ES2627745T3

ES2627745T3 - Composiciones antisentido, y procedimientos de fabricación y uso de las mismas

Info

Publication number: ES2627745T3
Application number: ES09756431.4T
Authority: ES
Inventors: Sergio Baroni; Salvatore Bellinvia; Francesca Viti
Original assignee: Nogra Pharma Ltd
Current assignee: Nogra Pharma Ltd
Priority date: 2008-11-13
Filing date: 2009-11-13
Publication date: 2017-07-31
Anticipated expiration: 2029-11-13
Also published as: US20170107520A1; US9314434B2; MX2023008408A; US10272047B2; US20190374472A1; CN102216458A; WO2010054826A1; EP2364360A1; CN102216458B; RS56049B1; RU2011123876A; HRP20170926T1; JP5719776B2; KR101767145B1; JP2014196356A; KR20110086599A; AU2017279624A1; JP2023138750A; EP3121280A1; US20160222383A1

Abstract

Una formulación de comprimido farmacéutico para administración oral de un oligonucleótido antisentido que comprende: una fase intragranular que comprende un oligonucleótido antisentido representado por la SEQ ID NO 1 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo y una carga farmacéuticamente aceptable; una fase extragranular que comprende un desintegrante; y un recubrimiento entérico que comprende un copolímero de etilacrilato-ácido metacrílico, en el que cuando se prueba en un aparato USP/EP Tipo 2 (pala) a 100 rpm y 37°C en un regulador de fosfato con un pH de 6,6 no más de aproximadamente 50 % de la cantidad del oligonucleótido antisentido se libera de la formulación de comprimido farmacéutico durante un periodo de 30 minutos y cuando se prueba en un aparato USP/EP Tipo 2 (pala) a 100 rpm y 37°C en HCl diluido con un pH de 1,0 sustancialmente ninguna cantidad de oligonucleótido antisentido se libera de la formulación de comprimido farmacéutico durante un periodo de 120 minutos, y en el que la formulación suministra el compuesto antisentido al íleon terminal y colón derecho de un paciente.

Description

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

DESCRIPCION

Composiciones antisentido, y procedimientos de fabricacion y uso de las mismas Antecedentes

La colitis ulcerativa y la enfermedad de Crohn, son las formas principales de enfermedades inflamatorias del intestino (IBD) cronicas en humanos. La enfermedad inflamatoria del intestino, es una respuesta inmunitaria inadecuada que ocurre en individuos geneticamente susceptibles como resultado de una interaccion compleja entre factores ambientales, factores microbianos y el sistema intestinal inmunitario. Se ha demostrado que la respuesta inmunitaria excesiva a los antigenos de las mucosas, controlada inadecuadamente por los mecanismos contrarreguladores normales, lleva a inflamacion intestinal cronica.

La enfermedad de Crohn es una enfermedad inflamatoria recurrente cronica del tracto gastrointestinal, caracterizada por inflamacion transmural segmental y cambios granulomatosos. Las presentaciones tipicas incluyen el envolvimiento discontinuo de diversas porciones del tracto gastrointestinal y el desarrollo de complicaciones que incluyen estenosis, abscesos o fistulas. Debido a que su causa es desconocida, el manejo medico de la enfermedad de Crohn es principalmente empirico, y se disena para reducir la inflamacion. La terapia medica incluye corticosteroides, antibioticos, farmacos inmunosupresores y agentes anti-TNFa. Debido a las fallas terapeuticas y a los efectos secundarios serios de las presentes terapias, se necesitan alternativas.

Una funcion importante en la patogenesis de la IBD es desempenada por el TGF-p1, una citoquina multifuncional capaz de regular el crecimiento, diferenciacion y funcion de las celulas inmunitarias y no inmunitarias. Se considera que una capacidad disminuida para montar una respuesta contrarreguladora eficiente del TGF-p1 a los estimulos inflamatorios, sera relevante en la patogenesis de enfermedades tales como la IBD. El TGF-p1 actua como un regulador negativo potente de la inflamacion de las mucosas, y que la inhibicion de su actividad resulta en el desarrollo de colitis que muestra similitudes inmunomorfologicas con la enfermedad de Crohn o colitis ulcerativa.

En el intestino inflamado de los pacientes con IBD, existe una notable sobreexpresion de Smad7 (una proteina que sirve como sustrato para los receptores del TGF-p1) y una reduccion de la fosforilacion de Smad3, una etapa crucial en la transduccion de senales mediada por el TGF-p1. De esta manera, en la IBD, los altos niveles de Smad7 pueden llevar a una senalizacion defectuosa del TGF-p1, que resulta en una sobreexpresion de los genes de las moleculas proinflamatorias, y el TGF-p1 no ejerce su funcion antiinflamatoria.

Los farmacos de oligodesoxinucleotidos antisentido, son cadenas cortas de nucleotidos de ADN que inhiben la traduccion de proteinas uniendose especificamente a un pequeno segmento de ARN mensajero (ARNm) responsable de dirigir la produccion de proteinas que provocan enfermedad. La secuencia de un farmaco antisentido se disena para ser complementaria a su ARNm objetivo de tal manera que, luego de hibridacion, el segmento de doble cadena resultante se reconoce por la celula como anormal y se destruye, previniendo de esta manera la traduccion del mensaje en la proteina producto.

Sin embargo, normalmente se administran productos terapeuticos antisentido por via parenteral, que pueden llevar a reacciones adversas debido a efectos sistemicos. Dicha administracion tambien puede ser incapaz de localizarse en el sitio de tratamiento necesario. Por lo tanto, subsiste la necesidad de una aplicacion tipo topica de tratamientos antisentido para el tratamiento de la IBD y enfermedades relacionadas, utilizando formulaciones basadas en comprimidos.

Resumen

Esta divulgacion se dirige a formulaciones de comprimidos farmaceuticos para administracion oral de oligonucleotidos antisentido como se establece en las reivindicaciones adjuntas.

