ES2203822T3 - Composicion que refuerza la cascara de huevos de ave. - Google Patents
Composicion que refuerza la cascara de huevos de ave.Info
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Abstract
LA PRESENTE INVENCION SE REFIERE A UNA COMPOSICION QUE REFUERZA LA CASCARA DE LOS HUEVOS DE AVE Y QUE PERMITE MEJORAR EL ESPESOR DE LA CASCARA DE HUEVO Y EL DE LA MEMBRANA DE LA CASCARA DE HUEVO EXTERIOR. DICHA COMPOSICION COMPRENDE COMO PRINCIPIO ACTIVO UN MICROORGANISMO VIABLE DEL TIPO BACILLUS EVENTUALMENTE ASOCIADO CON UN VECTOR O UN DILUYENTE.
Description
Composición que refuerza la cascara de huevos de
ave.
La presente invención se refiere a un método que
utiliza una composición fortalecedora de las cáscaras de los huevos
de ave para mejorar la resistencia de las cáscaras de los huevos de
ave mediante la adición de dicha composición a los piensos para
aves, como gallinas, y la administración a las mismas.
Los huevos de aves, como gallinas, se rompen con
frecuencia durante la puesta o durante las etapas de manipulación
que incluyen la recogida, la selección, el lavado, el embalaje, el
transporte, la exposición, la venta, el almacenamiento etc.. La
resistencia de los huevos de aves está relacionada con la estructura
de la cáscara de los huevos y se corresponde con grosor y la
gravedad específica de la cáscara de los huevos (véase Shinpen
Chikusan Daijiten, p. 463, publicado por Yokendo). La
estructura de la cáscara de los huevos se compone de la cáscara de
los huevos, la membrana de la cáscara de los huevos y la cutícula.
La cáscara de un huevo de gallina pesa aproximadamente 5 g por
término medio, tiene un grosor de 300 a 360 \mum y se compone de
aproximadamente 98% de materia inorgánica (98,4% de carbonato de
calcio con carbonato de magnesio y fosfato de calcio, cada uno de
ellos a nivel de trazas) y aproximadamente 2% en peso de materia
orgánica. La membrana de la cáscara de un huevo de gallina tiene un
grosor aproximado de 70 \mum y consiste en la membrana externa de
la cáscara del huevo y la membrana interna de la cáscara del huevo.
En el lado obtuso del huevo, la membrana exterior de la cáscara del
huevo y la membrana interior de la cáscara del huevo se separan
formando la cámara de aire. La membrana de la cáscara del huevo se
compone en peso de aproximadamente 90% de proteínas, 3% de lípidos
y 2% de sacáridos. La cutícula de un huevo de gallina es una
envoltura amorfa que se forma en la superficie de la cáscara del
huevo, inmediatamente después de la puesta, por el secado del
material gelatinoso segregado en la puesta del huevo. En peso se
compone aproximadamente de 85% a 87% de proteínas, de
aproximadamente 3,5% a 3,7% de sacáridos y de aproximadamente 2,5% a
3,5% de lípidos. El grosor de la cáscara de los huevos varía según
la temperatura y la edad. A saber, el grosor de la cáscara de los
huevos se reduce a temperaturas más altas o con el avance de la
edad.
Puesto que el calcio es el componente más
importante de la cáscara de los huevos, el nivel de calcio en la
sangre estaría relacionado con la formación de la cáscara de los
huevos. El calcio absorbido del tracto intestinal se acumula
primeramente en el fémur y después se libera, cuando es necesario,
en la sangre en forma de osteoblastos, participando de esta manera
en la formación de la cáscara de los huevos. Por lo tanto, las
cáscaras de los huevos de gallina pueden hacerse más gruesas
fomentando la absorción y el metabolismo del calcio. Aun cuando el
papel de la membrana de la cáscara de los huevos no se conoce en
detalle, se supone que la cáscara de los huevos puede fortalecerse
cuando la membrana de la cáscara de los huevos se hace más gruesa
junto con la cáscara.
