ES2206760T3

ES2206760T3 - Forma profarmacos y analogos de la campotecina, su aplicacion como medicamentos.

Info

Publication number: ES2206760T3
Application number: ES97950235T
Authority: ES
Inventors: Dennis Bigg; Olivier Lavergne; Jerry Harnett; Alain Rolland; Anne-Marie Liberatore; Christophe Lanco
Original assignee: Societe de Conseils de Recherches et dApplications Scientifiques SCRAS SAS
Current assignee: Ipsen Pharma SAS
Priority date: 1996-12-20
Filing date: 1997-12-05
Publication date: 2004-05-16
Anticipated expiration: 2017-12-05
Also published as: IL129892A; UA57757C2; ATE253582T1; CA2275345C; HK1024694A1; IL129892A0; EP0946566B1; NO992997D0; CZ299794B6; AU734512B2; NO992997L; DE69726007D1; NO324973B1; HUP0001385A2; HUP0001385A3; KR100516873B1; PT946566E; AR005849A1; BR9713977A; WO1998028304A1

Abstract

LA INVENCION SE REFIERE A NUEVOS ANALOGOS DE LA CAMPTOTECINA Y EN CONCRETO A LOS PRODUCTOS QUE RESPONDEN A LAS SIGUIENTES FORMULAS: 8 - ETIL - 8,9 - DIHIDRO - 8 - HIDROXI - 1 - BENCIL 2H, 10H, 12H - [1,3] OXACINO [5,6 - F] OXEPIONO [3'',4'':6,7] INDOLICINO [1,2 - B] QUINOLEINA - 10,13 (15H) - DIONA; 5 - ETIL - 9,10 - DIFLUORO - 4,5 - DIHIDRO - 5 - (2 - AMINO - 1 - OXOPROPOXI) - 1H - OXEPINO [3'',4'':6,7] INDOLICINO [1,,2 - B] QUINOLEINA - 3, 15 (4H, 13H) - DIONA; SU PROCEDIMIENTO DE PREPARACION, SU APLICACION COMO MEDICAMENTOS, LAS COMPOSICIONES FARMACEUTICAS QUE LOS CONTIENENS Y SU UTILIZACION PARA LA REALIZACION DE MEDICAMENTOS ANTITUMORALES, ANTIVIRALES O ANTIPARASITARIOS.

Description

Formas profármacos y análogos de la camptotecina, su aplicación como medicamentos.

La camptotecina es un compuesto natural que se aisló por primera vez de las hojas y de la corteza de la planta china denominada camptothecia acuminata (véase Wall y sus colaboradores, J. Amer. Chem. Soc. 88:3888 (1966)). La camptotecina es un compuesto pentacíclico constituido de un fragmento de indolizina-[1,2-b]-quinolina (ciclos A, B, C y D) fusionado con una \alpha-hidroxilactona de seis eslabones (ciclo E). El carbono en posición 20, que lleva al grupo \alpha-hidroxi, es asimétrico y confiere a la molécula un poder rotativo. La forma natural de la camptotecina posee la configuración absoluta "S" en el carbono 20 y responde a la fórmula siguiente:

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La camptotecina y sus análogos presentan una actividad antiproliferativa en varias razas celulares cancerosas, que comprenden las razas celulares de tumores humanos del colón, del pulmón y de mama (Suffness, M. y colaboradores: The Alkaloids Chemistry and Pharmacology, Bross, A., ed., Vol. 25, pág. 73 (Academic Press, 1985)). Se sugiere que la actividad antiproliferativa de la camptotecina esté en relación con su actividad inhibidora del topoisomerasa I del ADN.

Por otra parte, la camptotecina y algunos de sus análogos no son hidrosolubles, lo que hace difícil su administración por vía parenteral. Se prepararon derivados hidrosolubles de la camptotecina donde los ciclos A y B llevan sustituyentes salificables (véase, por ejemplo, las patentes de EE.UU. 4.981.968, y 5.049.668 y la patente europea 0540099). Pero estos productos revelaron una actividad antitumoral reducida con respecto a la de los derivados no hidrosolubles. Igualmente, se prepararon otros derivados hidrosolubles de la camptotecina donde el grupo hidroxilo de la posición 20 es esterificado por un ácido que lleva un radical salificable, tal como, por ejemplo, la glicina (véase la patente de EE.UU. 4.943.579 y la solicitud de patente internacional vía PCT nº WO96/02546). Estos derivados fueron designados por el experto en la técnica por la denominación "formas de fármacos" ya que no son biológicamente activos como tal, sino solo después de una primera etapa de metabolización una vez administrados al paciente. Las formas de fármacos de los análogos \alpha-hidroxilactónicas de la camptotecina mostraron una buena eficacia antitumoral en el animal y en clínica, pero acompañada de efectos secundarios nefastos como la aparición de graves diarreas que pueden poner en peligro la vida del paciente. Por lo tanto, es necesario desarrollar compuestos análogos hidrosolubles de la camptotecina que sean más eficaces y mejor tolerados.

Por otra parte, se indicó que la \alpha-hidroxilactona era una exigencia absoluta a la vez para la actividad in vivo e in vitro de los camptotecinas (Camptothecins: New Anticancer Agents, Putmesil, M., y sus colaboradores, ed., pág. 27 (CRC Press, 1995); Wall, M. y sus colaboradores, Cancer Res. 55:753 (1995); Hertzberg y sus colaboradores, J. Med. Chem. 32:715 (1982) y Crow y sus colaboradores; J. Med. Chem. 35:4160 (1992)). Sin embargo, la firma solicitante descubrió que las \beta-hidroxilactonas con 7 eslabones tienen una actividad biológica comparable o superior a la de las \alpha -hidroxilactonas (solicitud de patente internacional vía PCT no publicada nº FR-96/00980). La presente invención se refiere a nuevos derivados de esta clase de análogos de la camptotecina, en los cuales una \beta-hidroxilactona con siete eslabones sustituye a la \alpha -hidroxilactona natural de la camptotecina. Se entiende por \beta-hidroxilactona una lactona que incluye un átomo de carbono suplementario entre el carbono del carboxilo y el carbono-\alpha que lleva el hidroxilo en \alpha-hidroxilactona.

Se eligieron dos soluciones con el fin de aumentar la hidrosolubilidad de los análogos de la camptotecina: la primera consiste en injertar conjuntamente una oxazina en el ciclo A de la molécula, y la segunda consiste en concebir formas de fármacos acetilando la función hidroxi de la \beta-hidroxilactona.

Más concretamente, entre esta nueva clase de análogos de la camptotecina, los compuestos según la presente invención son bien sea análogos modificados por fijación de un ciclo de oxazina sobre los carbonos 10 y 11, o bien formas de fármacos en los cuales una \beta-hidroxilactona sustituye a la \alpha-hidroxilactona natural de la camptotecina. Por lo tanto, los compuestos de la presente invención son \beta-hidroxilactonas análogos de la camptotecina en los cuales se injertó un ciclo de oxazina o de fármacos hidrosolubles y presentan una actividad biológica potente que es un hecho inesperado con respecto al estado de la técnica anterior.

La invención tiene más particularmente como objeto los compuestos de fórmula (I):

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bajo forma racémica, de enantiómero o cualquiera de las combinaciones de estas formas, en la cual:

R_{1}: representa el grupo etilo;

R_{2}: representa H o un halo;

R_{3}: representa H, un alquilo inferior, halo u OR_{6} en el cual R_{6} representa H, un alquilo inferior o un arilo alquilo inferior;

R_{4}: representa H o -(CH_{2})_{m}NR_{6}R_{7} en el cual R_{6} y R_{7} representan, independientemente, H o un alquilo inferior;

R_{5}: representa H, un alquilo inferior o -(CH_{2})_{n}[N=X] sustituido o no sustituido y [N=X] representa el grupo piperidilo, morfolinilo, piperazinilo o indolilo y dicho sustituyente es un alquilo inferior;

: o R_{3} y R_{4} forman un ciclo de oxazina eventualmente sustituido sobre el átomo de nitrógeno por un radical R_{9} que representa un alquilo inferior;

R_{P}: representa H o un grupo fácilmente escindible de fórmula -C(O)-(A_{1})-NH_{2} en el cual A_{1} representan (CH_{2})_{m} o un radical alquileno inferior ramificado;

M: es un número entero comprendido entre 0 y 6;

N: es 1 ó 2; y

estando entendido que cuando R_{P} es un átomo de hidrógeno, R_{3} y R_{4} forman juntos un ciclo de oxazina eventualmente sustituido,

y cuando el término inferior se asocia a alquilo o alquileno, significa como máximo 6 átomos de carbono;

o una sal farmacéuticamente aceptable de este último.

Tal como se utiliza aquí, el término inferior en referencia a los grupos alquilo, o alquileno designa grupos hidrocarbonados alifáticos saturados, lineales o ramificados, que incluyen de 1 a 6 carbonos, como por ejemplo metilo, etilo, propilo, isopropilo, butilo, t-butilo, vinilo, alilo, isopropenilo, pentenilo, hexanilo y propenilo etinilo.

Los compuestos según la presente invención tienen dos formas enantiómeros posibles, es decir, bajo las configuraciones "R" y "S". La presente invención incluye las dos formas enantiómeros y todas las combinaciones de estas formas, y comprenden las mezclas racémicas "RS". Con un deseo de simplicidad, cuando ninguna configuración específica se indica en las fórmulas de estructura, se debe comprender que las dos formas enantiómeros y sus mezclas están representadas.

Algunos ejemplos de camptotecinas sustituidas, utilizadas como productos de partida, se pueden encontrar en las patentes americanas nº 4.473.692, 4.604.463, 4.894.956, 5.162.532, 5.395.939, 5.315.007, 5.264.579, 5.258.516, 5.254.690, 5.212.317 y 5.341.745, en las solicitudes de patentes internacionales vía PCT nº US91/08028, US94/06451, US90/05172, US92/04611, US93/10987, US91/09598, EP94/03058 y EP95/00393 y en las solicitudes de patentes europeas nº 0325247, 0495432, 0321122 y 0540099.

Para los compuestos que incluyen un ciclo de oxazina:

- se trata con una amina primaria, en las condiciones de Mannich, un compuesto \beta-hidroxilactónico de fórmula general D:

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en la cual R_{3} es un radical hidroxilo, R_{4} es H, y R_{1} y R_{2} tienen el significado anteriormente indicado para obtener un compuesto \beta-hidroxilactónico de fórmula general Ia

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en la cual R_{1}, R_{2}, R_{5} y R_{9} tienen el significado anteriormente indicado.

Este procedimiento consiste en calentar a una temperatura de 30ºC a 80ºC durante un tiempo que va de 0,5 a 5 horas el producto de partida en presencia de una amina primaria tal como la bencilamina, de formaldehído en un disolvente ácido tal como el ácido acético o el ácido propiónico. Alternativamente, se puede calentar a una temperatura de 30ºC a 80ºC durante un tiempo que va de 0,5 a 5 horas una suspensión del producto de partida en el ácido acético en una hexahidrotriazina tri-N-sustituida tal como la hexahidro-1,3,5-trimetil-triazina, la 1,3,5-trietilhexahidro-triazina o la 1,3,5-tribencil-hexahidrotriazina.

- se acila eventualmente dicho compuesto de fórmula general D o Ia, preferentemente con un derivado del radical C (O)-A_{1}-N-H_{2} tal como se define anteriormente, para dar el compuesto \beta-hidroxilactónico de la fórmula general I con R_{P} diferente de H (forma de fármaco de la invención).

En el procedimiento anterior, los grupos R_{2}, R_{3}, R_{4} y R_{5} se pueden proteger si es necesario según los métodos clásicos de protección (Greene, T.; Protective Groups in Organic Synthesis 10-86 (John Wiley & Sons 1981)). Si al menos uno de los grupos R_{22} o R_{23} es H, o contiene al menos una función químicamente incompatible con el procedimiento de acilación tal como, por ejemplo, una amina primaria o secundario, es entonces necesario recurrir a un grupo protector resistente a las condiciones de acilación. Un grupo protector comúnmente empleado para las aminas es el terc-butiloxicarbonil (BOC). Por lo tanto, la reacción de acilación se efectúa tal como se describe anteriormente, luego el grupo protector se escinde, por ejemplo por un tratamiento con el ácido trifluoroacético en el caso del BOC, para dar el compuesto de fórmula general (I) o (II). El uso de los grupos protectores se conoce por el experto en la técnica (para otros ejemplos, se puede referir a Greene, T., Protectives Groups in Organic Synthesis, John Wiley & Sons, 1981).

