ES2225339T3 - 2-amino-benzoxazinonas para el tratamiento de infecciones virales. - Google Patents
2-amino-benzoxazinonas para el tratamiento de infecciones virales.Info
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Abstract
Un compuesto de fórmula general I **(Fórmula)** seleccionado entre un grupo de compuestos compuesto por 5-metil-2-[[(1R)-1-feniletil]amino]-4H-3, 1-benzoxazin-4-ona; 1, 1-dimetiletil éster de N°-(5-metil-4-oxo-4H-3, 1-benzoxazin-2-il)-NE-[(fenilmetoxi)carbonil]-L-lisina; éster metílico de N-(5-metil-4-oxo-4H-3, 1-benzoxazin-2-il)-L-fenilalanina; éster metílico de N-(5-metil-4-oxo-4H-3, 1-benzoxazin-2-il)-L-triptófano; 1, 1-dimetiletil éster de N-(5-metil-4-oxo-4H-3, 1-benzoxazin-2-il)-L-triptófano; 2-[[2-metoxi-(1S)-(1-fenilmetil)etil]amino]-5-metil-4H-3, 1-benzoxazin-4-ona; éster metílico de 3, 5-diyodo-N-(5-metil-4-oxo-4H-3, 1-benzoxazin-2-il)-L- tirosina; éster metílico de N-(5-metil-4-oxo-4H-3, 1-benzoxazin-2-il)-O-metil-L-tirosina; 1, 1-dimetiletil éster de N-(5-metil-4-oxo-4H-3, 1-benzoxazin-2-il)-L-fenilglicina; aS-[(5-metil-4-oxo-4H-3, 1-benzoxazin-2-il)amino]-4-metoxi-N-metil-N-(fenilmetil)bencenopropanamida; 5-metoxi-2-[[(1R)-1-feniletil]amino]-4H-3, 1-benzoxazin-4-ona; y N-metil-N-fenilmetilamida de N-[5-metoxi-4-oxo-4H-3, 1-benzoxazin-2-il]-O-metil-L-tirosina, y las sales farmacéuticamente aceptables de dichos compuestos seleccionados.
Description
2-amino-benzoxazinonas
para el tratamiento de infecciones virales.
Esta invención se incluye en el campo de los
agentes antivirales y específicamente se refiere a compuestos,
composiciones y métodos para tratar trastornos relacionados con
herpes.
Existe una gran necesidad de nuevas terapias para
el tratamiento de enfermedades víricas. Aunque ha habido un gran
progreso en el desarrollo de diversas terapias para el tratamiento
de infecciones bacterianas, hay pocas terapias viables para el
tratamiento de virus. La zidovudina es el tratamiento primario
aprobado para el virus de la inmunodeficiencia humana. El
ganciclovir, aciclovir y foscarnet se utilizan normalmente para el
tratamiento de infecciones por herpesvirus. Sin embargo, estas
terapias pueden tener efectos secundarios substanciales que se
basan en sus efectos perjudiciales sobre la replicación del ADN de
las células hospedadoras o en su efecto sobre un número limitado de
infecciones virales. Además, se sabe que los virus desarrollan
resistencia a las terapias, lo que provoca una disminución
progresiva de la eficacia.
Los virus se clasifican en amplias categorías
basadas en si incorporan ARN o ADN. Las familias importantes de
virus clasificadas por el tipo de ADN incluyen adenoviridae,
poxviridae, papovaviridae y herpesviridae.
Herpesviridae es una familia de virus de
ADN que incluye el virus del herpes simple de tipo 1
(HSV-1), el virus del herpes simple de tipo 2
(HSV-2), el citomegalovirus (CMV), el virus
varicela-zoster (VZV), el virus de
Epstein-Barr, el herpesvirus
humano-6 (HHV6), el herpesvirus
humano-7 (HHV7), el herpesvirus
humano-8 (HHV8), el virus de la seudorrabia y el
virus de la rinotraqueítis, entre otros.
Se sabe que los herpesvirus expresan su contenido
genético dirigiendo la síntesis de varias proteínas codificadas por
el ADN del herpesvirus en la célula hospedadora. Una de las
proteínas importantes codificadas por el virus se prepara como un
precursor que consta de una proteína proteasa localizada en el
extremo amino terminal y una proteína de ensamblaje localizada en el
extremo carboxilo terminal. Este precursor se procesa
proteolíticamente de manera autocatalítica en una secuencia de
aminoácidos específica conocida como sitio de "liberación"
produciendo la proteína proteasa y la proteína de ensamblaje por
separado. La proteína de ensamblaje se escinde adicionalmente por la
proteasa en otra secuencia de aminoácidos específica conocida como
sitio de escisión de "maduración". Recientemente, el documento
EP Nº 514.830 publicado el 25 de noviembre de 1992, describe una
proteasa de serina con especificidad de virus que tiene un papel en
la replicación de herpesvirus. Adicionalmente, Lui y Roizman [J.
Virol, 65, 5149 (1991)] describen la secuencia y actividad de
una proteasa y la proteína de ensamblaje asociada codificadas por
U_{L}26 de HSV-1. A. R. Welch et al.
[Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 88, 10792 (1991) y el
documento WO93/01291, publicado el 21 de enero de 1993] describen la
proteasa relacionada (conocida también como asemblina) y la
proteína de ensamblaje codificadas por U_{L}80 de CMV. Un
planteamiento que se está investigando actualmente para el uso
potencial en el tratamiento de infecciones por herpesvirus es el
desarrollo de inhibidores de proteasas de herpesvirus.
En la bibliografía se ha descrito que las
4H-3,1-benzoxazinonas tienen actividad de
proteasa de serina entre otras. Aunque se ha notificado que los
compuestos de esto tipo tienen actividad inhibidora de proteasas de
serina, no se ha notificado que ninguno inhiba la proteasa viral
asemblina. Por ejemplo, Teshima et al. [J. Biol.
Chem., 257, 5085-5091 (1982)] describe
diversas
2-alquil-4H-3,1-benzoxazin-4-onas
como inhibidores enzimáticos. Moorman y Abeles [J. Amer. Chem.
Soc., 104, 6785-6786 (1982)] describen la
4H-3,1-benzoxazin-2,4-diona
como un compuesto que tiene actividad inhibidora de enzimas. R.
