MXPA97006738A - Nuevos compuestos farmaceuticos de benzofurano - Google Patents

Abstract

La presente invención proporciona un compuesto de la fórmula (I) en donde R1 es hidrógeno, OH, halo, OCO(alquilo de 1 a 6átomos de carbono), OCO(arilo), OSO2(alquilo de 4 a 6átomos de carbono), OCOO(alquilo de 1 a 6átomos de carbono), OCOO(arilo), OCONH(alquilo de 1 a 6átomos de carbono), o OCON(alquilo de 1 a 6átomos de carbono)2;R2 es arilo, alquilo de 1 a 6átomos de carbono, cicloalquilo de 3 a 6átomos de carbono, o 4-ciclohexanol;R3 es O(CH2)2 o O(CH2)3;R4 y R5 son opcionalmente CO(CH2)2CH3, CO(CH2)3CH3, alquilo de 1 a 6átomos de carbono, o R4 y R5 se combinan para formar, con el nitrógeno, al cual están unidos, piperidina, morfolina, pirrolidina, 3-metilpirrolidina, 3,3-dimetilpirrolidina, 3,4-dimetilpirrolidina, azepina, o pipecolina;R6 es=C=CH2,=CH(alquilo de 1 a 5átomos de carbono),=CH(alquenilo de 2 a 5átomos de carbono),=C=CH(alquilo de 1 a 5átomos de carbono),=CH(arilo),=C(OH) (alquilo de 1 a 5átomos de carbono),=C(OH) (alquenilo de 2 a 5átomos de carbono),=C(OH)arilo;y las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos. La presente invención proporciona además las composiciones farmacéuticas que contienen los compuestos de la fórmula (I), quecontienen opcionalmente estrógeno o progestina y el uso de tales compuestos solos, o en combinación con estrógeno o progestina, para aliviar los síntomas del síndrome post-menopáusico, particularmente la osteoporosis, condiciones patológicas relacionadas al sistema cardiovascular, y cáncer dependiente del estrógeno. Como se utiliza en la presente, el término"progestina"incluyen los compuestos que tienen actividad progestacional tales como, por ejemplo, progesterona, noretilnodrel, nongestrel, acetato de megestrol, noretindrona y similares. Los compuestos de la presente invención son tambiénútiles para inhibir la enfermedad fibroide uterina y la endometriosis en mujeres, y la proliferación de células del músculo liso aórtico, particularmente restenosis, en humanos.

Description

NUEVOS COMPUESTOS FARMACÉUTICOS DE BENZOFURANO DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN Esta invención se refiere a los campos de la química farmacéutica y orgánica, y proporciona nuevos compuestos de benzotiofeno los cuales son útiles para el tratamiento de diversas indicaciones médicas asociadas con el síndrome post-menopaúsico, y la enfermedad fibroide uterina endometriosis, y proliferación de células del músculo liso aórticas. "El síndrome post-menopaúsico" es un término utilizado para describir diversas condiciones patológicas, las cuales frecuentemente afectan a mujeres quienes han entrado a o terminado la metamorfosis fisiológica conocida como menopausia. Aunque son contempladas numerosas patologías por el uso de este término, tres efectos mayores del síndrome post-menopaúsico son la fuente de mayor interés médica a largo plazo: osteoporosis, efectos cardiovasculares tales como hiperlipidemia, y cáncer dependiente de estrógeno, particularmente de cáncer de mama y cáncer uterino. La osteoporosis describe un grupo de enfermedades las cuales surgen de diversas etiologías, REF: 25350 pero las cuales están caracterizadas por la pérdida neta de la masa ósea por unidad de volumen. La consecuencia de esta pérdida de masa ósea y la fractura ósea resultante, es la incapacidad del esqueleto para proporcionar soporte estructural apropiado para el cuerpo . Uno de los tipos más comunes de osteoporosis es aquel asociado con la menopausia. La mayoría de las mujeres pierden de aproximadamente 20% hasta aprox-imadamente 60% de la masa ósea en el comportamiento trabecular del hueso dentro de 3 a 6 años después del cese de la menstruación. La pérdida rápida está en general asociada con el incremento de la resorción y formación óseas. No obstante, el ciclo de resorción es más dominante y el resultado es una pérdida neta de la masa ósea. La osteoporosis es una enfermedad común y seria entre las mujeres post-menopáusicas . Existen un aproximado de 25 millones de mujeres en los Estados Unidos, solamente, quienes están afectadas con esta enfermedad. Los resultados de la osteoporosis son personalmente dañinos y también representan una gran pérdida económica debido a su cronicidad y a la necesidad para un apoyo extenso y de largo plazo (hospitalización y cuidado intenso doméstico de enfermería) de las secuelas de la enfermedad. Esto es especialmente cierto en pacientes de más edad. Además, aunque la osteoporosis no es considerada en general como una condición que amenace la vida, una proporción de mortalidad del 20% al 3,0% está relacionada con fracturas de cadera en mujeres ancianas. Un gran porcentaje de esta proporción de mortalidad puede estar directamente asociada por la osteoporosis postmenopáusica. El tejido más vulnerable en el hueso para los efectos de la osteoporosis post-menopáusica es el hueso trabecular. Ese tejido es frecuentemente denominado como hueso esponjoso o canceloso y está en particular concentrado cerca de los extremos del hueso (cerca de las articulaciones) y en las vértebras de la espina. El tejido trabecular está caracterizado por pequeñas estructuras osteoides las cuales se interconectan una con la otra, así como el tejido cortical más denso y sólido, el cual constituye la superficie exterior y el eje central del hueso. Esta red interconectada de trabéculas da soporte lateral a la estructura cortical exterior y es crítica para la resistencia biomecánica de la estructura completa. En la osteoporosis postmenopáusica, es principalmente la resorción neta y la pérdida de los trabéculos lo que conduce a la falla y fractura del hueso. A la luz de la pérdida de los trabéculos en mujeres post-menopáusicas, no es sorprendente que la mayoría de las mujeres comunes sean aquellas asociadas con los huesos que son altamente dependientes del soporte trabecular, por ejemplo, las vértebras, el cuello de ios huesos que soportan el peso, tal como el fémur y el antebrazo. Por supuesto, las fracturas de cadera, ias fracturas de cuello y fracturas por aplastamiento vertebral son marcas distintivas de la osteoporosis post-menopáusica. A la fecha, el único método en general aceptado para el tratamiento de la osteoporosis post-menopáusica es ia terapia de reemplazo de estrógeno. Aunque la terapia es en general exitosa, el cumplimiento del paciente con ia terapia es bajo, principalmente debido a que el tratamiento con estrógeno frecuentemente produce efectos colaterales indeseables. Durante todo el tiempo pre-menopáusico, la mayoría de las mujeres tienen menos incidencia de enfermedad cardiovascular que los hombres de igual edad. Después de ia menopausia, no obstante, la proporción de enfermedad cardiovascular en mujeres se incrementa ligeramente para ajustarse., a la proporción observada en hombres. Esta pérdida de protección ha sido ligada a la pérdida de estróger.o y, en particular, a la pérdida de la habiíidaa del estrcgeno para regular los niveles de lípidos séricos. La naturaleza de la habilidad del estrógeno para regular ios lípidos séricos no es bien comprendida, pero la evidencia a la fecha indica que el estrógeno puede sobreregular los receptores de los lípidos de baja densidad (LDL) en el hígado para eliminar el colesterol en exceso. Además, el estrógeno parece que genera algún efecto sobre la biosíntesis del colesterol, y otros efectos benéficos sobre la salud cardiovascular . Se ha reportado en la literatura que las mujeres post-menopáusicas que tienen terapias de reemplazo de estrógeno tienen una remisión de los niveles de lípidos séricos a concentraciones como aquellas del estado pre-menopáusico . De este modo, el estrógeno parecería ser un tratamiento razonable para esta condición. No obstante, los efectos colaterales de ia terapia de reemplazo de estrógeno no son aceptables para muchas ¡numeres, limitando de este modo el uso de esta terapia. Una terapia ideal de esta condición podría ser un agente como podría regular el nivel del lípido sérico como lo hace el estrógeno, pero que estuviera desprovisto de los efectos colaterales de los riesgos asociados con la terapia con estrógeno. La tercera patología principal asociada con el síndrome pcst-mencpáusico es el cáncer de mama dependiente del estrógeno y, a un grado menor, los cánceres dependientes del estrógeno de otros órganos, particularmente, ei útero. Aunque tales neoplasmas no están solamente limitados a una mujer post-menopáusica, éstos son más prevaientes en la población postmenopáusica más anciana. La quimioterapia actual de estos cánceres ha confiado tremendamente en el uso de compuestos antiestrógeno tales como, por ejemplo, tamoxifeno. Aunque tales agonistas-antagonistas mixtos tienen efectos benéficos en el tratamiento de estos cánceres, y los efectos colaterales estrogénicos son tolerables en situaciones agudas que amenazan la vida, éstos no son ideales. Por ejemplo, estos agentes pueden tener efectos estimuladores sobre ciertas poblaciones de células cancerosas en ei útero, debido a sus propiedades estrogénicas (agonistas) y pueden por lo tanto ser contraproducentes en ciertos casos. Una mejor terapia para el tratamiento de estos cánceres, podría ser un agente el cual es un compuesto antiestrógeno que tiene propiedades agonistas despreciables o no estrogénicas sobre los tejidos reproductores. En respuesta a la necesidad clara para nuevos agentes farmacéuticos que sean capaces de aliviar los síntomas de, entre otros, del síndrome post-menopáusico, la presente invención proporciona nuevos compuestos de benzotiofeno, ias composiciones farmacéuticas de los mismos, y les métodos para utilizar tales compuestos para el tratamiento del síndrome post-menopáusico y otras condiciones patológicas relacionadas con el estrógeno, tales como aquellas mencionadas más adelante. La fibrosis uterina (enfermedad fibroide uterina) es un problema clínico viejo e incluso actual, el cual posee una variedad de nombres, incluyendo enfermedad fibroide uterina, hipertrofia uterina, liomioma uterina, hipertrofia miometrial, fibrosis uterina, y metritis fibrótica. Esencialmente, la fibrosis uterina es una condición donde existe una deposición inapropiada de tejido fibroide sobre la pared del útero. Esta condición es una causa de dismenorrea e infertilidad en mujeres. La causa exacta de esta condición es pobremente comprendida, pero la evidencia sugiere que ésta es una respuesta inapropiada del tejido fibroide al estrógeno. Tal condición a sido producida en conejos mediante administraciones diarias de estrógeno por 3 meses. En cobayos, ía condición ha sido producida mediante la administración diaria de estrógeno per cuatro meses. Además, en ratas, el estrógeno provoca hipertrofia similar.

