ES2306600A1 - Un cultivo puro de la cepa ah2 de la especie bacillus velezensis y producto para el control biologico de hongos fitopatogenos y estimulador del crecimiento vegetal. - Google Patents
Un cultivo puro de la cepa ah2 de la especie bacillus velezensis y producto para el control biologico de hongos fitopatogenos y estimulador del crecimiento vegetal. Download PDFInfo
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Abstract
Un cultivo puro de la cepa AH2 de la especie Bacillus velezensis y producto para el control biológico de hongos fitopatógenos y estimulador del crecimiento vegetal. La invención se refiere a un nuevo producto fungicida para el control biológico de hongos fitopatógenos que contiene un nuevo aislado de Bacillus velezensis cepa AH2, depositada en la Colección Española de Cultivos Tipo (CECT) con la denominación CECT-7221, la cual posee una elevada capacidad antagonista frente a este tipo de patógenos, así como la propiedad de estimular el crecimiento vegetal por diferentes mecanismos. Se describe también un formulado líquido que posee una buena estabilidad a temperatura ambiente y que resulta efectivo en el tratamiento de enfermedades producidas por hongos fitopatógenos y para la estimulación del crecimiento de plantas.
Description
Un cultivo puro de la cepa AH2 de la especie
Bacillus velezensis y producto para el control biológico de
hongos fitopatógenos y estimulador del crecimiento vegetal.
El objeto de la presente invención es un
producto para el control biológico de hongos fitopatógenos,
constituido por células viables de un nuevo aislado de Bacillus
velezensis (Ruiz-García y col., 2005) cepa AH2,
que presenta una elevada actividad antifúngica, particularmente
frente a diferentes hongos fitopatógenos, así como una buena
capacidad para estimular el crecimiento vegetal mediante diferentes
mecanismos. El producto ha sido formulado a partir de un caldo
fermentado, obtenido mediante un cultivo sumergido agitado, el cual
es utilizado directamente en la formulación. Este formulado mantiene
una elevada actividad por al menos seis meses a temperatura
ambiente. Constituye además motivo de la presente invención la cepa
de Bacillus velezensis AH2 empleada en la obtención del
formulado.
Desde hace años, ha sido reconocida la necesidad
e importancia de desarrollar y ampliar los procedimientos de
Producción Integrada y de Agricultura Ecológica, como alternativa
al uso indiscriminado de productos químicos en la agricultura, para
reducir los efectos nocivos de estos últimos. El uso de
biopreparados a partir de microorganismos para el control biológico
de plagas y enfermedades, así como para la fertilización de
cultivos de interés comercial, se presenta como una de las
alternativas más prometedoras dentro de este contexto. Además,
estos biopreparados desempeñan un importante papel en los modelos
de agricultura sostenible debido a la posibilidad de producirse a
partir de recursos renovables (Altieri, 1997).
La ventaja fundamental que tiene esta vía es que
por basarse en mecanismos naturales, se trata de una alternativa
ecológica, respetuosa con el medio ambiente, no contaminante, y que
reduce notablemente los riesgos de adquisición de resistencia por
parte de los patógenos. También, al ser selectivos en su modo de
acción, en general es poco probable que dañen a otros organismos
beneficiosos y en muchos casos benefician al ecosistema y estimulan
el crecimiento vegetal, haciendo más sostenible la producción
agrícola, a la vez que los efectos sobre la salud humana son
mínimos o nulos. Prácticamente todas las plagas y enfermedades son
afectadas en alguna medida por organismos antagonistas. En muchos
casos estos entes biológicos representan el factor más importante
en la regulación de las poblaciones de organismos patógenos en la
naturaleza.
Uno de los grupos más importantes entre los
organismos causantes de enfermedades de las plantas son los hongos
fitopatógenos, que incluye especies de los géneros Botrytis,
Pythium, Rhizoctonia, Alternaria, Fusarium, Phy- tophthora,
Thielaviopsis y Botryosphaeria entre muchos otros, los
cuales pueden sobrevivir durante muchos años en el suelo.
