JPH01502340A - 家畜の胃腸病の予防及び処置のための製剤 - Google Patents
家畜の胃腸病の予防及び処置のための製剤Info
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
家畜の胃腸病の予防及び処置のための製剤技術分野
本発明は、獣医学及びより詳しくは、若い家畜の胃腸病の予防及び処置のために
獣医の業務に有用な製剤に関する。
従来の技術
相当の数の若い家畜に存在する現代の動物−繁殖複合体においては、急性の胃腸
疾患が、満足の行く衛生条件の観察に基づいてさえ、新生児の相当の部分に発生
する。
そのような疾病の主な原因は、挺生の後、初めの数時間及び数日の間、抗感染保
護の重要な因子として通常作用する標準の微生物がまだその動物中に形成されて
いないことである。
この期間中、種々の病原性及び条件によっては病原性の微生物(腸病原性大腸菌
、ブドウ球菌属、プロテウス属、サルモネラ属、及び同様のもの)が、周囲(空
気、器具、疾病動物、人、及び他の源)から動物中に侵入することができ;これ
らの微生物は新生児の腸の中で実質的に自由に繁殖し、種々の胃腸管疾病を引き
起こす、初期のころにおけるそのような疾病の発生は、新生児を弱体化し、そし
てそれらの生存率を低める(動物の一部の死)。
急性胃腸病の処置のために抗生物質、すなわちサルファミド及びニトロフラン製
剤、及び薬草酒及び他の製剤の使用が当業界において良く知られている。しかし
ながら、これらのすべての薬物は十分に効果的ではない、なぜならば、多くの病
原性及び条件によっては病原性の微生物は、これらの薬物に対して耐性であるか
らである。
生存する微生物培養物に基づいて調製される、動物の胃腸病の予防及び処置のた
めの製剤は、現在見込みあるものである。これらの製剤は、動物の寿命の初期段
階において、病原性及び条件によっては病原性の細菌のその中での繁殖を阻害す
ることができる、胃腸管中での微生物の人工的な形成に貢献する。従って、微生
物ス上y1上且二左λ−ヱL工2皇左q (Stre tococcus fa
ecium Cernelle)の生存培養物から製造される製剤が当業界で知
られている(GB、 B、 1.300゜1種の微生物のみを含有する。さらに
、この製剤は、動物の保護応答に対する刺激効果を付与せず(内因性インターフ
ェロンを誘発せず、そして血液白血球の食作用活性を増強しない)、そしてまた
その通用の分野も制限する。
発明の開示
製剤の作用の高い効力、すなわち病原性及び条件によっては病原性の微生物の広
範囲の効果を特徴とし、動物の保護応答を刺激し、投与における合併症又は副作
用を引き起こさず、そして長期の貯蔵のために適切な、家畜の胃腸病の予防及び
処置のための製剤を提供することが本発明の目的である。
特表千1−502340 (2)
この目的は、本発明の細菌のバイオマスを含有する、家畜の胃腸病の予防及び処
置のための製剤により達成され、そしてこの製剤は、細菌のバイオマスとして、
人工的な栄養培地上での培養に基づいて、最も高く且つ安定した拮抗活性の特徴
を示す自然選択により野性培養物から選択された菌株バ之立ス サブチリス(B
acillus 5ubtilis) TSMPM k V−2335のバイオ
マス及び菌株バ之旦ス リケニホルミス(Bacillus1ichenifo
r+n1s) TSMPII N[LV−2336のバイオマス(Centra
1Museua+ of Industrial Microorganism
s of the A11−UnionResearch In5titute
of Genetics and 5election of Indust
−rial Microorganismsに寄託されている)、並びに充填剤
を出発成分として次の割合(質量%)で含む:ld中に微生物細胞150〜22
0bln、を含む菌株バ之立λサブチリスTSMPM I& V−2335のバ
イオマス・・・・・・45〜60.1ml中に微生物細胞150〜200bln
、を含む菌株バ之旦スユ欠三主土まスTSMPM隘V −2336のバイオマス
・・・・・・15〜20、充填剤・・・・・・残り。
本発明の製剤の作用の効力は、上記に特定された菌株の使用により確保される。
菌株五之立ス サブチリスTSMPM隘V −2335は、動物の消化管の種々
の部分に、ある時間保持される性質を特徴とする;それは、病原性及び条件によ
っては病原性の細菌〔シュトモ2(Sal++onella Weslaco)
、土上天主立±旦且人ユヱ人(伽凰並虹凰江匝匡j…)・二五至生立λ±12土
(Proteus 旦り肛n)、及び同様のもの〕に対する拮抗効果を示し、白
血球の食細胞活性を刺激し、通常の微生物相に影響を与えないで動物中に内因性
インターフェロンの誘発を高める。菌株バ之iス’ =;htl、−”4 XT
S?lPM Nn V−2336は、動物の消化管の種々の部分に、ある時間保
持される性質を示し、それは病原性細菌及び菌類〔ス フィロコーカス ヱ皇紅
旦■ flavus)及び同様のもの〕に対して拮抗効果を有し、動物の白血球
の食細胞活性を刺激し、通常の微生物相に影響を及ぼさず;それは消化過程を促
進する酵素活性を特徴とする。
本発明の製剤は、好ましくは充填剤として、す、カロース又はグルコースと家畜
の血清との混合物又は前記サッカロース又はグルコースとゼラチンとの混合物を
含む。
家畜の血清又はゼラチンの使用は、製剤に導入される培養物の生物学的性質の安
定化に貢献する。サッカロース又はグルコースの使用は、製剤の製造過程におけ
る凍結乾燥、貯蔵中のその生物学的及び物理的性質の保持及びその通用の間、製
剤と溶媒との良好な相溶性の最適条件を付与する。
発明を効果的に実施するための最良のB標本発明の製剤は、上記特定された新規
菌株のバイオマスを導入する。それらの菌株バ2立ス サブチリスTS?IP?
