ES2646191T3 - Inhibidores de Factor XII para la administración con procedimientos médicos que comprenden contacto con superficies artificiales - Google Patents

Inhibidores de Factor XII para la administración con procedimientos médicos que comprenden contacto con superficies artificiales Download PDF

Info

Publication number
ES2646191T3
ES2646191T3 ES12707782.4T ES12707782T ES2646191T3 ES 2646191 T3 ES2646191 T3 ES 2646191T3 ES 12707782 T ES12707782 T ES 12707782T ES 2646191 T3 ES2646191 T3 ES 2646191T3
Authority
ES
Spain
Prior art keywords
fxii
blood
fxiia
rha
infestin
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
ES12707782.4T
Other languages
English (en)
Inventor
Stefan Zeitler
Marc. NOLTE
Stefan Schulte
Gerhard. DICKNEITE
Ingo Pragst
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
CSL Behring GmbH Deutschland
Original Assignee
CSL Behring GmbH Deutschland
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by CSL Behring GmbH Deutschland filed Critical CSL Behring GmbH Deutschland
Application granted granted Critical
Publication of ES2646191T3 publication Critical patent/ES2646191T3/es
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/55—Protease inhibitors
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/1767—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from invertebrates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/715—Polysaccharides, i.e. having more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic linkages; Derivatives thereof, e.g. ethers, esters
    • A61K31/726—Glycosaminoglycans, i.e. mucopolysaccharides
    • A61K31/727—Heparin; Heparan
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/55—Protease inhibitors
    • A61K38/556—Angiotensin converting enzyme inhibitors
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/55—Protease inhibitors
    • A61K38/57—Protease inhibitors from animals; from humans
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/55—Protease inhibitors
    • A61K38/57—Protease inhibitors from animals; from humans
    • A61K38/58—Protease inhibitors from animals; from humans from leeches, e.g. hirudin, eglin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
    • A61K39/3955—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against proteinaceous materials, e.g. enzymes, hormones, lymphokines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/62—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being a protein, peptide or polyamino acid
    • A61K47/64—Drug-peptide, drug-protein or drug-polyamino acid conjugates, i.e. the modifying agent being a peptide, protein or polyamino acid which is covalently bonded or complexed to a therapeutically active agent
    • A61K47/643—Albumins, e.g. HSA, BSA, ovalbumin or a Keyhole Limpet Hemocyanin [KHL]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/62—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being a protein, peptide or polyamino acid
    • A61K47/65—Peptidic linkers, binders or spacers, e.g. peptidic enzyme-labile linkers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L33/00—Antithrombogenic treatment of surgical articles, e.g. sutures, catheters, prostheses, or of articles for the manipulation or conditioning of blood; Materials for such treatment
    • A61L33/0005—Use of materials characterised by their function or physical properties
    • A61L33/0011—Anticoagulant, e.g. heparin, platelet aggregation inhibitor, fibrinolytic agent, other than enzymes, attached to the substrate
    • A61L33/0041—Anticoagulant, e.g. heparin, platelet aggregation inhibitor, fibrinolytic agent, other than enzymes, attached to the substrate characterised by the choice of an antithrombatic agent other than heparin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L33/00—Antithrombogenic treatment of surgical articles, e.g. sutures, catheters, prostheses, or of articles for the manipulation or conditioning of blood; Materials for such treatment
    • A61L33/0076—Chemical modification of the substrate
    • A61L33/0082—Chemical modification of the substrate by reacting with an organic compound other than heparin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L33/00—Antithrombogenic treatment of surgical articles, e.g. sutures, catheters, prostheses, or of articles for the manipulation or conditioning of blood; Materials for such treatment
    • A61L33/06—Use of macromolecular materials
    • A61L33/12—Polypeptides, proteins or derivatives thereof, e.g. degradation products thereof
    • A61L33/128—Other specific proteins or polypeptides not covered by A61L33/122 - A61L33/126
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/02—Antithrombotic agents; Anticoagulants; Platelet aggregation inhibitors
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/36—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against blood coagulation factors
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/40—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against enzymes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L2300/00—Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices
    • A61L2300/20—Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices containing or releasing organic materials
    • A61L2300/252—Polypeptides, proteins, e.g. glycoproteins, lipoproteins, cytokines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L2300/00—Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices
    • A61L2300/20—Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices containing or releasing organic materials
    • A61L2300/252—Polypeptides, proteins, e.g. glycoproteins, lipoproteins, cytokines
    • A61L2300/256—Antibodies, e.g. immunoglobulins, vaccines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L2300/00—Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices
    • A61L2300/40—Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices characterised by a specific therapeutic activity or mode of action
    • A61L2300/42—Anti-thrombotic agents, anticoagulants, anti-platelet agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L2420/00—Materials or methods for coatings medical devices
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/76—Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Surgery (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Materials Engineering (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Materials For Medical Uses (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)

Abstract

Inhibidor de FXII/FXIIa para su uso en la prevención de la formación y/o estabilización de trombos durante y/o después de un procedimiento médico llevado a cabo en un sujeto humano o animal que comprende poner en contacto sangre de dicho sujeto humano o animal con superficies artificiales, donde dicho inhibidor de FXII/FXIIa se administra antes y/o durante y/o después de dicho procedimiento médico y además donde (i) la superficie artificial se expone a al menos un 80% del volumen de sangre del sujeto y la superficie artificial es de al menos 0.2 m2 o (ii) la superficie artificial es un recipiente para la recolección de sangre fuera del cuerpo del sujeto o (iii) la superficie artificial es un estent, válvula, catéter intraluminal o un sistema para el bombeo de sangre asistido interno, donde el inhibidor de FXII/FXIIa comprende (i) la secuencia polipeptídica de Infestina-4 de origen natural (SEQ ID NO: 1) o una variante de esta, donde una variante comprende (a) los aminoácidos N-terminales 2-13 de la secuencia de Infestina-4 de origen natural y al menos una y hasta cinco mutaciones aminoacídicas fuera de dichos aminoácidos N-terminales que dan lugar a diferencias respecto a la secuencia de Infestina-4 de origen natural; y/o (b) seis residuos de cisteína conservados de la secuencia de Infestina-4 de origen natural y una homología de al menos un 70% respecto a la secuencia de Infestina-4 de origen natural. (ii) el SPINK-1 (SEQ ID NO: 2), que se muta para incluir los aminoácidos N-terminales 2-13 de la secuencia de Infestina-4 de origen natural, o una variante de dicho SPINK-1 mutado, donde una variante comprende (a) los aminoácidos N-terminales 2-13 de la secuencia de Infestina-4 de origen natural y al menos una y hasta cinco mutaciones aminoacídicas fuera de dichos aminoácidos N-terminales que dan lugar a diferencias respecto a la secuencia de SPINK-1 de origen natural y que aumentan la homología de la variante respecto a la secuencia de Infestina-4 de origen natural; y/o (b) seis residuos de cisteína conservados de la secuencia de SPINK-1 de origen natural y una homología de al menos un 70% respecto a la secuencia de SPINK-1 de origen natural. (iii) un anticuerpo anti-FXII/FXIIa, donde el anticuerpo se une a FXII/FXIIa e inhibe su actividad y/o activación.