En la búsqueda de agentes para el control
biológico que puedan llegar a tener un interés comercial, hay que
tener en cuenta una serie de factores que estudiados en su conjunto
pueden conducir a un resultado exitoso. Entre estos se podría
mencionar, los entes biológicos a utilizar ya sea independientemente
o en inóculos mixtos, la actividad biológica específica, los
mecanismos de acción frente al patógeno, el sistema de producción
empleado, así como el tipo de formulación y su estabilidad
(Warrior, 2000).
Diversos mecanismos han sido descritos para
explicar el fenómeno de control biológico de estos patógenos, tales
como parasitismo, protección cruzada, antibiosis, competición e
inducción de resistencia, entre otros (Shoda, 2000, Walsh y col.,
2001).
Uno de los nichos ecológicos más estudiados ha
sido la rizosfera, por las relaciones que aquí se establecen entre
plantas y otros organismos (Warrior, 2000). Desde la década de los
80 se ha venido estudiando los microorganismos de la rizosfera,
como posibles sustitutos de los plaguicidas químicos para controlar
una amplia gama de enfermedades. Debido a su abundante distribución
en suelo, su capacidad de colonizar las raíces de las plantas, y de
producir una gran variedad de compuestos beneficiosos, así como
antagonistas de un elevado número de patógenos, estos organismos
resultan muy adecuados para el control biológico de plagas y
enfermedades. (Anjaiah y col., 1998; Hill y col., 1994; Maurhofer y
col., 1991; Rodriguez, y Pfender. 1997; Ross y col., 2000 y
Thomashow y col., 1997).
Entre los grupos microbianos de la rizosfera,
que han sido ampliamente estudiados como agentes de control
biológico de plagas y enfermedades producidas por los
microorganismos, se encuentra el constituido por los hongos. El
mismo ha sido empleado con éxito en el control de hongos patógenos
pertenecientes a los géneros Botrytis, Fusarium, Pythium,
Phytophthora, Rhizoctonia, Sclerotinia, Penicillium, y
Macrophomina y otros (Whipps y Lumsden, 2001, McQuilken y
col., 2001, Jones y Whipps, 2002, entre otros). Dado su metabolismo
tan diverso, este grupo microbiano es capaz de producir una gran
variedad de sustancias útiles para el control biológico. Por estas
razones, el número de cepas y productos a base de hongos para este
fin es cada vez más amplio y variado (Cook y col., 1996, Whipps,
1997, Fravel y col., 1998, EPA USA 2006. US Pat 6,306,386 y US Pat
6,890,530 entre otros). Los mecanismos mediante los cuales se
ejerce el control biológico de las enfermedades son complejos y se
sabe que puede ser el resultado de la adición o sinergia entre
varios de ellos. Entre estos se encuentra la competición por los
nutrientes y el espacio, la capacidad de producir sustancias que
impiden la germinación de la espora (fungistasis) o de producir
muerte celular (antibiosis) y la modificación de la rizosfera
acidificando el suelo, lo que impide la proliferación del patógeno.
El biocontrol también puede resultar de una interacción directa
entre el patógeno y el agente de biocontrol (parasitismo), mediante
enzimas hidrolíticos tales como quitinasas y glucanasas, o la acción
conjunta de éstas y los metabolitos tóxicos (Benitez, y col.,
2004).
El empleo de las rizobacterias promotoras del
crecimiento vegetal (PGPR) para el control biológico de plagas y
enfermedades ha sido también ampliamente estudiado. La
particularidad fundamental de este tipo de agentes es que además de
su efecto protector, poseen una amplia capacidad de colonizar las
raíces de las plantas y un gran poder estimulador del crecimiento
vegetal, lo que une al efecto protector una mejora general de la
sanidad de los cultivos y de esta forma, la planta es también más
resistente al ataque de los patógenos. Este grupo de agentes ha
sido empleado en enfermedades producidas por hongos fitopatógenos
pertenecientes a los géneros Rhizoctonia, Fusarium, Pythium,
Thielaviopsis, Penicillium, Alternaria y Botrytis entre
otros (Emmert y Handelsman, 1999, Ligon, y col., 2000, Cavaglieri, y
col., 2004 y Roberts, y col., 2005, US Pat 7,118,739, entre
otros).