Se han hecho intentos de aumentar el grosor de la
cáscara de los huevos de gallina, por ejemplo, mediante la adición
de varios materiales de calcio a los piensos, mejorando los métodos
de alimentación o administrando CPP (fosfopéptido de caseína) y CCM
(malato de citrato de calcio). Sin embargo, no se ha creado ningún
método que resulte satisfactorio para los interesados en la recogida
de huevos a gran escala, que tienen un pequeño margen de
beneficios. De esta manera, se ha visto la necesidad de desarrollar
técnicas mediante las cuales la cáscara de los huevos de gallina
pueda fortalecerse con procedimientos adecuados.
Existen informes de que varios preparados viables
de microorganismos contribuyen a la ganancia de peso corporal de las
aves, a la mejora en la calidad de la carne, al incremento en la
proporción de puesta de huevos y a la supresión y disminución de
las enterobacterias perjudiciales etc.. Estos preparados se han
puesto ya en uso práctico con varios propósitos. Hay informes
también de que las cáscaras de los huevos pueden hacerse ligeramente
más gruesas y la proporción de huevos con cáscaras demasiado finas
puede reducirse añadiendo a un pienso un preparado que contiene
Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus casei, Bifidobacterium
bifidum, Aspergillus oryzae y Tirulopsis sp. Sin embargo, no se
ha indicado que este preparado consiga un efecto de fortalecimiento
a un nivel suficiente para mostrar una diferencia significativa.
Además, nunca se ha aclarado qué microorganismo ejerce el efecto de
fortalecimiento de la cáscara de los huevos.
Ha sido necesario mejorar la eficiencia económica
de las explotaciones avícolas, puesto que las técnicas para
incrementar la relación entre la eficiencia de los piensos y la
puesta de huevos han avanzado. Como resultado, surge una tendencia
hacia la explotación avícola intensiva. En relación con la
explotación avícola a gran escala, la recogida, selección, lavado y
embalaje de huevos se están mecanizando. Bajo estas circunstancias,
es muy importante fortalecer las cáscaras de los huevos y las
membranas externas de las cáscaras de los huevos para mejorar la
resistencia a la rotura durante el transporte, la exposición, la
venta, etc. El aumento del grosor y la resistencia de las cáscaras
de los huevos y las membranas externas de las cáscaras de los
huevos da lugar a otra ventaja en el sentido de que la resistencia
contra las bacterias y la permeabilidad al oxígeno mejoran también
y, por consiguiente, se prolonga la duración de almacenaje de los
huevos. Por lo tanto, existe la necesidad de desarrollar una
composición para fortalecer la cáscara de los huevos que sea
efectiva desde el punto de vista práctico, principalmente para los
interesados en la explotación avícola.
Un objeto de la presente invención es
proporcionar un método para aumentar el grosor de la cáscara de los
huevos y el de la membrana externa de la cáscara de los huevos, que
consiste en administrar a un ave que lo necesite una cantidad
efectiva de una composición fortalecedora de la cáscara de los
huevos que comprenda un microorganismo viable perteneciente a la
especie Bacillus subtilis como ingrediente activo,
opcionalmente acompañado por un portador o diluyente.
El microorganismo viable contenido en la
composición fortalecedora autilizada en el método de la presente
invención como ingrediente activo pertenece a la especie
Bacillus subtilis y las propiedades microbiológicas del mismo
se describen en Bergey's Manual of Bacteriology, Vol. 11
(1986). Más específicamente, se prefiere utilizar Bacillus
subtilis C-3102, que tiene un efecto mejorado
en el fortalecimiento de la cáscara de los huevos de ave (Depósito
Nº FERM BP-1096; Nombre de l institución
depositaria: Fermentation Research Institute, Agency of Industrial
Science and Tecnology (nombre actual: National Institute of
Bioscience and Human-Technology, Agency of
Industrial Science and Technology); Dirección de la institución
depositaria: 1-3, Higashi 1 chome,
Yatabe-machi, Tsukuba-gun,
Ibaraki-ken 305 Japón (Dirección actual:
1-3, Higashi 1 chome, Tsukuba-shi,
Ibaraki-ken 305 Japón); Fecha de depósito: 28 de
junio de 1986). Se conocen muchas cepas de Bacillus
subtilis, como las que se describen en ATCC Bacteria and
Bacteriophages, 19ª ed., 1996, páginas 57-63,
incorporado aquí como referencia.