Los compuestos de fórmula D se preparan como sigue:

- se acopla un compuesto de fórmula general M

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en la cual R_{1}, tiene el significado anteriormente indicado y R_{20} representa el hidrógeno o un átomo de halógeno, con un 2-halo-3-quinolina-metanol de fórmula general N

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en la cual R_{2}, R_{3}, R_{4} y R_{5} tienen el significado anteriormente indicado y X representa un átomo de halógeno, para dar el compuesto de fórmula O, y

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- luego se cicliza el compuesto de fórmula general O para obtener el compuesto de fórmula general D tal como se define anteriormente.

En el procedimiento anteriormente descrito, los grupos R_{1}, R_{2}, R_{3} y R_{4} se pueden proteger en caso necesario según los métodos clásicos de protección (Greene, T., Protective Groups in Organic Synthesis 10-86 (John Wiley & Sons 1981)). La formación del compuesto O a partir de los compuestos de fórmula general M y N se efectúa por un tratamiento conocido por el experto en la técnica bajo el nombre de reacción de Mitsunobu (se refiere a Mitsunobu, O. y coll. Synthesis, pág. 1 (1981)). Se trata de desplazar la función hidroxilo del compuesto N por un nucleófilo tal como el compuesto M, o un derivado desprotonado de este último, por un tratamiento con una fosfina, por ejemplo trifenilfosfina, y un derivado azodicarboxilato, por ejemplo el azodicarboxilato de dietilo, en un disolvente aprótico tal como, por ejemplo, el tetrahidrofurano o el N,N-dimetilformamida. La ciclización del compuesto O se efectúa preferentemente en presencia de un catalizador paladiado (por ejemplo el diacetato de paladio) en condiciones básicas (proporcionadas por ejemplo por un acetato alcalino eventualmente combinado con un agente de transferencia de fase como, por ejemplo, el bromuro de tetrabutilamonio), en un disolvente aprótico tal como el acetonitrilo o el N,N-dimetilformamida, a una temperatura comprendida entre 50ºC y 120ºC (R. Grigg y coll., Tetrahedron 46, página 4003 (1990)).

Los compuestos de fórmula general M se pueden preparar según un procedimiento caracterizado porque

- se protege el carbonilo de una piridina de fórmula general

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en la cual R_{1} tiene el significado anteriormente indicado y R_{24} representa un átomo de halógeno o un alcoxi inferior, por una función acetal, para dar el compuesto de fórmula general F

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en la cual los grupos Z y Z' representan, independientemente, un alquil inferior o forman juntos una cadena hidrocarbonada saturada de 2 a 4 carbonos;

- se introduce en el compuesto de fórmula general F una función hidroximetilo para obtener un compuesto de fórmula general G

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- luego se protege la función alcohólica del compuesto de fórmula general G para dar un compuesto de fórmula general H

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en la cual R_{1} y Z y Z' tienen el significado anteriormente indicado y R_{25} representa un grupo protector de la función alcohol,

- se desprotege el acetal del compuesto de fórmula general H para dar el compuesto de fórmula general I'

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- se trata con un agente alquilante funcionalizado el compuesto de fórmula I' para dar un \beta-hidroxiester de fórmula general J

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en la cual R_{1}, R_{24} y R_{25} tienen el significado anteriormente indicado y R_{17} representa OR_{6} o NHR_{6} y R_{6} representa H, un alquilo inferior, cicloalquilo, cicloalquilo alquilo inferior, alquenilo inferior, alcoxi inferior alquilo inferior, o aril o arilo alquilo inferior,

- se escinde el grupo protector R_{25} del compuesto de fórmula general J, para dar un compuesto de fórmula general K,

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en la cual R_{1}, R_{18}, R_{19}, R_{20} y R_{24} tienen el significado anteriormente indicado y R_{17}

- se cicliza el compuesto de fórmula general K en compuesto de fórmula general L

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y finalmente

- se transforma el radical R_{24} del compuesto L en carbonilo, para obtener el compuesto de fórmula general M

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La función carbonilo de un 4-acil-2-halopiridina (obtenida por ejemplo según Lamattina, J. L. J. Heterocyclic Chem. 20, pág. 553 (1983)) se protege preferentemente por una función acetal, preferentemente por una función acetal cíclica, según las condiciones clásicas conocidas por el experto en la técnica (Greene, T., Protective Groups in Organic Synthesis 10-86 (John Wiley & Sons 1981)). El producto intermedio así obtenido se trata con un alcoholato de sodio o de potasio en un disolvente aprótico (por ejemplo acetonitrilo), o en el alcohol del que se deriva el alcoholato, a una temperatura comprendida entre 0ºC y 100ºC para dar el compuesto de fórmula general F. Este último se puede litiar en posición 3 por tratamiento con un aril- o alquil-litio (por ejemplo mesitil-litio) en un disolvente etéreo tal como el tetrahidrofurano a una temperatura comprendida entre -100ºC y 0ºC. Al producto intermedio litiado así obtenido, se añade un electrófilo formilante tal como el N,N-dimetilformamida, y el aldehído así obtenido, después de la hidrólisis, se trata con un agente reductor tal como el borohidruro de sodio para dar el compuesto de fórmula general G. La protección de la función alcohol del compuesto G se efectúa según las condiciones clásicas conocidas por el experto en la técnica, para obtener un compuesto de fórmula general H. Los ejemplos de grupos protectores de la función alcohol comprenden los que forman los éteres [es decir, metilo, metoximetilo, tetrahidropiranil, 2-metoxietoxi-metilo, benciloximetilo, t-butil y bencil (sustituido o no sustituido)], y los ésteres (es decir, formato, acetato e isobutirato). Para otros ejemplos de grupos protectores de hidroxil primarios, se puede referir a Greene, T., Protectives Groups in Organic Synthesis, 10-86 (John Wiley & Sons, 1981). La desprotección del compuesto de fórmula general H para dar el compuesto de fórmula general I' se efectúa en condiciones selectivas que mantienen la integridad del radical R_{25}, por ejemplo, por tratamiento en condiciones ácidas (por ejemplo con el ácido trifluoroacético). Las condiciones selectivas de protección y de desprotección de los grupos funcionales se conocen por el experto en la técnica (Greene, T., Protective Groups in Organic Synthesis 10-86 (John Wiley & Sons 1981)). El tratamiento del compuesto I' por un agente alquilante funcionalizado para dar un \beta-hidroxiéster de fórmula general J, se puede realizar con la ayuda de un enolato de litio o de un derivado zíncico de un éster carboxílico en un disolvente aprótico anhidro, por ejemplo el tetrahidrofurano. Se escinde el grupo protector R_{25} del compuesto de fórmula general J, para dar un compuesto de fórmula general K, en condiciones de desprotección conocidas por el experto en la técnica. Por ejemplo, cuando R_{25} es un grupo bencilo, se puede someter una solución alcohólica del compuesto de fórmula general J añadida de un catalizador paladiado en una atmósfera de hidrógeno bajo una presión de 0,5 a 10 Bar. La ciclización del compuesto de fórmula general K así obtenido se puede efectuar en condiciones ácidas (por ejemplo por tratamiento con el ácido trifluoracético, o el gas clorhídrico disuelto en un disolvente anhidro tal como el diclorometano o el dioxano) para dar un ciclo \beta-hidroxilactónico con siete eslabones tal como en el compuesto de fórmula general L. Los compuestos de fórmula general L se pueden transformar en piridonas de fórmula general M, por ejemplo, por un tratamiento con el ácido clorhídrico en caliente, o por un tratamiento con el yoduro de trimetilsililo.

Los 2-halo-3-quinolina-metanol de fórmula general N se pueden obtener a partir de acetanilidas de fórmula general P

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en la cual R_{2}, R_{3} y R_{4} tienen el significado indicado en las fórmulas generales de los compuestos I y II. En los procedimientos siguientes, los grupos R_{2}, R_{3} y R_{4} se puede proteger en caso necesario según los procedimientos clásicos de protección (Greene, T., Protective Groups in Organic Synthesis 10-86 (John Wiley & Sons 1981)).

Por lo tanto, los compuestos de fórmula N se pueden obtener según el siguiente procedimiento: dichas anilinas de fórmula P son N-acetiladas por tratamiento con un agente acetilante tal como por ejemplo el anhídrido acético. Las acetanilidas así obtenidas se tratan a una temperatura comprendida entre 50ºC y 100ºC, de preferencia a 75ºC, con un reactivo conocido por el experto en la técnica bajo el nombre de reactivo de Vilsmeyer (obtenido por la acción del oxicloruro de fosforilo sobre el N,N-dimetilformamida a una temperatura comprendida entre 0ºC y 10ºC) para dar el 2-cloro -3-quinolinacarbaldehído correspondiente (se refiere, por ejemplo a Meth-Cohn, y coll. J. Chem. Soc., Perkin Trans. I. pág. 1520 (1981); Meth-Cohn, y Coll. J. Chem. Soc., Perkin Trans. I. pág. 2509 (1981); y Nakasimhan y Coll. J. Am. Chem. Soc., 112, pág. 4431 (1990)). El cloro en posición 2 de los 2-cloro-3-quinolinacarbaldehídos se puede sustituir por yodo o por bromo calentando el producto en un disolvente inerte tal como el acetonitrilo en presencia de una sal de yodo o de bromo (por ejemplo el yoduro de sodio o el bromuro de tetrabutilamonio). Una traza de ácido como el ácido clorhídrico concentrado puede ser necesaria para catalizar esta transformación. Los 2-halo-3-quinolinacarbaldehídos se reducen fácilmente en 2-halo-3-quinolinametanol correspondientes de fórmula general N, en las condiciones clásicas conocidas por el experto en la técnica tal como el tratamiento en un disolvente alcohólico (por ejemplo el metanol) con borohidruro de sodio a una temperatura comprendida entre 0ºC y 40ºC.

Igualmente, los compuestos de fórmula N se pueden obtener según el siguiente procedimiento: las anilinas de fórmula general P tal como se definen anteriormente se acilan por reacción con un nitrilo (tal como el cloroacetonitrilo o el propionitrilo) en presencia de tricloruro de boro y de otro ácido de Lewis tal como el tricloruro de aluminio, el tetracloruro de titanio o el cloruro de dietilaluminio en un disolvente aprótico o una mezcla de disolvente aprótico, seguida de una hidrólisis (véase Sugasawa, T., y Coll. J. Am. Chem. Soc. 100, pág. 4842 (1978)). El producto intermedio así obtenido se trata a continuación con el cloruro de etilmalonilo en un disolvente aprótico tal como el acetonitrilo en presencia de una base tal como la trietilamina, luego se trata con un alcoholato alcalino, por ejemplo con metilato de sodio en metanol, para dar un 2-hidroxi-3-quinolinacarboxilato de etilo sustituido en posición 4. Este último se transforma en 2-cloro-3-quinolinacarboxilato de etilo por un tratamiento con oxicloruro de fosforilo. Cuando la posición 4 de la quinolina lleva un grupo clorometilo, se puede efectuar una sustitución nucleófila por tratamiento con una amina secundaria tal como por ejemplo la dimetilamina, la N-metilpiperazina, la morfolina o la piperidina. El 2-cloro-3-quinolinacarboxilato de etilo se reduce a continuación con el hidruro de diisobutilaluminio en un disolvente aprótico tal como el diclorometano para dar el 2-cloro-3-quinolinametanol de fórmula general N. En la literatura, se describieron compuestos análogos a los compuestos intermedios (N) y en particular en la solicitud de patente internacional vía PCT nº 95/05427.

Algunos compuestos de la invención se pueden preparar en forma de sales farmacéuticamente aceptables según los métodos usuales. Las sales aceptables comprenden, a título de ejemplo y de manera no limitativa, sales de adición de ácidos inorgánicos tales como clorhidrato, sulfato, fosfato, difosfato, bromohidrato y nitrato o ácidos orgánicos como acetato, maleato, fumarato, tartarato, succinato, citrato, lactato, metano sulfonato, p-toluensulfonato, pamoato, salicilato, oxalato y estearato. Igualmente, forman parte del ámbito de aplicación de la presente invención, cuando son utilizables; las sales formadas a partir de bases tales como el hidróxido de sodio o de potasio. Como otros ejemplos de sales farmacéuticamente aceptables, se puede referir a "Pharmaceutical Salts", J. Pharm. Sci. 66:1 (1977).

Los compuestos de la presente invención poseen interesantes propiedades farmacológicas. Tanto así que los compuestos de la presente invención tienen una actividad inhibidora de la topoisomerasa I y una actividad antitumoral. El estado de la técnica sugiere que los compuestos de la invención presenten una actividad antiparasítica y/o antiviral. Los compuestos de la presente invención se pueden así utilizar en distintas aplicaciones terapéuticas.

