ES2611986T3 - Sustrato modificado y procedimiento de producción del mismo - Google Patents
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Abstract
Un procedimiento de producción de un material de base modificado, en el que el material de base que comprende un polímero que contiene grupo(s) éster se irradia con una radiación durante el contacto de dicho material de base con una solución acuosa de un alcohol(es) monohídrico(s) o una solución acuosa de un alcohol(es) que tiene no menos de 2 grupos hidroxilo y que tiene un peso molecular menor de 2000, siendo dicho alcohol que tiene no menos de 2 grupos hidroxilo un monómero o un polímero, y siendo uno que tiene uno o más átomos de carbono entre los átomos de carbono a cada uno de los cuales está unido el grupo hidroxilo en dicho monómero o en cada monómero que constituye dicho polímero, en el que el dicho(s) alcohol(es) se usa(n) como compuesto(s) que proporciona(n) grupo(s) hidrófobo(s), y el(los) grupo(s) hidrófobo(s) se injerta(n) en el polímero que contiene grupo(s) éster en dicho material de base modificado, en el que el porcentaje de grupo(s) hidrófobo(s) con respecto al(a los) grupo(s) éster no es mayor de un 80 % en moles.
Description
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En los casos en los que el material de base fue una película, se lavó la película 3 veces o más con agua en una cantidad de aproximadamente 100 veces el peso de la película por cada lavado. Posteriormente, se sumergió la película en agua pura desaireada.
El material de base modificado sumergido en agua como se ha descrito anteriormente se irradió con rayos-γ a una dosis de 25 kGy a 35 kGy.
En los casos en los que el material de base modificado tras la esterilización por radiación se somete a irradiación con rayos-γ en agua, es preferible llevar a cabo la irradiación con un año a partir de la esterilización. Además, la muestra que se somete al ensayo de adhesión de plaqueta o ensayo de adhesión de fibrinógeno es preferentemente uno que se somete a esterilización en un año a partir del ensayo.
(2) Procedimiento de Ensayo de Adhesión de Plaquetas
Se adhirió una cinta adhesiva de doble cara a un disco de poliestireno (en forma de película) que tenía un diámetro de 18 mm, y se adhirieron también las membranas de fibras huecas. Se cortaron las membranas de fibras huecas con forma semicilíndrica con una cuchilla de borde individual para exponer las superficies internas de las membranas de fibras huecas. En los casos en los que la muestra fue una película, se cortó ésta en un cuadrado con un tamaño de 3 a 5 mm, y se adhirió la película cortada al disco (si hubo alguna mancha, raya, pliegue o similar sobre la superficie de las membranas de fibras huecas o la película, las plaquetas se adhirieron a las misma, de manera que no fue posible obtener una evaluación correcta. De este modo, se debe prestar atención a ello).
Se unión el disco resultante a un tubo Falcon (marca registrada) cortado con forma cilíndrica (diámetro de 18 mm, Nº. 2051), de manera que la superficie sobre la cual se adhirieron las membranas de fibras huecas estuvo ubicada en el interior del cilindro, y el hueco en la parte en la cual se unión el disco se cerró con película de parafina. Tras el lavado del interior del cilindro con solución salina fisiológica, se llenó el interior del cilindro con solución salina fisiológica. Se recogió sangre venosa a partir de un individuo normal, y se añadió a la misma una inyección de heparina de sodio (producida por Ajinomoto) de forma inmediata hasta una concentración de 50 U/ml. Tras descartar la solución salina fisiológica en el cilindro, se colocó 1,0 ml de sangre en el cilindro en 10 minutos desde la recogida de sangre, y se agitó la sangre a 37 ºC durante 1 hora. Posteriormente, se lavaron las membranas de fibras huecas con 10 ml de solución salina fisiológica, y se fijaron los componentes de sangre con solución salina fisiológica que contenía un 2,5 % en volumen de glutaraldehído (producido por Nacalai Tesque), seguido de lavado de las membranas con 20 ml de agua destilada. Se secaron las membranas de fibra huecas lavadas a presión reducida durante 10 horas a temperatura normal a una presión absoluta de 66 Pa. Se adhirió el disco obtenido de este modo a la etapa de un microscopio electrónico de barrida con una cinta adhesiva de doble cara. Posteriormente, se formó una película fina de platino-paladio sobre las superficies de las membranas de fibras huecas o de la película por medio de metalizado por bombardeo para obtener una muestra. Se observaron las superficies internas de las membranas de las fibras huecas o la superficie de la película con un microscopio electrónico de barrido de emisión de campo (S800 producido por Hitachi) con un aumento de 1500, y se contó el número de plaquetas adheridas en un campo visual (4,3 x 103 µm2). Se contó el número de plaquetas adheridas en 10 campos visuales en la parte central de la dirección longitudinal de las fibras huecas o en la parte central de la película, y se definió su media como el número de plaquetas adheridas (plaquetas (4,3 x 103 µm2)). Se observó la parte central debido a que es probable que se forme una agrupación sanguínea en las partes terminales de la dirección longitudinal de las fibras huecas y en las partes periféricas de la película.
En el ensayo de adhesión de plaquetas, se sometieron a ensayo un control positivo y un control negativo en cada experimento con el fin de comprobar si el ensayo se llevaba a cabo de forma apropiada o no. El control positivo es una muestra conocida como material al cual se adhiere un gran número de plaquetas. El control negativo es una muestra conocida como un material al cual únicamente se adhiere un pequeño número de plaquetas. Como control positivo, se emplean membranas de fibras huecas en “Filtryzer BG-1.6U”, un riñón artificial producido por TORAY. Como control negativo, se emplean membranas de fibras huecas en riñón artificial PS-1.6UW producido por Kawasumi Laboratories. En las condiciones experimentales anteriormente descritas, únicamente cuando el número de plaquetas adheridas al control positivo no es menor de 40 (plaquetas/(4,3 x 103 µm2)), y el número de plaquetas adheridas al control negativo no es mayor de 5 (plaquetas/(4,3 x 103 µm2)), se adopta el valor medido. Si el número de plaquetas adheridas al control está fuera del intervalo anteriormente descrito, el ensayo se lleva a cabo de nuevo porque se piensa que la sangre no fue fresca o tuvo lugar una activación excesiva de la misma.
Si el número de plaquetas adheridas no es mayor de 20 (plaquetas/(4,3 x 103 µm2)) en el presente experimento, se piensa que la compatibilidad con la sangre es buena.
- (3)
- Procedimiento para Someter a Ensayo la Adsorción de Fibrinógeno
- (a)
- Preparación de Muestra
Debido a la absorción de fibrinógeno al recipiente, los resultados experimentales fluctúan. Por tanto, tras disolver el material de base modificado objeto de ensayo, la solución resultante se revistió directamente sobre la pared interna de un tubo Eiken (N.º 2, producido por Eiken Kizai).
11
(Tabla 2) Resultados del Ensayo de Adhesión de Plaquetas
- Número de Plaquetas Adheridas
- Ejemplo 9
- Etanol (0,01 mol/l) 0,27
- Ejemplo 10
- 2-propanol (0,01 mol/l) 0,32
- Ejemplo Comparativo 11
- Ninguno (agua) 40,8
- Ejemplo Comparativo 12
- Pirosulfito de sodio (0,01 mol/l) 15,8
17
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-
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