EA029556B1 - Дизамещенные бензотиенил-пирролотриазины и их применение в качестве ингибиторов киназы рфрф - Google Patents

Abstract

Изобретение относится к новым замещенным производным 5-(1-бензотиофен-2-ил)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-амина, обладающим ингибирующей активностью протеин-тирозинкиназы, к способам получения таких соединений, к фармацевтическим композициям, содержащим такие соединения, и к применению таких соединений или композиций для лечения пролиферативных расстройств, в частности раковых и опухолевых заболеваний.

Description

Изобретение относится к новым замещенным производным 5-(1-бензотиофен-2-ил)пирроло[2,11][1,2,4]триазин-4-амина, обладающим ингибирующей активностью протеин-тирозинкиназы, к способам получения таких соединений, к фармацевтическим композициям, содержащим такие соединения, и к применению таких соединений или композиций для лечения пролиферативных расстройств, в частности раковых и опухолевых заболеваний.

029556

Изобретение относится к новым замещенным производным 5-(1-бензотиофен-2-ил)пирроло[2,1-£] [1,2,4]триазин-4-амина, обладающим ингибирующей активностью протеин-тирозинкиназы, к способам получения таких соединений, к фармацевтическим композициям, содержащим такие соединения, и к применению таких соединений или композиций для лечения пролиферативных расстройств, в частности рака и опухолевых заболеваний.

Рак является главной причиной смерти во всем мире и в 2008 году насчитывалось 7.6 миллионов смертельных случаев (приблизительно 13% от всех смертей). По прогнозам смертность от рака продолжит расти во всём мире и к 2030 году составит более 11 миллионов (АНО коигсе, Рас! §йее! Νο. 297, РеЬгиагу 2011).

Существует много подходов относительно возможности возникновения рака и что является одной из причин того, почему его лечение является затруднительным. Один из подходов состоит в том, что преобразование клеток может происходить вследствие генетической альтерации. Завершение проекта генома человека показало геномную нестабильность и гетерогенность раковых генов человека. Недавние стратегии по выявлению этих генетических альтераций ускорили процесс обнаружения ракового гена. Дефект гена может привести, например, к сверхэкспрессии белков, и, следовательно, к нефизиологической активации этих белков. Одно семейство белков, из которого происходят многие онкогенные белки, представляют собой тирозинкиназы и в частности рецепторные тирозинкиназы (РТК). В последние два десятилетия многочисленные направления исследований продемонстрировали важность РТКопосредованной передачи сигналов в неблагоприятный рост клеток, приводящий к раку. В последние годы в клинической практике были достигнуты обнадеживающие результаты с селективными низкомолекулярными ингибиторами тирозинкиназ в качестве нового класса противоопухолевых средств |δ\νίηпеу апб Ап!йопу, №Циге Кеу. Эгид Όίκα 10 (7), 507-519 (2011)].

Факторы роста фибробластов (ФРФ) и их рецепторы (РФРФ) являются частью уникальной и разнообразной сигнальной системы, играющей ключевую роль в различных биологических процессах, которые охватывают разносторонние аспекты эмбрионального развития и патофизиологии взрослых [Кой апб ΟηπΙζ. 1. Вюсйеш. 149 (2), 121-130 (2011)]. Пространственно-временным образом ФРФ через связывание с РФРФ стимулируют широкий диапазон клеточных функций, включая миграцию, пролиферацию, дифференциацию и выживание.

Семейство ФРФ насчитывает 18 секретируемых полипептидных факторов роста, которые связываются с четырьмя высоко консервативными рецепторными тирозинкиназами (РФРФ от 1 до 4), выраженными на клеточной поверхности. К тому же, РФРФ-5 может связываться с ФРФ, но не имеет киназного домена, и вследствие этого лишен внутриклеточной передачи сигналов. Специфичность взаимодействия лиганд-рецептор улучшается целым рядом транскрипционных и трансляционных процессов, которые дают начало множеству изоформ посредством альтернативной транскрипционной инициации, альтернативного сплайсинга и С-концевых усечений. Различные гепарансульфатпротеогликаны (например, синдеканы) могут быть частью комплекса ФРФ/РФРФ и оказывать сильное влияние на способность ФРФ вызывать сигнальные ответы [Ро1апкка е! а1., Оеуе1ортеп1а1 Оупатюк 238 (2), 277-293 (2009)]. РФРФ представляют собой рецепторы клеточной поверхности, состоящие из трех внеклеточных иммуноглобулиноподобных доменов, однопроходного трансмембранного домена, и внутриклеточного домена димеризованной тирозинкиназы. Связывание ФРФ приводит в непосредственную близость внутриклеточные киназы, позволяя им трансфосфорилировать друг друга. Было идентифицировано семь сайтов фосфорилирования (например, в РФРФ-1 Туг463, Туг583, Туг585, Туг653, Туг654, Туг730, и Туг766).

Некоторые из этих групп фосфотирозина действуют в качестве стыковочных сайтов для сигнальных молекул ниже, которые сами также могут быть непосредственно фосфорилированы посредством РФРФ, что приводит к активации многочисленных путей сигнальной трансдукции. Таким образом, сигнальный каскад МАПК вовлечен в рост и дифференциацию клеток, сигнальный каскад Р13К/Ак! вовлечен в процесс выживаемости клеток и предопределения судьбы клеток, в то время как сигнальные каскады Р13К и РКС выполняют функцию управления клеточной полярностью. В настоящее время было идентифицировано несколько ингибиторов обратной связи передачи сигналов ФРФ и включают членов семейств §рту (§ргои!у) и §е£ (экспрессия, сходная с ФРФ). Кроме того, в определенных условиях, РФРФ высвобождается из мембран пред-Гольджи в цитозоль. Рецептор и его лиганд, ФРФ-2, совместно транспортируются в ядро с помощью механизма, который вовлекает импортин, и вступают в комплекс СКЕВсвязующего белка (СВР), общего и основного транскрипционного коактиватора, который действует как отпирающий фактор активации гена. Путем наблюдений были получены многократные корреляции между иммуногистохимической экспрессией ФРФ-2, РФРФ-1 и РФРФ-2 и их цитоплазматические и ядерные локализации опухолевых клеток. Например, в аденокарциноме легких эта ассоциация также обнаруживается на ядерном уровне, придавая особое значение активной роли комплекса в ядре [Когс апб Рпекек Сигг. Сапсег Эгидк Татдекк 5, 639-651 (2009)].

ФРФ в значительной степени экспрессируются как в формирующихся, так и в зрелых тканях, и имеют важное значение для множества нормальных и патологических процессов, включая развитие ткани, регенерацию ткани, развитие кровеносных сосудов, неопластическую трансформацию, миграцию клеток, клеточную дифференцировку и клеточное выживание. Кроме того, ФРФ как проангиогенные

- 1 029556

факторы также были вовлечены в появляющийся феномен устойчивости к ингибированию рецептора 2 сосудистого эндотелиального фактора роста (РСЭФР-2) [Вегдегк апб Напайап, Ναί. Реу. Сапсег 8, 592-603 (2008)].

Последние онкогеномные профили сетей передачи сигналов доказали важную роль для аберрантной ФРФ передачи сигналов в возникновении некоторых распространенных злокачественных опухолей человека [Аексйе е1 а1, Вюсйет. 1. 437 (2), 199-213 (2011)]. Лиганд-независимая РФРФ конститутивная передача сигнала была описана при многих злокачественных опухолях человека, таких как рак головного мозга, рак головы и шеи, рак желудочно-кишечного тракта и рак яичников. РФРФ-мутированные формы, а также РФРФ-внутригенные транслокации идентифицированы в злокачественных новообразованиях, таких как миелопролиферативные заболевания. Примечательно, что те же самые мутации, выявленные в качестве причины многих нарушений развития, также обнаружены в опухолевых клетках (например, мутации, обнаруженные при ахондроплазии и танатофорной дисплазии, которые вызывают димеризацию и таким образом конститутивную активацию РФРФ-3, также часто обнаруживают при раке мочевого пузыря). Мутация, которая способствует димеризации, лишь одним механизмом, который может увеличить лиганд-независимую передачу сигналов от РФРФ. Другие мутации, локализирующиеся внутри или снаружи киназного домена РФРФ, могут изменить конформацию домена, вызывающую постоянно активные киназы.

Амплификация хромосомной области 8р11-12, геномная локализация РФРФ-1, является общей фокальной амплификацией в раке молочной железы и встречается приблизительно в 10% случаев рака молочной железы, преимущественно при позитивных раковых опухолях эстрогеновых рецепторов. РФРФ-1 амплификации также были описаны в случае немелкоклеточной сквамозной карциномы легкого и обнаруживаются с низкой частотой в случае рака яичников, рака мочевого пузыря и рабдомиосаркомы. Аналогичным образом приблизительно в 10% случаев рака желудочно-кишечного тракта выявляют РФРФ-2 амплификацию, которая ассоциируется с плохим прогнозом, злокачественными опухолями диффузного типа. Кроме того, были обнаружены множественные однонуклеотидные полиморфизмы (ОНП), расположенные в от РФРФ-1 до -4, соотносящиеся с повышенным риском развивающихся селективных злокачественных образований, или были описаны как связанные с плохим прогнозом (например, РФРФ-4 С388Р аллель при раке молочной железы, раке толстой кишки и аденокарциноме легкого). Непосредственная роль этих ОНП как стимуляторов злокачественных новообразований все еже остается спорной.

Таким образом, было осуществлено большое число ίη νίίτο и ίη νίνο исследований, которые подтверждают от РФРФ-1 до -4 в качестве важных раковых мишеней, и эти данные подытожены во всеобъемлющих обзорах [см., например, Нет/1е еί а1., Е.хреП Ορίη. Тйег. ТагцеЕ 15 (7), 829-846 (2011); Аексйе еί а1., Вюсйет. 1. 437 (2), 199-213 (2011); Сгеийсй апб Ро11оск, Тгепбк ίη Мо1еси1аг Мебюше 17 (5), 283-292 (2011); НаицЩеп еί а1., Мо1. Сапсег Рек. 8 (11), 1439-1452 (2010)]. Некоторые стратегии были соблюдены для ослабления аберрантной от РФРФ-1 до -4 передачи сигналов в опухолях человека, включая среди прочего ингибирующие антитела и низкомолекулярные ингибиторы. Некоторое количество селективных низкомолекулярных РФРФ ингибиторов в настоящее время находится на стадии клинической разработки, такие как ΛΖΌ-4547 (АЩгаХепеса) и ВГС-398 (Νονηηίδ).

Несмотря на значительные продвижения, которые, как правило, были достигнуты в терапии рака в последние годы, существует постоянная потребность в идентификации новых противораковых соединений с улучшенными свойствами, такими как более сильная действенность, большая селективность, сниженная токсичность и/или лучшая переносимость. Вследствие этого, техническую задачу, которая должна быть решена в соответствии с настоящим изобретением, можно рассматривать как обеспечивающую альтернативные соединения с ингибирующей активностью в отношении РФРФ киназ, тем самым предоставляя новые терапевтические возможности для лечения РФРФ-опосредованных заболеваний, в частности рака и других пролиферативных нарушений.

Конденсированные гетеро-5,6-бициклические киназные ингибиторы, несущие 9- или 10-членный бициклический гетероарильный заместитель были раскрыты в АО 2007/061737-А2 и АО 2005/097800А1, соответственно. Эти соединения были описаны как пригодные для лечения рака и других заболеваний, вследствие их ингибирующего действия в отношении тТОР (мишень рапамицина в клетках млекопитающих) и/или ЮР-1Р (рецептор инсулиноподобного фактора роста типа 1) киназ. Дополнительные гетеро-5,6-бициклические матричные структуры, ассоциированные с ингибированием киназ, были описаны, в числе других, в АО 01/19828-А2, АО 2007/079164-А2 и АО 2010/051043-А1.

Производные 4-аминопирроло[2,1-1][1,2,4]триазина с отличающимся профилями ингибирования в отношении ряда протеинкиназ были раскрыты, в числе других, в АО 00/71129-А1, АО 2007/056170-А2, АО 2007/061882-А2, АО 2007/064932-А2, АО 2009/136966-А1, и АО 2010/126960-А1.

В АО 2005/121147-А1, АО 2007/064883-А2 и АО 2007/064931-А2 производные 4-аминопирроло [2,1-1][1,2,4]триазина, содержащие замещенную диарилмочевинную группу в 5-положении, были описаны как обладающие РФРФ-1 ингибирующей активностью. Тем не менее, другие рецепторные тирозинкиназы, а именно РСЭФР, РТФР и Пе-2 киназы, также в значительной степени ингибируются этим особым классом соединений. Так как было высказано предположение, что такая мультикиназная активность во время лечения может привести к увеличению возможных побочных эффектов, то целью настоящего

- 2 029556

изобретения является выявление новых средств, обладающих улучшенной селективностью в отношении РФРФ киназ, тем самым обеспечивая новые возможности для более переносимой раковой терапии.

Неожиданным образом было обнаружено, что определенные производные 4-аминопирроло[2,1-Г] [1,2,4]триазина, несущие специфически замещенный бензотиофен-2-ил остаток в 5-положении, проявляют сильное и селективное ингибирование РФРФ киназ, а именно РФРФ-1 и РФРФ-3 киназ, что делает эти соединения в особенности пригодными для лечения пролиферативных нарушений, таких как раковые и опухолевые заболевания.

Таким образом, в одном аспекте, настоящее изобретение относится к 6,7-дизамещенным производным 5-(1-бензотиофен-2-ил)пирроло[2,1-Г][1,2,4]триазин-4-аминм общей формулы (I)

причем К¹ означает водород, хлор, метил или метокси,

К² означает водород или метокси,

при условии, что по меньшей мере один из К¹ и К² отличается от водорода,

О¹ представляет собой хлор, (С^-Ср-алкил, (С]-С4)-алкоксикарбонил, 5-членный азагетероарил, или группу -СН2-ОК³, -ΟΗ2-ΝΚ⁴Κ⁵ или -С(=О)-Ж⁴К⁶, причем

К³ означает водород, (Сд-Ср-алкил, (Сз-Сб)-циклоалкил или фенил, причем

(I) указанный (С_гС4)-алкил по выбору замещен посредством гидрокси, (С_гС4)-алкокси, гидроксикарбонил, (С1-С4)-алкоксикарбонил, амино, аминокарбонил, моно-(С1-С4)-алкиламинокарбонил, ди-(С1С4)-алкиламинокарбонил, (С3-С6)-циклоалкил или до тремя атомами фтора, и

(II) указанный (Сз-Сб)-циклоалкил по выбору замещен одним или двумя заместителями, независимо выбранными из группы, которая включает (С1-С4)-алкил, гидрокси и амино, и

(III) указанный фенил по выбору замещен одним или двумя заместителями, независимо выбранными из группы, которая включает фтор, хлор, бром, циано, трифторметил, трифторметокси, (С1-С4)-алкил и (С1-С4)-алкокси,

К⁴ означает водород или (С1-С4)-алкил,

К⁵ означает водород, (С₁-С₄)-алкил, (С₁-С₄)-алкилкарбонил, (С₃-С₆)-цикло алкил или от 4- до 6членный гетероцикло алкил, причем

(I) указанный (С_гС4)-алкил по выбору замещен посредством гидрокси, (С_гС4)-алкокси, гидроксикарбонил, (С1-С4)-алкоксикарбонил, аминокарбонил, моно-(С1-С4)-алкиламинокарбонил, ди-(С1-С4)алкиламинокарбонил или (С₃-С₆)-циклоалкил, и

(II) указанный (Сз-Сб)-цикло алкил по выбору замещен одним или двумя заместителями, независимо выбранными из группы, которая включает (С₁-С₄)-алкил, гидрокси и амино, и

(III) указанный от 4- до 6-членный гетероциклоалкил по выбору замещен одним или двумя заместителями, независимо выбранными из группы, которая включает (С1-С4)-алкил, гидрокси, оксо и амино,

К⁶ означает водород, (С1-С4)-алкил, (С3-С6)-циклоалкил или от 4- до 6-членный гетероциклоалкил, причем

(I) указанный (С_гС4)-алкил по выбору замещен посредством гидрокси, (С_гС4)-алкокси, гидроксикарбонил, (С1-С4)-алкоксикарбонил, амино, аминокарбонил, моно-(С1-С4)-алкиламинокарбонил, ди-(С1С4)-алкиламинокарбонил или (С3-С6)-циклоалкил, и

(II) указанный (Сз-Сб)-циклоалкил по выбору замещен одним или двумя заместителями, независимо выбранными из группы, которая включает (С1-С4)-алкил, гидрокси и амино, и

(III) указанный от 4- до 6-членный гетероциклоалкил по выбору замещен одним или двумя заместителями, независимо выбранными из группы, которая включает (С1-С4)-алкил, гидрокси, оксо и амино, или

К⁴ и К⁵ или К⁴ и К⁶, соответственно, соединены и взятые совместно с атомом азота, к которому они присоединены, образуют моноциклическое, насыщенное от 4- до 7-членное гетероциклоалкильное кольцо, которое может содержать второй кольцевой гетероатом, выбранный из Ν(Η⁷) и О, и которое может быть замещенным на кольцевых атомах углерода одним или двумя заместителями независимо выбранными из группы, состоящей из (С1-С4)-алкила, оксо, гидрокси, амино и аминокарбонила, и причем

К⁷ означает водород, (С1-С4)-алкил, формил или (С1-С4)-алкилкарбонил, и

О² представляет собой хлор, циано, (С_гС4)-алкил, или группу -СК^8АК^8В -ОН, -СН2-ЫК⁹К¹⁰, -С(=О)ΝΕ¹¹^² или -СН2-ОК¹⁵, причем

К^8А и К^8В независимо выбраны из группы, состоящей из водорода, (С1-С4)-алкила, циклопропила и циклобутила,

К⁹ означает водород или (С1-С4)-алкил,

- 3 029556

К¹⁰ означает водород, (Υ-СД-алкил, (Υ-СД-алкилкарбонил, (С₃-С₆)-цикло алкил или от 4- до 6членный гетероцикло алкил, причем

(I) указанный (С₁-С₄)-алкил по выбору замещен посредством гидрокси, амино, аминокарбонил, моно-(С₁-С₄)-алкиламинокарбонил или ди-(С₁-С₄)-алкиламинокарбонил, и

(II) указанный (С₃-С₆)-циклоалкил по выбору замещен одним или двумя заместителями, независимо выбранными из группы, которая включает (С₁-С₄)-алкил, гидрокси и амино, и

(III) указанный от 4- до 6-членный гетероциклоалкил по выбору замещен одним или двумя заместителями, независимо выбранными из группы, которая включает (С₁-С₄)-алкил, гидрокси, оксо и амино,

К¹¹ означает водород или (С₁-С₄)-алкил,

К¹² означает водород, (С₁-С₄)-алкил, (С₃-С₆)-цикло алкил или от 4- до 6-членный гетероциклоалкил, причем

(I) указанный (С₁-С₄)-алкил по выбору замещен посредством гидрокси, амино, аминокарбонил, моно-(С1-С4)-алкиламинокарбонил или ди-(С1-С4)-алкиламинокарбонил, и

(II) указанный (С₃-С₆)-циклоалкил по выбору замещен одним или двумя заместителями, независимо выбранными из группы, которая включает (С₁-С₄)-алкил, гидрокси и амино, и

(III) указанный от 4- до 6-членный гетероциклоалкил по выбору замещен одним или двумя заместителями, независимо выбранными из группы, которая включает (С₁-С₄)-алкил, гидрокси, оксо и амино, или

К⁹ и К¹⁰ или К¹¹ и К¹², соответственно, соединены и взятые совместно с атомом азота, к которому они присоединены, образуют моноциклическое, насыщенное от 4- до 7-членное гетероциклоалкильное кольцо, которое может содержать второй кольцевой гетероатом, выбранный из Ы(К¹³), О, δ и δ(Ο)₂, и которое может быть замещенным на кольцевых атомах углерода посредством до трех заместителей, независимо выбранных из группы, состоящей из фтора, (С₁-С₄)-алкил, оксо, гидрокси, амино и аминокарбонила, и причем

К¹³ означает водород, (С₁-С₄)-алкил, (С₃-С₆)-циклоалкил, формил или (С₁-С₄)-алкилкарбонил, и

К¹⁵ означает (С₁-С₄)-алкил,

при условии, что О¹ не представляет собой хлор, если О² является хлором или циано.

Соединения в соответствии с данным изобретением также могут быть представлены в форме их солей, сольватов и/или сольватов солей.

Соединения в соответствии с изобретением представляют собой соединения формулы (I) и их соли, сольваты и сольваты солей, соединения, включенные в формулу (I) формул (ША), (ШВ), (ШС), (Σ-Ό) и (IЕ), приведенные в дальнейшем и их соли, сольваты и сольваты солей, и соединения, включенные в формулу (I) и указанные в дальнейшем как технологические продукты и/или примеры осуществления и их соли, сольваты и сольваты солей, причем соединения, включенные в формулу (I) и указанные в дальнейшем уже не являются солями, сольватами и сольватами солей.

Соли, в целях настоящего изобретения предпочтительно, представляют собой фармацевтически приемлемые соли соединений в соответствии с изобретением (например, см. δ. М. Вегде ек а1, "Ркагтасеик1еа1 δαίΐδ". 1. Ркагт. δοί. 1977, 66, 1-19). Также включены соли, которые сами не являются пригодными для фармацевтических применений, но могут быть использованы, например, для выделения или очистки соединений в соответствии с изобретением.

Фармацевтически приемлемые соли включают кислотно-аддитивные соли минеральных кислот, карбоновых кислот и сульфоновых кислот, например, соли хлористо-водородной кислоты, бромистоводородной кислоты, серной кислоты, фосфорной кислоты, метансульфоновой кислоты, этансульфоновой кислоты, бензолсульфоновой кислоты, толуолсульфоновой кислоты, нафталиндисульфоновой кислоты, муравьиной кислоты, уксусной кислоты, трифторуксусной кислоты, пропионовой кислоты, молочной кислоты, виннокаменной кислоты, яблочной кислоты, лимонной кислоты, фумаровой кислоты, малеиновой кислоты и бензойной кислоты.

Фармацевтически приемлемые соли также включают соли обычных оснований, такие как, например, и предпочтительно соли щелочных металлов (например, соли натрия и калия), соли щелочноземельных металлов (например, соли кальция и магния), и соли аммония, производные от аммиака или органических аминов, такие как для иллюстрации и предпочтительно этиламин, диэтиламин, триэтиламин, Ν,Ν-диизопропилэтиламин, моноэтаноламин, диэтаноламин, триэтаноламин, диметиламиноэтанол, диэтиламиноэтанол, прокаин, дициклогексиламин, дибензиламин, Ν-метилморфолин, Νметилпиперидин, аргинин, лизин, и 1,2-этилендиамин.

Сольваты в контексте изобретения обозначаются как такие формы соединений в соответствии с изобретением, которые образуют комплекс в твердом или жидком состоянии путем стехиометрической координации с молекулами сольвента. Г идраты представляют собой особую форму сольватов, в которых координация происходит с водой. Гидраты являются предпочтительными сольватами в контексте настоящего изобретения.

Соединения, предлагаемые в настоящем изобретении, могут, или по природе асимметрических центров или посредством ограниченного вращения, присутствовать в форме изомеров (энантиомеры, диастереомеры). Может присутствовать любой изомер, в котором асимметрический центр находится в (К)-,

- 4 029556

(δ)-, или (Κ,δ-конфигурации.

Следует также иметь в виду, что, когда в соединениях согласно изобретению присутствуют два или более асимметрических центров, то часто будут возможны некоторые диастереомеры и энантиомеры примерных структур, и что чистые диастереомеры и чистые энантиомеры представляют предпочтительные варианты осуществления. Предполагается, что чистые стереоизомеры, чистые диастереомеры, чистые энантиомеры, и их смеси, входят в объем притязаний настоящего изобретения.

Геометрические изомеры по природе заместителей около двойной связи или кольцо может присутствовать в цис (= Ζ-) или транс (= Е-) форме, и обе изомерные формы включены в объем настоящего изобретения.

Все изомеры, будь-то разделенные, чистые, частично чистые, или в рацемической смеси, соединений настоящего изобретения включены в объем притязаний настоящего изобретения. Очистка указанных изомеров и разделение указанных изомерных смесей могут быть выполнены посредством стандартных методик, известных в уровне техники. Например, диастереомерные смеси могут быть разделены на индивидуальные изомеры хроматографическими способами или кристаллизацией, и рацематы могут быть разделены на соответствующие энантиомеры или хроматографическими способами на хиральных фазах или разделением.

К тому же, включены все возможные таутомерные формы соединений, описанных выше, в соответствии с настоящим изобретением.

Настоящее изобретение также охватывает все пригодные изотопные варианты соединений в соответствии с изобретением. Под изотопным вариантом соединения в соответствии с изобретением следует понимать соединение, в котором по меньшей мере один атом в соединении в соответствии с изобретением был заменен на другой атом того же самого атомного числа, но с отличной атомной массой нежели атомная масса, которая обычно или преимущественно встречается в природе. Примеры изотопов, которые могут быть введены в соединение в соответствии с изобретением, представляют собой изотопы водорода, углерода, азота, кислорода, фтора, хлора, брома и йода, такие как ²Н (дейтерий), ³Н (тритий), ¹³С, ¹⁴С, ¹⁵Ν, ¹⁷О, ¹⁸О, ¹⁸Р, ³⁶С1, ⁸²Вг, ¹²³1, ¹²⁴1, ¹²⁹1 и ¹³¹1. Могут быть пригодными отдельные изотопные варианты соединения в соответствии с изобретением, в особенности те, в которые были введены один или несколько радиоактивных изотопов, например, для изучения механизма действия или распределения действующего соединения в организме. Вследствие сравнительно легкой способности к приготовлению и способности к обнаружению для этой цели в особенности пригодны соединения, меченные посредством ³Н или ¹⁴С изотопов. К тому же, введение изотопов, например, дейтерия, может привести к отдельным терапевтическим эффектам как следствие более высокой метаболической стабильности соединения, например, продление периода полураспада в организме или снижение требуемой активной дозы. Вследствие этого в некоторых случаях такие модификации соединений в соответствии с изобретением также могут составлять предпочтительный вариант осуществления настоящего изобретения. Изотопные варианты соединений в соответствии с изобретением могут быть получены способами, известными специалистам в данной области техники, например, с помощью способов, описанных ниже и способов, описанных в демонстрационных примерах, с использованием в них соответствующих изотопных модификаций конкретных реагентов и/или исходных соединений.

В контексте настоящего изобретения, заместители и остатки имеют следующее значение, если не указано иное.

(С₁-С₄)-Алкил в контексте изобретения представляет собой неразветвленный или разветвленный алкильный радикал, имеющий от 1 до 4 атомов углерода. В данном случае в качестве примера и предпочтительно можно указать: метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, изо-бутил, втор-бутил, и третбутил.

(С1-С4)-Алкокси в контексте изобретения представляет собой неразветвленный или разветвленный алкокси радикал, имеющий от 1 до 4 атомов углерода. В данном случае в качестве примера и предпочтительно можно указать: метокси, этокси, н-пропокси, изопропокси, н-бутокси, изо-бутокси, втор-бутокси, и трет-бутокси.

Моно-(С₁-С₄)-алкиламино в контексте изобретения представляет собой аминогруппу с неразветвленным или разветвленным алкильным заместителем, который содержит от 1 до 4 атомов углерода. В данном случае в качестве примера и предпочтительно можно указать: метиламино, этиламино, нпропиламино, изопропиламино, н-бутиламино, и трет-бутиламино.

Ди-(С₁-С₄)-алкиламино в контексте изобретения представляет собой аминогруппу с двумя одинаковыми или различными неразветвленными или разветвленными алкильными заместителями, причем каждый содержит от 1 до 4 атомов углерода. В данном случае в качестве примера и предпочтительно можно указать: Ν,Ν-диметиламино, Ν,Ν-диэтиламино, ^этил-Л-метиламино, ^метил^-п-пропиламино, Νизопропил-Л-метиламино, ^изопропил-Ы-п-пропиламино, Ν,Ν-диизопропиламино, Ν-п-бутил-Нметиламино, и ^трет-бутил-И-метиламино.

(С1-С4)-Алкилкарбонил в контексте изобретения представляет собой неразветвленный или разветвленный алкильный радикал, имеющий от 1 до 4 атомов углерода, который присоединен к остатку молекулы через карбонильную группу [-С(=О)-]. В данном случае в качестве примера и предпочтительно

- 5 029556

можно указать: ацетил, пропионил, н-бутирил, изо-бутирил, н-пентаноил и пивалоил.

(Ц-СЦ-Алкоксикарбонил в контексте изобретения представляет собой неразветвленный или разветвленный алкокси радикал, имеющий от 1 до 4 атомов углерода, который присоединен к остатку молекулы через карбонильную группу [-С(=О)-]. В данном случае в качестве примера и предпочтительно можно указать: метоксикарбонил, этоксикарбонил, н-пропоксикарбонил, изопропоксикарбонил, нбутоксикарбонил, и трет-бутоксикарбонил.

Моно-(С₁-С₄)-алкиламинокарбонил в контексте изобретения представляет собой аминогруппу, которая присоединена к остатку молекулы через карбонильную группу [-С(=О)-] и которая имеет неразветвленный или разветвленный алкил заместитель, имеющий от 1 до 4 атомов углерода. В данном случае в качестве примера и предпочтительно можно указать: метиламинокарбонил, этиламинокарбонил, нпропиламинокарбонил, изопропиламинокарбонил, н-бутиламинокарбонил, и трет-бутиламинокарбонил.

Ди-(С₁-С₄)-алкиламинокарбонил в контексте изобретения представляет собой аминогруппу, которая присоединена к остатку молекулы через карбонильную группу [-С(=О)-] и которая имеет два одинаковых или различных неразветвленных или разветвленных алкильных заместителя, имеющих в каждом случае от 1 до 4 атомов углерода. В данном случае в качестве примера и предпочтительно можно указать: Νдиметиламинокарбонил, Ν,Ν-диэтиламинокарбонил, Ν-этил-Ы-метиламинокарбонил, Ы-метил-Ы-п-пропиламинокарбонил, Ы-изопропил-Ы-метиламинокарбонил, Ν,Ν-диизопропиламинокарбонил, Ы-п-бутилΝ-метиламинокарбонил, и Ы-трет-бутил-Ы-метиламинокарбонил.

(С₃-С₆)-циклоалкил в контексте изобретения представляет собой моноциклический, насыщенный карбоцикл, имеющий от 3 до 6 кольцевых атомов углерода. В данном случае в качестве примера могут быть упомянуты: циклопропил, циклобутил, циклопентил, и циклогексил. Предпочтительными являются циклопропил и циклобутил.

От 4- до 7-членный гетероцикло алкил и от 4- до 6-членный гетероцикло алкил в контексте изобретения представляет собой моноциклический, насыщенный гетроцикл с от 4 до 7 или, соответственно, от 4 до 6 кольцевыми атомами в совокупности, который содержит один или два одинаковых или различных кольцевых гетроатомов из ряда Ν, О, δ и δ(Ο)₂, и который может быть связан через кольцевой атом углерода или через кольцевой атом азота (если присутствует). От 4- до 6-членный гетероциклоалкил, содержащий один кольцевой атом азота и по выбору один другой кольцевой гетероатом из ряда Ы, О или δ(Ο)₂ является предпочтительным. 5- или 6-членный гетероцикло алкил, содержащий один кольцевой атом азота и по выбору один другой кольцевой гетероатом из ряда Ы или О, является особенно предпочтительным. В данном случае в качестве примера могут быть упомянуты: азетидинил, оксетанил, тиетанил, пирролидинил, пиразолидинил, имидазолидинил, тетрагидрофуранил, тиоланил, 1,1-диоксидотиоланил, 1,2-оксазолидинил, 1,3-оксазолидинил, 1,3-тиазолидинил, пиперидинил, пиперазинил, тетрагидропиранил, тетрагидротиопиранил, 1,3-диоксанил, 1,4-диоксанил, 1,2-оксазинанил, морфолинил, тиоморфолинил, 1,1-диоксидотиоморфолинил, азепанил, 1,4-диазепанил, и 1,4-оксазепанил. Предпочтительными являются азетидинил, пирролидинил, пиразолидинил, имидазолидинил, 1,2-оксазолидинил, 1,3-оксазолидинил, пиперидинил, пиперазинил, 1,2-оксазинанил, морфолинил, и тиоморфолинил. В особенности предпочтительны пирролидинил, пиперидинил, пиперазинил и морфолинил.

5-членный азагетероарил в контексте изобретения представляет собой ароматический гетероциклический радикал (гетероароматический), имеющий в совокупности 5 кольцевых атомов, который содержит по меньшей мере один кольцевой атом азота и по выбору один или два других кольцевых гетроатомов из ряда Ν, О и/или δ, и который связан через кольцевой атом углерода или по выбору через кольцевой атом азота (если допускается валентностью). Предпочтителен 5-членный азагетероарил, содержащий один кольцевой атом азота и один или два других кольцевых гетроатомов из ряда Ы и/или О. В данном случае в качестве примера могут быть упомянуты: пирролил, пиразолил, имидазолил, оксазолил, тиазолил, изоксазолил, изотиазолил, триазолил, оксадиазолил и тиадиазолил. Предпочтительными являются пиразолил, имидазолил, оксазолил, изоксазолил и оксадиазолил.

Оксо заместитель в контексте изобретения представляет собой атом кислорода, который связан с атомом углерода через двойную связь.

В контексте настоящего изобретения, для всех радикалов, которые встречаются несколько раз, их значение не зависит друг от друга. Если радикалы в соединениях в соответствии с изобретением являются замещенными, то радикалы могут быть моно- или полизамещенными, если не указано иное. Предпочтительно замещение одним или двумя или тремя одинаковыми или различными заместителями. В особенности предпочтительно замещение одним или двумя одинаковым или различными заместителями.

В предпочтительном варианте осуществления, настоящее изобретение относится к соединениям общей формулы (I), причем

К¹ означает хлор, метил или метокси,

К² означает водород или метокси,

С¹ представляет собой хлор, (С1-С4)-алкил, (С1-С4)-алкоксикарбонил или 5-членный аза-гетероарил, выбранный из группы, состоящей из пиразолила, имидазолила, оксазолила, изоксазолила и оксадиазолила, или представляет собой группу -СН2-ОК³ или -СН2-ЫК⁴К⁵, причем

К³ означает водород, (С₁-С₄)-алкил или (С₃-С₆)-циклоалкил,

- 6 029556

причем указанный (С-С₄)-алкил по выбору замещен посредством гидрокси, (С-СД-алкокси, гидроксикарбонил, (С-СД-алкоксикарбонил, амино, аминокарбонил, (С₃-С₆)-цикло алкил или до тремя атомами фтора,

К⁴ означает водород или Щ-СД-алкил,

К⁵ означает водород, (С1-С₄)-алкил, (С1-С₄)-алкилкарбонил, (С₃-С₆)-цикло алкил или 5- или 6членный гетероцикло алкил, причем

(I) указанный (С₁-С₄)-алкил по выбору замещен посредством гидрокси, гидроксикарбонил или (С₃С6)-цикло алкил, и

(II) указанный 5- или 6-членный гетероциклоалкил по выбору замещен посредством оксо, или

К⁴ и К⁵ соединены и, взятые совместно с атомом азота, к которому они присоединены, образуют моноциклическое, насыщенное от 4- до 6-членное гетероциклоалкильное кольцо, которое может содержать второй кольцевой гетероатом, выбранный из Ν(Κ⁷) и О, и который может быть замещен на кольцевом атоме углерода посредством оксо или гидрокси, и причем

К⁷ означает водород или (С₁-С₄)-алкил, и

О² представляет собой хлор, циано, (С1-С4)-алкил, или группу -СК^8АК^8В-ОН, -СЩ-Ж^.¹⁰, -С(=О)νΑΆ² или -СН2-ОК¹⁵, причем

К^8А и К^8В независимо выбраны из группы, состоящей из водорода, (С₁-С₄)-алкила и циклопропила,

К⁹ означает водород или метил,

К¹⁰ означает водород, (С₁-С₄)-алкил, (С₁-С₄)-алкилкарбонил, (С₃-С₆)-цикло алкил или 5- или 6членный гетероциклоалкил, причем

(I) указанный (С₁-С₄)-алкил по выбору замещен посредством гидрокси или аминокарбонил, и

(II) указанный 5- или 6-членный гетероцикло алкил по выбору замещен посредством оксо,

К¹¹ означает водород или метил,

К¹² означает водород, (С₁-С₄)-алкил, (С₃-С₆)-цикло алкил или 5- или 6-членный гетероциклоалкил, причем

(I) указанный (С₁-С₄)-алкил по выбору замещен посредством гидрокси, и

(II) указанный 5- или 6-членный гетероциклоалкил по выбору замещен посредством оксо, или

К⁹ и К¹⁰ или К¹¹ и К¹², соответственно, соединены и взятые совместно с атомом азота, к которому они присоединены, образуют моноциклическое, насыщенное от 4- до 6-членное гетероциклоалкильное кольцо, которое может содержать второй кольцевой гетероатом, выбранный из ЖК.¹³). О, 8 и 8(О)₂, и которое может быть замещенным на кольцевых атомах углерода посредством до трех заместителей, независимо выбранных из группы, состоящей из фтора, (С₁-С₄)-алкил, оксо, гидрокси, амино и аминокарбонила, и причем

К¹³ означает водород, (С₁-С₄)-алкил, циклопропил, циклобутил, формил или (С₁-С₄)-алкилкарбонил, и

К¹⁵ означает метил или этил,

при условии, что О¹ не представляет собой хлор, если О² является хлором или циано.

В особенно предпочтительном варианте осуществления настоящее изобретение относится к соединениям общей формулы (I), причем

К¹ означает метил,

К² означает метокси,

О¹ представляет собой метил, оксазол-5-ил или группу -СН2-ОК³ или -СН2-NК⁴К⁵, причем

К³ означает водород, (С₁-С₄)-алкил, циклопропил или циклобутил,

причем указанный (С1-С4)-алкил по выбору замещен посредством гидрокси, метокси, этокси, гидроксикарбонил, метоксикарбонил, этоксикарбонил, амино, аминокарбонил, циклопропил, циклобутил или тремя атомами фтора,

К⁴ означает водород, метил или этил,

К⁵ означает водород, (С₁-С₄)-алкил, ацетил, циклопропил, циклобутил или 2-оксопирролидин-3-ил, причем указанный (С₁-С₄)-алкил по выбору замещен посредством гидрокси, гидроксикарбонил,

циклопропил или циклобутил, или

К⁴ и К⁵ соединены и, взятые совместно с атомом азота, к которому они присоединены, образуют моноциклическое, насыщенное 5- или 6-членный гетероцикло алкил кольцо который может содержать второй кольцевой гетероатом, выбранный из ΝΗ и О, и который может быть замещен на кольцевом атоме углерода посредством оксо или гидрокси, и

О² представляет собой метил или группу -СК^8АК^8В-ОН, -СН₂-Ж⁹К¹⁰ или -С(=О)-Ж^ПК¹², причем

К^8А и К^8В независимо означают водород или метил,

К⁹ означает водород,

К¹⁰ означает водород, (С₁-С₄)-алкил, ацетил, циклопропил, циклобутил или 2-оксопирролидин-3-ил, причем указанный (С1-С4)-алкил по выбору замещен посредством гидрокси или аминокарбонил,

К¹¹ означает водород или метил,

К¹² означает водород, (С₁-С₄)-алкил, циклопропил, циклобутил или 2-оксопирролидин-3-ил, причем указанный (С₁-С₄)-алкил по выбору замещен посредством гидрокси, или

- 7 029556

К⁹ и К¹⁰ или К¹¹ и К¹², соответственно, соединены и, взятые совместно с атомом азота, к которому они присоединены, образуют моноциклическое, насыщенное от 4- до 6-членное гетероциклоалкильное кольцо, которое может содержать второй кольцевой гетероатом, выбранный из Ν(Κ¹³), О и §(О)₂, и которое может быть замещенным на кольцевых атомах углерода посредством до трех заместителей, независимо выбранных из группы, состоящей из фтора, метил, оксо, гидрокси, амино и аминокарбонил, и причем

К¹³ означает водород, формил или ацетил.

В отдельном варианте осуществления настоящее изобретение относится к соединениям общей формулы (I), причем

К¹ означает метил и

К² означает метокси.

В другом отдельном варианте осуществления, настоящее изобретение относится к соединениям общей формулы (I), причем

С¹ представляет собой группу -СН₂-ОК³, причем

К³ означает водород или (С₁-С₄)-алкил по выбору замещенный посредством гидрокси, метокси, амино, аминокарбонил или до тремя атомами фтора.

В другом отдельном варианте осуществления, настоящее изобретение относится к соединениям общей формулы (I), причем

С¹ представляет собой группу -СН₂-МК.⁴К⁵, причем

К⁴ означает водород или метил,

К⁵ означает (С₁-С₄)-алкил, ацетил, циклопропил, циклобутил или 2-оксопирролидин-3-ил,

причем указанный (С1-С4)-алкил по выбору замещен посредством гидрокси, или

К⁴ и К⁵ соединены и, взятые совместно с атомом азота, к которому они присоединены, образуют

моноциклическое, насыщенное 5- или 6-членное гетероциклоалкильное кольцо, которое может содержать второй кольцевой гетероатом, выбранный из ΝΗ и О, и который может быть замещен на кольцевом атоме углерода посредством оксо или гидрокси.

В другом отдельном варианте осуществления настоящее изобретение относится к соединениям общей формулы (I), причем

С² представляет собой группу -СН^ГОК¹⁰. причем

К⁹ означает водород,

К¹⁰ означает ацетил или 2-оксопирролидин-3-ил, или

К⁹ и К¹⁰ соединены и взятые совместно с атомом азота, к которому они присоединены, образуют моноциклическое, насыщенное 5- или 6-членное гетероциклоалкильное кольцо, который может содержать второй кольцевой гетероатом, выбранный из Ν(Ε¹³) и О, и которое может быть замещенным на кольцевых атомах углерода двумя заместителями, независимо выбранными из группы, состоящей из метила, оксо, гидрокси и амино, и причем

К¹³ означает водород, формил или ацетил.

В еще одном отдельном варианте осуществления настоящее изобретение относится к соединениям общей формулы (I), причем

С² представляет собой группу -С(=О)-МК.^ПК.¹², причем

К¹¹ означает водород,

К¹² означает (С₁-С₄)-алкил или 2-оксопирролидин-3-ил,

причем указанный (С1-С4)-алкил по выбору замещен посредством гидрокси, или

К¹¹ и К¹² соединены и, взятые совместно с атомом азота, к которому они присоединены, образуют моноциклическое, насыщенное от 4- до 6-членное гетероциклоалкильное кольцо, которое может содержать второй кольцевойгетероатом, выбранный из ΝΗ и О, и который может быть замещен на кольцевом атоме углерода посредством оксо или гидрокси.

В особенно предпочтительном варианте осуществления, настоящее изобретение относится к соединениям общей формулы (I), причем

К¹ означает метил,

К² означает метокси,

С¹ представляет собой группу -СН₂-ОК³, причем

К³ означает (С₁-С₄)-алкил по выбору замещенный посредством гидрокси, амино или аминокарбонила, и

С² представляет собой группу -СН₂-НК⁹К¹⁰ или -С(=О)-МК^ПК¹², причем

К⁹ означает водород,

К¹⁰ означает 2-оксопирролидин-3-ил, или

К⁹ и К¹⁰ соединены и, взятые совместно с атомом азота, к которому они присоединены, образуют пиперазин-1-ильное, 3-оксопиперазин-1-ильное или 4-ацетилпиперазин-1-ильное кольцо,

К¹¹ означает водород,

К¹² означает 2-оксопирролидин-3-ил, или

К¹¹ и К¹² соединены и, взятые совместно с атомом азота, к которому они присоединены, образуют

- 8 029556

3-гидроксиазетидин-1-ильное, 4-гидроксипиперидин-1-ильное или 3-оксопиперазин-1-ильное кольцо.

Определения остатков, указанные конкретно в соответствующих комбинациях или предпочтительных комбинациях остатков, также заменены по желанию определениями остатков других комбинаций, независимо от конкретных комбинаций, указанных для остатков. В особенности предпочтительны комбинации двух или более указанных выше предпочтительных рядов.

Соединения общей формулы (I) могут быть получены различными путями синтеза, которые главным образом зависят от природы отдельных выбранных групп О¹ и О² (см. определения выше).

Таким образом, в другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу получения соединений общей формулы (I), отличающемуся тем, что

[А] 6-замещенный 4-аминопирроло[2,1-£][1,2,4]триазин формулы (II)

причем К³ имеет описанное выше значение, сначала подвергают взаимодействию с формальдегидом и амином формулы (III)

причем К⁹ и К¹⁰ имеют описанные выше значения, в присутствии кислоты, чтобы получить соединение формулы (IV)

причем К³, К⁹ и К¹⁰ имеют описанные выше значения, затем бромируют до получения соединения

формулы (V)

причем К³, К⁹ и К¹⁰ имеют описанные выше значения, и впоследствии сочетают с боронатом бензотиофен-2-ила формулы (VI)

причем К¹ и К² имеют описанные выше значения, и

К¹⁴ представляет собой водород или (С1-С₄)-алкил, или оба К¹⁴ остатка связаны вместе, чтобы образовать -(СН2)2-, -С(СН3)2-С(СН3)2-, -(СН2)3-, -СН2-С(СН3)2-СН2- или -С(=О)-СН2-Ы(СН3)-СН2-С(=О)- мостик

в присутствии палладиевого катализатора и основания с получением целевого соединения формулы

(ГА)

1 2 3 9 10

причем К , К , К , К и К имеют описанные выше значения, или

[В] 6-замещенный 4-аминопирроло[2,1-й][1,2,4]триазин формулы (II)

причем К имеет описанное выше значение, сначала подвергают формилированию с Ν,Ν-диметилформамидом в присутствии фосфорилхлорида до получения альдегида формулы (VII)

- 9 029556

причем К³ имеет описанное выше значение, затем бромируют до получения соединения формулы

(VIII)

причем К³ имеет описанное выше значение, и впоследствии сочетают с боронатом бензотиофен-2ила формулы (VI)

причем К¹, К² и К¹⁴ имеют описанные выше значения, в присутствии палладиевого катализатора и основания, чтобы получить соединение формулы (IX)

причем К¹, К² и К³ имеют описанные выше значения, которые затем или [В-1] вступают в реакцию с амином формулы (III)

т>9 т>10

причем К и К имеют описанные выше значения,

в присутствии кислоты и восстановителя с получением целевого соединения формулы (ВА)

1 2 3 9 10

причем К , К , К , К и К имеют описанные выше значения, или [В-2] окисляют до получения карбоновой кислоты формулы (X)

причем К¹, К² и К³ имеют описанные выше значения, и в заключение сочетают с амином формулы

(XI)

причем К¹¹ и К¹² имеют описанные выше значения, в присутствии конденсирующего агента с получением целевого соединения формулы Ц-В)

- 10 029556

1 2 3 11 12

причем К , К , К , К и К имеют описанные выше значения, или

[С] 6-замещенный 4-амино-5-бромпирроло[2,1-Г|[1,2,4]триазин формулы (XII)

сначала сочетают с боронатом бензотиофен-2-ила формулы (VI)

причем К¹, К² и К¹⁴ имеют описанные выше значения, в присутствии палладиевого катализатора и

причем К⁹ и К¹⁰ имеют описанные выше значения, в присутствии кислоты с получением соединения

формулы (1-С)

причем К¹, К², К⁹ и К¹⁰ имеют описанные выше значения, которое впоследствии или

в присутствии кислоты и восстановителя с получением целевого соединения формулы (Ι-Ό)

- 11 029556

причем К¹, К², К⁴, К⁵, К и К¹⁰ имеют описанные выше значения, или

[С-2] превращают в соответствующее производное б-(галогенметила) формулы (XVI)

причем К¹, К², К⁹ и К¹⁰ имеют описанные выше значения, и

X означает хлор, бром или йод, и обрабатывают спиртом формулы (XVII)

причем К^3А имеет значение К³ как описано выше за исключением водорода, в присутствии основания с получением целевого соединения формулы (1-Е)

причем К¹, К², К^3А, К⁹ и К¹⁰ имеют описанные выше значения, по выбору с последующим, при необходимости, (I) разделением полученных таким образом соединений формулы (I) на их соответствующие энантиомеры и/или диастереомеры, предпочтительно с применением хроматографических методов, и/или (II) превращения соединений формулы (I) в их соответствующие гидраты, сольваты, соли и/или гидраты или сольваты солей посредством обработки соответствующими растворителями и/или кислотами или основаниями.

Соединения формул (КА), (КВ), (КС), (Σ-О) и (КЕ), которые могут быть получены описанными выше способами, каждое представляет собой отдельное подмножество соединений общей формулы (I).

Стадии способа [А] (II) (IV) и [С] (XIII) (Х-С), представляющие собой реакции аминометилирования по типу Манниха, осуществляют обычным способом путем обработки соответствующего исходного соединения смесью водного формальдегида и аминного компонента (III) в присутствии кислотного катализатора, такого как муравьиная кислота или уксусная кислота. Предпочтительно уксусную кислоту используют и как катализатор, и как растворитель. Реакцию обычно осуществляют при температуре в пределах от +20°С до +80°С.

В качестве бромирующего агента для стадий способа [А] (IV) (V) и [В] (VII) (VIII), предпочтительно применяют Ν-бромсукцинимид (НБС), 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (ДБДМГ) или элементарный бром. Как правило, реакции осуществляют в инертном растворителе, таком как дихлорметан, хлороформ, тетрагидрофуран, ацетонитрил или Ν,Ν-диметилформамид (ДМФ), в температурном диапазоне от -78°С до +20°С.

Реакции сочетания [А] (V) + (VI) Ц-А), [В] (VIII) + (VI) (IX) и [С] (XII) + (VI) (XIII) ["сочетание Сузуки-Мияуры"] как правило, осуществляют в инертном растворителе при помощи палладиевого катализатора и водного основания. Пригодные для этой цели палладиевые катализаторы включают, например, палладий(П) ацетат, палладий(П) хлорид, бис(трифенилфосфин)палладий(П) хлорид, бис(ацетонитрил)палладий(П) хлорид, [1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен]палладий(П) хлорид, тетракис(трифенилфосфин)палладий(0), бис(дибензилиденацетон)палладий(0), и трис(дибензилиденацетон) дипалладий(0), по выбору в комбинации с другими лигандами фосфина, такими как, например, 2дициклогексилфосфино-2',4',б'-триизопропилбифенил (У-РИоз), 2-дициклогексилфосфино-2',б'-диметоксбифенил (5-РИоз), 4,5-бис(дифенилфосфино)-9,9-диметилксантен ^α^ρ^δ), или 4-(ди-трет-бутилфос- 12 029556

фино)-М,Ы-диметиланилин. К тому же могут быть использованы палладиевые прекатализаторы, из которых каталитически активный вид вырабатывается в условиях реакции, такие как (2'-аминобифенил-2ил)(хлор)палладий-дициклогексил(2',4',6'-триизопропилбифенил -2-ил)фосфин [см., например, 8. Ко!Ьа е! а1., ТеЦаЬебтои 58, 9633-9695 (2002); Т. Е. Вагбег е1 а1., I. Ат. СЬет. 8ос. 127 (13), 4685-4696 (2005); 8. Ь. ВисЬтаЫ е! а1., I. Ат. СЬет. 8ос. 132 (40), 14073-14075 (2010), и другие процитированные там ссылки].

Пригодными основаниями для этих реакций сочетания в частности являются карбонаты щелочных металлов, такие как карбонат натрия, калия или цезия, фосфаты щелочных металлов, такие как натрия или фосфат калия, или фториды щелочных металлов, такие как фторид калия или цезия. Как правило, эти основания применяют в виде водных растворов. Реакции осуществляют в органических растворителях, которые являются инертными в условиях реакции. Предпочтительно применяют смешиваемый с водой органические растворители, такие как 1,2-диметоксиэтан, тетрагидрофуран, 1,4-диоксан, ацетонитрил, Ν,Ν-диметилформамид (ДМФ) или диметилсульфоксид (ДМСО), но также можно использовать и другие инертные растворители, такие как дихлорметан или толуол.

Стадию способа [В] (II) (VII) ["формилирование Вильсмайера-Хаака"] осуществляют обычным образом путем обработки пирролотриазина (II) в Ν,Ν-диметилформамидном (ДМФ) растворителе с фосфорилхлоридом. Реакцию обычно осуществляют при температуре от 0°С до +80°С.

Восстановителями, пригодными для реакций восстановительного аминирования [В-1] (РХЩШ)^· Ό-А) и [С-1] (XIV)+(XV)^(I-^) являются обычными борогидриды щелочных металлов, такие как борогидрид лития, борогидрид натрия, борогидрид калия, цианоборогидрид натрия или триацетоксиборогидрид натрия. Преобразования, как правило, осуществляют в присутствии кислоты, предпочтительно уксусной кислоты, в спирте или простоэфирном растворителе, таком как метанол, этанол, изопропанол, тетрагидрофуран или 1,4-диоксан, в температурном интервале от 0°С до +80°С, в зависимости от реакционной способности аминных компонентов (III) и (XV), соответственно, и/или применяемого конкретного борогидрида.

Для реакции окисления в стадии способа [В-2] (IX)^(X), предпочтительным способом является окисление хлоритом натрия в присутствии гипохлоритного акцептора, такого как 2-метил-2-бутен [ср. Н.

Рштск е! а1., ТеЦаЬеДтои 37, 2091-2096 (1981); А. КаасЬ и О. Ке18ет, I. Ргак!. СЬет. 342 (6), 605-608 (2000), и процитированные там ссылки]. Реакцию обычно осуществляют в смеси тетрагидрофуран/вода

при температуре между 0°С и температурой окружающей среды.