Stein, et al. [Biochemistry, 26,
4126-4130, (1987)] describe
2-alquil-4H-benzoxazin-4-onas,
con substituciones adicionales en las posiciones 5, 6 y 7, como
compuestos que inhiben el enzima elastasa. La publicación WO
92/18488 (publicada el 29 de octubre de 1992) describe
2-alquil-4H-3,1-benzoxazin-4-onas
con substituciones en las posiciones 5 y 7 como inhibidores
selectivos de elastasa. La Solicitud Europea 206.323 (publicada el
30 de diciembre de 1985) describe 2-alcoxi-,
2-ariloxi- y
2-aralcoxi-4H-3,1-benzoxazin-4-onas
que tiene substituciones en las posiciones 5, 6, 7 y 8 como
inhibidores de enzimas. La Patente de Estados Unidos Nº 4.745.116,
de A. Kranz et al. describe 2-alcoxi,
2-ariloxi- y
2-aralcoxi-4H-3,1-benzoxazin-4-onas,
que tienen substituciones adicionales en las posiciones 5, 7 y 8,
como inhibidores de enzimas. La Patente de Estados Unidos Nº
5.428.021 de C. Hiebert et al., describe
6-(aminoácido)amino-2-alcoxibenzoxazinonas
como inhibidores de elastasa. La publicación WO 96/07648, publicada
el 14 de marzo de 1996, describe
2-fenilamino-benzoxazinonas para el
tratamiento de la enfermedad de Alzheimer y, específicamente, se
describe
6-cloro-2-(2-yodofenilamino)-benzo[d]
[1,3]oxazin-4-ona.
Se han descrito
2-amino-4H-3,1-benzoxazinonas.
A. Krantz et al. [J. Med. Chem., 33,
464-479 (1990)] describen
4H-3,1-benzoxazin-4-onas
substituidas con substituyentes alquilo, alquilamino, alcoxi y
alquiltio en la posición 2, y con substituciones adicionales en las
posiciones 5, 6 y 7, como inhibidores de elastasa. Uejima, et
al. [J. Pharm. Exp. Ther., 265,
516-522 (1993)] describen
2-alquilamino-5-metil-7-acilamino-4H-3,1-benzoxazin-4-onas
como inhibidores de elastasa muy selectivos con una estabilidad
significativa en plasma. La Patente de Estados Unidos Nº 4.657.893
de A. Krantz et al, describe 2-alquilamino- y
2-alquilurido-4H-3,1-benzoxazin-4-onas
que tienen substituciones adicionales en las posiciones 5, 7 y 8,
como inhibidores de enzimas.
F. L. M. Alvarez [An. Quim., 79,
115-17 (1983)] describe la preparación de
2-sulfonilamino-4H-3,1-benzoxazinonas.
J.G. Tercero et al. [An. Quim., 83,
247-50 (1987)] describen la preparación de
2-arilsulfonilamino-4H-3,1-benzoxazinonas.
I. Butula et al. [Croat. Chem.
Acta, 54, 105-8 (1981)] describen la
síntesis de
2-alquilamino-4H-3,1-benzoxazinonas.
H. Ulrich et al. [J. Org Chem., 32,
4052-53(1967)] describen la síntesis de
2-alquilamino-4H-3,1-benzoxazinonas.
E. Papadopoulos [J. Heterocyclic. Chem., 21,
1411-14 (1984)] describe el uso de
2-haloalquilamino-4H-3,1-benzoxazin-4-ona
como material de partida para la síntesis de fenilureas. La
solicitud de Patente Europea 466.944 (publicada el 22 de enero de
1992) describe
2-alquilamino-7-acilamino-5-alquil-4H-benzoxazin-4-onas
como inhibidores enzimáticos selectivos de elastasa.
M. Badawy et al. [J. Heterocyclic.
Chem., 21, 1403-4 (1984)] describen el uso de
N-fenil-2-amino-4H-3,1-benzoxazin-4-ona
como material de partida para la síntesis de quinazolinas. R. Khan
y R. Rastogi [J. Chem. Research(S),
342-43 (1992)] describen la síntesis de
2-[5-aril-1,3,4-oxadiazol-2-il]amino-4H-3,1-benzoxazin-4-onas.
Las
4H-3,1-benzoxazin-4-onas
no se han descrito anteriormente como inhibidores selectivos de la
proteasa asemblina ni para el tratamiento y/o profilaxis de
infecciones virales.
La presente invención se refiere a una serie de
benzoxazinonas substituidas específicas, útiles en el tratamiento
terapéutico y profiláctico de infecciones virales, como se define
mediante la fórmula general I.
y seleccionadas entre un grupo de
compuestos compuesto
por
5-metil-2-[[(1R)-1-feniletil]amino]-4H-3,1-benzoxazin-4-ona;
1,1-dimetiletil éster de
N^{\alpha}-(5-metil-4-oxo-4H-3,1-benzoxazin-2-il)-N^{\varepsilon}-[(fenilmetoxi)carbonil]-L-lisina;
éster metílico de
N-(5-metil-4-oxo-4H-3,1-benzoxazin-2-il)-L-fenilalanina;
éster metílico de
N-(5-metil-4-oxo-4H-3,1-benzoxazin-2-il)-L-triptófano;
1,1-dimetiletil éster de
N-(5-metil-4-oxo-4H-3,1-benzoxazin-2-il)-L-triptófano;
2-[[2-metoxi-(1S)-(1-fenilmetil)etil]amino]-5-metil-4H-3,1-benzoxazin-4-ona;
éster metílico de
3,5-diyodo-N-(5-metil-4-oxo-4H-3,1-benzoxazin-2-il)-L-tirosina;
éster metílico de
N-(5-metil-4-oxo-4H-3,1-benzoxazin-2-il)-O-metil-L-tirosina;
1,1-dimetiletil éster de
N-(5-metil-4-oxo-4H-3,1-benzoxazin-2-il)-L-fenilglicina;
\alphaS-[(5-metil-4-oxo-4H-3,1-benzoxazin-2-il)amino]-4-metoxi-N-metil-N-(fenilmetil)bencenopropanamida;
5-metoxi-2-[[(1R)-1-feniletil]amino]-4H-3,1-benzoxazin-4-ona;
y
N-metil-N-fenilmetilamida
de
N-[5-metoxi-4-oxo-4H-3,1-benzoxazin-2-il]-O-metil-L-tirosina,
y las sales farmacéuticamente aceptables de
dichos compuestos seleccionados.
Los compuestos de esta invención se ha demostrado
que son particularmente eficaces contra herpetoviridae. Por lo tanto
son particularmente útiles para el tratamiento de virus de herpes
simple (HSV-1, HSV-2),
citomegalovirus (CMV), herpes varicela-zoster,
Epstein-Barr, HHV6, HHV7, seudorrabia y
rinotraqueítis, entre otros.
La invención incluye también un método de
tratamiento de un sujeto que tiene una infección vírica con una
cantidad eficaz de un compuesto que puede inhibir una proteasa
específica del virus. Preferiblemente, el sujeto se trata con un
inhibidor de proteasa de herpes virus. Más preferiblemente, es un
método en el que el inhibidor de proteasa vírica es un inhibidor de
proteasa de CMV o un inhibidor de proteasa de HSV. Incluso más
preferible es un método en el que el sujeto se trata con un
inhibidor de proteasa de CMV, codifica por U_{L}80, proteasa de
HSV-1 o proteasa de HSV-1 codificada
por U_{L}26 tal como compuesto de
4H-3,1-benzoxazin-4-ona
de la presente invención.
