ES2283052T3 - Geles de alginato de liberacion sostenida. - Google Patents
Geles de alginato de liberacion sostenida. Download PDFInfo
- Publication number
- ES2283052T3 ES2283052T3 ES98915592T ES98915592T ES2283052T3 ES 2283052 T3 ES2283052 T3 ES 2283052T3 ES 98915592 T ES98915592 T ES 98915592T ES 98915592 T ES98915592 T ES 98915592T ES 2283052 T3 ES2283052 T3 ES 2283052T3
- Authority
- ES
- Spain
- Prior art keywords
- protein
- composition
- mixture
- alginate
- active agent
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Lifetime
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
- A61K9/16—Agglomerates; Granulates; Microbeadlets ; Microspheres; Pellets; Solid products obtained by spray drying, spray freeze drying, spray congealing,(multiple) emulsion solvent evaporation or extraction
- A61K9/1605—Excipients; Inactive ingredients
- A61K9/1629—Organic macromolecular compounds
- A61K9/1652—Polysaccharides, e.g. alginate, cellulose derivatives; Cyclodextrin
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Fats And Perfumes (AREA)
- Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
- Compounds Of Alkaline-Earth Elements, Aluminum Or Rare-Earth Metals (AREA)
- Transition And Organic Metals Composition Catalysts For Addition Polymerization (AREA)
Abstract
La presente invención se refiere a formulaciones que emplean como base geles de alginato de liberación prolongada y los procedimientos correspondientes.
Description
Geles de alginato de liberación sostenida.
La presente invención se refiere a formulaciones
de liberación sostenida que usan perlas de gel de alginato y a los
métodos de ellas.
Con los avances en tecnologías de ingeniería
genética y celular, la disponibilidad de proteínas recombinantes ha
engendrado avances en el uso de proteínas como medicamentos para
aplicaciones terapéuticas. Muchas enfermedades o estados tratados
con proteínas farmacéuticas requieren niveles de proteínas
sostenidos para conseguir el resultado terapéutico más eficaz. Sin
embargo, como muchos productos farmacéuticos proteínas, la vida
media biológica generalmente corta requiere administración
frecuente. Estas inyecciones repetidas se dan a intervalos diversos
que producen niveles de medicación fluctuantes con una carga física
y monetaria significativa sobre los pacientes. Puesto que muchos
estados responden mejor a niveles controlados de un producto
farmacéutico, existe necesidad de liberación controlada de un
medicamento para proporcionar períodos más largos de liberación
constante. Tales medicamentos de liberación sostenida
proporcionarían al paciente no sólo efectos profilácticos,
terapéuticos o diagnósticos aumentados, sino también una disminución
de la frecuencia de inyecciones así como de los costes totales.
Los intentos actuales para sostener niveles de
medicación en seres humanos o animales entre dosis han incluido el
uso de polímeros biodegradables como matrices para controlar la
liberación de medicamentos. Por ejemplo, la Patente de Gran Bretaña
Nº 1.388.580 describe el uso de hidrogeles para liberación sostenida
de insulina. La Patente de los EE.UU. Nº 4.789.550 describe el uso
de microcápsulas de alginato revestidas de polilisina para entrega
de proteína por células vivas encapsulantes. Los intentos de
liberación sostenida han utilizado también composiciones de
polímeros aniónicos o catiónicos rodeadas por polímeros iónicos de
carga opuesta para encapsular células capaces de producir
composiciones activas biológicamente. Patente de los EE.UU. Nº
4.744.933. De igual modo, también se han descrito capas múltiples de
polímeros de reticulación aniónicos o catiónicos como medio para
obtener liberación controlada. Patentes de los EE.UU. Nº 4.690.682 y
4.789.516. Además, intentos adicionales describen el uso de
alginatos solos, o alginatos revestidos con otros polímeros
biodegradables, para liberación controlada de composiciones de
polipéptidos o precipitados catiónicos de ellas. Documentos PCT WO
96/00081, PCT WO 95/29664 y PCT WO 96/03116.
Estos intentos, no obstante, han proporcionado
medios insuficientes para obtener entrega con liberación sostenida
de productos farmacéuticos proteínas deseados. Se sabe generalmente
que el uso de ciertos polímeros biodegradables, por ejemplo,
co-glicólido de poliláctido, en condiciones in
vivo, presentan altos estallidos iniciales de liberación de
medicamento. Johnson, O. et al., Nature Med., 2/7: 795
(1996). Además, se sabe generalmente que proteínas usadas con
formas actuales de preparaciones de liberación sostenida pueden
experimentar desnaturalización y perder su bioactividad por
exposición a los agentes encapsulantes. Tales preparaciones usan
disolventes orgánicos que pueden tener efectos perjudiciales sobre
la proteína de elección. Finalmente, como se discute después, el
uso de alginato solo no ha proporcionado la liberación de proteína
controlada deseada necesaria para resultados terapéuticos
eficaces.
eficaces.
En general, los alginatos son polisacáridos
aniónicos de origen natural muy conocidos, constituidos por ácido
1,4-enlazado-\beta-D-manurónico
y ácido \alpha-L-gulurónico.
Smidsrod, O. et al., Trends in Biotechnology, 8:
71-78 (1990); Aslani, P. et al., J.
Microencapsulation, 13/5: 601-614 (1996). Los
alginatos varían típicamente del 70% de ácido manurónico y 30% de
ácido gulurónico a 30% de ácido manurónico y 70% de ácido
gulurónico. Smidsrod, supra. El ácido algínico es insoluble
en agua, mientras que las sales formadas con iones monovalentes
como sodio, potasio y amonio son solubles en agua. McDowell, R.H.,
"Properties of Alginates" (Londres, Alginate Industries Ltd.,
4ª edición, 1977). Se conocen cationes polivalentes que reaccionan
con alginatos y forman espontáneamente geles.
Los alginatos tienen una amplia variedad de
aplicaciones tales como aditivos de alimentación, adhesivos,
pastillas farmacéuticas y vendajes de heridas. También se han
recomendado alginatos para técnicas de separación de proteínas. Por
ejemplo, Gray, C.J. et al., en Biotechnology and
Bioengineering, 31: 607-612 (1988) atrapaban
insulina en geles de alginato de zinc/calcio para separación de
insulina de otras proteínas del suero.
También se han documentado bien matrices de
alginato para sistemas de entrega de fármacos, véase por ejemplo la
Patente de los EE.UU. nº 4.695.463, que describe un sistema de
entrega de goma de mascar basada en alginato y preparaciones
farmacéuticas. Se han usado perlas de alginato para liberación
controlada de diversas proteínas tales como: receptor de factor de
necrosis de tumores en perlas de catión-alginato
revestidas con policationes, Wee, S.F., Proceed. Intern. Symp.
Control. Rel. Bioact. Mater., 21: 730-31
(1994); factor de crecimiento transformante encapsulado en perlas
de alginato, Puolakkainen, P.A. et al., Gastroenterology,
107: 1319-1326 (1994); factores angiógenos
atrapados en perlas de calcio-alginato, Downs, E.C.
et al., J. of Cellular Physiology, 152:
422-429 (1992); albúmina atrapada en perlas de
alginato de quitosan, Polk, A. et al., J. Pharmaceutical
Sciences, 83/2: 178-185 (1994), o perlas de
alginato de quitosan-calcio revestidas con
polímeros, Okhamafe, A.O. et al., J. Microencapsulation,
13/5: 497-508 (1996); hemoglobulina
encapsulada con perlas de alginato de
quitosan-calcio, Huguet, M.L. et al., J.
Applied Polymer Science, 51: 1427-1432
(1994), Huguet, M.L. et al., Process Biochemistry,
31: 745-751 (1996); e
interleuquina-2 encapsulada en microesferas de
alginato-quitosan, Liu, L.S. et al.,
Proceed. Intern. Symp. Control. Rel. Bioact. Mater, 22:
542-543 (1995).
Los sistemas que usan perlas de gel de alginato,
o perlas de gel de alginato/calcio para atrapar proteínas carecen
de la falta de cualquier efecto de liberación sostenida debido a la
liberación rápida de la proteína de las perlas de alginato. Liu, L.
et al., J. Control Rel., 43: 65-74
(1997). Para evitar tal liberación rápida, un cierto número de los
sistemas anteriores intentan usar revestimientos de polímero de
policatión (por ejemplo, polilisina, quitosan) para retardar la
liberación de las perlas de alginato de proteína Véase, por ejemplo,
Wheatley, M.A. et al., J. Applied Polymer Science,
43: 2123-2135 (1991); Wee, S.F. et
al., supra; Liu, L.S. et al. supra; Wee,
S.F. et al., Controlled Release Society, 22:
566-567 (1995) y Lim et al.,
supra.
Los policationes, tales como polilisina, son
polielectrólitos cargados positivamente que interactúan con las
moléculas de alginato cargadas negativamente para formar complejos
de polielectrólito que actúan como barreras de difusión en la
superficie de la perla. Pueden tener lugar problemas con el uso de
policationes porque: (1) tales formulaciones pueden ser citotóxicas
debido a los policationes (Huguet, M.L. et al., supra;
Zimmermann, Ulrich, Electrophoresis, 13: 269 (1992);
Bergmann, P. et al., Clinical Science, 67: 35 (1984)); (2)
los policationes son propensos a oxidación; (3) las perlas con
revestimientos de policationes tienden a no ser erosionables y
concentrarse en el cuerpo; (4) tales formulaciones se fabrican
mediante procedimientos de revestimiento laboriosos que incluyen
revestimientos múltiples del policatión polilisina (Padol et
al., Proceed. Intern. Symp. Control. Rel. Bioact. Mater,
2: 216 (1986); y (5) las interacciones iónicas entre la
proteína y los policationes pueden producir pérdida de actividad de
la proteína o causar inestabilidad de la proteína.