En una realizacion, se proporciona una formulacion de comprimido farmaceutico para administracion oral de un oligonucleotido antisentido que comprende una fase intragranular, en la que la fase intragranular incluye un oligonucleotido antisentido representado por la SEQ ID NO 1, o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo (tal como una sal de sodio), y una carga farmaceuticamente aceptable, y una fase extragranular, que comprende un desintegrante; y un recubrimiento enterico que comprende un copolimero de etilacrilato-acido metacrilico, en el que cuando se prueba en un aparato USP/EP Tipo 2 (pala) a 100 rpm y 370C en un regulador de fosfato con un pH de 6,6 no mas de aproximadamente 50 % de la cantidad del oligonucleotido antisentido se libera de la formulacion de comprimido farmaceutico durante un periodo de 30 minutos y cuando se prueba en un aparato USP/EP Tipo 2 (pala) a 100 rpm y 370C en HCl diluido con un pH de 1,0 sustancialmente ninguna cantidad de oligonucleotido antisentido se libera de la formulacion de comprimido farmaceutico durante un periodo de 120 minutos, y en el que la formulacion suministra el compuesto antisentido al ileon terminal y colon derecho de un paciente.

Los oligonucleotidos contemplados incluyen aquellos representados por la SEQ ID NO 1, en la que por lo menos uno, o en ciertas realizaciones, todos, los enlaces de internucleotidos son fosforotioatos O,O-ligados.

La presente divulgacion proporciona un comprimido que incluye un oligonucleotido antisentido divulgado, y comprende un recubrimiento enterico. Dicho comprimido incluye una carga, un desintegrante, y puede incluir un 5 lubricante. Por ejemplo, se proporciona en la presente memoria una forma de dosis oral como se establece en las reivindicaciones, tal como un comprimido, que comprende aproximadamente 35 mg a aproximadamente 500 mg del oligonucleotido antisentido, por ejemplo 40 mg de un oligonucleotido representado por la SEQ ID NO 1 o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo.

En una realizacion, se proporciona en la presente memoria un comprimido para uso oral que comprende: 0,5 % a 10 10 % en peso de un oligonucleotido antisentido representado por la SEQ ID NO 1 o una sal farmaceuticamente

aceptable del mismo; 30 % a 50 % en peso de manitol; y 10 % a 30 % en peso de celulosa microcristalina.

Por ejemplo, la divulgacion proporciona un comprimido farmaceuticamente aceptable para uso oral como se establece en las reivindicaciones, que comprende una fase intragranular y fase extragranular, en la que por ejemplo, la fase intragranular comprende 5 % a 10 %, en peso (por ejemplo aproximadamente 8 % en peso) de un 15 oligonucleotido antisentido representado por la SEQ ID NO 1 o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo, aproximadamente 40 % en peso de manitol, aproximadamente 8 % en peso de celulosa microcristalina, aproximadamente 5 % en peso de hidropropilmetil celulosa, y aproximadamente 2 % en peso de glicolato de almidon sodio, y por ejemplo, la fase extragranular comprende aproximadamente 17 % en peso de celulosa microcristalina, aproximadamente 2 % en peso de glicolato de almidon sodio, y aproximadamente 0,4 % en peso de estearato de 20 magnesio, en el que el comprimido comprende un recubrimiento enterico.

Tambien se proporcionan en la presente memoria formulaciones de comprimidos farmaceuticos para uso en el tratamiento de enfermedad de Crohn, colitis ulcerativa, y enfermedad inflamatoria del intestino cronica. La formulacion de comprimido farmaceutico se puede administrar a un paciente en necesidad del mismo. Por ejemplo, luego de administrar por via oral la formulacion de comprimido farmaceutico, a un paciente, la formulacion 25 farmaceutica, sustancialmente suministra el compuesto antisentido al ileon terminal y colon derecho del paciente.

Breve descripcion de los dibujos

La Figura 1 representa la estructura molecular de un compuesto antisentido, divulgado en la presente memoria como AS 1.

La Figura 2 es un esquema del proceso de fabricacion para AS 1.

30 La Figura 3 es una grafica de barras que representa la distribucion de tamano de particula para la concentracion de dosis de 3,5 mg de AS1.

La Figura 4 es una grafica de barras que representa la distribucion de tamano de particula para la concentracion de dosis de 35 mg de AS1.

La Figura 5 es una grafica de barras que representa la distribucion de tamano de particula para la concentracion de 35 dosis de 250 mg de AS1.

La Figura 6 es una grafica lineal que presenta los perfiles de disolucion (como un porcentaje de comprimido disuelto) para tres comprimidos con concentraciones de dosis diferentes de AS1 en tres medios diferentes (pH 1,0, pH 6,6, y pH 7,2).

La Figura 7 representa el perfil de disolucion de un lote descrita en la presente memoria.

40 Descripcion detallada

La presente divulgacion en general se dirige a composiciones farmaceuticas como se establece en las reivindicaciones que incluyen un oligonucleotido antisentido, tal como aquel representado en la Figura 1. Las composiciones contempladas incluyen oligonucleotidos que actuan contra Smad7, y se administran por via oral. Las composiciones divulgadas, cuando se administran por via oral, suministran una cantidad efectiva de un 45 oligonucleotido antisentido al sistema intestinal de un paciente, especificamente una cantidad efectiva de un oligonucleotido antisentido se suministra al ileon terminal y colon derecho de un paciente.

Los oligonucleotidos antisentido contemplados incluyen aquellos que comprenden la SEQ ID NO: 1 GTC* GCC CCT TCT CCC C*GC AGC, en la que C* representa 5-metil-2’-desoxicitidina. En algunas realizaciones, por lo menos uno

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

de los enlaces de internucleotidos de un oligonucleotido antisentido contemplado es un fosforotioato O,O-ligado, por ejemplo, cada uno de los 20 enlaces de internucleotidos de la SEQ ID NO: 1 puede ser un fosforotioato O,O-ligado. En algunas realizaciones, las composiciones contemplados divulgadas en la presente memoria pueden incluir una sal farmaceuticamente aceptable, por ejemplo una sal de sodio del oligonucleotido antisentido de la SEQ ID NO: 1, que opcionalmente puede incluir 1 a 20 enlaces de internucleotidos de fosforotioato O,O-ligado. Las sales contempladas de oligonucleotidos incluyen aquellas que se neutralizan completamente, por ejemplo, cada enlace de fosforotioato se asocia con un ion tal como Na+. Los oligonucleotidos pueden incluir nucleobases de origen natural, azucares, y enlaces de internucleosido covalente (estructura principal) asi como tambien porciones de origen no natural. Un oligonucleotido antisentido de ejemplo, mencionado en la presente memoria como AS 1, se muestra en la Figura 1.

