ES2260417T3

ES2260417T3 - Derivados de mikanolida, su preparacion y sus aplicaciones terapeuticas.

Info

Publication number: ES2260417T3
Application number: ES02710969T
Authority: ES
Inventors: Olivier Lavergne; Christophe Lanco; Gregoire Prevost; Beng Poon Teng
Original assignee: Societe de Conseils de Recherches et dApplications Scientifiques SCRAS SAS
Current assignee: Ipsen Pharma SAS
Priority date: 2001-01-12
Filing date: 2002-01-11
Publication date: 2006-11-01
Anticipated expiration: 2022-01-11
Also published as: TWI293302B; WO2002055523A1; RU2003124760A; JP4418627B2; US6887869B2; DE60209698D1; CN1234711C; CA2433981A1; BR0206311A; NZ526690A; US20040122084A1; AR035681A1; AU2002229870B2; RU2278121C2; ATE319716T1; MXPA03006162A; CN1484646A; KR100859227B1; KR20030066806A; EP1353926A1

Abstract

Un compuesto de la **fórmula**, en la que R1 representa un átomo de hidrógeno o un radical SR4 o NR4R5; R2 representa SR6 o NR6R7; R3 representa OH, O(CO)R14, OSiR15R16R17, O(CO)OR18 o O(CO)NHR18; R4 y R6 representan, independientemente, un radical alquilo, un radical cicloalquilo, cicloalquilalquilo, hidroxialquilo o también uno de los radicales arilo o aralquilo opcionalmente sustituidos sobre su grupo arilo con uno o más radicales elegidos entre los radicales alquilo, hidroxi o alcoxi, R5 y R7 representan, independientemente, un átomo de hidrógeno, un radical alquilo, un radical cicloalquilo, cicloalquilalquilo, hidroxialquilo o también uno de los radicales arilo o aralquilo opcionalmente sustituidos sobre su grupo arilo con uno o más radicales elegidos entre los radicales alquilo, hidroxi o alcoxi, o una sal de un compuesto de la fórmula general.

Description

Derivados de mikanolida, su preparación y sus aplicación terapéuticas.

La invención tiene por objeto nuevos derivados de mikanolida, sus procedimientos de preparación así como sus aplicaciones terapéuticas, especialmente como agentes anticancerosos, antibacterianos y antivirales.

Las plantas tropicales del género Mikania tales como M. cordata, M. scandens o M. micrantha son parte de ciertas farmacopeas tradicionales de la India, América del Sur y América Central. Bajo los nombres de guaco, bejuco de finca, cepu, liana francesa, matafinca, o también vedolin, los extractos de Mikania se emplean como antibióticos y anti-inflamatorios.

Se han aislado y caracterizado sustancias activas procedentes de extractos de Mikania: se trata de mikanolida y dihidromikanolida (véanse sus estructuras en la figura que sigue), y en menor medida escandenolidas. Estos son sesquiterpenos de la familia de los germacranos, es decir que tienen el 4-isopropil-1,7-dimetilciclodecano por esqueleto hidrocarbonado (Herz et al., Tetrahedron Lett. (1967) 3111-3115; Kiang et al., Phytochemistry (1968) 7: 1035-1037; Cuenca et al., J. Nat. Prod. (1988), 51, 625-626).

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Los estudios de los extractos de Mikania detallan una actividad antimicrobiana frente a Staphylococus aureus y Cándida albicans (Facey et al., J. Pharm. Pharmacol. (1999) 51, 1455-1460; Mathur et al., Rev. Latinoam. Quim. (1975), 6, 201-205). Facey y su equipo han demostrado especialmente que los extractos orgánicos de M. micrantha, utilizados en la medicina tradicional bajo la forma de decocciones destinadas a tratar las infecciones cutáneas y las úlceras, tenían una actividad antibacteriana y que las sustancias mikanolida y dihidromikanolida estaban entre los principios activos de dichos extractos orgánicos (Facey et al., J. Pharm. Pharmacol. (1999) 51(12), 1455-1460). Se han descrito también actividades moluscocidas, piscicidas y bactericidas para la dihidromikanolida (Vasquez et al., AG Meeting, Amsterdam, Netherlands, 26-30 Jul. 1999, póster No. 316).

Con el fin de elucidar las estructuras, ciertos derivados simples de mikanolida y dihidromikanolida, y especialmente los compuestos de las fórmulas generales (A1) y (A2) representadas a continuación

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en las cuales R representa un átomo de hidrógeno o el grupo acetilo, han sido sintetizados y descritos en Herz et al., J. Org. Chem. (1970), 35, 1453-1464. Sin embargo este documento no describe ninguna actividad farmacológica para estos compuestos.

Anteriormente, S.M. Kupchan y su equipo (S.M. Kupchan et al., J. Am. Chem. Soc. (1996), 88(15),3674-3676), habían aislado dos dilactones de sesquiterpenos de tipo germacrano un partir de la planta Elephantopus elatus Bertol. (compuestas), a saber la elefantina (A3) y la elefantopina (A4) representadas a continuación

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Estos dos compuestos estaban descritos como inhibidores tumorales.

En la solicitud de la patente francesa FR 2 801 792 se ha descrito recientemente que la mikanolida y la dihidromikanolida están dotadas de una actividad antiproliferativa, que está ligada con la inhibición de la DNA-polimerasa (solicitud de patente PCT WO 01/39720). Sin embargo, las mikanolidas no tienen todas las propiedades físico-químicas deseables para una aplicación medicamentosa porque no son ni muy solubles en agua, ni muy estables, lo que hace su uso farmacéutico relativamente difícil, en particular bajo la forma inyectable.

Ahora, en esta solicitud se han desarrollado nuevos derivados semi-sintéticos de mikanolida, que se pueden utilizar para el tratamiento de enfermedades debidas a proliferaciones celulares anormales, especialmente para el tratamiento del cáncer, enfermedades víricas e infecciones bacterianas y parasitarias. Estos compuestos tienen la ventaja de una mejor solubilidad y una mejor estabilidad que la de mikanolida y dihidromikanolida a la vez que conservan una actividad similar a la de estas últimas o incluso superior.

La invención tiene por objeto los compuestos de la fórmula general (I)

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que corresponde a las sub-fórmulas generales (I)_{1} y (I)_{2}

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en las cuales

R_{1} representa un átomo de hidrógeno o un radical SR_{4} o NR_{4}R_{5};

R_{2} representa SR_{6} o NR_{6}R_{7};

R_{3} representa OH, O(CO)R_{14}, OSiR_{15}R_{16}R_{17}, O(CO)OR_{18} o O(CO)NHR_{18};

R_{4} y R_{6} representan, independientemente, un radical alquilo, un radical cicloalquilo, cicloalquilalquilo, hidroxialquilo o también uno de los radicales arilo o aralquilo opcionalmente sustituidos sobre su grupo arilo con uno o más radicales elegidos entre los radicales alquilo, hidroxi o alcoxi,

R_{5} y R_{7} representan, independientemente, un átomo de hidrógeno, un radical alquilo, un radical cicloalquilo, cicloalquilalquilo, hidroxialquilo o también uno de los radicales arilo o aralquilo opcionalmente sustituidos sobre su grupo arilo con uno o más radicales elegidos entre los radicales alquilo, hidroxi o alcoxi,

R_{4} y R_{5} pueden formar junto con el átomo de nitrógeno que los sostiene, un heterociclo con 5 a 7 miembros, siendo elegidos los miembros complementarios entre los radicales -CR_{8}R_{9}-, -NR_{10}-, -O- y -S-, siendo entendido, sin embargo, que no puede haber más que un solo miembro elegido entre -O- o-S- en dicho heterociclo,

y R_{6} y R_{7} pueden formar junto con el átomo de nitrógeno que los sostiene, un heterociclo con 5 a 7 miembros, siendo elegidos los miembros complementarios entre los radicales -CR_{11}R_{12}-, -NR_{13}-, -O- y -S-, siendo entendido, sin embargo, que no puede haber más que un solo miembro elegido entre -O- o-S- en dicho heterociclo,

R_{8}, R_{10}, R_{11} y R_{13} representan, independientemente cada vez que intervienen, un átomo de hidrógeno o un radical alquilo, alcoxicarbonilo o aralquilo,

R_{9} y R_{12} que representan, independientemente cada vez que intervienen, un átomo de hidrógeno o cada uno de R_{9} y R_{12} pueden formar respectivamente junto con R_{8} y R_{11} un radical -O-(CH_{2})_{2}-O- unido de una y otra parte al átomo de carbono que le sostiene, no estando presente sin embargo tal radical más que una vez como máximo por radical NR_{4}R_{5} o NR_{6}R_{7}, representan, independientemente cada vez que intervienen, un átomo de hidrógeno o un radical alquilo;

R_{14} representa un radical alquilo, cicloalquilo o adamantilo o uno de los radicales arilo, heteroarilo, aralquilo o heteroaralquilo opcionalmente sustituidos sobre su grupo arilo o heteroarilo con uno o más radicales elegidos entre un átomo de halógeno y los radicales alquilo, haloalquilo, nitro, hidroxi, alcoxi, alquiltio o fenilo,

o también R_{14} es tal que R_{14}-COOH representa un aminoácido natural o el enantiómero óptico de dicho aminoácido;

R_{15}, R_{16} y R_{17} representan, independientemente, un radical alquilo o un radical fenilo;

R_{18} representa un radical alquilo, cicloalquilo o adamantilo o uno de los radicales arilo, heteroarilo, aralquilo o heteroaralquilo opcionalmente sustituidos sobre su grupo arilo o heteroarilo con uno o más radicales elegidos entre un átomo de halógeno y los radicales alquilo, haloalquilo, nitro, hidroxi, alcoxi, alquiltio o fenilo;

siendo entendido, sin embargo, que cuando los compuestos corresponden a la sub-fórmula general (I)_{2}, entonces R_{1} no representa un átomo de hidrógeno;

o las sales de estos compuestos.

Por alquilo, cuando no se especifica otra cosa, se entiende un radical alquilo lineal o ramificado que contiene 1 a 12 átomos de carbono, y preferiblemente 1 a 6 átomos de carbono. Por cicloalquilo, cuando no se especifica otra cosa, se entiende un sistema monocíclico carbonado que contiene 3 a 7 átomos de carbono. Por haloalquilo, se entiende un radical alquilo en el que al menos uno de los átomos de hidrógeno (y opcionalmente todos) está reemplazado por un átomo de halógeno. Por arilo carbocíclico o heterocíclico, cuando no se especifica otra cosa, se entiende un sistema carbocíclico o heterocíclico que comprende uno a tres ciclos condensados de los que al menos uno es un ciclo aromático, un sistema que es denominado heterocíclico cuando al menos uno de los ciclos que le componen contiene uno o más heteroátomos (O, N o S). Por arilo, cuando no se especifica otra cosa, se entiende un radical arilo carbocíclico. Por heteroarilo, se entiende un radical arilo heterocíclico. Por haloalquilo, se entiende un radical alquilo en el que al menos uno de los átomos de hidrógeno (y opcionalmente todos) está reemplazado por un átomo de halógeno. Finalmente, por átomo de halógeno, se entiende los átomos de flúor, cloro, bromo o yodo.

Por radicales alcoxi, hidroxialquilo, cicloalquilalquilo, aralquilo y heteroaralquilo, se entiende respectivamente los radicales alcoxi, hidroxialquilo, cicloalquilalquilo y aralquilo en los que los radicales alquilo, cicloalquilo, arilo y heteroaralquilo tienen los significados indicados precedentemente.

Por aminoácido natural, se entiende valina (Val), leucina (Leu), isoleucina (Ile), metionina (Met), fenilalanina (Fe), asparragina (Asn), ácido glutámico (Glu), glutamina (Gln), histidina (His), lisina (Lys), arginina (Arg), ácido aspártico (Asp), glicina (Gly), alanina (Ala), serina (Ser), treonina (Thr), tirosina (Tyr), triptófano (Trp), cisteína (Cys) o prolina (Pro).

Por alquilo lineal o ramificado que tiene 1 a 6 átomos de carbono, se entiende en particular los radicales metilo, etilo, propilo, isopropilo, butilo, isobutilo, sec-butilo y terc-butilo, pentilo, neopentilo, isopentilo, hexilo, isohexilo. Por alcoxi, se entiende especialmente los radicales metoxi, etoxi e isopropoxi, y en particular los radicales metoxi y etoxi. Por cicloalquilo, se entiende especialmente los radicales ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo y ciclohexilo. Por haloalquilo, se entiende especialmente el radical trifluorometilo. Por arilo carbocíclico, se entiende especialmente los radicales fenilo, naftilo y fenantrilo, preferiblemente los radicales fenilo y naftilo y más preferiblemente el radical fenilo. Por arilo heterocíclico, se entiende especialmente los radicales pirrolilo, furanilo, benzofuranilo, tienilo, benzotienilo, piridilo, pirimidinilo, triazinilo, imidazolilo, oxazolilo, tiazolilo, indolilo y quinolilo, y preferiblemente los radicales furanilo, benzofuranilo, tienilo y benzotienilo. Por aralquilo, se entiende especialmente un radical fenalquilo, y preferiblemente el radical bencilo. Por heteroaralquilo, se entiende especialmente un radical tienilalquilo, furanilalquilo, pirrolilalquilo y tiazolilalquilo (siendo preferiblemente el radical alquilo de dichos radicales un radical metilo), y preferiblemente un radical tienilalquilo (preferiblemente tienilmetilo).