Description

5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
DESCRIPCION
Inhibidores de Factor XII para la administracion con procedimientos medicos que comprenden contacto con superficies artificiales
Campo
La presente solicitud se refiere al uso de inhibidores de FXII/FXIIa en procedimientos medicos que comprenden poner sangre en contacto con superficies artificiales. Ciertas realizaciones se refieren a la terapia anticoagulante de pacientes que necesitan procedimientos quirurgicos que requieren bombas de derivacion cardiopulmonar (CPB, por sus siglas en ingles) donde el nuevo uso de inhibidores del factor de coagulacion FXII/FXIIa reduce o reemplaza la necesidad de administrar heparina/bivalirudina durante procedimientos de CPB. En ciertas realizaciones, se recubre la superficie artificial con el inhibidor de FXII.
Antecedentes
Las lesiones de la pared vascular y las superficies artificiales desencadenan la adhesion y agregacion repentinas de las plaquetas sangumeas, seguidas de la activacion del sistema de coagulacion plasmatica y la formacion de trombos que contienen fibrina, que ocluyen el lugar de la lesion. Estos mecanismos son cruciales para limitar la perdida sangumea postraumatica, pero pueden tambien ocluir vasos enfermos lo que conduce a isquemia e infarto de organos vitales u oclusion de las membranas de CPB.
En el modelo de cascada clasico, la coagulacion sangumea tiene lugar mediante una serie de reacciones que implican la activacion de zimogenos mediante proteolisis limitada que culmina con la generacion de trombina, la cual convierte el fibrinogeno plasmatico en fibrina y activa las plaquetas. A su vez, las plaquetas que se adhieren a colageno o fibrina facilitan la generacion de trombina en varios ordenes de magnitud mediante la exposicion de fosfolfpidos procoagulantes (principalmente fosfatidilserina) en su superficie exterior, lo que propaga el ensamblaje y la activacion de complejos de proteasas de coagulacion y mediante la interaccion directa entre los receptores de plaquetas y los factores de coagulacion.
Existen dos vfas convergentes para la coagulacion que estan desencadenadas por componentes extrmsecos (pared vascular) o intrmsecos (transportados por la sangre) del sistema vascular. La via “extrmseca” es iniciada por el complejo del factor VII plasmatico (FVII) con la protema integral de membrana factor tisular (TF), un cofactor de la coagulacion esencial que se encuentra ausente en la superficie luminal pero fuertemente expresado en las capas subendoteliales del vaso y que es accesible o se libera a traves de una lesion tisular. El TF expresado en microvesmulas circulantes podna contribuir tambien a la propagacion de trombos sustentando la generacion de trombina en la superficie de las plaquetas activadas.
La via “intrmseca” o “via de activacion por contacto” se inicia cuando el factor XII (FXII, factor Hageman) entra en contacto con superficies cargadas negativamente en una reaccion que involucra al quininogeno de alto peso molecular y la calicrema plasmatica. El FXII puede ser activado por constituyentes macromoleculares de la matriz subendotelial tales como glicosaminoglicanos y colagenos, sulfatidos, nucleotidos y otros polianiones solubles o materiales no fisiologicos tales como vidrio o polfmeros. Uno de los activadores por contacto mas potentes es el caolm y esta reaccion sirve como base mecamstica para la principal prueba de coagulacion clmica, el tiempo de tromboplastina parcial activada (aPTT, por sus siglas en ingles), que mide la funcion de coagulacion de la via “intrmseca”. En las reacciones propagadas por las plaquetas, el FXII activado (FXIIa) activa a continuacion el FXI a FXIa y posteriormente el FXIa activa el FIX a FIXa. El complejo de FVIIIa, donde dicho FVIIIa ha sido activado previamente por trazas de FXa y/o trombina, y FIXa (el complejo tenasa) posteriormente activa el FX a FXa. A pesar de su elevada potencia para inducir la coagulacion sangumea in vitro, la importancia (pato)fisiologica de la via de coagulacion intrmseca desencadenada por FXII viene cuestionada por el hecho de que las deficiencias hereditarias de FXII asf como de quininogeno de alto peso molecular y calicrema plasmatica no estan asociadas con complicaciones hemorragicas graves. Esto, junto con la observacion de que los humanos y ratones que carecen de constituyentes de la via extrmseca tales como TF y FVII padecen hemorragias graves, ha conducido a la hipotesis actual de que para el cese de la hermorragia in vivo puede que se requiera exclusivamente la cascada extrmseca (Mackman, N. 2004. Role of tissue factor in hemostasis, thrombosis, and vascular development. Arterioscler. Thromb. Vasc. Biol. 24, 101 5-1 022).
En algunas afecciones patologicas, la cascada de coagulacion se puede activar de forma inapropiada, lo que da lugar a continuacion a la formacion de tapones que actuan de forma hemostatica en el interior de los vasos sangumeos. Por ende, los vasos pueden ocluirse y el suministro de sangre a los organos distales es limitado. Ademas, los trombos formados se pueden desprender y producir embolias en otras partes del cuerpo, lo que da lugar a oclusion isquemica. Este proceso se conoce como tromboembolismo y esta asociado con una elevada mortalidad.
En el documento WO20061066878, se propone el uso de anticuerpos contra FXII/FXIIa o el uso de inhibidores de FXII/FXIIa para prevenir la formacion y/o estabilizacion de trombos. Como inhibidores potenciales se han propuesto
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
antitrombina (AT III), inhibidor de la enzima conversora de angiotensina, inhibidor C1, aprotinina, inhibidor de la proteasa alfa-I, antipama ([(S)-I-carboxi-2-feniletil]carbamoil-L-Arg-L-Val-Arginal), acetal dimetflico del Z-Pro-Pro- aldehndo, DX88 (Dyax Inc., 300 Technology Square, Cambridge, MA 02139, EE. UU.; citado en: Williams A y Baird LG.2003. DX-88 and HAE: a developmental perspective. Transfus Apheresis Sci. 29:255-258), leupeptina, inhibidores de proliloligopeptidasa tales como Fmoc-Ala-Pyr-CN, inhibidores de tripsina de mafz, mutaciones del inhibidor de tripsina pancreatica bovina, ecotina, protema anticoagulante de limanda japonesa, inhibidor v de tripsina de Cucurbita maxima, incluidos isoinhibidores de Curcurbita maxima y Hamadarina (segun ha sido divulgado por Isawa H et al. 2002. A mosquito salivary protein inhibits activation of the plasma contact system by binding to factor XI and high molecular weight kininogen. J. Biol. Chem. 277:27651-27658).
Recientemente, se ha presentado la Infestina-4 como un nuevo inhibidor de FXIIa. Las infestinas son una clase de inhibidores de sermproteasas, derivados del intestino medio del insecto hematofago Triatoma infestans, un vector principal del parasito Trypanosoma cruzi, del que se tiene constancia que causa la enfermedad de Chagas (Campos ITN et al. 32 Insect. Biochem. Mol. Bio. 991-997, 2002; Campos ITN et al. 577 FEBS Lett. 512-516, 2004). Este insecto utiliza estos inhibidores para prevenir la coagulacion de la sangre ingerida. El gen de Infestina codifica 4 dominios que dan como resultado protemas que pueden inhibir diferentes factores de la via de coagulacion. En particular, el dominio 4 codifica una protema (Infestina-4) que es un potente inhibidor de FXIIa. Se ha administrado Infestina-4 a ratones sin complicaciones hemorragicas (WO 2008/098720).
Debido a que las superficies artificiales pueden desencadenar la via de activacion por contacto, los procedimientos medicos que conllevan poner en contacto sangre con tales superficies artificiales entranan un riesgo medico considerable. Por lo tanto, el uso de dispositivos protesicos o hemodializadores, que entran en contacto con la sangre, esta limitado en gran medida a causa de la activacion de la cascada de coagulacion intrmseca. Un recubrimiento adecuado de la superficie protesica podna evitar dicho problema en algunos casos, pero en otros podna comprometer su funcion. Algunos ejemplos de tales dispositivos protesicos son valvulas cardiacas, estents vasculares y cateteres permanentes.
En los casos donde se utilizan tales dispositivos, es necesario administrar anticoagulantes tales como heparina para prevenir la formacion de fibrina en la superficie.
Sin embargo, algunos pacientes son intolerantes a la heparina, lo que puede causar trombocitopenia inducida por heparina (HIT, por sus siglas en ingles) lo que da como resultado agregacion plaquetaria y trombosis potencialmente mortal. Ademas, una desventaja inherente a todos los anticoagulantes utilizados en clmicas es un mayor riesgo de episodios hemorragicos serios. Por lo tanto, existe una gran necesidad de nuevos tipos de anticoagulantes que no esten asociados con tales complicaciones y que se puedan utilizar en pacientes afectados o como modelo de terapia superior que prevenga la trombosis sin mayores riesgos hemorragicos (Renne T et al. 2005. Defective thrombus formation in mice lacking factorXII. J. Exp. Med. 202:271-281).
Un procedimiento medico que conlleva una activacion por contacto masiva es la derivacion cardiopulmonar (CPB). Actualmente, los dispositivos de CPB en cirugfa cardiaca se utilizan por dos razones: a) mantenimiento artificial de la circulacion sangumea durante la cardioplegia de los pacientes que se estan sometiendo a una cirugfa cardiaca (funcion bombeadora) y b) oxigenacion artificial de la sangre durante la cardioplegia de los pacientes que se estan sometiendo a una cirugfa cardiaca (funcion oxigenadora) mediante oxigenacion con membrana semipermeable.
Debido al mantenimiento artificial del flujo sangumeo mediante la funcion bombeadora, la sangre del paciente se hace pasar por una membrana semipermeable (~3 m2, superficie artificial) que permite que el oxfgeno pase a traves de la membrana y se una a los eritrocitos a la vez que la sangre en sf se mantiene en el sistema cerrado de circulacion artificial. Esta oxigenacion artificial es vital para el paciente y requiere una estrategia de anticoagulacion durante la CPB (H. P. Wendl et al. 1996; Immunpharmacology; C. Sperling et al., Biomaterials 30 (2009)). Los dispositivos de DPB utilizados actualmente tienen hasta 3 m2 de superficie artificial que conduce a una activacion por contacto masiva del sistema de coagulacion, el sistema inflamatorio, asf como la activacion del sistema del complemento. Con el fin de minimizar estos efectos en los sistemas de cascada mencionados, se utilizan biomateriales polimericos de diferente tipo (p. ej., 2-metilacriloxietilfosforilcolina, MCP) (Yu J et al.; Int J Artif Organs 1994; 17: 499-504; C. Sperling et al. Biomaterials 30 (2009) 4447-4456). A pesar del hecho de que se utilizan nuevos materiales superficiales como la fosforilcolina polar que son menos trombogenicos, continua siendo necesario anticoagular a los pacientes que se estan sometiendo a un CPB con heparina/bivalirudina, ya que una reaccion mediada por plaquetas conducina inmediatamente a una oclusion del oxigenador de CPB con un desenlace fatal para el paciente.
Actualmente existen dos productos autorizados para la anticoagulacion durante CPB:
a) Heparina:
La heparina se administra al paciente de manera ajustada al peso corporal (300-400 UI/kg de peso corporal (PC)
3
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
poco antes de conectar los dispositivos de CPB para prevenir que la sangre del paciente coagule. La CPB en sf tambien se carga con heparina antes de conectarla al paciente. Esta es la unica estrategia de anticoagulacion que permite operaciones de CPB con oxigenacion artificial durante todo el procedimiento sin un desenlace fatal inmediato para el paciente. Durante este procedimiento, la capacidad de coagulacion se monitoriza mediante el tiempo de coagulacion activada (ACT, por sus siglas en ingles) durante la cirugfa (valor normal 100-120 s; durante la operacion 300-500 s). Mediante la medicion del ACT el facultativo puede dirigir la dosificacion de heparina de manera semicuantitativa. La heparina se une a AT (ATIII) y construye un complejo de inhibicion rapida que inactiva el sistema de coagulacion. Las heparinas de bajo peso molecular (LMWH, por sus siglas en ingles) inhiben principalmente el complejo protrombinasa (factor X, factor Va, Ca2+, fosfolfpidos), mientras que las heparinas no fraccionadas (UFH, por sus siglas en ingles) tambien inhiben el factor II y, por tanto, reaccionan mas deprisa que las LMWH. Ademas, los factores IX, XI, XII y la calicrema se inactivan mediante heparinas.
Tras la CPB, es necesario antagonizar el efecto de la heparina mediante protamina (1 mg/100 UI de heparina), ya que un potencial episodio hemorragico podna tener un desenlace fatal para el paciente.
Las mayores limitaciones de este estandar de atencion medica son:
i) La cantidad de heparina en la sangre del paciente no se correlaciona con el ACT (Gruenwald et al., 2010; the Journal of Extra Corporeal Tecnology), por lo tanto, continua habiendo un riesgo de que el paciente se encuentre en un estado de hipo- o hipercoagulopatfa.
ii) La heparina puede inducir trombocitopenia (HIT 1, causada por heparina mediante activacion directa de trombocitos, o HIT 2, causada por acumulaciones de heparina y factor plaquetario 4, y el sucesivo desarrollo de anticuerpos contra los complejos).
iii) La ventana temporal entre la antagonizacion de heparina tras la CPB y el comienzo de la terapia anticoagulante de los pacientes en una unidad de cuidados intensivos (UCI) continua siendo un factor de riesgo de episodios tromboticos o hemorragicos.
iv) La protamina, como antidoto para el efecto de la heparina, en sf aumenta el riesgo de episodios tromboticos, reacciones alergicas graves y cafdas de presion sangumea fatales. Una segunda administracion de protamina mas adelante en caso de infradosis podna tener un desenlace fatal para el paciente.
b) Bivalirudina:
La bivalirudina (derivada de la hirudina) esta registrada para su uso en pacientes con HIT conocida como alternativa a la anticoagulacion mediante heparina. Las limitaciones de esta terapia alternativa son:
i) No existe antfdoto clmico registrado disponible por el momento en caso de hemorragia.
ii) Mayor consumo de productos sangumeos durante la CPB con los riesgos posoperatorios resultantes (C. Dyke et al.; surgery for acquired cardiovascular disease 2005).
En la presente solicitud se descubrio, sorprendentemente, que el uso de inhibidores de FXII/FXIIa previene la coagulacion, a la vez que el riesgo hemorragico durante y despues de procedimientos de CPB no se potencia en los procedimientos medicos que comprenden poner en contacto la sangre de un paciente con superficies artificiales, que en ciertas realizaciones se encuentran fuera del cuerpo. Por lo tanto, es necesario administrar unicamente una cantidad reducida de otros anticoagulantes ademas del inhibidor de FXII/FXIIa. En una realizacion, la adicion de otros anticoagulantes ademas del inhibidor de FXII/FXIIa se puede evitar por completo. Esto conduce a procedimientos medicos mas seguros, al evitarse el mayor riesgo de hemorragia que es inherente a la terapia actual, asf como complicaciones al revertir la anticoagulacion.
Compendio de ciertas realizaciones
La solicitud proporciona un inhibidor de FXII/FXIIa para su uso en la prevencion de la formacion y/o estabilizacion de trombos durante y/o despues de un procedimiento medico llevado a cabo en un sujeto humano o animal que comprende poner en contacto sangre de dicho sujeto humano o animal con superficies artificiales, donde dicho inhibidor de FXII/FXIIa se administra antes y/o durante y/o despues de dicho procedimiento medico. En ciertas realizaciones, el contacto entre la sangre de dicho sujeto y la superficie artificial tiene lugar fuera del cuerpo del sujeto. En una realizacion de la invencion, la superficie artificial se expone a al menos un 80%, 90% o 100% de la sangre del sujeto humano o animal. En otra realizacion, el volumen de un 80%, 90% o 100% de la sangre del sujeto humano o animal entra en contacto con la superficie artificial en menos de 30 minutos, menos de 15 minutos, menos de 10 minutos o menos de 5 minutos. En otra realizacion, la superficie artificial sirve como recipiente para la sangre fuera del cuerpo humano o animal, y dicha sangre puede encontrarse en una cantidad de al menos 50 mL, 100 mL, 200 mL, 300 mL, 400 mL, 500 mL o mas. En una realizacion, la superficie artificial que se expone a la sangre del
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
paciente es de al menos 0.2 m2 En algunas realizaciones, el area de superficie artificial es de al menos 0.1 m2 o al menos 0.5 m2 En otra realizacion, la superficie artificial excluye retractores, agujas, escalpelos y otro instrumental quirurgico rutinario que solo entre en contacto con una fraccion de la sangre del sujeto.
Otra realizacion incluye un inhibidor de FXII/FXIIa para su uso en la prevencion de la formacion y/o estabilizacion de trombos durante y/o despues de un procedimiento medico llevado a cabo en un sujeto humano o animal que comprende poner en contacto la sangre de dicho sujeto humano o animal con superficies artificiales, donde dicho inhibidor de FXII/FXIIa se administra antes y/o durante y/o despues de dicho procedimiento medico y, ademas, donde
i) la superficie artificial se expone a al menos un 80% del volumen de sangre del sujeto y la superficie artificial
es de al menos 0.2 m2 o
ii) la superficie artificial es un recipiente para la recoleccion de la sangre fuera del cuerpo del sujeto o
iii) la superficie artificial es un estent, valvula, cateter intraluminal o un sistema para el bombeo de sangre
asistido interno.
Otra realizacion se refiere a un inhibidor de FXII/FXIIa para su uso en la prevencion de la formacion y/o estabilizacion de trombos durante y/o despues de un procedimiento medico llevado a cabo en un sujeto humano o animal que comprende poner en contacto la sangre de dicho sujeto humano o animal con superficies artificiales, donde dicho inhibidor de FXII/FXIIa se administra antes, durante y/o despues de dicho procedimiento medico, y donde dicho sujeto humano o animal no presenta un mayor riesgo hemorragico o donde dicho sujeto humano o animal presenta un riesgo hemorragico reducido en comparacion con el riesgo hemorragico asociado con la administracion de heparina o derivados de esta y/o hirudina o derivados de esta. Preferentemente, el riesgo hemorragico no es mayor.
Otra realizacion se refiere a un inhibidor de FXII/FXIIa para su uso en la prevencion de la formacion y/o estabilizacion de trombos durante y/o despues de un procedimiento medico llevado a cabo en un sujeto humano o animal que comprende poner en contacto la sangre de dicho sujeto humano o animal con superficies artificiales, donde dicho inhibidor de FXII/FXIIa se administra antes, durante y/o despues de dicho procedimiento medico, y donde dicho sujeto humano o animal no presenta un mayor riesgo hemorragico y donde en dicho sujeto humano o animal i) el tiempo de hemorragia segun Duke en la oreja o en la yema del dedo no es mas largo de 10 minutos o ii) el tiempo de hemorragia segun el metodo de Ivy no es mas largo de 10 minutos o iii) el tiempo de hemorragia segun el metodo de Marx no es mas largo de 4 minutos.
En ciertas realizaciones, el procedimiento medico es
i) cualquier procedimiento que requiera una derivacion cardiopulmonar o