Se contempla en la presente memoria composiciones adecuadas para el suministro oral de un oligonucleotido antisentido, especificamente, comprimidos, que incluyen un recubrimiento enterico, por ejemplo, un recubrimiento gastrorresistente, de tal manera que las composiciones pueden suministrar el compuesto antisentido a, por ejemplo, el ileon terminal y colon derecho de un paciente. Por ejemplo, dicha administracion puede resultar en un efecto topico, al aplicar sustancial y topicamente el compuesto antisentido directamente a una porcion afectada del intestino de un paciente. En algunas realizaciones, dicha administracion puede evitar sustancialmente la absorcion sistemica no deseada del compuesto antisentido.

Por ejemplo, se proporciona un comprimido para administracion oral que comprende granulos (por ejemplo, se forma por lo menos parcialmente de granulos) que incluyen un compuesto antisentido divulgado, por ejemplo, AS1, y excipientes farmaceuticamente aceptables. Dicho comprimido se puede recubrir con un recubrimiento enterico. Los comprimidos contemplados pueden incluir excipientes farmaceuticamente aceptables, tales como cargas, aglutinantes, desintegrantes y/o lubricantes, asi como agentes colorantes, agentes de liberacion, agentes de recubrimiento, edulcorantes, saborizantes tales como gaulteria, naranja, xilitol, sorbitol, fructosa y maltodextrina, y agentes de perfume, conservantes y/o antioxidantes.

Las formulaciones farmaceuticas contempladas en la presente memoria incluyen una fase intragranular que incluye un compuesto antisentido contemplado, por ejemplo, aquel representado en la SEQ ID NO: 1, o una sal farmaceuticamente aceptable, por ejemplo, AS1, y una carga farmaceuticamente aceptable. Por ejemplo, AS1 y una carga se pueden mezclar juntos, con opcionalmente otros excipientes, y formados en granulos. En algunas realizaciones, la fase intragranular se puede formar utilizando granulacion en humedo, por ejemplo, un liquido (por ejemplo, agua) se agrega al compuesto antisentido mezclado y carga, y luego la combinacion se seca, se muele y/o se tamiza para producir granulos. El experto en la tecnica entenderia que se pueden utilizar otros procesos para obtener una fase intragranular.

Las formulaciones contempladas incluyen una fase extragranular, la cual puede incluir uno o mas excipientes farmaceuticamente aceptables, y la cual se puede mezclar con la fase intragranular para formar una formulacion divulgada.

Una formulacion divulgada incluye una fase intragranular que incluye una carga. Ejemplos de cargas incluyen, pero no se limitan a, celulosa, gelatina, fosfato de calcio, lactosa, sacarosa, glucosa, manitol, sorbitol, celulosa microcristalina, pectina, poliacrilatos, dextrosa, acetato de celulosa, hidroxipropilmetilcelulosa, almidon parcialmente pregelatinizado, carbonato de calcio, y otros que incluyen combinaciones de los mismos.

En algunas realizaciones, una formulacion divulgada puede incluir una fase intragranular y/o una fase extragranular que incluye un aglutinante, que puede funcionar generalmente para mantener juntos los ingredientes de la formulacion farmaceutica. Aglutinantes de ejemplo pueden incluir, pero no se limitan a, los siguientes: almidones, azucares, celulosa o celulosa modificada tal como hidroxipropilcelulosa, lactosa, almidon de maiz pregelatinizado, polivinilpirrolidona, hidroxipropil celulosa, hidroxipropilmetil celulosa, hidroxipropil celulosa poco sustituida, carboximetil celulosa de sodio, metil celulosa, etil celulosa, alcoholes de azucar, y otros que incluyen combinaciones de los mismos.

Las formulaciones contempladas, incluyen una fase intragranular y/o una fase extragranular, pueden incluir un desintegrante tal como, pero no limitado a, almidon, celulosa, polivinilpirrolidona entrelazada, almidon glicolato de sodio, carboximetil celulosa de sodio, alginatos, almidon de maiz, croscarmelosa de sodio, carboximetil celulosa entrelazada, hidroxipropil celulosa poco sustituida, acacia, y otros que incluyen combinaciones de los mismos. Por ejemplo, una fase intragranular y/o una fase extragranular, pueden incluir un desintegrante.

En algunas realizaciones, una formulacion contemplada incluye una fase intragranular que comprende un compuesto antisentido divulgado y excipientes seleccionados de: manitol, celulosa microcristalina, hidroxipropilmetilcelulosa y almidon glicolato de sodio, o combinaciones de los mismos, y una fase extragranular que comprende uno o mas de: celulosa microcristalina, almidon glicolato de sodio y estearato de magnesio, o mezclas de los mismos.

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

En algunas realizaciones, una formulacion contemplada puede incluir un lubricante, por ejemplo, una fase extragranular puede contener un lubricante. Los lubricantes incluyen, pero no se limitan a, talco, sflice, grasas, estearina, estearato de magnesio, fosfato de calcio, dioxido de silicio, silicato de calcio, fosfato de calcio, dioxido de silicio coloidal, estearatos metalicos, aceite vegetal hidrogenado, almidon de mafz, benzoato de sodio, polietilenglicoles, acetato de sodio, estearato de calcio, lauril sulfato de sodio, cloruro de sodio, lauril sulfato de magnesio, talco y acido estearico.

La formulacion farmaceutica como se establece en las reivindicaciones comprende un recubrimiento enterico. En general, los recubrimientos entericos crean una barrera para la medicacion oral que controla la ubicacion en la cual el farmaco se absorbe a lo largo del tracto digestivo. Los recubrimientos entericos pueden incluir un polfmero que se desintegra a diferentes velocidades de acuerdo con el pH. Los recubrimientos entericos pueden incluir, por ejemplo, ftalato-acetato de celulosa, copolfmeros de acrilato de metilo-acido metacrflico, succinato acetato de celulosa, ftalato de hidroxipropilmetil celulosa, copolfmeros de metacrilato de metilo-acido metacrflico, copolfmeros de acrilato de etilo-acido metacrflico, copolfmero tipo C de acido metacrflico, ftalato-acetato de polivinilo y ftalato acetato de celulosa.

Recubrimientos entericos de ejemplo incluyen los grados Opadry® AMB, Acryl-EZE®, Eudragit®. En algunas realizaciones, un recubrimiento enterico puede comprender 5 % a l0 %, 5 % a 20 %, 8 a 15 %, 8 % a 18 %, 10 % a 12 %, o 12 a 16 %, de un comprimido en peso contemplado. Los recubrimientos entericos incluyen un copolfmero de acrilato de etilo-acido metacnlico.

