EA032428B1 - Новые соединения метилпиперидина, подходящие для ингибирования микросомальной простагландин-e-синтазы 1 - Google Patents

Новые соединения метилпиперидина, подходящие для ингибирования микросомальной простагландин-e-синтазы 1 Download PDF

Info

Publication number
EA032428B1
EA032428B1 EA201790766A EA201790766A EA032428B1 EA 032428 B1 EA032428 B1 EA 032428B1 EA 201790766 A EA201790766 A EA 201790766A EA 201790766 A EA201790766 A EA 201790766A EA 032428 B1 EA032428 B1 EA 032428B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
mmol
mixture
add
methyl
collect
Prior art date
Application number
EA201790766A
Other languages
English (en)
Other versions
EA201790766A1 (ru
Inventor
Мэттью Джозеф Фишер
Стивен Ли Каклиш
Питер Рудольф Маннинен
Кэтрин Мари Партридж
Мэтью Аллен Шиффлер
Алан М. Варшавски
Джереми Шуленбург Йорк
Original Assignee
Эли Лилли Энд Компани
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=54478248&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=EA032428(B1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Эли Лилли Энд Компани filed Critical Эли Лилли Энд Компани
Publication of EA201790766A1 publication Critical patent/EA201790766A1/ru
Publication of EA032428B1 publication Critical patent/EA032428B1/ru

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/445—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine
    • A61K31/451—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine having a carbocyclic group directly attached to the heterocyclic ring, e.g. glutethimide, meperidine, loperamide, phencyclidine, piminodine
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/14—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing three or more hetero rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/445—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine
    • A61K31/4523—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/4545—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems containing a six-membered ring with nitrogen as a ring hetero atom, e.g. pipamperone, anabasine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/47—Quinolines; Isoquinolines
    • A61K31/4709—Non-condensed quinolines and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/47—Quinolines; Isoquinolines
    • A61K31/472—Non-condensed isoquinolines, e.g. papaverine
    • A61K31/4725—Non-condensed isoquinolines, e.g. papaverine containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/506—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim not condensed and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D211/00—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings
    • C07D211/04—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D211/06—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D211/36—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D211/60—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C07D211/62—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals attached in position 4
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D211/00—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Hydrogenated Pyridines (AREA)

Abstract

В изобретении предложены соединения формулы 1 или их фармацевтически приемлемая сольотличающиеся тем, что R, R1 и G являются такими, как определено в настоящем документе; способы получения указанных соединений и применение указанных соединений для лечения боли и/или воспаления, связанных с артритом или остеоартритом.