Конденсирующие средства, пригодные для стадии способа [В-2] (X)+(XI)^(I-В) [образование амидов] включают, например, карбодиимиды, такие как ^№-диэтил-Х,№-дипропил-, Ν,Ν'-диизопропил-, Ν,Ν'-дициклогексилкарбодиимид (ЭСС) или ^(3-диметиламинопропил)-№-этилкарбодиимид (БОС), производные фосгена, такие как Ν,Ν'-карбонилдиимидазол (СЭЕ или изобутил хлорформиат, αхлоренамины, такие как 1-хлор-2-метил-1-диметиламино-1-пропен, соединения фосфора, такие как пропанфосфоновый ангидрид, диэтил цианофосфонат, бис(2-оксо-3-оксазолидинил)фосфорилхлорид, бензотриазол-1-илокси-трис(диметиламино)фосфония гексафторфосфат (ВОР) или бензотриазол-1-илокситрис(пирролидино)фосфония гексафторфосфат (РуВОР), и соединения урония, такие как О(бензотриазол-1-ил)-НХ,№№-тетраметилурония тетрафторборат (ТВТИ), О-(бензотриазол-1-ил)Ν,Ν,Ν'Ν'-тетраметилурония гексафторфосфат (НВТИ), 2-(2-оксо-1-(2Н)-пиридил)-1,1,3,3-тетраметилурония тетрафторборат (ТРТИ), О-(7-азабензотриазол-1-ил)-НХ,№№-тетраметилурония гексафторфосфат (НАТИ) или (9-(1Н-6-хлорбензотриазол-1-ил)-1,1,3,3-тетраметилурония тетрафторборат (ТСТИ), при необходимости в комбинации с другими вспомогательными веществами, такими как 1-гидроксибензотриазол (НОВ!) или Ν-гидроксисукцинимид (НО8и), и/или основаниями, такими как карбонаты щелочных металлов, например, карбонат натрия или калия, или органические аминные основания, такие как триэтиламин, Ν-метилпиперидин, Ν-метилморфолин (НММ), Ν,Ν-диизопропилэтиламин (ДИПЭМ), пиридин или 4-ЫХ-диметиламинопиридин (ДМАП). Предпочтение отдается применению гексафторфосфату О-(7-азабензотриазол-1-ил)-НХ,№№-тетраметилурония (НАТИ) или тетрафторборату О(бензотриазол-1-ил)-НХ,№№-тетраметилурония (ТВТИ) в комбинации с Ν,Ν-диизопропилэтиламином (ДИПЭМ) и по выбору 1-гидроксибензотриазолом (НОВ!).

Инертные растворители для стадии способа [В-2] ^)+(^)^-(^) представляют собой, например, простые эфиры, такие как диэтиловый эфир, трет-бутил метиловый эфир, тетрагидрофуран, 1,4-диоксан или 1,2-диметоксиэтан, углеводороды, такие как бензол, толуол, ксилол, гексан или циклогексан, галогенированные углеводороды, такие как дихлорметан, трихлорметан, четырёххлористый углерод, 1,2дихлорэтан, трихлорэтилен или хлорбензол, или другие растворители, такие как ацетон, ацетонитрил, этилацетат, пиридин, диметилсульфоксид (ДМСО), Ν,Ν-диметилформамид (ДМФ), Ν,Ν'-диметилпропиленмочевина (ДМПУ) или Ν-метилпирролидинон (НМП). Также возможно применять смеси этих растворители. Предпочтение отдается применению дихлорметана, тетрагидрофурана, Ν,Ν-диметилформамида или их смесей. Реакции, как правило, осуществляют при температуре в пределах от 0°С до +60°С, предпочтительно при от +10°С до +40°С.

Окислители, способные преобразовать первичный спирт Ό-С) в альдегид (XIV) (способ [С-1]) при мягких условиях, включают 1,1,1-триацетокси-1,1-дигидро-1,2-бензйодоксол-3(1Н)-он ("периодинан

- 13 029556

Десса-Мартина"), 2,2,6,6-тетраметилпиперидин-1-оксил (ТЕМРО) в комбинации с вторичными окислителями, такими как йодсилбензол-Ц-диацетат или натрия гипохлорит, и системы окисления на основе диметилсульфоксида (ДМСО), такие как ДМСО/трифторуксусный ангидрид или ДМСО/Ν,Ν'дициклогексилкарбодиимид (ЭСС), Предпочтение отдается 1,1,1-триацетокси-1,1-дигидро-1,2-бензйодоксол-3(1Н)-он. Реакцию, как правило, осуществляют в инертном растворителе, предпочтительно с применением дихлорметана,

Для превращения от гидрокси до галогена в стадии способа [С-2] (Ι-С) (XVI) могут быть применены различные стандартные методы и реагенты, которые хорошо известны в уровне техники. Предпочтительными реагентами являются тионилхлорид [для X = С1], тетрабромметан/трифенилфосфин [для X = Вг], и йод/трифенилфосфин [для X = I]. Получение производных б-(хлорметила) (XVI) [X = С1] является предпочтительным по причинам удобства обработки и стабильности соединения.

Пригодные основания для стадии способа [С-2] ^МА^УЛ) (Ι-Е) [образование простого эфира] в частности представляют собой карбонаты щелочных металлов, такие как карбонат лития, натрия, калия или цезия, ацетаты щелочных металлов, такие как ацетат натрия или калия, или обычные третичные аминные основания, такие как триэтиламин, Ν-метилморфолин, Ν-метилпиперидин, Ν,Ν-диизопропилэтиламин или пиридин. Предпочтение отдается Ν,Ν-диизопропилэтиламину (ДИПЭМ). Реакцию (XVI) + (XVII) Ц-Е) осуществляют в инертном растворителе, таком как тетрагидрофуран, или без растворителя, с применением избытка спирта (XVII), при температуре в пределах от +20°С до +200°С, предпочтительно при от +50°С до +150°С. Преимущественно, превращение осуществляют посредством устройства микроволнового реактора.

Реакционная последовательность Д-С) (XVI) Ц-Е) может быть осуществлена в две отдельные стадии, т.е. с выделением и очисткой промежуточного соединения (XVI), или она может быть осуществлена с применением однореакторной методики, т.е. использования сырого промежуточного соединения (XVI) как получено в реакции получения.

В случаях, когда первичный или вторичный аминный фрагмент образует часть С¹ или С² группы в целевых соединениях формулы (I), иногда в описанных выше реакциях получения может быть целесообразным применять защищенное производное этого амина в качестве компонента реакции вместо свободного амина. Для этой цели могут быть использованы обычные временные аминозащитные группы, такие как ацильные группы (например, ацетил или трифторацетил) или защитные группы карбаматного типа (например, Вое-, СЬ/-или Ртос-группа). Предпочтительно применяют группу Вое (трет-бутоксикарбонил). Подобным образом, гидроксифункция, являясь частью С¹ или С² группы, может быть временно заблокирована в предшествующих соединениях и промежуточных соединениях способа, например, как простой тетрагидропираниловый (ТГП) эфир или как производное простого силилового эфира, такое как триметилсилиловый или трет-бутилдиметилсилиловый эфир.

Затем эти защитные группы могут быть отщеплены одновременно во время водной обработки и процедур очистки, или их удаляют в последующей, отдельной стадии реакции с применением стандартных способов, хорошо известных в уровне техники. Получение таких защищенных промежуточных соединений из соответствующих свободных аминов или спиртов подобным образом легко осуществить, следуя общим методикам, описанным в литературных источниках [см., например, Т. V. Сгеепе аиб Р. \νιιΐ5. Рто1есйуе Сгоирк ίη Огдашс ЗутНемх \УПеу. №\ν Уогк, 1999].

Некоторые типы защищенных (т.е. ацилированных) аминных производных сами проявляют существенную РФРФ-ингибирующую активность.

Соответственно, такие соединения также охватываются общей формулой (I) как определено выше.

Получение соединений настоящего изобретения может быть показано посредством следующих схем реакций:

Схема 1

- 14 029556

Схема 2

Схема 3

- 15 029556

Схема 4

6-Замещенные 4-аминопирроло[2,1-Г][1,2,4]триазины формулы (II) могут быть получены, например, двумя различными способами, которые изображены на схеме 5 ниже. В первом способе 4-амино-6цианопирроло[2,1-Г][1,2,4]триазин (XVIII) превращают в сложный эфир (XIX) путем опосредованного кислотой алкоголиза и затем восстанавливают до получения б-(гидроксиметил) соединения (На) [К³ в (II) = Н] с применением триэтилборогидрида лития. Стандартное превращение в соответствующий 6(галогенметил)пирролотриазин, такой как соединение хлора (XX), с последующей обработкой спиртом формулы (XVII) в присутствии основания без труда обеспечивает производные простого эфира формулы (ЛЬ) [К³ в (II) Ψ Н]. Получение исходного соединения (XVIII) было описано ранее [см. Межд. пат. заявку ШО 2007/ 064883 (Промежуточное соединение АХ / стадия 3)].

Второй способ начинается с защищенного 1-амино-4-бром-2-цианопиррола (XXI) [получение приведено в Межд. пат. заявке ШО 2007/064883 (Промежуточное соединение ААЕ, Стадия 3)]. Депротонирование уретанового азота, последующее металлирование в 4-положении и реакция с формальдегидом обеспечивает производное 4-(гидроксиметила) (XXII). Обработка хлоридом водорода с последующим добавлением спирта (XVII) и конденсация с формамидином с применением однореакторной методики после этого обеспечивает целевое соединение формулы (НЬ). Этот способ является в особенности пригодным для получения производных простого алкилового эфира [К^3А в (НЬ) = (Су-СД-алкил] в том отношении, что в этих случаях спиртовой реагент (XVII) может также в качестве реакционного растворителя.

- 16 029556

Производное 4-амино-5-бромпирроло[2,1-£][1,2,4]триазина формулы (XII) легко доступно из 4амино-6-(гидроксиметил)пирроло[2,1-Г|[1,2,4]триазииа (Па) (см. схему 5) посредством исходного 5,7диброминирования с применением 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина и последующего селективного 7деброминирования через обмен галоген-металл с н-бутиллитием, за которым следует гашение метанолом (см. схему 6 ниже).

Бензотиофен-2-ил боронаты формулы (VI) могут быть получены без труда, исходя из замещенных производных тиофенола формулы (XXIV) (см. схему 7 ниже). Алкилирование бром-ацеталем (XXV) и последующая опосредованная полифосфорной кислотой циклизация обеспечивает промежуточные соединения бензотиофена формулы (XXVII), которые затем металлируют во 2-положении и подвергают взаимодействию с триалкилборатом. Щелочная обработка обеспечивает свободные (бензотиофен-2ил)бороновые кислоты формулы (ΝΊα) которые могут быть превращены, по желанию, в циклические боронаты, например, так называемые МГОА боронаты формулы (ΝΊΒ), путем стандартных процедур, известных в уровне техники [см., например, Ό. М. Кпарр е! ай, I. Ат. Сйеш. §ос. 131 (20), 6961-6963 (2009)].

Схема 7

[ср. Р. А. Р1е апй Ь. I. Матей, I. Не1егосусйс Сйеш. 25 (4), 1271-1272 (1988); А. УейитеШ е! а1.Д. Мей. Сйеш. 50 (23), 5644-5654 (2007)].

Соединения формул (III), (XI), (XV), (XVII), (XXIV) и (XXV) или коммерчески доступны, известны из литературных источников, или могут быть получены из легкодоступных исходных веществ адаптацией стандартных способов, описанных в литературных источниках. Подробные процедуры и ссылки на литературные источники для получения исходных веществ можно также найти в Экспериментальной части в разделе, посвященном получению исходных веществ и промежуточных соединений.

Получение других подгрупп соединений общей формулы (I) показано в дальнейшем при помощи схем реакций 8-14. Необходимые предшественники пирролотриазина могут быть легко синтезированы обычными способами, хорошо известными в уровне техники, и для других синтетических превращений, в большинстве случаев, придерживаются способов получения, которые были очерчены в разделе способов выше, с применением реагентов подобного типа, таких как, например, бромирование, боронатное сочетание, аминометилирование, восстановительное аминирование, окисление и/или реакции с образованием простых эфиров или амидов. Другие подробности приведены в Экспериментальной части, посвященной получению примерных вариантов осуществления и их соответствующих предшествующих соединений.

- 17 029556

[К = (С1-С4)-алкил].

Схема 8

[К^8А, К^8В = (С1-С4)-алкил, циклопропил или циклобутил].

Схема 9

[К^8А = (С_гС4)-алкил, циклопропил или циклобутил; X = С1, Вг или I].

Схема 10

18 029556

Схема 11

[К = хлор или (С1-С₄)-алкил; для получения исходного вещества (XXVIII), см. Межд. пат. заявку Ж) 2007/064883 и ^О 2007/056170, соответственно].

Схема 12

[для получения исходного соединения (XXIX), см. схему 14 ниже].

- 19 029556

Схема 13

Схема 14

Соединения, предлагаемые в настоящем изобретении, обладают ценными фармакологическими свойствами и могут быть применены для предупреждения и лечения нарушений у людей и других млекопитающих.

Соединения, предлагаемые в настоящем изобретении являются сильными ингибиторами активности или экспрессии рецепторных тирозинкиназ, в особенности киназ РФРФ, и в первую очередь киназ РФРФ-1 и РФРФ-3. Таким образом, в другом варианте осуществления, настоящее изобретение обеспечивает способ лечения нарушений, относящихся к или опосредованных активностью киназ РФРФ у пациента, нуждающегося в таком лечении, включающий введение пациенту эффективного количества соединений формулы (I), как определено выше. В некоторых вариантах осуществления, нарушения, относящиеся к активности киназ РФРФ представляют собой пролиферативные нарушения, в частности раковые и опухолевые заболевания.

- 20 029556

В контексте настоящего изобретения, понятие "лечение" или "лечить" включает ингибирование, замедление, облегчение, смягчение, прекращение, уменьшение, или вызывание регрессии заболевания, расстройства, состояния, или статуса, его развития и/или прогрессирования, и/или его симптомов. Понятие "предупреждение" или "предотвращение" включает снижение риска наличия, приобретения, или появления заболевания, нарушения, состояния или статуса, его развития и/или прогрессирования и/или его симптомов. Понятие предотвращение включает профилактику. Лечение или предотвращение нарушения, заболевания, условия или статуса может быть частичным или полным.

Понятие "пролиферативное нарушение" включает нарушения, связанные с нежелательной или неконтролируемой пролиферацией клетки. Соединения, предлагаемые в настоящем изобретении, могут быть использованы, чтобы предотвратить, ингибировать, блокировать, снизить, уменьшить, контролировать, и т.п. клеточную пролиферацию и/или клеточное деление и/или вызвать апоптоз. Этот способ включает введение нуждающемуся в этом субъекту, включая млекопитающее, включая человека, количества соединения, предлагаемого в настоящем изобретении, или его фармацевтически приемлемой соли, изомера, полиморфа, метаболита, гидрата или сольвата, которое является эффективным для лечения или предупреждения расстройства.

В данном документе, для простоты, предпочтение отдается использованию единственного числа, нежели множественного числа, но, как правило, подразумевает включение множественного числа, если не указано иное. Например, выражение "Способ лечения заболевания у пациента, включающий введение пациенту эффективного количества соединений формулы (I)" подразумевает как заключающее в себе одновременное лечение более чем одного заболевания, а также введение более чем одного соединения формулы (I).

Они подразумевают, в частности, следующие заболевания, но не ограничиваясь ними: карциномы молочной железы и опухоли молочных желез (протоковая и лобулярная формы, также ίη κΐΐυ), опухоли дыхательных путей (мелкоклеточную и немелкоклеточную карциному легкого, мелкоклеточную и немелкоклеточную карциному, бронхиальную карциному, бронхиальную аденому, плевролегочную бластому), опухоли мозга (например, из ствола мозга и гипоталамуса, астроцитома, глиобластома, медуллобластомой, эпендимома и нейро-эктодермальные и шишковидные опухоли), опухоли органов пищеварения (пищевода, желудка, желчного пузыря, тонкой кишки, толстой кишки, прямой кишки, анального отверстия), опухоли печени (в частности гепатоцеллюлярная карцинома, холангиоцеллюлярная карцинома и смешанная гепатоцеллюлярная и холангиоцеллюлярная карцинома), опухоли головы и шеи (гортани, глотки, носоглотки, ротоглотки, губы и полости рта).

Пролиферативные нарушения, которые можно лечить и/или предупреждать при помощи соединений согласно настоящему изобретению в особенности включают, но не ограничиваются ними, группу раковых и опухолевых заболеваний. Под ними подразумевают, в частности, следующие заболевания, но не ограничиваясь ними: карциномы молочных желез и опухоли молочных желез (протоковая и лобулярная формы, также ίη вин), опухоли дыхательных путей (мелкоклеточная и немелкоклеточная карцинома легкого, мелкоклеточная и немелкоклеточная карцинома, карцинома бронха, аденома бронха, плевролегочная бластома), церебральные опухоли (например, стволовой части мозга и гипоталамуса, астроцитома, глиобластома, медуллобластома, эпендимальная глиома, и нейроэктодермальная и шишковидная опухоли), опухоли пищеварительных органов (пищевода, желудка, жёлчного пузыря, тонкой кишки, толстой кишки, прямой кишки, анального отверстия), опухоли печени (в числе других гепатоцеллюлярная карцинома, холангиоцеллюлярная карцинома и смешанная гепатоцеллюлярная и холангиоцеллюлярная карцинома), опухоли головы и области шеи (гортань, подглоточник, носоглотка, ротоглотка, губы и ротовая полость), опухоли кожи (сквамозная эпителиальная карцинома, саркома Капоши, злокачественная меланома, рак кожи из клеток Меркеля и немеланомный рак кожи), опухоли мягких тканей (в числе других саркомы мягких тканей, остеосаркомы, злокачественные фиброзные гистиоцитомы, лимфосаркомы и рабдомиосаркомы), опухоли глаз (в числе других внутриглазная меланома, увеальная меланома и ретинобластома), опухоли эндокринных и экзокринных желез (например, щитовидная железа и паращитовидные железы, поджелудочная железа и слюнная железа), опухоли мочевыводящих путей (опухоли мочевого пузыря, полового члена, почек, почечной лоханки и мочеточника), опухоли репродуктивных органов (карциномы эндометрия, шейки матки, яичников, влагалища, вульвы и матки у женщин, и карциномы предстательной железы и яичек у мужчин), а также их отдаленных метастазы. Эти нарушения также включают пролиферативные заболевания крови в солидной форме и в виде клеток циркулирующей крови, такие как лимфомы, лейкемии и миелопролиферативные заболевания, например, острая миелоидная, острая лимфобластная, хроническая лимфоцитарная, хроническая миелогенная и волосатоклеточная лейкемия, и лимфомы, связанные со СПИДом, лимфомы Ходжкина, неходжкинские лимфомы, кожные Т-клеточные лимфомы, лимфомы Беркитта, и лимфомы в центральной нервной системе.

Предполагается, что вследствие их профиля активности и селективности соединения согласно настоящему изобретению в особенности пригодны для лечения рака груди (молочной железы), легкого, желудка (желудочный), мочевого пузыря и яичников и опухолевые заболевания. Кроме того, соединения, предлагаемые в настоящем изобретении могут быть в особенности пригодными для предотвращения или подавления метастазирования опухоли в целом.

- 21 029556

Другие пролиферативные нарушения, которые можно лечить и/или предупреждать с помощью соединений и способов согласно настоящему изобретению включают псориаз, келоиды и другие гиперплазии, поражающие кожу, буллезные нарушения, связанные с субэпидермальным образованием пузырей, в том числе буллезный пемфигоид, мультиформную эритему и герпетиформный дерматит, фиброзные нарушения, такие фиброз легких, атеросклероз, рестеноз и цирроз печени, почечные заболевания, включая пролиферативные нарушения мезангиальных клеток, гломерулопатии, гломерулонефрит, диабетическую нефропатию, злокачественный нефросклероз и поликистоз почек, доброкачественная гиперплазия предстательной железы (ДГПЖ), ангиогенные пролиферативные нарушения или кровеносных сосудов и синдромы тромботической микроангиопатии.

Соединения, предлагаемые в настоящем изобретении, также пригодны для лечения и/или предотвращения офтальмологических заболеваний, таких как, например, возрастная дегенерация жёлтого пятна (ВДЖП), сухая дегенерация жёлтого пятна, ишемическая окклюзия вены сетчатки, диабетический отёк жёлтого пятна, диабетическая ретинопатия, ретинопатия недоношенных и другие виды ретинопатии.

Другие состояния, которые можно лечить и / или предупреждать путем введения соединения согласно настоящему изобретению включают гинекологические заболевания, такие как эндометриоз, миома и кисты яичника, метаболические расстройства, связанные с липогенезом, метаболизмом желчи, фосфатным метаболизмом, метаболизмом кальция и/или минерализацией костей, нарушения скелета, такие как, например, карликовость, ахондродисплазия и синдром Пфейфера, заболевания хрящей, такие как остеоартрит и полиартрит, ревматоидный артрит, облысение и отторжение трансплантата.

Указанные выше заболевания были хорошо изучены у людей, но также существуют со сходной этиологией у других млекопитающих и могут подвергаться лечению путем применения соединений и способов согласно настоящему изобретению.

Таким образом, настоящее изобретение помимо этого относится к применению соединений в соответствии с изобретением для лечения и/или предупреждения нарушений, в особенности указанных выше нарушений.

Кроме того, настоящее изобретение относится к применению соединений в соответствии с изобретением для получения фармацевтической композиции для лечения и/или предупреждения нарушений, в особенности указанных выше нарушений.

Помимо этого настоящее изобретение относится к применению соединений в соответствии с изобретением в способе лечения и/или предупреждения нарушений, в особенности указанных выше нарушений.

Настоящее изобретение, кроме того, относится к способу лечения и/или предупреждения нарушений, в особенности указанных выше нарушений, путем применения эффективного количества по меньшей мере одного соединения в соответствии с изобретением.

Соединения согласно настоящему изобретению можно вводить в качестве единственного фармацевтического средства или в комбинации с одним или несколькими дополнительными терапевтическими средствами до тех пор, пока эта комбинация не приводит к нежелательным и/или неприемлемым побочным эффектам. Такая комбинированная терапия включает введение одного фармацевтического дозированного состава, который содержит соединение формулы (I), как определено выше, и одно или несколько дополнительных терапевтических средств, а также введение соединения формулы (I) и всякого дополнительного терапевтического средства самого по себе отдельно от фармацевтического дозированного состава. Например, соединение формулы (I) и терапевтическое средство можно вводить пациенту совместно с одной (фиксированной) пероральной дозировочной композицией, такой как таблетка или капсула, или каждое средство можно вводить в отдельных дозировочных составах.

При использовании отдельных дозировочных составов, соединение формулы (I) и одно или несколько дополнительных терапевтических средств можно вводить по существу в одно и то же время (т.е., одновременно) или в разные периоды времени (т.е., последовательно).

В частности, соединения, предлагаемые в настоящем изобретении, могут быть использованы в фиксированной или отдельной комбинации с другими противораковыми средствами, такими как алкилирующие средства, антиметаболиты, противоопухолевые средства растительного происхождения, средства гормональной терапии, ингибиторы топоизомеразы, ингибиторы тубулина, киназные ингибиторы, нацеленные лекарственные средства, антитела, конъюгаты антитела с лекарственным препаратом (АЭСк), иммунологические средства, модификаторы биологического отклика, антиангиогенные соединения и другие антипролиферативные, цитостатические и/или цитотоксические вещества. В этом отношении нижеследующий неограничивающий перечень примеров вспомогательных средств, которые могут быть применены в комбинации с соединениями, предлагаемыми в настоящем изобретении.

Арабеликс, абиратерон, акларубицин, афатиниб, афлиберцепт, альдеслейкин, алемтузумаб, алитретиноин, альфарадин, альтретамин, аминоглутетимид, амонафид, амрубицин, амсакрин, анастрозол, андромустин, арглабин, аспарагиназа, акситиниб, 5-азацитидин, базиликсимаб, белотекан, бендамустин, бевацизумаб, бексаротен, бикалутамид, бисантрен, блеомицин, бортезомиб, бозутиниб, бриванибаланинат, бусерелин, бусульфан, кабазитаксел, СЛЬ-101, кальция фолинат, кальция левофолинат, камптотецин, капецитабин, карбоплатин, кармофур, кармустин, катумаксомаб, седираниб, селмолейкин, сетукси- 22 029556

маб, хлорамбуцил, хлормадинон, хлорметин, цидофовир, цисплатин, кладрибин, клодроновая кислота, клофарабин, комбретастатин, кризантаспаз, кризотиниб, циклофосфамид, ципротерон, цитарабин, дакарбазин, дактиномицин, дарбепоэтин альфа, даринапарзин, дазатиниб, даунорубицин, децитабин, дегареликс, денилейкин дифтитокс, денозумаб, деслорелин, диброспидий хлорид, доцетаксел, довитиниб, доксифлуридин, доксорубицин, дутастерид, экулизумаб, эдреколомаб, эфлорнитин, эллиптиний ацетат, элтромбопаг, эндостатин, эноцитабин, эпимбицин, эпирубицин, эпитиостанол, эпоэтин альфа, эпоэтин бета, эпотилон, эптаплатин, эрибулин, эрлотиниб, эстрадиол, эстрамустин, этопозид, эверолимус, эксатекан, эксеместан, эксисулинд, фадрозол, фенретинид, филграстим, финастерид, флавопиридол, флударабин, 5-флуроурацил, флюоксиместерон, флутамид, форетиниб, форместан, фотемустин, фульвестрант, ганиреликс, гефитиниб, гемцитабин, гемтузумаб, гиматекан, гимерацил, глуфосфамид, глутоксим, гозерелин, гистрелин, гидроксимочевина, ибандроновая кислота, ибритумомаб тиуксетан, идарубицин, ифосфамид, иматиниб, имиквимод, импросульфан, интеданиб, интерферон альфа, интерферон альфа-2а, интерферон альфа-2Ъ, интерферон бета, интерферон гамма, интерлейкин-2, ипилимумаб, иринотекан, иксабепилон, ланреотид, лапатиниб, лазофоксифен, леналидомид, ленограстим, лентинат, ленватиниб, лестауртиниб, летрозол, лейпрорелин, левамизол, линифаниб, линситиниб, лизурид, лобаплатин, ломустин, лонидамин, луртотекан, мафосфамид, мапатумумаб, мазитиниб, мазопрокол, медроксипрогестерон, мегестрол, мералсопрол, мелфалан, мепитиостан, меркаптопурин, метотрексат, метиламинолевулинат, метилтестостерон, мифамуртид, мифепристон, милтефозин, мириплатин, митобронитол, митогуазон, митолактол, митомицин, митотан, митоксантрон, молграмостим, мотезаниб, нандролон, недаплатин, неларабин, нератиниб, нилотиниб, нилутамид, нимотузумаб, нимустин, нитракрин, нолатрексед, офатумумаб, опрелвекин, оксалиплатин, паклитаксел, палифермин, памидроновая кислота, панитумумаб, пазопаниб, пегаспаргаза, ПЭГ-эпоэтин бета, пегфилграстим, ПЭГ-интерферон альфа-2Ъ, пелитрексол, пеметрексед, пемтумомаб, пентостатин, пепломицин, перфосфамид, перифозин, пертузумаб, пицибанил, пирарубицин, пирарубицин, плериксафор, пликамицин, полиглузам, полиэстрадиол фосфат, понатиниб, порфимер натрия, пралатрексат, преднимустин, прокарбазин, прокодазол, РХ-866, квинаголид, раоксифен, ралтитрексед, ранибизумаб, ранимустин, разоксан, регорафениб, ризедроновая кислота, ритуксимаб, ромидепсин, ромиплостим, рубитекан, саракатиниб, сарграмостим, сатраплатин, селуметиниб, сипулейцелТ, сиролимус, сизофиран, собузоксан, сорафениб, стрептозоцин, сунитиниб, талапорфин, тамибаротен, тамоксифен, тандутиниб, тазонермин, тецелейкин, тегафур, телатиниб, темопорфин, темозоломид, темсиролимус, тенипозид, тестолактон, тестостерон, тетрофосмин, талидомид, тиотепа, тимальфазин, тиогуанин, типифарниб, тивозаниб, тоцераниб, тоцилизумаб, топотекан, торемифен, тозитумомаб, трабектедин, трастузумаб, треосульфан, третиноин, триапин, трилостан, триметрексат, трипторелин, трофосфамид, убенимекс, вальрубицин, вандетаниб, вапреодит, варлитиниб, ваталаниб, вемурафениб, видарабин, винбластин, винкристин, виндезин, винфлунин, винорелбин, волоциксимаб, вориностат, циностатин, золедроновая кислота и зорубицин.

Как правило, при помощи комбинации соединений согласно настоящему изобретению с другими противораковыми средствами могут быть осуществлены следующие цели:

улучшенная активность в замедлении роста опухоли, в уменьшении ее размера или даже в ее полной ликвидации по сравнению с лечением посредством одного активного соединения;

возможность применения химиотерапевтических средств, используемых в более низкой дозировке, чем в монотерапии;

возможность более переносимой терапии с несколькими побочными эффектами, по сравнению с индивидуальным введением;

возможность лечения более широкого спектра раковых и опухолевых заболеваний; достижение более высокой скорости отклика на терапию;

более длительная продолжительность жизни пациента по сравнению со стандартной терапией.

Таким образом, в другом варианте осуществления, настоящее изобретение относится к фармацевтическим композициям, содержащим по меньшей мере одно из соединений в соответствии с изобретением и одно или несколько дополнительных терапевтических средств для лечения и/или предупреждения нарушений, в особенности указанных выше нарушений.

При лечении рака соединения, предлагаемые в настоящем изобретении можно также использовать в сочетании с радиационной терапией и/или хирургическим вмешательством.

Кроме того, соединения формулы (I) можно применять, как таковые или в композициях, в исследованиях и диагностике, или в качестве аналитических эталонных стандартов, и т.п., которые хорошо известны в уровне техники.

Если соединения, предлагаемые в настоящем изобретении, вводят в качестве фармацевтических средств людям и другим млекопитающим, то их можно применять как таковые или в виде фармацевтической композиции, содержащей, например, от 0.1 до 99.5% (более предпочтительно от 0.5 до 90%) действующего вещества в комбинации с одним или несколькими фармацевтически приемлемыми наполнителями.

Таким образом, в другом аспекте настоящее изобретение относится к фармацевтическим композициям, содержащим по меньшей мере одно из соединений в соответствии с изобретением, обычно совме- 23 029556

стно с одним или несколькими инертными, нетоксическими, фармацевтически пригодными наполнителями, и к их применению для лечения и/или предупреждения нарушений, в особенности указанных выше нарушений.

Соединения в соответствии с изобретением могут действовать системно и/или местно. Для этой цели они могут быть введены приемлемым способом, таким как, например, перорально, парентерально, пульмонально, назально, сублингвально, лингвально, трансбуккально, ректально, дермально, чрескожно, конъюктивально, в ухо или местным способом, или в виде импланта или стента.

Для этих путей введения соединения в соответствии с изобретением могут быть введены в виде приемлемых форм применения.

Для перорального введения пригодны формы применения, которые действуют в соответствии с известным уровнем техники и доставляют соединения в соответствии с изобретением быстро и/или модифицировано, и которые содержат соединения в соответствии с изобретением в кристаллической и/или аморфизированной и/или растворенной форме, например, таблетки (непокрытые или покрытые оболочкой таблетки, например, с устойчивыми к желудочному соку или обеспечивающими замедленное растворение, или нерастворимыми покрытиями, которые контролируют высвобождение соединений в соответствии с изобретением), таблетки, которые быстро распадаются в ротовой полости, или пленки/облатки, пленки/лиофилизаты, капсулы (например, твердые или мягкие желатиновые капсулы), драже, гранулы, пеллеты, порошки, эмульсии, суспензии, аэрозоли или растворы.

Парентеральное введение может осуществляться с исключением стадии абсорбции (например, внутривенно, внутриартериально, внутрисердечно, интраспинально или эндолюмбально) или с включением стадии абсорбции (например, внутримышечно, подкожно, внутрикожно, подкожно или внутрибрюшинно). Формами применения, пригодными для парентерального введения, в частности, являются составы для инъекций и инфузий в виде растворов, суспензий, эмульсий, лиофилизатов или стерильных порошков.

Формы, пригодные для других путей введения включают, например, фармацевтические формы для ингаляции (например, порошковые ингаляторы, небулайзеры), назальные капли, назальные растворы, спреи, таблетки, которые предназначены для введения лингвально, под язык или трансбуккально (например, пастилки, леденцы), суппозитории, препараты для глаз или ушей (например, капли, мази), вагинальные капсулы, водные суспензии (лосьоны, встряхиваемые смеси), липофильные суспензии, мази, кремы, молочко, пасты, пены, присыпки, трансдермальные терапевтические системы (например, пластыри), имплантаты или стенты.

В предпочтительном варианте осуществления, фармацевтическая композиция, содержащая соединение формулы (I), как определено выше предоставляется в форме, пригодной для перорального введения. В другом предпочтительном варианте осуществления, фармацевтическая композиция, содержащая соединение формулы (I), как определено выше предоставляется в форме, пригодной для внутривенного введения.

Соединения в соответствии с изобретением могут быть переведены в указанные формы применения известным по себе способом путем смешивания с инертными, нетоксичными, фармацевтически пригодными вспомогательными наполнителями. Эти наполнители включают, в числе других носители (например, микрокристаллическая целлюлоза, лактоза, маннит), растворители (например, жидкие полиэтиленгликоли), эмульгаторы (например, додецилсульфат натрия), поверхностно-активные вещества (например, полиоксисорбитанолеат), диспергаторы (например, поливинилпирролидон), синтетические и природные полимеры (например, альбумин), стабилизаторы (например, антиоксиданты, такие как, например, аскорбиновая кислота), красители (например, неорганические пигменты, такие как, например, оксиды железа) и вещества, улучшающие вкус и/или запах.

Предпочтительная доза соединения, предлагаемого в настоящем изобретении, является максимальной, которую пациент может перенести и которая не вызывает серьезных побочных эффектов. В качестве иллюстрации, соединение согласно настоящему изобретению можно вводить парентерально в дозе от приблизительно 0.001 мг/кг до приблизительно 1 мг/кг, предпочтительно от приблизительно 0.01 мг/кг до приблизительно 0.5 мг/кг массы тела. При пероральном приеме примерный диапазон доз составляет приблизительно от 0.01 до 100 мг/кг, предпочтительно приблизительно от 0.01 до 20 мг/кг и более предпочтительно приблизительно от 0.1 до 10 мг/кг массы тела. Промежуточные диапазоны описанных выше значений также являются частью настоящего изобретения.

Тем не менее, фактические уровни дозировки и период действия вводимых действующих веществ в фармацевтических композициях согласно настоящему изобретению могут варьироваться таким образом, чтобы получить количество действующего вещества, который является эффективным для достижения желаемого терапевтического ответа у отдельного пациента, композиции и способа введения, не будучи токсичным для пациента. Вследствие этого может быть необходимым, если это целесообразно, отклоняться от указанных количеств, в частности в зависимости от возраста, пола, массы тела, режима питания и общего состояния здоровья пациента, биодоступности и фармакодинамических характеристик конкретного соединения и его способа и пути введения, времени или интервал, в течение которого происходит введение, выбранных схем приема, реакции отдельного пациента на действующее вещество,

- 24 029556

конкретного пораженного заболевания, степени или поражения или тяжести заболевания, вида сопутствующего лечения (т.е., взаимодействия соединения согласно настоящему изобретению с другими совместно вводимыми терапевтическими средствами), а также других соответствующих обстоятельств.

Таким образом, в некоторых случаях может быть достаточным обходиться меньшим, нежели указанное выше минимальное количество, в то время как в других случаях потребуется превышение указанного верхнего предела. Лечение может быть начато с небольших дозировок, которые меньше оптимальной дозы соединения. После этого доза может быть увеличена путем небольшого приращения, пока при этих обстоятельствах не будет достигнут оптимальный эффект. Для удобства общую суточную дозу можно разделить и вводить отдельными порциями, распределенными в течение дня.

Нижеследующие примерные варианты осуществления иллюстрируют изобретение. Изобретение не ограничивается этими примерами.

Процентные отношения в последующих тестах и примерах, если не указано иное, даны по весу; части указаны по весу. Соотношения растворителей, соотношения разбавления и концентрации, приведенные для жидкости/жидких растворов, каждый раз представлены в пересчете на объем.

А. Примеры

Сокращения и аббревиатуры:

Ас - ацетил

Ас₂О - уксусный ангидрид

АсОН - уксусная кислота водн. - водный (раствор)

Вос - трет-бутоксикарбонил шир. - широкий ('Н-ЯМР сигнал)

Ви бутил

кат. - каталитический конц. - концентрированный ά - дублет ('Н-ЯМР сигнал)

ДБДМГ - 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин ПХИ - прямая химическая ионизация (МС)

ДХМ - дихлорметан

периодинан Десса-Мартина - 1,1,1-триацетокси-1,1-дигидро-1,2-бензйодоксол-3(1Н)-он

ДИПЭМ - Ν,Ν-диизопропилэтиламин

ДМФ - Ν,Ν-диметилформамид

ДМСО - диметилсульфоксид

ΕΙ - ионизация электронным ударом (МС) экв. - эквивалент(ы)

Ε8Ι - электрораспылительная ионизация (МС)

Εΐ - этил

ЕЮАс - этилацетат

ГХ-МС - газовая хроматография в совокупности с масс-спектроскопией ч. - час(ы)

На1 - галоген

¹Н-ЯМР - спектроскопия протонным ядерным магнитным резонансом

ВЭЖХ - высокоэффективная жидкостная хроматография ίΡτ- изопропил

ЖХ-МС - жидкостная хроматография в совокупности с масс-спектроскопией

Ме - метил

МеОН - метанол мин - минута(ы)

МС - масс-спектроскопия

т/ζ - отношение массы к заряду (МС)

НБС - Ν-бромсукцинимид

п-Ви - п-бутил

Νί'Έ - Ν-хлорсукцинимид

от теор. - от теории (химический выход)

Ρά/С - палладий на угле

ΡάΟ₂(άρρΓ) - [1,1'-бис(дифенил фосфино)ферроцен]дихлорпалладий(11)

Рй(йЬа)₂ - бис(дибензилиденацетон)палладий

РН - фенил

РРА - полифосфорная кислота ц - квартет (¹Н-ЯМР сигнал) колич. - количественный (выход) рац - рацемический

- 25 029556

Фу - ТСХ фактор удерживания КР - обращенно-фазная (ВЭЖХ)

КТ - комнатная температура Ву - время удерживания (ВЭЖХ)

8 - синглет (¹Н-ЯМР сигнал) нас. - насыщенный (раствор) ΐ - триплет (¹Н-ЯМР сигнал)

ТВАР - тетра-п-бутиламмония фторид ΤΒΌΜδ - трет-бутилдиметилсилил

ТВТИ - И[(1Н-бензотриазол-1-илокси)(диметиламино)метилен]-Иметилметанаминия тетрафторборат

!Ви - трет-бутил

трет - третичный

ТФУ - трифторуксусная кислота

ТГФ - тетрагидрофуран

ТСХ - тонкослойная хроматография.

Способы ЖХ-МС и ГХ-МС.

Способ 1 (ЖХ-МС).

Прибор: М1сгота88 ОиаИго Ргсписг с \Уа1ег5 ИРЬС АсдиНу; колонка: ТНегто Нурег8Й ООЬЭ 1.9 мк, 50 мм х 1 мм; элюент А: 1 л вода + 0.5 мл 50% водн. муравьиная кислота, элюент В: 1 л ацетонитрил + 0.5 мл 50% водн. муравьиная кислота; градиент: 0.0 мин. 90% А 0.1 мин. 90% А 1.5 мин. 10% А

2.2 мин. 10% А; температура: 50°С; скорость потока: 0.33 мл/мин; УФ обнаружение: 210 нм.

Способ 2 (ЖХ-МС).

Прибор: ^а1ег8 АсдиНу 5>0Э ИРЬС 8у81ет; колонка: ^а1ег8 АсдиНу ИРЬС Н§§ Т3 1.8МК, 50 мм х 1 мм; элюент А: 1 л вода + 0.25 мл 99% муравьиная кислота, элюент В: 1 л ацетонитрил + 0.25 мл 99% муравьиная кислота; градиент: 0.0 мин. 90% А 1.2 мин. 5% А 2.0 мин. 5% А; термостат: 50°С; скорость потока: 0.40 мл/мин; УФ обнаружение: 210-400 нм.

Способ 3 (ЖХ-МС).

Прибор: Мюгота88 ОиаНго Мюго с ВЭЖХ АдПеп! 1100 §епе8; колонка: УМС-ТпаП С18 3 мк, 50 мм х 3 мм; элюент А: 1 л вода + 0.01 моль аммония карбонат, элюент В: 1 л ацетонитрил; градиент: 0.0 мин. 100% А 2.75 мин. 5% А 4.5 мин. 5% А; термостат: 40°С; скорость потока: 1.25 мл/мин; УФ обнаружение: 210 нм.

Способ 4 (ЖХ-МС.:

Прибор: ^а1ег8 АсдиНу 5>0Э ИРЬС 8у81ет; колонка: ^а1ег8 АсдиНу ИРЬС Н§§ Т3 1.8 мк, 30 мм х 2 мм; элюент А: 1 л вода + 0.25 мл 99% муравьиная кислота, элюент В: 1 л ацетонитрил + 0.25 мл 99% муравьиная кислота; градиент: 0.0 мин. 90% А 1.2 мин. 5% А 2.0 мин. 5% А; термостат: 50°С; скорость потока: 0.60 мл/мин; УФ обнаружение: 208-400 нм.

Способ 5 (ЖХ-МС).

Прибор: Мюгота88 ОиаНго Ргет1ег с ^а1ег8 ИРЬС АсдиНу; колонка: ТНегто Нурег8Й ООЬЭ 1.9мк, 50 мм х 1 мм; элюент А: 1 л вода + 0.5 мл 50 % водн. муравьиная кислота, элюент В: 1 л ацетонитрил + 0.5 мл 50% водн. муравьиная кислота; градиент: 0.0 мин. 97% А 0.5 мин. 97% А 3.2 мин. 5% А 4.0 мин. 5% А; температура: 50°С; скорость потока: 0.3 мл/мин; УФ обнаружение: 210 нм.

Способ 6 (ГХ-МС).

Прибор: Мюгота88 ОСТ, ОС6890; колонка: Ке81ек КТХ-35, 15 м х 200 мкм х 0.33 мкм; постоянный поток с гелием: 0.88 мл/мин; термостат: 70°С; вход: 250°С; градиент: 70°С, 30°С/мин 310°С (поддержание в течение 3 мин.).

Способ 7 (ЖХ-МС).

Прибор МС: ^а1ег8 Мюгота88 ОМ; Прибор ВЭЖХ: АдПеп! 1100 8епе8; колонка: АдПеп! 2ОКВАХ Ех1епЛ-С18 3.0 мм х 50 мм, 3.5мк; элюент А: 1 л вода + 0.01 моль аммония карбонат, элюент В: 1 л ацетонитрил; градиент: 0.0 мин. 98% А 0.2 мин. 98% А 3.0 мин. 5% А 4.5 мин. 5% А; температура: 40°С; скорость потока: 1.75 мл/мин; УФ обнаружение: 210 нм.

Способ 8 (ЖХ-МС).

Прибор МС: ^а1ег8 Мюгота88 Ζ0; Прибор ВЭЖХ: АдПеШ 1100 8епе8; колонка: АдПеп! ΖОКΒАX Ех!епЛ-С18 3.0 мм х 50 мм, 3.5мк; элюент А: 1 л вода + 0.01 моль аммония карбонат, элюент В: 1 л ацетонитрил; градиент: 0.0 мин. 98% А 0.2 мин. 98% А 3.0 мин. 5 % А 4.5 мин. 5% А; температура: 40°С; скорость потока: 1.75 мл/мин; УФ обнаружение: 210 нм.

Общие способы очистки (см. табл. I и II ниже).

Способ Р1.

Препаративная ОФ ВЭЖХ (Керго8г1 С18, градиент ацетонитрил/0.2 % водн. трифторуксусная ки- 26 029556

слота).

Способ Р2.

Препаративная ОФ ВЭЖХ (ХВпбдс С18, градиент ацетонитрил/вода + 0.1 % водн. аммиак).

Способ Р3.

Препаративная ОФ ВЭЖХ (Зипйге С18, градиент ацетонитрил/вода).

Способ Р4.

Препаративная ОФ ВЭЖХ (ХВпбде С18, градиент ацетонитрил/вода + 0.05 % водн. аммиак).

Способ Р5.

Продукт, полученный от предыдущей ОФ ВЭЖХ очистки, растворяют в метаноле и отфильтровывают через анионообменный картридж (§1га1озрЬеге5 8РЕ, РЬ-НСО₃ МР-гезш). Картридж элюируют метанолом, и фильтрат выпаривают.

Способ Р6.

Раствор продукта в этилацетате промывают нас. водн. раствором гидрокарбоната натрия за которым следует нас. водн. раствор хлорида натрия, высушивают над сульфатом магния, отфильтровывают и выпаривают.

Исходные вещества и промежуточные соединения

Промежуточное соединение 1А. 2-Метокси-4-метиланилин

Смесь 5-метил-2-нитроанизола (265 г, 1.58 моль) и 10 % Р6/С (39.75 г) в ТГФ (1.32 л) взбалтывали в течение ночи при КТ под 1 атм водорода. Фильтрация через кизельгур и выпаривание обеспечило 216.1 г сырого продукта, который использовали в следующей стадии без дополнительной очистки. ЖХ-МС (способ 3): Ву = 2.39 мин; МС (ΕδΣροκ): т/ζ = 138 (М+Н)+ ¹Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-6₆): δ = 6.45-6.63 (т, 3Н), 4.46 (5, 2Н), 3.72 (₈, 3Н), 2.16 (₈, 3Н) част. на млн.

Промежуточное соединение 2А. 2-Метокси-4-метилбензолтиол

Способ 1. Раствор нитрита натрия (7 г, 101.4 ммоль) в воде (25 мл) добавляли по каплям к охлажденному (0-5°С) раствору промежуточного соединения 1А (13.7 г, 100 ммоль) в концентрированной хлористо-водородной кислоте (30 мл) и воде (85 мл). После перемешивания при 0°С в течение 10 мин. добавляли ацетат натрия (15 г, 182.8 ммоль). Полученную смесь добавляли по каплям к горячему раствору (70-80°С) О-этилдитиокарбоната калия (30 г, 187.1 ммоль) в воде (140 мл), взбалтывали между 70 и 80°С в течение 1 ч и затем охлаждали до КТ. Смесь экстрагировали два раза этилацетатом, и объединенные органические экстракты высушивали над сульфатом натрия и выпаривали. Остаток ресуспендировали в

1.3 м растворе гидроксида калия в этаноле (300 мл). Добавляли глюкозу (8 г), и полученную смесь кипятили в колбе с обратным холодильником в течение 3 ч. После этого этанольный растворитель выпаривали, и остаток разбавляли с водой и подкисляли посредством 6 н водной серной кислоты. Осторожно добавляли цинковую пыль (15 г), и полученную смесь нагревали до 50°С в течение 30 мин. Затем смесь охлаждали до КТ, разбавляли с дихлорметаном и отфильтровывали. Фильтрат экстрагировали два раза с дихлорметаном, и объединенные органические экстракты высушивали над сульфатом натрия и выпаривали с получением 14.3 г сырого продукта, который использовали в следующей стадии без дополнительной очистки.

Способ 2.

К 2.9 л ТГФ добавляли теплый раствор 355 мл (6.67 моль) концентрированной серной кислотой в 1.1 л воды. При 50°С, 293 г (1.33 моль) 2-метокси-4-метилбензолсульфонилхлорид добавляли при помешивании. После этого осторожно порциями добавляли 521 г (7.97 моль) цинковой пыли (пенообразование), и слегка экзотермическую реакцию охлаждали в водяной бане, чтобы поддерживать температуру в 50°-55°С. Смесь впоследствии взбалтывали при 55°С в течение 3 ч. За ходом реакции наблюдали с помощью ТСХ (силикагель, петролейный эфир/этилацетат 95:5). Реакционную смесь выливали в 13.6 л воды, добавляли 6.8 л дихлорметана, и смесь взбалтывали в течение 5 мин. После декантирования от оставшегося цинка и разделения фаз, водную фазу экстрагировали еще раз с 6.8 л дихлорметана. Объединенные органические фазы промывали посредством 10% рассола, высушивали и выпаривали при 40°С под сниженным давлением с получением 237 г сырого продукта. Это вещество использовали в следующей стадии без дополнительной очистки. Аналитический образец получали посредством хроматографии на силикагеле с петролейным эфиром/этилацетатом (97:3) в качестве элюента. ЖХ-МС (способ 1): Ву = 1.21 мин; МС (ЕЗТпед): т/ζ = 153 (М-Н)-¹Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-6₆): δ = 7.17 (6, 1Н), 6.81 (5, 1Н), 6.66

- 27 029556

(ά, 1Η), 4.63 (шир. 8, 1Н), 3.80 (8, 3Н), 2.26 (8, 3Н) част, на млн.

Промежуточное соединение 3А. 1-[(2,2-Диэтоксиэтил)сульфанил]-2-метокси-4-метилбензол

237 г сырого вещества из промежуточного соединения 2А, 287 г (1.46 моль) бромацетальдегиддиэтилацеталя и 862 г (2.65 моль) карбонат цезия суспендировали в 2 л ДМФ. Температуру реакции повышали сначала до 40°С, затем взбалтывание продолжали в течение ночи при температуре окружающей среды. Реакционную смесь распределяли между 10 л воды и 2.7 л этилацетата. Водную фазу экстрагировали с другой частью 2.7 л этилацетата. Объединенные органические фазы промывали посредством 10 % рассола, высушивали и выпаривали. Полученный маслянистый остаток очищали посредством хроматографии на силикагеле с петролейным эфиром/этилацетатом (95:5) в качестве элюента. Выход: 236 г масла (66% от теор.) ГХ-МС (способ 6): Ву = 6.03 мин; МС (ΕΣρο8): т/ζ - 270 (М)+ ¹Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-а₆): δ = 7.16 (ά, 1Н), 6.82 (8, 1Н), 6.73 (ά, 1Н), 4.55 (ί, 1Н), 3.80 (8, 3Н), 3.52-3.64 (т, 2Н), 3.39-3.51 (т, 2Н), 2.96 (ά, 2Н), 2.33 (8, 3Н), 1.09 (ί, 6Н) част. на млн.

Промежуточное соединение 4А. 7-Метокси-5-метил-1-бензотиофен

К нагреваемой с обратным холодильником смеси 13 г полифосфорной кислоты и 150 мл хлорбензола добавляли по каплям раствор 5.2 г (19.2 ммоль) промежуточного соединения 3А, и нагревание с обратным холодильником продолжали в течение ночи. После охлаждения, органический слой декантировали, и остаток и колбу ополаскивали два раза с помощью ДХМ. Объединенные органические фазы выпаривали под сниженным давлением. Остаток (3.76 г) подвергали хроматографии на силикагеле с изогексан/0-10 % этилацетат в качестве элюента. Выход: 1.69 г масла (49% от теор.) ГХ-МС (способ 6): Ву = 5.20 мин; МС (ΕΣροδ): т/ζ = 178 (М)+ Ή-ЯМР (400 МГц, ДМСОШ₆): δ = 7.68 (ά, 1Н), 7.34 (ά, 1Н), 7.28 (8, 1Н), 6.78 (8, 1Н), 3.93 (8, 3Н), 2.43 (8, 3Н) част. на млн.

Промежуточное соединение 5А. (7-Метокси-5-метил-1-бензотиофен-2-ил)бороновая кислота

Под атмосферой аргона 26.7 г (150 ммоль) промежуточного соединения 4А растворяли в 270 мл ТГФ и охлаждали до -70°С. Между -70°С и -65°С, 66 мл (165 ммоль) 2.5 N раствора н-бутиллития в гексане добавляли по каплям в течение 20 мин., что приводило к образованию белого осадка. После перемешивания в течение 1 ч. при -70°С добавляли 41.5 мл (180 ммоль) триизопропил бората при этой температуре в течение 10 мин. (что дало густую суспензию). Взбалтывание продолжали в течение 1 ч. при 70°С, до того, как реакционной смеси позволяли нагреться до КТ в течение ночи. После этого добавляли 400 мл насыщенного водн. раствора хлорида аммония, слои разделяли, и водный слой экстрагировали еще раз с помощью ТГФ. Объединенные органические фазы выпаривали под сниженным давлением. К полученному таким образом остатку добавляли 200 мл воды и 86 мл 2 Н водн. раствора гидроксида натрия. Раствор промывали два раза посредством ДХМ, затем подкисляли с помощью 35 мл 3 М серной кислоты, и полученную суспензию взбалтывали энергично в течение 1 ч. Осадок отфильтровывали путем отсасывания и высушивали в течение ночи при 45°С в вакууме. Выход: 28.25 г бесцветного твердого вещества (94 % чистый путем ЖХ-МС, 80 % от теор.) ЖХ-мС (способ 2): Ву = 0.87 мин; МС (ΕΜρο8): т/ζ = 223 (М+Н)+ ’Н-ЯМР (400 МГц, ДМСОШ₆): δ = 7.17 (ά, 1Н), 6.81 (8, 1Н), 6.66 (ά, 1Н), 4.63 (шир. 8, 1Н), 3.80 (8, 3Н), 2.26 (8, 3Н) част. на млн.

Промежуточное соединение 6А. 2-(7-Метокси-5-метил-1-бензотиофен-2-ил)-6-метил-1,3,6,2-диоксазаборокан-4,8-дион

6.3 г (28.4 ммоль) промежуточного соединения 5А и 4.2 г (28.4 ммоль) 2,2'-(метилимино) диуксусной кислоты растворяли в смеси из 45 мл ДМСО и 400 мл толуол и нагревали в колбе с обратным холодильником в течение 16 ч с применением ловушки Дина-Старка. После выпаривания, остаток ресуспендировали в этилацетате и промывали три раза водой и один раз рассолом. Органическую фазу высуши- 28 029556

вали над сульфатом магния и выпаривали до объема в приблизительно 200 мл. Белое твердое вещество выпадало в осадок, который отфильтровывали, промывали этилацетатом и высушивали в вакууме с получением первого выхода (5.52 г) соединения, указанного в заголовке. Второй выход (3.32 г) получали после выпаривания маточного раствора и флеш-хроматографии над слоем силикагеля с применением циклогексан/0-100% этилацетат в качестве элюента.