Por consiguiente, existe la necesidad de
desarrollar formulaciones farmacéuticas que consigan un medio mejor
de liberación sostenida para aplicaciones clínicas. Numerosas
proteínas recombinantes o naturales podrían beneficiarse de la
liberación constante a largo plazo, y proporcionar por ello
resultados clínicos más eficaces.
La presente invención proporciona tales avances.
Las composiciones farmacéuticas de la presente invención son
capaces de proporcionar protección, degradación disminuida y
liberación lenta de proteína con estabilidad y eficacia de la
proteína aumentada. También, las composiciones farmacéuticas de la
presente invención proporcionan un medio simple, rápido y económico
de liberación de proteína recombinante controlada para resultados
profilácticos, terapéuticos o diagnósticos eficaces. Los documentos
WO-A-9008551 y
WO-A-9011757 se refieren a
dispositivos de entrega sostenida.
\vskip1.000000\baselineskip
La presente invención se refiere a formulaciones
de liberación sostenida que usan perlas o partículas de gel de
alginato, y a métodos de ellas según las reivindicaciones. En
particular, la formación de los geles de liberación sostenida
incluye la co-precipitación de perlas de gel de
alginato con un agente activo biológicamente. Este método
proporciona una ventaja para producir una carga eficaz y alta de
agente activo biológicamente dentro del gel de alginato para
entrega de liberación sostenida mientras se consigue protección de
la proteína, degradación disminuida, estabilidad aumentada y
eficacia del agente a entregar.
Por consiguiente, un aspecto de la presente
descripción proporciona una composición de liberación sostenida,
que comprende un polímero hidrófilo; un agente activo
biológicamente; y al menos un agente de precipitación. Durante la
formulación de la composición, el agente activo biológicamente se
co-precipita con el polímero hidrófilo. Además,
pueden añadirse también a la composición agentes de precipitación
adicionales. Según se usa aquí, el término
co-precipitación se refiere al uso de
agente(s) para precipitación del agente activo
biológicamente junto con el polímero hidrófilo para formar una
matriz del polímero precipitado y el agente, por ejemplo, la
formación de las perlas de gel de alginato sería mediante
precipitación. Tal precipitación puede ser simultánea o dentro de
una estrecha proximidad entre ellos. La precipitación de moléculas y
cualesquiera agentes de precipitación relacionados es muy conocida
por los expertos en la técnica.
Otro aspecto proporciona métodos para producir
las composiciones de liberación sostenida de la presente invención.
Comprenden las etapas de disolver un agente activo biológicamente y
un polímero hidrófilo con un disolvente para formar una primera
mezcla; disolver al menos un agente de precipitación en un
disolvente para formar una segunda mezcla; añadir la solución del
agente activo biológicamente y el polímero hidrófilo de la primera
mezcla al agente de precipitación y disolvente de la segunda mezcla;
y co-precipitar el agente activo biológicamente
dentro del polímero hidrófilo. Los presentes métodos incluyen
también el uso de agentes de precipitación adicionales. Además,
también se considera una etapa para aislar la composición de
liberación sostenida.
Según se usa aquí, el término disolvente se
refiere a disolventes de base acuosa capaces de dispersar o disolver
los agentes activos biológicamente, los polímeros hidrófilos o los
agentes de precipitación de elección. Tales disolventes son muy
conocidos por un experto en la técnica. La adición de la primera
mezcla a la segunda mezcla para formar la composición de
co-precipitación puede hacerse por métodos muy
conocidos por un experto en la técnica, incluyendo, aunque sin
limitarse a ellos, adición de gotitas, dispersión, pulverización o
mezclado usando chorros de pulverización, chorros de aire,
atomización y campos eléctricos. El término dispersión para los
fines de esta invención puede significar dispersiones líquidas,
sólidas o gaseosas. Según se usa aquí, el término aislamiento se
refiere al procedimiento para aislar la composición de liberación
sostenida de la presente invención. Tales procedimientos de
aislamiento y purificación son muy conocidos en la técnica.
En otro aspecto aún, la presente invención
proporciona una composición de liberación sostenida producida por
los métodos anteriores según se reivindica. Los aspectos adicionales
incluyen formulaciones farmacéuticas de las composiciones
anteriores en un excipiente o coadyuvante aceptable
farmacéuticamente.
En otros aspectos todavía, la presente
descripción proporciona métodos para tratar indicaciones con
composiciones de liberación sostenida que contienen agentes activos
biológicamente deseados.
\vskip1.000000\baselineskip
Pueden obtenerse alginatos y derivados de ellos
de diversas fuentes comerciales, naturales o sintéticas muy
conocidas en la técnica.
De igual modo, pueden obtenerse agentes de
precipitación de diversas fuentes comerciales, naturales o
sintéticas que son muy conocidas en la técnica. Los agentes de
precipitación incluyen, aunque sin limitarse a ellos, iones de
metales polivalentes, sales, acetatos, citratos, cloruros,
carbonatos, hidróxidos, oxalatos, tartratos o hidróxidos de ellos,
ácidos o polímeros solubles en agua. En particular, los iones de
metales pueden incluir, aunque sin limitarse a ellos, aluminio,
bario, calcio, hierro, manganeso, magnesio, estroncio y zinc.
Preferiblemente, los iones de metales son calcio y zinc o las sales
de ellos, como acetato de zinc, acetato cálcico o sales cloruro.
Pueden usarse también pequeñas moléculas y sales solubles en agua
tales como sulfato amónico, acetona, etanol y glicerol.
Pueden usarse otros tamaños y tipos de agentes
de precipitación, dependiendo del perfil terapéutico deseado (por
ejemplo, la duración de la liberación sostenida deseada, los
efectos, si hay alguno sobre la actividad biológica, la facilidad
de manipulación, el grado o falta de antigenicidad y otros efectos
conocidos de un agente de precipitación deseado para una proteína o
análogo terapéutico). Un experto en la técnica apreciará otros
agentes de precipitación que están dentro del alcance de la
invención.
Según se usa aquí, la expresión tampón o
solución tampón se refiere al uso de ácidos inorgánicos u orgánicos
o una combinación de ellos para preparar una solución tampón como se
conoce en la técnica. Los ácidos inorgánicos dentro del alcance de
la presente invención incluyen haluro de hidrógeno (por ejemplo,
ácido clorhídrico), fosfórico, nítrico o sulfúrico. Otros ácidos
inorgánicos serían muy conocidos para un experto en la técnica y se
consideran aquí. Los ácidos orgánicos dentro del alcance de la
invención incluyen ácidos carboxílicos alifáticos y ácidos
aromáticos tales como fórmico, carbónico, acético, propiónico,
butírico, valérico, caproico, acrílico, malónico, succínico,
glutárico, adípico, maleico, fumárico, glicina o fenol sulfónico.
Otros ácidos orgánicos serían muy conocidos para un experto en la
técnica. El tampón preferido de la presente invención incluye
sistemas de tampón de glicina y glicina ácido fosfórico.
Según se usa aquí, agentes activos
biológicamente se refiere a proteínas recombinantes o de origen
natural, humanas o de animales, útiles para aplicación
profiláctica, terapéutica o diagnóstica. El agente activo
biológicamente puede ser natural, sintético, semisintético o
derivados de ellos. Los agentes activos biológicamente de la
presente invención deben ser precipitables. Se considera un amplio
intervalo de agentes activos biológicamente. Éstos incluyen, aunque
sin limitarse a ellos, hormonas, citoquinas, factores
hematopoyéticos, factores del crecimiento, factores antiobesidad,
factores tróficos, factores anti-inflamatorios y
enzimas (véase también Patente de los EE.UU. Nº 4.695.463 para
tener ejemplos adicionales de agentes activos biológicamente
útiles). Un experto en la técnica será capaz fácilmente de adaptar
un agente activo biológicamente deseado a las composiciones de la
presente invención.
Tales proteínas incluirían, aunque sin limitarse
a ellas, interferones (véanse Patentes de los EE.UU. Nº 5.372.808,
5.541.293, 4.897.471 y 4.695.623), interleuquinas (véase Patente de
los EE.UU. Nº 5.075.222), eritropoyetinas (véanse Patentes de los
EE.UU. Nº 4.703.008, 5.441.868, 5.618.698, 5.547.933 y 5.621.080),
factores estimulantes de colonias de granulocitos (véanse Patentes
de los EE.UU. Nº 4.810.643, 4.999.291, 5.581.476, 5.582.823 y
Publicación PCT Nº 94/17185), factor de células estaminales
(Publicación PCT Nº 91/05795, 92/17505 y 95/17206) y la proteína OB
(véanse Publicaciones PCT Nº 96/40912, 96/05309, 97/00128, 97/01010
y 97/06816). Además, los agentes activos biológicamente pueden
incluir también, aunque sin limitarse a ellos, productos
relacionados anti-obesidad, insulina, gastrina,
prolactina, hormona adrenocorticotrópica (ACTH), hormona estimulante
de tiroides (TSH), hormona luteinizante (LH), hormona estimulante
de folículos (FSH), gonadotropina coriónica humana (HCG), motilina,
interferones (alfa, beta, gamma), interleuquinas
(IL-1 a IL-12), factor de necrosis
de tumores (TNF), proteína de unión a factor de necrosis de tumores
(TNF-bp), factor neurotrófico derivado del cerebro
(BDNF), factor neurotrófico derivado de glial (GDNF), factor
neurotrófico 3 (NT3), factores de crecimiento de fibroblastos
(FGF), factor de crecimiento neurotrófico (NGF), factores de
crecimiento de huesos tales como osteoprotegerina (OPG), factores
de crecimiento de tipo insulina (IGFs), factor estimulante de
colonias de macrófagos (M-CSF), factor estimulante
de colonias de granulocitos-macrófagos
(GM-CSF), factor de crecimiento derivado de
megaqueratinocitos (MGDF), trombopoyetina, factor de crecimiento
derivado de plaquetas (PGDF), factores de crecimiento estimulantes
de colonias (CSFs), proteína morfogenética de huesos (BMP),
dismutasa superóxido (SOD), activador de plasminógeno de tejidos
(TPA), uroquinasa, estreptoquinasa y calicreína. El término
proteínas, según se usa aquí, incluye péptidos, polipéptidos,
moléculas de consenso, análogos, derivados o combinaciones de
ellos.
