EA035171B1

EA035171B1 - Конъюгаты на основе связывающихся с psma лигандов или ингибиторов psma для позитронно-эмиссионной томографии

Info

Publication number: EA035171B1
Application number: EA201690862A
Authority: EA
Inventors: Ионтчо Р. Влахов; Кристофер П. Лимон; Филип С. Лоу; Гарт Л. Пархам; Циньшоу Чэнь
Original assignee: Эндосайт, Инк.; Пурдью Рисерч Фаундейшн
Priority date: 2013-11-14
Filing date: 2014-11-13
Publication date: 2020-05-08
Also published as: KR20160079887A; TWI657827B; AU2023202704A1; CN108514646A; US20160287731A1; US20220125958A1; CN105849568B; EP3777898A3; IL261259B; JP6464166B2; JP2022023172A; MX2022014611A; JP2019023232A; BR112016010927A2; CA2930581A1; EA201690862A1; AU2021200067A1; US20190275181A1; AU2021200067B2; IL245612A0

Abstract

Описаны соединения, композиции и способы для диагностирования и/или наблюдения патогенного заболевания с использованием позитронно-эмиссионной томографии. Кроме того, описаны конъюгаты формулы B-L-P, где B представляет собой радикал, представляющий собой средство нацеливания, выбранное из связывающихся с PSMA лигандов или ингибиторов PSMA, L представляет собой бивалентный линкер, содержащий аспарагиновую кислоту, лизин или аргинин, и P представляет собой радикал, представляющий собой средство визуализации или средство лучевой терапии, такой как радионуклид или содержащая радионуклид группа, или радикал, представляющий собой соединение, способное к связыванию с радионуклидом, такой как металлохелатирующая группа.

Description

Область техники

Изобретение, описанное в настоящем документе, относится к соединениям, композициям и способам для диагностирования и/или наблюдения заболеваний, а также болезненных состояний с применением радионуклидов. В частности, изобретение, описанное в настоящем документе, относится к соединениям, композициям и способам для диагностирования и/или наблюдения заболеваний, а также патогенных болезненных состояний с применением радионуклидов для позитронно-эмиссионной томографии (PET).

Предпосылки и краткое описание изобретения

PET представляет собой методику радионуклидной визуализации, с помощью которой выявляют пары γ-лучей, косвенно испускаемых позитрон-излучающим радионуклидом. Поскольку два испускаемых γ-луча проходят точно в противоположных направлениях, возможно определить их участки локализации и, тем самым, восстановить трехмерное изображение всех излучателей позитронов в результате компьютерного анализа источников испускаемых γ-лучей. По сравнению с другими радиовизуализационными методами, такими как SPECT, PET, как сообщают, демонстрирует более высокую чувствительность (приблизительно 2 порядка величины), улучшенную пространственную разрешающую способность (приблизительно 5 мм), более высокое отношение сигнал-шум и предусматривает превосходный количественный анализ радиоактивного индикатора как при доклинических, так и клинических применениях. Кроме того, в отличие от приблизительно 90 мин, необходимых для получения сканированных изображений организма для стандартной SPECT-визуализации, получение изображений с помощью PET обычно может быть проведено приблизительно за 20 мин. Более того, для PET-визуализации in vivo в целом необходимы лишь субнаномолярные (от 10^-10 до 10^-12) концентрации радиоактивного индикатора, при которых, как сообщается, минимизируется вероятное повреждение других биологических систем. Наконец, PET обеспечивает количественную динамическую визуализацию, с помощью которой можно облегчить исследования кинетики поражения цели посредством оккупации рецепторов. В настоящем документе сообщается, что было обнаружено, что средства PET могут быть нацелены на предварительно определенные ткани с применением рецепторов витаминов и/или простатического специфического мембранного антигена (PSMA).

Предстательная железа представляет собой мужской половой орган, функциями которого является продуцирование и хранение семенной жидкости, которая обеспечивает питательные вещества и жидкую среду для выживания сперматозоидов, вводимых во влагалище во время размножения. Подобно другим тканям предстательная железа может давать начало либо злокачественным (раковым), либо доброкачественным (нераковым) опухолям. Как сообщается, рак предстательной железы является одним из наиболее распространенных типов рака у мужчин в западном обществе и является второй основной формой злокачественных новообразований среди американских мужчин.

Простатический специфический мембранный антиген (PSMA) представляет собой биомаркер, который сверхэкспрессируется при раке предстательной железы. PSMA сверхэкспрессируется в озлокачествленных тканях предстательной железы по сравнению с другими органами организма человека, такими как почки, проксимальная часть тонкого кишечника и слюнные железы. PSMA также экспрессируется на новообразованных сосудах во многих солидных опухолях, не относящихся к опухолям предстательной железы, в том числе при раке легкого, толстой кишки, молочной железы, почки, печени и поджелудочной железы, но не на нормальных сосудах. Однако PSMA минимально экспрессируется в головном мозге. PSMA представляет собой мембраносвязанный гликопротеин клеточной поверхности II типа с молекулярной массой ~110 кДа, включающий внутриклеточный сегмент (аминокислоты 1-18), трансмембранный домен (аминокислоты 19-43) и обширный внеклеточный домен (аминокислоты 44-750). Несмотря на то, что функции внутриклеточного сегмента и трансмембранного домена, как сообщается, в настоящее время являются несущественными, внеклеточный домен вовлечен в несколько различных видов активности. Например, PSMA играет роль в центральной нервной системе, где он метаболизирует Nацетиласпартилглутамат (NAAG) в глутаминовую и N-ацетиласпарагиновую кислоту. PSMA также играет роль в проксимальной части тонкого кишечника, где он удаляет γ-связанный глутамат из поли-γглутамированного фолата и α-связанный глутамат из пептидов и малых молекул.

Несмотря на то, что определенная функция PSMA в отношении клеток рака предстательной железы остается неясной, известно, что PSMA подвергается быстрой интернализации в клетке, подобно рецепторам, связанным с клеточной поверхностью, таким как рецепторы витаминов. PSMA интернализируется через ямки, окаймленные клатрином, и затем может либо возвращаться на клеточную поверхность, либо двигаться к лизосомам. Соответственно, средства диагностики, визуализации и терапевтические средства могут нацеливаться на PSMA для доставки в клетки, экспрессирующие PSMA, такие как клетки рака предстательной железы.

- 1 035171

В настоящем документе сообщается, что было обнаружено, что соединения и композиции, описанные в настоящем документе, применимы для нацеливания и доставки радионуклидов для диагностирования и/или наблюдения различных заболеваний и болезненных состояний, вызванных популяциями патогенных клеток. Кроме того, было обнаружено, что соединения и композиции, описанные в настоящем документе, также применимы для нацеливания и доставки радионуклидов для лечения различных заболеваний и болезненных состояний, вызванных популяциями патогенных клеток, при лучевой терапии.

Согласно настоящему изобретению предложен конъюгат формулы

B-L-P или его фармацевтически приемлемая соль, где

В представляет собой радикал связывающегося с PSMA лиганда или ингибитора PSMA,

L представляет собой бивалентный линкер и

P выбран из группы, состоящей из

где P дополнительно содержит радионуклид.

В предпочтительном иллюстративном варианте осуществления бивалентный линкер L содержит полипептид, содержащий фенилаланин, лизин, аргинин или аспарагиновую кислоту или их комбинацию. В другом предпочтительном иллюстративном варианте осуществления бивалентный линкер L не включает в себя бирадикал формулы NH-(CH₂)₂-NH.

В предпочтительном иллюстративном варианте осуществления вышеописанный конъюгат содержит фрагмент, имеющий формулу

где радионуклид представляет собой ион хелатированного металла или соль хелатированного металла.

В другом предпочтительном иллюстративном варианте осуществления вышеописанный конъюгат содержит фрагмент, имеющий формулу

- 2 035171 где радионуклид представляет собой ион хелатированного металла или соль хелатированного ме талла.

В еще одном предпочтительном иллюстративном варианте осуществления вышеописанный конъюгат содержит фрагмент, имеющий формулу

о со₂н где n представляет собой целое число, выбранное из 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 или 10; или

О СО₂Н

О СО₂Н где W представляет собой O или S.

- 3 035171 где радионуклид представляет собой ион хелатированного металла или соль хелатированного металла.

где n представляет собой целое число, выбранное из 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 или 10.

В предпочтительном иллюстративном варианте осуществления бивалентный линкер L имеет формулу

В другом предпочтительном иллюстративном варианте осуществления бивалентный линкер L имеет формулу

В предпочтительном иллюстративном варианте осуществления радионуклид включает позитронноактивный радионуклид или средство лучевой терапии. Предпочтительно позитронно-активным радионуклидом или средством лучевой терапии является ⁶⁸Ga, ⁶⁶Ga, ¹⁸F, ¹⁷⁷Lu, ⁹⁰Y, ⁶⁴Cu, ⁶¹Cu, ⁸⁹Zr, ⁴⁵Ti, ⁵¹Mn,

- 4 035171

63^ 82^ 1 124т 11 13χτ 15z~\

Zn, Rb, 1, C, N или O.

Согласно настоящему изобретению также предложен конъюгат формулы

B-L-P или его фармацевтически приемлемая соль, где B представляет собой радикал связывающегося с PSMA лиганда или ингибитора PSMA, L представляет собой бивалентный линкер и P выбран из группы, состоящей из

СО₂Н СО₂Н

о или О .

- 5 035171

где n представляет собой целое число, выбранное из 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 или 10; или

где W представляет собой O или S.

В еще одном другом предпочтительном иллюстративном варианте осуществления вышеописанный конъюгат содержит фрагмент, имеющий формулу

- 6 035171 где n представляет собой целое число, выбранное из 1, 2, 3 ,4, 5, 6, 7, 8, 9 или 10.

Подробное описание

В каждом из вышеупомянутых и в каждом из последующих вариантов осуществления следует понимать, что формулы включают и представляют собой не только все фармацевтически приемлемые соли соединений, но также включают любые и все гидраты и/или сольваты соединений формул. Следует отметить, что определенные функциональные группы, такие как гидрокси, аминогруппы и подобные, образуют комплексы и/или координационные соединения с водой и/или различными растворителями в различных физических формах соединений. Соответственно, следует понимать, что формулы, описанные в настоящем документе, включают в себя и представляют такие различные гидраты и/или сольваты. Также следует понимать, что с помощью такой формулы описаны формулы соединений, не относящиеся к гидратам и/или сольватам, а также формулы соединений, относящиеся к гидратам и/или сольватам.

Применяемый в настоящем документе термин композиция обычно относится к любому продукту, содержащему определенные ингредиенты в определенных количествах, а также к любому продукту, который получают, непосредственно или опосредованно, в результате комбинаций определенных ингредиентов в определенных количествах. Следует понимать, что композиции, описанные в настоящем документе, могут быть получены из выделенных соединений, описанных в настоящем документе, или из солей, растворов, гидратов, сольватов и других форм соединений, описанных в настоящем документе. Следует отметить, что определенные функциональные группы, такие как гидрокси, аминогруппы и подоб

- 7 035171 ные, образуют комплексы и/или координационные соединения с водой и/или различными растворителями в различных физических формах соединений. Следует также понимать, что композиции могут быть получены из различных аморфных, неаморфных, частично кристаллических, кристаллических и/или других морфологических форм соединений, описанных в настоящем документе. Следует также понимать, что композиции могут быть получены из различных гидратов и/или сольватов соединений, описанных в настоящем документе. Соответственно, такие фармацевтические композиции, в которых упомянуты соединения, описанные в настоящем документе, следует понимать как включающие каждую или любую комбинацию различных морфологических форм и/или сольватных или гидратных форм соединений, описанных в настоящем документе. Кроме того, следует понимать, что композиции могут быть получены из различных сокристаллов соединений, описанных в настоящем документе.

В качестве иллюстрации композиции могут включать один или несколько носителей, разбавителей и/или наполнителей. Соединения, описанные в настоящем документе, или композиции, содержащие их, могут быть составлены в терапевтически эффективном количестве в любой традиционной лекарственной форме, пригодной для способов, описанных в настоящем документе. Соединения, описанные в настоящем документе, или композиции, содержащие их, в том числе такие составы, можно вводить при помощи широкого спектра традиционных путей для способов, описанных в настоящем документе, и большого разнообразия форматов дозировок, с использованием известных процедур (в общем см. Remington: The Science and Practice of Pharmacy, (21^st ed., 2005)).

В каждом из вышеупомянутых и в каждом из последующих вариантов осуществления также следует понимать, что формулы включают и представляют собой каждый возможный изомер, такой как стереоизомеры и геометрические изомеры как отдельно, так и в любой и во всех возможных смесях. В каждом из вышеупомянутых и в каждом из последующих вариантов осуществления также следует понимать, что формулы включают и представляют собой любую и все кристаллические формы, частично кристаллические формы и некристаллические и/или аморфные формы соединений.

Иллюстративные варианты осуществления настоящего изобретения описаны в следующих пунктах. Конъюгат формулы

B-L-P или его фармацевтически приемлемая соль, где В представляет собой радикал, представляющий собой средство нацеливания, выбранный из связывающихся с PSMA лигандов и ингибиторов PSMA, L представляет собой бивалентный линкер и P представляет собой радикал, представляющий собой средство визуализации или средство лучевой терапии, такой как радионуклид или содержащая радионуклид группа, или его предшественник, или радикал, представляющий собой соединение, способное к связыванию с радионуклидом или содержащей радионуклид группой, такой как металлохелатирующая группа.

Конъюгат по любому из предыдущих пунктов, где линкер содержит полипептид.

Конъюгат по любому из предыдущих пунктов, где линкер содержит полипептид, содержащий лизин, аргинин или аспарагиновую кислоту или их комбинацию. Конъюгат по любому из предыдущих пунктов, где линкер содержит лизин.

Конъюгат по любому из предыдущих пунктов, где линкер содержит Lys.

Конъюгат по любому из предыдущих пунктов, где линкер содержит Arg-Lys.

Конъюгат по любому из предыдущих пунктов, где линкер содержит Arg-Arg-Lys.

Конъюгат по любому из предыдущих пунктов, где линкер содержит Asp-Arg-Arg-Lys.

Конъюгат по любому из предыдущих пунктов, где линкер не включает в себя полиаминовый радикал, такой как полиаминовый бирадикал формулы NH-(CH₂)₂-NH.

Конъюгат по любому из предыдущих пунктов, где P имеет формулу

или его производное, содержащее хелатированный металл. Конъюгат по любому из предыдущих пунктов, имеющий формулу

или его производное, содержащее хелатированный металл.

Конъюгат по любому из предыдущих пунктов, где линкер содержит [(CH₂)₂O]_n, [(CH₂)₂O]_n-(CH₂)₂C(O), [(CH2)2O]n-(CH2)2-C(O)NH, [(CH2)2O]n-(CH2)2-C(O)NH-(CH2)2, [(CH2)2O]2-(CH2)n-C(O)NH-(CH2)2NH, где n представляет собой целое число от 1 до приблизительно 12.

Конъюгат по любому из предыдущих пунктов, где линкер содержит [(CH₂)₂O]₂, [(CH₂)₂O]₆ или

- 8 035171 [(CH₂)₂O]₁₂.

Конъюгат по любому из предыдущих пунктов, где линкер содержит (CH₂)₂O-(CH₂)₂-C(O), [(CH2)2O]2-(CH2)2-C(O), [(CH2)2O]₆-(CH2)2-C(O) или [(CH₂bO]1₂-(CH₂b-C(O).

Конъюгат по любому из предыдущих пунктов, где линкер содержит (CH₂)₂O-(CH₂)₂-C(O)NH, [(CH2)2O]2-(CH2)2-C(O)NH, [(CH2)2O]6-(CH2)2-C(O)NH или [(CH2)2O]12-(CH2)2-C(O)NH.

Конъюгат по любому из предыдущих пунктов, где линкер содержит (CH₂)₂O-(CH₂)₂-C(O)NH-(CH₂)₂, [(CH2)2O]2-(CH2)2-C(O)NH-(CH2)2, [(CH2)2O]6-(CH2)2-C(O)NH-(CH2)2 или [(CH2)2O]12-(CH2)2-C(O)NH(CH2)2.

Конъюгат по любому из предыдущих пунктов, где линкер содержит (CH₂)₂O-(CH₂)₂-C(O)NH(CH2)2NH, [(CH2)2O]2-(CH2)2-C(O)NH-(CH2)2NH, [(CH2)2O]6-(CH2)2-C(O)NH-(CH2)2NH или [(CH2)2O]12(CH2)2-C(O)NH-(CH2)2NH.

Конъюгат по любому из предыдущих пунктов, где линкер содержит NH[(CH₂)₂O]_n, NH[(CH₂)₂O]_n(CH2)2-C(O), NH[(CH2)2O]n-(CH2)2-C(O)NH, NH[(CH2hO]n-(CH2)2-C(O)NH-(CH2)2, NH[(CH₂bO]n-(CH₂bC(O)NH-(CH₂)₂NH, где n представляет собой целое число от 1 до приблизительно 12.

Конъюгат по любому из предыдущих пунктов, где линкер содержит NH(CH₂)₂O, NH[(CH₂)₂O]₂, NH[(CH2)2O]6, NH[(CH2)2O]12.

Конъюгат по любому из предыдущих пунктов, где линкер содержит NH(CH₂)₂O-(CH₂)₂-C(O), NH[(CH2)2O]2-(CH2)2-C(O), NH[(CH2)2O]6-(CH2)2-C(O) или NH[(CH2)2O]12-(CH2)2-C(O).

Конъюгат по любому из предыдущих пунктов, где линкер содержит NH(CH₂)₂O-(CH₂)₂-C(O)NH, NH[(CH2)2O]2-(CH2)2-C(O)NH, NH[(CH2)2O]6-(CH2)2-C(O)NH или NH[(CH2)2O]12-(CH2)2-C(O)NH.

Конъюгат по любому из предыдущих пунктов, где линкер содержит NH(CH₂)₂O-(CH₂)₂-C(O)NH(CH2)2,NH[(CH2)2O]2-(CH2)2-C(O)NH-(CH2)2, NH[(CH2)2O]6-(CH2)2-C(O)NH-(CH2)2 или NH[(CH2)2O]12(CH2)2-C(O)NH-(CH2)2.