Se prefiere un compuesto de la fórmula general (I) que tiene al menos una de las siguientes características:

\bullet: el compuesto corresponde a la sub-fórmula general (I)_{1};

\bullet: R_{1} representa un átomo de hidrógeno o un radical NR_{4}R_{5};

\bullet: R_{2} representa un radical NR_{6}R_{7};

\bullet: R_{3} representa OH, o un radical O(CO)R_{14}, OSiR_{15}R_{16}R_{17} o O(CO)NHR_{18}.

Más preferiblemente, un compuesto de la fórmula general (I) será el que tiene al menos una de las siguientes características:

\bullet: el compuesto corresponde a la sub-fórmula general (I)_{1};

\bullet: R_{1} representa un átomo de hidrógeno;

\bullet: R_{2} representa un radical NR_{6}R_{7};

\bullet: R_{3} representa un radical O(CO)R_{14}, OSiR_{15}R_{16}R_{17} o O(CO)NHR_{18}.

Muy particularmente, un compuesto de la fórmula general (I) será el que tiene al menos una de las siguientes características:

\bullet: el compuesto corresponde a la sub-fórmula general (I)_{1};

\bullet: R_{1} representa un átomo de hidrógeno;

\bullet: R_{2} representa un radical NR_{6}R_{7} y preferiblemente un radical NR_{6}R_{7} en el que R_{6} y R_{7} se eligen independientemente entre un átomo de hidrógeno y un radical alquilo;

Además, R_{2} representará muy preferiblemente un radical NR_{6}R_{7} en el que R_{6} y R_{7} son radicales alquilo, y en particular un radical NR_{6}R_{7} en el que R_{6} y R_{7} son radicales metilo. R_{3} representará muy preferiblemente un radical O(CO)NHR_{18}.

Preferiblemente también, R_{4} representará un radical alquilo o aralquilo, y R_{5} representará un átomo de hidrógeno o un radical alquilo, o también R_{4} y R_{5} formarán junto con el átomo de nitrógeno que los sostiene, un heterociclo con 5 a 7 miembros, siendo elegidos los miembros complementarios entre los radicales -CR_{8}R_{9}-, -NR_{10}-, -O- y -S-. Preferiblemente, R_{8} representará, independientemente cada vez que interviene, un átomo de hidrógeno o un radical alquilo (y preferiblemente un átomo de hidrógeno) y R_{9} representará, independientemente cada vez que interviene, un átomo de hidrógeno. Preferiblemente, R_{10} representará, independientemente cada vez que interviene, un átomo de hidrógeno o un radical alquilo.

Preferiblemente también, R_{6} representará un radical alquilo o aralquilo, y R_{7} representará un átomo de hidrógeno o un radical alquilo, o también R_{6} y R_{7} formarán junto con el átomo de nitrógeno que los sostiene, un heterociclo con 5 a 7 miembros, siendo elegidos los miembros complementarios entre los radicales -CR_{11}R_{12}-, -NR_{13}-, -O- y -S-. Preferiblemente, R_{11} representará, independientemente cada vez que interviene, un átomo de hidrógeno o un radical alquilo o alcoxicarbonilo (y preferiblemente un átomo de hidrógeno) o también R_{11} y R_{12} representarán, una vez juntos, un radical -O-(CH_{2})_{2}-O- unido de una y otra parte al átomo de carbono que le sostiene. Preferiblemente, R_{13} representará, independientemente cada vez que interviene, un átomo de hidrógeno o un radical alquilo.

Además, R_{14} representará preferiblemente un radical alquilo o cicloalquilo, o uno de los radicales arilo o heteroarilo opcionalmente sustituidos con un átomo de halógeno o un radical haloalquilo o fenilo. Más preferiblemente, R_{14} representará un radical cicloalquilo o uno de los radicales arilo o heteroarilo opcionalmente sustituidos con un átomo de halógeno o un radical haloalquilo. De forma aún más preferida, R_{14} representará un radical ciclohexilo o uno de los radicales fenilo, tienilo o benzotienilo opcionalmente sustituidos con un átomo de halógeno.

Por otro lado, R_{15}, R_{16} y R_{17} representarán preferiblemente radicales alquilo. De forma particularmente preferida, uno de los radicales R_{15}, R_{16} y R_{17} representará un radical terc-butilo y los otros dos representarán radicales metilo.

Finalmente, R_{18} representará preferiblemente un radical alquilo, cicloalquilo o adamantilo, o uno de los radicales arilo o heteroarilo opcionalmente sustituidos con un átomo de halógeno o un radical alquilo, haloalquilo, alcoxi, alquiltio o fenilo. Más preferiblemente, R_{18} representará un radical cicloalquilo o uno de los radicales arilo o heteroarilo opcionalmente sustituidos con un radical alquilo, alcoxi o alquiltio. De forma aún más preferida, R_{18} representará uno de los radicales fenilo, tienilo o benzotienilo opcionalmente sustituidos con un radical alquilo, alcoxi o alquiltio.

Por otro lado, cuando R_{4} y R_{5} forman junto con el átomo de nitrógeno que los sostiene, un heterociclo con 5 a 7 miembros, el radical NR_{4}R_{5} representa preferiblemente uno de los radicales pirrolilo, piperidilo, piperazinilo, morfolinilo o tiomorfolinilo opcionalmente sustituidos con un radical alquilo (siendo éste preferiblemente un radical metilo o etilo, y más preferiblemente un radical metilo) sobre uno de sus átomos de carbono o de nitrógeno, o con un radical -O-(CH_{2})_{2}-O- unido de una y otra parte a un átomo de carbono. Más preferiblemente, cuando R_{4} y R_{5} forman junto con el átomo de nitrógeno que los sostiene, un heterociclo con 5 a 7 miembros, el radical NR_{4}R_{5} representará uno de los radicales pirrolilo, piperidilo, piperazinilo, morfolinilo o tiomorfolinilo opcionalmente sustituidos con un radical alquilo (siendo éste preferiblemente un radical metilo) sobre uno de sus átomos de carbono o de nitrógeno.

Del mismo modo, cuando R_{6} y R_{7} forman junto con el átomo de nitrógeno que los sostiene, un heterociclo con 5 a 7 miembros, el radical NR_{6}R_{7} representa preferiblemente uno de los radicales pirrolilo, piperidilo, piperazinilo, morfolinilo o tiomorfolinilo opcionalmente sustituidos con un radical alquilo (siendo éste preferiblemente un radical metilo o etilo, y más preferiblemente un radical metilo) sobre uno de sus átomos de carbono o de nitrógeno, o con un radical -O-(CH_{2})_{2}-O- unido de una y otra parte a un átomo de carbono. Más preferiblemente, cuando R_{6} y R_{7} forman junto con el átomo de nitrógeno que los sostiene, un heterociclo con 5 a 7 miembros, el radical NR_{6}R_{7} representará uno de los radicales pirrolilo, piperidilo, piperazinilo, morfolinilo o tiomorfolinilo opcionalmente sustituidos con un radical alquilo (siendo éste preferiblemente un radical metilo) sobre uno de sus átomos de carbono o de nitrógeno.

La invención se refiere en particular a los siguientes compuestos descritos en los ejemplos:

- 12-diisopropilaminometil-7-metil-3,6,10,15-tetraoxapentaciclo[12.2.1.0^{2,4}.0^{5,7}.0^{9,13}]heptadec-1(17)-en-11,16-diona;

- 12-dimetilamino-3-dimetilaminometil-11-hidroxi-8-metil-5,9,15-trioxatetraciclo[11.2.1.0^{2,6}.0^{8,10}]hexadec-13(16)-en-4,14-diona;

- 12-bencil(metil)amino-3-bencil(metil)aminometil-11-hidroxi-8-metil-5,9,15-trioxatetraciclo[11.2.1.0^{2,6}.0^{8.10}]hexadec-13(16)-en-4,14-diona;

- 11-hidroxi-8-metil-12-morfolino-3-morfolinometil-5,9,15-trioxatetraciclo[11.2.1.0^{2,6}.0^{8,10}]hexadec-13(16)-en-4,14-diona;

- 12-dimetilamino-11-hidroxi-3,8-dimetil-5,9,15-trioxatetraciclo[11.2.1.0^{2,6}.0^{8,10}]hexadec-13(16)-en-4,14-diona;

- 11-hidroxi-3,8-dimetil-12-(4-metilpiperidino)-5,9,15-trioxatetraciclo[11.2.1.0^{2,6}.0^{8,10}]hexadec-13(16)-en-4,14-diona;

- 11-hidroxi-3,8-dimetil-12-pirrolidino-5,9,15-trioxatetraciclo[11.2.1.0^{2,6}.0^{8,10}]hexadec-13(16)-en-4,14-diona;

- 1-[11-hidroxi-3,8-dimetil-4,14-dioxo-5,9,15-trioxatetraciclo[11.2.1.0^{2,6}.0^{8,10}]hexadec-13(16)-en-12-il]-4-piperidincarboxilato de etilo;

- 12-(4-bencilpiperidino)-11-hidroxi-3,8-dimetil-5,9,15-trioxatetraciclo[11.2.1.0^{2,6}0^{8,10}]hexadec-13(16)-en-4,14-diona;

- 11-hidroxi-3,8-dimetil-12-piperidino-5,9,15-trioxatetraciclo[11.2.1.0^{2,6}.0^{8,10}]hexadec-13(16)-en-4,14-diona;

- 12-(1,4-dioxa-8-azaespiro[4.5]dec-8-il)-11-hidroxi-3,8-dimetil-5,9,15-trioxatetraciclo[11.2.1.0^{2,6}.0^{8,10}]hexadec-13(16)-en-4,14-diona;

- 11-hidroxi-3,8-dimetil-12-morfolino-5,9,15-trioxatetraciclo[11.2.1.0^{2,6}.0^{8,10}]hexadec-13(16)-en-4,14-diona;

- 11-(terc-butildimetilsiloxi)-12-dimetilamino-3,8-dimetil-5,9,15-trioxatetraciclo[11.2.1.0^{2,6}.0^{8,10}]hexadec-13(16)-en-4,14-diona;

- acetato de 3,8-dimetil-12-(4-metilpiperidino)-4,14-dioxo-5,9,15-trioxatetraciclo[11.2.1.0^{2,6}.0^{8,10}]hexadec-13(16)-en-11-ilo;

- 3,8-dimetil-12-(4-metilpiperidino)-4,14-dioxo-11-fenilcarboniloxi-5,9,15-trioxatetraciclo[11.2.1.0^{2,6}.0^{8,10}]hexadec-13(16)-eno;

- 3,8-dimetil-12-(4-metilpiperidino)-4,14-dioxo-5,9,15-trioxatetraciclo[11.2.1.0^{2,6}.0^{8,10}]hexadec-13(16)-en-11-ilcarbonato de etilo;

- 11-hidroxi-12-isobutilsulfanil-3-isobutilsulfanilmetil-8-metil-5,9,15-trioxatetraciclo[11.2.1.0^{2,6}.0^{8,10}]hexadec-13(16)-en-4,14-diona;

- 11-hidroxi-12-isobutilsulfanil-3,8-dimetil-5,9,15-trioxatetraciclo[11.2.1.0^{2,6}.0^{8,10}]hexadec-13(16)-en-4,14-diona;

- benzoato de 12-(dimetilamino)-3,8-dimetil-4,14-dioxo-5,9,15-trioxatetraciclo[11.2.1.0^{2,6}.0^{8,10}]hexadec-13(16)-en-11-ilo;

- acetato de 12-(dimetilamino)-3,8-dimetil-4,14-dioxo-5,9,15-trioxatetraciclo[11.2.1.0^{2,6}.0^{8,10}]hexadec-13(16)-en-11-ilo;

- ciclohexanocarboxilato de 12-(dimetilamino)-3,8-dimetil-4,14-dioxo-5,9,15-trioxatetraciclo[11.2.1.0^{2,6}.0^{8,10}]hexadec-13(16)-en-11-ilo;

- 4-fluorobenzoato de 12-(dimetilamino)-3,8-dimetil-4,14-dioxo-5,9,15-trioxatetraciclo[11.2.1.0^{2,6}.0^{8,10}]hexadec-13(16)-en-11-ilo;

- heptanoato de 12-(dimetilamino)-3,8-dimetil-4,14-dioxo-5,9,15-trioxatetraciclo[11.2.1.0^{2,6}.0^{8,10}]hexadec-13(16)-en-11-ilo;

- 4-(trifluorometil)benzoato de 12-(dimetilamino)-3,8-dimetil-4,14-dioxo-5,9,15-trioxatetraciclo[11.2.1.0^{2,6}.0^{8,10}]hexadec-13(16)-en-11-ilo;

- 2-tiofencarboxilato de 12-(dimetilamino)-3,8-dimetil-4,14-dioxo-5,9,15-trioxatetraciclo[11.2.1.0^{2,6}.0^{8,10}]hexadec-13(16)-en-11-ilo;

- 3,3-dimetilbutanoato de 12-(dimetilamino)-3,8-dimetil-4,14-dioxo-5,9,15-trioxatetraciclo[11.2.1.0^{2,6}.0^{8,10}]hexadec-13(16)-en-11-ilo;

- 1-benzotiofen-2-carboxilato de 12-(dimetilamino)-3,8-dimetil-4,14-dioxo-5,9,15-trioxatetraciclo[11.2.1.0^{2,6}.
0^{8,10}]hexadec-13(16)-en-11-ilo;

- 2-furoato de 12-(dimetilamino)-3,8-dimetil-4,14-dioxo-5,9,15-trioxatetraciclo[11.2.1.0^{2,6}.0^{8,10}]hexadec-13(16)-en-11-ilo;