Los derivados de agentes activos biológicamente
pueden incluir la incorporación de uno o más restos químicos al
resto de proteína. Se ha encontrado que la modificación química de
agentes activos biológicamente proporciona ventajas adicionales en
ciertas circunstancias, tales como aumento de la estabilidad y
tiempo de circulación de la proteína terapéutica y disminución de
la inmunogenicidad. Un experto en la técnica será capaz de
seleccionar la modificación química deseada en base a la
dosificación deseada, el tiempo de circulación, la resistencia a
proteólisis, los usos terapéuticos y otras consideraciones.
Las proteínas, análogo o derivado pueden
administrarse acomplejados a una composición de unión. Tal
composición de unión puede tener el efecto de prolongar el tiempo
de circulación de la proteína, análogo o derivado o aumentar la
actividad del agente activo biológicamente. Tal composición puede
ser una proteína (o, de manera sinónima, péptido), derivado,
análogo o combinación. Por ejemplo, una proteína de unión para la
proteína OB es receptor de proteína OB o porción del mismo, tal
como una porción soluble del mismo. Otras proteínas de unión pueden
determinarse examinando proteína OB o la proteína de elección, en
suero, o examinarse empíricamente la presencia de unión. Tal unión
no interferirá típicamente con la capacidad de la proteína OB o
análogo o derivado para unirse al receptor de proteína OB endógeno
y/o efectuar transducción de señal. Además de la proteína OB,
también serán aplicables complejos de unión a otras proteínas
terapéuticas de la presente invención. Los muy expertos en la
técnica serán capaces de determinar proteínas de unión apropiadas
para uso con la presente invención.
Las composiciones farmacéuticas de liberación
sostenida de la presente invención pueden administrarse mediante
preparaciones orales (por ejemplo, cápsulas tales como cápsulas
duras y cápsulas blandas, preparaciones sólidas tales como
gránulos, pastillas, píldoras, comprimidos o grageas, sellos,
glóbulos, formas en polvo y liofilizadas, preparaciones líquidas
tales como suspensiones) y no orales (por ejemplo, preparaciones
intramuscular, subcutánea, transdérmica, visceral, IV
(intravenosa), IP (intraperitoneal), intraarterial, intratecal,
intracapsular, intraorbital, inyectable, pulmonar, nasal, rectal y
uterina-transmucósica). En general, están
comprendidas por la invención composiciones farmacéuticas de
liberación sostenida que comprenden cantidades eficaces de
proteína, o productos derivados, con las composiciones de liberación
sostenida de la invención junto con diluyentes, agentes de
conservación, solubilizantes, emulsionantes, coadyuvantes y/o
excipientes aceptables farmacéuticamente necesarios para
admnistración. Véase el documento PCT 97/01331. La formulación
farmacéutica óptima para un agente activo biológicamente deseado se
determinará por un experto en la técnica dependiendo de la vía de
administración y de la dosificación deseada. Se describen ejemplos
de composiciones farmacéuticas en Remington's Pharmaceutical
Sciences (Mack Publishing Co., 18ª Ed., Easton, PA, págs.
1435-1712 (1990)).
Los componentes que pueden necesitarse para
administración incluyen diluyentes de diverso contenido de tampón
(por ejemplo, Tris-HCl, acetato), pH y fuerza
iónica; aditivos tales como tensioactivos y agentes de
solubilización (por ejemplo, Tween 80, HCO-60,
Polysorbate 80), antioxidantes (por ejemplo, ácido ascórbico,
glutationa, metabisulfito sódico), polisacáridos adicionales (por
ejemplo, carboximetilcelulosa, alginato sódico, hialuronato sódico,
sulfato de protamina, polietilenglicol), agentes de conservación
(por ejemplo, Thimersol, alcohol bencílico, metilparabén,
propilparabén) y sustancias de formación (por ejemplo, lactosa,
manitol); incorporación del material a preparaciones en partículas
de compuestos polímeros tales como polímeros o copolímeros de ácido
poliláctico/poliglicólico, etc., o combinado con liposomas. El ácido
hialurónico puede usarse también como componente de administración
y éste puede tener el efecto de promover aún más la duración
sostenida en la circulación. Adicionalmente, las composiciones de
liberación sostenida de la presente invención pueden dispersarse
también con aceites (por ejemplo, aceite de sésamo, aceite de maíz,
vegetal), o una mezcla de ellos con un fosfolípido (por ejemplo,
lecitina) o triglicéridos de ácidos grasos de cadena media (por
ejemplo, Miglyol 812) para proporcionar una suspensión aceitosa.
Las composiciones de la presente invención también pueden
dispersarse con agentes de dispersión tales como polisacáridos
solubles en agua (por ejemplo, manitol, lactosa, glucosa,
almidones), ácido hialurónico, glicina, fibrina, colágeno y sales
inorgánicas (por ejemplo, cloruro sódico).
Además, también se consideran para su uso en la
administración de las composiciones de liberación sostenida de la
presente invención dispositivos mecánicos diseñados para entrega
pulmonar de productos terapéuticos, incluyendo, aunque sin
limitarse a ellos, nebulizadores, inhaladores dosificados e
inhaladores de polvo, todos los cuales son familiares para los
expertos en la técnica.
Los componentes de administración pueden influir
en el estado físico, la estabilidad, la proporción de liberación
in vivo y la proporción de eliminación in vivo de las
presentes proteínas y derivados. Un experto en la técnica apreciará
los componentes de administración apropiados y/o los dispositivos
mecánicos apropiados a usar dependiendo del uso terapéutico, la vía
de administración, la dosificación deseada, el tiempo de
circulación, la resistencia a proteólisis, la estabilidad de la
proteína y otras consideraciones.
Terapéuticos. Los usos terapéuticos
dependen del agente activo biológicamente usado. Un experto en la
técnica será capaz fácilmente de adaptar un agente activo
biológicamente deseado a la presente invención para sus usos
terapéuticos previstos. Los usos terapéuticos para tales agentes se
indican con mayor detalle en las siguientes publicaciones que se
incorporan aquí como referencia incluyendo dibujos. Los usos
terapéuticos incluyen, aunque sin limitarse a ellos, usos para
proteínas de tipo interferones (véanse Patentes de los EE.UU. Nº
5.372.808, 5.541.293, 4.897.471 y 4.695.623), interleuquinas (véase
Patente de los EE.UU. Nº 5.075.222), eritropoyetinas (véanse
Patentes de los EE.UU. Nº 4.703.008, 5.441.868, 5.618.698, 5.547.933
y 5.621.080), factores estimulantes de colonias de granulocitos
(véanse Patentes de los EE.UU. Nº 4.999.291, 5.581.476, 5.582.823,
4.810.643 y Publicación PCT Nº 94/17185), factor de células
estaminales (Publicaciones PCT Nº 91/05795, 92/17505 y 95/17206) y
la proteína OB (véanse Publicaciones PCT Nº 96/40912, 96/05309,
97/00128, 97/01010 y 97/06816).
Además, los usos terapéuticos de la presente
invención incluyen usos de agentes activos biológicamente
incluyendo, aunque sin limitarse a ellos, productos relacionados
anti-obesidad, insulina, gastrina, prolactina,
hormona adrenocorticotrópica (ACTH), hormona estimulante de
tiroides (TSH), hormona luteinizante (LH), hormona estimulante de
folículos (FSH), gonadotropina coriónica humana (HCG), motilina,
interferones (alfa, beta, gamma), interleuquinas
(IL-1 a IL-12), factor de necrosis
de tumores (TNF), proteína de unión a factor de necrosis de tumores
(TNF-bp), factor neurotrófico derivado del cerebro
(BDNF), factor neurotrófico derivado de glial (GDNF), factor
neurotrófico 3 (NT3), factores de crecimiento de fibroblastos
(FGF), factor de crecimiento neurotrófico (NGF), factores de
crecimiento de huesos tales como osteoprotegerina (OPG), factores de
crecimiento de tipo insulina (IGFs), factor estimulante de colonias
de macrófagos (M-CSF), factor estimulante de
colonias de granulocitos-macrófagos
(GM-CSF), factor de crecimiento derivado de
megaqueratinocitos (MGDF), trombopoyetina, factor de crecimiento
derivado de plaquetas (PGDF), factores de crecimiento estimulantes
de colonias (CSFs), proteína morfogenética de huesos (BMP),
dismutasa superóxido (SOD), activador de plasminógeno de tejidos
(TPA), uroquinasa, estreptoquinasa y calicreína. El término
proteínas, según se usa aquí, incluye péptidos, polipéptidos,
moléculas de consenso, análogos, derivados o combinaciones de
ellos. Además, las presentes composiciones pueden usarse también
para fabricación de uno o más medicamentos para el tratamiento o
mejora de los estados que pretende tratar el agente activo
biológicamente.
A modo de ejemplo, pueden conseguirse también
usos terapéuticos (oxigenación de la sangre) y una disminución de
la resorción u osteoporosis de huesos en ausencia de pérdida de
peso.