Конъюгат по любому из предыдущих пунктов, где линкер содержит NH(CH₂)₂O-(CH₂)₂-C(O)NH(CH2)2NH, NH[(CH2)2O]2-(CH2)2-C(O)NH-(CH2)2NH, NH[(CH2)2O]6-(CH2)2-C(O)NH-(CH2)2NH или NH[(CH2)2O]12-(CH2)2-C(O)NH-(CH2)2NH.

Конъюгат по любому из предыдущих пунктов, где линкер содержит NH[(CH₂)₂O]_n-(CH₂)₂NH, где n представляет собой целое число от 1 до приблизительно 12.

Конъюгат по любому из предыдущих пунктов, где линкер содержит NH(CH₂)₂O-(CH₂)₂NH, NH[(CH2)2O]2-(CH2)2NH, NH[(CH2)2O]6-(CH2)2NH или NH[(CH2)2O]12-(CH2)2NH.

Конъюгат по любому из предыдущих пунктов, где линкер содержит NH[(CH₂)₂O]_n-(CH₂)₂NH-C(O)(CH₂)₂-C(O), где n представляет собой целое число от 1 до приблизительно 12.

Конъюгат по любому из предыдущих пунктов, где линкер содержит NH(CH₂)₂O-(CH₂)₂NH-C(O)(CH2)2-C(O), NH[(CH2)2O]2-(CH2)2NH-C(O)-(CH2)2-C(O), NH[(CH2)2O]6-(CH2)2NH-C(O)-(CH2)2-C(O) или NH[(CH2)2O]12-(CH2)2NH-C(O)-(CH2)2-C(O).

Конъюгат по любому из предыдущих пунктов, имеющий формулу

НО₂С )

НО₂С или его производное, содержащее хелатированный металл. Конъюгат по любому из предыдущих пунктов, имеющий формулу

- 9 035171 или его производное, содержащее хелатированный металл.

Конъюгат по любому из предыдущих пунктов, где средство нацеливания представляет собой радикал, представляющий собой связывающийся с PSMA лиганд или ингибитор PSMA.

Конъюгат по любому из предыдущих пунктов, где средство нацеливания представляет собой радикал, представляющий собой ингибитор PSMA.

где W представляет собой O или S.

Конъюгат по любому из предыдущих пунктов, где линкер содержит полипептид, содержащий фенилаланин, лизин, аргинин или аспарагиновую кислоту или их комбинацию.

Конъюгат по любому из предыдущих пунктов, где линкер содержит лизин.

Конъюгат по любому из предыдущих пунктов, где линкер содержит Asp-Arg-Lys.

Конъюгат по любому из предыдущих пунктов, где линкер содержит Arg-Asp-Arg.

Конъюгат по любому из предыдущих пунктов, где линкер содержит Arg-Asp-Arg-Lys.

Конъюгат по любому из предыдущих пунктов, где линкер содержит Phe-Arg-Asp.

Конъюгат по любому из предыдущих пунктов, где линкер содержит Phe-Arg-Asp-Arg.

Конъюгат по любому из предыдущих пунктов, где линкер содержит Phe-Arg-Asp-Arg-Lys.

Конъюгат по любому из предыдущих пунктов, где линкер содержит Phe-Phe-Arg.

Конъюгат по любому из предыдущих пунктов, где линкер содержит Phe-Phe-Arg-Asp.

Конъюгат по любому из предыдущих пунктов, где линкер содержит Phe-Phe-Arg-Asp-Arg.

Конъюгат по любому из предыдущих пунктов, где линкер содержит Phe-Phe-Arg-Asp-Arg-Lys.

Конъюгат по любому из предыдущих пунктов, где радикал, представляющий собой радионуклид или содержащую радионуклид группу, или его предшественник, или соединение, способное к связыванию с радионуклидом или содержащей радионуклид группой, представляет собой радикал NOTA.

- 10 035171

О или его производное, содержащее хелатированный металл. Конъюгат по любому из предыдущих пунктов, имеющий формулу

где n представляет собой целое число, выбранное из 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 или 10. Конъюгат по любому из предыдущих пунктов, имеющий формулу

предыдущих пунктов, где линкер имеет формулу

Конъюгат по любому из

Конъюгат по любому из предыдущих пунктов, где линкер имеет формулу

Конъюгат по любому ют собой L-фенилаланин.

Конъюгат по любому из предыдущих пунктов, где один или несколько фенилаланинов представляиз предыдущих пунктов, имеющий формулу

- 11 035171

или его производное, содержащее хелатированный металл. Конъюгат по любому из предыдущих пунктов, где P имеет формулу

Конъюгат по любому из предыдущих пунктов, где радионуклид представляет собой позитронноактивный радионуклид.

Конъюгат по любому из предыдущих пунктов, где радионуклид представляет собой ион металла.

Конъюгат по любому из предыдущих пунктов, где радионуклид представляет собой соль металла.

Конъюгат по любому из предыдущих пунктов, содержащий галогенид алюминия, такой как фторид алюминия, хлорид алюминия, бромид алюминия или йодид алюминия.

Конъюгат по любому из предыдущих пунктов, содержащий фторид алюминия.

Конъюгат по любому из предыдущих пунктов, содержащий ¹⁸Р-фторид алюминия.

Конъюгат по любому из предыдущих пунктов, содержащий йодид алюминия.

Конъюгат по любому из предыдущих пунктов, содержащий ¹²⁵Кйодид алюминия.

Конъюгат по любому из предыдущих пунктов, содержащий ион галлия.

Конъюгат по любому из предыдущих пунктов, содержащий ион ⁶⁶Ga.

Конъюгат по любому из предыдущих пунктов, содержащий ион ⁶⁸Ga.

Конъюгат по любому из предыдущих пунктов, содержащий ион циркония.

Конъюгат по любому из предыдущих пунктов, содержащий ион ⁸⁹Zr.

- 12 035171

Конъюгат по любому из предыдущих пунктов, содержащий ион меди.

Конъюгат по любому из предыдущих пунктов, содержащий ион ⁶⁴Cu.

Конъюгат по любому из предыдущих пунктов, где радионуклид представляет собой средство лучевой терапии, такое как йод, в том числе ¹³¹I, лютеций, в том числе ¹⁷⁷Lu, иттрий, в том числе ⁹⁰Y, стронций, в том числе Sr, самарий, в том числе Sm, и т.п., или содержащую средство лучевой терапии группу.

Конъюгат по любому из предыдущих пунктов, содержащий ион лютеция, такой как ион ¹⁷⁷Lu. Конъюгат по любому из предыдущих пунктов, содержащий ион иттрия, такой как ион ⁹⁰Y. Конъюгат формул

или его фармацевтически приемлемая соль. Конъюгат формул

или

М = AI-¹⁸F, ^eeGa, ¹⁷⁷Lu или^,0У или его фармацевтически приемлемая соль.

где X^- представляет собой основу конъюгата, представляющую собой кислоту, такую как трифторметансульфоновая кислота.

- 13 035171 где X^- представляет собой основу конъюгата, представляющую собой кислоту, такую как трифторметансульфоновая кислота.

CN

Конъюгат по любому из предыдущих пунктов, где P имеет формулу *NH-C(CH₂OH)₃.

Конъюгат по любому из предыдущих пунктов, содержащий фторид бора.

Конъюгат по любому из предыдущих пунктов, содержащий F-фторид бора.

Фармацевтическая композиция, содержащая один или несколько конъюгатов по любому из предыдущих пунктов в комбинации с одним или несколькими носителями, разбавителями или наполнителями или их комбинацией.

Композиция однократной дозы или стандартной лекарственной формы, содержащая диагностически эффективное количество одного или нескольких конъюгатов по любому из предыдущих пунктов, необязательно в комбинации с одним или несколькими носителями, разбавителями или наполнителями или их комбинацией, для диагностирования и/или наблюдения заболеваний, вызванных популяцией патогенных клеток, таких как рак или воспалительное заболевание.

Композиция однократной дозы или стандартной лекарственной формы, содержащая терапевтически эффективное количество одного или нескольких конъюгатов по любому из предыдущих пунктов, необязательно в комбинации с одним или несколькими носителями, разбавителями или наполнителями или их комбинацией, для лечения заболеваний, вызванных популяцией патогенных клеток, таких как рак или воспалительное заболевание.

Композиция для диагностирования и/или наблюдения заболевания или болезненного состояния, вызванных, по меньшей мере частично, популяцией патогенных клеток, таких как рак или воспалительное заболевание, у животного-хозяина, причем композиция содержит диагностически эффективное количество одного или нескольких конъюгатов по любому из предыдущих пунктов; или фармацевтическая композиция, содержащая диагностически эффективное количество одного или нескольких конъюгатов по любому из предыдущих пунктов, необязательно дополнительно содержащая один или несколько носителей, разбавителей или наполнителей или их комбинацию.

Композиция для лечения заболевания или болезненного состояния, вызванных, по меньшей мере частично, популяцией патогенных клеток, таких как рак или воспалительное заболевание, у животногохозяина, причем композиция содержит терапевтически эффективное количество одного или нескольких конъюгатов по любому из предыдущих пунктов; или фармацевтическая композиция, содержащая терапевтически эффективное количество одного или нескольких конъюгатов по любому из предыдущих

- 14 035171 пунктов, необязательно дополнительно содержащая один или несколько носителей, разбавителей или наполнителей или их комбинацию.

Способ диагностирования и/или наблюдения заболевания или болезненного состояния, вызванных, по меньшей мере частично, популяцией патогенных клеток, таких как рак или воспалительное заболевание, у животного-хозяина, причем способ включает стадию введения диагностически эффективного количества одного или нескольких конъюгатов по любому из предыдущих пунктов или фармацевтической композиции, содержащей диагностически эффективное количество одного или нескольких конъюгатов по любому из предыдущих пунктов, необязательно дополнительно содержащей один или несколько носителей, разбавителей или наполнителей или их комбинацию.

Способ лечения заболевания или болезненного состояния, вызванных, по меньшей мере частично, популяцией патогенных клеток, таких как рак или воспалительное заболевание, у животного-хозяина, причем способ включает стадию введения терапевтически эффективного количества одного или нескольких конъюгатов по любому из предыдущих пунктов или фармацевтической композиции, содержащей терапевтически эффективное количество одного или нескольких конъюгатов по любому из предыдущих пунктов, необязательно дополнительно содержащей один или несколько носителей, разбавителей или наполнителей или их комбинацию.

Применение одного или нескольких конъюгатов по любому из предыдущих пунктов или фармацевтической композиции, содержащей один или несколько конъюгатов по любому из предыдущих пунктов, необязательно дополнительно содержащей один или несколько носителей, разбавителей или наполнителей или их комбинацию, при изготовлении лекарственного препарата для диагностирования и/или наблюдения заболевания или болезненного состояния, вызванных, по меньшей мере частично, популяцией патогенных клеток, таких как рак или воспалительное заболевание, у животного-хозяина.

Применение одного или нескольких конъюгатов по любому из предыдущих пунктов или фармацевтической композиции, содержащей один или несколько конъюгатов по любому из предыдущих пунктов, необязательно дополнительно содержащей один или несколько носителей, разбавителей или наполнителей или их комбинацию, при изготовлении лекарственного препарата для лечения и/или наблюдения заболевания или болезненного состояния, вызванных, по меньшей мере частично, популяцией патогенных клеток, таких как рак или воспалительное заболевание, у животного-хозяина.

Набор, содержащий один или несколько конъюгатов по любому из предыдущих пунктов или фармацевтическую композицию на их основе, необязательно дополнительно содержащую один или несколько носителей, разбавителей или наполнителей или их комбинацию; необязательный растворитель; необязательный реакционный контейнер и набор инструкций, для получения одного или нескольких радионуклидов и объединения одного или нескольких радионуклидов с одним или несколькими конъюгатами с получением средства визуализации, диагностического средства или терапевтического средства.

Следует понимать, что в каждом случае, где соединение или химическая формула включает атом или положение, которые обозначены или включают (*), (*) указывает на то, что соединение или химическая формула представляет собой радикал со свободной валентностью при таком атоме или положении, а также, что такой атом или положение представляет собой место для прикрепления другого радикала.

В другом иллюстративном варианте осуществления конъюгат, композиция, однократная доза, способ, применение или набор в соответствии с любым другим вариантом осуществления, описанным в настоящем документе, содержат соединение формулы

COR

или его производное, содержащее хелатированный металл; или радикал, представляющий собой вышеуказанное, где каждый R, в каждом случае независимо, выбран с образованием карбоновой кислоты или ее соли, сложного эфира или амида, и каждый из R¹, R² и R³ независимо выбран из водорода и алкила, циклоалкила, арила, арилалкила, гетероарила и гетероарилалкила, каждый из которых необязательно замещен.

- 15 035171

COR

или его производное, содержащее хелатированный металл; или радикал, представляющий собой вышеуказанное, где каждый R, в каждом случае независимо, выбран с образованием карбоновой кислоты или ее соли, сложного эфира или амида, и каждый из R¹, R² и R³ независимо выбран из водорода и алкила, циклоалкила, арила, арилалкила, гетероарила и гетероарилалкила, каждый из которых необязательно замещен, такие как следующие иллюстративные соединения:

R¹	R²
* Н₂С^Х	^NH2 V	Н
*Н₂С^Х	АА s	Н
ί * Н₂С	н ^γΝ^ΝΗ₂ ^S	Н

или соль карбоновой кислоты или ее карбоксамидное производное (CONH2), или радикал в соответствии с вышеуказанным; или их производное, содержащее хелатированный металл.

или его производное, содержащее хелатированный металл; или радикал, представляющий собой вышеуказанное, где R⁴ и R⁵ выбраны из водорода и алкила, циклоалкила, арила, арилалкила, гетероарила и гетероарилалкила, каждый из которых необязательно замещен, или соль карбоновой кислоты или ее карбоксамидное производное (CONH₂), или радикал в соответствии с вышеуказанным; или их производное, содержащее хелатированный металл.

- 16 035171

или соль карбоновой кислоты или ее карбоксамидное производное (CONH₂), или радикал в соответствии с вышеуказанным; или их производное, содержащее хелатированный металл.

Применяемый в настоящем документе термин радикал в целом относится к соединению или фрагменту химического вещества со свободной валентностью, которые образуются после удаления атома водорода или гидроксильной группы из карбоновой кислоты. Например, следующие радикалы могут быть образованы из L-NETA

где каждый (*) при атоме представляет собой свободную валентность для прикрепления линкера и/или средства нацеливания.

Следует понимать, что вышеуказанные соединения и их радикалы могут быть дополнительно функционализированы с прикреплением реакционноспособных групп для последующего прикрепления линкеров и/или групп нацеливания. В качестве иллюстрации в настоящем документе описываются следующие реакционноспособные промежуточные соединения:

где n равняется 0 или 1, и NX представляет собой и т.п.

Следует понимать, что следующие соединения и их хелаты металлов не являются конъюгатами в соответствии с настоящим изобретением:

где n равняется 1 или 3.

- 17 035171

Соединения, описанные в настоящем документе, могут содержать один или несколько хиральных центров или могут иметь возможность иным образом существовать в виде множества стереоизомеров. Следует понимать, что в одном варианте осуществления настоящее изобретение, описанное в настоящем документе, не ограничивается каким-либо конкретным стереохимическим условием, и что соединения и композиции, способы, применения и лекарственные препараты, которые их включают, могут быть оптически чистыми или могут представлять собой любую разновидность стереоизомерных смесей, в том числе рацемических и других смесей энантиомеров, другие смеси диастереомеров и т.п. Также следует понимать, что такие смеси стереоизомеров могут включать одну стереохимическую конфигурацию в одном или нескольких хиральных центрах, при этом они могут включать смеси стереохимических конфигураций в одном или нескольких других хиральных центрах.

Аналогично, соединения, описанные в настоящем документе, могут включать геометрические центры, такие как цис-, транс-, Е- и Z-двойные связи. Следует понимать, что в другом варианте осуществления настоящее изобретение, описанное в настоящем документе, не ограничивается любым конкретным условием относительно геометрического изомера, и что соединения и композиции, способы, применения и медицинские препараты, в которые они включены, могут быть чистыми или могут представлять собой любой из целого ряда смесей геометрических изомеров. Также следует понимать, что такие смеси геометрических изомеров могут включать одну конфигурацию по одной или нескольким двойным связям, при этом они могут включать смеси геометрических структур по одной или нескольким другим двойным связям.

Применяемый в настоящем документе термин алкил включает цепь атомов углерода, которая необязательно разветвлена. Каждый из применяемых в настоящем документе терминов алкенил и алкинил включает цепь атомов углерода, которая необязательно разветвлена, и включает по меньшей мере одну двойную связь или тройную связь соответственно. Следует понимать, что алкинил может также включать одну или несколько двойных связей. Следует также понимать, что в определенных вариантах осуществления алкил преимущественно имеет ограниченную длину, в том числе C₁-C₂₄, C₁-C₁₂, C₁-C₈, C₁C₆ и C₁-C₄. В качестве иллюстрации такие алкильные группы с особенно ограниченной длиной, в том числе C₁-C₈, C₁-C₆ и C₁-C₄, могут быть названы как низший алкил. Следует также понимать, что в определенных вариантах осуществления каждый из алкенила и/или алкинила может преимущественно иметь ограниченную длину, в том числе C₂-C₂₄, C₂-C₁₂, C₂-C₈, C₂-C₆ и C₂-C₄. В качестве иллюстрации такие алкенильные и/или алкинильные группы с особенно ограниченной длиной, в том числе C₂-C₈, C₂-C₆ и C₂C₄, могут быть названы как низший алкенил и/или алкинил. Следует отметить в настоящем документе, что более короткие алкильные, алкенильные и/или алкинильные группы могут придавать соединению меньшую липофильность, и они, таким образом, будут характеризоваться отличающимся фармакокинетическим поведением. В вариантах осуществления настоящего изобретения, описанных в настоящем документе, следует понимать в каждом случае, что упоминание алкила относится к алкилу, как определено в настоящем документе, и необязательно к низшему алкилу. В вариантах осуществления настоящего изобретения, описанных в настоящем документе, следует понимать в каждом случае, что упоминание алкенила относится к алкенилу, как определено в настоящем документе, и необязательно к низшему алкенилу. В вариантах осуществления настоящего изобретения, описанных в настоящем документе, следует понимать в каждом случае, что упоминание алкинила относится к алкинилу, как определено в настоящем документе, и необязательно к низшему алкинилу. Иллюстративные алкильные, алкенильные и алкинильные группы представляют собой, без ограничения, метильную, этильную, н-пропильную, изопропильную, н-бутильную, изобутильную, втор-бутильную, трет-бутильную, пентильную, 2-пентильную, 3пентильную, неопентильную, гексильную, гептильную, октильную и т.п., и соответствующие группы, содержащие одну или несколько двойных и/или тройных связей, или их комбинацию.