- 5-nitro-2-furoato de 12-(dimetilamino)-3,8-dimetil-4,14-dioxo-5,9,15-trioxatetraciclo[11.2.1.0^{2,6}.0^{8,10}]hexadec-13(16)-en-11-ilo;

- 2-tienilacetato de 12-(dimetilamino)-3,8-dimetil-4,14-dioxo-5,9,15-trioxatetraciclo[11.2.1.0^{2,6}.0^{8,10}]hexadec-13(16)-en-11-ilo;

- fenoxiacetato de 12-(dimetilamino)-3,8-dimetil-4,14-dioxo-5,9,15-trioxatetraciclo[11.2.1.0^{2,6}.0^{8,10}]hexadec-13(16)-en-11-ilo;

- 4-terc-butilfenilcarbamato de 8-(dimetilamino)-3,10a-dimetil-2,6-dioxodecahidro-4,7-metenofuro[3,2-c]oxireno[f]oxacicloundecin-9-ilo;

- tien-2-ilcarbamato de 8-(dimetilamino)-3,10a-dimetil-2,6-dioxodecahidro-4,7-metenofuro[3,2-c]oxireno[f]oxacicloundecin-9-ilo;

- 2-metoxifenilcarbamato de 8-(dimetilamino)-3,10a-dimetil-2,6-dioxodecahidro-4,7-metenofuro[3,2-c]oxireno[f]oxacicloundecin-9-ilo;

- 2(metiltio)fenilcarbamato de 8-(dimetilamino)-3,10a-dimetil-2,6-dioxodecahidro-4,7-meteno-furo[3,2-c]oxireno [f]oxacicloundecin-9-ilo;

- 2-etoxifenilcarbamato de 8-(dimetilamino)-3,10a-dimetil-2,6-dioxodecahidro-4,7-metenofuro[3,2-c]oxireno[f]oxacicloundecin-9-ilo;

- tien-3-ilcarbamato de 8-(dimetilamino)-3,10a-dimetil-2,6-dioxodecahidro-4,7-metenofuro[3,2-c]oxireno[f]oxacicloundecin-9-ilo;

- 1-benzotien-3-ilcarbamato de 8-(dimetilamino)-3,10a-dimetil-2,6-dioxodecahidro-4,7-metenofuro[3,2-c]oxireno[f]oxacicloundecin-9-ilo;

- N-(ter-butoxicarbonil)glicinato de 8-(dimetilamino)-3,10a-dimetil-2,6-dioxodecahidro-4,7-meteno-furo[3,2-c]oxireno[f]oxacicloundecin-9-ilo;

- tien-3-ilacetato de 8-(dimetilamino)-3,10a-dimetil-2,6-dioxodecahidro-4,7-metenofuro[3,2-c]oxireno[f]oxacicloundecin-9-ilo;

- 1-benzotien-3-ilacetato de 8-(dimetilamino)-3,10a-dimetil-2,6-dioxodecahidro-4,7-metenofuro[3,2-c]oxireno[f]oxacicloundecin-9-ilo;

- tiofen-3-carboxilato de 8-(dimetilamino)-3,10a-dimetil-2,6-dioxodecahidro-4,7-metenofuro[3,2-c]oxireno[f]oxacicloundecin-9-ilo;

- 5-feniltien-2-ilcarbamato de 8-(dimetilamino)-3,10a-dimetil-2,6-dioxodecahidro-4,7-metenofuro[3,2-c]oxireno[f]oxacicloundecin-9-ilo;

- 1-adamantilcarbamato de 8-(dimetilamino)-3,10a-dimetil-2,6-dioxodecahidro-4,7-metenofuro[3,2-c]oxireno[f]oxacicloundecin-9-ilo;

- 2-naftilcarbamato de 8-(dimetilamino)-3,10a-dimetil-2,6-dioxodecahidro-4,7-metenofuro[3,2-c]oxireno[f]oxacicloundecin-9-ilo;

- 2-terc-butil-6-metilfenilcarbamato de 8-(dimetilamino)-3,10a-dimetil-2,6-dioxodecahidro-4,7-meteno-furo[3,2-c]oxireno[f]oxacicloundecin-9-ilo;

- 2,5-dimetoxifenilcarbamato de 8-(dimetilamino)-3,10a-dimetil-2,6-dioxodecahidro-4,7-meteno-furo[3,2-c]oxireno[f]oxacicloundecin-9-ilo;

así como sus sales.

La invención se refiere muy particularmente a los siguientes compuestos:

- 4-fluorobenzoato de 12-(dimetilamino)-3,8-dimetil-4,14-dioxo-5,9,15-trioxatetraciclo[11.2.1.0^{2,6.}0^{8,10}]hexadec-13(16)-en-11-ilo;

- 1-benzotiofen-2-carboxilato de 12-(dimetilamino)-3,8-dimetil-4,14-dioxo-5,9,15-trioxatetraciclo[11.2.1.0^{2,6}.
0^{8,10}]hexadec-13(16)-en-1-ilo;

así como sus sales.

En lo que se refiere a las sales de los compuestos de la fórmula general (I), son preferidos los maleatos, fumaratos, metanosulfonatos e hidrocloruros de los compuestos de la fórmula general (I), y especialmente los descritos en los ejemplos, a saber:

- maleato de 11-hidroxi-3,8-dimetil-4,14-dioxo-5,9,15-trioxatetraciclo[11.2.1.0^{2,6}.0^{8,10}]hexadec-13(16)-en-12-il(dimetil)amonio;

- fumarato de 11-hidroxi-3,8-dimetil-4,14-dioxo-5,9,15-trioxatetraciclo[11.2.1.0^{2,6}.0^{8,10}]hexadec-13(16)-en-12-il(dimetil)amonio;

- metanosulfonato de 11-hidroxi-3,8-dimetil-4,14-dioxo-5,9,15-trioxatetraciclo[11.2.1.0^{2,6}.0^{8,10}]hexadec-13(16)-en-12-il(dimetil)amonio;

- hidrocloruro de 11-{[terc-butil(dimetil)silil]oxi}-12-(dimetilamino)-3,8-dimetil-5,9,15-trioxatetraciclo[11.2.1.
0^{2,6}.0^{8,10}]hexadec-13(16)-en-4,14-diona

- hidrocloruro de 2-tiofencarboxilato de 12-(dimetilamino)-3,8-dimetil-4,14-dioxo-5,9,15-trioxatetraciclo[11.2.
1.0^{2,6}.0^{8,10}]hexadec-13(16)-en-11-ilo.

La invención tiene también por objeto los compuestos de la fórmula general (I)'

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6

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que corresponde a las sub- fórmulas generales (I)'_{1} y (I)'_{2}

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en las que

R_{1} representa un átomo de hidrógeno o un radical SR_{4} o NR_{4}R_{5};

R_{2} representa SR_{6} o NR_{6}R_{7};

R_{3} representa OH, O(CO)R_{14}, O(CO)OR_{14}, o OSiR_{15}R_{16}R_{17};

R_{9} y R_{12} que representan, independientemente cada vez que intervienen, un átomo de hidrógeno o cada uno de R_{9} y R_{12} pueden formar respectivamente con R_{8} y R_{11} un radical -O-(CH_{2})_{2}-O- unido de una y otra parte al átomo de carbono que le sostiene, no estando presente sin embargo tal radical más que una vez como máximo por radical NR_{4}R_{5} o NR_{6}R_{7}, representan, independientemente cada vez que intervienen, un átomo de hidrógeno o un radical alquilo;

R_{14} representa un radical alquilo o cicloalquilo o uno de los radicales arilo, heteroarilo, aralquilo o heteroaralquilo opcionalmente sustituidos sobre su grupo arilo o heteroarilo con uno o más radicales elegidos entre un átomo de halógeno y los radicales alquilo, haloalquilo, nitro, hidroxi o alcoxi;

siendo entendido, sin embargo, que cuando los compuestos corresponden a la sub-fórmula general (I)'_{2}, entonces R_{1} no representa un átomo de hidrógeno;

o las sales de estos compuestos.

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La invención tiene también por objeto los compuestos de la fórmula general (I)''

8

que corresponde a las sub-fórmulas generales (I)''_{1} y (I)''_{2}

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en las que

R_{1} representa un átomo de hidrógeno o un radical SR_{4} o NR_{4}R_{5};

R_{2} representa SR_{6} o NR_{6}R_{7};

R_{3} representa OH, O(CO)R_{14}, O(CO)OR_{14}, o OSiR_{15}R_{16}R_{17};

R_{4}, R_{5}, R_{6} y R_{7} representan, independientemente, un átomo de hidrógeno, un radical alquilo, un radical cicloalquilo, cicloalquilalquilo, hidroxialquilo o también uno de los radicales arilo o aralquilo opcionalmente sustituidos sobre su grupo arilo con uno o más radicales elegidos entre los radicales alquilo, hidroxi o alcoxi,

R_{4} y R_{5} pueden formar junto con el átomo de nitrógeno que los sostiene, un heterociclo con 5 a 7 miembros, siendo elegidos los miembros complementarios entre los radicales -CR_{8}R_{9}-, -NR_{10}-, -O- y -S-, siendo entendido, sin embargo, que no puede haber más que un solo miembro elegido entre -O- o -S- en dicho heterociclo,

R_{9} y R_{12} que representan, independientemente cada vez que intervienen, un átomo de hidrógeno o cada uno de R_{9} y R_{12} pueden formar con R_{8} y R_{11} respectivamente un radical -O-(CH_{2})_{2}-O- unido de una y otra parte al átomo de carbono que le sostiene, no estando presente sin embargo tal radical más que una vez como máximo por radical NR_{4}R_{5} o NR_{6}R_{7}, representan, independientemente cada vez que intervienen, un átomo de hidrógeno o un radical alquilo;

R_{14}, R_{15}, R_{16} y R_{17} representan, independientemente, un átomo de hidrógeno, un radical alquilo o uno de los radicales arilo o aralquilo opcionalmente sustituidos sobre su grupo arilo con uno o más radicales elegidos entre los radicales alquilo, hidroxi o alcoxi;

siendo entendido, sin embargo, que cuando los compuestos corresponden a la sub-fórmula general (I)''_{2}, entonces R_{1} no representa un átomo de hidrógeno;

o las sales de estos compuestos.

Los compuestos de la presente invención pueden inhibir las proliferaciones celulares anormales en un paciente, por ejemplo un mamífero tal como el hombre, mediante la administración a dicho paciente de una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de la fórmula general (I), (I)' o (I)'' o de una sal farmacéuticamente aceptable de tal compuesto.

Los compuestos de la fórmula general (I), (I)' o (I)'' tienen actividad anti-tumoral. Se pueden utilizar para el tratamiento de tumores en un paciente mediante la administración a dicho paciente de una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de la fórmula general (I), (I)' o (I)'' o de una sal farmacéuticamente aceptable de tal compuesto. Ejemplos de tumores o cánceres incluyen los cánceres de esófago, estómago, intestino, recto, cavidad bucal, faringe, laringe, pulmón, colon, mama, cuello uterino, corpus endometrium, ovarios, próstata, testículos, vejiga, riñones, hígado, páncreas, huesos, tejido conjuntivo, piel, por ejemplo los melanomas, ojos, cerebro y sistema nervioso central, así como el cáncer de tiroides, la leucemia, la enfermedad de Hodgkin, los linfomas distintos de la enfermedad de Hodgkin, los mielomas múltiples y otros.

Ellos se pueden utilizar igualmente para el tratamiento de las infecciones parasitarias mediante la inhibición de los hemoflagelantes (por ejemplo en la tripanosomia o en las infecciones por leishmania) o mediante la inhibición de los plasmodios (tal como por ejemplo en la malaria), pero también para el tratamiento de las infecciones o enfermedades víricas.

Estas propiedades hacen a los compuestos de la invención adecuados para uso farmacéutico. La invención tiene pues por objeto, a título de medicamentos, los compuestos de la fórmula general (I), (I)' o (I)'' descritos precedentemente o sus sales farmacéuticamente aceptables. Se refiere también a composiciones farmacéuticas que contienen estos compuestos o sus sales farmacéuticamente aceptables. La invención tiene además por objeto el uso de estos compuestos o de sus sales farmacéuticamente aceptables para fabricar medicamentos destinados a inhibir las DNA-polimerasas, y especialmente a tratar las enfermedades debidas a proliferaciones celulares anormales (en particular cáncer o aterosclerosis, hiperplasia benigna de la próstata y fibrosis), así como las enfermedades víricas y las enfermedades parasitarias, en particular las causadas por los protozoos (por ejemplo la malaria) o los protistas (por ejemplo las enfermedades causadas por amebas). Finalmente, la invención se refiere al uso de los compuestos de la fórmula general (I), (I)' o (I)'' descritos precedentemente o de sus sales farmacéuticamente aceptables para preparar un medicamento destinado a tratar enfermedades de origen bacteriano.

Por sal farmacéuticamente aceptable, se entiende especialmente las sales de adición de ácidos inorgánicos tales como hidrocloruro, hidrobromuro, hidroyoduro, sulfato, fosfato, difosfato y nitrato o ácidos orgánicos tales como acetato, maleato, fumarato, tartrato, succinato, citrato, lactato, metanosulfonato, p-toluenosulfonato, pamoato y estearato. Entran también en el campo de la presente invención, cuando son utilizables, las sales formadas a partir de bases tales como hidróxido de sodio o de potasio. Para otros ejemplos de sales farmacéuticamente aceptables, se puede referir a "Salt selection for basic drugs", Int. J. Pharm. (1986), 33, 201-217.

