ES2591203T3 - Benzotienilo-pirrolotriazinas disustituidas y su uso como inhibidores de la FGFR cinasa - Google Patents

Abstract

Un compuesto de fórmula (I)**Fórmula** en la que R1 es hidrógeno, cloro, metilo o metoxi, R2 es hidrógeno o metoxi, a condición de que al menos uno de R1 y R2 sea diferente de hidrógeno, G1 representa cloro, alquilo (C1-C4), alcoxicarbonilo (C1-C4), aza-heteroarilo de miembros o el grupo -CH2- OR3, -CH2-NR4R5 o -C(>=O)-NR4R6, en donde R3 es hidrógeno, alquilo (C1-C4) o cicloalquilo (C3-C6) o fenilo, (i) dicho alquilo (C1-C4) está opcionalmente sustituido con hidroxi, alcoxi (C1-C4), hidroxicarbonilo, alcoxicarbonilo (C1-C4), amino, aminocarbonilo, mono-(C1-C4)-alquil-aminocarbonilo, di-alquilaminocarbonilo (C1-C4)-, cicloalquilo (C3-C6) o hasta tres átomo de flúor, y (ii) dicho cicloalquilo (C3-C6) está opcionalmente sustituido con uno o dos sustituyentes independientemente seleccionados del grupo que consiste en alquilo (C1-C4), hidroxi y amino, y (iii) dicho fenilo está opcionalmente sustituido con uno o dos sustituyentes independientemente seleccionados del grupo que consiste en flúor, cloro, bromo, ciano, trifluorometilo, trifluorometoxi, alquilo (C1-C4) y alcoxi (C1-C4), R4 es hidrógeno o alquilo (C1-C4), R5 es hidrógeno, alquilo (C1-C4), alquilcarbonilo (C1-C4), cicloalquilo (C3-C6) o heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros, en donde (i) dicho alquilo (C1-C4) está opcionalmente sustituido con hidroxi, alcoxi (C1-C4), hidroxicarbonilo, alcoxicarbonilo (C1-C4), aminocarbonilo, mono-(C1-C4)-alquil-aminocarbonilo, di-alquilaminocarbonilo (C1-C4) o cicloalquilo (C3-C6), y (ii) dicho cicloalquilo (C3-C6) está opcionalmente sustituido con uno o dos sustituyentes independientemente seleccionados del grupo que consiste en alquilo (C1-C4), hidroxi y amino, y (iii) dicho heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros está opcionalmente sustituido con uno o dos sustituyentes independientemente seleccionados del grupo que consiste en alquilo (C1-C4), hidroxi, oxo y amino, R6 es hidrógeno, alquilo (C1-C4), cicloalquilo (C3-C6) o heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros, en donde (i) dicho alquilo (C1-C4) está opcionalmente sustituido con hidroxi, alcoxi (C1-C4), hidroxicarbonilo, alcoxicarbonilo (C1-C4), amino, aminocarbonilo, mono-(C1-C4)-alquil-aminocarbonilo, di-alquilaminocarbonilo (C1-C4) o cicloalquilo (C3-C6), y (ii) dicho cicloalquilo (C3-C6) está opcionalmente sustituido con uno o dos sustituyentes independientemente seleccionados del grupo que consiste en alquilo (C1-C4), hidroxi y amino, y (iii) dicho heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros está opcionalmente sustituido con uno o dos sustituyentes independientemente seleccionados del grupo que consiste en alquilo (C1-C4), hidroxi, oxo y amino, o R4 y R5, o R4 y R6, respectivamente, están unidos y, tomados junto con el átomo de nitrógeno al cual están unidos, forman un anillo heterocicloalquilo monocíclico, saturado de 4 a 7 miembros el cual puede contener un segundo heteroátomo del anillo seleccionado de N(R7) y O, y el cual puede estar sustituido en los átomos de carbono del anillo con uno o dos sustituyentes independientemente seleccionados del grupo que consiste en alquilo (C1-C4), oxo, hidroxi, amino y aminocarbonilo, y en donde R7 es hidrógeno, alquilo (C1-C4), formilo o alquilcarbonilo (C1-C4), y G2 representa cloro, ciano, alquilo (C1-C4) o el grupo -CR8AR8B-OH, -CH2-NR9R10, -C(>=O)-NR11R12 o -CH2-OR15, en donde R8A y R8B se seleccionan independientemente del grupo que consiste en hidrógeno, alquilo (C1-C4), ciclopropilo y ciclobutilo, R9 es hidrógeno o alquilo (C1-C4), R10 es hidrógeno, alquilo (C1-C4), alquilcarbonilo (C1-C4), cicloalquilo (C3-C6) o heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros, en donde (i) dicho alquilo (C1-C4) está opcionalmente sustituido con hidroxi, amino, aminocarbonilo, mono- (C1-C4)-alquilaminocarbonilo o di-alquilaminocarbonilo (C1-C4), y (ii) dicho cicloalquilo (C3-C6) está opcionalmente sustituido con uno o dos sustituyentes independientemente seleccionados del grupo que consiste en alquilo (C1-C4), hidroxi y amino, y (iii) dicho heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros está opcionalmente sustituido con uno o dos sustituyentes independientemente seleccionados del grupo que consiste en alquilo (C1-C4), hidroxi, oxo y amino, R11 es hidrógeno o alquilo (C1-C4), R12 es hidrógeno, alquilo (C1-C4), cicloalquilo (C3-C6) o heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros, en donde (i) dicho alquilo (C1-C4) está opcionalmente sustituido con hidroxi, amino, aminocarbonilo, mono- (C1-C4)-alquilaminocarbonilo, o di-alquilaminocarbonilo (C1-C4), y (ii) dicho cicloalquilo (C3-C6) está opcionalmente sustituido con uno o dos sustituyentes independientemente seleccionados del grupo que consiste en alquilo (C1-C4), hidroxi y amino, y (iii) dicho heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros está opcionalmente sustituido con uno o dos sustituyentes independientemente seleccionados del grupo que consiste en alquilo (C1-C4), hidroxi, oxo y amino, o R9 y R10, o R11 y R12, respectivamente, están unidos y, tomados junto con el átomo de nitrógeno al cual están unidos, forman un anillo heterocicloalquilo monocíclico, saturado de 4 a 7 miembros el cual puede contener un segundo heteroátomo del anillo seleccionado de N(R13), O, S y S(O)2, y el cual puede estar sustituido en los átomos de carbono del anillo con hasta tres sustituyentes independientemente seleccionados del grupo que consiste en flúor, alquilo (C1-C4), oxo, hidroxi, amino y aminocarbonilo, y en donde R13 es hidrógeno, alquilo (C1-C4) o cicloalquilo (C3-C6), formilo o alquilcarbonilo (C1-C4), y R15 es alquilo (C1-C4), a condición de que G1 no sea cloro cuando G2 es cloro o ciano, o una sal, un hidrato y/o un solvato del mismo aceptables para uso farmacéutico.

Description

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DESCRIPCION

Benzotienilo-pirrolotriazinas disustituidas y su uso como inhibidores de la FGFR cinasa

La presente invencion se refiere a derivados de 5-(1-benzotiofen-2-il)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-amina novedosos que tienen actividades inhibidoras de la protema tirosina quinasa, a procesos para la preparacion de estos compuestos, a composiciones farmaceuticas que contienen estos compuestos, y al uso de estos compuestos o composiciones para tratar trastornos proliferativos, en particular, cancer y enfermedades tumorales.

El cancer es la mayor causa de muerte a nivel mundial y represento 7,6 millones de muertes (alrededor del 13% de todas las muertes) en 2008. Se preve que las muertes por cancer continuaran elevandose en el mundo hasta mas de 11 millones en 2o3o (fuente de la OMS, Hoja informativa N°. 297, febrero 2011).

Existen muchas formas en las que puede aparecer el cancer, lo cual es una de las razones por las que su terapia es diffcil. Una de las formas en que se puede producir la transformacion de las celulas es despues de una alteracion genetica. La terminacion del proyecto del genoma humano mostro inestabilidad genomica y heterogeneidad de los genes del cancer humano. Las recientes estrategias para identificar estas alteraciones geneticas aceleraron el proceso para descubrir el gen cancengeno. Por ejemplo, la anormalidad genetica puede conducir a la sobreexpresion de protemas, y por lo tanto a una activacion no fisiologica de estas protemas. Una familia de protemas de la cual deriva un numero de oncoprotemas son las tirosina quinasas y en particular las tirosina quinasas receptoras (RTKs). En las ultimas dos decadas, numerosas vfas de investigacion han demostrado la importancia de la senalizacion mediada por RTK en el desarrollo celular adverso que conduce al cancer. En los ultimos anos, se han obtenido resultados promisorios en la clmica con inhibidores de pequenas moleculas selectivos de las tirosina quinasas como una nueva clase de agentes anti-tumorales [Swinney and Anthony, Nature Rev. Drug Disc. 10 (7), 507-519 (2011)].

Los factores de crecimiento de los fibroblastos (FGFs) y sus receptores (FGFRs) forman parte de un unico y diverso sistema de senalizacion, el cual cumple una funcion clave en una variedad de procesos biologicos que abarcan varios aspectos del desarrollo embrionico y la patofisiologfa adulta [Itoh and Ornitz, J. Biochem. 149(2), 121-130 (2011)]. De una manera espacio-temporal, los FGFs estimulan a traves de la union del FGFR un amplio intervalo de funciones celulares que incluyen la migracion, proliferacion, diferenciacion y supervivencia.

La familia de los FGF comprende 18 factores de crecimiento polipeptfdico secretados que se unen a cuatro tirosina quinasas del receptor muy conservadas (FGFR-1 a -4) que se expresan en la superficie celular. Ademas, el FGRF-5 puede unirse a los FGFs pero no tiene un dominio quinasa, y por lo tanto esta privado de la senalizacion intracelular. La especificidad de la interaccion del ligando/receptor es potenciada por un numero de procesos de transcripcion y de traduccion que da lugar a multiples isoformas por la iniciacion transcripcional alternativa, el corte y empalme alternativo, y los truncamientos del terminal C. Varios proteoglicanos de sulfato heparan (por ej., syndecans) pueden ser parte del complejo FGF/FGFR e influir con fuerza en la capacidad de los FGFs para inducir las respuestas de senalizacion [Polanska et al., Developmental Dynamics 238 (2), 277-293 (2009)]. Los FGFRs son receptores de la superficie celular que consisten de tres dominios de tipo inmunoglobulina extracelulares, un dominio de transmembrana de unico paso, y un dominio de tirosina quinasa dimerizado intracelular. La union del FGF le aporta a las quinasas intracelulares una mtima proximidad, permitiendoles transfosforilarse una con otra. Se han identificado siete sitios de fosforilacion (por ej. en el FGFR-1 Tyr463, Tyr583, Tyr585, Tyr653, Tyr654, Tyr730, y Tyr766).

Algunos de estos grupos de fosfotirosina actuan como sitios de acoplamiento para las moleculas de senalizacion corriente abajo, las cuales en sf mismas tambien pueden ser directamente fosforiladas por el FGFR, conduciendo a la activacion de multiples vfas de transduccion de senal. De este modo, la cascada de senalizacion MAPK esta involucrada en el crecimiento y la diferenciacion celular, la cascada de senalizacion PI3K/Akt esta involucrada en la supervivencia celular y la determinacion del destino de la celula, mientras que las cascadas de senalizacion PI3K y PKC cumplen una funcion en el control de la polaridad celular. Varios inhibidores de retroalimentacion de la senalizacion del FGF han sido identificados recientemente e incluyen los miembros de las familias Spry (Sprouty) y Sef (expresion similar al FGF). Ademas, en ciertas condiciones, el FGFR es liberado de las membranas pre-Golgi en el citosol. El receptor y su ligando, FGF-2, son cotransportados en el nucleo mediante un mecanismo que involucra la importancia, y estan comprometidos en el complejo de la protema que se une al CREB (CBP), un coactivador transcripcional esencial y comun que actua como factor de entrada de la activacion genica. Se han observado multiples correlaciones entre la expresion inmuno-histoqmmica del FGF-2, el FGFR-1 y el FGFR-2 y sus localizaciones celulares tumorales nucleares y citoplasmicas. Por ejemplo, en los adenocarcinomas de pulmon esta asociacion tambien se encontro en el nivel nuclear, enfatizando una funcion activa del complejo en el nucleo [Korc and Friesel, Curr. Cancer Drugs Targets 5, 639-651 (2009)].

Los FGFs se expresan ampliamente tanto en los tejidos en desarrollo y adultos y cumplen importantes funciones en una variedad de procesos normales y patologicos, incluyendo el desarrollo tisular, la regeneracion del tejido, angiogenesis, transformacion neoplasica, migracion celular, diferenciacion celular, y supervivencia celular. Ademas, los FGFs como factores proangiogenicos han estado implicados ademas en el fenomeno de aparicion de la resistencia a la inhibicion del receptor-2 del factor de crecimiento endotelial vascular (VEGFR-2) [Bergers and Hanahan, Nat. Rev. Cancer 8, 592-603 (2008)].

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Los recientes perfiles oncogenomicos de las redes de senalizacion mostraron una importante funcion para la senalizacion del FGF aberrante en la aparicion de algunos canceres humanos [Wesche et al., Biochem. J. 437 (2), 199-213 (2011)]. La senalizacion constitutiva del FGFR independiente del ligandos ha sido descripta en muchos canceres humanos, tales como cancer de cerebro, cancer de cabeza y cuello, cancer gastrico y cancer de ovario. Las formas mutadas del FGFR como tambien las traslocaciones intragenicas del FGFR han sido identificadas en malignidades tales como enfermedades mieloproliferativas. De interes, las mismas mutaciones que se descubrieron como la causa de muchos trastornos del desarrollo tambien se hallaron en las celulas tumorales (por ej., las mutaciones halladas en acondroplasia y displasia tanatoforica, las cuales causan la dimerizacion y de este modo la activacion constitutiva del FGFR-3, tambien se hallan con frecuencia en el cancer de vesfcula). Una mutacion que promueve la dimerizacion es solo un mecanismo que puede incrementar la senalizacion independiente del ligando de los FGFRs. Otras mutaciones localizadas dentro o fuera del dominio quinasa de los FGFRs pueden cambiar la conformacion del dominio dando lugar a las quinasas permanentemente activas.

La amplificacion de la region cromosomica 8p11-12, la locacion genomica del FGRF-1, es una amplificacion focal comun en el cancer de pecho y se produce en aproximadamente el 10% de los canceres de pecho, predominantemente en los canceres positivos del receptor de estrogenos. Las amplificaciones del FGFR-1 tambien han sido informadas en el carcinoma escamoso de pulmon de celulas no pequenas y se hallan a una baja incidencia en el cancer de ovarios, cancer de vesfcula y rabdomiosarcoma. De manera similar, aproximadamente el 10% de los canceres gastricos muestran la amplificacion del FGFR-2, el cual esta asociado con canceres del tipo difuso, de pobre pronostico. Ademas, se hallo que multiples polimorfismos de nucleotidos simples (SNPs) localizados en los FGFR-1 a -4 se correlacionan con un riesgo incrementado de desarrollar canceres selectivos, o se informo que estan asociados con bajo pronostico (por ej., el alelo FGFR-4 G388R en el cancer de pecho, cancer de colon y adenocarcinoma de pulmon). La funcion directa de estos SNPs para promover el cancer todavfa es controvertida.

En smtesis, se ha realizado un gran numero de estudios in vitro e in vivo que validan a los FGFR-1 a -4 como dianas del cancer importantes, y las revisiones exhaustivas han sintetizado estos hallazgos (vease, por ejemplo, Heinzle et al., Expert Opin. Ther. Targets 15 (7), 829-846 (2011); Wesche et al., Biochem. J. 437 (2), 199-213 (2011); Greulich and Pollock, Trends in Molecular Medicine 17 (5), 283-292 (2011); Haugsten et al., Mol. Cancer Res. 8 (11), 14391452 (2010)]. Se han seguido varias estrategias para atenuar la senalizacion de los FGFR-1 a -4 aberrantes en tumores humanos incluyendo anticuerpos de bloqueo e inhibidores de pequenas moleculas, entre otros. Actualmente un numero selectivo de inhibidores del FGFR de pequenas moleculas estan en desarrollo clmico, tales como AZD- 4547 (AstraZeneca) y BJG-398 (Novartis).

No obstante los avances significativos que se han logrado en general en la terapia cancerosa en los ultimos anos, hay una constante necesidad de identificar nuevos compuestos anticancerosos con propiedades mejoradas, tales como mayor potencia, mayor selectividad, toxicidad reducida y/o mejor tolerancia. Por lo tanto, el problema tecnico a ser resuelto de acuerdo con la presente invencion puede ser visto al suministrar compuestos alternativos que tengan actividad inhibidora sobre las quinasas del FGFR, ofreciendo de este modo nuevas opciones terapeuticas para el tratamiento de las enfermedades mediadas por el FGFR, en particular el cancer y otros trastornos proliferativos.

Los inhibidores de la quinasa hetero-5,6-bidclica fusionada que portan un sustituyente heteroarilo bidclico de 9 miembros o uno de 10 miembros han sido divulgados en los documentos WO 2007/061737-A2 y WO 2005/097800- A1, respectivamente. Se establecio que estos compuestos son utiles para el tratamiento del cancer y otras enfermedades que debido a su accion inhibidora sobre las quinasas de mTOR (blanco mairnfero de rapamicina) y/o el IGF-1R (receptor del factor de crecimiento del tipo insulina tipo 1). Ademas, las estructuras del molde hetero-5,6- bidclico asociadas con la inhibicion de las quinasas se han descripto en, entre otros, los documentos WO 01/19828- A2, WO 2007/079164-A2 y WO 2010/051043-A1.

Los derivados de 4-aminopirrolo[2,1-f][1,2,4]triazina con perfiles de inhibicion diferentes contra un numero de protema quinasas han sido divulgados en , inter alia, WO 00/71129-A1, WO 2007/056170-A2, WO 2007/061882-A2, WO 2007/064932-A2, WO 2009/136966-A1, y WO 2010/126960-A1.

En los documentos WO2005/121147-A1, WO 2007/064883-A2 y WO 2007/064931-A2, los derivados de 4- aminopirrolo[2,1-f][1,2,4]triazina que contienen un grupo diarilurea sustituido en la posicion 5 se describieron como que tienen actividad de inhibicion del FGFR-1. Sin embargo, otras tirosinas quinasas del receptor, notablemente el VEGFR, PDGFR y Tie-2 quinasas, tambien son significativamente inhibidas por esta clase particular de compuesto. Como se planteo como hipotesis que esta actividad multi quinasa podna conducir a un aumento de los efectos colaterales potenciales durante el tratamiento, el objetivo de la presente invencion fue identificar nuevos agentes que tengan una selectividad mejorada para las FGFR quinasas, proporcionando de este modo nuevas opciones para una terapia contra el cancer mas tolerable.

Sorprendentemente se ha hallado ahora que ciertos derivados de 4-aminopirrolo[2,1-f][1,2,4]triazina que portan un residuo bentotiofen-2-ilo espedficamente sustituido en la posicion 5 exhiben una potente y selectiva inhibicion de las FGFR quinasas, notablemente de las FGFR-1 y FGFR-3 quinasas, lo cual hace que estos compuestos sean particularmente utiles para el tratamiento de trastornos proliferativos, tales como cancer y enfermedades tumorales.

De este modo, en un aspecto, la presente invencion se refiere a derivados de 5-(1-benzotiofen-2-il)pirrolo[2,1-

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f][1,2,4]triazin-4-amina 6,7-disustituidos de la formula general (I)

imagen1

en la que

R1 es hidrogeno, cloro, metilo o metoxi,

R2 es hidrogeno o metoxi,

a condicion de que al menos uno de R1 y R2 sea diferente de hidrogeno,

G1 representa cloro, alquilo (C1-C4), alcoxicarbonilo (C1-C4), aza-heteroarilo de 5 miembros, o el grupo -CH2-

OR3, -CH2-NR4R5 o -C(=O)-NR4R6, en la que

R3 es hidrogeno, alquilo (C1-C4) o cicloalquilo (C3-C6) o fenilo, en la que

(i) dicho alquilo (C1-C4) esta opcionalmente sustituido con hidroxi, alcoxi (C1-C4), hidroxicarbonilo, alcoxicarbonilo (C1-C4), amino, aminocarbonilo, mono-(C1-C4)-alquil-aminocarbonilo, di- alquilaminocarbonilo (C1-C4)-, cicloalquilo (C3-C6) o hasta tres atomos de fluor,

y

(ii) dicho cicloalquilo (C3-C6) esta opcionalmente sustituido con uno o dos sustituyentes independientemente seleccionados del grupo que consiste en alquilo (C1-C4), hidroxi y amino,

y

(iii) dicho fenilo esta opcionalmente sustituido con uno o dos sustituyentes independientemente seleccionados del grupo que consiste en fluor, cloro, bromo, ciano, trifluorometilo, trifluorometoxi, alquilo (C1-C4) y alcoxi (C1-C4),

R4 es hidrogeno o alquilo (C1-C4),

R5 es hidrogeno, alquilo (C1-C4), alquilcarbonilo (C1-C4), cicloalquilo (C3-C6) o heterocicloalquilo de 4 a

6 miembros, en la que

(i) dicho alquilo (C1-C4) esta opcionalmente sustituido con hidroxi, alcoxi (C1-C4), hidroxicarbonilo,

alcoxicarbonilo (C1-C4), aminocarbonilo, mono-(C1-C4)-alquil-aminocarbonilo, di-

alquilaminocarbonilo (C1-C4), o cicloalquilo (C3-C6),

y

(ii) dicho cicloalquilo (C3-C6) esta opcionalmente sustituido con uno o dos sustituyentes independientemente seleccionados del grupo que consiste en alquilo (C1-C4), hidroxi y amino,

y

(iii) dicho heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros esta opcionalmente sustituido con uno o dos sustituyentes independientemente seleccionados del grupo que consiste en alquilo (C1-C4), hidroxi, oxo y amino,

R6 es hidrogeno, alquilo (C1-C4), cicloalquilo (C3-C6) o heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros, en la que

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(i) dicho alquilo (C1-C4) esta opcionalmente sustituido con hidroxi, alcoxi (C1-C4), hidroxicarbonilo, alcoxicarbonilo (C1-C4), amino, aminocarbonilo, mono-(C1-C4)-alquil-aminocarbonilo, di- alquilaminocarbonilo (C1-C4), o cicloalquilo (C3-C6),

y

(ii) dicho cicloalquilo (C3-C6) esta opcionalmente sustituido con uno o dos sustituyentes independientemente seleccionados del grupo que consiste en alquilo (C1-C4), hidroxi y amino,

y

(iii) dicho heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros esta opcionalmente sustituido con uno o dos sustituyentes independientemente seleccionados del grupo que consiste en alquilo (C1-C4), hidroxi, oxo y amino,

o

R(i) * * 4 y R5, o R4 y R6, respectivamente, se unen y, tomados junto con el atomo de nitrogeno al cual estan unidos, forman un anillo heterocicloalquilo monodclico, saturado de 4 a 7 miembros el cual puede contener un segundo heteroatomo del anillo seleccionado de N(R7 *) y O, y el cual puede estar sustituido en los atomos de carbono del anillo con uno o dos sustituyentes independientemente seleccionados del grupo que consiste en alquilo (C1-C4), oxo, hidroxi, amino y aminocarbonilo, y en la que

R7 es hidrogeno, alquilo (C1-C4), formilo o alquilcarbonilo (C1-C4),

representa cloro, ciano, alquilo (C1-C4), o el grupo -CR8AR8B-OH, -CH2-NR9R10, -C(=O)-NR11R12 * * o -CH2-

OR15, en la que

R8A and R8B se seleccionan independientemente del grupo que consiste en hidrogeno, alquilo (C1-C4),

ciclopropilo y ciclobutilo,

R9 es hidrogeno o alquilo (C1-C4),

R10 es hidrogeno, alquilo (C1-C4), alquilcarbonilo (C1-C4), cicloalquilo (C3-C6) o heterocicloalquilo de 4 a

6 miembros, en la que

(i) dicho alquilo (C1-C4) esta opcionalmente sustituido con hidroxi, amino, aminocarbonilo, mono-

(C1-C4)-alquilaminocarbonilo, o di-alquilaminocarbonilo (C1-C4),

y

(ii) dicho cicloalquilo (C3-C6) esta opcionalmente sustituido con uno o dos sustituyentes independientemente seleccionados del grupo que consiste en alquilo (C1-C4), hidroxi y amino,

y

(iii) dicho heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros esta opcionalmente sustituido con uno o dos

sustituyentes independientemente seleccionados del grupo que consiste en alquilo (C1-C4), hidroxi, oxo y amino,

R11 es hidrogeno o alquilo (C1-C4),

R12 es hidrogeno, alquilo (C1-C4), cicloalquilo (C3-C6) o heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros, en la que

(i) dicho alquilo (C1-C4) esta opcionalmente sustituido con hidroxi, amino, aminocarbonilo, mono-

(C1-C4)-alquilaminocarbonilo, o di-alquilaminocarbonilo (C1-C4),

y

(ii) dicho cicloalquilo (C3-C6) esta opcionalmente sustituido con uno o dos sustituyentes independientemente seleccionados del grupo que consiste en alquilo (C1-C4), hidroxi y amino,

y

(iii) dicho heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros esta opcionalmente sustituido con uno o dos sustituyentes independientemente seleccionados del grupo que consiste en alquilo (C1-C4), hidroxi, oxo y amino,

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R y R , o R y R , respectivamente, se unen y, tornados junto con el atomo de nitrogeno al cual estan unidos, forman un anillo heterocicloalquilo monodclico, saturado de 4 a 7 miembros el cual puede contener un segundo heteroatomo del anillo seleccionado de N(R13), O, S y S(O)2, y el cual puede estar sustituido en los atomos de carbono del anillo con hasta tres sustituyentes independientemente seleccionados del grupo que consiste en fluor, alquilo (C1-C4), oxo, hidroxi, amino y aminocarbonilo, y en la que

R13 es hidrogeno, alquilo (C1-C4) o cicloalquilo (C3-C6), formilo o alquilcarbonilo (C1-C4),

y

R15 es alquilo (C1-C4),

a condicion de que G1 no sea cloro cuando G2 es cloro o ciano.

Los compuestos de acuerdo con esta invencion pueden estar presentes ademas en la forma de sus sales, solvatos y/o solvatos de las sales.

Los compuestos de acuerdo con esta invencion son los compuestos de formula (I) y sus sales, solvatos, y solvatos de las sales, los compuestos incluidos en la formula (I) de las formulas (I-A), (I-B), (I-C), (I-D) y (I-E) mencionados a continuacion y sus sales, solvatos, y solvatos de las sales, y los compuestos incluidos en la formula (I) y mencionados a continuacion como los productos del proceso y/o los ejemplos de realizacion y sus sales, solvatos, y solvatos de las sales, donde los compuestos incluidos en la formula (I) mencionados a continuacion ya no son sales, solvatos, y solvatos de las sales,

Las sales con el fin de la presente invencion son preferentemente sales farmaceuticamente aceptables de los compuestos de acuerdo con la invencion (por ejemplo, vease S. M. Berge et al., "Pharmaceutical Salts", J. Pharm. Sci. 1977, 66, 1-19). Las sales que no son adecuadas por si mismas para usos farmaceuticos, pero se pueden usar por ejemplo para el aislamiento y la purificacion de los compuestos de acuerdo con la invencion, tambien se incluyen.

Las sales farmaceuticamente aceptables incluyen sales de adicion de acido de acidos minerales, acidos carboxflicos y acidos sulfonicos, por ejemplo sales de acido clorhndrico, acido bromhndrico, acido sulfurico, acido fosforico, acido metanosulfonico, acido etanosulfonico, acido bencenosulfonico, acido toluenosulfonico, acido nafatlenodisulfonico, acido formico, acido acetico, acido trifluoroacetico, acido propionico, acido lactico, acido tartarico, acido malico, acido dtrico, acido fumarico, acido maleico, y acido benzoico.

Las sales farmaceuticamente aceptables incluyen tambien sales de bases tradicionales, tales como por ejemplo y preferentemente sales de dianal alcalino (por ejemplo sales de sodio y potasio), sales de dianal alcalinoterreo (por ejemplo sales de calcio y magnesio), y sales de amonio que derivan de amornaco o aminas organicas, tales como las que se ilustran y preferentemente etilamina, dietilamina, trietilamina, N,N-diisopropiletilamina, monoetanolamina, dietanolamina, trietanolamina, dimetilaminoetanol, dietilaminoetanol, procarna, diciclohexilamina, dibencilamina, N- metilmorfolina, N-metilpiperidina, arginina, lisina, y 1,2-etilendiamina.

Se designan solvatos en el contexto de la invencion como aquellas formas de los compuestos de acuerdo con la invencion que forman un complejo en el estado solido o lfquido por coordinacion estoiquiometrica con moleculas de solvente. Los hidratos son una forma espedfica de solvatos, en los cuales la coordinacion tiene lugar con agua. Los hidratos son solvatos preferentes en el contexto de la presente invencion.

Los compuestos de la presente invencion pueden, o bien por naturaleza de los centros asimetricos o por rotacion restringida, estar presentes en la forma de isomeros (enantiomeros, diastereomeros). Cualquier isomero puede estar presente en el cual el centro asimetrico este en la configuracion (R)-, (S)-, o (R,S)-.

Ademas se apreciara que cuando dos o mas centros asimetricos estan presentes en los compuestos de la invencion, varios diastereomeros y enantiomeros de las estructuras ejemplificadas a menudo seran posibles, y que los diastereomeros puros y los enantiomeros puros representan las realizaciones preferentes. Se pretende que los estereoisomeros puros, los diastereomeros puros, los enantiomeros puros y sus mezclas, esten dentro del alcance de la invencion.

Los isomeros geometricos por naturaleza de los sustituyentes alrededor de un enlace doble o un anillo pueden estar presentes en la forma cis (=Z) o trans (=E-), y ambas formas isomericas estan dentro del alcance de esta invencion.

Todos los isomeros, ya sea separados, puros, parcialmente puros, o en mezcla racemica, de los compuestos de esta invencion estan dentro del alcance de esta invencion. La purificacion de dichos isomeros y la separacion de dichas mezclas isomericas pueden obtenerse mediante tecnicas estandares conocidas en la tecnica. Por ejemplo, las mezclas diastereomericas se pueden separar en los isomeros individuales por procesos cromatograficos o cristalizacion, y los racematos se pueden separar en los respectivos enantiomeros ya sea por procesos cromatograficos sobre fases quirales o por resolucion.

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Ademas, todas las formas tautomericas posibles de los compuestos que se describieron anteriormente se incluyen de acuerdo con la presente invencion.

La presente invencion abarca ademas todas las variantes isotopicas adecuadas de los compuestos de acuerdo con la invencion. Una variante isotopica de un compuesto de acuerdo con la invencion se entiende que significa un compuesto en el cual al menos un atomo dentro del compuesto de acuerdo con la invencion ha sido intercambiado por otro atomo del mismo numero atomico, pero con una masa atomica diferente a la masa atomica que usual o predominantemente se produce en la naturaleza. Ejemplos de isotopos que se pueden incorporar a los compuestos de la invencion incluyen isotopos de hidrogeno, carbono, nitrogeno, oxfgeno, fluor, cloro, bromo, y yodo, tales como 2H (deuterio), 3H (tritio), 13C, 14C, 15N, 17O, 18O, 18F, 36Cl, 82Br, 123I, ^24I, 129I and 131I. Las variantes isotropicas

particulares de un compuesto de acuerdo con la invencion, especialmente aquellas en las cuales se han incorporado uno o mas isotopos radioactivos, pueden ser beneficiosas, por ejemplo, para el examen del mecanismo de accion o de la distribucion del compuesto activo en el cuerpo. Debido a la preparacion y deteccion comparativamente facil, especialmente los compuestos etiquetados con isotopos 3H o 14C son adecuados para este fin. Ademas, la incorporacion de isotopos, por ejemplo de deuterio, puede conducir a beneficios terapeuticos particulares como consecuencia de una mayor estabilidad dianabolica del compuesto, por ejemplo una extension de la vida media en el cuerpo o una reduccion en la dosis activa requerida. Estas modificaciones de los compuestos de acuerdo con la invencion pueden, por lo tanto, en algunos casos, constituir ademas una realizacion preferente de la presente invencion. Las variantes isotopicas de los compuestos de acuerdo con la invencion se pueden preparar mediante procesos conocidos por los expertos en la tecnica, por ejemplo, mediante los procedimientos descriptos a continuacion y los procedimientos que se describen en los ejemplos de trabajo, mediante el uso de las correspondientes modificaciones isotopicas de los reactivos particulares y/o los compuestos de partida en los mismos.

En el contexto de la presente invencion los sustituyentes y los residuos tienen el siguiente significado, a menos que se especifique de otro modo:

Alquilo (C1-C4) en el contexto de la invencion representa un radical alquilo de cadena recta o ramificada que tiene 1 a 4 atomos de carbono. Puede mencionarse a modo de ejemplo y preferentemente: metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, iso-butilo, sec-butilo, y ter-butilo.

Alcoxi (C1-C4) en el contexto de la invencion representa un radical alcoxi de cadena recta o ramificada que tiene 1 a 4 atomos de carbono. Puede mencionarse a modo de ejemplo y preferentemente: metoxi, etoxi, n-propoxi, isopropoxi, n-butoxi, iso-butoxi, sec-butoxi, y ter-butoxi.

Mono-alquilamino (C1-C4) en el contexto de la invencion representa un grupo amino con un sustituyente alquilo de cadena recta o ramificada que contiene 1 a 4 atomos de carbono. Puede mencionarse a modo de ejemplo y preferentemente: metilamino, etilamino, n-propilamino, isopropilamino, n-butilamino, y ter-butilamino.

Di-alquilamino (C1-C4) en el contexto de la invencion representa un grupo amino con dos sustituyentes alquilo de cadena recta o ramificada identicos o diferentes que contiene cada uno de ellos 1 a 4 atomos de carbono. Puede mencionarse a modo de ejemplo y preferentemente: N,N-dimetilamino, N,N-dietilamino, N-etil-N-metilamino, N-metil- N-n-propilamino, N-isopropil-N-metilamino, N-isopropil-N-n-propilamino, N,N-diisopropilamino, N-n-butil-N-metilamino, y N-ter-butil-N-metilamino.

Alquilcarbonilo (C1-C4) en el contexto de la invencion representa un radical alquilo de cadena recta o ramificada que tiene 1 a 4 atomos de carbono, el cual esta unido al resto de la molecula mediante un grupo carbonilo [-C(=O)-]. Puede mencionarse a modo de ejemplo y preferentemente: acetilo, propionilo, n-butirilo, iso-butirilo, n-pentanoflo, y pivaloflo.

Alcoxicarbonilo (C1-C4) en el contexto de la invencion representa un radical alcoxi de cadena recta o ramificada que tiene 1 a 4 atomos de carbono el cual esta unido al resto de la molecula mediante un grupo carbonilo [-C(=O)-]. Puede mencionarse a modo de ejemplo y preferentemente: metoxicarbonilo, etoxicarbonilo, etoxicarbonilo; y etoxicarbonilo, n-propoxicarbonilo, isopropoxicarbonilo, n-butoxicarbonilo, y ter-butoxicarbonilo.

Mono-alquilaminocarbonilo (C1-C4) en el contexto de la invencion representa un grupo amino, el cual esta unido al resto de la molecula mediante un grupo carbonilo [-C(=O)-] y el cual tiene un sustituyente alquilo de cadena recta o ramificada que tiene 1 a 4 atomos de carbono. Puede mencionarse a modo de ejemplo y preferentemente: metilaminocarbonilo, etilaminocarbonilo, n-propilaminocarbonilo, isopropilaminocarbonilo, n-butilaminocarbonilo, y ter- butilaminocarbonilo.

Di-alquilaminocarbonilo (C1-C4) en el contexto de la invencion representa un grupo amino, el cual esta unido al resto de la molecula mediante un grupo carbonilo [-C(=O)-] y el cual tiene dos sustituyentes alquilo de cadena recta o ramificada identicos o diferentes que tiene 1 a 4 atomos de carbono. Puede mencionarse a modo de ejemplo y preferentemente: N,N-dimetilaminocarbonilo, N,N-dietilaminocarbonilo, N-et//-N-metilaminocarbonilo, N-metil-N-n- propilaminocarbonilo, N-isopropil-N-metilaminocarbonilo, N,N-diisopropilaminocarbonilo, N-n-butil-N-metilamino- carbonilo, y N-ter-butil-N-metilaminocarbonilo.

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Cicloalquilo (C3-C6) en el contexto de la invencion representa un carbociclo monodclico, saturado que tiene 3 a 6 atomos de carbono. Puede mencionarse a modo de ejemplo; ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, y ciclohexilo. Se prefieren ciclopropilo y ciclobutilo.

Heterocicloalquilo de 4 a 7 miembros y heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros en el contexto de la invencion representan un heterociclo monodclico, saturado con 4 a 7 o, respectivamente, 4 a 6 atomos del anillo en total, el cual contiene uno o mas heteroatomos del anillo identicos o diferentes de las series N, O, S y S(O)2, y el cual puede estar unido mediante un atomo de carbono del anillo o mediante un atomo de nitrogeno del anillo (si esta presente). Se prefiere el heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros que contiene un atomo de nitrogeno del anillo y opcionalmente otro heteroatomo del anillo de las series N, O o S(O)2. Se prefiere particularmente el heterocicloalquilo de 5 o 6 miembros que contiene un atomo de nitrogeno del anillo y opcionalmente otro heteroatomo del anillo de las series N u O. Puede mencionarse a modo de ejemplo: azetidinilo, oxetanilo, tietanilo, pirrolidinilo, pirazolidinilo, imidazolidinilo, tetrahidrofuranilo, tiolanilo, 1,1 -dioxidotiolanilo, 1,2-oxazolidinilo, 1,3-oxazolidinilo, 1,3-tiazolidinilo, piperidinilo, piperazinilo, tetrahidropiranilo, tetrahidrotiopiranilo, 1,3-dioxanilo, 1,4-dioxanilo, 1,2-oxazinanilo, morfolinilo, tiomorfo- linilo, 1,1-dioxidotiomorfolinilo, azepanilo, 1,4-diazepanilo, y 1,4-oxazepanilo. Se prefieren azetidinilo, pirrolidinilo, pirazolidinilo, imidazolidinilo, 1,2-oxazolidinilo, 1,3-oxazolidinilo, piperidinilo, piperazinilo, 1,2-oxazinanilo, morfolinilo, y tio- morfolinilo. Se prefieren particularmente pirrolidinilo, piperidinilo, piperazinilo, y morfolinilo.

Azaheteroarilo de 5 miembros en el contexto de la invencion representa un radical heterodclico aromatico (heteroaromatico) que tiene 5 atomos del anillo en total, el cual contiene al menos un atomo de nitrogeno del anillo y opcionalmente uno o dos otros heteroatomos del anillo de la serie N, O y/o S, y el cual esta unido mediante un atomo de carbono del anillo u opcionalmente mediante un atomo de nitrogeno del anillo (cuando lo permite la valencia). Se prefiere el azaheteroarilo de 5 miembros que contiene un atomo de nitrogeno del anillo y uno o dos otros heteroatomos del anillo de la serie N y/u O. Puede mencionarse a modo de ejemplo: pirrolilo, pirazolilo, imidazolilo, oxazolilo, tiazolilo, isoxazolilo, isotiazolilo, triazolilo, oxadiazolilo, y tiadiazolilo. Se prefieren pirazolilo, imidazolilo, oxazolilo, isoxazolilo, y oxadiazolilo.

Un sustituyente oxo en el contexto de la invencion represente un atomo de oxfgeno, el cual esta unido a un atomo de carbono mediante un enlace doble.

En el contexto de la presente invencion, para todos los radicales que aparecen varias veces, su significado es independiente uno de otro. Si los radicales en los compuestos de acuerdo con la invencion estan sustituidos, los radicales pueden ser mono- o poli-sustituido, a menos que se especifique lo contrario. Se prefiere la sustitucion con uno o con dos o tres sustituyentes identicos o diferentes. Se prefiere particularmente la sustitucion con uno o con dos sustituyentes identicos o diferentes.

En una realizacion preferente, la presente invencion se refiere a los compuestos de formula general (I), en la que R1 es cloro, metilo o metoxi,

R2 es hidrogeno o metoxi,

G1 representa cloro, alquilo (C1-C4), alcoxicarbonilo (C1-C4) o azaheteroarilo de 5 miembros seleccionado del grupo que consiste en pirazolilo, imidazolilo, oxazolilo, isoxazolilo y oxadiazolilo, o representa el grupo -CH2- OR3 o -CH2-NR4R5 *, en la que

R3 es hidrogeno, alquilo (C1-C4) o cicloalquilo (C3-C6),

en la que dicho alquilo (C1-C4) esta opcionalmente sustituido con hidroxi, alcoxi (C1-C4), hidroxi- carbonilo, alcoxicarbonilo (C1-C4), amino, aminocarbonilo, cicloalquilo (C3-C6) o hasta tres atomos de fluor,

R4 es hidrogeno o alquilo (C1-C4),

R5 es hidrogeno, alquilo (C1-C4), alquilcarbonilo (C1-C4), cicloalquilo (C3-C6) o heterocicloalquilo de 5 o 6 miembros, en la que

(i) dicho alquilo (C1-C4) esta opcionalmente sustituido con hidroxi, hidroxicarbonilo, o cicloalquilo

(C3-C6),

y

(ii) dicho heterocicloalquilo de 5 o 6 miembros esta opcionalmente sustituido con oxo, o

R4 y R5 se unen y, tomados junto con el atomo de nitrogeno al cual estan unidos, forman un anillo

heterocicloalquilo monodclico, saturado de 4 a 6 miembros, el cual puede contener un segundo

heteroatomo del anillo seleccionado de N(R7) y O, y el cual puede estar sustituido en un atomo de

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40

carbono del anillo con oxo o hidroxi, y en la que R7 es hidrogeno o alquilo (C1-C4),

y

G2 representa cloro, ciano, alquilo (C1-C4), o el grupo -CR8AR8B-OH, -CH2-NR9R10, -C(=O)-NR11R12 o -CH2-

OR15, en la que

R8A and R8B se seleccionan independientemente del grupo que consiste en hidrogeno, alquilo (C1-C4), y ciclopropilo,

R9 es hidrogeno o metilo,

R10 es hidrogeno, alquilo (C1-C4), alquilcarbonilo (C1-C4), cicloalquilo (C3-C6) o heterocicloalquilo de 5 o

6 miembros, en la que

(i) dicho alquilo (C1-C4) esta opcionalmente sustituido con hidroxi o aminocarbonilo, y

(ii) dicho heterocicloalquilo de 5 o 6 miembros esta opcionalmente sustituido con oxo,

R11 es hidrogeno o metilo,

R12 es hidrogeno, alquilo (C1-C4), cicloalquilo (C3-C6) o heterocicloalquilo de 5 o 6 miembros, en la que

(i) dicho alquilo (C1-C4) esta opcionalmente sustituido con hidroxi, y

(ii) dicho heterocicloalquilo de 5 o 6 miembros esta opcionalmente sustituido con oxo, o

9 10 11 12

R y R , o R y R , respectivamente, se unen y, tomados junto con el atomo de nitrogeno al cual estan unidos, forman un anillo heterocicloalquilo monodclico, saturado de 4 a 6 miembros el cual puede contener un segundo heteroatomo del anillo seleccionado de N(R13), O, S y S(O)2, y el cual puede estar sustituido en los atomos de carbono del anillo con hasta tres sustituyentes independientemente seleccionados del grupo que consiste en fluor, alquilo (C1-C4), oxo, hidroxi, amino y aminocarbonilo, y en la que

R13 es hidrogeno, alquilo (C1-C4), ciclopropilo, ciclobutilo, formilo o alquilcarbonilo (C1-C4),

y

R15 es metilo o etilo,

a condicion de que G1 no sea cloro cuando G2 es cloro o ciano.

En una realizacion particularmente preferente, la presente invencion se refiere a los compuestos de formula general (I), en la que

R1 es metilo,

R2 es metoxi,

G1 representa metilo, oxazol-5-ilo o el grupo -CH2-OR3 o -CH2-NR4R5, en la que

R3 es hidrogeno, alquilo (C1-C4), ciclopropilo o ciclobutilo,

en la que dicho alquilo (C1-C4) esta opcionalmente sustituido con hidroxi, metoxi, etoxi, hidroxi- carbonilo, metoxicarbonilo, etoxicarbonilo, amino, aminocarbonilo, ciclopropilo, ciclobutilo o hasta tres atomos de fluor,

R4 es hidrogeno, metilo o etilo,

R5 es hidrogeno, alquilo (C1-C4), acetilo, ciclopropilo, ciclobutilo o 2-oxopirrolidin-3-ilo,

en la que dicho alquilo (C1-C4) esta opcionalmente sustituido con hidroxi, hidroxicarbonilo, ciclopropilo o ciclobutilo,

5

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o

R4 y R5 se unen y, tornados junto con el atomo de nitrogeno al cual estan unidos, forman un anillo heterocicloalquilo monodclico, saturado de 5 o 6 miembros, el cual puede contener un segundo heteroatomo del anillo seleccionado de NH y O, y el cual puede estar sustituido en un atomo de carbono del anillo con oxo o hidroxi,

y

G2 representa metilo o el grupo -CR8AR8B-OH, -CH2-NR9R10 o -C(=O)-NR11R12, en la que

r8A y r8B son independientemente hidrogeno o metilo,

R9 es hidrogeno,

R10 es hidrogeno, alquilo (C1-C4), acetilo, ciclopropilo, ciclobutilo o 2-oxopirrolidin-3-ilo,

en la que dicho alquilo (C1-C4) esta opcionalmente sustituido con hidroxi o aminocarbonilo,

R11 es hidrogeno o metilo,

R12 es hidrogeno, alquilo (C1-C4), ciclopropilo, ciclobutilo o 2-oxopirrolidin-3-ilo,

en la que dicho alquilo (C1-C4) esta opcionalmente sustituido con hidroxi, o

R y R , o R y R , respectivamente, se unen y, tomados junto con el atomo de nitrogeno al cual estan unidos, forman un anillo heterocicloalquilo monodclico, saturado de 4 a 6 miembros, el cual puede contener un segundo heteroatomo del anillo seleccionado de N(R13), O, y S(O)2, y el cual puede estar sustituido en los atomos de carbono del anillo con hasta tres sustituyentes independientemente seleccionados del grupo que consiste en fluor, metilo, oxo, hidroxi, amino y aminocarbonilo, y en la que

R13 es hidrogeno, formilo o acetilo.

En una realizacion distinta, la presente invencion se refiere a los compuestos de formula general (I), en la que

R1 es metilo,

y

R2 es metoxi.

En otra realizacion distinta, la presente invencion se refiere a los compuestos de formula general (I), en la que

G1 representa el grupo -CH2-OR3, en la que

R3 es hidrogeno o alquilo (C1-C4) opcionalmente sustituido con hidroxi, metoxi, amino, aminocarbonilo

o hasta tres atomos de fluor.

En otra realizacion distinta, la presente invencion se refiere a los compuestos de formula general (I), en la que

G1 representa el grupo -CH2-NR4R5, en la que

R4 es hidrogeno o metilo,

R5 es alquilo (C1-C4), acetilo, ciclopropilo, ciclobutilo o 2-oxopirrolidin-3-ilo,

en la que dicho alquilo (C1-C4) esta opcionalmente sustituido con hidroxi, o

R4 y R5 se unen y, tomados junto con el atomo de nitrogeno al cual estan unidos, forman un anillo heterocicloalquilo monodclico, saturado de 5 o 6 miembros, el cual puede contener un segundo heteroatomo del anillo seleccionado de NH y O, y el cual puede estar sustituido en un atomo de carbono del anillo con oxo o hidroxi.

En otra realizacion distinta, la presente invencion se refiere a los compuestos de formula general (I), en la que

G2 representa el grupo -CH2-NR9R10, en la que

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R9 es hidrogeno,

R10 es acetilo o 2-oxopirrolidin-3-ilo,

o

R9 y R10 se unen y, tornados junto con el atomo de nitrogeno al cual estan unidos, forman un anillo heterocicloalquilo monodclico, saturado de 5 o 6 miembros, el cual puede contener un segundo heteroatomo del anillo seleccionado de N(R13) y O, y el cual puede estar sustituido en los atomos de carbono del anillo con hasta dos sustituyentes independientemente seleccionados del grupo que consiste en metilo, oxo y amino, y en la que

R13 es hidrogeno, formilo o acetilo.

Aun en otra realizacion distinta, la presente invencion se refiere a los compuestos de formula general (I), en la que G2 representa el grupo -C(=O)-NR11R12, en la que

R11 es hidrogeno,

R12 es alquilo (C1-C4) o 2-oxopirrolidin-3-ilo,

en la que dicho alquilo (C1-C4) esta opcionalmente sustituido con hidroxi, o

R11 y R12 se unen y, tomados junto con el atomo de nitrogeno al cual estan unidos, forman un anillo heterocicloalquilo monodclico, saturado de 4 a 6 miembros, el cual puede contener un segundo heteroatomo del anillo seleccionado de NH y O, y el cual puede estar sustituido en un atomo de carbono del anillo con oxo o hidroxi.

En una realizacion especialmente preferente, la presente invencion se refiere a los compuestos de formula general (I), en la que

R1 es metilo,

R2 es metoxi,

G1 representa el grupo -CH2-OR3, en la que

R3 es alquilo (C1-C4) opcionalmente sustituido con hidroxi, amino o aminocarbonilo,

y

G2 representa el grupo -CH2-NR9R10 o -C(=O)-NR11R12, en la que

R9 es hidrogeno,

R10 es 2-oxopirrolidin-3-ilo, o

R9 y R10 se unen y, tomados junto con el atomo de nitrogeno al cual estan unidos, forman un anillo piperazin-1-ilo, 3-oxopiperazin-1-ilo o 4-acetilpiperazin-1-ilo.

R11 es hidrogeno,

R12 es 2-oxopirrolidin-3-ilo,

o

R11 y R12 se unen y, tomados junto con el atomo de nitrogeno al cual estan unidos, forman un anillo 3- hidroxiazetidin-1-ilo, 4-hidroxipiperidin-1-ilo o 3-oxopiperazin-1-ilo.

Las definiciones de los residuos indicados espedficamente en las combinaciones respectivas o las combinaciones preferentes de los residuos tambien se reemplazan segun se desee por las definiciones de los residuos de otras combinaciones, sin importar las combinaciones particulares indicadas para los residuos. Las combinaciones de dos o mas de los intervalos preferentes antes mencionados son particularmente preferentes.

Los compuestos de la formula general (I) se pueden preparar a traves de varias vfas de smtesis, las cuales estan regidas esencialmente por la naturaleza de los grupos G1 y G2 particulares que han sido elegidos (vease las

5

10

definiciones anteriores).