Por ejemplo, se proporciona un comprimido que comprende o consiste esencialmente de 0,5 % a 70 %, por ejemplo 0,5 % a 10 %, o 1 % a 20 %, en peso de un oligonucleotido antisentido o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo (por ejemplo AS1). Dicho comprimido puede incluir por ejemplo, 0,5 % a 60 % en peso de manitol, por ejemplo 30 % a 50 % en peso de manitol, por ejemplo aproximadamente 40 % en peso de manitol; y/o 20 % a 40 % en peso de celulosa microcristalina, o 10 % a 30 % en peso de celulosa microcristalina. Por ejemplo, un comprimido divulgado puede incluir una fase intragranular que incluye 30 % a 60 %, por ejemplo 45 % a 65 % en peso, o alternativamente, 5 a 10 % en peso de AS1,30 % a 50 %, o alternativamente, 5 % a 15 % en peso de manitol, 5 % a 15 % celulosa microcristalina, 0 % a 4 %, o 1 % a 7 % hidroxipropilmetilcelulosa, y 0 % a 4 %, por ejemplo 2 % a 4 % glicolato de almidon sodio en peso.

Las formulaciones de ejemplo incluyen formas de dosificacion que incluyen o consisten esencialmente de 35 mg a 500 mg de AS1, por ejemplo, se contemplan en la presente memoria comprimidos que incluyen aproximadamente 35 mg, 40 mg, 50 mg, 60 mg, 70 mg, 80 mg, 90 mg, 100 mg, 150 mg, 200 mg, o 250 mg de AS1.

En una realizacion de ejemplo, se proporciona un comprimido farmaceuticamente aceptable para administracion oral que incluye una fase intragranular que puede incluir aproximadamente 50 % en peso de AS1 (o sal del mismo), aproximadamente 11,5 % en peso de manitol, aproximadamente 10 % en peso de celulosa microcristalina, aproximadamente 3 % en peso de hidropropilmetilcelulosa, y aproximadamente 2,5 % en peso de glicolato de almidon sodio; y una fase extragranular que puede incluir aproximadamente 20 % en peso de celulosa microcristalina, aproximadamente 2,5 % en peso de glicolato de almidon sodio, y aproximadamente 0,5 % en peso de estearato de magnesio. El comprimido tambien incluye un recubrimiento enterico como se establece en las reivindicaciones.

En otra realizacion de ejemplo, se proporciona un comprimido farmaceuticamente aceptable para administracion oral que incluye o consiste esencialmente de: una fase intragranular que puede incluir o consistir esencialmente de 5 % a 10 %, por ejemplo, aproximadamente 8 % en peso de AS1 (por ejemplo en el que los enlaces de internucleotidos con cada uno fosforotioatos O,O-ligados, y/o sales de los mismos, por ejemplo una sal de sodio), aproximadamente 40 % en peso de manitol, aproximadamente 8 % en peso de celulosa microcristalina, aproximadamente 5 % en peso de hidropropilmetilcelulosa, y aproximadamente 2. % en peso de glicolato de almidon sodio; y una fase extragranular que puede incluir aproximadamente 17 % en peso de celulosa microcristalina, aproximadamente 2 % en peso de glicolato de almidon sodio, y aproximadamente 0,4 % en peso de estearato de magnesio.

Los comprimidos divulgados tambien incluyen un recubrimiento enterico como se establece en las reivindicaciones, por ejemplo, un comprimido divulgado puede incluir aproximadamente 13 %, aproximadamente 15 %, 16 %, 17 % en peso de un recubrimiento enterico, por ejemplo AcyrlEZE®.

La velocidad en cuyo punto se disuelve el recubrimiento y se libera el ingrediente activo es su velocidad de disolucion. En una realizacion, un comprimido contemplado puede tener un perfil de disolucion, por ejemplo cuando se prueba en un aparato USP/EP Tipo 2 (pala) a 100 rpm y 370C en un regulador de fosfato con un pH de 7,2, de aproximadamente 50 % a aproximadamente 100 % del oligonucleotido que se libera despues de aproximadamente 120 minutos a aproximadamente 240 minutos, por ejemplo despues de 180 minutos. El comprimido contemplado tiene un perfil de disolucion, cuando se prueba en un aparato USP/EP Tipo 2 (pala) a 100 rpm y 370C en HCl diluido con un pH de 1,0, en el que sustancialmente no se libera nada del oligonucleotido despues de 120 minutos y un perfil de disolucion, cuando se prueba en aparato USP/EP Tipo 2 (pala) a 100 rpm y 370C en un regulador de fosfato

con un pH de 6,6, de 10 % a 30 %, o no mas de aproximadamente 50 %, del oligonucleotido se libera despues de 30 minutos.

Las formulaciones divulgadas cuando se administran por via oral al paciente pueden resultar en minima concentracion en plasma del oligonucleotido en el paciente. Las formulaciones divulgadas, cuando se administran 5 por via oral a un paciente, se suministran de forma topica al ileon terminal y colon derecho de un paciente, por ejemplo a un sitio intestinal afectado o enfermo de un paciente.

Tambien se proporcionan en la presente memoria formulaciones de comprimidos farmaceuticos como se establece en las reivindicaciones para uso en el tratamiento de enfermedad de Crohn, colitis ulcerativa, y/o enfermedad inflamatoria del intestino cronica.

10 Ejemplos

Se pretende que los siguientes ejemplos de ninguna manera limiten el alcance de esta invencion, sino que se proporcionan para ilustrar los procedimientos de la presente invencion. Muchas otras realizaciones de esta invencion seran evidentes para un experto en la tecnica.

Ejemplo 1 - Comprimidos

15 Se prepararon granulos en humedo al suministrar cada componente intragranular en un contenedor adecuado. Todos los materiales intragranulares se tamizaron a traves de un tamiz de 710 pm y se mezclaron en un tazon de procesador de alimentos durante alrededor de 5 minutos. Se agrego lentamente fluido de granulacion acuoso utilizando una jeringa. La masa humeda se hizo pasar a traves de un tamiz manual de 2,00 mm, y se seco en un horno a 40°C por hasta 90 minutos. Despues del secado, los granulos se tamizaron a traves de un tamiz manual de 20 1,00 mm. Se utilizo un mortero y pistilo para reducir el tamano de los granulos gruesos. Los granulos se mezclaron

con los excipientes extragranulares, excepto estearato de magnesio, utilizando un mezclador Turbula durante 10 minutos a 42 rpm. Se agrego estearato de magnesio a la mezcla, y se mezclo adicionalmente durante 2 minutos a 42 rpm. Se comprimieron formulaciones sobre una maquina de compresion de punzon individual Manesty F3. Un diagrama de flujo del procedimiento de fabricacion general para los comprimidos de ASI, se puede ver en la Figura 25 2.