El tratamiento más común de la fibrosis uterina involucra procedimientos quirúrgicos costosos y algunas veces una fuente de complicaciones tales como la formación de adhesiones e infecciones abdominales. En algunos pacientes, la cirugía inicial, es únicamente un tratamiento temporal y los fibroides vuelven a surgir. En aquellos casos se realiza una histeroctomía, la cual termina efectivamente con los tejidos fibroides, pero también con la vida reproductora del paciente. También, ios antagonistas de la hormona de liberación de gonadotropina pueden ser administrados, incluso su uso es cauteloso por el hecho de que puede conducir a csteoporosis . De este modo, existe una necesidad para nuevos métoacs para el tratamiento de fibrosis uterina, y los métodos de la presente invención satisfacen esa necesidad. La endometriosis es una condición de d s enorrea severa, la cual está acompañada por dolor severo, sangrado dentro de- las masas endometriales o de la cavidad peritoneai y frecuentemente conduce a infertilidad. La causa de los síntomas de esta condición parece ser crecimientos endometriales ectópicos los cuales responden inapropiadamente al control hormonal normal y están localizados en los tejidos inapropiados . Debido a las localizaciones inapropiadas para el crecimiento endometrial, el tejido parece iniciar respuestas locales similares a la inflamación, provocando infiltración de macrófagos y una cascada de eventos que conducen al inicio de la respuesta dolorosa. La etiología exacta de esta enfermedad no es bien comprendida, y su tratamiento por terapia hormonal es diverso, pobremente definido, y marcado con numerosos efectos colaterales no deseados y quizás peligrosos. Uno de los tratamientos para esta enfermedad es el uso de estrógeno a baja dosis para suprimir el crecimiento endometrial a través de un efecto de retroalimentación negativo sobre la liberación central e ia gonadotropina y ia producción subsecuente de estrógeno por el ovario; no obstante, es algunas veces necesario utilizar estrógeno continuo para controlar los síntomas. Este uso de estrógeno puede frecuentemente conducir a efectos colaterales indeseables e incluso al riesgo de cáncer endometrial. Otro tratamiento consiste de la administración continua de ia progestina lo cual induce amenorrea y por supresión de la producción de estrógeno ovárico puede provocar regresiones de ios crecimientos endometriales. El uso de terapias con progestina crónico es frecuentemente acomoañaao cor efectos colaterales de las progestínas, nc placenteros por el sistema nervioso central (SNC), y f ecuentemente conduce a infertilidad debido a la supresión de la función ovárica. Un tercer tratamiento consiste de la administración de andrógenos débiles, los cuales son efectivos para controlar ha. endometriosis; sin embargo, éstos inducen severos efectos de masculinización. Varios de estos tratamientos para la endometriosis han estado también implicados en provocar un grado leve de pérdida ósea con terapia continua. Por lo tanto, son deseables nuevos métodos para el tratamiento de la endometriosis . La proliferación de células de músculo liso aórtico, juega un papel importante en enfermedades tales como ateroescierosis y restenosis. La restenosis vascular después de la angioplastia coronaria transluminal percutánea (PTCA) ha mostrado ser una respuesta tisular caracterizada por una fase temprana y tardía. La fase temprana ocurre horas a días después de la PTCA, y es debida a trombosis con algunos vasoespasmos, mientras que la fase tardía parece estar dominada por proliferación y migración excesiva de células del músculo liso aórtico. En esta enfermedad, la motilidad y la colonización celular incrementada por tales células musculares y los macrófagos, contribuyen significativamente a la patogénesis de la enfermedad. La proliferación y migración excesiva de las células del músculo liso aórtico, vasculares, pueden ser el mecanismo primario para la reoclusión de las arterias coronarias después de la PTCA, aterectomía, angioplastia con láser y cirugía de injerto de derivación arterial. Ver "Intimal Proliferation of Smooth Muscle Cells as an Explanation for Recurrent Coronary Artery Stenosis after Percutaneous Transluminai Coronary Angioplasty" Austin y colaboradores. Journal of the American College of Cardiology, 3: 369-375 íAgo, 1985) . La restenosis vascular permanece siendo una complicación mayor a largo plazo después de la intervención quirúrgica de arterias bloqueadas, mediante angioplastía coronaria transluminal percutánea (PTCA) , aterectomía, angioplastia por láser, y cirugía de injerto de derivación arterial. En aproximadamente 35% de los pacien.is quienes sufren de PTCA, la reoclusión ocurre dentro de tres a seis meses después del procedimiento. Las estrategias actuales para tratar la restenosis vascular incluyen la intervención mecánica por dispositivos tales como los stents o terapias farmacológicas incluyendo heparina, heparina de bajo peso molecular, cumarina, aspirina, aceite de pescado, antagonistas de calcio, esteroides, y prostaciclina.

Estas estrategias han fallado en disminuir la proporción o velocidad ae reoclusicr. y han sido inefectivas para el tratamiento y prevención de la restenosis vascular. Ver "Prevention of Restenosis after Percutaneous Trnasluminal Coronary Angioplasty: The Search for a 'Magic Bullet'". Hermans et al., American Heart Journal, 122: 171-187 (Julio de 1991). En la patogénesis de la restenosis ocurre la proliferación y migración excesiva de la célula como resu-ltado de factores de crecimiento producidos por los constituyentes celulares en la sangre y la pared de los vasos arteriales dañados, lo cual promueve la proliferación de células musculares lisas en la restenosis muscular. Los agentes que .Inhiben la proliferación y/o la migración de las células del músculo aórtico liso, son útiles en ei tratamiento y prevención de la restenosis. La presente invención proporciona el uso de compuestos como inhibidores de la proliferación de células del músculo liso aórtico y, de este modo los inhibidores de restenosis .

La presente invención se refiere a los compuestos de la fórmula I en donde R. es hidrógeno, OH, halo, OCO(alquilo de 1 a 6 átomos de carbono), OCO(arilo), OS02 (alquilo de 4 a 6 átomos de carbono), OCOO(alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, OCOO(arilo), OCONH (alquilo de 1 a 6 átomos de carbono), o CCONíaiquilo de 1 a 6 átomos de carbono) . ; Rr es arilo, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, cicioalquilo de 3 a 6 átomos de carbono, ó 4-c clohexanol ; R3 es 0(CH,) - o 0(CH2) 3; R4 y R- son opcionalmente CO(CH2) CH3, CO(CH ) ,CH3 alquilo de i a 6 átomos de carbono, o R y R5 se combinan para formar, con el nitrógeno, al cual están unidos, piperidi a, morfolina, pirrolidina, 3-metilpirroíidina, 3, 3-dimetiipirrolidina, 3,4-dimetilpirroiidina, a?epina, o pipecolina; \ R es C = CH .CH (alquilo de 1 a 5 átomos de carbono), „CH (alquenilo de 2 a 5 átomos de carbono), £. = CH(alquilo de 1 a 5 átomos de carbono), .CH;aríío;, C(0H) (alquilo de 1 a- 5 átomos de carbono) , (alquenilo de 2 a 5 átomos de carbono), JC(OH) arilo; y sales f rmacéuticamente aceptables de las mismas. La presente invención se refiere además a ias composiciones farmacéuticas que contienen compuestos de la fórmula I, que contienen opcionalmente estrógeno o progestina, y el uso de tales compuestos, solos o en combinación con estrógeno o progestina, para aliviar los síntomas dei síndrome post-menopaúsico, particularmente osteoporosis, condiciones patológicas relacionadas a la enfermedad cardiovascular y cáncer dependiente del estrógeno. Como se usa en la presente, el término "estrógeno" incluye los compuestos esteroides que tienen actividades estrogénicas tal como, por ejemplo, 17ß-estradioí, estrona, estrógeno conjugado (Premarin ®) , estrógeno de equino, 17ß-etinil-estradiol, y similares. Como se utiliza en la presente, el término "progestina" incluyen ios compuestos que tienen actividad progestacional tal como, por ejemplo, progesterona, noretilnodrei, nongestrel, acetato de megestrol, noretmdrona, y similares. Los compuestos de la presente invención también son útiles para inhibir la enfermedad fibroide uterina y endometriosis en mujeres, y la proliferación de células del músculo liso aórtico, particularmente restenosis, en humanos .

Un aspecto de la presente invención, incluye los compuestos de la fórmula I en donde R^ es hidrógeno, OH, halo, OCO (alquilo de 1 a 6 átomos de carbono), OCO (arilo), 0S02 (alquilo de 4 a 6 átomos de carbono:, OCOO(alquilo de 1 a 6 átomos ae carbono, OCOO(arilo), OCONH (alquilo de 1 a 6 átomos de carbono), o CCON(alquilo de 1 a 6 átomos de carbono) j ; R; es arilo, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, cicloalquilo de 3 a 6 átomos de carbono, o 4-ciclohexanol; R3 es 0(CH ) : o 0(CH,:) 3; R4 y R: son opcionalmente CO(CH2) CH3 CO(CH-) .CH-,, alquilo de i a 6 átomos de carbono, o R4 y R5 se combinan para formar, con el nitrógeno, al cual están unidos, piperidma, morfolina, pirrolídina, 3- tiloirrol di a, 3, 3-dimetilpirrolidina, 3,4-dimetiipirrolidina, azepina, o pipecolina; \ R es C = CH. .lquilo de 1 a 5 átomos de carbono' •JCH (alquenilo de 2 a 5 átomos de carbono), CH (alquilo de 1 a 5 átomos de carbono), .CH i ariio), CíOH) (alquilo de 1 a 5 átomos de carbono) , C(OH) (aiquenilo de 2 a 5 átomos de carbono), JC(OH) arilo; y sales farmacéuticamente aceptables de las mismas .

