ES2328361T3

ES2328361T3 - Uso de ciclosporinas modificadas para el tratamiento de trastornos por hcv.

Info

Publication number: ES2328361T3
Application number: ES04764762T
Authority: ES
Inventors: Makoto Hijikata; Kunitada Shimotohno; Koichi Watashi
Original assignee: Novartis AG
Current assignee: Novartis AG
Priority date: 2003-09-03
Filing date: 2004-09-02
Publication date: 2009-11-12
Anticipated expiration: 2024-09-02
Also published as: IS8371A; AU2008203031A1; AU2008203031B2; GB0320638D0; BRPI0414062B8; HK1091732A1; US7968518B2; RU2006110533A; PL1663287T3; PT1663287E; AU2004268382A1; TWI342782B; NZ545495A; EP1797892A1; RU2389501C2; MA28032A1; ZA200601550B; MXPA06002394A; BRPI0414062B1; EP1797892B1

Abstract

Uso de una ciclosporina en la preparación de una composición farmacéutica para prevenir o tratar infecciones de hepatitis C o trastornos inducidos por HCV, en el que la ciclosporina (i) se une a ciclofilina recombinante humana con una relación de unión (RU) de menos de 0,7, siendo RU el logaritmo en base 10 de la relación de la IC50 de la ciclosporina a la IC50 de la ciclosporina A, según se mide en una prueba de ELISA competitiva; y (ii) tiene una actividad en la reacción de linfocitos mixtos de no más de 5% de la de la ciclosporina A, en donde la ciclosporina es un compuesto de fórmula Ia en la que W'' es MeBmt, dihidro-MeBmt u 8''-hidroxi-MeBmt; X es alfabu, Val, Thr, Nva u O-metiltreonina (MeOThr); R'' es Sar, (D)-MeSer, (D)-MeAla o (D)-MeSer(Oacetilo); Y'' es MeLeu, gamma-hidroxi-MeLeu, MeVal, MeThr, MeAla, MeaIle o MeaThr, N-etilVal, N-etilIle, N-etilThr, NetilPhe, N-etilTyr o N-etilThr(Oacetilo) Z es Val, Leu, MeVal o MeLeu; y Q'' es MeLeu, gamma-hidroxi-MeLeu o MeAla, o una de sus sales farmacéuticamente aceptables.

Description

Uso de ciclosporinas modificadas para el tratamiento de trastornos por HCV.

La presente invención se refiere a un nuevo uso para ciclosporinas no inmunosupresoras.

Las ciclosporinas comprenden una clase de undecapéptidos poli(metilados en N) cíclicos estructuralmente distintos, que poseen comúnmente actividad farmacológica, en particular inmunosupresora o antiinflamatoria. La primera de las ciclosporinas en ser aislada fue el metabolito fúngico ciclosporina, también conocido como ciclosporina A.

Está bien establecido que la ciclosporina A actúa interfiriendo con el proceso de activación de células T bloqueando la iniciación de la transcripción de IL-2. Se ha observado que la ciclosporina A forma un complejo con una proteína citosólica de 17 kD denominada ciclofilina, que está presente en muchos tipos de células y se ha observado que es idéntica a la peptidil-prolil cis-trans isomerasa, una enzima implicada en el plegamiento de proteínas.

Sin embargo, se ha encontrado que la unión a ciclofilina es un criterio necesario pero no suficiente para una actividad inmunosupresora. El complejo ciclosporina A/ciclofilina también puede estar asociado con la proteína celular denominada calcineurina (CN) que pertenece a la superfamilia de las fosfatasas. Esta unión anula su actividad de fosfatasa, dando como resultado la silenciación del factor de transcripción NF-AT. La inhibición de la ruta de CN/NF-AT es el mecanismo esencial para la inmunosupresión mediada por ciclosporina A.

