ES2210746T3 - Control de plagas inocuo. - Google Patents
Control de plagas inocuo.Info
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- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Abstract
La invención se refiere a un pesticida y al procedimiento para emplear el pesticida para matar invertebrados, especialmente insectos, arácnidos y larvas. El procedimiento consiste en preparar una mezcla de un vehículo portador con un pesticida y aplicar la mezcla a insectos arácnidos y larvas y a su hábitat. El pesticida es un neurotransmisor- aceptor que afecta a la neurotransmisión y emplea los lugares receptores de octopamina en los insectos, arácnido y larvas. Dicho agente es un compuesto químico del aceite esencial de una planta natural. La colocación de los compuestos químicos de la presente invención sobre una superficie proporciona una toxicidad residual de hasta 30 días. La invención se refiere a varios vehículos portadores para el agente aceptor. Los compuestos químicos de la presente invención evitan la alimentación de los insectos, arácnidos y larvas y también retardan el crecimiento de las larvas de los insectos y arácnidos.
Description
Control de plagas inocuo.
La presente invención se refiere a un método de
control de plagas y, más en particular, a un método de preparación
y de aplicación de un pesticida que afecta a los sitios receptores
de octopamina de insectos, arácnidos y larvas.
Durante muchos años se han estudiado muchos
productos químicos y mezclas de actividad pesticida con el fin de
obtener un producto que sea selectivo para los invertebrados como
insectos, arácnidos y sus larvas, que tenga poca o ninguna
toxicidad para vertebrados tales como mamíferos, peces, aves y otras
especies, y que, por otro lado, no perduren ni dañen el
medioambiente. Muchos productos de los cuales los solicitantes
tienen conocimiento y los cuales tienen la suficiente actividad
pesticida como para tener importancia comercial, también tienen
efectos tóxicos o deletéreos en mamíferos, peces, aves u otras
especies que no son el objetivo del producto. Por ejemplo, los
compuestos organofósforos y los carbamatos inhiben la actividad de
la acetilcolinesterasa en insectos, así como en todo tipo de
animales. El clordimeform y las formamidinas relacionadas son
conocidos por el hecho de actuar en receptores de la octopamina de
insectos, pero han sido eliminados del mercado por su potencial
cardiotóxico en vertebrados, la carcinogenicidad en animales y por
un efecto variado en distintos insectos. También, se considera que
dosis muy elevadas son tóxicas para ciertas especies de
insectos.
Se ha postulado que los compuestos de amidina
afectan a la adenilato ciclasa sensible a la octopamina presente en
los insectos [Nathanson et al, Mol. Parmacol
20:68-75 (1981) y Nathanson, Mol. Parmacol
28: 254-268 (1985)]. Se realizó otro estudio sobre
la captación y el metabolismo de la octopamina en el sistema
nervioso del insecto [Wierenga et al, Neurochem 54, 20
479-489 (1990)]. Estos estudios estaban dirigidos a
compuestos con contenido en nitrógeno que imitan la estructura de
la octopamina.
Algunos insecticidas como trioxabiciclooctanos,
ditianos, silatranos, lindano, toxafeno, ciclodienos y picrotoxina
actúan sobre el receptor GABA (ácido gamma amino butírico). No
obstante, estos productos también afectan a mamíferos, pájaros,
peces y otras especies.
Los documentos siguientes también se han
considerado como parte relevante del estado de la técnica anterior
y describen aceites esenciales de plantas usados como insecticidas
o acaricidas de acuerdo con unas circunstancias específicas.
Los documentos
WO-A-85/05038,
WO-A-93/00811,
WO-A-94/27434,
WO-A-94/27434, DE 4231045; las
patentes japonesas 04 149 103, 02 049,703, 52 110 823, 05 039 203,
01 016 706, 04 091 003; Coats J.R. et al, ACS Symposium Series, Ch
20, 1991, págs. 305-316 y Biological Abstracts,
vol. 91, resumen n° 305-316.
Ejemplos de algunos compuestos generalmente
descritos en este contexto son feniletilaminas, cloroetilamina,
aldehídos aromáticos, alcohol cinámico, acetato de bencilo, alcohol
bencílico, aldehído cinámico, terpineol, timol, etc.
Sigue existiendo la necesidad de un pesticida
particularmente eficaz dirigido sólo a insectos, arácnidos y sus
larvas y que no tenga efectos no deseados y nocivos en otras
especies.
Un objetivo fundamental de la presente invención
es proporcionar un método de preparación y de aplicación de un
pesticida que mate invertebrados, especialmente insectos, arácnidos
y sus larvas, y que no tenga efectos nocivos en otras especies,
incluidos mamíferos, peces y aves.
Otro objetivo de la presente invención es
proporcionar un método de preparación y de aplicación de un
pesticida que ejerza sus propiedades pesticidas a través del sitio
receptor de la octopamina en los insectos, arácnidos y sus larvas y
otros invertebrados.
