EA029220B1 - 3,4-дигидроизохинолин-2(1h)-ильные соединения в качестве положительных аллостерических модуляторов (pam) допаминового рецептора d1 - Google Patents

Abstract

В изобретении предложены определенные 3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ильные соединения, в частности соединения формулы I, и их фармацевтические композиции. В изобретении также предложены способы применения соединения формулы I для лечения когнитивных нарушений, связанных с болезнью Паркинсона, шизофренией или болезнью Альцгеймера.

Description

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ЕВРАЗИЙСКОМУ ПАТЕНТУ

(45) Дата публикации и выдачи патента 2018.02.28

(21) Номер заявки

201592082

(22) Дата подачи заявки

2014.05.27

(51) Ιπί. С1. С07Р 217/16 (2006.01) А61К31/472 (2006.01) А61Р 25/16 (2006.01) А61Р 25/18 (2006.01)

(54) 3,4-ДИГИДРОИЗОХИНОЛИН-2(1Н)-ИЛЬНЫЕ СОЕДИНЕНИЯ В КАЧЕСТВЕ ПОЛОЖИТЕЛЬНЫХ АЛЛОСТЕРИЧЕСКИХ МОДУЛЯТОРОВ (РАМ) ДОПАМИНОВОГО РЕЦЕПТОРА 1)1

(31) 61/828,740; 61/905,329

(32) 2013.05.30; 2013.11.18

(33) и§

(43) 2016.04.29

(86) РСТ/И82014/039494

(87) ΥΟ 2014/193781 2014.12.04

(71) (73) Заявитель и патентовладелец:

ЭЛИ ЛИЛЛИ ЭНД КОМПАНИ (ϋδ)

(72) Изобретатель:

Бидл Кристофер Дэвид, Коатес Дэвид Эндрю, Хао Цзюньлян, Крушински Джр. Джозеф Херман, Рейнхард Мэттью Роберт, Шаус Джон Менерт, Волфанджел Крэйг Дэниел (ϋδ)

(74) Представитель:

Лыу Т.Н., Угрюмов В.М., Дементьев В.Н., Глухарёва А.О., Карпенко О.Ю., Клюкин В.А., Строкова О.В., Христофоров А.А. (Κϋ)

(56) И8-А1-2012252853 ТО-А1-2008109336 ϋδ-Α-5236934

029220 Β1

029220 Β1

(57) В изобретении предложены определенные 3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ильные соединения, в частности соединения формулы I, и их фармацевтические композиции. В изобретении также предложены способы применения соединения формулы I для лечения когнитивных нарушений, связанных с болезнью Паркинсона, шизофренией или болезнью Альцгеймера.

029220

В настоящем изобретении предложены определенные 3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ильные соединения, их фармацевтические композиции, способы их применения, а также способы их получения.

Болезнь Паркинсона представляет собой хроническое прогрессирующее нейродегенеративное расстройство, характеризующееся утратой допаминергических нейронов в головном мозге. Болезнь Паркинсона проявляется в виде тремора в покое наряду с другими двигательными симптомами (например, акинезией и брадикинезией) и не связанными с движением симптомами (например, когнитивными нарушениями, расстройствами сна и депрессией). Существующая в настоящее время терапия для лечения болезни Паркинсона включает предшественников допамина, таких как леводопа, и агонистов допамина, таких как прамипексол. Такие допаминовые лекарственные средства прямого действия имеют ограниченную эффективность, отчасти из-за когнитивных нарушений, связанных с высокими дозами, риска припадков (как показано на грызунах для определенных агонистов Ό1) и развития устойчивости. Таким образом, остается значительная неудовлетворенная потребность в безопасном и эффективном лечении болезни Паркинсона.

Аллостерические модуляторы представляют собой агенты, которые удаленно изменяют взаимодействия лигандов с их рецепторами путем модификации лигандсвязывающей среды. Примером модуляции такого типа является модуляция, при которой связывание модулятора с аллостерическим (вторичным) сайтом приводит к конформационным изменениям в рецепторном белке, которые передаются ортостерическому (первичному) сайту связывания лиганда. Качество аллостерического эффекта считают положительным, если модулятор облегчает или усиливает взаимодействие, или отрицательным, если он ингибирует взаимодействие лиганда с ортостерическим сайтом связывания.

Соединения согласно настоящему изобретению являются положительными аллостерическими модуляторами (РАМ) допаминового рецептора 1 (Ό1). Таким образом, соединения согласно настоящему изобретению являются подходящими для лечения состояний, в которых участвует Ό1, таких как болезнь Паркинсона и шизофрения, включая ослабление сопутствующих симптомов, таких как умеренные когнитивные нарушения при болезни Паркинсона, а также когнитивные нарушения и негативные симптомы при шизофрении. Соединения согласно настоящему изобретению, как полагают, являются подходящими для лечения симптомов болезни Альцгеймера, таких как когнитивные нарушения. Соединения согласно настоящему изобретению также являются подходящими для улучшения двигательных симптомов болезни Паркинсона в качестве монотерапии. Кроме того, соединения согласно настоящему изобретению, как полагают, являются подходящими для лечения депрессии и синдрома дефицита внимания с гиперактивностью (СДВГ).

В настоящем изобретении предложены определенные новые соединения, которые являются положительными аллостерическими модуляторами (РАМ) рецептора 1)1 и, таким образом, являются подходящими для лечения расстройств, описанных выше. Новые соединения согласно настоящему изобретению могут обеспечить альтернативное лечение таких расстройств. В настоящем изобретении также предложена сокристаллическая форма определенных новых соединений.

В публикации заявки на европейский патент № ЕР 330360 раскрыты определенные соединения изохинолина в качестве агонистов опиоидного каппа-рецептора и подходящие в качестве анальгетиков.

В патенте США № 5236934 раскрыты определенные соединения 1,2,3,4-тетрагидроизохинолина в качестве ингибиторов рецептора ангиотензина II и подходящие для лечения расстройств ЦНС, включая когнитивную дисфункцию.

В публикации заявки на патент США № 2006/0287359 раскрыты определенные соединения тетрагидроизохинолина в качестве антагонистов рецептора эстрогена и подходящие для лечения заболеваний, связанных с эстрогеном, включая рак молочной железы.

В настоящем изобретении предложено соединение формулы I

но.

I,

где η представляет собой 0, 1 или 2;

К¹ представляет собой галоген;

К² представляет собой галоген, Н, СЫ, С1-С3-алкокси или С1-С3-алкил; К³ представляет собой Н, галоген, С1-С₃-алкокси или С₁-С₃-алкил.

- 1 029220

В настоящем изобретении также предложено соединение формулы 1а

1а,

где η представляет собой 0, 1 или 2;

К¹ представляет собой галоген;

К² представляет собой галоген, Η, ΟΝ, С₁-С₃-алкокси или С₁-С₃-алкил;

К³ представляет собой Η, галоген, С₁-С₃-алкокси или С₁-С₃-алкил.

В настоящем изобретении также предложено соединение формулы I или 1а, где η представляет собой 0, 1 или 2;

К¹ представляет собой галоген;

К² представляет собой галоген;

К³ представляет собой Η или С₁-С₃-алкокси.

В настоящем изобретении также предложено соединение формулы I или 1а, где η представляет собой 0, 1 или 2;

К¹ представляет собой С1, Р или Вг;

К² представляет собой С1, ОСН₃, Η, Р, СN или СН₃;

К³ представляет собой ОС^, Н, СН2СН3, С1, ОС^ОДЬ, ОС! ЬС! к Р, СН(СН3)2 или СН₃ В настоящем изобретении также предложено соединение формулы I или 1а, где η представляет собой 0 или 2;

К¹ представляет собой С1,

К² представляет собой С1 или Р;

К³ представляет собой Η или ОСЦ5.

В настоящем изобретении также предложено соединение формулы 1Ь

Конкретное соединение формулы I представляет собой 2-(2,6-дихлорфенил)-1-[(18,3К)-3(гидроксиметил)-5-(3-гидрокси-3-метилбутил)-1-метил-3,4-дигидроизохинолин-2(Ш)-ил]этанон.

В настоящем изобретении также предложена композиция, содержащая 2-(2,6-дихлорфенил)-1[(18,3К)-3-(гидроксиметил)-5-(3-гидрокси-3-метилбутил)-1-метил-3,4-дигидроизохинолин-2(Ш)ил]этанон и 4-гидроксибензойную кислоту.

В настоящем изобретении также предложена композиция, содержащая 2-(2,6-дихлорфенил)-1[(18,3К)-3-(гидроксиметил)-5-(3-гидрокси-3-метилбутил)-1-метил-3,4-дигидроизохинолин-2(Ш)ил]этанон и 4-гидроксибензойную кислоту в соотношении примерно 1:1.

В настоящем изобретении также предложена сокристаллическая форма композиции, содержащая 2-(2,6-дихлорфенил)-1-[(18,3К)-3-(гидроксиметил)-5-(3-гидрокси-3-метилбутил)-1-метил-3,4дигидроизохинолин-2(Ш)-ил]этанон и 4-гидроксибензойную кислоту.

В настоящем изобретении также предложена стабильная сокристаллическая форма композиции, содержащая 2-(2,6-дихлорфенил)-1-[(18,3К)-3-(гидроксиметил)-5-(3-гидрокси-3-метилбутил)-1-метил-3,4дигидроизохинолин-2(Ш)-ил]этанон и 4-гидроксибензойную кислоту.

В настоящем изобретении также предложена сокристаллическая форма композиции, содержащая 2(2,6-дихлорфенил)-1-[(18,3К)-3-(гидроксиметил)-5-(3-гидрокси-3-метилбутил)-1-метил-3,4- 2 029220

дигидроизохинолин-2(1Н)-ил]этанон и 4-гидроксибензойную кислоту, характеризующаяся дифрактограммой рентгеновской порошковой дифракции, имеющей дифракционный пик при угле дифракции 2тета, составляющий 18,2°, в комбинации с одним или более пиков, выбранных из группы, состоящей из 16,0, 25,4 и 7,0°; с допустимым отклонением для углов дифракции 0,2° градуса.

Конкретное соединение формулы I представляет собой 2-(2,6-дихлорфенил)-1-((18,3К)-3(гидроксиметил)-5 -(2-гидроксипропан-2-ил)-1 -метил-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)этан-1-он.

В настоящем изобретении также предложена кристаллическая форма 2-(2,6-дихлорфенил)-1((18,3К)-3 -(гидроксиметил)-5-(2-гидроксипропан-2-ил)-1 -метил-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)этан-1 она, характеризующаяся дифрактограммой рентгеновской порошковой дифракции, имеющей дифракционный пик при угле дифракции 2-тета составляющий 14,27° в комбинации с одним или более пиков, выбранных из группы, состоящей из 15,71, 18,01, 18,68, 22,43 и 25,08°; с допустимым отклонением для углов дифракции 0,2°.

Кроме того, в настоящем изобретении предложена фармацевтическая композиция, содержащая соединение формулы I, и фармацевтически приемлемый носитель, разбавитель или вспомогательное вещество.

Кроме того, в настоящем изобретении предложен способ лечения болезни Паркинсона, включающий введение пациенту, нуждающемуся в этом, эффективного количества соединения формулы I.

Кроме того, в настоящем изобретении предложен способ лечения нейрокогнитивных расстройств, ассоциированных с болезнью Паркинсона, включающий введение пациенту, нуждающемуся в этом, эффективного количества соединения формулы I.

Кроме того, в настоящем изобретении предложен способ лечения шизофрении, включающий введение пациенту, нуждающемуся в этом, эффективного количества соединения формулы I.

Кроме того, в настоящем изобретении предложен способ лечения болезни Альцгеймера, включающий введение пациенту, нуждающемуся в этом, эффективного количества соединения формулы I.

Кроме того, в настоящем изобретении предложено соединение формулы I для применения в терапии.

Кроме того, в настоящем изобретении предложено соединение формулы I для применения в качестве лекарственного средства.

Кроме того, в настоящем изобретении предложено соединение формулы I для применения при лечении болезни Паркинсона.

Кроме того, в настоящем изобретении предложено соединение формулы I для применения при лечении шизофрении.

Кроме того, в настоящем изобретении предложено соединение формулы I для применения при лечении болезни Альцгеймера.

Кроме того, в настоящем изобретении предложено применение соединения формулы I для изготовления лекарственного средства против болезни Паркинсона.

Кроме того, в настоящем изобретении предложена фармацевтическая композиция, содержащая 2-(2,6-дихлорфенил)-1-[(18,3К)-3-(гидроксиметил)-5-(3-гидрокси-3-метилбутил)-1-метил-3,4дигидроизохинолин-2(1Н)-ил]этанон и 4-гидроксибензойную кислоту, и фармацевтически приемлемый носитель, разбавитель или вспомогательное вещество.

Соединение формулы I можно применять в комбинации с другими лекарственными средствами, которые используются для лечения/предотвращения/подавления или облегчения заболеваний или состояний, для которых соединения формулы I являются подходящими, включая болезнь Паркинсона и шизофрению. Такое(ие) другое(ие) лекарственное(ые) средство(а) можно вводить обычно используемым путем и в обычно применяемом количестве, одновременно или последовательно с соединением формулы I. Когда соединение формулы I применяется одновременно с одним или более другими лекарственными средствами, то предпочтительной является фармацевтическая лекарственная форма с однократной дозировкой, содержащая такие другие лекарственные средства в дополнение к соединению формулы I. Соответственно, фармацевтические композиции согласно настоящему изобретению, включают те, которые также содержат один или более других активных ингредиентов в дополнение к соединению формулы I. Примеры других активных ингредиентов эффективных при лечении болезни Паркинсона, которые могут быть объединены с соединением формулы I либо введены по отдельности или в той же фармацевтической композиции, включают, но не ограничиваются ими:

(a) предшественники допамина, такие как леводопа; мелеводопа, и этилеводопа; и

(b) агонисты допамина, включая прамипексол, ропинирол, апоморфин, ротиготин, бромокриптин, каберголин и перголид.

Понятно, что соединения согласно настоящему изобретению могут существовать в виде стереоизомеров. Варианты реализации настоящего изобретения включают все энантиомеры, диастереомеры и их смеси. Предпочтительные варианты реализации представляют собой преимущественно один диастереомер. Более предпочтительные варианты реализации представляют собой преимущественно один энантиомер.

- 3 029220

Конкретный диастереомер соединения формулы I представлен соединением формулы 1а

где пунктирная связь ..... и клиновидная связь —, присутствующие в диастереомере в трансконфигурации, являются предпочтительными.

Конкретный энантиомер соединения формулы I или 1а представленный в примерах, включая соединения примера 1: 2-(2,6-дихлорфенил)-1-[(15,3К)-3-(гидроксиметил)-5-(3-гидрокси-3-метилбутил)-1метил-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил]этанон, является более предпочтительным.

В контексте настоящего описания термин "сокристалл" относится к многокомпонентной кристаллической форме твердого вещества, содержащей два соединения, в которой объединение соединений главным образом осуществляется через нековалентные и неионные химические взаимодействия, такие как водородные связи. В фармацевтической области сокристаллы обычно содержат первое соединение, которое является активным фармацевтическим ингредиентом, и второе соединение, которое называют гостевое соединение или коформер (еоРогтег). Сокристалл можно отличить от кристаллической формы соли тем, что первое соединение остается, по существу, незаряженным или нейтральным. Сокристалл можно отличить от кристаллогидратной или сольватной формы тем, что гостевое соединение не является исключительно водой или растворителем. Предпочтительный сокристалл представляет собой одну из стабильных форм, имеющих подходящую температуру плавления.

В контексте настоящего описания "галогеновая" группа относится к хлору, фтору, брому или йоду. Конкретные примеры галогенов представляют собой хлор и фтор.

В контексте настоящего описания группа "С₁-С₃-алкокси" относится к метокси, этокси, н-пропокси и изопропокси. Конкретный пример С₁-С₃-алкокси представляет собой метокси.

В контексте настоящего описания группа "С₁-С₃-алкил" относится к метилу, этилу, н-пропилу и изопропилу. Конкретный пример С₁-С₃-алкила представляет собой метил.

В контексте настоящего описания термин "пациент" относится к животному, такому как млекопитающее, и включает в себя человека. Человек является предпочтительным пациентом.

Также общепризнано, что специалист в данной области может лечить болезнь Паркинсона путем введения пациенту с симптомами в данный момент эффективного количества соединения формулы I. Таким образом, термины "лечение" и "лечить" предназначены для обозначения всех процессов, где может осуществляться замедление, прерывание, приостановление, управление или остановка прогрессирования существующего расстройства и/или его симптомов, но необязательно указывает на полное устранение всех симптомов.

Также общепризнано, что специалист в данной области может лечить болезнь Паркинсона путем введения пациенту с риском возникновения симптомов эффективного количества соединения формулы I и подразумевается включение профилактического лечения этих симптомов.

В контексте настоящего описания термин "эффективное количество" соединения формулы I относится к количеству, т.е. дозе, которая эффективна при лечении расстройства, такого как болезнь Паркинсона, описанного в настоящем документе. Лечащий врач, как и специалист в данной области, может легко определить эффективное количество путем применения обычных методов и наблюдения результатов, полученных в аналогичных случаях. При определении эффективного количества или дозы соединения формулы I рассматривается ряд факторов, включая, но не ограничиваясь ими, вводимое соединение формулы I; совместное введение других агентов, если они применяются; вид млекопитающего; его размер, возраст и общее состояние здоровья; степень развития или тяжесть заболевания, такого как болезнь Паркинсона; индивидуальный ответ пациента; способа введения; характеристики биодоступности вводимого препарата; выбранная схема приема; применение других сопутствующих лекарственных средств; и другие обстоятельства, относящиеся к данному случаю.

Соединение формулы I можно вводить по отдельности или в виде фармацевтической композиции с фармацевтически приемлемыми носителями, разбавителями или вспомогательными веществами. Такие фармацевтические композиции и способы их получения известны в данной области техники (см., например, КеннпЩоп: ТЬе Нелепее апй Ргаейсе о£ РЬагтасу, Ώ.Β. Тгоу, Еййог, 21^8ί Εάΐίΐοη., [лрртсои, АЛПанщ & ΑΊΙΜητ 2006).

Анализ положительной аллостерической модуляции человеческого рецептора Ώ1.

Клетки НЕК293, стабильно экспрессирующие человеческий рецептор Ώ1, получали с помощью ретровирусной трансдукции генов с применением вектора ρΒΑΒΕ-Ыео и ретровирусной системы РЬоешх. Клетки выращивали в ΏΜΕΜ/Ε12 (СЛео) с добавлением 10% телячьей сыворотки, 20 мМ НЕРЕ5, 2 мМ

- 4 029220

глутамата и 150 мкг/мл зеоцина при 37°С в 5% СО₂. Приблизительно при 80% конфлюентности, клетки собирали при помощи 0,25% трипсина/ЭДТА, суспендировали в фетальной бычьей сыворотке плюс 8% ДМСО и хранили в жидком азоте. В день анализа клетки размораживали и ресуспендировали в 8ΤΙΜ буфере (сбалансированном солевом растворе Хенкса, дополненном 0,1% БСА, 20 мМ ΗΕΡΕδ, 200 мкм изобутилметилксантина (ΙΒΜΧ) и 100 мкм аскорбиновой кислоты). Испытуемое соединение последовательно разбавляли (1:3) в ДМСО и далее разбавляли 1:40 в 8ΤΙΜ буфере, содержащем 2Х концентрацию ЕС₂₀ допамина. Концентрацию ЕС₂₀ допамина определяли как концентрацию, которая увеличивает цАМФ до 20% от максимального количества, которое может быть индуцировано допамином; в данном анализе ЕС_тах составляла 5 мкМ и обычно ЕС₂₀ составляла 12 нМ. 25 мкл данного раствора смешивали с 25 мкл клеточной суспензии (1250 клеток) и вносили в каждую лунку 96-луночного планшета с половинным объемом лунок; конечная концентрация ДМСО составляла 1,25%. Планшеты инкубировали при 25°С в течение 60 мин. Продукцию цАМФ количественно определяли при помощи гомогенной флуоресценции с разрешением во времени (ΗΤΡΕ) (ОкЪю™) в соответствии с инструкциями производителей: в лунки добавляли лизирующий буфер, содержащий анти-цАМФ криптат и 02-конъюгат (25 мкл каждого), планшеты инкубировали еще 60-90 мин и измеряли флуоресценцию при помощи планшетного ридера Εηνίκίοη (РегкигЕйпег™). Данные преобразовывали в концентрацию цАМФ, используя стандартную калибровочную кривую цАМФ, и анализировали как абсолютную ЕС₅₀ с применением 4-параметрического нелинейного логистического уравнения (АЪаке™ ν5.3.1.22). Абсолютную ЕС₅₀ для положительного аллостерического модулятора рассчитывали как концентрацию, генерирующую полумаксимальное количество цАМФ, на основе диапазона (\уик1о\у гаидшд) от ЕС₂₀ допамина, который определяет минимальный ответ, к ответу ЕС_тах, определенный путем добавления 5 мкМ допамина.