A parte de ser útiles para el tratamiento de
seres humanos, estos compuestos son útiles para el tratamiento
veterinario de animales, incluyendo animales de compañía y animales
de granja tales como aunque sin limitación caballos, perros, gatos,
vacas, ovejas y cerdos.
Los compuestos de la presente invención pueden
usarse también en co-terapias, parcial o
completamente, en lugar de otros compuestos antivirales
convencionales, tales como junto con antivirales incluyendo, aunque
sin limitación ganciclovir, docosanol, trifluridina, foscarnet,
ribavirin, epervudina, interferón, timoestimulina,
Ciba-Geigy CGP-16056, esprofeno,
Efalith, ibuprofeno, piconol, ufenamato, timopentina, aciclovir,
valaciclovir, edoxudina, famciclovir, idoxuridina, vidarabina,
Epavir, acetato de zinc, tromantadina, riodoxol, sorivudina, Yakult
Honsha LC-9018, cidofovir, bromovinildesoxiuridina,
Lidakol, agente de liberación de citoquina de Stega Pharmaceutical,
CSL ISCOM, penciclovir, Viraplex, Pharmacia & Upjohn THF,
Boehringer Ingelheim BIRR-4, NIH péptido T, Virend,
glicerolato de zinc y lobucavir.
La expresión "terapéuticamente eficaz"
pretende cualificar la cantidad de compuesto que conseguirá el
objetivo de mejorar la gravedad y frecuencia de aparición, evitando
efectos secundarios adversos típicamente relacionados con terapias
alternativas. La expresión "terapia combinada" (o
"co-terapia"), definiendo el uso de un
compuesto de la presente invención y otro agente, pretende abarcar
la administración de cada uno de los agentes de una manera
secuencial en un régimen que proporcionará efectos beneficiosos de
la combinación de fármacos y pretende también incluir la
co-administración de estos agentes de una manera
prácticamente simultanea, tal como en una sola cápsula que tiene
una proporción fija de estos agentes activos o en múltiples cápsulas
diferentes para cada agente.
La presente invención comprende una composición
farmacéutica que comprende una cantidad terapéuticamente eficaz de
un compuesto de fórmula I asociado con al menos un vehículo,
adyuvante o diluyente farmacéuticamente aceptable.
La presente invención comprende también un método
de tratamiento terapéutico y profiláctico de infecciones víricas,
particularmente infección por herpetoviridae, en un sujeto,
comprendiendo el método tratar al sujeto que tiene dicha infección
por herpes con una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto
de fórmula I.
La presente invención comprende también un método
de inhibición de una proteasa vírica, comprendiendo el método
administrar una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de
fórmula I.
También se incluyen en la familia de compuesto de
fórmula I las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos. La
expresión "sales farmacéuticamente aceptables" incluye sales
usadas habitualmente para formar sales de metales alcalinos y para
formar sales de adición de ácidos libres o bases libres. La
naturaleza de la sal no es crítica, con la condición de que sea
farmacéuticamente aceptable. Las sales de adición de ácidos
farmacéuticamente aceptables de los compuestos de fórmula I pueden
prepararse a partir de un ácido inorgánico o de un ácido orgánico.
Son ejemplos de dichos ácidos inorgánicos ácido clorhídrico,
bromhídrico, yodhídrico, nítrico, carbónico, sulfúrico y fosfórico.
Los ácidos orgánicos apropiados pueden seleccionarse entre las
clases de ácidos orgánicos alifáticos, cicloalifáticos, aromáticos,
aralifáticos, heterocíclicos, carboxílicos y sulfónicos, siendo
ejemplos de los mismos el ácido fórmico, acético, propiónico,
succínico, glicólico, glucónico, láctico, málico, tartárico,
cítrico, ascórbico, glucurónico, maleico, fumárico, pirúvico,
aspártico, glutámico, benzoico, antranílico, mesílico, salicílico,
p-hidroxibenzoico, fenilacético, mandélico, embónico
(pamoico), metanosulfónico, etilsulfónico, bencenosulfónico,
pantoténico, toluenosulfónico,
2-hidroxietanosulfónico, sulfanílico, esteárico,
ciclohexilaminosulfónico, algénico,
\beta-hidroxibutírico, galactárico y
galacturónico, Las sales de adición de bases farmacéuticamente
aceptables adecuadas de los compuestos de fórmula I incluyen sales
metálicas preparadas a partir de aluminio, calcio, litio, magnesio,
potasio, sodio y cinc o sales orgánicas preparadas a partir de
N,N'-dibenciletilenodiamina, colina, cloroprocaína,
dietanolamina, etilenodiamina, meglumina
(N-metilglucamina) y procaína. Todas estas sales
pueden prepararse por medios convencionales a partir del
correspondiente compuesto de fórmula I haciendo reaccionar, por
ejemplo, el ácido o la base apropiada con el compuesto de fórmula
I.
En la solicitud anterior
WO-A-96/37485 se describen
procedimientos generales de síntesis para la preparación de los
compuestos de fórmula I.
Los siguientes ejemplos contienen descripciones
detalladas de métodos de preparación de los compuestos de fórmula I.
Todas las partes están en peso y las temperaturas en grados
centígrados a menos que se indique otra cosa.
Se usan las siguientes abreviaturas:
EtOAc - acetato de etilo
HCl - ácido clorhídrico
DMSO - dimetilsulfóxido
d_{6}-DMSO- dimetilsulfóxido
deuterado
CDCl_{3} - cloroformo deuterado
CHCl_{3} - cloroformo
CD_{3}OD - metanol deuterado
Et_{2}O - éter dietílico
MgSO_{4} - sulfato de magnesio
H_{2}SO_{4} - ácido sulfúrico
NaHCO_{3} - bicarbonato sódico
KHSO_{4} - hidrógeno sulfato potásico
NMM - N-metilmorfolina
DMF - dimetilformamida
DMAP - 4-dimetilaminopiridina
CDI - carbonildiimidazol
NaOH - hidróxido sódico
KOH - hidróxido potásico
LiOH - hidróxido de litio
Pd (OH)_{2}/C - hidróxido de paladio
sobre carbono
Pd/C - paladio sobre carbono
EDC -
1-(3-dimetilaminopropil)-3-etilcarbodiimida\cdotHCl
BOC - terc-butiloxicarbonilo
TLC - cromatografía de capa fina
MeOH - metanol
KI - yoduro potásico
CH_{2}Cl_{2} - cloruro de metileno
A una suspensión enfriada en hielo de CDI (0,53
g, 3,27 mmol) en 5 ml de piridina se le añadió clorhidrato del
éster t-butílico de L-alanina (0,57
g, 3,13 mmol). Después de agitar a 0ºC durante 30 minutos, se
añadió ácido
2-amino-6-metilbenzoico
(0,43 g, 2,85 mmol). El baño de hielo se retiró y la reacción se
agitó a 65ºC durante 2 horas. La mezcla de reacción se diluyó con
EtOAc y se lavó con HCl 1 N, se secó (MgSO_{4}), se filtró y se
evaporó a presión reducida. El producto bruto (0,30 g) se disolvió
en 5 ml de CH_{2}Cl_{2}. Se añadieron secuencialmente
trietilamina (0,15 g, 1,47 mmol) y EDC (0,28 g, 1,47 mmol). Después
de agitar a temperatura ambiente durante 2 horas la mezcla de
reacción se diluyó con EtOAc y se lavó con HCl 1 N, se secó
(MgSO_{4}), se filtró y se evaporó a presión reducida. La
cromatografía en gel de sílice del residuo (EtOAc/hexano 1:1) dio
113 mg de éster terc-butílico de
N-(5-metil-4-oxo-4H-3,1-benzoxazin-2-il)-L-alanina:
Análisis calculado para C_{16}H_{20}N_{2}O_{4}: C, 63,14;
H, 6,62, N, 9,21. Encontrado: C, 62,90; H, 6,97; N, 9,11.
