ES2641879T3 - Uso de gelsolina para diagnosticar y tratar enfermedades inflamatorias - Google Patents

Uso de gelsolina para diagnosticar y tratar enfermedades inflamatorias Download PDF

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Abstract

Un método para caracterizar el perfil de riesgo de un sujeto sano de presentar una enfermedad inflamatoria futura, que comprende: comparar un nivel de gelsolina en un fluido corporal (por ejemplo sangre, plasma, suero, orina, líquido sinovial o fluido alveolar), o tejido (por ejemplo un tejido articular, gastrointestinal, tiroideo, adrenérgico, vascular, pulmonar, renal, cardíaco, dérmico, ocular, cerebral, pancreático, hepático, nervioso o muscular) obtenido del sujeto hasta un valor predeterminado (preferiblemente de aproximadamente 250 mg/l de plasma o menos), y caracterizar el perfil de riesgo del sujeto de presentar una enfermedad inflamatoria en función del nivel de gelsolina en comparación con el valor predeterminado, en donde un nivel de gelsolina en o debajo del nivel predeterminado es indicativo de que el sujeto presenta un riesgo elevado de padecer la enfermedad inflamatoria, y en donde un nivel de gelsolina en o encima del valor predeterminado es indicativo de que el sujeto no presenta un riesgo elevado de padecer la enfermedad inflamatoria, en donde el sujeto no presenta signos ni síntomas de una infección, septicemia o trastorno relacionado con actina.

Description

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DESCRIPCION
Uso de gelsolina para diagnosticar y tratar enfermedades inflamatorias.
Campo de la invencion
La invencion se refiere a usos diagnosticos y terapeuticos de la gelsolina.
Antecedentes de la invencion
La inflamacion es la respuesta del organismo a una lesion, infeccion o moleculas percibidas por el sistema inmune como extranas. La inflamacion se caracteriza por dolor, hinchazon y funcion alterada del tejido afectado. Si bien la capacidad de montar una respuesta inflamatoria es esencial para la supervivencia, la capacidad de controlar la inflamacion es tambien necesaria para la salud. Las enfermedades inflamatorias se caracterizan por la activacion del sistema inmune en un tejido u organo hasta niveles anormales que pueden llevar al funcionamiento anormal y/o enfermedad en el tejido u organo.
Las enfermedades inflamatorias son una causa importante de morbimortalidad en todo el mundo. Afectan a varios organos y tejidos tales como los vasos sangumeos, el corazon, cerebro, nervios, articulaciones, piel, pulmones, ojos, tubo digestivo, rinones, tiroides, glandulas suprarrenales, pancreas, hugado y musculo. Los tratamientos de las enfermedades inflamatorias han atrafdo mucho la atencion de la industria farmaceutica. Un tema recurrente en los debates de las opciones de tratamiento de trastornos inflamatorios es la limitacion del tratamiento de referencia. Los manejos y tratamientos estan demostrando mejonas pero no curas. El planteamiento mas comun para tratar trastornos inflamatorios en la ultima decada ha abordado la funcion proinflamatoria de las citocinas con los compuestos que se unen a estas moleculas o a sus receptores.
A pesar de los avances recientes, las terapias actuales para las enfermedades inflamatorias todavfa suponen aliviar los smtomas y reducir la inflamacion con farmacos no espedficos, reducir el avance de la enfermedad con agentes modificadores de la enfermedad y mejorar la calidad de vida con modificaciones del estilo de vida, tolerando los efectos colaterales y la resistencia a los medicamentos. Se necesitan mejores opciones de tratamiento con menos potencial de efectos colaterales. Dado que el resultado del tratamiento depende de un diagnostico correcto, es importante realizar pruebas correctas para diagnosticar las enfermedades inflamatorias y controlar el tratamiento de esas enfermedades. Un diagnostico correcto permite al medico establecer una terapia correcta y oportuna. El control correcto del tratamiento permite al medico decidir el curso del tratamiento y aconsejar a los pacientes y sus familiares acerca del curso esperado de la enfermedad.
Por tanto, existe un fuerte incentivo para identificar nuevas y mejores pruebas y planteamientos para diagnosticar y para evaluar los tratamientos de las enfermedades inflamatorias.
La gelsolina, descubierta primero como una protema de union a actina intracelular implicada en la motilidad celular (Yin, H. L. & Stossel, T. P. (1979) Nature 281, 583-6), recientemente ha sido implicada en una serie de enfermedades. Si bien se desconoce la verdadera funcion de la gelsolina en el plasma, los estudios clmicos y animales han demostrado que la disminucion de gelsolina en el plasma por lesion e inflamacion se asocia con desenlaces adversos. El mecanismo propuesto de reduccion de gelsolina es que se une a abundante actina en las celulas expuestas por la ruptura de los tejidos. Mas recientemente, se descubrio que la gelsolina se une a mediadores inflamatorios bioactivos, acido lisofosfatfdico, fosfato de diadenosina, peptido AP (un peptido implicado en la patogenia de la enfermedad de Alzheimer), factor de activacion de plaquetas y posiblemente otros.
Los documentos US 2006/0009386 y WO 2005/112970 se refieren al uso de gelsolina para tratar infecciones y para controlar el tratamiento de infecciones.
El documento WO 2005/046454 describe la administracion de gelsolina a pacientes infectados con bacterias gramnegativas con el fin de controlar el choque septicemico en un paciente, que resulta de endotoxinas desencadenadas por la liberacion de moleculas de LPS provenientes de la infeccion bacteriana.
El documento WO 02/059604 describe metodos y composiciones para detectar, diagnosticar y pronosticar esclerosis multiple (MS). La publicacion hace referencia a un numero de marcadores potenciales relacionados con la esclerosis multiple, que estan presentes de manera diferencial en una muestra de un sujeto que padece MS comparada con una muestra de otro sujeto que no padece MS. Uno de dichos marcadores se identifica como gelsolina.
El documento WO 2004/082617 describe marcadores biologicos para la artritis reumatoidea, y su uso para diagnosticar y tratar la artritis reumatoidea, o vigilar la progresion de la enfermedad. La Tabla 2 expone una lista de protemas que disminuyen en sujetos que padecen artritis reumatoidea, en donde una de las protemas, entre las muchas mencionadas, es la gelsolina.
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El documento WO 03/088811 describe el uso de gelsolina como un marcador de pronostico de enfermedades ateroscleroticas.
El documento US 6040147 describe metodos para caracterizar el perfil de riesgo de un individuo de desarrollar un trastorno cardiovascular futuro obteniendo un nivel del marcador de inflamacion sistemica en el individuo, en particular una protema C reactiva, una citocina o una molecula de adhesion celular.
Candiano et al. (2005); American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine; Vol. 172, No. 9 sugiere que la gelsolina podna mejorar la fluidez del lfquido superficial de las vfas respiratorias en el asma, rompiendo la actina filamentosa que podna ser liberada en grandes cantidades por las celulas muertas durante la inflamacion.
Rothenbach et al. (2004); Journal of Applied Physiology; Vol. 96; No. 1 describe un estudio que investiga la funcion de la gelsolina en el plasma en la patofisiologfa de la lesion pulmonar inducida por inflamacion.
Aidinis et al. (2005) PLoS Genetics; Vol. 1; No. 4 identifica redisposiciones citoesqueleticas de los fibroblastos sinoviales promovidas por gelsolina como un nuevo determinante patofisiologico de artritis reumatoidea.
Compendio de la invencion
La presente invencion se refiere a un metodo para caracterizar el perfil de riesgo de un sujeto aparentemente sano de padecer una enfermedad inflamatoria futura, que comprende comparar un nivel de gelsolina en un fluido corporal (por ejemplo sangre, plasma, suero, orina, lfquido sinovial o fluido alveolar), o tejido (por ejemplo un tejido articular, gastrointestinal, tiroideo, adrenergico, vascular, pulmonar, renal, cardiaco, dermico, ocular, cerebral, pancreatico, hepatico, nervioso o muscular) obtenido del sujeto hasta un valor predeterminado (preferiblemente de aproximadamente 250 mg/l de plasma o menos), y caracterizar el perfil de riesgo del sujeto de experimentar una enfermedad inflamatoria en funcion del nivel de gelsolina en comparacion con el nivel predeterminado, en donde un nivel de gelsolina en o debajo del nivel predeterminado es indicativo de que el sujeto presenta un riesgo elevado de padecer la enfermedad inflamatoria, y en donde un nivel de gelsolina en o encima del nivel predeterminado es indicativo de que el sujeto no presenta un riesgo elevado de padecer la enfermedad inflamatoria, en donde el sujeto no tiene ningun signo ni smtoma de una infeccion, septicemia ni trastorno relacionado con actina.
Otro aspecto de la presente invencion se refiere a un metodo para caracterizar el perfil de riesgo de un sujeto preferiblemente aparentemente sano de presentar una enfermedad inflamatoria futura, que comprende comparar el nivel de la gelsolina en una muestra obtenida de un sujeto con un primer valor predeterminado (preferiblemente aproximadamente 250 mg/l de plasma o menos) para establecer un primer valor de riesgo, comparar el nivel de un segundo marcador de inflamacion en una muestra obtenida de un sujeto con un segundo valor predeterminado para establecer un segundo valor de riesgo, y caracterizar el perfil de riesgo del sujeto de presentar la enfermedad inflamatoria en funcion de la combinacion del primer valor de riesgo y el segundo valor de riesgo, en donde la combinacion del primer valor de riesgo y el segundo valor de riesgo establece un tercer valor de riesgo distinto de dichos primero y segundo valores, en donde el sujeto no tiene ningun signo ni smtoma de infeccion, septicemia o trastorno relacionado con actina.
Otro aspecto de la presente invencion se refiere a gelsolina opcionalmente en combinacion con un segundo agente, para uso en un metodo para tratar a un sujeto en riesgo de una enfermedad inflamatoria que se sabe que presenta un nivel de gelsolina debajo del normal; en una cantidad eficaz para reducir el riesgo del sujeto de padecer la enfermedad inflamatoria o en una cantidad eficaz para elevar el nivel de gelsolina en el sujeto por encima de un valor predeterminado.
La gelsolina (GSN), concretamente la gelsolina citoplasmica (cGSN), ademas de ser una protema de union a actina intracelular implicada en la motilidad celular, es tambien una protema secretora abundante (Yin, H. L., Kwiatkowski, D. J., Mole, J. E. & Cole, F. S. (1984) J Biol Chem 259, 5271-6). La isoforma exportada de gelsolina, designada gelsolina plasmatica (pGSN), tiene 25 aminoacidos adicionales y se origina en el empalme alternativo de un solo gen (Kwiatkowski, D. J., Stossel, T. P., Orkin, S. H., Mole, J. E., Cohen, H. R. & Yin, H. L. (1986) Nature 323, 455-8).
La presente invencion se basa en el sorprendente descubrimiento de que los niveles de gelsolina en el plasma se reducen en muestras de sangre de sujetos humanos con una enfermedad inflamatoria: artritis reumatoidea (RA). Estos hallazgos respaldan la hipotesis de que las reducciones de los niveles de gelsolina en el plasma reflejan la lesion primaria provocada en los tejidos articulares por el agente causante de artritis reumatoidea y preceden al dolor articular y a la destruccion por el proceso inflamatorio resultante. Estas observaciones ofrecen un fundamento para prevenir y/o suprimir con el tratamiento de gelsolina las manifestaciones de las enfermedades inflamatorias. Una correlacion de estas observaciones es que el control de los niveles de gelsolina en el plasma podna convertirse en parte de la estrategia de control de la artritis reumatoidea.
Sin desear estar influenciados por ningun mecanismo o teona particular, se cree que la gelsolina podna ejercer su efecto protector inhibiendo los mediadores de inflamacion. Por lo tanto, la invencion se refiere a metodos para usar
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gelsolina para diagnosticar enfermedades inflamatorias y para controlar el efecto de la terapia. La invencion tambien se refiere al uso de gelsolina para tratar la inflamacion y las enfermedades inflamatorias.
De acuerdo con un aspecto de la invencion, se da a conocer un metodo para caracterizar el perfil de riesgo de un sujeto de presentar una enfermedad inflamatoria futura (p. ej., artritis reumatoidea en algunas realizaciones). El metodo comprende obtener un nivel de gelsolina en el sujeto y comparar el nivel de la gelsolina con un valor predeterminado. El perfil de riesgo del sujeto de presentar una enfermedad inflamatoria (p. ej., artritis reumatoidea) se caracteriza en funcion del nivel de gelsolina en comparacion con el valor predeterminado. Un nivel de gelsolina en o debajo del nivel predeterminado es indicativo de que el sujeto conlleva un riesgo elevado de presentar la enfermedad inflamatoria y un nivel de gelsolina en o encima del nivel predeterminado es indicativo de que el sujeto no conlleva un riesgo elevado de presentar la enfermedad inflamatoria.
En algunas realizaciones, el metodo comprende ademas realizar una o mas pruebas para evaluar la enfermedad inflamatoria. Evaluar una enfermedad inflamatoria puede implicar un nivel de un marcador de inflamacion en el sujeto. Los ejemplos de marcadores de inflamacion incluyen, aunque sin limitarse a ello, CRP, molecula de adhesion intercelular soluble (sICAM-1), ICAM 3, BL-CAM, LFA-2, VCAM-1, NCAM, PECAM, fibrinogeno, amiloide A en suero (SAA), fosfolipasa asociada a lipoprotemas A2 (LpPIA2), ligando sCD40 (sCD4OL), mieloperoxidasa, Interleucina 6 (lL-6) o Interleucina 8 (IL-8).
De acuerdo con otro aspecto de la invencion, se da a conocer un metodo para caracterizar el perfil de riesgo de un sujeto de padecer una enfermedad inflamatoria futura (p. ej., artritis reumatoidea en realizaciones preferidas). El metodo comprende obtener un nivel de gelsolina en el sujeto y comparar el nivel de la gelsolina con un primer valor predeterminado para establecer un primer valor de riesgo. Se obtiene el nivel de un segundo marcador de inflamacion en el sujeto y el nivel del segundo marcador de inflamacion se compara con un segundo valor predeterminado para establecer un segundo valor de riesgo. El perfil de riesgo del sujeto de padecer la enfermedad inflamatoria se caracteriza en funcion de la combinacion del primer valor de riesgo y el segundo valor de riesgo, en donde la combinacion del primer valor de riesgo y el segundo valor de riesgo establece un tercer valor de riesgo diferente de dichos primero y segundo valores de riesgo.
En algunas realizaciones, el sujeto es un sujeto aparentemente sano.
En algunas realizaciones, el primer valor predeterminado puede ser una pluralidad de intervalos del nivel de gelsolina predeterminado, una pluralidad de intervalos que esten debajo de aproximadamente 250 mg/l de plasma y otro de dichos intervalos que este encima de aproximadamente 250 mg/l de plasma, y la etapa comparativa comprende determinar en cual de dicha pluralidad de intervalos de niveles de gelsolina predeterminados recae el nivel de gelsolina de dicho sujeto.
De acuerdo con otro aspecto de la presente descripcion, se da a conocer un metodo para tratar a un sujeto que padece o presenta riesgo de padecer una enfermedad inflamatoria (p. ej., artritis reumatoidea en realizaciones preferidas). El metodo comprende administrar una cantidad eficaz de gelsolina al sujeto que necesita dicho tratamiento para tratar al sujeto.
De acuerdo con otro aspecto de la descripcion, se da a conocer un metodo para tratar a un sujeto que padece o presenta riesgo de padecer una enfermedad inflamatoria (p. ej., artritis reumatoidea en realizaciones preferidas). El metodo comprende administrar una cantidad eficaz de gelsolina al sujeto que necesita dicho tratamiento para elevar el nivel de gelsolina en el sujeto por encima de un valor predeterminado.
En algunas realizaciones, el sujeto esta de otro modo libre de indicaciones que requieran tratamiento con gelsolina. La gelsolina preferiblemente se administra por via oral, sublingual, bucal, intranasal, intravenosa, intramuscular, intraarticular, intraperitoneal, subcutanea otopica. La gelsolina se puede administrar en forma profilactica.