Применяемый в настоящем документе термин алкилен включает бивалентную цепь атомов углерода, которая необязательно разветвлена. Применяемые в настоящем документе термины алкенилен и алкинилен включают бивалентную цепь атомов углерода, которая необязательно разветвлена и включает по меньшей мере одну двойную связь или тройную связь соответственно. Следует понимать, что алкинилен может также включать одну или несколько двойных связей. Следует также понимать, что в определенных вариантах осуществления алкилен преимущественно имеет ограниченную длину, в том числе C₁-C₂₄, C₁-C₁₂, C₁-C₈, C₁-C₆ и C₁-C₄. В качестве иллюстрации такие алкиленовые группы с особенно ограниченной длиной, в том числе C₁-C₈, C₁-C₆ и C₁-C₄, могут быть названы как низший алкилен. Следует также понимать, что в определенных вариантах осуществления каждый из алкенилена и/или алкинилена может преимущественно иметь ограниченную длину, в том числе C₂-C₂₄, C₂-C₁₂, C₂-C₈, C₂-C₆ и C₂C4. В качестве иллюстрации такие алкениленовые и/или алкиниленовые группы с особенно ограниченной длиной, в том числе C2-C8, C2-C6 и C2-C4, могут быть названы как низший алкенилен и/или алкинилен. Следует отметить в настоящем документе, что более короткие алкиленовые, алкениленовые и/или алкиниленовые группы могут придавать соединениям меньшую липофильность, и они, таким образом, будут характеризоваться отличающимся фармакокинетическим поведением. В вариантах осуществления настоящего изобретения, описанного в настоящем документе, следует понимать в каждом случае, что упоминание алкилена, алкенилена и алкинилена относится к алкилену, алкенилену и алкинилену, как

- 18 035171 определено в настоящем документе, и необязательно к низшим алкилену, алкенилену и алкинилену. Иллюстративными алкильными группами являются, без ограничения, метилен, этилен, н-пропилен, изопропилен, н-бутилен, изобутилен, втор-бутилен, пентилен, 1,2-пентилен, 1,3-пентилен, гексилен, гептилен, октилен и т.п.

Применяемый в настоящем документе термин линкер включает цепь атомов, которые соединяют две или более функциональных частей молекулы с образованием конъюгата. В качестве иллюстрации цепь атомов выбирают из C, N, O, S, Si и P, или C, N, O, S и P, или C, N, O и S. Цепь атомов ковалентно связывает различные функциональные средства конъюгата, такие как средства нацеливания, лекарственные средства, диагностические средства, средства визуализации и т.п. Линкер может иметь различную длину, например в диапазоне от приблизительно 2 до приблизительно 100 атомов в непрерывном скелете. Атомы, применяемые в образовании линкера, могут объединяться всеми релевантными с химической точки зрения способами, как, например, цепи атомов углерода, образующие алкиленовые, алкениленовые и алкиниленовые группы и т.п.; цепи атомов углерода и кислорода, образующие простые эфиры, полиоксиалкиленовые группы или при объединении с карбонильными группами, образующими сложные эфиры и карбонаты и т.п.; цепи атомов углерода и азота, образующие амины, имины, полиамины, гидразины, гидразоны или при объединении с карбонильными группами, образующие амиды, мочевины, семикарбазиды, карбазиды и т.п.; цепи атомов углерода, азота и кислорода, образующие алкоксиамины, алкоксиламины или при объединении с карбонильными группами образующие уретаны, аминокислоты, ацилоксиламины, гидроксаминовые кислоты и т.п.; а также многие другие. Кроме того, следует понимать, что атомы, образующие цепь в каждом из вышеупомянутых иллюстративных вариантов осуществления, могут быть либо насыщенными, либо ненасыщенными, таким образом, образующими одинарные, двойные или тройные связи, так что, например, радикалами, которые включаются в линкер, могут быть алканы, алкены, алкины, имины и т.п. Кроме того, следует понимать, что атомы, образующие линкер, также могут циклизоваться друг с другом или могут быть частью циклической структуры с образованием бивалентных циклических структур, которые образуют линкер, в том числе циклоалканы, простые циклические эфиры, циклические амины и другие гетероциклы, арилены, гетероарилены и т.п. в линкере. В случае последнего расположения следует понимать, что длину линкера можно определять по любому пути через одну или несколько циклических структур. В качестве иллюстрации, длина линкера определяется по самому короткому пути через каждую из циклических структур. Следует понимать, что линкеры необязательно могут быть замещены по любой одной или нескольким из свободных валентностей вдоль цепи атомов, например, необязательными заместителями на любом из атомов углерода, азота, кремния или фосфора. Также следует понимать, что линкер может соединять две или несколько функциональных частей молекулы с образованием конъюгата по любой свободной валентности, и не является необходимым, чтобы любая из двух или более функциональных частей молекулы, образующей конъюгат, присоединялась на любом явном конце линкера.

Применяемый в настоящем документе термин циклоалкил включает цепь атомов углерода, которая необязательно разветвлена, где по меньшей мере часть цепи является циклической. Следует понимать, что циклоалкилалкил является разновидностью циклоалкила. Следует понимать, что циклоалкил может быть полициклическим. Иллюстративный циклоалкил включает без ограничения циклопропил, циклопентил, циклогексил, 2-метилциклопропил, циклопентилэт-2-ил, адамантил и т.п. Применяемый в настоящем документе термин циклоалкенил включает цепь атомов углерода, которая необязательно разветвлена и включает по меньшей мере одну двойную связь, где по меньшей мере часть цепи является циклической. Следует понимать, что одна или несколько двойных связей могут быть в циклической части циклоалкенила и/или нециклической части циклоалкенила. Следует понимать, что каждый из циклоалкенилалкила и циклоалкилалкенила является разновидностью циклоалкенила. Следует понимать, что циклоалкил может быть полициклическим. Иллюстративный циклоалкенил включает без ограничения циклопентенил, циклогексилэтен-2-ил, циклогептенилпропенил и т.п. Следует также понимать, что цепь, образующая циклоалкил и/или циклоалкенил, преимущественно, имеет ограниченную длину, в том числе C₃-C₂₄, C₃-C₁₂, C₃-C₈, C₃-C₆ и C₅-C₆. Следует отметить в настоящем документе, что более короткие алкильные и/или алкенильные цепи, образующие циклоалкил и/или циклоалкенил, соответственно, могут придавать соединениям меньшую липофильность, и они, таким образом, будут характеризоваться отличающимся фармакокинетическим поведением.

Применяемый в настоящем документе термин гетероалкил включает цепь атомов, которая включает как атомы углерода, так и по меньшей мере один гетероатом и необязательно разветвлена. Иллюстративные гетероатомы включают азот, кислород и серу. В определенных вариациях иллюстративные гетероатомы также включают фосфор и селен. Применяемый в настоящем документе термин циклогетероалкил, в том числе гетероциклил и гетероцикл, включает цепь атомов, которая включает как атомы углерода, так и по меньшей мере один гетероатом, такая как гетероалкил, и необязательно разветвлена, при этом по меньшей мере часть цепи является циклической. Иллюстративные гетероатомы включают азот, кислород и серу.

В определенных вариациях иллюстративные гетероатомы также включают фосфор и селен. Иллюстративный циклогетероалкил включает без ограничения тетрагидрофурил, пирролидинил, тетрагидро- 19 035171 пиранил, пиперидинил, морфолинил, пиперазинил, гомопиперазинил, хинуклидинил и т.п.

Применяемый в настоящем документе термин арил включает моноциклические и полициклические ароматические карбоциклические группы, каждая из которых может быть необязательно замещена. Иллюстративные ароматические карбоциклические группы, описанные в настоящем документе, включают без ограничения фенил, нафтил и т.п. Применяемый в настоящем документе термин гетероарил включает ароматические гетероциклические группы, каждая из которых может быть необязательно замещена. Иллюстративные ароматические гетероциклические группы включают без ограничения пиридинил, пиримидинил, пиразинил, триазинил, тетразинил, хинолинил, хиназолинил, хиноксалинил, тиенил, пиразолил, имидазолил, оксазолил, тиазолил, изоксазолил, изотиазолил, оксадиазолил, тиадиазолил, триазолил, бензимидазолил, бензоксазолил, бензтиазолил, бензизоксазолил, бензизотиазолил и т.п.

Применяемый в настоящем документе термин необязательно замещенный включает замещение атомов водорода другими функциональными группами в радикале, который необязательно замещен. Такие другие функциональные группы в качестве иллюстрации включают без ограничения амино, гидроксил, галоген, тиол, алкил, галогеналкил, гетероалкил, арил, арилалкил, арилгетероалкил, гетероарил, гетероарилалкил, гетероарилгетероалкил, нитро, сульфоновые кислоты и их производные, карбоновые кислоты и их производные и т.п. В качестве иллюстрации любые из амино, гидроксила, тио, алкила, галогеналкила, гетероалкила, арила, арилалкила, арилгетероалкила, гетероарила, гетероарилалкила, гетероарилгетероалкила и/или сульфоновой кислоты необязательно замещены.

Применяемые в настоящем документе термины необязательно замещенный арил и необязательно замещенный гетероарил включают замещение атомов водорода другими функциональными группами в ариле или гетероариле, которые необязательно замещены. Такие другие функциональные группы, также называемые в настоящем документе заместители арила, в качестве иллюстрации включают без ограничения амино, гидрокси, галоген, тио, алкил, галогеналкил, гетероалкил, арил, арилалкил, арилгетероалкил, гетероарил, гетероарилалкил, гетероарилгетероалкил, нитро, сульфоновые кислоты и их производные, карбоновые кислоты и их производные и т.п. В качестве иллюстрации любые из амино, гидрокси, тио, алкила, галогеналкила, гетероалкила, арила, арилалкила, арилгетероалкила, гетероарила, гетероарилалкила, гетероарилгетероалкила и/или сульфоновой кислоты необязательно замещены.

Иллюстративные заместители включают, без ограничения, радикал (CH₂)_xZ^X, где х представляет собой целое число 0-6 и Z^X выбран из галогена, гидрокси, алканоилокси, в том числе С1-С6алканоилокси, необязательно замещенного ароилокси, алкила, в том числе С1-С6алкила, алкокси, в том числе С1С6алкокси, циклоалкила, в том числе С3-С8циклоалкила, циклоалкокси, в том числе С3-С8циклоалкокси, алкенила, в том числе С2-С6алкенила, алкинила, в том числе С2-С6алкинила, галогеналкила, в том числе С1-С6галогеналкила, галогеналкокси, в том числе С1-С6галогеналкокси, галогенциклоалкила, в том числе С3-С8галогенциклоалкила, галогенциклоалкокси, в том числе С3-С8галогенциклоалкокси, амино, С1С6алкиламино, (С1-С6алкил)(С1-С6алкил)амино, алкилкарбониламино, Ы-(С1-С6алкил)алкилкарбониламино, аминоалкила, С1-С6алкиламиноалкила, (С1-С6алкил)(С1-С6алкил)аминоалкила, алкилкарбониламиноалкила, М-(С1-С6алкил)алкилкарбониламиноалкила, циано и нитро; или Z^X выбран из CO2R⁴ и CONR5R⁶, где каждый из R⁴, R⁵ и R⁶, в каждом случае независимо, выбран из водорода, С1-С₆алкила, арил-С₁-С₆алкила и гетероарил-С₁-С₆алкила.

Следует понимать, что в каждом случае, раскрытом в настоящем документе, упоминание диапазона целых чисел для любой переменной включает упоминаемый диапазон, каждый отдельный член в диапазоне и каждый возможный поддиапазон для этой переменной. Например, упоминание, что n представляет собой целое число от 0 до 8, описывает этот диапазон, отдельные и выбираемые значения 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 и 8, как, например, n равняется 0, или n равняется 1, или n равняется 2 и т.д. Кроме того, упоминание, что n представляет собой целое число от 0 до 8, также описывает абсолютно все поддиапазоны, каждый из которых может служить основанием для дополнительного варианта осуществления, как, например, n представляет собой целое число от 1 до 8, от 1 до 7, от 1 до 6, от 2 до 8, от 2 до 7, от 1 до 3, от 2 до 4 и т.д.

Применяемый в настоящем документе термин композиция обычно относится к любому продукту, содержащему определенные ингредиенты в определенных количествах, а также к любому продукту, который получают, непосредственно или опосредованно, в результате комбинаций определенных ингредиентов в определенных количествах. Следует понимать, что композиции, описанные в настоящем документе, могут быть получены из выделенных соединений, описанных в настоящем документе, или из солей, растворов, гидратов, сольватов и других форм соединений, описанных в настоящем документе. Следует отметить, что определенные функциональные группы, такие как гидрокси, аминогруппы и подобные, образуют комплексы и/или координационные соединения с водой и/или различными растворителями в различных физических формах соединений. Следует также понимать, что композиции могут быть получены из различных аморфных, неаморфных, частично кристаллических, кристаллических и/или других морфологических форм соединений, описанных в настоящем документе. Следует также понимать, что композиции могут быть получены из различных гидратов и/или сольватов соединений, описанных в настоящем документе. Соответственно, такие фармацевтические композиции, в которых упомянуты соединения, описанные в настоящем документе, следует понимать как включающие каждую или любую

- 20 035171 комбинацию различных морфологических форм и/или сольватных или гидратных форм соединений, описанных в настоящем документе.

В качестве иллюстрации композиции могут включать один или несколько носителей, разбавителей и/или наполнителей. Соединения, описанные в настоящем документе, или композиции, содержащие их, могут быть составлены в диагностически или терапевтически эффективном количестве в любой традиционной лекарственной форме, пригодной для способов, описанных в настоящем документе. Соединения, описанные в настоящем документе, или композиции, содержащие их, в том числе такие составы, можно вводить при помощи широкого спектра традиционных путей для способов, описанных в настоящем документе, и большого разнообразия форматов дозировок, с использованием известных процедур (в общем см. Remington: The Science and Practice of Pharmacy, (21^st ed., 2005)).

Применяемый в настоящем документе термин диагностически эффективное количество относится к такому количеству активного соединения или фармацевтического средства, которое вызывает биологическую или медицинскую реакцию в системе тканей у животного или человека, что определяет исследователь, ветеринар, врач или другой клиницист, которая предусматривает диагностирование или наблюдение симптомов заболевания или нарушения, лечение которого осуществляют. Иллюстративные диагностически эффективные количества конъюгата, подлежащего введению животному-хозяину, включают от приблизительно 1 пг/кг до приблизительно 10 мг/кг, от 1 нг/кг до приблизительно 10 мг/кг, или от приблизительно 10 мкг/кг до приблизительно 1 мг/кг, или от приблизительно 100 до приблизительно 500 мкг/кг.

Применяемый в настоящем документе термин терапевтически эффективное количество относится к такому количеству активного соединения или фармацевтического средства, которое вызывает биологическую или медицинскую реакцию в системе тканей у животного или человека, что определяет исследователь, ветеринар, врач или другой клиницист, которая предусматривает облегчение симптомов заболевания или нарушения, лечение которого осуществляют. В одном аспекте терапевтически эффективное количество представляет собой такое количество, с помощью которого возможно лечение или облегчение заболевания или симптомов заболевания при приемлемом отношении польза/риск, применяемом к любому терапевтическому лечению. Однако следует понимать, что общее за сутки применение соединений и композиций, описанных в настоящем документе, может быть определено лечащим врачом в рамках тщательной медицинской оценки. Конкретный терапевтически эффективный уровень дозы для любого определенного пациента будет зависеть от ряда факторов, в том числе нарушения, которое подлежит лечению, и тяжести нарушения; активности конкретного применяемого соединения; конкретной применяемой композиции; возраста, массы тела, общего состояния здоровья, пола и режима питания пациента; времени введения, пути введения и скорости экскреции конкретного применяемого соединения; длительности лечения; лекарственных средств, применяемых в комбинации или случайно с конкретным применяемым соединением; и подобных факторов, хорошо известных исследователю, ветеринару, врачу или другому клиницисту, специализирующемуся в данной области. Иллюстративные терапевтически эффективные количества конъюгата, подлежащего введению животному-хозяину, включают от приблизительно 1 пг/кг до приблизительно 10 мг/кг, от 1 нг/кг до приблизительно 10 мг/кг, или от приблизительно 10 мкг/кг до приблизительно 1 мг/кг, или от приблизительно 100 до приблизительно 500 мкг/кг.

Термин введение, как применяется в настоящем документе, включает все средства введения соединений и композиций, описанных в настоящем документе, животному-хозяину, в том числе без ограничения пероральным (po), внутривенным (iv), внутримышечным (im), подкожным (sc), трансдермальным, ингаляционным, буккальным, окулярным, сублингвальным, вагинальным, ректальным и т.п. Соединения и композиции, описанные в настоящем документе, можно вводить в стандартных лекарственных формах и/или составах, содержащих традиционные нетоксичные, фармацевтически приемлемые носители, вспомогательные средства и/или среды.

