KR102057444B1 - 이치환된 벤조티에닐-피롤로트리아진 및 fgfr 키나제 억제제로서의 그의 용도 - Google Patents

이치환된 벤조티에닐-피롤로트리아진 및 fgfr 키나제 억제제로서의 그의 용도 Download PDF

Info

Publication number
KR102057444B1
KR102057444B1 KR1020147019406A KR20147019406A KR102057444B1 KR 102057444 B1 KR102057444 B1 KR 102057444B1 KR 1020147019406 A KR1020147019406 A KR 1020147019406A KR 20147019406 A KR20147019406 A KR 20147019406A KR 102057444 B1 KR102057444 B1 KR 102057444B1
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
alkyl
hydrogen
methyl
formula
amino
Prior art date
Application number
KR1020147019406A
Other languages
English (en)
Other versions
KR20140103328A (ko
Inventor
디르크 브롬
멜라니 헤로울트
마리-피에르 콜린
발터 휘브쉬
마리오 로벨
클레멘스 루스티히
실비아 그뤼네발트
울프 뵈머
베레나 뵈링거
Original Assignee
바이엘 파마 악티엔게젤샤프트
바이엘 인텔렉쳐 프로퍼티 게엠베하
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 바이엘 파마 악티엔게젤샤프트, 바이엘 인텔렉쳐 프로퍼티 게엠베하 filed Critical 바이엘 파마 악티엔게젤샤프트
Publication of KR20140103328A publication Critical patent/KR20140103328A/ko
Application granted granted Critical
Publication of KR102057444B1 publication Critical patent/KR102057444B1/ko

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/04—Ortho-condensed systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/53—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with three nitrogens as the only ring hetero atoms, e.g. chlorazanil, melamine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/535—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines
    • A61K31/5355—Non-condensed oxazines and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/535—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines
    • A61K31/5375—1,4-Oxazines, e.g. morpholine
    • A61K31/5377—1,4-Oxazines, e.g. morpholine not condensed and containing further heterocyclic rings, e.g. timolol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/54—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one sulfur as the ring hetero atoms, e.g. sulthiame
    • A61K31/541—Non-condensed thiazines containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D409/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D409/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D409/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D409/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D409/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing three or more hetero rings

Abstract

본 발명은 단백질 티로신 키나제 억제 활성을 갖는 신규 치환된 5-(1-벤조티오펜-2-일)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민 유도체, 이러한 화합물의 제조방법, 이 화합물을 포함하는 약학 조성물, 및 증식성 장애, 특히 암 및 종양 질환을 치료하기 위한 상기 화합물 또는 조성물의 용도에 관한 것이다.