^{1}H-RMN (300 MHz, CDCl_{3}) \delta 1,49 (s,
9H), 1,50 (d, J = 7 Hz, 3H), 2,70 (s, 3H), 4,48
(pent, J = 7 Hz, 1H), 5,68 (s a, 1H, intercambiable), 6,95 (d, J = 8 Hz, 1H), 6,99 (d, J = 8 Hz, 1H), 7,45 (t, J = 8 Hz, 1H).
(pent, J = 7 Hz, 1H), 5,68 (s a, 1H, intercambiable), 6,95 (d, J = 8 Hz, 1H), 6,99 (d, J = 8 Hz, 1H), 7,45 (t, J = 8 Hz, 1H).
Los siguientes compuestos se prepararon
procediendo de una manera similar pero substituyendo el clorhidrato
de éster t-butílico de L-alanina con
otras aminas o clorhidratos de amina apropiadamente
substituidos:
(1i) 1,1-Dimetiletil éster de
N^{\alpha}-(5-metil-4-oxo-4H-3,1-benzoxazin-2-il)-N^{\varepsilon}-[(fenilmetoxi)carbonil)-L-lisina:
^{1}H RMN (300 MHz, CDCl_{3}) \delta
1,40-1,63 (m, 13H), 1,75-1,95 (m,
2H), 2,65 (s, 3H), 3,18 (m, 3H), 4,42 (m, 1H), 5,08 (s, 2H), 5,47
(t a, J = 7 Hz, 1H, intercambiable), 6,25 (d a, J = 7 Hz, 1H,
intercambiable), 6,88 (d, J = 8 Hz, 1H), 7,05 (d, J = 8 Hz, 1H),
7,20-7,35 (m, 5H), 7,39 (t, J = 8 Hz, 1H).
(1k) Éster metílico de
N-(5-metil-4-oxo-4H-3,1-benzoxazin-2-il)-L-fenilalanina:
Análisis calculado para C_{19}H_{18}N_{2}
O_{4}: C, 67,44; H, 5,36; N, 8,28. Encontrado: C, 67,20; H, 5,57, N, 8,05.
O_{4}: C, 67,44; H, 5,36; N, 8,28. Encontrado: C, 67,20; H, 5,57, N, 8,05.
(1m) Éster metílico de
N-(5-metil-4-oxo-4H-3,1-benzoxazin-2-il)-L-triptófano:
^{1}H RMN (300 MHz, CDCl_{3}) \delta 2,67 (s, 3H), 3,40 (m,
2H), 3,70 (s, 3H), 4,93 (m, 1H), 5,47 (d a, J = 7 Hz, 1H,
intercambiable), 6,90- 7,20 (m, 5H), 7,30 (d, J = 8 Hz, 1H), 7,43
(t, J = 8 Hz, 1H), 7,55 (d, J = 8 Hz, 1H), 8,44 (s, 1H,
intercambiable).
(1n) 1,1-Dimetiletil éster de
N-(5-metil-4-oxo-4H-3,1-benzoxazin-2-il)-L-triptófano:
^{1}H RMN (300 MHz, CDCl_{3}) \delta 1,38 (s, 9H), 2,63 (s,
3H), 3,33 (m, 2H), 4,78 (m, 1H), 5,68 (d a, J = 7 Hz, 1H,
intercambiable), 6,85-7,15 (m, 5H), 7,26 (d, J = 8
Hz, 1H), 7,37 (t, J = 8 Hz, 1H), 7,60 (d, J = 8 Hz, 1H), 8,65 (s,
1H, intercambiable).
(1o) 1,1-Dimetiletil éster de
N-(5-metil-4-oxo-4H-3,1-benzoxazin-2-il)-L-fenilglicina:
^{1}H RMN (300 MHz,
CDCl_{3}) \delta 1,42 (s, 9H), 2,62 (s, 3H), 5,50 (d, J = 7 Hz, 1H), 6,38 (s a, 1H, intercambiable), 6,86 (d, J = 8 Hz, 1H), 7,02 (d, J = 8 Hz, 1H), 7,25-7,38 (m, 4H), 7,47 (d, J = 8 Hz, 2H).
CDCl_{3}) \delta 1,42 (s, 9H), 2,62 (s, 3H), 5,50 (d, J = 7 Hz, 1H), 6,38 (s a, 1H, intercambiable), 6,86 (d, J = 8 Hz, 1H), 7,02 (d, J = 8 Hz, 1H), 7,25-7,38 (m, 4H), 7,47 (d, J = 8 Hz, 2H).
(1p)
2-[[2-Metoxi-(1S)-(1-fenilmetil)etil]amino]-5-metil-4H-3,1-benzoxazin-4-ona:
Análisis calculado para C_{19}H_{20}
N_{2}O_{3}: C, 70,35; H, 6,22, N, 8,64. Encontrado: C 70,00; H, 6,28; N, 8,54.
N_{2}O_{3}: C, 70,35; H, 6,22, N, 8,64. Encontrado: C 70,00; H, 6,28; N, 8,54.
(1q) Éster metílico de
3,5-diyodo-N-(5-metil-4-oxo-4H-3,1-benzoxazin-2-il)-L-tirosina:
^{1}H RMN (300 MHz,
CDCl_{3}) \delta 2,72 (s, 3H), 3,09 (m, 2H), 3,79 (s, 3H), 4,86 (t, J = 7 Hz, 1H), 5,50 (s a, 1H, intercambiable), 7,01 (d, J = 8 Hz, 1H), 7,13 (d, J = 8 Hz, 1H), 7,49 (t, J = 8 Hz, 1H), 7,52 (s, 2H).
CDCl_{3}) \delta 2,72 (s, 3H), 3,09 (m, 2H), 3,79 (s, 3H), 4,86 (t, J = 7 Hz, 1H), 5,50 (s a, 1H, intercambiable), 7,01 (d, J = 8 Hz, 1H), 7,13 (d, J = 8 Hz, 1H), 7,49 (t, J = 8 Hz, 1H), 7,52 (s, 2H).