Description

Настоящее изобретение относится к новым соединениям; к фармацевтическим композициям, содержащим указанные соединения; способам применения указанных соединений для лечения боли и/или воспаления, связанных с артритом; и промежуточным соединениям и способам, подходящим для применения при синтезе указанных соединений.
Артрит включает воспаление суставов и часто сопровождается болью и ригидностью. Остеоартрит, наиболее распространенная форма артрита, представляет собой сложное дегенеративное заболевание суставов, характеризующееся прогрессирующим разрушением суставного хряща; перисуставных структур, в том числе костей, синовия и связанных тканей волокнистых суставов; и варьирующей степенью воспаления. Существующие способы лекарственной терапии с применением нестероидных противовоспалительных лекарственных средств (НПВС) и ингибиторов циклооксигеназы-2 (ингибиторы СОХ-2) могут уменьшать боль, связанную с остеоартритом, но проявлять лишь умеренную эффективность с течением времени, и применение каждого из них сопряжено с различным соотношением польза/риск.
НПВС и ингибиторы СОХ-2 уменьшают воспаление и боль за счет ингибирования ферментов СОХ2. В ответ на провоспалительные патогены ферменты СОХ-2 расщепляют арахидоновую кислоту с образованием простагландина Н2 (РСН2). РСН2 затем метаболизируется различными ферментами с образованием других эйкозаноидов, в том числе простагландина Е2 (РСЕ2), простагландина 12 (РС12), простагландина Ρ2α (РСР2а), простагландина Ό2 (РСО2) и тромбоксана А2 (ТХА2). Указанные метаболиты, как известно, индуцируют физиологические и патофизиологические эффекты. Считается, что пагубные побочные эффекты НПВС и ингибиторов СОХ-2 в отношении желудочно-кишечного тракта и сердечнососудистой системы могут объясняться опосредованным лекарственными средствами дисбалансом РС12 и ТХА2. Следовательно, применение лекарственных средств указанных классов может быть противопоказано многим пациентам вследствие уже существующих или возникающих нарушений сердечно-сосудистой системы и/или желудочно-кишечного тракта. Кроме того, у пациентов может развиваться устойчивость к конкретным видам лекарственной терапии с течением времени.
Было установлено, что относящийся к метаболитам арахидоновой кислоты РСЕ2 является важным медиатором состояний, связанных с остеоартритом, например лихорадки, боли и воспаления. Простагландин Е2, в частности, синтезируется в ходе метаболизма РСН2 микросомальной простагландин-Е2-синтазой 1 (шРСЕ8-1). Считается, что селективное ингибирование шРСЕ8-1 может представлять собой новый вариант лечения для пациентов, страдающих артритом.
В публикации Ж) 2013/146970 описаны тризамещенные соединения хинолина, и высказано предположение, что описанные соединения могут подходить для лечения, в том числе, воспалительных заболеваний. Однако в указанной публикации не описаны заявленные в настоящем документе соединения.
По-прежнему существует потребность в дополнительных вариантах лечения воспаления и облегчения боли, связанной с артритом. В настоящем изобретении предложены новые соединения, которые ингибируют шРСЕ8-1 и могут оказывать благоприятный эффект при лечении пациентов, страдающих артритом и остеоартритом.
В настоящем изобретении предложены соединения формулы 1 или их фармацевтически приемлемые соли о
1,
где К представляет собой Н или -СН3; К выбран из:
- 1 032428
О выбран из:
В настоящем изобретении предложены соединения формулы 2 или их фармацевтически приемлемые соли
К выбран из:
О выбран из:
- 2 032428
и
В настоящем изобретении также предложены соединения формул 1 или 2 или их фармацевтически приемлемые соли, где К1 представляет собой -СН3.
В предпочтительных соединениях формул 1 или 2 или их фармацевтически приемлемых солях К выбран из:
В более предпочтительных соединениях формул 1 или 2 или их фармацевтически приемлемых солях К выбран из:
В еще более предпочтительных соединениях формул 1 или 2 или их фармацевтически приемлемых солях К выбран из:
- 3 032428
В предпочтительных соединениях формул 1 или 2 или их фармацевтических солях О представляет собой
или
В настоящем изобретении также предложено соединение формулы 3 или его фармацевтически приемлемая соль
Согласно одному варианту реализации предложены нейтральные соединения формул 1, 2 или 3. Согласно другому варианту реализации указанные соединения предложены в виде фармацевтически приемлемых солей. Согласно одному предпочтительному варианту реализации солевой формы соединение формулы 3 предложено в виде хлористоводородной соли.
В настоящем изобретении также предложена фармацевтически приемлемая композиция, которая содержит соединение формул 1, 2 или 3 или его фармацевтически приемлемую соль, и по меньшей мере что-либо один компонент, выбранный из фармацевтически приемлемого носителя, разбавителя или вспомогательного вещества.
В настоящем изобретении также предложен способ лечения пациента, нуждающегося в лечении боли, связанной с артритом или остеоартритом. Указанный способ включает введение указанному пациенту эффективного количества фармацевтически приемлемой композиции, которая содержит соединение формул 1, 2 или 3 или его фармацевтически приемлемую соль и по меньшей мере один компонент, выбранный из фармацевтически приемлемого носителя, разбавителя или вспомогательного вещества.
В настоящем изобретении также предложен способ лечения пациента, нуждающегося в лечении артрита или остеоартрита. Согласно одному варианту в настоящем изобретении предложен способ лечения признаков и/или симптомов остеоартрита у пациента. Указанный способ включает введение указанному пациенту эффективного количества соединения формул 1, 2 или 3 или его фармацевтически приемлемой соли.
В настоящем изобретении также предложен способ лечения пациента, нуждающегося в лечении воспаления, связанного с артритом или остеоартритом. Указанный способ включает введение указанному пациенту эффективного количества фармацевтически приемлемой композиции, которая содержит соединение формул 1, 2 или 3 или его фармацевтически приемлемую соль и по меньшей мере один компонент, выбранный из фармацевтически приемлемого носителя, разбавителя или вспомогательного вещества.
В настоящем изобретении также предложен способ лечения пациента, нуждающегося в лечении боли, связанной с артритом. Указанный способ включает введение указанному пациенту эффективного количества соединения формул 1, 2 или 3 или его фармацевтически приемлемой соли. В настоящем изобретении также предложен способ лечения у пациента боли, связанной с остеоартритом. Указанный способ включает введение указанному пациенту эффективного количества соединения, соответствующего соединению формул 1, 2 или 3 или его фармацевтически приемлемой соли.
- 4 032428
В настоящем изобретении предложено соединение формул 1, 2 или 3 для применения в качестве лекарственного средства. Указанное лекарственное средство или соединение можно применять для терапии. Указанная терапия может включать лечение артрита или остеоартрита у пациента. Согласно одному варианту реализации указанная терапия может представлять собой лечение боли или воспаления, связанных с артритом или остеоартритом.
В настоящем изобретении также предложено применение соединения для получения лекарственного средства для лечения артрита или остеоартрита. Согласно одному варианту реализации указанное лекарственное средство применяют для лечения боли или воспаления, связанных с артритом или остеоартритом.
В настоящем документе термины лечение или лечить включают прекращение или уменьшение тяжести существующего симптома или расстройства, в частности, боли и/или воспаления, связанных с артритом или остеоартритом.
В настоящем документе термин пациент относится к млекопитающим, таким как морские свинки, крысы, собаки, кошки, коровы, лошади, овцы, козы или человек; или домашней птице, например, курице или утке. Предпочтительно пациент представляет собой млекопитающее, более предпочтительно человека.
Примеры соединений согласно настоящему изобретению могут быть введены в состав фармацевтических композиций в соответствии с принятыми практиками. Примеры фармацевтически приемлемых носителей, вспомогательных веществ и разбавителей можно найти в руководстве: КеттдЮп'з Рйагтасеийса1 8с1спссз. Сеплаго, Ед., Маск РиЫщЫпд Со. ЕазЮп Ра. 1990. Неограничивающие примеры включают крахмал, сахара, маннит и производные кремния; связующие агенты, такие как карбоксиметилцеллюлоза и другие производные целлюлозы, моностеарат глицерина; адсорбционные носители, такие как каолин и бентонит; смазывающие вещества, такие как тальк, кальций и стеарат магния, и твердые полиэтилгликоли. Согласно одному варианту реализации указанный фармацевтический состав включает 20% каптизол в 25 мМ фосфатном буфере, рН 2.
Предпочтительные фармацевтические композиции могут быть введены в состав таблетки или капсулы для перорального введения или инъецируемого раствора. Указанная(ый) таблетка, капсула или раствор включает соединение согласно настоящему изобретению в количестве, эффективном для лечения нуждающегося в лечении пациента.
В настоящем документе термин эффективное количество относится к количеству или дозе соединения согласно настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемой соли, которое, при введении пациенту одной или нескольких доз, обеспечивает требуемый эффект, такой как уменьшение или устранение боли и/или воспаления у пациента, который проходит диагностику или лечение.
Эффективное количество может быть легко определено специалистом по диагностике с применением известных методик, а также путем наблюдения за результатами, полученными при аналогичных обстоятельствах. При определении эффективного для пациента количества специалист по диагностике может учитывать ряд факторов, в том числе, но не ограничиваясь перечисленными, вид млекопитающего, размер, возраст и общее состояние здоровья; тяжесть симптомов; индивидуальный ответ пациента; способ введения; биодоступность соединения формул 1, 2 или 3 или его фармацевтически приемлемой соли в виде готового лекарственного продукта при выбранной схеме введения; применение сопутствующего лекарственного средства; и другие релевантные обстоятельства.
Согласно одному варианту реализации эффективное количество может составлять от приблизительно 0,0005 мг/кг массы тела до приблизительно 100 мг/кг. Более предпочтительно, эффективное количество может составлять от приблизительно 0,001 до приблизительно 50 мг/кг. Еще более предпочтительно, эффективное количество может составлять от приблизительно 0,001 до приблизительно 20 мг/кг.
Соединение согласно настоящему изобретению можно комбинировать с другими способами лечения и/или дополнительными терапевтическими агентами. Предпочтительно соединение согласно настоящему изобретению можно комбинировать с другими агентами, которые также являются эффективными при лечении артрита или остеоартрита. Примеры указанных дополнительных терапевтических агентов включают НПВС или ингибиторы СОХ-2, такие как ибупрофен, аспирин, ацетаминофен, целекоксиб, напроксен и кетопрофен; опиоиды, такие как оксикодон и фентанил; и кортикостероиды, такие как гидрокортизон, преднизолон и преднизон.
Соединение согласно настоящему изобретению и дополнительный(ые) терапевтический(ие) агент(ы) могут вводиться либо совместно, посредством одного и того же способа доставки и устройства, например, в одной пилюле, капсуле, таблетке или в одном растворе; либо по отдельности: одновременно, с помощью разных устройств для доставки, или последовательно.
Соединение согласно настоящему изобретению может быть представлено в виде фармацевтически приемлемой соли. Фармацевтически приемлемая соль относится к солям соединения согласно настоящему изобретению, которые считаются приемлемыми для клинического и/или ветеринарного применения. Фармацевтически приемлемые соли и общие методики их получения хорошо известны в данной области техники. См., например, Р. 81аЫ, е1 а1., НалдЬоок о£ Рйагтасеийса1 8а11з: Ргорегйез,
- 5 032428
8е1ес!юп апд Изе (УСНАЖ11еу-УСН, 2002); 8.М. Вегде, е! а1., Рйагтасеийса1 8а1!з, 1оигпа1 о£ Рйагтасеийса1 8с1епсез, Уо1. 66, Νο. 1, 1апиагу 1977.
Соединение согласно настоящему изобретению или его соль можно получать с применением различных процедур, известных в данной области техники, некоторые из которых представлены на схемах, в описании составов и в примерах, приведенных ниже. Специалисту в данной области техники будет понятно, что для получения соединений согласно настоящему изобретению или их солей конкретные этапы синтеза для каждого из описанных способов можно комбинировать различным образом, или можно комбинировать с этапами из других схем. Продукты каждого этапа на представленных ниже схемах могут быть выделены или очищены с применением стандартных способов, в том числе экстракции, испарения, осаждения, хроматографии, сверхкритической жидкостной хроматографии, фильтрации, тритурации и кристаллизации.
Индивидуальные изомеры, энантиомеры или диастереомеры могут быть выделены или извлечены специалистом в данной области техники в любой удобный момент при синтезе соединений формулы 1 с применением таких способов, как техники селективной кристаллизации или хиральная хроматография (см., например, I. I. 1асдиез, е! а1., Епапйотегз, Касета!ез, апд КезоШйопз, 1оЬп Ш|1еу апд 8опз, 1пс., 1981; Е.Ь. Е11е1 апд 8.Н. ШОев, 81егеосйеш181гу о£ Огдашс Сотроипдз, Ш|1еу-1п1ег8с1епсе, 1994). Кроме того, промежуточные соединения согласно приведенному ниже описанию получения составов содержат защитные группы азота и кислорода. Условия обеспечения и снятия защиты хорошо известны специалистам и описаны в опубликованных источниках (см., например, Сгеепе'з Рго!ес!1уе Сгоирз 1п Огдашс 8уп!йе818, Роиг!й Едйюп, Ре1ег С.М. Ши18 апд Тйеодога Сгеепе, 1оКп Ш|1еу аЪд 8опз, 1пс. 2007).
Реагенты и исходные материалы обычно легкодоступны специалисту в данной области техники. Другие реагенты и исходные материалы могут быть получены с применением стандартных техник органической химии и химии гетероциклических соединений, а также процедур, описанных в разделе Составы и в примерах ниже.
Изображение связи с проходящей через нее линией, как на рисунке ниже, указывает на точку присоединения заместителя к остальной части молекулы.
он
