ES2687706T3

ES2687706T3 - Anticuerpos útiles en la inmunización pasiva contra la gripe

Info

Publication number: ES2687706T3
Application number: ES11796555.8T
Authority: ES
Inventors: Lawrence M. Kauvar; Stote Ellsworth; William Usinger; Krista Maureen Mccutcheon; Minha Park
Original assignee: Trellis Bioscience Inc
Current assignee: Trellis Bioscience Inc
Priority date: 2010-06-17
Filing date: 2011-06-17
Publication date: 2018-10-26
Anticipated expiration: 2031-06-17
Also published as: US10676520B2; AU2011268072A1; KR20130137584A; AU2011268072A2; US20120020971A1; JP2013531993A; CN106397584A; CN103209994A; CA2839421C; AU2011268072B2; AU2017203924B2; KR101849738B1; DK2582721T3; EP2582721B1; AU2017203924A1; WO2011160083A1; RU2635999C2; CN103209994B; EP2582721A4; BR112012032185A2

Abstract

Un anticuerpo monoclonal humano, opcionalmente un anticuerpo biespecífico, o un fragmento inmunorreactivo del mismo, que comprende una cadena pesada que comprende CDR1 de la secuencia GGIIRKYAIN (SEQ ID NO: 77), CDR2 de la secuencia GGIIAIFNTANYAQKFQG (SEQ ID NO: 78) y CDR3 de la secuencia ARGMNYYSDYFDY (SEQ ID NO: 79) y una cadena ligera que comprende CDR1 de la secuencia RASQSVRSNNLA (SEQ ID NO: 80), una CDR2 de la secuencia GASSRAT (SEQ ID NO: 81) y una CDR3 de la secuencia QQYGSSPALT (SEQ ID NO: 82), en donde el anticuerpo o fragmento se une a la región tallo de la proteína HA0 y HA2 a partir de clados virales de influenza que incluyen al menos un clado de cada uno del Grupo 1 y Grupo 2 de influenza A.

Description

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

DESCRIPCION

Anticuerpos útiles en la inmunización pasiva contra la gripe Campo de la invención

La invención se refiere al campo de la inmunización pasiva contra la gripe. Más particularmente, anticuerpos que se unen cerca de la secuencia consenso del sitio de escisión de la maduración de HA0 de la hemaglutinina A de influenza, incluyendo anticuerpos secretados por células humanas.

Antecedentes de la invención

La proteína de hemaglutinina del virus de la gripe tiene un dominio de cabeza globular que es altamente heterogéneo entre las cepas de gripe y una región de tallo que contiene un sitio de fusión que es necesario para la entrada en las células. La proteína de hemaglutinina HA0 se activa para permitir que el sitio de fusión tenga un efecto en la virulencia por la escisión en las porciones HA1 y HA2 que permanecen acopladas usando enlaces disulfuro pero que experimentan un cambio conformacional. Este sitio de escisión contiene una secuencia consenso que se comparte tanto por influenza A como influenza B, como por las diversas cepas de influenza A y B.

Bianchi, E., y col., J. Virol. (2005) 79: 7380-7388 describen una vacuna de influenza B "universal" basada en la secuencia consenso de este sitio de escisión que fue capaz de generar anticuerpos en ratones cuando se conjugó al complejo de proteína de membrana externa de Neisseria meningitidis. También se describieron anticuerpos monoclonales que parecen unirse a la secuencia consenso. Además, se observó una transferencia pasiva exitosa de antisuero en ratones. Otras vacunas de la técnica anterior, tales como las descritas en el documento WO2004/080403 que comprenden péptidos derivados de las proteínas M2 y/o HA de la gripe inducen anticuerpos que son de débil eficacia o no son efectivos en todas las cepas.

Prabhu et al (J. Vir. Vol. 83, n° 6, páginas 2553-2562) y el documento WO2010074656 describen un anticuerpo 1C9 que es específico del péptido de fusión conservado antigénicamente de HA2 y puede contribuir a la protección con clado cruzado de los ratones infectado con el virus H5N1.

Descripción de la invención

La invención proporciona un anticuerpo monoclonal humano, opcionalmente un anticuerpo biespecífico, o un fragmento inmunorreactivo del mismo, que comprende una cadena pesada que comprende CDR1 de la secuencia GGIIRKYAIN (SEQ ID NO: 77), CDR2 de la secuencia GGIIAIFNTANYAQKFQG (SEQ ID NO: 78), y CDR3 de la secuencia ARGMNYYSDYFdY (SEQ ID NO: 79), y una cadena ligera que comprende CDR1 de la secuencia RASQSVRSNNLA (SEQ ID NO: 80), una CDR2 de la secuencia GASSRAT (SEQ ID NO: 81), y una CDR3 de la secuencia QQYGSSPALT (SEQ ID NO: 82), en donde el anticuerpo o el fragmento se une a la región del tallo de proteína HA0 y HA2 de clados virales de influenza que incluyen al menos un clado de cada Grupo 1 y Grupo 2 de influenza A. Dichos anticuerpos pueden conferir inmunidad pasiva en caso de una pandemia causada, por ejemplo, por una cepa de influenza previamente no identificada o una cepa contra la cual no se confiere protección por las vacunas estacionales actualmente disponibles. Dado que los anticuerpos se unen a través de muchas cepas, indicativo de que se dirigen a un sitio esencial y, por lo tanto, de que es probable que estén incluidos incluso en una cepa previamente no detectada, dicha vacuna sería eficaz en tales circunstancias. Dichos anticuerpos también son útiles para mejorar o prevenir la infección en sujetos para quienes la vacunación no produjo una respuesta totalmente protectora o que están en alto riesgo debido a un sistema inmune débil (p. ej., los muy jóvenes, los ancianos, pacientes trasplantados, cáncer o pacientes VIH tratados con quimioterapia).

Por tanto, la invención se refiere a anticuerpos monoclonales o fragmentos inmunorreactivos de los mismos que son ampliamente reactivos con el virus de la gripe A del Grupo 1, incluidos H1, H2, H5, H6, H8, H9, H11, H13, H16 o el Grupo 2, incluido H3 y H7 como muestras de tipo, o que muestran reactividad de grupos cruzados. Los anticuerpos se unen específicamente a un epítopo contenido en la proteína HA0 del virus de la gripe y reconocen la forma trimérica nativa de HA. Como se entiende bien en la técnica, las proteínas no basadas en inmunoglobulinas pueden tener propiedades de reconocimiento de epítopos similares a las de un anticuerpo y también pueden proporcionar realizaciones adecuadas, que incluyen agentes de unión basados en fibronectina, transferrina, lipocalina o aptámeros basados en ácidos nucleicos.

En otros aspectos, la invención se dirige a métodos para usar los anticuerpos y fragmentos de la invención para inhibir pasivamente la infección viral en sujetos. La invención también se dirige a materiales y métodos recombinantes para producir estos anticuerpos o fragmentos.

Breve descripción de los dibujos

Las Figuras 1A y 1B muestran los resultados de unión por MAB53 y MAB8 con respecto a la proteína HA0 de varios clados de influenza probados por ELISA. La Figura 1C muestra que MAB53 se une al trímero nativo, expresado en células HEK293.

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

Las Figuras 2A y 2B muestran los resultados de la unión de MAB53 y MAB8 frente a la proteína HAo a partir de diversos clados tal como lo prueba el biosensor FortéBio®.

La Figura 3A muestra el grado de unión según se ensayó mediante ELISA de MAB53 con respecto a HA0 como una proteína intacta y el fragmento de escisión HA1. La Figura 3B muestra el grado de unión de MAB53 a un péptido denotado CP de HA2.

Las Figuras 4A y 4B muestran los resultados de un ensayo de FortéBio® que demuestra que MAB53 compite con MAB8, pero no con MAB30.

Las Figuras 5A y 5B muestran el mapeo de CDR de acuerdo con el número Kabat de regiones variables de cadena pesada y ligera de MAB53. IGHV1-69*01 es SEQ ID NO: 83 e IGKV3-20*01 es SEQ ID NO: 84.

La Figura 6 muestra la neutralización de H1N1 por diversas cantidades de MAB53, según se midió mediante ensayo de placa in vitro.

Las Figuras 7A y 7B muestran tiempos de supervivencia para ratones expuestos a H1N1 (panel A) o H5N1 (panel B) en función de la administración de diversas cantidades de MAB53.

La Figura 8 muestra el efecto del tratamiento posterior a la infección de H5N1 con MAB53.

Modos de llevar a cabo la invención

La presente invención proporciona anticuerpos útiles que incluyen proporcionar medios efectivos para identificar células que secretan tales anticuerpos de manera que las secuencias codificantes relevantes puedan recuperarse y almacenarse para la producción recombinante posterior y fácil de tales anticuerpos. El método incluye un diseño basado en lógica binaria de un procedimiento de selección.

Tal procedimiento puede aplicarse fácilmente a células humanas usando, en particular, el método CellSpot™ descrito en la patente de los Estados Unidos 7.413.868. Brevemente, el método es capaz de seleccionar células individuales obtenidas de sujetos humanos (u otros) en ensayos de alto rendimiento, aprovechando el marcaje con marcadores en partículas y la observación microscópica. En una realización ilustrativa, incluso una sola célula puede analizarse para detectar los anticuerpos que secreta permitiendo que los anticuerpos secretados sean adsorbidos o acoplados a una superficie y luego tratando la superficie con los antígenos deseados acoplados cada uno a un marcador de partículas distintivo. Por lo tanto, la huella de una célula puede identificarse con la ayuda de un microscopio. Usando esta técnica, se pueden rastrear millones de células para buscar secreciones de anticuerpos deseables e incluso se pueden recuperar anticuerpos raros, tales como los deseados en este documento para la inmunización pasiva contra la gripe a través de cepas. Dado que los sujetos humanos tienen anticuerpos contra al menos algunas cepas de influenza, y dado que los anticuerpos obtenidos mediante el método de la invención se unen a una secuencia conservada, estos anticuerpos sirven para tratar nuevas cepas y cepas con las que las poblaciones humanas tienen experiencia.

La descripción proporciona un método para identificar un anticuerpo monoclonal de la presente invención que se une a una ubicación cercana a la secuencia consenso del sitio de escisión de hemaglutinina (HA0). El método comprende poner en contacto anticuerpos o fragmentos monoclonales candidatos con: i) un péptido que consiste esencialmente en una secuencia de aminoácidos cadena arriba o cadena abajo de dicha secuencia consenso, pero que carece de dicha secuencia consenso; ii) un péptido que consiste esencialmente en una secuencia de aminoácidos cadena arriba de dicha secuencia consenso e incluye dicha secuencia consenso; e iii) un péptido que consiste esencialmente en una secuencia de aminoácidos cadena abajo de dicha secuencia consenso y que incluye dicha secuencia consenso; en el que un anticuerpo monoclonal que se une al péptido de ii) e iii) pero no al péptido de i) se identifica como un péptido que se une específicamente a la secuencia de consenso del sitio de escisión de HA0. También se podrían usar otras combinaciones, como será evidente para el experto en la materia, siempre que se siga una lógica binaria. Por ejemplo, i) podría ser un péptido que consiste esencialmente en un aminoácido cadena arriba de la secuencia consenso de una primera cepa y que carece de la secuencia consenso, donde ii) es la secuencia de HA0 completa de la primera cepa e iii) es la secuencia de HA0 completa de una segunda cepa. Las porciones más cortas también podrían ser utilizadas. Para una confirmación adicional, también se puede usar un péptido aislado de la región conservada, aunque se cree que la información derivada de los dominios proteicos más grandes es más informativa con respecto al reconocimiento del antígeno intacto.

Este método no se limita a emplear la técnica CellSpot™, ni está limitado a anticuerpos humanos. La lógica binaria de este método puede emplearse en cualquier método de detección alternativo. Asimismo, se puede aplicar a otras bibliotecas de diversidad además de las inmunoglobulinas naturales.

El método se basa en una lógica binaria en la que se usan péptidos que contienen la secuencia consenso deseada y porciones adicionales cadena arriba y/o cadena abajo como péptidos de prueba y se evalúa su capacidad de anticuerpos complejos en comparación con regiones que carecen de la secuencia consenso. Por lo tanto, se obtienen patrones mediante los cuales las células que secretan los anticuerpos apropiados pueden identificarse instantáneamente.

En una realización ilustrativa, se usan tres antígenos para evaluar la población de anticuerpos secretados. El primer péptido es la totalidad o sustancialmente toda la secuencia de aminoácidos cadena arriba de la secuencia consenso contenida en HA0 y está acoplada a un marcador en partículas, por ejemplo, rojo. Un segundo antígeno de prueba contiene estas secuencias cadena arriba, pero contiene también la secuencia consenso y está marcado con 5 partículas de un color diferente, por ejemplo, azul. Un tercer péptido de prueba contiene la secuencia consenso y todas o sustancialmente todas las regiones cadena abajo de la proteína HA0 y está marcado con un tercer color en las partículas, por ejemplo, verde. (Por porción cadena arriba se entiende hacia el extremo N desde la secuencia consenso y por la parte cadena abajo la continuación de la secuencia de aminoácidos desde la secuencia consenso hacia el extremo C. Por "sustancialmente todo" se entiende que falta solo uno o unos pocos aminoácidos 10 esenciales). Los anticuerpos que se unen a la secuencia consenso se unirán a los péptidos marcados con partículas verdes y azules, pero no se unirán a la secuencia cadena arriba marcada en rojo que carece de la secuencia consenso. Si se desea, la especificidad puede confirmarse añadiendo un cuarto péptido que represente solo la porción cadena abajo sin la secuencia consenso unida, por ejemplo, a un marcador en partículas amarillo, en donde el marcador amarillo en forma de partículas no se unirá al anticuerpo. Por supuesto, no importa si se elige la parte 15 anterior o posterior como control negativo.

El sitio de escisión para diversas cepas de influenza A e influenza B es conocido. Por ejemplo, el artículo citado anteriormente de Bianchi, et al., muestra en la Tabla 1 la secuencia alrededor del sitio de escisión de varias de tales cepas:

Tabla 1. Secuencia consenso de la región expuesta al disolvente de los sitios de escisión madurativos del virus de la 20 gripe A y B

Virus/subtipo: Cepa Secuencia®

A/H3/HA0: Consenso NVPEKQTR 1 GIFGAIAGFIE

(SEQ ID NO:1): (SEQ ID NO: 2)

A/H1/HA0: Consenso NIPSIQSR GLFGAIAGFIE

(SEQ ID NO:3): (SEQ ID NO: 4)

B/HA0: b Consenso PAKLLKER 1 GFFGAIAGFLE

(SEQ ID NO:5): (SEQ ID NO: 6)

aLa posición de escisión entre HA1 y HA2 está indicada por la flecha.

b El consenso es el mismo para los linajes Victoria y Yamagata.

Como se indica, se produce un consenso estricto comenzando con el residuo de arginina cadena arriba del sitio de escisión y, por lo tanto, las secuencias consenso preferidas incluidas en los péptidos de prueba de la invención tienen la secuencia RGI/L/F FGAIAGFLE (SEQ ID NO: 7). Puede ser posible usar solo una porción de esta

25 secuencia en los péptidos de prueba.

Una vez que se han identificado las células que secretan los anticuerpos deseados, es sencillo recuperar las secuencias de nucleótidos que las codifican y producir los anticuerpos deseados a gran escala de forma recombinante. Esto también permite la manipulación de los anticuerpos para que puedan producirse, por ejemplo, como anticuerpos monocatenarios o en términos de sus regiones variables solamente.

30 Los ácidos nucleicos recuperados pueden almacenarse físicamente y recuperarse para la producción recombinante posterior y/o la información de secuencia en cuanto a la secuencia de codificación para el anticuerpo puede recuperarse y almacenarse para permitir la síntesis posterior de los ácidos nucleicos apropiados. La disponibilidad de la información contenida en las secuencias de codificación y las técnicas de síntesis y clonación rápidas junto con los métodos conocidos de producción recombinante permite la producción rápida de los anticuerpos necesarios en

35 caso de una pandemia u otra emergencia.

Los solicitantes han recuperado múltiples anticuerpos monoclonales que son inmunorreactivos con la proteína HA0

de la gripe a partir de múltiples clados (SEQ ID NO: 9-23, 26-40, 42-56 y 59-73). Otras secuencias incluyen la

secuencia de aminoácidos para la región constante de la cadena pesada de IgG1 humana (SEQ ID NO: 8), la

secuencia de aminoácidos para la región kappa constante de la cadena ligera humana (SEQ ID NO: 24), la

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

secuencia de aminoácidos para la región lambda constante de cadena ligera humana (SEQ ID NO: 25), la secuencia de nucleótidos para la región constante de cadena pesada humana (SEQ ID NO: 41), la secuencia de nucleótidos para la región kappa constante de cadena ligera humana (SEQ ID NO: 57), y la secuencia de nucleótidos para la región lambda constante de la cadena ligera humana (SEQ ID NO: 58).

Dos de estos mAbs, MAB53 y MAB8, tienen reactividad cruzada sustancial entre clados de influenza importantes, emparentados de forma lejana. Como se muestra en las Figuras 1A y B, cada uno de estos se une a tres clados diferentes con afinidad razonable o alta. MAB53 se une a HA0 a partir de los clados H1, H9 y H7 y MAB8 se une a la proteína HA0 de los clados H1, H7 y H3. Los resultados que se muestran en la Figura 1 se obtuvieron mediante un ensayo ELISA contra la proteína HA0, e implican que las afinidades están en el rango nanomolar. La reactividad frente al trímero nativo de HA de todos los clados del Grupo 1 se verificó usando HA expresado en células HEK293 con unión de anticuerpo medida por citometría de flujo.

Estos resultados se confirmaron usando un sistema de ensayo alternativo, el ensayo de unión basado en la interferometría de bionivel denominado biosensor ForteBio®, como se muestra en las Figuras 2A y 2B. Según lo medido por este ensayo más preciso, las afinidades son las siguientes:

MAB53/H1 = 60 M, H5 = 6 nM, H7 = 70 pM, H9 = 30 pM;

MAB8/H1 = 9 nM, H3 = 16 nM, H5 = 0,2 nM.

Ambos MAB53 y MAB8 son anticuerpos completamente humanos, pero se incluyen además en la invención anticuerpos similares característicos de otras especies. En el contexto de la invención, "anticuerpos" y sus fragmentos incluyen aquellas porciones de la molécula que son pertinentes para la unión; así, los fragmentos incluirían regiones variables solamente y "anticuerpos", como un término general, serían además considerados como que incluyen tales fragmentos. Así, los fragmentos Fab, F(ab')2', y fragmentos Fv están incluidos también como anticuerpos de cadena sencilla recombinantemente producidos, y fusiones de tales construcciones que crean agentes biespecíficos. Los anticuerpos quiméricos, humanizados y humanos están todos dentro del alcance de la presente invención ya que son anticuerpos imitadores basados en otras estructuras proteicas tales como fibronectina, transferrina, o lipocalina. Igualmente, ahora existen múltiples tecnologías para la fabricación de una molécula tipo anticuerpo sencilla que incorpora dominios de especificidad de antígeno a partir de dos anticuerpos separados (anticuerpo bi-específico). De este modo, se puede construir un único anticuerpo con una reactividad de cepa muy amplia usando los dominios Fab de anticuerpos individuales con una amplia reactividad para el Grupo 1 y el Grupo 2, respectivamente. Han sido descritas tecnologías adecuadas por Macrogenics (Rockville, MD), Micromet (Bethesda, MD) y Merrimac (Cambridge, MA). (Véase, por ejemplo, Orcutt KD, Ackerman ME, Cieslewicz M, Quiroz E, Slusarczyk aL, Frangioni JV, Wittrup KD. A modular IgG-scFv bispecific antibody topology, Protein Eng Des Sel. (2010) 23: 221-228; Fitzgerald J, Lugovskoy A. Rational engineering of antibody therapeutics targeting multiple oncogene pathways. MAbs. (2011) 1: 3 (3); Baeuerle PA, Reinhardt C. Bispecific T-cell engaging antibodies for cancer therapy. Cancer Res. (2009) 69: 4941-4944.)

