g)，产物不经纯化，直接用于下一步反应。

MS m/z(ESI)：196.1[M+1]。

第三步

(S)-5-((3，4-二氟苯基)氨基甲酰基)-6-甲基-4，5，6，7-四氢吡唑并[1，5-a]吡嗪-3-羧酸甲酯7e

将粗品化合物7c(2g，3.23mmol)、三乙胺(1.64g，16.17mmol)溶解于20mL二氯甲烷中，搅拌10分钟。冰浴条件下，加入1，2-二氟-4-苯异氰酸酯(601.87mg，3.88mmol，采用公知的方法“European Journal of Medicinal Chemistry，2016，115，1-13”制备)，反应20分钟。反应温度上升至室温，搅拌反应20分钟。反应液依次用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系C和A纯化，得标题化合物7e(1g，产率：88.27％)。MS m/z(ESI)：351.1[M+1]。

第四步

(S)-5-((3，4-二氟苯基)氨基甲酰基)-6-甲基-4，5，6，7-四氢吡唑并[1，5-a]吡嗪-3-羧酸7f

将化合物7e(500mg，1.43mmol)、氢氧化钠(285.45mg，7.14mmol)溶解于5mL甲醇、四氢呋喃和水混合溶剂中(V∶V∶V＝2∶2∶1)。于40℃，搅拌反应1小时。再于35℃，搅拌反应15小时。反应液减压浓缩，加入10mL水，滴加6M盐酸于上述溶液至pH为2，过滤，收集滤饼，得粗品标题化合物7f(450mg)，产物不经纯化，直接用于下一步反应。

MS m/z(ESI)：337.4[M+1]。

第五步

将粗品化合物7f(80mg，237.89μmol)、O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N，N，N′，N′-四甲基脲六氟磷酸酯(67.16mg，285.47μmol)、N，N-二异丙基乙胺(122.98mg，951.55μmol)溶解于3mL N，N-二甲基甲酰胺中，反应10分钟，加入化合物1e(53.36mg，356.83μmol)，搅拌反应3小时。反应液减压浓缩，所得残余物用薄层色谱法以展开剂体系C纯化，所得粗品用高效液相制备(Waters-2767，洗脱体系：碳酸氢铵，水，乙腈)纯化，得标题化合物7(70mg，产率：68.22％)。

MS m/z(ESI)：432.1[M+1]。

¹H NMR(400MHz，CD₃OD)δ8.09(m，1H)，7.49-7.47(m，1H)，7.16-7.13(m，2H)，5.32(d，1H)，5.01-4.99(m，1H)，4.84-4.80(m，1H)，4.66(d，1H)，4.32-4.29(m，1H)，4.17(d，1H)，1.40(d，3H)，1.21(d，3H)。

实施例8

(S)-N³-(叔丁基)-N⁵-(3，4-二氟苯基)-6-甲基-6，7-二氢吡唑并[1，5-a]吡嗪-3，5(4H)-二甲酰胺8

将粗品化合物7f(150mg，446.04μmol)、O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N，N，N′，N′-四甲基脲六氟磷酸酯(157.41mg，669.06μmol)、N，N-二异丙基乙胺(230.58mg，1.78mmol)溶解于3mL N，N-二甲基甲酰胺中，反应10分钟，加入叔丁胺(48.93mg，669.06μmol)，搅拌反应3小时。反应液加入30mL水，乙酸乙酯(30mL×2)萃取，合并有机相，有机相减压浓缩，所得残余物用薄层色谱法以展开剂体系C纯化，所得粗品用高效液相制备(Waters-2767，洗脱体系：碳酸氢铵，水，乙腈)纯化，得标题化合物8(30mg，产率：17.18％)。

MS m/z(ESI)：392.2[M+1]。

¹H NMR(400MHz，CD₃OD)δ8.02(s，1H)，7.53-7.50(m，1H)，7.20-7.17(m，2H)，5.31(d，1H)，5.01-4.98(m，1H)，4.68(d，1H)，4.33-4.29(m，1H)，4.18(d，1H)，1.46(s，9H)，1.23(d，3H)。

实施例9

(R)-N⁵-(3-氰基-4-氟苯基)-N³-(1，1，1-三氟丙-2-基)-6，7-二氢吡唑并[1，5-a]吡嗪-3，5(4H)-二甲酰胺9

第一步

5-(3-氰基-4-氟苯基)氨基甲酰基)-4，5，6，7-四氢吡唑并[1，5-a]吡嗪-3-羧酸甲酯9a

将化合物2c(50mg，275.95μmol)、化合物3d(38.56mg，275.95μmol)和三乙胺(279.23mg，2.76mmol)溶解于10mL四氢呋喃中，0℃下，加入双(三氯甲基)碳酸酯(32.76mg，110.38μmol)，缓慢升至室温，搅拌反应3小时。反应液减压浓缩，所得残余物用薄层色谱法以展开剂体系A纯化，得标题化合物9a(20mg，产率：21.1％)。

MS m/z(ESI)：344.2[M+1]。

第二步

5-(3-氰基-4-氟苯基)氨基甲酰基)-4，5，6，7-四氢吡唑并[1，5-a]吡嗪-3-甲酸9b

将化合物9a(100mg，291.28μmol)溶于10mL甲醇中，加入氢氧化锂(139.52mg，5.83mmol)和2mL水，搅拌反应3小时。反应液减压浓缩，加入10mL水，滴加6M盐酸于上述溶液至pH为2，反应液减压浓缩，得粗品标题化合物9b(95.91mg)，产物不经纯化直接用于下一步反应。

MS m/z(ESI)：330.1[M+1]。

第三步

将粗品化合物9b(95.91mg，291.28μmol)溶于10mL N，N-二甲基甲酰胺中，加入化合物1e(34.34mg，303.69μmol)，三乙胺(92.19mg，911.06μmol)，0℃加入O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N，N，N′，N′-四甲基脲六氟磷酸酯(85.74mg，364.43μmol)，搅拌反应12小时。反应液减压浓缩，所得残余物用高效液相制备(Waters 2767-SQ Detecor2，洗脱体系：碳酸氢铵，水，乙腈)纯化，得标题化合物9(5mg，产率：3.88％)。

MS m/z(ESI)：425.1[M+1]。

¹H NMR(400MHz，CD₃OD)δ8.07(s，1H)，7.87-7.85(m，2H)，7.32-7.27(m，1H)，5.06(s，2H)，4.86-4.84(m，1H)，4.29-4.27(m，2H)，4.06-4.03(m，2H)，1.42(d，3H)。

实施例10

(S)-N³-(叔丁基)-6-甲基-N⁵-((3，4，5-三氟苯基)-6，7-二氢吡唑并[1，5-a]吡嗪-3，5(4H)-二甲酰胺10

第一步

(S)-6-甲基-5-((3，4，5-三氟苯基)氨基甲酰基)-4，5，6，7-四氢吡唑并[1，5-a]吡嗪-3-羧酸甲酯10a

将化合物1a(1.17g，7.92mmol)和化合物7c(1.63g，5.28mmol)溶解于30mL二氯甲烷中，再加入三乙胺(2.14g，21.22mmol)和双(三氯甲基)碳酸酯(626.8mg，2.11mmol)，搅拌反应2小时。反应液减压浓缩，所得残余物用薄层色谱法以展开剂体系A纯化，得标题化合物10a(730mg，产率：37.5％)。

MS m/z(ESI)：369.1[M+1]。

第二步

(S)-6-甲基-5-((3，4，5-三氟苯基)氨基甲酰基)-4，5，6，7-四氢吡唑并[1，5-a]吡嗪-3-羧酸10b

将化合物10a(730mg，1.98mmol)、氢氧化钠(396.45mg，9.91mmol)溶解于10mL甲醇、四氢呋喃和水混合溶剂中(V∶V∶V＝2∶2∶1)，于40℃搅拌反应1小时，再于35℃，搅拌反应15小时。反应液减压浓缩，加入10mL水，滴加6M盐酸于上述溶液至pH为2，过滤，收集滤饼，得粗品标题化合物10b(702mg，1.98mmol)，产物不经纯化直接用于下一步反应。

MS m/z(ESI)：355.4[M+1]。

第三步

(S)-N³-(叔丁基)-6-甲基-N⁵-(3，4，5-三氟苯基)-6，7-二氢吡唑并[1，5-a]吡嗪-3，5(4H)-二甲酰胺10

将粗品化合物10b(85mg，239.92μmol)、O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N，N，N′，N′-四甲基脲六氟磷酸酯(67.74mg，287.91μmol)、N，N-二异丙基乙胺(129.21mg，719.76μmol)溶解于3mL N，N-二甲基甲酰胺中，反应10分钟，加入叔丁胺(35.09mg，479.84μmol)，搅拌反应3小时。反应液减压浓缩，所得残余物用薄层色谱法以展开剂体系C纯化，所得粗品用高效液相制备(Waters-2767，洗脱体系：碳酸氢铵，水，乙腈)纯化，得标题化合物10(50mg，产率：50.90％)。

MS m/z(ESI)：410.2[M+1]。

¹H NMR(400MHz，CD₃OD)δ8.00(s，1H)，7.30-7.28(m，2H)，5.31(d，1H)，4.98-4.96(m，1H)，4.69(d，1H)，4.31-4.27(m，1H)，4.17(d，1H)，1.44(s，9H)，1.22(d，3H)。

实施例11

(S)-N⁷-(3-氰基-4-氟苯基)-6-甲基-N¹-((R)-1，1，1-三氟丙-2-基)-5，6-二氢咪唑并[1，5-a]吡嗪-1，7-(8H)-二甲酰胺11

第一步

(S)-7-((3-氰基-4-氟苯基)氨基甲酰基)-6-甲基-5，6，7，8-四氢咪唑并[1，5-a]吡嗪-1-羧酸甲酯11a

将粗品化合物6e(9.2g，47.13mmol)溶解于50mL四氢呋喃中，加入化合物3d(6.5g，47.13mmol)和三乙胺(5.82g，56.55mmol)，于0℃，加入双(三氯甲基)碳酸酯(4.9g，16.49mmol)，缓慢升至室温，搅拌反应12小时。反应液过滤，滤液减压浓缩，得粗品标题化合物11a(16.84g)，产物不经纯化直接用于下一步反应。MS m/z(ESI)：358.1[M+1]。

第二步

(S)-7-((3-氰基-4-氟苯基)氨基甲酰基)-6-甲基-5，6，7，8-四氢咪唑并[1，5-a]吡嗪-1-甲酸11b

将粗品化合物11a(16.84g，47.13mmol)溶解于50mL甲醇中，于0℃下，滴加入预制的氢氧化钠溶液(氢氧化钠(12g，282.76mmol)溶于60mL水)，缓慢升至室温，搅拌反应4小时。反应液减压浓缩除去有机溶剂，所得残余物用二氯甲烷洗涤，用6M盐酸调节水相pH为1至2，减压浓缩，得粗品标题化合物11b(16.18g)，产物不经纯化直接用于下一步反应。

