BR112015029090B1 - 3,4-dihidroisoquinolin-2(1h)-ila, seus usos, composição farmacêuticas e sua forma cocristalina - Google Patents

Abstract

3,4-DI-HIDROISOQUINOLIN-2(1H)-ILA, SEUS USOS, COMPOSIÇÕES FARMACÊUTICAS E SUA FORMA COCRISTALINA. A presente invenção refere-se a alguns compostos de 3,4-di-hidroisoquinolin-2(1H)-ila, particularmente compostos de fórmula I, e composições farmacêuticas dos mesmos. A invenção adicionalmente proporciona métodos de uso de um composto de fórmula I para tratar transtorno cognitivo associado com doença de Parkinson ou esquizofrenia. I

Description

[001] A invenção proporciona alguns compostos de 3,4-di- hidroisoquinolin-2(1H)-ila, composições farmacêuticas dos mesmos, métodos de uso das mesmas, e processos para preparação das mesmas.

[002] A doença de Parkinson é um transtorno neurodegenerativo crônico e progressivo, caracterizado pela perda de neurônios dopaminérgicos no cérebro. A doença de Parkinson se manifesta em tremor em repouso junto com outros sintomas motores (por exemplo, acinesia e bradicinesia) e sintomas não-motores (por exemplo, transtorno cognitivo, transtornos do sono, e depressão). A terapia atual para o tratamento da doença de Parkinson inclui precursores de dopamina tais como levodopa, e agonistas de dopamina como pramipexol. As terapias de dopamina de ação direta referidas são limitadas em eficácia devido em parte a disfunção da cognição associada a alta dose, risco de derrame (conforme mostrado em roedores para alguns agonistas de D1), e desenvolvimento de tolerância. Existe uma significativa necessidade não satisfeita de tratamento seguro e eficaz da doença de Parkinson.

[003] Moduladores alostéricos são agentes que alteram remotamente as interações de ligantes com seus receptores modificando o ambiente de ligação de ligante. Um exemplo deste tipo de modulação é quando a ligação de um modulador a um sítio alostérico (secundário) produz uma alteração estrutural na proteína receptora que é transmitida para o sítio de ligação ortostérica (primário) de ligante. A qualidade do efeito alostérico é considerada positiva se o modulador facilitar ou potencializar uma interação ou negativa se inibir uma interação do ligante com o sítio de ligação ortostérica.

[004] Os compostos da presente invenção são moduladores alostéricos positivos (PAMs) do receptor de dopamina 1 (D1). Enquanto tais, os compostos da presente invenção são úteis para o tratamento de condições nas quais D1 desempenha um papel tais como doença de Parkinson e esquizofrenia, incluindo o alívio de sintomas associados tais como transtorno cognitivo branco na doença de Parkinson bem como transtorno cognitivo e sintomas negativos na esquizofrenia. Acredita-se que os compostos da presente invenção também sejam úteis no tratamento de sintomas da doença de Alzheimer tais como transtorno cognitivo. Os compostos da presente invenção também são úteis para a melhora de sintomas motores na doença de Parkinson como uma monoterapia. Do mesmo modo, acredita-se que os compostos da presente invenção sejam úteis no tratamento de depressão e transtorno de déficit de atenção e hiperatividade (ADHD).

[005] A presente invenção proporciona alguns novos compostos que são PAMs do receptor D1 e, como tais, são úteis no tratamento dos transtornos discutidos acima. Os novos compostos da presente invenção podem proporcionar um tratamento alternativo para os transtornos referidos. A presente invenção adicionalmente proporciona uma forma cocristalina de alguns novos compostos.

[006] A Publicação do Requerimento de Patente Europeia No. EP 330360 revela alguns compostos de isoquinolina como agonistas do capa-receptor opioide e úteis como analgésicos.

[007] A Patente dos Estados Unidos No. 5236934 revela alguns compostos de 1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolina como inibidores do receptor de angiotensina II e úteis no tratamento de transtornos do sistema nervoso central incluindo disfunção cognitiva.

[008] A Publicação do Requerimento de Patente dos Estados Unidos No. US 2006/0287359 revela alguns compostos de tetra- hidroisoquinolina como antagonistas de receptores estrogênicos e úteis no tratamento de doenças relacionadas com estrogênio incluindo câncer de mama.

[009] A presente invenção proporciona um composto de Fórmula I

[0010] em que

[0011] n é 0, 1 ou 2;

[0012] R1 é halogênio;

[0013] R2 é halogênio, H, CN, C1 - C3 alcóxi ou C1 - C3 alquila; e

[0014] R3 é H, halogênio, C1 - C3 alcóxi ou C1 - C3 alquila.

[0015] A presente invenção adicionalmente proporciona um composto de Fórmula Ia

[0016] em que

[0017] n é 0, 1 ou 2;

[0018] R1 é halogênio;

[0019] R2 é halogênio, H, CN, C1 - C3 alcóxi ou C1 - C3 alquila; e

[0020] R3 é H, halogênio, C1 - C3 alcóxi ou C1 - C3 alquila.

[0021] A presente invenção adicionalmente proporciona um composto de Fórmula I ou Ia

[0022] em que

[0023] n é 0, 1 ou 2;

[0024] R1 é halogênio;

[0025] R2 é halogênio; e

[0026] R3 é H ou C1 - C3 alcóxi.

[0027] A presente invenção adicionalmente proporciona um composto de Fórmula I ou Ia

[0028] em que

[0029] n é 0, 1 ou 2;

[0030] R1 é Cl, F ou Br;

[0031] R2 é Cl, OCH3, H, F, CN ou CH3; e

[0032] R3 é OCH3, H, CH2CH3, Cl, OCH(CH3)2, OCH2CH3, F, CH(CH3)2 ou CH3.

[0033] A presente invenção adicionalmente proporciona um composto de Fórmula I ou Ia

[0034] n é 0 ou 2;

[0035] R1 é Cl;

[0036] R2 é Cl ou F; e

[0037] R3 é H ou OCH3.

[0038] A presente invenção adicionalmente proporciona um composto de Fórmula Ib

[0039] Um composto particular de Fórmula I é um composto de Fórmula Ic.

[0040] Um composto particular de Fórmula I é 2-(2,6-diclorofenil)- 1-[(1S,3R)-3-(hidroximetil)-5-(3-hidróxi-3-metilbutil)-1-metil-3,4-di- hidroisoquinolin-2(1H)-il]etanona.

[0041] A presente invenção adicionalmente proporciona uma composição compreendendo 2-(2,6-diclorofenil)-1-[(1S,3R)-3- (hidroximetil)-5-(3-hidróxi-3-metilbutil)-1-metil-3,4-di-hidroisoquinolin- 2(1H)-il]etanona e ácido 4-hidroxibenzoico.

[0042] A presente invenção adicionalmente proporciona uma composição compreendendo 2-(2,6-diclorofenil)-1-[(1S,3R)-3- (hidroximetil)-5-(3-hidróxi-3-metilbutil)-1-metil-3,4-di-hidroisoquinolin- 2(1H)-il]etanona e ácido 4-hidroxibenzoico em uma proporção de cerca de um para um.

[0043] A presente invenção adicionalmente proporciona uma forma cocristalina de uma composição compreendendo 2-(2,6- diclorofenil)-1-[(1S,3R)-3-(hidroximetil)-5-(3-hidróxi-3-metilbutil)-1-metil- 3,4-di-hidroisoquinolin-2(1H)-il]etanona e ácido 4-hidroxibenzoico.