En algunas realizaciones, los metodos de tratamiento ademas comprenden administrar un segundo agente para tratar la enfermedad inflamatoria (p. ej., artritis reumatoidea en realizaciones preferidas). Los ejemplos de agentes para tratar la enfermedad inflamatoria incluyen, entre otros, Alclofenac, Alclometasona Dipropionato, Algestona Acetonido, Alfa Amilasa, Amcinafal, Amcinafide, Amfenac Sodico, Hidrocloruro de Amiprilosa, Anakinra, Anirolac, Anitrazafen, Apazona, Balsalazide Disodico, Bendazac, Benoxaprofeno, Hidrocloruro de Bencidamina, Bromelains, Broperamole, Budesonida, Carprofeno, Cicloprofeno, Cintazona, Cliprofeno, Propionato de Clobetasol, Butirato de Clobetasona, Clopirac, Propionato de Cloticasona, Acetato de Cormetasona, Cortodoxona, inhibidor de Ciclooxigenasa-2 (COX-2), Deflazacort, Desonida, Desoximetasona, Dipropionato de Dexametasona, Diclofenac Potasico, Diclofenac Sodico, Diacetato de Diflorasona, Diflumidona Sodica, Diflunisal, Difluprednato, Diftalona, Dimetil Sulfoxido, Drocinonida, Endrisona, Enlimomab, Enolicam Sodico, Epirizol, Etodolac, Etofenamato, Felbinac, Fenamol, Fenbufen, Fenclofenac, Fenclorac, Fendosal, Fenpipalone, Fentiazac, Flazalone, Fluazacort, Acido Flufenamico, Flumizol, Acetato de Flunisolida, Flunixin, Flunixin Meglurnina, Fluocortin Butilo, Acetato de Fluorometolona, Fluquazona, Flurbiprofen, Fluretofen, Propionato de Fluticasona, Furaprofeno, Furobufeno, Halcinonida, Propionato de Halobetasol, Acetato de Halopredona, Ibufenac, Ibuprofeno, Ibuprofeno Aluminio, Ibuprofeno Piconol, Ilonidap, Indometacina, Indometacina Sodica, Indoprofeno, Indoxol, Intrazol, Acetato de
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Isoflupredona, Isoxepac, Isoxicam, Cetoprofeno, Hidrocloruro de Lofemizol, Lornoxicam, Etabonato de Loteprednol, Meclofenamato Sodico, Acido Meclofenamico, Dibutirato de Meclorisona, Acido Mefenamico, Mesalarnina, Meseclazona, Metilprednisolona Suleptanato, Morniflumato, Nabumetona, Naproxeno, Naproxeno Sodico, Naproxol, Nimazona, Olsalazina Sodica, Orgotema, Orpanoxin, Oxaprozin, Oxifenbutazona, Hidrocloruro de Paranilina, Pentosan Polisulfato Sodico, Fenbutazona Sodico Glicerato, Pirfenidona, Piroxicam, Piroxicam Cinamato, Piroxicam Olamina, Pirprofen, Prednazato, Prifelona, Acido Prodolico, Proquazona, Proxazol, Citrato de Proxazol, Rimexolona, Romazarit, Salcolex, Salnacedin, Salsalato, Cloruro de Sanguinarium, Seclazona, Sermetacin, Sudoxicam, Sulindac, Suprofeno, Talmetacin, Talniflumato, Talosalato, Tebufelona, Tenidap, Tenidap Sodico, Tenoxicam, Tesicam, Tesimide, Tetridamina, Tiopinac, Pivalato de Tixocortol, Tolmetina, Tolmetina Sodica, Triclonide, Triflumidato, Zidometacina o Zomepirac Sodico.
Los agentes antiinflamatorios tambien incluyen inhibidores de Ciclooxigenasa-2 (COX-2). La Ciclooxigenasa es un complejo enzimatico presente en la mayona de los tejidos que produce varias prostaglandinas y tromboxanos a partir de acido araquidonico. Los farmacos antiinflamatorios no esteroideos ejercen la mayona de su actividad antiinflamatoria, analgesica y antipiretica e inhiben las contracciones uterinas inducidas por las hormonas y el desarrollo de ciertos tipos de cancer a traves de la inhibicion de la ciclooxigenasa (tambien conocida como prostaglandina G/H sintasa y/o prostaglandina-endoperoxido sintasa). Inicialmente, se conocfa solamente una forma de ciclooxigenasa: la "enzima constitutiva" o ciclooxigenasa-1 (COX-1). Se identifico originalmente en vesfculas seminales bovinas.
La ciclooxigenasa-2 (COX-2) se ha clonado, secuenciado y caracterizado inicialmente a partir de fuentes aviares, murinas y humanas (vease, p. ej., la patente de EE. UU. 5.543.297, emitida el 6 de agosto de 1996 para Cromlish, et al., y cedida a Merck Frosst Canada, Inc., Kirkland, CA, titulada: "Human cyclooxygenase-2 cDNA and assays for evaluating cyclooxygenase-2 activity"). Esta enzima es distinta de las COX-1. COX-2, es rapida y facilmente inducible por un numero de agentes que incluyen mitogenos, endotoxina, hormonas, citocinas y factores de crecimiento. Como las prostaglandinas tienen funciones tanto fisiologicas como patologicas, se cree que la enzima constitutiva, COX-1, es responsable, en gran parte, de la liberacion endogena basal de prostaglandinas y en consecuencia es importante en sus funciones fisiologicas tales como el mantenimiento de la integridad gastrointestinal y el torrente circulatorio renal. En contraste, se cree que la forma inducible, COX-2, es principalmente responsable de los efectos patologicos de las prostaglandinas en donde la induccion rapida de la enzima ocurrina en respuesta a dichos agentes como agentes inflamatorios, hormonas, factores de crecimiento y citocinas. Por lo tanto, se cree que un inhibidor selectivo de COX-2 tiene propiedades antiinflamatorias, antipireticas y analgesicas similares a un farmaco antiinflamatorio no esteroideo convencional, y ademas inhibe las contracciones uterinas inducidas por hormonas y tiene efectos anticancerosos potenciales, pero con efectos colaterales reducidos. En particular, se cree que dichos inhibidores de COX-2 tienen un menor potencial de toxicidad gastrointestinal, un menor potencial de efectos colaterales renales, un menor efecto de tiempos de sangrado y posiblemente un menor potencial de inducir ataques de asma en sujetos asmaticos sensibles a la aspirina, y por lo tanto son utiles de acuerdo con la presente invencion.
Se conocen en la tecnica un numero de inhibidores de COX-2 selectivos. Los ejemplos de inhibidores de COX-2 selectivos incluyen, por ejemplo, celecoxib (Celebrex®), valdecoxib (Bextra®) y rofecoxib (Vioxx®). Los inhibidores de COX-2 selectivos tambien incluyen, entre otros, los inhibidores de COX-2 descritos en la patente de EE. UU. 5.474.995 "Phenyl heterocycles as COX-2 inhibitors"; la patente de EE. UU. 5.521.213 "Diaryl bicyclic heterocycles as inhibitors of cyclooxygenase-2"; la patente de EE. uU. 5.536.752 "Phenyl heterocycles as COX-2 inhibitors"; la patente de EE. Uu. 5.550.142 "Phenyl heterocycles as COX-2 inhibitors"; la patente de EE. UU. 5.552.422 "Aryl substituted 5,5 fused aromatic nitrogen compounds as anti-inflammatory agents"; patente de EE. UU. 5.604.253 "N- benzylindol-3-yl propanoic acid derivatives as cyclooxygenase inhibitors"; patente de EE. UU. 5.604.260 "5- methanesulfonamido-1-indanones as an inhibitor of cyclooxygenase-2"; patente de EE. UU. 5.639.780 N-benzyl indol-3-yl butanoic acid derivatives as cyclooxygenase inhibitors"; patente de EE. UU.5.677.318 Diphenyl-1,2-3- thiadiazoles as anti-inflammatory agents"; patente de EE. UU.5.691.374 "Diaryl-5-oxygenated-2-(5H)-furanones as COX-2 inhibitors"; patente de EE. UU.5.698.584 "3,4-diaryl-2-hydroxy-2,5-dihydrofurans as prodrugs to COX-2 inhibitors"; patente de EE. UU. 5,710,140 "Phenyl heterocycles as COX-2 inhibitors patente de EE. UU.5.733.909 "Diphenyl stilbenes as prodrugs to COX-2 inhibitors"; patente de EE. UU.5.789.413 "Alkylated styrenes as prodrugs to COX-2 inhibitors"; patente de EE. UU. 5.817.700 "Bisaryl cyclobutenes derivatives as cyclooxygenase inhibitors"; patente de EE. UU. 5.849.943 "Stilbene derivatives useful as cyclooxygenase-2 inhibitors"; patente de EE. UU.5.861.419 "Substituted pyridines as selective cyclooxygenase-2 inhibitors"; patente de EE. UU. 5.922.742 "Pyridiny1-2-cyclopenten-l-ones as selective cyclooxygenase-2 inhibitors"; patente de EE. UU. 5.925.631 "Alkylated styrenes as prodrugs to COX-2 inhibitors"; todas comunmente cedidas a Merck Frosst Canada, Inc. (Kirkland, CA). Los inhibidores de COX-2 adicionales tambien se describen en la patente de EE. UU. 5.643.933, cedida a G. D. Searle & Co. (Skokie, IL), titulada: "Substituted sulfonylphenylheterocycles as cyclooxygenase-2 and 5-lipoxygenase inhibitors".
Un numero de los inhibidores de COX-2 anteriormente identificados son profarmacos de inhibidores de COX-2 selectivos, y ejercen su accion por conversion in vivo a los inhibidores de COX-2 activos y selectivos. Los inhibidores de COX-2 activos y selectivos formados a partir de los profarmacos del inhibidor de COX-2 anteriormente
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mencionados se describen en detalle en el documento WO 95/00501, publicado el 5 de enero de 1995, el documento WO 95/18799, publicado el 13 de julio de 1995 y la patente de EE. UU. 5.474.995, emitida el 12 de diciembre de 1995. Dadas las descripciones de la patente de Ee. UU. 5.543.297, titulada: "Human cyclooxygenase-2 cDNA and assays for evaluating cyclooxygenase-2 activity," una persona con experiencia ordinaria en la tecnica sena capaz de determinar si un agente es un inhibidor de COX-2 selectivo o un precursor de un inhibidor de COX-2, y por lo tanto parte de la presente invencion.
En algunas realizaciones, el metodo comprende ademas administrar un segundo gente para tratar la artritis reumatoidea. Los ejemplos de agentes para tratar la artritis reumatoidea incluyen, entre otros, hidroxicloroquina (Plaquenil), (Aralen), metotrexato, sulfasalazina (Azulfidine), Lefhmomide (Arava), azatioprina (Imuran), penicilamina (Cuprimine o Depen), sales de oro (Ridaura o Aurolate), minociclina (Dynacin o Minocin), ciclosporina (Neoral o Sandimmune) ciclofosfamida (Cytoxan o Neosar), Etanercept (Enbrel), Infliximab (Remicade), Ahakinra (Kineret) o Adalimumab (Humira).
De acuerdo con otro aspecto de la descripcion, se da a conocer un metodo para tratar a un sujeto para reducir el riesgo de una enfermedad inflamatoria (p. ej., artritis reumatoidea en realizaciones preferidas). El metodo comprende seleccionar a un sujeto en funcion de que se sepa que el sujeto tiene un nivel de gelsolina debajo del normal y administrar al sujeto una cantidad eficaz de gelsolina y/o un segundo agente para reducir el riesgo de que el sujeto presente la enfermedad inflamatoria (p. ej., artritis reumatoidea en realizaciones preferidas).
De acuerdo con otro aspecto de la descripcion, se da a conocer un metodo para tratar a un sujeto para reducir el riesgo de una enfermedad inflamatoria (p. ej., artritis reumatoidea en realizaciones preferidas). El metodo comprende seleccionar a un sujeto en funcion de que se sepa que presenta un nivel de gelsolina debajo del normal y administrar una cantidad eficaz de gelsolina y/o un segundo agente al sujeto para elevar el nivel de gelsolina en el sujeto por encima de un valor predeterminado.
En algunas realizaciones, el metodo comprende ademas administrar al sujeto un segundo agente para tratar la enfermedad inflamatoria (p. ej., artritis reumatoidea en realizaciones preferidas). Los ejemplos de agentes para tratar la enfermedad inflamatoria se mencionaron anteriormente.
De acuerdo incluso con otro aspecto de la descripcion, se da a conocer un metodo para tratar a un sujeto con un nivel de gelsolina debajo del normal. El metodo comprende tratar al sujeto con una primera terapia para tratar o reducir el riesgo de una enfermedad inflamatoria (p. ej., artritis reumatoidea en realizaciones preferidas). Se obtiene un nivel de gelsolina en el sujeto. El nivel de gelsolina se compara con un valor predeterminado correspondiente a un nivel de gelsolina predeterminado (p. ej., en una poblacion de control aparentemente sana). Si no se alcanza el nivel de gelsolina predeterminado, el sujeto se trata con un segundo agente para tratar o reducir el riesgo de la enfermedad inflamatoria (p. ej., artritis reumatoidea en realizaciones preferidas) hasta alcanzar el nivel de gelsolina predeterminado.
Un "nivel de gelsolina debajo del normal" es un nivel de gelsolina que es por lo menos 10% menos que el nivel medio medido para una poblacion determinada de sujetos. El nivel de gelsolina medio puede depender de la poblacion de sujetos particular. Por ejemplo, una poblacion aparentemente sana suele tener un intervalo "normal" de gelsolina distinto que una poblacion de sujetos que ha experimentado una afeccion previa. En algunas realizaciones, el nivel de gelsolina es por lo menos 10% menos que el nivel medio medido para una poblacion determinada de sujetos. En otras realizaciones, el nivel de gelsolina es por lo menos 20% menos que el nivel medio medido para una poblacion determinada de sujetos. Incluso en otras realizaciones, el nivel de gelsolina es por lo menos 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 95%, 99% o 100% menos que el nivel medio medido para una poblacion determinada de sujetos. En una de las realizaciones, el nivel de gelsolina esta debajo de aproximadamente 250 mg/l de plasma. En otras realizaciones importantes, el nivel de gelsolina es inferior a aproximadamente 2,4 pm/l (micromoles/litro) de plasma.
En algunas realizaciones, el sujeto esta de otro modo libre de indicaciones que requieran tratamiento con el agente. Cuando el agente es gelsolina, un sujeto libre de indicaciones que requieran tratamiento con gelsolina es un sujeto que no presenta signos ni smtomas que requieran tratamiento con gelsolina. La gelsolina se indica para el tratamiento de septicemia e infecciones. La gelsolina tambien se indica para el tratamiento de trastornos relacionados con actina como smdrome de dificultad respiratoria aguda (ARDS), necrosis hepatica fulminante, insuficiencia renal aguda, lesion muscular, trastornos caracterizados por niveles elevados de BUN y/o creatinina. Los expertos en la tecnica conocen los trastornos relacionados con actina.
En otras realizaciones, el sujeto es aparentemente sano. Tal como se emplea en este documento, un "sujeto aparentemente sano" es un sujeto que no presenta signos ni smtomas de una enfermedad.
De acuerdo con otro aspecto de la descripcion, se da a conocer un metodo para evaluar la eficacia de una terapia para tratar o reducir el riesgo de una enfermedad inflamatoria (p. ej., artritis reumatoidea en realizaciones preferidas) en un sujeto. El metodo comprende obtener un nivel de gelsolina en un sujeto que se somete a terapia con un agente para tratar o reducir el riesgo enfermedad inflamatoria (p. ej., artritis reumatoidea en realizaciones
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preferidas). El nivel de gelsolina obtenido se compara con un valor predeterminado correspondiente a un nivel de gelsolina (p. ej., en una poblacion control aparentemente sana). Una determinacion de si el nivel de gelsolina esta por encima del nivel predeterminado es indicativa de si la terapia es eficaz.
En algunas realizaciones, obtener un nivel de gelsolina se repite como para controlar el nivel de gelsolina en el sujeto con el transcurso del tiempo.