В приведенном выше анализе соединения, приведенные в качестве примера в настоящем описании, демонстрировали абсолютную ЕС₅₀ менее 300 нМ для человеческого рецептора Ό1. Соединение из примера 1 демонстрировало абсолютную ЕС₅₀ 3,66±0,67 нМ (Станд.ош.сред.; и=9) с максимальным ответом 83,8±4,4% для человеческого рецептора Ό1. Сокристалл из примера 2 демонстрировал абсолютную ЕС₅₀ 1,11±0,11 нМ (Станд.ош.сред.; и=2) для человеческого рецептора Ό1. Соединение из примера 3 демонстрировало абсолютную ЕС₅₀ 11,75±1,27 нМ (Станд.ош.сред.; и=16) с максимальным ответом 91,3±2,4% для человеческого рецептора Ό1. Эти данные показывают, что иллюстративные соединения формулы I являются положительными аллостерическими модуляторами человеческого рецептора Ό1.

Противопаркинсонические эффекты соединений согласно изобретению можно определять с помощью методов, хорошо известных в данной области техники, таких как двигательная активность на животных моделях, включая воздействие на базовую (привычную) двигательную активность и на резерпининдуцированную акинезию у мышей с гуманизированным допаминовым рецептором 1 (Ό1).

Получение мышей киоск-ίη с человеческим рецептором Ό1.

Трансгенных мышей, в которых мышиные допаминовые рецепторы 1 (Ό1) заменены на их человеческие аналоги, можно получить при помощи стандартных методик. Например, геномные фрагменты мыши субклонировали в бактериальной искусственной хромосомной библиотеке РР23 и клонировали в направленном векторе РСК-иео. Открытую рамку считывания мыши заменяли на открытую рамку считывания человеческого рецептора Ό1 в экзоне 2. Селективный маркер иео, расположенный выше экзона 2, фланкировали сайтами ίτί для последующего удаления. Фланкирование экзона 2 сайтами селекции 1охР дает возможность создавать киоск-оШ мышей Ό1 путем скрещивания с мышами, экспрессирующими ген нуклеазы сге.

Эмбриональные стволовые клетки С57ВБ/6 N линии В6-3 выращивали на митотически инактивированном питающем слое эмбриональных фибробластов мыши на среде ΌΜΞΜ с высоким содержанием глюкозы с 20% фетальной бычьей сыворотки и 2х10⁶ единиц/л фактора, ингибирующего лейкемию. 10 млн эмбриональных стволовых клеток плюс 30 мкг линеаризованного ДНК-вектора подвергали электропорации и селекции 0418 (200 мкг/мл). Клоны выделяли и анализировали при помощи Саузернблоттинга.

Клон, содержащий вставку ожидаемого размера, встраивали в бластоцисты и проводили генотипирование полученных мышей при помощи ПНР. Химерных самцов скрещивали с самками, содержащими ген нуклеазы Ир для удаления селективного маркера. Потомство, содержащее человеческий рецептор Ό1 без селективного маркера, идентифицировали посредством ПНР. Гетерозиготных самцов скрещивали с самками мышей С57ВБ/6. Скрещивали самцов и самок из потомства, содержащих человеческий рецептор Ό1, и гомозиготы идентифицировали посредством ПЦР. Поведение и размножение гомозигот были нормальными, и колонию поддерживали в гомозиготном состоянии для последующих поколений.

Базовая (привычная) двигательная активность.

Двигательную активность измеряли при помощи автоматизированной системы для отслеживания движения у мышей. Мышей со встроенным (киоск-ίη) рецептором Ό1 человека помещали в камеры и оставляли на 60 мин для привыкания к камерам. В течение этого времени они демонстрировали уменьшение движений с течением времени. После введения соединения согласно настоящему изобретению движения животных увеличивались дозозависимым образом.

- 5 029220

В частности, камеры двигательной активности располагали в прямоугольных рамах с инфракрасными лучами для измерения двигательной активности (горизонтальной и вертикальной активности), называемой способность передвигаться. Двигательную активность регистрировали в период времени между 7:30 и 15:00 часами.

Мышей случайным образом распределяли по обрабатываемым группам, как показано в табл. 1. Каждую мышь в отдельности помещали в одну из камер двигательной активности на 60 мин для привыкания. Затем мышам перорально вводили дозу и регистрировали суммарное количество перемещений в течение 10 мин для каждой мыши в течение 60-минутного периода. У мышей, предварительно обработанных резерпином, не включали предшествующий период привыкания. Таким образом, сразу же после введения дозы, измеряли суммарное количество перемещений в течение 60 мин. Данные передавались из программного обеспечения/компьютера в электронные таблицы для дальнейшего анализа. Статистический анализ проводили с применением однофакторного дисперсионного анализа с последующим апостериорным анализом с применением наименьшей значимой разности Фишера или теста Даннетта.

В анализе базовой (привычной) двигательной активности соединения из примеров 1-4 и 13 способствуют перемещениям мышей дозозависимым образом (табл. 1-5). Это показывает, что соединения из примеров 1-4 и 13 являются эффективными в двигательной активации животных, которые привыкли к окружающей среде.

Таблица 1

Исследуемое соединение	Базовая двигательная активность (суммарное количество перемещений в течение 60 мин) (среднее, стандартная ошибка среднего, стандартная ошибка в %)
Носитель (20% гидроксипропил бетациклодекстрин)	Среднее 542 Станд. ош. сред. 111 Станд. ош., % 30
Пример 1 (1 мг/кг)	Среднее 542 Станд. ош. сред. 52 Станд. ош., % 10
Пример 1 (3 мг/кг)	Среднее 1118 * Станд. ош. сред. 289 Станд. ош., % 26
Пример 1 (6 мг/кг)	Среднее 1818 ** @ Станд. ош. сред. 392 Станд. ош., % 22
Пример 1 (10 мг/кг)	Среднее 3047 *** @ Станд. ош. сред. 306 Станд. ош., % 10
Пример 1 (30 мг/кг)	Среднее 4623 *** @ Станд. ош. сред. 486 Станд. ош., % 11
*р<0,05, **р<0,01, ***р<0,001 по сравнению с носителем (непарный ΐ-тест) @ р<0,01 по сравнению с носителем Тест множественных сравнений Даннета в однофакторном дисперсионном анализе

- 6 029220

	Таблица 2
Исследуемое соединение	Базовая двигательная активность (суммарное количество перемещений в течение 60 мин) (среднее, стандартная ошибка среднего, стандартная ошибка в %)
Носитель, η = 8 (20% гидроксипропилбетациклодекстрин)	Среднее 380 Станд. ош.сред. 84 Станд. ош., % 22
Пример 2 (3 мг/кг) п = 8	Среднее 861 ** Станд. ош. сред. 145 Станд. ош., % 17
Пример 2 (6 мг/кг) п = 8	Среднее 1940 ** @ Станд. ош. сред. 456 Станд. ош., % 24
Пример 2 (10 мг/кг) п = 8	Среднее 3539 *** @ Станд. ош. сред. 259 Станд. ош., % 7
Пример 2 (20 мг/кг) η = 8	Среднее 5070 *** @ Станд. ош. сред. 287 Станд. ош., % 6
Пример 2 (30 мг/кг) п= 8	Среднее 4628 *** @ Станд. ош. сред. 374 Станд. ош., % 8

**р<0,01, ***р<0,001 по сравнению с носителем (непарный 1тест)

@ р<0,0001 по сравнению с носителем Тест множественных сравнений Даннета в однофакторном

	Таблица 3 Базовая двигательная активность (суммарное количество
Исследуемое соединение	перемещений в течение 60 мин) (среднее, стандартная ошибка среднего, стандартная ошибка в %)
Носитель, η = 8
(20% гидроксипропил бетациклодекстрин)	Среднее 347 Станд. ош. сред. 88 Станд. ош., % 25
Пример 3 (3 мг/кг) η = 8	Среднее 927 * Станд. ош. сред. 183 Станд. ош., % 20
Пример 3 (6 мг/кг) п = 8	Среднее 2180 ** @ Станд. ош. сред. 455 Станд. ош., % 24
Пример 3 (10 мг/кг) η = 8	Среднее 2707 *** @ Станд. ош. сред. 414 Станд. ош., % 15
Пример 3 (20 мг/кг) п= 8	Среднее 3698 *** @ Станд. ош. сред. 298 Станд. ош., % 8
Пример 3 (30 мг/кг) п= 8	Среднее 3825 *** @ Станд. ош. сред. 248 Станд. ош., % 6

*р<0,01, **р<0,001, ***р<0,0001 по сравнению с носителем (непарный ΐ-тест)

@ р<0,0001 по сравнению с носителем Тест множественных сравнений Даннета в однофакторном дисперсионном анализе

- 7 029220

	Таблица 4
Исследуемое соединение	Базовая двигательная активность (суммарное количество перемещений в течение 60 мин) (среднее, стандартная ошибка среднего, стандартная ошибка в %)
Носитель, η = 8 (20% гидроксипропил бетациклодекстрин)	Среднее 394 Станд. ош. сред. 96 Станд. ош., % 24
Пример 4 (3 мг/кг) η = 8	Среднее 546 Станд. ош. сред. 90 Станд. ош., % 16
Пример 4 (6 мг/кг) п = 8	Среднее 665 Станд. ош. сред. 289 Станд. ош., % 43
Пример 4 (10 мг/кг) η = 8	Среднее 2102 * @ Станд. ош. сред. 443 Станд. ош., % 21
Пример 4 (20 мг/кг) η = 8	Среднее 4536 *** @ Станд. ош. сред. 233 Станд. ош., % 5
Пример 4 (30 мг/кг) η = 8	Среднее 6726 * * @ Станд. ош. сред. 610 Станд. ош., % 9

*р<0,01, ***р<0,0001 по сравнению с носителем (непарный 1тест)

@ р<0,0001 по сравнению с носителем Тест множественных сравнений Даннета в однофакторном

	Таблица 5 Базовая двигательная активность (суммарное количество
Исследуемое соединение	перемещений в течение 60 мин) (среднее, стандартная ошибка среднего, стандартная ошибка в %)
Носитель, η = 8
(20% гидроксипропил бетациклодекстрин)	Среднее 305 Станд. ош. сред. 61 Станд. ош., % 20
Пример 13 (3 мг/кг) п = 8	Среднее 745 * Станд. ош. сред. 143 Станд. ош., % 19
Пример 13 (6 мг/кг) п = 8	Среднее 1487 *** @ Станд. ош. сред. 207 Станд. ош., % 14
Пример 13 (10 мг/кг) п = 8	Среднее 3006 *** @ Станд. ош. сред. 377 Станд. ош., % 13
Пример 13 (20 мг/кг) п = 8	Среднее 4900 *** @ Станд. ош. сред. 408 Станд. ош., % 8
Пример 13 (30 мг/кг) η = 8	Среднее 4708 *** @ Станд. ош. сред. 369 Станд. ош., % 8

*р<0,01, ***р<0,0001 по сравнению с носителем (непарный 1тест)

@ р<0,0001 по сравнению с носителем Тест множественных сравнений Даннета в однофакторном

- 8 029220

Обращение резерпин-индуцированной акинезии.

Резерпин является агентом, разрушающим катехоламин (истощает допамин и норадреналин). Через 18-24 ч мыши, обработанные резерпином, демонстрировали акинезию и снижали количество перемещений. Резерпин-индуцированную акинезию оценивали путем измерения воздействия соединений на двигательную активность приблизительно через 18-24 ч после подкожной однократной дозы резерпина 0,15, 0,3 или 0,6 мг/кг. Использовали то же самое оборудование, что и для привычной двигательной активности, для оценки примера 1 в табл. 6 и 7. Для соединения из примера 3 (как показано в табл. 8) для измерения двигательной активности применяли систему видеонаблюдения перемещений ΕίΤονΐδΐοη 8.

Самцов мышей со встроенным гуманизированным допаминовым рецептором Ό1 случайным образом распределяли по обрабатываемым группам. Каждую мышь в отдельности помещали в одну из камер двигательной активности. Регистрировали количество перемещений в течение 10 мин для каждой мыши в течение 60-минутного периода после введения дозы. Таким образом, воздействие на резерпининдуцированное исследовательское поведение оценивали в общей сложности 60 мин. Данные передавались из программного обеспечения/компьютера в электронные таблицы для дальнейшего анализа. Статистический анализ проводили с применением однофакторного дисперсионного анализа с последующим апостериорным анализом с применением ί-теста. В приведенном выше методе анализа соединение из примера 1 обращает вспять эффекты обработки резерпином и восстанавливает движения мышей дозозависимым образом, как измерено посредством инфракрасных лучей (табл. 6 и 7). Это показывает, что соединение из примера 1 является эффективным в ΐη νίνο модели болезни Паркинсона.

Таблица 6

Исследуемое соединение	Двигательная активность (суммарное количество перемещений в течение 60 мин) (среднее, стандартная ошибка среднего, стандартная ошибка в %)
Контрольный носитель (20% гидроксипропил бетациклодекстрин, без резерпина)	Среднее 1629 Станд. ош. сред. 188 Станд. ош., % 12
Носитель + Резерпин (0,15 мг/кг)	Среднее 1336 Станд. ош. сред. 191 Станд. ош., % 14
Носитель + Резерпин (0,3 мг/кг)	Среднее 640 Станд. ош. сред. 61 Станд. ош., % 9
Пример 1 (10 мг/кг) + Резерпин (0,15 мг/кг)	Среднее 4623 *** Станд. ош. сред. 486 Станд. ош., % 11
Пример 1 (30 мг/кг) + Резерпин (0,15 мг/кг)	Среднее 6222 *** Станд. ош. сред. 659 Станд. ош., % 11
Пример 1 (30 мг/кг) + Резерпин (0,3 мг/кг)	Среднее 4056 ** Станд. ош. сред. 548 Станд. ош., % 13
***р<0,001 по сравнению с носителем (непарный ΐ-тест) @ р<0,01 по сравнению с носителем Тест множественных сравнений Даннета в однофакторном дисперсионном анализе

- 9 029220

Таблица 7

Исследуемое соединение	Двигательная активность (суммарное количество перемещений в течение 60 мин) (среднее, стандартная ошибка среднего, стандартная ошибка в %)
Контрольный носитель, η = 8 (20% гидроксипропил бетациклодекстрин, без резерпина)	Среднее Станд. ош. сред. Станд. ош., %	1545 235 15
Носитель +	Среднее	813 @
Резерпин (0,3 мг/кг)	Станд. ош. сред.	198
п = 8	Станд. ош., %	24
Пример 1 (3 мг/кг) +	Среднее	1107
Резерпин (0,3 мг/кг)	Станд. ош. сред.	265
п = 8	Станд. ош., %	24
Пример 1 (6 мг/кг) +	Среднее	1740 *
Резерпин (0,3 мг/кг)	Станд. ош. сред	228
п = 8	Станд. ош., %	13
Пример 1 (10 мг/кг) +	Среднее	3042 * @
Резерпин (0,3 мг/кг)	Станд. ош. сред.	300
п = 8	Станд. ош., %	10
Пример 1 (30 мг/кг) +	Среднее	4061 * @
Резерпин (0,3 мг/кг)	Станд. ош. сред.	268
п = 8	Станд. ош., %	7
@р<0,0001 по сравнению с носителем (непарный 1-тест)
*р<0,0001 по сравнению с резерпином (непарный 1-тест)

В приведенном выше методе анализа соединение из примера 3 обращает вспять эффекты обработки резерпином и восстанавливает движения мышей дозозависимым образом, как измерено посредством видеонаблюдения перемещений (табл. 8). Это показывает, что соединение из примера 3 является эффективным в ίη νίνο модели болезни Паркинсона.

- 10 029220

Таблица 8

Исследуемое соединение	Двигательная активность (среднее пройденное расстояние (см) за 60 мин) (среднее, стандартная ошибка среднего, стандартная ошибка в %)
Контрольный носитель, η = 7 (20% гидроксипропил бетациклодекстрин, без резерпина)	Среднее 9553 Станд.ош.сред. 918
Носитель + Резерпин (0,6 мг/кг) п = 7	Среднее 4990 # Станд.ош.сред. 271
Пример 3 (3 мг/кг) + Резерпин (0,6 мг/кг) N=8	Среднее 10243 ** Станд.ош.сред. 1351
Пример 3 (10 мг/кг) + Резерпин (0,6 мг/кг) п = 8	Среднее 22341 *** Станд.ош.сред. 2013
Пример 3 (30 мг/кг) + Резерпин (0,6 мг/кг) п = 7	Среднее 26513 *** Станд.ош.сред. 3359
**р<0,01, ***р<0,001 по сравнению с резерпином-носителем #р<0,05, по сравнению с носителем-носителем

Воздействие на внеклеточные уровни ацетилхолина в префронтальной коре.

Ацетилхолин (АХ) является ключевым нейромедиатором мозга для высших когнитивных функций. При болезни Альцгеймера происходит дегенерация корковых областей мозга, имеющих важное значение для функции памяти, таких как гиппокамп с потерей холинергических нейронов. Донепезил (Апсер1®) является ингибитором ацетилхолинэстеразы, который повышает уровень ацетилхолина в мозге и показывает клинические свидетельства повышения когнитивных функций. Было показано, что агонисты допамина Ό1 модулируют высвобождение ацетилхолина и когнитивную деятельность в моделях на животных. Соединения, которые увеличивают внеклеточные уровни ацетилхолина в гиппокампе свободно передвигающихся мышей со встроенным гуманизированным допаминовым рецептором Ό1 (ΗΌ1ΚΙ), как полагают, являются полезными при лечении когнитивной дисфункции, связанной с болезнью Альцгеймера.

Порядок проведения эксперимента.

Микродиализные зонды под наркозом изофлурана стереотаксически имплантировали в вентральный гиппокамп (НРС) самцов мышей 1ιΙ)1 ΚΙ (Сйаг1ез К4уег, Великобритания). Координаты от брегмы для имплантации зонда: АР -3,1; БМ +2,8; Όν -4,5 мм.

На следующий день животным подключали зонды для перфузии искусственной спинномозговой жидкости (содержащей \аС1 (141 мМ), КС1 (5 мМ), МдС1₂ (0,8 мМ) и СаС1₂ (1,5 мМ)). После 90-минутного периода вымывания образцы диализата собирали с 20-минутными интервалами. Через 2 ч животным перорально вводили либо носитель (20% гидроксипропилбетациклодекстрин), либо исследуемое соединение и образцы собирали в течение еще 3 ч. Все образцы немедленно замораживали в сухом льду и хранили при -80°С до анализа на ряд нейромедиаторов и метаболитов.

Анализ проб.

К каждому образцу диализата (29 мкл) добавляли: 20 мкл буфера (1 М Βϊδ-Τπδ, рН 10), 20 мкл смешанного дейтерированного стандарта и 260 мкл 0,1% мас./об. дансилхлорида (в ацетоне). Образцы перемешивали на вортексе и нагревали при 65°С в течение 30 мин, затем сушили в атмосфере Ν₂ и ресуспендировали в 40 мкл смеси 50:50 (об./об.) ацетонитрила:воды (содержащей 10 мМ формиата аммония и 0,06% муравьиной кислоты). Далее образцы центрифугировали при 13000 об/мин в течение 10 мин при температуре окружающей среды и переносили 35 мкл в виалы 03-ΤΐνΚ; 10 мкл инжектировали в

- 11 029220

ЖХ/МС/МС при помощи автосамплера СТС РАЬ НТС-χί.