El género Pseudomonas ha sido objeto de
numerosos estudios a lo largo de años por ser uno de los agentes
más activos y dominantes en la rizosfera (Geels y Schippers, 1983,
de Freitas y Germida 1991, de la Cruz y col., 1992, Ligon, y col.,
2000, US Pat 7,087,424). Miembros del género producen diferentes
antibióticos que están íntimamente relacionados con la reducción y
supresión de enfermedades de plantas. Otro factor que juega un papel
fundamental en este fenómeno es la producción de sideróforos, lo
cual contribuye además, al crecimiento de las plantas por la vía
del suministro de hierro. Esta habilidad está muy extendida en
miembros del género Pseudomonas. Sin embargo, la incapacidad
del género para producir estructuras de resistencia durante su
crecimiento, limita en alguna medida la estabilidad y efectividad
de los biopreparados obtenidos con cepas de este género.
El género Bacillus también ha sido
ampliamente estudiado, por presentar grandes potencialidades en
este sentido. Este tiene como características principales el hecho
de estar prácticamente omnipresente en todo tipo de suelos, a lo
cual une una elevada tolerancia térmica, un rápido crecimiento en
medios líquidos y la formación de esporas de resistencia que le
permite sobrevivir durante largos periodos de tiempo. Todo esto le
confiere a las cepas del género un gran potencial como agentes de
biocontrol. La Agencia Norteamericana de Protección del
Medioambiente (EPA) tiene registradas más de diez cepas de
diferentes especies de este género como bioplaguicidas y en
particular biofungicidas (EPA 2006). Los principales mecanismos
asociados al biocontrol de hongos fitopatógenos mediante cepas de
este género, también incluyen la producción de antibióticos,
sideróforos, surfactantes y enzimas hidrolíticos tales como
quitinasas entre otros (Utkhede, 1984, Acea y col., 1988,
Stanghellini y Miller 1996, Shoda 2000, Banat y col., 2000, Zhang,
y col., 2001, Ruiz-García y col., 2005, US Pat
7,087,424 y EP1647188).
Otros géneros bacterianos han sido también
estudiados como agentes para el biocontrol, entre los que se
encuentran los géneros, Enterobacter, Alcaligenes,
Stenotrophomonas y Streptomyces (McClure, y col., 1998,
Brewster y col., 1997, Sabaratnam and Traquair, 2002, Cavaglieri y
col., 2004 y otros).
La forma física de un producto biopreparado es
también un factor de gran importancia y que es necesario tener en
cuenta. Lo que se busca, es que los microorganismos permanezcan
viables en estado inactivo o metabólicamente activos (Fernández,
1995). Este último es uno de los problemas más importantes de la
Biotecnología Agrícola, pues se trata no solamente de que las
células microbianas se mantengan viables durante largos periodos de
tiempo, sino que sean capaces de sobrevivir en el ambiente y
realizar la función para la que fueron destinados.
Cuando se trata de microorganismos esporógenos,
generalmente existe una flexibilidad mayor en cuanto a la
formulación, pues estos organismos pueden sobrevivir durante largos
periodos de tiempo, siendo capaces de germinar y multiplicarse una
vez restablecidas las condiciones favorables. Las técnicas de
inmovilización celular ofrecen toda una serie de ventajas con
respecto a las células libres que las hacen muy atractivas para su
aplicación práctica (Fernández, 1995, Vassileva y col., 1998a y
1998b, entre otros) y muy particularmente para la biotecnología
ambiental. El empleo de células inmovilizadas puede potenciar los
efectos de los microorganismos sin crear problemas de
contaminación, dando lugar a productos muy activos y novedosos
(Bellota y col., 1994, Núñez, 1998, Fonseca, 1998, Pat Esp.
ES2234417).
El objeto de la presente invención, es un
producto para el control biológico de hongos fitopatógenos,
constituido por células viables de un nuevo aislado de Bacillus
velezensis (Ruiz-García y col., 2005) cepa AH2.