(1r) Éster metílico del ácido
N-(5-metil-4-oxo-4H-3,1-benzoxazin-2-il)-O-metil-L-tirosina:
^{1}H RMN (300 MHz, CDCl_{3}) \delta 2,66 (s, 3H), 3,15 (m,
2H), 3,73 (s, 3H), 3,74 (s, 3H), 4,85 (m a, 1H), 5,68 (s a, 1H,
intercambiable), 6,80 (d, J = 8 Hz, 2H), 6,92 (d, J = 8 Hz, 1H),
7,07 (m, 3H), 7,42 (t, J = 8 Hz, 1H).
(1s)
\alphaS-[[5-Metil-4-oxo-4H-3,1-benzoxazin-2-il)amino]-4-metoxi-N-metil-N-(fenilmetil)bencenopropanamida:
Análisis calculado para C_{27}H_{27}N_{3}O_{4}: C, 70,88; H, 5,95; N, 9,18. Encontrado: C, 70,65; H, 6,03; N, 9,06.
Análisis calculado para C_{27}H_{27}N_{3}O_{4}: C, 70,88; H, 5,95; N, 9,18. Encontrado: C, 70,65; H, 6,03; N, 9,06.
Los siguientes compuestos se preparan de una
manera similar pero substituyendo el ácido
2-amino-6-metilbenzoico
por ácido
2-amino-6-metoxibenzoico
[véase S. Gould y R. Eisenberg, J. Org. Chem., 56,
6666-6671 (1991)] y substituyendo el clorhidrato de
éster butílico de L-alanina por otras aminas o
clorhidratos de amina apropiados:
(1t)
5-Metoxi-2-[[(1R)-1-feniletil]amino]-4H-3,1-benzoxazin-4-ona;
y
(1u)
N-metil-N-fenilmetilamida
de
N-[5-metoxi-4-oxo-4H-3,1-benzoxazin-2-il]-O-metil-L-tirosina.
A una solución agitada del ácido
2-(3-etilureido)-6-metilbenzoico
(250 mg, 1,125 mmol) y trietilamina (170 mg, 1,69 mmol) en 10 ml de
CH_{2}Cl_{2} a temperatura ambiente se le añadió EDC (501 mg,
1,69 mmol). Después de agitar a temperatura ambiente durante 3
horas, la mezcla de reacción se diluyó con EtOAc y se lavó
secuencialmente con HCl 1 N y NaHCO_{3} saturado. La fracción
orgánica se secó (MgSO_{4}), se filtró y se evaporó a presión
reducida. La cromatografía en gel de sílice del residuo (1:1 de
EtOAc/hexano) produjo 127 mg de producto: Análisis calculado para
_{11}H_{12}N_{2}O_{2}\cdot0,25 H_{2}O: C, 63,30; H,
6,04; N, 13,42. Encontrado: C, 63,32; H, 5,92; N, 13,10. ^{1}H RMN
(300 MHz, d_{6}-DMSO) \delta 1,14 (t, J = 7 Hz,
3H), 2,60 (s, 3H), 3,27 (pent, J = 7 Hz, 2H), 6,95 (d, J = 8 Hz,
1H), 7,02 (d, J = 8 Hz, 1H), 7,50 (t, J = 8 Hz, 1H), 7,90 (t a, J =
7 Hz, 1H, intercambiable).
El siguiente compuesto se preparó procediendo de
una manera similar pero substituyendo el ácido
2-(3-etilureido)-6-metilbenzoico
por el ácido benzoico apropiadamente substituido:
(3c)
5-Metil-2-[[(1R)-1-feniletil]amino]-4-3,1-benzoxazin-4-ona:
Análisis calculado para C_{17}H_{16}N_{2}O_{2}: C, 72,84;
H, 5,75; N, 9,99. Encontrado: C, 72,51; H, 5,88; N, 9,97.
Los compuestos de esta invención presentaron
actividad antiviral como indica la inhibición in vitro de la
proteasa de herpesvirus y de la infectividad por HCMV. La actividad
antiviral de los compuestos de esta invención ilustrados en los
ejemplos se determinó por los siguientes métodos.
Se determinó la actividad de la proteasa
asemblina usando un substrato cromogénico de
para-nitroanilida (pNA) basado en el sitio de
escisión de maduración de hCMV,
succinil-AGVVNA-para-nitroanilida.
La incubación de este substrato con asemblina dio como resultado la
escisión del enlace alanil para-nitroanilida amida,
liberando para-nitroanilina libre que podría
determinarse por absorbancia a 405 nm. Se disolvieron inhibidores
potenciales de proteasa en DMSO y se añadieron 10 \mul a los
pocillos de una placa de 96 pocillos (Dynatech, Immulon 1). El
enzima se diluyó a 4,8 \mug/ml en tampón de ensayo (fosfato
sódico 10 mM, pH 7,4, acetato sódico 150 mM, CHAPS al 0,1%,
glicerol al 20%) y se añadieron 100 \mul a cada pocillo. Después
de una incubación de 30 minutos a temperatura ambiente, se
añadieron 50 \mul de substrato (1 parte de
succinil-AGVVNA-paranitroanilida 20
mM (SEC ID Nº: 1) en DMSO más 9 partes de tampón de ensayo), y se
tomaron lecturas periódicas en un lector de microplacas a 405 nm
respecto a 650 nm. Las actividades se expresaron como cambio de
unidades de miliabsorbancia (mAU) por minuto. La potencia del
inhibidor se determinó por comparación con incubaciones que carecían
de inhibidor, que en estas condiciones proporcionaron un aumento de
0,5-1 mAU/min. No se observó aumento cuando se
omitió el enzima. Los resultados se incluyen en la tabla 1.
Se purificó proteasa de HCMV a partir de E.
coli que expresaba una construcción de ADN que codificaba el
dominio proteasa de la fase de lectura abierta de U_{L}80 de la
cepa AD169 de citomegalovirus humano. La construcción también
codificaba seis restos de histidina adicionales en el extremo amino
de la proteasa. Estos restos de histidina adicionales
proporcionaron un ligando de afinidad por medio del cual se
purificó usando níquel-ácido nitriloacético-agarosa
(Qiagen).
La proteasa purificada se almacenó como una
solución madre de 1-3 mg/ml en tampón HEPES 20 mM,
pH 7,4; que contenía un 20% de glicerol (v/v). Esta solución madre
se diluyó con tampón de ensayo hasta 4,8 \mug/ml. En la reacción
enzimática se usó una alícuota de 100 \mul de esta solución.