Выход: 8.84 г (общая чистота 92.5 % посредством ЖХ-МС, 87 % от теор.) ЖХ-МС (способ 2): Ву = 0.93 мин; МС (ЕЯроз): т/ζ = 334 (М+Н)+ ¹Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆): δ = 7.42 (5, 1Н), 7.26 (5, 1Н), 6.76 (5, 1Н), 4.40 (б, 2Н), 4.17 (б, 2Н), 3.92 (5, 3Н), 2.63 (5, 3Н), 2.42 (5, 3Н) част. на млн.

Промежуточное соединение 7А. Этил 4-аминопирроло[2,1-1][1,2,4]триазин-6-карбоксилат

Раствор 4-аминопирроло[2,1-Т][1,2,4]триазин-6-карбонитрила (3.9 г, 24.5 ммоль; получение описано в РСТ Межд. пат. заявке ШО 2007/064883) в этаноле (124.8 мл) взбалтывали с концентрированной серной кислотой (62.4 мл) при 80°С в течение ночи. После охлаждения до КТ, реакционную смесь выливали в 800 г льда и доводили до рН 6-7 с помощью концентрированного водн. раствор гидроксида натрия. Этилацетат (500 мл) и дихлорметан (500 мл) добавляли к суспензии, и полученную смесь отфильтровывали над кизельгуром. Органический слой отделяли от водного слоя. Твердое вещество растворяли в горячей воде (1 л), и водный слой экстрагировали два раза этилацетатом. Объединенные органические слои высушивали над сульфатом натрия и выпаривали. Остаток растирали в порошок со смесью изопропанол/диэтиловый эфир, и твердое вещество отфильтровывали с получением 2.5 г (49 % от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 2): Ву = 0.59 мин; МС (Е8!ро5): т/ζ = 206 (М+Н)+ ¹Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆): δ = 8.11-7.97 (т, 3Н), 7.88 (5, 1Н), 7.34 (шир. 5, 1Н), 4.27 (ф 2Н), 1.30 (1, 3Н) част. на млн.

Промежуточное соединение 8А. (4-Аминопирроло[2,1-£][1,2,4]триазин-6-ил)метанол

Охлажденный льдом раствор промежуточного соединения 7А (3.0 г, 14.5 ммоль) в ТГФ (30 мл) обрабатывали посредством 1 м раствора триэтилборогидрида лития в ТГФ (58 мл) и взбалтывали при КТ в течение 45 мин. Реакционную смесь затем охлаждали до 0°С, гасили при помощи метанола, медленно нагревали до КТ и адсорбировали на кизельгуре. Очищение колоночной хроматографией над силикагелем (дихлорметан/метанол 20:1 4:1 градиент) обеспечило 2.21 г (92.5 % от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 3): Ву = 1.46 мин; МС (ЕЗIρо5): т/ζ = 164 (М+Н)+ ¹Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆): δ = 7.75 (5, 1Н), 7.64 (шир. 5, 2Н), 7.50 (шир. б, 1Н), 6.79 (шир. б, 1Н), 5.01 (1, 1Н), 4.50 (б, 2Н) част. на млн.

Промежуточное соединение 9А. трет-Бутил [2-циано-4-(гидроксиметил)-1Н-пиррол-1-ил]карбамат

Под аргоном 1М раствор бромида метилмагния в ТГФ (13.3 мл) в течение 15 мин добавляли к раствору трет-бутил (4-бром-2-циано-1Н-пиррол-1-ил)карбамата (3.7 г, 12.09 ммоль; получение описано в РСТ Межд. пат. заявке ШО 2007/064883, Промежуточное соединение ААЕ, стадия 3) в ТГФ (37 мл), охлажденный до -60°С. Через 30 мин, 1.6 М раствор н-бутиллития в гексане (15.1 мл, 24.2 ммоль) добавляли к реакционной смеси в течение 10 мин, и полученную смесь взбалтывали между -60 и -40°С в течение 1 ч. После этого, параформальдегид (1.09 г, 36.3 ммоль) добавляли к реакционной смеси, и реакционную смесь медленно нагревали до КТ и взбалтывали в течение ночи. После гашения нас. водн. раствором хлорида аммония, водный слой экстрагировали два раза этилацетатом. Объединенные органические фазы промывали с помощью нас. водн. раствора хлорида натрия, высушивали над сульфатом натрия и выпаривали. Очищение колоночной хроматографией на силикагеле (циклогексан/этилацетат 2:1 1:1)

обеспечило 2.04 г (69 % от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 4): Ву = 0.70 мин; МС (ΕδΣροβ): т/ζ = 238 (М+Н)+ ^!Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆): δ = 10.79 (шир. 5, 1Н), 7.09 (б, 1Н), 6.86 (б, 1Н), 4.97 (1, 1Н), 4.28 (б, 2Н), 1.45 (5, 9Н) част. на млн.

Промежуточное соединение 10А. 6-(Метоксиметил)пирроло[2,1-1][1,2,4]триазин-4-амин

- 29 029556

Способ 1.

Раствор промежуточного соединения 8А (1.3 г, 7.9 ммоль) в ТГФ (25 мл) обрабатывали тионилхлоридом (1.15 мл, 15.8 ммоль) и взбалтывали при КТ в течение 2 ч. После выпаривания, остаток растворяли в метаноле (25 мл) и обрабатывали ацетатом натрия (1.3 г, 15.8 ммоль). Смесь взбалтывали в течение 3 ч. при 65°С и затем снова выпаривали. Очищение колоночной хроматографией на силикагеле (дихлорметан/метанол 100:2) обеспечило 787 мг (55 % от теор.) соединения, указанного в заголовке.

Способ 2.

Раствор промежуточного соединения 9А (6.14 г, 25.88 ммоль) в 4М растворе хлорида водорода в 1,4-диоксане (15 мл) взбалтывали при КТ в течение 5 ч. После разбавления с метанолом (73 мл), взбалтывание при КТ продолжали в течение ночи. После этого добавляли фосфат калия (54.9 г, 258.65 ммоль) и ацетат формамидиния (13.46 г, 129.32 ммоль), и полученную смесь взбалтывали при 65°С в течение 17 ч. Реакционную смесь выпаривали, добавляли нас. водн. раствор хлорида натрия, и смесь экстрагировали с дихлорметаном после чего этилацетатом. Объединенные органические фазы высушивали над сульфатом натрия и выпаривали. Очищение колоночной хроматографией на силикагеле (дихлорметан/метанол 40:1 20:1) обеспечило 2.36 г (49 % от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 3):

Ву = 1.72 мин; МС (ΕδΙροβ): т/ζ = 179 (М+Н)+ ’Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆): δ = 7.77 (β, 1Н), 7.69 (шир. в, 2Н), 7.57 (в, 1Н), 6.81 (в, 1Н), 4.42 (в, 2Н), 3.25 (в, 3Н) част. на млн.

Промежуточное соединение 11А. 4-Амино-6-(метоксиметил)пирроло[2,1-1][1,2,4]триазин-7-карбальдегид

Фосфорилхлорид (13.7 мл, 147.18 ммоль) добавляли к раствору промежуточного соединения 10А (5.24 г, 29.43 ммоль) в ДМФ (80 мл) при 0°С. Полученную смесь взбалтывали при 60°С в течение 8 ч, затем осторожно гасили водой и нейтрализовали 4М водн. раствором гидроксида натрия. Водный слой экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические фазы промывали с помощью нас. водн. раствора хлорида натрия, высушивали над сульфатом магния и выпаривали. Раствор остатка в метаноле (50 мл) обрабатывали ацетатом натрия (2.41 г, 29.43 ммоль) и нагревали в колбе с обратным холодильником в течение ночи. Реакционную смесь разбавляли с водой и экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические фазы промывали с помощью нас. водн. раствора хлорида натрия, высушивали над сульфатом магния и выпаривали, с получением 2.66 г сырого продукта, который использовали в следующей стадии без дополнительной очистки. ЖХ-МС (способ 4): Ву = 0.50 мин; МС (Е81ров): т/ζ = 207 (М+Н)+ ’Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆): δ = 10.35 (в, 1Н), 8.20 (шир. в, 2Н), 8.07 (в, 1Н), 7.06 (в, 1Н), 4.72 (в, 2Н), 3.39 (в, 3Н) част. на млн.

Промежуточное соединение 12А. 4-Амино-5-бром-6-(метоксиметил)пирроло[2,1-Г][1,2,4]триазин-7карбальдегид

Раствор промежуточного соединения 11А (сырой, 2.66 г) в ДМФ (30 мл), охлаждали до -30°С, обрабатывали раствором Ν-бромсукцинимида (НБС; 2.52 г, 14.19 ммоль) в ДМФ (14 мл). Полученную смесь медленно нагревали до 0°С. Через 1 ч, смесь нагревали до КТ, взбалтывали в течение дополнительных 15 мин и затем гасили с 1 М водн. раствором тиосульфата натрия. Осадок отфильтровывали и промывали этилацетатом, с получением 1.1 г (100 % чистота, 30% от теор.) в качестве первого выхода соединения, указанного в заголовке. Остальной фильтрат экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические фазы промывали с помощью нас. водн. раствора хлорида натрия, высушивали над сульфатом натрия и выпаривали. Очищение остатка колоночной хроматографией на силикагеле (циклогексан/этилацетат 1:1 1:3) обеспечило дополнительные 1.39 г (70 % чистота, 26 % от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 2): Ву = 0.67 мин; МС (Е31ров): т/ζ = 283/285 (М+Н)+ Ίί-ЯМР (400 МГц, ДМСОб₆): δ = 10.36 (в, 1Н), 8.63 (шир. в, 1Н), 8.13 (в, 1Н), 7.23 (шир. в, 1Н), 4.64 (в, 2Н), 3.26 (в, 3Н) част, на млн.

Промежуточное соединение 13А. 4-Амино-6-(метоксиметил)-5-(7-метокси-5-метил-1-бензотиофен2-ил)пирроло [2,1-ί][ 1,2,4]триазин-7 -карбальдегид

- 30 029556

Под аргоном, дегазированный 0.5 М водн. раствор фосфата калия (9.9 мл) добавляли к раствору промежуточного соединения 12А (710 мг, 2.49 ммоль), Промежуточное соединение 5А (921 мг, 3.73 ммоль) и (2'-аминобифенил-2-ил)(хлор)палладий-дициклогексил(2',4',б'-триизопропилбифенил-2-ил) фосфин (1:1; 19б мг, 249 мкмоль; см. 8. С ВисЬтеаИ е! а1, 1. Ат. СИет. 8ос. 132 (40), 14073-14075 (2010)) в дегазированном ТГФ (28.4 мл). Полученную смесь взбалтывали при б0°С в течение 2 ч и затем выпаривали. Очищение остатка колоночной хроматографией на силикагеле (циклогексан/этилацетат 5:1 т1:1) обеспечило 550 мг (51% от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 2): Ву = 1.0б мин; МС (ΕδΞροδ): т/ζ = 383 (М+Н)+ ’Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-б_б): δ = 10.50 (δ, 1Н), 8.43 (шир. δ, 1Н), 8.21 (з, 1Н), 7.42 (з, 1Н), 7.33 (з, 1Н), б.87 (з, 1Н), б.09 (шир. з, 1Н), 4.58 (з, 2Н), 3.9б (з, 3Н), 3.19 (з, 3Н), 2.4б (з, 3Н) част. на млн.

Промежуточное соединение 14А. б-(Этоксиметил)пирроло[2,1-1][1,2,4]триазин-4-амин

Способ 1.

К суспензии из 2 г (12.2 ммоль) промежуточного соединения 8А в 40 мл ТГФ при КТ добавляли 1.78 мл (24.4 ммоль) тионилхлорида в течение 20 с. Смесь взбалтывали в течение 1.5 ч, затем выпаривали до сухости, и остаток растворяли в 40 мл этанол. Добавляли 2 г (24.4 ммоль) ацетата натрия, и смесь взбалтывали при 70°С в течение 1 ч. 45 мин. Реакционную смесь выпаривали снова, и добавляли нас. водн. раствор гидрокарбоната натрия. Смесь экстрагировали пять раз этилацетатом. Объединенные органические фазы промывали с помощью нас. водн. раствора хлорида натрия, высушивали сульфатом магния и выпаривали до сухости, с получением 2.02 г сырого продукта, который очищали колоночной хроматографией на силикагеле с дихлорметаном/метанол (0-2 %) в качестве элюента. Выход: 1.37 г (58 % от теор.).

Способ 2.

Стадия 1. Раствор промежуточного соединения 9А (2.3 г, 9.б9 ммоль) в 1,4-диоксане (5 мл) обрабатывали 4 М раствором хлорида водорода в 1,4-диоксане (24 мл, 9б.9 ммоль) и взбалтывали при КТ в течение 130 мин. После этого, суспензию отфильтровывали, и осадок промывали 1,4-диоксаном (5 мл) и высушивали в вакууме с получением 1.01 г (54% от теор.) промежуточного соединения 1-амино-4(хлорметил)-1Н-пиррол-2-карбонитрила гидрохлорид.

Стадия 2. Свежеприготовленный 1-амино-4-(хлорметил)-1Н-пиррол-2-карбонитрила гидрохлорид из стадии 1 (0.3 г, 1.82 ммоль) растворяли в этаноле (10 мл) и взбалтывали при КТ в течение 5 мин. Светлый раствор обрабатывали ацетатом формамидина (813 мг, 7.81 ммоль) и фосфатом калия (1.бб г, 7.81 ммоль) и взбалтывали сначала при КТ в течение 3 дней, затем при 80°С в течение 10.5 ч. Добавляли еще ацетат формамидина (488 мг, 4.б9 ммоль), и смесь взбалтывали в течение последующих 18 ч при 80°С. Затем смесь охлаждали до КТ, и добавляли воду и этилацетат. Органическую фазу отделяли, и водную фазу экстрагировали два раза этилацетатом. Объединенные органические фазы промывали с помощью нас. водн. раствора хлорида натрия, высушивали сульфатом магния и выпаривали. Остаток растворяли в смеси из метанола и дихлорметана, адсорбировали на диатомовой земле, высушивали в вакууме и в заключение очищали посредством хроматографии на силикагеле (градиент 0-10% метанол/дихлорметан) с получением 2б0 мг (78 % от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 3): Ву = 2.02 мин; МС (Е8!роз): т/ζ = 193 (М+Н)+ ’Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-б_б): δ = 7.77 (з, 1Н), 7.59-7.74 (шир. з, 2Н), 7.5б (з, 1Н), б.82 (з, 1Н), 5.7б (з, 1Н), 4.4б (з, 2Н), 3.4б (ц, 2Н), 1.13 (!, 3Н) част. на млн.

Промежуточное соединение 15А. 4-Амино-б-(этоксиметил)пирроло[2,1-1][1,2,4]триазин-7-карбальдегид

К раствору 2.1 г (10.9 ммоль) промежуточного соединения 14А в 40 мл сухого ДМФ по каплям добавляли 5.1 мл (54.б ммоль) фосфорилхлорида при 0°С под атмосферой аргона. Смесь взбалтывали при

- 31 029556

60°С в течение 10 ч. После этого, осторожно добавляли воду, и смесь взбалтывали при температуре окружающей среды, пока все реакционноспособные промежуточные соединения не подверглись распаду (ВЭЖХ контроль). Кислотный раствор нейтрализовали с 1М водн. раствором гидроксида натрия и три раза экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические фазы промывали с помощью нас. водн. раствора хлорида натрия, высушивали над сульфатом магния и выпаривали под сниженным давлением. Выход: 1.94 г (чистота 90%, 81% от теор.) ЖХ-МС (способ 5): Ву = 1.49 мин; МС (Εδ^οδ): т/ζ = 221 (М+Н)+ 'Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-ά·.): δ = 10.35 (δ, 1Н), 8.14-8.26 (т, 2Н), 8.07 (δ, 1Н), 7.07 (δ, 1Н), 4.76 (δ, 2Н), 3.58 (д, 2Н), 1.20 (1, 3Н) част. на млн.

Промежуточное соединение 16А. 4-Амино-5-бром-6-(этоксиметил)пирроло[2,1-1][1,2,4]триазин-7карбальдегид

К раствору 73 г (0.33 моль) промежуточного соединения 15А в 1.9 л ДМФ по каплям добавляли раствор 65 г (0.37 моль) НБС в 200 мл ДМФ при -15°С. Смесь давали нагреться до 0°С и взбалтывали в течение 3 ч. при этой температуре. Реакционную смесь выливали в 2% водн. раствор тиосульфата натрия при помешивании, и осадок отфильтровывали, промывали с помощью воды и высушивали в вакууме над пентоксидом фосфора. Выход: 85.6 г (86 % от теор.) ЖХ-МС (способ 2): Ву = 0.76 мин; МС (ΕδΕροδ): т/ζ = 299/301 (М+Н)+ 'Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-й₆): δ = 10.36 (δ, 1Н), 8.62 (шир. δ, 1Н), 8.13 (δ, 1Н), 7.22 (шир. δ, 1Н), 4.68 (δ, 2Н), 3.49 (д, 2Н), 1.10 (1, 3Н) част. на млн.

Промежуточное соединение 17А. 4-Амино-6-(этоксиметил)-5-(7-метокси-5-метил-1-бензотиофен-2ил)пирроло[2,1-1][1,2,4]триазин-7-карбальдегид

Под атмосферой аргона 714 мг (чистота 85 %, 2.03 ммоль) промежуточного соединения 16А, 946 мг (2.84 ммоль) промежуточного соединения 6А и 160 мг (0.2 ммоль) (2'-аминобифенил-2-ил)(хлор)палладий-дициклогексил(2',4',6'-триизопропилбифенил -2-ил)фосфина (1:1; см. δ. Ь. ВисктеаШ е1 а1., 1. Ат. Скет. δο^ 132 (40), 14073-14075 (2010)) суспендировали в 15.5 мл ТГФ. После этого добавляли 15.5 мл дегазированного 0.5 М водн. раствора фосфата калия, и смесь взбалтывали при 50°С в течение 16 ч. После добавления воды смесь экстрагировали этилацетатом, и объединенные органические фазы высушивали над сульфатом магния и выпаривали под сниженным давлением. Остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (100 г) с 10-50 % этилацетат/ циклогексан в качестве элюента. Выход: 452 мг (75 % чистый посредством ВЭЖХ, 42 % от теор.) ЖХ-МС (способ 5): Ву = 2.38 мин; МС (ΕδΕροδ): т/ζ = 397 (М+Н)+ ’Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-й₆): δ = 10.50 (δ, 1Н), 8.42 (шир. δ, 1Н), 8.21 (δ, 1Н), 7.43 (δ, 1Н), 7.33 (δ, 1Н), 6.87 (δ, 1Н), 6.07 (шир. δ, 1Н), 4.63 (δ, 2Н), 3.96 (δ, 3Н), 3.40 (φ 2Н), 2.46 (δ, 3Н), 1.02 (ΐ, 3Н) част. на млн.

Промежуточное соединение 18А. (4-Амино-5,7-дибромпирроло[2,1-1][1,2,4]триазин-6-ил)метанол

Раствор промежуточного соединения 8А (5 г, 30.4 ммоль) в ТГФ (100 мл) обрабатывали 1,3-дибром5,5-диметилгидантоином (9.58 г, 33.5 ммоль) и взбалтывали при КТ в течение 2 ч. Осадок отфильтровывали и высушивали в вакууме с получением 6.60 г (64 % от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 2): Ву = 0.56 мин; МС (Εδ^οδ): т/ζ = 321/323/325 (М+Н)+ ’Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-й₆): δ = 8.23 (шир. δ, 1Н), 7.96 (δ, 1Н), 6.94 (шир. δ, 1Н), 5.09 (шир. δ, 1Н), 4.43 (δ, 2Н) част, на млн.

Промежуточное соединение 19А. (4-Амино-5-бромпирроло[2,1-1][1,2,4]триазин-6-ил)метанол

он

Суспензию промежуточного соединения 18А (3.7 г, 11.5 ммоль) в ТГФ (800 мл) нагревали при помешивании до полного растворения. Смесь затем охлаждали до -78°С, и по каплям добавляли 1.6М рас- 32 029556

твор н-бутиллития в гексане (20 мл, 32.1 ммоль). Через 5 мин. добавляли другую часть 1.6 м раствора нбутиллития (1.5 мл, 2.29 ммоль). Полученную смесь взбалтывали при -78°С в течение 5 мин, затем гасили при помощи метанола (5 мл) и нагревали до КТ. Реакционную смесь разбавляли с нас. водн. раствором хлорида аммония, нас. водн. раствором гидрокарбоната натрия, нас. водн. раствором хлорида натрия и этилацетатом. После разделения фаз, органический слой промывали с помощью нас. водн. раствора хлорида натрия. Объединенные водные фазы повторно экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические фазы промывали снова с нас. водн. раствором хлорида натрия, высушивали над сульфатом магния и выпаривали с получением 2.87 г сырого продукта, который использовали в последующих стадиях без дополнительной очистки. ЖХ-МС (способ 3): Ву = 1.73 мин; МС (ΕδΣροδ): ш/ζ = 243/245 (М+Н)+ ’Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-й₆): δ = 8.41-7.89 (шир. 8, 1Н), 7.82 (8, 1Н), 7.66 (8, 1Н), 7.13-6.48 (шир. 8, 1Н), 5.11 (!, 1Н), 4.45 (й, 2Н) част. на млн.

Промежуточное соединение 20А. [4-Амино-5-(7-метокси-5-метил-1-бензотиофен-2-ил)пирроло[2,1Г][1,2,4]триазин-6-ил]метанол

Суспензию промежуточного соединения 19А (70 % чистота, 2.52 г, 7.26 ммоль), промежуточное соединение 6А (3.63 г, 10.9 ммоль) и фторид цезия (5.51 г, 36.3 ммоль) в смеси ТГФ/вода (10:1; 80 мл) дегазировали под аргоном. Добавляли 4-(ди-трет-бутилфосфино)-К,К-диметиланилин-дихлорпалладий (2:1; 176 мг, 0.248 ммоль), и полученную смесь снова дегазировали и взбалтывали при 50°С в течение 16 ч. Реакционную смесь затем промывали с помощью нас. водн. раствора хлорида натрия, и органический слой отделяли, высушивали над сульфатом магния, отфильтровывали и выпаривали. Остаток суспендировали в метаноле, и полученное твердое вещество отфильтровывали и высушивали в вакууме с получением 1.97 г (90 % чистота, 72 % от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 2): Ву = 0.85 мин; МС (ΕδΣρο8): ш/ζ = 340 (М+Н)+ ’Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-й₆): δ = 7.91 (8, 1Н), 7.5-8.1 (шир. 8, 1Н), 7.72 (8, 1Н), 7.35 (8, 1Н), 7.30 (8, 1Н), 6.84 (8, 1Н), 5.5-6.0 (шир. 8, 1Н), 5.06 (!, 1Н), 4.49 (й, 2Н), 3.95 (8, 3Н), 2.45 (8, 3Н) част. на млн.

Промежуточное соединение 21А. 6-(Метоксиметил)-5-(7-метокси-5-метил-1-бензотиофен-2-ил) пирроло [2,1-ί][1,2,4]триазин-4-амин

Раствор промежуточного соединения 20А (400 мг, 1.17 ммоль) в дихлорметане (12 мл) обрабатывали тионилхлоридом (128 мкл, 1.76 ммоль) и взбалтывали при КТ в течение 15 мин. После выпаривания, остаток ресуспендировали в метаноле (12 мл) и обрабатывали с помощью ДИПЭМ (409 мкл, 2.35 ммоль). Смесь кипятили в колбе с обратным холодильником в течение ночи и затем снова выпаривали. Очищение колоночной хроматографией на силикагеле (дихлорметан/метанол 98:2 95:5) обеспечило 388 мг

(93% от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 2): Ву = 1.00 мин; МС (ΕδΣρο8): ш/ζ = 355 (М+Н)+ ’Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-й₆): δ = 7.93 (8, 1Н), 7.82 (8, 1Н), 7.35 (8, 1Н), 7.31 (8, 1Н), 6.84 (8, 1Н), 4.38 (8, 2Н), 3.95 (8, 3Н), 3.22 (8, 3Н), 2.45 (8, 3Н) част. на млн.

Промежуточное соединение 22А. 6-(Этоксиметил)-5-(7-метокси-5-метил-1-бензотиофен-2-ил) пирроло [2,1-ί][1,2,4] триазин-4-амин

Промежуточное соединение 20А (200 мг, 587 мкмоль) в дихлорметане (5 мл) обрабатывали тионилхлоридом (64 мкл, 881 мкмоль) и взбалтывали при КТ в течение 15 мин. После выпаривания, остаток кипятили в колбе с обратным холодильником в этаноле (5 мл) в течение 1 ч, затем обрабатывали с по- 33 029556

мощью ДИПЭМ (204 мкл, 1.17 ммоль) и нагревали в колбе с обратным холодильником снова в течение ночи. Реакционную смесь выпаривали, и сырой продукт очищали колоночной хроматографией на силикагеле (дихлорметан/метанол 98:2 95:5) с получением 202 мг (90 % от теор.) соединения, указанного в

заголовке. ЖХ-МС (способ 5): Ву = 2.32 мин; МС (ΕδΙροδ): т/ζ = 369 (М+Н)+ 'И-ЯМР (400 МГц, ДМСОЙ6): δ = 8.31-7.59 (шир. δ, 1Н), 7.93 (δ, 1Н), 7.81 (δ, 1Н), 7.35 (δ, 1Н), 7.30 (δ, 1Н), 6.84 (δ, 1Н), 6.20-5.50 (шир. δ, 1Н), 4.41 (δ, 2Н), 3.95 (δ, 3Н), 3.41 (ς, 2Н), 2.45 (δ, 3Н), 1.08 (ί, 3Н) част. на млн.

Промежуточное соединение 23А. трет-Бутил 4-{[4-амино-6-(гидроксиметил)-5-(7-метокси-5-метил1 -бензотиофен-2-ил)пирроло[2,1-ί][1,2,4]триазин-7-ил] метил}пиперазин-1-карбоксилат

Раствор промежуточного соединения 20А (9.5 г, 27.9 ммоль) в уксусной кислоте (136.8 мл) обрабатывали с трет-бутил пиперазин-1-карбоксилатом (6.24 г, 33.49 ммоль) и 37 % водн. раствором формальдегида (2.5 мл, 33.49 ммоль). Смесь взбалтывали при 60°С в течение 2.5 ч. После выпаривания остаток ресуспендировали в этилацетате, и смесь промывали два раза с нас. водн. раствором гидрокарбоната натрия, высушивали над сульфатом натрия и выпаривали. Остаток растирали в порошок в кипящем этаноле (100 мл). Твердое вещество отфильтровывали и промывали с этанолом и диэтиловым эфиром с получением 9.70 г (58 % от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 2): Ву = 0.88 мин; МС (ΕδΙροδ): т/ζ = 539 (М+Н)+ ¹Н-ЯМР (400 МГц, СОС1₃): δ = 7.94 (δ, 1Н), 7.13-7.35 (т, 2Н, наложение с СНС13 пиком), 6.67 (δ, 1Н), 5.86 (шир. δ, 1Н), 5.54 (шир. δ, 2Н), 4.68 (δ, 2Н), 4.08 (δ, 2Н), 4.00 (δ, 3Н), 3.45 (шир. δ, 4Н), 2.59-2.48 (т, 7Н), 1.45 (δ, 9Н) част. на млн.

Промежуточное соединение 24А. трет-Бутил 4-({4-амино-5-(7-метокси-5-метил-1-бензотиофен-2ил)-6-[(2-метокси-2-оксоэтокси)метил] пирроло [2,1-ί][1,2,4]триазин-7 -ил} метил)пиперазин-1 -карбоксилат

Раствор промежуточного соединения 23А (300 мг, 556 мкмоль) в дихлорметане (12 мл) обрабатывали тионилхлоридом (81 мкл, 1.11 ммоль) и взбалтывали при КТ в течение 15 мин. После выпаривания, остаток растворяли в свежедистиллированном метилгликоляте (2.5 мл) и обрабатывали с помощью ДИПЭМ (485 мкл, 2.78 ммоль). Смесь взбалтывали при 70°С в течение 2 ч, затем выпаривали снова, и избыток метилгликолят удаляли дистилляцией. Очищение остатка колоночной хроматографией на силикагеле (циклогексан/этилацетат 1:5) обеспечило 136 мг (33 % от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХМС (способ 2): Ву = 0.88 мин; МС (ΕδΙροδ): т/ζ = 611 (М+Н)+ ¹Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-й₆): δ = 7.99 (δ, 1Н), 7.39 (δ, 1Н), 7.31 (δ, 1Н), 6.85 (δ, 1Н), 4.58 (δ, 2Н), 4.11 (δ, 2Н), 3.96 (δ, 3Н), 3.93 (δ, 2Н), 3.57 (δ, 3Н), 3.30-3.24 (т, 4Н), 2.45-2.38 (т, 7Н), 1.39 (δ, 9Н) част. на млн.

Промежуточное соединение 25А. трет-Бутил 4-{[4-амино-6-формил-5-(7-метокси-5-метил-1бензотиофен-2-ил)пирроло [2,1-ί][1,2,4]триазин-7 -ил] метил}пиперазин-1 -карбоксилат

Раствор промежуточного соединения 23А (300 мг, 556 мкмоль) в дихлорметане (4.2 мл) обрабатывали периодинаном Десса-Мартина (1,1,1-триацетокси-1,1-дигидро-1,2-бензйодоксол-3(1Н)-он; 307 мг,

- 34 029556

724 мкмоль) и взбалтывали при КТ в течение 2 ч. Реакционную смесь гасили нас. водн. раствором гидрокарбоната натрия и нас. водн. раствором тиосульфата натрия (1:1) и взбалтывали при КТ в течение 30 мин. Водный слой экстрагировали три раза посредством дихлорметана, и объединенные органические слои высушивали над сульфатом магния и выпаривали. Очищение колоночной хроматографией на силикагеле (циклогексан/этилацетат 1:1^100% этилацетат) обеспечило 273 мг (87% от теор.) соединения, указанного в заголовке.

ЖХ-МС (способ 2): Ву = 0.87 мин; МС (Ε8Σροδ): т/ζ - 537 (М+Н)+ ¹Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-й₆): δ = 10.02 (з, 1Н), 8.44-8.18 (шир. δ, 1Н), 8.08 (δ, 1Н), 7.51 (δ, 1Н), 7.32 (δ, 1Н), 6.88 (δ, 1Н), 6.01-5.74 (шир. δ, 1Н), 4.16 (δ, 2Н), 3.96 (δ, 3Н), 3.30-3.22 (т, 4Н), 2.48-2.40 (т, 7Н), 1.38 (δ, 9Н) част. на млн.

Промежуточное соединение 26А. 4-Амино-5-(7-метокси-5-метил-1-бензотиофен-2-ил)-7-(пиперазин-1 -илметил)пирроло[2,1-£][1,2,4]триазин-6-карбальдегид бис(формамид)

Раствор промежуточного соединения 23А (80 мг, 148 мкмоль) в ТГФ (3.9 мл) обрабатывали периодинаном Десса-Мартина (1,1,1-триацетокси-1,1-дигидро-1,2-бензйодоксол-3(1Н)-он; 94 мг, 222 мкмоль) и взбалтывали при КТ в течение 30 мин. Реакционную смесь гасили с нас. водн. раствором гидрокарбоната натрия и нас. водн. раствором тиосульфата натрия (1:1). Водный слой экстрагировали три раза этилацетатом, и объединенные органические слои высушивали над сульфатом магния и выпаривали. Остаток растворяли в 4 М растворе хлорида водорода в 1,4-диоксане (4 мл) и взбалтывали при КТ в течение 1 ч. После выпаривания, остаток очищали препаративной ОФ ВЭЖХ (Ксргозй С18, градиент 10-95 % ацетонитрил/0.1% водн. муравьиная кислота) с получением 34 мг (52 % от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 2): Ву = 0.78 мин; МС (Ε8Σροδ): т/ζ = 437 (М+Н)+ ¹Н-ЯМР (400 МГц, ДМСОй₆): δ = 10.02 (δ, 1Н), 8.29 (шир. δ, 2Н), 8.09 (δ, 1Н), 7.50 (δ, 1Н), 7.33 (δ, 1Н), 6.88 (δ, 1Н), 4.17 (δ, 2Н), 3.96 (δ, 3Н), 2.90-2.81 (т, 4Н), 2.63-2.56 (т, 4Н), 2.46 (δ, 3Н) част. на млн.

Промежуточное соединение 27А. трет-Бутил 4-({4-амино-5-(7-метокси-5-метил-1-бензотиофен-2ил)-6-[(3-оксопиперазин-1 -ил)метил] пирроло[2,1-£][1,2,4]триазин-7-ил} метил)пиперазин-1 -карбоксилат

Раствор промежуточного соединения 25А (185 мг, 344 мкмоль) в ТГФ (4.6 мл) обрабатывали посредством 2-оксопиперазина (344 мг, 3.4 ммоль), натрия триацетоксиборогидрид (365 мг, 1.7 ммоль) и уксусной кислоты (39 мкл, 689 мкмоль). Полученную смесь взбалтывали при КТ в течение 2 ч, затем адсорбировали на кизельгуре и очищали колоночной хроматографией на силикагеле (дихлорметан дихлорметан/метанол 100:8) с получением 221 мг (колич.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 4): Ву = 0.77 мин; МС (Ε8Σροδ): т/ζ = 621 (М+Н)+.

Промежуточное соединение 28А. Ν-Этилэтанаминия 4-амино-7-{[4-(трет-бутоксикарбонил) пиперазин-1-ил]карбонил} -5-(7-метокси-5-метил-1-бензотиофен-2-ил)пирроло[2,1 -£][1,2,4]трназнн-6-карбоксилат

Раствор промежуточного соединения 25А (70 мг, 130 мкмоль) в ТГФ/вода (10:1, 4.85 мл) обрабатывали с 2 М раствором 2-метил-2-бутена в ТГФ (521 мкл, 1.04 ммоль) и дигидрофосфата натрия (107 мг, 783 мкмоль) и взбалтывали при КТ в течение 5 мин. Добавляли хлорит натрия (70 мг, 783 мкмоль), и полученную смесь взбалтывали при КТ в течение ночи. После разбавления с водой, водную фазу экстраги- 35 029556

ровали три раза этилацетатом. Объединенные органические слои высушивали над сульфатом натрия и выпаривали, и остаток очищали препаративной ОФ ВЭЖХ (ХВпбде С18, градиент 5-50 % ацетонитрил/вода + 0.05 % диэтиламин) с получением 18 мг (21% от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 1): Ву = 1.14 мин; МС (Е81рок): т/ζ = 567 (М+Н)+ ¹Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆): среди проч. δ = 8.26-7.89 (шир. 8, 1Н), 7.94 (к, 1Н), 7.33 (к, 1Н), 7.28 (к, 1Н), 6.83 (к, 1Н), 5.64-5.33 (шир. к, 1Н), 3.95 (к, 3Н), 2.80 (ς, 4Н), 2.45 (к, 3Н), 1.40 (к, 9Н), 1.09 (!, 6Н) част. на млн.

Промежуточное соединение 29А. трет-Бутил 4-{[4-амино-6-(азидометил)-5-(7-метокси-5-метил-1бензотиофен-2-ил)пирроло[2,1 -£][1,2,4]триазин-7-ил]метил}пиперазин-1-карбоксилат

Раствор промежуточного соединения 23А (150 мг, 0.278 ммоль) в дихлорметане (7.5 мл) обрабатывали тионилхлоридом (40 мкл, 0.56 ммоль) и взбалтывали при КТ в течение 15 мин. После выпаривания, остаток растворяли в ДМФ (6 мл) и обрабатывали с азидом натрия (362 мг, 5.57 ммоль) и йодидом натрия (208 мг, 1.39 ммоль). Смесь нагревали до 80°С в течение 1 ч, затем разбавляли с водой и экстрагировали три раза этилацетатом. Объединенные органические слои промывали с помощью воды и посредством нас. водн. раствора хлорида натрия, высушивали над сульфатом магния и выпаривали. Очищение колоночной хроматографией на силикагеле (циклогексан/этилацетат 98:2^100% этилацетат) обеспечило 95.8 мг (57% от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 4): Ву = 0.99 мин; МС (Е81рок): т/ζ = 564 (М+Н)+ ¹Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆): δ = 8.20-7.80 (шир. к, 1Н), 8.01 (к, 1Н), 7.39 (к, 1Н), 7.33 (к, 1Н), 6.86 (к, 1Н), 6.05-5.55 (шир. к, 1Н), 4.50 (к, 2Н), 3.96 (к, 3Н), 3.94 (к, 2Н), 3.32-3.25 (т, 4Н), 2.45 (к, 3Н), 2.43-2.36 (т, 4Н), 1.39 (к, 9Н) част. на млн.

Промежуточное соединение 30А. трет-Бутил 4-{[6-(ацетамидометил)-4-амино-5-(7-метокси-5метил-1 -бензотиофен-2-ил)пирроло [2,1-ί][1,2,4]триазин-7-ил] метил}пиперазин-1 -карбоксилат

Смесь промежуточного соединения 29А (320 мг, 567 мкмоль), 10 % Рб/С (320 мг) и уксусный ангидрид (106 мкл, 1.13 ммоль) в метаноле (32 мл) взбалтывали в течение 90 мин. под 1 атм водорода при КТ. Смесь затем отфильтровывали через кизельгур, и фильтрат выпаривали. Очищение колоночной хроматографией на силикагеле (циклогексан/этилацетат 1:1 100 % этилацетат) обеспечило 440 мг (колич.)

соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 2): Ву = 0.91 мин; МС (Е81рок): т/ζ = 580 (М+Н)' 'Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆): δ = 8.02-7.97 (т, 2Н), 7.38 (к, 1Н), 7.31 (к, 1Н), 6.85 (к, 1Н), 4.27 (шир. б, 2Н), 3.95 (к, 3Н), 3.89 (к, 2Н), 3.31-3.24 (т, 4Н), 2.45 (к, 3Н), 2.43-2.36 (т, 4Н), 1.74 (к, 3Н), 1.39 (к, 9Н) част. на млн.

Промежуточное соединение 31А. 7-[(4-Ацетилпиперазин-1-ил)метил]-4-амино-5-(7-метокси-5метил-1 -бензотиофен-2-ил)пирроло [2,1-ί][1,2,4]триазин-6-карбальдегид

Раствор из примера 55 (678 мг, чистота 89%, 1.26 ммоль) в дихлорметане (4 мл) содержащий молекулярные сита (4А) обрабатывали периодинаном Десса-Мартина (1,1,1-триацетокси-1,1-дигидро-1,2бензйодоксол-3(1Н)-он; 623 мг, 1.47 ммоль) и взбалтывали при КТ в течение 5 мин. Реакционную смесь

- 36 029556

затем адсорбировали на диатомовой земле и очищали колоночной хроматографией на силикагеле (градиент из 30-100 % этилацетат/циклогексан, затем 0-10 % метанол/дихлорметан) с получением 449 мг (49% от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 4): Ву = 0.70 мин; МС (ΕδΙροδ): т/ζ = 479 (М+Н)+.

Промежуточное соединение 32А. 4-{[4-Амино-6-(азидометил)-5-(7-метокси-5-метил-1-бензотиофен-2 -ил)пирроло [2,1-ί][1,2,4]триазин-7-ил] метил } пиперазин-2-он

Раствор из примера 13 (59 мг, 130 мкмоль) в дихлорметане (3.5 мл) обрабатывали тионилхлоридом (19 мкл, 261 мкмоль) и взбалтывали при КТ в течение 15 мин. После выпаривания, остаток растворяли в ДМФ (2.8 мл) и обрабатывали с йодидом натрия (97 мг, 652 мкмоль) и азидом натрия (169 мг, 2.6 ммоль). Смесь взбалтывали при 80°С в течение 1 ч. После разбавления с нас. водн. раствором хлорида натрия, водную фазу экстрагировали четыре раза этилацетатом, и объединенные органические слои высушивали над сульфатом магния и выпаривали. Очищение колоночной хроматографией на силикагеле (дихлорметан/метанол 98:2 90:10) обеспечило 35 мг (56 % от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС

(способ 5): Ву = 2.04 мин; МС (ΕδΙροδ): т/ζ = 478 (М+Н)+ 'Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆): δ = 8.02 (δ, 1Н), 7.75 (шир. δ, 1Н), 7.41 (δ, 1Н), 7.33 (δ, 1Н), 6.86 (δ, 1Н), 4.51 (δ, 2Н), 4.01 (δ, 2Н), 3.96 (δ, 3Н), 3.16-3.08 (т, 2Н), 3.04-2.98 (т, 2Н), 2.65-2.58 (т, 2Н), 2.45 (δ, 3Н) част. на млн.

Промежуточное соединение 33А. 4-Амино-5-(7-метокси-5-метил-1-бензотиофен-2-ил)-7-(морфолин-4-илметил)пирроло [2,1 -1][1,2,4]триазин-6-карбальдегид

Раствор из примера 50 (710 мг, чистота 70%, 1.13 ммоль) в дихлорметане (5 мл) содержащий молекулярные сита (4А) обрабатывали периодинаном Десса-Мартина (1,1,1-триацетокси-1,1-дигидро-1,2бензйодоксол-3(1Н)-он; 623 мг, 1.47 ммоль) и взбалтывали при КТ в течение 5 мин. Реакционную смесь затем адсорбировали на диатомовой земле и очищали колоночной хроматографией на силикагеле (градиент из 30-100 % этилацетат/циклогексан) с получением 386 мг (72 % от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 2): Ву = 0.76 мин; МС (ΕδΙροδ): т/ζ = 438 (М+Н)+.

Промежуточное соединение 34А. (4-Амино-7-бромпирроло[2,1-1][1,2,4]триазин-6-ил)метанол

Вг

Раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (87 мг, 0.305 ммоль) в ТГФ (1 мл) добавляли по каплям к раствору промежуточного соединения 8А (100 мг, 0.609 ммоль) в ТГФ (4 мл) и метанол (2 мл) при -78°С. Смесь взбалтывали при -78°С в течение 16 ч, затем разбавляли с водой и экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические слои промывали с помощью нас. водн. Раствора хлорида натрия, высушивали над сульфатом магния и выпаривали. Очищение колоночной хроматографией на силикагеле (дихлорметан/метанол 20:1 10:1) обеспечило 55 мг (32% от теор.) соединения, указанного в заголовке.

ЖХ-МС (способ 3): Ву = 1.71 мин; МС (ΕδΙροδ): т/ζ = 243/245 (М+Н)+ 'Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆): δ = 1.14-1.94 (т, 3Н), 7.04 (δ, 1Н), 5.12 (ί, 1Н), 4.48 (б, 2Н) част. на млн.

Промежуточное соединение 35А. 7-Бром-6-({[трет-бутил(диметил)силил]окси}метил)пирроло[2,1£][1,2,4]триазин-4-амин

Вг

Раствор промежуточного соединения 34А (885 мг, 3.64 ммоль) в ДМФ (11 мл) обрабатывали хлори- 37 029556

дом трет-бутилдиметилсилила (823 мг, 5.46 ммоль) и имидазолом (743 мг, 10.92 ммоль) и взбалтывали при КТ в течение 2 ч. Реакционную смесь объединяли с реакционной смесью 100 мг пробного образца, разбавляли с водой и экстрагировали два раза этилацетатом. Объединенные органические фазы промывали с помощью воды и нас. водн. натрия хлорид раствор, высушивали над сульфатом магния и выпаривали. Очищение колоночной хроматографией на силикагеле (циклогексан/этилацетат 2:1 100 % этилацетат) обеспечило 1.36 г (93 % от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 2): Ву = 1.13 мин; МС (ЕЗЩоз): т/ζ = 357/359 (М+Н)+ 'Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆): δ = 7.98-7.68 (т, 3Н), 7.04 (δ, 1Н), 4.68 (δ, 2Н), 0.89 (δ, 9Н), 0.09 (δ, 6Н) част. на млн.

Промежуточное соединение 36А. 4-Амино-6-({[трет-бутил(диметил)силил]окси}метил)пирроло [2,1-ί][1,2,4]триазин-7-карбонитрил

Под аргоном, смесь промежуточного соединения 35А (880 мг, 2.46 ммоль), [1,1'-бис(дифенил фосфино)ферроцен]дихлорпалладий(П)-дихлорметан комплекс [РбС1₂(брр£) х ДХМ] (120 мг, 0.148 ммоль), бис(дибензилиденацетон)палладий [Рб(бЬа)2] (135 мг, 0.148 ммоль), цианид цинка (578 мг, 4.92 ммоль), цинковую пыль (64 мг, 0.985 ммоль) и ацетат цинка (180 мг, 0.985 ммоль) в дегазированном ДМФ/вода (100:1, 9.2 мл) взбалтывали при 160°С в течение ночи. Реакционную смесь затем объединяли с реакционной смесью из 100 мг пробного образца, и объединенные смеси адсорбировали на кизельгуре, отфильтровывали над другим слоем кизельгура и элюировали с трет-бутилметиловым эфиром. Фильтрат промывали нас. водн. раствором гидрокарбоната натрия, и водный слой снова экстрагировали три раза с третбутилметиловым эфиром. Объединенные органические фазы высушивали над сульфатом натрия и выпаривали. Очищение колоночной хроматографией на силикагеле (циклогексан/этилацетат 1:1) обеспечило 453 мг (44 % от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 2): Ву = 1.09 мин; МС (ЕЗК рок): т/ζ = 304 (М+Н)+ ’Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆): δ = 8.22-8.35 (т, 2Н), 8.06 (δ, 1Н), 6.95 (δ, 1Н), 4.83 (δ, 2Н), 0.91 (δ, 9Н), 0.11 (δ, 6Н) част, на млн.

Промежуточное соединение 37А. 4-Амино-5-бром-6-({[трет-бутил(диметил)силил]окси}метил) пирроло [2,1-ί][1,2,4]триазин-7-карбонитрил

ΟΝ

Раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (621 мг, 2.17 ммоль) в ТГФ (20 мл) добавляли по каплям к раствору промежуточного соединения 36А (1.1 г, 3.62 ммоль) в ТГФ (80 мл) при -50°С. Полученную смесь медленно нагревали до КТ, взбалтывали в течение 2 ч. и затем гасили с 10% водн. раствором тиосульфата натрия и нас. водн. раствором гидрокарбоната натрия. Водную фазу экстрагировали три раза этилацетатом. Твердое вещество, осажденное из раствора этилацетата, отфильтровывали и промывали этилацетатом, с получением 508 мг (100% чистота, 36% от теор.) в качестве первого выхода соединения, указанного в заголовке. Остальной фильтрат высушивали над сульфатом натрия и выпаривали. Остаток осаждали из ДМСО и промывали посредством ДМСО и этилацетата с получением дополнительных 498 мг (85% чистота, 26% от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 5): Ву = 2.70 мин; МС (Е5Щок): т/ζ = 382/384 (М+Н)+ ’Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆): δ = 8.10 (δ, 1Н), 4.76 (δ, 2Н), 0.90 (δ, 9Н), 0.12 (δ, 6Н) част, на млн.

Промежуточное соединение 38А. 4-Амино-6-({[трет-бутил(диметил)силил]окси}метил)-5-(7-метокси-5-метил-1-бензотиофен-2-ил)пирроло[2,1-Е][1,2,4]триазин-7-карбонитрил

Под аргоном раствор промежуточного соединения 37А (459 мг, 1.29 ммоль) в дегазированном ТГФ (14.8 мл) добавляли к (2'-аминобифенил-2-ил)(хлор)палладий-дициклогексил(2',4',6'-триизопропилбифенил-2-ил)фосфину (1:1; 152 мг, 0.19 ммоль; см. 8. Ь. ВисЬтеаИ е1 а1., 1. Ат. СЬет. Зое. 132 (40), 14073-14075 (2010)) и промежуточному соединению 6А (647 мг, 1.94 ммоль). Дегазированный 0.5 М водн. раствор фосфата калия (5.1 мл) добавляли по каплям, и полученную смесь взбалтывали при 60°С в течение 2 ч. Реакционную смесь затем объединяли с реакционными смесями предыдущих 70, 90 и 500 мг пробных образцов и выпаривали. Очищение остатка колоночной хроматографией на силикагеле (цикло- 38 029556

гексан/этилацетат 3:1 100% этилацетат) обеспечило 1.0 г (58% от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 2): Ву = 1.49 мин; МС (ΕδΙροδ): т/ζ - 480 (М+н)+ ¹Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-4₆): δ = 8.57-8.35 (шир. δ, 1Н), 8.18 (δ, 1Н), 7.41 (δ, 1Н), 7.30 (δ, 1Н), 6.86 (δ, 1Н), 6.28-6.03 (шир. δ, 1Н), 4.74 (δ, 2Н), 3.95 (δ, 3Н), 2.44 (δ, 3Н), 0.83 (δ, 9Н), 0.00 (δ, 6Н) част, на млн.

Промежуточное соединение 39А. 4-Амино-6-формил-5-(7-метокси-5-метил-1-бензотиофен-2-ил)

Раствор из примера 68 (250 мг, 0.684 ммоль) в дихлорметане (5 мл) обрабатывали периодинаном Десса-Мартина (1,1,1 -триацетокси-1,1 -дигидро-1,2-бензйодоксол-3(1Н)-он; 377 мг, 0.889 ммоль) и взбалтывали при КТ в течение 1 ч. Реакционную смесь объединяли с реакционной смесью из 50 мг пробного образца, гасили с нас. водн. раствором гидрокарбоната натрия и нас. водн. раствором тиосульфата натрия (1:1) и взбалтывали при КТ в течение 30 мин. Водную фазу экстрагировали три раза этилацетатом, и объединенные органические фазы высушивали над сульфатом натрия и выпаривали. Очищение колоночной хроматографией на силикагеле (циклогексан/25% этилацетат 100% этилацетат) обеспечило 102 мг (24 % от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 2): Ву = 1.02 мин; МС (ΕδΙροδ): т/ζ - 364 (М+Н)+ ¹Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-άβ): δ = 9.86 (δ, 1Н), 8.78 (шир. δ, 1Н), 8.30 (δ, 1Н), 7.62 (δ, 1Н), 7.36 (δ, 1Н), 6.91 (δ, 1Н), 6.51 (шир. δ, 1Н), 3.97 (δ, 3Н), 2.46 (δ, 3Н) част. на млн.

Промежуточное соединение 40А. 4-Амино-6-(азидометил)-5-(7-метокси-5-метил-1-бензотиофен-2ил)пирроло [2,1-ί][1,2,4]триазин-7-карбонитрил

Раствор из примера 68 (100 мг, 273 мкмоль) в дихлорметане (5 мл) обрабатывали тионилхлоридом (39 мкл, 547 мкмоль) и взбалтывали при КТ в течение 15 мин. После выпаривания, остаток растворяли в ДМФ (6 мл) и обрабатывали посредством йодида натрия (205 мг, 1.36 ммоль) и азидом натрия (355 мг, 5.47 ммоль). Смесь взбалтывали при 80°С в течение ночи, затем разбавляли с водой и экстрагировали три раза этилацетатом. Объединенные органические слои промывали с помощью воды, после чего следовал нас. водн. раствор хлорида натрия, высушивали над сульфатом натрия и выпаривали с получением 91 мг сырого продукта, который использовали в следующей стадии без дополнительной очистки. ЖХ-МС (способ 2): Ву = 1.13 мин; МС (ΕδΙροδ): т/ζ = 391 (М+Н)+ ¹Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-4₆): δ = 8.65-8.45 (шир. δ, 1Н), 8.23 (δ, 1Н), 7.46 (δ, 1Н), 7.34 (δ, 1Н), 6.88 (δ, 1Н), 6.41-6.10 (шир. δ, 1Н), 4.57 (δ, 2Н), 3.96 (δ, 3Н), 2.46 (δ, 3Н) част. на млн.

Промежуточное соединение 41А. 5,7-Дибром-6-({[трет-бутил(диметил)силил]окси}метил)пирроло [2,1-ί][1,2,4]триазин-4-амин

Раствор промежуточного соединения 18А (2 г, 6.21 ммоль) в ДМФ (20 мл) обрабатывали с помощью имидазола (846 мг, 12.4 ммоль) и хлорида трет-бутилдиметилсилила (1.12 г, 7.45 ммоль) и взбалтывали при КТ в течение 20 ч. Реакционную смесь затем разбавляли с водой (200 мл) и взбалтывали при КТ в течение дополнительных 2 ч. Фильтрация твердого вещества обеспечила 2.46 г (88% от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 2): Ву = 1.37 мин; МС (ΕδΙροδ): т/ζ = 437 (М+Н)' ¹Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-Й6): δ = 8.49-8.05 (шир. δ, 1Н), 7.96 (δ, 1Н), 7.15-6.76 (шир. δ, 1Н), 4.64 (δ, 2Н), 0.87 (δ, 9Н), 0.09 (δ, 6Н) част. на млн.

Промежуточное соединение 42А. 2-[4-Амино-5-бром-6-({[трет-бутил(диметил)силил]окси}метил) пирроло [2,1-ί][1,2,4]триазин-7-ил] пропан-2-ол

- 39 029556

Под аргоном раствор промежуточного соединения 41А (1 г, 2.29 ммоль) в ТГФ (40 мл) охлаждали до -78°С и обрабатывали посредством 1.6М раствора метиллития в диэтиловом эфире (1.5 мл, 2.40 ммоль). После перемешивания в течение 10 мин. при -78°С добавляли 1.6 М раствор н-бутиллития в гексане (1.58 мл, 2.52 ммоль), и взбалтывание продолжали в течение 10 мин. Добавляли ацетон (1.68 мл, 22.92 ммоль), и полученную смесь медленно нагревали до КТ, и взбалтывали при КТ в течение 18 ч. Реакцию затем гасили водой, и водную фазу экстрагировали два раза этилацетатом. Объединенные органические фазы промывали с помощью нас. водн. раствора хлорида натрия, высушивали над сульфатом магния и выпаривали. Очищение флеш-хроматографией на силикагеле (циклогексан/этилацетат 2:1) обеспечило 306 мг (30 % от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 4): Ву = 1.39 мин; МС (Е8фо5): т/ζ = 415/417 (М+Н)+ ¹Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-й₆): δ = 8.23-7.85 (шир. 5, 1Н), 7.89 (5, 1Н), 7.05-6.82 (шир. 5, 1Н), 5.49 (5, 1Н), 4.88 (5, 2Н), 1.66 (5, 6Н), 0.87 (5, 9Н), 0.08 (5, 6Н) част. на млн.

