ES2267131T3 - Anticuerpos anticoagulantes humanizados contra el factor ix, para uso en el tratamiento de la trombosis. - Google Patents
Anticuerpos anticoagulantes humanizados contra el factor ix, para uso en el tratamiento de la trombosis. Download PDFInfo
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Abstract
El uso de un anticuerpo monoclonal de antifactor IX seleccionado a partir del grupo constituido por SB 249413, en el que la cadena pesada tiene la secuencia de aminoácidos expuesta en SEQ ID NO 31 y la cadena ligera tiene la secuencia de aminoácidos expuesta en SEQ ID NO 44; SB 249415, en el que la cadena pesada tiene la secuencia de aminoácidos expuesta en SEQ ID NO 52 y la cadena ligera tiene la secuencia de aminoácidos expuesta en SEQ ID NO 57; SB 249416, en el que la cadena pesada tiene la secuencia de aminoácidos expuesta en SEQ ID NO 52 y la cadena ligera tiene la secuencia de aminoácidos expuesta en SEQ ID NO 62; SB 249417, en el que la cadena pesada tiene la secuencia de aminoácidos expuesta en SEQ ID NO 52 y la cadena ligera tiene la secuencia de aminoácidos expuesta en SEQ ID NO 74; SB 257731, en el que la cadena pesada tiene la secuencia de aminoácidos expuesta en SEQ ID NO 52 y la cadena ligera tiene la secuencia de aminoácidos expuesta en SEQ ID NO 78; SB 257732, en el que la cadena pesada tiene la secuencia de aminoácidos expuesta en SEQ ID NO 89 y la cadena ligera tiene la secuencia de aminoácidos expuesta en SEQ ID NO 99, dicho anticuerpo tiene actividad neutralizante autolimitativa contra el factor IX en la fabricación de un medicamento para el tratamiento de trastornos trombóticos y embólicos asociados.
Description
Anticuerpos anticoagulantes humanizados contra
el Factor IX, para uso en el tratamiento de la trombosis.
La invención se refiere a anticuerpos
monoclonales humanizados (mAb) que se unen a un factor o cofactor de
coagulación humana y a sus usos como inhibidores autolimitativos de
la trombosis.
En circunstancias normales, una lesión bien sea
menor o mayor, en las células endoteliales vasculares que recubren
un vaso sanguíneo dispara una respuesta hemostática a través de una
secuencia de eventos comúnmente denominados como la "cascada"
de coagulación. La cascada culmina en la conversión de fibrinógeno
soluble en fibrina insoluble que, junto con las plaquetas forma un
coágulo o trombo localizado que previene la extravasación de
componentes sanguíneos. La cicatrización de heridas puede ir seguida
de la disolución de coágulos y la restauración de la integridad y
del flujo del vaso sanguíneo.
Los eventos que se producen durante la lesión y
la formación del coágulo son una serie cuidadosamente regulada y
enlazada de reacciones. En resumen, una serie de proteínas de
coagulación de plasma en formas de proenzima inactivas y cofactores
circulan en la sangre. Los complejos de enzima activa están
ensamblados en una región de lesión y se activan secuencialmente a
serina proteasas, catalizando cada serina proteasa sucesiva la
posterior proenzima a activación de proteasa. Esta cascada
enzimática da como resultado cada etapa que aumenta el efecto de la
sucesiva etapa. Para un vista de conjunto de la cascada de
coagulación véase el primer capítulo de "Thrombosis and
Hemorrhage", J. Loscalzo and A. Schafer, eds., Blackwell
Scientific Publications, Oxford, Inglaterra (1994).
Aunque la coagulación eficiente limita la
pérdida de sangre en la región de la lesión, la formación
inapropiada de trombos en venas o arterias es una causa común de
discapacidad y muerte. La actividad coaguladora anormal puede dar
como resultado, y/o a partir de patologías o tratamientos tales como
infarto de miocardio, angina inestable, fibrilación atrial,
apoplejía, daño renal, angioplastia coronaria transluminal
percutánea, coagulación intravascular diseminada, sepsis, embolismo
pulmonar y trombosis venal profunda. La formación de coágulos sobre
superficies extrañas de órganos artificiales, shunts y prótesis
tales como válvulas de corazón artificial también es
problemática.
Los agentes anticoagulantes aprobados
actualmente usados en el tratamiento de estas patologías y otros
trastornos trombóticos y embólicos incluyen la heparina de
heteropolisacáridos sulfatados y heparina de bajo peso molecular
(LMW). Estos agentes se administran parenteralmente y pueden
producir la inhibición rápida y completa de la coagulación por
activación del inhibidor de trombina, antitrombina III y la
inactivación de todos los factores de coagula-
ción.
ción.
Sin embargo, debido a su potencia, la heparina y
la heparina LMW experimenta inconvenientes. La hemorragia
incontrolada como consecuencia de simples esfuerzos del movimiento y
acompañados de contactos con objetos físicos o en lugares
quirúrgicos es la mayor complicación y se observa entre el 1 y el 7%
de los pacientes que reciben infusión continua y entre el 8 y el 14%
de los pacientes a los que se dan dosis intermitentes de bolo. Para
minimizar este riesgo, se extraen continuamente muestras para
permitir vigilar continuamente los tiempos de coagulación in
vivo, lo cual contribuye sustancialmente a los costes de la
terapia u a la incomodidad de los pacientes.
Además, el rango del objetivo terapéutico para
conseguir el nivel deseado de eficacia sin poner el paciente en
riesgo de hemorragia es estrecho. El rango terapéutico es
aproximadamente de 1 a menos de 3 \mug de heparina/ml de plasma
que da como resultado tiempo de ensayo de tiempo de tromboplastina
parcial activada (aPTT) de aproximadamente 35 a aproximadamente 100
segundos. Incrementar la concentración de heparina a 3 \mug/ml
sobrepasa el rango objetivo y a concentraciones superiores a 4
\mug/ml, la actividad coaguladora no es detectable. De este modo,
se ha de tener un gran cuidado para mantener las concentraciones de
plasma del paciente dentro del rango terapéutico.
Otro coagulante aprobado con efecto más duradero
y más lento es la warfarina, un derivado de la cumarina. La
warfarina actúa compitiendo con la modificación
post-translacional dependiente de vitamina K de la
protrombina y otros factores de coagulación dependiente de la
vitamina K.
El patrón general de la acción anticoagulante,
en el cual la sangre se vuelve no coagulable a concentraciones sólo
ligeramente superiores al rango terapéutico se observa para la
warfarina así como para la heparina y la heparina LM.
Bessos et al. (Thrombosis Research) 40;
863-867, 1985 presenta anticuerpos murinos contra el
Factor IX. Algunos de tales anticuerpos murinos tienen una actividad
neutralizante limitada contra el Factor IX.
Existe claramente una necesidad de un agente
anticoagulante que sea eficaz en el control de trastornos
trombóticos y embólicos y que no produce hemorragia incontrolada o
su posibilidad.
En consecuencia, la invención es un anticuerpo
monoclonal humanizado de factor anticoagulación que tiene actividad
neutralizante autolimitativa contra el factor de coagulación,
seleccionándose el anticuerpo monoclonal a partir del grupo
constituido por SB 249413, SB 249415, SB 249416, SB 249417, SB
257731, SB 257732.
Otro aspecto de la invención es un fragmento Fab
neutralizante o un F(ab')_{2} del mismo, producido por
deleción de la región Fc de los anticuerpos monoclonales de la
invención.
Otro aspecto más de la invención es el uso de
los anticuerpos de la invención en la fabricación de un medicamento
para el tratamiento de trastornos trombóticos y embólicos
asociados.
La figura 1 es un gráfico de resultados
experimentales que demuestra la titración del plasma humano normal
con los mAb murinos BC1 y BC2 del antifactor IX.
La figura 2 es un gráfico de resultados
experimentales que demuestra la titración del plasma humano normal
con los mAb murinos 9E4(2)F4 y 11G4(1)B9
del antifactor IX.
La figura 3 es un gráfico de resultados
experimentales que demuestra la titración del plasma humano normal
con los mAb HFXHC y HFXLC del antifactor murino X y el mAb HFXHI
del antifactor murino XI.
La figura 4 es un histograma de resultados
experimentales que demuestra el efecto de la heparina, el ácido
acetilsalicílico y los mAb del antifactor murino X sobre el tiempo
de tromboplastina parcial activada (aPTT) a los 10 minutos en un
modelo de trombosis carotidea de rata.
La figura 5 es un histograma de resultados
experimentales que demuestra el efecto de la heparina, el ácido
acetilsalicílico y los mAb del antifactor murino X sobre el tiempo
de protrombina a los 60 minutos en un modelo de trombosis carotidea
de rata.
La figura 6 es un histograma de resultados
experimentales que demuestra el efecto de la heparina, el ácido
acetilsalicílico y los mAb del antifactor murino X sobre la oclusión
del flujo arterial carotideo en un modelo de trombosis carotidea de
rata.
La figura 7 es un histograma de resultados
experimentales que demuestra el efecto de la heparina, el ácido
acetilsalicílico y los mAb del antifactor murino X sobre el peso del
trombo en un modelo de trombosis carotidea de rata.
La figura 8 es un histograma de resultados
experimentales que demuestra el efecto de la heparina, el mAb BC2
del antifactor murino IX y los mAb humanizados del factor IX sobre
un aPTT a los 60 minutos en un modelo de trombosis carotidea de
rata.
La figura 10 es un histograma de resultados
experimentales que demuestra el efecto de la heparina, el mAb BC2
del antifactor murino IX, un mAb quimérico del factor IX y mAb
humanizados del factor IX sobre el peso del trombo en un modelo de
trombosis carotidea de rata.
La presente invención proporciona anticuerpos
monoclonales humanizados ejemplares SB 249413, SB 249415, SB 249416,
SB 249417, SB 257731 y SB 257732 dirigidos contra el factor humano
IX. Se prefiere particularmente el anticuerpo monoclonal antihumano
SB 249517 del factor IX.
Estos productos son útiles en las composiciones
terapéuticas y farmacéuticas para trastornos trombóticos y embólicos
asociados al infarto de miocardio, la angina inestable, la
fibrilación atrial, la apoplejía, el daño renal, el embolismo
pulmonar, trombosis venal profunda, angioplastia coronaria
transluminal percutánea, sepsis, órganos artificiales, shunts o
prótesis.
Tal como se usa en la presente memoria
descriptiva, el término "actividad neutralizante
autolimitativa" se refiere a la actividad de un anticuerpo que se
une al factor IX humano de coagulación e inhibe la trombosis de tal
manera que se produce la modulación limitada de la coagulación. Se
define "Modulación limitada de coagulación" como un incremento
en el tiempo de coagulación, medido por la prolongación del tiempo
de tromboplastina parcial activada (aPTT), donde el plasma permanece
coagulable con un aPTT que alcanza un valor máximo a pesar de las
concentraciones crecientes de anticuerpo monoclonal. Esta modulación
limitada de la coagulación contrasta con el plasma que se vuelve
incoagulable y que muestra un aPTT infinito en presencia de
concentraciones crecientes de heparina. Preferiblemente, el valor
máximo de aPTT de los procedimientos de la invención están dentro
del rango terapéutico de la heparina. Más preferiblemente, el aPTT
máximo está dentro del rango de aproximadamente 35 segundos a
aproximadamente 100 segundos lo cual corresponde a aproximadamente
1,5 veces a aproximadamente 3,5 veces el valor de aPTT de control
normal. En una realización de la invención, se prolonga el aPTT sin
prolongación significativa del tiempo de protrombina (PT).
"Anticuerpo alterado" se refiere a una
proteína codificada por una región de codificación de
inmunoglobulina alterada, que se puede obtener por la expresión en
una célula huésped seleccionada. Tales anticuerpos alterados son
anticuerpos modificados (por ejemplo anticuerpos quiméricos o
humanizados) o fragmentos de anticuerpo que carecen de toda o parte
de una región constante de inmunoglobulina, por ejemplo, Fv, Fab,
Fab' o (F(ab')_{2} y similares.
"Región de codificación de inmunoglobulina
alterada" se refiere a una secuencia de ácido nucleico que
codifica un anticuerpo alterado de la invención. Cuando el
anticuerpo alterado es un anticuerpo humanizado o injertado de una
región determinante de complementariedad (CDR), las secuencias que
codifican las regiones determinantes de complementariedad (CDR) de
una inmunoglobulina no-humana se insertan dentro de
un primer compañero de inmunoglobulina que comprende secuencias de
estructuras humanas variables. Opcionalmente, el primer compañero de
inmunoglobulina se enlaza operativamente a un segundo compañero de
inmunoglobulina.
"Primer compañero de inmunoglobulina" se
refiere a una secuencia de ácido nucleico que codifica una región
variable de estructura humana o inmunoglobulina humana en la que las
regiones nativas de codificación de CDR (o que se originan de manera
natural) son sustituidas por las regiones de codificación de CDR de
un anticuerpo donante. La región variable humana puede ser una
cadena pesada de inmunoglobulina, una cadena ligera (o ambas
cadenas), un análogo o fragmentos funcionales de los mismos. Tales
regiones CDR, situadas dentro de la región variable de los
anticuerpos (inmunoglobulinas) se pueden determinar por
procedimientos conocidos en la técnica. Por ejemplo Kabat et
al., en "Sequences of Proteins of inmunological Interest",
4ª Ed., U.S. Department of Health and Human Services, National
Institutes of Health (1987) presenta reglas para localizar CDR.
Además, se conocen sistemas informáticos que son útiles para
identificar regiones/estructuras de CDR.
"Segundo compañero de inmunoglobulina" se
refiere a otra secuencia de nucleótidos que codifica una proteína o
un péptido al cual el primer compañero de inmunoglobulina se
condensa en la estructura o mediante una secuencia de enlace
convencional opcional (es decir, operativamente enlazado).
Preferiblemente, es un gen de inmunoglobulina. El segundo compañero
de inmunoglobulina puede incluir una secuencia de ácido nucleico que
codifica toda la región constante para el mismo anticuerpo (es
decir, homólogo, donde el primer y el segundo anticuerpo modificado
se derivan de la misma fuente) o un anticuerpo adicional de interés
(es decir, heterólogo). Puede ser una cadena pesada de
inmunoglobulina o una cadena ligera (o ambas cadenas como parte de
un único polipéptido). El segundo compañero de inmunoglobulina no se
limita a una clase particular de inmunoglobulina o isotipo. Además,
el segundo compañero de inmunoglobulina puede comprender parte de
una región constante de inmunoglobulina. Tal como se encuentra en
una Fab, o F(ab)_{2} (es decir, una parte discreta
de una región constante humana o región de estructura). Tal segundo
compañero de inmunoglobulina puede también comprender una secuencia
que codifica una proteína de membrana entera expuesta sobre la
superficie exterior de una célula huésped, por ejemplo como parte de
una biblioteca de visualización de fagos, o una secuencia que
codifica una proteína para detección analítica o de diagnóstico, por
ejemplo peroxidasa de rábano rusticano,
\beta-galactosidasa, etc.
Los términos Fv, Fc, Fd, Fab, Fab' o
F(ab')2 se usan con sus significados estándar. Véase, por
ejemplo Harlow et al., en "antibodies A Laboratory
Manual", cold Spring Harbor Laboratory, (1988).
Tal como se usa en la presente memoria
descriptiva, un "anticuerpo modificado" describe un tipo de
anticuerpo alterado, es decir un anticuerpo sintético de longitud
total (por ejemplo, un anticuerpo quimérico o humanizado en
oposición a un fragmento de anticuerpo) en el cual una parte de los
dominios de cadena ligera y/o pesada de un anticuerpo receptor son
sustituidos por partes análogas de uno o más anticuerpos donantes
que tienen especificidad para el epítope seleccionado. Por ejemplo,
tales moléculas pueden incluir anticuerpos caracterizado por una
cadena pesada humanizada asociada a una cadena ligera no modificada
(o cadena ligera quimérica), o viceversa. Los anticuerpos
modificados pueden también estar caracterizados por la alteración
de las secuencias de ácido nucleico que codifican las regiones de
estructura de dominio variable ligero y/o pesado del anticuerpo
receptor con el fin de retener la especificidad de enlace de los
anticuerpos donantes. Estos anticuerpos pueden comprender la
sustitución de una o más CDR (preferiblemente todas) a partir del
anticuerpo receptor con CDR de un anticuerpo donante descrito en la
presente memoria descriptiva.