De este modo, en otra realizacion, la presente invencion se refiere a un procedimiento para preparar los compuestos de la presente formula general (I), caracterizada porque

[A] una 4-aminopirrolo[2,1-f][1,2,4]triazina 6 sustituida de formula (II)

imagen2

en la que R3 tiene el significado que se describio anteriormente, se hace reaccionar primero con formaldel'ndo y una amina de formula (III)

,9

HN

,R

*R

10

(III),

en la que R9 y R10tienen los significados que se describieron anteriormente, en presencia de un acido para dar un compuesto de formula (IV)

imagen3

en la que R3, R9 y R10tienen los significados que se describieron anteriormente, posteriormente se brominan a un compuesto de formula (V)

imagen4

en la que R3, R9 y R10 tienen y posteriormente se acoplan

los significados que se describieron anteriormente, con un benzotiofeno-2-il boronato de formula (VI)

O—R14

imagen5

/

-B \

O—R

14

R

en la que R1 y R2tienen los significados que se describieron anteriormente,

y

R14 representa hidrogeno o alquilo (C1-C4), o ambos residuos R14 se enlazan juntos para formar un puente -(CH2)2-, -C(CH3)2-C(CH3)2-, -(CH2)3-, -CH2-C(CH3)2-CH2- o -C(=O)-CH2-N(CH3)-CH2-C(=O)-,

en presencia de un catalizador de paladio y una base para dar el compuesto diana de formula (I-A)

,1

R

imagen6

R

(I-A),

1 2 3 9 10

en la que R , R , R , R y R tienen los significados que se describieron anteriormente,

3

o

[B] una 4-aminopirrolo[2,1-f][1,2,4]triazina 6 sustituida de formula (II)

10

NH

—R3

(II),

en la que R3 tiene el significado que se describio anteriormente,

se formila primero con N,N-dimetilformamida en presencia de cloruro de fosforilo a un aldehfdo de formula (VII)

imagen7

15

imagen8

3

en la que R3 tiene el significado que se describio anteriormente,

posteriormente se bromina a un compuesto de formula (VIII)

5

10

imagen9

3

(VIII),

en la que R3 tiene el significado y posteriormente se acopla con

que se describio anteriormente, un benzotiofeno-2-il boronato de formula

O—R14

imagen10

/

■B \

O—R

14

R

(VI)

(VI),

en la que R1, R2 y R14tienen los significados que se describieron anteriormente, en presencia de un catalizador de paladio y una base para dar un compuesto de formula (IX)

R1

imagen11

(IX),

en la que R1, R2 y R3tienen los significados que se describieron anteriormente, el cual posteriormente o bien

[B-1] se hace reaccionar con una amina de formula (III)

HN

R9

R10

(III),

en la que R9 y R10tienen los significados que se describieron anteriormente,

en presencia de un acido y un agente reductor para dar el compuesto diana de formula (I-A)

5

o

imagen12

(I-A),

1 2 3 9 10

en la que R , R , R , R y R tienen los significados que se describieron anteriormente,

[B-2] se oxida a un acido carboxflico de formula (X)

imagen13

(X),

en la que R1, R2 y R3 tienen los significados que se describieron anteriormente, y finalmente se acopla con una amina de formula (XI)

HN

R

11

R

12

(XI),

en la que R11 y R12 tienen los significados que se describieron anteriormente, en presencia de un agente de condensacion para dar el compuesto diana de formula (I-B)

5

R'

imagen14

(I-B),

1 2 3 11 12

en la que R , R , R , R y R tienen los significados que se describieron anteriormente,

[C] una 4-amino-5-bromopirrolo[2,1-f][1,2,4]triazina 6 sustituida de formula (XII)

imagen15

(XII)

se acopla primero con un benzotiofeno-2-il boronato de formula (VI)

imagen16

O—R

/

14

-B

.14

R

(VI),

en la que R1, R2 y R14 tienen los significados que se describieron anteriormente, en presencia de un catalizador de paladio y una base para dar un compuesto de formula (XIII)

.1

R

imagen17

R2

(XIII),

en la que R1 y R2 tienen los significados que se describieron anteriormente,

3

o

5

y posteriormente se hace reaccionar con formaldel'ndo y una amina de formula (III)

-.9

hn;

,R

*R

10

(III),

en la que R9 y R10tienen los significados que se describieron anteriormente, en presencia de un acido para dar el compuesto de formula (I-C)

R1

imagen18

(I-C),

en la que R1, R2 R9 y R10 tienen los significados que se describieron anteriormente,

el cual posteriormente o bien

[C-1] se oxida a un aldehfdo de formula (XIV)

imagen19

(XIV),

en la que R1, R2 R9 y R10 tienen los significados que se describieron anteriormente, y se trata con una amina de formula (XV)

HN

R4

R5

(XV),

en la que R4 y R5 tienen los significados que se describieron anteriormente,

en presencia de un acido y un agente reductor para dar el compuesto diana de formula (I-D)

j

R

imagen20

R

(I-D),

en la que R1, R2, R4, R5, R9y R10tienen los significados que se describieron anteriormente,

o

[C-2] se convierte en el correspondiente derivado 6-(halometilo) de formula (XVI)

1

R

imagen21

R2

R

(XVI),

en la que R1, R2 R9 y R10 tienen los significados que se describieron anteriormente, y

X es cloro, bromo o yodo, y se trata con un alcohol de formula (XVII)

R3—OH

(XVII),

en la que R3A tiene el significado de R3 como se describio anteriormente salvo hidrogeno, en presencia de una base para dar el compuesto diana de formula (I-E)

5

5

5

10

15

20

25

30

35

40

imagen22

en la que R1, R2, R3A, R9 y R10 tienen los significados que se describieron anteriormente, seguido opcionalmente, donde sea apropiado, por (i) separacion de los compuestos de formula (I) obtenidos de este modo en sus respectivos enantiomeros y/o diastereomeros, preferentemente usando procedimientos cromatograficos, y/o (ii) conversion los compuestos de formula (I) en sus respectivos hidratos, solvatos, sales y/o hidratos o solvatos de las sales mediante el tratamiento con los correspondientes solventes y/o acidos o bases.

Los compuestos de las formulas (I-A), (I-B), (I-C), (I-D) y (I-E), los cuales se pueden preparar mediante los procedimientos descriptos anteriormente, representan cada uno de ellos un subconjunto particular de los compuestos de la formula general (I).

Los pasos del procedimiento [A] (II) ^ (IV) and [C] (XIII) ^ (I-C), que representan las reacciones de aminometilacion del tipo Mannich, se llevan a cabo en la forma usual mediante el tratamiento del compuesto de partida respectivo con una mezcla de formaldetndo acuoso y el componente amina (III) en presencia de un catalizador de acido tal como acido formico o acido acetico. Preferentemente, el acido acetico se usa tanto como catalizador como solvente. La reaccion usualmente se realiza a una temperatura que oscila desde +20°C a +80°C.

Como agente de brominacion para las etapas del procedimiento [A] (IV) ^ (V) and [B] (VII) ^ (VIII), preferentemente se usan N-bromo-succinimida (NBS), 1,3-dibromo-5,5-dimetildantoma (DBDMH) o bromo elemental. Las reacciones se llevan a cabo generalmente en un solvente inerte, tales como diclorometano, cloroformo, tetrahidrofurano, acetonitrilo o N,N-dimetilformamida (DMF), dentro de un intervalo de temperatura desde -78°C a +20°C.

Las reacciones de acoplamiento [A] (V) + (VI) ^ (I-A), [B] (VIII) + (VI) ^ (IX) and [C] (XII) + (VI) ^ (XIII) ["acoplamiento Suzuki-Miyaura“] se llevan a cabo generalmente en un solvente inerte con la ayuda de un catalizador de paladio y una base acuosa. Los catalizadores de paladio adecuados para este fin incluyen, por ejemplo, acetato de paladio (II), cloruro de paladio (II), cloruro de bis(trifenilfosfina)paladio(II), cloruro de bis(acetonitrilo)paladio(II), cloruro de [1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno]paladio(II), tetrakis(trifenilfosfina)paladio(0), bis(dibencilidenacetona)pala- dio(0), y tris(dibencilidenacetona)dipaladio(0), opcionalmente en combinacion con otros ligandos de fosfina, tales como por ejemplo, 2-diciclohexilfosfino-2',4',6'-triisopropilbifenilo (X-Phos), 2-diciclohexilfosfino-2',6'-dimethoxibifenilo (S-Fos), 4,5-bis(difenilfosfino)-9,9-dimetilxanteno (Xantphos), o 4-(di-ter-butilfosfino)-W,W-dimetilanilina. Ademas, se pueden usar precatalizadores de paladio a partir de los cuales se genera la especie cataltticamente activa bajo condiciones de reaccion, tales como (2'-aminobifenil-2-il)(cloro)paladio-diciclohexil(2',4',6'-triisopropilbifenil-2-il)fosfina, [vease, por ejemplo, S. Kotha et al., Tetrahedron 58, 9633-9695 (2002); T. E. Barder et al., J. Am. Chem. Soc. 127 (13), 4685-4696 (2005); S. L. Buchwald et al., J. Am. Chem. Soc. 132 (40), 14073-14075 (2010), y otras referencias mencionadas en los mismos].

Las bases adecuadas para estas reacciones de acoplamiento son en particular los carbonatos alcalinos, tales como sodio, potasio o carbonato de cesio, fosfatos alcalinos, tales como fosfato de sodio o potasio, o fluoruros alcalinos, tales como fluoruro de potasio o cesio. Usualmente, estas bases se emplean como soluciones acuosas. Las reacciones se llevan a cabo en solventes organicos que son inertes bajo las condiciones de reaccion. Preferentemente, se emplean solventes organicos miscibles en agua, tales como 1,22-dimetoxietano, tetrahidrofurano, 1,4-dioxano, acetonitrilo, N,N-dimetilformamida (DMF) o dimetilsulfoxido (DMSO), pero tambien se pueden usar otros solventes inertes tales como diclorometano o tolueno.

La etapa del procedimiento [B] (II) ^ (VII) ["formilacion Vilsmeier-Haack"] se lleva a cabo de la manera usual mediante el tratamiento de la pirrolotriazina (II) en solvente de N,N-dimetilformamida (DMF) con cloruro de fosforilo. La reaccion se realiza usualmente a una temperatura desde 0°C hasta +80°C.

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

Los agentes de reduccion para las reacciones de aminacion reductoras [B-1] (IX) + (III) ^ (I-A) y [C-1] (XIV) + (XV) ^ (I-D) son borohidruros alcalinos convencionales, tales como borohidruro de litio, borohidruro de sodio, borohidruro de potasio, cianoborohidruro de sodio o triacetoxiborohidruro de sodio. Las transformaciones se llevan a cabo generalmente en presencia de un acido, preferentemente acido acetico, en un alcohol o solvente de eter, tales como metanol, etanol, isopropanol, tetrahidrofurano o 1,4-dioxano, dentro de un intervalo de temperatura desde 0°C a +80°C, dependiendo de la reactividad de los componentes amina (III) y (XV), respectivamente, y/o el borohidruro particular usado.

Para la reaccion de oxidacion en la etapa del procedimiento [B-2] (IX) ^ (X), la oxidacion con clorito de sodio en presencia de un limpiador de hipoclorito tal como 2-metil-2-buteno representa el procedimiento de eleccion [cf.H. W. Pinnick et al., Tetrahedron 37, 2091-2096 (1981); A. Raach and O. Reiser, J. Prakt. Chem. 342 (6), 605-608 (2000), y las referencias citadas en el mismo]. La reaccion usualmente se lleva a cabo en una mezcla de tetrahidrofurano/agua a una temperatura entre 0°C y temperatura ambiente.

Los agentes de condensacion adecuados para la etapa del procedimiento B-2] (X) + (XI) ^ (I-B) [formacion de amida] incluyen, por ejemplo, carbodiimidas tales como N,N'-dietil-, N,N'-dipropil-, N,N'-diisopropil-, N,N'- diciclohexilcarbodiimida (DCC) o N-(3-dimetilaminopropil)-N'-etilcarbodiimida (EDC), Derivados de fosgeno tales como N,N'-carbonildiimidazol (CDI) o isobutil cloroformiato, a-cloroenaminas tales como 1-cloro-2-metil-1- dimetilamino-1-propeno, compuestos de fosforo tales como anhfdrido propanofosfonico, dietil cianofosfonato, bis(2- oxo-3-oxazolidinil)fosforil cloruro, benzotriazol-1-iloxi-tris(dimetilamino)fosfonio hexafluorofosfato (BOP) o benzo- triazol-1 -iloxi-tris(pirrolidino)fosfonio hexafluorofosfato (PyBOP), y compuestos de uronio tales como 0-(benzotriazol- 1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronio tetrafluoroborato (TBTU), 0-(benzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronio hexafluorofosfato (HBTU), 2-(2-oxo-1-(2H)-piridil)-1,1,3,3-tetrametiluronio tetrafluoroborato (TPTU), 0-(7-azabenzotriazol-1-il)- N,N,N',N'-tetrametiluronio hexafluorofosfato (HATU) o 0-(1H-6-chlorobenzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametiluronio tetrafluoroborato (TCTU), si fuera apropiado en combinacion con otros auxiliares, tales como 1-hidroxibenzotriazol (HOBt) o N-hidroxisuccinimida (HOSu), y/o bases tales como carbonatos alcalinos, por ejemplo carbonato de sodio o potasio, o bases de amina organica, tales como trietilamina, N-metilpiperidina, N-metilmorfolina (NMM), N,N- diisopropiletilamina (DIPEA), piridina o 4-N,N-dimetilaminopiridina (DMAP). Se da preferencia a usar 0-(7-azabenzo- triazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronio hexafluorofosfato (HATU) o 0-(benzotriazol-1-yl)-N,N,N',N'-tetrametiluronio tetrafluoroborato (TBTU) en combinacion con N,N-diisopropiletilamina (DIPEA) y opcionalmente 1-hidroxibenzotriazol (HOBt).

Los solventes inertes para la etapa del procedimiento [B-2] (X) + (XI) ^ (I-B) son, por ejemplo, eteres tales como eter dietflico, ter-butil metil eter, tetrahidrofurano, 1,4-dioxano, o 1,2-dimetoxietano, hidrocarburos tales como benceno, tolueno, xileno, hexano o ciclohexano, hidrocarburos halogenados tales como diclorometano, triclorometano, tetracloruro de carbono, 1,2-dicloroetano, tricloroetileno o clorobenceno, u otros solventes tales como acetona, acetonitrilo, acetato de etilo, piridina, dimetilsulfoxido (DMSO), N,N-dimetilformamida (DMF), N,N'-dimetilpropileno urea (DMPU) o N-metilpirrolidinona (NMP). Ademas es posible usar mezclas de estos solventes. Se da preferencia al uso de diclorometano, tetrahidrofurano, N,N-dimetilformamida o mezclas de los mismos. Las reacciones se llevan a cabo generalmente a una temperatura que oscila desde 0°C a +60°C. preferentemente a +10°C hasta +40°C.

Los agentes de oxidacion que son capaces de convertir el alcohol primario (I-C) en el aldehfdo (XIV) (procedimiento [C-1] en condiciones suaves incluyen 1,1,1-triacetoxi-1,1-dihidro-1,2-benzodioxol-3-(1H)-ona (“periodinano Dess- Martin”), 2,2,6,6-tetrametilpiperidin-1-oxilo (TEMPO) en combinacion con oxidantes secundarios tales como yodosobenceno-I,I-diacetato o hipoclorito de sodio, y los sistemas de oxidacion basados en dimetilsulfoxido (DMSO) tales como DMSO/antndrido trifluoroacetico o DMSO/ N,N'-diciclohexil-carbodiimida (DCC). Se da preferencia a 1,1,1-triacetoxi-1,1,-dihidro-1,2-benciodoxol-3-(1H)-ona. La reaccion se lleva a cabo generalmente en un solvente inerte, preferentemente usando diclorometano.

Para la transformacion de hidroxi a halogeno en la etapa del procedimiento [C-2] (I-C) ^ (XVI), se pueden emplear varios procedimientos estandares y reactivos que son bien conocidos en la tecnica. Los reactivos de eleccion son cloruro de tionilo [para X = Cl], tetrabromometano/trifenilfosfina [para X = Br], y yodo/trifenilfosfina [para X = I]. Se prefiere la preparacion de los derivados de 6-(clorometilo) (XVI) [X = Cl] por razones de conveniencia de elaboracion y estabilidad del compuesto.

Las bases adecuadas para la etapa del procedimiento [C-2] (XVI) + (XVII) ^ (I-E) [formacion de eter] son en particular carbonatos alcalinos tales como litio, sodio, potasio o carbonato de cesio, acetatos alcalino tales como acetato de sodio o potasio, o bases de amina terciaria convencionales tales como trietilamina, N-metilmorfolina, N- metilpiperidina, N,N-diisopropiletilamina o piridina. Se da preferencia a N,N-diisopropiletilamina (DIPEA). La reaccion (XVI) + (XVII) ^ (I-E) se realiza en un solvente inerte, tal como tetrahidrofurano, o sin solvente, usando un exceso de alcohol (XVII), a una temperatura que oscila desde +20°C a +200°C, preferentemente a +50°C hasta +150°C. Ventajosamente, la conversion se lleva a cabo por medio de un dispositivo de reactor de microondas.

La secuencia de la reaccion (I-C) ^ (XVI) ^ (I-E) puede llevarse a cabo en dos etapas separadas, es decir con aislamiento y purificacion del compuesto intermediario (XVI), o se puede llevar a cabo usando un procedimiento directo. es decir empleando el intermediario bruto (XVI) como se obtiene en la reaccion de preparacion.

En los casos donde un resto de amina primaria o secundaria forma parte del grupo G1 o G2 en los compuestos diana de formula (I), algunas veces puede ser apropiado en las reacciones de preparacion descriptas anteriormente usar un derivado protegido de esta amina como compuesto de reaccion en lugar de la amina libre. A este fin, se pueden emplear grupos de proteccion amino temporarios convencionales, tales como los grupos de acilo (por ej., acetilo o 5 trifluoroacetilo) o grupos de proteccion del tipo carbamato (por ej., un grupo Boc, Cbz o Fmoc). Preferentemente se usa un grupo Boc (ter-butoxicarbonilo). De manera similar, una funcion hidroxi que es parte del grupo G1 o G2 puede ser bloqueada temporalmente en los compuestos precursores y en los intermediarios del procedimiento, por ejemplo, como un eter tetrahidropiranilo (THP) o como un derivado de silil eter, tal como trimetilsililo o ter-butildimetilsililo eter.

Estos grupos de proteccion se pueden escindir posteriormente de forma concomitante durante los procedimientos de

10 elaboracion acuosa y purificacion, o se pueden remover en una etapa de reaccion posterior, separada usando procedimientos estandares bien conocidos en la tecnica. La preparacion de estos intermediarios protegidos a partir de las correspondientes aminas libres o alcoholes se obtiene de igual modo facilmente siguiendo los procedimientos generales descriptos en la literatura [vease, por ejemplo, T. W. Greene and P. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, Wiley, New York, 1999].

15 Ciertos tipos de derivados de amina protegidos (es decir, acilados) ejercen actividad inhibidora del FGFR significativa por sf mismos. En consecuencia, estos compuestos tambien estan comprendidos en la formula general (I) como se definio anteriormente.

La preparacion de los compuestos de la invencion se puede ilustrar por medio de los siguientes esquemas de reaccion:

20 Esquema 1

imagen23

HN

,Ra

'R

10

h2c=o

AcOH

imagen24

R

NBS

R1

imagen25

R

3

3

3

imagen26

NBS N

imagen27

imagen28

NaClO2

Me2C=CHMe

NaH2PO4

3

3

R

R

3

imagen29

HN

V2

11

R

TBTU, DIPEA

imagen30

R'

imagen31

R

HN,

,R°

'R

10

h2c=o

AcOH

R1

R

imagen32

R2

R

R1

R1

imagen33

R

5

imagen34

HN

R9

R10

h2c=o

AcOH

SOCl2

imagen35

R3—OH base

imagen36

HN

R9

R10

H2C=O

AcOH

imagen37

imagen38

imagen39

R

2

R

2

R

2

3A

La 4-aminopirrolo[2,1-f][1,2,4]triazina 6 sustituida de formula (II) puede, por ejemplo, prepararse mediante dos v^as diferentes, las cuales se describen en el esquema 5 a continuacion. En la primera v^a, la 4-amino-65 cianopirrolo[2,1-f][1,2,4]triazina (XVIII) se convierte en el ester (XIX) mediante la alcoholfsis mediada por acido y posteriormente se reduce al compuesto 6-(hidroximetilo) (IIa) [R3 en (II) = H] usando trietil-borohidruro de litio. La transformacion estandar en la correspondiente 6-(halometil)pirrolotriazina, tal como el compuesto cloro (XX), seguido

del tratamiento con un alcohol de formula (XVII) en presencia de una base proporciona facilmente los derivados de eter de 'formula (IIb) [R3 en (II) * H]. La preparacion del compuesto de partida (XVIII) ha sido descripta previamente [vease la Solicitud de Patente Internacional WO 2007/ 064883 (Intermediario AX / Etapa 3)].

La segunda via comienza a partir del 1-amino-4-bromo-2-cianopirrol protegido (XXI) [la preparacion se da en la 5 Solicitud de Patente Internacional WO 2007/064883 (Intermediario AAE, Etapa 3)]. La deprotonacion del nitrogeno uretano, la subsiguiente dianalacion en la posicion 4 y la reaccion con formaldetndo da el derivado 4-(hidroximetilo) (XXII). El tratamiento con cloruro de hidrogeno seguido de la adicion de alcohol (XVII) y la condensacion con formamidina usando un procedimiento directo proporciona posteriormente el compuesto diana de formula (IIb). Esta via es especialmente adecuada para la preparacion de los derivados de alquil eter [R3A en (IIb) = (Ci-C4)-alquilo] en 10 que el reactivo de alcohol (XVII) tambien puede ser util como el solvente de reaccion en estos casos.

Esquema 5

NH

N

imagen40

CN

EtOH N

N

conc. H2SO4

imagen41

l3 n

imagen42

(XVIII)

(XIX) (IIa)

NH

NH

SOCl2 ^ 1 1

R3—OH (XVII)

N

// \ ^ Cl base N O—r3A

x HCl

(XX)

(IIb)

1. HCl

,3A

NC

1. MeMgBr ncn

H

-Br -----------------*- 2. n-BuLi bo^n- H

3. H2C=O

(XXI)

(XXII)

2. R— OH (XVII) 3. HC(=NH)NH2

OH

El derivado 4-amino-5-bromopirrolo[2,1-f][1,2,4]triazina de formula (XII) esta disponible facilmente a partir de 4-amino- 6-(hidroximetil)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazina (IIa) (vease el esquema 5) por la 5,7-dibrominacioin inicial usando 1,315 dibromo-5,5-dimetilhidantoma y la subsiguiente 7-debrominacion selectiva mediante un intercambio de halogeno-

dianal con n-butillitio seguido del templado de metanol (vease el esquema 6 a continuacion).

H3C

CH3O

imagen43

Br^N^N"Br

O

(IIa)

imagen44

(xxm)

1. n-BuLi, -78°C

2. MeOH

imagen45

(XII)

Los benzotiofeno-2-il boronatos de formula (VI) pueden ser preparados de forma conveniente partiendo de los derivados de tiofenol sustituidos de formula (XXIV) (vease el esquema 7 a continuacion). La alquilacion con bromo- 5 acetal (XXV) y la posterior ciclizacion mediada por el acido polifosforico proporciona los intermediarios de benzotiofeno de formula (XXVII) los cuales posteriormente se dianalizan en la posicion 2 y se hacen reaccionar con trialquil borato. La elaboracion alcalina da los acidos (benzotiofen-2-il)boronico libres de formula (VIa) los cuales pueden ser transformados, si se desea, en boronatos dclicos, por ej., los denominados boronatos MIDA de formula (VIb), mediante procedimientos estandares conocidos en la tecnica [vease, por ejemplo, D. M. Knapp et al., 10 J. Am. Chem. Soc. 131 (20), 6961-6963 (2009)].

imagen46

Br

OEt

OEt

(XXV)

SH

Cs2CO3

imagen47

OEt

PPA

imagen48

1. n-BuLi, B(OiPr)3

2. NaOH ac.

imagen49

OH

/

B

\

OH

Ha^N

COOH

COOH

Colector die agua

imagen50

[cf. P. A. Ple and L. J. Marnett, J. Heterocyclic Chem. 25 (4), 1271-1272 (1988); A. Venturelli et al, J. Med. Chem. 50 (23), 5644-5654 (2007)].

5 Los compuestos de las formulas (III), (XI), (XV), (XVII), (XXIV) y (XXV) estan disponibles en el comercio, se conocen a partir de la literatura, o se pueden preparar a partir de los materiales de partida facilmente disponibles por la adaptacion de los procedimientos estandares descriptos en la literatura. Los procedimientos detallados y las referencias de literatura para preparar los materiales de partida tambien se pueden hallar en la Parte Experimental en la seccion sobre la preparacion de los materiales de partida y los intermediarios.

10 La preparacion de otros subgrupos de los compuestos de formula general (I) se ilustra en los siguientes esquemas de reaccion 8-14. Los precursores de pirrolotriazina requeridos se pueden sintetizar facilmente mediante procedimientos habituales bien conocidos en la tecnica, y otras transformaciones sinteticas, en muchos casos, siguen las vfas de preparacion que han sido delineadas en la seccion del procedimiento anterior, usando tipos similares de reacciones, tales como, por ejemplo, brominacion, acoplamiento de boronato, aminometilacion, aminacion reductora, oxidacion 15 y/o reacciones formadoras de eter o amida. Se proporcionan otros detalles en la Parte Experimental sobre la preparacion de las realizaciones de ejemplo y sus respectivos compuestos precursores.

imagen51

,OH tBuMe2SiCl

Imidazol

(XXIII)

imagen52

1. n-BuLi

p 8A p8B

2. V"

O

imagen53

TBAF N

imagen54

imagen55

Periodinano

Dessi-l\/lartin

imagen56

imagen57

HN^

R4

R5

NaBH(OAc)3

AcOH

5 [R8A, R8B = alquilo (C1-C4), ciclopropilo o ciclobutilo].

imagen58

R8—MgX

imagen59

[R8A = alquilo (C1-C4), ciclopropilo o ciclobutilo; X = Cl, Br o I].

5 Esquema 10

imagen60

1. SOCl2

2. NaN3

imagen61

H2, Pd/C [R-C(O)]2O

imagen62

[R = alquilo (C1-C4)].

imagen63

(XXVIII)

R

HN

,R9

'R'

10

h2c=o

AcOH

imagen64

H3C

CH3 O

O

R1

imagen65

R

R

10

imagen66

R2

R

[R = cloro o alquilo (C1-C4); para la preparacion del material de partida (XXVIII), vease la Solicitud de Patente Internacional WO 2007/064883 y WO 2007/056170, respectivamente].

9

5

imagen67

Me2Zn

Catalizador Pd

imagen68

tBuMe2SiCl

escision silil eter

imidazol q|_| ,

imagen69

0 O

1 i ,B^ _ .-Bv

^ N

Catalizador Pd

imagen70

R'

imagen71

R2

imagen72

NBS

imagen73

Periodinano

Dess-Martin

R'

imagen74

R

R'

imagen75

[para la preparacion del compuesto de partida (XXIX), vease el esquema 14 a continuacion].

3

4

NH

N

imagen76

NH

PH tBuMe2SiCl N

^ ^N-

Imidazol N

imagen77

OTBDMS

(Ila)

imagen78

R

NBS N

imagen79

imagen80

b'

OR

S OR14

R

imagen81

R1

r

HCl ac.

imagen82

Periodinano OH Dess-Martin

Cl

imagen83

imagen84

R

N

R

2

2

R

R

R

NH,

N '

k- /N^

N

(IIa)

NH

OH

NBS N

imagen85

NH

PH tBuMeSiCI

OTBDMS

Imidazol

IN I —^ \

(XXIX)

Br

H3C

Br

CH3 O

NH

Zn(CN)2 n

Catalizador [I’d

imagen86

OTBDMS

B^^T^Br

O

CN

NH

2 Br

imagen87

OTBDMS

CN

R1

imagen88

PTBDMS TBAF

Periodinano

Dess-Martia

imagen89

HN

'R5

imagen90

R2

NaBH(OAc)3

AcOH

imagen91

R

R

2

R

4

R

4

Los compuestos de la presente invencion tienen propiedades farmacologicas valiosas y se pueden usar para la prevencion y el tratamiento de trastornos en humanos y otros mairnferos.

5 Los compuestos de la presente invencion son potentes inhibidores de la actividad o la expresion de las tirosina quinasas del receptor, particularmente de las quinasas del FGFR, y de forma mas notable de las quinasas del FGFR- 1 y el FGFR-3. En consecuencia, en otra realizacion, la presente invencion proporciona un procedimiento para trastornos que se relacionan a o estan mediados por la actividad de las quinasas del FGFR en un paciente que necesita de ese tratamiento, que comprende administrar al paciente una cantidad eficaz de un compuesto de formula 10 (I) como se definio anteriormente. En ciertas realizaciones, los trastornos que se refieren a la actividad de las

quinasas del FGFR son trastornos proliferativos, en particular cancer y enfermedades tumorales.

En el contexto de la presente invencion, el termino “tratamiento” o “que trata” incluye inhibir, retardar, aliviar, mitigar, detener, reducir, o causar la regresion de una enfermedad, trastorno, afeccion, o estado, el desarrollo y/o el avance de la misma, y/o sus smtomas. El termino “prevencion” o “que previene” incluye reducir los riesgos de tener, contraer, 15 o experimentar una enfermedad, trastorno, afeccion, o estado, el desarrollo y/o el avance de la misma, y/o sus smtomas. El termino prevencion incluye la profilaxis. El tratamiento o la prevencion de un trastorno, enfermedad,

5

10

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55

afeccion, o estado puede ser parcial o completo.

El termino “trastorno proliferativo” incluye los trastornos que involucran la proliferacion no deseada o sin control de una celula. Los compuestos de la presente invencion se pueden utilizar para prevenir, inhibir, bloquear, reducir, disminuir, controlar, etc., la proliferacion celular y/o la division celular, y/o producir apoptosis. Este procedimiento comprende administrar a un sujeto que lo necesita, incluyendo un mairnfero, incluyendo un humano, una cantidad de un compuesto de esta invencion, o una sal, isomero, polimorfo, dianabolito, hidrato o solvato del mismo aceptable para uso farmaceutico, el cual es eficaz para tratar o prevenir el trastorno.

A lo largo de este documento, con el fin de simplificar, se da preferencia al uso de un lenguaje singular sobre el plural, pero en general significa incluir el lenguaje plural si no se establece lo contrario. Por ejemplo, la expresion ”Un procedimiento para tratar una enfermedad en un paciente, que comprende administrar a un paciente una cantidad eficaz de un compuesto de formula (I) significa incluir el tratamiento simultaneo de mas de una enfermedad como tambien la administracion de mas de un compuesto de formula (I).

Los trastornos proliferativos que se pueden tratar y/o prevenir con los compuestos de la presente invencion incluyen particularmente, pero sin limitacion, el grupo de cancer y enfermedades tumorales. Se entiende que estos son en particular, las siguientes enfermedades, pero sin estar limitado a estos: carcinomas de mamas y tumores de mamas (formas ductal y lobular, tambien in situ), tumores del tracto respiratorio (carcinoma de pulmon de celulas pequenas y no pequenas, carcinoma parvicelular y no-parvicelular, carcinoma broncogenico, adenoma broncogenico, blastoma pleuropulmonar), tumores cerebrales (por ej., del tronco encefalico y del hipotalamo, astrocitoma, glioblastoma, meduloblastoma, ependimoma, y neuro-ectodermico y tumores pineales), tumores de los organos digestivos (esofago, estomago, vesfcula biliar, intestino delgado, intestino grueso, recto, ano), tumores hepaticos (entre otros carcinoma hepatocelular, carcinoma colangiocelular y una mezcla del carcinoma hepatocelular y colangiocelular), tumores de la cabeza y la region del cuello (laringe, hipofaringe, nasofaringe, orofaringe, labios y cavidad oral), tumores cutaneos (carcinoma epitelial escamoso, sarcoma de Kaposi, melanoma maligno, cancer cutaneo de celulas Merkel y cancer cutaneo no melanomatoso), tumores de tejido blando (entre otros sarcomas de tejido blando, osteosarcomas, histiocitomas fibrosos malignos, linfosarcomas y rabdomiosarcomas), tumores de los ojos (entre otros melanoma intraocular, melanoma maligno uveal y retinoblastoma), tumores de las glandulas endocrinas y exocrinas (por ej., tiroides y glandulas paratiroideas, pancreas y glandula salivar), tumores del tracto urinario (tumores de la vesfcula, pene, rinon, pelvis renal y ureter), tumores de los organos reproductivos (carcinomas del endometrio, cuello del utero, ovario, vagina, vulva y utero en las mujeres, y carcinomas de prostata y testfculos en los hombres), como tambien sus metastasis distantes. Estos trastornos ademas incluyen hemopatfas proliferativas en forma solida y en forma de globulos rojos en circulacion, tales como linfomas, leucemias y enfermedades mieloproliferativas, por ej., mieloide agudo, leucemia linfoblastica aguda, linfodtica cronica, mielogena cronica y tricoleucemia, y linfomas relacionados con SIDA, linfomas de Hodgkin, linfomas de no Hodgkin, linfomas de celulas T cutaneas, linfomas de Burkitt, y linfomas en el sistema nervioso central.

Debido a su actividad y perfil de selectividad, se cree que los compuestos de la presente invencion son particularmente adecuados para el tratamiento del cancer de pecho (de mama), pulmon, estomago (gastrico), vesroula y ovario y las enfermedades tumorales. Ademas, los compuestos de la presente invencion pueden ser especialmente adecuados para la prevencion o eliminacion de la metastasis tumoral en general.

Otros trastornos proliferativos que se pueden tratar y/o prevenir con los compuestos y los procedimientos de la presente invencion incluyen psoriasis, queloides y otras hiperplasias que afectan la piel, trastornos bullosos asociados con la formacion del ampollas subepidermicas incluyen penfigoide ampolloso, eritema multiforme y dermatitis herpetiformis, trastornos fibroticos tales como fibrosis de pulmon, aterosclerosis, restenosis y cirrosis hepatica, Enfermedades renales incluyendo los trastornos proliferativos de celulas mesangiales, glomerulopatfas, glomerulonefritis, nefropatfa diabetica, nefroesclerosis maligna y enfermedad del rinon poliqrnstico, hiperplasia prostatica benigna (BpH)). trastornos proliferativos angiogenicos y de vasos sangumeos, y smdromes de la microangiopatia trombotica.

Los compuestos de la presente invencion ademas son utiles para el tratamiento y/o la prevencion de enfermedades oftalmologicas tales como, por ejemplo, degeneracion macular relacionada con la edad (AMD), degeneracion macular seca, oclusion de la vena de la retina isquemica, edema macular diabetico, retinopatfa diabetica, retinopatfa del prematuro, y otras retinopatfas.

Otras afecciones que se pueden tratar y/o prevenir mediante la administracion de un compuesto de la presente invencion incluyen enfermedades ginecologicas tales como endometriosis, mioma y quistes ovaricos, trastornos dianabolicos relacionados con la adipogenesis, dianabolismo biliar, dianabolismo del fosfato, dianabolismo del calcio y/o mineralizacion osea, trastornos del esqueleto tales como, por ejemplo, microsomia, acondrodisplasia y smdrome de Pfeiffer, enfermedades cartilaginosas tales como osteoartritis y poliartritis, artritis reumatoide, calvicies, y rechazo al trasplante.

Las enfermedades antes mencionadas han sido bien caracterizadas en humanos, pero ademas existen con una etiologfa comparable en otros mai^eras, y se pueden tratar en aquellos con los compuestos y los procedimientos de la presente invencion.

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De este modo, la presente invencion ademas se refiere al uso de los compuestos de acuerdo con la invencion para el tratamiento y/o la prevencion de trastornos, especialmente de los trastornos antes mencionados.

La presente invencion ademas se refiere al uso de los compuestos de acuerdo con la invencion para preparar una composicion farmaceutica para el tratamiento y/o la prevencion de trastornos, especialmente de los trastornos antes mencionados.

La presente invencion ademas se refiere al uso de los compuestos de acuerdo con la invencion en un procedimiento para el tratamiento y/o la prevencion de trastornos, especialmente de los trastornos antes mencionados.

La presente invencion ademas se refiere a un procedimiento para el tratamiento y/o prevencion de trastornos, especialmente de los trastornos antes mencionados, mediante el uso de una cantidad eficaz de al menos uno de los compuestos de acuerdo con la invencion.

Los compuestos de la presente invencion se pueden administrar como el unico agente farmaceutico o en combinacion con uno o mas agentes terapeuticos adicionales en la medida en que esta combinacion no conduzca a efectos colaterales indeseables y/o inaceptables. Esta terapia de combinacion incluye la administracion de una formulacion de dosificacion farmaceutica unica que contiene un compuesto de formula (I), como se define anteriormente, y uno o mas agentes terapeuticos adicionales, como tambien la administracion de un compuesto de formula (I) y cada agente terapeutico adicional en su propia formulacion de dosificacion farmaceutica separada. Por ejemplo, un compuesto de formula (I) y un agente terapeutico se pueden administrar al paciente juntos en una sola composicion de dosificacion oral (fija) tal como un comprimido o capsula, o cada agente se puede administrar en formulaciones de dosificacion separadas.

Donde se usan formulaciones de dosificacion separadas, el compuesto de formula (I) y uno o mas agentes terapeuticos adicionales se pueden administrar esencialmente a la misma vez (es decir, de forma concurrente) o en tiempos escalonados separados (es decir, de forma secuencial).

En particular, los compuestos de la presente invencion se pueden usar en combinacion fija o separada con otros agentes anticancerosos tales como agentes alquilantes, antidianabolitos, agentes antitumorales que derivan de las plantas, agentes de terapia hormonal, inhibidores de topoisomerasa, inhibidores de tubulin, inhibidores de quinasa, farmacos espedficos, anticuerpos, conjugados de anticuerpo-farmaco (ADCs), compuestos inmunologicos, modificadores de respuesta biologica, compuestos anti-angiogenicos, y otras sustancias antiproliferativas, citostaticas y/o citotoxicas. A este respecto, el siguiente es un listado no limitante de ejemplos de agentes secundarios que se pueden usar en combinacion con los compuestos de la presente invencion.

Abarelix, abiraterone, aclarubicin, afatinib, aflibercept, aldesleukin, alemtuzumab, alitretinoin, alfaradin, altretamina, aminoglutethimida, amonafida, amrubicin, amsacrine, anastrozol, andromustine, arglabin, asparaginasa, axitinib, 5- azacitidina, basiliximab, belotecan, bendamustine, bevacizumab, bexaroteno, bicalutamida, bisantreno, bleomicina, bortezomib, bosutinib, brivanib alaninato, buserelin, busulfan, cabazitaxel, CAL-101, folinato de calcio, levofolinato de calcio, camptotecin, capecitabina, carboplatino, carmofur, carmustine, catumaxomab, cediranib, celmoleuquina, cetu- ximab, clorambucil, clormadinona, chlormetina, cidofovir, cisplatino, cladribina, acido clodronico, clofarabine, com- bretastatina, crisantaspase, crizotinib, ciclofosfamida cyproterone, citarabina, dacarbazine, dactinomicina, darbepoetin alfa, darinaparsin, dasatinib, daunorubicin, decitabine, degarelix, denileuquina diftitox, denosumab, deslorelin, cloruro de dibrospidio, docetaxel, dovitinib, doxifluridina, doxorubicin, dutasteride, eculizumab, edre- colomab, eflornitina, acetato de eliptinio, eltrombopag, endostatina, enocitabina epimbicin, epirubicin, epitiostanol, epoetin alfa, epoetin beta, epotilona, eptaplatin, eribulin, erlotinib, estradiol, estramustine, etoposide, everolimus, exatecan, exemestane, exisulind, fadrozol, fenretinide, filgrastim, finasteride, flavopiridol, fludarabine, 5-fluorouracil, fluoximesterone, flutamide, foretinib, formestane, fotemustine, fulvestrant, ganirelix, gefitinib, gemcitabina, gem- tuzumab, gimatecan, gimeracil, glufosfamide, glutoxim, goserelin, histrelin, hidroxi-urea, acido ibandronico, ibri- tumomab tiuxetan, idarubicin, ifosfamida, imatinib, imiquimod, improsulfan, intedanib, interferon alfa, interferon alfa- 2a, interferon alfa-2b, interferon beta, interferon gamma, interleuquin-2, ipilimumab, irinotecan, ixabepilone, lanreotide, lapatinib, lasofoxifeno, lenalidomide, lenograstim, lentinan, lenvatinib, lestaurtinib, letrozol, leuprorelin, levamisol, linifanib, linsitinib, lisuride, lobaplatin, lomustine, lonidamina, lurtotecan, mafosfamide, mapatumumab, masitinib, masoprocol, medroxiprogesterona, megestrol, melarsoprol, mefalan, mepitiostane, mercaptopurina, metotrexato, aminolevulinato de metilo, metiltestosterona, mifamurtide, mifepristone, miltefosine, miriplatin, mitobroni- tol, mitoguazona, mitolactol, mitomicinas, mitotane, mitoxantrone, molgramostim, motesanib, nandrolone, nedaplatin, nelarabine, neratinib, nilotinib, nilutamida, nimotuzumab, nimustine, nitracrine, nolatrexed, ofatumumab, oprelvekin, oxaliplatino, paclitaxel, palifermin, acido pamidronico, panitumumab, pazopanib, pegaspargase, pegepoetin beta, pegfilgastrim, peg-interferon alfa-2b, pelitrexol, pemetrexed, pemtumomab, pentostatin, peplomicina, perfosfamide, perifosine, pertuzumab, picibanil, pirambicin, pirarubicin, plerixafor, plicamicin, poliglusam, poliestradiol fosfato, ponatinib, porfimer sodio, pralatrexato, prednimustine, procarbazina, procodazol, PX-866, quinagolide, raloxifeno, raltitrexed, ranibizumab, ranimustine, razoxane, regorafenib, acido risedronico, rituximab, romidepsin, romiplostim, rubitecan, saracatinib, sargramostim, satraplatin, selumetinib, sipuleucel-T, sirolimus, sizofiran, sobuzoxane, sorafenib, estreptozocina, sunitinib, talaporfin, tamibaroteno, tamoxifeno, tandutinib, tasonermin, teceleukin, tegafur, telatinib, temoporfin, temozolomide, temsirolimus, teniposide, testolactona, testosterona, tetrofosmin, talidomide, tiotepa, timalfasin, tioguanina, tipifarnib, tivozanib, toceranib, tocilizumab, topotecan, toremifeno, tositumomab,

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trabectedin, trastuzumab, treosulfan, tretinoin, triapine, trilostane, trimetrexato, triptorelin, trofosfamida, ubenimex, valrubicin, vandetanib, vapreotide, varlitinib, vatalanib, vemurafenib, vidarabine, vinblastine, vincristine, vindesine, vinflunine, vinorelbine, volociximab, vorinostat, zinostatin, acido zoledronico, y zorubicin.

En general, los siguientes objetivos se pueden alcanzar con la combinacion de los compuestos de la presente invencion con otros agentes anticancerosos:

• actividad mejorada en la disminucion del crecimiento de un tumor, en la reduccion de su tamano o incluso en su completa eliminacion en comparacion con el tratamiento con un solo compuesto activo;

• posibilidad de emplear los quimioterapeuticos usados en una dosificacion menor que en la monoterapia;

• posibilidad de una terapia mas tolerable con pocos efectos colaterales en comparacion con la administracion individual;

• posibilidad de tratamiento de un espectro mas amplio de cancer y enfermedades tumorales;

• obtencion de un mdice mas alto de respuesta a la terapia;

• tiempo de supervivencia mas prolongado del paciente en comparacion con la terapia estandar.

De este modo, en otra realizacion, la presente invencion se refiere a composiciones farmaceuticas que comprende al menos uno de los compuestos de acuerdo con la invencion y uno o mas agentes terapeuticos adicionales para el tratamiento y/o la prevencion de trastornos, especialmente de los trastornos antes mencionados.

En el tratamiento del cancer, los compuestos de la presente invencion tambien se pueden emplear junto con la radioterapia y/o intervencion quirurgica.

Mas aun, los compuestos de formula (I) se pueden utilizar, como tal o en composiciones, en investigacion y diagnostico, o como criterios de referencia analttica, y similares, los cuales son bien conocidos en la tecnica.

Cuando los compuestos de la presente invencion se administran como productos farmaceuticos, a humanos y otros mairnferos, se puede administrar per se o en forma de una composicion farmaceutica que contiene, por ejemplo, 0,1% a 99,5% (mas preferentemente, 0,5% a 90%) del ingrediente activo en combinacion con uno o mas excipientes aceptables para uso farmaceutico.

De este modo, en otro aspecto, la presente invencion se refiere a composiciones farmaceuticas que comprenden al menos uno de los compuestos de acuerdo con la invencion, convencionalmente junto con uno o mas excipientes inertes, no toxicos, adecuados para uso farmaceutico y al uso de los mismos para el tratamiento y/o la prevencion de trastornos, especialmente de los trastornos antes mencionados.

Los compuestos de acuerdo con la invencion pueden actuar de forma sistemica y/o local. A este fin, se pueden administrar en una forma adecuada tal como, por ejemplo, por via oral, pulmonar, nasal, lingual, sublingual, bucal, rectal, dermica, transdermica, conjuntival, otica o topica, o en forma de un implante o stent.

Para estas vfas de aplicacion, los compuestos de la invencion se pueden administrar en formas de aplicacion adecuadas.

Las formas de aplicacion adecuadas para administracion oral que funcionan de acuerdo con la tecnica anterior y administran los compuestos de acuerdo con la invencion de forma rapida y/o modificada, y que contienen los compuestos de acuerdo con la invencion en forma cristalina, amorfa y/o disuelta, tales como, por ejemplo, comprimidos (comprimidos sin recubrir o recubiertos, por ejemplo que tienen recubrimientos entericos o recubrimientos que son insolubles o se disuelven con un retraso o controlan la liberacion del compuesto de acuerdo con la invencion), comprimidos que se desintegran de forma rapida en la boca, o pelfculas/obleas, pelfculas/ liofilisados, capsulas (por ej., capsulas de gelatina dura o blanda), comprimidos recubiertos con azucar, granulos, pellets, polvos, emulsiones, suspensiones, aerosoles o soluciones.

La aplicacion parenteral se puede llevar a cabo evitando el paso de absorcion (por via intravenosa, intraarterial, intracardial, intraespinal o intralumbar) o con la inclusion de una absorcion (por via intramuscular, subcutanea, intracutanea, percutanea o intraperitoneal). Las formas de aplicacion parenteral utiles incluyen preparaciones de inyeccion e infusion en la forma de soluciones, suspensiones, emulsiones, liofilisados y polvos esteriles.

Las formas adecuadas para otras vfas de aplicacion incluyen, por ejemplo, formas farmaceuticas inhaladoras (por ej., inhaladores de polvo, nebulizadores), gotas nasales, soluciones o pulverizaciones, comprimidos o capsulas a ser administradas por via lingual, sublingual o bucal (por ej., pastillas, pfldoras), supositorios, preparaciones para ofdos y ojos (por ej., gotas, unguentos), capsulas vaginales, suspensiones acuosas (lociones, mezclas para agitar), suspensiones lipofflicas, unguentos, cremas, leches, pastas, espumas, polvos para espolvorear, sistemas terapeuticos transdermicos (por ej., parches), implantes y stents.

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En una realizacion preferente, la composicion farmaceutica que comprende un compuesto de formula (I) como se definio anteriormente se proporciona en una forma adecuada para la administracion oral. En otra realizacion preferente, la composicion farmaceutica que comprende un compuesto de formula (I) como se definio anteriormente se proporciona en una forma adecuada para la administracion intravenosa.

Los compuestos de acuerdo con la invencion se pueden convertir en las formas de aplicacion mencionadas de manera conocida per se mezclando con excipientes adecuados inertes, no toxicos, farmaceuticamente aceptables. Estos excipientes incluyen, entre otros, veidculos (por ej., celulosa microcristalina, lactosa, manitol), solventes (por ej., polietilenglicoles lfquidos), emulsionantes (por ej., dodecil sulfato sodico), tensioactivos (por ej., polioxosorbitan oleato), dispersantes (por ej., polivinilpirrolidona), polfmeros sinteticos y naturales (por ej., albumina), estabilizantes (por ej., antioxidantes tales como, por ejemplo, acido ascorbico), colorantes (por ej., pigmentos inorganicos tales como, por ejemplo, oxidos de hierro), y agentes enmascaradores del gusto y/o el olor.

Una dosis preferente del compuesto de la presente invencion es la maxima que un paciente pueda tolerar y no desarrollar serios efectos colaterales. De manera ilustrativa, el compuesto de la presente invencion se puede administrar por via parenteral a una dosis de aproximadamente O,o0l mg/kg hasta aproximadamente 1 mg/kg, preferentemente de aproximadamente 0,01 mg/kg a aproximadamente 0,5 mg/kg de peso corporal. En la administracion oral, un intervalo de dosis ejemplar es aproximadamente 0,01 a 100 mg/kg, preferentemente aproximadamente 0,01 a 20 mg/kg, y mas preferentemente aproximadamente 0,1 a 10 mg/kg de peso corporal. Los intervalos intermedios a los valores antes mencionados ademas intentan ser parte de la invencion.

No obstante, los niveles de dosificacion reales y el tiempo de administracion de los principios activos en las composiciones farmaceuticas de la invencion pueden variar para obtener una cantidad del ingrediente activo el cual es eficaz para obtener la respuesta terapeutica deseada para un paciente particular, la composicion y el modo de administracion, sin ser toxica al paciente. Por lo tanto, puede ser necesario donde sea apropiado desviarse de las cantidades establecidas, en particular como una funcion de la edad, el genero, el peso corporal, la dieta y el estado de salud general del paciente, la biodisponibilidad y las caractensticas farmacodinamicas del compuesto particular y su modo y la via de administracion, el tiempo o el intervalo en el cual tiene lugar la administracion, el regimen de dosis seleccionado, la respuesta del paciente individual al ingrediente activo, la enfermedad espedfica involucrada, el grado o la implicancia o la severidad de la enfermedad, la clase de tratamiento concurrente (es decir, la interaccion del compuesto de la invencion con otros terapeuticos coadministrados), y otras circunstancias relevantes.

De este modo, puede ser satisfactorio en algunos casos administrar menos de la cantidad minima antes mencionada, por lo que en otros casos el lfmite superior establecido puede ser excedido. El tratamiento puede iniciarse con dosificaciones mas pequenas, las cuales son inferiores a la dosis optima del compuesto. De aid en adelante, la dosificacion puede incrementarse mediante pequenos incrementos hasta que se alcance el efecto optimo bajo las circunstancias. Por conveniencia, la dosificacion diaria total puede dividirse y administrarse en porciones individuales distribuidas a lo largo del dfa.

Las siguientes realizaciones de ejemplo ilustran la invencion. La invencion no esta limitada a los ejemplos.

Los porcentajes en los siguientes ensayos y ejemplos, a menos que se indique lo contrario, son en peso, las partes son en peso. Las relaciones de solvente, las relaciones y concentraciones de dilucion informadas para el lfquido/ soluciones lfquidas se basan cada una de ellas en el volumen.

A. Ejemplos

Abreviaturas y acronimos:

Ac

Ac2O

AcOH

Ac.

Boc

br.

Bu

cat.

conc.

d:

DBDMH

DCI

DCM

Periodinano Dess-Martin

DIPEA

DMF

DMSO

EI

eq.

ESI

Et

EtOAc

GC-MS

h

Hal

''h-rmn

HPLC

iPr

LC-MS

Me

MeOH min...

EM

m/z

acetilo

anhndrido acetico

acido acetico

acuoso (solucion)

ter-butoxicarbonilo

ancho (1H-RMN senal)

butilo

catalftico

concentrado

doblete (1H-RMN senal)

1,3-dibromo-5,5-dimetildantoma ionizadon qmmica directa (EM) diclorometano

1,1,1-triacetoxi-1,1-dihidro-1,2-benzodioxol-3-(1H)-ona

N,N-diisopropiletilamina

N,N-dimetilformamida

dimetilsulfoxido

ionizacion por impacto de electrones (EM) equivalente(s)

ionizacion por electro aspersion (EM) etilo

acetato de etilo

Cromatografica gaseosa-espectroscopfa de masa acoplada

hora(s)

halogeno

espectroscopfa de resonancia magnetica nuclear protonica

cromatograffa Uquida de alta resolucion

isopropilo

Cromatografica l^quida-espectroscop^a de masa acoplada

metilo

metanol

minuto(s)

espectroscopfa de masa relacion masa a carga (EM)

NBS n-Bu NCS de teo.

Pd/C

PdCl2(dppf)

Pd(dba)2

Ph

PPA

q

Cuant.

rac

Rf

RP

ta

Tr

s

sat.

t

TBAF

TBDMS

TBTU

tBu

ter

TFA

THF

TLC

N-bromosuccinimida

n-butilo

N-clorosuccinimida

de teona (rendimiento qmmico)

paladio sobre carbon

[1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloropaladio(N)

bis(dibencilidenacetona)paladio

Fenilo

acido polifosforico cuarteto (1H-RMN senal) cuantitativo (rendimiento) racemico

factor de retencion TLC fase inversa (HPLC) temperatura ambiente tiempo de retencion (HPLC) singulete (1H-RMN senal) saturada (solucion) triplete (1H-RMN senal) tetra-n-butilamonio fluoruro ter-butildimetilsililo

tetrafluoroborato W-[(1H-benzotriazol-1-

iloxi)(dimetilamino)metileno]-W-metil-metanaminio

ter-butilo

terciario

acido trifluoroacetico tetrahidrofurano cromatograffa de capa delgada

Procedimientos LC-MS y GC-MS:

Procedimiento 1 (LC-MS):

Instrumento: Micromass Quattro Premier con Waters UPLC Acquity; columna: Thermo Hypersil GOLD 1.9|j, 50 mm x 5 1 mm; eluyente A: 1 litro de agua + 0,5 ml 50% de acido formico acuoso, eluyente B: 1 litro de acetonitrilo + 0,5 ml

50% de acido formico ac.; gradiente: 0,0 min 90% A ^ 0,1 min 90% A ^ 1,5 min 10% A ^ 2,2 min 10% A; temperatura: 50°C; caudal: 0,33 ml/min; deteccion UV: 210 nm.