Сокращения в настоящем документе определены в соответствии с источником: Л1дпсЫт1са Лс1а, Уо1. 17, 1, 1984. Другие сокращения определены следующим образом: 5 относится к сдвигу относительно тетраметилсилана в миллионных долях; АТСС относится к Американской коллекции типовых культур; БОФ относится к (бензотриазол-1-илокси)-трис-(диметиламино)фосфония гексафторфосфату; БСА относится к бычьему сывороточному альбумину; КДИ относится к 1,1'карбонилдиимидазолу; ДЦК относится к 1,3-дициклогексилкарбодиимиду; ДХМ относится к дихлорметану; ДИК относится к 1,3-диизопропилкарбодиимиду; ДМФ относится к диметилформамиду; ДМСО относится к диметилсульфоксиду; ЭДКИ относится к гидрохлориду 1-(3диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимида; ЭДТК относится к этилендиаминтетрауксусной кислоте; ЭИ относится к энантиомерному избытку; ИФА относится к иммуноферментному анализу; ЭИ/МС относится к масс-спектрометрии с электронной ионизацией; ЭС/МС относится к масс-спектрометрии с электрораспылением; ЕЮЛс относится к этилацетату; Е1ОН относится к этанолу или этиловому спирту; Пр.№ относится к номеру примера; НЛТИ относится к (1-[бис-(диметиламино)метилен]-1Н1,2,3-триазоло[4,5-Ъ]пиридиний-3-оксид-гексафторфосфату); НВТИ относится к (1Н-бензотриазол-1илокси)(диметиламино)-^№диметилметанимина гексафторфосфату; НОАТ относится к 1-гидрокси-7азобензотриазолу; НОВТ относится к 1-гидроксилбензотриазол-гидрату; 1С50 относится к концентрации агента, обеспечивающей 50% максимального ингибиторного ответа, возможного для указанного агента; ί-РгОН относится к изопропанолу или изопропиловому спирту; ЛПС относится к липополисахариду; МеОН относится к метанолу; мин относится к минутам; НПВС относится к нестероидным противовоспалительным лекарственным средствам; ФСБ относится к забуференному фосфатом солевому раствору; РСЕ2 относится к простагландину Е2; РСН2 относится к простагландину Н2; РС12 относится к простагландину 12; РуВОР относится к (бензотриазол-1-илокситрипирролидинофосфония гексафторфосфату); РуВгОР относится к бром(трипирролидинил)фосфония гексафторфосфату; гЫЕ-13 относится к рекомбинантному интерлейкину 1β человека; 8СР относится к сверхкритической жидкости; СЖХ относится к сверхкритической жидкостной хроматографии; ТБМЭ относится к трет-бутилметиловому эфиру; ТГФ относится к тетрагидрофурану и !К относится к времени удерживания.
Общие методы ЖХ/МС. Все анализы осуществляют с помощью системы для жидкостной хроматографии (ЖХ) АдДеп! 1200 1пйпДу, состоящей из дегазатора 1260 Н1Р (С4225А), двухкомпонентного насоса 1260 (С1312В), автоматического пробозаборника 1290 (С4226А),
- 6 032428 термостатированного колоночного отделения 1290 (О1316С) и диодно-матричного детектора 1260 (О4212В), соединенного с одиночным квадрупольным масс-спектрометрическим (МС) детектором АдПеп! 6150. Система МС работает с источником электрораспылительной ионизации (ЭСИ) как в режиме положительных, так и в режиме отрицательных ионов. Устанавливают значение давления распылителя, равное 50 фунт/кв.дюйм, значения температуры сушильного газа и потока - 350°С и 12,0 л/мин соответственно. Используют значения напряжения на капилляре 4000 В в режиме положительных ионов и 3500 В в режиме отрицательных ионов. Регистрацию данных осуществляют с применением программного обеспечения АдПеп! СПеш§!а!юп.
Способ ВЭЖХ 1. Анализы проводят на колонке Оа1се1 СЫга1Рак ΑΌ-3Κ (длина 100 мм, внутренний диаметр 4,6 мм, размер частиц 3 мкм). Подвижная фаза: А2=вода с 10 мМ бикарбонатом аммония, показатель рН доведен до 9 добавлением гидроксида аммония; и В2=ацетонитрил. Хроматографирование проводят при температуре 25°С и скорости потока 1,5 мл/мин с элюированием в градиенте от 50 до 95% (В2) на протяжении 3,0 мин с последующим 3,0-минутным удерживанием при 95% (В2). Регистрацию данных в УФ (ΌΑΌ) осуществляют при 40 Гц, в диапазоне сканирования 190-400 нм (с шагом 5 нм). Перед МС-детектором осуществляют разделение потока 1:1. Устанавливают диапазон регистрации МС 100-800 м/з с шагом 0,2 м/з в режиме с любой полярностью. Устанавливают напряжение фрагментора 70 (ЭСИ+) или 120 (ЭСИ-), приращение: 0,40 (ЭСИ+) или 1,00 (ЭСИ-); пороговое количество ионов: 4000 (ЭСИ+) или 1000 (ЭСИ-). Общая продолжительность цикла МС составляет 0,15 с/цикл.
Способ СЖХ 1. Анализы проводят на колонке Оа1се1 СЫга1Рак О1-Н (длина 100 мм, внутренний диаметр 4,6 мм, размер частиц 5 мкм). Подвижная фаза: 8% (20 мМ ΝΗ3 в ΐ-РгОН) и 92% СО2(8с£) при давлении 100 бар. Анализ проводят при температуре 35°С и скорости потока 3 мл/мин. Регистрацию данных в УФ (ΌΑΌ) осуществляют при длине волны 220 нм.
Способ СЖХ 2. Анализы проводят на колонке Оа1се1 СЫга1Рак А8-Н (длина 100 мм, внутренний диаметр 4,6 мм, размер частиц 5 мкм). Подвижная фаза: 20% (20 мМ N113 в ΐ-РгОН) и 80% СО2(8с£) при давлении 100 бар. Анализ проводят при температуре 35°С и скорости потока 5 мл/мин. Регистрацию данных в УФ (ΌΑΌ) осуществляют при длине волны 220 нм. Приведенные ниже схемы дополнительно иллюстрируют настоящее изобретение.
Этап 1
К
РС = защитная группа
Схема 1
1. Гидрирование
Этап 3 :2. Снятие защиты
На этапе 1 схемы 1 трифторметилсульфонильную группу присоединяют к пиперидину в качестве уходящей группы в ходе последующей реакции этапа 2. РО представляет собой защитную группу, разработанную для аминогруппы, такую как карбаматы и амиды. Затем проводят карбонилирование продукта этапа 1 с применением палладиевого катализатора для получения сложноэфирного продукта этапа 2. Двойная связь в тетрагидропиридине может быть восстановлена в условиях гидрирования. На подэтапе 2 этапа 3 с пиперидинамина может быть снята защита в кислотных условиях. Затем можно проводить реакция пиперидинового продукта этапа 3 с галоген-замещенной группой О в условиях, подходящих для нуклеофильного ароматического замещения, с получением продукта этапа 4. Например, для получения продукта подэтапа 1 этапа 4 может применяться неорганическое основание, такое как К2СО3, или органическое основание, такое как Ν,Ν-диизопропилэтиламин, пиридин или триэтиламин. В качестве возможного варианта, можно проводить реакцию пиперидинового продукта этапа 3 с Νоксидом хинолона с применением активирующего агента, такого как РуРгор, с получением продукта этапа 4. Снятие защиты карбоксигруппы пиперидина может осуществляться в стандартных условиях с неорганическим основанием, таким как водный раствор гидроксида натрия или гидроксида лития, с получением продукта подэтапа 2 этапа 4, или в кислотных условиях с применением 4 М НС1 или водного раствора серной кислоты.
- 7 032428
Схема 2
На схеме 2 продукт пиперидинкарбоновой кислоты этапа 4 может быть соединен в условиях амидирования с подходящим амином, Κ-ΝΗ2, с применением органического основания, такого как триэтиламин или диизопропилэтиламин, связующего реагента, такого как ЭДКИ, и связующей добавки, такой как НОВТ, с получением соединений подэтапа 1 этапа 5. Специалисту в данной области техники будет понятно, что существует ряд способов и реагентов для получения амидов в результате реакции карбоновых кислот и аминов. Например, реакция аминного соединения с подходящей карбоновой кислотой в присутствии связующего реагента с применением или без применения органического основания может обеспечивать получение соединения формулы 1. Связующие реагенты включают карбодиимиды, такие как ДНК, ДИК, ЭДКИ или карбонилдиимидазол, например КДИ. Для усиления реакции можно также применять амидные связующие добавки, такие как НОВТ и ΗΘΆΐ. Кроме того, вместо более традиционных связующих реагентов можно применять соли урония или фосфония с ненуклеофильными анионами, такие как ΗΒΤϋ, НАТИ, БОФ, РуВОР и РуВгОР. Добавка, такая как ДМАП, может применяться для усиления реакции. Затем с продукта подэтапа 1 этапа 5, при необходимости, может быть снята защита в стандартных условиях с применением неорганического основания, такого как водный гидроксид натрия или гидроксид лития, в растворителе, таком как МеОН и ТГ Ф, с получением соединений формулы 1.
Фармацевтически приемлемую соль соединений согласно настоящему изобретению, например, хлористоводородная соль, можно получать, например путем проведения реакции подходящего свободного основания формулы 1 и подходящей фармацевтически приемлемой кислоты, такой как соляная кислота, в подходящем растворителе, таком как диэтиловый эфир, в стандартных условиях. Кроме того, получение таких солей может осуществляться одновременно со снятием защитной группы азота. Получение таких солей хорошо известно и распространено в данной области техники. См. например, Сои1б, Р.Ь., Ба11 §е1есЕоп Бог ЬаНс бгидз, 1п1егпайопа1 1оигпа1 оБ РБагшасеиЕсз, 33.: 201-217 (1986); ВазЕп, КД., е1 а1., Ба11 Бе1ес1юп апб Ор11Ш17а11оп Ргосебигез Бог РБагшасеи11са1 Νο\ν СБеш1са1 ЕпЕЕез, Огдашс Ргосезз КезеагсБ апб Веуе1оршеп1, 4: 427-435 (2000); и Вегде, Б.М., е1 а1., РБагшасеиЕса1 Ба11§, 1оигпа1 оБ РБагшасеиЕса1 Бшепсез, 66: 1-19, (1977).
Представленные ниже составы и примеры дополнительно иллюстрируют настоящее изобретение.
Состав 1. трет-Бутил-3,3-диметил-4-(((трифторметил)сульфонил)окси)-3,6-дигидропиридин-1(2Н)карбоксилат
В атмосфере азота охладить раствор диизопропиламина (260 мл, 1,85 моль) в ТГФ (1,0 л) до -20°С, затем добавить раствор п-бутиллития (2,50 М в гексанах, 650 мл, 1,60 моль) по каплям в течение 30 мин. Оставить смесь для нагревания до -10°С и перемешивать в течение 1 ч. Охладить смесь до -74°С и добавить раствор трет-бутил-3,3-диметил-4-оксопиперидин-1-карбоксилата (260 г, 1,14 моль) в ТГФ (1,0 л мл) по каплям в течение 60 мин. Перемешивать смесь при -74°С в течение 2 ч, затем добавить раствор ^фенил-бис-(трифторметансульфонимида) (430 г, 1,20 моль) в ТГФ (1,0 л). Нагреть смесь до 0°С и перемешивать в течение 2 ч. Смесь оставить для нагревания до комнатной температуры и перемешивать в течение ночи. Остановить реакцию добавлением насыщенного водного раствора Ν^Π (1,0 л); развести в воде (2,0 л); разделить слои; и экстрагировать водный слой Е1ОАс (2x2 л). Объединить органические экстракты; высушить над №2БО4; профильтровать; собрать фильтрат и сконцентрировать фильтрат под пониженным давлением. Провести флэш-хроматографию полученного неочищенного материала на силикагеле, элюировать в градиенте от 0 до 15% ТБМЭ в гексанах с получением титульного соединения в виде оранжевого масла с чистотой приблизительно 75% по массе по оценке с применением 1Н ЯМР (430 г, 78%).
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б6) δ 1,05 (синглет, 6Н), 1,40 (синглет, 9Н), 3,36 (синглет, 2Н), 4,02 (дублет, Д=3,4 Гц, 2Н), 5,82 (шир. синглет, 1Н).
Состав 2. О1-трет-Бутил-О4-метил 3,3-диметил-2,6-дигидропиридин-1,4-дикарбоксилат
- 8 032428
Объединить ацетат палладия(П) (4,40 г, 20,0 ммоль), 1,1'-бис-(дифенилфосфино)ферроцен (13,3 г, 22,8 ммоль), трет-бутил-3,3 -диметил-4-(((трифторметил)сульфонил)окси)-3,6-дигидропиридин-1 (2Н)карбоксилат (72,0 г, 150 ммоль), безводный ацетонитрил (850 мл), безводный МеОН (570 мл) и триэтиламин (36,0 мл, 245 ммоль) в автоклаве ΡΑΚΚ™ объемом 2 л, оснащенном механической мешалкой. Закрыть автоклав. Продуть и заполнить автоклав монооксидом углерода с повышением давления до 689 кПа. Нагреть смесь до 65°С в течение 2,25 ч; охладить смесь до комнатной температуры; и аккуратно вентилировать автоклав. (Осторожно! Ядовитый газ!). Сконцентрировать под пониженным давлением с получением неочищенного материала. Объединить указанный материал с пятью другими партиями материала, полученными при помощи аналогичной процедуры в тех же масштабах. Провести флэш-хроматографию объединенного материала на силикагеле, элюировать в градиенте от 0 до 20% ТБМЭ в гексанах с получением титульного соединения в виде масла желтого цвета с чистотой приблизительно 83% по массе (260 г, 88%). МС (м/з): 214 (М - ΐ-Ви + 2Н)+.
Состав 3. (±)-О1-трет-Бутил-О4-метил 3,3-диметилпиперидин-1,4-дикарбоксилат
Суспендировать палладий (10% по массе на угле, 5,4 г, 5,1 ммоль) в МеОН (700 мл), затем добавить раствор О1-трет-бутил-О4-метил-3,3-диметил-2,6-дигидропиридин-1,4-дикарбоксилата (130 г, 396 ммоль), растворенного в МеОН (700 мл) в реактор ΡΆΚΚ™ объемом 2,25 л. Закрыть реактор, продуть сначала газообразным азотом, затем водородом. Довести давление водорода в реакторе до 414 кПа и перемешивать смесь при комнатной температуре в течение 1,5 ч. Понизить давление и профильтровать смесь для удаления катализатора. Объединить фильтрат с полученным в ходе другой по существу идентичной реакции и сконцентрировать под пониженным давлением с получением титульного соединения в виде масла желтого цвета с чистотой приблизительно 85% по массе (240 г, 95%). МС (м/з): 216 (М - ΐ-Ви + 2Н)+.
Состав 4. (±)-Метил-3,3 -диметилпиперидин-4-карбоксилатгидрохлорид
Добавить НС1 (4,0 М раствор в 1,4-диоксане, 2,0 л, 8,0 моль) к раствору О1-трет-бутил-О4-метил3,3-диметилпиперидин-1,4-дикарбоксилата (240 г, 752 ммоль) в 1,4-диоксане (500 мл). Перемешивать полученную смесь при комнатной температуре в течение ночи и сконцентрировать под пониженным давлением. Остаток развести ТБМЭ (500 мл) и собрать полученные твердые вещества путем фильтрации. Промыть фильтрационный осадок ТБМЭ (2x400 мл) и высушить твердое вещество в вакуумной печи при 35°С в течение ночи с получением титульного соединения в виде белого твердого вещества (144 г, 92%). МС (м/з): 172 (М+Н)+.
Состав 5. (-)-Метил-(48)-3,3 -диметил-1 -(8-метил-2-хинолил)пиперидин-4-карбоксилат
смеси метил-3,3 -диметилпиперидин-4Добавить К2СО3 карбоксилатгидрохлорида (144 г, 693 ммоль) и 2-хлор-8-метилхинолина (125 г, 704 ммоль) в ДМСО (1,4 л). Перемешивать полученную смесь в течение ночи при 131±1°С. Охладить смесь до комнатной температуры; профильтровать для удаления твердых веществ; собрать фильтрат; развести фильтрат водой (2 л); затем экстрагировать ЕЮАс (2x3 л). Промыть объединенные органические экстракты водой (3x1,5 л); высушить над Ш28О4; профильтровать; собрать и сконцентрировать фильтрат под пониженным давлением. Провести флэш-хроматографию полученного неочищенного материала на силикагеле, элюировать в градиенте от 25 до 30% (10% ТБМЭ в ДХМ) в гексанах с получением рацемата титульного соединения. Растворить указанный материал в МеОН (7,5 л) и профильтровать. Провести
- 9 032428 хиральную СЖХ материала (СЫга1рак О1-Н, 50 ммх250 ммх5 мкм), с применением 15% (0,2% диметилэтиламина в ΐ-ΡτΟΗ) в СО2(8Ср) в качестве подвижной фазы при скорости потока 400 г/мин, путем введения 5 мл раствора каждые 95 с, пока не будет израсходован весь материал. Для каждого введения собрать первую элюирующую фракцию (£к=2,57 мин, с применением способа СЖХ 1). Объединить собранные фракции с полученными аналогичным образом в ходе предыдущей реакции с получением 98 г неочищенного метил-3,3-диметилпиперидин-4-карбоксилатгидрохлорида. Сконцентрировать смесь под пониженным давлением и рекристаллизовать материал из горячего ЕЮН (1,38 л). Собрать кристаллы и высушить кристаллический материал в вакуумной печи при 40°С в течение ночи с получением титульного соединения в виде белого кристаллического твердого вещества (156 г, выход 43% пропорционально размеру партий). МС (м/з): 313 (М+Н)+, [α]20 ο -45° (с 0,21, ДХМ). ЭИ=>99% по оценке с применением способа СЖХ 1.
Состав 6. (-)-(48)-3,3-Диметил-1-(8-метил-2-хинолил)пиперидин-4-карбоновая кислота
Обработать метил-(48)-3,3-диметил-1-(8-метил-2-хинолил)пиперидин-4-карбоксилат (154 г, 493 ммоль) серной кислотой (10% по объему в воде, 2,31 л, 2,75 моль) и нагревать смесь с обратным холодильником в течение ночи. Охладить смесь до комнатной температуры и добавить ΝαΟΗ (50% по массе в воде) до достижения показателя рН, составляющего 13. Добавить ТБМЭ (500 мл) для получения трехфазной смеси. Пометить слои в направлении от верхнего к нижнему: слой А, слой В и слой С. Извлечь слой С (нижний слой). Добавить воду (600 мл) к слоям А и В и отделить водный слой от органических слоев. Отделить органические слои (А и В). Объединить водный слой со слоем С. Экстрагировать объединенные водные слои с ТБМЭ (500 мл); разделить слои; и отделить органические экстракты. Добавлять НС1 (5,0 М) к водному слою до достижения показателя рН 6,5. Экстрагировать полученную смесь на водной основе ТБМЭ (2х400 мл). Объединить все органические экстракты (в том числе слои А и В); высушить над М§8О4; профильтровать; собрать и сконцентрировать фильтрат под пониженным давлением с получением титульного соединения в виде белого твердого вещества 96% чистоты (145 г, 95%). МС (м/з): 299 (М+Н)+. [α]20η -59,6° (с 3,12, СН3ОН).