Las composiciones farmacéuticas que contienen un compuesto de la invención pueden estar en una forma sólida como, por ejemplo, polvos, píldoras, gránulos, comprimidos, liposomas, cápsulas o supositorios. Las píldoras, los comprimidos o las cápsulas pueden estar recubiertas con una sustancia capaz de proteger la composición de la acción del ácido gástrico o de las enzimas en el estómago del sujeto durante un periodo de tiempo suficiente para permitir que esta composición pase sin digerir al intestino delgado del sujeto. El compuesto se puede administrar también localmente, por ejemplo en el emplazamiento mismo de un tumor. El compuesto se puede administrar también según un proceso de liberación prolongada (por ejemplo utilizando una composición de liberación prolongada o una bomba de perfusión). Los soportes sólidos apropiados pueden ser, por ejemplo, fosfato de calcio, estearato de magnesio, carbonato de magnesio, talco, azúcares, lactosa, dextrina, almidón, gelatina, celulosa, metilcelulosa, carboximetilcelulosa de sodio, polivinilpirrolidina y cera.

Las composiciones farmacéuticas que contienen un compuesto de la invención se pueden presentar igualmente en forma líquida como, por ejemplo, soluciones, emulsiones, suspensiones o una formulación de liberación prolongada. Los soportes líquidos apropiados pueden ser, por ejemplo, agua, disolventes orgánicos tales como glicerol o glicoles tal como polietilenglicol, así como sus mezclas, en proporciones variadas, en agua.

La administración de un medicamento según la invención se puede realizar por vía tópica, oral, parenteral, por inyección intramuscular, etc.

La dosis de un compuesto según la presente invención, a ser proporcionada para el tratamiento de las enfermedades o trastornos mencionados antes, varía según el método de administración, la edad y el peso corporal del sujeto a ser tratado así como el estado de este último, y la decisión final será tomada por el médico o veterinario actuante. Dicha cantidad determinada por el médico o veterinario actuante se denomina aquí "cantidad terapéuticamente eficaz ".

Las mismas preferencias que se han indicado precedentemente para los compuestos de la fórmula general (I) son aplicables mutatis mutandis a los compuestos de la fórmula general (I)' o (I)'', a los medicamentos de la fórmula general (I), (I)' o (I)'', a las composiciones farmacéuticas que contienen un compuesto de la fórmula general (I), (I)' o (I)'' y al uso de un compuesto de la fórmula general (I), (I)' o (I)'' para preparar medicamentos.

Según la invención, los compuestos de la fórmula general (I), (I)' o (I)'' se pueden preparar por los procedimientos descritos más adelante.

Preparación de los compuestos de la fórmula general (I), (I)' o (I)'' y de sus sales Preparación de los compuestos de la sub-fórmula general (I)_{1}

Caso 1 R_{1} = H:

La preparación de este tipo de compuestos se resume en el esquema 1 que sigue. La dihidromikanolida por adición de un nucleófilo tal como una amina primaria o secundaria HNR_{6}R_{7}, o también de un tiol R_{6}SH en presencia de una base, en un disolvente inerte tal como tetrahidrofurano o acetona, a una temperatura preferiblemente comprendida entre 0ºC y 50ºC, y más preferiblemente a temperatura ambiente.

En el caso en que R_{3} no es OH, se trata el intermedio obtenido con uno de los reactivos de la fórmula general R_{14}(CO)-Hal (o un reactivo equivalente como por ejemplo el anhídrido (R_{14}(CO))_{2}O), R_{18}O(CO)-Hal, Hal-Si R_{15}R_{16}R_{17} (Hal representa un átomo de halógeno) o R_{18}-NCO para obtener el compuesto final deseado. De forma general, esta reacción se lleva a cabo en un disolvente aprótico tal como diclorometano, tricloroetano, acetonitrilo, tetrahidrofurano o tolueno, a una temperatura preferiblemente comprendida entre 0ºC y 110ºC y opcionalmente en presencia de una base tal como trietilamina o 4-dimetilaminopiridina. Estos tipos de reacción son bien conocidos por los expertos en la técnica (que podrán consultar especialmente de forma útil la siguiente publicación de referencia: Greene et al., "Protective groups in Organic Synthesis", and edition, Wiley, New-York, 1991) debido a su uso frecuente para proteger una función alcohol o amina. Por ejemplo, en lo que se refiere a la reacción de sililación, ésta se realiza generalmente por tratamiento del compuesto alcohólico con un cloruro de sililo en presencia de una base, en un disolvente aprótico a una temperatura comprendida entre 0ºC y 50ºC.

Esquema 1

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Un método suplementario para la obtención de los compuestos con R_{3} = OCOR_{14} consiste en tratar el alcohol intermedio con el ácido R_{14}-COOH en presencia de una base, como por ejemplo dimetilaminopiridina, y de un agente de acoplamiento, como por ejemplo hidrocloruro de 1-(3-dimetilaminopropil)-3-etilcarbodiimida (EDC.HCl).

Caso 2: R_{1} = R_{2} \neq H:

Los compuestos de la fórmula (I)_{1} en la cual R_{1} = R_{2} \neq H y R_{3} representa un grupo hidroxilo se pueden preparar a partir de mikanolida mediante la adición de un nucleófilo tal como una amina primaria o secundaria HNR_{4}R_{5}, o también de un tiol R_{4}SH en presencia de una base, en un disolvente inerte tal como tetrahidrofurano o acetona, a una temperatura preferiblemente comprendida entre 0ºC y 50ºC, y más preferiblemente a temperatura ambiente.

En el caso en que R_{3} no es OH, se lleva a cabo una segunda reacción con la ayuda de un compuesto de la fórmula general R_{14}(CO)-Hal (o un reactivo equivalente como por ejemplo anhídrido (R_{14}(CO))_{2}O), R_{18}O(CO)-Hal o Hal-SiR_{15}R_{16}R_{17} (Hal representa un átomo de halógeno) o R_{18}-NCO para obtener el compuesto final deseado. Esta reacción se puede llevar a cabo de manera análoga a la descrita en el Caso 1.

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Esquema 2

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Caso 3: R_{1} \neq H y R_{1} \neq R_{2}:

En este caso, el compuesto de la fórmula general (I)_{2} se somete a las mismas reacciones que en el Caso 1 para producir el compuesto final deseado en el cual R_{1} \neq R_{2}.

Esquema 3

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Preparación de los compuestos de la sub-fórmula general (I)_{2}

Los compuestos de la sub-fórmula (I)_{2} se pueden preparar, esquema 4, a partir de mikanolida mediante la adición de un nucleófilo tal como una amina primaria o secundaria HNR_{6}R_{7}, o también de un tiol R_{6}SH en presencia de un base, en un disolvente inerte tal como tetrahidrofurano o acetona, a una temperatura preferiblemente comprendida entre 0ºC y 50ºC, y más preferiblemente a temperatura ambiente.

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Esquema 4

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Sales de los compuestos de la fórmula general (I)

Ciertos compuestos de la invención se pueden preparar en la forma de sales farmacéuticamente aceptables según los métodos usuales. En lo que se refiere a estas sales, un experto en la técnica podrá consultar de forma útil el artículo de Gould et al., "Salt selection for basic drugs", Int. J. Pharm. (1 986), 33, 201-217.

A menos que ellos sean definidos de otra manera, todos los términos técnicos y científicos usados aquí tienen el mismo significado que usualmente es entendido por un especialista ordinario en el campo al que pertenece esta invención. Similarmente, todas las publicaciones, solicitudes de patentes, todas las patentes y todas las otras referencias mencionadas aquí se incorporan como referencia.

Los siguientes ejemplos se presentan para ilustrar los procedimientos anteriores y no deben ser considerados en ningún caso como un límite para el alcance de la invención.

Ejemplos

La nomenclatura utilizada para los ejemplos en principio está en conformidad con las normas de la IUPAC. Ella ha sido determinada con la ayuda del programa ACD/Name® (versión 4.53) para los ejemplos 1 a 36 y con la ayuda del programa ACD/Name® (versión 5.00) para los ejemplos 37 a 52.

La numeración indicada sobre la figura que sigue se emplea para los ejemplos 1 a 36 en lo que se refiere a las posiciones de los sustituyentes -CH_{2}-R_{1}, R_{2} y R_{3} sobre los policiclos de las sub-fórmulas generales (I)_{1} y (I)_{2}:

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Ejemplo 1

12-Diisopropilaminometil-7-metil-3.6,10,15-tetraoxapentaciclo[12.2.1.0^{2,4}.0^{5,7}.0^{9,13}]heptadec-1(17)-en-11,16-diona

A una solución de mikanolida (100 \mumol; 29 mg) en acetona (1 ml) se añade diisopropilamina (500 \mumol; 70 \mul). Se agita la masa de reacción durante 30 minutos a temperatura ambiente y después se elimina el disolvente por evaporación a presión reducida. Se recoge el residuo en éter, se filtra y se seca bajo vacío. Se obtienen 10 mg de producto en la forma de un polvo blanco.

NMR-^{1}H (DMSO): 0,90-1,30 (m, 15H); 1,85 (m, 2H); 2,15 (t, 2H); 3,15-3,50 (m, 4H); 3,95 (s, 1H); 4,75 (m, 1H); 5,50 (s, 1H); 6,00 (s, 1H); 6,25 (s, 1H); 7,60 (s, 1H).

Ejemplo 2

12-Dimetilamino-3-dimetilaminometil-11-hidroxi-8-metil-5,9,15-trioxatetraciclo[11.2.1.0^{2,6}.0^{8,10}]hexadec-13(16)-en-4,14-diona

A una solución de mikanolida (30 \mumol; 9 mg) en acetona (0.3 ml), se añade una solución de dimetilamina (160 \mumol; 80 \mul; 2M en THF). Se agita la masa de reacción durante 30 minutos a temperatura ambiente y después se concentra a presión reducida. Se recoge el residuo en éter, se filtra y se seca bajo vacío. Se obtienen 6 mg del compuesto esperado en la forma de un polvo blanco.

NMR-^{1}H (DMSO): 1,11 (s, 3H); 1,94-1,97 (m, 2H); 2,20 (s, 6H); 2,47 (s, 6H); 2,67 (m, 2H); 2,85 (t, 1H); 3,07 (d, 1H); 3,15 (m, 1H); 3,52 (d, 1H); 3,63 (m, 1H); 4,62 (m, 1H); 5,36 (s, 1H); 5,47 (s, 1H); 8,00 (s, 1H).

NMR-^{13}C (DMSO): 20,68; 42,85; 43,37; 44,71; 45,92; 49,95; 57,84; 58,24; 61,61; 62,97; 67,94; 77,09; 80,67; 131,46; 151,01; 172,03; 174,98.

Ejemplo 3

12-Bencil(metil)amino-3-bencil(metil)aminometil-11-hidroxi-8-metil-5,9,15-trioxatetraciclo[11.2.1.0^{2,6}.0^{8,10}]hexadec-13(16)-en-4,14-diona

Este compuesto se obtiene por un procedimiento similar al descrito para la síntesis del compuesto del ejemplo 2. Se obtiene el producto esperado en la forma de un polvo blanco.

NMR-^{1}H (DMSO): 1,12 (s, 3H); 1,96 (m, 2H); 2,10 (m, 1H); 2,15 (s, 3H); 2,47 (m, 2H); 2,83 (d, 2H); 2,89 (d, 1H); 3,22 (d, 1H), 3,26 (m, 1H); 3,58 (dd, 2H); 3,69 (m, 1H); 3,89 (d, 1H); 3,93 (s, 2H); 4,73 (m, 1H); 5,47 (d, 1H); 5,52 (s, 1H); 7,23-7,40 (m, 10H); 8,10 (s, 1H).

NMR-^{13}C (DMSO): 20,65; 39,08; 40,54; 42,09; 43,09; 43,52; 50,18; 56,57; 57,85; 60,17; 61,14; 62,21; 62,33; 68,37; 77,22; 81,01; 126,07; 128,30; 131,48; 138,88; 139,67; 150,35; 172,16; 175,18.

Ejemplo 4

11-Hidroxi-8-metil-12-morfolino-3-morfolinometil-5,9,15-trioxatetraciclo[11.2.1.0^{2,6}.0^{8,10}]hexadec-13(16)-en-4,14-diona

NMR-^{1}H (DMSO): 1,13 (s, 3H); 1,85-2,10 (m, 2H); 2,36 (m, 2H); 2,40 (m, 2H); 2,74 (m, 4H); 2,88 (t, 1H); 2,95 (m, 2H); 3,10 (d, 1H); 3,24 (m, 1H); 3,50-3,70 (m, 10H); 4,64 (m, 1H); 5,49 (s, 1H); 5,50 (d, 1H); 8,01 (s, 1H).

Ejemplo 5

12-Dimetilamino-11-hidroxi-3,8-dimetil-5,9,15-trioxatetraciclo[11.2.1.0^{2,6}.0^{8,10}]hexadec-13(16)-en-4,14-diona

A una solución de dihidromikanolida (100 \mumol, 29 mg) en acetona (1 ml), se añade una solución de dimetilamina (500 \mumol, 250 \mul, 2M en THF). Se agita la masa de reacción durante 2 horas a temperatura ambiente y después se elimina el disolvente por evaporación a presión reducida. Se recoge el residuo en éter, se filtra y se seca bajo vacío. Se obtienen 25 mg de producto en la forma de un polvo blanco.