l NI V−2335及び五之立ス’ −+Jlz−XTSMPM ?m V
2336は、Central Museum of Industrial
Microorganisms of the Al1−υn1on Re5e
arch In5titute of Genetics and 5elec
tion ofIndustrial Microorganismsに寄託さ
れている。菌株−バ2ラ−ス サブチリスTSMPM It V−2335は、
野性の培養物から単離され、そして人工的な栄養培地上で培養した後、その生来
の変動性の研究の間、最も高く且つ同時に安定した(50継代以上の間)拮抗活
性を特徴とするものの選択によって選択される。
菌株は次の培養上の形態学的且つ生理学的−生化学的特徴を有し;“クララシュ
ド(crushed)”滴下又は“懸2滴下において、移動性でグラム陽性の杆
状細胞はカタラーゼを産生し:有酸素条件下で、それは細胞中の中央に位置する
胞子を形成する。その培養菌は、通常使用される培地(肉−ヘプトン寒天、麦芽
汁寒天、Gro+eyko培地、ポテト寒天)上でひじょうに増殖する。肉−ヘ
プトン寒天上で、不均等の貝殻状の縁を有する白色又はクリーム色のしわになっ
たマント状の表面を有する異形のコロニーが形成される。それらのコロニーはま
た、光たくの表面及び均等の縁を用する円形で平なものでもあり得る0両種類の
コロニーは、ループにより寒天から容易に除去される。肉−ヘプトンブイヨン上
で増殖される場合、培養菌はフィルムを形成する。18時間の培養菌のスミアに
おいては、離れて又は鎖状のいずれかで存在する、2.0〜2.2 X 0.7
〜0.85JmOサイズを有する線状のものであるグラム陽性杆状細胞が検出さ
れる。胞子形成の後、それらの細胞は増殖せず;グルコース寒天上での増殖の後
、β−ヒドロキシ酪酸の包含は、原形質中の検出されない。その培養物は、ガス
を含まないで酸の形成を伴って、グルコース、アラビノース、マンニトール、キ
シロースの発酵を確保する。Foges−Proskower反応は、陽性であ
る。嫌気条件下で、その培養物は、NO,からガスを形成せず;それはアルギニ
ンジヒドロラーゼも生成しない。その培養物は、NaCAを7%含む培地上で増
殖し;それはスターチ、ゼラチンを加水分解し、シトレートを吸収し、プロピオ
ネートを使用せず、レシチナーゼ活性を示さず、温血動物に対して病原性を持た
ない。
菌株バ之立困 呈上王主土l困TSM門猶V −2336は、野性の培養物から
単離され、そして人工的な栄養培地上で培養した後、その変動性の研究の間、最
も高く且つ同時に安定した(45継代以上にわたって)拮抗活性を特徴とするも
のの選択によって選択される。
菌株は次の培養上の形態学的且つ生理学的−生化学的特徴を有し;“クララシュ
ド°滴下又は“懸”滴下において、移動性の杆状細胞であり、主に鎖状の2.4
〜2.7 X 0.5〜0.75−のサイズを有する。卵形の胞子は、細胞中の
中央に位置し、後で増殖しない、グルコース寒天上で増殖した後、小球が原形質
中に検出されない。
肉−ヘプトン寒天上で、コロニーは、光沢のない不透明な粗い表面を有する。そ
れらはまた、なめらかな光沢のある表面も有する0両種類のコロニーは、しっか
りと寒天に付着し、そしてループにより除去することが難しい。
長時間たった培養物のコロニーは、暗カン色に変わる。肉−ヘプトンブイヨン上
に、しわになったフィルムが形成され、そして時々、クリーム色の暗色部を伴う
、その培養物は、カタラーゼを産生ずる。それは、嫌気条件下で寒天上で増殖す
る能力を有する。Foges−Proskower反応は陽性であり、7%Na
C1を7%含む培地上で増殖し、スターチ、カゼインを加水分解し、尿素を加水
分解しない。ゆっくりとゼラチンを液体化する。肉−ヘプトンブイヨン上で増殖
する場合、アンモニアが形成され、インドール、硫化水素は、形成されない。
その培養物は、酸の形成を伴って、グルコース、ラクトース、マンニトールの発
酵を確保する。ニトレートを還元し、嫌気条件下でニトレートからガスを形成す
る。培養物は、コーギュラーゼ(凝固酵素)、ヒアルロニダーゼ及びレシチナー