Промежуточное соединение 43А. 2-[4-Амино-5-бром-6-(гидроксиметил)пирроло[2,1-1][1,2,4]триазин-7-ил] пропан-2 -ол

Раствор промежуточного соединения 42А (304 мг, 0.732 ммоль) в ТГФ (15 мл) обрабатывали посредством 1 М раствора фторида тетра-н-бутиламмония в ТГФ (768 мкл, 768 мкмоль) и взбалтывали при КТ в течение 2 мин. Реакционную смесь разбавляли с ацетонитрилом (20 мл), затем выпаривали, и остаток очищали препаративной ОФ ВЭЖХ (Керго5Й С18, градиент 10-30 % ацетонитрил/0.2% водн. ТФУ). Полученный таким образом продукт растворяли в метаноле и отфильтровывали через анионнообменный картридж (§1га1о5рЬеге5 8РЕ, РЬ-НСО₃ МР-ге5ш). Картридж элюировали посредством метанола, и фильтрат выпаривали с получением 180 мг (67 % от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 2): Ву = 0.55 мин; МС (Е8Що5): т/ζ = 301/303 (М+Н)+ ’Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-й₆): δ = 8.21-7.90 (т, 1Н), 7.87 (5, 1Н), 7.09-6.60 (шир. 5, 1Н), 5.90 (шир. 5, 1Н), 5.03 (шир. 5, 1Н), 4.63 (5, 2Н), 1.66 (5, 6Н) част. на млн.

Промежуточное соединение 44А. 4-Амино-7-(2-гидроксипропан-2-ил)-5-(7-метокси-5-метил-1-бензотиофен-2-ил)пирроло[2,1-1][1,2,4]триазин-6-карбальдегид

Раствор из примера 73 (135 мг, чистота 89 %, 302 мкмоль) в дихлорметане (7 мл) обрабатывали периодинаном Десса-Мартина (1,1,1-триацетокси-1,1-дигидро-1,2-бензйодоксол-3(1Н)-он; 166 мг, 392 мкмоль) и взбалтывали при КТ в течение 70 мин. Реакционную смесь объединяли с реакционной смесью из 18 мг (45 мкмоль) пробного образца и гасили с нас. водн. раствором гидрокарбоната натрия и нас. водн. раствором тиосульфата натрия (1:1). Водную фазу экстрагировали три раза посредством дихлорметана. Объединенные органические фазы промывали с помощью нас. водн. раствора хлорида натрия, высушивали над сульфатом магния и выпаривали с получением 143 мг (чистота 77%, 92% от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 2): Ву = 1.08 мин; МС (Е8Еро5): т/ζ = 397 (М+Н)+.

Промежуточное соединение 45А. 6-({[трет-Бутил(диметил)силил]окси}метил)пирроло[2,1-1]

[1,2,4]триазин-4-амин

Раствор из 1.5 г (9.14 ммоль) промежуточного соединения 8А в 15 мл сухого ДМФ обрабатывали с 1.65 г (10.96 ммоль) хлорида трет-бутилдиметилсилила и 1.24 г (18.27 ммоль) имидазола и взбалтывали при КТ в течение ночи. Реакционную смесь выливали в 250 мл воды и взбалтывали в течение 5 мин. Полученный осадок отфильтровывали и высушивали в вакууме при 45°С. Выход: 2.28 г (90% от теор.). ЖХМС (способ 5): Ву = 2.12 мин; МС (Е8Що5): т/ζ = 279 (М+Н)+.

Промежуточное соединение 46А. 6-({[трет-Бутил(диметил)силил]окси}метил)-7-хлорпирроло[2,1-1]

[1,2,4]триазин-4-амин

- 40 029556

Раствор 2 г (7.18 ммоль) промежуточного соединения 45А в 20 мл ТГФ обрабатывали с 893 мг (6.47 ммоль) Ν-хлорсукцинимида 6 частями в течение 60 мин при -10°С. Взбалтывание продолжали в течение 15 мин. при -10°С, затем смеси давали нагреваться до КТ. При КТ добавляли еще 192 мг (1.44 ммоль) Νхлорсукцинимида, и взбалтывание продолжали в течение ночи. Около одной десятой части реакционной смеси выпаривали до сухости, и остаток очищали препаративной ОФ ВЭЖХ (Кергокй С18, градиент 1095% ацетонитрил/0.1% водн. муравьиная кислота) с получением 94 мг (4 % от теор.) соединения, указанного в заголовке. Большую часть реакционной смеси адсорбировали на силикагеле и подвергали хроматографии на силикагеле с изогексан/этилацетатом 5-66 % в качестве элюента, с получением 899 мг (40% от теор.) соединения, указанного в заголовке. Общий выход: 993 мг (44 % от теор.). ЖХ-МС (способ 5): Ву = 2.45 мин; МС (Εδφοδ): т/ζ = 313 (М+Н)+ 'Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-ф): δ = 7.69-8.04 (т, 3Н), 7.0 (₈, 1Н), 4.70 (8, 2Н), 0.88 (δ, 9Н), 0.08 (δ, 6Н) част. на млн.

Промежуточное соединение 47А. 5-Бром-6-({[трет-бутил(диметил)силил]окси}метил)-7-хлорпирроло [2,1-ί][1,2,4]триазин-4-амин

Раствор 890 мг (2.85 ммоль) промежуточного соединения 46А в 20 мл ДМФ обрабатывали с 506 мг (2.85 ммоль) Л^Л-бромсукцинимида частями в течение 1 ч при -10°С. Взбалтывание продолжали в течение 3 ч. при -10°С и затем в течение ночи при КТ. Добавляли воду (200 мл), и смесь взбалтывали в течение 2 ч. Осажденное твердое вещество отфильтровывали, промывали с помощью воды и высушивали в вакууме при 45°С. Выход: 997 мг (89% от теор.). ЖХ-МС (способ 5): Ву = 2.82 мин; МС (Εδφοδ): т/ζ = 391/ 393/395 (М+Н)+ 'Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-ф): δ = 8.32 (шир. δ, 1Н), 7.97 (δ, 1Н), 6.97 (шир. δ, 1Н), 4.66 (δ, 2Н), 0.87 (δ, 9Н), 0.09 (δ, 6Н) част. на млн.

Промежуточное соединение 48А. 6-({[трет-Бутил(диметил)силил]окси}метил)-7-хлор-5-(7-метокси5 -метил-1 -бензотиофен-2-ил)пирроло [2,1-ί][1,2,4]триазин-4-амин

Под атмосферой аргона, в колбу загружали 800 мг (2.04 ммоль) промежуточного соединения 47А, 680 мг (2.04 ммоль) промежуточного соединения 6А, 80 мг (0.1 ммоль) (2'-аминобифенил-2-ил)(хлор) палладий-дициклогексил(2',4',6'-триизопропилбифенил-2-ил)фосфина (1:1; см. δ. Ь. ВисЬтеаЫ е! а1., 1. Ат. СЬет. Зое. 132 (40), 14073-14075 (2010)) и 1.3 г (6.13 ммоль) фосфат калия. После этого добавляли 30 мл дегазированной смеси 1,4-диоксан/вода (5:1), и раствор взбалтывали при 70°С в течение 1 ч. Добавляли дополнительные 680 мг (2.04 ммоль) промежуточного соединения 6А и 32 мг (0.04 ммоль) (2'аминобифенил-2-ил)(хлор)палладий-дициклогексил(2',4',6'-триизопропилбифенил -2-ил)фосфина (1:1), и взбалтывание при 70°С продолжали в течение еще 1 ч. Эту процедуру повторяли три раза до тех пор, пока исходный материал не израсходуется (контроль с помощью ЖХ-МС). С последней порцией реагентов также добавляли 1.6 мл 5М водн. раствора гидроксида натрия, чтобы достичь значения рН в 8-9. В конце периода реакции добавляли 30 мл воды и 5М водн. муравьиной кислоты (рН 3-4) после чего выделяли масло. Часть этого масла очищали препаративной ОФ ВЭЖХ (Κ^ρτοδίΐ С18, градиент 10-95% ацетонитрил/0.1% водн. муравьиная кислота). Были получены две фракции соединения, указанного в заголовке: 103 мг твердого вещества (89 % чистота посредством ЖХ-МС, 9% от теор.), и 23 мг твердого вещества (100% чистота посредством ЖХ-МС, 2% от теор.). Остальную часть масла и надосадочную жидкость разбавляли с водой, устанавливали до рН 8-9 с нас. водн. раствором гидрокарбоната натрия и экстрагировали три раза посредством дихлорметана. Объединенные органические фазы промывали с помощью воды, высушивали и выпаривали под сниженным давлением, с получением 2.1 г масла. Это вещество очищали колоночной хроматографией на силикагеле с дихлорметаном/0-5% метанол в качестве элюента с получением дополнительных 709 мг (43% чистота посредством ЖХ-МС, 31% от теор.) соединения, указанного в заголовке. Общий выход: 42% от теор. ЖХ-МС (способ 2): Ву = 1.57 мин; МС (Εδ^οδ): т/ζ = 489 (М+Н)+ ’Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-6₆): δ = 8.08 (δ, 1Н), 7.43 (δ, 1Н), 7.32 (δ, 1Н), 6.88 (δ, 1Н), 4.66 (δ, 2Н), 3.98 (δ, 3Н), 2.47 (δ, 3Н), 0.84 (δ, 9Н), -0.03 (δ, 6Н) част. на млн.

Промежуточное соединение 49А. 4-Амино-7-хлор-5-(7-метокси-5-метил-1-бензотиофен-2-ил) пир- 41 029556

роло [2,1-ί][1,2,4]триазин-6-карбальдегид

К суспензии из 166 мг (0.44 ммоль) из примера 79 и молекулярных сит (3А) в 3 мл дихлорметана добавляли 207 мг (0.49 ммоль) периодинана Десса-Мартина (1,1,1-триацетокси-1,1-дигидро-1,2-бензйодоксол-3(1Н)-он) при 0-5°С. Смесь взбалтывали в течение 10 мин при этой температуре, затем дополнительно добавляли 56 мг (0.13 ммоль) периодинан Десса-Мартина, и взбалтывание продолжали в течение 15 мин при 5°С и 10 мин. при температуре окружающей среды. После этого смесь адсорбировали на диатомовой земле и очищали колоночной хроматографией на силикагеле с дихлорметаном/ 0-10% метанол в качестве элюента. Выход: 100 мг твердого вещества (92.7% чистый посредством ЖХ-МС, 56% от теор.). ЖХ-МС (способ 2): Ву = 1.08 мин; МС (ΕδΙροδ): т/ζ = 373 (М+Н)+ Ή-ЯМР (400 МГц, ДМСО-й₆): δ = 9.90 (δ, 1Н), 8.46 (шир. δ, 1Н), 8.15 (δ, 1Н), 7.54 (δ, 1Н), 7.34 (δ, 1Н), 6.89 (δ, 1Н), 6.07 (шир. δ, 1Н), 3.96 (δ, 3Н), 2.46 (δ, 3Н) част. на млн.

Промежуточное соединение 50А. 7-Хлор-6-(хлорметил)-5-(7-метокси-5-метил-1-бензотиофен-2-ил) пирроло [2,1 -ί] [ 1,2,4]триазин-4-амин

Указанное в заголовке соединение выделяли в виде побочного продукта при получении из примера 79 (см. ниже). Выход: 9.2 мг (10% от теор.). ЖХ-МС (способ 3): Ву = 2.98 мин; МС (ΕδΙροδ): т/ζ = 393/395 (М+Н)+.

Промежуточное соединение 51А. [2,1-ί][1,2,4]триазин-4-амин

6-({[трет-Бутил(диметил)силил]окси}метил)-7-метилпирроло

сн₃

К раствору 3 г (8.4 ммоль) промежуточного соединения 35А в 60 мл 1,4-диоксан под атмосферой аргона добавляли 171 мг (0.21 ммоль) РйС1₂(йрр£) х ДХМ и затем по каплям в течение 10 мин 16.8 мл 2М раствора диметилцинка в толуоле (вызывая повышение температуры с 22 до 31°С). Взбалтывание продолжали сначала в течение 10 мин при температуре окружающей среды, затем в течение 13 ч при 90°С. После этого к реакционной смеси при КТ добавляли воду (10 мл), и суспензию взбалтывали в течение 1 ч. Смесь выпаривали под сниженным давлением, и остаток ресуспендировали в воде и этилацетате и взбалтывали в течение еще 1 ч. Осадок отфильтровывали и отбрасывали, фазы разделяли, и водный слой экстрагировали два раза этилацетатом. Объединенные органические фазы высушивали и выпаривали с получением 2.45 г (92 % чистота посредством ЖХ-МС, 92 % от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 5): Ву = 2.18 мин; МС (ΕδΙροδ): т/ζ = 293 (М-Н)' Ή-ЯМР (400 МГц, ДМСО-ά): δ = 7.98-7.78 (т, 3Н), 7.04 (δ, 1Н), 4.68 (δ, 2Н), 0.89 (δ, 9Н), 0.09 (δ, 6Н) част. на млн.

Промежуточное соединение 52А. (4-Амино-7-метилпирроло[2,1-£][1,2,4]триазин-6-ил)метанол

Способ 1.

К раствору 100 мг (0.28 ммоль) промежуточного соединения 35А в 2 мл 1,4-диоксана под атмосферой аргона добавляли 6 мг (0.01 ммоль) РйС1₂(йрр£) х ДХМ и затем по каплям в течение 10 мин 0.56 мл 2М раствор диметилцинка в толуоле. Смесь взбалтывали при 90°С в течение ночи, затем выпаривали, и остаток обрабатывали с ацетонитрилом и 5 М водн. муравьиной кислотой. Осадок отфильтровывали, фильтрат выпаривали, и остаток ресуспендировали в ДМСО/ацетонитрил и очищали препаративной ОФ ВЭЖХ (ϋορΓΟδίΙ С18, градиент 10-95 % ацетонитрил/0.1 % водн. муравьиная кислота). Выход: 33 мг (66% от теор.). Ή-ЯМР (400 МГц, ДМСО-й₆): δ = 7.79 (δ, 1Н), 7.47 (шир. δ, 2Н), 6.80 (δ, 1Н), 4.84 (ΐ, 1Н), 4.49 (ά, 2Н), 2.36 (δ, 3Н) част. на млн.

Способ 2.

- 42 029556

Под атмосферой аргона, микроволновый реакционный сосуд загружали посредством 750 мг (3.1 ммоль) промежуточного соединения 34А, 515 мкл (3.7 ммоль) триметилбороксина, 786 мг (3.7 ммоль) фосфата калия и 73 мг (0.09 ммоль) (2'-аминобифенил-2-ил)(хлор)палладий-дициклогексил(2',4',6'триизопропилбифенил-2-ил)фосфина (1:1; см. δ. Ь. ВиеИиаМ е( а1., I. Ат. СЬет. Бое. 132 (40), 1407314075 (2010)). После этого добавляли 13 мл дегазированной смеси 1,4-диоксан/вода (5:1), сосуд запечатывали, и смесь нагревали до 140°С в течение 20 мин. в микроволновой печи (4 бар, 50 ватт). Добавляли дополнительно 50 мг (2'-аминобифенил-2-ил)(хлор)палладий-дициклогексил(2',4',6'-триизопропилбифенил-2-ил)фосфина (1:1), и смесь снова нагревали до 140°С в течение 20 мин в микроволновой печи. Добавляли еще часть 515 мкл триметилбороксина, и сосуд снова нагревали до 140°С в течение 20 мин. Последнюю процедуру повторяли более двух раз с периодами нагревания в 30 мин каждый до тех пор, пока ЖХ-МС не показала остатки только незначительных количеств исходного вещества. Смесь отфильтровывали над кизельгуром, промывали посредством 1,4-диоксана, и объединенные фильтраты выпаривали до сухости. Этот остаток объединяли с предыдущими 100 мг пробного образца и очищали препаративной ОФ ВЭЖХ (ХВпйде С18, градиент 5-42 % ацетонитрил/0.05% водн. раствор гидроксида аммония). Выход: 238 мг (38 % от теор.). ЖХ-МС (способ 5): Ву = 0.51 мин; МС (ЕБЫед): т/ζ = 177 (М-Н)^ХН-ЯМР (400 МГц, ДМСО-а₆): δ = 7.79 (з, 1Н), 7.48 (шир. з, 2Н), 6.80 (з, 1Н), 4.84 (ί, 1Н), 4.49 (ά, 2Н), 2.36 (з, 3Н) част, на млн.

Промежуточное соединение 53А. (4-Амино-5-бром-7-метилпирроло[2,1-(][1,2,4]триазин-6-ил)метанол

сн₃

Раствор 245 мг (1.38 ммоль) промежуточного соединения 52А в 8.8 мл ДМФ обрабатывали с 288 мг (1.62 ммоль) Ν-бромсукцинимида частями в течение 2 ч. при -10°С. Взбалтывание продолжали при -10°С в течение 30 мин и затем в течение 2 ч при температуре окружающей среды. Смесь выливали в 50 мл воды и экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические фазы высушивали и выпаривали. Остаток подвергали флеш-хроматографии на силикагеле с дихлорметаном/0-15% метанол в качестве элюента. Выход: 148 мг (42% от теор.). ЖХ-МС (способ 4): Ву = 0.42 мин; МС (ЕЗГроз): т/ζ = 257/259 (М+Н)+ 'Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-4₆): δ = 7.85 (з, 1Н), 6.14-8.22 (широкий, 2Н), 4.88 (ί, 1Н), 4.45 (ά, 2Н), 2.43 (з, 3Н) част, на млн.

Промежуточное соединение 54А. 4-Амино-5-(7-метокси-5-метил-1-бензотиофен-2-ил)-7-метилпирроло[2,1 -£][1,2,4]триазин-6-карбальдегид

К суспензии 175 мг (0.49 ммоль) из примера 75 и молекулярных сит (3А) в 3.5 мл дихлорметан добавляли 230 мг (0.54 ммоль) периодинана Десса-Мартина (1,1,1-триацетокси-1,1-дигидро-1,2-бензйодоксол-3(1Н)-он) при 0-5°С. Смесь взбалтывали в течение 5 мин. при этой температуре, затем еще 30 мин. при КТ. После этого смесь адсорбировали на диатомовой земле и очищали флеш-хроматографией на силикагеле с изогексан/10-100 % этилацетатом в качестве элюента. Выход: 139 мг твердого вещества (79% от теор.). ЖХ-МС (способ 5): Ву = 2.34 мин; МС (Е5Гроз): т/ζ = 353 (М+Н)+ 'Н-ЯМР (400 МГц, ДМСОά6): δ = 9.93 (з, 1Н), 8.06 (з, 1Н), 7.50 (з, 1Н), 7.33 (з, 1Н), 6.88 (з, 1Н), 3.96 (з, 3Н), 2.71 (з, 3Н), 2.46 (з, 3Н) част. на млн.

Промежуточное соединение 55А. трет-Бутил 4-[(4-амино-6-метилпирроло[2,1-(][1,2,4]триазин-7ил)метил]пиперазин-1-карбоксилат

Раствор 6-метилпирроло[2,1-(][1,2,4]триазин-4-амина (500 мг, 3.3 ммоль; получение описано в РСТ Межд. пат. заявке ^О 2007/056170) в уксусной кислоте (8 мл) обрабатывали посредством 37% водн. раствора формальдегида (328 мкл, 4.04 ммоль) и трет-бутил пиперазин-1-карбоксилата (754 мг, 4.04 ммоль). Смесь взбалтывали при 60°С в течение ночи. После выпаривания, остаток ресуспендировали в этилацетате и промывали нас. водн. раствором гидрокарбоната натрия. Водный слой экстрагировали два раза

- 43 029556

этилацетатом. Объединенные органические фазы высушивали над сульфатом магния и выпаривали с получением 1.2 г сырого продукта, который использовали в следующей стадии без дополнительной очистки. ЖХ-МС (способ 2): Ву = 0.56 мин; МС (ΕδΣρο8): т/ζ = 347 (М+Н)+ Ή-ЯМР (400 МГц, ДМСО-й₆): δ = 7.79 (8, 1Н), 7.51 (шир. 8, 2Н), 6.67 (8, 1Н), 3.76 (шир. 8, 2Н), 3.29-3.17 (т, 4Н), 2.36-2.29 (т, 4Н), 2.22 (8, 3Н), 1.37 (8, 9Н) част. на млн.

Промежуточное соединение 56А. трет-Бутил 4-[(4-амино-5-бром-6-метилпирроло[2,1-Г][1,2,4]триа-

Раствор промежуточного соединения 55А (1.17 г, 3.37 ммоль) в ТГФ (20 мл) охлаждали до -60°С и обрабатывали посредством 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (5.78 мг, 2.02 ммоль). Смесь взбалтывали в течение 4 ч. При от -60 до -20°С. После этого реакционную смесь гасили посредством 10% водн. раствора тиосульфата натрия. Большую часть ТГФ растворителя выпаривали, после чего осаждалось твердое вещество. Фильтрация и рекристаллизация из ацетона обеспечили 862 мг (59% от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 2): Ву = 0.66 мин; МС (ΕδΣρο8): т/ζ = 425/427 (М+Н)+ Ή-ЯМР (400 МГц, ДМСО-йб): δ = 8.29-7.62 (шир. 8, 1Н), 7.85 (8, 1Н), 7.17-6.44 (шир. 8, 1Н), 3.80 (8, 2Н), 3.29-3.22 (т, 4Н), 2.37-2.27 (т, 4Н), 2.16 (8, 3Н), 1.37 (8, 9Н) част. на млн.

Промежуточное соединение 57А. трет-Бутил 4-{[4-амино-5-(7-метокси-5-метил-1-бензотиофен-2ил)-6-метилпирроло[2,1-£][1,2,4]триазин-7-ил]метил}пиперазин-1-карбоксилат

Раствор промежуточного соединения 56А (100 мг, 235 мкмоль) в дегазированном 1,4-диоксане (3 мл) обрабатывали промежуточным соединением 6А (93 мг, 282 мкмоль), дициклогексил(2',6'диметоксибифенил-2-ил)фосфином (δ-ΡΗθ8; 9.6 мг, 23 мкмоль) и диацетатом палладия (2.6 мг, 11 мкмоль). Добавляли дегазированный 3 М водн. раствор фосфата калия (588 мкл), и полученную смесь взбалтывали при 60°С в течение 1 ч. Добавляли дополнительную часть промежуточного соединения 6А (78 мг, 235 мкмоль), и взбалтывание при 60°С продолжали в течение ночи. Реакционную смесь гасили с 2 М водн. раствором гидроксида натрия, и водную фазу экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические фазы промывали с помощью нас. водн. раствора хлорида натрия, высушивали над сульфатом магния и выпаривали. Очищение колоночной хроматографией на силикагеле (циклогексан/этилацетат 3:2) обеспечило 82 мг (62 % от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 2): Ву = 0.97 мин; МС (ΕδΣρο8): т/ζ = 523 (М+Н)+ Ή-ЯМР (400 МГц, ДМСО-й₆): δ = 7.94 (8, 1Н), 7.34 (8, 1Н), 7.30 (8, 1Н), 6.84 (8, 1Н), 3.95 (8, 3Н), 3.84 (8, 2Н), 3.30-3.23 (т, 4Н, наложение с водным пиком), 2.45 (8, 3Н), 2.422.33 (т, 4Н), 2.19 (8, 3Н), 1.39 (8, 9Н) част, на млн.

Промежуточное соединение 58А. трет-Бутил 4-[(4-амино-6-хлорпирроло[2,1-Г][1,2,4]триазин-7-ил) метил] пиперазин-1-карбоксилат

По процедуре получения промежуточного соединения 55А, 4 г (23.7 ммоль) 6-хлорпирроло[2,1-Г]

[1,2,4]триазин-4-амина (получение описано в РСТ Межд. пат. заявке ^О 2007/064883) подвергали реакции, чтобы получить 11.2 г соединения, указанного в заголовке в виде сырого вещества который использовали в следующей стадии без дополнительной очистки. ЖХ-МС (способ 5): Ву = 0.74 мин; МС (ΕδΣρο8): т/ζ = 367 (М+Н)+. Образец 67 мг соответствующей соли формамида, трет-бутил 4-[(4-амино-6хлорпирроло[2,1-£][1,2,4]триазин-7-ил)метил]пиперазин-1-карбоксилат формамид, выделяли после препаративной ОФ ВЭЖХ (Керго8Й С18, градиент 10-95% ацетонитрил/0.1% водн. муравьиная кислота) 100 мг сырого вещества, полученного выше. Ή-ЯМР (400 МГц, ДМСО-й₆): среди проч. δ = 8.14 (8, 1Н), 7.91 (8, 1Н), 7.83 (шир. 8, 2Н), 6.95 (8, 1Н), 3.80 (8, 2Н), 3.17 (8, 2Н), 2.38 (шир. 8, 4Н), 1.37 (8, 9Н) част. на млн.

Промежуточное соединение 59А. трет-Бутил 4-[(4-амино-5-бром-6-хлорпирроло[2,1-Г][1,2,4]триазин-7-ил)метил]пиперазин-1-карбоксилат

- 44 029556

По процедуре получения промежуточного соединения 56А, 11 г (30 ммоль) промежуточного соединения 58А подвергали реакции, чтобы получить 1.17 г (9% от теор.) соединения, указанного в заголовке после флеш-хроматографии на силикагеле (дихлорметан/метанол 10:1) и последующей препаративной ОФ ВЭЖХ (Оа180 С18, градиент 40-65% ацетонитрил/вода). ЖХ-МС (способ 2): Ву = 0.74 мин; МС (Ε8Σроз): т/ζ = 445/447/449 (М+Н)+ ¹Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-6₆): среди проч. δ = 7.96 (5, 1Н), 3.84 (5, 2Н), 2.37 (шир. з, 4Н), 1.37 (з, 9Н) част. на млн.

Промежуточное соединение 60А. трет-Бутил 4-{[4-амино-6-хлор-5-(7-метокси-5-метил-1-бензотиофен-2-ил)пирроло [2,1-ί][1,2,4]триазин-7-ил] метил}пиперазин-1 -карбоксилат

Под атмосферой аргона в колбу загружали 140 мг (0.31 ммоль) промежуточного соединения 59А, 102 мг (0.46 ммоль) промежуточного соединения 5А, 16 мг (0.02 ммоль) Р6С1₂(6рр£) х ДХМ и 122 мг (1.15 ммоль) карбоната натрия. После добавления 3 мл дегазированной 1,2-диметоксиэтан/вода (3:1), суспензию взбалтывали при 60°С в течение 2.5 ч. Добавляли дополнительные части промежуточного соединения 5А (50 мг, 0.23 ммоль) и Р6С1₂(6рр£) х ДХМ (8 мг, 0.01 ммоль), и взбалтывание продолжали при 40°С в течение 2.5 ч. Последнюю процедуру повторяли еще раз до тех пор, пока исходный материал не израсходуется. После этого, реакционную смесь частично выпаривали под сниженным давлением, добавляли воду, и смесь экстрагировали с дихлорметаном. Объединенные органические фазы промывали с помощью воды и нас. водн. натрия хлорид раствор, высушивали и выпаривали под сниженным давлением. Остаток (322 мг) очищали препаративной ОФ ВЭЖХ (Кергозй С18, градиент 10-95% ацетонитрил/0.1% водн. муравьиная кислота) с получением 49 мг смеси соединения, указанного в заголовке и производного со снятой защитой Вос, 6-хлор-5-(7-метокси-5-метил-1-бензотиофен-2-ил)-7-(пиперазин-1илметил)пирроло[2,1-£][1,2,4]триазин-4-амина. Эту смесь использовали как таковую в следующей стадии реакции (см. пример 85). ЖХ-МС (способ 2): Ву = 1.00 мин; МС (ЕЗЩоз): т/ζ = 543 (М+Н)+, и Ву = 0.81 мин; МС (ЕЗЩоз): т/ζ = 443 (М+Н)+.

Промежуточное соединение 61А. 4-{[4-Амино-6-(метоксиметил)пирроло[2,1-£][1,2,4]триазин-7-ил] метил} пиперазин-2-он

Раствор промежуточного соединения 10А (5 г, 28.1 ммоль) и пиперазин-2-он (3.09 г, 30.9 ммоль) в уксусной кислоте (85 мл) обрабатывали посредством 37% водн. раствора формальдегида (3.15 мл, 42.1 ммоль) и взбалтывали при 60°С в течение 16 ч. Летучие компоненты выпаривали под сниженным давлением, и остаток растворяли в метаноле и адсорбировали на диатомовой земле. Очищение колоночной хроматографией на силикагеле (5-10 % метанол/дихлорметан) обеспечило 3.91 г (46% от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 3): Ву = 1.68 мин; МС (ЕЗЩоз): т/ζ = 291 (М+Н)+.

Промежуточное соединение 62А. 4-{[4-Амино-5-бром-6-(метоксиметил)пирроло[2,1-Г][1,2,4]триазин-7-ил] метил} пиперазин-2-он

Раствор промежуточного соединения 61А (3.9 г, 13.4 ммоль) в ДМФ (50 мл) охлаждали до 0°С и обрабатывали посредством раствора Ν-бромсукцинимида (2.63 г, 14.8 ммоль) в ДМФ (6 мл). Смесь взбалтывали при 0°С в течение 1 ч. После этого, растворитель выпаривали, и остаток растворяли в метаноле и адсорбировали на диатомовой земле. Очищение колоночной хроматографией на силикагеле (5-10

- 45 029556

% метанол/дихлорметан) обеспечило 1.99 г (39% от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 3): Ву = 1.86 мин; МС (ΕδΣροδί): т/ζ - 369/371 (М+Н)+ ’Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆): δ = 7.96-8.23 (шир. 5, 1Н), 7.90 (5, 1Н), 7.71 (5, 1Н), 6.72-6.98 (шир. 5, 1Н), 4.45 (5, 2Н), 3.91 (5, 2Н), 3.27 (5, 3Н), 3.07 (шир. 5, 2Н), 2.96 (5, 2Н), 2.56 (шир. 5, 2Н) част, на млн.

Промежуточное соединение 63А. 7-(Хлорметил)-6-(этоксиметил)-5-(7-метокси-5-метил-1-бензотиофен-2-ил)пирроло[2,1-Г][1,2,4]триазин-4-амин гидрохлорид

Суспензию из примера 86 (1 г, 2.51 ммоль) в толуоле (60 мл) обрабатывали по каплям тионилхлоридом (1.83 мл, 25.1 ммоль), и смесь взбалтывали при КТ в течение ночи. Летучие компоненты выпаривали под сниженным давлением. Остаток выпаривали совместно с толуолом под сниженным давлением три раза с получением 0.85 г (74% от теор.) соединения, указанного в заголовке, которое сразу же применяли в следующей стадии без дополнительной очистки.

Промежуточное соединение 64А. 4-Амино-6-(этоксиметил)-5-(7-метокси-5-метил-1-бензотиофен-2ил)пирроло[2,1-Г][1,2,4]триазин-7-карбоновая кислота

Суспензию промежуточного соединения 17А (5 г, 12.6 ммоль) в ТГФ/вода (10:1, 220 мл) обрабатывали с помощью 2 М раствора 2-метил-2-бутена в ТГФ (31.5 мл, 63.1 ммоль) и дигидрофосфата натрия (6.96 г, 50.4 ммоль). Смесь взбалтывали при КТ в течение 5 мин. После этого добавляли хлорит натрия (4.56 г, 50.44 ммоль), и полученную смесь взбалтывали при КТ в течение 20 ч. Суспензию отфильтровывали, и полученное твердое вещество промывали с помощью воды с получением 4.24 г (74 % от теор.) соединения, указанного в заголовке который использовали в следующей стадии без дополнительной очистки. ЖХ-МС (способ 4): Ву = 1.06 мин; МС ^8^05): т/ζ = 413 (М+Н)+ 'И-ЯМР (400 МГц, ДМСОб₆): δ = 13.22 (шир. 5, 1Н), 8.53-8.00 (шир. 5, 1Н), 8.14 (5, 1Н), 7.41 (5, 1Н), 7.33 (5, 1Н), 6.86 (5, 1Н), 6.285.65 (шир. 5, 1Н), 4.61 (5, 2Н), 3.96 (5, 3Н), 3.36 (ц, 2Н), 2.46 (5, 3Н), 1.01 (ΐ, 3Н) част. на млн.

Промежуточное соединение 65А. 5,7-Диметокси-1-бензотиофен

К раствору 1-бензотиофен-5,7-диола (1.16 г, 6.98 ммоль) в ацетоне (20 мл) под аргоном добавляли карбонат калия (2.89 г, 20.9 ммоль) и йодметан (912 мкл, 14.6 ммоль). Полученную смесь взбалтывали при кипячении в колбе с обратным холодильником в течение 18 ч. После охлаждения до КТ, смесь обрабатывали с 7М раствором аммиака в метаноле (10 мл) в течение 30 мин. и затем адсорбировали на силикагеле. Очищение колоночной хроматографией над силикагелем (циклогексан/этилацетат 40:1) обеспечило 0.52 г (32 % от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 4): Ву = 1.02 мин; МС ^8^05): т/ζ - 195 (М+Н)+ 'И-ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆): δ = 7.69 (б, 1Н), 7.35 (б, 1Н), 7.02 (б, 1Н), 6.57 (б, 1Н), 3.92 (5, 3Н), 3.81 (5, 3Н) част. на млн.

Промежуточное соединение 66А. (5,7-Диметокси-1-бензотиофен-2-ил)бороновая кислота

но

Под атмосферой аргона, 1.6 М раствор н-бутиллития в гексане (1.84 мл, 2.95 ммоль) добавляли по каплям к раствору промежуточного соединения 65А (520 мг, 2.68 ммоль) в сухом ТГФ (5 мл) при -70°С. Через 1 ч при -70°С добавляли триизопропил борат (742 мкл, 3.21 ммоль), и смесь взбалтывали в течение 16 ч при медленном нагревании до КТ. Добавляли дихлорметан и нас. водн. раствор хлорида аммония, и значение рН устанавливали до 6 путем добавления 1М хлористо-водородной кислоты. Органическую фазу отделяли, и водную фазу экстрагировали с дихлорметаном. Объединенные органические фазы высушивали сульфатом магния, отфильтровывали и выпаривали. Полученный остаток очищали колоночной

- 46 029556

хроматографией над силикагелем (сначала элюирование с дихлорметаном/метанолом 40:1, затем метанолом, в заключение метанол/4 М хлоридом водорода в 1,4-диоксане 10:1) с получением 631 мг (71% чистота, 71% от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 4): Ву = 0.83 мин; МС (Е81ров): т/ζ = 239 (М+Н)+.

Промежуточное соединение 67А. 4-Амино-6-(хлорметил)пирроло[2,1-£][1,2,4]триазин-7-карбальдегид

Промежуточное соединение 67А выделяли как побочный продукт синтеза промежуточного соединения 11А после колоночной хроматографии на силикагеле (дихлорметан/ацетон 8:2 7:3). ЖХ-МС

(способ 2): Ву = 0.6 мин; МС (Е81ров): т/ζ = 211/213 (М+Н)+.

Промежуточное соединение 68А. 4-Амино-6-[(3-оксопиперазин-1-ил)метил]пирроло[2,1-1][1,2,4] триазин-7-карбальдегид

Раствор промежуточного соединения 67А (11.03 г, 52.4 ммоль) и 2-оксопиперазин (6.82 г, 68.1 ммоль) в 331 мл ДМФ обрабатывали при КТ с ДИПЭМ (13.7 мл, 78.6 ммоль) и взбалтывали в течение ночи. Осадок отфильтровывали, промывали с помощью ДМФ и диэтилового эфира и затем высушивали в вакууме с получением 11.64 г соединения, указанного в заголовке (89% чистота, 72% от теор.). ЖХ-МС (способ 7): Ву = 1.30 мин; МС (Е81ров): т/ζ = 275 (М+Н)+.

Промежуточное соединение 69А. 4-{[4-Амино-7-(гидроксиметил)пирроло[2,1-1][1,2,4]триазин-6-ил] метил } пиперазин-2 -он

К раствору промежуточного соединения 68А (10.17 г, 89 % чистота, 33.01 ммоль) в 1 М хлористоводородной кислоте (370 мл) и метаноле (370 мл) при КТ добавляли цинковую пыль (12.1 г, 185 ммоль), и смесь взбалтывали при КТ в течение 18 ч. Добавляли силикагель (100 г), и летучие компоненты выпаривали под сниженным давлением. Остаток суспендировали в метаноле, летучие компоненты снова выпаривали под сниженным давлением, и остаток высушивали в вакууме. Твердое вещество подвергали колоночной хроматографии на силикагеле (градиент дихлорметан/7 М аммиак в метаноле 10:1 3:1) с

получением 6.39 г соединения, указанного в заголовке (60 % от теор.). ЖХ-МС (способ 8): Ву = 1.12 мин; МС (Е81ров): т/ζ = 277 (М+Н)+ 'Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆): δ = 7.83 (в, 1Н), 7.76 (шир. в, 1Н), 7.64 (шир. в, 2Н), 6.83 (в, 1Н), 5.01 (шир. в, 1Н), 4.74 (в, 2Н), 3.64 (шир. в, 2Н), 3.14 (шир. в, 2Н), 2.95 (шир. в, 2Н), 2.58 (шир. в, 2Н) част. на млн.

Промежуточное соединение 70А. 4-{[4-Амино-5-бром-7-(гидроксиметил)пирроло[2,1-1][1,2,4]триазин-6-ил]метил} пиперазин-2-он трифторацетат

Суспензию промежуточного соединения 69А (1 г) в метаноле/воде (10:1, 33 мл) обрабатывали трифторуксусной кислотой (0.56 мл, 7.24 ммоль), чтобы получить светлый раствор. Раствор Νбромсукцинимида (708 мг, 3.98 ммоль) в метаноле (30 мл) добавляли по каплям при 0°С, и смесь взбалтывали при 0°С в течение 1 ч. Образованный осадок отфильтровывали и высушивали в вакууме с получением 700 мг соединения, указанного в заголовке (41% от теор.). ЖХ-МС (способ 7): Ву = 1.38 мин; МС (Е81ров): т/ζ = 355/357 (М+Н)+ Ίί-ЯМР (400 МГц, Ώ2Ο): δ = 7.90 (в, 1Н), 5.00 (в, 2Н), 4.44 (в, 2Н), 3.85 (в, 2Н), 3.58 (шир. 1, 2Н), 3.50 (шир. 1, 2Н) част. на млн.

Примеры получения

Пример 1. 4-{ [4-Амино-6-(метоксиметил)-5 -(7-метокси-5 -метил-1 -бензотиофен-2-ил)пирроло [2,1-ί]

[1,2,4]триазин-7-ил]метил}пиперазин-2-он

- 47 029556

Способ 1.

Раствор промежуточного соединения 13А (3 г, 7.84 ммоль) в метаноле (87 мл) обрабатывали уксусной кислотой (0.898 мл, 15.б8 ммоль), 2-оксопиперазином (1.17 г, 11.7б ммоль) и триацетоксиборогидридом натрия (4.98 г, 23.53 ммоль). Смесь взбалтывали при КТ в течение 4.5 ч. Добавляли дополнительные части 2-оксопиперазина (392 мг, 3.9 ммоль) и триацетоксиборогидрида натрия (3.3 г, 15.б8 ммоль), и полученную смесь взбалтывали при б0°С в течение ночи. После выпаривания, остаток ресуспендировали в нас. водн. растворе гидрокарбоната натрия и экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические фазы высушивали над сульфатом натрия и выпаривали, и остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (дихлорметан/метанол 40:1 10:1). Полученный таким образом продукт растирали в порошок в метаноле и отфильтровывали с получением 540 мг (14% от теор.) соединения, указанного в заголовке. Метанольный маточный раствор выпаривали и остаток очищали двукратной ОФ ВЭЖХ (Кергозй С18, градиент 10-95% ацетонитрил/0.1% водн. муравьиная кислота). Фракции, содержащие чистый продукт, объединяли и нейтрализовали с нас. водн. раствором гидрокарбоната натрия. Ацетонитрильный растворитель выпаривали, и водную фазу экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические фазы высушивали над сульфатом натрия и выпаривали с получением 395 мг (13% от теор.) в виде второй партии соединения, указанного в заголовке.

Способ 2.

Раствор промежуточного соединения 21А (291 мг, 0.82 ммоль) в уксусной кислоте (2.9 мл) обрабатывали посредством 37 % водн. раствора формальдегида (104 мкл, 1.39 ммоль) и 2-оксопиперазином (139 мг, 1.39 ммоль). Смесь взбалтывали при б0°С в течение 3 ч. и затем выпаривали. Очищение препаративной ОФ ВЭЖХ (Кергозй С18, градиент 10-95% ацетонитрил/0.1% водн. муравьиная кислота) обеспечило 184 мг (44% от теор.) соединения, указанного в заголовке.

ЖХ-МС (способ 4): Ву = 0.77 мин; МС (ЕЗ^оз): т/ζ = 4б7 (М+Н)+. ¹Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-й_б): δ = 8.00 (з, 1Н), 7.73 (шир. з, 1Н), 7.37 (з, 1Н), 7.31 (з, 1Н), б.84 (з, 1Н), 4.41 (з, 2Н), 3.97 (з, 2Н), 3.9б (з, 3Н), 3.20 (з, 3Н), 3.15-3.08 (шир. з, 2Н), 3.01 (з, 2Н), 2.б4 (шир. 1, 2Н), 2.45 (з, 3Н) част. на млн.

Пример 2. 4-{[4-Амино-б-(метоксиметил)-5-(7-метокси-5-метил-1-бензотиофен-2-ил)пирроло[2,1-£| [ 1,2,4]триазин-7 -ил]метил} пиперазин-2-она дигидрохлорид

Раствор из примера 1 (100 мг, 214 мкмоль) в 1,4-диоксане (2 мл) обрабатывали посредством 4М раствора хлорида водорода в 1,4-диоксане (2 мл, 8 ммоль). Растворитель выпаривали, оставляя 130 мг (колич.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 2): Ву = 0.79 мин; МС (ЕЗ^оз): т/ζ = 4б7 (М+Н)+ ¹Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-й_б): δ = 8.39 (шир. з, 1Н), 8.31-8.53 (шир. з, 1Н), 8.17 (з, 1Н), 7.38 (з, 1Н), 7.34 (з, 1Н), б.87 (з, 1Н), 0.21-0.42 (шир. з, 1Н), 4.81 (шир. з, 2Н), 4.52 (шир. з, 2Н), 3.9б (з, 3Н), 3.57 (з, 2Н), 3.32-3.72 (т, 4Н), 3.2б (з, 3Н), 2.4б (з, 3Н) част. на млн.

Пример 3. (3К)-3-({[4-Амино-б-(метоксиметил)-5-(7-метокси-5-метил-1-бензотиофен-2-ил)пирроло [2,1-ί] [1,2,4]триазин-7-ил] метил} амино)пирролидин-2-она дигидрохлорид

- 48 029556

Раствор промежуточного соединения 13А (520 мг, 1.36 ммоль) в метаноле (15 мл) и уксусной кислоты (156 мкл, 2.7 ммоль) обрабатывали посредством (К)-3-аминопирролидин-2-она (503 мг, 5.0 ммоль) и триацетоксиборогидрида (1.06 г, 5.0 ммоль). Смесь взбалтывали при КТ в течение ночи и затем выпаривали. Очищение препаративной ОФ ВЭЖХ (Кергозй С18, градиент 10-95% ацетонитрил/0.1% водн. муравьиная кислота) и лиофилизация полученного таким образом продукта из 4М раствора хлорида водорода в 1,4-диоксане обеспечило 272 мг (36 % от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 2): Ву = 0.70 мин; МС ^роз): т/ζ = 467 (М+Н)+ 'Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆): δ = 9.62 (шир. з, 1Н), 9.46 (шир. з, 1Н), 8.56-8.22 (шир. з, 1Н), 8.44 (з, 1Н), 8.19 (з, 1Н), 7.38 (з, 1Н), 7.34 (з, 1Н), 6.87 (з, 1Н), 6.54-6.12 (шир. з, 1Н), 4.89-4.65 (т, 2Н), 4.58-4.46 (т, 2Н), 4.17-4.07 (шир. з, 1Н, наложение с водным пиком), 3.96 (з, 3Н), 3.36-3.16 (т, 2Н), 3.25 (з, 3Н), 2.48-2.39 (т, 1Н), 2.46 (з, 3Н), 2.23-2.06 (т, 1Н) част. на млн.

Пример 4. (3К)-3-({[4-Амино-6-(метоксиметил)-5-(7-метокси-5-метил-1-бензотиофен-2-ил)пирроло [2,1-Т][1,2,4]триазин-7-ил]метил}амино)пирролидин-2-он

Раствор промежуточного соединения 13А (2.0 г, 5.2 ммоль) в метаноле (58 мл) и уксусной кислоты (0.6 мл) обрабатывали посредством (К)-3-аминопирролидин-2-она (785 мг, 7.8 ммоль) и триацетоксиборогидрида (3.32 г, 15.6 ммоль). Смесь взбалтывали при КТ в течение ночи. После этого реакционную смесь разбавляли с нас. водн. раствором гидрокарбоната натрия и экстрагировали три раза этилацетатом. Объединенные органические фазы высушивали над сульфатом натрия и выпаривали. Остаток очищали двукратной колоночной хроматографией на силикагеле (дихлорметан/метанол от 40:1 до 10:1) с получением 957 мг (37 % от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 4): Ву = 0.72 мин; МС (ЕЭДроз): т/ζ = 467 (М+Н)+ ¹Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆): δ = 8.01 (з, 1Н), 7.75 (з, 1Н), 7.35 (з, 1Н), 7.31 (з, 1Н), 6.85 (з, 1Н), 4.46-4.34 (т, 2Н), 4.24-4.02 (т, 2Н), 3.96 (з, 3Н), 3.24-3.04 (т, 3Н), 3.21 (з, 3Н), 2.45 (з, 3Н), 2.40-2.27 (т, 1Н), 1.80-1.65 (т, 1Н) част. на млн.

Пример 5. 4-{[4-Амино-6-(этоксиметил)-5-(7-метокси-5-метил-Гбензотиофен-2-ил)пирроло[2,1-Г] [ 1,2,4]триазин-7-ил]метил} пиперазин-2-он

Способ 1.

Раствор промежуточного соединения 17А (2 г, 5.05 ммоль) в ТГФ (100 мл) обрабатывали при 0°С посредством 2-оксопиперазина (1.01 г, 10.1 ммоль), триацетоксиборогидрида натрия (1.07 г, 5.04 ммоль) и уксусной кислоты (0.29 мл, 5.04 ммоль). Полученную смесь взбалтывали при 0°С в течение 30 мин. Каждые 30 мин добавляли четыре дополнительные порции триацетоксиборогидрида натрия (1.07 г, 5.04 ммоль) и уксусной кислоты (0.29 мл, 5.04 ммоль), и полученную смесь взбалтывали дополнительно в течение 30 мин при 0°С, затем в течение 25 мин при 35°С и в заключение при КТ в течение ночи. Реакцию гасили с 10% водн. раствором хлорида натрия и экстрагировали два раза этилацетатом. Объединенные органические слои выпаривали. Остаток очищали колоночной хроматографией над силикагелем (дихлорметан/ метанол 95:5 90:10) с получением 360 мг (17% от теор.) соединения, описанного в примере 86 (см. ниже) и 1.82 г соединения, указанного в заголовке отдельными фракциями. Полученный таким образом продукт суспендировали в этаноле (20 мл), нагревали в колбе с обратным холодильником в течение 2 ч. и затем охлаждали до 15°С. Твердое вещество отфильтровывали и промывали этанолом с получением 1.63 г (67 % от теор.) чистого соединения, указанного в заголовке.

Способ 2.

Раствор из примера 13 (930 мг, 1.9 ммоль) в дихлорметане (18 мл) обрабатывали тионилхлоридом (210 мкл, 2.8 ммоль) и взбалтывали при КТ в течение 15 мин. После выпаривания, остаток растворяли в этаноле (18 мл) и обрабатывали с помощью ДИПЭМ (670 мкл, 3.8 ммоль). Смесь взбалтывали при 70°С в течение 2 ч. и затем выпаривали. Остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (дихлорметан/метанол 98:2 90:10). Полученный таким образом продукт растирали в порошок в смеси ацето- 49 029556

нитрил/диэтиловый эфир и отфильтровывали. Фильтрат выпаривали, и остаток повторно очищали колоночной хроматографией на силикагеле (дихлорметан/метанол 98:2 90:10). Снова полученный таким

образом продукт растирали в порошок в ацетонитрил/диэтиловом эфире и отфильтровывали. Эту процедуру повторяли еще один раз. Три партии полученных таким способом твердых веществ объединяли, растирали в порошок в ацетонитрил/диэтиловом эфире еще один раз и в заключение отфильтровывали с получением 600 мг (62% от теор.) соединения, указанного в заголовке.

Способ 3.

Раствор промежуточного соединения 22А (720 мг, чистота 89%, 1.74 ммоль) в уксусной кислоте (10 мл) взбалтывали с пиперазин-2-оном (261 мг, 2.61 ммоль) при 60°С. К нему добавляли 37% водн. раствор формальдегида (260 мкл, 3.48 ммоль) тремя порциями через 0, 3 и 12 ч., соответственно, и смесь взбалтывали при 60°С в течение в общем 24 ч. После этого летучие компоненты были удалены под сниженным давлением, и остаток распределяли между этилацетатом и нас. водн. раствором гидрокарбоната натрия. Органическую фазу промывали с помощью нас. водн. раствора хлорида натрия, высушивали сульфатом магния и выпаривали. Остаток растворяли в смеси метанола и дихлорметана, адсорбировали на диатомовой земле, высушивали в вакууме и очищали флеш-хроматографией на силикагеле (градиент 06% метанол/дихлорметан). Фракции продукта объединяли, выпаривали и повторно очищали препаративной ОФ ВЭЖХ (Керго8Й С18, градиент 30-50% ацетонитрил/0.2% водн. ТФУ). Фракции продукта объединяли снова, разбавляли с нас. водн. раствором гидрокарбоната натрия и экстрагировали этилацетатом. Органическую фазу промывали с помощью нас. водн. раствора хлорида натрия, высушивали сульфатом магния и выпаривали с получением 281 мг (31% от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 2): Ву = 0.86 мин; МС (ΕδΣρο8): ш/ζ = 481 (М+Н)+ ¹Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-й₆): δ = 8.01 (8, 1Н), 7.8-8.05 (шир. 8, 1Н), 7.74 (шир. 8, 1Н), 7.38 (8, 1Н), 7.31 (8, 1Н), 6.85 (8, 1Н), 5.6-5.9 (шир. 8, 1Н), 4.45 (8, 2Н), 3.97 (8, 2Н), 3.94 (8, 3Н), 3.41 (ц, 2Н), 3.09-3.13 (ш, 2Н), 3.02 (8, 2Н), 2.63-2.69 (шир. 8, 2Н), 2.45 (8, 3Н), 1.07 (ί, 3Н) част. на млн.

Пример 6. 4-{[4-Амиио-6-(этоксиметил)-5-(7-метокси-5-метил-1-беизотиофеи-2-ил)пирроло[2,1-ί] [ 1,2,4]триазин-7 -ил]метил} пиперазин-2-она дигидрохлорид

Раствор промежуточного соединения 17А (60 мг, чистота 69 %, 104 мкмоль) в метаноле (6 мл) обрабатывали посредством 2-оксопиперазина (22 мг, 209 мкмоль), цианоборогидрида натрия (33 мг, 522 ммоль) и уксусной кислоты (12 мкл, 209 мкмоль). Смесь взбалтывали при 60°С в течение 16 ч и затем отфильтровывали. Фильтрат и остаток были очищены отдельно препаративной ОФ ВЭЖХ (Керго8Й С18, градиент 40-60% ацетонитрил/0.2% водн. ТФУ). Фракции продукта объединяли, разбавляли с 1 М хлористоводородной кислотой (3 мл) и выпаривали до сухости с получением 46 мг (79% от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 2): Ву = 0.87 мин; МС (ЕвЩо8): ш/ζ = 481 (М+Н)+ ¹Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-й6): δ = 8.37 (шир. 8, 1Н), 8.31 (шир. 8, 1Н), 8.14 (8, 1Н), 7.38 (8, 1Н), 7.33 (8, 1Н), 6.87 (8, 1Н), 6.13 (шир. 8, 1Н), 4.80 (шир. 8, 2Н), 4.52 (8, 2Н), 3.96 (8, 3Н), 3.86 (шир. 8, 2Н), 3.36-3.51 (ш, 5Н), 2.46 (8, 3Н), 1.11 (ί, 3Н) част. на млн.

Пример 7. (3К)-3-({[4-Амино-6-(этоксиметил)-5-(7-метокси-5-метил-1-бензотиофен-2-ил)пирроло [2,1-ί] [1,2,4]триазин-7-ил] метил} амино)пирролидин-2-она дигидрохлорид

Раствор промежуточного соединения 17А (60 мг, чистота 69%, 104 мкмоль) в метаноле (3 мл) обрабатывали с (К)-3-аминопирролидин-2-оном (22 мг, 209 мкмоль), цианоборогидридом натрия (33 мг, 522 мкмоль) и уксусной кислотой (12 мкл, 209 мкмоль). Смесь взбалтывали при 60°С в течение 4 ч и затем отфильтровывали. Фильтрат очищали препаративной ОФ ВЭЖХ (Керго8Й С18, градиент 40-60% ацетонитрил/ 0.2% водн. ТФУ). Фракции продукта объединяли, разбавляли с 1М хлористо-водородной кислотой и выпаривали до сухости с получением 46 мг (79 % от теор.) соединения, указанного в заголовке.