Para identificar el epítopo al que se une MAB53, se realizaron ensayos ELISA con respecto a la proteína HA0 sin dividir, el fragmento HA1 y el fragmento HA2. Como se muestra en las Figuras 3A y B, mientras que MAB53 se une con alta afinidad a HA0, no se une a HA1, lo que implica la unión al fragmento de HA2 complementario. Para confirmar esta hipótesis, se inmovilizó un péptido derivado de HA2 en una placa recubierta con estreptavidina usando una biotina C-terminal. Específicamente, la secuencia probada fue RGLFGAIAGFIENGW (SEQ ID NO: 74). También se usaron porciones de flanqueo irrelevantes. MAB53 fue confirmado que era capaz de unirse a este péptido. Como MAB53 no se une a HA0 cuando se analiza mediante transferencia Western, se supone que el epítopo dominante es, al menos en parte, de naturaleza conformacional.

También se ha encontrado que MAB8 y MAB53 se unen a los epítopos mismos o cercanos como se demuestra por su capacidad para competir entre sí por la unión a la proteína HA0 del clado H1. Esto se mostró usando un ensayo de FortéBio® usando 2 pg/ml de anticuerpo y HA0 50 nM de H1. Como se muestra en la Figura 4A, la señal obtenida de MAB53 unido a la superficie de FortéBio® se aumenta cuando se agrega una solución de HA0 50 nM. Sin embargo, cuando se agrega MAB8, no se produce ninguna señal adicional. Por lo tanto, MAB53 bloquea el epítopo unido por MAB8. Como se muestra en la Figura 4B, sin embargo, otro anticuerpo que es inmunorreactivo con HA0, MAB30, se une, aparentemente, a un epítopo diferente ya que la señal se potencia cuando se agrega al MAB53-HA0 acoplado.

De manera importante, MAB53 y MAB8 difieren en que MAB8 se libera de la proteína HA0 cuando el pH se reduce a 6, mientras que MAB53 no lo hace. Esta diferencia es significativa ya que esto parece predecir la capacidad de neutralización. En pruebas de la capacidad de MAB8 para neutralizar la infección viral por H1N1 en un ensayo de reducción de placa en células diana MDCK, bajas dosis de MAB53 de 1-5 pg/ml de infección neutralizada por H1N1, por H7N3, H5N1 y H9N2. Sin embargo, MAB8 no neutraliza la infección por estas cepas. Por lo tanto, las cepas neutralizantes se pueden seleccionar preferentemente lavando el MAB o fragmento unido a pH 6 durante la selección primaria, eliminando así de HA0 MAB que es poco probable que permanezcan unidos a medida que el complejo anticuerpo-virus entra en la célula a través del compartimento endosómico y, por tanto, se espera que tenga una capacidad reducida para neutralizar el virus.

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

Por ejemplo, en el método CelISpot, HAo se puede unir a un soporte sólido (perlas fluorescentes) y capturarse mediante el MAB o una mezcla de MAB, luego lavar a pH 6.

El MAB53 se produce por recombinación y ha sido secuenciado. Las secuencias de longitud completa de la cadena pesada y la cadena ligera son las siguientes:

Cadena Pesada:

QVQLVQSGAEVRKPGSSVKVSCKVSGGNRKYAINWVRQAPGQGLEWMGGMAIFNTANYAQKFQGRVTITADESTS

TVYMELSSLRSEDTALYYCARGMNYYSDYFDYWGQGSLVTVSPASTKGPSVFPLVPSSKSTSGGTAALGCLVKDYF

PEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCP PCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVS VLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWE SNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (SEQ ID NO:75); y

Cadena ligera:

EIVLTQSPGTLSLSPGERATLSCRASQSVRSNNLAWYQHKPGQAPRLLIFGASSRATGIPDRFSGSGSGTDFTLTIS

RLEPEDFAVYYCQQYGSSPALTFGGGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDN ALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC (SEQ ID NO:76).

Las secuencias en negrita son dominios variables, y las secuencias sin negrita representan la cadena constante de IgG1 para la cadena pesada y cadena constante kappa para la cadena ligera.

Además, estas regiones variables se analizaron de acuerdo con la evaluación de Kabat CDR basada en las regiones marco coincidentes. Como se muestra en la Figura 5A, CDR1, CDR2 y CDR3 de la cadena pesada de IGHV1-69*01 (SEQ ID NO: 83) son GGIIRKYAIN (SEQ ID NO: 77), GGIIAIFNTANYAQKFQG (SEQ ID NO: 78) y ArGMNYYSDYFDY (SEQ ID NO: 79), respectivamente. Como se muestra en la Figura 5B, CDR1, CDR2 y cDr3 de la cadena ligera IGKV3-20*01 (SEQ ID NO: 84) son RASQSVRSNNLA (SEQ ID NO: 80), GASSRAT (SEQ ID NO: 81) y QQYGSSPALT (SEQ ID NO: 82), respectivamente.

Como se muestra en la Figura 6, MAB53 neutraliza H1N1 in vitro en un ensayo de placa.

También se ha demostrado que los ratones pretratados con dosis graduales de MAB53 sobreviven a la exposición de títulos letales de los virus H1N1 y H5N1 con 100% de protección contra la exposición a H1N1, como se muestra en la Figura 7. La potencia es comparable a un anticuerpo de la técnica anterior descrito por Crucell que no muestra actividad contra las cepas del Grupo 2. Throsby M., y col., PLoS One. (2008) 3: e3942. Epub 2008 Dec 16. Estos son anticuerpos monoclonales neutralizantes heterosubtípicos protectores cruzados contra H5N1 y H1N1 recuperados de células B humanas con memoria IgM+.

Como se muestra en la Figura 7A, MAB53 proporcionó protección completa a 10 mg/kg; el 90% sobrevivió a 2 mg/kg y el 50% sobrevivió a 0,4 mg/kg. En comparación, el anticuerpo de la técnica anterior de Crucell dio una protección completa a 2 mg/kg, pero solo el 20% sobrevivió cuando se administraron 0,7 mg/kg. Esto es a pesar del hecho de que la letalidad de la dosis viral fue menor que la del experimento mostrado en la Figura 7A; solo el 90% de los ratones murió después de la infección, mientras que en el experimento que se muestra en la Figura 7A, todos los ratones murieron en el día 6. Esto demuestra que MAB53 es altamente potente.

Cuando la exposición por H5N1 se sustituyó por la exposición por H1N1, para MAB53 se muestra en la Figura 7B, 10 mg/kg dieron 80% de supervivencia; 2 mg/kg dieron 60% de supervivencia y 0,4 mg/kg dieron 50% de supervivencia. En comparación, para el anticuerpo de la técnica anterior, se obtuvo una supervivencia del 100% a 5 mg/kg y una supervivencia del 60% a 1,7 mg/kg. Por lo tanto, las tasas de supervivencia a 1,7 mg/kg y 2 mg/kg fueron comparables. En este caso, la dosis viral en sí misma fue ligeramente menos potente en los ratones probados con MAB53.

Como se muestra en la Figura 8, se administró MAB53 (10 mg/kg) como tratamiento después de la infección en el día +3 frente a la cepa H5N1 de alta patología. El anticuerpo de control es isotipo compatible, pero no reconoce ningún antígeno de la gripe. El protocolo de infección y tratamiento es el mismo que el de la Figura 7A, pero administrado en el día +3 en lugar del día -1.

Se realizó un análisis de Pepscan, estableciendo que MAB53 y CR6261 se unen a regiones similares de HA, pero a diferentes epítopos (datos no mostrados). Esto es consistente con la actividad diferente de los dos anticuerpos.

Por lo tanto, MAB53 y los anticuerpos que se unen al mismo epítopo en las mismas condiciones son efectivos como vacunas pasivas adecuadas para la protección de poblaciones contra epidemias y pandemias, y para el uso profiláctico o terapéutico contra la gripe estacional para pacientes con un sistema inmune debilitado.

5

10

15

20

25

Listado de secuencias

NVPEKQTR (SEQ ID NO:1)

GIFGAIAGFIE (SEQ ID NO:2)

NIPSIQSR (SEQ ID NO:3)

GLFGAIAGFIE (SEQ ID NO:4)

PAKLLKER (SEQ ID NO:5)

GFFGAIAGFLE (SEQ ID NO:6)

RGI/L/F FGAIAGFLE (SEQ ID NO:7).

Secuencia de aminoácidos HC de lqG1 humana de la región constante (SEQ ID NO:8')

ASTKGPSVFPLVPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPA

VLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCP

PCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCWVDVSHEDPEVKFNWYVDGV

EVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTIS

KAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYK

TTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK

Secuencia de aminoácidos HC de MAB1 del dominio variable (SEQ ID NO:9')

QVQLQESGPGLVKPSETLSLICRVSGGSISSHYWSWIRQPPGKGLEWIGYISYRG

RSNHNPSLGRRVSMSIDTSENQFSLNLSSVIAADTAVYYCARDATGIREINALDI

WGQGTTVTVSS

Secuencia de aminoácidos HC de MAB8 del dominio variable (SEQ ID NO: 101

EVQLVESGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFSTYTMSWVRQAPGQGLEWVSSITRTS

SNIYYADSVEGRFTISRDNAKNSLYLQMHSLRVEDTAVYYCARISGVVGPVPFDY WGQGTLITVSS

Secuencia de aminoácidos HC de MAB30 del dominio variable (SEQ ID NQ:111

EVQLVES GGGLVQPGGSLRLS CAAS GF TF SDHYMDWVRQAP GKGLEWVGRIRNKA

AIYTTEYAASVKGRFTISRDDLKSSVYLQMNSLKTDDTAIYYCARSYGYFDYWGQ GTLVTVSS

Secuencia de aminoácidos HC de MAB42 del dominio variable (SEQ ID NO: 121

QVQLVQS GAEVKKP GASVKVS CKAS GYS FNGYYMHWVRQAP GQGLEWMGWINLSS

GGTDYAQKFQGWVTLTRDTSITTAYMELSSLRSNDTAVYYCARIRPRTGGLDSWG

QGTLVIVSS

Secuencia de aminoácidos HC de MAB48 del dominio variable (SEQ ID NO: 131

QVQLVQS GAEVKKP GS SVKVS CKAS GVTFTAYAISWVRQAP GRGLEWMGGISP LF

GIVNFGQNFQGRVTITADKSTGAAYMELSSLSSEDTAMYYCARGPYYYDRSHLDY

WGQGTLVTVSS

Secuencia de aminoácidos HC de MAB49 del dominio variable (SEQ ID NO: 141

QVQLVQS GAEVKRP GS SVKVS CKAS GGTFSS YAISWVRQAP GQGLEWMGGIIGMF

GTTNYAQKFQGRVTITADEFTSTAYMELTSLRSDDTAMYYCARDRNYYASGTYDH

WGQGTLVTVSS

Secuencia de aminoácidos HC de MAB52 del dominio variable (SEQ ID NO: 151

QVLLVQSGAEVKKPGSSVNISCKASGGTFSNYAISWVRQAPGQGLDWMGRIIPIF

GTANYAQKFQGRLTITADESTSTAYMELSSLRSEDTAVFYCAITKPGSVYALDVW

GQGTTVTVSS

QVQLVQSGAEVRKPGSSVKVSCKVSGGIIRKYAINWVRQAPGQGLEWMGGIIAIF

NTANYAQKFQGRVTITADESTSTVYMELSSLRSEDTALYYCARGMNYYSDYFDYW

GQGSLVTVSP

Secuencia de aminoácidos HC de MAB285 del dominio variable (SEQ ID NO:17)

QVQLVQS GAEVKKP GASVKVS CRAS GYTF TGYYMQWVRQAP GQGLEWMGFINANT

GVTNFAQKFQGRVTLTRDTSISTAYMELRRLTSADTAVYYCARAPQWLSYSFDIW

GQGTMVTVSS

Secuencia de aminoácidos HC de MAB321 del dominio variable (SEQ ID NO:18')

EVQLVESGAEVRSPGASVKLSCKASAYTFINYYLHWVRQAPGQRLEWMGWINPDS

GVTEYAQTFQGRVTMTRDTSINTAYLDLERLTSDDTAVYYCARGFIPWGGKYFYL 5 DYWGQGTLVTVSS

Secuencia de aminoácidos HC de MAB322 del dominio variable (SEQ ID NO:19')

QVQLQQSGPGLVKPSQTLSLTCSVSGSFIRSGDYNWSWIRQPPGKGLEWIGYIDN

SGSTHYNPSLKSRVSISVDTSKNHLSLKLSFVTDADTGVYYCAGEQASDSRGNYY YYAMDVWGQGTPVTVS S

Secuencia de aminoácidos HC de MAB375 del dominio variable (SEQ ID NQ:20')

QVQLQQSGPGLMKPSETLSLSCTVSGDSVSSFYWSWIRQSPGKGLEWIGYLLYSG

NTKYNPSLKSRATISRDTSKNQLSLELTSLTAADTAVYYCARVVRWRHGGDLDVW

GQGTMVTVSS

10 Secuencia de aminoácidos HC de MAB376 del dominio variable (SEQ ID NO^II

QVQLVQSGGDLVQPGGSLRLSCAVSGFIFRKYIMSWVRQAPGKGPEWVAVISSSG

DRTFYADSVEGRFIVSRDNSKDTLFLQMNSLRTEDTAMYYCAKDLLGFCSGGDCL KVF D LWGRGTMVTV S S

Secuencia de aminoácidos HC de MAB377 del dominio variable (SEQ ID NQ:22')

QVQLLQSGPGLIKASETLSLSCSVSNDSVSNYYWSWIRQSPEKGLEWIGYLLYSG

NTKYNPSLKSRAIISRDMSKNQLSLRVTSVTAADTAIYYCARVVRWRFGGDMDVW GQGTAVTVST

Secuencia de aminoácidos HC de MAB378 del dominio variable (SEQ ID NO:23')

QVQLQQSGPGLIKPSETLSLSCSVSGDSVNNYYWSWIRQPPEKGLEWIGYLQYSG

STKYNPSLKSRVTISRDTSKNQLSLKLTSVTAADTAIYYCARVVRWRHGGDMDVW 15 GQGTAVTVSS

Secuencia de aminoácidos LC humana de la región constante kappa (SEQ ID NQ:24')

RTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQES

VTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC

Secuencia de aminoácidos LC humana de la región constante lambda (SEQ ID NO:25')

GQPKAAPSVTLFPPSSEELQANKATLVC LIS D F YP GAVTVAWKAD S SPVKAGVET

TTPSKQSNNKYAASSYLSLTPEQWKSHRSYSCQVTHEGSTVEKTVVPAECS

20 Secuencia de aminoácidos LC de MAB1 (SEQ ID NQ^ei

DIQMTQSPSSLSASGGDRVTITCRASQSVSTYLNWYQQKPGKAPNLLVYAVSNLQ

RGVPSRFSGSGSGTHFTLTISSLQPEDFATYYCQQSYSDPLTFGGGTKVEIKR

TVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESV

TEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC

Secuencia de aminoácidos LC de MAB8 (SEQ ID NQ:27')

DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQTISKYLNWYQQKPGRAPKLLIYSASSLQ

SGVPSRFTGSGSGTDFTLTITSLQPEDFATYYCQQSYRPSQITFGPGTKVDIKR

TVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESV

TEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC

DIQMTQSPSTLSASVGDRVTITCRASQSISSWLAWYQQKPGNAPNLLIYKASSLE

SGVPSRFSGSGSGTEFTLTISSLQPDDFATYYCQQYDTYSPTFGQGTKVEIKR

TVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESV

TEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC

Secuencia de aminoácidos LC de MAB42 (SEQ ID NQ:29')

QSALTQPASVSGSAGQSITISCTGTSSDVGAYNFVSWYQHHPGKAPKLMIYDVDN

RPSGVSNRFSGSKSGDTASLTISGLQAEDEADYYCSSYRRNGPWVFGGGTKLTVL

GQPKAAPTVTLFPPSSEELQANKATLVC LIS D F YP GAVTVAWKAD S SPVKAGVET 5 TTPSKQSNNKYAASSYLSLTPEQWKSHRSYSCQVTHEGSTVEKTVVPAECS

Secuencia de aminoácidos LC de MAB48 (SEQ ID NQ:30')

EIVLTQSPGTLSLSPGERATLSCRASQSVGSSDLAWYQQKPGQAPRLLIYGASSR

ATGIPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFAVYYCQQYVSSPLTFGGGTKVEIKR

TVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTE

QDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC

Secuencia de aminoácidos LC de MAB49 (SEQ ID NO^II

DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISRYLNWYQQKPGKAPKLLIYSASSLQ

SGVPSRFGGSGSGTDFTLTISSLQPEDFALYYCQQTYSIPITFGQGTRLDFKR

TVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESV

TEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC

10 Secuencia de aminoácidos LC de MAB52 (SEQ ID NQ:32')

DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQTISTYLNWYQQKPGKAPNLLIYTASSLQ

SGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQSYDAPTWTFGPGTKVEIKR

TVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESV

TEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC

Secuencia de aminoácidos LC de MAB53 (SEQ ID NO:33')

EIVLTQSPGTLSLSPGERATLSCRASQSVRSNNLAWYQHKPGQAPRLLIFGASSR

ATGIPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFAVYYCQQYGSSPALTFGGGTKVEIKR

TVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESV

TEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC

Secuencia de aminoácidos LC de MAB285 (SEQ ID NQ:34')

QSVLTQPPSASGTPGQRVTISCSGSSSNIGSNPVNWYQQLPGTAPRLLIYSNNQR PSGVPDRFSGSKSGTSASLAISGLRSEDEADYYCTSWDDSLNAWVFGGGTRLTVL GQP KAAP SVTLFPPSSEELQANKAT LVC LIS D F YP GAVTVAWKAD S SPVKAGVE T 15 TTPSKQSNNKYAASSYLSLTPEQWKSHRSYSCQVTHEGSTVEKTVVPAECS

Secuencia de aminoácidos LC de MAB321 (SEQ ID NO:35')

DIVLTQSPPSLSASVGDRVTITCRASQSINNYLNWYQQKPGNAPRILIYGASSLV

SGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQSYRPLYTFGPGTQLDVKRTV

AAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTE

DSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC

Secuencia de aminoácidos LC de MAB322 (SEQ ID NOiSei

DIVMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASESISAYLNWYQHTPGRAPKLLIYAASSLE

TGVPSRFSGSGSGTEFTLTISGLQPEDFVTYYCQQTYNTPRTFGQGTKVEIKRTV

AAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTE

DSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC

DIQMTQSPSFLSASVGDRVTFTCRASQGIASSLAWYQQKAGKAPKLLIYAASTLE

DGVPSRFSGSGFGTEFTLTITSLQPEDFATYYCHQVNSYPRTFGPGTTVDINR

TVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESV

TEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC

Secuencia de aminoácidos LC de MAB376 (SEQ ID NO:38')

DIQMTQSPSTLSASVGDTVTITCRASQSISTWLAWFQQKPGRAPKLLIYQASSLE

GGVPSRFSGSGSGTDFNLTISGLQPDDFATYYCLQYNTYSKSFGQGTKVEIKR

TVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESV

TEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC

Secuencia de aminoácidos LC de MAB377 (SEQ ID NQ:39')

DIQMTQSPSFLSASVGDRVTITCRASQGIATSLAWYQQKPGKAPRLLIYAASTLE SGVPSRFSGGGSGTDFTLTISSLQPEDFAVYYCQQVNSYPRTFGPGTKLDVKR TVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESV 5 TEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC

Secuencia de aminoácidos LC de MAB378 (SEQ ID NQ:40')

DIQMTQSPSFLSASVGDRVTMTCRASQGISSYLAWYQQKPGKAPKLLIYAASTLE

SGVPSRFSGSGSGTEFTLTISSLQPEDFAIYYCQQVNGYPRTFGPGTKVDIKR

TVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESV

TEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC

Secuencia de nucleótidos HC de lqG1 humana de la región constante (se subrayan los intrones') (SEQ ID NO:41)

GCCTCCACCAAGGGCCCATCAGTCTTCCCCCTGGCACCCTCTACCAAGAGCACCT

CTGGGGGCACAACGGCCCTGGGCTGCCTGGTCAAGGACTACTTCCCCGAACCGGT

GACGGTGTCGTGGAACTCAGGCGCCCTGACCAGCGGCGTGCACACCTTCCCGGCT

GTCCTACAGTCCTCAGGACTCTACTCCCTCAGCAGCGTGGTGACCGTGCCCTCCA

GCAGCTTGGGCACCCAGACCTACATCTGCAACGTGAATCACAAGCCCAGCAACAC

CAAGGTGGACAAGAGAGTTGGTGAGAGGCCAGCACAGGGAGGGAGGGTGTCTGCT

GGAAGCCAGGCTCAGCGCTCCTGCCTGGACGCATCCCGGCTATGCAGTCCCAGTC

CAGGGCAGCAAGGCAGGCCCCGTCTGCCTCTTCACCCGGAGGCCTCTGCCCGCCC

CACTCATGCTCAGGGAGAGGGTCTTCTGGCTTTTTCCCCAGGCTCTGGGCAGGCA

CAGGCTAGGTGCCCCTAACCCAGGCCCTGCACACAAAGGGGCAGGTGCTGGGCTC

0

AGACCTGCCAAGAGCCATATCCGGGAGGACCCTGCCCCTGACCTAAGCCCACCCC AAAGGCCAAACTCTCCACTCCCTCAGCTCGGACACCTTCTCTCCTCCCAGATTCC AGTAACTCCCAATCTTCTCTCTGCAGAGCCCAAATCT T GT GACAAAACTCACACA TGCCCACCGTGCCCAGGTAAGCCAGCCCAGGCCTCGCCCTCCAGCTCAAGGCGGG ACAGGTGCCCTAGAGTAGCCTGCATCCAGGGACAGGCCCCAGCCGGGTGCTGACA CGTCCACCTCCATCTCTTCCTCAGCACCTGAACTCCTGGGGGGACCGTCAGTCTT CCTCTTCCCCCCAAAACCCAAGGACACCCTCATGATCTCCCGGACCCCTGAGGTC ACATGCGTGGTGGTGGACGTGAGCCACGAAGACCCTGAGGTCAAGTTCAACTGGT ACGTGGACGGCGTGGAGGTGCATAATGCCAAGACAAAGCCGCGGGAGGAGCAGTA CAACAGCACGTACCGTGTGGTCAGCGTCCTCACCGTCCTGCACCAGGACTGGCTG AATGGCAAGGAGTACAAGTGCAAGGTCTCCAACAAAGCCCTCCCAGCCCCCATCG AGAAAACCATCTCCAAAGCCAAAGGTGGGACCCGTGGGGTGCGAGGGCCACATGG ACAGAGGCCGGCTCGGCCCACCCTCTGCCCTGAGAGTGACCGCTGTACCAACCTC TGTCCCTACAGGGCAGCCCCGAGAACCACAGGTGTACACCCTGCCCCCATCCCGG GAGGAGATGACCAAGAACCAGGTCAGCCTGACCTGCCTGGTCAAAGGCTTCTATC CCAGCGACATCGCCGTGGAGTGGGAGAGCAATGGGCAGCCGGAGAACAACTACAA GACCACGCCTCCCGTGCTGGACTCCGACGGCTCCTTCTTCCTCTATAGCAAGCTC ACCGTGGACAAGAGCAGGTGGCAGCAGGGGAACGTCTTCTCATGCTCCGTGATGC ATGAGGCTCTGCACAACCACTACACGCAGAAGAGCCTCTCCCTGTCCCCGGGTAA ATGA

Secuencia de nucleótidos del dominio variable de HC de MAB1 (SEQ ID NQ:42')

CAGGTGCAGCTGCAGGAGTCGGGCCCAGGACTGGTGAAGCCTTCGGAGACCCTGT

CCCTCATCTGCAGAGTCTCTGGTGGCTCGATCAGTAGTCATTACTGGAGCTGGAT

CCGGCAGCCCCCAGGGAAGGGACTGGAGTGGATTGGATATATTTCTTATAGGGGG

AGAAGCAACCACAATCCTTCCCTTGGGAGACGAGTCTCTATGTCAATAGACACGT

CGGAGAACCAGTTCTCCCTGAACCTGAGCTCTGTGATCGCTGCGGACACGGCCGT

ATATTACTGTGCGAGAGATGCTACTGGGATCAGAGAAATCAATGCTCTTGATATC

TGGGGCCAAGGGACAACGGTCACCGTCTCTTCA

Secuencia de nucleótidos del dominio variable de HC de MAB8 (SEQ ID NO:43')

GAGGTGCAGCTGGTGGAGTCTGGGGGAGGCCTGGTCAAGCCTGGGGGGTCCCTGA

GACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGTTTCACTTTCAGTACCTATACTATGAGTTGGGT

CCGCCAGGCTCCAGGGCAGGGGCTAGAGTGGGTCTCGTCCATTACTAGGACTAGT

AGTAATATATACTACGCAGACTCAGTGGAGGGCCGATTCACCATCTCCAGAGACA

ACGCCAAGAACTCACTGTATCTGCAGATGCATAGCCTGAGAGTCGAAGACACGGC

TGTGTATTACTGTGCGAGAATCAGCGGGGTAGTGGGACCTGTCCCCTTTGACTAC

TGGGGCCAGGGAACCCTGATCACCGTCTCCTCT

5 Secuencia de nucleótidos del dominio variable de HC de MAB30 (SEQ ID NQ:44')

GAGGTGCAGCTGGTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTCCAGCCTGGAGGGTCCCTGA

GACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTCAGTGACCACTACATGGACTGGGT

CCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTTGGCCGTATTAGAAATAAAGCT

GCCATTTACACCACAGAATACGCCGCGTCTGTGAAAGGCAGATTCACCATCTCAA

GAGATGATTTAAAGAGCTCAGTGTATCTGCAAATGAACAGTCTGAAAACCGACGA

CACGGCCATATATTACTGTGCTAGGAGCTATGGATACTTTGACTACTGGGGCCAG

GGAACCCTGGTCACCGTCTCCTCA

Secuencia de nucleótidos del dominio variable de HC de MAB42 (SEQ ID NO:45')

CAGGTGCAGCTGGTACAGTCTGGGGCTGAGGTGAAGAAGCCTGGGGCCTCAGTGA AGGTCTCCTGCAAGGCTTCTGGATATTCCTTCAACGGCTACTATATGCACTGGGT GCGACAGGCCCCTGGACAAGGGCTTGAGTGGATGGGTTGGATCAACCTGAGCAGT GGTGGCACAGATTATGCACAGAAATTTCAGGGGTGGGTCACTTTGACCAGGGACA CGTCCATCACCACAGCCTACATGGAGTTGAGCAGCCTGAGATCGAACGACACGGC CGTGTATTACTGTGCGAGAATTAGACCTCGCACTGGTGGACTTGACTCCTGGGGC 10 CAGGGAACCCTGGTCATCGTCTCCTCA

Secuencia de nucleótidos del dominio variable de HC de MAB48 (SEQ ID NQ^ei

CAGGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGGGCTGAGGTGAAGAAGCCTGGGTCCTCGGTGA

AAGTCTCCTGCAAGGCTTCTGGAGTCACCTTCACCGCCTATGCTATCAGTTGGGT

GCGACAGGCCCCTGGACGAGGGCTTGAGTGGATGGGAGGGATCAGCCCTTTGTTT

GGAATAGTAAATTTCGGACAGAACTTCCAGGGCAGAGTCACGATTACCGCGGACA

AATCCACGGGCGCAGCCTACATGGAGCTGAGCAGCCTGAGCTCTGAGGACACGGC

CATGTATTACTGTGCGAGAGGACCCTATTATTACGATAGAAGTCACCTAGACTAC

TGGGGCCAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCCTCA

Secuencia de nucleótidos del dominio variable de HC de MAB49 (SEQ ID 1x10:47)

CAGGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGGGCTGAGGTGAAGAGGCCTGGGTCCTCGGTGA

AGGTCTCCTGCAAGGCTTCTGGAGGCACCTTCAGCAGTTATGCTATTAGCTGGGT

GCGACAGGCCCCTGGACAAGGGCTTGAGTGGATGGGAGGGATCATCGGTATGTTT

GGAACAACAAACTACGCACAGAAGTTCCAGGGCAGAGTCACGATTACCGCGGACG

AATTCACGAGCACAGCCTACATGGAGCTGACCAGCCTGAGATCTGACGACACGGC

CATGTATTACTGTGCGAGAGACCGAAATTACTATGCTTCGGGGACTTATGACCAC

TGGGGCCAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCCTCA

CAAGTGCTGCTGGTGCAGTCTGGGGCTGAAGTGAAGAAGCCTGGGTCCTCGGTGA

ATATCTCTTGCAAGGCTTCTGGAGGCACTTTCAGCAACTATGCTATCTCCTGGGT

GCGACAGGCCCCTGGACAAGGTCTTGACTGGATGGGAAGGATCATCCCTATCTTT

GGAACAGCAAACTACGCACAGAAATTCCAGGGCAGACTCACCATTACCGCGGACG

AATCCACGAGCACAGCCTACATGGAACTGAGCAGCCTGAGATCTGAAGACACGGC

CGTGTTTTACTGTGCGATTACTAAACCGGGGTCTGTCTACGCTTTGGACGTCTGG

GGCCAAGGGACCACGGTCACCGTCTCCTCA

Secuencia de nucleótidos del dominio variable de HC de MAB53 (SEQ ID NQ:49')

CAGGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGGGCTGAGGTGAGGAAGCCGGGGTCCTCGGTGA

AGGTCTCCTGCAAGGTTTCTGGAGGCATCATTAGGAAATATGCTATCAACTGGGT

GCGACAGGCCCCCGGACAAGGGCTTGAGTGGATGGGAGGGATCATCGCTATCTTT AATACAGCAAACTATGCACAGAAATTCCAGGGCAGAGTCACGATTACCGCGGACG AGTCCACGAGCACAGTCTACATGGAGCTGAGCAGCCTGAGATCTGAAGACACGGC CCTTTATTACTGTGCGAGAGGAATGAATTACTACAGTGACTACTTTGACTACTGG 5 GGCCAGGGAAGCCTTGTCACCGTCTCCCCA

Secuencia de nucleótidos del dominio variable de HC de MAB285 (SEQ ID NQ:50')

CAGGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGGGCTGAGGTGAAGAAGCCTGGGGCCTCAGTGA

AGGTCTCCTGCCGGGCTTCTGGATACACCTTCACCGGCTACTATATGCAGTGGGT

GCGGCAGGCCCCTGGCCAAGGGCTTGAGTGGATGGGATTCATCAATGCTAACACT

GGTGTCACAAACTTTGCTCAGAAGTTTCAGGGCAGGGTCACCTTGACCAGGGACA

CGTCCATCAGCACAGCCTACATGGAGCTGAGGAGGCTGACATCTGCCGACACGGC

CGTGTATTACTGTGCGAGAGCGCCCCAGTGGTTATCGTATTCTTTTGATATCTGG

GGCCAAGGGACAATGGTCACCGTCTCCTCA

Secuencia de nucleótidos del dominio variable de HC de MAB321 (SEQ ID NO:51)

GAGGTGCAGCTGGTGGAGTCTGGGGCTGAGGTGAGGAGCCCTGGGGCCTCAGTGA

AGCTCTCCTGCAAGGCTTCTGCATACACCTTCATCAACTACTATCTGCACTGGGT

GCGACAGGCCCCTGGACAAAGGCTTGAGTGGATGGGATGGATCAACCCTGACAGT

GGTGTCACAGAATATGCACAGACATTTCAGGGCAGGGTCACCATGACCAGGGACA

CGTCCATCAATACAGCCTACCTGGACCTGGAGAGACTGACATCTGACGACACGGC

CGTATATTACTGTGCGAGAGGTTTTATTCCTTGGGGTGGGAAGTACTTCTACCTT

GACTACTGGGGCCAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCCTCA

10 Secuencia de nucleótidos del dominio variable de HC de MAB322 (SEQ ID NQ:52')

CAGGTACAGCTGCAGCAGTCAGGGCCAGGACTGGTGAAGCCTTCACAGACCCTGT

CCCTCACCTGCAGTGTATCTGGTAGTTTCATCAGAAGTGGAGATTATAATTGGAG

TTGGATCCGCCAGCCCCCAGGGAAGGGCCTGGAGTGGATTGGGTACATCGATAAT

AGCGGGAGCACCCACTACAACCCGTCCCTCAAGAGTCGAGTTAGCATATCAGTGG

ACACGTCCAAGAACCACTTGTCCCTGAAGCTGAGTTTTGTGACTGACGCAGACAC

GGGCGTGTATTACTGTGCCGGAGAACAAGCGTCTGATAGTCGTGGTAATTACTAC

TACTACGCTATGGACGTCTGGGGCCAAGGGACCCCGGTCACCGTCTCCTCA

Secuencia de nucleótidos del dominio variable de HC de MAB375 (SEQ ID NO:53')

CAGGTGCAGCTGCAGCAGTCGGGCCCCGGACTGATGAAGCCTTCGGAGACCCTGT

CCCTCAGCTGCACTGTCTCTGGTGACTCCGTCAGTAGTTTTTATTGGAGTTGGAT

TCGGCAGTCTCCAGGAAAGGGACTGGAGTGGATTGGGTATTTGCTTTACAGTGGG

AATACCAAGTATAATCCGTCCCTCAAGAGTCGAGCCACCATATCAAGAGACACGT

CCAAGAACCAGTTGTCCCTGGAGTTGACCTCTCTGACCGCTGCGGACACGGCCGT

CTACTATTGTGCGAGAGTGGTGAGATGGCGACATGGTGGCGATTTGGACGTCTGG

GGCCAAGGGACCACGGTCACCGTCTCCTCA

CAGGTGCAGCTGGTGCAGTCCGGGGGGGACTTGGTCCAGCCGGGGGGGTCCCTGA

GACTGTCATGTGCAGTCTCTGGATTCATCTTTAGAAAATATATCATGAGTTGGGT

CCGGCAGGCTCCAGGGAAGGGGCCGGAGTGGGTCGCAGTTATTAGTTCTAGTGGT

GACCGGACATTCTACGCCGACTCCGTGGAGGGCCGCTTCATCGTCTCCAGAGACA

ATTCCAAGGACACACTGTTTCTGCAAATGAACAGCCTGAGAACCGAGGACACGGC

CATGTATTACTGTGCGAAAGACCTTTTGGGATTTTGTAGTGGTGGTGATTGCCTG

AAGGTCTTCGATCTCTGGGGCCGAGGCACCATGGTCACTGTCTCCTCA

Secuencia de nucleótidos del dominio variable de HC de MAB377 (SEQ ID NO:55')

CAGGTGCAGCTGCTGCAGTCGGGCCCAGGACTGATAAAGGCTTCGGAGACCCTGT

CTCTCAGCTGCAGTGTCTCTAATGACTCCGTCAGTAATTATTATTGGAGTTGGAT

CCGGCAGTCCCCAGAGAAGGGACTGGAGTGGATTGGGTATTTGCTTTATAGTGGG

AATACCAAGTACAATCCCTCCCTCAAGAGTCGAGCCATCATATCAAGAGACATGT

CCAAAAATCAGTTGTCCCTCAGAGTGACTTCTGTGACCGCTGCGGACACGGCCAT

ATATTATTGTGCGCGAGTGGTGAGATGGCGATTTGGTGGTGATATGGACGTCTGG

GGTCAAGGGACCGCGGTCACCGTCTCCACA

Secuencia de nucleótidos del dominio variable de HC de MAB378 (SEQ ID NOiSei

CAGGTGCAGCTGCAGCAGTCGGGCCCAGGACTGATAAAGCCTTCGGAGACCCTGT

CTCTCAGCTGCTCTGTCTCTGGTGACTCCGTCAATAATTATTATTGGAGTTGGAT CCGGCAGCCCCCAGAGAAGGGACTGGAGTGGATTGGGTATCTGCAGTATAGTGGG AGTACAAAGTACAACCCCTCCCTCAAGAGTCGAGTCACCATATCAAGAGACACGT CCAAAAACCAGTTGTCCCTGAAGCTGACCTCTGTGACCGCTGCGGACACGGCCAT ATATTATTGTGCGAGAGTGGTGAGATGGCGACATGGTGGGGATATGGACGTCTGG 5 GGCCAAGGGACCGCGGTCACCGTCTCCTCT

Secuencia de nucleótidos LC humana de la región constante kappa (SEQ ID NQ:57')

CGAACTGTGGCTGCACCATCTGTCTTCATCTTCCCGCCATCTGATGAGCAGTTGA

AATCTGGAACTGCTAGCGTTGTGTGCCTGCTGAATAACTTCTATCCCAGAGAGGC

CAAAGTACAGTGGAAGGTGGATAACGCCCTCCAATCGGGTAACTCCCAGGAGAGT

GTCACAGAGCAGGACAGCAAGGACAGCACCTACAGCCTCAGCAGCACCCTGACGC

TGAGCAAAGCAGACTACGAGAAACACAAAGTCTACGCCTGCGAAGTCACCCATCA

GGGCCTGAGCTCGCCCGTCACAAAGAGCTTCAACAGGGGAGAGTGTTAG

Secuencia de nucleótidos LC humana de la región constante lambda (SEQ ID NO:58')

GGTCAGCCCAAGGCTGCCCCCTCTGTCACTCTGTTCCCGCCCTCTAGCGAGGAGC

TTCAAGCCAACAAGGCCACACTGGTGTGTCTCATAAGTGACTTCTACCCGGGAGC

CGTGACAGTGGCCTGGAAGGCAGATAGCAGCCCCGTCAAGGCGGGAGTGGAGACC

ACCACACCCTCCAAACAAAGCAACAACAAGTACGCGGCCAGCAGCTATCTGAGCC

TGACGCCTGAGCAGTGGAAGTCCCACAGAAGCTACAGCTGCCAGGTCACGCATGA

AGGGAGCACCGTGGAGAAGACAGTGGTCCCTGCAGAATGCTCT

10 Secuencia de nucleótidos del dominio variable de LC de MAB1 (SEQ ID NQ:59')

GACATCCAGATGACCCAGTCTCCATCCTCCCTGTCTGCATCTGGAGGAGACAGAG

TCACCATCACTTGCCGGGCAAGTCAGAGTGTTAGTACGTATTTAAATTGGTATCA

GCAGAAACCAGGGAAAGCCCCTAACCTCCTGGTCTATGCTGTATCCAATTTACAA

CGTGGCGTGCCATCAAGGTTCAGTGGCAGTGGATCTGGGACACATTTCACTCTCA

CAATCAGCAGTCTGCAACCTGAGGATTTCGCAACTTACTACTGTCAACAGAGTTA

CAGTGACCCTCTCACTTTCGGCGGAGGGACCAAGGTGGAGATCAAA

Secuencia de nucleótidos del dominio variable de LC de MAB8 (SEQ ID NQ:60')