Применяемый в настоящем документе термин аминокислота обычно относится к β, γ и более длинным аминокислотам, таким как аминокислоты формулы

-N(R)-(CR'R)q-C(O)где R представляет собой водород, алкил, ацил или подходящую защитную группу азота, R' и R представляют собой водород или заместитель, каждый из которых независимо выбран в каждом случае, и q представляет собой целое число, такое как 1, 2, 3, 4 или 5. В качестве иллюстрации R' и/или R независимо представляют собой, без ограничения, водород или боковые цепи, присутствующие во встречающихся в природе аминокислотах, таких как метил, бензил, гидроксиметил, тиометил, карбоксил, карбоксилметил, гуанидинопропил и т.п. и их производных и защищенных производных. Вышеописанная формула включает все стереоизомерные вариации. Например, аминокислота может быть выбрана из аланина, аспарагиновой кислоты, аспарагина, цистеина, глутаминовой кислоты, фенилаланина, гистидина, изолейцина, лизина, лейцина, метионина, пролина, глутамина, аргинина, серина, треонина, валина, триптофана, тирозина и орнитина и т.п.

Следует понимать, что в каждом случае, раскрытом в настоящем документе, упоминание диапазона целых чисел для любой переменной включает упоминаемый диапазон, каждый отдельный член в диапазоне и каждый возможный поддиапазон для этой переменной. Например, упоминание, что n представля

- 21 035171 ет собой целое число от 0 до 8, описывает этот диапазон, отдельные и выбираемые значения 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 и 8, как, например, n равняется 0, или n равняется 1, или n равняется 2 и т.д. Кроме того, упоминание, что n представляет собой целое число от 0 до 8, также описывает абсолютно все поддиапазоны, каждый из которых может служить основанием для дополнительного варианта осуществления, как, например, n представляет собой целое число от 1 до 8, от 1 до 7, от 1 до 6, от 2 до 8, от 2 до 7, от 1 до 3, от 2 до 4 и т.д.

В другом варианте осуществления линкеры, описанные в настоящем документе, включают полиэфир, например, линкеры следующих формул:

где m, в каждом случае независимо, выбран из целого числа от 1 до приблизительно 8; р представляет собой целое число, выбранное из от 1 до приблизительно 10; и n, в каждом случае независимо, выбран из целого числа от 1 до приблизительно 3. В одном аспекте m в каждом случае независимо равняется от 1 до приблизительно 3. В другом аспекте n в каждом случае равняется 1. В другом аспекте р, в каждом случае независимо, равняется от 4 до приблизительно 6. В качестве иллюстрации полипропиленовые полиэфиры, соответствующие вышеуказанным, описываются в настоящем документе и могут быть включены в конъюгаты в качестве линкеров. Кроме того, следует отметить, что смешанные полиэтиленовые и полипропиленовые полиэфиры могут включаться в конъюгаты в качестве линкеров. Кроме того, в настоящем документе описываются циклические вариации вышеуказанных полиэфирных соединений, таких как включающие тетрагидрофуранил, 1,3-диоксаны, 1,4-диоксаны и т.п.

В другом варианте осуществления линкеры, описанные в настоящем документе, включают множество гидроксильных функциональных групп, например линкеры, которые включают моносахариды, олигосахариды, полисахариды и т.п. Следует понимать, что линкеры, содержащие полигидроксил, содержат множество групп -(CROH), где R представляет собой водород или алкил.

В другом варианте осуществления линкеры включают один или несколько следующих бирадикалов:

где R представляет собой H, алкил, циклоалкил или арилалкил; m представляет собой целое число от 1 до приблизительно 3; n1 представляет собой целое число от 1 до приблизительно 5 или n1 представляет собой целое число от 2 до приблизительно 5, p представляет собой целое число от 1 до приблизительно 5, и r выбран из целого числа от 1 до приблизительно 3. В одном аспекте целое число n равняется 3 или 4. В другом аспекте целое число p равняется 3 или 4. В другом аспекте целое число r равняется 1.

- 22 035171

где R представляет собой H, алкил, циклоалкил или арилалкил; m представляет собой целое число от 1 до приблизительно 3; n представляет собой целое число от 1 до приблизительно 5 или от 2 до приблизительно 5, p представляет собой целое число от 1 до приблизительно 5, и r выбран из целого числа от 1 до приблизительно 3. В одном аспекте целое число n равняется 3 или 4. В другом аспекте целое число p равняется 3 или 4. В другом аспекте целое число r равняется 1.

В другом варианте осуществления линкер включает одну или несколько из следующих цикличе ских полигидроксильных групп:

где n представляет собой целое число от 2 до приблизительно 5, p представляет собой целое число от 1 до приблизительно 5, и каждый r представляет собой независимо выбранное целое число от 1 до приблизительно 4. В одном аспекте целое число n равняется 3 или 4. В другом аспекте целое число p равняется 3 или 4. В другом аспекте каждое целое число r независимо равняется 2 или 3. Следует понимать, что в настоящем документе описываются все стереохимические формы таких секций линкеров. Например, в вышеупомянутых формулах секция может быть получена из рибозы, ксилозы, глюкозы, маннозы, галактозы или другого сахара и сохраняет стереохимические расположения боковых гидроксильных и алкильных групп, присутствующих в этих молекулах. Кроме того, следует понимать, что с помощью вышеупомянутых формул также описываются различные дезоксисоединения. В качестве ил- 23 035171 люстрации описываются соединения следующих формул:

где n равняется или меньше r, например, если r равняется 2 или 3, n равняется 1 или 2, или 1, 2 или 3 соответственно.

В другом варианте осуществления линкер включает полигидроксильное соединение следующей формулы:

где каждый n и r выбран из целого числа от 1 до приблизительно 3. В одном аспекте линкер включает в себя одно или несколько полигидроксильных соединений следующих формул:

Следует понимать, что в настоящем документе описываются все стереохимические формы таких секций линкеров. Например, в вышеупомянутых формулах секция может быть получена из рибозы, ксилозы, глюкозы, маннозы, галактозы или другого сахара и сохраняет стереохимические расположения боковых гидроксильных и алкильных групп, присутствующих в этих молекулах.

В другой конфигурации линкеры L, описанные в настоящем документе, включают полигидроксильные группы, которые расположены на определенном расстоянии от скелета линкера. В одном варианте осуществления такие углеводные группы или полигидроксильные группы соединяются со скелетом посредством триазольной группы с образованием триазол-связанных линкеров. В качестве иллюстрации такие линкеры включают бирадикалы следующих формул:

где n, m и r, в каждом случае независимо, выбраны из целого числа от 1 до приблизительно 5. В одном иллюстративном аспекте m, в каждом случае независимо, равняется 2 или 3. В другом аспекте r в каждом случае равняется 1. В другом аспекте n в каждом случае равняется 1. В одной вариации группа, соединяющая полигидроксильную группу со скелетом линкера, представляет собой отличающуюся гетероарильную группу, в том числе, без ограничения, пиррол, пиразол, 1,2,4-триазол, фуран, оксазол, изоксазол, тиенил, тиазол, изотиазол, оксадиазол и т.п. Аналогично, описываются двухвалентные 6-членные кольцевые гетероарильные группы. Другие вариации вышеупомянутых иллюстративных линкеров включают оксиалкиленовые группы, например, со следующими формулами:

- 24 035171

где n и r, в каждом случае независимо, выбраны из целого числа от 1 до приблизительно 5; а p выбран из целого числа от 1 до приблизительно 4.

В другом варианте осуществления такие углеводные группы или полигидроксильные группы соединяются со скелетом посредством амидной группы с образованием амид-связанных линкеров. В качестве иллюстрации такие линкеры включают бирадикалы следующих формул:

где каждый n представляет собой независимо выбранное целое число от 1 до приблизительно 3, и m представляет собой независимо выбранное целое число от 1 до приблизительно 22. В одном иллюстративном аспекте каждый n независимо равняется 1 или 2. В другом иллюстративном аспекте m выбран из от приблизительно 6 до приблизительно 10, в качестве иллюстрации 8. В одной вариации группа, соединяющая полигидроксильную группу со скелетом линкера, представляет собой отличающуюся функциональную группу, в том числе, без ограничения, сложные эфиры, мочевины, карбаматы, ацилгидразоны и т.п. Подобным образом, описываются циклические вариации. Другие вариации вышеупомянутых иллюстративных линкеров включают оксиалкиленовые группы, например, со следующими формулами:

где n в каждом случае представляет собой независимо выбранное целое число от 1 до приблизительно 5; и p представляет собой целое число, выбранное из от 1 до приблизительно 4.

- 25 035171

где R представляет собой H, алкил, циклоалкил или арилалкил; каждый m независимо выбран из целого числа от 1 до приблизительно 3; каждый n представляет собой независимо выбранное целое число от 1 до приблизительно 6, p представляет собой целое число от 1 до приблизительно 5, и r выбран из целого числа от 1 до приблизительно 3. В одной вариации каждый n независимо равняется 3 или 4. В другой вариации целое число p равняется 3 или 4. В другой вариации целое число r равняется 1.

- 26 035171

где R представляет собой H, алкил, циклоалкил или арилалкил; каждый m независимо выбран из целого числа от 1 до приблизительно 3; каждый n представляет собой независимо выбранное целое число от 2 до приблизительно 6, p представляет собой целое число от 1 до приблизительно 5, и r выбран из целого числа от 1 до приблизительно 3. В одной вариации каждый n независимо равняется 3 или 4. В другой вариации целое число p равняется 3 или 4. В другой вариации целое число r равняется 1.

В другом варианте осуществления линкеры включают один или несколько следующих бирадика лов:

где каждый m независимо выбран из целого числа от 1 до приблизительно 3; каждый n представляет собой независимо выбранное целое число от 1 до приблизительно 6, p представляет собой целое число от 1 до приблизительно 5, и r выбран из целого числа от 1 до приблизительно 3. В одной вариации каждый n независимо равняется 3 или 4. В другой вариации целое число p равняется 3 или 4. В другой вариации целое число r равняется 1.

- 27 035171

где каждый m независимо выбран из целого числа от 1 до приблизительно 3; каждый n представляет собой независимо выбранное целое число от 2 до приблизительно 6, p представляет собой целое число от 1 до приблизительно 5, и r выбран из целого числа от 1 до приблизительно 3. В одной вариации каждый n независимо равняется 3 или 4. В другой вариации целое число p равняется 3 или 4. В другой вариации целое число r равняется 1.

где каждый n представляет собой независимо выбранное целое число от 1 до приблизительно 3, p представляет собой целое число от 1 до приблизительно 5, и r представляет собой выбранное целое число от 1 до приблизительно 3. В другой вариации целое число p равняется 3 или 4. В другой вариации целое число r равняется 1.

В другом варианте осуществления линкер представляет собой комбинацию скелета и разветвляющихся боковых мотивов, таких как иллюстрированные следующими формулами:

где n в каждом случае независимо выбран из целого числа от 0 до приблизительно 3. Вышеприве- 28 035171 денные формулы предназначены для представления циклических сахаров с 4, 5, 6 и даже большим числом членов. Кроме того, следует понимать, что вышеупомянутые формулы могут быть модифицированы до типичных дезоксисахаров, где одна или несколько гидроксигрупп, представленных в формулах, замещены водородом, алкилом или амино. Кроме того, следует понимать, что соответствующие карбонильные соединения описываются вышеупомянутыми формулами, где одна или несколько из гидроксильных групп окисляются до соответствующего карбонила. Кроме того, в этом иллюстративном варианте осуществления пираноза включает как функциональную карбоксильную, так и аминогруппу и (a) может быть внедрена в скелет и (b) может обеспечивать синтетическую основу для разветвляющихся боковых цепей в вариациях этого варианта осуществления. Любую из боковых гидроксильных групп можно применять для присоединения других химических радикалов, в том числе дополнительных сахаров, с получением соответствующих олигосахаридов. Также описываются другие вариации данного ва рианта осуществления, в том числе вставка пиранозы или другого сахара в скелет по одному атому углерода, т.е. спиро-расположение, по геминальной паре атомов углерода и подобные расположения. Например, один или два конца линкера, или средство P, или лиганд B могут быть соединены с сахаром, подлежащим вставке в скелет в 1,1; 1,2; 1,3; 1,4; 2,3 или другом расположении.

В другом варианте осуществления линкеры включают одну или несколько аминогрупп следующих формул:

где каждый n в каждом случае независимо выбран из целого числа от 1 до приблизительно 3. В одном аспекте каждый n, в каждом случае независимо, равняется 1 или 2. В другом аспекте целое число n в каждом случае равняется 1.

В другом варианте осуществления линкер представляет собой сложный эфир серной кислоты, такой как алкиловый сложный эфир серной кислоты. В качестве иллюстрации линкер характеризуется следующей формулой:

- 29 035171

где каждый n, в каждом случае независимо, выбран из целого числа от 1 до приблизительно 3. В качестве иллюстрации каждый n, в каждом случае независимо, равняется 1 или 2.

Следует понимать, что в такой полигидроксильной, полиаминной карбоновой кислоте, серной кислоте и подобных линкерах, которые включают свободные атомы водорода, связанные с гетероатомами, один или несколько из таких свободных атомов водорода могут быть защищены соответствующей гидроксильной, аминной или кислотной защитной группой соответственно, или в качестве альтернативы могут быть блокированы как соответствующие пролекарства, последние из которых выбраны для конкретного применения, как, например, пролекарства, которые высвобождают исходное лекарственное средство при обычных или специфических физиологических условиях.

Следует понимать, что в каждом из вышеуказанных иллюстративных примеров стереохимические конфигурации, показанные в настоящем документе, представлены лишь для иллюстрации, и при этом описываются другие стереохимические конфигурации. Например, в одной вариации соответствующие несвойственные конфигурации аминокислот могут быть включены в конъюгаты, описанные в настоящем документе, следующим образом:

где каждый n представляет собой независимо выбранное целое число от 2 до приблизительно 5, p представляет собой целое число от 1 до приблизительно 5, и r представляет собой целое число от 1 до приблизительно 4, как описано выше.

Кроме того, следует понимать, что в вышеупомянутых вариантах осуществления открытые положения, такие как (*) атомы, представляют собой положения для прикрепления средства нацеливания B или средства (P). Кроме того, следует понимать, что такое присоединение одного или обоих B и A может быть прямым или может осуществляться через промежуточный линкер. Дополнительные иллюстративные линкеры описаны в патенте США № 7601332, раскрытие которого включено в настоящий документ посредством ссылки.

- 30 035171

Иллюстративные бивалентные радикалы образуют часть линкера.

- 31 035171

Следует понимать, что бивалентные линкеры могут быть объединены любым релевантным с химической точки зрения способом либо непосредственно, либо посредством промежуточного гетероатома для конструирования линкеров, описанных в настоящем документе.

В другом варианте осуществления поливалентные линкеры, описанные в настоящем документе, содержат линкер, выбранный из группы, состоящей из карбонила, тионокарбонила, алкилена, циклоалкилена, алкиленциклоалкила, алкиленкарбонила, циклоалкиленкарбонила, карбонилалкилкарбонила, 1алкиленсукцинимид-3-ила, 1-(карбонилалкил)сукцинимид-3-ила, алкиленсульфоксила, сульфонилалкила, алкиленсульфоксилалкила, алкиленсульфонилалкила, карбонилтетрагидро-2И-пиранила, карбонилтетрагидрофуранила, 1-(карбонилтетрагидро-2И-пиранил)сукцинимид-3-ила и 1-(карбонилтетрагидрофуранил)сукцинимид-3-ила.

В другом варианте осуществления соединения, описанные в настоящем документе, содержат одну или несколько аминокислот.

Соединения, описанные в настоящем документе, могут применяться как в клинической медицине, так и в ветеринарии. Таким образом, животным-хозяином, несущим популяцию патогенных клеток и подлежащим введению соединений, описанных в настоящем документе, может быть человек или , в случае ветеринарного применения, может быть лабораторное, сельскохозяйственное, домашнее или дикое животное. Настоящее изобретение можно применять по отношению к животным-хозяевам, в том числе, без ограничения, людям, лабораторным животным, таким как грызуны (например, мыши, крысы, хомяки и т.д.), кролики, обезьяны, шимпанзе, домашним животным, таким как собаки, кошки и кролики, сельскохозяйственным животным, таким как коровы, лошади, свиньи, овцы, козы, и диким животным в неволе, таким как медведи, панды, львы, тигры, леопарды, слоны, зебры, жирафы, гориллы, дельфины и киты.

Соединения, композиции, способы и применения, описанные в настоящем документе, применимы для диагностирования и/или наблюдения заболеваний, вызванных, по меньшей мере частично, популяциями патогенных клеток, которые могут вызывать ряд патологий у животных-хозяев. Применяемый в настоящем документе термин патогенные клетки или популяция патогенных клеток в целом относится к раковым клеткам, возбудителям инфекции, таким как бактерии и вирусы, инфицированным бактериями или вирусами клеткам, клеткам воспаления, активированным макрофагам, способным вызывать болезненное состояние, и любому другому типу патогенных клеток, которые однозначно экспрессируют, преимущественно экспрессируют или сверхэкспрессируют сайты связывания для средств нацеливания, описанных в настоящем документе.

В качестве иллюстрации популяцией патогенных клеток может быть популяция раковых клеток, которые являются онкогенными, в том числе доброкачественные опухоли и злокачественные опухоли, или они могут быть неонкогенными. Популяция раковых клеток может возникать спонтанно или в результате таких процессов, как мутации, присутствующие в зародыше животного-хозяина, или соматические мутации, или она может быть индуцированной химически, вирусом или радиоактивным излучением. Настоящее изобретение может быть использовано для диагностирования, наблюдения и/или лечения таких форм рака, в том числе карцином, сарком, лимфом, болезнь Ходжкина, меланом, мезотелиом, лимфомы Буркитта, назофарингеальных карцином, лейкозов и миелом. Популяция раковых клеток без ограничения может относится к формам рака ротовой полости, щитовидной железы, эндокринной железы, кожи, желудка, пищевода, гортани, поджелудочной железы, толстой кишки, мочевого пузыря, кости, яичника, шейки матки, матки, молочной железы, яичка, предстательной железы, прямой кишки, почки, печени и легкого.