Además, otro objetivo de la presente invención es
proporcionar un método de preparación y de aplicación de un
pesticida en concentraciones relativamente bajas que sea eficaz
durante un período comparativamente largo de tiempo, por ejemplo al
menos 24 horas.
Según las enseñanzas de la presente invención, se
ha descrito un método para matar insectos y arácnidos y sus larvas
de acuerdo con la reivindicación 1 anexa. Las fases incluyen la
preparación de una mezcla de un soporte con un agente efector que
interfiere en los neurotransmisores del sitio receptor de la
octopamina en 'insectos, arácnidos y sus larvas, y la aplicación de
la mezcla a insectos, arácnidos, larvas y a su hábitat. El agente
efector interactúa con los sitios del receptor de octopamina en los
insectos, arácnidos y larvas e interfiere en la neurotransmisión de
los invertebrados, pero no afecta a mamíferos, peces y aves. El
agente es una mezcla de alcohol cinámico, eugenol y alfa terpineol.
La mezcla es agregada a un soporte para producir una mezcla
uniforme. La mezcla se aplica a insectos, arácnidos y larvas y a su
hábitat. La mezcla interactúa con los sitios receptores de la
octopamina en el invertebrado e interfiere en la neurotransmisión
de los invertebrados, pero no afecta a mamíferos, peces ni
aves.
En otro aspecto se ha descrito un método de
control de insectos, arácnidos y sus larvas. Se prepara una
emulsión a partir de la mezcla anterior que interrumpe la
neurotransmisión en el sitio receptor de la octopamina en insectos,
arácnidos y sus larvas.
La Figura 1 es un gráfico que muestra el efecto
de la mezcla 3-B de la presente invención en la
concentración intracelular de [Ca^{2+}] en células neuronales.
La Figura 2 es un gráfico que muestra la
contracción de los músculos de una pata de cucaracha inducida por
estimulación eléctrica, cuando se inyecta la mezcla
3-B de la presente invención en el tórax de una
cucaracha viva.
La Figura 3 es un gráfico que muestra la
contracción de los músculos de una pata de cucaracha, en una pata
aislada, inducida por estimulación eléctrica cuando se aplica la
mezcla 3-B de la presente invención a la pata
aislada.
La Figura 4 es un gráfico que muestra la prueba
de la Figura 2 usando acetona como control, sin la mezcla
3-B.
La Figura 5 es un gráfico que muestra la prueba
de la Figura 3 usando acetona como control, sin la mezcla
3-B.
La Figura 6 es una serie de gráficos que muestran
la transmisión de señales desde los mecanorreceptores de los cerci
después de la aplicación de la mezcla 3-B y de un
control en el nervio abdominal de la cucaracha.
La Figura 7 es una tabla que muestra el daño
producido por la alimentación de discos de hojas de una planta de
repollo con la mezcla de 3-B en comparación con un
control.
La mezcla de la presente invención produce
actividad fisiológica para insectos invertebrados, arácnidos y sus
larvas. Los productos químicos siguientes, que tienen un anillo de
carbono de seis elementos y que tienen al menos un grupo funcional
oxigenado sustituido, son los productos químicos de la presente
invención
Los materiales arriba enumerados son todos
componentes de aceites esenciales de plantas.
El eugenol y el alfa-terpineol
son monoterpenos, cada uno conteniendo diez (10) átomos de
carbono.
Todos los productos químicos de la presente
invención son productos químicos orgánicos de origen natural que
están desprovistos de halógenos. Además, algunos productos químicos
de la presente invención están considerados por la Agencia de
Protección Medioambiental estadounidense (EPA) como inofensivos para
los seres humanos y están exentos de registro. Así, estos productos
químicos no requieren una aprobación previa o registro ante la EPA.
Algunos de estos productos químicos han sido añadidos en
insecticidas de la técnica precedente como atrayentes y repelentes.
No obstante, no se ha informado de que estos productos químicos
tengan actividad pesticida tóxica con las concentraciones descritas
en la presente invención.
Todos los productos químicos de la presente
invención actúan como agonistas o antagonistas en el sitio receptor
de la octopamina en insectos, arácnidos y sus larvas y, en
consecuencia, producen efectos fisiológicos en los invertebrados
expuestos. Los productos químicos de la presente invención están
considerados como agentes efectores. La exposición a
concentraciones reducidas de los productos químicos, o bien la
exposición durante breves espacios de tiempo, afecta a las
costumbres alimenticias de los insectos, arácnidos y larvas
expuestos. Esto es importante para aquellos invertebrados que se
alimentan de vegetales, puesto que se produce una reducción del
deterioro de las plantas por parte de los invertebrados que han
recibido concentraciones subletales de los productos químicos de la
presente invención. Asimismo, se ha mostrado que los insectos,
arácnidos o larvas que sobreviven a la exposición a los productos
químicos de la presente invención retardan su crecimiento.