Procedimiento 2 (LC-MS):

Instrumento: Sistema Waters Acquity SQD UPLC; columna: Waters Acquity UPLC HSS T3 1,8j, 50 mm x 1 mm; 10 eluyente A: 1 litro de agua + 0,25 ml 99% de acido formico, eluyente B: 1 litro de acetonitrilo + 0,25 99% ml 50% de acido formico; gradiente: 0,0 min 90% A ^ 1,2 min 5% A ^ 2,0 min 5% A; horno: 50C; caudal: 0,40 ml/min; deteccion UV: 210-400 nm.

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Procedimiento 3 (LC-MS):

Instrumento: Micromass Quattro Micro con HPLC Agilent 1100 Series; columna: YMC-Triart C18 3j, 50 mm x 3 mm; eluyente A: 1 litro de agua + 0,01 mol carbonato de amonio, eluyente B: 1 litro de acetonitrilo; gradiente: 0,0 min 100% A ^ 2,75 min 5% A ^ 4,5 min 5% A; horno: 40°C; caudal: 1,25 ml/min; deteccion UV: 210 nm.

Procedimiento 4 (LC-MS):

Instrumento: Sistema Waters Acquity SQD UPLC; columna: Waters Acquity UPLC HSS T3 1,8|j, 30 mm x 2 mm; eluyente A: 1 litro de agua + 0,25 ml 99% de acido formico, eluyente B: 1 litro de acetonitrilo + 0,25 99% ml 50% de acido formico; gradiente: 0,0 min 90% A ^ 1,2 min 5% A ^ 2,0 min 5% A; horno: 50°C; caudal: 0,60 ml/min; deteccion UV: 208-400 nm.

Procedimiento 5 (LC-MS):

Instrumento: Micromass Quattro Premier con Waters UPLC Acquity; columna: Thermo Hypersil GOLD 1.9j, 50 mm x 1 mm; eluyente A: 1 litro de agua + 0,5 ml 50% de acido formico acuoso, eluyente B: 1 litro de acetonitrilo + 0,5 ml 50% de acido formico ac.; gradiente: 0,0 min 97% A ^ 0,5 min 97% A ^ 3,2 min 5% A ^ 4,0 min 5% A; temperatura: 50C; caudal: 0,3 ml/min; deteccion UV: 210 nm.

Procedimiento 6 (GC-MS):

Instrumento: Micromass GCT, GC6890; columna: Restek RTX-35, 15 m x 200 jm x 0,33 jm; flujo constante con helio: 0,88 ml/min; horno: 70°C; entrada: 250°C; gradiente: 70°C, 30°C/min ^ 310°C (mantener durante 3 min).

Procedimiento 7 (LC-MS):

Instrumento EM: Waters Micromass QM; Instrumento HPLC: Agilent 1100 series; columna: Agilent ZORBAX Extend- C18 3,0 mm x 50 mm, 3.5j; eluyente A: 1 litro de agua + 0,01 mol carbonato de amonio, eluyente B: 1 litro de acetonitrilo; gradiente: 0,0 min 98% A ^ 0,2 min 98% A ^ 3,0 min 5% A ^ 4,5 min 5% A; temperatura: 40C; caudal:

1.75 ml/min; deteccion UV: 210 nm.

Procedimiento 8 (LC-MS):

Instrumento EM: Waters Micromass ZQ; Instrumento HPLC: Agilent 1100 series; columna: Agilent ZORBAX Extend- C18 3,0 mm x 50 mm, 3.5j; eluyente A: 1 litro de agua + 0,01 mol carbonato de amonio, eluyente B: 1 litro de acetonitrilo; gradiente: 0,0 min 98% A ^ 0,2 min 98% A ^ 3,0 min 5% A ^ 4,5 min 5% A; temperatura: 40C; caudal:

1.75 ml/min; deteccion UV: 210 nm.

Procedimientos generales de purificacion (Vease tabla I y II a continuacion):

Procedimiento P1:

RP-HPLC preparativa (Reprosil C18, gradiente acetonitrilo/ 0,2% acido trifluoroacetico ac.).

Procedimiento P2:

RP-HPLC preparativa (XBridge C18, gradiente acetonitrilo/ agua + 0,1% amomaco ac.).

Procedimiento P3:

RP-HPLC preparativa (Sunfire C18, gradiente acetonitrilo/ agua).

Procedimiento P4:

RP-HPLC preparativa (XBridge C18, gradiente acetonitrilo/ agua + 0,05% amomaco ac.).

Procedimiento P5:

El producto obtenido a partir de la purificacion por RP-HPLC precedente se disuelve en metanol y se filtra a traves de un cartucho de intercambio anionico (Stratospheres SPE, PL-HCO3 MP-resina). El cartucho se eluye con metanol, y el filtrado se evapora.

Procedimiento P6:

Una solucion del producto en acetato de etilo se lava con solucion de hidrogeno carbonato de sodio seguido de solucion de cloruro de sodio acuoso saturada, se seca sobre sulfato de magnesio, se filtra y se evapora.

Materiales de partida e intermediarios:

Intermediary 1A 2-metoxi-4-metilanilina

imagen92

Una mezcla de 5-metil-2-nitroanisol (265 g, 1,58 moles) y 10% Pd/C (39,75 g) en THF (1,32 L) se agito durante toda 5 la noche a ta bajo 1 atm de hidrogeno. La filtracion sobre kieselguhr y la evaporacion dieron 216,1 g del producto bruto el cual se uso en el proximo paso sin purificacion posterior.

LC-MS (procedimiento 3): Tr = 2,39 min; MS (ESIpos): m/z = 138 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-da): 6 = 6,45-6,63 (m, 3H), 4,46 (s, 2H), 3,72 (s, 3H), 2,16 (s, 3H) ppm.

Intermediary 2A

10 2-metoxi-4-metilbencenotiol

imagen93

SH

Procedimiento 1:

Una solucion de nitrito de sodio (7 g, 101,4 mmoles) en agua (25 ml) se agrego gota a gota a una solucion enfriada (0°-5°C) del intermediario 1A (13,7 g, 100 mmoles) en acido clorhyrico concentrado (30 ml) y agua (85 ml). 15 Despues de agitar a 0°C durante 10 min, se agrego acetato de sodio (15 g, 182,8 mmoles). La mezcla resultante se agrego gota a gota a una solucion caliente (70°-80°C) de O-etil ditiocarbonato de potasio (30 g, 187,1 mmoles) en agua (140 ml), se agito entre 70°C y 80°C durante 1 h y posteriormente se enfrio hasta ta. La mezcla se extrajo dos veces con acetato de etilo, y los extractos organicos combinados se secaron sobre sulfato de sodio y se evaporaron. El residuo se coloco en una solucion 1,3 M de hidroxido de potasio en etanol (300 ml). Se agrego 20 glucosa (8 g), y la mezcla resultante se sometio a reflujo durante 3 h. Posteriormente, el solvente de etanol se evaporo, y el residuo se diluyo con agua y se acidifico con acido sulfurico acuoso 6N. Se agrego polvo de zinc (15 g) cuidadosamente, y la mezcla resultante se calento hasta 50°C durante 30 min. La mezcla posteriormente se enfrio hasta ta, se diluyo con diclorometano y se filtro. El filtrado se extrajo dos veces con diclorometano, y los extractos organicos combinados se secaron sobre sulfato de sodio y se evaporaron dando 14,3 g del producto bruto 25 el cual se uso en el proximo paso sin purificacion posterior.

Procedimiento 2:

A 2,9 litros de THF se agrego una solucion tibia de 355 ml (6,67 moles) acido sulfurico concentrado en 1,1 litro de agua. A 50°C, se agregaron 293 g (1,33 moles) cloruro 2-metoxi-4-metilbencenosulfonilo bajo agitacion. Posteriormente, 521 g (7,97 moles) de polvo de zinc se agregaron cuidadosamente en porciones (espumando), y la 30 reaccion levemente exotermica se enfrio en un bano acuoso para mantener una temperatura de 50°-55°C. La mezcla posteriormente se agito a 55°C durante 3 h. El avance de la reaccion se controlo por TLC (gel de sflice, eter de petroleo/acetato de etilo 95:5). La mezcla de reaccion se vertio en 13,6 litros de agua, 6,8 litros diclorometano se agregaron, y la mezcla se agito durante 5 min. Despues de decantar del zinc remanente y separacion de fase, la fase acuosa se extrajo una vez mas con 6,8 litros diclorometano. Las fases organicas combinadas se lavaron con 35 10% de salmuera, se secaron y se evaporaron a 40°C a presion reducida dando 237 g de producto bruto. Este

material se uso en el proximo paso sin purificacion posterior. Una muestra analttica se obtuvo por cromatograffa de gel de sflice con eter de petroleo/acetato de etilo (97:3) como eluyente.

LC-MS (procedimiento 1): Tr = 1,21 min; MS (ESIneg): m/z = 153 (M-H)~

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 6 = 7,17 (d, 1H), 6,81 (s, 1H), 6,66 (d, 1H), 4,63 (br. s, 1H), 3,80 (s, 3H), 2,26 (s, 3H)

5

10

15

20

25

30

ppm.

Intermediary 3A

1-[(2,2-dietoxietil)sulfanil]-2-metoxi-4-metilbenceno

imagen94

S

O

CH

3

<x ^CH

3

Se suspendieron 237 g material bruto del intermediary 2A, 287 g (1,46 moles) bromoacetaldehyo-dietilacetal y 862 g (2,65 moles) carbonato de cesio en 2 litros de DMF. La temperatura de reaccion aumento inicialmente hasta 40°C, posteriormente se continuo con la agitacion durante toda la noche a temperatura ambiente. La mezcla de reaccion se dividio entre 10 litros de agua y 2,7 litros de acetato de etilo. La fase acuosa se extrajo con otra porcion de 2,7 litros acetato de etilo. Las fases organicas combinadas se lavaron con 10% salmuera, se secaron y se evaporaron. El residuo oleoso resultante se purifico por cromatograffa de gel de sflice con eter de petroleo/acetato de etilo (95:5) como eluyente.

Rendimiento: 236 g de un aceite (66% de teor.)

GC-MS (procedimiento 6): Tr = 6,03 min; MS (Elpos): m/z = 270 (M)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 6 = 7,16 (d, 1H), 6,82 (s, 1H), 6,73 (d, 1H), 4,55 (t, 1H), 3,80 (s, 3H), 3,52-3,64 (m, 2H), 3,39-3,51 (m, 2H), 2,96 (d, 2H), 2,33 (s, 3H), 1,09 (t, 6H) ppm.

Intermediario 4A

7-metoxi-5-metil-1 -benzotiofeno

imagen95

A una mezcla de reflujo de 13 g acido polifosforico y 150 ml clorobenceno se agrego gota a gota una solucion de 5,2 g (19,2 mmoles) del intermediario 3A, y se continuo con el reflujo durante toda la noche. Despues de enfriar, la capa organica se decanto, y el residuo y el matraz se enjuagaron dos veces con DCM. Las fases organicas combinadas se evaporaron a presion reducida. El residuo (3,76 g) se cromatografio sobre gel de sflice con isohexano/0-10% acetato de etilo como eluyente.

Rendimiento: 1,69 g de un aceite (49% de teor.)

GC-MS (procedimiento 6): Tr = 5,20 min; MS (Elpos): m/z = 178 (M)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 6 = 7,68 (d, 1H), 7,34 (d, 1H), 7,28 (s, 1H), 6,78 (s, 1H), 3,93 (s, 3H), 2,43 (s, 3H) ppm.

Intermediario 5A

Acido (7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)boronico

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5

10

15

20

25

30

35

Bajo atmosfera de argon, 26,7 g (150 mmoles) del intermediary 4A se disolvieron en 270 ml de THF y se enfriaron hasta -70°C. Entre -70°C y -65°C, 66 ml (165 mmoles) de una solucion 2,5 N de n-butilitio en hexano se agregaron gota a gota dentro de 20 min, dando por resultado la formacion de un precipitado de color blanco. Despues de agitar durante 1 h a -70°C, 41,5 ml (180 mmoles) tri isopropil borato se agregaron a esta temperatura dentro de 10 min (dando por resultado una suspension espesa). Se continuo con la agitacion durante 1 h a -70°C, antes que la mezcla de reaccion se dejara entibiar hasta ta durante toda la noche. Posteriormente, se agregaron 400 ml de solucion de cloruro de amonio acuosa saturada, las capas se separaron, y la capa acuosa se extrajo una vez mas con THF. Las fases organicas combinadas se evaporaron a presion reducida. Al residuo obtenido de este modo, se agregaron 200 ml de agua y 86 ml de solucion de hidroxido de sodio acuoso 2 N. La solucion se lavo dos veces con DCM, posteriormente se acidifico con 35 ml de 3 M acido sulfurico, y la suspension resultante se agito vigorosamente durante 1 h. El precipitado se filtro por succion y se seco durante toda la noche a 45°C al vado.

Rendimiento: 28,25 g de un solido incoloro (94% puro por LC-MS, 80% de teor.)

LC-MS (procedimiento 2): Tr = 0,87 min; MS (ESIpos): m/z = 223 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 6 = 7,17 (d, 1H), 6,81 (s, 1H), 6,66 (d, 1H), 4,63 (br. s, 1H), 3,80 (s, 3H), 2,26 (s, 3H) ppm.

Intermediario 6A

2-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)-6-metil-1,3,6,2-dioxazaborocano-4,8-diona

O

imagen97

O

N-CH3

Se disolvieron 6,3 g (28,4 mmoles) del intermediario 5A y 4,2 g (28,4 mmoles) acido 2,2'-(metilimino)diacetico en una mezcla de 45 ml DMSO y 400 ml tolueno y se sometio a reflujo durante 16 h usando una trampa Dean-Stark. Despues de la evaporacion, el residuo se coloco en acetato de etilo y se lavo tres veces con agua y una vez con salmuera. La fase organica se seco sobre sulfato de magnesio y se evaporo hasta un volumen de aproximadamente 200 ml. Un solido de color blanco precipito el cual se filtro, se lavo con acetato de etilo y se seco al vacfo para dar un primer cultivo (5,52 g) del compuesto del tftulo. Un segundo cultivo (3,32 g) se obtuvo despues de la evaporacion de la lejfa madre y de la cromatograffa flash sobre una capa de gel de sflice usando ciclohexano/0-100% acetato de etilo en forma de eluyente.

Rendimiento: 8,84 g (pureza total 92,5% por LC-MS, 87% de teor.)

LC-MS (procedimiento 2): Tr = 0,93 min; MS (ESIpos): m/z = 334 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 6 = 7,42 (s, 1H), 7,26 (s, 1H), 6,76 (s, 1H), 4,40 (d, 2H), 4,17 (d, 2H), 3,92 (s, 3H), 2,63 (s, 3H), 2,42 (s, 3H) ppm.

Intermediario 7A

4-aminopirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-6-carboxilato de etilo

NH,

N

CH3

imagen98

Una solucion de 4-aminopirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-6-carbonitrilo (3,9 g, 24,5 mmoles; preparacion descripta en Solicitud de Patente Internacional pCt WO 2007/064883) en etanol (124,8 ml) se agito con acido sulfurico concentrado (62,4 ml) a 80°C durante toda la noche. Despues de enfriar hasta ta, la mezcla de reaccion se vertio en 800 g de hielo y se llevo hasta pH 6-7 con solucion de hidroxido de sodio acuoso concentrado. Se agregaron

acetato de etilo (500 ml) y diclorometano (500 ml) a la suspension, y la mezcla resultante se filtro sobre kieselguhr. La capa organica se separo de la capa acuosa. El solido se disolvio en agua caliente (1 l), y la capa acuosa se extrajo dos veces con acetato de etilo. Las capas organicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio y se evaporaron. El residuo se trituro con una mezcla de isopropanol/eter dietflico, y el solido se filtro dando 2,5 g (49% 5 de teor.) del compuesto del tttulo.

LC-MS (procedimiento 2): Tr = 0,59 min; MS (ESIpos): m/z = 206 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-da): 6 = 8,11-7,97 (m, 3H), 7,88 (s, 1H), 7,34 (br. s, 1H), 4,27 (q, 2H), 1,30 (t, 3H) ppm. Intermediario 8A

(4-aminopirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-6-il)metanol

10

15

NH

N

Una solucion helada del intermediario 7A (3,0 g, 14,5 mmoles) en THF (30 ml) se trato con una solucion 1M de trietilborohidruro de litio 1M en THF (58 ml) y se agito a ta durante 45 min. La mezcla de reaccion se enfrio posteriormente hasta 0°C, se templo con metanol, se entibio lentamente hasta ta y se adsorbio sobre kieselguhr. La purificacion por cromatograffa de columna sobre gel de sflice (diclorometano/metanol 20:1 ^ 4:1 gradiente) dio 2,21 g (92,5% de teor.) del compuesto del tttulo.

LC-MS (procedimiento 3): Tr = 1,46 min; MS (ESIpos): m/z = 164 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-da): 6 = 7,75 (s, 1H), 7,64 (br. s, 2H), 7,50 (br. d, 1H), 6,79 (br. d, 1H), 5,01 (t, 1H), 4,50 (d, 2H) ppm.

Intermediario 9A

imagen99

20

[2-ciano-4-(hidroximetil)-1H-pirrol-1-il]carbamato de fer-butilo

imagen100

3

N

CN

HO—'

Bajo argon, una solucion 1M de bromuro de metilmagnesio en THF (13,3 ml) se agrego durante 15 min a una solucion de (4-bromo-2-ciano-1H-pirrol-1-il)carbamato de fer-butilo (3,7 g, 12,09 mmoles; preparacion descripta en Solicitud de Patente Internacional PCT WO 2007/064883, Intermediario AAE, Etapa 3) en ThF (37 ml) se enfrio 25 hasta -60°C. Despues de 30 min, una solucion 1,6M de n-butilitio en hexano (15,1 ml, 24,2 mmoles) se agrego durante 10 min a la reaccion, y la mezcla resultante se agito entre -60°C y -40°C durante 1 h. Posteriormente, se agrego paraformaldel'ndo (1,09 g, 36,3 mmoles) a la reaccion, y la mezcla de reaccion se entibio lentamente hasta ta y se agito durante toda la noche. Despues de templar con solucion de cloruro de amonio acuosa saturada, la capa acuosa se extrajo dos veces con acetato de etilo. Las fases organicas combinadas se lavaron con solucion de 30 cloruro de sodio acuosa saturada, se secaron sobre sulfato de sodio y se evaporaron. La purificacion por cromatograffa de columna sobre gel de sflice (ciclohexano/acetato de etilo 2:1 ^ 1:1) dio 2,04 g (69% de teor.) del compuesto del tttulo.

LC-MS (procedimiento 4): Tr = 0,70 min; MS (ESIpos): m/z = 238 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 6 = 10,79 (br. s, 1H), 7,09 (d, 1H), 6,86 (d, 1H), 4,97 (t, 1H), 4,28 (d, 2H), 1,45 (s, 35 9H) ppm.

Intermediario 10A

6-(metoximetil)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-amina

imagen101

3

Procedimiento 1:

Una solucion del intermediary 8A (1,3 g, 7,9 mmoles) en THF (25 ml) se trato con cloruro de tionilo (1,15 ml, 15,8 mmoles) y se agito a ta durante 2 h. Despues de la evaporacion, el residuo se disolvio en metanol (25 ml) y se trato 5 con acetato de sodio (1,3 g, 15,8 mmoles). La mezcla se agito durante 3 h a 65°C y posteriormente se evaporo nuevamente. La purificacion por cromatograffa de columna sobre gel de sflice (diclorometano/metanol 100:2) dio 787 mg (55% de teor.) del compuesto del fftulo.

Procedimiento 2:

Una solucion del intermediario 9A (6,14 g, 25,88 mmoles) en una solucion 4 M de cloruro de hidrogeno en 1,410 dioxano (15 ml) se agito a ta durante 5 h. Despues de diluir con metanol (73 ml), se continuo con la agitacion a ta durante toda la noche. Posteriormente, se agregaron fosfato de potasio (54,9 g, 258,65 mmoles) y acetato formamidinio (13,46 g, 129,32 mmoles), y la mezcla resultante se agito a 65°C durante 17 h. La mezcla de reaccion se evaporo, se agrego solucion de cloruro de sodio acuosa saturada, y la mezcla se extrajo con diclorometano seguido de acetato de etilo. Las fases organicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio y se evaporaron. La 15 purificacion por cromatograffa de columna sobre gel de sflice (diclorometano/metanol 40:1 ^ 20:1) dio 2,36 g (49% de teor.) del compuesto del fftulo.

LC-MS (procedimiento 3): Tr = 1,72 min; MS (ESIpos): m/z = 179 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 6 = 7,77 (s, 1H), 7,69 (br. s, 2H), 7,57 (s, 1H), 6,81 (s, 1H), 4,42 (s, 2H), 3,25 (s, 3H) ppm.

20 Intermediario 11A

4-Amino-6-(metoximetil)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-7-carbaldel'ffdo

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3

Se agrego cloruro de fosforilo (13,7 ml, 147,18 mmoles) a una solucion del intermediario 10A (5,24 g, 29,43 mmoles) en DMF (80 ml) a 0°C. La mezcla resultante se agito a 60°C durante 8 h, posteriormente cuidadosamente 25 se templo con agua y se neutralizo con solucion de hidroxido de sodio acuoso 4 M. La capa acuosa se extrajo con acetato de etilo. Las fases organicas combinadas se lavaron con solucion de cloruro de sodio acuosa saturada, se secaron sobre sulfato de magnesio y se evaporaron. Una solucion del residuo en metanol (50 ml) se trato con acetato de sodio (2,41 g, 29,43 mmoles) y se sometio a reflujo durante toda la noche. La mezcla de reaccion se diluyo con agua y se extrajo con acetato de etilo. Las fases organicas combinadas se lavaron con solucion de 30 cloruro de sodio acuosa saturada, se secaron sobre sulfato de magnesio y se evaporaron, dando 2,66 g del producto bruto el cual se uso en el proximo paso sin purificacion posterior.

LC-MS (procedimiento 4): Tr = 0,50 min; MS (ESIpos): m/z = 207 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 6 = 10,35 (s, 1H), 8,20 (br. s, 2H), 8,07 (s, 1H), 7,06 (s, 1H), 4,72 (s, 2H), 3,39 (s, 3H) ppm.

35 Intermediario 12A

4-amino-5-bromo-6-(metoximetil)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-7-carbaldel'ffdo

imagen103

3

Una solucion del intermediary 11A (bruto, 2,66 g) en DMF (30 ml), se enfrio hasta -30°C, se trato con una solucion de W-bromosuccinimida (NBS; 2,52 g, 14,19 mmoles) en DMF (14 ml). La mezcla resultante se entibio lentamente hasta 0°C. Despues de 1 hora, la mezcla se entibio hasta ta, se agito durante otros 15 min y posteriormente se 5 templo con solucion de tiosulfato de sodio acuoso 1 M. El precipitado se filtro y se lavo con acetato de etilo, dando 1,1 g (100% de pureza, 30% de teor.) en forma de un primer cultivo del compuesto del fftulo. El filtrado restante se extrajo con acetato de etilo. Las fases organicas combinadas se lavaron con solucion de cloruro de sodio acuosa saturada, se secaron sobre sulfato de sodio y se evaporaron. La purificacion del residuo por cromatograffa de columna sobre gel de sflice (ciclohexano/acetato de etilo 1:1 ^ 1:3) dio otros 1,39 g (70% de pureza, 26% de teor.) 10 del compuesto del fftulo.

LC-MS (procedimiento 2): Tr = 0,67 min; MS (ESIpos): m/z = 283/285 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 6 = 10,36 (s, 1H), 8,63 (br. s, 1H), 8,13 (s, 1H), 7,23 (br. s, 1H), 4,64 (s, 2H), 3,26 (s, 3H) ppm.

Intermediario 13A

15 4-amino-6-(metoximetil)-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-7-carbaldel'ffdo

HX

/CH3

O

CH3

H

Bajo argon, una solucion de fosfato de potasio acuoso 0,5 M desgasificada (9,9 ml) se agrego a una solucion del intermediario 12A (710 mg, 2,49 mmoles), el intermediario 5A (921 mg, 3,73 mmoles) y (2'-aminobifenil-2-il)- (cloro)paladio-diciclohexil(2',4',6'-triisopropilbifenil-2-il)fosfina (1:1; 196 mg, 249 pmoles; vease S. L. Buchwald et al., 20 J. Am. Chem. Soc. 132 (40), 14073-14075 (2010)) en THF desgasificado (28,4 ml). La mezcla resultante se agito a 60°C durante 2 h y posteriormente se evaporo. La purificacion del residuo por cromatograffa de columna sobre gel de sflice (ciclohexano/acetato de etilo 5:1 ^ 1:1) dio 550 mg (51% de teor.) del compuesto del fftulo.

LC-MS (procedimiento 2): Tr = 1,06 min; MS (ESIpos): m/z = 383 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 6 = 10,50 (s, 1H), 8,43 (br. s, 1H), 8,21 (s, 1H), 7,42 (s, 1H), 7,33 (s, 1H), 6,87 (s, 25 1H), 6,09 (br. s, 1H), 4,58 (s, 2H), 3,96 (s, 3H), 3,19 (s, 3H), 2,46 (s, 3H) ppm.

Intermediario 14A

6-(etoximetil)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-amina

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5

10

15

20

25

30

35

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Procedimiento 1:

A una suspension de 2 g (12,2 mmoles) del intermediario 8A en 40 ml de THF se agregaron 1,78 ml (24,4 mmoles) cloruro de tionilo a ta dentro de 20 seg. La mezcla se agito durante 1,5 h, posteriormente se evaporo hasta sequedad, y el residuo se disolvio en 40 ml etanol. Se agregaron 2 g (24,4 mmoles) acetato de sodio, y la mezcla se agito a 70°C durante 1 h 45 min. La mezcla de reaccion se evaporo nuevamente, y se agrego solucion de hidrogeno carbonato de sodio acuosa saturada. La mezcla se extrajo cinco veces con acetato de etilo. Las fases organicas combinadas se lavaron con solucion de cloruro de sodio acuosa saturada, se secaron con sulfato de magnesio y se evaporaron hasta sequedad, dando 2,02 g de producto bruto el cual se purifico por cromatograffa de columna sobre gel de sflice con diclorometano/metanol (0-2%) en forma de eluyente.

Rendimiento: 1,37 g (58% de teor.).

Procedimiento 2:

Etapa 1: Una solucion del intermediario 9A (2,3 g, 9,69 mmoles) en 1,4-dioxano (5 ml) se trato con una solucion 4 M de cloruro de hidrogeno en 1,4-dioxano (24 ml, 96,9 mmoles) y se agito a ta durante 130 min. Posteriormente, la suspension se filtro, y el precipitado se lavo con 1,4-dioxano (5 ml) y se seco al vacfo dando 1,01 g (54% de teor.) del compuesto intermediario clorhidrato 1-amino-4-(clorometil)-1H-pirrol-2-carbonitrilo.

Etapa 2: se disolvio 1-amino-4-(clorometil)-1H-pirrol-2-carbonitrilo clorhidrato recien preparado de la etapa 1 (0,3 g, 1,82 mmoles) en etanol (10 ml) y se agito a ta durante 5 min. La solucion transparente se trato con acetato de formamidina (813 mg, 7,81 mmoles) y fosfato de potasio (1,66 g, 7,81 mmoles) y se agito primero a ta durante 3 dfas, posteriormente a 80°C durante 10,5 h. S e agrego mas acetato de formamidina (488 mg, 4,69 mmoles), y la mezcla se agito durante otros 18 h a 80°C. La mezcla posteriormente se enfrio hasta ta, y se agregaron agua y acetato de etilo. La fase organica se separo, y la fase acuosa se extrajo dos veces con acetato de etilo. Las fases organicas combinadas se lavaron con solucion de cloruro de sodio acuosa saturada, se secaron con sulfato de magnesio y se evaporaron. El residuo se disolvio en una mezcla de metanol y diclorometano, se adsorbio sobre tierra de diatomea, se secaron al vacfo y finalmente se purifico por cromatograffa sobre gel de sflice (gradiente 0-10% metanol/diclorometano) dando 260 mg (78% de teor.) del compuesto del fftulo.

LC-MS (procedimiento 3): Tr = 2,02 min; MS (ESIpos): m/z = 193 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 6 = 7,77 (s, 1H), 7,59-7,74 (br. s, 2H), 7,56 (s, 1H), 6,82 (s, 1H), 5,76 (s, 1H), 4,46 (s, 2H), 3,46 (q, 2H), 1,13 (t, 3H) ppm.

Intermediario 15A

4-amino-6-(etoximetil)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-7-carbaldel'ffdo

imagen106

O

CH3

A una solucion de 2,1 g (10,9 mmoles) del intermediario 14A en 40 ml de DMF seco, se agregaron 5,1 ml (54,6 mmoles) de cloruro de fosforilo gota a gota a 0°C bajo una atmosfera de argon. La mezcla se agito a 60°C durante 10 h. Posteriormente, se agrego agua cuidadosamente, y la mezcla se agito a temperatura ambiente hasta que todos los intermediarios reactivos se destruyeron (Control por HPLC). La solucion acida se neutralizo con solucion de hidroxido de sodio acuoso 1 M y se extrajo tres veces con acetato de etilo. Las fases organicas combinadas se lavaron con solucion de cloruro de sodio acuosa saturada, se secaron sobre sulfato de magnesio y se evaporaron a presion reducida.

Rendimiento: 1,94 g (pureza 90%, 81% de teor.)

LC-MS (procedimiento 5): Tr = 1,49 min; MS (ESIpos): m/z = 221 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-da): 6 = 10,35 (s, 1H), 8,14-8,26 (m, 2H), 8,07 (s, 1H), 7,07 (s, 1H), 4,76 (s, 2H), 3,58 (q, 2H), 1,20 (t, 3H) ppm.

Intermediary 16A

4-amino-5-bromo-6-(etoximetil)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-7-carbaldel'ndo

imagen107

A una solucion de 73 g (0,33 moles) del intermediario 15A en 1,9 litros de DMF se agrego gota a gota una solucion de 65 g (0,37 moles) de NBS en 200 ml de DMF a -15°C. La mezcla se dejo entibiar hasta 0°C y se agito durante 3 10 h a esta temperatura. La mezcla de reaccion se vertio en 2% de solucion de tiosulfato de sodio acuoso bajo agitacion, y el precipitado se filtro, se lavo con agua y se seco sobre pentoxido de fosforo al vado.

Rendimiento: 85,6 g (86% de teor.)

LC-MS (procedimiento 2): Tr = 0,76 min; MS (ESIpos): m/z = 299/301 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 6 = 10,36 (s, 1H), 8,62 (br. s, 1H), 8,13 (s, 1H), 7,22 (br. s, 1H), 4,68 (s, 2H), 3,49 (q, 15 2H), 1,10 (t, 3H) ppm.

Intermediario 17A

4-amino-6-(etoximetil)-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-7-carbaldel'ndo

imagen108

Bajo una atmosfera de argon, 714 mg (pureza 85%, 2,03 mmoles) del intermediario 16A, 946 mg (2,84 mmoles) del 20 intermediario 6A y 160 mg (0,2 mmoles) (2'-aminobifenil-2-il)(cloro)paladio-diciclohexil(2',4',6'-triisopropilbifenil-2- il)fosfina (1:1; vease S. L. Buchwald et al., J. Am. Chem. Soc. 132 (40), 14073-14075 (2010)) se suspendieron en 15,5 ml de THF. Posteriormente, se agregaron 15,5 ml de una solucion de fosfato de potasio acuoso 0,5 M desgasificada, y la mezcla se agito a 50°C durante 16 h. Despues de la adicion de agua, la mezcla se extrajo con acetato de etilo, y las fases organicas combinadas se secaron sobre sulfato de magnesio y se evaporaron a presion 25 reducida. El residuo se purifico por cromatograffa de columna sobre gel de sflice (100 g) con 10-50% acetato de etilo/ ciclohexano en forma de eluyente.

Rendimiento: 452 mg (75% puro por HPLC, 42% de teor.)

LC-MS (procedimiento 5): Tr = 2,38 min; MS (ESIpos): m/z = 397 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-da): 6 = 10,50 (s, 1H), 8,42 (br. s, 1H), 8,21 (s, 1H), 7,43 (s, 1H), 7,33 (s, 1H), 6,87 (s, 1H), 6,07 (br. s, 1H), 4,63 (s, 2H), 3,96 (s, 3H), 3,40 (q, 2H), 2,46 (s, 3H), 1,02 (t, 3H) ppm.

Intermediario 18A

5

10

(4-amino-5,7-dibromopirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-6-il)metanol

NH„

N

N

Br

Una solucion del intermediario 8A (5 g, 30,4 mmoles) en THF (100 ml) se trato con 1,3-dibromo-5,5- dimetilhidantoma (9,58 g, 33,5 mmoles) y se agito a ta durante 2 h. El precipitado se filtro y se seco al vado para dar 6,60 g (64% de teor.) del compuesto del tttulo.

LC-MS (procedimiento 2): Tr = 0,56 min; MS (ESIpos): m/z = 321/323/325 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 6 = 8,23 (br. s, 1H), 7,96 (s, 1H), 6,94 (br. s, 1H), 5,09 (br. s, 1H), 4,43 (s, 2H) ppm. Intermediario 19A

imagen109

(4-amino-5-bromopirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-6-il)metanol

imagen110

Una suspension del intermediario 18A (3,7 g, 11,5 mmoles) en THF (800 ml) se calento bajo agitacion hasta 15 disolucion completa. La mezcla se enfrio posteriormente hasta -78°C, y una solucion 1,6M de n-butilitio en hexanos (20 ml, 32,1 mmoles) se agrego gota a gota. Despues de 5 min, se agrego otra porcion de solucion de n-butillitio 1,6 m (1,5 ml, 2,29 mmoles). La mezcla resultante se agito a -78°C durante 5 min, posteriormente se templo con metanol (5 ml) y se entibio hasta ta. La mezcla de reaccion se diluyo con solucion de cloruro de amonio acuosa saturada, solucion de hidrogeno carbonato de sodio acuosa saturada, solucion de cloruro de sodio acuosa saturada 20 y acetato de etilo. Despues de la separacion de fase, la capa organica se lavo con solucion de cloruro de sodio acuosa saturada. Las fases acuosas combinadas se extrajeron nuevamente con acetato de etilo. Las fases organicas combinadas se lavaron nuevamente con solucion de cloruro de sodio acuosa saturada, se secaron sobre sulfato de magnesio y se evaporaron para dar 2,87 g del producto bruto el cual se uso en etapas subsiguientes sin purificacion posterior.

25 LC-MS (procedimiento 3): Tr = 1,73 min; MS (ESIpos): m/z = 243/245 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 6 = 8,41-7,89 (br. s, 1H), 7,82 (s, 1H), 7,66 (s, 1H), 7,13-6,48 (br. s, 1H), 5,11 (t, 1H), 4,45 (d, 2H) ppm.

Intermediario 20A

[4-amino-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-6-il]metanol

imagen111

Una suspension del intermediary 19A (70% de pureza, 2,52 g, 7,26 mmoles), el intermediary 6A (3,63 g, 10,9 mmoles) y fluoruro de cesio (5,51 g, 36,3 mmoles) en una mezcla de THF/agua (10:1; 80 ml) se desgasifico bajo argon. Se agrego 4-(di-ter-butilfosfino)-W,W-dimetilanilina-dicloropaladio (2:1; 176 mg, 0,248 mmoles) , y la mezcla 5 resultante se desgasifico nuevamente y se agito a 50°C durante 16 h. La mezcla de reaccion posteriormente se lavo con solucion de cloruro de sodio acuosa saturada, y la capa organica se separo, se seco sobre sulfato de magnesio, se filtro y se evaporo. El residuo se suspendio en metanol, y el solido resultante se filtro y se seco al vacfo para dar 1,97 g (90% de pureza, 72% de teor.) del compuesto del tttulo.

LC-MS (procedimiento 2): Tr = 0,85 min; MS (ESIpos): m/z = 340 (M+H)+

10 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 6 = 7,91 (s, 1H), 7,5-8,1 (br. s, 1H), 7,72 (s, 1H), 7,35 (s, 1H), 7,30 (s, 1H), 6,84 (s,

1H), 5,5-6,0 (br. s, 1H), 5,06 (t, 1H), 4,49 (d, 2H), 3,95 (s, 3H), 2,45 (s, 3H) ppm.

5

10

15

20

25

Intermediary 21A

6-(metoximetil)-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-amina

imagen112

(128 |il, 1,76 mmoles) y se agito a ta durante 15 min. Despues de la evaporacion, el residuo se coloco en metanol (12 ml) y se trato con DIPEA (409 |il, 2,35 mmoles). La mezcla se sometio a reflujo durante toda la noche y posteriormente se evaporo nuevamente. La purificacion por cromatograffa de columna sobre gel de sflice (diclorometano/metanol 98:2 ^ 95:5) dio 388 mg (93% de teor.) del compuesto del fftulo.

LC-MS (procedimiento 2): Tr = 1,00 min; MS (ESIpos): m/z = 355 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-da): 6 = 7,93 (s, 1H), 7,82 (s, 1H), 7,35 (s, 1H), 7,31 (s, 1H), 6,84 (s, 1H), 4,38 (s, 2H), 3,95 (s, 3H), 3,22 (s, 3H), 2,45 (s, 3H) ppm.

Intermediario 22A

6-(etoximetil)-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-amina

imagen113

El intermediario 20A (200 mg, 587 |imoles) en diclorometano (5 ml) se trato con cloruro de tionilo (64 |il, 881 imoles) y se agito a ta durante 15 min. Despues de la evaporacion, el residuo se sometio a reflujo en etanol (5 ml) durante 1 h, posteriormente se trato con DIPEA (204 |il, 1,17 mmoles) y se sometio a reflujo nuevamente durante toda la noche. La mezcla de reaccion se evaporo, y el producto bruto se purifico por cromatograffa de columna sobre gel de sflice (diclorometano/metanol 98:2 ^ 95:5) dando 202 mg (90% de teor.) del compuesto del fftulo.

LC-MS (procedimiento 5): Tr = 2,32 min; MS (ESIpos): m/z = 369 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 6 = 8,31-7,59 (br. s, 1H), 7,93 (s, 1H), 7,81 (s, 1H), 7,35 (s, 1H), 7,30 (s, 1H), 6,84 (s, 1H), 6,20-5,50 (br. s, 1H), 4,41 (s, 2H), 3,95 (s, 3H), 3,41 (q, 2H), 2,45 (s, 3H), 1,08 (t, 3H) ppm.

Intermediario 23A

4-{[4-amino-6-(hidroximetil)-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-7-il]metil}piperazin-1-

carboxilato de fer-butilo

imagen114

3

Una solucion del intermediario 20A (9,5 g, 27,9 mmoles) en acido acetico (136,8 ml) se trato con piperazin-1- carboxilato de fer-butilo (6,24 g, 33,49 mmoles) y 37% de solucion de formaldel'ndo acuosa (2,5 ml, 33,49 mmoles).

5 La mezcla se agito a 60°C durante 2,5 h. Despues de la evaporacion, el residuo se coloco en acetato de etilo, y la mezcla se lavo dos veces con solucion de hidrogeno carbonato de sodio acuosa saturada, se seco sobre sulfato de sodio y se evaporo. El residuo se trituro en etanol en ebullicion (100 ml). El solido se filtro y se lavo con etanol y eter dietflico dando 9,70 g (58% de teor.) del compuesto del tttulo.

LC-MS (procedimiento 2): Tr = 0,88 min; MS (ESIpos): m/z = 539 (M+H)+

10 1H-RMN (400 MHz, CDCla): 6 = 7,94 (s, 1H), 7,13-7,35 (m, 2H, superposicion con pico de CHCh ), 6,67 (s, 1H), 5,86

(br. s, 1H), 5,54 (br. s, 2H), 4,68 (s, 2H), 4,08 (s, 2H), 4,00 (s, 3H), 3,45 (br. s, 4H), 2,59-2,48 (m, 7H), 1,45 (s, 9H) ppm.

Intermediario 24A

4-({4-amino-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)-6-[(2-metoxi-2-oxoetoxi)metil]pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-7- il}metil)piperazin-1-carboxilato de fer-butilo

imagen115

3

5 Una solucion del intermediario 23A (300 mg, 556 |imoles) en diclorometano (12 ml) se trato con cloruro de tionilo (81 |il, 1,11 mmoles) y se agito a ta durante 15 min. Despues de la evaporacion, el residuo se disolvio en metilglicolato recien destilado (2,5 ml) y se trato con DIPEA (485 |il, 2,78 mmoles). La mezcla se agito a 70°C durante 2 h, posteriormente se evaporo nuevamente, y metilglicolato en exceso se removio por destilacion. La purificacion del residuo por cromatograffa de columna sobre gel de sflice (ciclohexano/acetato de etilo 1:5) dio 136 10 mg (33% de teor.) del compuesto del tttulo.

LC-MS (procedimiento 2): Tr = 0,88 min; MS (ESIpos): m/z = 611 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-da): 6 = 7,99 (s, 1H), 7,39 (s, 1H), 7,31 (s, 1H), 6,85 (s, 1H), 4,58 (s, 2H), 4,11 (s, 2H), 3,96 (s, 3H), 3,93 (s, 2H), 3,57 (s, 3H), 3,30-3,24 (m, 4H), 2,45-2,38 (m, 7H), 1,39 (s, 9H) ppm.

Intermediario 25A

15 4-{[4-amino-6-formil-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-7-il]metil}piperazin-1-carboxilato de fer-butilo

imagen116

O

Una solucion del intermediario 23A (300 mg, 556 |imoles) en diclorometano (4,2 ml) se trato con Periodinano Dess-

3

Martin (1,1,1-triacetoxi-1,1-dihidro-1,2-benziodoxol-3(1H)-ona; 307 mg, 724 |imoles) y se agito a ta durante 2 h. La mezcla de reaccion se templo con solucion de hidrogeno carbonato de sodio acuosa saturada y solucion de tiosulfato de sodio acuosa saturada (1:1) y se agito a ta durante 30 min. La capa acuosa se extrajo tres veces con diclorometano, y las capas organicas combinadas se secaron sobre sulfato de magnesio y se evaporaron. La 5 purificacion por cromatograffa de columna sobre gel de sflice (ciclohexano/acetato de etilo 1:1 ^ 100% acetato de etilo) dio 273 mg (87% de teor.) del compuesto del tttulo.

LC-MS (procedimiento 2): Tr = 0,87 min; MS (ESIpos): m/z = 537 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-da): 6 = 10,02 (s, 1H), 8,44-8,18 (br. s, 1H), 8,08 (s, 1H), 7,51 (s, 1H), 7,32 (s, 1H), 6,88 (s, 1H), 6,01-5,74 (br. s, 1H), 4,16 (s, 2H), 3,96 (s, 3H), 3,30-3,22 (m, 4H), 2,48-2,40 (m, 7H), 1,38 (s, 9H) ppm.

10 Intermediario 26A

4-amino-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)-7-(piperazin-1-ilmetil)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-6-carbaldel'ndo

bis(formiato)

imagen117

Una solucion del intermediario 23A (80 mg, 148 |imoles) en THF (3,9 ml) se trato con Periodinano Dess-Martin 15 (1,1,1-triacetoxi-1,1-dihidro-1,2-benziodoxol-3(1H)-ona; 94 mg, 222 |imoles) y se agito a ta durante 30 min. La mezcla de reaccion se templo con solucion de hidrogeno carbonato de sodio acuosa saturada y solucion de tiosulfato de sodio acuosa saturada (1:1). La capa acuosa se extrajo tres veces con acetato de etilo, y las capas organicas combinadas se secaron sobre sulfato de magnesio y se evaporaron. El residuo se disolvio en una solucion 4 M de cloruro de hidrogeno en 1,4-dioxano (4 ml) y se agito a ta durante 1 h. Despues de la evaporacion, 20 el residuo se purifico por RP-HPLC preparativa (Reprosil C18, gradiente 10-95% acetonitrilo/0,1% de acido formico acuoso) dando 34 mg (52% de teor.) del compuesto del tttulo.

LC-MS (procedimiento 2): Tr = 0,78 min; MS (ESIpos): m/z = 437 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 6 = 10,02 (s, 1H), 8,29 (br. s, 2H), 8,09 (s, 1H), 7,50 (s, 1H), 7,33 (s, 1H), 6,88 (s, 1H), 4,17 (s, 2H), 3,96 (s, 3H), 2,90-2,81 (m, 4H), 2,63-2,56 (m, 4H), 2,46 (s, 3H) ppm.

25 Intermediario 27A

4-({4-amino-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)-6-[(3-oxopiperazin-1-il)metil]pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-7- il}metil)piperazin-1-carboxilato de fer-butilo

imagen118

3

Una solucion del intermediary 25A (185 mg, 344 |imoles) en THF (4,6 ml) se trato con 2-oxopiperazina (344 mg, 3,4 mmoles), triacetoxiborohidruro de sodio (365 mg, 1,7 mmoles) y acido acetico (39 |il, 689 |imoles). La mezcla resultante se agito a ta durante 2 h, posteriormente se adsorbio sobre kieselguhr y se purifico por cromatograffa de 5 columna sobre gel de sflice (diclorometano ^ diclorometano/metanol 100:8) dando 221 mg (cuant.) del compuesto del tftulo.

LC-MS (procedimiento 4): Tr = 0,77 min; MS (ESIpos): m/z = 621 (M+H)+.

Intermediario 28A

W-etiletanaminio 4-amino-7-{[4-(ter-butoxicarbonil)piperazin-1-il]carbonil}-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2- 10 il)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-6-carboxilato

H3C

\ ,CH:

CH,

N

imagen119

CH

O

CH

CH

O

Una solucion del intermediario 25A (70 mg, 130 |imoles) en THF/agua (10:1, 4,85 ml) se trato con una solucion 2 M de 2-metil-2-buten en THF (521 |il, 1,04 mmoles) y dihidrogenofosfato de sodio (107 mg, 783 |imoles) y se agito a ta durante 5 min. Se agrego clorito de sodio (70 mg, 783 |imoles), y la mezcla resultante se agito a ta durante toda la 15 noche. Despues de diluir con agua, la fase acuosa se extrajo tres veces con acetato de etilo. Las capas organicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio y se evaporaron, y el residuo se purifico por RP-HPLC preparativa (XBridge C18, gradiente 5-50% acetonitrilo/agua + 0,05% dietilamina) dando 18 mg (21% de teor.) del compuesto del tftulo.

LC-MS (procedimiento 1): Tr = 1,14 min; MS (ESIpos): m/z = 567 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-da): inter al. 6 = 8,26-7,89 (br. s, 1H), 7,94 (s, 1H), 7,33 (s, 1H), 7,28 (s, 1H), 6,83 (s, 1H), 5,64-5,33 (br. s, 1H), 3,95 (s, 3H), 2,80 (q, 4H), 2,45 (s, 3H), 1,40 (s, 9H), 1,09 (t, 6H) ppm.

Intermediario 29A

4-{[4-amino-6-(azidometil)-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-7-il]metil}piperazin-1- 5 carboxilato de ter-butilo

Una solucion del intermediario 23A (150 mg, 0,278 mmoles) en diclorometano (7,5 ml) se trato con cloruro de tionilo (40 |il, 0,56 mmoles) y se agito a ta durante 15 min. Despues de la evaporacion, el residuo se disolvio en DMF (6 ml) y se trato con azida de sodio (362 mg, 5,57 mmoles) y yoduro de sodio (208 mg, 1,39 mmoles). La mezcla se 10 calento hasta 80°C durante 1 h, posteriormente se diluyo con agua y se extrajo tres veces con acetato de etilo. Las capas organicas combinadas se lavaron con agua y con solucion de cloruro de sodio acuosa saturada, se secaron sobre sulfato de magnesio y se evaporaron. La purificacion por cromatograffa de columna sobre gel de sflice (ciclohexano/acetato de etilo 98:2 ^ 100% acetato de etilo) dio 95,8 mg (57% de teor.) del compuesto del tttulo.

LC-MS (procedimiento 4): Tr = 0,99 min; MS (ESIpos): m/z = 564 (M+H)+

15 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 8 = 8,20-7,80 (br. s, 1H), 8,01 (s, 1H), 7,39 (s, 1H), 7,33 (s, 1H), 6,86 (s, 1H), 6,05

5,55 (br. s, 1H), 4,50 (s, 2H), 3,96 (s, 3H), 3,94 (s, 2H), 3,32-3,25 (m, 4H), 2,45 (s, 3H), 2,43-2,36 (m, 4H), 1,39 (s, 9H) ppm.

Intermediario 30A

4-{[6-(acetamidometil)-4-amino-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-7-il]metil}piperazin-1- 20 carboxilato de ter-butilo

imagen120

H3C

CH

'3

imagen121

3

Una mezcla del intermediary 29A (320 mg, 567 |imoles), 10% Pd/C (320 mg) y antndrido acetico (106 |il, 1,13 mmoles) en metanol (32 ml) se agito durante 90 min bajo 1 atm de hidrogeno a ta. La mezcla posteriormente se filtro a traves de kieselguhr, y el filtrado se evaporo. La purificacion por cromatograffa de columna sobre gel de sflice 5 (ciclohexano/acetato de etilo 1:1 ^ 100% acetato de etilo) dio 440 mg (cuant.) del compuesto del tttulo.

LC-MS (procedimiento 2): Tr = 0,91 min; MS (ESIpos): m/z = 580 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-da): 6 = 8,02-7,97 (m, 2H), 7,38 (s, 1H), 7,31 (s, 1H), 6,85 (s, 1H), 4,27 (br. d, 2H), 3,95 (s, 3H), 3,89 (s, 2H), 3,31-3,24 (m, 4H), 2,45 (s, 3H), 2,43-2,36 (m, 4H), 1,74 (s, 3H), 1,39 (s, 9H) ppm.

Intermediario 31A

10 7-[(4-acetilpiperazin-1-il)metil]-4-amino-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-6- carbaldetndo

imagen122

3

Una solucion del ejemplo 55 (678 mg, pureza 89%, 1,26 mmoles) en diclorometano (4 ml) que contiene tamices moleculares (4A) se trato con Periodinano Dess-Martin (1,1,1-triacetoxi-1,1-dihidro-1,2-benziodoxol-3(1H)-ona; 623 15 mg, 1,47 mmoles) y se agito a ta durante 5 min. La mezcla de reaccion posteriormente se adsorbio sobre tierra de diatomea y se purifico por cromatograffa de columna sobre gel de sflice (gradiente de 30-100% de acetato de etilo/ciclohexano, posteriormente 0-10% de metanol/diclorometano) dando 449 mg (49% de teor.) del compuesto del tftulo.

LC-MS (procedimiento 4): Tr = 0,70 min; MS (ESIpos): m/z = 479 (M+H)+.

Intermediary 32A

4-{[4-amino-6-(azidometil)-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-7-il]metil}piperazin-2-ona

imagen123

Una solucion del ejemplo 13 (59 mg, 130 |imoles) en diclorometano (3,5 ml) se trato con cloruro de tionilo (19 |il, 5 261 |imoles) y se agito a ta durante 15 min. Despues de la evaporacion, el residuo se disolvio en DMF (2,8 ml) y se

trato con yoduro de sodio (97 mg, 652 |imoles) y azida de sodio (169 mg, 2,6 mmoles). La mezcla se agito a 80°C durante 1 h. Despues de diluir con solucion de cloruro de sodio acuosa saturada, la fase acuosa se extrajo cuatro veces con acetato de etilo, y las capas organicas combinadas se secaron sobre sulfato de magnesio y se evaporaron. La purificacion por cromatograffa de columna sobre gel de sflice (diclorometano/metanol 98:2 ^ 90:10) 10 dio 35 mg (56% de teor.) del compuesto del tttulo.

