ES2205702T3 - Compuesto farmaceuticos de benzotiofeno. - Google Patents
Compuesto farmaceuticos de benzotiofeno.Info
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Abstract
LA INVENCION SE REFIERE A UN COMPUESTO DE FORMULA I: DONDE R 1 ES H, OH, HALO, OCO(ALQUILO C 1 - C 6 ), OCO (ARILO), OSO 2 (ALQUILO C 4 - C 6 ), OCOO(ALQUILO C 1 - C 6 ), OCOO(ARILO), OCONH(ALQUILO C 1 - C6 ) O OCON(ALQUILO C 1 - C 6 ) 2 ; R 2 ES ARILO, ALQUILO C 1 - C 6 , CICLOALQUILO C 3 C 6 O 4 - CICLOHEXANOL; R 3 ES O(CH 2 ) 2 O O(CH 2 ) 3 ; R 4 Y R 5 SE COMBINAN PARA FORMAR, CON EL ATOMO DE NITROGENO AL QUE ESTAN UNIDOS, PIPERIDINA, MORFOLINA, PIRROLIDINA, 3 METILPIRROLIDINA, 3,3 - METILPIRROLIDINA, 3, 3 - DIMETILPIRROLIDINA, 3, 4 - DIMETILPIRROLIDINA, AZEPINA O PIPECOLINA; DONDE EL ARILO DE R 1 Y R 2 ES F ENILO OPCIONALMENTE SUSTITUIDO DE 1 A 3 VECES POR ALQUILO C SUB,1 - C 6 , ALCOXI C 1 - C 6 , HALO, AMINO O HID ROXILO. SE INCLUYEN ASIMISMO LAS SALES FARMACEUTICAMENTE ACEPTABLES DE DICHOS COMPUESTOS.
Description
Compuestos farmacéuticos de benzotiofeno.
La presente invención se refiere a los campos de
la química farmacéutica y orgánica, y proporciona compuestos
benzotiofenos nuevos que son útiles para varias indicaciones
médicas de tratamiento asociadas al síndrome posmenopáusico y a la
enfermedad fibroide uterina, la endometriosis y la proliferación de
las células del músculo liso de la aorta.
"Síndrome posmenopáusico" es un término
usado para describir varios estados patológicos que con frecuencia
afectan a las mujeres que han entrado en la menopausia o terminado
la metamorfosis fisiológica conocida como menopausia. Aunque son
numerosas las patologías contempladas por el uso de este término,
tres efectos importantes del síndrome posmenopáusico son la fuente
de mayor preocupación desde el punto de vista médico a largo plazo:
la osteoporosis, los efectos cardiovasculares como la
hiperlipidemia y el cáncer dependiente de estrógeno, en particular
el cáncer de mama y el cáncer uterino.
La osteoporosis describe un grupo de enfermedades
que surgen de diversas etiologías pero que se caracterizan por la
pérdida neta de masa ósea por unidad de volumen. La consecuencia de
esta pérdida de masa ósea y la fractura ósea resultante es la
incapacidad del esqueleto de proporcionar un apoyo estructural
adecuado para el cuerpo.
Uno de los tipos más comunes de osteoporosis es
la asociada a la menopausia. La mayoría de las mujeres pierden
alrededor del 20% al 60% de la masa ósea del compartimiento
trabecular del hueso dentro del plazo de los 3 a 6 años después de
la interrupción de la menstruación. Por lo general, esta pérdida
rápida está asociada a un aumento de la resorción y formación ósea.
Sin embargo, el ciclo de resorción es más dominante y el resultado
es una pérdida neta de masa ósea. La osteoporosis es una enfermedad
grave y común entre las mujeres menopáusicas.
Se ha estimado que sólo en Estados Unidos existen
25 millones de mujeres que padecen esta enfermedad. Los resultados
de la osteoporosis son perjudiciales en lo personal y, además,
suponen grandes pérdidas económicas debido a su cronicidad y a la
necesidad de un apoyo importante y prolongado (hospitalización y
asistencia auxiliar domiciliaria) de las secuelas de la enfermedad.
Esto es especialmente cierto para los pacientes de mayor edad.
Además, aunque por lo general no se considera que la osteoporosis
sea una enfermedad potencialmente mortal, en las pacientes ancianas
un 20% al 30% del índice de mortalidad está relacionado con las
fracturas de cadera. Un porcentaje alto de este índice de
mortalidad puede estar directamente asociado a la osteoporosis
posmenopáusica.
El tejido del hueso más vulnerable a los efectos
de la osteoporosis posmenopáusica es la sustancia trabecular. Este
tejido se denomina con frecuencia hueso espojoso o hueso
trabecular, y está particularmente concentrado cerca de los extremos
del hueso (cerca de las articulaciones) y en las vértebras de la
columna vertebral. En el tejido óseo trabecular se distinguen
pequeñas estructuras osteoides que se interconectan entre sí, y
tejido cortical más sólido y denso que constituye la superficie más
externa y eje central del hueso. Esta red interconectada de
trabécula brinda soporte lateral a la estructura cortical externa y
es crítica para la fuerza biomecánica de toda la estructura. En la
osteoporosis posmenopáusica es principalmente la resorción y
pérdida neta de trabécula la que conduce a la insuficiencia y la
fractura del hueso. En vista de la pérdida de trabécula de las
mujeres posmenopáusicas, no es sorprendente que las fracturas más
comunes sean las asociadas a aquellos huesos que son muy
dependientes del apoyo trabecular, por ejemplo las vértebras, y el
cuello de los huesos que soportan el peso como el fémur y el
antebrazo. En realidad, la fractura de cadera, las fracturas de
Colles y el aplastamiento vertebral son características distintivas
de la osteoporosis posmenopáusica.
En este momento, el único método generalmente
aceptado para el tratamiento de la osteoporosis posmenopáusica es
el tratamiento sustitutivo con estrógenos. Aunque por lo general el
tratamiento es satisfactorio, su cumplimiento por parte de las
pacientes es bajo principalmente porque la estrógenoterapia produce
efectos secundarios indeseables.
Durante todo el periodo premenopáusico, la
mayoría de las mujeres tiene una incidencia menor de enfermedad
cardiovascular que los hombres de su misma edad. Sin embargo,
después de la menopausia la incidencia de enfermedad cardiovascular
en las mujeres aumenta lentamente hasta alcanzar el índice
observado en los varones. Esta pérdida de protección se ha
vinculado a la pérdida de estrógenos y, en particular, a la pérdida
de la capacidad de los estrógenos de regular los niveles de lípidos
séricos. Aún no se ha comprendido del todo la naturaleza de la
capacidad de los estrógenos de regular los lípidos séricos, pero
los indicios hasta la fecha indican que el estrógeno puede regular
en aumento los receptores de los lípidos de baja densidad (LBD) del
hígado para eliminar el exceso de colesterol. Además, el estrógeno
parece tener algún efecto sobre la biosíntesis de colesterol y
otros efectos beneficiosos sobre la salud cardiovascular.
Se ha publicado en la bibliografía que en las
mujeres posmenopáusicas que reciben tratamiento sustitutivo con
estrógenos se produce un regreso a los niveles de lípidos séricos
hasta las concentraciones del estado premenopáusico. Por tanto, el
estrógeno podría parecer ser un tratamiento razonable para este
estado. Sin embargo, para muchas mujeres los efectos secundarios
del tratamiento sustitutivo con estrógenos no son aceptables,
limitando así el uso de este tratamiento. Un tratamiento ideal para
este estado sería un agente que regulara el nivel de lípidos
séricos como lo hace el estrógeno, pero que careciera de los
efectos secundarios y riesgos asociados al tratamiento con
estrógenos.
La tercera patología importante asociada al
síndrome posmenopáusico es el cáncer de mama dependiente del
estrógeno y, en menor medida, los cánceres dependientes del
estrógeno de otros órganos, en particular del útero. Aunque esos
neoplasmas no están sólo limitados a las mujeres posmenopáusicas,
están más extendidos en la población posmenopáusica, de mayor edad.
La quimioterapia actual de estos cánceres se basa en gran medida en
el uso de compuestos antiestrógenos como por ejemplo el tamoxifeno.
Los agonistas-antagonistas mixtos de ese tipo estos
no son ideales, a pesar de sus efectos beneficiosos en el
tratamiento de estos cánceres y de que sus efectos secundarios
estrógenos son tolerables en situaciones agudas potencialmente
mortales. Por ejemplo, estos agentes pueden tener efectos
estimulantes sobre ciertas poblaciones de células cancerosas del
útero debido a sus propiedades estrógenas (agonistas) y, por tanto,
pueden ser contraproducentes en algunos casos. Un tratamiento mejor
para estos cánceres sería un agente que fuera un compuesto
antiestrógeno cuyas propiedades estrógenas agonistas sobre los
tejidos reproductores fueran insignificantes o inexistentes.
En respuesta a la necesidad clara de agentes
farmacéuticos nuevos que sean capaces de aliviar los síntomas de,
por ejemplo, el síndrome posmenopáusico, la presente invención
proporciona compuestos benzotiofenos nuevos, composiciones
farmacéuticas de los mismos y métodos para usar esos compuestos para
el tratamiento del síndrome posmenopáusico y otros estados
patológicos asociados al estrógeno como los mencionados más
arriba.
La fibrosis uterina (tumor fibroide uterino) es
un problema clínico antiguo y siempre presente conocido por varios
nombres, incluyendo enfermedad fibroide uterina, hipertrofia
uterina, leiomioma uterino, hipertrofia miometrial, fibrosis uterina
y metritis fibrótica. Esencialmente la fibrosis uterina es una
enfermedad en la que se produce una deposición inadecuada de tejido
fibroide sobre la pared del útero.
Esta enfermedad es una de las causas de
dismenorrea e infertilidad de la mujer. Se conoce escasamente la
causa exacta de esta enfermedad, pero los indicios indican que es
una respuesta inadecuada de tejido fibroide al estrógeno. Una
enfermedad de este tipo se ha producido en conejos mediante la
administración diaria de estrógeno durante 3 meses. En cobayas, la
enfermedad se ha producido mediante la administración diaria de
estrógeno durante cuatro meses. Además, en ratas, el estrógeno causa
una hipertrofia similar.