Los términos generales utilizados en la descripción de ios compuestos descritos en la presente, poseen sus significados usuales. Por ejemplo, "alquilo" se refiere a las cadenas alifáticas lineales o ramificadas de 2 a 6 átomos de carbono, que incluyen etilo, propiio, isopropilo, butilo, n-butilo, pentilo, isopentilo, hexilo, isohexilo, y similares. De manera similar, el término "alqueno de 2 a 6 átomos de carbono" representan los aiquenos lineales o ramificados que tienen de 2 a 6 átomos de carbono e incluyen propileno, etileno, isoprcpileno, butileno, n-butileno, hexileno, pentileno, y similares. El término "apío" incluye fenilo opcionalmente sustituido 1 a 3 veces con alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, alcoxi de 1 a 6 átomos de carbono, halo, amino, nitro, o hidroxilo.

Preparación de Benzofurano Los compuestos de la presente invención son derivados de benzofurano el cual es nombrado y numerado de acuerdo al índice de Anillos, de la Sociedad Química Norteamericana (The American Chemical Society) , como sigue En los procesos para la preparación de los compuestos de la presente invención, el material inicial es un compuesto de la fórmula II II en donde R- es un grupo protector de hidroxilo; y R., R: y R- son como se definen anteriormente; o una sal de los mismos.

Aunque la base libre de un compuesto de la fórmula II ee un material inicial aceptable, una forma salina por aaición de ácido, particularmente la sal de clorhidrato, es frecuentemente más conveniente. Los compuestos de la fórmula II son conocidos en la técnica y son preparados por medio de los métodos análogos descritos en las Patentes Norteamericanas Nos. 4,133,814; 4,380,635; y 4,418,068, cada una de las cuales se incorpora por referencia en la presente. En genera-l, un precursor de benzofurano de la fórmula III III es preparado por medio ae los procedimientos conocidos. Típicamente, los dos grupos hidroxilo son protegidos mediante grupos protectores de hidroxilo, conocidos, los cuales son capaces de resistir la acilación bajo condiciones estándares de Friedel-Crafts (formando los grupos protectores R" de los compuestos de la fórmula II) y la reducción subsecuente por un agente' reductor fuerte. Los grupos protectores de hidroxilo preferidos son alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, y metilo es especialmente preferido. Ver, por ejemplo, las Patentes Norteamericanas anteriormente incorporadas, J. . Barton, "Protective Groups in Organic Chemistry", J. G. W. McOmie ;ea.), Plenum Press, New York, NY, 1973, Capítulo 2, y T. W. and Sons, New York, NY, 1981, Capítulo 7. Siguiendo a la preparación del precursor de la fórmula III protegido, deseado, el precursor se acila, utilizando con condiciones estándares de Friedel-Crafts, con un compuesto de la fórmula IV IV en donde n, R,, R4 y R5 son como se definen anteriormente; y R es cloro, bromo, yodo, o un grupo éster de activación. La preparación de los compuestos de la fórmula IV, así como los métodos de acilación preferidos, se describen en las Patentes Norteamericanas anteriormente descritas. Cuando R4 y R5 son cada uno alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, son preferidos el metilo y el etilo. Cuando R4 y R- son combinados, se prefieren el i-piperidinilo y el 1-pirrolidinilo . De éstos, la porción pipepdino es especialmente preferida. Después de la acilación y, de este modo, la preparación de un compuesto de la fórmula II, son preparados los compuestos de la presente invención, en los cuales R- es -OH mediante la adición de un compuesto de la fórmula II o una sal del mismo, a un solvente apropiado, y luego se hace reaccionar el compuesto de la fórmula II con un agente reductor tal como, por ejemplo, hidruro de 1 ít lo-alumimo (LAH), bajo un gas inerte tal como nitrógeno. Los solventes apropiados incluyen cualquier solvente o mezcla de solvente los cuales permanecerán inertes bajo las condiciones reductoras. Los solventes apropiados incluyen, éter dietílico, dioxano y tetrahidrofurano (THF). La forma anhidra de estos solventes es preferida, y el THF anhidro es especialmente preferido. La temperatura empleada en este paso es aquella que es suficiente para efectuar una terminación de la reacción de reducción. La temperatura ambiente, en el intervalo de aproximadamente 17°C hasta aproximadamente 25°C, es en general adecuada.