GACATCCAGATGACCCAGTCTCCATCTTCCCTGTCTGCATCTGTAGGAGACAGAG

TCACCATCACTTGCCGGGCAAGTCAGACCATTAGCAAGTATTTAAATTGGTATCA

GCAGAAGCCAGGGAGAGCCCCTAAACTCCTGATCTACTCTGCGTCCAGTTTGCAA

AGTGGGGTCCCATCAAGGTTCACTGGCAGTGGATCTGGGACAGATTTCACTCTCA

CCATCACCAGTCTGCAACCTGAAGATTTTGCAACTTACTACTGTCAACAGAGTTA

CAGACCCTCCCAGATCACTTTCGGCCCTGGGACCAAAGTGGATATCAAA

Secuencia de nucleótidos del dominio variable de LC de MAB30 (SEQ ID NQ:61')

GACATCCAGATGACCCAGTCTCCTTCCACCCTGTCTGCATCTGTAGGAGACAGAG

TCACCATCACTTGCCGGGCCAGTCAGAGTATTAGTAGTTGGTTGGCCTGGTATCA

GCAGAAACCAGGGAACGCCCCTAACCTCCTGATCTATAAGGCGTCTAGTTTAGAA

AGTGGGGTCCCATCAAGGTTCAGCGGCAGTGGATCTGGGACAGAATTCACTCTCA

CCATCAGCAGCCTGCAGCCTGATGATTTTGCAACTTATTACTGCCAACAGTATGA

TACTTATTCTCCGACGTTCGGCCAAGGGACCAAGGTGGAAATCAAA

Secuencia de nucleótidos del dominio variable de LC de MAB42 (SEQ ID NQ:62')

CAGTCTGCCCTGACTCAGCCTGCCTCCGGGTCTGGGTCTGCTGGACAGGCGATCA

CCATCTCCTGCACTGGAACCGGCACTGACGTCTGTGCTTATAACTTTGTCTCCTG

GTACCAACACCACCCCGGCGAAGCCCCCAAACTCATGATTTATGATGTCGATAAT

CGGCCCTCATGGGTTTCTAATCGCTTCTCTGGCTCCAAGTCTGGTAACACGGCCT

CCCTGACCATCTCTGGGCTCCAGGCTGAGGACGAGGCTGATTACTACTGCAGCTC

ATATAGAAGGAACGGCCCTTGCTTGTTCGGCGGAGGGACCAAGCTGACCGTCCTG

5 Secuencia de nucleótidos del dominio variable de LC de MAB48 (SEQ ID NO:63')

GAAATTGTGTTGACGCAGTCTCCAGGCACCCTGTCTTTGTCTCCAGGGGAAAGAG

CCACCCTCTCCTGCAGGGCCAGTCAGAGTGTTGGCAGCAGCGACTTAGCCTGGTA

CCAGCAGAAACCTGGCCAGGCTCCCAGGCTCCTCATATATGGTGCATCCAGCCGG

GCCACTGGCATCCCAGACAGGTTCAGTGGCAGTGGGTCTGGGACAGACTTCACTC

TCACCATCAGCAGACTGGAGCCTGAAGATTTTGCAGTGTATTACTGTCAGCAGTA

TGTCAGTTCACCCCTCACTTTCGGCGGAGGGACCAAGGTGGAGATCAAG

Secuencia de nucleótidos del dominio variable de LC de MAB49 (SEQ ID NQ:64')

GACATCCAGATGACCCAGTCTCCATCCTCCCTGTCTGCATCTGTAGGAGACAGAG

TCACCATCACTTGCCGGGCAAGTCAGAGCATTAGCAGGTATTTAAATTGGTATCA

GCAGAAACCAGGGAAAGCCCCTAAACTCCTGATCTATTCTGCATCCAGTTTGCAA

AGTGGGGTCCCATCAAGGTTCGGTGGCAGTGGATCTGGGACAGATTTCACTCTCA

CCATCAGCAGTCTGCAACCTGAAGATTTTGCACTTTACTACTGTCAACAGACTTA

CAGTATCCCGATCACCTTCGGCCAAGGGACACGACTGGACTTTAAA

Secuencia de nucleótidos del dominio variable de LC de MAB52 (SEQ ID NO:65')

GACATCCAGATGACCCAGTCTCCATCCTCCCTGTCTGCATCTGTAGGAGACAGAG TCACTATCACTTGCCGGGCAAGTCAGACCATTAGCACCTATTTAAATTGGTATCA GCAGAAACCAGGGAAAGCCCCTAACCTCCTGATCTATACTGCATCCAGTTTGCAA AGCGGGGTCCCATCAAGATTCAGTGGCAGTGGATCTGGGACAGATTTCACTCTCA CCATCAGCAGTCTGCAACCTGAAGATTTTGCAACTTATTACTGTCAACAGAGTTA 10 CGATGCCCCCACGTGGACCTTCGGCCCAGGGACCAAGGTGGAAATCAAA

Secuencia de nucleótidos del dominio variable de LC de MAB53 (SEQ ID NO:66')

GAAATTGTGTTGACACAGTCTCCAGGCACCCTGTCTTTGTCTCCAGGGGAAAGAG

CCACCCTCTCCTGCAGGGCCAGTCAGAGTGTTAGAAGCAACAACTTAGCCTGGTA

CCAGCACAAACCTGGCCAGGCTCCCAGGCTCCTCATCTTTGGTGCATCCAGCAGG

GCCACTGGCATCCCAGACAGGTTCAGTGGCAGTGGGTCTGGGACAGACTTCACTC

TCACCATCAGCAGACTGGAGCCTGAAGATTTTGCAGTATATTACTGTCAGCAGTA

TGGTAGCTCACCTGCGCTCACTTTCGGCGGAGGGACCAAGGTGGAGATCAAA

Secuencia de nucleótidos del dominio variable de LC de MAB285 (SEQ ID 1x10:67)

CAGTCTGTGCTGACTCAGCCACCCTCAGCGTCTGGGACCCCCGGGCAGAGGGTCA

CCATCTCTTGTTCTGGAAGCAGCTCCAACATCGGAAGTAATCCTGTAAACTGGTA

CCAGCAGCTCCCAGGAACGGCCCCCAGACTTCTCATCTATAGTAATAATCAGCGG

CCCTCAGGGGTCCCTGACCGATTCTCTGGCTCCAAGTCTGGCACCTCAGCCTCCC

TGGCCATCAGTGGGCTCCGGTCCGAGGATGAGGCTGATTACTACTGTACATCATG

GGATGACAGCCTGAATGCTTGGGTGTTCGGCGGGGGGACCAGGCTGACCGTCCTA

GATATCGTGTTGACTCAGTCTCCACCCTCCCTGTCTGCATCTGTGGGGGACAGAG

TCACCATCACTTGCCGGGCAAGTCAGAGCATTAATAACTACTTAAATTGGTATCA

ACAGAAACCAGGGAACGCCCCAAGAATACTAATCTATGGTGCATCCAGTTTGGTA

AGTGGGGTCCCATCAAGGTTCAGTGGCAGTGGATCTGGGACAGATTTCACCCTCA

CCATCAGCAGTCTGCAACCTGAAGATTTTGCAACTTACTACTGTCAACAGAGTTA

CCGGCCCCTGTACACTTTTGGCCCGGGGACCCAGCTGGATGTCAAA

Secuencia de nucleótidos del dominio variable de LC de MAB322 (SEQ ID NO:69')

GATATCGTGATGACCCAGTCTCCATCTTCCCTGTCTGCATCTGTGGGAGACAGAG

TCACCATCACTTGCCGGGCAAGTGAGAGCATTAGCGCTTATTTAAATTGGTATCA

GCACACACCAGGGAGAGCCCCTAAGCTCCTGATCTATGCTGCCTCCAGTTTGGAA

ACTGGGGTCCCATCAAGGTTCAGTGGCAGTGGATCTGGCACAGAATTCACTCTCA

CCATCAGCGGTCTGCAACCTGAAGATTTTGTCACTTACTACTGTCAACAGACTTA

CAATACCCCTCGGACCTTCGGCCAAGGGACCAAGGTGGAAATCAAA

Secuencia de nucleótidos del dominio variable de LC de MAB375 (SEQ ID NQ:70')

GATATCCAGATGACCCAGTCTCCATCCTTCTTGTCTGCATCTGTGGGAGACAGAG

TCACCTTCACTTGCCGGGCCAGTCAGGGCATTGCCAGTTCTTTAGCCTGGTATCA GCAAAAAGCAGGGAAAGCCCCTAAGCTCCTGATCTATGCTGCTTCTACTTTGGAA GATGGGGTCCCATCAAGGTTCAGCGGCAGTGGATTTGGGACAGAATTCACTCTCA CAATCACCAGCCTGCAGCCTGAAGATTTTGCAACCTATTACTGTCATCAGGTGAA 5 TAGTTACCCTCGGACTTTCGGCCCTGGGACCACAGTGGATATCAAC

Secuencia de nucleótidos del dominio variable de LC de MAB376 (SEQ ID NOJII

GATATCCAGATGACCCAGTCTCCTTCCACCCTGTCTGCATCTGTGGGAGACACAG

TCACCATCACTTGCCGGGCCAGTCAGAGTATTAGTACTTGGTTGGCCTGGTTTCA

GCAGAAACCAGGGAGAGCCCCTAAACTCCTGATCTATCAGGCGTCTAGTTTGGAA

GGTGGGGTCCCATCAAGGTTCAGCGGCAGTGGGTCTGGGACAGACTTCAACCTCA

CCATCAGCGGCCTGCAGCCTGATGATTTTGCAACTTATTACTGCCTACAATATAA

CACTTATTCGAAGTCATTCGGCCAAGGGACCAAGGTGGAAATCAAAC

Secuencia de nucleótidos del dominio variable de LC de MAB377 (SEQ ID NQ:72')

GATATCCAGATGACCCAGTCTCCATCCTTCTTGTCTGCATCTGTCGGAGACAGAG

TCACCATCACCTGCCGGGCCAGTCAGGGCATTGCCACTTCTTTAGCCTGGTATCA

GCAAAAACCTGGGAAAGCCCCGAGGCTCCTGATCTATGCTGCATCCACTTTGGAA

AGTGGGGTCCCATCAAGGTTCAGCGGCGGTGGATCTGGGACAGACTTCACTCTCA

CAATCAGCAGTCTGCAGCCCGAAGATTTTGCTGTTTATTACTGTCAACAGGTTAA

CTCCTATCCTCGGACTTTCGGCCCTGGGACCAAACTGGATGTCAAAC

10 Secuencia de nucleótidos del dominio variable de LC de MAB378 (SEQ ID NO:73')

GATATCCAGATGACCCAGTCTCCATCCTTCTTGTCTGCATCTGTAGGAGACAGAG

TCACCATGACCTGCCGGGCCAGTCAGGGCATTAGCAGTTATTTAGCCTGGTATCA

GCAAAAACCAGGGAAAGCCCCTAAGCTCCTGATCTATGCTGCATCGACTTTGGAA

AGTGGGGTCCCATCAAGGTTCAGCGGCAGTGGATCTGGGACAGAATTCACTCTCA

CAATCAGCAGCCTGCAGCCCGAAGATTTTGCAATTTATTACTGTCAACAGGTTAA

TGGTTACCCTCGGACTTTCGGCCCTGGGACCAAAGTGGATATCAAAC

RGLFGAIAGFIENGW (SEQ ID NO:74). Cadena pesada de MAB53 (SEQ ID NO:75)

5

10

15

20

25

30

QVQLVQSGAEVRKPGSSVKVSCKVSGGIIRKYAINWVRQAPGQGLEWMGGIIAIF NTANYAQKFQGRVTITADESTSTVYMELSSLRSEDTALYYCARGMNYYSDYFDYW GQGSLVTVSPASTKGPSVFPLVPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGA LTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEP KSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPE VKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKA LPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWE SNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYT QKSLSLSPGK

Cadena ligera de MAB53 (SEQ ID NO:761

EIVLTQSPGTLSLSPGERATLSCRASQSVRSNNLAWYQHKPGQAPRLLIFGASSR

ATGIPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFAVYYCQQYGSSPALTFGGGTKVEIKR

TVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESV

TEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC

GGIIRKYAIN (SEQ ID NO:77)

GGIIAIFNTANYAQKFQG (SEQ ID NO:78)

ARGMNYYSDYFDY (SEQ ID NO:79)

RASQSVRSNNLA (SEQ ID NO:80)

GASSRAT (SEQ ID NO:81)

QQYGSSPALT (SEQ ID NO:82)

IGHV1-69*01 (SEQ ID NO:83)

QVQLVQSGAEVRK PGS SVKVSCKVSGGIIRKYAINWVRQAPGQG

LEWMGGIIAIFNTANYAQKFQGRVTITADESTSTVYMELSSLRSEDTALYYCARG

MNYYSDYFDYWGQGSLVTTVS

IGKV3-20*01 (SEQ ID NO:84)

EIVLTQSPGTLSLSPGERATLSCRASQSVRSNNLAWYQHKPGQAPRLLIFGASSR

ATGIPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFAVYYCQQYGSSPALTFGGGTKVEIK

LISTADO DE SECUENCIAS [0038]

<110> TRELLIS BIOSCIENCE, INC.

KAUVAR, Lawrence M.

ELLSWORTH, Stote USINGER, William MCCUTCHEON, Krista Maureen PARK, Minha

<120> ANTICUERPOS ÚTILES EN LA INMUNIZACIÓN PASIVA CONTRA LA GRIPE

<130> 388512012840

<140> Todavía no asignada

<141> Simultáneamente con la presente

<150> Documento US 61/445.455 <151> 2011-02-22

<150> Documento US 61/443.103 <151> 2011-02-15

<150> Documento US 61/355.978 <151> 2010-06-17

5

10

15

20

25

30

35

40

45

<160> 84

<170> FastSEQ for Windows Versión 4.0

<210> 1 <211>8 <212> PRT

<213> Secuencia artificial <220>

<223> secuencia consenso A/H3/HA0 sintéticamente construida <400> 1

Asn Val Pro Glu Lys Gln Thr Arg 1 5

<210>2 <211> 11 <212> PRT

<213> Secuencia artificial <220>

<223> secuencia consenso A/H3/HA0 sintéticamente construida <400>2

Gly lie Phe Gly Ala lie Ala Gly Phe lie Glu 15 10

<210>3 <211>8 <212> PRT

<213> Secuencia artificial <220>

<223> secuencia consenso A/H1/HA0 sintéticamente construida <400>3

Asn lie Pro Ser lie Gln Ser Arg 1 5

<210>4 <211> 11 <212> PRT

<213> Secuencia artificial <220>

<223> secuencia consenso A/H1/HA0 sintéticamente construida <400>4

Gly Leu Phe Gly Ala lie Ala Gly Phe lie Glu 15 10

<210>5 <211>8 <212> PRT

<213> Secuencia artificial <220>

<223> secuencia consenso B/HA0 sintéticamente construida <400>5

Pro Ala Lys Leu Leu Lys Glu Arg 1 5

<210>6 <211> 11 <212> PRT

<213> Secuencia artificial <220>

<223> secuencia consenso B/HA0 sintéticamente construida <400>6

Gly Phe Phe Gly Ala lie Ala Gly Phe Leu Glu 15 10

<210>7 5 <211> 14

<212> PRT

<213> Secuencia artificial <220>

<223> secuencia consenso sintéticamente construida 10 <400> 7

Arg Gly lie Leu Phe Phe Gly Ala lie Ala Gly Phe Leu Glu 15 10

<210>8 <211> 330 <212> PRT

15 <213> Homo sapiens

<220>

<221> CHAIN <222> (1)...(330)

<223> Secuencia de aminoácidos de la cadena pesada de IgG1 de la región constante 20 <400> 8

Ala: Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Val Pro Ser Ser Lys

1: 5 10 15

Ser: Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr



: 20 25 30

Phe: Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser


: 35 40 45

Gly: Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser

: 50 55 60

Leu: Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr

65: 70 75 80

Tyr: lie Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys




: 85 90 95

Lys: Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys



: 100 105 110

Pro: Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe
Pro
Pro


: 115 120 125

Lys: Pro Lys Asp Thr Leu Met lie Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys

: 130 135 140

Val
Val
Val: Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp

145: 150 155 160

Tyr: Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu




: 165 170 175

Glu: Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu



: 180 185 190

His: Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn


: 195 200 205

Lys: Ala Leu Pro Ala Pro lie Glu Lys Thr lie Ser Lys Ala Lys Gly

: 210 215 220

Gln: Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu

225: 230 235 240

Leu: Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr




: 245 250 255

Pro: Ser Asp lie Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn



: 260 265 270

Asn: Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe


: 275 280 285

Leu: Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn

: 290 295 300

Val: Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr

305: 310 315 320

Gln: Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys




: 325 330

5

10

15

20

25

<210>9 <211> 121 <212> PRT

<213> Secuencia artificial <220>

<223> secuencia de aminoácidos de la cadena pesada de MAB1 sintéticamente construida del dominio variable <400>9

Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu 15 10 15

Thr Leu Ser Leu lie Cys Arg Val Ser Gly Gly Ser lie Ser Ser His 20 25 30

Tyr Trp Ser Trp lie Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp lie 35 40 45

Gly Tyr lie Ser Tyr Arg Gly Arg Ser Asn His Asn Pro Ser Leu Gly 50 55 60

Arg Arg Val Ser Met Ser lie Asp Thr Ser Glu Asn Gln Phe Ser Leu

65 70 75 80

Asn Leu Ser Ser Val lie Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala

85 90 95

Arg Asp Ala Thr Gly lie Arg Glu lie Asn Ala Leu Asp lie Trp Gly 100 105 110

Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 115 120

<210> 10 <211> 121 <212> PRT

<213> Secuencia artificial <220>

<223> secuencia de aminoácidos de la cadena pesada de MAB8 sintéticamente construida del dominio variable <400> 10

Glu: Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly

1: 5 10 15

Ser: Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Thr Tyr



: 20 25 30

Thr: Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Val


: 35 40 45

Ser
Ser: lie Thr Arg Thr Ser Ser Asn lie Tyr Tyr Ala Asp Ser Val

: 50 55 60

Glu: Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr

65: 70 75 80

Leu: Gln Met His Ser Leu Arg Val Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys




: 85 90 95

Ala: Arg lie Ser Gly Val Val Gly Pro Val Pro Phe Asp Tyr Trp Gly



: 100 105 110

Gln: Gly Thr Leu lie Thr Val Ser Ser


: 115 120

<210> 11 <211> 118 <212> PRT

<213> Secuencia artificial <220>

<223> secuencia de aminoácidos de la cadena pesada de MAB30 sintéticamente construida del dominio variable <400> 11

5

10

15

65

70

85

Ser: Gly Gly Gly 10 Leu Val Gln Pro Gly 15 Gly

Ala
Ala: Ser 25 Gly Phe Thr Phe Ser 30 Asp His

Gln: Ala 40 Pro Gly Lys Gly Leu 45 Glu Trp Val

Ala 55: Ala lie Tyr Thr Thr 60 Glu Tyr Ala Ala

Thr: lie Ser Arg Asp 75 Asp Leu Lys Ser Ser 80

Ser: Leu Lys Thr 90 Asp Asp Thr Ala lie 95 Tyr

Gly: Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr

100

Leu Val Thr Val Ser Ser 115

<210> 12 <211> 119 <212> PRT

<213> Secuencia artificial

105

lio

<220>

<223> secuencia de aminoácidos de la cadena pesada de MAB42 sintéticamente construida del dominio variable