Se han identificado ciclosporinas que se unen fuertemente a ciclofilina pero no son inmunosupresoras. Se considera que una ciclosporina es no inmunosupresora cuando tiene una actividad en la reacción de linfocitos mixtos (MLR, por sus siglas en inglés) de no más de 5%, preferiblemente no más de 2%, de la ciclosporina A. La reacción de linfocitos mixtos es descrita por T. Meo en "Immunological Methods", L. Lefkovits y B. Peris, Eds., Academic Press, N.Y. pp. 227-239 (1979). Células de bazo (0,5 x 10^{6}) de ratones Balb/c (hembra, 8-10 semanas) se coincuban durante 5 días con 0,5 x 10^{6} células de bazo irradiadas (2000 rad) o tratadas con mitomicina C procedentes de ratones CBA (hembra, 8-10 semanas). Las células alogeneicas irradiadas inducen una respuesta proliferativa en las células de bazo Balb c que puede medirse mediante la incorporación de precursor marcado en el DNA. Puesto que las células estimulantes son irradiadas (o tratadas con mitomicina C), no responden a las células Balb/c con proliferación pero sí retienen su antigenicidad. La IC_{50} encontrada para el compuesto de prueba en la MLR se compara con la encontrada para ciclosporina A en un experimento paralelo. Además, las ciclosporinas no inmunosupresoras carecen de la capacidad para inhibir CN y la ruta de NF-AT aguas abajo.

EP 0 484 281 A1 describe el uso de ciclosporinas no inmunosupresoras en el tratamiento del sida o trastornos relacionados con el sida.

Se ha encontrado ahora sorprendentemente que las ciclosporinas no inmunosupresoras que se unen a ciclofilina tienen un efecto inhibidor sobre el virus de la hepatitis C (HCV, por sus siglas en inglés).

Se ha considerado que la infección persistente por HCV, que se ha identificado como el principal agente causal de la hepatitis no A, no B, está estrechamente relacionada con enfermedades hepáticas tales como hepatitis crónica, cirrosis hepática o carcinoma hepatocelular. El desarrollo de estas enfermedades hepáticas es un problema de salud pública principal. La terapia anti-HCV eficaz se restringe a una terapia con interferón o una combinación de interferón y ribavirina. Sin embargo, puesto que el virus no se elimina de aproximadamente la mitad de los pacientes con HCV tratados con estos agentes conocidos, sigue habiendo una fuerte necesidad de agentes anti-HCV alternativos.

De acuerdo con esto, la presente invención proporciona el uso de una ciclosporina que se une a ciclofilina no inmunosupresora en la prevención o el tratamiento de infecciones de hepatitis C o trastornos inducidos por HCV.

Infecciones de hepatitis C o trastornos inducidos por HCV son, por ejemplo, hepatitis crónica, cirrosis hepática o cáncer hepático, por ejemplo carcinoma hepatocelular. Las ciclosporinas que se unen a ciclofilina no inmunosupresoras también pueden usarse, por ejemplo, como un tratamiento profiláctico de neonatos nacidos de madres infectadas con HCV o de trabajadores sanitarios expuestos al virus, o de receptores de trasplantes, por ejemplo receptores de trasplantes de hígado, para eliminar una posible infección recurrente por HCV después del trasplante.

Se considera que una ciclosporina se une a ciclofilina si se une a ciclofilina recombinante humana al menos una quinta parte tan bien como lo hace la ciclosporina A en la prueba de ELISA competitiva descrita por Quesniaux en Eur. J. Immunol. 1987 17 1359-1365. En esta prueba, la ciclosporina que ha de probarse se añade durante la incubación de ciclofilina con BSA-ciclosporina A revestidas y se calcula la concentración requerida para dar un 50% de inhibición de la reacción de control sin competidor (IC_{50}). Los resultados se expresan como la relación de unión (RU), que es el logaritmo en base 10 de la relación de la IC_{50} del compuesto de prueba y la IC_{50} en una prueba simultánea de la propia ciclosporina A. Así, una RU de 1,0 indica que el compuesto de prueba se une a ciclofilina humana un factor de diez menos bien que lo hace la ciclosporina A, y un valor negativo indica una unión más fuerte que la de la ciclosporina A. Las ciclosporinas activas contra HCV tiene una RU menor de 0,7, preferiblemente igual a o menor de
cero.