La longitud de tiempo para este paso es aquel necesario para que ocurra la reacción. Típicamente, esta reacción toma desde aproximadamente 1 hasta aproximadamente 20 horas. El tiempo óptimo puede ser determinado mediante la verificación periódica del progreso de la reacción vía las técnicas cromatográficas convencionales . El carbono a (carboxilo) puede ser luego modificado a los grupos definidos por R6, cuando R6 es "" !OH) (alquilo de 1 a 5 átomos de carbono) , (OH) (aiquenilc de 2 a 5 átomos de carbono! \, ; 0H ) ap l o . Un grupo tal como RLi , RMgX u otras especies nucleofílicas del carbono, en donde R es alquilo de 1 a 5 átomos de carbono, alquenilo de 2 a 5 átomos de carbono, o arilo, es agregado a un compuesto de la fórmula II en un solvente apropiado como se define anteriormente, a una temperatura de 0 a -85°C. Después de que se proporciona una cantidad suficiente de tiempo 'de 15 minutos a 20 horas) para permitir que se complete ia reacción, se agrega oicarbonato de sodio acuoso saturado, y la mezcla se extrae, y los extractos combinados se lavan, se secan, se filtran, se concentran y se purifican para producir un compuesto de la fórmula la. Para los grupos donde Re es JCH (alquile de 1 a 5 átomos de carbono), JCH (alquenilo de 2 a 5 átomos de carbono; el grupo a-hidroxilo es reducido a p mpuesto la anterior, con un agente reductor, tai como triet ílsilano, seguido por la adición de un ácido tal como ácido trifluoroacético. Después de un tiempo suficiente (de 15 minutos a 24 horas), la reacción se apaga, tai como mediante el uso de una mezcla de acetato de etilo/bicarbonato de sodio acuoso saturado. La mezcla se extrae y los materiales orgánicos se lavan, se secan, se filtran, se concentran y se purifican, para producir un compuesto de la fórmula Ib. Los métodos alternativos para lograr ésto incluyen (a) triaiquilsilano con un ácido Lewis tal como Et2AlCl2 o BF «EtrO : tri fluoruro-eterato de boro); (b) hidrogenólisis (H con un catalizador tal como paladio sobre carbono. Además, el diclorometil-silano seguido por yoduro de sodio, es efectivo. Cuando Rf es un grupo de la fórmula JC = CH (alquilo de I a 5 átomos de carbono), un compuesto apropiado de la fórmula la en un solvente apropiado es enfriado a 10°C hasta -25°C. Después de ésto,, el hidroxilo se elimina. Tal eliminación puede ser lograda mediante la adición de una base tal como dimetilaminopipdina (DMAP) seguido por la adición de cloruro de metansulfonilo, seguido nuevamente por DMAP. Alternativamente, los alquenos deseados pueden ser preparados mediante ia reacción del compuesto carbonílico con un lluro de fosfonio, tal como R2rP- CH (alquilo de 1 a 5 átomos de carbono). Otros compuestos organofosforados tales como Ar2P(0)CHR o (RO) 2P (0) CHR, pueden ser empleados también (Boutagy y colaboradores, Chem . Revi ews, 74, 87 (1974)). Otros compuestos son preparados mediante el reemplazo de los grupos hidroxilo R- y R2 con una porción ae ía fórmula -O-C0- • lquilo de 1 a 6 átomos de carbono), -C-CO-Ar en ei cual Ar es fenilo opcionalmente sustituido, o -O-SO;- (alquilo de 4 a 6 átomos de carbono) vía los procedimientos bien conocidos. Ver, por ejemplo, la Patente Norteamericana No. 4,358,593, supra . Por ejemplo, cuando se desea un grupo -0-CO (alquilo de 1 a 6 átomos de carbono) o -O-CO-Ar, el compuesto dihidroxilo de la fórmula I se hace reaccionar con un agente tal como cloruro de acilo, bromuro, ciano, o a?ida, o con un anhídrido apropiado, o se mezcla con anhídrido. Las reacciones son convenientemente llevadas a cabo en un solvente básico tal como piridina, lutidina, quínolina o isoquinolina, o en un solvente de amina terciaria, tal como trietilamina, tributilamina, etilpiperidina, y similares. La reacción puede también llevarse a cabo en un solvente inerte tal como acetato de etilo, dime Iforma ida, dimetilsulfóxido, dioxano, dimetoxietano, acetonitrilo, acetona, metil-etil-cetona, y similares, a los cuales ha sido agregado al menos un equivalente de un depurador de ácido, tal como una amina terciaria. Si se desea, los catalizadores de acilación tales como la 4-dimetilaminopiridina o 4- pirrolidinopiridina pueden ser utilizadas. Ver, por ejemplo, Hasiam, y colaboradores, Tetrahedron, 36 : 2409- 2433 (1980) . Las reacciones de acilación que proporcionan ios grupos R y R¿ anteriormente mencionados, se llevan a cabo a temperaturas moderadas en el intervalo de aproximadamente -25°C hasta aproximadamente 100°C, f ecuentemente bajo una atmósfera inerte tal como gas nitrógeno. No obstante, la temperatura ambiente es usualmente adecuada para que corra la reacción. Tales acilaciones del grupo hidroxilo también pueden ser realizadas mediante reacciones catalizadas por ácido de los ácidos carboxílicos apropiados en solventes orgánicos inertes o calor. Se utilizan catalizadores ácidos tales como ácido sulfúrico, ácido polifosfóríco, ácido metansulfónico, y similares. Los grupos de R- y R2 anteriormente mencionados también pueden ser proporcionados mediante la formación de un éster activo del ácido apropiado, tal como los esteres formados mediante reactivos conocidos tales como diciclohexilcarbodiimida, acilimidazoles, nitrofenoles, pentaclorofenoí , N-hidroxisuccinímida, y 1- hidroxibenzotpazol . Ver, por ejemplo, Bull. Chem. Soc. Japan, 38: 1979 (1965), y Chem. Ber., 788 y 2024 (1970) . Cada una de las técnicas anteriores se proporcionan los grupos -O-CO- (alquilo de 1 a 6 átomos de carbono) y -O-CO-Ar se llevan a cabo solventes como se discute anteriormente. Estas técnicas que no producen un producto ácido en el curso de la reacción, por supuesto, no necesitan el uso de un depurador de ácido en la mezcla de reacción. Cuando un compuesto de la fórmula I es deseado, en el cual R- y R, es -0-S0¿ (alquilo de 4 a 6 átomos de carbono), el compuesto dihidroxílico de la fórmula I se hace reaccionar con, por ejemplo, un derivado del ácido sulfóníco apropiado, tal como un derivado del ácido sulfónico apropiado tal como un cloruro de sulfonílo, bromuro, o sal de amonio de sulfonilo, como se muestra por King y Mcnoir, J. A. Chem. 5oc, 97: 2566-2567 (1975). El compuesto dihidroxílico puede también hacerse reaccionar con el anhídrido sulfónico apropiado. Tales reacciones se llevan a cabo bajo condiciones tales como se explicaron anteriormente en la discusión de la reacción con los haiuros de ácido y similares. Los compuestos de la fórmula I se pueden preparar de modo que R. y R2 poseen diferentes grupos protectores biológicos o, preferentemente, se preparan de modo que R: y R2 poseen cada uno el mismo grupo protector biológico. Los grupos protectores preferidos incluyen -OCH,, -O-CO-C (CH ,) , -O-CO-C ís, y -0-S02- (CH2 ) 3- CH-, . Aunque la forma de base libre de los compuestos de la fórmula I puede ser utilizada en los métodos de la presente invención, se prefiere preparar y usar una forma de sal farmacéuticamente aceptable. De este modo, los compuestos utilizados en los métodos de esta invención, fueron principalmente sales por adición de ácido, farmacéuticamente aceptables, con una amplia variedad de saies de ácidos orgánicos e inorgánicos, e incluyen las sales fisiológicamente aceptables que son frecuentemente utilizadas en la química farmacéutica. Tales sales son también parte de esta invención. Los ácidos inorgánicos típicos, utilizados para formar tales sales incluyen, los ácidos clorhídrico, bromhídrico, yodhídrico, nítrico, sulfúrico, fosfórico, hipofosfórico, y similares. Las sales derivadas de ácidos orgánicos, tales__ como ácidos mono- y dicarboxílicos aiifáticos, ácidos alcanoicos sustituidos con fenilo, ácidos hidroxialcanoicos e hidroxialcandioicos, ácidos aromáticos, ácidos sulfónicos alifáticos y aromáticos, pueden también ser utilizados. Tales sales farmacéuticamente aceptables incluyen de este modo, las sales de acetato, fenilacetato, trifluoroacetato, acrilato, ascorbato, benzoato, cloroben?oato, dinitrobenzoato, hidrobenzoato, metoxibenzoato, metilbenzoato, o-acetoxibenzoato, naf aien-2-benzoato, bromuro, isobutirato, fenilbutirato, ß-hidroxibutirato, butin-1, 4-dioato, hexm-1 , 4-dioato, caprato, caprilato, cloruro, cinamato, citrato, formiato, fumarato, glicolato, heptanoato, hipurato, lactato, maiato, maleato, hidroximaleato, malonato, andelato, mesilato, nicotinato, isonicotinato, nitrato, oxalato, ftalato, tereftalato, fosfato, fos fato onoácido, fosfatodiácido, metafosfato, pirofosfato, propiolato, propionato, fenilpropionato, salicilato, sebacato, succinato, suberato, sulfato, bisulfato, pirosulfato, sulfit~, bisulfito, sulfonato, bencensulfonato, p-brornofenilsulfonato, clorobencensulfcnato, etansulfonato, 2-hidroxietansulfonato, metansulfonato, naftalen-1-sulfonato, nafatalen-2-sulfonato, p-toluensulfonato, xilensul fonatc, tártrato, y similares. Una sal preferida es ia sal de clorhidrato. Las sales por adición de ácido farmacéuticamente aceptables se forman típicamente mediante la reacción de un compuesto de la fórmula I con una cantidad equimolar o en exceso de ácido. Los reactivos se combinan en general en un solvente mutuo tal como éter dietílico o acetato de etilo. La sal precipita normalmente de la solución dentro de aproximadamente 1 hora a 10 días, y se puede aislar mediante filtración o el solvente puede ser depurado por medios convencionales.

Las sales f rmacéuticamente aceptables tienen en general características mejoradas de solubilidad en comparación del compuesto a partir del cual éstas son derivadas, y de éste modo son frecuentemente adaptadas para la formulación de líquidos o emulsiones. Los siguientes ejemplos son presentados para ilustrar adicionalmente la preparación de los compuestos de la presente invención. No se pretende que la invención esté limitada en alcance en virtud de cualquiera de los siguientes ejemplos. H RMN y " 'C RMN son medidos como se indica a 300 y 75 respectivamente. Los desplazamiento químicos de H RMN son reportados como valores d en ppm ccn relación ai solvente de RMN empleado. Las constancias de acopiamiento de "H RMN son reportadas en Hertzios (Hz) y se refieren a las multiplicidades aparentes. La multiplicidad es indicada como sigue: s (singulete) d (doblete), t (triplete), q (cuartete); m (multiplete) , comp (complejo), br (amplio), y ap (aparente). La cromatografía en columna se realiza de acuerdo al método de Still (Still, W. C . ; Kahn, M.; Mitra, A. J. Org. Chem. 1978, 43, 2923) a no ser que se indique de otro modo con gel de sílice EM Science (maya 230-400 de la ASTM) . La cromatografía radial es realizada en un cromatotrón utilizando placas de 1, 2 ó 4 mm. Todas las reacciones sensibles ai aire y/o a la humedad son corridas bajo una atmósfera de argón o de nitrógeno en vidriería rigu - -amenté seca. En todos los casos, las concentraciones son realizadas bajo presión reducida con un evaporador rotatorio.

Preparación 1 TBDM A una solución del compuesto (II) en donde los grupos hidroxilo no están protegidos, (1.00 g) , agitando en tetrahidrofurano (THF) (20 mi) a temperatura ambiente, se agrega N, N-dimetilaminopiridina (1.00 g) seguido por cloruro de t-butildimetilsililo (0.90 g) . Después de 12 h, la reacción se diluye con agua y se extrae con cloroforme. Los extractos orgánicos combinados se secan sulfato de sodio (Na2so ) Y se concentran. ?l aceite se recoge en acetato de etilo y ei precitado resultante se filtra. El filtrado se concentra y se purifica mediante cromatografía instantánea geí de sílice, acetato de etilo) para dar ei producto deseado.

Ej emplo 1 A una solución del producto de la preparación 1, (2.04 g) agitando a -78°C en tetrahidrofurano (10 mi) se agrega MeLi (4.16 mi de una solución 1.4 M en éter dietílico) gota a gota. Después de 15 min., la reacción se apaga con bicarbonato de sodio acuoso suturado en exceso, y se extrae con acetato de etilo. Los extractos orgánicos combinados se lavan con salmuera, se secan con sulfato de magnesio (MgS04), se filtran y se concentran. Ei material resultante se purifica mediante cromatografía radial (gel de sílice, 4 mm, 2.5:2.5:0.1:0.1 de hexanos-acetato de etilo : trietilamina ¡metanol ) para dar el producto deseado .

Ejemplo 2 A una solución del producto del Ejemplo 1, (0.50 g) agitando el tetrahidrofuano (5 mi) a 0°C se agrega fluoruro de tetrabutilamonio (1.74 mi de una solución 1.0 M en tetrahidrofurano). Después de 15 min., se agrega bicarbonato de sodio acuoso saturado y la mezcla resultante se extrae con acetato de etilo. Los extractos orgánicos combinados se lavan con salmuera, se secan con sulfato de magnesio, se filtran y se concentran. El material resultante se purifica mediante cromatografía radial (gel de sílice, 2 mm, 2.5:2.5:0.1:0.1 hexanos : acetato de etilo :metanol : trietilamina) para dar el producto deseado . Ej emplo 3 TBDM A una solución del producto del Ejemplo 1, -1.77 gj agitando en CH¿C12 (50 mi) a 0°C, se agrega trietilsilano (2.36 mi) seguido por ácido trifluoroacético (4.72 mi). Después de 15 min., la reacción se apaga mediante el vaciado cuidadoso de la mezcla de reacción dentro de una mezcla de acetato de etilo/bicarbonato de sodio acuoso saturado. La mezcla bifásica se extrae con acetato de etilo y los extractos orgánicos combinados se lavan con salmuera, se secan con sulfato de magnesio (MgS04), se filtran y se concentran.