El Bacillus subtilis, como se describe más
arriba, puede cultivarse en un medio líquido o sólido que contenga
fuentes de carbono, fuentes de nitrógeno, materia inorgánica, etc.,
comúnmente empleado en medios de cultivo de microorganismos. Puede
emplearse cualquier fuente de carbono siempre que pueda ser
metabolizada por Bacillus subtilis. Por ejemplo, glucosa,
fructosa, sacarosa, almidón o melazas. Los ejemplos de la fuente de
nitrógeno incluyen peptona, hidrolizato de caseína, extracto de
carne y sulfato de amonio. Si es necesario, el medio puede contener
también ácido fosfórico, sales de potasio, magnesio, calcio, sodio,
hierro, manganeso, etc., vitaminas, aminoácidos, surfactante, etc..
Es preferible llevar a cabo el cultivo aeróbicamente. Con respecto a
las condiciones de cultivo, es preferible utilizar, por ejemplo, un
medio líquido contenido en un recipiente fermentador bajo efectos de
aireación/agitación, un medio sólido del tipo placa o un
fermentador automatizado de producción de koji. El cultivo
se efectúa a una temperatura de 20 a 50ºC, preferiblemente 30 a 45ºC
durante 12 horas a 7 días con un valor ph del cultivo de 5 a 9,
preferiblemente 6 a 8.
El cultivo así obtenido puede emplearse como tal
o tras concentración Alternativamente, los microorganismos obtenidos
del cultivo pueden emplearse como tales o procesados juntamente con
cargas y similares hasta conseguir un polvo seco o gránulos. Como
cargas, los ejemplos incluyen carbonato de calcio, moyuelo, harina
de maíz, salvado de arroz desengrasado, salvado de trigo, leche en
polvo desnatada, etc.
La composición fortalecedora de la cáscara de los
huevos utilizada en el método de la presente invención puede
contener un portador o diluyente. El portador y diluyente no están
especialmente limitados y se seleccionan entre portadores y
diluyentes farmacéutica y nutricionalmente aceptables.
En la presente invención, los microorganismos
pertenecientes a Bacillus subtilis pueden someterse a un
tratamiento apropiado de mutación, como la exposición a la luz
ultravioleta, rayos X o radiación, y un tratamiento químico con un
compuesto mutagénico (por ejemplo nitroguanidina, tintura de
acridina). También se puede preparar mutantes por inserción,
supresión o sustitución de nucleótidos, así como por mutación
espontánea. Los mutantes obtenidos de esta manera pueden utilizarse
en la presente invención mientras sean capaces de aumentar el
grosor de la cáscara de los huevos y el grosor de la membrana
externa del huevo. El término Bacillus subtilis incluye estos
mutantes.
La composición fortalecedora de la cáscara de los
huevos utilizada en el método de la presente invención contiene
preferiblemente de 10^{5} a 10^{11} por gramo de preparados del
microorganismo viable Bacillus subtilis en forma de esporas
y/o células nutritivas.
Se cree que la composición fortalecedora de la
cáscara de los huevos utilizada en el método del presente invento
promueve la absorción y el metabolismo del calcio que necesitan las
aves para aumentar el grosor de la cáscara de los huevos o el
grosor de la membrana externa de la cáscara de los huevos. Por
consiguiente, puede añadirse, por ejemplo, a un pienso de fórmula
para avicultura que contenga calcio en una cantidad suficiente
necesaria para las aves ponedoras. Puede administrarse sin
restricción según un método arbitrario. En un caso preferido, se
procesa en preparados que pueden añadirse uniformemente a piensos
comercializados de fácil administración a las aves, en particular
en forma de polvos. La concentración efectiva de la composición
fortalecedora de la cáscara de los huevos varía dependiendo del tipo
y edad de las aves, etc. Por ejemplo, se puede añadir a un pienso
comercializado para aves preferiblemente en cantidades que den un
recuento viable de 10^{3} a 10^{7} microornanismos viables por
gramo en la preparación de un pienso para fortalecer la cáscara de
los huevos de las aves. Cuando el recuento viable es menor de
10^{3} por gramo, no se consigue ningún efecto significativo. Por
otro lado, no es ventajoso desde un punto de vista económico que el
recuento viable exceda 10^{7} por gramo, puesto que existe el
riesgo de que el incremento de coste debido a la adición del
preparado viable de microorganismos pueda sobrepasar el coste de
los huevos rotos.
