ES2210746T3

ES2210746T3 - Control de plagas inocuo.

Info

Publication number: ES2210746T3
Application number: ES98919807T
Authority: ES
Inventors: Steven M. Bessette; Myron A. Beigler
Original assignee: Ecosmart Technologies Inc
Current assignee: Ecosmart Technologies Inc
Priority date: 1997-06-06
Filing date: 1998-04-23
Publication date: 2004-07-01
Anticipated expiration: 2018-04-23
Also published as: US6342536B1; EP0991320A1; CN1224320C; DE69819724T2; NZ501217A; JP3258340B2; CA2291121C; US6329433B1; HK1025883A1; AU729441B2; KR20010013422A; AU7251298A; CA2291121A1; ATE253826T1; NO995902D0; US6331572B1; US6342535B1; PL337222A1; US6004569A; US6372803B1

Abstract

La invención se refiere a un pesticida y al procedimiento para emplear el pesticida para matar invertebrados, especialmente insectos, arácnidos y larvas. El procedimiento consiste en preparar una mezcla de un vehículo portador con un pesticida y aplicar la mezcla a insectos arácnidos y larvas y a su hábitat. El pesticida es un neurotransmisor- aceptor que afecta a la neurotransmisión y emplea los lugares receptores de octopamina en los insectos, arácnido y larvas. Dicho agente es un compuesto químico del aceite esencial de una planta natural. La colocación de los compuestos químicos de la presente invención sobre una superficie proporciona una toxicidad residual de hasta 30 días. La invención se refiere a varios vehículos portadores para el agente aceptor. Los compuestos químicos de la presente invención evitan la alimentación de los insectos, arácnidos y larvas y también retardan el crecimiento de las larvas de los insectos y arácnidos.

Description

Control de plagas inocuo.

Antecedentes de la invención

La presente invención se refiere a un método de control de plagas y, más en particular, a un método de preparación y de aplicación de un pesticida que afecta a los sitios receptores de octopamina de insectos, arácnidos y larvas.

Durante muchos años se han estudiado muchos productos químicos y mezclas de actividad pesticida con el fin de obtener un producto que sea selectivo para los invertebrados como insectos, arácnidos y sus larvas, que tenga poca o ninguna toxicidad para vertebrados tales como mamíferos, peces, aves y otras especies, y que, por otro lado, no perduren ni dañen el medioambiente. Muchos productos de los cuales los solicitantes tienen conocimiento y los cuales tienen la suficiente actividad pesticida como para tener importancia comercial, también tienen efectos tóxicos o deletéreos en mamíferos, peces, aves u otras especies que no son el objetivo del producto. Por ejemplo, los compuestos organofósforos y los carbamatos inhiben la actividad de la acetilcolinesterasa en insectos, así como en todo tipo de animales. El clordimeform y las formamidinas relacionadas son conocidos por el hecho de actuar en receptores de la octopamina de insectos, pero han sido eliminados del mercado por su potencial cardiotóxico en vertebrados, la carcinogenicidad en animales y por un efecto variado en distintos insectos. También, se considera que dosis muy elevadas son tóxicas para ciertas especies de insectos.

Se ha postulado que los compuestos de amidina afectan a la adenilato ciclasa sensible a la octopamina presente en los insectos [Nathanson et al, Mol. Parmacol 20:68-75 (1981) y Nathanson, Mol. Parmacol 28: 254-268 (1985)]. Se realizó otro estudio sobre la captación y el metabolismo de la octopamina en el sistema nervioso del insecto [Wierenga et al, Neurochem 54, 20 479-489 (1990)]. Estos estudios estaban dirigidos a compuestos con contenido en nitrógeno que imitan la estructura de la octopamina.

Algunos insecticidas como trioxabiciclooctanos, ditianos, silatranos, lindano, toxafeno, ciclodienos y picrotoxina actúan sobre el receptor GABA (ácido gamma amino butírico). No obstante, estos productos también afectan a mamíferos, pájaros, peces y otras especies.

Los documentos siguientes también se han considerado como parte relevante del estado de la técnica anterior y describen aceites esenciales de plantas usados como insecticidas o acaricidas de acuerdo con unas circunstancias específicas.

Los documentos WO-A-85/05038, WO-A-93/00811, WO-A-94/27434, WO-A-94/27434, DE 4231045; las patentes japonesas 04 149 103, 02 049,703, 52 110 823, 05 039 203, 01 016 706, 04 091 003; Coats J.R. et al, ACS Symposium Series, Ch 20, 1991, págs. 305-316 y Biological Abstracts, vol. 91, resumen n° 305-316.

Ejemplos de algunos compuestos generalmente descritos en este contexto son feniletilaminas, cloroetilamina, aldehídos aromáticos, alcohol cinámico, acetato de bencilo, alcohol bencílico, aldehído cinámico, terpineol, timol, etc.