Terapias de combinación. Las presentes
composiciones y métodos pueden usarse conjuntamente con otras
terapias, tales como dieta modificada y ejercicio. Otros
medicamentos, tales como los útiles para el tratamiento de diabetes
(por ejemplo, insulina y posiblemente amilina), medicamentos para
disminuir el colesterol y la tensión sanguínea (tales como los que
reducen los niveles de lípidos en sangre u otros medicamentos
cardiovasculares), medicamentos para aumento de la actividad (por
ejemplo, anfetaminas), diuréticos (para eliminación de líquidos) y
supresores del apetito. Tal administración puede ser simultánea o
puede ser in seriatim. Además, los presentes métodos pueden
usarse conjuntamente con procedimientos quirúrgicos, tales como
cirugías cosméticas diseñadas para cambiar la apariencia total de
un cuerpo (por ejemplo, liposucción o cirugías láser diseñadas para
reducir la masa corporal, o cirugías de implante diseñadas para
aumentar la apariencia de la masa corporal). Pueden aumentarse con
el uso concomitante de las presentes composiciones y métodos los
beneficios para la salud de cirugías cardíacas, tales como cirugías
de bypass u otras cirugías diseñadas para aliviar un estado
perjudicial causado por el bloqueo de vasos sanguíneos por
depósitos grasos, tales como placa arterial. Los métodos para
eliminar cálculos biliarios, tales como métodos ultrasónicos o
láser, pueden usarse también antes de, durante o después del
transcurso de los presentes métodos terapéuticos. Además, los
presentes métodos pueden usarse como un adjunto a cirugías o
terapias para huesos rotos, músculo dañado u otras terapias que
mejorarían por un aumento de la masa de tejido flaco.
Un experto en la técnica será capaz de
determinar dosificaciones eficaces por administración y observación
del efecto terapéutico deseado. La dosificación de la preparación de
liberación sostenida es la cantidad necesaria para conseguir la
concentración eficaz del agente activo biológicamente in
vivo, durante un período dado de tiempo. La dosificación y la
frecuencia de administración preferida de las preparaciones de
liberación sostenida varían con el tipo del agente activo
biológicamente, la duración deseada de liberación, la enfermedad
objetivo, la frecuencia de administración deseada, la especie de
animal sujeto y otros factores. Preferiblemente, la formulación de
la molécula será tal que entre aproximadamente 0,10 mg/kg/día y 100
mg/kg/día produzcan el efecto terapéutico deseado.
Las dosificaciones eficaces pueden determinarse
usando herramientas de diagnóstico a lo largo del tiempo. A modo de
ejemplo, la presente invención proporciona las dosificaciones de
proteína OB. Por ejemplo, puede usarse primero un diagnóstico para
medir la cantidad de proteína OB en la sangre (o plasma o suero)
para determinar niveles endógenos de proteína OB. Tal herramienta
de diagnóstico puede estar en forma de un ensayo de anticuerpo, tal
como un ensayo sandwich de anticuerpo. Se cuantifica inicialmente la
cantidad de proteína OB endógena, y se determina una línea de base.
Las dosificaciones terapéuticas se determinan a medida que se
continúa la cuantificación de proteína OB endógena y exógena (es
decir, proteína, análogo o derivado encontrados dentro del cuerpo,
auto-producidos o administrados) durante el
transcurso de la terapia. Por ejemplo, puede ser necesaria
inicialmente una dosificación relativamente alta, hasta verse el
beneficio terapéutico, y usarse después dosificaciones más bajas
para mantener los beneficios terapéuticos.
Preparación de perlas de
proteína/alginato. Un procedimiento típico se ilustra mediante
el siguiente ejemplo usando la proteína OB o leptina como proteína
de elección. Un experto en la técnica entenderá y será capaz de
aplicar estos procedimientos a otros agentes activos
biológicamente.
Preparación de la mezcla de gotas. La
expresión "mezcla de gotas" según se usa aquí se refiere a la
mezcla que contiene el polímero hidrófilo y el agente activo
biológicamente. Una mezcla de un ml de alginato del 5% (TRIS 10 mM;
pH 8) se añade con agitación magnética a 4 ml de leptina (100 mg/ml;
TRIS 10 mM; pH 8) en un vaso de boca ancha de 10 ml (en un baño de
hielo). La mezcla se vuelve turbia. Se añaden después a la mezcla
40 \mul de NaOH 4 mM y se continúa la agitación durante 15 minutos
(en hielo). Se clarifica la mezcla y su pH final está entre
aproximadamente 8,6 y 8,8. La concentración de alginato debe ser
debe ser al menos 0,05% en peso. Además, el alginato debe ser al
menos preferiblemente 30% de ácido gulurónico.
Además de lo anterior, puede añadirse
polietilenglicol a la mezcla de gotas como se discute después. De
igual modo, tampones o excipientes ayudan a la estabilidad de la
proteína de elección. Un experto en la técnica estará bien enterado
de los ingredientes apropiados que deben añadirse con fines de
estabilidad dependiendo de la proteína escogida para entregar.
Preparación de la mezcla del baño. La
expresión "mezcla del baño" según se usa aquí se refiere a la
mezcla que contiene el(los) agente(s) de
precipitación usado(s) para co-precipitar el
agente activo biológicamente y el polímero hidrófilo. El baño
contiene típicamente 10 ml de mezcla en un vaso de boca ancha de 50
ml consistente en CaCl_{2} 100 mM más otros ingredientes (véase
después). El pH es preferiblemente ácido para ayudar a disminuir el
efecto estallido. El pH debe ser preferiblemente menor que pH 4. El
tampón del baño dependerá también de la proteína usada. Un experto
en la técnica será capaz de ajustar la capacidad o fuerza del tampón
en base a la proteína usada. Así, dependiendo de la estabilidad de
la proteína, si la concentración del tampón es demasiado alta, por
ejemplo con G-CSF, la proteína puede parecer ser
menos estable y disminuirá la liberación sostenida.
El baño puede estar constituido por CaCl_{2},
ZnCl_{2}, polietilengicoles ("PEG") y tampones ácidos. El
zinc interactúa con la proteína precipitándola, ayudando por ello a
aumentar la carga de la perla, a disminuir el efecto estallido y a
la liberación lenta de la proteína de la perla. El calcio ayuda a
formar el precipitado de alginato y a la formación de la perla. El
calcio ayuda también a conformar la perla, especialmente si el baño
es viscoso por la adición de otros aditivos como PEG. Puede
aumentarse el calcio cuando hay aumento de viscosidad para ayudar a
mantener la forma de la perla. Las concentraciones de zinc deben ser
al menos 0,1 mM y la concentración de calcio debe ser al menos 10
mM.
La adición de PEG ayuda a aumentar la carga. Se
sabe que ciertos PEGs precipitan proteínas. También puede añadirse
PEG a la mezcla proteína/alginato que se gotea en el baño para
ayudar a maximizar la carga y la liberación sostenida. El peso
molecular del PEG puede variar de 700 Da a 1.000 kDa, pero
preferiblemente 700 Da-100 kDa. Un experto en la
técnica sabrá de la cantidad de PEG a añadir a la mezcla del baño,
pero puede ser tan alta como el 99%, preferiblemente menor del 75%
en peso. Un experto en la técnica sabrá también que puede limitarse
la concentración de PEG por la viscosidad del baño.
Preparación de perlas. En general, se
pulverizan, gotean o dispersan gotitas de una mezcla de gotas de
leptina/alginato en una mezcla del baño (como se ha descrito antes)
que precipita o gelifica la mezcla leptina/alginato. Además, pueden
usarse medios electrostáticos para formación de perlas.
Para hacer perlas pequeñas, es decir, de menos
de unos pocos cientos de micrómetros de diámetro, se usa una cámara
de flujo (portainyector) consistente en una aguja con flujo de aire
coaxial. Una de dos aberturas está conectada a una tubería de gas y
la otra abertura a una jeringa (3 ml) usada para bombear (a
aproximadamente 1 ml/min) la mezcla proteína/alginato al baño.
Típicamente, se inyectan 2 ml de la mezcla en 10 ml de mezcla del
baño. El inyector está situado aproximadamente a 0,8 cm de la parte
superior del vaso de boca ancha del baño. El tamaño de perla se
determina principalmente por el caudal de gas, por ejemplo, con un
caudal de 8 l/min, el tamaño de perla varía de 50 a 150
micrómetros de diámetro. El caudal de leptina/alginato tiene un
efecto mucho menor sobre el tamaño de perla.
Para hacer perlas grandes (es decir,
1-3 mm de diámetro), se usa una jeringa de
tuberculina de 1 cm^{3}, equipada con una aguja 24G para gotear
la mezcla leptina/alginato en la mezcla del baño. El baño contiene
típicamente 1,5% de CaCl_{2} y ZnCl_{2} de 5 a 50 mM. Se recogen
las perlas vertiéndolas a través de un filtro de células de nylon
de 40 micrómetros. Las perlas se enjuagan el el filtro con 5 ml de
agua estéril y se secan suavemente de la cara inferior del
filtro
con un paño de limpieza (paño gamma 67). Las perlas se guardan en un microtubo de tapón de rosca de plástico estéril.
con un paño de limpieza (paño gamma 67). Las perlas se guardan en un microtubo de tapón de rosca de plástico estéril.
Método de estallido: Se determina la
carga de fármaco de un grupo de perlas seleccionado pesando con
precisión 100 mg de las perlas cargadas hidratadas en 1 ml de
citrato sódico 0,5 M pH 8,5. La suspensión de perlas se incuba a
temperatura ambiente hasta que se desintegran las perlas formando
habitualmente un precipitado. Se centrifuga la suspensión a 14k rpm
durante 2 min (Eppendorf, 5415 C). Se recoge el sobrenadante y se
registra la absorbancia a 280 nm. El precipitado se disuelve
suspendiéndolo en 1 ml de urea 7 M. Se registra la absorbancia de
esta mezcla. La carga de proteína de las perlas cargadas hidratadas
se expresa como mg de proteína por mg de perla o mg de proteína por
ml de perla y se determina de la suma de las dos absorbancias.
Método acumulativo: Este método se usa
conjuntamente con los estudios de liberación in vitro. Se
totaliza la cantidad de proteína liberada de las perlas incluyendo
el estallido al final del estudio. Para tener detalles, véase
después.