Se encontrará a continuación, en la parte experimental, una ilustración de las propiedades farmacológicas de los compuestos de la invención.

Los compuestos pueden inhibir la topoisomerasa, por ejemplo de tipo I, en un paciente, por ejemplo en un mamífero tal como el hombre, por administración a este paciente de una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de fórmula (I).

Los compuestos de la invención poseen igualmente una actividad antitumoral. Se pueden utilizar para el tratamiento de los tumores, por ejemplo de los tumores que expresan una topoisomerasa, en un paciente por administración a este último una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de fórmula (I). Los ejemplos de tumores o de cánceres comprenden los cánceres de esófago, de estómago, de intestinos, de recto, de cavidad oral, de faringe, de laringe, de pulmón, de colón, de mama, de cérvix uteri, de corpus endometrio, de ovarios, de próstata, de testículos, de vejiga, de riñones, de hígado, de páncreas, de huesos, de tejidos conjuntivos, de piel, de ojos, de cerebro y de sistema nervioso central, así como el cáncer de tiroides, la leucemia, la enfermedad de Hodgkin, las linfomas distintas que las de Hodgkin, las mielomas múltiples y otros.

Igualmente, se pueden utilizar para el tratamiento de las infecciones parasíticas por la inhibición de los hemoflagelasos (por ejemplo en la tripanosomia o las infecciones leiskmania) o por inhibición del plasmodio (tal como, por ejemplo, en la malaria), pero también para el tratamiento de las infecciones o enfermedades víricas.

Estas propiedades hacen de los productos de fórmula (I) que sean aptos para una utilización farmacéutica. La presente solicitud tiene igualmente por objeto, como medicamentos, los productos de fórmula (I) tal como se definen anteriormente, así como las sales de adición con los ácidos minerales u orgánicos farmacéuticamente aceptables de dichos productos de fórmula (I), así como las composiciones farmacéuticas que contienen, como principio activo, uno al menos de los medicamentos tal como se definen anteriormente.

Así, la invención se refiere a composiciones farmacéuticas que contienen un compuesto de la invención o una sal aditiva de ácido farmacéuticamente aceptable de ésta, en asociación con un vehículo farmacéuticamente aceptable siguiendo el modo de administración elegido (por ejemplo oral, intravenosa, intraperitoneal, intramuscular, transdérmico o subcutánea). La composición farmacéutica (por ejemplo terapéutica) puede ser en forma de sólido, de líquido, de liposomas o de micelas lipídicas.

La composición farmacéutica puede ser en forma de sólido tal como, por ejemplo, polvos, píldoras, gránulos, comprimidos, liposomas, cápsulas de gelatina o supositorios. La píldora, el comprimido o la cápsula de gelatina se pueden revestir de una sustancia capaz de proteger la composición de la acción del ácido gástrico o de las enzimas en el estómago del sujeto durante un período de tiempo suficiente para permitir a esta composición pasar sin ser digerida en el intestino delgado de este último. También, el compuesto se puede administrar localmente, por ejemplo en el mismo sitio del tumor. También, el compuesto se puede administrar según el proceso de liberación prolongada (por ejemplo una composición de liberación prolongada o una bomba de infusión). Los vehículos sólidos apropiados pueden ser, por ejemplo, el fosfato de calcio, el estearato de magnesio, el carbonato de magnesio, el talco, los azúcares, la lactosa, la dextrina, el almidón, la gelatina, la celulosa, la celulosa de metilo, la celulosa carboximetilo de sodio, la polivinilpirrolidina y la cera. Las composiciones farmacéuticas que contienen un compuesto de la invención pueden, por lo tanto, presentarse igualmente en forma de líquido tal como, por ejemplo, de soluciones, de emulsiones, de suspensiones o de una formulación de liberación prolongada. Los vehículos líquidos convenientes pueden ser, por ejemplo, el agua, los disolventes orgánicos tal como el glicerol o los glicoles tal como el polietilenglicol, asimismo como sus mezclas, en proporciones variadas, en agua.

Igualmente la invención tiene por objeto la utilización de los productos de fórmula (I) tal como se define anteriormente, para la preparación de medicamentos destinados a inhibir la topoisomerasa, de medicamentos destinados a tratar los tumores, de medicamentos destinados a tratar las infecciones parasíticas, así como de medicamentos destinados a tratar infecciones o enfermedades víricas.

La dosis de un compuesto según la presente invención, a prever para el tratamiento de las enfermedades o de los trastornos anteriormente mencionados, varía según el modo de administración, la edad y el peso corporal del sujeto que se debe tratar así como del estado de este último, y se decidirá en definitiva por el médico o el veterinario que le trata. Dicha cantidad determinada por el médico o el veterinario que le trata se denomina aquí "cantidad terapéuticamente eficaz".

A menos que estén definidos otras maneras, todos los términos técnicos y científicos utilizados aquí tienen el mismo significado que el corrientemente comprendido por un especialista ordinario del campo al cual pertenece esta invención. Del mismo modo, todas las publicaciones, solicitudes de patentes, todas las patentes y todas las referencias mencionadas aquí se incorporan como referencia.

Los ejemplos siguientes se presentan para ilustrar los procedimientos anteriormente citados y no deben en ningún caso ser considerados como un límite del alcance de la invención.

Parte experimental Preparación 1 5-etil-4,5-dihidro-5-hidroxi-1H-oxepino-[3',4':6,7]-indolizina-[1,2-b]-quinolina-3,15(4H, 13H)-diona 1.a. 4-etil-3,4-dihidroxi-1H-pirano-[3',4':6,7]-indolizina -[1,2-b]-quinolina-14 (4H, 12H)-ona

Se añade por porciones borohidruro de sodio (14 g, 370 mmol) a una suspensión de (S)-(+)-camptotecina (14 g, 40 mmoles, que se puede obtener de diferentes fuentes comerciales tal como Aldrich Chemical Co. (Milwaukee, WI)), en metanol (750 ml) y se calienta suavemente la mezcla resultante hasta 55ºC con el fin de obtener una solución límpida que se agita a continuación durante 16 horas a temperatura ambiente. A continuación, se evapora el disolvente bajo presión reducida, se recoge el residuo con agua (250 ml), se neutraliza por adición de ácido acético (21 ml) y se deja en reposo durante 2 horas a 4ºC. Se filtra la suspensión resultante y se lava sucesivamente con agua fría, con acetona y con dietil éter, lo que permite obtener, después del secado a presión reducida, el compuesto buscado en forma de un sólido de color blanco, p.f. 280ºC.

1.b. 8-formiloximetil-7-propionilindolizina-[1,2-b]-quinolina-9-(11H)-ona

Se añade, gota a gota, una solución de metaperiodato de sodio (14 g, 65 mmoles) en agua (140 ml) a una suspensión de 4-etil-3,4-dihidroxi-1H-pirano-[3',4':6,7]-indolizina-[1,2-b]-quinolina-14-(4H, 12H)-ona (13,4 g, 38 mmoles) en ácido acético glacial (720 ml) y se agita la solución resultante durante una hora a temperatura ambiente. La mezcla de la reacción se vierte a continuación en una mezcla de hielo/agua (650 ml) y se agita la suspensión resultante durante media hora luego se filtra y se lava sucesivamente con agua, con alcohol isopropílico y con éter-dietílico, lo que permite obtener, después del secado a presión reducida, el compuesto buscado (11,5 g) en forma de un sólido de color amarillo pálido, p.f. > 200ºC (d).

1.c.\beta-etil-\beta-hidroxi-\beta-(8-hidroximetil-9-oxo-(11H)-indolizina-[1,2-b]-quinolina-7-il)-propionato de terc-butilo

Se activa una suspensión de zinc (6,5 g, 100 mmoles) agitada con un agitador magnético en dietiléster anhidro (50 ml) bajo atmósfera de argón, por adición, gota a gota, de clorotrimetilsilano (0,75 ml, 5,7 mmoles). Se agita también durante 15 minutos a temperatura ambiente luego se calienta a reflujo. Se retira a continuación el baño de calentamiento y se añade, gota a gota, bromoacetato de terc-butilo (15 ml, 100 mmol) a una velocidad que garantiza el mantenimiento a reflujo. El calentamiento externo se vuelve a poner y se prosigue durante también una hora. La solución etérea resultante del reactivo de Reformatsky se deja enfriar hasta la temperatura ambiente luego se transfiere mediante una cánula a una suspensión de 8-formiloximetil-7-propionilindolizina-[1,2-b]-quinolina-9-(11H)-ona (1,6 g, 4,7 mmoles) en tetrahidrofurano anhidro (40 ml) bajo atmósfera de argón. La mezcla de la reacción se agita a reflujo durante una hora, luego se deja enfriar hasta la temperatura ambiente, y se detiene la reacción por adición de cloruro de amonio saturado (100 ml) y se extrae con cloroformo (3 x 100 ml). Los extractos clorofórmicos combinados se secan sobre sulfato de sodio, se evaporan, y el residuo se purifica por cromatografía sobre columna de gel de sílice (1-2% MeOH/CH_{2}Cl_{2}), lo que permite obtener 0,64 g del compuesto buscado (31%) en forma de un sólido de color amarillo pálido, p.f. 146-149ºC.

RMN- ^{1}H (CDCl_{3}): 0,93 (t, 3H); 1;37 (s, 9H); 1,99 (m, 2H); 2;97 (dd, 2H); 3,5 (se, 1H); 5,10 (s, 2H); 5,24 (s, 2H); 7,40 (s,1H); 7,59 (t, 1H); 7;83 (t, 1H); 7,90 (d, 1H); 8,20 (d, 1H); 8,34 (s, 1H).

RMN- ^{13}C (CDCl_{3}): 8,18; 27,90; 34,59; 45,34; 49,91; 58,55; 77,39; 82,42; 100,52; 127,67; 127,97; 128,10; 128,64; 129,44; 129,79; 130,42; 130,99; 142,86; 148,69; 152,75; 155,16; 162,38; 172,24.

IR (KBr): 764; 1016; 1157; 1580; 1651; 1726.

1.d. 5-etil-4,5-dihidro-5-hidroxi-1H-oxepino-[3',4':6,7]-indolizina-[1,2-b]-quinolina-3,15-(4H, 13H)-diona

Se disuelven \beta-etil-\beta-hidroxi-\beta-(8-hidroximetil-9-oxo-(11H)-indolizina-[1,2-b]-quinolina-7-il) propionato de terc-butilo (1,45 g, 3,32 mmoles) en diclorometano anhidro (25 ml) y se trata con una solución saturada de cloruro de hidrógeno en diclorometano (100 ml). La mezcla que resulta se mantiene a -20ºC durante 16 horas. Se filtra el precipitado, se lava con metanol y se seca bajo presión reducida, lo que permite obtener 662 mg (55%) del compuesto buscado en forma de un sólido de color amarillo, p.f. > 300ºC.

RMN- ^{1}H (DMSO): 0,90 (t, 3H); 1,20 (q, 2H); 3,27 (dd, 2H); 5,29 (s, 2H); 5,49 (dd, 2H); 7,42 (s, 1H); 7,73 (t, 1H); 7,90 (t, 1H); 8,16 (t, 2H); 8,71 (s, 1H).

RMN- ^{13}C (DMSO): 8,45; 36,48; 42,54; 50,68; 61,44; 73,34; 99,78; 122,71; 127,83; 128,15; 128,75; 129,08; 130,07; 130,61; 131,81; 144,66; 148,04; 152,80; 155,91; 159,26; 172,08.

IR (KBr): 761; 1127; 1204; 1285; 1580; 1653; 1757.