Sigue existiendo la necesidad de un pesticida particularmente eficaz dirigido sólo a insectos, arácnidos y sus larvas y que no tenga efectos no deseados y nocivos en otras especies.

Breve resumen de la invención

Un objetivo fundamental de la presente invención es proporcionar un método de preparación y de aplicación de un pesticida que mate invertebrados, especialmente insectos, arácnidos y sus larvas, y que no tenga efectos nocivos en otras especies, incluidos mamíferos, peces y aves.

Otro objetivo de la presente invención es proporcionar un método de preparación y de aplicación de un pesticida que ejerza sus propiedades pesticidas a través del sitio receptor de la octopamina en los insectos, arácnidos y sus larvas y otros invertebrados.

Además, otro objetivo de la presente invención es proporcionar un método de preparación y de aplicación de un pesticida en concentraciones relativamente bajas que sea eficaz durante un período comparativamente largo de tiempo, por ejemplo al menos 24 horas.

Según las enseñanzas de la presente invención, se ha descrito un método para matar insectos y arácnidos y sus larvas de acuerdo con la reivindicación 1 anexa. Las fases incluyen la preparación de una mezcla de un soporte con un agente efector que interfiere en los neurotransmisores del sitio receptor de la octopamina en 'insectos, arácnidos y sus larvas, y la aplicación de la mezcla a insectos, arácnidos, larvas y a su hábitat. El agente efector interactúa con los sitios del receptor de octopamina en los insectos, arácnidos y larvas e interfiere en la neurotransmisión de los invertebrados, pero no afecta a mamíferos, peces y aves. El agente es una mezcla de alcohol cinámico, eugenol y alfa terpineol. La mezcla es agregada a un soporte para producir una mezcla uniforme. La mezcla se aplica a insectos, arácnidos y larvas y a su hábitat. La mezcla interactúa con los sitios receptores de la octopamina en el invertebrado e interfiere en la neurotransmisión de los invertebrados, pero no afecta a mamíferos, peces ni aves.

En otro aspecto se ha descrito un método de control de insectos, arácnidos y sus larvas. Se prepara una emulsión a partir de la mezcla anterior que interrumpe la neurotransmisión en el sitio receptor de la octopamina en insectos, arácnidos y sus larvas.

Breve descripción de los dibujos

La Figura 1 es un gráfico que muestra el efecto de la mezcla 3-B de la presente invención en la concentración intracelular de [Ca^{2+}] en células neuronales.

La Figura 2 es un gráfico que muestra la contracción de los músculos de una pata de cucaracha inducida por estimulación eléctrica, cuando se inyecta la mezcla 3-B de la presente invención en el tórax de una cucaracha viva.

La Figura 3 es un gráfico que muestra la contracción de los músculos de una pata de cucaracha, en una pata aislada, inducida por estimulación eléctrica cuando se aplica la mezcla 3-B de la presente invención a la pata aislada.

La Figura 4 es un gráfico que muestra la prueba de la Figura 2 usando acetona como control, sin la mezcla 3-B.

La Figura 5 es un gráfico que muestra la prueba de la Figura 3 usando acetona como control, sin la mezcla 3-B.

La Figura 6 es una serie de gráficos que muestran la transmisión de señales desde los mecanorreceptores de los cerci después de la aplicación de la mezcla 3-B y de un control en el nervio abdominal de la cucaracha.

La Figura 7 es una tabla que muestra el daño producido por la alimentación de discos de hojas de una planta de repollo con la mezcla de 3-B en comparación con un control.

Descripción

La mezcla de la presente invención produce actividad fisiológica para insectos invertebrados, arácnidos y sus larvas. Los productos químicos siguientes, que tienen un anillo de carbono de seis elementos y que tienen al menos un grupo funcional oxigenado sustituido, son los productos químicos de la presente invención

alcohol cinámico

1

eugenol

2

alfa-terpineol

3

Los materiales arriba enumerados son todos componentes de aceites esenciales de plantas.

El eugenol y el alfa-terpineol son monoterpenos, cada uno conteniendo diez (10) átomos de carbono.

Todos los productos químicos de la presente invención son productos químicos orgánicos de origen natural que están desprovistos de halógenos. Además, algunos productos químicos de la presente invención están considerados por la Agencia de Protección Medioambiental estadounidense (EPA) como inofensivos para los seres humanos y están exentos de registro. Así, estos productos químicos no requieren una aprobación previa o registro ante la EPA. Algunos de estos productos químicos han sido añadidos en insecticidas de la técnica precedente como atrayentes y repelentes. No obstante, no se ha informado de que estos productos químicos tengan actividad pesticida tóxica con las concentraciones descritas en la presente invención.