<400> 12

Gln 1: Val Gln Leu Val 5 Gln Ser Gly Ala Glu 10 Val Lys Lys Pro Gly 15 Ala

Ser: Val Lys Val 20 Ser Cys Lys Ala Ser 25 Gly Tyr Ser Phe Asn 30 Gly Tyr

Tyr: Met His 35 Trp Val Arg Gln Ala 40 Pro Gly Gln Gly Leu 45 Glu Trp Met

Gly: Trp 50 lie Asn Leu Ser Ser 55 Gly Gly Thr Asp Tyr 60 Ala Gln Lys Phe

Gln 65: Gly Trp Val Thr Leu 70 Thr Arg Asp Thr Ser 75 lie Thr Thr Ala Tyr 80

Met: Glu Leu Ser Ser 85 Leu Arg Ser Asn Asp 90 Thr Ala Val Tyr Tyr 95 Cys

Ala Thr: Arg Leu lie Val 115 Arg 100 lie Pro Val Arg Ser Thr Ser Gly Gly 105 Leu Asp Ser Trp Gly 110 Gln Gly

<210> 13 <211> 121 <212> PRT

<213> Secuencia artificial <220>

<223> secuencia de aminoácidos de la cadena pesada de MAB48 sintéticamente construida del dominio variable <400> 13

Gln: Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser

1: 5 10 15

Ser: Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Val Thr Phe Thr Ala Tyr



: 20 25 30

Ala: lie Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Arg Gly Leu Glu Trp Met


: 35 40 45

Gly
Gly: lie Ser Pro Leu Phe Gly lie Val Asn Phe Gly Gln Asn Phe

: 50 55 60

Gln: Gly Arg Val Thr lie Thr Ala Asp Lys Ser Thr Gly Ala Ala Tyr

65: 70 75 80

Met: Glu Leu Ser Ser Leu Ser Ser Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys




: 85 90 95

Ala: Arg Gly Pro Tyr Tyr Tyr Asp Arg Ser His Leu Asp Tyr Trp Gly



: 100 105 110

Gln: Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser


: 115 120

20

<211> 121 <212> PRT

<213> Secuencia artificial <220>

5 <223> secuencia de aminoácidos de la cadena pesada de MAB49 sintéticamente construida del dominio variable

<400> 14

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Arg Pro Gly Ser 15 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30

Ala lie Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45

Gly Gly lie lie Gly Met Phe Gly Thr Thr Asn Tyr Ala Gln Lys Phe 50 55 60

Gln Gly Arg Val Thr lie Thr Ala Asp Glu Phe Thr Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Thr Ser Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Asp Arg Asn Tyr Tyr Ala Ser Gly Thr Tyr Asp His Trp Gly 100 105 110

Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120

<210> 15 <211> 120 10 <212> PRT

<213> Secuencia artificial

<220>

<223> secuencia de aminoácidos de la cadena pesada de MAB52 sintéticamente construida del dominio variable <400> 15

Gln: Val Leu Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser

1: 5 10 15

Ser: Val Asn lie Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Ser Asn Tyr



: 20 25 30

Ala: lie Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Asp Trp Met


: 35 40 45

Gly: Arg lie lie Pro lie Phe Gly Thr Ala Asn Tyr Ala Gln Lys Phe

: 50 55 60

Gln: Gly Arg Leu Thr lie Thr Ala Asp Glu Ser Thr Ser Thr Ala Tyr

65: 70 75 80

Met: Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Phe Tyr Cys




: 85 90 95

Ala: lie Thr Lys Pro Gly Ser Val Tyr Ala Leu Asp Val Trp Gly Gln



: 100 105 110

Gly: Thr Thr Val Thr Val Ser Ser


: 115 120

<210> 16 <211> 120 <212> PRT

<213> Secuencia artificial 20 <220>

<223> secuencia de aminoácidos de la cadena pesada de MAB53 sintéticamente construida del dominio variable <400> 16

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Arg Lys Pro Gly Ser 15 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Val Ser Gly Gly lie lie Arg Lys Tyr

5

10

15

Ala

Gly

Gln

65

Met

Ala

Gly

lie: Asn 20 Trp Val Arg Gln Ala 25 Pro

Gly: 35 lie lie Ala lie Phe 40 Asn Thr

50 Gly: Arg Val Thr lie 55 Thr Ala Asp

Glu: Leu Ser Ser 70 Leu Arg Ser
Glu

Arg: Gly Met 85 Asn Tyr Tyr Ser Asp

Ser: Leu 100 Val Thr Val Ser Pro 105

: 115 120




: 30

Gly: Gln Gly Leu 45 Glu Trp Met

Ala: Asn Tyr 60 Ala Gln Lys Phe

Glu: Ser 75 Thr Ser Thr Val Tyr 80

Asp 90: Thr Ala Leu Tyr Tyr 95 Cys

Tyr: Phe Asp Tyr Trp 110 Gly Gln

<210> 17 <211>120 <212> PRT

<213> Secuencia artificial <220>

<223> secuencia de aminoácidos de la cadena pesada de MAB285 sintéticamente construida del dominio variable <400> 17

Gln: Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala

1: 5 10 15

Ser: Val Lys Val Ser Cys Arg Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Gly Tyr



: 20 25 30

Tyr: Met Gln Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met


: 35 40 45

Gly: Phe lie Asn Ala Asn Thr Gly Val Thr Asn Phe Ala Gln Lys Phe

: 50 55 60

Gln: Gly Arg Val Thr Leu Thr Arg Asp Thr Ser lie Ser Thr Ala Tyr

65: 70 75 80

Met: Glu Leu Arg Arg Leu Thr Ser Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys




: 85 90 95

Ala: Arg Ala Pro Gln Trp Leu Ser Tyr Ser Phe Asp lie Trp Gly Gln



: 100 105 110

Gly: Thr Met Val Thr Val Ser Ser


: 115 120

<210> 18 <211> 123 <212> PRT

<213> Secuencia artificial <220>

<223> secuencia de aminoácidos de la cadena pesada de MAB321 sintéticamente construida del dominio variable

<400> 18

Glu 1: Val Gln Leu Val 5 Glu Ser Gly Ala Glu 10 Val Arg Ser Pro Gly 15 Ala

Ser: Val Lys Leu 20 Ser Cys Lys Ala Ser 25 Ala Tyr Thr Phe lie 30 Asn Tyr

Tyr: Leu His 35 Trp Val Arg Gln Ala 40 Pro Gly Gln Arg Leu 45 Glu Trp Met

Gly: Trp 50 lie Asn Pro Asp Ser 55 Gly Val Thr Glu Tyr 60 Ala Gln Thr Phe

Gln 65: Gly Arg Val Thr Met 70 Thr Arg Asp Thr Ser 75 lie Asn Thr Ala Tyr 80

Leu: Asp Leu Glu Arg 85 Leu Thr Ser Asp Asp 90 Thr Ala Val Tyr Tyr 95 Cys

Ala Arg Gly Phe lie Pro Trp Gly Gly Lys Tyr Phe Tyr Leu Asp Tyr 100 105 110

Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120

20 <210> 19

<211> 127 <212> PRT

<213> Secuencia artificial

<223> secuencia de aminoácidos de la cadena pesada de MAB322 sintéticamente construida del dominio variable <400> 19

Gln 1: Val Gln Leu Gln 5 Gln Ser Gly Pro Gly 10 Leu Val Lys Pro Ser 15 Gln

Thr: Leu Ser Leu 20 Thr Cys Ser Val Ser 25 Gly Ser Phe lie Arg 30 Ser Gly

Asp: Tyr Asn 35 Trp Ser Trp lie Arg 40 Gln Pro Pro Gly Lys 45 Gly Leu Glu

Trp: lie 50 Gly Tyr lie Asp Asn 55 Ser Gly Ser Thr His 60 Tyr Asn Pro Ser

Leu 65: Lys Ser Arg Val Ser 70 lie Ser Val Asp Thr 75 Ser Lys Asn His Leu 80

Ser: Leu Lys Leu Ser 85 Phe Val Thr Asp Ala 90 Asp Thr Gly Val Tyr 95 Tyr

Cys: Ala Gly Glu 100 Gln Ala Ser Asp Ser 105 Arg Gly Asn Tyr Tyr 110 Tyr Tyr

Ala: Met Asp 115 Val Trp Gly Gln Gly 120 Thr Pro Val Thr Val 125 Ser Ser

5 <210> 20

<211> 120 <212> PRT

<213> Secuencia artificial <220>

10 <223> secuencia de aminoácidos de la cadena pesada de MAB375 sintéticamente construida del dominio variable

<400> 20

Gln: Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Gly Leu Met Lys Pro Ser Glu

1: 5 10 15

Thr: Leu Ser Leu Ser Cys Thr Val Ser Gly Asp Ser Val Ser Ser Phe



: 20 25 30

Tyr: Trp Ser Trp lie Arg Gln Ser Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp lie


: 35 40 45

Gly: Tyr Leu Leu Tyr Ser Gly Asn Thr Lys Tyr Asn Pro Ser Leu Lys

: 50 55 60

Ser: Arg Ala Thr lie Ser Arg Asp Thr Ser Lys Asn Gln Leu Ser Leu

65: 70 75 80

Glu: Leu Thr Ser Leu Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala




: 85 90 95

Arg: Val Val Arg Trp Arg His Gly Gly Asp Leu Asp Val Trp Gly Gln



: 100 105 110

Gly: Thr Met Val Thr Val Ser Ser


: 115 120

<210> 21 <211> 126 15 <212> PRT

<213> Secuencia artificial

<220>

<223> secuencia de aminoácidos de la cadena pesada de MAB376 sintéticamente construida del dominio variable <400> 21

5

10

15

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Asp Leu Val Gln Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Val Ser Gly Phe lie Phe Arg Lys Tyr 20 25 30

lie Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Pro Glu Trp Val 35 40 45

Ala Val lie Ser Ser Ser Gly Asp Arg Thr Phe Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Glu Gly Arg Phe lie Val Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asp Thr Leu Phe

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Thr Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Lys Asp Leu Leu Gly Phe Cys Ser Gly Gly Asp Cys Leu Lys Val 100 105 110

Phe Asp Leu Trp Gly Arg Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser 115 120 125

<210> 22 <211> 120 <212> PRT

<213> Secuencia artificial <220>

<223> secuencia de aminoácidos de la cadena pesada de MAB377 sintéticamente construida del dominio variable

<400> 22

Gln 1: Val Gln Leu Leu 5 Gln Ser Gly Pro Gly 10 Leu lie Lys Ala Ser 15 Glu

Thr: Leu Ser Leu 20 Ser Cys Ser Val Ser 25 Asn Asp Ser Val Ser 30 Asn Tyr

Tyr: Trp Ser 35 Trp lie Arg Gln Ser 40 Pro Glu Lys Gly Leu 45 Glu Trp lie

Gly: Tyr 50 Leu Leu Tyr Ser Gly 55 Asn Thr Lys Tyr Asn 60 Pro Ser Leu Lys

Ser 65: Arg Ala lie lie Ser 70 Arg Asp Met Ser Lys 75 Asn Gln Leu Ser Leu 80

Arg: Val Thr Ser Val 85 Thr Ala Ala Asp Thr 90 Ala lie Tyr Tyr Cys 95 Ala

Arg Gly: Val Thr Val Ala 115 Arg 100 Val Trp Thr Arg Val Phe Ser Gly Thr 120 Gly 105 Asp Met Asp Val Trp 110 Gly Gln

<210> 23 <211> 120 <212> PRT

<213> Secuencia artificial <220>

<223> secuencia de aminoácidos de la cadena pesada de MAB378 sintéticamente construida del dominio variable <400> 23

Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Gly Leu lie Lys Pro Ser Glu

15 10 15

Thr Leu Ser Leu Ser Cys Ser Val Ser Gly Asp Ser Val Asn Asn Tyr 20 25 30

Tyr Trp Ser Trp lie Arg Gln Pro Pro Glu Lys Gly Leu Glu Trp lie 35 40 45

Gly Tyr Leu Gln Tyr Ser Gly Ser Thr Lys Tyr Asn Pro Ser Leu Lys 50 55 60

Ser Arg Val Thr lie Ser Arg Asp Thr Ser Lys Asn Gln Leu Ser Leu

65 70 75 80

Lys Leu Thr Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala lie Tyr Tyr Cys Ala

85 90 95

Arg Val Val Arg Trp Arg His Gly Gly Asp Met Asp Val Trp Gly Gln 100 105 110

Gly Thr Ala Val Thr Val Ser Ser 115 120

5

10

15

20

25

<211> 107 <212> PRT <213> Homo sapiens

<220>

<221> CHAIN <222> (1)...(107)

<223> secuencia de aminoácidos de la cadena ligera de la región constante kappa <400> 24

Arg Thr Val 1

Gln Leu Lys

Tyr Pro Arg 35

Ser Gly Asn 50

Thr Tyr Ser 65

Lys His Lys Pro Val Thr

<210> 25 <211> 106 <212> PRT <213> Homo sapiens

<220>

<221> CHAIN <222> (1)...(106)

<223> secuencia de aminoácidos de la cadena ligera de la región constante lambda <400> 25

Gly Gln Pro Lys Ala Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser 15 10 15

Glu Glu Leu Gln Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu lie Ser Asp 20 25 30

Phe Tyr Pro Gly Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Ser Ser Pro 35 40 45

Val Lys Ala Gly Val Glu Thr Thr Thr Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn 50 55 60

Lys Tyr Ala Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys

65 70 75 80

Ser His Arg Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val

85 90 95

Glu Lys Thr Val Val Pro Ala Glu Cys Ser 100 105

<210> 26 <211> 214 <212> PRT

<213> Secuencia artificial <220>

<223> secuencia de aminoácidos de la cadena ligera de MAB1 sintéticamente construida <400> 26

Ala
Ala: Pro Ser Val Phe lie Phe Pro Pro Ser Asp Glu

: 5 10 15

Ser: Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe

20: 25 30

Glu: Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln




: 40 45

Ser: Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp
Ser



: 55 60

Leu: Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu


: 70 75 80

Val: Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser

: 85 90 95

Lys: Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys

100: 105

5

10

15

Asp 1: lie Gln Met Thr 5 Gln Ser Pro Ser Ser 10 Leu Ser Ala Ser Gly 15 Gly

Asp: Arg Val Thr 20 lie Thr Cys Arg Ala 25 Ser Gln Ser Val Ser 30 Thr Tyr

Leu: Asn Trp 35 Tyr Gln Gln Lys Pro 40 Gly Lys Ala Pro Asn 45 Leu Leu Val

Tyr: Ala 50 Val Ser Asn Leu Gln 55 Arg Gly Val Pro Ser 60 Arg Phe Ser Gly

Ser 65: Gly Ser Gly Thr His 70 Phe Thr Leu Thr lie 75 Ser Ser Leu Gln Pro 80

Glu: Asp Phe Ala Thr 85 Tyr Tyr Cys Gln Gln 90 Ser Tyr Ser Asp Pro 95 Leu

Thr: Phe Gly Gly 100 Gly Thr Lys Val Glu 105 lie Lys Arg Thr Val 110 Ala Ala

Pro: Ser Val 115 Phe lie Phe Pro Pro 120 Ser Asp Glu Gln Leu 125 Lys Ser Gly

Thr: Ala 130 Ser Val Val Cys Leu 135 Leu Asn Asn Phe Tyr 140 Pro Arg Glu Ala

Lys 145: Val Gln Trp Lys Val 150 Asp Asn Ala Leu Gln 155 Ser Gly Asn Ser Gln 160

Glu: Ser Val Thr Glu 165 Gln Asp Ser Lys Asp 170 Ser Thr Tyr Ser Leu 175 Ser

Ser: Thr Leu Thr 180 Leu Ser Lys Ala Asp 185 Tyr Glu Lys His Lys 190 Val Tyr

Ala Phe: Cys Asn 210 Glu 195 Arg Val Gly Thr Glu His Cys Gln Gly 200 Leu Ser Ser Pro Val 205 Thr Lys Ser

<210> 27 <211> 215 <212> PRT

<213> Secuencia artificial <220>

<223> secuencia de aminoácidos de la cadena ligera de MAB8 sintéticamente construida <400> 27

Asp lie Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 15 10 15

Asp Arg Val Thr lie Thr Cys Arg Ala Ser Gln Thr lie Ser Lys Tyr 20 25 30

Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Arg Ala Pro Lys Leu Leu lie 35 40 45

Tyr Ser Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Thr Gly 50 55 60

Ser 65: Gly Ser Gly Thr Asp 70 Phe Thr Leu Thr

Glu: Asp Phe Ala Thr 85 Tyr Tyr Cys Gln Gln 90

lie: Thr Phe Gly 100 Pro Gly Thr Lys Val 105 Asp

Ala: Pro Ser 115 Val Phe lie Phe Pro 120 Pro Ser

Gly: Thr 130 Ala Ser Val Val Cys 135 Leu Leu Asn

Ala 145: Lys Val Gln Trp Lys 150 Val Asp Asn Ala

Gln: Glu Ser Val Thr 165 Glu Gln Asp Ser Lys 170

Ser
Ser: Thr Leu 180 Thr Leu Ser Lys Ala 185 Asp

Tyr Ser: Ala Phe 210 Cys 195 Asn Glu Arg Val Gly Thr Glu His Cys 215 Gln 200 Gly Leu

lie 75: Thr Ser Leu Gln Pro 80

Ser: Tyr Arg Pro Ser 95 Gln

lie: Lys Arg Thr 110 Val Ala

Asp: Glu Gln 125 Leu Lys Ser

Asn: Phe 140 Tyr Pro Arg Glu

Leu 155: Gln Ser Gly Asn Ser 160

Asp: Ser Thr Tyr Ser 175 Leu

Tyr: Glu Lys His 190 Lys Val

Ser
Ser: Pro 205 Val Thr Lys

<210> 28 <211> 214 <212> PRT

<213> Secuencia artificial

<223> secuencia de aminoácidos de la cadena ligera de MAB30 sintéticamente construida

<400> 28

Asp 1: lie Gln Met Thr 5 Gln Ser Pro Ser Thr 10 Leu Ser Ala Ser Val 15 Gly

Asp: Arg Val Thr 20 lie Thr Cys Arg Ala 25 Ser Gln Ser lie Ser 30 Ser Trp

Leu: Ala Trp 35 Tyr Gln Gln Lys Pro 40 Gly Asn Ala Pro Asn 45 Leu Leu lie

Tyr: Lys 50 Ala Ser Ser Leu Glu 55 Ser Gly Val Pro Ser 60 Arg Phe Ser Gly

Ser 65: Gly Ser Gly Thr Glu 70 Phe Thr Leu Thr lie 75 Ser Ser Leu Gln Pro 80

Asp
Asp: Phe Ala Thr 85 Tyr Tyr Cys Gln Gln 90 Tyr Asp Thr Tyr Ser 95 Pro

Thr: Phe Gly Gln 100 Gly Thr Lys Val Glu 105 lie Lys Arg Thr Val 110 Ala Ala

5 <210> 29

<211> 216 <212> PRT

<213> Secuencia artificial <220>

10 <223> secuencia de aminoácidos de la cadena ligera de MAB42 sintéticamente construida

<400> 29

Gln: Ser Ala Leu Thr Gln Pro Ala Ser Val Ser Gly Ser Ala Gly
Gln

1: 5 10 15

Ser: lie Thr lie Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Ala Tyr



: 20 25 30

Asn: Phe Val Ser Trp Tyr Gln His His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu


: 35 40 45

Met: lie Tyr Asp Val Asp Asn Arg Pro Ser Gly Val Ser Asn Arg Phe

: 50 55 60

Ser: Gly Ser Lys Ser Gly Asp Thr Ala Ser Leu Thr lie Ser Gly Leu

65: 70 75 80

Gln: Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Tyr Arg Arg Asn




: 85 90 95

Gly: Pro Trp Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly Gln



: 100 105 110

Pro: Lys Ala Ala Pro Thr Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser Glu Glu


: 115 120 125

Leu: Gln Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu lie Ser Asp Phe Tyr

: 130 135 140

Pro: Gly Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Ser Ser Pro Val Lys

145: 150 155 160

Ala: Gly Val Glu Thr Thr Thr Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn Lys Tyr