В качестве иллюстрации популяция патогенных клеток также может представлять собой активированные моноциты или макрофаги, связанные с болезненными состояниями, такими как фибромиалгия, ревматоидный артрит, остеоартрит, язвенный колит, болезнь Крона, псориаз, остеомиелит, рассеянный склероз, атеросклероз, фиброз легких, саркоидоз, системный склероз, отторжение трансплантированного органа (GVHD), красная волчанка, синдром Шегрена, гломерулонефрит, воспаление кожи, такое как псориаз, и т.п., хроническими воспалениями и воспалениями вследствие травмы, такой как травма головы или позвоночника, видами эмболии и т.п.

В другом варианте осуществления группа нацеливания представляет собой лиганд или ингибитор PSMA, такой как производное пентандиовой кислоты формулы со,н

НО;

где X представляет собой RP(O)(OH)CH₂- (US 5968915); RP(O)(OH)N(R¹)- (US 5863536); RP(O)(OH)O- (US 5795877); RN(OH)C(O)Y- или RC(O)NH(OH)Y, где Y представляет собой -CR₁R₂-, -NR₃- или -O- (US 5962521); RS(O)Y, RSO2Y или RS(O)(NH)Y, где Y представляет собой -CR₁R₂-, -NR₃или -O- (US. 5902817); и RS-алкил, где R представляет собой, например, водород, алкил, арил или арилалкил, каждый из которых может быть необязательно замещен (J. Med. Chem. 46:1989-1996 (2003)).

- 32 035171

В каждой из вышеуказанных формул каждый из R, R_b R2 и R₃ независимо выбран из водорода, С₁С₉алкила с прямой или разветвленной цепью, С₂-С9алкенила с прямой или разветвленной цепью, С₃С₈циклоалкила, С₅-С₇циклоалкенила и арила. Кроме того, в каждом случае каждый из R, R₁, R₂ и R₃ необязательно может быть замещен, например, одной или несколькими группами, выбранными из С₃С₈циклоалкила, С₅-С₇циклоалкенила, галогена, гидрокси, нитро, трифторметила, С₁-С₆алкила с прямой или разветвленной цепью, С₂-С₆алкенила с прямой или разветвленной цепью, С₁-С₄алкокси, С₂С₄алкенилокси, фенокси, бензилокси, амино, арила. В одном аспекте арил выбран из 1-нафтила, 2нафтила, 2-индолила, 3-индолила, 2-фурила, 3-фурила, 2-тиенила, 3-тиенила, 2-пиридила, 3-пиридила, 4пиридила, бензила и фенила, и в каждом случае арил необязательно может быть замещен одной или несколькими, в качестве иллюстрации одной-тремя группами, выбранными из галогена, гидрокси, нитро, трифторметила, С1-С6алкила с прямой или разветвленной цепью, С2-С6алкенила с прямой или разветвленной цепью, С₁-С₄алкокси, С₂-С₄алкенилокси, фенокси, бензилокси и амино. В одной вариации для каждой из вышеуказанных формул R не представляет собой водород.

Иллюстративные лиганды PSMA (US 5968915) включают

2-[[метилгидроксифосфинил]метил]пентандиовую кислоту; 2-[[этилгидроксифосфинил]метил]пентандиовую кислоту; 2-[[пропилгидроксифосфинил]метил]пентандиовую кислоту; 2-[[бутилгидроксифосфинил]метил]пентандиовую кислоту; 2-[[циклогексилгидроксифосфинил]метил]пентандиовую кислоту; 2-[[фенилгидроксифосфинил]метил]пентандиовую кислоту; 2-[[2-(тетрагидрофуранил)гидроксифосфинил]метил]пентандиовую кислоту; 2-[[(2-тетрагидропиранил)гидроксифосфинил]метил]пентандиовую кислоту; 2-[[((4-пиридил)метил)гидроксифосфинил]метил]пентандиовую кислоту; 2-[[((2-пиридил)метил)гидроксифосфинил]метил]пентандиовую кислоту; 2-[[(фенилметил)гидроксифосфинил]метил]пентандиовую кислоту; 2-[[((2-фенилэтил)метил)гидроксифосфинил]метил]пентандиовую кислоту; 2-[[((3-фенилпропил)метил)гидроксифосфинил]метил]пентандиовую кислоту; 2-[[((3-фенилбутил)метил)гидроксифосфинил]метил]пентандиовую кислоту; 2-[[((2-фенилбутил)метил)гидроксифосфинил]метил]пентандиовую кислоту; 2-[[(4-фенилбутил)гидроксифосфинил]метил]пентандиовую кислоту и 2-[[(аминометил)гидроксифосфинил]метил]пентандиовую кислоту.

Иллюстративные лиганды PSMA (US 5863536) включают Ы-[метилгидроксифосфинил]глутаминовую кислоту; Ы-[этилгидроксифосфинил]глутаминовую кислоту; И-[пропилгидроксифосфинил]глутаминовую кислоту; И-[бутилгидроксифосфинил]глутаминовую кислоту; И-[фенилгидроксифосфинил]глутаминовую кислоту; И-[(фенилметил)гидроксифосфинил]глутаминовую кислоту; И-[((2-фенилэтил)метил)гидроксифосфинил]глутаминовую кислоту и Ы-метил-Н-[фенилгидроксифосфинил]глутаминовую кислоту.

Иллюстративные лиганды PSMA (US 5795877) включают 2-[[метилгидроксифосфинил]окси]пентандиовую кислоту; 2-[[этилгидроксифосфинил]окси]пентандиовую кислоту; 2-[[пропилгидроксифосфинил]окси]пентандиовую кислоту; 2-[[бутилгидроксифосфинил]окси]пентандиовую кислоту; 2-[[фенилгидроксифосфинил]окси]пентандиовую кислоту; 2-[[((4-пиридил)метил)гидроксифосфинил]окси]пентандиовую кислоту; 2-[[((2-пиридил)метил)гидроксифосфинил]окси]пентандиовую кислоту; 2-[[(фенилметил)гидроксифосфинил]окси]пентандиовую кислоту и 2[[((2-фенилэтил)метил)гидроксифосфинил]окси]пентандиовую кислоту. Иллюстративные лиганды PSMA (US 5962521) включают 2-[[(Ы-гидрокси)карбамоил] метил] пентандиовую кислоту; 2-[[(И-гидрокси-Ы-метил)карбамоил]метил]пентандиовую кислоту; 2-[[(И-бутил-М-гидрокси)карбамоил]метил]пентандиовую кислоту; 2-[[(И-бензил-Н-гидрокси)карбамоил]метил]пентандиовую кислоту; 2-[[(И-гидрокси-М-фенил)карбамоил]метил]пентандиовую кислоту; 2-[[(И-гидрокси-Ы-2-фенилэтил)карбамоил]метил]пентандиовую кислоту; 2-[[(И-этил-М-гидрокси)карбамоил]метил]пентандиовую кислоту; 2-[[(И-гидрокси-Ы-пропил)карбамоил]метил]пентандиовую кислоту; 2-[[(И-гидрокси-Ы-3-фенилпропил)карбамоил]метил]пеитандиовую кислоту; 2-[[(И-гидрокси-Ы-4-пиридил)карбамоил]метил]пентандиовую кислоту; 2-[[(Ы-гидрокси)карбоксамидо] метил] пентандиовую кислоту;

- 33 035171

2-[[N-гидрокси(метил)карбоксамидо]метил]пентандиовую кислоту; 2-[[Х-гидрокси(бензил)карбоксамидо]метил]пентандиовую кислоту; 2-[[№гидрокси(фенил)карбоксамидо]метил]пентандиовую кислоту; 2-[[№гидрокси(2-фенилэтил)карбоксамидо]метил]пентандиовую кислоту; 2-[[N-гидрокси(этил)карбоксамидо]метил] пентандиовую кислоту; 2-[[№гидрокси(пропил)карбоксамидо]метил]пентандиовую кислоту;

2-[[N-гидрокси(3 -фенилпропил)карбоксамидо]метил]пентандиовую кислоту и 2-[[№гидрокси(4-пиридил)карбоксамидо]метил]пентандиовую кислоту. Иллюстративные лиганды PSMA (US 5902817) включают 2-[(сульфинил)метил]пентандиовую кислоту;

2-[(метилсульфинил)метил]пентандиовую кислоту; 2-[(этилсульфинил)метил]пентандиовую кислоту; 2-[(пропилсульфинил)метил]пентандиовую кислоту; 2-[(бутилсульфинил)метил]пентандиовую кислоту; 2-[(фенилсульфинил]метил]пентандиовую кислоту; 2-[[(2-фенилэтил)сульфинил]метил]пентандиовую кислоту; 2-[[(3-фенилпропил)сульфинил]метил]пентандиовую кислоту; 2-[[(4-пиридил)сульфинил] метил]пентандиовую кислоту; 2-[(бензилсульфинил)метил]пентандиовую кислоту; 2-[(сульфонил)метил]пентандиовую кислоту; 2-[(метилсульфонил)метил]пентандиовую кислоту; 2-[(этилсульфонил)метил]пентандиовую кислоту; 2-[(пропилсульфонил)метил]пентандиовую кислоту; 2-[(бутилсульфонил)метил]пентандиовую кислоту; 2-[(фенилсульфонил]метил]пентандиовую кислоту; 2-[[(2-фенилэтил)сульфонил]метил]пентандиовую кислоту; 2-[[(3-фенилпропил)сульфонил]метил]пентандиовую кислоту; 2-[[(4-пиридил)сульфонил] метил]пентандиовую кислоту; 2-[(бензилсульфонил)метил]пентандиовую кислоту; 2-[(сульфоксиминил)метил]пентандиовую кислоту; 2-[(метилсульфоксиминил)метил]пентандиовую кислоту; 2-[(этилсульфоксиминил)метил]пентандиовую кислоту; 2-[(пропилсульфоксиминил)метил]пентандиовую кислоту; 2-[(бутилсульфоксиминил)метил]пентандиовую кислоту; 2-[(фенилсульфоксиминил]метил]пентандиовую кислоту; 2-[[(2-фенилэтил)сульфоксиминил]метил]пентандиовую кислоту; 2-[[(3-фенилпропил)сульфоксиминил]метил]пентандиовую кислоту; 2-[[(4-пиридил)сульфоксиминил]метил]пентандиовую кислоту и 2-[(бензилсульфоксиминил)метил]пентандиовую кислоту. Иллюстративные лиганды PSMA включают

В другом варианте осуществления лиганд PSMA представляет собой мочевину из двух аминокислот. В одном аспекте аминокислоты включают одну или несколько дополнительных карбоновых кислот. В другом варианте осуществления аминокислоты включают одну или несколько дополнительных кислот из фосфорной, фосфоновой, фосфиновой, сульфиновой, сульфоновой или бороновой кислот. В другом аспекте аминокислоты включают одну или несколько тиольных групп или их производных. В другом аспекте аминокислоты включают один или несколько биоизостеров карбоновых кислот, таких как тетразолы и т.п.

- 34 035171

В другом варианте осуществления лиганд PSMA представляет собой соединение формулы

где R¹ представляет собой

В другом иллюстративном варианте осуществления средство связывания представляет собой моче вину из аминодикарбоновой кислоты, такой как аспарагиновая кислота, глутаминовая кислота и т.п., и другой аминодикарбоновой кислоты или ее аналога, например, средство связывания формулы _Л HOOCL _Л НООС^ _{λ Л ζ} Л

О (рп О λη О (рп О Ъ )т О (priO

CT^N'XOOH hooc^n^n^cooh ноосН>^Жмфсоон н НН н н Н н где Q представляет собой аминодикарбоновую кислоту, такую как аспарагиновая кислота, глутаминовая кислота, или ее аналог, каждый из n и m независимо выбран из целого числа от 1 до приблизительно 6, и (*) представляет собой точку прикрепления линкера L.

В качестве иллюстрации лиганд PSMA представляет собой соединение формул

СООН

СООН ноос НН НН

MUPA η η η η

DUPA

В другом варианте осуществления лиганд PSMA представляет собой 2-[3-(1-карбокси-2-меркаптоэтил)уреидо]пентандиовую кислоту (MUPA) или 2-[3-(1,3-дикарбоксипропил)уреидо]пентандиовую кислоту (DUPA).

Другие иллюстративные примеры лигандов PSMA включают пептидные аналоги, такие как квискваловая кислота, аспартат-глутамат (Asp-Glu), Glu-Glu, Gly-Glu, γ-Glu-Glu, в-Х-ацетич-Р-аспартат-Рглутамат (β-NAAG) и т.п.

В другом варианте осуществления лиганд PSMA содержит мочевину или тиомочевину лизина и аминокислоту или одно или несколько их производных на основе карбоновой кислоты, в том числе, без ограничения, мочевины или тиомочевины лизина и аспарагиновую кислоту, или глутаминовую кислоту, или гомоглутаминовую кислоту.

В другом варианте осуществления лиганд PSMA содержит мочевину или тиомочевину L-лизина и L-глутамата.

В другом варианте осуществления лиганд PSMA содержит соединение, выбранное из следующего:

- 35 035171

В другом варианте осуществления лиганд PSMA содержит следующее: СО₂Н о со₂н nh₂

НО₂С N N Н Н

Соединения, линкеры, промежуточные соединения и конъюгаты, описанные в настоящем документе, могут быть получены с помощью традиционных способов, в том числе таковых, которые описаны в публикациях международных заявок на патент № WO 2009/002993, WO 2004/069159, WO 2007/022494 и WO 2006/012527 и заявке на патент США № 13/837539 (поданной 15 марта 2013 г.). Раскрытие каждого из вышеуказанных документов включено в настоящий документ посредством ссылки в полном объеме.

Каждая публикация, процитированная в настоящем документе, включена в настоящий документ посредством ссылки.

В другом варианте осуществления описывается способ диагностирования и/или наблюдения заболевания или болезненного состояния, где способ включает стадии введения пациенту, подлежащего оценке в отношении болезненного состояния, эффективного количества конъюгата общей формулы B-LP. Способ включает обеспечение достаточного количества времени для связывания конъюгата с целевой тканью и диагностирование и/или наблюдение заболевания или болезненного состояния экстракорпорально, например, посредством применения позитронно-эмиссионной томографии.

Радионуклид может включать позитронно-активный изотоп с подходящим периодом полураспада и профилем токсичности. В различных вариантах осуществления радиоизотоп имеет период полураспада более 30 мин, более 70 мин, более 80 мин, более 90 мин, более 100 мин, менее 8 ч, менее 6 ч, менее 4 ч, или менее 3 ч. В других вариантах осуществления радиоизотоп имеет период полураспада от приблизительно тельно тельно тельно тельно тельно тельно тельно от от от от от от приблизиприблизиприблизиприблизиприблизиприблизидо приблизительно 6 ч, от приблизительно 80 мин до приблизительно 6 ч, до приблизительно 6 ч, от приблизительно 100 мин до приблизительно 6 ч, до приблизительно 8 ч, от приблизительно 70 мин до приблизительно 8 ч, до приблизительно 8 ч, от приблизительно 90 мин до приблизительно 8 ч, или приблизи30 мин до приблизительно 4 ч, от приблизительно 70 мин до приблизительно 4 ч, 80 мин до приблизительно 4 ч, от приблизительно 90 мин до приблизительно 4 ч, 100 мин до приблизительно 4 ч, от приблизительно 30 мин до приблизительно 6 ч, мин мин мин мин

100 мин до приблизительно 8 ч.

Радионуклид может включать один или несколько позитронно-активных изотопов, таких как, без ограничения, изотопы, выбранные из ⁸⁹Zr, ⁴⁵Ti, ⁵¹Mn, ⁶⁴Cu, ⁶¹Cu, ⁶³Zn, ⁸²Rb, ⁶⁸Ga, ⁶⁶Ga, ¹¹C, ¹³N, ¹⁵O, ¹²⁴I, ³⁴Cl и ¹⁸F. В другом варианте осуществления радионуклид представляет собой галогенид, такой как позитронно-активный галогенид. В другом варианте осуществления радионуклид представляет собой ион металла, такой как позитронно-активный ион металла. В другом варианте осуществления радионуклид представляет собой ион галлия, такой как позитронно-активный ион галлия. В другом варианте осуществления радионуклид выбран из ⁸⁹Zr, ⁶⁴Cu, ⁶⁸Ga, ⁶⁶Ga, ¹²⁴I и ¹⁸F. В другом иллюстративном варианте осуществления радиоизотоп выбран из ⁸⁹Zr, ⁶⁴Cu, ⁶⁸Ga, ¹²⁴I и ¹⁸F. В другом варианте осуществления радиоизотоп представляет собой ⁶⁸Ga, или ⁸⁹Zr, или ¹⁸F. В другом варианте осуществления в каждом из вышеуказанных и следующих вариантов осуществления, описанных в настоящем документе, радиоизотоп представляет собой ⁶⁸Ga. В другом варианте осуществления в каждом из вышеуказанных и следующих вариантов осуществления, описанных в настоящем документе, радиоизотоп представляет собой ¹⁸F. В другом варианте осуществления в каждом из вышеуказанных и следующих вариантов осуществления, описанных в настоящем документе, радиоизотоп представляет собой ⁸⁹Zr. В другом варианте осуществления в каждом из вышеуказанных и следующих вариантов осуществления, описанных в настоящем документе, радиоизотоп представляет собой ⁶⁴Cu. Кроме того, следует понимать, что изотопы фтора, описанные в настоящем документе, могут быть выбраны из различных изотопных комбинаций ¹⁸F и ¹⁹F. Понятно, что факторы, которые могут быть включены при выборе подходящего изотопа, включают достаточный период полураспада позитронно-активного изотопа для обеспечения возможности получения диагностической композиции в фармацевтически приемлемом носителе перед введением пациенту, а

- 36 035171 также достаточный остаточный период полураспада с обеспечением достаточной активности для обеспечения возможности экстракорпорального измерения с помощью PET-сканирования. Кроме того, подходящий изотоп должен иметь достаточно короткий период полураспада для ограничения воздействия на пациента излишнего облучения. В одном иллюстративном варианте осуществления ¹⁸F с периодом полураспада 110 мин обеспечивает подходящее время получения диагностической композиции, а также приемлемую скорость разрушения. Кроме того, по мере распада ¹⁸F преобразуется в ¹⁸O.