- 50 029556

ЖХ-МС (способ 4): Ву = 0.74 мин; МС (ΕδΙροδ): т/ζ = 481 (М+Н)+ ¹Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-й₆): δ = 9.58-9.75 (т, 1Н), 9.33-9.54 (т, 1Н), 8.44 (δ, 1Н), 8.27-8.71 (шир. δ, 1Н), 8.19 (δ, 1Н), 7.38 (δ, 1Н), 7.34 (δ, 1Н), 6.87 (δ, 1Н), 6.18-6.48 (шир. δ, 1Н), 4.68-4.87 (т, 2Н), 4.49-4.62 (ς, 2Н), 3.96 (δ, 3Н), 3.45 (ς, 2Н), 3.183.35 (т, 2Н), 2.46 (δ, 4Н), 2.08-2.22 (т, 1Н), 1.10 (ί, 3Н) част. на млн.

Пример 8. (3К)-3-({[4-Амино-6-(этоксиметил)-5-(7-метокси-5-метил-1-бензотиофен-2-ил)пирроло [2,1-ί][1,2,4]триазин-7-ил]метил} амино)пирролидин-2-он

Раствор промежуточного соединения 17А (226 мг, чистота 75 %, 428 мкмоль) в метаноле (4 мл) обрабатывали посредством (К)-3-аминопирролидин-2-она (85 мг, 855 мкмоль), цианоборогидрида натрия (134 мг, 2.14 ммоль) и уксусной кислоты (49 мкл, 855 мкмоль). Смесь взбалтывали при КТ в течение 1.5 ч. После этого смесь непосредственно разделяли препаративной ОФ ВЭЖХ (ΚβρίΌδΐΙ С18, градиент 4060% ацетонитрил/0.2% водн. ТФУ). Фракции продукта объединяли, разбавляли с нас. водн. раствором гидрокарбоната натрия и экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические фазы промывали с помощью нас. водн. раствора хлорида натрия, высушивали над сульфатом магния и выпаривали до сухости с получением 180 мг (88% от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 4): Ву = 0.74 мин; МС (ΕδΙροδ): т/ζ - 481 (М+Н)+ ¹Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-й₆): δ = 8.00 (δ, 1Н), 7.76 (δ, 1Н), 7.88.1 (шир. δ, 1Н), 7.35 (δ, 1Н), 7.31 (δ, 1Н), 6.84 (δ, 1Н), 5.6-5.9 (шир. δ, 1Н), 4.39-4.49 (т, 2Н), 4.04-4.23 (т, 2Н), 3.96 (δ, 3Н), 3.41 (ς, 2Н), 3.05-3.23 (т, 3Н), 2.45 (δ, 3Н), 2.31-2.40 (т, 1Н), 1.68-1.79 (т, 1Н), 1.08 (ί, 3Н) част. на млн.

Пример 9. Ы2-{[4-Амино-6-(этоксиметил)-5-(7-метокси-5-метил-1-бензотиофен-2-ил)пирроло[2,1-Г]

[1,2,4]триазин-7-ил]метил}глицинамида дигидрохлорид

Раствор промежуточного соединения 17А (60 мг, чистота 69%, 104 мкмоль) в метаноле (3 мл) обрабатывали посредством глицинамида гидрохлорид (23 мг, 209 мкмоль), цианоборогидрида натрия (32 мг, 522 ммоль) и уксусной кислоты (12 мкл, 209 мкмоль). Смесь взбалтывали при 60°С в течение 16 ч. После фильтрации фильтрат отделяли препаративной ОФ ВЭЖХ (Κβρτοδίΐ С18, градиент 20-40% ацетонитрил/0.2% водн. ТФУ). Фракции продукта объединяли, разбавляли с 1 М хлористо-водородной кислотой, выпаривали до сухости и объединяли с остатком из стадии фильтрации. Это вещество повторно очищали двукратной препаративной ОФ ВЭЖХ (ΚβρίΌδΐΙ С18, градиент 20-40% ацетонитрил/0.2% водн. ТФУ). Фракции продукта объединяли снова, разбавляли с 1 М хлористо-водородной кислотой и выпаривали до сухости с получением 7.4 мг (13 % от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 2): Ву = 0.80 мин; МС (ΕδΙροδ): т/ζ = 455 (М+Н)+ ¹Н-ЯМР (500 МГц, ДМСО-й₆): δ = 9.33 (шир. δ, 2Н), 9.05 (шир. δ, 1Н), 8.31 (δ, 1Н), 7.93 (шир. δ, 1Н), 7.58 (шир. δ, 1Н), 7.40 (δ, 1Н), 7.35 (δ, 1Н), 7.05 (шир. δ, 1Н), 6.88 (δ, 1Н), 4.65 (шир. т, 2Н), 4.56 (δ, 2Н), 3.96 (δ, 3Н), 3.74 (шир. т, 2Н), 3.46 (ς, 2Н), 2.46 (δ, 3Н), 1.10 (ί, 3Н) част. на млн.

Пример 10. 6-(Этоксиметил)-5-(7-метокси-5-метил-1-бензотиофен-2-ил)-7-(морфолин-4-илметил) пирроло [2,1-ί][1,2,4]триазин-4-амин

Раствор промежуточного соединения 17А (55 мг, чистота 73 %, 101 мкмоль) в метаноле (3 мл) обрабатывали морфолином (18 мг, 202 мкмоль), цианоборогидридом натрия (19 мг, 303 ммоль) и уксусной

- 51 029556

кислотой (18 мкл, 304 мкмоль). Смесь взбалтывали при 60°С в течение 18 ч. Добавляли дополнительные количества морфолина (18 мг, 202 мкмоль), цианоборогидрида натрия (19 мг, 303 ммоль) и уксусной кислоты (18 мкл, 304 мкмоль), и взбалтывание при 60°С продолжали в течение еще 3 ч. Полученную смесь разбавляли с ТГФ, чтобы растворить осадки и разделяли препаративной ОФ ВЭЖХ (Реρ^οδ^1 С18, градиент 20-40% ацетонитрил/0.2% водн. ТФУ). Фракции продукта объединяли и выпаривали до сухости. Остаток растворяли в метаноле и отфильтровывали через анионнообменный картридж (δί^аίοδρйе^еδ δΡΕ, РЬ-НСО₃ МР-гезт). Картридж элюировали посредством метанола, и фильтрат выпаривали с получением 32 мг (68% от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 2): Ву = 0.78 мин; МС (ΕδΙροδ): т/ζ = 468 (М+Н)+ ¹Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆): δ = 7.98 (δ, 1Н), 7.9 (шир. δ, 1Н), 7.37 (δ, 1Н), 7.31 (δ, 1Н), 6.84 (δ, 1Н), 5.75 (шир. δ, 1Н), 4.45 (δ, 2Н), 3.95 (δ, 3Н), 3.88 (δ, 2Н), 3.51-3.56 (т, 4Н), 3.40 (ς, 2Н), 2.4-2.5 (т, 4Н), 2.45 (δ, 3Н), 1.06 (ί, 3Н) част. на млн.

Пример 11. 1-(4-{[4-Амино-6-(этоксиметил)-5-(7-метокси-5-метил-1-бензотиофен-2-ил)пирроло[2,1Г][1,2,4]триазин-7-ил]метил}пиперазин-1-ил)этанона дигидрохлорид

Раствор промежуточного соединения 17А (130 мг, 0.328 ммоль) в метаноле (8 мл) обрабатывали с Νацетилпиперазин (63 мг, 0.492 ммоль), цианоборогидрид натрия (103 мг, 1.63 ммоль) и уксусной кислоты (37 мкл, 0.655 ммоль). Смесь взбалтывали при 60°С в течение 3 ч. Затем ее объединяли с реакционной смесью 30 мг пробного образца, выпаривали и очищали препаративной ОФ ВЭЖХ (Реρ^οδ^1 С18, градиент 10-95% ацетонитрил/0.1% водн. муравьиная кислота). Полученный таким образом продукт лиофилизировали из 1,4диоксана, затем растворяли в этилацетате и промывали нас. водн. раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой высушивали над сульфатом магния, выпаривали и лиофилизировали снова из 1,4-диоксана. Повторное очищение препаративной ОФ ВЭЖХ (^ρΐΌδί1 С18, градиент 10-95% ацетонитрил/0.1% водн. муравьиная кислота), с последующей двукратной колоночной хроматографией на силикагеле (дихлорметан/метанол 98:2^4:1) и лиофилизация из 4М раствора хлорида водорода в 1,4-диоксане обеспечило 49 мг (18% от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 2): Ву = 0.82 мин; МС (ΕδΙροδ): т/ζ = 509 (М+Н)+ ¹Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆): среди проч. δ = 8.65-8.26 (шир. δ, 1Н), 8.17 (δ, 1Н), 7.38 (δ, 1Н), 7.34 (δ, 1Н), 6.87 (δ, 1Н), 6.53-6.05 (шир. δ, 1Н), 4.75 (шир. δ, 2Н), 4.56 (шир. δ, 2Н), 3.96 (δ, 3Н), 3.45 (ς, 2Н, наложение с водным пиком), 2.46 (δ, 3Н), 2.03 (δ, 3Н), 1.09 (ί, 3Н) част. на млн.

Пример 12. [4-Амино-5-(7-метокси-5-метил-1-бензотиофен-2-ил)-7-(пиперазин-1-илметил)пирроло [2,1 -Г][1,2,4]триазин-6-ил]метанол бис(формамид)

Раствор промежуточного соединения 23А (95 мг, 152 мкмоль) в 4 М растворе хлорида водорода в 1,4диоксане (3.7 мл) взбалтывали при КТ в течение 2 ч. После выпаривания, остаток очищали препаративной ОФ ВЭЖХ (Κ^ρΓΟδί1 С18, градиент 10-95% ацетонитрил/0.1% водн. муравьиная кислота) с получением 44 мг (62% от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 2): Ву = 0.63 мин; МС (ΕδΙροδ): т/ζ = 439 (М+Н)+ ¹Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆): δ = 8.28 (шир. δ, 2Н), 7.98 (δ, 1Н), 7.37 (δ, 1Н), 7.31 (δ, 1Н), 6.85 (δ, 1Н), 4.50 (δ, 2Н, наложение с водным пиком), 3.98 (δ, 2Н, наложение с водным пиком), 3.95 (δ, 3Н, наложение с водным пиком), 2.95-2.84 (т, 4Н), 2.61-2.55 (т, 4Н, наложение с ДМСО пик), 2.45 (δ, 3Н) част. на млн.

Пример 13. 4-{[4-Амино-6-(гидроксиметил)-5-(7-метокси-5-метил-1-бензотиофен-2-ил)пирроло[2,1-

- 52 029556

Раствор промежуточного соединения 20А (1.34 г, 3.96 ммоль) в уксусной кислоте (13.9 мл) обрабатывали посредством 37% водн. раствора формальдегида (501 мкл, 6.6 ммоль) и 2-оксопнперазнна (670 мг, 6.6 ммоль). Смесь взбалтывали при 50°С в течение 2 ч. и затем выпаривали. Очищение колоночной хроматографией на силикагеле (дихлорметан/метанол 98:2 90:10) обеспечило 942 мг (49% от теор.)

соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 2): Ву = 0.67 мин; МС (Ε8Σροδ): т/ζ = 453 (М+Н)+ ¹Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-Й6): δ = 7.99 (δ, 1Н), 7.76 (шир. δ, 1Н), 7.39 (δ, 1Н), 7.31 (δ, 1Н), 6.84 (δ, 1Н), 4.51 (δ, 2Н), 4.03 (шир. δ, 2Н), 3.95 (δ, 3Н), 3.18-3.13 (т, 2Н), 3.07-2.98 (т, 2Н), 2.72-2.60 (т, 2Н), 2.45 (δ, 3Н) част. на млн.

Пример 14. 7-{[(38)-3-Амино-3-метилпирролидин-1-ил]метил}-6-(метоксиметил)-5-(7-метокси-5метил-1 -бензотнофен-2-нл)пнрроло [2,1-ί] [1,2,4]трназнн-4-амнна тригидрохлорид

Раствор промежуточного соединения 21А (100 мг, 0.28 ммоль) в уксусной кислоте (1 мл) обрабатывали посредством 37% водн. раствора формальдегида (25 мкл, 0.33 ммоль) и трет-бутил [(38)-3метилпирролидин-3-ил]карбамата (ΥοδΗίάα е! а1, Скет. Ркагт. Ви11. 1996, 44 (7), 1376-1386; 67 мг, 0.33 ммоль). Смесь взбалтывали при КТ в течение 3 ч. и затем выпаривали. Остаток разбавляли с нас. водн. раствором гидрокарбоната натрия, и добавляли твердый карбонат калия до тех пор, пока не происходило образование газа. Водную фазу экстрагировали три раза этилацетатом. Объединенные органические фазы высушивали над сульфатом натрия и выпаривали. Остаток растворяли в 4М растворе хлорида водорода в 1,4-диоксане (2 мл) и взбалтывали при КТ в течение 2 ч. После выпаривания, остаток очищали двукратной препаративной ОФ ВЭЖХ (сначала ^ρΓ0δί1 С18, градиент 10-95 % ацетонитрил/0.1 % водн. муравьиная кислота; затем 81пе1б КР18, градиент 5-50% метанол + 0.1% водн. ТФУ/0.1% водн. ТФУ). Полученный таким образом продукт лиофилизировали из 4 М раствора хлорида водорода в 1,4-диоксане с получением 14 мг (8 % от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 2): Ву = 0.67 мин; МС (Ε8Σροδ): т/ζ = 467 (М+Н)+ Ίΐ-ЯМП’ (400 МГц, ДМСО-б₆): среди проч. δ = 8.50-8.22 (шир. δ, 1Н), 8.14 (δ, 1Н), 7.36 (δ, 1Н), 7.34 (δ, 1Н), 6.87 (δ, 1Н), 6.36-6.01 (шир. δ, 1Н), 4.88 (шир. δ, 2Н), 4.56 (шир. δ, 2Н), 3.96 (δ, 3Н, наложение с водным пиком), 3.26 (δ, 3Н), 2.46 (δ, 3Н), 1.52 (δ, 3Н) част. на млн.

Пример 15. 7-{[(38)-3 - Амино-3 -метилпирролидин-1 -ил] метил}-6-(этоксиметил)-5-(7-метокси-5-метил-1 -бензотиофен-2-ил)пирроло [2,1-ί] [1,2,4]триазин-4-амин

Раствор промежуточного соединения 17А (100 мг, 271 мкмоль) в уксусной кислоте (1 мл) обрабатывали посредством 37% водн. раствора формальдегида (24 мкл, 326 мкмоль) и трет-Бутил [(38)-3метилпирролидин-3-ил]карбамата (ΥοδΗίάα е! а1., Скет. Ркагт. Ви11. 1996, 44 (7), 1376-1386; 65 мг, 326 мкмоль). Смесь взбалтывали при 60°С в течение 4 ч. После этого добавляли дополнительные количества 37% водн. раствора формальдегида (10 мкл, 136 мкмоль) и трет-бутил [(38)-3-метилпирролидин-3-ил] карбамата (27 мг, 136 мкмоль), и взбалтывание при 60°С продолжали в течение ночи. После выпаривания, остаток распределяли между этилацетатом и нас. водн. раствором гидрокарбоната натрия. Твердый карбонат калия добавляли до тех пор, пока не происходило образование газа. Водную фазу экстрагировали три раза этилацетатом. Объединенные органические фазы высушивали над сульфатом натрия, выпаривали и очищали препаративной ОФ ВЭЖХ (^ρΓ0δί1 С18, градиент 10-95 % ацетонитрил/0.1% водн. муравьиная кислота). Полученный таким образом продукт растворяли в 4 М растворе хлорида водорода в 1,4-диоксане (2 мл) и взбалтывали при КТ в течение 1 ч. После выпаривания, остаток очищали препаративной ОФ ВЭЖХ (^ρΓ0δί1 С18, градиент 10-95% ацетонитрил/0.1% водн. муравьиная кислота) с получением 24 мг (18 % от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 4): Ву = 0.70 мин; МС (Ε8Σροδ): т/ζ = 481 (М+Н)+. ^ХН-ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆): среди проч. δ = 8.19 (δ, 1Н), 7.38 (δ, 1Н), 7.34 (δ, 1Н), 6.87 (δ, 1Н), 4.90 (шир. δ, 2Н), 3.96 (δ, 3Н), 3.46 (ς, 3Н), 2.46 (δ, 3Н), 1.54 (δ, 3Н), 1.14-1.05 (т, 3Н) част, на млн.

Пример 16. 1-(4-{ [4-Амино-6-(метоксиметил)-5-(7 -метокси-5-метил-1 -бензотиофен-2-ил)пирроло

[2,1-£][1,2,4]триазин-7-ил]метил}пиперазин-1-ил)этанон дигидрохлорид

- 53 029556

Раствор промежуточного соединения 21А (50 мг, 141 мкмоль) в уксусной кислоте (1 мл) обрабатывали посредством 37% водн. раствора формальдегида (4.6 мкл, 169 мкмоль) и Ν-ацетилпиперазина (21.6 мг, 169 мкмоль). Смесь взбалтывали при 75°С в течение 3 ч. После выпаривания, остаток очищали препаративной ОФ ВЭЖХ (Кергокй С18, градиент 10-95% ацетонитрил/0.1% водн. муравьиная кислота). Лиофилизация из 4М раствора хлорида водорода в 1,4-диоксане обеспечила 34 мг (39% от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 5): Ву = 1.78 мин; МС (Е81рок): т/ζ = 495 (М+Н)' ¹НЯМР (400 МГц, ДМСО-б6): среди проч. δ = 8.70-8.35 (шир. к, 1Н), 8.18 (к, 1Н), 7.37 (к, 1Н), 7.34 (к, 1Н), 6.86 (к, 1Н), 6.61-6.19 (шир. к, 1Н), 4.74 (шир. к, 2Н), 4.54 (шир. к, 2Н), 3.96 (к, 3Н), 3.25 (к, 3Н), 2.46 (к, 3Н), 2.03 (к, 3Н) част. на млн.

Пример 17. 6-(Метоксиметил)-5-(7-метокси-5-метил-1-бензотиофен-2-ил)-7-(пиперазин-1-илметил) пирроло [2,1-ί][1,2,4]триазин-4-амина формамид

Раствор промежуточного соединения 23А (110 мг, 204 мкмоль) в дихлорметане (2.2 мл) обрабатывали тионилхлоридом (29 мкл, 408 мкмоль) и взбалтывали при КТ в течение 15 мин. После выпаривания, остаток растворяли в метаноле (2.2 мл) и обрабатывали с помощью ДИПЭМ (39 мкл, 224 мкмоль). Смесь взбалтывали при 70°С в течение 1 ч. и затем выпаривали. Остаток ресуспендировали в 4 М растворе хлорида водорода в 1,4-диоксане (2.2 мл) и взбалтывали при КТ в течение 2 ч. Выпаривание и очистка препаративной ОФ ВЭЖХ (Кергокй С18, градиент 10-95% ацетонитрил/0.1% водн. муравьиная кислота) обеспечили 44.9 мг (46% от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 2): Ву = 0.73 мин; МС (Е81рок): т/ζ = 453 (М-Н)' ¹Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆): δ = 8.28 (шир. к, 1Н), 8.00 (к, 1Н), 7.35 (к, 1Н), 7.31 (к, 1Н), 6.85 (к, 1Н), 4.41 (к, 2Н), 4.00-3.90 (т, 5Н), 3.00-2.90 (т, 4Н), 2.65-2.56 (т, 4Н), 2.45 (к, 3Н) част. на млн.

Пример 18. 6-(Этоксиметил)-5-(7-метокси-5-метил-1-бензотиофен-2-ил)-7-(пиперазин-1-илметил) пирроло [2,1-ί][1,2,4]триазин-4-амин

Раствор промежуточного соединения 23А (80 мг, 317 мкмоль) в дихлорметане (2 мл) обрабатывали тионилхлоридом (22 мкл, 297 мкмоль) и взбалтывали при КТ в течение 15 мин. После выпаривания остаток растворяли в этаноле (2 мл) и обрабатывали с помощью ДИПЭМ (28 мкл, 163 мкмоль). Смесь взбалтывали при 70°С в течение 1 ч и затем выпаривали. Остаток ресуспендировали в 4М растворе хлорида водорода в 1,4-диоксане (2 мл) и взбалтывали при КТ в течение 1 ч. Выпаривание и очистка препаративной ОФ ВЭЖХ (Кергокй С18, градиент 10-95% ацетонитрил/0.1% водн. муравьиная кислота) обеспечили 35 мг (50% от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 2): Ву = 0.82 мин; МС (Е81рок): т/ζ = 467 (М-Н)' ¹Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆): среди проч. δ = 8.09 (шир. к, 1Н), 7.36 (к, 1Н), 7.32 (к, 1Н), 6.86 (к, 1Н), 4.50 (шир. к, 2Н), 3.96 (к, 3Н), 3.42 (ς, 2Н, наложение с водным пиком), 2.45 (к, 3Н), 1.05 (I, 3Н) част. на млн.

Пример 19. 6-(Этоксиметил)-5-(7-метокси-5-метил-1-бензотиофен-2-ил)-7-(пиперазин-1-илметил) пирроло [2,1-ί][1,2,4]триазин-4-амин дигидрохлорид

- 54 029556

Раствор из примера 18 (50 мг, 107 мкмоль) в 4М растворе хлорида водорода в 1,4-диоксане (1 мл) взбалтывали при КТ в течение 15 мин. После выпаривания были получены 55 мг (93% от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 4): Ву = 0.74 мин; МС (Εδ^οδ): т/ζ = 467 (М+н)+ ¹Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆): среди проч. δ = 8.18 (δ, 1Н), 7.37 (δ, 1Н), 7.34 (δ, 1Н), 6.87 (δ, 1Н), 4.76 (шир. δ, 2Н), 4.60 (шир. δ, 2Н), 3.96 (δ, 3Н), 3.45 (ς, 2Н), 2.46 (δ, 3Н), 1.09 (ΐ, 3Н) част. на млн.

Пример 20. 1-(4-{[4-Амино-6-(этоксиметил)-5-(7-метокси-5-метил-1-бензотиофен-2-ил)пирроло[2,1ί] [ 1,2,4]триазин-7-ил] метил } пиперазин-1 -ил)этанон

Раствор из примера 18 (70 мг, 150 мкмоль) в дихлорметане (2 мл) и ТГФ (0.8 мл) обрабатывали посредством ацетилхлорида (21 мкл, 300 мкмоль) и карбоната натрия (127 мг, 1.2 ммоль). Смесь взбалтывали при КТ в течение ночи. После выпаривания, остаток очищали препаративной ОФ ВЭЖХ (ΒΌρϊΌδίΙ С18, градиент 10-95% ацетонитрил/0.1 % водн. муравьиная кислота) с получением 27 мг (31% от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 4): Ву = 0.77 мин; МС (Εδ^οδ): т/ζ = 509 (М+Н)+ ¹Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆): δ = 7.98 (δ, 1Н), 7.37 (δ, 1Н), 7.31 (δ, 1Н), 6.84 (δ, 1Н), 4.45 (δ, 2Н), 3.95 (δ, 3Н), 3.92 (δ, 2Н), 3.45-3.36 (т, 6Н), 2.48-2.38 (т, 7Н, наложение с ДМСО пик), 1.97 (δ, 3н), 1.06 (1, 3н) част. на млн.

Пример 21. 4-({4-Амино-6-[(2-гидроксиэтокси)метил]-5-(7-метокси-5-метил-1-бензотиофен-2-ил) пирроло[2,1-ί][1,2,4]триазин-7-ил}метил)пиперазин-2-он формамид

Раствор из примера 13 (60 мг, 132 мкмоль) в дихлорметане (2 мл) обрабатывали тионилхлоридом (14 мкл, 198 мкмоль). Смесь взбалтывали при КТ в течение 15 мин. и затем выпаривали. Остаток растворяли в этиленгликоле (500 мкл) и взбалтывали при 100°С в течение 90 мин. Очищение препаративной ОФ ВЭЖХ (ΒΌρϊΌδίΙ С18, градиент 10-95% ацетонитрил/0.1% водн. муравьиная кислота) обеспечило 34 мг (47% от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 2): Ву = 0.69 мин; МС (Εδ^οδ): т/ζ = 497 (М+Н)+ ¹Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-сЦ: δ = 8.14 (δ, 1Н), 8.00 (δ, 1Н), 7.74 (шир. δ, 1Н), 7.42 (δ, 1Н), 7.31 (δ, 1Н), 6.84 (δ, 1Н), 4.49 (δ, 2Н), 3.99 (δ, 2Н), 3.96 (δ, 3Н), 3.50-3.43 (т, 2Н), 3.42-3.36 (т, 2Н, наложение с водным пиком), 3.15-3.07 (т, 2Н), 3.03 (δ, 2Н), 2.69-2.61 (т, 2Н), 2.45 (δ, 3Н) част. на млн.

Пример 22. 2-{[4-Амино-5-(7-метокси-5-метил-1-бензотиофен-2-ил)-7-(пиперазин-1-илметил) пирроло[2,1-1][1,2,4]триазин-6-ил]метокси}этанол дигидрохлорид

Раствор промежуточного соединения 23А (100 мг, 185 мкмоль) в дихлорметане (4 мл) обрабатывали тионилхлоридом (27 мкл, 371 мкмоль). Смесь взбалтывали при КТ в течение 20 мин. и затем выпаривали. Остаток растворяли в этиленгликоле/ТГФ (2:1, 1.5 мл) и взбалтывали при 100°С в течение 2 ч. После выпаривания, остаток очищали препаративной ОФ ВЭЖХ (КергозП С18, градиент 10-95% ацетонит- 55 029556

рил/0.1% водн. муравьиная кислота), с последующей колоночной хроматографией на силикагеле (дихлорметан/метанол + 0.1% водн. аммиак 98:2 90:10). Лиофилизация из 4 М раствора хлорида водорода

в 1,4-диоксане обеспечило 67 мг (64% от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 2): Ву = 0.66 мин; МС (Е8!роз): ΐη/ζ = 483 (М+Н)+ ¹Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-ф): δ = 8.16 (з, 1Н), 7.49 (з, 1Н), 7.43 (з, 1Н), 6.98 (з, 1Н), 4.86 (з, 2Н), 4.69 (з, 2Н), 4.03 (з, 3Н), 3.81-3.49 (т, 12Н), 2.50 (з, 3Н) част. на млн.

Пример 23. 6-(Бутоксиметил)-5-(7-метокси-5-метил-1-бензотиофен-2-ил)-7-(пиперазин-1-илметил) пирроло[2,1-£][1,2,4]триазин-4-амина формамид

Раствор промежуточного соединения 23А (100 мг, 185 мкмоль) в дихлорметане (2 мл) обрабатывали тионилхлоридом (27 мкл, 371 мкмоль). Смесь взбалтывали при КТ в течение 15 мин. и затем выпаривали. Остаток растворяли в 1 -бутаноле (2 мл) и нагревали до 70°С в течение 1 ч. После выпаривания, остаток ресуспендировали в 4М растворе хлорида водорода в 1,4-диоксане (2 мл) и взбалтывали при КТ в течение 2 ч. Выпаривание и очистка препаративной ОФ ВЭЖХ (КергозП С18, градиент 10-95% ацетонитрил/0.1% водн. муравьиная кислота) обеспечило 22 мг (24% от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 2): Ву = 0.82 мин; МС (Е8Хроз): т/ζ = 495 (М+н)+ ¹Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-ф): δ = 8.29 (з, 1Н), 7.99 (з, 1Н), 7.35 (з, 1Н), 7.29 (з, 1Н), 6.84 (з, 1Н), 4.43 (з, 2Н), 3.95 (з, 3Н), 3.92 (з, 2Н), 3.35 (ΐ, 2Н), 2.90-2.79 (т, 4Н), 2.45 (з, 3Н), 1.47-1.37 (т, 2Н), 1.31-1.18 (т, 2Н), 0.80 (ΐ, 3Н) част. на млн.

Пример 24. 5 -(7 -Метокси-5-метил-1 -бензотиофен-2-ил)-7-(пиперазин-1 -илметил)-6-(пропоксиметил)пирроло[2,1-£][1,2,4]триазин-4-амин бис(формамид)

Раствор промежуточного соединения 23А (100 мг, 185 мкмоль) в дихлорметане (2 мл) обрабатывали тионилхлоридом (27 мкл, 371 мкмоль). Смесь взбалтывали при КТ в течение 15 мин. и затем выпаривали. Остаток растворяли в 1-пропаноле (2 мл), обрабатывали с помощью ДИПЭМ (48 мкл, 278 мкмоль) и взбалтывали при КТ в течение 1 ч. После выпаривания, остаток ресуспендировали в 4М растворе хлорида водорода в 1,4-диоксане (2 мл) и взбалтывали при КТ в течение 2 ч. Выпаривание и очистка препаративной ОФ ВЭЖХ (Кергозй С18, градиент 10-95% ацетонитрил/0.1% водн. муравьиная кислота) обеспечило 15 мг (16% от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 2): Ву = 0.78 мин; МС (Е8Хроз): т/ζ = 481 (М+Н)+ ¹Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-сХ,): δ = 8.26 (шир. з, 2Н), 7.98 (з, 1Н), 7.36 (з, 1Н), 7.30 (з, 1Н), 6.84 (з, 1Н), 4.44 (з, 2Н), 3.95 (з, 3Н), 3.92 (з, 2Н), 3.32 (ΐ, 2Н), 2.87-2.79 (т, 4Н), 1.52-1.39 (т, 2Н), 0.81 (ΐ, 3Н) част. на млн.

Пример 25. 6-[(Циклопропилметокси)метил]-5-(7-метокси-5-метил-1-бензотиофен-2-ил)-7-(пиперазин-1-илметил)пирроло[2,1-Х][ 1,2,4]триазин-4-амин бис(формамид)

Раствор промежуточного соединения 23А (100 мг, 185 мкмоль) в дихлорметане (2 мл) обрабатывали тионилхлоридом (27 мкл, 371 мкмоль). Смесь взбалтывали при КТ в течение 15 мин. и затем выпаривали. Остаток растворяли в циклопропилметаноле (2 мл), обрабатывали с помощью ДИПЭМ (48 мкл, 278 мкмоль) и взбалтывали при 70°С в течение 2 ч. После выпаривания, остаток ресуспендировали в 4М растворе хлорида водорода в 1,4-диоксане (2 мл) и взбалтывали при КТ в течение 2 ч. Выпаривание и очистка препаративной ОФ ВЭЖХ (Кергозй С18, градиент 10-95% ацетонитрил/0.1% водн. муравьиная кислота) обеспечило 29 мг (30 % от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 2): Ву = 0.78 мин; МС (ЕЗХроз): т/ζ = 493 (М+Н)+ ¹Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-0₆): δ = 8.28 (шир. з, 2Н), 7.99 (з, 1Н), 7.37 (з, 1Н), 7.30 (з, 1Н), 6.84 (з, 1Н), 4.45 (з, 2Н), 3.95 (з, 3Н), 3.93 (з, 2Н), 3.21 (ά, 2Н), 2.95-2.83 (т, 4Н), 2.61- 56 029556

2.56 (т, 4Н), 2.45 (δ, 3Н), 1.01-0.91 (т, 1Н), 0.46-0.37 (т, 2Н), 0.15-0.08 (т, 2Н) част. на млн.

Пример 26. 6-[(Циклобутилокси)метил]-5-(7-метокси-5-метил-1-бензотиофен-2-ил)-7-(пиперазин-1илметил)пирроло[2,1-£][1,2,4]триазин-4-амин

Раствор промежуточного соединения 23А (85 мг, 157 мкмоль) в дихлорметане (1.7 мл) обрабатывали тионилхлоридом (23 мкл, 315 мкмоль). Смесь взбалтывали при КТ в течение 15 мин. и затем выпаривали. Остаток растворяли в циклобутаноле (1.7 мл), обрабатывали с помощью ДИПЭМ (41 мкл, 236 мкмоль) и взбалтывали при 70°С в течение 2 ч. После выпаривания, остаток ресуспендировали в 4 М растворе хлорида водорода в 1,4-диоксане (1.7 мл) и взбалтывали при КТ в течение 2 ч. Выпаривание и очистка препаративной ОФ ВЭЖХ (ΚΌρϊΌδΐΙ С18, градиент 10-95 % ацетонитрил/0.1% водн. муравьиная кислота) обеспечило 23 мг (28% от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 2): Ву = 0.82 мин; МС (ΕδΙροδ): т/ζ = 493 (М+Н)+ Ή-ЯМР (400 МГц, ДМСО-й₆): δ = 8.01 (δ, 1Н), 7.37 (δ, 1Н), 7.32 (δ, 1Н), 6.85 (δ, 1Н), 4.37 (δ, 2Н), 4.06-3.86 (т, 6Н), 3.14-2.97 (т, 4Н), 2.80-2.62 (т, 4Н), 2.45 (δ, 3Н), 2.101.96 (т, 2Н), 1.83-1.69 (т, 2Н), 1.65-1.52 (т, 1Н), 1.49-1.33 (т, 1Н) част. на млн.

Пример 27. 6-(Изопропоксиметил)-5-(7-метокси-5-метил-1-бензотиофен-2-ил)-7-(пиперазин-1-илметил)пирроло[2,1-£][1,2,4]триазин-4-амина формамид

Раствор промежуточного соединения 23А (65 мг, 120 мкмоль) в дихлорметане (1.3 мл) обрабатывали тионилхлоридом (17 мкл, 241 мкмоль). Смесь взбалтывали при КТ в течение 15 мин и затем выпаривали. Остаток растворяли в 2-пропаноле (1.3 мл), обрабатывали с помощью ДИПЭМ (23 мкл, 132 мкмоль) и взбалтывали при 70°С в течение 1 ч. Добавляли еще ДИПЭМ (23 мкл, 132 мкмоль), и смесь взбалтывали снова при 70°С в течение 1 ч. После этого добавляли другую порцию ДИПЭМ (63 мкл, 362 мкмоль), и взбалтывание продолжали при 90°С в течение 3 ч. После выпаривания, остаток ресуспендировали в 4М растворе хлорида водорода в 1,4-диоксане (1.3 мл) и взбалтывали при КТ в течение 2 ч. Выпаривание и очистка препаративной ОФ ВЭЖХ (ΚΌρϊΌδΐΙ С18, градиент 10-95% ацетонитрил/0.1% водн. муравьиная кислота) обеспечило 23 мг (34% от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 4): Ву = 0.74 мин; МС (ΕδΙροδ): т/ζ = 481 (М+Н)+ Ή-ЯМР (400 МГц, ДМСО-й₆): δ = 8.30 (δ, 1Н), 7.98 (δ, 1Н), 7.37 (δ, 1Н), 7.30 (δ, 1Н), 6.84 (δ, 1Н), 4.43 (δ, 2Н), 3.95 (δ, 3Н), 3.90 (δ, 2Н), 3.57 (т, 1Н, наложение с водным пиком), 2.88-2.78 (т, 4Н), 2.45 (δ, 3Н), 1.04 (ά, 6Н) част. на млн.

Пример 28. 6-[(2-Метоксиэтокси)метил]-5-(7-метокси-5-метил-1-бензотиофен-2-ил)-7-(пиперазин-1 илметил)пирроло[2,1-£][1,2,4]триазин-4-амина формамид

Раствор промежуточного соединения 23А (100 мг, 185 мкмоль) в дихлорметане (2 мл) обрабатывали тионилхлоридом (27 мкл, 371 мкмоль). Смесь взбалтывали при КТ в течение 15 мин. и затем выпаривали. Остаток растворяли в 2-метоксиэтаноле (2 мл), обрабатывали с помощью ДИПЭМ (35 мкл, 204 мкмоль) и взбалтывали при 70°С в течение 1 ч. После выпаривания, остаток ресуспендировали в 4М растворе хлорида водорода в 1,4-диоксане (2 мл) и взбалтывали при КТ в течение 2 ч. Выпаривание и очистка препаративной ОФ ВЭЖХ (ΚΌρτοδίΙ С18, градиент 10-95% ацетонитрил/0.1% водн. муравьиная кислота) обеспечило 50 мг (50% от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 2): Ву = 0.75 мин; МС (ΕδΙροδ): т/ζ = 497 (М+Н)+ Ή-ЯМР (400 МГц, ДМСО-й₆): δ = 8.26 (шир. δ, 1Н), 7.99 (δ, 1Н), 7.39 (δ, 1Н), 7.30 (δ, 1Н), 6.84 (δ, 1Н), 4.48 (δ, 2Н), 3.95 (δ, 3Н), 3.94 (δ, 2Н), 3.52-3.46 (т, 2Н, наложение с водным пиком), 3.44-3.37 (т, 2Н, наложение с водным пиком), 3.20 (δ, 3Н), 2.94-2.84 (т, 4Н), 2.61-2.54 (т,

- 57 029556

4Н, наложение с ДМСО пик), 2.45 (5, 3Н) част. на млн.

Пример 29. 5-(7-Метокси-5-метил-1-бензотиофен-2-ил)-7-(пиперазин-1-илметил)-6-[(2,2,2-трифторэтокси)метил]пирроло[2,1-ί][1,2,4]триазин-4-амина формамид

Раствор промежуточного соединения 23А (100 мг, 185 мкмоль) в дихлорметане (2 мл) обрабатывали тионилхлоридом (27 мкл, 371 мкмоль). Смесь взбалтывали при КТ в течение 15 мин и затем выпаривали. Остаток растворяли в 2,2,2-трифторэтаноле (2 мл), обрабатывали с помощью ДИПЭМ (35 мкл, 204 мкмоль) и взбалтывали при 70°С в течение 1 ч. Затем добавляли еще ДИПЭМ (35 мкл, 204 мкмоль), и взбалтывание продолжали при КТ в течение 1 ч. После выпаривания, остаток ресуспендировали в 4 М растворе хлорида водорода в 1,4-диоксане (2 мл) и взбалтывали при КТ в течение 2 ч. Выпаривание и очистка препаративной ОФ ВЭЖХ (Керго5Й С18, градиент 10-95% ацетонитрил/0.1% водн. муравьиная кислота) обеспечило 23 мг (23% от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 2): Ву = 0.79 мин; МС (Е81ро5): т/ζ = 521 (М+н)+ 'Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-й₆): δ = 8.28 (шир. 5, 1Н), 8.00 (5, 1Н), 7.37 (5, 1Н), 7.30 (5, 1Н), 6.85 (5, 1Н), 4.66 (5, 2Н), 4.08 (ς, 2н), 3.95 (5, 3Н), 3.92 (5, 2Н), 2.85-2.75 (т, 4Н),

2.45 (5, 3Н) част. на млн.

Пример 3 0. 6-[(2-Аминоэтокси)метил]-5 -(7-метокси-5 -метил-1 -бензотиофен-2-ил)-7-(пиперазин-1 илметил)пирроло[2,1-1][1,2,4]триазин-4-амина тригидрохлорид

Раствор промежуточного соединения 23А (150 мг, 278 мкмоль) в дихлорметане (5 мл) обрабатывали тионилхлоридом (40 мкл, 556 мкмоль). Смесь взбалтывали при КТ в течение 15 мин. и затем выпаривали. Остаток растворяли в ТГФ (0.5 мл) и обрабатывали с трет-бутил (2-гидроксиэтил)карбамат (1 мл) и ДИПЭМ (242 мкл, 1.39 ммоль). Смесь взбалтывали при 100°С в течение ночи. После выпаривания, остаток ресуспендировали в 1,4-диоксане (10 мл), обрабатывали посредством 4М раствора хлорида водорода в 1,4-диоксане (10 мл) и взбалтывали при КТ в течение 1 ч. Летучие компоненты были удалены под сниженным давлением, и остаток очищали препаративной ОФ ВЭЖХ (Керго5Й С18, градиент 10-95% ацетонитрил/0.1% водн. муравьиная кислота). Дополнительная очистка препаративной ОФ ВЭЖХ (8Ые1й КР18, 25% ацетонитрил/75% 0.01% водн. ТФУ), за которой следовала лиофилизация из 4М раствора хлорида водорода в 1,4-диоксане обеспечили 10 мг (6 % от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХМС (способ 2): Ву = 0.58 мин; МС (Е8^о5): т/ζ = 482 (М+Н)+ ¹Н-ЯМР (400 МГц, Ό₂Θ): δ = 8.12 (5, 1Н), 7.50 (5, 1Н), 7.44 (5, 1Н), 6.99 (5, 1Н), 4.61 (5, 2Н), 4.04 (5, 3Н), 3.88-3.80 (т, 1Н), 3.70-3.60 (т, 3Н), 3.523.46 (т, 4Н), 3.40-3.34 (т, 4Н), 3.07 (ΐ, 2Н), 2.51 (5, 3Н) част. на млн.

Пример 31. Метил {[4-амино-5-(7-метокси-5-метил-1-бензотиофен-2-ил)-7-(пиперазин-1-илметил) пирроло[2,1-ί][1,2,4]триазин-6-ил]метокси}ацетат

Раствор промежуточного соединения 23А (50 мг, 92 мкмоль) в дихлорметане (2 мл) обрабатывали тионилхлоридом (13 мкл, 186 мкмоль). Смесь взбалтывали при КТ в течение 15 мин и затем выпаривали. Остаток растворяли в метилгликоляте (1 мл), обрабатывали с помощью ДИПЭМ (80 мкл, 464 мкмоль) и взбалтывали при 70°С в течение 2 ч. После выпаривания остаток ресуспендировали в дихлорметане (1.6 мл), обрабатывали трифторуксусной кислотой (400 мкл, 5.19 ммоль) и взбалтывали при КТ в течение 1 ч. После этого, смесь выпаривали, и остаток очищали препаративной ОФ ВЭЖХ (Керго5Й С18, градиент 10-95% ацетонитрил/0.1% водн. ТФУ). Фракции, содержащие указанное в заголовке соединение нейтрализовали с нас. водн. раствором гидрокарбоната натрия и выпаривали. Остаток ресуспендировали в воде, и смесь экстрагировали три раза посредством дихлорметана. Объединенные органические фазы высуши- 58 029556

вали над сульфатом натрия и выпаривали с получением 21 мг (43% от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 2): Ву = 0.72 мин; МС (ЕЗЩок): т/ζ = 511 (М+Н)+ 'Н-ЯМР (400 МГц, ДМСОа₆): δ = 7.99 (δ, 1Н), 7.39 (δ, 1Н), 7.31 (δ, 1Н), 6.85 (δ, 1Н), 4.59 (δ, 2Н), 4.11 (δ, 2Н), 3.95 (δ, 3Н), 3.90 (δ, 2Н), 3.57 (δ, 3Н), 2.81-2.69 (т, 4Н), 2.48-2.39 (т, 7Н) част. на млн.

Пример 32. {[4-Амино-5-(7 -метокси-5 -метил-1 -бензотиофен-2-ил)-7-(пиперазин-1 -илметил)пирроло [2,1-ί] [1,2,4]триазин-6-ил]метокси}уксусная кислота

Раствор промежуточного соединения 24А (200 мг, 327 мкмоль) в ТГФ (14 мл) обрабатывали с 2.5 М водн. лития гидроксид раствор (16 мл) и взбалтывали при 80°С в течение 2 ч. Смесь затем объединяли с реакционной смесью 27 мг пробного образца. Водную фазу экстрагировали два раза с ТГФ, и объединенные органические фазы выпаривали. Остаток растворяли в 4М растворе хлорида водорода в 1,4диоксане (2 мл) и взбалтывали при КТ в течение 3 ч. После выпаривания, остаток очищали препаративной ОФ ВЭЖХ (К.ерго8Й С18, градиент 10-95% ацетонитрил/0.1% водн. ТФУ). Лиофилизация из 4 М раствора хлорида водорода в 1,4-диоксане и повторное очищение препаративной ОФ ВЭЖХ ^ВгИде С18, градиент 5-95% ацетонитрил/0.1% водн. раствор гидроксида аммония) обеспечило 13 мг (7% от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 2): Ву = 0.69 мин; МС (ЕЗЩок): т/ζ = 497 (М+Н)+ 'Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆): δ = 8.00 (δ, 1Н), 7.38 (δ, 1Н), 7.30 (δ, 1Н), 6.84 (δ, 1Н), 4.54 (δ, 2Н), 4.08 (δ, 2Н), 3.95 (δ, 3Н), 3.79 (δ, 2Н), 2.99-2.89 (т, 4Н), 2.73-2.63 (т, 4Н), 2.44 (δ, 3Н) част, на млн.

Пример 33. 2-{[4-Амино-5-(7-метокси-5-метил-1-бензотиофен-2-ил)-7-(пиперазин-1-илметил) пирроло [2,1-ί][1,2,4]триазин-6-ил]метокси}ацетамид

Промежуточное соединение 24А (200 мг, 327 мкмоль) обрабатывали посредством 7 М раствора аммиака в метаноле (10 мл) и взбалтывали при КТ в течение ночи. Смесь затем объединяли с реакционной смесью 20 мг пробного образца, и растворители выпаривали. Остаток обрабатывали посредством 4 М раствора хлорида водорода в 1,4-диоксане (2 мл) и взбалтывали при КТ в течение 2 ч. Выпаривание и последующие очистки препаративной ОФ ВЭЖХ (сначала Ксргокй С18, градиент 10-95% ацетонитрил/0.1% водн. ТФУ; затем XВ^^ά§с С18, градиент 5-95% ацетонитрил/0.1% водн. раствор гидроксида аммония) обеспечило 5.5 мг (3% от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 2): Ву = 0.69 мин; МС (ЕЗЩок): т/ζ = 496 (М+Н)+ Ίί-ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆): δ = 8.14-7.59 (шир. δ, 1Н), 7.99 (δ, 1Н), 7.39 (δ, 1Н), 7.35-7.22 (т, 3Н), 6.85 (δ, 1Н), 4.54 (δ, 2Н), 3.95 (δ, 3Н), 3.90 (δ, 2Н), 3.79 (δ, 2Н), 2.73-2.66 (т, 4Н), 2.45 (δ, 3Н), 2.43-2.35 (т, 4Н) част. на млн.

Пример 34. 2-({7-[(4-Ацетилпиперазин-1 -ил)метил]-4-амино-5-(7-метокси-5-метил-1 -бензотиофен2-ил)пирроло[2,1 -ί] [1,2,4]триазин-6-ил}метокси)ацетамид

Раствор из примера 33 (105 мг, 68% чистота, 144 мкмоль) в ТГФ/дихлорметан (1:2.5, 3.9 мл) обрабатывали карбонатом натрия (179 мг, 1.6 ммоль) и взбалтывали при КТ в течение 30 мин. Добавляли ацетилхлорид (30 мкл, 424 мкмоль), и полученную смесь взбалтывали при КТ в течение 30 мин, затем гасили при помощи метанола (2 мл) и выпаривали. Очищение препаративной ОФ ВЭЖХ (Ксргокй С18, градиент 10-95% ацетонитрил/0.1% водн. муравьиная кислота) обеспечило 30 мг (85% чистота, 34% от теор.) соединения, указанного в заголовке.

- 59 029556

ЖХ-МС (способ 5): Ву = 1.67 мин; МС (ΕδΙροδ): т/ζ = 538 (М+Н)+ Ή-ЯМР (400 МГц, ДМСО-й₆): δ = 7.99 (δ, 1Н), 7.40 (δ, 1Н), 7.33-7.19 (т, 3Н), 6.85 (δ, 1Н), 4.55 (δ, 2Н), 3.96 (δ, 5Н), 3.80 (δ, 2Н), 3.43-3.36 (т, 4Н), 2.47-2.38 (т, 7Н), 1.97 (δ, 3Н) част. на млн.

Пример 35. 5-(7-Метокси-5-метил-1-бензотиофен-2-ил)-6-(феноксиметил)-7-(пиперазин-1-илметил) пирроло[2,1-Е][1,2,4]триазин-4-амин бис(формамид)

Раствор промежуточного соединения 23А (100 мг, 185 мкмоль) в дихлорметане (2 мл) обрабатывали тионилхлоридом (27 мкл, 371 мкмоль). Смесь взбалтывали при КТ в течение 15 мин. и затем выпаривали. Остаток растворяли в ТГФ (2 мл), обрабатывали с фенол (174 мг, 1.85 ммоль) и ДИПЭМ (48 мкл, 278 мкмоль) и взбалтывали при 70°С в течение 2 ч. Добавляли дополнительные количества фенола (174 мг, 1.85 ммоль) и ДИПЭМ (64 мкл, 371 мкмоль), и взбалтывание продолжали при 70°С в течение ночи. После выпаривания, остаток ресуспендировали в 4М растворе хлорида водорода в 1,4-диоксане (2 мл) и взбалтывали при КТ в течение 2 ч. Выпаривание и очистка препаративной ОФ ВЭЖХ (ΚορυοδίΙ С18, градиент 10-95% ацетонитрил/0.1% водн. муравьиная кислота) обеспечило 8 мг (8% от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 2): Ву = 0.84 мин; МС (ΕδΙροδ): т/ζ = 515 (М+Н)' Ή-ЯМР (400 МГц, ДМСО-й₆): δ = 8.26 (δ, 2Н), 8.02 (δ, 1Н), 7.36 (δ, 1Н), 7.30-7.22 (т, 3Н), 6.99-6.89 (т, 3Н), 6.81 (т, 1Н), 5.04 (δ, 2Н), 3.93 (δ, 5Н), 2.78-2.71 (т, 4Н), 2.42 (δ, 3Н) част. на млн.

Пример 36. 5-(7-Метокси-5-метил-1-бензотиофен-2-ил)-6-[(метиламино)метил]-7-(пиперазин-1илметил)пирроло [2,1-ί][1,2,4]триазин-4-амина тригидрохлорид

Промежуточное соединение 25А (150 мг, 279 мкмоль) в ТГФ (3 мл) обрабатывали уксусной кислотой (32 мкл, 559 мкмоль), 2 М раствором метиламина в ТГФ (698 мкл, 1.39 ммоль) и триацетоксиборогидридом натрия (296 мг, 1.39 ммоль). Смесь взбалтывали при 60°С в течение 2 ч. и затем выпаривали. Остаток растворяли в 4М растворе хлорида водорода в 1,4-диоксане (1.87 мл) и взбалтывали при КТ в течение 2 ч. После выпаривания, остаток очищали препаративной ОФ ВЭЖХ (ΚορυοδίΙ С18, градиент 1095% ацетонитрил/0.1% водн. ТФУ). Лиофилизация из 4 М раствора хлорида водорода в 1,4-диоксане обеспечило 79 мг (49% от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 2): Ву = 0.56 мин; МС (ΕδΙροδ): т/ζ = 452 (М+Н)+ Ή-ЯМР (400 МГц, Ό₂Ο): δ = 8.17 (δ, 1Н), 7.57 (δ, 1Н), 7.46 (δ, 1Н), 7.01 (δ, 1Н), 4.52 (δ, 2Н), 4.46 (δ, 2Н), 4.04 (δ, 3Н), 3.48-3.39 (т, 4Н), 3.25-3.15 (т, 4Н), 2.59 (δ, 3Н), 2.51 (δ, 3Н) част. на млн.

Пример 37. 6-[(Диметиламино)метил]-5-(7-метокси-5-метил-1-бензотиофен-2-ил)-7-(пиперазин-1илметил)пирроло [2,1-ί][1,2,4]триазин-4-амина тригидрохлорид

Раствор промежуточного соединения 25А (150 мг, 279 мкмоль) в ТГФ (3 мл) обрабатывали уксусной кислотой (32 мкл, 559 мкмоль), 2 М раствором диметиламина в ТГФ (698 мкл, 1.39 ммоль) и триацетоксиборогидридом натрия (296 мг, 1.39 ммоль). Смесь взбалтывали при 60°С в течение 2 ч и затем выпаривали. Остаток растворяли в 4М растворе хлорида водорода в 1,4-диоксане (1.88 мл) и взбалтывали при КТ в течение 2 ч. После выпаривания, остаток очищали препаративной ОФ ВЭЖХ (ΚορυοδίΙ С18, градиент 10-95% ацетонитрил/0.1% водн. ТФУ). Лиофилизация из 4 М раствора хлорида водорода в 1,4диоксане обеспечило 83 мг (50% от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 4): Ву =

- 60 029556

0.50 мин; МС (Ε8Σρο5): т/ζ = 466 (М+Н)+ ¹Н-ЯМР (400 МГц, О₂О): δ = 8.17 (5, 1Н), 7.57 (5, 1Н), 7.45 (5, 1Н), 7.01 (5, 1Н), 4.57 (5, 2Н), 4.50 (5, 2Н), 4.04 (5, 3Н), 3.47-3.36 (т, 4Н), 3.21-3.12 (т, 4Н), 2.80 (5, 6Н), 2.51 (5, 3Н) част. на млн.

Пример 3 8. 6-[(Этиламино)метил] -5 -(7-метокси-5-метил-1 -бензотиофен-2-ил)-7-(пиперазин-1 -илметил)пирроло[2,1-ί][1,2,4]триазин-4-амина тригидрохлорид

Раствор промежуточного соединения 25А (60 мг, 111.8 мкмоль) в ТГФ (1 мл) обрабатывали посредством 2 М раствора этиламина в ТГФ (83 мкл, 167 мкмоль), триацетоксиборогидрида натрия (118 мг, 559 мкмоль) и уксусной кислоты (83 мкл, 167 мкмоль). Смесь взбалтывали при 60°С в течение 90 мин. Добавляли дополнительные количества 2М раствора этиламина (83 мкл, 167 мкмоль) и триацетоксиборогидрида натрия (71 мг, 335 мкмоль), и взбалтывание при 60°С продолжали в течение еще 2 ч. После выпаривания, остаток растворяли в 4 М растворе хлорида водорода в 1,4-диоксане (3 мл) и взбалтывали при КТ в течение ночи. Смесь выпаривали, и остаток очищали препаративной ОФ ВЭЖХ (Керго5Й С18, градиент 10-95 % ацетонитрил/0.1 % водн. муравьиная кислота) и лиофилизировали из 4М раствора хлорида водорода в 1,4-диоксане. Повторное очищение препаративной ОФ ВЭЖХ (8ипйге С18, 20% ацетонитрил/80% 0.02% водн. ТФУ) и повторная лиофилизация из 4М раствора хлорида водорода в 1,4-диоксане обеспечили 19 мг (29 % от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 2): Ву = 0.56 мин; МС (Ε8Σρο5): т/ζ = 466 (М+Н)+ ¹Н-ЯМР (400 МГц, О₂О): δ = 8.14 (5, 1Н), 7.56 (5, 1Н), 7.45 (5, 1Н), 7.01 (5, 1Н), 4.45 (5, 4Н), 4.04 (5, 3Н), 3.45-3.32 (т, 4Н), 3.18-3.05 (т, 4Н), 2.99 (ς, 2Н), 2.51 (5, 3Н), 1.10 (ΐ, 3Н) част. на млн.