LC-MS (procedimiento 5): Tr = 2,04 min; MS (ESIpos): m/z = 478 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 6 = 8,02 (s, 1H), 7,75 (br. s, 1H), 7,41 (s, 1H), 7,33 (s, 1H), 6,86 (s, 1H), 4,51 (s, 2H), 4,01 (s, 2H), 3,96 (s, 3H), 3,16-3,08 (m, 2H), 3,04-2,98 (m, 2H), 2,65-2,58 (m, 2H), 2,45 (s, 3H) ppm.

Intermediario 33A

15

4-amino-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)-7-(morfolin-4-ilmetil)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-6-carbaldel'ndo

imagen124

Una solucion del ejemplo 50 (710 mg, pureza 70%, 1,13 mmoles) en diclorometano (5 ml) que contiene tamices moleculares (4A) se trato con Periodinano Dess-Martin (1,1,1-triacetoxi-1,1-dihidro-1,2-benziodoxol-3(1H)-ona; 623 mg, 1,47 mmoles) y se agito a ta durante 5 min. La mezcla de reaccion posteriormente se adsorbio sobre tierra de 20 diatomea y se purifico por cromatograffa de columna sobre gel de sflice (gradiente de 30-100% acetato de etilo/ciclohexano) dando 386 mg (72% de teor.) del compuesto del tttulo.

5

10

15

20

25

30

LC-MS (procedimiento 2): Tr = 0,76 min; MS (ESIpos): m/z = 438 (M+H)+. Intermediary 34A

(4-amino-7-bromopirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-6-il)metanol

imagen125

Una solucion de 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoma (87 mg, 0,305 mmoles) en THF (1 ml) se agrego gota a gota a una solucion del intermediary 8A (100 mg, 0,609 mmoles) en THF (4 ml) y metanol (2 ml) a -78°C. La mezcla se agito a -78°C durante 16 h, posteriormente se diluyo con agua y se extrajo con acetato de etilo. Las capas organicas combinadas se lavaron con solucion de cloruro de sodio acuosa saturada, se secaron sobre sulfato de magnesio y se evaporaron. La purificacion por cromatograffa de columna sobre gel de sflice (diclorometano/metanol 20:1 ^ 10:1) dio 55 mg (32% de teor.) del compuesto del tttulo.

LC-MS (procedimiento 3): Tr = 1,71 min; MS (ESIpos): m/z = 243/245 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-da): 6 = 7,74-7,94 (m, 3H), 7,04 (s, 1H), 5,12 (t, 1H), 4,48 (d, 2H) ppm.

Intermediario 35A

7-bromo-6-({[fer-butil(dimetil)silil]oxi}metil)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-amina

imagen126

CH3 CH

O—Si—{- ' I \

Ch ch

3

CH

3

3

Una solucion del intermediario 34A (885 mg, 3,64 mmoles) en DMF (11 ml) se trato con ter-butildimetilsilil cloruro (823 mg, 5,46 mmoles) e imidazol (743 mg, 10,92 mmoles) y se agito a ta durante 2 h. La mezcla de reaccion se combino con la mezcla de reaccion de una serie analftica de 100 mg, se diluyo con agua y se extrajo dos veces con acetato de etilo. Las fases organicas combinadas se lavaron con agua y solucion de cloruro de sodio acuosa saturada, se secaron sobre sulfato de magnesio y se evaporaron. La purificacion por cromatograffa de columna sobre gel de sflice (ciclohexano/acetato de etilo 2:1 ^ 100% acetato de etilo) dio 1,36 g (93% de teor.) del compuesto del tttulo.

LC-MS (procedimiento 2): Tr = 1,13 min; MS (ESIpos): m/z = 357/359 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 6 = 7,98-7,68 (m, 3H), 7,04 (s, 1H), 4,68 (s, 2H), 0,89 (s, 9H), 0,09 (s, 6H) ppm. Intermediario 36A

4-amino-6-({[ter-butil(dimetil)silil]oxi}metil)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-7-carbonitrilo

imagen127

CH

I 3

I

CH

CH

^-CH

CH3

3

Bajo argon, una mezcla del intermediario 35A (880 mg, 2,46 mmoles), complejo [1,1'-bis(difenilfosfino)- ferroceno]dicloropaladio(M)-diclorometano [PdCh(dppf) x DCM] (120 mg, 0,148 mmoles),

bis(dibencilidenacetona)paladio [Pd(dba)2] (135 mg, 0,148 mmoles), cianuro de zinc (578 mg, 4,92 mmoles), polvo

de zinc (64 mg, 0,985 mmoles) y acetato de zinc (180 mg, 0,985 mmoles) en DMF desgasificado/agua (100:1, 9,2 ml) se agito a 160°C durante toda la noche. La mezcla de reaccion posteriormente se combino con la mezcla de reaccion de una serie analftica de 100 mg, y las mezclas combinadas se adsorbieron sobre kieselguhr, se filtro sobre otra capa de kieselguhr y eluyo con ter-butil metil eter. El filtrado se lavo con solucion de hidrogeno carbonato 5 de sodio acuosa saturada, y la capa acuosa se extrajo nuevamente tres veces con ter-butil metil eter. Las fases organicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio y se evaporaron. La purificacion por cromatografta de columna sobre gel de sflice (ciclohexano/acetato de etilo 1:1) dio 453 mg (44% de teor.) del compuesto del tftulo.

LC-MS (procedimiento 2): Tr = 1,09 min; MS (ESIpos): m/z = 304 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-da): 6 = 8,22-8,35 (m, 2H), 8,06 (s, 1H), 6,95 (s, 1H), 4,83 (s, 2H), 0,91 (s, 9H), 0,11 (s, 10 6H) ppm.

Intermediario 37A

4-amino-5-bromo-6-({[ter-butil(dimetil)silil]oxi}metil)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-7-carbonitrilo

imagen128

CN

CH

I

O—Si

/ I

CH

ch

^-CH

CH3

3

Una solucion de 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoma (621 mg, 2,17 mmoles) en THF (20 ml) se agrego gota a gota a 15 una solucion del intermediario 36A (1,1 g, 3,62 mmoles) en THF (80 ml) a -50°C. La mezcla resultante se entibio lentamente hasta ta, se agito durante 2 h y posteriormente se templo con 10% de solucion de tiosulfato de sodio acuoso y solucion de hidrogeno carbonato de sodio acuosa saturada. La fase acuosa se extrajo tres veces con acetato de etilo. Un precipitado solido de la solucion de acetato de etilo se filtro y se lavo con acetato de etilo, dando 508 mg (100% de pureza, 36% de teor.) en forma de un primer cultivo del compuesto del tftulo. El filtrado restante 20 se seco sobre sulfato de sodio y se evaporaron. El residuo se precipito a partir de DMSO y se lavo con DMSO y acetato de etilo dando otros 498 mg (85% de pureza, 26% de teor.) del compuesto del tftulo.

LC-MS (procedimiento 5): Tr = 2,70 min; MS (ESIpos): m/z = 382/384 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 6 = 8,10 (s, 1H), 4,76 (s, 2H), 0,90 (s, 9H), 0,12 (s, 6H) ppm.

Intermediario 38A

25 4-amino-6-({[ter-butil(dimetil)silil]oxi}metil)-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-7-

carbonitrilo

imagen129

3

Bajo argon, una solucion del intermediario 37A (459 mg, 1,29 mmoles) en THF desgasificado (14,8 ml) se agrego a (2'-aminobifenil-2-il)(cloro)paladio-diciclohexil(2',4',6'-triisopropilbifenil-2-il)fosfina (1:1; 152 mg, 0,19 mmoles; vease 30 S. L. Buchwald et al., J. Am. Chem. Soc. 132 (40), 14073-14075 (2010)) y el intermediario 6A (647 mg, 1,94 mmoles). La solucion de fosfato de potasio 0,5 M desgasificado (5,1 ml) se agrego gota a gota, y la mezcla resultante se agito a 60°C durante 2 h. La mezcla de reaccion posteriormente se combino con las mezclas de reaccion de las anteriores series analfticas de 70 mg, 90 mg y 500 mg y se evaporaron. La purificacion del residuo

por cromatograffa de columna sobre gel de s^lice (ciclohexano/acetato de etilo 3:1 ^ 100% acetato de etilo) dio 1,0 g (58% de teor.) del compuesto del tttulo.

LC-MS (procedimiento 2): Tr = 1,49 min; MS (ESIpos): m/z = 480 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-da): 6 = 8,57-8,35 (br. s, 1H), 8,18 (s, 1H), 7,41 (s, 1H), 7,30 (s, 1H), 6,86 (s, 1H), 6,285 6,03 (br. s, 1H), 4,74 (s, 2H), 3,95 (s, 3H), 2,44 (s, 3H), 0,83 (s, 9H), 0,00 (s, 6H) ppm.

Intermediario 39A

4-amino-6-formil-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-7-carbonitrilo

imagen130

Una solucion del ejemplo 68 (250 mg, 0,684 mmoles) en diclorometano (5 ml) se trato con periodinano Dess-Martin 10 (1,1,1-triacetoxi-1,1-dihidro-1,2-benziodoxol-3(1H)-ona; 377 mg, 0,889 mmoles) y se agito a ta durante 1 h. La mezcla de reaccion se combino con la mezcla de reaccion de una serie analttica de 50 mg, se templo con solucion de hidrogeno carbonato de sodio acuosa saturada y solucion de tiosulfato de sodio acuosa saturada (1:1) y se agito a ta durante 30 min. La fase acuosa se extrajo tres veces con acetato de etilo, y las fases organicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio y se evaporaron. La purificacion por cromatograffa de columna sobre gel de sflice 15 (ciclohexano/25% acetato de etilo ^ 100% acetato de etilo) dio 102 mg (24% de teor.) del compuesto del tttulo.

LC-MS (procedimiento 2): Tr = 1,02 min; MS (ESIpos): m/z = 364 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 6 = 9,86 (s, 1H), 8,78 (br. s, 1H), 8,30 (s, 1H), 7,62 (s, 1H), 7,36 (s, 1H), 6,91 (s, 1H), 6,51 (br. s, 1H), 3,97 (s, 3H), 2,46 (s, 3H) ppm.

Intermediario 40A

20

4-amino-6-(azidometil)-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-7-carbonitrilo

imagen131

Una solucion del ejemplo 68 (100 mg, 273 |imoles) en diclorometano (5 ml) se trato con cloruro de tionilo (39 |il, 547 imoles) y se agito a ta durante 15 min. Despues de la evaporacion, el residuo se disolvio en DMF (6 ml) y se trato con yoduro de sodio (205 mg, 1,36 mmoles) y azida de sodio (355 mg, 5,47 mmoles). La mezcla se agito a 80°C 25 durante toda la noche, posteriormente se diluyo con agua y se extrajo tres veces con acetato de etilo. Las capas

5

10

15

20

25

30

organicas combinadas se lavaron con agua, seguido de solucion de cloruro de sodio acuosa saturada, se secaron sobre sulfato de sodio y se evaporaron dando 91 mg del producto bruto el cual se uso en el proximo paso sin purificacion posterior.

LC-MS (procedimiento 2): Tr = 1,13 min; MS (ESIpos): m/z = 391 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-da): d = 8,65-8,45 (br. s, 1H), 8,23 (s, 1H), 7,46 (s, 1H), 7,34 (s, 1H), 6,88 (s, 1H), 6,416,10 (br. s, 1H), 4,57 (s, 2H), 3,96 (s, 3H), 2,46 (s, 3H) ppm.

Intermediario 41A

5,7-dibromo-6-({[fer-butil(dimetil)silil]oxi}metil)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-amina

NHL

2 Br

N

imagen132

N^^A iH3/CH3

Br

\ I /

O“?K

CH

CH CH3

Una solucion del intermediario 18A (2 g, 6,21 mmoles) en DMF (20 ml) se trato con imidazol (846 mg, 12,4 mmoles) y fer-butildimetilsilil cloruro (1,12 g, 7,45 mmoles) y se agito a ta durante 20 h. La mezcla de reaccion posteriormente se diluyo con agua (200 ml) y se agito a ta durante otros 2 h. La filtracion del solido dio 2,46 g (88% de teor.) del compuesto del tttulo.

LC-MS (procedimiento 2): Tr = 1,37 min; MS (ESIpos): m/z = 437 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 8 = 8,49-8,05 (br. s, 1H), 7,96 (s, 1H), 7,15-6,76 (br. s, 1H), 4,64 (s, 2H), 0,87 (s, 9H), 0,09 (s, 6H) ppm.

Intermediario 42A

2-[4-amino-5-bromo-6-({[fer-butil(dimetil)silil]oxi}metil)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-7-il]propan-2-ol

imagen133

3

Bajo argon, una solucion del intermediario 41A (1 g, 2,29 mmoles) en THF (40 ml) se enfrio hasta -78°C y se trato con una solucion 1,6M de metillitio en eter dietflico (1,5 ml, 2,40 mmoles). Despues de agitar durante 10 min a - 78°C, se agrego una solucion 1,6M de n-butilitio en hexanos (1,58 ml, 2,52 mmoles), y se continuo con la agitacion durante 10 min. Se agrego acetona (1,68 ml, 22,92 mmoles), y la mezcla resultante se entibio lentamente hasta ta y se agito a ta durante 18 h. La reaccion posteriormente se templo con agua, y la fase acuosa se extrajo dos veces con acetato de etilo. Las fases organicas combinadas se lavaron con solucion de cloruro de sodio acuosa saturada, se secaron sobre sulfato de magnesio y se evaporaron. La purificacion por cromatograffa flash sobre gel de sflice (ciclohexano/acetato de etilo 2:1) dio 306 mg (30% de teor.) del compuesto del tttulo.

LC-MS (procedimiento 4): Tr = 1,39 min; MS (ESIpos): m/z = 415/417 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 8 = 8,23-7,85 (br. s, 1H), 7,89 (s, 1H), 7,05-6,82 (br. s, 1H), 5,49 (s, 1H), 4,88 (s, 2H), 1,66 (s, 6H), 0,87 (s, 9H), 0,08 (s, 6H) ppm.

Intermediario 43A

imagen134

Una solucion del intermediary 42A (304 mg, 0,732 mmoles) en THF (15 ml) se trato con una solucion 1M de fluoruro de tetra-n-butilamonio en THF (768 |il, 768 |imoles) y se agito a ta durante 2 min. La mezcla de reaccion se diluyo con acetonitrilo (20 ml), posteriormente se evaporo, y el residuo se purifico por RP-HPLC preparativa 5 (Reprosil C18, gradiente 10-30% acetonitrilo/0,2% TFA ac.). El producto obtenido de este modo se disolvio en metanol y se filtro a traves de un cartucho de intercambio anionico (Stratospheres SPE, PL-HCO3 MP-resina). El cartucho se eluyo con metanol, y el filtrado se evaporo dando 180 mg (67% de teor.) del compuesto del tttulo.

LC-MS (procedimiento 2): Tr = 0,55 min; MS (ESIpos): m/z = 301/303 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-da): 8 = 8,21-7,90 (m, 1H), 7,87 (s, 1H), 7,09-6,60 (br. s, 1H), 5,90 (br. s, 1H), 5,03 (br. s, 10 1H), 4,63 (s, 2H), 1,66 (s, 6H) ppm.

Intermediario 44A

4-amino-7-(2-hidroxipropan-2-il)-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-6-carbaldel'ndo

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Una solucion del ejemplo 73 (135 mg, pureza 89%, 302 pmoles) en diclorometano (7 ml) se trato con Periodinano 15 Dess-Martin (1,1,1-triacetoxi-1,1-dihidro-1,2-benziodoxol-3(1H)-ona; 166 mg, 392 pmoles) y se agito a ta durante 70 min. La mezcla de reaccion se combino con la mezcla de reaccion de una serie analftica de 18 mg (45 pmoles) y se templo con solucion de hidrogeno carbonato de sodio acuosa saturada y solucion de tiosulfato de sodio acuosa saturada (1:1). La fase acuosa se extrajo tres veces con diclorometano. Las fases organicas combinadas se lavaron con solucion de cloruro de sodio acuosa saturada, se secaron sobre sulfato de magnesio y se evaporaron dando 20 143 mg (pureza 77%, 92% de teor.) del compuesto del tttulo.

LC-MS (procedimiento 2): Tr = 1,08 min; MS (ESIpos): m/z = 397 (M+H)+.

Intermediario 45A

6-({[fer-butil(dimetil)silil]oxi}metil)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-amina

5

10

15

20

25

30

NH

N

imagen136

CH3 CH

I / 3

O—Si—(—CH

/ Ch CH

3

3

Una solucion de 1,5 g (9,14 mmoles) del intermediary 8A en 15 ml DMF seco se trato con 1,65 g (10,96 mmoles) fer-butildimetilsilil cloruro y 1,24 g (18,27 mmoles) imidazol y se agito a ta durante toda la noche. La mezcla de reaccion se vertio en 250 ml agua y se agito durante 5 min. El precipitado resultante se filtro y se seco al vado a 45°C. Rendimiento: 2,28 g (90% de teor.).

LC-MS (procedimiento 5): Tr = 2,12 min; MS (ESIpos): m/z = 279 (M+H)+.

Intermediario 46A

6-({[fer-Butil(dimetil)silil]oxi}metil)-7-cloropirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-amina

imagen137

3

Una solucion de 2 g (7,18 mmoles) del intermediario 45A en 20 ml de THF se trato con 893 mg (6,47 mmoles) N- clorosuccinimida en 6 porciones durante 60 min a -10°C. Se continuo con la agitacion durante 15 min a -10°C, posteriormente la mezcla se dejo entibiar hasta ta. Otros 192 mg (1,44 mmoles) N-clorosuccinimida se agregaron a ta, y se continuo con la agitacion durante toda la noche. Aproximadamente un decimo de la mezcla de reaccion se evaporo hasta sequedad, y el residuo se purifico por RP-HPLC preparativa (Reprosil C18, gradiente 10-95% acetonitrilo/0,1% de acido formico acuoso) dando 94 mg (4% de teor.) del compuesto del tftulo. La mayor parte de la mezcla de reaccion se adsorbio sobre gel de sflice y se sometio a cromatograffa sobre gel de sflice con isohexano/acetato de etilo 5-66% como eluyente, dando 899 mg (40% de teor.) del compuesto del tftulo. Total rendimiento: 993 mg (44% de teor.).

LC-MS (procedimiento 5): Tr = 2,45 min; MS (ESIpos): m/z = 313 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 8 = 7,69-8,04 (m, 3H), 7,0 (s, 1H), 4,70 (s, 2H), 0,88 (s, 9H), 0,08 (s, 6H) ppm. Intermediario 47A

5-Bromo-6-({[fer-butil(dimetil)silil]oxi}metil)-7-cloropirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-amina

imagen138

3

Una solucion de 890 mg (2,85 mmoles) del intermediario 46A en 20 ml DMF se trato con 506 mg (2,85 mmoles) N- bromosuccinimida en porciones durante 1 h a -10°C. Se continuo con la agitacion durante 3 h a -10°C y posteriormente durante toda la noche a ta. Se agrego agua (200 ml) , y la mezcla se agito durante 2 h. El solido precipitado se filtro, se lavo con agua y se seco al vado a 45°C. Rendimiento: 997 mg (89% de teor.).

LC-MS (procedimiento 5): Tr = 2,82 min; MS (ESIpos): m/z = 391/393/395 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 8 = 8,32 (br. s, 1H), 7,97 (s, 1H), 6,97 (br. s, 1H), 4,66 (s, 2H), 0,87 (s, 9H), 0,09 (s, 6H) ppm.

Intermediario 48A

5

10

15

20

25

30

imagen139

3

Bajo una atmosfera de argon, un matraz se cargo con 800 mg (2,04 mmoles) del intermediario 47A, 680 mg (2,04 mmoles) del intermediario 6A, 80 mg (0,1 mmoles) (2'-aminobifenil-2-il)(cloro)paladio-diciclohexil(2',4',6'- triisopropilbifenil-2-il)fosfina (1:1; vease S. L. Buchwald et al., J. Am. Chem. Soc. 132 (40), 14073-14075 (2010)) y 1,3 g (6,13 mmoles) fosfato de potasio. Posteriormente, 30 ml de una mezcla de 1,4-dioxano/agua desgasificada (5:1) se agregaron, y la solucion se agito a 70°C durante 1 h. Otros 680 mg (2,04 mmoles) del intermediario 6A y 32 mg (0,04 mmoles) (2'-aminobifenil-2-il)(cloro)paladio-diciclohexil(2',4',6'-triisopropilbifenil-2-il)fosfina (1:1) se agregaron, y la agitacion a 70°C continuo durante 1 h. Este procedimiento se repitio tres veces hasta que el material de partida se consumio (control por LC-MS). Con la ultima porcion de reactivos, ademas se agregaron 1,6 ml de solucion 5 M de hidroxido de sodio ac. para obtener un valor de pH de 8-9. Al final del penodo de reaccion, se agregaron 30 ml agua y 5 M acido formico acuoso (pH 3-4) al cabo de lo cual se separo un aceite. Una parte de este aceite se purifico por RP-HPLC preparativa (Reprosil C18, gradiente 10-95% acetonitrilo/0,1% de acido formico acuoso). Se obtuvieron dos fracciones del compuesto del tttulo: 103 mg de un solido (89% de pureza por LC-MS, 9% de teor.), y 23 mg de un solido (100% de pureza por LC-MS, 2% de teor.). El resto del aceite y el sobrenadante se diluyeron con agua, se ajusto hasta pH 8-9 con solucion de hidrogeno carbonato de sodio acuosa saturada y se extrajo tres veces con diclorometano. Las fases organicas combinadas se lavaron con agua, se secaron y se evaporaron a presion reducida, dando 2,1 g de un aceite. Este material se purifico por cromatograffa de columna sobre gel de sflice con diclorometano/0-5% metanol como eluyente para dar otros 709 mg (43% de pureza por LC- MS, 31% de teor.) del compuesto del tftulo. Total rendimiento: 42% de teor.

LC-MS (procedimiento 2): Tr = 1,57 min; MS (ESIpos): m/z = 489 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 8 = 8,08 (s, 1H), 7,43 (s, 1H), 7,32 (s, 1H), 6,88 (s, 1H), 4,66 (s, 2H), 3,98 (s, 3H), 2,47 (s, 3H), 0,84 (s, 9H), -0,03 (s, 6H) ppm.

Intermediario 49A

4-amino-7-cloro-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-6-carbaldel'ndo

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A una suspension de 166 mg (0,44 mmoles) del ejemplo 79 y tamices moleculares (3A) en 3 ml de diclorometano se agregaron 207 mg (0,49 mmoles) periodinano Dess-Martin (1,1,1-triacetoxi-1,1-dihidro-1,2-benziodoxol-3(1H)-ona) a 0-5°C. La mezcla se agito durante 10 min a esta temperatura, posteriormente otros se agregaron 56 mg (0,13 mmoles) Periodinano Dess-Martin, y se continuo con la agitacion durante 15 min a 5°C y 10 min a temperatura

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ambiente. Despues de esto, la mezcla se adsorbio sobre tierra de diatomea y se purifico por cromatograffa de columna sobre gel de sflice con diclorometano/ 0-10% metanol como eluyente. Rendimiento: 100 mg de un solido (92,7% puro por LC-MS, 56% de teor.).

LC-MS (procedimiento 2): Tr = 1,08 min; MS (ESIpos): m/z = 373 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-da): 8 = 9,90 (s, 1H), 8,46 (br. s, 1H), 8,15 (s, 1H), 7,54 (s, 1H), 7,34 (s, 1H), 6,89 (s, 1H), 6,07 (br. s, 1H), 3,96 (s, 3H), 2,46 (s, 3H) ppm.

Intermediario 50A

7-cloro-6-(clorometil)-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-amina

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El compuesto del tttulo se aislo en forma de subproducto en la preparacion del ejemplo 79 (vease a continuacion). Rendimiento: 9,2 mg (10% de teor.).

LC-MS (procedimiento 3): Tr = 2,98 min; MS (ESIpos): m/z = 393/395 (M+H)+.

Intermediario 51A

6-({[fer-butil(dimetil)silil]oxi}metil)-7-metilpirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-amina

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3

A una solucion de 3 g (8,4 mmoles) del intermediario 35A en 60 ml 1,4-dioxano bajo una atmosfera de argon se agregaron 171 mg (0,21 mmoles) de PdCh(dppf) x DCM y posteriormente gota a gota durante 10 min 16,8 ml de una solucion 2 M de dimetilzinc en tolueno (causando un incremento en la temperatura desde 22°C hasta 31°C). Se continuo con la agitacion primero durante 10 min a temperatura ambiente, posteriormente durante 13 h a 90°C. Despues de esto, se agrego agua (10 ml) a la mezcla de reaccion a ta, y la suspension se agito durante 1 h. La mezcla se evaporo a presion reducida, y el residuo se coloco en agua y acetato de etilo y se agito durante 1 hora mas. El precipitado se filtro y se descarto, las fases se separaron, y la capa acuosa se extrajo dos veces con acetato de etilo. Las fases organicas combinadas se secaron y se evaporaron dando 2,45 g (92% de pureza por LC- MS, 92% de teor.) del compuesto del tttulo.

LC-MS (procedimiento 5): Tr = 2,18 min; MS (ESIpos): m/z = 293 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 8 = 7,98-7,78 (m, 3H), 7,04 (s, 1H), 4,68 (s, 2H), 0,89 (s, 9H), 0,09 (s, 6H) ppm. Intermediario 52A

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Procedimiento 1:

A una solucion de 100 mg (0,28 mmoles) del intermediario 35A en 2 ml 1,4-dioxano bajo una atmosfera de argon se agregaron 6 mg (0,01 mmoles) de PdCh(dppf) x DCM y posteriormente gota a gota durante 10 min 0,56 ml de una solucion 2 M de dimetilzinc en tolueno. La mezcla se agito a 90°C durante toda la noche, posteriormente se evaporo, y el residuo se trato con acetonitrilo y 5 M acido formico acuoso. El precipitado se filtro, el filtrado se evaporo, y el residuo se coloco en DMSO/acetonitrilo y se purifico por RP-HPLC preparativa (Reprosil C18, gradiente 10-95% acetonitrilo/0,1% de acido formico acuoso). Rendimiento: 33 mg (66% de teor.).

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 8 = 7,79 (s, 1H), 7,47 (br. s, 2H), 6,80 (s, 1H), 4,84 (t, 1H), 4,49 (d, 2H), 2,36 (s, 3H) ppm.

Procedimiento 2:

Bajo una atmosfera de argon, un recipiente de reaccion de microondas se cargo con 750 mg (3,1 mmoles) del intermediario 34A, 515 pl (3,7 mmoles) trimetilboroxina, 786 mg (3,7 mmoles) fosfato de potasio y 73 mg (0,09 mmoles) (2'-aminobifenil-2-il)(cloro)paladio-diciclohexil(2',4',6'-triisopropilbifenil-2-il)fosfina (1:1; vease S. L. Buch- wald et al., J. Am. Chem. Soc. 132 (40), 14073-14075 (2010)). Posteriormente, 13 ml de una mezcla de 1,4- dioxano/agua desgasificada (5:1) se agregaron, el recipiente se cerro, y la mezcla se calento hasta 140°C durante 20 min en las microondas (4 bar, 50wat). Otros 50 mg (2'-aminobifenil-2-il)(cloro)paladio-diciclohexil(2',4',6'- triisopropilbifenil-2-il)fosfina (1:1) se agregaron, y la mezcla se calento nuevamente hasta 140°C durante 20 min en las microondas. Se agrego otra porcion de 515 pl de trimetilboroxina, y el recipiente se calento nuevamente hasta 140°C durante 20 min. Este ultimo procedimiento se repitio dos veces mas con penodos de calentamiento de 30 min cada uno hasta que la LC-MS mostro que solo quedaron pequenas cantidades del material de partida. La mezcla se filtro sobre kieselguhr, se lavo con 1,4-dioxano, y los filtrados combinados se evaporaron hasta sequedad. Este residuo se combino con una serie analttica de 100 mg anterior y se purifico por RP-HPLC preparativa (XBridge C18, gradiente 5-42% acetonitrilo/0,05% solucion de hidroxido de amonio ac.). Rendimiento: 238 mg (38% de teor.).

LC-MS (procedimiento 5): Tr = 0,51 min; MS (ESIneg): m/z = 177 (M-H)~

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 8 = 7,79 (s, 1H), 7,48 (br. s, 2H), 6,80 (s, 1H), 4,84 (t, 1H), 4,49 (d, 2H), 2,36 (s, 3H) ppm.

Intermediario 53A

(4-amino-5-bromo-7-metilpirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-6-il)metanol

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Una solucion de 245 mg (1,38 mmoles) del intermediario 52A en 8,8 ml DMF se trato con 288 mg (1,62 mmoles) N- bromosuccinimida en porciones durante 2 h a -10°C. Se continuo con la agitacion a -10°C durante 30 min y posteriormente durante 2 h a temperatura ambiente. La mezcla se vertio en 50 ml agua y se extrajo con acetato de etilo. Las fases organicas combinadas se secaron y se evaporaron. El residuo se cromatografio flash sobre gel de sflice con diclorometano/0-15% metanol como eluyente. Rendimiento: 148 mg (42% de teor.).

LC-MS (procedimiento 4): Tr = 0,42 min; MS (ESIpos): m/z = 257/259 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 8 = 7,85 (s, 1H), 6,14-8,22 (ancho, 2H), 4,88 (t, 1H), 4,45 (d, 2H), 2,43 (s, 3H) ppm. Intermediario 54A

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A una suspension de 175 mg (0,49 mmoles) del ejemplo 75 y tamices moleculares (3A) en 3,5 ml diclorometano se agregaron 230 mg (0,54 mmoles) Periodinano Dess-Martin (1,1,1-triacetoxi-1,1-dihidro-1,2-benziodoxol-3(1H)-ona) 5 a 0-5°C. La mezcla se agito durante 5 min a esta temperatura, seguido de 30 min a ta. Despues de esto, la mezcla se adsorbio sobre tierra de diatomea y se purifico por cromatograffa flash sobre gel de sflice con isohexano/10- 100% acetato de etilo como eluyente. Rendimiento: 139 mg de un solido (79% de teor.).

LC-MS (procedimiento 5): Tr = 2,34 min; MS (ESIpos): m/z = 353 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-da): 8 = 9,93 (s, 1H), 8,06 (s, 1H), 7,50 (s, 1H), 7,33 (s, 1H), 6,88 (s, 1H), 3,96 (s, 3H), 10 2,71 (s, 3H), 2,46 (s, 3H) ppm.

Intermediario 55A

fer-butilo 4-[(4-amino-6-metilpirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-7-il)metil]piperazin-1-carboxilato

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Una solucion de 6-metilpirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-amina (500 mg, 3,3 mmoles; preparacion descripta en Solicitud 15 de Patente Internacional PCT wO 2007/056170) en acido acetico (8 ml) se trato con 37% de solucion de formaldetndo acuosa (328 |il, 4,04 mmoles) y piperazin-1-carboxilato de fer-butilo (754 mg, 4,04 mmoles). La mezcla se agito a 60°C durante toda la noche. Despues de la evaporacion, el residuo se coloco en acetato de etilo y se lavo con solucion de hidrogeno carbonato de sodio acuosa saturada. La capa acuosa se extrajo dos veces con acetato de etilo. Las fases organicas combinadas se secaron sobre sulfato de magnesio y se evaporaron dando 1,2 20 g del producto bruto el cual se uso en el proximo paso sin purificacion posterior.

LC-MS (procedimiento 2): Tr = 0,56 min; MS (ESIpos): m/z = 347 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 8 = 7,79 (s, 1H), 7,51 (br. s, 2H), 6,67 (s, 1H), 3,76 (br. s, 2H), 3,29-3,17 (m, 4H), 2,36-2,29 (m, 4H), 2,22 (s, 3H), 1,37 (s, 9H) ppm.

Intermediario 56A

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Una solucion del intermediary 55A (1,17 g, 3,37 mmoles) en THF (20 ml) se enfrio hasta -60°C y se trato con 1,3- dibromo-5,5-dimetilhidantoma (5,78 mg, 2,02 mmoles). La mezcla se agito durante 4 h a -60°C hasta -20°C. Despues de esto, la mezcla de reaccion se templo con 10% de solucion de tiosulfato de sodio acuoso. La mayona 5 del solvente THF se evaporo al cabo de lo cual un solido precipito. La filtracion y recristalizacion a partir de acetona dio 862 mg (59% de teor.) del compuesto del tttulo.

LC-MS (procedimiento 2): Tr = 0,66 min; MS (ESIpos): m/z = 425/427 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-da): 8 = 8,29-7,62 (br. s, 1H), 7,85 (s, 1H), 7,17-6,44 (br. s, 1H), 3,80 (s, 2H), 3,29-3,22 (m, 4H), 2,37-2,27 (m, 4H), 2,16 (s, 3H), 1,37 (s, 9H) ppm.

10 Intermediario 57A

4-{[4-amino-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)-6-metilpirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-7-il]metil}piperazin-1-carboxilato de fer-butilo

imagen148

3

Una solucion del intermediario 56A (100 mg, 235 |imoles) en 1,4-dioxano desgasificado (3 ml) se trato con 15 Intermediario 6A (93 mg, 282 |imoles), diciclohexil(2',6'-dimetoxibifenil-2-il)fosfina (S-Phos; 9,6 mg, 23 |imoles) y paladio diacetato (2,6 mg, 11 |imoles). Se agrego solucion de fosfato de potasio ac. 3 M desgasificado (588 |il), y la mezcla resultante se agito a 60°C durante 1 h. Se agrego otra porcion del intermediario 6A (78 mg, 235 |imoles), y la agitacion a 60°C continuo durante toda la noche. La mezcla de reaccion se templo con solucion de hidroxido de sodio 2 M ac., y la fase acuosa se extrajo con acetato de etilo. Las fases organicas combinadas se lavaron con 20 solucion de cloruro de sodio acuosa saturada, se secaron sobre sulfato de magnesio y se evaporaron. La purificacion por cromatograffa de columna sobre gel de sflice (ciclohexano/acetato de etilo 3:2) dio 82 mg (62% de teor.) del compuesto del tttulo.

LC-MS (procedimiento 2): Tr = 0,97 min; MS (ESIpos): m/z = 523 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 8 = 7,94 (s, 1H), 7,34 (s, 1H), 7,30 (s, 1H), 6,84 (s, 1H), 3,95 (s, 3H), 3,84 (s, 2H), 25 3,30-3,23 (m, 4H, superposicion con pico de agua), 2,45 (s, 3H), 2,42-2,33 (m, 4h), 2,19 (s, 3H), 1,39 (s, 9H) ppm.

Intermediary 58A

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Siguiendo el procedimiento del intermediario 55A, 4 g (23,7 mmoles) 6-cloropirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-amina 5 (preparacion descripta en Solicitud de Patente Internacional PCT WO 2007/064883) se hicieron reaccionar para dar 11,2 g del compuesto del tttulo como material bruto, el cual se uso en el proximo paso sin purificacion posterior.

LC-MS (procedimiento 5): Tr = 0,74 min; MS (ESIpos): m/z = 367 (M+H)+

Una muestra de 67 mg de la correspondiente sal formiato, formiato 4-[(4-amino-6-cloropirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-7- il)metil]piperazin-1-carboxilato de fer-butilo, se aislo despues de la RP-HPLC preparativa (Reprosil C18, gradiente 10 10-95% acetonitrilo/0,1% de acido formico acuoso) de 100 mg del material bruto obtenido anteriormente.

1H-RMN (400 MHz, DMSO-da): inter al. 8 = 8,14 (s, 1H), 7,91 (s, 1H), 7,83 (br. s, 2H), 6,95 (s, 1H), 3,80 (s, 2H), 3,17 (s, 2H), 2,38 (br. s, 4H), 1,37 (s, 9H) ppm.

Intermediario 59A

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4-[(4-amino-5-bromo-6-cloropirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-7-il)metil]piperazin-1-carboxilato de ter-butilo

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Siguiendo el procedimiento del intermediario 56A, 11 g (30 mmoles) del intermediario 58A se hicieron reaccionar para dar 1,17 g (9% de teor.) del compuesto del tftulo despues de la cromatograffa flash sobre gel de sflice (dicloro- metano/metanol 10:1) y subsiguiente RP-HPLC preparativa (Daiso C18, gradiente 40-65% acetonitrilo/agua).

LC-MS (procedimiento 2): Tr = 0,74 min; MS (ESIpos): m/z = 445/447/449 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): inter al. 8 = 7,96 (s, 1H), 3,84 (s, 2H), 2,37 (br. s, 4H), 1,37 (s, 9H) ppm.

Intermediario 60A

4-{[4-amino-6-cloro-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-7-il]metil}piperazin-1-carboxilato de ter-butilo

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/CHs

rcHs

CH3

Bajo una atmosfera de argon, un matraz se cargo con 140 mg (0,31 mmoles) del intermediary 59A, 102 mg (0,46 mmoles) del intermediary 5A, 16 mg (0,02 mmoles) PdCh(dppf) x DCM y 122 mg (1,15 mmoles) carbonato de sodio. Despues de la adicion de 3 ml de 1,2-dimetoxietano desgasificado/agua (3:1), la suspension se agito a 60°C durante 2,5 h. Otras porciones del intermediario 5A (50 mg, 0,23 mmoles) y PdCh(dppf) x DCM (8 mg, 0,01 mmoles) se agregaron, y se continuo con la agitacion a 40°C durante 2,5 h. Este ultimo procedimiento se repitio una vez mas hasta que el material de partida se consumio. Posteriormente, la mezcla de reaccion se evaporo parcialmente a presion reducida, se agrego agua, y la mezcla se extrajo con diclorometano. Las fases organicas combinadas se lavaron con agua y solucion de cloruro de sodio acuosa saturada, se secaron y se evaporaron a presion reducida. El residuo (322 mg) se purifico por RP-HPLC preparativa (Reprosil C18, gradiente 10-95% acetonitrilo/0,1% de acido formico acuoso) para dar 49 mg de una mezcla del compuesto del tftulo y el derivado Boc desprotegido, 6-cloro-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)-7-(piperazin-1-ilmetil)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-amina. Esta mezcla se uso como tal en la proxima etapa de reaccion (vease el ejemplo 85).

LC-MS (procedimiento 2): Tr = 1,00 min; MS (ESIpos): m/z = 543 (M+H)+, y Tr = 0,81 min; MS (ESIpos): m/z = 443 (M+H)+.

Intermediario 61A

4-{[4-amino-6-(metoximetil)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-7-il]metil}piperazin-2-ona

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Una solucion del intermediario 10A (5 g, 28,1 mmoles) y piperazin-2-ona (3,09 g, 30,9 mmoles) en acido acetico (85 ml) se trato con 37% de solucion de formaldehyio acuosa (3,15 ml, 42,1 mmoles) y se agito a 60°C durante 16 h. Los volatiles se evaporaron a presion reducida, y el residuo se disolvio en metanol y se adsorbio sobre tierra de diatomea. La purificacion por cromatografta de columna sobre gel de sflice (5-10% metanol/diclorometano) dio 3,91 g (46% de teor.) del compuesto del tftulo.

LC-MS (procedimiento 3): Tr = 1,68 min; MS (ESIpos): m/z = 291 (M+H)+.

Intermediario 62A

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O

Una solucion del intermediary 61A (3,9 g, 13,4 mmoles) en DMF (50 ml) se enfrio hasta 0°C y se trato con una solucion de W-bromosuccinimida (2,63 g, 14,8 mmoles) en DMF (6 ml). La mezcla se agito a 0°C durante 1 h. Posteriormente, el solvente se evaporo, y el residuo se disolvio en metanol y se adsorbio sobre tierra de diatomea. 5 La purificacion por cromatograffa de columna sobre gel de sflice (5-10% metanol/diclorometano) dio 1,99 g (39% de teor.) del compuesto del tttulo.

LC-MS (procedimiento 3): Tr = 1,86 min; MS (ESIpos): m/z = 369/371 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 8 = 7,96-8,23 (br. s, 1H), 7,90 (s, 1H), 7,71 (s, 1H), 6,72-6,98 (br. s, 1H), 4,45 (s, 2H), 3,91 (s, 2H), 3,27 (s, 3H), 3,07 (br. s, 2H), 2,96 (s, 2H), 2,56 (br. s, 2H) ppm.

10 Intermediario 63A

Clorhidrato 7-(clorometil)-6-(etoximetil)-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-amina

imagen154

Una suspension del ejemplo 86 (1 g, 2,51 mmoles) en tolueno (60 ml) se trato gota a gota con cloruro de tionilo (1,83 ml, 25,1 mmoles), y la mezcla se agito a ta durante toda la noche. Los volatiles se evaporaron a presion 15 reducida. El residuo se coevaporo con tolueno a presion reducida tres veces dando 0,85 g (74% de teor.) del compuesto del tftulo el cual se uso inmediatamente para la proxima etapa sin purificacion posterior.

Intermediario 64A

Acido 4-amino-6-(etoximetil)-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-7-carboxflico

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Una suspension del intermediary 17A (5 g, 12,6 mmoles) en THF/agua (10:1,220 ml) se trato con una solucion 2 M de 2-metil-2-buteno en THF (31,5 ml, 63,1 mmoles) y con dihidrogenofosfato de sodio (6,96 g, 50,4 mmoles). La mezcla se agito a ta durante 5 min. Posteriormente, se agrego clorito de sodio (4,56 g, 50,44 mmoles) , y la mezcla 5 resultante se agito a ta durante 20 h. La suspension se filtro, y el solido resultante se lavo con agua dando 4,24 g (74% de teor.) del compuesto del tftulo el cual se uso en el proximo paso sin purificacion posterior.

LC-MS (procedimiento 4): Tr = 1,06 min; MS (ESIpos): m/z = 413 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 8 = 13,22 (br. s, 1H), 8,53-8,00 (br. s, 1H), 8,14 (s, 1H), 7,41 (s, 1H), 7,33 (s, 1H), 6,86 (s, 1H), 6,28-5,65 (br. s, 1H), 4,61 (s, 2H), 3,96 (s, 3H), 3,36 (q, 2H), 2,46 (s, 3H), 1,01 (t, 3H) ppm.

10 Intermediario 65A

5,7-dimetoxi-1-benzotiofeno

imagen156

A una solucion de 1-benzotiofeno-5,7-diol (1,16 g, 6,98 mmoles) en acetona (20 ml) bajo argon se agregaron carbonato de potasio (2,89 g, 20,9 mmoles) y yodometano (912 pl, 14,6 mmoles). La mezcla resultante se agito bajo 15 reflujo durante 18 h. Despues de enfriar hasta ta, la mezcla se trato con una solucion 7 M de amomaco en metanol (10 ml) durante 30 min y posteriormente se adsorbio sobre gel de sflice. La purificacion por cromatograffa de columna sobre gel de sflice (ciclohexano/acetato de etilo 40:1) dio 0,52 g (32% de teor.) del compuesto del tftulo.

LC-MS (procedimiento 4): Tr = 1,02 min; MS (ESIpos): m/z = 195 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 8 = 7,69 (d, 1H), 7,35 (d, 1H), 7,02 (d, 1H), 6,57 (d, 1H), 3,92 (s, 3H), 3,81 (s, 3H) 20 ppm.

Intermediario 66A

Acido (5,7-dimetoxi-1-benzotiofen-2-il)boronico

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Bajo una atmosfera de argon, una solucion 1,6M de n-butilitio en hexano (1,84 ml, 2,95 mmoles) se agrego gota a

5

10

15

20

25

gota a una solucion del intermediary 65A (520 mg, 2,68 mmoles) en THF seco (5 ml) a -70°C. Despues de 1 hora a -70°C, se agrego triisopropil borato (742 pl, 3,21 mmoles), y la mezcla se agito durante 16 h mientras se entibiaba lentamente hasta ta. Diclorometano y solucion de cloruro de amonio acuosa saturada se agregaron, y el valor de pH se ajusto hasta 6 por la adicion de 1 M acido clorhndrico. La fase organica se separo, y la fase acuosa se extrajo con diclorometano. Las fases organicas combinadas se secaron con sulfato de magnesio, se filtraron y se evaporaron. El residuo resultante se purifico por cromatograffa de columna sobre gel de sflice (primero eluyendo con dicloro- metano/metanol 40:1, posteriormente metanol, finalmente metanol/4 M cloruro de hidrogeno en 1,4-dioxano 10:1) dando 631 mg (71% de pureza, 71% de teor.) del compuesto del tttulo.

LC-MS (procedimiento 4): Tr = 0,83 min; MS (ESIpos): m/z = 239 (M+H)+.

Intermediario 67A

4-amino-6-(clorometil)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-7-carbaldel'ndo

imagen158

El intermediario 67A se aislo como un subproducto de la smtesis del intermediario 11A despues de la cromatograffa de columna sobre gel de sflice (diclorometano/acetona 8:2 ^ 7:3).

LC-MS (procedimiento 2): Tr = 0,6 min; MS (ESIpos): m/z = 211/213 (M+H)+.

Intermediario 68A

4-Amino-6-[(3-oxopiperazin-1-il)metil]pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-7-carbaldel'ndo

H

O

imagen159

Una solucion del intermediario 67A (11,03 g, 52,4 mmoles) y 2-oxopiperazina (6,82 g, 68,1 mmoles) en 331 ml DMF se trato a ta con DIPEA (13,7 ml, 78,6 mmoles) y se agito durante toda la noche. El precipitado se filtro, se lavo con DMF y eter dietflico y posteriormente se secaron al vacfo para dar 11,64 g del compuesto del tttulo (89% de pureza, 72% de teor.).

LC-MS (procedimiento 7): Tr = 1,30 min; MS (ESIpos): m/z = 275 (M+H)+.

Intermediario 69A

4-{[4-Amino-7-(hidroximetil)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-6-il]metil}piperazin-2-ona

imagen160

H

N

O

OH

A una solucion del intermediary 68A (10,17 g, 89% de pureza, 33,01 mmoles) en 1 M acido clorlddrico (370 ml) y metanol (370 ml) a ta se agrego polvo de zinc (12,1 g, 185 mmoles), y la mezcla se agito a ta durante 18 h. Se agrego gel de sflice (100 g), y los volatiles se evaporaron a presion reducida. El residuo se suspendio en metanol, 5 los volatiles se evaporaron a presion reducida nuevamente, y el residuo se seco al vado. El solido se sometio a cromatograffa de columna sobre gel de sflice (gradiente diclorometano/7 M amomaco en metanol 10:1 ^ 3:1) para dar 6,39 g del compuesto del tttulo (60% de teor.).

LC-MS (procedimiento 8): Tr = 1,12 min; MS (ESIpos): m/z = 277 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-da): 8 = 7,83 (s, 1H), 7,76 (br. s, 1H), 7,64 (br. s, 2H), 6,83 (s, 1H), 5,01 (br. s, 1H), 4,74 10 (s, 2H), 3,64 (br. s, 2H), 3,14 (br. s, 2H), 2,95 (br. s, 2H), 2,58 (br. s, 2H) ppm.

Intermediario 70A

Trifluoroacetato 4-{[4-amino-5-bromo-7-(hidroximetil)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-6-il]metil}piperazin-2-ona

Una suspension del intermediario 69A (1 g) en metanol/agua (10:1, 33 ml) se trato con acido trifluoroacetico (0,56 ml, 7,24 mmoles) para dar por resultado una solucion transparente. Una solucion de W-bromosuccinimida (708 mg, 3,98 mmoles) en metanol (30 ml) se agrego gota a gota a 0°C, y la mezcla se agito a 0°C durante 1 h. El precipitado formado se filtro y se seco al vado para dar 700 mg del compuesto del tftulo (41% de teor.).

LC-MS (procedimiento 7): Tr = 1,38 min; MS (ESIpos): m/z = 355/357 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, D2O): 8 = 7,90 (s, 1H), 5,00 (s, 2H), 4,44 (s, 2H), 3,85 (s, 2H), 3,58 (br. t, 2H), 3,50 (br. t, 2H)

Ejemplos de preparacion:

Ejemplo 1

4-{[4-amino-6-(metoximetil)-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-7-il]metil}piperazin-2-ona

H

imagen161

OH

20 ppm.

5

10

15

20

25

imagen162

Procedimiento 1:

Una solucion del intermediary 13A (3 g, 7,84 mmoles) en metanol (87 ml) se trato con acido acetico (0,898 ml, 15,68 mmoles), 2-oxopiperazina (1,17 g, 11,76 mmoles) y triacetoxiborohidruro de sodio (4,98 g, 23,53 mmoles). La mezcla se agito a ta durante 4,5 h. Se agregaron otras porciones de 2-oxopiperazina (392 mg, 3,9 mmoles) y triacetoxiborohidruro de sodio (3,3 g, 15,68 mmoles), y la mezcla resultante se agito a 60°C durante toda la noche. Despues de la evaporacion, el residuo se coloco en solucion de hidrogeno carbonato de sodio acuosa saturada y se extrajo con acetato de etilo. Las fases organicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio y se evaporaron, y el residuo se purifico por cromatograffa de columna sobre gel de sflice (diclorometano/metanol 40:1 ^ 10:1). El producto obtenido de este modo se trituro en metanol y se filtro dando 540 mg (14% de teor.) del compuesto del tftulo. El licor madre metanolico se evaporo y el residuo se purifico por RP-HPLC dos veces (Reprosil C18, gradiente 10-95% acetonitrilo/0,1% de acido formico acuoso). Las fracciones que contienen el producto bruto se combinaron y se neutralizo con solucion de hidrogeno carbonato de sodio acuosa saturada. El solvente de acetonitrilo se evaporo, y la fase acuosa se extrajo con acetato de etilo. Las fases organicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio y se evaporaron dando 395 mg (13% de teor.) en forma de un segundo lote del compuesto del tftulo.

Procedimiento 2:

Una solucion del intermediario 21A (291 mg, 0,82 mmoles) en acido acetico (2,9 ml) se trato con 37% de solucion de formaldehftdo acuosa (104 |il, 1,39 mmoles) y 2-oxopiperazina (139 mg, 1,39 mmoles). La mezcla se agito a 60°C durante 3 h y posteriormente se evaporo. La purificacion por RP-HPLC preparativa (Reprosil C18, gradiente 10-95% acetonitrilo/0,1% de acido formico acuoso) dio 184 mg (44% de teor.) del compuesto del tftulo.

LC-MS (procedimiento 4): Tr = 0,77 min; MS (ESIpos): m/z = 467 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 8 = 8,00 (s, 1H), 7,73 (br. s, 1H), 7,37 (s, 1H), 7,31 (s, 1H), 6,84 (s, 1H), 4,41 (s, 2H), 3,97 (s, 2H), 3,96 (s, 3H), 3,20 (s, 3H), 3,15-3,08 (br. s, 2H), 3,01 (s, 2H), 2,64 (br. t, 2H), 2,45 (s, 3H) ppm.

Ejemplo 2

Diclorhidrato 4-{[4-amino-6-(metoximetil)-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-7-

il]metil}piperazin-2-ona

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Una solucion del ejemplo 1 (100 mg, 214 pmoles) en 1,4-dioxano (2 ml) se trato con una solucion 4 M de cloruro de hidrogeno en 1,4-dioxano (2 ml, 8 mmoles). El solvente se evaporo dejando 130 mg (cuant.) del compuesto del tftulo.

5 LC-MS (procedimiento 2): Tr = 0,79 min; MS (ESIpos): m/z = 467 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-da): 8 = 8,39 (br. s, 1H), 8,31-8,53 (br. s, 1H), 8,17 (s, 1H), 7,38 (s, 1H), 7,34 (s, 1H), 6,87 (s, 1H), 6,21-6,42 (br. s, 1H), 4,81 (br. s, 2H), 4,52 (br. s, 2H), 3,96 (s, 3H), 3,57 (s, 2H), 3,32-3,72 (m, 4H), 3,26 (s, 3H), 2,46 (s, 3H) ppm.