: 165 170 175

Ala
Ala: Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys Ser His



: 180 185 190

Arg: Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val Glu Lys


: 195 200 205

Thr: Val Val Pro Ala Glu Cys Ser

: 210 215

<210> 30

<211> 215 <212> PRT

<213> Secuencia artificial <220>

5 <223> secuencia de aminoácidos de la cadena ligera de MAB48 sintéticamente construida

<400> 30

Glu lie Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly

15 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Gly Ser Ser

20 25 30

Asp Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu

35 40 45

lie Tyr Gly Ala Ser Ser Arg Ala Thr Gly lie Pro Asp Arg Phe Ser

50 55 60

Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr lie Ser Arg Leu Glu

65 70 75 80

Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Val Ser Ser Pro

85 90 95

Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu lie Lys Arg Thr Val Ala

100 105 110

Ala Pro Ser Val Phe lie Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser

115 120 125

Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu

130 135 140

Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser

145 150 155 160

Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu

165 170 175

Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val

180 185 190

Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys

195 200 205

Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys

210 215

10 <210> 31

<211> 214 <212> PRT

<213> Secuencia artificial <220>

15 <223> secuencia de aminoácidos de la cadena ligera de MAB49 sintéticamente construida

<400> 31

5

10

Asp 1: lie Gln Met Thr 5 Gln Ser Pro Ser Ser 10 Leu Ser Ala Ser Val 15 Gly

Asp: Arg Val Thr 20 lie Thr Cys Arg Ala 25 Ser Gln Ser lie Ser 30 Arg Tyr

Leu: Asn Trp 35 Tyr Gln Gln Lys Pro 40 Gly Lys Ala Pro Lys 45 Leu Leu lie

Tyr: Ser 50 Ala Ser Ser Leu Gln 55 Ser Gly Val Pro Ser 60 Arg Phe Gly Gly

Ser 65: Gly Ser Gly Thr Asp 70 Phe Thr Leu Thr lie 75 Ser Ser Leu Gln Pro 80

Glu: Asp Phe Ala Leu 85 Tyr Tyr Cys Gln Gln 90 Thr Tyr Ser lie Pro 95 lie

Thr: Phe Gly Gln 100 Gly Thr Arg Leu Asp 105 Phe Lys Arg Thr Val 110 Ala Ala

<210> 32 <211> 215 <212> PRT

<213> Secuencia artificial <220>

<223> secuencia de aminoácidos de la cadena ligera de MAB52 sintéticamente construida <400> 32

Asp lie Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 15 10 15

Asp Arg Val Thr lie Thr Cys Arg Ala Ser Gln Thr lie Ser Thr Tyr

imagen1

Leu: Asn Trp 35 Tyr Gln Gln Lys Pro 40

Tyr: Thr 50 Ala Ser Ser Leu Gln 55 Ser

Ser 65: Gly Ser Gly Thr Asp 70 Phe Thr

Glu: Asp Phe Ala Thr 85 Tyr Tyr Cys

Trp: Thr Phe Gly 100 Pro Gly Thr Lys

Ala: Pro Ser 115 Val Phe lie Phe Pro 120

Gly: Thr 130 Ala Ser Val Val Cys 135 Leu

Ala 145: Lys Val Gln Trp Lys 150 Val Asp

Gln: Glu Ser Val Thr 165 Glu Gln Asp

Ser
Ser: Thr Leu 180 Thr Leu Ser Lys

Tyr: Ala Cys 195 Glu Val Thr His Gln 200

Ser: Phe 210 Asn Arg Gly Glu Cys 215

Gly: Lys Ala Pro Asn 45 Leu Leu lie

Gly: Val Pro Ser 60 Arg Phe Ser
Gly

Leu: Thr lie 75 Ser Ser Leu Gln Pro 80

Gln: Gln 90 Ser Tyr Asp Ala Pro 95 Thr

Val 105: Glu lie Lys Arg Thr 110 Val Ala

Pro: Ser Asp Glu Gln 125 Leu Lys Ser

Leu: Asn Asn Phe 140 Tyr Pro Arg Glu

Asn: Ala Leu 155 Gln Ser Gly Asn Ser 160

Ser: Lys 170 Asp Ser Thr Tyr Ser 175 Leu

Ala 185: Asp Tyr Glu Lys His 190 Lys Val

Gly: Leu Ser Ser Pro 205 Val Thr Lys

<210> 33 <211> 216 <212> PRT

5

10

<213> Secuencia artificial <220>

<223> secuencia de aminoácidos de la cadena ligera de MAB53 sintéticamente construida

<400> 33

Glu: lie Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly

1: 5 10 15

Glu: Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Arg Ser Asn



: 20 25 30

Asn: Leu Ala Trp Tyr Gln His Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu


: 35 40 45

lie: Phe Gly Ala Ser Ser Arg Ala Thr Gly lie Pro Asp Arg Phe Ser

: 50 55 60

Gly: Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr lie Ser Arg Leu Glu

65: 70 75 80

Pro: Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Gly Ser Ser
Pro




: 85 90 95

Ala: Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu lie Lys Arg Thr Val



: 100 105 110

Ala
Ala: Pro Ser Val Phe lie Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys


: 115 120 125

Ser: Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg

: 130 135 140

Glu: Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn

145: 150 155 160

Ser: Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr
Ser




: 165 170 175

Leu: Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys



: 180 185 190

Val: Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr


: 195 200 205

Lys: Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys

: 210 215

<210> 34 <211> 216 <212> PRT

<213> Secuencia artificial <220>

<223> secuencia de aminoácidos de la cadena ligera de MAB285 sintéticamente construida

<400> 34

Gln: Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly
Gln

1: 5 10 15

Arg: Val Thr lie Ser Cys Ser Gly Ser Ser Ser Asn lie Gly Ser Asn



: 20 25 30

Pro: Val Asn Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Arg Leu Leu


: 35 40 45

lie: Tyr Ser Asn Asn Gln Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser

: 50 55 60

Gly: Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala lie Ser Gly Leu Arg

65: 70 75 80

Ser: Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Thr Ser Trp Asp Asp Ser Leu




: 85 90 95

Asn: Ala Trp Val Phe Gly Gly Gly Thr Arg Leu Thr Val Leu Gly Gln



: 100 105 110

Pro: Lys Ala Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser Glu Glu


: 115 120 125

Leu: Gln Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu lie Ser Asp Phe Tyr

: 130 135 140

Pro: Gly Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Ser Ser Pro Val Lys

145: 150 155 160

Ala: Gly Val Glu Thr Thr Thr Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn Lys Tyr




: 165 170 175

Ala
Ala: Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys Ser His



: 180 185 190

Arg: Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val Glu Lys


: 195 200 205

Thr: Val Val Pro Ala Glu Cys Ser

: 210 215

<210> 35 <211> 213 <212> PRT

<213> Secuencia artificial 5 <220>

<223> secuencia de aminoácidos de la cadena ligera de MAB321 sintéticamente construida <400> 35

Asp lie Val Leu Thr Gln Ser Pro Pro Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 15 10 15

Asp Arg Val Thr lie Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser lie Asn Asn Tyr 20 25 30

Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Asn Ala Pro Arg lie Leu lie 35 40 45

Tyr Gly Ala Ser Ser Leu Val Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr lie Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Tyr Arg Pro Leu Tyr

85 90 95

Thr Phe Gly Pro Gly Thr Gln Leu Asp Val Lys Arg Thr Val Ala Ala

100 105 110

Pro Ser Val Phe lie Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly 115 120 125

Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala 130 135 140

Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln

145 150 155 160

Glu Ser Val Thr Glu Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser

165 170 175

Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala 180 185 190

Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe 195 200 205

Asn Arg Gly Glu Cys

10 210

<210> 36 <211> 213 <212> PRT

<213> Secuencia artificial 15 <220>

<223> secuencia de aminoácidos de la cadena ligera de MAB322 sintéticamente construida <400> 36

Asp 1: lie Val Met Thr 5 Gln Ser Pro Ser Ser 10 Leu Ser Ala Ser Val 15 Gly

Asp: Arg Val Thr 20 lie Thr Cys Arg Ala 25 Ser Glu Ser lie Ser 30 Ala Tyr

Leu: Asn Trp 35 Tyr Gln His Thr Pro 40 Gly Arg Ala Pro Lys 45 Leu Leu lie

Tyr: Ala 50 Ala Ser Ser Leu Glu 55 Thr Gly Val Pro Ser 60 Arg Phe Ser Gly

Ser 65: Gly Ser Gly Thr Glu 70 Phe Thr Leu Thr lie 75 Ser Gly Leu Gln Pro 80

Glu: Asp Phe Val Thr 85 Tyr Tyr Cys Gln Gln 90 Thr Tyr Asn Thr Pro 95 Arg

Glu: Ser Val Thr Glu 165 Asp Ser Lys Asp Ser 170 Thr Tyr Ser Leu Ser 175 Ser

Thr: Leu Thr Leu 180 Ser Lys Ala Asp Tyr 185 Glu Lys His Lys Val 190 Tyr Ala

Cys Asn: Glu Arg 210 Val 195 Gly Thr Glu His Cys Gln Gly Leu 200 Ser Ser Pro Val Thr 205 Lys Ser Phe

<210> 37 <211> 214 <212> PRT

5 <213> Secuencia artificial

<220>

<223> secuencia de aminoácidos de la cadena ligera de MAB375 sintéticamente construida

<400> 37

Asp 1: lie Gln Met Thr 5 Gln Ser Pro Ser Phe 10 Leu Ser Ala Ser Val 15 Gly

Asp: Arg Val Thr 20 Phe Thr Cys Arg Ala 25 Ser Gln Gly lie Ala 30 Ser Ser

Leu: Ala Trp 35 Tyr Gln Gln Lys Ala 40 Gly Lys Ala Pro Lys 45 Leu Leu lie

Tyr: Ala 50 Ala Ser Thr Leu Glu 55 Asp Gly Val Pro Ser 60 Arg Phe Ser Gly

Ser 65: Gly Phe Gly Thr Glu 70 Phe Thr Leu Thr lie 75 Thr Ser Leu Gln Pro 80

Glu: Asp Phe Ala Thr 85 Tyr Tyr Cys His Gln 90 Val Asn Ser Tyr Pro 95 Arg

Thr: Phe Gly Pro 100 Gly Thr Thr Val Asp 105 lie Asn Arg Thr Val 110 Ala Ala

10 <210> 38

<211> 214 <212> PRT

<213> Secuencia artificial

5

10

<223> secuencia de aminoácidos de la cadena ligera de MAB376 sintéticamente construida <400> 38

Asp lie Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Thr Leu Ser Ala Ser Val Gly 15 10 15

Asp Thr Val Thr lie Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser lie Ser Thr Trp 20 25 30

Leu Ala Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Arg Ala Pro Lys Leu Leu lie 35 40 45

Tyr Gln Ala Ser Ser Leu Glu Gly Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Asn Leu Thr lie Ser Gly Leu Gln Pro

65 70 75 80

Asp Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln Tyr Asn Thr Tyr Ser Lys

85 90 95

Ser Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu lie Lys Arg Thr Val Ala Ala 100 105 110

Pro Ser Val Phe lie Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly 115 120 125

Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala 130 135 140

Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln

145 150 155 160

Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser

165 170 175

Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr

180 185 190

Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser 195 200 205

Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210

<210> 39 <211> 214 <212> PRT

<213> Secuencia artificial <220>

<223> secuencia de aminoácidos de la cadena ligera de MAB377 sintéticamente construida

<400> 39

Asp 1: lie Gln Met Thr 5 Gln Ser Pro Ser Phe 10 Leu Ser Ala Ser Val 15 Gly

Asp: Arg Val Thr 20 lie Thr Cys Arg Ala 25 Ser Gln Gly lie Ala 30 Thr Ser

Leu: Ala Trp 35 Tyr Gln Gln Lys Pro 40 Gly Lys Ala Pro Arg 45 Leu Leu lie

Tyr: Ala 50 Ala Ser Thr Leu Glu 55 Ser Gly Val Pro Ser 60 Arg Phe Ser Gly

Gly 65: Gly Ser Gly Thr Asp 70 Phe Thr Leu Thr lie 75 Ser Ser Leu Gln Pro 80

Glu: Asp Phe Ala Val 85 Tyr Tyr Cys Gln Gln 90 Val Asn Ser Tyr Pro 95 Arg

Thr: Phe Gly Pro 100 Gly Thr Lys Leu Asp 105 Val Lys Arg Thr Val 110 Ala Ala

5

10

15

20

25

<210> 40 <211> 214 <212> PRT

<213> Secuencia artificial <220>

<223> secuencia de aminoácidos de la cadena ligera de MAB378 sintéticamente construida <400> 40

Asp lie Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Phe Leu Ser Ala Ser Val Gly 15 10 15

Asp Arg Val Thr Met Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly lie Ser Ser Tyr 20 25 30

Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu lie

35 40 45

Tyr Ala Ala Ser Thr Leu Glu Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60

Ser 65: Gly Ser Gly Thr Glu 70 Phe Thr

Glu: Asp Phe Ala lie 85 Tyr Tyr Cys

Thr: Phe Gly Pro 100 Gly Thr Lys Val

Pro: Ser Val 115 Phe lie Phe Pro Pro 120

Thr: Ala 130 Ser Val Val Cys Leu 135 Leu

Lys 145: Val Gln Trp Lys Val 150 Asp Asn

Glu: Ser Val Thr Glu 165 Gln Asp Ser

Ser: Thr Leu Thr 180 Leu Ser Lys Ala

Ala Phe: Cys Asn 210 Glu 195 Arg Val Gly Thr Glu His Cys Gln Gly 200

Leu: Thr lie 75 Ser Ser Leu Gln Pro 80

Gln: Gln 90 Val Asn Gly Tyr Pro 95 Arg

Asp 105: lie Lys Arg Thr Val 110 Ala Ala

Ser: Asp Glu Gln Leu 125 Lys Ser Gly

Asn
Asn: Phe Tyr 140 Pro Arg Glu Ala

Ala: Leu Gln 155 Ser Gly Asn Ser Gln 160

Lys: Asp 170 Ser Thr Tyr Ser Leu 175 Ser

Asp 185: Tyr Glu Lys His Lys 190 Val Tyr

Leu: Ser Ser Pro Val 205 Thr Lys Ser

<210> 41 <211> 1599 <212> DNA <213> Homo sapiens

<220>

<221> característica mixta <222> (1)...(1599)

<223> Secuencia de nucleótidos de la cadena ligera de IgG1 de la región constante

<220>

<221> intrón <222> (289)...(685)

<220>

<221> intrón <222> (731)...(848)

<220>

<221> intrón <222> (1208) ... (1277)

<400> 41

5

10

15

20

25

gcctccacca agggcccatc agtcttcccc ctggcaccct ggcacaacgg ccctgggctg cctggtcaag gactacttcc tggaactcag gcgccctgac cagcggcgtg cacaccttcc ggactctact ccctcagcag cgtggtgacc gtgccctcca tacatctgca acgtgaatca caagcccagc aacaccaagg aggccagcac agggagggag ggtgtctgct ggaagccagg gcatcccggc tatgcagtcc cagtccaggg cagcaaggca ccggaggcct ctgcccgccc cactcatgct cagggagagg ggctctgggc aggcacaggc taggtgcccc taacccaggc tgctgggctc agacctgcca agagccatat ccgggaggac accccaaagg ccaaactctc cactccctca gctcggacac agtaactccc aatcttctct ctgcagagcc caaatcttgt accgtgccca ggtaagccag cccaggcctc gccctccagc tagagtagcc tgcatccagg gacaggcccc agccgggtgc cttcctcagc acctgaactc ctggggggac cgtcagtctt aggacaccct catgatctcc cggacccctg aggtcacatg acgaagaccc tgaggtcaag ttcaactggt acgtggacgg agacaaagcc gcgggaggag cagtacaaca gcacgtaccg tcctgcacca ggactggctg aatggcaagg agtacaagtg

tcccagcccc catcgagaaa accatctcca aagccaaagg ggccacatgg acagaggccg gctcggccca ccctctgccc acctctgtcc ctacagggca gccccgagaa ccacaggtgt gaggagatga ccaagaacca ggtcagcctg acctgcctgg gacatcgccg tggagtggga gagcaatggg cagccggaga cccgtgctgg actccgacgg ctccttcttc ctctatagca aggtggcagc aggggaacgt cttctcatgc tccgtgatgc tacacgcaga agagcctctc cctgtccccg ggtaaatga

<210> 42 <211> 363 <212> ADN

<213> Secuencia artificial <220>

<223> secuencia de nucleótidos del dominio variable de <400> 42

caggtgcagc tgcaggagtc gggcccagga ctggtgaagc atctgcagag tctctggtgg ctcgatcagt agtcattact ccagggaagg gactggagtg gattggatat atttcttata ccttcccttg ggagacgagt ctctatgtca atagacacgt aacctgagct ctgtgatcgc tgcggacacg gccgtatatt gggatcagag aaatcaatgc tcttgatatc tggggccaag tea

<210> 43 <211> 363 <212> ADN

<213> Secuencia artificial <220>

<223> secuencia de nucleótidos del dominio variable de

<400> 43

gaggtgcagc tggtggagtc tcctgtgcag cctctggttt ccagggcagg ggctagagtg gcagactcag tggagggccg ctgcagatgc atagcctgag ggggtagtgg gacctgtccc tet

<210> 44 <211> 354 <212> ADN

<213> Secuencia artificial

tgggggaggc ctggtcaagc cactttcagt acctatacta ggtctcgtcc attactagga attcaccatc tccagagaca agtcgaagac acggctgtgt ctttgactac tggggccagg

<220>

<223> secuencia de nucleótidos del dominio variable de

ctaccaagag cacctctggg 60 ccgaaccggt gacggtgtcg 120 cggctgtcct acagtcctca 180 gcagcttggg cacccagacc 240 tggacaagag agttggtgag 300 ctcagcgctc ctgcctggac 360 ggccccgtct gcctcttcac 420 gtcttctggc tttttcccca 480 cctgcacaca aaggggcagg 540 cctgcccctg acctaagccc 600 cttctctcct cccagattcc 660 gacaaaactc acacatgccc 720 tcaaggcggg acaggtgccc 780 tgacacgtcc acctccatct 840 cctcttcccc ccaaaaccca 900 cgtggtggtg gacgtgagcc 960 cgtggaggtg cataatgcca 1020 tgtggtcagc gtcctcaccg 1080 caaggtctcc aacaaagccc 1140

tgggacccgt ggggtgcgag 1200 tgagagtgac cgctgtacca 1260 acaccctgcc cccatcccgg 1320 tcaaaggctt ctatcccagc 1380 acaactacaa gaccacgcct 1440 agctcaccgt ggacaagagc 1500 atgaggctct gcacaaccac 1560

1599

la cadena pesada de MAB1 sintéticamente construida

cttcggagac cctgtccctc 60 ggagctggat ccggcagccc 120 gggggagaag caaccacaat 180 cggagaacca gttctccctg 240 actgtgcgag agatgctact 300 ggacaacggt caccgtctct 360

363

la cadena pesada de MAB8 sintéticamente construida

ctggggggtc cctgagactc 60 tgagttgggt ccgccaggct 120 ctagtagtaa tatatactac 180 acgccaagaa ctcactgtat 240 attactgtgc gagaatcagc 300 gaaccctgat caccgtctcc 360

363

la cadena pesada de MAB30 sintéticamente construida

5

10

15

20

25

30

<400> 44

gaggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc ttggtccagc ctggagggtc cctgagactc 60

tcctgtgcag cctctggatt caccttcagt gaccactaca tggactgggt ccgccaggct 120

ccagggaagg ggctggagtg ggttggccgt attagaaata aagctgccat ttacaccaca 180

gaatacgccg cgtctgtgaa aggcagattc accatctcaa gagatgattt aaagagctca 240

gtgtatctgc aaatgaacag tctgaaaacc gacgacacgg ccatatatta ctgtgctagg 300

agctatggat actttgacta ctggggccag ggaaccctgg tcaccgtctc ctca 354

<210> 45 <211> 357 <212> ADN

<213> Secuencia artificial

<220>

<223> secuencia de nucleótidos del dominio variable de la cadena pesada de MAB42 sintéticamente construida