Пример 39/2-({[4-Амино-5-(7-метокси-5-метил-1-бензотиофен-2-ил)-7-(пиперазин-1-илметил)пирроло[2,1-1][1,2,4]триазин-6-ил]метил}амино)этанол тригидрохлорид

Раствор промежуточного соединения 25А (150 мг, 279 мкмоль) в ТГФ (3 мл) обрабатывали с 2аминоэтанол (84 мкл, 1.39 ммоль), натрия триацетоксиборогидрид (296 мг, 1.39 ммоль) и уксусной кислоты (32 мкл, 559 мкмоль). Смесь взбалтывали при 60°С в течение 2 ч и затем выпаривали. Остаток растворяли в 4М растворе хлорида водорода в 1,4-диоксане (1.87 мл) и взбалтывали при КТ в течение 2 ч. После выпаривания, остаток очищали препаративной ОФ ВЭЖХ (Керго5Й С18, градиент 10-95% ацетонитрил/0.1% водн. ТФУ). Лиофилизация из 4М раствора хлорида водорода в 1,4-диоксане обеспечило 140 мг (80% от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 2): Ву = 0.54 мин; МС (Е8Хро5): т/ζ = 482 (М+Н)+ ¹Н-ЯМР (400 МГц, О₂О): δ = 8.15 (5, 1Н), 7.56 (5, 1Н), 7.45 (5, 1Н), 7.00 (5, 1Н),

4.47 (5, 2Н), 4.37 (5, 2Н), 4.04 (5, 3Н), 3.79-3.71 (т, 2Н), 3.42-3.34 (т, 4Н), 3.19-3.12 (т, 2Н), 3.06-2.97 (т, 4Н), 2.51 (5, 3Н) част. на млн.

Общая методика реакций восстановительного аминирования с промежуточным соединением 25А (ОР1): 0.1М раствор промежуточного соединения 25А в ТГФ обрабатывали с 5 экв. соответствующего аминного компонента, 5 экв. триацетоксиборогидрида натрия и 2 экв. уксусной кислоты. Полученную смесь взбалтывали при 60°С в течение 2 ч. и затем выпаривали. 0.15 М раствор полученного таким образом остатка в 4М растворе хлорида водорода в 1,4-диоксане взбалтывали при КТ в течение 1-2 ч. После выпаривания, остаток очищали, как описано ниже.

Пример 40. рац- 1-{[4-Амино-5-(7-метокси-5-метил-1 -бензотиофен-2-ил)-7-(пиперазин-1 -илметил) пирроло[2,1-1][1,2,4]триазин-6-ил]метил}пиперидин-3-ола тригидрохлорид

- 61 029556

Согласно ОР1, промежуточное соединение 25А (150 мг, 279 мкмоль) подвергали реакции с 3гидроксипиперидином (141 мг, 1.39 ммоль). Очищение препаративной ОФ ВЭЖХ (Керго5Й С18, градиент 10-95 % ацетонитрил/0.1 % водн. ТФУ) и лиофилизация из 4М раствора хлорида водорода в 1,4диоксане обеспечило 178 мг (колич.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 2): Ву = 0.54 мин; МС (ЕЗЩоз): т/ζ = 522 (М+Н)+ ’Н-ЯМР (400 МГц, О₂О): δ = 8.16 (₈, 1Н), 7.55 (₈, 1Н), 7.45 (₈, 1Н), 7.01 (5, 1Н), 4.66-4.16 (т, 5Н), 4.04 (₈, 3Н), 3.55-2.71 (т, 11Н), 2.51 (₈, 3Н), 1.96-1.42 (т, 4Н), 1.64-1.50 (т, 1Н) част. на млн.

Пример 41. 1-{[4-Амино-5-(7-метокси-5-метил-1-бензотиофен-2-ил)-7-(пиперазин-1-илметил) пирроло[2,1-Е][1,2,4]триазин-6-ил]метил}пиперидин-4-ол тригидрохлорид

В соответствии с ОР1, промежуточное соединение 25А (150 мг, 279 мкмоль) подвергали реакции с 4-гидроксипиперидином (141 мг, 1.39 ммоль). Очищение препаративной ОФ ВЭЖХ (Керго5Й С18, градиент 10-95% ацетонитрил/0.1% водн. ТФУ) и лиофилизация из 4М раствора хлорида водорода в 1,4диоксане обеспечило 162 мг (91% от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 4): Ву = 0.48 мин; МС (ЕЗТроа): т/ζ = 522 (М+Н)+ ’Н-ЯМР (400 МГц, О₂О): δ = 8.16 (5, 1Н), 7.58 (шир. 5, 1Н), 7.46 (5, 1Н), 7.01 (5, 1н), 4.67-4.48 (т, 4Н), 4.04 (5, 4Н), 3.59-2.78 (т, 12Н), 2.51 (5, 3Н), 2.14-1.38 (т, 4Н) част. на млн.

Пример 42. рац-1-{[4-Амино-5-(7-метокси-5-метил-1-бензотиофен-2-ил)-7-(пиперазин-1-илметил) пирроло [2,1-ί][1,2,4]триазин-6-ил]метил}пирролидин-3 -ол тригидрохлорид

В соответствии с ОР1, промежуточное соединение 25А (150 мг, 279 мкмоль) подвергали реакции с 3-гидроксипирролидином (113 мкл, 1.39 ммоль). Очищение препаративной ОФ ВЭЖХ (Керго5Й С18, градиент 10-95 % ацетонитрил/0.1 % водн. ТФУ) и лиофилизация из 4 М раствора хлорида водорода в 1,4-диоксане обеспечило 148 мг (85 % от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 4): Ву = 0.46 мин; МС (Е5фо5): т/ζ = 508 (М+Н)+ ’Н-ЯМР (400 МГц, О₂О): δ = 8.18 (5, 1Н), 7.58 (5, 1Н), 7.46 (5, 1Н), 7.01 (5, 1Н), 4.71-4.30 (т, 5Н), 4.04 (5, 3Н), 3.70-2.95 (т, 12Н), 2.51 (5, 3Н), 2.32-2.14 (т, 1Н), 2.031.87 (т, 1Н) част. на млн.

Пример 43. 6-[(Диэтиламино)метил]-5-(7-метокси-5-метил-1-бензотиофен-2-ил)-7-(пиперазин-1илметил)пирроло [2,1-ί][1,2,4]триазин-4-амина тригидрохлорид

В соответствии с ОР1, промежуточное соединение 25А (150 мг, 279 мкмоль) подвергали реакции с диэтиламином (144 мкл, 1.39 ммоль). Очищение препаративной ОФ ВЭЖХ (Керго5Й С18, градиент 1095% ацетонитрил/ 0.1% водн. ТФУ) и лиофилизация из 4М раствора хлорида водорода в 1,4-диоксане обеспечили 127 мг (69% от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 2): Ву = 0.55 мин; МС (ЕЗХров): т/ζ = 494 (М+Н)+ ’Н-ЯМР (400 МГц, О₂О): δ = 8.19 (5, 1Н), 7.61 (5, 1Н), 7.47 (5, 1Н), 7.01 (5, 1Н), 4.59 (5, 2Н), 4.51 (5, 2Н), 4.04 (5, 3Н), 3.47-3.35 (т, 4Н), 3.29-3.00 (т, 8Н), 2.51 (5, 3Н), 1.07 (1, 6н) част. на млн.

Пример 44. 6-[(Циклобутиламино)метил]-5-(7-метокси-5-метил-1-бензотиофен-2-ил)-7-(пиперазин1 -илметил)пирроло [2,1-ί][1,2,4]триазин-4-амина тригидрохлорид

- 62 029556

В соответствии с ОР1, промежуточное соединение 25А (150 мг, 279 мкмоль) подвергали реакции с циклобутиламином (119 мкл, 1.39 ммоль). Очищение препаративной ОФ ВЭЖХ (Кергозй С18, градиент 10-95% ацетонитрил/0.1% водн. ТФУ) и лиофилизация из 4М раствора хлорида водорода в 1,4-диоксане обеспечило 127 мг (72% от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 2): Ву = 0.58 мин; МС (ЕЗЩоз): т/ζ - 492 (М+Н)+ ^ХН-ЯМР (400 МГц, Ό₂Ο): δ = 8.1б (з, 1Н), 7.59 (з, 1Н), 7.47 (з, 1Н), 7.00 (з, 1Н), 4.40 (з, 2Н), 4.37 (з, 2Н), 4.04 (з, 3Н), 3.б9-3.58 (т, 1Н), 3.44-3.33 (т, 4Н), 3.21-3.12 (т, 4Н), 2.51 (з, 3Н), 2.02-1.87 (т, 4Н), 1.81-1.б2 (т, 2Н) част. на млн.

Пример 45. 5-(7-Метокси-5-метил-1-бензотиофен-2-ил)-7-(пиперазин-1-илметил)-б-(пирролидин-1илметил)пирроло [2,1-ί][1,2,4]триазин-4-амина тригидрохлорид

В соответствии с СР1, промежуточное соединение 25А (150 мг, 279 мкмоль) подвергали реакции с пирролидином (11б мкл, 1.39 ммоль). Очищение препаративной ОФ ВЭЖХ (Кергозй С18, градиент 10-95 % ацетонитрил/ 0.1% водн. ТФУ) и лиофилизация из 4 М раствора хлорида водорода в 1,4-диоксане обеспечило 112 мг (б4% от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 2): Ву = 0.54 мин; МС (ЕЗЩоз): т/ζ = 492 (М+Н)+ ^ХН-ЯМР (400 МГц, Ό₂Ο): δ = 8.19 (з, 1Н), 7.б0 (з, 1Н), 7.4б (з, 1Н), 7.01 (з, 1Н), 4.70-4.б1 (т, 4Н), 4.04 (з, 3Н), 3.55-3.40 (т, бН), 3.35-3.2б (т, 4Н), 3.02-2.87 (т, 2Н), 2.51 (з, 3Н), 1.97-1.83 (т, 4Н) част. на млн.

Пример 4б. б-[(Циклопропиламино)метил]-5-(7-метокси-5-метил-1-бензотиофен-2-ил)-7-(пиперазин- 1-илметил)пирроло [2,1-ί][1,2,4]триазин-4-амина тригидрохлорид

В соответствии с СР1, промежуточное соединение 25А (200 мг, 372 мкмоль) подвергали реакции с циклопропиламином (129 мкл, 1.8б ммоль). Очищение препаративной ОФ ВЭЖХ (Кергозй С18, градиент 10-95% ацетонитрил/0.1% водн. ТФУ) и лиофилизация из 4М раствора хлорида водорода в 1,4-диоксане обеспечило 140 мг (б2% от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 5): Ву = 1.42 мин; МС (ЕЗЩоз): т/ζ = 478 (М+Н)+ ^ХН-ЯМР (400 МГц, Ό₂Ο): δ = 8.1б (з, 1Н), 7.5б (з, 1Н), 7.4б (з, 1Н), 7.01 (з, 1Н), 4.57 (з, 2Н), 4.47 (з, 2Н), 4.04 (з, 3Н), 3.4б-3.34 (т, 4Н), 3.19-3.07 (т, 4Н), 2.01-2.54 (т, 1Н), 2.51 (з, 3Н), 0.75-0.б4 (т, 4Н) част. на млн.

Пример 47. б-{[(Циклопропилметил)амино]метил}-5-(7-метокси-5-метил-1-бензотиофен-2-ил)-7(пиперазин-1 -илметил)пирроло [2,1-ί][1,2,4]триазин-4-амина тригидрохлорид

В соответствии с ОР1, промежуточное соединение 25А (200 мг, 372 мкмоль) подвергали реакции с циклопропилметиламином (1б1 мкл, 1.8б ммоль). Очищение препаративной ОФ ВЭЖХ (Кергозй С18,

- б3 029556

градиент 10-95% ацетонитрил/0.1% водн. ТФУ) и лиофилизация из 4 М раствора хлорида водорода в 1,4диоксане обеспечило 163 мг (69% от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 2): Ву = 0.60 мин; МС (ЕЗ1ров): т/ζ = 492 (М+н)+ ¹Н-ЯМР (400 МГц, ϋ₂Ο): δ = 8.14 (в, 1Н), 7.57 (в, 1Н), 7.45 (в, 1Н), 7.00 (в, 1Н), 4.50 (в, 2Н), 4.44 (в, 2Н), 4.04 (в, 3Н), 3.42-3.34 (т, 4Н), 3.16-3.07 (т, 4Н), 2.86 (ά, 2Н), 2.50 (в, 3Н), 0.89-0.76 (т, 1н), 0.55-0.45 (т, 2Н), 0.23-0.14 (т, 2Н) част, на млн.

Пример 48. N-{[4-Амино-5-(7-метокси-5-метил-1-бензотиофен-2-ил)-7-(пиперазин-1-илметил) пирроло[2,1-ί][1,2,4]триазин-6-ил]метил} глицина тригидрохлорид

Раствор промежуточного соединения 25А (161 мг, 300 мкмоль) в ТГФ (3.2 мл) обрабатывали посредством 2-аминоуксусной кислоты (112 мг, 1.5 ммоль), триацетоксиборогидрида натрия (317 мг, 1.5 ммоль) и уксусной кислоты (34 мкл, 600 мкмоль). Полученную смесь взбалтывали при 60°С в течение 2 ч и затем выпаривали. Остаток очищали препаративной ОФ ВЭЖХ (КерговП С18, градиент 10-95% ацетонитрил/0.1% водн. ТФУ). Полученный таким образом продукт растворяли в 4М растворе хлорида водорода в 1,4-диоксане (2 мл) и взбалтывали при КТ в течение 1 ч. После выпаривания, остаток очищали препаративной ОФ ВЭЖХ (КерговП С18, градиент 10-95% ацетонитрил/0.1% водн. ТФУ). Последующая лиофилизация из 4М раствора хлорида водорода в 1,4-диоксане обеспечила 18 мг (9% от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 2): Ву = 0.63 мин; МС (ЕЗ1ров): т/ζ = 496 (М+н)+ ¹Н-ЯМР (400 МГц, ΙΤΟ): δ = 8.14 (в, 1Н), 7.54 (в, 1Н), 7.45 (в, 1Н), 6.99 (в, 1Н), 4.42 (в, 2Н), 4.36 (в, 2Н), 4.03 (в, 3Н), 3.64 (в, 2н), 3.42-3.33 (т, 4Н), 3.07-2.96 (т, 4Н), 2.50 (в, 3Н) част. на млн.

Пример 49. 4-{[4-Амино-5-(7-метокси-5-метил-1-бензотиофен-2-ил)-7-(пиперазин-1-илметил) пирроло[2,1-ί][1,2,4]триазин-6-ил]метил} пиперазин-2-она тригидрохлорид

Раствор промежуточного соединения 27А (220 мг, 354 мкмоль) в 4М растворе хлорида водорода в 1,4-диоксане (2 мл) взбалтывали при КТ в течение 2 ч. После этого, смесь выпаривали, оставляя 235 мг сырого продукта, который использовали в следующей стадии без дополнительной очистки. ЖХ-МС (способ 4): Ву = 0.60 мин; МС (ЕЗТров): т/ζ = 521 (М+Н)+.

Пример 50. [4-Амино-5-(7-метокси-5-метил-1-бензотиофен-2-ил)-7-(морфолин-4-илметил)пирроло [2,1-ί][1,2,4]триазин-6-ил]метанол

Раствор промежуточного соединения 20А (500 мг, чистота 87%, 1.28 ммоль) и хлорида 4метиленморфолин-4-иния (347 мг, 2.56 ммоль) в ДМФ (28 мл) взбалтывали при 70°С в течение 1.5 ч. Смесь разбавляли этилацетатом и промывали с нас. водн. раствором гидрокарбоната натрия и нас. водн. натрия хлорид раствор. Органический слой высушивали сульфатом магния и выпаривали под сниженным давлением с получением 710 мг (чистота 78%, 99% от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 2): Ву = 0.65 мин; МС (ЕЗТров): т/ζ = 440 (М+Н)+.

Пример 51. (35)-3-({[4-Амино-5-(7-метокси-5-метил-1-бензотиофен-2-ил)-7-(морфолин-4-илметил) пирроло[2,1-(][1,2,4]триазин-6-ил]метил}амино)пирролидин-2-он

- 64 029556

Раствор промежуточного соединения 33А (65 мг, 149 мкмоль) в метаноле (2 мл) обрабатывали с (3δ)-3-аминопирролидин-2-он (45 мг, 446 мкмоль), цианоборогидрид натрия (47 мг, 743 мкмоль) и уксусной кислоты (26 мкл, 446 мкмоль). После перемешивания при 60°С в течение 16 ч, полученную смесь отделяли препаративной ОФ ВЭЖХ (Керго8Й С18, градиент 20-40% ацетонитрил/0.2% водн. ТФУ). Полученный таким образом продукт растворяли в метаноле и отфильтровывали через анионнообменный картридж ^1га1о8рйеге8 δΡΕ, РЬ-НСО₃ МР-ге81п). Картридж элюировали посредством метанола, и фильтрат выпаривали с получением 49 мг (63 % от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 2): Ву = 0.71 мин; МС (Εδ^08): т/ζ = 522 (М+Н)+ 1Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-й₆): δ = 7.96 (8, 1Н), 7.66 (8, 1Н), 7.5-8.1 (шир. 8, 1Н), 7.44 (8, 1Н), 7.31 (8, 1Н), 6.84 (8, 1Н), 5.4-6.0 (шир. 8, 1Н), 3.95 (8, 3Н), 3.91 (8, 2Н), 3.75 (ά, 2Н), 3.50-3.66 (т, 4Н), 3.06-3.19 (т, 3Н), 2.94-3.05 (т, 1Н), 2.61 (1, 1Н), 2.45 (1, 3Н), 2.38-2.44 (т, 4Н), 1.89-1.99 (т, 1Н), 1.49-1.60 (т, 1Н) част, на млн.

Пример 52. 4-{[4-Амино-5-(7-метокси-5-метил-1-бензотиофен-2-ил)-7-(морфолин-4-илметил) пирроло[2,1-1][1,2,4]триазин-6-ил]метил}пиперазин-2-он

Раствор промежуточного соединения 33А (65 мг, 149 мкмоль) в метаноле (2 мл) обрабатывали посредством 2-оксопиперазина (45 мг, 446 мкмоль), цианоборогидрида натрия (47 мг, 743 мкмоль) и уксусной кислоты (26 мкл, 446 мкмоль). После перемешивания при 60°С в течение 16 ч, полученную смесь отделяли препаративной ОФ ВЭЖХ (Керго8Й С18, градиент 20-40% ацетонитрил/0.2% водн. ТФУ). Полученный таким образом продукт растворяли в метаноле и отфильтровывали через анионнообменный картридж ^1га1о8рйеге8 δΡΕ, РЬ-НСО₃ МР-ге81п). Картридж элюировали посредством метанола, и фильтрат выпаривали с получением 41 мг (53% от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 2): Ву = 0.70 мин; МС (Εδφθ8): т/ζ = 522 (М+Н)+ Ή-ЯМР (400 МГц, ДМСО-й₆): δ = 7.97 (8, 1Н), 7.67 (шир. 8, 1Н), 7.55-8.05 (шир. 8, 1Н), 7.38 (8, 1Н), 7.30 (8, 1Н), 6.84 (8, 1Н), 5.29-5.88 (шир. 8, 1Н), 3.95 (8, 3Н), 3.92 (8, 2Н), 3.58 (8, 2Н), 3.51-3.56 (т, 4Н), 3.00-3.06 (т, 2Н), 2.85 (8, 2Н), 2.45 (з, 3Н), 2.43-2.48 (т, 5Н) част. на млн.

Пример 53. рац-1-({[4-Амино-5-(7-метокси-5-метил-1-бензотиофен-2-ил)-7-(морфолин-4-илметил) пирроло[2,1-1][1,2,4]триазин-6-ил]метил}амино)пропан-2-ол

Раствор промежуточного соединения 33А (64 мг, 146 мкмоль) в метаноле (2 мл) обрабатывали посредством рац-1-аминопропан-2-ола (33 мг, 439 мкмоль), цианоборогидрида натрия (46 мг, 731 мкмоль) и уксусной кислоты (25 мкл, 439 мкмоль). После перемешивания при 60°С в течение 16 ч, полученную смесь отделяли препаративной ОФ ВЭЖХ (Керго8Й С18, градиент 20-40% ацетонитрил/0.2% водн. ТФУ). Полученный таким образом продукт растворяли в метаноле и отфильтровывали через анионнообменный картридж ^1га1о8рйеге8 δΡΕ, РЬ-НСО₃ МР-ге81п). Картридж элюировали посредством метанола, и фильтрат выпаривали с получением 42 мг (57 % от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 5): Ву = 1.63 мин; МС (Εδ^): т/ζ = 497 (М+Н)+ Ή-ЯМР (400 МГц, ДМСО-й₆): δ = 7.96 (8, 1Н), 7.477.92 (шир. 8, 1Н), 7.39 (8, 1Н), 7.30 (8, 1Н), 6.84 (8, 1Н), 5.36-5.92 (шир. 8, 1Н), 4.36 (ά, 1Н), 3.95 (з, 3Н), 3.90 (8, 2Н), 3.64-3.75 (т, 2Н), 3.49-3.61 (т, 5Н), 2.45 (8, 3Н), 2.39-2.47 (т, 4Н), 2.31-2.38 (т, 2Н), 0.97 (ά, 3Н) част. на млн.

Пример 54. 1-({[4-Амино-5-(7-метокси-5-метил-1-бензотиофен-2-ил)-7-(морфолин-4-илметил) пирроло[2,1-1][1,2,4]триазин-6-ил]метил}амино)-2-метилпропан-2-ол

- 65 029556

Раствор промежуточного соединения 33А (80 мг, 183 мкмоль) в метаноле (2 мл) обрабатывали посредством 1-амино-2-метилпропан-2-ола (34 мг, 274 мкмоль), цианоборогидрида натрия (57 мг, 914 мкмоль) и уксусной кислоты (21 мкл, 366 мкмоль). После перемешивания при 60°С в течение 16 ч, полученную смесь отделяли препаративной ОФ ВЭЖХ (КергозП С18, градиент 20-40% ацетонитрил/0.2% водн. ТФУ). Полученный таким образом продукт растворяли в метаноле и отфильтровывали через анионнообменный картридж (8!га!озрЬегез 8РЕ, РЬ-НСО₃ МР-гезт). Картридж элюировали посредством метанола, и фильтрат выпаривали с получением 29 мг (31% от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 2): Ву = 0.65 мин; МС (^роз): т/ζ = 511 (М+Н)+ ¹Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆): δ = 7.96 (з, 1Н), 7.50-8.02 (шир. з, 1Н), 7.42 (з, 1Н), 7.28 (з, 1Н), 6.84 (з, 1Н), 5.4-6.0 (шир. з, 1Н), 4.11 (з, 1Н), 3.95 (з, 3Н), 3.90 (з, 2Н), 3.70 (б, 2Н), 3.51-3.58 (т, 4Н), 2.45 (з, 3Н), 2.39-2.46 (т, 4Н), 2.33 (б, 2Н), 1.83-1.92 (т, 1Н), 1.03 (з, 6Н) част. на млн.

Пример 55. 1-(4-{ [4-Амино-6-(гидроксиметил)-5 -(7 -метокси-5 -метил-1 -бензотиофен-2-ил)пирроло [2,1-ί] [1,2,4]триазин-7-ил] метил}пиперазин-1-ил)этанон

Раствор промежуточного соединения 20А (345 мг, 1.01 ммоль) в уксусной кислоте (5 мл) обрабатывали посредством 37% водн. раствора формальдегида (91 мкл, 1.22 ммоль) и 1-ацетилпиперазина (160 мг, 1.22 ммоль). Смесь взбалтывали при 60°С в течение 6 ч. и затем выпаривали. Остаток растворяли в смеси ТГФ/1 М водн. раствор гидроксида лития (1:1, 10 мл) и взбалтывали при КТ в течение 2 ч. Смесь затем объединяли с реакционной смесью 100 мг пробного образца, и добавляли нас. водн. раствор хлорида аммония. Смесь экстрагировали этилацетатом, и органическую фазу промывали с помощью нас. водн. раствора хлорида натрия, высушивали над сульфатом магния и выпаривали под сниженным давлением с получением 678 мг (чистота 87%, 94% от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 2): Ву = 0.71 мин; МС (Е8Хроз): т/ζ = 481 (М+Н)+.

Пример 56. (3К)-3-[({7-[(4-Ацетилпиперазин-1-ил)метил]-4-амино-5-(7-метокси-5-метил-1-бензотиофен-2-ил)пирроло[2,1-1][1,2,4]триазин-6-ил}метил)амино]пирролидин-2-он

Раствор промежуточного соединения 31А (80 мг, 167 мкмоль) в метаноле (1.4 мл) обрабатывали посредством (3К)-3-аминопирролидин-2-она (21 мг, 251 мкмоль), цианоборогидрида натрия (52 мг, 836 мкмоль) и уксусной кислоты (19 мкл, 334 мкмоль). После перемешивания при 60°С в течение 16 ч, полученную смесь отделяли препаративной ОФ ВЭЖХ (КергозП С18, градиент 20-40% ацетонитрил/0.2% водн. ТФУ). Полученный таким образом продукт растворяли в метаноле и отфильтровывали через анионнообменный картридж (8!га!озрЬегез 8РЕ, РЬ-НСО₃ МР-гезт). Картридж элюировали посредством метанола, и фильтрат выпаривали с получением 46 мг (49% от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 2): Ву = 0.70 мин; МС (Е8Хроз): т/ζ = 563 (М+Н)+ ¹Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆): δ = 8.42 (з, 1Н), 8.05 (з, 1Н), 7.93-8.24 (шир. з, 1Н), 7.51 (з, 1Н), 7.34 (з, 1Н), 6.88 (з, 1Н), 5.75-6.07 (шир. з, 1Н), 4.21-4.37 (т, 2Н), 4.19 (з, 2Н), 4.10 (ί, 1Н), 3.96 (з, 3Н), 3.56-3.66 (т, 2Н), 3.44-3.54 (т, 4Н), 3.11-3.27 (т, 4Н), 2.47 (з, 4Н), 2.16-2.25 (т, 1Н), 2.00 (з, 3Н), 1.86-1.95 (т, 1Н) част. на млн.

Пример 57. 1-(4-{ [4-Амино-6- {[(2-гидрокси-2-метилпропил)амино]метил} -5-(7-метокси-5-метил-1 бензотиофен-2-ил)пирроло[2,1-ί][1,2,4]триазин-7 -ил] метил}пиперазин-1 -ил)этанон

- 66 029556

Раствор промежуточного соединения 31А (80 мг, 183 мкмоль) в метаноле (2 мл) обрабатывали посредством 1-амино-2-метилпропан-2-ола (31 мг, 251 мкмоль), цианоборогидрида натрия (53 мг, 836 мкмоль) и уксусной кислоты (19 мкл, 334 мкмоль). После перемешивания при 60°С в течение 16 ч, полученную смесь отделяли препаративной ОФ ВЭЖХ (ΚΌρτοδίΙ С18, градиент 20-40% ацетонитрил/0.2% водн. ТФУ). Полученный таким образом продукт растворяли в метаноле и отфильтровывали через анионнообменный картридж (δίπΠοδρΙκ'ΐτ'δ δΡΕ, РЬ-НСО₃ ΜΡ-ιτ'δΐη). Картридж элюировали посредством метанола, и фильтрат выпаривали с получением 29 мг (31% от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 2): Ву = 0.71 мин; МС (Εδ^οδ): т/ζ = 552 (М+Н)+ ¹Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-ф): δ = 7.96 (δ, 1Н), 7.59-8.02 (шир. δ, 1Н), 7.42 (δ, 1Н), 7.28 (δ, 1Н), 6.84 (δ, 1Н), 5.45-5.93 (шир. δ, 1Н), 4.13 (шир. δ, 1Н), 3.95 (δ, 3Н), 3.93 (δ, 2Н), 3.71 (δ, 2Н), 3.37-3.44 (т, 4Н), 2.45 (δ, 3Н), 2.32-2.43 (т, 6н), 1.97 (δ, 3Н), 1.03 (δ, 6Н) част. на млн.

Пример 58. 4-({ 4-Амино-5 -(7-метокси-5-метил-1 -бензотиофен-2-ил)-6-[(3 -оксопиперазин-1 -ил)метил]пирроло[2,1-ί][1,2,4]триазин-7-ил}метил)пиперазин-1 -карбальдегид формамид

Ангидрид уксусной кислоты (498 мкл, 5.17 ммоль) и муравьиную кислоту (237 мкл, 6.28 ммоль) взбалтывали сначала 2 ч. при 50°С и затем в течение ночи при КТ. После этого смесь разбавляли с дихлорметаном (5.1 мл), и 1.16 мл этого раствора добавляли к раствору из примера 49 (233 мг, 370 мкмоль) в пиридине (89 мкл). После перемешивания при КТ в течение 2 ч, смесь разбавляли с метанолом и затем выпаривали. Остаток очищали препаративной ОФ ВЭЖХ (ΡΌρτοδίΙ С18, градиент 10-95% ацетонитрил/0.1% водн. муравьиная кислота) с получением 77 мг (35% от теор.) указанного в заголовке соединения. ЖХ-МС (способ 4): Ву = 0.62 мин; МС (Εδ^οδ): т/ζ = 549 (М+Н)+ ¹Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-0₆): среди проч. δ = 8.14 (δ, 1Н), 7.97 (δ, 2Н), 7.67 (δ, 1Н), 7.38 (δ, 1Н), 7.30 (δ, 1Н), 6.84 (δ, 1Н), 3.96 (δ, 2Н), 3.95 (δ, 3Н), 3.58 (δ, 2Н), 3.04 (шир. !, 2н), 2.86 (δ, 2Н), 2.45 (δ, 3Н), 2.42 (шир. !, 2Н) част, на млн.

Пример 59. 4-({7-[(4-Ацетилпиперазин-1 -ил)метил] -4-амино-5 -(7-метокси-5-метил-1 -бензотиофен2-ил)пирроло[2,1-ί][1,2,4]триазин-6-ил}метил)пиперазин-2-он

Суспензию из примера 49 (310 мг, 522 мкмоль) в дихлорметане/ТГФ (2.5:1, 9.64 мл) обрабатывали карбонатом натрия (442 мг, 4.17 ммоль) и взбалтывали при КТ в течение 30 мин. Добавляли ацетилхлорид (74 мкл, 1.04 ммоль), и полученную смесь взбалтывали при КТ в течение 2 ч. После гашения метанолом, смесь выпаривали, и остаток очищали препаративной ОФ ВЭЖХ (Ι%ρΐΌδΐ1 С18, градиент 10-95% ацетонитрил/0.1% водн. муравьиная кислота) с получением 133 мг (45% от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 2): Ву = 0.69 мин; МС (ΕδΓροδ): т/ζ = 563 (М+Н)+ ¹Н-ЯМР (400 МГц, метанол-Щ): δ = 7.89 (δ, 1Н), 7.30 (δ, 1Н), 7.28 (δ, 1Н), 6.79 (δ, 1Н), 4.13 (δ, 2Н), 3.98 (δ, 3Н), 3.74 (δ, 2Н), 3.59 (!, 2Н), 3.54 (!, 2Н), 3.18 (!, 2Н), 3.02 (δ, 2Н), 2.68-2.55 (т, 6Н), 2.48 (δ, 3Н), 2.08 (δ, 3Н) част. на млн.

Пример 60. Метил 4-амино-5-(7-метокси-5-метил-1-бензотиофен-2-ил)-7-(пиперазин-1-илкарбонил) пирроло[2,1-ί][1,2,4]триазин-6-карбоксилат бис(формамид)

К раствору промежуточного соединения 28А (15 мг, 26 мкмоль) в смеси ТГФ/метанол (5:1, 180 мкл), охлаждали до 0°С, добавляли (триметилсилил)диазометан (2 М раствор в гексане, 15 мкл, 32 мкмоль). Полученную смесь медленно нагревали до КТ в течение 30 мин. и затем выпаривали. Остаток растворяли в 4 М растворе хлорида водорода в 1,4-диоксане (0.5 мл) и взбалтывали при КТ в течение 1 ч. После выпаривания, остаток очищали препаративной ОФ ВЭЖХ (Ι%ρΐΌδΐ1 С18, градиент 10-95 % ацето- 67 029556

нитрил/0.1% водн. муравьиная кислота) с получением 4.8 мг (35% от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 2): Ву = 0.66 мин; МС (ЕЗГроз): т/ζ = 481 (М-Н)' ¹Н-ЯМР (400 МГц, ДМСОάβ): среди проч. δ = 8.17 (з, 2Н), 8.38-8.23 (шир. з, 1Н), 8.04 (з, 1Н), 7.43 (з, 1Н), 7.31 (з, 1Н), 6.86 (з, 1Н), 5.71-5.58 (шир. з, 1Н), 3.96 (з, 3Н), 3.60 (з, 3Н, наложение с водным пиком), 2.46 (з, 3Н) част, на млн.

Пример 61. 5-(7-Метокси-5-метил-1-бензотиофен-2-ил)-6-(1,3-оксазол-5-ил)-7-(пиперазин-1-илметил)пирроло[2,1-£][1,2,4]триазин-4-амина тригидрохлорид

Раствор промежуточного соединения 25А (100 мг, 0.19 ммоль) в метаноле (3.33 мл) обрабатывали посредством (4-толуолсульфонил)метилизоцианида (36 мг, 0.19 ммоль) и карбоната калия (25 мг, 186 мкмоль). Смесь кипятили в колбе с обратным холодильником в течение 6 ч. Затем ее объединяли с реакционными смесями от трех 30 мг пробных образцов и выпаривали. Остаток растворяли в 4М растворе хлорида водорода в 1,4-диоксане (10 мл) и взбалтывали при КТ в течение 2 ч. После выпаривания, остаток очищали двукратной препаративной ОФ ВЭЖХ (Кергозй С18, градиент 10-95% ацетонитрил/0.1% водн. ТФУ). Дополнительная очистка колоночной хроматографией на силикагеле (дихлорметан/метанол 5:1 с 0.5% водн. аммиак) и лиофилизация из 4М раствора хлорида водорода в 1,4-диоксане обеспечило 75 мг (34% от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 4): Ву = 0.69 мин; МС (ЕЗ^оз): т/ζ = 476 (М-Н)' ¹Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-ф;): среди проч. δ = 8.40 (з, 1Н), 8.20 (з, 1Н), 7.46 (з, 1Н), 7.35 (з, 1Н), 6.96 (з, 1Н), 6.89 (з, 1Н), 3.95 (з, 3Н), 2.46 (з, 3Н) част. на млн.

Пример 62. 6-(Аминометил)-5-(7-метокси-5-метил-1-бензотиофен-2-ил)-7-(пиперазин-1-илметил) пирроло [2,1-£][1,2,4]триазин-4-амина тригидрохлорид

Суспензию промежуточного соединения 29А (76 мг, 134 мкмоль) и 10 % Ρά/С (60 мг) в 0.5М растворе хлорида водорода в метаноле (20 мл) взбалтывали при КТ в течение 3 ч. под 1 атм водорода. Смесь затем отфильтровывали через кизельгур, фильтрат выпаривали, и остаток очищали препаративной ОФ ВЭЖХ (Кергозй С18, градиент 10-95% ацетонитрил/0.1% водн. ТФУ). Полученный таким образом продукт лиофилизировали из 4М раствора хлорида водорода в 1,4-диоксане с получением 34 мг (46% от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 2): Ву = 0.55 мин; МС (ЕЗ^оз): т/ζ = 438 (М-Н)' ¹Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-ф;): среди проч. δ = 8.24 (шир. з, 3Н), 8.12 (з, 1Н), 7.52 (з, 1Н), 7.34 (з, 1Н), 6.89 (з, 1Н), 3.96 (з, 3Н), 3.76-3.63 (т, 1Н), 3.52-3.42 (т, 1Н), 2.47 (з, 3Н) част, на млн.

Пример 63. №{[4-Амино-5-(7-метокси-5-метил-1-бензотиофен-2-ил)-7-(пиперазин-1-илметил)пирроло[2,1 -Г][1,2,4]триазин-6-ил]метил} ацетамид бис(трифторацетат)

Раствор промежуточного соединения 30А (210 мг, 362 мкмоль) в дихлорметане (26 мл) обрабатывали трифторуксусной кислотой (5.2 мл) и взбалтывали при КТ в течение 1 ч. После выпаривания при КТ, остаток очищали препаративной ОФ ВЭЖХ (Кергозй С18, градиент 10-95% ацетонитрил/0.1% водн. ТФУ) с получением 163 мг (63% от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 3): Ву = 2.42 мин; МС (ЕЗ^оз): т/ζ = 480 (М-Н)' ¹Н-ЯМР (400 МГц, ДМСОЧ): среди проч. δ = 9.00-8.75 (шир. з, 1Н), 8.30-8.16 (шир. з, 1Н), 8.08 (з, 1Н), 7.38 (з, 1Н), 7.33 (з, 1Н), 6.87 (з, 1Н), 4.32 (шир. ά, 2Н), 3.96 (з, 3Н), 3.40-2.98 (т, 8Н), 2.46 (з, 3Н), 1.77 (з, 3Н) част. на млн.

Пример 64. №{[4-Амино-5-(7-метокси-5-метил-1-бензотиофен-2-ил)-7-(пиперазин-1-илметил)пирроло[2,1 -Г][1,2,4]триазин-6-ил]метил} ацетамид дигидрохлорид

- 68 029556

Раствор промежуточного соединения 30А (80 мг, 0.14 ммоль) в дихлорметане (10 мл) и трифторуксусная кислота (2 мл) взбалтывали при КТ в течение 1 ч. и затем выпаривали. Очищение препаративной ОФ ВЭЖХ (Кергокй С18, градиент 10-95 % ацетонитрил/0.1% водн. муравьиная кислота) и лиофилизация из смеси метанола и 4 М раствора хлорида водорода в 1,4-диоксане обеспечили 39 мг (50% от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 5): Ву = 1.56 мин; МС (Е81роз): т/ζ = 480 (М+Н)+ ¹Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆): среди проч. δ = 8.12 (к, 1Н), 7.38 (к, 1Н), 7.33 (к, 1Н), 6.87 (к, 1Н), 4.37 (шир. б, 2Н), 3.96 (к, 3Н), 3.85-3.20 (т, 8Н, наложение с водным пиком), 2.46 (к, 3Н), 1.76 (к, 3Н) част, на млн.

Пример 65. №({4-Амино-7-[(4-формилпиперазин-1 -ил)метил]-5 -(7-метокси-5-метил-1 -бензотиофен2-ил)пирроло[2,1-1][1,2,4]триазин-6-ил}метил)ацетамид формамид

Ангидрид уксусной кислоты (304 мкл, 3.16 ммоль) и муравьиную кислоту (145 мкл, 3.16 ммоль) взбалтывали сначала 2 ч при 50°С и затем в течение ночи при КТ. После этого, смесь разбавляли с дихлорметаном (3.1 мл), и 663 мкл этого раствора добавляли к раствору из примера 63 (160 мг, 226 мкмоль) в пиридине (54 мкл). Смесь взбалтывали при КТ в течение 2 ч, затем разбавляли с метанолом (1 мл), и взбалтывание продолжали при 40°С в течение еще 2 ч. После выпаривания, остаток очищали препаративной ОФ ВЭЖХ (Кергокй С18, градиент 10-95% ацетонитрил/0.1% водн. муравьиная кислота) с получением 74 мг (61% от теор.) указанного в заголовке соединения. ЖХ-МС (способ 4): Ву = 0.65 мин; МС (Е81рок): т/ζ = 508 (М+Н)+ ¹Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆): δ = 8.13 (к, 1Н), 8.06-7.89 (т, 3Н), 7.38 (к, 1Н), 7.31 (к, 1Н), 6.85 (к, 1Н), 4.28 (б, 2Н), 4.01-3.88 (т, 5Н), 2.47-2.34 (т, 7Н), 1.75 (к, 3Н) част. на млн.

Пример 66. №({7-[(4-Ацетилпиперазин-1-ил)метил]-4-амино-5-(7-метокси-5-метил-1-бензотиофен2-ил)пирроло[2,1-1][1,2,4]триазин-6-ил}метил)ацетамид

Раствор из примера 63 (110 мг, 229 мкмоль) и ацетилхлорид (32 мкл, 458 мкмоль) в ТГФ/ дихлорметане (1:2, 3 мл) обрабатывали карбонатом натрия (194 мг, 1.83 ммоль) и взбалтывали при КТ в течение ночи. После этого, смесь разбавляли с метанолом (2 мл) и вода (1 мл) и взбалтывали при КТ в течение 1 ч. После выпаривания, остаток очищали препаративной ОФ ВЭЖХ (Кергокй С18, градиент 10-95 % ацетонитрил/0.1% водн. муравьиная кислота). Лиофилизация из 1,4-диоксана и повторное очищение колоночной хроматографией на силикагеле (дихлорметан/метанол 50:1 —>100% метанол) обеспечило 35 мг (28 % от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 2): Ву = 0.70 мин; МС (Е81рок): т/ζ = 522 (М+Н)+ ¹Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆): δ = 8.04-7.98 (т, 2Н), 7.38 (к, 1Н), 7.31 (к, 1Н), 6.85 (к, 1Н), 4.27 (б, 2Н), 3.95 (к, 3Н), 3.91 (к, 2Н), 3.44-3.36 (т, 4Н), 2.48-2.35 (т, 7Н), 1.98 (к, 3Н), 1.75 (к, 3Н) част, на млн.

Пример 67. №({4-Амино-5-(7-метокси-5-метил-1-бензотиофен-2-ил)-7-[(3-оксопиперазин-1-ил) метил]пирроло [2,1-1][1,2,4]триазин-6-ил } метил)ацетамид

- 69 029556

Суспензию промежуточного соединения 32А (35 мг, 73 мкмоль) в метаноле (4.1 мл) обрабатывали с уксусный ангидрид (13 мкл, 146 мкмоль) и 10% Рй/С (41 мг) и взбалтывали при КТ в течение 1 ч под 1 атм водорода. Фильтрация через кизельгур и выпаривание фильтрата обеспечило 30 мг (79 % от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 5): Ву = 1.65 мин; МС (Е8Що8): ш/ζ = 494 (М+Н)+ ¹Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-й₆): δ = 7.99 (8, 2Н), 7.75 (шир. 8, 1Н), 7.39 (8, 1Н), 7.31 (8, 1Н), 6.85 (8, 1Н), 4.27 (8, 1Н), 4.26 (8, 1Н), 3.95 (8, 5Н), 3.19-3.08 (ш, 2Н), 3.05-2.96 (ш, 2Н), 2.66-2.57 (ш, 2Н), 2.45 (8, 3Н), 1.72 (8, 3Н) част, на млн.

Пример 68. 4-Амиио-6-(гидроксиметил)-5-(7-метокси-5-метил-1-беизотиофеи-2-ил)пирроло[2,1-ί]

[1,2,4]триазии-7-карбоиитрил

Раствор промежуточного соединения 38А (1 г, 2.08 ммоль) в ТГФ (10 мл) обрабатывали посредством 1М раствора фторида тетра-п-бутиламмония в ТГФ (12 мл, 12 ммоль). Смесь взбалтывали при КТ в течение ночи и затем выпаривали. Остаток ресуспеидировали в воде и экстрагировали три раза этилацетатом. Объединенные органические фазы высушивали над сульфатом магния и выпаривали. Остаток растирали в порошок в метил-трет-бутиловом эфире, и твердое вещество отфильтровывали с получением 680 мг (78% от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 2): Ву = 0.95 мин; МС (Е8Що8): ш/ζ = 366 (М+Н)+ ¹Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-й₆): δ = 8.61-8.29 (шир. 8, 1Н), 8.18 (8, 1Н), 7.43 (8, 1Н), 7.32 (8, 1Н), 6.87 (8, 1Н), 6.32-6.03 (шир. 8, 1Н), 5.46 (ΐ, 1Н), 4.55 (й, 2Н), 3.96 (8, 3Н), 2.45 (8, 3Н) част. на млн.

Пример 69. 4-Амиио-6-(метоксиметил)-5-(7-метокси-5-метил-1-беизотиофеи-2-ил)пирроло[2,1-ί]

[1,2,4]триазии-7-карбоиитрил

Раствор из примера 68 (60 мг, 164 мкмоль) в дихлорметане (5 мл) обрабатывали тионилхлоридом (18 мкл, 246 мкмоль). Смесь взбалтывали при КТ в течение 15 мин и затем выпаривали. Остаток растворяли в метаноле (2 мл) и обрабатывали с помощью ДИПЭМ (57 мкл, 328 мкмоль). Смесь взбалтывали сначала 2 ч при 60°С, затем нагревали в колбе с обратным холодильником в течение ночи и в заключение нагревали до 150°С в течение 30 мин. в микроволновом устройстве. После этого смесь выпаривали, и остаток очищали препаративной ОФ ВЭЖХ (Керго8Й С18, градиент 10-95% ацетонитрил/0.1% водн. ТФУ). Полученный таким образом продукт растворяли в метаноле и отфильтровывали через аииоииообмеииый картридж (§!га!о8рйеге8 8РЕ, РГ-НСО₃ МР-ге81п). Картридж элюировали посредством метанола, и фильтрат выпаривали с получением 18 мг (28% от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 4): Ву = 1.12 мин; МС (ЕЗТроз): ш/ζ = 379 (М+Н)+ ¹Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-й₆): δ = 8.61-8.40 (шир. 8, 1Н), 8.21 (8, 1Н), 7.42 (8, 1Н), 7.33 (8, 1Н), 6.87 (8, 1Н), 6.34-6.09 (шир. 8, 1Н), 4.47 (8, 2Н), 3.96 (8, 3Н), 3.26 (8, 3Н), 2.45 (8, 3Н) част. на млн.

Пример 70. 4-Амиио-6-(этоксиметил)-5-(7-метокси-5-метил-1-беизотиофеи-2-ил)пирроло[2,1-ί]

[1,2,4]триазии-7-карбоиитрил

Раствор из примера 68 (60 мг, 164 мкмоль) в дихлорметане (5 мл) обрабатывали тионилхлоридом (18 мкл, 246 мкмоль). Смесь взбалтывали при КТ в течение 15 мин. и затем выпаривали. Остаток растворяли в этаноле (2 мл) и обрабатывали с помощью ДИПЭМ (57 мкл, 328 мкмоль). Смесь взбалтывали при 60°С в течение ночи и затем нагревали до 150°С в течение 30 мин в микроволновом устройстве. После этого смесь выпаривали, и остаток очищали препаративной ОФ ВЭЖХ (Керго8Й С18, градиент 10-95% ацетонитрил/0.1% водн. ТФУ). Полученный таким образом продукт растворяли в этаноле (2 мл) и снова нагревали до 150°С в течение 30 мин. в микроволновой печи термостат. ДИПЭМ (57 мкл, 328 мкмоль)

- 70 029556

добавляли, и нагревание до 150°С в микроволновой печи продолжали в течение еще 30 мин. После выпаривания остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (дихлорметан/ метанол 95:5) с получением 16 мг (23% от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 2): Ву = 1.18 мин; МС (ΕδΙροδ): т/ζ = 393 (М+Н)+ ¹Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆): δ = 8.61-8.38 (шир. δ, 1Н), 8.20 (δ, 1Н), 7.42 (δ, 1Н), 7.33 (δ, 1Н), 6.87 (δ, 1Н), 6.33-6.08 (шир. δ, 1Н), 4.51 (δ, 2Н), 3.96 (δ, 3Н), 3.45 (ς, 2Н), 2.45 (δ, 3Н),

1.10 (ί, 3Н) част. на млн.

Пример 71. 4-Амино-5-(7-метокси-5-метил-1-бензотиофен-2-ил)-6-[(3-оксопиперазин-1-ил)метил]

Раствор промежуточного соединения 39А (20 мг, 55 мкмоль) в ТГФ (0.73 мл) обрабатывали уксусной кислотой (6 мкл, 110 мкмоль), 2-оксопиперазином (27 мг, 275 мкмоль) и триацетоксиборогидридом натрия (58 мг, 275 мкмоль). После перемешивания при КТ в течение 3 ч, добавляли дополнительные количества ТГФ (1 мл), уксусная кислоты (6 мкл, 110 мкмоль), 2-оксопиперазин (27 мг, 275 мкмоль) и натрия триацетоксиборогидрид (58 мг, 275 мкмоль), и взбалтывание при КТ продолжали в течение ночи. После выпаривания, остаток очищали препаративной ОФ ВЭЖХ ^βρίοδ^ С18, градиент 10-95% ацетонитрил/0.1% водн. ТФУ). Полученный таким образом продукт растворяли в метаноле и отфильтровывали через анионнообменный картридж (δί^аίοδρйе^еδ δΡΕ, РЬ-НСО₃ МР-гскш). Картридж элюировали посредством метанола, и фильтрат выпаривали с получением 13 мг (52% от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 2): Ву = 0.86 мин; МС (ΕδΙροδ): т/ζ = 447 (М+Н)+ ¹Н-ЯМР (400 МГц, ДМСОб₆): δ = 8.60-8.31 (шир. δ, 1Н), 8.19 (δ, 1Н), 7.74 (δ, 1Н), 7.44 (δ, 1Н), 7.33 (δ, 1Н), 6.87 (δ, 1Н), 6.25-5.98 (шир. δ, 1Н), 3.96 (δ, 3Н), 3.62 (δ, 2Н), 3.13-3.07 (т, 2Н), 2.91 (δ, 2Н), 2.45 (δ, 3Н) част. на млн.

Пример 72. ^№-{[4-Амино-5-(7-метокси-5-метил-1-бензотиофен-2-ил)пирроло[2,1-1][1,2,4]триазин-6,7-диил] бис(метилен) } диацетамид

Суспензию промежуточного соединения 40А (сырой, 85 мг), 10% Рб/С (115 мг) и уксусный ангидрид (40 мкл, 435 мкмоль) в метаноле (12 мл) взбалтывали при КТ под 1 атм водорода. Через 4 ч добавляли дополнительные количества 10% Рб/С (115 мг) и уксусный ангидрид (40 мкл, 435 мкмоль), и взбалтывание при КТ под 1 атм водорода продолжали в течение 2 ч. Полученную смесь отфильтровывали через кизельгур, фильтрат выпаривали, и остаток очищали препаративной ОФ ВЭЖХ (^ρϊΌδΐί С18, градиент 10-95% ацетонитрил/0.1% водн. ТФУ). Полученный таким образом продукт растворяли в метаноле и отфильтровывали через анионнообменный картридж (δί^аίοδρйе^еδ δΡΕ, РЬ-НСО₃ МР-гскш). Картридж элюировали посредством метанола, и фильтрат выпаривали с получением 18 мг (18% от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 2): Ву = 0.73 мин; МС (ΕδΙροδ): т/ζ = 452 (М+Н)+ ¹Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆): δ = 8.29 (шир. ί, 1Н), 8.04 (шир. ί, 1Н), 8.00 (δ, 1Н), 7.34 (δ, 1Н), 7.31 (δ, 1Н), 6.85 (δ, 1Н), 4.58 (б, 2Н), 4.26 (б, 2Н), 3.95 (δ, 3Н), 2.45 (δ, 3Н), 1.81 (δ, 3Н), 1.74 (δ, 3Н) част. на млн.

Пример 73. 2-[4-Амино-6-(гидроксиметил)-5-(7-метокси-5-метил-1-бензотиофен-2-ил)пирроло[2,1ί] [ 1,2,4]триазин-7-ил] пропан-2-ол

Колбу, содержащую суспензию промежуточного соединения 43А (180 мг, 598 мкмоль), промежуточное соединение 6А (299 мг, 897 мкмоль) и фторид цезия (454 мг, 2.99 ммоль) в ТГФ/вода (10:1, 11 мл) дегазировали под сниженным давлением и затем снова наполняли аргоном. Добавляли 4-(ди-третбутилфосфино)^Х-диметиланилин-дихлорпалладий (2:1; 13 мг, 18 мкмоль). Полученную смесь дегазировали снова и взбалтывали под аргоном при 50°С в течение 16 ч. После этого реакционную смесь отде- 71 029556

ляли препаративной ОФ ВЭЖХ (Κβρτοδίΐ С18, градиент 30-50% ацетонитрил/0.2% водн. ТФУ). Фракции продукта разбавляли посредством 7М раствора аммиака в метаноле и затем концентрировали под сниженным давлением. Осадок отфильтровывали, промывали с помощью воды и высушивали в вакууме с получением 99 мг (42% от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 2): Ву = 0.89 мин; МС (ΕδΙροδ): т/ζ = 399 (М+Н)+ ¹Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-й₆): δ = 7.96 (δ, 1Н), 7.51-8.02 (шир. δ, 1Н), 7.37 (δ, 1Н), 7.31 (δ, 1Н), 6.86 (δ, 1Н), 5.99 (δ, 1Н), 5.23-5.82 (шир. δ, 1Н), 5.04 (ΐ, 1Н), 4.53 (ά, 2Н), 3.96 (δ, 3Н),

2.45 (δ, 3Н), 1.73 (δ, 6Н) част. на млн.