Se disolvió alfa-terpineol,
eugenol y alcohol cinámico en acetona y se designó muestra 3B. La
gama de porcentajes en peso de los componentes de la mezcla son:
10%-50% de alfa-terpineol, 10%-50% de eugenol y
20%-35% de alcohol cinámico. La mezcla preferida tiene partes
iguales en peso de cada uno de los componentes. Se inyectó 3B en el
abdomen a cucarachas americanas macho y hembra. Se observaron
señales evidentes de toxicidad con 1 mg/cucaracha en 2 µl de
acetona. Con dosis inferiores no se observaron síntomas. Con este
procedimiento, murieron 2 de cada 6 en un período de 30 minutos. De
las que sobrevivieron, algunas mostraron dificultades locomotrices.
No se observó hiperactividad, incluso en aquellas que murieron
rápidamente. En algunos casos, los insectos tratados (2/6) murieron
después de 2 a 3 días.
Ninguna de las cucarachas americanas murió al ser
tratada por aplicación tópica antes de 24 horas. Un 40% (4/10) de
la mortalidad se observó después de 24 horas desde el tratamiento,
y este efecto dependió del tiempo. Después de 72 horas, murió el
100%. Los insectos del control, que recibieron 2 \mul de acetona
solamente por inyección, no mostraron ningún efecto de enfermedad
(Tabla 1).
Efecto según el tiempo transcurrido de 3-B (1 mg/insecto) en cucarachas americanas tratadas por aplicación tópica. | ||
Tiempo (h) | Mortalidad-3B | Mortalidad-control |
24 | 4/10 | 0 |
48 | 6/10 | 0 |
72 | 10/10 | 0 |
Los datos del estudio anterior sugieren que la
acción de 3B depende del lugar de aplicación, es decir, 'inyección
abdominal vs. aplicación tópica para todo el cuerpo.
Se aplicó 3B en distintas zonas del insecto.
Cuando se proporcionó en la región del esternón ventral (en la base
de las piernas posteriores) de la cucaracha americana, el 3B fue
más tóxico con 125 \mug/insecto. En este caso, las señales
tóxicas evidentes fueron observadas tras un periodo de 10 minutos.
Se inyectó una dosis letal de 250-500
\mug/insecto y los insectos murieron en un periodo de 30 minutos
(tabla 2).
En el último caso de inyección de una dosis
letal, las patas posteriores parecían paralizadas mientras que las
patas delanteras y las intermedias se movían rápidamente, aunque no
hubo una hiperexcitación clara. Este fenómeno de muerte rápida fue
también observado en cucarachas alemanas 5 que fueron tratadas por
aplicación tópica (el 3B es más tóxico para las cucarachas alemanas
que para las cucarachas americanas). Con 125 \mug/insecto, el 80%
(8/10) de las cucarachas alemanas quedaron inmóviles en un tiempo
de 2 a 3 horas y murieron en un periodo de 24 horas (la dosis fue
de 125 \mug de 3B por insecto con 0.4 \mul acetona).
Los datos anteriores confirman la observación de
que el lugar de aplicación proporciona unos grados variables de
toxicidad. Para una mayor confirmación, se aplicó 1 mg de 3B en 20
ml acetona en pequeños botes cubriendo toda la superficie. Una hora
después, la acetona se había evaporado completamente, 5 cucarachas
americanas fueron introducidas en cada bote.5 Los botes de control
fueron tratados exactamente igual pero sólo con 20 ml de acetona.
Todas las cucarachas murieron en un período entre 10 y 30 minutos
en los botes que contenían 3B. Ninguna murió en los botes de
control. Algunos insectos (3/5) mostraron hiperactividad tras un
periodo entre 1 y 3 minutos después de la exposición. Después de 8
minutos, se observó un parálisis de 0 las patas posteriores. Estos
datos "paralelos" son consistentes con el estudio precedente,
en el que se observó una muerte rápida al proporcionar 3B en la zona
del esternón ventral en lugar de en el abdomen. El hecho de que los
tóxicos podrían penetrar más rápido por las patas (sin capa de
quitina como en el cuerpo) apoya la noción de que la
permeabilidad/penetración del 3B juega un 5 papel clave en su
toxicidad (tabla 3).
Efecto según el tiempo transcurrido de 3B (1 mg/bote) en cucarachas americanas expuestas a una | |
superficie pretral:ada después una hora tras la aplicación de 3B.* | |
Tiempo (min.) | Mortalidad |
10 | 3/5 |
15 | 3/5 |
20 | 4/5 |
30 | 5/5 |
*Ninguna muerte en insectos expuestos a la superficie tratada sólo con acetona. |
Basándonos en estos datos, los mismos botes
tratados fueron usados para un estudio residual. En este
experimento, las cucarachas americanas fueron transferidas a los
bote tratados y de control en espacios temporales diferentes desde
el momento en que la acetona se evaporó, es decir, 24, 48, 96, 72
horas y 7 días. Curiosamente, todos los insectos murieron después
de ser expuestos a los recipientes tratados, incluso 7 días después
de la aplicación de 3B. No obstante, fue necesario más tiempo para
que las cucarachas murieran en proporción a la duración de tiempo
desde la aplicación inicial de 3B en el recipiente. Algunas señales
tóxicas se observaron en todos los casos tras la exposición.