El tratamiento más común para la fibrosis uterina
implica procedimientos quirúrgicos costosos y, algunas veces, fuente
de complicaciones tales como la formación de adherencias
abdominales e infecciones. En algunas pacientes, la cirugía inicial
sólo es un tratamiento provisional y los fibroides vuelven a crecer.
En esos casos se realiza una histerectomía que efectivamente acaba
con los fibroides pero también con la vida reproductiva de la
paciente. Asimismo pueden administrarse los antagonistas de la
hormona liberadora de la gonadotropina, aunque su uso es limitado
por el hecho de que puede llevar a la osteoporosis. De modo que
existe una necesidad de contar con métodos nuevos para tratar la
fibrosis uterina y los métodos de la presente invención satisfacen
esa necesidad.
La endometriosis es una enfermedad con
dismenorrea grave que está acompañada por dolor intenso, hemorragia
dentro de las masas endometriales o cavidad peritoneal y con
frecuencia lleva a la infertilidad. Aparentemente, los síntomas de
esta enfermedad se deben a proliferaciones endometriales ectópicas
que responden de forma inadecuada al control hormonal normal y
están localizadas en tejidos inadecuados. Debido a que la
proliferación endometrial se produce en localizaciones inadecuadas,
el tejido parece iniciar respuestas locales de tipo inflamatorio
que causan infiltración de macrófagos y una sucesión de eventos en
cascada que lleva al inicio de la respuesta dolorosa. Todavía no se
conoce bien la etiología exacta de esta enfermedad y su tratamiento
por hormonoterapia es diverso, está mal definido y se encuentra
marcado por numerosos efectos colaterales indeseables y
posiblemente peligrosos.
Uno de los tratamientos para esta enfermedad es
el uso de estrógenos a dosis baja para suprimir el crecimiento
endometrial a través de un efecto de retroalimentación negativa
sobre la liberación de gonadotropina de origen central y la
posterior producción de estrógeno ovárico; sin embargo, algunas
veces es necesario usar estrógeno continuo para controlar los
síntomas. Con frecuencia este uso de estrógeno puede llevar a
efectos secundarios indeseables e incluso al riesgo de cáncer de
endometrio.
Otro tratamiento consiste en la administración
continua de progestágenos que inducen amenorrea y al suprimir la
producción de estrógeno ovárico puede causar regresiones de los
crecimientos endometriales. A menudo el uso de un tratamiento
prolongado con progestágenos está acompañado por los efectos
secundarios desagradables de los progestágenos al sistema nervioso
central y muchas veces conduce a la infertilidad debido a la
supresión de la función ovárica.
Un tercer tratamiento consiste en la
administración de andrógenos débiles que son eficaces para
controlar la endometriosis; sin embargo, inducen efectos
virilizantes graves. Varios de estos tratamientos de endometriosis
también causan un grado leve de pérdida ósea con tratamiento
continuo. Por tanto, se requieren métodos nuevos para el
tratamiento de la endometriosis.
La proliferación de células del músculo liso de
la aorta desempeña un papel importante en enfermedades como la
ateroesclerosis y la reestenosis. Se ha comprobado que la
reestenosis vascular después de la angioplastia coronaria
transluminal percutánea (PTCA: percutaneous transluminal coronary
angioplasty) es una respuesta tisular caracterizada por una fase
inicial y una fase tardía. La fase inicial, que se produce horas a
días después de la PTCA, se debe a la trombosis con algunos
vasoespasmos mientras que la fase tardía parece estar dominada por
una proliferación y migración excesiva de células del músculo liso
de la aorta. En esta enfermedad, el aumento de la movilidad y
colonización celular por parte de esas células musculares y
macrófagos contribuye de forma importante a la patogenia de la
enfermedad. La proliferación y migración excesiva de células de
músculo liso vascular de la aorta puede ser el mecanismo principal
de la reoclusión de las arterias coronarias después de la PTCA, la
aterectomía, la angioplastia por láser y la cirugía de injerto de
derivación arterial. Véase "Intimal Proliferation of Smooth Muscle
Cells as an Explanation for Recurrent Coronary Artery Stenosis
after Percutaneous Transluminal Coronary Angioplasty," Austin
et al., Journal of the American College of
Cardiology, 8: 369-375 (agosto, 1985).
La reestenosis vascular sigue siendo una
complicación a largo plazo importante después de la intervención
quirúrgica de las arterias bloqueadas mediante angioplastia
coronaria transluminal percutánea, la aterectomía, la angioplastia
por láser y la cirugía de injerto de derivación arterial. En
aproximadamente el 35% de los pacientes que se someten a una PTCA,
la reoclusión se produce dentro del plazo de los tres a seis meses
posteriores al procedimiento. Las estrategias que se utilizan en la
actualidad para tratar la reestenosis vascular incluyen la
intervención mecánica con dispositivos tales como las endoprótesis
vasculares (stents) o las farmacoterapias que incluyen el
tratamiento con heparina, heparina de bajo peso molecular,
coumarina, aspirina, aceite de pescado, antagonistas del calcio,
esteroides y prostaciclina. Estas estrategias han fracasado en
frenar la tasa de reoclusión, y han sido ineficaces para tratar y
prevenir la reestenosis vascular. Véase "Prevention of Restenosis
after Percutaneous Transluminal Coronary Angioplasty: The Search for
a 'Magic Bullet'," Hermans et al., American Heart
Journal, 122: 171-187 (julio, 1991).
En la patogenia de la reestenosis la
proliferación y migración excesiva de las células se produce como
resultado de factores de crecimiento producidos por los componentes
celulares de la sangre y la pared del vaso arterial lesionado que
median la proliferación de las células del músculo liso en la
reestenosis vascular.
Los agentes que inhiben la proliferación y/o la
migración de las células de músculo liso de la aorta son útiles
para el tratamiento y la prevención de la reestenosis. La presente
invención prevé el uso de compuestos como inhibidores de la
proliferación de células del músculo liso de la aorta y, por tanto,
inhibidores de la reestenosis.
El documento EP 0062 503 está relacionado con los
compuestos
6-hidroxi-2-(4-hidroxifenil)-3-[4-(2-piperidino)etoxi)benzoil]benzo[b]tiofeno
y
6-hidroxi-2-(4-hidroxifenil)-3-[4-(3-metil-pirrolidino)etoxi)benzoil]benzo[b]tiofeno,
como antiestrógenos y andrógenos.
En el documento EP 0471 609 se describe un
proceso para la preparación de benzofurano, benzotiofeno, derivados
de indol o indocilina.
El documento EP 0641 791 está relacionado con
derivados del benzotiofeno sustituidos en la posición 2 por un átomo
de halógeno, un grupo alquilo inferior, o un grupo cicloalquilo o
cicloalquenilo sustituido opcionalmente por un grupo alquilo
inferior, un grupo hidroxilo, un grupo aciloxi o un grupo oxo, como
antiestrógenos.
El documento EP 0516 257 describe los derivados
del 2-fenil benzo [b] furano y tiofeno como
antiestrógenos.
El documento
DE-B-1300575 describe los compuestos
benzotiofenos como agentes antifertilidad.
La presente invención está relacionada con los
compuestos de fórmula I
donde R_{1} es H, OH, halógeno, OCO (alquilo de
C_{1}-C_{6}), OCO (arilo), OSO_{2} (alquilo
de C_{4}-C_{6}), OCOO (alquilo de
C_{1}-C_{6}), OCOO (arilo), OCONH (alquilo de
C_{1}-C_{6}) o OCON (alquilo de
C_{1}-C_{6})_{2};
R_{2} es arilo, alquilo de
C_{1}-C_{6}, cicloalquilo de
C_{3}-C_{6} o
4-ciclohexanol;
R_{3} es O(CH_{2})_{2} o
O(CH_{2})_{3};
R_{4} y R_{5} son opcionalmente
CO(CH_{2})_{2}CH_{3}, CO(CH_{2})_{3}CH_{3},
alquilo de C_{1}-C_{6}, o R_{4} y R_{5} se
combinan para formar, con el nitrógeno al cual están unidos,
piperidina, morfolina, pirrolidina,
3-metilpirrolidina,
3,3-dimetilpirrolidina,
3,4-dimetilpirrolidina, acepina o pipecolina;
R_{6} es
y sales farmacéuticamente aceptables de los
mismos.
La presente invención está relacionada, además,
con composiciones farmacéuticas de fórmula I, que opcionalmente
contienen estrógeno o progestágeno y el uso de esos compuestos,
solos o en combinación con estrógeno o progestágenos, para el alivio
de los síntomas del síndrome posmenopáusico, en particular la
osteoporosis, los procesos patológicos cardiovasculares y el cáncer
dependiente del estrógeno. Según se lo utiliza aquí, el término
"estrógeno" incluye los compuestos esteroides con actividad
estrógena tales como, por ejemplo,
17\beta-estradiol, estrona, estrógeno conjugado
(Premarin®), estrógeno equino,
17\beta-etinil-estradiol y otros
similares. Según se lo utiliza aquí, el término "progestágeno"
incluye compuestos con actividad progestacional tales como, por
ejemplo, progesterona, noretilnodrel, nongestrel, acetato de
megestrol y noretindrona.
Los compuestos de la presente invención también
son útiles para inhibir la enfermedad fibroide uterina y la
endometriosis en mujeres y la proliferación de las células del
músculo liso de la aorta, particularmente la reestenosis, en los
seres humanos.
Un aspecto de la presente invención incluye
compuestos de fórmula I
donde R_{1}, R_{2}, R_{3}, R_{4}, R_{5}
y R_{6} son según se los define más
arriba;
y sales farmacéuticamente aceptables de los
mismos.
Los términos generales usados en la descripción
de los compuestos aquí descritos mantienen su significado usual.
Por ejemplo "alquilo" se refiere a las cadenas alifáticas
lineales o ramificadas de 2 a 6 átomos de carbono, incluyendo el
etilo, propilo, isopropilo, butilo, n-butilo,
pentilo, isopentilo, hexilo e isohexilo. De la misma forma, el
término "alqueno de C_{2}-C_{6}" representa
alquenos lineales o ramificados con 2 a 6 átomos de carbono e
incluye el propileno, etileno, isopropileno, butileno,
n-butileno, hexileno y pentileno.
El término "arilo" incluye el fenilo
opcionalmente sustituido 1 a 3 veces con alquilo de
C_{1}-C_{6}, alcoxi de
C_{1}-C_{6}, halógeno, amino, nitro o
hidroxi.