Пример 74. 4-{[4-Амино-7-(2-гидроксипропан-2-ил)-5-(7-метокси-5-метил-1-бензотиофен-2-ил) пирроло[2,1-ί][1,2,4]триазин-6-ил]метил} пиперазин-2-он

Раствор промежуточного соединения 44А (50 мг, 73% чистота, 92 мкмоль) в метаноле (4 мл) обрабатывали посредством 2-оксопиперазина (28 мг, 276 мкмоль), цианоборогидрид натрия (23 мг, 368 мкмоль) и уксусной кислоты (21 мкл, 368 мкмоль). Смесь взбалтывали сначала 18 ч при 60°С и затем 3 дня при КТ. После этого смесь отделяли препаративной ОФ ВЭЖХ (Κβρίοδίΐ С18, градиент 20-40% ацетонитрил/0.2% водн. ТФУ). Фракции продукта разбавляли посредством 7 М раствора аммиака в метаноле и выпаривали под сниженным давлением. Остаток растворяли в этилацетате и промывали с помощью воды. Органическую фазу высушивали посредством сульфата натрия и концентрировали под сниженным давлением. Остаток растворяли в 1,4-диоксане и лиофилизировали с получением 24 мг (52% от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 5): Ву = 1.85 мин; МС (ΕδΙροδ): т/ζ = 481 (М+Н)+ ¹Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-й₆): δ = 7.99 (δ, 1Н), 7.73-8.01 (шир. δ, 1Н), 7.41 (δ, 1Н), 7.33 (δ, 1Н), 6.87 (δ, 1Н), 5.2-5.7 (шир. δ, 1Н), 3.95 (δ, 3Н), 3.57 (δ, 2Н), 3.14 (шир. δ, 2Н), 2.60 (шир. δ, 4Н), 2.46 (δ, 3Н), 1.70 (шир. δ, 6Н) част. на млн.

Пример 75. [4-Амино-5-(7-метокси-5-метил-1-бензотиофен-2-ил)-7-метилпирроло[2,1-£][1,2,4]триазин-6-ил] метанол

Под атмосферой аргона в колбу загружали 165 мг (0.64 ммоль) промежуточного соединения 53А, 143 мг (0.64 ммоль) промежуточного соединения 5А, 25 мг (0.03 ммоль) (2'-аминобифенил-2-ил)(хлор) палладий-дициклогексил(2',4',6'-триизопропилбифенил -2-ил)фосфина (1:1; см. δ. Ь. Вией^аШ е! а1., I. Ат. Сйет. δοο. 132 (40), 14073-14075 (2010)) и 409 мг (1.93 ммоль) фосфата калия. После этого добавляли 7 мл дегазированной смеси 1,4-диоксана и воду (5:1), и раствор взбалтывали при 70°С в течение 1 ч. Добавляли другую порцию промежуточного соединения 5А (142 мг, 0.64 ммоль) и (2'-аминобифенил-2ил)(хлор)палладий-дициклогексил(2',4',6'-триизопропилбифенил -2-ил)фосфина (10 мг, 0.012 ммоль), и взбалтывание продолжали в течение 1 ч. После этого реакционную смесь частично выпаривали под сниженным давлением, добавляли воду, и смесь экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические фазы выпаривали под сниженным давлением, и остаток растирали в порошок с ацетонитрил. Осадок отфильтровывали и высушивали в вакууме с получением 180 мг (92% чистота посредством ЖХ-МС, 73% от теор.) соединения, указанного в заголовке. Из фильтрата получали вторую партию (41 мг, 18% от теор.) посредством препаративной ОФ ВЭЖХ (ΚΌρτοδίΙ С18, градиент 10-95 % ацетонитрил/0.1% водн. муравьиная кислота). Общий выход: 91% от теор. ЖХ-МС (способ 5): Ву = 1.92 мин; МС (ΕδΙροδ): т/ζ = 355 (М+Н)+ ¹Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-й₆): δ = 7.95 (δ, 1Н), 7.35 (δ, 1Н), 7.30 (δ, 1Н), 6.83 (δ, 1Н), 4.82 (ΐ, 1Н), 4.44 (ά, 2Н), 3.95 (δ, 3Н), 2.45 (δ, 3Н) част, на млн.

Пример 76. 4-{[4-Амино-5-(7-метокси-5-метил-1-бензотиофен-2-ил)-7-метилпирроло[2,1-£][1,2,4] триазин-6-ил]метил}пиперазин-2-он

- 72 029556

Суспензию 55 мг (0.16 ммоль) промежуточного соединения 54А в ТГФ (1.5 мл) обрабатывали посредством 78 мг (0.78 ммоль) пиперазин-2-она, 18 мкл (0.31 ммоль) уксусной кислоты и 166 мг (0.78 ммоль) триацетоксиборогидрида. Смесь взбалтывали при температуре окружающей среды в течение ночи. После этого, 1.5 мл добавляли воду, и большую часть ТГФ растворителя выпаривали под сниженным давлением. Остальную смесь разбавляли с большим количеством воды, и осажденное твердое вещество отфильтровывали и высушивали (35 мг). Это вещество дополнительно очищали препаративной ОФ ВЭЖХ (ΕβρΓοδίΙ С18, градиент 10-95 % ацетонитрил/0.1% водн. муравьиная кислота). Фракции продукта устанавливали до рН 9 с помощью твердого карбоната калия и частично концентрировали под сниженным давлением. Осажденное твердое вещество отфильтровывали и высушивали при 45 °С в вакууме с получением 16 мг (24% от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 5): Ву = 1.74 мин; МС (Εδ^οδ): т/ζ = 437 (М+Н)+ 'Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-й₆): δ = 7.95 (δ, 1Н), 7.66 (шир. δ, 1Н), 7.35 (δ, 1Н), 7.30 (δ, 1Н), 6.83 (δ, 1Н), 3.95 (δ, 3Н), 3.50 (δ, 2Н), 3.05 (т, 2Н), 2.84 (δ, 2Н), 2.45 (т, 5Н) част, на млн.

Пример 77. 1-({[4-Амино-5-(7-метокси-5-метил-1-бензотиофен-2-ил)-7-метилпирроло[2,1-Т|[1,2,4] триазин-6-ил]метил}амино)-2-метилпропан-2-ол формамид

Суспензию 55 мг (0.16 ммоль) промежуточного соединения 54А в ТГФ (1.5 мл) обрабатывали посредством 98 мг (0.78 ммоль) гидрохлорида 1-амино-2-метилпропан-2-ола, 39 мг (0.47 ммоль) ацетата натрия и 166 мг (0.78 ммоль) триацетоксиборогидрида натрия. Смесь взбалтывали при температуре окружающей среды в течение ночи. После этого, 1.5 мл добавляли воду, и смесь выпаривали под сниженным давлением. Остаток очищали препаративной ОФ ВЭЖХ (Кергозй С18, градиент 10-95% ацетонитрил/0.1% водн. муравьиная кислота) с получением 38 мг (52% от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 5): Ву = 1.68 мин; МС (Εδ^οδ): т/ζ = 426 (М+Н)+ 'ίί-ЯМР (400 МГц, ДМСО-й₆): δ = 8.19 (δ, 1Н), 7.94 (δ, 1Н), 7.38 (δ, 1Н), 7.29 (δ, 1Н), 6.84 (δ, 1Н), 3.95 (δ, 3Н), 2.45 (δ, 3Н), 2.34 (δ, 2Н), 1.02 (δ, 6Н) част. на млн.

Пример 78. ШЮ-АминоА-^-метоксиА-метил-Ебензотиофен^-ил^-метилпирроло^Д-ГЩДА] триазин-6-ил]метил}амино)-2-метилпропан-2-ол

Раствор 29 мг (0.06 ммоль) из примера 77 в 3 мл метанола пропускали через картридж ЗйайзрЬегез δΡΕ РЬ-НСО₃ ΜΡ-Γβδίη, предварительно обрабатывали посредством 2 мл метанола. Картридж промывали 4 мл метанола, и элюат выпаривали с получением 21.5 мг (82% от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 4): Ву = 0.68 мин; МС (Εδ^οδ): т/ζ - 426 (М+Н)+ ¹Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-й₆): δ = 7.94 (δ, 1Н), 7.37 (δ, 1Н), 7.28 (δ, 1Н), 6.83 (δ, 1Н), 4.07 (δ, 1Н), 3.95 (δ, 3Н), 3.63-3.75 (т, 2Н), 2.45 (δ, 3Н), 2.32 (т, 3Н), 1.42-1.56 (т, 1Н), 1.02 (δ, 6Н) част. на млн.

Пример 79. [4-Амино-7-хлор-5-(7-метокси-5-метил-1-бензотиофен-2-ил)пирроло[2,1-Т|[1,2,4]триазин-6-ил]метанол

Раствор промежуточного соединения 48А (117 мг, 0.24 ммоль) в 5 мл ТГФ обрабатывали с помощью 5 мл конц. хлористоводородной кислоты и взбалтывали при температуре окружающей среды в течение ночи. После этого добавляли 12 мл 5 М водн. раствора гидроксид натрия, а также этилацетат, слои разделяли, и водный слой экстрагировали два раза этилацетатом. Объединенные органические фазы промывали с помощью нас. водн. раствора хлорида натрия, высушивали и выпаривали. Остаток очищали препаративной ОФ ВЭЖХ (ΕβρίΌδίΙ С18, градиент 10-95% ацетонитрил/0.1% водн. муравьиная кислота) с получением 30 мг (34% от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 2): Ву = 0.90

- 73 029556

мин; МС (Ε8Σροδ): т/ζ = 375 (М+Н)+ ’Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆): δ = 8.04 (δ, 1Н), 7.43 (δ, 1Н), 7.32 (δ, 1Н), 6.85 (δ, 1Н), 5.02 (ΐ, 1Н), 4.43 (ά, 2Н), 3.96 (δ, 3Н), 2.45 (δ, 3Н) част. на млн. 9.2 мг (10% от теор.) 7хлор-6-(хлорметил)-5-(7-метокси-5-метил-1-бензотиофен-2-ил)пирроло[2,1-£][1,2,4]триазин-4-амина выделяли в виде побочного продукта (ср. промежуточное соединение 50А).

Пример 80. 4-{ [4-Амино-7-хлор-5-(7-метокси-5 -метил-1 -бензотиофен-2-ил)пирроло[2,1-£] [ 1,2,4]

триазин-6-ил] метил} пиперазин-2-он

Указанное в заголовке соединение получали в соответствии с процедурой из примера 76, исходя из 40 мг (0.11 ммоль) промежуточного соединения 49А. Выход: 27 мг (55% от теор.). ЖХ-МС (способ 2): Ву = 0.86 мин; МС (Ε8Σροδ): т/ζ = 457 (М+Н)+ ^!Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆): δ = 8.05 (δ, 1Н), 7.68 (шир. δ, 1Н), 7.44 (δ, 1Н), 7.31 (δ, 1Н), 6.85 (δ, 1Н), 3.96 (δ, 3Н), 3.52 (δ, 2Н), 3.05 (шир. δ, 2Н), 2.86 (δ, 2Н), 2.45 (δ, 3Н) част. на млн.

Пример 81. 1-({ [4-Амино-7-хлор-5-(7-метокси-5 -метил-1 -бензотиофен-2-ил)пирроло[2,1-ί][1,2,4]

триазин-6-ил]метил}амино)-2-метилпропан-2-ол формамид

Указанное в заголовке соединение получали в соответствии с процедурой из примера 77, исходя из 40 мг (0.11 ммоль) промежуточного соединения 49А. Выход: 24 мг (45 % от теор.). ЖХ-МС (способ 2): Ву = 0.73 мин; МС (£8^08): т/ζ = 446 (М+Н)+ ^!Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆): δ = 8.15 (δ, 1Н), 8.04 (δ, 1Н),

7.45 (δ, 1Н), 7.30 (δ, 1Н), 6.85 (δ, 1Н), 3.96 (δ, 3Н), 3.73 (δ, 2Н), 2.45 (δ, 3Н), 2.32 (δ, 2Н), 1.00 (δ, 6Н) част. на млн.

Пример 82. 1-({ [4-Амино-7-хлор-5-(7-метокси-5 -метил-1 -бензотиофен-2-ил)пирроло[2,1-ί][1,2,4] триазин-6-ил]метил}амино)-2-метилпропан-2-ол

Указанное в заголовке соединение получали из примера 81 в соответствии с процедурой из примера 78. ЖХ-МС (способ 2): Ву = 0.72 мин; МС (£8^08): т/ζ = 446 (М+Н)+ ’Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆): δ = 8.04 (δ, 1Н), 7.45 (δ, 1Н), 7.30 (δ, 1Н), 6.85 (δ, 1Н), 4.09 (шир. δ, 1Н), 3.95 (δ, 3Н), 3.71 (δ, 2Н), 2.45 (δ, 3Н), 2.31 (δ, 2Н), 1.44-1.64 (т, 1Н), 1.00 (δ, 6Н) част, на млн.

Пример 83. 7-Хлор-6-(этоксиметил)-5-(7-метокси-5-метил-1 -бензотиофен-2-ил)пирроло[2,1-ί][1,2,4] триазин-4-амин

8.2 мг (0.02 ммоль) промежуточного соединения 50А суспендировали в 1 мл этанола, обрабатывали посредством 41 мкл (0.11 ммоль) 2.68 М раствора этанолата натрия в этаноле и нагревали в колбе с обратным холодильником в течение 1 мин. Светлый раствор затем выпаривали, и сырой продукт очищали препаративной ОФ ВЭЖХ (^ρΓ0δί1 С18, градиент 10-95% ацетонитрил/0.1% водн. муравьиная кислота)

- 74 029556

с получением 5 мг (56% от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 4): Ву = 1.25 мин; МС (Е8фо5): т/ζ = 402 (М+Н)+ 'Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-Й6): δ = 8.06 (5, 1Н), 7.40 (5, 1Н), 7.32 (5, 1Н), 6.86 (5, 1Н), 4.40 (5, 2Н), 3.96 (5, 3Н), 3.40 (ς, 2Н), 2.45 (5, 3Н), 1.06 (ΐ, 3Н) част. на млн.

Пример 84. 5-(7-Метокси-5-метил-1-бензотиофен-2-ил)-6-метил-7-(пиперазин-1 -илметил)пирроло [2,1-ί] [1,2,4]триазин-4-амина формамид

Раствор промежуточного соединения 57А (100 мг, 191 мкмоль) в 4М растворе хлорида водорода в 1,4-диоксане (2 мл) взбалтывали при КТ в течение 3 ч. и затем выпаривали. Очищение двукратной препаративной ОФ ВЭЖХ (Керго5Й С18, градиент 10-95% ацетонитрил/0.1% водн. муравьиная кислота) обеспечило 71 мг (67% от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 2): Ву = 0.81 мин; МС (Е8фо5): т/ζ = 423 (М+Н)+ 'Н-ЯМР (400 МГц, СВС1₃): δ = 8.46 (шир. 5, 1Н), 7.89 (5, 1Н), 7.27 (5, 1Н, наложение с СНС1₃ пик), 7.18 (5, 1Н), 6.67 (5, 1Н), 4.01 (5, 3Н), 3.97 (5, 2Н), 3.18-3.09 (т, 4Н), 2.82-2.73 (т, 4Н), 2.50 (5, 3Н), 2.24 (5, 3Н) част. на млн.

Пример 85. 6-Хлор-5-(7-метокси-5-метил-1-бензотиофен-2-ил)-7-(пиперазин-1-илметил)пирроло [2,1-ί] [1,2,4]триазин-4-амина тригидрохлорид

Промежуточное соединение 60А (65 мг, 0.12 ммоль) взбалтывали в 1 мл 4М раствора хлорида водорода в 1,4-диоксане в течение 2 ч при КТ. Суспензию выпаривали до сухости, и сырой продукт очищали препаративной ОФ ВЭЖХ (Керго5Й С18, градиент 10-95% ацетонитрил/0.1% водн. Хлористо-водородной кислоты) с получением 49 мг (74 % от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 2): Ву = 0.81 мин; МС (Е8фо5): т/ζ = 443 (М+Н)+ 'Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-й₆): среди проч. δ = 9.56 (шир. 5, 1Н), 8.45 (шир. 5, 1Н), 8.19 (5, 1Н), 7.44 (5, 1Н), 7.36 (5, 1Н), 6.89 (5, 1Н), 6.30 (шир. 5, 1Н), 4.63 (шир. 5, 1Н), 3.40 (шир. 5, 8Н), 2.46 (5, 3Н) част. на млн.

Пример 86. [4-Амино-6-(этоксиметил)-5-(7-метокси-5-метил-1-бензотиофен-2-ил)пирроло[2,1-ί] [ 1,2,4]триазин-7 -ил] метанол

Указанное в заголовке соединение (360 мг) получали в виде побочного продукта при получении из примера 5 посредством способа получения 1. ЖХ-МС (способ 2): Ву = 0.99 мин; МС (Е8фо5): т/ζ = 399 (М+Н)+ 'Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-й₆): δ = 8.09-7.72 (шир. 5, 1Н), 7.99 (5, 1Н), 7.35 (5, 1Н), 7.31 (5, 1Н), 6.84 (5, 1Н), 6.05-5.48 (шир. 5, 1Н), 5.04 (шир. 5, 1Н), 4.81 (ά, 2Н), 4.47 (5, 2Н), 3.96 (5, 3Н), 3.39 (ς, 3Н),

2.45 (5, 3Н), 1.05 (ΐ, 3Н) част. на млн.

Пример 87. 1-{ [4-Амино-6-(этоксиметил)-5-(7-метокси-5-метил-1 -бензотиофен-2-ил)пирроло [2,1-ί] [ 1,2,4]триазин-7 -ил] метил} имидазолидин-2-он

- 75 029556

Суспензию промежуточного соединения 63А (100 мг, 0.221 ммоль) в ТГФ (5 мл) обрабатывали посредством имидазолидин-2-она (57 мг, 0.662 ммоль) и Ν,Ν-диизопропилэтиламина (153 мкл, 0.926 ммоль), и смесь нагревали до 150°С в течение 90 мин. в микроволновой печи. После этого реакционную смесь очищали препаративной ОФ ВЭЖХ (Кергозй С18, градиент 40-60% ацетонитрил/0.2% водн. трифторуксусная кислота). Полученный таким образом продукт растворяли в метаноле и отфильтровывали через анионнообменный картридж (ЗйаФзрйегез ЗРЕ, РЬ-НСО₃ МР-гезт). Картридж элюировали посредством метанола, и фильтрат выпаривали. Продукт очищали еще раз с помощью препаративной тонкослойной хроматографии над силикагелем (циклогексан/этилацетат 3:1) с получением 24 мг (22% от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 2): Ву = 0.99 мин; МС (ЕЗЩоз): т/ζ = 467 (М+Н)+ ¹Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-06): δ = 8.21-7.65 (шир. з, 1Н), 7.99 (з, 1Н), 7.36 (з, 1Н), 7.31 (з, 1Н), 6.84 (з, 1Н), 6.38 (з, 1Н), 6.04-5.56 (шир. з, 1Н), 4.65 (з, 2Н), 4.46 (з, 2Н), 3.95 (з, 3Н), 3.38 (ς, 2Н), 3.31-3.10 (т, 4Н), 2.45 (з, 3Н), 1.06 (ΐ, 3Н) част. на млн.

Пример 88. 4-{ [4-Амино-5 -(7-метокси-1 -бензотиофен-2-ил)-6-(метоксиметил)пирроло [2,1-ί][1,2,4] триазин-7-ил] метил}пиперазин-2-он

К раствору промежуточного соединения 62А (72.6 мг, 197 мкмоль), (7-метокси-1-бензотиофен-2ил)бороновая кислота (45 мг, 216 мкмоль) и фторида цезия (149 мг, 983 мкмоль) в дегазированном ТГФ/вода (10:1, 2.2 мл) под аргоном добавляли (2'-аминобифенил-2-ил)(хлор)палладий-дициклогексил (2',4',6'-триизопропилбифенил-2-ил)фосфин (1:1; 7.7 мг, 9.8 мкмоль; см. З. й. Висй\\аМ еΐ а1., I. Ат. Сйет. Зос. 132 (40), 14073-14075 (2010)). Полученную смесь дегазировали снова и взбалтывали под аргоном при 60°С в течение 3 ч. После этого смесь отделяли препаративной ОФ ВЭЖХ (Кергозй С18, градиент 20-40% ацетонитрил/0.1% водн. ТФУ). Фракции продукта объединяли и выпаривали до сухости. Остаток растворяли в метаноле и отфильтровывали через анионнообменный картридж (З1га1озрйегез ЗРЕ, РЬ-НСОз МР-гезт). Картридж элюировали посредством метанола, и фильтрат выпаривали с получением 31 мг (35 % от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 2): Ву = 0.71 мин; МС (ЕЗЩоз): т/ζ = 453 (М+Н)+ ¹Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-й₆): δ = 8.00 (з, 1Н), 7.72 (з, 1Н), 7.61-8.23 (шир. з, 1Н), 7.51 (ά, 1Н), 7.46 (з, 1Н), 7.40 (ΐ, 1Н), 6.99 (ά, 1Н), 5.57-6.11 (шир. з, 1Н), 4.42 (з, 2Н), 3.98 (з, 5Н), 3.20 (з, 3Н), 3.11 (шир. т, 2Н), 3.01 (з, 2Н), 2.62-2.67 (т, 2Н) част, на млн.

Пример 89. 4-{[4-Амино-6-(метоксиметил)-5-(5-метил-1-бензотиофен-2-ил)пирроло[2,1-Х][1,2,4] триазин-7-ил] метил}пиперазин-2-он

К раствору промежуточного соединения 62А (50 мг, 135 мкмоль), (5-метил-1-бензотиофен-2ил)бороновая кислота (28.6 мг, 149 мкмоль) и фторида цезия (103 мг, 677 мкмоль) в дегазированном ТГФ/вода (10:1, 4.4 мл) под аргоном добавляли (2'-аминобифенил-2-ил)(хлор)палладийдициклогексил (2',4',6'-триизопропилбифенил -2-ил)фосфин (1:1; 5.3 мг, 6.8 мкмоль; см. З. й. Висй^аЫ еΐ а1.,Л Ат. Сйет. Зос. 132 (40), 14073-14075 (2010)). Полученную смесь дегазировали снова и взбалтывали под аргоном при 60°С в течение 16 ч. После этого смесь отделяли препаративной ОФ ВЭЖХ (Кергозй С18, градиент 30-50% ацетонитрил/0.1% водн. ТФУ). Фракции продукта объединяли и выпаривали до сухости. Остаток растворяли в метаноле и отфильтровывали через анионнообменный картридж (З1га1оЗрйегез ЗРЕ, РЙ-НСО₃ МР-гезт). Картридж элюировали посредством метанола, и фильтрат выпаривали с получением 27 мг (45% от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 2): Ву = 0.79 мин; МС (ЕЗЩоз): т/ζ = 437 (М+Н)^{4 1}Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-сй): δ = 8.00 (з, 1Н), 7.89 (ά, 1Н), 7.73 (з, 1Н), 7.71 (з, 1Н), 7.58-8.18 (шир. з, 1Н), 7.40 (з, 1Н), 7.24 (άά, 1Н), 5.58-6.03 (т, 1Н), 4.42 (з, 2Н), 3.97 (з, 2Н), 3.21 (з, 3Н), 3.11 (шир. ΐ, 2Н), 3.01 (з, 2Н), 2.64 (ΐ, 2Н), 2.44 (з, 3Н) ч., на млн.

Пример 90. 1-[4-Амино-6-(этоксиметил)-5-(7-метокси-5-метил-1-бензотиофен-2-ил)пирроло[2,1-Х]

[1,2,4]триазин-7-ил]этанол

- 76 029556

Под аргоном, 1 М раствор бромида метилмагния в ТГФ (630 мкл, 630 мкмоль) добавляли по каплям при КТ к раствору промежуточного соединения 17А (100 мг, 252 мкмоль) в ТГФ (10 мл). Смесь взбалтывали при КТ в течение 3 ч. и затем обрабатывали с другой порцией бромида метилмагния в ТГФ (177 мкл, 177 мкмоль). Реакционную смесь взбалтывали в течение еще 16 ч, затем гасили посредством нас. водн. раствора хлорида аммония и экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические слои промывали рассолом, высушивали сульфатом магния, отфильтровывали и выпаривали. Остаток очищали препаративной ОФ ВЭЖХ (Ксргозй С18, градиент 40-60% ацетонитрил/0.1% водн. ТФУ). Фракции продукта разбавляли с нас. водн. раствором гидрокарбоната натрия и экстрагировали этилацетатом. Органическую фазу промывали с помощью нас. водн. раствора хлорида натрия, высушивали сульфатом магния, отфильтровывали и выпаривали с получением 39 мг (36 % от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 4): Ву = 1.07 мин; МС (ЕЗ^оз): т/ζ = 413 (М+Н)+ ¹Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆): δ = 7.95 (δ, 1Н), 7.56-8.07 (шир. δ, 1Н), 7.35 (δ, 1Н), 7.31 (δ, 1Н), 6.84 (δ, 1Н), 5.46-5.54 (т, 1Н), 5.37-5.95 (шир. δ, 1Н), 5.26 (б, 1Н), 4.67 (б, 1Н), 4.38 (б, 1Н), 3.95 (δ, 3Н), 3.38 (ц, 2Н), 2.45 (δ, 3Н), 1.52 (б, 3Н), 1.05 (ΐ, 3Н) част, на млн.

Пример 91. [4-Амино-6-(этоксиметил)-5-(7-метокси-5-метил-1-бензотиофен-2-ил)пирроло[2,1-Г]

[1,2,4] триазин-7-ил] (циклопропил)метанол

Под аргоном 0.5 М раствор бромида циклопропилмагния в ТГФ (1.26 мл, 630 мкмоль) при КТ добавляли по каплям к раствору промежуточного соединения 17А (100 мг, 252 мкмоль) в ТГФ (5 мл). Смесь взбалтывали при КТ в течение 1 ч, затем гасили нас. водн. раствором хлорида аммония и экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические слои промывали рассолом, высушивали сульфатом магния, отфильтровывали и выпаривали. Остаток очищали препаративной ОФ ВЭЖХ (Ксргозй С18, градиент 50-70% ацетонитрил/0.1% водн. ТФУ). Фракции продукта разбавляли с нас. водн. раствором гидрокарбоната натрия и экстрагировали этилацетатом. Органическую фазу промывали с помощью нас. водн. раствора хлорида натрия, высушивали сульфатом магния, отфильтровывали и выпаривали с получением 10 мг (10 % от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 2): Ву = 1.13 мин; МС (ЕЗЩоз): т/ζ = 439 (М+Н)+ ¹Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆): δ = 7.94 (δ, 1Н), 7.68-8.04 (шир. δ, 1Н), 7.36 (δ, 1Н), 7.31 (δ, 1Н), 6.84 (δ, 1Н), 5.47-5.89 (шир. δ, 1Н), 5.30 (б, 1Н), 4.64 (б, 1Н), 4.59-4.67 (т, 1Н), 4.39 (б, 1Н), 3.96 (δ, 3н), 3.38 (ц, 2Н), 2.45 (δ, 3Н), 1.54-1.64 (т, 1Н), 1.04 (ΐ, 3Н), 0.51-0.59 (т, 1Н), 0.40-0.47 (т, 1Н), 0.28-0.38 (т, 2Н) част. на млн.

Пример 92. (3З)-3-({[4-Амино-6-(метоксиметил)-5-(7-метокси-5-метил-1-бензотиофен-2-ил)пирроло [2,1-ί] [1,2,4]триазин-7-ил]метил}амино)пирролидин-2-он

Суспензию промежуточного соединения 13А (100 мг, 0.233 ммоль) в ТГФ (2 мл) обрабатывали посредством (З)-3-аминопирролидин-2-она (35 мг, 0.349 ммоль), триацетоксиборогидрида натрия (148 мг, 0.698 ммоль) и уксусной кислоты (26.6 мкл, 0.465 ммоль). Полученную смесь взбалтывали при КТ в течение 3 ч и затем непосредственно очищали препаративной ОФ ВЭЖХ (Ксргозй С18, градиент 40-60% ацетонитрил/0.2% водн. трифторуксусная кислота). Фракции продукта объединяли и выпаривали до сухости. Остаток растворяли в метаноле и отфильтровывали через анионнообменный картридж (З!га!озрЬсгсз ЗРЕ, РР-НСО3 МР-гсзш). Картридж элюировали посредством метанола, и фильтрат выпаривали с

- 77 029556

получением 5б мг (51% от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 4): Ву = 0.72 мин; МС (ЕЗЩоз): т/ζ = 4б7 (М+Н)+ 'Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-йб): δ = 8.01 (з, 1Н), 7.7б (з, 1Н), 7.35 (з, 1Н), 7.31 (з, 1Н), б.85 (з, 1Н), 4.48 (й, 2Н), 4.43 (й, 2Н), 4.24-4.02 (т, 2Н), 3.9б (з, 3Н), 3.2б-2.99 (т, бН), 2.45 (з, 3Н), 2.40-2.27 (т, 1Н), 1.82-1.б4 (т, 1Н) част. на млн.

Пример 93. (3 8)-3-({ [4-Амино-б-(этоксиметил)-5-(7-метокси-5-метил-1-бензотиофен-2-ил)пирроло [2,1 -Е][1,2,4]триазин-7-ил]метил}амино)пирролидин-2-он

Суспензию промежуточного соединения 17А (100 мг, 0.252 ммоль) в ТГФ (2 мл) обрабатывали посредством (8)-3-аминопирролидин-2-она (38 мг, 378 мкмоль), натрия триацетоксиборогидрид (1б0 мг, 757 мкмоль) и уксусной кислоты (30 мкл, 504 мкмоль). Полученную смесь взбалтывали при КТ в течение 3 ч и затем непосредственно очищали препаративной ОФ ВЭЖХ (Кергозй С18, градиент 30-50% ацетонитрил/0.2% водн. трифторуксусная кислота). Фракции продукта объединяли и выпаривали до сухости. Остаток растворяли в метаноле и отфильтровывали через анионнообменный картридж (ЗйаЮзрИсгсз 8РЕ, РЬ-НСО₃ МР-тезт). Картридж элюировали посредством метанола, и фильтрат выпаривали с получением 84 мг (б9 % от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 4): Ву = 0.75 мин; МС (ЕЗЩоз): т/ζ = 481 (М+Н)+ ’Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-й_б): δ = 8.00 (з, 1Н), 7.75 (з, 1Н), 7.б7-8.11 (шир. з, 1Н), 7.35 (з, 1Н), 7.31 (з, 1Н), б.85 (з, 1Н), 5.5-б.0 (шир. з, 1Н), 4.44 (ц, 2Н), 4.14-4.21 (т, 1Н), 4.02-4.11 (т, 1Н), 3.38-3.45 (ц, 2Н), 3.1б-3.24 (т, 1н), 3.05-3.1б (т, 2Н), 2.45 (з, 3Н), 2.31-2.40 (т, 1Н), 1.б7-1.79 (т, 1Н), 1.08 (ΐ, 3Н) част. на млн.

Общая процедура для получения примеров 94-105 в табл. I: 0.13М суспензию промежуточного соединения 17А в ТГФ обрабатывали с 1.5 экв. соответствующего аминного компонента, 3 экв. триацетоксиборогидрида натрия и 1.5 экв. уксусной кислоты. Полученную смесь взбалтывали при б0°С в течение 3-20 ч. После этого очистку осуществляли в соответствии с указанными способами.

Таблица I

Пример №	Структура	Способ(ы) очистки	Данные ЖХ-МС
94	ΝΗ	Н3С сн3 / 5 /снэ X о—'	Р1, Р5	Способ 4: Ву = 1.22 мин; МС (Е51ро$): ш/ζ = 468 (М+Н)+
	Чг	ю
95	ΝΗ	н3с Г \ ЛН, V СИ,	Р6, РЗ	Способ 2: Ву = 0.92 мин; МС (Е81роз): т/ζ = 509 (М+Н)+
	С	Хгл 1 ΝΗ нэс %

- 78 029556

96	н3с		Р1, Р5	Способ 4:
	/У Η ζ-, ,		Ву = 0.83 мин;
	\ \\ 'СН, Αί>.κ~·ο		МС (ΕδΙροδ): т/ζ = 452
	νη2 у-			(М+Н)+
	*® СН,
		о—'
	1¾¾. Ν Д	-о
97	Н3С		Р1, Р5	Способ 5:
	гУ			Ву = 1.84 мин;
	\ Η 'СМЭ		МС (ΕδΙροδ): т/ζ = 454
	ΝΗ2 У"			(М+Н)+
	Ν’ί?ιί=\ Ц. Ν Д
	Ν0^ΌΗ
98	н3с		Р1,Р5	Способ 5:
				Ву = 1.82 мин;
	\ 'V χνΗ3 ϋ-Χ'Ό		МС (ΕδΙροδ): т/ζ = 482
	νη2 γ-	3 СН3		(М+Н)+
		о-/
		’О~°н
99	“3ς		Р1,Р5	Способ 5:
	<у			Ву = 2.21 мин;
	\ V ΛΗ3 кь-Х^о		МС (ΕδΙροδ): т/ζ = 516
	ΝΗ2 У"	8 СН,		(М+Н)+
	Ж Д	0^
	Ос
100	Н,С		Р1,Р5	Способ 2:
	Г η ζ-ο		Ву = 0.86 мин;
	\ А ζ^Η3 У^./жэ		МС (ΕδΙροδ): т/ζ = 507
	νη2 у-	"5 .СН,		(М+Н)+
		0—'
		У/~Х7
101	Η3ς		Р1,Р5	Способ 2:
	ζΧ ΝΗ2 Г'	V ζ0Η3		Ву = 0.81 мин; МС (ΕδΙροδ): т/ζ = 468 (М+Н)+
	® СИ,
	'ί'^ΓΑЦ. ж д	/ 3 о—'
	о
		он
102	н3с		Р1, Р5, Р4	Способ 2:
	ζΧ	ΐ ζεΗ3 =•/"0		Ву = 1.03 мин; МС (ΕδΙροδ): т/ζ = 474
	ΝΗ„	5 сн3		(М+Н)+
		о-·7
	сх> N Д	О/
103	н,с		ΡΙ,Ρ5, Р2	Способ 2:
	гУ			Ву = 1.05 мин;
	\ Έ ,СН, >5ί>/^0		МС (ΕδΙροδ): т/ζ = 460
	νη2 у-			(М+Н)+
	® СН,
		О-/
	νΑΧ
	кч '.Ν^Ζ N \	о. Р
104	Н3С		Р1,Р6	Способ 2:
	X Й -,_,		Ву = 0.91 мин;
	1 *к_ ζ^3 Ή-ζ^Ο		МС (ΕδΙροδ): т/ζ = 467
	ΝΗ2 γ-			(М+Н)+
	СН,
		_У°
	к> ζ-ν-Ή^ Ν \	<г° \—ΝΗ
105	ад		ΡΙ,Ρό	Способ 2:
	<у			Ву = 0.89 мин;
	\ ’ϋ ζυΜ3 кй>у^~о		МС (ΕδΙροδ): т/ζ = 495
	νη2 у-	'5 СН		(М+Н)+
		^ο->
	ζχ>
	4/~Λ ..V
	3	о

- 79 029556

Пример 106. 4-Амино-6-(этоксиметил)-5-(7-метокси-5 -метил-1 -бензотиофен-2-ил)-Ы-[(3К)-2-оксопирролидин-3-ил]пирроло[2,1 -Т][1,2,4]триазин-7-карбоксамид

Перемешиваемый раствор промежуточного соединения 64А (50 мг, 121 мкмоль) в ДМФ (2 мл) обрабатывали при КТ посредством №[(1Н-бензотриазол-1-илокси)(диметиламино)метилен]-Ы-метилметанаминия тетрафторбората (ТВТи) (43 мг, 133 мкмоль) и ДИПЭМ (53 мкл, 303 мкмоль). Через 15 мин. добавляли (3К)-3-аминопирролидин-2-он (24 мг, 242 мкмоль), и полученную смесь взбалтывали при КТ в течение дополнительно 2 ч. После этого смесь отделяли препаративной ОФ ВЭЖХ (Κ'ρϊΌδΐΙ С18, градиент 30-50% ацетонитрил/0.2% водн. трифторуксусная кислота). Фракции продукта объединяли и выпаривали до сухости. Остаток растворяли в метаноле и отфильтровывали через анионнообменный картридж (δίΓίΐΙοδρΙκ'ΐΌδ δΡΕ, РЬ-НСОз МР-гезт). Картридж элюировали посредством метанола, и фильтрат выпаривали с получением 36 мг (60% от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 2): Ву = 0.91 мин; МС (ΕδΙροδ): т/ζ = 495 (М+Н)+ Ή-ЯМР (400 МГц. ДМСО-4₆): δ = 9.50 (ά, 1Н), 8.21-8.45 (шир. δ, 1Н), 8.17 (δ, 1Н), 7.97 (δ, 1Н), 7.41 (δ, 1Н), 7.33 (δ, 1Н), 6.86 (δ, 1Н), 5.84-6.09 (шир. δ, 1Н), 4.74 (άά, 2Н), 4.47-4.56 (т, 1Н), 3.96 (δ, 3Н), 3.37 (ς, 2Н), 3.22-3.29 (т, 2Н), 2.54-2.61 (т, 1Н), 2.46 (δ, 3Н), 1.90-2.03 (т, 1Н), 1.00 (ΐ, 3Н) ч., на млн.

Пример 107. 4-{ [4-Амино-6-(этоксиметил)-5-(7-метокси-5-метил-1-бензотиофен-2-ил)пирроло[2,1 -1’|

[1,2,4]триазин-7-ил]карбонил}пиперазин-2-он

Перемешиваемый раствор промежуточного соединения 64А (50 мг, 121 мкмоль) в ДМФ (2 мл) обрабатывали при КТ посредством ТВТи (43 мг, 133 мкмоль) и ДИПЭМ (53 мкл, 303 мкмоль). Через 15 мин добавляли пиперазин-2-он (24 мг, 242 мкмоль), и полученную смесь взбалтывали при КТ в течение дополнительных 16 ч. После этого смесь отделяли препаративной ОФ ВЭЖХ (Κ'ρϊΌδΐΙ С18, градиент 4060% ацетонитрил/0.2% водн. трифторуксусная кислота). Фракции продукта объединяли и выпаривали до сухости. Остаток растворяли в метаноле и отфильтровывали через анионнообменный картридж (δίπιΐοδρ^κδ δΡΕ, ΡΙ,-11СО₃ ΜΡ-κ'δΐηρ Картридж элюировали посредством метанола, и фильтрат выпаривали с получением 45 мг (68 % от теор.) соединения, указанного в заголовке. ЖХ-МС (способ 2): Ву = 0.92 мин; МС (ΕδΙροδ): т/ζ = 495 (М+Н)+¹Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-άβ): δ = 8.14 (шир. δ, 1Н), 7.99-8.01 (т, 1Н), 7.9-8.3 (шир. δ, 1Н), 7.41 (ά, 1Н), 7.32 (δ, 1Н), 6.86 (δ, 1Н), 5.78-6.05 (шир. δ, 1Н), 4.30-4.49 (т, 2Н), 4.134.23 (т, 1Н), 4.03-4.10 (т, 1Н), 3.96 (δ, 3Н), 3.76-3.87 (т, 1Н), 3.57-3.74 (т, 1Н), 3.35-3.43 (т, 2Н), 3.143.25 (т, 1Н), 2.45 (δ, 3Н), 0.96-1.05 (т, 3Н) част. на млн.

Общая методика для получения примеров 108-123 в табл. ΙΙ: 0.13 М раствор промежуточного соединения 64А в ДМФ обрабатывали посредством 1.1 экв. ТВТи и 2.5 экв. ДИПЭМ и взбалтывали при КТ в течение 15 мин. Добавляли 2 экв. соответствующего амина, и полученную смесь взбалтывали при КТ в течение дополнительных 18 ч. После этого очистку осуществляли в соответствии с указанными способами.

Т аблица ΙΙ

Пример №	Структура	Способ(ы) очистки	Данные ЖХ-МС
108	Г у _УСН· о н	Р1	Способ 2: Ву = 1,02 мин; МС (ΕδΙροδ): ш/ζ = 456 (М+Н)+

- 80 029556

109	н3с --сн= νη2 V5 СН,	Р1	Способ 4: Ву = 0.97 мин; МС (ΕδΙροδ): т/ζ = 412 (М+Н)+
N Д о7	_О—' 'МН2
ПО	уснз ΐΜ V3 сн3 Д ΖΝ^(/ N \ /СН3 о Н	Р1, Р5	Способ 2: Ву = 1.01 мин; МС (ΕδΙροδ): т/ζ = 426 (М+Н)+
111	Н3С у'у хсн’ унг V сн3 Ν V Μ~Ν 3 О Н	Р1,Р5	Способ 4: Ву = 1.11 мин; МС (ΕδΙροδ): т/ζ = 440 (М+Н)+
112	н3с (уу 'сн’ унг У снз /О_ >о	Р1	Способ 4: Ву= 1.07 мин; МС (ΕδΙροδ): т/ζ = 482 (М+Н)+
113	ги \ _/ М1 .$ ч >? °	Р1, Р5	Способ 2: Ву = 0.84 мин; МС (ΕδΙροδ): т/ζ = 523 (М+Н)+
114	Н3С 3^^ /СНз ун2 V <^4-4 °— Д А"</ ί Ν Υ сн3 сГЧ сн3	Р1, Р5	Способ 2: Ву = 0.96 мин; МС (ΕδΙροδ): т/ζ = 440 (М+Н)+
115	Ηή щЧо^СНз Гг л3 /СНз мУУ,0^ МД> /Αν о н	Р1, Р5	Способ 2: Ву = 1.09 мин; МС (ΕδΙροδ): т/ζ = 452 (М+Н)+
116	•м χΖ40 ζ°Ηϊ >М V сн3 гуу N Д ΪΗ 33 (У Μ-ΝΗ	Р1,Р5	Способ 4: Ву = 0.95 мин; МС (ΕδΙροδ): т/ζ = 495 (М+Н)+
117	Н3С ЧЧ-хСНэ инг У3 сн3 ОУ Ν Уг° ° У_йн	Р1,Р5	Способ 4: Ву = 0.93 мин; МС (ΕδΙροδ): т/ζ = 481 (М+Н)+

- 81 029556

118	н3с 'СН> V5 СН, 0— Ц- ΐ да он	ΡΙ, Р5	Способ 2: Ву = 0.93 мин; МС (Е81роз): т/ζ-482 (М+Н)+
119	Н3С даУ/э ун, да сн, уда .да N \ νί О	ΡΙ, Р5	Способ 2: Ву = 1.04 мин; МС (Е81роз): т/ζ - 516 (М+Н)+
120	у у-δ СНэ X да-да , N \ о \да-"он	ΡΙ, Р5	Способ 4: Ву = 0.88 мин; МС (Е81роз): т/ζ = 468 (М+Н)+
121	Н3С ΝΗ3 у-5 дадаХ ' Ν о	ΡΙ, Р5	Способ 4: Ву = 0.91 мин; МС (Е31роз); т/ζ = 496 (М+Н)+
122	н}с ''сн* Гг / _УСН’	Р1,Р5	Способ 4: Ву = 1.09 мин; МС (Е81роз): т/ζ - 488 (М+Н)+
123	Н3С даЬо'™1 ρ V3 сн, да-да / N д __	Р1,Р5	Способ 4: Ву = 0.98 мин; МС (Е81роз): т/ζ = 530 (М+НГ

Пример 124. 4-{ [4-Амино-5-(5,7-диметокси-1-бензотиофен-2-ил)-6-(метоксиметил)пирроло[2,1-Е]

К раствору промежуточного соединения 62А (100 мг, 271 мкмоль), промежуточного соединения 66А (77 мг, 325 мкмоль) и фторида цезия (206 мг, 1.35 ммоль) в дегазированном ТГФ/вода (10:1; 5 мл) под аргоном добавляли (2'-аминобифенил-2-ил)(хлор)палладий-дициклогексил(2',4',6'-триизопропилбифенил-2-ил)фосфин (1:1; 42.6 мг, 54 мкмоль; см. 8. Ь. ВисЬ\\а16 е1 а1., I. Ат. СЬет. 8ос. 132 (40), 14073-14075 (2010)). Полученную смесь дегазировали снова и взбалтывали под аргоном при 60°С в течение 6 ч. После этого добавляли другую порцию промежуточного соединения 66А (39 мг, 162 мкмоль), и взбалтывание при 60°С продолжали в течение 10 ч. После этого реакционную смесь отделяли препаративной ОФ ВЭЖХ (Керго5Й С18, градиент 30-50% ацетонитрил/0.1% водн. ТФУ). Фракции продукта объединяли и выпаривали до сухости. Остаток растворяли в метаноле и отфильтровывали через анионнообменный картридж (81гаЮ5рЬеге5 8РЕ, РЬ-НСО₃ МР-ге5т). Картридж элюировали посредством метанола, и фильтрат выпаривали с получением 40 мг (28% от теор.) соединения, указанного в заголовке.

- 82 029556

ЖХ-МС (способ 2): Ву = 0.78 мин; МС (ЕЗ1ров): т/ζ = 483 (М+Н)+ Ή-ЯМР (500 МГц, ДМСО-Щ): δ = 7.99 (в, 1Н), 7.68 (шир. в, 1Н), 7.49-8.17 (шир. в, 1Н), 7.37 (в, 1н), 7.05 (ά, 1Н), 6.63 (ά, 1Н), 5.5-6.0 (шир. в, 1Н), 4.42 (в, 2Н), 3.97 (в, 2н), 3.94 (в, 3Н), 3.84 (в, 3Н), 3.20 (в, 3Н), 3.09-3.14 (т, 2Н), 3.01 (в, 2Н), 2.622.67 (т, 2Н) част. на млн.

Пример 125. 4-{[4-Амино-7-(гидроксиметил)-5-(7-метокси-5-метил-1-бензотиофен-2-ил)пирроло [2,1-Г][1,2,4]триазин-6-ил]метил}пиперазин-2-он

К суспензии промежуточного соединения 70А (700 мг, 1.49 ммоль), Промежуточное соединение 5А (497 мг, 2.24 ммоль) и цезия фторид (1.36 г, 8.95 ммоль) в дегазированном ТГФ/вода (2:1, 90 мл) под аргоном добавляли (2'-аминобифенил-2-ил)(хлор)палладий-дициклогексил(2',4',6'-триизопропилбифенил 2-ил)фосфин (1:1; 117 мг, 0.149 ммоль; см. δ. Ь. ВисЬ^аЫ е1 а1., I. Ат. СЬет. Зое. 132 (40), 14073-14075 (2010)). Полученную смесь дегазировали снова и взбалтывали под аргоном при 60°С в течение ночи. Добавляли другую порцию промежуточного соединения 5А (231 мг, 1.04 ммоль) и (2'-аминобифенил-2-ил) (хлор)палладий-дициклогексил(2',4',6'-триизопропилбифенил -2-ил)фосфин (1:1; 117 мг, 0.149 ммоль), и взбалтывание продолжали при 60°С в течение 3 ч. Осадок отфильтровывали, промывали с ТГФ и высушивали в вакууме. Твердое вещество суспендировали в смеси из ДМФ и 1М водн. трифторуксусной кислоты и отфильтровывали. Фильтрат отделяли препаративной ОФ ВЭЖХ (Керговй С18, градиент 20-40% ацетонитрил/0.2% водн. трифторуксусная кислота). Фракции продукта объединяли и затем подщелачивали путем добавления нас. водн. раствора бикарбонат натрия. Раствор экстрагировали этилацетатом, и органический слой промывали рассолом, высушивали над сульфатом магния и выпаривали с получением 88 мг соединения, указанного в заголовке (13% от теор.). ЖХ-МС (способ 2): Ву = 0.70 мин; МС (ЕЗ1ров): т/ζ = 453 (М+Н)+ Ή-ЯМР (400 МГц, ДМСОД₆): среди проч. δ = 7.6-8.0 (шир. в, 1Н), 7.98 (в, 1Н), 7.71 (в, 1Н), 7.37 (в, 1Н), 7.31 (в, 1Н), 6.84 (в, 1Н), 5.4-5.8 (шир. в, 1Н), 5.19 (1, 1Н), 4.85 (ά, 2Н), 3.95 (в, 3Н), 3.58 (в, 2Н), 3.04 (шир. т, 2Н), 2.88 (в, 2Н), 2.45 (в, 3Н) част. на млн.

Пример 126. 4-{[4-Амино-7-(метоксиметил)-5-(7-метокси-5-метил-1-бензотиофен-2-ил)пирроло[2,1-

Суспензию из примера 125 (88 мг, 194 мкмоль) в дихлорметане (5 мл) обрабатывали тионилхлоридом (29 мкл, 389 мкмоль), и смесь взбалтывали при КТ в течение 65 мин. Добавляли другую порцию тионилхлорида (29 мкл, 389 мкмоль), и взбалтывание продолжали в течение 1.5 ч. Затем добавляли избыток метанола, за которым следовало добавление по каплям 5.4М раствора метилата натрия в метаноле (84 мг, 1.56 ммоль) пока не достигли рН 8. После перемешивания в течение 3 дней летучие компоненты выпаривали под сниженным давлением, и остаток отделяли препаративной ОФ ВЭЖХ (Керговй С18, градиент 20-40% ацетонитрил/0.2% водн. трифторуксусная кислота). Фракции продукта выпаривали с получением 19 мг соединения, указанного в заголовке (21% от теор.). ЖХ-МС (способ 2): Ву = 0.77 мин; МС (ЕЗ1ров): т/ζ = 466 (М+Н)+ Ή-ЯМР (400 МГц, ДМСОД₆): δ = 7.99 (в, 1Н), 7.75-8.11 (шир. в, 1Н), 7.68 (в, 1Н), 7.38 (в, 1Н), 7.31 (в, 1Н), 6.84 (в, 1Н), 5.51-5.82 (т, 1Н), 4.77 (в, 2Н), 3.95 (в, 3Н), 3.55 (в, 2н), 3.31 (в, 3н), 3.04 (шир. в, 2Н), 2.85 (в, 2Н), 2.42-2.48 (т, 5Н) част. на млн.

Пример 127. 4- {[4-Амино-7-(этоксиметил)-5-(7-метокси-5-метил-1 -бензотиофен-2-ил)пирроло [2,1-ί] [ 1,2,4]триазин-6-ил]метил} пиперазин-2-он

83 029556

Суспензию из примера 125 (100 мг, 221 мкмоль) в дихлорметане (10 мл) обрабатывали тионилхлоридом (161 мкл, 2.21 ммоль), и смесь взбалтывали при КТ в течение 30 мин. Добавляли этанол, и летучие компоненты выпаривали под сниженным давлением. Остаток растворяли в этаноле (10 мл), этилат натрия (30 мг, 442 мкмоль) добавляли, и смесь взбалтывали при КТ в течение 1 ч. Смесь затем непосредственно разделяли препаративной ОФ ВЭЖХ (Кергозй С18, градиент 20-40% ацетонитрил/0.2% водн. трифторуксусная кислота). Фракции продукта объединяли и подщелачивали путем добавления нас. водн. раствора бикарбоната натрия. Раствор экстрагировали этилацетатом, и органический слой промывали рассолом, высушивали над сульфатом магния и выпаривали с получением 57 мг соединения, указанного в заголовке (54% от теор.). ЖХ-МС (способ 2): Ву = 0.85 мин; МС (Е8!роз): т/ζ = 480 (М+Н)+ 'Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆): δ = 7.99 (з, 1Н), 7.75-8.09 (шир. з, 1Н), 7.64-7.71 (т, 1Н), 7.38 (з, 1Н), 7.31 (з, 1Н), 6.84 (з, 1Н), 5.38-5.91 (шир. з, 1Н), 4.81 (з, 2Н), 3.95 (з, 3Н), 3.49-3.59 (т, 4Н), 2.99-3.08 (т, 2Н), 2.86 (з, 2Н), 1.12 (!, 3Н) част. на млн.

В. Оценивание биологической активности.

Сокращения и аббревиатуры:

АЬх - 6-аминокапроевая кислота

АТФ - аденозинтрифосфат

АБС - альбумин бычьей сыворотки

СКЕВ - белок, связывающий цАМФ-ответный элемент

ДМСО - диметилсульфоксид

ЭДТА - этилендиаминтетрауксусная кислота

ЕОТА - этиленгликоль-бис(2-амииоэтилэфир)-НХ,№,№-тетрауксусная кислота

ФБС - фетальная бычья сыворотка

ФРФ - фактор роста фибробластов

РФРФ - рецептор фактора роста фибробластов

ЗФБ - зеленый флуоресцентный белок

ГСТ - глутатион 8-трансфераза

ГЭПЭС - 4-(2-гидроксиэтил)пиперазин-1-этансульфоновая кислота

ГФВР - гомогенная флуоресценция с временным разрешением

МОР8 - 3-(N-морфолиио)пропаисульфоиовая кислота тТОК - мишень рапамицина в клетках млекопитающих ФБР забуференный фосфатом физиологический раствор РР3К - фосфатидилинозитол 3-киназа

КТК - рецепторная тирозиикииаза

ОНП - однонуклеотидный полиморфизм

ТК-РКЕТ - резонансный перенос энергии флуоресценции с временным разрешением

ФЭРС - фактор роста эндотелия сосудов

РФЭРС - рецептор фактора роста эндотелия сосудов.

Доказательство активности соединений согласно настоящему изобретению может быть завершено посредством ίη уйто, ех У1уо и ίη У1уо анализов, которые хорошо известны в уровне техники. Например, чтобы показать активность соединений настоящего изобретения могут быть использованы следующие анализы.

В-1. Анализ киназы РФРФ-1 высокого АТФ.

Ингибиторную активность РФРФ-1 при высокой концентрации АТФ соединений, предлагаемых в настоящем изобретении после их предварительной инкубации с РФРФ-1 определяли количественно, используя анализ РФРФ-1 высокого АТФ на основе ТК-РКЕТ, как описано в нижеследующих абзацах.