ゼ活性を持たす;それは温血動物に対して病原性を持たない。
本発明の製剤は、水に不溶性であるが、しかしその中で及びミルク中で均質の安
定した懸濁液を形成する、薄褐色の結晶化された多孔性乾燥塊状物を含有する。
水の質量部分は、5%以下である。その製剤は、250■の乾燥固体(300〜
400bln、の微生物細胞)を含むガラスアンプル又は500■の乾燥固体(
600〜800bln、の微生物細胞)を有するガラスフラスコ中に利用できる
。
本発明の製剤は、若い家畜の急性胃腸病(病原性微生物及び条件によっては病原
性の微生物により引き起こされる家畜の非細菌症、大腸菌症、サルモネラ症、他
の種々の急性胃腸病)の予防及び処置のために有用である。
予防目的のための製剤の投与の形態は、次の通りである:300〜400bln
、の生存微生物細胞を有するアンプルの内容物が煮沸された11のミルク又は水
と共に混合され、そして25〜30℃に冷却され;次に初乳による栄養物摂取の
前(但し、誕生の後、1〜2時間以内)、前記混合物200−が新生動物に与え
られ;次にその供給が24及び48時間後、くり返される。
治療目的のための本発明の製剤の投与の態様は、次の通りである=300〜40
0bln、の生存微生物細胞を含むアンプルの内容物が、煮沸された11のミル
ク又は水と共に混合され、そして25〜30℃に冷却され、そして次に、その混
合物200m1が、病気が治るまで、1日2〜3回その病気の動物に与えられる
。
治療目的のための本発明の製剤の投与は、動物への病原性療法の他の薬物の投与
を除外しない、但し抗生物質の経口投与を除く、上記に特定された投与量におい
ては、それは合併病又は副作用を引き起こさない0本発明の製剤の投与に対する
禁忌は存在しない、獣医業務における本発明の製剤の使用は、安全性の測定の観
察を必要としない。
本発明の製剤は、若い家畜の胃腸病の予防及び処置のために試験された。予防目
的のために、その製剤が、328匹の新生牛に投与された。その製剤は、次の態
様で使用された。アンプルの内容物(300〜400bln、の微生物細胞)が
煮沸された11のミルク又は水と共に混合され、そして25〜30℃に冷却され
、そして初めに誕生後、2〜3時間で、次に再び2日目及び3日目、200 a
fの投与量でそれぞれ動物に供給される。
多くの場合、その製剤の供給は、4〜7日目で達成された。
平行した実験が対照動物群(185頭)に対して行われ、ここで−m的な予防測
定が取られる。子牛に対する観察が、1力月間、行われた。誕生の日及び誕生後
30日での体重の計量が行われた。
本発明の製剤の試験の結果は、本発明の製剤を供給された328匹の新生牛のう
ち、19匹が胃腸管の障害を有したことを示した。対照群においては、185匹
のうち123匹が病気になり、そしてそれらのうち4匹が死んだ。従って、本発
明の製剤の使用のおかげで、病的状態は、10倍減少した。
予防目的のために、本発明の製剤が、大腸菌、ブドウ球菌属、プロテウス属、ク
レゴメラ属、サルモネラ属の腸病原性株により引き起こされる種々の胃腸病を有
する284匹の子牛に投与された0本発明の製剤、次の態様で使用された:アン
プルの内容物(300〜400bln、の微生物細胞)が、煮沸された11のミ
ルク又は水と共に混合され、そして25〜30℃の温度に冷却され、そしてその
治癒まで(通常4〜5日間)、動物に供給された。治療目的のための本発明の製
剤の適用の結果として、284匹の動物のうち279匹が生存した。対照群にお
いては、抗生物質、化学調製物、薬草液及び他の方法により処理された134匹
の動物のうち18匹が死んだ。
従って、本発明の製剤の適用の場合における動物の予防の割合は、一般的に許容
される薬物の場合におけるよりも12%高い。
上記のようにして行−ねれた試験は、本発明の製剤の高い治療及び予防効力を証
明した。その製剤は、動物の胃腸病を引き起こす種々の種類の微生物に対する広
い範囲の拮抗性作用を示す。その製剤は、動物の予防応答の強化(内因性インタ
ーフェロンの誘発、白血球の食細胞活性の増強)に貢献する。
その製剤は、適用が簡単であり、無害且つ安全であり;それは新生動物の栄養補