La terapia puede ser con gelsolina, Alclofenac, Alclometasona Dipropionato, Algestona Acetonido, Alfa Amilasa, Amcinafal, Amcinafide, Amfenac Sodico, Hidrocloruro de Amiprilosa, Anakinra, Anirolac, Anitrazafen, Apazona, Balsalazide Disodico, Bendazac, Benoxaprofeno, Hidrocloruro de Bencidamina, Bromelains, Broperamole, Budesonida, Carprofeno, Cicloprofeno, Cintazona, Cliprofeno, Propionato de Clobetasol, Butirato de Clobetasona, Clopirac, Propionato de Cloticasona, Acetato de Cormetasona, Cortodoxona, inhibidor de Ciclooxigenasa-2 (COX-2), Deflazacort, Desonida, Desoximetasona, Dipropionato de Dexametasona, Diclofenac Potasico, Diclofenac Sodico, Diacetato de Diflorasona, Diflumidona Sodica, Diflunisal, Difluprednato, Diftalona, Dimetil Sulfoxido, Drocinonida, Endrisona, Enlimomab, Enolicam Sodico, Epirizol, Etodolac, Etofenamato, Felbinac, Fenamol, Fenbufen, Fenclofenac, Fenclorac, Fendosal, Fenpipalone, Fentiazac, Flazalone, Fluazacort, Acido Flufenamico, Flumizol, Acetato de Flunisolida, Flunixin, Flunixin Meglumina, Fluocortin Butilo, Acetato de Fluorometolona, Fluquazona, Flurbiprofen, Fluretofen, Propionato de Fluticasona, Furaprofeno, Furobufeno, Halcinonida, Propionato de Halobetasol, Acetato de Halopredona, Ibufenac, Ibuprofeno, Ibuprofeno Aluminio, Ibuprofeno Piconol, Ilonidap, Indometacina, Indometacina Sodica, Indoprofeno, Indoxol, Intrazol, Acetato de Isoflupredona, Isoxepac, Isoxicam, Cetoprofeno, Hidrocloruro de Lofemizol, Lornoxicam, Etabonato de Loteprednol, Meclofenamato Sodico, Acido Meclofenamico, Dibutirato de Meclorisona, Acido Mefenamico, Mesalamina, Meseclazona, Metilprednisolona Suleptanato, Morniflumato, Nabumetona, Naproxeno, Naproxeno Sodico, Naproxol, Nimazona, Olsalazina Sodica, Orgotema, Orpanoxin, Oxaprozin, Oxifenbutazona, Hidrocloruro de Paranilina, Pentosan Polisulfato Sodico, Fenbutazona Sodica Glicerato, Pirfenidona, Piroxicam, Piroxicam Cinamato, Piroxicam Olamina, Pirprofen, Prednazato, Prifelona, Acido Prodolico, Proquazona, Proxazol, Citrato de Proxazol, Rimexolona, Romazarit, Salcolex, Salnacedin, Salsalato, Cloruro de Sanguinarium, Seclazona, Sermetacin, Sudoxicam, Sulindac, Suprofeno, Talmetacin, Talniflumato, Talosalato, Tebufelona, Tenidap, Tenidap Sodico, Tenoxicam, Tesicam, Tesimide, Tetridamina, Tiopinac, Pivalato de Tixocortol, Tolmetina, Tolmetina Sodica, Triclonide, Triflumidato, Zidometacina, Zomepirac Sodico, hidroxicloroquina (Plaquenil), cloroquina (Aralen), metotrexato, sulfasalazina (Azulfidine), Leflunomida (Arava), azatioprina (Imuran), penicilamina (Cuprimine o Depen), sales de oro (Ridaura o Aurolate), minociclina (Dynacin o Minocin), ciclosporina (Neoral o Sandimmune) ciclofosfamida (Cytoxan o Neosar), Etanercept (Enbrel), Infliximab (Remicade), Anakinra (Kineret) o Adalimumab (Humira).
De acuerdo con otro aspecto de la descripcion, se da a conocer un metodo para decidir el curso de una terapia en un sujeto. El metodo comprende obtener un nivel de gelsolina en un sujeto que se somete a una terapia para tratar o reducir el riesgo de una enfermedad inflamatoria (p. ej., artritis reumatoidea en realizaciones preferidas). El nivel de gelsolina se compara con un valor predeterminado correspondiente a un nivel de gelsolina (p. ej., en una poblacion control aparentemente sana). Se determina si el nivel de gelsolina obtenido esta en o encima o en o debajo del nivel predeterminado y el curso de la terapia se decide en funcion de dicha determinacion. En algunas realizaciones, obtener un nivel de gelsolina se repite como para controlar el nivel de gelsolina en el sujeto con el transcurso del tiempo.
Las siguientes realizaciones se aplican a los diversos aspectos de la invencion expuestos a menos que se indique algo distinto.
La enfermedad inflamatoria puede ser artritis, artritis reumatoidea, asma, enfermedad inflamatoria de los intestinos (enfermedad de Crohn o colitis ulcerosa), enfermedad pulmonar obstructiva cronica (EPOC), rinitis alergica, vasculitis (poliarteritis nodosa, arteritis temporal, granulomatosis de Wegener, arteritis de Takayasu o smdrome de Behcet), neuropatfa inflamatoria, psoriasis, lupus eritematoso sistemico (SLE), tiroiditis cronica, tiroiditis de Hashimoto, enfermedad de Addison, polimialgia reumatica, smdrome de Sjogren o smdrome de Churg-Strauss. En algunas realizaciones importantes, la enfermedad inflamatoria es artritis reumatoidea.
El nivel de gelsolina puede estar en un fluido corporal del sujeto. Los ejemplos de fluidos corporales incluyen, entre otros, sangre, plasma, suero, orina, lfquido sinovial o fluido alveolar.
El nivel de gelsolina puede estar en un tejido corporal del sujeto. El tejido corporal puede ser un tejido articular, gastrointestinal, tiroideo, adrenergico, vascular, pulmonar, renal, cardiaco, dermico, ocular, cerebral pancreatico, hepatico, nervioso o muscular. En algunas realizaciones, el sujeto es un sujeto aparentemente sano.
En algunas realizaciones, el valor predeterminado es 250 mg/l de plasma o inferior. En algunas realizaciones, el valor predeterminado de gelsolina es aproximadamente 240 mg/l, 230 mg/l, 220 mg/l, 210 mg/l, 200 mg/l, 190 mg/l, 180 mg/l, 170 mg/l, 160 mg/l, 150 mg/l, 140 mg/l, 130 mg/l, 120 mg/l, 110 mg/l, 100 mg/l, 90 mg/l, 80 mg/l, 70 mg/l, 60 mg/l, 50 mg/l, 40 mg/l, 30 mg/l, 20 mg/l o 10 mg/l de plasma o inferior.
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En algunas otras realizaciones, el valor predeterminado es 2,4 jm/l de plasma o menos. En algunas realizaciones, el valor predeterminado de gelsolina es aproximadamente 2,3 jm/l, 2.2 jm/l, 2,1 jm/l, 2,0 jm/l, 1,9 jm/l, 1,8 jm/l, 1,7 jm/l, 1,6 jm/l, 1,5 jm/l, 1,4 jm/l, 1,3 jm/l, 1,2 jm/l, 1,1 jm/l, 1,0 jm/l, 0,9 jm/l, 0,8 jm/l, 0,7 jm/l, 0,6 jm/l, 0,5 jm/l, 0,4 jm/l, 0,3 jm/l, 0,2 jm/l de plasma o menos.
Cada una de las limitaciones de la invencion puede abarcar diversas realizaciones de la invencion. Se anticipa, por lo tanto, que cada una de las limitaciones de la invencion que implica cualquier elemento o combinacion de elementos se puede incluir en cada aspecto de la invencion. La invencion es capaz de otras realizaciones y de practicarse o llevarse a cabo en diversas formas. Tambien, la fraseologfa y la terminologfa empleadas en este documento tienen como proposito describir y no deben considerarse como limitativas. El uso de "que incluye", "que comprende" o "que tiene", "que contiene", "que abarca" y sus variaciones en este documento, tiene como fin abarcar los puntos mencionados en lo sucesivo y sus equivalentes, ademas de puntos adicionales.
Estos y otros aspectos de la invencion, ademas de las diversas ventajas y utilidades, seran obvios con referencia a la Descripcion detallada de la invencion. Como se entendera, cada aspecto de la invencion puede abarcar distintas realizaciones.
Breve descripcion de los dibujos
La FIG. 1 es un histograma que muestra que la concentracion de gelsolina en el plasma (pGSN) disminuye en pacientes con artritis reumatoidea (RA) en comparacion con controles sanos y con menos lfquido sinovial que en la sangre de pacientes con RA.
La FIG. 2 es un inmunoensayo con un anticuerpo espedfico para la isoforma plasmatica de gelsolina que muestra que la gelsolina presente en el lfquido sinovial (SF) de pacientes con RA esta compuesta principalmente por la isoforma plasmatica.
La FIG. 3 es un conjunto de histogramas que muestra que la concentracion de gelsolina en el plasma (pGSN) disminuye en modelos de raton de artritis septica: A) artritis inducida por Staphylococcus aureus (S. aureus), B) septicemia inducida por Staphylococcus aureus (S. aureus) y C) artritis septica inducida por Streptococcus agalactiae (Str. agalactiae). La disminucion ocurrio en el punto de tiempo primero ensayado (dos dfas despues de la inoculacion).
Se ha de entender que los dibujos no son necesarios para hacer posible la invencion.
Descripcion detallada de la invencion
La presente invencion se basa en el sorprendente descubrimiento de que los niveles de gelsolina en el plasma disminuyen en muestras de sangre de sujetos humanos con una enfermedad inflamatoria: artritis reumatoidea (RA). Se plantea que los niveles de gelsolina en el plasma se reducen en respuesta a la lesion inicial (desconocida) provocada por el agente causante de RA. Por lo tanto, el reemplazo de gelsolina periferica puede mitigar la lesion secundaria mediada por diversas celulas inflamatorias. Se cree que el patron de la reduccion de gelsolina para pronosticar la enfermedad y el uso de gelsolina para tratar la enfermedad son ciertos en enfermedades inflamatorias en general.
La presente descripcion abarca, en algunos aspectos, administrar gelsolina a un sujeto para tratar una enfermedad inflamatoria en el sujeto. El termino "tratar" o "tratamiento" tiene como fin incluir la profilaxis, la mejona, la prevencion o la cura de la enfermedad.
Tal como se emplea en la presente memoria, el termino "sujeto" significa cualquier marnffero que puede necesitar tratamiento. Los sujetos incluyen, entre otros: seres humanos, primates no humanos, gatos, perros, ovejas, cerdos, caballos, vacas, roedores como ratones, hamsteres y ratas. Los sujetos preferidos son sujetos humanos.
Tal como se emplea en la presente memoria, el termino "gelsolina" abarca gelsolina de tipo salvaje (num. de acceso en GenBank X04412), isoformas, analogos, variantes, fragmentos o derivados funcionales de gelsolina.
La gelsolina (GSN), a diferencia de otras protemas mairnferas, tiene isoformas citoplasmicas (cGSN) y segregadas o exportadas, tambien denominadas gelsolina plasmatica (pGSN), que derivan del empalme alternativo del mensaje de un solo gen (Sun et al. J. Biol. Chem. 274:33179-33182 (1999)). Tal como se emplean en la presente memoria, las isoformas de gelsolina incluyen versiones de gelsolina con algunas pequenas diferencias en sus secuencias de aminoacidos, usualmente una variante de empalme o el resultado de alguna modificacion post-traduccion.
La gelsolina abarca gelsolina nativa asf como tambien gelsolina sintetica y recombinante, y analogos de gelsolina. La gelsolina es una protema secretora abundante (Yin, H. L., Kwiatkowski, D. J., Mole, J. E. & Cole, F. S. (1984) J Biol Chem 259, 5271-6). La isoforma exportada de gelsolina, pGSN, posee 25 aminoacidos adicionales y se origina de un empalme alternativo de un solo gen (Kwiatkowski, D. J., Stossel, T. P., Orkin, S. H., Mole, J. E., Colten, H. R.
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& Yin, H. L. (1986) Nature 323, 455-8). La gelsolina humana recombinante (rhGSN) (Biogen IDEC, Inc., Cambridge, MA) se produce en E. coli, y aunque tiene la misma estructura primaria que la protema nativa, bajo condiciones convencionales de purificacion, difiere de la gelsolina plasmatica humana natural por un enlace disulfuro presente en la protema natural. La protema recombinante es, por lo tanto, correctamente oxidada despues de la purificacion, y su estructura y funciones no son distinguibles de la gelsolina plasmatica humana (Wen et. al, Biochemistry 35:97009709 (1996)). En algunos de los aspectos terapeuticos y realizaciones importantes de la descripcion, se prefiere el uso de rhGSN. En algunos de los aspectos y realizaciones diagnosticos importantes de la descripcion, se prefiere el uso de pGSN.
Un "analogo de gelsolina" hace referencia a un compuesto practicamente similar en funcion o bien a la gelsolina nativa o a un fragmento de esta. Los analogos de gelsolina incluyen secuencias de aminoacidos biologicamente activos practicamente similares a las secuencias de gelsolina y pueden tener secuencias sustituidas, eliminadas, extendidas, reemplazadas o de lo contrario modificadas que poseen bioactividad sustancialmente similar a aquella de la gelsolina. Por ejemplo, un analogo de gelsolina es uno que no tiene la misma secuencia de aminoacidos que la gelsolina, pero que es suficientemente homologo a la gelsolina como para retener la bioactividad de la gelsolina. La bioactividad se puede determinar, por ejemplo, determinando las propiedades del analogo de gelsolina y/o determinando la capacidad del analogo de gelsolina de tratar o prevenir la artritis reumatoidea. Un ejemplo de un ensayo de bioactividad de gelsolina es la capacidad de la gelsolina de estimular la nucleacion de actina. Los ensayos de bioactividad de la gelsolina se describen en el Ejemplo y los conocen los expertos en la tecnica.
Un "fragmento" tiene como fin incluir cualquier porcion de una molecula de gelsolina que provee un segmento de gelsolina que mantiene la bioactividad de la gelsolina, en donde el termino esta destinado a incluir fragmentos de gelsolina hechos a partir de cualquier fuente, tal como, por ejemplo, secuencias de peptidos naturales, secuencias de peptidos sinteticos o qmmicamente sintetizados y secuencias de peptidos geneticamente modificadas.
Una "variante" de gelsolina hace referencia a un compuesto sustancialmente similar en estructura y bioactividad o bien a la gelsolina nativa o a un fragmento de esta. El termino variante abarca protemas de la familia de gelsolina. Las protemas de la familia de gelsolina consisten en un grupo de protemas de union a actina que comparten repeticiones de dominios homologos de aproximadamente 15kDa que adoptan un pliegue similar. Los ejemplos de protemas de la familia de gelsolina incluyen, entre otros, advilina, vilina, capG, protemas flightless, fragmina, severina, adseverina, protovilina y supervilina.
Un "derivado funcional" de gelsolina es un derivado que posee una bioactividad que es sustancialmente similar a la bioactividad de la gelsolina. Por "sustancialmente similar" se entiende una actividad que es cuantitativamente diferente pero cualitativamente igual. Por ejemplo, un derivado funcional de gelsolina podna contener el mismo esqueleto de aminoacidos que la gelsolina pero tambien contiene otras modificaciones tales como modificaciones post-traduccion como por ejemplo fosfolfpidos ligados o carbohidrato covalentemente unido, dependiendo de la necesidad de dichas modificaciones para el desempeno del ensayo diagnostico o el tratamiento terapeutico. Tal como se emplea en este documento, el termino tambien esta destinado a incluir un derivado qmmico de gelsolina. Dichos derivados pueden mejorar la solubilidad, la absorcion, la semivida biologica, etc. de la gelsolina. Los derivados pueden tambien reducir la toxicidad de la gelsolina, o eliminar o atenuar cualquier efecto colateral indeseable de la gelsolina, etc. Los restos qmmicos capaces de mediar dichos efectos se describen en Remington's Pharmaceutical Sciences (1980). Los procedimientos para acoplar dichos restos a una molecula tal como gelsolina se conocen en la tecnica. La expresion "derivado funcional" pretende incluir los "fragmentos", "variantes", "analogos" o "derivados qmmicos" de la gelsolina.
La descripcion abarca en algunos aspectos, metodos para tratar una enfermedad inflamatoria (p. ej., artritis reumatoidea en realizaciones preferidas) en un sujeto. Se sabe que el sujeto presenta, o se sospecha que presenta, o conlleva riesgo de presentar, la enfermedad inflamatoria. La gelsolina se administra en una cantidad eficaz para tratar la enfermedad inflamatoria en el sujeto.
Una respuesta a un metodo de tratamiento de la descripcion puede, por ejemplo, medirse determinando los efectos fisiologicos del tratamiento, tal como la disminucion o la ausencia de smtomas despues de la administracion del tratamiento.
En otro aspecto de la descripcion, se da a conocer un metodo para controlar la terapia en un sujeto. El metodo implica obtener un nivel de gelsolina en un sujeto que se somete a terapia para tratar una enfermedad inflamatoria (p. ej., artritis reumatoidea en realizaciones preferidas). El nivel de gelsolina se compara con un valor predeterminado correspondiente a un nivel control de gelsolina (p. ej., en una poblacion aparentemente sana). Una determinacion de si el nivel de gelsolina esta en o debajo de un nivel predeterminado es indicativa de si el sujeto se beneficiana con la continuacion de la misma terapia o se beneficiana con un cambio de terapia. En algunas realizaciones, obtener un nivel de gelsolina se repite como para supervisar los niveles de gelsolina del sujeto con el transcurso del tiempo. En algunas realizaciones, el sujeto puede haberse sometido a la terapia durante por lo menos 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12 semanas o mas. En algunas realizaciones, el sujeto puede haberse sometido a la terapia durante por lo menos 3, 4, 5, 6 meses o mas.
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Un cambio en la terapia con gelsolina hace referencia a un incremento en la dosis de la gelsolina, un cambio de una gelsolina a otra gelsolina, un cambio de gelsolina a otro agente, la adicion de otro agente al esquema terapeutico de gelsolina o una de sus combinaciones.
De acuerdo con otro aspecto de la descripcion, se da a conocer un metodo para evaluar la eficacia de una terapia para tratar o reducir el riesgo de una enfermedad inflamatoria (p. ej., artritis reumatoidea en realizaciones preferidas). El metodo implica obtener un nivel de gelsolina en un sujeto que se somete a una terapia para tratar la enfermedad inflamatoria. El nivel de gelsolina se compara con un valor predeterminado correspondiente a un nivel de control de gelsolina (p. ej., en una poblacion aparentemente sana). Una determinacion de que el nivel de gelsolina esta en o encima de un nivel predeterminado es indicativa de que la terapia es eficaz. En algunas realizaciones, el sujeto puede haberse sometido a la terapia durante por lo menos 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12 semanas o mas. En algunas realizaciones, el sujeto puede haberse sometido a la terapia durante por lo menos 3, 4, 5, 6 meses o mas.