ii) la oxigenacion y bombeo de sangre mediante oxigenacion con membrana extracorporea o
iii) el bombeo de sangre asistido (interno o externo) o
iv) la dialisis de sangre o
v) la filtracion de sangre extracorporea o
vi) la recoleccion de sangre en cualquier deposito para su uso posterior en un sujeto humano o animal o
vii) el uso de uno o varios cateteres intraluminales venosos o arteriales o
viii) el uso de uno o varios dispositivos para cateterismo cardiaco intervencionista o diagnostico, o
ix) el uso de uno o varios dispositivos intravasculares o
x) el uso de injertos artificiales.
En otra realizacion, se proporciona un dispositivo medico, donde el dispositivo medico se recubre con un inhibidor de FXII/FXIIa. El dispositivo medico puede ser una maquina de derivacion cardiopulmonar, un sistema de oxigenacion con membrana extracorporea para la oxigenacion de sangre, un dispositivo para el bombeo asistido de sangre, un dispositivo de dialisis de sangre, un dispositivo para la filtracion extracorporea de sangre, un deposito para su uso en la recoleccion de sangre, un cateter intraluminal, un estent, una valvula cardiaca artificial y/o accesorios para cualquiera de estos dispositivos, incluidos tubos, canulas, bomba centnfuga, valvulas, puertos de acceso venoso, desviadores, etc.
En una realizacion, el inhibidor de FXII/FXIIa se administra antes, despues y/o durante un procedimiento medico que comprende la recoleccion de sangre en cualquier deposito para su uso posterior en un sujeto humano o animal. En una realizacion, el inhibidor de FXII/FXIIa se administra al donante de sangre antes y/o durante el proceso de donacion de sangre.
En otra realizacion, el inhibidor de FXII/FXIIa se mezcla con la sangre en el deposito de recoleccion. En otra realizacion mas, el inhibidor de FXII/FXIIa se dispone en el deposito de recoleccion antes de la recoleccion de la sangre y la superficie interna del deposito puede estar recubierta con el. En otra realizacion, el inhibidor de FXII/FXIIa se administra al receptor de la sangre antes, durante y/o despues de que se administre la sangre al
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
receptor humano o animal.
En otras realizaciones, el inhibidor de FXII/FXIIa se administra con heparina o derivados de esta y/o hirudina o derivados de esta, donde se anade una cantidad reducida de heparina o derivados de esta y/o hirudina o derivados de esta ademas del inhibidor de FXII/FXIIa antes y/o durante y/o despues del procedimiento medico en comparacion con la cantidad de heparina o derivados de esta y/o hirudina o derivados de esta que se administra normalmente antes y/o durante dicho procedimiento medico cuando no se administra inhibidor de FXII/FXIIa. La expresion “se administra con” indica que se administra al mismo tiempo (en una formulacion unica o dos formulaciones separadas) o se administra en el plazo de 1 minuto, 5, 10, 15, 30 o 45 minutos, o 1 hora, 2, 3, 4, 5 o 6 horas, o se administra en momentos diferentes, pero para los mismos procedimientos medicos. Cualquier agente se puede administrar en primer lugar.
Los derivados de heparina estan integrados por un grupo de productos derivados de la heparina, producidos mediante una o mas modificaciones qmmicas. Por ejemplo, la heparina sulfatada es un derivado en el que todos los grupos hidroxilo primarios en los residuos de glucosamina y una amplia proporcion de grupos hidroxilo secundarios en las unidades de disacarido se han sustituido por esteres O-sulfato; la heparina con carboxilo reducido es un derivado en el que los grupos carboxflicos de los residuos de acido uronico de la heparina se han reducido a alcoholes; la heparina oxidada con peryodato es un derivado en el que todos los residuos de acido uronico no sulfatados de la heparina se oxidan con acido peryodico. Otros derivados de heparina incluyen, por ejemplo, heparina O-desulfatada, heparina 2-O-desulfatada, heparina completamente N-acetilada, heparina completamente N-sulfatada, heparina N-desulfatada, heparina N-deacetilada. Los derivados de hirudina tambien pueden contener modificaciones qmmicas, que son del peptido de hirudina, o los derivados pueden ser analogos sinteticos del peptido de hirudina y/o pueden comprender el peptido de hirudina conectado a, por ejemplo, una molecula portadora, que se puede utilizar, por ejemplo, para aumentar la semivida de la hirudina. Algunos ejemplos de derivados de hirudina incluyen lepirudina y desirudina. Los derivados de hirudina se caracterizan por que se unen al sitio catalttico activo de la trombina.
En una realizacion, la heparina o derivados de esta y/o hirudina o derivados de esta que se administran con el inhibidor de FXII/FXIIa se administran en una cantidad reducida de modo que el ACT sin el inhibidor de FXII/FXIIa sea inferior a 500 segundos.
En otra realizacion, el inhibidor de FXII/FXIIa se administra en un procedimiento medico sin la administracion de heparina o un derivado de esta y/o la administracion de hirudina o un derivado de esta.
En una realizacion, el sujeto humano o animal tiene un riesgo protrombotico reducido o nulo despues del procedimiento medico. En otra realizacion, el sujeto humano o animal tiene un riesgo protrombotico reducido o nulo a continuacion del antagonismo posoperatorio de la heparina o derivados de esta y/o el antagonismo posoperatorio de la hirudina o derivados de esta se previene o reduce utilizando un inhibidor de FXII/FXIIa.
En otra realizacion, el riesgo protrombotico a continuacion del antagonismo posoperatorio de la heparina o derivados de esta y/o el antagonismo posoperatorio de la hirudina o derivados de esta se previene o reduce administrando el inhibidor de FXII/FXIIa antes, durante y/o despues de un procedimiento medico, donde se anade una cantidad reducida o nula de antagonista de heparina y/o antagonista de hirudina despues del procedimiento medico en comparacion con la cantidad de dicho antagonista que se administra normalmente despues de dicho procedimiento medico cuando no se administra inhibidor de FXII/FXIIa.
En una realizacion, el inhibidor de FXII/FXIIa, que se utiliza de acuerdo con la invencion actual, comprende
i) la secuencia polipeptfdica de Infestina-4 de origen natural (SEQ ID NO:1) o una variante de esta, donde una
variante comprende
a) los aminoacidos N-terminales 2-13 de la secuencia de Infestina-4 de origen natural y al menos una y hasta cinco mutaciones aminoaddicas fuera de dichos aminoacidos N-terminales que dan lugar a diferencias respecto a la secuencia de Infestina-4 de origen natural; y/o
b) seis residuos de cistema conservados de la secuencia de Infestina-4 de origen natural y una homologfa de al menos un 70% respecto a la secuencia de Infestina-4 de origen natural.
ii) el SPINK-1 (SEQ ID NO:2), que se muta para incluir los aminoacidos N-terminales 2-13 de la secuencia de
Infestina-4 de origen natural o una variante de dicho SPINK-1 mutado, donde una variante comprende
a) los aminoacidos N-terminales 2-13 de la secuencia de Infestina-4 de origen natural y al menos una y hasta cinco mutaciones aminoaddicas fuera de dichos aminoacidos N-terminales que dan lugar a diferencias respecto a la secuencia de SPINK-1 de origen natural y que aumentan la homologfa de la variante respecto a la secuencia de Infestina-4 de origen natural; y/o
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
b) seis residuos de cistema conservados de la secuencia de SPINK-1 de origen natural y una homologfa de al menos un 70% respecto a la secuencia de SPINK-1 de origen natural.
iii) un anticuerpo anti-FXII/FXIIa, donde el anticuerpo se une a FXII/FXIIa e inhibe su actividad y/o activacion.
En una realizacion, el inhibidor de FXII/FXIIa, que se utiliza de acuerdo con la invencion actual, se conecta a un polipeptido que aumenta la semivida, donde el peptido que aumenta la semivida es opcionalmente albumina, afamina, alfa-fetoprotema o protema de union a la vitamina D, albumina humana o una variante de esta, una inmunoglobulina o una variante de esta, un Fc de una IgG. En otra realizacion dicho polipeptido que aumenta la semivida esta conectado al inhibidor de FXII/FXIIa a traves de un conector.
Descripcion de los dibujos
Figura 1: El tiempo de coagulacion de sangre completa ex vivo (WBCT, por sus siglas en ingles) de sangre completa porcina se puede prolongar drasticamente tras anadirle el inhibidor de FXII/FXIIa rHA-Infestina-4. El volumen requerido de rHA-Infestina-4 se proporciono en una jeringa. A continuacion, la sangre completa porcina se anadio hasta un volumen total de 500 |jL, se mezclo con cuidado y despues se proporciono en un vial de vidrio precalentado. El tiempo de coagulacion se determino visualmente agitando con cuidado el vial de vidrio cada minuto (incubacion a 37 °C en un bano de agua). Los datos se presentan en forma de media + error estandar de la media. N = sangre completa de 2-3 cerdos a cada concentracion.
Figura 2: El WBCT ex vivo de sangre completa murina se puede prolongar tras anadirle un anticuerpo monoclonal anti-FXII/FXIIa (MAb, por sus siglas en ingles). El volumen requerido de un MAb anti-FXII/FXIIa se proporciono en una jeringa. A continuacion, la sangre completa murina se anadio hasta un volumen total de 500 jL, se mezclo con cuidado y despues se proporciono en un vial de vidrio precalentado. El tiempo de coagulacion se determino visualmente agitando con cuidado el vial de vidrio cada minuto (incubacion a 37 °C en un bano de agua). Los datos se presentan en forma de media + error estandar de la media. N = sangre completa de 3 ratones a cada concentracion.
Figura 3: El WBCT ex vivo de sangre completa porcina se prolonga notablemente tras una unica administracion intravenosa (i.v.) de rHA-Infestina-4. En momentos espedficos tras la administracion, se tomo sangre de los animales y se proporciono en un vial de vidrio precalentado. El tiempo de coagulacion se determino visualmente agitando con cuidado el respectivo vial de vidrio cada minuto (incubacion a 37 °C en un bano de agua).
Figura 4: El aPTT de sangre porcina se prolongo notablemente despues de la administracion de rHA-Infestina-4 en comparacion con el control negativo.
Figura 5: el PT de sangre porcina solo se prolongo marginalmente despues de la administracion de dosis mas elevadas de rHA-Infestina-4 en comparacion con la prolongacion del aPTT.
Figura 6: El tiempo de hemorragia cutanea porcina permanecio en el intervalo normal (~2-5 min) despues de que se administrara rHA-Infestina 4. Este efecto duro hasta el final del experimento.
Figura 7: La circulacion extracorporea en el modelo porcina se llevo a cabo segun el grafico mostrado en la figura 7.
Figura 8: Despues de la administracion de rHA-Infestina-4, el aPTT de la sangre porcina continuo siendo notablemente prolongado durante todo el experimento de circulacion extracorporea.
Figura 9: El PT de la sangre porcina solo fue afectado ligeramente despues de la administracion de rHA-Infestina-4 durante el experimento extracorporeo.
Figura 10: El WBCT ex vivo de la sangre porcina se prolonga a lo largo de todo el experimento extracorporeo tras una unica administracion i.v. de rHA-Infestina-4. En momentos espedficos, se tomo sangre de este animal y se proporciono en un vial de vidrio precalentado. El tiempo de coagulacion se determino visualmente agitando con cuidado el vial de vidrio cada minuto (incubacion a 37 °C en un bano de agua).
Figura 11: Sitios de contacto del inhibidor de R. prolixus con trombina y de SPINK-1 con quimotripsina. # indica los aminoacidos que son sitios de contacto entre el inhibidor de R. prolixus y la trombina; + indica aminoacidos que son sitios de contacto entre SPINK-1 y la quimotripsina.
Figura 12: Similitud entre la secuencia de aminoacidos de Infestina-4 (14) y SPINK-1 (SP). * indica aminoacidos identicos; | indica aminoacidos similares; los aminoacidos en negrita son cistemas conservadas; los aminoacidos subrayados 2-13 de la secuencia de Infestina-4 son conservados.
Figura 13: Secuencias de aminoacidos de Infestina-4, SPINK1 y tres variantes de SPINK1 (K1, K2 y K3). * indica aminoacidos identicos; | aminoacidos similares respecto a la secuencia de Infestina-4. La secuencia subrayada de 14 se utilizo para reemplazar 15 aminoacidos de SPINK-1 para generar K1. Las variantes K2 y K3 se generaron
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
mediante mutaciones puntuales adicionales (aminoacidos subrayados) en la secuencia de K1.
Descripcion detallada
Un inhibidor de FXII/FXIIa se refiere a inhibidores de cualquiera de entre Factor XII y Factor XII activado (FXIIa) o ambos.
La solicitud proporciona un inhibidor de FXII/FXIIa para su uso en la prevencion de la formacion y/o estabilizacion de trombos durante y/o despues de un procedimiento medico llevado a cabo en un sujeto humano o animal que comprende poner en contacto sangre de dicho sujeto humano o animal con superficies artificiales, donde dicho inhibidor de FXII/FXIIa se administra antes, durante y/o despues de dicho procedimiento medico.
Una superficie artificial es cualquier superficie no humana o no animal que se pone en contacto con la sangre durante un procedimiento medico y que conduce a la activacion por contacto del Factor XII al Factor XIIa. En ciertas realizaciones, el contacto entre la sangre del sujeto y la superficie artificial tiene lugar fuera del cuerpo del sujeto. A modo de ejemplo no limitante tales superficies artificiales pueden ser acero, cualquier tipo de plastico, vidrio, silicona, goma, etc. En una realizacion, la superficie artificial se expone a al menos un 80%, 90% o 100% de la sangre del sujeto humano o animal. En otra realizacion, el volumen de un 80%, 90% o 100% de la sangre del sujeto humano o animal entra en contacto con la superficie artificial en menos de 30 minutos, menos de 15 minutos, menos de 10 minutos o menos de 5 minutos. En otra realizacion, la superficie artificial sirve como recipiente para la sangre fuera del cuerpo humano o animal, y dicha sangre puede encontrarse en una cantidad de al menos 50 mL, 100 mL, 200 mL, 300 mL, 400 mL, 500 mL o mas. En una realizacion, la superficie artificial que se expone a la sangre del paciente es de al menos 0.2 m2 En una realizacion, el volumen total de la sangre del paciente se expone a la superficie artificial, que es de al menos 0.2 m2. En algunas realizaciones, el area de superficie artificial es de al menos 0.1 m2 o de al menos 0.5 m2. En otra realizacion, la superficie artificial excluye retractores, agujas, escalpelos y otro instrumental quirurgico rutinario que solo entra en contacto con una fraccion de la sangre del sujeto.
En una realizacion, el inhibidor de FXII/FXIIa se administra antes, durante y/o despues del procedimiento medico. En otra realizacion, el inhibidor de FXII/FXIIa se administra durante el procedimiento medico. En otra realizacion, se puede administrar tambien antes de que empiece el procedimiento medico. Puede incluso ser beneficioso que se administre despues del procedimiento medico puesto que puede ocurrir una activacion por contacto en las superficies artificiales que se han integrado en los vasos durante las operaciones.
Otra realizacion se refiere a un inhibidor de FXII/FXIIa para la prevencion de la formacion y/o estabilizacion de trombos durante y/o despues de un procedimiento medico llevado a cabo en un sujeto humano o animal que comprende poner en contacto sangre de dicho sujeto humano o animal con superficies artificiales, donde el contacto entre la sangre y la superficie artificial tiene lugar fuera del cuerpo del sujeto, donde dicho inhibidor de FXII/FXIIa se administra antes, durante y/o despues de dicho procedimiento medico y donde dicho sujeto humano o animal no tiene un mayor riesgo hemorragico. En algunas realizaciones, el contacto entre la sangre de dicho sujeto y al menos una parte de la superficie artificial tiene lugar “fuera” del cuerpo del sujeto, que en ciertas realizaciones es al menos 1 cm, o 2 cm, o 3 cm, o 4 cm, o 5 cm, o 10 cm, o 15 cm, o 20 cm, o 50 cm o mas lejos del cuerpo del sujeto.
Otra realizacion se refiere a un inhibidor de FXII/FXIIa para la prevencion de la formacion y/o estabilizacion de trombos durante y/o despues de un procedimiento medico llevado a cabo en un sujeto humano o animal que comprende poner en contacto sangre de dicho sujeto humano o animal con superficies artificiales, donde dicho inhibidor de FXII/FXIIa se administra antes, durante y/o despues de dicho procedimiento medico, y donde dicho sujeto humano o animal no tiene un mayor riesgo hemorragico y donde en dicho sujeto humano o animal, i) el tiempo de hemorragia en la oreja o en la yema del dedo segun Duke no es mas largo de 10 minutos, no mas largo de 8 minutos, no mas largo de 6 minutos o no mas largo de 5 minutos o ii) el tiempo de hemorragia de acuerdo con el metodo de Ivy no es mas largo de 10 minutos, no mas largo de 8 minutos, no mas largo de 6 minutos o no mas largo de 5 minutos o iii) el tiempo de hemorragia de acuerdo con el metodo de Marx no es mas largo de 4 minutos, no mas largo de 3 minutos o no mas largo de 2 minutos. Dicho de otro modo: debido a la administracion de un inhibidor de FXII/FXIIa.
La determinacion del riesgo hemorragico segun Duke, Ivy o Marx son solo ejemplos no limitantes de metodos que se pueden utilizar para determinar el riesgo de hemorragia en sujetos humanos o animales. En animales el riesgo de hemorragia tambien se puede evaluar determinando el tiempo de hemorragia cutanea. Por ejemplo, en cerdos, el tiempo de hemorragia cutanea (SBT, por sus siglas en ingles) se puede definir como el tiempo hasta que cesa la perdida de sangre desde una incision estandarizada en el interior de la oreja de 5 mm de longitud por 1 mm de profundidad originada utilizando un dispositivo de corte Surgicutt® (International Technidyne Cop., Edison, Nueva Jersey, EE. UU.).
A continuacion, se describen los metodos de prueba mencionados anteriormente para humanos, en comparacion con esta prueba en animales.
El tiempo de hemorragia de acuerdo con el metodo de Duke se lleva a cabo en el borde del lobulo de la oreja o en la
8
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
yema del dedo con un esfigmomanometro alrededor del brazo superior (40 mm Hg) de un sujeto. El investigador perfora el borde del lobulo de la oreja o la yema del dedo con una lanceta e induce una lesion tisular que es de ~3 mm de profundidad. A continuacion, el investigador deja que la sangre salga de la lesion tisular por gravedad sin comprometer la lesion tecnica o manualmente. La sangre que gotea se limpia con un papel de celulosa cada 15 o 30 segundos sin tocar la lesion. Este procedimiento se repite hasta que el investigador detecta un cese mediante inspeccion visual. Los valores normales para esta prueba de hemorragia evaluada visualmente son de hasta 5 minutos. Sin embargo, existen ciertas variaciones en funcion tambien del sujeto individual, de modo que el tiempo de hemorragia normal segun Duke puede ser tambien de hasta 6 minutos, o hasta 8 minutos o hasta 10 minutos.