Иллюстративные позитронно-распадающиеся изотопы с подходящими значениями периода полураспада включают ³⁴Cl, период полураспада приблизительно 32 мин; ⁴⁵Ti, период полураспада приблизительно 3 ч; ⁵¹Mn, период полураспада приблизительно 45 мин; ⁶¹Cu, период полураспада приблизительно 3,4 ч; ⁶³Zn, период полураспада приблизительно 38 мин; ⁸²Rb, период полураспада приблизительно 2 мин; ⁶⁸Ga, период полураспада приблизительно 68 мин, ⁶⁶Ga, период полураспада приблизительно 9,5 ч, ¹¹C, период полураспада приблизительно 20 мин, ¹⁵O, период полураспада приблизительно 2 мин, ¹³N, период полураспада приблизительно 10 мин, или ¹⁸F, период полураспада приблизительно 110 мин.

В другом варианте осуществления радионуклид представляет собой средство лучевой терапии. Иллюстративные радионуклиды для лучевой терапии включают изотопы лютеция, такие как ¹⁷⁷Lu, изотопы иттрия, такие как ⁹⁰Y, изотопы меди, такие как ⁶⁷Cu и ⁶⁴Cu и т.п.

Радионуклид может ковалентно присоединяться к конъюгату, например к арильной или гетероарильной ароматической группе, в том числе бензамидильной, бензиловой, фенильной, пиридинильной, пиримидинильной, пиридазинильной, нафтильной, бензотиазолильной, бензимизолильной, бензоксазолильной и подобным группам. В одном иллюстративном варианте осуществления радиоизотоп представляет собой F, и при этом радионуклид включает арильную группу, к которой радиоизотоп ковалентно присоединяется.

Радионуклид может быть присоединен к конъюгату нековалентно, например, в хелате.

Также способы могут применяться в комбинации с любыми другими уже разработанными и известными из уровня техники способами диагностики рака, включающими способы с применением других уже разработанных диагностических средств и с использованием рентгеновской компьютерной томографии (CT), магнитно-резонансной визуализации (MRI), функциональной магнитно-резонансной визуализации (fMRI), ультразвука и однофотонной эмиссионной компьютерной томографии (SPECT).

Понятно, что в некоторых применениях способов, описанных в настоящем документе, для каждого из способов и способов синтеза, описанных в настоящем документе, может быть необходимо либо практически полное фторирование, либо в качестве альтернативы лишь частичное фторирование. Соответственно, способы и способы синтеза, описанные в настоящем документе, могут осуществляться в различных альтернативных вариантах осуществления. Следовательно, понятно, что в таких аспектах, где необходимо лишь частичное фторирование, способы и синтезы, описанные в настоящем документе, могут осуществляться при меньших стехиометрических количествах фторирующего средства. Аналогичным образом, понятно, что в некоторых применениях способов, описанных в настоящем документе, для каждого из способов и способов синтеза, описанных в настоящем документе, может быть необходимо либо практически полное радиофторирование, либо в качестве альтернативы лишь частичное радиофторирование. Соответственно, способы и способы синтеза, описанные в настоящем документе, могут осуществляться в различных альтернативных вариантах осуществления. Следовательно, понятно, что в таких аспектах, где необходимо лишь частичное радиофторирование, способы и синтезы, описанные в настоящем документе, могут осуществляться при меньших стехиометрических количествах радиофторирующего средства, где остальное представляет собой необязательно ¹⁹F.

Следующие примеры дополнительно иллюстрируют конкретные варианты осуществления настоящего изобретения; однако следующие иллюстративные примеры не должны каким-либо образом толковаться как ограничивающие настоящее изобретение.

Примеры

Общая информация.

Воду дистиллировали и затем деионизировали (18 MQ/см²) посредством пропускания через систему фильтрации воды Milli-Q (Millipore Corp., Милфорд, Массачусетс). Все химические вещества и растворители, если не указано, приобретали у Sigma (Сент-Луис, Миссури) и применяли без дополнительной очистки. Аминокислоты приобретали у Chem-Impex Int (Чикаго, Иллинойс). 2,2'-(7-(2-((2,5Диоксопирролидин-1 -ил)окси)-2-оксоэтил)-1,4,7-триазонан-1,4-диил)диуксусную кислоту (NOTA-NHS) приобретали у CheMatech (Франция). N10-TFA-птероевая кислота была предоставлена Endocyte, Inc. Анализ и очистку с применением высокоэффективной жидкостной хроматографии (HPLC) предшественника DUPA-NOTA провод или с помощью прибора Agilent G6130B. HPLC для радиоактивных веществ провод или с помощью γ-детектора с применением колонки Xselect CSH C18 (250х 10 мм) и MeCN и 0,1% муравьиной кислоты в качестве подвижных фаз.

- 37 035171

Пример. C-NETA.

трет-Бутил-[2-гидрокси-1-(4-нитробензил)этил]карбамат (QC04011) получали из коммерчески доступного метил-2-амино-3-(4-нитрофенил)пропаноата посредством удаления NaBH₄ и введения защитной группы Boc. При последующем окислении Десса-Мартина и восстановительном аминировании с применением QC04001 получали соединение QC04013 с защитной группой трис-Boc, которое преобразовывали в QC04014 после удаления защитной группы Boc в 4М HCl в диоксане. При обработке QC04014 третбутилбромацетатом с последующим гидрогенолизом группы NO2 получали QC04016. При следующей реакции QC04016 с янтарным ангидридом получали бифункциональный C-NETA (QC04018) в виде соответствующего трет-бутилового сложного эфира.

QC04001

Пример. ди-трет-Бутил-[1,4,7]триазанонан-1,4-дикарбоксилат (QC04001).

QC04001 получали в соответствии с модификацией процедуры синтеза, представленной ранее. [1921]. В раствор 1,4,7-триазонан-тригидрохлорида (TACN-3HCl, 1,85 г, 7,7 ммоль, M.W.:238,6) в CHCl₃ (25 мл) добавляли DIPeA (4,0 мл, 3,0 г, 2з,1 ммоль, M.W.: 129,24, d: 0,742) и BOC-ON (3,77 г, 15,3 ммоль, M.W.: 246,26) порциями. Полученную смесь перемешивали в течение 5 дней и выпаривали растворитель под вакуумом. Остаток разделяли между 10% раствором NaOH (10 мл) и диэтиловым эфиром (30 мл). Эфирный слой отделяли и промывали 10% раствором NaOH (10 мл) и водой (10 мл) несколько раз. Эфирный слой высушивали (MgSO₄, фильтровали и концентрировали под вакуумом с получением QC04001 (2,53 г, количественный), который применяли без дополнительной очистки.

¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ = 3,47-3,50 (m, 2H), 3,42-3,45 (m, 2H), 3,38 (br, s, 1H), 3,28-3,34 (m, 2H), 3,16-3,28 (m, 2H), 2,86-2,99 (m, 4H), 1,48 (s, 18H);

¹³C ЯМР (101 МГц, CDCl₃) δ = 156,08, 155,85 (C = О), 79,80, 79,70 (^t-Bu), 53,20, 52,62, 52,52, 51,78, 50,50, 49,91, 49,63, 48,39, 48,23, 47,83, 47,46 (кольцо TACN из 53,20-47,46), 28,60 (tBu).

4UU4U1U QC04011

Пример. трет-Бутил-[2-гидрокси-1-(4-нитробензил)этил]карбамат (QC04011)[19].

С незначительным поправками представленной процедуры [19], где соль HCl и метил-2-амино-3-(4нитрофенил)пропаноата применяли непосредственно без нейтрализации Et₃N, в раствор гидрохлоридной соли метил-2-амино-3-(4-нитрофенил)пропаноата (6,22 г, 23,9 ммоль) в MeOH (70 мл) при 23°C добавляли NaBH₄ (2,86 г, 71,4 ммоль) несколькими порциями. Реакцию контролировали с помощью TLC и LC- 38 035171

MS. Смесь нагревали до температуры флегмы (с помощью водяной бани при ~70°C) и добавляли порциями NaBH₄ по мере необходимости, пока большая часть исходного вещества не исчезла, для чего потребовалось всего приблизительно 6 г NaBH₄. После выпаривания растворителя остаток обрабатывали H₂O (70 мл) и экстрагировали DCM/IPA (3/1). Объединенные органические слои высушивали, фильтровали и концентрировали под вакуумом с получением белого твердого вещества QC04010 (4,4 г, 94), которое применяли без дополнительной очистки.

Пример. QC04010 (4,4 г, 22,7 ммоль) растворяли в CH3CN (30 мл) при температуре окружающей среды, в который порциями добавляли BOC-ON (11,2 г, 27,2 ммоль, 1,2 экв.). В указанную выше смесь добавляли DIPEA (5, 24 мл, 3,76 г, 29,2 ммоль, M.W.: 129,24, d: 0,742), полученную смесь перемешивали в течение 4 ч и выпаривали. Остаток разделяли между эфиром (50 мл) и 10% раствором NaOH (20 мл). Эфирный слой отделяли и последовательно промывали 10% раствором NaOH (10 мл) и водой (10 мл). Эфирный слой высушивали, фильтровали и концентрировали под вакуумом. Остаток промывали эфиром (20 мл) с получением QC04011 (5,31 г, 75%), который применяли без дополнительной очистки. Для получения аналитического образца остаток очищали посредством колоночной хроматографии на SiO₂ с элюированием гексана/этилацетата (от 3/1 до 1/1 с 1% MeOH) с получением чистого QC04011 в виде белого твердого вещества.

¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ = 8, 15 (d, J = 8,8 МГц, 2H), 7,40 (d, J =8,8 МГц, 2H), 4, 84 (d, J = 6,8 МГц, 1H), 3,90 (s, 1H), 3,68 (dd, J = 3,1 МГц, 1H), 3,57 (dd, J = 3,1 МГц, 1H), 2,98 (d, J = 6,0 МГц, 2H), 1,39 (s, 9H);

¹³C ЯМР (101 МГц, CDCl₃) δ= 156,0, 146,4, 146,2, 130,1, 123,5, 79,8, 63,3, 53,1, 37,3, 28,0.

QC04011 QC04012

Пример. трет-Бутил-( 1 -(4-нитрофенил)-3 -оксопропан-2-ил)карбамат.

QC04011 (1,27 г, 4,3 ммоль) растворяли в CH₂Cl₂ (40 мл) и охлаждали до 0°C, к которому одной порцией добавляли периодинан Десса-Мартина (1,70 г, 5,16 ммоль, 1,2 экв.). После перемешивания в течение 15 мин при 0°C реакцию нагревали до 23°C и перемешивали в течение 45 мин. Реакцию гасили посредством добавления основного водн. раствора Na₂S₂O₃ (50/50, об./об. водн. Na₂S₂O₃ и водн. Na₂HCO₃) и полученную смесь интенсивно перемешивали в течение 15 мин. После экстракции CH₂Cl₂(3х) органические фазы последовательно промывали водой и солевым раствором, высушивали над Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали под вакуумом с получением QC04012, который применяли без дополнительной очистки.

Пример. Восстановительное аминирование QC04012 и QC04001 с получением QC04013:⁴.

1,4-ди-трет-Бутил-7-(2-{ [(трет-бутокси)карбонил]амино}3-(4-нитрофенил)пропил)-1,4,7 -триазонан1,4-дикарбоксилат (QC04013). Соединение QC04012 (4,3 ммоль, теоретически) добавляли в раствор QC04001 (1,40 г, 4,3 ммоль) в DCE (100 мл) при 0°C. Полученный раствор перемешивали в течение 10 мин и в раствор добавляли порциями триацетоксиборогидрид натрия (1,28 г, 6,02 ммоль, 1,4 экв.) в течение 30 мин. Смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение ночи. Реакционную смесь концентрировали, обрабатывали насыщенным водным раствором NaHCO₃ (50 мл) и экстрагирова ли этилацетатом (3х50 мл). Объединенные органические слои высушивали с применением Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали под вакуумом. Остаток очищали посредством флэш-хроматографии (SiO₂, Нех/EA = 3/1) с получением QC04013 (2,31 г, 88,5% в 2 стадии, исходя из 2,61 г, теоретически) в виде бледно-желтого полутвердого вещества.

¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ = 8,11 (2H, d, J = 7,6 Гц), 7,35 (2H, d, J = 7,6 Гц), 5,28 (1H, s, br), 3,543,88 (2H, m), 3,39-3,54 (2H, m), 3,32-3,40 (1H, m), 3,15-3,32 (2H, m), 2,79-3,15 (4H, m), 2,37-2,73 (6H, m), 1,43 (9H, s), 1,42 (9H, s), 1,38 (9H, s);

¹³C ЯМР (101 МГц, CDCl₃) δ = 156,15, 155,99, 155,70, 155,56, 147,00, 146,95, 146,81, 146,76, 130,36, 123,73, 123,65, 123,60, 80,07, 79,99, 79,92, 79,81, 79,57, 79,46, 60,79, 60,47, 55,52, 54,33, 54,06, 53,64, 53,15, 53,28, 51,54, 50,80, 50,71, 50,42, 49,87, 49,07, 48,12, 39,67, 39,45, 28,74, 28,61.

MS масса/заряд: MS-API: расчетное для C₃₀H₅₀N₅O₈ ([M+H]⁺): 608,4, найденное значение: 608,3.

- 39 035171

Вос QC04013 QC04014

Пример. 1-(4-Нитрофенил)-3-(1,4,7-триазонан-1-ил)пропан-2-амин.

QC04013 (2,31 г, 3,8 ммоль) диспергировали в 30 мл 4М HCl/диоксан, полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 20 ч. Реакционную смесь быстро добавляли к холодному Et₂O для осаждения белого твердого вещества. Твердое вещество собирали и высушивали на воздухе с получением чистого продукта QC04014 (1,71 г, в количественном выходе) в виде бледно-белого твердого вещества.

MS масса/заряд: MS-API: расчетное для C15H26N5O2 ([M+H]+): 308,2, найденное значение: 308,2.

О*Ви

Пример. Введение три-трет-бутилэтилацетата ^1b.

В раствор QC04014 (78 мг, 0,19 ммоль) и DIPEA (0,272 мл, 202 мг, 1,56 ммоль, 8,2 экв. M.W.: 129,24, d: 0,742) в DMF (2 мл) добавляли NaI (233,8 мг, 1,56 ммоль, 8,2 экв. M.W.: 149,89) и третбутилбромацетат (0,126 мл, 168 мг, 0,86 ммоль, 4,5 экв. M.W.: 195,05, d: 1,321) медленно при комнатной температуре. Полученную смесь нагревали до 60-70°C и перемешивали в течение 20 ч. По окончании контролируемую с помощью TLC и LC-MS реакцию гасили водой и экстрагировали Et₂O. Объединенный органический растворитель промывали последовательно водой и солевым раствором и высушивали над Na₂SO₄. После фильтрации растворитель выпаривали под вакуумом и полученный темно-окрашенный маслянистый остаток очищали с помощью флэш-хроматографии на SiO₂ (DCM/MeOH = 100/1-100/4) с получением QC04015 (14 мг, 10%) в виде желтого масла и QC04015' (61 мг, 49,4%).

MS масса/заряд: MS-API: расчетное для C3₉H₆₆N₅Oio ([M+H]⁺): 764,5, найденное значение: 764,4.

Пример. В раствор QC04015 (20 мг, 0,039 ммоль) в MeOH (2 мл) добавляли катализатор 10% Pd/C (5 мг). Полученную смесь подвергали гидрогенолизу посредством взбалтывания с применением H₂ (г) при 1 атм (~15 фунт/кв.дюйм) при температуре окружающей среды в течение 14 ч. Реакционную смесь разбавляли избытком DCM и фильтровали через целит, фильтрат концентрировали in vacuo с получением QC04016 (13 мг, 67,5%).

MS масса/заряд: MS-API: расчетное для C₃₉H₆₈N₅O₈ ([M+H]⁺): 734, 5, найденное значение: 734,4. Примеры, направленные на получение фолата

C25H31N9O7

Точная масса: 569,23

Мол. вес: 569,57

Пример. Pte-yGlu-Lys-OH (EC1777).

EC1777 получали с применением твердофазного синтеза пептидов следующим образом.

- 40 035171

Соединение	ммоль	Эквивалент	Молекулярная масса	Количество (граммы)
Fmoc-Lysсмола (Загрузка ~0,5 ммоль/г)	0,5	1		1,00
Fmoc-Glu-O^lBu	1,0	2	425,5	0,426
N^iU-TFAптероевая кислота	0,65	1,3	408	0,265
РуВОР	1,3	2	520,31	0,52
DIPEA	1,5	3	129,24 (d=0,742)	0,168

В емкость для синтеза пептидов помещали Fmoc-Lys-смолу (1,0 г, 0,5 ммоль) и промывали DMF (3x10 мл). Сначала провод или удаление защитной группы Fmoc с применением 20% пиперидина в растворе DMF (3x10 мл) в течение 10 мин на цикл. После промывок DMF (3x10 мл) и i-PrOH (3x10 мл), провод или тест Kaiser для определения окончания реакции. После другой промывки DMF (3x10 мл) в емкость добавляли раствор аминокислоты (2,0 экв.) в DMF, РуВОР (2,0 экв.) и DIPEA (3,0 экв.) и раствор барботировали аргоном в течение 1 ч. Раствор для сочетания фильтровали, смолу промывали DMF (3x10 мл) и i-PrOH (3x10 мл) и провод или тест Kaiser для оценки окончания реакции. Вышеуказанный способ осуществляли последовательно для дальнейшего сочетания. Провод или расщепление смолы с применением смеси, состоящей из 95% CF3CO2H, 2,5% H₂O и 2,5% триизопропилсилана. Смесь для расщепления (10 мл) выливали в смолу и барботировали аргоном в течение 30 мин с последующей фильтрацией в чистую колбу. Последовательно дважды провод или дополнительное расщепление со свежей смесью для расщепления в течение 10 мин барботирования. Объединенный фильтрат выливали в холодный диэтиловый эфир, образованный осадок собирали посредством центрифугирования при 4000 об/мин в течение 5 мин (3x). Получали осадок с последующим декантированием и высушиванием твердого вещества под вакуумом. Удаление трифтор-ацетильной защитной группы достигалось посредством растворения неочищенного осадка в H₂O (15 мл), который подщелачивали Na₂CO₃ до pH 9 при барботировании аргона. По окончании реакции, подтвержденной с помощью LCMS, раствор подкисляли до pH 3 с применением 2М HCl и необходимый линкер очищали посредством препаративной HPLC (подвижная фаза A = 10 мМ ацетат аммония, pH 5; органическая фаза B = ацетонитрил; способ; от 10% B до 100% В в течение 30 мин) с выходом EC1777 (112 мг, 39%);

¹H ЯМР (500 МГц DMSO-d₆) опорные сигналы: δ 8,60 (s, 1H), 7,58 (d, 2H), 6,60 (d, 2H), 4,45 (s, 2H). [M+H]+ = расчетное для 570,23, найденное значение 570,582.