Description

이치환된 벤조티에닐-피롤로트리아진 및 FGFR 키나제 억제제로서의 그의 용도{Disubstituted benzothienyl-pyrrolotriazines and uses thereof as FGFR kinase inhibitors}
본 발명은 단백질 티로신 키나제 억제 활성을 갖는 신규 치환된 5-(1-벤조티오펜-2-일)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민 유도체, 이러한 화합물의 제조방법, 이 화합물을 포함하는 약학 조성물, 및 증식성 장애, 특히 암 및 종양 질환을 치료하기 위한 상기 화합물 또는 조성물의 용도에 관한 것이다.
암은 전세계적으로 사망의 주된 요인이며, 이로 2008년에만 7백 6십만명이 사망하였다(모든 사망의 약 13%). 암으로 인한 사망은 2030년 전세계적으로 천백만명 이상 치솟을 것으로 예상된다(WHO 자료, 자료표 번호 297, 2011년 2월).
암을 유발할 수 있는 경로는 아주 많고 이것이 그의 치료를 어렵게 하는 이유중 하나이다. 세포를 변형시킬 수 있는 한가지 방법은 유전자 변경을 통해서이다. 인간 게놈 프로젝트의 완성으로 인간 암 유전자의 게놈 불안정성 및 이질성이 입증되었다. 이들 유전적 변경을 규명하려는 최근의 전략으로 암-유전자 발견의 과정이 속도를 내게 되었다. 유전자 이상은, 예컨대, 단백질의 과발현, 및 이에 따른 이들 단백질의 비생리적 활성화로 이어질 수 있다. 다수의 종양-단백질을 이끄는 단백질의 한 부류는 티로신 키나제 및 특히 수용체 티로신 키나제(RTK)이다. 과거 20년간, 많은 연구 방안이 암을 이끄는 불리한 세포 증식에서 RTK-매개 신호전달의 중요성을 입증하였다. 최근 몇년, 새로운 부류의 항종양형성제로서 티로신 키나제의 선택적 소-분자 억제제를 사용하여 유망한 임상 결과가 이루어졌다[Swinney and Anthony, Nature Rev. Drug Disc. 10 (7), 507-519 (2011)].
섬유아세포 성장 인자(FGF) 및 그의 수용체(FGFR)는 배아 발생 및 성인 병리생리학의 다양한 측면을 포함하는 각종 생리 과정에서 주요한 역할을 하는 독특하고 다양한 신호전달 시스템의 일부를 이룬다[Itoh and Ornitz, J. Biochem. 149 (2), 121-130 (2011)]. 시공간적 방식으로, FGF는 FGFR 결합을 통해 이동, 증식, 분화 및 생존을 비롯한 광범위 세포 기능을 자극한다.
FGF 부류는 세포 표면에서 발현된 4개의 고도로 보존된 수용체 티로신 키나제(FGFR-1 내지 -4)에 결합된 18개의 분비 폴리펩티드 성장 인자를 포함한다. 또한, FGFR-5는 FGF에 결합할 수 있으나, 키나제 도메인을 갖지 않으며, 따라서 세포내 신호전달을 하지 못한다. 리간드/수용체 상호작용의 특이성은 대안적인 전사 개시, 대안적인 스플라이싱, 및 C-말단 절단에 의해 다수 이소형을 일으키는 다수의 전사 및 번역 과정으로 증대된다. 다양한 헤파린 설페이트 프로테오글리칸(예를 들면, 신데칸)은 FGF/FGFR 복합물의 일부일 수 있으며, 신호전달 반응을 유도하기 위한 FGF 능력에 강한 영향을 미친다[Polanska et al., Developmental Dynamics 238 (2), 277-293 (2009)]. FGFR은 세포외 면역글로불린-유사 도메인, 단일-경로 막관통 도메인 및 세포내 이량체화 티로신 키나제 도메인으로 구성된 세포 표면 수용체이다. FGF의 결합은 세포내 키나제를 근접시켜 이들을 상호 트랜스인산화시키도록 할 수 있다. 7개의 인산화 부위가 동정되었다(예를 들면, FGFR-1에서 Tyr463, Tyr583, Tyr585, Tyr653, Tyr654, Tyr730, 및 Tyr766).
이들 포스포티로신 그룹의 일부는 자체가 또한 FGFR로 직접 인산화될 수 있는 다운스크림 신호전달 분자에 대한 도킹 부위로서 작용하여 다수 신호 전달 경로의 활성화를 이끈다. 요컨대, MAPK 신호전달 캐스케이드는 세포 성장 및 분화에 연루되며, PI3K/Akt 신호전달 캐스케이드는 세포 생존 및 세포 운명 결정에 연루되는 반면, PI3K 및 PKC 신호전달 캐스케이드는 세포 극성의 조절 기능을 가진다. FGF 신호전달의 다수 피드백 억제제가 규명되었으며, Spry(Sprouty) 및 Sef(FGF와 유사 발현) 부류의 일원을 포함한다. 또한, 특정 조건에서, FGFR은 pre-Golgi 막으로부터 시토졸로 방출된다. 수용체 및 그의 리간드, FGF-2는 임포르틴을 포함하는 메카니즘에 의해 핵으로 공동 운반되고, 유전자 활성화 게이팅 인자로서 작용하는 공통의 필수 전사 공동-활성체인 CREB-결합 단백질(CBP) 복합물에 참여한다. FGF-2, FGFR-1 및 FGFR-2의 면역조직화학적 발현과 그의 세포질 및 핵 종양 세포 국소화 사이에 다수의 상관관계가 관찰되었다. 예컨대, 폐선암에서 이러한 관계가 또한 핵 수준에서 발견되었으며, 이는 핵에서 복합물의 활성 역할을 강조한다[Korc and Friesel, Curr. Cancer Drugs Targets 5, 639-651 (2009)].
FGF는 발생 및 성인 조직 모두에서 널리 발현되며, 조직 발달, 조직 재생, 혈관형성, 종양성 변형, 세포 이동, 세포 분화 및 세포 생존을 비롯한 각종 정상적 및 병적 과정에서 중요한 역할을 한다. 또한, FGF는 혈관내피 성장 인자 수용체-2 (VEGFR-2) 억제에 대한 내성의 출현 현상에 또한 연루되는 프로-혈관신생 인자이다[Bergers and Hanahan, Nat. Rev. Cancer 8, 592-603 (2008)].
최근 신호전달 네트워크의 종양게놈 프로파일은 일부 일반 인간 암의 출현에 이상 FGF 신호전달에 대한 중요한 역할을 입증하였다[Wesche et al., Biochem. J. 437 (2), 199-213 (2011)]. 리간드-독립성 FGFR 구조적 신호전달이 많은 인간 암, 예컨대 뇌암, 두경부암, 위암 및 난소암에서 기술되었다. FGFR-돌연변이 형태뿐 아니라 FGFR-유전자내 전좌가 악성종양, 예컨대 골수증식성 질환에서 규명되었다. 흥미롭게도, 많은 발달 장애의 요인인 것으로 발견된 동일한 돌연변이가 또한 종양 세포에서 관찰되었다(예를 들면, FGFR-3의 이량화 및 따라서 구조적 활성화를 초래하는 연골형성부전 및 치사성 형성이상에서 발견되는 돌연변이가 또한 방광암에서 빈번히 발견된다). 이량화를 촉진하는 돌연변이는 FGFR로부터 리간드-독립성 신호전달을 증가시킬 수 있는 메카니즘중 하나일 뿐이다. FGFR의 키나제 도메인 내부 또는 외부에 위치하는 다른 돌연변이는 영구 활성 키나제를 일으키는 도메인 형태를 변경할 수 있다.
FGFR-1의 게놈 위치인 염색체 영역 8p11-12의 증폭은 유방암에서 공통적인 중심 증폭이며, 유방암, 주로 에스트로겐 수용체-양성 암의 대략 10%에서 발생한다. FGFR-1 증폭은 또한 비소형 세포 폐 편평상피암종에서 보고되었으며, 난소암, 방광암 및 횡문근육종에서 낮은 발생률로 발견되었다. 유사하게, 위암의 약 10%가 FGFR-2 증폭을 나타내며, 예후가 좋지 않은 미만형 암과 관련된다. 또한, FGFR-1 내지 -4에 위치한 다수의 단일 뉴클레오티드 다형체(SN)가 선택적 암 발생의 위험 증가와 관련되는 것으로 나타났거나, 또는 좋지 않은 예후와 관련이 있는 것으로 보고되었다(예를 들면, 유방암, 대장암 및 폐선암에서 FGFR-4 G388R 대립형질). 암을 촉진하는데 있어 이들 SNP의 직접적인 역할은 여전히 논란이 되고 있다.
요약하면, 중요한 암 표적제로서 FGFR-1 내지 -4를 규명하기 위한 많은 수의 시험관내 및 생체내 연구가 수행되었으며, 이들의 결론에서 종합적인 검토가 요약되었다[참조예: Heinzle et al., Expert Opin. Ther. Targets 15 (7), 829-846 (2011); Wesche et al., Bio-chem. J. 437 (2), 199-213 (2011); Greulich and Pollock, Trends in Molecular Medicine 17 (5), 283-292 (2011); Haugsten et al., Mol. Cancer Res. 8 (11), 1439-1452 (2010)]. 특히 항체 및 소분자 억제제의 차단을 비롯하여, 인간 종양에서 이상 FGFR-1 내지 -4 신호전달을 약화시키기 위해 몇가지 전략이 나왔다. 다수의 선택적 소-분자 FGFR 억제제, 예컨대 AZD-4547 (Astra-Zeneca) 및 BJG-398 (Novartis)가 현재 임상 개발중에 있다.
일반적으로 최근 몇년들어 암 치료에 상당한 전진이 있었지만, 개선된 성질, 예컨대 더 높은 효능, 더 큰 선택성, 감소된 독성 및/또는 더 좋은 허용성을 가지는 새로운 항암 화합물을 찾는 것이 여전히 필요하다. 따라서, 본 발명에 따라 해결될 기술적 문제는 FGFR 키나제에 대해 억제 활성을 가지는 대안적인 화합물을 제공함으로써 FGFR-매개 질환, 특히 암 및 다른 증식성 장애의 치료에 새로운 치료상 선택권을 제공하는데서 찾을 수 있다.
9- 또는 10-원 바이사이클릭 헤테로아릴 치환체를 가지는 융합된 헤테로-5,6-바이사이클릭 키나제 억제제가 WO 2007/061737-A2호 및 WO 2005/097800-A1호에 각각 기술되었다. 이들 화합물은 mTOR(라파마이신의 포유동물 표적) 및/또는 IGF-1R(1형 인슐린-유사 성장 인자 수용체) 키나제에 대한 그의 억제 작용 때문에 암 및 기타 질환의 치료용으로 유용하다고 언급되었다. 키나제 억제와 관련된 추가의 헤테로-5,6-바이사이클릭 템플레이트 구조가 특히, WO 01/19828-A2호, WO 2007/079164-A2 및 WO 2010/051043-A1호에 기술되었다.
다수의 단백질 키나제에 대해 상이한 억제 프로파일을 갖는 4-아미노피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진 유도체가 특히 WO 00/71129-A1호, WO 2007/056170-A2호, WO 2007/061882-A2호, WO 2007/064932-A2호, WO 2009/136966-A1호 및 WO 2010/126960-A1호에 기술되었다.
WO 2005/121147-A1호, WO 2007/064883-A2호 및 WO 2007/064931-A2호에, 5-위치에 치환된 디아릴우레아 그룹을 가지는 4-아미노피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진 유도체가 FGFR-1 억제 활성을 가지는 것으로 기술되었다.
그러나, 다른 수용체 티로신 키나제, 특히 VEGFR, PDGFR 및 Tie-2 키나제도 이러한 특정 부류의 화합물에 의해 상당히 억제된다.
이러한 다중-키나제 활성이 치료동안 잠재적인 부작용을 증가시킬 수 있는 것으로 추측되기 때문에, 본 발명의 목적은 FGFR 키나제에 대한 선택성을 향상시킴으로써 더 괜찮은 암 치료를 위한 새로운 선택권을 제공하는 신규 약제를 찾는 것이다.
놀랍게도, 본 발명에 따라 5-위치에서 특정적으로 치환된 벤조티오펜-2-일 잔기를 가지는 특정의 4-아미노피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진 유도체가 FGFR 키나제, 특히 FGFR-1 및 FGFR-3 키나제의 강력하면서 선택적인 억제제로서 나타나, 이들 화합물이 증식성 장애, 예컨대 암 및 종양 질환의 치료용으로 특히 유용하다는 것이 발견되었다.
따라서, 일 측면으로, 본 발명은 화학식 (I)의 6,7-이치환된 5-(1-벤조티오펜-2-일)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민 유도체에 관한 것이다:
Figure 112014065561338-pct00001
(I)
상기 식에서,
R1은 수소, 클로로, 메틸 또는 메톡시이고,
R2는 수소 또는 메톡시이되,
단, R1 및 R2의 적어도 하나는 수소가 아니고,
G1은 클로로, (C1-C4)-알킬, (C1-C4)-알콕시카보닐, 5-원 아자-헤테로아릴, 또는 그룹 -CH2-OR3, -CH2-NR4R5 또는 -C(=O)-NR4R6을 나타내고, 여기서
R3은 수소, (C1-C4)-알킬, (C3-C6)-사이클로알킬 또는 페닐을 나타내고, 여기서
(i) 상기 (C1-C4)-알킬은 하이드록시, (C1-C4)-알콕시, 하이드록시카보닐, (C1-C4)-알콕시카보닐, 아미노, 아미노카보닐, 모노-(C1-C4)-알킬아미노카보닐, 디-(C1-C4)-알킬아미노카보닐, (C3-C6)-사이클로알킬 또는 3개 이하의 플루오로 원자에 의해 임의로 치환되고,
(ii) 상기 (C3-C6)-사이클로알킬은 (C1-C4)-알킬, 하이드록시 및 아미노로 구성된 그룹으로부터 독립적으로 선택되는 1 또는 2개의 치환체에 의해 임의로 치환되고,
(iii) 상기 페닐은 플루오로, 클로로, 브로모, 시아노, 트리플루오로메틸, 트리플루오로메톡시, (C1-C4)-알킬 및 (C1-C4)-알콕시로 구성된 그룹으로부터 독립적으로 선택되는 1 또는 2개의 치환체에 의해 임의로 치환되고,
R4는 수소 또는 (C1-C4)-알킬이고,
R5는 수소, (C1-C4)-알킬, (C1-C4)-알킬카보닐, (C3-C6)-사이클로알킬 또는 4- 내지 6-원 헤테로사이클로알킬이고, 여기서
(i) 상기 (C1-C4)-알킬은 하이드록시, (C1-C4)-알콕시, 하이드록시카보닐, (C1-C4)-알콕시카보닐, 아미노카보닐, 모노-(C1-C4)-알킬아미노카보닐, 디-(C1-C4)-알킬아미노카보닐 또는 (C3-C6)-사이클로알킬에 의해 임의로 치환되고,
(ii) 상기 (C3-C6)-사이클로알킬은 (C1-C4)-알킬, 하이드록시 및 아미노로 구성된 그룹으로부터 독립적으로 선택되는 1 또는 2개의 치환체에 의해 임의로 치환되고,
(iii) 상기 4- 내지 6-원 헤테로사이클로알킬은 (C1-C4)-알킬, 하이드록시, 옥소 및 아미노로 구성된 그룹으로부터 독립적으로 선택되는 1 또는 2개의 치환체에 의해 임의로 치환되고,
R6은 수소, (C1-C4)-알킬, (C3-C6)-사이클로알킬 또는 4- 내지 6-원 헤테로사이클로알킬이고, 여기서
(i) 상기 (C1-C4)-알킬은 하이드록시, (C1-C4)-알콕시, 하이드록시카보닐, (C1-C4)-알콕시카보닐, 아미노, 아미노카보닐, 모노-(C1-C4)-알킬아미노카보닐, 디-(C1-C4)-알킬아미노카보닐 또는 (C3-C6)-사이클로알킬에 의해 임의로 치환되고,
(ii) 상기 (C3-C6)-사이클로알킬은 (C1-C4)-알킬, 하이드록시 및 아미노로 구성된 그룹으로부터 독립적으로 선택되는 1 또는 2개의 치환체에 의해 임의로 치환되고,
(iii) 상기 4- 내지 6-원 헤테로사이클로알킬은 (C1-C4)-알킬, 하이드록시, 옥소 및 아미노로 구성된 그룹으로부터 독립적으로 선택되는 1 또는 2개의 치환체에 의해 임의로 치환되거나, 또는
R4 및 R5, 또는 R4 및 R6은 각각, 결합하고, 이들이 결합된 질소 원자와 함께, N(R7) 및 O로부터 선택되는 제2 환 헤테로원자를 함유할 수 있고, 환 탄소 원자상에서 (C1-C4)-알킬, 옥소, 하이드록시, 아미노 및 아미노카보닐로 구성된 그룹으로부터 독립적으로 선택되는 1 또는 2개의 치환체에 의해 치환될 수 있는 모노사이클릭, 포화 4- 내지 7-원 헤테로사이클로알킬 환을 형성하고, 여기서
R7은 수소, (C1-C4)-알킬, 포르밀 또는 (C1-C4)-알킬카보닐이고,
G2는 클로로, 시아노, (C1-C4)-알킬, 또는 그룹 -CR8AR8B-OH, -CH2-NR9R10, -C(=O)-NR11R12 또는 -CH2-OR15를 나타내고, 여기서
R8A 및 R8B는 수소, (C1-C4)-알킬, 사이클로프로필 및 사이클로부틸로 구성된 그룹으로부터 독립적으로 선택되고,
R9는 수소 또는 (C1-C4)-알킬이고,
R10은 수소, (C1-C4)-알킬, (C1-C4)-알킬카보닐, (C3-C6)-사이클로알킬 또는 4- 내지 6-원 헤테로사이클로알킬이고, 여기서
(i) 상기 (C1-C4)-알킬은 하이드록시, 아미노, 아미노카보닐, 모노-(C1-C4)-알킬아미노카보닐 또는 디-(C1-C4)-알킬아미노카보닐에 의해 임의로 치환되고,
(ii) 상기 (C3-C6)-사이클로알킬은 (C1-C4)-알킬, 하이드록시 및 아미노로 구성된 그룹으로부터 독립적으로 선택되는 1 또는 2개의 치환체에 의해 임의로 치환되고,
(iii) 상기 4- 내지 6-원 헤테로사이클로알킬은 (C1-C4)-알킬, 하이드록시, 옥소 및 아미노로 구성된 그룹으로부터 독립적으로 선택되는 1 또는 2개의 치환체에 의해 임의로 치환되고,
R11은 수소 또는 (C1-C4)-알킬이고,
R12는 수소, (C1-C4)-알킬, (C3-C6)-사이클로알킬 또는 4- 내지 6-원 헤테로사이클로알킬이고, 여기서
(i) 상기 (C1-C4)-알킬은 하이드록시, 아미노, 아미노카보닐, 모노-(C1-C4)-알킬아미노카보닐 또는 디-(C1-C4)-알킬아미노카보닐에 의해 임의로 치환되고,
(ii) 상기 (C3-C6)-사이클로알킬은 (C1-C4)-알킬, 하이드록시 및 아미노로 구성된 그룹으로부터 독립적으로 선택되는 1 또는 2개의 치환체에 의해 임의로 치환되고,
(iii) 상기 4- 내지 6-원 헤테로사이클로알킬은 (C1-C4)-알킬, 하이드록시, 옥소 및 아미노로 구성된 그룹으로부터 독립적으로 선택되는 1 또는 2개의 치환체에 의해 임의로 치환되거나, 또는
R9 및 R10, 또는 R11 및 R12는 각각, 결합하고, 이들이 결합된 질소 원자와 함께, N(R13), O, S 및 S(O)2로부터 선택되는 제2 환 헤테로원자를 함유할 수 있고, 환 탄소 원자상에서 플루오로, (C1-C4)-알킬, 옥소, 하이드록시, 아미노 및 아미노카보닐로 구성된 그룹으로부터 독립적으로 선택되는 3개 이하의 치환체에 의해 치환될 수 있는 모노사이클릭, 포화 4- 내지 7-원 헤테로사이클로알킬 환을 형성하고,
R13은 수소, (C1-C4)-알킬, (C3-C6)-사이클로알킬, 포르밀 또는 (C1-C4)-알킬카보닐이고,
R15는 (C1-C4)-알킬이되,
단, G2가 클로로 또는 시아노인 경우, G1은 클로로가 아니다.
본 발명에 따른 화합물은 또한 그의 염, 용매화물 및/또는 염의 용매화물의 형태로 존재할 수 있다.
본 발명에 따른 화합물은 화학식 (I)의 화합물, 및 그의 염, 그의 용매화물 및 염의 용매화물, 화학식 (I)에 포함되는 하기 언급되는 화학식 (I-A), (I-B), (I-C), (I-D) 및 (I-E)의 화합물, 및 그의 염, 용매화물 및 염의 용매화물, 및 화학식 (I)에 포함되고 공정 생성물 및/또는 수행 실시예로서 하기 언급되는 화합물, 및 그의 염, 용매화물 및 염의 용매화물이며, 여기서 화학식 (I)에 포함되고 하기에 언급되는 화합물은 이미 염, 용매화물 및 염의 용매화물이 아니다.
본 발명의 목적을 위한 염은 바람직하게는 본 발명에 따른 화합물의 약학적으로 허용되는 염이다(예를 들어, S. M. Berge et al., "Pharmaceutical Slats", J. Pharm. Sci. 1977, 66, 1-19 참조). 그 자체가 제약 용도에 적합하지는 않지만, 예를 들어, 본 발명에 따른 화합물의 단리 또는 정제에 사용될 수 있는 염이 또한 포함된다.
본 발명에 따른 화합물의 약학적으로 허용되는 염은 무기산, 카복실산 및 설폰산의 산 부가염, 예를 들어, 염산, 브롬화수소산, 황산, 인산, 메탄설폰산, 에탄설폰산, 벤젠설폰산, 톨루엔설폰산, 나프탈렌디설폰산, 포름산, 아세트산, 트리플루오로아세트산, 프로피온산, 락트산, 타르타르산, 말산, 시트르산, 푸마르산, 말레산 및 벤조산의 염을 포함한다.
약학적으로 허용되는 염은 또한, 통상적인 염기의 염, 예컨대 예로서 및 바람직하게는, 알칼리 금속 염 (예를 들어, 나트륨 및 칼륨 염), 알칼리 토금속 염 (예를 들어, 칼슘 및 마그네슘 염), 및 암모니아 또는 유기 아민, 예컨대 예로서 및 바람직하게는 에틸아민, 디에틸아민, 트리에틸아민, N,N-디이소프로필에틸아민, 모노에탄올아민, 디에탄올아민, 트리에탄올아민, 디메틸아미노에탄올, 디에틸아미노에탄올, 프로카인, 디사이클로헥실아민, 디벤질아민, N-메틸모르폴린, N-메틸피페리딘, 아르기닌, 리신 및 1,2-에틸렌디아민으로부터 유도된 암모늄 염을 포함한다.
본 발명의 맥락에서 용매화물은 용매 분자와의 화학양론적 배위에 의해 고체 또는 액체 상태의 착물을 형성하는 본 발명에 따른 화합물의 형태로서 기재된다. 수화물은 배위가 물과 함께 일어나는 특정 형태의 용매화물이다. 수화물이 본 발명의 맥락에서 바람직한 용매화물이다.
본 발명의 화합물은 비대칭 중심 특성 또는 한정된 회전에 의해 이성체 형태(거울상이성체, 부분입체이성체)로 존재할 수 있다. 비대칭 중심이 (R)-, (S)-, 또는 (R,S)-배위인 임의 이성체가 존재할 수 있다.
2개 이상의 비대칭 중심이 본 발명의 화합물에 존재하는 경우, 예시된 구조의 다수의 부분입체이성체 및 거울상이성체가 종종 가능할 것이고, 순수한 부분입체이성체 및 순수한 거울상이성체가 바람직한 구체예를 나타내는 것임이 또한 인식될 것이다. 순수한 입체이성체, 순수한 부분입체이성체, 순수한 거울상이성체, 및 그의 혼합물은 본 발명의 범위에 속하는 것으로 의도된다.
이중 결합 또는 환에 대한 치환체의 특성으로 기하 이성체가 이스(= Z-) 또는 트랜스(= E-) 형태로 존재할 수 있으며, 두 이성체 모두 본 발명의 범위에 속한다.
분리되었거나, 순수하거나, 부분적으로 순수하거나, 또는 라세미 혼합물의 본 발명의 화합물의 모든 이성체는 본 발명의 범위에 포함된다. 상기 이성체의 정제 및 상기 이성체 혼합물의 분리는 당업계에 공지된 표준 기술로 이뤄질 수 있으며, 예를 들어, 부분입체이성체 혼합물은 크로마토그래피 공정 또는 결정화에 의해 개별 이성체로 분리될 수 있고, 라세메이트는 키랄상에서의 크로마토그래피 공정 또는 분할에 의해 각각의 거울상이성체로 분리될 수 있다.
또한, 상술된 화합물의 모든 가능한 호변이성체가 본 발명에 따라 포함된다.
본 발명은 또한 본 발명에 따른 화합물의 모든 적절한 동위원소 변형을 포함한다. 본 발명에 따른 화합물의 동위원소 변형은, 본 발명에 따른 화합물 내의 적어도 하나의 원자가 동일한 원자 번호를 갖지만 자연에서 통상적으로 또는 주로 발생하는 원자 질량과 상이한 원자 질량을 갖는 또 다른 원자로 교환된 화합물을 의미하는 것으로 이해한다. 본 발명에 따른 화합물에 도입될 수 있는 동위원소의 예는 수소, 탄소, 질소, 산소, 불소, 염소, 브롬 및 요오드의 동위원소, 예컨대 2H (중수소), 3H (삼중수소), 13C, 14C, 15N, 17O, 18O, 18F, 36Cl, 82Br, 123I, 124I, 129I 및 131I이다. 본 발명에 따른 화합물의 특정 동위원소 변형체, 예를 들면 하나 이상의 방사성 동위원소가 도입된 것이 체내 작용 기전 또는 활성 화합물 분포 연구에 유용할 수 있다. 3H 또는 14C로 표지된 화합물이 비교적 용이한 제조성 및 검출성으로 인해 이 목적에 적합하다. 또한 중수소와 같은 동위원소의 도입은 화합물의 보다 큰 대사 안정성의 결과로서 특별한 치료 이점, 예를 들어 체내 반감기 연장 또는 요구되는 활성 용량의 감소를 유발할 수 있다. 따라서, 본 발명에 따른 화합물의 이러한 변형은 일부의 경우 또한 본 발명의 바람직한 구체예를 구성할 수 있다. 본 발명에 따른 화합물의 동위원소 변형체는 일반적으로 당업자들에 공지된 통상의 방법을 이용하여, 예를 들어 하기 기재된 방법 또는 실시예에 기재된 방법에 의해 특정 시약 및/또는 그에서의 출발 화합물의 상응하는 동위원소 변형을 이용하여 제조될 수 있다.
본 발명과 관련하여, 달리 명시하지 않는 한, 치환체 및 잔기는 다음 의미를 갖는다:
본 발명과 관련하여 (C1-C4)-알킬은 1 내지 4개의 탄소 원자를 가지는 직쇄 또는 분지형 알킬 라디칼을 나타낸다. 예시적으로는 바람직하게 메틸, 에틸, n-프로필, 이소프로필, n-부틸, 이소-부틸, sec-부틸, 및 tert-부틸이 언급될 수 있다.
본 발명과 관련하여 (C1-C4)-알콕시는 1 내지 4개의 탄소 원자를 가지는 직쇄 또는 분지형 알콕시 라디칼을 나타낸다. 예시적으로는 바람직하게 메톡시, 에톡시, n-프로폭시, 이소프로폭시, n-부톡시, 이소-부톡시, sec-부톡시, 및 tert-부톡시가 언급될 수 있다.
본 발명과 관련하여 모노-(C1-C4)-알킬아미노는 1 내지 4개의 탄소 원자를 함유하는 직쇄 또는 분지형 알킬 치환체를 가지는 아미노 그룹을 나타낸다. 예시적으로는 바람직하게 메틸아미노, 에틸아미노, n-프로필아미노, 이소-프로필아미노, n-부틸아미노, 및 tert-부틸아미노가 언급될 수 있다.
본 발명과 관련하여 디-(C1-C4)-알킬아미노는 각각 1 내지 4개의 탄소 원자를 함유하는 2개의 동일하거나 상이한 직쇄 또는 분지형 알킬 치환체를 가지는 아미노 그룹을 나타낸다. 예시적으로는 바람직하게 N,N-디메틸아미노, N,N-디에틸아미노, N-에틸-N-메틸아미노, N-메틸-N-n-프로필아미노, N-이소프로필-N-메틸아미노, N-이소프로필-N-n-프로필아미노, N,N-디이소프로필아미노, N-n-부틸-N-메틸아미노, 및 N-tert-부틸-N-메틸아미노가 언급될 수 있다.
본 발명과 관련하여 (C1-C4)-알킬카보닐은 카보닐 그룹[-C(=O)-]을 통해 나머지 분자에 결합된 1 내지 4개의 탄소 원자를 가지는 직쇄 또는 분지형 알킬 라디칼을 나타낸다. 예시적으로는 바람직하게 아세틸, 프로피오닐, n-부티릴, 이소-부티릴, n-펜타노일 및 피발로일이 언급될 수 있다.
본 발명과 관련하여 (C1-C4)-알콕시카보닐은 카보닐 그룹[-C(=O)-]을 통해 나머지 분자에 결합된 1 내지 4개의 탄소 원자를 가지는 직쇄 또는 분지형 알콕시 라디칼을 나타낸다. 예시적으로는 바람직하게 메톡시카보닐, 에톡시카보닐, n-프로폭시카보닐, 이소프로폭시카보닐, n-부톡시카보닐, 및 tert-부톡시카보닐이 언급될 수 있다.
본 발명과 관련하여 모노-(C1-C4)-알킬아미노카보닐은 카보닐 그룹[-C(=O)-]을 통해 나머지 분자에 결합되고 1 내지 4개의 탄소 원자를 가지는 직쇄 또는 분지형 알킬 치환체를 갖는 아미노 그룹을 나타낸다. 예시적으로는 바람직하게 메틸아미노카보닐, 에틸아미노카보닐, n-프로필아미노카보닐, 이소-프로필아미노카보닐, n-부틸아미노카보닐, 및 tert-부틸아미노카보닐이 언급될 수 있다.
본 발명과 관련하여 디-(C1-C4)-알킬아미노카보닐은 카보닐 그룹[-C(=O)-]을 통해 나머지 분자에 결합되고 각 경우 1 내지 4개의 탄소 원자를 가지는 2개의 동일하거나 상이한 직쇄 또는 분지형 알킬 치환체를 갖는 아미노 그룹을 나타낸다. 예시적으로는 바람직하게 N,N-디메틸아미노카보닐, N,N-디에틸아미노카보닐, N-에틸-N-메틸아미노카보닐, N-메틸-N-n-프로필아미노카보닐, N-이소프로필-N-메틸아미노카보닐, N,N-디이소프로필아미노카보닐, N-n-부틸-N-메틸아미노카보닐, 및 N-tert-부틸-N-메틸아미노카보닐이 언급될 수 있다.
본 발명과 관련하여 (C3-C6)-사이클로알킬은 3 내지 6개의 환 탄소 원자를 가지는 모노사이클릭, 포화 카보사이클을 나타낸다. 예시적으로는 사이클로프로필, 사이클로부틸, 사이클로펜틸, 및 사이클로헥실이 언급될 수 있다. 사이클로프로필 및 사이클로부틸이 바람직하다.
본 발명과 관련하여 4- 내지 7-원 헤테로사이클로알킬 및 4- 내지 6-원 헤테로사이클로알킬은 각각 총 4 내지 7개 또는, 4 내지 6개의 환 원자를 가지며, N, O, S 및 S(O)2로부터의 1 또는 2개의 동일하거나 상이한 환 헤테로원자를 함유하고, 환 탄소 원자 또는 환 질소 원자(존재하는 경우)를 통해 결합될 수 있는 모노사이클릭, 포화 헤테로사이클을 나타낸다. 1개의 환 질소 원자 및 임의로 N, O 또는 S(O)2로부터의 1개의 추가의 환 헤테로원자를 가지는 4- 내지 6-원 헤테로사이클로알킬이 바람직하다. 1개의 환 질소 원자 및 임의로 N 또는 O로부터의 1개의 추가의 환 헤테로원자를 가지는 5- 또는 6-원 헤테로사이클로알킬이 특히 바람직하다. 예시적으로 아제티디닐, 옥세타닐, 티에타닐, 피롤리디닐, 피라졸리디닐, 이미다졸리디닐, 테트라하이드로푸라닐, 티올라닐, 1,1-디옥시도티올라닐, 1,2-옥사졸리디닐, 1,3-옥사졸리디닐, 1,3-티아졸리디닐, 피페리디닐, 피페라지닐, 테트라하이드로피라닐, 테트라하이드로티오피라닐, 1,3-디옥사닐, 1,4-디옥사닐, 1,2-옥사지나닐, 모르폴리닐, 티오모르폴리닐, 1,1-디옥시도티오모르폴리닐, 아제파닐, 1,4-디아제파닐, 및 1,4-옥사제파닐이 언급될 수 있다. 아제티디닐, 피롤리디닐, 피라졸리디닐, 이미다졸리디닐, 1,2-옥사졸리디닐, 1,3-옥사졸리디닐, 피페리디닐, 피페라지닐, 1,2-옥사지나닐, 모르폴리닐, 및 티오모르폴리닐이 바람직하다. 피롤리디닐, 피페리디닐, 피페라지닐, 및 모르폴리닐이 특히 바람직하다.
본 발명과 관련하여 5-원 아자-헤테로아릴은 총 5개의 환 원자를 갖고, 적어도 하나의 환 질소 원자 및 임의로 N, O 및/또는 S 그룹으로부터의 1 또는 2개의 추가의 환 헤테로원자를 함유하며, 환 탄소 원자 또는 임의로 환 질소 원자를 통해 (원자가가 허용하는 한) 결합된 방향족 헤테로사이클릭 라디칼(헤테로방향족)을 나타낸다. 1개의 환 질소 원자 및 N 및/또는 O 그룹으로부터의 1 또는 2개의 추가의 환 헤테로원자를 함유하는 5-원 아자-헤테로아릴이 바람직하다. 예시적으로 피롤릴, 피라졸릴, 이미다졸릴, 옥사졸릴, 티아졸릴, 이속사졸릴, 이소티아졸릴, 트리아졸릴, 옥사디아졸릴, 및 티아디아졸릴이 언급될 수 있다. 피라졸릴, 이미다졸릴, 옥사졸릴, 이속사졸릴, 및 옥사디아졸릴이 바람직하다.
본 발명과 관련하여 옥소 치환체는 이중 결합을 통해 탄소 원자에 결합된 산소 원자를 나타낸다.
본 발명과 관련하여 수회 발생하는 모든 라디칼에서 그 의미는 서로 독립적이다. 본 발명에 따른 화합물에서 라디칼이 치환된 경우, 라디칼은 달리 언급이 없으면 일- 또는 다치환될 수 있다. 1개 또는 2 또는 3개의 동일하거나 상이한 치환체에 의한 치환이 바람직하다. 1개 또는 2개의 동일하거나 상이한 치환체에 의한 치환이 특히 바람직하다.
바람직한 구체예에 있어서, 본 발명은
R1은 클로로, 메틸 또는 메톡시이고,
R2는 수소 또는 메톡시이고,
G1은 클로로, (C1-C4)-알킬, (C1-C4)-알콕시카보닐 또는 피라졸릴, 이미다졸릴, 옥사졸릴, 이속사졸릴 및 옥사디아졸릴로 구성된 그룹으로부터 선택되는 5-원 아자-헤테로아릴을 나타내거나, 또는 그룹 -CH2-OR3 또는 -CH2-NR4R5를 나타내고, 여기서
R3은 수소, (C1-C4)-알킬 또는 (C3-C6)-사이클로알킬이고,
상기 (C1-C4)-알킬은 하이드록시, (C1-C4)-알콕시, 하이드록시카보닐, (C1-C4)-알콕시카보닐, 아미노, 아미노카보닐, (C3-C6)-사이클로알킬 또는 3개 이하의 플루오로 원자에 의해 임의로 치환되고,
R4는 수소 또는 (C1-C4)-알킬이고,
R5는 수소, (C1-C4)-알킬, (C1-C4)-알킬카보닐, (C3-C6)-사이클로알킬 또는 5- 또는 6-원 헤테로사이클로알킬이고, 여기서
(i) 상기 (C1-C4)-알킬은 하이드록시, 하이드록시카보닐 또는 (C3-C6)-사이클로알킬에 의해 임의로 치환되고,
(ii) 상기 5- 또는 6-원 헤테로사이클로알킬은 옥소에 의해 임의로 치환되거나, 또는
R4 및 R5는 결합하고, 이들이 결합된 질소 원자와 함께, N(R7) 및 O로부터 선택되는 제2 환 헤테로원자를 함유할 수 있고, 환 탄소 원자상에서 옥소 또는 하이드록시에 의해 치환될 수 있는 모노사이클릭, 포화 4- 내지 6-원 헤테로사이클로알킬 환을 형성하고, 여기서
R7은 수소 또는 (C1-C4)-알킬이고,
G2는 클로로, 시아노, (C1-C4)-알킬, 또는 그룹 -CR8AR8B-OH, -CH2-NR9R10, -C(=O)-NR11R12 또는 -CH2-OR15를 나타내고, 여기서
R8A 및 R8B는 수소, (C1-C4)-알킬 및 사이클로프로필로 구성된 그룹으로부터 독립적으로 선택되고,
R9는 수소 또는 메틸이고,
R10은 수소, (C1-C4)-알킬, (C1-C4)-알킬카보닐, (C3-C6)-사이클로알킬 또는 5- 또는 6-원 헤테로사이클로알킬이고, 여기서
(i) 상기 (C1-C4)-알킬은 하이드록시 또는 아미노카보닐에 의해 임의로 치환되고,
(ii) 상기 5- 또는 6-원 헤테로사이클로알킬은 옥소에 의해 임의로 치환되고,
R11은 수소 또는 메틸이고,
R12는 수소, (C1-C4)-알킬, (C3-C6)-사이클로알킬 또는 5- 또는 6-원 헤테로사이클로알킬이고, 여기서
(i) 상기 (C1-C4)-알킬은 하이드록시에 의해 임의로 치환되고,
(ii) 상기 5- 또는 6-원 헤테로사이클로알킬은 옥소에 의해 임의로 치환되거나, 또는
R9 및 R10, 또는 R11 및 R12는 각각, 결합하고, 이들이 결합된 질소 원자와 함께, N(R13), O, S 및 S(O)2로부터 선택되는 제2 환 헤테로원자를 함유할 수 있고, 탄소 원자상에서 플루오로, (C1-C4)-알킬, 옥소, 하이드록시, 아미노 및 아미노카보닐로 구성된 그룹으로부터 독립적으로 선택되는 3개 이하의 치환체에 의해 치환될 수 있는 모노사이클릭, 포화 4- 내지 6-원 헤테로사이클로알킬 환을 형성하고, 여기서
R13은 수소, (C1-C4)-알킬, 사이클로프로필, 사이클로부틸, 포르밀 또는 (C1-C4)-알킬카보닐이고,
R15는 메틸 또는 에틸이되,
단, G2가 클로로 또는 시아노인 경우, G1은 클로로가 아닌
화학식 (I)의 화합물에 관한 것이다.
특히 바람직한 구체예에 있어서, 본 발명은
R1은 메틸이고,
R2는 메톡시이고,
G1은 메틸, 옥사졸-5-일 또는 그룹 -CH2-OR3 또는 -CH2-NR4R5를 나타내고, 여기서
R3은 수소, (C1-C4)-알킬, 사이클로프로필 또는 사이클로부틸이고,
상기 (C1-C4)-알킬은 하이드록시, 메톡시, 에톡시, 하이드록시카보닐, 메톡시카보닐, 에톡시카보닐, 아미노, 아미노카보닐, 사이클로프로필, 사이클로부틸 또는 3개 이하의 플루오로 원자에 의해 임의로 치환되고,
R4는 수소, 메틸 또는 에틸이고,
R5는 수소, (C1-C4)-알킬, 아세틸, 사이클로프로필, 사이클로부틸 또는 2-옥소피롤리딘-3-일이고,
상기 (C1-C4)-알킬은 하이드록시, 하이드록시카보닐, 사이클로프로필 또는 사이클로부틸에 의해 임의로 치환되거나, 또는
R4 및 R5는 결합하고, 이들이 결합된 질소 원자와 함께, NH 및 O로부터 선택되는 제2 환 헤테로원자를 함유할 수 있고, 환 탄소 원자상에서 옥소 또는 하이드록시에 의해 치환될 수 있는 모노사이클릭, 포화 5- 또는 6-원 헤테로사이클로알킬 환을 형성하고,
G2는 메틸 또는 그룹 -CR8AR8B-OH, -CH2-NR9R10 또는 -C(=O)-NR11R12를 나타내고, 여기서
R8A 및 R8B는 독립적으로 수소 또는 메틸이고,
R9는 수소이고,
R10은 수소, (C1-C4)-알킬, 아세틸, 사이클로프로필, 사이클로부틸 또는 2-옥소피롤리딘-3-일이고,
상기 (C1-C4)-알킬은 하이드록시 또는 아미노카보닐에 의해 임의로 치환되고,
R11은 수소 또는 메틸이고,
R12는 수소, (C1-C4)-알킬, 사이클로프로필, 사이클로부틸 또는 2-옥소피롤리딘-3-일이고,
상기 (C1-C4)-알킬은 하이드록시에 의해 임의로 치환되거나, 또는
R9 및 R10, 또는 R11 및 R12는 각각, 결합하고, 이들이 결합된 질소 원자와 함께, N(R13), O 및 S(O)2로부터 선택되는 제2 환 헤테로원자를 함유할 수 있고, 환 탄소 원자상에서 플루오로, 메틸, 옥소, 하이드록시, 아미노 및 아미노카보닐로 구성된 그룹으로부터 독립적으로 선택되는 3개 이하의 치환체에 의해 치환될 수 있는 모노사이클릭, 포화 4- 내지 6-원 헤테로사이클로알킬 환을 형성하고,
R13은 수소, 포르밀 또는 아세틸인
화학식 (I)의 화합물에 관한 것이다.
다른 구체예에 있어서, 본 발명은
R1은 메틸이고,
R2는 메톡시인
화학식 (I)의 화합물에 관한 것이다.
또다른 구체예에 있어서, 본 발명은
G1은 그룹 -CH2-OR3을 나타내고, 여기서
R3은 수소, 또는 하이드록시, 메톡시, 아미노, 아미노카보닐 또는 3개 이하의 플루오로 원자에 의해 임의로 치환된 (C1-C4)-알킬인
화학식 (I)의 화합물에 관한 것이다.
또다른 구체예에 있어서, 본 발명은
G1은 그룹 -CH2-NR4R5를 나타내고, 여기서
R4는 수소 또는 메틸이고,
R5는 (C1-C4)-알킬, 아세틸, 사이클로프로필, 사이클로부틸 또는 2-옥소피롤리딘-3-일이고,
상기 (C1-C4)-알킬은 하이드록시에 의해 임의로 치환되거나, 또는
R4 및 R5는 결합하고, 이들이 결합된 질소 원자와 함께, NH 및 O로부터 선택되는 제2 환 헤테로원자를 함유할 수 있고, 환 탄소 원자상에서 옥소 또는 하이드록시에 의해 치환될 수 있는 모노사이클릭, 포화 5- 또는 6-원 헤테로사이클로알킬 환을 형성하는
화학식 (I)의 화합물에 관한 것이다.
또다른 구체예에 있어서, 본 발명은
G2는 그룹 -CH2-NR9R10을 나타내고, 여기서
R9는 수소이고,
R10은 아세틸 또는 2-옥소피롤리딘-3-일이거나, 또는
R9 및 R10은 결합하고, 이들이 결합된 질소 원자와 함께, N(R13) 및 O로부터 선택되는 제2 환 헤테로원자를 함유할 수 있고, 환 탄소 원자상에서 메틸, 옥소, 하이드록시 및 아미노로 구성된 그룹으로부터 독립적으로 선택되는 2개 이하의 치환체에 의해 치환될 수 있는 모노사이클릭, 포화 5- 또는 6-원 헤테로사이클로알킬 환을 형성하고,
R13은 수소, 포르밀 또는 아세틸인
화학식 (I)의 화합물에 관한 것이다.
또다른 구체예에 있어서, 본 발명은
G2는 그룹 -C(=O)-NR11R12를 나타내고, 여기서
R11은 수소이고,
R12는 (C1-C4)-알킬 또는 2-옥소피롤리딘-3-일이고,
상기 (C1-C4)-알킬은 하이드록시에 의해 임의로 치환되거나, 또는
R11 및 R12는 결합하고, 이들이 결합된 질소 원자와 함께, NH 및 O로부터 선택되는 제2 환 헤테로원자를 함유할 수 있고, 환 탄소 원자상에서 옥소 또는 하이드록시에 의해 치환될 수 있는 모노사이클릭, 포화 4- 내지 6-원 헤테로사이클로알킬 환을 형성하는
화학식 (I)의 화합물에 관한 것이다.
특히 바람직한 구체예에 있어서, 본 발명은
R1은 메틸이고,
R2는 메톡시이고,
G1은 그룹 -CH2-OR3을 나타내고, 여기서
R3은 하이드록시, 아미노 또는 아미노카보닐에 의해 임의로 치환된 (C1-C4)-알킬이고,
G2는 그룹 -CH2-NR9R10 또는 -C(=O)-NR11R12를 나타내고, 여기서
R9는 수소이고,
R10은 2-옥소피롤리딘-3-일이거나, 또는
R9 및 R10은 결합하고, 이들이 결합된 질소 원자와 함께, 피페라진-1-일, 3-옥소피페라진-1-일 또는 4-아세틸피페라진-1-일 환을 형성하고,
R11은 수소이고,
R12는 2-옥소피롤리딘-3-일이거나, 또는
R11 및 R12는 결합하고, 이들이 결합된 질소 원자와 함께, 3-하이드록시아제티딘-1-일, 4-하이드록시피페리딘-1-일 또는 3-옥소피페라진-1-일 환을 형성하는
화학식 (I)의 화합물에 관한 것이다.
잔기의 각각의 조합 또는 바람직한 조합에서 특정적으로 제시된 잔기의 정의는 또한 잔기를 위해 제시된 특정 조합에 상관없이, 필요에 따라 다른 조합의 잔기의 정의로 대체된다. 상기 언급된 바람직한 범위의 2 이상의 조합이 특히 바람직하다.
화학식 (I)의 화합물은 주로 선택된 특정 G1 및 G2 그룹의 종류(상기 정의 참조)에 의해 좌우되는 다양한 합성 경로로 제조될 수 있다.
즉 또다른 구체예에 있어서, 본 발명은 다음을 특징으로 하는 화학식 (I)의 화합물의 제조 방법에 관한 것이다:
[A] 화학식 (II)의 6-치환된 4-아미노피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진을 먼저 산의 존재하에 포름알데하이드 및 화학식 (III)의 아민과 반응시켜 화학식 (IV)의 화합물을 제공한 후, 화학식 (V)의 화합물로 브롬화하고, 이어 팔라듐 촉매 및 염기의 존재하에 화학식 (VI)의 벤조티오펜-2-일 보로네이트와 커플링하여 화학식 (I-A)의 목적 화합물을 수득하는 단계:
Figure 112014065561338-pct00002
(II)
Figure 112014065561338-pct00003
(III)
Figure 112014065561338-pct00004
(IV)
Figure 112014065561338-pct00005
(V)
Figure 112014065561338-pct00006
(VI)
Figure 112014065561338-pct00007
(I-A)
[상기 식에서, R3, R9, R10, R1 및 R2는 상술된 의미를 갖고,
R14는 수소 또는 (C1-C4)-알킬을 나타내거나, 또는 두 R14 잔기는 함께 연결되어 -(CH2)2-, -C(CH3)2-C(CH3)2-, -(CH2)3-, -CH2-C(CH3)2-CH2- 또는 -C(=O)-CH2-N(CH3)-CH2-C(=O)- 브리지를 형성한다]
또는
[B] 화학식 (II)의 6-치환된 4-아미노피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진을 먼저 포스포릴 클로라이드의 존재하에 N,N-디메틸포름아미드로 포르밀화하여 화학식 (VII)의 알데하이드를 제공한 후, 화학식 (VIII)의 화합물로 브롬화하고, 팔라듐 촉매 및 염기의 존재하에 화학식 (VI)의 벤조티오펜-2-일 보로네이트와 커플링하여 화학식 (IX)의 화합물을 제공하고, 이어
[B-1] 산 및 환원제의 존재하에 화학식 (III)의 아민과 반응시켜 화학식 (I-A)의 목적 화합물을 수득하거나,
[B-2] 화학식 (X)의 카복실산으로 산화하고, 마지막으로 축합제의 존재하에 화학식 (XI)의 아민과 커플링하여 화학식 (I-B)의 목적 화합물을 수득하는 단계:
Figure 112014065561338-pct00008
(II)
Figure 112014065561338-pct00009
(VII)
Figure 112014065561338-pct00010
(VIII)
Figure 112014065561338-pct00011
(VI)
Figure 112014065561338-pct00012
(IX)
Figure 112014065561338-pct00013
(III)
Figure 112014065561338-pct00014
(I-A)
Figure 112014065561338-pct00015
(X)
Figure 112014065561338-pct00016
(XI)
Figure 112014065561338-pct00017
(I-B)
[상기 식에서,
R3, R1, R2, R14, R9, R10, R11 및 R12는 상술된 의미를 가진다]
또는
[C] 화학식 (XII)의 6-치환된 4-아미노-5-브로모피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진을 먼저 팔라듐 촉매 및 염기의 존재하에 화학식 (VI)의 벤조티오펜-2-일 보로네이트와 커플링하여 화학식 (XIII)의 화합물을 제공한 후, 산의 존재하에 포름알데하이드 및 화학식 (III)의 아민과 반응시켜 화학식 (I-C)의 화합물을 제공하고, 이어
[C-1] 화학식 (XIV)의 알데하이드로 산화시키고, 산 및 환원제의 존재하에 화학식 (XV)의 아민으로 처리하여 화학식 (I-D)의 목적 화합물을 수득하거나,
[C-2] 화학식 (XVI)의 상응하는 6-(할로메틸) 유도체로 전환시키고, 염기의 존재하에 화학식 (XVII)의 알콜로 처리하여 화학식 (I-E)의 목적 화합물을 수득하는 단계:
Figure 112014065561338-pct00018
(XII)
Figure 112014065561338-pct00019
(VI)
Figure 112014065561338-pct00020
(XIII)
Figure 112014065561338-pct00021
(III)
Figure 112014065561338-pct00022
(I-C)
Figure 112014065561338-pct00023
(XIV)
Figure 112014065561338-pct00024
(XV)
Figure 112014065561338-pct00025
(I-D)
Figure 112014065561338-pct00026
(XVI)
Figure 112014065561338-pct00027
(XVII)
Figure 112014065561338-pct00028
(I-E)
[상기 식에서,
R1, R2, R14, R9, R10, R4 및 R5는 상술된 의미를 갖고,
X는 클로로, 브로모 또는 요오도이고,
R3A는 상술된 R3의 의미를 가지나, 수소는 제외된다]
임의로, 경우에 따라, (i) 상기 수득한 화학식 (I)의 화합물을, 바람직하게는 크로마토그래피 방법을 이용하여 그의 각 거울상이성체 및/또는 부분입체이성체로 분리하고/하거나, (ii) 화학식 (I)의 화합물을 상응하는 용매 및/또는 산 또는 염기로 처리하여 그의 각 수화물, 용매화물, 염 및/또는 염의 수화물 또는 염의 용매화물로 전환시키는 단계.
상술된 방법으로 제조될 수 있는 화학식 (I-A), (I-B), (I-C), (I-D) 및 (I-E)의 화합물은 각각 화학식 (I)의 화합물의 특정 부분을 나타낸다.
마니히 타입(Machich-type) 아미노-메틸화 반응을 나타내는 공정 단계 [A] (II) → (IV) 및 [C] (XIII) → (I-C)는 각각의 출발 화합물을 산 촉매, 예컨대 포름산 또는 아세트산의 존재하에 수성 포름알데하이드 및 아민 성분 (III)의 혼합물로 처리함으로써 일반적인 방식으로 수행된다. 바람직하게, 아세트산은 촉매 및 용매 양지로서 사용된다. 반응은 보통 +20 ℃ 내지 +80 ℃ 범위의 온도에서 수행된다.
공정 단계 [A] (IV) → (V) 및 [B] (VII) → (VIII)에 대한 브롬화제로서는 바람직하게 N-브로모숙신이미드 (NBS), 1,3-디브로모-5,5-디메틸히단토인 (DBDMH) 또는 브롬 원소가 사용된다. 반응은 일반적으로 불활성 용매, 예컨대 디클로로메탄, 클로로포름, 테트라하이드로푸란, 아세토니트릴 또는 N,N-디메틸포름아미드 (DMF) 중에 -78 ℃ 내지 +20 ℃ 범위의 온도내에서 수행된다.
커플링 반응 [A] (V) + (VI) → (I-A), [B] (VIII) + (VI) → (IX) 및 [C] (XII) + (VI) → (XIII) ["스즈키-미야우라(Suzuki-Miyaura) 커플링"]은 일반적으로 불활성 용매중에서 팔라듐 촉매 및 수성 염기를 사용하여 수행된다. 이 목적에 적합한 팔라듐 촉매는, 예를 들어, 팔라듐(II) 아세테이트, 팔라듐(II) 클로라이드, 비스(트리페닐포스핀)팔라듐(II) 클로라이드, 비스(아세토니트릴)팔라듐(II) 클로라이드, [1,1'-비스(디페닐포스피노)페로센]팔라듐(II) 클로라이드, 테트라키스-(트리페닐포스핀)팔라듐(0), 비스(디벤질리덴아세톤)팔라듐(0), 및 트리스(디벤질리덴아세톤)디팔라듐-(0)이며, 임의로 다른 포스핀 리간드, 예컨대, 이를테면 2-디사이클로헥실포스피노-2',4',6'-트리이소프로필바이페닐 (X-Phos), 2-디사이클로헥실포스피노-2',6'-디메톡시바이페닐 (S-Phos), 4,5-비스(디페닐포스피노)-9,9-디메틸크산텐 (Xantphos), 또는 4-(디-tert-부틸포스피노)-N,N-디메틸아닐린과 조합된다. 또한, 촉매적 활성종이 반응 조건하에 발생되는 팔라듐 전촉매, 예컨대 (2'-아미노바이페닐-2-일)(클로로)팔라듐디사이클로헥실(2',4',6'-트리이소프로필바이페닐-2-일)포스핀이 사용될 수 있다 [예를 들어, S. Kotha et al., Tetrahedron 58, 9633-9695 (2002); T. E. Barder et al., J. Am. Chem. Soc. 127 (13), 4685-4696 (2005); S. L. Buch-wald et al., J. Am. Chem. Soc. 132 (40), 14073-14075 (2010), 및 그에 인용된 추가 문헌 참조].
이들 커플링 반응에 적합한 염기는 특히 알칼리 카보네이트, 예컨대 소듐, 포타슘 또는 탄산 카보네이트, 알칼리 포스페이트, 예컨대 소듐 또는 포타슘 포스페이트, 또는 알칼리 플루오라이드, 예컨대 포타슘 또는 세슘 플루오라이드이다. 보통, 이들 염기는 수용액으로서 사용된다. 반응은 반응 조건하에 불활성인 유기 용매중에서 수행된다. 바람직하게, 수혼화성 유기 용매, 예컨대 1,2-디메톡시에탄, 테트라하이드로푸란, 1,4-디옥산, 아세토니트릴, N,N-디메틸포름아미드 (DMF) 또는 디메틸설폭사이드 (DMSO)가 사용되나, 다른 불활성 용매, 예컨대 디클로로메탄 또는 톨루엔도 또한 사용될 수 있다.
공정 단계 [B] (II) → (VII) ["빌스마이어-하크(Vilsmeier-Haack) 포르밀화"]는 N,N-디메틸포름아미드 (DMF) 용매중의 피롤로트리아진 (II)을 포스포릴 클로라이드로 처리함으로써 일반적인 방식으로 수행된다. 반응은 보통 0 ℃ 내지 +80 ℃의 온도에서 수행된다.
환원 아미노화 반응 [B-1] (IX) + (III) → (I-A) 및 [C-1] (XIV) + (XV) → (I-D)에 적합한 환원제는 통상적인 알칼리 보로하이드라이드, 예컨대 리튬 보로하이드라이드, 소듐 보로하이드라이드, 포타슘 보로하이드라이드, 소듐 시아노보로하이드라이드 또는 소듐 트리아세톡시보로하이드라이드이다. 변형은 아민 성분 (III) 및 (XV) 각각의 반응성, 및/또는 사용된 특정 보로하이드라이드에 따라, 일반적으로 산, 바람직하게 아세트산의 존재하에, 알콜 또는 에테르 용매, 예컨대 메탄올, 에탄올, 이소프로판올, 테트라하이드로푸란 또는 1,4-디옥산중에서 0 ℃ 내지 +80 ℃의 온도 범위내에서 수행된다.
공정 단계 [B-2] (IX) → (X)에서의 산화 반응을 위해, 2-메틸-2-부텐과 같은 하이포클로라이트 스캐빈저의 존재하에 아염소산나트륨에 의한 산화는 선택적 방법을 나타낸다 [참조: H. W. Pinnick et al., Tetrahedron 37, 2091-2096 (1981); A. Raach and O. Reiser, J. Prakt. Chem. 342 (6), 605-608 (2000), 및 그에 인용된 문헌]. 반응은 보통 테트라하이드로푸란/물 혼합물중에 0 ℃ 내지 주변 온도의 온도에서 수행된다.
공정 단계 [B-2] (X) + (XI) → (I-B) [아미드 형성]에 적합한 축합제는 예를 들어, 카보디이미드, 예컨대 N,N'-디에틸-, N,N'-디-프로필-, N,N'-디이소프로필-, N,N'-디사이클로헥실카보디이미드 (DCC) 또는 N-(3-디메틸아미노프로필)-N'-에틸카보디이미드 (EDC), 포스겐 유도체, 예컨대 N,N'-카보닐디이미다졸 (CDI) 또는 이소부틸 클로로포르메이트, α-클로로엔아민, 예컨대 1-클로로-2-메틸-1-디메틸아미노-1-프로펜, 인 화합물, 예컨대 프로판포스폰산 무수물, 디에틸 시아노포스포네이트, 비스(2-옥소-3-옥사졸리디닐)포스포릴 클로라이드, 벤조트리아졸-1-일-옥시트리스(디메틸아미노)포스포늄 헥사플루오로포스페이트 (BOP) 또는 벤조트리아졸-1-일-옥시트리스(피롤리디노)포스포늄 헥사플루오로포스페이트 (PyBOP), 및 우로늄 화합물, 예컨대 O-(벤조트리아졸-1-일)-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄 테트라플루오로보레이트 (TBTU), O-(벤조트리아졸-1-일)-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄 헥사플루오로포스페이트 (HBTU), 2-(2-옥소-1-(2H)피리딜)-1,1,3,3-테트라메틸우로늄 테트라플루오로보레이트 (TPTU), O-(7-아자벤조트리아졸-1-일)-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄 헥사플루오로포스페이트 (HATU) 또는 O-(1H-6-클로로벤조트리아졸-1-일)-1,1,3,3-테트라메틸우로늄 테트라플루오로보레이트 (TCTU)를 포함하며, 필요에 따라 추가의 보조제, 예컨대 1-하이드록시벤조트리아졸 (HOBt) 또는 N-하이드록시숙신이미드 (HOSu), 및/또는 염기, 예컨대 알칼리 카보네이트, 예를 들어 소듐 또는 칼륨 카보네이트, 또는 유기 아민 염기, 예컨대 트리에틸아민, N-메틸피페리딘, N-메틸모르폴린 (NMM), N,N-디이소프로필에틸아민 (DIPEA), 피리딘 또는 4-N,N-디메틸아미노피리딘 (DMAP)과 조합된다. O-(7-아자벤조트리아졸-1-일)-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄 헥사플루오로포스페이트 (HATU) 또는 O-(벤조트리아졸-1-일)-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄 테트라플루오로보레이트 (TBTU)를 N,N-디이소프로필에틸아민 (DIPEA) 및 임의로 1-하이드록시벤조트리아졸 (HOBt)과 조합하여 사용하는 것이 바람직하다.
공정 단계 [B-2] (X) + (XI) → (I-B)에 대한 불활성 용매는, 예를 들어, 에테르, 예컨대 디에틸 에테르, tert-부틸 메틸 에테르, 테트라하이드로푸란, 1,4-디옥산 또는 1,2-디메톡시에탄, 탄화수소, 예컨대 벤젠, 톨루엔, 크실렌, 헥산 또는 사이클로헥산, 할로겐화 탄화수소, 예컨대 디클로로메탄, 트리클로로메탄, 카본 클로라이드, 1,2-디클로로에탄, 트리클로로에틸렌 또는 클로로벤젠, 또는 기타 용매, 예컨대 아세톤, 아세토니트릴, 에틸 아세테이트, 피리딘, 디메틸설폭사이드 (DMSO), N,N-디메틸포름아미드 (DMF), N,N'-디메틸-프로필렌 우레아 (DMPU) 또는 N-메틸피롤리디논 (NMP)이다. 이들 용매의 혼합물을 사용하는 것이 또한 가능하다. 디클로로메탄, 테트라하이드로푸란, N,N-디메틸포름아미드 또는 이들의 혼합물을 사용하는 것이 바람직하다. 반응은 일반적으로 0 ℃ 내지 +60 ℃, 바람직하게 +10 ℃ 내지 +40 ℃ 범위의 온도에서 수행된다.
온화한 조건하에 일차 알콜 (I-C)를 알데하이드 (XIV)로 전환시킬 수 있는 (공정 [C-1]) 산화제는 1,1,1-트리아세톡시-1,1-디하이드로-1,2-벤즈요오독솔-3(1H)-온 ("데스-마틴 퍼이오디난(Dess-Martin periodinane)"), 2,2,6,6-테트라메틸피페리딘-1-옥실 (TEMPO)을 이차 산화제, 예컨대 요오도소벤젠-I,I-디아세테이트 또는 소듐 하이포클로라이트, 및 디메틸설폭사이드 (DMSO)-기반 산화 시스템, 예컨대 DMSO/트리플루오로아세트산 무수물 또는 DMSO/N,N'-디사이클로헥실카보디이미드 (DCC)와 조합된 것을 포함한다. 1,1,1-트리아세톡시-1,1-디하이드로-1,2-벤즈요오독솔-3(1H)-온을 사용하는 것이 바람직하다. 반응은 일반적으로 불활성 용매중에서, 바람직하게는 디클로로메탄을 사용하여 수행된다.
공정 단계 [C-2] (I-C) → (XVI)에서 하이드록시-할로겐 변형을 위해, 업계에 잘 알려진 다양한 표준 방법 및 시약이 사용될 수 있다. 선택적인 시약은 티오닐 클로라이드 [X = Cl을 위해], 테트라브로모-메탄/트리페닐포스핀 [X = Br을 위해], 및 요오드/트리페닐포스핀 [X = I를 위해]이다. 후처리 편의성 및 화합물 안정성의 이유로 6-(클로로메틸) 유도체 (XVI) [X = Cl]의 제조가 바람직하다.
공정 단계 [C-2] (XVI) + (XVII) → (I-E) [에테르 형성]에 적합한 염기는 특히 알칼리 카보네이트, 예컨대 리튬, 소듐, 포타슘 또는 세슘 카보네이트, 알칼리 아세테이트, 예컨대 소듐 또는 포타슘 아세테이트, 또는 통상적인 삼급 아민 염기, 예컨대 트리에틸아민, N-메틸모르폴린, N-메틸피페리딘, N,N-디이소프로필에틸아민 또는 피리딘이다. N,N-디이소프로필에틸아민 (DIPEA)이 바람직하다. 반응 (XVI) + (XVII) → (I-E)은 불활성 용매, 예컨대 테트라하이드로푸란중에, 또는 용매없이, 과량의 알콜 (XVII)을 +20 ℃ 내지 +200 ℃, 바람직하게 +50 ℃ 내지 +150 ℃ 범위의 온도에서 사용하여 수행된다. 유리하게는, 전환은 마이크로웨이브 반응기 장치를 사용하여 수행된다.
반응 순서 (I-C) → (XVI) → (I-E)는 두 별도 단계, 즉 중간체 화합물 (XVI)의 분리 및 정제로 수행될 수 있거나, 또는 원-폿(one-pot) 절차로, 즉 제조 반응에서 수득한 조 중간체 (XVI)를 사용하여 수행될 수 있다.
일차 또는 이차 아민 부분이 목적하는 화학식 (I)의 화합물에서 G1 또는 G2 그룹의 부분을 형성하는 경우에는, 상술된 제조 반응에서 반응 성분으로 유리 아민 대신 상기 아민의 보호된 유도체를 사용하는 것이 적절할 때가 있을 수 있다. 이를 위해, 통상적인 일시 아미노-보호 그룹, 예컨대 아실 그룹 (예를 들면, 아세틸 또는 트리플루오로아세틸) 또는 카바메이트-타입 보호 그룹 (예를 들면, Boc-, Cbz- 또는 Fmoc-그룹)이 사용될 수 있다. Boc (tert-부톡시카보닐) 그룹이 바람직하게는 사용된다. 유사하게, G1 또는 G2 그룹의 일부인 하이드록시 작용기는 전구체 화합물 및 공정 중간체에서, 예를 들어 테트라하이드로피라닐 (THP) 에테르 또는 실릴 에테르 유도체, 예컨대 트리메틸실릴 또는 tert-부틸디메틸실릴 에테르로서 일시적으로 봉쇄될 수 있다.
이어, 이들 보호 그룹은 수성 후처리 및 정제 절차동안 절단이 수반될 수 있거나, 또는 후속 분리 반응 단계에서 업계에 잘 알려진 표준 방법을 이용하여 제거될 수 있다. 상응하는 유리 아민 또는 알콜로부터 이같은 보호된 중간체의 제조는 문헌에 기술된 일반적인 절차에 따라 용이하게 수행된다 [예를 들어, T. W. Greene and P. Wuts, Protective Groups in Organic Syn-thesis, Wiley, New York, 1999 참조].
특정 타입의 보호된 (즉 아실화된) 아민 유도체는 그 자체로 상당한 FGFR-억제 활성을 발휘한다. 따라서, 이 화합물 또한 상기 정의된 바와 같은 화학식 (I)에 포함된다.
본 발명의 화합물의 제조는 하기 반응식으로 나타내어질 수 있다:
반응식 1
Figure 112014065561338-pct00029
반응식 2
Figure 112014065561338-pct00030
반응식 3
Figure 112014065561338-pct00031
반응식 4
Figure 112014065561338-pct00032
화학식 (II)의 6-치환된 4-아미노피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진은, 예를 들어, 하기 반응식 5에 예시된 바와 같은 두가지 상이한 경로로 제조될 수 있다. 제1 경로에서, 4-아미노-6-시아노피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진 (XVIII)을 산-매개 알콜분해에 의해 에스테르 (XIX)로 전환시킨 후, 리튬 트리에틸보로하이드라이드를 사용하여 6-(하이드록시메틸) 화합물 (IIa) [(II)에서 R3 = H]로 환원시킨다. 상응하는 6-(할로메틸)피롤로트리아진, 예컨대 클로로 화합물 (XX)로의 표준 변형후, 염기의 존재하에 화학식 (XVII)의 알콜로 처리하여 화학식 (IIb) [(II)에서 R3은 H가 아니다]의 에테르 유도체를 용이하게 제공한다. 출발 화합물 (XVIII)의 제조는 이미 기술되었다 [국제특허출원 WO 2007/ 064883호 참조 (중간체 AX / 단계 3)].
제2 경로는 보호된 1-아미노-4-브로모-2-시아노피롤 (XXI)로부터 출발한다 [제조는 국제특허출원 WO 2007/064883호에 주어졌다 (중간체 AAE, 단계 3)]. 우레탄 질소의 보호후, 4-위치에서 금속화 및 포름알데하이드와의 반응으로 4-(하이드록시메틸) 유도체 (XXII)를 제공한다. 염화수소로 처리한 후 알콜 (XVII)을 첨가하고, 포름아미딘과 원-폿 절차로 축합하여 목적하는 화학식 (IIb)의 화합물을 제공한다. 이 경로는 알킬 에테르 유도체 [(IIb)에서 R3A = (C1-C4)-알킬]를 제조하는데 특히 적합하며, 이 경우 알콜 반응물 (XVII)은 반응 용매로서 또한 제공될 수 있다.
반응식 5
Figure 112014065561338-pct00033
화학식 (XII)의 4-아미노-5-브로모피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진 유도체는 1,3-디브로모-5,5-디메틸히단토인을 사용한 초기 5,7-디브롬화 및 n-부틸리튬과의 할로겐-금속 교환을 통한 후속의 선택적 7-탈브롬화에 이은 메탄올 퀀칭에 의해 (하기 반응식 6 참조) 4-아미노-6-(하이드록시메틸)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진 (IIa)으로부터 용이하게 얻을 수 있다 (반응식 6 참조).
반응식 6
Figure 112014065561338-pct00034
화학식 (VI)의 벤조티오펜-2-일 보로네이트는 편리하게는 화학식 (XXIV)의 치환된 티오페놀 유도체로부터 출발하여 제조될 수 있다 (하기 반응식 7 참조). 브로모아세탈 (XXV)로의 알킬화에 이은 폴리인산-매개 폐환으로 화학식 (XXVII)의 벤조티오펜을 제공한 후, 2-위치에서 금속화하고, 트리알킬 보레이트와 반응시킨다. 알칼리 후처리로 화학식 (VIa)의 자유 (벤조티오펜-2-일)보론산을 제공하고, 필요에 따라 업계에 공지된 표준 절차에 의해 화학식 (VIb)의 사이클릭 보로네이트, 예를 들면, 소위 MIDA 보로네이트로 변형시킬 수 있다 [예를 들어, D. M. Knapp et al., J. Am. Chem. Soc. 131 (20), 6961-6963 (2009) 참조].
반응식 7
Figure 112014065561338-pct00035
[참조: P. A. Ple and L. J. Marnett, J. Heterocyclic Chem. 25 (4), 1271-1272 (1988); A. Ven-tu-relli et al., J. Med. Chem. 50 (23), 5644-5654 (2007)].
화학식 (III), (XI), (XV), (XVII), (XXIV) 및 (XXV)의 화합물은 상업적으로 입수할 수 있거나, 문헌에 공지되었거나, 문헌에 기술된 표준 방법을 채용하여 용이하게 입수할 수 있는 출발물질로부터 제조될 수 있다. 출발물질의 제조를 위한 상세한 절차 및 문헌 참조는 또한 출발물질 및 중간체의 제조에 대한 섹션의 실험 파트에서 확인할 수 있다.
화학식 (I)의 화합물의 추가 하위 그룹에 대한 제조는 다음 반응식 8 내지 14에 나타내었다. 필요한 피롤로트리아진 전구체는 업계에 공지된 통상적인 방법 및 추가의 합성 변형으로 용이하게 합성할 수 있으며, 이는 대부분의 경우 유사한 타입의 반응, 예컨대, 브롬화, 보로네이트 커플링, 아미노메틸화, 환원적 아미노화 산화 및/또는 에테르 또는 아미드 형성 반응을 이용하는 상기 제조 섹션에 설명된 제조 경로를 따른다. 추가의 세부 사항은 예시적인 구체예 및 그의 각 전구체 화합물의 제조에 대한 실험 파트에 제공되어 있다.
반응식 8
Figure 112014065561338-pct00036
[R8A, R8B = (C1-C4)-알킬, 사이클로프로필 또는 사이클로부틸].
반응식 9
Figure 112014065561338-pct00037
[R8A = (C1-C4)-알킬, 사이클로프로필 또는 사이클로부틸; X = Cl, Br 또는 I].
반응식 10
Figure 112014065561338-pct00038
[R = (C1-C4)-알킬].
반응식 11
Figure 112014065561338-pct00039
[R = 클로로 또는 (C1-C4)-알킬; 출발물질 (XXVIII)의 제조에 대해서는 국제특허출원 WO 2007/064883 및 WO 2007/056170호를 각각 참조바람].
반응식 12
Figure 112014065561338-pct00040
[출발 화합물 (XXIX)의 제조에 대해서는 하기 반응식 14를 참조바람].
반응식 13
Figure 112014065561338-pct00041
반응식 14
Figure 112014065561338-pct00042
본 발명의 화합물은 유익한 약리 특성을 가지며, 인간 및 다른 포유동물에서 장애의 예방 및 또는 치료를 위해 사용될 수 있다.
본 발명의 화합물은 수용체 티로신 키나제, 특히 FGFR 키나제, 및 가장 특히는 FGFR-1 및 FGFR-3 키나제의 활성 또는 발현의 효능있는 억제제이다. 따라서, 다른 구체예에 있어서, 본 발명은 환자에 상기 정의된 바와 같은 화학식 (I)의 화합물의 유효량을 투여함을 포함하여, 치료를 필요로 하는 환자에서 FGFR 키나제의 활성과 관련되거나 이로 매개되는 장애를 치료하는 방법을 제공한다. 특정 구체예에 있어서, FGFR 키나제의 활성과 관련된 장애는 증식 장애, 특히 암 및 종양 질환이다.
본 발명에서 용어 "치료" 또는 "치료하는"은 질환, 장애, 병태 또는 상태, 그의 발생 및/또는 진행 및/또는 그의 증상을 억제, 지연, 경감, 완화, 저지, 감소시키거나, 퇴행을 야기하는 것을 포함한다. 용어 "예방" 또는 "예방하는"은 질환, 장애, 병태 또는 상태, 그의 발생 및/또는 진행 및/또는 그의 증상을 가지거나, 이에 걸리거나, 또는 경험의 위험을 감소시키는 것을 포함한다. 용어 "예방"은 방지를 포함한다. 질환, 장애, 병태 또는 상태의 치료 또는 예방은 부분적 또는 완전한 것일 수 있다.
"증식성 장애"라는 용어는 세포의 요망되지 않는 또는 제어되지 않는 증식을 포함하는 장애를 포함한다. 본 발명의 화합물은 세포 증식 및/또는 세포 분열의 예방, 저해, 차단, 감소, 저하, 제어 등을 위하여 및/또는 아폽토시스를 생성하기 위하여 이용될 수 있다. 이 방법은 인간을 비롯한 포유 동물을 포함하여 그를 필요로 하는 대상체에게 장애를 치료 또는 예방하기에 유효한 양의 본 발명의 화합물, 또는 그의 약학적으로 허용되는 염, 이성체, 다형체, 대사산물, 수화물 또는 용매화물을 투여하는 단계를 포함한다.
본 명세서에서는, 간소화를 위해 단수가 복수에 우선하여 주어지지만, 달리 언급이 없으면, 이는 일반적으로 복수를 포함하도록 의도된다. 예를 들어, "환자에게 유효량의 화학식 (I)의 화합물을 투여하는 것을 포함하여 환자에서 질환을 치료하는 방법"은 복수의 화학식 (I)의 화합물 투여뿐만 아니라 복수 질환의 동시 치료를 포함하도록 의도된다.
본 발명의 화합물로 치료 및/또는 예방될 수 있는 증식성 장애에는 특히 암 및 종양 질환의 그룹이 포함되나 이로 제한되지 않는다. 이들은 특히, 하기 질환의 의미로서 이해하면 되지만, 이로 제한되지는 않는다: 유방암종 및 유방종양 (유관 및 소엽 형태, 또한 제자리), 기도 종양 (소형 세포 및 비소형 세포 폐암종, 소세포 및 비소세포 암종, 기관지 암종, 기관지 선종, 흉막과 폐의 아세포종), 뇌 종양 (예를 들면, 뇌간 및 시상하부, 성상세포종, 교아종, 수모세포종, 뇌질피복세포종, 및 신경외배엽 및 송과체 종양), 소화관 (식도, 위, 담낭, 소장, 대장, 직장, 항문 ) 종양, 간 종양 (특히, 간세포 암종, 담관세포 암종 및 혼합 간세포 및 담관세포 암종), 두경부 (후두, 하인두, 비인두, 구인두, 구순 및 구강) 종양, 피부종양 (편평세포 암종, 카포시 육종, 악성 흑색종, 메르켈 세포 피부암 및 비흑색종 피부암), 연조직 종양 (특히 연조직 육종, 골육종, 악성 섬유 조직구종, 림프육종 및 횡문근육종), 안 종양 (특히 안내 흑색종, 포도막 흑색종 및 망막아종), 내분비 및 외분비선 (예를 들면, 갑상선 및 부갑상선, 췌장 및 타액선) 종양, 요로 (방광, 음경, 신장, 신우, 요관) 종양, 생식기관 종양 (여성에서 자궁내막, 자궁경부, 난소, 질, 외음부 및 자궁 암종, 및 남성에서 전립선암 및 고환암종), 및 이들의 전이. 이들 장애는 또한 고형의 증식성 혈액 질환 및 순환 혈액 세포, 예컨대 림프종, 백혈병 및 골수증식성 질환, 예를 들면 급성 골수성 백혈병, 급성 림프아구성 백혈병, 만성 림프구성 백혈병, 만성 골수성 백혈병 및 모발상세포 백혈병, 및 AIDS-관련 림프종, 호지킨 림프종, 비호지킨 림프종, 피부 T-세포 림프종, 버킷 림프종, 및 중추 신경계에서의 림프종을 포함한다.
그의 활성 및 선택성 프로파일에 의해, 본 발명의 화합물은 유방 (유선), 폐, 위 (위장), 방광 및 난소암 및 종양 질환의 치료에 특히 적합할 것으로 판단된다. 또한, 본 발명의 화합물은 종양 전이의 예방 또는 억압에 일반적으로 특히 적합할 수 있다.
본 발명의 화합물 및 방법으로 치료 및/또는 예방될 수 있는 기타 증식성 장애는 건선, 켈로이드 및 피부에 영향을 미치는 다른 과형성, 표피밑 수포 형성과 관련된 수포성 장애 (수포성류천포창, 다형홍반 및 포진성피부염 포함), 섬유성 장애, 예컨대 폐섬유증, 아테롬성동맥경화증, 재발협착증 및 간경변증, 혈관사이세포 증식 장애, 사구체병염, 사구체신염, 당뇨병성 신장증, 악성 신장경화증 및 다낭성 신장 질환과 같은 신장 질환, 양성 전립선비대증 (BPH), 혈관신생 또는 혈관 증식성 장애, 및 혈전성 미소혈관 증후군을 포함한다.
본 발명의 화합물은 또한 안과적 질환, 예를 들어, 연령 관련 황반변성 (AMD), 건식형 시력 감퇴, 허혈성 망막 정맥 폐쇄, 당뇨성 망막 부종, 당뇨성 망막증, 미숙아 망막증 및 기타 망막증을 치료 및/또는 예방하는데 유용하다.
본 발명의 화합물을 투여하여 치료 및/또는 예방될 수 있는 다른 병태는 부인과 질환, 예컨대 자궁내막증, 근종 및 난소 낭종, 지방생성 관련 대사성 장애, 담즙 대사, 인산염 대사, 칼슘 대사 및/또는 골 무기질화, 골격 장애, 예를 들어, 왜소증, 연골형성이상및 파이퍼 (Pfeiffer) 증후군, 연골 질환, 예컨대 골관절염 및 다발성 관절염, 류마티스성 관절염, 대머리, 및 이식 거부를 포함한다.
상기 언급된 질환은 인간에서 잘 특정되어 있으며, 또한 다른 포유동물에서 필적할만한 병인으로 존재하며, 본 발명의 화합물 및 방법으로 치료될 수 있다.
따라서, 본 발명은 또한 장애, 특히 상기 언급된 장애의 치료 및/또는 예방을 위한 본 발명에 따른 화합물의 용도에 관한 것이다.
본 발명은 또한 장애, 특히 상기 언급된 장애의 치료 및/또는 예방용 약학 조성물을 제조하기 위한 본 발명에 따른 화합물의 용도에 관한 것이다.
본 발명은 또한 장애, 특히 상기 언급된 장애를 치료 및/또는 예방하기 위한 방법에서 본 발명에 따른 화합물의 용도에 관한 것이다.
본 발명은 또한 적어도 하나의 본 발명에 따른 화합물을 유효량으로 사용하여 상기 언급된 장애를 치료 및/또는 예방하는 방법에 관한 것이다.
본 발명의 화합물은 단독 약제 또는 하나 이상의 추가 치료제와 조합으로 투여될 수 있으며, 이때 상기 조합으로 바람직하지 않고/않거나 허용되지 않는 부작용을 일으키지 않아야 한다. 상기 조합 치료는 상기 정의된 바와 같은 화학식 (I)의 화합물, 및 하나 이상의 추가 치료제를 함유하는 단일 약학 복용 제제를 투여하는 것뿐 아니라, 화학식 (I)의 화합물 및 각각의 추가 치료제를 그 자체의 별도 약학 복용 제제로 투여하는 것을 포함한다. 예를 들어, 화학식 (I)의 화합물 및 치료제는 환자에 단일 (고정된) 경구 복용 조성물, 예컨대 정제 또는 캅셀로서 함께 투여될 수 있거나, 또는 각각의 제제는 분리된 복용 제제로 투여될 수 있다.
별도의 복용 제제가 사용되는 경우, 화학식 (I)의 화합물 및 하나 이상의 추가 치료제는 실질적으로 동시에 (즉, 동반하여) 또는 별도의 시간 간격을 두고 (즉, 순차적으로) 투여될 수 있다.
특히, 본 발명의 화합물은 다른 항암제, 예컨대 알킬화제, 항대사제, 식물 유래 항종양제, 호르몬 치료제, 토포이소머라제 억제제, 튜불린 억제제, 키나제 억제제, 표적 약제, 항체, 항체-약제 접합체 (ADC), 면역학제, 생물학적 반응 변경제, 항혈관신생 화합물, 및 다른 항증식제, 세포증식억제제 및/또는 세포독성 물질과 고정 또는 분리된 조합물로 사용될 수 있다. 이와 관련하여, 본 발명의 화합물과 조합하여 사용될 수 있는 제2 제제의 예에 대한 목록을 하기에 나타내나 이들에만 제한되지는 않는다:
아바렐릭스, 아비라테론, 아클라루비신, 아파티닙, 아플리베르셉트, 알데스류킨, 알렘투주마브, 알리트레티노인, 알파라딘, 알트레타민, 아미노글루테티미드, 아모나피드, 암루비신, 암사크린, 아나스트로졸, 안드로무스틴, 아르글라빈,아스파라기나제, 악시티닙, 5-아자시티딘, 바실릭시마브, 벨로테칸, 벤다무스틴, 베바시주마브, 벡사로텐, 비칼루타미드, 비산트렌, 블레오마이신, 보르테조미브, 보수티닙, 브리바닙, 알라니네이트, 부세렐린, 부설판, 카바지탁셀, CAL-101, 칼슘 폴리네이트, 칼슘 레보폴리네이트, 캄포테신, 카페시타빈, 카르보플라틴, 카르모푸르, 카르무스틴, 카투막소마브, 세디라닙, 셀모류킨, 세툭시마브, 클로람부실, 클로르마디논, 클로르메틴, 시도포비르, 시스플라틴, 클라드리빈, 클로드론산, 클로파라빈, 콤브레타스타틴, 크리산타스파제, 크리조티닙, 사이클로포스파미드, 사이프로테론, 사이타라빈, 다카르바진, 닥티노마이신, 다르베포에틴 알파, 다리나파르신, 다사티닙, 다우노루비신, 데시타빈, 데가렐릭스, 데니류킨 디프티톡스, 데노수마브, 데슬로렐린, 디브로스피듐 클로라이드, 도세탁셀, 도비티닙, 독시플루리딘, 독소루비신, 두타스테라이드, 에쿨리주마브, 에드레콜로마브, 에플로르니틴, 엘립티늄 아세테이트, 엘트롬보팍, 엔도스타틴, 에노시타빈, 에핌비신, 에피루비신, 에피티오스타놀, 에포에틴 알파, 에포에틴 베타, 에포틸론, 엡타플라틴, 에리불린, 에를로티니브, 에스트라디올, 에스트라무스틴, 에토포시드, 에베롤리무스, 엑사테칸, 엑세메스탄, 엑시술린드, 파드로졸, 펜레티나이드, 필그라스팀, 피나스테라이드, 플라보피리돌, 플루다라빈, 5-플루오로우라실, 플루옥시메스테론, 플루타미드, 포레티팁, 포르메스탄, 포테무스틴, 풀베스트란트, 가니렐릭스, 게피티닙, 겜시타빈, 겜투주마브, 기마테칸, 기메라실, 글루포스파미드, 글루톡심, 고세렐린, 히스트렐린, 하이드록시우레아, 이반드론산, 이브리투모마브 티욱세탄, 이다루비신, 이포스파미드, 이마티닙, 이미퀴모드, 임프로설판, 인테타닙, 인터페론 알파, 인터페론 알파-2a, 인터페론 알파-2b, 인터페론 베타, 인터페론 감마, 인터류킨-2, 이필리무마브, 이리노테칸, 익사베필론, 란레오티드, 라파티닙, 레소폭시펜, 레날리도미드, 레노그라스팀, 렌티난, 레바티닙, 레스타우르티닙, 레트로졸, 류프로렐린, 레바미솔, 리니파닙, 린시티닙, 리수라이드, 로바플라틴, 로무스틴, 로니다민, 루르토테칸, 마포스파미드, 마파투무마브, 마시티닙, 마소프로콜, 메드록시프로게스테론, 메게스트롤, 멜라르소프롤, 멜팔란, 메피티오스탄, 머캅토퓨린, 메토트렉세이트, 메틸 아미노레불리네이트, 메틸테스토스테론, 미파무르티드, 미페프리스톤, 밀테포신, 미리플라틴, 미토브로니톨, 미토구아존, 미토락톨, 미토마이신, 미토탄, 미톡산트론, 몰그라모스틴, 모테사닙, 난드롤론, 네다플라틴, 넬라라빈, 네라티닙, 닐로티닙, 닐루타미드, 니모투주마브, 니무스틴, 니트라크린, 놀라트렉세드, 오파투무마브, 오프레베킨, 옥살리플라틴, 파클리탁셀, 팔리페르민, 파미드론산, 파니투무마브, 파조파니브, 페가스파르가제, PEG-에포에틴 베타, 페그필그라스팀, PEG-인터페론 알파-2b, 펠리트렉솔, 페메트렉세드, 펨투모마브, 펜토스타틴, 페플로마이신, 페르포스파미드, 페리포신, 패르투주마브, 피시바닐, 피람비신, 피라루비신, 플레릭사포르, 플리카마이신, 폴리글루삼, 폴리에스트라디올 포스페이트, 포나티닙, 포르피머 소듐, 프랄라트렉세이트, 프레드니무스틴, 프로카르바진, 프로코다졸, PX-866, 퀴나골리드, 랄록시펜, 랄티트렉세드, 라니비주마브, 라니무스틴, 라족산, 레고라페니브, 리세드론산, 리툭시마브, 로미뎁신, 로미플로스팀, 루비테칸, 사르그라모스팀, 사트라플라틴, 셀루메티닙, 시플류셀-T, 시롤리무스, 시조피란, 소부족산, 소라페닙, 스트렙토조신, 수니티닙, 탈라포르핀, 타미바로텐, 타목시펜, 탄두티닙, 타소네르민, 테세류킨, 테가푸르, 탈라티닙, 테모포르핀, 테모졸로미드, 템시롤리무스, 테니포시드, 테스토락톤, 테스토스테론, 테트로포스민, 탈리도미드, 티오테파, 티말파신, 티오구아닌, 티미파르닙, 티보자닙, 토세라닙, 토실리주마브, 토포테칸, 토레미펜, 토시투모마브, 트라벡테딘, 트라스투주마브, 트레오설판, 트레티노인, 트리아핀, 트릴로스탄, 트리메트렉세이트, 트립토렐린, 트로포스파미드, 우베니멕스, 발루비신, 반데타닙, 바프레오티드, 바를리티닙, 바탈라닙, 베무라페닙, 비다라빈, 빈블라스틴, 빈크리스틴, 빈데신, 빈플루닌, 비노렐빈, 볼로식시마브, 보리노스타트, 지노스타틴, 졸드론산 및 조루비신.
일반적으로, 다른 항암제를 본 발명의 화합물과 조합하여 사용하면,
· 단일 활성 화합물을 투여했을 때와 비교하여 종양의 성장을 느리게하거나, 그의 크기를 감소시키거나, 심지어는 그를 완전히 제거하는데 개선된 활성을 나타내고,
· 단일요법에서 더 적은 양으로 화학요법제를 사용하는 것이 가능하고,
· 개별 투여와 비교하여 부작용이 적어 보다 허용되는 화학요법 치료가 가능하고,
· 광범위한 스펙트럼의 암 및 종양 질환의 치료가 가능하고,
· 치료 반응 속도를 높이고,
· 표준 치료와 비교하여 환자의 생존 시간을 길게 하는 목적을 추구할 수 있다.
요컨대, 추가 구체예에 있어서, 본 발명은 적어도 하나의 본 발명에 따른 화합물 및 하나 이상의 추가 치료제를 포함하는 장애, 특히 상기 언급된 장애 치료 및/또는 예방용 약학 조성물에 관한 것이다.
암 치료시, 본 발명의 화합물은 또한 방사선 치료 및/또는 외과 수술과 병용하여 사용될 수 있다.
또한, 화학식 (I)의 화합물은 연구 및 진단에 있어 그 자체로, 또는 조성물로, 또는 당업계에 공지된 분석 기준 표준물 등으로서 사용될 수 있다.
본 발명의 화합물이 약품으로서 인간 및 다른 포유동물에 투여되는 경우, 이들은 자체로 또는, 예를 들어, 0.1% 내지 99.5% (더욱 바람직하게는 0.5% 내지 90%)의 활성 성분을 하나 이상의 약학적으로 허용되는 부형제와 함께 함유하는 약학 조성물로서 투여된다.
요컨대, 다른 측면으로, 본 발명은 통상적으로 하나 이상의 불활성인 비독성의 약학상 적합한 부형제와 함께 적어도 하나의 본 발명에 따른 화합물을 포함하는 약학 조성물, 및 장애, 특히 상기 언급된 장애를 치료 및/또는 예방하기 위한 그의 용도에 관한 것이다.
본 발명에 따른 화합물은 전신적으로 및/또는 국소적으로 작용할 수 있다. 이를 위해, 이들은 적합한 방식으로, 예컨대 경구, 비경구, 폐, 비강, 설하, 혀, 협측, 직장, 피부, 경피, 결막, 귀 또는 국소 경로, 또는 이식물 또는 스텐트로서 투여될 수 있다.
이들 적용 경로를 위해, 본 발명의 화합물은 적합한 적용형으로 투여될 수 있다.
경구 투여에 적합한 투여 형태는 선행기술에 따라 기능하며 본 발명에 따른 화합물을 신속하게 및/또는 변경된 방식으로 방출하고, 본 발명에 따른 화합물을 결정질 및/또는 무정형 및/또는 용해된 형태로 함유하는 투여 형태, 예를 들면, 정제 (비코팅 정제, 또는 장용 코팅을 가지거나, 불용 또는 지연 용해 및 본 발명에 따른 화합물의 방출을 조절하는 코팅을 갖는 코팅 정제), 구강 내에서 신속하게 붕해되는 정제, 또는 필름/웨이퍼, 필름/동결건조물, 캡슐 (예를 들면, 경질 또는 연질 젤라틴 캡슐), 당-코팅 정제, 과립, 펠렛, 분말, 에멀젼, 현탁액, 에어로졸 또는 용액이다.
비경구 적용은 흡수 단계 없이 (예를 들면, 정맥내, 동맥내, 심장내, 척수내 또는 요추내), 또는 흡수 단계를 포함하여 (예를 들면, 근육내, 피하, 피내, 경피 또는 복막내) 수행될 수 있다. 유용한 비경구 투여 형태는 특히 용액, 현탁액, 에멀젼, 동결건조물 및 멸균 분말 형태의 주사 및 주입을 위한 제제를 포함한다.
그밖의 적용 경로에 적합한 것은, 예를 들면, 흡입용 약제 형태 (특히, 분말 흡입기, 네뷸라이저), 점비제, 용액 또는 스프레이; 설측, 설하 또는 협측 투여용 정제 또는 캡슐(예를 들면, 트로키, 로젠지), 좌제, 귀 또는 눈을 위한 제제(예를 들면, 소적제, 연고), 질 캡슐, 수성 현탁액 (로션, 진탕 혼합물), 친유성 현탁액, 연고, 크림, 밀크, 페이스트, 발포제, 살포용 분말, 경피 치료 시스템 (예를 들면, 패치), 이식물 및 스텐트이다.
바람직한 구체예에 있어서, 상기 정의된 화학식 (I)의 화합물을 포함하는 약학 조성물은 경구 투여에 적합한 형태로 제공된다. 다른 바람직한 구체예에 있어서, 상기 정의된 화학식 (I)의 화합물을 포함하는 약학 조성물은 정맥내 투여에 적합한 형태로 제공된다.
본 발명에 따른 화합물은 그 자체로 공지된 방식으로 약학적으로 적합한 비독성 불활성 부형제와 혼합함으로써 상기 명시된 투여 형태로 전환시킬 수 있다. 이들 부형제로는 특히 담체 (예를 들면, 미정질 셀룰로스, 락토스, 만니톨), 용매 (예를 들면, 액체 폴리에틸렌 글리콜), 유화제 (예를 들면, 나트륨 도데실 술페이트, 계면활성제 (예를 들면, 폴리옥시소르비탄 올레에이트), 분산제 (예를 들면, 폴리비닐피롤리돈), 합성 및 천연 중합체 (예를 들면, 알부민), 안정제 (예를 들면, 항산화제, 예를 들면, 아스코르브산), 착색제 (예를 들면, 무기 안료, 예를 들면, 산화철) 및 향미제 및/또는 냄새 차폐제를 포함한다.
본 발명의 화합물의 바람직한 용량은 최대 환자가 견딜 수 있고 심각한 부작용을 발생하지 않는 범위이다. 예시적으로, 본 발명의 화합물은 비경구적으로 약 0.001 mg/체중 kg 내지 약 1 mg/체중 kg, 바람직하게는 약 0.01 mg/체중 kg 내지 약 0.5 mg/체중 kg의 용량으로 투여될 수 있다. 경구 투여시, 예시적인 용량 범위는 약 0.01 내지 100 mg/체중 kg, 바람직하게는 약 0.01 내지 20 mg/체중 kg, 및 더욱 바람직하게는 약 0.1 내지 10 mg/체중 kg이다. 상기 명시된 값의 중간 범위도 또한 본 발명의 일부인 것으로 의도된다.
그렇치만, 본 발명의 약학 조성물중 활성 성분의 실제 용량 수준 및 시간 경과는 환자에 독성없이, 특정 환자에 대한 소기 치료 반응, 투여 조성물 및 방식에 효과적인 활성 성분의 양이 얻어지도록 변할 수 있다. 따라서, 경우에 따라서는 특히 연령, 성별, 체중, 식이 및 환자의 전체적인 건강 상태, 특정 화합물의 생체이용성 및 약력학적 특성 및 그의 투여 방식 및 경로, 투여가 일어나는 시간 또는 간격, 선택된 용량 요법, 활성 성분에 대한 개별 환자의 반응, 연루된 특정 질환, 질환의 관련 또는 중증성 정도, 동반 치료의 종류 (즉, 본 발명의 화합물과 다른 공동 투여되는 치료재의 상호작용) 및 기타 관련 상황의 함수로서 언급된 양으로부터 벗어날 수도 있다.
즉, 일부 경우에는, 상기 언급된 최소량 미만으로도 충분할 수 있으나, 다른 경우에는, 언급된 상한선을 초과하기도 한다. 치료는 화합물의 최적의 용량보다 적은 용량으로 시작할 수 있다. 따라서, 용량은 상황하에 최적의 효과가 도달할 때까지 소량씩 늘려갈 수 있다. 편의상, 1일 총량은 나누어져 하루에 걸쳐 개별량으로 투여될 수 있다.
다음 실시예가 본 발명을 설명한다. 본 발명은 이들 실시예로 한정되지 않는다.
하기 표 및 실시예에서 백분율은 달리 언급이 없으면, 중량 백분율이고; 부는 중량부이다. 액체/액체 용액에 대한 용매비, 희석비 및 농도 데이터는 각각 부피에 기초한다.
A. 실시예
약어 및 두문자어:
Ac 아세틸
Ac2O 아세트산 무수물
AcOH 아세트산
aq. 수성 (용액)
Boc tert-부톡시카보닐
br. 브로드 (1H-NMR 신호)
Bu 부틸
cat. 촉매적
conc. 농축
d 이중선 (1H-NMR 신호)
DBDMH 1,3-디브로모-5,5-디메틸히단토인
DCI 직접 화학 이온화 (MS)
DCM 디클로로메탄
데스-마틴 퍼이오디난 1,1,1-트리아세톡시-1,1-디하이드로-1,2-벤즈요오 독솔-3(1H)-온
DIPEA N,N-디이소프로필에틸아민
DMF N,N-디메틸포름아미드
DMSO 디메틸설폭사이드
EI 전기 충격 이온화 (MS)
eq. 당량
ESI 전기분무 이온화 (MS)
Et 에틸
EtOAc 에틸 아세테이트
GC-MS 기체 크로마토그래피-결합 질량 분석법
h 시간
Hal 할로겐
1H-NMR 양성자 핵자기공명분광법
HPLC 고성능 액체 크로마토그래피
iPr 이소프로필
LC-MS 액체 크로마토그래피-결합 질량 분석법
Me 메틸
MeOH 메탄올
min 분
MS 질량 분석법
m/z 질량-대-전하비 (MS)
NBS N-브로모숙신이미드
n-Bu n-부틸
NCS N-클로로숙신이미드
of th. 이론치의 (화학적 수율)
Pd/C 차콜상 팔라듐
PdCl2(dppf) [1,1'-비스(디페닐-포스피노)-페로센]디클로로팔라 듐(II)
Pd(dba)2 비스(디벤질리덴아세톤)팔라듐
Ph 페닐
PPA 폴리인산
q 사중선 (1H-NMR 신호)
quant. 정량적 (수율)
rac 라세믹
Rf TLC 체류 인자
RP 역상 (HPLC)
rt 실온
Rt 체류 시간 (HPLC)
s 단일선 (1H-NMR 신호)
sat. 포화 (용액)
t 삼중산 (1H-NMR 신호)
TBAF 테트라-n-부틸암모늄 플루오라이드
TBDMS tert-부틸디메틸실릴
TBTU N-[(1H-벤조트리아졸-1-일옥시)(디메틸아미노)메틸렌]- N-메틸메탄아미늄 테트라플루오로보레이트
tBu tert-부틸
tert 삼급
TFA 트리플루오로아세트산
THF 테트라하이드로푸란
TLC 박층 크로마토그래피
LC-MS 및 GC-MS 방법:
방법 1 (LC-MS):
기기: Micromass Quattro Premier + Waters UPLC Acquity; 컬럼: Thermo Hypersil GOLD 1.9μ 50 mm x 1 mm; 용리제 A: 1 L 물 + 0.5 mL 50% 수성 포름산, 용리제 B: 1 L 아세토니트릴 + 0.5 ml 50% 수성 포름산; 구배: 0.0 분 90% A → 0.1 분 90% A → 1.5 분 10% A → 2.2 분 10% A; 온도: 50 ℃; 유속: 0.33 mL/min; UV 검출: 210 nm.
방법 2 (LC-MS):
기기: Waters Acquity SQD UPLC 시스템; 컬럼: Waters Acquity UPLC HSS T3 1.8μ 50 mm x 1 mm; 용리제 A: 1 L 물 + 0.25 mL 99% 포름산, 용리제 B: 1 L 아세토니트릴 + 0.25 mL 99% 포름산; 구배: 0.0 분 90% A → 1.2 분 5% A → 2.0 분 5% A; 오븐: 50 ℃; 유속: 0.40 mL/min; UV 검출: 210-400 nm.
방법 3 (LC-MS):
기기: Micromass Quattro Micro with HPLC Agilent 1100 Series; 컬럼: YMC-Triart C18 3μ 50 mm x 3 mm; 용리제 A: 1 L 물 + 0.01 mol 탄산암모늄, 용리제 B: 1 L 아세토니트릴; 구배: 0.0 분 100% A → 2.75 분 5% A → 4.5 분 5% A; 오븐: 40 ℃; 유속: 1.25 mL/min; UV 검출: 210 nm.
방법 4 (LC-MS):
기기: Waters Acquity SQD UPLC 시스템; 컬럼: Waters Acquity UPLC HSS T3 1.8μ 30 mm x 2 mm; 용리제 A: 1 L 물 + 0.25 mL 99% 포름산, 용리제 B: 1 L 아세토니트릴 + 0.25 mL 99% 포름산; 구배: 0.0 분 90% A → 1.2 분 5% A → 2.0 분 5% A; 오븐: 50 ℃; 유속: 0.60 mL/min; UV 검출: 208-400 nm.
방법 5 (LC-MS):
기기: Micromass Quattro Premier + Waters UPLC Acquity; 컬럼: Thermo Hypersil GOLD 1.9μ 50 mm x 1 mm; 용리제 A: 1 L 물 + 0.5 mL 50% 수성 포름산, 용리제 B: 1 L 아세토니트릴 + 0.5 ml 50% 수성 포름산; 구배: 0.0 분 97% A → 0.5 분 97% A → 3.2 분 5% A → 4.0 분 5% A; 온도: 50 ℃; 유속: 0.3 mL/min; UV 검출: 210 nm.
방법 6 (GC-MS):
기기: Micromass GCT, GC6890; 컬럼: Restek RTX-35, 15 m x 200 μM x 0.33 μM; 헬륨으로 일정 흐름: 0.88 mL/min; 오븐: 70 ℃; 주입구: 250 ℃; 구배: 70 ℃, 30 ℃/min → 310 ℃ (3 분 유지).
방법 7 (LC-MS):
기기 MS: Waters Micromass QM; 기기 HPLC: Agilent 1100 series; 컬럼: Agilent ZORBAX Extend-C18 3.0 mm x 50 mm, 3.5μ 용리제 A: 1 L 물 + 0.01 mol 탄산암모늄, 용리제 B: 1 L 아세토니트릴; 구배: 0.0 분 98% A → 0.2 분 98% A → 3.0 분 5% A → 4.5 분 5% A; 온도: 40 ℃; 유속: 1.75 mL/min; UV 검출: 210 nm.
방법 8 (LC-MS):
기기 MS: Waters Micromass ZQ; 기기 HPLC: Agilent 1100 series; 컬럼: Agilent ZORBAX Extend-C18 3.0 mm x 50 mm, 3.5μ 용리제 A: 1 L 물 + 0.01 mol 탄산암모늄, 용리제 B: 1 L 아세토니트릴; 구배: 0.0 분 98% A → 0.2 분 98% A → 3.0 분 5% A → 4.5 분 5% A; 온도: 40 ℃; 유속: 1.75 mL/min; UV 검출: 210 nm.
일반적인 정제 방법 (하기 표 I 및 II 참조) :
방법 P1:
제조용 RP-HPLC (Reprosil C18, 구배 아세토니트릴/0.2% aq. 트리플루오로아세트산).
방법 P2:
제조용 RP-HPLC (XBridge C18, 구배 아세토니트릴/물 + 0.1% aq. 암모니아).
방법 P3:
제조용 RP-HPLC (Sunfire C18, 구배 아세토니트릴/물).
방법 P4:
제조용 RP-HPLC (XBridge C18, 구배 아세토니트릴/물 + 0.05% aq. 암모니아).
방법 P5:
앞의 RP-HPLC 정제로부터 얻은 생성물을 메탄올에 용해시키고, 음이온 교환 캐트리지 (Stratospheres SPE, PL-HCO3 MP-수지)를 통해 여과하였다. 캐트리지를 메탄올로 용출시키고, 여액을 증발시켰다.
방법 P6:
에틸 아세테이트중 생성물의 용액을 포화 탄산수소나트륨 수용액에 이어 포화 염화나트륨 수용액으로 세척한 뒤, 황산마그네슘에서 건조시키고, 여과한 다음, 증발시켰다.
출발물질 및 중간체:
중간체 1A
2-메톡시-4-메틸아닐린
Figure 112014065561338-pct00043
THF (1.32 L) 중 5-메틸-2-니트로아니솔 (265 g, 1.58 mol) 및 10% Pd/C (39.75 g)의 혼합물을 1 atm의 수소하에 rt에서 밤새 교반하였다. 키젤구어를 통해 여과하고, 증발시켜 216.1 g의 조생성물을 얻고 추가 정제없이 다음 단계에 사용하였다.
LC-MS (방법 3): Rt = 2.39 min; MS (ESIpos): m/z = 138 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 6.45-6.63 (m, 3H), 4.46 (s, 2H), 3.72 (s, 3H), 2.16 (s, 3H) ppm.
중간체 2A
2-메톡시-4-메틸벤젠티올
Figure 112014065561338-pct00044
방법 1 :