<400> 45

caggtgcagc tggtacagtc tcctgcaagg cttctggata cctggacaag ggcttgagtg gcacagaaat ttcaggggtg atggagttga gcagcctgag cctcgcactg gtggacttga

<210> 46 <211> 363 <212> ADN

<213> Secuencia artificial

tggggctgag gtgaagaagc ttccttcaac ggctactata gatgggttgg atcaacctga ggtcactttg accagggaca atcgaacgac acggccgtgt ctcctggggc cagggaaccc

ctggggcctc agtgaaggtc 60 tgcactgggt gcgacaggcc 120 gcagtggtgg cacagattat 180 cgtccatcac cacagcctac 240 attactgtgc gagaattaga 300 tggtcatcgt ctcctca 357

<220>

<223> secuencia de nucleótidos del dominio variable de la cadena pesada de MAB48 sintéticamente construida <400> 46

caggtgcagc tggtgcagtc tggggctgag gtgaagaagc ctgggtcctc ggtgaaagtc 60

tcctgcaagg cttctggagt caccttcacc gcctatgcta tcagttgggt gcgacaggcc 120

cctggacgag ggcttgagtg gatgggaggg atcagccctt tgtttggaat agtaaatttc 180

ggacagaact tccagggcag agtcacgatt accgcggaca aatccacggg cgcagcctac 240

atggagctga gcagcctgag ctctgaggac acggccatgt attactgtgc gagaggaccc 300

tattattacg atagaagtca cctagactac tggggccagg gaaccctggt caccgtctcc 360

tea 363

<210> 47 <211> 363 <212> ADN

<213> Secuencia artificial

<220>

<223> secuencia de nucleótidos del dominio variable de la cadena pesada de MAB49 sintéticamente construida <400> 47

caggtgcagc tggtgcagtc tggggctgag gtgaagaggc ctgggtcctc ggtgaaggtc 60

tcctgcaagg cttctggagg caccttcagc agttatgeta ttagctgggt gcgacaggcc 120

cctggacaag ggcttgagtg gatgggaggg atcatcggta tgtttggaac aacaaactac 180

gcacagaagt tccagggcag agtcacgatt accgcggacg aattcacgag cacagcctac 240

atggagctga ccagcctgag atctgacgac acggccatgt attactgtgc gagagaccga 300

aattactatg cttcggggac ttatgaccac tggggccagg gaaccctggt caccgtctcc 360

tea 363

<210> 48 <211> 360 <212> ADN

<213> Secuencia artificial

<220>

5

10

15

20

25

30

caagtgctgc tggtgcagtc tggggctgaa gtgaagaagc ctgggtcctc ggtgaatatc 60

tcttgcaagg cttctggagg cactttcagc aactatgcta tctcctgggt gcgacaggcc 120

cctggacaag gtcttgactg gatgggaagg atcatcccta tctttggaac agcaaactac 180

gcacagaaat tccagggcag actcaccatt accgcggacg aatccacgag cacagcctac 240

atggaactga gcagcctgag atctgaagac acggccgtgt tttactgtgc gattactaaa 300

ccggggtctg tctacgcttt ggacgtctgg ggccaaggga ccacggtcac cgtctcctca 360

<210> 49 <211> 360 <212> ADN

<213> Secuencia artificial <220>

<223> secuencia de nucleótidos del dominio variable de la cadena pesada de MAB53 sintéticamente construida <400> 49

caggtgcagc tggtgcagtc tggggctgag gtgaggaagc cggggtcctc ggtgaaggtc 60 tcctgcaagg tttctggagg catcattagg aaatatgcta tcaactgggt gcgacaggcc 120 cccggacaag ggcttgagtg gatgggaggg atcatcgcta tctttaatac agcaaactat 180 gcacagaaat tccagggcag agtcacgatt accgcggacg agtccacgag cacagtctac 240 atggagctga gcagcctgag atctgaagac acggcccttt attactgtgc gagaggaatg 300 aattactaca gtgactactt tgactactgg ggccagggaa gccttgtcac cgtctcccca 360

<210> 50 <211> 360 <212> ADN

<213> Secuencia artificial

<220>

<223> secuencia de nucleótidos del dominio variable de la cadena pesada de MAB285 sintéticamente construida

<400> 50

caggtgcagc tggtgcagtc tcctgccggg cttctggata cctggccaag ggcttgagtg gctcagaagt ttcagggcag atggagctga ggaggctgac cagtggttat cgtattcttt

<210> 51 <211> 369 <212> ADN

<213> Secuencia artificial

tggggctgag gtgaagaagc caccttcacc ggctactata gatgggattc atcaatgcta ggtcaccttg accagggaca atctgccgac acggccgtgt tgatatctgg ggccaaggga

ctggggcctc agtgaaggtc 60 tgcagtgggt gcggcaggcc 120 acactggtgt cacaaacttt 180 cgtccatcag cacagcctac 240 attactgtgc gagagcgccc 300 caatggtcac cgtctcctca 360

<220>

<223> secuencia de nucleótidos del dominio variable de la cadena pesada de MAB321 sintéticamente construida <400> 51

gaggtgcagc tggtggagtc tggggctgag gtgaggagcc ctggggcctc agtgaagctc 60 tcctgcaagg cttctgcata caccttcatc aactactatc tgcactgggt gcgacaggcc 120 cctggacaaa ggcttgagtg gatgggatgg atcaaccctg acagtggtgt cacagaatat 180 gcacagacat ttcagggcag ggtcaccatg accagggaca cgtccatcaa tacagcctac 240 ctggacctgg agagactgac atctgacgac acggccgtat attactgtgc gagaggtttt 300 attccttggg gtgggaagta cttctacctt gactactggg gccagggaac cctggtcacc 360 gtctcctca 369

<210> 52 <211> 381 <212> ADN

<213> Secuencia artificial <220>

5

10

15

20

25

30

caggtacagc tgcagcagtc agggccagga ctggtgaagc cttcacagac cctgtccctc 60 acctgcagtg tatctggtag tttcatcaga agtggagatt ataattggag ttggatccgc 120 cagcccccag ggaagggcct ggagtggatt gggtacatcg ataatagcgg gagcacccac 180 tacaacccgt ccctcaagag tcgagttagc atatcagtgg acacgtccaa gaaccacttg 240 tccctgaagc tgagttttgt gactgacgca gacacgggcg tgtattactg tgccggagaa 300 caagcgtctg atagtcgtgg taattactac tactacgcta tggacgtctg gggccaaggg 360 accccggtca ccgtctcctc a 381

<210> 53 <211> 360 <212> ADN

<213> Secuencia artificial

<220>

<223> secuencia de nucleótidos del dominio variable de la cadena pesada de MAB375 sintéticamente construida <400> 53

caggtgcagc tgcagcagtc gggccccgga ctgatgaagc cttcggagac cctgtccctc 60 agctgcactg tctctggtga ctccgtcagt agtttttatt ggagttggat tcggcagtct 120 ccaggaaagg gactggagtg gattgggtat ttgctttaca gtgggaatac caagtataat 180 ccgtccctca agagtcgagc caccatatca agagacacgt ccaagaacca gttgtccctg 240 gagttgacct ctctgaccgc tgcggacacg gccgtctact attgtgcgag agtggtgaga 300 tggcgacatg gtggcgattt ggacgtctgg ggccaaggga ccacggtcac cgtctcctca 360

<210> 54 <211> 378 <212> ADN

<213> Secuencia artificial <220>

<223> secuencia de nucleótidos del dominio variable de la cadena pesada de MAB376 sintéticamente construida <400> 54

caggtgcagc tggtgcagtc cgggggggac ttggtccagc cgggggggtc cctgagactg 60 tcatgtgcag tctctggatt catctttaga aaatatatca tgagttgggt ccggcaggct 120 ccagggaagg ggccggagtg ggtcgcagtt attagttcta gtggtgaccg gacattctac 180 gccgactccg tggagggccg cttcatcgtc tccagagaca attccaagga cacactgttt 240 ctgcaaatga acagcctgag aaccgaggac acggccatgt attactgtgc gaaagacctt 300 ttgggatttt gtagtggtgg tgattgcctg aaggtcttcg atctctgggg ccgaggcacc 360

atggtcactg tctcctca

<210> 55 <211> 360 <212> ADN

<213> Secuencia artificial

378

<220>

<223> secuencia de nucleótidos del dominio variable de la cadena pesada de MAB377 sintéticamente construida <400> 55

caggtgcagc tgctgcagtc gggcccagga ctgataaagg cttcggagac cctgtctctc 60 agctgcagtg tctctaatga ctccgtcagt aattattatt ggagttggat ccggcagtcc 120 ccagagaagg gactggagtg gattgggtat ttgctttata gtgggaatac caagtacaat 180 ccctccctca agagtcgagc catcatatca agagacatgt ccaaaaatca gttgtccctc 240 agagtgactt ctgtgaccgc tgcggacacg gccatatatt attgtgcgcg agtggtgaga 300 tggcgatttg gtggtgatat ggacgtctgg ggtcaaggga ccgcggtcac cgtctccaca 360

<210> 56 <211> 360 <212> ADN

<213> Secuencia artificial <220>

5

10

15

20

25

30

35

caggtgcagc tgcagcagtc gggcccagga ctgataaagc cttcggagac cctgtctctc 60 agctgctctg tctctggtga ctccgtcaat aattattatt ggagttggat ccggcagccc 120 ccagagaagg gactggagtg gattgggtat ctgcagtata gtgggagtac aaagtacaac 180 ccctccctca agagtcgagt caccatatca agagacacgt ccaaaaacca gttgtccctg 240 aagctgacct ctgtgaccgc tgcggacacg gccatatatt attgtgcgag agtggtgaga 300 tggcgacatg gtggggatat ggacgtctgg ggccaaggga ccgcggtcac cgtctcctct 360

<210> 57 <211> 324 <212> ADN <213> Homo sapiens

<220>

<221> misc_feature <222> (1)...(324)

<223> secuencia de nucleótidos de la cadena ligera de la región constante kappa <400> 57

cgaactgtgg ctgcaccatc tgtcttcatc ggaactgcta gcgttgtgtg cctgctgaat tggaaggtgg ataacgccct ccaatcgggt agcaaggaca gcacctacag cctcagcagc aaacacaaag tctacgcctg cgaagtcacc agcttcaaca ggggagagtg ttag

<210> 58 <211> 318 <212> ADN <213> Homo sapiens

<220>

<221> característica mixta <222> (1)...(318)

<223> secuencia de nucleótidos de la cadena ligera de la región constante lambda <400> 58

ggtcagccca aggctgcccc ctctgtcact ctgttcccgc cctctagcga ggagcttcaa gccaacaagg ccacactggt gtgtctcata agtgacttct acccgggagc cgtgacagtg gcctggaagg cagatagcag ccccgtcaag gcgggagtgg agaccaccac accctccaaa caaagcaaca acaagtacgc ggccagcagc tatctgagcc tgacgcctga gcagtggaag tcccacagaa gctacagctg ccaggtcacg catgaaggga gcaccgtgga gaagacagtg gtccctgcag aatgctct

<210> 59 <211> 321 <212> ADN

<213> Secuencia artificial

60

120

180

240

300

318

ttcccgccat ctgatgagca gttgaaatct 60 aacttctatc ccagagaggc caaagtacag 120 aactcccagg agagtgtcac agagcaggac 180 accctgacgc tgagcaaagc agactacgag 240 catcagggcc tgagctcgcc cgtcacaaag 300

324

<220>

<223> secuencia de nucleótidos del dominio variable de la cadena ligera de MAB1 sintéticamente construida

<400> 59

gacatccaga tgacccagtc atcacttgcc gggcaagtca gggaaagccc ctaacctcct aggttcagtg gcagtggatc gaggatttcg caacttacta gggaccaagg tggagatcaa

tccatcctcc ctgtctgcat gagtgttagt acgtatttaa ggtctatgct gtatccaatt tgggacacat ttcactctca ctgtcaacag agttacagtg a

ctggaggaga cagagtcacc 60 attggtatca gcagaaacca 120 tacaacgtgg cgtgccatca 180 caatcagcag tctgcaacct 240 accctctcac tttcggcgga 300

321

<210> 60 <211> 324 <212> ADN

<213> Secuencia artificial

<220>

5

10

15

20

25

30

gacatccaga tgacccagtc tccatcttcc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60

atcacttgcc gggcaagtca gaccattagc aagtatttaa attggtatca gcagaagcca 120

gggagagccc ctaaactcct gatctactct gcgtccagtt tgcaaagtgg ggtcccatca 180

aggttcactg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcaccag tctgcaacct 240

gaagattttg caacttacta ctgtcaacag agttacagac cctcccagat cactttcggc 300

cctgggacca aagtggatat caaa 324

<210> 61 <211> 321 <212> ADN

<213> Secuencia artificial

<220>

<223> secuencia de nucleótidos del dominio variable de la cadena ligera de MAB30 sintéticamente construida

<400> 61

gacatccaga tgacccagtc atcacttgcc gggccagtca gggaacgccc ctaacctcct aggttcagcg gcagtggatc gatgattttg caacttatta gggaccaagg tggaaatcaa

<210> 62 <211> 330 <212> ADN

<213> Secuencia artificial

tccttccacc ctgtctgcat gagtattagt agttggttgg gatctataag gcgtctagtt tgggacagaa ttcactctca ctgccaacag tatgatactt a

ctgtaggaga cagagtcacc 60 cctggtatca gcagaaacca 120 tagaaagtgg ggtcccatca 180 ccatcagcag cctgcagcct 240 attctccgac gttcggccaa 300

321

<220>

<223> secuencia de nucleótidos del dominio variable de la cadena ligera de MAB42 sintéticamente construida <400> 62

cagtctgccc tgactcagcc tcctgcactg gaaccggcac caccccggcg aagcccccaa tctaatcgct tctctggctc caggctgagg acgaggctga ttcggcggag ggaccaagct

<210> 63 <211> 324 <212> ADN

<213> Secuencia artificial <220>

<223> secuencia de nucleótidos del dominio variable de la cadena ligera de MAB48 sintéticamente construida <400> 63

gaaattgtgt tgacgcagtc tccaggcacc ctgtctttgt ctccagggga aagagccacc 60

ctctcctgca gggccagtca gagtgttggc agcagcgact tagcctggta ccagcagaaa 120

cctggccagg ctcccaggct cctcatatat ggtgcatcca gccgggccac tggcatccca 180

gacaggttca gtggcagtgg gtctgggaca gacttcactc tcaccatcag cagactggag 240

cctgaagatt ttgcagtgta ttactgtcag cagtatgtca gttcacccct cactttcggc 300

ggagggacca aggtggagat caag 324

<210> 64 <211> 321 <212> ADN

<213> Secuencia artificial

tgcctccggg tctgggtctg ctggacaggc gatcaccatc 60 tgacgtctgt gcttataact ttgtctcctg gtaccaacac 120 actcatgatt tatgatgtcg ataatcggcc ctcatgggtt 180 caagtctggt aacacggcct ccctgaccat ctctgggctc 240 ttactactgc agctcatata gaaggaacgg cccttgcttg 300 gaccgtcctg 330

<220>

<223> secuencia de nucleótidos del dominio variable de la cadena ligera de MAB49 sintéticamente construida <400> 64

gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60

atcacttgcc gggcaagtca gagcattagc aggtatttaa attggtatca gcagaaacca 120

gggaaagccc ctaaactcct gatctattct gcatccagtt tgcaaagtgg ggtcccatca 180

aggttcggtg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240

gaagattttg cactttacta ctgtcaacag acttacagta tcccgatcac cttcggccaa 300

gggacacgac tggactttaa a 321

5

10

15

20

25

30

35

<210> 65 <211> 324 <212> ADN

<213> Secuencia artificial <220>

<223> secuencia de nucleótidos del dominio variable de la cadena ligera de MAB52 sintéticamente construida <400> 65

gacatccaga tgacccagtc atcacttgcc gggcaagtca gggaaagccc ctaacctcct agattcagtg gcagtggatc gaagattttg caacttatta ccagggacca aggtggaaat

<210> 66 <211> 327 <212> ADN

<213> Secuencia artificial <220>

<223> secuencia de nucleótidos del dominio variable de la cadena ligera de MAB53 sintéticamente construida <400> 66

gaaattgtgt tgacacagtc tccaggcacc ctgtctttgt ctccagggga aagagccacc 60

ctctcctgca gggccagtca gagtgttaga agcaacaact tagcctggta ccagcacaaa 120

cctggccagg ctcccaggct cctcatcttt ggtgcatcca gcagggccac tggcatccca 180

gacaggttca gtggcagtgg gtctgggaca gacttcactc tcaccatcag cagactggag 240

cctgaagatt ttgcagtata ttactgtcag cagtatggta gctcacctgc gctcactttc 300

ggcggaggga ccaaggtgga gatcaaa 327

<210> 67 <211> 330 <212> ADN

<213> Secuencia artificial

tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcact 60 gaccattagc acctatttaa attggtatca gcagaaacca 120 gatctatact gcatccagtt tgcaaagcgg ggtcccatca 180 tgggacagat ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 ctgtcaacag agttacgatg cccccacgtg gaccttcggc 300 caaa 324

<220>

<223> secuencia de nucleótidos del dominio variable de la cadena ligera de MAB285 sintéticamente construida

<400> 67

cagtctgtgc tgactcagcc tcttgttctg gaagcagctc ccaggaacgg cccccagact gaccgattct ctggctccaa tccgaggatg aggctgatta ttcggcgggg ggaccaggct

accctcagcg tctgggaccc caacatcgga agtaatcctg tctcatctat agtaataatc gtctggcacc tcagcctccc ctactgtaca tcatgggatg gaccgtccta

ccgggcagag ggtcaccatc 60 taaactggta ccagcagctc 120 agcggccctc aggggtccct 180 tggccatcag tgggctccgg 240 acagcctgaa tgcttgggtg 300

330

<210> 68 <211> 321 <212> ADN

<213> Secuencia artificial

<220>

<223> secuencia de nucleótidos del dominio variable de la cadena ligera de MAB321 sintéticamente construida

<400> 68

gatatcgtgt tgactcagtc atcacttgcc gggcaagtca gggaacgccc caagaatact aggttcagtg gcagtggatc gaagattttg caacttacta gggacccagc tggatgtcaa

tccaccctcc ctgtctgcat gagcattaat aactacttaa aatctatggt gcatccagtt tgggacagat ttcaccctca ctgtcaacag agttaccggc a

ctgtggggga cagagtcacc 60 attggtatca acagaaacca 120 tggtaagtgg ggtcccatca 180 ccatcagcag tctgcaacct 240 ccctgtacac ttttggcccg 300

321

<210> 69 <211> 321 <212> ADN

<213> Secuencia artificial

5

10

15

20

25

30

<223> secuencia de nucleótidos del dominio variable de la cadena ligera de MAB322 sintéticamente construida

<400> 69

gatatcgtga tgacccagtc atcacttgcc gggcaagtga gggagagccc ctaagctcct aggttcagtg gcagtggatc gaagattttg tcacttacta gggaccaagg tggaaatcaa

tccatcttcc ctgtctgcat gagcattagc gcttatttaa gatctatgct gcctccagtt tggcacagaa ttcactctca ctgtcaacag acttacaata a

ctgtgggaga cagagtcacc 60 attggtatca gcacacacca 120 tggaaactgg ggtcccatca 180 ccatcagcgg tctgcaacct 240 cccctcggac cttcggccaa 300