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Ejemplos de ciclosporinas que se unen a ciclofilina no inmunosupresoras incluyen, por ejemplo, compuestos de fórmula Ia

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en la que

W' es MeBmt, dihidro-MeBmt u 8'-hidroxi-MeBmt;

X es \alphaAbu, Val, Thr, Nva u O-metiltreonina (MeOThr);

R' es Sar, (D)-MeSer, (D)-MeAla o (D)-MeSer(Oacetilo);

Y' es MeLeu, \gamma-hidroxi-MeLeu, MeVal, MeThr, MeAla, MeaIle o MeaThr, N-etilVal, N-etilIle, N-etilThr, NetilPhe, N-etilTyr o N-etilThr(Oacetilo)

Z es Val, Leu, MeVal o MeLeu; y

Q' es MeLeu, \gamma-hidroxi-MeLeu o MeAla.

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Los grupos W', X, Y', Z, Q' y R' tienen, independientemente, los siguientes significados preferidos:

W' es preferiblemente W'', donde W'' es MeBmt o dihidro-MeBmt;

X es preferiblemente X', donde X' es \alphaAbu o Nva, más preferiblemente X'', donde X'' es \alphaAbu;

R' es preferiblemente R'', donde R'' es Sar;

Y' es preferiblemente Y'', donde Y'' es \gamma-hidroxi-MeLeu, MeVal, MeThr, N-etilIle o N-etilVal;

Z es preferiblemente Z', donde Z' es Val o MeVal; y

Q' es preferiblemente Q'', donde Q'' es MeLeu;

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Ejemplos de compuestos preferidos de Fórmula Ia son, por ejemplo:

a) [dihidro-MeBmt]1-[\gamma-hidroxi-MeLeu]4-ciclosporina; RU* = 0,1; RI<1%

b) [MeVal]4-ciclosporina; RU = 0,1; RI<1%

c) [MeIle]4-ciclosporina; RU =-0,2; RI <1% (ejemplo de referencia)

d) [MeThr]4-ciclosporina;

e) [\gamma-hidroxi-MeLeu]4-ciclosporina; RU = 0,4; RI<1%

f) [Etil-Ile]4-ciclosporina; RU = 0,1; RI <2%

g) [Etil-Val]4-ciclosporina; RU = 0; RI <2%

h) [Nva]2-[\gamma-hidroxi-MeLeu]4-ciclosporina;

i) [\gamma-hidroxi-MeLeu]4-[\gamma-hidroxi-MeLeu]6-ciclosporina;

j) [MeVal]5-ciclosporina; RU = 0,4; RI = 5,3%

k) [Me0Thr]2-[(D)MeAla]3-[MeVal]5-ciclosporina;

j) [8'-hidroxi-MeBmt]'-ciclosporina; RU = 0,35; RI= 1,8%

k) [MeAla]6-ciclosporina; RU = -0,4; RI = 3,2

l) [\gamma-hidroxi-MeLeu]9-ciclosporina; RU = 0,15; RI = 2,9 (ejemplo de referencia) RI = Relación Inmunosupresora, expresada como un porcentaje de la actividad con relación a ciclosporina A.

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Los compuestos de fórmula Ia pueden obtenerse de una variedad de modos, que pueden clasificarse como:

1) Fermentación

2) Biotransformación

3) Derivación

4) Síntesis Parcial

5) Síntesis Total

según se describe, por ejemplo, en EP 0 484 281 A1 o WO 00/01715.

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Por otra parte, se describe lo siguiente:

1.1: Un método para prevenir o tratar infecciones de hepatitis C o trastornos inducidos por HCV en un sujeto que lo necesite, que comprende administrar a dicho sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de una ciclosporina que se une a ciclofilina no inmunosupresora, por ejemplo un compuesto de fórmula Ia.

\quad: De acuerdo con la invención, la ciclosporina que se une a ciclofilina no inmunosupresora puede administrarse en una cantidad eficaz para aliviar o eliminar uno o más de los signos o síntomas de hepatitis C, por ejemplo, eficaz para disminuir el RNA de HCV medido en una muestra de suero de un sujeto.

1.2: Un método para inhibir la replicación de HCV en un medio, que comprende aplicar a este medio una cantidad eficaz de una ciclosporina que se une a ciclofilina no inmunosupresora, por ejemplo un compuesto de fórmula Ia.

1.3: Un método para inhibir la replicación de HCV en un paciente que lo necesite, que comprende administrar a este sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de una ciclosporina que se une a ciclofilina no inmunosupresora, por ejemplo un compuesto de fórmula Ia.