Se pesan perlas cargadas hidratadas (100 mg) en
un tubo de microcentrífuga de 1,5 ml (Eppendorf) y se añade 1 ml de
tampón (histidina 10 mM pH 7,4). La muestra se pone en un sacudidor
incubador a 37ºC y 100-200 rpm. A intervalos
seleccionados de tiempo, se retira la muestra del incubador, se
centrifuga (Eppendorf, 1.000 rpm, 2 min) y se separa el
sobrenadante y sustituye por 1 ml de tampón nuevo. La cantidad de
proteína liberada se determina a partir de la absorbancia del
sobrenadante. Después de tomar la muestra liberada final, se
determina la cantidad dejada en la perla por el Método de
Carga/Estallido de perla. El porcentaje liberado en un tiempo dado
se determina a partir de la suma de la proteína total liberada y la
restante en la perla al completarse el experimento.
Pérdida de peso de ratón: En general, se
inyectan ratones una vez con una suspensión de las perlas cargadas
o perlas sin cargar. Se usan ratones hembras de seis a ocho semanas
(tipo C57/BLC), que pesan típicamente 20 gramos. En el caso de
muestras de perlas, se añaden 350 \mul de tampón (MES 50 mM pH
6,7) a 100 mg de perlas hidratadas y se somete a vórtice. Se extrae
la suspensión en una jeringa de 1 cm^{3} y se inyectan
subcutáneamente todas las perlas y 300 \mul del tampón (aguja
23G) en el pescuezo del ratón. Se pesa diariamente a los
ratones.
Estudio farmacocinético de ratas: Se usan
ratas hembras de seis a ocho semanas (tipo Sprague Dawley), que
pesan típicamente 250 gramos. Las inyecciones se realizan de manera
similar a la descrita en los experimentos de pérdida de peso de
ratón. Se toman muestras de sangre por recogida con catéter a
diversos intervalos de tiempo post-inyección y se
analiza leptina en las muestras por un ensayo ELISA.
Los siguientes ejemplos se ofrecen para ilustrar
más totalmente la invención, pero no han de considerarse
limitativos del alcance de la misma. Además, con respecto a la
descripción anterior o los ejemplos que siguen, un experto en la
técnica será capaz de hacer los cambios necesarios a las
descripciones para producción a gran escala.
Este ejemplo examina el efecto de la
concentración de leptina en la perla sobre la liberación de leptina
de perlas de alginato coprecipitadas con zinc/leptina. Las perlas
pequeñas se preparan como se ha descrito antes usando ZnCl_{2} 25
mM en el baño. La perla de mayor concentración, es decir, 66 mg/ml
de leptina, se prepara usando 84 mg/ml de leptina en alginato al
1%, mientras que la perla de menor concentración, es decir, 21 mg/ml
de leptina, se prepara a partir de 28 mg/ml de leptina en alginato
del 1%. A medida que aumenta la concentración de la leptina en la
perla, disminuye la liberación fraccionada de leptina de la perla.
Para la mayor concentración, se libera 25% de leptina en 80 h,
mientras que con la concentración más baja se libera el 80% en 80
h.
Este ejemplo examina el efecto del nivel de
ZnCl_{2} del baño sobre la liberación de leptina de perlas de
alginato coprecipitadas con zinc/leptina. Las perlas pequeñas se
preparan como se ha descrito antes, pero el nivel de ZnCl_{2} en
el baño es 0,5 y 25 mM y la concentración de leptina en las perlas
es 37 mg/ml (por el método acumulativo). Este ejemplo muestra que a
medida que aumenta el nivel de ZnCl_{2} en el baño, las perlas
resultantes tienen un estallido disminuido y una proporción de
liberación disminuida de leptina. Con ZnCl_{2} 0,5 mM, las perlas
tienen un estallido del 20% y una liberación del 50% a las 40 h;
mientras que con ZnCl_{2} 25 mM, las perlas tienen un estallido
de menos del 5% y una liberación del 25% a las 40 h.
Este ejemplo compara una perla de alginato
coprecipitada con zinc/leptina con una formulación de tampón de
acetato testigo (20 mg/ml) en un experimento farmacocinético/de
bioactividad combinado. Las perlas pequeñas contienen 64 mg/ml de
leptina (es decir, por ml de perlas) y se fabrican como se ha
descrito antes con ZnCl_{2} 17 mM en el baño. Se da a ratas
hembras (220 g de peso corporal) una inyección SC (subcutánea)
simple con una dosis de 50 mg/kg. Las concentraciones en plasma de
la muestra de perlas están sostenidas con relación a la del
testigo. Las ratas inyectadas con muestras de perlas mantienen una
concentración en plasma de leptina por encima de 50 ng/ml durante
más de 112 h , en contraste con las 12-18 h para los
animales testigo. Los niveles en sangre de leptina más sostenidos
superiores en el grupo de perlas se correlacionan con su pérdida de
peso más pronunciada y sostenida en comparación con el grupo
testigo. Las ratas inyectadas con muestras de perlas pierden
continuamente peso durante 120 h; a las 120 h, la pérdida de peso
total es el 9% del peso inicial. Como contraste, las ratas testigo
pierden el 7% de su peso inicial en 50 h, pero recuperan el peso en
120 h.
Este ejemplo muestra el efecto de diversos PEGs
en el baño, además de ZnCl_{2} 10 mM, sobre la eficacia de carga
y la liberación in vitro de IL-1ra. Las
perlas pequeñas se preparan como se ha descrito antes con
IL-1ra en PIPES 10 mM pH 6,85. Un baño de perlas (A)
contiene CaCl_{2} 100 mM, ZnCl_{2} 10 mM, 20% de PEG 1K y 20%
de PEG 2K. Un segundo baño de perlas (B) contiene lo mismo que A
pero sin 20% de PEG 1K. La concentración de IL-1ra
en las perlas A y B es 58 mg/ml, es decir, una eficacia de carga del
74% determinada a partir del estallido de citrato sódico. La
formulación B tiene un estallido del 55% y liberó el 75% después
de 18 h. La formulación A tiene un estallido del 20% y liberó el 50%
después de 18 h. Así, la adición de PEGs en el baño condujo a
perlas altamente cargadas que sostienen la liberación en la
proteína. También, la adición de PEG 1K condujo a un estallido aún
más bajo y liberación de proteína más lenta.
(No según la
invención)
Este ejemplo muestra el efecto de tener PEGs,
pero no zinc, en el baño sobre la carga y el estallido inicial de
IL-1ra de perlas de alginato. Las perlas pequeñas se
preparan como se ha descrito antes excepto que el baño contiene 20%
de PEG 1K y 20% de PEG 2K además de CaCl_{2} 100 mM. La eficacia
de carga es del 93% con 63 mg/ml de IL-1ra en la
perla. El estallido inicial es el 35%. Así, la adición de PEGs al
baño puede conducir a una carga elevada de proteína sin la
presencia de iones zinc.
En este ejemplo se hace una comparación de la
eficacia de liberación de una inyección de bolus de
IL-1ra en tampón (PIPES 10 mM, pH 6,85) e
IL-1ra en perlas de alginato del Ejemplo 1. Se
inyectaron SC (subcutáneamente) ratones Balb/C hembras (peso
corporal 20 g) en el tiempo cero con las diversas formulaciones,
conteniendo cada una 10 mg de IL-1ra. A las 18 h,
se inyectó IV (intravenosamente) a los ratones con
rhIL-1B (0,1 \mug por ratón) y se sacrificaron 2
h más tarde para tomar muestras de sangre. Se analiza en la sangre
la concentración de glucosa y el número de linfocitos. La
IL-1beta causa normalmente una caída de la
concentración de glucosa y el número de linfocitos, pero la
presencia de un cierto nivel de IL-1ra protege
contra tal pérdida. El resultado del experimento muestra que sólo
los ratones que reciben la IL-1ra contenida en las
perlas están protegidos contra la pérdida de valor de los
parámetros de la sangre. Este resultado demuestra que las perlas de
alginato sostienen la liberación de la IL-1ra en un
nivel eficaz durante al menos 18 h.
Este ejemplo es un experimento testigo que
ilustra la preparación y liberación de perlas que contienen proteína
usando GCSF, en el que el baño de precipitación sólo contiene
CaCl_{2} (100 mM). Las perlas grandes se preparan como se ha
descrito antes. La mezcla de la jeringa contiene 46 mg/ml de GCSF
(Tris 10 mM pH 7) en alginato del 1%. Las perlas preparadas
contienen 16 mg/ml de GCSF (de estallido de citrato). Así, con sólo
CaCl_{2} en el baño, la eficacia de carga es del 35%. La
liberación fraccionada de la proteína muestra un estallido del 60%
y liberación del 75% en un día. Así, usando un procedimiento
conocido descrito en la bibliografía se obtiene una carga de
proteína baja y una liberación rápida.
Este ejemplo muestra el efecto de ZnCl_{2} en
el baño sobre la carga y liberación de GCSF en perlas de alginato.
Las perlas grandes se preparan como se ha descrito antes excepto que
se añade al baño ZnCl_{2} 10 mM. La mezcla de la jeringa contiene
46 mg/ml de GCSF en alginato del 1%. Las perlas preparadas contienen
28 mg/ml de GCSF (de estallido de citrato). Así, con la adición de
ZnCl_{2} 10 mM al baño (además de CaCl_{2} 100 mM) la eficacia
de carga aumenta del 35% (Ejemplo 6) al 61%. La liberación
fraccionada de la proteína muestra un estallido reducido del 40% y
una liberación de un día del 55%. Así, la adición de ZnCl_{2} al
baño de CaCl_{2} conduce a una eficacia de carga mayor, estallido
más bajo y liberación más lenta de la proteína.
Este ejemplo muestra el efecto de tener PEG en
el baño siendo el pH del baño ácido sobre la carga y liberación de
GCSF con perlas de alginato. Las perlas grandes se preparan como se
ha descrito en el Ejemplo 7 excepto que se añade al baño 20% de PEG
(Aldrich) y el pH del baño es 1,7. El baño contiene también
CaCl_{2} 100 mM y ZnCl_{2} 10 mM. La eficacia de carga para
GCSF es del 54% y la liberación fraccionada (25 mg/ml en las
perlas) muestra un estallido muy reducido de menos del 5% y
liberación del 40% después de 100 horas. Así, una mezcla del baño
ácida que puede contener PEG (además de CaCl_{2} y ZnCl_{2})
conduce a bajo estallido y liberación lenta de proteína.