Todos los productos químicos de la presente invención actúan como agonistas o antagonistas en el sitio receptor de la octopamina en insectos, arácnidos y sus larvas y, en consecuencia, producen efectos fisiológicos en los invertebrados expuestos. Los productos químicos de la presente invención están considerados como agentes efectores. La exposición a concentraciones reducidas de los productos químicos, o bien la exposición durante breves espacios de tiempo, afecta a las costumbres alimenticias de los insectos, arácnidos y larvas expuestos. Esto es importante para aquellos invertebrados que se alimentan de vegetales, puesto que se produce una reducción del deterioro de las plantas por parte de los invertebrados que han recibido concentraciones subletales de los productos químicos de la presente invención. Asimismo, se ha mostrado que los insectos, arácnidos o larvas que sobreviven a la exposición a los productos químicos de la presente invención retardan su crecimiento.

Se disolvió alfa-terpineol, eugenol y alcohol cinámico en acetona y se designó muestra 3B. La gama de porcentajes en peso de los componentes de la mezcla son: 10%-50% de alfa-terpineol, 10%-50% de eugenol y 20%-35% de alcohol cinámico. La mezcla preferida tiene partes iguales en peso de cada uno de los componentes. Se inyectó 3B en el abdomen a cucarachas americanas macho y hembra. Se observaron señales evidentes de toxicidad con 1 mg/cucaracha en 2 µl de acetona. Con dosis inferiores no se observaron síntomas. Con este procedimiento, murieron 2 de cada 6 en un período de 30 minutos. De las que sobrevivieron, algunas mostraron dificultades locomotrices. No se observó hiperactividad, incluso en aquellas que murieron rápidamente. En algunos casos, los insectos tratados (2/6) murieron después de 2 a 3 días.

Ninguna de las cucarachas americanas murió al ser tratada por aplicación tópica antes de 24 horas. Un 40% (4/10) de la mortalidad se observó después de 24 horas desde el tratamiento, y este efecto dependió del tiempo. Después de 72 horas, murió el 100%. Los insectos del control, que recibieron 2 \mul de acetona solamente por inyección, no mostraron ningún efecto de enfermedad (Tabla 1).

TABLA 1

Efecto según el tiempo transcurrido de 3-B (1 mg/insecto) en cucarachas americanas tratadas por aplicación tópica.
Tiempo (h)	Mortalidad-3B	Mortalidad-control
24	4/10	0
48	6/10	0
72	10/10	0

Los datos del estudio anterior sugieren que la acción de 3B depende del lugar de aplicación, es decir, 'inyección abdominal vs. aplicación tópica para todo el cuerpo.

Se aplicó 3B en distintas zonas del insecto. Cuando se proporcionó en la región del esternón ventral (en la base de las piernas posteriores) de la cucaracha americana, el 3B fue más tóxico con 125 \mug/insecto. En este caso, las señales tóxicas evidentes fueron observadas tras un periodo de 10 minutos. Se inyectó una dosis letal de 250-500 \mug/insecto y los insectos murieron en un periodo de 30 minutos (tabla 2).

TABLA 2

4

En el último caso de inyección de una dosis letal, las patas posteriores parecían paralizadas mientras que las patas delanteras y las intermedias se movían rápidamente, aunque no hubo una hiperexcitación clara. Este fenómeno de muerte rápida fue también observado en cucarachas alemanas 5 que fueron tratadas por aplicación tópica (el 3B es más tóxico para las cucarachas alemanas que para las cucarachas americanas). Con 125 \mug/insecto, el 80% (8/10) de las cucarachas alemanas quedaron inmóviles en un tiempo de 2 a 3 horas y murieron en un periodo de 24 horas (la dosis fue de 125 \mug de 3B por insecto con 0.4 \mul acetona).

Los datos anteriores confirman la observación de que el lugar de aplicación proporciona unos grados variables de toxicidad. Para una mayor confirmación, se aplicó 1 mg de 3B en 20 ml acetona en pequeños botes cubriendo toda la superficie. Una hora después, la acetona se había evaporado completamente, 5 cucarachas americanas fueron introducidas en cada bote.5 Los botes de control fueron tratados exactamente igual pero sólo con 20 ml de acetona. Todas las cucarachas murieron en un período entre 10 y 30 minutos en los botes que contenían 3B. Ninguna murió en los botes de control. Algunos insectos (3/5) mostraron hiperactividad tras un periodo entre 1 y 3 minutos después de la exposición. Después de 8 minutos, se observó un parálisis de 0 las patas posteriores. Estos datos "paralelos" son consistentes con el estudio precedente, en el que se observó una muerte rápida al proporcionar 3B en la zona del esternón ventral en lugar de en el abdomen. El hecho de que los tóxicos podrían penetrar más rápido por las patas (sin capa de quitina como en el cuerpo) apoya la noción de que la permeabilidad/penetración del 3B juega un 5 papel clave en su toxicidad (tabla 3).