Además, al repetir el mismo experimento con cucarachas alemanas, se
observaron efectos tóxicos mayores y efectos más rápidos. Parece que
se produce alguna degradación en los efectos tóxicos con el tiempo
(tabla 4).
Efecto del 3B (1 mg/bote) aplicado en superficies en cucarachas americanas expuestas a dichas superficies | |
en momentos diferentes después del tratamiento de la superficie. | |
Tiempo transcurrido tras la aplicación de 3B (días) | Tiempo requerido para matar el 100% de insectos (días) |
1 | 1 |
2 | 3 |
3 | 6 |
5 | 8 |
7* | 10(6/10 murieron) |
*Sólo murieron 6 insectos al exponer 10 cucarachas en unos recipientes pretratados 7 días después de la aplicación | |
de 3-B. |
El cordón nervioso abdominal de la cucaracha
mostró la segunda mayor absorción de octopamina de todos los
tejidos estudiados [J. Neurochem 54 479-489
(1990)]. La eficacia elevada de los productos químicos de la
presente invención en el estudio "paralelo" se atribuye a la
elevada concentración de receptores de octopamina en el cordón
nervioso ventral muy próximo a las patas posteriores.
Puesto que las señales tóxicas producidas por el
3B no indicaron modelos de acción colinérgica, se consideraron
otras posibilidades de mayor importancia como el receptor GABA,
receptor de octopamina/enlace de amina biogénica, [Ca^{2+}], o
veneno por respiración mitocondrial:
1. Estudio del receptor
GABA-canal de cloruro: este sitio de acción es
conocido por ser uno de los sitios de acción más importantes en
varios insecticidas. Al evaluar la acción de 3B, se usó
3H-EBOB ([^{3}H]n- propil biciclo orto
benzoato) y 35S-TBPS (ésteres biciclo fosforosos).
El primer ligando fue usado basándose en las conclusiones de que el
EBOB ha demostrado tener un radioligando altamente tóxico a la vez
que de gran afinidad con el sitio de enlace convulsionante del
receptor GABA en insectos. También muestra sitios de enlace
idénticos o superpuestos a siete clases de insecticidas:
trioxabiciclooctanos, ditianos, silatranos, lindano, toxafeno,
ciclodienos y picrotoxinina. El TBPS ha sido rechazado por tener
una pobre relevancia toxicológica y afinidad de enlace en los
insectos. Ambos radioligandos fueron usados en este estudio con
fines comparativos. Según se muestra en la tabla 6, el 3B no
provocó ninguna acción antagónica en la afinidad de enlace del
3H-EBOB o del 35S-TBPS con unas
concentraciones de 3B oscilando entre
10 \muM y 10 NM. Sólo se observó un efecto significativo con 100 BM. No obstante, con una concentración tan alta
(100 \muM), la especificidad para el sitio de acción es improbable. Por el contrario, el heptaclorepóxido sólo y una mezcla de Endosulfano 1 (60%) y Endosulfano II (40%) como estándar positivo fueron altamente activos incluso con 10 Nm. Estos datos indican que este sistema de ensayo no funciona bien para el 3B, y que el defecto de su acción se debe a su inaccesibilidad al sitio del receptor GABA. El hecho de que la cepa London resistente al ciclodieno mostrara resistencia cruzada al 3B apoya los datos anteriores y descarta el receptor GABA como el objetivo o el sitio de acción del 3B.
10 \muM y 10 NM. Sólo se observó un efecto significativo con 100 BM. No obstante, con una concentración tan alta
(100 \muM), la especificidad para el sitio de acción es improbable. Por el contrario, el heptaclorepóxido sólo y una mezcla de Endosulfano 1 (60%) y Endosulfano II (40%) como estándar positivo fueron altamente activos incluso con 10 Nm. Estos datos indican que este sistema de ensayo no funciona bien para el 3B, y que el defecto de su acción se debe a su inaccesibilidad al sitio del receptor GABA. El hecho de que la cepa London resistente al ciclodieno mostrara resistencia cruzada al 3B apoya los datos anteriores y descarta el receptor GABA como el objetivo o el sitio de acción del 3B.
\newpage
2. Receptor de octopamina/sitio de enlace de
amina biogénica: se sabe que las aminas biogénicas desempeñan
diversas funciones fisiológicas a través de sus receptores
específicos en los insectos. El receptor de octopamina es el
receptor más dominante de la amina biogénica en insectos. Se sabe
que algunos acaricidas, como el clordimeform, actúan en los
receptores de octopamina provocando una variedad de síntomas,
incluyendo cambios en el comportamiento. Cuando se incubó 3B
directamente con un tejido homogeneizado del cordón nervioso de
cucarachas americanas, se halló un aumento significativo en la
AIVMP cíclica (AMPc) con una dosis de 1 \muM. La octopamina
química fue usada como control positivo y provocó un aumento
significativo en la camp con 1 \muM. Otra prueba de que la
octopamina es el sitio de acción principal de 3B es que en el
co-tratamiento de 3B y octopamina, 3B anuló el
aumento de octopamina inducida en la AMPc.