물 (25 ml) 중 아질산나트륨 (7 g, 101.4 mmol)의 용액을 진한 염산 (30 ml) 및 물 (85 ml) 중의 중간체 1A (13.7 g, 100 mmol)의 냉각 (0-5 ℃) 용액에 적가하였다. 0 ℃에서 10 분동안 교반한 후, 소듐 아세테이트 (15 g, 182.8 mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 물 (140 ml) 중 포타슘 O-에틸 디티오카보네이트 (30 g, 187.1 mmol)의 뜨거운 용액 (70-80 ℃)에 적가하고, 70 ℃ 내지 80 ℃에서 1 시간동안 교반한 후, rt로 냉각하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트로 2회 추출하고, 모아진 유기 추출물을 황산나트륨에서 건조시키고, 증발시켰다. 잔사를 에탄올 (300 ml) 중 수산화칼륨의 1.3 M 용액에 취하였다. 글루코스 (8 g)를 첨가하고, 생성된 혼합물을 3 시간동안 환류시켰다. 이어, 에탄올 용매를 증발시키고, 잔사를 물로 희석한 다음, 6 N 수성 황산으로 산성화하였다. 아연 분말 (15 g)을 주의하여 첨가하고, 생성된 혼합물을 30 분동안 50 ℃로 가열하였다. 이어 혼합물을 rt로 냉각하고, 디클로로메탄으로 희석하고, 여과하였다. 여액을 디클로로메탄으로 2회 추출하고, 모아진 유기 추출물을 황산나트륨에서 건조시키고, 증발시켜 14.3 g의 조생성물을 얻고 추가 정제없이 다음 단계에 사용하였다.
방법 2 :
2.9 L의 THF에 1.1 L 물 중 355 ml (6.67 mol) 진한 황산의 따뜻한 용액을 첨가하였다. 50 ℃에서, 293 g (1.33 mol) 2-메톡시-4-메틸벤젠설포닐 클로라이드를 교반하에 첨가하였다. 이어, 521 g (7.97 mol)의 아연 분말을 분량들로 나누어 주의하여 첨가하고 (기포 형성), 약간의 발열 반응을 수조에서 식혀 50-55 ℃의 온도를 유지하였다. 혼합물을 55 ℃에서 3 시간동안 교반하였다. 반응 진행을 TLC (실리카겔, 석유에테르/에틸 아세테이트 95:5)로 추적하였다. 반응 혼합물을 13.6 L의 물에 붓고, 6.8 L 디클로로메탄을 첨가한 후, 혼합물을 5 분동안 교반하였다. 남은 아연으로부터 경사분리 및 상 분리 후, 수성상을 6.8 L 디클로로메탄으로 한번 더 추출하였다. 모아진 유기상을 10% 염수로 세척하고, 건조시킨 후, 40 ℃에서 감압하에 증발시켜 237 g의 조 생성물을 수득하였다. 이 물질을 다음 단계에 추가 정제없이 사용하였다. 용리제로서 석유에테르/에틸 아세테이트 (97:3)를 사용하여 실리카겔 크로마토그래피하여 분석용 샘플을 수득하였다.
LC-MS (방법 1): Rt = 1.21 min; MS (ESIneg): m/z = 153 (M-H)-
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 7.17 (d, 1H), 6.81 (s, 1H), 6.66 (d, 1H), 4.63 (br. s, 1H), 3.80 (s, 3H), 2.26 (s, 3H) ppm.
중간체 3A
1-[(2,2-디에톡시에틸)설파닐]-2-메톡시-4-메틸벤젠
Figure 112014065561338-pct00045
중간체 2A로부터의 조 물질 237 g, 287 g (1.46 mol) 브로모아세트알데하이드디에틸아세탈 및 862 g (2.65 mol) 탄산세슘을 2 L DMF에 현탁시켰다. 반응 온도를 우선 40 ℃로 증가시킨 후, 주변 온도에서 밤새 교반을 계속하였다. 반응 혼합물을 10 L의 물 및 2.7 L의 에틸 아세테이트로 분배하였다. 수성상을 다른 2.7 L 분량의 에틸 아세테이트로 추출하였다. 모아진 유기상을 10% 염수로 세척하고, 건조시킨 후, 증발시켰다. 생성된 유성 잔사를 용리제로서 석유에테르/에틸 아세테이트 (95:5)를 사용하여 실리카겔 크로마토그래피로 정제하였다.
수율: 236 g의 오일 (이론치의 66%)
GC-MS (방법 6): Rt = 6.03 min; MS (EIpos): m/z = 270 (M)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 7.16 (d, 1H), 6.82 (s, 1H), 6.73 (d, 1H), 4.55 (t, 1H), 3.80 (s, 3H), 3.52-3.64 (m, 2H), 3.39-3.51 (m, 2H), 2.96 (d, 2H), 2.33 (s, 3H), 1.09 (t, 6H) ppm.
중간체 4A
7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜
Figure 112014065561338-pct00046
13 g 폴리인산 및 150 ml 클로로벤젠의 환류 혼합물에 5.2 g (19.2 mmol)의 중간체 3A의 용액을 적가하고, 밤새 계속 환류시켰다. 냉각 후, 유기층을 경사분리하고, 잔사 및 플라스크를 DCM으로 두번 헹구었다. 모아진 유기상을 감압하에 증발시켰다. 잔사 (3.76 g)를 용리제로 이소헥산/0-10% 에틸 아세테이트를 사용하여 실리카겔상에서 크로마토그래피하였다.
수율: 1.69 g의 오일 (이론치의 49%)
GC-MS (방법 6): Rt = 5.20 min; MS (EIpos): m/z = 178 (M)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 7.68 (d, 1H), 7.34 (d, 1H), 7.28 (s, 1H), 6.78 (s, 1H), 3.93 (s, 3H), 2.43 (s, 3H) ppm.
중간체 5A
(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)보론산
Figure 112014065561338-pct00047
아르곤 분위기하에, 26.7 g (150 mmol)의 중간체 4A를 270 ml의 THF에 용해시키고, -70 ℃로 냉각하였다. -70 ℃ 내지 -65 ℃에서, 헥산중 n-부틸-리튬 2.5 N 용액 66 ml (165 mmol)를 20 분내에 적가하고, 백색 침전을 얻었다. -70 ℃에서 1 시간동안 교반한 후, 41.5 ml (180 mmol) 트리이소프로필 보레이트를 이 온도에서 10 분내에 첨가하였다 (농후 현탁물 생성). 교반을 70 ℃에서 1 시간동안 계속한 후, 반응 혼합물을 밤새 rt로 가온하였다. 이어, 400 ml의 포화 염화암모늄 수용액을 첨가하고, 층을 분리하여 수성층을 THF로 한번 더 추출하였다. 모아진 유기상을 감압하에 증발시켰다. 이렇게 얻은 잔사에 200 ml의 물 및 86 ml의 2 N 수산화나트륨 수용액을 첨가하였다. 용액을 DCM으로 2회 세척하고, 35 ml의 3 M 황산으로 산성화한 후, 생성된 현탁물을 1 시간동안 격렬히 교반하였다. 침전을 흡인여과하고, 밤새 45 ℃에서 진공하에 건조시켰다.
수율: 28.25 g의 무색 고체 (LC-MS에 의해 94% 순수, 이론치의 80%)
LC-MS (방법 2): Rt = 0.87 min; MS (ESIpos): m/z = 223 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 7.17 (d, 1H), 6.81 (s, 1H), 6.66 (d, 1H), 4.63 (br. s, 1H), 3.80 (s, 3H), 2.26 (s, 3H) ppm.
중간체 6A
2-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)-6-메틸-1,3,6,2-디옥자보로칸-4,8-디온
Figure 112014065561338-pct00048
6.3 g (28.4 mmol)의 중간체 5A 및 4.2 g (28.4 mmol) 2,2'-(메틸이미노)디아세트산을 45 ml DMSO 및 400 ml 톨루엔의 혼합물에 용해시키고, 16 시간동안 딘-스탁 트랩을 이용하여 환류시켰다. 증발 후, 잔사를 에틸 아세테이트에 취한 후, 물로 3회 및 염수로 1회 세척하였다. 유기상을 황산마그네슘에서 건조시키고, 약 200 ml의 부피가 되도록 증발시켰다. 침전된 백색 고체를 여과하고, 에틸 아세테이트로 세척한 뒤, 진공에서 건조하여 표제 화합물의 제1 산물 (5.52 g)을 수득하였다. 모액을 증발시키고, 실리카겔층 상에서 용리제로 사이클로헥산/0-100% 에틸 아세테이트를 사용하여 플래쉬 크로마토그래피하여 제2 산물 (3.32 g)을 수득하였다.
수율: 8.84 g (LC-MS에 의한 총 순도 92.5%, 이론치의 87%)
LC-MS (방법 2): Rt = 0.93 min; MS (ESIpos): m/z = 334 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 7.42 (s, 1H), 7.26 (s, 1H), 6.76 (s, 1H), 4.40 (d, 2H), 4.17 (d, 2H), 3.92 (s, 3H), 2.63 (s, 3H), 2.42 (s, 3H) ppm.
중간체 7A
에틸 4-아미노피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-카복실레이트
Figure 112014065561338-pct00049
에탄올 (124.8 ml) 중 4-아미노피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-카보니트릴 (3.9 g, 24.5 mmol; PCT 국제특허출원 WO 2007/064883호에 기술된 바와 같이 제조)의 용액을 진한 황산 (62.4 ml)과 80 ℃에서 밤새 교반하였다. rt로 냉각 후, 반응 혼합물을 800 g의 얼음에 붓고, 농축 수산화나트륨 수용액으로 pH 6-7로 하였다. 에틸 아세테이트 (500 ml) 및 디클로로메탄 (500 ml)을 현탁물에 첨가하고, 생성된 혼합물을 키젤구어를 통해 여과하였다. 유기층을 수성층에서 분리하였다. 고체를 온수 (1 L)에 용해시키고, 수성층을 에틸 아세테이트로 2회 추출하였다. 모아진 유기층을 황산나트륨에서 건조시키고, 증발시켰다. 잔사를 이소프로판올/디에틸에테르 혼합물로 연마하고, 고체를 여과하여 2.5 g (이론치의 49%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 2): Rt = 0.59 min; MS (ESIpos): m/z = 206 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 8.11-7.97 (m, 3H), 7.88 (s, 1H), 7.34 (br. s, 1H), 4.27 (q, 2H), 1.30 (t, 3H) ppm.
중간체 8A
(4-아미노피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-일)메탄올
Figure 112014065561338-pct00050
THF (30 ml) 중 중간체 7A (3.0 g, 14.5 mmol)의 빙냉각 용액을 THF (58 ml) 중 리튬 트리에틸보로하이드라이드 1 M 용액으로 처리하고, rt에서 45 분동안 교반하였다. 이어 반응 혼합물을 0 ℃로 냉각하고, 메탄올로 퀀칭한 후, rt로 서서히 가온하고, 키젤구어에 흡착시켰다. 실리카겔 상에서 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 (디클로로메탄/메탄올 20:1 → 4:1 구배) 2.21 g (이론치의 92.5%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 3): Rt = 1.46 min; MS (ESIpos): m/z = 164 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 7.75 (s, 1H), 7.64 (br. s, 2H), 7.50 (br. d, 1H), 6.79 (br. d, 1H), 5.01 (t, 1H), 4.50 (d, 2H) ppm.
중간체 9A
tert-부틸 [2-시아노-4-(하이드록시메틸)-1H-피롤-1-일]카바메이트
Figure 112014065561338-pct00051
아르곤하에, THF (13.3 ml) 중 메틸마그네슘 브로마이드의 1 M 용액을 -60 ℃로 냉각시킨 THF (37 ml) 중 tert-부틸 (4-브로모-2-시아노-1H-피롤-1-일)카바메이트 (3.7 g, 12.09 mmol; PCT 국제특허출원 WO 2007/064883, 중간체 AAE, 단계 3호에 기술된 바와 같이 제조)의 용액에 15 분간 첨가하였다. 30 분 후, 헥산중 n-부틸리튬의 1.6 M 용액 (15.1 ml, 24.2 mmol)을 반응에 10 분간 첨가하고, 생성된 혼합물을 -60 ℃ 내지 -40 ℃에서 1 시간동안 교반하였다. 이어, 파라포름알데하이드 (1.09 g, 36.3 mmol)를 반응에 첨가하고, 반응 혼합물을 rt로 서서히 가온한 다음, 밤새 교반하였다. 포화 염화암모늄 수용액으로 퀀칭한 후, 수성층을 에틸 아세테이트로 2회 추출하였다. 모아진 유기상을 포화 염화나트륨 수용액으로 세척한 후, 황산나트륨에서 건조시키고, 증발시켰다. 실리카겔 상에서 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 (사이클로헥산/에틸 아세테이트 2:1 → 1:1) 2.04 g (이론치의 69%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 4): Rt = 0.70 min; MS (ESIpos): m/z = 238 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.79 (br. s, 1H), 7.09 (d, 1H), 6.86 (d, 1H), 4.97 (t, 1H), 4.28 (d, 2H), 1.45 (s, 9H) ppm.
중간체 10A
6-(메톡시메틸)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민
Figure 112014065561338-pct00052
방법 1 :
THF (25 ml) 중 중간체 8A (1.3 g, 7.9 mmol)의 용액을 티오닐 클로라이드 (1.15 ml, 15.8 mmol)로 처리하고, rt에서 2 시간동안 교반하였다. 증발 후, 잔사를 메탄올 (25 ml)에 용해시키고, 소듐 아세테이트 (1.3 g, 15.8 mmol)로 처리하였다. 혼합물을 65 ℃에서 3 시간동안 교반한 후, 다시 증발시켰다. 실리카겔 상에서 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 (디클로로메탄/메탄올 100:2) 787 mg (이론치의 55%)의 표제 화합물을 수득하였다.
방법 2 :
1,4-디옥산중 염화수소의 4 M 용액 (15 ml) 중 중간체 9A (6.14 g, 25.88 mmol)의 용액을 rt에서 5 시간동안 교반하였다. 메탄올 (73 ml)로 희석한 후, 교반을 rt에서 밤새 계속하였다. 이어, 포타슘 포스페이트 (54.9 g, 258.65 mmol) 및 포름아미디늄 아세테이트 (13.46 g, 129.32 mmol)를 첨가하고, 생성된 혼합물을 65 ℃에서 17 시간동안 교반하였다. 반응 혼합물을 증발시키고, 포화 염화나트륨 수용액을 첨가한 후, 혼합물을 디클로로메탄에 이어 에틸 아세테이트로 추출하였다. 모아진 유기상을 황산나트륨에서 건조시키고, 증발시켰다. 실리카겔 상에서 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 (디클로로메탄/메탄올 40:1 → 20:1) 2.36 g (이론치의 49%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 3): Rt = 1.72 min; MS (ESIpos): m/z = 179 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 7.77 (s, 1H), 7.69 (br. s, 2H), 7.57 (s, 1H), 6.81 (s, 1H), 4.42 (s, 2H), 3.25 (s, 3H) ppm.
중간체 11A
4-아미노-6-(메톡시메틸)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-카브알데하이드
Figure 112014065561338-pct00053
포스포릴 클로라이드 (13.7 ml, 147.18 mmol)를 DMF (80 ml) 중 중간체 10A (5.24 g, 29.43 mmol)의 용액에 0 ℃에서 첨가하였다. 생성된 혼합물을 60 ℃에서 8 시간동안 교반하고, 물로 주의하여 퀀칭한 후, 4 M 수산화나트륨 수용액으로 중화하였다. 수성층을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 모아진 유기상을 포화 염화나트륨 수용액으로 세척한 후, 황산마그네슘에서 건조시키고, 증발시켰다. 메탄올 (50 ml) 중 잔사의 용액을 소듐 아세테이트 (2.41 g, 29.43 mmol)로 처리하고, 밤새 환류시켰다. 반응 혼합물을 물로 희석한 다음, 에틸 아세테이트로 추출하였다. 모아진 유기상을 포화 염화나트륨 수용액으로 세척한 후, 황산마그네슘에서 건조시키고, 증발시켜 2.66 g의 조생성물을 얻고 추가 정제없이 다음 단계에 사용하였다.
LC-MS (방법 4): Rt = 0.50 min; MS (ESIpos): m/z = 207 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.35 (s, 1H), 8.20 (br. s, 2H), 8.07 (s, 1H), 7.06 (s, 1H), 4.72 (s, 2H), 3.39 (s, 3H) ppm.
중간체 12A
4-아미노-5-브로모-6-(메톡시메틸)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-카브알데하이드
Figure 112014065561338-pct00054
-30 ℃로 냉각시킨 DMF (30 ml) 중 중간체 11A (조, 2.66 g)의 용액을 DMF (14 ml) 중 N-브로모숙신이미드 (NBS; 2.52 g, 14.19 mmol)의 용액으로 처리하였다. 생성된 혼합물을 0 ℃로 서서히 가온하였다. 1 시간 후, 혼합물을 rt로 가온하고, 15 분간 더 교반한 후, 1 M 티오황산나트륨 수용액으로 퀀칭하였다. 침전을 여과하고, 에틸 아세테이트로 세척한 뒤, 1.1 g (100% 순도, 이론치의 30%)을 표제 화합물의 제1 산물로서 얻었다. 남은 여액을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 모아진 유기상을 포화 염화나트륨 수용액으로 세척한 후, 황산나트륨에서 건조시키고, 증발시켰다. 잔사를 실리카겔 상에서 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 (사이클로헥산/에틸 아세테이트 1:1 → 1:3) 1.39 g (70% 순도, 이론치의 26%)의 표제 화합물을 더 수득하였다.
LC-MS (방법 2): Rt = 0.67 min; MS (ESIpos): m/z = 283/285 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.36 (s, 1H), 8.63 (br. s, 1H), 8.13 (s, 1H), 7.23 (br. s, 1H), 4.64 (s, 2H), 3.26 (s, 3H) ppm.
중간체 13A
4-아미노-6-(메톡시메틸)-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-카브알데하이드
Figure 112014065561338-pct00055
아르곤하에, 탈기한 0.5 M 수성 포타슘 포스페이트 용액 (9.9 ml)을 탈기한 THF (28.4 ml) 중 중간체 12A (710 mg, 2.49 mmol), 중간체 5A (921 mg, 3.73 mmol) 및 (2'-아미노바이페닐-2-일)(클로로)팔라듐-디사이클로헥실(2',4',6'-트리이소프로필바이페닐-2-일)포스핀 (1:1; 196 mg, 249 μmol; S. L. Buchwald et al., J. Am. Chem. Soc. 132 (40), 14073-14075 (2010) 참조)의 용액에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 60 ℃에서 2 시간동안 교반한 후, 증발시켰다. 잔사를 실리카겔 상에서 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 (사이클로헥산/에틸 아세테이트 5:1 → 1:1) 550 mg (이론치의 51%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 2): Rt = 1.06 min; MS (ESIpos): m/z = 383 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.50 (s, 1H), 8.43 (br. s, 1H), 8.21 (s, 1H), 7.42 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.87 (s, 1H), 6.09 (br. s, 1H), 4.58 (s, 2H), 3.96 (s, 3H), 3.19 (s, 3H), 2.46 (s, 3H) ppm.
중간체 14A
6-(에톡시메틸)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민
Figure 112014065561338-pct00056
방법 1 :
40 ml THF 중 2 g (12.2 mmol)의 중간체 8A의 현탁물에 1.78 ml (24.4 mmol) 티오닐 클로라이드를 rt에서 20 초 내로 첨가하였다. 혼합물을 1.5 시간동안 교반한 후, 증발건고하고, 잔사를 40 ml 에탄올에 용해시켰다. 2 g (24.4 mmol) 소듐 아세테이트를 첨가하고, 혼합물을 70 ℃에서 1 시간 45 분동안 교반하였다. 반응 혼합물을 다시 증발시킨 후, 포화 탄산수소나트륨 수용액을 첨가하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트로 5회 추출하였다. 모아진 유기상을 포화 염화나트륨 수용액으로 세척한 후, 황산마그네슘에서 건조시키고, 증발건고하여 2.02 g의 조생성물을 얻고, 용리제로 디클로로메탄/메탄올 (0-2%)을 사용하여 실리카겔 상에서 컬럼 크로마토그래피로 정제하였다.
수율: 1.37 g (이론치의 58%).
방법 2 :
단계 1: 1,4-디옥산 (5 ml) 중 중간체 9A (2.3 g, 9.69 mmol)의 용액을 1,4-디옥산중 염화수소의 4 M 용액 (24 ml, 96.9 mmol)으로 처리하고, rt에서 130 분동안 교반하였다. 이어, 현탁물을 여과하고, 침전을 1,4-디옥산 (5 ml)으로 세척한 후, 진공에서 건조하여 1.01 g (이론치의 54%)의 중간체 화합물 1-아미노-4-(클로로메틸)-1H-피롤-2-카보니트릴 하이드로클로라이드를 수득하였다.
단계 2 : 단계 1로부터 새로 제조한 1-아미노-4-(클로로메틸)-1H-피롤-2-카보니트릴 하이드로클로라이드 (0.3 g, 1.82 mmol)를 에탄올 (10 ml)에 용해시키고, rt에서 5 분동안 교반하였다. 맑은 용액을 포름아미딘 아세테이트 (813 mg, 7.81 mmol) 및 포타슘 포스페이트 (1.66 g, 7.81 mmol)로 처리하고, 먼저 rt에서 3 일동안, 이후 80 ℃에서 10.5 시간동안 교반하였다. 추가의 포름아미딘 아세테이트 (488 mg, 4.69 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 80 ℃에서 18 시간 더 교반하였다. 이어 혼합물을 rt로 냉각하고, 물 및 에틸 아세테이트를 첨가하였다. 유기상을 분리하고, 수성상을 에틸 아세테이트로 2회 추출하였다. 모아진 유기상을 포화 염화나트륨 수용액으로 세척한 후, 황산마그네슘에서 건조시키고, 증발시켰다. 잔사를 메탄올 및 디클로로메탄의 혼합물에 용해시키고, 규조토에 흡착시키고, 진공에서 건조하고, 마지막으로 실리카겔 상에서 크로마토그래피에 의해 정제하여 (구배 0-10% 메탄올/디클로로메탄) 260 mg (이론치의 78%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 3): Rt = 2.02 min; MS (ESIpos): m/z = 193 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 7.77 (s, 1H), 7.59-7.74 (br. s, 2H), 7.56 (s, 1H), 6.82 (s, 1H), 5.76 (s, 1H), 4.46 (s, 2H), 3.46 (q, 2H), 1.13 (t, 3H) ppm.
중간체 15A
4-아미노-6-(에톡시메틸)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-카브알데하이드
Figure 112014065561338-pct00057
40 ml 무수 DMF 중 2.1 g (10.9 mmol)의 중간체 14A의 용액에 5.1 ml (54.6 mmol) 포스포릴 클로라이드를 0 ℃에서 아르곤 분위기하에 적가하였다. 혼합물을 60 ℃에서 10 시간동안 교반하였다. 이어, 물을 주의하여 첨가하고, 혼합물을 주변 온도에서 모든 반응 중간체가 파괴될 때까지 (HPLC 대조) 교반하였다. 산성 용액을 1 M 수산화나트륨 수용액으로 중화하고, 에틸 아세테이트로 3회 추출하였다. 모아진 유기상을 포화 염화나트륨 수용액으로 세척한 후, 황산마그네슘에서 건조시키고, 감압하에 증발시켰다.
수율: 1.94 g (순도 90%, 이론치의 81%)
LC-MS (방법 5): Rt = 1.49 min; MS (ESIpos): m/z = 221 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.35 (s, 1H), 8.14-8.26 (m, 2H), 8.07 (s, 1H), 7.07 (s, 1H), 4.76 (s, 2H), 3.58 (q, 2H), 1.20 (t, 3H) ppm.
중간체 16A
4-아미노-5-브로모-6-(에톡시메틸)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-카브알데하이드
Figure 112014065561338-pct00058
1.9 L DMF 중 73 g (0.33 mol)의 중간체 15A의 용액에 200 ml DMF 중 65 g (0.37 mol) NBS의 용액을 -15 ℃에서 적가하였다. 혼합물을 0 ℃로 가온하고, 이 온도에서 3 시간동안 교반하였다. 반응 혼합물을 2% 티오황산나트륨 수용액에 교반하에 붓고, 침전을 여과한 후, 물로 세척하고, 진공중에 오산화인에서 건조시켰다.
수율: 85.6 g (이론치의 86%)
LC-MS (방법 2): Rt = 0.76 min; MS (ESIpos): m/z = 299/301 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.36 (s, 1H), 8.62 (br. s, 1H), 8.13 (s, 1H), 7.22 (br. s, 1H), 4.68 (s, 2H), 3.49 (q, 2H), 1.10 (t, 3H) ppm.
중간체 17A
4-아미노-6-(에톡시메틸)-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-카브알데하이드
Figure 112014065561338-pct00059
아르곤 분위기하에, 714 mg (순도 85%, 2.03 mmol)의 중간체 16A, 946 mg (2.84 mmol)의 중간체 6A 및 160 mg (0.2 mmol) (2'-아미노바이페닐-2-일)(클로로)팔라듐디사이클로헥실(2',4',6'-트리이소프로필바이페닐-2-일)포스핀 (1:1; S. L. Buch-wald et al., J. Am. Chem. Soc. 132 (40), 14073-14075 (2010) 참조)를 15.5 ml THF에 현탁시켰다. 이어, 15.5 ml의 탈기한 0.5 M 수성 포타슘 포스페이트 용액을 첨가하고, 혼합물을 50 ℃에서 16 시간동안 교반하였다. 물을 첨가한 후, 혼합물을 에틸 아세테이트로 추출하고, 모아진 유기상을 황산마그네슘에서 건조시키고, 감압하에 증발시켰다. 잔사를 실리카겔 (100 g) 상에서 용리제로 10-50% 에틸 아세테이트/ 사이클로헥산을 사용하여 컬럼 크로마토그래피로 정제하였다.
수율: 452 mg (HPLC에 의해 75% 순수, 이론치의 42%)
LC-MS (방법 5): Rt = 2.38 min; MS (ESIpos): m/z = 397 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.50 (s, 1H), 8.42 (br. s, 1H), 8.21 (s, 1H), 7.43 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.87 (s, 1H), 6.07 (br. s, 1H), 4.63 (s, 2H), 3.96 (s, 3H), 3.40 (q, 2H), 2.46 (s, 3H), 1.02 (t, 3H) ppm.
중간체 18A
(4-아미노-5,7-디브로모피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-일)메탄올
Figure 112014065561338-pct00060
THF (100 ml) 중 중간체 8A (5 g, 30.4 mmol)의 용액을 1,3-디브로모-5,5-디메틸히단토인 (9.58 g, 33.5 mmol)으로 처리하고, rt에서 2 시간동안 교반하였다. 침전을 여과하고, 진공에서 건조하여 6.60 g (이론치의 64%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 2): Rt = 0.56 min; MS (ESIpos): m/z = 321/323/325 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 8.23 (br. s, 1H), 7.96 (s, 1H), 6.94 (br. s, 1H), 5.09 (br. s, 1H), 4.43 (s, 2H) ppm.
중간체 19A
(4-아미노-5-브로모피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-일)메탄올
Figure 112014065561338-pct00061
THF (800 ml) 중 중간체 18A (3.7 g, 11.5 mmol)의 현탁물을 완전히 용해될 때까지 교반하에 가열하였다. 이어 혼합물을 -78 ℃로 냉각하고, 헥산중 n-부틸리튬의 1.6 M 용액 (20 ml, 32.1 mmol)을 적가하였다. 5 분 후, 추가 분량의 1.6 M n-부틸리튬 용액 (1.5 ml, 2.29 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 -78 ℃에서 5 분동안 교반하고, 메탄올 (5 ml)로 퀀칭한 후, rt로 가온하였다. 반응 혼합물을 포화 염화암모늄 수용액, 포화 탄산수소나트륨 수용액, 포화 염화나트륨 수용액 및 에틸 아세테이트로 희석하였다. 상 분리 후, 유기층을 포화 염화나트륨 수용액으로 세척하였다. 모아진 수성상을 에틸 아세테이트로 재추출하였다. 모아진 유기상을 포화 염화나트륨 수용액으로 다시 세척한 뒤, 황산마그네슘에서 건조시키고, 증발시켜 2.87 g의 조생성물을 얻고 추가 정제없이 후속 단계에 사용하였다.
LC-MS (방법 3): Rt = 1.73 min; MS (ESIpos): m/z = 243/245 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 8.41-7.89 (br. s, 1H), 7.82 (s, 1H), 7.66 (s, 1H), 7.13-6.48 (br. s, 1H), 5.11 (t, 1H), 4.45 (d, 2H) ppm.
중간체 20A
[4-아미노-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-일]메탄올
Figure 112014065561338-pct00062
THF/물 혼합물 (10:1; 80 ml) 중의 중간체 19A (70% 순도, 2.52 g, 7.26 mmol), 중간체 6A (3.63 g, 10.9 mmol) 및 불화세슘 (5.51 g, 36.3 mmol)의 현탁물을 아르곤하에 탈기하였다. 4-(디-tert-부틸포스피노)-N,N-디메틸아닐린디클로로팔라듐 (2:1; 176 mg, 0.248 mmol)을 첨가하고, 생성된 혼합물을 다시 탈기한 다음, 50 ℃에서 16 시간동안 교반하였다. 이어 반응 혼합물을 포화 염화나트륨 수용액으로 세척한 후, 유기층을 분리하고, 황산마그네슘에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 잔사를 메탄올에 현탁시키고, 생성된 고체를 여과한 후, 진공에서 건조하여 1.97 g (90% 순도, 이론치의 72%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 2): Rt = 0.85 min; MS (ESIpos): m/z = 340 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 7.91 (s, 1H), 7.5-8.1 (br. s, 1H), 7.72 (s, 1H), 7.35 (s, 1H), 7.30 (s, 1H), 6.84 (s, 1H), 5.5-6.0 (br. s, 1H), 5.06 (t, 1H), 4.49 (d, 2H), 3.95 (s, 3H), 2.45 (s, 3H) ppm.
중간체 21A
6-(메톡시메틸)-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민
Figure 112014065561338-pct00063
디클로로메탄 (12 ml) 중 중간체 20A (400 mg, 1.17 mmol)의 용액을 티오닐 클로라이드 (128 μl, 1.76 mmol)로 처리하고, rt에서 15 분동안 교반하였다. 증발 후, 잔사를 메탄올 (12 ml)에 취하고, DIPEA (409 μl, 2.35 mmol)로 처리하였다. 혼합물을 밤새 환류시킨 후, 다시 증발시켰다. 실리카겔 상에서 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 (디클로로메탄/메탄올 98:2 → 95:5) 388 mg (이론치의 93%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 2): Rt = 1.00 min; MS (ESIpos): m/z = 355 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 7.93 (s, 1H), 7.82 (s, 1H), 7.35 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.84 (s, 1H), 4.38 (s, 2H), 3.95 (s, 3H), 3.22 (s, 3H), 2.45 (s, 3H) ppm.
중간체 22A
6-(에톡시메틸)-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민
Figure 112014065561338-pct00064
디클로로메탄 (5 ml) 중의 중간체 20A (200 mg, 587 μmol)를 티오닐 클로라이드 (64 μl, 881 μmol)로 처리하고, rt에서 15 분동안 교반하였다. 증발 후, 잔사를 에탄올 (5 ml)에서 1 시간동안 환류시킨 후, DIPEA (204 μl, 1.17 mmol)로 처리하고, 다시 밤새 환류시켰다. 반응 혼합물을 증발시키고, 조생성물을 실리카겔 상에서 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 (디클로로메탄/메탄올 98:2 → 95:5) 202 mg (이론치의 90%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 5): Rt = 2.32 min; MS (ESIpos): m/z = 369 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 8.31-7.59 (br. s, 1H), 7.93 (s, 1H), 7.81 (s, 1H), 7.35 (s, 1H), 7.30 (s, 1H), 6.84 (s, 1H), 6.20-5.50 (br. s, 1H), 4.41 (s, 2H), 3.95 (s, 3H), 3.41 (q, 2H), 2.45 (s, 3H), 1.08 (t, 3H) ppm.
중간체 23A
tert-부틸 4-{[4-아미노-6-(하이드록시메틸)-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일]메틸}피페라진-1-카복실레이트
Figure 112014065561338-pct00065
아세트산 (136.8 ml) 중 중간체 20A (9.5 g, 27.9 mmol)의 용액을 tert-부틸 피페라진-1-카복실레이트 (6.24 g, 33.49 mmol) 및 37% 수성 포름알데하이드 용액 (2.5 ml, 33.49 mmol)으로 처리하였다. 혼합물을 60 ℃에서 2.5 시간동안 교반하였다. 증발 후, 잔사를 에틸 아세테이트에 취한 후, 혼합물을 포화 탄산수소나트륨 수용액으로 2회 세척하고, 황산나트륨에서 건조시키고, 증발시켰다. 잔사를 끓는 에탄올 (100 ml)에서 연마하였다. 고체를 여과하고, 에탄올 및 디에틸에테르로 세척하여 9.70 g (이론치의 58%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 2): Rt = 0.88 min; MS (ESIpos): m/z = 539 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ = 7.94 (s, 1H), 7.13-7.35 (m, 2H, CHCl3 피크와 오버랩), 6.67 (s, 1H), 5.86 (br. s, 1H), 5.54 (br. s, 2H), 4.68 (s, 2H), 4.08 (s, 2H), 4.00 (s, 3H), 3.45 (br. s, 4H), 2.59-2.48 (m, 7H), 1.45 (s, 9H) ppm.
중간체 24A
tert-부틸 4-({4-아미노-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)-6-[(2-메톡시-2-옥소에톡시)메틸]피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일}메틸)피페라진-1-카복실레이트
Figure 112014065561338-pct00066
디클로로메탄 (12 ml) 중 중간체 23A (300 mg, 556 μmol)의 용액을 티오닐 클로라이드 (81 μl, 1.11 mmol)로 처리하고, rt에서 15 분동안 교반하였다. 증발 후, 잔사를 새로 증류시킨 메틸글리콜레이트 (2.5 ml)에 용해시키고, DIPEA (485 μl, 2.78 mmol)로 처리하였다. 혼합물을 70 ℃에서 2 시간동안 교반한 뒤, 다시 증발시킨 후, 과량의 메틸글리콜레이트를 증류 제거하였다. 잔사를 실리카겔 상에서 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 (사이클로헥산/에틸 아세테이트 1:5) 136 mg (이론치의 33%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 2): Rt = 0.88 min; MS (ESIpos): m/z = 611 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 7.99 (s, 1H), 7.39 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.85 (s, 1H), 4.58 (s, 2H), 4.11 (s, 2H), 3.96 (s, 3H), 3.93 (s, 2H), 3.57 (s, 3H), 3.30-3.24 (m, 4H), 2.45-2.38 (m, 7H), 1.39 (s, 9H) ppm.
중간체 25A
tert-부틸 4-{[4-아미노-6-포르밀-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일]메틸}피페라진-1-카복실레이트
Figure 112014065561338-pct00067
디클로로메탄 (4.2 ml) 중 중간체 23A (300 mg, 556 μmol)의 용액을 데스-마틴 퍼이오디난 (1,1,1-트리아세톡시-1,1-디하이드로-1,2-벤즈요오독솔-3(1H)-온; 307 mg, 724 μmol)로 처리하고, rt에서 2 시간동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 탄산수소나트륨 수용액 및 포화 티오황산나트륨 수용액 (1:1)으로 퀀칭하고, rt에서 30 분동안 교반하였다. 수성층을 디클로로메탄으로 3회 추출하고, 모아진 유기층을 황산마그네슘에서 건조시키고, 증발시켰다. 실리카겔 상에서 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 (사이클로헥산/에틸 아세테이트 1:1 → 100% 에틸 아세테이트) 273 mg (이론치의 87%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 2): Rt = 0.87 min; MS (ESIpos): m/z = 537 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.02 (s, 1H), 8.44-8.18 (br. s, 1H), 8.08 (s, 1H), 7.51 (s, 1H), 7.32 (s, 1H), 6.88 (s, 1H), 6.01-5.74 (br. s, 1H), 4.16 (s, 2H), 3.96 (s, 3H), 3.30-3.22 (m, 4H), 2.48-2.40 (m, 7H), 1.38 (s, 9H) ppm.
중간체 26A
4-아미노-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)-7-(피페라진-1-일메틸)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-카브알데하이드 비스(포르미에이트)
Figure 112014065561338-pct00068
THF (3.9 ml) 중 중간체 23A (80 mg, 148 μmol)의 용액을 데스-마틴 퍼이오디난 (1,1,1-트리아세톡시-1,1-디하이드로-1,2-벤즈요오독솔-3(1H)-온; 94 mg, 222 μmol)으로 처리하고, rt에서 30 분동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 탄산수소나트륨 수용액 및 포화 티오황산나트륨 수용액 (1:1)으로 퀀칭하였다. 수성층을 에틸 아세테이트로 3회 추출하고, 모아진 유기층을 황산마그네슘에서 건조시키고, 증발시켰다. 잔사를 1,4-디옥산중 염화수소의 4 M 용액 (4 ml)에 용해시키고, rt에서 1 시간동안 교반하였다. 증발 후, 잔사를 제조용 RP-HPLC로 정제하여 (Reprosil C18, 구배 10-95% 아세토니트릴/0.1% 수성 포름산) 34 mg (이론치의 52%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 2): Rt = 0.78 min; MS (ESIpos): m/z = 437 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.02 (s, 1H), 8.29 (br. s, 2H), 8.09 (s, 1H), 7.50 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.88 (s, 1H), 4.17 (s, 2H), 3.96 (s, 3H), 2.90-2.81 (m, 4H), 2.63-2.56 (m, 4H), 2.46 (s, 3H) ppm.
중간체 27A
tert-부틸 4-({4-아미노-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)-6-[(3-옥소피페라진-1-일)메틸]피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일}메틸)피페라진-1-카복실레이트
Figure 112014065561338-pct00069
THF (4.6 ml) 중 중간체 25A (185 mg, 344 μmol)의 용액을 2-옥소피페라진 (344 mg, 3.4 mmol), 소듐 트리아세톡시보로하이드라이드 (365 mg, 1.7 mmol) 및 아세트산 (39 μl, 689 μmol)으로 처리하였다. 생성된 혼합물을 rt에서 2 시간동안 교반한 후, 키젤구어에 흡착시키고, 실리카겔 상에서 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 (디클로로메탄 → 디클로로메탄/메탄올 100:8) 221 mg (정량적)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 4): Rt = 0.77 min; MS (ESIpos): m/z = 621 (M+H)+.
중간체 28A
N-에틸에탄아미늄 4-아미노-7-{[4-(tert-부톡시카보닐)피페라진-1-일]카보닐}-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-카복실레이트
Figure 112014065561338-pct00070
THF/물 (10:1, 4.85 ml) 중 중간체 25A (70 mg, 130 μmol)의 용액을 THF (521 μl, 1.04 mmol) 중 2-메틸-2-부텐의 2 M 용액 및 인산이수소나트륨 (107 mg, 783 μmol)으로 처리하고, rt에서 5 분동안 교반하였다. 아염소산나트륨 (70 mg, 783 mmol)을 첨가하고, 생성된 혼합물을 rt에서 밤새 교반하고 물로 희석한 후, 수성상을 에틸 아세테이트로 3회 추출하였다. 모아진 유기층을 황산나트륨에서 건조시키고, 증발시키고, 잔사를 제조용 RP-HPLC로 정제하여 (XBridge C18, 구배 5-50% 아세토니트릴/물 + 0.05% 디에틸아민) 18 mg (이론치의 21%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 1): Rt = 1.14 min; MS (ESIpos): m/z = 567 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): inter al. δ = 8.26-7.89 (br. s, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 7.28 (s, 1H), 6.83 (s, 1H), 5.64-5.33 (br. s, 1H), 3.95 (s, 3H), 2.80 (q, 4H), 2.45 (s, 3H), 1.40 (s, 9H), 1.09 (t, 6H) ppm.
중간체 29A
tert-부틸 4-{[4-아미노-6-(아지도메틸)-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일]메틸}피페라진-1-카복실레이트
Figure 112014065561338-pct00071
디클로로메탄 (7.5 ml) 중 중간체 23A (150 mg, 0.278 mmol)의 용액을 티오닐 클로라이드 (40 μl, 0.56 mmol)로 처리하고, rt에서 15 분동안 교반하였다. 증발 후, 잔사를 DMF (6 ml)에 용해시키고, 소듐 아지드 (362 mg, 5.57 mmol) 및 요오드화나트륨 (208 mg, 1.39 mmol)으로 처리하였다. 혼합물을 1 시간동안 80 ℃로 가열한 후, 물로 희석한 다음, 에틸 아세테이트로 3회 추출하였다. 모아진 유기층을 물, 포화 염화나트륨 수용액으로 세척하고, 황산마그네슘에서 건조시키고, 증발시켰다. 실리카겔 상에서 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 (사이클로헥산/에틸 아세테이트 98:2 → 100% 에틸 아세테이트) 95.8 mg (이론치의 57%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 4): Rt = 0.99 min; MS (ESIpos): m/z = 564 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): d = 8.20-7.80 (br. s, 1H), 8.01 (s, 1H), 7.39 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.86 (s, 1H), 6.05-5.55 (br. s, 1H), 4.50 (s, 2H), 3.96 (s, 3H), 3.94 (s, 2H), 3.32-3.25 (m, 4H), 2.45 (s, 3H), 2.43-2.36 (m, 4H), 1.39 (s, 9H) ppm.
중간체 30A
tert-부틸 4-{[6-(아세트아미도메틸)-4-아미노-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일]메틸}피페라진-1-카복실레이트
Figure 112014065561338-pct00072
메탄올 (32 ml) 중 중간체 29A (320 mg, 567 μmol), 10% Pd/C (320 mg) 및 아세트산 무수물 (106 μl, 1.13 mmol)의 혼합물을 90 분동안 1 atm의 수소하에 rt에서 교반하였다. 이어 혼합물을 키젤구어를 통해 여과하고, 여액을 증발시켰다. 실리카겔 상에서 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 (사이클로헥산/에틸 아세테이트 1:1 → 100% 에틸 아세테이트) 440 mg (정량적)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 2): Rt = 0.91 min; MS (ESIpos): m/z = 580 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 8.02-7.97 (m, 2H), 7.38 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.85 (s, 1H), 4.27 (br. d, 2H), 3.95 (s, 3H), 3.89 (s, 2H), 3.31-3.24 (m, 4H), 2.45 (s, 3H), 2.43-2.36 (m, 4H), 1.74 (s, 3H), 1.39 (s, 9H) ppm.
중간체 31A
7-[(4-아세틸피페라진-1-일)메틸]-4-아미노-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-카브알데하이드
Figure 112014065561338-pct00073
분자체 (4Å)를 함유하는 디클로로메탄 (4 ml) 중 실시예 55 (678 mg, 순도 89%, 1.26 mmol)의 용액을 데스-마틴 퍼이오디난 (1,1,1-트리아세톡시-1,1-디하이드로-1,2-벤즈요오독솔-3(1H)-온; 623 mg, 1.47 mmol)으로 처리하고, rt에서 5 분동안 교반하였다. 이어 반응 혼합물을 규조토에 흡착시키고, 실리카겔 상에서 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 (30-100% 에틸 아세테이트/사이클로헥산, 이어 0-10% 메탄올/디클로로메탄로 구배) 449 mg (이론치의 49%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 4): Rt = 0.70 min; MS (ESIpos): m/z = 479 (M+H)+.
중간체 32A
4-{[4-아미노-6-(아지도메틸)-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일]메틸}피페라진-2-온
Figure 112014065561338-pct00074
디클로로메탄 (3.5 ml) 중 실시예 13 (59 mg, 130 μmol)의 용액을 티오닐 클로라이드 (19 μl, 261 μmol)로 처리하고, rt에서 15 분동안 교반하였다. 증발 후, 잔사를 DMF (2.8 ml)에 용해시키고, 요오드화나트륨 (97 mg, 652 μmol) 및 소듐 아지드 (169 mg, 2.6 mmol)로 처리하였다. 혼합물을 80 ℃에서 1 시간동안 교반하였다. 포화 염화나트륨 수용액으로 희석한 후, 수성상을 에틸 아세테이트로 4회 추출하고, 모아진 유기층을 황산마그네슘에서 건조시키고, 증발시켰다. 실리카겔 상에서 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 (디클로로메탄/메탄올 98:2 → 90:10) 35 mg (이론치의 56%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 5): Rt = 2.04 min; MS (ESIpos): m/z = 478 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 8.02 (s, 1H), 7.75 (br. s, 1H), 7.41 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.86 (s, 1H), 4.51 (s, 2H), 4.01 (s, 2H), 3.96 (s, 3H), 3.16-3.08 (m, 2H), 3.04-2.98 (m, 2H), 2.65-2.58 (m, 2H), 2.45 (s, 3H) ppm.
중간체 33A
4-아미노-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)-7-(모르폴린-4-일메틸)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-카브알데하이드
Figure 112014065561338-pct00075
분자체 (4Å)를 함유하는 디클로로메탄 (5 ml) 중 실시예 50 (710 mg, 순도 70%, 1.13 mmol)의 용액을 데스-마틴 퍼이오디난 (1,1,1-트리아세톡시-1,1-디하이드로-1,2-벤즈요오독솔-3(1H)-온; 623 mg, 1.47 mmol)으로 처리하고, rt에서 5 분동안 교반하였다. 이어 반응 혼합물을 규조토에 흡착시키고, 실리카겔 상에서 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 (30-100% 에틸 아세테이트/사이클로헥산의 구배) 386 mg (이론치의 72%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 2): Rt = 0.76 min; MS (ESIpos): m/z = 438 (M+H)+.
중간체 34A
(4-아미노-7-브로모피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-일)메탄올
Figure 112014065561338-pct00076
THF (1 ml) 중 1,3-디브로모-5,5-디메틸히단토인 (87 mg, 0.305 mmol)의 용액을 THF (4 ml) 및 메탄올 (2 ml) 중간체 8A (100 mg, 0.609 mmol)의 용액에 -78 ℃에서 적가하였다. 혼합물을 -78 ℃에서 16 시간동안 교반한 뒤, 물로 희석한 다음, 에틸 아세테이트로 추출하였다. 모아진 유기층을 포화 염화나트륨 수용액으로 세척한 후, 황산마그네슘에서 건조시키고, 증발시켰다. 실리카겔 상에서 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 (디클로로메탄/메탄올 20:1 → 10:1) 55 mg (이론치의 32%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 3): Rt = 1.71 min; MS (ESIpos): m/z = 243/245 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 7.74-7.94 (m, 3H), 7.04 (s, 1H), 5.12 (t, 1H), 4.48 (d, 2H) ppm.
중간체 35A
7-브로모-6-({[tert-부틸(디메틸)실릴]옥시}메틸)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민
Figure 112014065561338-pct00077
DMF (11 ml) 중 중간체 34A (885 mg, 3.64 mmol)의 용액을 tert-부틸디메틸실릴 클로라이드 (823 mg, 5.46 mmol) 및 이미다졸 (743 mg, 10.92 mmol)로 처리하고, rt에서 2 시간동안 교반하였다. 반응 혼합물을 100 mg 시험 수행의 반응 혼합물과 합하여 물로 희석한 다음, 에틸 아세테이트로 2회 추출하였다. 모아진 유기상을 물, 포화 염화나트륨 수용액으로 세척하고, 황산마그네슘에서 건조시키고, 증발시켰다. 실리카겔 상에서 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 (사이클로헥산/에틸 아세테이트 2:1 → 100% 에틸 아세테이트) 1.36 g (이론치의 93%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 2): Rt = 1.13 min; MS (ESIpos): m/z = 357/359 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 7.98-7.68 (m, 3H), 7.04 (s, 1H), 4.68 (s, 2H), 0.89 (s, 9H), 0.09 (s, 6H) ppm.
중간체 36A
4-아미노-6-({[tert-부틸(디메틸)실릴]옥시}메틸)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-카보니트릴
Figure 112014065561338-pct00078
아르곤하에, 탈기한 DMF/물 (100:1, 9.2 ml) 중 중간체 35A (880 mg, 2.46 mmol), [1,1'-비스(디페닐포스피노)페로센]디클로로팔라듐(II)-디클로로메탄 복합물 [PdCl2(dppf) x DCM] (120 mg, 0.148 mmol), 비스(디벤질리덴아세톤)팔라듐 [Pd(dba)2] (135 mg, 0.148 mmol), 시안화아연 (578 mg, 4.92 mmol), 아연 분말 (64 mg, 0.985 mmol) 및 아연 아세테이트 (180 mg, 0.985 mmol)의 혼합물을 160 ℃에서 밤새 교반한 후, 반응 혼합물을 100 mg 시험 수행의 반응 혼합물과 합하여 합한 혼합물을 키젤구어에 흡착시키고, 다른 키젤구어층을 통해 여과하고, tert-부틸 메틸 에테르로 용출하였다. 여액을 포화 탄산수소나트륨 수용액르로 세척하고, 수성층을 tert-부틸 메틸 에테르로 3회 재추출하였다. 모아진 유기상을 황산나트륨에서 건조시키고, 증발시켰다. 실리카겔 상에서 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 (사이클로헥산/에틸 아세테이트 1:1) 453 mg (이론치의 44%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 2): Rt = 1.09 min; MS (ESIpos): m/z = 304 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 8.22-8.35 (m, 2H), 8.06 (s, 1H), 6.95 (s, 1H), 4.83 (s, 2H), 0.91 (s, 9H), 0.11 (s, 6H) ppm.
중간체 37A
4-아미노-5-브로모-6-({[tert-부틸(디메틸)실릴]옥시}메틸)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-카보니트릴
Figure 112014065561338-pct00079
THF (20 ml) 중 1,3-디브로모-5,5-디메틸히단토인 (621 mg, 2.17 mmol)의 용액을 THF (80 ml) 중 중간체 36A (1.1 g, 3.62 mmol)의 용액에 -50 ℃에서 적가하였다. 생성된 혼합물을 rt로 서서히 가온하고, 2 시간동안 교반한 후, 10% 티오황산나트륨 수용액 및 포화 탄산수소나트륨 수용액으로 퀀칭하였다. 수성상을 에틸 아세테이트로 3회 추출하였다. 에틸 아세테이트 용액으로 침전시킨 고체를 여과하고, 에틸 아세테이트로 세척한 뒤, 508 mg (100% 순도, 이론치의 36%)을 표제 화합물의 제1 산물로서 얻었다. 남은 여액을 황산나트륨에서 건조시키고, 증발시켰다. 잔사를 DMSO에서 침전시킨 후, DMSO 및 에틸 아세테이트로 세척하여 498 mg (85% 순도, 이론치의 26%)의 표제 화합물을 추가로 수득하였다.
LC-MS (방법 5): Rt = 2.70 min; MS (ESIpos): m/z = 382/384 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 8.10 (s, 1H), 4.76 (s, 2H), 0.90 (s, 9H), 0.12 (s, 6H) ppm.
중간체 38A
4-아미노-6-({[tert-부틸(디메틸)실릴]옥시}메틸)-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-카보니트릴
Figure 112014065561338-pct00080
아르곤하에, 탈기한 THF (14.8 ml) 중 중간체 37A (459 mg, 1.29 mmol)의 용액을 (2'-아미노바이페닐-2-일)(클로로)팔라듐디사이클로헥실(2',4',6'-트리이소프로필바이페닐-2-일)포스핀 (1:1; 152 mg, 0.19 mmol; S. L. Buchwald et al., J. Am. Chem. Soc. 132 (40), 14073-14075 (2010) 참조) 및 중간체 6A (647 mg, 1.94 mmol)에 첨가하였다. 탈기한 0.5 M 수성 포타슘 포스페이트 용액 (5.1 ml)을 적가하고, 생성된 혼합물을 60 ℃에서 2 시간동안 교반하였다. 이어 반응 혼합물을 사전 70 mg, 90 mg 및 500 mg 시험 수행의 반응 혼합물과 합하고, 증발시켰다. 잔사를 실리카겔 상에서 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 (사이클로헥산/에틸 아세테이트 3:1 → 100% 에틸 아세테이트) 1.0 g (이론치의 58%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 2): Rt = 1.49 min; MS (ESIpos): m/z = 480 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 8.57-8.35 (br. s, 1H), 8.18 (s, 1H), 7.41 (s, 1H), 7.30 (s, 1H), 6.86 (s, 1H), 6.28-6.03 (br. s, 1H), 4.74 (s, 2H), 3.95 (s, 3H), 2.44 (s, 3H), 0.83 (s, 9H), 0.00 (s, 6H) ppm.
중간체 39A
4-아미노-6-포르밀-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-카보니트릴
Figure 112014065561338-pct00081
디클로로메탄 (5 ml) 중 실시예 68 (250 mg, 0.684 mmol)의 용액을 데스-마틴 퍼이오디난 (1,1,1-트리아세톡시-1,1-디하이드로-1,2-벤즈요오독솔-3(1H)-온; 377 mg, 0.889 mmol)으로 처리하고, rt에서 1 시간동안 교반하였다. 반응 혼합물을 50 mg 시험 수행 반응 혼합물과 합하고, 포화 탄산수소나트륨 수용액 및 포화 티오황산나트륨 수용액 (1:1)으로 퀀칭한 후, rt에서 30 분동안 교반하였다. 수성상을 에틸 아세테이트로 3회 추출하고, 모아진 유기상을 황산나트륨에서 건조시키고, 증발시켰다. 실리카겔 상에서 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 (사이클로헥산/25% 에틸 아세테이트 → 100% 에틸 아세테이트) 102 mg (이론치의 24%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 2): Rt = 1.02 min; MS (ESIpos): m/z = 364 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 9.86 (s, 1H), 8.78 (br. s, 1H), 8.30 (s, 1H), 7.62 (s, 1H), 7.36 (s, 1H), 6.91 (s, 1H), 6.51 (br. s, 1H), 3.97 (s, 3H), 2.46 (s, 3H) ppm.
중간체 40A
4-아미노-6-(아지도메틸)-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-카보니트릴
Figure 112014065561338-pct00082
디클로로메탄 (5 ml) 중 실시예 68 (100 mg, 273 μmol)의 용액을 티오닐 클로라이드 (39 μl, 547 μmol)로 처리하고, rt에서 15 분동안 교반하였다. 증발 후, 잔사를 DMF (6 ml)에 용해시키고, 요오드화나트륨 (205 mg, 1.36 mmol) 및 소듐 아지드 (355 mg, 5.47 mmol)로 처리하였다. 혼합물을 80 ℃에서 밤새 교반한 후 물로 희석한 다음, 에틸 아세테이트로 3회 추출하였다. 모아진 유기층을 물에 이어 포화 염화나트륨 수용액으로 세척하고, 황산나트륨에서 건조시키고, 증발시켜 91 mg의 조생성물을 얻고 추가 정제없이 다음 단계에 사용하였다.
LC-MS (방법 2): Rt = 1.13 min; MS (ESIpos): m/z = 391 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): d = 8.65-8.45 (br. s, 1H), 8.23 (s, 1H), 7.46 (s, 1H), 7.34 (s, 1H), 6.88 (s, 1H), 6.41-6.10 (br. s, 1H), 4.57 (s, 2H), 3.96 (s, 3H), 2.46 (s, 3H) ppm.
중간체 41A
5,7-디브로모-6-({[tert-부틸(디메틸)실릴]옥시}메틸)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민
Figure 112014065561338-pct00083
DMF (20 ml) 중 중간체 18A (2 g, 6.21 mmol)의 용액을 이미다졸 (846 mg, 12.4 mmol) 및 tert-부틸디메틸실릴 클로라이드 (1.12 g, 7.45 mmol)로 처리하고, rt에서 20 시간동안 교반하였다. 이어 반응 혼합물을 물 (200 ml)로 희석한 다음, rt에서 2 시간 더 교반하였다. 고체를 여과하여 2.46 g (이론치의 88%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 2): Rt = 1.37 min; MS (ESIpos): m/z = 437 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 8.49-8.05 (br. s, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.15-6.76 (br. s, 1H), 4.64 (s, 2H), 0.87 (s, 9H), 0.09 (s, 6H) ppm.
중간체 42A
2-[4-아미노-5-브로모-6-({[tert-부틸(디메틸)실릴]옥시}메틸)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일]-프로판-2-올
Figure 112014065561338-pct00084
아르곤하에, THF (40 ml) 중 중간체 41A (1 g, 2.29 mmol)의 용액을 -78 ℃로 냉각하고, 디에틸에테르중 메틸리튬의 1.6 M 용액 (1.5 ml, 2.40 mmol)으로 처리하였다. -78 ℃에서 10 분동안 교반한 후, 헥산중 n-부틸리튬의 1.6 M 용액 (1.58 ml, 2.52 mmol)을 첨가하고, 교반을 10 분동안 계속하였다. 아세톤 (1.68 ml, 22.92 mmol)을 첨가하고, 생성된 혼합물을 rt로 서서히 가온한 후, rt에서 18 시간동안 교반하였다. 이어 반응을 물로 퀀칭하고, 수성상을 에틸 아세테이트로 2회 추출하였다. 모아진 유기상을 포화 염화나트륨 수용액으로 세척한 후, 황산마그네슘에서 건조시키고, 증발시켰다. 실리카겔 상에서 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여 (사이클로헥산/에틸 아세테이트 2:1) 306 mg (이론치의 30%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 4): Rt = 1.39 min; MS (ESIpos): m/z = 415/417 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 8.23-7.85 (br. s, 1H), 7.89 (s, 1H), 7.05-6.82 (br. s, 1H), 5.49 (s, 1H), 4.88 (s, 2H), 1.66 (s, 6H), 0.87 (s, 9H), 0.08 (s, 6H) ppm.
중간체 43A
2-[4-아미노-5-브로모-6-(하이드록시메틸)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일]프로판-2-올
Figure 112014065561338-pct00085
THF (15 ml) 중 중간체 42A (304 mg, 0.732 mmol)의 용액을 THF 중 테트라-n-부틸암모늄 플루오라이드의 1 M 용액 (768 μl, 768 μmol)으로 처리하고, rt에서 2 분동안 교반하였다. 반응 혼합물을 아세토니트릴 (20 ml)로 희석한 다음, 증발시키고, 잔사를 제조용 RP-HPLC로 정제하였다 (Reprosil C18, 구배 10-30% 아세토니트릴/0.2% aq. TFA). 얻은 생성물을 메탄올에 용해시키고, 음이온 교환 캐트리지 (Stratospheres SPE, PL-HCO3 MP-수지)를 통해 여과하였다. 캐트리지를 메탄올로 용출하고, 여액을 증발시켜 180 mg (이론치의 67%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 2): Rt = 0.55 min; MS (ESIpos): m/z = 301/303 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 8.21-7.90 (m, 1H), 7.87 (s, 1H), 7.09-6.60 (br. s, 1H), 5.90 (br. s, 1H), 5.03 (br. s, 1H), 4.63 (s, 2H), 1.66 (s, 6H) ppm.
중간체 44A
4-아미노-7-(2-하이드록시프로판-2-일)-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-카브알데하이드
Figure 112014065561338-pct00086
디클로로메탄 (7 ml) 중 실시예 73 (135 mg, 순도 89%, 302 μmol)의 용액을 데스-마틴 퍼이오디난 (1,1,1-트리아세톡시-1,1-디하이드로-1,2-벤즈요오독솔-3(1H)-온; 166 mg, 392 μmol)으로 처리하고, rt에서 70 분동안 교반하였다. 반응 혼합물을 18 mg (45 μmol) 시험 수행의 반응 혼합물과 합하고, 포화 탄산수소나트륨 수용액 및 포화 티오황산나트륨 수용액 (1:1)으로 퀀칭하였다. 수성상을 디클로로메탄으로 3회 추출하였다. 모아진 유기상을 포화 염화나트륨 수용액으로 세척한 후, 황산마그네슘에서 건조시키고, 증발시켜 143 mg (순도 77%, 이론치의 92%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 2): Rt = 1.08 min; MS (ESIpos): m/z = 397 (M+H)+.
중간체 45A
6-({[tert-부틸(디메틸)실릴]옥시}메틸)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민
Figure 112014065561338-pct00087
15 ml 무수 DMF 중 1.5 g (9.14 mmol)의 중간체 8A의 용액을 1.65 g (10.96 mmol) tert-부틸디메틸실릴 클로라이드 및 1.24 g (18.27 mmol) 이미다졸로 처리하고, rt에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 250 ml 물에 붓고, 5 분동안 교반하였다. 생성된 침전을 여과하고, 45 ℃에서 진공하에 건조하였다. 수율: 2.28 g (이론치의 90%).
LC-MS (방법 5): Rt = 2.12 min; MS (ESIpos): m/z = 279 (M+H)+.
중간체 46A
6-({[tert-부틸(디메틸)실릴]옥시}메틸)-7-클로로피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민
Figure 112014065561338-pct00088
20 ml THF 중 2 g (7.18 mmol)의 중간체 45A의 용액을 893 mg (6.47 mmol) N-클로로숙신이미드로 60 분간 -10 ℃에서 6 분량으로 처리하였다. 교반을 -10 ℃에서 15 분동안 계속한 후, 혼합물을 rt로 가온하였다. 또다른 192 mg (1.44 mmol) N-클로로숙신이미드를 rt에서 첨가하고, 교반을 밤새 계속한 다음, 반응 혼합물의 1/10을 증발건고하고, 잔사를 제조용 RP-HPLC로 정제하여 (Repro-sil C18, 구배 10-95% 아세토니트릴/0.1% 수성 포름산) 94 mg (이론치의 4%)의 표제 화합물을 수득하였다. 반응 혼합물 대부분을 실리카겔에 흡착시키고, 실리카겔 상에서 용리제로 이소헥산/에틸 아세테이트 5-66%을 사용해 크로마토그래피하여 899 mg (이론치의 40%)의 표제 화합물을 수득하였다. 총 수율: 993 mg (이론치의 44%).
LC-MS (방법 5): Rt = 2.45 min; MS (ESIpos): m/z = 313 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 7.69-8.04 (m, 3H), 7.0 (s, 1H), 4.70 (s, 2H), 0.88 (s, 9H), 0.08 (s, 6H) ppm.
중간체 47A
5-브로모-6-({[tert-부틸(디메틸)실릴]옥시}메틸)-7-클로로피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민
Figure 112014065561338-pct00089
20 ml DMF 중 890 mg (2.85 mmol)의 중간체 46A의 용액을 506 mg (2.85 mmol) N-브로모숙신이미드로 1 시간에 걸쳐 -10 ℃에서 처리하였다. 교반을 -10 ℃에서 3 시간, 이어 rt에서 밤새 계속하였다. 물 (200 ml)을 첨가하고, 혼합물을 2 시간동안 교반하였다. 침전된 고체를 여과한 후, 물로 세척하고, 45 ℃에서 진공하에 건조하였다. 수율: 997 mg (이론치의 89%).
LC-MS (방법 5): Rt = 2.82 min; MS (ESIpos): m/z = 391/393/395 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 8.32 (br. s, 1H), 7.97 (s, 1H), 6.97 (br. s, 1H), 4.66 (s, 2H), 0.87 (s, 9H), 0.09 (s, 6H) ppm.
중간체 48A
6-({[tert-부틸(디메틸)실릴]옥시}메틸)-7-클로로-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민
Figure 112014065561338-pct00090
아르곤 분위기하에서, 800 mg (2.04 mmol)의 중간체 47A, 680 mg (2.04 mmol)의 중간체 6A, 80 mg (0.1 mmol) (2'-아미노바이페닐-2-일)(클로로)팔라듐디사이클로헥실(2',4',6'-트리이소프로필바이페닐-2-일)포스핀 (1:1; S. L. Buch-wald et al., J. Am. Chem. Soc. 132 (40), 14073-14075 (2010) 참조) 및 1.3 g (6.13 mmol) 포타슘 포스페이트를 플라스크에 채웠다. 이어, 30 ml의 탈기한 1,4-디옥산/물 혼합물 (5:1)을 첨가하고, 용액을 70 ℃에서 1 시간동안 교반하였다. 추가 680 mg (2.04 mmol)의 중간체 6A 및 32 mg (0.04 mmol) (2'-아미노바이페닐-2-일)(클로로)팔라듐디사이클로헥실(2',4',6'-트리이소프로필바이페닐-2-일)포스핀 (1:1)을 첨가하고, 70 ℃에서 1 시간 더 교반을 계속하였다. 이 절차를 출발물질이 소모될 때까지 (LC-MS로 추적) 3회 반복하였다. 마지막 시약 부분을 1.6 ml의 5 M 수산화나트륨 수용액과 함께 첨가하여 pH 값을 8-9로 만들었다. 반응 말미에, 30 ml 물 및 5 M 수성 포름산을 첨가하고 (pH 3-4) 오일을 분리하였다. 이 오일의 일부를 제조용 RP-HPLC로 정제하였다 (Repro-sil C18, 구배 10-95% 아세토니트릴/0.1% 수성 포름산). 두 분획의 표제 화합물을 수득하였다: 103 mg의 고체 (LC-MS에 의한 89% 순도, 이론치의 9%), 및 23 mg의 고체 (LC-MS에 의한 100% 순도, 이론치의 2%). 나머지 오일 및 상등액을 물로 희석한 다음, 포화 탄산수소나트륨 수용액으로 pH 8-9로 조절하고, 디클로로메탄으로 3회 추출하였다. 모아진 유기상을 물로 세척하고, 건조시킨 후, 감압하에 증발시켰다, 2.1 g의 오일을 수득하였다. 이 물질을 실리카겔 상에서 용리제로 디클로로메탄/0-5% 메탄올을 사용하여 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 709 mg (LC-MS에 의한 43% 순도, 이론치의 31%)의 표제 화합물을 더 수득하였다. 총 수율: 이론치의 42%
LC-MS (방법 2): Rt = 1.57 min; MS (ESIpos): m/z = 489 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 8.08 (s, 1H), 7.43 (s, 1H), 7.32 (s, 1H), 6.88 (s, 1H), 4.66 (s, 2H), 3.98 (s, 3H), 2.47 (s, 3H), 0.84 (s, 9H), -0.03 (s, 6H) ppm.
중간체 49A
4-아미노-7-클로로-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-카브알데하이드
Figure 112014065561338-pct00091
3 ml 디클로로메탄 중 166 mg (0.44 mmol)의 실시예 79 및 분자체 (3Å)의 현탁물에 207 mg (0.49 mmol) 데스-마틴 퍼이오디난 (1,1,1-트리아세톡시-1,1-디하이드로-1,2-벤즈요오독솔-3(1H)-온)을 0-5 ℃에서 첨가하였다. 혼합물을 이 온도에서 10 분동안 교반한 후, 56 mg (0.13 mmol) 데스-마틴 퍼이오디난을 추가로 첨가하고, 교반을 5 ℃에서 15 분, 이어 주변 온도에서 10 분동안 계속하였다. 그후, 혼합물을 규조토에 흡착시키고, 실리카겔 상에서 용리제로 디클로로메탄/ 0-10% 메탄올을 사용하여 컬럼 크로마토그래피로 정제하였다. 수율: 100 mg의 고체 (LC-MS에 의한 92.7% 순도, 이론치의 56%).
LC-MS (방법 2): Rt = 1.08 min; MS (ESIpos): m/z = 373 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 9.90 (s, 1H), 8.46 (br. s, 1H), 8.15 (s, 1H), 7.54 (s, 1H), 7.34 (s, 1H), 6.89 (s, 1H), 6.07 (br. s, 1H), 3.96 (s, 3H), 2.46 (s, 3H) ppm.
중간체 50A
7-클로로-6-(클로로메틸)-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민
Figure 112014065561338-pct00092
표제 화합물을 실시예 79의 제조 (이하 참조)에서의 부산물로서 분리하였다. 수율: 9.2 mg (이론치의 10%).
LC-MS (방법 3): Rt = 2.98 min; MS (ESIpos): m/z = 393/395 (M+H)+.
중간체 51A
6-({[tert-부틸(디메틸)실릴]옥시}메틸)-7-메틸피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민
Figure 112014065561338-pct00093
60 ml 1,4-디옥산 중 3 g (8.4 mmol)의 중간체 35A의 용액에 171 mg (0.21 mmol)의 PdCl2(dppf) x DCM을 아르곤 분위기하에 첨가한 후, 톨루엔중 디메틸아연의 2 M 용액 16.8 ml을 10 분간 적가하였다 (온도가 22 ℃에서 31 ℃로 상승). 교반을 우선 주변 온도에서 10 분, 이어 90 ℃에서 13 시간동안 계속하였다. 그후, 물 (10 ml)을 반응 혼합물에 rt에서 첨가하고, 현탁물을 1 시간동안 교반하였다. 혼합물을 감압하에 증발시키고, 잔사를 물 및 에틸 아세테이트에 취한 후, 1 시간동안 교반하였다. 침전을 여과하여 버리고, 상을 분리한 후, 수성층을 에틸 아세테이트로 2회 추출하였다. 모아진 유기상을 건조시킨 후, 증발시켜 2.45 g (LC-MS에 의한 92% 순도, 이론치의 92%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 5): Rt = 2.18 min; MS (ESIpos): m/z = 293 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 7.98-7.78 (m, 3H), 7.04 (s, 1H), 4.68 (s, 2H), 0.89 (s, 9H), 0.09 (s, 6H) ppm.
중간체 52A
(4-아미노-7-메틸피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-일)메탄올
Figure 112014065561338-pct00094
방법 1 :
2 ml 1,4-디옥산 중 100 mg (0.28 mmol)의 중간체 35A의 용액에 6 mg (0.01 mmol) PdCl2(dppf) x DCM을 아르곤 분위기하에 첨가한 후, 톨루엔중 디메틸아연의 2 M 용액 0.56 ml을 10 분간 적가하였다. 혼합물을 90 ℃에서 밤새 교반하고, 증발시킨 후, 잔사를 아세토니트릴 및 5 M 수성 포름산으로 처리하였다. 침전을 여과한 후, 여액을 증발시키고, 잔사를 DMSO/아세토니트릴에 취한 다음, 제조용 RP-HPLC로 정제하였다 (Reprosil C18, 구배 10-95% 아세토니트릴/0.1% 수성 포름산). 수율: 33 mg (이론치의 66%).
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 7.79 (s, 1H), 7.47 (br. s, 2H), 6.80 (s, 1H), 4.84 (t, 1H), 4.49 (d, 2H), 2.36 (s, 3H) ppm.
방법 2 :
아르곤 분위기하에서, 마이크로웨이브 반응 베슬에 750 mg (3.1 mmol)의 중간체 34A, 515 ㎕ (3.7 mmol) 트리메틸보록신, 786 mg (3.7 mmol) 포타슘 포스페이트 및 73 mg (0.09 mmol) (2'-아미노바이페닐-2-일)(클로로)팔라듐디사이클로헥실(2',4',6'-트리이소프로필바이페닐-2-일)포스핀 (1:1; S. L. Buch-wald et al., J. Am. Chem. Soc. 132 (40), 14073-14075 (2010) 참조)을 충전하였다. 이어, 13 ml의 탈기한 1,4-디옥산/물 혼합물 (5:1)을 첨가하고, 베슬을 밀폐한 후, 혼합물을 마이크로웨이브 (4 bar, 50 watt)에서 20 분동안 140 ℃로 가열하였다. 50 mg (2'-아미노바이페닐-2-일)(클로로)팔라듐디사이클로헥실(2',4',6'-트리이소프로필바이페닐-2-일)포스핀 (1:1)을 더 첨가하고, 혼합물을 다시 마이크로웨이브에서 20 분동안 140 ℃로 가열하였다. 다른 분량의 515 ㎕ 트리메틸보록신을 첨가하고, 베슬을 다시 20 분동안 140 ℃로 가열하였다. 나중 절차를 가열 시간을 30 분으로 하여 LC-MS가 소량의 출발물질만이 남아 있음을 보일 때까지 2회 더 반복하였다. 혼합물을 키젤구어를 통해 여과한 뒤, 1,4-디옥산으로 세척하고, 모아진 여액을 증발건고하였다. 이 잔사를 사전 100 mg 시험 수행의 것과 모으고, 제조용 RP-HPLC로 정제하였다 (XBridge C18, 구배 5-42% 아세토니트릴/0.05% aq. 수산화암모늄 용액). 수율: 238 mg (이론치의 38%).
LC-MS (방법 5): Rt = 0.51 min; MS (ESIneg): m/z = 177 (M-H)-
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 7.79 (s, 1H), 7.48 (br. s, 2H), 6.80 (s, 1H), 4.84 (t, 1H), 4.49 (d, 2H), 2.36 (s, 3H) ppm.
중간체 53A
(4-아미노-5-브로모-7-메틸피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-일)메탄올
Figure 112014065561338-pct00095
8.8 ml DMF 중 245 mg (1.38 mmol)의 중간체 52A의 용액을 288 mg (1.62 mmol) N-브로모숙신이미드로 2 시간에 걸쳐 -10 ℃에서 처리하였다. 교반을 -10 ℃에서 30 분, 이어 주변 온도에서 2 시간동안 계속하였다. 혼합물을 50 ml 물에 붓고, 에틸 아세테이트로 추출하였다. 모아진 유기상을 건조시킨 후, 증발시켰다. 잔사를 실리카겔 상에서 용리제로 디클로로메탄/0-15% 메탄올을 사용하여 플래쉬-크로마토그래피하였다. 수율: 148 mg (이론치의 42%).
LC-MS (방법 4): Rt = 0.42 min; MS (ESIpos): m/z = 257/259 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 7.85 (s, 1H), 6.14-8.22 (broad, 2H), 4.88 (t, 1H), 4.45 (d, 2H), 2.43 (s, 3H) ppm.
중간체 54A
4-아미노-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)-7-메틸피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-카브알데하이드
Figure 112014065561338-pct00096
3.5 ml 디클로로메탄 중 175 mg (0.49 mmol)의 실시예 75 및 분자체 (3Å)의 현탁물에 230 mg (0.54 mmol) 데스-마틴 퍼이오디난 (1,1,1-트리아세톡시-1,1-디하이드로-1,2-벤즈요오독솔-3(1H)-온)을 0-5 ℃에서 첨가하였다. 혼합물을 이 온도에서 5 분동안 교반한 후, rt에서 30 분동안 교반하였다. 그후, 혼합물을 규조토에 흡착시키고, 실리카겔 상에서 용리제로 이소헥산/10-100% 에틸 아세테이트를 사용하여 플래쉬-크로마토그래피로 정제하였다. 수율: 139 mg의 고체 (이론치의 79%).
LC-MS (방법 5): Rt = 2.34 min; MS (ESIpos): m/z = 353 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 9.93 (s, 1H), 8.06 (s, 1H), 7.50 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.88 (s, 1H), 3.96 (s, 3H), 2.71 (s, 3H), 2.46 (s, 3H) ppm.
중간체 55A
tert-부틸 4-[(4-아미노-6-메틸피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)메틸]피페라진-1-카복실레이트
Figure 112014065561338-pct00097
아세트산 (8 ml) 중 6-메틸피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민 (500 mg, 3.3 mmol; PCT 국제특허출원 WO 2007/056170에 기술된 바와 같이 제조)의 용액을 37% 수성 포름알데하이드 용액 (328 μl, 4.04 mmol) 및 tert-부틸 피페라진-1-카복실레이트 (754 mg, 4.04 mmol)로 처리하였다. 혼합물을 60 ℃에서 밤새 교반하였다. 증발 후, 잔사를 에틸 아세테이트에 취한 후, 포화 탄산수소나트륨 수용액으로 세척하였다. 수성층을 에틸 아세테이트로 2회 추출하였다. 모아진 유기상을 황산마그네슘에서 건조시키고, 증발시켜 1.2 g의 조생성물을 얻고 추가 정제없이 다음 단계에 사용하였다.
LC-MS (방법 2): Rt = 0.56 min; MS (ESIpos): m/z = 347 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 7.79 (s, 1H), 7.51 (br. s, 2H), 6.67 (s, 1H), 3.76 (br. s, 2H), 3.29-3.17 (m, 4H), 2.36-2.29 (m, 4H), 2.22 (s, 3H), 1.37 (s, 9H) ppm.
중간체 56A
tert-부틸 4-[(4-아미노-5-브로모-6-메틸피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)메틸]피페라진-1-카복실레이트
Figure 112014065561338-pct00098
THF (20 ml) 중 중간체 55A (1.17 g, 3.37 mmol)의 용액을 -60 ℃로 냉각하고, 1,3-디브로모-5,5-디메틸히단토인 (5.78 mg, 2.02 mmol)으로 처리하였다. 혼합물을 -60 ℃ 내지 -20 ℃에서 4 시간동안 교반하였다. 그후, 반응 혼합물을 10% 티오황산나트륨 수용액으로 퀀칭하였다. THF 용매 대부분을 증발시키고, 침전된 고체를 얻었다. 여과후 아세톤에서 재결정하여 862 mg (이론치의 59%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 2): Rt = 0.66 min; MS (ESIpos): m/z = 425/427 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 8.29-7.62 (br. s, 1H), 7.85 (s, 1H), 7.17-6.44 (br. s, 1H), 3.80 (s, 2H), 3.29-3.22 (m, 4H), 2.37-2.27 (m, 4H), 2.16 (s, 3H), 1.37 (s, 9H) ppm.
중간체 57A
tert-부틸 4-{[4-아미노-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)-6-메틸피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일]메틸}피페라진-1-카복실레이트
Figure 112014065561338-pct00099
탈기한 1,4-디옥산 (3 ml) 중 중간체 56A (100 mg, 235 μmol)의 용액을 중간체 6A (93 mg, 282 μmol), 디사이클로헥실(2',6'-디메톡시바이페닐-2-일)포스핀 (S-Phos; 9.6 mg, 23 μmol) 및 팔라듐 디아세테이트 (2.6 mg, 11 μmol)로 처리하였다. 탈기한 3 M 수성 포타슘 포스페이트 용액 (588 ml)을 첨가하고, 생성된 혼합물을 60 ℃에서 1 시간동안 교반하였다. 추가 분의 중간체 6A (78 mg, 235 μmol)를 첨가하고, 교반을 60 ℃에서 밤새 계속하였다. 반응 혼합물을 2 M 수산화나트륨 수용액으로 퀀칭하고, 수성상을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 모아진 유기상을 포화 염화나트륨 수용액으로 세척한 후, 황산마그네슘에서 건조시키고, 증발시켰다. 실리카겔 상에서 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 (사이클로헥산/에틸 아세테이트 3:2) 82 mg (이론치의 62%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 2): Rt = 0.97 min; MS (ESIpos): m/z = 523 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 7.94 (s, 1H), 7.34 (s, 1H), 7.30 (s, 1H), 6.84 (s, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.84 (s, 2H), 3.30-3.23 (m, 4H, 물 피크와 오버랩), 2.45 (s, 3H), 2.42-2.33 (m, 4H), 2.19 (s, 3H), 1.39 (s, 9H) ppm.