Los compuestos de la presente invención son
derivados del benzo [b] tiofeno que se denomina y se numera según
el Índice anular de The American Chemical Society de la siguiente
forma:
En el proceso de preparación de los compuestos de
la presente invención, el material de partida es un compuesto de
fórmula II.
donde
R_{7} es un grupo protector de hidroxi; y
R_{3}, R_{4} y R_{5} son como se ha
definido más arriba;
o una sal de los
mismos.
Aunque la base libre de un compuesto de fórmula
II es un material de partida aceptable, con frecuencia es más
conveniente la forma en sal de adición ácida, en particular la sal
clorhidrato.
Los compuestos de fórmula II son conocidos en la
técnica y se preparan esencialmente a través de los métodos
descritos en las patentes de EE.UU. nº 4.133.814, 4.380.635 y
4.418.068.
Por lo general, se prepara un precursor
benzotiofeno de fórmula III
mediante los procedimientos conocidos.
Típicamente, los dos grupos hidroxi están protegidos por grupos
protectores de hidroxi conocidos que son capaces de resistir la
acilación en las condiciones normales Fiedel-Crafts
(que forman los grupos protectores R_{5} de los compuestos de
fórmula II) y la subsiguiente reducción por un agente fuertemente
reductor. Los grupos protectores de hidroxi preferidos son alquilos
de C_{1}-C_{4} y se prefiere especialmente el
metilo. Ver, por ejemplo, las patentes mencionadas más arriba de
Estados Unidos, J. W. Barton, "Protective Groups in Organic
Chemistry", J. G. W. McOmie (ed.), Plenum Press, Nueva York, NY,
1973, Capítulo 2, y T. W. Green, "Protective Groups in Organic
Synthesis", John Wiley and Sons, Nueva York, NY, 1981, Capítulo
7.
Después de la preparación del precursor protegido
deseado de fórmula III, se realiza la acilación del precursor con
un compuesto de fórmula IV usando las condiciones normales de
Friedel-Crafts.
donde
n, R_{3}, R_{4} y R_{5} son según se han
definido más arriba; y
R es cloro, bromo, yodo o un grupo éster
activador. La preparación de compuestos de fórmula IV y los métodos
de acilación preferidos, se describen en las patentes de Estados
Unidos incluidas más arriba. Cuando R_{4} y R_{5} son cada uno
un alquilo de C_{1}-C_{4}, se prefieren metilo
y etilo. Cuando R_{4} y R_{5} están combinados, se prefieren
1-piperidinil y 1-pirrolidinil. De
estos, el grupo piperidino es especialmente preferido.
Después de la acilación y, por tanto, de la
preparación de un compuesto de fórmula II o una sal del mismo, los
compuestos de la presente invención en que R_{7} es -OH se
preparan agregando un compuesto de fórmula II o una sal del mismo a
un disolvente adecuado y, luego, reaccionando el compuesto de
fórmula II con un agente reductor tal como, por ejemplo, hídrido de
litio aluminio (LAH) en una atmósfera de gas inerte como
nitrógeno.
Entre los disolventes adecuados se incluye
cualquier disolvente o mezcla de disolventes que permanezca inerte
en condiciones reductoras. Entre los disolventes adecuados se
incluyen el éter dietílico, el dioxano y el tetrahidrofurano (THF).
Se prefiere la forma anhidra de estos disolventes y se prefiere
especialmente el THF anhidro.
La temperatura empleada en este paso es aquella
que sea suficiente como para lograr que se complete la reacción de
reducción. Por lo general, la temperatura ambiente, en el intervalo
de los 17ºC a los 25ºC es adecuada.
La duración de este paso es la necesaria para que
se produzca la reacción. Típicamente, esta reacción tarda entre 1 y
20 horas. El tiempo óptimo puede determinarse controlando la
evolución de la reacción mediante las técnicas cromatográficas
convencionales.
El \alpha-carbono (carboxi)
puede modificarse entonces a los grupos definidos por R_{6}
cuando R_{6} es
Un grupo como el RLi, RMgX u otras especies
neuclofílicas del carbono, donde R es alquilo de
C_{1}-C_{5}, alquenilo de
C_{2}-C_{5} o arilo, se agrega a un compuesto
de fórmula II en un disolvente adecuado como se definió antes de una
temperatura de 0 a -85ºC. Después de transcurrida una cantidad de
tiempo suficiente (15 minutos a 20 horas) para permitir que termine
la reacción, se agrega bicarbonato de sodio en disolución acuosa
saturada, se realiza una extracción de la mezcla, y se lavan, secan,
filtran, concentran y purifican los extractos combinados para
producir un compuesto de fórmula Ia.
Para grupos donde R_{6} es
el grupo \alpha-hidroxi se
reduce del compuesto Ia anterior con un agente reductor, tal como
trietilsilano, seguido del agregado de un ácido como el ácido
trifluoracético. Después de transcurrido un tiempo suficiente (15
minutos a 24 horas), se detiene la reacción como por ejemplo con el
uso de una mezcla de acetato etílico/bicarbonato de sodio en
disolución acuosa saturada. Se extrae la mezcla, y se lavan, secan,
filtran, concentran y purifican las materias orgánicas para
producir un compuesto de fórmula Ib. Métodos alternativos para
llevar a cabo esto incluyen (a) trialquilsilano con un ácido de
Lewis como Et_{2}AlCl_{2} o BF_{3}Et_{2}O (trifluoruro de
boro-eterato); (b) hidrogenolisis (H_{2}) con un
catalizador como paladio o carbono. Además, es efectivo el
diclorodimetilsilano seguido de yoduro de
sodio.
Se preparan otros compuestos reemplazando los
grupos hidroxi R_{1} y R_{2} por un grupo de fórmula
-O-CO-(alquilo de C_{1}-C_{6}),
-O-CO-Ar en el cual Ar es
opcionalmente sustituido por fenilo, o
-O-SO_{2}-(alquilo de
C_{4}-C_{6}) por procedimientos bien conocidos.
Ver, por ejemplo, la Patente de EE.UU. nº 4.358.593,
supra.
Por ejemplo, cuando se desea un grupo
-O-CO (alquilo de C_{1}-C_{6}) o
-O-CO-Ar, el compuesto dihidroxi de
fórmula I se hace reaccionar con un agente tal como cloruro,
bromuro, cianuro de acilo o azida, o con un anhídrido adecuado o
mezclado con anhídrido. Las reacciones se realizaron
convenientemente en un disolvente básico como piridina, lutidina,
quinolina o isoquinolina, o en un disolvente amina terciaria tal
como trietilamina, tributilamina, metilpiperidina y otros
similares. La reacción también se puede realizar en un disolvente
inerte como el acetato etílico, dimetilformamida, dimetilsulfoxida,
dioxano, dimetoxietano, acetonitrilo, acetona, metil etil cetona y
otros similares, a los que se ha agregado al menos un equivalente
de un antioxidante ácido, tal como una amina terciaria. Si se lo
desea, se puede usar un catalizador de acilación tal como la
4-dimetilaminopiridina o la
4-pirrolidino-piridina. Ver,
por ejemplo, Haslam, et al., Tetrahedron, 36:
2409-2433 (1980).
Las reacciones de acilación que proporcionan los
grupos R_{1} y R_{2} antes mencionados se realizan a
temperaturas moderadas dentro del intervalo de aproximadamente
-25ºC a aproximadamente 100ºC, con frecuencia en una atmósfera
inerte como el gas nitrógeno. Sin embargo, la temperatura ambiente
normalmente es adecuada para que se produzca la reacción.
Este tipo de acilaciones del grupo hidroxi
también se pueden realizar por reacciones catalizadas por ácidos
carboxílicos adecuados en disolventes orgánicos inertes o al calor.
Se usan catalizadores ácidos tales como el ácido sulfúrico, el ácido
polifosfórico, el ácido metansulfónico y otros similares.
Los grupos R_{1} y R_{2} antes mencionados
también se pueden proporcionar formando un éster activo del ácido
apropiado, tales como los ésteres formados por reactivos conocidos
tales como la diciclohexilcarbodiimida, los acilimidazoles, los
nitrofenoles, el pentaclorofenol, la
N-hidroxisuccinimida y el hidroxibenzotriazol.
Ver, por ejemplo, Bull. Chem. Soc. Japan, 38:
1979 (1965) y Chem. Ber., 788 y 2024 (1970).
Cada una de las técnicas antes mencionadas que
proporciona -O-CO- (alquilo de
C_{1}-C_{6}) y grupos
-O-CO-Ar se realizan en disolventes
según se comenta más arriba. Desde luego, esas técnicas que no
producen un producto ácido durante el transcurso de la reacción, no
necesitan el uso de un antioxidante ácido en la mezcla reactiva.
Cuando se desea un compuesto de fórmula I en el
que R_{1} y R_{2} sea -O-SO_{2}-(alquilo de
C_{4}-C_{6}), el compuesto dihidroxi de fórmula
I se hace reaccionar con, por ejemplo, un derivado del ácido
sulfónico adecuado tal como el cloruro de sulfonilo, bromuro o sal
amonio de sulfonilo, como explican King y Monoir en J. Am. Chem.
Soc., 97: 2566-2567 (1975). El compuesto
dihidroxi también puede reaccionar con el anhídrido sulfónico
adecuado. Tales reacciones se realizan en condiciones como las que
se explican más arriba en el comentario de la reacción con haluros
de ácidos y similares.
Los compuestos de fórmula I se pueden preparar de
forma tal que R_{1} y R_{2} tengan diferentes grupos
protectores biológicos o, preferiblemente, se preparan de forma tal
que R_{1} y R_{2} lleven cada uno el mismo grupo biológico
protector. Los grupos biológicos protectores incluyen –OCH_{3},
-O-CO-C (CH_{3})_{3},
-O-CO-C_{6}H_{5} y
-O-SO_{2}-
(CH_{2})_{3}-CH_{3}.
Aunque en los métodos de la presente invención se
puede usar la forma de base libre de los compuestos de fórmula I,
se prefiere preparar y usar una forma salina farmacéuticamente
aceptable. De modo que, los compuestos usados en los métodos de
esta invención forman principalmente sales de adición ácida
farmacéuticamente aceptables con una gran variedad de ácidos
orgánicos e inorgánicos, e incluyen las sales fisiológicamente
aceptables que pueden usarse con frecuencia en la química
farmacéutica. Tales sales también son parte de la presente
invención. Los ácidos orgánicos típicos usados para formar esas
sales incluyen el ácido clorhídrico, bromhídrico, yodhídrico,
nítrico, sulfúrico, fosfórico e hipofosfórico.