NMR-^{1}H (DMSO): 1,10 (s, 3H); 1,25 (d, 3H), 1,90 (dd, 1H); 1,99 (t, 1H); 2,49 (s, 6H); 2,58 (t, 1H); 2,94 (m, 1H); 3,06 (d, 1H); 3,51 (m, 1H); 3,63 (m, 1H); 4,62 (m, 1H); 5,34 (s, 1H); 5,37 (d, 1H); 8,00 (s, 1H).

Ejemplo 6

Maleato de 11-hidroxi-3,8-dimetil-4,14-dioxo-5,9,15-trioxatetraciclo[11.2.1.0^{2,6}.0^{8,10}]hexadec-13(16)-en-12-il(dimetil)amonio

Se añade una solución de ácido maleico (0,1 mmol; 11,6 mg) en acetona (0,5 ml) a una solución del compuesto del ejemplo 5 (0,1 mmol; 34 mg) en acetona (0,5 ml). Se filtra el precipitado, se lava con acetona y se seca a presión reducida. Se obtienen 24 mg del producto esperado en la forma de un polvo blanco. Punto de fusión: 178,5ºC.

NMR-^{1}H (DMSO): 1,09 (s, 3H); 1,28 (d, 3H); 1,94 (dd, 1H); 2,05 (m, 1H); 2,63 (t, 1H); 2,70-3,70 (m, 9H); 3,79 (t, 1H); 4,38 (s, 1H); 4,68 (m, 1H); 5,45 (s, 1H); 6,07 (s, 2H); 8,31 (s, 1H).

Ejemplo 7

Fumarato de 11-hidroxi-3,8-dimetil-4,14-dioxo-5,9,15-trioxatetraciclo[11.2.1.0^{2,6}.0^{8,10}]hexadec-13(16)-en-12-il(dimetil)amonio

Se añade una solución de ácido fumárico (0,1 mmol; 11,6 mg) en acetona (3 ml) a una solución del compuesto del ejemplo 5 (0,1 mmol; 34 mg) en acetona (0,5 ml). Se filtra el precipitado, se lava con acetona y se seca a presión reducida. Se obtienen 15 mg del producto esperado en la forma de un polvo blanco. Punto de fusión: 159ºC.

NMR-^{1}H (DMSO): 1,11 (s, 3H); 1,25 (d, 3H); 1,92 (dd, 1H); 2,02 (m, 1H); 2,58 (t, 1H); 2,80-4,00 (m, 11H); 4,64 (m, 1H); 5,34 (s, 1H); 6,61 (s, 2H); 8,01 (s, 1H).

Ejemplo 8

Metanosulfonato de 11-hidroxi-3,8-dimetil-4,14-dioxo-5,9,15-trioxatetraciclo[11.2.1.0^{2,6}.0^{8,10}]hexadec-13(16)-en-12-il(dimetil)amonio

Se añade una solución de ácido metanosulfónico (0,1 mmol; 1 ml; 0,1N en acetona) a una solución del compuesto del ejemplo 5 (0,1 mmol; 34 mg) en acetona (2 ml). Se filtra el precipitado, se lava con acetona y se seca a presión reducida. Se obtienen 24 mg del producto esperado en la forma de un polvo blanco. Punto de fusión: 220ºC.

NMR-^{1}H (DMSO): 1,09 (s, 3H); 1,29 (d, 3H); 1,97 (dd, 1H); 2,07 (m, 1H); 2,30 (s, 3H); 2,65 (t, 1H); 2,80-3,15 (m, 7H); 3,28 (d, 1H); 3,85 (t, 1H); 4,66-4,72 (m, 2H); 5,49 (s, 1H); 6,94 (s, 1H); 8,44 (s, 1H); 10,04 (s, 1H).

Ejemplo 9

11-Hidroxi-3,8-dimetil-12-(4-metilpiperidino)-5,9,15-trioxatetraciclo[11.2.1.0^{2,6}.0^{8,10}]hexadec-13(16)-en-4,14-diona

Se obtiene este compuesto por un procedimiento similar al descrito para la síntesis del compuesto del ejemplo 5. Se obtiene el producto esperado en la forma de un polvo blanco. Punto de fusión: 210ºC.

NMR-^{1}H (DMSO): 0,80-3,50 (m, 23H); 3,60-3,75 (m, 2H); 4,62 (m, 1H); 5,32 (s, 2H); 8,01 (s, 1H).

Ejemplo 10

11-Hidroxi-3,8-dimetil-12-pirrolidino-5,9,15-trioxatetraciclo[11.2.1.0^{2,6}.0^{8,10}]hexadec-13(16)-en-4,14-diona

Se obtiene este compuesto por un procedimiento similar al descrito para la síntesis del compuesto del ejemplo 5. Se obtiene el producto esperado en la forma de un polvo blanco.

NMR-^{1}H (DMSO): 1,12 (s, 3H); 1,25 (d, 3H); 1,69 (m, 4H); 1,91 (dd, 1H); 2,00 (m, 1H); 2,60 (t, 1H); 2,80 (m, 4H); 2,95 (m, 1H); 3,02 (d, 1H); 3,45 (s, 1H); 3,63 (m, 1H); 4,61 (m, 1H); 5,34 (s, 1H); 5,42 (d, 1H); 7,97 (s, 1H).

Ejemplo 11

1-[11-Hidroxi-3,8-dimetil-4,14-dioxo-5,9,15-trioxatetraciclo[11.2.1.0^{2,6}]hexadec-13(16)-en-12-il]-4-piperidincarboxilato de etilo

NMR-^{1}H (DMSO): 1,00-4,00 (m, 25H); 4,04 (q, 2H); 4,64 (m, 1H); 5,35 (s, 1H); 5,48 (d, 1H); 8,07 (s,1H).

Ejemplo 12

12-(4-Bencilpiperidino)-11-hidroxi-3,8-dimetil-5,9,15-trioxatetraciclo[11.2.1.0^{2,6}.0^{8,10}]hexadec-13(16)-en-4,14-diona

NMR-^{1}H (DMSO): 1,00-1,80 (m, 12H); 1,85-2,10 (m, 2H); 2,35-4,00 (m, 6H); 4,63 (m, 1H); 5,33 (m, 2H); 7,00-7,20 (m, 5H); 8,03 (s, 1H).

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Ejemplo 13

11-Hidroxi-3,8-dimetil-12-piperidino-5,9,15-trioxatetraciclo[11.2.1.0^{2,6}.0^{8,10}]hexadec-13(16)-en-4,14-diona

NMR-^{1}H (DMSO): 1,11 (s, 3H); 1,26 (d, 3H); 1,35-1,70 (m, 6H); 1,85-2,14 (m, 2H); 2,57-3,18 (m, 7H); 3,50-3,75 (m, 2H); 4,64 (m, 1H); 5,34 (m, 2H); 8,04 (s, 1H).

Ejemplo 14

12-(1,4-Dioxa-8-azaespiro[4.5]dec-8-il)-11-hidroxi-3,8-dimetil-5,9,15-trioxatetraciclo[11.2.1.0^{2,6}.0^{8,10}]hexadec-13(16)-en-4,14-diona

NMR-^{1}H (DMSO): 1,11 (s, 3H); 1,26 (d, 3H); 1,40-1,80 (m, 6H); 1,85-2,05 (m, 2H); 2,58-4,00 (m, 17H); 4,67 (m, 1H); 5,37 (s, 1H); 5,44 (d, 1H); 8,08 (s, 1H).

Ejemplo 15

11-Hidroxi-3,8-dimetil-12-morfolino-5,9,15-trioxatetraciclo[11.2.1.0^{2,6}.0^{8,10}]hexadec-13(16)-en-4,14-diona

NMR-^{1}H (DMSO): 1,10 (s, 3H); 1,25 (d, 3H); 1,89 (dd, 1H); 2,01 (m, 1H); 2,61 (t, 1H); 2,75 (m, 2H); 3,95 (m, 3H); 3,08 (d, 1H); 3,55-3,75 (m, 5H); 4,63 (1H); 5,33 (s, 1H); 5,54 (d, 1H); 8,04 (s, 1H).

Ejemplo 16

11-(terc-butildimetilsiloxi)-12-dimetilamino-3,8-dimetil-5,9,15-trioxatetraciclo[11.2.1.0^{2,6}.0^{8,10}]hexadec-13(16)-en-4,14-diona

A una solución del compuesto del ejemplo 5 (80 \mumol; 27 mg) e imidazol (160 \mumol; 11 mg) en DMF (0,5 ml), se añade cloruro de terc-butildimetilsililo (80 \mumol, 12 mg). Se agita la solución obtenida durante 20 horas y después se vierte la masa de reacción en agua. Se extrae dos veces la fase acuosa con acetato de etilo, se lava la fase orgánica con agua y después con una solución de cloruro de sodio. La fase orgánica se seca sobre sulfato de magnesio, se filtra y después se evapora. El residuo se eluye sobre sílice con una mezcla de acetato de isopropilo y diclorometano (20/80). Se obtienen 20 mg de producto en la forma de un polvo blanco.

NMR-^{1}H (DMSO): 0,04 (s, 3H); 0,07 (s, 3H); 0,89 (s, 9H); 1,14 (s, 3H); 1,25 (d, 3H); 1,90 (dd, 1H); 1,99 (dd, 1H); 2,48 (s, 6H); 2,63 (t, 1H); 2,93-2,98 (m, 1H); 3,12 (d, 1H); 3,43 (m, 1H); 3,80 (m, 1H); 4,61 (m, 1H); 5,36 (s, 1H); 8,03 (s, 1H).

Ejemplo 17

Acetato de 3,8-dimetil-12-(4-metilpiperidino)-4,14-dioxo-5,9,15-trioxatetraciclo[11.2.1.0^{2,6}.0^{8,10}]hexadec-13(16)-en-11-ilo

A una solución del compuesto del ejemplo 9 (100 \mumol; 40 mg) en piridina (0,5 ml), se añade anhídrido acético (150 \mumol; 15 \mul). Se agita la solución obtenida durante 20 horas y después se vierte la masa de reacción en agua. Se extrae dos veces la fase acuosa con acetato de etilo y se lava la fase orgánica obtenida con agua y después con una solución de cloruro de sodio. La fase orgánica se seca sobre sulfato de magnesio, se filtra y después se evapora. El residuo se eluye sobre sílice con una mezcla de acetato de isopropilo y diclorometano (20/80). Se obtienen 16 mg de producto en la forma de un polvo blanco.

NMR-^{1}H (DMSO): 0,90 (d, 3H); 1,11 (s, 3H); 1,26 (d, 3H); 1,35 (m, 1H); 1,60 (m, 2H), 1,94 (dd, 1H); 2,03 (d, 1H); 2,09 (s, 3H); 2,43 (t, 1H); 2,60 (t, 1H); 2,98 (d, 1H); 2,94-3,05 (m, 2H); 3,36-3,45 (m, 4H); 4,07 (d, 1H); 4,64 (dd, 1H); 4,70 (m, 1H); 5,38 (s, 1H); 8,12 (s, 1H).

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Ejemplo 18

3,8-Dimetil-12-(4-metilpiperidino)-4,14-dioxo-11-fenilcarboniloxi-5,9,15-trioxatetraciclo[11.2.1.0^{2,6}.0^{8,10}]hexadec-13(16)-eno

A una solución del compuesto del ejemplo 9 (100 \mumol; 40 mg) en piridina (0,5 ml), se añade cloruro de benzoilo (400 \mumol; 46 \mul). Se agita la masa de reacción durante 2 horas y después se trata de la misma manera que para la preparación del compuesto del ejemplo 17. Se obtienen 25 mg de producto en la forma de un polvo blanco. Punto de fusión: 234ºC.

NMR-^{1}H (DMSO): 0,73 (d, 3H); 1,18 (s, 3H); 1,25 (m, 1H); 1,27 (d, 3H); 1,45-1,60 (m, 2H); 2,00 (dd, 1H); 2,10 (m, 1H); 2,65 (t, 1H); 2,92-3,15 (m, 3H); 3,45 (m, 2H); 3,54 (d, 1H); 4,18 (d, 1H); 4,36 (t, 1H); 4,74 (m, 1H); 4,95 (t, 1H); 5,41 (s, 1H); 7,58 (t, 2H); 7,70 (t, 1H); 8,01 (d, 2H); 8,19 (s, 1H).

Ejemplo 19

3,8-Dimetil-12-(4-metilpiperidino)-4,14-dioxo-5,9,15-trioxatetraciclo[11.2.1.0^{2,6}.0^{8,10}]hexadec-13(16)-en-11-ilcarbonato de etilo

A una solución del compuesto del ejemplo 9 (100 \mumol; 40 mg) en piridina (0,5 ml), se añade cloroformiato de etilo (300 \mumol; 28 \mul). Se agita la masa de reacción durante 2 horas y después se trata de la misma manera que para la preparación del compuesto del ejemplo 17. Se obtienen 20 mg de producto en la forma de un polvo blanco.

NMR-^{1}H (DMSO): 0,88 (d, 3H); 1,10-1,40 (m, 12H); 1,59 (m, 2H); 2,90-2,10 (m, 2H); 2,35-2,50 (m, 2H); 2,58 (t, 1H); 2,80 (d, 1H); 2,95-3,07 (m, 2H); 3,40 (d, 1H); 4,11-4,25 (m, 3H); 4,43 (dd, 1H); 4,70 (m, 1H); 5,39 (s, 1H); 8,13 (s, 1H).