ЕС1778

Точная масса: 1019,39 Мол. вес: 1020,08

Пример. Pte-yGlu-Lys-NOTA.

В сухой колбе обрабатывали ультразвуком EC1777 (30,5 мг, 0,054 ммоль, 1,0 экв.), 1,1,3,3тетраметилгуанидин (13,45 мкл, 0,107 ммоль, 2,0 экв.) и DMSO (2,5 мл) под аргоном в течение 1 ч. В раствор добавляли DIPEA (0,19 мл, 1,07 ммоль, 20 экв.) с последующей обработкой ультразвуком в течение дополнительного часа. В прозрачный раствор добавляли p-SCN-Bn-NOTA.3HCl (33 мг, 0,059 ммоль, 1,1 экв.) и контролировали реакцию до завершения с помощью LCMS, очищали с применением препаративной HPLC (подвижная фаза A = 10 мМ ацетат аммония, pH 5; органическая фаза B = ацетонитрил; способ; от 10% B до 100% B за 30 мин) с получением EC1778 (16 мг, 29%).

¹H ЯМР (500 МГц DMSO-d6) опорные сигналы: δ 8,60 (s, 1H), 7,58 (d, 2H), 7,29 (d, 2H), 7,07 (d, 2H), 6,61 (d, 2H), 4,45 (s, 2H), 4,20 (t, 1H).

[M+H]⁺ = расчетное для 1020,39, найденное значение 1020,63.

- 41 035171

Примеры нацеливания на PSMA

)Pd/C, н₂, Меон

2) 4-нмтрофенилхлороформиат, DIPEA, DCM

Точная масса: 652,33

Мол. вес : 652,73

Пример. EC1380,10.

В сухую колбу добавляли H-Glu(O^tBu)-O^tBu-HCl (2,48 г, 8,41 ммоль) и 4-нитрофенилхлорформиат (1,86 г, 9,25 ммоль, 1,1 экв.), растворяли в CH2Cl2 (30 мл) в атмосфере аргона. Перемешиваемый раствор охлаждали до 0°C, затем по каплям добавляли DIPEA (4, 50 мл, 25,2 ммоль, 3 экв.). Обеспечивали нагревание реакционной смеси до комнатной температуры и перемешивали в течение 1 ч. К перемешиваемому раствору добавляли H-Lys-(Z)-O^tBu (4,39 г, 11,8 ммоль, 1,4 экв.), DIPEA (4,50 мл, 25,2 ммоль, 3 экв.) и перемешивали в течение 1 ч. По окончании реакцию гасили насыщенным NaHCO3 и экстрагировали CH₂Cl₂ три раза. Органические экстракты объединяли, высушивали над Na₂SO₄, фильтровали и растворитель удаляли посредством пониженного давления. Продукт очищали с применением хроматографии на силикагеле с применением петролейного эфира и этилацетата. Амин с защитной группой Cbz переносили в круглодонную колбу с 10% Pd/C (10 мас.%, экв.), растворяли в MeOH (30 мл) в атмосфере водорода (1 атм) и перемешивали в течение 3 ч. По окончании реакционную смесь фильтровали через целит и растворитель удаляли посредством пониженного давления с получением неочищенного амина. Амин поглощали в CH₂Cl₂ (30 мл) в атмосфере аргона и охлаждали до 0°C. К охлажденному раствору последовательно добавляли 4-нитрофенилхлорформиат (2,2 г, 10,9 ммоль, 1,3 экв.) и DIPEA (6,0 мл, 33,6 ммоль, 4 экв.) и перемешивали в течение 2 ч при комнатной температуре. Реакционную смесь гасили насыщенным NH₄Cl и экстрагировали три раза этилацетатом. Объединяли органические экстракты, высушивали над Na₂SO₄, фильтровали и растворитель удаляли под вакуумом, а также очищали с применением хроматографии на силикагеле с получением необходимого активированного амина, EC1380 (2,54 г, 46%).

Пример. Glu(O^tBu)-O^tBu-Lys-O^tBu-AMPAA-Asp(O^tBu)-Asp(O^tBu)-Lys(Mtt)-смола 11.

После общей процедуры, описанной для синтеза связанного смолой фолат-пептид-смола 1, следовала реакция сочетания 2 X Fmoc-L-Asp(O^tBu)-OH, Fmoc-АМРАА-OH, Fmoc-L-Lys(Z)-O^tBu и Fmoc-(L)Glu(O^tBu) с Fmoc-L-Lys(Mtt)-смола Ванга. Связанный смолой пентапептид подвергали стандартному удалению защитной группы Fmoc, промывкам и тесту Kaiser. После другой промывки DMF (3x10 мл) в емкость добавляли раствор EC1380 (2,0 экв.) в DMF и DIPEA (3,0 экв.) и раствор барботировали аргоном в течение 2 ч. Раствор для сочетания фильтровали, смолу промывали DMF (3x10 мл) и i-PrOH (3x10 мл) и провод или тест Kaiser для оценки окончания реакции.

- 42 035171

ЕС22О0 ^c5bH₇₈N₁₂O₂₃S Точная масса ; 1318,50 Мол. вес: 1319,35

Пример. Glu-Lys-AMPAA-Asp-Asp-Lys-Bn-NOTA 12.

Glu-Lys-AMPAA-Asp-Asp-Lys-Bn-NOTA, EC2209 получали с выходом 47% в соответствии со способом, описанным для фолат-пептид-NOTA, 4.

¹H ЯМР (500 МГц DMSO-d₆) опорные сигналы: δ 7,25 - 7,18 (m, 2H), 7,14 (d, J = 8,1 Гц, 1H), 7,12 7,06 (m, 5H), 4,47 (ddd, J = 17,8, 7,5, 5,6 Гц, 2H), 4,11 - 4,08 (m, 3h), 4,08 - 4,02 (m, 2H), 3,98 (dd, J = 8,2, 5,1 Гц, 1H).

[M+H]⁺ = расчетное для 1319,50, найденное значение 1319,70.

Пример. Glu(O^tBu)-O^tBu-Lys-O^tBu-Aoc-Phe-Phe-Arg(Pbf)-Asp(O^tBu)-Arg(Pbf)-Lys(Mtt)-смола 13.

После общей процедуры, описанной для синтеза связанного смолой фолат-пептид-смола 1, следовала реакция сочетания Fmoc-L-Arg(Pbf)-OH, Fmoc-L-Asp(O^tBu)-OH, Fmoc-L-Arg(Pbf)-OH, 2 X FmocPhe-OH, Fmoc-Aoc-OH, Fmoc-L-Lys(Z)-O^tBu, Fmoc-(L)-Glu(O^tBu) и EC1380 с Fmoc-L-Lys(Mtt)-смола

Ванга.

Пример. Glu-Lys-Aoc-Phe-Phe-Arg-Asp-Arg-Lys-NOTA 14.

Glu-Lys-Aoc-Phe-Phe-Arg-Asp-Arg-Lys-NOTA, EC2390 получали с выходом 37% в соответствии со способом, описанным для фолат-пептид-NOTA, 4.

¹Н ЯМР (500 МГц DMSO-d₆) опорные сигналы: δ 7,25 - 7,14 (m, 6H), 7,16 - 7,08 (m, 3H), 4,47 (dd, J = 9,0, 4,7 Гц, 1H), 4,42 (t, J = 5,9 Гц, 1H), 4,36 (dd, J = 10,4, 4,4 Гц, 1H), 4,27 (t, J = 6,9 Гц, 1H), 4,16 (t, J = 5,6 Гц, 1H), 3,97 - 3,88 (m, 2H).

[M+H]⁺ = расчетное для 1639,84, найденное значение 1640,22.

Реагенты и условия:

(а) трифосген, TEA/DCM, -78 °C; (Ь) H-L-G|u(OBn)-OtBu HC|; (с) H₂; Pd-C/DCM.

Пример. DUPA-EAOA-Phe-Arg-Lys-NH₂.

ди-трет-Бутиловый сложный эфир 2-[3-(3-бензилоксикарбонил-1-трет-бутоксикарбонил-пропил)уреидо]пентандиовой кислоты (2) [1, 2].

В раствор L-глутамат-ди-трет-бутилового сложного эфира гидрохлорида 1 (1,0 г, 3,39 ммоль) и трифосген (329,8 мг, 1,12 ммоль) в DCM (25,0 мл) при -78°C добавляли триэтиламин (TEA, 1,0 мл, 8,19 ммоль). После перемешивания в течение 2 ч при -78°C в аргоне добавляли раствор L-Glu(OBn)-OtBu (1,2 г, 3,72 ммоль) и TEA (600 мкл, 4,91 ммоль) в DCM (5,0 мл). Обеспечивали достижение реакционной смесью комнатной температуры (rt) в течение периода 1 ч и перемешивали при температуре окружающей

- 43 035171 среды в течение ночи. Реакцию гасили 1М HCl и органический слой промывали солевым раствором, высушивали над Na₂SO₄. Неочищенный продукт очищали с применением флэш-хроматографии (гексашБЮЛе) 1:1) с получением промежуточного соединения 2 (1,76 г, 90,2%) в виде бесцветного масла и кристаллизовали с применением гексан:ПСМ. Rf) 0,67 (гексан:БЮЛе) 1:1).

¹Н ЯМР (CDCl₃): δ 1,43 (s, 9H, CH3-tBu); 1,44 (s, 9H, CH3-tBu); 1,46 (s, 9H, CH3-tBu); 1,85 (m, 1H, Glu-H); 1,87 (m, 1H, Glu-H); 2,06 (m, 1H, Glu-H); 2,07 (m, 1H, Glu-H); 2,30 (m, 2H, Glu-H); 2,44 (m, 2H, Glu-H); 4,34 [s (широкий), 1H, RH]; 4,38 [s (широкий), 1H, R-H]; 5,10 (s, 2H, CH2-Ar); 5,22 [s (широкий), 2H, мочевина-H); 7,34 (m, 5H, Ar-H).

EI-HRMS (масса/заряд): (M+H)+ расчетное для C₃₀H₄₇N₂O₉, 579,3282; найденное значение, 579,3289.

Пример. 1-трет-Бутиловый сложный эфир 2-[3-(1,3-бис-трет-бутоксикарбонил-пропил)уреидо]пентандиовой кислоты, DUPA_1.

К раствору 2 (250 мг, 432 ммоль) в DCM добавляли 10% Pd/C. Реакционную смесь гидрогенизировали при 1 атм в течение 24 ч при rt. Pd/C фильтровали через подушку целита и промывали DCM. Неочищенный продукт очищали с применением флэш-хроматографии (гексан: EtOAe) 40:60) с получением DUPA_1 (169 мг, 80,2%) в виде бесцветного масла и кристаллизовали с применением гексан:DCM. Rf = 0,58 (гексан: EtOAc = 40:60).

¹H ЯМР (CDCl₃): δ 1,46 (m, 27H, CH3-tBu); 1, 91 (m, 2H, Glu-H); 2,07 (m, 1H, Glu-H); 2,18 (m, 1H, Glu-H); 2,33 (m, 2H, Glu-H); 2,46 (m, 2H, Glu-H); 4,31(s (широкий), 1H, RH); 4,35 (s (широкий), 1H, R-H); 5,05 (t, 2H, мочевина-H);

EI-HRMS (масса/заряд): (M+H)⁺: расчетное для C₂₃H₄₁N₂O₉, 489,2812; найденное значение, 489,2808.

о

O^NH

H₂N NH

DUPA-EAOA-Phe-Arg-Lys-NH₂

Реагенты и условия:

(a) (i) 20% пиперидин/DMF, комнатная температура, 10 мин; (ii) Fmoe-Arg(Boe)₂-OH, HBTU, HOBt, DMF-DIPEA, 2 ч;

(b) (i) 20% пиперидин/DMF, комнатная температура, 10 мин.; (ii) Fmoe-Phe-OH, HBTU, HOBt, DMFDIPEA, 2 ч;

(e) (i) 20% пиперидин/DMF, комнатная температура, 10 мин; (ii) Fmoe-8-амино-октановая (EAO) кислота, HBTU, HOBt, DMF/DIPEA, 2 ч;

(d) (i) 20% пиперидин/DMF, комнатная температура, 10 мин; (ii) (tBuO)₃-DUPA-OH, HBTU, HOBt, DIPEA, 2 ч;

(e) TFA/H2O/TIPS (95:2,5:2,5), 1 ч.

Пример. DUPA-EAOA-Phe-Arg-Lys-NH₂.

Обеспечивали набухание Fmoe-Lys(Boe)-смола Ванга (0,43 мМ) в DCM (3 мл), затем в диметилформамиде (DMF, 3 мл). Добавляли в смолу 20% раствор пиперидина в DMF (3x3 мл) и барботировали аргон в течение 5 мин. Смолу промывали DMF (3x3 мл) и изопропиловым спиртом (i-PrOH, 3x3 мл). Образование свободного амина оценивали с помощью теста Kaiser. После разбухания смолы в DMF добавляли раствор Fmoe-Arg(Boe)₂-OH (2,5 экв.), HBTU (2,5 экв.), HOBt (2,5 экв.) и DIPEA (4,0 экв.) в DMF. Барботировали аргон в течение 2 ч и промывали смолу DMF (3x3 мл) и i-PrOH (3x3 мл). Эффективность реакции сочетания оценивали с помощью теста Kaiser. Вышеуказанную последовательность повторяли еще для 3 стадий сочетания с введением последовательно фенилаланина (Phe), 8-амино-октановой кислоты (EAO) и DUPA. Конечное соединение отщепляли от смолы с применением смеси трифторуксусная кислота (TFA):H₂O:триизопропилсилан (95:2,5:2,5) и концентрировали под вакуумом.

Концентрированный продукт осаждали в холодном диэтиловом эфире и высушивали под вакуумом. Неочищенный продукт очищали с применением препаративной RP-HPLC [(А) 210 нм; градиент раство- 44 035171 рителя: от 0% B до 50% B за цикл 30 мин; подвижная фаза: А) 0,1% TFA, pH 2; B) ацетонитрил (ACN)].

ACN удаляли под вакуумом и чистые фракции лиофилизировали с получением DUPA-EAOA-Phe-ArgLys-NH₂ в виде белого твердого вещества. УФ/видим.: Х_макс. = 205 нм. Аналитическая RP-HPLC: t_R = 6,2 мин (A = 0,1% TFA; B = CH3CN, градиент растворителя: от 0% B до 50% B за 15 мин); ESI-MS (масса/заряд): (M+H)⁺ расчетное для C₄₀H₆₅Ni₀Oi₃, 893,5; найденное значение, 893,4.

Точная масса ; 892,5 Молекулярный вес : 893,0

QC08002

Химическая формула : СщНдзМ^Отв Точная масса : 1177,6 Молекулярный вес : 1178,3

Пример. DUPA-EAOA-Phe-Arg-Lys-NH₂-N OTA.

К DUPA-EAOA-Phe-Arg-Lys-NH₂(QC08001, 5,0 мг, 0,0056 ммоль, M.W.:893,0) в DMSO (0,20 мл, с концентрацией при 0,028М) добавляли NOTA-NHS (5,5 мг, 0,0084 ммоль, 1,5 экв.), затем DIPEA (2,9 мкл, 0,017 ммоль). Реакцию перемешивали при 23°C, контролировали с помощью LC-MS и большую часть исходного вещества преобразовывали в соответствующий продукт за 5 ч. Неочищенное вещество очищали с помощью RP-C₁₈ HPLC: ACN удаляли под вакуумом и чистые фракции лиофилизировали с получением чистого DUPA-EAOA-Phe-Arg-Lys-NH₂-NOTA (QC08002, 3,3 мг, 50%). Аналитическая RPC₁₈ HPLC: t_R = 5,98 мин (A = 0,1% TFA; B = CH₃CN, градиент растворителя: от 0% B до 50% B за 15 мин); препаративная RP-C₁₈ HPLC: t_R = 16,16 мин. (A = 0,1% TFA; B = CH₃CN, градиент растворителя: от 0% B до 50% B за 30 мин); УФ-видим.: Хмакс. = 201 нм; HPLC (препаративная колонка С18 Agilent): Подвижная фаза: A = 0,1% TFA; B = CH3CN; способ: 0-50 CH3CN-30 мин, t_R = 16,16 мин LC-MS (квадрупольная система LC/MS Agilent G6130B): подвижная фаза: A = 0,1% TFA; B = CH3CN; способ: 0-50 CH3CN-30 мин, t_R = 5,98 мин; MS масса/заряд: MS-API: расчетное для C₅₂H₈₄N₁₃O₁₈ ([M+H]⁺): 1178,6, найденное значение: 1178,4.

Пример. DUPA-EAOA-Phe-Arg-Lys-NH₂-NOTA-A1¹⁸F.

Способ a). DUPA-EAOA-Phe-Arg-Lys-NH2-NOTA растворяли в 2 мМ NaOAc (pH 4,5) и 0,5 мл этанола и обрабатывали с помощью Al¹⁸F₃-3H₂O (1,5 экв.), который получали свежим перед применением. Регулировали pH до 4, 5-5, 0 и реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 15-30 мин при поддержании pH при 4,5-5,0. После охлаждения до комнатной температуры неочищенное вещество загружали в гильзу и элюировали радиоактивный индикатор во флакон. После стерилизующего фильтрования и разбавления до соответствующей радиоактивности (5-10 мКи) и удельной активности (>1 Ки/мкмоль) радиоактивный индикатор был готов для PET-визуализации in vivo.