El material resultante se purifica mediante cromatografía radial (gel de sílice, 2 mm, 2.5:2.5:0.1:0.1 hexanos : acetato de etilo : trietila ma :MeOH) para dar el producto deseado. Ijemplo 4 A una solución del producto del Ejemplo 3 (0.50 g) agitando en tetrahidrofurano (5 mi) a 0°C, se agrega fluoruro de tetrabutilamonio (1.78 mi de solución 1.0 M en THF). Después de 15 min., la reacción se apaga mediante la adición de bicarbonato de sodio acuoso saturado. La mezcla resultante se extrae con acetato de etilo y los extractos orgánicos combinados se lavan subsecuentemente con salmuera, se secan con sulfato de magnesio, se filtran y se concentran. El material resultante se purifica mediante cromatografía radial (geí de sílice, 2 mm, 2.5:2.5:0.75:0.25 hexanos : acetato de etilo :metanol : trietilamina) para dar el producto deseado.

Ej emplo 5 A una solución del producto del Ejemplo 1 i 1.70 g) agitando en cloruro de metileno (CH2C12) (20 mi) a 0°C, se agrega N, N-dimetilammopiridina (461 mg, 3.78 mmol) seguido por cloruro de metansulfonilo (0.27 mi, 3.55 mmol) . Después de 0.5 horas, se agrega una segunda porción de N, -dimetilaminopiridina (461 mg) y la solución se deja calentar a temperatura ambiente. Después de 20 horas la mezcla de reacción se vacía en salmuera y subsecuentemente se extrae con acetato de etilo. Los extractos orgánicos combinados se lavan con salmuera, se secan con sulfato de magnesio, se filtran y se concentran. La purificación mediante cromatografía radial (gel de sílice, 2 mm, 2.5:2.5:0.1:0.1 hexanos :acetato de etilo : trietilamina :metanol) dio el producto deseado.

Ejemplo 6 A una solución del producto del Ejemplo 5 (0.42 g) agitando en tetrahidrofurano (5 mi) a 0°C, se agrega fluoruro de tetrabutilamonio (1.51 mi de una solución 1.0 M, en tetrahidrofurano). Después de 15 min., se agrega bicarbonato de sodio acuoso saturado a la reacción, y la mezcla se extrae subsecuentemente con acetato de etilo. Los extractos orgánicos combinados se lavan con salmuera, se secan con sulfato de magnesio, se filtran y se concentran. Ei material resultante se purifica mediante cromatografía radial (gel de sílice, 2 m , 2.5:2.5:0.70:0.30 hexanos : acetato de <: 1.1 lo : rfif ton . : '..' i o J. larn i ría ) para dar el producto deseado . Ejemplo 7 A una solución del prod :to de la Preparación 1 (1.00 g) agitando a -78°C se agregó PhLi (1.6 mi de una solución 1.3 M) . Después de 15 min., se agregó bicarbonato de sodio acuoso saturado y la mezcla de reacción se extrajo con acetato de etilo. Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron con sulfato de magnesio, se filtraron y se concentraron. La purificación del material crudo mediante cromatografía radial (4 mm, gel de sílice, 2.5: 2.5: .01 : . CC5 acetato de etilo :hexanos : trietilamina ¡metanol) da el producto deseado .

Ejemplo 8 A una solución del producto del Ejemplo 7 (0.50 g) agitando en tetrahidrofurano (5 mi) a 0°C se agrega fluoruro de tetrabutílamonio (1.60 mi de una solución 1.0 M en tetrahidrofurano, 1.60 mmol). Después de 15 min., se agrega bicarbonato de sodio acuoso saturado y la mezcla resultante se extrae con acetato de etilo. Los extractos orgánicos combinados se lavan con salmuera, se secan con sulfato de magnesio, -:e filtran y se concentran. El material resultante se purifica mediante crom ografía radial (gel de sílice, 2 mm, 2.5:2.5:0.1:0.1 hexanos : acetato de etilo ¡metanol : triet íia ma) para dar el producto deseado .

P ocedimiento de Prueba c "i?m?entc de Preparación General En l:s ejemplos que ilustran los métodos, se utilizó un ir: délo post-menopáusico en el cual se determinaron ". :s efectos de diferentes tratamientos sobre ics líe ices circulantes. Ratas hembra Sprague Dawley de setenta y cinco días de edao intervalo de peso de 200 a 225 g) se obtuvieron c 'Loarles River Laboratories (Portage, MI). A los animales se les extirparon ios ovarios Dilateraimente OVX , o se expusieron a un procedimiento quirúrgico ie ír.a en i := Laboratorios Charles River, y luego se erc rraren después de una semana. A la llegada, éstos se alojaron en rejas colgantes metálicas en grupo de J o 4 por reja y tuvieron acceso aú l ibi t um al alimento contenido a caicio aproximadamente 0.5o) y agua por una sc-ana. La temperatura ambiente se mantuvo a 22.2° ± l.~'C :on una humedad relativa mínima del 40%. El fotorper.c:'- en ia naoitación de 12 horas de luz y 11 horas de oscuridad.

Recolección de Tejidos de Régimen de Dosificación. Después de -;na semana del período de aclimatación (por io tanto, des semanas después de ia extirpación de los ovarios i pos t-C'.'X i ) se inició la dosificación diaria con ei compuesta ie prueba. El 17a-etinil-estradiol o el compuesto de prueba, se administra oralmente, ha no ser que se establezca otro modo, como una suspensión en 1% de carboxi e ilceluiosa o disuelto en 20% de ciclcdextrir.a . Los animales se dosificaron diariamente por .4 días. lespués del régimen de dosificación, los animales se pesaron y se anestesiaron con un mezcla de cetamina: xi.s..na (2:1, V:V) y se recolectó una muestra de sangre mediante punción cardiaca. Los animales se sacrificaron luego mediante asfixia con CO¿, el útero se retiró a través de una incisión de línea media, y se determinó ei ceso húmedo del útero.

A álisis de Colesterol. Las muestras sanguíneas se cejaron coagular a temperatura ambiente por 2 horas, y el suero se obtuvo después de ia centrifugación por 10 minutos a 3000 rpm. El colesterol sérico se determinó utilizando un ensayo de colesterol de alta precisión Bte ringer Mannheim Diagnostics. Brevemente el colesterol se oxidó a colest-4-en-3-ona y peróxido de hidrógeno. ?l peróxido de hidrogeno se hizo luego reaccionar con fenol y 4-aminofenazona en presencia de peroxidasa para producir un colorante de p-quinonimina, el cual se ley espect rofotométricamente a 500 nm. La concentració.". de colesterol se calculó luego contra una curva estár.-jar. El ensayo completo se automatizó utilizando una Estación de Trabajo Automatizada Biomek.

Ensayo de Peroxidasa de ?osinófilos Uterinos (EPO). Los úteros se mantuvieron a 4°C hasta el tiempo del análisis enzimático. Los úteros se homogeneizaron luego en 50 volúmenes de amortiguador Tris de 50 mM (pH - 8.0) que contenía Tritón X-100 al 0.005%. Después de la adición de peróxido de hidrógeno al 0.01% y O- fenilendiamina 10 M (concentraciones finales) en amortiguador Tris, se verificó periódicamente el incremento en la absorbancia por un minuto a 450 nm. La presencia de eosinófilos en el útero es una indicación de ía actividad estrogénica de un compuesto. La velocidad máxima de un intervalo de 15 segundos es determinada sobre la porción lineal inicial de la curva de reacción.

Fuente dei ctmcuesto: ei i^a-etínii-estradiol se obtuvo de Sigma y r Procedimiento F- Prueba le Qsteoporcsis .

Siguiendo el procedimiento de preparación general, i f ra , las ratas se trataron diariamente por 35 días (6 ratas por grupo de tratamiento) y se sacrificaron mediante asfixia con dióxido de carbono en el día 36. El periodo de tiempo de 35 días es suficiente cara permitir ~ la reducción máxima en la densidad ó s ea , medida como se describe en la presente. A la fecha dei sacrificio, los úteros fueron extirpados, se disectarc.o cara liberarlos dei tejido extraño, y los contenidos fluidos fueron expulsados antes de la determinación del peso húmedo, con el fin de confirmar la deficiencia estrogénica asociada con la ovariectomía completa. El eso del útero es rutinariamente reducido en aproximadamente 75% en respuesta a la ovariectomía. Los úteros fueron luego colocados en formalina amortiguada neutra al 10% para permitir el análisis histológico ubsecuente. Los fémures derechos se extirparon y se sometieron a rayos X digital izados y se analizaron mediante un cr". jra a de análisis de imagen (imagen NIH) en ía metafísis distal. El aspecto proximal de las tibias de estos animales es también explorado por tomografía ccmputapzada cuantitativa. De acuerdo con los procedimientos anteriores, los compuestos Je ía presente invención y el etinil-estradiol (E.o en hidroxipropil-ß-ciclodextrina al 20%, se administra oralmente en los animales de prueba. En resumen, la ovariectomía de los animales de prueba provoran una reducción significativa en la densidad femural en comparación a los controles tratados con vehículo, intactos. El etini 1-estradiol oralmente administrado ?? ) previene esta prueba, pero el riesgo oe estimulad :.o uterina con este tratamiento, está siempre prese e. Los rompuesto= de la presente invención previenen 2a pérdida ósea de una manera general, dependiente :e la dosis. En consecuencia, los compuestos ce la presente invención, son útiles para el tratamiento del síndrome post-menopáusico, particula ment la osteoporosis.