Ejemplo 20

11-Hidroxi-12-isobutilsulfanil-3-isobutilsulfanilmetil-8-metil-5,9,15-trioxatetraciclo[11.2.1.0^{2,6}.0^{8,10}]hexadec-13(16)-en-4,14-diona

A una solución de mikanolida (100 \mumol; 30 mg) y dimetilaminopiridina (10 \mumol; 1.2 mg) en acetona (1 ml), se añade 2-metil-1-propanotiol (500 \mumol; 54 \mul). Se agita la masa de reacción durante dos horas a temperatura ambiente y después se evapora el disolvente a presión reducida. Se recoge el residuo en éter, el precipitado se filtra, se lava con éter y se seca bajo vacío. Se obtienen 35 mg de producto en la forma de un polvo blanco.

NMR-^{1}H (DMSO): 0,96 (m, 12H); 1,15 (s, 3H); 1,77 (m, 2H); 1,93 (d, 2H); 2,50 (m, 4H); 2,80-2,98 (m, 4H); 3,39 (m, 1H); 3,76 (m, 1H); 4,07 (d, 1H); 4,62 (q, 1H); 5,52 (s, 1H); 5,62 (s, 1H); 8,06 (s, 1H).

Ejemplo 21

11-Hidroxi-12-isobutilsulfanil-3,8-dimetil-5,9,15-trioxatetraciclo[11.2.1.0^{2,6}.0^{8,10}]hexadec-13(16)-en-4,14-diona

A una solución de dihidromikanolida (100 \mumol; 30 mg) y dimetilaminopiridina (10 \mumol; 1.2 mg) en acetona (1 ml), se añade 2-metil-1-propanotiol (500 \mumol; 54 \mul). Se agita la masa de reacción durante dos horas a temperatura ambiente y después se evapora el disolvente a presión reducida. Se recoge el residuo en éter después el precipitado formado se filtra, se lava con éter y se seca bajo vacío. Se obtienen 25 mg de producto en la forma de un polvo blanco.

NMR-^{1}H (DMSO): 0,96 (t, 6H); 1,13 (s, 3H); 1,25 (d, 3H); 1,78 (m, 1H); 1,89 (dd, 1H); 2,00 (t, 1H); 2,48 (m, 2H); 2,62 (t, 1H); 2,82 (d, 1H), 2,98 (m, 1H); 3,78 (m, 1H); 4,07 (d, 1H); 4,57 (m, 1H); 5,40 (s, 1H); 5,61 (d, 1H); 8,06 (s, 1H).

Ejemplo 22

Benzoato de 12-(dimetilamino)-3,8-dimetil-4,14-dioxo-5,9,15-trioxatetraciclo[11.2.1.0^{2,6}.0^{8,10}]hexadec-13(16)-en-11-ilo

Se obtiene este compuesto por un procedimiento similar al descrito para la síntesis del compuesto del ejemplo 18. Se obtiene el producto esperado en la forma de un polvo blanco.

NMR-^{1}H (DMSO):1,21 (s, 3H); 1,28 (d, 3H); 1,98 (dd, 1H); 2,08 (t, 1H); 2,48 (s, 6H); 2,66 (t, 1H); 3,01 (m, 1H); 3,51 (d, 1H); 4,04 (d, 1H); 4,71 (m, 1H); 5,06 (dd, 1H); 4,43 (s, 1H); 7,58 (m, 2H); 7,70 (t, 1H); 8,01 (d, 2H); 8,20 (s, 1H).

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Ejemplo 23

Acetato de 12-(dimetilamino)-3,8-dimetil-4,14-dioxo-5,9,15-trioxatetraciclo[11.2.1.0^{2,6}.0^{8,10}]hexadec-13(16)-en-11-ilo

Se obtiene este compuesto por un procedimiento similar al descrito para la síntesis del compuesto del ejemplo 17. Se obtiene el producto esperado en la forma de un polvo blanco.

NMR-^{1}H (DMSO):1,14 (s, 3H); 1,26 (d, 3H); 1,94 (dd, 1H); 2,05 (t, 1H); 2,08 (s, 3H); 2,45 (s, 6H); 2,62 (t, 1H); 3,97 (m, 1H); 3,32 (m, 1H); 3,90 (d, 1H); 4,68 (m, 1H); 4,78 (m, 1H); 5,39 (s, 1H); 8,12 (s, 1H).

Ejemplo 24

Ciclohexanocarboxilato de 12-(dimetilamino)-3,8-dimetil-4,14-dioxo-5,9,15-trioxatetraciclo[11.2.1.0^{2,6}.0^{8,10}]hexadec-13(16)-en-11-ilo

NMR-^{1}H (DMSO): 1,14 (s, 3H); 1,26 (d, 3H); 1,08-1,48 (m, 5H); 1,58 (m, 1H); 1,68 (m, 2H); 1,84 (t, 2H); 1,93 (dd, 1H); 2,03 (t, 1H); 2,37 (m, 1H); 2,44 (s, 6H); 2,61 (t, 1H); 2,98 (m, 1H); 3,32 (t, 1H); 3,87 (d, 1H); 4,66 (m, 1H); 4,77 (dd, 1H); 5,40 (s, 1H); 8,12 (s, 1H).

Ejemplo 25

4-Fluorobenzoato de 12-(dimetilamino)-3,8-dimetil-4,14-dioxo-5,9,15-trioxatetraciclo[11.2.1.0^{2,6}.0^{8,10}]hexadec-13(16)-en-11-ilo

NMR-^{1}H (DMSO): 1,20 (s, 3H); 1,28 (d, 3H); 1,97 (dd, 1H); 2,08 (t, 1H); 2,46 (s, 6H); 2,65 (t, 1H); 3,00 (m, 1H); 3,50 (d, 1H); 4,04 (d, 1H); 4,71 (m, 1H); 5,04 (dd, 1H); 5,43 (s, 1H); 7,41 (t, 2H); 8,06 (dd, 2H); 8,20 (s, 1H).

Ejemplo 26

Hidrocloruro de 11-{[terc-butil(dimetil)silil]oxi}-12-(dimetilamino)-3,8-dimetil-5,9,15-trioxatetraciclo[11.2.1.0^{2,6}. 0^{8,10}]hexadec-13(16)-en-4,14-diona

Se añade una solución de ácido clorhídrico (0,3 mmol; 0,3 ml; 1 N en éter) a una solución del compuesto del ejemplo 16 (0,22 mmol; 100 mg) en acetona (2 ml). Se filtra el precipitado, se lava con un poco de acetona, con éter y se seca a presión reducida. Se obtienen 70 mg del producto esperado en la forma de un polvo blanco.

NMR-^{1}H (DMSO): 0,14 (d, 6H); 0,90 (s, 9H); 1,15 (s, 3H); 1,27 (d, 3H); 1,85 (dd, 1H); 2,05 (t, 1H); 2,72 (t, 1H); 2,90-3,25 (m, 7H); 3,72 (m, 1H); 3,93 (m, 1H); 4,76 (m, 2H); 5,46 (s, 1H); 8,70 (d, 1H); 11,64 (s, 1H).

Ejemplo 27

Heptanoato de 12-(dimetilamino)-3,8-dimetil-4,14-dioxo-5,9,15-trioxatetraciclo[11.2.1.0^{2,6}.0^{8,10}]hexadec-13(16)-en-11-ilo

NMR-^{1}H (DMSO): 0,86 (t, 3H); 1,14 (s, 3H); 1,20-1,35 (m, 9H); 1,55 (m, 2H); 1,95 (dd, 1H); 2,02 (t, 1H); 2,35 (t, 2H); 2,44 (s, 6H); 2,61 (t, 1H); 2,96 (m, 1H); 3,33 (t, 1H); 3,89 (d, 1H); 4,68 (m, 1H); 4,77 (dd, 1H); 5,40 (s, 1H); 8,12 (s, 1H).

Ejemplo 28

4-(Trifluorometil)benzoato de 12-(dimetilamino)-3,8-dimetil-4,14-dioxo-5,9,15-trioxatetraciclo[11.2.1.0^{2,6}.0^{8,10}]hexadec-13(16)-en-11-ilo

NMR-^{1}H (DMSO):1,21 (s, 3H); 1,28 (d, 3H); 2,01 (dd, 1H); 2,06 (t, 1H); 2,48 (s, 6H); 2,66 (t, 1H); 3,00 (m, 1H); 3,55 (d, 1H); 4,09 (d, 1H); 4,73 (m, 1H); 5,04 (dd, 1H); 5,44 (s, 1H); 7,96 (d, 2H); 8,19 (d, 2H); 8,21 (s, 1H).

Ejemplo 29

2-Tiofencarboxilato de 12-(dimetilamino)-3,8-dimetil-4,14-dioxo-5,9,15-trioxatetraciclo[11.2.1.0^{2,6}.0^{8,10}]hexadec-13(16)-en-11-ilo

NMR-^{1}H (DMSO): 1,20 (s, 3H); 1,27 (d, 3H); 1,99 (m, 1H); 2,07 (t, 1H); 2,49 (s, 6H); 2,65 (t, 1H); 3,00 (m, 1H); 3,47 (d, 1H); 4,00 (d, 1H); 4,70 (m, 1H); 5,01 (dd, 1H); 5,43 (s, 1H); 7,26 (t, 1H); 7,87 (d, 1H); 8,01 (dd, 1H); 8,18 (s, 1H).

Ejemplo 30

3,3-Dimetilbutanoato de 12-(dimetilamino)-3,8-dimetil-4,14-dioxo-5,9,15-trioxatetraciclo[11.2.1.0^{2,6}.0^{8,10}]hexadec-13(16)-en-11-ilo

NMR-^{1}H (DMSO): 1,00 (s, 9H); 1,15 (s, 3H); 1,26 (d, 3H); 1,94 (dd, 1H); 2,03 (t, 1H); 2,24 (dd, 2H); 2,45 (s, 6H); 2,62 (t, 1H); 2,98 (m, 1H); 3,32 (d, 1H); 3,86 (d, 1H); 4,65 (m, 1H); 4,81 (dd, 1H); 5,40 (s, 1H); 8,12 (s, 1H).

Ejemplo 31

1-Benzotiofen-2-carboxilato de 12-(dimetilamino)-3,8-dimetil-4,14-dioxo-5,9,15-trioxatetraciclo[11.2.1.0^{2,6}.0^{8,10}]hexadec-13(16)-en-11-ilo

NMR-^{1}H (DMSO): 1,22 (s, 3H); 1,28 (d, 3H); 2,01 (dd, 1H); 2,08 (m, 1H); 2,50 (s, 6H); 2,66 (t, 1H); 3,00 (m, 1H); 3,52 (d, 1H); 4,05 (d, 1H); 4,71 (m, 1H); 5,06 (dd, 1H); 5,44 (s, 1H); 7,50 (t, 1H); 7,56 (t, 1H); 8,09 (t, 2H); 8,21 (s, 1H); 8,27 (s, 1H).

Ejemplo 32

2-Furoato de 12-(dimetilamino)-3,8-dimetil-4,14-dioxo-5,9,15-trioxatetraciclo[11.2.1.0^{2,6}.0^{8,10}]hexadec-13(16)-en-11-ilo

NMR-^{1}H (DMSO): 1,19 (s, 3H); 1,27 (d, 3H); 1,97 (dd, 1H); 2,07 (t, 1H); 2,47 (s, 6H); 2,64 (t, 1H); 3,00 (m, 1H); 3,46 (d, 1H); 4,00 (d, 1H); 4,70 (m, 1H); 4,98 (dd, 1H); 5,43 (s, 1H); 6,72 (d, 1H); 7,36 (d, 1H); 8,03 (s, 1H); 8,18 (s, 1H).

Ejemplo 33

5-Nitro-2-furoato de 12-(dimetilamino)-3,8-dimetil-4,14-dioxo-5,9,15-trioxatetraciclo[11.2.1.0^{2,6}.0^{8,10}]hexadec-13(16)-en-11-ilo

NMR-^{1}H (DMSO): 1,19 (s, 3H); 1,28 (d, 3H); 1,98 (dd, 1H); 2,08 (t, 1H); 2,45 (s, 6H); 2,64 (t, 1H); 3,00 (m, 1H); 3,53 (d, 1H); 4,08 (d, 1H); 4,72 (m, 1H); 4,97 (dd, 1H); 5,44 (s, 1H); 7,65 (d, 1H); 7,80 (d, 1H); 8,21 (s, 1H).

Ejemplo 34

Hidrocloruro de 2-tiofencarboxilato de 12-(dimetilamino)-3,8-dimetil-4,14-dioxo-5,9,15-trioxatetraciclo[11.2.1.0^{2,6}. 0^{8,10}]hexadec-13(16)-en-11-ilo

Se añade una solución de ácido clorhídrico (0,8 mmol; 0,8 ml; 1 N en éter) a una solución del compuesto del ejemplo 29 (0,44 mmol; 196 mg) en acetona (4 ml). Se filtra el precipitado, se lava con un poco de acetona, con éter y se seca a presión reducida. Se obtienen 180 mg del producto esperado en la forma de un polvo blanco.

\newpage

NMR-^{1}H (DMSO): 1,23 (s, 3H); 1,29 (d, 3H); 1,90 (dd, 1H); 2,13 (t, 1H); 2,76 (t, 1H); 2,85-3,25 (m, 7H); 3,95 (m, 1H); 4,78 (m, 1H); 5,02 (m, 1H); 5,38 (m, 1H); 5,51 (s, 1H); 7,29 (t, 1H); 7,97 (s, 1H); 8,08 (d, 1H); 8,86 (s, 1H); 12,12 (s, 1H).