Состав 7. (±)-2-((Бензилокси)метил)-2,3-дигидро-4Н-пиран-4-он
Добавить раствор /пС12 в ТГФ (0,5 М, 1,21 л, 607 ммоль)в холодный (0°С) раствор (Е)-1-метокси-3(триметилсилил)окси-1,3-бутадиена (чистота 95%, 100 г, 551 ммоль) и (бензилокси)ацетальдегида (чистота 97%, 80 мл, 551,370 ммоль) в толуоле (551 мл) в течение 90 мин при поддержании внутренней температуры реакционной смеси ниже 10°С. Смесь оставить для нагревания до комнатной температуры и перемешивать в течение ночи. Разделить реакционную смесь на две равных части; выполнить для каждой части следующие процедуры. Добавить в виде 4-х порций трифторуксусную кислоту (35 мл, 457 ммоль). Через 20 мин сконцентрировать полученную смесь под пониженным давлением; развести в ЕЮАс; добавить избыток насыщенного ШНСО3; профильтровать для удаления твердых веществ; собрать фильтрат; отделить и собрать органический слой. Промыть органический раствор насыщенным водным раствором №С1; извлечь органические экстракты; высушить над М§8О4; профильтровать; собрать фильтрат и сконцентрировать под пониженным давлением. Объединить полученный из всех ранее разделенных частей материал. Провести флэш-хроматографию полученного материала на силикагеле, элюировать в градиенте от 20 до 50% ЕЮАс в гексанах с получением титульного соединения в виде оранжевого масла с чистотой 92% (96 г, 73%).
1Н ЯМР (400 МГц, СОС13) δ 7,40-7,28 (мультиплет, 6Н), 5,42 (дублет, 1=6,0 Гц, 1Н), 4,65-4,56 (мультиплет, 3Н), 3,74-3,67 (мультиплет, 2Н), 2,75 (дублет дублетов (дд), 1=16,8, 14,3 Гц, 1Н), 2,42 (дд, 1=16,9, 3,2 Гц, 1Н).
Состав 8. (±)-2-(Бензилоксиметил)тетрагидропиран-4-он
Перемешивать смесь ЕЮАс (880 мл), (±)-2-((бензилокси)метил)-2,3-дигидро-4Н-пиран-4-она (96 г, 0,440 моль), триэтиламина (123 мл, 0,882 моль) и палладия (10% на угле, 4,68 г, 4,40 ммоль) в атмосфере водорода при комнатной температуре в течение 73 ч.
Профильтровать смесь через диатомит; промыть фильтрационный осадок ЕЮАс (250 мл); и затем промыть фильтрат водным раствором НС1 (0,1 М), насыщенным водным раствором ШНСО3 и насыщенным водным раствором №С1. Высушить органический слой над М§8О4; профильтровать; собрать фильтрат и сконцентрировать под пониженным давлением с получением титульного соединения
- 10 032428 в виде материала светло-желтого цвета (81,4 г, 84%). ЖХ/МС (ЭСИ+): 221 [М+Н]+, 238 [Μ+ΝΗ4]+, 243 [Μ+Να]+.
Состав 9. (28,4К)-2-(Бензилоксиметил)тетрагидропиран-4-ол
Охладить раствор (±)-2-(бензилоксиметил)тетрагидропиран-4-она (40,6 г, 184 ммоль) в ТГФ (1,08 л) до -78°С. Добавить раствор Б1А1Н4 (1,0 М в ТГФ, 240 мл, 240 ммоль) по каплям в течение 15 мин. Оставить смесь для нагревания до 0°С после завершения добавления и медленно по каплям добавить воду (8,4 мл). После перемешивания смеси в течение 5 мин добавить раствор ΝαΟΗ (15% по массе в 8,4 мл воды) и перемешивать в течение дополнительных 5 мин. Затем добавить воду (3x8,4 мл) и оставить смесь для нагревания до комнатной температуры. Через 30 мин профильтровать суспензию для удаления твердых веществ и сконцентрировать фильтрат под пониженным давлением с получением титульного соединения в виде бесцветного масла. Промыть твердые вещества однократно ТГФ; профильтровать; и сконцентрировать фильтрат под пониженным давлением. Объединить указанный материал с полученным по существу в соответствии с той же процедурой в предыдущих реакциях, начиная с 40 г, 22 г и 45 г (±)-2-(бензилоксиметил)тетрагидропиран-4-она. Растворить объединенные материал в ϊ-ΡγΟΗ (637 мл). Провести хиральную СЖХ материала (СЫга1рак А8-Н, 50 ммх150 ммх5 мкм) с применением 25% ϊ-ΡγΟΗ в СО2(3с1) в качестве подвижной фазы при скорости потока 300 г/мин, путем введения 1,35 г раствора каждые 114 с, пока не будет введен весь материал. Для каждого введения собрать первую элюирующую фракцию (основной изомер). Объединить все собранные фракции с получением титульного соединения с ЭИ >99% по оценке с применением способа СЖХ 2 (62,8 г, выход 42% пропорционально размеру партий). ЖХ/МС (ЭСИ): 223 [М+Н]+, 240 [Μ+ΝΗ4]+, 245 |\Б\а|', 467 [2Μ+Να]+.
Состав 10. ((28,4К)-2-(Бензилоксиметил)тетрагидропиран-4-ил)метансульфонат
По каплям добавить раствор метансульфонилхлорида (11,7 мл, 150,6 ммоль) в ДХМ (70 мл) к смеси (28,4К)-2-(бензилоксиметил)тетрагидропиран-4-ола (31 г, 139,5 ммоль), ДХМ (1,40 л) и Ν,Νдиизопропилэтиламина (73,0 мл, 418,4 ммоль) при 0°С. Смесь оставить для нагревания до комнатной температуры и перемешивать в течение ночи. Затем добавить раствор метансульфонилхлорида (0,537 мл, 6,98 ммоль) в ДХМ (5 мл) и перемешивать смесь в течение 5 мин при комнатной температуре. Охладить смесь до 0°С, вылить в воду; разделить; и собрать органический слой. Промыть органический слой водой (500 мл); объединить органический слой с органическими слоями/экстрактами, полученными в ходе других по существу идентичных реакций. Высушить объединенные органические растворы над Μ§8Ο4; профильтровать; собрать фильтрат и сконцентрировать фильтрат под пониженным давлением с получением титульного соединения в виде масла светло-оранжевого цвета (84,7 г, выход 97% пропорционально размеру партий).
1Η ЯМР (400 МГц, Щ-ДМСО) δ 7,36-7,24 (мультиплет, 5Η), 4,86-4,77 (мультиплет, 1Η), 4,47 (синглет, 2Η), 3,96 (дд, 1=7,6, 4,4 Гц, 1Η), 3,60-3,54 (мультиплет, 1Η), 3,48-3,36 (мультиплет, 3Η), 3,18 (синглет, 3Η), 2,05 (дублет, 1=7,8 Гц, 1Η), 1,98 (дублет, 1=7,8 Гц, 1Η), 1,58 (кажущийся квинтет дуплетов, 1=12,0, 4,8 Гц, 1Η), 1,40 (кажущийся квинтет, 1=11,8 Гц, 1Н).
Состав 11. ((28,48)-4-Аминотетрагидро-2Н-пиран-2-ил)метанола гидрохлорид н°^О-мн2
Н-С1
Добавить азид натрия (12,85 г, 191,7 ммоль) к раствору ((28,4К)-2(бензилоксиметил)тетрагидропиран-4-ил)метансульфонат (32,0 г, 106,5 ммоль) в ДМФ (304 мл). Нагреть полученную смесь до 100°С и перемешивать в течение 4 ч. Охладить реакционную смесь до комнатной температуры. Вылить смесь в воду (400 мл) и затем экстрагировать ЕЮАс (2x400 мл). Объединить органические экстракты и промыть насыщенным водным раствором \аС1 (3x200 мл). Высушить органические экстракты над Μ^8Ο4; профильтровать; и собрать фильтрат. Сконцентрировать фильтрат под пониженным давлением до общего объема, составляющего приблизительно 100 мл. Растворить полученную смесь в ЕЮАс (700 мл) и добавить в сосуд РАКЕ™, содержащий РЮ2 (2,7 г, 12 ммоль) и ЕЮАс (700 мл). Продуть сосуд азотом; затем заполнить водородом до достижения давления 414 кПа. Встряхивать смесь в течение 4 ч при комнатной температуре. Профильтровать смесь и сконцентрировать бесцветный фильтрат под пониженным давлением для получения 23,2 г бесцветного масла. Объединить с 36,2 г материала, полученного с применением по существу идентичной процедуры в ходе предыдущей реакции. Растворить объединенный материал в ΕΐΟΗ (600 мл) и добавить 11С1 (37% по массе в Η2Ο, 50 мл). Добавить полученную смесь в сосуд РАКК™, содержащий Рй (10% на угле, 10,0 г, 9,40 ммоль) и
- 11 032428
ЕЮН (600 мл). Продуть реактор азотом и заполнить водородом до достижения давления 414 кПа. Встряхивать смесь при комнатной температуре в течение 1 ч. Профильтровать смесь; собрать фильтрат и сконцентрировать бесцветный фильтрат под пониженным давлением с получением титульного соединения в виде густого темного масла с чистотой приблизительно 72% (54,2 г, 85%). ЖХ/МС (ЭСИ): 132 [М+Н]+.
Состав 12. (±)-(Метил 3,3-диметил-1-[4-(трифторметил)фенил]пиперидин-4-карбоксилат
Добавить К2СО3 (460 мг, 3,33 ммоль) к смеси метил-3,3-диметилпиперидин-4карбоксилатгидрохлорида (300 мг, 1,44 ммоль), 1-фтор-4-(трифторметил)бензена (475 мг, 2,89 ммоль) и
ДМСО (2 мл). Перемешивать полученную смесь при 130°С в течение двух дней. Охладить смесь до комнатной температуры и перемешивать в течение 3 дней. Провести флэш-хроматографию с обращенной фазой полученного материала на силикагеле С18, элюировать в градиенте от 10 до 100% ацетонитрила (0,1% муравьиной кислоты) в воде (0,1% муравьиной кислоты) с получением титульного соединения в виде масла желтого цвета (113 мг, 25%). МС (м/з): 316 (М+Н)+.
Состав 13. (±)-3,3-Диметил-1-[4-(трифторметил)фенил]пиперидин-4-карбоновая кислота.
но
Добавить 2 М водный раствор ЖОН (1 мл, 2 ммоль) к смеси метил-(±)-3,3-диметил-1-[4(трифторметил)фенил]пиперидин-4-карбоксилата (113 мг, 0,36 ммоль), МеОН (1 мл) и ТГФ (5 мл). Перемешивать полученную смесь при 50°С в течение ночи. Охладить смесь до комнатной температуры и добавлять НС1 (33% по массе в воде) до достижения показателя рН смеси, составляющего 3. Сконцентрировать смесь под пониженным давлением с получением титульного соединения в виде твердого вещества желтого цвета с чистотой 88% (123 мг, выход 99%). МС (м/з): 302 (М+Н)+.
Состав 14. (±)-3,3-Диметил-1-[5-(трифторметил)пиримидин-2-ил]пиперидин-4-карбоновая кислота
НО
Добавить триэтиламин (7,65 мл, 54,9 ммоль) к смеси (±)-метил-3,3-диметилпиперидин-4карбоксилатгидрохлорида (8,55 г, 41,2 ммоль), 2-хлор-5-(трифторметил)пиримидина (5,0 г, 27,4 ммоль) и ацетонитрила (67 мл). Нагреть смесь в микроволновой печи до 180°С в течение 1 ч; затем охладить смесь до комнатной температуры; и сконцентрировать под пониженным давлением. Добавить МеОН (40 мл),
ТГФ (80 мл) и 2 М водный раствор ЖОН (40 мл, 80 ммоль). Перемешивать полученную смесь в течение двух дней при 50°С. Добавить 2М водный раствор ЖОН (45 мл, 90 ммоль) и перемешивать полученную смесь в течение 4 ч при 50°С. Охладить смесь до комнатной температуры, а затем добавить НС1 (33% по массе в воде) до достижения значения рН 3. Сконцентрировать под пониженным давлением. Развести в
Н2 водном растворе НС1 (100 мл) и экстрагировать ЕЮАс (2x100 мл). Промыть объединенные органические экстракты солевым раствором (100 мл); высушить над Ж28О4; профильтровать; собрать фильтрат и сконцентрировать под пониженным давлением с получением титульного соединения (7,60 г,
61%). МС (м/з): 302 (М+Н)+.
Состав 15. 5,8-Диметилхинолин-1-оксид
О
Добавить 3-хлорпероксибензойную кислоту (5,96 г, 24,1 ммоль) к смеси 5,8-диметилхинолина (2 г, профильтровать смесь. Собрать фильтрат. Перемешивать полученную смесь при комнатной температуре в течение ночи. Развести в ДХМ (100 мл); промыть Н2 водным раствором ЖОН (3x50 мл); высушить над Ж28О4; профильтровать; собрать фильтрат и сконцентрировать до сухого остатка под пониженным давлением. Провести флэш-хроматографию с обращенной фазой полученного неочищенного материала на силикагеле С18, элюировать в градиенте от 15 до 70% ацетонитрила (10 мМ бикарбонат аммония) в воде (10 мМ бикарбонат аммония) с получением титульного соединения (372 мг, 18%). МС (м/з): 327 (М+Н)+.
Состав 16. (±)-Метил-1-(5,8-диметил-2-хинолил)-3,3-диметилпиперидин-4-карбоксилат.
- 12 032428
Добавить Ν,Ν-диизопропилэтиламин (2,02 мл, 11,6 ммоль) и РуВгоР (1,75 г, 3,75 ммоль) к смеси (±)-метил-3,3-диметилпиперидин-4-карбоксилатгидрохлорида (600 мг, 2,89 ммоль), 5,8-диметилхинолин1-оксида (678 мг, 3,91 ммоль) и ДХМ (15 мл). Перемешивать полученную смесь при комнатной температуре в течение 3 дней. Провести флэш-хроматографию с обращенной фазой неочищенного реакционного продукта на силикагеле С18, элюировать в градиенте от 10 до 100% ацетонитрила (0,1% муравьиной кислоты) в воде (0,1% муравьиной кислоты). Объединить фракции, содержащие требуемый продукт, и сконцентрировать под вакуумом до объема, составляющего приблизительно 30 мл. Довести рН до 6 добавлением Н2 водного раствора ХаОН. Экстрагировать водный раствор ЕЮАс (2x30 мл), промыть водным буферным раствором с рН 6 (4x30 мл), высушить над М§804; профильтровать и сконцентрировать под пониженным давлением с получением титульного соединения (166 мг, 18%). МС (м/з): 327 (М+Н)+.
Состав 17. (±)-1-(5,8-Диметил-2-хинолил)-3,3-диметилпиперидин-4-карбоновая кислота.
Объединить смесь метил-(±)-1 -(5,8-диметил-2-хинолил)-3,3-диметилпиперидин-4-карбоксилата (166 мг, 0,51 ммоль), МеОН (0,1 мл), ТГФ (0,5 мл) и 1 М водного раствора №011 (2,5 мл, 2,5 ммоль) в сосуде для микроволновой обработки. Нагревать полученную смесь при 120°С в течение 2 ч в микроволновом реакторе. Охладить смесь до комнатной температуры и добавить 1 Н водный раствор НС1 до достижения показателя рН, равного 6. Экстрагировать СНС13 (2x25 мл); высушить над Ха28О4; профильтровать; собрать фильтрат и сконцентрировать под пониженным давлением с получением титульного соединения (135 мг, 85%). МС (м/з): 312 (М+Н)+.
Состав 18. (±)-Метил-1 -(8-хлор-2-хинолил)-3,3-диметилпиперидин-4-карбоксилат.
С1
Добавить К2СО3 (1,07 г, 7,75 ммоль) к смеси метил-(±)-3,3-диметилпиперидин-4карбоксилатгидрохлорида (700 мг, 3,37 ммоль), 2,8-дихлорхинолина (876 мг, 4,38 ммоль) и ДМСО (4,5 мл). Перемешивать полученную смесь при 130°С в течение ночи. Охладить смесь до комнатной температуры; профильтровать для удаления твердых веществ; развести в воде (5 мл); и экстрагировать ЕЮАс (4x20 мл). Промыть объединенные органические экстракты водой (20 мл), а затем солевым раствором (20 мл). Высушить органические экстракты над М§804; профильтровать; собрать фильтрат и сконцентрировать под пониженным давлением. Провести флэш-хроматографию полученного неочищенного материала на силикагеле, элюировать в градиенте от 0 до 40% ЕЮАс в гексанах с получением титульного соединения (1,1 г, 98%). МС (м/з): 332 (М+Н)+.
Состав 19. (±)-1-(8-Хлор-2-хинолил)-3,3-диметилпиперидин-4-карбоновая кислота
С1
Объединить смесь (±)-метил-1-(8-хлор-2-хинолил)-3,3-диметилпиперидин-4-карбоксилата (1,1 г, 3,3 ммоль), МеОН (0,8 мл), ТГФ (3,3 мл) и 1 М водный раствор №ОН (3,3 мл, 17 ммоль) в сосуде для микроволновой обработки. Нагревать полученную смесь при 120°С в течение 2 ч в микроволновой печи. Охладить смесь до комнатной температуры, а затем добавлять 5 Н водный раствор НС1 до достижения показателя рН, равного 6. Экстрагировать смесь ЕЮАс (3x10 мл). Объединить органические экстракты; высушить над Ха28О4; профильтровать; собрать фильтрат и сконцентрировать под пониженным давлением с получением титульного соединения (815 мг, 77%). МС (м/з): 318 (М+Н)+.
Состав 20. Метил-4-анилино-2,5-дигидрофуран-3-карбоксилат
Добавить р-толуолсульфоновую кислоту (500 мг, 3,16 ммоль) к смеси (±)-метил-4оксотетрагидрофуран-3-карбоксилата (6,6 г, 45,8 ммоль), анилина (4,3 мл, 47,2 ммоль) и толуола (70 мл). Установить на реакционный сосуд ловушку Дина-Старка и нагреть до 140°С. Перемешивать полученную смесь при комнатной температуре в течение ночи. Нагреть реакционную смесь до 140°С и перемешивать в течение 2 ч. Охладить смесь и добавить диэтиловый эфир (100 мл) и воду (100 мл). Экстрагировать смесь диэтиловым эфиром (3x50 мл); высушить над М§804; профильтровать; собрать фильтрат и