Se sintetizó un substrato específico basado en la
especificidad de escisión de la proteasa de HCMV en el "sitio de
maduración" de la proteína de ensamblaje (F. Liu y B. Roizman,
J. Virol., 65, 5149 (1991) y A.R. Welch, et
al, J. Virol., 65, 4091 (1991)). El sitio de
maduración de la proteína de ensamblaje tiene la
secuencia...AGVVNA*SCRLATA...; el substrato usado fue
succinil-AGVVNA-PNA (SEC ID Nº: 1)
que se preparó por métodos de síntesis de péptidos convencionales
tales como los descritos en Bodansky y Bodansky, "The Practice of
Peptide Synthesis" (1984), y se almacenó como una solución madre
20 mM en dimetilsulfóxido. Ésta se diluyó 10 veces con tampón de
ensayo para dar una concentración 2 mM justo antes del uso. En la
reacción se usó una alícuota de 50 \mul.
Se usó tampón de ensayo (tampón fosfato sódico 10
mM, pH 7,4; acetato sódico 150 mM, un 0,1% de CHAPS; y un 20% de
glicerol (v/v)) para diluir las soluciones madre de enzima y
substrato.
Con estos ensayos complementarios se ensayó la
capacidad de un compuesto para inhibir la producción de nuevos
virus y la toxicidad del compuesto para las células hospedadoras.
Fue importante que los dos ensayos se realizaran simultáneamente
para comparar los resultados directamente, ya que la toxicidad
puede reducir indirectamente el rendimiento viral.
DMEM - Medio de Eagle Modificado por Dulbecco;
disponible en el mercado.
FBS - suero bovino fetal; disponible en el
mercado y contiene factores desconocidos necesarios para el
crecimiento de las células en cultivo.
PBS - solución salina tamponada con fosfato:
tampón fosfato sódico 10 mM, pH 7,4, cloruro sódico 120 mM, cloruro
potásico 2,7 mM.
El rendimiento viral se estimó midiendo la
cantidad de antígeno viral producido cuatro días después de la
infección con un anticuerpo monoclonal contra una proteína viral
abundante "temprana inmediata". Se usó un anticuerpo
secundario unido a enzima (peroxidasa de rábano picante) específico
para el anticuerpo primario (de ratón) para medir la cantidad de
antígeno viral. Los compuestos de ensayo de diluyeron hasta dos
veces la concentración final deseada en DMEM + FBS al 5%. Cien
microlitros de esta solución se pusieron en cada pocillo de una
placa de 96 pocillos. Esto se hizo una vez para la placa antiviral
de 96 pocillos y de nuevo para una placa de citotoxicidad. También
se incluyeron dos controles para ambas placas; un control sin
fármaco y un control sin virus. Se ensayó rutinariamente
ganciclovir en placas antivirales y de citotoxicidad como patrón de
referencia, porque tiene actividad antiviral conocida para HCMV.
Todas las células se prepararon recogiendo fibroblastos de prepucio
humano con tripsina y resuspendiendo a una concentración de 5 x
10^{5} células por ml en DMEM. Las células infectadas se
prepararon infectándolas con HCMV (cepa AD169) a una multiplicidad
de infección = 0,2. Se añadieron 100 microlitros de células no
infectadas (5 x 10^{4} células) a los pocillos apropiados de la
placa de citotoxicidad. De una manera similar, se añadieron 100
\mul de células infectadas (5 x 10^{4} células) a los pocillos
apropiados de la placa antiviral. Además, se incluyeron células no
infectadas y no tratadas con el compuesto en ensayo como controles
en la placa antiviral. Las placas se incubaron durante 96 horas a
37ºC en una atmósfera con un 5% de CO_{2} y se procesaron para
medir la cantidad de antígeno viral y la toxicidad. Los resultados
se incluyen en la tabla 1.
Lo siguiente se realizó sólo en la placa
antiviral. Se retiró el medio y las células se fijaron con
acetona:metanol 1:1 durante 15 minutos a -20ºC. Se retiró el agente
de fijación y las células se lavaron una vez con PBS que contenía
un 0,05% de Tween 20. Para bloquear la unión no específica de
anticuerpos, cada pocillo se incubó con PBS que contenía un 3% (p/v)
de albúmina de suero bovino (BSA) durante 1 hora a 22ºC. La
solución de bloqueo se retiró y las células se lavaron una vez con
PBS que contenía un 0,05% de Tween 20 antes de incubar con una
dilución 1:100 de anticuerpo primario en PBS que contenía un 3% de
PSA durante 2 horas a 22ºC. El anticuerpo primario fue un anticuerpo
monoclonal (procedente de ratón) específico para el antígeno
nuclear temprano inmediato de HCMV y estaba disponible en el mercado
(Dupont). Se retiró la solución de anticuerpo primario y la placa
se aclaró 5 veces con PBS que contenía un 1% (v/v) de Triton
X-100 (PBST) antes de incubar con anticuerpo
secundario diluido 1:1000 en PBS que contenía un 3% de BSA durante 2
horas a 22ºC. El anticuerpo secundario (procedente de cabra)
reconoció los determinantes específicos de ratón del anticuerpo
primario y se unió covalentemente a la peroxidasa de rábano picante
(Sigma). La placa se aclaró 5 veces con PBST y una vez con agua
desionizada antes de añadir 100 \mul de solución de substrato TMB
y de incubar durante 30 minutos a 22ºC. La reacción se detuvo
añadiendo 100 \mul de ácido fosfórico y se registró la OD
(densidad óptica) a 450 nm. El substrato para la peroxidasa de
rábano picante unida al anticuerpo secundario fue TMB (3,3',5,5'
tetrametilbenzidina). Se preparó a partir de un kit disponible en
el mercado (Kirkegaard & Perry Laboratories, Inc.). La actividad
antiviral se calculó comparando la cantidad de antígeno viral
producido en pocillos tratados con fármaco con el producido en
pocillos sin fármaco. Los resultados se incluyen en la
tabla 1.
tabla 1.
En este ensayo, se controló la replicación de
HCMV mediante la producción de beta-galactosidasa
de E. coli por el virus RC256 modificado por ingeniería
genética [Spaete y Mocarski, Proc. Nat. Acad. Sci.,
84, 7213-7217 (1987)]. Se realizaron un
ensayo antiviral y un ensayo de citotoxicidad para cada compuesto.
Las diluciones de los compuestos de ensayo y la infección de las
células en una placa de 96 pocillos fueron esencialmente como se ha
descrito anteriormente para el ELISA de HCMV excepto por lo
siguiente. Se infectaron fibroblastos de prepucio humano a 3,5 x
10^{5} células por mililitro en solución con RC256 a 0,05 pfu por
célula. Los compuestos y las células se incubaron 3 días y se
procesaron 2 días después de la infección. Para la detección de la
beta galactosidasa, el sobrenadante se aspiró de las placas de
ensayo antivirales y se añadieron 50 \mul de Tampón de Lisis
Indicador (Promega, diluido a 1X con agua) por pocillo. Las placas
se incubaron a temperatura ambiente al menos 30 minutos y se
congelaron a -20ºC en este punto para el procesamiento posterior. Se
añadieron 50 \mul de tampón de ensayo 2X [Na_{2}HPO_{4} 120
mM, NaH_{2}PO_{4} 80 mM, MgCl_{2} 2 mM,
2-mercaptoetanol 100 mM, ONPG 4,4 mM (Sigma)] por
pocillo y se incubaron a temperatura ambiente durante un periodo de
30 a 45 minutos. La reacción se detuvo con 100 \mul de tampón
CAPS 1 M,
pH = 11,0 por pocillo y la densidad óptica se leyó a 410 nanómetros. Se usó ganciclovir como control positivo y se determinó la EC50 como se ha descrito anteriormente para el ELISA de HCMV. Los resultados se incluyen en la
tabla 1.
pH = 11,0 por pocillo y la densidad óptica se leyó a 410 nanómetros. Se usó ganciclovir como control positivo y se determinó la EC50 como se ha descrito anteriormente para el ELISA de HCMV. Los resultados se incluyen en la
tabla 1.