Un "anticuerpo quimérico" se refiere a un
tipo de anticuerpo modificado que contiene una región variable que
se produce de manera natural (Cadena ligera y cadenas pesadas)
derivada de un anticuerpo donante asociado a regiones constantes de
cadena ligera y cadena larga derivadas de un anticuerpo
receptor.
Un "anticuerpo humanizado" se refiere a un
tipo de anticuerpo modificado que tiene sus CDR derivadas de una
inmunoglobulina donante no-humana, derivándose las
partes restantes derivadas de inmunoglobulina de una o más
inmunoglobulinas humanas. Además, los residuos de soporte de
estructura se pueden alterar para preservar la afinidad de enlace.
Véase, por ejemplo Queen et al., Proc. Natl Acad. Sci.
USA, 86, 10029-10032 (1989). Hodgson
et al., Bio/Technology, 9, 421 (1991).
El término "anticuerpo donante" se refiere
a un anticuerpo monoclonal o recombinante que aporta las secuencias
de ácido nucleico de sus regiones variables, CDR u otros fragmentos
funcionales o análogos de los mismos a un primer compañero de
inmunoglobulina, para de este modo proporcionar la región que
codifica la inmunoglobulina alterada y el anticuerpo alterado
expresado de manera natural con la característica de la
especificidad antigénica y la actividad neutralizante del anticuerpo
donante. Un anticuerpo donante apropiado para su uso en esta
invención es un anticuerpo murino monoclonal neutralizante
autolimitativo designado como BC2. Otros anticuerpos donantes
apropiados incluyen los anticuerpos murinos monoclonales
neutralizantes autolimitativos designados como BC1,
9E4(2)F4, 11G4(1)B9, HFXLC y HFXT.
El término anticuerpo"receptor" se refiere
a anticuerpos monoclonales o recombinantes heterólogos al anticuerpo
donante, que aporta todas o una parte de las secuencias de ácido
nucleico que codifican sus regiones de estructura de cadena pesada
y/o ligera y/o sus regiones constantes de cadena pesada y/o ligera
al primer compañero de inmunoglobulina. Preferiblemente, un
anticuerpo humano es el anticuerpo receptor.
"CDR" se define como las secuencias de
aminoácido de la región que determina la complementariedad de un
anticuerpo que son las regiones hipervariables de cadenas pesada y
ligera de inmunoglobulina. Véase, por ejemplo Kabat et al.,
Sequences of Proteins of Immunological Interest, 4ª Ed. U.S.
Department of Health and Human Services, National Institutes of
Health (1987). Hay tres CDR o regiones CDR de cadena pesada y tres
CDR o regiones CDR de cadena ligera en la parte variable de una
inmunoglobulina. De este modo, "CDR" tal como se usa en la
presente memoria descriptiva, se refiere a las tres CDR de cadena
pesada, o a las tres CDR de cadena ligera o a ambas CDR de cadena
pesada y cadena ligera, si fuese apropiado.
Las CDR proporcionan la mayoría de los residuos
de contacto para el enlace del anticuerpo al antígeno o epitope. Las
CDR de interés en la invención se derivan de secuencias variables
de cadenas pesada y cadena ligera de anticuerpos donantes e incluyen
análogos de las CDR que se generan naturalmente, dichos análogos
también comparten o retienen la misma especificidad de enlace del
antígeno y/o la capacidad neutralizante que el anticuerpo donante
del cual se han derivado.
Por "compartir la especificidad o la capacidad
neutralizante de enlace de antígeno" se entiende, por ejemplo,
que aunque el mAb BC2 se puede caracterizar por un cierto nivel de
actividad neutralizante autolimitativa, una CDR codificada por una
secuencia de ácido nucleico de BC2 en un entorno estructural
apropiado puede tener una menor o mayor actividad. Se espera que las
CDR de BC2 en tales entornos reconozcan, sin embargo, el (los)
mismo(s)
\hbox{epitope(s)} que BC2.
Un "fragmento funcional" es una secuencia
parcial variable de cadena pesada o ligera (por ejemplo, menor
deleción en el término amino carboxi de la región variable de la
inmunoglobulina) que retiene la misma especificidad y/o capacidad
neutralizante de enlace de antígenos. Que el anticuerpo del cual se
deriva el fragmento.
Un "análogo" es una secuencia de
aminoácidos modificada por al menos un aminoácido, en la cual dicha
modificación puede ser química o una sustitución o una redisposición
de unos pocos aminoácidos (es decir, no más de 10), dicha
modificación permite que la secuencia de aminoácidos retenga las
características biológicas, por ejemplo, especificidad y alta
afinidad antigénica, de la secuencia no-modificada.
Los análogos ejemplares incluyen mutaciones silentes que se pueden
construir, por sustituciones, para crear algunos sitios de
restricción de endonucleasa dentro o alrededor de las regiones de
codificación de CDR.
Los análogos pueden también producirse como
variaciones alélicas. Una "variación o modificación alélica "es
una alteración en la secuencia de ácido nucleico que codifica las
secuencia de aminoácido o péptidos de la invención. Tales
variaciones o modificaciones pueden ser debidas a la degeneración en
el código genético o pueden ser modificadas deliberadamente para
proporcionar características deseadas. Estas variaciones o
modificaciones pueden o no dar como resultado alteraciones en
cualquier secuencia codificada de aminoácidos.
El término "agentes efectores" se refiere a
moléculas portadoras no proteínicas a las cuales los anticuerpos
alterados, y/o las cadenas ligeras o pesadas naturales o sintéticas
del anticuerpo donante u otros fragmentos del anticuerpo donante se
pueden asociar por medios convencionales. Tales portadores no
proteínicos pueden incluir portadores convencionales usados en el
campo diagnóstico, por ejemplo, poliestireno u otros perlas de
plástico, polisacáridos, por ejemplo como se usa en el sistema
BIAcore (Pharmacia) u otra sustancia no proteínicas útiles en el
campo médico y seguras para la administración a humanos y animales.
Otros agentes efectores pueden incluir un macrociclo para quelar un
átomo de metal pesado o radioisótopos. Tales agentes efectores
pueden también ser útiles para incrementar la semivida de los
anticuerpos alterados, por ejemplo polietilenglicol.
Un mAb neutralizante autolimitativo ejemplar es
el mAb BC2, un anticuerpo murino que se puede usar para el
desarrollo de una molécula quimérica o humanizada. El mAb BC2 se
caracteriza por una actividad inhibitoria autolimitativa en el
tiempo de coagulación. Tal como lo ha medido el ensayo aPTT, el
efecto del mAb BC2 sobre el tiempo de coagulación exhibe un valor
máximo de aproximadamente 100 segundo. El mAb BC2 también se enlaza
al Factor IXa, inhibe la conversión del Factor IX en Ixa e inhibe la
actividad del Factor Ixa. Los cofactores de metal divalente son
requeridos por su actividad, exhibiendo el mAb una mayor preferencia
por Ca^{2-} sobre Mn^{2-}. El IC_{50} observado en el ensayo
aPTT es aproximadamente 50 nM; El mAb BC2 exhibe una reactividad
cruzada de especie con rata y es de isotipo IgG2a.
Otros anticuerpos donantes deseables son los mAb
murinos, BC1, 9E4(2)F4 y 11G4(1)B9.
Estos mAb se caracterizan por una actividad inhibitoria
autolimitativa sobre el tiempo de coagulación. Tal como lo ha medido
el ensayo aPTT, el efecto de estos mAb sobre el tiempo de
coagulación exhibe un valor máximo de aproximadamente entre 90 y 100
segundos para 9E4(2)F4 y aproximadamente 80 segundos
para 11G4(1)B9. El mAb BC1 también se enlaza al Factor
Ixa, inhibe la actividad del Factor Ixa pero no inhibe la conversión
del Factor X en Ixa. No se requiere un cofactor de metal para su
actividad. El IC_{50} para BC1 en el ensayo aPTT es
aproximadamente 35 nM. El mAb BC1 es de isotipo IgG1.
Otro anticuerpo donante deseable caracterizado
por una actividad inhibitoria autolimitativa sobre el tiempo de
coagulación es el mAb murino XFXLC. Tal como lo ha medido el ensayo
aPTT, el efecto del mAb XFXLC sobre el tiempo de coagulación exhibe
un valor máximo de aproximadamente 50 a 60 segundos. El mAb XFXLC se
enlaza a la cadena ligera del Factor X, e inhibe la actividad del
Factor X/Xa. El IC_{50} observado en el ensayo aPTT es
aproximadamente 20 nM.
Otro anticuerpo donante deseable caracterizado
por una actividad inhibitoria autolimitativa sobre el tiempo de
coagulación es el mAb murino HFXI. Tal como lo ha medido el ensayo
aPTT, el efecto del mAb XFXI sobre el tiempo de coagulación exhibe
un valor máximo de aproximadamente100 segundos. El mAb XFXLC se
puede enlazar al Factor XI, e inhibe la actividad del Factor XI/XIa.
El IC_{50} observado en el ensayo aPTT es aproximadamente 30
nM.
Aunque no destinado a unirse a ninguna teoría
relativa al mecanismo de acción, estos mAb parecen regular la
coagulación por un mecanismo no competitivo o alostérico con lo que
sólo se consigue una inhibición parcial.
La presente invención incluye también el uso de
fragmentos Fab o fragmentos F(ab')_{2} derivados de los
anticuerpos de la invención dirigidos contra el factor o cofactor
humano de coagulación. Estos fragmentos son útiles como agentes que
tienen actividad neutralizante autolimitativa contra el factor de
coagulación IX. Un fragmento Fab contiene la cadena ligera entera y
la parte terminal amino de la cadena pesada. Un fragmento
F(ab')_{2} es el fragmento formado por dos fragmentos Fab
enlazados por enlaces disulfuro. Los fragmentos Fab y los fragmentos
F(ab')_{2} se pueden obtener por medios convencionales, por
ejemplo escisión del mAb con las enzimas proteolíticas apropiadas,
papaina y/o pepsina o por procedimientos recombinantes. Los
fragmentos Fab y F(ab')_{2} de los mAb se la invención son
útiles por si mismos como agentes terapéuticos, profilácticos o de
diagnóstico.
Las secuencias de ácido nucleico del mAb de la
presente invención, o sus fragmentos, que codifican las secuencias
variables de péptidos de cadena ligera y cadena pesada son también
útiles para la introducción mutagénica de cambios específicos en las
secuencias de ácido nucleico que codifican las CDR o las regiones de
estructura, y para la incorporación de la secuencia resultante de
ácido nucleico modificada o de fusión en un plásmido para su
expresión. Por ejemplo, las sustituciones silentes en la secuencia
de nucleótidos de la región de estructura y que codifican la CDR se
pueden usar para crear sitio de enzimas de restricción que facilitan
la inserción de regiones de estructura y/o CDR mutagenizadas.
Las secuencias de ácidos nucleicos y aminoácidos
de la región variable de cadena pesada de BC2 están listadas en
las SEQ ID Nos: 5 y 7. Las secuencias de CDR de esta región están
listadas en las SEQ ID Nos: 8, 9 y 10.
Las secuencias de ácidos nucleicos y aminoácidos
de la región variable de cadena ligera de BC2 están listadas en las
SEQ ID Nos: 6 y 11. Las secuencias de CDR de esta región están
listadas en las SEQ ID Nos: 12, 13 y 14.
Teniendo en cuenta la degeneración del código
genético, se pueden construir diversas secuencia de codificación que
codifican las secuencias variables de aminoácidos de cadena pesada y
ligera y las secuencias de CDR de la invención así como los
fragmentos funcionales y sus análogos que comparten la especificidad
antigénica del anticuerpo donante. Las secuencias de ácidos
nucleicos aislados de la invención, o sus fragmentos que codifican
las secuencias de péptidos de cadena variable o las CDR se pueden
usar para producir otros anticuerpos modificados de la presente
invención cuando se combinan operativamente con un segundo compañero
de inmunoglobulina.
Se debería apreciar que además de las
secuencias aisladas de ácidos nucleicos que codifican las partes
del anticuerpo alterado y los anticuerpos descritos en la presente
memoria descriptiva, otras secuencias de ácidos nucleicos están
incluidas en la presente invención, tales como las complementarias
a las secuencias nativas de codificación de CDR o las
complementarias a las regiones de estructura humana que rodean las
regiones de codificación de CDR. Las secuencias de ADN útiles
incluyen las secuencias que se hibridan en condiciones rigurosas de
hibridación a las secuencias de ADN. Véase T- Maniatis et
al., Molecular Cloning (A Laboratory Manual),
Cold Spring Harbor Laboratory (1982), pp. 387-389.
Un ejemplo de una condición rigurosa de hibridación es la
hibridación a 4XSSC a 65ºC, seguida de un lavado a 0,1XSSC a 65ºC
durante una hora. Alternativamente, una condición rigurosa de
hibridación ejemplar es formaldehído al 50%, 4XSSC a 42ºC.
Preferiblemente, estas secuencias de ADN de hibridación son al menos
de aproximadamente 18 nucleótidos de longitud, es decir,
aproximadamente la dimensión de una CDR.
Se prefiere particularmente el anticuerpo
humanizado SB 249413 donde la cadena pesada tiene la secuencia de
aminoácidos expuesta en la SEQ ID NO: 31 y la cadena ligera tiene
la secuencia de aminoácido expuesta en la SEQ ID NO: 44. También se
prefiere el anticuerpo humanizado SB 249415 donde la cadena pesada
tiene la secuencia de aminoácidos expuesta en la SEQ ID NO: 52 y la
cadena ligera tiene la secuencia de aminoácidos expuesta en la SEQ
ID NO: 57. Igualmente se prefiere particularmente el anticuerpo
humanizado SB 249416 donde la cadena pesada tiene la secuencia de
aminoácidos expuesta en la SEQ ID NO: 52 y la cadena ligera tiene la
secuencia de aminoácido expuesta en la SEQ ID NO: 62. También se
prefiere particularmente el anticuerpo humanizado SB 249417 donde
la cadena pesada tiene la secuencia de aminoácidos expuesta en la
SEQ ID NO: 52 y la cadena ligera tiene la secuencia de aminoácidos
expuesta en la SEQ ID NO: 74. También se prefiere particularmente
el anticuerpo humanizado SB 257731 donde la cadena pesada tiene la
secuencia de aminoácidos expuesta en la SEQ ID NO: 52 y la cadena
ligera tiene la secuencia de aminoácido expuesta en la SEQ ID NO:
78. También se prefiere el anticuerpo humanizado SB 257732 donde la
cadena pesada tiene la secuencia de aminoácidos expuesta en la SEQ
ID NO: 89 y la cadena ligera tiene la secuencia de aminoácidos
expuesta en la SEQ ID NO: 99.
Se entenderá por parte de los técnicos en la
materia que un anticuerpo modificado se puede modificar, además,
por los cambios en los aminoácidos de dominio variable sin afectar
necesariamente a la especificidad y la alta afinidad del anticuerpo
donante (es decir, un análogo). Se anticipa que los aminoácidos de
cadena pesada y ligera pueden ser sustituidos por otros aminoácidos
bien en las estructuras de dominio variable o en las CDR o en
ambas. Estas sustituciones podrían ser suministradas por el
anticuerpo donante o por secuencia de consenso a partir de un
subgrupo particular.
Además, la región constante puede ser alterada
para mejorar o reducir las propiedades selectivas de las moléculas
de la presente invención. Por ejemplo, la dimerización, el unión a
los receptores Fc o la capacidad de enlazar y activar un complemento
(véase por ejemplo, Angal et al., Mol. Immunol,
30, 105-108 (1993), Xu et al., J.
Biol. Chem., 269, 3469-3474 (1994),
Winter et al., EP 307434-b).