Способ b). DUPA-EAOA-Phe-Arg-Lys-NH₂-NOTA растворяли в 2 мМ NaOAc (pH 4,5) и обрабатывали с помощью AlCl₃-3H₂O (1,5 экв.). Регулировали pH до 4,5-5,0 и реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 15-30 мин при поддержании pH при 4,5-5,0. Неочищенное вещество очищали с помощью RP-HPLC с получением промежуточного соединения DUPA-EAOA-Phe-Arg-Lys-NH2NOTA-Al-OH, готового для введения метки ¹⁸F. Подходящее количество DUPA-EAOA-Phe-Arg-Lys-NH₂- 45 035171

NOTA-Al-OH обрабатывали соляным раствором с Na¹⁸F и этанолом (1/1, об./об.) и всю смесь нагревали при 100-110^oC в течение 15 мин. После охлаждения до комнатной температуры неочищенное вещество загружали в гильзу и радиоактивный индикатор элюировали во флакон. После стерилизующего фильтрования и разбавления до соответствующей радиоактивности (5-10 мКи) и удельной активности (>1 Ки/мкмоль) радиоактивный индикатор был готов для применения в PET-визуализации in vivo.

Реагенты и условия:

(a) Fmoc-Phe-OH, HBTU, HOBt, DMF/DIPEA, 2 ч;

(b) (i) 20% пиперидин/DMF, комнатная температура, 10 мин; (ii) Fmoc-Phe-OH, HBTU, HOBt, DMF/DIPEA, 2 ч;

(c) (i) 20% пиперидин/DMF, комнатная температура, 10 мин; (ii) Fmoc-8-амино-октановая (EAO) кислота, HBTU, HOBt, DMF/DIPEA, 2 ч;

(e) TFA/H2O/TIPS (95:2,5:2,5), 1 ч.

Пример. Твердофазный синтез пептидов (SPPS) DUPA-EAOA-Phe-Phe-EDA-NH₂ [2, 3].

DUPA-EAOA-Phe-Phe-EDA-NH₂ получали, как описано в настоящем документе для DUPA-EAOAPhe-Arg-Lys-NH₂ (QC08001). Обеспечивали набухание коммерчески доступной смолы Trt-EDA в DCM (3 мл), затем в диметилформамиде (DMF, 3 мл), к которой добавляли раствор Fmoc-Phe-OH (2,5 экв.), HBTU (2,5 экв.), HOBt (2,5 экв.) и DIPEA (4,0 экв.) в DMF. Барботировали аргон в течение 2 ч и промывали смолу DMF (3x3 мл) и i-PrOH (3x3 мл). Эффективность реакции сочетания оценивали с помощью теста Kaiser. Добавляли в смолу 20% раствор пиперидина в DMF (3x3 мл) и барботировали аргон в течение 5 мин. Смолу промывали DMF (3x3 мл) и изопропиловым спиртом (i-PrOH, 3x3 мл). Образование свободного амина оценивали с помощью теста Kaiser. Вышеуказанную последовательность повторяли еще для 3 стадий сочетания с введением последовательно второго фенилаланина (Phe), 8-аминооктановой кислоты (EAO) и DUPA. Конечное соединение отщепляли от смолы с применением смеси трифторуксусная кислота (TFA):H₂O:триизопропилсилан (95:2,5:2,5) и концентрировали под вакуумом. Концентрированный продукт осаждали в холодном диэтиловом эфире и высушивали под вакуумом. Неочищенный продукт очищали с применением препаративной RP-HPLC [λ] 210 нм; градиент растворителя: от 0% B до 100% B за цикл 30 мин; подвижная фаза: A) 10 мМ NH₄OAc (pH 7, буфер); B) ацетонитрил (ACN)]. ACN удаляли под вакуумом и чистые фракции лиофилизировали с получением DUPA-EAOAPhe-Phe-EDA-NH₂ в виде белого твердого вещества. Аналитическая RP-C₁₈ HPLC: t_R = 3,99 мин (A = 10 мМ NH₄OAc, pH 7,0; B = CH₃CN, градиент растворителя: от 0% B до 100% B за 15 мин.); препаративная RP-C₁₈ HPLC: t_R = 16,05 мин (A = 10 мМ NH₄OAc, pH 7,0; B = CH₃CN, градиент растворителя: от 0% В до

100% В за 30 мин); УФ-видим.: λ,^. = 209 нм; LC-MS: LC-MS (квадрупольная система LC/MS Agilent G6130B) подвижная фаза для продукта: буфер (pH 7)-CH₃CN; способ: 0-100 ACN-15 мин, t_R = 3,99 мин MS масса/заряд: MS-API: расчетное для C₃₉H₅₆N₇O₁₁ ([M+H]⁺): 798, 4, найденное значение: 798,3; расчетное для C₃₉H₅₅N₇O₁₁K ([M+K]⁺): 836, 4, найденное значение: 836, 3.

HPLC (препаративная колонка С18 Agilent): подвижная фаза: буфер (pH 7)-CH3CN; способ: 0-100 ACN-30 мин, t_R = 16,05 мин.

- 46 035171

Химическая формула : C_3gH₅₅N₇O₁₁

Точная масса : 1032,5 Молекулярный вес: 1083,2

Пример. К DUPA-EAOA-Phe-Phe-EDA-NH₂ (QC08008, 5,9 мг, 0,0074 ммоль, M.W.:797,4) в DMSO (0,25 мл, с концентрацией при 0,025М) добавляли NOTA-NHS (7,3 мг, 0,011 ммоль, 1,5 экв.), затем 4 капли DIPEA. Смесь перемешивали при 23°C и контролировали с помощью LC-MS. Через 4 ч LC-MS показала, что почти все исходное вещество было преобразовано в продукт. Затем неочищенное вещество очищали с помощью препаративной RP-HPLC с получением чистого DUPA-EAOA-Phe-Phe-NOTA (QC08009,4, 50 мг, 56%, исходя из теоретических 8,02 мг, чистота 97% с помощью HPLC при 210 нм). Аналитическая RP-C18 HPLC: t_R = 3,45 мин (A = 10 мМ NH₄OAc, pH 7,0; B = CH₃CN, градиент растворителя: от 0% В до 100% B за 15 мин); препаративная RP-C₁₈ HPLC: t_R = 10,09 мин (A = 10 мМ NH₄OAc, pH 7,0; B = CH₃CN, градиент растворителя: от 0% B до 100% B за 30 мин); УФ-видим.: Х_макс = 211 нм; LCMS: LC-MS (квадрупольная система LC/MS Agilent G6130B) подвижная фаза для продукта: буфер (pH 7)-CH₃CN; способ: 0-100 ACN-15 мин, t_R = 3,45 мин MS масса/заряд: MS-API: расчетное для C₅₁H₇₅N₁₀O₁₆([M+H]+): 1083,5, найденное значение: 1083,3;

HPLC (препаративная колонка С18 Agilent): подвижная фаза: буфер (pH 7)-CH₃CN; способ: 0-100 ACN-30 мин, t_R = 10,09 мин;

¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ = 10,13 (br, 1H), 8,98 (br, 1H), 8,43 (br, 1H), 7,90 (br, 3H), 7,30-7,10 (m, 10H), 6,37 (br, 1H), 6,28 (br, 1H), 4,60-4,52 (m, 1H), 4,32-4,44 (m, 1H), 4,24-4,31 (m, 2H), 3,95-4,03 (m, 2H), 3,85-3,92 (m, 2H), 3,28 (s, 4H), 3,25 (s, 2H), 3,09 (m, 1H), 3,05 (m, 1H), 2,92-3,02 (m, 4H), 2,54-2,67 (m, 12H), 2,31-2,38 (m, 2H), 2, 19-2,31 (m, 3H), 2,11-2,18 (m, 2H), 2,02-2,10 (m, 3H), 1,52-1,72 (m, 4H), 1,251,37 (m, 4H), 1,05-1,13 (m, 2H)

Пример. Радиохимический синтез радиоактивного индикатора DUPA-EAOA-Phe-Arg-Lys-NOTA⁶⁴Cu.

Также были рассмотрены хелатирующие средства на основе NOTA и использовались в составе на основе NOTA-^64/67Cu для медицинской радиологии/лучевой терапии [14-16]. Получали соответствующий DUPA-NOTA-⁶⁴Cu для двойного назначения, визуализации и терапии, также называемый тераностическими средствами. DUPA-EAOA-Phe-Arg-Lys-NOTA-⁶⁴Cu получали в соответствии со стандартным протоколом с незначительными модификациями [4, 14-16]. ⁶⁴Cu(OAc)2, полученный на месте из ⁶⁴CuCl2 с применением 0,1М ацетата аммония (pH 5,5), добавляли в реакционную пробирку, содержащую предшественник DUPA-NOTA. Полученную смесь затем нагревали до 95°C в течение 15 мин. После охлаждения до комнатной температуры неочищенное вещество очищали с помощью HPLC для радиоактивных веществ на колонке С18 с применением MeCN и 0,1% TFA в качестве подвижной фазы с получением целевого радиоактивного индикатора с радиохимической чистотой (RCP) ~90%. Посредством стерилизующе- 47 035171 го фильтрования и разбавления в изотоническом растворе до необходимой радиоактивности получали радиоактивный индикатор, готовый для PET-визуализации.

Пример. Радиохимический синтез DUPA-EAOA-Phe-Phe-NOTA-⁶⁴Cu/Al-¹⁸F.

Пример. Радиохимический синтез DUPA-EAOA-Phe-Phe-NOTA-6⁸Ga.

Пример. Общая процедура введения метки Ga. Ga элюировали из ⁶⁸Ge/6⁸Ga генератора с применением 0,1н. HCl. Предварительно определенное количество ⁶⁸Ga в 0,1н. HCl добавляли в раствор DUPANOTA в ацетатном буфере (pH 4,8). Инкубировали смесь для введения метки при комнатной температуре и проверяли эффективность введения метки с помощью HPLC для радиоактивных веществ. Меченный радиоактивным изотопом продукт очищали с помощью HPLC для радиоактивных веществ и определяли пики образца DUPA-NOTA-⁶⁸Ga. После стерилизующего фильтрования и разбавления до соответствующей радиоактивности (5-10 мКи) и удельной активности (>1 Ки/мкмоль) радиоактивный индикатор был готов для исследования с применением PET-визуализации in vivo.

- 48 035171

Пример. Радиохимический синтез тераностического средства на основе DUPA-C-NETA.

Пример. Получение производных NOTA.

В настоящем документе описываются бифункциональные конъюгаты, также называемые тераностическими средствами. Соединения, описанные в настоящем документе, могут сильно хелатировать как радионуклиды, такие как ¹⁸F и ⁶⁸Ga, для PET-визуализации, так и радионуклиды ¹⁷⁷Lu и ⁹⁰Y для лучевой терапии. C-NETA, производное NOTA, рассматривалось для хелатирования Al¹⁸F с приблизительно двойной эффективностью (87%) NOTA [17]. Более того, C-NETA также, как сообщается, хелатируют широкоиспользуемые радиотерапевтические нуклиды, такие как ¹⁷⁷Lu и ⁹⁰Y, с высокой эффективностью введения метки [18]. Таким образом, в настоящем документе следует понимать, что C-NETA применим в качестве бифункционального хелатирующего средства, которое может применяться как для PETвизуализации, так и лучевой терапии, где радионуклид представляет собой металл или галогенид металла, например Al¹⁸F, ⁶⁸Ga, ¹⁷⁷Lu или ⁹⁰Y.

Пример. При РуВОР-поддерживаемой реакции сочетания QC04018 и QC08008 с последующим удалением защитной группы трет-бутилового сложного эфира с применением TFA получали DUPA-CNETA. DUPA-C-NETA применяют для оценки эффективности введения метки Al¹⁸F, ⁶⁸Ga, ¹⁷⁷Lu и ⁹⁰Y, а также для оценки PET-визуализации in vivo и лучевой терапии.

Примеры способа.

Пример. Оценка in vitro радиоактивного индикатора DUPA-EAOA-Phe-Phe-NOTA-⁶⁸Ga (⁶⁸GaQC08009).

⁶⁷Ga имеет более длительный период полураспада, чем ⁶⁸Ga (приблизительно 3,3 дня по сравнению с приблизительно 68 мин соответственно). Таким образом, ⁶⁷Ga применяют в качестве заменителя ⁶⁸Ga для оценки in vitro значений Kd и визуализации ткани. Следует понимать, что оценка in vitro значений Kd и визуализация ткани, наблюдаемые для ⁶⁷Ga, являются прогностическими ⁶⁸Ga. DUPA-EAOA-PhePhe-NOTA-⁶⁷Ga (67Ga-NOTA-LC-PSMA2) получали близко к количественному радиохимическому выходу. Исследование in vitro как в линии клеток PSMA(-) (PC3), так и линии клеток PSMA(+) (LnCaP и PIP-PC3) показало PSMA-опосредованное высокое и специфическое накопление с Kd = 8,45±2,16 нМ. PC3 представляет собой линию клеток PSMA(-); LnCap представляет собой линию клеток PSMA(+); и PIP-PC3 представляет собой линию трансфицированных клеток с более высокой экспрессией PSMA. Накопление ⁶⁸Ga-QC08009 клетками PC3 было минимальным и не изменялось при конкурировании. Накопление ⁶⁸Ga-QC08009 LnCaP и PIP-PC3 было значительным, при этом клетки PIP-PC3 демонстрировали наиболее высокое накопление. В обоих случаях накопление ⁶⁸Ga-QC08009 LnCaP и PIP-PC3 блокировалось конкурирующим лигандом. По сравнению с ⁶⁷Ga-DKFZ-PSMA11, средством визуализации при клинических испытаниях, ⁶⁷Ga-NOTA-LC-PSMA2 демонстрировало превосходное связывание с тканями PSMA(+) рака предстательной железы.

Пример. PET-визуализация in vivo и BioD-исследование радиоактивного индикатора DUPA-EAOAPhe-Phe-NOTA-⁶⁸Ga (⁶⁸Ga-QC08009).

Сканированное изображение микро-PET/CT in vivo с применением радиоактивного индикатора ⁶⁸Ga-NOTA-LC-PSMA2 у мышей, несущих ксенотрансплантаты LnCaP PSMA(+), показало 4,29% накопление ID в опухоли PSMA(+). Через 1 ч после инъекции большая часть радиоактивного индикатора была обнаружена в мочевом пузыре. Без ограничения конкретной теорией на основании данных в настоящем документе полагают, что первичный путь выведения находится в моче. Кроме того, по сравнению с другими тканями незначительная аккумуляция радиоактивного индикатора наблюдалось в почках. Без ограничения конкретной теорией в настоящем документе полагают, что относительно высокая экспрессия PSMA в почках мышей по сравнению с другими тканями, по меньшей мере частично, обуславливает незначительную аккумуляцию радиоактивного индикатора ⁶⁸Ga-NOTA-LC-PSMA2 в почках.

Claims

1. Конъюгат формулы

где P дополнительно содержит радионуклид.

2. Конъюгат по п.1, где бивалентный линкер L содержит полипептид, содержащий фенилаланин, лизин, аргинин или аспарагиновую кислоту или их комбинацию.

3. Конъюгат по п.1, где бивалентный линкер L не включает в себя бирадикал формулы

NH-(CH₂)₂-NH.

4. Конъюгат по п.1, содержащий фрагмент, имеющий формулу

5. Конъюгат по п.1, содержащий фрагмент, имеющий формулу

6. Конъюгат по п.1, содержащий фрагмент, имеющий формулу

- 50 035171

7. Конъюгат по п.1, содержащий фрагмент, имеющий формулу

О СО₂Н

О СО₂Н где W представляет собой O или S.

8. Конъюгат по п.1, содержащий фрагмент, имеющий формулу

О где радионуклид представляет собой ион хелатированного металла или соль хелатированного металла.

9. Конъюгат по п.1, содержащий фрагмент, имеющий формулу

- 51 035171

где n представляет собой целое число, выбранное из 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 или

10. 10. Конъюгат по п.1, где бивалентный линкер L имеет формулу

11. Конъюгат по п.1, где бивалентный линкер L имеет формулу

12. Конъюгат по п.1, содержащий фрагмент, имеющий формулу

13. Конъюгат по п.1, содержащий фрагмент, имеющий формулу

14. Конъюгат по п.1, где радионуклид включает позитронно-активный радионуклид или средство лучевой терапии.

15. Конъюгат по п.14, где позитронно-активным радионуклидом или средством лучевой терапии является Ga, Ga, F, Lu, Y, Cu, Cu, Zr, Ti, Mn, Zn, Rb, I, C, N или О.

16. Конъюгат формулы

- 52 035171

17. Конъюгат по п.16, где бивалентный линкер L содержит полипептид, содержащий фенилаланин, лизин, аргинин или аспарагиновую кислоту или их комбинацию.

18. Конъюгат по п.16, где бивалентный линкер L не включает в себя бирадикал формулы

NH-(CH₂)₂-NH.

19. Конъюгат по п.16, содержащий фрагмент, имеющий формулу

20. Конъюгат по п.16, содержащий фрагмент, имеющий формулу

21. Конъюгат по п.16, содержащий фрагмент, имеющий формулу

- 53 035171

где W представляет собой O или S.

22. Конъюгат по п.16, содержащий фрагмент, имеющий формулу

23. Конъюгат по п.16, содержащий фрагмент, имеющий формулу

24. Конъюгат по п.16, содержащий фрагмент, имеющий формулу

25. Конъюгат по п. 16, где бивалентный линкер L имеет формулу

26. Конъюгат по п. 16, где бивалентный линкер L имеет формулу

- 54 035171

27. Конъюгат по п.16, содержащий фрагмент, имеющий формулу

28. Конъюгат по п.16, содержащий фрагмент, имеющий формулу