Un aspecto de la descripcion se refiere a la medicion de gelsolina para orientar tratamientos con el fin de mejorar el desenlace en los sujetos. Los niveles durante la terapia de gelsolina tienen un valor predictivo para respuesta a tratamientos de una enfermedad inflamatoria (p. ej., artritis reumatoidea en realizaciones preferidas). Los niveles de gelsolina durante la terapia son aditivos de indicadores del desenlace de la enfermedad en la tecnica anterior.
Los sujetos que se beneficianan con este aspecto de la presente descripcion son sujetos que se someten a la terapia para tratar o prevenir una enfermedad inflamatoria tal como por ejemplo artritis reumatoidea (es decir, un sujeto "en terapia"). Un sujeto en terapia es un sujeto que ya ha sido diagnosticado y que esta en el curso de un tratamiento con una terapia para tratar una enfermedad inflamatoria tal como artritis reumatoidea. La terapia puede consistir en cualquiera de los agentes terapeuticos a los que se hace referencia en este documento. La terapia tambien puede consistir en tratamientos que no sean con farmacos. En realizaciones importantes, la terapia es una que incrementa los niveles de gelsolina. En una realizacion particularmente importante, la terapia es una terapia con gelsolina. Los sujetos preferidos son sujetos humanos. El sujeto que mas probablemente se beneficiana con esta descripcion es un sujeto humano que esta en terapia y que tiene un nivel de gelsolina en o debajo de aproximadamente 250 mg/l (o 2,4 jm/l) de plasma.
En algunas realizaciones, el sujeto ya padece la enfermedad. En algunas realizaciones, el sujeto puede conllevar riesgo elevado de padecer la enfermedad.
Los expertos en la tecnica conocen los factores de riesgo de enfermedades. Por ejemplo, los factores de riesgo de artritis reumatoidea incluyen la edad (entre 25 y 45 anos), el sexo femenino, la etnia caucasica o indio americana, obesidad y un antecedente familiar positivo. El grado de riesgo de artritis reumatoidea depende de la multitud y gravedad o de la magnitud de los factores de riesgo que presente el sujeto. Los cuadros de riesgo y algoritmos de prediccion estan disponibles para evaluar el riesgo de enfermedades inflamatorias tales como artritis reumatoidea en un sujeto en base a la presencia y gravedad de los factores de riesgo. En algunas realizaciones, el sujeto que presenta riesgo elevado de padecer la enfermedad inflamatoria puede ser un sujeto aparentemente sano. Un sujeto aparentemente sano es un sujeto que no presenta signos ni smtomas de enfermedad.
Los expertos en la tecnica conocen otros metodos para evaluar el riesgo de una enfermedad inflamatoria en un sujeto.
El tratamiento preferido de la presente descripcion es gelsolina. La gelsolina se puede administrar sola, en una composicion farmaceutica, o combinada con otros esquemas terapeuticos. La gelsolina y opcionalmente otro agente(s) terapeutico se pueden administrar simultanea o secuencialmente. Cuando los otros agentes terapeuticos se administran simultaneamente, se pueden administrar en las mismas formulaciones o en formulaciones separadas, pero se administran al mismo tiempo. Los otros agentes terapeuticos se pueden administrar secuencialmente unos con otros y con la gelsolina cuando la administracion de los otros agentes terapeuticos y la gelsolina se separa temporalmente. La separacion en tiempo entre la administracion de estos compuestos puede ser una cuestion de minutos o puede ser mas prolongada.
En la practica de ciertos metodos de la presente invencion, se requiere obtener un nivel de gelsolina en un sujeto. Este nivel luego se compara con un valor predeterminado, en donde el nivel de gelsolina en comparacion con un valor predeterminado es indicativo de la probabilidad de que el sujeto se beneficiara con la continuacion de la terapia. El sujeto puede entonces caracterizarse en terminos del beneficio neto que obtendra a partir de un cambio en la terapia.
El nivel de la gelsolina para el sujeto puede obtenerse por cualquier metodo reconocido en la tecnica. Habitualmente, el nivel se determina midiendo el nivel de gelsolina en un fluido corporal, por ejemplo, sangre, suero, plasma, linfa, saliva, orina, lfquido sinovial y similar. El nivel se puede determinar por ELISA u otros inmunoensayos, u otras tecnicas convencionales para determinar la presencia de gelsolina. Los metodos convencionales pueden incluir una muestra(s) de fluido corporal del sujeto para medicion en un laboratorio comercial. Los metodos para medir la gelsolina se describen en el Ejemplo.
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La invencion tambien abarca comparar el nivel de gelsolina del sujeto con un valor predeterminado. El valor predeterminado puede adquirir una variedad de formas. Puede ser un simple valor de corte, como una mediana o media. Puede establecerse en base a grupos comparativos, como por ejemplo en donde el riesgo en un grupo definido es el doble del riesgo que en otro grupo definido. Puede ser un intervalo, por ejemplo, en donde la poblacion ensayada se divida en partes iguales (o desiguales) en grupos, como un grupo de bajo riesgo, un grupo de riesgo medio y un grupo de alto riesgo, o en cuartiles, en donde el cuartil mas bajo representa a los sujetos con el mayor riesgo y el cuartil mas alto representa a los sujetos con el menor riesgo. El valor predeterminado puede ser un valor de corte predeterminado por el hecho de que un grupo que tiene un nivel de gelsolina de no menos del valor de corte demuestra un incremento estadfsticamente significativo en el riesgo de presentar una enfermedad inflamatoria (p. ej., artritis reumatoidea en realizaciones preferidas) en comparacion con un grupo comparativo. En algunas realizaciones, el grupo comparativo es un grupo que tiene un nivel de gelsolina menor.
El valor predeterminado puede depender de la poblacion particular de sujetos seleccionada. Por ejemplo, una poblacion aparentemente sana puede tener un intervalo 'normal' diferente de gelsolina que las poblaciones de sujetos que padecen otras afecciones. Por consiguiente, los valores predeterminados seleccionados pueden representar la categona en la que recae un sujeto. Los intervalos y categonas adecuados se pueden seleccionar con tan solo la experimentacion de rutina de los expertos en la tecnica. El fluido corporal preferido es sangre. En algunas realizaciones, el valor predeterminado de gelsolina es aproximadamente 250 mg/l de plasma o menos. En algunas realizaciones, el valor predeterminado de gelsolina es aproximadamente 240 mg/l, 230 mg/l, 220 mg/l, 210 mg/l, 200 mg/l, 190 mg/l, 180 mg/l, 170 mg/l, 160 mg/l, 150 mg/l, 140 mg/l, 130 mg/l, 120 mg/l, 110 mg/l, 100 mg/l, 90 mg/l, 80 mg/l, 70 mg/l, 60 mg/l, 50 mg/l, 40 mg/l, 30 mg/l, 20 mg/l o 10 mg/l de plasma o menos.
En algunas realizaciones, el valor predeterminado de gelsolina es aproximadamente 2,4 pm/l de plasma o menos. En algunas realizaciones, el valor predeterminado de gelsolina es aproximadamente 2,3 pm/l, 2,2 pm/l, 2,1 pm/l, 2,0 pm/l, 1,9 pm/l, 1,8 pm/l, 1,7 pm/l, 1,6 pm/l, 1,5 pm/l, 1,4 pm/l, 1,3 pm/l, 1,2 pm/l, 1,1 pm/l, 1,0 pm/l, 0,9 pm/l, 0,8 pm/l, 0,7 pm/l, 0,6 pm/l, 0,5 pm/l, 0,4 pm/l, 0,3 pm/l, 0,2 pm/l de plasma o menos.
Un valor predeterminado importante de gelsolina es un valor que es el promedio para una poblacion de sujeto sanos (es decir, sujetos que no presentan signos ni smtomas de enfermedad). El valor predeterminado dependera, desde ya, de las caractensticas de la poblacion de sujetos en la que yace el sujeto. En la caracterizacion del riesgo, se pueden establecer numerosos valores predeterminados.
Actualmente, hay fuentes comerciales que producen reactivos para ensayos de gelsolina. Estas incluyen, por ejemplo, Cytoskeleton (Denver, CO), Sigma (St. Louis, MO) y Calbiochem (San Diego, CA).
En algunas realizaciones, la invencion comprende ademas medir el nivel de gelsolina junto con un segundo marcador de una enfermedad inflamatoria (p. ej., artritis reumatoidea en realizaciones preferidas). Los expertos en la tecnica conocen los marcadores de enfermedades inflamatorias, cuyos ejemplos se describieron anteriormente. Los ejemplos de marcadores de artritis reumatoidea incluyen, por ejemplo, anticuerpos antipeptidos dclicos citrulinados (anti-CCP), HLA-DR4 y protema reactiva C (CRP). Se obtiene un nivel de gelsolina en el sujeto. El nivel de gelsolina se compara con un valor predeterminado para establecer un primer valor de riesgo. Se obtiene un nivel de enfermedad inflamatoria del segundo marcador en el sujeto. El nivel de la enfermedad inflamatoria del segundo marcador en el sujeto se compara con un segundo valor predeterminado para establecer un segundo valor de riesgo. El perfil de riesgo del sujeto de presentar la enfermedad inflamatoria (p. ej., artritis reumatoidea en realizaciones preferidas) luego se caracteriza en funcion de la combinacion del primer valor de riesgo y el segundo valor de riesgo, en donde la combinacion del primer valor de riesgo y el segundo valor de riesgo establece un tercer valor de riesgo diferente del primero y segundo valores de riesgo. En algunas realizaciones, el tercer valor de riesgo es mayor que cualquiera del primero y segundo valores de riesgo. Los sujetos preferidos para los ensayos y los valores predeterminados se describieron anteriormente. La enfermedad puede ser cualquier enfermedad inflamatoria anteriormente descrita.
La descripcion da a conocer metodos para determinar si un sujeto se beneficiara con la continuacion de la terapia o se beneficiana con un cambio en la terapia. El beneficio es habitualmente una reduccion en los signos y smtomas o una recuperacion mas rapida de las manifestaciones de la enfermedad. Los expertos en la tecnica conocen los signos, smtomas y manifestaciones de la enfermedad. Por ejemplo, en la artritis reumatoidea, los signos y smtomas de la enfermedad incluyen dolor, hinchazon y sensibilidad en la articulacion o articulaciones afectadas.
Estos metodos tienen importantes implicancias en el tratamiento de pacientes y tambien en el desarrollo clmico de nuevas terapias. Determinar si un sujeto se beneficiara con la continuacion de la terapia o se beneficiana con un cambio en la terapia es clmicamente util. Un ejemplo de utilidad clmica de los metodos de la presente invencion incluye identificar a sujetos que sean menos propensos o mas propensos a responder a la terapia. Los metodos de la descripcion son tambien utiles para pronosticar o determinar que un sujeto se beneficiana con la continuacion de la terapia o se beneficiana con un cambio en la terapia. Los profesionales sanitarios seleccionan esquemas terapeuticos para tratamiento en funcion del beneficio neto esperado para el sujeto. El beneficio neto deriva de la
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relacion riesgo a beneficio. La presente invencion permite determinar si un sujeto se beneficiara con la continuacion de la terapia o si se beneficiana con un cambio en la terapia, ayudando as^ al medico a seleccionar una terapia.
Otro ejemplo de utilidad clmica, en el caso de sujetos humanos por ejemplo, incluye ayudar a los investigadores clmicos en la seleccion de ensayos clmicos de sujetos con una alta probabilidad de obtener un beneficio neto. Se espera que los investigadores clmicos usen ahora la presente invencion para determinar los criterios de entrada para los ensayos clmicos.
Un sujeto que se beneficiana con la terapia continua es un sujeto cuyo nivel de gelsolina durante la terapia alcanza un cierto valor predeterminado o cuyo nivel de gelsolina esta aumentando. Los valores predeterminados de gelsolina se describieron anteriormente. Un sujeto que se beneficiana con un cambio en la terapia es un sujeto cuyo nivel de gelsolina durante la terapia no alcanzo un cierto nivel predeterminado o cuyo nivel de gelsolina durante la terapia no esta aumentando.
Tal como se emplea en la presente memoria, un "cambio en la terapia" se refiere a un incremento o una reduccion en la dosis de la terapia existente, un cambio de una terapia a otra terapia, la adicion de otra terapia a la terapia existente o una combinacion de estos. Un cambio de una terapia a otra puede implicar un cambio a una terapia con un perfil de alto riesgo pero en donde aumente la probabilidad de beneficios esperados. En algunas realizaciones, las terapias preferidas aumentan los niveles de gelsolina. Un sujeto que se beneficiana con un cambio en la terapia aumentando la dosis de la terapia existente es un sujeto que, por ejemplo, estuvo en terapia pero que no recibio la dosis maxima tolerada o la dosis maxima permitida de la terapia y cuyo nivel de gelsolina no alcanzo un cierto valor predeterminado. En dichos casos, la dosis de la terapia existente se aumenta hasta que el nivel de gelsolina alcanza un cierto valor predeterminado. En algunos casos, la dosis de la terapia existente aumenta de la dosis existente a una dosis superior que no es la dosis maxima tolerada ni la dosis maxima permitida de la terapia. En otros casos, la dosis se aumenta hasta la dosis maxima tolerada o la dosis maxima permitida de la terapia. Un sujeto que se beneficiana con un cambio en la terapia reduciendo la dosis de la terapia existente es, por ejemplo, un sujeto cuyo nivel de gelsolina durante la terapia alcanza o puede alcanzar un cierto valor predeterminado con una dosis inferior de la terapia.
Un sujeto que se beneficiana con un cambio de una terapia a otra es, por ejemplo, un sujeto que recibio la dosis maxima tolerada o la dosis maxima permitida de la terapia y cuyo nivel de gelsolina no alcanzo un cierto valor predeterminado. Otro ejemplo es un sujeto que no recibio la dosis maxima tolerada ni la dosis maxima permitida de la terapia pero que segun su medico sena mas probable que se beneficiara con otra terapia. Dichas determinaciones se basan, por ejemplo, en el desarrollo en el sujeto de efectos colaterales no deseados en la terapia inicial o en la ausencia de respuesta a la terapia inicial.
Un sujeto que se beneficiana con un cambio en la terapia por la adicion de otra terapia a la terapia existente es, por ejemplo, un sujeto que estuvo en terapia pero cuyo nivel de gelsolina no alcanzo un cierto valor predeterminado. En dichos casos, se anade otra terapia a la terapia existente. La terapia que se anade a la terapia existente puede tener un mecanismo de accion diferente para aumentar el nivel de gelsolina que la terapia existente. En algunos casos, se puede usar una combinacion de los cambios anteriormente mencionados en la terapia.
La descripcion tambien da a conocer metodos para determinar la eficacia de una terapia. La eficacia es tfpicamente la eficacia de la terapia para aumentar el nivel de gelsolina. Esto a veces se denomina tambien respuesta positiva o respuesta favorable. La eficacia se puede determinar mediante una o mas pruebas de gelsolina en la sangre para determinar si los niveles de gelsolina aumentan como consecuencia de la terapia. En algunas realizaciones, la determinacion de la eficacia se basa en la eficacia de una terapia para aumentar los niveles de gelsolina y de normalizacion de marcadores de inflamacion y/o para normalizar el recuento de globulos blancos.
La medicion de gelsolina tfpicamente se indica en pm/l (micromoles/litro), mg/dl (miligramos/decilitro) o mg/l (miligramos/litro).
La descripcion tambien da a conocer metodos para decidir el curso de una terapia en un sujeto que se somete a terapia por una enfermedad inflamatoria tal como la artritis reumatoidea. Dicho curso de terapia se decide en base al nivel de gelsolina. En algunas realizaciones, el sujeto ya padece la enfermedad o conlleva riesgo de presentar la enfermedad inflamatoria. En algunas realizaciones, el sujeto conlleva un riesgo elevado de padecer la enfermedad inflamatoria, el sujeto presenta uno o mas factores de riesgo de padecer la enfermedad.
La cantidad de un tratamiento puede variar, por ejemplo, aumentando o disminuyendo la cantidad de gelsolina o agente farmacologico o una composicion terapeutica, cambiando la composicion terapeutica administrada, cambiando la ruta de administracion, cambiando los horarios y la frecuencia de la dosis, etc. La cantidad eficaz variara con la afeccion particular que se este tratando, la edad y el estado ffsico del sujeto que se este tratando, la gravedad de la afeccion, la duracion del tratamiento, la naturaleza de la terapia concurrente (si la hubiese), la ruta de administracion espedfica y factores similares que estan dentro del conocimiento y la experiencia del medico. Por ejemplo, una cantidad eficaz puede depender de la duracion que ha tenido la enfermedad inflamatoria en el individuo.