MS m/z(ESI)：344.1[M+1]。

第三步

将粗品化合物11b(13g，37.87mmol)、化合物1e(7.4g，49.23mmol)和三乙胺(11.6g，113.6mmol)溶解于200mL N，N-二甲基甲酰胺中，冷却到0℃，加入O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N，N，N′，N′-四甲基脲六氟磷酸酯(29g，75.73mmol)，缓慢升至室温，搅拌反应12小时。反应液加入300mL乙酸乙酯，水洗(100mL×3)，有机相减压浓缩，所得残余物用高效液相制备(Waters 2767-SQ Detecor2，洗脱体系：碳酸氢铵，水，乙腈)纯化，得标题化合物11(1.8g，产率：10.8％)。

MS m/z(ESI)：439.0[M+1]。

¹H NMR(400MHz，CD₃OD)δ7.87-7.85(m，1H)，7.73-7.70(m，2H)，7.69-7.27(m，1H)，5.30-5.26(d，1H)，4.83-4.82(m，1H)，4.85-4.72(m，2H)，4.23-4.21(m，2H)，1.43(d，3H)，1.20(d，3H)。

实施例12

(S)-N¹-(叔丁基)-N⁷-(3，4-二氟苯基)-6-甲基-5，6-二氢咪唑并[1，5-a]吡嗪-1，7-(8H)-二甲酰胺12

将化合物6f(2.11g，6.27mmol)溶于15mL四氢呋喃中，加入叔丁胺(600mg，8.16mmol)，0℃下，滴加1M双三甲基硅基胺基锂四氢呋喃溶液(5g，31.37mmol)，搅拌反应2小时。反应液中加水100mL，乙酸乙酯萃取(100mL×3)，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩。所得残余物用高效液相制备(Waters 2767-SQ Detecor2，洗脱体系：碳酸氢铵，水，乙腈)纯化，得标题化合物12(120mg，产率：4.9％)。

MS m/z(ESI)：392.1[M+1]。

¹H NMR(400MHz，CD₃OD)δ7.65(s，1H)，7.50-7.49(m，1H)，7.19-7.17(m，2H)，5.25-5.21(d，1H)，4.92-4.90(m，1H)，4.77-4.73(m，1H)，4.20-4.18(m，2H)，1.46(s，9H)，1.19-1.17(d，3H)。

实施例13(S)-6-甲基-N¹-(3-甲基氧杂环丁烷-3-基)-N⁷-(3，4，5-三氟苯基)-5，6-二氢咪唑并[1，5-a]吡嗪-1，7(8H)-二甲酰胺13

第一步

(S)-6-甲基-7-((3，4，5-三氟苯基)氨基甲酰基)-5，6，7，8-四氢咪唑并[1，5-a]吡嗪-1-甲酸甲酯13a

将粗品化合物6e(140.00mg，452.72μmol)溶解于15mL四氢呋喃中，加入化合物1a(99.89mg，679.08μmol)和三乙胺(183.24mg，1.81mmol)，于0℃，加入双(三氯甲基)碳酸酯(53.74mg，181.09μmol)，缓慢升至室温，搅拌反应12小时。反应液减压浓缩，所得残余物用薄层色谱法以展开剂体系A纯化，得标题化合物13a(88mg，产率：52.8％)。

MS m/z(ESI)：369.1[M+1]。

第二步(S)-6-甲基-7-((3，4，5-三氟苯基)氨基甲酰基)-5，6，7，8-四氢咪唑并[1，5-a]吡嗪-1-羧酸13b

将化合物13a(75mg，203.63μmol)溶于10mL甲醇中，加入氢氧化钠(81.45mg，2.04mmol)和2mL水，搅拌反应3小时。反应液减压浓缩，得粗品标题化合物13b(75mg)，产物不经纯化直接用于下一步反应。

MS m/z(ESI)：355.0[M+1]。

第三步

(S)-6-甲基-N¹-(3-甲基氧杂环丁烷-3-基)-N⁷-(3，4，5-三氟苯基)-5，6-二氢咪唑并[1，5-a]吡嗪-1，7(8H)-二甲酰胺13

将粗品化合物13b(75mg，211.69μmol)溶于10mL N，N-二甲基甲酰胺中，加入3-甲基-3-氨基氧杂环丁烷13c(27.66mg，317.53μmol，上海书亚医药科技有限公司)和三乙胺(64.26mg，635.07μmol)，0℃下，加入O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N，N，N′，N′-四甲基脲六氟磷酸酯(99.61mg，423.38μmol)，室温搅拌反应12小时。反应液减压浓缩，所得残余物用高效液相制备(Waters 2767-SQ Detecor2，洗脱体系：碳酸氢铵，水，乙腈)纯化，得标题化合物13(16mg，产率：17.9％)。

MS m/z(ESI)：424.0[M+1]。

¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δ8.87(s，1H)，8.36(s，1H)，7.68(s，1H)，7.33-7.27(m，2H)，5.27-5.20(m，1H)，4.92(d，2H)，4.73(d，2H)，4.78-4.73(m，1H)，4.52(d，2H)，4.26-4.20(m，2H)，1.73(s，3H)，1.20(d，3H)。

实施例14

(S)-6-甲基-N³-(3-甲基氧杂环丁烷-3-基)-N⁵-(3，4，5-三氟苯基)-6，7-二氢吡唑并[1，5-a]吡嗪-3，5(4H)-二甲酰胺14

将粗品化合物10b(100mg，282.26μmol)、化合物13c(36.89mg，423.39μmol)、N，N-二异丙基乙胺(42.84mg，423.39μmol)溶解于10mL N，N-二甲基甲酰胺中，加入O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N，N，N′，N′-四甲基脲六氟磷酸酯(79.69mg，338.71μmol)，搅拌反应1小时。反应液减压浓缩，所得残余物用薄层色谱法以展开剂体系A纯化，所得粗品用高效液相制备(Waters-2767，洗脱体系：碳酸氢铵，水，乙腈)纯化，得标题化合物14(80mg，产率：66.94％)。

MS m/z(ESI)：424.5[M+1]。

¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δ8.89(s，1H)，8.37(s，1H)，7.99(s，1H)，7.33-7.17(m，2H)，5.33(d，1H)，5.00-4.98(m，1H)，4.88(d，2H)，4.71(d，1H)，4.52(d，2H)，4.34-4.31(m，1H)，4.21-4.18(m，1H)，1.72(s，3H)，1.25(d，3H)。

实施例15

(S)-N⁵-(3-氰基-4-氟苯基)-6-甲基-N³-((R)-1，1，1-三氟丙-2-基)-6，7-二氢吡唑并[1，5-a]吡嗪-3，5(4H)-二甲酰胺15

第一步

(S)-5-(叔丁氧基羰基)-6-甲基-4，5，6，7-四氢吡唑并[1，5-a]吡嗪-3-甲酸15a

将化合物7b(525mg，1.78mmol)、一水合氢氧化锂(373mg，8.9mmol)溶解于10mL甲醇、四氢呋喃和水混合溶剂中(V∶V∶V＝2∶2∶1)，搅拌反应16小时。反应液减压浓缩，加入10mL水，滴加6M盐酸于上述溶液至pH为2，用乙酸乙酯萃取(20mL×2)，合并有机相，减压浓缩，得粗品标题化合物15a(500mg)，产物不经纯化直接用于下一步反应。

MS m/z(ESI)：282.2[M+1]。

第二步

(S)-6-甲基-3-(((R)-1，1，1-三氟丙-2-基)氨基甲酰基)-6，7-二氢吡唑并[1，5-a]吡嗪-5(4H)-羧酸叔丁酯15b

将粗品化合物15a(500mg，1.78mmol)、化合物1e(479mg，3.2mmol)和N，N-二异丙基乙胺(360mg，3.56mmol)溶解于20mL N，N-二甲基甲酰胺中，加入O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N，N，N′，N′-四甲基脲六氟磷酸酯(628mg，2.67mmol)，搅拌反应2小时。反应液减压浓缩，所得残余物用薄层色谱法以展开剂体系A纯化，得标题化合物15b(600mg，产率：89.56％)。

MS m/z(ESI)：377.2[M+1]

第三步

(S)-6-甲基-N-((R)-1，1，1-三氟丙-2-基)-4，5，6，7-四氢吡唑并[1，5-a]哌嗪-3-甲酰胺三氟乙酸盐15c

将化合物15b(500mg，1.33mmol)溶解于20mL二氯甲烷，加入三氟乙酸(758mg，6.65mmol)，搅拌反应2小时。反应液减压浓缩，得粗品标题化合物15c(500mg)，产物不经纯化直接用于下一步反应。

MS m/z(ESI)：277.2[M+1]。

第四步

将粗品化合物15c(50mg，128μmol)溶解于10mL四氢呋喃中，加入化合物3d(26mg，192μmol)和三乙胺(26mg，256μmol)，于0℃，加入双(三氯甲基)碳酸酯(13mg，45μmol)，升至室温搅拌反应1小时。反应液减压浓缩，所得残余物用薄层色谱法以展开剂体系A纯化，所得粗品用高效液相制备(Waters-2767，洗脱体系：碳酸氢铵，水，乙腈)纯化，得标题化合物15(20mg，产率：35.61％)。

MS m/z(ESI)：439.2[M+1]。

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.87-7.86(m，1H)，7.83(s，1H)，7.70-7.68(m，1H)，7.42(s，1H)，7.20-7.16(m，1H)，6.01(d，1H)，5.34-5.23(m，2H)，4.92-4.89(m，1H)，4.84(d，1H)，4.38-4.34(m，1H)，4.25(d，1H)，1.49(d，3H)，1.27(d，3H)。

实施例16

(S)-N⁵-(2，6-二氟吡啶-4-基)-6-甲基-N³-((R)-1，1，1-三氟丙-2-基)-6，7-二氢吡唑并[1，5-a]吡嗪-3，5(4H)-二甲酰胺16

第一步

2，6-二氟-4-吡啶异氰酸酯16b

将2，6-二氟-4-氨基吡啶16a(500mg，3.84mmol)、N，N-二异丙基乙胺(583mg，5.76mmol)溶解于25mL甲苯，加入双(三氯甲基)碳酸酯(297mg，4.61mmol)，110℃下搅拌反应4小时。反应液减压浓缩，得粗品标题化合物16b(1g)，产物不经纯化直接用于下一步反应。

第二步

(S)-N5-(2，6-difluoropyridin-4-yl)-6-methyl-N3-((R)-1，1，1-trifluoropropan-2-yl)-6，7-dihydropyrazolo[1，5-a]pyrazine-3，5(4H)-dicarboxamide

将粗品化合物15c(100mg，256μmol)溶解于10mL二氯甲烷中，加入粗品化合物16b(80mg)和三乙胺(78mg，769μmol)，搅拌反应2小时。反应液减压浓缩，所得残余物用薄层色谱法以展开剂体系A纯化，所得粗品用高效液相制备(Waters-2767，洗脱体系：碳酸氢铵，水，乙腈)纯化，得标题化合物16(20mg，产率：18.05％)。

MS m/z(ESI)：433.5[M+1]

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ8.19(s，1H)，7.84(s，1H)，7.31(s，1H)，7.10(s，1H)，6.05(d，1H)，5.34(d，1H)，5.27-5.25(m，1H)，4.90-4.88(m，1H)，4.84(d，1H)，4.38-4.34(m，1H)，4.28(d，1H)，1.48(d，3H)，1.29(d，3H)。