중간체 58A
tert-부틸 4-[(4-아미노-6-클로로피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)메틸]피페라진-1-카복실레이트
Figure 112014065561338-pct00100
4 g (23.7 mmol) 6-클로로피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민 (PCT 국제특허출원 WO 2007/064883에 기술된 바와 같이 제조)을 중간체 55A의 절차에 따라 반응시켜 11.2 g의 표제 화합물을 조 물질로서 얻고 다음 단계에 추가 정제없이 사용하였다.
LC-MS (방법 5): Rt = 0.74 min; MS (ESIpos): m/z = 367 (M+H)+
상기 수득한 100 mg의 조 물질을 제조용 RP-HPLC (Reprosil C18, 구배 10-95% 아세토니트릴/0.1% 수성 포름산)한 후, 67 mg의 상응하는 포르미에이트 염의 샘플, tert-부틸 4-[(4-아미노-6-클로로피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)메틸]피페라진-1-카복실레이트 포르미에이트를 분리하였다.
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): inter al. δ = 8.14 (s, 1H), 7.91 (s, 1H), 7.83 (br. s, 2H), 6.95 (s, 1H), 3.80 (s, 2H), 3.17 (s, 2H), 2.38 (br. s, 4H), 1.37 (s, 9H) ppm.
중간체 59A
tert-부틸 4-[(4-아미노-5-브로모-6-클로로피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)메틸]피페라진-1-카복실레이트
Figure 112014065561338-pct00101
11 g (30 mmol)의 중간체 58A를 중간체 56A의 절차에 따라 반응시키고, 실리카겔 상에서 플래쉬-크로마토그래피 (디클로로메탄/메탄올 10:1) 및 이어 제조용 RP-HPLC (Daiso C18, 구배 40-65% 아세토니트릴/물) 하여 1.17 g (이론치의 9%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 2): Rt = 0.74 min; MS (ESIpos): m/z = 445/447/449 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): inter al. δ = 7.96 (s, 1H), 3.84 (s, 2H), 2.37 (br. s, 4H), 1.37 (s, 9H) ppm.
중간체 60A
tert-부틸 4-{[4-아미노-6-클로로-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일]메틸}피페라진-1-카복실레이트
Figure 112014065561338-pct00102
아르곤 분위기하에서, 플라스크에 140 mg (0.31 mmol)의 중간체 59A, 102 mg (0.46 mmol)의 중간체 5A, 16 mg (0.02 mmol) PdCl2(dppf) x DCM 및 122 mg (1.15 mmol) 탄산나트륨을 채웠다. 3 ml 탈기한 1,2-디메톡시에탄/물 (3:1)을 첨가한 후, 현탁물을 60 ℃에서 2.5 시간동안 교반하였다. 추가분의 중간체 5A (50 mg, 0.23 mmol) 및 PdCl2(dppf) x DCM (8 mg, 0.01 mmol)을 첨가하고, 교반을 40 ℃에서 2.5 시간동안 계속하였다. 나중 절차를 출발물질이 소모될 때까지 한번 더 반복하였다. 이어, 반응 혼합물을 감압하에 부분 증발시키고, 물을 첨가한 후, 혼합물을 디클로로메탄으로 추출하였다. 모아진 유기상을 물 및 포화 염화나트륨 수용액으로 세척하고, 건조시킨 후, 감압하에 증발시켰다. 잔사 (322 mg)를 제조용 RP-HPLC로 정제하여 (Reprosil C18, 구배 10-95% 아세토니트릴/0.1% 수성 포름산) 표제 화합물과 Boc-탈보호된 유도체, 6-클로로-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)-7-(피페라진-1-일-메틸)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민의 혼합물 49 mg을 수득하였다. 이 혼합물을 다음 반응 단계에 그대로 사용하였다 (실시예 85 참조).
LC-MS (방법 2): Rt = 1.00 min; MS (ESIpos): m/z = 543 (M+H)+, 및 Rt = 0.81 min; MS (ESI-pos): m/z = 443 (M+H)+.
중간체 61A
4-{[4-아미노-6-(메톡시메틸)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일]메틸}피페라진-2-온
Figure 112014065561338-pct00103
아세트산 (85 ml) 중 중간체 10A (5 g, 28.1 mmol) 및 피페라진-2-온 (3.09 g, 30.9 mmol)의 용액을 37% 수성 포름알데하이드 용액 (3.15 ml, 42.1 mmol)으로 처리하고, 60 ℃에서 16 시간동안 교반하였다. 휘발 물질을 감압하에 증발시키고, 잔사를 메탄올에 용해시킨 다음, 규조토에 흡착시켰다. 실리카겔 상에서 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 (5-10% 메탄올/디클로로메탄) 3.91 g (이론치의 46%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 3): Rt = 1.68 min; MS (ESIpos): m/z = 291 (M+H)+.
중간체 62A
4-{[4-아미노-5-브로모-6-(메톡시메틸)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일]메틸}피페라진-2-온
Figure 112014065561338-pct00104
DMF (50 ml) 중 중간체 61A (3.9 g, 13.4 mmol)의 용액을 0 ℃로 냉각하고, DMF (6 ml) 중 N-브로모숙신이미드 (2.63 g, 14.8 mmol)의 용액으로 처리하였다. 혼합물을 0 ℃에서 1 시간동안 교반하였다. 이어, 용매를 증발시키고, 잔사를 메탄올에 용해시킨 다음, 규조토에 흡착시켰다. 실리카겔 상에서 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 (5-10% 메탄올/디클로로메탄) 1.99 g (이론치의 39%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 3): Rt = 1.86 min; MS (ESIpos): m/z = 369/371 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 7.96-8.23 (br. s, 1H), 7.90 (s, 1H), 7.71 (s, 1H), 6.72-6.98 (br. s, 1H), 4.45 (s, 2H), 3.91 (s, 2H), 3.27 (s, 3H), 3.07 (br. s, 2H), 2.96 (s, 2H), 2.56 (br. s, 2H) ppm.
중간체 63A
7-(클로로메틸)-6-(에톡시메틸)-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민 하이드로클로라이드
Figure 112014065561338-pct00105
톨루엔 (60 ml) 중 실시예 86 (1 g, 2.51 mmol)의 현탁물을 티오닐 클로라이드 (1.83 ml, 25.1 mmol)로 적가 처리하고, 혼합물을 rt에서 밤새 교반하였다. 휘발 물질을 감압하에 증발시켰다. 잔사를 톨루엔과 감압하에 3회 공증발시켜 0.85 g (이론치의 74%)의 표제 화합물을 얻고, 다음 단계에 추가 정제없이 바로 사용하였다.
중간체 64A
4-아미노-6-(에톡시메틸)-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-카복실산
Figure 112014065561338-pct00106
THF/물 (10:1, 220 ml) 중 중간체 17A (5 g, 12.6 mmol)의 현탁물을 THF 중 2-메틸-2-부텐의 2 M 용액 (31.5 ml, 63.1 mmol) 및 인산이수소나트륨 (6.96 g, 50.4 mmol)으로 처리하였다. 혼합물을 rt에서 5 분동안 교반하였다. 이어, 아염소산나트륨 (4.56 g, 50.44 mmol)을 첨가하고, 생성된 혼합물을 rt에서 20 시간동안 교반하였다. 현탁액을 여과하고, 생성된 고체를 물로 세척한 후 4.24 g (이론치의 74%)의 표제 화합물을 얻고 다음 단계에 추가 정제없이 사용하였다.
LC-MS (방법 4): Rt = 1.06 min; MS (ESIpos): m/z = 413 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 13.22 (br. s, 1H), 8.53-8.00 (br. s, 1H), 8.14 (s, 1H), 7.41 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.86 (s, 1H), 6.28-5.65 (br. s, 1H), 4.61 (s, 2H), 3.96 (s, 3H), 3.36 (q, 2H), 2.46 (s, 3H), 1.01 (t, 3H) ppm.
중간체 65A
5,7-디메톡시-1-벤조티오펜
Figure 112014065561338-pct00107
아세톤 (20 ml) 중 1-벤조티오펜-5,7-디올 (1.16 g, 6.98 mmol)의 용액에 탄산칼륨 (2.89 g, 20.9 mmol) 및 요오도메탄 (912 ㎕, 14.6 mmol)을 아르곤하에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 환류하에 18 시간동안 교반하였다. rt로 냉각 후, 혼합물을 메탄올중 암모니아의 7 M 용액 (10 ml)으로 30 분동안 처리한 후, 실리카겔에 흡착시켰다. 실리카겔 상에서 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 (사이클로헥산/에틸 아세테이트 40:1) 0.52 g (이론치의 32%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 4): Rt = 1.02 min; MS (ESIpos): m/z = 195 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 7.69 (d, 1H), 7.35 (d, 1H), 7.02 (d, 1H), 6.57 (d, 1H), 3.92 (s, 3H), 3.81 (s, 3H) ppm.
중간체 66A
(5,7-디메톡시-1-벤조티오펜-2-일)보론산
Figure 112014065561338-pct00108
아르곤 분위기하에서, 헥산중 n-부틸리튬의 1.6 M 용액 (1.84 ml, 2.95 mmol)을 무수 THF (5 ml) 중 중간체 65A (520 mg, 2.68 mmol)의 용액에 -70 ℃에서 적가하였다. -70 ℃에서 1 시간 후, 트리이소프로필 보레이트 (742 ㎕, 3.21 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 rt 까지 서서히 가온하면서 16 시간동안 교반하였다. 디클로로메탄 및 포화 염화암모늄 수용액을 첨가하고, pH 값을 1 M 염산으로 6으로 조정하였다. 유기상을 분리하고, 수성상을 디클로로메탄으로 추출하였다. 모아진 유기상을 황산마그네슘에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 생성된 잔사를 실리카겔 상에서 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 (먼저 디클로로메탄/메탄올 40:1, 이어 메탄올, 마지막으로 메탄올/1,4-디옥산중 4 M 염화수소 10:1으로 용출시킴) 631 mg (71% 순도, 이론치의 71%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 4): Rt = 0.83 min; MS (ESIpos): m/z = 239 (M+H)+.
중간체 67A
4-아미노-6-(클로로메틸)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-카브알데하이드
Figure 112014065561338-pct00109
실리카겔 상에서 컬럼 크로마토그래피 (디클로로메탄/아세톤 8:2 → 7:3) 후 중간체 67A를 중간체 11A의 합성 부산물로서 분리하였다.
LC-MS (방법 2): Rt = 0.6 min; MS (ESIpos): m/z = 211/213 (M+H)+.
중간체 68A
4-아미노-6-[(3-옥소피페라진-1-일)메틸]피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-카브알데하이드
Figure 112014065561338-pct00110
331 ml DMF 중 중간체 67A (11.03 g, 52.4 mmol) 및 2-옥소피페라진 (6.82 g, 68.1 mmol)의 용액을 rt에서 DIPEA (13.7 ml, 78.6 mmol)로 처리하고, 밤새 교반하였다. 침전을 여과한 후, DMF 및 디에틸에테르로 세척하고, 진공에서 건조하여 11.64 g의 표제 화합물 (89% 순도, 이론치의 72%)을 수득하였다.
LC-MS (방법 7): Rt = 1.30 min; MS (ESIpos): m/z = 275 (M+H)+.
중간체 69A
4-{[4-아미노-7-(하이드록시메틸)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-일]메틸}피페라진-2-온
Figure 112014065561338-pct00111
rt에서 1 M 염산 (370 ml) 및 메탄올 (370 ml) 중 중간체 68A (10.17 g, 89% 순도, 33.01 mmol)의 용액에 아연 가루 (12.1 g, 185 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 rt에서 18 시간동안 교반하였다. 실리카겔 (100 g)을 첨가하고, 휘발 물질을 감압하에 증발시켰다. 잔사를 메탄올에 현탁시키고, 휘발 물질을 감압하에 다시 증발시킨 후, 잔사를 진공에서 건조하였다. 고체를 실리카겔 상에서 컬럼 크로마토그래피하여 (구배 디클로로메탄/메탄올중 7 M 암모니아 10:1 → 3:1) 6.39 g의 표제 화합물 (이론치의 60%)을 수득하였다.
LC-MS (방법 8): Rt = 1.12 min; MS (ESIpos): m/z = 277 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 7.83 (s, 1H), 7.76 (br. s, 1H), 7.64 (br. s, 2H), 6.83 (s, 1H), 5.01 (br. s, 1H), 4.74 (s, 2H), 3.64 (br. s, 2H), 3.14 (br. s, 2H), 2.95 (br. s, 2H), 2.58 (br. s, 2H) ppm.
중간체 70A
4-{[4-아미노-5-브로모-7-(하이드록시메틸)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-일]메틸}피페라진-2-온 트리플루오로아세테이트
Figure 112014065561338-pct00112
메탄올/물 (10:1, 33 ml) 중 중간체 69A (1 g)의 현탁물을 트리플루오로아세트산 (0.56 ml, 7.24 mmol)으로 처리하여 맑은 용액을 얻었다. 메탄올 (30 ml) 중 N-브로모숙신이미드 (708 mg, 3.98 mmol)의 용액을 0 ℃에서 적가하고, 혼합물을 0 ℃에서 1 시간동안 교반하였다. 형성된 침전을 여과하고, 진공에서 건조하여 700 mg의 표제 화합물 (이론치의 41%)을 수득하였다.
LC-MS (방법 7): Rt = 1.38 min; MS (ESIpos): m/z = 355/357 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, D2O): δ = 7.90 (s, 1H), 5.00 (s, 2H), 4.44 (s, 2H), 3.85 (s, 2H), 3.58 (br. t, 2H), 3.50 (br. t, 2H) ppm.
제조 실시예:
실시예 1
4-{[4-아미노-6-(메톡시메틸)-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일]메틸}피페라진-2-온
Figure 112014065561338-pct00113
방법 1:
메탄올 (87 ml) 중 중간체 13A (3 g, 7.84 mmol)의 용액을 아세트산 (0.898 ml, 15.68 mmol), 2-옥소피페라진 (1.17 g, 11.76 mmol) 및 소듐 트리아세톡시보로하이드라이드 (4.98 g, 23.53 mmol)로 처리하였다. 혼합물을 rt에서 4.5 시간동안 교반하였다. 추가분의 2-옥소피페라진 (392 mg, 3.9 mmol) 및 소듐 트리아세톡시보로하이드라이드 (3.3 g, 15.68 mmol)를 첨가하고, 생성된 혼합물을 60 ℃에서 밤새 교반하였다. 증발 후, 잔사를 포화 탄산수소나트륨 수용액에 취하고, 에틸 아세테이트로 추출하였다. 모아진 유기상을 황산나트륨에서 건조시키고, 증발시키고, 잔사를 실리카겔 상에서 컬럼 크로마토그래피로 정제하였다 (디클로로메탄/메탄올 40:1 → 10:1). 얻은 생성물을 메탄올에서 연마하고, 여과하여 540 mg (이론치의 14%)의 표제 화합물을 수득하였다. 메탄올성 모액을 증발시키고, 잔사를 투폴드(two-fold) RP-HPLC로 정제하였다 (Repro-sil C18, 구배 10-95% 아세토니트릴/0.1% 수성 포름산). 순수한 생성물을 함유하는 분획을 모으고, 포화 탄산수소나트륨 수용액으로 중화하였다. 아세토니트릴 용매를 증발시키고, 수성상을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 모아진 유기상을 황산나트륨에서 건조시키고, 증발시켜 395 mg (이론치의 13%)을 표제 화합물의 제2 배치로 수득하였다.
방법 2:
아세트산 (2.9 ml) 중 중간체 21A (291 mg, 0.82 mmol)의 용액을 37% 수성 포름알데하이드 용액 (104 μl, 1.39 mmol) 및 2-옥소피페라진 (139 mg, 1.39 mmol)으로 처리하였다. 혼합물을 60 ℃에서 3 시간동안 교반한 후, 증발시켰다. 제조용 RP-HPLC로 정제하여 (Reprosil C18, 구배 10-95% 아세토니트릴/0.1% 수성 포름산) 184 mg (이론치의 44%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 4): Rt = 0.77 min; MS (ESIpos): m/z = 467 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 8.00 (s, 1H), 7.73 (br. s, 1H), 7.37 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.84 (s, 1H), 4.41 (s, 2H), 3.97 (s, 2H), 3.96 (s, 3H), 3.20 (s, 3H), 3.15-3.08 (br. s, 2H), 3.01 (s, 2H), 2.64 (br. t, 2H), 2.45 (s, 3H) ppm.
실시예 2
4-{[4-아미노-6-(메톡시메틸)-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일]메틸}피페라진-2-온 디하이드로클로라이드
Figure 112014065561338-pct00114
1,4-디옥산 (2 ml) 중 실시예 1 (100 mg, 214 μmol)의 용액을 1,4-디옥산중 염화수소의 4 M 용액 (2 ml, 8 mmol)으로 처리하였다. 용매를 증발시켜 130 mg (정량적)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 2): Rt = 0.79 min; MS (ESIpos): m/z = 467 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 8.39 (br. s, 1H), 8.31-8.53 (br. s, 1H), 8.17 (s, 1H), 7.38 (s, 1H), 7.34 (s, 1H), 6.87 (s, 1H), 6.21-6.42 (br. s, 1H), 4.81 (br. s, 2H), 4.52 (br. s, 2H), 3.96 (s, 3H), 3.57 (s, 2H), 3.32-3.72 (m, 4H), 3.26 (s, 3H), 2.46 (s, 3H) ppm.
실시예 3
(3R)-3-({[4-아미노-6-(메톡시메틸)-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일]메틸}아미노)피롤리딘-2-온 디하이드로클로라이드
Figure 112014065561338-pct00115
메탄올 (15 ml) 중 중간체 13A (520 mg, 1.36 mmol) 및 아세트산 (156 ml, 2.7 mmol)의 용액을 (R)-3-아미노피롤리딘-2-온 (503 mg, 5.0 mmol) 및 트리아세톡시보로하이드라이드 (1.06 g, 5.0 mmol)로 처리하였다. 혼합물을 rt에서 밤새 교반한 후, 증발시켰다. 제조용 RP-HPLC로 정제하고 (Reprosil C18, 구배 10-95% 아세토니트릴/0.1% 수성 포름산), 1,4-디옥산중 염화수소의 4 M 용액으로부터 상기 얻은 생성물을 동결건조하여 272 mg (이론치의 36%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 2): Rt = 0.70 min; MS (ESIpos): m/z = 467 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): d = 9.62 (br. s, 1H), 9.46 (br. s, 1H), 8.56-8.22 (br. s, 1H), 8.44 (s, 1H), 8.19 (s, 1H), 7.38 (s, 1H), 7.34 (s, 1H), 6.87 (s, 1H), 6.54-6.12 (br. s, 1H), 4.89-4.65 (m, 2H), 4.58-4.46 (m, 2H), 4.17-4.07 (br. s, 1H, 물 피크와 오버랩), 3.96 (s, 3H), 3.36-3.16 (m, 2H), 3.25 (s, 3H), 2.48-2.39 (m, 1H), 2.46 (s, 3H), 2.23-2.06 (m, 1H) ppm.
실시예 4
(3R)-3-({[4-아미노-6-(메톡시메틸)-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일]메틸}아미노)피롤리딘-2-온
Figure 112014065561338-pct00116
메탄올 (58 ml) 및 아세트산 (0.6 ml) 중 중간체 13A (2.0 g, 5.2 mmol)의 용액을 (R)-3-아미노피롤리딘-2-온 (785 mg, 7.8 mmol) 및 트리아세톡시보로하이드라이드 (3.32 g, 15.6 mmol)로 처리하였다. 혼합물을 rt에서 밤새 교반하였다. 그후, 반응 혼합물을 포화 탄산수소나트륨 수용액으로 희석한 다음, 에틸 아세테이트로 3회 추출하였다. 모아진 유기상을 황산나트륨에서 건조시키고, 증발시켰다. 잔사를 실리카겔 상에서 투폴드 컬럼 크로마토그래피로 정제하여(디클로로메탄/메탄올 40:1 내지 10:1) 957 mg (이론치의 37%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 4): Rt = 0.72 min; MS (ESIpos): m/z = 467 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 8.01 (s, 1H), 7.75 (s, 1H), 7.35 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.85 (s, 1H), 4.46-4.34 (m, 2H), 4.24-4.02 (m, 2H), 3.96 (s, 3H), 3.24-3.04 (m, 3H), 3.21 (s, 3H), 2.45 (s, 3H), 2.40-2.27 (m, 1H), 1.80-1.65 (m, 1H) ppm.
실시예 5
4-{[4-아미노-6-(에톡시메틸)-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일]메틸}피페라진-2-온
Figure 112014065561338-pct00117
방법 1:
THF (100 ml) 중 중간체 17A (2 g, 5.05 mmol)의 용액을 2-옥소피페라진 (1.01 g, 10.1 mmol), 소듐 트리아세톡시보로하이드라이드 (1.07 g, 5.04 mmol) 및 아세트산 (0.29 ml, 5.04 mmol)으로 0 ℃에서 처리하였다. 생성된 혼합물을 0 ℃에서 30 분동안 교반하였다. 4 추가분의 소듐 트리아세톡시보로하이드라이드 (1.07 g, 5.04 mmol) 및 아세트산 (0.29 ml, 5.04 mmol)을 30 분마다 첨가하고, 생성된 혼합물을 0 ℃에서 30 분, 이어 35 ℃에서 25 분 및 마지막으로 rt에서 밤새 교반하였다. 반응을 10% aq. 염화나트륨 용액으로 퀀칭하고, 에틸 아세테이트로 2회 추출하였다. 모아진 유기층을 증발시켰다. 잔사를 실리카겔 상에서 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 (디클로로메탄/ 메탄올 95:5 → 90:10) 360 mg (이론치의 17%)의 실시예 86에 기술된 화합물 (이하 참조) 및 1.82 g의 표제 화합물을 분리된 분획으로 수득하였다. 얻은 표제 생성물을 에탄올 (20 ml)에 현탁시켜 2 시간동안 환류시킨 후, 15 ℃로 냉각하였다. 고체를 여과하고, 에탄올로 세척하여 1.63 g (이론치의 67%)의 순수한 표제 화합물을 수득하였다.
방법 2:
디클로로메탄 (18 ml) 중 실시예 13 (930 mg, 1.9 mmol)의 용액을 티오닐 클로라이드 (210 μl, 2.8 mmol)로 처리하고, rt에서 15 분동안 교반하였다. 증발 후, 잔사를 에탄올 (18 ml)에 용해시키고, DIPEA (670 μl, 3.8 mmol)로 처리하였다. 혼합물을 70 ℃에서 2 시간동안 교반하고, 증발시켰다. 잔사를 실리카겔 상에서 컬럼 크로마토그래피로 정제하였다 (디클로로메탄/메탄올 98:2 → 90:10). 얻은 생성물을 아세토니트릴/디에틸에테르 혼합물에서 연마하고, 여과하였다. 여액을 증발시키고, 잔사를 실리카겔 상에서 컬럼 크로마토그래피로 재정제하였다 (디클로로메탄/메탄올 98:2 → 90:10). 다시, 얻은 생성물을 아세토니트릴/디에틸에테르에서 연마하고, 여과하였다. 이 절차를 한번 더 반복하였다. 이렇게 얻은 3 배치를 모아 아세토니트릴/디에틸에테르에서 다시 한번 연마한 후, 마지막으로 여과하여 600 mg (이론치의 62%)의 표제 화합물을 수득하였다.
방법 3:
아세트산 (10 ml)중 중간체 22A (720 mg, 순도 89%, 1.74 mmol)의 용액을 피페라진-2-온 (261 mg, 2.61 mmol)과 60 ℃에서 교반하였다. 여기에 37% 수성 포름알데하이드 용액 (260 ㎕, 3.48 mmol)을 각각 0, 3 및 12 시간 후 3 분량으로 첨가하고, 혼합물을 60 ℃에서 총 24 시간동안 교반하였다. 이어, 휘발 물질을 감압하에 제거하고, 잔사를 에틸 아세테이트 및 포화 탄산수소나트륨 수용액으로 분배하였다. 유기상을 포화 염화나트륨 수용액으로 세척한 후, 황산마그네슘에서 건조시키고, 증발시켰다. 잔사를 메탄올과 디클로로메탄의 혼합물에 용해시킨 다음, 규조토에 흡착시키고, 진공에서 건조한 후, 실리카겔 상에서 플래쉬-크로마토그래피로 정제하였다 (구배 0-6% 메탄올/디클로로메탄). 생성물 분획을 합해 증발시키고, 제조용 RP-HPLC로 재정제하였다 (Reprosil C18, 구배 30-50% 아세토니트릴/0.2% aq. TFA). 생성물 분획을 다시 합해 포화 탄산수소나트륨 수용액으로 희석한 다음, 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기상을 포화 염화나트륨 수용액으로 세척한 후, 황산마그네슘에서 건조시키고, 증발시켜 281 mg (이론치의 31%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 2): Rt = 0.86 min; MS (ESIpos): m/z = 481 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 8.01 (s, 1H), 7.8-8.05 (br. s, 1H), 7.74 (br. s, 1H), 7.38 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.85 (s, 1H), 5.6-5.9 (br. s, 1H), 4.45 (s, 2H), 3.97 (s, 2H), 3.94 (s, 3H), 3.41 (q, 2H), 3.09-3.13 (m, 2H), 3.02 (s, 2H), 2.63-2.69 (br. s, 2H), 2.45 (s, 3H), 1.07 (t, 3H) ppm.
실시예 6
4-{[4-아미노-6-(에톡시메틸)-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일]메틸}피페라진-2-온 디하이드로클로라이드
Figure 112014065561338-pct00118
메탄올 (6 ml) 중 중간체 17A (60 mg, 순도 69%, 104 μmol)의 용액을 2-옥소피페라진 (22 mg, 209 μmol), 소듐 시아노보로하이드라이드 (33 mg, 522 mmol) 및 아세트산 (12 ml, 209 μmol)으로 처리하였다. 혼합물을 60 ℃에서 16 시간동안 교반한 후, 여과하였다. 여액 및 잔사를 제조용 RP-HPLC로 정제하였다 (Reprosil C18, 구배 40-60% 아세토니트릴/0.2% aq. TFA). 생성물 분획을 합해 1 M 염산 (3 ml)으로 희석한 다음, 증발건고하여 46 mg (이론치의 79%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 2): Rt = 0.87 min; MS (ESIpos): m/z = 481 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 8.37 (br. s, 1H), 8.31 (br. s, 1H), 8.14 (s, 1H), 7.38 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.87 (s, 1H), 6.13 (br. s, 1H), 4.80 (br. s, 2H), 4.52 (s, 2H), 3.96 (s, 3H), 3.86 (br. s, 2H), 3.36-3.51 (m, 5H), 2.46 (s, 3H), 1.11 (t, 3H) ppm.
실시예 7
(3R)-3-({[4-아미노-6-(에톡시메틸)-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일]메틸}아미노)피롤리딘-2-온 디하이드로클로라이드
Figure 112014065561338-pct00119
메탄올 (3 ml) 중 중간체 17A (60 mg, 순도 69%, 104 μmol)의 용액을 (R)-3-아미노피롤리딘-2-온 (22 mg, 209 μmol), 소듐 시아노보로하이드라이드 (33 mg, 522 μmol) 및 아세트산 (12 ml, 209 μmol)으로 처리하였다. 혼합물을 60 ℃에서 4 시간동안 교반한 후, 여과하였다. 여액을 제조용 RP-HPLC로 정제하였다 (Reprosil C18, 구배 40-60% 아세토니트릴/ 0.2% aq. TFA). 생성물 분획을 합해 1 M 염산으로 희석한 다음, 증발건고하여 46 mg (이론치의 79%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 4): Rt = 0.74 min; MS (ESIpos): m/z = 481 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 9.58-9.75 (m, 1H), 9.33-9.54 (m, 1H), 8.44 (s, 1H), 8.27-8.71 (br. s, 1H), 8.19 (s, 1H), 7.38 (s, 1H), 7.34 (s, 1H), 6.87 (s, 1H), 6.18-6.48 (br. s, 1H), 4.68-4.87 (m, 2H), 4.49-4.62 (q, 2H), 3.96 (s, 3H), 3.45 (q, 2H), 3.18-3.35 (m, 2H), 2.46 (s, 4H), 2.08-2.22 (m, 1H), 1.10 (t, 3H) ppm.
실시예 8
(3R)-3-({[4-아미노-6-(에톡시메틸)-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일]메틸}아미노)피롤리딘-2-온
Figure 112014065561338-pct00120
메탄올 (4 ml) 중 중간체 17A (226 mg, 순도 75%, 428 μmol)의 용액을 (R)-3-아미노피롤리딘-2-온 (85 mg, 855 μmol), 소듐 시아노보로하이드라이드 (134 mg, 2.14 mmol) 및 아세트산 (49 μl, 855 μmol)으로 처리하였다. 혼합물을 rt에서 1.5 시간동안 교반하였다. 그후, 혼합물을 제조용 RP-HPLC로 직접 분리하였다 (Reprosil C18, 구배 40-60% 아세토니트릴/0.2% aq. TFA). 생성물 분획을 합해 포화 탄산수소나트륨 수용액으로 희석한 다음, 에틸 아세테이트로 추출하였다. 모아진 유기상을 포화 염화나트륨 수용액으로 세척한 후, 황산마그네슘에서 건조시키고, 증발건고하여 180 mg (이론치의 88%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 4): Rt = 0.74 min; MS (ESIpos): m/z = 481 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 8.00 (s, 1H), 7.76 (s, 1H), 7.8-8.1 (br. s, 1H), 7.35 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.84 (s, 1H), 5.6-5.9 (br. s, 1H), 4.39-4.49 (m, 2H), 4.04-4.23 (m, 2H), 3.96 (s, 3H), 3.41 (q, 2H), 3.05-3.23 (m, 3H), 2.45 (s, 3H), 2.31-2.40 (m, 1H), 1.68-1.79 (m, 1H), 1.08 (t, 3H) ppm.
실시예 9
N2-{[4-아미노-6-(에톡시메틸)-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일]메틸}글리신아미드 디하이드로클로라이드
Figure 112014065561338-pct00121
메탄올 (3 ml) 중 중간체 17A (60 mg, 순도 69%, 104 μmol)의 용액을 글리신아미드 하이드로클로라이드 (23 mg, 209 μmol), 소듐 시아노보로하이드라이드 (32 mg, 522 mmol) 및 아세트산 (12 μl, 209 μmol)으로 처리하였다. 혼합물을 60 ℃에서 16 시간동안 교반하였다. 여과후, 여액을 제조용 RP-HPLC로 분리하였다 (Reprosil C18, 구배 20-40% 아세토니트릴/0.2% aq. TFA). 생성물 분획을 합해 1 M 염산으로 희석한 다음, 증발건고하고, 여과 단계에서의 잔사와 합했다. 이 물질을 투폴드 제조용 RP-HPLC로 재정제하였다 (Reprosil C18, 구배 20-40% 아세토니트릴/0.2% aq. TFA). 생성물 분획을 다시 합해, 1 M 염산으로 희석한 다음, 증발건고하여 7.4 mg (이론치의 13%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 2): Rt = 0.80 min; MS (ESIpos): m/z = 455 (M+H)+
1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ = 9.33 (br. s, 2H), 9.05 (br. s, 1H), 8.31 (s, 1H), 7.93 (br. s, 1H), 7.58 (br. s, 1H), 7.40 (s, 1H), 7.35 (s, 1H), 7.05 (br. s, 1H), 6.88 (s, 1H), 4.65 (br. m, 2H), 4.56 (s, 2H), 3.96 (s, 3H), 3.74 (br. m, 2H), 3.46 (q, 2H), 2.46 (s, 3H), 1.10 (t, 3H) ppm.
실시예 10
6-(에톡시메틸)-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)-7-(모르폴린-4-일메틸)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민
Figure 112014065561338-pct00122
메탄올 (3 ml) 중 중간체 17A (55 mg, 순도 73%, 101 μmol)의 용액을 모르폴린 (18 mg, 202 μmol), 소듐 시아노보로하이드라이드 (19 mg, 303 mmol) 및 아세트산 (18 μl, 304 μmol)으로 처리하였다. 혼합물을 60 ℃에서 18 시간동안 교반하였다. 추가량의 모르폴린 (18 mg, 202 μmol), 소듐 시아노보로하이드라이드 (19 mg, 303 mmol) 및 아세트산 (18 μl, 304 μmol)을 첨가하고, 교반을 60 ℃에서 3 시간동안 계속하였다. 생성된 혼합물을 THF로 희석하여 침전을 용해시키고, 제조용 RP-HPLC로 분리하였다 (Reprosil C18, 구배 20-40% 아세토니트릴/0.2% aq. TFA). 생성물 분획을 합해 증발건고하였다. 잔사를 메탄올에 용해시킨 다음, 음이온 교환 캐트리지를 통해 여과하였다 (Stratospheres SPE, PL-HCO3 MP-수지). 캐트리지를 메탄올로 용출하고, 여액을 증발시켜 32 mg (이론치의 68%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 2): Rt = 0.78 min; MS (ESIpos): m/z = 468 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 7.98 (s, 1H), 7.9 (br. s, 1H), 7.37 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.84 (s, 1H), 5.75 (br. s, 1H), 4.45 (s, 2H), 3.95 (s, 3H), 3.88 (s, 2H), 3.51-3.56 (m, 4H), 3.40 (q, 2H), 2.4-2.5 (m, 4H), 2.45 (s, 3H), 1.06 (t, 3H) ppm.
실시예 11
1-(4-{[4-아미노-6-(에톡시메틸)-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일]메틸}피페라진-1-일)에타논 디하이드로클로라이드
Figure 112014065561338-pct00123
메탄올 (8 ml) 중 중간체 17A (130 mg, 0.328 mmol)의 용액을 N-아세틸피페라진 (63 mg, 0.492 mmol), 소듐 시아노보로하이드라이드 (103 mg, 1.63 mmol) 및 아세트산 (37 μl, 0.655 mmol)으로 처리하였다. 혼합물을 60 ℃에서 3 시간동안 교반하였다. 이를 30 mg 시험 수행의 반응 혼합물과 합해 증발시키고, 제조용 RP-HPLC로 정제하였다 (Repro-sil C18, 구배 10-95% 아세토니트릴/0.1% 수성 포름산). 얻은 생성물을 1,4-디옥산에서 동결건조한 후, 에틸 아세테이트에 용해시키고, 포화 탄산수소나트륨 수용액으로 세척하였다. 유기층을 황산마그네슘에서 건조시키고, 증발시키고, 1,4-디옥산에서 다시 동결건조하였다. 제조용 RP-HPLC (Reprosil C18, 구배 10-95% 아세토니트릴/0.1% 수성 포름산)에 이어 실리카겔 상에서 투폴드 컬럼 크로마토그래피 (디클로로메탄/메탄올 98:2 → 4:1)로 재정제한 후, 1,4-디옥산중 염화수소의 4 M 용액에서 동결건조하여 49 mg (이론치의 18%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 2): Rt = 0.82 min; MS (ESIpos): m/z = 509 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): inter al. δ = 8.65-8.26 (br. s, 1H), 8.17 (s, 1H), 7.38 (s, 1H), 7.34 (s, 1H), 6.87 (s, 1H), 6.53-6.05 (br. s, 1H), 4.75 (br. s, 2H), 4.56 (br. s, 2H), 3.96 (s, 3H), 3.45 (q, 2H, 물 피크와 오버랩), 2.46 (s, 3H), 2.03 (s, 3H), 1.09 (t, 3H) ppm.
실시예 12
[4-아미노-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)-7-(피페라진-1-일메틸)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-일]메탄올 비스(포르미에이트)
Figure 112014065561338-pct00124
1,4-디옥산중 염화수소의 4 M 용액 (3.7 ml) 중 중간체 23A (95 mg, 152 μmol)의 용액을 rt에서 2 시간동안 교반하였다. 증발 후, 잔사를 제조용 RP-HPLC로 정제하여 (Reprosil C18, 구배 10-95% 아세토니트릴/0.1% 수성 포름산) 44 mg (이론치의 62%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 2): Rt = 0.63 min; MS (ESIpos): m/z = 439 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 8.28 (br. s, 2H), 7.98 (s, 1H), 7.37 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.85 (s, 1H), 4.50 (s, 2H, 물 피크와 오버랩), 3.98 (s, 2H, 물 피크와 오버랩), 3.95 (s, 3H, 물 피크와 오버랩), 2.95-2.84 (m, 4H), 2.61-2.55 (m, 4H, DMSO 피크와 오버랩), 2.45 (s, 3H) ppm.
실시예 13
4-{[4-아미노-6-(하이드록시메틸)-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일]메틸}피페라진-2-온
Figure 112014065561338-pct00125
아세트산 (13.9 ml) 중 중간체 20A (1.34 g, 3.96 mmol)의 용액을 37% 수성 포름알데하이드 용액 (501 μl, 6.6 mmol) 및 2-옥소피페라진 (670 mg, 6.6 mmol)으로 처리하였다. 혼합물을 50 ℃에서 2 시간동안 교반한 후, 증발시켰다. 실리카겔 상에서 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 (디클로로메탄/메탄올 98:2 → 90:10) 942 mg (이론치의 49%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 2): Rt = 0.67 min; MS (ESIpos): m/z = 453 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 7.99 (s, 1H), 7.76 (br. s, 1H), 7.39 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.84 (s, 1H), 4.51 (s, 2H), 4.03 (br. s, 2H), 3.95 (s, 3H), 3.18-3.13 (m, 2H), 3.07-2.98 (m, 2H), 2.72-2.60 (m, 2H), 2.45 (s, 3H) ppm.
실시예 14
7-{[(3S)-3-아미노-3-메틸피롤리딘-1-일]메틸}-6-(메톡시메틸)-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민 트리하이드로클로라이드
Figure 112014065561338-pct00126
아세트산 (1 ml) 중 중간체 21A (100 mg, 0.28 mmol)의 용액을 37% 수성 포름알데하이드 용액 (25 μl, 0.33 mmol) 및 tert-부틸 [(3S)-3-메틸피롤리딘-3-일]카바메이트 (Yoshida et al., Chem. Pharm. Bull. 1996, 44 (7), 1376-1386; 67 mg, 0.33 mmol)로 처리하였다. 혼합물을 rt에서 3 시간동안 교반한 후, 증발시켰다. 잔사를 포화 탄산수소나트륨 수용액으로 희석한 다음, 고체 탄산칼륨을 가스 방출이 더 이상 일어나지 않을 때까지 첨가하였다. 수성상을 에틸 아세테이트로 3회 추출하였다. 모아진 유기상을 황산나트륨에서 건조시키고, 증발시켰다. 잔사를 1,4-디옥산중 염화수소의 4 M 용액 (2 ml)에 용해시키고, rt에서 2 시간동안 교반하였다. 증발 후, 잔사를 투폴드 제조용 RP-HPLC로 정제하였다 (일차로 Reprosil C18, 구배 10-95% 아세토니트릴/0.1% 수성 포름산; 이어 Shield RP18, 구배 5-50% 메탄올 + 0.1% aq. TFA/0.1% aq. TFA). 얻은 생성물을 1,4-디옥산중 염화수소의 4 M 용액에서 동결건조하여 14 mg (이론치의 8%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 2): Rt = 0.67 min; MS (ESIpos): m/z = 467 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): inter al. δ = 8.50-8.22 (br. s, 1H), 8.14 (s, 1H), 7.36 (s, 1H), 7.34 (s, 1H), 6.87 (s, 1H), 6.36-6.01 (br. s, 1H), 4.88 (br. s, 2H), 4.56 (br. s, 2H), 3.96 (s, 3H, 물 피크와 오버랩), 3.26 (s, 3H), 2.46 (s, 3H), 1.52 (s, 3H) ppm.
실시예 15
7-{[(3S)-3-아미노-3-메틸피롤리딘-1-일]메틸}-6-(에톡시메틸)-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민
Figure 112014065561338-pct00127
아세트산 (1 ml) 중 중간체 17A (100 mg, 271 μmol)의 용액을 37% 수성 포름알데하이드 용액 (24 μl, 326 μmol) 및 tert-부틸 [(3S)-3-메틸피롤리딘-3-일]-카바메이트 (Yoshida et al., Chem. Pharm. Bull. 1996, 44 (7), 1376-1386; 65 mg, 326 μmol)로 처리하였다. 혼합물을 60 ℃에서 4 시간동안 교반하였다. 이어, 추가량의 37% 수성 포름알데하이드 용액 (10 μl, 136 μmol) 및 tert-부틸 [(3S)-3-메틸피롤리딘-3-일]카바메이트 (27 mg, 136 μmol)를 첨가하고, 교반을 60 ℃에서 밤새 계속하였다. 증발 후, 잔사를 에틸 아세테이트 및 포화 탄산수소나트륨 수용액으로 분배하였다. 고체 탄산칼륨을 가스 방출이 더 이상 일어나지 않을 때까지 첨가하였다. 수성상을 에틸 아세테이트로 3회 추출하였다. 모아진 유기상을 황산나트륨에서 건조시키고, 증발시킨 후, 제조용 RP-HPLC로 정제하였다 (Reprosil C18, 구배 10-95% 아세토니트릴/0.1% 수성 포름산). 얻은 생성물을 1,4-디옥산중 염화수소의 4 M 용액 (2 ml)에 용해시키고, rt에서 1 시간동안 교반하였다. 증발 후, 잔사를 제조용 RP-HPLC로 정제하여 (Reprosil C18, 구배 10-95% 아세토니트릴/0.1% 수성 포름산) 24 mg (이론치의 18%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 4): Rt = 0.70 min; MS (ESIpos): m/z = 481 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): inter al. δ = 8.19 (s, 1H), 7.38 (s, 1H), 7.34 (s, 1H), 6.87 (s, 1H), 4.90 (br. s, 2H), 3.96 (s, 3H), 3.46 (q, 3H), 2.46 (s, 3H), 1.54 (s, 3H), 1.14-1.05 (m, 3H) ppm.
실시예 16
1-(4-{[4-아미노-6-(메톡시메틸)-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일]메틸}피페라진-1-일)에타논 디하이드로클로라이드
Figure 112014065561338-pct00128
아세트산 (1 ml) 중 중간체 21A (50 mg, 141 μmol)의 용액을 37% 수성 포름알데하이드 용액 (4.6 μl, 169 μmol) 및 N-아세틸피페라진 (21.6 mg, 169 μmol)으로 처리하였다. 혼합물을 75 ℃에서 3 시간동안 교반하였다. 증발 후, 잔사를 제조용 RP-HPLC로 정제하였다 (Reprosil C18, 구배 10-95% 아세토니트릴/0.1% 수성 포름산). 1,4-디옥산중 염화수소의 4 M 용액에서 동결건조하여 34 mg (이론치의 39%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 5): Rt = 1.78 min; MS (ESIpos): m/z = 495 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): inter al. δ = 8.70-8.35 (br. s, 1H), 8.18 (s, 1H), 7.37 (s, 1H), 7.34 (s, 1H), 6.86 (s, 1H), 6.61-6.19 (br. s, 1H), 4.74 (br. s, 2H), 4.54 (br. s, 2H), 3.96 (s, 3H), 3.25 (s, 3H), 2.46 (s, 3H), 2.03 (s, 3H) ppm.
실시예 17
6-(메톡시메틸)-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)-7-(피페라진-1-일메틸)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민 포르미에이트
Figure 112014065561338-pct00129
디클로로메탄 (2.2 ml) 중 중간체 23A (110 mg, 204 μmol)의 용액을 티오닐 클로라이드 (29 μl, 408 μmol)로 처리하고, rt에서 15 분동안 교반하였다. 증발 후, 잔사를 메탄올 (2.2 ml)에 용해시킨 다음, DIPEA (39 μl, 224 μmol)로 처리하였다. 혼합물을 70 ℃에서 1 시간동안 교반한 후, 증발시켰다. 잔사를 1,4-디옥산중 염화수소의 4 M 용액 (2.2 ml)에 취하고, rt에서 2 시간동안 교반하였다. 증발하고 제조용 RP-HPLC로 정제하여 (Reprosil C18, 구배 10-95% 아세토니트릴/0.1% 수성 포름산) 44.9 mg (이론치의 46%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 2): Rt = 0.73 min; MS (ESIpos): m/z = 453 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 8.28 (br. s, 1H), 8.00 (s, 1H), 7.35 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.85 (s, 1H), 4.41 (s, 2H), 4.00-3.90 (m, 5H), 3.00-2.90 (m, 4H), 2.65-2.56 (m, 4H), 2.45 (s, 3H) ppm.
실시예 18
6-(에톡시메틸)-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)-7-(피페라진-1-일메틸)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민
Figure 112014065561338-pct00130
디클로로메탄 (2 ml) 중 중간체 23A (80 mg, 317 μmol)의 용액을 티오닐 클로라이드 (22 μl, 297 μmol)로 처리하고, rt에서 15 분동안 교반하였다. 증발 후, 잔사를 에탄올 (2 ml)에 용해시키고, DIPEA (28 μl, 163 μmol)로 처리하였다. 혼합물을 70 ℃에서 1 시간동안 교반한 후, 증발시켰다. 잔사를 1,4-디옥산중 염화수소의 4 M 용액 (2 ml)에 취하고, rt에서 1 시간동안 교반하였다. 증발하고 제조용 RP-HPLC로 정제하여 (Reprosil C18, 구배 10-95% 아세토니트릴/0.1% 수성 포름산) 35 mg (이론치의 50%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 2): Rt = 0.82 min; MS (ESIpos): m/z = 467 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): inter al. δ = 8.09 (br. s, 1H), 7.36 (s, 1H), 7.32 (s, 1H), 6.86 (s, 1H), 4.50 (br. s, 2H), 3.96 (s, 3H), 3.42 (q, 2H, 물 피크와 오버랩), 2.45 (s, 3H), 1.05 (t, 3H) ppm.
실시예 19
6-(에톡시메틸)-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)-7-(피페라진-1-일메틸)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민 디하이드로클로라이드
Figure 112014065561338-pct00131
1,4-디옥산중 염화수소의 4 M 용액 (1 ml) 중 실시예 18 (50 mg, 107 μmol)의 용액을 rt에서 15 분동안 교반하였다. 증발 후 55 mg (이론치의 93%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 4): Rt = 0.74 min; MS (ESIpos): m/z = 467 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): inter al. δ = 8.18 (s, 1H), 7.37 (s, 1H), 7.34 (s, 1H), 6.87 (s, 1H), 4.76 (br. s, 2H), 4.60 (br. s, 2H), 3.96 (s, 3H), 3.45 (q, 2H), 2.46 (s, 3H), 1.09 (t, 3H) ppm.
실시예 20
1-(4-{[4-아미노-6-(에톡시메틸)-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일]메틸}피페라진-1-일)에타논
Figure 112014065561338-pct00132
디클로로메탄 (2 ml) 및 THF (0.8 ml) 중 실시예 18 (70 mg, 150 μmol)의 용액을 아세틸 클로라이드 (21 μl, 300 μmol) 및 탄산나트륨 (127 mg, 1.2 mmol)으로 처리하였다. 혼합물을 rt에서 밤새 교반하였다. 증발 후, 잔사를 제조용 RP-HPLC로 정제하여 (Reprosil C18, 구배 10-95% 아세토니트릴/0.1% 수성 포름산) 27 mg (이론치의 31%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 4): Rt = 0.77 min; MS (ESIpos): m/z = 509 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 7.98 (s, 1H), 7.37 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.84 (s, 1H), 4.45 (s, 2H), 3.95 (s, 3H), 3.92 (s, 2H), 3.45-3.36 (m, 6H), 2.48-2.38 (m, 7H, DMSO 피크와 오버랩), 1.97 (s, 3H), 1.06 (t, 3H) ppm.
실시예 21
4-({4-아미노-6-[(2-하이드록시에톡시)메틸]-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일}메틸)피페라진-2-온 포르미에이트
Figure 112014065561338-pct00133
디클로로메탄 (2 ml) 중 실시예 13 (60 mg, 132 μmol)의 용액을 티오닐 클로라이드 (14 μl, 198 μmol)로 처리하였다. 혼합물을 rt에서 15 분동안 교반하고, 증발시켰다. 잔사를 에틸렌 글리콜 (500 μl)에 용해시키고, 100 ℃에서 90 분동안 교반하였다. 제조용 RP-HPLC로 정제하여 (Reprosil C18, 구배 10-95% 아세토니트릴/0.1% 수성 포름산) 34 mg (이론치의 47%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 2): Rt = 0.69 min; MS (ESIpos): m/z = 497 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 8.14 (s, 1H), 8.00 (s, 1H), 7.74 (br. s, 1H), 7.42 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.84 (s, 1H), 4.49 (s, 2H), 3.99 (s, 2H), 3.96 (s, 3H), 3.50-3.43 (m, 2H), 3.42-3.36 (m, 2H, 물 피크와 오버랩), 3.15-3.07 (m, 2H), 3.03 (s, 2H), 2.69-2.61 (m, 2H), 2.45 (s, 3H) ppm.
실시예 22
2-{[4-아미노-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)-7-(피페라진-1-일메틸)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-일]메톡시}에탄올 디하이드로클로라이드
Figure 112014065561338-pct00134
디클로로메탄 (4 ml) 중 중간체 23A (100 mg, 185 μmol)의 용액을 티오닐 클로라이드 (27 μl, 371 μmol)로 처리하였다. 혼합물을 rt에서 20 분동안 교반한 후, 증발시켰다. 잔사를 에틸렌 글리콜/THF (2:1, 1.5 ml)에 용해시키고, 100 ℃에서 2 시간동안 교반하였다. 증발 후, 잔사를 제조용 RP-HPLC (Reprosil C18, 구배 10-95% 아세토니트릴/0.1% 수성 포름산)에 이어 실리카겔 상에서 컬럼 크로마토그래피 (디클로로메탄/메탄올 + 0.1% aq. 암모니아 98:2 → 90:10)로 정제하였다. 1,4-디옥산중 염화수소의 4 M 용액에서 동결건조하여 67 mg (이론치의 64%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 2): Rt = 0.66 min; MS (ESIpos): m/z = 483 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 8.16 (s, 1H), 7.49 (s, 1H), 7.43 (s, 1H), 6.98 (s, 1H), 4.86 (s, 2H), 4.69 (s, 2H), 4.03 (s, 3H), 3.81-3.49 (m, 12H), 2.50 (s, 3H) ppm.
실시예 23
6-(부톡시메틸)-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)-7-(피페라진-1-일메틸)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민 포르미에이트
Figure 112014065561338-pct00135
디클로로메탄 (2 ml) 중 중간체 23A (100 mg, 185 μmol)의 용액을 티오닐 클로라이드 (27 μl, 371 μmol)로 처리하였다. 혼합물을 rt에서 15 분동안 교반한 후, 증발시켰다. 잔사를 1-부탄올 (2 ml)에 용해시키고, 1 시간동안 70 ℃로 가열하였다. 증발후, 잔사를 1,4-디옥산중 염화수소의 4 M 용액 (2 ml)에 취하고, rt에서 2 시간동안 교반하였다. 증발하고 제조용 RP-HPLC로 정제하여 (Reprosil C18, 구배 10-95% 아세토니트릴/0.1% 수성 포름산) 22 mg (이론치의 24%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 2): Rt = 0.82 min; MS (ESIpos): m/z = 495 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 8.29 (s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.35 (s, 1H), 7.29 (s, 1H), 6.84 (s, 1H), 4.43 (s, 2H), 3.95 (s, 3H), 3.92 (s, 2H), 3.35 (t, 2H), 2.90-2.79 (m, 4H), 2.45 (s, 3H), 1.47-1.37 (m, 2H), 1.31-1.18 (m, 2H), 0.80 (t, 3H) ppm.
실시예 24
5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)-7-(피페라진-1-일메틸)-6-(프로폭시-메틸)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민 비스(포르미에이트)
Figure 112014065561338-pct00136
디클로로메탄 (2 ml) 중 중간체 23A (100 mg, 185 μmol)의 용액을 티오닐 클로라이드 (27 μl, 371 μmol)로 처리하였다. 혼합물을 rt에서 15 분동안 교반한 후, 증발시켰다. 잔사를 1-프로판올 (2 ml)에 용해시키고, DIPEA (48 μl, 278 μmol)로 처리한 후, rt에서 1 시간동안 교반하였다. 증발 후, 잔사를 1,4-디옥산중 염화수소의 4 M 용액 (2 ml)에 취하고, rt에서 2 시간동안 교반하였다. 증발하고 제조용 RP-HPLC로 정제하여 (Reprosil C18, 구배 10-95% 아세토니트릴/0.1% 수성 포름산) 15 mg (이론치의 16%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 2): Rt = 0.78 min; MS (ESIpos): m/z = 481 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 8.26 (br. s, 2H), 7.98 (s, 1H), 7.36 (s, 1H), 7.30 (s, 1H), 6.84 (s, 1H), 4.44 (s, 2H), 3.95 (s, 3H), 3.92 (s, 2H), 3.32 (t, 2H), 2.87-2.79 (m, 4H), 1.52-1.39 (m, 2H), 0.81 (t, 3H) ppm.
실시예 25
6-[(사이클로프로필메톡시)메틸]-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)-7-(피페라진-1-일-메틸)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민 비스(포르미에이트)
Figure 112014065561338-pct00137
디클로로메탄 (2 ml) 중 중간체 23A (100 mg, 185 μmol)의 용액을 티오닐 클로라이드 (27 μl, 371 μmol)로 처리하였다. 혼합물을 rt에서 15 분동안 교반한 후, 증발시켰다. 잔사를 사이클로프로필메탄올 (2 ml)에 용해시키고, DIPEA (48 μl, 278 μmol)로 처리한 후, 70 ℃에서 2 시간동안 교반하였다. 증발 후, 잔사를 1,4-디옥산중 염화수소의 4 M 용액 (2 ml)에 취하고, rt에서 2 시간동안 교반하였다. 증발하고 제조용 RP-HPLC로 정제하여 (Reprosil C18, 구배 10-95% 아세토니트릴/0.1% 수성 포름산) 29 mg (이론치의 30%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 2): Rt = 0.78 min; MS (ESIpos): m/z = 493 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 8.28 (br. s, 2H), 7.99 (s, 1H), 7.37 (s, 1H), 7.30 (s, 1H), 6.84 (s, 1H), 4.45 (s, 2H), 3.95 (s, 3H), 3.93 (s, 2H), 3.21 (d, 2H), 2.95-2.83 (m, 4H), 2.61-2.56 (m, 4H), 2.45 (s, 3H), 1.01-0.91 (m, 1H), 0.46-0.37 (m, 2H), 0.15-0.08 (m, 2H) ppm.
실시예 26
6-[(사이클로부틸옥시)메틸]-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)-7-(피페라진-1-일-메틸)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민
Figure 112014065561338-pct00138
디클로로메탄 (1.7 ml) 중 중간체 23A (85 mg, 157 μmol)의 용액을 티오닐 클로라이드 (23 μl, 315 μmol)로 처리하였다. 혼합물을 rt에서 15 분동안 교반한 후, 증발시켰다. 잔사를 사이클로부탄올 (1.7 ml)에 용해시키고, DIPEA (41 μl, 236 μmol)로 처리한 후, 70 ℃에서 2 시간동안 교반하였다. 증발 후, 잔사를 1,4-디옥산중 염화수소의 4 M 용액 (1.7 ml)에 취하고, rt에서 2 시간동안 교반하였다. 증발하고 제조용 RP-HPLC로 정제하여 (Reprosil C18, 구배 10-95% 아세토니트릴/0.1% 수성 포름산) 23 mg (이론치의 28%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 2): Rt = 0.82 min; MS (ESIpos): m/z = 493 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 8.01 (s, 1H), 7.37 (s, 1H), 7.32 (s, 1H), 6.85 (s, 1H), 4.37 (s, 2H), 4.06-3.86 (m, 6H), 3.14-2.97 (m, 4H), 2.80-2.62 (m, 4H), 2.45 (s, 3H), 2.10-1.96 (m, 2H), 1.83-1.69 (m, 2H), 1.65-1.52 (m, 1H), 1.49-1.33 (m, 1H) ppm.
실시예 27
6-(이소프로폭시메틸)-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)-7-(피페라진-1-일-메틸)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민 포르미에이트
Figure 112014065561338-pct00139
디클로로메탄 (1.3 ml) 중 중간체 23A (65 mg, 120 μmol)의 용액을 티오닐 클로라이드 (17 μl, 241 μmol)로 처리하였다. 혼합물을 rt에서 15 분동안 교반한 후, 증발시켰다. 잔사를 2-프로판올 (1.3 ml)에 용해시키고, DIPEA (23 μl, 132 μmol)로 처리한 후, 70 ℃에서 1 시간동안 교반하였다. 추가량의 DIPEA (23 μl, 132 μmol)를 첨가하고, 혼합물을 70 ℃에서 1 시간동안 다시 교반하였다. 이어, 다른 분량의 DIPEA (63 μl, 362 μmol)를 첨가하고, 교반을 90 ℃에서 3 시간동안 계속하였다. 증발 후, 잔사를 1,4-디옥산중 염화수소의 4 M 용액 (1.3 ml)에 취하고, rt에서 2 시간동안 교반하였다. 증발하고 제조용 RP-HPLC로 정제하여 (Reprosil C18, 구배 10-95% 아세토니트릴/0.1% 수성 포름산) 23 mg (이론치의 34%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 4): Rt = 0.74 min; MS (ESIpos): m/z = 481 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 8.30 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.37 (s, 1H), 7.30 (s, 1H), 6.84 (s, 1H), 4.43 (s, 2H), 3.95 (s, 3H), 3.90 (s, 2H), 3.57 (m, 1H, 물 피크와 오버랩), 2.88-2.78 (m, 4H), 2.45 (s, 3H), 1.04 (d, 6H) ppm.
실시예 28
6-[(2-메톡시에톡시)메틸]-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)-7-(피페라진-1-일-메틸)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민 포르미에이트
Figure 112014065561338-pct00140
디클로로메탄 (2 ml) 중 중간체 23A (100 mg, 185 μmol)의 용액을 티오닐 클로라이드 (27 μl, 371 μmol)로 처리하였다. 혼합물을 rt에서 15 분동안 교반한 후, 증발시켰다. 잔사를 2-메톡시에탄올 (2 ml)에 용해시키고, DIPEA (35 μl, 204 μmol)로 처리한 후, 70 ℃에서 1 시간동안 교반하였다. 증발 후, 잔사를 1,4-디옥산중 염화수소의 4 M 용액 (2 ml)에 취하고, rt에서 2 시간동안 교반하였다. 증발하고 제조용 RP-HPLC로 정제하여 (Reprosil C18, 구배 10-95% 아세토니트릴/0.1% 수성 포름산) 50 mg (이론치의 50%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 2): Rt = 0.75 min; MS (ESIpos): m/z = 497 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 8.26 (br. s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.39 (s, 1H), 7.30 (s, 1H), 6.84 (s, 1H), 4.48 (s, 2H), 3.95 (s, 3H), 3.94 (s, 2H), 3.52-3.46 (m, 2H, 물 피크와 오버랩), 3.44-3.37 (m, 2H, 물 피크와 오버랩), 3.20 (s, 3H), 2.94-2.84 (m, 4H), 2.61-2.54 (m, 4H, DMSO 피크와 오버랩), 2.45 (s, 3H) ppm.
실시예 29
5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)-7-(피페라진-1-일메틸)-6-[(2,2,2-트리플루오로-에톡시)메틸]피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민 포르미에이트
Figure 112014065561338-pct00141
디클로로메탄 (2 ml) 중 중간체 23A (100 mg, 185 μmol)의 용액을 티오닐 클로라이드 (27 μl, 371 μmol)로 처리하였다. 혼합물을 rt에서 15 분동안 교반한 후, 증발시켰다. 잔사를 2,2,2-트리플루오로에탄올 (2 ml)에 용해시키고, DIPEA (35 μl, 204 μmol)로 처리한 후, 70 ℃에서 1 시간동안 교반하였다. 추가량의 DIPEA (35 ml, 204 mmol)를 첨가하고, 교반을 rt에서 1 시간동안 계속하였다. 증발 후, 잔사를 1,4-디옥산중 염화수소의 4 M 용액 (2 ml)에 취하고, rt에서 2 시간동안 교반하였다. 증발하고 제조용 RP-HPLC로 정제하여 (Reprosil C18, 구배 10-95% 아세토니트릴/0.1% 수성 포름산) 23 mg (이론치의 23%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 2): Rt = 0.79 min; MS (ESIpos): m/z = 521 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 8.28 (br. s, 1H), 8.00 (s, 1H), 7.37 (s, 1H), 7.30 (s, 1H), 6.85 (s, 1H), 4.66 (s, 2H), 4.08 (q, 2H), 3.95 (s, 3H), 3.92 (s, 2H), 2.85-2.75 (m, 4H), 2.45 (s, 3H) ppm.
실시예 30
6-[(2-아미노에톡시)메틸]-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)-7-(피페라진-1-일-메틸)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민 트리하이드로클로라이드
Figure 112014065561338-pct00142
디클로로메탄 (5 ml) 중 중간체 23A (150 mg, 278 μmol)을 티오닐 클로라이드 (40 μl, 556 μmol)로 처리하였다. 혼합물을 rt에서 15 분동안 교반한 후, 증발시켰다. 잔사를 THF (0.5 ml)에 용해시키고, tert-부틸 (2-하이드록시에틸)카바메이트 (1 ml) 및 DIPEA (242 μl, 1.39 mmol)로 처리하였다. 혼합물을 100 ℃에서 밤새 교반하였다. 증발후, 잔사를 1,4-디옥산 (10 ml)에 취하고, 1,4-디옥산중 염화수소의 4 M 용액 (10 ml)으로 처리한 후, rt에서 1 시간동안 교반하였다. 휘발 물질을 감압하에 제거하고, 잔사를 제조용 RP-HPLC로 정제하였다 (Reprosil C18, 구배 10-95% 아세토니트릴/0.1% 수성 포름산). 제조용 RP-HPLC로 추가 정제하고 (Shield RP18, 25% 아세토니트릴/75% 0.01% aq. TFA), 이어 1,4-디옥산중 염화수소의 4 M 용액에서 동결건조하여 10 mg (이론치의 6%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 2): Rt = 0.58 min; MS (ESIpos): m/z = 482 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, D2O): δ = 8.12 (s, 1H), 7.50 (s, 1H), 7.44 (s, 1H), 6.99 (s, 1H), 4.61 (s, 2H), 4.04 (s, 3H), 3.88-3.80 (m, 1H), 3.70-3.60 (m, 3H), 3.52-3.46 (m, 4H), 3.40-3.34 (m, 4H), 3.07 (t, 2H), 2.51 (s, 3H) ppm.
실시예 31
메틸 {[4-아미노-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)-7-(피페라진-1-일-메틸)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-일]메톡시}아세테이트
Figure 112014065561338-pct00143
디클로로메탄 (2 ml) 중 중간체 23A (50 mg, 92 μmol)의 용액을 티오닐 클로라이드 (13 μl, 186 μmol)로 처리하였다. 혼합물을 rt에서 15 분동안 교반한 후, 증발시켰다. 잔사를 메틸글리콜레이트 (1 ml)에 용해시키고, DIPEA (80 μl, 464 μmol)로 처리한 후, 70 ℃에서 2 시간동안 교반하였다. 증발 후, 잔사를 디클로로메탄 (1.6 ml)에 취하고, 트리플루오로아세트산 (400 μl, 5.19 mmol)으로 처리한 후, rt에서 1 시간동안 교반하였다. 이어, 혼합물을 증발시키고, 잔사를 제조용 RP-HPLC로 정제하였다 (Reprosil C18, 구배 10-95% 아세토니트릴/0.1% aq. TFA). 표제 화합물을 함유하는 분획을 포화 탄산수소나트륨 수용액으로 중화하고, 증발시켰다. 잔사를 물에 취하고, 혼합물을 디클로로메탄으로 3회 추출하였다. 모아진 유기상을 황산나트륨에서 건조시키고, 증발시켜 21 mg (이론치의 43%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 2): Rt = 0.72 min; MS (ESIpos): m/z = 511 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 7.99 (s, 1H), 7.39 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.85 (s, 1H), 4.59 (s, 2H), 4.11 (s, 2H), 3.95 (s, 3H), 3.90 (s, 2H), 3.57 (s, 3H), 2.81-2.69 (m, 4H), 2.48-2.39 (m, 7H) ppm.
실시예 32
{[4-아미노-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)-7-(피페라진-1-일메틸)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-일]메톡시}아세트산
Figure 112014065561338-pct00144
THF (14 ml) 중 중간체 24A (200 mg, 327 μmol)의 용액을 2.5 M aq. 수산화리튬 용액 (16 ml)으로 처리하고, 80 ℃에서 2 시간동안 교반하였다. 이어 혼합물을 27 mg 시험 수행의 반응 혼합물과 합했다. 수성상을 THF로 2회 추출하고, 모아진 유기상을 증발시켰다. 잔사를 1,4-디옥산중 염화수소의 4 M 용액 (2 ml)에 용해시키고, rt에서 3 시간동안 교반하였다. 증발 후, 잔사를 제조용 RP-HPLC로 정제하였다 (Reprosil C18, 구배 10-95% 아세토니트릴/0.1% aq. TFA). 1,4-디옥산중 염화수소의 4 M 용액에서 동결건조하고, 제조용 RP-HPLC로 재정제하여 (XBridge C18, 구배 5-95% 아세토니트릴/0.1% aq. 수산화암모늄 용액) 13 mg (이론치의 7%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 2): Rt = 0.69 min; MS (ESIpos): m/z = 497 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 8.00 (s, 1H), 7.38 (s, 1H), 7.30 (s, 1H), 6.84 (s, 1H), 4.54 (s, 2H), 4.08 (s, 2H), 3.95 (s, 3H), 3.79 (s, 2H), 2.99-2.89 (m, 4H), 2.73-2.63 (m, 4H), 2.44 (s, 3H) ppm.
실시예 33
2-{[4-아미노-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)-7-(피페라진-1-일메틸)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-일]메톡시}아세트아미드
Figure 112014065561338-pct00145
중간체 24A (200 mg, 327 μmol)를 메탄올중 암모니아의 7 M 용액 (10 ml)으로 처리하고, rt에서 밤새 교반하였다. 이어 혼합물을 20 mg 시험 수행의 반응 혼합물과 합하고, 용매를 증발시켰다. 잔사를 1,4-디옥산중 염화수소의 4 M 용액 (2 ml)으로 처리하고, rt에서 2 시간동안 교반하였다. 증발하고, 이어 제조용 RP-HPLC로 정제하여 (일차로 Reprosil C18, 구배 10-95% 아세토니트릴/0.1% aq. TFA; 이어 XBridge C18, 구배 5-95% 아세토니트릴/0.1% aq. 수산화암모늄 용액) 5.5 mg (이론치의 3%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 2): Rt = 0.69 min; MS (ESIpos): m/z = 496 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 8.14-7.59 (br. s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.39 (s, 1H), 7.35-7.22 (m, 3H), 6.85 (s, 1H), 4.54 (s, 2H), 3.95 (s, 3H), 3.90 (s, 2H), 3.79 (s, 2H), 2.73-2.66 (m, 4H), 2.45 (s, 3H), 2.43-2.35 (m, 4H) ppm.
실시예 34
2-({7-[(4-아세틸피페라진-1-일)메틸]-4-아미노-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-일}메톡시)아세트아미드
Figure 112014065561338-pct00146
THF/디클로로메탄 (1:2.5, 3.9 ml) 중 실시예 33 (105 mg, 68% 순도, 144 μmol)의 용액을 탄산나트륨 (179 mg, 1.6 mmol)으로 처리하고, rt에서 30 분동안 교반하였다. 아세틸 클로라이드 (30 μl, 424 μmol)를 첨가하고, 생성된 혼합물을 rt에서 30 분동안 교반한 후, 메탄올 (2 ml)로 퀀칭하고, 증발시켰다. 제조용 RP-HPLC로 정제하여 (Reprosil C18, 구배 10-95% 아세토니트릴/0.1% 수성 포름산) 30 mg (85% 순도, 이론치의 34%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 5): Rt = 1.67 min; MS (ESIpos): m/z = 538 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 7.99 (s, 1H), 7.40 (s, 1H), 7.33-7.19 (m, 3H), 6.85 (s, 1H), 4.55 (s, 2H), 3.96 (s, 5H), 3.80 (s, 2H), 3.43-3.36 (m, 4H), 2.47-2.38 (m, 7H), 1.97 (s, 3H) ppm.
실시예 35
5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)-6-(페녹시메틸)-7-(피페라진-1-일-메틸)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민 비스(포르미에이트)
Figure 112014065561338-pct00147
디클로로메탄 (2 ml) 중 중간체 23A (100 mg, 185 μmol)의 용액을 티오닐 클로라이드 (27 μl, 371 μmol)로 처리하였다. 혼합물을 rt에서 15 분동안 교반한 후, 증발시켰다. 잔사를 THF (2 ml)에 용해시키고, 페놀 (174 mg, 1.85 mmol) 및 DIPEA (48 μl, 278 μmol)로 처리한 후, 70 ℃에서 2 시간동안 교반하였다. 추가량의 페놀 (174 mg, 1.85 mmol) 및 DIPEA (64 μl, 371 μmol)를 첨가하고, 교반을 70 ℃에서 밤새 계속하였다. 증발후, 잔사를 1,4-디옥산중 염화수소의 4 M 용액 (2 ml)에 취하고, rt에서 2 시간동안 교반하였다. 증발하고 제조용 RP-HPLC로 정제하여 (Reprosil C18, 구배 10-95% 아세토니트릴/0.1% 수성 포름산) 8 mg (이론치의 8%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 2): Rt = 0.84 min; MS (ESIpos): m/z = 515 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 8.26 (s, 2H), 8.02 (s, 1H), 7.36 (s, 1H), 7.30-7.22 (m, 3H), 6.99-6.89 (m, 3H), 6.81 (m, 1H), 5.04 (s, 2H), 3.93 (s, 5H), 2.78-2.71 (m, 4H), 2.42 (s, 3H) ppm.
실시예 36
5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)-6-[(메틸아미노)메틸]-7-(피페라진-1-일-메틸)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민 트리하이드로클로라이드
Figure 112014065561338-pct00148
THF (3 ml) 중 중간체 25A (150 mg, 279 μmol)를 아세트산 (32 μl, 559 μmol), THF 중 메틸아민의 2 M 용액 (698 μl, 1.39 mmol) 및 소듐 트리아세톡시보로하이드라이드 (296 mg, 1.39 mmol)로 처리하였다. 혼합물을 60 ℃에서 2 시간동안 교반한 후, 증발시켰다. 잔사를 1,4-디옥산중 염화수소의 4 M 용액 (1.87 ml)에 용해시키고, rt에서 2 시간동안 교반하였다. 증발 후, 잔사를 제조용 RP-HPLC로 정제하였다 (Reprosil C18, 구배 10-95% 아세토니트릴/0.1% aq. TFA). 1,4-디옥산중 염화수소의 4 M 용액에서 동결건조하여 79 mg (이론치의 49%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 2): Rt = 0.56 min; MS (ESIpos): m/z = 452 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, D2O): δ = 8.17 (s, 1H), 7.57 (s, 1H), 7.46 (s, 1H), 7.01 (s, 1H), 4.52 (s, 2H), 4.46 (s, 2H), 4.04 (s, 3H), 3.48-3.39 (m, 4H), 3.25-3.15 (m, 4H), 2.59 (s, 3H), 2.51 (s, 3H) ppm.
실시예 37
6-[(디메틸아미노)메틸]-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)-7-(피페라진-1-일-메틸)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민 트리하이드로클로라이드
Figure 112014065561338-pct00149
THF (3 ml) 중 중간체 25A (150 mg, 279 μmol)의 용액을 아세트산 (32 μl, 559 μmol), THF 중 디메틸아민의 2 M 용액 (698 μl, 1.39 mmol) 및 소듐 트리아세톡시보로하이드라이드 (296 mg, 1.39 mmol)로 처리하였다. 혼합물을 60 ℃에서 2 시간동안 교반한 후, 증발시켰다. 잔사를 1,4-디옥산중 염화수소의 4 M 용액 (1.88 ml)에 용해시키고, rt에서 2 시간동안 교반하였다. 증발 후, 잔사를 제조용 RP-HPLC로 정제하였다 (Repro-sil C18, 구배 10-95% 아세토니트릴/0.1% aq. TFA). 1,4-디옥산중 염화수소의 4 M 용액에서 동결건조하여 83 mg (이론치의 50%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 4): Rt = 0.50 min; MS (ESIpos): m/z = 466 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, D2O): δ = 8.17 (s, 1H), 7.57 (s, 1H), 7.45 (s, 1H), 7.01 (s, 1H), 4.57 (s, 2H), 4.50 (s, 2H), 4.04 (s, 3H), 3.47-3.36 (m, 4H), 3.21-3.12 (m, 4H), 2.80 (s, 6H), 2.51 (s, 3H) ppm.
실시예 38
6-[(에틸아미노)메틸]-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)-7-(피페라진-1-일-메틸)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민 트리하이드로클로라이드
Figure 112014065561338-pct00150
THF (1 ml) 중 중간체 25A (60 mg, 111.8 μmol)의 용액을 THF 중 에틸아민의 2 M 용액 (83 μl, 167 μmol), 소듐 트리아세톡시보로하이드라이드 (118 mg, 559 μmol) 및 아세트산 (83 μl, 167 μmol)으로 처리하였다. 혼합물을 60 ℃에서 90 분동안 교반하였다. 추가량의 2 M 에틸아민 용액 (83 μl, 167 μmol) 및 소듐 트리아세톡시보로하이드라이드 (71 mg, 335 μmol)를 첨가하고, 교반을 60 ℃에서 2 시간동안 계속하였다. 증발 후, 잔사를 1,4-디옥산중 염화수소의 4 M 용액 (3 ml)에 용해시키고, rt에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 증발시키고, 잔사를 제조용 RP-HPLC로 정제한 후 (Reprosil C18, 구배 10-95% 아세토니트릴/0.1% 수성 포름산), 1,4-디옥산중 염화수소의 4 M 용액에서 동결건조하였다. 제조용 RP-HPLC로 재정제하고 (Sunfire C18, 20% 아세토니트릴/80% 0.02% aq. TFA), 1,4-디옥산중 염화수소의 4 M 용액으로 재동결건조하여 19 mg (이론치의 29%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 2): Rt = 0.56 min; MS (ESIpos): m/z = 466 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, D2O): δ = 8.14 (s, 1H), 7.56 (s, 1H), 7.45 (s, 1H), 7.01 (s, 1H), 4.45 (s, 4H), 4.04 (s, 3H), 3.45-3.32 (m, 4H), 3.18-3.05 (m, 4H), 2.99 (q, 2H), 2.51 (s, 3H), 1.10 (t, 3H) ppm.
실시예 39
2-({[4-아미노-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)-7-(피페라진-1-일메틸)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-일]메틸}아미노)에탄올 트리하이드로클로라이드
Figure 112014065561338-pct00151
THF (3 ml) 중 중간체 25A (150 mg, 279 μmol)의 용액을 2-아미노에탄올 (84 μl, 1.39 mmol), 소듐 트리아세톡시보로하이드라이드 (296 mg, 1.39 mmol) 및 아세트산 (32 μl, 559 μmol)으로 처리하였다. 혼합물을 60 ℃에서 2 시간동안 교반한 후, 증발시켰다. 잔사를 1,4-디옥산중 염화수소의 4 M 용액 (1.87 ml)에 용해시키고, rt에서 2 시간동안 교반하였다. 증발 후, 잔사를 제조용 RP-HPLC로 정제하였다 (Repro-sil C18, 구배 10-95% 아세토니트릴/0.1% aq. TFA). 1,4-디옥산중 염화수소의 4 M 용액에서 동결건조하여 140 mg (이론치의 80%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 2): Rt = 0.54 min; MS (ESIpos): m/z = 482 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, D2O): δ = 8.15 (s, 1H), 7.56 (s, 1H), 7.45 (s, 1H), 7.00 (s, 1H), 4.47 (s, 2H), 4.37 (s, 2H), 4.04 (s, 3H), 3.79-3.71 (m, 2H), 3.42-3.34 (m, 4H), 3.19-3.12 (m, 2H), 3.06-2.97 (m, 4H), 2.51 (s, 3H) ppm.