Хроматографическое разделение дансилированных образцов (включая стандарты лекарственных средств) проводили в градиентом режиме при помощи бинарного насоса 81нтас1/и НС-20ЛО ХК и колонки для ВЭЖХ РНенотенех Кте'Юх, ХВ-С18 с размером частиц 2,6 мкм. Подвижная фаза А состояла из смеси ацетонитрила/воды 5%:95% (об./об.), 2 мМ формиата аммония и 0,06% муравьиной кислоты, и мобильная фаза В состояла из ацетонитрила/воды 95%:5% (об./об.), 2 мМ формиата аммония и 0,06% муравьиной кислоты.

Прибор АВ 8с1ех АР15500 имел два период работы, первый период с положительным Т18 режимом для обнаружения ацетилхолина (АХ) и второй период с положительными и отрицательными Т18 режимами.

Обработка данных.

Данные выражали в процентах от контрольного периода до инъекции, полученного усреднением трех образцов до доставки лекарственного средства (= 100%), и значения выражали как процент от этого значения. Статистические анализы проводили с применением КМ/Ρΐί (дисперсионного анализа с повторными измерениями) для сравнения ответов между обрабатываемыми группами. Значение вероятности р<0,05 считали статистически значимым.

Результаты.

Ацетилхолиновый ответ рассчитывали путем измерения площади под кривой (АиС) по отношению к контрольному базовому уровню до инъекции для каждого лекарственного средства в течение 2-часового периода после введения лекарственного средства. Затем данные анализировали при помощи дисперсионного анализа (однофакторного; 1МР ν9) с последующим апостериорным анализом с применением ί-теста.

Введение соединения из примера 4 в дозе 30 мг/кг, внутрибрюшинно, или ингибитора ацетилхолинэстеразы донепезила в дозе 1 мг/кг, внутрибрюшинно, приводило к статистически значимому увеличению внеклеточных уровней ацетилхолина по сравнению с контрольным носителем (табл. 9). Это показывает, что соединение из примера 4 является эффективным в ΐη νίνο модели болезни Альцгеймера.

Таблица 9

Воздействие соединения из примера 4 (30 мг/кг, внутрибрюшинно) или донепезила (1 мг/кг, внутрибрюшинно) на ацетилхолиновый ответ

в гиппокампе мышей НО 1 К!
Исследуемое соединение	Ответ АИС + Станд.ош.сред. (2 ч)
Носитель	681 ± 51
Пример 4	1794 ± 476 ##
Донепезил	1472±120#
# Р<0,05, ## Р<0,01 по сравнению с носителем;
*** Р < 0,0001 по сравнению с носителем, донепезилом
и примером 4 (п=3-4 на группу)

Соединения формулы I, которые включают соединения формул 1а, 1Ь и 1с, можно получить путем способов, известных в области химии, или при помощи нового способа, описанного в настоящем документе. Способ получения соединения формулы I и новых промежуточных соединений для получения соединения формулы I предложен в дополнительных особенностях изобретения и проиллюстрирован процедурами, приведенными ниже.

Как правило, соединение формулы На где η представляет собой 0, 1 или 2, можно получить из соединения формулы II, где η представляет собой 0, 1 или 2 и Рд1 представляет собой подходящую защитную группу для гидроксила (схема 1). Конкретные примеры Рд1 включают трет-бутил(диметил)силил и трет-бутил(дифенил)силил. В частности, соединение формулы II, где Рд1 представляет собой третбутил(диметил)силил, взаимодействует с фторидом тетрабутиламмония в растворителе, таком как тетрагидрофуран, с получением соединения формулы Ра

- 12 029220

Схема 1

Соединение формулы II, где η представляет собой 2 и Рд1 представляет собой третбутил(диметил)силил, можно получить путем взаимодействия соединения формулы III с метиллитием в подходящем растворителе (схема 2). Подходящие растворители включают тетрагидрофуран. Соединение формулы III, где Рд1 представляет собой трет-бутил(диметил)силил, можно получить путем взаимодействия соединения формулы IV с водородом в присутствии подходящего катализатора на основе переходного металла, такого как СГ-бисЮиизопропилфосфино^ерроценЦ^-циклооктадиен^одийО) тетрафторборат. Реакцию удобно проводить в растворителе, таком как метанол. Соединение формулы IV, где Рд1 представляет собой трет-бутил(диметил)силил, можно получить путем взаимодействия соединения формулы V с этилакрилатом в присутствии конденсирующего катализатора на основе переходного металла, такого как ацетат палладия, лиганда, такого как три-о-толилфосфин, и основания, такого как триэтиламин. Реакцию удобно проводить в растворителе, таком как ацетонитрил. Соединение формулы V можно получить путем ацилирования соединения формулы VIII соответствующей К¹, К², К³ фенилуксусной кислотой в присутствии активирующего агента, такого как бензотриазол-1-илокситрипирролидинофосфония гексафторфосфат, и основания, такого как триэтиламин. Реакцию удобно проводить в растворителе, таком как диметилформамид.

Схема 2

Альтернативно, соединение формулы II можно получить из соединения формулы VI, где Рд1 представляет собой подходящую защитную группу для гидроксила (схема 3). Конкретные примеры Рд1 включают трет-бутил(диметил)силил и трет-бутил(дифенил)силил. В частности, соединение формулы VI, где Рд1 представляет собой трет-бутил(диметил)силил, ацилируют 2,6-дихлорфенилуксусной кислотой в присутствии активирующего агента, такого как 1,1'-карбонилдиимидазол, с получением соединения формулы II. Реакцию удобно проводить в растворителе, таком как тетрагидрофуран. Соединение формулы VI можно получить путем восстановления соединения формулы VII водородом в присутствии катализатора, такого как палладий. Реакцию удобно проводить в растворителе, таком как этанол. Соединение формулы VII можно получить путем взаимодействия соединения формулы VIII с 2-метилбут-3-ен2-олом в присутствии катализатора, такого как ацетат палладия, лиганда, такого как

- 13 029220

2-дициклогексилфосфино-2',6'-диметоксибифенил, и основания, такого как карбонат калия. Реакцию удобно проводить в растворителе, таком как диметилформамид. Соединение формулы VIII можно получить при помощи многостадийного процесса из соединения формулы X через промежуточное соединение формулы IX, как известно специалистам в данной области химии, или при помощи способа, описанного в получении и примерах. Соединение формулы X можно получить, как описано в получении и примерах.

Соединение формулы II, где η представляет собой 0 и Рд1 представляет собой третбутил(диметил)силил, можно получить путем взаимодействия соединения формулы Ша с метилмагнийбромидом в подходящем растворителе (схема 4). Соединение формулы Ша можно получить путем ацилирования соединения формулы А'Па соответствующей К¹, К², К³ фенилуксусной кислотой в присутствии активирующего агента, такого как бензотриазол-1-ил-окситрипирролидинофосфония гексафторфосфат, и основания, такого как триэтиламин. Реакцию удобно проводить в растворителе, таком как диметилформамид. Соединение формулы νΠα можно получить путем взаимодействия соединения формулы VIII с монооксидом углерода и метанолом в присутствии палладиевого(0) катализатора.

Соединение формулы II, где η представляет собой 1 и Рд1 представляет собой третбутил(диметил)силил, можно получить путем взаимодействия соединения формулы ШЪ с метилмагнийхлориде в подходящем растворителе (схема 5). Соединение формулы ШЪ можно получить путем ацилирования соединения формулы νΐ№ соответствующей К¹, К², К³ фенилуксусной кислотой в присутствии активирующего агента, такого как бензотриазол-1-ил-окситрипирролидинофосфония гексафторфосфат, и основания, такого как триэтиламин. Реакцию удобно проводить в растворителе, таком как диметилформамид. Соединение формулы можно получить путем взаимодействия соединения формулы VIII с ацетоном в присутствии палладиевого(0) катализатора и лиганда, как описано в получении и примерах.

- 14 029220

Схема 5

В контексте настоящего описания термин "ДМСО" относится к диметилсульфоксиду; "Тп§" относится к трисгидроксиметиламинометану; "ДТТ" относится к дитиотреитолу; "НЕС" относится к гидроксиэтилцеллюлозе; "ΏΜΕΜ" относится к среде Игла, модифицированной по способу Дульбекко; "МС" относится к масс-спектру и "ΗΕΡΕδ" относится к 4-(2-гидроксиэтил)-1-пиперазинэтансульфоновой кислоте.

Получение 1.

Синтез метил-2-бром-О-фенилаланината гидрохлорида.

Растворяли 2-бром-О-фенилаланин (22,4 г, 91,8 ммоль) в метаноле (459 мл). Добавляли ацетилхлорид (65,3 мл, 917,7 ммоль) при комнатной температуре. Перемешивали в течение 36 ч. Концентрировали при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения (27,2 г, 92,3 ммоль).

МС (т/ζ): 258 (М+1).

Альтернативный синтез метил-2-бром-О-фенилаланината гидрохлорида.

В метанол (10,00 л) добавляли ацетилхлорид (562,79 г, 7,17 моль) при 0°С в подходящем сосуде. Нагревали смесь до 17,5°С и перемешивали. Через 30 мин добавляли 2-бром-О-фенилаланин (500,00 г, 2,05 моль) и нагревали с обратным холодильником. Через 4 ч охлаждали до 20°С и удаляли растворитель при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения (589 г, 1,96 моль) в виде грязно-белого твердого вещества.

МС (т/ζ): 258 (М-С1 (⁷⁹Вг)), 260 (М-С1 (⁸¹Вг)).

Получение 2.

Синтез метил-2-бром-Ы-(метоксикарбонил)-О-фенилаланината.

Метил-2-бром-О-фенилаланината гидрохлорид (27,2 г, 92,3 ммоль) растворяли в дихлорметане (923 мл) и воде (185 мл). Добавляли бикарбонат натрия (31,0 г, 369,4 ммоль) и метилхлорформиат (7,86 мл, 101,6 ммоль) при комнатной температуре. Перемешивали смесь в течение 2,5 ч. Разбавляли водой и экстрагировали дихлорметаном. Дихлорметановые экстракты сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали при помощи хроматографии на силикагеле путем элюирования смесью этилацетата:гексана (градиент 10-75%) с получением указанного в заголовке соединения (29,1 г, 92,1 ммоль).

МС (т/ζ): 316 (М+1).

Альтернативный синтез метил-2-бром-К-(метоксикарбонил)-О-фенилаланината.

К метил-2-бром-О-фенилаланината гидрохлориду (580 г, 1,91 моль) в дихлорметане (9,86 л) добавляли воду (2,94 л) и гидрокарбонат натрия (648,25 г, 7,64 моль) при 10°С в подходящем сосуде. Через

- 15 029220

5 мин добавляли метилхлорформиат (198,53 г, 2,10 моль) и перемешивали смесь при 20°С. Через 3 ч добавляли воду (2,5 л) и слои разделяли. Экстрагировали водный слой дихлорметаном, Объединенные органические экстракты сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения (556 г, 1,74 моль).

МС (т/ζ): 315,8 (М+1 (⁷⁹Вг)), 317,8 (М+1 (⁸¹Вг)).

Получение 3.

Синтез диметил-(3К)-5-бром-3,4-дигидро-Ш-изохинолин-2,3-дикарбоксилата.

Перемешивали смесь метил-2-бромШ-(метоксикарбонил)-О-фенилаланината (29,1 г, 92,10 ммоль) и параформальдегида (9,13 г, 101,3 ммоль) в ледяной уксусной кислоте (115 мл, 2,01 моль) и концентрированной серной кислоты (38,4 мл, 719,9 ммоль) при комнатной температуре в течение 7 ч. Разделяли между водой и этилацетатом. Слои разделяли и экстрагировали водный слой этилацетатом. Этилацетатные экстракты объединяли и сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали при помощи хроматографии на силикагеле путем элюирования смесью этилацетата:гексана (градиент 5-40%) с получением указанного в заголовке соединения (27,6 г, 84,0 ммоль).

МС (т/ζ): 328 (М+1).

Получение 3 а.

Синтез диметил-(3К)-5-бром-3,4-дигидро-1Η-изохинолин-2,3-дикарбоксилата и (3К)-5-бром-2метоксикарбонил-3,4-дигидро-1Η-изохинолин-3-карбоновой кислоты.

К уксусной кислоте (4,29 л) при 10°С в подходящем сосуде добавляли 2-бромШ(метоксикарбонил)-О-фенилаланинат (572 г, 1,81 моль) и параформальдегид (205,86 г, 2,17 моль). Через 10 мин медленно добавляли концентрированную серную кислоту (2,63 кг, 26,83 моль) и затем перемешивали при 35°С. Через 12 ч охлаждали до 15°С и добавляли воду (7,5 л) и этилацетат (6 л). Слои разделяли и повторно экстрагировали водный слой этилацетатом (2,5 л). Объединенные органические экстракты сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением смеси указанных в заголовке соединений с уксусной кислотой (640 г, 1,69 моль).

Масс-спектр (т/ζ): 3а: 327,95 (М+1 (⁷⁹Вг)), 330,05 (М+1 (⁸¹Вг)); 3Ь: 314 (М+1 (⁷⁹Вг)), 315,95 (М+1 (⁸¹Вг)).

Получение 4. Синтез метил-(3К)-5-бром-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-3-карбоксилата гидрохлорида.

Растворяли диметил-(3К)-5-бром-3,4-дигидро-1Η-изохинолин-2,3-дикарбоксилат (27,55 г, 84,0 ммоль) в 5н. хлористо-водородной кислоте (330,6 мл, 1,65 моль) и нагревали с обратным холодильником в течение трех дней. Концентрировали при пониженном давлении с получением белого твердого вещества. Промывали твердое вещество диэтиловым эфиром и сушили под вакуумом при 40°С в течение ночи с получением (3К)-5-бром-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-3-карбоновой кислоты гидрохлорида (1:1) (20,8 г, 71,1 ммоль). Добавляли ацетилхлорид (50,6 мл, 711,0 ммоль) при 0°С к смеси (3К)-5-бром-1,2,3,4тетрагидроизохинолин-3-карбоновой кислоты гидрохлорида (1:1) (20,8 г, 71,1 ммоль) в метаноле (474 мл). Нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 36 ч. Концентрировали при пониженном давлении и сушили с получением указанного в заголовке соединения (21,9 г, 71,4 ммоль).

МС (т/ζ): 270 (М+1).

Получение 5.

Синтез (3К)-5-бром-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-3-карбоновой кислоты гидрохлорида.

К смеси диметил-(3К)-5-бром-3,4-дигидро-1Η-изохинолин-2,3-дикарбоксилата и (3К)-5-бром-2- 16 029220

метоксикарбонил-3,4-дигидро-1Н-изохинолин-3-карбоновой кислоты (получение За) (520 г, 1,27 моль) в подходящем сосуде добавляли воду (1,3 л) и 36,5% хлористо-водородную кислоту (9,07 кг, 90,81 моль) и перемешивали смесь при 95°С. Через 12 ч охлаждали смесь до 10°С и перемешивали в течение 15 мин. Смесь фильтровали и сушили твердое вещество под вакуумом при 40°С с получением указанного в заголовке соединения (332 г, 1,13 моль).

МС (т/ζ): 256,1 (М-С1 (⁷⁹Вг)), 258 (М-С1 (⁸¹Вг)).

Получение 6.

Синтез 2-трет-бутил-3-метил-(3К)-5-бром-3,4-дигидро-1Н-изохинолин-2,3-дикарбоксилата.

Растворяли метил-(3К)-5-бром-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-3-карбоксилат гидрохлорид (21,0 г,

68.5 ммоль) в 1,4-диоксане (685 мл). Добавляли насыщенный раствор бикарбоната натрия (685 мл,

17.5 моль) и ди-трет-бутилдикарбонат (29,9 г, 137,0 ммоль) при комнатной температуре. Перемешивали двухфазную смесь в течение 90 мин. Экстрагировали этилацетатом. Сушили этилацетат над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали при помощи хроматографии на силикагеле путем элюирования смесью этилацетата:гексана (градиент 5-50%) с получением указанного в заголовке соединения (19,5 г, 52,7 ммоль).

МС (т/ζ): 270 (М-1ВОС+1).

Получение 7 Синтез [(3К)-5-бром-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-3-ил]метанола.

Вг ОН

К (3К)-5-бром-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-3-карбоновой кислоты гидрохлориду (325,4 г, 1,11 моль) в тетрагидрофуране (4,88 л) добавляли алюмогидрид лития (2 л, 2,00 моль, 1 М в ТГФ) при -35°С в подходящем сосуде, затем нагревали до 25°С в течение 60 мин и перемешивали. Через 3 ч охлаждали смесь до -5°С, затем добавляли воду (76 мл), 15% мас./мас. водный раствор гидроксида натрия (76 мл) и воду (228 мл). Нагревали смесь до 25°С, добавляли безводный сульфат магния (750 г) и перемешивали. Смесь фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением твердого вещества. Добавляли дихлорметан (690 мл) к твердому веществу и суспендировали в течение 30 мин перед фильтрацией с получением твердого вещества. Сушили твердое вещество под вакуумом при 35°С с получением указанного в заголовке соединения (148,9 г, 0,55 моль).

МС (т/ζ): 242 (М+1 (⁷⁹Вг)), 244 (М+1 (⁸¹Вг)).

Получение 8.

Синтез трет-бутил-(3К)-5-бром-3-(гидроксиметил)-3,4-дигидро-1Н-изохинолин-2-карбоксилата.

К раствору 2-трет-бутил-3-метил-(3К)-5-бром-3,4-дигидро-1Н-изохинолин-2,3-дикарбоксилата (18,4 г, 49,7 ммоль) в тетрагидрофуране (497 мл) добавляли метанол (10,1 мл, 248,5 ммоль) и боргидрид лития (99,4 мл, 198,8 ммоль, 2 М в ТГФ) при комнатной температуре на водяной бане. Перемешивали в течение 40 мин и гасили реакцию водой. Экстрагировали этилацетатом. Сушили этилацетатные экстракты над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали при помощи хроматографии на силикагеле путем элюирования смесью этилацетата:гексана (градиент 5-80%). Сушили под высоким вакуумом в течение ночи с получением указанного в заголовке соединения виде белого твердого вещества (19,1 г, 55,8 ммоль).

МС (т/ζ): 286 (М-1Ви+1).

Получение 9.

Синтез (3К)-5 -бром-3-( {[трет-бутил(диметил)силил] окси}метил)-1,2,3,4-тетрагидроизохинолина.

К раствору трет-бутил-(3К)-5-бром-3-(гидроксиметил)-3,4-дигидро-1Н-изохинолин-2-карбоксилата (15,5 г, 45,3 ммоль) в дихлорметане (226 мл) добавляли трифторуксусную кислоту (75,5 мл, 998,3 ммоль) при комнатной температуре. Перемешивали 30 мин и концентрировали при пониженном давлении. Сушили под вакуумом с получением [(3К)-5-бром-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-3-ил]метанола;

- 17 029220

2,2,2-трифторуксусной кислоты в виде влажного твердого вещества. Растворяли [(3К)-5-бром-1,2,3,4тетрагидроизохинолин-3-ил]метанол; 2,2,2-трифторуксусную кислоту в дихлорметане (753 мл). Добавляли 1Н-имидазол (51,3 г, 753 ммоль), Ы,Ы-диметил-4-пиридинамин (460 мг, 3,77 ммоль) и третбутилдиметилхлорсилан (13,6 г, 90,4 ммоль). Перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Добавляли насыщенный раствор хлорида аммония и экстрагировали дихлорметаном. Дихлорметановые экстракты сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Объединяли с неочищенным продуктом, по существу, из такой же реакции и запускали с 19,4 ммоль трет-бутил-(3К)-5-бром-3-(гидроксиметил)-3,4-дигидро-1Н-изохинолин-2-карбоксилата. Остаток очищали при помощи хроматографии на силикагеле путем элюирования смесью этилацетата:гексана (градиент 5-40%) с получением указанного в заголовке соединения (14,3 г, 40,1 ммоль).

МС (т/ζ): 356 (М+1).

Альтернативный синтез (3К)-5-бром-3-({[трет-бутил(диметил)силил]окси}метил)-1,2,3,4тетрагидроизохинолина.