Ejemplo 3

10 Diclorhidrato (3R)-3-({[4-amino-6-(metoximetil)-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-7-

il]metil}amino)pirrolidin-2-ona

imagen164

Una solucion del intermediario 13A (520 mg, 1,36 mmoles) en metanol (15 ml) y acido acetico (156 |il, 2,7 mmoles) se trato con (R)-3-aminopirrolidin-2-ona (503 mg, 5,0 mmoles) y triacetoxiborohidruro (1,06 g, 5,0 mmoles). La 15 mezcla se agito a ta durante toda la noche y posteriormente se evaporo. La purificacion por RP-HPLC preparativa (Reprosil C18, gradiente 10-95% acetonitrilo/0,1% de acido formico acuoso) y liofilizacion del producto obtenido de este modo a partir de una solucion 4 M de cloruro de hidrogeno en 1,4-dioxano dio 272 mg (36% de teor.) del compuesto del tftulo.

LC-MS (procedimiento 2): Tr = 0,70 min; MS (ESIpos): m/z = 467 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-da): d = 9,62 (br. s, 1H), 9,46 (br. s, 1H), 8,56-8,22 (br. s, 1H), 8,44 (s, 1H), 8,19 (s, 1H), 7,38 (s, 1H), 7,34 (s, 1H), 6,87 (s, 1H), 6,54-6,12 (br. s, 1H), 4,89-4,65 (m, 2H), 4,58-4,46 (m, 2H), 4,17-4,07 (br. s, 1H, superposicion con pico de agua), 3,96 (s, 3H), 3,36-3,16 (m, 2H), 3,25 (s, 3H), 2,48-2,39 (m, 1H), 2,46 (s, 3H), 2,23-2,06 (m, 1H) ppm.

5 Ejemplo 4

(3R)-3-({[4-amino-6-(metoximetil)-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-7-

il]metil}amino)pirrolidin-2-ona

imagen165

3

Una solucion del intermediario 13A (2,0 g, 5,2 mmoles) en metanol (58 ml) y acido acetico (0,6 ml) se trato con (R)- 10 3-aminopirrolidin-2-ona (785 mg, 7,8 mmoles) y triacetoxiborohidruro (3,32 g, 15,6 mmoles). La mezcla se agito a ta durante toda la noche. Despues de esto, la mezcla de reaccion se diluyo con solucion de hidrogeno carbonato de sodio acuosa saturada y se extrajo tres veces con acetato de etilo. Las fases organicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio y se evaporaron. El residuo se purifico por cromatograffa de columna dos veces sobre gel de sflice (diclorometano/metanol 40:1 hasta 10:1) para dar 957 mg (37% de teor.) del compuesto del tttulo.

15 LC-MS (procedimiento 4): Tr = 0,72 min; MS (ESIpos): m/z = 467 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 8 = 8,01 (s, 1H), 7,75 (s, 1H), 7,35 (s, 1H), 7,31 (s, 1H), 6,85 (s, 1H), 4,46-4,34 (m, 2H), 4,24-4,02 (m, 2H), 3,96 (s, 3H), 3,24-3,04 (m, 3H), 3,21 (s, 3H), 2,45 (s, 3H), 2,40-2,27 (m, 1H), 1,80-1,65 (m, 1H) ppm.

Ejemplo 5

20 4-{[4-amino-6-(etoximetil)-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-7-il]metil}piperazin-2-ona

5

10

15

20

25

30

35

imagen166

Procedimiento 1:

Una solucion del intermediary 17A (2 g, 5,05 mmoles) en THF (100 ml) se trato a 0°C con 2-oxopiperazina (1,01 g, 10,1 mmoles), triacetoxiborohidruro de sodio (1,07 g, 5,04 mmoles) y acido acetico (0,29 ml, 5,04 mmoles). La mezcla resultante se agito a 0°C durante 30 min. Cuatro porciones adicionales de triacetoxiborohidruro de sodio (1,07 g, 5,04 mmoles) y de acido acetico (0,29 ml, 5,04 mmoles) se agregaron cada 30 minutos, y la mezcla resultante se agito durante otros 30 min a 0°C, posteriormente durante 25 min a 35°C y finalmente a ta durante toda la noche. La reaccion se templo con 10% de solucion de cloruro de sodio ac. y se extrajo dos veces con acetato de etilo. Las capas organicas combinadas se evaporaron. El residuo se purifico por cromatograffa de columna sobre gel de sflice (diclorometano/ metanol 95:5 ^ 90:10) dando 360 mg (17% de teor.) del compuesto descripta en Ejemplo 86 (vease a continuacion) y 1,82 g del compuesto del tftulo en fracciones separadas. El producto del tftulo obtenido de este modo se suspendio en etanol (20 ml), se sometio a reflujo durante 2 h y posteriormente se enfrio hasta 15°C. El solido se filtro y se lavo con etanol dando 1,63 g (67% de teor.) del compuesto del tftulo puro.

Procedimiento 2:

Una solucion del ejemplo 13 (930 mg, 1,9 mmoles) en diclorometano (18 ml) se trato con cloruro de tionilo (210 |il, 2,8 mmoles) y se agito a ta durante 15 min. Despues de la evaporacion, el residuo se disolvio en etanol (18 ml) y se trato con DIPEA (670 |il, 3,8 mmoles). La mezcla se agito a 70°C durante 2 h y posteriormente se evaporo. El residuo se purifico por cromatograffa de columna sobre gel de sflice (diclorometano/metanol 98:2 ^ 90:10). El producto obtenido de este modo se trituro en una mezcla de acetonitrilo/eter diefflico y se filtro. El filtrado se evaporo, y el residuo se purifico nuevamente por cromatograffa de columna sobre gel de sflice (diclorometano/metanol 98:2 ^ 90:10). Nuevamente, el producto obtenido de este modo se trituro en acetonitrilo/eter diefflico y se filtro. Este procedimiento se repitio una vez mas. Los tres lotes de solidos obtenidos de esta manera se combinaron, se trituraron en acetonitrilo/eter diefflico una vez nuevamente y finalmente se filtro dando 600 mg (62% de teor.) del compuesto del tftulo.

Procedimiento 3:

Una solucion del intermediario 22A (720 mg, pureza 89%, 1,74 mmoles) en acido acetico (10 ml) se agito con piperazin-2-ona (261 mg, 2,61 mmoles) a 60°C. A esto, se agrego 37% de solucion de formaldehffdo acuosa (260 pl, 3,48 mmoles) en tres porciones despues de 0, 3 y 12 h, respectivamente, y la mezcla se agito a 60°C durante un total de 24 h. Posteriormente, los volatiles se removieron a presion reducida, y el residuo se dividio entre acetato de etilo y solucion de hidrogeno carbonato de sodio acuosa saturada. La fase organica se lavo con solucion de cloruro de sodio acuosa saturada, se secaron con sulfato de magnesio y se evaporaron. El residuo se disolvio en una mezcla de metanol y diclorometano, se adsorbio sobre tierra de diatomea, se secaron al vado y se purifico por cromatograffa flash sobre gel de sflice (gradiente 0-6% metanol/diclorometano). Las fracciones del producto se combinaron, se evaporo y re-se purifico por RP-HPLC preparativa (Reprosil C18, gradiente 30-50% acetonitrilo/0,2% TFA ac.). Las fracciones del producto se combinaron nuevamente, se diluyo con solucion de hidrogeno carbonato de sodio acuosa saturada y se extrajo con acetato de etilo. La fase organica se lavo con solucion de cloruro de sodio acuosa saturada, se secaron con sulfato de magnesio y se evaporaron dando 281 mg (31% de teor.) del compuesto del tftulo.

LC-MS (procedimiento 2): Tr = 0,86 min; MS (ESIpos): m/z = 481 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-da): 8 = 8,01 (s, 1H), 7,8-8,05 (br. s, 1H), 7,74 (br. s, 1H), 7,38 (s, 1H), 7,31 (s, 1H), 6,85 (s, 1H), 5,6-5,9 (br. s, 1H), 4,45 (s, 2H), 3,97 (s, 2H), 3,94 (s, 3H), 3,41 (q, 2H), 3,09-3,13 (m, 2H), 3,02 (s, 2H), 2,632,69 (br. s, 2H), 2,45 (s, 3H), 1,07 (t, 3H) ppm.

Ejemplo 6

5 Diclorhidrato 4-{[4-amino-6-(etoximetil)-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-7-

il]metil}piperazin-2-ona

imagen167

x 2 HCl

Una solucion del intermediary 17A (60 mg, pureza 69%, 104 pmoles) en metanol (6 ml) se trato con 2- oxopiperazina (22 mg, 209 pmoles), cianoborohidruro de sodio (33 mg, 522 mmoles) y acido acetico (12 |il, 209 10 pmoles). La mezcla se agito a 60°C durante 16 h y posteriormente se filtro. El filtrado y el residuo se purificaron de forma separada por RP-HPLC preparativa (Reprosil C18, gradiente 40-60% acetonitrilo/0,2% TFA ac.). Las fracciones del producto se combinaron, se diluyo con 1 M acido clorhndrico (3 ml) y se evaporaron hasta sequedad dando 46 mg (79% de teor.) del compuesto del tttulo.

LC-MS (procedimiento 2): Tr = 0,87 min; MS (ESIpos): m/z = 481 (M+H)+

15 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 8 = 8,37 (br. s, 1H), 8,31 (br. s, 1H), 8,14 (s, 1H), 7,38 (s, 1H), 7,33 (s, 1H), 6,87 (s,

1H), 6,13 (br. s, 1H), 4,80 (br. s, 2H), 4,52 (s, 2H), 3,96 (s, 3H), 3,86 (br. s, 2H), 3,36-3,51 (m, 5H), 2,46 (s, 3H), 1,11 (t, 3H) ppm.

Ejemplo 7

Diclorhidrato (3R)-3-({[4-amino-6-(etoximetil)-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-7-

20 il]metil}amino)pirrolidin-2-ona

imagen168

Una solucion del intermediary 17A (60 mg, pureza 69%, 104 pmoles) en metanol (3 ml) se trato con (R)-3- aminopirrolidin-2-ona (22 mg, 209 pmoles), cianoborohidruro de sodio (33 mg, 522 pmoles) y acido acetico (12 |il, 209 |imoles). La mezcla se agito a 60°C durante 4 h y posteriormente se filtro. El filtrado se purifico por RP-HPLC 5 preparativa (Reprosil C18, gradiente 40-60% acetonitrilo/ 0,2% TFA ac.). Las fracciones del producto se combinaron, se diluyo con 1 M acido clorhndrico y se evaporaron hasta sequedad dando 46 mg (79% de teor.) del compuesto del tttulo.

LC-MS (procedimiento 4): Tr = 0,74 min; MS (ESIpos): m/z = 481 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 8 = 9,58-9,75 (m, 1H), 9,33-9,54 (m, 1H), 8,44 (s, 1H), 8,27-8,71 (br. s, 1H), 8,19 (s, 10 1H), 7,38 (s, 1H), 7,34 (s, 1H), 6,87 (s, 1H), 6,18-6,48 (br. s, 1H), 4,68-4,87 (m, 2H), 4,49-4,62 (q, 2H), 3,96 (s, 3H),

3,45 (q, 2H), 3,18-3,35 (m, 2H), 2,46 (s, 4H), 2,08-2,22 (m, 1H), 1,10 (t, 3H) ppm.

Ejemplo 8

(3R)-3-({[4-amino-6-(etoximetil)-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-7-

il]metil}amino)pirrolidin-2-ona

imagen169

Una solucion del intermediario 17A (226 mg, pureza 75%, 428 pmoles) en metanol (4 ml) se trato con (R)-3- aminopirrolidin-2-ona (85 mg, 855 pmoles), cianoborohidruro de sodio (134 mg, 2,14 mmoles) y acido acetico (49 |il, 855 |imoles). La mezcla se agito a ta durante 1,5 h. Despues de esto, la mezcla se separo directamente por RP- HPLC preparativa (Reprosil C18, gradiente 40-60% acetonitrilo/0,2% TFA ac.). Las fracciones del producto se

combinaron, se diluyo con solucion de hidrogeno carbonato de sodio acuosa saturada y se extrajo con acetato de etilo. Las fases organicas combinadas se lavaron con solucion de cloruro de sodio acuosa saturada, se secaron sobre sulfato de magnesio y se evaporaron hasta sequedad dando 180 mg (88% de teor.) del compuesto del tftulo.

LC-MS (procedimiento 4): Tr = 0,74 min; MS (ESIpos): m/z = 481 (M+H)+

5 1H-RMN (400 MHz, DMSO-da): 8 = 8,00 (s, 1H), 7,76 (s, 1H), 7,8-8,1 (br. s, 1H), 7,35 (s, 1H), 7,31 (s, 1H), 6,84 (s,

1H), 5,6-5,9 (br. s, 1H), 4,39-4,49 (m, 2H), 4,04-4,23 (m, 2H), 3,96 (s, 3H), 3,41 (q, 2H), 3,05-3,23 (m, 3H), 2,45 (s, 3H), 2,31-2,40 (m, 1H), 1,68-1,79 (m, 1H), 1,08 (t, 3H) ppm.

Ejemplo 9

Diclorhidrato W2-{[4-amino-6-(etoximetil)-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-7-

10 il]metil}glicinamida

imagen170

Una solucion del intermediario 17A (60 mg, pureza 69%, 104 pmoles) en metanol (3 ml) se trato con clorhidrato glicinamida (23 mg, 209 pmoles), cianoborohidruro de sodio (32 mg, 522 mmoles) y acido acetico (12 |il, 209 imoles). La mezcla se agito a 60°C durante 16 h. Despues de la filtracion, el filtrado se separo por RP-HPLC 15 preparativa (Reprosil C18, gradiente 20-40% acetonitrilo/0,2% TFA ac.). Las fracciones del producto se combinaron, se diluyeron con 1 M acido clorhftdrico, se evaporaron hasta sequedad y se combinaron con el residuo a partir de la etapa de filtracion. Este material se purifico nuevamente por RP-HPLC preparativa dos veces (Reprosil C18, gradiente 20-40% acetonitrilo/0,2% TFA ac.). Las fracciones del producto se combinaron nuevamente, se diluyeron con 1 M acido clorhftdrico y se evaporaron hasta sequedad dando 7,4 mg (13% de teor.) del compuesto del tftulo.

20 LC-MS (procedimiento 2): Tr = 0,80 min; MS (ESIpos): m/z = 455 (M+H)+

1H-RMN (500 MHz, DMSO-d6): 8 = 9,33 (br. s, 2H), 9,05 (br. s, 1H), 8,31 (s, 1H), 7,93 (br. s, 1H), 7,58 (br. s, 1H), 7,40 (s, 1H), 7,35 (s, 1H), 7,05 (br. s, 1H), 6,88 (s, 1H), 4,65 (br. m, 2H), 4,56 (s, 2H), 3,96 (s, 3H), 3,74 (br. m, 2H),

3,46 (q, 2H), 2,46 (s, 3H), 1,10 (t, 3H) ppm.

Ejemplo 10

25 6-(etoximetil)-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)-7-(morfolin-4-ilmetil)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-amina

imagen171

Una solucion del intermediary 17A (55 mg, pureza 73%, 101 pmoles) en metanol (3 ml) se trato con morfolina (18 mg, 202 pmoles), cianoborohidruro de sodio (19 mg, 303 mmoles) y acido acetico (18 |il, 304 |imoles). La mezcla se agito a 60°C durante 18 h. Otras cantidades de morfolina (18 mg, 202 pmoles), cianoborohidruro de sodio (19 mg, 5 303 mmoles) y acido acetico (18 |il, 304 |imoles) se agregaron, y la agitacion a 60°C continuo durante otra 3 h. La

mezcla resultante se diluyo con THF para disolver los precipitados y se separo por RP-HPLC preparativa (Reprosil C18, gradiente 20-40% acetonitrilo/0,2% TFA ac.). Las fracciones del producto se combinaron y se evaporaron hasta sequedad. El residuo se disolvio en metanol y se filtro a traves de un cartucho de intercambio anionico (Stratospheres SPE, PL-HCO3 MP-resina). El cartucho se eluyo con metanol, y el filtrado se evaporo dando 32 mg 10 (68% de teor.) del compuesto del tttulo.

LC-MS (procedimiento 2): Tr = 0,78 min; MS (ESIpos): m/z = 468 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-da): 8 = 7,98 (s, 1H), 7,9 (br. s, 1H), 7,37 (s, 1H), 7,31 (s, 1H), 6,84 (s, 1H), 5,75 (br. s, 1H), 4,45 (s, 2H), 3,95 (s, 3H), 3,88 (s, 2H), 3,51-3,56 (m, 4H), 3,40 (q, 2H), 2,4-2,5 (m, 4H), 2,45 (s, 3H), 1,06 (t, 3H) ppm.

15 Ejemplo 11

Diclorhidrato 1-(4-{[4-amino-6-(etoximetil)-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-7-

il]metil}piperazin-1-il)etanona

imagen172

Una solucion del intermediario 17A (130 mg, 0,328 mmoles) en metanol (8 ml) se trato con W-acetilpiperazina (63 20 mg, 0,492 mmoles), cianoborohidruro de sodio (103 mg, 1,63 mmoles) y acido acetico (37 |il, 0,655 mmoles). La mezcla se agito a 60°C durante 3 h. Posteriormente se combino con la mezcla de reaccion de una serie analftica de 30 mg, se evaporo y se purifico por RP-HPLC preparativa (Reprosil C18, gradiente 10-95% acetonitrilo/0,1% de acido formico acuoso). El producto obtenido de este modo se liofilizo a partir de 1,4-dioxano, posteriormente se

disolvio en acetato de etilo y se lavo con solucion de hidrogeno carbonato de sodio acuosa saturada. La capa organica se seco sobre sulfato de magnesio, se evaporo y se liofilizo nuevamente a partir de 1,4-dioxano. Re-la purificacion por RP-HPLC preparativa (Reprosil C18, gradiente 10-95% acetonitrilo/0,1% de acido formico acuoso), seguido de cromatograffa de columna dos veces sobre gel de sflice (diclorometano/metanol 98:2 ^ 4:1) y la 5 liofilizacion a partir de una solucion 4 M de cloruro de hidrogeno en 1,4-dioxano dio 49 mg (18% de teor.) del compuesto del tttulo.

LC-MS (procedimiento 2): Tr = 0,82 min; MS (ESIpos): m/z = 509 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-da): inter al. 8 = 8,65-8,26 (br. s, 1H), 8,17 (s, 1H), 7,38 (s, 1H), 7,34 (s, 1H), 6,87 (s, 1H), 6,53-6,05 (br. s, 1H), 4,75 (br. s, 2H), 4,56 (br. s, 2H), 3,96 (s, 3H), 3,45 (q, 2H, superposicion con pico de agua), 10 2,46 (s, 3H), 2,03 (s, 3H), 1,09 (t, 3H) ppm.

Ejemplo 12

bis(formiato) [4-amino-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)-7-(piperazin-1-ilmetil)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-6-

iljmetanol

imagen173

15 Una solucion del intermediario 23A (95 mg, 152 |imoles) en una solucion 4 M de cloruro de hidrogeno en 1,4- dioxano (3,7 ml) se agito a ta durante 2 h. Despues de la evaporacion, el residuo se purifico por RP-HPLC preparativa (Reprosil C18, gradiente 10-95% acetonitrilo/0,1% de acido formico acuoso) dando 44 mg (62% de teor.) del compuesto del tttulo.

LC-MS (procedimiento 2): Tr = 0,63 min; MS (ESIpos): m/z = 439 (M+H)+

20 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 8 = 8,28 (br. s, 2H), 7,98 (s, 1H), 7,37 (s, 1H), 7,31 (s, 1H), 6,85 (s, 1H), 4,50 (s, 2H,

superposicion con pico de agua), 3,98 (s, 2H, superposicion con pico de agua), 3,95 (s, 3H, superposicion con pico de agua), 2,95-2,84 (m, 4H), 2,61-2,55 (m, 4H, superposicion con pico de DMSO ), 2,45 (s, 3H) ppm.

Ejemplo 13

4-{[4-amino-6-(hidroximetil)-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-7-il]metil}piperazin-2-ona

imagen174

Una solucion del intermediary 20A (1,34 g, 3,96 mmoles) en acido acetico (13,9 ml) se trato con 37% de solucion de formaldehndo acuosa (501 |il, 6,6 mmoles) y 2-oxopiperazina (670 mg, 6,6 mmoles). La mezcla se agito a 50°C durante 2 h y posteriormente se evaporo. La purificacion por cromatograffa de columna sobre gel de sflice 5 (diclorometano/metanol 98:2 ^ 90:10) dio 942 mg (49% de teor.) del compuesto del tttulo.

LC-MS (procedimiento 2): Tr = 0,67 min; MS (ESIpos): m/z = 453 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 8 = 7,99 (s, 1H), 7,76 (br. s, 1H), 7,39 (s, 1H), 7,31 (s, 1H), 6,84 (s, 1H), 4,51 (s, 2H), 4,03 (br. s, 2H), 3,95 (s, 3H), 3,18-3,13 (m, 2H), 3,07-2,98 (m, 2H), 2,72-2,60 (m, 2H), 2,45 (s, 3H) ppm.

Ejemplo 14

10 Triclorhidrato 7-{[(3S)-3-amino-3-metilpirrolidin-1-il]metil}-6-(metoximetil)-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-

il)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-amina

imagen175

2

x 3 HCl

Una solucion del intermediario 21A (100 mg, 0,28 mmoles) en acido acetico (1 ml) se trato con 37% de solucion de formaldehndo acuosa (25 |il, 0,33 mmoles) y [(3S)-3-metilpirrolidin-3-il]carbamato de ter-butilo (Yoshida et al., Chem.

15 Pharm. Bull. 1996, 44 (7), 1376-1386; 67 mg, 0,33 mmoles). La mezcla se agito a ta durante 3 h y posteriormente se evaporo. El residuo se diluyo con solucion de hidrogeno carbonato de sodio acuosa saturada, y se agrego carbonato de potasio solido hasta que no se produjo mas generacion de gas. La fase acuosa se extrajo tres veces con acetato de etilo. Las fases organicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio y se evaporaron. El residuo se disolvio en una solucion 4 M de cloruro de hidrogeno en 1,4-dioxano (2 ml) y se agito a ta durante 2 h. Despues

20 de la evaporacion, el residuo se purifico por RP-HPLC preparativa dos veces (primero Reprosil C18, gradiente 1095% acetonitrilo/0,1% de acido formico acuoso; posteriormente Shield RP18, gradiente 5-50% metanol + 0,1% TFA ac./0,1% TFA ac.). El producto obtenido de este modo se liofilizo a partir de una solucion 4 M de cloruro de hidrogeno en 1,4-dioxano dando 14 mg (8% de teor.) del compuesto del tttulo.

LC-MS (procedimiento 2): Tr = 0,67 min; MS (ESIpos): m/z = 467 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-da): inter al. 8 = 8,50-8,22 (br. s, 1H), 8,14 (s, 1H), 7,36 (s, 1H), 7,34 (s, 1H), 6,87 (s, 1H), 6,36-6,01 (br. s, 1H), 4,88 (br. s, 2H), 4,56 (br. s, 2H), 3,96 (s, 3H, superposicion con pico de agua), 3,26 (s, 3h),

2,46 (s, 3H), 1,52 (s, 3H) ppm.

5 Ejemplo 15

7-{[(3S)-3-amino-3-metilpirrolidin-1-il]metil}-6-(etoximetil)-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)pirrolo[2,1-

f][1,2,4]triazin-4-amina

imagen176

2

Una solucion del intermediary 17A (100 mg, 271 |imoles) en acido acetico (1 ml) se trato con 37% de solucion de 10 formaldel'ndo acuosa (24 |il, 326 |imoles) y [(3S)-3-metilpirrolidin-3-il]carbamato de ter-butilo (Yoshida et al., Chem.

Pharm. Bull. 1996, 44 (7), 1376-1386; 65 mg, 326 pmoles). La mezcla se agito a 60°C durante 4 h. Posteriormente, se agregaron otras cantidades de 37% de solucion de formaldel'ndo acuosa (10 |il, 136 |imoles) y [(3S)-3- metilpirrolidin-3-il]carbamato de ter-butilo (27 mg, 136 |imoles), y la agitacion a 60°C continuo durante toda la noche. Despues de la evaporacion, el residuo se dividio entre acetato de etilo y solucion de hidrogeno carbonato de sodio 15 acuosa saturada. Se agrego carbonato de potasio solido hasta que no se produjo mas generacion de gas. La fase acuosa se extrajo tres veces con acetato de etilo. Las fases organicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se evaporaron y se purificaron por RP-HPLC preparativa (Reprosil C18, gradiente 10-95% acetonitrilo/0,1% de acido formico acuoso). El producto obtenido de este modo se disolvio en una solucion 4 M de cloruro de hidrogeno en 1,4-dioxano (2 ml) y se agito a ta durante 1 h. Despues de la evaporacion, el residuo se purifico por 20 RP-HPLC preparativa (Reprosil C18, gradiente 10-95% acetonitrilo/0,1% de acido formico acuoso) dando 24 mg (18% de teor.) del compuesto del tttulo.

LC-MS (procedimiento 4): Tr = 0,70 min; MS (ESIpos): m/z = 481 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): inter al. 8 = 8,19 (s, 1H), 7,38 (s, 1H), 7,34 (s, 1H), 6,87 (s, 1H), 4,90 (br. s, 2H), 3,96 (s, 3H), 3,46 (q, 3H), 2,46 (s, 3H), 1,54 (s, 3H), 1,14-1,05 (m, 3H) ppm.

25 Ejemplo 16

Diclorhidrato 1-(4-{[4-amino-6-(metoximetil)-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-7-

il]metil}piperazin-1-il)etanona

imagen177

x 2 HCl

CH,

Una solucion del intermediario 21A (50 mg, 141 |imoles) en acido acetico (1 ml) se trato con 37% de solucion de formaldehndo acuosa (4,6 |il, 169 |imoles) y W-acetilpiperazina (21,6 mg, 169 |imoles). La mezcla se agito a 75°C durante 3 h. Despues de la evaporacion, el residuo se purifico por RP-HPLC preparativa (Reprosil C18, gradiente 5 10-95% acetonitrilo/0,1% de acido formico acuoso). La liofilizacion a partir de una solucion 4 M de cloruro de

hidrogeno en 1,4-dioxano dio 34 mg (39% de teor.) del compuesto del tttulo.

LC-MS (procedimiento 5): Tr = 1,78 min; MS (ESIpos): m/z = 495 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): inter al. 8 = 8,70-8,35 (br. s, 1H), 8,18 (s, 1H), 7,37 (s, 1H), 7,34 (s, 1H), 6,86 (s, 1H), 6,61-6,19 (br. s, 1H), 4,74 (br. s, 2H), 4,54 (br. s, 2H), 3,96 (s, 3H), 3,25 (s, 3H), 2,46 (s, 3H), 2,03 (s, 3H) ppm.

10 Ejemplo 17

Formiato 6-(metoximetil)-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)-7-(piperazin-1-ilmetil)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-4- amina

imagen178

Una solucion del intermediario 23A (110 mg, 204 |imoles) en diclorometano (2,2 ml) se trato con cloruro de tionilo 15 (29 |il, 408 |imoles) y se agito a ta durante 15 min. Despues de la evaporacion, el residuo se disolvio en metanol

(2,2 ml) y se trato con DIPEA (39 |il, 224 |imoles). La mezcla se agito a 70°C durante 1 h y posteriormente se evaporo. El residuo se coloco en una solucion 4 M de cloruro de hidrogeno en 1,4-dioxano (2,2 ml) y se agito a ta durante 2 h. La evaporacion y la purificacion por RP-HPLC preparativa (Reprosil C18, gradiente 10-95% acetonitrilo/0,1% de acido formico acuoso) dio 44,9 mg (46% de teor.) del compuesto del tttulo.

20 LC-MS (procedimiento 2): Tr = 0,73 min; MS (ESIpos): m/z = 453 (M+H)+

Ejemplo 18

6-(etoximetil)-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)-7-(piperazin-1-ilmetil)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-amina

imagen179

Una solucion del intermediary 23A (80 mg, 317 |imoles) en diclorometano (2 ml) se trato con cloruro de tionilo (22 5 |il, 297 |imoles) y se agito a ta durante 15 min. Despues de la evaporacion, el residuo se disolvio en etanol (2 ml) y

se trato con DIPEA (28 |il, 163 |imoles). La mezcla se agito a 70°C durante 1 h y posteriormente se evaporo. El residuo se coloco en una solucion 4 M de cloruro de hidrogeno en 1,4-dioxano (2 ml) y se agito a ta durante 1 h. La evaporacion y la purificacion por RP-HPLC preparativa (Reprosil C18, gradiente 10-95% acetonitrilo/0,1% de acido formico acuoso) dio 35 mg (50% de teor.) del compuesto del tttulo.

10 LC-MS (procedimiento 2): Tr = 0,82 min; MS (ESIpos): m/z = 467 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-da): inter al. 8 = 8,09 (br. s, 1H), 7,36 (s, 1H), 7,32 (s, 1H), 6,86 (s, 1H), 4,50 (br. s, 2H), 3,96 (s, 3H), 3,42 (q, 2H, superposicion con pico de agua), 2,45 (s, 3H), 1,05 (t, 3H) ppm.

Ejemplo 19

Diclorhidrato 6-(etoximetil)-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)-7-(piperazin-1-ilmetil)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-4- 15 amina

imagen180

Una solucion del ejemplo 18 (50 mg, 107 |imoles) en una solucion 4 M de cloruro de hidrogeno en 1,4-dioxano (1 ml) se agito a ta durante 15 min. Despues de la evaporacion se obtuvieron 55 mg (93% de teor.) del compuesto del tftulo.

20 LC-MS (procedimiento 4): Tr = 0,74 min; MS (ESIpos): m/z = 467 (M+H)+

Ejemplo 20

1-(4-{[4-amino-6-(etoximetil)-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-7-il]metil}piperazin-1-

il)etanona

5

imagen181

Una solucion del ejemplo 18 (70 mg, 150 |imoles) en diclorometano (2 ml) y THF (0,8 ml) se trato con cloruro de acetilo (21 |il, 300 |imoles) y carbonato de sodio (127 mg, 1,2 mmoles). La mezcla se agito a ta durante toda la noche. Despues de la evaporacion, el residuo se purifico por RP-HPLC preparativa (Reprosil C18, gradiente 10-95% acetonitrilo/0,1% de acido formico acuoso) dando 27 mg (31% de teor.) del compuesto del tttulo.

10 LC-MS (procedimiento 4): Tr = 0,77 min; MS (ESIpos): m/z = 509 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-da): 8 = 7,98 (s, 1H), 7,37 (s, 1H), 7,31 (s, 1H), 6,84 (s, 1H), 4,45 (s, 2H), 3,95 (s, 3H), 3,92 (s, 2H), 3,45-3,36 (m, 6H), 2,48-2,38 (m, 7H, superposicion con Pico de DMSO), 1,97 (s, 3H), 1,06 (t, 3H) ppm.

Ejemplo 21

Formiato 4-({4-Amino-6-[(2-hidroxietoxi)metil]-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-7- 15 il}metil)piperazin-2-ona

imagen182

Una solucion del ejemplo 13 (60 mg, 132 |imoles) en diclorometano (2 ml) se trato con cloruro de tionilo (14 |il, 198 imoles). La mezcla se agito a ta durante 15 min y posteriormente se evaporo. El residuo se disolvio en etilenglicol (500 |il) y se agito a 100°C durante 90 min. La purificacion por RP-HPLC preparativa (Reprosil C18, gradiente 10-

LC-MS (procedimiento 2): Tr = 0,69 min; MS (ESIpos): m/z = 497 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-da): 8 = 8,14 (s, 1H), 8,00 (s, 1H), 7,74 (br. s, 1H), 7,42 (s, 1H), 7,31 (s, 1H), 6,84 (s, 1H), 4,49 (s, 2H), 3,99 (s, 2H), 3,96 (s, 3H), 3,50-3,43 (m, 2H), 3,42-3,36 (m, 2H, superposicion con pico de agua), 3,155 3,07 (m, 2H), 3,03 (s, 2H), 2,69-2,61 (m, 2H), 2,45 (s, 3H) ppm.

Ejemplo 22

Diclorhidrato 2-{[4-amino-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)-7-(piperazin-1-ilmetil)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-6- il]metoxi}etanol

imagen183

10 Una solucion del intermediary 23A (100 mg, 185 |imoles) en diclorometano (4 ml) se trato con cloruro de tionilo (27 |il, 371 |imoles). La mezcla se agito a ta durante 20 min y posteriormente se evaporo. El residuo se disolvio en etilenglicol/THF (2:1, 1,5 ml) y se agito a 100°C durante 2 h. Despues de la evaporacion, el residuo se purifico por RP-HPLC preparativa (Reprosil C18, gradiente 10-95% acetonitrilo/0,1% de acido formico acuoso), seguido de cromatograffa de columna sobre gel de sflice (diclorometano/metanol + 0,1% de amomaco ac. 98:2 ^ 90:10). La 15 liofilizacion a partir de una solucion 4 M de cloruro de hidrogeno en 1,4-dioxano dio 67 mg (64% de teor.) del compuesto del tttulo.

LC-MS (procedimiento 2): Tr = 0,66 min; MS (ESIpos): m/z = 483 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 8 = 8,16 (s, 1H), 7,49 (s, 1H), 7,43 (s, 1H), 6,98 (s, 1H), 4,86 (s, 2H), 4,69 (s, 2H), 4,03 (s, 3H), 3,81-3,49 (m, 12H), 2,50 (s, 3H) ppm.

20 Ejemplo 23

Formiato 6-(butoximetil)-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)-7-(piperazin-1-ilmetil)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-4- amina

imagen184

5

10

Una solucion del intermediary 23A (100 mg, 185 |imoles) en diclorometano (2 ml) se trato con cloruro de tionilo (27 |il, 371 |imoles). La mezcla se agito a ta durante 15 min y posteriormente se evaporo. El residuo se disolvio en 1- butanol (2 ml) y se calento hasta 70°C durante 1 h. Despues de la evaporacion, el residuo se coloco en una solucion 4 M de cloruro de hidrogeno en 1,4-dioxano (2 ml) y se agito a ta durante 2 h. La evaporacion y la purificacion por RP-HPLC preparativa (Reprosil C18, gradiente 10-95% acetonitrilo/0,1% de acido formico acuoso) dio 22 mg (24% de teor.) del compuesto del tttulo.

LC-MS (procedimiento 2): Tr = 0,82 min; MS (ESIpos): m/z = 495 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-da): 8 = 8,29 (s, 1H), 7,99 (s, 1H), 7,35 (s, 1H), 7,29 (s, 1H), 6,84 (s, 1H), 4,43 (s, 2H),

3,95 (s, 3H), 3,92 (s, 2H), 3,35 (t, 2H), 2,90-2,79 (m, 4H), 2,45 (s, 3H), 1,47-1,37 (m, 2H), 1,31-1,18 (m, 2H), 0,80 (t, 3H) ppm.

Ejemplo 24

bis(formiato) 5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)-7-(piperazin-1-ilmetil)-6-(propoximetil)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-4- amina

15

imagen185

Una solucion del intermediario 23A (100 mg, 185 |imoles) en diclorometano (2 ml) se trato con cloruro de tionilo (27 |il, 371 |imoles). La mezcla se agito a ta durante 15 min y posteriormente se evaporo. El residuo se disolvio en 1- propanol (2 ml), se trato con DIPEA (48 |il, 278 |imoles) y se agito a ta durante 1 h. Despues de la evaporacion, el residuo se coloco en una solucion 4 M de cloruro de hidrogeno en 1,4-dioxano (2 ml) y se agito a ta durante 2 h. La 20 evaporacion y la purificacion por RP-HPLC preparativa (Reprosil C18, gradiente 10-95% acetonitrilo/0,1% de acido formico acuoso) dio 15 mg (16% de teor.) del compuesto del tttulo.

LC-MS (procedimiento 2): Tr = 0,78 min; MS (ESIpos): m/z = 481 (M+H)+

Ejemplo 25

bis(formiato) 6-[(ciclopropilmetoxi)metil]-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)-7-(piperazin-1-ilmetil)pirrolo[2,1- f][1,2,4]triazin-4-amina

5

imagen186

Una solucion del intermediario 23A (100 mg, 185 |imoles) en diclorometano (2 ml) se trato con cloruro de tionilo (27 |il, 371 |imoles). La mezcla se agito a ta durante 15 min y posteriormente se evaporo. El residuo se disolvio en ciclopropilmetanol (2 ml), se trato con DIPEA (48 |il, 278 |imoles) y se agito a 70°C durante 2 h. Despues de la evaporacion, el residuo se coloco en una solucion 4 M de cloruro de hidrogeno en 1,4-dioxano (2 ml) y se agito a ta 10 durante 2 h. La evaporacion y la purificacion por RP-HPLC preparativa (Reprosil C18, gradiente 10-95% acetonitrilo/0,1% de acido formico acuoso) dio 29 mg (30% de teor.) del compuesto del tttulo.

LC-MS (procedimiento 2): Tr = 0,78 min; MS (ESIpos): m/z = 493 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-da): 8 = 8,28 (br. s, 2H), 7,99 (s, 1H), 7,37 (s, 1H), 7,30 (s, 1H), 6,84 (s, 1H), 4,45 (s, 2H),

3,95 (s, 3H), 3,93 (s, 2H), 3,21 (d, 2H), 2,95-2,83 (m, 4H), 2,61-2,56 (m, 4H), 2,45 (s, 3H), 1,01-0,91 (m, 1H), 0,4615 0,37 (m, 2H), 0,15-0,08 (m, 2H) ppm.

Ejemplo 26

6-[(ciclobutiloxi)metil]-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)-7-(piperazin-1-ilmetil)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-amina

imagen187

Una solucion del intermediario 23A (85 mg, 157 |imoles) en diclorometano (1,7 ml) se trato con cloruro de tionilo (23 20 |il, 315 |imoles). La mezcla se agito a ta durante 15 min y posteriormente se evaporo. El residuo se disolvio en

ciclobutanol (1,7 ml), se trato con DIPEA (41 |il, 236 |imoles) y se agito a 70°C durante 2 h. Despues de la evaporacion, el residuo se coloco en una solucion 4 M de cloruro de hidrogeno en 1,4-dioxano (1,7 ml) y se agito a

5

10

15

20

25

LC-MS (procedimiento 2): Tr = 0,82 min; MS (ESIpos): m/z = 493 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-da): 8 = 8,01 (s, 1H), 7,37 (s, 1H), 7,32 (s, 1H), 6,85 (s, 1H), 4,37 (s, 2H), 4,06-3,86 (m, 6H), 3,14-2,97 (m, 4H), 2,80-2,62 (m, 4H), 2,45 (s, 3H), 2,10-1,96 (m, 2H), 1,83-1,69 (m, 2H), 1,65-1,52 (m, 1H), 1,49-1,33 (m, 1H) ppm.

Ejemplo 27

Formiato 6-(isopropoximetil)-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)-7-(piperazin-1-ilmetil)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-

Una solucion del intermediario 23A (65 mg, 120 |imoles) en diclorometano (1,3 ml) se trato con cloruro de tionilo (17 |il, 241 |imoles). La mezcla se agito a ta durante 15 min y posteriormente se evaporo. El residuo se disolvio en 2- propanol (1,3 ml), se trato con DIPEA (23 |il, 132 |imoles) y se agito a 70°C durante 1 h. S e agrego mas DIPEA (23 |il, 132 |imoles), y la mezcla se agito nuevamente a 70°C durante 1 h. Posteriormente, otra porcion de DIPEA (63 |il, 362 |imoles) se agrego, y se continuo con la agitacion a 90°C durante 3 h. Despues de la evaporacion, el residuo se coloco en una solucion 4 M de cloruro de hidrogeno en 1,4-dioxano (1,3 ml) y se agito a ta durante 2 h. La evaporacion y la purificacion por RP-HPLC preparativa (Reprosil C18, gradiente 10-95% acetonitrilo/0,1% de acido formico acuoso) dio 23 mg (34% de teor.) del compuesto del tttulo.

LC-MS (procedimiento 4): Tr = 0,74 min; MS (ESIpos): m/z = 481 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 8 = 8,30 (s, 1H), 7,98 (s, 1H), 7,37 (s, 1H), 7,30 (s, 1H), 6,84 (s, 1H), 4,43 (s, 2H),

3,95 (s, 3H), 3,90 (s, 2H), 3,57 (m, 1H, superposicion con pico de agua), 2,88-2,78 (m, 4H), 2,45 (s, 3H), 1,04 (d, 6H) ppm.

amina

imagen188

H3C

'3

x HCOOH

Ejemplo 28

Formiato (

f][1,2,4]triazin-4-amina

6-[(2-metoxietoxi)metil]-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)-7-(piperazin-1-ilmetil)pirrolo[2,1-

imagen189

Una solucion del intermediary 23A (100 mg, 185 |imoles) en diclorometano (2 ml) se trato con cloruro de tionilo (27 |il, 371 |imoles). La mezcla se agito a ta durante 15 min y posteriormente se evaporo. El residuo se disolvio en 2- metoxietanol (2 ml), se trato con DIPEA (35 |il, 204 |imoles) y se agito a 70°C durante 1 h. Despues de la 5 evaporacion, el residuo se coloco en una solucion 4 M de cloruro de hidrogeno en 1,4-dioxano (2 ml) y se agito a ta durante 2 h. La evaporacion y la purificacion por RP-HPLC preparativa (Reprosil C18, gradiente 10-95% acetonitrilo/0,1% de acido formico acuoso) dio 50 mg (50% de teor.) del compuesto del tttulo.

LC-MS (procedimiento 2): Tr = 0,75 min; MS (ESIpos): m/z = 497 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-da): 8 = 8,26 (br. s, 1H), 7,99 (s, 1H), 7,39 (s, 1H), 7,30 (s, 1H), 6,84 (s, 1H), 4,48 (s, 2H), 10 3,95 (s, 3H), 3,94 (s, 2H), 3,52-3,46 (m, 2H, superposicion con pico de agua), 3,44-3,37 (m, 2H, superposicion con

pico de agua), 3,20 (s, 3h), 2,94-2,84 (m, 4H), 2,61-2,54 (m, 4H, superposicion con Pico de DMSO), 2,45 (s, 3H) ppm.

Ejemplo 29

Formiato 5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)-7-(piperazin-1-ilmetil)-6-[(2,2,2-trifluoroetoxi)metil]pirrolo[2,1-

15 f][1,2,4]triazin-4-amina

imagen190

Una solucion del intermediario 23A (100 mg, 185 |imoles) en diclorometano (2 ml) se trato con cloruro de tionilo (27 |il, 371 |imoles). La mezcla se agito a ta durante 15 min y posteriormente se evaporo. El residuo se disolvio en 2,2,2-trifluoroetanol (2 ml), se trato con DIPEA (35 |il, 204 |imoles) y se agito a 70°C durante 1 h. Se agrego mas 20 DIPEA (35 |il, 204 |imoles), y se continuo con la agitacion a ta durante 1 h. Despues de la evaporacion, el residuo se coloco en una solucion 4 M de cloruro de hidrogeno en 1,4-dioxano (2 ml) y se agito a ta durante 2 h. La evaporacion y la purificacion por RP-HPLC preparativa (Reprosil C18, gradiente 10-95% acetonitrilo/0,1% de acido formico acuoso) dio 23 mg (23% de teor.) del compuesto del tttulo.

LC-MS (procedimiento 2): Tr = 0,79 min; MS (ESIpos): m/z = 521 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-da): 8 = 8,28 (br. s, 1H), 8,00 (s, 1H), 7,37 (s, 1H), 7,30 (s, 1H), 6,85 (s, 1H), 4,66 (s, 2H), 4,08 (q, 2H), 3,95 (s, 3H), 3,92 (s, 2H), 2,85-2,75 (m, 4H), 2,45 (s, 3H) ppm.

Ejemplo 30

5 Triclorhidrato 6-[(2-aminoetoxi)metil]-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)-7-(piperazin-1-ilmetil)pirrolo[2,1-

f][1,2,4]triazin-4-amina

imagen191

Una solucion del intermediary 23A (150 mg, 278 |imoles) en diclorometano (5 ml) se trato con cloruro de tionilo (40 |il, 556 |imoles). La mezcla se agito a ta durante 15 min y posteriormente se evaporo. El residuo se disolvio en THF 10 (0,5 ml) y se trato con (2-hidroxietil)carbamato de fer-butilo (1 ml) y DIPEA (242 |il, 1,39 mmoles). La mezcla se

agito a 100°C durante toda la noche. Despues de la evaporacion, el residuo se coloco en 1,4-dioxano (10 ml), se trato con una solucion 4 M de cloruro de hidrogeno en 1,4-dioxano (10 ml) y se agito a ta durante 1 h. Los volatiles se removieron a presion reducida, y el residuo se purifico por RP-HPLC preparativa (Reprosil C18, gradiente 1095% acetonitrilo/0,1% de acido formico acuoso). Ademas la purificacion por RP-HPLC preparativa (Shield RP18, 15 25% acetonitrilo/75% 0,01% TFA ac.) seguida de liofilizacion a partir de una solucion 4 M de cloruro de hidrogeno

en 1,4-dioxano dio 10 mg (6% de teor.) del compuesto del tttulo.

LC-MS (procedimiento 2): Tr = 0,58 min; MS (ESIpos): m/z = 482 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, D2O): 8 = 8,12 (s, 1H), 7,50 (s, 1H), 7,44 (s, 1H), 6,99 (s, 1H), 4,61 (s, 2H), 4,04 (s, 3H), 3,883,80 (m, 1H), 3,70-3,60 (m, 3H), 3,52-3,46 (m, 4H), 3,40-3,34 (m, 4H), 3,07 (t, 2H), 2,51 (s, 3H) ppm.

20 Ejemplo 31

{[4-amino-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)-7-(piperazin-1-ilmetil)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-6-il]metoxi}acetato de metilo

imagen192

Una solucion del intermediario 23A (50 mg, 92 |imoles) en diclorometano (2 ml) se trato con cloruro de tionilo (13 |il, 186 |imoles). La mezcla se agito a ta durante 15 min y posteriormente se evaporo. El residuo se disolvio en metilglicolato (1 ml), se trato con DIPEA (80 |il, 464 |imoles) y se agito a 70°C durante 2 h. Despues de la 5 evaporacion, el residuo se coloco en diclorometano (1,6 ml), se trato con acido trifluoroacetico (400 |il, 5,19 mmoles) y se agito a ta durante 1 h. Posteriormente, la mezcla se evaporo, y el residuo se purifico por RP-HPLC preparativa (Reprosil C18, gradiente 10-95% acetonitrilo/0,1% TFA ac.). Las fracciones que contienen el compuesto del tftulo se neutralizaron con solucion de hidrogeno carbonato de sodio acuosa saturada y se evaporaron. El residuo se coloco en agua, y la mezcla se extrajo tres veces con diclorometano. Las fases organicas combinadas se 10 secaron sobre sulfato de sodio y se evaporaron dando 21 mg (43% de teor.) del compuesto del tftulo.

LC-MS (procedimiento 2): Tr = 0,72 min; MS (ESIpos): m/z = 511 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-da): 8 = 7,99 (s, 1H), 7,39 (s, 1H), 7,31 (s, 1H), 6,85 (s, 1H), 4,59 (s, 2H), 4,11 (s, 2H),

3,95 (s, 3H), 3,90 (s, 2H), 3,57 (s, 3H), 2,81-2,69 (m, 4H), 2,48-2,39 (m, 7H) ppm.

Ejemplo 32

15 Acido {[4-amino-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)-7-(piperazin-1-ilmetil)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-6-

il]metoxi}acetico

imagen193

Una solucion del intermediario 24A (200 mg, 327 |imoles) en THF (14 ml) se trato con solucion 2,5 M de hidroxido de litio ac. (16 ml) y se agito a 80°C durante 2 h. La mezcla posteriormente se combino con la mezcla de reaccion 20 de una serie analftica de 27 mg. La fase acuosa se extrajo dos veces con THF, y las fases organicas combinadas se evaporaron. El residuo se disolvio en una solucion 4 M de cloruro de hidrogeno en 1,4-dioxano (2 ml) y se agito a ta durante 3 h. Despues de la evaporacion, el residuo se purifico por RP-HPLC preparativa (Reprosil C18, gradiente 10-95% acetonitrilo/0,1% TFA ac.). la liofilizacion a partir de una solucion 4 M de cloruro de hidrogeno en 1,4- dioxano y re-la purificacion por RP-HPLC preparativa (XBridge C18, gradiente 5-95% acetonitrilo/0,1% solucion de

hidroxido de amonio ac.) dio 13 mg (7% de teor.) del compuesto del tttulo.

LC-MS (procedimiento 2): Tr = 0,69 min; MS (ESIpos): m/z = 497 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-da): 8 = 8,00 (s, 1H), 7,38 (s, 1H), 7,30 (s, 1H), 6,84 (s, 1H), 4,54 (s, 2H), 4,08 (s, 2H),

3,95 (s, 3H), 3,79 (s, 2H), 2,99-2,89 (m, 4H), 2,73-2,63 (m, 4H), 2,44 (s, 3H) ppm.

5 Ejemplo 33

2-{[4-amino-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)-7-(piperazin-1-ilmetil)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-6-

il]metoxi}acetamida

imagen194

El intermediario 24A (200 mg, 327 |imoles) se trato con una solucion 7 M de amomaco en metanol (10 ml) y se agito 10 a ta durante toda la noche. La mezcla posteriormente se combino con la mezcla de reaccion de una serie analftica de 20 mg, y los solventes se evaporaron. El residuo se trato con una solucion 4 M de cloruro de hidrogeno en 1,4- dioxano (2 ml) y se agito a ta durante 2 h. La evaporacion y subsiguientes purificaciones por RP-HPLC preparativa (primero Reprosil C18, gradiente 10-95% acetonitrilo/0,1% TFA ac.; posteriormente XBridge C18, gradiente 5-95% acetonitrilo/0,1% de solucion de hidroxido de amonio ac.) dio 5,5 mg (3% de teor.) del compuesto del tftulo.

15 LC-MS (procedimiento 2): Tr = 0,69 min; MS (ESIpos): m/z = 496 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 8 = 8,14-7,59 (br. s, 1H), 7,99 (s, 1H), 7,39 (s, 1H), 7,35-7,22 (m, 3H), 6,85 (s, 1H), 4,54 (s, 2H), 3,95 (s, 3H), 3,90 (s, 2H), 3,79 (s, 2H), 2,73-2,66 (m, 4H), 2,45 (s, 3H), 2,43-2,35 (m, 4H) ppm.

Ejemplo 34

2-({7-[(4-acetilpiperazin-1-il)metil]-4-amino-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-6- 20 il}metoxi)acetamida

imagen195

3

Una solucion del ejemplo 33 (105 mg, 68% de pureza, 144 |imoles) en THF/diclorometano (1:2,5, 3,9 ml) se trato con carbonato de sodio (179 mg, 1,6 mmoles) y se agito a ta durante 30 min. Se agrego cloruro de acetilo (30 |il, 424 |imoles), y la mezcla resultante se agito a ta durante 30 min, posteriormente se templo con metanol (2 ml) y se 5 evaporo. La purificacion por RP-HPLC preparativa (Reprosil C18, gradiente 10-95% acetonitrilo/0,1% de acido formico acuoso) dio 30 mg (85% de pureza, 34% de teor.) del compuesto del tttulo.

LC-MS (procedimiento 5): Tr = 1,67 min; MS (ESIpos): m/z = 538 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-da): 8 = 7,99 (s, 1H), 7,40 (s, 1H), 7,33-7,19 (m, 3H), 6,85 (s, 1H), 4,55 (s, 2H), 3,96 (s, 5H), 3,80 (s, 2H), 3,43-3,36 (m, 4H), 2,47-2,38 (m, 7H), 1,97 (s, 3H) ppm.

10 Ejemplo 35

bis(formiato) 5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)-6-(phenoximetil)-7-(piperazin-1-ilmetil)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin- 4-amina

imagen196

Una solucion del intermediario 23A (100 mg, 185 |imoles) en diclorometano (2 ml) se trato con cloruro de tionilo (27 15 |il, 371 |imoles). La mezcla se agito a ta durante 15 min y posteriormente se evaporo. El residuo se disolvio en THF

(2 ml), se trato con fenol (174 mg, 1,85 mmoles) y DIPEA (48 |il, 278 |imoles) y se agito a 70°C durante 2 h. Otras cantidades de fenol (174 mg, 1,85 mmoles) y DIPEA (64 |il, 371 |imoles) se agregaron, y se continuo con la agitacion a 70°C durante toda la noche. Despues de la evaporacion, el residuo se coloco en una solucion 4 M de cloruro de hidrogeno en 1,4-dioxano (2 ml) y se agito a ta durante 2 h. La evaporacion y la purificacion por RP- 20 HPLC preparativa (Reprosil C18, gradiente 10-95% acetonitrilo/0,1% de acido formico acuoso) dio 8 mg (8% de teor.) del compuesto del tttulo.