No se limitan particularmente las aves en las que
se pretende aumentar el grosor de la cáscara de los huevos y el
grosor de la membrana externa de la cáscara de los huevos según la
presente invención. Ejemplos de las mismas incluyen a gallinas,
patas, gallinas Bantam, ocas y codornices.
Habiendo descrito en general esta invención,
puede obtenerse una mayor comprensión haciendo referencia a ciertos
ejemplos específicos que se indican aquí a efectos de ilustración
solamente y no pretenden ser limitadores, a menos que se
especifique en contrario.
A 100 kg de agua desionizada se añadieron 2 kg de
melazas, 2 kg de peptona de soja y 100 g de fosfato de dipotasio,
agitando hasta disolver homogéneamente. A continuación, se ajustó el
valor de ph de la mezcla a 7.5 utilizando una solución 1 N de
hidróxido de sodio. El medio así obtenido se vertió en un vaso
fermentador y se esterilizó a 95ºC durante 60 minutos. Después de
enfriar a 37ºC, el medio se inoculó con 1 kg de un caldo de cultivo
de Bacillus subtilis C-3102 que había sido
previamente preparado. A continuación, el microorganismo fue
cultivado en condiciones de aireación/agitación a 37ºC durante 40
horas. Después, los microorganismos se extrajeron del caldo de
cultivo utilizando una centrifugadora continua (tipo prensa de
cizallamiento). Después de añadir la misma cantidad (en peso) de
leche desnatada en polvo, la mezcla obtenida se secó por
congelación al vacío. El polvo seco de microorganismos (7,5 kg)
obtenido de este modo mostraba un recuento viable de 1,2x10^{10}
por gramo.
Las gallinas ponedoras (De Kalb, de 265 días de
edad a la iniciación de la prueba) se clasificaron en un lote de
control (no administración) y un lote de prueba (administración de
1x10^{5} por gramo de Bacillus subtilis
C-3102), cada uno de ellos de 20 gallinas. La
alimentación preliminar se efectuó durante 7 días, seguida por la
prueba durante 20 días. Durante el período de pre- alimentación se
alimentó a las gallinas con un pienso de fórmula comercializada
para el período de gran puesta (fabricado por la National Federation
of Agricultural Cooperative Associations, DCP \geq 18,0%, ME
\geq 2.900 kcal). Durante el período de prueba, las gallinas del
lote de prueba fueron alimentadas con un pienso al cual se habían
añadido gránulos que contenían 10^{7} por gramo de los
microorganismos viables preparados según el procedimiento de
cultivo más arriba mencionado, mientras que las gallinas del lote de
control fueron alimentadas continuamente con el pienso
comercializado ya mencionado sin modificación. Después de la
terminación del período de prueba los piensos de los lotes de
prueba y de control fueron intercambiados entre sí. A continuación
se efectuó la prealimentación durante 7 días, seguidos por la
prueba durante 20 días. El grosor de la cáscara de los huevos en el
diámetro menor de cada uno de los huevos puestos en los últimos 10
días del período de prueba se midió con un micrómetro. Los
resultados se indican en la Tabla 1 más abajo. Se vio así que el
grosor de la cáscara de los huevos del lote de prueba había
aumentado en una diferencia significativa de 5%.