Preparación 2 Resolución de la 5-etil-4,5-dihidro-5-hidroxi-1H-oxepino-[3',4':6,7]-indolizina-[1,2-b]-quinolina-3,15-(4H, 13H)-diona

Se lleva a ebullición una mezcla de ácido \beta-etil-\beta-hidroxi-(8-hidroximetilindolizina-[1,2-b]-quinolina-9-(11H)-ona-7-il)-propiónico (19,5 g, 51 mmoles) y de L-(-)-\alpha-metilbencilamina (12,12 g, 100 mmoles) en etanol absoluto (1 l), se filtra en caliente y se deja reposar durante 68 h. Se filtra el precipitado y se lava con etanol y con éter para dar 9,8 g de un sólido blanco. Un análisis por cromatografía líquida de alta presión en fase estacionaria quiral ("HPLC quiral" sobre columna Chiral-AGP (Chromtech, Estocolmo, Suecia) 100 x 4 mm, empleando como eluyente acetonitrilo a 2% en tampón fosfata 10 mM a pH 6,9, picos de eluyente a 4,5 y 7,5 min) revela dos picos de integración respectivamente para 24% y 76% de la superficie total de los dos picos. Se recoge el sólido en etanol a 93% (350 ml) a reflujo, luego se deja reposar durante 48 h. Se filtra el precipitado luego se lava con etanol y con éter para obtener 4,8 g de un sólido de color blanco que da dos picos de integración respectivamente para 9% y 91% de la superficie total de los dos picos por HPLC quiral. Se recoge el sólido en etanol a 50% (48 ml) a reflujo luego se deja reposar durante 48 h. Se filtra el precipitado luego se lava con etanol y con éter para dar 2,7 g de un sólido de color blanco que da dos picos de integración respectivamente para 3 y 97% de la superficie total de los dos picos por HPLC quiral. Se recoge el sólido en etanol a 50% (22 ml) a reflujo luego se deja reposar durante 48 h. Se filtra el precipitado luego se lava con etanol y con éter para obtener 1,6 g de un sólido de color blanco que da dos picos de integración respectivamente para 1% y 99% de la superficie total de los dos picos por HPLC quiral. Se trata la sal resultante, diastereoisoméricamente enriquecida, se recoge con agua destilada (20 ml), por el ácido acético (0,35 ml; 6,4 mmoles) durante 15 min. Se filtra el precipitado obtenido, se lava con agua, con acetona y con éter luego se seca a vacío a 80ºC para obtener 1,1 g de un sólido de color blanco. Se recoge este último en etanol absoluto (55 ml) añadido a ácido clorhídrico concentrado (11,5N,
11 ml) para obtener una solución de color amarillo que se mantiene bajo agitación a temperatura ambiente durante 68 h. Se filtra el precipitado así obtenido y se lava con agua con etanol y con éter, luego se seca a vacío a 80ºC para obtener 770 mg de 5-etil-4,5-dihidro-5-hidroxi-1H-oxepino-[3',4':6,7]-indolizina-[1,2-b]-quinolina-3,15 (4H, 13H)-diona enantiomericamente enriquecida. Un análisis por HPLC quiral (columna Chiral-AGP, eluida con un gradiente de 2 a 5% de acetonitrilo en tampón fosfata 10 mM a pH 6,9, picos de eluyente a 15 y 20 min) revela un exceso enantiómerico de 98%. Se recoge el procedimiento anteriormente descrito sustituyendo la L-(-)-\alpha-metilbencilamina por la D-(+)-\alpha-metilbencilamina. Se obtiene así el otro enantiómero del 5-etil-4,5-dihidro-5-hidroxi-1H-oxepino-[3',4':6,7]-indolizina-[1,2-b]-quinolina-3,15-(4H, 13H)-diona.

Preparación 3 5,12-dietil-4,5-dihidro-5-hidroxi-1H-oxepino-[3',4':6,7]-indolizina-[1,2-b]-quinolina-3,15-(4H, 13H)-diona

Se prepara este compuesto de una manera análoga la preparación 1; excepto que en la etapa 1.a., la 7-etil-camptotecina (Sawada y sus colaboradores, Chem. Pharm. Bull. 39:2574 (1991)) se utiliza en lugar de la camptotecina. Se obtiene el compuesto buscado en forma de un sólido de color amarillo vivo, p.f. > 270ºC.

RMN- ^{1}H (DMSO): 0,92 (t, 3H); 1,39 (t, 3H); 1,93 (q, 2H); 3,08 (d, 2H); 3,25 (q, 2H); 3,51 (d, 2H); 5,32 (s, 2H); 5,52 (dd, 2H); 7,42 (s, 1H); 7,76 (t, 1H); 7,89 (t, 1H); 8,18 (d, 1H); 8,32 (d, 1H).

RMN- ^{13}C (DMSO): 8,46; 14,15; 22,42; 36,50; 42,54; 49, 95; 61,45; 73,35; 99,68; 122,61; 124,27; 126,76; 127,70; 128,27; 129,92; 130,18; 145,17; 145,82; 148,57; 152,15; 155,89; 159,26; 172,08.

Preparación 4 5-etil-9,10-difluoro-4,5-dihidro-5-hidroxi-1H-oxepino-[3',4':6,7]-indolizina-[1,2-b]-quinolina-3,15-(4H, 13H)-diona 4.a. 2-etil-2-(2-metoxi-4-piridil)-1,3-dioxolano

Se destila agua de manera azeotrópica (una noche entera) con un aparato tipo Dean Stark a partir de una mezcla de 2-cloro-4-propionilpiridina (10 g, 59 mmoles) obtenida como en Lamattina, J. L. J. Heterocyclic Chem. 20, pág. 553 (1983), de etilenglicol (20 ml) y de ácido p-toluensulfónico (250 mg) en tolueno (150 ml). El disolvente se elimina a continuación bajo presión reducida, el ácido se neutraliza con bicarbonato de sodio acuoso saturado (100 ml) y se extrae el producto con éter. Los extractos etéreos combinados se lavan con salmuera, se secan sobre sulfato de sodio y se evaporan, lo que da 13,3 g (96%) de producto bruto protegido por el grupo carbonilo que se lleva a reflujo con 3 equivalentes de metóxido de sodio en acetonitrilo hasta el final de la reacción (control por cromatografía sobre capa fina: SiO_{2}, óxido de terc-butilo metilo/hexano (TBMO/HX) 50/50). La solución nitrilo acetonitrilo se filtra a continuación y se evapora. El residuo se recoge con éter, se lava con agua y con salmuera; se seca sobre sulfato de sodio y se evapora, lo que da un aceite de color marrón que se destila (a 70-75ºC y 0,04 mbar); se recuperan 10,7 g (rendimiento global 81%) de producto (F) en forma de un aceite límpido.

4.b. 2-etil-2-(3-hidroximetil-2-metoxi-4-piridil)-1,3-di-oxolano

Se añade, gota a gota, mediante una cánula terc-butil-litio (1,7 M en pentano, 100 ml, 170 mmoles) a una solución de bromomesitileno (13 ml, 85 mmoles) en tetrahidrofurano anhidro (300 ml) a -78ºC y bajo atmósfera de argón. Se agita el precipitado de color blanco resultante a -78ºC durante una hora luego se añade 2-etil-2-(2-metoxi-4-piridil)-1,3-dioxolano (10 g, 44,8 mmol) y se agita la mezcla de la reacción durante 15 minutos a -78ºC, una hora a 0ºC y una hora a temperatura ambiente. Después de un nuevo enfriamiento a -78ºC, se añade N,N-dimetilformamida anhidro (100 mmoles) y se deja calentándose la mezcla de la reacción hasta la temperatura ambiente luego se agita durante 16 horas, después de que un análisis por cromatografía sobre capa fina (SiO_{2}, TBMO/HX: 50/50) pone de manifiesto el consumo completo del producto de partida. Se detiene la reacción con cloruro de amonio saturado y la mezcla de la reacción se extrae con dietil éter (200 ml, 50 ml, 50 ml). Se secan los extractos combinados sobre sulfato de sodio y se evaporan, lo que da un aceite de color amarillo que se purifica por cromatografía sobre columna (SiO_{2}, TBMO/HX: 0/100 a 5/95 para eluir los derivados de mesitileno luego 20/80 a 50/50 para eluir el producto) para obtener el aldehído intermedio (7 g). El aldehído se disuelve en metanol (100 ml) y se trata con borohidruro de sodio (5 g, 132 mmoles) y la mezcla resultante se agita hasta el consumo completo del aldehído intermedio (en aproximadamente 1 hora) con control analítico por cromatografía sobre capa fina. A continuación, se evapora el disolvente, se recoge el residuo con éter, se lava con agua y con salmuera, se seca, y el disolvente se evapora. La cromatografía sobre columna (SiO_{2}, TBMO/HX: 10/90 a 50/50) del residuo da 7 g (rendimiento global 62%) de producto (G) en forma de un aceite de color amarillo.

4.c. 2-(3-benciloximetil-2-metoxi-4-piridil)-2-etil-1,3-dioxolano

Se añade, gota a gota, una solución de 2-etil-2-(3-hidroximetil-2-metoxi-4-piridil)-1,3-dioxolano (7 g, 30 mmoles) y de cloruro de bencilo (5 ml, 45 mmoles) en tetrahidrofurano anhidro (50 ml) a una suspensión de hidruro de sodio (80% en aceite mineral, 1,85 g, 61 mmoles) en tetrahidrofurano anhidro (100 ml) y se mantiene a reflujo la mezcla de la reacción durante 16 horas. La mezcla de la reacción se deja a continuación enfriarse hasta la temperatura ambiente, se detiene la reacción con agua (50 ml) y la mezcla de la reacción se concentra bajo presión reducida. Se disuelve el residuo en dietil éter (150 ml) y se lava con agua y con salmuera, se seca y se evapora. Una purificación por cromatografía sobre columna (SiO_{2}, TBMO/HX: 5/95 a 20/80) da el producto protegido por el bencilo (H), 9 g, (87%) en forma de un aceite límpido.

4.d. 1-(3-benciloximetil-2-metoxi-4-piridil)-propano-1-ona

Se trata 2-(3-benciloximetil-2-metoxi-4-piridil)-2-etil-1,3-dioxolano (9 g, 27 mmoles) con ácido trifluoracético (10 ml) y con agua (5 ml) a una temperatura de baño de 120ºC durante 3 horas. La mezcla de la reacción se concentra bajo presión reducida y las trazas residuales de ácidos se neutralizan por la adición de bicarbonato de sodio acuoso saturado. La extracción con éter seguida de una cromatografía sobre columna (SiO_{2}, TBMO/HX: 10/90) da 5,5 g (70%) de producto (I).

4.e.\beta-etil-\beta-hidroxi-\beta-(3-benciloximetil-2-metoxi-4-piridil) propionato de terc-butilo

Se añade, gota a gota, bromoacetato de terc-butilo (13 ml, 80 mmoles) a una suspensión de zinc (5,3 g, 80 mmoles activada por tratamiento con HCl 6N en 10 segundos, luego se lava sucesivamente con agua hasta pH neutro, con acetona y con dietil éter) en tetrahidrofurano anhidro (60 ml) a reflujo. El medio de la reacción se mantiene a reflujo también durante 10 minutos después de que la adición haya terminado. A continuación, se añade una solución de 1-(3-benciloximetil-2-metoxi-4-piridil)-propano-1-ona (5,8 g, 20 mmoles) en el tetrahidrofurano anhidro (20 ml) y se agita la mezcla de la reacción bajo reflujo durante una hora suplementaria. Se detiene la reacción a 0ºC con cloruro de amonio acuoso saturado (100 ml) y se extrae la mezcla de la reacción con dietil éter. Se secan los extractos combinados sobre sulfato de sodio y se evaporan, lo que da un aceite de color amarillo que se purifica por cromatografía sobre columna (SiO_{2}, TBMO/HX: 5/95 a 10/90) para obtener el éster de terc-butilo (J) (7 g, 95%) en forma de un aceite límpido.

4.f.\beta-etil-\beta-hidroxi-\beta-(3-hidroximetil-2-metoxi-4-piridil)-propionato de terc-butilo

Se somete a hidrogenólisis \beta-etil-\beta-hidroxi-\beta-(3-(3-benciloximetil-2-metoxi-4-piridil)-propionato de terc-butilo (1 g, 2,5 mmol) a presión atmosférica y a temperatura ambiente utilizando un 5% de paladio sobre carbón como catalizador (50 mg) y etanol absoluto como disolvente (10 ml). Una vez terminada la reacción (6 horas), el catalizador se separa por filtración y el disolvente se evapora, lo que deja 0,7 g (90%) de producto (K) de una pureza suficiente para una utilización sintética posterior.

4.g. 5-etil-1,5-dihidro-5-hidroxi-9-metoxi-oxepino-[3,4-c]-piridina-3(4H)-ona

Se trata \beta-etil-\beta-hidroxi-\beta-(3-hidroximetil-2-metoxi-4-piridil)-propionato de terc-butilo (8,8 g, 28 mmoles) con ácido trifluoroacético (30 ml) durante 3 horas a temperatura ambiente. Los componentes volátiles se evaporan y el residuo se purifica por cromatografía sobre columna (SiO_{2}, CH_{2}Cl_{2}/MeOH: 100/0 a 98/2), lo que da un aceite límpido que, después del tratamiento con tolueno, da 5,9 g de producto (L) (89%) en forma de cristales de color blanco, p.f. 97-98ºC.