También pueden usarse las sales derivadas de los
ácidos orgánicos tales como los ácidos alifáticos monocarboxílico y
dicarboxílico, los ácidos alcanoicos
fenil-sustituidos, los ácidos hidroxialcanoico e
hidroxialcanodioico, ácidos aromáticos, ácidos sulfónicos
alifáticos y aromáticos. De modo que esas sales farmacéuticamente
aceptables incluyen acetato, fenilacetato, trifluoroacetato,
acrilato, ascorbato, benzoato, clorobenzoato, dinitrobenzoato,
hidroxibenzoato, metoxibenzoato, metilbenzoato,
o-acetoxibenzoato,
naftalen-2-benzoato, bromuro,
isobutirato, fenilbutirato,
\beta-hidroxibutirato,
butin-1-4-dioato,
hexin-1,4-dioato, caprato,
caprilato, cloruro, cinamato, citrato, formato, fumarato,
glucolato, heptanoato, hipurato, lactato, malato, maleato,
hidroximaleato, malonato, mandelato, mesilato, nicotinato,
isonicotinato, nitrato, oxalato, ftalato, tereftalato, fosfato,
monohidrogenofosfato, dihidrogenofosfato, metafosfato, pirofosfato,
propiolato, propionato, fenilpropionato, salicilato, sebacato,
succinato, suberato, sulfato, bisulfato, pirosulfato, sulfito,
bisulfito, sulfonato, bencenosulfonato,
p-bromofenilsulfonato, clorobencenosulfonato,
etanosulfonato, 2-hidroxietanosulfonato,
metanosulfonato,
naftalen-1-sulfonato,
naftalen-2-sulfonato,
p-toluenosulfonato, xilenosulfonato y tartarato.
Una sal preferida es la sal clorhidrato.
Las sales de adición ácida farmacéuticamente
aceptables se forman típicamente haciendo reaccionar un compuesto
de fórmula I con una cantidad ácido equimolar o en exceso. Los
reactivos se combinan generalmente en un disolvente mutuo tal como
el éter dietílico o el acetato etílico. La sal normalmente precipita
de la solución en el plazo de una hora a 10 días y se puede aislar
por filtración o se puede eliminar el disolvente por los métodos
convencionales.
Por lo general, las sales farmacéuticamente
aceptables tienen mejores características de solubilidad que el
compuesto del cual derivan, de modo que con frecuencia son más
fáciles de tratar para las formulaciones como líquidos o
emulsiones.
Los ejemplos siguientes se presentan para
ilustrar más la preparación de los compuestos de la presente
invención. No se supone que la invención esté limitada en su
aplicación debido a cualquiera de los siguientes ejemplos.
RMN de ^{1}H y RMN de ^{13}C se miden como se
indicó a 300 y 75 respectivamente. Los cambios químicos del RMN de
^{1}H se notifican como valores \delta en ppm relativos al
disolvente RMN empleado. Las constantes de acoplamiento RMN de
^{1}H se notifican en Hertz (Hz) y se refieren a las
multiplicidades aparentes. La multiplicidad se indica de la
siguiente forma: s (simple); \delta (doble, t (triple), q
(cuádruple); m (múltiple); comp (compleja), br (amplia) y app
(aparente). La cromatografía en columna se realiza según el método
de Still (Still, W. C.; Kahn, M.; Mitra, A. J. Org. Chem.
1987, 43, 2923) a no ser que se indique otra cosa con gel de sílice
EM Science (malla 230-400 ASTM). Se realiza
cromatografía radial en un Chromatotron usando placas de 1, 2 ó 4
mm. Todas las reacciones sensibles al aire o a la humedad se las
deja migrar bajo una atmósfera de argón o nitrógeno en equipo de
vidrio rigurosamente seco. En todos los casos las concentraciones
se realizan a presión reducida con un evaporador rotativo.
Se agrega
N,N-dimetilaminopiridina a una solución de
raloxifeno (1,00 g; 1,96 mmol) agitando en THF (20 ml) a temperatura
ambiente se agrega a N,N-dimetilaminopiridina (1,00
g; 8,2 mmol), seguida de t-butildimetilsililcloruro (0,90 g;
6 mmol). Después de 12 horas, se diluye la reacción con agua y se
extrae con cloroformo. Los extractos orgánicos combinados se secan
(sulfato de sodio) y se concentran. Se recoge el aceite en etil
acetato y se filtra el precipitado resultante. Se concentra el
filtrado y se purifica por cromatografía rápida (flash) (gel de
sílice, acetato elílico) para dar 1,1 g (80%) del producto deseado
como un aceite amarillo espeso: RMN de ^{1}H (300 MHz,
CDCl_{3}) \delta 7,76 (d, J = 8,9 Hz, 2H); 7,68 (d; 9,0 Hz; 1H);
7,22-7,29 (m, 3H); 6,88 (dd, J = 8,9; 3,1 Hz, 1H);
6,72 (d, J = 9,1 Hz, 2H); 6,63 (d, J = 9,1 Hz, 2H); 4,10 (br, 2H);
2,79 (br, 2H); 2,54 (br, 4H); 1,62 (br; 4H); 1,25 (br; 2H); 1,01
(s, 9H); 0,93 (s, 9H); 0,22 (s, 6H); 0,06 (s, 6H); MS (FD) 701
(M+); IR (CHCl_{3}), 2934, 1642, 1599, 1259 cm^{-1}; AE
teórico/encontrado C (68,43/68,53), H (7,90/7,92), N
(2,00/2,23).
A una solución del producto de la Preparación 1,
(2,04 g; 2,91 mmol), agitando a -78ºC en THF (10 ml), se agrega MeLi
(4,16 ml de una solución de 1,4 M en éter dietílico; 5,82 mmol) gota
a gota. Después de 15 minutos se detiene la reacción con un exceso
de disolución acuosa saturada de bicarbonato de sodio y se extrae
con acetato etílico. Los extractos orgánicos combinados se lavan
con solución saturada (salmuera), se seca (MgSO_{4}), se filtra y
se concentra. Se purifica el material resultante por cromatografía
radial (gel de sílice, 4 mm; 2,5:2,5:0,1:0,1 de hexanos:acetato
etílico:trietilamina:MeOH) para dar 1,70 g (81%) del material
deseado como una espuma blanca: RMN de ^{1}H (300 MHz,
CDCl_{3}) \delta 7,31-7,36 (m, 5H), 7,17 (d, J
=2,9 Hz, 1H), 6,81 (d, J = 8,9 Hz, 4H), 6,84 (dd, J = 9,0, 2,9 Hz,
1H, 4,12 (br, 2H), 2,81 (br, 2H), 2,59 (br, 4H), 1,65 (s, 3H), 1,63
(br, 4H), 1,45 (br, 2H), 0,99 (s, 9H), 0,97 (s, 9H), 0,21 (s, 6H),
0,19 (s, 6H), MS (FD), 0,19 (s, 6H), MS (FD) 718 (M+); IR
(CHCl_{3}), 2934, 1606, 1467, 1525 cm^{-1}; AE
teórico/encontrado C (68,57/68,93), H (8,28/8,26), N
(1,95/2,10).
A una solución del producto del Ejemplo 1 (0,50
g; 0,69 mmol), agitando en THF (5 ml) a 0ºC, se agrega fluoruro de
tetrabutilamonio (1,74 ml de una solución de 1,0 M en THF; 1,74
mmol). Después de 15 minutos, se agrega bicarbonato de sodio en
disolución acuosa saturada y se extrae la mezcla resultante con
acetato etílico. Los extractos orgánicos combinados se lavan con
solución saturada (salmuera), se secan con (MgSO_{4}), se filtran
y se concentran. El material resultante se purifica por
cromatografía radial (gel de sílice, 2 mm; 2,5:2,5:0,1:0,1
hexanos:acetato etílico:MeOH:trietilamina) para dar un rendimiento
cuantitativo del producto deseado como un sólido blanco del producto
deseado como un aceite amarillo espeso: RMN de ^{1}H (300 MHz,
CDCl_{3}) \delta 9,81 (s, 1H), 9,40 (s, 1H), 7,53 (d, J = 9,2
Hz, 1H), 7,24 (app t, J = 9,0 Hz, 4H), 7,03 (d, J = 2,8 Hz, 1H),
6,80 superposición d, J = 9,1 Hz, 6,61 (dd, J = 8,9, 2,9 Hz, 1H),
5,72 (s, 1H), 3,98 (tm J = 4,0 Hz, 2H), 2,61 (br, 2H), 2,41 (br,
4H), 1,24-1,55 (series de m, 9H); MS (FD) 490
(M+).
A una solución del producto del Ejemplo 1, (1,77
g; 2,46 mmol) agitando en CH_{2}Cl_{2} (50 ml) a 0ºC se agrega
trietilsilano (2,36 ml; 14,8 mmol) seguido de ácido trifluoroacético
(4,72 ml). Después de 15 minutos se detiene la reacción vertiendo
con cuidado la mezcla reactiva en una mezcla de acetato
etílico/bicarbonato de sodio en disolución acuosa saturada. La
mezcla bifásica se extrae con acetato etílico y los extractos
orgánicos combinados se lavan con solución saturada (salmuera), se
secan (MgSO_{4}), se filtran y se concentran. El material
resultante se purifica por cromatografía radial (gel de sílice, 2
mm; 2,5:2,5:0,1:0,1 hexanos:acetato etílico:trietilamina:MeOH) para
dar 1,5 g (87%) del producto deseado como una espuma blanca: RMN de
^{1}H (300 MHz, CDCl_{3}) \delta 7, 7,36 (d, J = 9,0 Hz, 2H),
7,17-7,21 (compleja, 4H), 6,86 (d, J = 8,9 Hz, 2H),
6,80 (s, J = 9,0 Hz, 2H), 6,68 (dd, J = 9,0, 2,8 Hz, 1H), 4,57 (q, J
= 4,0 Hz, 1H), 4,17 (br, 2H), 2,84 (br, 2H), 2,62 (br, 4H),
1,62-1,74 (compleja, 7H), 1,49 (br, 2H), 0,99 (s,
9H), 0,97 (s, 9H), 0,22 (s, 6H), 0,20 (s, 6H), MS (FD) 703 (M+); IR
(CHCl_{3}), 2935, 1605, 1468, 1265 cm^{-1}; AE
teórico/encontrado C (70,13/69,78); H (8,47/8,62), N
(2,00/2,11).