321

<210> 70 <211> 321 <212> ADN

<213> Secuencia artificial

<220>

<223> secuencia de nucleótidos del dominio variable de la cadena ligera de MAB375 sintéticamente construida <400> 70

gatatccaga tgacccagtc tccatccttc ttgtctgcat ctgtgggaga cagagtcacc 60

ttcacttgcc gggccagtca gggcattgcc agttctttag cctggtatca gcaaaaagca 120

gggaaagccc ctaagctcct gatctatgct gcttctactt tggaagatgg ggtcccatca 180

aggttcagcg gcagtggatt tgggacagaa ttcactctca caatcaccag cctgcagcct 240

gaagattttg caacctatta ctgtcatcag gtgaatagtt accctcggac tttcggccct 300

gggaccacag tggatatcaa c 321

<210> 71 <211> 322 <212> ADN

<213> Secuencia artificial

<220>

<223> secuencia de nucleótidos del dominio variable de la cadena ligera de MAB376 sintéticamente construida

<400> 71

gatatccaga tgacccagtc atcacttgcc gggccagtca gggagagccc ctaaactcct aggttcagcg gcagtgggtc gatgattttg caacttatta gggaccaagg tggaaatcaa

tccttccacc ctgtctgcat gagtattagt acttggttgg gatctatcag gcgtctagtt tgggacagac ttcaacctca ctgcctacaa tataacactt ac

ctgtgggaga cacagtcacc 60 cctggtttca gcagaaacca 120 tggaaggtgg ggtcccatca 180 ccatcagcgg cctgcagcct 240 attcgaagtc attcggccaa 300

322

<210> 72 <211> 322 <212> ADN

<213> Secuencia artificial

<220>

<223> secuencia de nucleótidos del dominio variable de la cadena ligera de MAB377 sintéticamente construida

<400> 72

gatatccaga tgacccagtc atcacctgcc gggccagtca gggaaagccc cgaggctcct aggttcagcg gcggtggatc gaagattttg ctgtttatta gggaccaaac tggatgtcaa

<210> 73 <211> 322 <212> ADN

<213> Secuencia artificial

tccatccttc ttgtctgcat gggcattgcc acttctttag gatctatgct gcatccactt tgggacagac ttcactctca ctgtcaacag gttaactcct ac

ctgtcggaga cagagtcacc 60 cctggtatca gcaaaaacct 120 tggaaagtgg ggtcccatca 180 caatcagcag tctgcagccc 240 atcctcggac tttcggccct 300

322

<220>

gatatccaga tgacccagtc tccatccttc ttgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc atgacctgcc gggccagtca gggcattagc agttatttag cctggtatca gcaaaaacca gggaaagccc ctaagctcct gatctatgct gcatcgactt tggaaagtgg ggtcccatca aggttcagcg gcagtggatc tgggacagaa ttcactctca caatcagcag cctgcagccc gaagattttg caatttatta ctgtcaacag gttaatggtt accctcggac tttcggccct gggaccaaag tggatatcaa ac

<210> 74 <211> 15 <212> PRT

5 <213> Secuencia artificial

<220>

<223> péptido sintéticamente construido derivado de HA2 <400> 74

Arg Gly Leu Phe Gly Ala lie Ala Gly Phe lie Glu Asn Gly Trp 15 10 15

10 <210> 75

<211> 450 <212> PRT

<213> Secuencia artificial <220>

15 <223> secuencia de aminoácidos de la cadena pesada de MAB53 sintéticamente construida

<400> 75

60

120

180

240

300

322

Gln 1: Val Gln Leu Val 5 Gln Ser Gly Ala Glu 10 Val Arg Lys Pro Gly 15 Ser

Ser: Val Lys Val 20 Ser Cys Lys Val Ser 25 Gly Gly lie lie Arg 30 Lys Tyr

Ala: lie Asn 35 Trp Val Arg Gln Ala 40 Pro Gly Gln Gly Leu 45 Glu Trp Met

Gly: Gly 50 lie lie Ala lie Phe 55 Asn Thr Ala Asn Tyr 60 Ala Gln Lys Phe

Gln 65: Gly Arg Val Thr lie 70 Thr Ala Asp Glu Ser 75 Thr Ser Thr Val Tyr 80

Met: Glu Leu Ser Ser 85 Leu Arg Ser Glu Asp 90 Thr Ala Leu Tyr Tyr 95 Cys

Ala: Arg Gly Met 100 Asn Tyr Tyr Ser Asp 105 Tyr Phe Asp Tyr Trp 110 Gly Gln

Gly: Ser Leu 115 Val Thr Val Ser Pro 120 Ala Ser Thr Lys Gly 125 Pro Ser Val

Phe: Pro 130 Leu Val Pro Ser Ser 135 Lys Ser Thr Ser Gly 140 Gly Thr Ala Ala

Leu 145: Gly Cys Leu Val Lys 150 Asp Tyr Phe Pro Glu 155 Pro Val Thr Val Ser 160

Trp: Asn Ser Gly Ala 165 Leu Thr Ser Gly Val 170 His Thr Phe Pro Ala 175 Val

Leu: Gln Ser Ser 180 Gly Leu Tyr Ser Leu 185 Ser Ser Val Val Thr 190 Val Pro

Ser
Ser: Ser 195 Leu Gly Thr Gln Thr 200 Tyr lie Cys Asn Val 205 Asn His Lys

Pro: Ser 210 Asn Thr Lys Val Asp 215 Lys Lys Val Glu Pro 220 Lys Ser Cys Asp

Lys 225: Thr His Thr Cys Pro 230 Pro Cys Pro Ala Pro 235 Glu Leu Leu Gly Gly 240

Pro: Ser Val Phe Leu 245 Phe Pro Pro Lys Pro 250 Lys Asp Thr Leu Met 255 lie

Ser: Arg Thr Pro 260 Glu Val Thr Cys Val 265 Val Val Asp Val Ser 270 His Glu

Asp: Pro Glu 275 Val Lys Phe Asn Trp 280 Tyr Val Asp Gly Val 285 Glu Val His

Asn: Ala 290 Lys Thr Lys Pro Arg 295 Glu Glu Gln Tyr Asn 300 Ser Thr Tyr Arg

Val 305: Val Ser Val Leu Thr 310 Val Leu His Gln Asp 315 Trp Leu Asn Gly Lys 320

Glu: Tyr Lys Cys Lys 325 Val Ser Asn Lys Ala 330 Leu Pro Ala Pro lie 335
Glu

Lys: Thr lie Ser 340 Lys Ala Lys Gly Gln 345 Pro Arg Glu Pro Gln 350 Val Tyr

Thr: Leu Pro 355 Pro Ser Arg Asp Glu 360 Leu Thr Lys Asn Gln 365 Val Ser Leu

Thr: Cys 370 Leu Val Lys Gly Phe 375 Tyr Pro Ser Asp lie 380 Ala Val Glu Trp

Glu 385: Ser Asn Gly Gln Pro 390 Glu Asn Asn Tyr Lys 395 Thr Thr Pro Pro Val 400

Leu: Asp Ser Asp Gly 405 Ser Phe Phe Leu Tyr 410 Ser Lys Leu Thr Val 415 Asp

Lys: Ser Arg Trp 420 Gln Gln Gly Asn Val 425 Phe Ser Cys Ser Val 430 Met His

Glu: Ala Leu 435 His Asn His Tyr Thr 440 Gln Lys Ser Leu Ser 445 Leu Ser Pro

Gly Lys

450

<210> 76 5 <211> 216

<212> PRT

<213> Secuencia artificial <220>

5

10

15

20

25

Glu 1: lie Val Leu Thr 5 Gln Ser Pro Gly Thr 10 Leu Ser Leu Ser Pro 15 Gly

Glu: Arg Ala Thr 20 Leu Ser Cys Arg Ala 25 Ser Gln Ser Val Arg 30 Ser Asn

Asn: Leu Ala 35 Trp Tyr Gln His Lys 40 Pro Gly Gln Ala Pro 45 Arg Leu Leu

lie: Phe 50 Gly Ala Ser Ser Arg 55 Ala Thr Gly lie Pro 60 Asp Arg Phe Ser

Gly 65: Ser Gly Ser Gly Thr 70 Asp Phe Thr Leu Thr 75 lie Ser Arg Leu Glu 80

Pro: Glu Asp Phe Ala 85 Val Tyr Tyr Cys Gln 90 Gln Tyr Gly Ser Ser 95
Pro

Ala: Leu Thr Phe 100 Gly Gly Gly Thr Lys 105 Val Glu lie Lys Arg 110 Thr Val

Ala
Ala: Pro 115 Ser Val Phe lie Phe 120 Pro Pro Ser Asp Glu 125 Gln Leu Lys

Ser: Gly 130 Thr Ala Ser Val Val 135 Cys Leu Leu Asn Asn 140 Phe Tyr Pro Arg

Glu 145: Ala Lys Val Gln Trp 150 Lys Val Asp Asn Ala 155 Leu Gln Ser Gly Asn 160

Ser: Gln Glu Ser Val 165 Thr Glu Gln Asp Ser 170 Lys Asp Ser Thr Tyr 175
Ser

Leu: Ser Ser Thr 180 Leu Thr Leu Ser Lys 185 Ala Asp Tyr Glu Lys 190 His Lys

Val Lys: Tyr Ser 210 Ala 195 Phe Cys Asn Glu Arg Val Gly Thr Glu 215 His 200 Cys Gln Gly Leu Ser Ser 205 Pro Val Thr

<210> 77 <211> 10 <212> PRT

<213> Secuencia artificial <220>

<223> región CDR1 sintéticamente construida de la cadena pesada de IGHV1-69 01 <400> 77

Gly Gly lie lie Arg Lys Tyr Ala lie Asn 15 10

<210> 78 <211> 18 <212> PRT

<213> Secuencia artificial <220>

<223> región CDR2 sintéticamente construida de la cadena pesada de IGHV1-69 01 <400> 78

Gly Gly lie lie Ala lie Phe Asn Thr Ala Asn Tyr Ala Gln Lys Phe 15 10 15

Gln Gly

<210> 79 <211> 13 <212> PRT

<213> Secuencia artificial <220>

<223> región CDR3 sintéticamente construida de la cadena pesada de IGHV1-69 01 <400> 79

Ala Arg Gly Met Asn Tyr Tyr Ser Asp Tyr Phe Asp Tyr 15 10

<210> 80 <211> 12 <212> PRT

<213> Secuencia artificial

5

10

15

20

25

30

35

<223> región CDR1 sintéticamente construida de la cadena ligera de IGKV3-20 01 <400> 80

Arg Ala Ser Gln Ser Val Arg Ser Asn Asn Leu Ala 15 10

<210> 81 <211>7 <212> PRT

<213> Secuencia artificial <220>

<223> región CDR2 sintéticamente construida de la cadena ligera de IGKV3-20 01 <400> 81

Gly Ala Ser Ser Arg Ala Thr 1 5

<210> 82 <211> 10 <212> PRT

<213> Secuencia artificial <220>

<223> región CDR3 sintéticamente construida de la cadena ligera de IGKV-20 01 <400> 82

Gln Gln Tyr Gly Ser Ser Pro Ala Leu Thr 15 10

<210> 83 <211> 120 <212> PRT

<213> Secuencia artificial <220>

<223> Cadena pesada sintéticamente construida de la región variable de MAB53 IGHV1-69 01 <400> 83

Gln: Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Arg Lys Pro Gly Ser

1: 5 10 15

Ser: Val Lys Val Ser Cys Lys Val Ser Gly Gly lie lie Arg Lys Tyr



: 20 25 30

Ala: lie Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met


: 35 40 45

Gly
Gly: lie lie Ala lie Phe Asn Thr Ala Asn Tyr Ala Gln Lys Phe

: 50 55 60

Gln: Gly Arg Val Thr lie Thr Ala Asp Glu Ser Thr Ser Thr Val Tyr

65: 70 75 80

Met: Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Leu Tyr Tyr Cys




: 85 90 95

Ala: Arg Gly Met Asn Tyr Tyr Ser Asp Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln



: 100 105 110

Gly: Ser Leu Val Thr Val Ser Pro


: 115 120

<210> 84 <211> 109 <212> PRT

<213> Secuencia artificial <220>

<223> Cadena ligera sintéticamente construida de la región variable de MAB53 IGKV3-20 01 <400> 84

Claims

5

10

15

20

25

30

35

REIVINDICACIONES

1. Un anticuerpo monoclonal humano, opcionalmente un anticuerpo biespecífico, o un fragmento inmunorreactivo del mismo, que comprende una cadena pesada que comprende CDR1 de la secuencia GGIIRKYAIN (SEQ ID NO: 77), CDR2 de la secuencia GGIIAIFNTANYAQKFQG (SEQ ID NO: 78) y CDR3 de la secuencia ARGMNYYSDYFDY (SEQ ID NO: 79) y una cadena ligera que comprende CDR1 de la secuencia RASQSVRSNNLA (SEQ ID NO: 80), una CDR2 de la secuencia GASSRAT (SEQ ID NO: 81) y una CDR3 de la secuencia QQYGSSpAlT (SEQ ID NO: 82), en donde el anticuerpo o fragmento se une a la región tallo de la proteína HA0 y HA2 a partir de clados virales de influenza que incluyen al menos un clado de cada uno del Grupo 1 y Grupo 2 de influenza A.
2. El anticuerpo o fragmento de la reivindicación 1 que se une a la región tallo de la proteína HA0 de los clados virales H1, H7 y H9 de influenza A o los clados virales H1, H7 y H3 de influenza A.
3. El anticuerpo o fragmento de la reivindicación 1, en el que el anticuerpo o fragmento permanece unido a la proteína HA0 de influenza cuando el pH se reduce a 6 in vitro.
4. El anticuerpo o fragmento de cualquiera de las reivindicaciones 1 - 3 que permanece unido al virus después de la captación a través de la ruta endosómica.
5. El anticuerpo o fragmento de cualquiera de las reivindicaciones 1 - 4 que neutraliza la infección por el virus H1N1, H7N3 o H5N1 en células MDCK.
6. El anticuerpo o fragmento de cualquiera de las reivindicaciones 1-5 que es protector en ratones contra la exposición con otros títulos letales de H1N1 o H5N1 a una dosis única de 1-10 mg/kg.
7. El anticuerpo o fragmento de la reivindicación 1 que es un anticuerpo o fragmento que comprende una cadena pesada que comprende la secuencia:

QVQLVQSGAEVRKPGSSVKVSCKVSGGIIRKYAINWVRQAPGQGLEWMGG

IIAIFNTANYAQKFQGRVTITADESTSTVYMELSSLRSEDTALYYCARGMNYYSDY FDYWGQGSLVTVSP

(aminoácidos 1-120 de SEQ ID NO: 75).
8. El anticuerpo o fragmento de la reivindicación 1 ó 7 que comprende una cadena ligera que comprende la

secuencia EIVLTQSPGTLSLSPGERATLSCRASQSVRSNNLAWYQHKPGQAPRLLIFGA

SSRATGIPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFAVYYCQQYGSSPALTFGGGTKVEIK (aminoácidos 1-109 de SEQ ID NO: 76).
9. Una composición farmacéutica que comprende el anticuerpo o fragmento de cualquiera de las reivindicaciones 18.
10. El anticuerpo o fragmento de cualquiera de las reivindicaciones 1-8 o la composición de la reivindicación 9 para su uso en un método para el tratamiento o la profilaxis de la infección por influenza en un sujeto.
11. Un sistema de expresión recombinante que comprende una secuencia de nucleótidos que codifica la cadena pesada y una secuencia de nucleótidos que codifica la región variable de la cadena ligera del anticuerpo o fragmento de cualquiera de las reivindicaciones 1, 7 u 8 unidas operativamente a secuencias de control para su expresión.
12. Células hospedadoras recombinantes modificadas para contener el sistema de expresión de la reivindicación 11.
13. Un método para producir un anticuerpo monoclonal o fragmento inmunorreactivo con el virus de la gripe, método que comprende cultivar las células de la reivindicación 12 en condiciones en las que dicha secuencia de nucleótidos se expresa.

OD 450nm

MAB53

imagen1

FIG. 1A

o

\

\

imagen2

J

imagen3

1

--Í--

«I

‘íTrn®* n u)

1U

00 450nm

Ciado H1

imagen4

Anticuerpo (nM)

FIG. 1B

de células

imagen5

Señal

imagen6
0.8 |-----------------------------1-----------------------------!-----------------------------!-----------------------------1

1000 1500 2000 2500 3000

Tiempo (s)

Panel HA 200 nM

FIG. 2A

Señal

IVIAB8

imagen7

Tiempo (s) Panel HA 200 nM

FÍG. 2B

OD 450nm

imagen8

FIG. 3A

imagen9

MAB53

Captura CP-Cterm biotina SA

CP=peptido de escisión

Anticuerpo (microgramos/ml)

FIG. 3B

imagen10

VH

kabat - CDR Ht

Kabat No i 23456789 10 1112 13 14 15 16 1718 1920 21 22 25 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 A B 36 37 38 39 40 41 4243 44

IG11V1-

69*01

QVQLVQ SGA E V R K P G S SVKVSCKV

S

Ci G I I R K Y A I N

W V RQAPGQG

imagen11

45 46 47 48 49 50 51 52 A B C 53 54 55 56 57 585960 61 6263 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 S2 A B C 83 84

R V T 1 T A D E S T STVYMEL SSLRS

L E W ¡Vlj O G 1 1 A 7 1 1 N T A NYAQKF QO

imagen12

en

FIG. 5A

VL

Rabal - COR L1 01

Kabat No.

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 1718192021 22 23 24 25 26 27 A B C D 1 F 28 29 30 31 32 33 34 35 36

IGKV3- 20*01

E I V L TQS P Ci T L S LSPGERATLSC R A S Q S . . . . V R S N N L A W Y

37 383940 41 4243 44 45 4647 48 49 50 51 52 53 54 A B C I> H 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 Q II KPGQ A P RLL í F G A S S R....................A T

Ci 1 P D R F S G S G S G

D F

Kabat - COR f >2

72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88899091 92 93 94 95 A B C D E F % 97 98 99 100101 102103 104 105 106107

T L T t SSLEPEDFAVYYC

Q Q Y G S S P A......................L T FGGGTKVE 1 K

FIO. 5B

PFU/pocillo

Titulación de MAB53 frente a H1 California A/Ca/07/09 (diluciones de 3 veces)

R2=0,97

imagen13

FIG. 6

Exposición de 10 LD5o A/Ca/04/09-ma H1N1

*

imagen14

-------clgG1 k (1 Omg/kg)

-------mAb#53 (1 Omg/kg)

.........mAb#53 (2mg/kg)

--------mAb#53 (0.4mg/kg)

* p < 0.0001 ☆ p — 0.0016

Virus: 10 LD50 A/CA/04/09-adptado a ratón Administración: i.n.-24 horas antes del anticuerpo administrado i.p.

N: 10 ratones por grupo

Letalidad: TODOS los ratones murieron el día 6 Comportamiento:

Total protección: 10 mg/kg

90% sobrevivieron a una dosis de 2 mg/kg

50% sobrevivieron a 0,4 mg/kg

FIG. 7A

Exposición de 10 LD5o A/Vietnam/1203/04 HPAI H5N1

imagen15

FIG. 78

-------clgGlk

------ mAb#53 (10mg/kg)

.........mAb#53 (2mg/kg)

-------mAb#53 (Ü.4mg/kg)

* p = 0.0002 ☆ p = 0.0268

& p = 0.0672

Virus: 10 LD50 A/Vietnam/1203/04 HPAI Administración: i.n.-24 horas a anticuerpos i.p.

N: 10 ratones por grupo

Letalidad: Solo el 90% de los ratones murieron (día 9) Comportamiento:

80% de supervivencia a 10 mg/kg 90% de supervivencia a 2 mg/kg 50 de supervivencia a 0,4 mg/kg

Porcentaje de supervivencia

Tratamiento el día +3 después de la infección

con H5N1

imagen16

imagen17

MAB53 a 10 mg/kg

FIG.8