[0044] A presente invenção adicionalmente proporciona uma forma cocristalina estável de uma composição compreendendo 2-(2,6- diclorofenil)-1-[(1S,3R)-3-(hidroximetil)-5-(3-hidróxi-3-metilbutil)-1-metil- 3,4-di-hidroisoquinolin-2(1H)-il]etanona e ácido 4-hidroxibenzoico.

[0045] A presente invenção adicionalmente proporciona uma forma cocristalina de uma composição compreendendo 2-(2,6- diclorofenil)-1-[(1S,3R)-3-(hidroximetil)-5-(3-hidróxi-3-metilbutil)-1-metil- 3,4-di-hidroisoquinolin-2(1H)-il]etanona e ácido 4-hidroxibenzoico caracterizada por um padrão de difração de pó de raio X usando radiação CuKα tendo um pico de difração em ângulo 2-Teta de difração de 18,2° em combinação com um ou mais dos picos selecionados entre o grupo consistindo em 16,0°, 25,4°, e 7,0°; com uma tolerância para os ângulos de difração de 0,2 grau.

[0046] Um composto particular de Fórmula I é 2-(2,6-diclorofenil)- 1-((1S,3R)-3-(hidroximetil)-5-(2-hidroxipropan-2-il)-1-metil-3,4-di- hidroisoquinolin-2(1H)-il)etan-1-ona.

[0047] A presente invenção adicionalmente proporciona uma forma cristalina de 2-(2,6-diclorofenil)-1-((1S,3R)-3-(hidroximetil)-5-(2- hidroxipropan-2-il)-1-metil-3,4-di-hidroisoquinolin-2(1H)-il)etan-1-ona caracterizada por um padrão de difração de pó de raio X usando radiação CuKα tendo um pico de difração em ângulo 2-Theta de difração de 14,27° em combinação com um ou mais dos picos selecionados entre o grupo consistindo em 15,71°, 18,01°, 18,68°, 22,43°, e 25,08°; com uma tolerância para os ângulos de difração de 0,2 grau.

[0048] Além disso, a presente invenção proporciona uma composição farmacêutica compreendendo um composto de Fórmula I, e um veículo, diluente ou excipiente farmaceuticamente aceitável.

[0049] Além disso, a presente invenção proporciona um método de tratamento de doença de Parkinson compreendendo administrar a um paciente que necessite do mesmo uma quantidade eficaz de um composto de Fórmula I.

[0050] Além disso, a presente invenção proporciona um método de tratamento de transtornos neurocognitivos associados com doença de Parkinson compreendendo administrar a um paciente que necessite do mesmo uma quantidade eficaz de um composto de Fórmula I.

[0051] Além disso, a presente invenção proporciona um método de tratamento de esquizofrenia compreendendo administrar a um paciente que necessite do mesmo uma quantidade eficaz de um composto de Fórmula I.

[0052] Além disso, a presente invenção proporciona um método de tratamento da doença de Alzheimer compreendendo administrar a um paciente que necessite do mesmo uma quantidade eficaz de um composto de Fórmula I.

[0053] Além disso, a presente invenção proporciona um composto de Fórmula I para uso em terapia.

[0054] Além disso, a presente invenção proporciona um composto de Fórmula I para uso como um medicamento.

[0055] Além disso, a presente invenção proporciona um composto de Fórmula I para uso no tratamento da doença de Parkinson.

[0056] Além disso, a presente invenção proporciona um composto de Fórmula I para uso no tratamento de esquizofrenia.

[0057] Além disso, a presente invenção proporciona um composto de Fórmula I para uso no tratamento da doença de Alzheimer.

[0058] Além disso, a presente invenção proporciona o uso de um composto de Fórmula I para a fabricação de um medicamento para doença de Parkinson.

[0059] Além disso, a presente invenção proporciona uma composição farmacêutica compreendendo 2-(2,6-diclorofenil)-1- [(1S,3R)-3-(hidroximetil)-5-(3-hidróxi-3-metilbutil)-1-metil-3,4-di- hidroisoquinolin-2(1H)-il]etanona e ácido 4-hidroxibenzoico, e um veículo, diluente ou excipiente farmaceuticamente aceitável.

[0060] Um composto de Fórmula I pode ser usado em combinação com outros fármacos que são usados no tratamento / na prevenção / na supressão ou melhora das doenças ou condições para as quais os compostos de Fórmula I são úteis incluindo doença de Parkinson e esquizofrenia. Um ou mais outros fármacos referidos podem ser administrados, por uma via e em uma quantidade comumente usada para esse fim, simultaneamente ou sequencialmente com um composto de Fórmula I. Quando um composto de Fórmula I é usado simultaneamente com um ou mais outros fármacos, é preferencial uma forma de unidade de dosagem farmacêutica contendo os outros fármacos referidos além do composto de Fórmula I. Por conseguinte, as composições farmacêuticas da presente invenção incluem aquelas que também contêm um ou mais ingredientes ativos diversos, aloém de um composto de Fórmula I. Exemplos de outros ingredientes ativos eficazes no tratamento da doença de Parkinson que podem ser combinados com um composto de Fórmula I, ou administrados separadamente ou na mesma composição farmacêutica incluem, mas não estão limitados a:

[0061] (a) precursores de dopamina tais como levodopa; melevodopa, e etilevodopa; e

[0062] (b) agonistas de dopamina incluindo pramipexol, ropinirol, apomorfina, rotigotina, bromocriptina, cabergolina, e pergolida.

[0063] Entende-se que os compostos da presente invenção podem existir como estereômeros. Modalidades da presente invenção incluem todos os enantiômeros, diastereômeros, e misturas dos mesmos. Modalidades preferenciais são predominantemente um diastereômero. Modalidades mais preferenciais são predominantemente um enantiômero.

[0064] Um diastereômero particular de um composto de Fórmula I representado por um composto de Fórmula Ia

[0065] em que é preferencial a ligação tracejada e a ligação em cunha — representam um diastereômero de configuração trans.

[0066] Um enantiômero particular de um composto de Fórmula I ou Ia representado pelos Exemplos incluindo o composto do Exemplo 1: 2-(2,6-diclorofenil)-1-[(1S,3R)-3-(hidroximetil)-5-(3-hidróxi-3- metilbutil)-1-metil-3,4-di-hidroisoquinolin-2(1H)-il]etanona é mais preferencial.

[0067] Conforme usado aqui, neste requerimento de patente, o termo "cocristal" se refere a uma forma sólida cristalina de múltiplos componentes compreendendo dois compostos em que a associação de compostos é essencialmente através de interações químicas não- covalentes e não-iônicas tais como ligação de hidrogênio. Nas técnicas farmacêuticas, um cocristal tipicamente compreende um primeiro composto o qual é um ingrediente farmacêutico ativo e um segundo composto o qual é referido como um composto auxiliar (guest) ou coformer. Um cocristal pode ser diferenciado de uma forma de sal cristalino pelo fato de que o primeiro composto permanece essencialmente inalterado ou neutro. Um cocristal pode ser diferenciado de uma forma de hidrato ou solvato cristalino pelo fato de que o composto auxiliar não é exclusivamente água ou um solvente. Um cocristal preferencial é um de forma estável tendo um ponto de fusão adequado.

[0068] Conforme usado aqui, neste requerimento de patente, o grupamento "halogênio" se refere a cloro, fluoro, bromo ou iodo. Valores particulares de halogênio são cloro e fluoro.

[0069] Conforme usado aqui, neste requerimento de patente, o grupamento "C1 - C3 alcóxi" se refere a metóxi, etóxi, n-propóxi e i- propóxi. Um valor particular de C1 - C3 alcóxi é metóxi.