La formulacion de concentracion de dosis de 250 mg a base de manitol elaborada a un tamano de lote de 50 g tiene un contenido de humedad de la mezcla seca de 5,21 % y un contenido de humedad de los granulos secos de 6,42 %. La formulacion de concentracion de dosis de 250 mg a base de manitol tiene 5,0 g de agua agregada, un tiempo de granulacion de 4 minutos, y un tiempo de secado de 60 minutos.

30 La concentracion de dosis de 35 mg a base de manitol elaborada a un tamano de lote de 100 g tiene un contenido de humedad de 2,35 % para los granulos secos, se agrego 28 g de agua, 6 minutos de tiempo de granulacion, y tiene un tiempo de secado de 65 minutos.

Los resultados de IPC de compresion para las formulaciones de concentracion de dosis de 250 mg a base de manitol son como sigue: peso promedio de 453,0 mg, una dureza de 18,0 Kp, un espesor de 3,82 mm, una 35 friabilidad de 0,23 %, y una desintegracion de 17 minutos.

La Tabla 1A incluye composiciones de comprimido para tres concentraciones de dosis: 3,5 mg, 35 mg, y 250 mg. El peso del comprimido fue 500 mg para todas las formulaciones.

Tabla 1A:

Materiales: 3,5 mg ( % p/p) 35 mg ( % p/p) 250 mg ( % p/p)

Intragranular

AS1 activo: 0,7 7,0 50,0

Manitol: 57,8 51,5 11,5

Celulosa microcristalina: 10,0 10,0 10,0

Materiales: 3,5 mg ( % p/p) 35 mg ( % p/p) 250 mg ( % p/p)

Hidroxipropilmetil celulosa: 6,0 6,0 3,0

Glicolato almidon de sodio: 2,5 2,5 2,5

Extragranular

Celulosa microcristalina: 20,0 20,0 20,0

Glicolato almidon de sodio: 2,5 2,5 2,5

Estearato de magnesio: 0,5 0,5 0,5

Total: 100,0 100,0 100,0

Tabla 1B indica compuesto de lotes de nucleo de estas tres concentraciones:

Materiales % p/p: Lote 1 Lote 2 Lote 3

Tamano de lote (unidades): 630 862 376

Intragranular

AS1 activo: 7,0 50,0 62,5 (corregido a la potencia, equivalente a 40 % p/p de AS1 puro)

Manitol: 51,5 11,5 1,7

Celulosa microcristalina: 10,0 10,0 7,3

Hidroxipropilmetil celulosa: 6,0 6,0 3.0

Glicolato almidon de sodio: 2,5 2,5 2,5

Extragranular

Celulosa microcristalina: 20,0 20,0 20,0

Glicolato almidon de sodio: 2,5 2,5 2,5

Estearato de magnesio: 0,5 0,5 0,5

Total: 100,0 100,0 100,0

Ejemplo 2 - Caracterizacion del polvo

5 Se evaluaron formulaciones para distribucion de tamano de partfcula, densidad, fndice de Carr y angulo de reposo. El analisis de particulas indico que las particulas son de tamano mas grande (335 pm) para la formulacion de concentracion de dosis de 3,5 mg, mientras que las formulaciones de concentracion de dosis de 35 mg y 250 mg exhibieron distribucion de tamano de partfcula usual. La Figura 3 representa la distribucion de tamano de partfcula para la concentracion de dosis de 3,5 mg, con la composicion indicada en la tabla 1. La Figura 4 representa la 10 distribucion de tamano de partfcula de la concentracion de dosis de 35 mg, con la composicion indicada en la tabla 1. Por ultimo, la figura 5 representa la distribucion de tamano de partfcula para la concentracion de dosis de 250 mg,

con la composicion como se indica en la tabla 1. La tabla 2 muestra los resultados de la caracterizacion del polvo para las tres concentraciones de dosis.

Tabla 2:

Propiedades: 3,5 mg 35 mg 250 mg

Angulo de reposo (0): 39,5 36,5 35,0

Densidad aparente vertida (g.cm-3): 0,069 0,62 0,63

Densidad aparente (g.cm-3): 0,75 0,72 0,72

Indice de compresibilidad de Carr ( %): 8,0 13,9 12,5

Tamano medio de particula (pm): 335 219 199

5 Ejemplo 3 - Recubrimiento enterico

Se preparo una solucion de recubrimiento al 20 % para recubrimientos Acryl-EZE®. Las cantidades requeridas de agua y Acryl-EZE® se suministraron en contenedores adecuados. Al mezclar, se agrego lentamente Acryl-EZE® al vortice. La dispersion se agito durante 45 minutos y se hizo pasar a traves de un tamiz de 500 pm. La aspersion se continuo hasta que se obtuvo una ganancia en peso de 10 % o 16 %.

10 Ejemplo 4 - Comprimidos de 40 mg

Se representa a continuacion una formula de lote para comprimidos de AS1 de 40 mg:

Materiales: % p/p g

Intragranular

AS1 activo: 8,02 % (*) 188,66

Manitol: 40,47 % (*) 952

Celulosa microcristalina: 8,29 % 195

Hidroxipropilmetilcelulosa: 4,97 % 117

Glicolato almidon de sodio: 2,07 % 48,75

Extragranular

Celulosa microcristalina: 16,58 % 390

Glicolato almidon de sodio: 2,07 % 48,8

Estearato de magnesio: 0,42 % 9,8

Opadry ® AMB: 3,32 % 78

AcrylEZE®: 13,79 % 324,5

Total: 100,0 100,0

Materiales

% p/p

g

* Se aplica correccion a la potencia para tener en cuenta la humedad y pureza API; el manitol se ajusta de acuerdo con lo anterior

Ejemplo 5 - Formulacion de comprimido de 200 mg

Un comprimido de AS1 a concentracion de dosis de 200 mg, se fabrico siguiendo generalmente el procedimiento del Ejemplo 1, como se muestra en la tabla 4. El peso del comprimido para todas las formulaciones fue de 500 mg.