Рекомбинантный меченный РФРФ-1 белок слияния [слияние глутатиона-трансферазы (ГСТ) (Νконцевая), Шз6-метка, тромбиновый сайт расщепления, и внутриклеточная часть РФРФ-1 человека из аминокислот от 0400 до К800 как запись НМ 015850 в ОепВапк], экспрессированные в 8Р9 клетках насекомых с применением системы экспрессии бакуловирусов и очищенные посредством аффинной хроматографии на глутатион-сефарозе, были приобретены у Ртоц1пазе (продукт № 0101-0000-1) и применяли в качестве фермента. В качестве субстрата для реакции киназы применяли биотинилированный пептид биотии-АЬx-ААЕЕЕΥР'Р^РАККК (С-конец в амидной форме), может быть приобретен, например, у Вюзуп!ап (Вег1ш-ВисЬ, Германия).

Как правило, исследуемые соединения испытывали на том же самом микротитрационном планшете в 11 различных концентрациях в диапазоне от 20 мкМ до 0.1 нМ (например, 20 мкМ, 5.9 мкМ, 1.7 мкМ, 0.51 мкМ, 0.15 мкМ, 44 нМ, 13 нМ, 3.8 нМ, 1.1 нМ, 0.33 нМ, и 0.1 нМ) в двух повторностях для каждой концентрации. Серии разбавлений приготавливали отдельно до анализа на уровне 100-кратно концентрированных маточных растворов в ДМСО; точные концентрации могут варьироваться в зависимости от применяемого устройства для пипетирования. Для анализа 50 нл каждого маточного раствора исследуемого соединения в ДМСО добавляли пипеткой в 384-луночный микротитрационный планшет низкого объема черного цвета (Отешет Вю-Опе, Фрикенхаузен, Германия). Добавляли 2 мкл раствора указанного выше белка слияния РФРФ-1 в водном аналитическом буфере [8 мМ МОР8 рН 7.0, 10 мМ ацетата маг- 84 029556

ния, 1.0 мМ дитиотреитола, 0.05% (мас./об.) альбумина бычьей сыворотки (АБС), 0.07% (об./об.) Т\\ееп20, 0.2 мМ ЭДТА], и смесь инкубировали в течение 15 мин. при 22°С, чтобы обеспечить предварительное связывание исследуемого соединения с ферментом. После этого, инициировали киназную реакцию посредством добавления в аналитический буфер 3 мкл раствора аденозинтрифосфата (АТФ, 3.3 мМ; конечная концентрация в 5 мкл аналитического объема = 2 мМ) и субстрата (0.16 мкМ; конечная концентрация в 5 мкл аналитического объема = 0.1 мкМ), и полученную смесь инкубировали в течение реакционного времени в 15 мин при 22°С. Концентрацию белка слияния РФРФ-1 устанавливали в зависимости от активности партии ферментов и выбирали соответствующим образом, чтобы иметь анализ в линейном диапазоне (типичные концентрации находились в пределах 0,05 мкг/мл). Реакцию останавливали посредством добавления 5 мкл раствора ГФВР проявляющих реагентов [25 нМ стрептавидин-ХЬ665 (С1к Вю1Шегпа11опа1) и 1 нМ РТ66-Еи-хелата, меченного хелатом европия анти-фосфо-тирозинового антитела (Регкш-Е1тег; вместо них можно использовать РТ66-ТЬ-криптат от С1к В1ош1егпайоиаГ), в водном растворе ЭДТА (50 мМ ЭДТА, 0.1% (мас./об.) АБС в 50 мМ ГЭПЭС/№ОН рН 7.5)].

Полученную смесь инкубировали в течение 1 ч при 22°С чтобы обеспечить образование комплекса между фосфорилированным биотинилированным пептидом и проявляющими реагентами. После этого, количество фосфорилированного субстрата оценивали путем измерения резонансного переноса энергии от Еи-хелата к стрептавидину-ХЬ665. Для этого испускание флуоресценции при 620 нм и 665 нм после возбуждения при 350 нм измеряли в считывающем устройстве ТК-РКЕТ [например, КиЬук!аг (ВМС ЬаЬ1есйпо1од1ек. Оффенбург, Германия) или У1еМи\ (Регкш-Е1тег)]. Соотношение излучений при 665 нм и при 622 нм было принято в качестве меры для количества фосфорилированного субстрата. Данные нормализировали (ферментативная реакция без ингибитора = 0% ингибирования, все другие аналитические компоненты, но без фермента = 100% ингибирования), и 1С₅₀ значения подсчитывали посредством выравнивания 4 параметров с применением программного обеспечения для внутреннего пользования.

1С₅₀ значения для отдельных соединений, предлагаемых в настоящем изобретении из данного анализа приведены в табл. 1А ниже:

Таблица 1А

85

029556

Избранные производные 8-амино-1-(бензотиофен-2-ил)имидазо[1,5-а]пиразина и родственные соединения, которые рассматривались как представляющие ближайший уровень техники (см. Межд. пат. заявку \УО 2007/061737-А2 и описанные там примерные соединения) синтезировали, следуя опубликованным процедурам и также были исследованы в ходе анализа РФРФ-1 высокий АТФ в целях сравнения.

Юо значения, которые были получены для этих соединений, приведены в табл. 1В ниже.

- 86 029556

Таблица 1В

КЛ значения, указанные в табл. 1А и 1В показывают, что соединения, предлагаемые в настоящем изобретении ингибируют примерно в от пяти до тысячи раз сильнее активность киназы РФРФ-1, чем избранные соединения из уровня техники.

В-2. Анализ РФРФ-3 киназы.

РФРФ-3 ингибирующую активность соединений, предлагаемых в настоящем изобретении, после их предварительной инкубации с РФРФ-3 определяли количественно, используя РФРФ-3 анализ на основе ТР-ΤРΕТ, как описано в нижеследующих абзацах.

Рекомбинантный меченный РФРФ-3 белок слияния [слияние глутатиона-трансферазы (ГСТ) (Νконцевая), Н^δ6-метка, тромбиновый сайт расщепления, и внутриклеточная часть РФРФ-3 человека из аминокислот от Р397 до Т806 как в записи NСВI/Ρ^οίе^η ЫР000133.1], выраженные в δΤ9 клетках насекомых с применением системы экспрессии бакуловирусов и очищенные посредством аффинной хроматографии на глутатионе-трансферазе, были приобретены у Р^цонкс (№ продукта 1068-0000-1) и применяли в качестве фермента. В качестве субстрата для реакции киназы применяли биотинилированный пептид биотин-Лйх-ΛΆΕΕΕΥΤΤΤΤΆΚΚΚ (С-конец в амидной форме), который может быть приобретен, например, у компании Вю5уп1ап (ВегНп-Висй, Германия).

Как правило, исследуемые соединения испытывали на том же самом микротитрационном планшете в 11 различных концентрациях в диапазоне от 20 мкМ до 0.1 нМ (например, 20 мкМ, 5.9 мкМ, 1.7 мкМ, 0.51 мкМ, 0.15 мкМ, 44 нМ, 13 нМ, 3.8 нМ, 1.1 нМ, 0.33 нМ, и 0.1 нМ) в двух повторностях для каждой концентрации. Серии разбавлений приготавливали отдельно до анализа на уровне 100-кратно концентрированных маточных растворов в ДМСО; точные концентрации могут варьироваться в зависимости от применяемого устройства для пипетирования. Для анализа 50 нл каждого маточного раствора исследуемого соединения в ДМСО добавляли пипеткой в 384-луночный микротитрационный планшет низкого объема черного цвета (Огетег Вю-Опе, Фрикенхаузен, Германия). Добавляли 2 мкл раствора указанного

- 87 029556

выше РФРФ-3 белка слияния в водный аналитический буфер [8 мМ МОР8 рН 7.0, 10 мМ ацетата магния, 1.0 мМ дитиотреитола, 0.05% (мас./об.) альбумина бычьей сыворотки (АБС), 0.07% (об./об.) Т\уееп-20, 0.2 мМ ЭДТА], и смесь инкубировали в течение 15 мин при 22°С, чтобы обеспечить предварительное связывание исследуемого соединения с ферментом. После этого инициировали киназную реакцию посредством добавления 3 мкл раствора аденозинтрифосфата (АТФ, 16.7 мкМ; конечная концентрация в 5 мкл аналитического объема =10 мкМ) и субстрата (0.8 мкМ; конечная концентрация в 5 мкл аналитического объема = 0.5 мкМ) в аналитический буфер, и полученную смесь инкубировали в течение реакционного времени в 60 мин. при 22°С. Концентрацию РФРФ-3 белка слияния устанавливали в зависимости от активности партии ферментов и выбирали соответствующим образом, чтобы иметь анализ в линейном диапазоне (типичные концентрации находились в пределах 0.03 мкг/мл). Реакцию останавливали посредством добавления 5 мкл раствора ГФВР проявляющих реагентов [100 нМ стрептавидин-X^665 (С18 Вюш!егпа!юпа1) и 1 нМ РТ66-ТЬ-криптата, меченное криптатом тербия антифосфотирозиновое антитело (С18 Вюш!ета!юпа1; вместо них можно использовать РТ66-Еи-хелат от Регкш-Е1шег), в водном растворе ЭДТА (50 мМ ЭДТА, 0.1 % (мас./об.) АБС в 50 мМ ГЭПЭС/ЫаОН рН 7.5)].

Полученную смесь инкубировали в течение 1 ч при 22°С, чтобы обеспечить образование комплекса между фосфорилированным биотинилированным пептидом и проявляющими реагентами. После этого, количество фосфорилированного субстрата оценивали путем измерения резонансного переноса энергии от ТЬ-хелата к стрептавидину-X^665. Для этого испускание флуоресценции при 620 нм и 665 нм после возбуждения при 350 нм измеряли в считывающем устройстве ТК-РКЕТ [например, КиЬу8!аг (ВМС ЬаЬ!есйио1од1е8, Оффенбург, Германия) или У1еМих (Регкш-Е1шег)]. Соотношение излучений при 665 нм и при 622 нм было принято в качестве меры для количества фосфорилированного субстрата. Данные нормализировали (ферментативная реакция без ингибитора = 0% ингибирования, все другие аналитические компоненты, но без фермента = 100% ингибирования), и Κ.'₅₀ значения подсчитывали посредством выравнивания 4 параметров с применением программного обеспечения для внутреннего пользования.

Юо значения для отдельных соединений, предлагаемых в настоящем изобретении, из данного анализа приведены в табл. 2А ниже:

Таблица 2А

Пример №	РФРФ-31Сед |нМ1
5	12.1
6	28.5
7	10.4
8	17.7
57	1.8
58	9.8
59	6.8
60	77.9
61	0.9
62	11.0
64	2.9
65	3.1
66	3.7
67	9.4
68	42.7
69	58.1
71	5.4
72	0.7
73	12.2
74 75	1.4 19.8
76	1.4
77	3.8
78	2.0
79	17.9
80	0.2
81	0.5
82	16.0
83	2.1
84	16.5
85	26.0
86	6.8
87	28.1
90	11.0
91	31.1
93	8.7
95	28.7
98	26.5
99	36.9
102	39.8
106	7.1
107	17.4
108	7.7
114	9.6
117	5.3
119	4.5
121	24.6

- 88 029556

Избранные производные 8-амино-1-(бензотиофен-2-ил)имидазо[1,5-а]пиразина и родственные соединения, который рассматривались как представляющие ближайший уровень техники (см. Межд. пат. заявку АО 2007/061737-А2 и описанные там примерные соединения) синтезировали, следуя опубликованным процедурам, а также исследовали в анализе РФРФ-3 в целях сравнения. Ю₅₀ значения, которые были получены для этих соединений, приведены в табл. 2В ниже:

Т аблица 2В

Ю₅₀ значения, указанные в табл. 2А и 2В показывают, что соединения, предлагаемые в настоящем изобретении ингибируют приблизительно в от трех до тысячи раз сильнее активность киназы РФРФ-3, чем избранные соединения из уровня техники.

В-3. Анализ киназы РФРФ-4 высокого АТФ.

РФРФ-4 ингибирующую активность при высокой концентрации АТФ соединений, предлагаемых в настоящем изобретении, после их предварительной инкубации с РФРФ-4 определяли количественно, используя анализ РФРФ-4 высокого АТФ на основе ТК-ΡΚΕΤ, как описано в нижеследующих абзацах.

Рекомбинантный меченный РФРФ-4 белок слияния [слияние глутатион-З-трансферазы (ГСТ) (Νконцевая), I Ιΐδό-метка. тромбиновый сайт расщепления, и внутриклеточная часть РФРФ-4 человека из аминокислот от К391 до Т802 как в записи СепВапк НМ 002011], выраженные в 8Ρ9 клетках насекомых с применением системы экспрессии бакуловирусов и очищенные посредством аффинной хроматографии на глутатион-агарозу, были приобретены у Ρ^ο^^ηаδе (№ продукта 0127-0000-3) и применяли в качестве фермента. В качестве субстрата для реакции киназы применяли биотинилированный пептид биотин-АйхΑΑΕΕΕΥΡΡΡΡΑΚΚΚ (С-конец в амидной форме) использовали который может быть приобретен, например, у компании ΗιοδΥηΙίΐη (Вегйп-Висй, Германия).

Как правило, исследуемые соединения испытывали на том же самом микротитрационном планшете в 11 различных концентрациях в диапазоне от 20 мкМ до 0.1 нМ (например, 20 мкМ, 5.9 мкМ, 1.7 мкМ, 0.51 мкМ, 0.15 мкМ, 44 нМ, 13 нМ, 3.8 нМ, 1.1 нМ, 0.33 нМ, и 0.1 нМ) в двух повторностях для каждой

- 89 029556

концентрации. Серии разбавлений приготавливали отдельно до анализа на уровне 100-кратно концентрированных маточных растворов в ДМСО; точные концентрации могут варьироваться в зависимости от применяемого устройства для пипетирования. Для анализа 50 нл каждого маточного раствора исследуемого соединения в ДМСО добавляли пипеткой в 384-луночный микротитрационный планшет низкого объема черного цвета (Стешет Вю-Опе, Фрикенхаузен, Германия). Добавляли 2 мкл раствора указанного выше РФРФ-4 белка слияния в водный аналитический буфер [8 мМ МΟΡδ рН 7.0, 10 мМ ацетата магния, 1.0 мМ дитиотреитола, 0.05 % (мас./об.) альбумина бычьей сыворотки (АБС), 0.07 % (об./об.) Т\уссп-20, 0.2 мМ ЭДТА], и смесь инкубировали в течение 15 мин при 22°С, чтобы обеспечить предварительное связывание исследуемого соединения с ферментом. После этого инициировали киназную реакцию посредством добавления 3 мкл раствора аденозинтрифосфата (АТФ, 3.3 мМ; конечная концентрация в 5 мкл аналитического объема = 2 мМ) и субстрата (0.8 мкМ; конечная концентрация в 5 мкл аналитического объема = 0.5 мкМ) в аналитический буфер, и полученную смесь инкубировали в течение реакционного времени в 60 мин. при 22°С. Концентрацию РФРФ-4 белок слияния устанавливали в зависимости от активности партии ферментов и выбирали соответствующим образом, чтобы иметь анализ в линейном диапазоне (типичные концентрации находились в пределах 0.03 мкг/мл). Реакцию останавливали посредством добавления 5 мкл раствора ГФВР проявляющих реагентов [100 нМ стрептавидин-ХЬ665 (С18 ВюиИсгпа1юпа1) и 1 нМ РТ66-ТЬ-криптат, меченное криптатом тербия антифосфотирозиновое антитело (С18 ВюиИсгпа1юпа1; вместо них можно использовать РТ66-Εи-хелат от РеГОт^тет), в водном растворе ЭДТА (50 мМ ЭДТА, 0.1 % (мас./об.) АБС в 50 мМ ГЭПЭС/№ОН рН 7.5)].

Полученную смесь инкубировали в течение 1 ч. при 22°С чтобы обеспечить образование комплекса между фосфорилированным биотинилированным пептидом и проявляющими реагентами. После этого, количество фосфорилированного субстрата оценивали путем измерения резонансного переноса энергии от ТЬ-хелата к стрептавидину-ХЬ665. Для этого испускание флуоресценции при 620 нм и 665 нм после возбуждения при 350 нм измеряли в считывающем устройстве ТК-ΡΕΕΤ [например, КиЬу81аг (ВМС ЬаЬ1ссЬпо1одю8, Оффенбург, Германия) или У1С\у1и\ (Рсгкт^тст)]. Соотношение излучений при 665 нм и при 622 нм было принято в качестве меры для количества фосфорилированного субстрата. Данные нормализировали (ферментативная реакция без ингибитора = 0 % ингибирования, все другие аналитические компоненты, но без фермента = 100 % ингибирования), и Κ.'₅₀ значения подсчитывали посредством выравнивания 4 параметров с применением программного обеспечения для внутреннего пользования.

В-4. Анализ тТОК киназы (в целях сравнения).

тТОК ингибирующую активность соединений, предлагаемых в настоящем изобретении, определяли количественно, используя анализ тТОК на основе ТК-ΡΕΕΤ, как описано в нижеследующих абзацах.

Рекомбинантный слитой меченный тТОК белок [глутатиона-трансферазы (ГСТ), слитой с человеческими тТОК аминокислотами из от 1360 до 2549], выраженные в клетках насекомых и очищенные посредством аффинной хроматографии на глутатион-сефарозе, были приобретены у Шукгодеп (кат № 4753) и применяли в качестве фермента. В качестве субстрата для киназной реакции использовали рекомбинантный белок слияния ЗФБ и 4Е-ВР1 (приобретено у Шукгодеп, кат. № РУ4759).

Исследуемые соединения растворяли в ДМСО, чтобы получить 10 мМ маточные растворы. Сначала растворы подвергали 10-кратному разбавлению посредством 100% ДМСО, чтобы получить 1 мМ растворы в 100% ДМСО, затем 100-кратно разбавляли посредством 50% ДМСО, чтобы получить 10 мкМ растворы в 50% ДМСО.

Для анализа 0.5 мкл 10 мкМ раствора исследуемого соединения в 50% ДМСО добавляли пипеткой в 384-луночный микротитрационный планшет низкого объема черного цвета (Стешет Вю-Опе, Фрикенхаузен, Германия). Добавляли 2 мкл раствора указанного выше тТОК белка слияния в водном аналитическом буфере [50 мМ ГЭПЭС.’/№ГОН рН 7.5, 5 мМ магния хлорид, 1.0 мМ дитиотреитола, 1 мМ ΕСΤΑ, 0.01 % (об./об.) ТпЮп-Хто, 0.01% (мас./об.) альбумина бычьей сыворотки (АБС)], и смесь инкубировали в течение 15 мин при 22°С, чтобы обеспечить предварительное связывание исследуемого соединения с ферментом. После этого, инициировали киназную реакцию посредством добавления 2.5 мкл раствора аденозинтрифосфата (АТФ, 80 мкМ; конечная концентрация в 5 мкл аналитического объема = 40 мкМ) и субстрата (0.6 мкМ; конечная концентрация в 5 мкл аналитического объема = 0.3 мкМ) в аналитический буфер, и полученную смесь инкубировали в течение реакционного времени в 60 мин. при 22°С. Концентрацию тТОК белка слияния выбирали соответствующим образом, чтобы иметь анализ в линейном диапазоне (типичная конечная концентрация в 5 мкл аналитического объема составляла 1.25 нг/мкл). Реакцию останавливали посредством добавления 5 мкл 30 мМ ЭДТА (конечная концентрация в 10 мкл аналитического объема =15 мМ) и 2 нМ меченного ТЬ-хелатом анти-4Е-ВР1 [рТ46] фосфоспецифического антитела |!пу11го8сп кат № РУ4755] (конечная концентрация в 10 мкл аналитического объема = 1 нМ) в ΡΕΕΤ буфере.

Полученную смесь инкубировали в течение 1 ч при 22°С, чтобы способствовать образованию комплекса между фосфорилированным субстратом и меченного ТЬ-хелатом антитела. После этого количество фосфорилированного субстрата оценивали путем измерения резонансного переноса энергии от ТЬхелата к ЗФБ. Для этого испускания флуоресценции при 495 нм и 520 нм после возбуждения при 340 нм

- 90 029556

измеряли в считывающей устройстве Еиу1зюи 2104 ти101аЬе1 геайег (Регкт-Е1тег). Соотношение излучений при 520 нм и при 495 нм было принято в качестве меры для количества фосфорилированного субстрата. Данные нормализировали (ферментативная реакция без ингибитора = 0% ингибирования, все другие аналитические компоненты, но без фермента = 100% ингибирования), и либо средние значения (если испытаны в повторностях при одной концентрации) или Κ.'₅₀ значения подсчитывали (посредством выравнивания 4 параметров с применением программного обеспечения для внутреннего пользования).

Средние значения ингибирования при 1 мкМ для отдельных соединений, предлагаемых в настоящем изобретении приведены в табл. 3 ниже.

Таблица 3

Пример №	тТОК % ингибирования (ф 1 мкМ
I	8.7
2	7.2
3	8.2
5	9.7
6	0.3
7	3.1
8	7.8
9	ингибирующ. эффект не обнаружен
10	6.0
11	33.2
12	25.8
13	14.9
14	15.7
16	36.9
17	6.7
18	ингибирующ. эффект не обнаружен
19	17.6
20	31.3
21	5.0
22	17.6
23	11.6
24	6.3
25	3.5
26	6.8
27	5.9
28	ингибирующ. эффект не обнаружен
29	28.5
30	21.1
31	16.3
32	1.6
33	0.9
34	25.9
35	1.4
36	14.4
37	8.6
38	20.8
39	11.5
40	0.1
41	ингибирующ. эффект не
87	12.7
88	5.3
89	ингибирующ. эффект не обнаружен
93	12.5
98	ингибирующ. эффект не обнаружен
99	5.3
103	ингибирующ. эффект не

(ингибирующ. эффект не обнаружен = ингибирующий эффект не обнаруживают при 1 мкМ).

Данные в табл. 3 показывают, что соединения, предлагаемые в настоящем изобретении, обладают лишь слабым, если обладают вообще, ингибирующим эффектом на тТОК киназу, которая не рассматривается как содействующая фармакологической активности, наблюдаемой с этими соединениями.

В-5. Ингибирование опосредованной фактором роста клеточной пролиферации.

Эндотелиальные клетки пупочной вены человека (НИУЕС) были получены от С'е11зуз1етз (ЕС0003) и выращивали в УазсиПГе ФЭРС полной среде (Се11зуз1етз. ЬЬ-1020), содержащей 2% фетальную бычью сыворотку (ФБС) при 37°С и 5% СО₂. Клетки применяли для анализа пролиферации до пассажа 7.

- 91 029556

Клетки 1ИАТС собирали с применением аккутазы (РАА, Ь11-007) и высеивали в колонки со 2 по 12 96-луночных планшетов (Ра1соп МIСКΟΤЕ8Τ 96-луночный планшет с плоским дном для тканевых культур, ВЭ 353075, или мкСЬЕАК-РЬАТЕ, черный. 96-луночный, Огешег Вю-Опе, № 655090) при плотности клеток 2500 клеток/лунку в 100 мкл να5^1ίίε ФЭРС полной среде с колонкой 1, остающейся пустой в качестве холостой пробы. Клетки подвергали инкубированию при 37°С и 5% СО₂ в течение по меньшей мере 6 ч. После этого, клетки промывали один раз с ФБР и выдерживали без сыворотки в течение ночи в ναδ^ϋΐΐίε базальной среде (Се115у5ΐет5, ЬМ-0002), содержащий гепарин, аскорбат и лглутамин (компоненты ν;·ΐ5αι1ίίο Ы£е РасЮг5 Κίΐ, Се115у5ΐет5, ЬЬ-1020), а также 0.2% ФБС.

Через приблизительно 18 ч, бессывороточную среду отбрасывали, и клетки в течение 72 ч подвергали воздействию 9 последовательных логарифмических или полулогарифмических концентраций исследуемого соединения в диапазоне от 10 рМ до 30 мкМ и до 5, 10 или 20 нг/мл ЬЬОР-2 (рекомбинантный человеческий ФРФ основной, К&Э 8у5ΐет5, 233-РВ) в 100 мкл бессывороточной среде. 10 мМ маточные растворы исследуемых соединений в ДМСО разбавляли до 200 х конечной концентрации в ДМСО, приводящей к конечной ДМСО концентрации 0.5% во всех лунках. Контрольные варианты состояли из клеток, выращенных только в бессывороточной среде и клеток, выращенных в содержащей ЬЬОР-2 бессывороточной среде с 0.5% ДМСО. Для того, чтобы определить пролиферацию клеток в каждую лунку добавляли 5 мкл раствора А1атаг В1ие (Вю5оигсе, ЭАЬ1100) (1:20 разбавление), и клетки подвергали инкубированию в течение дополнительных 4 ч. при 37°С и 5% СО₂ до измерения флуоресценции (возб. 535 нм, изл. 595 нм) с помощью считывающего устройства для планшетов 8рес1гаЛног Р1и5 Тесап (ХРЬИОК⁴ уещюп 4.20). В некоторых экспериментах использовали Набор для определения АТФ (ВМЕНИ ОтЪН, ЬВК-Т100) в соответствии с инструкциями производителя. В каждом эксперименте образцы анализировали три раза, и определяли допустимые отклонения. Использовали программное обеспечение ОгарЬРаД Рп5т 5, чтобы проанализировать данные и получить Κ.'₅₀ значения. Все исследуемые соединения подвергали анализу от 2 до 10 раз в независимых экспериментах и были получены сходные результаты.

Данные, приведенные в табл. 4 ниже, представляют собой КА, значения для характерных соединений, предлагаемых в настоящем изобретении, полученные из соответствующих усреднённых рКА, значений.

Таблица 4

Большая часть соединений, предлагаемых в настоящем изобретении показала приблизительно от десяти- до стократную-сниженную ингибирующую активность в данном анализе пролиферации, когда фактор роста эндотелия сосудов (ФЭРС-А₁₆₅ изоформа) использовали в качестве посреднического фактора роста (вместо ФРФ-2), что указывает на значительную селективность этих соединений для РФРФ в отношении РСЭФР киназ.

В-6. Ксенотрансплантат человека и сингенные модели опухолей.

Были осуществлены различные модели опухолей с целью профилирования соединений, предлагаемых в настоящем изобретении, ш У1уо. Опухолевые клетки человека, крысы или мыши выращивали ш

- 92 029556

νΐίτο и имплантировали или в иммунодефицитных, или в иммунокомпетентных мышей, или иммунодефицитных крыс. Лечение начинают после приживаемости опухоли, и животным с опухолями вещества вводили различными способами (перорально, внутривенно, внутрибрюшинно или подкожно). Вещества были испытаны в качестве монотерапии или в комбинированной терапии с другими фармакологическими веществами. Лечение животных с опухолями осуществляли пока опухоли не достигли среднего размера в 120 мм². Опухоли измеряли в двух измерениях с применением циркуля, и объем опухоли был рассчитан по формуле (длина х ширина²)/2. Эффективность вещества оценивали в конце эксперимента с применением соотношения Т/С [Т = конечный вес опухоли в обработанной группе; С = конечный вес опухоли в контрольной группе]. Статистическая значимость эффективности между контрольными и обработанными группами определяли с помощью теста на дисперсность АNОVА. Все исследования на животных были проведены в соответствии с немецкими регуляторными нормативами.

Несмотря на то, что изобретение было описано со ссылкой на конкретные варианты осуществления, очевидно, что могут быть изобретены и другие варианты осуществления и вариации настоящего изобретения другими специалистами в данной области техники без отступления от сущности и объема притязаний настоящего изобретения. Пункты

Claims (15)

1. формулы изобретения следует толковать как включающие в себя все такие варианты осуществления и эквивалентные вариации.

   С. Примеры, относящиеся к фармацевтическим композициям.

   Фармацевтические композиции в соответствии с настоящим изобретением могут быть проиллюстрированы следующим образом.

   Стерильный внутривенный раствор.

   Раствор 5 мг/мл целевого соединения в соответствии с настоящим изобретением может быть приготовлен с применением стерильной воды для инъекций, и при необходимости регулируют значение рН. Раствор для введения разбавляют до 1-2 мг/мл со стерильной 5% декстрозой и вводят как внутривенную инфузию в течение примерно 60 мин.

   Лиофилизированный порошок для внутривенного введения.

   Стерильный препарат может быть приготовлен с использованием (I) 100-1000 мг целевого соединения в соответствии с настоящим изобретением в виде лиофилизированного порошка, (II) 32-327 мг/мл цитрата натрия, и (III) 300-3000 мг Декстрана 40. Состав восстанавливают с помощью стерильного солевого раствора для инъекций или 5% декстрозы до концентрации 10-20 мг/мл, который в дальнейшем разводят с помощью солевого раствора или 5% декстрозы до 0,2-0,4 мг/мл, и вводят или в виде внутривенного болюса, или в виде внутривенной инфузии в течение 15-60 мин.

   Внутримышечная суспензия.

   Может быть приготовлен следующий раствор или суспензия для внутримышечной инъекции.

   50 мг/мл целевого, нерастворимого в воде соединения согласно настоящему изобретению; 5 мг/мл натрий-карбоксиметилцеллюлозы; 4 мг/мл Т\\ееп 80; 9 мг/мл хлорида натрия; 9 мг/мл бензилового спирта.

   Капсулы с твердой оболочкой.

   Большое количество капсул приготавливают путем заполнения стандартных, состоящих из двух частей твердых желатиновых капсул, каждой посредством 100 мг порошкообразного соединения согласно настоящему изобретению, 150 мг лактозы, 50 мг целлюлозы и 6 мг стеарата магния.

   Мягкие желатиновые капсулы.

   Приготавливают смесь из соединения согласно настоящему изобретению в легко усваиваемом масле, таком как соевое масло, хлопковое масло или оливковое масло, и впрыскивают с помощью поршневого насоса прямого вытеснения в расплавленный желатин с образованием капсул, содержащих 100 мг действующего вещества. Капсулы промывают и высушивают. Целевое соединение согласно настоящему изобретению может быть растворено в смеси из полиэтиленгликоля, глицерина и сорбита для приготовления смешиваемой с водой лекарственной смеси.

   Таблетки.

   Большое количество таблеток приготавливают с помощью стандартных процедур таким образом, что дозированная единица представляет собой 100 мг целевого соединения согласно настоящему изобретению, 0,2 мг коллоидного диоксида кремния, 5 мг стеарата магния, 275 мг микрокристаллической целлюлозы, 11 мг крахмала и 98,8 мг лактозы. Можно применять соответствующие водные и неводные покрытия для повышения вкусовых качеств, улучшения отточенности и стабильности или замедленной абсорбции.

   Раствор или суспензия для местного применения в глаза (глазные капли): Стерильный состав может быть приготовлен с помощью 100 мг целевого соединения настоящего изобретения в виде лиофилизированного порошка, восстановленного в 5 мл стерильного солевого раствора. В качестве консерванта, могут быть использованы хлорид бензалкония, тимеросал, нитрат фенилртути, или т.п. в пределах от приблизительно 0.001 до 1% по весу.

   - 93 029556

   1. Соединение формулы (I)

   в которой

   К¹ означает водород, хлор, метил или метокси,

   К² означает водород или метокси,

   при условии, что по меньшей мере один из К¹ и К² отличается от водорода,

   О¹ представляет собой хлор, (С1-С4)-алкил, (С1-С4)-алкоксикарбонил, 5-членный азагетероарил или группу -СН2-ОК³, -СН2-Ж⁴К⁵ или -С(=О)-НК⁴К⁶, причем

   К³ означает водород, (С₁-С₄)-алкил, (С₃-С₆)-циклоалкил или фенил,

   (I) указанный (С₁-С₄)-алкил по выбору замещен посредством гидрокси, (С₁-С₄)-алкокси, гидроксикарбонила, (С₁-С₄)-алкоксикарбонила, амино, аминокарбонила, моно-(С₁-С₄)-алкиламинокарбонила, ди(С₁-С₄)-алкиламинокарбонила, (С₃-С₆)-циклоалкила или до трех атомов фтора, и

   (II) указанный (С₃-С₆)-циклоалкил по выбору замещен одним или двумя заместителями, независимо выбранными из группы, которая включает (С₁-С₄)-алкил, гидрокси и амино, и

   (III) указанный фенил по выбору замещен одним или двумя заместителями, независимо выбранными из группы, которая включает фтор, хлор, бром, циано, трифторметил, трифторметокси, (С₁-С₄)-алкил и (С₁-С₄)-алкокси,

   К⁴ означает водород или (С₁-С₄)-алкил,

   К⁵ означает водород, (С₁-С₄)-алкил, (С₁-С₄)-алкилкарбонил, (С₃-С₆)-циклоалкил или от 4- до 6членный гетероциклоалкил, содержащий один кольцевой атом азота, и необязательно один другой кольцевой гетероатом, выбранный из Ν, О или δ(Ο)₂, причем

   (I) указанный (С₁-С₄)-алкил по выбору замещен посредством гидрокси, (С₁-С₄)-алкокси, гидроксикарбонила, (С₁-С₄)-алкоксикарбонила, аминокарбонила, моно-(С₁-С₄)-алкиламинокарбонила, ди-(С₁-С₄)алкиламинокарбонила или (С3-С6)-циклоалкила, и

   (II) указанный (С₃-С₆)-циклоалкил по выбору замещен одним или двумя заместителями, независимо выбранными из группы, которая включает (С₁-С₄)-алкил, гидрокси и амино, и

   (III) указанный от 4- до 6-членный гетероциклоалкил по выбору замещен одним или двумя заместителями, независимо выбранными из группы, которая включает (С1-С4)-алкил, гидрокси, оксо и амино,

   К⁶ означает водород, (С₁-С₄)-алкил, (С₃-С₆)-циклоалкил или от 4- до 6-членный гетероциклоалкил, содержащий один кольцевой атом азота, и необязательно один другой кольцевой гетероатом, выбранный из Ν, О или δ(Ο)₂, причем

   (I) указанный (С₁-С₄)-алкил по выбору замещен посредством гидрокси, (С₁-С₄)-алкокси, гидроксикарбонила, (С₁-С₄)-алкоксикарбонила, амино, аминокарбонила, моно-(С₁-С₄)-алкиламинокарбонила, ди(С₁-С₄)-алкиламинокарбонила или (С₃-С₆)-циклоалкила, и

   (II) указанный (С₃-С₆)-циклоалкил по выбору замещен одним или двумя заместителями, независимо выбранными из группы, которая включает (С1-С4)-алкил, гидрокси и амино, и

   (III) указанный от 4- до 6-членный гетероциклоалкил по выбору замещен одним или двумя заместителями, независимо выбранными из группы, которая включает (С₁-С₄)-алкил, гидрокси, оксо и амино, или

   К⁴ и К⁵ или К⁴ и К⁶, соответственно, соединены и, взятые совместно с атомом азота, к которому они присоединены, образуют моноциклическое, насыщенное от 4- до 7-членное гетероциклоалкильное кольцо, которое может содержать второй кольцевой гетероатом, выбранный из Ν(Ρ/) и О, и которое может быть замещенным на кольцевых атомах углерода одним или двумя заместителями, независимо выбранными из группы, состоящей из (С1-С4)-алкила, оксо, гидрокси, амино и аминокарбонила, и причем

   К⁷ означает водород, (С₁-С₄)-алкил, формил или (С₁-С₄)-алкилкарбонил, и

   О² представляет собой хлор, циано, (С1-С4)-алкил, или группу -СК^8АК^8В-ОН, -ΟΉ^-ΝΑΎ -С(=О)νΚΥ¹² или -СН2-ОК¹⁵, причем

   К^8А и К^8В независимо выбраны из группы, состоящей из водорода, (С₁-С₄)-алкила, циклопропила и циклобутила,

   К⁹ означает водород или (С₁-С₄)-алкил,

   К¹⁰ означает водород, (С₁-С₄)-алкил, (С₁-С₄)-алкилкарбонил, (С₃-С₆)-циклоалкил или от 4- до 6членный гетероциклоалкил, содержащий один кольцевой атом азота, и необязательно один другой кольцевой гетероатом, выбранный из Ν, О или 8(О)₂, причем

   - 94 029556

   (I) указанный (С₁-С₄)-алкил по выбору замещен посредством гидрокси, амино, аминокарбонила, моно-(С₁-С₄)-алкиламинокарбонила или ди-(С₁-С₄)-алкиламинокарбонила, и

   (II) указанный (С₃-С₆)-циклоалкил по выбору замещен одним или двумя заместителями, независимо выбранными из группы, которая включает (С₁-С₄)-алкил, гидрокси и амино, и

   (III) указанный от 4- до 6-членный гетероциклоалкил по выбору замещен одним или двумя заместителями, независимо выбранными из группы, которая включает (С₁-С₄)-алкил, гидрокси, оксо и амино,

   К¹¹ означает водород или (С₁-С₄)-алкил,

   К¹² означает водород, (С₁-С₄)-алкил, (С₃-С₆)-циклоалкил или от 4- до 6-членный гетероциклоалкил, содержащий один кольцевой атом азота, и необязательно один другой кольцевой гетероатом, выбранный из Ν, О или δ(Ο)₂, причем

   (I) указанный (С₁-С₄)-алкил по выбору замещен посредством гидрокси, амино, аминокарбонила, моно-(С₁-С₄)-алкиламинокарбонила или ди-(С₁-С₄)-алкиламинокарбонила, и

   (II) указанный (С₃-С₆)-циклоалкил по выбору замещен одним или двумя заместителями, независимо выбранными из группы, которая включает (С1-С4)-алкил, гидрокси и амино, и

   (III) указанный от 4- до 6-членный гетероциклоалкил по выбору замещен одним или двумя заместителями, независимо выбранными из группы, которая включает (С₁-С₄)-алкил, гидрокси, оксо и амино, или

   К⁹ и К¹⁰ или К¹¹ и К¹², соответственно, соединены и, взятые совместно с атомом азота, к которому они присоединены, образуют моноциклическое, насыщенное от 4- до 7-членное гетероциклоалкильное кольцо, которое может содержать второй кольцевой гетероатом, выбранный из Ν®³), О, δ и δ(Ο)₂, и которое может быть замещенным на кольцевых атомах углерода посредством до трех заместителей, независимо выбранных из группы, состоящей из фтора, (С₁-С₄)-алкила, оксо, гидрокси, амино и аминокарбонила, и причем

   К¹³ означает водород, (С₁-С₄)-алкил, (С₃-С₆)-циклоалкил, формил или (С₁-С₄)-алкилкарбонил, и

   К¹⁵ означает (С₁-С₄)-алкил,

   при условии, что С¹ не представляет собой хлор, если С² является хлором или циано, или его фармацевтически приемлемая соль.
2. 2. Соединение формулы (I) по п.1, причем К¹ означает хлор, метил или метокси,

   К² означает водород или метокси,

   С¹ представляет собой хлор, (С1-С4)-алкил, (С1-С4)-алкоксикарбонил или 5-членный азагетероарил, выбранный из группы, включающей пиразолил, имидазолил, оксазолил, изоксазолил и оксадиазолил, или представляет собой группу -СН2-ОК³ или -СН2-ЫК⁴К⁵, причем

   К³ означает водород, (С₁-С₄)-алкил или (С₃-С₆)-циклоалкил,

   причем указанный (С₁-С₄)-алкил по выбору замещен посредством гидрокси, (С₁-С₄)-алкокси, гидроксикарбонила, (С₁-С₄)-алкоксикарбонила, амино, аминокарбонила, (С₃-С₆)-циклоалкила или до трех атомов фтора,

   К⁴ означает водород или (С₁-С₄)-алкил,

   К⁵ означает водород, (С₁-С₄)-алкил, (С₁-С₄)-алкилкарбонил, (С₃-С₆)-циклоалкил или 5- или 6членный гетероциклоалкил, причем

   (I) указанный (С₁-С₄)-алкил по выбору замещен посредством гидрокси, гидроксикарбонила или (С₃С6)-циклоалкила, и

   (II) указанный 5- или 6-членный гетероциклоалкил по выбору замещен посредством оксо, или

   К⁴ и К⁵ соединены и, взятые совместно с атомом азота, к которому они присоединены, образуют моноциклическое, насыщенное от 4- до 6-членное гетероциклоалкильное кольцо, которое может содержать второй кольцевой гетероатом, выбранный из Ν/К⁷) и О, и который может быть замещен на кольцевом атоме углерода посредством оксо или гидрокси, и причем

   К⁷ означает водород или (С₁-С₄)-алкил, и

   С² представляет собой хлор, циано, (С1-С4)-алкил или группу -СК^8АК^8В-ОН, -СН2-Ж⁹К^|и. -С(=О)ЯК¹¹К¹² или -СН₂-ОК¹⁵, причем

   К^8А и К^8В независимо выбраны из группы, состоящей из водорода, (С₁-С₄)-алкила и циклопропила,

   К⁹ означает водород или метил,

   К¹⁰ означает водород, (С₁-С₄)-алкил, (С₁-С₄)-алкилкарбонил, (С₃-С₆)-циклоалкил или 5- или 6членный гетероциклоалкил, причем

   (I) указанный (С₁-С₄)-алкил по выбору замещен посредством гидрокси или аминокарбонила, и

   (II) указанный 5- или 6-членный гетероциклоалкил по выбору замещен посредством оксо,

   К¹¹ означает водород или метил,

   К¹² означает водород, (С₁-С₄)-алкил, (С₃-С₆)-циклоалкил или 5- или 6-членный гетероциклоалкил, причем

   (I) указанный (С₁-С₄)-алкил по выбору замещен посредством гидрокси, и

   (II) указанный 5- или 6-членный гетероциклоалкил по выбору замещен посредством оксо, или

   К⁹ и К¹⁰ или К¹¹ и К¹², соответственно, соединены и, взятые совместно с атомом азота, к которому

   - 95 029556

   они присоединены, образуют моноциклическое, насыщенное от 4- до 6-членное гетероциклоалкильное кольцо, которое может содержать второй кольцевой гетероатом, выбранный из Ν(Κ¹³), О, З и З(О)₂, и которое может быть замещенным на кольцевых атомах углерода посредством до трех заместителей, независимо выбранных из группы, состоящей из фтора, (С₁-С₄)-алкила, оксо, гидрокси, амино и аминокарбонила, и причем

   К¹³ означает водород, (С₁-С₄)-алкил, циклопропил, циклобутил, формил или (С₁-С₄)-алкилкарбонил, и

   К¹⁵ означает метил или этил,

   при условии, что С¹ не представляет собой хлор, если С² является хлором или циано, или его фармацевтически приемлемая соль.
3. 3. Соединение формулы (I) по п.1 или 2, причем

   К¹ означает метил,

   К² означает метокси,

   С¹ представляет собой метил, оксазол-5-ил или группу -СН2-ОК³ или -СН2-МК⁴К⁵, причем

   К³ означает водород, (С₁-С₄)-алкил, циклопропил или циклобутил,

   причем указанный (С₁-С₄)-алкил по выбору замещен посредством гидрокси, метокси, этокси, гидроксикарбонила, метоксикарбонила, этоксикарбонила, амино, аминокарбонила, циклопропила, циклобутила или до трех атомов фтора,

   К⁴ означает водород, метил или этил,

   К⁵ означает водород, (С₁-С₄)-алкил, ацетил, циклопропил, циклобутил или 2-оксопирролидин-3-ил, причем указанный (С₁-С₄)-алкил по выбору замещен посредством гидрокси, гидроксикарбонила,

   циклопропила или циклобутила, или

   К⁴ и К⁵ соединены и, взятые совместно с атомом азота, к которому они присоединены, образуют моноциклическое, насыщенное 5- или 6-членное гетероциклоалкильное кольцо, которое может содержать второй кольцевой гетероатом, выбранный из ΝΉ и О, и которое может быть замещенным на кольцевом атоме углерода посредством оксо или гидрокси, и

   С² представляет собой метил или группу -СК^8АК^8В-ОН, -СН₂-МК⁹К¹⁰ или -С(=О)-МК¹¹К¹², причем

   К^8А и К^8В независимо означают водород или метил,

   К⁹ означает водород,

   К¹⁰ означает водород, (С₁-С₄)-алкил, ацетил, циклопропил, циклобутил или 2-оксопирролидин-3-ил, причем указанный (С₁-С₄)-алкил по выбору замещен посредством гидрокси или аминокарбонила,

   К¹¹ означает водород или метил,

   К¹² означает водород, (С₁-С₄)-алкил, циклопропил, циклобутил или 2-оксопирролидин-3-ил,

   причем указанный (С1-С4)-алкил по выбору замещен посредством гидрокси, или

   К⁹ и К¹⁰ или К¹¹ и К¹², соответственно, соединены и, взятые совместно с атомом азота, к которому

   они присоединены, образуют моноциклическое, насыщенное от 4- до 6-членное гетероциклоалкильное кольцо, которое может содержать второй кольцевой гетероатом, выбранный из МК¹³), О и З(О)₂, и которое может быть замещенным на кольцевых атомах углерода посредством до трех заместителей, независимо выбранных из группы, состоящей из фтора, метила, оксо, гидрокси, амино и аминокарбонила, и причем

   К¹³ означает водород, формил или ацетил, или его фармацевтически приемлемая соль.
4. 4. Соединение формулы (I) по пп.1, 2 или 3, причем

   К¹ означает метил,

   К² означает метокси,

   С¹ представляет собой группу -СН2-ОК³, причем

   К³ означает (С1-С4)-алкил, по выбору замещенный посредством гидрокси, амино или аминокарбонила, и

   С² представляет собой группу -СН₂-МК⁹К¹⁰ или -С(=О)-МК¹¹К¹², причем

   К⁹ означает водород,

   К¹⁰ означает 2-оксопирролидин-3-ил, или

   К⁹ и К¹⁰ соединены и, взятые совместно с атомом азота, к которому они присоединены, образуют пиперазин-1-ильное, 3-оксопиперазин-1-ильное или 4-ацетилпиперазин-1-ильное кольцо,

   К¹¹ означает водород,

   К¹² означает 2-оксопирролидин-3-ил, или

   К¹¹ и К¹² соединены и, взятые совместно с атомом азота, к которому они присоединены, образуют 3-гидроксиазетидин-1-ильное, 4-гидроксипиперидин-1-ильное или 3-оксопиперазин-1-ильное кольцо,

   или его фармацевтически приемлемая соль.
5. 5. Соединение 4-{[4-амино-6-(метоксиметил)-5-(7-метокси-5-метил-1-бензотиофен-2-ил)пирроло [2,1-1][1,2,4]триазин-7-ил]метил}пиперазин-2-он по пп.1-4

   - 96 029556

   или его фармацевтически приемлемая соль.
6. 6. Соединение 4-{[4-амино-6-(метоксиметил)-5-(7-метокси-5-метил-1-бензотиофен-2-ил)пирроло [2,1-Т][1,2,4]триазин-7-ил]метил}пиперазин-2-он по пп.1-4
7. 7. Способ получения соединения формулы (Ι) по пп.1-6, отличающийся тем, что

   [А] 6-замещенный 4-аминопирроло[2,1-Т][1,2,4]триазин формулы (ΙΙ)

   причем Р³ имеет значение, указанное в пп.1-4,

   сначала подвергают взаимодействию с формальдегидом и амином формулы (ΙΙΙ)

   ^Н%,о

   ^к (Ш),

   причем Р⁹ и Р¹⁰ имеют значения, указанные в пп.1-4,

   в присутствии кислоты, чтобы получить соединение формулы (ГУ)

   причем Р³, Р⁹ и Р¹⁰ имеют значения, указанные в пп.1-4, затем бромируют до получения соединения формулы (V)

   причем Р³, Р⁹ и Р¹⁰ имеют значения, указанные в пп.1-4,

   и впоследствии сочетают с боронатом бензотиофен-2-ила формулы (V!)

   причем Р¹ и Р² имеют значения, указанные в пп. 1 -4, и Р¹⁴ представляет собой водород или (С1-С₄)-алкил, или оба остатка Р¹⁴ связаны вместе, чтобы образовать -(СН2)2-, -С(СН3)2-С(СН3)2-, -(СН2)3-, -СН2-С(СН3)2-СН2- или -С(=О)-СН2-ЖСН3)-СН2-С(=О)- мостик,

   в присутствии палладиевого катализатора и основания с получением целевого соединения формулы

   (Ι-А)

   - 97 029556

   1 2 3 9 10

   причем К , К , К , К и К имеют значения, указанные в пп.1-4, по выбору с последующим, при необходимости,

   (I) разделением полученных таким образом соединений формулы (I) на их соответствующие энантиомеры и/или диастереомеры, и/или

   (II) превращения соединений формулы (I) в их соответствующие соли посредством обработки соответствующими кислотами или основаниями.
8. 8. Способ получения соединения формулы (I) по пп.1-6, отличающийся тем, что

   [В] 6-замещенный 4-аминопирроло[2,1-1][1,2,4]триазин формулы (II)

   причем К имеет значение, указанное в пп.1-4,

   сначала подвергают формилированию с Ν,Ν-диметилформамидом в присутствии фосфорилхлорида до получения альдегида формулы (VII)

   причем К имеет значение, указанное в пп.1-4,

   затем бромируют до получения соединения формулы (VIII)

   причем К³ имеет значение, указанное в пп.1-4,

   и впоследствии сочетают с боронатом бензотиофен-2-ила формулы (VI) рЦ о—и¹⁴

   причем К¹, К² и К¹⁴ имеют указанные выше значения,

   в присутствии палладиевого катализатора и основания, чтобы получить соединение формулы (IX)

   причем К¹, К² и К³ имеют значения, указанные в пп.1-4,

   которое затем или

   [В-1] вступают в реакцию с амином формулы (III)

   ΗΝ_{ν 10}

   ^р (Ш),

   причем К⁹ и К¹⁰ имеют значения, указанные в пп.1-4,

   в присутствии кислоты и восстановителя с получением целевого соединения формулы (>А)

   - 98 029556

   причем К¹, К², К³, К⁹ и К¹⁰ имеют значения, указанные в пп.1-4, или [В-2] окисляют до получения карбоновой кислоты формулы (X)

   причем К¹, К² и К³ имеют значения, указанные в пп.1-4, и в заключение сочетают с амином формулы (XI)

   ^ΗΝΧ_β1₂

   К (XI),

   причем К¹¹ и К¹² имеют значения, указанные в пп.1-4,

   в присутствии конденсирующего агента с получением целевого соединения формулы (1-В)

   1 2 3 11 12

   причем К , К , К , К и К имеют значения, указанные в пп. 1 -4, по выбору с последующим, при необходимости, (I) разделением полученных таким образом соединений формулы (I) на их соответствующие энантиомеры и/или диастереомеры, и/или (II) превращения соединений формулы (I) в их соответствующие соли посредством обработки соответствующими кислотами или основаниями.
9. 9. Способ получения соединения формулы (I) по пп.1-6, отличающийся тем, что

   [С] 6-замещенный 4-амино-5-бромпирроло[2,1-£][1,2,4]триазин формулы (XII)

   сначала сочетают с боронатом бензотиофен-2-ила формулы (VI)

   причем К¹, К² и К¹⁴ имеют указанные выше значения,

   в присутствии палладиевого катализатора и основания, чтобы получить соединение формулы (XIII)

   причем К¹ и К² имеют значения, указанные в пп.1-4,

   и затем подвергают реакции с формальдегидом и амином формулы (III)

   - 99 029556

   причем К⁹ и К¹⁰ имеют значения, указанные в пп.1-4, в присутствии кислоты с получением соединения формулы (Ι-С)

   причем К¹, К², К⁹ и К¹⁰ имеют значения, указанные в пп.1-4, которое впоследствии или

   [С-1] окисляют до получения альдегида формулы (ΧΙΥ)

   причем К¹, К², К⁹ и К¹⁰ имеют значения, указанные в пп.1-4, и обрабатывают амином формулы (XV)

   причем К⁴ и К⁵ имеют значения, указанные в пп.1-4,

   в присутствии кислоты и восстановителя с получением целевого соединения формулы (Ι-Ό)

   причем К¹, К², К⁴, К⁵, К⁹ и К¹⁰ имеют значения, указанные в пп.1-4, или

   [С-2] превращают в соответствующее производное 6-(галогенметила) формулы (XVI)

   причем К¹, К², К⁹ и К¹⁰ имеют значения, указанные в пп.1-4, и X означает хлор, бром или йод, и обрабатывают спиртом формулы (ΧνΙΙ)

   ОН

   (ХУП),

   причем К^3А имеет значение К³, как указано в пп.1-4, за исключением водорода,

   - 100 029556

   в присутствии основания с получением целевого соединения формулы (ЕЕ)

   причем К¹, К², К^3А, К⁹ и К¹⁰ имеют указанные выше значения,

   по выбору с последующим, при необходимости, (I) разделением полученных таким образом соединений формулы (I) на их соответствующие энантиомеры и/или диастереомеры, и/или (II) превращения соединений формулы (I) в их соответствующие соли посредством обработки соответствующими кислотами или основаниями.
10. 10. Применение соединения по любому из пп.1-6 для лечения и/или предотвращения раковых и опухолевых заболеваний.
11. 11. Применение соединения по любому из пп.1-6 для изготовления фармацевтической композиции для лечения и/или предотвращения раковых и опухолевых заболеваний.
12. 12. Фармацевтическая композиция, содержащая соединение по любому из пп.1-6 и один или несколько фармацевтически приемлемых наполнителей.
13. 13. Фармацевтическая композиция по п.12, дополнительно содержащая одно или несколько дополнительных терапевтических средств, выбранных из перечня, состоящего из алкилирующих средств, антиметаболитов, противоопухолевых средств растительного происхождения, средств гормональной терапии, ингибиторов топоизомеразы, ингибиторов тубулина, киназных ингибиторов, нацеленных лекарственных средств, антител, конъюгатов антитела с лекарственным препаратом (АОСк), иммунологических средств, модификаторов биологического отклика, антиангиогенных соединений и других антипролиферативных, цитостатических и/или цитотоксических веществ.
14. 14. Фармацевтическая композиция по п.9 или 10 для лечения и/или предотвращения раковых и опухолевых заболеваний.
15. 15. Способ лечения и/или предотвращения раковых и опухолевых заболеваний у млекопитающего, включающий введение нуждающемуся в этом млекопитающему терапевтически эффективного количества одного или нескольких соединений по любому из пп.1-6 или фармацевтической композиции по любому из пп.12-14.