Este ejemplo muestra el efecto de tener PEGs y
zinc en el baño y el pH del baño rebajado con agente(s)
acidifican-
te(s) sobre la carga de, y el estallido inicial de GCSF de perlas de alginato. Las perlas grandes se preparan como se ha descrito antes excepto que el baño contiene ZnCl_{2} 25 mM, CaCl_{2} 100 mM y 5% de PEG 1K y 5% de PEG 10K. El pH del baño se rebaja con tampón de glicina y ácido fosfórico a pH 1,65. Las perlas resultantes (20 mg/ml de carga) presentan menos del 5% de estallido y una liberación fraccionada del 40% en 90 h. Así, una combinación de PEGs y zinc y bajo pH en el baño conduce a un estallido bajo y una liberación lenta.
te(s) sobre la carga de, y el estallido inicial de GCSF de perlas de alginato. Las perlas grandes se preparan como se ha descrito antes excepto que el baño contiene ZnCl_{2} 25 mM, CaCl_{2} 100 mM y 5% de PEG 1K y 5% de PEG 10K. El pH del baño se rebaja con tampón de glicina y ácido fosfórico a pH 1,65. Las perlas resultantes (20 mg/ml de carga) presentan menos del 5% de estallido y una liberación fraccionada del 40% en 90 h. Así, una combinación de PEGs y zinc y bajo pH en el baño conduce a un estallido bajo y una liberación lenta.
(No según la
invención)
Este ejemplo muestra la preparación de GCSF en
perlas de alginato con PEGs en un baño de pH bajo sin adición de
iones zinc. Las perlas pequeñas se preparan como se ha descrito
antes excepto que el baño contiene 5% de PEG 1K y 5% de PEG 10K. El
pH del baño se rebaja a 1,43 usando tampón de glicina y ácido
fosfórico. La eficacia de carga es del 42% con 14 mg/ml en las
perlas (de estallido de citrato). La liberación fraccionada muestra
un estallido del 32% y una liberación del 35% después de 70 h.
(No según la
invención)
Las perlas grandes de GCSF/alginato del Ejemplo
12 y de los siguientes Ejemplos 13-15 se preparan de
manera similar a la descrita antes, pero con un control más
riguroso del tiempo de las diversas operaciones y un método
alternativo para determinar la carga. Más específicamente, se gotea
1 ml de una mezcla GCSF/alginato en 10 ml del baño agitado
magnéticamente en aproximadamente 2 minutos. Las perlas se filtran y
se lavan con 5 ml de agua. El procedimiento de fabricación de
perlas total consume aproximadamente 5 minutos. La carga se
determina (por A280) a partir de la diferencia de la cantidad de
proteína en la mezcla de alginato goteada en el baño y la proteína
que no queda incorporada en las perlas formadas, es decir, la
proteína restante en la mezcla del baño y los lavados. Esta
cantidad de proteína incorporada a las perlas se divide por el
volumen de 1 ml de mezcla añadida al baño para obtener la carga
expresada en mg/ml de perlas.
El Ejemplo 12 compara la presencia de PEG en el
baño sobre la carga de GCSF en las perlas. Las perlas grandes se
preparan como se ha descrito antes excepto que el baño contiene
CaCl_{2} 200 mM y 15% de PEG 8K (pH 5-6); el
baño de las perlas testigo tiene CaCl_{2} 200 mM. La adición de
PEG al baño aumenta la carga de 21,8 mg/ml (eficacia del 70%) a
26,5 mg/ml (eficacia del 85%).
(No según la
invención)
Este ejemplo muestra el efecto del pH del baño
bajo sobre la carga y liberación de GCSF con perlas de alginato. La
formación de perlas y la carga se determinan como en el Ejemplo 12
con PEG excepto que uno de los baños contiene tampón de glicina 0,5
M pH 2,1. La carga a pH 2,1, 24,9 mg/ml (eficacia del 80%), es
similar a la del testigo. Sin embargo, la liberación inicial a una
hora (29%) es menor y la liberación a las 24 h más sostenida (32%)
que la del testigo (92% y 99% respectivamente).
Este ejemplo muestra el efecto de la adición de
zinc a un baño que contiene PEG sobre la carga de GCSF en perlas de
alginato. La formación de perlas y la carga se determinan como en el
Ejemplo 12 con PEG. La adición de ZnCl_{2} 10 mM al baño aumentó
la carga de 26,5 mg/ml (eficacia del 85%) a 30,3 mg/ml (eficacia del
97%).
(No según la
invención)
Este ejemplo muestra un estallido inicial bajo y
una liberación sostenida de GCSF desde perlas de alginato. La
formación de perlas, la carga y la liberación se realizan de manera
similar a la del Ejemplo 13 excepto que el baño contiene CaCl_{2}
100 mM, 5% de PEG 1K y 5% de PEG 2K, y tampón de glicina 0,5 M (pH
2,1). Las perlas cargadas contienen 24 mg/ml de GCSF. En ½ hora la
liberación inicial es casi cero, a las 19 h la liberación es del
13,6% y a las 44 h la liberación es del 24%.
Claims (35)
1. Una composición de perlas de gel de
liberación sostenida, que comprende:
- a)
- un polímero hidrófilo;
- b)
- un agente activo biológicamente; y
- c)
- al menos dos agentes de precipitación;
en la que al menos uno de los
agentes de precipitación comprende zinc y
co-precipita el agente activo biológicamente con el
polímero hidrófilo, en la que el polímero hidrófilo es
alginato.
2. La composición de la reivindicación 1ª, en la
que al menos uno de los agentes de precipitación se selecciona del
grupo constituido por iones de metales polivalentes o sales,
acetatos, citratos, cloruros, carbonatos o hidróxidos de ellos.
3. La composición de la reivindicación 2ª, en la
que los iones de metales se seleccionan del grupo constituido por
manganeso, estroncio, hierro, magnesio, calcio, bario o aluminio y
mezclas de ellos.
4. La composición de la reivindicación 3ª, en la
que los agentes de precipitación comprenden zinc y calcio.
5. La composición de una cualquiera de las
reivindicaciones 1ª a 4ª, en la que el alginato contiene al menos
30% de ácido gulurónico.
6. La composición de una cualquiera de las
reivindicaciones 1ª a 4ª, en la que el alginato consiste en al
menos 0,05% en peso.
7. La composición de una cualquiera de las
reivindicaciones 1ª a 6ª, en la que el agente activo biológicamente
comprende una proteína.
8. La composición de la reivindicación 7ª, en la
que la proteína consiste en al menos 0,01 mg/ml.
9. La composición de la reivindicación 7ª, en la
que la proteína se selecciona del grupo constituido por factores
hematopoyéticos, factores estimulantes de colonias, factores
anti-obesidad, factores de crecimiento, factores
tróficos y factores anti-inflamatorios.
10. La composición de la reivindicación 7ª, en
la que la proteína se selecciona del grupo constituido por leptina,
G-CSF, SCF, BDNF, GDNF, NT3, GM-CSF,
IL-1ra, IL2, TNF-bp, MGDF, OPG,
interferones, eritropoyetina, KGF y análogos o derivados de
ellos.
11. La composición de alguna de las
reivindicaciones 1ª a 10ª, en la que al menos uno de los agentes de
precipitación se selecciona del grupo constituido por polímeros
solubles en agua.
12. La composición de la reivindicación 11ª, en
la que el polímero soluble en agua es polietilenglicol.
13. Un método para producir una composición de
perlas de gel de liberación sostenida, que comprende las etapas
de:
- a)
- disolver un agente activo biológicamente y un polímero hidrófilo en un disolvente para formar una primera mezcla;
- b)
- disolver al menos dos agentes de precipitación en un disolvente para formar una segunda mezcla;
- c)
- añadir la primera mezcla a la segunda mezcla; y
- d)
- co-precipitar el agente activo biológicamente con el polímero hidrófilo para formar una partícula co-precipitada,
en el que al menos uno de los
agentes de precipitación es zinc y co-precipita el
agente activo biológicamente, en el que el polímero hidrófilo es
alginato.
14. El método de la reivindicación 13ª, en el
que al menos un agente de precipitación se selecciona del grupo
constituido por iones de metales polivalentes o sales, acetatos,
citratos, cloruros, carbonatos o hidróxidos de ellos.
15. El método de la reivindicación 14ª, en el
que el ion de metal se selecciona del grupo constituido por
manganeso, estroncio, hierro, magnesio, calcio, bario, aluminio o
mezclas de ellos.
16. El método de la reivindicación 15ª, en el
que los agentes de precipitación comprenden zinc y calcio.
17. El método de la reivindicación 16ª, en el
que el agente de precipitación de la segunda mezcla consiste en al
menos 1 mM de calcio y 0,1 mM de zinc.
18. El método de una cualquiera de las
reivindicaciones 13ª a 17ª, en el que la segunda mezcla tiene un pH
inferior a 4.
19. El método de una cualquiera de las
reivindicaciones 13ª a 18ª, en el que el alginato contiene al menos
30% de ácido gulurónico.
20. El método de la reivindicación 19ª, en el
que la primera mezcla consiste en al menos 0,05% de alginato en
peso.
21. El método de una cualquiera de las
reivindicaciones 13ª a 20ª, en el que el agente activo
biológicamente comprende una proteína.
22. El método de la reivindicación 21ª, en el
que la primera mezcla consiste en al menos 0,01 mg/ml de
proteína.
23. El método de la reivindicación 21ª, en el
que la proteína se selecciona del grupo constituido por factores
hematopoyéticos, factores estimulantes de colonias, factores
anti-obesidad, factores de crecimiento, factores
tróficos y factores anti-inflamatorios.