Dicha cepa fue aislada de suelos de la Región de Murcia. La
característica fundamental de este aislado, es que presenta una
elevada actividad antifúngica frente a diferentes agentes causantes
de enfermedades de cultivos de interés económico, tales como hongos
de los géneros Botrytis, Pythium, Rhizoctonia, Alternaria,
Fusarium, Phytophthora, Thielaviopsis y Botryosphaeria,
entre otros. Por otra parte, posee la capacidad de estimular el
crecimiento de las plantas por diferentes mecanismos. Dicho
microorganismo ha sido depositados en la Colección Española de
Cultivos Tipo (CECT) que le ha asignado los números de depósito
CECT-7221 La cepa fue identificada por los autores y
se solicitó además la identificación en la CECT. La identificación
de especie en la CECT se llevó a cabo mediante amplificación
directa por PCR del gen del 16S rRNA, secuenciación parcial del
mismo (con lecturas en las dos direcciones) y análisis de las
secuencias, concluyéndose finalmente que se trata de Bacillus
velezensis. El producto, para el control biológico de hongos
fitopatógenos y la estimulación del crecimiento vegetal, consiste
en una formulación líquida que contiene como materia activa
principal, esporas viables del cultivo.
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El microorganismo Bacillus velezensis
cepa AH2 CECT-7221 constituye igualmente objeto de
esta invención. El mismo fue obtenido mediante un procedimiento que
combina el aislamiento en medio Agar Nutritivo (Oxoid), previa
eliminación de células vegetativas, y la selección a través de su
facultad antagonista frente a diferentes hongos fitopatógenos,
teniendo en cuenta además la capacidad para estimular el
crecimiento vegetal (Fernández 2004). La capacidad para inhibir el
crecimiento fúngico fue determinada en bioensayos in vitro
en medio Patata Dextrosa Agar (PDA) (Oxoid). Se seleccionó, mediante
estos bioensayos, la cepa AH2 entre todos los aislados probados,
por su amplia capacidad para inhibir el crecimiento de diferentes
hongos fitopatógenos, tales como especies de los géneros
Botrytis, Pythium, Rhizoctonia, Alternaria, Fusarium,
Phytophthora, Thielaviopsis y Botryosphaeria. El poder
estimulador del crecimiento vegetal fue comprobado mediante
bioensayos de laboratorio, según los métodos descritos por Bashan y
col., 1986, Fernández 1995 y Bashan 1998. A continuación se
comprobó su capacidad para estimular el crecimiento vegetal
mediante bioensayos en invernadero (Villaverde y col 2004). Por otra
parte se comprobó que es capaz de solubilizar fosfatos, de producir
ácido-3-indol acético y otras
sustancias promotoras del crecimiento vegetal, así como sideróforos.
Se determinó también la presencia del enzima
1-aminociclopropano 1-carboxilato
desaminasa, a través del crecimiento en medios con ácido
1-aminociclopropano 1-carboxílico
(ACC) como única fuente de nitrógeno.
Todas estas actividades corroboran sus capacidad de estimular el crecimiento vegetal. (Villaverde y col., 2004).
Todas estas actividades corroboran sus capacidad de estimular el crecimiento vegetal. (Villaverde y col., 2004).
De igual manera, es objeto de esta invención, el
procedimiento de obtención del producto para el tratamiento de
enfermedades producidas por hongos fitopatógenos, el cual consta de
los siguientes pasos:
- a)
- Crecimiento y esporulación de Bacillus velezensis cepa AH2 en un medio de cultivo adecuado mediante fermentación sumergida. En este paso se alcanzan valores de conteos celulares del orden de 10^{9} unidades formadoras de colonias por mililitro (UFC.mL^{-1})
- b)
- Elaboración del formulado mediante la adición, al caldo fermentado con las células, de los otros componentes.