El tiempo de hemorragia de acuerdo con el metodo de Ivy se lleva a cabo con un corte definido en la piel del lado interno del antebrazo (p. ej., Surgicutt®), a la vez que se crea una presion tisular estandarizada con un esfigmomanometro (40 mm Hg) en el brazo superior del sujeto. El investigador limpia la sangre que sale de la lesion por gravedad cada 30 segundos sin tocar la lesion. A continuacion, se toma el tiempo hasta que se detiene la hemorragia. Los valores normales para esta prueba de hemorragia evaluada visualmente son de hasta 5 minutos. Sin embargo, existen ciertas variaciones en funcion tambien del sujeto individual, de modo que el tiempo de hemorragia normal segun Ivy puede ser tambien de hasta 6 minutos, o hasta 8 minutos o hasta 10 minutos.
El tiempo de hemorragia subacuatico segun Marx se lleva a cabo mediante una lesion tisular realizada en la yema del dedo de un sujeto utilizando una lanceta. Despues de que se haya producido la lesion tisular, es necesario introducir la yema del dedo en agua a 37 °C inmediatamente. A continuacion, mientras el dedo permanece sumergido, el investigador inspecciona visualmente la hemorragia y monitoriza el tiempo hasta que la hemorragia se detiene sin comprometer la lesion tisular. Los valores normales para esta prueba de hemorragia evaluada visualmente son de hasta 2 minutos. Sin embargo, existen ciertas variaciones en funcion tambien del sujeto individual, de modo que el tiempo de hemorragia normal segun Marx tambien puede ser de hasta 3 minutos o hasta 4 minutos.
En ciertas realizaciones, el procedimiento medico es, a modo de ejemplos no limitantes:
i) cualquier procedimiento que utilice una derivacion cardiopulmonar (CBP), incluido, por ejemplo, la revascularizacion coronaria (CABG, por sus siglas en ingles), reemplazo de valvulas, reemplazo aortico y otras formas de cirugfa cardiaca o vascular; o
ii) la oxigenacion y bombeo de sangre mediante oxigenacion con membrana extracorporea (ECMO, por sus siglas en ingles), que se utiliza en pacientes con smdrome de dificultad respiratoria aguda (ARDs, por sus siglas en ingles) o para el smdrome de dificultad respiratoria infantil (IRDS, por sus siglas en ingles) o en pacientes que hayan aspirado sustancias toxicas, o para el smdrome de aspiracion de meconio (MAS, por sus siglas en ingles) o infecciones pulmonares, o hipertension pulmonar o fallo cardiaco por diversas razones como, por ejemplo, despues de una cirugfa cardiaca, como resultado de una cardiomiopatfa o antes de un trasplante de corazon; o
iii) el bombeo de sangre asistido (interno o externo) incluidos los dispositivos asistidos ventriculares y corazones artificiales o
iv) la dialisis de sangre; o
v) la filtracion extracorporea de sangre; o
vi) la recoleccion de sangre en cualquier deposito para su uso posterior en un sujeto humano o animal; o
vii) el uso de uno o varios cateteres intraluminales venosos o arteriales que en teona deben permanecer durante un cierto tiempo (p. ej. cateter de Swan-Ganz, cateter venoso central, etc.), o
viii) el uso de cateteres, fascias, alambres grna u otro u otros equipos/dispositivos para 'cateterismo cardiaco intervencionista o diagnostico; o
ix) el uso de uno o varios dispositivos intravasculares tales como uno o mas estents, uno o mas filtros de la vena cava, uno o mas oclusores de defecto septal auricular (ASD, por sus siglas en ingles), defecto septal ventricular (VSD, por sus siglas en ingles) o del conducto arterioso persistente (PDA, por sus siglas en ingles, uno o varios serpentines; o
x) el uso de una o varias valvulas cardiacas artificiales, incluidas por ejemplo valvulas aorticas, valvulas mitrales, valvulas tricuspides, valvulas pulmonares y donde una valvula cardiaca puede ser una valvula mecanica o una valvula bioprotesica, una valvula producida mediante ingeniena de tejidos o una valvula montada en un estent; o
xi) el uso de uno o varios injertos vasculares artificiales, incluidos, por ejemplo, uno o mas injertos aorticos, uno o varios injertos pulmonares y una o mas derivaciones de Blalock-Taussig (BT) modificadas Gore-tex.
En general, existen varias situaciones medicas en las que la sangre entra en contacto con superficies artificiales dentro y fuera del cuerpo humano, que despues pueden dar como resultado la formacion de coagulos como consecuencia de la activacion de la coagulacion en estas superficies.
El contacto externo (fuera del cuerpo humano) se puede resumir como los procedimientos que incluyen circulacion
9
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
extracorporea de modo que la sangre se saque fuera del cuerpo y al cabo de un tiempo se devuelva al cuerpo (baipas, ECMO, hemofiltracion, dialisis, recoleccion de sangre, etc.).
El contacto interno (dentro del cuerpo humano) con superficies extranas se da en todos los procedimientos que utilizan dispositivos intravasculares, tanto los que se implantan de forma permanente (estents de valvulas cardiacas, etc.) como aquellos que se emplean solo de forma temporal (cateteres, alambres gma, etc.).
En otra realizacion, se proporciona un dispositivo medico, donde el dispositivo medico se recubre con un inhibidor de FXII/FXIIa. El dispositivo medico puede ser una maquina de derivacion cardiopulmonar, un sistema de oxigenacion con membrana extracorporea para la oxigenacion de la sangre, un dispositivo para el bombeo asistido de sangre, un dispositivo de dialisis de sangre, un dispositivo para la filtracion extracorporea de sangre, un deposito para su uso en la recoleccion de sangre, un cateter intraluminal, un estent, una valvula cardiaca artificial y/o accesorios para cualquiera de estos dispositivos, incluidos tubos, canulas, bomba centnfuga, valvulas, puertos de acceso venoso, desviadores, etc. Otra realizacion incluye metodos para preparar tales dispositivos recubriendolos con inhibidores de FXII/FXIIa mediante inmersion, pulverizacion y otros metodos convencionales en la tecnica de las tecnologfas de recubrimiento.
En algunas realizaciones, la superficie artificial se recubre con el inhibidor de FXII/FXIIa, donde el inhibidor de FXII/FXIIa se encuentra en la superficie en una forma tal que este disponible para unirse a FXII/FXIIa, es decir, se preserva la actividad biologica del inhibidor de FXII/FXIIa. En algunas realizaciones, el inhibidor de FXII/FXIIa se une covalentemente a la superficie artificial. En otras realizaciones, el inhibidor de FXII/FXIIa se une de forma no covalente a la superficie. En ciertas realizaciones, la superficie artificial se impregna con el inhibidor de FXII/FXIIa. La superficie artificial puede ser una superficie que eluye farmacos, donde el inhibidor de FXII/FXIIa se libera lentamente desde la superficie. El inhibidor de FXII/FXIIa puede estar embebido en la superficie, donde el inhibidor de FXII/FXIIa se disuelve lentamente a medida que la sangre entra en contacto con la superficie artificial. En algunas realizaciones, la superficie se derivatiza para que los inhibidores de FXII/FXIIa se adhieran a la superficie. En ciertas realizaciones, la concentracion de inhibidor de FXII/FXIIa con la que se recubre la superficie puede ser similar a la cantidad que se administra a un sujeto sistemicamente. Las concentraciones de las disoluciones de inhibidor de FXII/FXIIa y/o la concentracion final de inhibidor de FXII/FXIIa disponible en la superficie artificial se puede determinar antes y/o durante la fabricacion. En algunas realizaciones, el inhibidor de FXII/FXIIa se administra aplicandolo como recubrimiento en la superficie artificial del dispositivo.
En otras realizaciones, el inhibidor de FXII/FXIIa se administra con heparina o derivados de esta y/o hirudina o derivados de esta, donde la cantidad de heparina o derivados de esta y/o hirudina o derivados de esta que se anade ademas del inhibidor de FXII/FXIIa antes y/o durante y/o despues del procedimiento medico es reducida en comparacion con la cantidad de heparina o derivados de esta y/o hirudina o derivados de esta que se administra normalmente antes y/o durante dicho procedimiento medico cuando no se administra inhibidor de FXII/FXIIa.
La terapia estandar en los procedimientos medicos mencionados anteriormente es la administracion de heparina o derivados de esta y/o hirudina o derivados de esta. Estos farmacos se administran para prevenir la coagulacion debida a la activacion por contacto que tiene lugar donde la sangre entra en contacto con superficies artificiales. Para conseguir la prevencion de la coagulacion estos farmacos se dosifican de forma que el tiempo de coagulacion activada (ACT) sea de entre 300-500 segundos. A valores de ACT inferiores a 300 segundos, llevar a cabo los procedimientos medicos mencionados anteriormente entranana un riesgo elevado de trombosis.
Se descubrio que la administracion de inhibidores de FXII/FXIIa permitia llevar a cabo los procedimientos medicos mencionados anteriormente con cantidades reducidas de heparina o derivados de esta y/o hirudina o derivados de esta que conducinan por sf solas, sin la administracion de un inhibidor de FXII/FXIIa, a valores de ACT inferiores a 500 segundos.
Algunas realizaciones incluyen llevar a cabo los procedimientos medicos mencionados anteriormente con cantidades mas reducidas de heparina o derivados de esta y/o hirudina o derivados de esta, de modo que los valores de ACT senan inferiores a 400 segundos, inferiores a 300 segundos, inferiores a 250 segundos, inferiores a 200 segundos, inferiores a 150 segundos, inferiores a 100 segundos, inferiores a 50 segundos cuando la heparina o derivados de esta y/o hirudina o derivados de esta se proporcionasen solos, sin la administracion de un inhibidor de FXII/FXIIa. Tales cantidades reducidas de heparina pueden incluir de 1 a 400 UI/kg de peso corporal (PC), de 50 a 300 UI/kg de PC, de 100 a 200 UI/kg de PC y de 200 a 300 UI de PC. Las cantidades reducidas de heparina pueden incluir cantidades inferiores a 400 UI/kg de peso corporal (PC), cantidades inferiores a 300 UI/kg de peso corporal (PC), cantidades inferiores a 200 UI/kg de peso corporal (PC), cantidades inferiores a 100 UI/kg de peso corporal (PC), cantidades inferiores a 50 UI/kg de peso corporal (PC) o cantidades inferiores a 10 UI/kg de peso corporal (PC).
En una realizacion, el inhibidor de FXII/FXIIa se administra en un procedimiento medico segun se ha descrito anteriormente sin la administracion de heparina o un derivado de esta y/o sin la administracion de hirudina o un derivado de esta.
Los pacientes tratados con los procedimientos medicos mencionados anteriormente sin la administracion de
10
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
heparina o un derivado de esta y/o sin la administracion de hirudina o un derivado de esta ademas de la administracion de un inhibidor de FXII/FXIIa estan protegidos contra la coagulacion debida a la activacion por contacto de la cascada de coagulacion mientras que no padezcan de mayor riesgo hemorragico, lo cual es un inconveniente de la terapia estandar actual. Esto es de suma importancia para pacientes y facultativos, ya que el estado de coagulacion despues de los procedimientos medicos mencionados no se refleja adecuadamente en las pruebas de coagulacion generales (p. ej., aPTT, PT) y, por lo tanto, no se puede monitorizar ni tratar adecuadamente. El paciente en sf puede mostrar signos de hipercoagulopatia o hipocoagulopatia. Por consiguiente, en algunos pafses, los pacientes no se anticoagulan de manera oportuna despues del procedimiento medico unicamente por potenciales razones medicas legales en caso de hemorragia grave despues de la cirugfa, mientras que el riesgo de coagulacion esta relacionado con los riesgos personales del paciente.
Debido a este mayor riesgo hemorragico asociado con la administracion de heparina o un derivado de esta despues de que se lleve a cabo el procedimiento medico y la sangre del sujeto humano o animal ya no este expuesta a las superficies artificiales, el efecto de la heparina o un derivado de esta se debe antagonizar tan pronto como sea posible para reducir el mayor riesgo hemorragico tan pronto como sea posible. Normalmente se proporciona protamina para antagonizar el efecto de la heparina o derivados de esta; sin embargo, el antagonismo presenta sus propios riesgos segun se describe mas adelante. En caso de que se utilice hirudina o un derivado de esta en su lugar o combinada con heparina o un derivado de esta, sena tambien beneficioso antagonizar los efectos de la hirudina o un derivado de esta ya que el riesgo hemorragico es tambien mayor, aunque aun no se ha autorizado un antagonista clmicamente util y, por lo tanto, la hirudina, o un derivado de esta, no antagonizada restante presenta riesgos. De llegar a estar disponibles tales antagonistas de hirudina o derivados de esta es previsible que el uso de los antagonistas conllevara un riesgo protrombotico comparable al del uso de antagonistas de heparina.
Los riesgos asociados con la administracion de protamina son una reaccion alergica grave inmediata causada por la molecula de protamina, el riesgo por hipotension grave y el riesgo por coagulacion debida al cese repentino del efecto de la heparina, que puede causar un exceso de generacion de trombina.
Por lo tanto, en otra realizacion, el riesgo protrombotico a continuacion del antagonismo posoperatorio de la heparina o derivados de esta y/o del antagonismo posoperatorio de hirudina o derivados de esta se previene o reduce utilizando un inhibidor de FXII/FXIIa.
En otra realizacion, el riesgo protrombotico a continuacion del antagonismo posoperatorio de la heparina o derivados de esta y/o del antagonismo posoperatorio de hirudina o derivados de esta se previene o reduce administrando el inhibidor de FXII/FXIIa antes, durante y/o despues de un procedimiento medico, donde se anade una cantidad reducida o nula del antagonista de heparina y/o antagonista de hirudina despues del procedimiento medico en comparacion con la cantidad de dicho antagonista que se administra normalmente despues de dicho procedimiento medico cuando no se administra inhibidor de FXII/FXIIa.
De forma mas general, en una realizacion, el sujeto humano o animal tiene un riesgo protrombotico reducido o nulo despues del procedimiento medico.
Segun se ha discutido anteriormente, “FXII/FXIIa” se refiere a cualquiera de entre Factor XII y Factor XII activado (FXIIa) o ambos. Por tanto, “inhibidor de FXII/FXIIa” incluye inhibidores de cualquiera de entre Factor FXII y FXIIa o ambos. Ademas, los anticuerpos anti-FXII/FXIIa incluyen anticuerpos que se unen e inhiben cualquiera de entre FXII y FXIIa o ambos. Se pretende que la expresion “inhibidor de FXII/FXIIa” tambien incluya un inhibidor de FXII/FXIIa que esta conectado a un polipeptido que prolonga la semivida que, en una realizacion, incluye un conector.
En una realizacion, el inhibidor de FXII/FXIIa se refiere a un inhibidor de FXII/FXIIa espedfico, preferentemente un inhibidor de FXIIa espedfico.
Un inhibidor de FXII/FXIIa espedfico se refiere a un inhibidor que inhibe las sermproteasas plasmaticas distintas de FXII y/o FXIIa en un porcentaje inferior o igual a un 25% si se utiliza en una relacion molar 1:1. Dicho de otro modo: un inhibidor de FXII/FXIIa espedfico inhibe las sermproteasas plasmaticas distintas de FXII y/o FXIIa en un porcentaje inferior o igual a un 25% cuando dicho inhibidor se utiliza en una relacion molar 1:1 de la respectiva sermproteasa plasmatica respecto a dicho inhibidor. Por ejemplo, un mAb de FXII/FXIIa espedfico inhibe la sermproteasa plasmatica FXIa solamente en un 5%, donde la relacion molar de FXIa respecto a dicho mAb es 1:1, mientras que el mismo mAb de FXII/FXIIa inhibe FXIIa en al menos un 80%, preferentemente al menos un 90%.
En una realizacion de la invencion, otra sermproteasa plasmatica se inhibe en mas de un 50% si se utiliza en una relacion molar 1:1 de la respectiva sermproteasa plasmatica respecto a dicho inhibidor.
En otra realizacion de la invencion, otras dos sermproteasas plasmaticas se inhiben en mas de un 50% si se utilizan en una relacion molar 1:1 de la respectiva sermproteasa plasmatica respecto a dicho inhibidor.
En otra realizacion mas, el inhibidor de FXII/FXIIa es un inhibidor de FXII/FXIIa humano, incluido un anticuerpo
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
monoclonal humanizado, preferentemente un anticuerpo monoclonal completamente humanizado.
El termino “homolog^a” segun se utiliza en la presente se refiere al numero porcentual de aminoacidos que son identicos o constituyen sustituciones conservativas. La homolog^a se puede determinar utilizando programas de comparacion de secuencias tales como GAP (Deveraux et al., 1984, Nucleic Acids Research 12, 387-395), que se incorpora a la presente por referencia. De esta forma, se podnan comparar secuencias de longitud similar o sustancialmente diferente a las citadas en la presente mediante insercion de huecos en el alineamento, donde dichos huecos se determinan, por ejemplo, mediante el algoritmo de comparacion utilizado por el GAP.
Infestina-4
En una realizacion, la solicitud proporciona un inhibidor de FXII/FXIIa que comprende el dominio 4 de Infestina, Infestina-4. En una realizacion el inhibidor de FXII/FXIIa comprende una variante de Infestina-4. En otra realizacion, los inhibidores de FXII/FXIIa comprenden el dominio 4 de Infestina y, opcionalmente, los dominios 1, 2 y/o 3 de Infestina; se tiene constancia de que estas protemas son potentes inhibidores de FXII/FXIIa (remftase al documento WO 2008/098720; remftase tambien a Campos ITN et al. 577 FEBS Lett. 512-516, 2004). Se proporciona la secuencia polipepftdica de Infestina-4 de origen natural (SEQ ID NO: 1). Segun se utiliza en la presente, el termino “variante” se refiere a un polipeptido con una mutacion aminoaddica, donde se define una “mutacion” como una sustitucion, una deleccion o una adicion a la secuencia de Infestina-4 de origen natural, donde tales cambios no alteran la habilidad funcional del polipeptido para inhibir FXII/FXIIa. El termino “variante” incluye fragmentos de la secuencia de Infestina-4 de origen natural o mutada. A continuacion, se proporcionan ejemplos adicionales de tales variantes.