중간체 25A와의 환원적 아미노화를 위한 일반적인 절차 (GP1):
THF 중 중간체 25A의 0.1 M 용액을 5 eq.의 각각의 아민 성분, 5 eq.의 소듐 트리아세톡시보로하이드라이드 및 2 eq.의 아세트산으로 처리하였다. 생성된 혼합물을 60 ℃에서 2 시간동안 교반한 후, 증발시켰다. 1,4-디옥산중 염화수소의 4 M 용액중의 상기 얻은 잔사의 0.15 M 용액을 rt에서 1-2 시간동안 교반하였다. 증발 후, 잔사를 후술하는 바와 같이 정제하였다.
실시예 40
rac-1-{[4-아미노-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)-7-(피페라진-1-일메틸)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-일]메틸}피페리딘-3-올 트리하이드로클로라이드
Figure 112014065561338-pct00152
중간체 25A (150 mg, 279 μmol)를 3-하이드록시피페리딘 (141 mg, 1.39 mmol)과 GP1에 따라 반응시켰다. 제조용 RP-HPLC로 정제하고 (Reprosil C18, 구배 10-95% 아세토니트릴/0.1% aq. TFA), 1,4-디옥산중 염화수소의 4 M 용액에서 동결건조하여 178 mg (정량적)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 2): Rt = 0.54 min; MS (ESIpos): m/z = 522 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, D2O): δ = 8.16 (s, 1H), 7.55 (s, 1H), 7.45 (s, 1H), 7.01 (s, 1H), 4.66-4.16 (m, 5H), 4.04 (s, 3H), 3.55-2.71 (m, 11H), 2.51 (s, 3H), 1.96-1.42 (m, 4H), 1.64-1.50 (m, 1H) ppm.
실시예 41
1-{[4-아미노-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)-7-(피페라진-1-일메틸)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-일]메틸}피페리딘-4-올 트리하이드로클로라이드
Figure 112014065561338-pct00153
중간체 25A (150 mg, 279 μmol)를 4-하이드록시피페리딘 (141 mg, 1.39 mmol)와 GP1에 따라 반응시켰다. 제조용 RP-HPLC로 정제하고 (Reprosil C18, 구배 10-95% 아세토니트릴/0.1% aq. TFA), 1,4-디옥산중 염화수소의 4 M 용액에서 동결건조하여 162 mg (이론치의 91%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 4): Rt = 0.48 min; MS (ESIpos): m/z = 522 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, D2O): δ = 8.16 (s, 1H), 7.58 (br. s, 1H), 7.46 (s, 1H), 7.01 (s, 1H), 4.67-4.48 (m, 4H), 4.04 (s, 4H), 3.59-2.78 (m, 12H), 2.51 (s, 3H), 2.14-1.38 (m, 4H) ppm.
실시예 42
rac-1-{[4-아미노-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)-7-(피페라진-1-일메틸)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-일]메틸}피롤리딘-3-올 트리하이드로클로라이드
Figure 112014065561338-pct00154
중간체 25A (150 mg, 279 μmol)를 3-하이드록시피롤리딘 (113 μl, 1.39 mmol)과 GP1에 따라 반응시켰다. 제조용 RP-HPLC로 정제하고 (Reprosil C18, 구배 10-95% 아세토니트릴/0.1% aq. TFA), 1,4-디옥산중 염화수소의 4 M 용액에서 동결건조하여 148 mg (이론치의 85%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 4): Rt = 0.46 min; MS (ESIpos): m/z = 508 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, D2O): δ = 8.18 (s, 1H), 7.58 (s, 1H), 7.46 (s, 1H), 7.01 (s, 1H), 4.71-4.30 (m, 5H), 4.04 (s, 3H), 3.70-2.95 (m, 12H), 2.51 (s, 3H), 2.32-2.14 (m, 1H), 2.03-1.87 (m, 1H) ppm.
실시예 43
6-[(디에틸아미노)메틸]-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)-7-(피페라진-1-일-메틸)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민 트리하이드로클로라이드
Figure 112014065561338-pct00155
중간체 25A (150 mg, 279 μmol)를 디에틸아민 (144 μl, 1.39 mmol)과 GP1에 따라 반응시켰다. 제조용 RP-HPLC로 정제하고 (Reprosil C18, 구배 10-95% 아세토니트릴/ 0.1% aq. TFA), 1,4-디옥산중 염화수소의 4 M 용액에서 동결건조하여 127 mg (이론치의 69%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 2): Rt = 0.55 min; MS (ESIpos): m/z = 494 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, D2O): δ = 8.19 (s, 1H), 7.61 (s, 1H), 7.47 (s, 1H), 7.01 (s, 1H), 4.59 (s, 2H), 4.51 (s, 2H), 4.04 (s, 3H), 3.47-3.35 (m, 4H), 3.29-3.00 (m, 8H), 2.51 (s, 3H), 1.07 (t, 6H) ppm.
실시예 44
6-[(사이클로부틸아미노)메틸]-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)-7-(피페라진-1-일-메틸)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민 트리하이드로클로라이드
Figure 112014065561338-pct00156
중간체 25A (150 mg, 279 μmol)를 사이클로부틸아민 (119 μl, 1.39 mmol)과 GP1에 따라 반응시켰다. 제조용 RP-HPLC로 정제하고 (Reprosil C18, 구배 10-95% 아세토니트릴/0.1% aq. TFA), 1,4-디옥산중 염화수소의 4 M 용액에서 동결건조하여 127 mg (이론치의 72%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 2): Rt = 0.58 min; MS (ESIpos): m/z = 492 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, D2O): δ = 8.16 (s, 1H), 7.59 (s, 1H), 7.47 (s, 1H), 7.00 (s, 1H), 4.40 (s, 2H), 4.37 (s, 2H), 4.04 (s, 3H), 3.69-3.58 (m, 1H), 3.44-3.33 (m, 4H), 3.21-3.12 (m, 4H), 2.51 (s, 3H), 2.02-1.87 (m, 4H), 1.81-1.62 (m, 2H) ppm.
실시예 45
5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)-7-(피페라진-1-일메틸)-6-(피롤리딘-1-일-메틸)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민 트리하이드로클로라이드
Figure 112014065561338-pct00157
중간체 25A (150 mg, 279 μmol)를 피롤리딘 (116 μl, 1.39 mmol)과 GP1에 따라 반응시켰다. 제조용 RP-HPLC로 정제하고 (Reprosil C18, 구배 10-95% 아세토니트릴/ 0.1% aq. TFA), 1,4-디옥산중 염화수소의 4 M 용액에서 동결건조하여 112 mg (이론치의 64%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 2): Rt = 0.54 min; MS (ESIpos): m/z = 492 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, D2O): δ = 8.19 (s, 1H), 7.60 (s, 1H), 7.46 (s, 1H), 7.01 (s, 1H), 4.70-4.61 (m, 4H), 4.04 (s, 3H), 3.55-3.40 (m, 6H), 3.35-3.26 (m, 4H), 3.02-2.87 (m, 2H), 2.51 (s, 3H), 1.97-1.83 (m, 4H) ppm.
실시예 46
6-[(사이클로프로필아미노)메틸]-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)-7-(피페라진-1-일-메틸)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민 트리하이드로클로라이드
Figure 112014065561338-pct00158
중간체 25A (200 mg, 372 μmol)를 사이클로프로필아민 (129 μl, 1.86 mmol)과 GP1에 따라 반응시켰다. 제조용 RP-HPLC로 정제하고 (Reprosil C18, 구배 10-95% 아세토니트릴/0.1% aq. TFA), 1,4-디옥산중 염화수소의 4 M 용액에서 동결건조하여 140 mg (이론치의 62%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 5): Rt = 1.42 min; MS (ESIpos): m/z = 478 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, D2O): δ = 8.16 (s, 1H), 7.56 (s, 1H), 7.46 (s, 1H), 7.01 (s, 1H), 4.57 (s, 2H), 4.47 (s, 2H), 4.04 (s, 3H), 3.46-3.34 (m, 4H), 3.19-3.07 (m, 4H), 2.61-2.54 (m, 1H), 2.51 (s, 3H), 0.75-0.64 (m, 4H) ppm.
실시예 47
6-{[(사이클로프로필메틸)아미노]메틸}-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)-7-(피페라진-1-일메틸)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민 트리하이드로클로라이드
Figure 112014065561338-pct00159
중간체 25A (200 mg, 372 μmol)를 사이클로프로필메틸아민 (161 μl, 1.86 mmol)과 GP1에 따라 반응시켰다. 제조용 RP-HPLC로 정제하고 (Reprosil C18, 구배 10-95% 아세토니트릴/0.1% aq. TFA), 1,4-디옥산중 염화수소의 4 M 용액에서 동결건조하여 163 mg (이론치의 69%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 2): Rt = 0.60 min; MS (ESIpos): m/z = 492 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, D2O): δ = 8.14 (s, 1H), 7.57 (s, 1H), 7.45 (s, 1H), 7.00 (s, 1H), 4.50 (s, 2H), 4.44 (s, 2H), 4.04 (s, 3H), 3.42-3.34 (m, 4H), 3.16-3.07 (m, 4H), 2.86 (d, 2H), 2.50 (s, 3H), 0.89-0.76 (m, 1H), 0.55-0.45 (m, 2H), 0.23-0.14 (m, 2H) ppm.
실시예 48
N-{[4-아미노-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)-7-(피페라진-1-일메틸)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-일]메틸}글리신 트리하이드로클로라이드
Figure 112014065561338-pct00160
THF (3.2 ml) 중 중간체 25A (161 mg, 300 μmol)의 용액을 2-아미노아세트산 (112 mg, 1.5 mmol), 소듐 트리아세톡시보로하이드라이드 (317 mg, 1.5 mmol) 및 아세트산 (34 μl, 600 μmol)으로 처리하였다. 생성된 혼합물을 60 ℃에서 2 시간동안 교반한 후, 증발시켰다. 잔사를 제조용 RP-HPLC로 정제하였다 (Reprosil C18, 구배 10-95% 아세토니트릴/0.1% aq. TFA). 얻은 생성물을 1,4-디옥산중 염화수소의 4 M 용액 (2 ml)에 용해시키고, rt에서 1 시간동안 교반하였다. 증발 후, 잔사를 제조용 RP-HPLC로 정제하였다 (Reprosil C18, 구배 10-95% 아세토니트릴/0.1% aq. TFA). 이어 1,4-디옥산중 염화수소의 4 M 용액에서 동결건조하여 18 mg (이론치의 9%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 2): Rt = 0.63 min; MS (ESIpos): m/z = 496 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, D2O): δ = 8.14 (s, 1H), 7.54 (s, 1H), 7.45 (s, 1H), 6.99 (s, 1H), 4.42 (s, 2H), 4.36 (s, 2H), 4.03 (s, 3H), 3.64 (s, 2H), 3.42-3.33 (m, 4H), 3.07-2.96 (m, 4H), 2.50 (s, 3H) ppm.
실시예 49
4-{[4-아미노-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)-7-(피페라진-1-일메틸)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-일]메틸}피페라진-2-온 트리하이드로클로라이드
Figure 112014065561338-pct00161
1,4-디옥산중 염화수소의 4 M 용액 (2 ml) 중 중간체 27A (220 mg, 354 μmol)의 용액을 rt에서 2 시간동안 교반하였다. 이어, 혼합물을 증발시켜 235 mg의 조생성물을 얻고 추가 정제없이 다음 단계에 사용하였다.
LC-MS (방법 4): Rt = 0.60 min; MS (ESIpos): m/z = 521 (M+H)+.
실시예 50
[4-아미노-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)-7-(모르폴린-4-일메틸)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-일]메탄올
Figure 112014065561338-pct00162
DMF (28 ml) 중 중간체 20A (500 mg, 순도 87%, 1.28 mmol) 및 4-메틸렌모르폴린-4-윰 클로라이드 (347 mg, 2.56 mmol)의 용액을 70 ℃에서 1.5 시간동안 교반하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석한 다음, 포화 탄산수소나트륨 수용액 및 포화 염화나트륨 수용액으로 세척하였다. 유기층을 황산마그네슘에서 건조시키고, 감압하에 증발시켜 710 mg (순도 78%, 이론치의 99%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 2): Rt = 0.65 min; MS (ESIpos): m/z = 440 (M+H)+.
실시예 51
(3S)-3-({[4-아미노-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)-7-(모르폴린-4-일메틸)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-일]메틸}아미노)피롤리딘-2-온
Figure 112014065561338-pct00163
메탄올 (2 ml) 중 중간체 33A (65 mg, 149 μmol)의 용액을 (3S)-3-아미노피롤리딘-2-온 (45 mg, 446 μmol), 소듐 시아노보로하이드라이드 (47 mg, 743 μmol) 및 아세트산 (26 μl, 446 mmol)으로 처리하였다. 60 ℃에서 16 시간동안 교반한 후, 생성된 혼합물을 제조용 RP-HPLC로 분리하였다 (Reprosil C18, 구배 20-40% 아세토니트릴/0.2% aq. TFA). 얻은 생성물을 메탄올에 용해시킨 다음, 음이온 교환 캐트리지를 통해 여과하였다 (Strato-spheres SPE, PL-HCO3 MP-수지). 캐트리지를 메탄올로 용출하고, 여액을 증발시켜 49 mg (이론치의 63%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 2): Rt = 0.71 min; MS (ESIpos): m/z = 522 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 7.96 (s, 1H), 7.66 (s, 1H), 7.5-8.1 (br. s, 1H), 7.44 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.84 (s, 1H), 5.4-6.0 (br. s, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.91 (s, 2H), 3.75 (d, 2H), 3.50-3.66 (m, 4H), 3.06-3.19 (m, 3H), 2.94-3.05 (m, 1H), 2.61 (t, 1H), 2.45 (t, 3H), 2.38-2.44 (m, 4H), 1.89-1.99 (m, 1H), 1.49-1.60 (m, 1H) ppm.
실시예 52
4-{[4-아미노-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)-7-(모르폴린-4-일메틸)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-일]메틸}피페라진-2-온
Figure 112014065561338-pct00164
메탄올 (2 ml) 중 중간체 33A (65 mg, 149 μmol)의 용액을 2-옥소피페라진 (45 mg, 446 μmol), 소듐 시아노보로하이드라이드 (47 mg, 743 μmol) 및 아세트산 (26 μl, 446 μmol)으로 처리하였다. 60 ℃에서 16 시간동안 교반한 후, 생성된 혼합물을 제조용 RP-HPLC로 분리하였다 (Reprosil C18, 구배 20-40% 아세토니트릴/0.2% aq. TFA). 얻은 생성물을 메탄올에 용해시킨 다음, 음이온 교환 캐트리지를 통해 여과하였다 (Strato-spheres SPE, PL-HCO3 MP-수지). 캐트리지를 메탄올로 용출하고, 여액을 증발시켜 41 mg (이론치의 53%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 2): Rt = 0.70 min; MS (ESIpos): m/z = 522 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 7.97 (s, 1H), 7.67 (br. s, 1H), 7.55-8.05 (br. s, 1H), 7.38 (s, 1H), 7.30 (s, 1H), 6.84 (s, 1H), 5.29-5.88 (br. s, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.92 (s, 2H), 3.58 (s, 2H), 3.51-3.56 (m, 4H), 3.00-3.06 (m, 2H), 2.85 (s, 2H), 2.45 (s, 3H), 2.43-2.48 (m, 5H) ppm.
실시예 53
rac-1-({[4-아미노-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)-7-(모르폴린-4-일메틸)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-일]메틸}아미노)프로판-2-올
Figure 112014065561338-pct00165
메탄올 (2 ml) 중 중간체 33A (64 mg, 146 μmol)의 용액을 rac-1-아미노-프로판-2-올 (33 mg, 439 μmol), 소듐 시아노보로하이드라이드 (46 mg, 731 μmol) 및 아세트산 (25 μl, 439 μmol)으로 처리하였다. 60 ℃에서 16 시간동안 교반한 후, 생성된 혼합물을 제조용 RP-HPLC로 분리하였다 (Reprosil C18, 구배 20-40% 아세토니트릴/0.2% aq. TFA). 얻은 생성물을 메탄올에 용해시킨 다음, 음이온 교환 캐트리지를 통해 여과하였다 (Strato-spheres SPE, PL-HCO3 MP-수지). 캐트리지를 메탄올로 용출하고, 여액을 증발시켜 42 mg (이론치의 57%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 5): Rt = 1.63 min; MS (ESIpos): m/z = 497 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 7.96 (s, 1H), 7.47-7.92 (br. s, 1H), 7.39 (s, 1H), 7.30 (s, 1H), 6.84 (s, 1H), 5.36-5.92 (br. s, 1H), 4.36 (d, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.90 (s, 2H), 3.64-3.75 (m, 2H), 3.49-3.61 (m, 5H), 2.45 (s, 3H), 2.39-2.47 (m, 4H), 2.31-2.38 (m, 2H), 0.97 (d, 3H) ppm.
실시예 54
1-({[4-아미노-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)-7-(모르폴린-4-일메틸)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-일]메틸}아미노)-2-메틸프로판-2-올
Figure 112014065561338-pct00166
메탄올 (2 ml) 중 중간체 33A (80 mg, 183 μmol)의 용액을 1-아미노-2-메틸프로판-2-올 (34 mg, 274 μmol), 소듐 시아노보로하이드라이드 (57 mg, 914 μmol) 및 아세트산 (21 μl, 366 μmol)으로 처리하였다. 60 ℃에서 16 시간동안 교반한 후, 생성된 혼합물을 제조용 RP-HPLC로 분리하였다 (Reprosil C18, 구배 20-40% 아세토니트릴/0.2% aq. TFA). 얻은 생성물을 메탄올에 용해시킨 다음, 음이온 교환 캐트리지를 통해 여과하였다 (Strato-spheres SPE, PL-HCO3 MP-수지). 캐트리지를 메탄올로 용출하고, 여액을 증발시켜 29 mg (이론치의 31%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 2): Rt = 0.65 min; MS (ESIpos): m/z = 511 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 7.96 (s, 1H), 7.50-8.02 (br. s, 1H), 7.42 (s, 1H), 7.28 (s, 1H), 6.84 (s, 1H), 5.4-6.0 (br. s, 1H), 4.11 (s, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.90 (s, 2H), 3.70 (d, 2H), 3.51-3.58 (m, 4H), 2.45 (s, 3H), 2.39-2.46 (m, 4H), 2.33 (d, 2H), 1.83-1.92 (m, 1H), 1.03 (s, 6H) ppm.
실시예 55
1-(4-{[4-아미노-6-(하이드록시메틸)-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일]메틸}피페라진-1-일)에타논
Figure 112014065561338-pct00167
아세트산 (5 ml) 중 중간체 20A (345 mg, 1.01 mmol)의 용액을 37% 수성 포름알데하이드 용액 (91 μl, 1.22 mmol) 및 1-아세틸피페라진 (160 mg, 1.22 mmol)으로 처리하였다. 혼합물을 60 ℃에서 6 시간동안 교반한 후, 증발시켰다. 잔사를 THF/1 M aq. 수산화리튬 용액 (1:1, 10 ml)의 혼합물에 용해시키고, rt에서 2 시간동안 교반하였다. 이어 혼합물을 100 mg 시험 수행의 반응 혼합물과 합하고, 포화 염화암모늄 수용액을 첨가하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트로 추출하고, 유기상을 포화 염화나트륨 수용액으로 세척한 후, 황산마그네슘에서 건조시킨 다음, 감압하에 증발시켜 678 mg (순도 87%, 이론치의 94%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 2): Rt = 0.71 min; MS (ESIpos): m/z = 481 (M+H)+.
실시예 56
(3R)-3-[({7-[(4-아세틸피페라진-1-일)메틸]-4-아미노-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-일}메틸)아미노]피롤리딘-2-온
Figure 112014065561338-pct00168
메탄올 (1.4 ml) 중 중간체 31A (80 mg, 167 μmol)의 용액을 (3R)-3-아미노피롤리딘-2-온 (21 mg, 251 μmol), 소듐 시아노보로하이드라이드 (52 mg, 836 μmol) 및 아세트산 (19 μl, 334 μmol)으로 처리하였다. 60 ℃에서 16 시간동안 교반한 후, 생성된 혼합물을 제조용 RP-HPLC로 분리하였다 (Reprosil C18, 구배 20-40% 아세토니트릴/0.2% aq. TFA). 얻은 생성물을 메탄올에 용해시킨 다음, 음이온 교환 캐트리지를 통해 여과하였다 (Strato-spheres SPE, PL-HCO3 MP-수지). 캐트리지를 메탄올로 용출하고, 여액을 증발시켜 46 mg (이론치의 49%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 2): Rt = 0.70 min; MS (ESIpos): m/z = 563 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 8.42 (s, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.93-8.24 (br. s, 1H), 7.51 (s, 1H), 7.34 (s, 1H), 6.88 (s, 1H), 5.75-6.07 (br. s, 1H), 4.21-4.37 (m, 2H), 4.19 (s, 2H), 4.10 (t, 1H), 3.96 (s, 3H), 3.56-3.66 (m, 2H), 3.44-3.54 (m, 4H), 3.11-3.27 (m, 4H), 2.47 (s, 4H), 2.16-2.25 (m, 1H), 2.00 (s, 3H), 1.86-1.95 (m, 1H) ppm.
실시예 57
1-(4-{[4-아미노-6-{[(2-하이드록시-2-메틸프로필)아미노]메틸}-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조-티오펜-2-일)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일]메틸}피페라진-1-일)에타논
Figure 112014065561338-pct00169
메탄올 (2 ml) 중 중간체 31A (80 mg, 183 μmol)의 용액을 1-아미노-2-메틸프로판-2-올 (31 mg, 251 μmol), 소듐 시아노보로하이드라이드 (53 mg, 836 μmol) 및 아세트산 (19 μl, 334 μmol)으로 처리하였다. 60 ℃에서 16 시간동안 교반한 후, 생성된 혼합물을 제조용 RP-HPLC로 분리하였다 (Reprosil C18, 구배 20-40% 아세토니트릴/0.2% aq. TFA). 얻은 생성물을 메탄올에 용해시킨 다음, 음이온 교환 캐트리지를 통해 여과하였다 (Strato-spheres SPE, PL-HCO3 MP-수지). 캐트리지를 메탄올로 용출하고, 여액을 증발시켜 29 mg (이론치의 31%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 2): Rt = 0.71 min; MS (ESIpos): m/z = 552 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 7.96 (s, 1H), 7.59-8.02 (br. s, 1H), 7.42 (s, 1H), 7.28 (s, 1H), 6.84 (s, 1H), 5.45-5.93 (br. s, 1H), 4.13 (br. s, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.93 (s, 2H), 3.71 (s, 2H), 3.37-3.44 (m, 4H), 2.45 (s, 3H), 2.32-2.43 (m, 6H), 1.97 (s, 3H), 1.03 (s, 6H) ppm.
실시예 58
4-({4-아미노-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)-6-[(3-옥소피페라진-1-일)메틸]-피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일}메틸)피페라진-1-카브알데하이드 포르미에이트
Figure 112014065561338-pct00170
아세트산 무수물 (498 μl, 5.17 mmol) 및 포름산 (237 μl, 6.28 mmol)을 먼저 50 ℃에서 2 시간, 이어 rt에서 밤새 교반하였다. 이어서, 혼합물을 디클로로메탄 (5.1 ml)으로 희석한 다음, 이 용액 1.16 ml를 피리딘 (89 μl) 중 실시예 49 (233 mg, 370 μmol)의 용액에 첨가하였다. rt에서 2 시간동안 교반한 후, 혼합물을 메탄올로 희석한 다음, 증발시켰다. 잔사를 제조용 RP-HPLC로 정제하여 (Reprosil C18, 구배 10-95% 아세토니트릴/0.1% 수성 포름산) 77 mg (이론치의 35%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 4): Rt = 0.62 min; MS (ESIpos): m/z = 549 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): inter al. δ = 8.14 (s, 1H), 7.97 (s, 2H), 7.67 (s, 1H), 7.38 (s, 1H), 7.30 (s, 1H), 6.84 (s, 1H), 3.96 (s, 2H), 3.95 (s, 3H), 3.58 (s, 2H), 3.04 (br. t, 2H), 2.86 (s, 2H), 2.45 (s, 3H), 2.42 (br. t, 2H) ppm.
실시예 59
4-({7-[(4-아세틸피페라진-1-일)메틸]-4-아미노-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-일}메틸)피페라진-2-온
Figure 112014065561338-pct00171
디클로로메탄/THF (2.5:1, 9.64 ml) 중 실시예 49 (310 mg, 522 μmol)의 현탁물을 탄산나트륨 (442 mg, 4.17 mmol)으로 처리하고, rt에서 30 분동안 교반하였다. 아세틸 클로라이드 (74 μl, 1.04 mmmol)를 첨가하고, 생성된 혼합물을 rt에서 2 시간동안 교반하였다. 메탄올로 퀀칭한 후, 혼합물을 증발시키고, 잔사를 제조용 RP-HPLC로 정제하여 (Reprosil C18, 구배 10-95% 아세토니트릴/0.1% 수성 포름산) 133 mg (이론치의 45%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 2): Rt = 0.69 min; MS (ESIpos): m/z = 563 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, 메탄올-d4): δ = 7.89 (s, 1H), 7.30 (s, 1H), 7.28 (s, 1H), 6.79 (s, 1H), 4.13 (s, 2H), 3.98 (s, 3H), 3.74 (s, 2H), 3.59 (t, 2H), 3.54 (t, 2H), 3.18 (t, 2H), 3.02 (s, 2H), 2.68-2.55 (m, 6H), 2.48 (s, 3H), 2.08 (s, 3H) ppm.
실시예 60
메틸 4-아미노-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)-7-(피페라진-1-일카보닐)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-카복실레이트 비스(포르미에이트)
Figure 112014065561338-pct00172
0 ℃로 냉각시킨 THF/메탄올 혼합물 (5:1, 180 μl) 중 중간체 28A (15 mg, 26 μmol)의 용액에 (트리메틸실릴)디아조메탄 (헥산중 2 M 용액, 15 μl, 32 μmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 30 분간 rt로 서서히 가온하고, 증발시켰다. 잔사를 1,4-디옥산중 염화수소의 4 M 용액 (0.5 ml)에 용해시키고, rt에서 1 시간동안 교반하였다. 증발 후, 잔사를 제조용 RP-HPLC로 정제하여 (Reprosil C18, 구배 10-95% 아세토니트릴/0.1% 수성 포름산) 4.8 mg (이론치의 35%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 2): Rt = 0.66 min; MS (ESIpos): m/z = 481 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): inter al. δ = 8.17 (s, 2H), 8.38-8.23 (br. s, 1H), 8.04 (s, 1H), 7.43 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.86 (s, 1H), 5.71-5.58 (br. s, 1H), 3.96 (s, 3H), 3.60 (s, 3H, 물 피크와 오버랩), 2.46 (s, 3H) ppm.
실시예 61
5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)-6-(1,3-옥사졸-5-일)-7-(피페라진-1-일메틸)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민 트리하이드로클로라이드
Figure 112014065561338-pct00173
메탄올 (3.33 ml) 중 중간체 25A (100 mg, 0.19 mmol)의 용액을 (4-톨루엔-설포닐)메틸이소시아나이드 (36 mg, 0.19 mmol) 및 탄산칼륨 (25 mg, 186 μmol)으로 처리하였다. 혼합물을 6 시간동안 환류시켰다. 이어, 이를 세번의 30 mg 시험 수행 반응 혼합물과 합해 증발시켰다. 잔사를 1,4-디옥산중 염화수소의 4 M 용액 (10 ml)에 용해시키고, rt에서 2 시간동안 교반하였다. 증발 후, 잔사를 투폴드 제조용 RP-HPLC로 정제하였다 (Reprosil C18, 구배 10-95% 아세토니트릴/0.1% aq. TFA). 실리카겔 상에서 컬럼 크로마토그래피로 추가 정제하고 (디클로로메탄/메탄올 5:1 + 0.5% aq. 암모니아), 1,4-디옥산중 염화수소의 4 M 용액에서 동결건조하여 75 mg (이론치의 34%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 4): Rt = 0.69 min; MS (ESIpos): m/z = 476 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): inter al. δ = 8.40 (s, 1H), 8.20 (s, 1H), 7.46 (s, 1H), 7.35 (s, 1H), 6.96 (s, 1H), 6.89 (s, 1H), 3.95 (s, 3H), 2.46 (s, 3H) ppm.
실시예 62
6-(아미노메틸)-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)-7-(피페라진-1-일메틸)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민 트리하이드로클로라이드
Figure 112014065561338-pct00174
메탄올중 염화수소의 0.5 M 용액 (20 ml) 중 중간체 29A (76 mg, 134 μmol) 및 10% Pd/C (60 mg)의 현탁물을 rt에서 3 시간동안 1 atm의 수소하에 교반하였다. 이어 혼합물을 키젤구어를 통해 여과하고, 여액을 증발시킨 후, 잔사를 제조용 RP-HPLC로 정제하였다 (Reprosil C18, 구배 10-95% 아세토니트릴/0.1% aq. TFA). 얻은 생성물을 1,4-디옥산중 염화수소의 4 M 용액에서 동결건조하여 34 mg (이론치의 46%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 2): Rt = 0.55 min; MS (ESIpos): m/z = 438 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): inter al. δ = 8.24 (br. s, 3H), 8.12 (s, 1H), 7.52 (s, 1H), 7.34 (s, 1H), 6.89 (s, 1H), 3.96 (s, 3H), 3.76-3.63 (m, 1H), 3.52-3.42 (m, 1H), 2.47 (s, 3H) ppm.
실시예 63
N-{[4-아미노-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)-7-(피페라진-1-일메틸)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-일]메틸}아세트아미드 비스(트리플루오로아세테이트)
Figure 112014065561338-pct00175
디클로로메탄 (26 ml) 중 중간체 30A (210 mg, 362 μmol)의 용액을 트리플루오로아세트산 (5.2 ml)으로 처리하고, rt에서 1 시간동안 교반하였다. rt에서 증발 후, 잔사를 제조용 RP-HPLC로 정제하여 (Reprosil C18, 구배 10-95% 아세토니트릴/0.1% aq. TFA) 163 mg (이론치의 63%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 3): Rt = 2.42 min; MS (ESIpos): m/z = 480 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): inter al. δ = 9.00-8.75 (br. s, 1H), 8.30-8.16 (br. s, 1H), 8.08 (s, 1H), 7.38 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.87 (s, 1H), 4.32 (br. d, 2H), 3.96 (s, 3H), 3.40-2.98 (m, 8H), 2.46 (s, 3H), 1.77 (s, 3H) ppm.
실시예 64
N-{[4-아미노-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)-7-(피페라진-1-일메틸)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-일]메틸}아세트아미드 디하이드로클로라이드
Figure 112014065561338-pct00176
디클로로메탄 (10 ml) 및 트리플루오로아세트산 (2 ml) 중 중간체 30A (80 mg, 0.14 mmol)의 용액을 rt에서 1 시간동안 교반한 후, 증발시켰다. 제조용 RP-HPLC로 정제하고 (Repro-sil C18, 구배 10-95% 아세토니트릴/0.1% 수성 포름산), 메탄올 및 1,4-디옥산중 염화수소의 4 M 용액의 혼합물에서 동결건조하여 39 mg (이론치의 50%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 5): Rt = 1.56 min; MS (ESIpos): m/z = 480 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): inter al. δ = 8.12 (s, 1H), 7.38 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.87 (s, 1H), 4.37 (br. d, 2H), 3.96 (s, 3H), 3.85-3.20 (m, 8H, 물 피크와 오버랩), 2.46 (s, 3H), 1.76 (s, 3H) ppm.
실시예 65
N-({4-아미노-7-[(4-포르밀피페라진-1-일)메틸]-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-일}메틸)아세트아미드 포르미에이트
Figure 112014065561338-pct00177
아세트산 무수물 (304 μl, 3.16 mmol) 및 포름산 (145 μl, 3.16 mmol)을 먼저 50 ℃에서 2 시간, 이어 rt에서 밤새 교반하였다. 이어서, 혼합물을 디클로로메탄 (3.1 ml)으로 희석한 다음, 이 용액 663 ㎕를 피리딘 (54 μl) 중 실시예 63 (160 mg, 226 μmol)의 용액에 첨가하였다. 혼합물을 rt에서 2 시간동안 교반하고, 메탄올 (1 ml)로 희석한 다음, 교반을 40 ℃에서 2 시간동안 계속하였다. 증발 후, 잔사를 제조용 RP-HPLC로 정제하여 (Reprosil C18, 구배 10-95% 아세토니트릴/0.1% 수성 포름산) 74 mg (이론치의 61%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 4): Rt = 0.65 min; MS (ESIpos): m/z = 508 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 8.13 (s, 1H), 8.06-7.89 (m, 3H), 7.38 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.85 (s, 1H), 4.28 (d, 2H), 4.01-3.88 (m, 5H), 2.47-2.34 (m, 7H), 1.75 (s, 3H) ppm.
실시예 66
N-({7-[(4-아세틸피페라진-1-일)메틸]-4-아미노-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-일}메틸)아세트아미드
Figure 112014065561338-pct00178
THF/ 디클로로메탄 (1:2, 3 ml) 중 실시예 63 (110 mg, 229 μmol) 및 아세틸 클로라이드 (32 μl, 458 μmol)의 용액을 탄산나트륨 (194 mg, 1.83 mmol)으로 처리하고, rt에서 밤새 교반하였다. 이어, 혼합물을 메탄올 (2 ml) 및 물 (1 ml)로 희석한 다음, rt에서 1 시간동안 교반하였다. 증발 후, 잔사를 제조용 RP-HPLC로 정제하였다 (Reprosil C18, 구배 10-95% 아세토니트릴/0.1% 수성 포름산). 1,4-디옥산에서 동결건조하고, 실리카겔 상에서 컬럼 크로마토그래피로 재정제하여 (디클로로메탄/메탄올 50:1 → 100% 메탄올) 35 mg (이론치의 28%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 2): Rt = 0.70 min; MS (ESIpos): m/z = 522 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 8.04-7.98 (m, 2H), 7.38 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.85 (s, 1H), 4.27 (d, 2H), 3.95 (s, 3H), 3.91 (s, 2H), 3.44-3.36 (m, 4H), 2.48-2.35 (m, 7H), 1.98 (s, 3H), 1.75 (s, 3H) ppm.
실시예 67
N-({4-아미노-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)-7-[(3-옥소피페라진-1-일)메틸]-피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-일}메틸)아세트아미드
Figure 112014065561338-pct00179
메탄올 (4.1 ml) 중 중간체 32A (35 mg, 73 μmol)의 현탁물을 아세트산 무수물 (13 μl, 146 μmol) 및 10% Pd/C (41 mg)로 처리하고, rt에서 1 시간동안 1 atm의 수소하에 교반하였다. 키젤구어를 통해 여과하고, 여액을 증발시켜 30 mg (이론치의 79%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 5): Rt = 1.65 min; MS (ESIpos): m/z = 494 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 7.99 (s, 2H), 7.75 (br. s, 1H), 7.39 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.85 (s, 1H), 4.27 (s, 1H), 4.26 (s, 1H), 3.95 (s, 5H), 3.19-3.08 (m, 2H), 3.05-2.96 (m, 2H), 2.66-2.57 (m, 2H), 2.45 (s, 3H), 1.72 (s, 3H) ppm.
실시예 68
4-아미노-6-(하이드록시메틸)-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-카보니트릴
Figure 112014065561338-pct00180
THF (10 ml) 중 중간체 38A (1 g, 2.08 mmol)의 용액을 THF 중 테트라-n-부틸암모늄 플루오라이드의 1 M 용액 (12 ml, 12 mmol)으로 처리하였다. 혼합물을 rt에서 밤새 교반한 후, 증발시켰다. 잔사를 물에 취하고, 에틸 아세테이트로 3회 추출하였다. 모아진 유기상을 황산마그네슘에서 건조시키고, 증발시켰다. 잔사를 tert-부틸 메틸 에테르에서 연마하고, 고체를 여과하여 680 mg (이론치의 78%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 2): Rt = 0.95 min; MS (ESIpos): m/z = 366 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 8.61-8.29 (br. s, 1H), 8.18 (s, 1H), 7.43 (s, 1H), 7.32 (s, 1H), 6.87 (s, 1H), 6.32-6.03 (br. s, 1H), 5.46 (t, 1H), 4.55 (d, 2H), 3.96 (s, 3H), 2.45 (s, 3H) ppm.
실시예 69
4-아미노-6-(메톡시메틸)-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-카보니트릴
Figure 112014065561338-pct00181
디클로로메탄 (5 ml) 중 실시예 68 (60 mg, 164 μmol)의 용액을 티오닐 클로라이드 (18 μl, 246 μmol)로 처리하였다. 혼합물을 rt에서 15 분동안 교반한 후, 증발시켰다. 잔사를 메탄올 (2 ml)에 용해시킨 다음, DIPEA (57 μl, 328 μmol)로 처리하였다. 혼합물을 먼저 60 ℃에서 2 시간동안 교반한 후, 밤새 환류시키고, 마지막으로 마이크로파 장치에서 30 분동안 150 ℃로 가열하였다. 그후, 혼합물을 증발시키고, 잔사를 제조용 RP-HPLC로 정제하였다 (Reprosil C18, 구배 10-95% 아세토니트릴/0.1% aq. TFA). 얻은 생성물을 메탄올에 용해시킨 다음, 음이온 교환 캐트리지를 통해 여과하였다 (Stratospheres SPE, PL-HCO3 MP-수지). 캐트리지를 메탄올로 용출하고, 여액을 증발시켜 18 mg (이론치의 28%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 4): Rt = 1.12 min; MS (ESIpos): m/z = 379 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 8.61-8.40 (br. s, 1H), 8.21 (s, 1H), 7.42 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.87 (s, 1H), 6.34-6.09 (br. s, 1H), 4.47 (s, 2H), 3.96 (s, 3H), 3.26 (s, 3H), 2.45 (s, 3H) ppm.
실시예 70
4-아미노-6-(에톡시메틸)-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-카보니트릴
Figure 112014065561338-pct00182
디클로로메탄 (5 ml) 중 실시예 68 (60 mg, 164 μmol)의 용액을 티오닐 클로라이드 (18 μl, 246 μmol)로 처리하였다. 혼합물을 rt에서 15 분동안 교반한 후, 증발시켰다. 잔사를 에탄올 (2 ml)에 용해시키고, DIPEA (57 μl, 328 μmol)로 처리하였다. 혼합물을 60 ℃에서 밤새 교반한 후, 마이크로파 장치에서 30 분동안 150 ℃로 가열하였다. 그후, 혼합물을 증발시키고, 잔사를 제조용 RP-HPLC로 정제하였다 (Reprosil C18, 구배 10-95% 아세토니트릴/0.1% aq. TFA). 얻은 생성물을 에탄올 (2 ml)에 용해시키고, 마이크로웨이브 오븐에서 30 분동안 150 ℃로 재가열하였다. DIPEA (57 μl, 328 μmol)를 첨가하고, 마이크로웨이브 오븐에서 150 ℃로의 가열을 30 분간 계속하였다. 증발후, 잔사를 실리카겔 상에서 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 (디클로로메탄/메탄올 95:5) 16 mg (이론치의 23%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 2): Rt = 1.18 min; MS (ESIpos): m/z = 393 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 8.61-8.38 (br. s, 1H), 8.20 (s, 1H), 7.42 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.87 (s, 1H), 6.33-6.08 (br. s, 1H), 4.51 (s, 2H), 3.96 (s, 3H), 3.45 (q, 2H), 2.45 (s, 3H), 1.10 (t, 3H) ppm.
실시예 71
4-아미노-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)-6-[(3-옥소피페라진-1-일)메틸]-피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-카보니트릴
Figure 112014065561338-pct00183
THF (0.73 ml) 중 중간체 39A (20 mg, 55 μmol)의 용액을 아세트산 (6 μl, 110 μmol), 2-옥소피페라진 (27 mg, 275μmmol) 및 소듐 트리아세톡시보로하이드라이드 (58 mg, 275 μmol)로 처리하였다. rt에서 3 시간동안 교반한 후, 추가량의 THF (1 ml), 아세트산 (6 μl, 110 μmol), 2-옥소피페라진 (27 mg, 275 μmol) 및 소듐 트리아세톡시보로하이드라이드 (58 mg, 275 μmol)를 첨가하고, 교반을 rt에서 밤새 계속하였다 증발 후, 잔사를 제조용 RP-HPLC로 정제하였다 (Reprosil C18, 구배 10-95% 아세토니트릴/0.1% aq. TFA). 얻은 생성물을 메탄올에 용해시킨 다음, 음이온 교환 캐트리지를 통해 여과하였다 (Strato-spheres SPE, PL-HCO3 MP-수지). 캐트리지를 메탄올로 용출하고, 여액을 증발시켜 13 mg (이론치의 52%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 2): Rt = 0.86 min; MS (ESIpos): m/z = 447 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 8.60-8.31 (br. s, 1H), 8.19 (s, 1H), 7.74 (s, 1H), 7.44 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.87 (s, 1H), 6.25-5.98 (br. s, 1H), 3.96 (s, 3H), 3.62 (s, 2H), 3.13-3.07 (m, 2H), 2.91 (s, 2H), 2.45 (s, 3H) ppm.
실시예 72
N,N'-{[4-아미노-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6,7-디일]비스(메틸렌)}디아세트아미드
Figure 112014065561338-pct00184
메탄올 (12 ml) 중 중간체 40A (조, 85 mg), 10% Pd/C (115 mg) 및 아세트산 무수물 (40 μl, 435 μmol)의 현탁물을 rt에서 1 atm의 수소하에 교반하였다. 4 시간후, 추가량의 10% Pd/C (115 mg) 및 아세트산 무수물 (40 μl, 435 μmol)을 첨가하고, 교반을 rt에서 1 atm의 수소하에 2 시간동안 계속하였다. 생성된 혼합물을 키젤구어를 통해 여과하고, 여액을 증발시킨 뒤, 잔사를 제조용 RP-HPLC로 정제하였다 (Repro-sil C18, 구배 10-95% 아세토니트릴/0.1% aq. TFA). 얻은 생성물을 메탄올에 용해시킨 다음, 음이온 교환 캐트리지를 통해 여과하였다 (Stratospheres SPE, PL-HCO3 MP-수지). 캐트리지를 메탄올로 용출하고, 여액을 증발시켜 18 mg (이론치의 18%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 2): Rt = 0.73 min; MS (ESIpos): m/z = 452 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 8.29 (br. t, 1H), 8.04 (br. t, 1H), 8.00 (s, 1H), 7.34 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.85 (s, 1H), 4.58 (d, 2H), 4.26 (d, 2H), 3.95 (s, 3H), 2.45 (s, 3H), 1.81 (s, 3H), 1.74 (s, 3H) ppm.
실시예 73
2-[4-아미노-6-(하이드록시메틸)-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일]프로판-2-올
Figure 112014065561338-pct00185
THF/물 (10:1, 11 ml) 중 중간체 43A (180 mg, 598 μmol), 중간체 6A (299 mg, 897 μmol) 및 불화세슘 (454 mg, 2.99 mmol)의 현탁물을 감압하에 탈기한 후, 아르곤을 다시 채웠다. 4-(디-tert-부틸포스피노)-N,N-디메틸아닐린디클로로팔라듐 (2:1; 13 mg, 18 μmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 다시 탈기하고, 아르곤하에 50 ℃에서 16 시간동안 교반하였다. 그후, 반응 혼합물을 제조용 RP-HPLC로 분리하였다 (Reprosil C18, 구배 30-50% 아세토니트릴/0.2% aq. TFA). 생성물 분획을 메탄올중 암모니아의 7 M 용액으로 희석한 다음, 감압하에 농축하였다. 침전을 여과한 후, 물로 세척하고, 진공에서 건조하여 99 mg (이론치의 42%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 2): Rt = 0.89 min; MS (ESIpos): m/z = 399 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 7.96 (s, 1H), 7.51-8.02 (br. s, 1H), 7.37 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.86 (s, 1H), 5.99 (s, 1H), 5.23-5.82 (br. s, 1H), 5.04 (t, 1H), 4.53 (d, 2H), 3.96 (s, 3H), 2.45 (s, 3H), 1.73 (s, 6H) ppm.
실시예 74
4-{[4-아미노-7-(2-하이드록시프로판-2-일)-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-일]메틸}피페라진-2-온
Figure 112014065561338-pct00186
메탄올 (4 ml) 중 중간체 44A (50 mg, 73% 순도, 92 μmol)의 용액을 2-옥소피페라진 (28 mg, 276 μmol), 소듐 시아노보로하이드라이드 (23 mg, 368 μmol) 및 아세트산 (21 μl, 368 μmol)으로 처리하였다. 혼합물을 먼저 60 ℃에서 18 시간, 이어 rt에서 3일동안 교반하였다. 그후, 혼합물을 제조용 RP-HPLC로 분리하였다 (Reprosil C18, 구배 20-40% 아세토니트릴/0.2% aq. TFA). 생성물 분획을 메탄올중 암모니아의 7 M 용액으로 희석한 다음, 감압하에 증발시켰다. 잔사를 에틸 아세테이트에 용해시키고, 물로 세척하였다. 유기상을 황산나트륨으로 건조시키고, 감압하에 농축하였다. 잔사를 1,4-디옥산에 용해시키고, 동결건조하여 24 mg (이론치의 52%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 5): Rt = 1.85 min; MS (ESIpos): m/z = 481 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 7.99 (s, 1H), 7.73-8.01 (br. s, 1H), 7.41 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.87 (s, 1H), 5.2-5.7 (br. s, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.57 (s, 2H), 3.14 (br. s, 2H), 2.60 (br. s, 4H), 2.46 (s, 3H), 1.70 (br. s, 6H) ppm.
실시예 75
[4-아미노-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)-7-메틸피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-일]메탄올
Figure 112014065561338-pct00187
아르곤 분위기하에서, 플라스크에 165 mg (0.64 mmol)의 중간체 53A, 143 mg (0.64 mmol)의 중간체 5A, 25 mg (0.03 mmol) (2'-아미노바이페닐-2-일)(클로로)팔라듐디사이클로헥실(2',4',6'-트리이소프로필바이페닐-2-일)포스핀 (1:1; S. L. Buch-wald et al., J. Am. Chem. Soc. 132 (40), 14073-14075 (2010) 참조) 및 409 mg (1.93 mmol) 포타슘 포스페이트를 채웠다. 이어, 7 ml 1,4-디옥산 및 물 (5:1)의 탈기 혼합물을 첨가하고, 용액을 70 ℃에서 1 시간동안 교반하였다. 다른 분량의 중간체 5A (142 mg, 0.64 mmol) 및 (2'-아미노바이페닐-2-일)(클로로)팔라듐디사이클로헥실(2',4',6'-트리이소프로필바이페닐-2-일)포스핀 (10 mg, 0.012 mmol)을 첨가하고, 교반을 1 시간동안 계속하였다. 그후, 반응 혼합물을 감압하에 부분 증발시켰다, 물을 첨가하고, 혼합물을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 모아진 유기상을 감압하에 증발시키고, 잔사를 아세토니트릴로 연마하였다. 침전을 여과하고, 진공에서 건조하여 180 mg (LC-MS에 의한 92% 순도, 이론치의 73%)의 표제 화합물을 수득하였다. 여액으로부터 제조용 RP-HPLC (Reprosil C18, 구배 10-95% 아세토니트릴/0.1% 수성 포름산)에 의해 제2 배치를 얻었다 (41 mg, 이론치의 18%). 총 수율: 이론치의 91%
LC-MS (방법 5): Rt = 1.92 min; MS (ESIpos): m/z = 355 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 7.95 (s, 1H), 7.35 (s, 1H), 7.30 (s, 1H), 6.83 (s, 1H), 4.82 (t, 1H), 4.44 (d, 2H), 3.95 (s, 3H), 2.45 (s, 3H) ppm.
실시예 76
4-{[4-아미노-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)-7-메틸피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-일]메틸}피페라진-2-온
Figure 112014065561338-pct00188
THF (1.5 ml) 중 55 mg (0.16 mmol)의 중간체 54A의 현탁물을 78 mg (0.78 mmol) 피페라진-2-온, 18 ㎕ (0.31 mmol) 아세트산 및 166 mg (0.78 mmol) 트리아세톡시보로하이드라이드로 처리하였다. 혼합물을 주변 온도에서 밤새 교반하였다. 이어, 1.5 ml 물을 첨가하고, THF 용매 대부분을 감압하에 증발시켰다. 남은 혼합물을 더 많은 물로 희석한 다음, 침전된 고체를 여과하고, 건조시켰다 (35 mg). 이 물질을 제조용 RP-HPLC로 추가 정제하였다 (Reprosil C18, 구배 10-95% 아세토니트릴/0.1% 수성 포름산). 생성물 분획을 고체 탄산칼륨으로 pH 9로 조정하고, 감압하에 부분 농축하였다. 침전된 고체를 여과하고, 45 ℃에서 진공하에 농축하여 16 mg (이론치의 24%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 5): Rt = 1.74 min; MS (ESIpos): m/z = 437 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 7.95 (s, 1H), 7.66 (br. s, 1H), 7.35 (s, 1H), 7.30 (s, 1H), 6.83 (s, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.50 (s, 2H), 3.05 (m, 2H), 2.84 (s, 2H), 2.45 (m, 5H) ppm.
실시예 77
1-({[4-아미노-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)-7-메틸피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-일]메틸}아미노)-2-메틸프로판-2-올 포르미에이트
Figure 112014065561338-pct00189
THF (1.5 ml) 중 55 mg (0.16 mmol)의 중간체 54A의 현탁물을 98 mg (0.78 mmol) 1-아미노-2-메틸프로판-2-올 하이드로클로라이드, 39 mg (0.47 mmol) 소듐 아세테이트 및 166 mg (0.78 mmol) 소듐 트리아세톡시보로하이드라이드로 처리하였다. 혼합물을 주변 온도에서 밤새 교반하였다. 이어, 1.5 ml 물을 첨가하고, 혼합물을 감압하에 증발시켰다. 잔사를 제조용 RP-HPLC로 정제하여 (Reprosil C18, 구배 10-95% 아세토니트릴/0.1% 수성 포름산) 38 mg (이론치의 52%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 5): Rt = 1.68 min; MS (ESIpos): m/z = 426 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 8.19 (s, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.38 (s, 1H), 7.29 (s, 1H), 6.84 (s, 1H), 3.95 (s, 3H), 2.45 (s, 3H), 2.34 (s, 2H), 1.02 (s, 6H) ppm.
실시예 78
1-({[4-아미노-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)-7-메틸피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-일]메틸}아미노)-2-메틸프로판-2-올
Figure 112014065561338-pct00190
3 ml 메탄올중 29 mg (0.06 mmol)의 실시예 77의 용액을 2 ml의 메탄올로 사전 조정한 Strato-spheres SPE PL-HCO3 MP-수지 캐트리지에 전개시켰다. 캐트리지를 4 ml의 메탄올로 세척하고, 용출액을 증발시켜 21.5 mg (이론치의 82%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 4): Rt = 0.68 min; MS (ESIpos): m/z = 426 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 7.94 (s, 1H), 7.37 (s, 1H), 7.28 (s, 1H), 6.83 (s, 1H), 4.07 (s, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.63-3.75 (m, 2H), 2.45 (s, 3H), 2.32 (m, 3H), 1.42-1.56 (m, 1H), 1.02 (s, 6H) ppm.
실시예 79
[4-아미노-7-클로로-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-일]메탄올
Figure 112014065561338-pct00191
5 ml THF 중 중간체 48A (117 mg, 0.24 mmol)의 용액을 5 ml 농축 염산으로 처리하고, 주변 온도에서 밤새 교반하였다. 이어, 12 ml의 5 M 수산화나트륨 수용액과 에틸 아세테이트를 첨가하고, 층을 분리한 뒤, 수성층을 에틸 아세테이트로 2회 추출하였다. 모아진 유기상을 포화 염화나트륨 수용액으로 세척한 후, 건조시킨 다음, 증발시켰다. 잔사를 제조용 RP-HPLC로 정제하여 (Reprosil C18, 구배 10-95% 아세토니트릴/0.1% 수성 포름산) 30 mg (이론치의 34%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 2): Rt = 0.90 min; MS (ESIpos): m/z = 375 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 8.04 (s, 1H), 7.43 (s, 1H), 7.32 (s, 1H), 6.85 (s, 1H), 5.02 (t, 1H), 4.43 (d, 2H), 3.96 (s, 3H), 2.45 (s, 3H) ppm.
9.2 mg (이론치의 10%)의 7-클로로-6-(클로로메틸)-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민을 부산물로서 분리하였다 (중간체 50A 참조).
실시예 80
4-{[4-아미노-7-클로로-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-일]메틸}피페라진-2-온
Figure 112014065561338-pct00192
표제 화합물을 40 mg (0.11 mmol)의 중간체 49A로부터 출발하여 실시예 76의 절차에 따라 제조하였다. 수율: 27 mg (이론치의 55%).
LC-MS (방법 2): Rt = 0.86 min; MS (ESIpos): m/z = 457 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 8.05 (s, 1H), 7.68 (br. s, 1H), 7.44 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.85 (s, 1H), 3.96 (s, 3H), 3.52 (s, 2H), 3.05 (br. s, 2H), 2.86 (s, 2H), 2.45 (s, 3H) ppm.
실시예 81
1-({[4-아미노-7-클로로-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-일]메틸}아미노)-2-메틸프로판-2-올 포르미에이트
Figure 112014065561338-pct00193
표제 화합물을 40 mg (0.11 mmol)의 중간체 49A로부터 출발하여 실시예 77의 절차에 따라 제조하였다. 수율: 24 mg (이론치의 45%).
LC-MS (방법 2): Rt = 0.73 min; MS (ESIpos): m/z = 446 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 8.15 (s, 1H), 8.04 (s, 1H), 7.45 (s, 1H), 7.30 (s, 1H), 6.85 (s, 1H), 3.96 (s, 3H), 3.73 (s, 2H), 2.45 (s, 3H), 2.32 (s, 2H), 1.00 (s, 6H) ppm.
실시예 82
1-({[4-아미노-7-클로로-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-일]메틸}아미노)-2-메틸프로판-2-올
Figure 112014065561338-pct00194
표제 화합물을 실시예 78의 절차에 따라 실시예 81로부터 제조하였다.
LC-MS (방법 2): Rt = 0.72 min; MS (ESIpos): m/z = 446 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 8.04 (s, 1H), 7.45 (s, 1H), 7.30 (s, 1H), 6.85 (s, 1H), 4.09 (br. s, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.71 (s, 2H), 2.45 (s, 3H), 2.31 (s, 2H), 1.44-1.64 (m, 1H), 1.00 (s, 6H) ppm.
실시예 83
7-클로로-6-(에톡시메틸)-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민
Figure 112014065561338-pct00195
8.2 mg (0.02 mmol)의 중간체 50A를 1 ml의 에탄올에 현탁시키고, 에탄올중 소듐 에탄올레이트의 2.68 M 용액 41 ㎕ (0.11 mmol)으로 처리한 후, 1 분간 환류시켰다. 맑은 용액을 증발시키고, 조생성물을 제조용 RP-HPLC로 정제하여 (Repro-sil C18, 구배 10-95% 아세토니트릴/0.1% 수성 포름산) 5 mg (이론치의 56%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 4): Rt = 1.25 min; MS (ESIpos): m/z = 402 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 8.06 (s, 1H), 7.40 (s, 1H), 7.32 (s, 1H), 6.86 (s, 1H), 4.40 (s, 2H), 3.96 (s, 3H), 3.40 (q, 2H), 2.45 (s, 3H), 1.06 (t, 3H) ppm.
실시예 84
5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)-6-메틸-7-(피페라진-1-일메틸)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민 포르미에이트
Figure 112014065561338-pct00196
1,4-디옥산중 염화수소의 4 M 용액 (2 ml) 중 중간체 57A (100 mg, 191 μmol)의 용액을 rt에서 3 시간동안 교반한 후, 증발시켰다. 투폴드 제조용 RP-HPLC로 정제하여 (Reprosil C18, 구배 10-95% 아세토니트릴/0.1% 수성 포름산) 71 mg (이론치의 67%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 2): Rt = 0.81 min; MS (ESIpos): m/z = 423 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ = 8.46 (br. s, 1H), 7.89 (s, 1H), 7.27 (s, 1H, CHCl3 피크와 오버랩), 7.18 (s, 1H), 6.67 (s, 1H), 4.01 (s, 3H), 3.97 (s, 2H), 3.18-3.09 (m, 4H), 2.82-2.73 (m, 4H), 2.50 (s, 3H), 2.24 (s, 3H) ppm.
실시예 85
6-클로로-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)-7-(피페라진-1-일메틸)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민 트리하이드로클로라이드
Figure 112014065561338-pct00197
중간체 60A (65 mg, 0.12 mmol)를 1 ml의 1,4-디옥산중 염화수소의 4 M 용액에서 2 시간동안 rt에서 교반하였다. 현탁물을 증발건고하고, 조생성물을 제조용 RP-HPLC로 정제하여 (Reprosil C18, 구배 10-95% 아세토니트릴/0.1% aq. 염산) 49 mg (이론치의 74%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 2): Rt = 0.81 min; MS (ESIpos): m/z = 443 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): inter al. δ = 9.56 (br. s, 1H), 8.45 (br. s, 1H), 8.19 (s, 1H), 7.44 (s, 1H), 7.36 (s, 1H), 6.89 (s, 1H), 6.30 (br. s, 1H), 4.63 (br. s, 1H), 3.40 (br. s, 8H), 2.46 (s, 3H) ppm.
실시예 86
[4-아미노-6-(에톡시메틸)-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일]메탄올
Figure 112014065561338-pct00198
표제 화합물 (360 mg)을 제조 방법 1에 의해 실시예 5의 제조에서의 부산물로서 수득하였다
LC-MS (방법 2): Rt = 0.99 min; MS (ESIpos): m/z = 399 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 8.09-7.72 (br. s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.35 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.84 (s, 1H), 6.05-5.48 (br. s, 1H), 5.04 (br. s, 1H), 4.81 (d, 2H), 4.47 (s, 2H), 3.96 (s, 3H), 3.39 (q, 3H), 2.45 (s, 3H), 1.05 (t, 3H) ppm.
실시예 87
1-{[4-아미노-6-(에톡시메틸)-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일]메틸}이미다졸리딘-2-온
Figure 112014065561338-pct00199
THF (5 ml) 중 중간체 63A (100 mg, 0.221 mmol)의 현탁물을 이미다졸리딘-2-온 (57 mg, 0.662 mmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민 (153 μl, 0.926 mmol)으로 처리하고, 혼합물을 마이크로웨이브 오븐에서 90 분동안 150 ℃로 가열하였다. 그후, 반응 혼합물을 제조용 RP-HPLC로 정제하였다 (Reprosil C18, 구배 40-60% 아세토니트릴/0.2% aq. 트리플루오로아세트산). 얻은 생성물을 메탄올에 용해시킨 다음, 음이온 교환 캐트리지를 통해 여과하였다 (Stratospheres SPE, PL-HCO3 MP-수지). 캐트리지를 메탄올로 용출하고, 여액을 증발시켰다. 생성물을 실리카겔 상에서 제조용 박층 크로마토그래피로 다시 한번 정제하여 (사이클로헥산/에틸 아세테이트 3:1) 24 mg (이론치의 22%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 2): Rt = 0.99 min; MS (ESIpos): m/z = 467 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 8.21-7.65 (br. s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.36 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.84 (s, 1H), 6.38 (s, 1H), 6.04-5.56 (br. s, 1H), 4.65 (s, 2H), 4.46 (s, 2H), 3.95 (s, 3H), 3.38 (q, 2H), 3.31-3.10 (m, 4H), 2.45 (s, 3H), 1.06 (t, 3H) ppm.
실시예 88
4-{[4-아미노-5-(7-메톡시-1-벤조티오펜-2-일)-6-(메톡시메틸)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일]메틸}피페라진-2-온
Figure 112014065561338-pct00200
탈기한 THF/물 (10:1, 2.2 ml) 중 중간체 62A (72.6 mg, 197 μmol), (7-메톡시-1-벤조티오펜-2-일)-보론산 (45 mg, 216 μmol) 및 불화세슘 (149 mg, 983 μmol)의 용액에 (2'-아미노바이페닐-2-일)(클로로)팔라듐디사이클로헥실(2',4',6'-트리이소프로필바이페닐-2-일)포스핀 (1:1; 7.7 mg, 9.8 μmol; S. L. Buch-wald et al., J. Am. Chem. Soc. 132 (40), 14073-14075 (2010) 참조)을 아르곤하에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 다시 탈기하고, 아르곤하에 60 ℃에서 3 시간동안 교반하였다. 그후, 혼합물을 제조용 RP-HPLC로 분리하였다 (Reprosil C18, 구배 20-40% 아세토니트릴/0.1% aq. TFA). 생성물 분획을 모으고, 증발건고하였다. 잔사를 메탄올에 용해시킨 다음, 음이온 교환 캐트리지를 통해 여과하였다 (Stratospheres SPE, PL-HCO3 MP-수지). 캐트리지를 메탄올로 용출하고, 여액을 증발시켜 31 mg (이론치의 35%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 2): Rt = 0.71 min; MS (ESIpos): m/z = 453 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 8.00 (s, 1H), 7.72 (s, 1H), 7.61-8.23 (br. s, 1H), 7.51 (d, 1H), 7.46 (s, 1H), 7.40 (t, 1H), 6.99 (d, 1H), 5.57-6.11 (br. s, 1H), 4.42 (s, 2H), 3.98 (s, 5H), 3.20 (s, 3H), 3.11 (br. m, 2H), 3.01 (s, 2H), 2.62-2.67 (m, 2H) ppm.
실시예 89
4-{[4-아미노-6-(메톡시메틸)-5-(5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일]메틸}피페라진-2-온
Figure 112014065561338-pct00201
탈기한 THF/물 (10:1, 4.4 ml) 중 중간체 62A (50 mg, 135 μmol), (5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)보론산 (28.6 mg, 149 μmol) 및 불화세슘 (103 mg, 677 μmol)의 용액에 (2'-아미노바이페닐-2-일)(클로로)팔라듐디사이클로헥실(2',4',6'-트리이소프로필바이페닐-2-일)포스핀 (1:1; 5.3 mg, 6.8 μmol; S. L. Buch-wald et al., J. Am. Chem. Soc. 132 (40), 14073-14075 (2010) 참조)을 아르곤하에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 다시 탈기하고, 아르곤하에 60 ℃에서 16 시간동안 교반하였다. 그후, 혼합물을 제조용 RP-HPLC로 분리하였다 (Reprosil C18, 구배 30-50% 아세토니트릴/0.1% aq. TFA). 생성물 분획을 모으고, 증발건고하였다. 잔사를 메탄올에 용해시킨 다음, 음이온 교환 캐트리지를 통해 여과하였다 (Strato-Spheres SPE, PL-HCO3 MP-수지). 캐트리지를 메탄올로 용출하고, 여액을 증발시켜 27 mg (이론치의 45%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 2): Rt = 0.79 min; MS (ESIpos): m/z = 437 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 8.00 (s, 1H), 7.89 (d, 1H), 7.73 (s, 1H), 7.71 (s, 1H), 7.58-8.18 (br. s, 1H), 7.40 (s, 1H), 7.24 (dd, 1H), 5.58-6.03 (m, 1H), 4.42 (s, 2H), 3.97 (s, 2H), 3.21 (s, 3H), 3.11 (br. t, 2H), 3.01 (s, 2H), 2.64 (t, 2H), 2.44 (s, 3H) ppm.
실시예 90
1-[4-아미노-6-(에톡시메틸)-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일]에탄올
Figure 112014065561338-pct00202
아르곤하에서, THF 중 메틸마그네슘 브로마이드의 1 M 용액 (630 ㎕, 630 μmol)을 THF (10 ml) 중 중간체 17A (100 mg, 252 μmol)의 용액에 rt에서 적가하였다. 혼합물을 rt에서 3 시간동안 교반한 후, 다른 분량의 THF 중 메틸마그네슘 브로마이드 (177 ㎕, 177 μmol)로 처리하였다. 반응 혼합물을 16 시간동안 교반한 뒤, 포화 염화암모늄 수용액으로 퀀칭하고, 에틸 아세테이트로 추출하였다. 모아진 유기층을 염수로 세척하여 황산마그네슘에서 건조시키고, 여과한 후, 증발시켰다. 잔사를 제조용 RP-HPLC로 정제하였다 (Reprosil C18, 구배 40-60% 아세토니트릴/0.1% aq. TFA). 생성물 분획을 포화 탄산수소나트륨 수용액으로 희석한 다음, 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기상을 포화 염화나트륨 수용액으로 세척한 후, 황산마그네슘에서 건조시키고, 여과한 다음, 증발시켜 39 mg (이론치의 36%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 4): Rt = 1.07 min; MS (ESIpos): m/z = 413 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 7.95 (s, 1H), 7.56-8.07 (br. s, 1H), 7.35 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.84 (s, 1H), 5.46-5.54 (m, 1H), 5.37-5.95 (br. s, 1H), 5.26 (d, 1H), 4.67 (d, 1H), 4.38 (d, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.38 (q, 2H), 2.45 (s, 3H), 1.52 (d, 3H), 1.05 (t, 3H) ppm.
실시예 91
[4-아미노-6-(에톡시메틸)-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일](사이클로프로필)메탄올
Figure 112014065561338-pct00203
아르곤하에서, THF 중 사이클로프로필마그네슘 브로마이드 0.5 M 용액 (1.26 ml, 630 μmol)을 rt에서 THF (5 ml) 중 중간체 17A (100 mg, 252 μmol)의 용액에 적가하였다. 혼합물을 rt에서 1 시간동안 교반한 뒤, 포화 염화암모늄 수용액으로 퀀칭하고, 에틸 아세테이트로 추출하였다. 모아진 유기층을 염수로 세척하고, 황산마그네슘에서 건조시킨 후, 여과하고, 증발시켰다. 잔사를 제조용 RP-HPLC로 정제하였다 (Reprosil C18, 구배 50-70% 아세토니트릴/0.1% aq. TFA). 생성물 분획을 포화 탄산수소나트륨 수용액으로 희석한 다음, 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기상을 포화 염화나트륨 수용액으로 세척한 후, 황산마그네슘에서 건조시키고, 여과한 다음, 증발시켜 10 mg (이론치의 10%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 2): Rt = 1.13 min; MS (ESIpos): m/z = 439 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 7.94 (s, 1H), 7.68-8.04 (br. s, 1H), 7.36 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.84 (s, 1H), 5.47-5.89 (br. s, 1H), 5.30 (d, 1H), 4.64 (d, 1H), 4.59-4.67 (m, 1H), 4.39 (d, 1H), 3.96 (s, 3H), 3.38 (q, 2H), 2.45 (s, 3H), 1.54-1.64 (m, 1H), 1.04 (t, 3H), 0.51-0.59 (m, 1H), 0.40-0.47 (m, 1H), 0.28-0.38 (m, 2H) ppm.
실시예 92
(3S)-3-({[4-아미노-6-(메톡시메틸)-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일]메틸}아미노)피롤리딘-2-온
Figure 112014065561338-pct00204
THF (2 ml) 중 중간체 13A (100 mg, 0.233 mmol)의 현탁물을 (S)-3-아미노피롤리딘-2-온 (35 mg, 0.349 mmol), 소듐 트리아세톡시보로하이드라이드 (148 mg, 0.698 mmol) 및 아세트산 (26.6 ㎕, 0.465 mmol)으로 처리하였다. 생성된 혼합물을 rt에서 3 시간동안 교반한 후, 제조용 RP-HPLC로 직접 정제하였다 (Reprosil C18, 구배 40-60% 아세토니트릴/0.2% aq. 트리플루오로아세트산). 생성물 분획을 모으고, 증발건고하였다. 잔사를 메탄올에 용해시킨 다음, 음이온 교환 캐트리지를 통해 여과하였다 (Stratospheres SPE, PL-HCO3 MP-수지). 캐트리지를 메탄올로 용출하고, 여액을 증발시켜 56 mg (이론치의 51%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 4): Rt = 0.72 min; MS (ESIpos): m/z = 467 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 8.01 (s, 1H), 7.76 (s, 1H), 7.35 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.85 (s, 1H), 4.48 (d, 2H), 4.43 (d, 2H), 4.24-4.02 (m, 2H), 3.96 (s, 3H), 3.26-2.99 (m, 6H), 2.45 (s, 3H), 2.40-2.27 (m, 1H), 1.82-1.64 (m, 1H) ppm.
실시예 93
(3S)-3-({[4-아미노-6-(에톡시메틸)-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일]메틸}아미노)피롤리딘-2-온
Figure 112014065561338-pct00205
THF (2 ml) 중 중간체 17A (100 mg, 0.252 mmol)의 현탁물을 (S)-3-아미노피롤리딘-2-온 (38 mg, 378 μmol), 소듐 트리아세톡시보로하이드라이드 (160 mg, 757 μmol) 및 아세트산 (30 ㎕, 504 μmol)으로 처리하였다. 생성된 혼합물을 rt에서 3 시간동안 교반한 후, 제조용 RP-HPLC로 직접 정제하였다 (Reprosil C18, 구배 30-50% 아세토니트릴/0.2% aq. 트리플루오로아세트산). 생성물 분획을 모으고, 증발건고하였다. 잔사를 메탄올에 용해시킨 다음, 음이온 교환 캐트리지를 통해 여과하였다 (Stratospheres SPE, PL-HCO3 MP-수지). 캐트리지를 메탄올로 용출하고, 여액을 증발시켜 84 mg (이론치의 69%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 4): Rt = 0.75 min; MS (ESIpos): m/z = 481 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 8.00 (s, 1H), 7.75 (s, 1H), 7.67-8.11 (br. s, 1H), 7.35 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.85 (s, 1H), 5.5-6.0 (br. s, 1H), 4.44 (q, 2H), 4.14-4.21 (m, 1H), 4.02-4.11 (m, 1H), 3.38-3.45 (q, 2H), 3.16-3.24 (m, 1H), 3.05-3.16 (m, 2H), 2.45 (s, 3H), 2.31-2.40 (m, 1H), 1.67-1.79 (m, 1H), 1.08 (t, 3H) ppm.
표 I에 있는 실시예 94-105의 제조를 위한 일반적인 절차:
THF 중 중간체 17A의 0.13 M 현탁물을 1.5 eq.의 각각의 아민 성분, 3 eq.의 소듐 트리아세톡시보로하이드라이드 및 1.5 eq.의 아세트산으로 처리하였다. 생성된 혼합물을 60 ℃에서 3-20 시간동안 교반하였다. 그후, 정제를 언급된 방법에 따라 수행하였다.
Figure 112014065561338-pct00206
Figure 112014065561338-pct00207
Figure 112014065561338-pct00208