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Una cantidad eficaz es una dosis del agente terapeutico suficiente para proporcionar un resultado deseable desde el punto de vista medico. Una cantidad eficaz puede ademas, por ejemplo, depender del grado hasta el cual un individuo presenta niveles de gelsolina anormalmente reducidos. Se ha de entender que los agentes terapeuticos de la invencion se usan para tratar o prevenir la enfermedad inflamatoria (como la artritis reumatoidea), es decir, se pueden usar de manera profilactica en sujetos con riesgo de presentar la enfermedad inflamatoria (como artritis reumatoidea). Por consiguiente, una cantidad eficaz es aquella cantidad que puede reducir el riesgo de demorar o quizas prevenir totalmente el desarrollo de la enfermedad inflamatoria (como la artritis reumatoidea). Se ha de reconocer que cuando se usa el agente terapeutico en circunstancias agudas, se usa para prevenir uno o mas resultados indeseables desde el punto de vista medico que habitualmente fluyen a partir de dichos eventos adversos.
Los factores implicados en la determinacion de una cantidad eficaz se conocen en la tecnica y se pueden abordar con tan solo la experimentacion de habitual. En general se prefiere que se use una dosis maxima de los agentes farmacologicos de la invencion (sola o combinada con otros agentes terapeuticos), es decir, la dosis segura mas alta de acuerdo con el criterio medico seguro. Los expertos en la tecnica entenderan, no obstante, que un paciente puede insistir con una dosis inferior o tolerar la dosis por cuestiones medicas, cuestiones fisiologicas o practicamente por cualquier otra cuestion.
La cantidad terapeuticamente eficaz de un agente farmacologico de la invencion es aquella cantidad eficaz para tratar la enfermedad inflamatoria. Por ejemplo, en el caso de la artritis reumatoidea, la respuesta deseada consiste en inhibir el avance de la artritis reumatoidea. Esto puede comprender solamente demorar el avance de la artritis reumatoidea temporalmente, aunque mas preferiblemente, comprende impedir el avance de la artritis reumatoidea en forma permanente. Esto se puede controlar a traves de metodos diagnosticos habituales conocidos por los expertos en la tecnica. La respuesta deseada al tratamiento de la artritis reumatoidea tambien puede demorar el inicio o incluso prevenir el inicio de la artritis reumatoidea.
Los agentes farmacologicos de la invencion son preferiblemente esteriles y contienen una cantidad eficaz de gelsolina para producir la respuesta deseada en una unidad de peso o volumen adecuada para administracion a un sujeto. La dosis de agentes farmacologicos administrada a un sujeto puede elegirse de acuerdo con distintos parametros, en particular de acuerdo con el modo de administracion utilizado y el estado del sujeto. Otros factores incluyen el periodo de tratamiento deseado. En el caso de que una respuesta en un sujeto sea insuficiente en las dosis iniciales aplicadas, se pueden emplear dosis mas altas (o dosis efectivamente mas altas por una ruta de administracion diferente, mas localizada) en la medida que el paciente las tolere. El medico o el veterinario pueden ajustar la dosis del agente farmacologico, particularmente en el caso de alguna complicacion. Una cantidad terapeuticamente eficaz habitualmente vana de 0,01 mg/kg a aproximadamente 1000 mg/kg, preferiblemente de aproximadamente 0,1 mg/kg a aproximadamente 500 mg/kg, y lo mas preferiblemente de aproximadamente 0,2 mg/kg a aproximadamente 250 mg/kg, en una o mas administraciones de la dosis diarias, durante uno o mas dfas.
La gelsolina y opcionalmente otros agentes terapeuticos se pueden administrar por sf mismos o en la forma de una sal farmaceuticamente aceptable.
Los expertos en la tecnica conocen los distintos modos de administracion, que suministran eficazmente los agentes farmacologicos de la invencion a un tejido, celula o fluido corporal deseado. Los metodos de administracion se analizan en otra parte de la solicitud. La invencion no se limita a los modos de administracion particulares descritos en esta memoria. Las referencias estandar en la tecnica (p. ej., Remington's Pharmaceutical Sciences, 20th Edition, Lippincott, Williams and Wilkins, Baltimore MD, 2001) ofrecen modos de administracion y formulaciones para administracion de diversas preparaciones y formulaciones farmaceuticas en vehfculos farmaceuticos. El experto en la tecnica conocera otros protocolos que son utiles para la administracion de los agentes farmacologicos de la invencion, en los que la cantidad de la dosis, el esquema de administracion, los sitios de administracion, el modo de administracion y la probabilidad variaran de los que se presentan en esta memoria.
La administracion de los agentes farmacologicos de la invencion a mairnferos distintos de seres humanos, p. ej., para fines de ensayo o fines terapeuticos veterinarios, se lleva a cabo practicamente bajo las mismas condiciones precedentemente descritas. El experto en la tecnica entendera que la presente invencion es aplicable tanto para enfermedades humanas como animales. Por ende, la presente invencion tiene como fin utilizarse tanto en medicina veterinaria como en productos terapeuticos humanos.
Cuando se administran las preparaciones farmaceuticas de la invencion se aplican en cantidades farmaceuticamente aceptables y en composiciones farmaceuticamente aceptables. El termino "farmaceuticamente aceptable" significa un material no toxico que no interfiere con la efectividad de la actividad biologica de los ingredientes activos. Dichas preparaciones suelen contener sales, agentes tampon, conservantes, vehfculos compatibles, y opcionalmente otros agentes terapeuticos. Cuando se usan en medicina, las sales deben ser farmaceuticamente aceptables, pero las sales no farmaceuticamente aceptables se pueden emplear convenientemente para preparar sus sales farmaceuticamente aceptables y no se excluyen del alcance de la invencion. Dichas sales farmacologica y farmaceuticamente aceptables incluyen, aunque sin limitarse a ello,
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aquellas preparadas a partir de los siguientes acidos: clortndrico, bromtHdrico, sulfurico, mtrico, fosforico, maleico, acetico, salidlico, dtrico, formico, malonico, succmico y similares. Ademas, las sales farmaceuticamente aceptables se pueden preparar como sales de metales alcalinos o sales alcalino-terreas, como sales de sodio, potasio o calcio.
Un agente o composicion farmacologico se puede combinar, si se desea, con un veldculo farmaceuticamente aceptable. La expresion "vetnculo farmaceuticamente aceptable", tal como se emplea en la presente memoria, significa una o mas cargas solidas o lfquidas compatibles, diluyentes o sustancias de encapsulacion que son adecuados para administrar a un ser humano. El termino "vetnculo" ilustra un ingrediente organico o inorganico, natural o sintetico, con el cual el ingrediente activo se combina para facilitar la aplicacion. Los componentes de las composiciones farmaceuticas tambien son capaces de combinarse con los agentes farmacologicos de la invencion, y entre sf, en un modo tal que no haya interaccion que pueda obstaculizar la eficacia farmaceutica deseada.
Las composiciones farmaceuticas pueden contener agentes tampon, como se describio anteriormente, incluidos acetato, fosfato, citrato, glicina, borato, carbonato, bicarbonato, hidroxido (y otras bases) y sales farmaceuticamente aceptables de los compuestos anteriores. Las composiciones farmaceuticas pueden ademas contener, opcionalmente, conservantes adecuados, como cloruro de benzalconio, clorobutanol, parabenos y timerosal.
Las composiciones farmaceuticas pueden convenientemente presentarse en forma de dosis unitaria y se pueden preparar por cualquiera de los metodos conocidos en la tecnica de farmacia. Todos los metodos incluyen la etapa de asociar el ingrediente activo con un vetnculo, que constituye uno o mas ingredientes accesorios. En general, las composiciones se preparan asociando en forma uniforme e mtima el compuesto activo con un vetnculo lfquido, un vetnculo solido finamente dividido, o ambos, y luego, si es necesario, dando forma al producto.
Los compuestos, cuando es conveniente para administrarlos sistemicamente, se pueden formular para administracion parenteral por inyeccion, p. ej., inyeccion intravenosa rapida o infusion continua. Las formulaciones para inyeccion se pueden presentar en forma de dosis unitaria, p. ej., en ampollas o en recipientes de multiples dosis, con un conservante anadido. Las composiciones pueden adquirir formas tales como suspensiones, disoluciones o emulsiones en vetnculos oleosos o acuosos, y pueden contener agentes de formulacion tales como agentes de suspension, estabilizacion y/o dispersion.
Las formulaciones farmaceuticas para administracion parenteral incluyen disoluciones acuosas de los compuestos activos en forma soluble en agua. Ademas, las suspensiones de los compuestos activos se pueden preparar como suspensiones para inyeccion oleosas adecuadas. Los disolventes o vetnculos lipofilos adecuados incluyen aceites grasos tales como aceite de sesamo, o esteres de acidos grasos sinteticos, como etil oleato o trigliceridos, o liposomas. Las suspensiones para inyeccion acuosas pueden contener sustancias que aumentan la viscosidad de la suspension, como carboximetilcelulosa sodica, sorbitol o dextrano. Opcionalmente, la suspension puede tambien contener estabilizadores o agentes adecuados que aumentan la solubilidad de los compuestos para permitir la preparacion de disoluciones altamente concentradas.
Alternativamente, los compuestos activos pueden estar en la forma de polvo para reconstitucion con un vetnculo adecuado (p. ej., disolucion salina, tampon o agua esteril apirogena) antes del uso.
Las composiciones adecuadas para administracion oral se pueden presentar como unidades discretas, como capsulas, comprimidos, pastillas, grageas, en donde cada uno contienen una cantidad predeterminada del compuesto activo (p. ej., gelsolina). Otras composiciones incluyen suspensiones en lfquidos acuosos o lfquidos no acuosos tales como un jarabe, elixir, una emulsion o un gel.
Las preparaciones farmaceuticas para uso oral se pueden obtener como excipiente solido, opcionalmente moliendo una mezcla resultante, y procesando la mezcla de granulos, despues de anadir auxiliares adecuados, si se desea, para obtener nucleos de comprimidos o pastillas. Los excipientes adecuados son, en particular, cargas tales como azucares, incluidas preparaciones de lactosa, sacarosa, manitol, sorbitol o celulosa, como por ejemplo almidon de mafz, almidon de trigo, almidon de arroz, almidon de patata, gelatina, goma tragacanto, metilcelulosa, hidroxipropilmetilcelulosa sodica, carboximetilcelulosa sodica y/o polivinilpirrolidona (PVP). Si se desea, se pueden anadir agentes disgregantes, como polivinilpirrolidona reticulada, agar o acido algmico o su sal, tal como alginato de sodio. Opcionalmente, las formulaciones orales se pueden formular en disolucion salina o tampones, es decir, EDTA para neutralizar condiciones acidas internas o se pueden administrar sin ningun vetnculo.
Ademas, se contemplan espedficamente las formas de administracion oral del componente o los componentes anteriormente mencionados. El componente o los componentes se pueden modificar qmmicamente como para que la administracion oral del derivado sea eficaz. En general, la modificacion qrnmica contemplada es la sujecion de por lo menos un resto a la molecula del componente propiamente dicha, en donde dicho resto permite (a) la inhibicion de proteolisis; y (b) absorcion en el torrente circulatorio desde el estomago o el intestino. Tambien se desea el incremento en la estabilidad general del componente o componentes y el incremento en el tiempo de circulacion en el cuerpo. Los ejemplos de dichos restos incluyen polietilenglicol, copolfmeros de etilenglicol y propilenglicol, carboximetilcelulosa, dextrano, alcohol polivimlico, polivinilpirrolidona y poliprolina. Abuchowski y Davis, 1981, "Soluble Polymer-Enzyme Adducts" en: Enzymes as Drugs, Hocenberg and Roberts, eds., Wiley-Interscience, New
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York, NY, pag. 367-383; Newmark, et al., 1982, J. Appl. Biochem. 4:185-189. Otros poUmeros que podnan utilizarse son poli-1,3-dioxolano y poli-1,3,6-tioxocano. Para uso farmaceutico, como se indico anteriormente, se prefieren los restos de polietilenglicol.
Para el componente (o derivado), la localizacion de liberacion puede ser el estomago, el intestino delgado (el duodeno, el yeyuno o el fleon), o el intestino grueso. El experto en la material cuenta con formulaciones disponibles que no se disolveran en el estomago, pero que liberaran el material en el duodeno o en otra parte del intestino. Preferiblemente, la liberacion evitara los efectos nocivos del entorno estomacal, o bien por proteccion de la gelsolina o por liberacion del material biologicamente activo mas alla del entorno estomacal, como en el intestino.
Para garantizar la resistencia gastrica absoluta, es esencial un recubrimiento impermeable a por lo menos pH 5,0. Los ejemplos de los ingredientes inertes mas comunes que se utilizan como recubrimientos entericos son acetato de celulosa trimelitato (CAT), ftalato de hidroxipropilmetilcelulosa (HPMCP), HPMCP 50, HPMCP 55, ftalato de polivinilacetato (PVAP), Eudragit L30D, Aquateric, celulosa acetato ftalato (CAP), Eudragit L, Eudragit S y Shellac. Estos recubrimientos se pueden usar como pelfculas mixtas.
Un recubrimiento o mezcla de recubrimientos puede tambien usarse en los comprimidos, que no tienen como fin la proteccion del estomago. Esto puede incluir recubrimientos de azucar o recubrimientos que hacen que el comprimido sea mas facil de tragar. Las capsulas pueden consistir en una envoltura dura (como gelatina) para administracion del compuesto terapeutico seco, es decir polvo; para formas lfquidas, se puede usar una envoltura de gelatina blanda. El material de envoltura de obleas podna ser almidon grueso u otro papel comestible. Para pfldoras, pastillas, comprimidos moldeados o comprimidos triturados, se pueden emplear tecnicas de acumulacion de humedad.
El compuesto terapeutico se puede incluir en la formulacion como multiparticulados finos en la forma de granulos o pildoritas de tamano de partfcula de aproximadamente 1 mm. La formulacion del material para administracion de capsulas podna ser tambien como polvo, tapones ligeramente comprimidos o incluso como comprimidos. El compuesto terapeutico podna prepararse por compresion.
Pueden incluirse todos los colorantes y saponferos. Por ejemplo, la gelsolina puede formularse (como por encapsulacion de liposomas o microesferas) y luego contenerse adicionalmente dentro de un producto comestible, tal como una bebida refrigerada que contiene colorante y saponferos.
Uno puede diluir o aumentar el volumen del compuesto terapeutico con un material inerte. Estos diluyentes podnan incluir carbohidratos, especialmente manitol, lactosa, lactosa anhidra, celulosa, sacarosa, dextranos modificados y almidon. Ciertas sales inorganicas pueden tambien usarse como cargas incluidos trifosfato de calcio, carbonato de magnesio y cloruro de sodio. Algunos diluyentes comercialmente disponibles son Fast-Flo, Emdex, STA-Rx 1500, Emcompress y Avicell.
Pueden incluirse desintegrantes en la formulacion del compuesto terapeutico en una forma de administracion solida. Los materiales utilizados como desintegrantes incluyen, entre otros, almidon, incluido el desintegrante comercial a base de almidon, Explotab. almidon glicolato sodico, Amberlite, carboximetilcelulosa sodica, ultramilopectina, alginato sodico, gelatina, cascara de naranja, carboximetilcelulosa acida, esponja natural y bentonita. Otra forma de los desintegrantes son las resinas insolubles de intercambio cationico. Se pueden utilizar gomas en polvo como desintegrantes y como aglutinante., Las gomas en polvo se pueden usar como desintegrantes y como aglutinantes, y pueden incluir gomas en polvo tales como agar, Karaya o tragacanto. El acido algmico y su sal de sodio son tambien utiles como desintegrantes.
Los aglutinantes se pueden usar para mantener el agente terapeutico unido para formar un comprimido duro e incluir materiales a partir de productos naturales tales como goma arabiga, tragacanto, almidon y gelatina. Otros incluyen metilcelulosa (MC), etilcelulosa (EC) y carboximetilcelulosa (CMC). La polivinilpirrolidona (PVP) y la hidroxipropilmetilcelulosa (HPMC) podnan usarse ambas en disoluciones alcoholicas para granular el agente terapeutico.
Se puede incluir un agente antifriccion en la formulacion del agente terapeutico para prevenir la adherencia durante el proceso de formulacion. Se pueden utilizar lubricantes como una capa entre el agente terapeutico y la pared de la matriz, y estos pueden incluir, entre otros, acido estearico como sus sales de magnesio y calcio, parafina lfquida de politetrafluoroetileno (PTFE), aceites vegetales y ceras. Se pueden tambien utilizar lubricantes solubles como laurilsulfato sodico , laurilsulfato de magnesio, polietilenglicol de diversos pesos moleculares, Carbowax 4000 y 6000.
Podnan anadirse deslizantes que mejoren las propiedades del farmaco durante la formulacion y para ayudar en la redisposicion durante la compresion. Los deslizantes pueden incluir almidon, talco, sflice pirogenica y silicoaluminato hidratado.