TABLA 3

Efecto según el tiempo transcurrido de 3B (1 mg/bote) en cucarachas americanas expuestas a una
superficie pretral:ada después una hora tras la aplicación de 3B.*
Tiempo (min.)	Mortalidad
10	3/5
15	3/5
20	4/5
30	5/5
*Ninguna muerte en insectos expuestos a la superficie tratada sólo con acetona.

Basándonos en estos datos, los mismos botes tratados fueron usados para un estudio residual. En este experimento, las cucarachas americanas fueron transferidas a los bote tratados y de control en espacios temporales diferentes desde el momento en que la acetona se evaporó, es decir, 24, 48, 96, 72 horas y 7 días. Curiosamente, todos los insectos murieron después de ser expuestos a los recipientes tratados, incluso 7 días después de la aplicación de 3B. No obstante, fue necesario más tiempo para que las cucarachas murieran en proporción a la duración de tiempo desde la aplicación inicial de 3B en el recipiente. Algunas señales tóxicas se observaron en todos los casos tras la exposición. Además, al repetir el mismo experimento con cucarachas alemanas, se observaron efectos tóxicos mayores y efectos más rápidos. Parece que se produce alguna degradación en los efectos tóxicos con el tiempo (tabla 4).

TABLA 4

Efecto del 3B (1 mg/bote) aplicado en superficies en cucarachas americanas expuestas a dichas superficies
en momentos diferentes después del tratamiento de la superficie.
Tiempo transcurrido tras la aplicación de 3B (días)	Tiempo requerido para matar el 100% de insectos (días)
1	1
2	3
3	6
5	8
7*	10(6/10 murieron)
*Sólo murieron 6 insectos al exponer 10 cucarachas en unos recipientes pretratados 7 días después de la aplicación
de 3-B.

El cordón nervioso abdominal de la cucaracha mostró la segunda mayor absorción de octopamina de todos los tejidos estudiados [J. Neurochem 54 479-489 (1990)]. La eficacia elevada de los productos químicos de la presente invención en el estudio "paralelo" se atribuye a la elevada concentración de receptores de octopamina en el cordón nervioso ventral muy próximo a las patas posteriores.

Puesto que las señales tóxicas producidas por el 3B no indicaron modelos de acción colinérgica, se consideraron otras posibilidades de mayor importancia como el receptor GABA, receptor de octopamina/enlace de amina biogénica, [Ca^{2+}], o veneno por respiración mitocondrial:

1. Estudio del receptor GABA-canal de cloruro: este sitio de acción es conocido por ser uno de los sitios de acción más importantes en varios insecticidas. Al evaluar la acción de 3B, se usó 3H-EBOB ([^{3}H]n- propil biciclo orto benzoato) y 35S-TBPS (ésteres biciclo fosforosos). El primer ligando fue usado basándose en las conclusiones de que el EBOB ha demostrado tener un radioligando altamente tóxico a la vez que de gran afinidad con el sitio de enlace convulsionante del receptor GABA en insectos. También muestra sitios de enlace idénticos o superpuestos a siete clases de insecticidas: trioxabiciclooctanos, ditianos, silatranos, lindano, toxafeno, ciclodienos y picrotoxinina. El TBPS ha sido rechazado por tener una pobre relevancia toxicológica y afinidad de enlace en los insectos. Ambos radioligandos fueron usados en este estudio con fines comparativos. Según se muestra en la tabla 6, el 3B no provocó ninguna acción antagónica en la afinidad de enlace del 3H-EBOB o del 35S-TBPS con unas concentraciones de 3B oscilando entre
10 \muM y 10 NM. Sólo se observó un efecto significativo con 100 BM. No obstante, con una concentración tan alta
(100 \muM), la especificidad para el sitio de acción es improbable. Por el contrario, el heptaclorepóxido sólo y una mezcla de Endosulfano 1 (60%) y Endosulfano II (40%) como estándar positivo fueron altamente activos incluso con 10 Nm. Estos datos indican que este sistema de ensayo no funciona bien para el 3B, y que el defecto de su acción se debe a su inaccesibilidad al sitio del receptor GABA. El hecho de que la cepa London resistente al ciclodieno mostrara resistencia cruzada al 3B apoya los datos anteriores y descarta el receptor GABA como el objetivo o el sitio de acción del 3B.