- 13 032428 сконцентрировать под пониженным давлением. Провести флэш-хроматографию полученного неочищенного материала на силикагеле, элюировать в градиенте от 0 до 100% ЕЮАс в гептане с получением титульного соединения (6,7 г, 67%). МС (м/з): 220 (М+Н)+.
Состав 21. (±)-Метил-3-(иодометил)-4-фенилимино-тетрагидрофуран-3-карбоксилат
Добавить раствор (±)-метил-4-анилино-2,5-дигидрофуран-3-карбоксилата (3,6 г, 16,4 ммоль) и 18краун-6 (4,8 г, 18 ммоль) в толуоле (15 мл) к смеси трет-бутоксида калия (2,0 г, 17,8 ммоль) и толуола (15 мл). Перемешивать полученную смесь при комнатной температуре в течение 30 мин. Добавить дийодметан (4 мл) и перемешивать реакционную смесь при комнатной температуре в течение ночи. Добавить воду (50 мл) и экстрагировать диэтиловым эфиром (2x50 мл). Собрать органические экстракты и промыть солевым раствором (50 мл). Высушить органические экстракты над Мд8О4; профильтровать; собрать фильтрат и сконцентрировать под пониженным давлением. Провести флэш-хроматографию полученного неочищенного материала на силикагеле, элюировать в градиенте от 0 до 60% ЕЮАс в гептане с получением титульного соединения (1,0 г, 17%). МС (м/з): 359 (М+Н)+.
Состав 22. (±)-Метил-5-оксотетрагидропиран-3-карбоксилат
Нагреть смесь три-н-бутилоловогидрида (1,12 мл, 4,18 ммоль), 2,2'-азобис-(2-метилпропионитрила) (35 мг, 0,21 ммоль) и толуола (10 мл) до дефлегмации. Добавить раствор (±)-метил-3-(иодометил)-4фенилимино-тетрагидрофуран-3-карбоксилата (1,0 г, 2,78 ммоль) в толуоле (50 мл) по каплям в течение 3 ч. Перемешивать полученную смесь при нагревании с обратным холодильником в течение 3 ч. Сконцентрировать реакционную смесь под пониженным давлением. Провести флэш-хроматографию полученного неочищенного материала на силикагеле, элюировать в градиенте от 0 до 80% ЕЮАс в гептане с получением титульного соединения (0,37 г, 84%).
*Н ЯМР (400 МГц, СОС13) δ 4,09-3,99 (мультиплет, 4Н), 3,72 (синглет, 3Н), 3,16 (мультиплет, 1Н), 2,82 (дд, 1=7,2, 16,9 Гц, 1Н), 2,66 (дд, 1=6,3, 16,9 Гц, 1Н).
Состав 23. (±)-Метил-транс-5-(бензиламино)тетрагидропиран-3-карбоксилат
Добавить триацетоксиборгидрид натрия (0,96 г, 4,53 ммоль) к смеси (±)-метил-5оксотетрагидропиран-3-карбоксилата (0,33 г, 2,08 ммоль), бензиламина (0,31 мл, 2,84 ммоль) и 1,2дихлорэтана (5 мл). Перемешивать полученную смесь при комнатной температуре в течение 2,5 ч. Добавить насыщенный водный раствор бикарбоната натрия (10 мл); экстрагировать ДХМ (3x10 мл); отделить органический слой; промыть солевым раствором (10 мл); высушить над Мд8О4; профильтровать; собрать фильтрат и сконцентрировать под пониженным давлением. Провести флэшхроматографию полученного неочищенного материала на силикагеле, элюировать в градиенте от 0 до 60% ЕЮАс в гептане, с получением титульного соединения (0,085 г, выход 16%). МС (м/з): 250 (М+Н)+.
Состав 24. (±)-Метил-транс-5-аминотетрагидропиран-3-карбоксилат
Добавить 10% палладий на угле (0,07 г, 0,66 ммоль) к смеси (±)-метил-транс-5(бензиламино)тетрагидропиран-3-карбоксилата (0,085 г, 0,34 ммоль) и этанола (8 мл). Продуть смесь водородом и перемешивать полученную смесь при комнатной температуре в атмосфере водород (1 атм.) в течение ночи. Профильтровать смесь и сконцентрировать под пониженным давлением с получением титульного соединения (0,045 г, выход 83%).
Ίΐ ЯМР (400 МГц, СПС13) δ 3,82-3,77 (мультиплет, 2Н), 3,68 (мультиплет, 4Н), 3,38-3,31 (мультиплет, 1Н), 3,11-3,08 (мультиплет, 1Н), 2,85-2,80 (мультиплет, 1Н), 2,17-2,11 (мультиплет, 1Н), 1,78-1,71 (мультиплет, 3Н).
Состав 25. (±)-Метил-транс-5-[[(48)-3,3-диметил-1-(8-метил-2-хинолил)пиперидин-4-карбонил]амино]тетрагидропиран-3-карбоксилат
- 14 032428
ммоль) к смеси (-)-(48)-3,3-диметил-1-(8-метил-2(0,087 г, 0,29 ммоль), (±)-метил-транс-5Добавить ЭДКИ (0,087 г, 0,45 хинолил)пиперидин-4-карбоновой кислоты аминотетрагидропиран-3-карбоксилата (0,045 г, 0,28 ммоль), НОВТ (9 мг, 0,06 ммоль), триэтиламина (0,15 мл, 1,08 ммоль) в ДХМ (5 мл). Перемешивать полученную смесь при комнатной температуре в течение 3 ч. Провести флэш-хроматографию полученной смеси на силикагеле, элюировать в градиенте от 5 до 100% ЕЮАс в гептане с получением титульного соединения (0,085 г, 66%). МС (м/з): 439 (М+Н)+.
Состав 26. (±)-Метил-транс-3-(дибензиламино)циклогексанкарбоксилат
Добавить карбонат калия (3,53 г, 25,6 ммоль) и бензил бромид (1,9 мл, 15,9 ммоль) к смеси (±)метил-транс-3-аминоциклогексанкарбоксилата (1,07 г, 6,8 ммоль) в ацетонитриле (40 мл). Нагреть полученную смесь до 80°С и перемешивать в течение 5 ч. Охладить смесь и добавить ацетонитрил (40 мл). Профильтровать через диатомит и сконцентрировать фильтрат под пониженным давлением. Провести флэш-хроматографию полученного неочищенного материала на силикагеле, элюировать в градиенте от 0 до 20% ЕЮАс в гексанах с получением титульного соединения (1,6 г, 70%). МС (м/з): 338 (М+Н)+.
Состав 27. (±)-2-[транс-3-(Дибензиламино)циклогексил]пропан-2-ол
Добавить метилмагния бромид (3,0 М раствор в диэтиловом эфире, 16 мл, 48 ммоль) к смеси (±)метил-транс-3-(дибензиламино)циклогексанкарбоксилата (1,6 г, 4,7 ммоль) и ТГФ (50 мл) при поддержании температуры 0°С. Оставить реакционную смесь для нагревания до комнатной температуры и перемешивать в течение ночи. Добавить воду (25 мл) и профильтровать через диатомит. Собрать водный фильтрат. Экстрагировать полученный материал на водной основе ЕЮАс (50 мл). Собрать органические экстракты; высушить над Ха28О4; профильтровать; собрать фильтрат и сконцентрировать под пониженным давлением. Добавить ЕЮАс (50 мл); промыть насыщенным водным раствором ΝΗ4Ο (2х25 мл); высушить над №28О4; профильтровать; собрать фильтрат и сконцентрировать под пониженным давлением с получением титульного соединения (1,1 г, 69%). МС (м/з): 338 (М+Н)+.
Состав 28. 2-[(18,38)-3-(Дибензиламино)циклогексил]пропан-2-ол
Растворить (±)-2-[транс-3-(дибензиламино)циклогексил]пропан-2-ол (1,1 г, 3,26 ммоль) в этаноле (13 мг/мл). Провести хиральную СЖХ материала (СЫга1рак ΙΑ, 2 смх15 см) с применением 12% (0,1% диметилэтиламина в ί-РгОН) в СО2(5Сц в качестве подвижной фазы при 220 нм и скорости потока 70 мл/мин. Собрать и объединить первую элюирующую фракцию и сконцентрировать под пониженным давлением с получением титульного соединения (0,54 г, 49%), ЭИ=>99%. МС (м/з): 338 (М+Н)+. Способ СЖХ-анализа (СЫга1рак ΙΑ, (15 смх0,46 см): 10% (0,1% диметилэтиламина в ί-РгОН) в СО2(5Сц в качестве подвижной фазы при 220 нм и скорости потока 3 мл/мин).
Состав 29. 2-[(18,35)-3-Аминоциклогексил]пропан-2-ол гидрохлорид
- 15 032428
Добавить гидроокись палладия (20% на угле, 0,51 г, 3,7 ммоль) к смеси 2-[(18,38)-3(дибензиламино)циклогексил]пропан-2-ола (0,54 г, 1,6 ммоль) в МеОН (20 мл) в смесительный сосуд Рагг™. Продуть сосуд и заполнить водородом до достижения давления 414 кПа. Встряхивать смесь в течение 4 дней при комнатной температуре. Профильтровать смесь через диатомит и сконцентрировать фильтрат под пониженным давлением. Развести смесь в диэтиловом эфире (25 мл) и ДХМ (25 мл). Добавить НС1 (4,0 М раствор в 1,4-диоксане, 0,8 мл) и сконцентрировать под пониженным давлением с получением титульного соединения (0,24 г, 77%). МС (м/з): 158 (М+Н)+.
Состав 30. трет-Бутил-Ы-[(1К8,2К8,48К,6К8)-6-(гидроксиметил)норборнан-2-ил]карбамат
Объединить (ацетилацетонато)дикарбонилродий (10 мг, 0,03 ммоль), 1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен (27 мг, 0,05 ммоль), метилбицикло[2.2.1]гепт-2-ен-5-карбоксилат (2,5 г, 11,9 ммоль) и трет-бутанол (25 мл) в автоклаве ΡΑΚΚ™ с механической мешалкой. Продуть и наполнить сосуд сингазом под давлением (смесь 1:1 монооксида углерода и водорода, 310 кПа). Перемешивать в течение ночи. Сконцентрировать смесь под пониженным давлением. Развести в ДХМ (29 мл) и МеОН (2,9 мл). Добавить боргидрид натрия (0,26 г, 6,9 ммоль) и перемешивать в течение 20 мин при комнатной температуре. Добавить ДХМ (60 мл) и промыть насыщенным водным раствором карбоната натрия (2x25 мл) и солевым раствором (25 мл). Высушить органический слой над Ыа28О4; профильтровать; собрать фильтрат и сконцентрировать под пониженным давлением. Провести флэш-хроматографию полученного неочищенного материала на силикагеле с элюированием раствором, содержащим 30% ДХМ, 30% третбутилметилового эфира и 40% гексанов, с получением титульного соединения в виде смеси диастереомеров (0,58 г, 21%).
2Н ЯМР (400 МГц, СОС1э) δ 4,71-4,59 (мультиплет, 1Н), 3,92-3,81 (мультиплет, 1Н), 3,46-3,45 (мультиплет, 2Н), 2,36 (дублет, 1=3,0 Гц, 1Н), 2,21-2,05 (мультиплет, 3Н), 1,55 (шир. синглет, 1Н), 1,491,25 (мультиплет, 12Н), 1,16-1,09 (мультиплет, 1Н), 0,68 (ддд, 1=12,9, 4,5, 2,4 Гц, 1Н).
Состав 31. [(1К8,2К8,48К,6К8)-6-Аминонорборнан-2-ил]метанола гидрохлорид
Добавить НС1 (4,0 М раствор в 1,4-диоксане, 2,1 мл, 8,3 ммоль) к смеси трет-бутил-Ν[(1К8,2К8,48К,6К8)-6-(гидроксиметил)норборнан-2-ил]карбамата (0,2 г, 0,83 ммоль) в ДХМ (8 мл) при поддержании температуры 0°С. Полученную Смесь оставить для нагревания до комнатной температуры и перемешивать в течение 3 ч. Сконцентрировать смесь под пониженным давлением с получением титульного соединения (0,15 г, 100%).
2Н ЯМР (400 МГц, СЭС13) δ 8,17-8,02 (мультиплет, 3Н), 4,93-4,90 (широкий сигнал, 1Н), 3,47-3,45 (мультиплет, 1Н), 3,19-3,15 (мультиплет, 2Н), 2,31 (мультиплет, 1Н), 2,14-2,12 (мультиплет, 1Н), 2,011,94 (мультиплет, 1Н), 1,92-1,88 (мультиплет, 1Н), 1,44-1,35 (мультиплет, 2Н), 1,22 (мультиплет, 1Н), 1,04-0,98 (мультиплет, 2Н).
Состав 32. трет-Бутил-((цис-4-((трет-бутоксикарбонил)амино)циклогексил)метил)(сульфамоил)карбамат
Добавить диизопропилазодикарбоксилат (1,6 мл, 7,8 ммоль) к смеси трет-бутил-цис-4(гидроксиметил)циклогексилкарбамата (1,5 г, 6,5 ммоль), трет-бутил-№сульфамоилкарбамата (1,9 г, 9,8 ммоль), трифенилфосфина (2,1 г, 7,8 ммоль) и ЕЮАс (33 мл). Перемешивать в течение ночи при комнатной температуре. Добавить воду (50 мл); экстрагировать ЕЮАс (2x50 мл); собрать органические экстракты. Промыть органические экстракты солевым раствором (25 мл); высушить над Мд8О4; профильтровать; собрать фильтрат и сконцентрировать под пониженным давлением. Провести флэш
- 16 032428 хроматографию полученного неочищенного материала на силикагеле, элюировать в градиенте от 10 до 80% Е1ОЛс в гексане с получением титульного соединения (1,78 г, 67%). МС (м/з): 430 (М + Ыа)+.
Состав 33. цис-1-Амино-4-[(сульфамоиламино)метил]циклогексана гидрохлорид
Добавить НС1 (4,0 М раствор в 1,4-диоксане, 15 мл, 60 ммоль) к трет-бутил-((цис-4-((третбутоксикарбонил)амино)циклогексил)метил)(сульфамоил)карбамату (1,78 г, 4,37 ммоль). Перемешивать полученную смесь в течение ночи при комнатной температуре. Сконцентрировать под пониженным давлением. Развести в МеОН (10 мл) и добавить по каплям диэтиловый эфир (150 мл) при интенсивном перемешивании. Собрать полученный белый осадок с помощью вакуумной фильтрации с получением титульного соединения (0,68 г, 56%). МС (м/з): 208 (М+Н)+.
Состав 34. Метил-(1К8,3К8)-3-((8)-3,3-диметил-1-(8-метилхинолин-2-ил)пиперидин-4 карбоксамидо)циклогексан-1 -карбоксилат
хинолил)пиперидин-4-карбоновой кислоты (0,8 г, 3 (-)-(48)-3,3-диметил-1-(8-метил-2ммоль), (±)-метил-транс-3аминоциклогексанкарбоксилатгидрохлорида (0,5 г, 3 ммоль), БОФ (2,0 г, 3 ммоль) и ДМФ (5 мл).
Перемешивать полученную смесь при комнатной температуре в течение ночи. Добавить насыщенный водный раствор бикарбоната натрия (20 мл) и экстрагировать ЕЮАс (2x25 мл). Собрать органические экстракты; промыть солевым раствором (25 мл); высушить над М§8О4; профильтровать; собрать фильтрат и сконцентрировать под пониженным давлением. Провести флэш-хроматографию полученного неочищенного материала на силикагеле, элюировать в градиенте от 10 до 90% ЕЮАс в гексанах с получением титульного соединения (1,00 г, 80%). МС (м/з): 438 (М+Н)+.
Пример 1. ((8)-Ы-((28,48)-2-(Гидроксиметил)тетрагидро-2Н-пиран-4-ил)-3,3-диметнл-1-(8-метилхинолин-2ил)пиперидин-4-карбоксамид
Добавить бензотриазол-1-ил-окситрипирролидинофосфоний гексафторфосфат (153 г, 293 ммоль) в виде суспензии в ДМФ (152 мл) в холодную (10°С) смесь (-)-(48)-3,3-диметил-1-(8-метил-2хинолил)пиперидин-4-карбоновой кислоты (76,0 г, 245 ммоль), ((28,48)-4-аминотетрагидро-2Н-пиран-2ил)метанола гидрохлорида (чистота 72%, 57,37 г, 246 ммоль), триэтиламина (153 мл, 1,10 моль) и ДМФ (380 мл) при поддержании внутренней температуры реакции ниже 20°С. Затем оставить смесь для нагревания до комнатной температуры и перемешивать в течение 30 мин. Вылить смесь в ледяную воду (1,5 л) при перемешивании. Экстрагировать смесь ДХМ (2x600 мл) и промыть объединенные органические экстракты полунасыщенным водным раствором ЫаС1 (1,0 л). Высушить органический раствор над М§8О4; профильтровать; собрать фильтрат и сконцентрировать фильтрат под пониженным давлением с получением влажного твердого вещества. Тритурировать влажное твердое вещество с водой и извлечь твердое вещество путем фильтрации. Тритурировать твердое вещество с водой (1,5 л) повторно и извлечь твердое вещество путем фильтрации. Промыть твердое вещество водой (2x250 мл). Отложить указанную первую партию выделенного твердого вещества. Собрать водные смывы; экстрагировать ДХМ (2x800 мл); объединить экстракты ДХМ. Добавить первую партию выделенных твердых веществ к объединенным ДХМ-экстрактам и промыть водным раствором НС1 (2,5 М, 2x800 мл). Отделить водный слой и добавить 50% водный раствор ЫаОН к водному слою до достижения показателя рН, равного 12, чтобы индуцировать осаждение. Профильтровать смесь для сбора полученного твердого вещества. Промыть твердое вещество водой (2x300 мл). Высушить твердое вещество в вакуумной печи при 50°С в течение 3 ч. Растворить твердое вещество в МеОН (1,2 л); добавить меркаптопропиловую мезопористую кремниевую фильтрующую смолу (1,2 ммоль/г, 715 м2/г, средний размер частиц 54 мкм) и перемешивать при 50°С в течение ночи. Профильтровать для извлечения твердых веществ с получением
- 17 032428 фильтрата. Промыть твердое вещество СН2С12:МеОН в пропорции 1:1 (2x500 мл). Объединить фильтраты и сконцентрировать под пониженным давлением с получением твердого вещества белого цвета. Тритурировать твердое вещество с ТБМЭ (1,5 л) и собрать твердые вещества. Кристаллизовать твердое вещество из горячего ЕЮН (1,8 л). Высушить твердое вещество в вакуумной печи при 50°С в течение 2,5 ч с получением титульного соединения в виде кристаллического твердого вещества белого цвета (76,7 г, 76%). ЖХ/МС (ЭСИ): 412 [М+Н]+.
Приведенные в табл. 1 ниже примеры могут быть получены по существу с применением процедуры для состава 34 с применением подходящего исходного амина вместо (±)-метил-транс-3аминоциклогексанкарбоксилатгидрохлорида и подходящей исходной карбоновой кислоты вместо (-)(48)-3,3-диметил-1-(8-метил-2-хинолил)пиперидин-4-карбоновой кислоты.
Таблица 1
Пр. № Структура Химическое название МС (т/ζ) (М+Н) Спос об очигц ения
2 (48)-Ν-[4-(Γ идроксиметил)-г/г/сциклогексил]-3,3 -диметил-1 -(8метил-2-хинолил)пиперидин-4карбоксамид 410 А
3 ДА , (48)-Ν-[6-(18,28,4Κ,68) - (Г идроксиметил)норборнан-2ил]-3,3 -диметил-1 -(8-метил-2хинолил)пиперидин-4карбоксамид 422 В