实施例17

(R)-N⁵-(3，4，5-三氟苯基)-N³-(1，1，1-三氟丙-2-基)-6，7-二氢-[1，2，3]三氮唑并[1，5-a]吡嗪-3，5(4H)-二甲酰胺17

第一步

(5-((3，4，5-三氟苯基)氨基甲酰基)-4，5，6，7-四氢-[1，2，3]三氮唑并[1，5-a]吡嗪-3-基)甲基乙酸酯17b

将(4，5，6，7-四氢-[1，2，3]三氮唑并[1，5-a]吡嗪-3-基)甲基乙酸酯17a(350mg，2mmol)(采用公知的方“Journal of Medicine Chemistry，2014，57(9)，3687-3706”制备)、二异丙基乙胺(790mg，6mmol)溶解于20mL二氯甲烷中，搅拌10分钟。冰浴下，加入1，2，3-三氟-5-苯异氰酸酯17f(400mg，2mmol，百灵威科技有限公司)，反应20分钟，升温至室温，搅拌反应20分钟。反应液减压浓缩，用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系C和A纯化，得标题化合物17b(190mg，产率：25.24％)。

MS m/z(ESI)：370.1[M+1]。

第二步

3-(羟甲基)-N-(3，4，5-三氟苯基)-6，7-二氢-[1，2，3]三氮唑并[1，5-a]吡嗪-5(4H)-甲酰胺17c

将化合物17b(190mg，0.51mmol)溶解于5mL甲醇和水(V∶V＝4∶1)的混合溶剂中，加入氢氧化锂(108mg，2.57mmol)，搅拌2小时。反应液中加水20mL，乙酸乙酯萃取(15mL×3)，合并有机相，减压浓缩，得粗品标题化合物17c(65mg)，产物不经纯化直接用于下一步反应。

MS m/z(ESI)：328.1[M+1]。

第三步

3-甲酰基-N-(3，4，5-三氟苯基)-6，7-二氢-[1，2，3]三氮唑并[1，5-a]吡嗪-5(4H)-甲酰胺17d

将粗品化合物17c(65mg，0.2mmol)溶解于5mL二氯甲烷中，加入氯铬酸吡啶盐(138mg，0.64mmol)和硅胶(140mg，100-200目)，搅拌3小时。过滤，减压浓缩，所得残余物用薄层色谱法以展开剂体系A纯化，得标题化合物17d(30mg，产率：43.12％)。

MS m/z(ESI)：326.1[M+1]。

第四步

(5-((3，4，5-三氟苯基)氨基甲酰基)-4，5，6，7-四氢-[1，2，3]三氮唑并[1，5-a]吡嗪-3-羧酸17e

将化合物17d(30mg，0.1mmol)溶解于5mL乙腈和水混合溶剂中(V∶V＝3∶2)，加入氨基磺酸(20mg，0.2mmol)，搅拌10分钟，加入亚氯酸钠(20mg，0.2mmol)，搅拌2小时。依次加入0.5mL饱和亚硫酸钠溶液和10mL水，乙酸乙酯萃取(10mL×3)，合并有机相，减压浓缩，得粗品化合物17e(25mg)，产物不经纯化直接用于下一步反应。

MS m/z(ESI)：342.1[M+1]。

第五步

将粗品化合物17e(25mg，73.2μmol)、O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N，N，N′，N′-四甲基脲六氟磷酸酯(35mg，146.5μmol)、N，N-二异丙基乙胺(47mg，366.2μmol)溶解于3mL N，N-二甲基甲酰胺中，反应10分钟，加入化合物1e(33mg，220μmol)，搅拌反应3小时。反应液减压浓缩，所得残余物用薄层色谱法以展开剂体系C纯化，得标题化合物17(5mg，产率：15.6％)。

MS m/z(ESI)：437.1[M+1]。

¹H NMR(400MHz，CD₃OD)δ7.29-7.27(m，2H)，4.60(br，1H)，4.54(t，2H)，4.04(t，2H)，2.80(s，2H)，1.45(d，3H)。

实施例18

(S)-6-甲基-N⁷-(3，4，5-三氟苯基)-N¹-((R)-1，1，1-三氟丙-2-基)-5，6-二氢咪唑并[1，5-a]吡嗪-1，7(8H)-二甲酰胺18

采用实施例6合成路线，将第四步原料化合物2d替换为原料化合物1a，制得标题化合物18(2.8mg)。

MS m/z(ESI)：450.2[M+1]。

¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δ8.86(s，1H)，8.33(d，1H)，7.73(s，1H)，7.33-7.28(m，2H)，5.29(d，1H)，4.92(d，1H)，4.85-4.76(m，2H)，4.28-4.22(m，2H)，1.44(d，3H)，1.34(d，3H)。

实施例19

N³-(3-甲基氧杂环丁烷-3-基)-N⁵-(3，4，5-三氟苯基)-6，7-二氢吡唑并[1，5-a]吡嗪-3，5(4H)-二甲酰胺19

第一步

5-((3，4，5-三氟苯基)氨基甲酰基)-4，5，6，7-四氢吡唑并[1，5-a]吡嗪-3-甲酸19a

将化合物4a(3g，8.74mmol)溶于20mL甲醇和20mL四氢呋喃中，加入氢氧化钠(3.39g，84.67mmol)和10mL水，搅拌反应16小时。反应液减压浓缩，加入20mL水，滴加6M盐酸于上述溶液至pH为2，反应液减压浓缩，得粗品标题化合物19a(100mg)，产物不经纯化直接用于下一步反应。

MS m/z(ESI)：341.1[M+1]。

第二步

(N³-(3-甲基氧杂环丁烷-3-基)-N⁵-(3，4，5-三氟苯基)-6，7-二氢吡唑并[1，5-a]吡嗪-3，5(4H)-二甲酰胺19

将粗品化合物19a(100mg，293.90μmol)、O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N，N，N′，N′-四甲基脲六氟磷酸酯(69.14mg，293.90μmol)、三乙胺(29.74mg，293.90μmol)溶解于5mL N，N-二甲基甲酰胺中，反应10分钟，加入化合物13c(108.96mg，881.69μmol)，搅拌反应3小时。反应液加入10mL水，乙酸乙酯(20mL×2)萃取，合并有机相，减压浓缩，所得残余物用薄层色谱法以展开剂体系C纯化，所得粗品用高效液相制备(Waters-2767，洗脱体系：碳酸氢铵，水，乙腈)纯化，得标题化合物19(20mg，产率：16.62％)。

MS m/z(ESI)：410.1[M+1]。

¹H NMR(400MHz，CD₃OD)δ7.95(s，1H)，7.30-7.26(m，2H)，5.01(s，2H)，4.88(d，2H)，4.50(d，2H)，4.28-4.25(m，2H)，4.04-4.01(m，2H)，1.71(s，3H)。

实施例20

(S)-N⁷-(2，6-二氟吡啶-4-基)-6-甲基N¹-((R)-1，1，1-三氟丙-2-基)-5，6-二氢咪唑并[1，5-a]吡嗪-1，7-(8H)-二甲酰胺20

采用实施例6合成路线，将第四步原料化合物2d替换为原料2，6-二氟-4-吡啶胺(上海毕得医药科技有限公司)，制得标题化合物20(10mg)。

MS m/z(ESI)：433.1[M+1]。

¹H NMR(400MHz，CD₃OD)δ7.69(s，1H)，7.11-7.09(d，2H)，5.33-5.29(m，1H)，4.97-4.77(m，1H)，4.56-4.41(m，1H)，4.27-4.21(m，1H)，3.80-3.45(m，2H)，1.38(d，3H)，1.15(d，3H)。

实施例21

(R)-N³-(仲丁基)-N⁵-(3，4，5-三氟苯基)-6，7-二氢吡唑并[1，5-a]吡嗪-3，5(4H)-二甲酰胺21

将化合物19a(96mg，282.26μmol)溶于10mL N，N-二甲基甲酰胺中，加入(R)-丁-2-胺(20.64mg，282.26μmol，梯希爱(上海)化成工业发展有限公司)和三乙胺(85.69mg，846.78μmol)，0℃下，加入O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N，N，N′，N′-四甲基脲六氟磷酸酯(79.69mg，338.71μmol)，升温到室温，反应12小时。反应液减压浓缩，所得残余物用高效液相制备(Waters 2767-SQ Detecor2，洗脱体系：碳酸氢铵，水，乙腈)纯化，得标题化合物21(10mg，产率：8.96％)。

MS m/z(ESI)：396.1[M+1]。

¹H NMR(400MHz，CD₃OD)δ8.00(s，1H)，7.30-7.26(m，2H)，5.04(s，2H)，4.27-4.25(m，2H)，4.04-4.00(m，3H)，1.60-1.56(m，2H)，1.22(d，3H)，0.96(t，3H)。

实施例22

(S)-N³-((R-仲-丁基))-N⁵-(3，4-二氟苯基)-6-甲基-6，7-二氢吡唑并[1，5-a]吡嗪-3，5(4H)-二甲酰胺22

采用实施例7的合成路线，将原料化合物1e替换为原料化合物(R)-丁-2-胺，制得标题化合物22(20mg)。

MS m/z(ESI)：392.1[M+1]。

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.69(s，1H)，7.53-7.50(m，1H)，7.23(s，1H)，7.06-7.02(m，2H)，5.62(d，1H)，5.23(d，2H)，4.82(d，1H)，4.31-4.28(m，1H)，4.28(d，1H)，4.07(d，1H)，1.60-1.57(m，2H)，1.22(d，6H)，0.99(t，3H)。

实施例23

(S)-N⁵-(3，4-二氟苯基)-N³-异丙基-6-甲基-6，7-二氢吡唑并[1，5-a]吡嗪-3，5(4H)-二甲酰胺23

采用实施例7的合成路线，将第五步原料化合物1e替换为原料异丙胺，制得标题化合物23(25mg)。

MS m/z(ESI)：378.1[M+1]。

¹H NMR(400MHz，CD₃OD)δ8.00(s，1H)，7.50-7.45(m，1H)，7.18-7.14(m，2H)，5.35-5.30(m，1H)，4.99-4.95(m，1H)，4.69-4.62(m，1H)，4.32-4.22(m，1H)，4.22-4.12(m，2H)，1.23-1.16(m，9H)。

实施例24

(S)-N⁵-(3，4-二氟苯基)-N³-(1-甲氧基-2-甲基丙烷-2-基)-6-甲基-6，7-二氢吡唑并[1，5-a]吡嗪-3，5(4H)-二甲酰胺24

采用实施例7的合成路线，将第五步原料化合物1e替换为原料1-甲氧基-2-甲基丙烷-2-胺(国药上海化学试剂)，制得标题化合物24(15mg)。

MS m/z(ESI)：422.1[M+1]

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.69(s，1H)，7.56-7.51(m，1H)，7.15-7.09(m，3H)，6.13(s，1H)，5.26-5.22(m，1H)，5.20(d，1H)，4.85(d，1H)，4.36-4.32(m，1H)，4.22(d，1H)，3.47(s，3H)，3.44(s，2H)，1.50(s，6H)，1.25(d，3H)。

实施例25 (S)-N⁵-(3-氯-2-氟吡啶-4-基)-6-甲基-N³-((R)-1，1，1-三氟丙-2-基)-6，7-二氢吡唑并[1，5-a]吡嗪-3，5(4H)-二甲酰胺25