En una realizacion, una variante de Infestina-4 comprende los aminoacidos N-terminales 2-13 de la secuencia de Infestina-4 de origen natural (remftase a la secuencia subrayada en la Figura 12) y al menos una y hasta cinco mutaciones aminoaddicas fuera de los aminoacidos N-terminales que dan lugar a diferencias respecto a la secuencia de Infestina-4 de origen natural, o seis residuos de cistema conservados (remftase a los aminoacidos en negrita en la Figura 12) y una homologfa de al menos un 70% respecto a la secuencia de Infestina-4 de origen natural. Los aminoacidos N-terminales 2-13 de la secuencia de Infestina-4 pueden ser importantes para unirse a FXII/FXIIa, tomando como base analisis de datos estructurales para un inhibidor relacionado Rhodnius prolixus (PDB: 1 TSO) que se une a la trombina y analisis de SPINK-1 que se une a la quimotripsina, que comparten ambos el rasgo comun de la acumulacion de sitios de contacto en la region N-terminal, segun se muestra en la Figura 11. Por lo tanto, en una realizacion, una variante de Infestina-4 comprende la region N-terminal conservada de los aminoacidos 2-13 de la secuencia de Infestina-4 de origen natural y al menos una y hasta cinco mutaciones aminoaddicas fuera de estos aminoacidos N-terminales conservados que dan lugar a diferencias respecto a la secuencia de Infestina-4 de origen natural. Una mutacion puede ser una sustitucion, una deleccion o una adicion. Segun se utiliza en la presente, la expresion “fuera de dichos aminoacidos N-terminales” se refiere a cualquier aminoacido a lo largo de la cadena polipepftdica de la variante distinto del tramo contiguo de aminoacidos que comprende la secuencia VRNPCACFRNYV, es decir, los aminoacidos 2-13 de la secuencia de Infestina-4 de origen natural. En otra realizacion, una variante de Infestina-4 comprende seis residuos de cistema conservados y tiene una homologfa de al menos un 70% respecto a la secuencia de Infestina-4 de origen natural. En una realizacion, los seis residuos de cistema conservados son los aminoacidos en las posiciones 6, 8, 16, 27, 31 y 48 de la secuencia de Infestina-4 de origen natural (remftase a la Figura 12). En una realizacion, la variante comprende la cistema conservada final. En otras realizaciones, las posiciones exactas de los residuos de cistema y las posiciones relativas entre sf pueden cambiar de las posiciones 6, 8, 16, 27, 31 y 48 de la secuencia de Infestina-4 de origen natural debido a inserciones o delecciones en la variante de Infestina-4. No obstante, en estas realizaciones, una variante de Infestina-4 comprende todas las seis cistemas y puede compartir una homologfa de un 70%, 75%, 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% o 99% respecto a la secuencia de Infestina-4 de origen natural.
En algunas realizaciones, una variante de infestina-4 se caracteriza por que inhibe FXII/FXIIa. La actividad funcional de la inhibicion de FXII/FXIIa se puede evaluar, por ejemplo, mediante caracterizacion in vitro y/o in vivo, incluidos ensayos directos para evaluar la inhibicion de la actividad enzimatica de FXII/FXIIa, el tiempo de coagulacion prolongado, es decir, el tiempo de la tromboplastina parcial activada (aPTT), o metodos in vivo para evaluar la coagulacion. Algunos ejemplos adicionales de variantes de Infestina-4 son mutaciones de SPINK-1, que se describen a continuacion.
Mutaciones de SPINK-1
Una realizacion involucra inhibidores de FXII/FXIIa para uso terapeutico en seres humanos. Se puede emplear una protema humana con una elevada similitud respecto a la Infestina-4. Por ejemplo, la protema humana con la similitud mas elevada respecto a la Infestina-4 es SPINK-1, un inhibidor de sermproteasas de tipo Kazal expresado en el pancreas (tambien conocido como inhibidor de tripsina de secrecion pancreatica, PSTI, por sus siglas en ingles). La familia de inhibidores de sermproteasas de tipo Kazal es una de las numerosas familias de inhibidores de sermproteasas. Se han descrito muchas protemas de diferentes especies (Laskowski M y Kato I, 49 Ann. Rev. Biochem. 593-626, 1980). Las similitudes de la secuencia de aminoacidos entre Infestina-4 y SPINK-1 se exponen
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
en la Figura 12.
Tomando como base la secuencia de SPINK-1 de origen natural (SEQ ID NO: 2) se pueden generar diversas variantes para aumentar la homologfa de la secuencia de SPINK-1 respecto a la Infestina-4. La frase “mayor homologfa respecto a la Infestina-4” se refiere al proceso donde se realizan mutaciones aminoaddicas al SPINK-1 para hacer que la secuencia de SPINK-1 se parezca mas a la secuencia de Infestina-4.
En una realizacion, el SPINK-1 se muta para que comprenda los aminoacidos N-terminales 2-13 de la secuencia de Infestina-4 de origen natural; se proporciona la secuencia polipeptidica y se denomina K1 (SEQ ID NO: 3). Segun se ha descrito anteriormente, se cree que la parte N-terminal de la secuencia de Infestina-4 es importante para la funcion inhibidora de FXII/FXIIa.
Por lo tanto, en una realizacion, una variante del SPINK-1 mutado comprende tambien los aminoacidos N-terminales 2-13 de la secuencia de Infestina-4 de origen natural y al menos una y hasta cinco mutaciones aminoaddicas fuera de dichos aminoacidos N-terminales, que dan lugar a diferencias respecto a la secuencia de SPINK-1 de origen natural y que aumentan la homologfa de la variante con la secuencia de Infestina-4 de origen natural. En otra realizacion, una variante de SPINK-1 mutado comprende seis residuos de cistema conservados y tiene una homologfa de al menos un 70% respecto a la secuencia de SPINK-1 de origen natural. Una mutacion puede ser una sustitucion, una deleccion o una adicion. Segun se ha definido anteriormente, la expresion “fuera de dichos aminoacidos N-terminales” se refiere a cualquier aminoacido a lo largo de la cadena polipeptfdica de la variante distinto del tramo contiguo de aminoacidos que esta compuesto por la secuencia VRNPCACFRNYV, es decir, los aminoacidos 2-13 de la secuencia de Infestina-4 de origen natural. El termino “variante” incluye fragmentos de dicha secuencia de SPINK-1 mutado. En una realizacion, los seis residuos de cistema conservados pueden ser los aminoacidos en las posiciones 9, 16, 24, 35, 38 y 56 de la secuencia de SPINK-1 de origen natural (remftase a la Figura 12). En una realizacion, la variante comprende la cistema conservada final. En otra realizacion, las posiciones exactas de las cistemas y las posiciones relativas entre sf pueden cambiar de las posiciones 9, 16, 24, 35, 38 y 56 de la secuencia de SPINK-1 de origen natural debido a inserciones o delecciones en la variante de SPINK-1. No obstante, en estas realizaciones, una variante de SPINK-1 comprende todas las seis cistemas. En algunas realizaciones, una variante de SPINK-1 tambien se caracteriza por que inhibe FXII/FXIIa.
Se proporcionan algunos ejemplos de tales variantes de SPINK-1 y se denominan K2 y K3 (SEQ ID NO: 4 y 5 respectivamente). En las variantes K2 y K3 de SPINK-1, se realizaron sustituciones aminoaddicas adicionales fuera del extremo N para aumentar la homologfa respecto a la Infestina-4, donde las variantes tambien se caracterizan por que inhiben la actividad de FXII/FXIIa. Remftase al documento WO 2008/098720. La Figura 13 muestra la secuencia de aminoacidos de estas variantes y el grado de cambios respecto a la secuencia de SPINK-1 de origen natural. En el caso de la variante K3 de SPINK-1, se realizaron cinco sustituciones aminoaddicas para aumentar la homologfa respecto a la Infestina-4. Por lo tanto, en algunas realizaciones, una variante de SPINK-1 puede compartir un 70%, 75%, 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% o 99% de homologfa con la secuencia de SPINK-1 de origen natural.
Otros inhibidores de FXII/FXIIa
En una realizacion, se administran otros inhibidores de FXII/FXIIa a un paciente que recibe un procedimiento medico. En el documento WO 2006/066878, se propone el uso de anticuerpos contra FXII/FXIIa o el uso de inhibidores de FXII/FXIIa. De forma espedfica, los inhibidores de FXII/FXIIa incluyen antitrombina III (AT III), inhibidor de la enzima conversora de angiotensina, inhibidor de C1, aprotinina, inhibidor de la proteasa alfa-1, antipama ([(S)-1-carboxi-2-feniletil]carbamoil-L-Arg-L-Val-Arginal), acetal dimetflico del Z-Pro-Pro-aldelddo, DX88 (Dyax Inc., 300 Technology Square, Cambridge, MA 02139, EE. UU.; citado en: Williams A y Baird LG, 29 Transfus Apheresis Sci. 255-258, 2003), leupeptina, inhibidores de proliloligopeptidasa tales como Fmoc-Ala-Pyr-CN, inhibidores de tripsina de mafz (CTI, por sus siglas en ingles), mutaciones del inhibidor de tripsina pancreatica bovina, ecotina, protema anticoagulante de limanda japonesa (YAP, por sus siglas en ingles), inhibidor V de tripsina de Cucurbita maxima, incluidos isoinhibidores de Curcurbita maxima y Hamadarina (segun ha sido divulgado por Isawa H et al. 277 J. Biol. Chem., 27651-27658, 2002) y Pro-Phe-Arg-clorometilcetona (PCK, por sus siglas en ingles).
El inhibidor de FXII/FXIIa puede ser, por ejemplo, un anticuerpo o fragmento de este, o un mimetico que retienen la actividad inhibidora, por ejemplo, analogos del dominio inhibidor de proteasas de tipo Kunitz de la protema precursora de amiloide segun se ha divulgado en la patente de EE. UU. N.° 6 613 890, en las columnas 4 a 8. Otros inhibidores adecuados pueden ser Hamadarina, segun se ha divulgado en Isawa H et al. 277 J. Biol. Chem. 2765127658, 2002. En Chen Z et al. 65 Applied and Environmental Microbiology, 1320-1324, 1999 y en Wen L et al. 18 Plant Mol. Biol. 813-814, 1992 se divulgan un inhibidor de tripsina de mafz adecuado y metodos para su produccion.
En otra realizacion, el inhibidor de FXII/FXIIa puede ser un anticuerpo anti-FXII/FXIIa que se una a FXII/FXIIa e inhiba la activacion y/o actividad de FXII/FXIIa. Un anticuerpo de este tipo se ha descrito, por ejemplo, en el documento WO 2006/066878 y en Ravon et al., 1 Blood 4134-43, 1995. Segun se ha discutido anteriormente, un
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
“anticuerpo anti-FXII/FXIIa” incluye anticuerpos que se unan e inhiban cualquiera de entre FXII y FXIIa o ambos. Algunos anticuerpos anti-FXII/FXIIa se describen en mas detalle mas adelante.
Inhibidores de FXII/FXIIa conectados a polipeptidos que aumentan la semivida
Otro aspecto de la solicitud proporciona inhibidores de FXII/FXIIa conectados a un polipeptido que aumenta la semivida (HLEP, por sus siglas en ingles). En una realizacion, los inhibidores de FXII/FXIIa son protemas de bajo peso molecular. Por lo tanto, se puede esperar una depuracion renal rapida, segun se ha publicado para otras protemas de bajo peso molecular (Werle M y Bernkop-Schmurch A, 30 Amino Acids 351-367, 2006). Una forma de abordar la semivida plasmatica corta de un compuesto polipeptfdico es inyectarlo repetidamente o mediante infusion continua. Otra estrategia es aumentar la semivida plasmatica intrmseca del polipeptido en sf. Por ejemplo, en una realizacion, los inhibidores de FXII/FXIIa estan conectados a protemas que prolongan la semivida.
Un “polipeptido que aumenta la semivida” ampfta la semivida del inhibidor de FXII/FXIIa in vivo en un paciente o en un animal. Por ejemplo, se ha descrito que la albumina e inmunoglobulinas y sus fragmentos o derivados son polipeptidos que aumentan la semivida (HLEP): Ballance et al. (WO 2001/79271) han descrito polipeptidos de fusion de una multitud de polipeptidos terapeuticos diferentes, de los cuales se predice que, cuando se fusionan con seroalbumina humana, tienen una semivida funcional mayor in vivo y un periodo de conservacion extendido.
Los terminos “albumina” y “seroalbumina” engloban la albumina humana (HA, por sus siglas en ingles) y variantes de esta, de la cual se proporciona la forma madura completa (SEQ ID NO: 6), asf como albumina de otras especies y variantes de esta. Segun se utiliza en la presente “albumina” se refiere a una secuencia de aminoacidos o polipeptido de albumina, o a una variante de albumina, que tiene una o mas actividades funcionales (p. ej., actividades biologicas) de albumina. Segun se utiliza en la presente, la albumina puede estabilizar o prolongar la actividad terapeutica de un inhibidor de FXII/FXIIa. La albumina puede derivarse de cualquier vertebrado, especialmente cualquier mairnfero, por ejemplo, un ser humano, mono, vaca, oveja o cerdo. Las albuminas que no proceden de mamferos incluyen, sin caracter limitante, albumina de gallina y de salmon. La parte de albumina del polipeptido conectado a albumina puede ser de un animal diferente que la parte polipeptfdica terapeutica. Remftase al documento WO2008/098720 para consultar ejemplos de protemas de fusion de albumina.
En una realizacion, una variante de albumina tiene una longitud de al menos 10, 20, 40 o al menos 70 aminoacidos,
0 puede incluir 15, 20, 25, 30, 50 o mas aminoacidos contiguos de la secuencia de HA (SEQ ID NO 6) o puede incluir parte o todos los dominios espedficos de HA. Una variante de albumina puede incluir una sustitucion, deleccion o adicion aminoaddica, ya sea una sustitucion conservativa o no conservativa, donde tales cambios no alteran sustancialmente el sitio activo o dominio activo que confiere las actividades terapeuticas de los polipeptidos que aumentan la semivida. Estas variantes pueden compartir un 70%, 75%, 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% o 99% de homologfa.
En una realizacion, la variante de albumina incluye fragmentos y puede estar compuesta o, como alternativa, comprender al menos un dominio completo de albumina o fragmentos de dichos dominios, por ejemplo, los dominios
1 (aminoacidos 1-194 de la SEQ ID nO 6), 2 (aminoacidos 195-387 de la SEQ ID NO 6), 3 (aminoacidos 388-585 de la SEQ ID NO 6), 1 + 2 (1-387 de la SEQ ID NO 6), 2 + 3 (195-585 de la SEQ ID NO 6) o 1 + 3 (aminoacidos 1-194 de la SEQ ID No 6 + aminoacidos 388-585 de la SEQ ID NO 6). Cada dominio en sf esta formado por dos subdominios homologos, concretamente 1-105, 120-194, 195-291, 316-387, 388-491 y 512-585, con regiones conectoras intersubdominio flexibles que comprenden los residuos de Lys106 a Glu119, Glu292 a Val315 y Glu492 a Ala511.
En otra realizacion, se pueden utilizar otras protemas que estan relacionadas estructural o evolutivamente con la albumina como HLEP, incluidas, sin caracter limitante, alfa-fetoprotema (WO2005/024044; Beattie y Dugaiczyk, 20 Gene 415-422, 1982), afamina (Lichenstein et al., 269 J. Biol. Chem. 18149-18154, 1994) y protema de union a la vitamina D (Cooke y David, 76 J. Clin. Invest. 2420-2424, 1985). Sus genes representan un agrupamiento multigenico con similitudes estructurales y funcionales asignadas a las mismas regiones cromosomicas en seres humanos, ratones y ratas. La similitud estructural de los miembros de la familia de las albuminas sugiere su usabilidad como HLEP. Por ejemplo, se ha reivindicado que la alfa-fetoproteina prolonga la semivida de un polipeptido terapeutico unido in vivo (WO 2005/024044). Se pueden utilizar tales protemas o variantes de estas, que son capaces de estabilizar o prolongar la actividad terapeutica, y pueden derivar de cualquier vertebrado, especialmente de cualquier mai^ero, por ejemplo, un ser humano, mono, vaca, oveja o cerdo, o no mamfero, incluidos, sin caracter limitante, gallina o salmon. Remftase al documento WO 2008/098720. Tales variantes pueden ser de una longitud de 10 o mas aminoacidos o pueden incluir aproximadamente 15, 20, 25, 30, 50 o mas aminoacidos contiguos de la respectiva secuencia proteica, o pueden incluir parte de los dominios espedficos de las respectivas protemas o todos ellos. Las protemas de fusion de los miembros de la familia de las albuminas pueden incluir variantes polimorficas presentes en la naturaleza.
En otra realizacion, se puede utilizar una inmunoglobulina (Ig) o variantes de esta como HELP, donde una variante incluye fragmentos. En una realizacion, se utilizan el dominio Fc o partes de la region constante de la
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
inmunoglobulina. La region constante puede ser la de una inmunoglobulina IgM, IgG, IgD, IgA o IgE. La parte polipeptfdica terapeutica se conecta a la Ig a traves de la region bisagra del anticuerpo o de un conector peptfdico, que puede ser escindible. Varias patentes y solicitudes de patente describen la fusion de protemas terapeuticas a regiones constantes de inmunoglobulina para extender la semivida de la protema terapeutica in vivo (US 2004/0087778, WO 2005/001025, WO 2005/063808, WO 2003/076567, WO 2005/000892, WO 2004/101740, US 6 403 077). Por ejemplo, un Fc fusionado a la citocina IFN-p logro una actividad biologica de la IFN-p aumentada, semivida en circulacion prolongada y mayor solubilidad (WO 2006/000448).
Por lo tanto, otra realizacion es utilizar tales secuencias de inmunoglobulina, por ejemplo, fragmentos Fc de inmunoglobulinas y variantes de estos, como HLEP. Los inhibidores de FXII/FXIIa se pueden fusionar a dominios Fc o al menos a partes de las regiones constantes de inmunoglobulinas como HLEP y se pueden producir como moleculas recombinantes en celulas hospedadoras procarioticas o eucarioticas, tales como lmeas celulares de bacterias, levaduras, plantas, animales (incluidos insectos) o seres humanos, o en animales transgenicos (WO 2008/098720). Una protema de fusion SPINK-K2-Fc se muestra de forma ilustrativa en la SEQ ID NO: 7.
Conectores
En una realizacion, se puede introducir un conector peptfdico de intervencion entre el polipeptido terapeutico y la HLEP. En una realizacion, se introduce un conector escindible, particularmente si la HLEP interfiere con la actividad espedfica del polipeptido terapeutico, p. ej., por impedimento esterico. En ciertas realizaciones, el conector se escinde con enzimas tales como las proteasas de coagulacion de la via de coagulacion intrrnseca, extrrnseca o comun. Las proteasas de coagulacion de la via intrrnseca son proteasas de la via de activacion por contacto, incluidas, por ejemplo, FXIIa, FXIa o FIXa. En una realizacion, el conector se escinde con FXIIa. Las proteasas de la via extrrnseca incluyen las proteasas de la via del factor tisular, por ejemplo, FVIIa. Las proteasas de la via comun incluyen las proteasas implicadas en la conversion de fibrinogeno a fibrina, por ejemplo, FXa, FIIa y FXIIIa.
Formulacion y administracion terapeutica
El inhibidor de FXII/FXIIa o variante de este puede tener una pureza superior a un 80%, o una pureza superior a un 95%, 96%, 97%, 98% o 99%. En una realizacion, la variante puede tener un estado farmaceuticamente puro que sea superior a un 99.9% puro con respecto a las macromoleculas contaminantes tales como otras protemas y acidos nucleicos, y exento de agentes infecciosos y pirogenicos.
El inhibidor de FXII/FXIIa purificado se puede disolver en disoluciones de tampon acuoso fisiologicamente compatibles convencionales a las que se pueden anadir, opcionalmente, excipientes farmaceuticos con el fin de proporcionar preparados farmaceuticos para tratar SBI en un paciente. Tales excipientes y portadores farmaceuticos, asf como formulaciones farmaceuticas adecuadas, son muy conocidos en la tecnica. Remftase, por ejemplo, a Kibbe et al. Handbook of Pharmaceutical Excipients (3.a edicion, Pharmaceutical Press), 2000. La composicion farmaceutica se puede formular en forma soluble estable o liofilizada. El polipeptido se puede liofilizar mediante una variedad de procedimientos conocidos en la tecnica. Las formulaciones liofilizadas se reconstituyen antes de su uso mediante la adicion de uno o mas diluyentes farmaceuticamente aceptables tales como agua esteril para inyeccion o solucion salina fisiologica esteril.