[0070] Conforme usado aqui, neste requerimento de patente, o grupamento "C1 - C3 alquila" se refere a metila, etila, n-propila e i-propila. Um valor particular de C1 - C3 alquila é metila.

[0071] Conforme usado aqui, neste requerimento de patente, o termo "paciente" se refere a um animal tal como um mamífero e inclui um ser humano. Um ser humano é um paciente preferencial.

[0072] Também deve ser reconhecido que uma pessoa versada na técnica pode tratar a doença de Parkinson por administração, a um paciente atualmente apresentando sintomas, de uma quantidade eficaz do composto de Fórmula I. Deste modo, os termos "tratamento" e "tratar" pretendem se referir a todos os processos em que pode haver um retardo, uma interrupção, uma suspensão, controle, ou parada da progressão de um transtorno existente e/ou sintomas do mesmo, mas não indica necessariamente uma eliminação total de todos os sintomas.

[0073] Também deve ser reconhecido que uma pessoa versada na técnica pode tratar a doença de Parkinson por administração, a um paciente em risco de futuros sintomas, de uma quantidade eficaz do composto de Fórmula I e pretende incluir tratamento profilático dos mesmos.

[0074] Conforme usado aqui, neste requerimento de patente, o termo "quantidade eficaz" de um composto de Fórmula I se refere a uma quantidade, isto é, uma dosagem, a qual é eficaz no tratamento de um transtorno, tal como doença de Parkinson descrita aqui, neste requerimento de patente. O médico assistente, como uma pessoa versada na técnica, pode prontamente determinar uma quantidade eficaz por meio do uso de técnicas convencionais e por observação dos resultados obtidos sob circunstâncias análogas. Na determinação de uma dose ou quantidade eficaz de um composto de Fórmula I, é considerada uma série de fatores, incluindo, mas não limitados ao composto de Fórmula I a ser administrado; a coadministração de outros agentes, caso usada; a espécie de mamífero; seu tamanho, idade, e saúde geral; o grau de envolvimento ou a gravidade do transtorno, tal como doença de Parkinson; a resposta do paciente individual; o modo de administração; as características de biodisponibilidade da preparação administrada; o regime de dose selecionado; o uso de outra medicação concomitante; e outras circunstâncias relevantes.

[0075] Um composto de Fórmula I pode ser administrado isolado ou sob a forma de uma composição farmacêutica com veículos, diluentes ou excipientes farmaceuticamente aceitáveis. As referidas composições farmacêuticas e os processos para fabricação das mesmas são conhecidos na técnica (Vide, por exemplo, Remington: The Science and Practice of Pharmacy, D.B. Troy, Editor, 21st Edition., Lippincott, Williams & Wilkins, 2006). Teste de Modulação Alostérica Positiva de Receptor D1 Humano

[0076] Células HEK293 expressando de modo estável o receptor D1 humano são geradas através de transdução de gene retroviral usando o vetor pBABE-bleo e o sistema retroviral Phoenix. As células são cultivadas em DMEM/F12 (Gibco) suplementado com 10% de soro de vitelo, 20 mM de HEPES, 2 mM de glutamato, e 150 μg/mL de zeocina a 37°C em 5% de CO2. Em aproximadamente 80% de confluência, as células são colhidas usando 0,25% de tripsina / EDTA, suspendidas em FBS mais 8% de DMSO, e armazenadas em nitrogênio líquido. No dia do teste, as células são degeladas e ressuspendidas em tampão STIM (Solução Salina Balanceada de Hanks (Hanks Balanced Salt Solution) suplementada com 0,1% de BSA, 20 mM de HEPES, 200 μM de IBMX, e 100 μM de ácido ascórbico). Um composto de teste é diluído serialmente (1:3) em DMSO e em seguida adicionalmente diluído a 1:40 em tampão STIM contendo 2X uma concentração de EC20 de dopamina. Uma concentração de EC20 de dopamina é definida como a concentração que aumenta o AMP cíclico até 20% da quantidade máxima que pode ser induzida por dopamina; neste teste, A ECmax é de 5 μM, e a EC20 é geralmente de 12 nM. Vinte e cinco μl desta solução é misturado com 25 μl de suspensão celular (1.250 células) e dispensado dentro de cada cavidade de placas de meia-área, de 96 cavidades; a concentração final de DMSO é de 1,25%. As placas são incubadas a 25°C por 60 min. A produção de cAMP é quantificada usando detecção de HTRF (Cisbio™) de acordo com as instruções do fornecedor: tampão de lise contendo criptato anti-cAMP e D2- conjugado (25 μl de cada) são adicionados às cavidades, as placas são incubadas por outros 60 a 90 min, e a fluorescência é detectada usando uma leitora de placas EnVision (PerkinElmer™). Os dados são convertidos para concentrações de cAMP usando uma curva-padrão de cAMP, e analisados como uma EC50 absoluta usando uma equação logística não-linear de 4 parâmetros (Abase™ v5.3.1.22). A EC50 absoluta para um modulador alostérico positivo é calculada como a concentração que gera uma quantidade meio-máxima de cAMP, com base em uma janela variando a partir da EC20 da dopamina, a qual define a resposta mínima, até a resposta ECmax, definida pela adição de 5 μM de dopamina.

[0077] No teste acima, os compostos exemplificados aqui, neste requerimento de patente, demonstram uma EC absoluta de menos de 300 nM no receptor D1 humano. O composto do Exemplo 1 apresenta uma EC50 absoluta de 3,66 + 0,67 nM (erro-padrão da média; n=9) com uma resposta mpaximu de 83,8 + 4,4 % no receptor D1 humano. O cocristal do Exemplo 2 apresenta uma EC absoluta de 1,11 + 0,11 nM (erro-padrão da média; n=2) no receptor D1 humano. O composto do Exemplo 3 apresenta uma EC absoluta de 11,75 + 1,27 nM (erro-padrão da média; n=16) com uma resposta mpaxima de 91,3 + 2,4 % no receptor D1 humano. Estes dados demonstram que os compostos de Fórmula I exemplificados são moduladores alostéricos positivos do receptor D1 humano.

[0078] Efeitos anti-Parkinson dos compostos da invenção podem ser determinados usando procedimentos de conhecimento geral na técnica tais como modelos animais de atividade locomotora incluindo efeitos sobre a atividade locomotora basal (habituada) e sobre a acinesia induzida por reserpina em camundongos de knock-in de receptores de dopamina 1 (D1) humanizados. Geração de Camundongo de Knock-in de Receptor de D1 Humano

[0079] Um camundongo transgênico no qual o receptor de dopamina 1 murino (D1) é substituído por seu correspondente humano pode ser gerado por técnicas de rotina. Por exemplo, fragmentos genômicos do camundongo são subclonados a partir da biblioteca de cromossoma artificial bacteriano RP23 e reclonados em um vetor de PGK-neo direcionamento. O frame de leitura aberta do camundongo é substituído com o frame de leitura aberta do receptor D1 humano no éxon 2. Um neo marcador de seleção a montante do éxon 2 é flanqueado por sítios frt para remoção posterior. O flanqueamento do éxon 2 por sítios de seleção loxP possibilita a opção de gerar camundongos de knock-out de D1 por cruzamento com camundongos expressando o gene de cre nuclease.