Un anticuerpo alterado que es un anticuerpo
quimérico difiere de los anticuerpos humanizados descritos
anteriormente proporcionando las regiones variables enteras de
cadena pesada y cadena ligera de los anticuerpos donantes no
humanos, incluyendo las regiones de estructuras, en asociación con
las regiones constantes de inmunoglobulina para ambas cadenas. Se
anticipa que los anticuerpos quiméricos que retienen la secuencia
adicional no humana relativa a los anticuerpos humanizados de la
presente invención puede producir una respuesta inmunitaria en los
humanos.
Tales anticuerpos son útiles en la prevención y
el tratamiento de trastornos trombóticos y embólicos, tal como se
explica más adelante.
Un hibridoma que produce un mAb donante
seleccionado, el anticuerpo murino BC2, es clonado adecuadamente y
el ADN de sus regiones variables de cadena pesada y ligera obtenido
por técnicas conocidas por los expertos en la técnica, por ejemplo,
las técnicas descritas en Sambrook et al., "Molecular
Cloning: A Laboratory Manual", 2ª edición, Cold Spring Harbor
Laboratory (1989). Las regiones variables pesadas y ligeras de BC2
que contienen al menos las regiones de codificación de CDR y las
partes de las regiones de estructuras de dominios variables ligeros
y/o pesados del mAb receptor requeridas con el fin de retener la
especificidad de enlace del mAb donante, así como las partes
derivadas de la inmunoglobulina restantes de la cadena del
anticuerpo derivada de una inmunoglobulina, se obtienen usando
cebadores de polinucleotido y transcriptasa inversa. Las regiones de
codificación de CDR son identificadas usando una base de datos
conocida y por comparación con otros anticuerpos.
Un anticuerpo quimérico de ratón/humano se puede
entonces preparar y ensayar para su capacidad de enlace. Tal
anticuerpo quimérico contiene las regiones de V_{H} y V_{L}
enteras del anticuerpo donante no humano, en asociación con regiones
constantes de Ig humana para ambas cadenas.
Las regiones de estructura homólogas de una
región variable de cadena pesada de un anticuerpo humano son
identificadas usando bases de datos informáticas, por ejemplo
KABAT®, y un anticuerpo humano que tiene homogolía a BC2 se
selecciona como el anticuerpo receptor. Las secuencias de regiones
variables sintéticas de cadena pesada que contienen las regiones de
codificación de CDR de BC2 sin las estructuras de los anticuerpos
humanos están diseñadas con sustituciones opcionales de nucleótidos
en las regiones de estructuras para incorporar sitios de
restricción. A continuación esta secuencia diseñada se sintetiza
usando oligómeros sintéticos largos. Alternativamente, la secuencia
diseñada se puede sintetizar recubriendo oligonucleótidos,
amplificar por reacción en cadena de la polimerasa (PCR), y corregir
los errores. Una región de estructura variable de cadena ligera
apropiada puede ser diseñada de una manera similar.
Un anticuerpo humanizado se puede derivar del
anticuerpo quimérico, o preferiblemente, se puede realizar
sintéticamente insertando las regiones de codificación de CDR de mAb
de las cadenas pesada y ligera dentro de la estructura de cadena
pesada y ligera. Alternativamente, un anticuerpo humanizado de la
invención se puede preparar usando técnicas de mutagénesis estándar.
De este modo, el anticuerpo humanizado resultante contiene regiones
de estructura humanas y regiones de codificación de CDR de mAb
donante. Puede haber una posterior manipulación de los residuos de
estructura. El anticuerpo humanizado resultante se puede expresar en
células huésped recombinantes, por ejemplo, células COS, CHO o de
mieloma. Otros anticuerpos humanizados se pueden preparar usando
esta técnica u otros anticuerpos no humanos, de alta afinidad,
neutralizantes, autolimitativos específicos del Factor IX apropiado
u otro específico del factor de coagulación.
Se produce un plásmido recombinante o vector de
expresión convencional colocando estas secuencias de codificación
para el anticuerpo alterado en asociación operativa con secuencias
de control regulatorias convencionales capaces de controlar la
replicación y la expresión en, y/o secreción a partir, de una célula
huésped. Las secuencias regulatorias incluyen secuencias promotoras,
por ejemplo secuencias promotoras CMV y de señal que se pueden
derivar de otros anticuerpos conocidos. De manera similar, un
segundo vector de expresión se puede producir teniendo una secuencia
de ADN que codificado una cadena ligera o pesada de anticuerpos
complementarios. Preferiblemente, este segundo vector de expresión
es idéntico al primero salvo en lo que respecta a las secuencias de
codificación y los marcadores seleccionables, con el fin de
garantizar, en la medida de lo posible, que cada cadena de
polipéptidos está funcionalmente expresada. Alternativamente, las
secuencias de codificación de cadenas ligera y pesada para el
anticuerpo alterado pueden residir en un único vector.
Una célula huésped seleccionada se cotransfecta
por técnicas convencionales tanto con el primero como con el segundo
vector (o se transfecta simplemente por un único vector) para crear
la célula huésped transfectada de la invención que comprende tanto
las cadenas pesada y ligera recombinantes o sintéticas. La célula
transfectada se cultiva a continuación por técnicas convencionales
para producir el anticuerpo modificado de la invención. El
anticuerpo humanizado que incluye la asociación tanto de la cadena
pesada y/o ligera recombinantes se criban a partir de cultivo por un
ensayo apropiado tal como ELISA o RIA. Se pueden emplear técnicas
similares convencionales para construir otras moléculas y
anticuerpos alterados de esta invención.
Los vectores apropiados para las etapas de
clonación y subclonación empleadas en los procedimientos y la
construcción de las composiciones de la invención pueden ser
seleccionados por un experto en la técnica. Por ejemplo, se puede
usar la serie pUC de los vectores de clonación, tales como pUC19,
que está comercialmente disponible en casas de suministros, tales
como Amersham o Pharmacia. Además, cualquier vector que se puede
usar para su clonación y que es capaz de replicarse fácilmente,
tiene una abundancia de sitios de clonación y genes seleccionables
(por ejemplo, resistencia a los antibióticos) y es fácilmente
manipulado. De este modo, la selección del vector de clonación no
es un factor de limitación en esta invención.
Igualmente, los vectores empleados para la
expresión de los anticuerpos modificados según la invención pueden
ser seleccionados por un experto en la técnica a partir de cualquier
vector convencional. Los vectores también contienen secuencias
regulatorias seleccionadas (tal como promotores CMV) que dirigen la
replicación y la expresión de secuencias de ADN heterólogas en
células huésped seleccionadas. Estos vectores contienen las
secuencias de ADN anteriormente descritas que codifican la región de
codificación de inmunoglobulina alterada o del anticuerpo
manipulado. Además, los vectores pueden incorporar las secuencias de
inmunoglobulina seleccionadas modificadas por la inserción de sitios
de restricción deseables para su fácil manipulación.
Los vectores de expresión pueden también
caracterizarse por genes apropiados para amplificar la expresión de
las secuencias de ADN heterólogas, por ejemplo, el gen de
dihidrofolato reductasa de mamífero (DHFR). Otras secuencias de
vector preferibles incluyen una secuencia de señal
poli-A, tal como de hormona de crecimiento bovina
(BGH) y la secuencia promotora de betaglobina (betaglopro). Los
vectores de expresión útiles en la presente memoria descriptiva se
pueden sintetizar por técnicas bien conocidas por los expertos en la
técnica.
Los componentes de tales vectores, por ejemplo
replicones, genes de selección, potenciadores, promotores,
secuencias de señal y similares, se pueden obtener a partir de
fuente comerciales o naturales o se pueden sintetizar mediante
procedimientos conocidos para su uso en la dirección de la expresión
y/o la secreción del producto del ADN recombinante en un huésped
seleccionado. Se pueden seleccionar también para este fin otros
vectores de expresión apropiados de los cuales se conocen numerosos
tipos en la técnica para expresión de mamíferos, bacterias,
insectos, levaduras y hongos.
La presente invención también comprende una
línea celular transfectada con un plásmido recombinante que contiene
las secuencias de codificación de los anticuerpos modificados o sus
moléculas alteradas de inmunoglobulina. Las células huésped útiles
para la clonación y otras manipulaciones de estos vectores de
clonación son también convencionales. Sin embargo, más
deseablemente, las células de diversas cepas de E. coli
usadas para la replicación de los vectores de clonación y otras
etapas en la construcción de anticuerpos alterados de la presente
invención.
Las células huésped o las líneas celulares
apropiadas para la expresión del anticuerpo modificado o anticuerpo
alterado de la invención son preferiblemente células de mamífero tal
como CHO, COS, una célula de fibroblasto (por ejemplo 3T3) y células
mieloides, y más preferiblemente una célula CHO o una célula
mieloide. Se pueden usar células humanas permitiendo de este modo
que la molécula sea modificada con patrones humanos de
glicosilación. Alternativamente, se pueden emplear otras líneas de
células eucarióticas. La selección de células huésped apropiada de
mamífero y de procedimientos apropiados para la transformación,
cultivo, amplificación, producción de cribado y de productos y
purificación son conocidos en la técnica. Véase, por ejemplo,
Sambrook et al., más arriba.
Las células bacterianas pueden resultar útiles
como células huésped apropiadas para la expresión de los Fab
recombinantes de la presente invención (véase, por ejemplo
Plückthun, A., Immunol. Rev.; 130,
151-188 (1992). Sin embargo, debido a la tendencia
de las proteínas expresadas en células bactrerianas a estar en forma
no expuesta o expuesta indebidamente o en forma
no-glicosilada, cualquier Fab recombinante producido
en una célula bacteriana tendría que ser cribado para la retención
de la capacidad de enlace del antígeno. Si la molécula expresada por
la célula bacteriana se produjese en una forma expuesta
apropiadamente, esta célula bacteriana sería un huésped deseable.
Por ejemplo, diversas cepas de E. coli usadas para expresión
son bien conocidas como células huésped en el campo de la
biotecnología. Igualmente se pueden emplear diversas cepas de B.
subtilis, Streptomyces, otros bacilos y similares.
Donde se desea, las cepas de levadura conocidas
por los expertos en la técnica están también disponibles como
células huésped, así como células de insecto, por ejemplo
Drosophila y Lepidopetera y sistemas de expresión
virales. Véase, por ejemplo, Miller et al., Genetic
Engineering, 8, 277-298. Plenum Press
(1986) y las referencias citadas en la presente memoria
descriptiva.
Los procedimientos generales por los cuales los
vectores de la invención se pueden construir, los procedimientos de
transfección requeridos para producir las células huésped de la
invención, y los procedimientos de cultivo necesarios para producir
el anticuerpo alterado de la invención a partir de tal célula
huésped son todos técnicas convencionales. Igualmente, una vez
producidos, los anticuerpos alterados de la invención se pueden
purificar a partir de los contenidos de cultivo de células según
procedimientos estándar de la técnica, que incluyen precipitación de
sulfato amónico, columnas de afinidad, cromatografía en columna,
electroforesis de gel y similares. Tales técnicas están dentro de la
técnica y no limitan la invención.
Otro procedimiento de expresión de los
anticuerpos humanizados puede utilizar la expresión en un animal
transgénico, tal como se ha descrito en la patente de los Estados
Unidos Número 4.873.316. Esta se refiere a un sistema de expresión
que usa el promotor de caseína del animal que cuando se incorpora
transgénicamente en un mamífero permite que la hembra produzca la
proteína recombinante deseada en su leche.
Una vez expresado por el procedimiento deseado,
el anticuerpo modificado es entonces examinado para su actividad
in vitro usando un ensayo apropiado. Actualmente, se emplean
formatos de ensayo ELISA convencionales para evaluar el enlace
cualitativo y cuantitativo del anticuerpo modificado al Factor IX.
Además, se pueden usar otros ensayos in vitro para verificar
la eficacia neutralizante antes de los posteriores estudios clínicos
humanos llevados a cabo para evaluar la persistencia del anticuerpo
modificado en el cuerpo a pesar de los mecanismos usuales de
toleran-
cia
cia
Se pueden realizar modificaciones menores a las
estructuras de regiones variables para efectuar grandes incrementos
en el enlace del antígeno sin inmunogenicidad incrementada
apreciable para el receptor. Tales anticuerpos modificados pueden
tratar efectivamente un humano para afecciones mediadas por el
factor de coagulación. Tales anticuerpos pueden también ser útiles
en la diagnosis de tales afecciones.
Alternativamente, el ácido acetilsalicílico se
puede administrar en combinación con el anticuerpo monoclonal de
factor de anticoagulación de la invención. En algunos casos, la
terapia de combinación reduce la dosis terapéuticamente efectiva del
anticuerpo monoclonal de factor de anticoagulación.
La respuesta terapéutica inducida por el uso de
las moléculas de la invención es producida por el enlace al factor
de coagulación respectivo y la posterior inhibición autolimitativa
de la cascada de coagulación. De este modo, las moléculas de la
presente invención, cuando están en preparaciones y formulaciones
apropiadas para uso terapéutico, son altamente deseables para
personas susceptibles a o que experimentan actividad de coagulación
anormal asociada a, pero no limitada a, infarto de miocardio, angina
inestable, fibrilación atrial, apoplejía, daño renal, embolismo
pulmonar, trombosis venal profunda e implantes de órganos
artificiales y prótesis.
Los anticuerpos alterados, los anticuerpos y los
fragmentos de los mismos de la invención se pueden usar también en
combinación con otros anticuerpos, particularmente mAB humanos
reactivos con otros marcadores (epítopes) sensibles a la afección
contra la cual se dirige el anticuerpo modificado de la
invención.
Se cree que los agentes terapéuticos de la
invención son deseables para el tratamiento de afecciones de
coagulación anormales a partir de aproximadamente 1 día a
aproximadamente 3 semanas o en la medida en que se necesite. Esto
representa un avance considerable respecto de los anticoagulantes
actualmente usados, la heparina y la warfarina. La dosis y duración
del tratamiento se refieren a la duración relativa de las moléculas
de la presente invención en la circulación humana, y se pueden
ajustar por un experto en la técnica dependiendo de la afección
tratada y la salud general del paciente.
El modo de administración del agente terapéutico
de la invención puede ser cualquier vía apropiada que suministre el
agente al huésped. Los anticuerpos alterados, los anticuerpos, los
anticuerpos modificados, y los fragmentos de los mismos, y las
composiciones farmacéuticas de la invención son particularmente
útiles para administración parenteral, es decir, subcutánea,
intramuscular, intravenosa o intranasal.
Los agentes terapéuticos de la invención se
pueden preparar como composiciones farmacéuticas que contienen una
cantidad efectiva del anticuerpo modificado (humanizado) de la
invención como un ingrediente activo en un vehículo
farmacéuticamente aceptable. Alternativamente, las composiciones
farmacéuticas de la invención podrían también contener ácido
acetilsalicílico. En el agente profiláctico de la invención, se
prefiere una suspensión o solución acuosa que contiene el anticuerpo
modificado, preferiblemente tamponado a pH fisiológico, en una forma
lista para inyección. Las composiciones para administración
parenteral comprenderán comúnmente una solución del anticuerpo
modificado de la invención o un cóctel de las mismas disuelto en un
vehículo farmacéuticamente aceptable, preferiblemente un vehículo
acuoso. Se pueden emplear diversos vehículos acuosos, por ejemplo,
solución salina al 0,4%, glicina al 0'3% y similares. Estas
soluciones son estériles y generalmente libres de materia en
partículas. Estas soluciones se pueden esterilizar por técnicas de
esterilización bien conocidas convencionales (por ejemplo, la
filtración). Las composiciones pueden contener sustancias auxiliares
farmacéuticamente aceptables requeridas para aproximarse a
condiciones fisiológicas tales como algente de tamponamiento y de
ajuste de pH, etc. La concentración del anticuerpo de la invención
en tal formulación farmacéutica puede ser muy amplia, es decir, de
menos de aproximadamente el 0,5%, normalmente al o al menos
aproximadamente al 1% a como máximo el 15 o el 20% en peso y se
seleccionará principalmente basado en volúmenes de fluido,
viscosidades, etc., según el modo particular de administración
seleccionado.