采用实施例3合成路线，将第一步原料化合物3a替换为原料化合物7b，将第三步原料化合物3d替换为原料化合物2-氯-3-氟吡啶-4-胺(上海毕得医药科技有限公司)，制得标题化合物25(20mg)。

MS m/z(ESI)：449.1[M+1]。

¹H NMR(400MHz，CD₃OD)δ8.09(s，1H)，8.04(d，1H)，7.87(t，1H)，5.42(d，1H)，5.02(t，1H)，4.84(t，1H)，4.77(d，1H)，4.38-4.35(m，1H)，4.21(d，1H)，1.41(d，3H)，1.29(d，3H)。

实施例26

(R)-N¹-(仲丁基)-N⁷-(3，4，5-三氟苯基)-5，6-二氢咪唑并[1，5-a]吡嗪-1，7(8H)-二甲酰胺26

采用实施例1的合成路线，将第三步原料化合物1e替换为原料化合物(R)-丁-2-胺，制得标题化合物26(4mg)。

MS m/z(ESI)：396.2[M+1]。

¹H NMR(400MHz，CD₃OD)δ7.68(s，1H)，7.31-7.29(m，2H)，5.05(s，2H)，4.23-4.21(m，2H)，4.01-3.95(m，3H)，1.61-1.58(m，2H)，1.24-1.23(m，3H)，0.96(t，3H)。

实施例27

(S)-N³-(四氢呋喃-3-基)-N⁵-(3，4，5-三氟苯基)-6，7-二氢吡唑并[1，5-a]吡嗪-3，5(4H)-二甲酰胺27

将粗品化合物19a(100mg，293.90μmol)、O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N，N，N′，N′-四甲基脲六氟磷酸酯(138.29mg，587.79μmol)、三乙胺(148.70mg，1.47mmol)溶解于3mL N，N-二甲基甲酰胺中，反应10分钟，加入(S)-四氢呋喃-3-胺盐酸盐27a(72.64mg，587.79μmol，上海毕得医药科技有限公司)，搅拌反应3小时。反应液加入10mL水，乙酸乙酯萃取(20mL×2)，合并有机相，有机相减压浓缩，所得残余物用薄层色谱法以展开剂体系C纯化，所得粗品用高效液相制备(Waters-2767，洗脱体系：碳酸氢铵，水，乙腈)纯化，得标题化合物27(20mg，产率：16.62％)。

MS m/z(ESI)：410.1[M+1]。

¹H NMR(400MHz，CD₃OD)δ8.02(s，1H)，7.30-7.26(m，2H)，5.03(s，2H)，4.56-4.55(m，1H)，4.27-4.25(m，2H)，4.04-3.95(m，4H)，3.85-3.84(m，1H)，3.72-3.71(m，1H)，2.32-2.27(m，1H)，2.02-1.96(m，1H)。

实施例28

(S)-N⁵-(3，4-二氟苯基)-N³-(1-羟基-2-甲基丙烷-2-基)-6-甲基-6，7-二氢吡唑并[1，5-a]吡嗪-3，5(4H)-二甲酰胺28

采用实施例7合成路线，将第五步原料化合物1e替换为原料2-氨基-2-甲基丙烷-1-醇(韶远化学试剂有限公司)，制得标题化合物28(10mg)。

MS m/z(ESI)：408.1[M+1]。

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.70(s，1H)，7.57-7.52(m，1H)，7.16-7.10(m，3H)，5.94(s，1H)，5.25-5.23(m，1H)，5.22(d，1H)，4.83(d，1H)，4.59-4.58(m，1H)，4.37-4.32(m，1H)，4.21(d，1H)，3.77-3.69(m，2H)，1.45(s，6H)，1.25(d，3H)。

实施例29

(R)-N⁵-(3，4-二氟苯基)-2-甲基-N³-(1，1，1-三氟丙-2-基)-6，7-二氢吡唑并[1，5-a]吡嗪-3，5(4H)-二甲酰胺29

第一步

2-(苄基((3-甲基-1H-吡唑-5-基)甲基)氨基)乙-1-醇29b

将3-甲基-1H-吡唑-5-甲醛29a(5.1g，45.41mmol，上海毕得医药科技有限公司)溶解于100mL二氯甲烷，加入2-(苄基氨基)乙醇(6.87g，45.41mmol)，搅拌反应1小时。加入醋酸硼氢化钠(9.62g，45.41mmol)，搅拌反应16小时。反应液减压浓缩，所得残余物用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系C和A纯化，得到标题化合物29b(11g，产率：98.75％)。

MS m/z(ESI)：246.1[M+1]。

第二步

N-苄基-2-氯-N-((3-甲基-1H-吡唑-5-基)甲基)乙-1-胺29c

将化合物29b(11g，44.84mmol)溶解于200mL二氯甲烷中，冷却至0℃，滴加二氯亚砜(16.00g，134.52mmol)，40℃反应16小时。反应液冷却至室温，减压浓缩，得到粗品标题化合物29c(11.8g)。产物不经纯化直接用于下一步反应。

MS m/z(ESI)：264.1[M+1]。

第三步

5-苄基-2-甲基-4，5，6，7-四氢吡唑并[1，5-a]吡嗪29d

将粗品化合物29c(11.8g，44.74mmol)溶解于200mL乙腈中，冷却到0℃，加入三乙胺(46g，447.37mmol)，80℃反应16小时。反应液冷却至室温，减压浓缩，加入100mL水，乙酸乙酯萃取(200mL×2)，合并有机相，有机相减压浓缩，得到粗品标题化合物29d(10.17g)。产物不经纯化直接用于下一步反应。

MS m/z(ESI)：228.1[M+1]。

第四步

5-苄基-3-溴-2-甲基-4，5，6，7-四氢吡唑并[1，5-a]吡嗪29e

将粗品化合物29d(228mg，1.0mmol)溶解于10mL乙腈中，0℃下，加入N-溴代丁二酰亚胺(180mg，1.0mmol)，缓慢升至室温，搅拌反应16小时。反应液减压浓缩，所得残余物用薄层色谱法以展开剂体系A纯化，得标题化合物29e(185mg，产率：60.6％)。

MS m/z(ESI)：306.1[M+1]。

第二步

5-苄基-2-甲基-4，5，6，7-四氢吡唑并[1，5-a]吡嗪-3-羧酸甲酯29f

一氧化碳气氛下，将八羰基二钴(226mg，662μmol)、碳酸钾(457mg，3.31mmol)加入10mL甲醇中，60℃搅拌反应45分钟。再加入化合物29e(100mg，327μmol)和2-氯乙酸甲酯(215mg，1.98mmol)，搅拌反应16小时。反应液减压浓缩，加入100mL乙酸乙酯，过滤，用100mL乙酸乙酯洗涤，滤液减压浓缩，所得残余物用薄层色谱法以展开剂体系A纯化，得标题化合物29f(60mg，产率：64.39％)。

MS m/z(ESI)：286.2[M+1]。

第三步

2-甲基-4，5，6，7-四氢吡唑并[1，5-a]吡嗪-3-羧酸甲酯29g

氢气氛下，将化合物29f(60mg，210.28μmol)溶解于10mL甲醇中，加入钯碳加氢催化剂(湿)(22.38mg，210.28μmol)，搅拌反应16小时。反应液过滤，滤液减压浓缩，得粗品标题化合物29g(30mg)，产物不经纯化直接用于下一步反应。

MS m/z(ESI)：196.2[M+1]。

采用实施例2中合成路线，将第三步原料化合物2c替换为原料粗品化合物29g，制得标题化合物29(10mg)。

MS m/z(ESI)：432.2[M+1]。

¹H NMR(400MHz，CD₃OD)δ7.49-7.44(m，1H)，7.19-7.14(m，2H)，4.96(s，2H)，4.87-4.83(m，1H)，4.20-4.17(m，2H)，4.01-3.96(m，2H)，2.40(s，3H)，1.42-1.39(m，3H)。

实施例30

N¹-((3-甲基氧杂环丁烷-3-基)-N⁷-(3，4，5-三氟苯基)-5，6-二氢咪唑并[1，5-a]吡嗪-1，7(8H)-二甲酰胺30

采用实施例1的合成路线，将第五步原料化合物1e替换为原料化合物13c，制得标题化合物30(5mg)。

MS m/z(ESI)：410.0[M+1]

¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δ8.39(s，1H)，7.80(s，1H)，7.67(s，1H)，7.31-7.26(m，2H)，5.02(s，2H)，4.54-4.51(d，2H)，4.23-4.20(m，2H)，3.96-3.93(m，2H)，3.57-3.53(m，2H)，1.72(s，3H)。

实施例31

(R)-N⁵-(3，4-二氟苯基)-N³-(1，1，1-三氟丙-2-基)-6，7-二氢-[1，2，3]三氮唑并[1，5-a]吡嗪-3，5(4H)-二甲酰胺31

采用实施例17的合成路线，将第一步原料化合物17f替换为原料化合物7d，制得标题化合物31(20mg)。

MS m/z(ESI)：419.1[M+1]。

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ8.11(s，1H)，8.09(s，1H)，7.56-7.52(m，1H)，7.13-7.08(m，1H)，7.06(br，1H)，5.35-5.32(m，1H)，4.99(s，1H)，4.94(s，1H)，4.68(s，2H)，2.26(t，2H)，1.42(d，3H)。

实施例32

(R)-N⁷-(2，6-二氟吡啶-4-基)-N¹-(1，1，1-三氟丙-2-基)-5，6-二氢咪唑并[1，5-a]吡嗪-1，7(8H)-二甲酰胺32

采用实施例16的合成路线，将第二步原料化合物15c替换为原料化合物3c，制得标题化合物32(25mg)。

MS m/z(ESI)：419.1[M+1]

¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δ8.79(s，1H)，8.33(s，1H)，7.70(s，1H)，7.10(s，2H)，5.08(s，2H)，4.84-4.80(m，1H)，4.26-4.23(m，2H)，3.99-3.96(m，2H)，1.44(d，3H)。

实施例33

(S)-6-甲基-N⁵-(3，4，5-三氟苯基)-N³-((R)-1，1，1-三氟丙-2-基)-6，7-二氢吡唑并[1，5-a]吡嗪-3，5(4H)-二甲酰胺33

采用实施例7的合成路线，将第三步原料化合物7d替换为化合物17f，制得标题化合物33(20mg)。

MS m/z(ESI)：450.0[M+1]。

¹H NMR(400MHz，CD₃OD)δ8.09(s，1H)，7.30-7.27(m，2H)，5.36(d，1H)，4.98-4.95(m，1H)，4.83-4.80(m，1H)，4.70(d，1H)，4.31-4.27(m，1H)，4.20(d，1H)，1.41(d，3H)，1.22(d，3H)。