4.h. 5-etil-1,5-dihidro-5-hidroxi-oxepino-[3,4-c]piridina 3,9(4H, 8H)-diona

Se calienta a reflujo durante 9 horas en ácido clorhídrico 1N (20 ml) 5-etil-1,5-dihidro-5-hidroxi-9-metoxi-oxepino-[3,4-c]-piridina-3-(4H)-ona (0,5 g, 2,1 mmoles). La mezcla de la reacción se concentra bajo presión reducida y el residuo se seca también por adición y evaporación del tolueno, por dos veces, luego se deja una noche entera bajo presión reducida en presencia de pentóxido de fósforo. Se disuelve el aceite resultante en acetonitrilo anhidro (5 ml) y se agita bajo atmósfera de argón durante 24 horas. Se filtra el precipitado y se seca, lo que da 0,23 g (49%) de un sólido de color blanco (M), p.f. 118-119ºC.

4.i. 2-cloro-6,7-difluoro-3-quinolina-metanol

Se emplea el procedimiento descrito por Meth-Cohn y sus colaboradores, J. Chem. Soc. Perkin Trans. I, pág. 1520 (1981); Meth-Cohn, J. Chem. Soc. Perkin Trans I, pág. 2509 (1981). Se añade 3,4-difluoroacetanilida (38 g, 22 mmoles) al reactivo de Vilsmeyer obtenido por adición, gota a gota, de oxicloruro de fosforilo (103 ml, 1,1 moles) a dimetilformamida anhidro (34 ml, 44 mmoles), enfriado con un baño de agua/hielo y se agita durante 0,5 horas bajo atmósfera de argón. La mezcla resultante se calienta a 70ºC durante 16 horas. Después del enfriamiento a temperatura ambiente, la mezcla de la reacción se añade a una mezcla de hielo y agua (400 ml) que se mantiene bajo agitación durante 2 horas, luego se filtra y se lava sucesivamente con agua, con etanol y con éter para dar 9 g de 2-cloro-6,7-difluoroquinolina-3-carbaldehído en forma de un sólido de color amarillo, p.f. 222-224º C. se trata este producto intermedio con borohidruro de sodio (2 g, 52 mmoles) en metanol (400 ml) a temperatura ambiente durante 0,5 horas luego se destruye el exceso de reactivo por adición de ácido acética (2 ml). El disolvente se elimina bajo presión reducida, se pone en solución el residuo en acetato de etilo y se lava sucesivamente con bicarbonato de sodio diluido, con agua y con una solución acuosa saturada en cloruro de sodio. Se seca la fase orgánica sobre sulfato de sodio, se filtra y se concentra. El sólido resultante se recristaliza en 1,2-dicloroetano para dar 8 g de 2-cloro-6,7-difluoro-3-quinolina-metanol en forma de un sólido de color beige.

4.j. 5-etil-8-(2-cloro-6,7-difluoro-3-quinolinametil)-1,5-dihidro-5-hidroxi-oxepino-[3,4-c]-piridina-3,9-(4H, 8H)-diona

Se añade, gota a gota, durante 5 minutos azodicarboxilato de dietilo (570 \mul, 3,6 mmoles) a una solución de 5-etil-1,5-dihidro-5-hidroxi-oxepino-[3,4-c]-piridina-3,9-(4H, 8H)-diona (400 mg, 1,79 mmoles), del compuesto obtenido en la etapa anterior 4.i. (770 mg, 2,23 mmoles) y de trifenilfosfina (934 mg, 3,58 mmoles) en N,N-dimetilformamida anhidro (45 ml) y se agita la mezcla resultante bajo atmósfera de argón a temperatura ambiente durante 16 horas. La mezcla de la reacción se concentra a continuación bajo presión reducida y se disuelve el residuo en éter (100 ml). Se lava la solución resultante con salmuera (4 x 50 ml), se seca sobre sulfato de sodio y se evapora. Se purifica el residuo por cromatografía sobre columna (SiO_{2}, CH_{2}Cl_{2}/MeOH: 99/1 a 98/2), lo que da 650 mg (66%) del producto en forma de un sólido de color blanco, p.f. 165-167ºC.

4.k. 5-etil-9,10-difluoro-4,5-dihidro-5-hidroxi-1H-oxepino -[3',4':6,7] -indolizina-[1,2-b]-quinolina-3,15-(4H, 13H)-diona

Se disuelven 5-etil-8-(2-cloro-6,7-difluoro-3-quinolinametil)-1,5-dihidro-5-hidroxi-oxepino-[3,4-c]-piridina-3,9-(4H, 8H)-diona (600 mg, 1,1 mmoles), bromuro de tetrabutil-amonio (352 mg, 1,1 mmoles), acetato de sodio (359 mg, 4,4 mmoles) y acetato de paladio II (98 mg, 0,43 mmoles) en acetonitrilo anhidro (40 ml) y se calientan a 90ºC bajo atmósfera de argón durante 16 horas. Después del enfriamiento a la temperatura ambiente, se separa un precipitado de color blanco de la solución rojiza. Se filtra este precipitado y se seca bajo presión reducida. El producto bruto se pone en suspensión en agua, se filtra y se seca bajo presión reducida sobre pentóxido de fósforo, lo que da 250 mg del compuesto buscado en forma de un sólido de color beige, p.f. > 250ºC.

RMN- ^{1}H (DMSO): 0,91 (t, 3H); 1,87 (m, 2H); 3,08 (d, 1H);3,51 (d, 1H); 4,45 (s, 4H); 5,19 (s, 2H); 5,47 (dd, 2H); 6,02 (se, 1H); 7,33 (s, 1H); 7,54 (s, 1H); 7,55 (s, 1H); 8,43 (s, 1H).

RMN- ^{13}C (DMSO): 8,43; 36,47; 42,54; 50,52; 61,43; 64,43 (2C); 73,31; 99,07; 112,27; 113,14; 122,00; 124,24; 128,18; 129,74; 144,59; 145,01; 145,33; 147,63; 150,88; 155,88; 159,23; 172,07.

Preparación 5 5-etil-4,5-dihidro-5,10-dihidroxi-1H-oxepino-[3',4':6,7]-indolizina-[1,2-b]-quinolina-3,15-(4H, 13H)-diona

Se trata 10-benciloxi-5-etil-4,5-dihidro-5-hidroxi-1H-oxepino-[3',4':6,7]-indolizina-[1,2-b]-quinolina-3,15-(4H, 13H)-diona (370 mg, 0,79 mmoles) con hidrógeno a presión atmosférica y a temperatura ambiente utilizando paladio a 10% sobre carbón como catalizador (60 mg) y el ácido trifluoroacético como disolvente (15 ml). Una vez terminada la reacción (16 horas), se añaden diclorometano (50 ml) y metanol (50 ml) a la mezcla de la reacción, el catalizador se filtra y los componentes volátiles se evaporan bajo presión reducida, lo que permite obtener el compuesto buscado bruto que contiene trazas de ácido trifluoroacético. Estas trazas se eliminan por co-destilación con 1,4-dioxano. Se obtiene el producto en forma de un sólido de color naranja, p.f. 150ºC (d), de una pureza suficiente para una utilización sintética posterior.

RMN- ^{1}H (DMSO): 0,89 (t, 3H); 1,85 (q, 2H); 3,02 (d, 1H); 3,45 (d, 1H); 5,19 (s, 2H); 5,37 (d, 1H); 5,50 (d, 1H); 5,98 (se, 1H); 7,26 (s 1H); 7,31 (s, 1H); 7,40 (d, 1H); 8,00 (d, 1H); 8,42 (s, 1H); 10,32 (s, 1H).

RMN- ^{13}C (DMSO): 8,47; 36,50; 42,61; 50,57; 61,46; 73,35; 98,84; 109,02; 121,83; 123,18; 129,50; 129,85; 130,12; 130,80; 143,39; 145,10; 149,69; 155,97; 156,82; 159,30; 172,11.

Preparación 6 5-etil-9-fluoro-4,5-dihidro-5-hidroxi-10-metoxi-lH-oxepino-[3',4':6,7]-indolizina-[1,2-b]-quinolina -3,15-(4H, 13H)-diona

Se obtiene este compuesto a partir de la 3-fluoro-4-metoxianilina según el método ilustrado en las etapas 4i, 4j y 4k de la preparación 4. Sólido de color amarillo, p.f. > 250ºC.

RMN- ^{1}H (DMSO): 0,89 (t, 3H); 1,85 (q, 2H); 3,08 (d, 1H); 3,49 (d, 1H); 4,00 (s, 3H); 5,25 (s, 2H); 5,39 (d, 1H); 5,51 (d, 1H); 6,00 (s, 1H); 7,32 (s, 1H); 7,72 (d, 1H); 7,91 (d, 1H); 8,58 (s, 1H).

RMN- ^{13}C (DMSO): 8,43; 36,48; 42,51; 50,68; 56,60; 61,42; 73,29; 99,25; 108,68; 113,52; 122,23; 126,33; 129,99; 130,30; 143,79; 144,70; 148,42; 151,18; 153,19; 155,81; 159,20; 172,06.

IR (KBr): 1259; 1503; 1602; 1737.

Preparación 7 9-cloro-5-etil-4,5-dihidro-5-hidroxi-10-metil-1H-oxepino-[3',4':6,7]-indolizina-[1,2-b]-quinolina-3,15-(4H, 13H)- diona

Se obtiene este compuesto a partir de la 3-cloro-4-metoxianilina según el método ilustrado en las etapas 4i, 4j y 4k de la preparación 4. Sólido de color amarillo; p.f. > 250ºC.

RMN- ^{1}H (DMSO): 0,85 (t, 3H); 1,85 (q, 2H); 2,55 (s, 3H); 3,07 (d, 1H); 3,45 (d, 1H); 5,25 (s, 2H); 5,39 (d, 1H); 5,51 (d, 1H); 6,05 (s, 1H); 7,39 (s, 1H); 8,10 (s, 1H); 8,20 (s, 1H); 8,60 (s, 1H).

RMN- ^{13}C (DMSO): 8,43; 20,20; 36,47; 42,49; 50,67; 61,41; 73,28; 99,87; 122,82; 126,98; 127,99; 129,60; 130,53; 131,08; 135,64; 136,56; 144,39; 147,11; 153,10; 155,85; 159,18; 172,03.

IR (KBr): 1208; 1479; 1606; 1656; 1724.

Preparación 8 8-etil-2,3,8,9-tetrahidro-8-hidroxi-10H, 12H-[1,4]-dioxino-[2,3-g]-oxepino-[3',4':6,7]-indolizina-[1,2-b]-quinolina-10,13-(15H)-diona

Se obtiene este compuesto a partir de la 3,4-etilenodioxianilina según el método ilustrado por las etapas 4i, 4j y 4k de la preparación 4. Sólido de color amarillo; p.f. > 250ºC.

RMN- ^{1}H (DMSO): 0,85 (t, 3H); 1,85 (q, 2H); 3,07 (d, 1H); 3,47 (d, 1H); 5,25 (s, 2H); 5,39 (d, 1H); 5,51 (d, 1H); 6,05 (s, 1H); 7,39 (s, 1H); 8,15 (q, 1H); 8,25 (q, 1H); 8,68 (s, 1H).

RMN- ^{13}C (DMSO): 8,41; 36,45; 42,48; 50,68; 61,40; 73,25; 99,92; 114,44; 115,42; 115,58; 122,96; 125,52; 130,56; 131,46; 144,21; 145,25; 142,36; 153,41; 155,85; 159,15; 172,00.

IR (KBr): 1266; 1512; 1581; 1618; 1751.

Preparación 9 7-etil-7,8-dihidro-7-hidroxi-9H, 11H-[1,3]-dioxolo-[4,5-g]-oxepino-[3',4':6,7]-indolizina-[1,2-b]-quinolina-9,12- [14H]-diona

Se obtiene este compuesto a partir de la 3,4-metilenodioxianilina según el método ilustrado en las etapas 4i, 4j y 4k de la preparación 4. Sólido de color crema; p.f. > 250ºC.

RMN- ^{1}H (DMSO): 0,85 (t, 3H); 1,85 (q, 2H); 3,07 (d, 1H); 3,45 (d, 1H); 5,20 (s, 2H); 5,39 (d, 1H); 5,51 (d, 1H); 6,00 (s, 1H); 6,30 (s, 2H); 7,30 (s, 1H); 7,49 (d, 2H); 8,45 (s, 1H).

RMN- ^{13}C (DMSO): 8,43; 36,49; 42,56; 50,58; 61,42; 73,31; 98,87; 102,75; 103,33; 104,92; 121,76; 125,74; 128,59; 130,33; 145,08; 146,69; 148,78; 150,19; 151,49; 155,90; 159,24; 172,08.