Las formulaciones del inhibidor de FXII/FXIIa se suministran al paciente mediante cualquier medio de administracion farmaceuticamente adecuado. Se conocen y se pueden utilizar varios sistemas de suministro para administrar la composicion por cualquier via conveniente. Las composiciones se pueden administrar sistemicamente, tal como parenteralmente. El termino “parenteral” segun se utiliza en la presente incluye tecnicas de inyeccion subcutanea, intravenosa, intramuscular, intraarterial e intratraqueal, instilacion, aplicacion por pulverizacion e infusion. Las formulaciones parenterales se pueden administrar por via intravenosa, en forma de bolo o como infusion constante, o por via subcutanea, de acuerdo con procedimientos conocidos. Los portadores lfquidos, que son muy conocidos para uso parenteral, incluyen agua esteril, solucion salina, dextrosa acuosa, disoluciones de azucares, etanol, glicoles y aceites. Para uso sistemico, las protemas terapeuticas se pueden formular para una lmea intravenosa o una lmea arterial. Las formulaciones se pueden administrar de forma continua mediante infusion o mediante inyeccion de bolo. Algunas formulaciones comprenden sistemas de liberacion lenta. En una realizacion, la formulacion se administra en forma de parche. Los comprimidos y capsulas para administracion oral pueden contener excipientes convencionales tales como agentes aglutinantes, rellenos, lubricantes o agentes humectantes, etc. Los preparados lfquidos orales pueden estar en forma de suspensiones acuosas u oleosas, disoluciones, emulsiones, jarabes, elixires o similares, o se pueden presentar como un producto seco para reconstituir con agua u otro vehroulo adecuado para su uso. Tales preparados lfquidos pueden contener aditivos convencionales tales como agentes de suspension, agentes emulsificantes, vehroulos no acuosos y conservantes.
La dosis del inhibidor de FXII/FXIIa puede depender de muchos factores tales como, p. ej., la indicacion, formulacion o modo de administracion y se puede determinar en ensayos preclmicos y clmicos para cada respectiva indicacion. La dosis de inhibidor de FXII/FXIIa se puede administrar a un paciente antes, durante y/o despues de un procedimiento medico. En una realizacion, el inhibidor de FXII/FXIIa se puede administrar 1, 2, 4, 6, 12, 24, 48, 72 o
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
96 horas antes y/o despues de un procedimiento medico. Un inhibidor de FXII/FXIIa se puede administrar en una unica dosis o en multiples dosis, o repetidamente en intervalos de 0.25, 0.5, 1, 2, 4, 6, 12, 24 o 48 horas antes, durante y/o despues de un procedimiento medico. A causa de la propiedad ventajosa de no aumentar el riesgo hemorragico, en una realizacion, el inhibidor de FXII/FXIIa se administra durante el procedimiento. La composicion farmaceutica se puede administrar sola o junto con otros agentes terapeuticos. Estos agentes se pueden coformular o se pueden administrar como formulaciones separadas conjunta o separadamente y mediante la misma via de administracion o diferentes vfas de administracion. El esquema de administracion o la dosis de un inhibidor de FXII/FXIIa tambien pueden variar entre pacientes individuales con la misma indicacion o diferentes indicaciones en funcion de factores tales como otras terapias o afecciones medicas.
Otra realizacion son inhibidores de FXII/FXIIa para la prevencion o el tratamiento del smdrome posperfusion.
El smdrome posperfusion es una disfuncion del sistema nervioso central o deterioro cognitivo o declive cognitivo despues de procedimientos de baipas como CABG. Entre otras cosas, se asume que esta causado por microtrombos generados por la activacion por contacto en las superficies artificiales utilizadas en el CABG u otro procedimiento medico donde la sangre entra en contacto con superficies artificiales. Actualmente, no existe una terapia conocida para el smdrome posperfusion (Newman et al., NEJM (2001) Vol. 344, N.° 6, pags. 394 a 402).
Otra realizacion es el uso de los inhibidores de FXII/FXIIa mencionados anteriormente para prevenir el bloqueo del flujo de sangre humana en un dispositivo medico extracorporeo, que puede ser, a modo de ejemplo no limitante, un dispositivo de derivacion cardiopulmonar o un dispositivo utilizado para la dialisis de sangre o la filtracion extracorporea de sangre. Por “bloqueo” nos referimos a una reduccion del flujo sangumeo en al menos un 10%, al menos un 20%, al menos un 30%, al menos un 40%, al menos un 50%, al menos un 60%, al menos un 70%, al menos un 80%, al menos un 90%, al menos un 95%, al menos un 99% o un cese completo del flujo sangumeo.
Ejemplos
1. Resultados de laboratorio
Durante una evaluacion de laboratorio se proporciono Infestina-4 fusionada con albumina recombinante (rHA- Infestina-4; segun se ha descrito en el documento WO2008/098720) en una jeringa y posteriormente se anadio sangre completa de un cerdo. Despues, esta disolucion se proporciono en un vial de vidrio y se determino el tiempo de coagulacion visualmente agitando con cuidado el vial de vidrio cada minuto (incubacion a 37 °C en un bano de agua). Sorprendentemente, a pesar de la activacion por contacto masiva mediante la superficie de vidrio, la sangre no mostro ningun signo de coagulacion durante hasta 3 horas (mientras que las muestras de control coagularon despues de aproximadamente 3 minutos, Fig. 1). Ademas, las evaluaciones sucesivas del tiempo de tromboplastina parcial activada (aPTT) de esta sangre no coagulada demostraron valores visiblemente prolongados. Estos resultados alentaron investigaciones ex vivo adicionales. En estas investigaciones, se pudo demostrar que la rHA- Infestina-4 prolongaba el tiempo de coagulacion de sangre completa (WBCT) de forma dependiente de la dosis (Fig. 1). Se pudo obtener un perfil comparable cuando se utilizo sangre completa murina de forma ilustrativa.
En un experimento adicional, se probo un anticuerpo anti-FXII/FXIIa espedfico en el mismo diseno de estudio, segun se ha explicado anteriormente. Sin embargo, puesto que este anticuerpo no reacciona con el sistema porcino, se utilizo sangre completa de ratones. Curiosamente, aunque se esperaba que la actividad de FXII se inhibiese por completo a las dosis probadas, el WBCT se prolongo un maximo de aproximadamente 3 veces (Fig. 2). Esto lleva a la conclusion de que el notorio efecto de la rHA-Infestina-4 en el WBCT no se podfa explicar unicamente por su potencial inhibitorio de FXII/FXIIa. En cambio, otros mecanismos, quiza su mas debil potencial inhibitorio de FXa, conducen a este hallazgo extraordinario.
2. Estudios preclmicos en animales
2.1. Datos en animales y anestesia Animales:
Se adquirieron cerdos machos castrados (Large white x German noble) que pesaban 24-40 kg de un criadero local (Willi Schlosser, Schwalmtal, Alemania) a los 3-4 meses de edad. Los animales se alojaron a 18-21 °C en establos con lecho de paja en ciclos ambientales dfa-noche y se alimentaron a voluntad con alimento para cerdos Deuka V (Deutsche Tiermahrung Cremer GmbH & Co. KG Dusseldorf, Alemania). Se suministro agua del grifo a voluntad. La crianza de ganado y los procedimientos de estudio cumplieron con la ley de bienestar animal alemana y las regulaciones de la Union Europea.
Anestesia:
Despues del ayuno durante la noche con acceso no restringido al agua, los animales se sedaron con una premedicacion intramuscular utilizando una mezcla de 2 mg-kg'1 de azaperona (Stresnil®, Janssen-Cilag GmbH,
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
Neuss, Alemania), 15 mgkg-1 de ketamina (Ketavet, Pharmacia & Upjohn, Erlangen, Alemania) y 0.02 mgkg-1 de sulfato de atropina (Atropinsulfate, B. Braun Melsungen AG, Melsungen, Alemania), los cerdos se anestesiaron a continuacion con 10 mg kg-1 de tiopental sodico a traves de una vena de la oreja. Tras la preparacion quirurgica de la traquea los animales se entubaron, la respiracion se soporto con un ventilador Heyer Access. La anestesia inhalada se mantuvo con un 1-2% de isoflurano (Isofluran CP®, CP Pharma GmbH, Burgdorf, Alemania). Se hizo avanzar un cateter de 1.4 x 2.1 mm dentro de una arteria carotida para la recoleccion de muestras de sangre y un cateter de 0.5 x 0.9 mm dentro de una arteria femoral para las mediciones de presion sangumea continuas. Se infundieron disolucion de Ringer a 4 mL kg-1h-1 para satisfacer los requerimientos de fluido basal y fluidos de prueba a traves de un cateter permanente de 1.4 x 2.1 mm en una vena yugular externa. La temperatura corporal se monitorizo mediante termometria rectal.
2.2. Investigaciones farmacocineticas en cerdos
Tras los resultados de laboratorio iniciales mencionados anteriormente, se evaluaron las cineticas de una unica aplicacion intravenosa (i.v.) de rHA-Infestina-4 en cerdos. Descubrimos que el WBCT ex vivo se prolongo notablemente despues de las administraciones i.v. unicas de rHA-Infestina-4 y disminuyo de nuevo durante la eliminacion de rHA-Infestina-4 de la circulacion (Fig. 3). Ademas, la administracion i.v. de rHA-Infestina-4 en cerdos condujo a una drastica prolongacion del aPTT, asf como, en dosis elevadas, a un tiempo de protrombina (PT) ligeramente prolongado (Fig. 4 y 5). Estos resultados demostraron que la rHA-Infestina-4 influye principalmente en la via de coagulacion intrmseca (aPTT), asf como, en dosis elevadas, ligeramente en la via de coagulacion extrmseca (PT). Ademas, se pudo detectar una prolongacion del tiempo de coagulacion en una tromboelastograffa.
Curiosamente, aunque el WBCT y aPTT se prolongaron notablemente, el tiempo de hemorragia cutanea (es decir, hemostasia fisiologica) no se vio afectado (Fig. 6).
2.3. Cirugfa de derivacion cardiopulmonar en el cerdo:
Con el fin de evaluar y probar el efecto anticoagulante de la rHA-Infestina-4 durante los procedimientos de derivacion cardiopulmonar (CPB), se llevo a cabo un ensayo de CPB preclmico en un modelo porcino. Esencialmente, se cargo la CPB con rHA-Infestina-4 (correspondiente a 50 mg/kg de peso corporal (PC)) y el animal en sf se trato con rHA- Infestina-4 en una dosis de 200 mg/kg de PC antes de conectarlo al dispositivo de CPB para prevenir la coagulacion y sucesiva oclusion de la membrana oxigenadora del dispositivo de CPB. No se utilizaron otras sustancias tales como heparina o bivalirudina (A. Koster et al. Am J Cardio 2004; 93: 356-359) como sustancias anticoagulantes.
2.3.1. Diseno del estudio de CPB:
Remftase a la Fig. 7 para una vision general sobre el diseno del estudio.
Despues de inducir la anestesia (2.1), se llevo a cabo una esternotoirna con una sierra oscilante, y se expuso el corazon. El pericardio se abrio longitudinalmente y se aseguro mediante suturas a la pared toracica. Se situo una sutura de jareta en la auricula derecha y la punta del corazon. Se administro una infusion i.v. de 200 mg/kg de PC de rHA-Infestina-4. Despues de ~10 min, un cateter arterial de 5.2 mm de diametro y un cateter venoso de 32 Fr se colocaron en la auricula derecha y el ventriculo izquierdo y se aseguraron con el torniquete. Ambos cateteres se conectaron a un oxigenador de fibra hueca para adultos pequeno con un reservorio venoso rigido (D905 EOS, Sorin SpA, Milan, Italia). El circuito extracorporeo se acondiciono con una disolucion compuesta por 500 mL de solucion salina isotonica, 1000 mL de hidroxietilalmidon al 6% 200/0.5 (Infukoll, Schwarz Pharma AG, Mannheim, Alemania), 2 mL-kg'1 de manitol al 15% (Osmofudin®, B. Braun) y 50 mg/kg de PC de rHA-Infestina-4. Las lmeas venosa y arterial se abrieron en sucesion y se dejo fluir la sangre venosa en el reservorio venoso por gravedad. Una bomba transporto la sangre al oxigenador. La sangre oxigenada se equilibro hasta la temperatura objetivo y se devolvio a traves de la lmea arterial al ventriculo izquierdo. Se mantuvo la hipotermia a 25 °C durante 2 horas, seguida de 1 hora de recalentamiento hasta la normotermia (37 °C).
Tras la finalizacion de la CPB, la sangre que quedaba en el oxigenador se devolvio al animal. La anticoagulacion no se revirtio tras el procedimiento de CPB.
Las muestras sangumeas para los ensayos de laboratorio se tomaron (1) al inicio, (2) despues de la infusion de rHA- Infestina-4 pero antes del comienzo de la CPB, (3) inmediatamente despues del comienzo de la CPB y (4) posteriormente cada 5 min hasta el final del experimento. Tambien se investigo el tiempo de hemorragia cutanea (SBT), definido como el tiempo hasta el cese de perdida sangumea a partir de una incision estandarizada en el interior de la oreja de 5 mm de longitud por 1 mm de profundidad creada utilizando un dispositivo de corte Surgicutt® (International Technidyne Corp., Edison, Nueva Jersey, EE. UU.).
2.3.2. Resultados de laboratorio durante la CPB:
Durante la CPB, los valores de aPTT fueron marcadamente prolongados durante todo el periodo de estudio en comparacion con los valores iniciales (Fig. 8), mientras que los valores de PT aumentaron solo levemente durante el
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
periodo de estudio (Fig. 9). Ademas, el WBCT ex vivo tambien aumento visiblemente durante el periodo de estudio (Fig. 10).
2.3.3. Resultados clmicos durante la CPB:
En el ambito medico es de conocimiento general que el contacto directo de la sangre con una superficie artificial conduce inmediatamente a una activacion de la coagulacion (via intrmseca), asf como a una activacion directa de las plaquetas con el cierre sucesivo de la membrana oxigenadora. Por lo tanto, el uso de heparina durante la CPB es actualmente el mejor estandar de atencion medica disponible.
Los experimentos con animales (porcinos) internos con el uso de 300 Ul/kg de PC de heparina tienen un riesgo hemorragico mas elevado como se refleja en la prolongacion del SBT, asf como en la hemorragia a traves de los bordes de la herida.
En contraposicion a estos resultados con la heparina, el SBT como prueba global para el riesgo hemorragico permanecio inalterado cuando se utilizo rHA-Infestina-4 en la CPB y, ademas, la hemostasia no se vio afectada al inspeccionar los bordes de la herida en busca de una mayor hemorragia. Sin embargo, el hallazgo mas importante fue que el oxigenador de CPB no se coagulo y permanecio completamente funcional durante el periodo de prueba.
La combinacion de los resultados de laboratorio indirectos (aPTT, PT), los resultados clmicos de CPB y SBT muestra, sorprendentemente, que la rHA-Infestina-4 cubre la necesidad medica no satisfecha de un nuevo farmaco anticoagulante que no comprometa la capacidad global de los pacientes de formar un coagulo estable, a la vez que la sangre permanece completamente no coagulada durante los procedimientos que requieren de superficies artificiales.
3. Conclusion
La rHA-Infestina-4 pudo prevenir la coagulacion del oxigenador de CBP influyendo principalmente en la via de coagulacion intrmseca, lo que se refleja en el aPTT, mientras que la via extrmseca (evaluaciones de PT) permanece inalterada hasta un cierto grado/dosis de rHA-Infestina-4. Estos resultados fueron sorprendentes y ofrecen una nueva estrategia en la terapia anticoagulante durante la CPB, ya que no es necesario inhibir el sistema de coagulacion extrmseco e intrmseco mediante heparina/bivalirudina, con el mayor riesgo hemorragico. Mas adelante, se podna disminuir el riesgo restante de procesos de microtrombosis y embolizacion durante y despues de procedimientos de CPB hasta un cierto nivel. Este nuevo tratamiento en los procedimientos de CPB muestra por primera vez que un inhibidor de FXII/FXIIa como la rHA-Infestina-4 podna reemplazar o al menos reducir la heparina/bivalirudina en el futuro uso clmico dando como resultado una oportunidad terapeutica significativamente mejorada.
4. Investigaciones adicionales
4.1. Los inhibidores de FXII/FXIIa se prueban en un nuevo planteamiento de estudio donde se hace pasar sangre completa de conejo por un circuito de derivacion cardiopulmonar (CPB) ex vivo. En la presente, la sangre circula constantemente a traves del circuito (y sin volver al conejo) donde se encuentra con una activacion (contacto) masiva del sistema de coagulacion si no se anticoagula. Este modelo se utiliza para probar la eficacia de los inhibidores de FXII/FXIIa o combinaciones de inhibidores de FXII/FXIIa y heparina para prevenir la oclusion del circuito de la CPB.
Las lecturas son, entre otras: la presion previa y posterior al paso por el oxigenador, el recuento de la sangre completa, que incluye tamano y recuento de plaquetas, permeabilidad del oxigenador y los filtros, lecturas adicionales de la funcion del sistema de coagulacion, sistema del complemento y sistema de cinina-calicrema.
Asumimos que los inhibidores de FXII/FXIIa pueden prevenir la oclusion/coagulacion de la CPB en este montaje ex vivo y ademas pueden reducir la activacion del sistema del complemento y del sistema de cinina-calicrema.
4.2 En otro conjunto de estudios, se estudia el efecto de los inhibidores de FXII/FXIIa (rHA-Infestina-4 y el MAb de FXII/FXIIa) en la coagulacion de sangre completa humana ex vivo (a partir de donantes sanos). Aqrn, se mide el WBCT segun se ha descrito anteriormente (es decir, para sangre completa de cerdo/ratones) tras anadir diferentes concentraciones de los inhibidores de FXII/FXIIa. Adicionalmente, se puede medir el WBCT utilizando un dispositivo de ACT (tiempo de coagulacion activada). Asumimos que, acorde con los resultados en otras especies mencionados anteriormente, observamos una inhibicion de los tiempos de coagulacion de sangre completa ex vivo dependientes de la dosis. Se determinara la dosis de inhibidores de FXII/FXIIa que se requiere para lograr una eficacia equivalente en los parametros nombrados anteriormente (WBCT), en comparacion con una dosis estandar de heparina no fraccionada. Adicionalmente, tambien se prueban combinaciones de inhibidores de FXII/FXIIa y dosis baja de heparina (u otros farmacos antitromboticos).
4.3 Ademas, se prueban los efectos de los inhibidores de FXII/FXIIa, asf como combinaciones de inhibidores de
FXII/FXIIa y heparina (u otros farmacos antitromboticos) en un sistema de circuito ex vivo (se hace pasar sangre completa humana de donantes sanos exentos de farmaco por el sistema mientras que los farmacos ya se han proporcionado en el sistema) compuesto por un sistema de CPB estandar, un sistema de ECMO estandar u otro circuito ex vivo clmicamente relevante. En la presente, la sangre circula constantemente en el circuito (y no se 5 devuelve al donante) donde encuentra una activacion (contacto) masiva del sistema de coagulacion. Las lecturas son, entre otras: presion previa y posterior al paso por el oxigenador, recuento de sangre completa que incluye tamano y recuento de plaquetas, permeabilidad del oxigenador y los filtros, lecturas adicionales de la funcion del sistema de coagulacion, sistema del complemento y sistema de cinina-calicrema. Se asume que los inhibidores de FXII/FXIIa o combinaciones de inhibidores de FXII/FXIIa y dosis bajas de heparina (u otros farmacos
10 antitromboticos) tambien pueden prevenir la coagulacion del circuito. Ademas, se asume que los inhibidores de FXII/FXIIa pueden reducir la activacion del sistema del complemento y del sistema de cinina-calicrema dentro de este circuito ex vivo. Se determinara la dosis de los inhibidores de FXII/FXIIa que se requiere para lograr una eficacia equivalente en los parametros y lecturas nombrados anteriormente, en comparacion con una dosis estandar de heparina no fraccionada.
15 Esta nueva estrategia para el tratamiento de pacientes antes, durante y/o despues de la activacion por contacto del sistema de coagulacion proporciona proteccion frente a la trombosis antes, durante y/o despues de ciertos procedimientos, a la vez que no se pone al paciente en riesgo de eventos hemorragicos al mismo tiempo.
5
10
15
20
25
30
LISTADO DE SECUENCIAS
<110> CSL Behring GmbH
<120> Inhibidores del Factor XII para la administration con procedimientos medicos que comprenden contacto con superficies artificiales
<130> 2011_M002_A177
<150>US61/496740
< 151> 2011-06-14
<150>EP11157557.7
< 151> 2011-03-09
<150>US61/450881
< 151> 2011-03-09
<160>7
<170> PatentIn version 3.5
<210>1
<211>48
<212>PRT
< 213> Trioma infestans <400>1