El ensayo de quimotripsina fue una modificación
del método de Delmar et al [Anal.Biochem., 99,
316-320 (1979)]. Se disolvió
\alpha-quimotripsina de páncreas bovino (tipo II,
Sigma) en HCl 0,001 N a 1 mg/ml y se diluyó adicionalmente 1/600 en
tampón de ensayo (Tris 0,1 M, pH 7,8, que contenía CaCl_{2} 0,1
M) antes de su uso. Se añadieron 20 \mul de compuesto de ensayo
en DMSO (o DMSO sólo), 100 \mul de tampón de ensayo y 30 \mul de
enzima a placas de 96 pocillos, se mezclaron y
pre-incubaron durante 30 minutos a temperatura
ambiente. La reacción se inició añadiendo 50 \mul de
N-succinil-Ala-Ala-Pro-Phe-p-nitroanilida
0,2 mM (Sigma; 2 mM en DMSO diluido 1/10 en tampón de ensayo antes
de su uso). Se controló el aumento de absorbancia a 405 nm durante
10 minutos con un lector de placas Biotek EL340. Los resultados se
incluyen en la tabla 1.
Se disolvió elastasa de leucocitos humanos (HLE)
(obsequio de R. Senior, Universidad de Washington) en solución
salina a 1 mg/ml y se diluyó adicionalmente 1/20 en tampón de
ensayo (Tris 0,2 M, pH 8,0) antes de su uso. Se añadieron 10 \mul
de compuesto de ensayo en DMSO (o DMSO solo), 100 \mul de tampón
de ensayo y 50 \mul de enzima a placas de 96 pocillos, se
mezclaron y se preincubaron durante 30 minutos a temperatura
ambiente. La reacción se inicio añadiendo 40 \mul de
metoxisuccinil-Ala-Ala-Pro-Val-p-nitroanilida
2,5 mM (Sigma; 25 mM en DMSO diluido 1/10 en tampón de ensayo antes
de su uso). Se controló el aumento de absorbancia a 405 nm durante
10 minutos con un lector de placas Biotek EL340. Los resultados se
muestran en la tabla 1.
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(Tabla pasa a página
siguiente)
En esta invención también se incluye una clase de
composiciones farmacéuticas que comprende uno o más compuestos de
fórmula I en asociación con uno o más vehículos y/o diluyentes y/o
adyuvantes no tóxicos farmacéuticamente aceptables (denominados en
conjunto en este documento materiales de "vehículo") y, si se
desea, otros ingredientes activos. Los compuestos de la presente
invención pueden administrarse por cualquier vía adecuada,
preferiblemente en forma de una composición farmacéutica adaptada a
dicha vía, y en una dosis eficaz para el tratamiento deseado. Los
compuestos y composiciones pueden administrarse, por ejemplo, por
vía oral, intravascular, intraperitoneal, subcutánea, intramuscular
o tópica.
Para administración oral, la composición
farmacéutica puede estar en forma de, por ejemplo, un comprimido,
cápsula, suspensión o líquido. La composición farmacéutica se
prepara preferiblemente en forma de una unidad de dosificación que
contiene una cantidad particular del ingrediente activo. Son
ejemplos de dichas unidades de dosificación comprimidos o cápsulas.
El ingrediente activo también puede administrarse por inyección
como una composición en la que, por ejemplo, puede usarse solución
salina, dextrosa o agua como vehículo adecuado.
La cantidad de compuesto terapéuticamente activo
que se administra y el régimen de dosificación para tratar un
estado de enfermedad con los compuestos y/o composiciones de esta
invención depende de diversos factores, incluyendo la edad, peso,
sexo y estado médico del sujeto, la gravedad de la enfermedad, la
vía y frecuencia de administración y el compuesto particular
empleado y, de esta manera, puede variar ampliamente. Las
composiciones farmacéuticas pueden contener el ingrediente activo
en el intervalo de aproximadamente 0,1 a 2000 mg, preferiblemente
en el intervalo de aproximadamente 0,5 a 500 mg y aún más
preferiblemente entre aproximadamente 1 y 100 mg. Puede ser
apropiada una dosis diaria de aproximadamente 0,1 a 100 mg/kg de
peso corporal, preferiblemente entre aproximadamente 0,1 y
aproximadamente 50 mg/kg de peso corporal y más preferiblemente
entre aproximadamente 1 y 20 mg/kg de peso corporal. La dosis diaria
puede administrarse en una a cuatro dosis por día.
Para fines terapéuticos, los compuestos de esta
invención habitualmente se combinan con uno o más adyuvantes
apropiados para la vía de administración indicada. Si se
administran per os, los compuestos pueden mezclarse con
lactosa, sacarosa, polvo de almidón, ésteres de celulosa de ácidos
alcanoicos, ésteres alquílicos de celulosa, talco, ácido esteárico,
estearato de magnesio, óxido de magnesio, sales de sodio y calcio
de los ácidos fosfórico y sulfúrico, gelatina, goma arábiga,
alginato sódico, polivinilpirrolidona, y/o alcohol polivinílico, y
después comprimirse o encapsularse para una administración
conveniente. Estas cápsulas o comprimidos pueden contener una
formulación de liberación controlada que puede proporcionarse en
una dispersión de compuesto activo en hidroxipropilmetil celulosa.
Las formulaciones para administración parenteral pueden estar en
forma de soluciones o suspensiones acuosas o no acuosas isotónicas,
estériles para inyección. Estas soluciones y suspensiones pueden
prepararse a partir de polvos o gránulos estériles que tienen uno o
más de los vehículos o diluyentes mencionados para uso en las
formulaciones para administración oral. Los compuestos pueden
disolverse en agua, polietilenglicol, propilenglicol, etanol,
aceite de maíz, aceite de semillas de algodón, aceite de cacahuete,
aceite de sésamo, alcohol bencílico, cloruro sódico y/o diversos
tampones. Otros adyuvantes y modos de administración se conocen bien
y ampliamente en la técnica farmacéutica.