A una solución del producto del Ejemplo 3 (0,50
g; 0,71 mmol), agitando en THF (5 ml) a 0ºC, se agrega fluoruro de
tetrabulilamonio (1,78 ml de una solución 1,0 M en THF; 1,78 mmol).
Después de 15 minutos se detiene la reacción con el agregado de
bicarbonato de sodio en disolución acuosa saturada. La mezcla
resultante se extrae con acetato etílico y posteriormente los
extractos orgánicos combinados se lavan con solución saturada
(salmuera), se secan (MgSO_{4}), se filtran y se concentran. El
material resultante se purifica por cromatografía radial (gel de
sílice, 2 mm; 2,5:2,5:0,75:0,25 hexanos:acetato
etílico:MeOH:trietilamina) para dar 314 mg (93%) del producto
deseado como un sólido blanco: RMN de ^{1}H (300 MHz, CDCl_{3})
\delta 9,71 (s, 1H), 9,50 (s, 1H), 7,30 (d, J = 9,1; 2H),
7,08-7,17 (compleja, 4H), 6,81-6,88
(complejo, 4H), 6,63 (dd, J = 9,1, 2,8 Hz, 1H), 4,41 (q, J = 4,2
Hz, 1H), 3,98 (t, J = 3,8 Hz, 2H), 2,60 (br, 2H), 2,41 (br, 4H),
1,81 (d, J = 4,0 Hz, 3H), 1,35-1,51 (series de br m,
6H); MS (FD) 474 (M+).
A una solución del producto de la Preparación 1
(1,00 g; 1,42 mmol) se agrega PhLi (1,6 ml de una solución 1,8 M en
THF; 2,84 mmol) agitando a -78ºC. Después de 15 minutos se agrega de
bicarbonato de sodio en disolución acuosa saturada y la mezcla
resultante se extrae con acetato etílico. Los extractos orgánicos
combinados se lavan posteriormente con solución saturada
(salmuera), se secan (MgSO_{4}), se filtran y se concentran. La
purificación del material bruto resultante por cromatografía radial
(4 mm, gel de sílice, 2,5:2,5:0,01:0,005 acetato
etílico:hexanos:trietilamina:MeOH) da 0,81 g (73%) del producto
deseado como una espuma blanca: RMN de ^{1}H (300 MHz,
CDCl_{3}) \delta 7,11-7,22 (compleja, 10H), 6,93
(d, J = 9,1 Hz, 2H), 6,57-6,78 (series de m, 4H),
4,18 (br, 2H), 2,90 (br, 2H), 2,61 (br, 4H),
1,40-1,80 (br, 6H), 0,98 (s, 9H), 0,97 (s, 9H),
0,19 (s, 6H), 0,16 (s, 6H); MS (FD) 781 (M+); AE teórico/encontrado
C (70,81/71,05), H (7,88/7,94), N (1,80/1,97).
A una solución del producto del Ejemplo 7 (0,50
g; 0,64 mmol) se agrega fluoruro de tetrabutilamonio (1,60 ml de una
solución 1,0 M en THF; 1,60 mmol) agitando en THF (5 ml) a -0ºC.
Después de 15 minutos se agrega de bicarbonato de sodio en
disolución acuosa saturada y la mezcla resultante se extrae con
acetato etílico. Los extractos orgánicos combinados se lavan
posteriormente con solución saturada (salmuera), se secan
(MgSO_{4}), se filtran y se concentran. El material resultante se
purifica por cromatografía radial (gel de sílice, 2 mm,
2,5:2,5:0,1:0,1) hexanos:acetato etílico:MeOH:trietilamina) para
dar 323 mg (91%) del producto deseado como un sólido blanco: RMN de
^{1}H (300 MHz, CDCl_{3}) \delta 9,35 (br, 2H), 7,38 (d, J =
9,0 Hz, 1H), 7,00-7,20 (compleja, 7H), 6,86 (d, J =
8,9 Hz, 2H), 6,58 (compleja, 3H), 6,40 (s, 1H), 6,31 (d, J = 8,9
Hz, 2H), 3,91 (t, J = 3,9 Hz, 2H), 2,60 (br, 2H), 2,41 (br, 4H),
1,38-1,51 (series de m, 6H); MS (FD) 552 (M+); AE
teórico/encontrado C (74,02/73,79), H (6,03/6,26), N
(2,54/2,60).
En los ejemplos que ilustran los métodos, se usó
un modelo posmenopáusico en el que se determinaron los efectos de
los diferentes tratamientos sobre los lípidos en circulación.
Se obtuvieron ratas Sprague Dawley de setenta y
cinco días (intervalo de peso de 200 a 225 mg) de Charles River
Laboratories (Portage, Michigan, EE.UU.). Los animales se
sometieron a ovariectomía bilateral (OVX) o a un procedimiento
quirúrgico Sham en Charles River Laboratories, y luego se enviaron
una semana después. Al llegar, se albergaron en jaulas de metal
colgantes en grupos de 3 ó 4 por jaula y se les dio un acceso ad
libitum al alimento (contenido de calcio aproximadamente 0,5%) y
agua durante una semana. La temperatura del ambiente se mantuvo a
22,2ºC \pm 1,7ºC, con una humedad relativa mínima del 40%. El
fotoperiodo de la habitación fue de 12 horas de luz y 12 horas de
oscuridad.
Después de un periodo de aclimatación de una
semana (por tanto, dos semanas post-OVX) se inicia
la dosificación a diario con el compuesto de prueba. A no ser que se
especifique otra cosa, se administra el
17\alpha-etinil estradiol o el compuesto de prueba
por vía oral, como una suspensión de carboximetilcelulosa al 1% o
disuelto en ciclodextrina al 20%. Se administró la dosis a los
animales a diario durante 4 días. Después del régimen de
administración, se pesaron los animales, se anestesiaron con una
mezcla de Ketamina:Xilazina (2:1; V:V) y se obtuvo una muestra de
sangre por punción cardiaca. Se sacrificaron los animales por
asfixia con CO_{2}, se extrajo el útero a través de una incisión
sobre la línea media y se determinó el peso uterino húmedo.
Se dejan coagular las muestras de sangre a
temperatura ambiente durante 2 horas y se extrae el suero después de
centrifugar durante 10 minutos a 3.000 rpm. Se determina el
colesterol sérico usando una determinación Boehringer Mannheim
Diagnostics de alta resolución. Brevemente, se oxida el colesterol a
colest-4-en-3-ona
y peróxido de hidrógeno. Luego se hace reaccionar el peróxido de
hidrógeno con fenol y 4-aminofenazona en presencia
de peroxidasa para producir colorante
p-quinonaimina, que se lee mediante
espectrofotometría a 500 nm. Se calcula la concentración de
colesterol comparando con una curva normalizada. Toda la
determinación se hace de forma automática con un Biomek Automated
Workstation.
Se mantienen los úteros a 4ºC hasta el momento
del análisis enzimático. Luego se homogeneizan los úteros en 50
volúmenes de tampón Tris 50 mM (pH - 8,0) que contiene 0,005% Triton
X-100. Después del agregado de 0,01% de peróxido de
hidrógeno y 10 mM de O-fenilendiamina
(concentraciones finales) en tampón Tris, se comprueba la
absorbancia durante un minuto a 450 nm. La presencia de eosinófilos
en el útero es una indicación de la actividad estrógena del
compuesto. La velocidad máxima en un intervalo de 15 segundos se
determina sobre la porción inicial, lineal de la curva de
reacción.
Se obtuvo 17\alpha-etinil
estradiol de Sigma Chemical Co., St. Louis, Missouri, EE.UU.
Los datos presentados en la Tabla 1 más abajo
muestran los resultados comparativos en ratas sometidas a
ovariectomía, ratas tratadas con 17\alpha-etinil
estradiol (EE_{2}; una forma de estrógeno oralmente disponible) y
ratas tratadas con ciertos compuestos de la presente invención.
Aunque EE_{2} causó una disminución del colesterol sérico cuando
se lo administró por vía oral a 0,1 mg/kg/día, también ejerció una
acción estimulante del útero de modo que el peso uterino con
EE_{2} fue sustancialmente mayor que el peso uterino de los
animales experimentales sometidos a ovariectomía. Esta respuesta
uterina al estrógeno es bien reconocida en la técnica.
Los compuestos de la invención no sólo
disminuyeron, en general, el colesterol sérico en comparación con
los animales de control sometidos a ovariectomía, sino que sólo
produjeron un aumento mínimo del peso uterino o lo disminuyeron con
la mayoría de los compuestos de la fórmula de la presente invención
probados. En comparación con los compuestos estrógenos conocidos en
la técnica, el beneficio de la reducción del colesterol sérico sin
afectar negativamente el peso uterino es muy poco frecuente y
deseable.
Como expresan los datos que se presentan más
abajo, también se evaluó la estrogenicidad examinando la respuesta
adversa de infiltración eosinófila dentro del útero. Los compuestos
de la presente invención no causaron ningún aumento del número de
eosinófilos observados en la capa estromal de las ratas sometidas a
ovariectomía, mientras que el estradiol causó un aumento sustancial,
esperado, de la infiltración eosinófila.
Los datos presentados a continuación en la Tabla
1 reflejan la respuesta de las ratas por tratamiento.
(Tabla pasa a página
siguiente)
Además de demostrar los beneficios de los
compuestos de la presente invención, en especial cuando se comparan
con el estradiol, los datos presentados más arriba demuestran
claramente que los compuestos de Fórmula I no son miméticos de
estrógenos. Además, no se observaron efectos toxicológicos
perjudiciales (supervivencia) con ningún tratamiento.