실시예 106
4-아미노-6-(에톡시메틸)-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)-N-[(3R)-2-옥소-피롤리딘-3-일]피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-카복사미드
Figure 112014065561338-pct00209
DMF (2 ml) 중 중간체 64A (50 mg, 121 μmol)의 교반 용액을 rt에서 N-[(1H-벤조트리아졸-1-일옥시)(디메틸아미노)메틸렌]-N-메틸메탄아미늄 테트라플루오로보레이트 (TBTU) (43 mg, 133 μmol) 및 DIPEA (53 ㎕, 303 μmol)로 처리하였다. 15 분후, (3R)-3-아미노피롤리딘-2-온 (24 mg, 242 μmol)을 첨가하고, 생성된 혼합물을 rt에서 2 시간동안 교반하였다. 그후, 혼합물을 제조용 RP-HPLC로 분리하였다 (Reprosil C18, 구배 30-50% 아세토니트릴/0.2% aq. 트리플루오로아세트산). 생성물 분획을 모으고, 증발건고하였다. 잔사를 메탄올에 용해시킨 다음, 음이온 캐트리지를 통해 여과하였다 (Stratospheres SPE, PL-HCO3 MP-수지). 캐트리지를 메탄올로 용출하고, 여액을 증발시켜 36 mg (이론치의 60%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 2): Rt = 0.91 min; MS (ESIpos): m/z = 495 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 9.50 (d, 1H), 8.21-8.45 (br. s, 1H), 8.17 (s, 1H), 7.97 (s, 1H), 7.41 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.86 (s, 1H), 5.84-6.09 (br. s, 1H), 4.74 (dd, 2H), 4.47-4.56 (m, 1H), 3.96 (s, 3H), 3.37 (q, 2H), 3.22-3.29 (m, 2H), 2.54-2.61 (m, 1H), 2.46 (s, 3H), 1.90-2.03 (m, 1H), 1.00 (t, 3H) ppm.
실시예 107
4-{[4-아미노-6-(에톡시메틸)-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일]카보닐}피페라진-2-온
Figure 112014065561338-pct00210
DMF (2 ml) 중 중간체 64A (50 mg, 121 μmol)의 교반 용액을 rt에서 TBTU (43 mg, 133 μmol) 및 DIPEA (53 ㎕, 303 μmol)로 처리하였다. 15 분후, 피페라진-2-온 (24 mg, 242 μmol)을 첨가하고, 생성된 혼합물을 rt에서 16 시간동안 교반하였다. 그후, 혼합물을 제조용 RP-HPLC로 분리하였다 (Reprosil C18, 구배 40-60% 아세토니트릴/0.2% aq. 트리플루오로아세트산). 생성물 분획을 모으고, 증발건고시켰다. 잔사를 메탄올에 용해시킨 다음, 음이온 교환 캐트리지를 통해 여과하였다 (Strato-spheres SPE, PL-HCO3 MP-수지). 캐트리지를 메탄올로 용출하고, 여액을 증발시켜 45 mg (이론치의 68%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 2): Rt = 0.92 min; MS (ESIpos): m/z = 495 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 8.14 (br. s, 1H), 7.99-8.01 (m, 1H), 7.9-8.3 (br. s, 1H), 7.41 (d, 1H), 7.32 (s, 1H), 6.86 (s, 1H), 5.78-6.05 (br. s, 1H), 4.30-4.49 (m, 2H), 4.13-4.23 (m, 1H), 4.03-4.10 (m, 1H), 3.96 (s, 3H), 3.76-3.87 (m, 1H), 3.57-3.74 (m, 1H), 3.35-3.43 (m, 2H), 3.14-3.25 (m, 1H), 2.45 (s, 3H), 0.96-1.05 (m, 3H) ppm.
표 II에 있는 실시예 108-123의 제조를 위한 일반적인 절차:
DMF 중 중간체 64A의 0.13 M 용액을 1.1 eq. TBTU 및 2.5 eq. DIPEA로 처리하고, rt에서 15 분동안 교반하였다. 2 eq.의 각각의 아민을 첨가하고, 생성된 혼합물을 rt에서 18 시간동안 교반하였다. 그후, 정제를 언급된 방법에 따라 수행하였다.
Figure 112014065561338-pct00211
Figure 112014065561338-pct00212
Figure 112014065561338-pct00213
Figure 112014065561338-pct00214