[0080] A linhagem de células-tronco embrionárias B6-3 C57BL/6 N é cultivada sobre uma camada nutritiva mitoticamente inativada de fibroblastos embrionários de camundongo em DMEM de alto teor de glucose com 20% de soro fetal bovino e 2x106 unidade/L de fator inibidor de leucemia. Dez milhões de células tronco embrionárias mais 30 microgramas de DNA de vetor linearizado são eletroporadas e submetidas a seleção de G418 (200 microgramos/mL). Os clones são isolados e analisados por Southern blotting.

[0081] Um clone contendo o inserto do tamanho esperado é inserido em blastocistos e os camundongos resultantes são genotipados por PCR. Uma quimera macho é cruzada com uma fêmea contendo o gene de Flp nuclease de modo a eliminar o marcador de seleção. A progênie contendo o receptor D1 humano sem o marcador de seleção é identificada por PCR. Um heterozigoto macho é acasalado com camundongos fêmeas C57BL/6. Espécimes macho e fêmea da progênie contendo o receptor D1 humano são acasalados e os homozigotos são identificados por PCR. O comportamento e a reprodução dos homozigotos é normal, e a colônia é mantida no estado homozigoto para as gerações seguintes. Atividade Locomotora Basal (habituados)

[0082] A atividade locomotora é medida usando um sistema automatizado para rastrear o movimento em camundongos. Camundongos de knock-in de receptor D1 humano são colocados dentro de câmaras e deixados para habituar às câmaras por 60 minutos. Durante este tempo, eles apresentam locomoção reduzida ao longo do tempo. Depois da administração de um composto da invenção, o movimento dos animais é aumentado em um modo dose- dependente.

[0083] Mais especificamente, as caixas de atividade locomotora são situadas em armações retangulares com feixes de raios infravermelhos para medição da atividade motora (atividade horizontal e vertical) denominada ambulações. A atividade locomotora é registrada entre o tempo de 7:30 e 15:00 horas.

[0084] Camundongos são atribuídos aleatoriamente a grupos de tratamento conforme mostrado na Tabela 1. Cada camundongo é colocado individualmente dentro de uma das caixas de atividade locomotora por 60 minutos de habituação. Em seguida, os camundongos são dosados por via oral e o número total de ambulações é registrado por 10 minutos para cada camundongo durante um período de 60 minutos. Em camundongos com pré- tratamento com reserpina, não é incluído período de habituação prévio. Deste modo, imediatamente depois da dosagem, o número total de ambulações é medido por 60 minutos. Os dados são transferidos do software / dos computadores para planilhas para análise posterior. Análise estatística é realizada usando ANOVA Oneway seguida por análise post-hoc usando teste de Dunnett ou LSD de Fishers.

[0085] No teste locomotor basal (habituados), os compostos do Exemplo 1, 2, 3, 4 e 13 facilitam o movimento em camundongos em uma maneira responsiva à dose (Tabelas 1 a 5). Isto demonstra que os compostos do Exemplo 1, 2, 3, 4 e 13 são eficazes na ativação locomotora de animais que estão habituados ao ambiente.

Reversão de Acinesia Induzida por Reserpina

[0086] Reserpina é um agente de depleção de catecolamina (esgota dopamina e norepinefrina). Depois de 18 a 24 horas, camundongos tratados com reserpina se tornam acinéticos e têm contagens reduzidas de atividade locomotora. A acinesia induzida por reserpina é avaliada medindo o efeito dos compostos sobre a atividade locomotora aproximadamente 18 a 24 horas depois de uma única dose de 0,15, 0,3 mg/kg ou 0,6 mg/kg de reserpina subcutânea. O equipamento usado é o mesmo que o usado para atividade locomotora habituada para a avaliação do Exemplo 1 nas Tabelas 6 e 7. Para o composto do Exemplo 3 (conforme mostrado na Tabela 8), um sistema de rastreio de video Ethovision 8 é usado para medir a atividade locomotora.

[0087] Camundongos de knock-in de receptores de dopamina D1 machos humanizados são aleatoriamente atribuídos a grupos de tratamento. Cada camundongo é colocado individualmente dentro de uma das caixas de atividade locomotora. As ambulações por 10 minutos para cada camundongo são medidas por até 60 minutos depois da dosagem. Portanto, os efeitos sobre o comportamento exploratório induzido por reserpina são avaliados por um total de 60 minutos. Os dados são transferidos do software / dos computadores para planilhas para análise posterior. Análise estatística é realizada usando ANOVA One-way seguido por análise post-hoc usando t-teste.

[0088] No teste acima, o composto do Exemplo 1 reverte os efeitos do tratamento com reserpina e restaura o movimento em camundongos em uma maneira responsiva à dose conforme medido por feixes de raios infravermelhos (Tabelas 6 e 7). Isto demonstra que o composto do Exemplo 1 é eficaz em um modelo in vivo de doença de Parkinson.

[0089] No teste acima, efeitos do tratamento com o composto do Exemplo 3 reverte os reserpina e restaura o movimento em camundongos em uma maneira responsiva à dose conforme medido por rastreamento por vídeo (Tabela 8). Isto demonstra que o composto do Exemplo 3 é eficaz em um modelo in vivo de doença de Parkinson.

Efeitos sobre os Níveis Extracelulares de Acetilcolina no Córtex Pré- frontal

[0090] A acetilcolina (Ach) é um neurotransmissor cerebral chave para funções cognitivas superiores. Na doença de Alzheimer ocorre uma degeneração de áreas cerebrais corticais de importância para função da memória tais como o hipocampo com perda de neurônios colinérgicos. Donepezil (Aricept®) é um inibidor da acetilcolina esterase o qual eleva os níveis cerebrais de acetilcolina e apresenta evidência clínica de aumento da cognição. Foi demonstrado que os agonistas da dopamina D1 modulam a liberação da acetilcolina e o desempenho cognitivo em modelos animais. Acredita-se que compostos os quais aumentam os níveis extracelulares de Ach no hipocampo de camundongos de knock-in de receptores da dopamina D1 humanizados (hD1KI) movendo-se livremente sejam úteis para o tratamento de disfunção cognitiva associada com doença de Alzheimer.

Procedimento Experimental

[0091] Sondas de microdiálise foram implantadas estereotaxicamente sob anaestesia com isoflurano no hipocampo ventral (HPC) de camundongos hD1KI machos (Charles River, Reino Unido). As coordenadas do bregma para implantação das sondas são: AP -3,1; LM +2,8; DV -4,5 mm.

[0092] No dia seguinte, os animais são conectados para permitir que as sondas sejam perfundidas com CSF artificial (contendo NaCl (141 mM), KCl (5 mM), MgCl2 (0,8 mM) e CaCl2 (1,5 mM)). Depois de um período de eliminação de 90 minutos, amostras do dialisado são coletadas em intervalos de 20 minutos. Depois de duas horas, os animais são injetados por via oral ou com veículo (20% de hidroxipropil betaciclodextrina) ou com composto de teste, e as amostras são coletadas por um adicional de 3 horas. Todas as amostras são imediatamente congeladas sobre gelo seco e armazenadas a -80r'C enquanto aguardam análise para uma gama de neurotransmissores e metabólitos.

Análise das Amostras

[0093] A cada amostra de diálise (29 μL) é adicionado: 20 μL de tampão (1M Bis-Tris, pH 10), 20 μL de padrão deuterado misto e 260μl de cloreto de dansil a 0,1% em peso / volume (em acetona). As amostras são turbilhonadas e aquecidas a 65°C por 30 min, em seguida são secadas sob N2 e ressuspendidas em 40 μl de ACN : água a 50:50 (em volume / volume) (contendo 10 mM de formato de amônio e 0,06% de ácido fórmico). As amostras são em seguida centrifugadas a 13000 rpm por 10 min em temperatura ambiente e 35 μl são pipetados para dentro de frascos 03-FIVR; 10 μl é injetado sobre a LC-MS/MS usando um CTC PAL HTC-xt Autosampler.