Siguiendo el Procedimiento general de
preparación, infra, se trataron las ratas diariamente
durante 35 días (6 ratas por grupo experimental) y se sacrificaron
por asfixia con dióxido de carbono el día 36. El periodo de 35 días
de duración es suficiente como para permitir una reducción máxima
de la densidad ósea, medida según se ha descrito aquí. En el
momento del sacrificio, se extrajeron los úteros, se disecaron para
separarlos de los tejidos ajenos y se expulsaron los contenidos
líquidos antes de determinar el peso húmedo para confirmar la
deficiencia de estrógeno asociada a la ovariectomía total. El peso
uterino se redujo de forma sistemática aproximadamente un 75% en
respuesta a la ovariectomía. Luego se colocaron los úteros en
formalina tamponada neutra al 10% para permitir el posterior
análisis histológico.
Se extirparon los fémures derechos y se generaron
radiografías digitalizadas que se analizaron mediante un programa
de análisis de imágenes (NIH: image analysis program) en la
metáfisis distal. El aspecto proximal de la tibia de estos animales
también se digitalizó por tomografía cuantitativa computarizada.
Conforme a los procedimientos anteriores, los
compuestos de la presente invención y el etinil estradiol
(EE_{2}) en hidroxipropil \beta-ciclodextrina al
20% se administraron a los animales experimentales por vía
oral.
En resumen, la ovariectomía de los animales
experimentales causa una reducción significativa de la densidad del
fémur en comparación con los controles intactos, tratados con el
vehículo. El etinil estradiol (EE_{2}) administrado por vía oral
evitó esta pérdida, pero con este tratamiento siempre está presente
el riesgo de la estimulación uterina.
Los compuestos de la presente invención evitan la
pérdida ósea de una forma general dependiente de la dosis. Conforme
a ello, los compuestos de la presente invención son útiles para el
tratamiento del síndrome posmenopáusico, en particular la
osteoporosis.
Células de adenocarcinoma de mama
MCF-7 (ATCC HTB 22) se mantienen en un MEM (medio
esencial mínimo, sin rojo fenol, Sigma, St. Louis, Missouri, EE.UU.)
suplementado con suero fetal bovino (FBS) al 10% (V/V),
L-glutamina (2 mM), piruvato de sodio (1 mM), HEPES
((N-[2-hidroxietil]
piperacina-N'-[2-ácido etanosulfónico] 10 mM),
aminoácidos no esenciales e insulina bovina (1 \mug/ml) (medio de
mantenimiento). Diez días antes de la prueba, se cambian las células
MCF-7 a un medio de mantenimiento suplementado con
un 10% de medio de prueba de suero fetal bovino tratado con carbón
vegetal recubierto por dextrano (DCC-FBS) en lugar
de un 10% de FBS para disminuir la reserva interna de esteroides.
Las células MCF-7 se extraen de los matraces de
mantenimiento usando medio de disociación de células (HBSS sin
Ca^{++}/Mg^{++} (sin rojo fenol) suplementado con HEPES 10 mM y
EDTA 2 mM). Se lavan las células dos veces con medio de prueba
ajustado a 80.000 células/ml. Se agregan aproximadamente 100 \mul
(8.000 células) a pocillos de microcultivo de fondo plano (Costar
3596) y se incuban a 37ºC en una incubadora humidificada y con un
5% de CO_{2} durante 48 horas para permitir la adherencia de las
células y el equilibrado después de la transferencia. Se preparan
diluciones en serie en el medio de prueba de los fármacos o del DMSO
como control de diluyente, y se transfieren 50 \mul a
microcultivos por triplicado seguidos por 50 \mul de medio de
prueba para un volumen final de 200 \mul. Después de otras 48
horas a 37ºC en incubadora humidificada y con CO_{2} al 5%, se
pulsan los microcultivos con timidina tritiada (1 \muCi/pocillo)
durante 4 horas. Se terminan los cultivos por congelación a -70ºC
durante 24 horas, seguida de descongelación y separación de los
microcultivos usando un Skatron Semiautomatic Cell Harvester. Se
cuentan las muestras por centelleo líquido usando un contador
Wallac BetaPlace \beta.
Se producen tumores de mama dependientes del
estrógeno en ratas Sprague-Dawley hembra que se
compran a Harlan Industries, Indianápolis, Indiana, EE.UU. Cuando
tienen aproximadamente 55 días de edad, las ratas reciben un aporte
único oral de 20 mg de
7,12-dimetilbenz[a]antraceno (DMBA).
Alrededor de 6 semanas después de la administración de DMBA, se
palpan las mamas a intervalos semanales para detectar la aparición
de tumores. Cuando aparecen uno o más tumores, se miden los
diámetros más largos y más cortos de cada tumor con un calibre
métrico, se registran las mediciones y se elige ese animal para
experimentación. Se intenta distribuir uniformemente los diversos
tamaños de tumores entre los grupos tratados y de control de modo
tal que los tumores de tamaño medio estén distribuidos de forma
equivalente entre los grupos experimentales. Los grupos de control
y los grupos de prueba de cada experimento contienen 5 a 9
animales.
Los compuestos de Fórmula I se administran
mediante inyecciones intraperitoneales en goma arábiga al 2% o por
vía oral. Los compuestos administrados por vía oral se disuelven o
se suspenden en 0,2 ml de aceite de maíz. Cada tratamiento
incluyendo los tratamientos de control de goma arábiga y aceite de
maíz se administran una vez al día a cada animal experimental.
Después de la medición inicial de los tumores de los animales
experimentales, se miden los tumores cada semana mediante el método
antes mencionado. El tratamiento y las mediciones a los animales
continúan durante 3 a 5 semanas, momento en el que se determinan
las áreas finales de los tumores. Para todos los grupos tratados
con el compuesto y el control, se determina el cambio del área media
del tumor.
Prueba
1
Entre 3 y 20 mujeres con fibrosis uterina reciben
el compuesto de la presente invención. La cantidad de compuesto
administrado es de 0,1 a 1.000 mg/día y el periodo de
administración es de 3 meses.
Se observan las mujeres durante el periodo de
administración y hasta 3 meses después de la interrupción de la
administración para evaluar los efectos sobre la fibrosis
uterina.
Prueba
2
Se usa el mismo procedimiento que en la Prueba 1,
excepto en que el periodo de administración es de 6 meses.
Prueba
3
Se usa el mismo procedimiento que en la Prueba 1,
excepto en que el periodo de administración es de 1 año.
Prueba
4
Se usa estimulación estrógena prolongada para
inducir leiomiomata en cobayas hembra sexualmente maduras. Se
administra la dosis de estradiol por inyección a los animales
3-5 veces por semana durante 2-4
meses o hasta que surgen los tumores. Los tratamientos que
consisten en un compuesto de la invención o el vehículo se
administran a diario durante 3-16 semanas, y luego
se sacrifican los animales, y se separa el útero y se analiza en
ellos la regresión del tumor.
Tejido de leiomiomas humanos se implanta en la
cavidad peritoneal y/o miometrio uterino de ratones atímicos
maduros, castrados, hembras. Se suministra estrógeno exógeno para
inducir el crecimiento del tejido explantado. En algunos casos, las
células de tumor separadas se incuban in vitro antes de la
implantación. El tratamiento consistente en un compuesto de la
presente invención o el vehículo se suministra por lavado gástrico
a diario durante 3-16 semanas y se extraen los
implantes y se analiza el crecimiento o la regresión. En el momento
del sacrificio, se separan los úteros para evaluar el estado del
órgano.
Prueba
5
A. Se separa tejido de tumores fibroides uterinos
humanos y se mantiene in vitro como cultivos iniciales sin
transformar. Las muestras quirúrgicas se pasan a través de una
malla o criba estéril o, alternativamente, se separan del tejido que
las rodea para producir una suspensión única de células. Se
mantienen las células en un medio que contiene un 10% de suero y
antibiótico. Se determinan las velocidades de crecimiento en
presencia y ausencia de estrógeno. Se evalúa la capacidad de las
células de producir el componente C_{3} del complemento y su
respuesta a los factores de crecimiento y hormonas de crecimiento.
Se evalúa la respuesta proliferativa de los cultivos in vitro
después del tratamiento con progestágenos, GnRH, un compuesto de la
presente invención y el vehículo. Se evalúan semanalmente los
niveles de receptores de hormona esteroide para determinar si las
características celulares importantes se mantienen in vitro.
Se utiliza tejido de 5-25 pacientes.
La actividad en al menos una de las pruebas
anteriores indica que los compuestos de la presente invención son
útiles para el tratamiento de la fibrosis uterina.
En las Pruebas 1 y 2 se pueden examinar los
efectos de 14 días y 21 días de administración de los compuestos de
la presente invención sobre el crecimiento del tejido endometrial
explantado.
Prueba
1
Doce a treinta ratas hembra adultas de la estirpe
CD se usan como animales experimentales. Se dividen en tres grupos
de igual número de animales. Se hace un seguimiento del ciclo
estrual de todos los animales. El día del proestro, se practica una
cirugía a cada una de las hembras. Se extrae el cuerno izquierdo del
útero de las hembras de todos los grupos, se divide en dos pequeños
cuadrados y se hace una sutura floja de los cuadrados en varios
lugares adyacentes al flujo sanguíneo mesentérico. Además, se
eliminan los ovarios de las hembras del Grupo 2.
El día después de la cirugía, los animales de los
Grupos 1 y 2 reciben inyecciones intraperitoneales de agua durante
14 días mientras que los animales del Grupo 3 reciben inyecciones
intraperitoneales de 1,0 mg de un compuesto de la presente invención
por kilo de peso corporal durante el mismo tiempo. Después de 14
días de tratamiento, se sacrifican todas las hembras y se extraen y
se preparan para el examen histológico los explantes de
endometrios, suprarrenales, úteros remanentes y ovarios, cuando se
aplique. Se pesan los ovarios y las suprarrenales.
Prueba
2
Doce a treinta ratas hembra adultas de la estirpe
CD se usan como animales experimentales. Se dividen en dos grupos
iguales. Se hace un seguimiento del ciclo estrual de todos los
animales. El día del proestro, se practica una cirugía a cada una
de las hembras. Se extrae el cuerno izquierdo del útero de las
hembras de todos los grupos, se divide en dos pequeños cuadrados y
se hace una sutura floja de los cuadrados en varios lugares
adyacentes al flujo sanguíneo mesentérico.