1.4: Un método para prevenir la recaída de infección por HCV en un receptor de trasplante que lo necesite, que comprende administrar a dicho receptor una cantidad terapéuticamente eficaz de una ciclosporina que se une a ciclofilina no inmunosupresora, por ejemplo un compuesto de fórmula Ia.

2.: Uso de una ciclosporina que se une a ciclofilina no inmunosupresora, por ejemplo un compuesto de fórmula Ia, en la preparación de una composición farmacéutica para el uso en cualquier método como los definidos anteriormente.

3.: Una composición farmacéutica para el uso en cualquier método como los definidos anteriormente, que comprende una ciclosporina que se une a ciclofilina no inmunosupresora, por ejemplo un compuesto de fórmula Ia, junto con uno o más diluyentes o portadores farmacéuticamente aceptables para la misma.

La utilidad de las ciclosporinas que se unen a ciclofilina no inmunosupresoras (en lo sucesivo en la presente memoria "ciclosporinas de la invención") para tratar enfermedades y dolencias como las especificadas anteriormente en la presente memoria puede demostrarse en pruebas animales o clínicas estándar, por ejemplo de acuerdo con los métodos descritos posteriormente en la presente memoria.

A.In vitro

Cultivo celular: células Huh-7 y MH-14, células de replicón de HCV, se cultivan en medio de Eagle modificado de Dulbecco (DMEM) con 10% de suero bovino fetal (FBS). Se cultivan células PH5CH8 en una mezcla 1:1 de DMEM y medio F12 suplementado con 100 ng/ml de factor de crecimiento epidérmico, 10 \mug/ml de insulina, 0,36 \mug/ml de hidrocortisona, 5 \mug/ml de transferrina, 5 \mug/ml de ácido linoleico, 20 ng/ml de selenio, 4 \mug/ml de glucagón, 10 ng/ml de prolactina, 10 \mug/ml de gentamicina, 200 \mug/ml de kanamicina y 2% de FBS.

Análisis por inmunotransferencia: El análisis por inmunotransferencia se realiza como se describe por K. Watashi et ál., Virology 2001, 286, 391-402. Los anticuerpos primarios usados en este experimento son anticuerpos anti-NS5A, anti-NS5B y anti-\beta-actina (Sigma).

Análisis por inmunofluorescencia indirecta: El análisis por inmunofluorescencia indirecta se realiza como se describe por K. Watashi, supra. Los anticuerpos primarios usados en este experimento son anticuerpos anti-NS5A y anti-PDI (StressGen).

Análisis por reacción en cadena de la polimerasa (PCR) con transcripción inversa (RT)

RNA total de células cultivadas se aísla con Sepasol-RNA I Super (nacalai tesque) según se recomienda por el fabricante. Se realiza análisis de RT-PCR usando un estuche de PCR de RNA de una etapa (Takara) de acuerdo con las directrices del fabricante. Los cebadores usados para la detección de mRNAs para 2',5'-oligoadenilato sintasa y proteína quinasa dependiente de RNA de doble hebra son 5'-CCGTGAAGTTTGAGGTCCAG-3', 5'-GAC
TAATTCCAAGACCGTCCG-3' y 5'-TGGCCGCTAAACTTGCATATC-3', 5'-GCGAGTGTGCTGGTCACTAAAG-3', respectivamente.

Análisis por transferencia Northern: El análisis por transferencia Nothern se realiza como se describe por H. Kishine et ál., Biochem. Biophys. Res. Commun., 2002, 47, 119-125. La sonda complementaria con la secuencia de NS5B usada en este experimento es descrita por H. Kishine, supra.

Análisis por RT-PCR en tiempo real: La 5'-UTR de RNA genómico de HCV se cuantifica usando el detector de secuencias ABI PRISM 7700 (AppliedBiosystems) según se describe por T. Takenchi et ál., Gastroenterology, 1999, 116, 636-642. Los cebadores directo e inverso usados en este experimento son 5'-CGGGAGAGCCATAGTGG-3' y 5'-AGTACCACAAGGCCTTTCG-3', respectivamente. La sonda fluorogénica es 5'-CTGCGGAACCGGTGAGTA
CAC-3'. Como un control interno, también se cuantifica RNA ribosómico usando TaqMan Ribosomal RNA Control Reagents (Applied Biosystems).