TABLA 6

5

\newpage

2. Receptor de octopamina/sitio de enlace de amina biogénica: se sabe que las aminas biogénicas desempeñan diversas funciones fisiológicas a través de sus receptores específicos en los insectos. El receptor de octopamina es el receptor más dominante de la amina biogénica en insectos. Se sabe que algunos acaricidas, como el clordimeform, actúan en los receptores de octopamina provocando una variedad de síntomas, incluyendo cambios en el comportamiento. Cuando se incubó 3B directamente con un tejido homogeneizado del cordón nervioso de cucarachas americanas, se halló un aumento significativo en la AIVMP cíclica (AMPc) con una dosis de 1 \muM. La octopamina química fue usada como control positivo y provocó un aumento significativo en la camp con 1 \muM. Otra prueba de que la octopamina es el sitio de acción principal de 3B es que en el co-tratamiento de 3B y octopamina, 3B anuló el aumento de octopamina inducida en la AMPc.

Para confirmar que el 3B es una materia tóxica para el receptor de octopamina, se determinaron dos importantes marcadores biológicos: los latidos del corazón/30 segundos y la actividad proteína quinasa (PKA) dependiente de la AMPc. Ambos están considerados como particularmente importantes en la identificación de la actividad del receptor de octopamina debido a que se ha demostrado que el corazón de la cucaracha posee una elevada concentración de receptores de octopamina. Cuando se aplicó una concentración de 3B de 200 \mug/insecto a la región del esternón de la cucaracha americana viva e intacta, se observó un aumento significativo en los latidos del corazón/30 segundos, lo que estuvo acompañado por un aumento en AMPc. Como sucedió anteriormente, las concentraciones más elevadas de 3B ocasionaron una reducción de los latidos del corazón (Tabla 7).

TABLA 7

6

TABLA 8

Efecto in vivo del 3-B (200 \mug/cucaracha) sobre la actividad PKA en la membrana sinaptosomal de las
cucarachas americanas.
	dpm/1 nmol de Kemptide/5 min. X \pm SD
Control	1753+57
3-B	4008+201

3. Posible función del [Ca^{2+}]: debido a las dificultades locomotrices observadas en las cucarachas tratadas con 3B en la región del esternón ventral, se postuló que los aumentos en los niveles intramusculares de Ca^{2+} podrían estar implicados en las contracciones de las patas posteriores. Por esta razón, se utilizaron células adrenales de cromafina de rata de la línea celular mamífera PC12. Esta línea celular es conocida porque imita las células neuronales, particularmente las neuronas catecolaminérgicas, y se ha usado como modelo para los fenómenos de liberación de transmisores presinápticos inducidos por Ca^{2+}. Tal y como se muestra en la Fig. 1, al añadir 3B con 100 \muM a estas células (en A), no se produjo ningún cambio en el Ca^{2+} libre intracelular. La concentración de [Ca^{2+}] en el interior de las células PC12 se determinó usando medidas espectrofluorométricas con Fura 2/AM (una sonda de fluorescencia que penetra en la célula para el Ca^{2+} libre). Un control positivo estándar, la tapsigargina aumentó claramente el [Ca^{2+}]\pm (en B) incluso a 500 Nm. También, 10 \muM de ionomicina, un ionoforo de Ca^{2+} (en C) produjo el aumento esperado de entrada de Ca^{2+}. Estos resultados mostraron que el 3B no muestra la capacidad para regular ningún tipo de homeóstasis de calcio en células mamíferas.

El efecto de los productos químicos de la presente invención en las células del tejido cerebral de la rata fue el siguiente, donde la generación de AMP cíclica se mide como dpm/mg de proteína.

control	5395+43
3-B	5411 \pm 391
terpineol	5399 \pm 219
eugenol	5461 \pm 488
alcohol fenil etílico	5499 \pm 415

Por lo tanto, no se produjo ningún cambio en el sistema de neurotransmisión del mamífero. Estos datos confirman la falta de neurotoxicidad de estos aceites esenciales en los mamíferos.

4. Veneno mitocondrial/respiratorio: otro modo posible de acción es el del envenenamiento mitocondrial o respiratorio. Se ha observado que todos los venenos mitocondriales provocan hiperactividad en cierto momento durante su acción. No obstante, cuando las cucarachas americanas fueron tratadas con una aplicación tópica de 3B, no se observó hiperactividad o hiperexcitación en ninguna fase del envenenamiento con ninguna concentración utilizada. Por otra parte, cuando las cucarachas americanas fueron expuestas a recipientes revestidos previamente con 1 mg de una solución de 3B al 60%, los insectos mostraron hiperexcitación. Estos datos sugieren que el modo de introducción es un factor determinante en el modo de acción de estos aceites esenciales. Estas observaciones confirman la idea de que el 3B no es un tipo de veneno que ataque al canal de Na^{+} corno objetivo principal. El hecho de que la cepa resistente al Kdr (con un canal de Na^{+} mutado que la vuelve insensible al DDT y a los piretroides) no mostró resistencia cruzada al 3B también apoya esta diagnosis.