De este modo, se podría preparar una composición
farmacéutica de la invención para inyección intramuscular para
contener 1 ml de agua tamponada estéril, y entre aproximadamente 1
ng a aproximadamente 100 mg, por ejemplo 50 ng a aproximadamente 30
mg o más preferiblemente, aproximadamente 5 mg a aproximadamente 25
mg, de un anticuerpo modificado de la invención, Igualmente, una
composición farmacéutica de la invención para infusión intravenosa
podría estar constituida para contener aproximadamente 250 ml de
solución estéril de Ringer, y aproximadamente 1 mg a
aproximadamente 30 mg y preferiblemente 5 mg a aproximadamente 25 mg
de un anticuerpo modificado de la invención. Los procedimientos
actuales para preparar composiciones de administración parenteral
son bien conocidos o serán evidentes para los expertos en la técnica
y de describen más en detalle en, por ejemplo, "Remington's
Pharmaceutical Science", 15ª ed., Mack Publishing Company,
Easton, Pennsylvania.
Se prefiere que el agente terapéutico de la
invención, cuando está en una preparación farmacéutica, esté
presente en formas de dosis unitaria. La dosis apropiada
terapéuticamente efectiva puede ser determinada fácilmente por los
expertos en la técnica. Para tratar efectivamente un trastorno
trombótico o embólico en un humano u otro animal, se debería
administrar una dosis de aproximadamente 0,1 mg a aproximadamente 20
mg por kg de peso corporal de una proteína o un anticuerpo de la
presente invención, por vía parenteral, preferiblemente intravenosa
o intramuscular. Tal dosis puede, si fuese necesario, repetirse a
intervalos de tiempo apropiados seleccionados como apropiados por un
médico durante la respuesta trombótica.
Los anticuerpos, anticuerpos alterados o
fragmentos de los mismos descritos en la presente memoria
descriptiva se pueden liofilizar para su almacenamiento y
reconstituir en un vehículo apropiado antes de su uso. Esta técnica
se ha mostrado efectiva con inmunoglobulinas convencionales y se
pueden emplear técnicas de liofilización y reconstitución conocidas
en la técnica.
La presente invención será descrita ahora con
referencia a los siguientes ejemplos específicos y no
limitativos.
Unos ratones hembra Balb/C fueron inyectados con
factor IX humano purificado tal como se describe en Jenny, R. et
al., Prep. Biochem. 16, 227-245 (1986).
Típicamente, cada ratón recibió una inyección inicial de 100 \mug
de proteína disuelta en 0,15 ml de solución salina de tampón fosfato
(PBS) y mezclada con 0,15 ml de adyuvante de Freund completo. Se
proporcionaron inmunizaciones de refuerzo de 50 \mug de proteína
en 0,15 ml de PBS con 0,15 ml de adyuvante de Freund incompleto
aproximadamente bisemanalmente a lo largo de un periodo de
2-3 meses. Después de la administración de refuerzo
final, el ratón recibió 50 \mug de factor IX en PBS tres días
antes de las fusiones de células de bazo/mieloma. Las células de
bazo se aislaron a partir de un ratón inmunizado y se fusionaron con
células de mieloma NS-1 (Kohler, G. et al.,
Eur. J. Immunol. 6, 292-295 (1976)) usando
polietilenglicol como se describe en Oi, V.T. et al.,
"Selected Methods in Cellular Immunology", Mischell, B.B y
Shigii, S.M., eds., Freeman Press, San Francisco. Después de la
fusión, las células se volvieron a suspender en un medio de RPMI
1640 que contenía sueros de ternero fetal al 10% y se colocaron
alícuotas en cada pocillo de 4 placas de 24 pocillos que contenías
0,5 ml de medio de acondicionamiento de células de lavado
peritoneal. Al siguiente día, cada pocillos recibió 1,0 ml de 2 x
10^{-2} M de hipoxantina, 8 x 10^{-7} M de aminopterina y 3,2 x
10^{-5} de M timidina en el medio de RPMI 1640 que contenía suero
de ternero fetal al 10%. Las células fueron alimentadas cada
3-4 días retirando la mitad del medio y
remplazándolo como medio fresco que contenía 1 x 10^{-2} M de
hipoxantina y 1,6 x 10^{-3} M de timi-
dina.
dina.
Aproximadamente dos semanas más tarde, se retiró
1,0 ml de medio de hibridoma de cada pocillo y se sometió a ensayo
para anticuerpos de antifactor IX usando un ensayo ELISA tal como se
ha descrito en Jenny, R.J. et al., en Meth. Enzymol.
222, 400-416 (1993). En resumen, el factor IX se
inmovilizó sobre pocillos de plástico de placas de microtitración de
96 pocillos. Los sobrenadantes de hibridoma o las diluciones de
anticuerpo purificado se incubaron a continuación en los pocillos.
Los pocillos se lavaron y se detectó la presencia de complejos
anticuerpo-antígeno con un segundo anticuerpo
antimurino de inmunoglobulina de cabra conjugado con peroxidasa de
rábano rusticano y la o-dianisidina de sustrato
cromogénico.
Los pocillos que contenían anticuerpos de
antifactor IX se subclonaron limitando la dilución y crecieron en
las placas de 96 pocillos. Los sobrenadantes de los cultivos de
células de hibridoma se cribaron para el anticuerpo a factor IX por
el ensayo ELISA descrito anteriormente y las células de hibridomas
positivos se expandieron, congelaron, almacenaron en nitrógeno
líquido y a continuación crecieron como tumores ascíticos en los
ratones.
El efecto de las concentraciones crecientes de
anticuerpos de factor de anticoagulación sobre el tiempo de
tromboplastina parcial activada (aPTT) de plasma humano se determinó
en un fibrómetro (Becton-Dickinson Microbiology
Systems, Cockeysville, Maryland) usando la revisión 3/93 del
procedimiento de referencia Baxter LIB0293-J (Baxter
Scientific, Edison, New Jersey).
Antes de iniciar el experimento, se dispusieron
2 a 3 ml de CaCl_{2} 0,02 M en un tubo de 5 ml dentro de la
cámara de calentamiento del fibrómetro. Las muestras de plasma
humano se retiraron en seguida o se mantuvieron en hielo o se fueron
reconstituidas según la recomendación del fabricante a partir de
Plasma de Referencia de Hemostasis (American Diagnostics, Greenwich,
Connectiticut).
La heparina no fraccionada de la mucosa
intestinal porcina (Sigma Chemical, St. Louis, Missouri), la
hepartina de bajo peso molecular de mucosa intestinal porcina
(Lovenox®, exoaparina sódica, Rhone Poulenc Rorer Pharmaceuticals,
Collegeville, Pennsilvania) o anticoagulantes de mAb fueron
preparados como soluciones de almacenamiento de aproximadamente 50
\muM y se diluyeron en serie directamente dentro del plasma de
ensayo. Se incluyó un plasma que contenía un espacio en blanco sin
coagulante como referencia.
Dos copas del fibrómetro fibroTube® se llenaron
con 100 \mul de plasma de ensayo o 100 \mul de plasma de ensayo
con anticoagulante y 125 \mul de reactivo de cefaloplastina
activada de actina (Reactivo de actina, a partir de cefalina
cerebral de conejo en ácido elágico, disponible en Baxter
Scientific), respectivamente y se dispusieron en los pocillos del
fibrómetro a 37ºC.
Después de un minuto, se transfirieron 100
\mul de reactivo de actina a una copa que contenía plasma y el
contenido se mezcló varias veces con una pipeta. Después de una
incubación de 3 minutos, se añadieron 100 \mul de CaCl_{2},
precalentado a 37ºC a la mezcla del plasma-reactivo
de actina usando un disparador de temporizador de pipeta automática
(Becton-Dickinson). Se anotaron los tiempos de
coagulación y se presentaron los resultados en la figura 1 como
tiempos de coagulación como una función de las concentraciones
finales de anticoagulante en el volumen de ensayo final de 300
\mul. La concentración nominal del Factor IX en el ensayo es de
30-40 nM.
Los resultados mostrados en la figura 1
demuestran el efecto de las concentraciones crecientes de los mAb
murinos BC1 y BC2 de antifactor IX sobre tiempos de coagulación
aPTT. Ambos mAb inhiben la coagulación prolongando el aPTT y ambos
mAb alcanzan un efecto de saturación final en el aPTT. Los valores
de IC_{50} son similares a \sim35 nM y \sim50 nM para BC1 y
BC2 respectivamente, pero la diferencia en la respuesta máxima a los
dos anticuerpos es pronunciada. Las concentraciones de saturación de
BC1 incrementan el aPTT en aproximadamente un 50% en \sim40
segundos. BC2, por otra parte, incrementa el aPTT en 3,5 veces en
aproximadamente 90 segundos. Se destaca la zona de objetivo
terapéutico usada en terapia anticoagulante con heparina. Los
resultados indican que los dos mAb están dentro del rango de aPTT
terapéutico de la heparina.
Las propiedades de los mAb BC1 y BC2 se resumen
en la Tabla 1. Cada uno de los mAb BC reconoce tanto el zimógeno,
Factor IX, como la proteasa activa, Factor Ixa, pero sólo BC2 es
capaz de bloquear tanto la activación del zimógeno como la actividad
de la proteasa. Se ha descubierto que BC1 y BC2 reaccionan de
manera cruzada con el Factor IX de mono Cynomolgus. Adicionalmente,
BC2 también reacciona de manera cruzada con el factor IX de
rata.
| BC1 | BC2 | |
| Enlaza Factor IX | si | si |
| Enlaza Factor Ixa | si | si |
| Inhibe la conversión de IX en Ixa | no | si |
| Inhibe la actividad de Ixa en el complejo Xasa | si | si |
| Requisito de cofactor | ninguno | metales divalentes |
| Ca^{2+} > Mn^{2-} | ||
| APTTmax x 100% | 150 | 350 |
| APTTnormal | ||
| IC_{50}, nM | \sim35 | \sim50 |
| Reactividad cruzada de especie | mono | rata, mono |
| Isotipo | IgGL | IgG2a |
Los resultados mostrados en la figura 2
demuestran el efecto de las concentraciones crecientes de los mAb de
antifactor IX, 9E4(2)F4, y 11G4(1)B9
sobre tiempos de coagulación aPTT. El plasma para el ensayo se
diluyó a la mitad de la concentración normal, dando un aPTT inicial
de 45 segundos. Ambos mAb inhiben la coagulación prolongando el
aPTT y ambos mAb alcanzan un efecto de saturación final sobre el
aPTT. Las concentraciones de saturación de 9E4(2)F4 y
11G4(1)B9 incrementan el aPTT en \sim90 a 100
segundos para 9E4(2)F4 y en \sim80 segundos para
1G4(1)B9. Los resultados indican que los dos mAb están
en la parte superior del rango de aPTT terapéutico de la
heparina.
Los resultados mostrados en la figura 3
demuestran el efecto de las concentraciones crecientes de los mAb de
antifactor X HFXLC (contra el epitope de cadena ligera), HFXHC
(contra el epitope de cadena pesada) y el mAb de antifactor XI HFXI
sobre tiempos de coagulación aPTT. Estos mAb se obtuvieron en los
laboratorios Enzyme Research Laboratories (South Bend, IN). Los mAb
HFXLC y HFXI inhiben la coagulación prolongando el aPTT y ambos mAb
alcanzan un efecto de saturación final sobre el aPTT. El valor
IC_{50} para HDXLc es \sim40 nM; las concentraciones de
saturación incrementan el aPTT en \sim60 segundos. El valor
IC_{50} para HFXI es \sim20 nM; las concentraciones de
saturación incrementan el aPTT en \sim100 segundos. Los
resultados indican que HFXCL está dentro del rango de aPTT
terapéutico de la heparina mientras que HFXI cae en la parte
superior del rango terapéutico de la heparina. El mAb HFXCL no
tuvo ningún efecto sobre los tiempos de coagulación aPTTT.
La prolongación autolimitativa del aPTT se
observó también con los anticuerpos al Factor VIII, el cofactor al
Factor IXa. Por ejemplo, el anticuerpo de factor VIII antihumano,
SAF8C-IG, adquirido en Affinity Biologicals Inc.,
incrementó el aPTT a un máximo de aproximadamente 65 segundos. La
mitad de la prolongación máxima del aPTT se llevó cabo con
aproximadamente 100 nM de anticuerpo.
Con el fin de evaluar la eficacia de los
anticuerpos de antifactor IX en prevención de la trombosis arterial,
se adaptó el modelo de trombosis de la arteria carótida de rata
indicada en Schumacher et al., J.Cardio. Pharm. 22,
526-533 (1993). Este modelo consiste en una lesión
segmentaria en el endotelio carotideo por radicales de oxígeno
generados por FeCL, la solución aplicada sobre la superficie de la
arteria carótida.
En resumen, las ratas fueron anestesiadas con
pentobarbitona sódica, la vena yugular fue canulada para inyecciones
intravenosas y la arteria femoral izquierda fue canulada para
vigilar la presión sanguínea y la frecuencia cardiaca. La arteria
carótida fue aislada por una técnica aséptica mediante una incisión
quirúrgica en el cuello y fue equipada con una sonda magnética de
flujo para medir el flujo sanguíneo. Después de un periodo de
estabilización, se establecieron los parámetros básicos para las
siguientes variables: flujo sanguíneo carotideo, presión arterial,
frecuencia cardiaca, tiempo de tromboplastina parcial activada
(aPTT) y tiempo de protrombina (PT). A continuación, se dispuso un
filtro de papel Whatman premedido empapado en solución de FeCl al
50%, en la arteria carótida durante 15 minutos para toda la lesión
de las células endoteliales subyacentes. Después de la retirada del
papel empapado en FeCl, el experimento prosiguió hasta su
conclusión durante 60 minutos. Al final del experimento, el trombo
carotideo fue extraído de la arteria carótida y se peso.
Todos los agentes fueron administrados 15
minutos antes de la aparición de la lesión carotidea. Se examinaron
los siguientes tratamientos y se compararon con el mAb BC2 de factor
IX.
1.- Heparina: 15, 30, 60 ó 120 U/kg de bolo,
seguido por la infusión de 0,5, 1, 2 ó 4 U/kg/min, respectivamente a
lo largo de 60 minutos.
2.- Ácido acetilsalicílico (ASA, aspirina): 5
mg/kg de bolo.
3.- mAb BC2 antifactor IX: 1, 2 ó 3 mg/kg de
bolo, seguido de la infusión de 0, 3, 1 ó 2 \mug/kg/min,
respectivamente a lo largo de 60 minutos,
Heparina: 30 U/kg de bolo + 1 U/kg/min + ASA a 5
mg/kg,
mAb BC2 antifactor IX : 1 mg/kg + 0,3
\mug/kg/min + ASA a 5 mg/kg.
Las figuras 4 y 5 demuestran que la farmacología
comparativa de los regímenes anticoagulante/trombótico mostrando el
efecto de la heparina, ASA y mAb BC2 de factor IX sobre aPTT (figura
4) y PT (figura 5).
El índice clave para diatesis hemorrágica, aPTT,
se usó como primer criterio para la evaluación de la eficacia contra
las predisposiciones hemorrágicas de los agentes
anticoagulantes/trombóticos usados en el estudio.
Los resultados en la figura 4 demuestran que la
prolongación dependiente de dosis de un aPTT por heparina con
prolongación máxima del tiempo de coagulación, más allá del límite
de ensayo, a las dosis más elevadas Asa por si sola no incrementa
significativamente el aPTT pero en combinación con heparina, se
observó un efecto sinérgistico pronunciado. El mAb de factor IX
tiene un efecto modesto sobre un aPTT e incluso no sobrepasa 3 veces
el límite del anticoagulante estándar practicado clínicamente. Más
significativamente, la baja dosis del mAb BC2 de factor IX en
combinación con ASA no cambia el aPTT.
En la figura 5, los datos indican que PT también
fue significativamente prolongado por heparina, a las dos dosis más
elevadas, y por la combinación de Asa + heparina, pero no por
ninguna de las dosis de mAb de factor IX sola o en combinación con
ASA.