Experimento de infección con HCV in vitro : El experimento de infección con HCV in vitro se realiza esencialmente como se describe por N. Kato et ál., Jpn. J. Cancer Res. 1996, 87, 787-792 y M. Ikada et ál., Virus Res., 1998, 56, 157-167. Células PH5CH8 (1 X 10^{5}) son infectadas con el plasma 1 B-2 (equivalente a 10^{4} a 10^{5} copias de RNA de HCV), que se prepara a partir de un donante de sangre positivo a HCV. A las 24 horas después de la inoculación, las células se lavan tres veces con solución salina tamponada con fosfato (PBS) y se mantienen con medio reciente.

Transfección y ensayo informador: La transfección en células MH-14 y H9 se realiza usando FuGENE 6 (Roche) y Lipofectamine 2000 transfection reagent (Invitrogen), respectivamente, de acuerdo con el protocolo del fabricante. El ensayo informador se realiza como se describe por K. Watashi, supra. Los plásmidos informadores usados en este estudio son pNFATLuc, pAP1-Luc, pNFKB-Luc (PathDetect Reporter System; Stratagene) y pRL-TK (Dual-luciferase reporter assay system; Promega).

Se estudió el efecto de diversas ciclosporinas de la invención sobre la replicación del genoma de HCV usando células MH-14, en las que el replicón subgenómico de HCV que se muestra en la Fig. 1A se replica autónomamente. El tratamiento con una ciclosporina de la invención, por ejemplo [MeIle]4-ciclosporina, por ejemplo a 1 \mug/ml, así como 100 U/ml de IFN\alpha que se usa como control positivo durante 7 días, disminuye la cantidad de proteínas NS5A y NS5B de HCV hasta niveles indetectables mediante análisis de inmunotransferencia. El análisis por inmunofluorescencia indirecta mostraba que la producción de proteína NS5A se reduce en todas las células tratadas con 1 \mug/ml de ciclosporina de la invención, mientras que el nivel de proteína disulfuro isomerasa (PDI), que es un marcador del retículo endoplásmico, como un control interno, no es alterado bajo esta condición. Las ciclosporinas de la invención disminuyen en este ensayo la expresión de proteínas de HCV en células de replicón de HCV.

El RNA de replicón se analiza en células MH-14 tratadas con o sin una ciclosporina de la invención o IFN\alpha durante 7 días mediante análisis por transferencia northern. El tratamiento con, por ejemplo, 1 \mug/ml de ciclosporina de la invención, por ejemplo [MeIle]4-ciclosporina, disminuye la cantidad de RNA del replicón hasta un nivel indetectable. El tratamiento con 100 U/ml de IFN\alpha produce un efecto similar. Además, la valoración se disminuye gradualmente y el nivel de RNA de HCV se reduce hasta aproximadamente 1/400 del original el 7º día. En el caso de un cotratamiento con IFN\alpha, se produce una reducción adicional en cualquier punto examinado (3º, 5º y 7º día) en comparación con el tratamiento simple bien con la ciclosporina o bien con IFN\alpha: el nivel de RNA del replicón en células MH-14 tratadas tanto con la ciclosporina como con el IFN\alpha durante 7 días se disminuye significativamente sobre el de las células tratadas con IFN\alpha solo.

Por otra parte, células PH5CH8 (línea celular de hepatocitos no neoplástica) se tratan con plasma positivo a HCV y subsiguientemente la valoración de genoma de HCV en diversos puntos temporales después de la inoculación se cuantifica mediante análisis de RT-PCR en tiempo real. Mientras que la valoración de genoma de RNA de HCV el 5º día después de la inoculación en las células se incrementa aproximadamente 10 veces en comparación con la del 1º día, no se observaba un incremento significativo en la valoración de genoma de RNA de HCV en estos puntos temporales en las células tratadas continuamente con una ciclosporina de la invención, por ejemplo [MeIle]4-ciclosporina, o IFN\alpha. Las ciclosporinas de la invención inhiben la replicación de hepatocitos cultivados infectados con HCV.