Este producto tiene buena estabilidad y conserva
la viabilidad celular, sin pérdidas significativas, por al menos
seis meses, a temperaturas no mayores de 30ºC. Las actividades
antifúngica y estimuladora del crecimiento vegetal del formulado
han sido comprobadas durante más de seis meses, conservando sus
propiedades iniciales. En su aplicación en ensayos de invernadero ha
demostrado efectividad en el tratamiento de enfermedades producidas
por diferentes hongos fitopatógenos y para la estimulación del
crecimiento vegetal. En los ensayos de campo también ha demostrado
efectividad para el tratamiento de hongos fitopatógenos y
particularmente de Botrytis cinerea.
Se tomó una ampolla del aislado de Bacillus
velezensis cepa AH2 conservado, se sembró en placas de medio
PDA y se incubó a 30ºC durante 72 horas, para su activación. De
esta placa se preparó un inóculo para el fermentador, tomándose una
porción del cultivo con un asa, con la que se inoculó un matraz
Erlenmeyer de 1000 mL, con 100 mL de medio Caldo Patata Dextrosa
(PD) y se incubó en agitación a 30ºC durante 16 h. Al cabo de este
tiempo se inoculó el contenido del matraz en un fermentador Braun
Biotech BIOSTAT® B de 3 L con medio PD, alcanzándose un volumen
final de 2 L. Se llevó a cabo la fermentación durante 24 h a una
velocidad de agitación de 600 r.p.m., una aireación de 1 v.v.m. (2
L.min^{-1}) y una temperatura de 30ºC. El pH se dejó variar
libremente y al final tuvo un valor \leq 5,5. Se alcanzó una
concentración final de 2 x 10^{9} células.mL^{-1} y
aproximadamente un 80% de esporulación. La velocidad específica de
crecimiento en fase exponencial (\mu) fue de 0,40 h^{-1}. La
diferentes fases de crecimiento se de-
sarrollaron durante las primeras 14 h de cultivo y a continuación se produjo el proceso de esporulación hasta las 24 h.
sarrollaron durante las primeras 14 h de cultivo y a continuación se produjo el proceso de esporulación hasta las 24 h.
Una vez terminada la fermentación, se tomaron
los 2 L de caldo fermentado y se procedió a añadir ácidos
propiónico, sórbico y ascórbico al 0,5, 0,1 y 0,2%
respectivamente.
A este producto se le determinó periódicamente
la viabilidad celular en medio Agar Nutritivo, comprobándose que
mantiene más del 80% de viabilidad al cabo de seis meses de
conservación a temperaturas no mayores de 30ºC
Con el producto elaborado siguiendo este esquema
de fabricación, se llevaron a cabo todos los ensayos sobre la
capacidad antifúngica y estimuladora del crecimiento vegetal con
resultados muy satisfactorios.
Estos ensayos fueron realizados en placas de
Petri. Se cultivaron los patógenos en placas de PDA por
48-72 horas a una temperatura de 25ºC. A
continuación se tomó una porción de aproximadamente 1 cm diámetro,
la cual fue colocada en el centro de una placa con medio PDA. Dicha
placa fue inoculada en los extremos con Bacillus velezensis
cepa AH2 mediante un asa. Posteriormente se incubó por
48-72 horas a 28ºC hasta observar la inhibición. En
el caso del ensayo con Botryosphaeria sp., además se cultivó
también en medio PD agitado, se centrifugó y se añadió el
sobrenadante en pocillos de 1 cm^{2} en la misma placa para
determinar la capacidad antifúngica del caldo fermentado libre de
células.
En la figura 1 se presentan los ensayos de
antagonismo in vitro frente a algunos de los patógenos
probados. Como puede observarse, existe una fuerte actividad
inhibitoria del crecimiento fúngico en cada uno de los hongos
fitopatógenos ensayados.
\global\parskip1.000000\baselineskip
Por otra parte, el ensayo realizado con el
sobrenadante del cultivo en el caso de Botryosphaeria sp.
demuestra que la bacteria posee actividad antifúngica de carácter
exocelular, tal como ocurre con otras muchas cepas del género
Bacillus.