Glu Val Arg Asn Pro Cys Ala Cys Phe Arg Asn Tyr Val Pro Val Cys 15 10 15

Gly Ser Asp Gly Lys Thr Tyr Gly Asn Pro Cys Met Leu Asn Cys Ala 20 25 30

Ala Gin Thr Lys Val Pro Gly Leu Lys Leu Val His Glu Gly Arg Cys 35 40 45
<210>2
<211>56
<212>PRT
< 213> Homo sapiens <400>2

Asp Ser Leu Gly Arg Glu Ala Lys Cys Tyr Asn Glu Leu Asn Gly Cys 15 10 15

Thr Lys lie Tyr Asp Pro Val Cys Gly Thr Asp Gly Asn Thr Tyr Pro 20 25 30

Asn Glu Cys Val Leu Cys Phe Glu Asn Arg Lys Arg Gin Thr Ser lie 35 40 45

Leu lie Gin Lys Ser Gly Pro Cys 50 55
<210>3
<211>53
<212>PRT
< 213> Secuencia artificial <220>
< 223> SPINK-1 humano mutado <400>3

Asp Ser Leu Gly Arg Glu Val Arg Asn Pro Cys Ala Cys Phe Arg Asn 15 10 15

Tyr Val Pro Val Cys Gly Thr Asp Gly Asn Thr Tyr Pro Asn Glu Cys 20 25 30

Val Leu Cys Phe Glu Asn Arg Lys Arg Gin Thr Ser lie Leu lie Gin 35 40 45
Lys Ser Gly Pro Cys 50
<210>4 5 <211>53
<212>PRT
< 213> Secuencia artificial <220>
< 223> SPINK-1 humano mutado
10 <400>4

Asp Ser Leu Gly Arg Glu Val Arg Asn Pro Cys Ala Cys Phe Arg Asn 15 10 15

Tyr Val Pro Val Cys Gly Thr Asp Gly Asn Thr Tyr Gly Asn Glu Cys 20 25 30

Met Leu Cys Ala Glu Asn Arg Lys Arg Gin Thr Ser lie Leu lie Gin 35 40 45
Lys Glu Gly Pro Cys 50
<210>5
<211>54
<212>PRT
15 < 213> Secuencia artificial
<220>
< 223> SPINK-1 humano mutado <400>5

Asp Ser Leu Gly Arg Glu Val Arg Asn Pro Cys Ala Cys Phe Arg Asn 15 10 15

Tyr Val Pro Val Cys Gly Thr Asp Gly Asn Thr Tyr Gly Asn Glu Cys 20 25 30

Met Leu Asn Cys Ala Glu Asn Arg Lys Arg Gin Thr Ser lie Leu lie 35 40 45
Gin Lys Glu Gly Pro Cys 50
20 <210>6 <211>585 <212>PRT
< 213> Homo sapiens <400>6
Asp Ala His Lys Ser Glu Val Ala 1 5
Glu Asn Phe Lys Ala Leu Val Leu 20
Gin Cys Pro Phe Glu Asp His Val 35 40
Phe Ala Lys Thr Cys Val Ala Asp 50 55
Ser Leu His Thr Leu Phe Gly Asp 65 70
Arg Glu Thr Tyr Gly Glu Met Ala 85
Glu Arg Asn Glu Cys Phe Leu Gin 100
Pro Arg Leu Val Arg Pro Glu Val 115 120
Asp Asn Glu Glu Thr Phe Leu Lys 130 135
Arg His Pro Tyr Phe Tyr Ala Pro 145 150
His Arg Phe Lys Asp Leu Gly Glu 10 15
lie Ala Phe Ala Gin Tyr Leu Gin 25 30
Lys Leu Val Asn Glu Val Thr Glu 45
Glu Ser Ala Glu Asn Cys Asp Lys 60
Lys Leu Cys Thr Val Ala Thr Leu 75 80
Asp Cys Cys Ala Lys Gin Glu Pro 90 95
His Lys Asp Asp Asn Pro Asn Leu 105 110
Asp Val Met Cys Thr Ala Phe His 125
Lys Tyr Leu Tyr Glu lie Ala Arg 140
Glu Leu Leu Phe Phe Ala Lys Arg 155 160

Claims (24)

  1. 5
    10
    15
    20
    25
    30
    35
    40
    45
    50
    REIVINDICACIONES
    1. Inhibidor de FXII/FXIIa para su uso en la prevencion de la formacion y/o estabilizacion de trombos durante y/o despues de un procedimiento medico llevado a cabo en un sujeto humano o animal que comprende poner en contacto sangre de dicho sujeto humano o animal con superficies artificiales, donde dicho inhibidor de FXII/FXIIa se administra antes y/o durante y/o despues de dicho procedimiento medico y ademas donde
    (i) la superficie artificial se expone a al menos un 80% del volumen de sangre del sujeto y la superficie artificial es de al menos 0.2 mi) 2 o
    (ii) la superficie artificial es un recipiente para la recoleccion de sangre fuera del cuerpo del sujeto o
    (iii) la superficie artificial es un estent, valvula, cateter intraluminal o un sistema para el bombeo de sangre asistido interno,
    donde el inhibidor de FXII/FXIIa comprende
    (i) la secuencia polipeptfdica de Infestina-4 de origen natural (SEQ ID NO: 1) o una variante de esta, donde una variante comprende
    (a) los aminoacidos N-terminales 2-13 de la secuencia de Infestina-4 de origen natural y al menos una y hasta cinco mutaciones aminoaddicas fuera de dichos aminoacidos N-terminales que dan lugar a diferencias respecto a la secuencia de Infestina-4 de origen natural;
    y/o
    (b) seis residuos de cistema conservados de la secuencia de Infestina-4 de origen natural y una homologfa de al menos un 70% respecto a la secuencia de Infestina-4 de origen natural.
    (ii) el SPINK-1 (SEQ ID NO: 2), que se muta para incluir los aminoacidos N-terminales 2-13 de la secuencia de Infestina-4 de origen natural, o una variante de dicho SPINK-1 mutado, donde una variante comprende
    (a) los aminoacidos N-terminales 2-13 de la secuencia de Infestina-4 de origen natural y al menos una y hasta cinco mutaciones aminoaddicas fuera de dichos aminoacidos N-terminales que dan lugar a diferencias respecto a la secuencia de SPINK-1 de origen natural y que aumentan la homologfa de la variante respecto a la secuencia de Infestina-4 de origen natural;
    y/o
    (b) seis residuos de cistema conservados de la secuencia de SPINK-1 de origen natural y una homologfa de al menos un 70% respecto a la secuencia de SPINK-1 de origen natural.
    (iii) un anticuerpo anti-FXII/FXIIa, donde el anticuerpo se une a FXII/FXIIa e inhibe su actividad y/o activacion.
  2. 2. Inhibidor de FXII/FXIIa para su uso de acuerdo con la reivindicacion 1 donde dicho sujeto humano o animal tiene un riesgo hemorragico que no es mayor y que se determina
    a) mediante el tiempo de hemorragia en la oreja o yema del dedo segun Duke y donde dicho tiempo de hemorragia en la oreja o yema del dedo no es mas largo de 10 minutos o
    b) segun el metodo de Ivy y donde el tiempo de hemorragia no es mas largo de 10 minutos o
    c) segun el metodo de Marx y el tiempo de hemorragia no es mas largo de 4 minutos.
  3. 3. Inhibidor de FXII/FXIIa para su uso de acuerdo con las reivindicaciones 1 y 2 donde el procedimiento medico es
    i) cualquier procedimiento que requiera una derivacion cardiopulmonar o
    ii) la oxigenacion y bombeo de sangre mediante oxigenacion con membrana extracorporea o
    iii) el bombeo de sangre asistido (interno o externo) o
    iv) la dialisis de sangre o
    v) la filtracion extracorporea de sangre o
    vi) la recoleccion de sangre en cualquier deposito para su uso posterior en un sujeto humano o animal
    o
    vii) el uso de uno o varios cateteres intraluminales venosos o arteriales o
    viii) el uso de uno o varios dispositivos para cateterismo cardiaco intervencionista o diagnostico, o
    ix) el uso de uno o varios dispositivos intravasculares o
    x) el uso de una o varias valvulas cardiacas artificiales o
    xi) el uso de uno o varios injertos artificiales.
    5
    10
    15
    20
    25
    30
    35
    40
    45
    50
  4. 4. Inhibidor de FXII/FXIIa para su uso de acuerdo con las reivindicaciones 1 a 3, donde el inhibidor de FXII/FXIIa se administra antes, despues y/o durante un procedimiento medico que requiere una derivacion cardiopulmonar.
  5. 5. Inhibidor de FXII/FXIIa para su uso de acuerdo con las reivindicaciones 1 a 3, donde el inhibidor de FXII/FXIIa se administra antes, despues y/o durante un procedimiento medico que comprende la recoleccion de sangre en cualquier deposito para su uso posterior en un sujeto humano o animal.
  6. 6. Inhibidor de FXII/FXIIa para su uso de acuerdo con la reivindicacion 5, donde el inhibidor:
    i) se administra al donante de sangre antes y/o durante el proceso de donacion de sangre o
    ii) se mezcla con la sangre en el deposito de recoleccion o
    iii) se administra al receptor de la sangre antes, durante y/o despues de que se administre la sangre al receptor humano o animal
  7. 7. Inhibidor de FXII/FXIIa para su uso de acuerdo con las reivindicaciones 1 a 6, donde el inhibidor de FXII/FXIIa se administra aplicandolo como recubrimiento en la superficie artificial.
  8. 8. Inhibidor de FXII/FXIIa para su uso de acuerdo con las reivindicaciones 1 a 7 donde se anade una cantidad reducida de heparina o derivados de esta y/o hirudina o derivados de esta ademas del inhibidor de FXII/FXIIa antes y/o durante y/o despues del procedimiento medico en comparacion con la cantidad de heparina o derivados de esta y/o hirudina o derivados de esta que se administra normalmente antes y/o durante dicho procedimiento medico cuando no se administra inhibidor de FXII/FXIIa.
  9. 9. Inhibidor de FXII/FXIIa para su uso de acuerdo con las reivindicaciones 1 a 8 donde no se utiliza heparina ni un derivado de esta, ni hirudina ni un derivado de esta ademas del inhibidor de FXII/FXIIa.
  10. 10. Inhibidor de FXII/FXIIa para su uso de acuerdo con las reivindicaciones 1 a 9 donde dicho sujeto humano o animal tiene un riesgo protrombotico reducido o nulo despues del procedimiento medico.
  11. 11. Inhibidor de FXII/FXIIa para su uso de acuerdo con las reivindicaciones 1 a 10 donde dicho sujeto humano o animal tiene un riesgo protrombotico reducido o nulo a continuacion de un antagonismo posoperatorio de heparina o derivados de esta y/o un antagonismo posoperatorio de hirudina o derivados de esta y, opcionalmente, donde el riesgo protrombotico esta causado por la administracion de protramina.
  12. 12. Inhibidor de FXII/FXIIa para su uso de acuerdo con las reivindicaciones 1 a 11 donde a dicho sujeto humano o animal se le anade una cantidad reducida o nula de antagonista de heparina y/o antagonista de hirudina despues del procedimiento medico, en comparacion con la cantidad de dicho antagonista que se administra normalmente despues de dicho procedimiento medico cuando no se administra inhibidor de FXII/FXIIa.
  13. 13. Inhibidor de FXII/FXIIa para su uso de acuerdo con las reivindicaciones 1 a 12 para la prevencion o el tratamiento del smdrome posperfusion.
  14. 14. Inhibidor de FXII/FXIIa para su uso de acuerdo con las reivindicaciones 1 a 13, donde el inhibidor de FXII/FXIIa comprende SPINK K1, K2 o K3 (SEQ ID NO: 3, 4 o 5).
  15. 15. Inhibidor de FXII/FXIIa para su uso de acuerdo con las reivindicaciones 1 a 14, donde el inhibidor de FXII/FXIIa se conecta a un polipeptido que aumenta la semivida, donde el peptido que aumenta la semivida es opcionalmente albumina, afamina, alfa-fetoprotema o protema de union a la vitamina D, albumina humana o una variante de esta, una inmunoglobulina o una variante de esta, un Fc de una IgG.
  16. 16. Inhibidor de FXII/FXIIa para su uso de acuerdo con la reivindicacion 15, donde el polipeptido que aumenta la semivida se conecta al inhibidor de FXII/FXIIa mediante un conector.
  17. 17. Inhibidor de FXII/FXIIa para su uso de acuerdo con la reivindicacion 16, donde el conector es al menos uno de entre:
    i) escindible;
    ii) escindible mediante una proteasa de coagulacion de la via de coagulacion intrmseca, extrmseca o comun; y
    iii) escindible mediante FXIIa.
  18. 18. Inhibidor de FXII/FXIIa segun se ha definido en las reivindicaciones 1 a 17 para su uso para prevenir el bloqueo del flujo de sangre humana en un dispositivo medico extracorporeo, donde el dispositivo medico es opcionalmente un dispositivo de derivacion cardiopulmonar o un dispositivo utilizado para la dialisis de
    sangre o la filtracion extracorporea de sangre.
  19. 19. Un dispositivo medico recubierto con un inhibidor de FXII/FXIIa segun se ha definido en las reivindicaciones 1 a 18, donde el dispositivo es una maquina de derivacion cardiopulmonar, un sistema de oxigenacion con membrana extracorporea para la oxigenacion de la sangre, un dispositivo para el bombeo 5 asistido de sangre, un dispositivo de dialisis de sangre, un dispositivo para la filtracion extracorporea de
    sangre, un deposito para su uso en la recoleccion de sangre, un cateter intraluminal, un estent, una valvula cardiaca artificial y/o accesorios para cualquiera de dichos dispositivos, incluidos tubos, canulas, bomba centnfuga, valvula, puerto de acceso venoso y/o desviador.
    imagen1
    Figura 1 - WBCT de sangre completa porcina ex vivo:
    □
    mcia
    ^ rHA-Infestina -4 2.5 mg/mL
    rHA-Infestina -4 1.0 mg/mL
    rHA-Infestina -4 0.5 mg/mL
    ED rHA-Infestina -4 0.25 mg/mL
    rHA-Infestina-4 0.125 mg/mL
    EEI rHA-Infestina -4 0.0625 mg/mL
    I_ =
    Figura 2 - WBCT de sangre completa murina ex vivo:
    □
    Imcial
  20. 0.0313 mg/mL
    MAb anti-FXII
  21. 0.0625 mg/mL
    MAb anti-FXII
  22. 0.125 mg/mL
    MAb anti-FXII
    — 12n
  23. 0.25 mg/mL
    MAb anti-FXII
    MAb anti-FXII
  24. 0.5 mg/mL
    l l l l ■
    1.0 mg/mL
    MAb anti-FXII
    Tiempo hasta la hemostasia (min.)
    Farmacocineticas/Tiempo de coagulation de sangre completa porcina
    imagen2
    Control neg. (solucion salina) -a- rHA-lnfestina-4 200 mg/kg rHA-Infestina -4 200 mg/kg -A- rHA-Infestina -4 200 mg/kg -0- rHA-lnfestina-4 154 mg/kg rHA-lnfestina-4 50 mg/kg -0- rHA-Infestina -4 50 mg/kg
    Segundos
    Farmacocineticas/aPTT
    porcino
    imagen3
    Control neg. (solucion salina) -a- rHA-lnfestina-4 200 mg/kg
    -a- rHA-lnfestina-4 200 mg/kg -a- rHA-lnfestina-4 200 mg/kg
    -e- rHA-lnfestina-4 154 mg/kg rHA-lnfestina-4 50 mg/kg
    rHA-lnfestina-4 50 mg/kg
    imagen4
    Figura 5- Medicion de FT de sangre porcina (rHA-lnfestina-4) ex vivo:
    Farmacocineticas/PT
    porcino
    Minutos
    Control neg. (solucion salina)
    rHA-Infestina -4 200mg/kg
    rHA-lnfestina-4 200 mg/kg
    "A1 rHA-Infestina -4 200 mg/kg
    rHA-lnfestina-4 154 mg/kg
    rHA-Infestina-4 50 mg/kg
    rHA-lnfestina-4 50 mg/kg
    Segundos
    Farmacocineticas/Tiempo de hemorragia cutanea porcina
    imagen5
    -■-Control neg. (solution salina) -if rHA-Infestina-4 200 mg/kg -is- rHA-lnfestina-4 200 mg/kg rHA-Infestina-4 200 mg/kg -o- rHA-lnfestina-4 154 mg/kg ■*- rHA-Infestina -4 50 mg/kg -e- rHA-lnfestina-4 50 mg/kg
    imagen6
    imagen7
    imagen8
    imagen9
    Rho EGGEPC- 14 EVRNPC- SP GREAKC'
    Figura 10 -Circulacion extracorporea en cerdo -tiempo de coagulacion de sangre completa
    Circulacion extracorporea/Tiempo de
    coagulacion de sangre completa porcina
    20-.
    = 15-
    10-
    100
    150
    200
    Minutos
    rHA-lnfestina4 200 mg/kg
    Figura 11
    ###
    ########
    GREAKCYNELNGCTKIYDPVCGTDGNTYPNECVL-CFENRKRTSILIQKSGPC
    ++
    Figura 12
    * indica aminoacidos identicos;| indica aminoacidos similares; los aminoacidos en negrita son cisteinas conservadas; los aminoacidos subrayados 2-13 de la secuencia de lnfestina-4 son conservados.
    14
    SP:
    1 5
    EVRNPC-
    * | *
    10 15 20 25 30 35 40 45
    ACFRNYVPVCGSDGKTYGNPCMLNCAAQTKVPGLKLV-HEGRC
    A A A A A | A A A A A- A | A A
    A- | AAAAA|AAAAAA|AA | A- A | AA-
    DSLGREAK—CYNELNGCTKIYDPVCGTDGNTYPNECVL-CFENRKRQTSILIQKSGPC 15 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55
    Figura 13
    ‘ indica aminoacidos identicos; | indica aminoacidos similares respecto a la secuencia de lnfestina-4. Los aminoacidos subrayados en 14 se utilizaron para reemplazar aminoacidos SP. Los aminoacidos subrayados en K2 y K3 son mutaciones puntuales adicionales en la secuencia de K1.
    14
    SP:
    Kl:
    K2 :
    EVRNPC-
    -ACFRNYVPVCGSDGKTYGNPCMLNCAAQTKVPGLKLV-HEGRC
    DSLGREAK—CYNELNGCTKIYDPVCGTDGNTYPNECVL-CFENRKRQTSILIQKSGPC
    A | A A | A AAAAjAA AA A A|A A | A A | AA
    DSLGREVRNPC----ACFRNYVPVCGTDGNTYPNECVL-CFENRKRQTSILIQKSGPC
    AAAAAAAAAAA | AA AA
    A A A A A A
    DSLGREVRNPC
    AAjAA | A A | AA
    -ACFRNYVPVCGTDGNTYGNECML-CAENRKRQTSILIQKEGPC
    A A A A A A
    AAAAAAAAAAAIAA AAAA AAA AA
    I
    A
    A A
    K3: DSLGREVRNPC-
    -ACFRNYVPVCGTDGNTYGNECMLNCAENRKRQTSILIQKEGPC
    A A A A A A
    AAAAAAAAAAAIAA AAAA AAAAAA
ES12707782.4T 2011-03-09 2012-03-09 Inhibidores de Factor XII para la administración con procedimientos médicos que comprenden contacto con superficies artificiales Active ES2646191T3 (es)