К смеси [(3К)-5-бром-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-3-ил]метанола (148,9 г, 0,58 моль), 1Н-имидазола (202,9 г, 2,92 моль), 4-диметиламинопиридина (0,72 г, 5,84 ммоль) и Ν,Ν-диметилформамида (1,04 л) в дихлорметане (2,61 л) добавляли трет-бутилдиметилхлорсилан (193,7 г, 1,29 моль) при 20°С и перемешивали в подходящем сосуде. Через 3 ч охлаждали смесь до 10°С и добавляли насыщенный водный раствор хлорида аммония (1,3 л). Экстрагировали водный слой дихлорметаном и промывали объединенные органические экстракты солевым раствором (2x2 л), сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении с получением остатка. Растворяли остаток в метил-трет-бутиловом эфире (1,5 л) и промывали солевым раствором (2x1 л). Разбавляли органическую фазу толуолом (5 л) и концентрировали при пониженном давлении с получением остатка. Добавляли толуол (2,6 л) к остатку и концентрировали при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения (210 г, 0,53 моль).

МС (т/ζ). 356 (М+1 (⁷⁹Вг)), 358 (М+1 (⁸¹Вг)).

Получение 10.

Синтез (3К)-5 -бром-3 -({[трет-бутил(диметил)силил] окси}метил)-3,4-дигидроизохинолина.

Растворяли (3К)-5-бром-3-({[трет-бутил(диметил)силил]окси}метил)-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин (4,2 г, 11,8 ммоль) в диэтиловом эфире (118 мл). Добавляли Ν-хлорсукцинимид (2,36 г, 17,7 ммоль). Перемешивали 30 мин при комнатной температуре и концентрировали при пониженном давлении. Растворяли остаток в гидроксиде калия (42,0 мл, 30,3 ммоль, 5% в МеОН) и перемешивали в течение 30 мин при комнатной температуре. Переливали в воду и экстрагировали дихлорметаном. Дихлорметановые экстракты сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали при помощи хроматографии на силикагеле путем элюирования смесью этилацетата:гексана (градиент 5-100%) с получением указанного в заголовке соединения (3,40 г, 9,59 ммоль).

МС (т/ζ): 354 (М+1).

Альтернативный синтез (3К)-5-бром-3-({[трет-бутил(диметил)силил]окси}метил)-3,4 дигидроизохинолина.

К раствору (3К)-5 -бром-3 -({[трет-бутил(диметил)силил] окси}метил)-1,2,3,4-тетрагидроизохинолина (220 г, 0,52 моль) в тетрагидрофуране (3,85 л) добавляли Ν-хлорсукцинимид (106,7 г, 0,79 моль) при 20°С в подходящем сосуде и перемешивали. Через 30 мин концентрировали смесь при пониженном давлении и растворяли остатки в 5% мас./мас. гидроксиде калия в метаноле (2,2 л, 1,69 моль) и перемешивали при 20°С. Через 30 мин добавляли смесь в воду (3 л) и трижды экстрагировали дихлорметаном (3x1 л). Объединенные органические экстракты сушили над безводным сульфатом магния и концентрировали при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения (210 г, 0,50 моль).

МС (т/ζ): 354 (М+1 (⁷⁹Вг)), 356 (М+1 (⁸¹Вг)).

Получение 11.

Синтез (18,3К)-5 -бром-3 -({[трет-бутил(диметил)силил] окси}метил)-1 -метил-1,2,3,4тетрагидроизохинолина.

Растворяли (3К)-5-бром-3-({[трет-бутил(диметил)силил]окси}метил)-3,4-дигидроизохинолин (3,4 г,

- 18 029220

9,59 ммоль) в диэтиловом эфире (160 мл). Охлаждали до -78°С на бане с сухим льдом и ацетоном. Добавляли по каплям метилмагнийхлорид (26,9 мл, 80,6 ммоль, 3 М в ТГФ). Реакционную смесь медленно нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение ночи. Медленно гасили насыщенным раствором хлорида аммония. Экстрагировали дихлорметаном и сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Объединяли с неочищенным продуктом, по существу, из такой же реакции и запускали с 1,73 ммоль (3К)-5-бром-3-({[третбутил(диметил)силил]окси}метил)-3,4 дигидроизохинолином. Объединенные остатки очищали при помощи хроматографии на силикагеле путем элюирования смесью этилацетата:гексана (градиент 5-65%) с получением указанного в заголовке соединения (3,78 г, 10,2 ммоль).

МС (т/ζ): 370 (М+1).

Относительную конфигурацию соединения (18,3К)-5-бром-3-({[третбутил(диметил)силил]окси}метил)-1-метил-1,2,3,4-тетрагидроизохинолина определяли посредством ЯМР-спектроскопии с применением экспериментов с одномерным ядерным эффектом Оверхаузера (1Ώ-ΝΟΕ8Υ). Селективное возбуждение метильной группы при 1,30 ррт приводило к увеличению ядерного эффекта Оверхаузера (ΝΟΕ) для На при 3,11 ррт. Это усиление ΝΟΕ согласуется только с конфигурацией, при которой метил и На находятся на одной и той же стороне кольца (транс-изомер), потому что в цис-изомере метальные протоны слишком далеко от На для проявления ΝΟΕ. Поскольку известно, что действительная химическая структура в положении 3 представляет собой К, тогда можно вывести, что действительная химическая структура в положении 1 представляет собой 8.

Альтернативный синтез (18,3К)-5-бром-3-({[трет-бутил(диметил)силил]окси}метил)-1-метил1,2,3,4-тетрагидроизохинолина.

К раствору (3К)-5-бром-3-({[трет-бутил(диметил)силил]окси}метил)-3,4-дигидроизохинолина (93,5 г, 0,24 моль) в диэтиловом эфире (2,8 л) добавляли метилмагнийхлорид (0,66 л, 1,99 моль, 3 М в ТГФ) при -65°С в подходящем сосуде. Затем нагревали реакционную смесь до 20°С в течение 2 ч и перемешивали. Через 16 ч охлаждали смесь до 0°С и гасили реакцию насыщенным водным раствором хлорида аммония (2,5 л), экстрагировали этилацетатом (2,5 л) и фильтровали смесь. Промывали объединенные органические экстракты солевым раствором (1 л), сушили над безводным сульфатом магния и концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного указанного в заголовке соединение в виде масла. Объединяли масло с неочищенными продуктами, по существу, из такой же реакции и запускали с 48 ммоль и 229 ммоль [(3К)-5-бром-3,4-дигидроизохинолин-3-ил]метокси-трет-бутилдиметил-силана и очищали их при помощи хроматографии на силикагеле путем элюирования этилацетатом в гексане (градиент 5-65% этилацетата) с получением указанного в заголовке соединения (151 г, 0,41 моль).

МС (т/ζ): 370,1 (М+1 (⁷⁹Вг)), 372,1(М+1 (⁸¹Вг)).

Получение 12.

Синтез трет-бутил-(18,3К)-5-бром-3-[[трет-бутил(диметил)силил]оксиметил]-1-метил-3,4-дигидро1 Н-изохинолин-2-карбоксилата.

Добавляли ди-трет-бутилдикарбонат (1,23 г, 5,54 ммоль) к раствору [(18,3К)-5-бром-1-метил1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-3-ил]метокси-трет-бутил-диметил-силана (2,01 г, 5,43 ммоль) в дихлорметане (15 мл). Перемешивали реакционную смесь в течение ночи при температуре окружающей среды. Концентрировали при пониженном давлении. Растворяли остаток в дихлорметане и промывали водой и солевым раствором, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Очищали при помощи хроматографии на силикагеле путем элюирования смесью этилацета- 19 029220

та:гексана (градиент 0-4%) с получением указанного в заголовке соединения (2,54 г, 5,40 ммоль).

МС (т/ζ): 370,2, 372,2 (М-ВОС+1).

Получение 13.

Синтез 1-[(18,3К)-5-бром-3-({[трет-бутил(диметил)силил]окси}метил)-1-метил-3,4дигидроизохинолин-2(1Н)-ил] -2-(2,6-дихлорфенил)этанона.

К смеси (18,3К)-5-бром-3-({[трет-бутил(диметил)силил]окси}метил)-1-метил-1,2,3,4тетрагидроизохинолина (3,78 г, 10,2 ммоль) и 2,6-дихлорфенилуксусной кислоты (2,30 г, 11,2 ммоль) в диметилформамиде (51,0 мл) добавляли бензотриазол-1-ил-окситрипирролидинофосфония гексафторфосфат (7,97 г, 15,3 ммоль). Добавляли триэтиламин (2,13 мл, 15,3 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре 3 ч. Разбавляли водой и экстрагировали дихлорметаном. Дихлорметановые экстракты сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали при помощи хроматографии на силикагеле путем элюирования смесью этилацетата:гексана (градиент 5-50%) с получением указанного в заголовке соединения (4,70 г, 8,43 ммоль).

МС (т/ζ): 556 (М+1).

Получение 14.

Синтез этил (2Е)-3-{( 18,3К)-3-({ [трет-бутил(диметил)силил]окси}метил)-2-[(2,6-дихлорфенил)ацетил]-1-метил-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-5-ил}проп-2-еноата.

Барботировали азот через ацетонитрил. Помещали три-о-толилфосфин (72,3 мг, 0,23 ммоль), палладия(11) ацетат (11,8 мг, 0,052 ммоль) и ацетонитрил (0,96 мл) в сосуд для микроволновой печи. Перемешивали 10 мин. Добавляли этилакрилат (0,31 мл, 2,88 ммоль). Добавляли 1-[(18,3К)-5-бром-3-({[третбутил(диметил)силил]окси}метил)-1-метил-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил] -2-(2,6дихлорфенил)этанон (0,54 г, 0,96 ммоль). Добавляли триэтиламин (0,40 мл, 2,88 ммоль) и энергично перемешивали. Продували азот по всей поверхности реакции. Г ерметично закрывали сосуд и нагревали до 160°С в течение 35 мин в микроволновой печи. Охлаждали до комнатной температуры и разбавляли этилацетатом. Осадок фильтровали и промывали этилацетатом. Концентрировали фильтрат при пониженном давлении с получением коричневого масла. Объединяли с неочищенным продуктом, по существу, из такой же реакции и запускали с 0,27 ммоль 1-[(18,3К)-5-бром-3-({[третбутил(диметил)силил]окси}метил)-1-метил-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил] -2-(2,6дихлорфенил)этанона. Объединенные остатки очищали при помощи хроматографии на силикагеле путем элюирования смесью этилацетата:гексана (градиент 0-10%) с получением указанного в заголовке соединения (0,54 г, 0,93 ммоль).

МС (т/ζ): 576 (М+1).

Следующее соединение получено, по существу, по способу получения 14.

Получ. №	Химическое название	Структура	Физические данные
15	трет-бутил-(18,ЗК)-3-[[третбутил(д иметил)силил] оксиметил] -5 - [(Е)-3 -этокси-3 -оксо-проп-1 -	У	МС (т/ζ): 390,2 (М-
енил] -1 -метил-3,4-дигидро-1Низохинолин-2-карбоксилат	θίγχ	ВОС+1).

- 20 029220

Получение 16.

Синтез трет-бутил-(18,3К)-3-[[трет-бутил(диметил)силил]оксиметил]-5-(3-этокси-3-оксо-пропил)-1метил-3,4-дигидро-1Н-изохинолин-2-карбоксилата.

В 100 мл колбу Парра добавляли 10% палладий на угле (0,09 г). Продували азотом. Добавляли этанол (5 мл) для смачивания катализатора. Добавляли трет-бутил-(18,3К)-3-[[третбутил(диметил)силил]оксиметил]-5-[(Е)-3-этокси-3-оксо-проп-1 -енил]-1 -метил-3,4-дигидро-1Низохинолин-2-карбоксилат (330 мг, 0,67 ммоль) в виде раствора в этаноле (15 мл). Герметично закрывали колбу и продували азотом. Продували сосуд водородом и повышали давление до 414 кПа водорода. Встряхивали при комнатной температуре в течение 1,5 ч. Сбрасывали давление и открывали сосуд. Фильтровали реакционную смесь. Концентрировали фильтрат при пониженном давлении. Остаток очищали при помощи хроматографии на силикагеле путем элюирования смесью этилацетата:гексана (градиент 0-10%) с получением указанного в заголовке соединения в виде прозрачного бесцветного масла (252 мг, 0,51 ммоль).

МС (т/ζ): 392,2 (М-ВОС+1).

Получение 17.

Синтез этил 3-{(18,3К)-3-({[трет-бутил(диметил)силил]окси}метил)-2-[(2,6-дихлорфенил)ацетил]1 -метил-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-5-ил} пропаноата.

В сухом боксе в 85 мл автоклав Рагг с якорем магнитной мешалки и стеклянным вкладышем, добавляли ЦЕ-бисДдиизопропилфосфино^ерроценДД-циклооктадиенфодийД) тетрафторборат (7 мг, 0,010 ммоль). Добавляли этил (2Е)-3-{(18,3К)-3-({[трет-бутил(диметил)силил]окси}метил)-2-[(2,6дихлорфенил)ацетил]-1-метил-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-5-ил}проп-2-еноат (133 мг, 0,23 ммоль) в виде раствора в безводном метанол (5 мл). Герметично закрывали автоклав и вынимали из сухого бокса. Продували сосуд водородом и повышали давление до 690 кПа водорода. Перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Сбрасывали давление и открывали сосуд. Концентрировали реакционную смесь при пониженном давлении. Остаток очищали при помощи хроматографии на силикагеле путем элюирования 25% метил-трет-бутиловым эфиром: гексаном с получением указанного в заголовке соединения в виде прозрачного бесцветного масла (121 мг, 0,21 ммоль).

МС (т/ζ): 578 (М+1).

Получение 18.

Синтез (18,3К)-5-бром-3-({[трет-бутил(диметил)силил]окси}метил)-1-метил-1,2,3,4тетрагидроизохинолин гидрохлорида.

К (18,3К)-5-бром-3-({[трет-бутил(диметил)силил]окси}метил)-1-метил-1,2,3,4тетрагидроизохинолину (419 г, 1,02 моль) в изопропилацетате (4,19 л) добавляли хлористый водород (267,24 г, 1,02 моль, 4 Μ в 1,4-диоксане) при 10°С и перемешивали в течение 15 мин в подходящем сосуде. Смесь фильтровали и осадок на фильтре промывали изопропилацетатом (2,5 л), сушили на фильтре в течение 30 мин, затем под вакуумом в печи при 40°С в течение 16 ч с получением указанного в заголовке соединения (380 г, 0,89 моль).

- 21 029220

МС (т/ζ): 370 (М-С1 (⁷⁹Вг)), 372 (М-С1 (⁸¹Вг)).

Получение 19.

Синтез (Е)-4-[(13,3К)-3-[[трет- бутил(диметил)силил] оксиметил] -1 -метил-1,2,3,4тетрагидроизохинолин-5-ил]-2-метил-бут-3-ен-2-ол.

К Ν,Ν-диметилформамиду (1,08 л) в подходящем сосуде добавляли (13,3К)-5-бром-3-({[третбутил(диметил)силил]окси}метил)-1-метил-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин гидрохлорид (310 г, 723,83 ммоль) и 2-метилбут-3-ен-2-ол (508,95 г, 5,79 моль) и дегазировали путем барботирования азота через раствор в течение 10 мин. Добавляли карбонат калия (315,12 г, 2,28 моль), 2-дициклогексилфосфино-2',6'-диметоксибифенил (15,32 г, 36,19 ммоль) и палладия(П) ацетат (8,29 г, 36,19 ммоль) и дегазировали путем барботирования азота через смесь в течение 15 мин, затем нагревали до 125°С. Через 16 ч охлаждали смесь до 20°С и разбавляли этилацетатом (1,5 л) и воде (2,5 л). Промывали этилацетатный слой солевым раствором (2,5 л), затем сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении с получением остатка. Очищали остаток при помощи флэшхроматографии путем элюирования 0-50% этилацетатом в изогексане с получением указанного в заголовке соединения (193 г, 459,1 ммоль).

МС (т/ζ): 376 (М+1).

Получение 20.

Синтез 4-[(13,3К)-3-[[трет-бутил(диметил)силил]оксиметил]-1-метил-1,2,3,4тетрагидроизохинолин-5-ил]-2-метил-бутан-2-ола.

Раствор (Е)-4-[(13,3К)-3-[ [трет- бутил(диметил)силил] оксиметил] -1 -метил-1,2,3,4тетрагидроизохинолин-5-ил]-2-метил-бут-3-ен-2-ол (68 г, 168,83 ммоль) в этаноле (816 мл) вносили в аппарат высокого давления для гидрирования и добавляли 5% палладия на активированном угле (35,83 г, 16,84 ммоль). Продували сосуд газообразным водородом, повышали давление до 470 кПа водорода и перемешивали при 25°С. Через 16 ч сбрасывали давление в сосуде и фильтровали реакционную смесь через кизельгур. Промывали кизельгур этилацетатом и концентрировали фильтрат при пониженном давлении с получением масла. Растворяли масло в этилацетате (1 л) и концентрировали при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения (64 г, 161 ммоль).

МС (т/ζ): 378,2 (М+1).

Получение 21.

Синтез 1-[(13,3К)-3-({ [трет-бутил(диметил)силил] окси}метил)-5-(3 -гидрокси-3 -метилбутил)-1 метил-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил]-2-(2,6-дихлорфенил)этанона.

Растворяли 4-[(13,3К)-3-[ [трет-бутил(диметил)силил] оксиметил] -1 -метил-1,2,3,4тетрагидроизохинолин-5-ил]-2-метил-бутан-2-ол (0,21 г, 0,36 ммоль) в ТГФ (2,0 мл). Охлаждали на бане с сухим льдом и ацетоном. Медленно добавляли метиллитий (0,67 мл, 1,07 ммоль, 1,6 М в диэтиловом эфире) и перемешивали на бане с сухим льдом и ацетоном в течение 4 ч. Добавляли насыщенный раствор хлорида аммония (2 мл). Снимали с бани с сухим льдом и ацетоном и позволяли смеси нагреться до комнатной температуры. Экстрагировали этилацетатом. Этилацетатные экстракты объединяли; промывали солевым раствором, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением прозрачного бесцветного масла. Остаток очищали при помощи хроматографии на силикагеле путем элюирования смесью этилацетата:гексана (градиент 0-30%) с получением указанного в заголовке соединения в виде прозрачного бесцветного масла (0,16 г, 0,29 ммоль).

МС (т/ζ): 564 (М+1).

- 22 029220

Альтернативный синтез 1-[(18,3К)-3-({[трет-бутил(диметил)силил]окси}метил)-5-(3-гидрокси-3метилбутил)-1-метил-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил]-2-(2,6-дихлорфенил)этанона.

К смеси 2,6-дихлорфенилуксусной кислоты (173,09 г, 818,83 ммоль) в тетрагидрофуране (1,63 л) в подходящем сосуде добавляли 1,1'-карбонилдиимидазол (112,9 г, 682,36 ммоль) и перемешивали при 25°С. Через 1 ч добавляли раствор 4-[(18,3К)-3-[[трет-бутил(диметил)силил]оксиметил]-1-метил-1,2,3,4тетрагидроизохинолин-5-ил]-2-метил-бутан-2-ол (217 г, 545,89 ммоль) в тетрагидрофуране (1,63 л) к смеси, нагревали смесь до 45°С и перемешивали. Через 24 ч охлаждали смесь до 20°С, удаляли 2 л тетрагидрофурана путем концентрирования при пониженном давлении и разбавляли остатки этилацетатом (2,5 л). Промывали этилацетатный раствор насыщенным водным раствором хлорида аммония (1,5 л), 1 М водным раствором гидроксида натрия (1 л), водой (1 л) и солевым раствором (1,5 л). Сушили органику над безводным сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения (376 г, 532,70 ммоль).

МС (т/ζ): 564,2 (М+1 (³⁵С1)), 566,2 (М+1 (³⁷С1)).

Следующее соединение получено, по существу, по способу получения 21.

Получ. №	Химическое название	Структура	Физические данные
22	трет-бутил-(18,ЗК)-3-[[третбутил(диметил)силил]оксиметил] -5 -(3 -гидрокси-3 -метил-бутил)-1 -		МС (т/ζ):
	метил-3,4-д игидро-1Низохинолин-2-карбоксилат		478,2 (М+1).

Пример 1.

Синтез 2-(2,6-дихлорфенил)-1-[( 18,3К)-3-(гидроксиметил)-5-(3-гидрокси-3-метилбутил)-1 -метил3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил]этанона.