5 Tabla 4: Composicion de la formulacion a concentracion de dosis de 200 mg

Materiales: Concentracion de dosis de 200 mg( % p/p)

Intragranular

AS1 activo: 62,5

Manitol: 1,7

Celulosa microcristalina: 7,3

Hidroxipropilmetil celulosa: 3,0

Glicolato almidon de sodio: 2,5

Extragranular

Celulosa microcristalina: 20,0

Glicolato almidon de sodio: 2,5

Estearato de magnesio: 0,5

Ejemplo 6 - Procedimiento de disolucion de HPLC

Este procedimiento de prueba analitico describe un analisis de disolucion de comprimidos con recubrimiento enterico de AS1 mediante HPLC. Se realiza la disolucion siguiendo el procedimiento de la Farmacopea Europea para formas 10 de dosificacion solidas de liberacion retardada, utilizando el Procedimiento A. El aparato utilizado fue el aparato Ph. Eur./USP 2 (pala).

Las condiciones de disolucion para el HPLC, son las siguientes: 5 el medio consiste de HCl pH 1,0 (120 minutos), pH 6,6 (30 minutos), pH 7,2 (60 minutos); una temperatura de 37°C; una velocidad de 100 rpm; muestra para recirculacion de 7,5 ml, tamano de muestra de 0,8 ml; tiempos de muestreo de 120 minutos en HCl pH 1,0, 15, 30 15 minutos pH 6,6, 15, 30, 45, 60 minutos pH 7,2; y un filtro en linea Disteck de 45 pm.

El medio se ajusto en cada recipiente durante la disolucion en cada estado, como sigue: el volumen inicial fue de 750 ml de HCl pH 1,0; a 120 minutos, se agregaron 200 ml de Na3PO4 0,2 M y 30 ml de Na2HPO4 1.0 M pH 6,7, seguido por el ajuste del pH a pH 6,60±0,05 con NaOH 2,0 M; a 150 minutos, seguido del ajuste del pH a 7,20±0,05 con NaOH 2,0 M.

20 Las condiciones cromatograficas, son las siguientes: una columna analitica para HPLC Dionex, DNAPac-100, 4 x 250 mm; una tasa de flujo de 2,0 ml/min; una temperatura de columna de 80°C; deteccion de luz UV a 260 nm; un volumen de inyeccion de 100 pl; un lavado con aguja de agua; una fase movil de A) acetonitrilo al 10 % en v/v en Tris 100 mM (pH 8,0), y B) acetonitrilo al 10 % en v/v en Tris 100 mM y LiCl 2 M (pH 8,0); un tiempo de ejecucion de HPLC de 15 minutos; y un periodo de elucion de AS1 a aproximadamente 6 minutos. El gradiente se presenta en la 25 tabla 6.

Tabla 6

Tiempo (min): Flujo(ml/min) % de A % de B Curva

Inicial: 2,0 70 30 -

6,0: 2,0 0 100 6

10,0: 2,0 0 100 6

11,0: 2,0 70 30 6

Preparacion de soluciones estandar de trabajo para comprimidos de 35 mg: se colocaron 12,5 mg del estandar de referencia AS1 en un matraz volumetrico de 50 ml, y se disolvieron con agua para elaborar una solucion de 50 ml. 5 Se diluyeron 7 ml de la solucion con agua para elaborar una solucion de 50 ml, proporcionando una concentracion final de AS1 de 0,035 mg/ml.

Preparacion de soluciones estandar de trabajo para comprimidos de 250 mg: se colocaron 12,5 mg de AS1 en un matraz volumetrico de 50 ml, y se disolvieron con agua hasta un volumen de 50 ml, produciendo una concentracion final de AS1 de 0,25 mg/ml.

10 La tabla 5 presenta los resultados de disolucion para los lotes de 35 mg, 250 mg y 200 mg, con un recubrimiento de Acryl-EZE® de ganancia de peso de 12 %. La Figura 6 es una grafica de los perfiles de disolucion para comprimidos con tres tamanos de dosis de formulaciones de AS1 en tres medios diferentes.

Tabla 5

: % de AS1 Disuelto

Tiempo (min):: 120 150 180 210

Medios:: pH 1,0 pH 6,6 pH 7,2 pH 7,2

35 mg (lote 1): 0,0 51,0 80,0 81,0

250 mg (lote 2): 0,0 62,0 78,0 78

200 mg (lote 3): 0,0 46,0 97,0 98,0

15 Se elaboraron comprimidos con 16 % de recubrimiento de Acryl-EZE® utilizando comprimidos como se describio anteriormente en el Lote 1, y se lleva a cabo el recubrimiento final hasta que la ganancia de peso de los comprimidos en el recipiente de recubrimiento sea de 16 % del valor de partida. La Figura 7 representa el perfil de disolucion.

Ejemplo 7 - Dosificacion oral de AS1 in vivo

20 Los objetivos del estudio fueron identificar los efectos potenciales de AS1 sobre los sistemas cardiovascular, respiratorio y nervioso central de monos Cynomolgus no restringidos conscientes, cuando se les administro una dosis individual por administracion oral o administracion intravenosa. La administracion intravenosa en este estudio se incluyo para investigar los efectos potenciales asociados con la exposicion sistemica. La formulacion de dosis intravenosa se administro como polvo en volumen, y para administracion oral como comprimidos con recubrimiento 25 enterico contenidos dentro de capsulas de gelatina. Se asignaron cuatro monos Cynomolgus machos experimentalmente no intactos, de 3,6 a 3,8 anos de edad, y que pesaban 3,4 a 3.9 kg a un grupo individual.

Tabla 7

5

10

15

20

25

30

35

No. de Animales (machos): Dias de dosificacion Nivel de dosis nominal (mg/kg) Volumen de dosis (ml/kg) Concentracion de dosis(mg/ml) Ruta de dosis

4: 1 0 N/A N/A Oral

: 4 ~ 13,4-14,9 N/A N/A Oral

: 7 -87,1-97,1 N/A N/A Oral

: 12 0 1 0 IV

: 14 3 3 IV

: 19 10 10 IV

Todos los niveles de dosis representan la cantidad de ASI, corregida para pureza. Las dosis orales de control fueron dos capsulas que contenian comprimidos de placebo. El nivel de dosis aproximado, logrado por la administracion de dos capsulas, cada una contiene un comprimido con 26.1 mg de AS1 por comprimido (corregido para pureza), y con base en pesos corporales que variaron de 3,5 a 3,9 kg en el dia 4. Nivel de dosis aproximado, logrado por la administracion de dos capsulas, que cada una contiene un comprimido con 169,9 mg de AS1 por comprimido (corregida para pureza), y con base en pesos corporales que variaron de 3,5 a 3,9 kg en el dia 4.