[0094] A separação cromatográfica de amostras dansiladas (in cluindo padrões de fármacos) é realizada sob um gradiente usando bombas binárias pumps Shimadzu LC-20AD XR e uma coluna de 2,6μm da Phenomenex Kinetex, de XB-C18 HPLC. A fase móvel A consiste de acetonitrilo / água a 5%:95% (em vol / vol), 2 mM de formato de amônio e 0,06% de ácido fórmico, e a fase móvel B, consiste em acetonitrila / água a 95%: 5% (em vol / vol), 2 mM de formiato de amônio e 0,06% de ácido fórmico.

[0095] Um AB Sciex API5500 é operado em dois períodos, período 1, modo TIS positivo para detecção de acetilcolina (Ach), e período 2 com modos TIS positivo e negativo.

Manipulação dos Dados

[0096] Os dados são expressos como uma percentagem de um período de controle pré-injeção - obtida ponderando as três amostras antes da liberação do fármaco (= 100%) e expressando os valores como uma percentagem deste valor. Análises estatísticas são empreendidas usando RM/Fit (ANOVA with Repeated Measures), para comparar as respostas entre os grupos de tratamento. Um valor de probabilidade de p <0,05 é considerado estatisticamente significativo. Resultados

[0097] A resposta da ACh é calculada medindo a Área Sob a Curva (AUC), em relação a um controle pré-injeção da linha basal, para cada condição de fármaco durante um período de duas horas pós administração do fármaco. Em seguida os dados são analisados por ANOVA (Oneway; JMP v9) seguido por t-teste post hoc.

[0098] A administração do composto do Exemplo 4 a 30 mg/kg IP ou do inibidor de acetilcolina esterase donepezil a 1 mg/kg, IP, produz um aumento estatisticamente significante comparados com controles de veículo em níveis extracelulares de Ach (Tabela 9). Isto demonstra que o composto do Exemplo 4 é eficaz em um modelo in vivo de doença de Alzheimer. Tabela 9

[0099] Efeito do Exemplo 4 (30 mg/kg IP) ou Donepezil (1 mg/kg IP) sobre a resposta de ACh no hipocampo de camundongo hD1 KI.

[00100] Compostos de Fórmula I, os quais incluem compostos de Fórmulas Ia, Ib, e Ic, podem ser preparados por processos conhecidos nas técnicas químicas ou por um novo processo descrito aqui, neste requerimento de patente. Um processo para a preparação de um composto de Fórmula I e novos intermediários para a fabricação de um composto de Fórmula I, proporcionam características adicionais da invenção e são ilustrados pelos procedimentos que se seguem.

[00101] De modo geral, um composto de Fórmula Ia em que n é 0, 1 ou 2 pode ser preparado a partir de um composto de Fórmula II em que n é 0, 1 ou 2 e Pg1 representa um grupamento de proteção hidroxila adequado (Esquema 1). Valores particulares de Pg1 incluem terc-butil(dimetil)silila e terc-butil(difenil)silila. Mais especificamente, um composto de Fórmula II em que Pg1 é terc-butil(dimetil)silila é reagido com fluoreto de tetrabutilamônio em um solvente tal como tetra- hidrofurano para proporcionar um composto de Fórmula Ia. Esquema 1

[00102] Um composto de Fórmula II em que n é 2 e Pg1 é terc- butil(dimetil)silila pode ser preparado por reação de um composto de Fórmula III com um metil lítio em um solvente adequado (Esquema 2). Solventes adequados incluem tetra-hidrofurano. Um composto de Fórmula III em que Pg1 é terc-butil(dimetil)silila pode ser preparado por reação de um composto de Fórmula IV com hidrogênio na presença de um catalisador de metal de transição adequado tal como tetrafluoroborato de 1,1'-bis(di-i-propilfosfino)ferroceno(1,5- ciclooctadieno)ródio(I). A reação é convenientemente realizada em um solvente tal como metanol. Um composto de Fórmula IV em que Pg1 é terc-butil(dimetil)silila pode ser preparado por reação de um composto de Fórmula V com etil acrilato na presença de um catalisador de ligação de metal de transição tal como acetato de paládio, um ligante tal como tri-o-tolilfosfina e uma base tal como trietil amina. A reação é convenientemente realizada em um solvente tal como acetonitrilo. Um composto de Fórmula V pode ser preparado por acilação de um composto de Fórmula VIII com o apropriado ácido R1, R2, R3 -fenilacético na presença de um agente de ativação tal como hexafluorofosfato de benzotriazol-1-il- oxitripirrolidinofosfônio e uma base tal como trietil amina. A reação é convenientemente realizada em um solvente tal como dimetil formamida. Esquema 2

[00103] Alternativamente, um composto de Fórmula II pode ser preparado a partir de um composto de Fórmula VI em que Pg1 é um grupamento de proteção hidroxila adequado (Esquema 3). Valores particulares de Pg1 incluem terc-butil(dimetil)silila e terc- butil(difenil)silila. Mais especificamente, um composto de Fórmula VI em que Pg1 é terc-butil(dimetil)silila é acilado com ácido 2,6- diclorofenilacético na presença de um agente de ativação tal como 1,1’-carbonildiimidazol para proporcionar um composto de Fórmula II. A reação é convenientemente realizada em um solvente tal como tetra- hidrofurano. Um composto de Fórmula VI pode ser preparado por redução de um composto de Fórmula VII com hidrogênio na presença de um catalisador tal como paládio. A reação é convenientemente realizada em um solvente tal como etanol. Um composto de Fórmula VII pode ser preparado por ligação de um composto de Fórmula VIII com 2- metilbut-3-en-2-ol na presença de um catalisador tal como acetato de paládio, um ligante tal como 2-diciclo-hexilfosfino-2‘,6‘-dimetoxibifenila e uma base tal como carbonato de potássio. A reação é convenientemente realizada em um solvente tal como dimetilformamida. Um composto de Fórmula VIII pode ser preparado em um modo multietapa a partir de um composto de Fórmula X através de um composto intermediário de Fórmula IX conforme é de conhecimento geral nas técnicas químicas ou por um processo descrito nas Preparações e nos Exemplos. Um composto de Fórmula X pode ser preparado conforme descrito nas Preparações e nos Exemplos. Esquema 3

[00104] Um composto de Fórmula II em que n é 0 e Pg1 é terc- butil(dimetil)silil pode ser preparado por reação de um composto de Fórmula IIIa com brometo de metil magnésio em um solvente adequado (Esquema 4). Um composto de Fórmula IIIa pode ser preparado por acilação de um composto de Fórmula VIIa com o ácido R1, R2, R3 -fenilacético apropriado na presença de um agente de ativação tal como hexafluorofosfato de benzotriazol-1-il- oxitripirrolidinofosfônio e uma base tal como trietil amina. A reação é convenientemente realizada em um solvente tal como dimetil formamida. Um composto de Fórmula VIIa pode ser preparado por reação de um composto de Fórmula VIII com monóxido de carbono e metanol na presença de um catalisador de paládio (0). Esquema 4

[00105] Um composto de Fórmula II em que n é 1 e Pg1 é terc- butil(dimetil)silila pode ser preparado por reação de um composto de Fórmula IIIb com cloreto de metil magnésio em um solvente adequado (Esquema 5). Um composto de Fórmula IIIb pode ser preparado por acilação de um composto de Fórmula VIIb com o ácido R1, R2, R3 - fenilacético apropriado na presença de um agente de ativação tal como hexafluorofosfato de benzotriazol-1-il-oxitripirrolidinofosfônio e uma base tal como trietil amina. A reação é convenientemente realizada em um solvente tal como dimetil formamida. Um composto de Fórmula VIIb pode ser preparado por reação de um composto de Fórmula VIII com acetona na presença de um catalisador de paládio (0) e um ligante conforme descrito nos exemplos e nas preparações. Esquema 5

[00106] Conforme usado aqui, neste requerimento de patente, "DMSO" se refere a dimetilsulfóxido; "Tris" se refere a trishidroximetilaminometano; "DTT" se refere a ditiotreitol; "HEC" se refere a hidroxietil celulose; "DMEM" se refere a Meio de Eagle Modificado por Dulbecco (em inglês, Dulbecco’s Modified Eagle’s Medium); "MS" se refere a espectro de massa; e "HEPS" se refere a ácido 4-(2-hidroxietil)-1-piperazinaetanossulfônico.