Para confirmar que el 3B es una materia tóxica
para el receptor de octopamina, se determinaron dos importantes
marcadores biológicos: los latidos del corazón/30 segundos y la
actividad proteína quinasa (PKA) dependiente de la AMPc. Ambos
están considerados como particularmente importantes en la
identificación de la actividad del receptor de octopamina debido a
que se ha demostrado que el corazón de la cucaracha posee una
elevada concentración de receptores de octopamina. Cuando se aplicó
una concentración de 3B de 200 \mug/insecto a la región del
esternón de la cucaracha americana viva e intacta, se observó un
aumento significativo en los latidos del corazón/30 segundos, lo
que estuvo acompañado por un aumento en AMPc. Como sucedió
anteriormente, las concentraciones más elevadas de 3B ocasionaron
una reducción de los latidos del corazón (Tabla 7).
Efecto in vivo del 3-B (200 \mug/cucaracha) sobre la actividad PKA en la membrana sinaptosomal de las | |
cucarachas americanas. | |
dpm/1 nmol de Kemptide/5 min. X \pm SD | |
Control | 1753+57 |
3-B | 4008+201 |
3. Posible función del [Ca^{2+}]: debido a las
dificultades locomotrices observadas en las cucarachas tratadas con
3B en la región del esternón ventral, se postuló que los aumentos
en los niveles intramusculares de Ca^{2+} podrían estar
implicados en las contracciones de las patas posteriores. Por esta
razón, se utilizaron células adrenales de cromafina de rata de la
línea celular mamífera PC12. Esta línea celular es conocida porque
imita las células neuronales, particularmente las neuronas
catecolaminérgicas, y se ha usado como modelo para los fenómenos de
liberación de transmisores presinápticos inducidos por Ca^{2+}.
Tal y como se muestra en la Fig. 1, al añadir 3B con 100 \muM a
estas células (en A), no se produjo ningún cambio en el Ca^{2+}
libre intracelular. La concentración de [Ca^{2+}] en el interior
de las células PC12 se determinó usando medidas
espectrofluorométricas con Fura 2/AM (una sonda de fluorescencia
que penetra en la célula para el Ca^{2+} libre). Un control
positivo estándar, la tapsigargina aumentó claramente el
[Ca^{2+}]\pm (en B) incluso a 500 Nm. También, 10 \muM
de ionomicina, un ionoforo de Ca^{2+} (en C) produjo el aumento
esperado de entrada de Ca^{2+}. Estos resultados mostraron que el
3B no muestra la capacidad para regular ningún tipo de homeóstasis
de calcio en células mamíferas.
El efecto de los productos químicos de la
presente invención en las células del tejido cerebral de la rata
fue el siguiente, donde la generación de AMP cíclica se mide como
dpm/mg de proteína.
control | 5395+43 |
3-B | 5411 \pm 391 |
terpineol | 5399 \pm 219 |
eugenol | 5461 \pm 488 |
alcohol fenil etílico | 5499 \pm 415 |
Por lo tanto, no se produjo ningún cambio en el
sistema de neurotransmisión del mamífero. Estos datos confirman la
falta de neurotoxicidad de estos aceites esenciales en los
mamíferos.
4. Veneno mitocondrial/respiratorio: otro modo
posible de acción es el del envenenamiento mitocondrial o
respiratorio. Se ha observado que todos los venenos mitocondriales
provocan hiperactividad en cierto momento durante su acción. No
obstante, cuando las cucarachas americanas fueron tratadas con una
aplicación tópica de 3B, no se observó hiperactividad o
hiperexcitación en ninguna fase del envenenamiento con ninguna
concentración utilizada. Por otra parte, cuando las cucarachas
americanas fueron expuestas a recipientes revestidos previamente
con 1 mg de una solución de 3B al 60%, los insectos mostraron
hiperexcitación. Estos datos sugieren que el modo de introducción es
un factor determinante en el modo de acción de estos aceites
esenciales. Estas observaciones confirman la idea de que el 3B no
es un tipo de veneno que ataque al canal de Na^{+} corno objetivo
principal. El hecho de que la cepa resistente al Kdr (con un canal
de Na^{+} mutado que la vuelve insensible al DDT y a los
piretroides) no mostró resistencia cruzada al 3B también apoya esta
diagnosis.
En las circunstancias anteriores, según las
cuales todos los sitios de acción conocidos para los insecticidas
más importantes resultaron ser insensibles al 3B, excepto el efecto
antagónico en el receptor de octopamina, se consideró la
posibilidad die que el modo de acción de este grupo de productos
químicos fuera totalmente novedoso.
Se observó que la toxicidad de 3B varía según el
lugar de aplicación, al menos en el caso de la cucaracha americana.