LC-MS (procedimiento 2): Tr = 0,84 min; MS (ESIpos): m/z = 515 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-da): 8 = 8,26 (s, 2H), 8,02 (s, 1H), 7,36 (s, 1H), 7,30-7,22 (m, 3H), 6,99-6,89 (m, 3H), 6,81 (m, 1H), 5,04 (s, 2H), 3,93 (s, 5H), 2,78-2,71 (m, 4H), 2,42 (s, 3H) ppm.

Ejemplo 36

Triclorhidrato 5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)-6-[(metilamino)metil]-7-(piperazin-1-ilmetil)pirrolo[2,1-

5 f][1,2,4]triazin-4-amina

imagen197

El intermediario 25A (150 mg, 279 |imoles) en THF (3 ml) se trato con acido acetico (32 |il, 559 |imoles), una solucion 2 M de metilamina en THF (698 |il, 1,39 mmoles) y triacetoxiborohidruro de sodio (296 mg, 1,39 mmoles). La mezcla se agito a 60°C durante 2 h y posteriormente se evaporo. El residuo se disolvio en una solucion 4 M de 10 cloruro de hidrogeno en 1,4-dioxano (1,87 ml) y se agito a ta durante 2 h. Despues de la evaporacion, el residuo se purifico por RP-HPLC preparativa (Reprosil C18, gradiente 10-95% acetonitrilo/0,1% TFA ac.). La liofilizacion a partir de una solucion 4 M de cloruro de hidrogeno en 1,4-dioxano dio 79 mg (49% de teor.) del compuesto del tttulo.

LC-MS (procedimiento 2): Tr = 0,56 min; MS (ESIpos): m/z = 452 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, D2O): 8 = 8,17 (s, 1H), 7,57 (s, 1H), 7,46 (s, 1H), 7,01 (s, 1H), 4,52 (s, 2H), 4,46 (s, 2H), 4,04 (s, 15 3H), 3,48-3,39 (m, 4H), 3,25-3,15 (m, 4H), 2,59 (s, 3H), 2,51 (s, 3H) ppm.

Ejemplo 37

Triclorhidrato 6-[(dimetilamino)metil]-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)-7-(piperazin-1-ilmetil)pirrolo[2,1-

f][1,2,4]triazin-4-amina

imagen198

20 Una solucion del intermediario 25A (150 mg, 279 |imoles) en THF (3 ml) se trato con acido acetico (32 |il, 559 imoles), una solucion 2 M de dimetilamina en THF (698 |il, 1,39 mmoles) y triacetoxiborohidruro de sodio (296 mg,

1,39 mmoles). La mezcla se agito a 60°C durante 2 h y posteriormente se evaporo. El residuo se disolvio en una

10

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20

25

solucion 4 M de cloruro de hidrogeno en 1,4-dioxano (1,88 ml) y se agito a ta durante 2 h. Despues de la evaporacion, el residuo se purifico por RP-HPLC preparativa (Reprosil C18, gradiente 10-95% acetonitrilo/0,1% TFA ac.). La liofilizacion a partir de una solucion 4 M de cloruro de hidrogeno en 1,4-dioxano dio 83 mg (50% de teor.) del compuesto del tttulo.

LC-MS (procedimiento 4): Tr = 0,50 min; MS (ESIpos): m/z = 466 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, D2O): 8 = 8,17 (s, 1H), 7,57 (s, 1H), 7,45 (s, 1H), 7,01 (s, 1H), 4,57 (s, 2H), 4,50 (s, 2H), 4,04 (s, 3H), 3,47-3,36 (m, 4H), 3,21-3,12 (m, 4H), 2,80 (s, 6H), 2,51 (s, 3H) ppm.

Ejemplo 38

Triclorhidrato 6-[(etilamino)metil]-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)-7-(piperazin-1-ilmetil)pirrolo[2,1-

f][1,2,4]triazin-4-amina

imagen199

Una solucion del intermediario 25A (60 mg, 111,8 |imoles) en THF (1 ml) se trato con una solucion 2 M de etilamina en THF (83 |il, 167 |imoles), triacetoxiborohidruro de sodio (118 mg, 559 |imoles) y acido acetico (83 |il, 167 limoles). La mezcla se agito a 60°C durante 90 min. Se agregaron otras cantidades de solucion 2 M de etilamina (83 |il, 167 |imoles) y triacetoxiborohidruro de sodio (71 mg, 335 |imoles), y la agitacion a 60°C continuo durante otras 2 h. Despues de la evaporacion, el residuo se disolvio en una solucion 4 M de cloruro de hidrogeno en 1,4- dioxano (3 ml) y se agito a ta durante toda la noche. La mezcla se evaporo, y el residuo se purifico por RP-HPLC preparativa (Reprosil C18, gradiente 10-95% acetonitrilo/0,1% de acido formico acuoso) y se liofilizo a partir de una solucion 4 M de cloruro de hidrogeno en 1,4-dioxano. La repurificacion por RP-HPLC preparativa (Sunfire C18, 20% acetonitrilo/80% 0,02% TFA ac.) y la re-liofilizacion a partir de una solucion 4 M de cloruro de hidrogeno en 1,4- dioxano dio 19 mg (29% de teor.) del compuesto del tttulo.

LC-MS (procedimiento 2): Tr = 0,56 min; MS (ESIpos): m/z = 466 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, D2O): 8 = 8,14 (s, 1H), 7,56 (s, 1H), 7,45 (s, 1H), 7,01 (s, 1H), 4,45 (s, 4H), 4,04 (s, 3H), 3,453,32 (m, 4H), 3,18-3,05 (m, 4H), 2,99 (q, 2H), 2,51 (s, 3H), 1,10 (t, 3H) ppm.

Ejemplo 39

Triclorhidrato 2-({[4-amino-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)-7-(piperazin-1-ilmetil)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-6- il]metil}amino)etanol

imagen200

Una solucion del intermediary 25A (150 mg, 279 |imoles) en THF (3 ml) se trato con 2-aminoetanol (84 |il, 1,39 mmoles), triacetoxiborohidruro de sodio (296 mg, 1,39 mmoles) y acido acetico (32 |il, 559 |imoles). La mezcla se agito a 60°C durante 2 h y posteriormente se evaporo. El residuo se disolvio en una solucion 4 M de cloruro de 5 hidrogeno en 1,4-dioxano (1,87 ml) y se agito a ta durante 2 h. Despues de la evaporacion, el residuo se purifico por RP-HPLC preparativa (Reprosil C18, gradiente 10-95% acetonitrilo/0,1% TFA ac.). La liofilizacion a partir de una solucion 4 M de cloruro de hidrogeno en 1,4-dioxano dio 140 mg (80% de teor.) del compuesto del tttulo.

LC-MS (procedimiento 2): Tr = 0,54 min; MS (ESIpos): m/z = 482 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, D2O): 8 = 8,15 (s, 1H), 7,56 (s, 1H), 7,45 (s, 1H), 7,00 (s, 1H), 4,47 (s, 2H), 4,37 (s, 2H), 4,04 (s, 10 3H), 3,79-3,71 (m, 2H), 3,42-3,34 (m, 4H), 3,19-3,12 (m, 2H), 3,06-2,97 (m, 4H), 2,51 (s, 3H) ppm.

Procedimiento general para las reacciones de aminacion reductora con el intermediario 25A (GP1):

Una solucion 0,1 M del intermediario 25A en THF se trato con 5 eq. del respectivo componente de amina, 5 eq. de triacetoxiborohidruro de sodio y 2 eq. de acido acetico. La mezcla resultante se agito a 60°C durante 2 h y posteriormente se evaporo. Una solucion 0,15 M del residuo obtenido de este modo en una solucion 4 M de cloruro 15 de hidrogeno en 1,4-dioxano se agito a ta durante 1-2 h. Despues de la evaporacion, el residuo se purifico como se describe a continuacion.

Ejemplo 40

Triclorhidrato rac-1-{[4-amino-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)-7-(piperazin-1-ilmetil)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin- 6-il]metil}piperidin-3-ol

imagen201

De acuerdo con el GP1, el intermediario 25A (150 mg, 279 |imoles) se hizo reaccionar con 3-hidroxipiperidina (141 mg, 1,39 mmoles). La purificacion por RP-HPLC preparativa (Reprosil C18, gradiente 10-95% acetonitrilo/0,1% TFA ac.) y la liofilizacion a partir de una solucion 4 M de cloruro de hidrogeno en 1,4-dioxano dio 178 mg (cuant.) del

compuesto del tttulo.

LC-MS (procedimiento 2): Tr = 0,54 min; MS (ESIpos): m/z = 522 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, D2O): 8 = 8,16 (s, 1H), 7,55 (s, 1H), 7,45 (s, 1H), 7,01 (s, 1H), 4,66-4,16 (m, 5H), 4,04 (s, 3H), 3,55-2,71 (m, 11H), 2,51 (s, 3H), 1,96-1,42 (m, 4H), 1,64-1,50 (m, 1H) ppm.

5 Ejemplo 41

Triclorhidrato 1-{[4-amino-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)-7-(piperazin-1-ilmetil)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-6- il]metil}piperidin-4-ol

imagen202

De acuerdo con GP1, el intermediario 25A (150 mg, 279 |imoles) se hizo reaccionar con 4-hidroxipiperidina (141 10 mg, 1,39 mmoles). La purificacion por RP-HPLC preparativa (Reprosil C18, gradiente 10-95% acetonitrilo/0,1% TFA ac.) y la liofilizacion a partir de una solucion 4 M de cloruro de hidrogeno en 1,4-dioxano dio 162 mg (91% de teor.) del compuesto del tttulo.

LC-MS (procedimiento 4): Tr = 0,48 min; MS (ESIpos): m/z = 522 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, D2O): 8 = 8,16 (s, 1H), 7,58 (br. s, 1H), 7,46 (s, 1H), 7,01 (s, 1H), 4,67-4,48 (m, 4H), 4,04 (s, 15 4H), 3,59-2,78 (m, 12H), 2,51 (s, 3H), 2,14-1,38 (m, 4H) ppm.

Ejemplo 42

Triclorhidrato rac-1-{[4-amino-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)-7-(piperazin-1-ilmetil)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin- 6-il]metil}pirrolidin-3-ol

imagen203

1,39 mmoles). La purificacion por RP-HPLC preparativa (Reprosil C18, gradiente 10-95% acetonitrilo/0,1% TFA ac.) y la liofilizacion a partir de una solucion 4 M de cloruro de hidrogeno en 1,4-dioxano dio 148 mg (85% de teor.) del compuesto del tttulo.

LC-MS (procedimiento 4): Tr = 0,46 min; MS (ESIpos): m/z = 508 (M+H)+

5 1H-RMN (400 MHz, D2O): 8 = 8,18 (s, 1H), 7,58 (s, 1H), 7,46 (s, 1H), 7,01 (s, 1H), 4,71-4,30 (m, 5H), 4,04 (s, 3H),

3,70-2,95 (m, 12H), 2,51 (s, 3H), 2,32-2,14 (m, 1H), 2,03-1,87 (m, 1H) ppm.

Ejemplo 43

Triclorhidrato 6-[(dietilamino)metil]-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)-7-(piperazin-1-ilmetil)pirrolo[2,1-

f][1,2,4]triazin-4-amina

10

imagen204

De acuerdo con GP1, el intermediario 25A (150 mg, 279 |imoles) se hizo reaccionar con dietilamina (144 |il, 1,39 mmoles). La purificacion por RP-HPLC preparativa (Reprosil C18, gradiente 10-95% acetonitrilo/ 0,1% TFA ac.) y la liofilizacion a partir de una solucion 4 M de cloruro de hidrogeno en 1,4-dioxano dio 127 mg (69% de teor.) del compuesto del tttulo.

15 LC-MS (procedimiento 2): Tr = 0,55 min; MS (ESIpos): m/z = 494 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, D2O): 8 = 8,19 (s, 1H), 7,61 (s, 1H), 7,47 (s, 1H), 7,01 (s, 1H), 4,59 (s, 2H), 4,51 (s, 2H), 4,04 (s, 3H), 3,47-3,35 (m, 4H), 3,29-3,00 (m, 8H), 2,51 (s, 3H), 1,07 (t, 6H) ppm.

Ejemplo 44

Triclorhidrato 6-[(ciclobutilamino)metil]-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)-7-(piperazin-1-ilmetil)pirrolo[2,1-

20 f][1,2,4]triazin-4-amina

imagen205

De acuerdo con GP1, el intermediario 25A (150 mg, 279 |imoles) se hizo reaccionar con ciclobutilamina (119 |il,

1,39 mmoles). La purificacion por RP-HPLC preparativa (Reprosil C18, gradiente 10-95% acetonitrilo/0,1% TFA ac.) y la liofilizacion a partir de una solucion 4 M de cloruro de hidrogeno en 1,4-dioxano dio 127 mg (72% de teor.) del compuesto del tttulo.

5 LC-MS (procedimiento 2): Tr = 0,58 min; MS (ESIpos): m/z = 492 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, D2O): 8 = 8,16 (s, 1H), 7,59 (s, 1H), 7,47 (s, 1H), 7,00 (s, 1H), 4,40 (s, 2H), 4,37 (s, 2H), 4,04 (s, 3H), 3,69-3,58 (m, 1H), 3,44-3,33 (m, 4H), 3,21-3,12 (m, 4H), 2,51 (s, 3H), 2,02-1,87 (m, 4H), 1,81-1,62 (m, 2H) ppm.

Ejemplo 45

10 Triclorhidrato 5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)-7-(piperazin-1-ilmetil)-6-(pirrolidin-1-ilmetil)pirrolo[2,1-

f][1,2,4]triazin-4-amina

imagen206

De acuerdo con GP1, el intermediario 25A (150 mg, 279 |imoles) se hizo reaccionar con pirrolidina (116 |il, 1,39 mmoles). La purificacion por RP-HPLC preparativa (Reprosil C18, gradiente 10-95% acetonitrilo/ 0,1% TFA ac.) y la 15 liofilizacion a partir de una solucion 4 M de cloruro de hidrogeno en 1,4-dioxano dio 112 mg (64% de teor.) del compuesto del tttulo.

LC-MS (procedimiento 2): Tr = 0,54 min; MS (ESIpos): m/z = 492 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, D2O): 8 = 8,19 (s, 1H), 7,60 (s, 1H), 7,46 (s, 1H), 7,01 (s, 1H), 4,70-4,61 (m, 4H), 4,04 (s, 3H), 3,55-3,40 (m, 6H), 3,35-3,26 (m, 4H), 3,02-2,87 (m, 2H), 2,51 (s, 3H), 1,97-1,83 (m, 4H) ppm.

20 Ejemplo 46

Triclorhidrato 6-[(ciclopropilamino)metil]-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)-7-(piperazin-1-ilmetil)pirrolo[2,1- f][1,2,4]triazin-4-amina

imagen207

De acuerdo con GP1, el intermediary 25A (200 mg, 372 |imoles) se hizo reaccionar con ciclopropilamina (129 |il, 1,86 mmoles). La purificacion por RP-HPLC preparativa (Reprosil C18, gradiente 10-95% acetonitrilo/0,1% TFA ac.) y la liofilizacion a partir de una solucion 4 M de cloruro de hidrogeno en 1,4-dioxano dio 140 mg (62% de teor.) del 5 compuesto del tttulo.

LC-MS (procedimiento 5): Tr = 1,42 min; MS (ESIpos): m/z = 478 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, D2O): 8 = 8,16 (s, 1H), 7,56 (s, 1H), 7,46 (s, 1H), 7,01 (s, 1H), 4,57 (s, 2H), 4,47 (s, 2H), 4,04 (s, 3H), 3,46-3,34 (m, 4H), 3,19-3,07 (m, 4H), 2,61-2,54 (m, 1H), 2,51 (s, 3H), 0,75-0,64 (m, 4H) ppm.

Ejemplo 47

10 Triclorhidrato 6-{[(ciclopropilmetil)amino]metil}-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)-7-(piperazin-1-

ilmetil)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-amina

imagen208

De acuerdo con GP1, el intermediario 25A (200 mg, 372 |imoles) se hizo reaccionar con ciclopropilmetilamina (161 |il, 1,86 mmoles). La purificacion por RP-HPLC preparativa (Reprosil C18, gradiente 10-95% acetonitrilo/0,1% TFA 15 ac.) y la liofilizacion a partir de una solucion 4 M de cloruro de hidrogeno en 1,4-dioxano dio 163 mg (69% de teor.) del compuesto del tttulo.

LC-MS (procedimiento 2): Tr = 0,60 min; MS (ESIpos): m/z = 492 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, D2O): 8 = 8,14 (s, 1H), 7,57 (s, 1H), 7,45 (s, 1H), 7,00 (s, 1H), 4,50 (s, 2H), 4,44 (s, 2H), 4,04 (s, 3H), 3,42-3,34 (m, 4H), 3,16-3,07 (m, 4H), 2,86 (d, 2H), 2,50 (s, 3H), 0,89-0,76 (m, 1H), 0,55-0,45 (m, 2H), 0,23-0,14 20 (m, 2H) ppm.

Triclorhidrato W-{[4-amino-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)-7-(piperazin-1-ilmetil)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-6-

il]metil}glycine

imagen209

Una solucion del intermediario 25A (161 mg, 300 |imoles) en THF (3,2 ml) se trato con 2-aminoacido acetico (112 5 mg, 1,5 mmoles), triacetoxiborohidruro de sodio (317 mg, 1,5 mmoles) y acido acetico (34 |il, 600 |imoles). La mezcla resultante se agito a 60°C durante 2 h y posteriormente se evaporo. El residuo se purifico por RP-HPLC preparativa (Reprosil C18, gradiente 10-95% acetonitrilo/0,1% TFA ac.). El producto obtenido de este modo se disolvio en una solucion 4 M de cloruro de hidrogeno en 1,4-dioxano (2 ml) y se agito a ta durante 1 h. Despues de la evaporacion, el residuo se purifico por RP-HPLC preparativa (Reprosil C18, gradiente 10-95% acetonitrilo/0,1% 10 TFA ac.). La posterior liofilizacion a partir de una solucion 4 M de cloruro de hidrogeno en 1,4-dioxano dio 18 mg (9% de teor.) del compuesto del tttulo.

LC-MS (procedimiento 2): Tr = 0,63 min; MS (ESIpos): m/z = 496 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, D2O): 8 = 8,14 (s, 1H), 7,54 (s, 1H), 7,45 (s, 1H), 6,99 (s, 1H), 4,42 (s, 2H), 4,36 (s, 2H), 4,03 (s, 3H), 3,64 (s, 2H), 3,42-3,33 (m, 4H), 3,07-2,96 (m, 4H), 2,50 (s, 3H) ppm.

15 Ejemplo 49

Triclorhidrato 4-{[4-amino-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)-7-(piperazin-1-ilmetil)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-6- il]metil}piperazin-2-ona

imagen210

Una solucion del intermediario 27A (220 mg, 354 |imoles) en una solucion 4 M de cloruro de hidrogeno en 1,420 dioxano (2 ml) se agito a ta durante 2 h. Posteriormente, la mezcla se evaporo dejando 235 mg del producto bruto el cual se uso en el proximo paso sin purificacion posterior.

LC-MS (procedimiento 4): Tr = 0,60 min; MS (ESIpos): m/z = 521 (M+H)+.

Ejemplo 50

[4-amino-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)-7-(morfolin-4-ilmetil)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-6-il]metanol

imagen211

Una solucion del intermediario 20A (500 mg, pureza 87%, 1,28 mmoles) y 4-metilenemorfolin-4-ium cloruro (347 mg, 5 2,56 mmoles) en DMF (28 ml) se agito a 70°C durante 1,5 h. La mezcla se diluyo con acetato de etilo y se lavo con

solucion de hidrogeno carbonato de sodio acuosa saturada y solucion de cloruro de sodio acuosa saturada. La capa organica se secaron con sulfato de magnesio y se evaporaron a presion reducida dando 710 mg (pureza 78%, 99% de teor.) del compuesto del tttulo.

LC-MS (procedimiento 2): Tr = 0,65 min; MS (ESIpos): m/z = 440 (M+H)+.

10 Ejemplo 51

(3S)-3-({[4-amino-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)-7-(morfolin-4-ilmetil)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-6-

il]metil}amino)pirrolidin-2-ona

imagen212

Una solucion del intermediario 33A (65 mg, 149 pmoles) en metanol (2 ml) se trato con (3S)-3-aminopirrolidin-2-ona 15 (45 mg, 446 pmoles), cianoborohidruro de sodio (47 mg, 743 pmoles) y acido acetico (26 |il, 446 |imoles). Despues

de agitar a 60°C durante 16 h, la mezcla resultante se separo por RP-HPLC preparativa (Reprosil C18, gradiente 20-40% acetonitrilo/0,2% TFA ac.). El producto obtenido de este modo se disolvio en metanol y se filtro a traves de un cartucho de intercambio anionico (Stratospheres SPE, PL-HCO3 MP-resina). El cartucho se eluyo con metanol, y el filtrado se evaporo dando 49 mg (63% de teor.) del compuesto del tttulo.

20 LC-MS (procedimiento 2): Tr = 0,71 min; MS (ESIpos): m/z = 522 (M+H)+

1H), 2,61 (t, 1H), 2,45 (t, 3H), 2,38-2,44 (m, 4H), 1,89-1,99 (m, 1H), 1,49-1,60 (m, 1H) ppm.

Ejemplo 52

4-{[4-amino-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)-7-(morfolin-4-ilmetil)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-6-il]metil}piperazin-

2-ona

imagen213

Una solucion del intermediario 33A (65 mg, 149 pmoles) en metanol (2 ml) se trato con 2-oxopiperazina (45 mg, 446 pmoles), cianoborohidruro de sodio (47 mg, 743 pmoles) y acido acetico (26 |il, 446 |imoles). Despues de agitar a 60°C durante 16 h, la mezcla resultante se separo por RP-HPLC preparativa (Reprosil C18, gradiente 20-40% acetonitrilo/0,2% TFA ac.). El producto obtenido de este modo se disolvio en metanol y se filtro a traves de un 10 cartucho de intercambio anionico (Stratospheres SPE, PL-HCO3 MP-resina). El cartucho se eluyo con metanol, y el filtrado se evaporo dando 41 mg (53% de teor.) del compuesto del tttulo.

LC-MS (procedimiento 2): Tr = 0,70 min; MS (ESIpos): m/z = 522 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 8 = 7,97 (s, 1H), 7,67 (br. s, 1H), 7,55-8,05 (br. s, 1H), 7,38 (s, 1H), 7,30 (s, 1H), 6,84 (s, 1H), 5,29-5,88 (br. s, 1H), 3,95 (s, 3H), 3,92 (s, 2H), 3,58 (s, 2H), 3,51-3,56 (m, 4H), 3,00-3,06 (m, 2H), 2,85 15 (s, 2H), 2,45 (s, 3H), 2,43-2,48 (m, 5H) ppm.

Ejemplo 53

rac-1-({[4-amino-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)-7-(morfolin-4-ilmetil)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-6-

il]metil}amino)propan-2-ol

imagen214

20 Una solucion del intermediario 33A (64 mg, 146 pmoles) en metanol (2 ml) se trato con rac-1-aminopropan-2-ol (33 mg, 439 pmoles), cianoborohidruro de sodio (46 mg, 731 pmoles) y acido acetico (25 |il, 439 |imoles). Despues de agitar a 60°C durante 16 h, la mezcla resultante se separo por RP-HPLC preparativa (Reprosil C18, gradiente 20-

10

15

20

40% acetonitrilo/0,2% TFA ac.). El producto obtenido de este modo se disolvio en metanol y se filtro a traves de un cartucho de intercambio anionico (Stratospheres SPE, PL-HCO3 MP-resina). El cartucho se eluyo con metanol, y el filtrado se evaporo dando 42 mg (57% de teor.) del compuesto del tttulo.

LC-MS (procedimiento 5): Tr = 1,63 min; MS (ESIpos): m/z = 497 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-da): 8 = 7,96 (s, 1H), 7,47-7,92 (br. s, 1H), 7,39 (s, 1H), 7,30 (s, 1H), 6,84 (s, 1H), 5,365,92 (br. s, 1H), 4,36 (d, 1H), 3,95 (s, 3H), 3,90 (s, 2H), 3,64-3,75 (m, 2H), 3,49-3,61 (m, 5H), 2,45 (s, 3H), 2,39-2,47 (m, 4H), 2,31-2,38 (m, 2H), 0,97 (d, 3H) ppm.

Ejemplo 54

1-({[4-amino-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)-7-(morfolin-4-ilmetil)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-6-il]metil}amino)-2-

metilpropan-2-ol

imagen215

Una solucion del intermediario 33A (80 mg, 183 pmoles) en metanol (2 ml) se trato con 1-amino-2-metilpropan-2-ol (34 mg, 274 pmoles), cianoborohidruro de sodio (57 mg, 914 pmoles) y acido acetico (21 |il, 366 |imoles). Despues de agitar a 60°C durante 16 h, la mezcla resultante se separo por Rp-HPLC preparativa (Reprosil C18, gradiente 20-40% acetonitrilo/0,2% TFA ac.). El producto obtenido de este modo se disolvio en metanol y se filtro a traves de un cartucho de intercambio anionico (Stratospheres SPE, PL-HCO3 MP-resina). El cartucho se eluyo con metanol, y el filtrado se evaporo dando 29 mg (31% de teor.) del compuesto del tttulo.

LC-MS (procedimiento 2): Tr = 0,65 min; MS (ESIpos): m/z = 511 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 8 = 7,96 (s, 1H), 7,50-8,02 (br. s, 1H), 7,42 (s, 1H), 7,28 (s, 1H), 6,84 (s, 1H), 5,4-6,0 (br. s, 1H), 4,11 (s, 1H), 3,95 (s, 3H), 3,90 (s, 2H), 3,70 (d, 2H), 3,51-3,58 (m, 4H), 2,45 (s, 3H), 2,39-2,46 (m, 4H), 2,33 (d, 2H), 1,83-1,92 (m, 1H), 1,03 (s, 6H) ppm.

Ejemplo 55

1-(4-{[4-amino-6-(hidroximetil)-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-7-il]metil}piperazin-1-

il)etanona

5

10

imagen216

formaldehftdo acuosa (91 |il, 1,22 mmoles) y 1-acetilpiperazina (160 mg, 1,22 mmoles). La mezcla se agito a 60°C durante 6 h y posteriormente se evaporo. El residuo se disolvio en una mezcla de THF/solucion 1 M de hidroxido de litio ac. (1:1, 10 ml) y se agito a ta durante 2 h. La mezcla posteriormente se combino con la mezcla de reaccion de una serie analftica de 100 mg, y se agrego solucion de cloruro de amonio acuosa saturada. La mezcla se extrajo con acetato de etilo, y la fase organica se lavo con solucion de cloruro de sodio acuosa saturada, se seco sobre sulfato de magnesio y se evaporo a presion reducida dando 678 mg (pureza 87%, 94% de teor.) del compuesto del tftulo.

LC-MS (procedimiento 2): Tr = 0,71 min; MS (ESIpos): m/z = 481 (M+H)+.

Ejemplo 56

(3R)-3-[({7-[(4-acetilpiperazin-1-il)metil]-4-amino-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-6-

il}metil)amino]pirrolidin-2-ona

15

imagen217

ona (21 mg, 251 pmoles), cianoborohidruro de sodio (52 mg, 836 pmoles) y acido acetico (19 |il, 334 |imoles). Despues de agitar a 60°C durante 16 h, la mezcla resultante se separo por RP-HPLC preparativa (Reprosil C18, gradiente 20-40% acetonitrilo/0,2% TFA ac.). El producto obtenido de este modo se disolvio en metanol y se filtro a traves de un cartucho de intercambio anionico (Stratospheres SPE, PL-HCO3 MP-resina). El cartucho se eluyo con metanol, y el filtrado se evaporo dando 46 mg (49% de teor.) del compuesto del tftulo.

LC-MS (procedimiento 2): Tr = 0,70 min; MS (ESIpos): m/z = 563 (M+H)

1H-RMN (400 MHz, DMSO-da): 8 = 8,42 (s, 1H), 8,05 (s, 1H), 7,93-8,24 (br. s, 1H), 7,51 (s, 1H), 7,34 (s, 1H), 6,88 (s, 1H), 5,75-6,07 (br. s, 1H), 4,21-4,37 (m, 2H), 4,19 (s, 2H), 4,10 (t, 1H), 3,96 (s, 3H), 3,56-3,66 (m, 2H), 3,44-3,54 (m, 4H), 3,11-3,27 (m, 4H), 2,47 (s, 4H), 2,16-2,25 (m, 1H), 2,00 (s, 3H), 1,86-1,95 (m, 1H) ppm.

Ejemplo 57

5 1-(4-{[4-amino-6-{[(2-hidroxi-2-metilpropil)amino]metil}-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)pirrolo[2,1- f][1,2,4]triazin-7-il]metil}piperazin-1-il)etanona

imagen218

Una solucion del intermediario 31A (80 mg, 183 pmoles) en metanol (2 ml) se trato con 1-amino-2-metilpropan-2-ol (31 mg, 251 pmoles), cianoborohidruro de sodio (53 mg, 836 pmoles) y acido acetico (19 |il, 334 |imoles). Despues 10 de agitar a 60°C durante 16 h, la mezcla resultante se separo por rP-HPLC preparativa (Reprosil C18, gradiente 20-40% acetonitrilo/0,2% TFA ac.). El producto obtenido de este modo se disolvio en metanol y se filtro a traves de un cartucho de intercambio anionico (Stratospheres SPE, PL-HCO3 MP-resina). El cartucho se eluyo con metanol, y el filtrado se evaporo dando 29 mg (31% de teor.) del compuesto del tttulo.

LC-MS (procedimiento 2): Tr = 0,71 min; MS (ESIpos): m/z = 552 (M+H)+

15 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 8 = 7,96 (s, 1H), 7,59-8,02 (br. s, 1H), 7,42 (s, 1H), 7,28 (s, 1H), 6,84 (s, 1H), 5,45

5,93 (br. s, 1H), 4,13 (br. s, 1H), 3,95 (s, 3H), 3,93 (s, 2H), 3,71 (s, 2H), 3,37-3,44 (m, 4H), 2,45 (s, 3H), 2,32-2,43 (m, 6H), 1,97 (s, 3H), 1,03 (s, 6H) ppm.

Ejemplo 58

Formiato 4-({4-amino-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)-6-[(3-oxopiperazin-1-il)metil]pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-7- 20 il}metil)piperazin-1-carbaldel'ndo

imagen219

x HCOOH

Se agitaron acido anhndrido acetico (498 |il, 5,17 mmoles) y acido formico (237 |il, 6,28 mmoles) primero 2 h a 50°C y posteriormente durante toda la noche a ta. A continuacion, la mezcla se diluyo con diclorometano (5,1 ml), y 1,16 ml de esta solucion se agregaron a una solucion del ejemplo 49 (233 mg, 370 |imoles) en piridina (89 |il). Despues de agitar a ta durante 2 h, la mezcla se diluyo con metanol y posteriormente se evaporo. El residuo se purifico por 5 RP-HPLC preparativa (Reprosil C18, gradiente 10-95% acetonitrilo/0,1% de acido formico acuoso) dando 77 mg (35% de teor.) del compuesto del tttulo.

LC-MS (procedimiento 4): Tr = 0,62 min; MS (ESIpos): m/z = 549 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-da): inter al. 8 = 8,14 (s, 1H), 7,97 (s, 2H), 7,67 (s, 1H), 7,38 (s, 1H), 7,30 (s, 1H), 6,84 (s, 1H), 3,96 (s, 2H), 3,95 (s, 3H), 3,58 (s, 2H), 3,04 (br. t, 2H), 2,86 (s, 2H), 2,45 (s, 3H), 2,42 (br. t, 2H) ppm.

10 Ejemplo 59

4-({7-[(4-acetilpiperazin-1-il)metil]-4-amino-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-6-

il}metil)piperazin-2-ona

imagen220

Una suspension del ejemplo 49 (310 mg, 522 |imoles) en diclorometano/THF (2,5:1, 9,64 ml) se trato con carbonato 15 de sodio (442 mg, 4,17 mmoles) y se agito a ta durante 30 min. Se agrego cloruro de acetilo (74 |il, 1,04 mmoles), y la mezcla resultante se agito a ta durante 2 h. Despues de templar con metanol, la mezcla se evaporo, y el residuo se purifico por RP-HPLC preparativa (Reprosil C18, gradiente 10-95% acetonitrilo/0,1% de acido formico acuoso) dando 133 mg (45% de teor.) del compuesto del tttulo.

LC-MS (procedimiento 2): Tr = 0,69 min; MS (ESIpos): m/z = 563 (M+H)+

20 1H-RMN (400 MHz, metanol^): 8 = 7,89 (s, 1H), 7,30 (s, 1H), 7,28 (s, 1H), 6,79 (s, 1H), 4,13 (s, 2H), 3,98 (s, 3H),

3,74 (s, 2H), 3,59 (t, 2H), 3,54 (t, 2H), 3,18 (t, 2H), 3,02 (s, 2H), 2,68-2,55 (m, 6H), 2,48 (s, 3H), 2,08 (s, 3H) ppm.

Ejemplo 60

bis(formiato) 4-amino-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)-7-(piperazin-1-ilcarbonil)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-6- carboxilato de metilo

imagen221

A una solucion del intermediary 28A (15 mg, 26 |imoles) en a THF/metanol mixture (5:1, 180 |il), se enfrio hasta 0°C, se agrego (trimetilsilil)diazometano (solucion 2 M en hexano, 15 |il, 32 |imoles). La mezcla resultante se entibio lentamente hasta ta durante 30 min y posteriormente se evaporo. El residuo se disolvio en una solucion 4 M de 5 cloruro de hidrogeno en 1,4-dioxano (0,5 ml) y se agito a ta durante 1 h. Despues de la evaporacion, el residuo se purifico por RP-HPLC preparativa (Reprosil C18, gradiente 10-95% acetonitrilo/0,1% de acido formico acuoso) dando 4,8 mg (35% de teor.) del compuesto del tttulo.

LC-MS (procedimiento 2): Tr = 0,66 min; MS (ESIpos): m/z = 481 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-da): inter al. 8 = 8,17 (s, 2H), 8,38-8,23 (br. s, 1H), 8,04 (s, 1H), 7,43 (s, 1H), 7,31 (s, 1H), 10 6,86 (s, 1H), 5,71-5,58 (br. s, 1h), 3,96 (s, 3H), 3,60 (s, 3H, superposicion con pico de agua), 2,46 (s, 3h) ppm.

Ejemplo 61

Triclorhidrato 5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)-6-(1,3-oxazol-5-il)-7-(piperazin-1-ilmetil)pirrolo[2,1-

f][1,2,4]triazin-4-amina

imagen222

15 Una solucion del intermediario 25A (100 mg, 0,19 mmoles) en metanol (3,33 ml) se trato con (4-tolueno- sulfonilo)metilisocianuro (36 mg, 0,19 mmoles) y carbonato de potasio (25 mg, 186 |imoles). La mezcla se sometio a reflujo durante 6 h. Posteriormente se combino con las mezclas de reaccion de tres series analtticas de 30 mg y se evaporaron. El residuo se disolvio en una solucion 4 M de cloruro de hidrogeno en 1,4-dioxano (10 ml) y se agito a ta durante 2 h. Despues de la evaporacion, el residuo se purifico por RP-HPLC preparativa dos veces (Reprosil 20 C18, gradiente 10-95% acetonitrilo/0,1% TFA ac.). Ademas, la purificacion por cromatograffa de columna sobre gel

de sflice (diclorometano/metanol 5:1 con 0,5% de amomaco ac.) y la liofilizacion a partir de una solucion 4 M de cloruro de hidrogeno en 1,4-dioxano dio 75 mg (34% de teor.) del compuesto del tttulo.

LC-MS (procedimiento 4): Tr = 0,69 min; MS (ESIpos): m/z = 476 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-da): inter al. 8 = 8,40 (s, 1H), 8,20 (s, 1H), 7,46 (s, 1H), 7,35 (s, 1H), 6,96 (s, 1H), 6,89 (s, 1H), 3,95 (s, 3H), 2,46 (s, 3H) ppm.

Ejemplo 62

Triclorhidrato 6-(aminometil)-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)-7-(piperazin-1-ilmetil)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-4- 5 amina

imagen223

Una suspension del intermediary 29A (76 mg, 134 |imoles) y 10% Pd/C (60 mg) en una solucion 0,5 M de cloruro de hidrogeno en metanol (20 ml) se agito a ta durante 3 h bajo 1 atm de hidrogeno. La mezcla posteriormente se filtro a traves de kieselguhr, el filtrado se evaporo, y el residuo se purifico por RP-HPLC preparativa (Reprosil C18, 10 gradiente 10-95% acetonitrilo/0,1% TFA ac.). El producto obtenido de este modo se liofilizo a partir de una solucion 4 M de cloruro de hidrogeno en 1,4-dioxano dando 34 mg (46% de teor.) del compuesto del tttulo.

LC-MS (procedimiento 2): Tr = 0,55 min; MS (ESIpos): m/z = 438 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): inter al. 8 = 8,24 (br. s, 3H), 8,12 (s, 1H), 7,52 (s, 1H), 7,34 (s, 1H), 6,89 (s, 1H), 3,96 (s, 3H), 3,76-3,63 (m, 1H), 3,52-3,42 (m, 1H), 2,47 (s, 3H) ppm.

15 Ejemplo 63

bis(trifluoroacetato) A/-{[4-amino-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)-7-(piperazin-1-ilmetil)pirrolo-

[2,1-f][1,2,4]triazin-6-il]metil}acetamida

imagen224

Una solucion del intermediario 30A (210 mg, 362 |imoles) en diclorometano (26 ml) se trato con acido 20 trifluoroacetico (5,2 ml) y se agito a ta durante 1 h. Despues de la evaporacion a ta, el residuo se purifico por RP- HPLC preparativa (Reprosil C18, gradiente 10-95% acetonitrilo/0,1% TfA ac.) dando 163 mg (63% de teor.) del compuesto del tttulo.

LC-MS (procedimiento 3): Tr = 2,42 min; MS (ESIpos): m/z = 480 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-da): inter al. 8 = 9,00-8,75 (br. s, 1H), 8,30-8,16 (br. s, 1H), 8,08 (s, 1H), 7,38 (s, 1H), 7,33 (s, 1H), 6,87 (s, 1H), 4,32 (br. d, 2H), 3,96 (s, 3H), 3,40-2,98 (m, 8H), 2,46 (s, 3H), 1,77 (s, 3H) ppm.

Ejemplo 64

5 Diclorhidrato W-{[4-amino-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)-7-(piperazin-1-ilmetil)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-6-

il]metil}acetamida

imagen225

Una solucion del intermediario 30A (80 mg, 0,14 mmoles) en diclorometano (10 ml) y acido trifluoroacetico (2 ml) se agito a ta durante 1 h y posteriormente se evaporo. La purificacion por RP-HPLC preparativa (Reprosil C18, 10 gradiente 10-95% acetonitrilo/0,1% de acido formico acuoso) y la liofilizacion a partir de una mezcla de metanol y solucion 4 M de cloruro de hidrogeno en 1,4-dioxano dio 39 mg (50% de teor.) del compuesto del tttulo.

LC-MS (procedimiento 5): Tr = 1,56 min; MS (ESIpos): m/z = 480 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): inter al. 8 = 8,12 (s, 1H), 7,38 (s, 1H), 7,33 (s, 1H), 6,87 (s, 1H), 4,37 (br. d, 2H), 3,96 (s, 3H), 3,85-3,20 (m, 8H, superposicion con pico de agua), 2,46 (s, 3H), 1,76 (s, 3H) ppm.

15 Ejemplo 65

Formiato A/-({4-amino-7-[(4-formilpiperazin-1-il)metil]-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin- 6-il}metil)acetamida

imagen226

x HCOOH

|j| de esta solucion se agregaron a una solucion del ejemplo 63 (160 mg, 226 jmoles) en piridina (54 |il). La mezcla se agito a ta durante 2 h, posteriormente se diluyo con metanol (1 ml), y se continuo con la agitacion a 40°C durante otra 2 h. Despues de la evaporacion, el residuo se purifico por RP-HpLC preparativa (Reprosil C18, gradiente 1095% acetonitrilo/0,1% de acido formico acuoso) dando 74 mg (61% de teor.) del compuesto del tttulo.

5 LC-MS (procedimiento 4): Tr = 0,65 min; MS (ESIpos): m/z = 508 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 8 = 8,13 (s, 1H), 8,06-7,89 (m, 3H), 7,38 (s, 1H), 7,31 (s, 1H), 6,85 (s, 1H), 4,28 (d, 2H), 4,01-3,88 (m, 5H), 2,47-2,34 (m, 7H), 1,75 (s, 3H) ppm.

Ejemplo 66

W-({7-[(4-acetilpiperazin-1-il)metil]-4-amino-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-6- 10 il}metil)acetamida

15

20

imagen227

(1:2, 3 ml) se trato con carbonato de sodio (194 mg, 1,83 mmoles) y se agito a ta durante toda la noche. Posteriormente, la mezcla se diluyo con metanol (2 ml) y agua (1 ml) y se agito a ta durante 1 h. Despues de la evaporacion, el residuo se purifico por RP-HPLC preparativa (Reprosil C18, gradiente 10-95% acetonitrilo/0,1% de acido formico acuoso). La liofilizacion a partir de 1,4-dioxano y la re-purificacion por cromatograffa de columna sobre gel de sflice (diclorometano/metanol 50:1 ^ 100% metanol) dio 35 mg (28% de teor.) del compuesto del tttulo.

LC-MS (procedimiento 2): Tr = 0,70 min; MS (ESIpos): m/z = 522 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 8 = 8,04-7,98 (m, 2H), 7,38 (s, 1H), 7,31 (s, 1H), 6,85 (s, 1H), 4,27 (d, 2H), 3,95 (s, 3H), 3,91 (s, 2H), 3,44-3,36 (m, 4H), 2,48-2,35 (m, 7H), 1,98 (s, 3H), 1,75 (s, 3H) ppm.

Ejemplo 67

W-({4-amino-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)-7-[(3-oxopiperazin-1-il)metil]pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-6-

il}metil)acetamida

5

imagen228

10

Una suspension del intermediario 32A (35 mg, 73 |imoles) en metanol (4,1 ml) se trato con anhndrido acetico (13 |il, 146 |imoles) y 10% Pd/C (41 mg) y se agito a ta durante 1 h bajo 1 atm de hidrogeno. La filtracion sobre kieselguhr y la evaporacion del filtrado dio 30 mg (79% de teor.) del compuesto del tttulo.

LC-MS (procedimiento 5): Tr = 1,65 min; MS (ESIpos): m/z = 494 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-da): 8 = 7,99 (s, 2H), 7,75 (br. s, 1H), 7,39 (s, 1H), 7,31 (s, 1H), 6,85 (s, 1H), 4,27 (s, 1H), 4,26 (s, 1H), 3,95 (s, 5H), 3,19-3,08 (m, 2H), 3,05-2,96 (m, 2H), 2,66-2,57 (m, 2H), 2,45 (s, 3H), 1,72 (s, 3H) ppm.

Ejemplo 68

4-amino-6-(hidroximetil)-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-7-carbonitrilo

imagen229

15 Una solucion del intermediario 38A (1 g, 2,08 mmoles) en THF (10 ml) se trato con una solucion 1M de fluoruro de tetra-n-butilamonio en THF (12 ml, 12 mmoles). La mezcla se agito a ta durante toda la noche y posteriormente se evaporo. El residuo se coloco en agua y se extrajo tres veces con acetato de etilo. Las fases organicas combinadas se secaron sobre sulfato de magnesio y se evaporaron. El residuo se trituro en ter-butil metil eter, y el solido se filtro dando 680 mg (78% de teor.) del compuesto del tttulo.

20 LC-MS (procedimiento 2): Tr = 0,95 min; MS (ESIpos): m/z = 366 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 8 = 8,61-8,29 (br. s, 1H), 8,18 (s, 1H), 7,43 (s, 1H), 7,32 (s, 1H), 6,87 (s, 1H), 6,32117

5

10

15

20

25

6,03 (br. s, 1H), 5,46 (t, 1H), 4,55 (d, 2H), 3,96 (s, 3H), 2,45 (s, 3H) ppm.

Ejemplo 69

4-amino-6-(metoximetil)-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-7-carbonitrilo

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3

Una solucion del ejemplo 68 (60 mg, 164 |imoles) en diclorometano (5 ml) se trato con cloruro de tionilo (18 |il, 246 imoles). La mezcla se agito a ta durante 15 min y posteriormente se evaporo. El residuo se disolvio en metanol (2 ml) y se trato con DIPEA (57 |il, 328 |imoles). La mezcla se agito primero 2 h a 60°C, posteriormente se sometio a reflujo durante toda la noche y finalmente se calento hasta 150°C durante 30 min en un dispositivo de microondas. Despues de esto, la mezcla se evaporo, y el residuo se purifico por RP-HPLC preparativa (Reprosil C18, gradiente 10-95% acetonitrilo/0,1% TFA ac.). El producto obtenido de este modo se disolvio en metanol y se filtro a traves de un cartucho de intercambio anionico (Stratospheres SPE, PL-HCO3 MP-resina). El cartucho se eluyo con metanol, y el filtrado se evaporo dando 18 mg (28% de teor.) del compuesto del tttulo.

LC-MS (procedimiento 4): Tr = 1,12 min; MS (ESIpos): m/z = 379 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 8 = 8,61-8,40 (br. s, 1H), 8,21 (s, 1H), 7,42 (s, 1H), 7,33 (s, 1H), 6,87 (s, 1H), 6,346,09 (br. s, 1H), 4,47 (s, 2H), 3,96 (s, 3H), 3,26 (s, 3H), 2,45 (s, 3H) ppm.

Ejemplo 70

4-amino-6-(etoximetil)-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-7-carbonitrilo

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Una solucion del ejemplo 68 (60 mg, 164 imoles) en diclorometano (5 ml) se trato con cloruro de tionilo (18 |il, 246 imoles). La mezcla se agito a ta durante 15 min y posteriormente se evaporo. El residuo se disolvio en etanol (2 ml) y se trato con DIPEA (57 |il, 328 imoles). La mezcla se agito a 60°C durante toda la noche y posteriormente se calento hasta 150°C durante 30 min en un dispositivo de microondas. Despues de esto, la mezcla se evaporo, y el residuo se purifico por RP-HPLC preparativa (Reprosil C18, gradiente 10-95% acetonitrilo/0,1% TFA ac.). El producto obtenido de este modo se disolvio en etanol (2 ml) y nuevamente se calento hasta 150°C durante 30 min en las microondas oven. Se agrego DIPEA (57 |il, 328 imoles), y el calentamiento hasta 150°C en las microondas oven continuo durante otros 30 min. Despues de la evaporacion, el residuo se purifico por cromatograffa de columna sobre gel de sflice (diclorometano/ metanol 95:5) dando 16 mg (23% de teor.) del compuesto del tttulo.

LC-MS (procedimiento 2): Tr = 1,18 min; MS (ESIpos): m/z = 393 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-da): 8 = 8,61-8,38 (br. s, 1H), 8,20 (s, 1H), 7,42 (s, 1H), 7,33 (s, 1H), 6,87 (s, 1H), 6,336,08 (br. s, 1H), 4,51 (s, 2H), 3,96 (s, 3H), 3,45 (q, 2H), 2,45 (s, 3H), 1,10 (t, 3H) ppm.

Ejemplo 71

4-amino-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)-6-[(3-oxopiperazin-1-il)metil]pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-7-carbonitrilo

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10

15

Una solucion del intermediary 39A (20 mg, 55 |imoles) en THF (0,73 ml) se trato con acido acetico (6 |il, 110 imoles), 2-oxopiperazina (27 mg, 275 |imoles) y triacetoxiborohidruro de sodio (58 mg, 275 |imoles). Despues de agitar a ta durante 3 h, otras cantidades de THF (1 ml), acido acetico (6 |il, 110 imoles), se agregaron 2-oxopiperazina (27 mg, 275 imoles) y triacetoxiborohidruro de sodio (58 mg, 275 imoles), y se continuo con la agitacion a ta durante toda la noche. Despues de la evaporacion, el residuo se purifico por RP-HPLC preparativa (Reprosil C18, gradiente 10-95% acetonitrilo/0,1% TFA ac.). El producto obtenido de este modo se disolvio en metanol y se filtro a traves de un cartucho de intercambio anionico (Stratospheres SPE, PL-HCO3 MP-resina). El cartucho se eluyo con metanol, y el filtrado se evaporo dando 13 mg (52% de teor.) del compuesto del tttulo.

LC-MS (procedimiento 2): Tr = 0,86 min; MS (ESIpos): m/z = 447 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 8 = 8,60-8,31 (br. s, 1H), 8,19 (s, 1H), 7,74 (s, 1H), 7,44 (s, 1H), 7,33 (s, 1H), 6,87 (s, 1H), 6,25-5,98 (br. s, 1H), 3,96 (s, 3H), 3,62 (s, 2H), 3,13-3,07 (m, 2H), 2,91 (s, 2H), 2,45 (s, 3H) ppm.

Ejemplo 72

W,W-{[4-amino-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-6,7-diil]bis(metilene)}diacetamida

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10

Una suspension del intermediary 40A (bruto, 85 mg), 10% Pd/C (115 mg) y antftdrido acetico (40 |il, 435 |imoles) en metanol (12 ml) se agito a ta bajo 1 atm de hidrogeno. Despues de 4 h, se agregaron otras cantidades de 10% Pd/C (115 mg) y antftdrido acetico (40 |il, 435 |imoles), y la agitacion a ta bajo 1 atm de hidrogeno continuo durante 2 h. La mezcla resultante se filtro a traves de kieselguhr, el filtrado se evaporo, y el residuo se purifico por RP-HPLC preparativa (Reprosil C18, gradiente 10-95% acetonitrilo/0,1% TFA ac.). El producto obtenido de este modo se disolvio en metanol y se filtro a traves de un cartucho de intercambio anionico (Stratospheres SPE, PL-HCO3 MP- resina). El cartucho se eluyo con metanol, y el filtrado se evaporo dando 18 mg (18% de teor.) del compuesto del tftulo.

LC-MS (procedimiento 2): Tr = 0,73 min; MS (ESIpos): m/z = 452 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-da): 8 = 8,29 (br. t, 1H), 8,04 (br. t, 1H), 8,00 (s, 1H), 7,34 (s, 1H), 7,31 (s, 1H), 6,85 (s, 1H), 4,58 (d, 2H), 4,26 (d, 2H), 3,95 (s, 3H), 2,45 (s, 3H), 1,81 (s, 3H), 1,74 (s, 3H) ppm.

Ejemplo 73

2-[4-amino-6-(hidroximetil)-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-7-il]propan-2-ol

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15 Un matraz que contiene una suspension del intermediario 43A (180 mg, 598 pmoles), el intermediario 6A (299 mg, 897 pmoles) y fluoruro de cesio (454 mg, 2,99 mmoles) en THF/agua (10:1, 11 ml) se desgasifico a presion reducida y posteriormente se relleno con argon. Se agrego 4-(di-fer-butilfosfino)-W,A/-dimetilanilina-dicloropaladio (2:1; 13 mg, 18 pmoles) . La mezcla resultante se desgasifico nuevamente y se agito bajo argon a 50°C durante 16 h. Despues de esto, la mezcla de reaccion se separo por RP-HPLC preparativa (Reprosil C18, gradiente 30-50% 20 acetonitrilo/0,2% de TFA ac.). Las fracciones del producto se diluyeron con una solucion 7 M de amomaco en metanol y posteriormente se concentro a presion reducida. El precipitado se filtro, se lavo con agua y se seco al vado dando 99 mg (42% de teor.) del compuesto del tftulo.

LC-MS (procedimiento 2): Tr = 0,89 min; MS (ESIpos): m/z = 399 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 8 = 7,96 (s, 1H), 7,51-8,02 (br. s, 1H), 7,37 (s, 1H), 7,31 (s, 1H), 6,86 (s, 1H), 5,99 25 (s, 1H), 5,23-5,82 (br. s, 1H), 5,04 (t, 1H), 4,53 (d, 2H), 3,96 (s, 3H), 2,45 (s, 3H), 1,73 (s, 6H) ppm.