24. El método de la reivindicación 21ª, en el
que la proteína se selecciona del grupo constituido por leptina,
G-CSF, SCF, BDNF, OPG, GDNF, NT3,
GM-CSF, IL-1ra, IL2,
TNF-bp, MGDF, interferones, eritropoyetina, KGF y
análogos o derivados de ellos.
25. El método de una cualquiera de las
reivindicaciones 13ª a 24ª, en el que al menos uno de los agentes
de precipitación se selecciona del grupo constituido por polímeros
solubles en agua.
26. El método de la reivindicación 25ª, en el
que el polímero soluble en agua es polietilenglicol.
27. El método de una cualquiera de las
reivindicaciones 13ª a 26ª, en el que la adición de la primera
mezcla a la segunda mezcla tiene lugar por pulverización, campos
electrostáticos, adición de gotitas, dispersión o mezclado, para
formar las partículas co-precipitadas.
28. El método de una cualquiera de las
reivindicaciones 13ª a 27ª, que comprende además la etapa de aislar
la partícula co-precipitada.
29. El producto de liberación sostenida
producido por el método de una cualquiera de las reivindicaciones
13ª a 28ª.
30. Una formulación farmacéutica que comprende
una composición según una cualquiera de las reivindicaciones 1ª a
12ª o 29ª en un excipiente, diluyente o coadyuvante aceptable
farmacéuticamente.
31. Una composición de liberación sostenida
según una cualquiera de las reivindicaciones 1ª a 12ª o 29ª en un
excipiente, diluyente o coadyuvante aceptable farmacéuticamente, de
uso en un método de tratamiento
32. El uso de una composición de liberación
sostenida según una cualquiera de las reivindicaciones 1ª a 12ª o
29ª o una formulación farmacéutica según la reivindicación 30ª, para
la fabricación de un medicamento para el tratamiento de un
trastorno seleccionado del grupo constituido por exceso de peso,
diabetes, alto nivel de lípidos en sangre, esclerosis arterial,
placa arterial, reducción o prevención de la formación de cálculos
biliarios, insuficiente masa de tejidos flacos, sensibilidad
insuficiente a insulina, y apoplejía, en la que el agente activo
biológicamente es leptina, un análogo o un derivado de ella.
33. El uso de una composición de liberación
sostenida según una cualquiera de las reivindicaciones 1ª a 12ª o
29ª o una formulación farmacéutica según la reivindicación 30ª, para
la fabricación de un medicamento para el tratamiento de un
trastorno seleccionado del grupo constituido por deficiencias de
células hematopoyéticas, infección y neutropenia, en la que el
agente activo biológicamente es G-CSF, un análogo o
un derivado de él.
34. El uso de una composición de liberación
sostenida según una cualquiera de las reivindicaciones 1ª a 12ª o
29ª o una formulación farmacéutica según la reivindicación 30ª, para
la fabricación de un medicamento para el tratamiento de
inflamación, en la que el agente activo biológicamente es una
IL-1ra, un análogo o un derivado de ella.
35. El uso según una cualquiera de las
reivindicaciones 32ª a 34ª, en el que el medicamento es para entrega
por inyección.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US08/842,756 US6656508B2 (en) | 1997-04-17 | 1997-04-17 | Sustained-release alginate gels |
| US842756 | 1997-04-17 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| ES2283052T3 true ES2283052T3 (es) | 2007-10-16 |
Family
ID=25288180
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| ES98915592T Expired - Lifetime ES2283052T3 (es) | 1997-04-17 | 1998-04-14 | Geles de alginato de liberacion sostenida. |
Country Status (13)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US6656508B2 (es) |
| EP (1) | EP0975333B1 (es) |
| JP (1) | JP2001524084A (es) |
| AT (1) | ATE354351T1 (es) |
| AU (1) | AU6973498A (es) |
| CA (1) | CA2286092C (es) |
| DE (1) | DE69837140T2 (es) |
| DK (1) | DK0975333T3 (es) |
| ES (1) | ES2283052T3 (es) |
| PT (1) | PT975333E (es) |
| TW (1) | TW577755B (es) |
| WO (1) | WO1998046211A1 (es) |
| ZA (1) | ZA983089B (es) |
Families Citing this family (45)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| IL117175A (en) | 1995-02-20 | 2005-11-20 | Sankyo Co | Osteoclastogenesis inhibitory factor protein |
| US7022683B1 (en) * | 1998-05-13 | 2006-04-04 | Carrington Laboratories, Inc. | Pharmacological compositions comprising pectins having high molecular weights and low degrees of methoxylation |
| US6432449B1 (en) * | 1998-05-18 | 2002-08-13 | Amgen Inc. | Biodegradable sustained-release alginate gels |
| AU2003200609B2 (en) * | 1998-05-18 | 2006-02-23 | Amgen Inc. | Biodegradable sustained-release alginate gels |
| ATE310531T1 (de) | 1998-08-07 | 2005-12-15 | Stabilisierte pharmazeutische zusammensetzungen von hedgehog-proteinen und deren verwendung | |
| NZ511506A (en) | 1998-10-28 | 2004-02-27 | Sankyo Co | Remedies for bone metabolic errors comprising OCIF |
| WO2000045792A1 (en) * | 1999-02-03 | 2000-08-10 | Powderject Research Limited | Hydrogel particle formulations |
| CA2364198A1 (en) * | 1999-03-08 | 2000-09-14 | Powderject Research Limited | Delivery of microparticle formulations using needleless syringe device for sustained-release of bioactive compounds |
| US6458387B1 (en) * | 1999-10-18 | 2002-10-01 | Epic Therapeutics, Inc. | Sustained release microspheres |
| DK1280521T3 (da) * | 2000-05-12 | 2005-08-08 | Pharmacia & Upjohn Co Llc | Vaccinesammensætning, fremgangsmåde til fremstilling deraf og fremgangsmåde til vaccination af hvirveldyr |
| EP1541132A1 (en) * | 2000-05-12 | 2005-06-15 | Pharmacia & Upjohn Company LLC | Vaccine composition, method of preparing the composition and method of vaccinating vertebrates |
| US20030022856A1 (en) * | 2001-01-30 | 2003-01-30 | The Regents Of The University Of Michigan | Method for sustained release local delivery of drugs for ablation of unwanted tissue |
| EP1270015A3 (en) * | 2001-06-29 | 2004-02-25 | Sankyo Company Limited | A complex comprising OCIF and Polysaccharide |
| JP2003081865A (ja) * | 2001-09-12 | 2003-03-19 | Ltt Institute Co Ltd | 水不溶性徐放性組成物、その製剤及びその製造方法 |
| US20040005999A1 (en) * | 2002-03-07 | 2004-01-08 | Andreasen Kasper Huus | Polyamino acid-based particle insulin preparation |
| US6840196B2 (en) | 2002-03-13 | 2005-01-11 | Aspen Pet Products, Inc. | Rawhide pet chew |
| US6984403B2 (en) * | 2003-12-04 | 2006-01-10 | Pfizer Inc. | Azithromycin dosage forms with reduced side effects |
| US8112400B2 (en) * | 2003-12-23 | 2012-02-07 | Texas Instruments Incorporated | Method for collecting data from semiconductor equipment |
| FI116625B (fi) * | 2004-01-28 | 2006-01-13 | Macrocrystal Oy | Menetelmä proteiinien kiteyttämiseksi hiilihydraattirunkoisilla polymeereillä |
| EP1781282A4 (en) * | 2004-07-23 | 2010-09-01 | Dpi Solutions Inc | COMPOSITION FOR STABILIZING VITAMIN C IN WATER PHASE AND THIS USE METHOD FOR STABILIZING VITAMIN C |
| EP1807506B1 (en) * | 2004-10-08 | 2013-04-17 | Georgia Tech Research Corporation | Microencapsulation of cells in hydrogels using electrostatic potentials |
| CA2583373C (en) * | 2004-10-12 | 2013-09-03 | Fmc Biopolymer As | Self-gelling alginate systems and uses thereof |
| US20060099550A1 (en) | 2004-11-10 | 2006-05-11 | Ranir/Dcp Corporation | Device and method for delivering an oral care agent |
| ATE552032T1 (de) * | 2005-07-14 | 2012-04-15 | Lithera Inc | Verbesserte lipolytikum-formulierung mit hinhaltender wirkstofffreigabe für die arealbehandlung von fettgewebe |
| US20070116680A1 (en) * | 2005-11-18 | 2007-05-24 | Rensselaer Polytechnic Institute | Stem cells within gel microenvironments |
| TWI285100B (en) * | 2005-12-27 | 2007-08-11 | Ind Tech Res Inst | Surface modification of polysaccharide, the modified polysaccharide, and method of culturing and recovery cells using the same |
| WO2007146319A2 (en) * | 2006-06-13 | 2007-12-21 | Symphony Medical, Inc. | Methods and apparatus for using polymer-based beads and hydrogels for cardiac applications |
| AU2007313077B2 (en) * | 2006-10-17 | 2011-06-02 | Neothetics, Inc. | Methods, compositions, and formulations for the treatment of thyroid eye disease |
| GB0624227D0 (en) * | 2006-12-05 | 2007-01-10 | Common Services Agency | Protein purification |
| JP5162134B2 (ja) * | 2007-01-22 | 2013-03-13 | 愛媛県 | 機能性材料の製造方法、機能性材料、シート状構造体、及び衛生製品 |
| WO2008118387A2 (en) * | 2007-03-23 | 2008-10-02 | Wayne State University | Erythrocyte atp-release modulators |
| CN103463638A (zh) * | 2007-08-28 | 2013-12-25 | Fmc有限公司 | 延迟的自胶凝藻酸盐体系及其应用 |