Para comprobar la capacidad de estimular el
crecimiento vegetal, se llevó a cabo un ensayo en plantas de pepino
en condiciones de invernadero experimental en macetas. Como control
positivo se utilizó el producto Bioprón PMC3 de Probelte S.A. dada
su reconocida capacidad de estimular el crecimiento vegetal de
diferentes cultivos.
Los resultados de este ensayo se presentan en la
figura 2.
Como puede observarse en esta figura 2, hubo un
notable incremento tanto en el Peso fresco total, como en el de la
parte verde y el de la raíz. Estos valores aunque menores, no se
diferenciaron estadísticamente con un 95% de confiabilidad con los
obtenidos cuando se usó el Bioprón PMC3, mientras que sí fueron
diferentes, como se observa en la gráfica, de los valores del
control. Estos ensayos fueron realizados en otros cultivos tales
como tomate y lechuga, obteniéndose resultados similares, lo que
permitió comprobar la capacidad estimuladora de crecimiento vegetal
de Bacillus velezensis cepa AH2 aislada en los laboratorios
de investigación de Probelte S.A.
- Referencia del ensayo:
- AFS Tomate Mazarrón 2006
- Nombre producto comercial:
- AFS
- Cultivo:
- Tomate Amadeo (Licopersicon esc. M)
- Condiciones:
- Invernadero de producción, riego localizado
- Marco de plantación:
- 1 m x 0.6 m
- Densidad de plantación
- Aprox. 16600 plantas/ha
- Tipo de suelo:
- Franco arenoso
- Materia activa:
- Bacillus velezensiscepa AH2, 10^{8} UFC/mL
- Uso genérico del producto:
- Fungicida
- Tipo de formulación:
- Líquido soluble
- Modo de aplicación:
- Pulverización foliar
- Patógeno objetivo del ensayo:
- Botrytis cinerea
- Producto de referencia:
- Karbel (Inscrito en el R.O.P.M.F. Nº 23506/14
- \quad
- (Carbendazima 25% + Dietofencarb 25%. 1 g/L de Probelte S.A.)
\vskip1.000000\baselineskip
Tesis a
ensayar
Se realizó un ensayo con un diseño en bloques,
completamente aleatorizado con cuatro repeticiones. El tamaño de la
parcela elemental fue de 15 m^{2} y 60 m^{2} de área total por
cada tratamiento.
Se realizaron 2 aplicaciones durante el ensayo
mediante pulverización foliar, T_{1} y T_{2}, en un volumen de
caldo de 1200 L/ha. El primero, 2,5 meses después de plantado y el
segundo a los 17 días de realizar el primero.
Para realizar la evaluación del ensayo, en la
parcela elemental se contaron el número total de tomates que tiene
cada planta, se anotaron los tomates con Botrytis y se le
dió un valor de 1 a 4 dependiendo de la intensidad del ataque del
patógeno y a partir de aquí se realizó el cálculo de la infestación.
Durante el ensayo se llevaron a cabo 3 valoraciones, una valoración
inicial V_{0} y dos valoraciones una vez terminados los
tratamientos, V_{1} a los 7 días de realizado el segundo
tratamiento y V_{2} a los 15 días.
Valoración V_{0}. No se observó síntoma alguno
de la enfermedad
Primera valoración V_{1} (Una semana después
del segundo tratamiento)
Eficacia
ABBOT
Test de Rangos Múltiples de
Duncan
\vskip1.000000\baselineskip
Segunda valoración V_{2} (Quince días después
del segundo tratamiento)
Eficacia
ABBOT
Test de Rangos Múltiples de
Duncan
\vskip1.000000\baselineskip
Como puede observarse, en ambas valoraciones el
tratamiento de AFS a 15 mL/L, produce una protección efectiva y
superior al producto químico comercial usado como control. En todo
momento la infestación se mantuvo bajo control y la efectividad del
producto ensayado ha sido muy elevada. El análisis estadístico
realizado arrojó que no existen diferencias significativas entre los
productos biológicos ensayados y el producto químico control.