| Lote | Número de huevos (n) | Grosor de la cáscara de los huevos (mm). |
| Media \pm s.d. | ||
| Control | 171 | 0,325 \pm 0,026 |
| Prueba | 172 | 0,331 \pm 0,026* |
| *p < 0,05 |
Esta prueba se llevó a cabo utilizando gallinas
ponedoras (De Kalb TX) alimentadas en dos granjas avícolas con una
proporción de 4.600 gallinas por granja. Las gallinas de la prueba
tenían 535 días de edad inmediatamente antes del sacrificio (la
relación de puesta de huevos a la iniciación de la prueba era de
76,5%). Las gallinas del lote de control se alimentaron con un
pienso de fórmula comercializada (fabricado por la National
Federation of Agricultural Cooperative Associations, DCP \geq
15,0%, ME \geq 2.750 kcal), mientras que las del lote de prueba
se alimentaron con el mismo pienso que el empleado en el lote de
control, pero conteniendo 3x10^{5} por gramo de microorganismos
viables de Bacillus subtilis C-3102. Un mes
después de la iniciación de la prueba, se escogieron al azar 100
huevos de cada lote y el grosor de la cáscara de los huevos se
midió del mismo modo que en el ejemplo 1. Los resultados se indican
en la Tabla 2 más abajo. Se vio así que el grosor de la cáscara de
los huevos del lote de prueba había aumentado en una diferencia
significativa de 0,1%.
| Lote | Número de huevos (n) | Grosor de la cáscara de los huevos (mm). |
| Media \pm s.d. | ||
| Control | 100 | 0,352 \pm 0,031 |
| Prueba | 100 | 0,383 \pm 0,044 *** |
| *** p < 0,001 |
Esta prueba se llevó a cabo utilizando 4.600
gallinas alimentadas en una granja avícola como lote de control y
6.500 gallinas alimentadas en otra granja avícola como lote de
prueba. Las gallinas del lote de control se alimentaron con un
pienso de fórmula comercializado, mientras que las del lote de
prueba se alimentaron con el mismo pienso que el utilizado en el
lote de control, pero conteniendo 3x10^{5} por gramo de
microorganismos viables Bacillus subtilis
C-3102. Se reuunieron los datos de puesta de huevos
en los 14 meses transcurridos desde el comienzo de utilización de
las aves hasta el sacrificio. Se calculó la proporción de los
huevos defectuosos con respecto a los recogidos. La Tabla 3 indica
los resultados. Como resultado, se vio que la proporción de huevos
defectuosos en el lote de prueba mejoró con una diferencia
significativa del 1%. Aun cuando no se midió el grosor de la
cáscara de los huevos, se dedujo que la cáscara de los huevos se
había fortalecido con un incremento en su grosor. De forma similar,
la proporción de puesta de huevos en el lote de prueba resultó
elevada, con una diferencia significativa del 1%.
| Lote de control | Lote de prueba | |
| Número total de gallinas | 1.744.990 | 2.420.146 |
| Número de huevos normales | 1.494.333 | 2.097.731 |
| Número de huevos defectuosos | 22.202 | 28.753 |
| Proporción de huevos defectuosos (%) | 1,46 (100) | 1,35 (92) ** |
| Proporción de puesta de huevos (%) | 85,64 (100) | 86,68 (101) ** |
| Peso medio de los huevos | 64,59 (100) | 64,76 (101) |
| ** p < 0,01 |
Entre las gallinas De Kalb TX sometidas a prueba
en el Ejemplo 2, se alimentó de forma continua exclusivamente a los
individuos con alto nivel de puesta de huevos. Las gallinas del
lote de control se alimentaron con un pienso de fórmula
comercializado (fabricado por la National Federation of Agricultural
Cooperative Associations, DCP \geq 18,0%, ME \geq 2.850 kcal),
mientras que las del lote de prueba se alimentaron con el mismo
pienso que el empleado en el lote de control, pero conteniendo
3x10^{5} por gramo de microorganismos viables de Bacillus
subtilis C-3102. Utilizando los huevos recogidos
de gallinas de 626 a 631 días de edad, se midió el grosor de la
cáscara de los huevos y el grosor de la membrana externa de la
cáscara de los huevos. La membrana interna de la cáscara de los
huevos se peló en la cámara de aire y después se pelaron las
cáscaras de los huevos para extraer la membrana externa de la
cáscara de los huevos. Aunque la membrana externa de la cáscara de
los huevos se adhiere fuertemente a la cáscara de los huevos y se
separa con dificultad completamente de la cáscara de los huevos, el
grosor de la membrana externa de la cáscara de los huevos,
aparentemente bien separada, se midió con un micrómetro. Los
resultados se muestran en la Tabla 4 más abajo. De esta manera, se
vio que el grosor de la cáscara de los huevos y el grosor de la
membrana externa de la cáscara de los huevos en el lote de prueba
habían ambos aumentado significativamente.