4 С1 н ΑγΝΆ (48)-1 -(8-хлор-2-хинолил)-М-[4(гидроксиметил)- цис циклогексил]-3,3 -диметилпиперидин-4-карбоксамид 430 А
5 (48)-Ν-[(18,38)-3- (Г идроксиметил)циклогексил]3,3-диметил-1-[4(трифторметил)фенил]пипериди н-4-карбоксамид 413 С
6 А-л ААЛ (4 8)-1 -(5,8-Диметил-2хинолил)-М-[4(гидроксиметил)- цис циклогексил]-3,3 -диметилпиперидин-4-карбоксамид 424 В
7 αχ Η I \ Λ Λ А а (4 8)-Ν-Циклопентил-3,3 диметил-1 -(8-метил-2хинолил)пиперидин-4карбоксамид 366 В
8 О I Αν ΐΓ Ί (48)-Ν-[(1Κ)-1,2- Диметилпропил] -3,3 -диметил-1 (8-метил-2-хинолил)пиперидин4-карбоксамид 368 в
- 18 032428
9 у ОЖ Н Н Чх/Ν N 1 /ДД/ (48)-Ν-[3-(18,38)- (Метансульфонамид)циклогекс ил]-3,3-дим етил-1-(8-метил-2хинолил)пиперидин-4карбоксамид 473 В
10 н ΈγγΙ ДДД/ (48)-Ν-[3-(18,38)- (Г идроксиметил)циклогексил]3,3-диметил-1-(8-метил-2хинолил)пиперидин-4карбоксамид 410 А
И (4 8)-3,3 -Диметил-1 -(8 -метил-2хинолил)-М-[4-г/цс[(сульфамоиламино)метил]цикл огексил] пипер ид ин-4карбоксамид 488 А
12 н (4 8)-3,3 -Диметил-1 -(8 -метил-2хинолил)-М-[(ЗК)тетрагидрофуран-3ил]пиперидин-4-карбоксамид 368 А
Способы очищения: А=Неочищенный продукт очищают с применением нормально-фазовой колоночной хроматографии на силикагеле с элюированием в градиенте ЕЮАс в гексанах. В=Неочищенный продукт очищают с применением колоночной хроматографии с обращенной фазой на С18 с элюированием в градиенте ацетонитрила и воды. С=Неочищенный продукт очищают с применением хиральной колоночной хроматографии на СЫга1рак А8-Н, 21x150 мм) с 15% изопропанола (1РА) в СО2 в качестве подвижной фазы при скорости потока 70 мл/мин.
Пример 13.
(48)-Ы-[(18,38)-3-(1-Гидрокси-1-метилэтил)циклогексил]-3,3-диметил-1-(8-метил-2-
Добавить Ν,Ν-диизопропилэтиламин (0,7 мл, 4 ммоль) и НАТи (0,31 г, 0,8 ммоль) к смеси (-)-(48)3,3-диметил-1-(8-метил-2-хинолил)пиперидин-4-карбоновой кислоты (0,2 г, 0,67 ммоль), 2-[(18,38)-3аминоциклогексил]пропан-2-ол гидрохлорида (0,13 г, 0,67 ммоль) и ДМФ (5 мл). Перемешивать полученную смесь при комнатной температуре в течение 45 мин. Провести флэш-хроматографию полученной реакционной смеси с обращенной фазой на С18, элюировать в градиенте от 5 до 80% АЦН в воде, с получением титульного соединения (0,26 г, 88%). МС (м/з): 438 (М+Н)+.
Получить приведенные в табл. 2 ниже примеры по существу с применением процедуры согласно примеру 13 с использованием подходящей исходной карбоновой кислоты вместо (-)-(48)-3,3-диметил-1(8-метил-2-хинолил)пиперидин-4-карбоновой кислоты.
Таблица 2
Пр. № Структура Химическое название МС (т/ζ) (М+Н)
14 ' ' (48)-1Х-[(18,38)-3-(1-Гидрокси- 1 -метил-этил)циклогексил] -3,3диметил-1-[4- (трифторметил)фенил]пиперид ин-4-карбоксамид 441
15 но^О Ж (48)-1Х-[(18,38)-3-(1-Гидрокси- 1 -метил-этил)циклогексил] -3,3диметил-1-[5(трифторметил)пиримидин-2ил] пипер ид ин-4-карбоксамид 442
Получить приведенные в табл. 3 примеры по существу с применением процедуры для состава 25 с использованием подходящего исходного амина вместо метил-(±)-транс-5-аминотетрагидропиран-3карбоксилата и подходящей исходной карбоновой кислоты вместо (-)-(48)-3,3-диметил-1-(8-метил-2хинолил)пиперидин-4-карбоновой кислоты.
- 19 032428
Таблица 3
пр. № Структура Химическое название МС (т/ζ) (М+ Н) Способ очищен ИЯ
16 (48)-1 -(8-метил-2-хинолил)3,3 - д иметил-Ν- [(3 8 )тетрагидропиран-3 ил] пиперид ин-4-карбоксамид 382 А
17 (4 8)-3,3 -Диметил-1 -(8-метил2-хинолил)-ТЧ-[( 18,3 Заметил сульф онилцикл огекси л] пиперидин-4-карбоксамид 458 С
Способы очищения: А=неочищенный продукт очищают с применением нормально-фазовой колоночной хроматографии на силикагеле, элюируют в градиенте от Е!ОАс в гексанах. С=неочищенный продукт очищают с применением хиральной колоночной СЖХ-хроматографии (СЫга1се1 ОЭ-Н, 21x250 мм) с 25% Е!ОН (0,2% изопропиламина (1РАт)) в СО2(8с£) в качестве подвижной фазы при скорости потока 70 мл/мин.
Пример 18.
(8)^-((3К8,58К)-5-(Гидроксиметил)тетрагидро-2Н-пиран-3-ил)-3,3-диметил-1-(8-метилхинолин-2ил)пиперидин-4 -карбоксамид
Добавить 5Н водный раствор ШОН (0,5 мл) к смеси метил-(3К8,5К8)-5-((48)-3,3-диметил-1-(8метил-2-хинолил)пиперидин-4-карбонил]амино]тетрагидропиран-3-карбоксилата (0,085 г, 0,19 ммоль), МеОН (2 мл) и ТГФ (2 мл). Перемешивать полученную смесь при комнатной температуре в течение 1 ч. Добавить 5 Н водный раствор НС1 (0,5 мл) и сконцентрировать. Развести неочищенную смесь в ТГФ (6 мл) и охладить до 0°С. Добавить по каплям 2 М раствор комплекса боран-ТГФ в ТГФ (0,15 мл, 0,3 ммоль). Медленно нагреть смесь до комнатной температуры и перемешивать при комнатной температуре в течение ночи. Добавить насыщенный водный раствор бикарбоната натрия (10 мл) и экстрагировать смесь Е!ОАс (3x10 мл). Собрать органические экстракты; промыть солевым раствором (10 мл); высушить над Мд8О4; профильтровать; собрать фильтрат и сконцентрировать под пониженным давлением. Провести флэш-хроматографию полученного неочищенного материала на силикагеле с элюированием 100% Е!ОАс с получением титульного соединения (0,046 г, выход 59% за 2 этапа). МС (м/з): 411 (М+Н)+.
Пример 19.
Метил-(1К8,3К8)-3-((8)-3,3-диметил-1-(8-метил-2-хинолил)пиперидин-4карбонил] амино]циклогексанкарбоновая кислота
Добавить 5Н водный раствор ШО11 (2,2 мл) к смеси метил-(±)-транс-[[(48)-3,3-диметил-1-(8-метил2-хинолил)пиперидин-4-карбонил]амино]циклогексан-3-карбоксилата (1,0 г, 2,2 ммоль), МеОН (2 мл) и ТГФ (8 мл). Перемешивать полученную смесь при комнатной температуре в течение ночи. Добавить 5 Н водный раствор НС1 (2,2 мл) для доведения показателя рН до 6,5. Экстрагировать Е!ОАс (2x25 мл) и собрать органические экстракты. Промыть органические экстракты солевым раствором (25 мл); высушить над Мд8О4; профильтровать; собрать фильтрат и сконцентрировать под пониженным давлением с получением титульного соединения (0,935 г, 98%). МС (м/з): 424 (М+Н)+.
Пример 20.
(8)-Л-((1К8,3К8)-3-(Этилкарбамоил)циклогексил)-3,3-диметил-1-(8-метилхинолин-2ил)пиперидин-4-карбоксамид
- 20 032428
Добавить триэтиламин (0,7 мл, 5 ммоль) к смеси (±)-транс-3-[[(48)-3,3-диметил-1-(8-метил-2хинолил)пиперидин-4-карбонил]амино]циклогексанкарбоновой кислоты (0,9 г, 2 ммоль), этанамина (2 мл, 3 ммоль), БОФ (1,0 г, 3 ммоль) и ДМФ (4 мл). Перемешивать полученную смесь при комнатной температуре в течение 3 ч. Добавить насыщенный водный раствор бикарбоната натрия (20 мл). Экстрагировать полученную смесь ЕЮАс (2x50 мл). Собрать органические экстракты; промыть солевым раствором (3x25 мл); высушить над Мд8О4; профильтровать; собрать фильтрат и сконцентрировать под пониженным давлением. Провести флэш-хроматографию полученного материала с обращенной фазой на силикагеле С18, элюировать в градиенте от 20 до 80% ацетонитрила (0,1% муравьиной кислоты) в воде (0,1% муравьиной кислоты), с получением титульного соединения (0,25 г, 30%). МС (м/з): 450 (М+Н)+.
Биологические анализы.
Анализ ингибирования фермента шРОЕ8-1 человека.
Фермент шРОЕ8-1 человека (1пуЩодеп™ (Ка1. № 97002К0, клон ΙΌ 6374722)) субклонируют в рс^NА3.1 и транзиентно экспрессируют в клетках 293Е. Микросомы получают из клеточного осадка в соответствии с опубликованными способами (Ои11е1 е1 а1., Рипйсайоп апб сйагас1еп7а1юп оБ гесошЫпап! Ш1сго8ота1 рго81ад1апбт Е зупЛазе-Ц Рго1ет Ехргеззюп апб РипБАайоп, 26 рр 489-495 (2002); и ТИогеп е1 а1., Нитап М1сго8ота1 Рго81апд1апбт Е 8уп1Иа8е-1, I. Вю1 СИет. 278(25), р. 22199-22209 (2003)). Вкратце, осадок разводят в гомогенизирующем буфере (15 мМ Тпз-НС1, рН 8,0; 0,25 М сахароза; 0,1 мМ ЭДТК; 1 мМ глутатион) и обрабатывают ультразвуком в течение 5x30 с на льду. Гомогенат центрифугируют при 5000хд в течение 10 мин при 4°С. Фракцию супернатанта сливают и помещают в пробирки Весктап ^и^ск-8еа1®, центрифугируют при 150000хд в течение 90 мин при 4°С. Фракцию супернатанта удаляют декантацией и осадок ресуспендируют в аналитическом буфере (10 мМ фосфат натрия, рН 7,0; 10% глицерин; 2,5 мМ глутатион; полный коктейль ингибиторов протеаз (КосИе)). Концентрацию белка определяют с применением реагента кумасси Р1и8™ от Р1егсе.
Для ферментного анализа микросомы разводят в аналитическом буфере и добавляют по 14 мкл полученного раствора в каждую лунку 384-луночных аналитических планшетах. Планшеты с разведениями соединений (Νιιικλ Кат. № 249944) получают с применением Тесап МС384™ и добавляют по 4 мкл/лунку в аналитические планшеты. Простагландин Н2 (РОН2) разводят в аналитическом буфере непосредственно перед применением и добавляют по 14 мкл/лунку в аналитические планшеты. Конечные концентрации составляли 6,55 мкг/мл для микросом и 1,67 мкм для РОН2. После 1,5-минутной инкубации при комнатной температуре для остановки реакции добавляют по 5 мкл/лунку 1 мг/мл 8пС12 в 0,5 Н НС1. 5 мкл продукта остановленной реакции переносят в 384-луночный планшет, содержащий 45 мкл 0,1% муравьиной кислоты, и планшеты помещают на хранение при -80°С. Планшеты транспортируют в Адбеп! Тесйпо1о§1е8, ранее - Вюсшз Е1Бе8с1епсе8 (Уэйкфилд, Массачусетс, 01880) для проведения стандартного ЖХ/МС-анализа на РОЕ2. Данные используют для расчета 1С50 (мкМ). Соединения, полученные в примерах, ингибируют тРОЕ8-1 человека с 1С50, составляющей менее 100 нМ. Иллюстративное соединение примера 1 ингибирует тРОЕ8-1 человека с 1С50, составляющей 0,00193, ±0,00064 мкМ, п=17. Указанный результат показывает, что иллюстративное соединение из примера 1 представляет собой мощный ингибитор фермента тРОЕ8-1 в составе с выделенным ферментом.
Клеточный анализ для измерения селективности в отношении эйкозаноидов.
Клетки линии эпителиальных клеток карциномы легкого человека А549 получают из АТСС (ССБ185) и поддерживают на культуральной клеточной среде Хэма (Кайгина) Р12 с добавлением 10% фетальной бычьей сыворотки (ФБС) (посевная среда) в стандартной увлажненной атмосфере 5% СО2 при 37°С. Клетки пересевают трижды в неделю в соотношении 1:3.
Для проведения анализа клетки извлекают из флаконов, однократно промывая их ФСБ, затем однократно промывая трипсином/ЭДТК. Через 3-5 мин при 37°С клетки суспендируют в посевной среде и центрифугируют при 2000 об/мин, 25°С, в течение 5 мин. Супернатант удаляют аспирацией и клеточный осадок ресуспендируют в посевной среде Р12К. Число клеток определяют путем подсчета клеток на гемоцитометре в аликвоте разведенной в ФСБ с трипановым синим культуры. Клетки высевают с плотностью 40000/лунку в 96-луночные планшеты Ра1соп за 24 ч до обработки. Соединения разводят ДМСО до конечной концентрации в 100 раз в пробирках 8сгееп Ма!ез. Среду из клеток удаляют и добавляют в клетки свежую среду (90 мкл/лунку). Добавляют соединения в количестве 1 мкл/лунку, п=2, с получением 7 концентраций для каждого соединения. Клетки предварительно обрабатывают соединениями в течение 30 мин при 37°С, 5% СО2. Синтез простагландина Е2 индуцируют добавлением рекомбинантного интерлейкина человека (τΗΙΕ-1β), разведенного посевной средой до конечной концентрации в 10х. В каждую лунку добавляют аликвоту объемом 10 мкл, с получением конечной концентрации τΗΙΕ-1β, составляющей 0,1 нг/мл. Продолжительность обработки составляет
- 21 032428 приблизительно 18 ч. Кондиционированную среду перемещают в полипропиленовые планшеты с Vобразным дном. Анализируют уровни РСЕ2 и простагландина Ι2 (РС12) в кондиционированной среде с применением специфических ферментативных иммуноанализов в соответствии с протоколами производителей (Саутап). Вкратце, добавляют кондиционированную среду (1 мкл) в каждую лунку 96луночного планшета, покрытого антителом для захвата и содержащего буфер для ИФА (49 мкл) от производителя. Метку разводят буфером для ИФА (50 мкл). Антитело для детекции разводят буфером для ИФА (50 мкл). Планшет закрывают адгезивной герметизирующей пленкой и инкубируют в течение 1 ч при комнатной температуре на орбитальном шейкере при 100 об/мин. Промывочный буфер разводят очищенной водой М1ЬЫРОКЕ и промывают планшет объемом 5х350 мкл/лунку с применением устройства для отмывки планшетов. Субстрат (реагент Эллмана) разводят очищенной водой М1ЬЫРОКЕ и затем добавляют в планшет в объеме 200 мкл/лунку. Приблизительно через 90-120 мин при комнатной температуре на орбитальном шейкере при 100 об/мин планшеты считывают при А412 на планшетридере. Для калибровки неизвестных значений используют стандартную кривую для РСЕ2. Иллюстративное соединение из примера 1 ингибирует образование РСЕ2 с 1С50, составляющей 0,00471 мкМ±0,00301, п=2.
Анализ цельной крови человека.
Кровь собирают от здоровых доноров-добровольцев в пробирки νΑΟΌΤΑΙΝΗΕ с гепарином натрия. Доноров выбирают, отчасти, на основании подтвержденного ими отсутствия приема НПВС, аспирина, целебрекса (Се1еЬгех®) или глюкокортикоидов в течение двух недель до сдачи крови. Кровь из всех пробирок/от всех доноров объединяют в конических центрифужных пробирках Согшпд объемом 250 мл и распределяют, по 436,5 мкл/лунку, в полипропиленовые планшеты с глубокими лунками. Соединения разводят в ДМСО в 100 раз до конечной концентрации и добавляют по 4,5 мкл/лунку в двух или трех повторностях для получения 7-точечных кривых. Кровь предварительно обрабатывают соединениями при 37°С, 5% СО2, в течение 30 мин в увлажненной атмосфере с помощью крышки для микропланшетов Мюгосйте Епу1гоптеп1а1 Мюгор1а1е Б/й. после чего добавляют, по 9 мкл/лунку, раствор Л11С в концентрации 5 мг/мл (81дта, серотип 0111:В4) в 1 мг/мл БСА/ФСБ с получением конечной концентрации 1111С, составляющей 100 мкг/мл. Планшеты инкубируют в течение 20-24 ч при 37°С, 5% СО2, в увлажненной атмосфере. Планшеты плотно запечатывают крышками из алюминиевой фольги и охлаждают на льду в течение приблизительно 1 ч. Затем планшеты центрифугируют в течение 10 мин при 1800хд и 4°С в центрифуге ЕррепйогГ 5810В. Плазму отделяют от клеточного слоя с применением Вашт Б200 со стерильными фильтровальными наконечниками и переносят в полипропиленовые планшеты с ν-образным дном. В блоки кассетных пробирок Сойаг количественно переносят по 100 мкл, добавляют стоп-реагент МеОН по 400 мкл/лунку и внутренние стандарты, й4-Р6Е2, й4-Р6Е2и и ά4-ΤΧΑ2β. Образцы перемешивают на вортексе в течение 5 мин и помещают в условия с температурой -20°С по меньшей мере на 1 ч. Образцы центрифугируют в течение 10 мин при 4000 об/мин в ЕррепйогГ 5810В.
Твердофазную экстракцию осуществляют с применением 30 мг/слой сорбента ^а!ег§ НЕВ в 96луночных планшетах на вакуумном коллекторе: Этап 1: матрицу промывают МеОН (1 мл), с последующим промыванием 0,1% муравьиной кислотой в воде (1 мл); Этап 2: наносят 400 мкл образца с 0,1% муравьиной кислотой в воде (900 мкл) и оставляют для связывания в течение 5 мин; Этап 3: матрицу промывают 0,1% муравьиной кислотой в воде (600 мкл) с последующим промыванием 80/20 воды/МеОН (600 мкл); Этап 4: продукты элюируют 2-500 мкл объемами ЕЮАс; полученные на этапе 5 образцы высушивают в атмосфере азота и восстанавливают в смеси вода/ацетонитрил (75/25) с 0,1% муравьиной кислоты (50 мкл). Продукты анализируют с применением ЖХ/МС/МС. Продукт из примера 1 ингибирует образование Р6Е2 в указанном анализе с 1С50, составляющей 0,00205±0,00082, п=11. Указанный результат подтверждает, что продукт из примера 1 ингибирует синтез РСЕ; в цельной крови человека.