IR (KBr): 1248; 1459; 1606; 1731.

Preparación 10 9-cloro-5-etil-4,5-dihidro-5-hidroxi-10-metoxi-1H-oxepino-[3',4':6,7]-indolizina-[1,2-b]- quinolina-3,15-(4H, 13H)-diona

Se obtiene este compuesto a partir de la 3-cloro-4-metoxianilina según el método ilustrado en las etapas 4i, 4j y 4k de la preparación 4. Sólido de color blanco; p.f. > 250ºC.

RMN- ^{1}H (DMSO): 0,85 (t, 3H); 1,85 (q, 2H); 3,07 (d, 1H); 3,45 (d, 1H); 4,01 (s, 3H); 5,22 (s, 2H); 5,39 (d, 1H); 5,51 (d, 1H); 6,02 (s, 1H); 7,31 (s, 1H); 7,68 (s, 1H); 8;20 (s, 1H); 8,55 (s, 1H).

RMN- ^{13}C (DMSO): 8,22; 36,27; 42,30; 50,48; 56,69; 61,23; 73,08; 99,16; 107,44; 122,16; 127,12; 128,12; 129,25; 130,02; 130,53; 143,29; 144,37; 151,12; 153,29; 155,71; 158.98; 171,84.

IR (KBr): 1056; 1256; 1483; 1592; 1657; 1747.

Preparación 11 5-etil-4,5-dihidro-5-hidroxi-10-metoxi-1H-oxepino-[3',4':6,7]-indolizina-[1,2-b]-quinolina-3,15-(4H, 13H)-diona

Se obtiene este compuesto a partir de la 4-metoxianilina según el método ilustrado en las etapas 4.i., 4.j. y 4.k. de la preparación 4. Sólido de color amarillo; p.f. > 250ºC.

RMN- ^{1}H (DMSO): 0,85 (t, 3H); 1,85 (q, 2H); 3,07 (d, 1H); 3,45 (d, 1H); 3,95 (s, 3H); 5,28 (s, 2H); 5,40 (d, 1H); 5,51 (d, 1H); 6,00 (s, 1H); 7,38 (s, 1H); 7,51 (d, 2H); 8,07 (d, 1H); 8,55 (s, 1H).

RMN- ^{13}C (DMSO): 8,45; 36,48; 42,51; 50,64; 55,92; 61,42; 73,33; 99,01; 106,49; 122,02; 123,19; 129,59; 130,20; 130,43; 144,17; 144,94; 150,40; 155,92; 158,31; 159,26; 172,07.

IR (KBr): 1251; 1604; 1655; 1735.

Preparación 12 9,11-dicloro-5-etil-4,5-dihidro-5-hidroxi-1H-oxepino-[3',4':6,7]-indolizina-[1,2-b]-quinolina-3,15 (4H, 13H)-diona

Se obtiene este compuesto a partir de la 3,5-dicloroanilina según el método ilustrado en las etapas 4.i., 4.j. y 4.k. de la preparación 4. Sólido de color amarillo; p.f. > 250º C.

RMN- ^{1}H (DMSO): 0,85 (t, 3H); 1,85 (q, 2H); 3,07 (d, 1H); 3,45 (d, 1H); 5,30 (s, 2H); 5,41 (d, 1H); 5,55 (d, 1H); 6,08 (s, 1H); 7,41 (s, 1H); 8,05 (s, 1H); 8,21 (s, 1H); 8,91 (s, 1H).

RMN- ^{13}C (DMSO): 8,39; 36,45; 42,51; 51,03; 61,39; 73,25; 100,62; 123,55; 124,63; 127,60; 128,08; 128,66; 132,06; 132,19; 134,53; 143,77; 148,80; 154,88; 155,82; 159,13; 171,98.

IR (KBr): 1064; 1275; 1586; 1651; 1743.

Preparación 13 5-etil-9-fluoro-4,5-dihidro-5-hidroxi-10-metil-1H-oxepino-[3',4':6,7]-indolizina-[1,2-b]-quinolina-3,15-(4H, 13H)- diona

Se obtiene este compuesto a partir de la 3-fluoro-4-metilanilina según el método ilustrado en las etapas 4.i., 4.j. y 4.k. de la preparación 4. Sólido de color amarillo; p.f. > 250ºC.

RMN- ^{1}H (DMSO): 0,89 (t, 3H); 1,85 (q, 2H); 2,49 (s, 3H); 3,08 (d, 1H): 3,49 (d, 1H); 5,21 (s, 2H); 5,39 (d, 1H); 5,51 (d, 1H); 6,05 (s, 1H); 7,39 (s, 1H); 7;87 (d, 1H); 8,05 (d; 1H); 8,61(s, 1H).

RMN- ^{13}C (DMSO): 8,40; 15,14; 36,45; 42,52; 50,60; 61,41; 73,28; 99,71; 112,00; 122,66; 125,38; 127,66; 129,59; 130,28; 144,49; 147,88; 152,88; 155,85; 159,18; 162,25; 172,02.

IR (KBr): 1054; 1580; 1651; 1760.

Preparación 14 5-etil-10-fluoro-4,5-dihidro-5-hidroxi-1H-oxepino-[3',4':6,7]-indolizina-[1,2-b]-quinolina-3,15-(4H, 13H)-diona

Se obtiene este compuesto a partir de la 4-fluoroanilina según el procedimiento ilustrado en las etapas 4.i., 4.j. y 4.k. de la preparación 4. Sólido de color blanco; p.f. > 250ºC.

RMN- ^{1}H (DMSO): 0,85 (t, 3H); 1,85 (q; 2H); 3,07 (d, 1H); 3,45 (d, 1H); 5,29 (s, 2H); 5,39 (d, 1H); 5,55 (d, 1H); 6,30 (s, 1H); 7,39 (s, 1H); 7,80 (q, 1H); 7,99 (q, 1H); 8,23 (q, 1H); 8,68 (s, 1H).

RMN- ^{13}C (DMSO): 8,40; 36,46; 42,48; 50,66; 61,41; 73,31; 99,68; 111,83; 122,75; 128,93; 130,93; 131,22; 131,93; 144,46; 145,27; 152,60; 155,89; 159,21; 172,04.

IR (KBr): 1209; 1589; 1659; 1739.

Preparación 15 10-cloro-5-etil-4,5-dihidro-5-hidroxi-1H-oxepino-[3',4':6,7]-indolizina-[1,2-b]-quinolina-3,15-(4H, 13H)-diona

Se obtiene este compuesto a partir de la 4-cloroanilina según el método ilustrado en las etapas 4.i., 4.j. y 4.k. de la preparación 4. Sólido de color amarillo. p.f. > 250ºC.

RMN- ^{1}H (DMSO): 0,85 (t, 3H); 1,85 (q, 2H); 3,07 (d, 1H); 3,47 (d, 1H); 5,25 (s, 2H); 5,39 (d, 1H); 5,51 (d, 1H); 6,05 (s, 1H); 7,39 (s, 1H); 7,89 (d, 1H); 8,19 (d, 1H); 8,29 (s, 1H); 8,67 (s, 1H).

RMN- ^{13}C (DMSO): 8,40; 36,46; 42,47; 50,70; 61,42; 73,31; 100,00; 122,96; 127,31; 127,42; 128,87; 131,11; 132,12; 144,34; 146,53; 153,38; 155,88; 159,20; 172,04.

IR (KBr): 1069; 1483; 1606; 1741.

Preparación 16 9-cloro-5-etil-10-fluoro-4,5-dihidro-5-hidroxi-1H-oxepino-[3',4':6,7]-indolizina-[1,2-b]-quino-lina-3,15-(4H, 13H)-diona

Se obtiene este compuesto a partir de la 4-cloro-3-fluoroanilina según el método ilustrado en las etapas 4.i., 4.j. y 4.k. de la preparación 4. Sólido de color amarillo. p.f. > 250ºC.

RMN- ^{1}H (DMSO): 0,85 (t, 3H); 1,85 (q, 2H); 3,07 (d, 1H); 3,45 (d, 1H); 5,25 (s, 2H); 5,39 (d, 1H); 5,51 (d, 1H); 6,05 (s, 1H); 7,40 (s, 1H); 8,20 (d, 1H); 8,40 (d, 1H); 8,68 (s, 1H).

RMN- ^{13}C (DMSO): 8,38; 36,47; 42,58; 50,71; 61,40; 73,26; 99,99; 113,59; 123,09; 124,28; 127,74; 130,64; 131,31; 144,13; 145,08; 153,57; 154,13; 155,84; 156,61; 159,14; 172,00.

IR (KBr): 1488; 1583; 1655; 1743.

Preparación 17 5,12-dietil-9-fluoro-4,5-dihidro-5-hidroxi-10-metoxi-1H-oxepino-[3',4':6,7]indolizina-[1,2-b]-quinolina-3,15-(4H, 13H)-diona 17.a. 5-fluoro-4-metoxi-2-propionilanilina

(Este producto se obtiene según Sugasawa T; Toyoda T; Adachi M; Sasakura K, J. Am Chem. Soc., 100 (1978), pág. 4842-4852). A una solución de 3-fluoro-4-metoxi-anilina (20 g, 142 mmoles) en diclorometano anhidro (200 ml), bajo atmósfera de argón y a 0ºC, se añade, gota a gota, de tricloruro de boro (1M en heptano, 156 ml, 156 mmoles). La suspensión de color rosa así obtenida se mantiene bajo agitación durante 5 min luego se añade, gota a gota, de propionitrilo (33 ml, 420 mmoles) seguido de tricloruro de aluminio (20,8 g, 156 mmoles) en pequeñas porciones. El medio de la reacción se calienta a reflujo durante 3 h, se enfría a 0ºC, se hidroliza añadiendo con precaución ácido clorhídrico 2N (100 ml), luego se lleva a reflujo durante 45 min. Después del enfriamiento a 0ºC, se obtiene un precipitado que se filtra, se lava con diclorometano, luego se recoge con agua (300 ml). La fase acuosa se basifica hasta pH alcalino, se extrae con diclorometano luego con acetato de etilo. La fase orgánica se seca (MgSO_{4}) luego se evapora para dar un producto bruto que se purifica por cromatografía sobre columna (SiO_{2}, AcOEt/Hpt: 1/99 a 20/80). Se obtienen 15,3 g de un sólido de color amarillo.

RMN- ^{1}H (CDCl_{3}): 1,20 (t, 3H); 2,92 (q, 2H); 3,83 (s, 3H); 6,2 (s, 2H); 6,40 (d, 2H); 7,32 (d, 2H).

IR (KBr): 857; 1148; 1240; 1561; 1583; 1662.

17.b. 4-etil-7-fluoro-2-hidroxi-6-metoxi-3-quinolina-carboxilato de etilo

A una solución de 5-fluoro-4-metoxi-2-propionil-anilina (15,3 g, 77,5 mmoles) y de trietilamina (13,9 ml, 100 mmoles) en acetonitrilo anhidro (110 ml), bajo atmósfera de argón y a 0ºC, se añade, gota a gota, una solución de cloruro de etilmalonilo (12,9 ml, 100 mmoles) en acetonitrilo anhidro (30 ml). Se deja el medio de la reacción volver de nuevo a la temperatura ambiente, se cánula, gota a gota, y bajo atmósfera de argón una solución de etilato de sodio (obtenida por 1,8 g, 78 mmoles, de sodio en 80 ml de etanol), luego se deja bajo agitación durante 12 h a temperatura ambiente. Se vierte la mezcla de la reacción en agua congelada (100 ml) y se agita durante dos horas, luego se filtra el precipitado que se lava con agua, con etanol y con éter. Se obtienen 19,4 g de un sólido de color blanco.

RMN- ^{1}H (DMSO): 1,25 (m, 6H); 2,78 (q, 2H); 3,92 (s, 3H); 4,30 (q, 2H); 7,15 (d, 2H); 7,40 (d, 2H); 11,93 (s, 1H). IR (KBr): 786; 1083; 1410; 1521; 1644; 1725.