Para infecciones del ojo u otros tejidos
externos, por ejemplo, la boca y la piel, las formulaciones
preferiblemente se aplican como una pomada o crema tópica que
contiene el o los ingredientes activos en una cantidad total, por
ejemplo, del 0,075 al 30% p/p, preferiblemente del 0,2 al 20% p/p y
más preferiblemente del 0,4 al 15% p/p. Cuando se formulan en una
pomada, los ingredientes activos pueden emplearse con una base
parafínica o una base de pomada miscible con agua. Como
alternativa, los ingredientes activos pueden formularse en una
crema con una base de crema de aceite en agua. Si se desea, la fase
acuosa de la base de crema puede incluir, por ejemplo, al menos un
30% p/p de un alcohol polihidroxílico tal como propilenglicol,
butano-1,3-diol, manitol, sorbitol,
glicerol, polietilenglicol y mezclas de los mismos. La formulación
tópica puede incluir deseablemente un compuesto que potencia la
absorción o penetración del ingrediente activo a través de la piel u
otras áreas afectadas. Los ejemplos de dichos potenciadores de la
penetración dérmica incluyen dimetilsulfóxido y análogos
relacionados. Los compuestos de esta invención también pueden
administrarse mediante un dispositivo transdérmico. La
administración tópica preferiblemente se realizará usando un parche
de tipo depósito y membrana porosa o de una variedad de matriz
sólida. En cualquier caso, el agente activo se suministra de manera
continua desde el depósito o las microcápsulas a través de una
membrana al adhesivo permeable al agente activo que está en
contacto con la piel o mucosa del receptor. Si el agente activo se
absorbe a través de la piel, se administra un flujo controlado y
predeterminado del agente activo al receptor. En el caso de las
microcápsulas, el agente de encapsulación también puede funcionar
como la membrana.
La fase oleosa de las emulsiones de esta
invención puede constituirse a partir de ingredientes conocidos y
de una manera conocida. Aunque la fase puede comprender únicamente
un emulsionante, puede comprender una mezcla de al menos un
emulsionante con una grasa o un aceite o con tanto una grasa como un
aceite. Preferiblemente, se incluye un emulsionante hidrófilo junto
con un emulsionante lipófilo que actúa como estabilizante. También
es preferible incluir tanto un aceite como una grasa. Juntos, el
emulsionante o los emulsionantes con o sin el estabilizante o los
estabilizantes forman lo que se denomina una cera emulsionante, y
la cera junto con el aceite y la grasa forman lo que se denomina
una base de pomada emulsionante que constituye la fase oleosa
dispersa de las formulaciones de crema. Los emulsionantes y los
estabilizantes de emulsión adecuados para uso en la formulación de
la presente invención incluyen Tween 60, Span 80, alcohol
cetoestearílico, alcohol miristílico, monoestearato de glicerilo, y
lauril sulfato sódico, entre otros.
La elección de aceites o grasas adecuadas para la
formulación se basa en la obtención de las propiedades cosméticas
deseadas, ya que la solubilidad del compuesto activo en la mayoría
de los aceites que probablemente se usarán en las formulaciones de
emulsión farmacéutica es muy baja. De esta manera, la crema
preferiblemente debe ser un producto no graso, que no macha y
lavable con consistencia adecuada para evitar el goteo desde los
tubos u otros recipientes. Pueden usarse ésteres de alquilo mono- o
dibásicos de cadena lineal o ramificada tales como
di-isoadipato, estearato de isocetilo, diéster de
propilenglicol de ácidos grasos de coco, miristato de isopropilo,
oleato de decilo, palmitato de isopropilo, estearato de butilo,
palmitato de 2-etilhexilo o una mezcla de ésteres
de cadena ramificada. Éstos pueden usarse solos o en combinación
dependiendo de las propiedades requeridas. Como alternativa, pueden
usarse lípidos con alto punto de fusión tales como parafina blanca
blanda y/o parafina líquida, u otros aceites minerales.
Las formulaciones adecuadas para la
administración tópica en el ojo incluyen también gotas oculares en
las que los ingredientes activos se disuelven o suspenden en un
vehículo adecuado, especialmente un disolvente acuoso para los
ingredientes activos. Los ingredientes activos antivirales están
presentes preferiblemente en dichas formulaciones en una
concentración del 0,5 al 20%, ventajosamente del 0,5 al 10% y
particularmente de aproximadamente el 1,5% p/p.
Claims (6)
1. Un compuesto de fórmula general I
seleccionado entre un grupo de
compuestos compuesto
por
5-metil-2-[[(1R)-1-feniletil]amino]-4H-3,1-benzoxazin-4-ona;
1,1-dimetiletil éster de
N^{\alpha}-(5-metil-4-oxo-4H-3,1-benzoxazin-2-il)-N^{\varepsilon}-[(fenilmetoxi)carbonil]-L-lisina;
éster metílico de
N-(5-metil-4-oxo-4H-3,1-benzoxazin-2-il)-L-fenilalanina;
éster metílico de
N-(5-metil-4-oxo-4H-3,1-benzoxazin-2-il)-L-triptófano;
1,1-dimetiletil éster de
N-(5-metil-4-oxo-4H-3,1-benzoxazin-2-il)-L-triptófano;
2-[[2-metoxi-(1S)-(1-fenilmetil)etil]amino]-5-metil-4H-3,1-benzoxazin-4-ona;
éster metílico de
3,5-diyodo-N-(5-metil-4-oxo-4H-3,1-benzoxazin-2-il)-L-
tirosina;
éster metílico de
N-(5-metil-4-oxo-4H-3,1-benzoxazin-2-il)-O-metil-L-tirosina;
1,1-dimetiletil éster de
N-(5-metil-4-oxo-4H-3,1-benzoxazin-2-il)-L-fenilglicina;
\alphaS-[(5-metil-4-oxo-4H-3,1-benzoxazin-2-il)amino]-4-metoxi-N-metil-N-(fenilmetil)bencenopropanamida;
5-metoxi-2-[[(1R)-1-feniletil]amino]-4H-3,1-benzoxazin-4-ona;
y
N-metil-N-fenilmetilamida
de
N-[5-metoxi-4-oxo-4H-3,1-benzoxazin-2-il]-O-metil-L-tirosina,
y las sales farmacéuticamente aceptables de
dichos compuestos seleccionados.
2. Una composición farmacéutica que comprende una
cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de acuerdo con la
reivindicación 1 y un vehículo o diluyente farmacéuticamente
aceptable.
3. Uso de un compuesto de acuerdo con la
reivindicación 1, para preparar un medicamento para el tratamiento
de una infección viral en un sujeto.
4. Uso de un compuesto de acuerdo con la
reivindicación 1, para preparar un medicamento para inhibir una
proteasa viral.
5. Uso de acuerdo con la reivindicación 3, en el
que la infección viral está provocada por un herpesvirus.
6. Uso de acuerdo con la reivindicación 5, en el
que la infección viral está provocada por CMV,
HSV-1 o HSV-2.
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