Claims (10)

  1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
    1. Соединение формулы 1 о
    где В1 представляет собой Н или -СН3; В выбран из:
    - 22 032428
    С выбран из:
    и или его фармацевтически приемлемая соль.
  2. 2. Соединение формулы 2 к
    ''с
    2 где К1 представляет собой Н или -СН3;
    К выбран из:
    - 23 032428
    С выбран из:
    или его фармацевтически приемлемая соль.
  3. 3. Соединение по п.1 или 2, где К выбран из:
    или его фармацевтически приемлемая соль.
  4. 4. Соединение по любому из пп.1-3, где С представляет собой или или его фармацевтически приемлемая соль.
  5. 5. Соединение, которое представляет собой или его фармацевтически приемлемая соль.
  6. 6. Соединение по любому из пп.1-5, где указанная фармацевтически приемлемая соль представляет собой гидрохлорид.
  7. 7. Фармацевтическая композиция для лечения боли или воспаления, связанных с артритом или остеоартритом, содержащая соединение по любому из пп.1-6 и по меньшей мере один из фармацевтически приемлемого носителя, разбавителя или вспомогательного вещества.
  8. 8. Применение соединения по любому из пп.1-6 для лечения артрита или остеоартрита.
  9. 9. Применение соединения по любому из пп.1-6 для лечения боли или воспаления, связанных с артритом или остеоартритом.
  10. 10. Применение соединения по любому из пп.1-6 для получения лекарственного средства для лечения артрита или остеоартрита.
EA201790766A 2014-10-29 2015-10-22 Новые соединения метилпиперидина, подходящие для ингибирования микросомальной простагландин-e-синтазы 1 EA032428B1 (ru)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201462072196P 2014-10-29 2014-10-29
PCT/US2015/056960 WO2016069376A1 (en) 2014-10-29 2015-10-22 Novel methyl-piperidine compounds useful for inhibiting microsomal prostaglandin e2 synthase-1