Las muestras de sangre para analisis toxicocinetico, se recolectaron para preestudio y 1 y 6 horas despues de dosis para dosis orales, y 5 minutos, 1 y 6 horas despues de dosis para dosis intravenosas. Las muestras se procesaron para plasma bajo condiciones de refrigeracion, y el plasma se almaceno a -70°C hasta su analisis. Las muestras se analizaron utilizando el ensayo de hibridacion especifica de AS1.

En el dia 1, todos los animales recibieron la dosis del articulo de control oral, seguida de dosis de AS1 en los dias 4 y 7 por medio de administracion forzada oral. Para las dosis orales, el placebo y los comprimidos que contenian AS1 fueron contenidos dentro de capsulas de gelatina de tamano adecuado para facilitar la administracion a traves de la ruta oral. En el dia 12, todos los animales recibieron la dosis de control intravenosa (solucion salina regulada con fosfato) por inyeccion de empuje lento, seguida de dosis intravenosas de AS1 en los dias 14 y 19.

Los datos cardiovasculares y datos de temperatura corporal se registraron por medio de telemetria a intervalos frecuentes antes de y durante 24 horas despues de la administracion de cada dosis. Se evaluo la funcion respiratoria mediante medicion de los parametros de gases en sangre, en muestras arteriales recolectadas antes de la dosificacion y 1,6 y 24 horas despues de cada dosis, asi como determinar (visualmente) la frecuencia respiratoria en esos mismos puntos de tiempo. Se evaluo la funcion neurologica al realizar un examen neurologico comprehensivo de todos los animales antes del estudio dentro de aproximadamente 24 horas despues de la finalizacion del periodo de registro mediante telemetria despues de la ultima dosis oral del articulo de prueba, y de nuevo dentro de aproximadamente 24 horas despues de la finalizacion del periodo de registro mediante telemetria despues de la ultima dosis intravenosa. Tambien se observaron los animales para signos clinicos (mortalidad/morbilidad, observaciones secundarias de la jaula, consumo de alimento y peso corporal).

A pesar de un LLOQ muy bajo para el ensayo (0,5 ng/ml), no se detecto AS1 en ninguna muestra en plasma despues de las dosis orales de hasta casi 100 mg/kg. En contraste, las concentraciones maximas medias en plasma despues de inyecciones IV fueron de 28,309 y 180,352 ng/ml para las dosis de 3 y 10 mg/kg, respectivamente. La depuracion de AS1 del plasma despues de dosificacion IC exhibio una cinetica similar a la que se habia reportado para oligonucleotidos estructuralmente relacionados (es decir, una vida media aproximada de 0.5 horas).

Ejemplo 8 - Estudio in vivo de 28 dias de AS1 administrado oralmente

El proposito de este estudio fue evaluar la toxicidad y toxicocinetica potencial de AS1 cuando se administraba una vez al dia oralmente a ratones durante 28 dias, seguido de un periodo de recuperacion de 28 dias. La formulacion de AS1 se preparo como una formulacion que contenia un recubrimiento gastroprotector en la forma de pequenas perlas de AS1 recubiertas que se cubrio sobre perlas inertes que luego se recubrieron con Eudragit® S 100 para imitar las formulaciones orales adecuadas para uso humano. Se utilizaron tres grupos a los que se les administraron diferentes niveles de dosis (30 mg/kg/dia (bajo nivel); 100 mg/kg/dia; 300 mg/kg/dia).

5

10

15

20

25

30

35

No hubo diferencias relacionadas con el genero en los niveles en plasma o tejido. A pesar de un LLOQ muy bajo para la prueba, se detecto AS1 en solo dos muestras en plasma de animales con muy baja dosis (30 mg/kg/dia) recolectadas en el dia 1, y no en cualesquier muestras recolectadas en el dia 28. A mayores niveles de dosis de 100 y 300 mg/kg/dia, el AS1 fue cuantificable en la mayoria de las muestras en plasma, y los niveles estuvieron generalmente relacionados con dosis. Sin embargo, incluso al nivel de dosis mas alto, los niveles en plasma no excedieron 21 ng/ml en ningun animal (en las muestras recolectadas en diversos tiempos entre 0,5 y 24 horas despues de dosis). Las concentraciones de AS1 fueron muy altas en los tejidos gastrointestinales (GI), con concentraciones maximas medias al nivel de dosis mas alto (despues de la primera dosis) de aproximadamente 536, 857, 825, 538, 137 y 127 pg/g de tejido para el intestino grueso, intestino delgado, estomago anterior, estomago glandular, esofago y recto, respectivamente.

La depuracion extensiva de los tejidos del tracto GI fue evidente durante 24 horas despues de la primera dosis. No hubo acumulacion aparente de AS1 con la dosificacion diaria.

Las concentraciones maximas medias en los dos organos principales de absorcion sistemica, el rinon y el higado, despues de la primera dosis de 300 mg/kg, fueron de solo 4,0 y 2,3 pg/gramo, la cual es mas de 100 veces menor que el rango de concentraciones medido en los tejidos GI.

Despues de la dosis mas baja de 30 mg/kg, las concentraciones medias mas altas en el rinon y el higado fueron de solo 0,4 y 0,3 pg/gramo. No hubo evidencia de acumulacion de AS1 en los organos internos durante el periodo de dosificacion de 28 dias.

La exposicion sistemica a AS1 en ratones fue muy baja despues de administracion oral de altas dosis (de hasta 300 mg/kg/dia) de AS1 suministrado en la formulacion gastroprotegida, y no hubo acumulacion en los tejidos GI o tejidos internos cuando se administraron diariamente durante 28 dias consecutivos.

Ejemplo 9 - Efecto terapeutico de AS1 sobre colitis

Para examinar el efecto terapeutico de AS1 sobre el curso de la inflamacion intestinal en el modelo de colitis inducido por TNBS, se trato a ratones con una dosis individual de AS1 o el oligonucleotido sentido Smad7 un dia despues de la administracion intrarrectal de TNBS. Las dosis individuales de 125 o 250 pg/raton mejoraron la perdida de peso y redujeron notablemente las manifestaciones histologicas de severidad de colitis.