Ensayo de cr 11 feración de MCF-7 'lulas de adenocarcmoma de mama MCF-7 HT3 son mantenidas en MEM (medio esencial mínimo, libre de rojo de fenol, Sigma, St. Louis, MO) suplementado ccn 10% de suero fetal bovino (FBS) (V/V), L-giutamma 2 mM), pir vato de sodio (1 mM) , HEPES { (N-[2-h?drox?et? i] iperazina-N' -[2-ácido etansulfónico] 10 M} aminoácidos no esenciales e insulina bovina (1 µg/ml), i edio de mantenimiento: . Diez días antes del ensayo, las células MCF-7 son cambiadas al medio de mantenimiento suplementado con 10% de suero fetal bovino depurado con carbón mineral recubierto con dextrano (DCC-FBS) (medio de ensayo) en lugar de 10% de FBS para agotar las reservas internas de esteroides. Las células de MCF-7 son retiradas de los matraces de mantenimiento utilizando medio de disociación de células (HBSS libre e Ca++/Mg** i libre de rojo de fenol) suplementado con H?PES 10 M y EDTA 2 mM) . Las células se lavan dos veces con medio de ensayo y se ajusta a 80,000 células/ml. Je agregan aproximadamente íOOµl (3,000 células) a ios pozos de microcuitivo de fondo plano (Costar 3596) y se incuban a 37°c en un incubador humidificado con 5% de CO- por 48 horas, para permitir la adherencia y el equilibrio de las células después de la transferencia. Se preparan diluciones en serie de los fármacos o DMSO cerno un control diluyente, en el medio de ens yt y 50 µl se transfieren a microcultivos por triplicad:- seguido por 50 µl de medios de ensayo para un volumen final de 200 µl. Después de un periodo adicional de 43 horas a 37°C en un incubador humidificado con 5% de CO , los microcultivos se pulsan con timidina tptiada ,1 uCi/pozo) por 4 horas. Los cultives se terminan mediante congelamiento a -70°C por 24 horas, seguido por descongelamiento y cosecha de los microcuitives utilizando un Cosechador de Células Semíautomáti oo Skatron. Las muestras se cuentan mediante cinti lación líquida utilizando un contador ß Wallac BetaPlace.

Inhibición de Tumor Mamario Inducido por DMBA Tumi res mamarios dependientes de estrógeno se proaucen en ratas hembras Spregue-Dawley, las cuales son adquiridas de Harían I dusries, Indianapol is, Indiana.

A los aproxima amente 55 dias de edad las ratas reciben una alimentación orai simple de 20 mg de 7,12- d?metilbenz[a]antraceno (DMBA). Aproximadamente 6 semanas después de la administración de DMBA, las glándulas mamarias son palpadas a intervalos semanales para la aparición de tumores. Siempre que aparezca uno o más tumores, los diámetro más largo y más corto de cada uno de ios tumores, son medidos con un calibrador métrico, las -ediciones se registran, y el animal se selecciona- para la experimentación. Se realiza un intento para distribuir uniformemente los diversos tamaños de t^m-^ es, en los grupos tratados y control, tal que los tumores de tamaño promedio sean equivalentemente distribuidos entre los grupos de prueba. Los grupos control y los grupos de prueba para cada experimento contienen de 5 a 9 animales. Los compuestos de la fórmula I se administran ya sea a través de inyecciones intraperitoneales en 2% de acacia, u oralmente. Los compuestos administrados oralmente sen ya sea disueltos o suspendidos en 0.2 mi de aceite de maíz. Cada tratamiento, incluyendo los tratamientos ctr. control con acacia y aceite de maíz, se administran una vez al día a cada animal de prueba. Después de ia medición inicial de tumor y selección de los animales ce prueba, los tumores se miden cada semana mediante el .método anteriormente mencionado. El tratamiento y las mediciones de los animales continúan por 3 a 5 semanas, tiempo en el cual se determinan las áreas finales de los tumores. Para cada tratamiento con compuesto y control, se determina el cambio en el área tu oral media .

Procedimientos de Prueba de Fibrosis Uterina Prue a 1 Entre 3 y 20 mujeres que tienen fibrosis uterina se administran con un compuesto de la presente invención. La cantidad del compuesto administrado es de 0.1 a 1000 mg/día, y ei periodo de administración es de 3 meses .

Las mujeres se observan durante el periodo de administración, y hasta 3 meses después de terminación de la administración, para efectos de la fibrosis uterina .

Prueba 2 Se ut_liza ei mismo procedimiento que en la Prueoa 1, excepto que el periodo de administración es de 6 meses.

Prueba 3 Se iliza ei mismo procedimiento que en la c tue a - t exce :: aue el ceriodc de administración es de 1 año .

Prueba 4 A. Inducción de tumores fibroides en cobayos. Se utiliza estimulación prolongada con estrógeno para inducir leiomioma en cobayos hembra sexualmente maduros. Los animales son dosificados con estradiol de 3-5 veces por semana mediante inyección por 2-4 meses c hasta ei surgimiento de tumores. Los tratamientos consistentes de un compuesto de la invención o "ehículo se administran levemente de 3-16 semanas, y luego los animales son sacrificados y los úteros se retiran y se analizan para la regresión del tumor. 3. Implante de tejido fibroide uterino humano en to es desnudos. El tejido proveniente de leiomiomas humanos es implantado e ia cavidad peritcneal y/ o miometrio uterino de ratones desnudos hembra, sexualmente maduros, castrados. Ei estrógeno exógeno es suministrado para inducir el crecimiento del tejido explantado. En algunos casos, ia= células tumorales cosechadas son cultivadas i r. oí tro antes del implante. El tratamiento consistente ce un compuesto de la presente invención o vehículo es suministrado mediante ei lavado gástrico en una base diaria de 3-6 semanas, y los implantes se retiran y se miden para el crecimiento o la regresión. Al tiempo del sacrificio, los úteros se cosechan para evaluar el estado del órgano.

Prueba 5 A. El te i no proveniente de tumores fibroides uterinos n manos es cosechado y mantenido, in vi tro, como cultivos no transformados primarios. Los especímenes quirúrgicos se enfocan a través de una malla estéril o tamiz o alternativamente se desmenuzan del tejido circunvecino para producir una suspensión de células simples. Las células se mantienen en un medio que mantiene e. 10% de suero y antibiótico. Las proporciones .e crecimiento en presencia y ausencia de estrógenos so determinadas. Las células se ensayan para su haoilidad de producir ei componente C3 del complemente y su respuesta a los factores del crecimiento y a la hormona del crecimiento. Los cultivos in vítro se evalúan para su respuesta proliferativa después del tratamiento con progestina, GnRH, un compuesto de la presente invención y vehículo. Los niveles de receptores de hormonas esteroides se evalúan semanalmente para exterminar si las carácterís t i o = importantes de ia célula son mantenidas in vitro. Se utilizan tejidos provenientes de 5-25 pacientes . La actividad en al menos una de las pruebas anteriores indica que ios compuestos de la presente invención sen ce interés potencial en el tratamiento de fibrosis uteri .

Procedimiento "¡e Prueba de ?ndometriosis En las Pruebas i y 2, pueden ser examinados los efectos de ía administración del día 14 y del día 21, de los compuestos de la presente invención, sobre el crecimiento dei tejido endometrial explantado.

Prueba 1 Doce a treinta ratas hembra adultas de la cepa CD son utilizadas como animales de prueba. Estos se dividen en tres grupos de números iguales. El ciclo estrual de todos los animales se verifica periódicamente. En el día del proestro, se realiza cirugía en cada hembra. Las hembras en cada grupo tienen el cuerno uterino izquierdo eliminado, seccionado en cuadros pequeños, y los cuadros son suturados sueltamente en diversos sitios adyacentes al flujo sanguíneo mese térico . Además, las hembras en el Grupo 2 ienen extirpados ios ovarios.

En el día después de la cirugía, los animales en los rupos i y 2, reciben inyecciones intracep toréales de agua por 14 días, mientras que los animales en ei Grupo 3, reciben inyecciones mtraperi icna les de 1.0 mg de un compuesto de la presente invención, por kilogramo de peso corporal por la misma duración. Después de 14 días de tratamiento, cada hembra se sacrifica y los explantes endometriales, las glándulas adrenaie=, los úteros remanentes y los ovarios, donde sea aplicable, son extirpados y preparados para el examen histológico. Los ovarios y las glándulas adrenales se pesan.

Prueba 2 Doce a treinta ratas hembra adultas de la cepa CD son utilizados como animales de prueba. Estos se dividen en os grupos iguales. El ciclo estrual de todos los animales se verifica periódicamente. En el día del proestro, se realiza ia cirugía en cada hembra, ias hembras en cada grupo tienen extirpados el cuerno uterino izquierdo, seccionado en pequeños cuadros, y los cuadros son sueltamente suturados en diversos sitios adyacentes al flujo sanguíneo mesentérico. Aproximadamente 50 días después de la cirugía, los animales asignados al Grupo 1 reciben inyecciones intraperitoneales de agua cor 21 días, mientras que los animales en el Grupo 2 reciben inyecciones intraperitoneales de l.C mg del compuesto de la presente invención por -:?logramc de peso corporal, por la misma Giración. Después de 21 días de tratamiento, cada hembra se sacrifica y los explantes endometriales y adrenales se extirpan y se pesan. Los explantes se miden como una indicación del crecimiento. Se verifican los ciclos menstruales.

Prueba 3 A. Inducción quirúrgica de endometriosis. Autó rafos de tejido endometrial se utilizan para inducir endometr icsis en ratas y/o conejos. Los animales hembra en madurez reproductiva sufren cofcrecto ía bilateral, y se suministra estrógeno exógenamente proporcionado de este modo un nivel especi rico ¡onstante oe hormona . El tejido endometpal autólogo es implantado en el peritoneo de 5-150 animales, y se suministra estrógeno para inducir el crecimiento de tejido explantado. El tratamiento consistente ie un compuesto de ia presente invención es suministrado m.eüíante lavado gástrico en una base diaria por 3- 16 semanas, y ios implantes son retirados y medidos para el crecimiento o regresión. Al tiempo del 33 sacrificio, ei cuerno intacto del útero es cosechado para evaluar ei estado deí endometpo.

B. Implante de tejido endometriai humano en ratones desnudos. Ei te ido proveniente de lesiones endometriales humanas es implantado en el peritoneo de ratones desnudos hembra, castrados, sexualmente maduros. El e=trógeno exógeno es suministrado para inducir el crecimiento del tejido expiantado. En algunos casos, las células endometriales cosechas se cultivan in vi tro antes del implante. El tratamiento consistente de un compuesto de ia presente invención suministrado mediante lavado gástr.c-. en una case diaria de 3-16 semanas, y íes implantes son retirados y medidos para el crecimiento o la regresión. Al tiempo del sacrificio, los úteros se cosechan para evaluar el estado del endometrio intacto.