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA201790766A1 EA201790766A1 (ru) 2017-12-29
EA032428B1 true EA032428B1 (ru) 2019-05-31

Family

ID=54478248

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA201790766A EA032428B1 (ru) 2014-10-29 2015-10-22 Новые соединения метилпиперидина, подходящие для ингибирования микросомальной простагландин-e-синтазы 1

Country Status (26)

Country Link
US (2) US9962375B2 (ru)
EP (1) EP3230278B1 (ru)
JP (1) JP6393830B2 (ru)
KR (1) KR101898829B1 (ru)
CN (1) CN107074829B (ru)
AR (1) AR102362A1 (ru)
AU (1) AU2015339644B2 (ru)
CA (1) CA2963321C (ru)
CL (1) CL2017001017A1 (ru)
CY (1) CY1122534T1 (ru)
DK (1) DK3230278T3 (ru)
EA (1) EA032428B1 (ru)
ES (1) ES2773439T3 (ru)
HR (1) HRP20200216T1 (ru)
HU (1) HUE047895T2 (ru)
JO (1) JO3581B1 (ru)
LT (1) LT3230278T (ru)
MX (1) MX2017005659A (ru)
NZ (1) NZ730724A (ru)
PL (1) PL3230278T3 (ru)
PT (1) PT3230278T (ru)
RS (1) RS59783B1 (ru)
SI (1) SI3230278T1 (ru)
TW (1) TWI605039B (ru)
WO (1) WO2016069376A1 (ru)
ZA (1) ZA201702198B (ru)

Families Citing this family (29)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
TW201627299A (zh) 2014-10-29 2016-08-01 美國禮來大藥廠 用於抑制微粒體前列腺素ｅ合成酶１之新穎羧酸化合物
CN111655253A (zh) * 2018-01-09 2020-09-11 杨百翰大学 用于用汉黄芩素治疗疼痛的组合物和方法
CN108558806B (zh) * 2018-05-31 2020-04-17 南京药石科技股份有限公司 一种5-氧代-四氢吡喃-3-羧酸酯的关键中间体及其制备方法
WO2020061475A2 (en) * 2018-09-21 2020-03-26 The Johns Hopkins University Compositions and methods for treating metabolic disorders
CR20210687A (es) 2019-06-25 2022-03-03 Gilead Sciences Inc PROTEÍNAS DE FUSIÓN FLT3L-Fc Y MÉTODOS DE USO
MX2022004370A (es) 2019-10-18 2022-05-06 Forty Seven Inc Terapias de combinacion para tratar sindromes mielodisplasicos y leucemia mieloide aguda.
CA3153636A1 (en) 2019-10-31 2021-05-06 Forty Seven, Inc. Anti-cd47 and anti-cd20 based treatment of blood cancer
TWI778443B (zh) 2019-11-12 2022-09-21 美商基利科學股份有限公司 Mcl1抑制劑
MX2022007930A (es) 2019-12-24 2022-08-08 Carna Biosciences Inc Compuestos moduladores de diacilglicerol quinasa.
EP4103285A2 (en) 2020-02-14 2022-12-21 Jounce Therapeutics, Inc. Antibodies and fusion proteins that bind to ccr8 and uses thereof
US20240043427A1 (en) 2020-05-01 2024-02-08 Gilead Sciences, Inc. Cd73 compounds
TW202211917A (zh) * 2020-08-21 2022-04-01 南韓商治納輔醫藥科技有限公司 對前列腺素e2受體具有抑制活性的新穎化合物及其用途
TW202302145A (zh) 2021-04-14 2023-01-16 美商基利科學股份有限公司 ＣＤ４７／ＳＩＲＰα結合及ＮＥＤＤ８活化酶Ｅ１調節次單元之共抑制以用於治療癌症
US20220389394A1 (en) 2021-05-18 2022-12-08 Gilead Sciences, Inc. METHODS OF USING FLT3L-Fc FUSION PROTEINS
EP4359389A1 (en) 2021-06-23 2024-05-01 Gilead Sciences, Inc. Diacylglyercol kinase modulating compounds
CN117377671A (zh) 2021-06-23 2024-01-09 吉利德科学公司 二酰基甘油激酶调节化合物
CN117355531A (zh) 2021-06-23 2024-01-05 吉利德科学公司 二酰基甘油激酶调节化合物
KR20240005901A (ko) 2021-06-23 2024-01-12 길리애드 사이언시즈, 인코포레이티드 디아실글리세롤 키나제 조절 화합물
CA3234909A1 (en) 2021-10-28 2023-05-04 Gilead Sciences, Inc. Pyridizin-3(2h)-one derivatives
WO2023077030A1 (en) 2021-10-29 2023-05-04 Gilead Sciences, Inc. Cd73 compounds
WO2023122581A2 (en) 2021-12-22 2023-06-29 Gilead Sciences, Inc. Ikaros zinc finger family degraders and uses thereof
CA3237577A1 (en) 2021-12-22 2023-06-29 Gilead Sciences, Inc. Ikaros zinc finger family degraders and uses thereof
TW202340168A (zh) 2022-01-28 2023-10-16 美商基利科學股份有限公司 Ｐａｒｐ７抑制劑
TW202346277A (zh) 2022-03-17 2023-12-01 美商基利科學股份有限公司 Ｉｋａｒｏｓ鋅指家族降解劑及其用途
WO2023183817A1 (en) 2022-03-24 2023-09-28 Gilead Sciences, Inc. Combination therapy for treating trop-2 expressing cancers
TW202345901A (zh) 2022-04-05 2023-12-01 美商基利科學股份有限公司 用於治療結腸直腸癌之組合療法
WO2023205719A1 (en) 2022-04-21 2023-10-26 Gilead Sciences, Inc. Kras g12d modulating compounds
US20240116928A1 (en) 2022-07-01 2024-04-11 Gilead Sciences, Inc. Cd73 compounds
WO2024064668A1 (en) 2022-09-21 2024-03-28 Gilead Sciences, Inc. FOCAL IONIZING RADIATION AND CD47/SIRPα DISRUPTION ANTICANCER COMBINATION THERAPY

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP1627869A1 (en) * 2003-05-20 2006-02-22 Ajinomoto Co., Inc. Amide derivative
WO2013146970A1 (ja) * 2012-03-29 2013-10-03 第一三共株式会社 新規キノリン誘導体

Family Cites Families (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6355010B1 (en) * 1999-03-31 2002-03-12 Coaxia, Inc. Intravascular spinal perfusion and cooling for use during aortic surgery
US20050239921A1 (en) * 2004-04-27 2005-10-27 Birmingham John N Preparation of organic additive-treated, pyrogenic silica-encapsulated titanium dioxide particles
UY32470A (es) * 2009-03-05 2010-10-29 Boehringer Ingelheim Int Derivados de 2-{2-cloro-5-[(sustituido) metil]fenilamino} -1-metil]fenilamino}-1-metilbencimidazol-5-carboxamidas-n-(sustituidas) y sus sales fisiológicamente aceptables, composiciones conteniéndolos y aplicaciones
WO2011023812A1 (en) 2009-08-27 2011-03-03 Novasaid Ab Microsomal prostaglandin e synthase-1 (mpges1) inhibitors
EP2491007B1 (en) * 2009-10-23 2013-09-25 Boehringer Ingelheim International GmbH Inhibitors of the microsomal prostaglandin E2 synthase-1
JP2016522253A (ja) * 2013-06-20 2016-07-28 ノヴァサイド・アクチボラグ Ｍｐｇｅ−１阻害剤としてのピペリジニルベンゾイミダゾール誘導体
TW201627299A (zh) 2014-10-29 2016-08-01 美國禮來大藥廠 用於抑制微粒體前列腺素ｅ合成酶１之新穎羧酸化合物

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP1627869A1 (en) * 2003-05-20 2006-02-22 Ajinomoto Co., Inc. Amide derivative
WO2013146970A1 (ja) * 2012-03-29 2013-10-03 第一三共株式会社 新規キノリン誘導体

Also Published As

Publication number Publication date
US20180250282A1 (en) 2018-09-06
EP3230278A1 (en) 2017-10-18
SI3230278T1 (sl) 2020-02-28
CA2963321A1 (en) 2016-05-06
AR102362A1 (es) 2017-02-22
TWI605039B (zh) 2017-11-11
ES2773439T3 (es) 2020-07-13
BR112017007011A2 (pt) 2017-12-26
US20170326128A1 (en) 2017-11-16
ZA201702198B (en) 2018-12-19
TW201627285A (zh) 2016-08-01
JP6393830B2 (ja) 2018-09-19
HRP20200216T1 (hr) 2020-05-15
MX2017005659A (es) 2017-06-26
RS59783B1 (sr) 2020-02-28
DK3230278T3 (da) 2020-01-20
CA2963321C (en) 2020-01-14
CY1122534T1 (el) 2021-01-27
WO2016069376A1 (en) 2016-05-06
JO3581B1 (ar) 2020-07-05
KR20170055025A (ko) 2017-05-18
PT3230278T (pt) 2020-02-20
CL2017001017A1 (es) 2017-12-11
PL3230278T3 (pl) 2020-06-01
JP2017537073A (ja) 2017-12-14
EP3230278B1 (en) 2019-12-11
AU2015339644B2 (en) 2018-03-29
KR101898829B1 (ko) 2018-09-13
HUE047895T2 (hu) 2020-05-28
NZ730724A (en) 2018-09-28
EA201790766A1 (ru) 2017-12-29
US9962375B2 (en) 2018-05-08
AU2015339644A1 (en) 2017-04-20
LT3230278T (lt) 2020-03-10
CN107074829A (zh) 2017-08-18
CN107074829B (zh) 2020-11-13

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EA032428B1 (ru) Новые соединения метилпиперидина, подходящие для ингибирования микросомальной простагландин-e-синтазы 1
US9969714B2 (en) Carboxylic acid compounds useful for inhibiting microsomal prostaglandin E2 synthase-1
MX2008015638A (es) Acidos fenil aceticos sustituidos como antagonistas de dp-2.
EA012649B1 (ru) 3-аминоциклопентанкарбоксамиды в качестве модуляторов хемокиновых рецепторов
EA011403B1 (ru) 3-(4-гетероарилциклогексиламино)циклопентанкарбоксамиды в качестве модуляторов хемокиновых рецепторов
EA020564B1 (ru) Замещенные n-фенил-1-(4-пиридинил)-1н-пиразол-3-амины
JP6148400B2 (ja) フェノキシエチルジヒドロ−１ｈ−イソキノリン化合物
JP5355551B2 (ja) キノロン化合物及び医薬組成物
EA030034B1 (ru) Азетидинилоксифенилпирролидиновые соединения
JP2007512313A (ja) ５−ｈｔ４受容体アゴニスト活性を有するキノリンカルボン酸化合物
JP2024501641A (ja) 置換大環状化合物及び関連する治療方法
JP2005502655A (ja) タキキニンアンタゴニストおよび／またはセロトニン再摂取阻害剤としての２−置換１−アリールピペラジン
AU2020287599B2 (en) Pyrrolidine compounds
WO2013039057A1 (ja) ピロリジン－３－イル酢酸誘導体
JP2012012388A (ja) 医薬
BR112017007011B1 (pt) Compostos de metil-piperidina, composição farmaceuticamente aceitável que o compreende e seu uso

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): AZ BY KG TJ TM