El efecto de heparina, ASA y el mAb de factor IX
sobre la oclusión de la arteria carótida se muestra en la figura 6.
Los resultados indican que las arterias carótidas de todos los
animales tratados con el vehículo se ocluyen en respuesta a la
lesión. La dosis de heparina inhibió dependientemente la oclusión de
la arteria carótida. A la dosis mayor, la heparina previno
completamente la oclusión de la arteria carótida, a esta dosis, sin
embargo, no se pudo iniciar la coagulación. ASA en combinación con
heparina también falló para prevenir completamente la oclusión
carotidea. mAb de factor XI bloqueó completamente la oclusión
carotidea a las dos dosis mayores, no teniendo coagulación
prolongada más allá del objetivo clínicamente deseado. La menor
dosis de mAb de factor IX, que falla ampliamente para garantizar
sólo la abertura, demostró una inhibición completa de la oclusión
carotidea cuando se administró en combinación con ASA.
El efecto de la heparina, ASA y mAb de factor IX
sobre el peso del trombo se muestra en la figura 7. La heparina
redujo dependientemente de la dosis la masa del trombo en la arteria
carótida. Sin embargo, algunos trombos residuales se siguieron
encontrando en la arteria carótida a pesar del bloqueo total de la
coagulación. ASA sola o en combinación con heparina (régimen de 30
U/kg) tuvo solamente un efecto parcial sobre el peso del trombo. mAb
de factor IX redujo dependiendo de la dosis la masa del trombo y la
dosis mayor previno virtualmente la completa formación del trombo.
Además, la combinación de la baja dosis de mAb de antifactor IX y
ASA, un régimen que previno completamente la oclusión carotidea sin
afectar de manera adversa a los índices de coagulación, previno
completamente la formación de trombos.
Los estudios realizados en el modelo de
trombosis carotidea en las ratas demostraron claramente la eficacia
del mAb de factor IX en la prevención de la trombosis en un modelo
de lesión arterial altamente trombogénico. Más particularmente, la
eficacia del mAb de factor IX se demostró dentro del objetivo
anticoagulante terapéutico deseado por el aPTT. Además, la heparina,
el anticoagulante estándar actual, alcanzó una eficacia comparable
al mAb de factor IX solamente a dosis que comprometieron gravemente
la coagulación respecto de la extensión de la producción de sangre
no coagulable. De manera interesante, la potenciación observada y la
sinergia adquirida por el tratamiento conjunto de ASA y heparina
también fue demostrada cuando se dio ASA con mAb de antifactor IX.
Sin embargo, a diferencia de la combinación de heparina y ASA que
dio como resultado la potenciación tanto de los efectos
antitrombóticos como anticoagulantes, la combinación de mAb del mAb
de factor IX y Asa dio como resultado la potenciación de la eficacia
antitrombótica sin efecto consistente sobre los parámetros de
coagulación sanguínea ex vivo. Tomados juntos, los datos
muestran una capacidad antitrombótica superior del mAb de factor IX
comparada con la heparina, ASA o una combinación de la heparina y
Asa.
Se recogieron segmentos de arteria carótida de
rata a partir de falso cloruro férrico solo y cloruro férrico + 6
mg/kg de anticuerpo de factor IX, 3/grupo, 15 minutos después de la
aplicación de cloruro férrico. Las arterias se fijaron por perfusión
con formaldehído y se ligaron por encima y por debajo del área
lesionada. Las arterias fijadas se deshidrataron, se incubaron en
hexametildisilazano y se secaron en un secador. Las arterias secadas
se abrieron longitudinalmente, se colocaron sobre los adaptadores
del microscopio electrónico de barrido (SEN) y se revistieron por
atomización con oro.
La microscopía (SEM) de las arterias sham reveló
un endotelismo esencialmente normal con raras plaquetas dispersas.
Hubo una pocas roturas en el endotelio, probablemente como
consecuencia del daño mecánico durante la cirugía y la membrana de
base subyacente se cubrió mediante un tapiz de plaquetas. No se
observó ninguna evidencia de formación de trombos en las ratas
sham.
La microscopía SEM de las arterias tratadas con
cloruro férrico reveló grandes trombos murales que ocupaban una gran
parte de la abertura del vaso. Los trombos se componían de plaquetas
agregadas, células sanguíneas rojas y material proteínico amorfo y
fibrilar. El material proteínico concuerda con la fibrina. El
endotelio de las arterias fue oscurecido en su mayor parte por los
grandes trombos. Donde es visible el endotelio que cubre la región
tratada con cloruro férrico se cubrió con numerosas plaquetas
adherentes y material proteínico amorfo.
La microscopía SEM de las arterias tratadas con
cloruro férrico de las ratas también tratadas con anticuerpo de
factor IX, reveló que la abertura de los vasos estaba ampliamente
libre de trombo. El endotelio que cubre la región tratada con
cloruro férrico mostró un daño extensivo y algunas áreas estaban
cubiertas por plaquetas adherentes y agregados plaquetarios pero
había un material poco o nada proteínico.
\newpage
El ARN total se purificó usando el Trireactivo
(Molecular Research Center, Inc., Cincinnati,OH) según el protocolo
del fabricante. El ARN se precipitó con isoporpanol y se disolvió en
SDS al 0,5% y se ajustó a 0,5 M de NaCl Se aisló el ARN poli
A^{+} con dinaperlas Oligo (dT)_{25} (Dynal A.S., Lake
success, NY) según el protocolo del fabricante. El ARN poli A^{+}
se eluyó a partir de las perlas y se volvió a suspender en tampón
TE. Doce alicuotas de 10 ng de ARN fueron transcritas inversamente
con un kit RT-PCR por las instrucciones del
fabricante (Boehringer Mammheim Cat. No 1483-188)
usando un oligo dT para cebar. Para la cadena pesada, se llevaron a
cabo las amplificaciones PCR de 6 híbridos de ANR/ADN para 25 ciclos
usando un cebador murino de IgG2a de charnela (SEQ ID NO: 1) y un
cebador de secuencia de señal de cadena pesada, (SEQ ID NO: 2).
Igualmente, para las amplificaciones PCR de cadena ligera, se
llevaron a cabo 6 híbridos de ANR/ADN para 25 ciclos usando un
cebador murino kapa (SEQ ID NO: 2) y un cebador de secuencia de
señal de cadena ligera degenerado, (SEQ ID NO: 4). Los productos PCR
de cada una de las 12 amplificaciones se ligaron en un vector
PCR2000 (Kit de clonación TA, Invitrogen, Cat No.
K2000-01). Se tomaron aleatoriamente colonias de
clones recombinantes y se prepararon minipreparaciones de ADN
plásmido usando un procedimiento de extracción alcalina descrito en
Birnboin y Doly en Nucl. Acid Res. 7, 1513 (1979). El ADN
plásmido aislado se digirió con Ecori y se analizó sobre gel
de agarosa al 0,8%. Se secuenciaron insertos de ADNc de doble cordón
de dimensión apropiada, es decir, \sim700 bp para la cadena pesada
y \sim70 bp para la cadena ligera por una modificación del
procedimiento Sanger. La secuencia 12 de las cadenas pesada y ligera
se comparó para generar una secuencia de región variable de cadena
pesada de BC2 de consenso (SEQ ID NO: 5) y la secuencia de región
variable de cadena ligera de BC2 de conseso (SEQ ID NO: 6).
El análisis de secuencia del ADNc de región
variable de cadena pesada de BC2 reveló un marco de lectura abierto
de 363 nucleótidos que codifica una secuencia de 121 aminoácidos
(SEQ ID NO: 7). Las secuencias 2 y 3 de CDR1 de cadena pesada están
listadas en las SEQ ID NO: 8, 9 y 10, respectivamente.
El análisis de secuencia del ADNc de región
variable de cadena pesada de BC2 reveló un marco de lectura abierto
de 321 nucleótidos que codifica una secuencia de 107 aminoácidos
(SEQ ID NO: 11). Las secuencias 2 y 3 de CDR1 de cadena ligera están
listadas en las SEQ ID NO: 12, 13 y 14, respectivamente.
Seis anticuerpos humanizados designados como SB
249413, SB 249415, SB 249416, SB 249417, SB 257731 y SB 257732
fueron diseñados para contener los CDR murinos descritos
anteriormente en una estructura de anticuerpos humanos.
SB 249413 contiene la cadena pesada F9HZFC
1-0 y la cadena ligera F9HZLC 1-0.
La cadena pesada humanizada de región variable sintética F9HZHC
1-0 fue diseñada usando las tres primeras regiones
de estructura de la cadena pesada obtenida a partir de la
inmunoglobulina RF-TS3'CL (Capra J.D. et al.,
J. Clin. Invest. 86, 1320-1328 (19990)
identificada en la base de datos Kabat como Kabpro: Hhc10w) y las
CDR de cadena pesada de BC2 descritas anteriormente. No se llevó a
cabo ninguna sustitución de aminoácidos de estructura que pudiese
influenciar la presentación de CDR. Se generaron cuatro
oligonucleótidos sintéticos de recubrimiento (SEQ ID NO: 15, 16, 17
y 18) que, cuando se recuecen y se extienden, codifican los
aminoácidos que representan la región variable de cadena pesada a
través de e incluyendo la CDR3 (SEQ ID NO: 19 y 20). Este gen
sintético se amplificó a continuación usando cebadores de PCR (SEQ
ID NO: 21 y 22) y se ligó al vector pCR2000 (Kit de clonación TA,
Invitrogen Cat. No K2000-01) y se aisló a partir de
la digestión de restricción SpeI, KpnI. Se realizó un
segundo fragmento de ADN que codifica la secuencia de señal campath
que incluye los cinco primeros aminoácidos de la región variable
(SEQ ID NO: 23 y 24) por amplificación de PCR de la región apropiada
de una construcción que codifica una cadena pesada de virus
sincitial antirespiratorio humanizado (SEQ ID NO: 25) con dos
cebadores (SEQ ID NO: 26 y 27) y que digieren con las enzimas de
restricción EcoRI y SpeI. Los dos fragmentos generados
se ligaron a un vector de expresión celular de mamífero
pFHZHC2-6pCD digerido de EcoR1, KpnI que contenía el
resto de una región constante de IgG1 y de estructura 4 de consenso
humana El vector contenía una única mutación de aminoácidos del
vector pFHZHC2-3pCD descrito en la solicitud de
patente internacional pulicada número WO94/05690. El residuo final
de la estructura 2 (residuo 49) fue mutado de Ser a Ala digiriendo
pFHZHC2-3pCD con XbaI y EcoR5 e insertando un
conector generado a partir de dos oligonucleótidos sintéticos (SEQ
ID NO: 28 y 29). La secuencia del inserto F9HZHC 1-0
se muestra en SEQ ID NO: 30 y 31.
La cadena ligera humanizada de región variable
sintética F9HZLC 1-0 se diseño usando las regiones
de estructura de la cadena ligera humana obtenida a partir de
inmunglobulina LS8'CL (Carmack et al., J. Exp. Med.
169, 1631-1643 (1989) identificada en la base de
datos Kabat como Kabpro:Hk1318) y las CDR de cadena ligera de BC2
descritas anteriormente. No se llevó a cabo ninguna sustitución de
aminoácidos de estructura que pudiese influenciar la presentación de
CDR. Se generaron dos oligonucleótidos sintéticos de recubrimiento
(SEQ ID NO: 32 y 33) que, cuando se recuecen y se extienden,
codifican los aminoácidos que representan la región variable de
cadena ligeras (SEQ ID NO: 34 y 35). Este gen sintético se
amplificó a continuación usando cebadores de CDR (SEQ ID NO: 36 y
37) y se ligó al vector pCR2000 (Kit de clonación TA. Invitrogen
Cart. No K2000-01) y se aisló a partir de la
digestión de restricción ScaI, SacII. Se realizó un
segundo fragmento de ADN que codifica la secuencia de señal campath
que incluye los dos primeros aminoácidos de la región variable (SEQ
ID NO: 38 y 39) por amplificación de PCR de la región apropiada de
una construcción que codifica una cadena pesada de virus
antirespiratorio sincitial humanizado (SEQ ID NO: 25) con dos
cebadores (SEQ ID NO: 26 y 40) y que digieren con las enzimas de
restricción EcoRI y ScaI. Los dos fragmentos
generados se ligaron a un vector de expresión celular de mamífero
pFHzLC1-2pCN digerido de ECOR1, SacII que contenía
el resto de una región constante kapa y de estructura 4 humana. El
vector contenía una única mutación de aminoácidos del vector
pFHZHLC1-1pCN descrito en la solicitud de patente
internacional publicada número WO94/05690. El residuo final de la
estructura 2 fue mutado de Ser a Pro digiriendo
pFHZLC1-pCN con Smai y Kpn1 e insertando un conector
generado a partir de dos oligonucleótidos (SEQ ID NO: 41 y 42). La
secuencia del inserto F9HZLC 1-0 se muestra en SEQ
ID NO: 43 y 44.
SB 249415 contiene la cadena pesada F9HZHC
1-1 y la cadena ligera F9HZLC 1-1.
Estas construcciones de cadena pesada y cadena ligera están basadas
en F9HZHC 1-0 y F9HZLC 1-0
respectivamente, aunque, tienen sustituciones de aminoácidos de
estructura que pueden influenciar la presentación de CDR.
F9HZHC 1-1 tienen tres
sustituciones de aminoácidos de estructura que pudieron influenciar
la presentación de CDR. Se generaron dos oligonucleótidos sintéticos
de recubrimiento (SEQ ID NO: 45 y 46) que, cuando se recuecen y se
extienden, codifican los aminoácidos que representan la parte
alterada de la región variable de cadena pesada (SEQ ID NO: 47 y
48). Este gen sintético se amplificó a continuación usando cebadores
de PCR (SEQ ID NO: 49 y 50) y se ligó al vector pCR2000 (Kit de
clonación TA. Invitrogen Cart. No K2000-01) y se
aisló a partir de una digestión de restricción EcoNi,
KpnI. Este fragmento se ligó al vector (SEQ ID NO: 30)
F9HZHC1-0 digerido EcoNI, KpnI. La secuencia del
inserto F9HZHC 1-1 se muestra en SEQ ID NO: 51 y
52.
F9HZLC 1-1 tiene cuatro
sustituciones de aminoácidos de estructura que pueden influenciar la
presentación de CDR. Se generaron dos oligonucleótidos sintéticos
(SEQ ID NO: 53 y 54) que, cuando se recuecen tienen extremos
cohesivos KpnI BamHI, y codifican los aminoácidos que representan la
parte alterada de la región variable de cadena ligera (SEQ ID NO:
55). F9HZLC 1-0 (SEQ ID NO: 43) se digirió con las
enzimas de restricción
KpnI y BamHI y se ligó al ADN sintético. La secuencia del inserto F9HZLC 1-1 se muestra en SEQ ID NO: 56
y 57.
KpnI y BamHI y se ligó al ADN sintético. La secuencia del inserto F9HZLC 1-1 se muestra en SEQ ID NO: 56
y 57.
SB 249415 contiene la cadena pesada F9HZHC
1-1 (descrita anteriormente) (SEQ ID No: 52) y la
cadena ligera F9HZLC 1-2. La construcción de cadena
ligera está basada en F9HZLC 1-1, aunque, tiene una
sustitución adicional de aminoácidos de estructura que puede
influenciar la presentación de CDR.
Se generaron dos oligonucleótidos sintéticos
(SEQ ID NO: 58 y 59) que, cuando se recuecen, tienen extremos
cohesivos BamH y XbaII y codifican los aminoácidos que representan
la parte alterada de la región variable de cadena ligera (SEQ ID NO:
60). El vector F9HZLC 1-1 (SEQ ID NO: 56) se digirió
con las enzimas de restricción BamHI y XbaI y se ligó al ADN
sintético. La secuencia del inserto F9HZLC 1-2 se
muestra en SEQ ID NO: 61 y 62.