实施例34

(S)-N⁵-(3，4-二氟苯基)-6-甲基-N³-((S)-四氢呋喃-3-基)-6，7-二氢吡唑并[1，5-a]吡嗪-3，5(4H)-二甲酰胺34

将粗品化合物7f(150mg，446.04μmol)、O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N，N，N′，N′-四甲基脲六氟磷酸酯(157.41mg，669.06μmol)、N，N-二异丙基乙胺(230.58mg，1.78mmol)溶解于3mL N，N-二甲基甲酰胺中，反应10分钟，加入化合物27a(82.3mg，669.06μmol)，搅拌反应3小时。反应液加入30mL水，乙酸乙酯(30mL×2)萃取，合并有机相，减压浓缩，所得残余物用薄层色谱法以展开剂体系C纯化，所得粗品用高效液相制备(Waters-2767，洗脱体系：碳酸氢铵，水，乙腈)纯化，得标题化合物34(30mg，产率：16.54％)。

MS m/z(ESI)：406.2[M+1]。

¹H NMR(400MHz，CD₃OD)δ8.05(s，1H)，7.52-7.47(m，1H)，7.20-7.17(m，2H)，5.33(d，1H)，5.00-4.99(m，1H)，4.70(d，1H)，4.56-4.54(m，1H)，4.34-4.32(m，1H)，4.21-4.20(m，1H)，4.04-3.95(m，2H)，3.85-3.83(m，1H)，3.73-3.72(m，1H)，2.32-2.27(m，1H)，2.01-1.94(m，3H)，1.24(d，1H)。

实施例35

N¹-(3-甲基四氢呋喃-3-基)-N⁷-(3，4，5-三氟苯基)-5，6-二氢咪唑并[1，5-a]吡嗪-1，7-(8H)-二甲酰胺35

采用实施例1的合成路线，将第五步原料化合物1e替换为原料3-甲基四氢呋喃-3-胺(上海毕得医药科技有限公司)，制得标题化合物35(16mg)。

MS m/z(ESI)：424.1[M+1]。

1H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δ8.87(s，1H)，8.35(s，1H)，7.67(s，1H)，7.31-7.27(m，2H)，5.03(s，2H)，4.21(t，2H)，4.10(d，1H)，3.96-3.92(m，4H)，3.75(d，1H)，2.46-2.41(m，1H)，2.09-2.01(m，1H)，1.59(s，3H)。

实施例36

(R)-N²-(3，4-二氟苯基)-N⁸-(1，1，1-三氟丙-2-基)-3，4-二氢吡咯并[1，2-a]吡嗪-2，8(1H)-二甲酰胺36

氢气氛下，将吡咯并[1，2-a]吡嗪-8-羧酸甲酯36a(500mg，2.84mmol，采用专利申请“US2015/51189 A1”公开的方法制备而得)和钯碳(698.38mg，2.84mmol)于10mL甲醇中，搅拌16小时。反应液过滤，减压浓缩，得粗品1，2，3，4-四氢吡咯并[1，2-a]吡嗪-8-羧酸甲酯36b(511mg，产率：100％)。

MS m/z(ESI)：181.2[M+1]。

采用实施例2的合成路线，将第三步原料化合物2c替换为原料粗品化合物36b，制得标题化合物36(10mg)。

MS m/z(ESI)：417.1[M+1]。

¹H NMR(400MHz，CD₃OD)δ7.51-7.46(m，1H)，7.19-7.15(m，2H)，6.71-6.70(m，2H)，5.00(s，2H)，4.85-4.82(m，1H)，4.11-4.09(m，2H)，3.94-3.91(m，2H)，1.39(d，3H)。

实施例37

(R)-N⁷-(2-(二氟甲基)吡啶-4-基)-N¹-(1，1，1-三氟丙-2-基)-5，6-二氢咪唑并[1，5-a]吡嗪-1，7(8H)-二甲酰胺37

第一步

7-((2-(二氟甲基)吡啶-4-基)氨基甲酰基)-5，6，7，8-四氢咪唑并[1，5-a]吡嗪-1-羧酸乙酯37c

将2-(二氟甲基)吡啶-4-胺37a(73.83mg，512.25μmol，采用专利申请“WO2015/118057A1”公开的方法制备而得)、5，6，7，8-四氢咪唑并[1，5-a]吡嗪-1-羧酸乙酯37b(100mg，512.25μmol，上海毕得医药科技有限公司)和三乙胺(103.67mg，1.02mmol)溶解于10mL四氢呋喃中，于0℃，加入双(三氯甲基)碳酸酯(60.80mg，204.09μmol)，缓慢升至室温，搅拌反应3小时。反应液减压浓缩，所得残余物用薄层色谱法以展开剂体系A纯化，得标题化合物37c(120mg，产率：64.2％)。

MS m/z(ESI)：366.2[M+1]。

第二步

将化合物37c(100mg，273.72μmol)和化合物1e(30.95mg，273.72μmol)溶解于10mL四氢呋喃中，于0℃，滴加1mL的1M双三甲基硅基胺基锂四氢呋喃溶液，加毕，缓慢升至室温，搅拌反应6小时。反应液减压浓缩，所得残余物用高效液相制备(Waters 2767-SQDetecor2，洗脱体系：碳酸氢铵，水，乙腈)纯化，得标题化合物37(20mg，产率：16.9％)。

MS m/z(ESI)：433.2[M+1]。

¹H NMR(400MHz，CD₃OD)δ8.42(d，1H)，7.88-7.87(m，1H)，7.70-7.66(m，2H)，6.80-6.53(m，1H)，5.10(s，2H)，4.83-4.81(m，1H)，4.26-4.24(m，2H)，4.00-3.98(m，2H)，1.44(d，3H)。

实施例38

(S)-N³，N⁵-双(3，4-二氟苯基)-6-甲基-6，7-二氢吡唑并[1，5-a]吡嗪-3，5(4H)-二甲酰胺38

将粗品化合物7f(80mg，237.89μmol)、O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N，N，N′，N′-四甲基脲六氟磷酸酯(83.95mg，356.83μmol)、N，N-二异丙基乙胺(92.23mg，713.66μmol)溶解于3mL N，N-二甲基甲酰胺中，反应10分钟，加入化合物2d(46.07mg，356.83μmol)，搅拌16小时。反应液加入10mL水，乙酸乙酯萃取(40mL×2)，合并有机相，有机相减压浓缩，所得残余物用薄层色谱法以展开剂体系C纯化，所得粗品用高效液相制备(Waters-2767，洗脱体系：碳酸氢铵，水，乙腈)纯化，得标题化合物38(10mg，产率：9.4％)。

MS m/z(ESI)：448.1[M+1]。

¹H NMR(400MHz，CD₃OD)δ8.18(s，1H)，7.83-7.81(m，1H)，7.52-7.50(m，1H)，7.41-7.39(m，1H)，7.24-7.17(m，3H)，5.39(d，1H)，5.04-5.01(m，1H)，4.75(d，1H)，4.38-4.36(m，1H)，4.22(d，1H)，1.26(d，3H)。

实施例39

(S)-N⁵-(3，4-二氟苯基)-6-甲基-N³-((R)-1，1，1-三氟丙-2-基)-6，7-二氢-[1，2，3]三氮唑并[1，5-a]吡嗪-3，5(4H)-二甲酰胺39

第一步

(S)-4-((1-羟丙基-2-基)(4-甲氧基苄基)氨基))丁基-2炔-1-基乙酸酯39b

将化合物6a(3.00g，15.00mmol)溶解于60mL二氧六环中，再加4-氯丁基-2-炔-1-基乙酸酯39a(5.73g，39.00mmol，采用公知的方法“Journal of Medicine Chemistry，2014，57(9)，3687-3706”制备)，加入三乙胺(4.7g，46.00mmol)，60℃搅拌反应12小时。反应液过滤，滤液减压浓缩，所得残余物用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系A纯化，得标题化合物39b(2.20g，产率：42.2％)。

MS m/z(ESI)：306.2[M+1]。

第二步

(S)-4-((1-氯丙基-2-基)(4-甲氧基苄基)氨基)丁基-2炔-1-基乙酸酯39c

将化合物39b(2.20g，7.20mmol)和吡啶(854mg，10.08mmol)溶解于30mL二氯甲烷中，冰浴下缓慢滴加入氯化亚砜(1.50g，12.60mmol)，缓慢升至室温，搅拌反应2小时。反应液中加入100mL二氯甲烷，用水洗涤(50mL×2)，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，得标题化合物39c(2.20g)，产物不经纯化直接用于下一步反应。

第三步

(S)-(5-(4-甲氧基苄基)-6-甲基-4，5，6，7-四氢-[1，2，3]三氮唑并[1，5-a]吡嗪-3-基)甲基乙酸酯39d

将粗品化合物39c(2.20g，6.79mmol)溶解于20mL N，N-二甲基甲酰胺中，加入叠氮化钠(574mg，8.83mmol，)，80℃反应12小时。反应液冷却至室温，加入50mL乙酸乙酯，用水洗涤(20mL×2)，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩所得残余物用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系A纯化，得标题化合物39d(1.30g，产率：57.9％)。

MS m/z(ESI)：331.1[M+1]。

第四步

(S)-(6-甲基-4，5，6，7-四氢-[1，2，3]三氮唑并[1，5-a]哌嗪-3-基)甲基乙酸酯三氟乙酸盐39e

将化合物39d(1.30g，2.33mmol)溶解于5mL三氟乙酸中，微波加热至100℃，反应5分钟。反应液冷却至室温，减压浓缩，得粗品标题化合物39e(1.28g)，产物不经纯化直接用于下一步反应。

第五步

(S)-(5-((3，4-二氟苯基)氨基甲酰基)-6-甲基-4，5，6，7-四氢-[1，2，3]三氮唑并[1，5-a]吡嗪-3-基)甲基乙酸酯39f

将粗品化合物39e(200mg，0.62mmol)、化合物2d(228mg，1.90mmol)和三乙胺(290mg，2.86mmol)溶解于10mL四氢呋喃中，冰水浴下，加入双(三氯甲基)碳酸酯(87mg，0.3mmol)，搅拌反应3小时。反应液减压浓缩，残余物用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系C纯化，得标题化合物39f(90mg，产率：40.1％)。

MS m/z(ESI)：366.1[M+1]。

采用实施例17的合成路线，将第二步原料化合物17b替换为化合物39f制得标题化合物39(20mg)。

MS m/z(ESI)：433.1[M+1]。

¹H NMR(400MHz，CD₃OD)δ7.50-7.48(m，1H)，7.18-7.16(m，2H)，5.43(d，1H)，5.08-5.06(m，1H)，4.89-4.87(m，1H)，4.74(d，1H)，4.60(d，1H)，4.49-4.46(m，1H)，1.49(d，3H)，1.21(d，3H)。

实施例40

(S)-N⁵-(4-氟-3-甲基苯基-)-6-甲基-N³-((R)-1，1，1-三氟丙-2-基)-6，7-二氢-[1，2，3]三氮唑并[1，5-a]吡嗪-3，5(4H)-二甲酰胺40

采用实施例39的合成路线，第五步原料化合物2d替换为3-甲基-4氟苯胺40a，制得标题化合物40(25mg)。

MS m/z(ESI)：429.1[M+1]

¹H NMR(400MHz，CD₃OD)δ7.29-7.26(m，1H)，7.21-7.20(m，1H)，6.99-6.94(m，1H)，5.45-5.41(d，1H)，5.09-5.08(m，2H)，4.76-4.71(d，1H)，4.63-4.59(m，1H)，4.52-4.51(d，1H)，2.27-2.26(d，3H)，1.48-1.46(d，3H)，1.23-1.22(d，3H)。