Aproximadamente 50 días después de la cirugía,
los animales asignados al Grupo 1 reciben inyecciones
intraperitoneales de agua durante 21 días mientras que los animales
del Grupo 2 reciben inyecciones intraperitoneales de 1,0 mg de un
compuesto de la presente invención por kilo de peso corporal
durante el mismo tiempo. Después de 21 días de tratamiento se
sacrificaron todas las hembras y se extraen todos los explantes
endometriales y adrenales y se pesan. Se miden los explantes como
una indicación del crecimiento. Se hace un seguimiento de los
ciclos estruales.
Prueba
3
Se usan autografías de tejido endometrial para
inducir endometriosis en ratas y/o conejos. Los animales hembra en
madurez reproductiva se someten a una ovariectomía bilateral y se
suministra estrógeno exógeno proporcionando así un nivel de hormona
constante y específico. Se implanta tejido endometrial autólogo en
el peritoneo de 5-150 animales y se proporciona
estrógeno para inducir el crecimiento de tejido explantado. Se
suministra diariamente durante 3-16 semanas un
tratamiento que consiste en un compuesto de la presente invención
por lavado gástrico, y se extraen los implantes y se mide el
crecimiento o la regresión. En el momento del sacrificio, se extrae
el cuerno del útero intacto para evaluar el estado del
endometrio.
Tejido de lesiones de endometrio humano se
implantan en el peritoneo de ratones hembra, sexualmente maduros,
castrados, atímicos. Se proporciona estrógeno exógeno para inducir
el crecimiento del tejido explantado. En algunos casos, las células
de endometrio separadas se cultivan in vitro antes de la
implantación. Se administra diariamente durante
3-16 días un tratamiento que consiste en un
compuesto de la presente invención por lavado gástrico, y se
extraen los implantes y se mide su crecimiento o regresión. En el
momento del sacrificio, se extraen los úteros para evaluar el estado
del endometrio intacto.
Prueba
4
A. Se separa tejido de las lesiones endometriales
humanas y se mantiene in vitro como cultivo inicial sin
transformar. Las muestras quirúrgicas se pasan a través de una
malla o criba estéril o, alternativamente, se separa del tejido que
las rodea para obtener una suspensión única de células. Se
mantienen las células en un medio que contiene un 10% de suero y
antibiótico. Se determinan las velocidades de crecimiento en
presencia y ausencia de estrógeno. Se evalúa la capacidad de las
células de producir el componente C_{3} del complemento y su
respuesta a los factores de crecimiento y hormonas de crecimiento.
Se evalúa la respuesta proliferativa de los cultivos in vitro
después del tratamiento con progestágenos, GnRH, un compuesto de la
presente invención y el vehículo. Se evalúan semanalmente los
niveles de receptores de hormona esteroide para determinar si las
características celulares importantes se mantienen in vitro.
Se utiliza tejido de 5-25 pacientes.
La actividad en al menos una de las pruebas
anteriores indica que los compuestos de la presente invención son
útiles para el tratamiento de la endometriosis.
Los compuestos de la presente invención tienen la
capacidad de inhibir la proliferación de las células del músculo
liso de la aorta. Esto se puede demostrar usando un cultivo de
células del músculo liso de la aorta derivadas de aorta de conejo,
determinándose la proliferación mediante la medición de la síntesis
de ADN. Se obtienen las células por un método de explante como el
descrito en Ross, J. of Cell Bio. 50: 172 (1971). Se
cultivan las células en placas de 96 pocillos para microtitulación
durante cinco días. Los cultivos confluyen y se detiene el
crecimiento. Luego se transfieren las células a un Medio de Eagle
modificado por Dulbecco (DMEM) que contiene 0,5% - 2% de plasma de
bajo contenido de plaquetas, 2 mM de L-glutamina,
100 U/ml de penicilina, 100 mg ml de estreptomicina, 1 mC/ml
^{3}H-timidina, 20 ng/ml de factor de crecimiento
derivado de plaquetas y concentraciones variables de los presentes
compuestos. La solución madre de los compuestos se prepara en
dimetil sulfóxido y luego se diluye hasta la concentración adecuada
(0,01 - 30 mM) en el medio de prueba anteriormente mencionado. Se
incuban las células a 37ºC durante 24 horas en 5% de CO_{2}/95% de
aire. Después de un periodo de 24 horas se fijan las células en
metanol. Luego se determina la incorporación de ^{3}H timidina al
ADN con contador de centelleo según se describe en Bonin, et
al., Exp. Cell Res. 181: 475-482
(1989).
La inhibición de la proliferación de las células
del músculo liso de la aorta por los compuestos de la presente
invención se demuestra, además, determinando sus efectos sobre el
crecimiento exponencial de las células. Células de músculo liso de
la aorta de conejo se siembran en placas de cultivo de tejido de 12
pocillos en DMEM que contiene un 10% de suero fetal bovino, de
L-glutamina 2 mM, 100 U/ml de penicilina y 100 mg/ml
de estreptomicina. Después de 24 horas las células están juntas y se
reemplaza el medio por DMEM que contiene un 10% de suero,
L-glutamina 2 mM, 100 U/ml de penicilina, 100 mg/ml
de estreptomicina y concentraciones deseadas de los compuestos. Se
deja crecer las células durante cuatro días. Se tratan las células
con tripsina y se determina el número de células de cada cultivo
contando mediante un contador ZM-Coulter.
La actividad en las pruebas anteriores indica que
los compuestos de la presente invención son útiles para el
tratamiento de la reestenosis.
La presente invención también proporciona un
método para aliviar el síndrome posmenopáusico en mujeres que
comprende el método antes mencionado usando compuestos de Fórmula I
y comprende, además, la administración a una mujer de una cantidad
eficaz de estrógeno o progestágeno. Estos tratamientos son
particularmente útiles para tratar la osteoporosis y disminuir el
nivel de colesterol sérico porque la paciente recibe los beneficios
de cada agente farmacéutico mientras que los compuestos de la
presente invención inhiben los efectos secundarios indeseables del
estrógeno y el progestágeno. La actividad de esta combinación de
tratamientos en cualquiera de las pruebas posmenopáusicas,
infra, indica que los tratamientos combinados son útiles
para aliviar los síntomas posmenopáusicos en mujeres.
Hay varias formas de estrógeno y progestágeno
comercialmente disponibles. Los agentes basados en estrógeno
incluyen, por ejemplo, estrógeno etinilo (0,01 - 0,03 mg/día),
mestranol (0,05 - 0,15 mg/día) y hormonas estrógenas conjugadas como
Premarin® (Wyeth-Ayerst; 0,3 - 2,5 mg/día). Los
agentes basados en progestágeno incluyen, por ejemplo,
medroxiprogesterona como Provera® (Upjohn; 2,5 - 10 mg/día),
noretilnodrel (1,0 - 10,0 mg/día) y noretindrona (0,5 - 2,0 mg/día).
Un compuesto preferido basado en estrógeno es Premarin, y el
noretilnodrel y la noretindrona son los agentes basados en
progestágeno preferidos.
El método de administración de cada uno de los
agentes basados en estrógeno y en progestágeno es coherente con los
conocidos en la técnica. Para la mayoría de los métodos de la
presente invención, se administran los compuestos de Fórmula I
continuamente desde 1 a 3 veces por día. Sin embargo, el tratamiento
cíclico puede ser especialmente útil en el tratamiento de la
endometriosis o puede usarse brevemente durante ataques dolorosos
de la enfermedad. En el caso de reestenosis, el tratamiento puede
limitarse a intervalos cortos (1-6 meses) después
de los procedimientos médicos como la angioplastia.
Como se ha usado aquí, el término "cantidad
eficaz" significa una cantidad de un compuesto de la presente
invención que es capaz de aliviar los síntomas de los diversos
estados patológicos aquí descritos. La dosis específica de un
compuesto administrado conforme a la presente invención será, desde
luego, determinada por las circunstancias particulares que rodean
al caso, por ejemplo, el compuesto administrado, la vía de
administración, el estado del paciente y la enfermedad a tratar. Una
dosis diaria típica contendrá un nivel de dosis atóxico de
alrededor de 5 mg a alrededor de 600 mg/día de un compuesto de la
presente invención. Las dosis diarias preferidas serán de alrededor
de 15 mg a alrededor de 80 mg/día.
Los compuestos de la presente invención se pueden
administrar por varias vías, incluyendo la oral, la rectal, la
transdérmica, la subcutánea, la intravenosa, la intramuscular y la
intranasal. Estos compuestos se formulan preferiblemente antes de la
administración, y la elección del compuesto a usar será decidida
por el médico a cargo. Por tanto, otro aspecto de la presente
invención es una composición farmacéutica de un compuesto de
Fórmula I, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, que
contenga opcionalmente una cantidad eficaz de estrógeno o
progestágeno, y un vehículo, diluyente o excipiente
farmacéuticamente aceptable.
El total de las sustancias activas de este tipo
de formulaciones comprende desde 0,1% a 99,9% en peso de la
formulación. Por "farmacéuticamente aceptable" se quiere decir
que el vehículo, diluyente, excipientes y sal deben ser compatibles
con los otros componentes de la formulación y no ser nocivos para
el receptor de los mismos.
Las formulaciones farmacéuticas de la presente
invención se pueden preparar por los procedimientos conocidos en la
técnica usando los componentes conocidos y fácilmente disponibles.
Por ejemplo, los compuestos de Fórmula I, con o sin un compuesto
estrógeno o progestágeno, se pueden formular con los excipientes,
diluyentes o vehículos comunes, y en forma de comprimidos,
cápsulas, suspensiones, polvos y otras formas similares. Ejemplos
de excipientes, diluyentes y vehículos que son adecuados para este
tipo de formulaciones incluyen los siguientes: rellenos y
diluyentes como el almidón, los azúcares, el manitol y los
derivados de sílice; agentes aglutinantes como la
carboximetilcelulosa y otros derivados de la celulosa, los
alginatos, la gelatina y la polivinilpirrolidona; agentes
humectantes como el glicerol, agentes desagregantes como el
carbonato de calcio y el bicarbonato de sodio; agentes para
retrasar la disolución como la parafina; aceleradores de la
resorción como los compuestos de amonio cuaternario; agentes
tensioactivos como el alcohol cetílico, monoestearato de glicerol;
vehículos de adsorción tales como el caolín y la bentonita y
lubricantes como el talco, el estearato de calcio y magnesio y
polietilenglicoles sólidos.