- \bullet
- En el ensayo realizado en Mazarrón (Murcia), en pulverización foliar para el control de Botrytis cinerea y observar el comportamiento del mismo en el futuro, AFS ha tenido una muy buena actividad respecto al testigo que no ha recibido ningún tratamiento.
- \bullet
- En la valoración V_{1} se obtuvieron eficacias para la dosis de 15 mL/L del orden del 90%,
- \bullet
- En la valoración V_{2} las eficacias fueron altas por, encima del 70% y en particular, en el caso de AFS por encima del 80%.
- \bullet
- Destacar que el nivel de incidencia del patógeno en el cultivo se mantiene bajo control con los tratamientos realizados.
- \bullet
- Al realizar el análisis de varianza en ambas valoraciones, sobre los parámetros medidos, al realizar el test de rangos múltiples de Duncan, se ha encontrado que no hay diferencias con un 99% de confiabilidad entre las dosificaciones en estudio y sí con respecto al testigo sin tratar.
- \bullet
- No se observó ningún síntoma de toxicidad en el cultivo a la dosis más alta.
- \bullet
- Se concluye por tanto que AFS a dosificación de 15 mL/L es una formulación adecuada para el control de Botrytis cinerea en tomate.
Claims (10)
1. Un cultivo puro de la cepa denominada AH2 de
la especie Bacillus velezensis caracterizada por
presentar una elevada actividad antifúngica y particularmente
frente a hongos fitopatógenos dada su capacidad de producir
sustancias antagonistas, así como una buena capacidad para estimular
el crecimiento vegetal, siendo la cepa capaz de solubilizar
fosfatos, producir ácido 3 indol acético y sideróforos, así como
capaz de crecer en ácido 1-aminociclopropano
1-carboxílico (ACC) como única fuente de nitrógeno,
habiendo sido depositada dicha cepa en la Colección Española de
Cultivos Tipo (CECT) con el número CECT-7221.
2. Un producto para el control biológico de
hongos fitopatógenos y estimulador del crecimiento vegetal
caracterizado por contener células viables de Bacillus
velezensiscepa AH2 (CECT-7221).
3. Un producto para el control biológico de
hongos fitopatógenos y estimulador del crecimiento vegetal según la
reivindicación 2, caracterizado porque las citadas células
viables se encuentran en forma de esporas.
4. Un producto para el control biológico de
hongos fitopatógenos y estimulador del crecimiento vegetal según
las reivindicaciones 2 ó 3, caracterizado porque las células
microbianas son obtenidas mediante un proceso de fermentación
sumergida en la cual se alcanzan concentraciones de esporas mayores
de 10^{9} UFC/mL.
5. Un producto para el control biológico de
hongos fitopatógenos y estimulador del crecimiento vegetal según
las reivindicaciones 2 ó 3, caracterizado por contener una
concentración de esporas total mayor de 10^{9} UFC/mL.
6. Un producto para el control biológico de
hongos fitopatógenos y estimulador del crecimiento vegetal según
una de las reivindicaciones 2 a 5, caracterizado por
contener, además de las células bacterianas, el sobrenadante del
cultivo con materia orgánica y sustancias con actividad antifúngica
entre otras.
7. Un producto para el control biológico de
hongos fitopatógenos y estimulador del crecimiento vegetal según la
reivindicación 2, caracterizado por tener una estabilidad a
temperatura ambiente no menor de 6 meses.
8. Un producto para el control biológico de
hongos fitopatógenos y estimulador del crecimiento vegetal según la
reivindicación 6, caracterizado porque la estabilidad es
garantizada mediante el empleo de sustancias inhibidoras del
crecimiento microbiano.
9. Un producto para el control biológico de
hongos fitopatógenos y estimulador del crecimiento vegetal según
las reivindicaciones 6 a 8, caracterizado porque la
sustancia inhibidora del crecimiento microbiano es seleccionada
entre uno o varios ácidos orgánicos utilizados como
conservantes.
10. Un producto para el control biológico de
hongos fitopatógenos y estimulador del crecimiento vegetal según
las reivindicaciones 2 a 9 caracterizado porque presenta una
elevada actividad al ser aplicado mediante pulverización foliar.
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