Preparação 1

[00107] Síntese de cloridrato de 2-bromo-D-fenilalaninato de metila.

[00108] Dissolver 2-bromo-D-fenilalanina (22,4 g, 91,8 mmol) em metanol (459 mL). Adicionar acetil cloreto (65,3 mL, 917,7 mmol) em temperatura ambiente. Agitar por 36 horas. Concentrar sob pressão reduzida para dar o composto do título (27,2 g, 92,3 mmol). MS (m/z): 258 (M+1).

[00109] Síntese alternativa de cloridrato de 2-bromo-D- fenilalaninato de metila.

[00110] Adicionar acetil cloreto (562,79 g, 7,17 mol) a metanol (10,00 L) a 0°C em um vaso apropriado. Aquecer a mistura até 17,5°C e agitar. Depois de 30 minutos, acrescentar 2-bromo-D-fenilalanina (500,00 g, 2,05 mol) e aquecer até o refluxo. Depois de 4 horas, arrefecer até 20°C e remover o solvente sob pressão reduzida para dar o composto do título (589 g, 1,96 mol) como um sólido acinzentado. MS (m/z): 258(M-Cl (79Br)), 260(M-Cl (81Br)).

Preparação 2

[00111] Síntese de 2-bromo-N-(metoxicarbonil)-D-fenilalaninato de metila.

[00112] Dissolver cloridrato de 2-bromo-D-fenilalaninato de metila (27,2 g, 92,3 mmol) em diclorometano (923 mL) e água (185 mL). Adicionar bicarbonato de sódio (31,0 g, 369,4 mmol) e cloroformiato de metila (7,86 mL, 101,6 mmol) em temperatura ambiente. Agitar a mistura por 2,5 horas. Diluir com água e extrair com diclorometano. Secar os extratos de diclorometano sobre sulfato de sódio, filtrar, e concentrar sob pressão reduzida. Purificar o resíduo por cromatografia de sílica-gel elutriando com acetato de etila : hexanos (10 a 75% de gradiente) para dar o composto do título (29,1 g, 92,1 mmol). MS (m/z): 316 (M+1).

[00113] Síntese alternativa de 2-bromo-N-(metoxicarbonil)-D- fenilalaninato de metila.

[00114] Adicionar água (2,94 L) e carbonato de hidrogênio de sódio (648,25 g, 7,64 mol) a cloridrato de 2-bromo-D-fenilalaninato de metila (580 g, 1,91 mol) em diclorometano (9,86 L) a 10°C em um vaso apropriado. Depois de 5 minutos acrescentar cloroformiato de metila (198,53 g, 2,10 mol) e agitar a mistura a 20°C. Depois de 3 horas acrescentar água (2,5 L) e separar as camadas. Extrair a camada aquosa com diclorometano, secar os extratos orgânicos combinados sobre sulfato de sódio e concentrar sob pressão reduzida para dar o composto do título (556 g, 1,74 mol). MS (m/z): 315,8(M+1 (79Br)), 317,8(M+1 (81Br)).

Preparação 3

[00115] Síntese de (3R)-5-bromo-3,4-di-hidro-1H-isoquinolina-2,3- dicarboxilato de dimetila.

[00116] Agitar uma mistura de 2-bromo-N-(metoxicarbonil)-D- fenilalaninato de metila (29,1 g, 92,10 mmol) e paraformaldeído (9,13g, 101,3 mmol) em ácido acético glacial (115 mL, 2,01 mol) e ácido sulfúrico concentrado (38,4 mL, 719,9 mmol) em temperatura ambiente por 7 horas. Particionar entre água e acetato de etila. Separar as camadas e extrair a camada aquosa com acetato de etila. Combinar os extratos de acetato de etila e secar sobre sulfato de sódio, filtrar, e concentrar sob pressão reduzida. Purificar o resíduo por cromatografia de sílica-gel elutriando com acetato de etila : hexanos (gradiente de 5 a 40%) para dar o composto do título (27,6 g, 84,0 mmol). MS (m/z): 328 (M+1).

Preparação 3a

[00117] Síntese de (3R)-5-bromo-3,4-di-hidro-1H-isoquinolina-2,3- dicarboxilato de dimetila e ácido (3R)-5-bromo-2-metoxicarbonil-3,4-di- hidro-1H-isoquinolina-3-carboxílico.

[00118] A ácido acético (4,29 L) a 10°C em um vaso apropriado, acrescentar 2-bromo-N-(metoxicarbonil)-D-fenilalaninato (572 g, 1,81mol) e paraformaldeído (205,86 g, 2,17 mol). Depois de 10 minutos acrescentar lentamente ácido sulfúrico concentrado (2,63 kg, 26,83mol) e em seguida agitar a 35°C. Depois de 12 horas, arrefecer até 15°C e adicionar água (7,5 L) e acetato de etila (6 L). Separar as camadas e re-extrair a camada aquosa com acetato de etila (2,5 L). Secar os extratos orgânicos combinados sobre sulfato de sódio, filtrar e concentrar sob pressão reduzida para dar uma mistura dos compostos do título com ácido acético (640 g, 1,69 mol). Espectro de massa (m/z): 3a: 327,95(M+1 (79Br)), 330,05(M+1 (81Br)). 3b: 314(M+1 (79Br)), 315,95(M+1 (81Br)). Preparação 4

[00119] Síntese de cloridrato de (3R)-5-bromo-1,2,3,4-tetra- hidroisoquinolina-3-carboxilato de metila.

[00120] Dissolver (3R)-5-bromo-3,4-di-hidro-1H-isoquinolina-2,3- dicarboxilato de dimetila (27,55 g, 84,0 mmol) em ácido clorídrico a 5 N (330,6 mL, 1,65 mol) e aquecer até o refluxo por três dias. Concentrar sob pressão reduzida para dar um sólido branco. Lavar o sólido com éter dietílico e secar sob vácuo a 40°C de um dia para o outro para dar cloridrato de ácido (3R)-5-bromo-1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolina-3- carboxílico (1:1) (20,8 g, 71,1 mmol). Adicionar acetil cloreto (50,6 mL, 711,0 mmol) a uma mistura a 0°C de cloridrato de ácido (3R)-5-bromo- 1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolina-3-carboxílico (1:1) (20,8 g, 71,1 mmol) em metanol (474 mL). Aquecer até a temperatura ambiente e agitar por 36 horas. Concentrar sob pressão reduzida e secar para dar o composto do título (21,9 g, 71,4 mmol). MS (m/z): 270 (M+1).