Applications Claiming Priority (7)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201161450881P 2011-03-09 2011-03-09
EP11157557 2011-03-09
EP11157557 2011-03-09
US201161450881P 2011-03-09
US201161496740P 2011-06-14 2011-06-14
US201161496740P 2011-06-14
PCT/EP2012/054149 WO2012120128A1 (en) 2011-03-09 2012-03-09 Factor xii inhibitors for the administration with medical procedures comprising contact with artificial surfaces

Publications (1)

Publication Number Publication Date
ES2646191T3 true ES2646191T3 (es) 2017-12-12

Family

ID=44515129

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
ES12707782.4T Active ES2646191T3 (es) 2011-03-09 2012-03-09 Inhibidores de Factor XII para la administración con procedimientos médicos que comprenden contacto con superficies artificiales

Country Status (11)

Country Link
US (2) US9352016B2 (es)
EP (1) EP2683397B1 (es)
JP (1) JP6109081B2 (es)
KR (1) KR101954052B1 (es)
CN (1) CN103415301A (es)
AU (1) AU2016213799A1 (es)
CA (1) CA2829037C (es)
DK (1) DK2683397T3 (es)
ES (1) ES2646191T3 (es)
PL (1) PL2683397T3 (es)
WO (1) WO2012120128A1 (es)

Families Citing this family (18)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2012120128A1 (en) 2011-03-09 2012-09-13 Csl Behring Gmbh Factor xii inhibitors for the administration with medical procedures comprising contact with artificial surfaces
EP2950718A4 (en) * 2013-02-01 2016-09-21 Becton Dickinson Co BLOOD COLLECTION DEVICES CONTAINING ADDITIVES FOR INHIBITION OF THE CONTACT PATH
US10286047B2 (en) * 2013-03-08 2019-05-14 Csl Behring Gmbh Treatment and prevention of remote ischemia-reperfusion injury
ES2945905T3 (es) 2014-02-07 2023-07-10 Exithera Pharmaceuticals Inc Compuestos y composiciones terapéuticos
JP7109160B2 (ja) 2014-06-18 2022-07-29 ツェー・エス・エル・ベーリング・ゲー・エム・ベー・ハー 神経外傷性障害において第ｘｉｉ因子インヒビターを使用する療法
AU2017305856B2 (en) 2016-08-05 2024-09-12 Csl Behring Gmbh Pharmaceutical formulations of C1 esterase inhibitor
EA202190056A1 (ru) 2018-06-19 2021-05-28 Ридженерон Фармасьютикалз, Инк. АНТИТЕЛА ПРОТИВ ФАКТОРА XII/XIIa И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ
JP7135620B2 (ja) * 2018-09-07 2022-09-13 ソニーグループ株式会社 血液凝固系解析装置、血液凝固系解析方法及び血液凝固系解析プログラム
CA3118707A1 (en) 2018-11-07 2020-05-14 Daiichi Sankyo Company, Limited Klk5 inhibitory peptide
CN114269430A (zh) 2019-08-21 2022-04-01 卡尔维斯塔制药有限公司 酶抑制剂
US20220298141A1 (en) 2019-08-21 2022-09-22 Kalvista Pharmaceuticals Limited Enzyme inhibitors
CN114269431A (zh) 2019-08-21 2022-04-01 卡尔维斯塔制药有限公司 酶抑制剂
CN114258392A (zh) 2019-08-21 2022-03-29 卡尔维斯塔制药有限公司 酶抑制剂
WO2021253662A1 (zh) * 2020-06-16 2021-12-23 宁波康善生物科技有限公司 抗fxii纳米抗体或其抗原结合片段及其应用
TW202237578A (zh) 2020-12-01 2022-10-01 英商卡爾維斯塔製藥有限公司 酶抑制劑
MX2023009677A (es) 2021-02-19 2023-08-25 Kalvista Pharmaceuticals Ltd Inhibidores de enzimas.
WO2024038282A1 (en) 2022-08-18 2024-02-22 Kalvista Pharmaceuticals Limited 2-aza- and 2-oxabicyclo[2.1.1]hexane derivatives as factor xiia enzyme inhibitors
TW202425999A (zh) 2022-10-19 2024-07-01 英商卡爾維斯塔製藥有限公司 酶抑制劑

Family Cites Families (33)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS5714358A (en) * 1980-07-02 1982-01-25 Toray Industries Antithrombus medical material
US5380299A (en) * 1993-08-30 1995-01-10 Med Institute, Inc. Thrombolytic treated intravascular medical device
EP0793504B1 (en) 1994-12-12 2005-06-08 Beth Israel Deaconess Medical Center, Inc. Chimeric cytokines and uses thereof
ZA963619B (en) 1995-05-08 1996-11-22 Scios Inc Protease inhibitor peptides
US5674236A (en) * 1996-04-30 1997-10-07 Medtronic, Inc. Lancet for capillary puncture blood samples
GB9800817D0 (en) * 1998-01-16 1998-03-11 Bio Discovery Ltd Serine protease inhibitors
US6660843B1 (en) 1998-10-23 2003-12-09 Amgen Inc. Modified peptides as therapeutic agents
JP2001276217A (ja) * 2000-04-04 2001-10-09 Dountsuendorufaa Udo 単一又は複数の疾患のある患者での組織、血漿又は血液透析用のバイオコートされた吸着剤
US6926898B2 (en) 2000-04-12 2005-08-09 Human Genome Sciences, Inc. Albumin fusion proteins
DE50213462D1 (de) * 2001-10-15 2009-05-28 Hemoteq Ag Beschichtung von stents zur verhinderung von restenose
KR20040105704A (ko) * 2002-02-06 2004-12-16 오르버스 메디칼 테크놀로지즈 인코포레이티드 내피 세포 부착 및 분화를 촉진하는 코팅을 갖는 의료 장치
EP1482882B1 (en) * 2002-02-11 2011-09-14 Gold-T Tech, Inc. Implantable device for preventing thrombus formation
EP1572936A2 (en) 2002-03-05 2005-09-14 Eli Lilly And Company Heterologous g-csf fusion proteins
DE10301300B4 (de) 2003-01-15 2009-07-16 Curacyte Chemistry Gmbh Verwendung von acylierten 4-Amidino- und 4-Guanidinobenzylaminen zur Inhibierung von Plasmakallikrein
TWI353991B (en) 2003-05-06 2011-12-11 Syntonix Pharmaceuticals Inc Immunoglobulin chimeric monomer-dimer hybrids
ES2333598T5 (es) 2003-05-06 2013-09-04 Biogen Idec Hemophilia Inc Proteinas quimericas del factor de coagulacion fc para tratar la hemofilia.
USRE43691E1 (en) 2003-05-16 2012-09-25 Pharming Intellectual Property B.V. C1 inhibitor with short half-life transient treatment
JP4629047B2 (ja) 2003-06-12 2011-02-09 イーライ リリー アンド カンパニー Ｇｌｐ−１アナログ複合タンパク質
US20050059660A1 (en) * 2003-08-01 2005-03-17 Pharmacia & Upjohn Company Novel combination
CN1871252A (zh) 2003-09-05 2006-11-29 Gtc生物治疗学公司 在转基因哺乳动物奶中生产融合蛋白的方法
JP2008504008A (ja) 2003-12-31 2008-02-14 メルク　パテント　ゲゼルシャフト　ミット　ベシュレンクテル　ハフトング 改良された薬物動態を有するＦｃ−エリスロポエチン融合タンパク質
US7670595B2 (en) 2004-06-28 2010-03-02 Merck Patent Gmbh Fc-interferon-beta fusion proteins
AU2005318464B2 (en) * 2004-12-23 2012-02-23 Csl Behring Gmbh Prevention of thrombus formation and/or stabilization
SI2380587T1 (en) * 2005-12-21 2018-03-30 Pharming Intellectual Property B.V. Use of a C1 inhibitor to prevent ischemic reperfusion injury
PE20081834A1 (es) * 2006-12-31 2009-01-16 Boehringer Ingelheim Int Proceso para la sintesis de derivados de acido 3-amino-tetrahidrofuran-3-carboxilico y uso de los mismos como medicamentos
ES2566385T3 (es) * 2007-02-12 2016-04-12 Csl Behring Gmbh Aplicación terapéutica de inhibidores de la proteasa de serina de tipo Kazal
PT3002298T (pt) * 2007-11-21 2019-11-20 Univ Oregon Health & Science Anticorpos monoclonais anti-fator xi e métodos de utilização dos mesmos
EP2497489A1 (en) 2011-03-09 2012-09-12 CSL Behring GmbH Factor XII inhibitors for the treatment of silent brain ischemia and ischemia of other organs
WO2012120128A1 (en) 2011-03-09 2012-09-13 Csl Behring Gmbh Factor xii inhibitors for the administration with medical procedures comprising contact with artificial surfaces
EP2758076B1 (en) 2011-09-24 2018-12-12 CSL Behring GmbH Combination therapy using immunoglobulin and c1-inhibitor
EP2623110A1 (en) 2012-01-31 2013-08-07 CSL Behring GmbH Factor XII inhibitors for the treatment of neurological inflammatory disorders
US10286047B2 (en) 2013-03-08 2019-05-14 Csl Behring Gmbh Treatment and prevention of remote ischemia-reperfusion injury
KR20160026905A (ko) 2013-06-28 2016-03-09 체에스엘 베링 게엠베하 인자 ｘｉｉ 억제제 및 ｃ1-억제제를 이용한 병용 치료요법

Also Published As

Publication number Publication date
CA2829037A1 (en) 2012-09-13
EP2683397B1 (en) 2017-08-09
US20140072600A1 (en) 2014-03-13
US20160279195A1 (en) 2016-09-29
CA2829037C (en) 2022-05-17
KR20140011372A (ko) 2014-01-28
AU2012224514A1 (en) 2013-05-02
JP6109081B2 (ja) 2017-04-05
US9352016B2 (en) 2016-05-31
DK2683397T3 (en) 2017-09-18
CN103415301A (zh) 2013-11-27
EP2683397A1 (en) 2014-01-15
US9987328B2 (en) 2018-06-05
WO2012120128A1 (en) 2012-09-13
JP2014508771A (ja) 2014-04-10
KR101954052B1 (ko) 2019-03-06
AU2016213799A1 (en) 2016-09-01
PL2683397T3 (pl) 2018-01-31

Similar Documents

Publication Publication Date Title
ES2646191T3 (es) Inhibidores de Factor XII para la administración con procedimientos médicos que comprenden contacto con superficies artificiales
JP5554756B2 (ja) カリクレインインヒビターおよびその使用
US9211318B2 (en) Use of C1 inhibitor for the prevention of ischemia-reperfusion injury
ES2236706T3 (es) Procedimiento para reducir las disfunciones de los sistemas inmunitario y hemostatico durante la circulacion extracorporal.
EP2698378B1 (en) Anticoagulant polypeptide and applications thereof
CN103917554A (zh) 用于改善重构后纯化的因子viii的稳定性的方法
ES2296335T3 (es) Utilizacion de uteroglobina humana recombinante en el tratamiento de afecciones fibroticas.
JP2000136202A (ja) 新規なヘパリン結合ペプチド
US11897924B2 (en) Anticoagulant fusion proteins and uses thereof
ES2742898T3 (es) Composiciones de protrombina humana y factor X activado para mejorar la hemostasia en el tratamiento de trastornos hemorrágicos
AU2012224514B2 (en) Factor XII inhibitors for the administration with medical procedures comprising contact with artificial surfaces
ES2654816T3 (es) Uso del inhibidor C1 para la prevención de lesión de reperfusión de isquemia
CA2625888C (en) Method of treating acute renal failure with thrombomodulin variant
Cattaneo et al. Desmopressin (DDAVP)
AU2021230101B2 (en) Synergistic and targeting compositions for treatment of arterial and venous thrombosis