Una observación de este tipo indica que el 3B puede no ser tan
sistémico en acción, y si un sitio produce una toxicidad elevada,
su objetivo puede estar muy cerca del sitio de aplicación. En vista
de la dificultad locomotriz observada en las cucarachas americanas
tratadas en el esternón central, se razonó que los ganglios
torácicos podrían estar afectados. Al inyectar 3B (250 mg en 0.4
\mul de acetona) en el tórax de una cucaracha viva y al provocar
contracciones en sus patas posteriores por un estímulo eléctrico
externo aplicado en el exterior del cuerpo, la capacidad de los
músculos de las patas de responder a los estímulos desapareció
totalmente después de un minuto (Fig. 2). Al aplicar
3-B a la pata aislada, y roporcionando directamente
estímulos eléctricos, no se halló ningún efecto del 3B (Fig. 3).
Estos datos sugieren que el efecto del 3B se produce sobre el
sistema nervioso y no en los músculos. Las pruebas de control que
utilizan acetona (0.4 \mul) sin 3-B no mostraron
efecto alguno (Figs. 4 y 5). Esta posibilidad fue probada de nuevo
usando el 6° ganglio abdominal y estudiando la transmisión de
señales desde los mecanorreceptores de los cerci generados por
soplido de aire. Con esle objetivo, se abrió la cavidad abdominal,
exponiendo todo el cordón nervioso abdominal. Una solución de
suspensión de 3B en 200 \mul de suero de insecto fue aplicada
directamente en todo el cordón nervioso abdominal. Los resultados
fueron drásticos, produciendo un bloqueo completo de la transmisión
con 250-500 PPM durante 5 minutos desde el momento
de la aplicación (Fig. 6). Incluso con 10 PPM, el efecto de bloqueo
del 3B fue evidente, produciendo efectos visibles en 15 minutos.
Estos resultados indican claramente que el 3B es un bloqueante
nervioso no sistémico.
Se prepararon formulaciones en polvo seco usando
los productos químicos de la presente invención. Los ejemplos
enumerados más abajo son para la mezcla 3B según se ha descrito
anteriormente (alcohol cinámico, eugenol y alfa terpineol).
El procedimiento consistió en colocar los
componentes en polvo en una placa de 500 ml y añadir el producto
químico (normalmente líquido) sobre el polvo. El polvo y el
producto químico mezclados en el recipiente se colocaron en un
tambor eléctrico para su secado durante aproximadamente 30 minutos.
Aproximadamente 1 mg del polvo seco resultante fue aplicado a un
filtro de papel Whatman N° 1 en una placa de Petri de 9 cm. El
polvo fue extendido uniformemente con un cepillo de pelo de
camello. Se utilizó un control que constaba únicamente de los
componentes en polvo, sin el producto químico de la presente
invención.
Se prepararon las composiciones
siguientes:(Tablas 12a-12c)
% en peso | Cantidad | Componentes |
40 | 20 g | tierra diatomácea |
20 | 10 g | carbonato cálcico |
20 | 10 g | bicarbonato sódico |
10 | 5 g | Hi-Sil 233 |
10 | 5 g | ingrediente activo* |
*el ingrediente activo es una mezcla de los productos químicos de la presente invención. |
% en peso | Cantidad | Componentes |
40 | 20 g | tierra diatomácea |
23 | 11.5 g | carbonato cálcico |
20 | 10 g | bicarbonato sódico |
10 | 5 g | Hi-Sil 233 |
7 | 3.5 g | ingrediente activo* |
*el ingrediente activo es una mezcla de los productos químicos de la presente invención. |
% en peso | Cantidad | Componentes |
40 | 20 g | tierra diatomácea |
25 | 12.5 g | carbonato cálcico |
20 | 10 g | bicarbonato sódico |
10 | 5 g | Hi-Sil 233 |
5 | 2.5 g | ingrediente activo* |
*el ingrediente activo es una mezcla de los productos químicos de la presente invención. |
Las mezclas fueron evaluadas colocando diez (10)
hormigas bravas comunes en placas de Pe.tri, respectivamente, que
fueron tapadas a continuación. El tiempo para que se produjera (KT)
una caída irreversible (KD) fue determinado a partir de
observaciones periódicas irregulares. Los insectos fueron
considerados KD cuando estaban hacia arriba, o cuando se les podía
poner hacia arriba y no podían ponerse derechos por sí mismos
durante al menos dos (2) minutos. KT-50 y
KT-90 (tiempo para el 50% y el 90% de KD
respectivamente) fueron calculados por interpolación del KD entre
los tiempos de recogida de datos. La mezcla al 10% (tabla 12a) tuvo
un KT 50% de 5 min. y 50 seg. y un KT 90% de 6 min. y 40 seg. Para
la mezcla al 7% (Tabla 12b) el KT 50% fue de 3 min. y 40 seg. y el
KT 90% fue de 4 min. y 40 seg. La mezcla al 5% (Tabla 12c) tuvo un
KT 50% de 2 min. y 33 seg. y el KT 90% de 3 min. y 45 seg.