Preparação 5

[00121] Síntese de cloridrato de ácido (3R)-5-bromo-1,2,3,4-tetra- hidroisoquinolina-3-carboxílico.

[00122] Adicionar água (1,3 L) e ácido clorídrico a 36,5% (9,07 Kg, 90,81 mol) a uma mistura de (3R)-5-bromo-3,4-di-hidro-1H- isoquinolina-2,3-dicarboxilato de dimetila e ácido (3R)-5-bromo-2- metoxicarbonil-3,4-di-hidro-1H-isoquinolina-3-carboxílico (Preparação 3a) (520 g, 1,27 mol) em um vaso apropriado e agitar a mistura a 95°C. Depois de 12 horas arrefecer a mistura até 10°C e agitar por 15 minutos. Filtrar a mistura e secar o sólido sob vácuo a 40°C para proporcionar o composto do título (332 g, 1,13 mol). MS (m/z): 256,1 (M-Cl (79Br)), 258 (M-Cl (81Br)). Preparação 6

[00123] Síntese de 2-terc-butil-3-metil-(3R)-5-bromo-3,4-di-hidro- 1H-isoquinolina-2,3-dicarboxilato.

[00124] Dissolver cloridrato de (3R)-5-bromo-1,2,3,4-tetra- hidroisoquinolina-3-carboxilato de metila (21,0 g, 68,5 mmol) em 1,4- dioxana (685 mL). Adicionar solução saturada de bicarbonato de sódio (685 mL, 17,5 mol) e di-terc-butildicarbonato (29,9 g, 137,0 mmol) em temperatura ambiente. Agitar a mistura bifásica por 90 min. Extrair com acetato de etila. Secar o acetato de etila sobre sulfato de sódio, filtrar, e concentrar sob pressão reduzida. Purificar o resíduo por cromatografia de sílica-gel elutriando com acetato de etila : hexanos (5 a 50% de gradiente) para dar o composto do título (19,5 g, 52,7 mmol). MS (m/z): 270 (M-tBOC+1).

Preparação 7

[00125] Síntese de [(3R)-5-bromo-1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolin-3-il] metanol.

[00126] Adicionar hidreto de alumínio de lítio (2 L, 2,00 mol, 1M em THF) a cloridrato de ácido (3R)-5-bromo-1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolina -3-carboxílico (325,4 g, 1,11 mol) em tetra-hidrofurano (4,88 L) a -35°C em um vaso apropriado, em seguida aquecer até 25°C durante 60 minutos e agitar. Depois de 3 horas, arrefecer a mistura até -5°C, em seguida acrescentar água (76 mL), hidróxido de sódio aquoso a 15% em peso / peso (76 mL) e água (228 mL). Aquecer a mistura até 25°C, acrescentar sulfato de magnésio anídrico (750 g) e agitar. Filtrar a mistura e concentrar sob pressão reduzida para dar um sólido. Adicionar diclorometano (690 mL) ao sólido e empastar por 30 minutos antes de filtração para dar um sólido. Secar o sólido sob vácuo a 35°C para dar o composto do título (148,9 g, 0,55 mol). MS (m/z): 242(M+1 (79Br)), 244(M+1 (81Br)).

Preparação 8

[00127] Síntese de (3R)-5-bromo-3-(hidroximetil)-3,4-di-hidro-1H- isoquinolina -2-carboxilato de terc-butila.

[00128] Adicionar metanol (10,1 mL, 248,5 mmol) e boridreto de lítio (99,4 mL, 198,8 mmol, 2 M em THF) a uma solução de 2-terc-butil-3- metil-(3R)-5-bromo- 3,4-di- hidro- 1H- isoquinolina- 2,3- dicarboxilato (18,4 g, 49,7 mmol) em tetra-hidrofurano (497 mL) em temperatura ambiente sobre um banho de água. Agitar por 40 min e extinguir a reação com água. Extrair com acetato de etila. Secar os extratos de acetato de etila sobre sulfato de sódio, filtrar, e concentrar sob pressão reduzida. Purificar o resíduo por cromatografia de sílica-gel elutriando com acetato de etila : hexanos (5 a 80% de gradiente). Secar sob alto vácuo de um dia para o outro para dar o composto do título como um sólido branco (19,1 g, 55,8 mmol). MS (m/z): 286 (M-tBu+1).

Preparação 9

[00129] Síntese de (3R)-5-bromo-3-({[terc-butil(dimetil)silil]óxi}metil)- 1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolina.

[00130] Adicionar ácido trifluoroacético (75,5 mL, 998,3 mmol) a solução de (3R) -5- bromo- 3-(hidroximetil)-3,4-di-hidro-1H-isoquinolina-2- carboxilato de terc-butila (15,5 g, 45,3 mmol) em diclorometano (226 mL) em temperatura ambiente. Agitar por 30 min e concentrar sob pressão reduzida. Secar sob vácuo para dar [(3R) -5- bromo- 1,2,3,4 -tetra- hidroisoquinolin -3-il] metanol; ácido 2,2,2-trifluoroacético como um sólido úmido. Dissolver [(3R)-5-bromo-1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolin-3-il]metanol; ácido 2,2,2-trifluoroacético em diclorometano (753 mL). Adicionar 1H- imidazol (51,3 g, 753 mmol), N,N-Dimetil-4-piridinamina (460 mg, 3,77mmol), e t-butildimetilclorossilano (13,6 g, 90,4 mmol). Agitar em temperatura ambiente de um dia para o outro. Adicionar solução saturada de cloreto de amônio e extrair com diclorometano. Secar os extratos de diclorometano sobre sulfato de sódio, filtrar, e concentrar sob pressão reduzida. Combinar com o produto bruto de substancialmente uma mesma reação realizada com 19,4 mmol de (3R)-5-bromo-3-(hidroximetil)-3,4-di- hidro-1H-isoquinolina-2-carboxilato de terc-butila. Purificar o resíduo por cromatografia de sílica-gel elutriando com acetato de etila : hexanos (gradiente de 5 a 40%) para dar o composto do título (14,3 g, 40,1 mmol). MS (m/z): 356 (M+1).

[00131] Síntese alternativa de (3R)-5-bromo-3-({[terc-butil (dimetil) silil] óxi}metil)-1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolina.

[00132] Adicionar terc-butildimetilclorossilano (193,7 g, 1,29 mol) a uma mistura de [(3R)-5-bromo-1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolin-3-il] metanol (148,9 g, 0,58 mol), 1H-imidazol (202,9 g, 2,92 mol), 4- dimetilaminopiridina (0,72 g, 5,84 mmol) e N,N- dimetilformamida (1,04L) em diclorometano (2,61 L) a 20°C e agitar em um vaso apropriado. Depois de 3 horas, arrefecer a mistura até 10°C e adicionar solução aquosa saturada de cloreto de amônio (1,3 L). Extrair a camada aquosa com diclorometano e lavar os extratos orgânicos combinados com salmoura (2 x 2L), secar sobre sulfato de sódio anídrico e concentrar sob pressão reduzida para dar um resíduo. Dissolver o resíduo em éter metil terc-butílico (1,5 L) e lavar com salmoura (2 x 1 L). Diluir a fase orgânica com tolueno (5 L) e concentrar sob pressão reduzida para dar um resíduo. Adicionar tolueno (2,6 L) ao resíduo e concentrar sob pressão reduzida para dar o composto do título (210 g, 0,53 mol). MS (m/z). 356(M+1 (79Br)), 358(M+1 (81Br)).