SB 249417 contiene la cadena pesada F9HZHC
1-1 (descrita anteriormente) (SEQ ID No: 52) y la
cadena ligera F9HZLC 2-0. Una cadena ligera
humanizada de región variable sintética F9HZLC 2-0
fue diseñada usando las regiones de estructura de la cadena ligera
humana obtenida a partir de la inmunoglobulina REI (Palm y
Hilschman, Z. Physiol. Chem 354, 1651-1654
(1973) identificada en la base de datos Kabat como Kabpro: HKL11) y
las CDR de cadena ligera de BC2 descritas anteriormente. Se
introdujeron cinco sustituciones humanas de consenso de aminoácidos.
Se hicieron 6 sustituciones murinas de aminoácidos de estructura
que pueden influenciar la presentación de CDR. Se generaron dos
oligonucleótidos sintéticos de recubrimiento (SEQ ID NO: 63 y 64)
que, cuando se recuecen y se extienden, codifican los aminoácidos
que representan la región variable de cadena ligera (SEQ ID NO: 65 y
66). Este gen sintético se amplificó a continuación usando cebadores
de PCR (SEQ ID NO: 67 y 68), se ligó al vector pCR2000 (Kit de
clonación TA. Invitrogen Cart. No K2000-01) y se
aisló a partir de una digestión de restricción ScaI,
SacII. Se realizó un segundo fragmento de ADN que codifica la
secuencia de señal campath que incluye los dos primeros aminoácidos
de la región variable (SEQ ID NO: 38) por amplificación de PCR de la
región apropiada de una construcción que codifica una cadena pesada
de virus sincitial antirespiratorio humanizado (SEQ ID NO: 25) con
dos cebadores (SEQ ID NO: 26 y 69) y que digieren con las enzimas de
restricción EcoRI y ScaI. Se generó un tercer fragmento de ADN que
codifica el resto de una estructura humana 4 (SEQ ID NO: 70) y que
tiene extremos cohesivos SacII y NarI recociendo dos
oligonucleótidos sintéticos (SEQ ID NO: 71 y 72). F9HZLC
1-0 (SEQ ID NO: 43) se digirió con las enzimas de
restricción EcorI y NarI y se lió a los tres fragmentos de ADN. La
secuencia del inserto F9HZLC 2-0 se muestra en SEQ
ID NO: 73 y 74.
SB 257732 contiene la cadena pesada F9HZHC
1-1 (SEQ ID NO: 52) y la cadena ligera F9HZLC
1-3, una única mutación de aminoácidos de F9HZLC
1-2 (SEQ ID NO: 62). F9HZLC 1-2 se
amplifico por PCR con los dos cebadores (SEQ ID NO: 26 y 69) y se
digirieron con las enzimas de restricción EcoRI y ScaI. Se aisló un
fragmento de 94 bp (SEQ ID NO: 75 y 76). El fragmento se ligó al
vector F9HZLC- 1-2 digeridos por EcoRI, ScaI para
producir la construcción de cadena ligera F9HZLC
1-3. La secuencia del inserto F9HZLC
1-3 se muestra en SEQ ID NO: 77 y 78.
SB 257732 contiene la cadena pesada F9HZFC
3-0 y la cadena ligera F9HZLC 3-0
humanizadas de región variable. Se generaron cuatro oligonucleótidos
sintéticos de recubrimiento (SEQ ID NO: 79, 80, 81 y 82) que, cuando
se recuecen y se extienden, codifican los aminoácidos que
representan la región variable de cadena pesada que se está
alterando (SEQ ID NO: 83 y 84). Este gen sintético se amplificó a
continuación usando cebadores de PCR (SEQ ID NO: 85 y 86), se ligó
al vector pCR2000 (Kit de clonación TA. Invitrogen Cart. No
K2000-01) y se aisló a partir de la digestión de
restricción StuI, KpnI. El fragmento aislado se ligó
al vector F9HZHC 1-1 (SEQ ID NO: 52) digerido StuI,
KpnI. Este vector se digirió entonces con EcorI, SpeI para retirar
la secuencia de señal. Se hizo un fragmento de ADN que codifica la
secuencia de señal campath (SEQ ID NO: 23) que incluye los cinco
primeros aminoácidos de la región variable por amplificación de PCR
de F9HZHC 1-0 con dos cebadores (SEQ ID No: 26 y 87)
y que digirieron con las enzimas de restricción EcoRI y SpeI. El
fragmento generado se ligó al vector. La secuencia del inserto
F9HZHC 3-0 se muestra en SEQ ID NO: 88 y 89. Se
generaron cuatro oligonucleótidos sintéticos de recubrimiento (SEQ
ID NO: 90, 91, 92 y 93) que, cuando se recuecen y se extienden,
codifican los aminoácidos que representan la región variable de
cadena ligera (SEQ ID NO: 94 y 95). Este gen sintético se amplificó
a continuación usando cebadores de PCR (SEQ ID NO: 96 y 97) y se
ligó al vector pCR2000 (Kit de clonación TA. Invitrogen Cart. No
K2000-01) y se aisló a partir de una digestión de
restricción Scai, NarI. El fragmento aislado se ligó
al vector F9HZLC 1-3 (SEQ ID NO: 77) digerido ScaI,
NarI. La secuencia del inserto F9HZLC 3-0 se muestra
en SEQ ID NO: 98 y 99.
Los mAb de antifactor IX humanizados se
expresaron en células CHO. Una línea celular DG-44
adaptada para el cultivo en suspensión en medio libre de suero se
cultivo en 100 ml de medio libre de proteína que contenía
nucleósidos IX y F68 al 0,05% en matraces Erlenmeqyer estériles
desechables de 250 ml (Corning) sobre un agitador de plataforma
Innova 2100 (New Brunswick Scientific) a 150 rpm a 37ºC en un
incubador de CO_{2} al 5% y aire humidificado al 95%. Estas
células fueron pasadas a 4 x 10^{5} células/ml dos veces a la
semana. Se linealizaron 15 \mug de cada uno de los vectores de
cadena ligera pCN-Lc y cadena pesada
pCD-Hc por digestión con Not1, se precipitaron en
condiciones estériles y se volvieron a suspender en 50 \mul de
tampón 1X TE (10 mM Tris, 1 mM EDTA, pH 7,5). El ADN se electroporó
usando un Pulsador de gen Bio-Rad (Laboratorios
Bio-Rad) dentro de las células
Acc-098 usando la técnica de Hensley et al.,
en J. Biol. Chem 269, 23949-23958 (1994). Se
lavaron 1,2 x 10^{2} células una vez en 12,5 ml de PBSacarosa de
hielo frío (PBS, 272 mM de sacarosa, 7 mM de fosfato de sodio, pH
7,4, 1 mM de MgCl_{2}), se resuspendieron en 0,8 ml de PBS, se
añadieron a 50 \mul de la solución de ADN y se incubaron sobre
hielo durante 15 minutos. Las células se pulsaron a 380 V y 25
microfaradio, a continuación se incubaron sobre hielo durante 10
minutos. Las células se pusieron en placas en las placas de cultivos
de 96 pocillos a 5 x 10^{5} células/placa en un medio de
mantenimiento durante 24 horas antes de la selección. Las células
fueron seleccionadas por su resistencia a 400 \mug/ml de G418
(Geneticin, Life Technologies, Inc.) en e medio de mantenimiento. 24
horas antes del ensayo, las células fueron alimentadas con 150
\mul del medio de mantenimiento.
El medio acondicionado de las colonias
individuales se sometió a ensayo usando un procedimiento de
detección por electroquimiluminiscencia (ECL) sobre un analizador
Origen (IGEN, Inc.) Véase Yang et al. Biotechnology 12,
193-194 (1994).
Todas las soluciones necesarias para el
rendimiento del ensayo (tampón de ensayo) y para el funcionamiento
del analizador (limpiador de células) fueron obtenidas en IGEN. Los
anticuerpos (igG antihumana (cadena g específica), Los productos
químicos Sigma y el fragmento F(ab')_{2} a IgG humana (H +
L), Kirkegaard 6 Perry Laboratories Inc) fueron marcados con
TAG-NHS-ester (IGEN, Inc.) a una
relación molar 7:1 de TAG:proteína, mientras que la Proteína A
(Sigma) se marcó con
Biotin-LC-Sulfo-NHS-éster
(IGEN, Inc.) a una relación molar de 20:1 de biotin: proteína, ambas
según las recomendaciones de IGEN. Las perlas magnéticas recubiertas
con Streptavidina (M-280) se obtuvieron en
Dynal.
Los inmunoensayos fueron realizados usando el
siguiente protocolo: por muestra, 50 \mul de las perlas revestidas
de Streptavidina (concentración final de 600 \mug/ml diluidos en
PBS, pH 7,8 con Tween al 1,25%) se mezclaron con 50 \mul de
Biotin-proteína A (concentración final de 1 \mug/
diluida en PBS, pH 7,8, con Tween al 1,25%) y se incubaron a
temperatura ambiente durante 15 minutos con agitación, se añadieron
50 \mul de los anticuerpos TAG (una mezcla con una concentración
final de 1,25 \mug/ml del fragmento F(ab')_{2} a IgG
humana (H + L) y 0,25 \mug/ml de IgG antihumana (cadena g
específica) diluido en PBS, pH 7,8 con Tween al 1,25%). La solución
se añadió entonces a 50 \mul de medio acondicionado y se incubo
con agitación a temperatura ambiente durante 1 hora. Se añadieron
200 \mul de tampón de ensayo a la mezcla de reacción y la muestra
se analizó sobre el analizador Origen I para medir la ECL. El
resultado indicó que aproximadamente el 20-37% de
las colonias sometidas a ensayo secretaron más de 15 ng/ml del
anticuerpo con una expresión media de aproximadamente 150 ng/ml.
Los mAb humanizados antifactor IX se purificaron
a partir de los medios condicionados usando una etapa de captura
Procep A seguida por una cromatografía de intercambio de iones para
reducir la carga de ADN. El material sorbente de Procep A
(Bioprocessing Ltd., Durham, Inglaterra) se usó para preparar una
columna con una relación de diámetro/altura de 1:1. el medio
condicionado clarificado se cargo en la columna a aproximadamente
150 cm/hora. La columna se lavo secuencialmente con solución salina
de tampón fosfato (PBS), PBS que contenía 1 M de NaCl y finalmente
con PBS. El material de unión se recubrió con 0,1 M de elusión de
ácido acético. El eluado se ajustó a pH 5,5 y se diluyó (1:4) con
agua. La solución diluida se cargó en una columna de
S-Sefarosa (2.5 x 13 cm) que se preequilibró con 20
mM de acetato de sodio, pH 5,5 a 80 cm/hora. La columna se lavó con
el tampón acetato hasta que se obtuvo una línea base estable y la
proteína de unión se eluyó con 20 mM de fosfato de sodio, pH 7,4 a
25 cm/hora. El material eluido se filtró con una membrana de 0,4
micrómetros y se almacenó a 4ºC.
100 ng de ARN de BC2 se transcribieron
inversamente con un kit RT-PCR según las
instrucciones del fabricante (Boehringer Mammheim Cat. No
1483-188) usando un oligo dT para cebar, y un PCR
amplificado con cebadores sintéticos ScaI (SEQ ID NO: 100) y NarI
(SEQ ID NO: 101) para producir la región variable de cadena ligera
de BC2 con extremos de ScaI, Nar1 (SEQ ID NO: 102 y 103). Este ADN
se ligó a F9HZHC 1-3 (SEQ ID NO: 77) digerido por
ScaI, NarI, y se digierio con ScaI, NarI para producir un F9CHLC de
cadena ligera quimérica de ratón-humano (SEQ ID NO:
104 y 105).
100 ng de ARN de BC2 se transcribieron
inversamente con un kit RT-PCR según las
instrucciones del fabricante (Boehringer Mammheim Cat. No
1483-188) usando un oligo dT para cebar y un PCR
amplificado con cebadores sintéticos SpeI (SEQ ID NO: 106) y NheI
(SEQ ID NO: 107) para producir la región variable de cadena pesada
de BC2 con extremos de SpeI, NheI (SEQ ID NO: 108 y 109). Esta
secuencia de señal campath se amplifico por PCR a partir de la
cadena pesada de RSVHZ19 (SEQ ID NO: 25) con cebadores EcorI (SEQ
ID 26) y SpeI (SEQ ID 87). Estos dos fragmentos de ADN se ligaron a
un vector IL4CHHCpcd digerido con EcorI, NheI descrito en la
Solicitud de patente internacional publicada número WO95/07301, que
reemplaza la región variable IL4 con la región variable de ratón
de
factor IX de BC2, para producir un F9CHHC de cadena pesada quimérica de ratón-humano (SEQ ID No: 110 y 111).
factor IX de BC2, para producir un F9CHHC de cadena pesada quimérica de ratón-humano (SEQ ID No: 110 y 111).
La cotransfección y la purificación del
ch\alphaFIX de anticuerpo quimérico de
ratón-humano se llevó a cabo tal como se ha descrito
anteriormente para las construcciones humanizadas.
Con el fin de evaluar la eficacia de anticuerpos
de antifactor IX humanizados en la prevención de la trombosis
arterial, se usó el modelo de trombosis de la arteria carótida en
ratas tal como se ha descrito anteriormente en el ejemplo 3. Los
parámetros básicos se establecieron para el flujo sanguíneo
carotideo, la presión arterial, la frecuencia cardiaca, la abertura
de vaso y el tiempo de tromboplastina parcial activada (aPTT).
Quince minutos después, se efectuó la lesión carotidea durante 10
minutos. Los parámetros fueron determinados 60 minutos después del
principio de la lesión carotidea. El trombo carotideo se extrajo
también de la arteria carótida y se pesó.
Todos los agentes fueron administrados por vía
intravenosa 15 minutos antes del principio de la lesión carotidea.
Los siguientes tratamientos fueron examinados y comparados con el
mAb BC2 de antifactor IX.
- 1.-
- Vehículo
- 2.-
- ch\alphaFIX: 3 mg/kg de bolo
- 3.-
- SB 249413: 3 mg/kg de bolo
- 4.-
- SB 249415: 3 mg/kg de bolo
- 5.-
- SB 249416: 3 mg/kg de bolo
- 6.-
- SB 249417: 3 mg/kg de bolo
- 7.-
- SB 257731: 3 mg/kg de bolo
- 8.-
- Heparina: 60 unidades/kg de bolo + 2 unidades/kg/minuto de infusión.
El aPTT se usó como el criterio principal para
la evaluación de la eficacia contra las propensiones hemorrágicas de
los agentes anticoagulantes/trombóticos usados en el estudio. Los
resultados en la figura 8 demuestran que los mAb humanizados de
factor IX SB 249413, SB 249415, SB 249416, SB 249417 y SB 257731
tenían un efecto modesto sobre el aPTT a 3,0 mg/kg lo cual está
dentro del rango clínico aceptado.
El efecto de los mAb de factor IX sobre la masa
del trombo se muestra en la figura 9. Los resultados indican que
todos los mAb humanizados son igualmente efectivos en la reducción
de la masa del trombo.
Los estudios realizados en el modelo de
trombosis carotidea en ratas demuestran claramente la eficacia de
los mAb humanizados de factor IX en la prevención de la trombosis en
un modelo de lesión arterial altamente trombogénica. Más
particularmente, la eficacia de todos los mAb humanizados de factor
IX fue demostrada dentro del objetivo anticoagulante terapéutico
deseado definido por el aPTTT.
La masa molecular de SB 249417 fue determinada
por MALD-MS en 148.000 Da. La ultracentrifugación
analítica de SB 249417 dio un valor idéntico. En presencia del
factor IX + Ca^{2+}, los anticuerpos derivados de BC2 se
sedimentaron con una masa de 248.9000 Da que corresponde a la masa
combinada del mAb y dos moléculas del factor IX. No se han observado
evidencias de agregados de orden superior en presencia o ausencia
de factor IX.
La cinética del factor IX que se une a SB 249417
fue evaluada por análisis de Biacore con anticuerpo unido a una
superficie de proteína A inmovilizada. Se usó factor IX humano
recombinante (rhFIX, Genetics Institute) a 49 nM y se realizaron
mediciones en presencia de 5 mM de Ca^{2+}. La interacción se
caracterizó por la rápida asociación, kass = 2,0 x 10^{5} M^{-1}
s^{-1} y relación relativamente lenta, kdiss = 4,1 x 10^{-4}
s^{-1}. El k_{d} calculado para el enlace del factor IX fue de
1,9 nM.