Растворяли 1-[(18,3К)-3-({[трет-бутил(диметил)силил]окси}метил)-5-(3-гидрокси-3-метилбутил)-1метил-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил]-2-(2,6-дихлорфенил)этанон (0,16 г, 0,28 ммоль) в ТГФ (2,8 мл). Добавляли фторид тетрабутиламмония (0,30 мл, 0,30 ммоль, 1 М в ТГФ). Перемешивали 40 мин. Добавляли насыщенный раствор хлорида аммония и экстрагировали этилацетатом. Этилацетатные экстракты объединяли; промывали водой и солевым раствором, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением остатка. Остаток очищали при помощи хроматографии на силикагеле путем элюирования смесью этилацетата:гексана (градиент 0-60%) с получением указанного в заголовке соединения в виде белой пены (0,12 г, 0,26 ммоль).

МС (т/ζ): 450 (М+1).

Альтернативный синтез 2-(2,6-дихлорфенил)-1-[(18,3К)-3-(гидроксиметил)-5-(3-гидрокси-3метилбутил)-1 -метил-3,4-дигидроизохинолин-2( 1 Н)-ил] этанон.

К раствору 1-[(18,3К)-3-[[трет-бутил(диметил)силил]оксиметил]-5-(3-гидрокси-3-метил-бутил)-1метил-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил]-2-(2,6-дихлорфенил)этанона (400 г, 566,71 ммоль) в тетрагидрофуране (4 л) добавляли фторид тетра-н-бутиламмония (651,71 мл, 651,71 ммоль, 1 М в ТГФ) при 5°С в подходящем сосуде. Нагревали смесь до 20°С и перемешивали. Через 3 ч удаляли 3 л тетрагидрофурана путем концентрирования при пониженном давлении и разбавляли остатки этилацетатом (2,5 л). Промывали органику насыщенным водным раствором хлорида аммония (2 л), водой (2 л) и солевым раствором (2x2 л). Сушили этилацетатный раствор над безводным сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении с получением масла. Растворяли данное масло в 2-пропаноле (2,5 л) и концентрировали при пониженном давлении с получением масла. Очищали при помощи хиральной сверхкритической флюидной хроматографии с применением колонки А8-Н (50x250 мм, размер частиц 5 мкм) путем элюирования 80% сверхкритическим диоксидом углерода и 20% 0,2% раствора диэтилметиламина в изопропиловом спирте при 280 г/мин с получением указанного в заголовке соединения (182,8 г, 389,62 ммоль).

МС (т/ζ): 450,2 (М+1 (³⁵С1)), 452,2 (М+1 (³⁷С1)).

Оптическое вращение: [α]²⁰ο-39,4° (с = 0,95, МеОН).

- 23 029220

Пример 2.

Сокристаллизация 2-(2,6-дихлорфенил)-1-[(18,3К)-3-(гидроксиметил)-5-(3-гидрокси-3-метилбутил)1-метил-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил]этанона и 4-гидроксибензойной кислоты.

Соединения 2-(2,6-дихлорфенил)-1-[(18,3К)-3 -(гидроксиметил)-5-(3 -гидрокси-3 -метилбутил)-1 метил-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил]этанон (402,56 мг) и 4-гидроксибензойную кислоту (144,7 мг) помещали в 40 мл флакон вместе с якорем магнитной мешалки. Флакон заполняли до краев водой (39 мл). Образец перемешивали при 1200 об/мин при 50°С (настройки магнитной мешалки с подогревом). Силиконовое масло капали вокруг основания флакона для обеспечения хорошего теплового переноса от нагревательной пластины. В результате получали густую белую суспензию с кусочками грязнобелого твердого вещества. Через 1 ч суспендирования термометр, вставленный в перегородку флакона, показывал 40,5°С, и образец превратился в однородную суспензию ярко-белого твердого вещества. После суспендирования в течение ночи образец представлял сбой однородную суспензию хлопьевидного белого твердого вещества. Показания термометра составляли 43,1°С. Микроскопия в поляризованном свете показала полное двойное лучепреломление. Ярко-белое твердое вещество выделяли путем вакуумной фильтрации и сушили на месте в потоке воздуха в течение 10 мин. Образец помещали в вакуумную печь при 75°С на 2 ч для получения указанной в заголовке композиции в виде белого кристаллического твердого вещества (484 мг, 94,9% выход). Точка начала плавления = 160,0°С (дифференциальная сканирующая калориметрия).

Рентгеновская порошковая дифракция.

Рентгеновские порошковые дифрактограммы (ХКО) твердых кристаллических веществ получали на рентгеновском порошковом дифрактометре Вгикег Ό4 Епйеауог, оснащенном СиКа источником (λ=1,54060 А) и детектором Vаηΐес, работающем при 35 кВ и 50 мА. Образец сканировали от 4 до 40° в 2Θ, с размером шага 0,009° в 2Θ и скоростью сканирования 0,5 с/шаг, и с 0,6 мм щелью расходимости, 5,28 мм фиксированной противорассеивающей щелью, и 9,5 мм приемной щелью. Сухой порошок помещали в кварцевый держатель образца и получали гладкую поверхность с помощью предметного стекла. Рентгеновские дифрактограммы кристаллических форм получали при температуре окружающей среды и относительной влажности. В области кристаллографии хорошо известно, что для любой данной кристаллической формы относительные интенсивности дифракционных пиков могут варьировать в зависимости от преимущественной ориентации из-за таких факторов, как морфология кристалла или габитус. Когда присутствуют эффекты предпочтительной ориентации, то изменяются интенсивности пиков, но остаются неизменными характерные положения пиков полиморфа. Кроме того, в области кристаллографии также хорошо известно, что для любой данной кристаллической формы угловые положения пиков могут слегка отличаться. Например, положения пиков могут смещаться из-за изменения температуры или влажности, при которых анализировали образец, смещения образца, или присутствия или в отсутствия внутреннего стандарта. В данном случае, варьирование положения пика 0,2 в 2θ будет учитывать эти потенциальные изменения, не препятствуя однозначной идентификации указанной кристаллической формы. Подтверждение кристаллической формы могут быть сделаны на основе любой уникальной комбинации различающихся пиков (в единицах° 2Θ), обычно более крупных пиков. (Фармакопея США # 35, Национальный формуляр #30, Глава <941>, страницы 427-432, 2012). Рентгеновские дифрактограммы кристаллических форм, полученные при температуре окружающей среды и относительной влажности, корректируют на основании стандартного эталонного материала 675 (слюда) Национального бюро стандартов (ΝΒ8) с пиками при 8,853 и 26,774° 2-тета.

Подготовленный образец сокристалла из примера 2 характеризовался дифрактограммой рентгеновской порошковой дифракции, полученной с применением СиКа излучения, имеющей дифракционные пики (значения 2-тета), как описано в табл. 3, и, в частности, имеющий пики при 18,2 в комбинации с одним или более пиков, выбранных из группы, состоящей из 16,0, 25,4 и 7,0; с допустимым отклонением для углов дифракции 0,2°.

- 24 029220

Таблица 3

Альтернативное получение сокристаллов 2-(2,6-дихлорфенил)-1-[(18,3К)-3-(гидроксиметил)-5-(3гидрокси-3-метилбутил)-1-метил-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил]этанона и 4-гидроксибензойной кислоты.

В 20 мл флакон вносили 2-(2,6-дихлорфенил)-1-[(18,3К)-3-(гидроксиметил)-5-(3-гидрокси-3метилбутил)-1-метил-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил]этанон (2,00 г, 1,00 экв.; 4,44 ммоль). Добавляли ацетон (4 мл) при перемешивании при комнатной температуре. Получали прозрачный раствор. Добавляли 4-гидроксибензойную кислоту (0,756 г; 1,23 экв.; 5,47 ммоль) при перемешивании при комнатной температуре. Сначала образовывалась легкая суспензия, а затем густая суспензия. Смесь нагревали на плитке до 60°С. 1 мл аликвоты ацетона добавляли до тех пор, пока не получалась хорошо перемешиваемая суспензия при 60°С. Суммарное количество добавленного ацетона составляло 9,00 мл (122,43 ммоль, 7,11 г). Температуру поддерживали при ~60°С в течение нескольких часов. Полученное твердое вещество собирали путем вакуумной фильтрации, ополаскивали 2 мл ацетона и сушили в вакуумной печи в течение ночи при 40°С с получением указанной в заголовке композиции в виде белого кристаллического твердого вещества. ВЭЖХ-анализ показал, что молярное соотношение 2-(2,6-дихлорфенил)-1-[(18,3К)-3-(гидроксиметил)-5-(3-гидрокси-3-метилбутил)-1-метил-3,4дигидроизохинолин-2(1Н)-ил]этанона и 4-гидроксибензойной кислоты в сокристалле составляло 1:1.

ВЭЖХ-анализ.

Колонка: ЛцПеШ ΖΟΚΒΆΧ Вопиз-КР, Кари.) Кезо1ийоп, 4,6x75 мм, 3,5 мкм.

Температура колонки: 30°С.

Объем инъекции: 2 мкл.

Детекция: УФ.

2-(2,6-Дихлорфенил)-1-[(18,3К)-3-(гидроксиметил)-5-(3-гидрокси-3-метилбутил)-1-метил-3,4дигидроизохинолин-2(1Н)-ил]этанон (пример 1) @ 219 нм.

4-Гидроксибензойная кислота @ 256 нм.

Скорость потока: 1,5 мл/мин.

Подвижная фаза:

A) 0,1% ТФУ в воде.

B) 0,1% ТФУ в ацетонитриле.

- 25 029220

Градиентная таблица.

Относительное отношение.

Соединение	Молекулярная масса	Теоретическое содержание для 1 к 1	Полученное содержание (п=3)
Пример 1	450,4	76,5 %	81,06%+ 0,15%
4-гидроксибензойная кислота	138,1	23,5%	23,74% + 0,20%

Второе альтернативное получение сокристаллов 2-(2,6-дихлорфенил)-1-[(18,3К)-3-(гидроксиметил)5-(3 -гидрокси-3 -метилбутил)-1 -метил-3,4-дигидроизохинолин-2( 1 Н)-ил] этанона и 4-гидроксибензойной кислоты.

Соединения 2-(2,6-дихлорфенил)-1-[(18,3К)-3-(гидроксиметил)-5-(3-гидрокси-3-метилбутил)-1метил-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил]этанон (45,06 г, 0,1 моль) и 4-гидроксибензойную кислоту (14,5 г, 1,05 моль эквив.) суспендировали при 23°С в 53:47 изоропиловом спирте:гептане (236 мл, 4 объема) и нагревали до 65°С. В полученный раствор вносили затравку сокристаллов 2-(2,6-дихлорфенил)-1[(18,3К)-3-(гидроксиметил)-5-(3-гидрокси-3-метилбутил)-1-метил-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)ил]этанона и 4-гидроксибензойной кислоты (553 мг, 1,0 мас. % загружено затравки) и перемешивали при 65°С в течение 30 мин. Добавляли гептан (943 мл, 16 объемов) при 65°С в течение 4,6 ч. Суспензию перемешивали при 65°С в течение дополнительных 30 мин, охлаждали до 23°С в течение 2 ч, перемешивали в течение ночи при 23°С и фильтровали под вакуумом. Твердые продукты ополаскивали 10:90 изопропиловым спиртом:гептаном (2x50 мл) и гептаном (50 мл), затем сушили в вакуумной печи при 40°С в течение 2 ч с получением указанной в заголовке композиции в виде белого кристаллического продукта (51,3 г, 86,3 мас.% выход). Точка начала плавления = 162,2°С (дифференциальная сканирующая калориметрия).

Получение 23.

Синтез 4-[(18,3К)-3-(гидроксиметил)-1-метил-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-5-ил]-2-метил-бутан-2ол гидрохлорида.

Растворяли трет-бутил-( 18,3К)-3 - [ [трет-бутил(диметил)силил] оксиметил] -5-(3 -гидрокси-3 -метилбутил)-1-метил-3,4-дигидро-1Н-изохинолин-2-карбоксилат (161 мг, 0,34 ммоль) в этилацетате (962 мкл). Охлаждали на ледяной бане. Добавляли хлористый водород (843 мкл, 3,37 ммоль, 4 М в диоксане) и перемешивали на ледяной бане в течение 4 ч. Концентрировали при пониженном давлении. Растворяли в этаноле и концентрировали при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения (100 мг, 0,34 ммоль).

МС (т/ζ): 264,2 (М+1).

Следующее соединение получено, по существу, по способу получения 23.

- 26 029220

Получ. №	Химическое название	Структура	Физические данные
24	4-[(13,ЗК)-3-(гидроксиметил)-1метил-1,2,3,4тетрагидроизохинолин-5-ил]-2метил-бутан-2-ол	НО / °Н	МС (т/ζ): 264,2 (М+1).

Получение 25.

Синтез 1-[(13,3К)-3 - [ [трет-бутил(диметил)силил] оксиметил] -5-(3 -гидрокси-3 -метил-бутил)-1 метил-3,4-дигидро-1Н-изохинолин-2-ил]-2-(2-хлор-5-метокси-фенил)этанона.

Растворяли 4-[(13,3К)-3-[[трет-бутил(диметил)силил]оксиметил]-1-метил-1,2,3,4тетрагидроизохинолин-5-ил]-2-метил-бутан-2-ол (0,36 г, 0,95 моль) в дихлорметане (9,5 мл). Добавляли диизопропилэтиламин (499 мкл, 2,86 ммоль). Добавляли 2-(2-хлор-5-метокси-фенил)уксусную кислоту (229,5 мг, 1,14 ммоль). Добавляли О-(7-аза-1Н-бензотриазол-1-ил)-Ы,Ы,Ы',Ы'-тетраметилурония гексафторфосфат (561 мг, 1,40 ммоль) и перемешивали при температуре окружающей среды в течение ночи. Разбавляли реакционную смесь дихлорметаном и промывали водой и солевым раствором, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением коричневого масла. Остаток очищали при помощи хроматографии на силикагеле путем элюирования ацетоном:гексаном (градиент 0-20%) с получением указанного в заголовке соединения в виде непрозрачного масла (0,46 г, 0,82 ммоль).

МС (т/ζ): 560,2 (М+1).

Следующие соединения получены, по существу, по способу получения 25.

Получ, Хе	Химическое название	Структура	Физические данные
26	1- [(18,ЗК)-3-[[третбутил(диметил)силил]оксиметил]-5-(3гидрокси-3-метил-бутил)-1 -метил-3,4дигидро-1Н-изохинолин-2-ил]-2-(6-хлор2- фтор-З -метокси-фенил )этанон	άΧχ * о	МС (т/ζ): 577,8 (М+1).
27	1-[(18,ЗК)-3-[[третбутил(диметил)силил]оксиметил]-5-(3гидрокси-3-метил-бутил)-1 -метил-3,4дигидро-1Н-изохинолин-2-ил]-2-(2-хлор6-метокси-фенил)этанон	Ч о-Х άΧχ 1	МС (т/ζ): 560,2 (М+1).

- 27 029220

Получение 28.

Синтез 1 -((13,3К)-3-(((трет-бутилдиметилсилил)окси)метил)-1-метил-5-винил-3,4дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)-2-(2,6-дихлорфенил)этан-1-она.

Растворяли 1-[(18,3К)-5 -бром-3 -({[трет-бутил(диметил)силил] окси}метил)-1 -метил-3,4дигидроизохинолин-2(1Н)-ил]-2-(2,6-дихлорфенил)этанон (300 мг, 0,54 ммоль) и винилбороновой кислоты дибутиловый эфир (0,24 мл, 1,08 ммоль) в 1,4-диоксане (5,4 мл). Добавляли водный раствор Ыа₂СО₃ (2,7 мл, 2 М в воде). Дегазировали азотом в течение 10 мин. Добавляли бис(трифенилфосфин)палладий(П) хлорид (76 мг, 0,11 ммоль). Нагревали до 80°С. Перемешивали в течение 2 ч. Добавляли воду и трижды экстрагировали этилацетатом. Этилацетатные экстракты объединяли, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением остатка. Остаток очищали при помощи хроматографии на силикагеле путем элюирования смесью этилацетата:гексана (градиент 5-80%) с получением указанного в заголовке соединения в виде белой пены (220 мг, 0,44 ммоль).

МС (т/ζ): 504 (М+1).

Получение 29.

Синтез 1 -((13,3К)-3-(((трет-бутилдиметилсилил)окси)метил)-5-(1-гидроксиэтил)-1 -метил-3,4дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)-2-(2,6-дихлорфенил)этан-1-она (смесь диастереомеров) и 1-((13,3К)-3(((трет-бутилдиметилсилил)окси)метил)-5-(2-гидроксиэтил)-1-метил-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)2-(2,6-дихлорфенил)этан-1-она.

Растворяли 1 -((13,3К)-3-(((трет-бутилдиметилсилил)окси)метил)-1-метил-5-винил-3,4дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)-2-(2,6-дихлорфенил)этан-1-он (477 мг, 0,95 ммоль) в ТГФ (9,5 мл). Охлаждали до 0°С. Добавляли ВН₃ (1,9 мл, 1,89 ммоль, 1 М в ТГФ). Перемешивали 4 ч при комнатной температуре. Охлаждали до 0°С. Добавляли ЫаОН (3,8 мл, 3 М в воде) и Н₂О₂ (0,58 мл, 30% мас./мас. в воде). Перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Добавляли этилацетат, промывали насыщенным раствором ЫаНСО₃ и солевым раствором, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением остатка. Остаток очищали при помощи хроматографии на силикагеле путем элюирования смесью этилацетата:гексана (градиент 5-60%) с получением 1-((13,3К)-3 -(((трет-бутилдиметилсилил)окси)метил)-5 -(1 -гидроксиэтил)-1 -метил-3,4дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)-2-(2,6-дихлорфенил)этан-1-она (смесь диастереомеров) в виде белой пены (92 мг, 0,19 ммоль).

МС (т/ζ): 522 (М+1).

1-((13,3К)-3 -(((трет-Бутилдиметилсилил)окси)метил)-5 -(2-гидроксиэтил)-1 -метил-3,4дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)-2-(2,6-дихлорфенил)этан-1-она в виде белой пены (254 мг, 0,49 ммоль).

МС (т/ζ): 522 (М+1).

Получение 30.

Синтез 1-((18,3К)-5 -ацетил-3 -(((трет-бутилдиметилсилил)окси)метил)-1 -метил-3,4дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)-2-(2,6-дихлорфенил)этан-1-она.

Растворяли 1 -((18,3К)-3-(((трет-бутилдиметилсилил)окси)метил)-5-(1-гидроксиэтил)-1-метил-3,4дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)-2-(2,6-дихлорфенил)этан-1-он (92 мг, 176 мкмоль, смесь двух диастереомеров) в СН₂С1₂ (1,8 мл). Добавляли ЫаНСО₃ (92 мг, 1,1 ммоль) и 3,3,3-триацетокси-3-йодфталид (90 мг, 211 мкмоль) при комнатной температуре. Перемешивали в течение 40 мин. Добавляли насыщенный рас- 28 029220

твор ΝαΙ 1СО₃ и насыщенный раствор Να₂δ₂Ο₃, трижды экстрагировали этилацетатом. Этилацетатные экстракты объединяли, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением остатка. Остаток очищали при помощи хроматографии на силикагеле путем элюирования смесью этилацетата:гексана (градиент 5-60%) с получением указанного в заголовке соединения в виде белой пены (0,068 г, 130 мкмоль).

МС (т/ζ): 522 (М+1).

Следующие соединения получены, по существу, по способу получения 30.

Получ. №	Название	Структура	Физические данные
	1-((18,ЗК)-3-(((третбутилдиметилсилил)окси)метил)-	О А		МС (т/ζ):
О'%
31	2-(2-(2,6-дихлорфенил)ацетил)-1 -		534,2
	А	οι
	метил-1,2,3,4-	с		(М+1).
	тетрагидроизохинолин-5-		АО
	ил)пропан-2-он
32	1- ((18,ЗК)-3-(((третбутилдиметилсилил)окси)метил)2- (2-(2-хлор-6-фторфенил)ацетил)-	о Λ	А — ώ О—	МС (т/ζ):
		Ат р	518,2
	1-метил-1,2,3,4-	с		(М+1).
	тетрагидроизохинолин-5ил)пропан-2-он		1 °сДА

Получение 33.

Синтез 2-((18,3К)-3-(((трет-бутилдиметилсилил)окси)метил)-2-(2-(2,6-дихлорфенил)ацетил)-1метил-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-5 -ил)ацетальдегида.