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Para auxiliar en la disolucion del agente terapeutico en el entorno acuoso, podna anadirse un tensioactivo como humectante. Los tensioactivos pueden incluir detergentes anionicos tales como laurilsulfato de sodio, dioctil sulfosuccinato de sodio y dioctil sulfonato de sodio. Se podnan emplear detergentes cationicos y podnan incluir cloruro de benzalconio o cloruro de bencetonio. La lista de posibles ingredientes no ionicos que podnan incluirse en la formulacion como tensioactivos son lauromacrogol 400, polioxil estearato 40, aceite de ricino hidrogenado con polioxietileno 10, 50 y 60, glicerol monostearato, polisorbato 40, 60, 65 y 80, ester de acido graso de sacarosa, metil celulosa y carboximetilcelulosa. Estos tensioactivos podnan estar presentes en la formulacion de gelsolina o bien solos o como una mezcla en distintas relaciones.
Las preparaciones farmaceuticas que pueden utilizarse oralmente incluyen capsulas duras hechas de gelatina, capsulas blandas selladas hechas de gelatina y un plastificante, como glicerol o sorbitol. Las capsulas duras pueden contener los ingredientes activos en mezcla con carga tal como lactosa, aglutinantes tales como almidones, y/o lubricantes tales como talco o estearato de magnesio y, opcionalmente estabilizadores. En las capsulas blandas, los compuestos activos se pueden disolver o suspender en lfquidos adecuados, como aceites grasos, parafina lfquida o polietilenglicoles lfquidos. Ademas, se pueden anadir estabilizadores.
Tambien se pueden emplear microesferas formuladas para administracion oral. Dichas microesferas se han definido bien en la tecnica. Todas las formulaciones para administracion oral debenan estar en dosis adecuadas para dicha administracion.
Para administracion por boca, las composiciones pueden tomar la forma de comprimidos o pastillas para chupar formuladas en el modo convencional.
Para administracion por inhalacion, los compuestos para uso de acuerdo con la presente invencion se pueden administrar convenientemente en la forma de una presentacion para pulverizacion en aerosol desde envases presurizados o un nebulizador, con el uso de un propulsor adecuado, p. ej., diclorodifluorometano, triclorofluorometano, diclorotetrafluoroetano, dioxido de carbono u otro gas adecuado. En el caso de un aerosol presurizado, la unidad de dosis se puede determinar proporcionando una valvula para suministrar una cantidad dosificada. Se pueden formular capsulas y cartuchos, p. ej., de gelatina, para uso en un inhalador o insuflador que contengan una mezcla de polvo del compuesto y una base de polvo adecuada tal como lactosa o almidon.
Tambien se contempla en la presente memoria la administracion pulmonar de gelsolina. La gelsolina se administra a los pulmones de un mairnfero mientras este inhala, y atraviesa el recubrimiento epitelial del pulmon hacia el torrente sangumeo. Otros informes de moleculas inhaladas incluyen Adjei et al., 1990, Pharmaceutical Research, 7:565-569; Adjei et al., 1990, International Journal of Pharmaceutics, 63:135-144 (acetato de leuprolida); Braquet et al., 1989, Journal of Cardiovascular Pharmacology, 13(supl. 5):143-146 (endotelina 1); Hubbard et al., 1989, Annals of Internal Medicine, Vol. III, pag. 206-212 (al-antitripsina); Smith et al., 1989, J. Clin. Invest. 84:1145-1146 (a-1-proteinasa); Oswein et al., 1990, "Aerosolization of Proteins", Proceedings of Symposium on Respiratory Drug Delivery II, Keystone, Colorado, March, (hormona del crecimiento recombinante humana); Debs et al., 1988, J. Immunol. 140:3482-3488 (interferon-Y y factor de necrosis tumoral alfa) y Platz et al., patente de EE. UU. num. 5.284.656 (factor estimulante de colonias de granulocitos). Un metodo y una composicion para administracion pulmonar de farmacos para efecto sistemico se describen en la patente de EE. UU. num. 5.451.569, emitida el 19 de septiembre de1995 para Wong et al.
Se contempla para uso en la practica de la presente invencion una amplia gama de dispositivos mecanicos disenados para la administracion pulmonar de productos terapeuticos; entre ellos nebulizadores, inhaladores de dosificacion e inhaladores de polvo, los cuales resultan familiares a los expertos en la tecnica.
Algunos ejemplos espedficos de dispositivos comercialmente disponibles para la practica de la presente invencion son el nebulizador Ultravent, fabricado por Mallinckrodt, Inc., St. Louis, Missouri; el nebulizador Acorn II, fabricado por Marquest Medical Products, Englewood, Colorado; el inhalador de dosificacion Ventolin, fabricado por Glaxo Inc., Research Triangle Park, North Carolina; y el inhalador de polvo Spinhaler, fabricado por Fisons Corp., Bedford, Massachusetts.
Todos los dispositivos mencionados requieren el uso de formulaciones adecuadas para dispensacion de gelsolina. Tfpicamente, cada formulacion es espedfica del tipo de dispositivo empleado y puede implicar el uso de un material propulsor adecuado, ademas de los diluyentes, adyuvantes y/o vehfculos habituales utiles en la terapia. A su vez, se contempla el uso de liposomas, microcapsulas o microesferas, complejos de inclusion u otro tipo de vehfculos. La gelsolina qmmicamente modificada tambien se puede preparar en distintas formulaciones, dependiendo del tipo de modificacion qmmica o del tipo de dispositivo empleado.
Las formulaciones adecuadas para uso con un nebulizador, o bien a chorro o ultrasonico, habitualmente comprenden gelsolina disuelta en una concentracion de aproximadamente 0,1 a 25 mg de gelsolina biologicamente activa por ml de disolucion. La formulacion puede ademas incluir un tampon y un azucar simple (p. ej., para estabilizacion de la gelsolina y regulacion de la presion osmotica). La formulacion del nebulizador puede tambien
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contener un tensioactivo para reducir o prevenir la agregacion de la gelsolina inducida por la superficie que es causada por la atomizacion de la disolucion al formar el aerosol.
Las formulaciones para uso con un dispositivo inhalador de dosificacion en general suelen comprender un polvo finamente dividido que contiene la gelsolina suspendida en un propulsor con la ayuda de un tensioactivo. El propulsor puede ser cualquier material convencional empleado para este proposito, como un clorofluorocarbono, un hidroclorofluorocarbono, un hidrofluorocarbono o un hidrocarburo, incluidos triclorofluorometano, diclorodifluorometano, diclorotetrafluoroetanol y. 1,1,1,2-tetrafluoroetano,o sus combinaciones. Los tensioactivos adecuados incluyen sorbitan trioleato y lecitina de soja. El acido oleico tambien puede ser util como tensioactivo.
Las formulaciones para dispensar desde un dispositivo inhalador de polvo comprenderan un polvo seco finamente dividido que contiene gelsolina e incluyen un agente de volumen, como lactosa, sorbitol, sacarosa o manitol en cantidades que facilitan la dispersion del polvo desde el dispositivo, p. ej., 50 a 90% en peso de la formulacion. La gelsolina debe ser lo mas ventajosamente preparada en forma particulada con un tamano de partfcula promedio de menos de 10 mm (o micrometros), lo mas preferiblemente 0,5 a 5 mm, para la administracion mas eficaz al pulmon distal.
Se contempla tambien la administracion nasal (o intranasal) de una composicion farmaceutica de la presente invencion. La administracion nasal permite el pasaje de una composicion farmaceutica de la presente invencion al torrente circulatorio directamente despues de administrar el producto terapeutico a la nariz, sin la necesidad de deposicion del producto en el pulmon. Las formulaciones para administracion nasal incluyen aquellas con dextrano o ciclodextrano.
Para la administracion nasal, un dispositivo util es un frasco duro pequeno al que se le conecta un pulverizador de dosificacion. En una realizacion, la dosis se administra atrayendo la composicion farmaceutica de la presente invencion hacia una camara de volumen definido, en donde la camara tiene una apertura con dimensiones para pulverizar y para la formulacion de aerosol, formando una pulverizacion cuando se comprime un lfquido de la camara. La camara se comprime para administrar la composicion farmaceutica de la presente invencion. En una realizacion espedfica, la camara tiene una disposicion de piston. Dichos dispositivos se comercializan.
Alternativamente, se puede usar un frasco plastico para oprimir con una apertura o abertura con dimensiones para pulverizar una formulacion de pulverizacion, formando una pulverizacion al oprimir. La abertura por lo general se encuentra en la parte superior del frasco, y la parte superior en general es conica para encajar parcialmente en los pasajes nasales para la administracion eficiente de la formulacion en aerosol. Preferiblemente, el inhalador nasal proporcionara una cantidad dosificada de la formulacion en aerosol, para administracion de una dosis medida del farmaco.
Los compuestos pueden tambien formularse en composiciones rectales o vaginales tales como supositorios o enemas de retencion, p. ej., que contienen bases de supositorios convencionales tales como manteca de cacao u otros gliceridos.
Ademas de las formulaciones previamente descritas, los compuestos tambien se pueden formular como una preparacion de liberacion lenta. Dichas formulaciones de accion prolongada se pueden formular con materiales polimericos o hidrofobos adecuados (por ejemplo, como una emulsion en un aceite aceptable) o resinas de intercambio ionico, o como derivados moderadamente solubles, por ejemplo, como una sal moderadamente soluble.
Las composiciones farmaceuticas tambien pueden comprender vehfculos o excipientes en fase solida o en gel adecuados. Los ejemplos de dichos vehfculos o excipientes incluyen, entre otros, carbonato de calcio, fosfato de calcio, distintos azucares, almidones, derivados de celulosa, gelatina y polfmeros tales como polietilenglicoles.
Las formas de preparacion farmaceutica lfquidas o solidas adecuadas son, por ejemplo, disoluciones acuosas o salinas para inhalacion, microencapsuladas, cocleadas, recubiertas en partfculas de oro microscopicas, contenidas en liposomas, nebulizadas, aerosoles, pildoritas para implantar en la piel, o secas en un objeto cortante que se raspara en la piel. Las composiciones farmaceuticas tambien incluyen granulos, polvos, comprimidos, comprimidos recubiertos, (micro)capsulas, supositorios, jarabes, emulsiones, suspensiones, cremas, gotas o preparaciones con liberacion prolongada de los compuestos activos, en cuya preparacion se emplean habitualmente excipientes y aditivos, y /o auxiliares tales como desintegrantes, aglutinantes, agentes de recubrimiento, agentes de expansion, lubricantes, saponferos, edulcorantes o solubilizantes. Las composiciones farmaceuticas son adecuadas para uso en una diversidad de sistemas de administracion de farmacos. Para una breve revision de metodos para administracion de farmacos, vease Langer, Science 249:1527-1533, 1990.El agente(s) terapeutico, que incluye espedficamente, entre otros, gelsolina, se puede proporcionar en partfculas. Partfculas, tal como se emplea en la presente invencion, significa nano o micropartfculas (o en algunos casos mas grandes) que pueden consistir total o parcialmente en gelsolina u otro agente(s) terapeutico descrito en este documento. Las partfculas pueden contener el agente(s) terapeutico en un nucleo rodeado por un recubrimiento como, entre otros, un recubrimiento enterico. El agente(s) terapeutico tambien puede dispersarse por todas las partfculas. El agente(s) terapeutico puede adsorberse en las partfculas. Las partfculas pueden ser de cinetica de liberacion de cualquier orden, incluida la liberacion de
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orden cero, liberacion de primer orden, liberacion de segundo orden, liberacion demorada, liberacion sostenida, liberacion inmediata y cualquiera de sus combinaciones, etc. La partfcula puede incluir, ademas del agente(s) terapeutico, cualquiera de esos materiales habitualmente utilizados en la tecnica de farmacia y medicina, incluidos, entre otros, material erosionable, no erosionable, biodegradable o no biodegradable, y sus combinaciones. Las partfculas pueden ser microcapsulas que contienen la gelsolina en una disolucion o en un estado semisolido. Las partfculas pueden adoptar practicamente cualquier forma.
Tanto los materiales polimericos no biodegradables como los biodegradables se pueden usar en la fabricacion de partfculas para administrar el agente(s) terapeutico. Dichos polfmeros pueden ser polfmeros naturales o sinteticos. El polfmero se selecciona en base al periodo de tiempo en el que se desea la liberacion. Los polfmeros bioadhesivos de interes particular incluyen hidrogeles bioerosionables descritos por H.S. Sawhney, C.P. Pathak y J.A. Hubei' en Macromolecules, (1993) 26:581-587. Estos incluyen acidos polihialuronicos, casema, gelatina, glutina, poliantndridos, acido poliacnlico, alginato, quitosan, poli(metil metacrilatos), poli(etil metacrilatos),
poli(butilmetacrilato), poli(isobutil metacrilato), poli(hexilmetacrilato), poli(isodecil metacrilato), poli(lauril metacrilato), poli(fenil metacrilato), poli(metil acrilato), poli(isopropil acrilato), poli(isobutil acrilato) y poli(octadecil acrilato).
El agente(s) terapeutico puede estar contenido en sistemas de liberacion controlada. La expresion "liberacion controlada" tiene como fin hacer referencia a cualquier formulacion que contiene farmaco en la que el modo y el perfil de liberacion del farmaco de la formulacion estan controlados. Esto se refiere a formulaciones de liberacion inmediata y no inmediata, en donde las formulaciones de liberacion no inmediata incluyen, entre otras, formulaciones de liberacion sostenida y liberacion demorada. La expresion "liberacion sostenida " (tambien denominada "liberacion extendida ") se usa en su sentido convencional para hacer referencia a la formulacion de un farmaco que proporciona liberacion gradual del farmaco durante un periodo de tiempo extendido, y que preferiblemente, aunque no necesariamente, resulta en niveles en sangre practicamente constantes de un farmaco durante un periodo de tiempo extendido. La expresion "liberacion demorada" se utiliza en su sentido convencional para hacer referencia a una formulacion de farmaco en la que hay una demora de tiempo entre la administracion de la formulacion y la liberacion del farmaco desde allt "Liberacion demorada" puede o no implicar la liberacion gradual del farmaco durante un periodo de tiempo extendido, y por lo tanto, puede ser o no "liberacion sostenida".
El uso de un implante de liberacion sostenida a largo plazo puede ser particularmente adecuado para el tratamiento de afecciones cronicas. Liberacion a "largo plazo", tal como se emplea en este documento, significa que el implante esta construido y dispuesto para administrar niveles terapeuticos del ingrediente activo durante por lo menos 7 dfas, y preferiblemente 30-60 dfas. Los expertos en la materia conocen los implantes de liberacion sostenida a largo plazo, que incluyen algunos de los sistemas de liberacion anteriormente descritos.
Para administracion topica al ojo, las membranas nasales, las membranas mucosas o la piel, la gelsolina se puede formular como unguentos, cremas o lociones, o como un parche transdermico o insercion intraocular o iontoforesis. Por ejemplo, los unguentos y cremas se pueden formular con una base acuosa u oleosa sola o junto con agentes espesantes y/o gelificantes adecuados. Las lociones se pueden formular con una base acuosa u oleosa y, tfpicamente, incluyen ademas uno o mas agentes emulsionantes, agentes de estabilizacion, dispersantes, agentes de suspension, espesantes o colorantes. (vease, p. ej., el documento U.S. 5.563.153, titulado "Sterile Topical Anesthetic Gel", emitido para Mueller, D., et al., para leer una descripcion de un vetuculo topico a base de gel farmaceuticamente aceptable).
En general, la gelsolina esta presente en una formulacion topica en una cantidad que oscila entre aproximadamente 0,01% y aproximadamente 30,0% en peso, en base al peso total de la composicion. Preferiblemente, la gelsolina esta presente en una cantidad que oscila entre aproximadamente 0,5 y aproximadamente 30% en peso y, lo mas preferiblemente, la gelsolina esta presente en una cantidad que oscila entre aproximadamente 0,5 y aproximadamente 10% en peso. En una realizacion, las composiciones de la invencion comprenden una mezcla de gel para maximizar el contacto con la superficie del dolor localizado y minimizar el volumen y la dosis necesaria para aliviar el dolor localizado. GELFOAM ® (un gel a base de metilcelulosa fabricado por Upjohn Corporation) es un vetuculo topico farmaceuticamente aceptable preferido. Otros vetuculos farmaceuticamente aceptables incluyen iontoforesis para administracion transdermica de farmacos.