La tabla 1 resume las propiedades biofísicas de
SB 249417
\vskip1.000000\baselineskip
| Isotipo | IgG1, Kapa | |
| Pureza por SDS-Page | > 95% (en condiciones de reducción) | |
| Peso molecular | ||
| \hskip1cm Espectrometría de masa | 148.000 Da | |
| \hskip1cm Ultracentrifugación analítica | 148.000 Da | |
| Estoquiometría del enlace de factor IX | ||
| \hskip1cm Calorimetría de titración isotérmica | Factor de 1,5 mol | |
| IX: mAb de 1 mol | ||
| Afinidad de enlace del factor IX | ||
| \hskip1cm Calorimetría de titración isotérmica | Kd = 4 nM a 25ºC | |
| \hskip1cm Biosensor | Kd = 2 nM | |
| Cinética de enlace de factor IX | ||
| \hskip1cm Biosensor | k_{ass} = 2,0 x 10^{5} M^{-1} S^{-1} | |
| K_{diss} = 4 x 10^{-4} s^{-1} |
\vskip1.000000\baselineskip
La tabla 2 resume las propiedades de enlace del
factor IX de los mAb de la presente invención. Las constantes de
disociación calculadas fueron esencialmente idénticas dentro del
error experimental.
| mAb | k_{ass}(M^{-1}s^{-1}) | k_{diss} (s^{-1}) | KD (nM) calculado | |
| SB 249 417 | 2,0 x 10^{5} | 4,1 x 10^{-4} | 1,9 | |
| BC2 | 4,8 x 10^{5} | 9,1 x 10^{-4} | 1,9 | |
| Chf9 | 2,4 x 10^{5} | 3,0 x 10^{-4} | 1,3 | |
| SB 249413 | 6,5 x 10^{5} | 2,8 x 10^{-3} | 3,7-5,1 | |
| SB 249415 | 7,5 x 10^{5} | 1,8 x 10^{-4} | 1,1-2,3 | |
| SB 249416 | 5,2 x 10^{5} | 4,1 x 10^{-4} | 0,8 | |
| SB 257731 | 9,2 x 10^{5} | 9,9 x 10^{-4} | 1,1 | |
| SB 257732 | 1,1 x 10^{5} | 1,2 x 10^{-3} | 1,5 |
\vskip1.000000\baselineskip
Las interacciones entre rhFIX y SB 249417, BC2 y
otras construcciones humanizadas se caracterizaron por la
microcalorimetría de titración, que mide las interacciones de enlace
en solución a partir del calor intrínseco de unión. Se hicieron
nueve inyecciones de 106 \muM de FIX dentro del calorímetro que
contienen 2 \muM de mAb SB 249417. El enlace fue detectado en las
4 primeras inyecciones como calores exotérmicos. En las 5 últimas
inyecciones los sitios de enlace de mAb se saturaron con Fix y sólo
se observaron calores de fondo de la mezcla. Los resultados
indicaron que el punto de equivalencia se produjo a una relación de
enlace molar cercana a 2 Fix por mAb, como se esperaba. El análisis
de cuadrados menores no lineales de los datos produjo la afinidad de
enlace.
Las afinidades rhFIX de los mAb se midieron a lo
largo de un rango de temperatura de entre 34 y 44ºC en 10 mM de
HEPES, 10 mM de CaCl_{2}, 150 mM de NaCL, pH 7,4. Estos datos
permiten que la afinidad a 37ºC sea determinada directamente y que
la afinidad a 25ºC sea calculada a partir de la ecuación van't Hoff.
Los datos de la Tabla 3 indican que las afinidades de SB 249417, BC2
y sus otras construcciones humanizadas están dentro del mismo error
(un factor de 2).
| MAb | Kd, nM a 25ºC | Kd, nM a 36ºC | Relación de enlace molar | |||
| FIX/mAb | ||||||
| BC2 | 10 | 20 | 1,4 | |||
| SB 249413 | 6 | 12 | 1,9 | |||
| SB 249415 | 3 | 7 | 1,7 | |||
| SB 249417 | 4 | 12 | 1,5 | |||
| SB 257732 | 4 | 9 | 1,8 |
\vskip1.000000\baselineskip
Los mAb 249413, Sb 249415, SB 249417 y SB 257732
exhibieron todos estabilidades térmicas muy similares por
calorimetría diferencial de barrido. Sus Tm expuestas varían entre
70 y 75ºC que indican alta estabilidad contra la desnaturalización
térmicamente inducida.
Una biblioteca de construcciones quiméricas
compuestas por secuencias de factores IX unidos a la estructura del
factor VII de proteína homóloga se construyó y se usó para
cartografiar el epítope para el mAb BC2 de factor IX. Véase Cheung
et al., Thromb. Res. 80, 419-427
(19956). Se midió el enlace usando un dispositivo de resonancia de
plasmón superficial BiaCore 2000. El anticuerpo BC2 se acopló
directamente al fragmento que usa la reacción NHS/EDC. El enlace se
midió durante un tiempo de contacto de 2 minutos a 20 \mul/min con
200 nM de cada una de las construcciones dadas en 25 mM de MOPS, pH
7,4, 0,15 M de NaCl, 5 mM de CaCl_{2}. La disociación se vigiló
durante 3 minutos usando el mismo tampón sin proteína. No se detectó
enlace a la construcción de tipo salvaje en presencia de 50 mm de
EDTA. Los datos se presentaron en la Tabla 4.
| Construcción | Grado de Enlace |
| Plasma Ixa | Enlaza |
| r-IX | Enlaza |
| Plasma VII | No hay enlace |
| IX LC/VIII HC | Enlaza |
| IX-A/VII | Enlaza |
| VII gla/IX | No hay enlace |
| VII-A/IX | No hay enlace |
| VII gla (IX 3-11)/IX | Enlaza |
| VII gla (IX 3-6)/IX | Enlace muy pequeño |
| VII gla (IX 9-11)/IX | Enlace muy pequeño |
| IX KSA | Enlaza |
Estos datos indican que las construcciones que
contienen la cadena ligera de factor IX y la cadena pesada de
factor VIII (IX LC/VII HC); los dominios de apilamiento gla y
aromáticos de factor IX (IX-A/VII), los residuos
3-11 del dominio gla del factor IX dentro del
dominio gla del factor VIII (VII gla (XI 3-11)/ IX);
y el factor IX que tiene una sustitución de lisina a alanina en el
residuo 5 (IX K5A) exhiben enlace a BC2. La construcción VII gla (XI
3-11)/IX exhibió el enlace de BC2 equivalente al
factor IX de tipo salvaje (plasma Ixa y r-IX). De
este modo el anticuerpo BC2 se enlaza a un epitope contenido
dentro del residuo 3-1 del dominio gla del Factor
IX.
(1) INFORMACIÓN GENERAL
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- SOLICITANTE: Blackburn, Michael
\hskip3.9cmChurch, William
\hskip3.9cmGross, Mitchell
\hskip3.9cmFeuerstein, Giora
\hskip3.9cmNichols, Andrew
\hskip3.9cmPadlan, Eduardo
\hskip3.9cmPatel, Arunbhai
\hskip3.9cmSylvester, Daniel
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TÍTULO DE LA INVENCIÓN: AGENTES ANTICOAGULANTES ÚTILES EN EL TRATAMIENTO DE LA TROMBOSIS
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- NÚMERO DE SECUENCIAS: 111
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- DIRECCIÓN DE CORREO:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- DIRECCIÓN: Smithkline Beecham Corporation
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- CALLE: 709 Swedeland Road
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CIUDAD: King of Prussia
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- ESTADO: PA
\vskip0.500000\baselineskip
- (E)
- PAÍS: USA
\vskip0.500000\baselineskip
- (F)
- CÓDIGO POSTAL: 19406
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- FORMA LEGIBLE INFORMÁTICA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- TIPO DE MEDIO: Disquete
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- ORDENADOR: Compatible IBM
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- SISTEMA OPERATIVO: DOS
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- SOFTWARE: FastSEQ Versión 1.5
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- DATOS DE SOLICITUD ACTUAL:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- NÚMERO DE SOLICITUD:
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- FECHA DE SOLICITUD: 16-ENERO-1997
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CLASIFICACIÓN:
\vskip0.800000\baselineskip
- (vii)
- DATOS DE SOLICITUD ANTERIOR:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- NÚMERO DE EXPEDIENTE: 60/029.119
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- FECHA DE SOLICITUD: 24-OCTUBRE-1996
\vskip0.800000\baselineskip
- (viii)
- INFORMACIÓN REPRESENTANTE/AGENTE:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- NOMBRE: Baumeister, Kirk
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- NÚMERO DE REGISTRO: 33.833
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- NÚMERO DE REFERENCIA/EXPEDIENTE: P50438
\vskip0.800000\baselineskip
- (ix)
- INFORMACIÓN DE TELECOMUNICACIÓN:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- TELÉFONO: 610-270-5096
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TELEFAX:
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- TELEX:
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 1:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 20 pares de bases
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: ácido nucleico
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: ADNc
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO:
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 1:
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
\hskip-.1em\dddseqskipCATCCTAGAG TCACCCAGGA
\hfill20
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 2:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 21 pares de bases
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: ácido nucleico
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: ADNc
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO:
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 2:
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
\hskip-.1em\dddseqskipAGCTGCCCAA AGTGCCCAAG C
\hfill21
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 3:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 36 pares de bases
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: ácido nucleico
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: ADNc
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO:
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 3:
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
\hskip-.1em\dddseqskipCTAACACTCA TTCCTGTTGA AGCTCTTGAC AATGGG
\hfill36
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 4:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 21 pares de bases
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: ácido nucleico
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: ADNc
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO:
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 4:
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
\hskip-.1em\dddseqskipGATTTTCARG TGCAGATTTT C
\hfill21
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 5:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 363 pares de bases
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: ácido nucleico
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: ADNc
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO:
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 5:
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 6:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 321 pares de bases
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: ácido nucleico
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: ADNc
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO:
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 6:
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 7:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 121 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: péptido
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: interno
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 7:
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 8:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 5 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: péptido
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: interno
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 8:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Asn Tyr Gly Met Asn}
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 9:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 17 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: péptido
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: interno
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 9:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Trp Ile Asn Thr Arg Asn Gly Lys Ser Thr Tyr
Val Asp Asp Phe Lys}
\sac{Gly}
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 10:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 12 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: péptido
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: interno
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 10:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Glu Gly Asn Met Asp Gly Tyr Phe Pro Phe Thr
Tyr}
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 11:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 107 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: áaminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: péptido
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: interno
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 11:
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 12:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 10 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: péptido
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: interno
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 12:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Arg Ala Ser Ser Ser Val Asn Tyr Met
His}
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO:13:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 7 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: péptido
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: interno
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 13:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Thr Ser Asn Leu Ala Ser}
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 14:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 9 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: péptido
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: interno
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 14:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Gln Gln Trp Ser Ile Asn Pro Arg Thr}
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 15:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 104 pares de bases
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: ácido nucleico
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: ADNc
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO:
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 15:
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 16:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 108 pares de bases
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: ácido nucleico
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: ADNc
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO:
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 16:
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 17:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 107 pares de bases
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: ácido nucleico
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: ADNc
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO:
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 17:
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 18:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 91 pares de bases
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: ácido nucleico
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: ADNc
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO:
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 18:
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 19:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 337 pares de bases
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: ácido nucleico
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: ADNc
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO:
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (ix)
- CARACTERÍSTICA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- NOMBRE/CLAVE: Secuencia de Codificación
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- LOCALIZACIÓN: 2...337
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- OTRA INFORMACIÓN:
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 19:
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 20:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 112 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: interno
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 20:
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 21:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 33 pares de bases
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: ácido nucleico
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: ADNc
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO:
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 21:
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
\hskip-.1em\dddseqskipGCTACTAGTG CAATCTGGGT CTGAGTTGAA GCC
\hfill33
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 22:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 30 pares de bases
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: ácido nucleico
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: ADNc
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO:
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 22:
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
\hskip-.1em\dddseqskipTGGGTACCCT GGCCCCAGTA AGTAAAAGGG
\hfill30
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 23:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 97 pares de bases
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: ácido nucleico
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: ADNc
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO:
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (ix)
- CARACTERÍSTICA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- NOMBRE/CLAVE: Secuencia de Codificación
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- LOCALIZACIÓN: 2...337
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- OTRA INFORMACIÓN:
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 23:
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 24:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 23 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: interno
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 24:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Met Gly Trp Ser Cys Ile Ile Leu Phe Leu Val
Ala Thr Ala Thr Gly}
\sac{Val His Ser Gln Val Gln Leu}
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 25:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 110 pares de bases
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: ácido nucleico
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: ADNc
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO:
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 25:
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 26:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 21 pares de bases
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: ácido nucleico
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: ADNc
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO:
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 26:
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
\hskip-.1em\dddseqskipGGAGACGCCA TCGAATTCTG A
\hfill21
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 27:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 30 pares de bases
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: ácido nucleico
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: ADNc
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO:
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 27:
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
\hskip-.1em\dddseqskipGATTGCACTA GTTGGACCTG GGAGTGGACA
\hfill30
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 28:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 77 pares de bases
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: ácido nucleico
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: ADNc
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO:
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 28:
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 29:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 73 pares de bases
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: ácido nucleico
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: ADNc
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO:
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 29:
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 30:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 363 pares de bases
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: ácido nucleico
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: ADNc
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO:
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (ix)
- CARACTERÍSTICA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- NOMBRE/CLAVE: Secuencia de Codificación
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- LOCALIZACIÓN: 1...363
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- OTRA INFORMACIÓN: F9H2HC 1-0
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 30:
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 31:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD:121 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: interno
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 31:
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 32:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 165 pares de bases
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: ácido nucleico
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: ADNc
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO:
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 32:
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 33:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 146 pares de bases
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: ácido nucleico
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: ADNc
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO:
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 33:
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 34:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 280 pares de bases
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: ácido nucleico
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: ADNc
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO:
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (ix)
- CARACTERÍSTICA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- NOMBRE/CLAVE: Secuencia de Codificación
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- LOCALIZACIÓN: 2...280
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- OTRA INFORMACIÓN:
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 34:
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 35:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 93 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: interno
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 35:
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 36:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 27 pares de bases
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: ácido nucleico
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: ADNc
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO:
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 36:
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
\hskip-.1em\dddseqskipTCGAGTACTG ACACAGTCTC CAGCCAC
\hfill27
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 37:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 27 pares de bases
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: ácido nucleico
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: ADNc
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO:
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 37:
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
\hskip-.1em\dddseqskipGACCGCGGGT TAATACTCCA CTGCTGA
\hfill27
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 38:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 94 pares de bases
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: ácido nucleico
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: ADNc
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO:
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (ix)
- CARACTERÍSTICA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- NOMBRE/CLAVE: Secuencia de Codificación
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- LOCALIZACIÓN: 27...92
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- OTRA INFORMACIÓN:
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 38:
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 39:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 22 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: interno
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 39:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Met Gly Trp Ser Cys Ile Ile Leu Phe Leu Val
Ala Thr Ala Thr Gly}
\sac{Val His Ser Glu Ile Val}
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 40:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 30 pares de bases
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: ácido nucleico
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: ADNc
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO:
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 40:
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
\hskip-.1em\dddseqskipGACTGTGTCA GTACTATCTC GGAGTGGACA
\hfill30
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 41:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 55 pares de bases
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: ácido nucleico
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: ADNc
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO:
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 41:
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
\hskip-.1em\dddseqskipGGGCAGCCTC CTAAGTTGCT CATTTACTGG GCGTCGACTA GGGAATCTGG GGTAC
\hfill55
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 42:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 51 pares de bases
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: ácido nucleico
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: ADNc
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO:
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 42:
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
\hskip-.1em\dddseqskipCCCAGATTCC CTAGTCGACG CCCAGTAAAT GAGCAACTTA GGAGGCTGCC C
\hfill51
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 43:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 321 pares de bases
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: ácido nucleico
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: ADNc
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO:
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (ix)
- CARACTERÍSTICA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- NOMBRE/CLAVE: Secuencia de Codificación
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- LOCALIZACIÓN: 1...321
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- OTRA INFORMACIÓN: F9H2LC1-0
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 43:
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 44:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 107 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: interno
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 44:
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 45:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 134 pares de bases
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: ácido nucleico
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: ADNc
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO:
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 45:
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 46:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 134 pares de bases
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: ácido nucleico
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: ADNc
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO:
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 46:
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 47:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 225 pares de bases
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: ácido nucleico
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: ADNc
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO:
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (ix)
- CARACTERÍSTICA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- NOMBRE/CLAVE: Secuencia de Codificación
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- LOCALIZACIÓN: 1...225
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- OTRA INFORMACIÓN:
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 47:
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 48:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 75 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: interno
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 48:
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 49:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 27 pares de bases
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: ácido nucleico
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: ADNc
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO:
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 49:
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
\hskip-.1em\dddseqskipTTTCCTGGAC AAGGGCTCAA GTGGATC
\hfill27
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 50:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 24 pares de bases
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: ácido nucleico
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: ADNc
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO:
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 50:
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
\hskip-.1em\dddseqskipTTTGGTACCC TGGCCCCAGT AAGT
\hfill24
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 51:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 363 pares de bases
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: ácido nucleico
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: ADNc
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO:
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (ix)
- CARACTERÍSTICA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- NOMBRE/CLAVE: Secuencia de Codificación
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- LOCALIZACIÓN: 1...363
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- OTRA INFORMACIÓN: F9HZHC 1-1
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 51:
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 52:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 121 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: interno