Растворяли 1-((18,3К)-3-(((трет-бутилдиметилсилил)окси)метил)-5-(2-гидроксиэтил)-1-метил-3,4дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)-2-(2,6-дихлорфенил)этан-1-он (160 мг, 0,31 ммоль) в СН₂С1₂ (3,1 мл). Добавляли КаНСО₃ (160 мг, 1,90 ммоль) и 3,3,3-триацетокси-3-йодфталид (156 мг, 0,37 ммоль) при комнатной температуре. Перемешивали в течение 40 мин. Добавляли насыщенный раствор КаНСО₃ и насыщенный раствор №₂В₂О₃, трижды экстрагировали этилацетатом. Этилацетатные экстракты объединяли, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением остатка. Остаток очищали при помощи хроматографии на силикагеле путем элюирования смесью этилацетата:гексана (градиент 5-60%) с получением указанного в заголовке соединения в виде белой пены (140 мг, 0,27 ммоль).

МС (т/ζ): 520,2 (М+1).

Получение 34.

Синтез 1-((18,3К)-3-(((трет-бутилдиметилсилил)окси)метил)-5-(2-гидроксипропил)-1-метил-3,4дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)-2-(2,6-дихлорфенил)этан-1-она (смесь двух диастереомеров).

Растворяли 2-((18,3К)-3-(((трет-бутилдиметилсилил)окси)метил)-2-(2-(2,6-дихлорфенил)ацетил)-1метил-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-5-ил)ацетальдегид (138 мг, 0,27 ммоль) в ТГФ (2,7 мл). Охлаждали до 0°С, добавляли МеМдС1 (0,097 мл, 0,29 ммоль, 3 М в Е1₂О). Перемешивали в течение 30 мин при 0°С. Добавляли воду и трижды экстрагировали этилацетатом. Этилацетатные экстракты объединяли, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением остатка. Остаток очищали при помощи хроматографии на силикагеле путем элюирования смесью этилацетата:гексана (градиент 2-60%) с получением указанного в заголовке соединения в виде белой пены (122 мг,

- 29 029220

0,23 ммоль).

МС (т/ζ): 536,2 (М+1).

Следующее соединение получено, по существу, по способу получения 34.

Получ. №	Название	Структура	Физические данные
	1-((18, ЗК)-3-(((трет-	он I 0 А .зА х η о	МС (т/ζ):
	бутилдиметилсилил)окси)метил)-	520,2
	5 -(2-гидроксипропил)-1 -метил -		(М+1).
35	3,4-дигидроизохинолин-2( 1Н)ил)-2-(2-хлор-6-фторфенил)этан1-он (смесь двух диастереомеров)

Получение 36.

Синтез 1-((13,3К)-5-бром-3-(((трет-бутилдиметилсилил)окси)метил)-1-метил-3,4дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)-2-(2-хлор-6-фторфенил)этан-1-она.

Растворяли (13,3К)-5-бром-3-(((трет-бутилдиметилсилил)окси)метил)-1-метил-1,2,3,4тетрагидроизохинолин (1,85 г, 4,99 ммоль) и 2-хлор-6-фторфенилуксусную кислоту (1,04 г, 5,49 ммоль) в дихлорметане (50 мл). Добавляли О-(7-азабензотриазол-1-ил)-НН№Х'-тетраметилурония гексафторфосфат (2,85 г, 7,49 ммоль) и диизопропилэтиламин (1,3 мл, 7,49 ммоль) при комнатной температуре. Перемешивали в течение 3 ч. Добавляли воду и трижды экстрагировали дихлорметаном. Объединяли дихлорметановые экстракты, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением остатка. Остаток очищали при помощи хроматографии на силикагеле путем элюирования смесью этилацетата:гексана (градиент 5-60%) с получением указанного в заголовке соединения в виде белой пены (2,2 г, 4,07 ммоль).

МС (т/ζ): 540,2 (М+1).

Получение 37.

Синтез 1-((13,3К)-3-(((трет-бутилдиметилсилил)окси)метил)-1-метил-5-винил-3,4дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)-2-(2-хлор-6-фторфенил)этан-1-она.

Растворяли 1-((13,3К)-5-бром-3-(((трет-бутилдиметилсилил)окси)метил)-1-метил-3,4дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)-2-(2-хлор-6-фторфенил)этан-1-он (1,8 г, 3,33 ммоль) и винилбороновой кислоты дибутиловый эфир (1,5 мл, 6,65 ммоль) в 1,4-диоксане (22 мл). Добавляли водный раствор №-1₂СХО (11 мл, 2 Μ в воде). Дегазировали азотом в течение 10 мин. Добавляли бис-(трифенилфосфин)палладий(11) хлорид (467 мг, 0,67 ммоль). Нагревали до 80°С. Перемешивали в течение 2 ч. Добавляли воду и трижды экстрагировали этилацетатом. Этилацетатные экстракты объединяли, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением остатка. Остаток очищали при помощи хроматографии на силикагеле путем элюирования смесью этилацетата:гексана (градиент 5-40%) с получением указанного в заголовке соединения в виде белой пены (1,54 г, 3,15 ммоль).

МС (т/ζ): 488,2 (М+1).

- 30 029220

Получение 38.

Синтез 1 -((18,3К)-3 -(((трет-бутилдиметилсилил)окси)метил)-5 -(2-гидроксиэтил)-1 -метил-3,4дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)-2-(2-хлор-6-фторфенил)этан-1-она.

Растворяли 1-((18,3К)-3-(((трет-бутилдиметилсилил)окси)метил)-1-метил-5-винил-3,4дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)-2-(2-хлор-6-фторфенил)этан-1-он (1,54 г, 3,15 ммоль) в ТГФ (31 мл). Охлаждали до 0°С. Добавляли ВН₃ (6,3 мл, 6,3 ммоль, 1 М в ТГФ). Перемешивали 4 ч при комнатной температуре. Охлаждали до 0°С. Добавляли NаОΗ (12,6 мл, 3 М в воде) и 11₂О₂ (1,92 мл, 30% мас./мас. в воде). Перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Добавляли этилацетат, промывали насыщенным раствором NаΗСО₃ и солевым раствором, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением остатка. Остаток очищали при помощи хроматографии на силикагеле путем элюирования смесью этилацетата:гексана (градиент 5-60%) с получением 1-((18,3К)-3-(((трет-бутилдиметилсилил)окси)метил)-5-(2-гидроксиэтил)-1-метил-3,4дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)-2-(2-хлор-6-фторфенил)этан-1-она в виде белой пены (1,08 г, 2,13 ммоль).

МС (т/ζ): 506,2 (М+1).

Получение 39.

Синтез 2-((18,3К)-3-(((трет-бутилдиметилсилил)окси)метил)-2-(2-(2-хлор-6-фторфенил)ацетил)-1метил-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-5-ил)ацетальдегида.

Растворяли 1 -((18,3К)-3 -(((трет-бутилдиметилсилил)окси)метил)-5 -(2-гидроксиэтил)-1 -метил-3,4дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)-2-(2-хлор-6-фторфенил)этан-1-он (1,08 г, 2,13 ммоль) в ΠΗ₂Ο₂ (21 мл). Добавляли NаΗСО₃ (1,08 г, 12,9 ммоль) и 3,3,3-триацетокси-3-йодфталид (1,09 г, 2,56 ммоль) при комнатной температуре. Перемешивали в течение 40 мин. Добавляли насыщенный раствор NаΗСО₃ и насыщенный раствор №₂8₂О₃, трижды экстрагировали этилацетатом. Этилацетатные экстракты объединяли, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением остатка. Остаток очищали при помощи хроматографии на силикагеле путем элюирования смесью этилацетата:гексана (градиент 5-60%) с получением указанного в заголовке соединения в виде белой пены (0,87 г, 1,73 ммоль).

Получение 40.

Синтез 1-((18,3К)-3-(((трет-бутилдиметилсилил)окси)метил)-1-метил-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-5-ил)пропан-2-она.

Смешивали (18,3К)-5-бром-3-(((трет-бутилдиметилсилил)окси)метил)-1-метил-1,2,3,4тетрагидроизохинолин гидрохлорид (2,5 г, 6,14 ммоль), ацетон (30 мл), фосфат калия, трехосновный, Ν-гидрат (3,99 г, 18,4 ммоль), Са!аСХ1ит А (ди(1-адамантил)-н-бутилфосфин, 220 мг, 0,61 ммоль) и трис(дибензилиденацетон)дипалладий(0) (290 мг, 0,31 ммоль). Перемешивали в течение 2 дней при 70°С. Охлаждали до 0°С. Добавляли воду и трижды экстрагировали этилацетатом. Этилацетатные экстракты объединяли, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением остатка. Остаток очищали при помощи хроматографии на силикагеле путем элюирования смесью этилацетата:гексана (градиент 10-100%) с получением указанного в заголовке соединения в виде белой пены (1,3 г, 3,74 ммоль).

МС (т/ζ): 348 (М+1).

- 31 029220

Получение 41.

Синтез 1-((18,3К)-3-(((трет-бутилдиметилсилил)окси)метил)-2-(2-(6-хлор-2-фтор-3-метоксифенил)ацетил)-1 -метил-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-5-ил)пропан-2-она.

Растворяли 1-((18,3К)-3-(((трет-бутилдиметилсилил)окси)метил)-1-метил-1,2,3,4тетрагидроизохинолин-5-ил)пропан-2-он (1,3 г, 3,74 ммоль) в дихлорметане (37 мл). Добавляли диизопропилэтиламин (2,0 мл, 11,22 ммоль), 2-(6-хлор-2-фтор-3-метоксифенил)уксусную кислоту (1,06 г, 4,86 ммоль), О-(7-азабензотриазол-1-ил)-АА№,№-тетраметилурония гексафторфосфат (1,91 г, 4,86 ммоль) и при комнатной температуре. Перемешивали в течение 16 ч. Промывали насыщенным водным раствором ΝαΙ 1СО₃, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением остатка. Остаток очищали при помощи хроматографии на силикагеле путем элюирования смесью этилацетата:гексана (градиент 5-50%) с получением указанного в заголовке соединения в виде белой пены (1,6 г, 2,69 ммоль).

МС (т/ζ): 548,6 (М+1).

Получение 42.

Синтез 1-((18,3К)-3-(((трет-бутилдиметилсилил)окси)метил)-5-(2-гидроксипропан-2-ил)-1-метил3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)-2-(2,6-дихлорфенил)этан-1-она.

Растворяли 1-((18,3К)-5-ацетил-3-(((трет-бутилдиметилсилил)окси)метил)-1-метил-3,4дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)-2-(2,6-дихлорфенил)этан-1-он (68 мг, 130 мкмоль) в ТГФ (1,3 мл). Охлаждали до 0°С, добавляли МеМдС1 (87 мкл, 261 мкмоль, 3 М в Εΐ₂Ο). Перемешивали 30 мин при 0°С и 30 мин при комнатной температуре. Добавляли МеМдС1 (87 мкл, 261 мкмоль, 3 М в Εΐ₂Ο) при комнатной температуре. Перемешивали в течение 60 мин. Добавляли воду и трижды экстрагировали этилацетатом. Этилацетатные экстракты объединяли, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения в виде белой пены (0,054 г, 100 мкмоль).

МС (т/ζ): 536,2 (М+1).

Следующие соединения получены, по существу, по способу получения 42.

- 32 029220

Получ. №	Название	Структура	Физические данные
43	1-((18,ЗК)-3-(((третбутилдиметилсилил)окси)метил)5-(2-гидрокси-2-метилпропил)-1 метил-3,4-д игидроизохинолин2(1Н)-ил)-2-(2,6д ихл ор ф ени л)этан-1 - он	+н А А о-А хх	МС (ш/ζ): 550,2 (М+1)
44	1-((18,ЗК)-3-(((третбутилдиметилсилил)окси)метил)5-(2-гидрокси-2-метилпропил)-1 метил-3,4-д игидроизохинолин2(1Н)-ил)-2-(2,6д ихл ор ф ени л)этан-1 - он	х А хх	МС (т/ζ): 534,2 (М+1).
45	1-((18,ЗК)-3-(((третбутилдиметилсилил)окси)метил)5-(2-гидрокси-2-метилпропил)-1 метил-3,4-д игидроизохинолин2( 1Н)-ил)-2-(6-хлор-2-фтор-3 метоксифенил )этан-1 -он	он 1 А А „А ΧχΥ	МС (т/ζ): 564 (М+1).

Пример 3.

Синтез 2-(2,6-дихлорфенил)-1 -((18,3К)-3-(гидроксиметил)-5-(2-гидроксипропан-2-ил)-1 -метил-3,4дигидроизохинолин-2( 1 Н)-ил)этан-1 -она.

Растворяли 1-((18,3К)-3-(((трет-бутилдиметилсилил)окси)метил)-5-(2-гидроксипропан-2-ил)-1метил-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)-2-(2,6-дихлорфенил)этан-1-он (0,054 г, 100 мкмоль) в ТГФ (1,0 мл). Добавляли фторид тетрабутиламмония (0,11 мл, 110 мкмоль, 1 М в ТГФ). Перемешивали в течение 30 мин. Добавляли насыщенный раствор хлорида аммония и трижды экстрагировали этилацетатом. Этилацетатные экстракты объединяли, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением остатка. Остаток очищали при помощи хроматографии на силикагеле путем элюирования смесью этилацетата:гексана (градиент 10-100%) с получением указанного в заголовке соединения в виде белой пены (0,03 г, 71 мкмоль).

МС (т/ζ): 422 (М+1).

Пример 3 а.

Получение кристаллического 2-(2,6 -дихлор ф енил) -1-((18,3К)-3- (гидр оксиметил) -5-(2гидроксипропан-2-ил)-1 -метил-3,4-дигидроизохинолин-2( 1 Н)-ил)этан-1 -она.

Растворяли 1,932 г 2-(2,6-дихлорфенил)-1-((18,3К)-3-(гидроксиметил)-5-(2-гидроксипропан-2-ил)-1метил-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)этан-1-она до концентрации 128 мг/мл в циклопентилметиловом эфире при перемешивании при 80°С/1000 об/мин. Раствор начинал выпадать в осадок в виде белого твердого вещества, которое затем охлаждали до температуры окружающей среды, после краткого периода суспендирования. Твердое вещество выделяли путем вакуумной фильтрации и недолго сушили в атмосфере азота, затем продолжали сушить при 65°С вакуумной печи в течение 2 ч. 1,606 г указанного в заголовке соединения получили с выходом 86,8%.

Рентгеновская порошковая дифракция.

Рентгеновские порошковые дифрактограммы (ΧΚΌ) твердых кристаллических веществ получали на рентгеновском порошковом дифрактометре Вгикег Ό4 Епйеауог, оснащенном СиКа источником (λ=1,54060 А) и детектором Уап1ее, работающем при 35 кВ и 50 мА. Образец сканировали от 4 до 40° в 2Θ, с размером шага 0,009° в 2Θ и скоростью сканирования 0,5 с/шаг, и с 0,6 мм щелью расходимости,

- 33 029220

5,28 мм фиксированной противорассеивающей щелью, и 9,5 мм приемной щелью. Сухой порошок помещали в кварцевый держатель образца и получали гладкую поверхность с помощью предметного стекла. В области кристаллографии хорошо известно, что для любой данной кристаллической формы относительные интенсивности дифракционных пиков могут варьировать в зависимости от преимущественной ориентации из-за таких факторов, как морфология кристалла и габитус. Когда присутствуют эффекты предпочтительной ориентации, то изменяются интенсивности пиков, но остаются неизменными характерные положения пиков полиморфа. См., например, Фармакопею США 35 - Национальный формуляр 30 Глава <941> Характеристика кристаллических и частично кристаллических твердых веществ с помощью рентгеновской порошковой дифракции (ΧΚΡΏ), включенный в фармакопею 1 декабря 2012 г. - 1 мая 2013 г. Кроме того, в области кристаллографии также хорошо известно, что для любой данной кристаллической формы угловые положения пиков могут слегка отличаться. Например, положения пиков могут смещаться из-за изменения температуры или влажности, при которых анализировали образец, смещения образца, или присутствия или в отсутствия внутреннего стандарта. В данном случае, варьирование положения пика 0,2 в 2θ будет учитывать эти потенциальные изменения, не препятствуя однозначной идентификации указанной кристаллической формы. Подтверждение кристаллической формы могут быть сделаны на основе любой уникальной комбинации различающихся пиков (в единицах° 2θ), обычно более крупных пиков. Рентгеновские дифрактограммы кристаллических форм, полученные при температуре окружающей среды и относительной влажности, корректируют на основании стандартных пиков ΝΙ8Τ 675 при 8,85 и 26,77° 2-тета.

Подготовленный образец кристаллического соединения из примера 3 а характеризовался дифрактограммой рентгеновской порошковой дифракции, полученной с применением СиКа излучения, имеющей дифракционные пики (значения 2-тета), как описано в табл. 10. В частности, на дифрактограмме присутствовал пик при 14,3 в комбинации с одним или более пиков, выбранных из группы, состоящей из 15,7, 18,0, 18,7, 22,4 и 25,1 с допустимым отклонением для углов дифракции 0,2°.

Таблица 10

Пики рентгеновской порошковой дифракции из примера 3 а

Следующие соединения получены, по существу, по способу согласно примеру 3.

- 34 029220

Пример №	Название	Структура	Физические данные
4	2-(2,6-дихлорфенил)-1 -	ОН			МС (т/ζ):
	((18,ЗК)-5-(2-гидрокси-2-		ОН		436 (М+1)
	метилпропил)-3 -	гА		С1
	(гидроксиметил)-1 -метил-		Υνο	Λ
	3,4-дигидроизохинолин-		1 и	А
	2(1 Н)-ил)этан- 1-он
5	2-(2-хлор-6-фторфенил)-1 -	он			МС (т/ζ):
	((18,ЗК)-5-(2-гидрокси-2-		он		420,2
	метилпропил)-3 -			Р	(М+1)
	(гидроксиметил)-1 -метил-		Υα	А
	3,4-дигидроизохинолин-		т и	А
	2(1 Н)-ил)этан- 1-он
6	2-(6-хлор-2-фтор-3-	он			МС (т/ζ):
	метоксифенил)-1 -((18,ЗК)-5-		он		449,8
	(2-гидрокси-2-		г		(М+1).
	метилпропил)-3 -			ν°-
	(гидроксиметил)-1 -метил-		г	А
	3,4-дигидроизохинолин-
	2(1 Н)-ил)этан- 1-он

Пример 4а.

Получение сокристаллического 2-(2,6-дихлорфенил)-1-((18,3К)-5-(2-гидрокси-2-метилпропил)-3(гидроксиметил)-1-метил-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)этан-1-она и 4-гидроксибензойной кислоты.

Помещали 2-(2,6-дихлорфенил)-1-((18,3К)-5-(2-гидрокси-2-метилпропил)-3-(гидроксиметил)-1метил-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)этан-1-он (98,33 мг) и 4-гидроксибензойную кислоту (35,40 мг) в 20 мл флакон, оснащенный якорем магнитной мешалки. Флакон заполняли до краев водой (~20 мл) и суспендировали при 45°С (настройки магнитной мешалки с подогревом) в течение ночи. Образец суспендировали еще в течение 48 ч при 60°С без образования кристаллов. Добавляли ацетон (1 мл), и образец суспендировали в течение ночи при 40°С/1000 об/мин. Материал стал кристаллический. Полученное белое твердое вещество выделяли путем вакуумной фильтрации и сушили на месте под вакуумом и под потоком воздуха в течение 10 мин.

Рентгеновская порошковая дифракция.