Los resultados se muestran en la Fig. 2E, 2F y 2G: se realiza análisis por inmunotransferencia (2E), análisis por inmunofluorescencia indirecta (2F) y análisis por RT-PCR en tiempo real (2G) usando células MH-14 tratadas con [MeIle]4-ciclosporina (\bullet) o una ciclosporina que no se une a ciclofilina (\sqbullet), por ejemplo 6-[ácido [R-(E)]-6,7-dideshidro-N,4-dimetil-3-oxo-L-2-aminooctanoico]-7-L-valina- ciclosporina A. Control en 2E y 2F (1ª fila), sin tratamiento; CysA en 2E, 1 \mug/ml; [MeIle]4-ciclosporina en 2E (\sqbullet) y 2F (\sqbullet), 1 \mug/ml; la ciclosporina que no se une a ciclofilina en 2E (\bullet) y 2F (\bullet), 1 \mug/ml.

B. Comprobación Clínica

Un total de 15 pacientes con infección crónica de hepatitis C se enrolan en un estudio de 2 semanas. Cada paciente recibe un compuesto de fórmula I, por ejemplo [MeIle]4-ciclosporina, en una dosis de 7 a 15 mg/kg p. o. Los niveles en suero de antígenos de hepatitis C se determinan el día 0 y el día 14 en cada paciente.

Una persona que sufre infección de hepatitis C, en particular infección crónica por HCV, puede exhibir uno o más de los siguientes signos o síntomas: (a) ALT elevada, (b) prueba positiva para anticuerpos anti-HCV, (c) presencia de HCV según se demuestra por una prueba positiva para RNA de HCV, (d) estigmas clínicos de enfermedad hepática crónica, (e) daño hepatocelular. Tales criterios no solo pueden usarse para diagnosticar hepatitis C, sino que pueden usarse para evaluar la respuesta de un paciente al tratamiento con fármacos.

Se sabe que la alanina aminotransferasa (ALT) y la aspartato aminotransferasa (AST) séricas elevadas se presentan en la hepatitis C descontrolada, y una respuesta completa al tratamiento se define generalmente como la normalización de estas enzimas séricas, particularmente ALT (Davis et ál., 1989, New Eng. J. Med. 321:1501-1506). ALT es una enzima liberada cuando las células del hígado se destruyen y es sintomática de infección por HCV.

Para seguir el transcurso de la replicación de HCV en sujetos en respuesta a un tratamiento con fármacos, RNA de HCV puede medirse en muestras de suero mediante, por ejemplo, un ensayo de reacción en cadena de la polimerasa "anidada" que usa dos grupos de cebadores derivados de las regiones génicas no estructurales N53 y N54 del genoma de HCV. Farci et ál., 1991, New Eng. J. Med. 325:98-104. Ulrich et ál., 1990, J. Clin. Invest., 86:1609-1614.

Puede usarse un examen histológico de muestras de biopsia de hígado como un segundo criterio para la evaluación. Véase, por ejemplo, Knodell et ál., 1981, Hepatology 1:431-435, cuyo Índice de Activida Histológica (inflamación portal, necrosis erosiva o en puentes, lesión lobular y fibrosis) proporciona un método de puntuación para la actividad de la enfermedad.

Las dosificaciones diarias requeridas para poner en práctica el método de la presente invención variarán dependiendo de, por ejemplo, la ciclosporina que se une a ciclofilina no inmunosupresora empleada, el paciente, el modo de administración, la gravedad de la dolencia que ha de tratarse. Un intervalo de dosificación diaria preferido es de aproximadamente 1 a 50 mg/kg al día como una sola dosis o en dosis divididas. Dosificaciones diarias adecuadas para pacientes son del orden de, por ejemplo, 1 a 20 mg/kg p.o. o i.v. Formas de dosificación unitaria adecuadas para administración oral comprenden de alrededor de 0,25 a 10 mg/kg de ingrediente activo, por ejemplo [MeIle]4-ciclosporina, junto con uno o más diluyentes o portadores farmacéuticamente aceptables para el mismo.

Las ciclosporinas de la invención pueden administrarse mediante cualquier ruta convencional, en particular enteralmente, por ejemplo oralmente, por ejemplo en la forma de soluciones para bebida, comprimidos o cápsulas, o parenteralmente, por ejemplo en la forma de soluciones o suspensiones inyectables. Composiciones farmacéuticas preferidas pueden ser, por ejemplo, las basadas en microemulsiones como las descritas en UK 2.222.770 A.