En las circunstancias anteriores, según las cuales todos los sitios de acción conocidos para los insecticidas más importantes resultaron ser insensibles al 3B, excepto el efecto antagónico en el receptor de octopamina, se consideró la posibilidad die que el modo de acción de este grupo de productos químicos fuera totalmente novedoso.

Se observó que la toxicidad de 3B varía según el lugar de aplicación, al menos en el caso de la cucaracha americana. Una observación de este tipo indica que el 3B puede no ser tan sistémico en acción, y si un sitio produce una toxicidad elevada, su objetivo puede estar muy cerca del sitio de aplicación. En vista de la dificultad locomotriz observada en las cucarachas americanas tratadas en el esternón central, se razonó que los ganglios torácicos podrían estar afectados. Al inyectar 3B (250 mg en 0.4 \mul de acetona) en el tórax de una cucaracha viva y al provocar contracciones en sus patas posteriores por un estímulo eléctrico externo aplicado en el exterior del cuerpo, la capacidad de los músculos de las patas de responder a los estímulos desapareció totalmente después de un minuto (Fig. 2). Al aplicar 3-B a la pata aislada, y roporcionando directamente estímulos eléctricos, no se halló ningún efecto del 3B (Fig. 3). Estos datos sugieren que el efecto del 3B se produce sobre el sistema nervioso y no en los músculos. Las pruebas de control que utilizan acetona (0.4 \mul) sin 3-B no mostraron efecto alguno (Figs. 4 y 5). Esta posibilidad fue probada de nuevo usando el 6° ganglio abdominal y estudiando la transmisión de señales desde los mecanorreceptores de los cerci generados por soplido de aire. Con esle objetivo, se abrió la cavidad abdominal, exponiendo todo el cordón nervioso abdominal. Una solución de suspensión de 3B en 200 \mul de suero de insecto fue aplicada directamente en todo el cordón nervioso abdominal. Los resultados fueron drásticos, produciendo un bloqueo completo de la transmisión con 250-500 PPM durante 5 minutos desde el momento de la aplicación (Fig. 6). Incluso con 10 PPM, el efecto de bloqueo del 3B fue evidente, produciendo efectos visibles en 15 minutos. Estos resultados indican claramente que el 3B es un bloqueante nervioso no sistémico.

Se prepararon formulaciones en polvo seco usando los productos químicos de la presente invención. Los ejemplos enumerados más abajo son para la mezcla 3B según se ha descrito anteriormente (alcohol cinámico, eugenol y alfa terpineol).

El procedimiento consistió en colocar los componentes en polvo en una placa de 500 ml y añadir el producto químico (normalmente líquido) sobre el polvo. El polvo y el producto químico mezclados en el recipiente se colocaron en un tambor eléctrico para su secado durante aproximadamente 30 minutos. Aproximadamente 1 mg del polvo seco resultante fue aplicado a un filtro de papel Whatman N° 1 en una placa de Petri de 9 cm. El polvo fue extendido uniformemente con un cepillo de pelo de camello. Se utilizó un control que constaba únicamente de los componentes en polvo, sin el producto químico de la presente invención.

Se prepararon las composiciones siguientes:(Tablas 12a-12c)

TABLA 12a

% en peso	Cantidad	Componentes
40	20 g	tierra diatomácea
20	10 g	carbonato cálcico
20	10 g	bicarbonato sódico
10	5 g	Hi-Sil 233
10	5 g	ingrediente activo*
*el ingrediente activo es una mezcla de los productos químicos de la presente invención.

TABLA 12b

% en peso	Cantidad	Componentes
40	20 g	tierra diatomácea
23	11.5 g	carbonato cálcico
20	10 g	bicarbonato sódico
10	5 g	Hi-Sil 233
7	3.5 g	ingrediente activo*
*el ingrediente activo es una mezcla de los productos químicos de la presente invención.

TABLA 12c

% en peso	Cantidad	Componentes
40	20 g	tierra diatomácea
25	12.5 g	carbonato cálcico
20	10 g	bicarbonato sódico
10	5 g	Hi-Sil 233
5	2.5 g	ingrediente activo*
*el ingrediente activo es una mezcla de los productos químicos de la presente invención.

Las mezclas fueron evaluadas colocando diez (10) hormigas bravas comunes en placas de Pe.tri, respectivamente, que fueron tapadas a continuación. El tiempo para que se produjera (KT) una caída irreversible (KD) fue determinado a partir de observaciones periódicas irregulares. Los insectos fueron considerados KD cuando estaban hacia arriba, o cuando se les podía poner hacia arriba y no podían ponerse derechos por sí mismos durante al menos dos (2) minutos. KT-50 y KT-90 (tiempo para el 50% y el 90% de KD respectivamente) fueron calculados por interpolación del KD entre los tiempos de recogida de datos. La mezcla al 10% (tabla 12a) tuvo un KT 50% de 5 min. y 50 seg. y un KT 90% de 6 min. y 40 seg. Para la mezcla al 7% (Tabla 12b) el KT 50% fue de 3 min. y 40 seg. y el KT 90% fue de 4 min. y 40 seg. La mezcla al 5% (Tabla 12c) tuvo un KT 50% de 2 min. y 33 seg. y el KT 90% de 3 min. y 45 seg.