실시예 124
4-{[4-아미노-5-(5,7-디메톡시-1-벤조티오펜-2-일)-6-(메톡시메틸)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일]메틸}피페라진-2-온
Figure 112014065561338-pct00215
탈기한 THF/물 (10:1; 5 ml) 중 중간체 62A (100 mg, 271 μmol), 중간체 66A (77 mg, 325 μmol) 및 불화세슘 (206 mg, 1.35 mmol)의 용액에 (2'-아미노바이페닐-2-일)(클로로)팔라듐디사이클로헥실(2',4',6'-트리이소프로필바이페닐-2-일)포스핀 (1:1; 42.6 mg, 54 μmol; S. L. Buch-wald et al., J. Am. Chem. Soc. 132 (40), 14073-14075 (2010) 참조)을 아르곤하에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 다시 탈기하고, 아르곤하에 60 ℃에서 6 시간동안 교반하였다. 이어, 추가 분량의 중간체 66A (39 mg, 162 μmol)를 첨가하고, 교반을 60 ℃에서 10 시간동안 계속하였다. 그후, 반응 혼합물을 제조용 RP-HPLC로 분리하였다 (Repro-sil C18, 구배 30-50% 아세토니트릴/0.1% aq. TFA). 생성물 분획을 모으고, 증발건고시켰다. 잔사를 메탄올에 용해시킨 다음, 음이온 교환 캐트리지를 통해 여과하였다 (Strato-spheres SPE, PL-HCO3 MP-수지). 캐트리지를 메탄올로 용출하고, 여액을 증발시켜 40 mg (이론치의 28%)의 표제 화합물을 수득하였다.
LC-MS (방법 2): Rt = 0.78 min; MS (ESIpos): m/z = 483 (M+H)+
1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ = 7.99 (s, 1H), 7.68 (br. s, 1H), 7.49-8.17 (br. s, 1H), 7.37 (s, 1H), 7.05 (d, 1H), 6.63 (d, 1H), 5.5-6.0 (br. s, 1H), 4.42 (s, 2H), 3.97 (s, 2H), 3.94 (s, 3H), 3.84 (s, 3H), 3.20 (s, 3H), 3.09-3.14 (m, 2H), 3.01 (s, 2H), 2.62-2.67 (m, 2H) ppm.
실시예 125
4-{[4-아미노-7-(하이드록시메틸)-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-일]메틸}피페라진-2-온
Figure 112014065561338-pct00216
탈기한 THF/물 (2:1, 90 ml) 중 중간체 70A (700 mg, 1.49 mmol), 중간체 5A (497 mg, 2.24 mmol) 및 불화세슘 (1.36 g, 8.95 mmol)의 현탁물에 (2'-아미노바이페닐-2-일)(클로로)팔라듐디사이클로헥실(2',4',6'-트리이소프로필바이페닐-2-일)포스핀 (1:1; 117 mg, 0.149 mmol; S. L. Buch-wald et al., J. Am. Chem. Soc. 132 (40), 14073-14075 (2010) 참조)을 아르곤하에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 다시 탈기하고, 아르곤하에 60 ℃에서 밤새 교반하였다. 추가 분량의 중간체 5A (231 mg, 1.04 mmol) 및 (2'-아미노바이페닐-2-일)(클로로)팔라듐디사이클로헥실(2',4',6'-트리이소프로필바이페닐-2-일)포스핀 (1:1; 117 mg, 0.149 mmol)을 첨가하고, 교반을 60 ℃에서 3 시간동안 계속하였다. 침전을 여과한 후, THF로 세척하고, 진공에서 건조하였다. 고체를 DMF 및 1 M aq. 트리플루오로아세트산의 혼합물에 현탁시키고, 여과하였다. 여액을 제조용 RP-HPLC로 분리하였다 (Reprosil C18, 구배 20-40% 아세토니트릴/0.2% aq. 트리플루오로아세트산). 생성물 분획을 모으고, 포화 aq. 소듐 바이카보네이트 용액을 첨가하여 알칼리화하였다. 용액을 에틸 아세테이트로 추출하고, 유기층을 염수로 세척한 후, 황산마그네슘에서 건조시키고, 증발시켜 88 mg의 표제 화합물 (이론치의 13%)을 수득하였다.
LC-MS (방법 2): Rt = 0.70 min; MS (ESIpos): m/z = 453 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): inter al. δ = 7.6-8.0 (br. s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.71 (s, 1H), 7.37 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.84 (s, 1H), 5.4-5.8 (br. s, 1H), 5.19 (t, 1H), 4.85 (d, 2H), 3.95 (s, 3H), 3.58 (s, 2H), 3.04 (br. m, 2H), 2.88 (s, 2H), 2.45 (s, 3H) ppm.
실시예 126
4-{[4-아미노-7-(메톡시메틸)-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-일]메틸}피페라진-2-온
Figure 112014065561338-pct00217
디클로로메탄 (5 ml) 중 실시예 125 (88 mg, 194 μmol)의 현탁물을 티오닐 클로라이드 (29 ㎕, 389 μmol)로 처리하고, 혼합물을 rt에서 65 분동안 교반하였다. 추가 분량의 티오닐 클로라이드 (29 ㎕, 389 μmol)를 첨가하고, 교반을 1.5 시간동안 계속하였다. 과량의 메탄올을 첨가한 뒤, 메탄올중 소듐 메틸레이트의 5.4 M 용액 (84 mg, 1.56 mmol)을 pH 8이 될 때까지 첨가하였다. 3 일동안 교반한 후, 휘발 물질을 감압하에 증발시키고, 잔사를 제조용 RP-HPLC로 분리하였다 (Reprosil C18, 구배 20-40% 아세토니트릴/0.2% aq. 트리플루오로아세트산). 생성물 분획을 증발시켜 19 mg의 표제 화합물 (이론치의 21%)을 수득하였다.
LC-MS (방법 2): Rt = 0.77 min; MS (ESIpos): m/z = 466 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 7.99 (s, 1H), 7.75-8.11 (br. s, 1H), 7.68 (s, 1H), 7.38 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.84 (s, 1H), 5.51-5.82 (m, 1H), 4.77 (s, 2H), 3.95 (s, 3H), 3.55 (s, 2H), 3.31 (s, 3H), 3.04 (br. s, 2H), 2.85 (s, 2H), 2.42-2.48 (m, 5H) ppm.
실시예 127
4-{[4-아미노-7-(에톡시메틸)-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-일]메틸}피페라진-2-온
Figure 112014065561338-pct00218
디클로로메탄 (10 ml) 중 실시예 125 (100 mg, 221 μmol)의 현탁물을 티오닐 클로라이드 (161 ㎕, 2.21 mmol)로 처리하고, 혼합물을 rt에서 30 분동안 교반하였다. 에탄올을 첨가하고, 휘발 물질을 감압하에 증발시켰다. 잔사를 에탄올 (10 ml)에 용해시키고, 소듐 에틸레이트 (30 mg, 442 μmol)를 첨가한 뒤, 혼합물을 rt에서 1 시간동안 교반하였다. 이어 혼합물을 제조용 RP-HPLC로 직접 분리하였다 (Reprosil C18, 구배 20-40% 아세토니트릴/0.2% aq. 트리플루오로아세트산). 생성물 분획을 모으고, 포화 aq. 소듐 바이카보네이트 용액을 첨가하여 알칼리화하였다. 용액을 에틸 아세테이트로 추출하고, 유기층을 염수로 세척한 후, 황산마그네슘에서 건조시키고, 증발시켜 57 mg의 표제 화합물 (이론치의 54%)을 수득하였다.
LC-MS (방법 2): Rt = 0.85 min; MS (ESIpos): m/z = 480 (M+H)+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 7.99 (s, 1H), 7.75-8.09 (br. s, 1H), 7.64-7.71 (m, 1H), 7.38 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.84 (s, 1H), 5.38-5.91 (br. s, 1H), 4.81 (s, 2H), 3.95 (s, 3H), 3.49-3.59 (m, 4H), 2.99-3.08 (m, 2H), 2.86 (s, 2H), 1.12 (t, 3H) ppm.
B. 생물학적 활성 평가
약어 및 두문자어:
Ahx 6-아미노헥산산
ATP 아데노신 트리포스페이트
BSA 소혈청알부민
CREB cAMP-반응 요소-결합 단백질
DMSO 디메틸설폭사이드
EDTA 에틸렌디아민테트라아세트산
EGTA 에틸렌글리콜-비스(2-아미노에틸에테르)-N,N,N',N'-테트라아세 트산
FBS 소태아혈청
FGF 섬유아세포 성장 인자
FGFR 섬유아세포 성장 인자 수용체
GFP 녹색 형광 단백질
GST 글루타티온 S-트랜스퍼라제
HEPES 4-(2-하이드록시에틸)피페라진-1-에탄설폰산
HRTF 비분리성 시간차 형광 (homogeneous time-resolved fluorescence)
MOPS 3-(N-모르폴리노)프로판설폰산
mTOR 라파마이신의 포유동물 표적
PBS 포스페이트 완충 염수
PI3K 포스파티딜이노시톨 3-키나제
RTK 수용체 티로신 키나제
SNP 단일 뉴클레오티드 다형체
TR-FRET 시간차 형광 공명 에너지 전달
VEGF 혈관내피 성장 인자
VEGFR 혈관내피 성장 인자 수용체
본 발명의 화합물의 활성 증명은 당업계에 널리 공지된 시험관내, 생체외 및 생체내 분석을 통해 이루어질 수 있다. 예를 들어, 본 발명의 화합물의 활성을 증명하기 위해서, 하기 분석을 이용할 수 있다.
B-1. FGFR-1 고 ATP 키나제 분석
FGFR-1과 예비배양한 후 본 발명의 화합물의 고 ATP 농도에서의 FGFR-1 억제 활성을 다음 단락들에 기술된 바와 같은 TR-FRET 기반 FGFR-1 고 ATP 분석을 이용하여 정량하였다:
바큘로바이러스 발현 시스템을 사용하여 SF9 곤충 세포에서 발현되고 글루타티온-아가로스 친화성 크로마토그래피로 정제된 재조합체 표지 FGFR-1 융합 단백질 [글루타티온-S-트랜스퍼라제 (GST)의 융합 (N-말단적) His6-tag, 트롬빈 절단 부위, 및 GenBank entry NM_015850에서와 같이 아미노산 G400 내지 R800으로부터의 인간 FGFR-1의 세포내 부분]을 Proqinase (제품 번호 0101-0000-1)로부터 구입하고 효소로 사용하였다. 키나제 반응을 위한 기질로서는, 예를 들어 Biosyntan (독일 베를린-부쉬)로부터 구입할 수 있는 비오티닐화된 펩티드 비오틴-Ahx-AAEEEYFFLFAKKK (아미드 형태 중 C-말단)를 사용하였다.
전형적으로, 시험 화합물을 20 μM 내지 0.1 nM (예를 들면, 20 μM, 5.9 μM, 1.7 μM, 0.51 μM, 0.15 μM, 44 nM, 13 nM, 3.8 nM, 1.1 nM, 0.33 nM, 및 0.1 nM) 범위의 11개의 상이한 농도로 동일한 마이크로타이터 플레이트에서 각 농도에 대해 2벌식으로 시험하였다. 분석전에 일련의 희석물을 DMSO 중 100-배 농축 스톡 용액으로서 별도로 제조하였다; 정확한 농도는 사용되는 피펫터에 따라 달라질 수 있다. 분석을 위해, DMSO 중 시험 화합물의 각 스톡 용액 50 nl를 흑색 저부피 384-웰 마이크로타이터 플레이트 (Greiner Bio-One, Frickenhausen, Germany)에 피펫팅하였다. 수성 분석 완충제 [8 mM MOPS pH 7.0, 10 mM 마그네슘 아세테이트, 1.0 mM 디티오트레이톨, 0.05% (w/v) 소혈청알부민 (BSA), 0.07% (v/v) Tween-20, 0.2 mM EDTA] 중 상기 FGFR-1 융합 단백질의 용액 2 ㎕를 첨가하고, 혼합물을 22 ℃에서 15 분동안 배양하여 시험 화합물이 효소에 미리 결합하도록 하였다. 이어서, 분석 완충제 중 아데노신 트리포스페이트 (ATP, 3.3 mM; 5 ㎕ 분석 부피중 최종 농도 = 2 mM) 및 기질 (0.16 μM; 5 ㎕ 분석 부피중 최종 농도 = 0.1 μM)의 용액 3 ㎕를 첨가하여 키나제 반응을 개시하고, 생성된 혼합물을 22 ℃에서 15 분의 반응 시간동안 배양하였다. FGFR-1 융합 단백질의 농도를 효소 로트의 활성에 따라 조절하고, 선형 범위의 분석에 적절하게 선택하였다 (전형적인 농도는 약 0.05 ㎍/ml의 범위였다). HTRF 검출 시약의 용액 5 ㎕ [수성 EDTA 용액 (50 mM HEPES/NaOH pH 7.5 중 50 mM EDTA, 0.1% (w/v) BSA) 중 25 nM 스트렙타비딘-XL665 (Cis Biointernational) 및 1 nM PT66-Eu-킬레이트, 유로퓸-킬레이트 표지된 항-포스포티로신 항체 (Cis Biointernational; Perkin-Elmer 제품의 PT66-Tb-크립테이트가 대신 사용될 수 있다)] 5 μl를 첨가하여 반응을 정지시켰다.
생성된 혼합물을 22 ℃에서 1 시간동안 배양하여, 인산화된 비오티닐화 펩티드와 검출 시약이 복합체를 형성하도록 하였다. 후속적으로 Eu-킬레이트로부터 스트렙타비딘-XL665로의 공명 에너지 전달을 측정하여, 인산화 기질의 양을 평가하였다. 이를 위해, 350 nm에서의 여기 후 620 nm 및 665 nm에서의 형광 방출을 TR-FRET 판독기 [예를 들어 Rubystar (BMG Labtechnologies, Offenburg, Germany) 또는 Viewlux (Perkin-Elmer)]에서 측정하였다. 665 nm 및 622 nm에서의 방출비를 인산화 기질의 양에 대한 척도로서 취하였다. 데이터를 표준화하고 (억제제 없는 효소 반응 = 0% 억제, 효소만 결여된 기타 모든 분석 성분 = 100% 억제), IC50 값을 회사 내부 소프트웨어를 이용하여 4 파라미터 피팅에 의해 계산하였다. 이 분석으로부터의 본 발명의 개별 화합물에 대한 IC50 값을 하기 표 1A에 나타내었다:
Figure 112014065561338-pct00219
Figure 112014065561338-pct00220
Figure 112014065561338-pct00221
선택된 8-아미노-1-(벤조티오펜-2-일)이미다조[1,5-a]피라진 유도체 및 가장 가까운 선행기술의 대표적인 것으로 간주되는 관련 화합물 (참조: 국제특허출원 WO 2007/061737-A2호 및 이곳에 기술된 실시예 화합물)을 공개된 절차에 따라 합성하고, 비교 목적으로 FGFR-1 고 ATP 분석으로 또한 검사하였다. 이들 화합물에 대한 IC50 값을 하기 표 1B에 나타내었다:
Figure 112014065561338-pct00222
Figure 112014065561338-pct00223
표 1A 및 1B에 명시된 IC50 값은 본 발명의 화합물이 FGFR-1 키나제 활성을 억제하는데 선택된 선행기술의 화합물보다 약 5배 내지 1000배 더 효능적임을 입증한다.
B-2. FGFR-3 키나제 분석
FGFR-3과 예비배양한 후 본 발명의 화합물의 고 ATP 농도에서의 FGFR-3 억제 활성을 다음 단락들에 기술된 바와 같은 TR-FRET 기반 FGFR-3 고 ATP 분석을 이용하여 정량하였다:
바큘로바이러스 발현 시스템을 사용하여 SF9 곤충 세포에서 발현되고 글루타티온-S-트랜스퍼라제 친화성 크로마토그래피로 정제된 재조합체 표지 FGFR-3 융합 단백질 [글루타티온-S-트랜스퍼라제 (GST)의 융합 (N-말단적) His6-tag, 트롬빈 절단 부위, 및 NCBI/단백질 엔트리 NP_000133.1에서와 같이 아미노산 R397 내지 T806로부터의 인간 FGFR-3의 세포내 부분]을 Proqinase (제품 번호 1068-0000-1)로부터 구입하고 효소로 사용하였다. 키나제 반응을 위한 기질로서는, 예를 들어 Biosyntan (독일 베를린-부쉬)로부터 구입할 수 있는 비오티닐화된 펩티드 비오틴-Ahx-AAEEEYFFLFAKKK (아미드 형태 중 C-말단)를 사용하였다.
전형적으로, 시험 화합물을 20 μM 내지 0.1 nM (예를 들면, 20 μM, 5.9 μM, 1.7 μM, 0.51 μM, 0.15 μM, 44 nM, 13 nM, 3.8 nM, 1.1 nM, 0.33 nM, 및 0.1 nM) 범위의 11개의 상이한 농도로 동일한 마이크로타이터 플레이트에서 각 농도에 대해 2벌식으로 시험하였다. 분석전에 일련의 희석물을 DMSO 중 100-배 농축 스톡 용액으로서 별도로 제조하였다; 정확한 농도는 사용되는 피펫터에 따라 달라질 수 있다. 분석을 위해, DMSO 중 시험 화합물의 각 스톡 용액 50 nl를 흑색 저부피 384-웰 마이크로타이터 플레이트 (Greiner Bio-One, Frickenhausen, Germany)에 피펫팅하였다. 수성 분석 완충제 [8 mM MOPS pH 7.0, 10 mM 마그네슘 아세테이트, 1.0 mM 디티오트레이톨, 0.05% (w/v) 소혈청알부민 (BSA), 0.07% (v/v) Tween-20, 0.2 mM EDTA] 중 상기 FGFR-3 융합 단백질의 용액 2 ㎕를 첨가하고, 혼합물을 22 ℃에서 15 분동안 배양하여 시험 화합물이 효소에 미리 결합하도록 하였다. 이어서, 분석 완충제 중 아데노신 트리포스페이트 (ATP, 16.7 μM; 5 ㎕ 분석 부피중 최종 농도 = 10 μM) 및 기질 (0.8 μM; 5 ㎕ 분석 부피중 최종 농도 = 0.5 μM)의 용액 3 ㎕를 첨가하여 키나제 반응을 개시하고, 생성된 혼합물을 22 ℃에서 60 분의 반응 시간동안 배양하였다. FGFR-3 융합 단백질의 농도를 효소 로트의 활성에 따라 조절하고, 선형 범위의 분석에 적절하게 선택하였다 (전형적인 농도는 약 0.03 ㎍/ml의 범위였다). HTRF 검출 시약의 용액 5 ㎕ [수성 EDTA 용액 (50 mM HEPES/NaOH pH 7.5 중 50 mM EDTA, 0.1% (w/v) BSA) 중 100 nM 스트렙타비딘-XL665 (Cis Biointernational) 및 1 nM PT66-Tb-킬레이트, 테르븀-킬레이트 표지된 항-포스포티로신 항체 (Cis Biointernational; Perkin-Elmer 제품의 PT66-Eu-킬레이트가 대신 사용될 수 있다)] 5 μl를 첨가하여 반응을 정지시켰다.
생성된 혼합물을 22 ℃에서 1 시간동안 배양하여, 인산화된 비오티닐화 펩티드와 검출 시약이 복합체를 형성하도록 하였다. 후속적으로 Tb-킬레이트로부터 스트렙타비딘-XL665로의 공명 에너지 전달을 측정하여, 인산화 기질의 양을 평가하였다. 이를 위해, 350 nm에서의 여기 후 620 nm 및 665 nm에서의 형광 방출을 TR-FRET 판독기 [예를 들어 Rubystar (BMG Labtechnologies, Offenburg, Germany) 또는 Viewlux (Perkin-Elmer)]에서 측정하였다. 665 nm 및 622 nm에서의 방출비를 인산화 기질의 양에 대한 척도로서 취하였다. 데이터를 표준화하고 (억제제 없는 효소 반응 = 0% 억제, 효소만 결여된 기타 모든 분석 성분 = 100% 억제), IC50 값을 회사 내부 소프트웨어를 이용하여 4 파라미터 피팅에 의해 계산하였다. 이 분석으로부터의 본 발명의 개별 화합물에 대한 IC50 값을 하기 표 2A에 나타내었다:
Figure 112014065561338-pct00224
Figure 112014065561338-pct00225
선택된 8-아미노-1-(벤조티오펜-2-일)이미다조[1,5-a]피라진 유도체 및 가장 가까운 선행기술의 대표적인 것으로 간주되는 관련 화합물 (참조: 국제특허출원 WO 2007/061737-A2호 및 이곳에 기술된 실시예 화합물)을 공개된 절차에 따라 합성하고, 비교 목적으로 FGFR-3 분석으로 또한 검사하였다. 이들 화합물에 대한 IC50 값을 하기 표 2B에 나타내었다:
Figure 112014065561338-pct00226
Figure 112014065561338-pct00227
표 2A 및 2B에 명시된 IC50 값은 본 발명의 화합물이 FGFR-3 키나제 활성을 억제하는데 선택된 선행기술의 화합물보다 약 3배 내지 1000배 더 효능적임을 입증한다.
B-3. FGFR-4 키나제 분석
FGFR-4와 예비배양한 후 본 발명의 화합물의 고 ATP 농도에서의 FGFR-4 억제 활성을 다음 단락들에 기술된 바와 같은 TR-FRET 기반 FGFR-4 고 ATP 분석을 이용하여 정량하였다:
바큘로바이러스 발현 시스템을 사용하여 SF9 곤충 세포에서 발현되고 글루타티온-아가로스 친화성 크로마토그래피로 정제된 재조합체 표지 FGFR-4 융합 단백질 [글루타티온-S-트랜스퍼라제 (GST)의 융합 (N-말단적) His6-tag, 트롬빈 절단 부위, 및 GenBank entry NM_002011에서와 같이 아미노산 R391 내지 T802로부터의 인간 FGFR-4의 세포내 부분]을 Proqinase (제품 번호 0127-0000-3)로부터 구입하고 효소로 사용하였다. 키나제 반응을 위한 기질로서는, 예를 들어 Biosyntan (독일 베를린-부쉬)로부터 구입할 수 있는 비오티닐화된 펩티드 비오틴-Ahx-AAEEEYFFLFAKKK (아미드 형태 중 C-말단)를 사용하였다.
전형적으로, 시험 화합물을 20 μM 내지 0.1 nM (예를 들면, 20 μM, 5.9 μM, 1.7 μM, 0.51 μM, 0.15 μM, 44 nM, 13 nM, 3.8 nM, 1.1 nM, 0.33 nM, 및 0.1 nM) 범위의 11개의 상이한 농도로 동일한 마이크로타이터 플레이트에서 각 농도에 대해 2벌식으로 시험하였다. 분석전에 일련의 희석물을 DMSO 중 100-배 농축 스톡 용액으로서 별도로 제조하였다; 정확한 농도는 사용되는 피펫터에 따라 달라질 수 있다. 분석을 위해, DMSO 중 시험 화합물의 각 스톡 용액 50 nl를 흑색 저부피 384-웰 마이크로타이터 플레이트 (Greiner Bio-One, Frickenhausen, Germany)에 피펫팅하였다. 수성 분석 완충제 [8 mM MOPS pH 7.0, 10 mM 마그네슘 아세테이트, 1.0 mM 디티오트레이톨, 0.05% (w/v) 소혈청알부민 (BSA), 0.07% (v/v) Tween-20, 0.2 mM EDTA] 중 상기 FGFR-4 융합 단백질의 용액 2 ㎕를 첨가하고, 혼합물을 22 ℃에서 15 분동안 배양하여 시험 화합물이 효소에 미리 결합하도록 하였다. 이어서, 분석 완충제 중 아데노신 트리포스페이트 (ATP, 3.3 mM; 5 ㎕ 분석 부피중 최종 농도 = 2 mM) 및 기질 (0.8 μM; 5 ㎕ 분석 부피중 최종 농도 = 0.5 μM)의 용액 3 ㎕를 첨가하여 키나제 반응을 개시하고, 생성된 혼합물을 22 ℃에서 60 분의 반응 시간동안 배양하였다. FGFR-4 융합 단백질의 농도를 효소 로트의 활성에 따라 조절하고, 선형 범위의 분석에 적절하게 선택하였다 (전형적인 농도는 약 0.03 ㎍/ml의 범위였다). HTRF 검출 시약의 용액 5 ㎕ [수성 EDTA 용액 (50 mM HEPES/NaOH pH 7.5 중 50 mM EDTA, 0.1% (w/v) BSA) 중 100 nM 스트렙타비딘-XL665 (Cis Biointernational) 및 1 nM PT66-Tb-킬레이트, 테르븀-킬레이트 표지된 항-포스포티로신 항체 (Cis Biointernational; Perkin-Elmer 제품의 PT66-Eu-킬레이트가 대신 사용될 수 있다)] 5 μl를 첨가하여 반응을 정지시켰다.
생성된 혼합물을 22 ℃에서 1 시간동안 배양하여, 인산화된 비오티닐화 펩티드와 검출 시약이 복합체를 형성하도록 하였다. 후속적으로 Tb-킬레이트로부터 스트렙타비딘-XL665로의 공명 에너지 전달을 측정하여, 인산화 기질의 양을 평가하였다. 이를 위해, 350 nm에서의 여기 후 620 nm 및 665 nm에서의 형광 방출을 TR-FRET 판독기 [예를 들어 Rubystar (BMG Labtechnologies, Offenburg, Germany) 또는 Viewlux (Perkin-Elmer)]에서 측정하였다. 665 nm 및 622 nm에서의 방출비를 인산화 기질의 양에 대한 척도로서 취하였다. 데이터를 표준화하고 (억제제 없는 효소 반응 = 0% 억제, 효소만 결여된 기타 모든 분석 성분 = 100% 억제), IC50 값을 회사 내부 소프트웨어를 이용하여 4 파라미터 피팅에 의해 계산하였다.
B-4. mTOR 키나제 분석 (비교 목적)
본 발명의 화합물의 mTOR 억제 활성을 다음 단락들에 기술된 바와 같은 TR-FRET 기반 mTOR 분석을 이용하여 정량하였다:
곤충 세포에서 발현되고 글루타티온-세파로스 친화성 크로마토그래피로 정제된 재조합체 융합 표지 mTOR 단백질 [1360 내지 2549 인간 mTOR 아미노산에 융합된 글루타티온-S-트랜스퍼라제 (GST)]을 Invitrogen (Cat.-No. 4753)로부터 구입하고 효소로 사용하였다. 키나제 반응을 위한 기질로서는, GFP 및 4E-BP1 (Invitrogen으로부터 구입, Cat.-No. PV4759)를 사용하였다.
시험 화합물을 DMSO에 용해시켜 10 mM 스톡 용액을 만들었다. 이 용액을 먼저 100% DMSO로 10배 희석하여 100% DMSO 중 1 mM 용액으로 만들고 이어 50% DMSO로 100배 희석하여 50% DMSO 중 10 μM 용액으로 만들었다.
분석을 위해 50% DMSO 중 시험 화합물의 10 μM 용액 0.5 μl를 흑색의 저부피 384 웰 마이크로타이터 플레이트 (Greiner Bio-one, Frickenhausen, Germany)에 피펫팅하였다. 수성 분석 완충제 [50 mM HEPES/NaOH pH 7.5, 5 mM 염화마그네슘, 1.0 mM 디티오트레이톨, 1 mM EGTA, 0.01% (v/v) Triton-X100, 0.01% (w/v) 소혈청알부민 (BSA)] 중 상기 mTOR 융합 단백질의 용액 2 μl를 첨가하고, 혼합물을 15 분동안 22 ℃에서 배양하여 시험 화합물이 효소에 미리 결합하도록 하였다. 이어서, 분석 완충제 중 아데노신 트리포스페이트 (ATP, 80 μM; 5 μl 분석 부피 중 최종 농도 = 40 μM) 및 기질 (0.6 μM; 5 μl의 분석 부피 중 최종 농도 = 0.3 μM)의 용액 2.5 μl를 첨가하여 키나제 반응을 개시하고, 생성된 혼합물을 22 ℃에서 60 분의 반응 시간 동안 배양하였다. mTOR 융합 단백질의 농도를 선형 범위의 분석이 되도록 적절하게 선택하였다 (5 μl의 분석 부피에서 전형적인 농도는 1.25 ng/μl이었다). 반응을 FRET 완충제중 30 mM EDTA (10 μl의 분석 부피에서 최종 농도 = 15 mM) 및 2 nM Tb-킬레이트 표지 항-4E-BP1 [pT46] 포스포-특이적 항체 [Invitrogen Cat.-No. PV4755] (10 ㎕ 분석 부피에서 최종 농도 = 1 nM) 5 μl를 첨가하여 정지시켰다.
생성된 혼합물을 22 ℃에서 1 시간동안 배양하여, 인산화된 기질과 Tb-킬레이트 표지 항체가 복합체를 형성하도록 하였다. 후속적으로 Tb-킬레이트로부터 GFP로의 공명 에너지 전달을 측정하여, 인산화 기질의 양을 평가하였다. 이를 위해, 340 nm에서의 여기 후 495 nm 및 520 nm에서의 형광 방출을 Envision 2104 multilabel 판독기 (Perkin-Elmer)에서 측정하였다. 520 nm 및 495 nm에서의 방출비를 인산화 기질의 양에 대한 척도로서 취하였다. 데이터를 표준화하고 (억제제 없는 효소 반응 = 0% 억제, 효소만 결여된 기타 모든 분석 성분 = 100% 억제), 평균값 (단일 농도에서 2벌로 시험되는 경우) 또는 IC50 값 (회사 내부 소프트웨어를 이용하여 4 파라미터 피팅으로)을 계산하였다.
본 발명의 개별 화합물에 대한 1 μM에서의 평균 억제값을 하기 표 3에 나타내었다:
Figure 112014065561338-pct00228
Figure 112014065561338-pct00229
(억제 효과 비검출 = 1 μM에서 억제 효과를 검출할 수 없음).
표 3에서의 데이터는 본 발명의 화합물이, 설상 있더라도, mTOR 키나제에 대한 억제 효과가 미미하다는 것을 보여주고 있으며, 이는 이들 화합물로 관찰된 약학적 활성에 기여하였다고 생각되지 않는다.
B-5. 성장 인자-매개 세포 증식의 억제
인간 탯줄 정맥 내피 세포 (HUVEC)를 Cellsystems (FC-0003)로부터 얻고, 2% 소태아혈청 (FBS)을 함유하는 Vasculife VEGF 완전 배지 (Cellsystems, LL-1020)에서 37 ℃ 및 5% CO2로 증식시켰다. 세포를 최대 7로 계대배양하여 증식 분석에 사용하였다.
HUVEC 세포를 아큐타제 (PAA, L11-007)를 사용하여 수확하고, 100 ㎕ Vasculife VEGF 완전 배지중에 96-웰 플레이트 (Falcon MICROTEST 조직 배양 플레이트 96-웰 평저, BD 353075, 또는 μCLEAR-PLATE, 흑색, 96-웰, Greiner Bio-One, No. 655090)의 2 내지 12 컬럼에 2500 세포/웰의 세포 밀도로 시딩하고, 나머지 1개의 컬럼은 블랭크로서 비워두었다. 세포를 37 ℃ 및 5% CO2에서 적어도 6 시간 배양하였다. 이어, 세포를 PBS로 1회 세척하고, 헤파린, 아스코베이트 및 L-글루타민 (Vasculife Life Factors Kit의 성분들, Cellsystems, LL-1020)과 0.2% FBS를 함유하는 Vasculife 기본 배지 (Cellsystems, LM-0002)에서 밤새 굶겼다.
약 18 시간후, 굶긴 배지를 버리고, 세포를 72 시간동안 100 ㎕ 굶긴 배지중 10 pM 내지 30 μM 범위내 시험 화합물의 9 연속 로그 또는 0.5-로그 농도 및 5, 10 또는 20 ng/ml hFGF-2 (재조합체 인간 FGF basic, R&D 시스템, 233-FB)에 노출시켰다. DMSO 중 시험 화합물의 10 mM 스톡 용액을 DMSO에서 200 x 최종 농도로 희석하여 모든 웰에서 0.5%의 최종 DMSO 농도로 만들었다. 대조군은 오직 굶긴 배지에서만 증식시킨 세포 및 0.5% DMSO가 첨가된 hFGF-2 함유 굶긴 배지에서 증식시킨 세포로 이루어졌다. 세포 증식을 결정하기 위해, 5 ㎕ 알라마르 블루 (Alamar Blue) 용액 (Biosource, DAL1100)을 각 웰 (1:20 희석)에 첨가하고, Spectrafluor Plus Tecan 플레이트 판독기 (XFLUOR4 방법 4.20)로 형광을 측정하기 전에 (여기 535 nm, 방출 595 nm), 세포를 37 ℃ 및 5% CO2에서 4 시간동안 배양하였다. 일부 실험에서는, ATP 결정 키트 (BIAFFIN GmbH, LBR-T100)가 제조업자의 안내에 따라 사용되었다. 각 실험에서, 샘플을 3벌로 분석하고, 표준 편차를 구하였다. GraphPad Prism 5 소포트웨어를 이용하여 데이터를 분석하고, IC50 값을 얻었다. 모든 시험 화합물을 독립 실험으로 2 내지 10 회 분석하고, 유사한 결과를 얻었다.
하기 표 4에 기술된 데이터는 상응하는 평균 pIC50 값으로부터의 본 발명의 대표적인 화합물에 대한 IC50 값을 나타낸다.
Figure 112014065561338-pct00230
혈관내피 성장 인자 (VEGF-A165 이소형)가 매개 성장 인자 (FGF-2 대신)로 사용되는 경우, 본 발명의 대부분의 화합물은 이 증식 분석에서 약 10 배 내지 100 배 감소된 억제 활성을 나타내었으며, 이는 이들 화합물이 VEGFR 키나제에 비해 FGFR에 대해 상당히 선택적임을 보여주는 것이다.
B-6. 인간 이종이식 및 동계 종양 모델
상이한 종양 모델에서 본 발명의 화합물의 생체내 평가가 시행되었다. 인간, 래트 또는 마우스 종양 세포를 시험관내에서 배양하고, 면역결핍 또는 면역적격 마우스, 또는 면역결핍 래트에 이식하였다. 종양 확립후 치료를 시작하고, 종양이 있는 동물을 상이한 경로 (경구, 정맥내, 복강내 또는 피하적)를 통해 물질로 처리하였다. 물질을 단일요법제로서 또는 다른 약학적 물질과 병용으로 시험하였다. 종양이 있는 동물의 치료를 종양의 평균 크기가 120 mm2가 될 때까지 수행하였다. 캘리퍼스를 사용하여 종양을 이차원적으로 측정하고, (길이 × 폭2)/2의 식에 따라 종양 용적을 계산하였다. 실험 말미에 T/C 비 [T = 처리 그룹에서 최종 종양 무게; C = 대조 그룹에서 최종 종양 무게]를 이용하여 물질의 효능을 평가하였다. 대조 그룹과 처리 그룹간 효능의 통계적 유의성을 ANOVA 분산 검정으로 결정하였다. 모든 동물 연구는 독일 규제 지침에 따라 행해졌다.
본 발명이 특정 구체예와 관련하여 기술되긴 하였지만, 당업자들에 의해 본 발명의 진정한 취지 및 범위를 벗어나지 않으면서 본 발명의 다른 구체예 및 변형이 이루어질 수 있음은 자명하다. 청구범위는 이러한 모든 구체예 및 등가적인 변형을 포함하는 것으로 해석되어야 한다.
C. 약학 조성물에 관한 실시예
본 발명에 따른 약학 조성물은 다음과 같이 설명될 수 있다:
멸균 정맥내 용액:
멸균 주사용수를 사용하여 본 발명의 목적 화합물의 5 mg/mL 용액을 제조할 수 있으며, pH는 필요에 따라 조절된다. 용액을 투여하기 위해 멸균 5% 덱스트로즈를 사용하여 1-2 mg/mL로 희석하고, 약 60 분간에 걸쳐 정맥내 주입으로 투여한다.
정맥내 투여용 동결건조 분말:
(i) 동결건조 분말로서 100-1000 mg의 본 발명의 목적 화합물, (ii) 32-327 mg/mL 소듐 시트레이트, 및 (iii) 300-3000 mg 덱스트란 40으로 멸균 제제가 제조될 수 있다. 제형은 멸균 주사용 염수 또는 5% 덱스트로즈를 사용하여 10 내지 20 mg/mL의 농도로 재구성되며, 염수 또는 5% 덱스트로즈를 사용하여 0.2 내지 0.4 mg/mL로 추가 희석된 다음, 정맥내 볼러스 또는 정맥내 주입으로 15-60 분에 걸쳐 투여된다.
근육내 현탁물:
하기 용액 또는 현탁물이 근육내 주사용으로 준비될 수 있다:
50 mg/ml의 본 발명의 수불용성 목적 화합물; 5 mg/mL 소듐 카복시메틸셀룰로스; 4 mg/mL Tween 80; 9 mg/mL 염화나트륨; 9 mg/mL 벤질 알콜.
경질 쉘 캅셀:
표준 투피스 (two-piece) 경질 젤라틴 캅셀 각각에 100 mg의 본 발명의 목적 분말 화합물, 150 mg의 락토스, 50 mg의 셀룰로스 및 6 mg의 마그네슘 스테아레이트를 충전하여 다수의 단위 캅셀을 제조한다.
연질 젤라틴 캅셀:
소화성 오일, 예컨대 대두유, 면실유 또는 올리브유중에 본 발명의 목적 화합물의 혼합물을 준비하고, 양변위 펌프로 용융 젤라틴에 주입하여 100 mg의 활성 성분을 함유하는 캅셀을 형성한다. 캅셀을 세척하고, 건조시킨다. 본 발명의 목적 화합물을 폴리에틸렌 글리콜, 글리세린 및 소르비톨의 혼합물에 용해시켜 수혼화성 약물 믹스를 제조한다.
정제:
투약 단위가 100 mg의 본 발명의 목적 화합물, 0.2 mg의 콜로이드성 이산화규소, 5 mg의 마그네슘 스테아레이트, 275 mg의 미정질 셀룰로스, 11 mg의 전분 및 98.8 mg의 락토스가 되도록 통상적인 절차로 다수의 정제를 제조한다. 기호성을 증진시키거나, 외관 및 안정성을 향상시키거나, 또는 흡수를 지연시키기 위해 적절한 수성 및 비수성 코팅이 적용될 수 있다.
안 국소 적용용 용액 또는 현탁물 (점안제):
5 ml 멸균 염수에서 재구성되는 동결건조 분말로서 100 mg의 본 발명의 목적 화합물로 멸균 제형을 제조할 수 있다. 약 0.001 내지 1 중량% 범위의 벤잘코늄 클로라이드, 티메로살, 페닐질산제2수은 등이 보존제로서 사용될 수 있다.