Los datos anteriores son ejemplos que demuestran
claramente la eficacia de la mezcla de productos químicos en unas
concentraciones que varían entre el 5%-10% en peso de los
ingredientes activos. Estos son ejemplos típicos, aunque no son
limitativos. Concentraciones muy bajas, como por ejemplo del 0.1% en
peso, también han demostrado ser eficaces para algunos productos
químicos individuales y para varias mezclas de productos químicos.
También se pueden utilizar concentraciones mucho más elevadas.
Como ejemplo de una concentración elevada, un
concentrado emulsionable tiene la formulación siguiente:
\newpage
Ingrediente | Objetivo | % peso |
3B | ingrediente activo | 90.0 |
Dodecil benceno sulfonato de sodio | emulgente | 6.6 |
C12-15 Pareth-3 sulfonato de sodio | emulgente | 2.0 |
Monooleato de sorbitán POE 20 | emulgente | 1.4 |
Otro concentrado emulsionable es:
Ingrediente | Objetivo | % peso |
3B | ingrediente activo | 90.0 |
Aceite de ricino (40 mol de EO) | emulgente | 10.0 |
El concentrado se diluye con hasta 50 a 70 partes
de agua por 1 parte de concentrado para proporcionar un medio
acuoso eficaz.
La mezcla de 3B y concentrado emulsionable fue
diluida en agua corriente y pulverizada sobre plantas de repollos y
judías para evaluar su eficacia contra el gusano gris asiático y
las arañuelas rojas (Tetranychus urticae) respectivamente.
Todos los valores están basados en un mínimo de cuatro dosis con
cinco réplicas y diez gusanos grises o treinta arañuelas deutoninfas
y/o adultas por réplica. Los valores registrados representan las
proporciones de agua y formulación (es decir, grado de dilución)
(p. ej., LD50 de 46.8 significa una proporción de agua y
concentrado emulsionable de 46.8:1). Se evaluó la mortalidad tras
24 horas (Tabla 13).
Mortalidad de la mezcla emulsionable de la mezcla 3-B | |
Gusano gris asiático de 3 días de edad | LD5O(95% I.C.) = 46.8 (44.0-49.8) |
LD9O(95% I.C.) = 30.6 (27.2-40.7) | |
Gusano gris asiático de 5 días de edad | LD5O(95% I.C.) = 53.0 (49.6-56.7) |
LD9O(95% I.C.) = 33.7 (29.7-45.6) | |
arañuela roja | LD5O(95% I.C.) = 82.3 (76.5-88.5) |
LD9O(95% I.C.) = 55.9 (49.3-75.5) |
La formulación de 3B concentrado emulsionable
diluido muestra una buena eficacia contra ambas edades de gusanos
grises, e incluso una mejor eficacia contra las arañuelas rojas.
Los gusanos grises de cinco días de edad tienen aproximadamente el
mismo tamaño que las larvas de la polilla del repollo maduras
(última fase), una especie objetivo en potencia. También es
relevante el hecho de que se observó que las concentraciones
subletales impidieron claramente la alimentación y, en
consecuencia, el deterioro de la planta. Con una disolución de 50:1,
60:1 y 70:1, la mortalidad larvaria representa sólo el 64%, 42% y
12%, respectivamente. No obstante, se produce un deterioro
alimenticio mínimo con las larvas supervivientes. Tal y como se
muestra en la Fig. 7, los discos, de hojas de plantas de repollo
con concentrado emulsionable de 3-B diluido 50:1,
60:1 y 70:1 presentaban áreas consumidas (ac) después de 24 horas
inferiores al 5%-30% en comparación con un control (sin
3-B) donde el área consumida fue superior al 80%.
Otro ejemplo de una concentración elevada es un polvo humectante que
tiene la formulación siguiente:
Ingrediente | Objetivo | % peso |
3B | ingrediente activo | 50.0 |
Sílice, hidratada, amorfa | absorbente | 41.5 |
Alquil naftaleno sulfonato de sodio | agente de dispersión | 3.0 |
Dioctil sulfosuccinato de sodio | agente humectante | 0.5 |
Dodecil benceno sulfonato de sodio | emulgente | 5.0 |
\newpage
Se mezcla una parte de este polvo con hasta
30-50 partes de agua para proporcionar un pesticida
eficaz. Este ejemplo es para la mezcla de 3B, aunque no es
limitativo y puede ser preparado con cualquiera de los productos
químicos individuales de la presente invención o cualquier
combinación de mezcla de los productos químicos individuales.