实施例41

(S)-N⁷-(3，4-二氟苯基)-6-甲基-N¹-((S)-1，1，1-三氟丙-2-基)-5，6-二氢咪唑并[1，5-a]吡嗪-1，7(8H)-二甲酰胺41

采用实施例6的合成路线，将原料化合物1e替换为原料化合物(2S)-1，1，1-三氟丙基-2-胺盐酸盐(上海毕得医药科技有限公司)，制得标题化合物41(110mg)。

MS m/z(ESI)：432.1[M+1]。

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.54-7.51(m，1H)，7.50(s，1H)，7.21-7.02(m，3H)，6.83(s，1H)，5.26-5.16(m，1H)，5.15-5.04(m，1H)，4.95-4.92(m，1H)，4.86-4.80(m，1H)，4.28-4.22(m，1H)，4.01-4.05(m，1H)，1.48(d，3H)，1.20(d，3H)。

实施例42

(R)-N⁵-(3，4-二氟苯基)-7-甲基-N³-((R)-1，1，1-三氟丙-2-基)-6，7-二氢[1，2，3]三氮唑并[1，5-a]吡嗪-3，5(4H)-二甲酰胺42

采用实施例39的合成路线，将第一步原料化合物6a替换化合物(2R)-1-((4-甲氧基苄基)氨基)丙-1-醇(采用公知的方法“Organic and Biomolecular Chemistry，2014，12，16，2584-2591”制备而得)，制得标题化合物42(20mg)。

MS m/z(ESI)：433.1[M+1]。

¹H NMR(400MHz，CD₃OD)δ7.50-7.48(m，1H)，7.15-7.12(m，2H)，5.16(d，1H)，5.02(d，1H)，4.77-4.75(m，1H)，4.13-4.10(m，1H)，3.77(m，1H)，3.06-3.03(m，1H)，1.67(d，3H)，1.44(d，3H)。

实施例43

(S)-N⁵-(3，4-二氟苯基)-6-甲基-N³-((S)-1，1，1-三氟丙-2-基)-6，7-二氢[1，2，3]三氮唑并[1，5-a]吡嗪-3，5(4H)-二甲酰胺43

采用实施例17的合成路线，将第二步原料化合物17b替换为化合物39f，原料化合物1e替换为原料化合物(2S)-1，1，1-三氟丙基-2-胺盐酸盐，制得标题化合物43(30mg)。

MS m/z(ESI)：433.3[M+1]

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.53-7.50(m，1H)，7.30(d，1H)，7.15(dd，1H)，7.06-7.04(m，1H)，6.84(s，1H)，5.37-5.32(m，1H)，5.27(d，1H)，4.89-4.85(m，2H)，4.61(d，1H)，4.52-4.48(m，1H)，1.50(d，3H)，1.26(d，3H)。

实施例44

(R)-N⁵-(3-氰基-4-氟苯基)-7-甲基-N³-((R)-1，1，1-三氟丙-2-基)-6，7-二氢[1，2，3]三氮唑并[1，5-a]吡嗪-3，5(4H)-二甲酰胺44

采用实施例39的合成路线，将第一步原料化合物6a替换为化合物(2R)-1-((4-甲氧基苄基)氨基)丙-1-醇，第五步原料化合物2d替换为化合物3d，制得标题化合物44(15mg)。

MS m/z(ESI)：440.3[M+1]。

¹H NMR(400MHz，CD₃OD)δ7.86-7.84(m，1H)，7.73-7.70(m，1H)，7.29(t，1H)，5.19(d，1H)，5.05(d，1H)，4.85-4.82(m，1H)，4.12(d，1H)，3.77-3.73(m，1H)，3.64-3.62(m，1H)，1.69(d，3H)，1.46(d，3H)。

实施例45

(S)-N⁵-(3-氰基-4-氟苯基)-6-甲基-N³-((R)-1，1，1-三氟丙-2-基)-6，7-二氢[1，2，3]三氮唑并[1，5-a]吡嗪-3，5(4H)-二甲酰胺45

第一步

(S)-(5-((3-氰基-4-氟苯基)氨基甲酰基)-6-甲基-4，5，6，7-四氢-[1，2，3]三氮唑并[1，5-a]吡嗪-3-基)甲基乙酸酯45a

将粗品化合物39e(400mg，1.24mmol)、化合物3d(450mg，3.80mmol)和三乙胺(580mg，5.80mmol)溶解于20mL四氢呋喃中，冰水浴下，加入双(三氯甲基)碳酸酯(180mg，0.6mmol)，搅拌反应3小时。反应液减压浓缩，残余物用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系C纯化，得标题化合物45a(195mg，产率：40.1％)。

MS m/z(ESI)：373.1[M+1]。

第二步

(S)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-3-(羟甲基)-6-甲基-6，7-二氢-[1，2，3]三氮唑并[1，5-a]吡嗪-5(4H)-甲酰胺45b

将化合物45a(190mg，0.51mmol)溶解于5mL甲醇和水(V∶V＝4∶1)的混合溶剂中，加入氢氧化锂(108mg，2.57mmol)，搅拌2小时。反应液中加水20mL，乙酸乙酯萃取(15mL×3)，合并有机相，减压浓缩，得粗品标题化合物45b(120mg)，产物不经纯化直接用于下一步反应。

MS m/z(ESI)：331.2[M+1]。

第三步

(S)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-3-甲酰基-6-甲基-6，7-二氢-[1，2，3]三氮唑并[1，5-a]吡嗪-5(4H)-甲酰胺45c

将粗品化合物45b(100mg，0.3mmol)溶解于5mL二氯甲烷中，加入氯铬酸吡啶盐(138mg，0.64mmol)和硅胶(140mg，100-200目)，搅拌3小时。过滤，减压浓缩，所得残余物用薄层色谱法以展开剂体系A纯化，得标题化合物45c(60mg，产率：43.1％)。

MS m/z(ESI)：329.5[M+1]。

第四步

(S)-(5-((3-氰基-4-氟苯基)氨基甲酰基)-6-甲基-4，5，6，7-四氢-[1，2，3]三氮唑并[1，5-a]吡嗪-3-羧酸45d

将化合物45c(30mg，0.1mmol)溶解于5mL乙腈和水混合溶剂中(V∶V＝3∶2)，加入氨基磺酸(20mg，0.2mmol)，搅拌10分钟，加入亚氯酸钠(20mg，0.2mmol)，搅拌2小时。依次加入0.5mL饱和亚硫酸钠溶液和10mL水，乙酸乙酯萃取(10mL×3)，合并有机相，减压浓缩，得粗品化合物45d(25mg)，产物不经纯化直接用于下一步反应。

MS m/z(ESI)：345.2[M+1]。

第五步

S)-N⁵-(3-氰基-4-氟苯基)-6-甲基-N³-((R)-1，1，1-三氟丙-2-基)-6，7-二氢[1，2，3]三氮唑并[1，5-a]吡嗪-3，5(4H)-二甲酰胺45

将粗品化合物45d(20mg，58.0μmol)、O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N，N，N′，N′-四甲基脲六氟磷酸酯(105mg，146.5μmol)、N，N-二异丙基乙胺(150mg，366.2μmol)溶解于3mL N，N-二甲基甲酰胺中，反应10分钟，加入化合物1e(50mg，110μmol)，搅拌反应3小时。反应液减压浓缩，所得残余物用薄层色谱法以展开剂体系C纯化，得标题化合物45(8mg，产率：31.3％)。

MS m/z(ESI)：440.3[M+1]。

¹H NMR(400MHz，CD₃OD)δ7.87-7.84(m，1H)，7.73-7.70(m，1H)，7.29(t，1H)，5.45(t，1H)，5.08-5.06(m，1H)，4.92-4.89(m，1H)，4.77(d，1H)，4.62(d，1H)，4.50(d，1H)，1.46(d，3H)，1.21(d，3H)。

实施例46

(S)-N⁷-(3-氰基-4-氟苯基)-6-甲基-N¹-(1-甲基环丁基)-5，6-二氢咪唑并[1，5-a]吡嗪-1，7(8H)-二甲酰胺46

采用实施例11的合成路线，将第三步原料化合物1e替换为化合物1-甲基环丁基1-胺(上海毕得医药科技有限公司)，制得标题化合物46(20mg)。

MS m/z(ESI)：411.4[M+1]。

¹H NMR(400MHz，CD₃OD)δ7.86-7.84(m，1H)，7.72-7.70(m，1H)，7.65(s，1H)，7.28(t，1H)，5.26(d，1H)，4.92-4.89(m，1H)，4.78(d，1H)，4.20-4.17(m，2H)，2.45-2.43(m，2H)，2.10-2.07(m，2H)，1.92-1.90(m，2H)，1.55(s，3H)，1.20(d，3H)。

实施例47

(R)-N⁷-(3-氰基-4-氟苯基)-5-甲基-N¹-((R)-1，1，1-三氟丙-2-基)-5，6-二氢咪唑并[1，5-a]吡嗪-1，7(8H)-二甲酰胺47

采用实施例6的合成路线，将第一步原料化合物6a替换为原料化合物(2S)-1-((4-甲氧基苄基)氨基)丙-1-醇，第四步原料化合物2d替换为原料化合物3d，制得标题化合物47(12mg)。

MS m/z(ESI)：439.2[M+1]

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.88(dd，1H)，7.62-7.61(m，1H)，7.57(s，1H)，7.22-7.17(m，3H)，5.20(d，1H)，5.03(d，1H)，4.84-4.80(m，1H)，4.42-4.40(m，1H)，4.25-4.21(dd，1H)，3.58-3.53(dd，1H)，1.64(d，3H)，1.47(d，3H)。

实施例48

(S)-N⁷-(3-氰基-4-氟苯基)-6-甲基-N¹-(1-甲基环丙基)-5，6-二氢咪唑并[1，5-a]吡嗪-1，7(8H)-二甲酰胺48

采用实施例11的合成路线，将第三步原料化合物1e替换为化合物1-甲基环丙基1-胺(上海毕得医药科技有限公司)，制得标题化合物48(20mg)。

MS m/z(ESI)：397.3[M+1]。

¹H NMR(400MHz，CD₃OD)δ7.86-7.84(m，1H)，7.72-7.70(m，1H)，7.63(s，1H)，7.29(t，1H)，5.28(d，1H)，4.91-4.89(m，1H)，4.80(d，1H)，4.20-4.17(m，2H)，1.44(s，3H)，1.20(d，3H)，0.71-0.68(m，2H)，0.68-0.66(m，2H)。

实施例49

(R)-N⁵-(3-4-二氟苯基-)-6-甲基-N³-((R)-1，1，1-三氟丙-2-基)-6，7-二氢咪唑并[1，5-a]吡嗪-3，5(4H)-二甲酰胺49

采用实施例7的合成路线，将第一步原料化合物7a替换为原料化合物(R)-3-碘-6-甲基-6，7-二氢吡唑并[1，5-a]吡嗪-5(4H)-羧酸叔丁酯(采用专利申请“WO2017198744A1”公开的方法制备)，制得标题化合物49(20mg)

MS m/z(ESI)：432.2[M+1]