| MY158903A (en) | 2007-11-16 | 2016-11-30 | Univ Rockefeller | Antibodies specific for the protofibril form of beta-amyloid protein |
| AU2010228926B2 (en) * | 2009-03-26 | 2015-12-10 | Warsaw Orthopedic, Inc. | Methods of identifying potential components for targeted drug delivery compositions |
| US9132084B2 (en) | 2009-05-27 | 2015-09-15 | Neothetics, Inc. | Methods for administration and formulations for the treatment of regional adipose tissue |
| SG182485A1 (en) * | 2010-01-15 | 2012-08-30 | Lithera Inc | Lyophilized cake formulations |
| WO2012005783A1 (en) | 2010-07-09 | 2012-01-12 | Board Of Regents Of The University Of Texas System | Biodegradable scaffolds |
| GB2485885B (en) | 2010-11-24 | 2015-06-17 | Neothetics Inc | Selective, lipophilic, and long-acting beta agonist monotherapeutic formulations and methods for the cosmetic treatment of adiposity and contour bulging |
| GB201120368D0 (en) | 2011-11-24 | 2012-01-04 | Sperm Vital As | Methods for the preparation of hydrogels |
| CN103830266A (zh) * | 2013-04-24 | 2014-06-04 | 杨亚勤 | 部分氧化海藻酸钠羧甲基化衍生物的制备方法和应用 |
| WO2017027778A1 (en) | 2015-08-13 | 2017-02-16 | Temple University-Of The Commonwealth System Of Higher Education | Calcium alginate dosage formulations, and methods of making and using thereof |
| RU2732502C2 (ru) | 2016-02-10 | 2020-09-18 | Ратгерс, Де Стейт Юниверсити Оф Нью Джерси | Новые моноклональные антитела к LAM и PIM6/LAM для диагностики и лечения инфекций, вызванных Mycobacterium tuberculosis |
| US11422128B2 (en) | 2016-04-13 | 2022-08-23 | Lsi Medience Corporation | Immunoassay employing sulfated polysaccharide |
| US10981976B2 (en) | 2016-08-31 | 2021-04-20 | University Of Rochester | Human monoclonal antibodies to human endogenous retrovirus K envelope (HERV-K) and use thereof |
| WO2020045162A1 (ja) * | 2018-08-30 | 2020-03-05 | 学校法人慶應義塾 | 薬物送達用担体 |
Family Cites Families (30)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US2507193A (en) | 1949-05-17 | 1950-05-09 | Bristol Lab Inc | Penicillin product |
| US2882203A (en) | 1951-06-26 | 1959-04-14 | Novo Terapeutisk Labor As | Injectable insulin preparation with protracted effect |
| US2741573A (en) | 1953-12-28 | 1956-04-10 | Abbott Lab | Penicillin compositions for intramuscular injection |
| US3676557A (en) | 1971-03-02 | 1972-07-11 | Endo Lab | Long-acting narcotic antagonist formulations |
| JPS5416979B2 (es) | 1972-01-08 | 1979-06-26 | ||
| US4352883A (en) * | 1979-03-28 | 1982-10-05 | Damon Corporation | Encapsulation of biological material |
| US4400391A (en) * | 1980-01-09 | 1983-08-23 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of Agriculture | Controlled release of bioactive materials using alginate gel beads |
| US4690682A (en) | 1983-04-15 | 1987-09-01 | Damon Biotech, Inc. | Sustained release |
| US4789516A (en) | 1983-04-15 | 1988-12-06 | Damon Biotech, Inc | Production of sustained released system |
| US4744933A (en) | 1984-02-15 | 1988-05-17 | Massachusetts Institute Of Technology | Process for encapsulation and encapsulated active material system |
| CA1215922A (en) | 1984-05-25 | 1986-12-30 | Connaught Laboratories Limited | Microencapsulation of living tissue and cells |
| US4695463A (en) | 1985-05-24 | 1987-09-22 | Warner-Lambert Company | Delivery system for active ingredients and preparation thereof |
| GB2186485B (en) * | 1986-02-13 | 1988-09-07 | Ethical Pharma Ltd | Slow release formulation |
| US4933185A (en) * | 1986-09-24 | 1990-06-12 | Massachusetts Institute Of Technology | System for controlled release of biologically active compounds |
| CA2046324A1 (en) | 1989-01-26 | 1990-07-27 | Wen-Ghih Tsang | Stabilization of aqueous-based hydrophobic protein solutions and sustained release vehicle |
| US5007790A (en) | 1989-04-11 | 1991-04-16 | Depomed Systems, Inc. | Sustained-release oral drug dosage form |
| US5175093A (en) * | 1989-11-07 | 1992-12-29 | Lehigh University | Bioactive cells immobilized in alginate beads containing voids formed with polyethylene glycol |
| US5215758A (en) | 1991-09-11 | 1993-06-01 | Euroceltique, S.A. | Controlled release matrix suppository for pharmaceuticals |
| US5192802A (en) * | 1991-09-25 | 1993-03-09 | Mcneil-Ppc, Inc. | Bioadhesive pharmaceutical carrier |
| JPH07503943A (ja) * | 1991-10-29 | 1995-04-27 | クローバー コンソリデイテッド，リミテッド | 封入及び薬剤放出に有用な架橋性の多糖類、ポリカチオン及び脂質 |
| US5656297A (en) | 1992-03-12 | 1997-08-12 | Alkermes Controlled Therapeutics, Incorporated | Modulated release from biocompatible polymers |
| US5711968A (en) | 1994-07-25 | 1998-01-27 | Alkermes Controlled Therapeutics, Inc. | Composition and method for the controlled release of metal cation-stabilized interferon |
| US5709854A (en) | 1993-04-30 | 1998-01-20 | Massachusetts Institute Of Technology | Tissue formation by injecting a cell-polymeric solution that gels in vivo |
| NZ260909A (en) | 1993-07-05 | 1995-04-27 | Takeda Chemical Industries Ltd | Production of sustained release preparation by allowing a water-soluble polypeptide to permeate into a biodegradable matrix in an aqueous solution |
| US5451411A (en) * | 1993-10-15 | 1995-09-19 | University Of Washington | Methods and compositions for the oral delivery of therapeutic agents |
| JPH10503179A (ja) | 1994-06-24 | 1998-03-24 | イミュネックス・コーポレーション | 放出制御性ポリペプチド組成物および炎症性腸疾患の治療方法 |
| US5629184A (en) | 1995-01-25 | 1997-05-13 | Amgen Inc. | Cationic copolymers of vinylamine and vinyl alcohol for the delivery of oligonucleotides |
| DE69632684T2 (de) | 1995-06-27 | 2005-06-09 | Takeda Pharmaceutical Co. Ltd. | Verfahren zur herstellung von zubereitungen mit verzögerter freisetzung |
| JP2000505791A (ja) | 1996-01-25 | 2000-05-16 | イーライ・リリー・アンド・カンパニー | 肥満症タンパク質類似体化合物およびその製剤 |
| EP0889737A1 (en) | 1996-02-06 | 1999-01-13 | Eli Lilly And Company | Obesity protein compounds and formulations thereof |
-
1997
- 1997-04-17 US US08/842,756 patent/US6656508B2/en not_active Expired - Fee Related
-
1998
- 1998-04-14 JP JP54424798A patent/JP2001524084A/ja not_active Ceased
- 1998-04-14 DK DK98915592T patent/DK0975333T3/da active
- 1998-04-14 PT PT98915592T patent/PT975333E/pt unknown
- 1998-04-14 EP EP98915592A patent/EP0975333B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1998-04-14 WO PCT/US1998/007566 patent/WO1998046211A1/en active IP Right Grant
- 1998-04-14 ES ES98915592T patent/ES2283052T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1998-04-14 CA CA002286092A patent/CA2286092C/en not_active Expired - Fee Related
- 1998-04-14 ZA ZA983089A patent/ZA983089B/xx unknown
- 1998-04-14 AU AU69734/98A patent/AU6973498A/en not_active Abandoned
- 1998-04-14 DE DE69837140T patent/DE69837140T2/de not_active Expired - Fee Related
- 1998-04-14 TW TW087105641A patent/TW577755B/zh not_active IP Right Cessation
- 1998-04-14 AT AT98915592T patent/ATE354351T1/de not_active IP Right Cessation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP0975333A1 (en) | 2000-02-02 |
| ATE354351T1 (de) | 2007-03-15 |
| JP2001524084A (ja) | 2001-11-27 |
| DE69837140D1 (de) | 2007-04-05 |
| DE69837140T2 (de) | 2007-11-29 |
| ZA983089B (en) | 1998-10-19 |
| PT975333E (pt) | 2007-05-31 |
| EP0975333B1 (en) | 2007-02-21 |
| AU6973498A (en) | 1998-11-11 |
| WO1998046211A1 (en) | 1998-10-22 |
| US6656508B2 (en) | 2003-12-02 |
| DK0975333T3 (da) | 2007-06-18 |
| TW577755B (en) | 2004-03-01 |
| US20020001619A1 (en) | 2002-01-03 |
| CA2286092A1 (en) | 1998-10-22 |
| CA2286092C (en) | 2004-12-14 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| ES2283052T3 (es) | Geles de alginato de liberacion sostenida. | |
| ES2294814T3 (es) | Geles de liberacion retardada y sostenida. | |
| US7374782B2 (en) | Production of microspheres | |
| ES2275341T3 (es) | Geles de alginato biodegradables de liberacion sostenida. | |
| US6699504B2 (en) | Slow release protein polymers | |
| US8637077B2 (en) | Sustained-release preparation | |
| US20030072803A1 (en) | Sustained-release delayed gels | |
| US20100180464A1 (en) | Cores and microcapsules suitable for parenteral administration as well as process for their manufacture | |
| AU2005200949B2 (en) | Sustained-Release Delayed Gels | |
| MXPA99009388A (es) | Geles de alginato de liberacion sostenida | |
| MXPA99010284A (es) | Composiciones de gelificacion retardada, de liberacion sostenida | |
| CN1263472A (zh) | 缓释延迟凝胶剂 |