| Lote | Número de huevos (n) | Grosor de la cáscara | Grosor de la membrana externa |
| de los huevos (mm): | de la cáscara de los huevos (mm): | ||
| Media \pms.d. | Media \pms.d. | ||
| Control | 55 | 0,358 \pm 0,029 | 0,059 \pm 0,01 |
| Prueba | 56 | 0,376 \pm 0,036 ** | 0,069 \pm 0,009 *** |
| ** p < 0,01, *** p < 0,001 |
La composición fortalecedora de la cáscara de los
huevos utilizada en el método de la presente invención, que contiene
microorganismos viables Bacillus subtilis como ingrediente
activo, presenta los efectos de promover la captación, absorción y
el metabolismo del calcio para aumentar el grosor de la cáscara de
los huevos y el grosor de la membrana externa de la cáscara de los
huevos de ave. De esta manera, la composición fortalecedora de la
cáscara de los huevos hace posible disminuir considerablemente la
proporción de huevos rotos, mejorando la eficiencia económica en la
producción y la distribución de huevos de ave.
Obviamente, son posibles numerosas modificaciones
y variaciones de la presente invención a la luz de las anteriores
enseñanzas. Por consiguiente, debe entenderse que dentro del campo
de las reivindicaciones adjuntas, la invención puede llevarse a la
práctica de otro modo distinto al que específicamente se describe
en la presente.
El documento previo de la presente solicitud,
Solicitud de Patente Japonesa núm. Hei 8-261633,
presentado el 2 de octubre de 1996, se incorpora al presente
documento como referencia.
Claims (10)
1. Un método para aumentar el grosor de la
cáscara de los huevos y el grosor de la membrana externa de la
cáscara de los huevos, que comprende:
la administración a las aves de una cantidad
efectiva para el fortalecimiento de la cáscara de los huevos de una
composición que comprende un microorganismo viable perteneciente a
la especie Bacillus subtilis.
2. El método según la reivindicación 1, en el
cual el citado microorganismo es Bacillus subtilis
C-3102, Depósito nº FERM BP-1096, o
una mutación del mismo.
3. El método según la reivindicación 1 ó 2, en el
cual dicha composición comprende, además, un portador o
diluyente.
4. El método según cualquiera de las
reivindicaciones 1 a 3, en el cual dicha composición comprende,
además, un pienso para aves.
5. El método según cualquiera de las
reivindicaciones 1 a 4 en el cual dicha composición es un polvo.
6. El método según cualquiera de las
reivindicaciones 1 a 5 en el cual el dicha composición comprende
106-1011 de los citados microorganismos viables por
gramo.
7. El método según cualquiera de las
reivindicaciones 1 a 6, en el cual dicha composición se añade a un
pienso comercializado en una cantidad que proporcione un recuento
viable de 103-107 microorganismos viables por gramo
para preparar un pienso fortalecedor resistencia de la cáscara de
los huevos de aves.
8. El método según cualquiera de las
reivindicaciones 1 a 7 en el cual las citadas aves son gallinas.
9. Un método para mejorar la absorción de calcio
por las aves, que comprende la alimentación de dichas aves con una
composición que comprende un microorganismo viable perteneciente a
la especie Bacillus subtilis.
10. El método según la reivindicación 9 en el
cual el citado microorganismo es Bacillus subtilis
C-3102, Depósito nº FERM BP-1096, o
una mutación del mismo.
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