La descripcion tambien contempla el uso de kits. En algunos aspectos de la descripcion, el kit puede incluir un vial de preparacion farmaceutica, un vial con diluyente para una preparacion farmaceutica y gelsolina. El vial que contiene el diluyente para la preparacion farmaceutica es opcional. El vial que contiene el diluyente contiene un diluyente tal como disolucion salina fisiologica para diluir lo que podna ser una disolucion concentrada o polvo de gelsolina liofilizado. Las instrucciones pueden incluir instrucciones para mezclar una cantidad particular del diluyente con una cantidad particular de la preparacion farmaceutica concentrada, mediante lo cual se prepara una formulacion final para inyeccion o infusion. Las instrucciones pueden incluir instrucciones para tratar a un sujeto con una cantidad de gelsolina eficaz. Tambien se ha de entender que los recipientes que contienen las preparaciones, ya sea que el recipiente sea un frasco, un vial con un tapon, una ampolla con tapon, una bolsa de infusion y similares, pueden contener indicios tales como marcas convencionales que cambian de color cuando la preparacion ha sido sometida a autoclave o esterilizada de otro modo.
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La presente invencion se ilustra ademas mediante los siguientes Ejemplos, que de ninguna manera se deben interpretar como limitativos.
Ejemplos
La gelsolina en el plasma (pGSN) es una protema segregada que circula en los fluidos extracelulares de seres humanos a concentraciones que promedian 250 mg/l. Diversos tipos de lesiones de tejidos provocan reducciones en los niveles de gelsolina en el plasma. Despues de una lesion grave de los tejidos provocada por traumatismos graves, quemaduras, septicemia, cirugfa mayor y pacientes de trasplante de celulas madre hematopoyeticas, los niveles de gelsolina (GSN) declinan hasta aproximadamente menos de 25% del nivel normal precedente y por lo tanto pronostican complicaciones de cuidado cntico medidas por requerimientos de ventilacion asistida, longitud de residencia en cuidados intensivos y hospitalizaciones en general, muerte y secuelas espedficas tales como lesion pulmonar secundaria (p. ej., smdrome de dificultad respiratoria aguda (ARDS), lesion pulmonar aguda (ALI), smdromes de disfuncion multiorganica (MODS)). Reducciones de gelsolina en el plasma similares en modelos animales preceden a cambios en la permeabilidad pulmonar e inflamacion, y la infusion de gelsolina en el plasma recombinante mejora estos efectos.
Ejemplo 1: La concentracion de gelsolina en el plasma (pGSN) disminuye en pacientes con artritis reumatoidea (RA) en comparacion con controles sanos y con menos lfquido sinovial que sangre en pacientes con RA.
Medimos los niveles de gelsolina en el plasma (pGSN) en pacientes con artritis reumatoidea (RA) para ensayar experimentalmente la hipotesis de que los niveles de gelsolina en el plasma caen en respuesta a la lesion inicial (desconocida) provocada por el agente causante de artritis reumatoidea. Como se muestra en la Figura 1, los niveles de (pGSN) circulante fueron significativamente inferiores en pacientes con RA comparados con controles sanos equiparados (103 ± 23 frente a 142 ± 29, P = 0,0002, FIG. 1). Los niveles de pGSN fueron similares tanto en hombres como en mujeres, y no dependieron de la edad de los pacientes ni de la duracion de la artritis. Los niveles de pGSN circulante se correlacionaron inversamente con los niveles de protema C reactiva (r=-0,272, p=0,026).
Materiales y metodos:
Pacientes: Se obtuvieron muestras de plasma y lfquido sinovial de 82 pacientes con RA que asistfan a consultorios de reumatologfa en Sahlgrenska University Hospital en Gotemburgo por efusion articular aguda. Se diagnostico RA de acuerdo con los criterios del American College of Rheumatology. Al momento de tomar las muestras de lfquido sinovial y sangre, todos los pacientes recibfan farmacos antiinflamatorios no esteroideos. Se obtuvieron radiograffas recientes de las manos y los pies de todos los pacientes. La presencia de erosiones oseas, definida como la perdida de definicion cortical de la articulacion, se registro en las articulaciones interfalangicas, metacarpofalangicas, carpo, interfalangicas y metatarsofalangicas del antepie. La presencia de una erosion fue suficiente para cumplir con el requisito de una enfermedad erosiva. La presencia de factor reumatoideo de cualquier isotipo de inmunoglobulina ensayada (IgM,-A, -G) se considero positiva. Se obtuvieron muestras de sangre control (n=87) de donantes de sangre que asistieron a la Unidad de Transfusiones Sangumeas de Sahlgrenska University Hospital y compatibles con pacientes con RA en cuanto a edad y genero.
Recoleccion y preparacion de muestras: Se obtuvo lfquido sinovial de las articulaciones de la rodilla por artrocentesis, se aspiro asepticamente y se transfirio a tubos que conteman citrato sodico (0,129 mol/1; pH 7,4). Las muestras se obtuvieron simultaneamente de la vena cubital y se recogieron en medio con citrato sodico. Las muestras de sangre y lfquido sinovial recogidas se centrifugaron a 800 g durante 15 minutos, se dividieron en almuotas y se almacenaron congeladas a -70° C hasta el uso.
Medicion de la concentracion de pGSN en el plasma y en lfquido sinovial por ensayo de nucleacion de pireno actina: se activa pGSN con calcio y se une a dos monomeros de actina para formar un nucleo desde el cual se polimeriza la actina en la direccion terminal senalada (la de crecimiento mas lento). Se preparo pireno actina derivando actina con N-pireniliodoacetamida (Molecular Probes, Eugene Oregon). Antes del uso, se diluyo pireno actina en tampon de despolimerizacion (Tampon A: ATP 0,5 mM, p-mercaptoetanol 5 mM, Tris 0,2 mM, CaC12 0,2 mM, pH 7,4) hasta 20 |jM, se almaceno 1 h a 37° C hasta alcanzar el equilibrio monomerico y se centrifugo a 250.000 g, 4°C durante 30 minutos en una maquina OptimaTM TL Ultracentrifuge (Beckman) hasta sedimentar cualquier actina filamentosa remanente. Se retiro el sobrenadante y se almaceno en un bano de agua con hielo hasta el uso. El plasma deficiente de plaquetas que se iba a analizar se diluyo 1:5 en tampon B (KC1 0,1 M, MgC12 0,2 mM, CaCl2 0,2 mM, ATP 0,5 mM, Tris 10 mM, mercaptoetanol 0,5 mM, pH 7,4). Se registro la fluorescencia de pireno actina usando un fluorometro de luminiscencia (FluoroMax-2®, JobinYvon-Spex Instruments S.A., Inc). Las longitudes de ondas de excitacion y emision fueron 366 y 386 nm, respectivamente. Se anadio pireno activan a una concentracion final de 1 jM en 280 j1 tampon B que contema faloidina 0,4 jM, CaC12 1,5 mM y 5 jl de muestra diluida en tubos de cultivo de vidrio y borosilicato de 6x50 mm (Kimble). La nucleacion se monitoreo durante 240 s en el fluorometro despues de una rapida agitacion en vortex. La pendiente lineal del incremento de fluorescencia se calculo entre 100-200s. Todas las muestras se llevaron a cabo por duplicado. La tasa de polimerizacion en cada muestra se convirtio a concentracion de pGSN con el uso de una curva estandar de pGSN humana recombinante.
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Estadfstica: El nivel de pGSN en las muestras de sangre y de Kquido sinovial se expreso como la desviacion estandar y media + SD. La comparacion entre las muestras de sangre y lfquido sinovial compatibles se analizo por la prueba de la t para datos emparejados. La comparacion de los niveles de pGSN tambien se realizo entre las muestras de sangre de pacientes y de controles sanos. Para mayor comparacion, el material de los pacientes se estratifico de acuerdo con hallazgos radiologicos (RA erosiva frente a RA no erosiva). Las diferencias en los niveles de pGSN en la sangre y el ffquido sinovial entre los grupos se calcularon por separado, empleando la prueba U de Mann-Whitney. Para la evaluacion de una posible influencia del tratamiento continuo sobre los niveles de pGSN, el material de los pacientes se estratifico de acuerdo con el tratamiento DMARD (tratado frente a no tratado). La comparacion entre los grupos se realizo usando la prueba U de Mann-Whitney. Para toda la evaluacion estadfstica de los resultados, los valores P debajo de 0,05 se consideraron estadfsticamente significativos.
Ejemplo 2: La isoforma de gelsolina presente en el lfquido sinovial (SF) de pacientes con RA es la isoforma de gelsolina en el plasma (pGSN)
Ya que la gelsolina se produce como una isoforma intracelular y extracelular, cada una de las cuales posee la capacidad de inducir la polimerizacion de actina, analizamos el origen de la actividad de la gelsolina por inmunoensayo con un anticuerpo espedfico de la isoforma del plasma (a-pGSN). La gelsolina presente en SF esta compuesta principalmente por la isoforma plasmatica (Fig. 2). El origen en el plasma de la gelsolina tambien fue respaldado por una correlacion entre los niveles de gelsolina en el plasma y el ffquido sinovial en el par compatible de muestras (r=0,39, p=0,0006). No obstante, la actividad de pGSN en las muestras de SF de pacientes con RA fue significativamente inferior que aquella del plasma (pg/ml, 69 ± 18 frente a 103 ± 23, p = 0,04) indicando un consumo local.
Materiales y metodos
Inmunoensayo: Los plasmas deficientes de plaquetas o ffquidos sinoviales se diluyeron 1:100 en tampon de muestra 1X (SB, 20% glicerol, 4,6% Tris, Tris-HC1 0,25 M, 0,01% azul de bromofenol, 10% v/v 2-Mercaptoetanol, pH 6,8) para ensayo de la isoforma de gelsolina, se agito brevemente en vortex y se sometio a ebullicion a 100 °C durante 10 minutos. Las muestras (10 jl) se ejecutaron en geles 10% SDS-PAGE (gelelectroforesis de dodecilsulfato sodico poliacrilamida) en un sistema Laemmli modificado. El lisado de plaquetas (2x10A8/ml, 5 j1) pGSN recombinante humana se uso como controles negativos y positivos para pGSN respectivamente. Las protemas se separaron durante 1,5 horas a 120V. Se embebieron membranas Immobilon P (PVDF, 0,45 jm; Millipore Corp., Bedford, MA) en metanol durante 1 minuto y tampon de transferencia (glicina 192 mM, Tris 25 mM, dodecilsulfato sodico 0,1%, metanol 20%) durante 5 minutos, antes de la transferencia. La transferencia se llevo a cabo a un voltaje variable, IA durante 90 minutos. Las membranas se bloquearon durante la noche en PBS que contema 0,05% Tween-20, 5% leche deshidratada desnatada Carnation y 0,05% azida de sodio pH 7,4 a 4°C. Para pGSN, se uso un anticuerpo policlonal espedfico de la isoforma de plasma humano (1:2000, 2h, producido en el laboratorio). Para todas las isoformas de GSN, se uso un anticuerpo monoclonal primario anti-gelsolina 2c4 (1:2500, 2h, producido en el laboratorio). Los anticuerpos secundarios utilizados fueron IgG antirraton de conejo (H+L)-HRP (1:5000, 80 min) y conjugado de IgG antirraton de cabra (H+L)-HRP respectivamente (1:3300, 80 min, Bio-Rad, Hercules, CA). Las membranas se lavaron 3 veces en PBS que contema 0,05% Tween-20 entre las incubaciones.
Se realizo la deteccion de quimioluminiscencia usando el sustrato quimioluminiscente SuperSignal® West Pico para deteccion de HRP (PIERCE, Rockford, IL). Las membranas fueron expuestas a 2 ml de cada disolucion de peroxido estable SuperSignal® West Pico y disolucion de Luminol/Potenciador SuperSignal® West Pico durante 2 minutos. Se expuso peffcula de autorradiograffa HyBlot CL (Denville Scientific, Inc., Metuchen, NJ) a la membrana durante 1 minuto en un cassette de autorradiograffa FBXC 810 (FischerBiotech, Pittsburg, PA). La peffcula se revelo usando un procesador M35A X-OMAT (Kodak). Ejemplo 3: pGSN se reduce en las etapas incipientes de un modelo de raton experimental de artritis septica/septicemia.
Los niveles de pGSN circulante se redujeron tanto durante la infeccion por estreptococos como por estafilococos. Esta reduccion ocurrio durante el transcurso de la enfermedad, comenzando 2 dfas despues de la inoculacion bacteriana en ambos grupos de animales artffticos y septicos. Antes de la inyeccion (dfa 0), el nivel de pGSN promedio de los ratones fue 200 ± 20 mg/l. Alrededor del dfa 2, los niveles de pGSN disminuyeron a 138 ± 16 mg/l para los animales con artritis por Staphylococcus aureus (S. aureus) (7x10A6 cfu/raton), 157 ± 15 mg/l para los animales inyectados con S. aureus septica (3.5x10A7 cfu/raton), y 152 ± 15 mg/l para los animales inyectados con Streptococcus agalactiae (Str. agalactiae) (1x10A7 cfu/raton). Los niveles de pGSN en el dfa 9 fueron 141 ± 21, 151 ± 15 y 124 ± 13 mg/l, respectivamente. Solamente los animales inyectados con bacterias estreptococicas exhibieron mayor disminucion de los niveles de pGSN circulantes en el dfa 9. La reduccion de pGSN no estuvo relacionada con la intensidad de la infeccion, ya que las concentraciones de pGSN despues de la administracion de la dosis septicemica (5 veces mayor que las artffticas), que resultan en mayor mortalidad, no fueron inferiores que aquellas observadas en los ratones con dosis artffticas.
Materiales y metodos
Induccion de artritis y septicemia por S. aureus: Se adquirieron ratas NMRI hembra de 5-6 semanas de vida de ALAB (Estocolmo, Suecia) y se mantuvieron en la instalacion animal del Departamento de Reumatolog^a de la Universidad de Goteborg. Se alojaron 10-11 animales por jaula bajo condiciones estandar de temperatura y luz, y se alimentaron con alimento estandar de laboratorio y agua a voluntad. La cepa S. aureus, LS-1, originalmente aislada 5 de una articulacion inflamada de un raton NZBxW espontaneamente artntico, la cepa Newman, ademas de la cepa Str. agalactiae 6313, un aislamiento clinico perteneciente al serotipo III, se usaron para la induccion de la artritis septica y la septicemia. Las bacterias se mantuvieron congeladas a -20°C, en PBS (cloruro de sodio 0,13 M, fosfato de sodio 10 mM, pH 7,4), que contema 5% BSA y 10% sulfoxido de dimetilo, hasta el uso. Antes de la inyeccion, la disolucion bacteriana se descongelo, se lavo dos veces con PBS y se ajusto con PBS hasta la concentracion 10 deseada. Los ratones recibieron inyecciones en la vena del rabo de una suspension de S. aureus o Str. agalactiae en 0,2 ml de PBS. Se determinaron los recuentos viables en la disolucion remanente para verificar el numero exacto de bacterias inyectadas y presentadas como unidades formadoras de colonias (cfu/ml).
Todos los ratones fueron supervisados individualmente durante el periodo de observacion de 8-9 dfas por evaluacion del aspecto de la articulacion, el peso, el aspecto general, el estado de alerta y las anomalfas de la piel. Se 15 obtuvieron muestras de sangre de la vena del rabo en un tubo esteril sin anticoagulante y se dejaron hasta coagularse durante 6-8 horas. Las muestras se centrifugaron a 3000xg durante 15 min, se dividio el suero en alfcuotas y se mantuvo congelado a -70° C hasta su uso.
Protocolo experimental: Veinte ratones obtuvieron por via intravenosa (i.v.) una dosis septicemica (LS-1, 4x107 cfu/raton, n=10) o artritogenica (7x106 cfu/raton, n=10) de S. aureus. Otros 10 ratones obtuvieron una dosis 20 intravenosa septicemica de Str. agalactiae (1x107 cfu/raton). Los dfas -3, 2, 4, 6 y 9 se tomaron muestras de sangre mediante una incision en la vena del rabo para determinar los niveles de pGSN. El dfa 9 todos los ratones se sacrificaron por dislocacion cervical. Se determino el nivel de pGSN con el mismo metodo que las muestras humanas (ensayo de nucleacion de pireno actina).
Ejemplo 4: Suplementacion de pGSN para demora del desarrollo de artritis en ratones
25 Se llevo a cabo la suplementacion de ratones con gelsolina recombinante durante 7 dfas con un intervalo de 24h comenzando inmediatamente antes de la inoculacion bacteriana (4x107/m1). Cinco ratones recibieron gelsolina y 7 recibieron PBS y se usaron como controles. Durante los primeros 9 dfas de infeccion por estafilococos, no se observo ninguna diferencia en los grupos tratados con gelsolina y en los grupos control con respecto a la perdida de peso, la tasa de supervivencia o el desarrollo de la artritis. No obstante, menos de los ratones tratados con gelsolina 30 desarrollaron artritis el dfa 3 (1 tratado frente a 4 no tratados - Vease la Tabla 1).
Tabla 1. Dinamica de peso, supervivencia y desarrollo de artritis en ratones NMRI infectados por via intravenosa con S. aureus. G = gelsolina en plasma, C = Control.