Ejemplo 74

4-{[4-amino-7-(2-hidroxipropan-2-il)-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-6-

il]metil}piperazin-2-ona

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25

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Una solucion del intermediary 44A (50 mg, 73% de pureza, 92 pmoles) en metanol (4 ml) se trato con 2-oxopiperazina (28 mg, 276 pmoles), cianoborohidruro de sodio (23 mg, 368 pmoles) y acido acetico (21 |il, 368 limoles). La mezcla se agito primero 18 h a 60°C y posteriormente 3 dfas a ta. Despues de esto, la mezcla se separo por RP-HPLC preparativa (Reprosil C18, gradiente 20-40% acetonitrilo/0,2% TFA ac.). Las fracciones del producto se diluyeron con una solucion 7 M de amomaco en metanol y se evaporaron a presion reducida. El residuo se disolvio en acetato de etilo y se lavo con agua. La fase organica se seco con sulfato de sodio y se concentro a presion reducida. El residuo se disolvio en 1,4-dioxano y se liofilizo dando 24 mg (52% de teor.) del compuesto del tftulo.

LC-MS (procedimiento 5): Tr = 1,85 min; MS (ESIpos): m/z = 481 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-da): 8 = 7,99 (s, 1H), 7,73-8,01 (br. s, 1H), 7,41 (s, 1H), 7,33 (s, 1H), 6,87 (s, 1H), 5,2-5,7 (br. s, 1H), 3,95 (s, 3H), 3,57 (s, 2H), 3,14 (br. s, 2H), 2,60 (br. s, 4H), 2,46 (s, 3H), 1,70 (br. s, 6H) ppm.

Ejemplo 75

[4-amino-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)-7-metilpirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-6-il]metanol

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Bajo una atmosfera de argon, un matraz se cargo con 165 mg (0,64 mmoles) del intermediario 53A, 143 mg (0,64 mmoles) del intermediario 5A, 25 mg (0,03 mmoles) (2'-aminobifenil-2-il)(cloro)paladio-diciclohexil(2',4',6'- triisopropilbifenil-2-il)fosfina (1:1; vease S. L. Buchwald et al., J. Am. Chem. Soc. 132 (40), 14073-14075 (2010)) y 409 mg (1,93 mmoles) fosfato de potasio. Posteriormente, se agregaron 7 ml de una mezcla desgasificada de 1,4- dioxano y agua (5:1), y la solucion se agito a 70°C durante 1 h. Se agrego otra porcion del intermediario 5A (142 mg, 0,64 mmoles) y de (2'-aminobifenil-2-il)(cloro)paladio-diciclohexil(2',4',6'-triisopropilbifenil-2-il)fosfina (10 mg, 0,012 mmoles), y se continuo con la agitacion durante 1 h. Despues de esto, la mezcla de reaccion se evaporo parcialmente a presion reducida, se agrego agua, y la mezcla se extrajo con acetato de etilo. Las fases organicas combinadas se evaporaron a presion reducida, y el residuo se trituro con acetonitrilo. El precipitado se filtro y se seco al vacfo dando 180 mg (92% de pureza por LC-MS, 73% de teor.) del compuesto del tftulo. A partir del filtrado se obtuvo un segundo lote (41 mg, 18% de teor.) por RP-HPLC preparativa (Reprosil C18, gradiente 10-95% acetonitrilo/0,1% de acido formico acuoso). Total rendimiento: 91% de teor.

LC-MS (procedimiento 5): Tr = 1,92 min; MS (ESIpos): m/z = 355 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-da): 8 = 7,95 (s, 1H), 7,35 (s, 1H), 7,30 (s, 1H), 6,83 (s, 1H), 4,82 (t, 1H), 4,44 (d, 2H), 3,95 (s, 3H), 2,45 (s, 3H) ppm.

Ejemplo 76

4-{[4-amino-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)-7-metilpirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-6-il]metil}piperazin-2-ona

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Una suspension de 55 mg (0,16 mmoles) del intermediary 54A en THF (1,5 ml) se trato con 78 mg (0,78 mmoles) piperazin-2-ona, 18 jl (0,31 mmoles) acido acetico y 166 mg (0,78 mmoles) triacetoxiborohidruro. La mezcla se agito a temperatura ambiente durante toda la noche. Posteriormente, se agregaron 1,5 ml agua, y la mayona del solvente THF se evaporo a presion reducida. La mezcla restante se diluyo con mas agua, y el solido precipitado se filtro y se seco (35 mg). Este material se purifico ademas por RP-HPLC preparativa (Reprosil C18, gradiente 1095% acetonitrilo/0,1% de acido formico acuoso). Las fracciones del producto se ajustaron hasta pH 9 con carbonato de potasio solido y se concentraron parcialmente a presion reducida. El solido precipitado se filtro y se seco a 45°C al vado para dar 16 mg (24% de teor.) del compuesto del tttulo.

LC-MS (procedimiento 5): Tr = 1,74 min; MS (ESIpos): m/z = 437 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 8 = 7,95 (s, 1H), 7,66 (br. s, 1H), 7,35 (s, 1H), 7,30 (s, 1H), 6,83 (s, 1H), 3,95 (s, 3H), 3,50 (s, 2H), 3,05 (m, 2H), 2,84 (s, 2H), 2,45 (m, 5H) ppm.

Ejemplo 77

Formiato 1-({[4-amino-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)-7-metilpirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-6-il]metil}amino)-2- metilpropan-2-ol

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se agregaron 1,5 ml agua, y la mezcla se evaporo a presion reducida. El residuo se purifico por RP-HPLC preparativa (Reprosil C18, gradiente 10-95% acetonitrilo/0,1% de acido formico acuoso) para dar 38 mg (52% de teor.) del compuesto del tttulo.

LC-MS (procedimiento 5): Tr = 1,68 min; MS (ESIpos): m/z = 426 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-da): 8 = 8,19 (s, 1H), 7,94 (s, 1H), 7,38 (s, 1H), 7,29 (s, 1H), 6,84 (s, 1H), 3,95 (s, 3H), 2,45 (s, 3H), 2,34 (s, 2H), 1,02 (s, 6H) ppm.

Ejemplo 78

1- ({[4-amino-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)-7-metilpirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-6-il]metil}amino)-2-metilpropan-

2- ol

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Una solucion de 29 mg (0,06 mmoles) del ejemplo 77 en 3 ml de metanol se corrio a traves de un cartucho Stratospheres SPE PL-HCO3 MP-resina, preacondicionado con 2 ml de metanol. El cartucho se lavo con 4 ml de metanol, y el eluado se evaporo para dar 21,5 mg (82% de teor.) del compuesto del tttulo.

LC-MS (procedimiento 4): Tr = 0,68 min; MS (ESIpos): m/z = 426 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 8 = 7,94 (s, 1H), 7,37 (s, 1H), 7,28 (s, 1H), 6,83 (s, 1H), 4,07 (s, 1H), 3,95 (s, 3H), 3,63-3,75 (m, 2H), 2,45 (s, 3H), 2,32 (m, 3H), 1,42-1,56 (m, 1H), 1,02 (s, 6H) ppm.

Ejemplo 79

[4-amino-7-cloro-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-6-il]metanol

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Una solucion del intermediario 48A (117 mg, 0,24 mmoles) en 5 ml de THF se trato con 5 ml de acido clortndrico conc. y se agito a temperatura ambiente durante toda la noche. Posteriormente, se agregaron 12 ml de solucion 5 M de hidroxido de sodio ac. como tambien acetato de etilo, las capas se separaron, y la capa acuosa se extrajo dos veces con acetato de etilo. Las fases organicas combinadas se lavaron con solucion de cloruro de sodio acuosa saturada, se secaron y se evaporaron. El residuo se purifico por RP-HPLC preparativa (Reprosil C18, gradiente 1095% acetonitrilo/0,1% de acido formico acuoso) para dar 30 mg (34% de teor.) del compuesto del tttulo.

LC-MS (procedimiento 2): Tr = 0,90 min; MS (ESIpos): m/z = 375 (M+H)+

3,96 (s, 3H), 2,45 (s, 3H) ppm.

9,2 mg (10% de teor.) de 7-cloro-6-(dorometil)-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-4- amina se aislaron en forma de un subproducto (cf. Intermediario 50A).

Ejemplo 80

4-{[4-amino-7-doro-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-6-il]metil}piperazin-2-ona

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10

15

El compuesto del tftulo se preparo de acuerdo con el procedimiento del ejemplo 76 partiendo de 40 mg (0,11 mmoles) del intermediario 49A. Rendimiento: 27 mg (55% de teor.).

LC-MS (procedimiento 2): Tr = 0,86 min; MS (ESIpos): m/z = 457 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-da): 8 = 8,05 (s, 1H), 7,68 (br. s, 1H), 7,44 (s, 1H), 7,31 (s, 1H), 6,85 (s, 1H), 3,96 (s, 3H), 3,52 (s, 2H), 3,05 (br. s, 2H), 2,86 (s, 2H), 2,45 (s, 3H) ppm.

Ejemplo 81

Formiato 1-({[4-amino-7-cloro-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-6-il]metil}amino)-2- metilpropan-2-ol

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El compuesto del tftulo se preparo de acuerdo con el procedimiento del ejemplo 77 partiendo de 40 mg (0,11 mmoles) del intermediario 49A. Rendimiento: 24 mg (45% de teor.).

LC-MS (procedimiento 2): Tr = 0,73 min; MS (ESIpos): m/z = 446 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 8 = 8,15 (s, 1H), 8,04 (s, 1H), 7,45 (s, 1H), 7,30 (s, 1H), 6,85 (s, 1H), 3,96 (s, 3H), 20 3,73 (s, 2H), 2,45 (s, 3H), 2,32 (s, 2H), 1,00 (s, 6H) ppm.

1- ({[4-amino-7-doro-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-6-il]metil}amino)-2-metilpropan-

2- ol

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5

10

El compuesto del tftulo se preparo a partir del ejemplo 81 de acuerdo con el procedimiento del ejemplo 78.

LC-MS (procedimiento 2): Tr = 0,72 min; MS (ESIpos): m/z = 446 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-da): 8 = 8,04 (s, 1H), 7,45 (s, 1H), 7,30 (s, 1H), 6,85 (s, 1H), 4,09 (br. s, 1H), 3,95 (s, 3H), 3,71 (s, 2H), 2,45 (s, 3H), 2,31 (s, 2H), 1,44-1,64 (m, 1H), 1,00 (s, 6H) ppm.

Ejemplo 83

7-cloro-6-(etoximetil)-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-amina

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Se suspendieron 8,2 mg (0,02 mmoles) del intermediario 50A en 1 ml de etanol, se trato con 41 jl (0,11 mmoles) de una solucion 2,68 M de etanolato de sodio en etanol y se sometio a reflujo durante 1 min. La solucion transparente posteriormente se evaporo, y el producto bruto se purifico por RP-HPLC preparativa (Reprosil C18, gradiente 1095% acetonitrilo/0,1% de acido formico acuoso) para dar 5 mg (56% de teor.) del compuesto del tftulo.

LC-MS (procedimiento 4): Tr = 1,25 min; MS (ESIpos): m/z = 402 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 8 = 8,06 (s, 1H), 7,40 (s, 1H), 7,32 (s, 1H), 6,86 (s, 1H), 4,40 (s, 2H), 3,96 (s, 3H), 3,40 (q, 2H), 2,45 (s, 3H), 1,06 (t, 3H) ppm.

Ejemplo 84

Formiato 5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)-6-metil-7-(piperazin-1-ilmetil)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-amina

HaC

W ^3

O

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x HCOOH

NH

5

10

Una solucion del intermediary 57A (100 mg, 191 |imoles) en una solucion 4 M de cloruro de hidrogeno en 1,4- dioxano (2 ml) se agito a ta durante 3 h y posteriormente se evaporo. La purificacion por RP-HPLC preparativa dos veces (Reprosil C18, gradiente 10-95% acetonitrilo/0,1% de acido formico acuoso) dio 71 mg (67% de teor.) del compuesto del tttulo.

LC-MS (procedimiento 2): Tr = 0,81 min; MS (ESIpos): m/z = 423 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, CDCla): 8 = 8,46 (br. s, 1H), 7,89 (s, 1H), 7,27 (s, 1H, superposicion con pico de CHCla ), 7,18 (s, 1H), 6,67 (s, 1H), 4,01 (s, 3H), 3,97 (s, 2H), 3,18-3,09 (m, 4H), 2,82-2,73 (m, 4H), 2,50 (s, 3H), 2,24 (s, 3H) ppm.

Ejemplo 85

Triclorhidrato 6-cloro-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)-7-(piperazin-1-ilmetil)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-amina

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El intermediario 60A (65 mg, 0,12 mmoles) se agito en 1 ml de una solucion 4 M de cloruro de hidrogeno en 1,4- dioxano durante 2 h a ta. La suspension se evaporo hasta sequedad, y el producto bruto se purifico por RP-HPLC preparativa (Reprosil C18, gradiente 10-95% acetonitrilo/0,1% de acido clorhndrico ac.) dando 49 mg (74% de teor.) 15 del compuesto del tftulo.

LC-MS (procedimiento 2): Tr = 0,81 min; MS (ESIpos): m/z = 443 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): inter al. 8 = 9,56 (br. s, 1H), 8,45 (br. s, 1H), 8,19 (s, 1H), 7,44 (s, 1H), 7,36 (s, 1H), 6,89 (s, 1H), 6,30 (br. s, 1H), 4,63 (br. s, 1H), 3,40 (br. s, 8H), 2,46 (s, 3H) ppm.

Ejemplo 86

20 [4-amino-6-(etoximetil)-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-7-il]metanol

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5

El compuesto del tftulo (360 mg) se obtuvo en forma de un subproducto en la preparacion del ejemplo 5 por el procedimiento de preparacion 1.

LC-MS (procedimiento 2): Tr = 0,99 min; MS (ESIpos): m/z = 399 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-da): 8 = 8,09-7,72 (br. s, 1H), 7,99 (s, 1H), 7,35 (s, 1H), 7,31 (s, 1H), 6,84 (s, 1H), 6,055,48 (br. s, 1H), 5,04 (br. s, 1H), 4,81 (d, 2H), 4,47 (s, 2H), 3,96 (s, 3H), 3,39 (q, 3H), 2,45 (s, 3H), 1,05 (t, 3H) ppm.

Ejemplo 87

1-{[4-amino-6-(etoximetil)-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-7-il]metil}imidazolidin-2-ona

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10

15

Una suspension del intermediario 63A (100 mg, 0,221 mmoles) en THF (5 ml) se trato con imidazolidin-2-ona (57 mg, 0,662 mmoles) y W,W-diisopropiletilamina (153 |il, 0,926 mmoles), y la mezcla se calento hasta 150°C durante 90 min en un horno de microondas. Despues de esto, la mezcla de reaccion se purifico por RP-HPLC preparativa (Reprosil C18, gradiente 40-60% acetonitrilo/0,2% de acido trifluoroacetico ac.). El producto obtenido de este modo se disolvio en metanol y se filtro a traves de un cartucho de intercambio anionico (Stratospheres SPE, PL-HCO3 MP-resina). El cartucho se eluyo con metanol, y el filtrado se evaporo. El producto se purifico una vez nuevamente por cromatograffa de capa delgada preparativa sobre gel de sflice (ciclohexano/acetato de etilo 3:1) dando 24 mg (22% de teor.) del compuesto del tftulo.

LC-MS (procedimiento 2): Tr = 0,99 min; MS (ESIpos): m/z = 467 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 8 = 8,21-7,65 (br. s, 1H), 7,99 (s, 1H), 7,36 (s, 1H), 7,31 (s, 1H), 6,84 (s, 1H), 6,38 (s, 1H), 6,04-5,56 (br. s, 1H), 4,65 (s, 2H), 4,46 (s, 2H), 3,95 (s, 3H), 3,38 (q, 2H), 3,31-3,10 (m, 4H), 2,45 (s, 3H), 1,06 (t, 3H) ppm.

4-{[4-amino-5-(7-metoxi-1-benzotiofen-2-il)-6-(metoximetil)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-7-il]metil}piperazin-2-ona

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3

5

10

15

A una solucion del intermediary 62A (72,6 mg, 197 |imoles), el acido (7-metoxi-1-benzotiofen-2-il)boronico (45 mg, 216 pmoles) y fluoruro de cesio (149 mg, 983 pmoles) en THF desgasificado/agua (10:1, 2,2 ml) bajo argon se agrego (2'-aminobifenil-2-il)(cloro)paladio-diciclohexil(2',4',6'-triisopropilbifenil-2-il)fosfina (1:1; 7,7 mg, 9,8 pmoles; vease S. L. Buchwald et al., J. Am. Chem. Soc. 132 (40), 14073-14075 (2010)). La mezcla resultante se desgasifico nuevamente y se agito bajo argon a 60°C durante 3 h. Despues de esto, la mezcla se separo por RP-HPLC preparativa (Reprosil C18, gradiente 20-40% acetonitrilo/0,1% TFA ac.). Las fracciones del producto se combinaron y se evaporaron hasta sequedad. El residuo se disolvio en metanol y se filtro a traves de un cartucho de intercambio anionico (Stratospheres SPE, PL-HCO3 MP-resina). El cartucho se eluyo con metanol, y el filtrado se evaporo dando 31 mg (35% de teor.) del compuesto del tttulo.

LC-MS (procedimiento 2): Tr = 0,71 min; MS (ESIpos): m/z = 453 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-da): 8 = 8,00 (s, 1H), 7,72 (s, 1H), 7,61-8,23 (br. s, 1H), 7,51 (d, 1H), 7,46 (s, 1H), 7,40 (t, 1H), 6,99 (d, 1H), 5,57-6,11 (br. s, 1H), 4,42 (s, 2H), 3,98 (s, 5H), 3,20 (s, 3H), 3,11 (br. m, 2H), 3,01 (s, 2H), 2,622,67 (m, 2H) ppm.

Ejemplo 89

4-{[4-amino-6-(metoximetil)-5-(5-metil-1-benzotiofen-2-il)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-7-il]metil}piperazin-2-ona

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A una solucion del intermediario 62A (50 mg, 135 |imoles), el acido (5-metil-1-benzotiofen-2-il)boronico (28,6 mg, 20 149 pmoles) y fluoruro de cesio (103 mg, 677 pmoles) en THF desgasificado/agua (10:1, 4,4 ml) bajo argon se

agrego (2'-aminobifenil-2-il)(cloro)paladio-diciclohexil(2',4',6'-triisopropilbifenil-2-il)fosfina (1:1; 5,3 mg, 6,8 pmoles; vease S. L. Buchwald et al., J. Am. Chem. Soc. 132 (40), 14073-14075 (2010)). La mezcla resultante se desgasifico

10

nuevamente y se agito bajo argon a 60°C durante 16 h. Despues de esto, la mezcla se separo por RP-HPLC preparativa (Reprosil C18, gradiente 30-50% acetonitrilo/0,1% TFA ac.). Las fracciones del producto se combinaron y se evaporaron hasta sequedad. El residuo se disolvio en metanol y se filtro a traves de un cartucho de intercambio anionico (Stratospheres SPE, PL-HCO3 MP-resina). El cartucho se eluyo con metanol, y el filtrado se evaporo dando 27 mg (45% de teor.) del compuesto del tttulo.

LC-MS (procedimiento 2): Tr = 0,79 min; MS (ESIpos): m/z = 437 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-da): 8 = 8,00 (s, 1H), 7,89 (d, 1H), 7,73 (s, 1H), 7,71 (s, 1H), 7,58-8,18 (br. s, 1H), 7,40 (s, 1H), 7,24 (dd, 1H), 5,58-6,03 (m, 1H), 4,42 (s, 2H), 3,97 (s, 2H), 3,21 (s, 3H), 3,11 (br. t, 2H), 3,01 (s, 2H), 2,64 (t, 2H), 2,44 (s, 3H) ppm.

Ejemplo 90

1-[4-amino-6-(etoximetil)-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-7-il]etanol

imagen251

Bajo argon, una solucion 1M de bromuro de metilmagnesio en THF (630 pl, 630 pmoles) se agrego gota a gota a ta a una solucion del intermediario 17A (100 mg, 252 pmoles) en THF (10 ml). La mezcla se agito a ta durante 3 h y 15 posteriormente se trato con otra porcion de bromuro de metilmagnesio en THF (177 pl, 177 pmoles). La mezcla de reaccion se agito durante otras 16 h, posteriormente se templo con solucion de cloruro de amonio acuosa saturada y se extrajo con acetato de etilo. Las capas organicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron con sulfato de magnesio, se filtraron y se evaporaron. El residuo se purifico por RP-HPLC preparativa (Reprosil C18, gradiente 40-60% acetonitrilo/0,1% TFA ac.). Las fracciones del producto se diluyeron con solucion de hidrogeno carbonato 20 de sodio acuosa saturada y se extrajeron con acetato de etilo. La fase organica se lavo con solucion de cloruro de sodio acuosa saturada, se seco con sulfato de magnesio, se filtro y se evaporo dando 39 mg (36% de teor.) del compuesto del tttulo.

LC-MS (procedimiento 4): Tr = 1,07 min; MS (ESIpos): m/z = 413 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 8 = 7,95 (s, 1H), 7,56-8,07 (br. s, 1H), 7,35 (s, 1H), 7,31 (s, 1H), 6,84 (s, 1H), 5,4625 5,54 (m, 1H), 5,37-5,95 (br. s, 1H), 5,26 (d, 1H), 4,67 (d, 1H), 4,38 (d, 1H), 3,95 (s, 3H), 3,38 (q, 2H), 2,45 (s, 3H),

1,52 (d, 3H), 1,05 (t, 3H) ppm.

Ejemplo 91

[4-amino-6-(etoximetil)-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-7-il](ciclopropil)metanol

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5

10

15

Bajo argon, una solucion 0,5 M de bromuro de ciclopropilmagnesio en THF (1,26 ml, 630 pmoles) se agrego gota a gota a ta a una solucion del intermediario 17A (100 mg, 252 pmoles) en THF (5 ml). La mezcla se agito a ta durante 1 h, posteriormente se templo con solucion de cloruro de amonio acuosa saturada y se extrajo con acetato de etilo. Las capas organicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron con sulfato de magnesio, se filtraron y se evaporaron. El residuo se purifico por RP-HPLC preparativa (Reprosil C18, gradiente 50-70% acetonitrilo/0,1% TFA ac.). Las fracciones del producto se diluyeron con solucion de hidrogeno carbonato de sodio acuosa saturada y se extrajeron con acetato de etilo. La fase organica se lavo con solucion de cloruro de sodio acuosa saturada, se seco con sulfato de magnesio, se filtro y se evaporo dando 10 mg (10% de teor.) del compuesto del tttulo.

LC-MS (procedimiento 2): Tr = 1,13 min; MS (ESIpos): m/z = 439 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-da): 8 = 7,94 (s, 1H), 7,68-8,04 (br. s, 1H), 7,36 (s, 1H), 7,31 (s, 1H), 6,84 (s, 1H), 5,475,89 (br. s, 1H), 5,30 (d, 1H), 4,64 (d, 1H), 4,59-4,67 (m, 1H), 4,39 (d, 1H), 3,96 (s, 3H), 3,38 (q, 2H), 2,45 (s, 3H), 1,54-1,64 (m, 1H), 1,04 (t, 3H), 0,51-0,59 (m, 1H), 0,40-0,47 (m, 1H), 0,28-0,38 (m, 2H) ppm.

Ejemplo 92

(3S)-3-({[4-amino-6-(metoximetil)-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-7-

il]metil}amino)pirrolidin-2-ona

H,C

/CH3

O

CH3

O

imagen253

V-NH

Una suspension del intermediario 13A (100 mg, 0,233 mmoles) en THF (2 ml) se trato con (S)-3-aminopirrolidin-2- ona (35 mg, 0,349 mmoles), triacetoxiborohidruro de sodio (148 mg, 0,698 mmoles) y acido acetico (26,6 pl, 0,465 20 mmoles). La mezcla resultante se agito a ta durante 3 h y posteriormente se purifico directamente por RP-HPLC preparativa (Reprosil C18, gradiente 40-60% acetonitrilo/0,2% acido trifluoroacetico ac.). Las fracciones del

5

10

15

20

25

producto se combinaron y se evaporaron hasta sequedad. El residuo se disolvio en metanol y se filtro a traves de un cartucho de intercambio anionico (Stratospheres SPE, PL-HCO3 MP-resina). El cartucho se eluyo con metanol, y el filtrado se evaporo dando 56 mg (51% de teor.) del compuesto del tttulo.

LC-MS (procedimiento 4): Tr = 0,72 min; MS (ESIpos): m/z = 467 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-da): 8 = 8,01 (s, 1H), 7,76 (s, 1H), 7,35 (s, 1H), 7,31 (s, 1H), 6,85 (s, 1H), 4,48 (d, 2H), 4,43 (d, 2H), 4,24-4,02 (m, 2H), 3,96 (s, 3H), 3,26-2,99 (m, 6H), 2,45 (s, 3H), 2,40-2,27 (m, 1H), 1,82-1,64 (m, 1H) ppm.

Ejemplo 93

(3S)-3-({[4-amino-6-(etoximetil)-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-7-

il]metil}amino)pirrolidin-2-ona

imagen254

Una suspension del intermediario 17A (100 mg, 0,252 mmoles) en THF (2 ml) se trato con (S)-3-aminopirrolidin-2- ona (38 mg, 378 pmoles), triacetoxiborohidruro de sodio (160 mg, 757 pmoles) y acido acetico (30 pl, 504 pmoles). La mezcla resultante se agito a ta durante 3 h y posteriormente se purifico directamente por RP-HPLC preparativa (Reprosil C18, gradiente 30-50% acetonitrilo/0,2% de acido trifluoroacetico ac.). Las fracciones del producto se combinaron y se evaporaron hasta sequedad. El residuo se disolvio en metanol y se filtro a traves de un cartucho de intercambio anionico (Stratospheres SPE, PL-HCO3 MP-resina). El cartucho se eluyo con metanol, y el filtrado se evaporo dando 84 mg (69% de teor.) del compuesto del tttulo.

LC-MS (procedimiento 4): Tr = 0,75 min; MS (ESIpos): m/z = 481 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 8 = 8,00 (s, 1H), 7,75 (s, 1H), 7,67-8,11 (br. s, 1H), 7,35 (s, 1H), 7,31 (s, 1H), 6,85 (s, 1H), 5,5-6,0 (br. s, 1H), 4,44 (q, 2H), 4,14-4,21 (m, 1H), 4,02-4,11 (m, 1H), 3,38-3,45 (q, 2H), 3,16-3,24 (m, 1H), 3,05-3,16 (m, 2H), 2,45 (s, 3H), 2,31-2,40 (m, 1H), 1,67-1,79 (m, 1H), 1,08 (t, 3H) ppm.

Procedimiento general para la preparacion de los ejemplos 94-105 en la tabla I:

Una suspension 0,13 M del intermediario 17A en THF se trato con 1,5 eq. del respectivo componente de amina, 3 eq. de triacetoxiborohidruro de sodio y 1,5 eq. de acido acetico. La mezcla resultante se agito a 60°C durante 3-20 h. Despues de esto, se llevo a cabo la purificacion de acuerdo con los procedimientos indicados.

Tabla I

Ejemplo N°.

Estructura Procedimiento(s) de purificacion Datos de LC-MS

94

h3c r\ 0'ch3 VH2 Vs CH3 1 / 3 N^y\ ?-* o P1, P5 Procedimiento 4: Tr = 1,22 min; MS (ESIpos): m/z = 468 (M+H)+

95

H3C f \ /CH3 NH2 \-"s CH3 N^\ /°^ k- /N-Y N \ ^Onh H3C^H\ H3C O P6, P3 Procedimiento 2: Tr = 0,92 min; MS (ESIpos): m/z = 509 (M+H)+

96

H3C \ \ /CH3 ^2 Vs ch3 N^k P^ k- /N^Y N \ '"O P1, P5 Procedimiento 4: Tr = 0,83 min; MS (ESIpos): m/z = 452 (M+H)+

97

H3C \ \ ZCH3 ^2 Vs ch3 N^k P^ k /N^ / N \ ^ N^V V^°H P1, P5 Procedimiento 5: Tr = 1,84 min; MS (ESIpos): m/z = 454 (M+H)+

98

H3C .ch3 ^2 VS ch3 n^A\ /°^ k- JnA P1, P5 Procedimiento 5: Tr = 1,82 min; MS (ESIpos): m/z = 482 (M+H)+

99

H3C \ \ .CH3 /^Ss/^O NH2 Vs CH3 n^V=\ /° k- ^nA 7 N \ \ ^° P1, P5 Procedimiento 5: Tr = 2,21 min; MS (ESIpos): m/z = 516 (M+H)+

100

H3C \ \ /CH3 )w^o NH2 VS CH3 n^A\ j°-* k- ^A N \ ' N \ ^/N^7 P1, P5 Procedimiento 2: Tr = 0,86 min; MS (ESIpos): m/z = 507 (M+H)+

101

H3C \ \ /CH3 NH2 VS ch3 \ / 3 N^^k /° W ^nA / N \ M OH P1, P5 Procedimiento 2: Tr = 0,81 min; MS (ESIpos): m/z = 468 (M+H)+

102

H3C \ \ /CH3 ^2 Vs ch3 p^ P1, P5, P4 Procedimiento 2: Tr = 1,03 min; MS (ESIpos): m/z = 474 (M+H)+

103

H3C \ \ /CH3 ^2 VS ch3 p^ N \ F P1, P5, P2 Procedimiento 2: Tr = 1,05 min; MS (ESIpos): m/z = 460 (M+H)+

104

H3C -ch3 ^2 Vs ch3 N^\ P^ VN--{ 0 VCO \—NH CD CL CL Procedimiento 2: Tr = 0,91 min; MS (ESIpos): m/z = 467 (M+H)+

105

H3C \ \ /CH3 ^2 Vs ch3 N^\ P^ k- /N-^ N \ '~^N \ \ NH Hp-i 3O CD CL CL Procedimiento 2: Tr = 0,89 min; MS (ESIpos): m/z = 495 (M+H)+

Ejemplo 106

4-amino-6-(etoximetil)-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)-W-[(3R)-2-oxopirrolidin-3-il]pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-7-

carboxamida

imagen255

Una solucion agitada del intermediario 64A (50 mg, 121 jmoles) en DMF (2 ml) se trato a ta con W-[(1H- benzotriazol-1-iloxi)(dimetilamino)metilene]-W-metilmetanaminio tetrafluoroborato (TBTU) (43 mg, 133 jmoles) y DIPEA (53 |jl, 303 jmoles). Despues de 15 min, se agrego (3R)-3-aminopirrolidin-2-ona (24 mg, 242 jmoles) , y la 5 mezcla resultante se agito a ta durante otros 2 h. Despues de esto, la mezcla se separo por RP-HPLC preparativa (Reprosil C18, gradiente 30-50% acetonitrilo/0,2% de acido trifluoroacetico ac.). Las fracciones del producto se combinaron y se evaporaron hasta sequedad. El residuo se disolvio en metanol y se filtro a traves de un cartucho de intercambio anionico (Stratospheres SPE, PL-HCO3 MP-resina). El cartucho se eluyo con metanol, y el filtrado se evaporo dando 36 mg (60% de teor.) del compuesto del tttulo.

10 LC-MS (procedimiento 2): Tr = 0,91 min; MS (ESIpos): m/z = 495 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-da): 8 = 9,50 (d, 1H), 8,21-8,45 (br. s, 1H), 8,17 (s, 1H), 7,97 (s, 1H), 7,41 (s, 1H), 7,33 (s, 1H), 6,86 (s, 1H), 5,84-6,09 (br. s, 1H), 4,74 (dd, 2H), 4,47-4,56 (m, 1H), 3,96 (s, 3H), 3,37 (q, 2H), 3,22-3,29 (m, 2H), 2,54-2,61 (m, 1H), 2,46 (s, 3H), 1,90-2,03 (m, 1H), 1,00 (t, 3H) ppm.

Ejemplo 107

15 4-{[4-amino-6-(etoximetil)-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-7-il]carbonil}piperazin-2- ona

imagen256

(Reprosil C18, gradiente 40-60% acetonitrilo/0,2% acido trifluoroacetico ac.). Las fracciones del producto se combinaron y se evaporaron hasta sequedad. El residuo se disolvio en metanol y se filtro a traves de un cartucho de intercambio anionico (Stratospheres SPE, PL-HCO3 MP-resina). El cartucho se eluyo con metanol, y el filtrado se evaporo dando 45 mg (68% de teor.) del compuesto del tttulo.

5 LC-MS (procedimiento 2): Tr = 0,92 min; MS (ESIpos): m/z = 495 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-da): 8 =8,14 (br. s, 1H), 7,99-8,01 (m, 1H), 7,9-8,3 (br. s, 1H), 7,41 (d, 1H), 7,32 (s, 1H), 6,86 (s, 1H), 5,78-6,05 (br. s, 1H), 4,30-4,49 (m, 2H), 4,13-4,23 (m, 1H), 4,03-4,10 (m, 1H), 3,96 (s, 3H), 3,76-3,87 (m, 1H), 3,57-3,74 (m, 1H), 3,35-3,43 (m, 2H), 3,14-3,25 (m, 1H), 2,45 (s, 3H), 0,96-1,05 (m, 3H) ppm.

Procedimiento general para la preparacion de los ejemplos 108-123 en la tabla II:

10 Una solucion 0,13 M del intermediario 64A en DMF se trato con 1,1 eq. TBTU y 2,5 eq. DIPEA y se agito a ta durante 15 min. Se agregaron 2 eq. de la respectiva amina, y la mezcla resultante se agito a ta durante otros 18 h. Despues de esto, se llevo a cabo la purificacion de acuerdo con los procedimientos indicados.

Tabla II

Ejemplo N°.

Estructura Procedimiento(s) de purificacion Datos de LC-MS

108

H3C \ \ XCH3 NH2 VS CH3 \ / 3 N^W OH J~~N 0H P1 Procedimiento 2: Tr = 1,02 min; MS (ESIpos): m/z = 456 (M+H)+

109

H3C \ \ .CH3 NH2 VS CH3 N^^\ P W /N-^f N \ O2 P1 Procedimiento 4: Tr = 0,97 min; MS (ESIpos): m/z = 412 (M+H)+

110

H3C \ \ .CH3 NH2 VS CH3 N^^\ P W /N-^f N /CH3 /T~~N OH P1, P5 Procedimiento 2: Tr = 1,01 min; MS (ESIpos): m/z = 426 (M+H)+

imagen257

115

H3C \ \ .CH3 NH0^S CH \ / 3 N^y^P K'h'\ j> /P^N 0H P1, P5 Procedimiento 2: Tr = 1,09 min; MS (ESIpos): m/z = 452 (M+H)+

116

H3C \ \ .CH3 NH2 Vs CH3 N^\ P^ k- /N^ N \ \ H #~~N O ,0 a P1, P5 Procedimiento 4: Tr = 0,95 min; MS (ESIpos): m/z = 495 (M+H)+

117

H3C /CH3 ^2 Vs ch3 N^\ P^ W /N-^f N \ ^ ^n^t° 0 \—Nh P1, P5 Procedimiento 4: Tr = 0,93 min; MS (ESIpos): m/z = 481 (M+H)+

118

H3C \ \ /CH3 NH2 VS ch3 \ / 3 N^^k P k /N-^ / AQ OH P1, P5 Procedimiento 2: Tr = 0,93 min; MS (ESIpos): m/z = 482 (M+H)+

119

H3C /CH3 NH2 Vs CH3 P^ N \ O ^0 w 0 0 P1, P5 Procedimiento 2: Tr = 1,04 min; MS (ESIpos): m/z = 516 (M+H)+

120

H3C .ch3 0 ^2 Vs ch3 N^J\ W / N \ O V"^0H P1, P5 Procedimiento 4: Tr = 0,88 min; MS (ESIpos): m/z = 468 (M+H)+

121

H3C .ch3 0 ^2 Vs ch3 n^a p^ k- JnA Tn-\ 0 V^/^OH P1, P5 Procedimiento 4: Tr = 0,91 min; MS (ESIpos): m/z = 496 (M+H)+

122

H3C \ \ /CH3 ^2 Vs ch3 n^A\ p^ k- ^nA N \ A~~N^\^F 0 V'Kp P1, P5 Procedimiento 4: Tr = 1,09 min; MS (ESIpos): m/z = 488 (M+H)+

imagen258

Ejemplo 124

4-{[4-amino-5-(5,7-dimetoxi-1-benzotiofen-2-il)-6-(metoximetil)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-7-il]metil}piperazin-2-ona

O

SCH3

imagen259

5 A una solucion del intermediary 62A (100 mg, 271 |imoles), el Intermediario 66A (77 mg, 325 pmoles) y fluoruro de cesio (206 mg, 1,35 mmoles) en THF desgasificado/agua (10:1; 5 ml) bajo argon se agrego (2'-aminobifenil-2-il)- (cloro)paladio-diciclohexil(2',4',6'-triisopropilbifenil-2-il)fosfina (1:1; 42,6 mg, 54 pmoles; vease S. L. Buchwald et al., J. Am. Chem. Soc. 132 (40), 14073-14075 (2010)). La mezcla resultante se desgasifico nuevamente y se agito bajo argon a 60°C durante 6 h. Posteriormente, se agrego otra porcion del intermediario 66A (39 mg, 162 pmoles), y la 10 agitacion a 60°C continuo durante 10 h. Despues de esto, la mezcla de reaccion se separo por RP-HPLC preparativa (Reprosil C18, gradiente 30-50% acetonitrilo/0,1% TFA ac.). Las fracciones del producto se combinaron y se evaporaron hasta sequedad. El residuo se disolvio en metanol y se filtro a traves de un cartucho de intercambio anionico (Stratospheres SPE, PL-HCO3 MP-resina). El cartucho se eluyo con metanol, y el filtrado se evaporo dando 40 mg (28% de teor.) del compuesto del tttulo.

15 LC-MS (procedimiento 2): Tr = 0,78 min; MS (ESIpos): m/z = 483 (M+H)+

1H-RMN (500 MHz, DMSO-d6): 8 = 7,99 (s, 1H), 7,68 (br. s, 1H), 7,49-8,17 (br. s, 1H), 7,37 (s, 1H), 7,05 (d, 1H), 6,63 (d, 1H), 5,5-6,0 (br. s, 1H), 4,42 (s, 2H), 3,97 (s, 2H), 3,94 (s, 3H), 3,84 (s, 3H), 3,20 (s, 3H), 3,09-3,14 (m, 2H), 3,01 (s, 2H), 2,62-2,67 (m, 2H) ppm.

Ejemplo 125

20 4-{[4-amino-7-(hidroximetil)-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-6-il]metil}piperazin-2-ona

imagen260

A una suspension del intermediary 70A (700 mg, 1,49 mmoles), el intermediary 5A (497 mg, 2,24 mmoles) y fluoruro de cesio (1,36 g, 8,95 mmoles) en THF desgasificado/agua (2:1, 90 ml) bajo argon se agrego (2'-aminobi- fenil-2-il)(doro)paladio-diciclohexil(2',4',6'-triisopropilbifenil-2-il)fosfina (1:1; 117 mg, 0,149 mmoles; vease S. L.

5 Buchwald et al., J. Am. Chem. Soc. 132 (40), 14073-14075 (2010)). La mezcla resultante se desgasifico nuevamente y se agito bajo argon a 60°C durante toda la noche. Otra porcion del intermediary 5A (231 mg, 1,04 mmoles) y (2'-aminobifenil-2-il)(cloro)paladio-diciclohexil(2',4',6'-triisopropilbifenil-2-il)fosfina (1:1; 117 mg, 0,149 mmoles) se agregaron, y se continuo con la agitacion a 60°C durante 3 h. El precipitado se filtro, se lavo con THF y se seco al vacfo. El solido se suspendio en mixture de DMF y 1 M de acido trifluoroacetico ac. y se filtro. El filtrado

10 se separo por RP-HPLC preparativa (Reprosil C18, gradiente 20-40% acetonitrilo/0,2% de acido trifluoroacetico acuoso). Las fracciones del producto se combinaron y posteriormente se alcalizaron por la adicion de solucion de bicarbonato de sodio acuosa saturada. La solucion se extrajo con acetato de etilo, y la capa organica se lavo con salmuera, se secaron sobre sulfato de magnesio y se evaporaron para dar 88 mg del compuesto del tftulo (13% de teor.).

15 LC-MS (procedimiento 2): Tr = 0,70 min; MS (ESIpos): m/z = 453 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-da): inter al. 8 = 7,6-8,0 (br. s, 1H), 7,98 (s, 1H), 7,71 (s, 1H), 7,37 (s, 1H), 7,31 (s, 1H), 6,84 (s, 1H), 5,4-5,8 (br. s, 1H), 5,19 (t, 1H), 4,85 (d, 2H), 3,95 (s, 3H), 3,58 (s, 2H), 3,04 (br. m, 2H), 2,88 (s, 2H), 2,45 (s, 3H) ppm.

Ejemplo 126

20 4-{[4-amino-7-(metoximetil)-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-6-il]metil}piperazin-2-ona

imagen261

389 pmoles), y la mezcla se agito a ta durante 65 min. Se agrego otra porcion de cloruro de tionilo (29 pl, 389 pmoles), y se continuo con la agitacion durante 1,5 h. Un exceso de metanol se agrego posteriormente, seguido de

5

10

15

20

25

la adicion gota a gota de una solucion 5,4 M de metilato de sodio en metanol (84 mg, 1,56 mmoles) hasta que se alcanzo pH 8. Despues de agitar durante 3 dfas, los volatiles se evaporaron a presion reducida, y el residuo se separo por RP-HPLc preparativa (Reprosil C18, gradiente 20-40% acetonitrilo/0,2% de acido trifluoroacetico ac.). Las fracciones del producto se evaporaron para dar 19 mg del compuesto del tftulo (21% de teor.).

LC-MS (procedimiento 2): Tr = 0,77 min; MS (ESIpos): m/z = 466 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-da): 8 = 7,99 (s, 1H), 7,75-8,11 (br. s, 1H), 7,68 (s, 1H), 7,38 (s, 1H), 7,31 (s, 1H), 6,84 (s, 1H), 5,51-5,82 (m, 1H), 4,77 (s, 2H), 3,95 (s, 3H), 3,55 (s, 2H), 3,31 (s, 3H), 3,04 (br. s, 2H), 2,85 (s, 2H), 2,422,48 (m, 5H) ppm.

Ejemplo 127

4-{[4-amino-7-(etoximetil)-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-6-il]metil}piperazin-2-ona

imagen262

Una suspension del ejemplo 125 (100 mg, 221 jmoles) en diclorometano (10 ml) se trato con cloruro de tionilo (161 |jl, 2,21 mmoles), y la mezcla se agito a ta durante 30 min. Se agrego etanol, y los volatiles se evaporaron a presion reducida. El residuo se disolvio en etanol (10 ml), se agrego etilato de sodio (30 mg, 442 jmoles), y la mezcla se agito a ta durante 1 h. La mezcla se separo posteriormente directamente por RP-HPLC preparativa (Reprosil C18, gradiente 20-40% acetonitrilo/0,2% de acido trifluoroacetico ac-). Las fracciones del producto se combinaron y se alcalizaron por la adicion de solucion de bicarbonato de sodio acuosa saturada. La solucion se extrajo con acetato de etilo, y la capa organica se lavo con salmuera, se seco sobre sulfato de magnesio y se evaporo para dar 57 mg del compuesto del tftulo (54% de teor.).

LC-MS (procedimiento 2): Tr = 0,85 min; MS (ESIpos): m/z = 480 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 8 = 7,99 (s, 1H), 7,75-8,09 (br. s, 1H), 7,64-7,71 (m, 1H), 7,38 (s, 1H), 7,31 (s, 1H), 6,84 (s, 1H), 5,38-5,91 (br. s, 1H), 4,81 (s, 2H), 3,95 (s, 3H), 3,49-3,59 (m, 4H), 2,99-3,08 (m, 2H), 2,86 (s, 2H), 1,12 (t, 3H) ppm.

B. Evaluacion de la actividad biologica Abreviaturas y acronimos:

Ahx acido 6-aminohexanoico

ATP adenosina trifosfato

BSA albumina de suero de bovino

CREB protema de union al elemento de respuesta cAMP

DMSO dimetilsulfoxido

EDTA acido etilendiaminotetraacetico

5

10

15

20

25

30

EGTA

FBS

FGF

FGFR

GFP

GST

HEPES

HRTF

MOPS

mTOR

PBS

PI3K

RTK

SNP

TR-FRET

VEGF

VEGFR

Acido etilenglicol-bis(2-aminoetil eter)-N,N,N‘,N‘-tetraacetico

suero de bovino fetal

factor de crecimiento del fibroblasto

receptor del factor de crecimiento del fibroblasto

protema fluorescente verde

glutationa S-transferasa

acido 4-(2-hidroxietil)piperazina-1-etansulfonico

fluorescencia resuelta en tiempo homogeneo

acido 3-(N-morfolino)propanosulfonico

blanco mairnfero de rapamicina

solucion salina tamponada con fosfato

fosfatidilinositol 3-quinasa

receptor tirosina quinasa

polimorfismo de nucleotido simple

transferencia de energfa de resonancia por fluorescencia de resolucion temporal

factor de crecimiento endotelial vascular receptor del factor de crecimiento endotelial vascular

La demostracion de la actividad de los compuestos de la presente invencion se puede obtener a traves de ensayos in vitro, ex vivo, e in vivo que son bien conocidos en la tecnica. Por ejemplo, para demostrar la actividad de los compuestos de la presente invencion, se pueden usar los siguientes ensayos.

B-1. Ensayo de ATP quinasa alta del FGFR-1

La actividad inhibidora del FGFR-1 a elevada concentracion de ATP de los compuestos de la presente invencion despues de su pre-incubacion con FGFR-1 se cuantifico empleando el ensayo aTp alto del FGFR-1 basado en la TR-FRET como se describe en los siguientes parrafos:

Una protema de fusion del FGFR-1 marcada recombinante [fusion de glutationa-S-transferasa (GST) (N-terminal), sitio de escision de la trombina, marca His6, y la parte intracelular del FGFR-1 humano de los aminoacidos G400 a R800 como en la entrada del GenBank NM_015850], que se expresa en las celulas de insectos SF9 usando el sistema de expresion baculovirus y se purifica mediante la cromatograffa por afinidad de glutationa-agarosa, se adquirio de Proqinase (producto n°. 0101-0000-1) y se uso como enzima. Como sustrato para la reaccion de quinasa, se uso el peptido biotinilado biotin-Ahx-AAEEEYFFLFAKKK (C-terminal en forma de amida) el cual se adquirio, por ej., de Biosyntan (Berlin-Buch, Alemania).

Usualmente, los compuestos de ensayo se ensayaron en la misma placa de microtttulos a 11 concentraciones diferentes en el intervalo de 20 pM a 0,1 nM (por ej., 20 pM, 5,9 pM, 1,7 pM, 0,51 pM, 0,15 pM, 44 nM, 13 nM, 3,8 nM, 1,1 nM, 0,33 nM, y 0,1 nM) en duplicados para cada concentracion. La serie de dilucion se preparo de forma separada antes del ensayo como soluciones de reserva 100 veces concentrada en DMSO; las concentracion exactas podnan variar dependiendo de la pipeta usada. Para el ensayo, se pipetearon 50 nl de cada solucion de reserva del compuesto de ensayo en DMSO en una placa de microtttulos de 384 pocillos de bajo volumen, negra (Greiner Bio- One, Frickenhausen, Alemania). Se agregaron 2 pl de una solucion de la protema de fusion del FGFR-1 anterior en tampon de ensayo acuoso [8 mM MOPS pH 7,0, 10 mM de acetato de magnesio, 1,0 mM de ditiotreitol, 0,05% (p/v) de albumina de suero de bovino (BSA), 0,07% (v/v) de Tween-20, 0,2 mM de EDTA], y la mezcla se incubo durante 15 min a 22°C para permitir la preunion del compuesto de ensayo a la enzima. A continuacion, la reaccion de quinasa se inicio mediante la adicion de 3 pl de una solucion de adenosina trifosfato (ATP, 3,3 mM; concentracion final en el volumen de ensayo de 5 pl = 2 mM) y sustrato (0,16 pM; concentracion final en el volumen de ensayo de 5 pl = 0,1 pM) en tampon de ensayo, y la mezcla resultante se incubo durante un tiempo de reaccion de 15 min a 22°C. La concentracion de la protema de fusion del FGFR-1 se ajusto dependiendo de la actividad del lote de enzimas y se eligio de forma apropiada para que el ensayo este en el intervalo lineal (las concentraciones tfpicas estuvieron en el

intervalo de 0,05 pg/ml). La reaccion se detuvo por la adicion de 5 pl de una solucion de reactivos de deteccion HTRF [25 nM de estreptavidina-XL665 (Cis Biointernational) y 1 nM PT66-Eu-quelato, un anticuerpo anti-fosfotirosina marcado con europio-quelato (Perkin-Elmer; se puede usar PT66-Tb-criptato de Cis Biointernational en su lugar), en solucion de EDTA acuosa (50 mM de EDTA, 0,1% p/v) de BSA en 50 mM de HEPES/NaOH pH 7,5)].

5 La mezcla resultante se incubo durante 1 hora a 22°C para permitir la formacion del complejo entre el peptido biotinilado fosforilado y los reactivos de deteccion. Posteriormente, la cantidad de sustrato fosforilado se evaluo mediante la medicion de la transferencia de energfa por resonancia del Eu-quelato a la estreptavidina-XL665. Para esto, las emisiones de fluorescencia a 620 nm y 665 nm despues de la excitacion a 350 nm se midieron en un lector TR-FRET [por ej., Rubystar (BMG Labtechnologies, Offenburg, Alemania) o Viewlux (Perkin-Elmer)]. La relacion de 10 las emisiones a 665 nm y a 620 nm se tomo como la medicion para la cantidad de sustrato fosforilado. Los datos se normalizaron (reaccion enzimatica sin inhibidor = 0% de inhibicion, todos los otros componentes del ensayo pero sin enzima = 100% de inhibicion), y los valores IC50 se calcularon mediante un ajuste de 4 parametros usando un software local.

Los valores de IC50 para los compuestos individuales de la invencion a partir de este ensayo se enumeran en la tabla 15 1A a continuacion.

Tabla 1A

Ejemplo N°.

FGFR-1 (ATP alta) IC50 [nM]

1

12,2

2

7,2

3

6,6

4

13,7

5

4,6

6

9,0

7

4,2

8

9,4

9

31,0

10

12,7

11

6,5

12

3,3

13

2,5

14

1,4

15

1,0

16

12,5

17

0,9

18

0,7

19

0,5

20

25,0

21

4,2

22

0,9

Ejemplo N°.

FGFR-1 (ATP alta) IC50 [nM]

23

17,9

24

1,3

25

0,7

26

0,9

27

1,3

28

2,1

29

1,6

30

2,8

31

1,5

32

5,2

33

1,0

34

6,0

35

61,3

36

3,0

37

22,1

38

6,9

39

1,1

40

2,1

41

2,8

42

5,1

43

8,6

44

2,1

Ejemplo N°.

FGFR-1 (ATP alta) IC50 [nM]

45

3,4

46

3,2

47

1,7

48

12,8

51

4,4

52

9,7

53

3,9

54

11,2

56

2,4

57

3,2

58

6,8

59

3,8

60

16,2

61

0,5

62

3,1

64

1,0

65

5,6

66

1,6

67

5,0

68

27,0

69

55,3

70

39,1

71

2,7

72

1,4

73

4,4

74

4,0

75

4,1

76

2,8

77

1,4

78

1,7

79

12,6

80

1,3

81

1,9

82

3,4

Ejemplo N°.

FGFR-1 (ATP alta) IC50 [nM]

83

14,5

84

3,7

85

26,4

86

3,9

87

14,1

88

79,6

89

82,9

90

9,9

91

52,9

92

8,2

93

5,5

94

81,9

95

17,0

96

54,5

97

16,4

98

17,0

99

24,8

100

54,5

101

30,8

102

39,2

103

50,3

104

5,6

105

8,7

106

6,4

107

9,4

108

3,9

109

8,4

110

17,5

111

27,0

112

42,1

113

52,7

114

11,2

115

24,9

116

3,7

5

10

Ejemplo N°.