Las ciclosporinas de la invención pueden administrarse como el único ingrediente o junto con otros fármacos, por ejemplo un fármaco que tenga actividades anti-HCV, por ejemplo un interferón, por ejemplo interferón-oc-2a o interferón-oc-2b, por ejemplo Intron^{R} A, Roferon^{R}, Avonex^{R}, Rebif^{R} o Betaferon^{R}, o un interferón conjugado a un polímero soluble en agua o a albúmina humana, por ejemplo albuferón, un agente antiviral, por ejemplo ribovirina, lamivudina, NV08 o NM283, un inhibidor de los factores codificados por HCV como la proteasa, la helicasa o la RNA polimerasa de NS3/4A, o un profármaco de tal inhibidor, un agente antifibrótico, por ejemplo un derivado de N-fenil-2-pirimidinamina, por ejemplo imatinib, un agente inmunomodulador, por ejemplo ácido micofenólico, una sal o uno de sus profármacos, por ejemplo micofenolato sódico o micofenolato de mofetilo, o un antagonista de receptor de S1P, por ejemplo FTY720 o uno de sus análogos opcionalmente fosforilado, por ejemplo según se describe en EP627406A1, EP778263A1, EP1002792A1, WO02/18395, W002/76995, WO 02/06268, JP2002316985, WO03/29184, W003/29205, W003/62252 y W003/62248.

Se entiende que los conjugados de interferón con un polímero soluble en agua incluyen especialmente conjugados con homopolímeros de poli(óxido de alquileno) tales como polietilenglicol (PEG) o polipropilenglicoles, polioles polioxietilenados, sus copolímeros y sus copolímeros de bloques. Como una alternativa a los polímeros basados en poli(óxido de alquileno), pueden usarse materiales efectivamente no antigénicos tales como dextrano, polivinilpirrolidonas, poliacrilamidas, poli(alcoholes vinílicos), polímeros basados en carbohidratos y similares. Tales conjugados de interferón-polímero se describen en las Patentes de EE. UU. Nº 4.766.106, 4.917.888, la Solicitud de Patente Europea Nº 0 236 987, la Solicitud de Patente Europea Nº 0 510 356 y la Publicación de Solicitud Internacional Nº WO 95/13090. Puesto que la modificación polímera reduce significativamente las respuestas antigénicas, el interferón extraño no necesita ser completamente análogo. El interferón usado para preparar conjugados de polímero puede prepararse a partir de un extracto de mamífero, tal como interferón de ser humano, rumiante o bovino, o producirse recombinantemente. Se prefieren los conjugados de interferón con polietilenglicol, también conocidos como interferones pegilados.

Conjugados especialmente preferidos de interferón son alfa-interferones pegilados, por ejemplo interferón-a-2a pegilado, interferón-a-2b pegilado; interferón de consenso pegilado o producto de interferón-a purificado pegilado. El interferón-a-2a pegilado se describe, por ejemplo, en la Patente Europea 593.868 y está disponible comercialmente, por ejemplo, bajo el nombre comercial PEGASUS (Hoffmann-La Roche). El interferón-a-2b pegilado se describe, por ejemplo, en la Patente Europea 975.369 y está disponible comercialmente, por ejemplo, bajo el nombre comercial PEG-INTRON An (Schering Plough). El interferón de consenso pegilado se describe en WO 96/11953. Los a-interferones pegilados preferidos son interferón-a-2a pegilado e interferón-a-2b pegilado. También se prefiere el interferón de consenso pegilado.

Las dosificaciones diarias con respecto al coagente usado variarán dependiendo de, por ejemplo, el compuesto empleado, el paciente, el modo de administración y la gravedad de la dolencia que ha de tratarse. Por ejemplo, la lamivudina puede administrarse a una dosificación diaria de 100 mg. El interferón pegilado puede administrarse parenteralmente de una a tres veces a la semana, preferiblemente una vez a la semana, a un dosis semanal total que varía de 2 a 10 millones de UI, más preferiblemente de 5 a 10 millones de UI, lo más preferiblemente de 8 a 10 millones de UI.