Dfa 1 Dfa 3 Dfa 5 Dfa 7 Dfa 9 Dfa 28
Gelsolina
31,5g 30,0g 27,2g 25,3g 25,7g 30,8g Peso promedio
Controles PBS
31,2 28,5 27,7 22,9 25,4 32,4 Peso promedio
5G/7C 5G/7C 5G/7C 5G/7C 3G/6C 2G/6C Supervivencia
1G/OC 1 G/4C 2G/4C 3G/4C 2G/1C 2G/2C Artritis
35 Materiales y metodos
Doce ratones recibieron una inyeccion intravenosa (i.v.) de una dosis septicemica de S. aureus (Newman, 4x107 cfu/raton). Cinco ratones recibieron pGSN recombinante humana por via infra-peritoneal (i.p.) durante los dfas 0-7, y los 7 ratones restantes recibieron PBS. Los ratones fueron supervisados individualmente hasta el dfa 28 y se siguieron sus signos de artritis, peso, aspecto general y estado de alerta.
40 La pGSN recombinante se produjo en E. coli, replegada con GS SG, formulada en NaC1 0,1 M y CaCh 1 mM por Biogen-Idec, Inc. (Cambridge, MA) y se mantuvo a -70° C antes del uso. Los ratones recibieron inyecciones de pGSN recombinante i.p. (6 mg/raton) una hora antes de la exposicion bacteriana y continuaron con intervalos de 24 horas (3 mg/raton) durante 7 dfas. Los controles recibieron un volumen correspondiente de PBS.
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Ejemplo 5:
La hipotesis de que la administracion de gelsolina podna impactar en los procesos inflamatorios se ensaya en un modelo de roedor de artritis inducida por colageno (CIA), un modelo autoinmune que se asemeja a la artritis reumatoidea. La CIA es inducible en ratones macho DBA/1 consangumeos cebando por via intradermica colageno heterologo u homologo II (aproximadamente 50 microgramos) en adyuvante completo de Freund y 2 semanas despues reforzando con la misma cantidad de colageno TI en adyuvante incompleto de Freund. La artritis se desarrolla aproximadamente 3 semanas despues de la dosis de cebado y alcanza su punto maximo 8 semanas despues del cebado. Los ratones presentan altos niveles de anticuerpos espedficos de colageno II, celulas T espedficas de colageno II, ademas de signos de inflamacion sistemica (p. ej., produccion de IL-6, TNF etc). Localmente en las articulaciones se observan inmensos infiltrados inflamatorios (que consisten en celulas T, macrofagos, neutrofilos y fibroblastos), ademas de destruccion intensa de cartflago y hueso subcondral. Estas caractensticas imitan bien el proceso observado en artritis reumatoidea humana (Myers et al., Life Sciences 61, pag 1861-1878, 1997). En un ensayo terapeutico, un conjunto de animales de ensayo recibe, por ejemplo, 8 mg de albumina de suero bovino u 8 mg de gelsolina de plasma recombinante humana por via subcutanea una vez, el dfa diez desde el inicio de la terapia (Ix) o tres dosis los dfas 2, 5 y 10 (3x). Se ha observado previamente que esta ruta de administracion y dosis eleva los niveles reducidos de gelsolina al 50% por septicemia hasta la normalidad. Se miden varios parametros de la enfermedad (p. ej., signos y smtomas clmicos, inicio, progresion, gravedad y remision de smtomas). En smtesis, nuestros hallazgos respaldan los dos aspectos de la hipotesis presentada, a saber, que las reducciones en los niveles de gelsolina en el plasma preceden a las manifestaciones de enfermedades inflamatorias tales como artritis reumatoidea, y que el tratamiento sistemico con gelsolina del plasma previene y/o suprime estas manifestaciones. Una correlacion clmica de estas observaciones es que el monitoreo serial de los niveles de gelsolina en el plasma podna convertirse en parte de la estrategia de control de enfermedades inflamatorias tales como la artritis reumatoidea, marcando cuando intensificar la terapia. Otra correlacion es que la elevacion profilactica de los niveles de gelsolina en el plasma podna proteger a los pacientes contra secuelas de inflamacion.
Si bien no se desean influencias de ningun mecanismo o teona particular, se supone que la gelsolina en el plasma disminuye de la sangre durante las enfermedades inflamatorias (como artritis reumatoidea (RA)) y se localiza o afsla en el sitio de lesion/inflamacion (el espacio articular en la artritis reumatoidea). Se cree que la gelsolina en el plasma en el sitio de inflamacion funciona uniendose a los mediadores inflamatorios y previene que causen mas dano, inhibiendo sus acciones sobre los receptores celulares. Esto es respaldado por el hecho de que la gelsolina en el plasma in vitro se une a algunos mediadores inflamatorios tales como acido lipofosfatfdico (LPA), peptido Al3 (Alzheimer) , diadenosina 5',5"1-P1,P3-trifosfato (Ap3A), fibronectina, fibrinogeno y lipopolisacarido (LPS), y reduce ciertas respuestas celulares al factor de activacion de plaquetas (PAF). Ademas, las celulas danadas en la articulacion inflamada liberan actina, y la gelsolina se une a la actina. La gelsolina puede tener una funcion protectora, seccionando actina filamentosa que podna de lo contrario ser toxica. Creemos que la gelsolina posee un efecto antiinflamatorio, pero que cuando la inflamacion es intensa y prolongada como en la RA, la suplementacion de gelsolina podna ser beneficiosa para reducir o tratar la inflamacion. El aislamiento o el reclutamiento de gelsolina hacia el sitio de inflamacion (como el espacio articular en artritis reumatoidea) podna explicar por que se reducen los niveles en el plasma, aunque tambien son posibles otras explicaciones.
Equivalentes
La memoria escrita precedente se considera suficiente para permitir que el experto en la tecnica practique la invencion. La presente invencion no se limita en alcance al ejemplo(s) provisto, ya que el ejemplo(s) esta destinado exclusivamente a ilustrar uno o mas aspectos de la invencion. Otras realizaciones funcionalmente equivalentes se consideran dentro del alcance de la invencion. Diversas modificaciones de la invencion, ademas de aquellas expuestas y descritas en este documento, seran obvias para los expertos en la tecnica a partir de la descripcion anterior. Cada una de las limitaciones de la invencion puede abarcar diversas realizaciones de la invencion. Por lo tanto, se anticipa que cada una de las limitaciones de la invencion que implica cualquier elemento o combinacion de elementos puede incluirse en cada aspecto de la invencion. La presente invencion no se limita en su aplicacion a los detalles de construccion ni a la disposicion de los componentes expuestos o ilustrados en los dibujos. La invencion es capaz de aceptar otras realizaciones y de practicarse o llevarse a cabo en diversas formas.
Ademas, las frases y terminos utilizados en el presente documento tienen fines descriptivos y no deben considerarse limitativos. El uso de "que incluye", "que comprende" o "que tiene", "que contiene", "que abarca" y sus variaciones en este documento, tiene como fin abarcar los puntos mencionados y sus equivalentes, asf como tambien puntos adicionales.

Claims (12)

  1. 5
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    REIVINDICACIONES
    1. Un metodo para caracterizar el perfil de riesgo de un sujeto sano de presentar una enfermedad inflamatoria futura, que comprende:
    comparar un nivel de gelsolina en un fluido corporal (por ejemplo sangre, plasma, suero, orina, Ifquido sinovial o fluido alveolar), o tejido (por ejemplo un tejido articular, gastrointestinal, tiroideo, adrenergico, vascular, pulmonar, renal, cardfaco, dermico, ocular, cerebral, pancreatico, hepatico, nervioso o muscular) obtenido del sujeto hasta un valor predeterminado (preferiblemente de aproximadamente 250 mg/l de plasma o menos), y
    caracterizar el perfil de riesgo del sujeto de presentar una enfermedad inflamatoria en funcion del nivel de gelsolina en comparacion con el valor predeterminado, en donde un nivel de gelsolina en o debajo del nivel predeterminado es indicativo de que el sujeto presenta un riesgo elevado de padecer la enfermedad inflamatoria, y en donde un nivel de gelsolina en o encima del valor predeterminado es indicativo de que el sujeto no presenta un riesgo elevado de padecer la enfermedad inflamatoria,
    en donde el sujeto no presenta signos ni smtomas de una infeccion, septicemia o trastorno relacionado con actina.
  2. 2. El metodo segun la reivindicacion 1, en donde la enfermedad inflamatoria es artritis, artritis reumatoidea, asma, enfermedad inflamatoria de los intestinos (enfermedad de Crohn o colitis ulcerosa), enfermedad pulmonar obstructiva cronica (EPOC), rinitis alergica, vasculitis (poliarteritis nodosa, arteritis temporal, granulomatosis de Wegener, arteritis de Takayasu o smdrome de Behcet), neuropatfa inflamatoria, psoriasis, lupus eritematoso sistemico (SLE), tiroiditis cronica, tiroiditis de Hashimoto, enfermedad de Addison, polimialgia reumatica, smdrome de Sjogren o smdrome de Churg-Strauss.
  3. 3. El metodo segun la reivindicacion 1, que ademas comprende realizar una o mas pruebas para evaluar la enfermedad inflamatoria, preferiblemente en donde la prueba consiste en medir un nivel de un marcador de inflamacion en el sujeto, por ejemplo, en donde el marcador de inflamacion es CRP, molecula de adhesion intercelular soluble (sICAM-1), ICAM 3, BL-CAM, LFA-2, VCAM-I, NCAM, PECAM, fibrinogeno, amiloide del suero A (SAA), fosfolipasa asociada a lipoprotemas A2 (LpPIA2), ligando sCD40 (sCD40L), mieloperoxidasa, Interleucina 6 (lL-6) o interleucina 8 (IL-8).
  4. 4. Un metodo para caracterizar el perfil de riesgo de un sujeto sano de presentar una enfermedad inflamatoria futura, que comprende:
    comparar el nivel de gelsolina en una muestra obtenida de un sujeto con un primer valor predeterminado (preferiblemente aproximadamente 250 mg/l de plasma o menos) para establecer un primer valor de riesgo,
    comparar el nivel de un segundo marcador de inflamacion en una muestra obtenida de un sujeto con un segundo valor predeterminado para establecer un segundo valor de riesgo, y
    caracterizar el perfil de riesgo del sujeto de presentar la enfermedad inflamatoria en funcion del primer valor de riesgo y el segundo valor de riesgo, en donde la combinacion del primer valor de riesgo y el segundo valor de riesgo establece un tercer valor de riesgo diferente de dichos primero y segundo valores de riesgo,
    en donde el sujeto no presenta ningun signo ni smtoma de una infeccion, septicemia o trastorno relacionado con actina.
  5. 5. El metodo segun la reivindicacion 4, en donde el primer valor predeterminado es una pluralidad de intervalos de niveles de gelsolina predeterminados, en donde uno de dicha pluralidad esta debajo de aproximadamente 250 mg/l de plasma y otro de dichos intervalos esta por encima de aproximadamente 250 mg/l de plasma, y en donde dicha etapa de comparacion comprende determinar en cual de dicha pluralidad de intervalos de niveles de gelsolina yace el nivel de gelsolina de dicho sujeto.
  6. 6. Gelsolina, opcionalmente en combinacion con un segundo agente para tratar una enfermedad inflamatoria, para uso en un metodo para tratar a un sujeto que conlleva riesgo de padecer una enfermedad inflamatoria, que preferiblemente se encuentra libre de indicaciones que ameriten tratamiento con gelsolina, preferiblemente en donde la gelsolina es gelsolina plasmatica (pGSN), gelsolina citoplasmica (cGSN), advilina, vilina, capG, protemas flightless, fragmina, severina, adseverina, protovilina o supervilina.
  7. 7. La gelsolina segun la reivindicacion 6, en donde la enfermedad inflamatoria es artritis, artritis reumatoidea, asma, enfermedad inflamatoria de los intestinos (enfermedad de Crohn o colitis ulcerosa), enfermedad pulmonar obstructiva cronica (EPOC), rinitis alergica, vasculitis (poliarteritis nodosa, arteritis temporal, granulomatosis de Wegener, arteritis de Takayasu o smdrome de Behcet), neuropatfa inflamatoria, psoriasis, lupus eritematoso sistemico (SLE), tiroiditis cronica, tiroiditis de Hashimoto, enfermedad de Addison, polimialgia reumatica, smdrome de Sjogren o smdrome de Churg-Strauss.
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  8. 8. La gelsolina segun la reivindicacion 6, en donde el segundo agente para tratar la enfermedad inflamatoria es Alclofenac, Alclometasona Dipropionato, Algestona Acetonido, Alfa Amilasa, Amcinafal, Amcinafide, Amfenac Sodico, Hidrocloruro de Amiprilosa, Anakinra, Anirolac, Anitrazafen, Apazona, Balsalazide Disodico, Bendazac, Benoxaprofeno, Hidrocloruro de Bencidamina, Bromelains, Broperamole, Budesonida, Carprofeno, Cicloprofeno, Cintazona, Cliprofeno, Propionato de Clobetasol, Butirato de Clobetasona, Clopirac, Propionato de Cloticasona, Acetato de Cormetasona, Cortodoxona, inhibidor de Ciclooxigenasa-2 (COX-2), Deflazacort, Desonida, Desoximetasona, Dipropionato de Dexametasona, Diclofenac Potasico, Diclofenac Sodico, Diacetato de Diflorasona, Diflumidona Sodica, Diflunisal, Difluprednato, Diftalona, Dimetil Sulfoxido, Drocinonida, Endrisona, Enlimomab, Enolicam Sodico, Epirizol, Etodolac, Etofenamato, Felbinac, Fenamol, Fenbufen, Fenclofenac, Fenclorac, Fendosal, Fenpipalone, Fentiazac, Flazalone, Fluazacort, Acido Flufenamico, Flumizol, Acetato de Flunisolida, Flunixin, Flunixin Meglumina, Fluocortin Butilo, Acetato de Fluorometolona, Fluquazona, Flurbiprofen, Fluretofen, Propionato de Fluticasona, Furaprofeno, Furobufeno, Halcinonida, Propionato de Halobetasol, Acetato de Halopredona, Ibufenac, Ibuprofeno, Ibuprofeno Aluminio, Ibuprofeno Piconol, Ilonidap, Indometacina, Indometacina Sodica, Indoprofeno, Indoxol, Intrazol, Acetato de Isoflupredona, Isoxepac, Isoxicam, Cetoprofeno, Hidrocloruro de Lofemizol, Lornoxicam, Etabonato de Loteprednol, Meclofenamato Sodico, Acido Meclofenamico, Dibutirato de Meclorisona, Acido Mefenamico, Mesalamina, Meseclazona, Metilprednisolona Suleptanato, Morniflumato, Nabumetona, Naproxeno, Naproxeno Sodico, Naproxol, Nimazona, Olsalazina Sodica, Orgotema, Orpanoxin, Oxaprozin, Oxifenbutazona, Hidrocloruro de Paranilina, Pentosan Polisulfato Sodico, Fenbutazona Sodica Glicerato, Pirfenidona, Piroxicam, Piroxicam Cinamato, Piroxicam Olamina, Pirprofen, Prednazato, Prifelona, Acido Prodolico, Proquazona, Proxazol, Citrato de Proxazol, Rimexolona, Romazarit, Salcolex, Salnacedin, Salsalato, Cloruro de Sanguinarium, Seclazona, Sermetacin, Sudoxicam, Sulindac, Suprofeno, Talmetacin, Talniflumato, Talosalato, Tebufelona, Tenidap, Tenidap Sodico, Tenoxicam, Tesicam, Tesimide, Tetridamina, Tiopinac, Pivalato de Tixocortol, Tolmetina, Tolmetina Sodica, Triclonide, Triflumidato, Zidometacina o Zomepirac Sodico.
  9. 9. La gelsolina segun la reivindicacion 6, que ademas comprende administrar un segundo agente para tratar la artritis reumatoidea.
  10. 10. La gelsolina segun la reivindicacion 9, en donde el segundo agente para tratar la artritis reumatoidea es hidroxicloroquina (Plaquenil), cloroquina (Aralen), metotrexato, sulfasalazina (Azulfidine), Leflunomida (Arava), azatioprina (Imuran), penicilamina (Cuprimine o Depen), sales de oro (Ridaura o Aurolate), minociclina (Dynacin o Minocin), ciclosporina (Neoral o Sandimmune) ciclofosfamida (Cytoxan o Neosar), Etanercept (Enbrel), Infliximab (Remicade), Anakinra (Kineret) o Adalimumab (Humira).
  11. 11. Gelsolina opcionalmente en combinacion con un segundo agente, para uso en un metodo para tratar a un sujeto en riesgo de una enfermedad inflamatoria que se sabe que presenta un nivel de gelsolina debajo de lo normal; en una cantidad eficaz para reducir el riesgo del sujeto de padecer una enfermedad inflamatoria.
  12. 12. Gelsolina opcionalmente en combinacion con un segundo agente, para uso en un metodo para tratar a un sujeto en riesgo de una enfermedad inflamatoria que se sabe que presenta un nivel de gelsolina debajo del normal; en una cantidad eficaz para elevar el nivel de gelsolina en el sujeto por encima de un valor predeterminado.
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