Los datos anteriores son ejemplos que demuestran claramente la eficacia de la mezcla de productos químicos en unas concentraciones que varían entre el 5%-10% en peso de los ingredientes activos. Estos son ejemplos típicos, aunque no son limitativos. Concentraciones muy bajas, como por ejemplo del 0.1% en peso, también han demostrado ser eficaces para algunos productos químicos individuales y para varias mezclas de productos químicos. También se pueden utilizar concentraciones mucho más elevadas.

Como ejemplo de una concentración elevada, un concentrado emulsionable tiene la formulación siguiente:

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Ingrediente	Objetivo	% peso
3B	ingrediente activo	90.0
Dodecil benceno sulfonato de sodio	emulgente	6.6
C12-15 Pareth-3 sulfonato de sodio	emulgente	2.0
Monooleato de sorbitán POE 20	emulgente	1.4

Otro concentrado emulsionable es:

Ingrediente	Objetivo	% peso
3B	ingrediente activo	90.0
Aceite de ricino (40 mol de EO)	emulgente	10.0

El concentrado se diluye con hasta 50 a 70 partes de agua por 1 parte de concentrado para proporcionar un medio acuoso eficaz.

La mezcla de 3B y concentrado emulsionable fue diluida en agua corriente y pulverizada sobre plantas de repollos y judías para evaluar su eficacia contra el gusano gris asiático y las arañuelas rojas (Tetranychus urticae) respectivamente. Todos los valores están basados en un mínimo de cuatro dosis con cinco réplicas y diez gusanos grises o treinta arañuelas deutoninfas y/o adultas por réplica. Los valores registrados representan las proporciones de agua y formulación (es decir, grado de dilución) (p. ej., LD50 de 46.8 significa una proporción de agua y concentrado emulsionable de 46.8:1). Se evaluó la mortalidad tras 24 horas (Tabla 13).

TABLA 13

Mortalidad de la mezcla emulsionable de la mezcla 3-B
Gusano gris asiático de 3 días de edad	LD5O(95% I.C.) = 46.8 (44.0-49.8)
	LD9O(95% I.C.) = 30.6 (27.2-40.7)
Gusano gris asiático de 5 días de edad	LD5O(95% I.C.) = 53.0 (49.6-56.7)
	LD9O(95% I.C.) = 33.7 (29.7-45.6)
arañuela roja	LD5O(95% I.C.) = 82.3 (76.5-88.5)
	LD9O(95% I.C.) = 55.9 (49.3-75.5)

La formulación de 3B concentrado emulsionable diluido muestra una buena eficacia contra ambas edades de gusanos grises, e incluso una mejor eficacia contra las arañuelas rojas. Los gusanos grises de cinco días de edad tienen aproximadamente el mismo tamaño que las larvas de la polilla del repollo maduras (última fase), una especie objetivo en potencia. También es relevante el hecho de que se observó que las concentraciones subletales impidieron claramente la alimentación y, en consecuencia, el deterioro de la planta. Con una disolución de 50:1, 60:1 y 70:1, la mortalidad larvaria representa sólo el 64%, 42% y 12%, respectivamente. No obstante, se produce un deterioro alimenticio mínimo con las larvas supervivientes. Tal y como se muestra en la Fig. 7, los discos, de hojas de plantas de repollo con concentrado emulsionable de 3-B diluido 50:1, 60:1 y 70:1 presentaban áreas consumidas (ac) después de 24 horas inferiores al 5%-30% en comparación con un control (sin 3-B) donde el área consumida fue superior al 80%. Otro ejemplo de una concentración elevada es un polvo humectante que tiene la formulación siguiente:

Ingrediente	Objetivo	% peso
3B	ingrediente activo	50.0
Sílice, hidratada, amorfa	absorbente	41.5
Alquil naftaleno sulfonato de sodio	agente de dispersión	3.0
Dioctil sulfosuccinato de sodio	agente humectante	0.5
Dodecil benceno sulfonato de sodio	emulgente	5.0

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Se mezcla una parte de este polvo con hasta 30-50 partes de agua para proporcionar un pesticida eficaz. Este ejemplo es para la mezcla de 3B, aunque no es limitativo y puede ser preparado con cualquiera de los productos químicos individuales de la presente invención o cualquier combinación de mezcla de los productos químicos individuales.