給及び成長の態様に何の変化も与えない。
本発明の製剤は、次の方法で製造される。菌株ハ之立ス土1造−九ムTSMPM
11kLV−2335及び4 ’J ;本)Ly17TSMPM llh V
−2336の培養物が、麦芽汁寒天上で別々に18時間及び12日間、28℃の
温度で増殖せしめられる。その培養物の増殖されたバイオマスが、殺菌した水道
水により洗浄され、そして1mZ中に150〜200bln、の微生物細胞を含
む懸濁液が調製される。バ2立ス サブチリスTSM門隘V −2335の12
日間及び18時間培養物の等体積及びバ之旦ス 旦ニホルミスTS?IP?l
Nll V−2336の12日間及び18時間培養物の等体積が、別々に組合わ
される。
次に、製剤は、次の割合の成分により製造される(質量%):菌株バ之立ス並グ
±ユ丞TSMPM嵐V −2335のバイオマス・・・・・・45〜60゜
菌株!]鑑と入 l立三1ソヒ糺ムTSMPM嵐V −2336のバイオマス・
・・・・・15〜20、及び
特表千1−502340 (4)
充填剤・・・・・・残り。
充填剤として、ウシ血清又はゼラチンとサッカロース又はグルコースとの混合物
が使用される。
その得られた混合物が殺菌されたアンプル中に注がれ、そして−20℃よりも高
くない温度で24時間、冷凍庫中に置かれる。その製剤の凍結乾燥は、−20〜
+20℃の範囲内の温度で44時間よりも短くない時間にわたって行われる。凍
結乾燥の後、そのアンプルは密封される。
本発明の製剤は、長期貯蔵に基づいて、少なくとも2年間活性を維持する。
本発明をより理解するために・、製剤の特別な組成、その無害性の実証及び比活
性を示す次の特定の例が、下記に与えられる。
例 1
本発明の製剤は、次の組成(質量%)を有する:菌株4 サブチリスTSMPM
m%’ −2335のバイオマス・・・・・・45、
菌株訟」tトん ユ左i」ソと糺ムTS?lpH隘V −2336のバイオマス
・・・・・・20、
牛の血清・・・・・・32、
サッカロース・・・・・・3゜
すべての成分を混合し、2tnlの殺菌したアンプル中に注ぎ、−20℃よりも
高くない温度で24時間維持し、そして次に一20〜+20℃の温度で少なくと
も44時間、凍結乾燥せしめる。凍結乾燥の後、そのアンプルを密封する。製剤
をさらに無害性及び比活性について試験する。
無害性試験を次の通りに実施する:
眩体重当たりs、ooo■の量での製剤の10%水溶液を少なくとも5匹のマウ
ス(18〜22gの体重)に経口投与した後、すべてのマウスは生存し、そして
5日間の観察の間、臨床的に健康であるべきである。
製剤の比活性試験を、次の方法で行う:製剤中に導入されly7’;ダ トロピ
カリス)に対して研究する。
拮抗活性の試験のために、製剤中に導入される培養物を、ベトリ皿(Gause
媒体階2を有する)の直径にそってひっかくことにより接種し、そして37℃の
温度で48時間の増殖の後、試験微生物の220mnの懸濁液を、ひっかくこと
により通用する。37℃で18時間の増殖の後、試験培養物の増殖の阻害領域は
、10〜150以下であるべきでない。
この試験の結果は、下記の表に示される。
例2
本発明の製剤は、次の組成(質量%)を有する:菌株バ之土囚 サブチリスTS
MP?l m V−2335のバイオマス・・・・・・60、
菌株で3ヨL入 ユ立三すソヒ虹みTSMPM嵐V −2336のバイオグルコ
ース・・・・・・5゜
製剤の製造及び試験を、例1に記載の方法に類似する方法で行う。その試験の結
果は、下記の表に示される。
例3
本発明の製剤は、次の組成(質量%)を有する:菌株亙之立困 サブチリスTS
MP?l NI V−2335のバイオマス・・・・・・50、
菌株と3化と入 ユ立三りQと鉦ムTSMPl’l隘V −2336のバイオマ
ス・・・・・・15、
牛の血清・・・・・・32、
サッカロース・・・・・・3゜
この製剤の製造及び試験を、例1におけるようにして行う。
その試験の結果は、下記の表に示される。
例4
本発明の製剤は、次の組成(質量%)を有する:菌株バ之立ム サブチリスTS
?IPM !4 V−2335のバイオマス・・・・・・55、