Рентгеновские порошковые дифрактограммы (ХКО) твердых кристаллических веществ получали на рентгеновском порошковом дифрактометре Вгикег 04 Нндеахог, оснащенном СиКа источником (λ=1,54060 А) и детектором \'аи1е'с, работающем при 35 кВ и 50 мА. Образец сканировали от 4 до 40° в 2θ, с размером шага 0,009° в 2Θ и скоростью сканирования 0,5 с/шаг, и с 0,6 мм щелью расходимости,

5,28 мм фиксированной противорассеивающей щелью, и 9,5 мм приемной щелью. Сухой порошок помещали в кварцевый держатель образца и получали гладкую поверхность с помощью предметного стекла. Рентгеновские дифрактограммы кристаллических форм получали при температуре окружающей среды и относительной влажности. В области кристаллографии хорошо известно, что для любой данной кристаллической формы относительные интенсивности дифракционных пиков могут варьировать в зависимости от преимущественной ориентации из-за таких факторов, как морфология кристалла и габитус. Когда присутствуют эффекты предпочтительной ориентации, то изменяются интенсивности пиков, но остаются неизменными характерные положения пиков полиморфа. Кроме того, в области кристаллографии также хорошо известно, что для любой данной кристаллической формы угловые положения пиков могут слегка отличаться. Например, положения пиков могут смещаться из-за изменения температуры или влажности, при которых анализировали образец, смещения образца, или присутствия или в отсутствия внутреннего стандарта. В данном случае, варьирование положения пика 0,2 в 2θ будет учитывать эти потенциальные изменения, не препятствуя однозначной идентификации указанной кристаллической формы. Подтверждение кристаллической формы могут быть сделаны на основе любой уникальной комбинации различающихся пиков (в единицах° 2Θ), обычно более крупных пиков. (Фармакопея США # 35, Национальный формуляр #30, Глава <941>, страницы 427-432, 2012). Рентгеновские дифрактограммы

- 35 029220

кристаллических форм, полученные при температуре окружающей среды и относительной влажности, корректируют на основании стандартного эталонного материала 675 (слюда) Национального бюро стандартов (ΝΒ8) с пиками при 8,85 и 26,77° 2-тета.

Полученный образец сокристалла из примера 4а характеризовался дифрактограммой рентгеновской порошковой дифракции, полученной с применением СиКа излучения, имеющей дифракционные пики (значения 2-тета), как описано ниже в табл. 11, и, в частности, имеющей пики при 7,0 в комбинации с одним или более пиков, выбранных из группы, состоящей из 18,8, 16,1 и 19,3, с допустимым отклонением для углов дифракции 0,2°.

Таблица11

Пики рентгеновской порошковой дифракции из примера 4а

Пик	Угол (°2-тета)	Интенсивность (%)
1	7,0	100,0
2	13,6	52,5
3	15,1	68,4
4	16,1	91,9
5	18,8	96,0
6	19,3	81,0
7	19,9	65,3
8	21,6	68,8
9	24,5	76,4
10	25,5	48,9

Пример 7.

Синтез 2-(2-хлор-6-метокси-фенил)-1-[(18,3К)-3-(гидроксиметил)-5-(3-гидрокси-3-метил-бутил)-1метил-3,4-дигидро-1 Н-изохинолин-2-ил]этанона.

Растворяли 1-[(18,3К)-3-[[трет-бутил(диметил)силил]оксиметил]-5-(3-гидрокси-3-метил-бутил)-1метил-3,4-дигидро-1Н-изохинолин-2-ил]-2-(2-хлор-6-метокси-фенил)этанон (0,58 г, 1,04 ммоль) в ТГФ (5,3 мл). Добавляли уксусную кислоту (16 мл, 279 ммоль) и воде (5,3 мл). Перемешивали при 50°С в течение 1,5 ч. Концентрировали при пониженном давлении. Растворяли остаток в этилацетате и промывали насыщенным раствором бикарбоната натрия, водой, и солевым раствором. Сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали при помощи хроматографии на силикагеле путем элюирования ацетоном:гексаном (градиент 0-30%) с получением указанного в заголовке соединения в виде белой пены (0,34 г, 0,76 ммоль).

МС (т/ζ): 446,0 (М+1).

Следующее соединение получено, по существу, по способу согласно примеру 8.

- 36 029220

Пример №	Название	Структура	Физические данные
	2-(2-хлор-5 -метокси-фенил)-1 -	НО /
	[(18,ЗК)-3-(гидроксиметил)-5-(3-	1 ?н
	гидрокси-3 -метил-бутил)-1 -метил-		С1 X	МС (т/ζ):
8	00^	446,0
	3,4-дигидро-1Н-изохинолин-2-		V	(М+1).
	ил]этанон
	2-(6-хлор-2-фтор-3 -метокси-	но /
	фенил)-1-[(18,ЗК)-3-	1 ?н
	(гидроксиметил)-5-(3 -гидрокси-3 -	γΊΟ"'"	С1	МС (т/ζ):
9	метил-бутил)-1 -метил-3,4-	ΟΟγ'χ 0 с"	ф	463,8 (М+1).
	дигидро-1Н-изохинолин-2-	г	Ον
	ил]этанон

Пример 10.

Синтез 2-(2-хлорфенил)-1-[( 18,3К)-3-(гидроксиметил)-5-(3-гидрокси-3-метил-бутил)-1 -метил-3,4-

Растворяли 2-(2-хлорфенил)уксусную кислоту (96,8 мг, 0,56 ммоль) и О-(7-аза-1Н-бензотриазол-1ил)-ННХ,Х-тетраметилурония гексафторфосфат (200 мг, 0,52 ммоль) в дихлорметане (2 мл). Добавляли диизопропилэтиламин (183 мкл, 1,05 ммоль). Перемешивали при температуре окружающей среды в течение 20 мин. Добавляли данную реакционную смесь к раствору 4-[(18,3К)-3-(гидроксиметил)-1-метил1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-5-ил]-2-метил-бутан-2-ола (92 мг, 0,35 моль) в дихлорметане (0,4 мл). Ополаскивали дихлорметаном (1 мл) и перемешивали при температуре окружающей среды в течение 3,5 ч. Разбавляли реакционную смесь водой и перемешивали. Экстрагировали дихлорметаном и сушили экстракты над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали при помощи хроматографии на силикагеле путем элюирования смесью этилацетата:гексана (градиент 0-60%) с получением остатка. Остаток очищали при помощи хроматографии на силикагеле путем элюирования 10% (2н. аммиак в метаноле):дихлорметан с получением указанного в заголовке соединения в виде белой пены (78 мг, 0,19 ммоль).

МС (т/ζ): 416,2 (М+1).

Следующее соединение получено, по существу, по способу согласно примеру 10.

Пример №	Название	Структура	Физические данные
11	2-(2-хлор-6-фтор-фенил)-1 [(18, ЗК)-3 -(гидроксиметил)-5 -(3 гидрокси-3 -метил-бутил)-1 метил-3,4-дигидро-1Низохинолин-2-ил]этанон	но / Αχό	МС (ш/ζ): 434,2 (М+1).

- 37 029220

Пример 12.

Синтез 3-хлор-2-[2-[(18,3К)-3-(гидроксиметил)-5-(3-гидрокси-3-метил-бутил)-1-метил-3,4-дигидро1 Н-изохинолин-2-ил] -2-оксо-этил] бензонитрила.

Во флаконе суспендировали 2-(2-хлор-6-циано-фенил)уксусную кислоту (75,4 мг, 0,37 ммоль) в ацетонитриле (0,3 мл). Добавляли триэтиламин (114 мкл, 0,82 ммоль) и перемешивали до растворения твердых веществ. Добавляли О-(бензотриазол-1-ил)-К,Ы, Ν',Ν'-тетраметилурония тетрафторборат (165 мг, 0,51 ммоль) и перемешивали при температуре окружающей среды в течение 10 мин. В отдельной колбе суспендировали 4-[(18,3К)-3-(гидроксиметил)-1-метил-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-5-ил]-2метил-бутан-2-ол гидрохлорид (102 мг, 0,34 моль) в ацетонитриле (0,3 мл). Добавляли триэтиламин (227 мкл, 1,63 ммоль) и образовывался осадок. Перемешивали в течение 10 мин при температуре окружающей среды. Переносили реакционную смесь 2-(2-хлор-6-циано-фенил)уксусной кислоты, ацетонитрила, триэтиламина, и О-(бензотриазол-1-ил)ХХХ, Ν'-тетраметилурония тетрафторбората из флакона в колбу, содержащую реакционную смесь 4-[(18,3К)-3-(гидроксиметил)-1-метил-1,2,3,4тетрагидроизохинолин-5-ил]-2-метил-бутан-2-ола гидрохлорида, ацетонитрила и триэтиламина. Ополаскивали ацетонитрилом (0,9 мл) и перемешивали однородную реакционную смесь при температуре окружающей среды в течение ночи. Разбавляли реакционную смесь водой и экстрагировали этилацетатом. Промывали этилацетатные экстракты водой, насыщенным раствором бикарбоната натрия и солевым раствором. Сушили экстракты над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали при помощи хроматографии на силикагеле путем элюирования смесью этилацетата:гексана (градиент 0-60%) с получением остатка. Очищали при помощи обращенно-фазовой хроматографии на силикагеле, модифицированном С18, с получением указанного в заголовке соединения в виде зеленого масла (34 мг, 0,08 ммоль).

МС (т/ζ): 441,2 (М+1).

Получение 46.

Синтез 2-(2-хлор-6-метил-фенил)уксусной кислоты.

С1

В 100 мл флакон завинчивающейся крышкой добавляли 2-(2-хлор-6-метил-фенил)ацетонитрил (8,0 г, 48,30 ммоль) и 3н. водный раствор гидроксида натрия (80 мл, 240,00 ммоль). Нагревали смесь при 110°С в течение 18 ч. Охлаждали смесь до 10°С и подкисляли до рН 1 при помощи хлористо-водородной кислоты (15 мл). Смесь экстрагировали этилацетатом. Разделяли и сушили органическую фазу над сульфатом натрия. Фильтровали и концентрировали досуха. Кристаллизовали из диэтилового эфира с получением указанного в заголовке соединения в виде грязно-белого твердого вещества (7,20 г, 39,00 ммоль).

МС (т/ζ): 184,8 (М+1).

Получение 47.

Синтез трет-бутил-2-(2-хлор-5-изопропил-фенил)ацетата.

Добавляли бис-(дибензилиденацетон)палладий (49,2 мг, 85,6 мкмоль) в круглодонную колбу и герметично закрывали пробкой. Продували азотом. При помощи шприца добавляли три-трет-бутилфосфин (85,6 мкл, 85,6 мкмоль, 1 М в толуоле) и лития бис-(триметилсилил)амид (12,8 мл, 11,56 ммоль, 0,9 М в метилциклогексане). При помощи шприца добавляли 2-бром-1-хлор-4-изопропилбензол (1,0 г,

4,28 ммоль) и трет-бутилацетат (865,2 мкл, 6,42 ммоль). При помощи шприца добавляли толуол (10,7 мл) и реакционная смесь становилась горячей на ощупь. Помещали в водяную баню с температурой окружающей среды и перемешивали в течение 3 ч. Хранили реакционную смесь в холодильнике в течение выходных дней. Реакционную смесь нагревали до температуры окружающей среды. Разбавляли реакционную смесь диэтиловым эфиром и добавляли насыщенный раствор хлорида аммония. Слои разделяли и промывали слой диэтилового эфира насыщенным раствором хлорида натрия. Сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали при помощи хроматографии на силикагеле путем элюирования ацетоном:гексаном (градиент 0-2%) с получением указан- 38 029220

ного в заголовке соединения (1,04 г). Снова очищали при помощи хроматографии на силикагеле путем элюирования дихлорметаном:гексаном (градиент 0-20%) с получением указанного в заголовке соединения (490 мг, 1,82 ммоль).

МС (т/ζ): 213,0 (М-1Ви+1).

Следующее соединение получено, по существу, по способу получения 47.

Получ. №	Название	Структура	Физические данные
48	трет-бутил-2-(2-хлор-5-этилфенил )ацетат	С1	МС (т/ζ): 198,8 (М®и+1).

Получение 49.

Синтез 2-(2-хлор-5-изопропил-фенил)уксусной кислоты.

Растворяли трет-бутил-2-(2-хлор-5-изопропил-фенил)ацетат (483 мг, 1,80 ммоль) в дихлорметане (5,1 мл). Добавляли трифторуксусную кислоту (1,09 мл, 14,4 ммоль) медленно и перемешивали реакционную смесь в течение 3 ч при температуре окружающей среды. Концентрировали при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения (380 мг, 1,79 ммоль).

МС (т/ζ): 229,8 (М+18).

Следующее соединение получено, по существу, по способу получения 49.

Получ. №	Название	Структура	Физические данные
50	2-(2-хлор-5-этил-фенил)уксусная кислота		МС (ш/ζ): 215,8 (М+18)

Получение 51.

Синтез изопропил 2-(3-изопропоксифенил)ацетата.

Растворяли 2-(3-гидроксифенил)уксусную кислоту (5,04 г, 32,8 ммоль) в диметилформамиде (49,9 мл). Добавляли карбонат калия (15,1 г, 108,2 ммоль) и 2-иодпропан (15,1 мл, 150,8 ммоль). Нагревали реакционную смесь до 80°С в течение 6 ч. Перемешивали при температуре окружающей среды в течение 64 ч. Нагревали реакционную смесь до 95°С в течение 6 ч. Добавляли дополнительный карбонат калия (9,2 г, 65,6 ммоль) и 2-иодпропан (15,1 мл, 150,8 ммоль) и нагревали реакционную смесь до 90°С в течение ночи. Повышали температуру реакционной смеси до 150°С и нагревали в течение ночи. Охлаждали до температуры окружающей среды и концентрировали при пониженном давлении. Разбавляли остаток водой и этилацетатом. Слои разделяли и экстрагировали водный слой этилацетатом. Этилацетатные экстракты объединяли и промывали водой и солевым раствором, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали при помощи хроматографии на силикагеле путем элюирования ацетоном:гексаном (градиент 0-20%) с получением указанного в заголовке соединения (4,79 г, 20,27 ммоль).

МС (т/ζ): 237,0 (М+Н), 254,0 (М+18).

Следующее соединение получено, по существу, по способу получения 51.

- 39 029220

Получ. №	Название	Структура	Физические данные
52	Этил 2-(2-хлор-5-этоксифенил)ацетат	Ϊ1 у у ”Ί	МС (ш/ζ): 243,0 (М+1) 260,0 (М+18).

Получение 53.

Синтез 2-(3-изопропоксифенил)уксусной кислоты.

Растворяли изопропил 2-(3-изопропоксифенил)ацетат (4,2 г, 17,8 ммоль) в тетрагидрофуране (35,6 мл). Добавляли воду (35,6 мл) и гидроксид лития (6,05 г, 248,8 ммоль). Нагревали реакционную смесь до 66°С в течение ночи. Концентрировали при пониженном давлении для удаления тетрагидрофурана. Разбавляли реакционную смесь водой и промывали диэтиловым эфиром. Подкисляли водный слой 5н. НС1 до рН 1. Экстрагировали водный слой диэтиловым эфиром. Промывали диэтиловый экстракт водой и солевым раствором, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения (3,37 г, 17,35 ммоль).

МС (т/ζ): 195,0 (М+1), 212,0 (М+18).

Следующее соединение получено, по существу, по способу получения 53.

Получ. №	Химическое название	Структура	Физические данные
54	2-(2-хлор-5-этокси-фенил)уксусную кислоту	_уэ—о о I	МС (ш/ζ): 232,0 (М+18).

Получение 55.

Синтез 2-(2-хлор-5-изопропокси-фенил)уксусной кислоты.

Растворяли 2-(3-изопропоксифенил)уксусную кислоту (3,24 г, 16,6 ммоль) в диметилформамиде (11,1 мл). Охлаждали на ледяной бане и добавляли раствор Ν-хлорсукцинимида (2,44 г, 18,3 ммоль) в диметилформамиде (12,2 мл). Перемешивали в течение ночи, позволяя реакционной смеси достигнуть температуры окружающей среды. Разбавляли реакционную смесь диэтиловым эфиром. Промывали водой. Водный экстракт промывали диэтиловым эфиром. Объединяли диэтиловые экстракты и промывали водой и солевым раствором, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали при помощи хроматографии на силикагеле путем элюирования ацетоном:гексаном (градиент 0-25%) с получением указанного в заголовке соединения (3,08 г, 13,47 ммоль).

МС (т/ζ): 245,8 (М+18).

Следующее соединение получено, по существу, по способу получения 55.

- 40 029220

Получ. №	Название	Структура	Физические данные
56	2-(2-хлор-5-гидроксифенил)уксусная кислота	А+ он	МС (т/ζ): 203,8 (М+18).

Получение 57.

Синтез метил-2-(2-хлор-6-циано-фенил)уксусной кислоты.

С1

В тетрагидрофуран (1 л) добавляли 2 М раствор диизопропиламида лития в тетрагидрофуране (62,6 мл, 461,8 ммоль) при -78°С. Медленно добавляли 1,3-диметил-3,4,5,6-тетрагидро-2(1Н)пиримидинон (19,94 мл, 164,91 ммоль) с последующим добавлением по каплям 3-хлор-2-метилбензонитрила (20 г, 131,93 ммоль). Поддерживали температуру смеси при -78°С при перемешивании в течение 5 мин. Продували реакционный сосуд диоксидом углерода (1 л; 25,65 моль) в течение 15 мин. Добавляли воду (100 мл) и перемешивали в течение 2 ч. Добавляли 10 М водный раствор гидроксида натрия для увеличения рН водной фазы до >12. Отделяли водный слой и промывали диэтиловым эфиром. Подкисляли водный слой концентрированной хлористо-водородной кислотой до рН-1 и экстрагировали этилацетатом. Отделяли органическую фазу и сушили над сульфатом натрия. Фильтровали и концентрировали досуха с получением указанного в заголовке соединения в виде грязно-белого твердого вещества (16,0 г; 81,80 ммоль).

МС (т/ζ): 195,9 (М+1).

Получение 58.

Синтез метил-(18,3К)-3-[[трет-бутил(диметил)силил]оксиметил]-1 -метил-1,2,3,4тетрагидроизохинолин-5-карбоксилата.

В стеклянном сосуде высокого давления, содержащем якорь магнитной мешалки, суспендировали (18,3К)-5-бром-3-((трет-бутилдиметилсилилокси)метил)-1-метил-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин (30 г, 81,0 ммоль), ацетат палладия (1,8 г, 8,1 ммоль), бис-(1,3-дифенилфосфино)пропан (6,7 г, 16,2 ммоль) и карбонат натрия (34,3 г, 324,0 ммоль) в смеси диметилсульфоксида (360 мл) и метанола (180 мл). Заполняли сосуд монооксидом углерода (410 кПа) и нагревали до 100°С при перемешивании. Поддерживали температуру 100°С в течение 19 ч. Позволяли смеси охладиться до температуры окружающей среды. Фильтровали полученную суспензию и разбавляли фильтрат метил-трет-бутиловым эфиром (1000 мл). Промывали раствор солевым раствором (3x500 мл). Сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения в виде темнооранжевого масла (26,7 г, 76,4 ммоль).

МС (т/ζ): 350,0 (м+1).

Получение 59.

Синтез метил-(18,3К)-3-[[трет-бутил(диметил)силил]оксиметил]-2-[2-(6-хлор-2-фтор-3-метоксифенил)ацетил]-1 -метил-3,4-дигидро-1 Н-изохинолин-5-карбоксилата.

К перемешиваемому раствору метил-(18,3К)-3-[[трет-бутил(диметил)силил]оксиметил]-1-метил1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-5-карбоксилата (500 мг, 1,29 ммоль), (бензотриазол-1илокси)трипирролидинофосфония гексафторофосфата (1,02 г, 1,93 ммоль) и 2-(6-хлор-2-фтор-3-метоксифенил)уксусной кислоты (356 мг, 1,54 ммоль) в диметилформамиде (6,4 мл) добавляли триэтиламин

- 41 029220

(0,36 мл, 2,57 ммоль). Перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Добавляли насыщенный водный раствор хлорида аммония (60 мл). Экстрагировали этилацетатом (3x50 мл). Промывали объединенные органические слои солевым раствором. Сушили над сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Очищали при помощи флэш-хроматографии с получением указанного в заголовке соединения в виде аморфного желтого твердого вещества (703 мг, 1,15 ммоль).

МС (т/ζ): 550,0 (М+1).

Следующие соединения получены, по существу, по способу получения 59.

Получ. №	Название	Структура	Физические данные
60	метил-(18,ЗК)-3-[[третбутил (д иметил)сил ил ] оксимет ил]-2-[2-(2-хлор-6-фтор-3метил-фенил)ацетил]-1 -метил3,4-дигидро-1Н-изохинолин-5 карбоксилат	1 °С|Ху	МС (ш/ζ): 534,0 (М+1).
61	метил-(18,ЗК)-3-[[третбутил (д иметил)сил ил ] оксимет ил] -2- [2-(2-хлор-6-метилфенил)ацетил] -1 -метил-3,4дигидро- 1 Н-изохинолин-5 карбоксилат	\ / о. с> Αί / т ° 7 Αά	МС (ш/ζ): 516,0 (М+1).