Ejemplo 35

2-Tienilacetato de 12-(dimetilamino)-3,8-dimetil-4,14-dioxo-5,9,15-trioxatetraciclo[11.2.1.0^{2,6}.0^{8,10}]hexadec-13(16)-en-11-ilo

NMR-^{1}H (DMSO): 1,14 (s, 3H); 1,26 (d, 3H); 1,94 (dd, 1H); 2,04 (m, 1H); 2,38 (s, 6H); 2,61 (t, 1H); 2,97 (m, 1H); 3,37 (d, 1H); 3,88 (d, 1H); 4,00 (d, 2H); 4,68 (m, 1H); 4,78 (dd, 1H); 5,39 (s, 1H); 6,98 (m, 2H); 7,43 (d, 1H); 8,12 (s, 1H).

Ejemplo 36

Fenoxiacetato de 12-(dimetilamino)-3,8-dimetil-4,14-dioxo-5,9,15-trioxatetraciclo[11.2.1.0^{2,6}.0^{8,10}]hexadec-13(16)-en-11-ilo

NMR-^{1}H (DMSO): 1,23 (s, 3H); 1,35 (d, 3H); 2,04 (dd, 1H); 2,13 (t, 1H); 2,58 (s, 6H); 2,67 (t, 1H); 3,06 (m, 1H); 3,48 (d, 1H); 4,08 (d, 1H); 4,77 (m, 1H); 4,86 (m, 1H); 4,96 (dd, 2H); 5,50 (s, 1H); 7,05 (m, 3H); 7,38 (m, 2H); 8,23 (s, 1H).

Ejemplo 37

4-terc-butilfenilcarbamato de 8-(dimetilamino)-3,10a-dimetil-2,6-dioxodecahidro-4,7-metenofuro[3,2-c]oxireno[f]oxacicloundecin-9-ilo

A una solución del compuesto del ejemplo 5 (200 \mumol; 67 mg) en 1,2-dicloroetano (10 ml), se añade isocianato de 4-terc-butilfenilo (250 \mumol; 44 mg). Se agita la solución obtenida durante 20 horas a 60ºC antes de evaporar el disolvente a presión reducida. El residuo se eluye sobre sílice utilizando una mezcla de acetona y diclorometano (20/80). Se recoge el residuo en éter, se filtra y se seca bajo vacío. Se obtienen 36 mg de producto en la forma de un polvo blanco.

NMR-^{1}H (DMSO): 1,18 (s, 3H); 1,25 (s, 9H); 1,27 (d, 3H); 1,95 (dd, 1H); 2,08 (t, 1H); 2,48 (s, 6H); 2,64 (t, 1H); 2,98 (m, 1H); 3,37 (m, 1H); 3,91 (d, 1H); 4,69 (m, 1H); 4,80 (dd, 1H); 5,40 (s, 1H); 7,29 (d, 2H); 7,38 (d, 2H); 8,12 (s, 1H); 9,67 (s, 1H).

Ejemplo 38

Tien-2-ilcarbamato de 8-(dimetilamino)-3,10a-dimetil-2,6-dioxodecahidro-4,7-metenofuro[3,2-c]oxireno[f]oxacicloundecin-9-ilo

NMR-^{1}H (DMSO): 1,18 (s, 3H); 1,26 (d, 3H); 1,95 (m, 1H); 2,06 (m, 1H); 2,48 (s, 6H); 2,64 (t, 1H); 2,97 (m, 1H); 3,36 (m, 1H); 3,90 (m, 1H); 4,68 (m, 1H); 4,79 (m, 1H); 5,40 (s, 1H); 6,61 (s, 1H); 6,82 (s, 1H); 6,94 (s, 1H); 8,13 (s, 1H); 10,78 (s, 1H).

Ejemplo 39

2-Metoxifenilcarbamato de 8-(dimetilamino)-3,10a-dimetil-2,6-dioxodecahidro-4,7-metenofuro[3,2-c]oxireno[f]oxacicloundecin-9-ilo

NMR-^{1}H (DMSO): 1,17 (s, 3H); 1,27 (d, 3H); 1,94 (dd, 1H); 2,05 (t, 1H); 2,48 (s, 6H); 2,63 (t, 1H); 2,98 (m, 1H); 3,37 (m, 1H); 3,80 (s, 3H); 3,87 (d, 1H); 4,68 (m, 1H); 4,80 (dd, 1H); 5,40 (s, 1H); 6,90 (t, 1H); 7,02 (d, 1H); 7,09 (t, 1H); 7,59 (d, 1H); 8,12 (s, 1H); 8,59 (s, 1H).

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Ejemplo 40

2(Metiltio)fenilcarbamato de 8-(dimetilamino)-3,10a-dimetil-2,6-dioxodecahidro-4,7-meteno-furo[3,2-c]oxireno[f]oxacicloundecin-9-ilo

NMR-^{1}H (DMSO): 1,17 (s, 3H); 1,27 (d, 3H); 1,95 (dd, 1H); 2,08 (t, 1H); 2,40 (s, 3H); 2,48 (s, 6H); 2,63 (t, 1H); 2,98 (m, 1H); 3,37 (s, 1H); 3,84 (d, 1H); 4,67 (m, 1H); 4,80 (dd, 1H); 5,39 (s, 1H); 7,15-7,25 (m, 3H); 7,32 (t, 1H); 8,10 (s, 1H); 8,90 (s, 1H).

Ejemplo 41

2-Etoxifenilcarbamato de 8-(dimetilamino)-3,10a-dimetil-2,6-dioxodecahidro-4,7-metenofuro[3,2-c]oxireno[f]oxacicloundecin-9-ilo

NMR-^{1}H (DMSO): 1,17 (s, 3H); 1,27 (d, 3H); 1,35 (t, 3H); 1,95 (dd, 1H); 2,05 (t, 1H); 2,48 (s, 6H); 2,63 (t, 1H); 2,98 (m, 1H); 3,34 (m, 1H); 3,90 (d, 1H); 4,07 (q, 2H); 4,67 (m, 1H); 4,79 (dd, 1H); 5,40 (s, 1H); 6,90 (t, 1H); 7,01 (d, 1H); 7,07 (t, 1H); 7,58 (d, 1H); 8,12 (s, 1H); 8,46 (s, 1H).

Ejemplo 42

Tien-3-ilcarbamato de 8-(dimetilamino)-3,10a-dimetil-2,6-dioxodecahidro-4,7-metenofuro[3,2-c]oxireno[f]oxacicloundecin-9-ilo

NMR-^{1}H (DMSO): 1,18 (s, 3H); 1,27 (d, 3H); 1,95 (dd, 1H); 2,05 (m, 1H); 2,48 (s, 6H); 2,64 (t, 1H); 2,98 (m, 1H); 3,36 (m, 1H); 3,90 (d, 1H); 4,68 (m, 1H); 4,80 (dd, 1H); 5,40 (s, 1H); 7,04 (d, 1H); 7,22 (s, 1H); 7,43 (t, 1H); 8,12 (s, 1H); 10,08 (s, 1H).

Ejemplo 43

1-Benzotien-3-ilcarbamato de 8-(dimetilamino)-3,10a-dimetil-2,6-dioxodecahidro-4,7-metenofuro[3,2-c]oxireno[f]oxacicloundecin-9-ilo

NMR-^{1}H (DMSO): 1,20 (s, 3H); 1,28 (d, 3H); 1,98 (dd, 1H); 2,07 (m, 1H); 2,48 (s, 6H); 2,65 (t, 1H); 2,98 (m, 1H); 3,40 (m, 1H); 3,97 (d, 1H); 4,70 (m, 1H); 4,82 (dd, 1H); 5,40 (s, 1H); 7,40 (m, 2H); 7,65 (s, 1H); 7,95 (d, 1H); 8,14 (m, 2H); 10,00 (s, 1H).

Ejemplo 44

N-(ter-butoxicarbonil)glicinato de 8-(dimetilamino)-3,10a-dimetil-2,6-dioxodecahidro-4,7-meteno-furo[3,2-c]oxireno[f]oxacicloundecin-9-ilo

A una solución del compuesto del ejemplo 5 (200 \mumol; 60 mg) en diclorometano (5 ml), se añaden hidrocloruro de 1-(3-dimetilaminopropil)-3-etilcarbodiimida (200 \mumol; 38 mg), N-terc-butiloxicarbonilglicina (200 \mumol; 35 mg), trietilamina (200 \mumol; 28 \mul) y dimetilaminopiridina (10 \mumol; 3 mg). Se agita la solución durante tres horas a temperatura ambiente, se vierte sobre una solución de NaHCO_{3} y después se extrae con acetato de etilo. La fase orgánica se lava con agua y después con una solución saturada de cloruro de sodio antes de ser secada sobre MgSO_{4} y filtrada. El disolvente se elimina por destilación a presión reducida. El residuo se eluye sobre sílice utilizando una mezcla de acetona y diclorometano (40/60). Se recoge el residuo en éter, se filtra y se seca bajo vacío. Se obtienen 25 mg de producto en la forma de un polvo blanco.

NMR-^{1}H (DMSO): 1,15 (s, 3H); 1,26 (d, 3H); 1,39 (s, 9H); 1,92 (dd, 1H); 2,05 (t, 1H); 2,43 (s, 6H); 2,62 (t, 1H); 2,98 (m, 1H); 3,35 (t, 1H); 3,75 (t, 2H); 3,84 (d, 1H); 4,67 (m, 1H); 4,81 (dd, 1H); 5,40 (s, 1H); 7,25 (t, 1H); 8,13 (s, 1H).

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Ejemplo 45

Tien-3-ilacetato de 8-(dimetilamino)-3,10a-dimetil-2,6-dioxodecahidro-4,7-metenofuro[3,2-c]oxireno[f]oxacicloundecin-9-ilo

Se obtiene este compuesto por un procedimiento similar al descrito para la síntesis del compuesto del ejemplo 44. Se obtiene el producto esperado en la forma de un polvo blanco.

NMR-^{1}H (DMSO): 1,14 (s, 3H); 1,26 (d, 3H); 1,94 (dd, 1H); 2,05 (m, 1H); 2,37 (s, 6H); 2,61 (t, 1H); 2,97 (m, 1H); 3,33 (t, 1H); 3,77 (s, 2H); 3,88 (d, 1H); 4,67 (m, 1H); 4,78 (dd, 1H); 5,39 (s, 1H); 7,04 (d, 1H); 7,36 (s, 1H); 7,50 (t, 1H); 8,11 (s, 1H).

Ejemplo 46

1-Benzotien-3-ilacetato de 8-(dimetilamino)-3,10a-dimetil-2,6-dioxodecahidro-4,7-metenofuro[3,2-c]oxireno[f]oxacicloundecin-9-ilo

NMR-^{1}H (DMSO): 1,13 (s, 3H); 1,25 (d, 3H); 1,94 (dd, 1H); 2,04 (t, 1H); 2,26 (s, 6H); 2,60 (t, 1H); 2,96 (m, 1H); 3,32 (m, 1H); 3,88 (d, 1H); 4,04 (s, 2H); 4,67 (m, 1H); 4,74 (dd, 1H); 5,38 (s, 1H); 7,40 (m, 2H); 7,64 (s, 1H); 7,79 (d, 1H); 7,99 (d, 1H); 8,09 (s, 1H).

Ejemplo 47

Tiofen-3-carboxilato de 8-(dimetilamino)-3,10a-dimetil-2,6-dioxodecahidro-4,7-metenofuro[3,2-c]oxireno[f]oxacicloundecin-9-ilo

NMR-^{1}H (DMSO): 1,19 (s, 3H); 1,27 (d, 3H); 1,97 (dd, 1H); 2,07 (t, 1H); 2,48 (s, 6H); 2,65 (t, 1H); 2,99 (m, 1H); 3,46 (d, 1H); 3,98 (s, 1H); 4,70 (m, 1H); 5,02 (m, 1H); 5,43 (s, 1H); 7,49 (s, 1H); 7,69 (s, 1H); 8,18 (s, 1H); 8,40 (s, 1H).

Ejemplo 48

5-Feniltien-2-ilcarbamato de 8-(dimetilamino)-3,10a-dimetil-2,6-dioxodecahidro-4,7-metenofuro[3,2-c]oxireno[f]oxacicloundecin-9-ilo

Se obtiene este compuesto por un procedimiento similar al descrito para la síntesis del compuesto del ejemplo 37. Se obtiene el producto esperado en la forma de un polvo blanco.

NMR-^{1}H (DMSO): 1,20 (s, 3H); 1,27 (d, 3H); 1,97 (dd, 1H); 2,03 (t, 1H); 2,38 (s, 6H); 2,67 (m, 1H); 2,98 (m, 1H); 3,37 (d, 1H); 3,94 (m, 1H); 4,69 (m, 1H); 4,81 (m, 1H); 5,41 (s, 1H); 6,60 (s, 1H); 7,22 (m, 2H); 7,36 (t, 2H); 7,55 (d, 2H); 8,14 (s, 1H); 10,93 (s, 1H).

Ejemplo 49

1-Adamantilcarbamato de 8-(dimetilamino)-3,10a-dimetil-2,6-dioxodecahidro-4,7-metenofuro[3,2-c]oxireno[f]oxacicloundecin-9-ilo

NMR-^{1}H (DMSO): 1,14 (s, 3H); 1,26 (d, 3H); 1,60 (s, 6H); 1,80-1,94 (m, 6H); 1,94-2,09 (m, 4H); 2,47 (s, 6H); 2,62 (t, 1H); 2,96 (m, 1H); 3,21 (d, 1H); 3,38 (s, 1H); 3,76 (s, 1H); 4,64 (m, 2H); 5,37 (s, 1H); 6,96 (s, 1H); 8,05 (s, 1H).