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 52:
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 53:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 82 pares de bases
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: ácido nucleico
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: ADNc
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO:
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 53:
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 54:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 90 pares de bases
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: ácido nucleico
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: ADNc
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO:
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 54:
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 55:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 27 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: péptido
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: interno
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 55:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Gln Gln Arg Pro Gly Gln Ala Pro Lys Pro Trp
Ile Tyr Ala Thr Ser}
\sac{Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro Ala Arg Phe
Ser}
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 56:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 321 pares de bases
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: ácido nucleico
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: ADNc
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO:
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (ix)
- CARACTERÍSTICA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- NOMBRE/CLAVE: Secuencia de Codificación
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- LOCALIZACIÓN: 1...321
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- OTRA INFORMACIÓN: F9HZLC 1-1
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 56:
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 57:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 107 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: interno
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 57:
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 58:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 41 pares de bases
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: ácido nucleico
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: ADNc
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO:
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 58:
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
\hskip-.1em\dddseqskipGATCCGGGTC TGGGACAGAT TACACTCTCA CGATATCCAG T
\hfill41
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 59:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 41 pares de bases
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: ácido nucleico
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: ADNc
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO:
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 59:
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
\hskip-.1em\dddseqskipCTAGACTGGA TATCGTGAGA GTGTAATCTG TCCCAGACCC G
\hfill41
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 60:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 13 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: péptido
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: interno
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 60:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile
Ser Ser}
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 61:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 321 pares de bases
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: ácido nucleico
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: ADNc
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO:
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (ix)
- CARACTERÍSTICA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- NOMBRE/CLAVE: Secuencia de Codificación
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- LOCALIZACIÓN: 1...321
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- OTRA INFORMACIÓN: F9HZLC 1-2
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 61:
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 62:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 107 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: interno
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 62:
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 63:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 165 pares de bases
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: ácido nucleico
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: ADNc
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO:
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 63:
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 64:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 161 pares de bases
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: ácido nucleico
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: ADNc
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO:
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 64:
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 65:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 280 pares de bases
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: ácido nucleico
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: ADNc
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO:
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (ix)
- CARACTERÍSTICA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- NOMBRE/CLAVE: Secuencia de Codificación
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- LOCALIZACIÓN: 2...280
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- OTRA INFORMACIÓN:
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 65:
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 66:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 93 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: interno
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 66:
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 67:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 27 pares de bases
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: ácido nucleico
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: ADNc
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO:
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 67:
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
\hskip-.1em\dddseqskipTTTAGTACTC ACCCAGAGCC CAAGCAG
\hfill27
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 68:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 27 pares de bases
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: ácido nucleico
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: ADNc
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO:
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 68:
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
\hskip-.1em\dddseqskipTTCCGCGGGT TAATACTCCA CTGCTGG
\hfill27
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 69:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 33 pares de bases
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: ácido nucleico
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: ADNc
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO:
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 69:
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
\hskip-.1em\dddseqskipCTCGAGCAGT ACTATCTGGG AGTGGACACC TGT
\hfill33
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 70:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 17 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: péptido
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: interno
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 70:
\newpage
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Arg Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile
Lys Arg Thr Val Ala}
\sac{Ala}
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 71:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 48 pares de bases
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: ácido nucleico
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: ADNc
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO:
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 71:
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
\hskip-.1em\dddseqskipGGACGTTCGG CCAAGGGACC AAGGTGGAAA TCAAACGGAC TGTGGCGG
\hfill48
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 72:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 52 pares de bases
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: ácido nucleico
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: ADNc
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO:
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 72:
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
\hskip-.1em\dddseqskipGGACGTTCGG CCAAGGGACC AAGGTGGAAA TCAAACGGAC TGTCGCGG
\hfill48
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 73:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 321 pares de bases
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: ácido nucleico
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: ADNc
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO:
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (ix)
- CARACTERÍSTICA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- NOMBRE/CLAVE: Secuencia de Codificación
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- LOCALIZACIÓN: 1...321
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- OTRA INFORMACIÓN: F9HZLC 2-0
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 73:
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 74:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 107aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: interno
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 74:
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 75:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 94 pares de bases
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: ácido nucleico
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: ADNc
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO:
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (ix)
- CARACTERÍSTICA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- NOMBRE/CLAVE: Secuencia de Codificación
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- LOCALIZACIÓN: 27...94
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- OTRA INFORMACIÓN:
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 75:
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 76:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 23 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: interno
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 76:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Met Gly Trp Ser Cys Ile Ile Leu Phe Leu Val
Ala Thr Ala Thr Gly}
\sac{Val His Ser Gln Ile Val Leu}
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 77:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 401 pares de bases
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: ácido nucleico
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: ADNc
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO:
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (ix)
- CARACTERÍSTICA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- NOMBRE/CLAVE: Secuencia de Codificación
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- LOCALIZACIÓN: 27...401
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- OTRA INFORMACIÓN: F9HZLC 1-3
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 77:
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 78:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 125 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: interno
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 78:
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 79:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 91 pares de bases
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: ácido nucleico
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: ADNc
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO:
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 79:
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 80:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 99 pares de bases
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: ácido nucleico
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: ADNc
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO:
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 80:
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 81:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 87 pares de bases
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: ácido nucleico
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: ADNc
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO:
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 81:
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 82:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 86 pares de bases
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: ácido nucleico
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: ADNc
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO:
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 82:
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 83:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 278 pares de bases
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: ácido nucleico
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: ADNc
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO:
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (ix)
- CARACTERÍSTICA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- NOMBRE/CLAVE: Secuencia de Codificación
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- LOCALIZACIÓN: 3...278
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- OTRA INFORMACIÓN:
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 83:
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 84:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 92 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: interno
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 84:
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 85:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 30 pares de bases
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: ácido nucleico
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: ADNc
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO:
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 85:
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
\hskip-.1em\dddseqskipAGGCCTCTGG ATACACCTTC ACTAACTATG
\hfill30
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 86:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 26 pares de bases
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: ácido nucleico
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: ADNc
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO:
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 86:
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
\hskip-.1em\dddseqskipGGTACCCTGG CCCCAGTAAG TAAAAG
\hfill26
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 87:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 37 pares de bases
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: ácido nucleico
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: ADNc
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO:
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 87:
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
\hskip-.1em\dddseqskipCCAGACTCGA CTAGTTGGAT CTGGGAGTGG ACACCTG
\hfill37
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 88:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 446 pares de bases
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: ácido nucleico
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: ADNc
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO:
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (ix)
- CARACTERÍSTICA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- NOMBRE/CLAVE: Secuencia de Codificación
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- LOCALIZACIÓN: 27...446
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- OTRA INFORMACIÓN: F9HZLC 3-0
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 88:
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 89:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 140 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: interno
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 89:
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 90:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 90 pares de bases
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: ácido nucleico
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: ADNc
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO:
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 90:
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 91:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 108 pares de bases
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: ácido nucleico
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: ADNc
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO:
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 91:
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 92:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 108 pares de bases
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: ácido nucleico
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: ADNc
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO:
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 92:
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 93:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 102 pares de bases
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: ácido nucleico
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: ADNc
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO:
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 93:
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 94:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 330 pares de bases
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: ácido nucleico
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: ADNc
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO:
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (ix)
- CARACTERÍSTICA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- NOMBRE/CLAVE: Secuencia de Codificación
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- LOCALIZACIÓN: 2...328
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- OTRA INFORMACIÓN:
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 94:
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 95:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 109 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: interno
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 95:
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 96:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 26 pares de bases
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: ácido nucleico
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: ADNc
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO:
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 96:
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
\hskip-.1em\dddseqskipCAAGTACTGA CACAGTCTCC ATCCTC
\hfill26
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 97:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 26 pares de bases
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: ácido nucleico
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: ADNc
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO:
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 97:
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
\hskip-.1em\dddseqskipAGGGCGCCGC CACAGTTCGT TTGATC
\hfill26
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 98:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 412 pares de bases
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: ácido nucleico
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: ADNc
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO:
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (ix)
- CARACTERÍSTICA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- NOMBRE/CLAVE: Secuencia de Codificación
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- LOCALIZACIÓN: 27...412
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- OTRA INFORMACIÓN: F9HZLC 3-0
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 98:
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 99:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 129 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: interno
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 99:
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 100:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 26 pares de bases
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: ácido nucleico
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: ADNc
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO:
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 100:
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
\hskip-.1em\dddseqskipCAAATAGTAC TCTCCCAGTC TCCAGC
\hfill26
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 101:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 41 pares de bases
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: ácido nucleico
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: ADNc
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO:
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 101:
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
\hskip-.1em\dddseqskipGGATAAGCTT GGCGCCGCAA CAGTCGGTTT GATTTCCAGC T
\hfill41
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 102:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 335 pares de bases
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: ácido nucleico
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: ADNc
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO:
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (ix)
- CARACTERÍSTICA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- NOMBRE/CLAVE: Secuencia de Codificación
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- LOCALIZACIÓN: 1...335
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- OTRA INFORMACIÓN:
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 102:
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 103:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 112 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: interno
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 103:
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 104:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 318 pares de bases
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: ácido nucleico
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: ADNc
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO:
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (ix)
- CARACTERÍSTICA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- NOMBRE/CLAVE: Secuencia de Codificación
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- LOCALIZACIÓN: 1...318
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- OTRA INFORMACIÓN:
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 104
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 105:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 106 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: interno
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 105:
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 106:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 30 pares de bases
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: ácido nucleico
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: ADNc
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO:
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 106:
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
\hskip-.1em\dddseqskipCAGATCCAAC TAGTGCAGTC TGGACCTGAG
\hfill30
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 107:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 32 pares de bases
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: ácido nucleico
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: ADNc
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO:
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 107:
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
\hskip-.1em\dddseqskipTTAAGCTTGC TAGCTGCAGA GACAGTGACC AG
\hfill32
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 108:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 369 pares de bases
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: ácido nucleico
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: ADNc
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO:
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (ix)
- CARACTERÍSTICA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- NOMBRE/CLAVE: Secuencia de Codificación
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- LOCALIZACIÓN: 1...369
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- OTRA INFORMACIÓN:
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 108:
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 109:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 123 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: interno
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 109:
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 110:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 363 pares de bases
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: ácido nucleico
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: ADNc
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO:
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (ix)
- CARACTERÍSTICA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- NOMBRE/CLAVE: Secuencia de Codificación
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- LOCALIZACIÓN: 1...363
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- OTRA INFORMACIÓN:
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 110:
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 111:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 121 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CADENA: única
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: interno
\vskip0.800000\baselineskip
- (vi)
- FUENTE ORIGINAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 111:
Claims (5)
1. El uso de un anticuerpo monoclonal de
antifactor IX seleccionado a partir del grupo constituido por SB
249413, en el que la cadena pesada tiene la secuencia de aminoácidos
expuesta en SEQ ID NO 31 y la cadena ligera tiene la secuencia de
aminoácidos expuesta en SEQ ID NO 44;
SB 249415, en el que la cadena pesada tiene la
secuencia de aminoácidos expuesta en SEQ ID NO 52 y la cadena ligera
tiene la secuencia de aminoácidos expuesta en SEQ ID NO 57;
SB 249416, en el que la cadena pesada tiene la
secuencia de aminoácidos expuesta en SEQ ID NO 52 y la cadena ligera
tiene la secuencia de aminoácidos expuesta en SEQ ID NO 62;
SB 249417, en el que la cadena pesada tiene la
secuencia de aminoácidos expuesta en SEQ ID NO 52 y la cadena ligera
tiene la secuencia de aminoácidos expuesta en SEQ ID NO 74;
SB 257731, en el que la cadena pesada tiene la
secuencia de aminoácidos expuesta en SEQ ID NO 52 y la cadena ligera
tiene la secuencia de aminoácidos expuesta en SEQ ID NO 78;
SB 257732, en el que la cadena pesada tiene la
secuencia de aminoácidos expuesta en SEQ ID NO 89 y la cadena ligera
tiene la secuencia de aminoácidos expuesta en SEQ ID NO 99, dicho
anticuerpo tiene actividad neutralizante autolimitativa contra el
factor IX en la fabricación de un medicamento para el tratamiento de
trastornos trombóticos y embólicos asociados.
2. El uso según la reivindicación 1 en el que el
trastorno asociado se selecciona a partir del grupo constituido
por:
infarto de miocardio, angina inestable,
fibrilación atrial, apoplejía, daño renal, embolismo pulmonar,
trombosis venal profunda, angioplastia coronaria transluminal
percutánea, coagulación intravascular diseminada, sepsis, órganos
ratifícales, shunts o prótesis.
3. El uso según la reivindicación 1 ó 2, en el
cual el anticuerpo es quimérico o humanizado.
4. El uso según la reivindicación 1, en el cual
el anticuerpo es un fragmento seleccionado del grupo constituido por
F_{VI}, Fab, Fab', F(ab')_{2}.
5. El uso de un ácido nucleico que codifica un
anticuerpo monoclonal seleccionado a partir del grupo constituido
por SB 249413, en el que la cadena pesada tiene la secuencia de
aminoácidos expuesta en SEQ ID NO 31 y la cadena ligera tiene la
secuencia de aminoácidos expuesta en SEQ ID NO 44;
SB 249415, en el que la cadena pesada tiene la
secuencia de aminoácidos expuesta en SEQ ID NO 52 y la cadena ligera
tiene la secuencia de aminoácidos expuesta en SEQ ID NO 57;
SB 249416, en el que la cadena pesada tiene la
secuencia de aminoácidos expuesta en SEQ ID NO 52 y la cadena ligera
tiene la secuencia de aminoácidos expuesta en SEQ ID NO 62;
SB 249417, en el que la cadena pesada tiene la
secuencia de aminoácidos expuesta en SEQ ID NO 52 y la cadena ligera
tiene la secuencia de aminoácidos expuesta en SEQ ID NO 74;
SB 257731, en el que la cadena pesada tiene la
secuencia de aminoácidos expuesta en SEQ ID NO 52 y la cadena ligera
tiene la secuencia de aminoácidos expuesta en SEQ ID NO 78;
SB 257732, en el que la cadena pesada tiene la
secuencia de aminoácidos expuesta en SEQ ID NO 89 y la cadena ligera
tiene la secuencia de aminoácidos expuesta en SEQ ID NO 99 en la
fabricación de un medicamento para el tratamiento de trastornos
trombóticos y embólicos asociados de una cualquiera de las
reivindicaciones 1 a 4.
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