De acuerdo con lo precedente, la presente invención describe además:

4.: Una combinación farmacéutica que comprende a) un primer agente que es una ciclosporina que se une a ciclofilina no inmunosupresora, por ejemplo un compuesto de fórmula Ia, y b) un coagente, por ejemplo un segundo agente farmacológico como los definidos anteriormente.

5.: Un método como el definido anteriormente que comprende la coadministración, por ejemplo concomitantemente o en secuencia, de una cantidad terapéuticamente eficaz de una ciclosporina que se une a ciclofilina no inmunosupresora, por ejemplo un compuesto de fórmula Ia, y un coagente, por ejemplo un segundo agente farmacológico como los definidos anteriormente.

Se entiende que los términos "coadministración" o "administración combinada" o similares, según se utilizan en la presente memoria, abarcan la administración de los agentes terapéuticos seleccionados a un solo paciente, y están destinados a incluir regímenes de tratamiento en los que los agentes no se administran necesariamente mediante la misma ruta de administración o al mismo tiempo.

La administración de una combinación farmacéutica de la invención da como resultado un efecto beneficioso, por ejemplo un efecto terapéutico sinérgico, en comparación con una monoterapia que aplica solo uno de sus ingredientes farmacéuticamente activos. Una combinación sinérgica preferida es una combinación de una ciclosporina que se une a ciclofilina no inmunosupresora con un interferón, opcionalmente conjugado a un polímero.

Una combinación preferida adicional es una combinación de una ciclosporina que se une a ciclofilina no inmunosupresora con ácido micofenólico, una de sus sales o profármacos, o con un agonista de receptor de S1P, por ejemplo FTY720.

[MeVal]4-ciclosporina es una ciclosporina que se une a ciclofilina no inmunosupresora preferida para el uso de acuerdo con la invención.

Claims

1. Uso de una ciclosporina en la preparación de una composición farmacéutica para prevenir o tratar infecciones de hepatitis C o trastornos inducidos por HCV, en el que la ciclosporina (i) se une a ciclofilina recombinante humana con una relación de unión (RU) de menos de 0,7, siendo RU el logaritmo en base 10 de la relación de la IC_{50} de la ciclosporina a la IC_{50} de la ciclosporina A, según se mide en una prueba de ELISA competitiva; y (ii) tiene una actividad en la reacción de linfocitos mixtos de no más de 5% de la de la ciclosporina A, en donde la ciclosporina es un compuesto de fórmula Ia

2

en la que

W' es MeBmt, dihidro-MeBmt u 8'-hidroxi-MeBmt;

X es \alphaAbu, Val, Thr, Nva u O-metiltreonina (MeOThr);

R' es Sar, (D)-MeSer, (D)-MeAla o (D)-MeSer(Oacetilo);

Y' es MeLeu, \gamma-hidroxi-MeLeu, MeVal, MeThr, MeAla, MeaIle o MeaThr, N-etilVal, N-etilIle, N-etilThr, N-etilPhe, N-etilTyr o N-etilThr(Oacetilo)

Z es Val, Leu, MeVal o MeLeu; y

Q' es MeLeu, \gamma-hidroxi-MeLeu o MeAla,

o una de sus sales farmacéuticamente aceptables.

2. Uso de una ciclosporina de acuerdo con la reivindicación 1, en la preparación de una composición farmacéutica para inhibir la replicación de HCV.

3. Uso de una ciclosporina de acuerdo con la reivindicación 1, en la preparación de una composición farmacéutica para prevenir la recaída de la infección por HCV en un receptor de trasplante.

4. Uso de acuerdo con la reivindicación 1, en el que la composición farmacéutica comprende una ciclosporina de acuerdo con la reivindicación 1 junto con uno o más diluyentes o portadores farmacéuticamente aceptables para la misma.

5. Uso de acuerdo con la reivindicación 1, en el que la composición farmacéutica es una combinación farmacéutica que comprende a) un primer agente que es una ciclosporina de acuerdo con la reivindicación 1, y b) un coagente seleccionado de un agente que tiene propiedades anti-HCV, un agente antifibrótico, un agente inmunomodulador o un agonista de receptor de S1P.

6. Uso de acuerdo con la reivindicación 5, en el que dicho coagente es un coagente que tiene propiedades anti-HCV.