Se puede preparar un polvo impermeable usando cualquiera de los productos químicos individuales o una mezcla de cualquiera de los productos químicos de la presente invención. La formulación siguiente es representativa, la mezcla de 3C presenta partes iguales en peso de alcohol bencílico, alcohol fenil etílico y terpineol:

Ingrediente	Objetivo	% peso
3C	ingrediente activo	5.0
Tierra diatomácea	agente de carga	75.0
Sílice hidrofóbico	absorbente	20.0

Las formulaciones siguientes representan dos aerosoles representativos preparados con las mezclas 3B y 3C, aunque pueden ser usados para otras mezclas y para productos químicos individuales de la presente invención:

Ingrediente	Objetivo	% peso
3B	ingrediente activo	5.0
Aceite de ricino (40 mol de EO)	emulgente	2.7
Monooleato de sorbitán POE 20	emulgente	0.6
Alquil benceno sulfonato de isopropilamina	emulgente	1.7
Agua	diluyente	90.0

Un champú pesticida tiene la composición siguiente, en la que el ingrediente activo es un producto químico individual de la presente invención o una mezcla de productos químicos:

Ingrediente	% peso
Ingrediente activo	0.5- 10.0
Secuestrante para agua dura	0.5 -3.0
Emulgente(s)	1.0-5.0
Espesante(s)	0.5-5.0
Estabilizador de espuma	0.5-2.0
Detergente	5.0-20.0
Tampón	0.1-2.0 (al pH requerido)
Tinte/colorante	0.01
Conservante	0.01 -1.0
Agua desionizada	Hasta el 100%

Se han preparado formulaciones en gel de la manera siguiente:

Color azul
3.00%	Ingrediente activo
15.00%	Etanol
0.42%	Carbopol 934
0-.42%-10%	Hidróxido sódico en agua
81.16%	Agua

Color amarillo
3.00%	Ingrediente activo
30.00%	Etanol
0.42%	Carbopol 934
0.42%-10%	Hidróxido sódico en agua
66.16%	Agua

El ingrediente activo es la mezcla de la presente invención.

Una formulación de polvo seco consiste en mezclar un carbonato de metal alcalinotérreo, como carbonato cálcico, un bicarbonato de metal alcalino, como el bicarbonato sódico, el ingrediente activo, un material absorbente, como tierra diatomácea y un agente de carga como HiSil 233.

Las concentraciones relativas de la mezcla son preferiblemente de aproximadamente el 20%-30% de carbonato de metal alcalinotérreo, 15%-25% de bicarbonato de metal alcalino, 0.1%-5% de ingrediente activo, 30%-50% de material absorbente y 5%-15% de agente de carga (todos en peso). Los gránulos del polvo son preferiblemente triturados hasta un tamaño inferior a 100 micras.

Los ingredientes activos pueden ser productos químicos individuales de la presente invención o mezclas derivadas.

En todos los ejemplos mencionados anteriormente, puede ser deseable añadir una cantidad de traza (menos del 2%) de un material para proporcionar un olor agradable, no sólo por razones estéticas sino también para identificar las áreas tratadas de un edificio. El olor agradable puede ser vainilla, canela, floral u otros olores aceptables para los consumidores. Los olores agradables no están limitados a los ejemplos proporcionados aquí.

Claims

1. Método para matar y/o controlar insectos, arácnidos y/o las larvas de los mismos, dicho método comprendiendo:

la preparación de una mezcla que comprende un soporte y un agente efector, que es una mezcla seleccionada a partir del grupo compuesto por alcohol cinámico, eugenol y alfa terpineol, y

la aplicación de la mezcla a insectos, arácnidos, sus larvas y/o su hábitat.

2. Método según la reivindicación 1, dicho método comprendiendo:

la preparación de una mezcla de alcohol cinámico, eugenol y alfa terpineol;

adición de la mezcla a un soporte para producir una mezcla sustancialmente uniforme.

3. Método según la reivindicación 2, donde la gama de porcentaje en peso de la mezcla es alcohol cinámico 20%-35%, eugenol 10%-50% y alfa terpineol 10%-50%.

4. Método según la reivindicación 2, donde la mezcla tiene partes iguales en peso de cada uno de los componentes.

5. Método según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, que comprende además la adición a la mezcla de un material con un olor agradable.

6. Método según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, donde el soporte es agua conteniendo al menos un emulgente.

7. Método según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, donde el soporte es un polvo humectante.

8. Método según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, donde el soporte es un polvo impermeable.

9. Método según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, donde el soporte es un aerosol.

10. Método según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, donde el soporte es un polvo seco.

11. Método según las reivindicaciones 1 a 4, donde la mezcla es en forma de emulsión.