Ejemplo 50

2-Naftilcarbamato de 8-(dimetilamino)-3,10a-dimetil-2,6-dioxodecahidro-4,7-metenofuro[3,2-c]oxireno[f]oxacicloundecin-9-ilo

NMR-^{1}H (DMSO): 1,20 (s, 3H); 1,28 (d, 3H); 1,96 (dd, 1H); 2,07 (t, 1H); 2,48 (s, 6H); 2,66 (t, 1H); 3,01 (m, 1H); 3,37 (m, 1H); 3,95 (d, 1H); 4,70 (m, 1H); 4,87 (dd, 1H); 5,42 (s, 1H); 7,38 (t, 1H); 7,46 (t, 1H); 7,55 (d, 1H); 7,82 (m, 3H); 8,10 (s, 1H); 8,14 (s, 1H); 10,01 (s, 1H).

Ejemplo 51

2-terc-butil-6-metilfenilcarbamato de 8-(dimetilamino)-3,10a-dimetil-2,6-dioxodecahidro-4,7-meteno-furo[3,2-c]oxireno[f]oxacicloundecin-9-ilo

NMR-^{1}H (DMSO): 1,14 (s, 3H); 1,20-1,42 (m, 12H); 1,92 (dd, 1H); 2,05 (m, 1H); 2,25 (s, 3H); 2,52 (s, 6H); 2,62 (m, 1H); 2,95 (m, 1H); 3,36 (m, 1H); 3,88 (m, 1H); 4,80-4,95 (m, 2H); 5,40 (s, 1H); 7,13 (m, 2H); 7,22 (s, 1H); 8,13 (s, 1H); 8,69 (s, 1H).

Ejemplo 52

2,5-Dimetoxifenilcarbamato de 8-(dimetilamino)-3,10a-dimetil-2,6-dioxodecahidro-4,7-meteno-furo[3,2-c]oxireno[f]oxa-cicloundecin-9-ilo

NMR-^{1}H (DMSO): 1,17 (s, 3H); 1,27 (d, 3H); 1,94 (dd, 1H); 2,06 (m, 1H); 2,48 (s, 6H); 2,64 (t, 1H); 2,98 (m, 1H); 3,33 (m, 1H); 3,69 (s, 3H); 3,76 (s, 3H); 3,89 (d, 1H); 4,68 (m, 1H); 4,80 (dd, 1H); 5,40 (s, 1H); 6,63 (d, 1H); 6,94 (d, 1H); 7,32 (s, 1H); 8,12 (s, 1H); 8,58 (s, 1H).

Estudio farmacológico de los compuestos de la invención

La utilidad de los compuestos de la invención se puede demostrar especialmente por el efecto de un tratamiento con estos mismos compuestos sobre:

-: la incorporación de citosina marcada con ^{32}P en un fragmento de DNA en presencia de DNA-polimerasa de E. Coli (sistema acelular);

-: la incorporación de timidina tritiada en el DNA de las células tumorales HT29 en división a lo largo de un periodo de 3 horas (sistema celular); y

-: la proliferación de dos líneas celulares humanas Mia-Paca2 y DU145.

1) Procedimientos Líneas celulares

Las líneas celulares DU-145 (células humanas de cáncer de próstata), HT29 (cáncer de colon) y Mia-PaCa2 (células humanas de cáncer pancreático) han sido adquiridas de la American Tissue Culture Collection (Rockville, Maryland, USA).

Incorporación de 5'-[alfa^{32}P]-trifosfato de deoxicitidina en un DNA en presencia de DNA-polimerasa en un sistema acelular

El marcaje del DNA se realiza sobre un fragmento de DNA que incorpora los nucleótidos gracias a la actividad de la enzima DNA-polimerasa. Entre estos nucleótidos, el dCTP se marca con fósforo radioactivo (^{32}P). El DNA plasmídico (pc DNA 3, Invitrogen, Netherlands) se diluye a una concentración de 2 ng en 45 \mul de solución TE (Tris-HCl 10 mM, pH 8, EDTA 1 mM) y se desnaturaliza calentando a 100ºC durante 10 minutos antes de ser puesto de nuevo directamente en hielo. El DNA desnaturalizado se coloca en el tubo que contiene la solución tampón de dATP, dGTP, dTTP, la enzima DNA-polimerasa Klenow y los cebadores aleatorios (sistema de marcaje con el cebador aleatorio Rediprime II, RPN 1633, RPN 1634, Amersham pharmacia biotech). Se añaden 2 \mul de 5'-[alfa^{32}P]-trifosfato de deoxicitidina Redivue (250 \muCi de actividad específica, Amersham, Orsay, France) para comenzar la reacción. La reacción se lleva a cabo en presencia o ausencia del compuesto a ser ensayado durante 10 minutos a 37º. La reacción se para añadiendo 5 \mul de EDTA (0,2 M). El DNA marcado se recupera en 200 \mul de isopropanol después de 10 minutos de centrifugación a 12.000 rpm y después se lava con etanol al 70%. Después de secado completo, se solubiliza el DNA en 50 \mul de TE. Se cuentan diez \mul en 5 ml de líquido de centelleo (Instagel plus y contador de centelleo Packard, Rungis, France).

Los resultados se expresan en porcentaje de inhibición de la incorporación del nucleótido marcado en la muestra con respecto al testigo: 100-[(DPM de la muestra tratada/DPM testigo)\times100].

Incorporación de timidina marcada con tritio en el DNA de células en fase exponencial de crecimiento

Se siembran células HT29 en placas de 96 pocillos (culturPlate-96, Packard, Rungis, France) (4000 células por pocillo) con el medio (DME, Gibco BRL, Cergy-Pontoise, France) complementado con 10 % de suero fetal de ternera (Gibco BRL, Cergy-Pontoise, France). El día 3, se quita el medio y se reemplaza con medio que contiene la timidina tritiada (5'-timidina TRK,328, 1 mCi, 0,6 \muCi/pocillo, Amersham, Orsay, France) con o sin el compuesto. Los tratamientos se realizan durante 3 horas. Se separa entonces el medio y se lavan las células dos veces con 20 \mul de PBS (Gibco BRL, Cergy-Pontoise, France). La solución de lisis (SDS 1,25%, EDTA 5 mM) se añade durante 10 minutos a temperatura ambiente, y después se añaden 75 \mul de líquido de centelleo (microscint 40, Packard, Rungis, France). La lectura de las placas se realiza sobre Topcount (Packard, Rungis, France). Estos ensayos se llevan a cabo por duplicado y los resultados se expresan por la relación de la incorporación del nucleótido marcado en la muestra tratada con el compuesto sobre la incorporación del nucleótido marcado en la muestra testigo (DPM de la muestra/DPM testigo).

Medida de la proliferación celular

Las células colocadas en 80 \mul de medio Eagle modificado por Dulbecco (Gibco-BRL, Cergy-Pontoise, France) completado con 10% de suero fetal de ternera inactivado por calentamiento (Gibco-BRL, Cergy-Pontoise, France), 50000 unidades/l de penicilina y 50 mg/l de estreptomicina (Gibco-BRL, Cergy-Pontoise, France), y glutamina 2 mM (Gibco-BRL, Cergy-Pontoise, France) se sembraron sobre una placa de 96 pocillos el día 0. Se trataron las células el día 1 durante 96 horas con concentraciones crecientes de cada uno de los compuestos a ser ensayados. Al final de este periodo, la cuantificación de la proliferación celular se evalúa por un ensayo colorimétrico que se basa en la escisión de la sal de tetrazolio WST1 por las deshidrogenasas mitocondriales en las células viables que lleva a la formación de formazán (Boehringer Mannheim, Meilan, France). Estos ensayos se realizan por duplicado con 8 determinaciones por concentración ensayada. Los productos se solubilizan en dimetilsulfóxido (DMSO) a 10^{-2} M y se utilizan finalmente en cultivo con DMSO al 0,5 %.

2) Resultados

A una concentración de 100 \mug/ml, el compuesto del ejemplo 16 inhibe, como dihidromikanolida, la actividad de la DNA-polimerasa en un sistema acelular (tabla I).

TABLA I

% de inhibición de la incorporación
Dihidromikanolida	77 \pm 11
Ejemplo 16	70 \pm 8

Por otro lado, el compuesto del ejemplo 16, como dihidromikanolida, inhibe la incorporación de la timidina tritiada en el DNA de las células humanas HT29 (tabla II).

TABLA II

(dpm muestra/dpm testigo)
Concentración \mug/ml	100	50	25
Dihidromikanolida	0,14	0,22	0,98
Ejemplo 16	0,52	0,58	0,71

Finalmente, los compuestos de los ejemplos 1 a 3, 9, 16, 18, 22, 24 a 32 y 39 a 43 inhiben la proliferación de las líneas celulares DU-145 con una concentración inhibidora IC_{50} inferior o igual a 30 \muM, mientras que los compuestos de los ejemplos 1 a 10, 12, 16 a 20, 22, 24 a 37 y 39 a 44 inhiben la proliferación de las líneas celulares Mia-Paca2 con una concentración inhibidora IC_{50} inferior o igual a 30 \muM.

Claims

1. Un compuesto de la fórmula general (I)

15

que corresponde a las sub-fórmulas generales (I)_{1} y (I)_{2}

16

en las cuales

R_{1} representa un átomo de hidrógeno o un radical SR_{4} o NR_{4}R_{5};

R_{2} representa SR_{6} o NR_{6}R_{7};

y R_{6} y R_{7} pueden formar junto con el átomo de nitrógeno que los sostiene, un heterociclo con 5 a 7 miembros, siendo elegidos los miembros complementarios entre los radicales -CR_{11}R_{12}-, -NR_{13}-, -O- y -S-, siendo entendido, sin embargo, que no puede haber más que un solo miembro elegido entre -O- o -S- en dicho heterociclo,

R_{9} y R_{12} representan, independientemente cada vez que intervienen, un átomo de hidrógeno o un radical alquilo, o cada uno de R_{9} y R_{12} pueden formar respectivamente junto con R_{8} y R_{11} un radical -O-(CH_{2})_{2}-O- unido de una y otra parte al átomo de carbono que le sostiene, no estando presente sin embargo tal radical más que una vez como máximo por radical NR_{4}R_{5} o NR_{6}R_{7},

o una sal de un compuesto de la fórmula general (I).

2. Un compuesto según la reivindicación 1, caracterizado porque corresponde a la sub-fórmula general (I)_{1} o es una sal de dicho compuesto.

3. Un compuesto según la reivindicación 2, caracterizado porque:

\bullet: R_{1} representa un átomo de hidrógeno o un radical NR_{4}R_{5};

\bullet: R_{2} representa un radical NR_{6}R_{7};

4. Un compuesto según la reivindicación 1, caracterizado porque corresponde a la sub-fórmula general (I)_{2}.

5. Un compuesto según la reivindicación 1, caracterizado porque se trata de uno de los compuestos siguientes:

\newpage

- acetato de 12-(dimetilamino)-3,8-dimetil-4,14-dioxo-5,9,15-trioxatetraciclo[11.2.1.0^{2,6}.0^{8,10}]hexadec-13(16)-en-11-ilo

\newpage

o de una sal de uno de estos compuestos.

6. A título de medicamento, un compuesto de la fórmula general (I) tal como se ha definido en la reivindicación 1, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

7. Un medicamento según la reivindicación 6, caracterizado porque se trata de uno de los compuestos siguientes:

o de una sal farmacéuticamente aceptable de uno de estos compuestos.

8. Una composición farmacéutica que contiene como principio activo, un compuesto de la fórmula general (I) tal como se ha definido en la reivindicación 1, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

9. Una composición farmacéutica según la reivindicación 8, caracterizada porque contiene, como principio activo, uno de los compuestos siguientes:

\newpage

o una sal farmacéuticamente aceptable de uno de estos compuestos.

10. El uso de un compuesto de la fórmula general (I) tal como se ha definido en la reivindicación 1, o de una de sus sales farmacéuticamente aceptables para preparar un medicamento destinado a inhibir las DNA-polimerasas.

11. El uso de un compuesto de la fórmula general (I) tal como se ha definido en la reivindicación 1, o de una de sus sales farmacéuticamente aceptables para preparar un medicamento destinado a tratar las enfermedades debidas a proliferaciones celulares anormales.

12. El uso según la reivindicación 11, caracterizado porque la enfermedad debida a proliferaciones celulares anormales es el cáncer.

13. El uso según la reivindicación 11, caracterizado porque la enfermedad debida a proliferaciones celulares anormales se elige entre la aterosclerosis, la hiperplasia benigna de la próstata y las fibrosis.

14. El uso de un compuesto de la fórmula general (I) tal como se ha definido en la reivindicación 1, o de una de sus sales farmacéuticamente aceptables para preparar un medicamento destinado a tratar las enfermedades víricas.

15. El uso de un compuesto de la fórmula general (I) tal como se ha definido en la reivindicación 1, o de una de sus sales farmacéuticamente aceptables para preparar un medicamento destinado a tratar las enfermedades parasitarias.

16. El uso de un compuesto de la fórmula general (I) tal como se ha definido en la reivindicación 1, o de una de sus sales farmacéuticamente aceptables para preparar un medicamento destinado a tratar las enfermedades de origen bacteriano.