¹H NMR(400MHz，CD₃OD)δ8.11(m，1H)，7.52-7.47(m，1H)，7.21-7.16(m，2H)，5.38-5.33(d，2H)，5.02-4.99(m，1H)，4.74-4.69(d，1H)，4.36-4.33(m，1H)，4.23-4.19(d，1H)，1.43-1.42(d，3H)，1.27-1.25(d，3H)。

实施例50

(S)-N¹-(叔丁基)-N⁷-(3-氰基-4-氟苯基-)-6-甲基-5，6-二氢咪唑并[1，5-a]吡嗪-1，7(8H)-二甲酰胺50

采用实施例11的合成路线，第三步原料化合物1e替换为原料化合物叔丁胺(国药集团化学试剂有限公司)制得标题化合物50(180mg)。

MS m/z(ESI)：399.2[M+1]

¹H NMR(400MHz，CD₃OD)δ7.90-7.88(m，1H)，7.75-7.67(m，1H)，7.33(s，1H)，7.31-7.29(m，1H)，5.28-5.24(d，1H)，4.94(m，1H)，4.81-4.77(m，1H)，4.26-4.20(m，2H)，1.48(d，9H)，1.22-1.20(d，3H)。

实施例51

(S)-N⁷-(3-氰基-4-氟苯基)-N¹-((R)-1-氟丙-2-基)-6-甲基-5，6-二氢咪唑并[1，5-a]吡嗪-1，7(8H)-二甲酰胺51

采用实施例11的合成路线，第三步原料化合物1e替换为原料化合物(S)-2-氟-1-甲基-乙胺盐酸盐(上海毕得医药科技有限公司)，制得标题化合物51(20mg)。

MS m/z(ESI)：403.2[M+1]

¹H NMR(400MHz，CD₃OD)δ7.89-7.87(m，1H)，7.77-7.74(m，1H)，7.73(s，1H)，7.31-7.29(m，1H)，5.31-5.27(d，1H)，4.94-4.92(m，1H)，4.83-4.78(d，1H)，4.52-4.50(d，1H)，4.40-4.39(m，2H)，4.25-4.22(m，2H)，1.32-1.30(d，3H)，1.22-1.20(d，3H)。

实施例52

(S)-N⁷-(3-氰基-4-氟苯基)-6-甲基-N¹-((S)-1，1，1-三氟丙-2-基)-5，6-二氢咪唑并[1，5-a]吡嗪-1，7(8H)-二甲酰胺52

采用实施例11的合成路线，将第三步原料化合物1e替换为原料化合物(2S)-1，1，1-三氟丙基-2-胺盐酸盐，制得标题化合物52(20mg)。

MS m/z(ESI)：439.2[M+1]

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.91(dd，1H)，7.63-7.62(m，1H)，7.50(s，1H)，7.20-7.14(m，3H)，5.22-5.16(m，2H)，4.95(d，1H)，4.85-4.83(m，1H)，4.26-4.23(m，1H)，4.11-4.08(dd，1H)，1.48(d，3H)，1.26(d，3H)。

实施例53

(R)-N⁷-(3，4-二氟苯基-)-6-甲基-N¹-((R)-1，1，1-三氟丙-2-基)-5，6-二氢咪唑并[1，5-a]吡嗪-1，7(8H)-二甲酰胺53

采用实施例6的合成路线，将第一步原料6a替换为原料(R)-2-((4-甲氧基苄基)氨基)丙-1-醇(采用公知的方法“Bioorganic&Medicinal Chemistry Letters，2015，25(5)，1086-1091”制备而得)，制得标题化合物53(90mg)

MS m/z(ESI)：432.2[M+1]

¹H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.71(s，1H)，7.52-7.47(m，1H)，7.21-7.17(m，2H)，5.31-5.27(d，1H)，4.94-4.92(m，1H)，4.76-4.84(m，2H)，4.24-4.22(m，2H)，1.45-1.43(d，3H)，1.23-1.21(d，3H)。

实施例54

(R)-N⁷-(3-氰基-4-氟苯基-)-6-甲基-N¹-((R)-1，1，1-三氟丙-2-基)-5，6-二氢咪唑并[1，5-a]吡嗪-1，7(8H)-二甲酰胺54

采用实施例6的合成路线，将第一步原料化合物6a替换为原料(R)-2-((4-甲氧基苄基)氨基)丙-1-醇，将第四步原料化合物2d替换为3d，制得标题化合物54(88mg)。

MS m/z(ESI)：439.2[M+1]

1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.89-7.87(m，1H)，7.75-7.73(m，1H)，7.71(s，1H)，7.33-7.29(m，1H)，5.32-5.28(d，1H)，4.95-4.93(m，1H)，4.85-4.82(m，2H)，4.25-4.22(m，2H)，1.45-1.43(d，3H)，1.23-1.22(d，3H)。

实施例55

(R)-N⁷-(3-氰基-4-氟苯基)-6-甲基-N¹-((S)-1，1，1-三氟丙-2-基)-5，6-二氢咪唑并[1，5-a]吡嗪-1，7(8H)-二甲酰胺55

采用实施例6的合成路线，将第一步原料化合物6a替换为原料(R)-2-((4-甲氧基苄基)氨基)丙-1-醇，将第四步原料化合物2d替换为3d，将第五步原料化合物1e替换为原料化合物(2S)-1，1，1-三氟丙基-2-胺盐酸盐，制得标题化合物55(20mg)。

MS m/z(ESI)：439.2[M+1]

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.86(dd，1H)，7.70-7.65(m，2H)，7.30-7.26(m，3H)，5.30(d，1H)，4.94-4.93(m，1H)，4.81-4.76(m，2H)，4.26-4.17(m，2H)，1.43(d，3H)，1.20(d，3H)。

实施例56

(S)-N⁷-(3-氰基-4-氟苯基)-5-甲基-N¹-((R)-1，1，1-三氟丙-2-基)-5，6-二氢咪唑并[1，5-a]吡嗪-1，7(8H)-二甲酰胺56

采用实施例6的合成路线，将第一步原料化合物6a替换为原料化合物(S)-1-((4-甲氧基苄基)氨基)丙-2-醇(采用公知的方法“Organic and Biomolecular Chemistry，2014，12，16，2584-2591”制备而得)，第四步原料化合物2d替换为原料化合物3d，制得标题化合物56(10mg)。

MS m/z(ESI)：439.2[M+1]

1H NMR(400MHz，CD₃OD)δ7.88-7.86(m，1H)，7.83(s，1H)，7.76-7.72(m，1H)，7.33-7.28(m，1H)，5.16-5.11(d，1H)，5.03-4.98(m，1H)，4.85-4.81(m，2H)，4.04-4.00(m，1H)，3.72-3.66(m，1H)，1.60-1.56(d，3H)，1.44-1.42(d，3H)。

实施例57

N⁵-(3-氰基-4-氟苯基-)-7-甲基-N³-((R)-1，1，1-三氟丙-2-基)-6，7-二氢-[1，2，3]三氮唑并[1，5-a]吡嗪-3，5(4H)-二甲酰胺57

采用实施例39的合成路线，将第一步原料化合物6a替换为原料化合物1-((4-甲氧基苄基)氨基)丙-2-醇(采用公知的方法“Organic and Biomolecular Chemistry，2014，12，16，2584-2591”制备而得)，第五步原料化合物2d替换为原料化合物3d，制得标题化合物57(220mg)。

MS m/z(ESI)：440.2[M+1]

¹H NMR(400MHz，CD₃OD)δ7.85-7.87(m，1H)，7.72-7.75(m，1H)，7.28-7.33(m，1H)，5.01-5.06(d，1H)，5.16-5.21(d，1H)，4.80-4.81(m，2H)，4.13-4.17(m，1H)，3.75-3.80(m，1H)，1.69-1.70(d，3H)，1.18-1.21(d，3H)。

实施例58

(S)-N⁷-(4-氟-3-甲基苯基-)-6-甲基-N¹-((R)-1，1，1-三氟丙-2-基)-5，6-二氢咪唑并[1，5-a]吡嗪-1，7(8H)-二甲酰胺58

采用实施例6的合成路线，将第四步原料化合物2d替换为原料化合物4-氟-3-甲基苯胺(上海毕得医药科技有限公司)，制得标题化合物58(14mg)。

MS m/z(ESI)：427.9[M+1]

¹H NMR(400MHz，CD₃OD)7.71(s，1H)，7.29-7.27(m，1H)，7.22-7.20(m，1H)，6.99-6.94(m，1H)，5.30-5.25(d，1H)，4.94-4.92(m，1H)，4.81-4.75(m，2H)，4.24-4.21(m，2H)，2.27-2.26(d，3H)，1.45-1.43(d，3H)，1.20-1.19(d，3H)。

实施例59

(S)-N-(3，4-二氟苯基)-6-甲基-1-(吡咯烷-1-羰基)-5，6-二氢咪唑并[1，5-a]吡嗪-7(8H)-甲酰胺59

采用实施例11合成路线，将第一步原料化合物3d替换为化合物2d，将第三步原料化合物1e替换为原料化合物吡咯烷(国药集团化学试剂有限公司)，制得标题化合物59(10mg)。

MS m/z(ESI)：389.8[M+1]。

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.69(s，1H)，7.52-7.47(m，1H)，7.20-7.16(m，3H)，5.26(d，1H)，4.93-4.90(m，1H)，4.77(d，1H)，4.23-4.21(m，2H)，4.04-4.01(m，2H)，3.63-3.60(m，2H)，2.01-1.93(m，4H)，1.22(d，3H)。

生物学评价

测试例1、本发明化合物体外抗HBV活性测试(细胞内HBV DNA定量分析)

一、实验材料及仪器

1.QIAamp 96 DNA QIAcube HT Kit(Qiagen)

2.QIAcube HT plasticware(Qiagen)

3.乙型肝炎病毒核酸定量检测试剂盒(泰普生物)

4.DNA提取设备(QIAcube)(Qiagen)

5.QuantStudio 6 Fiex(ABI，ThermFisher)

6.酶标仪(BMG)

7.HepG2.2.15细胞(上海瑞鹿生物技术有限公司)

二、实验步骤

HepG2.2.15细胞是整合了HBV基因组的稳定表达细胞株，可通过复制、转录、翻译、并包装成带有HBV DNA的病毒颗粒分泌到细胞外。本研究采用定量PCR的方法对HepG2.2.15体外增殖产生的HBV DNA进行定量分析，筛选本发明化合物通过对HBV衣壳蛋白装配抑制进而抑制HBV DNA复制的活性。