El AS1 (dado como una dosis individual de 125 pg un dia despues de induccion de colitis por TNBS), redujo significativamente la produccion colonica de la subunidad p40 monomerica, un componente de las citoquinas IL-12 e IL-23, que demuestran inhibicion de la produccion colonica de estas citoquinas proinflamatorias.

Todas las publicaciones y patentes mencionadas en la presente memoria, que incluyen aquellos elementos enlistados mas adelante, se incorporan en la presente como referencia en su totalidad como si cada publicacion o patente individual se incorporara especificamente e individualmente en la presente como referencia. En caso de conflicto, controlara la presente solicitud, incluyendo cualquier definicion en la misma.

Equivalentes

Aunque se han discutido realizaciones especificas de la invencion objeto, la especificacion anterior es ilustrativa y no restrictiva. Muchas variaciones de la invencion llegaran a ser evidentes para aquellos expertos en la tecnica despues de que revisen esta especificacion. El alcance entero de la invencion se debe determinar con relacion a las reivindicaciones, junto con su alcance completo de equivalentes, y la especificacion, junto con dichas variaciones.

Claims

5

10

15

20

25

30

35

40

REIVINDICACIONES

1. Una formulacion de comprimido farmaceutico para administracion oral de un oligonucleotido antisentido que comprende:

una fase intragranular que comprende un oligonucleotido antisentido representado por la SEQ ID NO 1 o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo y una carga farmaceuticamente aceptable;

una fase extragranular que comprende un desintegrante; y

un recubrimiento enterico que comprende un copolimero de etilacrilato-acido metacrilico, en el que cuando se prueba en un aparato USP/EP Tipo 2 (pala) a 100 rpm y 370C en un regulador de fosfato con un pH de 6,6 no mas de aproximadamente 50 % de la cantidad del oligonucleotido antisentido se libera de la formulacion de comprimido farmaceutico durante un periodo de 30 minutos y cuando se prueba en un aparato USP/EP Tipo 2 (pala) a 100 rpm y 370C en HCl diluido con un pH de 1,0 sustancialmente ninguna cantidad de oligonucleotido antisentido se libera de la formulacion de comprimido farmaceutico durante un periodo de 120 minutos, y

en el que la formulacion suministra el compuesto antisentido al ileon terminal y colon derecho de un paciente.
2. La formulacion de comprimido farmaceutico de la reivindicacion 1, en la que los enlaces de internucleotidos de la SEQ ID NO 1 son fosforotioatos O,O ligados.
3. La formulacion de comprimido farmaceutico de reivindicaciones 1 o 2, en la que el oligonucleotido antisentido es la sal de sodio de la SEQ ID NO 1.
4. La formulacion de comprimido farmaceutico de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en la que la fase intragranular comprende adicionalmente un desintegrante y/o la fase extragranular comprende adicionalmente un lubricante.
5. La formulacion de comprimido farmaceutico de la reivindicacion 4, en la que el lubricante es glicolato de almidon sodio.
6. La formulacion de comprimido farmaceutico de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en la que la carga es manitol, y/o el desintegrante es glicolato de almidon sodio.
7. La formulacion de comprimido farmaceutico de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, en la que la fase intragranular comprende adicionalmente un componente seleccionado de celulosa microcristalina, glicolato de almidon sodio, hidroxipropilmetil celulosa, y mezclas de los mismos y/o la fase extragranular comprende adicionalmente un componente seleccionado de celulosa microcristalina y estearato de magnesio, y mezclas de los mismos.
8. La formulacion de comprimido farmaceutico de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7 en la que dicho recubrimiento enterico tiene 8 % a 18 %, en peso del comprimido.
9. La formulacion de comprimido farmaceutico de la reivindicacion 1 que comprende:

0,5 % a 10 % en peso de un oligonucleotido antisentido representado por la SEQ ID NO 1 o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo;

30 % a 50 % en peso de manitol; y

10 % a 30 % en peso de celulosa microcristalina.
10. La formulacion de comprimido farmaceutico de la reivindicacion 1 que comprende 35 mg a 500 mg de un oligonucleotido antisentido representado por la SEQ ID NO 1 o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo.
11. La formulacion de comprimido farmaceutico de la reivindicacion 1 que comprende: una fase intragranular que comprende:

5 % a 10 % en peso oligonucleotido antisentido representado por la SEQ ID NO 1 o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo;

5

10

15

20

25

aproximadamente 40 % en peso de manitol, aproximadamente 8 % en peso de celulosa microcristalina, aproximadamente 5 % en peso de hidroxipropilmetil celulosa, y aproximadamente 2 % en peso de glicolato de almidon sodio; y una fase extragranular que comprende:

aproximadamente 17 % en peso de celulosa microcristalina, aproximadamente 2 % en peso de glicolato de almidon sodio, y aproximadamente 0,4 % en peso de estearato de magnesio.
12. La formulacion de comprimido farmaceutico de la reivindicacion 10, que tiene aproximadamente 40 mg del oligonucleotido antisentido.
13. La formulacion de comprimido farmaceutico de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 12 para uso en el tratamiento de enfermedad de Crohn, colitis ulcerativa o enfermedad inflamatoria del intestino cronica.
14. La formulacion de comprimido farmaceutico de la reivindicacion 1, en la que la formulacion de comprimido farmaceutico comprende 0,5 % a 70 % en peso de un oligonucleotido antisentido representado por la SEQ ID NO: 1 o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo; 0,5 % a 60 % en peso de manitol; 20 % a 40 % en peso de celulosa microcristalina.
15. La formulacion de comprimido farmaceutico de la reivindicacion 14, en la que la formulacion de comprimido farmaceutico comprende 5 % a 20 % en peso del recubrimiento enterico.
16. La formulacion de comprimido farmaceutico de la reivindicacion 14, en la que la formulacion de comprimido farmaceutico comprende 8 % a 18 % en peso del recubrimiento enterico.
17. La formulacion de comprimido farmaceutico de la reivindicacion 14, en la que la formulacion de comprimido farmaceutico comprende 8 % a 15 % en peso del recubrimiento enterico.
18. La formulacion de comprimido farmaceutico de la reivindicacion 14, en la que la formulacion de comprimido farmaceutico comprende 12 % a 16 % en peso del recubrimiento enterico.
19. La formulacion de comprimido farmaceutico de la reivindicacion 14, en la que la formulacion de comprimido farmaceutico comprende aproximadamente 13 %, aproximadamente 15 %, aproximadamente 16 %, o aproximadamente 17 % en peso del recubrimiento enterico.