- 42 029220

62	метил-(18,ЗК)-3-[[третбутил (диметил)силил] оксимет ил]-2-[2-(2-хлор-5-метилфенил)ацетил] -1 -метил-3,4дигидро- 1 Н-изохинолин-5 карбоксилат	°γ°- (γ	МС (т/ζ): 516,0 (Μ+1).
63	метил-(18,ЗК)-3-[[третбутил (диметил)силил] оксимет ил]-2-[2-(2-хлор-6-фторфенил)ацетил] -1 -метил-3,4дигидро- 1 Н-изохинолин-5 карбоксилат	°γ°- (У Ауб	МС (т/ζ): 520,2 (Μ+1).
64	метил-(18,ЗК)-3-[[третбутил (диметил)силил] оксимет ил]-2-[2-(2-хлор-5-метоксифенил)ацетил] -1 -метил-3,4дигидро- 1 Н-изохинолин-5 карбоксилат	Υ" ι'Υ Υγ У	МС (т/ζ): 532,2 (Μ+1).
65	метил-(18,ЗК)-3-[[третбутил (диметил)силил] оксимет ил]-2-[2-(2-хлор-6-метоксифенил)ацетил] -1 -метил-3,4дигидро- 1 Н-изохинолин-5 карбоксилат	Ύ°" ι'Υ Αχό	МС (т/ζ): 532,1 (Μ+1).
66	метил-(18,ЗК)-3-[[третбутил (диметил)силил] оксимет ил]-2-[2-(2-хлор-5-изопропилфенил)ацетил] -1 -метил-3,4дигидро- 1 Н-изохинолин-5 карбоксилат	°ϊ°" ι'Υ Υγ	МС (т/ζ): 544,0 (Μ+1).

- 43 029220

67	метил-(18,ЗК)-3-[[третбутил (диметил)силил] оксимет ил]-2-[2-(2-хлор-5-этоксифенил)ацетил] -1 -метил-3,4дигидро- 1 Н-изохинолин-5 карбоксилат	°т°" Хф φ-φ “Ί	МС (т/ζ): 545,8 (М+1)
68	метил-(18,ЗК)-3-[[третбутил (диметил)силил] оксимет ил] -2- [2-(2-хлор-5 -этилфенил)ацетил] -1 -метил-3,4дигидро- 1 Н-изохинолин-5 карбоксилат	СО < о— 2= ° ЙГ	МС (т/ζ): 529,9 (М+1)
69	метил-(18,ЗК)-3-[[третбутил (диметил)силил] оксимет ил]-2-[2-(2-хлор-6-цианофенил)ацетил] -1 -метил-3,4дигидро- 1 Н-изохинолин-5 карбоксилат	х- а Фр,	МС (т/ζ): 527,0 (М+1).
70	метил-(18,ЗК)-3-[[третбутил (диметил)силил] оксимет ил]-2-[2-(6-хлор-2-фтор-3метил-фенил)ацетил]-1 -метил3,4-дигидро-1 Н-изохинолин-5 карбоксилат	°γ°- °-3Х 1	МС (т/ζ): 534,0 (М+1).
71	метил-(18,ЗК)-3-[[третбутил (диметил)силил] оксимет ил]-2-[2-(2хлорфенил)ацетил]-1 -метил3,4-дигидро-1 Н-изохинолин-5 карбоксилат	°γ°- XX Ф'Ф	МС (т/ζ): 502,0 (М+1).

- 44 029220

72	метил-(18,ЗК)-2-[2-(2бромфенил)ацетил]-3-[[третбутил (диметил)силил] оксимет ил] -1 -метил-3,4-д игидро-1Низохинолин-5-карбоксилат	та т© та©	МС (т/ζ): 545,8, 547,8 (М+1)
73	метил-(18,ЗК)-3-[[третбутил (диметил)силил] оксимет ил]-2-[2-(2-хлор-5-фторфенил)ацетил] -1 -метил-3,4дигидро- 1 Н-изохинолин-5 карбоксилат	та ?'Υ та© Р	МС (т/ζ): 520,0 (М+1).
74	метил-(18,ЗК)-3-[[третбутил (диметил)силил] оксимет ил]-2-[2-(2,5дихлорфенил)ацетил]-1 -метил3,4-дигидро-1 Н-изохинолин-5 карбоксилат	та °'Υ та© С1	МС (т/ζ): 536,0 (М+1).
75	метил-(18,ЗК)-3-[[третбутил (диметил)силил] оксимет ил]-2-[2-(2-хлор-5изопропокси-фенил)ацетил]-1 метил-3,4-дигидро-1Низохинолин-5-карбоксилат	та ι'Υ та© Υ	МС (т/ζ): 560,2 (М+1).
76	метил-(18,ЗК)-3-[[третбутил (диметил)силил] оксимет ил]-2-[2-(2,6-дифтор-3-метилфенил)ацетил] -1 -метил-3,4дигидро- 1 Н-изохинолин-5 карбоксилат	XX 1 °ρ/γ	МС (т/ζ): 518,0 (М+1).
77	метил-(18,ЗК)-3-[[третбутил (диметил)силил] оксимет ил]-2-[2-(2,6дифторфенил)ацетил] -1 метил-3,4-дигидро-1Низохинолин-5-карбоксилат	х© ©та	МС (т/ζ): 504,0 (М+1).
78	метил-(18,ЗК)-3-[[третбутил (диметил)силил] оксимет ил]-2-[2-(2-хлор-6-фтор-3метокси-фенил)ацетил]-1 метил-3,4-дигидро-1Низохинолин-5-карбоксилат	XX 1 °с,та©	МС (т/ζ): 550,0 (М+1).

- 45 029220

Пример 13.

Синтез 2-(6-хлор-2-фтор-3-метокси-фенил)-1-[( 18,3К)-3-(гидроксиметил)-5-(1 -гидрокси-1 -метилэтил)-1-метил-3,4-дигидро-1Н-изохинолин-2-ил]этанона.

он

°-А

К перемешиваемому раствору метил-(18,3К)-3-[[трет-бутил(диметил)силил]оксиметил]-2-[2-(6хлор-2-фтор-3-метоксифенил)ацетил]-1-метил-3,4-дигидро-Ш-изохинолин-5-карбоксилата (703 мг, 1,15 ммоль) в тетрагидрофуране (5 мл) добавляли 0,6 М раствор комплекса лантана(Ш) хлорида бис-(лития хлорида) в тетрагидрофуране (1,92 мл, 1,15 ммоль). Перемешивали при комнатной температуре в течение 40 мин. По каплям добавляли 3 М раствор метилмагнийбромида в диэтиловом эфире (3,50 эквив.; 4,03 ммоль; 1,34 мл; 1,39 г). Перемешивали реакционную смесь в течение 1,5 ч. Гасили солевым раствором (25 мл). После прекращения выделения газа, экстрагировали этилацетатом (3x25 мл). Промывали объединенные органические слои солевым раствором. Сушили над сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Растворяли остаток в тетрагидрофуране (10 мл) и добавляли фторид тетрабутиламмония, тригидрат (492 мг, 1,73 ммоль). Перемешивали в течение 2 ч при комнатной температуре. Концентрировали при пониженном давлении. Промывали остаток этилацетатом (50 мл) через небольшой флэш-слой силикагеля (§Ьог1 йа§Ь §Шса раб) (15 г). Концентрировали при пониженном давлении. Очищали при помощи обращенно-фазовой хроматографии на силикагеле, модифицированном С18, с получением указанного в заголовке соединения виде белого твердого вещества (349 мг, 0,76 ммоль).

МС (т/ζ): 436,0 (М+1).

Следующие соединения получены, по существу, по способу согласно примеру 13.

Пример №	Название	Структура	Физические данные
	2-(2-хлор-6-фтор-3-метил-фенил)-	ОН	он
	1-[(13,ЗК)-3-(гидроксиметил)-5-	X
14	(1 -гидрокси-1 -метил-этил)-1 -	о		г	МС (т/ζ):
ту	χΧ	420,2 (М+1).
	метил-3,4-дигидро-1Н-	I А
		<4	ЧХ
	изохинолин-2-ил]этанон		С1
	2-(2-хлор-6-метил-фенил)-1 [(1 δ, ЗК)-3 -(гидроксиметил)-5 -(1 -	он т	он
15	гидрокси-1 -метил-этил)-1 -метил-	X	Ш'"1	С1	МС (т/ζ):
и		А	402,0 (М+1).
	3,4-дигидро-1Н-ИЗОХИНОЛИН-2-
	ил]этанон		1 0 X	XX
	2-(2-хлор-5-метил-фенил)-1[(1 δ, ЗК)-3 -(гидроксиметил)-5 -(1 -	он X	ОН Ж
16	гидрокси-1 -метил-этил)-1 -метил-	о	ш-	С1 1	МС (т/ζ):
	хХ	402,0 (М+1).
	3,4-дигидро-1Н-ИЗОХИНОЛИН-2ил]этанон		ϊ 5	V

- 46 029220

17	2-(2-хлор-6-фтор-фенил)-1 [(18, ЗК)-3 -(гидроксиметил)-5 -(1 гидрокси-1 -метил-этил)-1 -метил3,4-дигидро-1 Н-изохинолин-2ил]этанон	он	МС (т/ζ): 406,0 (М+1).
&	он 1
у	С1 ό
	2-(2-хлор-5 -метокси-фенил)-1 -	он	О н
	[(18, ЗК)-3 -(гидроксиметил)-5 -(1 -	X		С1 X
18	гидрокси-1 -метил-этил)-1 -метил3,4-дигидро-1Н-изохинолин-2-		τΎ	МС (т/ζ): 418,0 (М+1).
	ил]этанон			X
	2-(2-хлор-6-метокси-фенил)-1 [(18, ЗК)-3 -(гидроксиметил)-5 -(1 -	он X	ОН
19	гидрокси-1 -метил-этил)-1 -метил3,4-дигидро-1Н-изохинолин-2-	а	X··'" гХ	С1 X	МС (т/ζ): 418,0 (М+1).
	ил]этанон		О
	2-(2-хлор-5-изопропил-фенил)-1 -	он	он
	[(18, ЗК)-3 -(гидроксиметил)-5 -(1 -	X	X-""'	X
20	гидрокси-1 -метил-этил)-1 -метил3,4-дигидро-1 Н-изохинолин-2ил]этанон	Ос	гУ	МС (т/ζ): 430,0 (М+1).
X

- 47 029220

21	2-(2-хлор-5-этокси-фенил)-1 [(1 δ, ЗК)-3 -(гидроксиметил)-5 -(1 гидрокси-1 -метил-этил)-1 -метил3,4-дигидро-1 Н-изохинолин-2ил]этанон	ОН	С1 ф °Ί	МС (ш/ζ): 432,2 (М+1).
&	он г"у
	2-(2-хлор-5-этил-фенил)-1 -	он	О н
	[(18, ЗК)-3 -(гидроксиметил)-5 -(1 -	X	•\.О
22	гидрокси-1 -метил-этил)-1 -метил-	ОС			МС (ш/ζ):
			г х^	Хи	416,0 (М+1).
	3,4-дигидро-1Н-изохинолин-2-		1 о	оу
	ил]этанон
	3-хлор-2-[2-[(18,ЗК)-3-	он
	(гидроксиметил)-5-( 1 -гидрокси-1 -	У	он
23	метил-этил)-1 -метил-3,4-дигидро-	ГТ	V'1	С1	МС (ш/ζ):
					413,0 (М+1).
	1Н-изохинолин-2-ил]-2-оксо-		г х
			* °
	этил] бензонитрил		νΧ
	2-(6-хлор-2-фтор-3-метил-фенил)-	он
	1 - [(18, ЗК)-3 -(гидроксиметил)-5 -	X	О н
24	(1 -гидрокси-1 -метил-этил)-1 -	ГТ	у-'"	С1	МС (ш/ζ):
		чхч		Хп	420,0 (М+1).
	метил-3,4-дигидр о- 1Н-		1 д
			1 О х	-ЧХ
	изохинолин-2-ил]этанон		г

- 48 029220

25	2-(2-хлорфенил)-1-[(18,ЗК)-3(гидроксиметил)-5 -(1 -гидрокси-1 метил-этил)-1 -метил-3,4-дигидро1 Н-изохинолин-2-ил]этанон	ОН Ф	пи	МС (т/ζ): 388,0 (М+1).
Υ'""1	С1 6
	2-(2-бромфенил)-1 -[(18,ЗК)-3 -	он	он
26	(гидроксиметил)-5 -(1 -гидрокси-1 метил-этил)-1 -метил-3,4-дигидро1 Н-изохинолин-2-ил]этанон	$	Υ-"'1 τΆ	Вг 6	МС (т/ζ): 431,8, 433,8 (М+1).
27	2-(2-хлор-5-фтор-фенил)-1 [(18, ЗК)-3 -(гидроксиметил)-5 -(1 гидрокси-1 -метил-этил)-1 -метил3,4-дигидро-1 Н-изохинолин-2ил]этанон	он Υ	ОН т"у	С1 ф Р	МС (т/ζ): 406,0 (М+1).
	2-(2,5-дихлорфенил)-1-[(18,ЗК)-3-	он т	он
28	(гидроксиметил)-5 -(1 -гидрокси-1 метил-этил)-1 -метил-3,4-дигидро-	о	Υ·""1	С1 ή	МС (т/ζ): 422,0 (М+1).
	1 Н-изохинолин-2-ил]этанон		ί О
				С1
	2-(2-хлор-5-изопропокси-фенил)-	он
	1 - [(13, ЗК)-3 -(гидроксиметил)-5 -	А	он X·’*'' С1
29	(1 -гидрокси-1 -метил-этил)-1 метил-3,4-дигидро-1Низохинолин-2-ил]этанон	А	•игф Υ		МС (т/ζ): 445,8 (М+1).

- 49 029220

30	2-(2,6-дифтор-3-метил-фенил)-1 [(18, ЗК)-3 -(гидроксиметил)-5 -(1 гидрокси-1 - метил-этил)-1 -метил3,4-дигидро-1 Н-изохино лин-2ил]этанон	ОН 5	он Аа ° Г	Р Ап аа	МС (т/ζ): 404,0 (М+1).
	2-(2,6-дифторфенил)-1 -[(13, ЗК)-3 -	он А	ОН
31	(гидроксиметил)-5 -(1 -гидрокси-1 метил-этил)-1 -метил-3,4-дигидро-	δ:	А	Ρ А	МС (т/ζ): 390,2 (М+1).
	1 Н-изохино лин-2-ил]этанон		г О	О
	2-(2-хлор-6-фтор-3 -метокси-	он	о н
	фенил)-1 -[(13, ЗК)-3 -		А··'"'	г
32	(гидроксиметил)-5 -(1 -гидрокси-1 метил-этил)-1 -метил-3,4-дигидро1 Н-изохино лин-2-ил]этанон	ОС	г"+ С1	АА А	МС (т/ζ): 436,2 (М+1).

Claims (21)

1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

   1. Соединение формулы

   где η представляет собой 0, 1 или 2;

   К¹ представляет собой галоген;

   К² представляет собой галоген, Н, СИ, С1-С3-алкокси или С1-С3-алкил; К³ представляет собой Н, галоген, С1-С₃-алкокси или С₁-С₃-алкил.
2. 2. Соединение по п.1 формулы

   К¹ представляет собой галоген;

   К² представляет собой галоген, Н, СИ, С1-С3-алкокси или С1-С3-алкил; К³ представляет собой Н, галоген, С1-С₃-алкокси или С₁-С₃-алкил.
3. 3. Соединение по п.1 или 2, отличающееся тем, что

   η представляет собой 0, 1 или 2;

   К¹ представляет собой галоген;

   К² представляет собой галоген;

   К³ представляет собой водород или С₁-С₃-алкокси.
4. 4. Соединение по п.1 или 2, отличающееся тем, что

   η представляет собой 0, 1 или 2;

   - 50 029220

   К¹ представляет собой С1, Р или Вг;

   К² представляет собой С1, ОСН₃, Н, Р, СN или СН₃;

   К³ представляет собой ОСН₃, Н, СН₂СН₃, С1, ОСН(СН₃)₂, ОСН₂СН₃, Р, СН(СН₃)₂ или СН₃.
5. 5. Соединение по любому из пп.1, 2 или 3, отличающееся тем, что η представляет собой 0 или 2;

   К¹ представляет собой С1,

   К² представляет собой С1 или Р;

   К³ представляет собой Н или ОСН₃.
6. 6. Соединение по п.1, которое представляет собой 2-(2,6-дихлорфенил)-1-[(18,3К)-3(гидроксиметил)-5 -(3 -гидрокси-3 -метилбутил)-1 -метил-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил]этанон.
7. 7. Фармацевтическая композиция для лечения состояний, связанных с допаминовым рецептором 1 (Ό1), содержащая 2-(2,6-дихлорфенил)-1-[(18,3К)-3-(гидроксиметил)-5-(3-гидрокси-3-метилбутил)-1метил-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил]этанон и 4-гидроксибензойную кислоту.
8. 8. Сокристаллическая форма композиции по п.7.
9. 9. Сокристаллическая форма композиции по п.8, характеризующаяся дифрактограммой рентгеновской порошковой дифракции, полученной с применением СиКа излучения, имеющей дифракционный пик при угле дифракции 2-тета, составляющем 18,2°, в комбинации с одним или более пиков, выбранных из группы, состоящей из 16,0, 25,4 и 7,0°; с допустимым отклонением для углов дифракции 0,2°.
10. 10. Фармацевтическая композиция, имеющая активность положительного аллостерического модулятора допаминового рецептора 1 (Ό1), содержащая 2-(2,6-дихлорфенил)-1-[(18,3К)-3-(гидроксиметил)5-(3-гидрокси-3 -метилбутил)-1 -метил-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил]этанон и 4-гидроксибензойную кислоту и фармацевтически приемлемый носитель, разбавитель или вспомогательное вещество.
11. 11. Фармацевтическая композиция, имеющая активность положительного аллостерического модулятора допаминового рецептора 1 (Ό1), содержащая соединение по любому из пп.1-6 и фармацевтически приемлемый носитель, разбавитель или вспомогательное вещество.
12. 12. Способ лечения болезни Паркинсона, включающий введение пациенту, нуждающемуся в этом, эффективного количества соединения по любому из пп.1-6.
13. 13. Способ лечения шизофрении, включающий введение пациенту, нуждающемуся в этом, эффективного количества соединения по любому из пп.1-6.
14. 14. Применение соединения по любому из пп.1-6 в терапии состояний, связанных с допаминовым рецептором 1 (Ό1).
15. 15. Применение соединения по любому из пп.1-6 для лечения болезни Паркинсона.
16. 16. Применение соединения по любому из пп.1-6 для лечения шизофрении.
17. 17. Соединение по п.1, представляющее собой 2-(2,6-дихлорфенил)-1-((18,3К)-5-(2-гидрокси-2метилпропил)-3 -(гидроксиметил)-1 -метил-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)этан-1 -он.
18. 18. Фармацевтическая композиция для лечения состояний, связанных с допаминовым рецептором 1 (Ό1), содержащая 2-(2,6-дихлорфенил)-1-((18,3К)-5-(2-гидрокси-2-метилпропил)-3-(гидроксиметил)-1метил-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)этан-1-он и 4-гидроксибензойную кислоту.
19. 19. Сокристаллическая форма композиции по п.18, характеризующаяся дифрактограммой рентгеновской порошковой дифракции, полученной с применением СиКа излучения, имеющей дифракционный пик при угле дифракции 2-тета, составляющем 7,0° в комбинации с одним или более пиков, выбранных из группы, состоящей из 18.8, 16.1 и 19.3°; с допустимым отклонением для углов дифракции 0,2°.
20. 20. Фармацевтическая композиция, имеющая активность положительного аллостерического модулятора допаминового рецептора 1 (Ό1), содержащая соединение по п.17 и фармацевтически приемлемый носитель, разбавитель или вспомогательное вещество.
21. 21. Фармацевтическая композиция, имеющая активность положительного аллостерического модулятора допаминового рецептора 1 (Ό1), содержащая 2-(2,6-дихлорфенил)-1-((18,3К)-5-(2-гидрокси-2метилпропил)-3 -(гидроксиметил)-1 -метил-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)этан-1 -он и 4-гидроксибензойную кислоту и фармацевтически приемлемый носитель, разбавитель или вспомогательное вещество.

    4^^