HepG2.2.15细胞在DMEM/高葡萄糖培养基(10％FBS，400μg/ml G418)中培养，每3天传代一次。实验当天以新鲜细胞培养基制取细胞悬液，以40,000细胞/孔96孔板(Corning，#3599)，5％二氧化碳，于37℃培养。第二天先将化合物溶解在纯DMSO中浓度为20mM，再用DMSO配制成首个浓度2mM，并以4倍依次稀释成8个浓度，设置对照的孔加入90μlDMSO。用含DMEM/高葡萄糖培养基稀释200倍。取出第一天接种的细胞培养板，用负压吸取装置吸出孔板内的培养基，再将配制好的含有各浓度的化合物培养基分别加入各孔中，以200μl/孔，于37℃培养72小时。第五天，用含有同样化合物的新鲜培养基对该培养细胞进行换液，方法等同第二天，再于37℃培养72小时。第八天，取出细胞培养板，以300g离心3分钟，收集培养上清液200μl/孔。采用Qiagen自动DNA提取设备进行细胞培养上清液内HBV DNA提取，具体方法参考试剂和仪器使用说明。最后以100μl/孔，用DNA洗脱缓冲液洗脱提取的DNA。采用泰普生物的乙型肝炎病毒核酸定量检测试剂盒对提取的DNA进行HBV DNA定量PCR分析，具体方法参考试剂盒说明。定量标准曲线采用试剂盒自带标准样品，平行进行实验。根据标准曲线对各个样品进行定量换算。最后用Graphpad Prism软件根据化合物各浓度与相应的DNA值计算化合物的EC₅₀值。Emax为化合物最大限度抑制HBV DNA复制的效应值。

本发明化合物通过对HBV衣壳蛋白装配抑制进而抑制HBV DNA复制体外活性通过以上的试验进行测定，测得的EC₅₀值见表1。

表1本发明化合物抗HBV活性测试(细胞内HBV DNA定量分析)的EC₅₀值

结论：本发明化合物对HBV DNA复制具有明显的抑制作用，与对照例59相比，具有显著优势。对照例59与本申请化合物结构上主要区别为酰胺基中的氨基为三级胺，由此可见本申请化合物中酰胺基中的二级胺对生物活性有显著提升。

测试例2、本发明化合物对HepG2细胞体外增殖的影响

一、实验材料及仪器

1.HepG2细胞(ATCC)

2.CellTiter-Glo^TM细胞增殖试剂盒(Promega)

3.自动移液工作站(Bravo)：Agilent Technologies公司

4.酶标仪(VICTOR 3)：PerkinElmer公司

5.CO₂培养箱(Fisher Scientific)

6.离心机(Fisher Scientific)

二、实验步骤

取对数生长期的HepG2细胞，用胰蛋白酶消化制备细胞悬液，以6,000细胞/孔96孔板(底透白色96孔板，PerkinElmer)，5％二氧化碳，于37℃培养16-20小时。第二天，化合物溶解在纯DMSO中浓度为20mM，利用自动移液工作站(Bravo)对化合物进行梯度稀释，3倍稀释，每个化合物设8个浓度点，对照的孔为DMSO；接着用EMEM(含10％FBS)培养基对DMSO配制的各浓度点化合物进行200倍稀释。取出第一天接种的细胞培养板，用负压吸取装置吸出孔板内的培养基，再将配制好的含有各浓度的化合物培养基分别加入各孔中，以100μl/孔，于37℃培养72小时。第五天，取出96孔细胞培养板，向各孔中加入新鲜配制的CellTiter Glo，以100μl/孔，放置5-10分钟，用白色封底膜(PerkinElmer)将该96孔板底部封膜，置于酶标仪中，用酶标仪测定Luminescence信号。用Graphpad Prism软件根据化合物各浓度与相应的增殖抑制信号值计算化合物的CC₅₀值。

本发明化合物对HepG2细胞体外增殖抑制的影响通过以上的试验进行测定，测得的CC₅₀值见表2。

表2本发明化合物对HepG2细胞体外增殖抑制的CC₅₀值

实施例编号	CC<sub>50</sub>(μM)
		2	＞100
4	＞100
		6	＞100
7	＞100
		8	＞100
9	＞100
		10	＞100
11	＞100
		12	＞100
13	＞100
		14	＞100
15	＞100
		16	＞100
17	＞100
		39	＞100
40	＞100
		41	＞100
42	＞100
		43	＞100
44	＞100
		45	＞100
46	＞100
		47	＞100
48	＞100
		58	＞100

结论：本发明化合物对HepG2细胞体外增殖抑制没有影响或影响较小，表现出高的安全性。

药代动力学评价

测试例3、本发明化合物的药代动力学测试

1、摘要

以大鼠为受试动物，应用LC/MS/MS法测定了大鼠灌胃给予实施例1化合物、实施例2化合物、实施例4化合物、实施例6化合物、实施例7化合物、实施例11化合物、实施例39化合物、实施例42化合物、实施例44化合物、实施例45化合物和实施例47化合物后不同时刻血浆中的药物浓度。研究本发明化合物在大鼠体内的药代动力学行为，评价其药动学特征。

2、试验方案

2.1试验药品

实施例1化合物、实施例2化合物、实施例4化合物、实施例6化合物、实施例7化合物、实施例11化合物、实施例39化合物、实施例42化合物、实施例44化合物、实施例45化合物和实施例47化合物。

2.2试验动物

健康成年SD大鼠44只，雌雄各半，4只/组，购自上海杰思捷实验动物有限公司，动物生产许可证号：SCXK(沪)2013-0006。

2.3药物配制

称取一定量药物，加5％体积的DMSO、5％体积的吐温80和90％体积的生理盐水配制成0.2mg/mL的无色澄清透明液体。

2.4给药

SD大鼠禁食过夜后灌胃给药，给药剂量均为2.0mg/kg，给药体积均为10.0mL/kg。

3.操作

大鼠灌胃给药实施例1化合物、实施例2化合物、实施例4化合物、实施例6化合物、实施例7化合物、实施例11化合物、实施例39化合物、实施例42化合物、实施例44化合物、实施例45化合物和实施例47化合物，于给药前及给药后0.5，1.0，2.0，4.0，6.0，8.0，11.0，24.0小时由眼眶采血0.1mL，置于肝素化试管中，3500转/分钟离心10分钟分离血浆，于-20℃保存，给药后2小时进食。

测定不同浓度的药物灌胃给药后大鼠血浆中的待测化合物含量：取给药后各时刻的大鼠血浆25μL，加入内标溶液喜树碱40μL(100ng/mL)，乙腈200μL，涡旋混合5分钟，离心10分钟(4000转/分钟)，血浆样品取上清液0.2μL进行LC/MS/MS分析。

4、药代动力学参数结果

本发明化合物的药代动力学参数如下：

结论：本发明化合物的药代吸收好，生物利用度高，具有药代动力学优势。

Claims

1.一种通式(I)所示的化合物：

或其互变异构体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体或其混合物形式，或其可药用的盐，

其中：

环A为苯基或吡啶基；

Y为N且Q为N或CH；或Y为CR⁵且Q为N；

R¹选自烷基、环烷基和杂环基，其中所述的烷基、环烷基和杂环基各自独立地任选进一步被选自卤素、烷基、卤代烷基、烷氧基、卤代烷氧基和羟基中的一个或多个取代基所取代；

R²为氢原子；

R³相同或不同，且各自独立地为氢原子或烷基；

R⁴相同或不同，且各自独立地选自氢原子、卤素、烷基、卤代烷基和氰基；

R⁵选自氢原子、卤素、烷基、卤代烷基、烷氧基、卤代烷氧基、氰基、氨基、硝基、羟基和羟烷基；

n为0、1、2或3；

s为0、1、2、3或4；

所述的烷基为C_1-6烷基；

所述的卤代烷基为C_1-6卤代烷基；

所述的羟烷基为C_1-6羟烷基；

所述的烷氧基为C_1-6烷氧基；

所述的卤代烷氧基为C_1-6卤代烷氧基；

所述的环烷基为3至6元环烷基；且

所述的杂环基为3至8元杂环基。

2.根据权利要求1所述的通式(I)所示的化合物，其为通式(III)、通式(IV)和通式(V)所示的化合物：

其中：

环A、R¹、R³、R⁴、s和n如权利要求1中所定义。

3.根据权利要求1或2所述的通式(I)所示的化合物，其为通式(VII)、通式(VIII)和通式(IX)所示的化合物：

其中：

G为C或N；

R¹、R³、R⁴、s和n如权利要求1中所定义。

4.根据权利要求1或2所述的通式(I)所示的化合物，其中R¹选自C_1-6烷基、3至6元环烷基和3至8元杂环基，其中所述的C_1-6烷基、3至6元环烷基和3至8元杂环基任选进一步被选自卤素、C_1-6烷基、C_1-6烷氧基和羟基中的一个或多个取代基所取代。

5.根据权利要求1或2所述的通式(I)所示的化合物，其为通式(VII-A)、通式(VIII-A)和通式(IX-A)所示的化合物：

其中：

G为C或N；

R⁸为C_1-6烷基；

R⁹为C_1-6烷基，其中所述的C_1-6烷基任选进一步被一个或多个卤素所取代；

R³、R⁴和s如权利要求1中所定义。

6.根据权利要求5所述的化合物，其中R⁸为甲基。

7.化合物，其选自如下结构：

8.一种通式(IA)所示的化合物：

或其互变异构体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体或其混合物形式，或其可药用盐，

其中：

R^a为氢原子或烷基；

环A为苯基或吡啶基；

Y为N且Q为N或CH；或Y为CR⁵且Q为N；

R³相同或不同，且各自独立地为氢原子或烷基；

n为0、1、2或3；

s为0、1、2、3或4；

所述的烷基为C_1-6烷基；

所述的卤代烷基为C_1-6卤代烷基；

所述的羟烷基为C_1-6羟烷基；

所述的烷氧基为C_1-6烷氧基；且

所述的卤代烷氧基为C_1-6卤代烷氧基。

9.根据权利要求8所述的通式(IA)所示的化合物，其选自：

10.一种通式(IIIA)所示的化合物：

其中：

M为三氟乙酸或盐酸；

R¹为进一步被选自卤素、烷氧基、卤代烷氧基和羟基中的一个或多个取代基所取代的烷基；或R¹为环烷基或杂环基，其中所述的环烷基或杂环基各自独立地任选进一步被选自卤素、烷基、卤代烷基、烷氧基、卤代烷氧基和羟基中的一个或多个取代基所取代；

R³相同或不同，且各自独立地为氢原子或烷基；

t为0或1；

n为0、1、2或3；

所述的烷基为C_1-6烷基；

所述的卤代烷基为C_1-6卤代烷基；

所述的烷氧基为C_1-6烷氧基；

所述的卤代烷氧基为C_1-6卤代烷氧基；

所述的环烷基为3至6元环烷基；且

所述的杂环基为3至8元杂环基。

11.化合物，其选自如下结构：

12.一种制备根据权利要求1所述的通式(I)所示的化合物的方法，该方法包括以下步骤：

其中：

R^a为氢原子或C_1-6烷基；

环A、Y、Q、R¹、R²、R³、R⁴、s和n如权利要求1中所定义。

13.一种药物组合物，其含有治疗有效量的根据权利要求1至7中任一项所述的化合物，以及一种或多种药学上可接受的赋形剂。

14.根据权利要求13所述的药物组合物，其中所述的赋形剂为载体或稀释剂。

15.根据权利要求1至7中任一项所述的化合物或根据权利要求13或14所述的药物组合物在制备衣壳蛋白抑制剂中的用途。

16.根据权利要求1至7中任一项所述的化合物或根据权利要求13或14所述的药物组合物在制备治疗病毒性感染疾病的药物中的用途。

17.根据权利要求16所述的用途，其中所述病毒选自乙型肝炎病毒、流感病毒、疱疹病毒和艾滋病毒。

18.根据权利要求16所述的用途，其中所述疾病选自乙型肝炎、流感、疱疹和艾滋病。