Claims (14)

  1. 화학식 (I)의 화합물, 또는 그의 약학적으로 허용되는 염, 수화물 또는 용매화물:
    Figure 112019071550811-pct00231

    상기 식에서,
    R1은 수소, 클로로, 메틸 또는 메톡시이고,
    R2는 수소 또는 메톡시이되,
    단, R1 및 R2의 적어도 하나는 수소가 아니고,
    G1은 클로로, (C1-C4)-알킬, (C1-C4)-알콕시카보닐, 5-원 아자헤테로아릴, 또는 그룹 -CH2-OR3, -CH2-NR4R5 또는 -C(=O)-NR4R6을 나타내고, 여기서
    R3은 수소, (C1-C4)-알킬, (C3-C6)-사이클로알킬 또는 페닐이고,
    (i) 상기 (C1-C4)-알킬은 하이드록시, (C1-C4)-알콕시, 하이드록시카보닐, (C1-C4)-알콕시카보닐, 아미노, 아미노카보닐, 모노-(C1-C4)-알킬아미노카보닐, 디-(C1-C4)-알킬아미노카보닐, (C3-C6)-사이클로알킬 또는 3개 이하의 플루오로 원자에 의해 임의로 치환되고,
    (ii) 상기 (C3-C6)-사이클로알킬은 (C1-C4)-알킬, 하이드록시 및 아미노로 구성된 그룹으로부터 독립적으로 선택되는 1 또는 2개의 치환체에 의해 임의로 치환되고,
    (iii) 상기 페닐은 플루오로, 클로로, 브로모, 시아노, 트리플루오로메틸, 트리플루오로메톡시, (C1-C4)-알킬 및 (C1-C4)-알콕시로 구성된 그룹으로부터 독립적으로 선택되는 1 또는 2개의 치환체에 의해 임의로 치환되고,
    R4는 수소 또는 (C1-C4)-알킬이고,
    R5는 수소, (C1-C4)-알킬, (C1-C4)-알킬카보닐, (C3-C6)-사이클로알킬 또는 4- 내지 6-원 헤테로사이클로알킬이고, 여기서
    (i) 상기 (C1-C4)-알킬은 하이드록시, (C1-C4)-알콕시, 하이드록시카보닐, (C1-C4)-알콕시카보닐, 아미노카보닐, 모노-(C1-C4)-알킬아미노카보닐, 디-(C1-C4)-알킬아미노카보닐 또는 (C3-C6)-사이클로알킬에 의해 임의로 치환되고,
    (ii) 상기 (C3-C6)-사이클로알킬은 (C1-C4)-알킬, 하이드록시 및 아미노로 구성된 그룹으로부터 독립적으로 선택되는 1 또는 2개의 치환체에 의해 임의로 치환되고,
    (iii) 상기 4- 내지 6-원 헤테로사이클로알킬은 (C1-C4)-알킬, 하이드록시, 옥소 및 아미노로 구성된 그룹으로부터 독립적으로 선택되는 1 또는 2개의 치환체에 의해 임의로 치환되고,
    R6은 수소, (C1-C4)-알킬, (C3-C6)-사이클로알킬 또는 4- 내지 6-원 헤테로사이클로알킬이고, 여기서
    (i) 상기 (C1-C4)-알킬은 하이드록시, (C1-C4)-알콕시, 하이드록시카보닐, (C1-C4)-알콕시카보닐, 아미노, 아미노카보닐, 모노-(C1-C4)-알킬아미노카보닐, 디-(C1-C4)-알킬아미노카보닐 또는 (C3-C6)-사이클로알킬에 의해 임의로 치환되고,
    (ii) 상기 (C3-C6)-사이클로알킬은 (C1-C4)-알킬, 하이드록시 및 아미노로 구성된 그룹으로부터 독립적으로 선택되는 1 또는 2개의 치환체에 의해 임의로 치환되고,
    (iii) 상기 4- 내지 6-원 헤테로사이클로알킬은 (C1-C4)-알킬, 하이드록시, 옥소 및 아미노로 구성된 그룹으로부터 독립적으로 선택되는 1 또는 2개의 치환체에 의해 임의로 치환되거나, 또는
    R4 및 R5, 또는 R4 및 R6은 각각, 결합하고, 이들이 결합된 질소 원자와 함께, N(R7) 및 O로부터 선택되는 제2 환 헤테로원자를 함유할 수 있고, 환 탄소 원자상에서 (C1-C4)-알킬, 옥소, 하이드록시, 아미노 및 아미노카보닐로 구성된 그룹으로부터 독립적으로 선택되는 1 또는 2개의 치환체에 의해 치환될 수 있는 모노사이클릭, 포화 4- 내지 7-원 헤테로사이클로알킬 환을 형성하고, 여기서
    R7은 수소, (C1-C4)-알킬, 포르밀 또는 (C1-C4)-알킬카보닐이고,
    G2는 클로로, 시아노, (C1-C4)-알킬, 또는 그룹 -CR8AR8B-OH, -CH2-NR9R10, -C(=O)-NR11R12 또는 -CH2-OR15를 나타내고, 여기서
    R8A 및 R8B는 독립적으로 수소, (C1-C4)-알킬, 사이클로프로필 및 사이클로부틸로 구성된 그룹으로부터 선택되고,
    R9는 수소 또는 (C1-C4)-알킬이고,
    R10은 수소, (C1-C4)-알킬, (C1-C4)-알킬카보닐, (C3-C6)-사이클로알킬 또는 4- 내지 6-원 헤테로사이클로알킬이고, 여기서
    (i) 상기 (C1-C4)-알킬은 하이드록시, 아미노, 아미노카보닐, 모노-(C1-C4)-알킬아미노카보닐 또는 디-(C1-C4)-알킬아미노카보닐에 의해 임의로 치환되고,
    (ii) 상기 (C3-C6)-사이클로알킬은 (C1-C4)-알킬, 하이드록시 및 아미노로 구성된 그룹으로부터 독립적으로 선택되는 1 또는 2개의 치환체에 의해 임의로 치환되고,
    (iii) 상기 4- 내지 6-원 헤테로사이클로알킬은 (C1-C4)-알킬, 하이드록시, 옥소 및 아미노로 구성된 그룹으로부터 독립적으로 선택되는 1 또는 2개의 치환체에 의해 임의로 치환되고,
    R11은 수소 또는 (C1-C4)-알킬이고,
    R12는 수소, (C1-C4)-알킬, (C3-C6)-사이클로알킬 또는 4- 내지 6-원 헤테로사이클로알킬이고, 여기서
    (i) 상기 (C1-C4)-알킬은 하이드록시, 아미노, 아미노카보닐, 모노-(C1-C4)-알킬아미노카보닐 또는 디-(C1-C4)-알킬아미노카보닐에 의해 임의로 치환되고,
    (ii) 상기 (C3-C6)-사이클로알킬은 (C1-C4)-알킬, 하이드록시 및 아미노로 구성된 그룹으로부터 독립적으로 선택되는 1 또는 2개의 치환체에 의해 임의로 치환되고,
    (iii) 상기 4- 내지 6-원 헤테로사이클로알킬은 (C1-C4)-알킬, 하이드록시, 옥소 및 아미노로 구성된 그룹으로부터 독립적으로 선택되는 1 또는 2개의 치환체에 의해 임의로 치환되거나, 또는
    R9 및 R10, 또는 R11 및 R12는 각각, 결합하고, 이들이 결합된 질소 원자와 함께, N(R13), O, S 및 S(O)2로부터 선택되는 제2 환 헤테로원자를 함유할 수 있고, 환 탄소 원자 상에서 플루오로, (C1-C4)-알킬, 옥소, 하이드록시, 아미노 및 아미노카보닐로 구성된 그룹으로부터 독립적으로 선택되는 3개 이하의 치환체에 의해 치환될 수 있는 모노사이클릭, 포화 4- 내지 7-원 헤테로사이클로알킬 환을 형성하고, 여기서
    R13은 수소, (C1-C4)-알킬, (C3-C6)-사이클로알킬, 포르밀 또는 (C1-C4)-알킬카보닐이고,
    R15는 (C1-C4)-알킬이되,
    단, G2가 클로로 또는 시아노인 경우, G1은 클로로가 아니다.
  2. 제1항에 있어서,
    R1은 클로로, 메틸 또는 메톡시이고,
    R2는 수소 또는 메톡시이고,
    G1은 클로로, (C1-C4)-알킬, (C1-C4)-알콕시카보닐 또는 피라졸릴, 이미다졸릴, 옥사졸릴, 이속사졸릴 및 옥사디아졸릴로 구성된 그룹으로부터 선택되는 5-원 아자헤테로아릴을 나타내거나, 또는 그룹 -CH2-OR3 또는 -CH2-NR4R5를 나타내고, 여기서
    R3은 수소, (C1-C4)-알킬 또는 (C3-C6)-사이클로알킬이고,
    상기 (C1-C4)-알킬은 하이드록시, (C1-C4)-알콕시, 하이드록시카보닐, (C1-C4)-알콕시카보닐, 아미노, 아미노카보닐, (C3-C6)-사이클로알킬 또는 3개 이하의 플루오로 원자에 의해 임의로 치환되고,
    R4는 수소 또는 (C1-C4)-알킬이고,
    R5는 수소, (C1-C4)-알킬, (C1-C4)-알킬카보닐, (C3-C6)-사이클로알킬 또는 5- 또는 6-원 헤테로사이클로알킬이고, 여기서
    (i) 상기 (C1-C4)-알킬은 하이드록시, 하이드록시카보닐 또는 (C3-C6)-사이클로알킬에 의해 임의로 치환되고,
    (ii) 상기 5- 또는 6-원 헤테로사이클로알킬은 옥소에 의해 임의로 치환되거나, 또는
    R4 및 R5는 결합하고, 이들이 결합된 질소 원자와 함께, N(R7) 및 O로부터 선택되는 제2 환 헤테로원자를 함유할 수 있고, 환 탄소 원자상에서 옥소 또는 하이드록시에 의해 치환될 수 있는 모노사이클릭, 포화 4- 내지 6-원 헤테로사이클로알킬 환을 형성하고, 여기서
    R7은 수소 또는 (C1-C4)-알킬이고,
    G2는 클로로, 시아노, (C1-C4)-알킬, 또는 그룹 -CR8AR8B-OH, -CH2-NR9R10, -C(=O)-NR11R12 또는 -CH2-OR15를 나타내고, 여기서
    R8A 및 R8B는 수소, (C1-C4)-알킬 및 사이클로프로필로 구성된 그룹으로부터 독립적으로 선택되고,
    R9는 수소 또는 메틸이고,
    R10은 수소, (C1-C4)-알킬, (C1-C4)-알킬카보닐, (C3-C6)-사이클로알킬 또는 5- 또는 6-원 헤테로사이클로알킬이고, 여기서
    (i) 상기 (C1-C4)-알킬은 하이드록시 또는 아미노카보닐에 의해 임의로 치환되고,
    (ii) 상기 5- 또는 6-원 헤테로사이클로알킬은 옥소에 의해 임의로 치환되고,
    R11은 수소 또는 메틸이고,
    R12는 수소, (C1-C4)-알킬, (C3-C6)-사이클로알킬 또는 5- 또는 6-원 헤테로사이클로알킬이고, 여기서
    (i) 상기 (C1-C4)-알킬은 하이드록시에 의해 임의로 치환되고,
    (ii) 상기 5- 또는 6-원 헤테로사이클로알킬은 옥소에 의해 임의로 치환되거나, 또는
    R9 및 R10, 또는 R11 및 R12는 각각, 결합하고, 이들이 결합된 질소 원자와 함께, N(R13), O, S 및 S(O)2로부터 선택되는 제2 환 헤테로원자를 함유할 수 있고 환 탄소 원자 상에서 플루오로, (C1-C4)-알킬, 옥소, 하이드록시, 아미노 및 아미노카보닐로 구성된 그룹으로부터 독립적으로 선택되는 3개 이하의 치환체에 치환될 수 있는 모노사이클릭, 포화 4- 내지 6-원 헤테로사이클로알킬 환을 형성하고, 여기서
    R13은 수소, (C1-C4)-알킬, 사이클로프로필, 사이클로부틸, 포르밀 또는 (C1-C4)-알킬카보닐이고,
    R15는 메틸 또는 에틸이되,
    단, G2가 클로로 또는 시아노인 경우, G1은 클로로가 아닌
    화학식 (I)의 화합물, 또는 그의 약학적으로 허용되는 염, 수화물 또는 용매화물.
  3. 제1항에 있어서,
    R1은 메틸이고,
    R2는 메톡시이고,
    G1은 메틸, 옥사졸-5-일 또는 그룹 -CH2-OR3 또는 -CH2-NR4R5를 나타내고, 여기서
    R3은 수소, (C1-C4)-알킬, 사이클로프로필 또는 사이클로부틸이고,
    상기 (C1-C4)-알킬은 하이드록시, 메톡시, 에톡시, 하이드록시카보닐, 메톡시카보닐, 에톡시카보닐, 아미노, 아미노카보닐, 사이클로프로필, 사이클로부틸 또는 3개 이하의 플루오로 원자에 의해 임의로 치환되고,
    R4는 수소, 메틸 또는 에틸이고,
    R5는 수소, (C1-C4)-알킬, 아세틸, 사이클로프로필, 사이클로부틸 또는 2-옥소-피롤리딘-3-일이고,
    상기 (C1-C4)-알킬은 하이드록시, 하이드록시카보닐, 사이클로프로필 또는 사이클로부틸에 의해 임의로 치환되거나, 또는
    R4 및 R5는 결합하고, 이들이 결합된 질소 원자와 함께, NH 및 O로부터 선택되는 제2 환 헤테로원자를 함유할 수 있고, 환 탄소 원자 상에서 옥소 또는 하이드록시로 치환될 수 있는 모노사이클릭, 포화 5- 또는 6-원 헤테로사이클로알킬 환을 형성하고,
    G2는 메틸 또는 그룹 -CR8AR8B-OH, -CH2-NR9R10 또는 -C(=O)-NR11R12를 나타내고, 여기서
    R8A 및 R8B는 독립적으로 수소 또는 메틸이고,
    R9는 수소이고,
    R10은 수소, (C1-C4)-알킬, 아세틸, 사이클로프로필, 사이클로부틸 또는 2-옥소-피롤리딘-3-일이고,
    상기 (C1-C4)-알킬은 하이드록시 또는 아미노카보닐에 의해 임의로 치환되고,
    R11은 수소 또는 메틸이고,
    R12는 수소, (C1-C4)-알킬, 사이클로프로필, 사이클로부틸 또는 2-옥소피롤리딘-3-일이고,
    상기 (C1-C4)-알킬은 하이드록시에 의해 임의로 치환되거나, 또는
    R9 및 R10, 또는 R11 및 R12는 각각, 결합하고, 이들이 결합된 질소 원자와 함께, N(R13), O 및 S(O)2로부터 선택되는 제2 환 헤테로원자를 함유할 수 있고 환 탄소 원자 상에서 플루오로, 메틸, 옥소, 하이드록시, 아미노 및 아미노카보닐로 구성된 그룹으로부터 독립적으로 선택되는 3개 이하의 치환체에 의해 치환될 수 있는 모노사이클릭, 포화 4- 내지 6-원 헤테로사이클로알킬 환을 형성하고, 여기서
    R13은 수소, 포르밀 또는 아세틸인
    화학식 (I)의 화합물, 또는 그의 약학적으로 허용되는 염, 수화물 또는 용매화물.
  4. 제1항에 있어서,
    R1은 메틸이고,
    R2는 메톡시이고,
    G1은 그룹 -CH2-OR3을 나타내고, 여기서
    R3은 하이드록시, 아미노 또는 아미노카보닐에 의해 임의로 치환된 (C1-C4)-알킬이고,
    G2는 그룹 -CH2-NR9R10 또는 -C(=O)-NR11R12를 나타내고, 여기서
    R9는 수소이고,
    R10은 2-옥소피롤리딘-3-일이거나, 또는
    R9 및 R10은 결합하고, 이들이 결합된 질소 원자와 함께, 피페라진-1-일, 3-옥소피페라진-1-일 또는 4-아세틸피페라진-1-일 환을 형성하고,
    R11은 수소이고,
    R12는 2-옥소피롤리딘-3-일이거나, 또는
    R11 및 R12는 결합하고, 이들이 결합된 질소 원자와 함께, 3-하이드록시아제티딘-1-일, 4-하이드록시피페리딘-1-일 또는 3-옥소피페라진-1-일 환을 형성하는
    화학식 (I)의 화합물, 또는 그의 약학적으로 허용되는 염, 수화물 또는 용매화물.
  5. 제1항에 있어서, 4-{[4-아미노-6-(메톡시메틸)-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일]메틸}피페라진-2-온인 화학식 (I)의 화합물, 또는 그의 약학적으로 허용되는 염, 수화물 또는 용매화물:
    Figure 112019071550811-pct00253
    .
  6. 제1항에 있어서, 4-{[4-아미노-6-(메톡시메틸)-5-(7-메톡시-5-메틸-1-벤조티오펜-2-일)피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일]메틸}피페라진-2-온인 화학식 (I)의 화합물:
    Figure 112017122593161-pct00254
    .
  7. [A] 화학식 (II)의 6-치환된 4-아미노피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진을 먼저 산의 존재하에 포름알데하이드 및 화학식 (III)의 아민과 반응시켜 화학식 (IV)의 화합물을 제공한 뒤, 화학식 (V)의 화합물로 브롬화하고, 이어 팔라듐 촉매 및 염기의 존재하에 화학식 (VI)의 벤조티오펜-2-일 보로네이트와 커플링하여 화학식 (I-A)의 목적 화합물을 수득하는 단계,
    [B] 화학식 (II)의 6-치환된 4-아미노피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진을 먼저 포스포릴 클로라이드의 존재하에 N,N-디메틸포름아미드를 사용하여 화학식 (VII)의 알데하이드로 포르밀화한 후, 화학식 (VIII)의 화합물로 브롬화하고, 이어, 팔라듐 촉매 및 염기의 존재하에 화학식 (VI)의 벤조티오펜-2-일 보로네이트와 커플링하여 화학식 (IX)의 화합물을 제공하고, 이를 이후에
    [B-1] 산 및 환원제의 존재하에 화학식 (III)의 아민과 반응시켜 화학식 (I-A)의 목적 화합물을 수득하거나, 또는
    [B-2] 화학식 (X)의 카복실산으로 산화시키고, 마지막으로 축합제의 존재하에 화학식 (XI)의 아민과 커플링하여 화학식 (I-B)의 목적 화합물을 수득하는 단계,
    [C] 화학식 (XII)의 6-치환된 4-아미노-5-브로모피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진을 먼저 팔라듐 촉매 및 염기의 존재하에 화학식 (VI)의 벤조티오펜-2-일 보로네이트와 커플링하여 화학식 (XIII)의 화합물을 제공한 후,
    산의 존재하에 포름알데하이드 및 화학식 (III)의 아민과 반응시켜 화학식 (I-C)의 화합물을 수득하고, 이를 이후에
    [C-1] 화학식 (XIV)의 알데하이드로 산화시키고, 산 및 환원제의 존재하에 화학식 (XV)의 아민으로 처리하여 화학식 (I-D)의 목적 화합물을 수득하거나, 또는
    [C-2] 화학식 (XVI)의 상응하는 6-(할로메틸) 유도체로 전환시키고, 염기의 존재하에 화학식 (XVII)의 알콜로 처리하여 화학식 (I-E)의 목적 화합물을 수득하는 단계,
    임의로, 이후에, 경우에 따라, (i) 이렇게 수득한 화학식 (I)의 화합물을 그의 각 거울상이성체 및/또는 부분입체이성체로 분리하고, 및/또는 (ii) 화학식 (I)의 화합물을 상응하는 용매 및/또는 산 또는 염기로 처리하여 그의 각 수화물, 용매화물, 염 및/또는 염의 수화물 또는 염의 용매화물로 전환시키는 단계를 특징으로 하는, 제1항 내지 제6항중 어느 한 항에 따른 화학식 (I)의 화합물의 제조방법:
    Figure 112017122593161-pct00232

    Figure 112017122593161-pct00233

    Figure 112017122593161-pct00234

    Figure 112017122593161-pct00235

    Figure 112017122593161-pct00236

    Figure 112017122593161-pct00237

    Figure 112017122593161-pct00238

    Figure 112017122593161-pct00239

    Figure 112017122593161-pct00240

    Figure 112017122593161-pct00241

    Figure 112017122593161-pct00242

    Figure 112017122593161-pct00243

    Figure 112017122593161-pct00244

    Figure 112017122593161-pct00245

    Figure 112017122593161-pct00246

    Figure 112017122593161-pct00247

    Figure 112017122593161-pct00248

    Figure 112017122593161-pct00249

    Figure 112017122593161-pct00250

    Figure 112017122593161-pct00251

    Figure 112017122593161-pct00252

    상기 식에서,
    R1, R2, R3, R4, R5, R9, R10, R11 및 R12는 제1항에 정의된 바와 같고,
    R14는 수소 또는 (C1-C4)-알킬을 나타내거나, 또는 두 R14 잔기가 함께 결합하여 -(CH2)2-, -C(CH3)2-C(CH3)2-, -(CH2)3-, -CH2-C(CH3)2-CH2- 또는 -C(=O)-CH2-N(CH3)-CH2-C(=O)- 브리지를 형성하고,
    X는 클로로, 브로모 또는 요오도이고,
    R3A는 제1항에 정의된 R3의 의미를 가지나, 수소는 제외된다.
  8. 제1항 내지 제6항중 어느 한 항에 있어서, 질환을 치료 및/또는 예방하기 위한 화학식 (I)의 화합물, 또는 그의 약학적으로 허용되는 염, 수화물 또는 용매화물.
  9. 제1항 내지 제6항중 어느 한 항에 있어서, 암 및 종양 질환의 치료 및/또는 예방을 위한 방법에 사용하기 위한 화학식 (I)의 화합물, 또는 그의 약학적으로 허용되는 염, 수화물 또는 용매화물.
  10. 제1항 내지 제6항중 어느 한 항에 있어서, 암 및 종양 질환의 치료 및/또는 예방용 약학 조성물을 제조하기 위해 사용되는 화학식 (I)의 화합물, 또는 그의 약학적으로 허용되는 염, 수화물 또는 용매화물.
  11. 제1항 내지 제6항중 어느 한 항에 따른 화학식 (I)의 화합물과 하나 이상의 약학적으로 허용되는 부형제를 포함하는, 암 및 종양 질환을 치료 및/또는 예방하기 위한 약학 조성물.
  12. 제11항에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제를 더 포함하는, 암 및 종양 질환을 치료 및/또는 예방하기 위한 약학 조성물.
  13. 암 및 종양 질환을 치료 및/또는 예방하기 위한 치료적 유효량의 제1항 내지 제6항중 어느 한 항에 따른 화학식 (I)의 화합물을 포함하는, 암 및 종양 질환을 치료 및/또는 예방하기 위한 약학 조성물.
  14. 삭제
KR1020147019406A 2011-12-15 2012-12-10 이치환된 벤조티에닐-피롤로트리아진 및 fgfr 키나제 억제제로서의 그의 용도 KR102057444B1 (ko)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP11193841.1 2011-12-15
EP11193841 2011-12-15
PCT/EP2012/074977 WO2013087578A1 (en) 2011-12-15 2012-12-10 Disubstituted benzothienyl-pyrrolotriazines and their use as fgfr kinase inhibitors

Publications (2)

Publication Number Publication Date
KR20140103328A KR20140103328A (ko) 2014-08-26
KR102057444B1 true KR102057444B1 (ko) 2019-12-19

Family

ID=47326168

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020147019406A KR102057444B1 (ko) 2011-12-15 2012-12-10 이치환된 벤조티에닐-피롤로트리아진 및 fgfr 키나제 억제제로서의 그의 용도

Country Status (43)

Country Link
US (4) US20140336173A1 (ko)
EP (1) EP2791140B1 (ko)
JP (1) JP6050829B2 (ko)
KR (1) KR102057444B1 (ko)
CN (1) CN104245700B (ko)
AR (1) AR089207A1 (ko)
AU (3) AU2012350750B2 (ko)
BR (1) BR112014014531B1 (ko)
CA (1) CA2859133C (ko)
CL (1) CL2014001547A1 (ko)
CO (1) CO7030961A2 (ko)
CR (1) CR20140288A (ko)
CU (2) CU24426B1 (ko)
CY (1) CY1118112T1 (ko)
DK (1) DK2791140T3 (ko)
DO (1) DOP2014000127A (ko)
EA (1) EA029556B1 (ko)
EC (1) ECSP14004722A (ko)
ES (1) ES2591203T3 (ko)
GT (1) GT201400113A (ko)
HK (1) HK1205123A1 (ko)
HR (1) HRP20161130T1 (ko)
HU (1) HUE029582T2 (ko)
IL (1) IL232611A (ko)
IN (1) IN2014CN04310A (ko)
JO (1) JO3295B1 (ko)
LT (1) LT2791140T (ko)
ME (1) ME02517B (ko)
MX (1) MX367158B (ko)
MY (1) MY178660A (ko)
PE (1) PE20141855A1 (ko)
PH (1) PH12014501355B1 (ko)
PL (1) PL2791140T3 (ko)
PT (1) PT2791140T (ko)
RS (1) RS55144B1 (ko)
SG (1) SG11201402325QA (ko)
SI (1) SI2791140T1 (ko)
TN (1) TN2014000255A1 (ko)
TW (1) TWI567076B (ko)
UA (1) UA116768C2 (ko)
UY (1) UY34484A (ko)
WO (1) WO2013087578A1 (ko)
ZA (1) ZA201405140B (ko)

Families Citing this family (26)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US10388493B2 (en) 2011-09-16 2019-08-20 Lam Research Corporation Component of a substrate support assembly producing localized magnetic fields
UY34484A (es) * 2011-12-15 2013-07-31 Bayer Ip Gmbh Benzotienilo-pirrolotriazinas disustituidas y sus usos
JP6084291B2 (ja) 2013-07-18 2017-02-22 大鵬薬品工業株式会社 Ｆｇｆｒ阻害剤の間歇投与用抗腫瘍剤
JP6084292B2 (ja) 2013-07-18 2017-02-22 大鵬薬品工業株式会社 Ｆｇｆｒ阻害剤耐性癌の治療薬
KR102228034B1 (ko) * 2013-10-21 2021-03-16 제노스코 치환된 피리미딘 화합물 및 syk 억제제로서의 이의 용도
KR20170090431A (ko) * 2014-12-11 2017-08-07 바이엘 파마 악티엔게젤샤프트 범 ｆｇｆｒ 억제제의 용도 및 범 ｆｇｆｒ 억제제를 사용하는 치료에 대하여 적격인 암 환자를 확인하는 방법
CA2978830A1 (en) * 2015-03-09 2016-09-15 Bayer Pharma Aktiengesellschaft Substituted 2,3-dihydroimidazo[1,2-c]quinazoline-containing combinations
AU2016378723B2 (en) 2015-12-22 2021-09-30 SHY Therapeutics LLC Compounds for the treatment of cancer and inflammatory disease
US11883404B2 (en) 2016-03-04 2024-01-30 Taiho Pharmaceuticals Co., Ltd. Preparation and composition for treatment of malignant tumors
JP7034084B2 (ja) 2016-03-28 2022-03-11 インサイト・コーポレイション Ｔａｍ阻害剤としてのピロロトリアジン化合物
CN107513068A (zh) * 2016-06-16 2017-12-26 中国科学院上海药物研究所 一种具有fgfr抑制活性的新型化合物及其制备和应用
SG10201911076QA (en) 2016-12-16 2020-01-30 Cystic Fibrosis Found Bycyclic heteroaryl derivatives as cftr potentiators
IL310023A (en) 2017-06-21 2024-03-01 SHY Therapeutics LLC Compounds interacting with the RAS superfamily for the treatment of cancer, inflammation, RAS pathology and fibrotic diseases
WO2019034075A1 (zh) * 2017-08-15 2019-02-21 南京明德新药研发股份有限公司 Fgfr和egfr抑制剂
KR20200041361A (ko) 2017-08-15 2020-04-21 씨에스피씨 종콰이 팔마씨우티컬 테크놀로지 (스자좡) 컴퍼니 리미티드 Fgfr 억제제 및 그의 의학적 용도
EP3700894A1 (en) * 2017-10-25 2020-09-02 Bayer Pharma Aktiengesellschaft Process for preparing benzothiophen-2yl boronate
WO2019105734A1 (en) 2017-11-28 2019-06-06 Bayer Consumer Care Ag Combinations of copanlisib
EP4353222A1 (en) 2018-03-19 2024-04-17 Taiho Pharmaceutical Co., Ltd. Use of sodium alkyl sulfate
WO2019180141A1 (en) 2018-03-23 2019-09-26 Bayer Aktiengesellschaft Combinations of rogaratinib
GEP20237531B (en) 2019-01-31 2023-08-25 Bayer Ag Monohydrate of rogaratinib hydrochloride and solid states thereof
WO2020164603A1 (zh) * 2019-02-15 2020-08-20 石药集团中奇制药技术（石家庄）有限公司 固体形式的fgfr抑制剂化合物及其制备方法
WO2020170355A1 (ja) * 2019-02-20 2020-08-27 大鵬薬品工業株式会社 Ｆｇｆｒ１変異腫瘍の治療方法
CN109928976A (zh) * 2019-02-26 2019-06-25 泰州亿腾景昂药业有限公司 一种工业化生产eoc317的方法
WO2021089005A1 (zh) * 2019-11-08 2021-05-14 石药集团中奇制药技术（石家庄）有限公司 一种fgfr抑制剂的用途
CN111004234A (zh) * 2019-11-28 2020-04-14 湖南农业大学 一种2-苯基咪唑并[1,2-α]吡啶类化合物的C3位卤化方法
CN117402161A (zh) * 2022-07-06 2024-01-16 上海科恩泰生物医药科技有限公司 一种具有fgfr抑制作用的亚砜亚胺类化合物、包含其的药物组合物及其用途

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2000071129A1 (en) 1999-05-21 2000-11-30 Bristol-Myers Squibb Company Pyrrolotriazine inhibitors of kinases
WO2007061737A2 (en) 2005-11-17 2007-05-31 Osi Pharmaceuticals, Inc. FUSED BICYCLIC mTOR INHIBITORS
WO2007079164A3 (en) 2005-12-29 2007-09-27 Abbott Lab Protein kinase inhibitors

Family Cites Families (15)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20020063854A (ko) 1999-09-17 2002-08-05 애보트 게엠베하 운트 콤파니 카게 치료제로서의 키나제 억제제
JPWO2004096806A1 (ja) * 2003-04-30 2006-07-13 大日本住友製薬株式会社 縮合イミダゾール誘導体
DE10327439A1 (de) * 2003-06-18 2005-01-05 Boehringer Ingelheim Pharma Gmbh & Co. Kg Neue Imidazopyridazinon- und Imidazopyridonderivate, deren Herstellung und deren Verwendung als Arzneimittel
EA012873B1 (ru) 2004-04-02 2009-12-30 Оси Фармасьютикалз, Инк. 6,6-бициклические кольцевые замещенные гетеробициклические ингибиторы протеинкиназ
UY28931A1 (es) 2004-06-03 2005-12-30 Bayer Pharmaceuticals Corp Derivados de pirrolotriazina utiles para tratar trastornos hiper-proliferativos y enfermedades asociadas con angiogenesis
TW200635927A (en) * 2004-12-22 2006-10-16 Bristol Myers Squibb Co Synthetic process
US8431695B2 (en) 2005-11-02 2013-04-30 Bayer Intellectual Property Gmbh Pyrrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-ylamines IGF-1R kinase inhibitors for the treatment of cancer and other hyperproliferative diseases
US7514435B2 (en) 2005-11-18 2009-04-07 Bristol-Myers Squibb Company Pyrrolotriazine kinase inhibitors
AU2006320440B2 (en) 2005-12-02 2012-04-05 Bayer Healthcare Llc Substituted 4-amino-pyrrolotriazine derivatives useful for treating hyper-proliferative disorders and diseases associated with angiogenesis
PE20070855A1 (es) 2005-12-02 2007-10-14 Bayer Pharmaceuticals Corp Derivados de 4-amino-pirrolotriazina sustituida como inhibidores de quinasas
US8338594B2 (en) 2005-12-02 2012-12-25 Bayer Healthcare Llc Pyrrolotriazine derivatives useful for treating cancer through inhibition of aurora kinase
US8124759B2 (en) 2007-05-09 2012-02-28 Abbott Laboratories Inhibitors of protein kinases
US8476282B2 (en) 2008-11-03 2013-07-02 Intellikine Llc Benzoxazole kinase inhibitors and methods of use
JP5656976B2 (ja) 2009-04-29 2015-01-21 ローカス ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド ピロロトリアジン化合物
UY34484A (es) * 2011-12-15 2013-07-31 Bayer Ip Gmbh Benzotienilo-pirrolotriazinas disustituidas y sus usos

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2000071129A1 (en) 1999-05-21 2000-11-30 Bristol-Myers Squibb Company Pyrrolotriazine inhibitors of kinases
WO2007061737A2 (en) 2005-11-17 2007-05-31 Osi Pharmaceuticals, Inc. FUSED BICYCLIC mTOR INHIBITORS
WO2007079164A3 (en) 2005-12-29 2007-09-27 Abbott Lab Protein kinase inhibitors

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Cancer Res., 70(13), pp.5199-5202(2010)
Trends Mol. Med. 17(5), pp.283-292(2011)

Also Published As

Publication number Publication date
EA201400707A1 (ru) 2014-11-28
AR089207A1 (es) 2014-08-06
IL232611A (en) 2017-05-29
DOP2014000127A (es) 2014-08-15
AU2012350750B2 (en) 2017-08-03
ES2591203T3 (es) 2016-11-25
CU20160039A7 (es) 2016-08-31
HUE029582T2 (en) 2017-03-28
US20190016724A1 (en) 2019-01-17
CN104245700B (zh) 2016-11-16
US20140336173A1 (en) 2014-11-13
UA116768C2 (uk) 2018-05-10
RS55144B1 (sr) 2016-12-30
EA029556B1 (ru) 2018-04-30
GT201400113A (es) 2015-08-25
AU2019204255A1 (en) 2019-07-04
CU24426B1 (es) 2019-06-04
PH12014501355A1 (en) 2014-09-22
PH12014501355B1 (en) 2014-09-22
CA2859133C (en) 2020-03-24
KR20140103328A (ko) 2014-08-26
AU2012350750A1 (en) 2014-06-12
US9206184B2 (en) 2015-12-08
PT2791140T (pt) 2016-09-20
SG11201402325QA (en) 2014-09-26
US20220153745A1 (en) 2022-05-19
CR20140288A (es) 2014-07-14
HK1205123A1 (en) 2015-12-11
MX367158B (es) 2019-08-07
CO7030961A2 (es) 2014-08-21
EP2791140A1 (en) 2014-10-22
SI2791140T1 (sl) 2016-10-28
ECSP14004722A (es) 2015-11-30
IN2014CN04310A (ko) 2015-09-04
JO3295B1 (ar) 2018-09-16
CA2859133A1 (en) 2013-06-20
BR112014014531A2 (pt) 2019-08-06
DK2791140T3 (en) 2016-09-19
EP2791140B1 (en) 2016-06-15
WO2013087578A1 (en) 2013-06-20
LT2791140T (lt) 2016-10-10
CL2014001547A1 (es) 2014-10-24
PE20141855A1 (es) 2014-11-26
HRP20161130T1 (hr) 2016-11-18
UY34484A (es) 2013-07-31
JP2015500307A (ja) 2015-01-05
MX2014006905A (es) 2014-09-08
IL232611A0 (en) 2014-06-30
BR112014014531B1 (pt) 2022-02-08
US20130158000A1 (en) 2013-06-20
CU20140065A7 (es) 2014-11-27
ME02517B (me) 2017-02-20
MY178660A (en) 2020-10-20
CY1118112T1 (el) 2017-06-28
JP6050829B2 (ja) 2016-12-21
PL2791140T3 (pl) 2017-08-31
TWI567076B (zh) 2017-01-21
TW201339162A (zh) 2013-10-01
NZ625073A (en) 2016-07-29
CN104245700A (zh) 2014-12-24
ZA201405140B (en) 2017-04-26
AU2017206140A1 (en) 2017-08-03
TN2014000255A1 (en) 2015-09-30

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR102057444B1 (ko) 이치환된 벤조티에닐-피롤로트리아진 및 fgfr 키나제 억제제로서의 그의 용도
CA2865021C (en) Substituted benzothienyl-pyrrolotriazines and uses thereof
JP6101290B2 (ja) 置換フェニルイミダゾピラゾールおよびその使用
CA2862981C (en) Substituted benzothienyl-pyrrolotriazines and uses thereof in the treatment cancer
NZ625073B2 (en) Disubstituted benzothienyl-pyrrolotriazines and their use as fgfr kinase inhibitors

Legal Events

Date Code Title Description
A201 Request for examination
E902 Notification of reason for refusal
E701 Decision to grant or registration of patent right