17.c. 2-cloro-4-etil-7-fluoro-6-metoxi-3-quinolina-carbo-xilato de etilo

Se lleva al reflujo durante 6 h una suspensión de 4-etil-7-fluoro-2-hidroxi-6-metoxi-3-quinolina-carboxilato de etilo (19,4 g, 0,066 moles) en cloruro de fosforilo (243 ml). Se destila el cloruro de fosforilo. Se trasvasa la mezcla de la reacción a un recipiente que contiene agua congelada. Se recoge con diclorometano para solubilizar. Se lava la fase orgánica con agua, luego con una solución saturada de cloruro de sodio. Se seca la fase orgánica sobre sulfato de magnesio y se evapora el disolvente. Se pone el residuo en suspensión con éter y se separa del producto de partida no convertido (4 g). Se evapora el filtrado y se purifica el residuo por cromatografía sobre columna (SiO_{2}, AcOEt/Hpt: 5/95 a 20/80). Se obtienen 10,9 g de un sólido de color blanco.

RMN- ^{1}H (DMSO): 1,30 (t, 3H); 1,39 (t, 3H); 3,08 (q, 2H); 4,09 (s, 3H); 4,49 (q, 2H); 7,64 (d, 2H); 7,86 (d, 2H).

IR (KBr): 865; 1016; 1082; 1190; 1224; 1253; 1272; 1508; 1571; 1732.

17.d. 2-cloro-4-etil-7-fluoro-6-metoxi-3-quinolina-metanol

Se trata una solución de 2-cloro-4-etil-7-fluoro-6-metoxi-3-quinolinacarboxilato de etilo (10,8 g, 35 mmoles) en diclorometano anhidro (200 ml), gota a gota, a temperatura ambiente bajo atmósfera inerte con hidruro de diisobutilaluminio (1M en diclorometano, 65 ml, 65 mmoles), luego se calienta a 400ºC durante 4 h.

Se enfría a 0ºC, se añade con precaución una solución acuosa de sal de Rochelle a 20% (105 ml) y diclorometano (200 ml) y se mantiene bajo agitación durante 1 h. Se decanta, se lava tres veces con agua, se seca la fase orgánica sobre sulfato de magnesio y se evapora el disolvente. Se purifica el residuo por cromatografía sobre columna (SiO_{2}, AcOEt/Hpt: 5/95 a 50/50). Se obtienen 6 g de un sólido de color blanco.

RMN- ^{1}H (DMSO): 1,28 (t, 3H); 3,25 (q, 2H); 4,04 (s, 3H); 4,77 (d, 2H); 5,27 (t, 1H); 7,55 (d, 2H); 7,73 (d, 2H).

IR (KBr): 840; 864; 1023; 1232; 1267; 1317; 1444; 1511; 1569.

17.e. 5,12-dietil-9-fluoro-4,5-dihidro-5-hidroxi-10-metoxi-1H-oxepino-[3',4':6,7]-indolizina-[1,2-b]-quinolina- 3,15-(4H, 13H)-diona

Se acopla el 2-cloro-4-etil-7-fluoro-6-metoxi-3-quinolinametanol al compuesto (M) tal como se describe en la etapa 4.j. de la preparación 4. El producto de acoplamiento resultante se cicliza según el procedimiento de la etapa 4.k. Se obtiene un sólido de color amarillo, p.f. > 275ºC.

RMN- ^{1}H (CF3COOD): 1,07 (m, 3H); 1,62 (m, 3H); 2,27 (m, 2H); 3,44 (d, 1H); 3,54 (m, 2H); 3,91 (d, 1H); 4,25 (s, 3H); 5,60 (d, 1H); 5,74 (s, 2H); 5,98 (d, 1H); 7,85 (m, 1H); 8,16 (m, 1H); 8,31 (s, 1H).

RMN- ^{13}C (CF3COOD): 9,03; 14,20; 26,68; 38,77; 43,98; 53,79; 58,27; 64,73; 77,93; 106,85; 109,24; 110,15; 128,99; 129,20; 131,61; 137,32; 141,23; 144,13; 154,79; 158,32; 160,25; 160,81; 179,30.

IR (KBr): 1013; 1068; 1265; 1466; 1514; 1601; 1655; 1748.

Preparación 18 5-etil-4,5-dihidro-5-hidroxi-12-metil-1H-oxepino-[3',4':6,7]-indolizina-[1,2-b]-quinolina-3,15-(4H, 13H)-diona

Se aplica a la 2-acetilanilina el procedimiento descrito en los ejemplos 17.b., 17.c. y 17.d. para dar el 2-cloro-4-metil-3-quinolinametanol. Este último se acopla al compuesto (M) tal como se describe en la etapa 4.j. de la preparación 4. El producto de acoplamiento resultante se cicliza según el procedimiento de la etapa 4.k. Se obtiene un sólido de color amarillo, p.f. > 260ºC.

RMN ^{1}H (DMSO): 0,87 (t, 3H); 1,87 (q, 2H); 2,78 (s, 3H); 2,80 (d, 1H); 3,55 (d, 1H); 5,27 (s, 2H); 5,42 (d, 1H); 5,52 (d, 1H); 6,04 (s, 1H); 7,39 (s, 1H); 7,75 (t, 1H); 7,88 (t, 1H); 8,13 (d, 1H); 8,25 (d, 1H).

RMN- ^{13}C (DMSO): 8,23; 36,26; 42,36; 62,00; 73,11; 78,65; 79,13; 79,25; 99,52; 122,36; 124,30; 127,67; 129,54; 129,55; 129,56; 140,11; 145,06; 148,07; 152,00; 155,79; 159,09; 171,89.

IR (KBr): 1649; 1751; 3404.

Preparación 19 10-benciloxi-5-etil-9-fluoro-4,5-dihidro-5-hidroxi-1H-oxepino-[3',4':6,7]-indolizina-[1,2-b]-quinolina-3,15-(4H, 13H)-diona

Se aplica a la 3-fluoro-4-metoxi-acetanilina el procedimiento ejemplificado en la etapa 4.i. para obtener el 2-cloro-7-fluoro-6-metoxi-quinolina-3-carbaldehído que se trata con un exceso de tribromuro de boro en diclorometano a temperatura ambiente durante 24 horas. Se obtiene 2-cloro-7-fluoro-6-hidroxi-quinolina-3-carbaldehído, que es O-bencilado en dimetilformamida en presencia de bromuro de bencilo y carbonato de potasio para dar el 6-benciloxi-2-cloro-7-fluoroquinolina-3-carbaldehído que se reduce con el borohidruro de sodio en metanol para dar el quinolinametanol correspondiente. Este último se acopla al compuesto (M) tal como se describe en la etapa 4.j. de la preparación 4. El producto de acoplamiento que resulta se cicliza según el procedimiento de la etapa 4.k. Se obtiene un sólido de color amarillo, p.f. > 275ºC.

RMN- ^{1}H (DMSO): 0,86 (t, 3H); 1,85 (q, 2H); 3,05 (d, 1H); 5,25 (s, 2H); 5,37 (s, 2H); 5,45 (dd, 2H); 6,05 (s, 1H); 7,4-7,6 (m, 5H); 7.88 (d, 1H); 7,95 (d, 1H); 8,56 (s, 1H).

Preparación 20 5-etil-9-fluoro-4,5-dihidro-5,10-di-hidroxi-1H-oxepino-[3',4':6,7]-indolizina-[1,2-b]-quinolina-3,15-(4H, 13H)-diona

Se trata el compuesto de la preparación 19 (0,79 mmoles) disuelto en ácido trifluoroacético (15 ml) con hidrógeno utilizando paladio a 10% sobre carbón (60 mg). Se obtiene un sólido de color amarillo, p.f. > 275ºC.

RMN- ^{1}H (DMSO): 0,86 (t, 3H); 1,85 (q, 2H); 3,05 (d, 1H); 5,25 (s, 2H); 5,37 (s, 2H); 5,45 (dd, 2H); 6,05 (s, 1H); 7,8 (d, 1H); 7,90 (d, 1H); 8,56 (s, 1H).

Las preparaciones descritas anteriormente servirán de base para la ilustración de la invención mediante los ejemplos que siguen.

Ejemplo 1 5-etil-9,10-difluoro-4,5-dihidro-5-(2-amino-1-oxoetoxi)-1H-oxepino-3',4':6,7]-indolizina-[1,2-b]-quinolina-3,15- (4H, 13H)-diona a. clorhidrato de 5-etil-9,10-difluoro-4,5-dihidro-5-(2-(t-butiloxicarbonilamino)-1-oxoetoxi)-1H-oxepino-[3',4':6, 7]-indolizina-[1,2-b]-quinolina-3,15(4H, 13H)-diona

Se trata una mezcla de 5-etil-9,10-difluoro-4,5-dihidro-5-hidroxi-1H-oxepino-[3',4':6,7]-indolizina-[1,2-b]-quinolina-3,15-(4H, 13H)-diona (200 mg, 0,526 mmoles, obtenido según la preparación 4), de N-Boc-glicina (185 mg, 1,051 mmoles) y de una cantidad catalítica de 4-dimetilaminopiridina (20 mg) en piridina anhidra (10 ml) a 0ºC y bajo atmósfera de argón con diciclohexilcarbodiimida (239 mg, 1,16 mmoles), luego se agita a temperatura ambiente durante 48 horas. Se expulsan los productos volátiles a vacío y se cromatogafia el residuo (SiO_{2}, 1% metanol en cloroformo) para dar el producto intermedio deseado (40 mg, 14%), un sólido de color amarillo.

RMN- ^{1}H (CDCl_{3}): 1,20 (t, 3H); 1,38 (s, 9H); 1,40-1,70 (m, 2H); 3,10 (d, 1H); 4,00 (d, 2H); 4,30 (d, 1H); 5,00 (t, 1H); 5,20 (s, 2H); 5,30-5,90 (dd, 2H); 7,20 (s, 1H); 7,50-8,10 (m, 2H); 8,30 (s, 1H).

b. Clorhidrato de 5-etil-9,10-difluoro-4,5-dihidro-5-(2-amino-1-oxoetoxi)-1H-oxepino-[3',4':6,7]-indolizina-[1,2-b]-quinolina-3,15-(4H, 13H)-diona

Se añade al producto intermedio obtenido anteriormente (40 mg, 0,072 mmoles) en solución en diclorometano (10 ml) y mantenida 0ºC, gota a gota, dioxano saturado en cloruro de hidrógeno (8 ml). La suspensión de color amarillo así formada se mantiene bajo agitación durante 2 horas, luego se expulsan los productos volátiles a vacío. El residuo, recogido con agua (5 ml), se lava con diclorometano (3 x 30 ml). Se congela la fase acuosa y se liofiliza para dar la sal esperada, un sólido de color amarillo higroscópica (20 mg, 50%).

RMN- ^{1}H (CDCl_{3}): 1,00 (t, 3H); 2,15 (m, 1H); 2,30 (m, 1H); 3,60 (d, 1H); 3,90 (d, 1H); 4,15 (s, 2H); 5,10 (s, 2H); 5,40 (d, 1H); 5,70 (d, 2H); 7,40 (s, 1H); 7,80 (m, 2H); 8,50 (s, 1H).

Ejemplo 2 5-etil-9,10-difluoro-4,5-dihidro-5-(2-amino-1-oxopropoxi)-1H-oxepino-[3',4':6,7]-indolizina-[1,2-b]-quinolina-3,15-(4H, 13H)-diona

Se aplica el procedimiento del ejemplo 1 a la 5-etil-9,10-difluoro-4,5-dihidro-5-hidroxi-1H-oxepino-[3',4':6,7]-indolizina-[1,2-b]-quinolina-3,15-(4H, 13H)-diona utilizando la N-Boc-b-alanina en lugar de la N-Boc-glicina, luego se escinde el Boc protector del producto intermedio así obtenido por un tratamiento con el ácido trifluor-acético en diclorometano. Se evaporan los productos volátiles a vacío, se recoge el residuo en diclorometano. La solución resultante se lava con bicarbonato diluido, se seca y se evapora. Se obtiene un sólido de color amarillo.

Al aplicar el procedimiento de los ejemplos 1 y 2 a otros compuestos, se obtienen resultados análogos. Se tiene así acceso a toda una serie de compuestos análogos de la camptotecina bajo forma de "fármacos".

Ejemplo 3 1,8-dietil-8,9-dihidro-8-hidroxi-2H, 10H, 12H-[1,3]-oxazino-[5,6-f]-oxepino-[3',4':6,7]-indolizina-[1,2-b]-quinolina-10,13(15H)-diona

Se trata una suspensión de 5-etil-4,5-dihidro-5,10-dihidroxi-1H-oxepino-[3',4':6,7]-indolizina-[1,2-b]-quinolina-3,15-(4H, 13H)-diona (84 mg obtenidos según la preparación 5) en ácido acético (2,5 ml) con 1,3,5-trietilhexahidrotriazina (0,5 ml). La mezcla de la reacción se agita a 70ºC durante 30 min, luego se evapora a vacío. El residuo se recoge con etanol se filtra y se lava, se obtiene un sólido, p.f. > 275º C.