Los compuestos también se pueden formular como
elixires o soluciones para la administración oral conveniente o
como soluciones adecuadas para la administración parenteral
adecuada, por ejemplo, por las vías intramuscular, subcutánea o
intravenosa. Además, los compuestos son bien adecuados para la
formulación como formas farmacéuticas de liberación prolongada y
otras similares. Las formulaciones se pueden constituir de forma
tal que la liberación de la sustancia activa se realice sólo o
preferiblemente en un lugar fisiológico particular, posiblemente
durante un lapso de tiempo. Los recubrimientos, envolturas y
matrices protectoras se pueden hacer, por ejemplo, con sustancias
poliméricas o ceras.
Los compuestos de fórmula I, solos o en
combinación con un agente farmacéutico de la presente invención,
por lo general se administrarán mediante una formulación
conveniente. Los siguientes ejemplos de formulación sólo son
ilustrativos y no pretenden limitar la aplicación de la presente
invención.
En las formulaciones siguientes, "sustancia
activa" significa un compuesto de fórmula I o una sal o solvato
del mismo.
Formulación
1
Las cápsulas de gelatina dura se preparan usando
lo siguiente:
\newpage
| Ingrediente | Cantidad (mg/cápsula) |
| Ingrediente activo | 0,1 - 1.000 |
| Almidón, NF | 0 - 650 |
| Polvo fluido de almidón | 0 - 650 |
| Fluido de silicona 350 centistoques | 0 - 15 |
La formulación anterior se puede cambiar para
cumplir con las variaciones razonables que se proporcionen.
Una formulación en comprimidos se prepara usando
los siguientes ingredientes:
Formulación
2
| Ingrediente | Cantidad (mg/comprimido) |
| Ingrediente activo | 2,5 - 1.000 |
| Celulosa microcristalina | 200 - 650 |
| Dióxido de silicona, de combustión | 10 - 650 |
| Ácido esteárico | 5 - 15 |
Los componentes de mezclan y se comprimen para
formar los comprimidos.
Como alternativa, es posible hacer comprimidos
que contengan 2,5 - 1.000 mg de sustancia activa de la siguiente
forma:
Formulación
3
| Ingrediente | Cantidad (mg/comprimido) |
| Ingrediente activo | 25 - 1.000 |
| Almidón | 45 |
| Celulosa microcristalina | 35 |
| Polivinilpirrolidona (como solución al 10% en agua) | 4 |
| Carboximetilcelulosa sódica | 4,5 |
| Estearato de magnesio | 0,5 |
| Talco | 1 |
La sustancia activa, el almidón y la celulosa se
pasan a través de una criba de malla nº 45 de EE.UU. y se mezclan
minuciosamente. La solución de polivinilpirrolidona se mezcla con
los polvos resultantes que luego se pasan a través de una criba de
malla nº 14 de EE.UU. Los gránulos así producidos se secan a
50-60ºC y se pasan a través de una criba de malla
nº 18 de EE.UU. El almidón carboximetilo sódico, el estearato de
magnesio y el talco, se pasan previamente por una criba nº 60 de
EE.UU., luego se agregan a los gránulos que, después de mezclar, se
comprimen sobre una máquina para hacer comprimidos para producir
los comprimidos.
Suspensiones que contienen 0,1 - 1.000 mg de
medicamento por cada 5 ml de dosis se hacen de la siguiente
forma:
Formulación
4
| Ingrediente | Cantidad (mg/5 ml) |
| Ingrediente activo | 0,1 - 1.000 mg |
| Carboximetilcelulosa sódica | 50 mg |
| Jarabe | 1,25 mg |
(Continuación)
| Ingrediente | Cantidad (mg/5 ml) |
| Solución de ácido benzoico | 0,10 ml |
| Aroma | q.v. |
| Color | q.v. |
| Agua destilada para | 5 ml |
El medicamento se pasa a través de una criba de
malla nº 45 de EE.UU. y se mezcla con carboximetilcelulosa sódica y
jarabe para formar una pasta suave. La solución de ácido benzoico,
el aroma y el color se diluyen con algo de agua y se agregan con
agitación. Luego se agrega agua suficiente como para producir el
volumen requerido.
Una solución en aerosol se prepara con los
siguientes ingredientes:
Formulación
5
| Ingrediente | Cantidad (% de peso) |
| Ingrediente activo | 0,25 |
| Etanol | 25,75 |
| Propelente 22 (Clorodifluorometano) | 70,00 |
El ingrediente activo se mezcla con etanol y se
agrega la mezcla a una parte del propelente 22, se enfría hasta los
30ºC y se transfiere a un dispositivo para rellenar. La cantidad
requerida se alimenta a un recipiente de acero inoxidable y se
diluye con el resto del propelente. Luego se ajustan las unidades
de válvula al recipiente.
Supositorios se preparan de la siguiente
forma:
Formulación
6
| Ingrediente | Cantidad (mg/supositorio) |
| Ingrediente activo | 250 |
| Glicéridos de ácidos grasos saturados | 2.000 |
La sustancia activa se pasa a través de una criba
de malla nº 60 de EE.UU. y se suspende en glicéridos de ácidos
grasos saturados previamente fundidos usando el calor mínimo
necesario. Luego se vierte la mezcla en un molde para supositorio de
2 g de capacidad nominal y se deja enfriar.
Una formulación intravenosa se prepara de la
siguiente forma:
Formulación
7
| Ingrediente | Cantidad |
| Ingrediente activo | 50 mg |
| Solución salina isotónica | 1.000 mg |
La solución de los ingredientes anteriores se
administra por vía intravenosa a un paciente a una velocidad de
aproximadamente 1 ml por minuto.
\newpage
Formulación
8
| Ingrediente | Cantidad (mg/cápsula) |
| Ingrediente activo | 50 |
| Premarin | 1 |
| Avicel pH 101 | 50 |
| Almidón 1.500 | 117,50 |
| Aceite de silicona | 2 |
| Tween 80 | 0,50 |
| Cab-O-Sil | 0,25 |
Formulación
9
| Ingrediente | Cantidad (mg/cápsula) |
| Ingrediente activo | 50 |
| Noretilnodrel | 5 |
| Avicel pH 101 | 82,50 |
| Almidón 1.500 | 90 |
| Aceite de silicona | 2 |
| Tween 80 | 0,50 |
Formulación
10
| Ingrediente | Cantidad (mg/cápsula) |
| Ingrediente activo | 50 |
| Premarin | 1 |
| Almidón de maíz NF | 50 |
| Povidona, K29-32 | 6 |
| Avicel pH 101 | 41,50 |
| Avicel pH 102 | 136,50 |
| Crospovidona XL10 | 2,50 |
| Estearato de magnesio | 0,50 |
| Cab-O-Sil | 0,50 |
Claims (10)
1. Un compuesto de Fórmula I
en el que R_{1} es H, OH, halógeno, OCO
(alquilo de C_{1}-C_{6}), OCO (arilo),
OSO_{2} (alquilo de C_{4}-C_{6}), OCOO
(alquilo de C_{1}-C_{6}), OCOO (arilo), OCONH
(alquilo de C_{1}-C_{6}) o OCON (alquilo de
C_{1}-C_{6})_{2};
R_{2} es arilo, alquilo de
C_{1}-C_{6}, cicloalquilo de
C_{3}-C_{6} o
4-ciclohexanol;
R_{3} es O (CH_{2})_{2} o O
(CH_{2})_{3};
R_{4} y R_{5} son opcionalmente
CO(CH_{2})_{2}CH_{3},
CO(CH_{2})_{3}CH_{3}, alquilo de
C_{1}-C_{6}, o R_{4} y R_{5} se combinan
para formar, con el nitrógeno al cual están unidos, piperidina,
morfolina, pirrolidina, 3-metilpirrolidina,
3,3-dimetilpirrolidina,
3,4-dimetilpirrolidina, acepina o pipecolina;
R_{6} es
y "acilo" significa fenilo opcionalmente
sustituido 1 a 3 veces con alquilo de
C_{1}-C_{6}, alcoxi de
C_{1}-C_{6}, halógeno, amino, nitro o
hidroxi;
y sales farmacéuticamente aceptables del
mismo.
2. Un compuesto de acuerdo con la Reivindicación
1 en el que R_{3} es -O(CH_{2})_{2}.
3. Un compuesto de acuerdo con la Reivindicación
2 en el que R_{4} y R_{5} forman piperidino.
4. Un compuesto de acuerdo con la Reivindicación
3 en el que R_{1} es -OH y R_{2} es
4-hidroxifenilo.
5. Un compuesto de acuerdo con la Reivindicación
4 en el que R_{6} es
6. Una composición farmacéutica que comprende un
compuesto de acuerdo con la Reivindicación 1 o una sal
farmacéuticamente aceptable del mismo y, opcionalmente, una cantidad
eficaz de estrógeno o progestágeno, en combinación con un vehículo,
diluyente o excipiente aceptable.
\newpage
7. El uso de un compuesto de cualquiera de las
Reivindicaciones 1 a 5 o de una sal farmacéuticamente aceptable del
mismo para la fabricación de un medicamento para aliviar los
síntomas del síndrome posmenopáusico.
8. El uso de un compuesto de cualquiera de las
Reivindicaciones 1 a 5, o una sal farmacéuticamente aceptable del
mismo para la fabricación de un medicamento para inhibir la
enfermedad fibroide uterina.
9. El uso de un compuesto de cualquiera de las
Reivindicaciones 1 a 5, o una sal farmacéuticamente aceptable del
mismo para la fabricación de un medicamento para inhibir la
endometriosis.
10. El uso de un compuesto de cualquiera de las
Reivindicaciones 1 a 5, o una sal farmacéuticamente aceptable del
mismo para la fabricación de un medicamento para inhibir la
proliferación de las células del músculo liso de la aorta o la
reestenosis.
Applications Claiming Priority (2)
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|---|---|---|---|
| US08/402,415 US6395755B1 (en) | 1995-03-10 | 1995-03-10 | Benzothiophene pharmaceutical compounds |
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| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| ES99202800T Expired - Lifetime ES2205702T3 (es) | 1995-03-10 | 1996-03-06 | Compuesto farmaceuticos de benzotiofeno. |
| ES96301534T Expired - Lifetime ES2148681T3 (es) | 1995-03-10 | 1996-03-06 | Compuestos de benzotiofeno de uso farmaceutico. |
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