FGFR-1 (ATP alta) IC50 [nM]

117

8,8

118

6,8

119

9,0

120

6,8

121

8,2

122

18,9

Ejemplo N°.

FGFR-1 (ATP alta) IC50 [nM]

123

25,1

124

27,3

125

5,0

126

3,9

127

8,0

Los derivados de 8-amino-1-(benzotiofen-2-il)imidazo[1,5-a]pirazina seleccionados y los compuestos relacionados que se consideraron representativos de la tecnica anterior mas proxima (vease la Solicitud de Patente Internacional WO 2007/061737-A2 y los compuestos de ejemplo descriptos en la misma) se sintetizaron siguiendo los procedimientos publicados y ademas se ensayaron en el ensayo de ATP alta del FGFR-1 con fines de comparacion. Los valores de IC50 que se obtuvieron para estos compuestos se enumeran en la tabla 1B a continuacion:

imagen263

Estructura del compuesto comparativa

Ejemplo N°. en el doc. WO 2007/061737 FGFR-1 (ATP alta) IC50 [nM]

NH2 V-S O

120 985

N^^ V-O 0

205 20000

NH2 \^s 1 1 ,N

210 456

NH2 V-S 1 1 /N

233 4600

Los valores de IC50 que se especifican en la tabla 1A y 1B muestran que los compuestos de la presente invencion son aproximadamente cinco a mil veces mas potentes en la inhibicion de la actividad del FGFR-1 quinasa que los compuestos de la tecnica anterior seleccionados.

5 B-2. Ensayo del FGFR-3 quinasa

La actividad inhibidora del FGFR-3 de los compuestos de la presente invencion despues de su pre-incubacion con el FGFR-3a se cuantifico empleando el ensayo del FGFR-3 basado en la TR-FRET como se describe en los siguientes parrafos:

Una protema de fusion del FGFR-3 marcada recombinante [fusion de glutationa-S-transferasa (GST) (N-terminal), 10 sitio de escision de la trombina, marca His6, y la parte intracelular del FGFR-3 humano de los aminoacidos R397 a R806 como en la entrada NCBI/Protema NP_000133,1], que se expresa en las celulas de insectos SF9 usando el sistema de expresion baculovirus y se purifica mediante la cromatograffa por afinidad de S-transferasa, se adquirio de Proqinase (producto n°. 1068-0000-1) y se uso como enzima. Como sustrato para la reaccion de quinasa, se uso el peptido biotinilado biotin-Ahx-AAEEEYFFLFAKKK (C-terminal en forma de amida) el cual se adquirio, por ej., de 15 Biosyntan (Berlin-Buch, Alemania).

5

10

15

20

25

30

Usualmente, los compuestos de ensayo se ensayaron en la misma placa de microtttulos a 11 concentraciones diferentes en el intervalo de 20 pM a 0,1 nM (por ej., 20 pM, 5,9 pM, 1,7 pM, 0,51 pM, 0,15 pM, 44 nM, 13 nM, 3,8 nM, 1,1 nM, 0,33 nM, y 0,1 nM) en duplicados para cada concentracion. La serie de dilucion se preparo de forma separada antes del ensayo como soluciones de reserva 100 veces concentrada en DMSO; las concentracion exactas podnan variar dependiendo de la pipeta usada. Para el ensayo, se pipetearon 50 nl de cada solucion de reserva del compuesto de ensayo en DMSO en una placa de microtttulos de 384 pocillos de bajo volumen, negra (Greiner Bio- One, Frickenhausen, Alemania). Se agregaron 2 pl de una solucion de la protema de fusion del FGFR-3 anterior en tampon de ensayo acuoso [8 mM MOPS pH 7,0, 10 mM de acetato de magnesio, 1,0 mM de ditiotreitol, 0,05% (p/v) de albumina de suero de bovino (BSA), 0,07% (v/v) de Tween-20, 0,2 mM de EDTA], y la mezcla se incubo durante 15 min a 22°C para permitir la preunion del compuesto de ensayo a la enzima. A continuacion, la reaccion de quinasa se inicio mediante la adicion de 3 pl de una solucion de adenosina trifosfato (ATP, 16,7 pM; concentracion final en el volumen de ensayo de 5 pl = 10 pM) y sustrato (0,8 pM; concentracion final en el volumen de ensayo de 5 pl = 0,5 pM) en tampon de ensayo, y la mezcla resultante se incubo durante un tiempo de reaccion de 60 min a 22°C. La concentracion de la protema de fusion del FGFR-3 se ajusto dependiendo de la actividad del lote de enzimas y se eligio de forma apropiada para que el ensayo este en el intervalo lineal (las concentraciones tfpicas estuvieron en el intervalo de 0,03 pg/ml). La reaccion se detuvo por la adicion de 5 pl de una solucion de reactivos de deteccion HTRF [100 nM de estreptavidina-XL665 (Cis Biointernational) y 1 nM PT66-Tb-criptato, un anticuerpo anti-fosfotirosina marcado con terbio-criptato (Cis Biointernational; se puede usar PT66-Eu-quelato de Perkin-Elmer en su lugar), en solucion de EDTA acuosa (50 mM de EDTA, 0,1% p/v) de BSA en 50 mM de HEPES/NaOH pH 7,5)].

La mezcla resultante se incubo durante 1 hora a 22°C para permitir la formacion del complejo entre el peptido biotinilado fosforilado y los reactivos de deteccion. Posteriormente, la cantidad de sustrato fosforilado se evaluo mediante la medicion de la transferencia de energfa por resonancia del Tb-quelato a la estreptavidina-XL665. Para esto, las emisiones de fluorescencia a 620 nm y 665 nm despues de la excitacion a 350 nm se midieron en un lector TR-FRET [por ej., Rubystar (BMG Labtechnologies, Offenburg, Alemania) o Viewlux (Perkin-Elmer)]. La relacion de las emisiones a 665 nm y a 620 nm se tomo como la medicion para la cantidad de sustrato fosforilado. Los datos se normalizaron (reaccion enzimatica si inhibidor = 0% de inhibicion, todos los otros componentes del ensayo pero sin enzima = 100% de inhibicion), y los valores IC50 se calcularon mediante un ajuste de 4 parametros usando un software local.

Los valores IC50 para los compuestos individuales de la invencion a partir de este ensayo se enumeran en la tabla 2A, dada a continuacion.

Tabla 2A

Ejemplo N°.

FGFR-3 IC50 [nM]

1

24,8

2

29,4

3

46,6

4

24,8

5

12,1

6

28,5

7

10,4

8

17,7

9

63,9

10

8,3

11

13,0

12

14,0

13

10,0

14

2,5

15

1,0

Ejemplo N°.

FGFR-3 IC50 [nM]

16

9,4

17

3,3

18

2,8

19

2,7

20

26,1

21

13,0

22

4,7

23

41,9

24

5,7

25

5,2

26

4,9

27

12,6

28

9,7

29

2,5

30

6,4

Ejemplo N°.

FGFR-3 IC50 [nM]

31

13,3

32

52,3

33

7,2

34

10,5

35

65,4

36

9,8

37

34,6

38

18,8

39

4,9

40

7,9

41

7,2

42

18,4

43

32,4

44

6,1

45

9,7

46

8,1

47

3,4

48

45,4

51

3,9

52

7,0

53

2,5

54

6,8

56

2,0

57

1,8

58

9,8

59

6,8

60

77,9

61

0,9

62

11,0

64

2,9

65

3,1

66

3,7

67

9,4

68

42,7

Ejemplo N°.

FGFR-3 IC50 [nM]

69

58,1

71

5,4

72

0,7

73

12,2

74

1,4

75

19,8

76

1,4

77

3,8

78

2,0

79

17,9

80

0,2

81

0,5

82

16,0

83

2,1

84

16,5

85

26,0

86

6,8

87

28,1

90

11,0

91

31,1

93

8,7

95

28,7

98

26,5

99

36,9

102

39,8

106

7,1

107

17,4

108

7,7

114

9,6

117

5,3

119

4,5

121

24,6

Los derivados de 8-amino-1-(benzotiofen-2-il)imidazo[1,5-a]pirazina seleccionados y los compuestos relacionados que se consideraron representativos de la tecnica anterior mas proxima (vease la Solicitud de Patente Internacional WO 2007/061737-A2 y los compuestos de ejemplo descriptos en la misma) se sintetizaron siguiendo los 5 procedimientos publicados y ademas se ensayaron en el ensayo de ATP alta del FGFR-3 con fines de comparacion. Los valores de IC50 que se obtuvieron para estos compuestos se enumeran en la tabla 2B, dada a continuacion:

imagen264

(Continuacion)

Estructura del compuesto

Ejemplo No. en el FGFR-3

comparativa

doc. WO 2007/061737 IC50 [nM]

a,CH3 NH2 V-O N^N O

205 20000

nh2 \^s 1 1 ,N

210 554

NH2 V-S 1 1 /N

233 10000

Los valores de IC50 que se especifican en la tabla 2A y 2B muestran que los compuestos de la presente invencion son aproximadamente tres a mil veces mas potentes en la inhibicion de la actividad del FGFR-3 quinasa que los 5 compuestos de la tecnica anterior seleccionados.

B-3. Ensayo de ATP quinasa alta del FGFR-4

La actividad inhibidora del FGFR-1 a elevada concentracion de ATP de los compuestos de la presente invencion despues de su pre-incubacion con FGFR-4 se cuantifico empleando el ensayo aTp alto del FGFR-4 basado en la TR-FRET como se describe en los siguientes parrafos:

10 Una protema de fusion del FGFR-4 marcada recombinante [fusion de glutationa-S-transferasa (GST) (N-terminal), sitio de escision de la trombina, marca His6, y la parte intracelular del FGFR-4 humano de los aminoacidos R391 a R802 como en la entrada del GenBank NM_002011], que se expresa en las celulas de insectos SF9 usando el sistema de expresion baculovirus y se purifica mediante la cromatograffa por afinidad de glutationa-agarosa, se adquirio de Proqinase (producto n°. 0101-0000-3) y se uso como enzima. Como sustrato para la reaccion de quinasa, 15 se uso el peptido biotinilado biotin-Ahx-AAEEEYFFLFAKKK (C-terminal en forma de amida) el cual se adquirio, por ej., de Biosyntan (Berlin-Buch, Alemania).

Usualmente, los compuestos de ensayo se ensayaron en la misma placa de microtttulos a 11 concentraciones diferentes en el intervalo de 20 pM a 0,1 nM (por ej., 20 pM, 5,9 pM, 1,7 pM, 0,51 pM, 0,15 pM, 44 nM, 13 nM, 3,8 nM, 1,1 nM, 0,33 nM, y 0,1 nM) en duplicados para cada concentracion. La serie de dilucion se preparo de forma 20 separada antes del ensayo como soluciones de reserva 100 veces concentrada en DMSO; las concentraciones exactas podnan variar dependiendo de la pipeta usada. Para el ensayo, se pipetearon 50 nl de cada solucion de reserva del compuesto de ensayo en DMSO en una placa de microtftulos de 384 pocillos de bajo volumen, negra (Greiner Bio-One, Frickenhausen, Alemania). Se agregaron 2 pl de una solucion de la protema de fusion del FGFR-1

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

anterior en tampon de ensayo acuoso [8 mM MOPS pH 7,0, 10 mM de acetato de magnesio, 1,0 mM de ditiotreitol, 0,05% (p/v) de albumina de suero de bovino (BSA), 0,07% (v/v) de Tween-20, 0,2 mM de EDTA], y la mezcla se incubo durante15 min a 22°C para permitir la preunion del compuesto de ensayo a la enzima. A continuacion, la reaccion de quinasa se inicio mediante la adicion de 3 jl de una solucion de adenosina trifosfato (ATP, 3,3 mM; concentracion final en el volumen de ensayo de 5 jl = 2 mM) y sustrato (0,8 jM; concentracion final en el volumen de ensayo de 5 jl = 0,5 jM) en tampon de ensayo, y la mezcla resultante se incubo durante un tiempo de reaccion de 60 min a 22□. La concentracion de la protema de fusion del FGFR-1 se ajusto dependiendo de la actividad del lote de enzimas y se eligio de forma apropiada para que el ensayo este en el intervalo lineal (las concentraciones tfpicas estuvieron en el intervalo de 0,03 jg/ml). La reaccion se detuvo por la adicion de 5 jl de una solucion de reactivos de deteccion HTRF [100 nM de estreptavidina-XL665 (Cis Biointernational) y 1 nM PT66-Tb-criptato, un anticuerpo anti- fosfotirosina marcado con terbio-criptato (Cis Biointernational; se puede usar PT66-Eu-quelato de Perkin-Elmer en su lugar), en solucion de EDTA acuosa (50 mM de EDTA, 0,1% p/v) de BSA en 50 mM de HEPES/NaOH pH 7,5)].

La mezcla resultante se incubo durante 1 hora a 22°C para permitir la formacion del complejo entre el peptido biotinilado fosforilado y los reactivos de deteccion. Posteriormente, la cantidad de sustrato fosforilado se evaluo mediante la medicion de la transferencia de energfa por resonancia del Tb-quelato a la estreptavidina-XL665. Para esto, las emisiones de fluorescencia a 620 nm y 665 nm despues de la excitacion a 350 nm se midieron en un lector TR-FRET [por ej., Rubystar (BMG Labtechnologies, Offenburg, Alemania) o Viewlux (Perkin-Elmer)]. La relacion de las emisiones a 665 nm y a 620 nm se tomo como la medicion para la cantidad de sustrato fosforilado. Los datos se normalizaron (reaccion enzimatica si inhibidor = 0% de inhibicion, todos los otros componentes del ensayo pero sin enzima = 100% de inhibicion), y los valores IC50 se calcularon mediante un ajuste de 4 parametros usando un software local.

B-4. Ensayo de mTOR quinasa (con fines comparativos)

La actividad inhibidora del mTOR de los compuestos de la presente invencion se cuantifico empleando el ensayo mTOR basado en la TR-FRET como se describe en los siguientes parrafos:

Una protema mTOR marcada de fusion recombinante [glutationa-S-transferasa (GST) fusionada a los aminoacidos mTOR humanos de 1360 a 2549], que se expresa en las celulas de insectos y purificada por cromatograffa por afinidad de glutationa-sefarosa, se adquirio de Invitrogen (Cat.-N° 4753) y se uso como enzima. Como sustrato para la reaccion de quinasa, se uso una protema de fusion recombinante de GFP y 4E-BP1 (adquirida de Invitrogen, Cat.- N°. PV4759).

Los compuestos se disolvieron en DMSO para generar soluciones de reserve de 10 mM. Estas soluciones primero se diluyeron 100 veces con 100% de DMSO para obtener soluciones 1 mM en 100% de DMSO, luego se diluyeron 100 veces en 50% de DMSO para obtener soluciones 10 jM en 50% de DMSO.

Para el ensayo, 0,5 jl de una solucion 10 jM del compuesto de ensayo en 50% de DMSO se pipeteo en una placa de microtttulos de 384 pocillos de bajo volumen, negra (Greiner Bio-One, Frickenhausen, Alemania). Se agregaron 2 jl de una solucion de la protema de fusion mTOR anterior en tampon de ensayo acuoso [50 mM de HEPES/NaOH pH 7,5, 5 mM de cloruro de magnesio, 1,0 mM de ditiotreitol, 1 mM de EGTA, 0,01% (v/v) de Triton-X100, 0,01% (p/v) de albumina de suero bovino (BSA)], y la mezcla se incubo durante 15 min a 22°C para permitir la preunion del compuesto de ensayo a la enzima. A continuacion, la reaccion de quinasa se inicio mediante la adicion de 2,5 jl de una solucion de adenosina trifosfato (ATP, 80 jM; concentracion final en el volumen de ensayo de 5 jl = 40 jM) y sustrato (0,6 jM; concentracion final en el volumen de ensayo de 5 jl = 0,3 jM) en tampon de ensayo, y la mezcla resultante se incubo durante un tiempo de reaccion de 60 min a 22°C. La concentracion de la protema de fusion mTOR se eligio de forma apropiada como para que el ensayo este en el intervalo lineal (una concentracion final tfpica en el volumen de ensayo de 5 jl fue 1,25 ng/jl. La reaccion se detuvo por la adicion de 5 jl de 30 mM de EDTA (concentracion final en el volumen de ensayo de 10 jl = 15 mM) y 2 nM de anticuerpo fosfoespedfico anti-4E-BP1 [pT46] marcado con Tb-quelato [Invitrogen Cat.-N°. PV4755] (concentracion final en el volumen de ensayo de 10 jl = 1 nM) en tampon de FRET.

La mezcla resultante se incubo durante 1 hora a 22°C para permitir la formacion del complejo entre el sustrato fosforilado y el anticuerpo marcado con Tb-quelato. Posteriormente, la cantidad de sustrato fosforilado se evaluo mediante la medicion de la transferencia de energfa por resonancia del Tb-quelato al GFP. Para esto, las emisiones de fluorescencia a 495 nm y 520 nm despues de la excitacion a 340 nm se midieron en un lector Envision 2104 de multiples etiquetas (Perkin-Elmer). La relacion de las emisiones a 520 nm y a 495 nm se tomo como la medicion para la cantidad de sustrato fosforilado. Los datos se normalizaron (reaccion enzimatica sin inhibidor = 0% de inhibicion, todos los otros componentes del ensayo pero sin enzima = 100% de inhibicion), y o bien se calcularon valores medios (si se ensayan en replicados a una concentracion simple) o los valores de IC50 (por un ajuste de 4 parametros usando un software local).

Los valores de inhibicion medios a 1 jM para los compuestos individuales de la presente invencion se enumeran en la tabla 3, dada a continuacion.

Ejemplo N°.

mTOR % de inhibicion @ 1 pM

1

8,7

2

7,2

3

8,2

5

9,7

6

0,3

7

3,1

8

7,8

9

sin deteccion del efecto inhibidor

10

6,0

11

33,2

12

25,8

13

14,9

14

15,7

16

36,9

17

6,7

18

sin deteccion del efecto inhibidor

19

17,6

20

31,3

21

5,0

22

17,6

23

11,6

24

6,3

25

3,5

26

6,8

27

5,9

28

sin deteccion del efecto inhibidor

29

28,5

30

21,1

31

16,3

32

1,6

Ejemplo N°.

mTOR % de inhibicion @ 1 pM

33

0,9

34

25,9

35

1,4

36

14,4

37

8,6

38

20,8

39

11,5

40

0,1

41

sin deteccion del efecto inhibidor

42

sin deteccion del efecto inhibidor

43

10,1

44

13,3

45

15,5

46

11,0

47

14,7

48

4,1

51

8,4

52

4,2

53

3,3

54

1,7

56

16,1

57

2,0

58

4,0

59

0,8

60

11,1

61

15,9

62

0,2

64

1,1

65

13,9

66

15,8

67

8,4

5

10

15

20

25

Ejemplo N°.

mTOR % de inhibicion @ 1 pM

68

8,0

69

8,7

70

5,8

71

0,1

72

8,2

73

18,5

74

18,6

75

10,2

76

8,5

77

0,7

78

5,8

79

14,7

80

3,9

81

4,1

82

7,1

83

6,3

84

9,1

85

0,9

Ejemplo N°.

mTOR % de inhibicion @ 1 pM

87

12,7

88

5,3

89

sin deteccion del efecto inhibidor

93

12,5

98

sin deteccion del efecto inhibidor

99

5,3

103

sin deteccion del efecto inhibidor

107

sin deteccion del efecto inhibidor

108

8,5

119

sin deteccion del efecto inhibidor

121

sin deteccion del efecto inhibidor

(sin deteccion del efecto inhibidor = sin efecto inhibidor detectable a 1 jM).

Los datos en la tabla 3 muestran que los compuestos de la presente invencion solo tienen un efecto inhibidor debil, si existe, sobre la mTOR quinasa, el cual no se considera que contribuya a la actividad farmacologica observada con estos compuestos.

B-5. Inhibicion de la proliferacion celular mediada por el factor de crecimiento

Se obtuvieron celulas endoteliales de la vena umbilical humana (HUVEC) de Cellsystems (FC-0003) y se desarrollaron en el medio completo de Vasculife VEGF (Cellsystems, LL-1020) que contiene 2% de suero bovino fetal (FBS) a 37°C y 5% de CO2. Las celulas se usaron para los ensayos de proliferacion hasta el pasaje 7.

Las celulas HUVEC se cosecharon usando accutasa (PAA, L11-007) y se sembraron en las columnas 2 a 12 de las placas de 96 pocillos (fondo plano de 96 pocillos de la placa de cultivo tisular Falcon MICROTEST, BD 353075, o jCLEAR-PLATe, de 96 pocillos, negra, Greiner Bio-One, No. 655090) a una densidad celular de 2500 celulas/ pocillo en 100 jl de medio completo Vasculife VEGF quedando la columna 1 vada como blanco. Las celulas se incubaron a 37°C y 5% de CO2 durante al menos 6 horas. A continuacion, las celulas se lavaron una vez con PBS y se privaron de alimento durante toda la noche en el medio basal Vasculife (Cellsystems, LM-0002) que contiene heparina, ascorbato y L-glutamina (componentes del kit de Vasculife Life Factors, Cellsystemas LL-1020) como tambien 0,2% de FBS.

Despues de aproximadamente 18 horas, se descarto el medio privado de alimento, y las celulas se expusieron durante 72 horas a 9 concentraciones de registro consecutivo o medio-registro del compuesto de ensayo en el intervalo de 10 pM a 30 jM y a 5, 10 o 20 ng/ml de hFGF-2 (FGF humano recombinante basico, R&D Systems, 233- FB) en 100 jl de medio privado de alimento. Las soluciones de reserva de 10 mM de los compuestos de ensayo en DMSO se diluyeron hasta 200 x concentracion final en DMSO dando por resultado una concentracion de DMSO final de 0,5% en todos los pocillos. Los controles consistieron de celulas desarrolladas en el medio privado de alimento unicamente y de celulas desarrolladas en el medio privado de alimento que contiene hFGF-2 con 0,5% de DMSO. Para determinar la proliferacion celular, se agrego 5 |il solucion de Alamar Azul (Biosource, DAL1100) a cada pocillo

(dilucion 1,20), y las celulas se dejaron incubar durante otras 4 horas a 37°C y 5% de CO2 antes de medir la fluorescencia (ex. 535 nm, em. 595 nm) con un lector de placa Spectrafluor Plus Tecan ((XFLUOR4 version 4,20). En algunos experimented, se uso un kit de determinacion de ATP (BIAFFIN GmbH, LBR-T100) de acuerdo con las instrucciones del fabricante. En cada experimento, se ensayaron muestras por triplicado, y se determinaron las 5 desviaciones estandares. Se uso el software GraphPad Prism 5 para analizar los datos y obtener los valores de IC50. Todos los compuestos de ensayo se ensayaron 2 a 10 veces en experimentos independientes y se obtuvieron resultados similares.

Los datos mencionados en la tabla 4, dada a continuacion, representan los valores IC50 para los compuestos representativos de la invencion que surgen de los correspondientes valores pIC50 promediados:

10

Tabla 4

Ejemplo N°.

Proliferacion de HUVEC mediada por hFGF-2, IC50 [nM]

1

16,4

4

17,5

5

5,3

8

9,7

10

16,0

11

150,0

13

17,0

14

25,0

16

117,3

18

10,4

21

3,7

26

56,7

34

37,3

38

213,3

39

365,0

45

171,0

46

84,5

48

360,0

51

1,2

52

4,0

53

3,3

Ejemplo N°.

Proliferacion de HUVEC mediada por hFGF-2, IC50 [nM]

54

2,2

56

18,1

57

3,2

59

51,1

60

250,0

64

4,5

67

12,1

68

14,4

71

5,4

72

1,6

73

5,5

74

0,2

75

1,5

76

1,5

77

3,2

79

3,5

80

1,6

81

1,6

84

46,6

85

126,0

15

La mayona de los compuestos de la presente invencion representaron aproximadamente de diez a cien veces la actividad inhibidora reducida en este ensayo de proliferacion cuando se uso el factor de desarrollo endotelial vascular (isoforma VEGF-A165) como factor de crecimiento mediador (en lugar de FGF-2), indicando una selectividad significativa de estos compuestos para las FGFR versus las VEGFR quinasas.

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

B-6.

Modelos de tumor humano senoinjerto y sinergicos.

Se han conducido diferentes modelos de tumor a fin de perfilar los compuestos de la presente invencion in vivo. Las celulas tumorales humanas, de rata o de raton se cultivaron in vivo y se implantaron en ratones inmunodeficientes o inmunocompetentes, o ratas inmunodeficientes. El tratamiento se inicio despues del establecimiento del tumor, y los animales que portan el tumor se trataron con sustancias a traves de diferentes vfas (por ej., por v^a intravenosa, intraperitoneal o subcutanea). Las sustancias se ensayaron como monoterapia o terapia de combinacion con otras sustancias farmacologicas. Se condujo el tratamiento de los animales que portan el tumor hasta que los tumores alcanzaron un tamano promedio de 120 mm2. Los tumores se midieron en dos dimensiones usando un calibre, y el volumen del tumor se calculo de acuerdo con la formula (longitud x ancho2)/2. La eficacia de la sustancia se evaluo al final del experimento usando la relacion T/C [T = peso final del tumor en el grupo tratado; C = peso final del tumor en el grupo control]. La significancia estadfstica de la eficacia entre el control y los grupos tratados se determino usando el ensayo de varianza ANOVA. Todos los estudios de animales se condujeron de acuerdo con las gmas regulatorias alemanas.

Si bien la invencion ha sido divulgada con referencia a realizaciones espedficas, es evidente que otros expertos en la tecnica pueden realizar otras realizaciones y variantes de la invencion sin apartarse del verdadero espmtu y alcance de la invencion. Se interpreta que las reivindicaciones incluyen todas estas realizaciones y las variantes equivalentes.

C. Ejemplos que se refieren a las composiciones farmaceuticas

Las composiciones farmaceuticas de acuerdo con la presente invencion se pueden ilustrar de la siguiente forma: Solucion i.v. esteril:

Una solucion de 5 mg/ml del compuesto deseado de la invencion se puede preparar usando agua esteril, inyectable, y el pH se ajusta si es necesario. La solucion se diluye para la administracion hasta 1-2 mg/ml con 5% de dextrosa esteril y se administra como una infusion i.v. durante aproximadamente 60 minutos.

Polvo liofilizado para administracion i.v.:

Se puede preparar una preparacion esteril con (i) 100-1000 mg del compuesto deseado de la invencion como polvo liofilizado, (ii) 32-327 mg/ml de citrato de sodio, y (iii) 300-3000 mg de dextrano 40. La formulacion se reconstituye con solucion salina esteril, inyectable o 5% de dextrosa a una concentracion de 10 a 20 mg/ml, la cual ademas se diluye con solucion salina o 5% de dextrosa hasta 0,2 hasta 0,4 mg/ml, y se administra o bien como bolo i.v. o por infusion i.v. durante 15 a 60 minutos.

Suspension intramuscular:

La siguiente solucion o suspension se puede preparar para inyeccion intramuscular:

50 mg/ml del compuesto insoluble en agua deseado de la invencion, 5 mg/ml de carboximetilcelulosa sodica; 4 mg/ml de Tween 80; 9 mg/ml de cloruro de sodio; 9 mg/ml de alcohol bendlico.

Capsulas duras:

Un gran numero de capsulas unitarias se preparan mediante el llenado de capsulas de gelatina dura de dos piezas estandares, conteniendo cada una 100 mg del compuesto en polvo, deseado de la invencion, 150 mg de lactosa, 50 mg de celulosa y 6 mg de estearato de magnesio.

Capsulas de gelatina blanda:

Una mezcla del compuesto deseado de la invencion en un aceite digerible, tal como aceite de soja, aceite de semilla de algodon o aceite de oliva, se prepara y se inyecta por medio de una bomba de desplazamiento positiva en gelatina molida para formar capsulas de gelatina blanda que contienen 100 mg del ingrediente activo. Las capsulas se lavan y se secan. El compuesto deseado de la invencion se puede disolver en una mezcla de polietilenglicol, glicerina y sorbitol para preparar una mezcla medicinal miscible en agua.

Comprimidos:

Se prepara un gran numero de comprimidos mediante procedimientos convencionales de modo que la unidad de dosificacion es 100 mg del compuesto deseado de la invencion, 0,2 mg de dioxido de silicio coloidal, 5 mg de estearato de magnesio, 275 mg de celulosa microcristalina, 11 mg de almidon, y 98,8 mg de lactosa. Los recubrimientos acuosos y no acuosos apropiados se pueden aplicar para incrementar el sabor agradable, mejorar la elegancia y la estabilidad, o retardar la absorcion.

Solucion o suspension para aplicacion topica al ojo (gotas oculares):

5

10

15

20

25

30

35

liofilizado reconstituido en 5 ml de solucion salina esteril. Como conservantes, se pueden usar cloruro de benzalconio, timerosal, nitrato fenilmercurico, o similares, en un intervalo de aproximadamente 0,001% a 1% en peso.

Claims (12)

1. 5

   10

   15

   20

   25

   30

   REIVINDICACIONES

   1. Un compuesto de formula (I)

   imagen1

   en la que

   R1 es hidrogeno, cloro, metilo o metoxi,

   R2 es hidrogeno o metoxi,

   a condicion de que al menos uno de R1 y R2 sea diferente de hidrogeno,

   G1 representa cloro, alquilo (C1-C4), alcoxicarbonilo (C1-C4), aza-heteroarilo de 5 miembros o el grupo -CH2-

   OR3, -CH2-NR4R5 o -C(=O)-NR4R6, en donde

   R3 es hidrogeno, alquilo (C1-C4) o cicloalquilo (C3-C6) o fenilo,

   (i) dicho alquilo (C1-C4) esta opcionalmente sustituido con hidroxi, alcoxi (C1-C4), hidroxicarbonilo, alcoxi- carbonilo (C1-C4), amino, aminocarbonilo, mono-(C1-C4)-alquil-aminocarbonilo, di-alquilaminocarbonilo (C1-C4)-, cicloalquilo (C3-C6) o hasta tres atomo de fluor,

   y

   (ii) dicho cicloalquilo (C3-C6) esta opcionalmente sustituido con uno o dos sustituyentes independientemente seleccionados del grupo que consiste en alquilo (C1-C4), hidroxi y amino,

   y

   (iii) dicho fenilo esta opcionalmente sustituido con uno o dos sustituyentes independientemente

   seleccionados del grupo que consiste en fluor, cloro, bromo, ciano, trifluorometilo, trifluorometoxi, alquilo (C1-C4) y alcoxi (C1-C4),

   R4 es hidrogeno o alquilo (C1-C4),

   R5 es hidrogeno, alquilo (C1-C4), alquilcarbonilo (C1-C4), cicloalquilo (C3-C6) o heterocicloalquilo de 4 a 6

   miembros, en donde

   (i) dicho alquilo (C1-C4) esta opcionalmente sustituido con hidroxi, alcoxi (C1-C4), hidroxicarbonilo,

   alcoxicarbonilo (C1-C4), aminocarbonilo, mono-(C1-C4)-alquil-aminocarbonilo, di-alquilaminocarbonilo (C1-C4) o cicloalquilo (C3-C6),

   y

   (ii) dicho cicloalquilo (C3-C6) esta opcionalmente sustituido con uno o dos sustituyentes independientemente seleccionados del grupo que consiste en alquilo (C1-C4), hidroxi y amino,

   y

   (iii) dicho heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros esta opcionalmente sustituido con uno o dos sustituyentes independientemente seleccionados del grupo que consiste en alquilo (C1-C4), hidroxi, oxo y amino,

   5

   10

   15

   20

   25

   30

   35

   40

   45

   R6 es hidrogeno, alquilo (C1-C4), cicloalquilo (C3-C6) o heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros, en donde

   (i) dicho alquilo (C1-C4) esta opcionalmente sustituido con hidroxi, alcoxi (C1-C4), hidroxicarbonilo, alcoxicarbonilo (C1-C4), amino, aminocarbonilo, mono-(Ci-C4)-alquil-aminocarbonilo, di-alquilaminocarbonilo (C1-C4) o cicloalquilo (C3-C6),

   y

   (ii) dicho cicloalquilo (C3-C6) esta opcionalmente sustituido con uno o dos sustituyentes independientemente seleccionados del grupo que consiste en alquilo (C1-C4), hidroxi y amino,

   y

   (iii) dicho heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros esta opcionalmente sustituido con uno o dos sustituyentes independientemente seleccionados del grupo que consiste en alquilo (C1-C4), hidroxi, oxo y amino,

   o

   R4 y R5, o R4 y R6, respectivamente, estan unidos y, tomados junto con el atomo de nitrogeno al cual estan unidos, forman un anillo heterocicloalquilo monodclico, saturado de 4 a 7 miembros el cual puede contener un segundo heteroatomo del anillo seleccionado de N(R7) y O, y el cual puede estar sustituido en los atomos de carbono del anillo con uno o dos sustituyentes independientemente seleccionados del grupo que consiste en alquilo (C1-C4), oxo, hidroxi, amino y aminocarbonilo, y en donde

   R7 es hidrogeno, alquilo (C1-C4), formilo o alquilcarbonilo (C1-C4),

   y

   G(i) 2 representa cloro, ciano, alquilo (C1-C4) o el grupo -CR8AR8B-OH, -CH2-NR9R10, -C(=O)-NR11R12 o -CH2-OR15,

   en donde

   r8A y r8B se seleccionan independientemente del grupo que consiste en hidrogeno, alquilo (C1-C4), ciclopropilo y ciclobutilo,

   R9 es hidrogeno o alquilo (C1-C4),

   R10 es hidrogeno, alquilo (C1-C4), alquilcarbonilo (C1-C4), cicloalquilo (C3-C6) o heterocicloalquilo de 4 a 6

   miembros, en donde

   (i) dicho alquilo (C1-C4) esta opcionalmente sustituido con hidroxi, amino, aminocarbonilo, mono- (C1-C4)-alquilaminocarbonilo o di-alquilaminocarbonilo (C1-C4),

   y

   (ii) dicho cicloalquilo (C3-C6) esta opcionalmente sustituido con uno o dos sustituyentes independientemente seleccionados del grupo que consiste en alquilo (C1-C4), hidroxi y amino,

   y

   (iii) dicho heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros esta opcionalmente sustituido con uno o dos

   sustituyentes independientemente seleccionados del grupo que consiste en alquilo (C1-C4), hidroxi, oxo y amino,

   R11 es hidrogeno o alquilo (C1-C4),

   R12 es hidrogeno, alquilo (C1-C4), cicloalquilo (C3-C6) o heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros, en donde

   (i) dicho alquilo (C1-C4) esta opcionalmente sustituido con hidroxi, amino, aminocarbonilo, mono- (C1-C4)-alquilaminocarbonilo, o di-alquilaminocarbonilo (C1-C4),

   y

   (ii) dicho cicloalquilo (C3-C6) esta opcionalmente sustituido con uno o dos sustituyentes

   independientemente seleccionados del grupo que consiste en alquilo (C1-C4), hidroxi y amino,

   y

   (iii) dicho heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros esta opcionalmente sustituido con uno o dos

   sustituyentes independientemente seleccionados del grupo que consiste en alquilo (C1-C4), hidroxi, oxo y

   5

   10

   15

   20

   25

   30

   35

   40

   amino,

   o

   R y R , o R y R , respectivamente, estan unidos y, tornados junto con el atomo de nitrogeno al cual estan unidos, forman un anillo heterocicloalquilo monodclico, saturado de 4 a 7 miembros el cual puede contener un segundo heteroatomo del anillo seleccionado de N(R13), O, S y S(O)2, y el cual puede estar sustituido en los atomos de carbono del anillo con hasta tres sustituyentes independientemente seleccionados del grupo que consiste en fluor, alquilo (C1-C4), oxo, hidroxi, amino y aminocarbonilo, y en donde

   R13 es hidrogeno, alquilo (C1-C4) o cicloalquilo (C3-C6), formilo o alquilcarbonilo (C1-C4),

   y

   R15 es alquilo (C1-C4),

   a condicion de que G1 no sea cloro cuando G2 es cloro o ciano, o una sal, un hidrato y/o un solvato del mismo aceptables para uso farmaceutico.
2. 2. El compuesto de formula (I) de acuerdo con la reivindicacion 1, en el que R1 es cloro, metilo o metoxi,

   R2 es hidrogeno o metoxi,

   G1 representa cloro, alquilo (C1-C4), alcoxicarbonilo (C1-C4) o azaheteroarilo de 5 miembros seleccionado del grupo que consiste en pirazolilo, imidazolilo, oxazolilo, isoxazolilo y oxadiazolilo, o representa el grupo -CH2-OR3 o - CH2-NR4R5 *, en donde

   R3 es hidrogeno, alquilo (C1-C4) o cicloalquilo (C3-C6),

   en donde dicho alquilo (C1-C4) esta opcionalmente sustituido con hidroxi, alcoxi (C1-C4), hidroxicarbonilo, alcoxicarbonilo (C1-C4), amino, aminocarbonilo, cicloalquilo (C3-C6) o hasta tres atomos de fluor,

   R4 es hidrogeno o alquilo (C1-C4),

   R5 es hidrogeno, alquilo (C1-C4), alquilcarbonilo (C1-C4), cicloalquilo (C3-C6) o heterocicloalquilo de 5 o 6

   miembros, en donde

   (i) dicho alquilo (C1-C4) esta opcionalmente sustituido con hidroxi, hidroxicarbonilo, o cicloalquilo (C3- C6),

   y

   (ii) dicho heterocicloalquilo de 5 o 6 miembros esta opcionalmente sustituido con oxo, o

   R4 y R5 estan unidos y, tomados junto con el atomo de nitrogeno al cual estan unidos, forman un anillo heterocicloalquilo monodclico, saturado de 4 a 6 miembros el cual puede contener un segundo heteroatomo del anillo seleccionado de N(R7 *) y O, y el cual puede estar sustituido en un atomo de carbono del anillo con oxo o hidroxi, y en donde

   R7 es hidrogeno o alquilo (C1-C4),

   y

   G2 representa cloro, ciano, alquilo (C1-C4), o el grupo -CR8AR8B-OH, -CH2-NR9R10, -C(=O)-NR11R12 o -CH2-

   OR15, en donde

   r8A y r8B se seleccionan independientemente del grupo que consiste en hidrogeno, alquilo (C1-C4) y ciclopropilo,

   R9 es hidrogeno o metilo,

   R10 es hidrogeno, alquilo (C1-C4), alquilcarbonilo (C1-C4), cicloalquilo (C3-C6) o heterocicloalquilo de 5 o 6

   miembros, en donde

   (i) dicho alquilo (C1-C4) esta opcionalmente sustituido con hidroxi o aminocarbonilo,

   y

   5

   10

   15

   20

   25

   30

   35

   40

   (ii) dicho heterocicloalquilo de 5 o 6 miembros esta opcionalmente sustituido con oxo,

   R11 es hidrogeno o metilo,

   R12 es hidrogeno, alquilo (C1-C4), cicloalquilo (C3-C6) o heterocicloalquilo de 5 o 6 miembros, en donde

   (i) dicho alquilo (C1-C4) esta opcionalmente sustituido con hidroxi,

   y

   (ii) dicho heterocicloalquilo de 5 o 6 miembros esta opcionalmente sustituido con oxo, o

   9 10 11 12

   R y R , o R y R , respectivamente, estan unidos y, tomados junto con el atomo de nitrogeno al cual estan unidos, forman un anillo heterocicloalquilo monodclico, saturado de 4 a 6 miembros el cual puede contener un segundo heteroatomo del anillo seleccionado de N(R13), O, S y S(O)2, y el cual puede estar sustituido en los atomos de carbono del anillo con hasta tres sustituyentes independientemente seleccionados del grupo que consiste en fluor, alquilo (C1-C4), oxo, hidroxi, amino y aminocarbonilo, y en donde

   R13 es hidrogeno, alquilo (C1-C4), ciclopropilo, ciclobutilo, formilo o alquilcarbonilo (C1-C4),

   y

   R15 es metilo o etilo,

   a condicion de que G1 no sea cloro cuando G2 es cloro o ciano, o una sal, un hidrato y/o un solvato del mismo farmaceuticamente aceptables.
3. 3. El compuesto de formula (I) de acuerdo con las reivindicaciones 1 o 2, en el que

   R1 es metilo,

   R2 es metoxi,

   G1 representa metilo, oxazol-5-ilo o el grupo -CH2-OR3 o -CH2-NR4R5, en donde

   R3 es hidrogeno, alquilo (C1-C4), ciclopropilo o ciclobutilo,

   en donde dicho alquilo (C1-C4) esta opcionalmente sustituido con hidroxi, metoxi, etoxi, hidroxicarbonilo, metoxicarbonilo, etoxicarbonilo, amino, aminocarbonilo, ciclopropilo, ciclobutilo o hasta tres atomos de fluor.

   R4 es hidrogeno, metilo o etilo,

   R5 es hidrogeno, alquilo (C1-C4), acetilo, ciclopropilo, ciclobutilo o 2-oxopirrolidin-3-ilo,

   en donde dicho alquilo (C1-C4) esta opcionalmente sustituido con hidroxi, hidroxicarbonilo, ciclopropilo o ciclobutilo,

   o

   R4 y R5 estan unidos y, tomados junto con el atomo de nitrogeno al cual estan unidos, forman un anillo heterocicloalquilo monodclico, saturado de 5 o 6 miembros, el cual puede contener un segundo heteroatomo del anillo seleccionado de NH y O, y el cual puede estar sustituido en un atomo de carbono del anillo con oxo o hidroxi,

   y

   G2 representa metilo o el grupo -CR8AR8B-OH, -CH2-NR9R10 o -C(=O)-NR11R12, en donde

   r8A y r8B son independientemente hidrogeno o metilo,

   R9 es hidrogeno,

   R10 es hidrogeno, alquilo (C1-C4), acetilo, ciclopropilo, ciclobutilo o 2-oxopirrolidin-3-ilo,

   en donde dicho alquilo (C1-C4) esta opcionalmente sustituido con hidroxi o aminocarbonilo,

   R11 es hidrogeno o metilo,

   R12 es hidrogeno, alquilo (C1-C4), ciclopropilo, ciclobutilo o 2-oxopirrolidin-3-ilo,

   en donde dicho alquilo (C1-C4) esta opcionalmente sustituido con hidroxi,

   5

   10

   15

   20

   25

   30

   o

   R9 y R10, o R11 y R12, respectivamente, estan unidos y, tomados junto con el atomo de nitrogeno al cual estan unidos, forman un anillo heterocicloalquilo monodclico, saturado de 4 a 6 miembros el cual puede contener un segundo heteroatomo del anillo seleccionado de N(R13), O y S(O)2, y el cual puede estar sustituido en los atomos de carbono del anillo con hasta tres sustituyentes independientemente seleccionados del grupo que consiste en fluor, metilo, oxo, hidroxi, amino y aminocarbonilo, y en donde

   R13 es hidrogeno, formilo o acetilo,

   o una sal, un hidrato y/o un solvato del mismo farmaceuticamente aceptables.
4. 4. El compuesto de formula (I) de acuerdo con las reivindicaciones 1, 2 o 3, en el que

   R1 es metilo,

   R2 es metoxi,

   G1 representa el grupo -CH2-OR3, en donde

   R3 es alquilo (C1-C4) opcionalmente sustituido con hidroxi, amino o aminocarbonilo,

   y

   G2 representa el grupo -CH2-NR9R10 o -C(=O)-NR11R12, en donde

   R9 es hidrogeno,

   R10 es 2-oxopirrolidin-3-ilo,

   o

   R9 y R10 estan unidos y, tomados junto con el atomo de nitrogeno al cual estan unidos, forman un anillo piperazin-1- ilo, 3-oxopiperazin-1-ilo o 4-acetilpiperazin-1-ilo.

   R11 es hidrogeno,

   R12 es 2-oxopirrolidin-3-ilo,

   o

   R11 y R12 estan unidos y, tomados junto con el atomo de nitrogeno al cual estan unidos, forman un anillo 3- hidroxiazetidin-1-ilo, 4-hidroxipiperidin-1-ilo o 3-oxopiperazin-1-ilo,

   o una sal, un hidrato y/o un solvato del mismo farmaceuticamente aceptables.
5. 5. El compuesto 4-{[4-amino-6-(metoximetil)-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-il)pirrolo[2,1f][1,2,4]triazin-7- il]metil}piperazin-2-ona de acuerdo con las reivindicaciones 1 a 4,

   imagen2

   o una sal, un hidrato y/o un solvato del mismo aceptables para uso farmaceutico.
6. 6. El compuesto 4-{[4-amino-6-(metoximetil)-5-(7-metoxi-5-metil-1-benzotiofen-2-i)pirrolo[2,1f][1,2,4]triazin-7- il]metil}piperazin-2-ona de acuerdo con las reivindicaciones 1 a 5

   5

   10

   imagen3
7. 7. Procedimiento de preparation de un compuesto de formula (I) como se define en las reivindicaciones 1 a 6,

   caracterizado porque

   [A] una 4-aminopirrolo[2,1-f][1,2,4]triazina 6 sustituida de formula (II)

   imagen4

   en la que R3 tiene el significado que se indica en las reivindicaciones 1 a 4, se hace reaccionar primero con formalde^do y una amina de formula (III)

   ^9

   HN

   ,R

   'R

   10

   (III),

   9 10

   en la que R y R tienen el significado que se indica en las reivindicaciones 1 a 4, en presencia de un acido para dar un compuesto de formula (IV)

   imagen5

   (IV),

   en la que R3, R9 y R10 tienen los significados que se indican en las reivindicaciones 1 a 4, posteriormente se brominan para dar un compuesto de formula (V)

   imagen6

   5

   10

   en la que R3, R9 y R10 tienen los significados que se indican en las reivindicaciones 1 a 4,

   y posteriormente se acopla con un benzotiofeno-2-il boronato de formula (VI)

   O—R14

   imagen7

   R

   /

   ■B \

   O—R

   14

   (VI),

   en la que R1 y R2 tienen los significados que se indican en las reivindicaciones 1 a 4,

   y

   R14 representa hidrogeno o alquilo (C1-C4), o ambos residuos R14 estan enlazados juntos para formar un puente

   -(CH2)2-, -C(CH3)2-C(CH3)2-, -(CH2)3-, -CH2-C(CH3)2-CH2- o -C(=O)-CH2-N(CH3)-CH2-C(=O)-,

   en presencia de un catalizador de paladio y una base para dar el compuesto diana de formula (I-A)

   R1

   imagen8

   (I-A),

   1 2 3 9 10

   en la que R , R , R , R y R tienen los significados que se indican en las reivindicaciones 1 a 4, o

   [B] una 4-aminopirrolo[2,1-f][1,2,4]triazina 6 sustituida de formula (II)

   NH

   —R3

   (II),

   en la que R3 tiene el significado que se indica en las reivindicaciones 1 a 4,

   se formila primero con N,N-dimetilformamida en presencia de cloruro de fosforilo para dar un aldehfdo de formula (VII)

   imagen9

   5

   imagen10

   en la que R3 tiene el significado que se indica en las reivindicaciones 1 a 4, posteriormente se bromina para dar un compuesto de formula (VIII)

   imagen11

   (VIII),

   en la que R3 tiene el significado que se indica en las reivindicaciones 1 a 4, y posteriormente se acopla con un benzotiofeno-2-il boronato de formula (VI)

   O—R14

   /

   imagen12

   -B

   \

   O—R

   14

   R

   (VI),

   en la que R1, R2 y R14 tienen los significados que se indicaron anteriormente,

   en presencia de un catalizador de paladio y una base para dar un compuesto de formula (IX)

   j

   R

   imagen13

   (IX),

   en la que R1, R2 y R3 tienen los significados que se indican en las reivindicaciones 1 a 4, el cual posteriormente o bien

   [B-1] se hace reaccionar con una amina de formula (III)

   3

   3

   5

   10

   HN

   R9

   R10

   en la que R9 y R10 tienen los significados que se indican en las reivindicaciones 1 a 4, en presencia de un acido y un agente reductor para dar el compuesto diana de formula (I-A)

   R1

   imagen14

   (I-A),

   1 2 3 9 10

   en la que R , R , R , R y R tienen los significados que se indican en las reivindicaciones 1 a 4, o

   [B-2]

   se oxida para dar un acido carbox^lico de formula (X)

   R1

   imagen15

   (X),

   en la que R1, R2 y R3 tienen los significados que se indican en las reivindicaciones 1 a 4, y finalmente se acopla con una amina de formula (XI)

   HN

   R

   11

   R

   12

   (XI),

   en la que R11 y R12 tienen los significados que se indican en las reivindicaciones 1 a 4, en presencia de un agente de condensacion para dar el compuesto diana de formula (I-B)

   5

   imagen16

   (I-B),

   1 2 3 11 12

   en la que R , R , R , R y R tienen los significados que se indican en las reivindicaciones 1 a 4, o

   [C]

   una 4-amino-5-bromopirrolo[2,1-f][1,2,4]triazina 6 sustituida de formula (XII)

   imagen17

   (XII)

   se acopla primero con un benzotiofeno-2-il boronato de formula (VI)

   imagen18

   O—R

   /

   -B \

   14

   O—R

   14

   R

   (VI),

   en la que R1, R2 en presencia de

   y R14 tienen los significados que se indicaron anteriormente,

   un catalizador de paladio y una base para dar un compuesto de formula (XIII)

   R1

   imagen19

   (XIII),

   en la que R1 y R2 tienen los significados que se indican en las reivindicaciones 1 a 4,

   y posteriormente se hace reaccionar con formaldel'ndo y una amina de formula (III)

   5

   10

   HN

   R9

   R10

   (III),

   en la que R9 y R10 tienen los significados que se indican en las reivindicaciones 1 a 4, en presencia de un acido para dar el compuesto de formula (I-C)

   R1

   imagen20

   (I-C),

   en la que R1, R2, R9 y R10 tienen los significados que se indican en las reivindicaciones 1 a 4, el cual posteriormente o bien

   [C-1] se oxida para dar un aldehfdo de formula (XIV)

   imagen21

   (XIV),

   en la que R1, R2, R9 y R10 tienen los significados que se indican en las reivindicaciones 1 a 4, y se trata con una amina de formula (XV)

   HN

   R4

   R5

   (XV),

   en la que R4 y R5 tienen los significados que se indican en las reivindicaciones 1 a 4,

   en presencia de un acido y un agente reductor para dar el compuesto diana de formula (I-D)

   5

   10

   imagen22

   (I-D),

   en la que R1, R2, R4, R5, R9 y R10 tienen los significados que se indican en las reivindicaciones 1 a 4, o

   [C-2]

   se convierte en el correspondiente derivado 6-(halometilo) de formula (XVI)

   R1

   imagen23

   (XVI),

   en la que R1

   R2, R9 y R10

   tienen los significados que se indican en las reivindicaciones 1 a 4,

   y

   X es cloro, bromo o yodo, y se trata con un alcohol de formula (XVII)

   R3—OH

   (XVII),

   en la que R3Atiene el significado de R3 como se indica en las reivindicaciones 1 a 4, salvo hidrogeno, en presencia de una base para dar el compuesto diana de formula (I-E)

   imagen24

   en la que R1, R2, R3A, R9 y R10 tienen los significados que se indicaron anteriormente,

   seguido opcionalmente, donde sea apropiado, de (i) separar los compuestos de formula (I) obtenidos de este modo en sus respectivos enantiomeros y/o diastereomeros, y/o (ii) convertir los compuestos de formula (I) en sus 5 respectivos hidratos, solvatos, sales y/o hidratos o solvatos de las sales mediante el tratamiento con los correspondientes solventes y/o acidos o bases.
8. 8. El compuesto como se define en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6 para el tratamiento y/o la prevencion de enfermedades.
9. 9. El compuesto como se define en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6 para su uso en un procedimiento 10 para el tratamiento y/o la prevencion de cancer y enfermedades tumorales.
10. 10. Uso de un compuesto segun se define en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6 para la fabricacion de una composicion farmaceutica para el tratamiento y/o la prevencion de cancer y enfermedades tumorales.
11. 11. Composicion farmaceutica que comprende un compuesto segun se define en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6 y uno o mas excipientes farmaceuticamente aceptables.

    15 12. La composicion farmaceutica de la reivindicacion 11, que comprende ademas uno o mas agentes

    terapeuticos adicionales.
12. 13. La composicion farmaceutica segun se define en la reivindicacion 12 para el tratamiento y/o la prevencion de cancer y enfermedades tumorales.