RMN- ^{1}H (DMSO): 0,87 (t, 3H); 1,50 (t, 3H); 1,85 (q, 2H); 2,77 (q, 2H); 3,05 (d, 1H); 3,47 (d, 1H); 4,37 (s, 2H); 5,00 (s, 2H); 5,22 (s, 2H); 5,45 (dd, 2H); 6.00 (s, 1H); 7,34 (s, 1H); 7,36 (d, 1H); 7,93 (d, 1H); 8,53 (s, 1H).

RMN- ^{13}C (DMSO): 8,46; 13,48; 36,46; 42,49; 45,49; 46,44; 50,75; 61,43; 73,33; 82,06; 99,02; 112,90; 122,00; 122,98; 125,42; 127,04; 129,04; 130,20; 144,09; 144,97; 149,87; 152,92; 155,98; 172,07.

IR (KBr): 1045; 1215; 1502; 1604; 1657; 1722.

Ejemplo 4 8-etil-8,9-dihidro-8-hidroxi-1-metil-2H, 10H, 12H-[1,3]-oxazino-[5,6-f]-oxepino -[3',4':6,7]-indolizina-[1,2-b]-quinolina-10,13-(15H)-diona

Se trata una suspensión de 5-etil-4,5-dihidro-5,10-dihidroxi-1H-oxepino-[3',4':6,7]-indolizina-[1,2-b]-quinolina-3,15-(4H, 13H)-diona (200 mg obtenidos según la preparación 5) en ácido acético (5 ml) con hexahidro-1,3,5-trimetiltriazina (110 mg). La mezcla de la reacción se agita a 70ºC durante 30 min, luego se evapora a vacío. El residuo se recoge con etanol, Se filtra y se lava con éter. Se obtiene un sólido, p.f. > 275ºC.

RMN- ^{1}H (DMSO): 0,87 (t, 3H); 1,85 (q, 2H); 3,04 (d, 1H); 3,48(d, 1H); 4,33 (s, 2H); 4,93 (s, 2H); 5,28 (s, 2H); 5,45 (dd, 2H); 6,01 (s, 1H); 7,35 (s, 1H); 7,38 (d, 1H); 7,94 (d, 1H); 8,49 (s, 1H).

RMN- ^{13}C (DMSO): 8,46; 36,43; 37,85; 42,55; 48,68; 50,79; 61,43; 73,35; 83,82; 99,04; 112,49; 122,04; 123,00; 125,46; 127,14; 129,07; 130,27; 144,99; 149,95; 152,46; 155,99; 172,09.

IR (KBr): 1047; 1058; 1219; 1246; 1295; 1439; 1504; 1604; 1655; 1735.

Ejemplo 5 8-etil-8,9-dihidro-8-hidroxi-1-bencil-2H, 10H, 12H-[1,3]-oxazino-[5,6-f]-oxepino-[3',4':6,7]-indolizina-[1,2-b]-quinolina-10,13-(15H)-diona

Se trata una suspensión de 5-etil-4,5-dihidro-5,10-dihidroxi-1H-oxepino-[3',4':6,7]-indolizina-[1,2-b]-quinolina-3,15-(4H, 13H)-diona (200 mg obtenidos según la preparación 5) en ácido acético (5 ml) con 1,3,5-tribencilhexahidrotriazina (285 mg). La mezcla de la reacción se agita a 70ºC durante 30 min, luego se evapora a vacío. El residuo se recoge con etanol se filtra y se lava con éter. Se obtiene un sólido, p.f. > 275ºC.

RMN- ^{1}H (DMSO): 0,85 (t, 3H); 1,85 (q, 2H); 3,05 (d, 1H); 3,47 (d, 1H); 3,96 (s, 2H); 4,33 (s, 2H); 5,04 (s, 2H); 5,17 (s, 2H); 5,44 (dd, 2H); 6,01 (s, 1H); 7,38 (m, 6H); 7,42 (d, 1H); 7,97 (d, 1H); 8,42 (s, 1H).

RMN- ^{13}C (DMSO): 8,42; 119,96; 36,45; 42,51; 46,36; 50,78; 55,38; 61,39; 73,31; 99,00; 112,55; 122,01; 123,08; 125,38; 127,09; 127,47; 128,70; 129,14; 130,35; 128,40; 139,19; 144,18; 149,99; 152,84; 155,92; 159,24; 172,05.

IR (KBr): 1056; 1205; 1225; 1248; 1504; 1535; 1599; 1655; 1726.

Ejemplo 6 8-etil-8,9-dihidro-4-fluoro-8-hidroxi-1-bencil-2H, 10H, 12 H-[1,3]-oxazino-[5,6-f]-oxepino-[3',4':6,7]-indolizina- [1,2-b]-quinolina-10,13(15H)-diona

Se trata una suspensión de 5-etil-9-fluoro-4,5-dihidro-5,10-dihidroxi-1H-oxepino-[3',4':6,7]indolizina-[1,2-b]-quinolina-3,15-(4H, 13H)-diona (200 mg, obtenidos según la preparación 20) en ácido acético (5 ml) con 1,3,5-tribencilhexahidrotriazina (285 mg). La mezcla de la reacción se agita a 70ºC durante 30 min, luego se evapora a vacío. Se recoge el residuo con etanol, se filtra y se lava con éter. Se obtiene un sólido, p.f. > 250ºC.

RMN- ^{1}H (DMSO): 0,85 (t, 3H); 1,85 (q, 2H); 3,05 (d, 1H); 3,48 (d, 1H): 3,95 (s, 2H); 4,45 (s, 2H); 5,20 (s, 4H); 5,45 (dd, 2H): 6,05 (s, 1H); 7,40 (s, 7H); 7,90 (d, 1H); 8.45 (s, 1H).

IR (KBr): 1248; 1451; 15001; 1598; 1657; 1727.

Estudio farmacológico de los productos de la invención Ensayo sobre la actividad de relajación del ADN inducido por la topoisomerasa 1

Se efectúan todas las reacciones en un tampón de reacción de 20 \mul constituido de 50 mM de Tris-HCl (pH 7,5), 50 mM de KCl, 0,5 mM de ditiotreitol, 10 mM de MgCl_{2}, 0,1 mM de ácido etilenodiamina tetra-acético (EDTA), 30 \mug/ml de albúmina de suero de bovina y 300 ng de pUC19 superenrrollada (Pharmacia Biotech, Orsay, Francia) con o sin compuestos que hay que ensayar en concentraciones definidas. Se disuelven inicialmente todos los compuestos que hay que ensayar en el dimetilsulfóxido (DMSO) o en agua para los compuestos hidrosolubles, estando las otras diluciones disueltas en agua destilada. La concentración de DMSO final no sobrepasa 1% (v/v). La reacción se inicia por la adición de topoisomerasa 1 de ADN de timo de ternera purificado (Life tecnologies/Gibco-BRL, Paisley, Reino Unido) de tal manera que la reacción sea completa en 15 minutos a 37ºC. Las reacciones se detienen por adición de 3 \mul de una mezcla que contiene sulfato de dodecil-sodio al 1%, 20 mM de EDTA y 500 \mug/ml de proteinasa K (Boehringer Mannheim, Meylan, Francia). Después de un período suplementario de incubación de 30 minutos a 37ºC, se añaden 2 \mul de un tampón de carga que contiene 10 mM de Na_{2}HPO_{4}, azul de bromofenol al 0,3% y Ficoll al 16%, a las muestras que se someten a una electroforesis en geles de agarosa al 1,2% a 1 V/cm durante 20 horas en un tampón que contiene 36 mM de Tris-HCl, pH 7,8, 30 mM de NaH_{2}PO_{4}, 1 mM de EDTA y 2 \mug/ml de cloroquina. Los geles se colorean con 2 \mug/ml de bromuro de etidio, fotografiados bajo luz UV de 312 nm con una cámara provista de "Dispositivo de Carga Acoplada" (Charge Coupled Device (ccd)) y la intensidad fluorescente se mide con la ayuda de un analizador de imagen tipo bioProfil (Vilber Lourmat, Lyón, Francia) con el fin de determinar el porcentaje de ADN relajado.

En cada experimentación, se incuba ADN plásmido superenrrollado solo o con la topoisomerasa 1. La reacción se completa en un espacio de tiempo de 15 minutos. Para cada compuesto que hay que ensayar o testigo (se llama testigo al vehículo solo), el ADN plásmido superenrrollado se incuba en presencia de la concentración máxima elegida para el experimento del compuesto que hay que ensayar o del testigo sin enzima o bien en presencia del compuesto que hay que ensayar, con concentraciones que van de 1 \muM a 200 \muM o del testigo y en presencia de enzimas. Tal como se indica en la Tabla I, los ejemplos 3 a 6 inhiben la actividad de relajación favorecida por la topoisomerasa 1 de una manera dependiente de la concentración.

TABLA I

18

Claims

1. Un compuesto caracterizado porque dicho compuesto tiene la fórmula (I):

19

R_{1}: representa el grupo etilo;

R_{2}: representa H o un halo;

M: es un número entero comprendido entre 0 y 6;

N: es 1 ó 2; y

y cuando el término inferior se asocia a alquilo, significa como máximo 6 átomos de carbono;

o una sal farmacéuticamente aceptable de este último.

2. Un compuesto según la reivindicación 1, caracterizado porque R_{3} y R_{4} forman un ciclo de oxazina eventualmente sustituido; o una sal farmacéuticamente aceptable de este último.

3. Un compuesto según la reivindicación 1, caracterizado porque R_{P} es un grupo fácilmente escindible; o una sal farmacéuticamente aceptable de este último.

4. Un compuesto según la reivindicación 2, caracterizado porque dicho compuesto se elige entre los compuestos que responden a las fórmulas siguientes:

- 1,8-dietil-8,9-dihidro-8-hidroxi-2H, 10H, 12H-[1,3]-oxazino-[5,6-f]-oxepino-[3',4':6,7]-indolizina-[1,2-b]-quinolina-10,13-(15H)-diona;

- 8-etil-8,9-dihidro-8-hidroxi-1-metil-2H, 10H, 12H-[1,3]-oxazino[5,6-f]-oxepino[3',4':6,7]-indolizina-[1,2-b]-
quinolina-10,13-(15H)-diona;

- 8-etil-8,9-dihidro-8-hidroxi-1-bencil-2H, 10H, 12H-[1,3]-oxazino-[5,6-f]-oxepino-[3',4':6;7]indolizina-[1,2-b]-quinolina-10,13(15H)-diona;

- 8-etil-8,9-dihidro-4-fluoro-8-hidroxi-1-bencil-2H, 10 H, 12H-[1,3]-oxazino[5,6-f]-oxepino-[3',4':6,7]-indolizina-[1,2-b]-quinolina-10,13-(15) -diona;

o una sal farmacéuticamente aceptable de este último.

5. Un compuesto según la reivindicación 3, caracterizado porque dicho compuesto se elige entre los compuestos que responden a las fórmulas siguientes:

- 5-etil-9,10-difluoro-4,5-dihidro-5-(2-amino-1-oxo-etoxi)-1H-oxepino-[3',4':6,7]indolizina-[1,2-b]-quinolina-
3,15-(4H, 13H)-diona;

- 5-etil-9,10-difluoro-4,5-dihidro-5-(2-amina-1-oxopropoxi)-1H-oxepino-[3',4':6,7]-indolizina-[1,2-b]-quinolina-3,15-(4H, 13H)-diona;

o una sal farmacéuticamente aceptable de este último.

6. Como medicamento, un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones anteriores o una sal farmacéuticamente aceptable de este último.

7. Composición farmacéutica que contiene, como principio activo, uno al menos de los compuestos según una cualquier de las reivindicaciones 1 a 5.

8. Utilización de un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5 para la preparación de medicamentos antitumorales.

9. Procedimiento de preparación de compuestos de fórmula Ia que corresponde a los productos de fórmula I en la cual R_{3} y R_{4} forman un ciclo de oxazina según una cualquiera de las reivindicaciones 1, 2 ó 4, caracterizado porque:

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10. procedimiento de preparación de compuestos de fórmula Ib que corresponde a los productos de fórmula I en la cual R_{P} no es un átomo de hidrógeno, según una cualquiera de las reivindicaciones 1, 2, 3 ó 5, caracterizado porque:

- se acila el compuesto de fórmula general D:

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o la fórmula:

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con un derivado del radical -C(O)-A_{1}-NH_{2} tal como se define en la reivindicación 1, para dar el compuesto \beta-hidroxi-lactónico de fórmula general R_{P} diferente de H.