菌株パ彰2と入 ユ立三目!ヒ辷ムTSMP?l磁V −2336のバイオマス
・・・・・・20、
ゼラチンの5%溶液・・・・・・21、サッカロース・・・・・・4゜
この製剤の製造及び試験を、例1に記載の方法に類似する方法で行う、その試験
の結果は、下記の表に示される。
例5
本発明の製剤は、次の組成(質量%)を有する:菌株五之立ス 支じ(L旦)、
TSMPM嵐V −2335のバイオマス・・・・・・52、
菌株乃]公と入 ユ立i」ソヒ糺入TS肝ガ嵐V −2336のバイオマス・・
・・・・18、
牛の血清・・・・・・25、
グルコース・・・・・・5゜
この製剤の製造及び試験を、例1に記載のようにして行う。
その試験の結果は、下記の表に示される。
例6
本発明の製剤は、次の組成(質量%)を有する:菌株バ之i囚 士夕一り隻ノヨ
TSMPM嵐V −2335のバイオマス・・・・・・58、
菌株パ」ヨL入 ユ立三リソと支ムTSMPM嵐v −2336のバイオマス・
・・・・・17、
牛の血清・・・・・・22、
サッカロース・・・・・・3゜
製剤の製造及び試験を、例1に記載のようにして行う。その試験の結果は、下記
の表に示される。
例7
本発明の製剤は、次の組成(質量%)を有する:菌株バ之立入 −サ1醪し呈ク
ヨTSMPM陽V −2335のバイオマス・・・・・・45、
菌株バ匹公ト入 ユ立三1!艶虹X TSMPM嵐V −2336のバイオマス
・・・・・・15、
牛の血清・・・・・・37、
特表平1−502340 (5)
グルコース・・・・・・3゜
製剤の製造及び試験を、例1に記載のようにして行う、・その試験の結果は、次
の表に示される。
表
本発明の製剤の試験の結果
1 無害 10 15 12
2 同上 11 16 13
3 同上 11 16 13
4 同上 11 16 13
5 同上 11 16 13
6 同上 11 16 12
産業上の適応性
本発明の製剤は、若い家畜の急性胃腸病を予防し又は処置するために使用され得
る。
Claims (2)
- 1.細菌のバイオマスを含んで成る、家畜の胃腸病の予防及び処置のための製剤 であって、前記細菌のバイオマスとして、人工的な栄養培地上での培養に基づい て、最も高く且つ安定した拮抗活性の特徴を示す自然選択により野性培養物から 選択された菌株バシラス サブチリス Bacillus subtlis)T SMPM Na V−2335のバイオマス及び菌株バシラス リケニホルミス (Bacillus licheniformis)TSMPM Na V−2 336のバイオマス(Central Museum of Industri al Microorganisms ofthe All−Union Re search Institute of Genetics and Sel ec−tion of Industria1 Microorganisms に寄託されている)、並びに充填剤を出発成分として次の割合(質量%)1m l中に微生物細胞150〜220bIn.を含む菌株バシラスサブチリスTSM PM Na V−2335のバイオマス・・・ ・・・45〜60、1ml中に 微生物細胞 150〜200b1n.を含む菌株バシラスリケニホルミスTSM PM NaV−2336のバイオマス・・・ ・・・15〜20、充填剤……残 り。 で含むことを特徴とする製剤。
- 2.充填剤として、牛の血清又はゼラチンとサッカロース又はグルコースとの混 合物を含むことを特徴とする請求項1記載の製剤。
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
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PCT/SU1987/000024 WO1988006619A1 (en) | 1987-02-24 | 1987-02-24 | Preparation for prophylaxis and treatment of gastro-intestinal disturbances in farm animals |
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