Prueba 4 A. Tejido proveniente de lesiones endcmetriales humanas es cosechado y mantenido i n vi tro como cultivos no transformados primarios. Los especímenes quirúrgicos se empujan i través de una malla estéril o tamiz, o alternativamente se desmenuzan a partir del tejido producir una suspensión de célula simple. Las células se mantienen en medios que contienen I Z \ de suero y antibiótico. Las proporciones ce crecimiento en presencia y ausencia de estrógenos son determinadas. las célu.as se cosechan para su habilidad oel producir el componente C3 del complemento y su respuesta a ios factores del crecimiento y a la hormona del crecimiento. Se evalúan los cultivos in vi tro pata su respuesta proliferativa después del tratamiento con progestinas, GnRH, un compuesto de la invención, y vehículo. Los niveles de receptores de hormonas esteroides se evaiúan semanalmente para evaluar y se mantienen en ias características importantes de las células i n vi tro . Se utilizan tejidos provenientes desde 5-25 pacientes. La actividad de cualquiera de los ensayos anteriores indica que ios compuestos de las presente invención son útiles en el tratamiento de la endometricsis .

Inhibición de la Proi i feración de las Células Lisas Aórticas/Restenosis Procedimiento "ie Prueba Los compuestos de la presente invención tienen la capacidad oe inhibir ia proliferación de células lisas aórticas. Esto puede ser demostrado mediante el uso de células lisas cultivadas derivadas de aorta de conejo, siendo determinada la proliferación por transmisión de síntesis de ADN. Las células se obtienen mediante el método de e?plante como se describe en Ross, J. of Cell Bio. 50: 172 (1971). Las células se colocan en piaca sobre placa de microtitulación por cinco días. Los cultivos se vuelven confluentes y el crecimiento se detiene. Las células son luego transferidas a Medio de Eagle Modificado de Dulbecco (DMEM) que contiene 0.5 -2 % de plasma pobre en plaquetas, L-glutamina 2 mM, 100 U/ml de penicilina, 100 mg/ml de estreptomicina, 1 mC/ml ce H-timidma, 20 ng/ml de factor de crecimiento derivado de plaquetas, y concentraciones variantes de ios presentes compuestos. La solución de reserva de los compuestos se prepara en sulfóxido de dimetiio y l..e:íc se diluye a la concentración apropiada v -• . C i - 30 M en el medio de ensayo anterior. Las células sen luego incubadas a 37°C por 24 horas bajo 5% de CO.-/95% de aire. Ai "final de las 24 horas, las células se fijan en metanol. La incorporación de K-timidina en ADN es luego determinada mediante conteo de cintiiación como se describe en Bonin, y o; lateradores, ??o. Cell Res. 131: 475-432 (1989).

La inhibición de la proliferación de las células del músculo liso aórtico por los compuestos de la presente invención, es además demostrada mediante la determinación de sus efectos sobre células en crecimiento exponencial. Las células del músculo liso provenientes ce aortas de conejos son sembrada en placas de cultivos ie tejido ce 12 pozos en DMEM que contiene 10% de suero fetal bovino, L-glutamma 2 mM, 100 U/ml de penicilina, y 100 mg/mí de estreptomicina. Después de 24 horas, las células se acoplan y el medio se reemplaza con DMEM que contiene 10% de suero, L-glutamina 2 mM, 100 U/ml de penicilina, 100 mg/ml de estreptomicina, y las concentraciones deseadas de ios compuestos. Las células se de^an desarrollar por cuatro días. Las células se tratan con tripsina y el número de células en cada cultivo se determinan mediante conteo utilizando un contador ZM-Couiter. La actividad oe las pruebas anteriores indica que los compuestos de ia presente invención, son de potencial en el tratamiento de la restenosis. La presente invención también proporciona un método de aliviar el síndrome de post-menopáusico en mujeres, el cual comprende el método utilizando los compuestos :e ia forr .la I y además comprende la a ministrad ir. a una mujer., de una cantidad efectiva de estrógeno o progestina. Estes tratamiento son particularmente útiles para el tratamiento de csteoporosis y disminución del colesterol sérico debido a que el paciente recicirá los beneficios de cada agente farmacéutico, mientras que los compuestos de la presente invención podrían inhibir los compuestos colaterales indeseables dei estrósenp y de la progestina. La actividad ce estos tratamientos en combinación en cualquiera de ias pruebas post-menopáusicas, infra, indica que ios tratamientos en combinación son útiles para aliviar los síntomas post-menopáusicos en mujeres. Diversas formas de estrógeno y progestina son comercialmente disponibles. Los agentes basados en estrógeno incluyen, por ejemplo, etinil-estrógeno (0.01 - 0.03 mg/día), mestranol (0.05 - 0.15 mg/día), y hormonas estrogénicas conjugadas tales como Premarin® yeth-Ayers t ; 0.03 - 2.5 mg/día). Los agentes basados en progestina, incluyen, por ejemplo, edroxiprogesterona tal como Provera8 (Upjohn; 2.5 - 10 mg/día), noretilnodrel (1.0 - 10.0 mg/día), y nonetindrona '0.5 - 2.0 mg/día) . Un compuesto basado en nitrógeno, preferido es el Premapn, y noretilnodrel y noretmdrona son agentes basados en progestina, preferidos . ?i ""étcdo de administración de cada agente de estrcgeno de regestma, es consistente con aquel que es conocido en d técnica. Para la mayor parte de los métodos ce la presente invención, ios compuestos de la formula I se administran continuamente, de 1 a 3 veces ai día. Nc obstante, la terapia cíclica puede ser especialmente útil en el tratamiento de endometriosis, o puede ser utilizada agudamente durante ataques dolorosos de la enfermedad. en ei caso de restenosis, la terapia puede _ estar limitada a intervalos cortos (1-6 meses) después de los procedimientos médicos tales como la angioplastia. Come se utiliza en la presente, el término "cantidad efectiva" significa una cantidad de compuesto oe ía presente invención que es capaz de aliviar ios síntomas de las diversas condiciones patológicas descritas en la presente. La dosis específica de un compuesto ad inistraole de acuerdo a esta invención será determinada, cor supuesto, por las circunstancias particulares que rodean al case, incluyendo, por ejemplo, el compuesto administrado, la ruta de aa inistracicn, el estado general de paciente, y la condic? n pat;l~j?ca que se trate. Una dosis diaria típica contendr un nivel de dosis no tóxico de a roximadamente 5 mg nasta aproximadamente 600 mg/día del compuesto de la presente invención. La dosis diaria preferida sera en general de aproximadamente 15 mg a apro imadame . fe 80 g/dia. Los compuestos de esta invención pueden ser administrados mediante una variedad de rutas incluyendo ias rutas oral, rectal, transdérmica, subcutánea, intravenosa, intramuscular, e intranasal. Estos compuestos preferentemente son formulados antes de la administración, la selección de los cuales será decidida por el médico que atiende. De este modo, otro aspecto más de la presente invención es una composición farmacéutica que comprende una cantidad efectiva de un compuesto de la fórmula I, o una sal farmacéuticamente aceptable dei mismo, que contiene opcionalmente una cantidad efectiva de es-trógeno o progestina, y un portador, diiuyente o excipiente farmacéuticamente aceptable . Los ingredientes activos totales en tales formulaciones comprenden desde 0.1% hasta 99.9% en peso de la formulación. Por "farmacéuticamente aceptable" se entiende que el portador, diluyente, excipientes y ia sal deben de ser compatibles con los otros ingredientes de ia formulación, y no dañinos para el recipiente de los mismos .

Las formulaciones farmacéuticas de la presente invención pueden ser preparadas mediante procedimientos conocidos er. la técnica utilizando ingredientes bien conocidos y fácilmente disponibles. Por ejemplo, los compuestos de la fórmula I, con o sin un compuesto tipo estrógeno c progestma, pueden ser formulados con excipientes comunes, diluyentes o portadores, y formados en tabletas, cápsulas, suspensiones, polvos y similares. Los ejemplos ae excipientes, diluyentes, y portadores que .son apropiados para tales formulaciones incluyen los siguientes: reilenaoores y extensores tales como almidón, azocares, manitol y derivados silícicos; agentes aglutinantes tales como carboximetilcelulosa y otros derivados de celulosa, algmatos, gelatina, y p oi i vmi ipi rro 11 dona ; agentes humectantes tales como glicerol; agentes desintegradores tales como carbonato ce calcio y cicarbonato de sodio; agentes para retardar la disolución tales coro parafina; aceleradores de la resorción tales como compuestos de amonio cuaternario; agentes activos de superficie tales como alcohol setílico, mcnoestearato de giicerol; portadores adsorctivos tales como caolín y bentonita; y lubricantes tales como talco, calcio y estearato de magnesio, y poiietilglic les sólidos.

Los compuestos tamoién pueden ser formulados como elíxires o soluciones para la administración oral conveniente o como soluciones apropiadas para la administra .n parenter l, por ejemplo, mediante las rutas intramusculares, subcutánea o intravenosa. Adicionai ente, ios compuestos son muy apropiados para la formulación como formas de dosis de liberación sostenida y similares. Las formulaciones pueden ser así constituidas de modo que éstas liberen el ingrediente activo sólo o preferentemente en un sitio fisiológico particular, posiblemente en un periodo de tiempo. Los recubrimientos, envolturas y matrices protectoras pueden ser elaborados, por ejemplo, a partir de sustancias poliméricas o ceras.

Los compuestos de la fórmula I, solos o en combinación con un agente farmacéutico de la presente invención, serán administrados en general en un formulación conveniente. Los siguientes ejemplos de formulación solo son ilustrativos y no se pretende que limiten el alcance de la presente invención.