Se puede preparar un polvo impermeable usando
cualquiera de los productos químicos individuales o una mezcla de
cualquiera de los productos químicos de la presente invención. La
formulación siguiente es representativa, la mezcla de 3C presenta
partes iguales en peso de alcohol bencílico, alcohol fenil etílico y
terpineol:
Ingrediente | Objetivo | % peso |
3C | ingrediente activo | 5.0 |
Tierra diatomácea | agente de carga | 75.0 |
Sílice hidrofóbico | absorbente | 20.0 |
Las formulaciones siguientes representan dos
aerosoles representativos preparados con las mezclas 3B y 3C,
aunque pueden ser usados para otras mezclas y para productos
químicos individuales de la presente invención:
Ingrediente | Objetivo | % peso |
3B | ingrediente activo | 5.0 |
Aceite de ricino (40 mol de EO) | emulgente | 2.7 |
Monooleato de sorbitán POE 20 | emulgente | 0.6 |
Alquil benceno sulfonato de isopropilamina | emulgente | 1.7 |
Agua | diluyente | 90.0 |
Un champú pesticida tiene la composición
siguiente, en la que el ingrediente activo es un producto químico
individual de la presente invención o una mezcla de productos
químicos:
Ingrediente | % peso |
Ingrediente activo | 0.5- 10.0 |
Secuestrante para agua dura | 0.5 -3.0 |
Emulgente(s) | 1.0-5.0 |
Espesante(s) | 0.5-5.0 |
Estabilizador de espuma | 0.5-2.0 |
Detergente | 5.0-20.0 |
Tampón | 0.1-2.0 (al pH requerido) |
Tinte/colorante | 0.01 |
Conservante | 0.01 -1.0 |
Agua desionizada | Hasta el 100% |
Se han preparado formulaciones en gel de la
manera siguiente:
Color azul | |
3.00% | Ingrediente activo |
15.00% | Etanol |
0.42% | Carbopol 934 |
0-.42%-10% | Hidróxido sódico en agua |
81.16% | Agua |
Color amarillo | |
3.00% | Ingrediente activo |
30.00% | Etanol |
0.42% | Carbopol 934 |
0.42%-10% | Hidróxido sódico en agua |
66.16% | Agua |
El ingrediente activo es la mezcla de la presente
invención.
Una formulación de polvo seco consiste en mezclar
un carbonato de metal alcalinotérreo, como carbonato cálcico, un
bicarbonato de metal alcalino, como el bicarbonato sódico, el
ingrediente activo, un material absorbente, como tierra diatomácea
y un agente de carga como HiSil 233.
Las concentraciones relativas de la mezcla son
preferiblemente de aproximadamente el 20%-30% de carbonato de metal
alcalinotérreo, 15%-25% de bicarbonato de metal alcalino, 0.1%-5%
de ingrediente activo, 30%-50% de material absorbente y 5%-15% de
agente de carga (todos en peso). Los gránulos del polvo son
preferiblemente triturados hasta un tamaño inferior a 100
micras.
Los ingredientes activos pueden ser productos
químicos individuales de la presente invención o mezclas
derivadas.
En todos los ejemplos mencionados anteriormente,
puede ser deseable añadir una cantidad de traza (menos del 2%) de
un material para proporcionar un olor agradable, no sólo por
razones estéticas sino también para identificar las áreas tratadas
de un edificio. El olor agradable puede ser vainilla, canela, floral
u otros olores aceptables para los consumidores. Los olores
agradables no están limitados a los ejemplos proporcionados
aquí.
Claims (11)
1. Método para matar y/o controlar insectos,
arácnidos y/o las larvas de los mismos, dicho método
comprendiendo:
la preparación de una mezcla que comprende un
soporte y un agente efector, que es una mezcla seleccionada a
partir del grupo compuesto por alcohol cinámico, eugenol y alfa
terpineol, y
la aplicación de la mezcla a insectos, arácnidos,
sus larvas y/o su hábitat.
2. Método según la reivindicación 1, dicho método
comprendiendo:
la preparación de una mezcla de alcohol cinámico,
eugenol y alfa terpineol;
adición de la mezcla a un soporte para producir
una mezcla sustancialmente uniforme.
3. Método según la reivindicación 2, donde la
gama de porcentaje en peso de la mezcla es alcohol cinámico
20%-35%, eugenol 10%-50% y alfa terpineol 10%-50%.
4. Método según la reivindicación 2, donde la
mezcla tiene partes iguales en peso de cada uno de los
componentes.
5. Método según cualquiera de las
reivindicaciones 1 a 3, que comprende además la adición a la mezcla
de un material con un olor agradable.
6. Método según cualquiera de las
reivindicaciones 1 a 5, donde el soporte es agua conteniendo al
menos un emulgente.
7. Método según cualquiera de las
reivindicaciones 1 a 4, donde el soporte es un polvo
humectante.
8. Método según cualquiera de las
reivindicaciones 1 a 4, donde el soporte es un polvo
impermeable.
9. Método según cualquiera de las
reivindicaciones 1 a 4, donde el soporte es un aerosol.
10. Método según cualquiera de las
reivindicaciones 1 a 4, donde el soporte es un polvo seco.
11. Método según las reivindicaciones 1 a 4,
donde la mezcla es en forma de emulsión.
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