Formulaciones En ias formulaciones siguientes, "ingrediente activo" significa un compuesto de la fórmula I, o una sal o solvato del mismo.

Formulación 1 : Cápsulas de Gelatina Se preparan capsulas de gelatina dura utilizando los siguientes : Ingrediente cantidad (mg/cápsula) Ingrediente activo 0.1 - 1000 Almidón NF 0 - 650 Almidón en polvo fluibie 0 - 650 silicona fluida ce 350 centistokes 0 - 15 Las formulación anterior puede ser cambiada en cumplimiento co ias variaciones razonables provistas. Se prepara una formulación en tableta utilizando los siguientes ingredientes: Formulación 2: Tabletas Ir.gr -diente Cantidad (mg/tableta) Ingrediente activo 2.5 - 1000 Celulosa micrecpstaiina 200 - 650 dióxido de silicio ahumado 10 - 650 ácido esteárico 5 - 15 Los componentes se mezclas y se comprimen para formar tabletas .

Alternativamente, las tabletas que contienen cada una 2.5 - 1C J0 mg de ingrediente activo están constituidas como sigue: Formulación 3: Tabletas Ingrediente Cantidad (mg/tableta) Ingrediente activo 25 - 1000 Almidón 45 Celulosa microc istalina 35 polivinilpirrol idona 4 (co o una solución ai 10% en agua) Carboximetiícelulcsa de sodro 4.5 Estearato de magnesio 0.5 Talco 1 ?l ingrediente activo, el almidón, y la celulosa se hacen pasar a través de un tamiz de malla norteamericana o . 45 v se mezcla perfectamente. La solución de la pciiviniipirrolidona se mezcla con los polvos resultantes los cuales se hacen luego pasar a través de un tamiz de malla norteamericana No. 14. Los granulos producidos así se secan a 50°-60° C y se hacen pasar a través de un tamiz de malla norteamericana No. 13. El carboxímetil - almidón de sodio, el estearato de magnesio y el talco, previamente pasa os a través de un tamiz de malla norteamericana No. 60, son luego agregados a los granulos los cuales, después del mezclado, son comprimidos sobre una máquina tableteadora para producir tabletas. Las suspensiones que contienen cada una 0.1 -1000 g de medicamento por 5 mi de dosis, son elaboradas como sigue: mulación 4: Suspensiones Ingrediente Cantidad (mg/ 5 mi; Ingrediente activo 0. ,1 - 1000 mg Oarboximetil-celulosa de sodio 50 mg Jarabe 1.25 mg Solución de ácido benzoico 0.10 mi Saber esp Color esp agua purificada hasta 5 mi El medicamento se hace pasar a través de un tamiz de malla norteamericana No. 45 y se mezcla con la carboximetilc^ l losa de sodio y jarabe, para formar una pasta suave. La solución de ácido benzoico, el sabor y el color se dilaten con aígo del agua y se agregan, con agitación. Se agrega luego suficiente agua para producir el volumen requerido.

Se prepara ana solución en aerosol que contiene los siguientes ingredientes: Formulación 5: Aerosol Ingrediente Cantidad (% en peso) Ingrediente active 0.25 ?tanol 25.75 Propeiente 22 ' Clcrodifluorometano) 70.00 El ingrediente activo se mezcla con el etanol y la mezcla se agrega a una porción de propelente 22, enfriada a 30° C, y se transfiere a un dispositivo de llenado. Se alimenta luego la cantidad requerida a un recipiente de acero moxicacie y se diluye con el propelente restante. I S unidades ?e válvula son luego ajustadas al recipiente.

Se preparan supositorios como sigue: For .ui oi : ücs i torics Ingrediente Cantidad (mg/Supositorio ) I ngrediente act i vo 250 gl icéridos ce ácidos grasos saturados 2 , 000 El ingrediente activo se hace pasar a través de un tamiz de malla norteamericana No. 60 y se suspende en los glicéridos de acido graso saturado previamente fundidos utilizando el calor necesario mínimo. La mezcla se vacía 1 ueao en un m--.de para supositorio de capacidad no:.._nal de 2 g y se cej enfriar.

Se prepara una formulación intravenosa como sigue: Formulación ~ : Solución intravenosa Ingrediente Cantidad ingrediente activo 50 mg •elución salina isotónica 1,000 mí La solución de los ingredientes anteriores se administra intravenosamente a un paciente a una velocidad de aproximadamente de 1 mi por minuto.

Formulación o -a sula I en combinación Ingrediente Cantidad (mg/cápsula; Ingrediente a. vo 50 Premarin 1 Avicel pH 101 50 Almidón 1500 117.50 Aceite de sil 2 Tween 80 0.50 -ac- 0.25 :n 9: laosula II en combinación .ente Cantidad (mg/cápsula) Ingrediente activo 50 Noretiinodrel 5 Avicel pH 101 82.50 Almidón 1500 90 Aceite ce sil- cena 2 Tween 6C 0.50 Insrediente Cantidad (mg/tableta! Ir.dredier.ee activo 50 Premarin 1 Almidón de maíz NF 50 Povidona K29-32 6 Avicel pH 101 41.50 Aviceí pH 102 136.50 Crospcvidona XL10 2.50 Estearato de Magnesio 0.50 Cab-O-Sil 0.50 Se hace constar que con relación a esta fecha, el mejor método conocido por la solicitante para llevar a la cráctica la citada invención, es el que resulta claro de la ecinte descripción de la invención. Habiéndose descrito la invención como antecede, se reclama como propiedad lo contenido en las siguientes:

Claims (3)

1. REIVINDICACIONES compuesto de la fórmula caracterizado porque Ri es hidrógeno, OH, halo, 0C0(alqu?lo de 1 a 6 átomos de carbono), OCO(ar?lo), CS0- (alquilo ce 4 a 6 átomos de carbono), 0C00(alqu?lo ce 1 a 6 at- os de carbono), OCOO(ar?lo), OCONH (alquilo de 1 a 6 atemos de carbono), o OCON(alquilo de 1 a 6 átomos de carccnc) ; R es ariio, alquilo de 1 a 6 átomos de carcono, ciclcalquilo de 3 a 6 átomos de carbono, o 4-c?clo exa ol; R es 0 CH i o 0 (CH , ; y R= son cpcionalmente CO(CH2)2CH-, CD OH ) CH , alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, o R. y R= se combinan cara formar, con el nitrógeno, al cual están unidos, piperidina, morfolina, pirrolidina, 3-metilpirrolidina, 3 , 3-dimetilpirrolidina, 3,4-dimetilpirrolidina, azepina, o pipecolina; \ es C = CH, " CH (alquilo de 1 a 5 átomos de carbono (alquenilo de 2 a 5 átomos de carbono; !C = CH (alquilo de 1 a 5 átomos de carbono; > JCH (arilo), C(OH) (alquilo de 1 a 5 átomos de carbono) , (alquenilo de 2 a 5 átomos de carbono), .C (OH) ariio; Ti y sales farmacéuticamente aceptables de las mismas.
2. 2. Un compuesto de conformidad con la reivindicación i, caracterizado porque R. es -0(CH2)¿. 3. Un compuesto de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado porque R y Rs forman piperidino . 4. "n compuesto de conformidad con la reivindicación 3, caracterizado porque es -OH y R2 es 4-hidroxi feniio . 5. Un compuesto de conformidad con la reivindicación 4, c racterizado porque R6 es : «OHímetilc, CH , ^C , OH) fenilo, ^CHfemlo o :H(C.H; ó. Una composición farmacéutica, caracterizada porque comprende un compuesto de conformidad con la reivindicación 1, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y opcionalmente, una cantidad efectiva de estrógeno o progestina en combinación con un portador, diiuyente o excipiente farmacéuticamente aceptable. Ei uso de un compuesto de conformidad con la reivindicación 1, o una sai farmacéuticamente aceptadle del mismo para aliviar los síntomas del síndrome post- encpáusico al administrar a una mujer en necesidad de tal tratamiento, una cantidad efectiva de dicho compuesto.
3. 3. Ei uso de conformidad con la reivindicación 7, caracterizado porque la condición patológica del síndrome post-menopáusico es la osteoporosis . 9. El uso de conformidad con la reivindicación 7, caracterizado porque ia condición patológica del síndrome post-menopáusico está relacionada a una enfermedad cardiovascular. 10. El uso de - conformidad con la reivindicación 9, caracterizado porque la enfermedad cardiovascular es hiperlipidemia . 11. El uso de conformidad con la reivindicación 7, caracterizado porque la condición patológica del síndrome post-menopáusico es cáncer dependiente de estrógeno. 12. El uso de un compuesto de conformidad con la r i indicación 1, o una sai farmacéuticamente aceptacle del mismo para inhibir la enfermedad fibroide al administrar a una mujer en necesidad de tal tratamiento, una cantidad efectiva de dicho compuesto. 13. El uso de un compuesto de conformidad con ía reivindicación 1, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para inhibir la endometriosis al administrar a una mujer en necesidad de tratamiento, una cantidad efectiva de dicho compuesto 14. El uso de un compuesto de conformidad con la reivindicación i, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para inhibir la proliferación de células del músculo liso aórtico al administrar a un humano en necesidad de tal tratamiento, una cantidad efectiva de dicho compuesto. 15. El uso de un compuesto de conformidad con la reivindicación 1, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para inhibir la restenosis al administrar a un humano en necesidad de tal tratamiento, una cantidad efectiva de dicho ccmouesto 16. ?i uso de conformidad con la reivindicación 7 para aliviar los síntomas del síndrome post-menopáusicc, que además comprende la administración a una mujer, de una cantidad efectiva de estrógeno. 17. El uso de conformidad con la reivindicación i para aliviar los síntomas del síndrome post-menopáusico que además comprende la administración a dicha mujer de una cantidad efectiva de progestina.