Preparação 10

[00133] Síntese de (3R)-5-bromo-3-({[terc-butil(dimetil)silil]óxi}metil)- 3,4 di-hidroisoquinolina.

[00134] Dissolver (3R)-5-bromo-3-({[terc-butil(dimetil)silil]óxi}metil)- 1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolina (4,2 g, 11,8 mmol) em éter dietílico (118mL). Adicionar N-clorossuccinimida (2,36 g, 17,7 mmol). Agitar por 30 min em temperatura ambiente e concentrar sob pressão reduzida. Dissolver o resíduo em hidróxido de potássio (42,0 mL, 30,3 mmol, 5% em MeOH) e agitar por 30 min em temperatura ambiente. Verter em água e extrair com diclorometano. Secar os extratos de diclorometano sobre sulfato de sódio, filtrar, e concentrar sob pressão reduzida. Purificar o resíduo por cromatografia de sílica-gel elutriando com acetato de etila : hexanos (5 a 100% de gradiente) para dar o composto do título (3,40 g, 9,59 mmol). MS (m/z): 354 (M+1).

[00135] Síntese alternativa de (3R)-5-bromo-3-({[terc-butil (dimetil) silil]óxi}metil)-3,4 di-hidroisoquinolina.

[00136] Adicionar N-clorossuccinimida (106,7 g, 0,79 mol) a uma solução de (3R) -5- bromo-3- ({[terc-butil (dimetil) silil]óxi}metil)- 1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolina (220 g, 0,52 mol) em tetra- hidrofurano (3,85 L) a 20°C em um vaso apropriado e agitar. Depois de 30 minutos concentrar a mistura sob pressão reduzida e dissolver os resíduos em 5% em peso / peso de hidróxido de potássio em metanol (2,2 L, 1,69 mol) e agitar a 20°C. Depois de 30 minutos, acrescentar a mistura à água (3 L) e extrair três vezes com diclorometano (3 x1 L). Secar os extratos orgânicos combinados sobre sulfato de magnésio anídrico e concentrar sob pressão reduzida para dar o composto do título (210 g, 0,50 mol). MS (m/z): 354(M+1 (79Br)), 356(M+1 (81Br)).

Preparação 11

[00137] Síntese de (1S,3R)-5-bromo-3-({[terc-butil (dimetil) silil] óxi} metil)-1-metil-1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolina.

[00138] Dissolver (3R)-5-bromo-3-({[terc-butil(dimetil)silil]óxi}metil)- 3,4 di-hidroisoquinolina (3,4 g, 9,59 mmol) em éter dietílico (160 mL). Arrefecer até -78°C sobre um banho de gelo seco e acetona. Adicionar cloreto de metilmagnésio (26,9 mL, 80,6 mmol, 3M em THF) gota a gota. Aquecer a mistura da reação lentamente até a temperatura ambiente e agitar de um dia para o outro. Extinguir com solução saturada de cloreto de amônio lentamente. Extrair com diclorometano e secar sobre sulfato de sódio, filtrar, e concentrar sob pressão reduzida. Combinar com o produto bruto de substancialmente uma mesma reação realizada com 1,73 mmol de (3R)-5-bromo-3-({[terc- butil (dimetil) silil] óxi} metil)-3,4 di-hidroisoquinolina. Purificar os resíduos combinados por cromatografia de sílica-gel elutriando com acetato de etila : hexanos (5 a 65% de gradiente) para dar o composto do título (3,78 g, 10,2 mmol). MS (m/z): 370 (M+1).

[00139] A configuração relativa do composto (1S,3R)-5-bromo-3- ({[terc-butil(dimetil)silil]óxi}metil)-1-metil-1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolina é determinada por espectroscopia por RMN usando experimentos de NOE uni-dimensional (1D-NOESY). Excitação seletiva do grupamento metila a 1,30 ppm dá origem a um NOE para Ha a 3,11 ppm. Este aumento do NOE somente é consistente com uma configuração na qual a metila e Ha estão sobre o mesmo lado do anel (isômero trans) porque no isômero cis os prótons da metila estão longe demais de Ha para apresentar um NOE. Como a química absoluta para a posição 3 é conhecida por ser R, então a química absoluta na posição 1 é deduzida como sendo S.

[00140] Síntese alternativa de (1S,3R)-5-bromo-3-({[terc-butil (dimetil) silil]óxi}metil)-1-metil-1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolina.

[00141] Adicionar cloreto de metilmagnésio (0,66 L, 1,99 mol, 3M em THF) a uma solução de (3R)-5-bromo-3-({[terc-butil (dimetil) silil] óxi} metil)-3,4 di-hidroisoquinolina (93,5 g, 0,24 mol) em éter dietílico (2,8 L) a -65°C em um vaso apropriado. Em seguida, aquecer a mistura da reação até 20°C durante 2 horas e agitar. Depois de 16 horas, arrefecer a mistura até 0°C e extinguir a reação com solução aquosa saturada de cloreto de amônio (2,5 L) e extrair com acetato de etila (2,5 L) e filtrar a mistura. Lavar os extratos orgânicos combinados com salmoura (1 L), secar sobre sulfato de magnésio anídrico e concentrar sob pressão reduzida para dar o composto do título bruto como um óleo. Combinar o óleo com produtos brutos de substancialmente as mesmas reações realizadas com 48 mmol e 229 mmol de [(3R)-5-bromo-3,4-di-hidroisoquinolin-3-il]metóxi-terc-butil- dimetil-silano e purificar os mesmos por cromatografia de sílica-gel elutriando com acetato de etila em hexanos (gradiente de 5a 65% de acetato de etila) para dar o composto do título (151 g, 0,41 mol). MS (m/z): 370,1 (M+1 (79Br)), 372,1(M+1 (81Br)).

Preparação 12

[00142] Síntese de terc-butil (1S,3R)-5-bromo-3-[[terc-butil (dimetil) silil]oximetil]-1-metil-3,4-di-hidro-1H-isoquinolina-2-carboxilato.

[00143] Adicionar di-terc-butil dicarbonato(1,23 g, 5,54 mmol) a uma solução de [(1S,3R)-5-bromo-1-metil-1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolin-3-il] metóxi-terc-butil-dimetil-silano (2,01 g, 5,43 mmol) em diclorometano (15 mL). Agitar a mistura da reação de um dia para o outro em temperatura ambiente. Concentrar sob pressão reduzida. Dissolver o resíduo em diclorometano e lavar com água e salmoura, secar sobre sulfato de sódio, filtrar e concentrar sob pressão reduzida. Purificar por cromatografia de sílica-gel elutriando com acetato de etila : hexanos (0 a 4% de gradiente) para dar o composto do título (2,54 g, 5,40 mmol). MS (m/z): 370,2, 372,2 (M-BOC+1).

Preparação 13

[00144] Síntese de 1-[(1S,3R)-5-bromo-3-({[terc-butil (dimetil) silil] óxi} metil) -1- metil -3,4-di- hidroisoquinolin -2(1H)-il]-2-(2,6-diclorofenil) etanona.

[00145] Adicionar hexafluorofosfato de benzotriazol-1-il- oxitripirrolidinofosfônio (7,97 g, 15,3 mmol) a uma mistura de (1S,3R)- 5-bromo-3-({[terc-butil(dimetil)silil]óxi}metil)-1-metil-1,2,3,4-tetra- hidroisoquinolina (3,78 g, 10,2 mmol) e ácido 2,6-diclorofenilacético (2,30 g, 11,2 mmol) em dimetilformamida (51,0 mL). Adicionar trietilamina (2,13 mL, 15,3 mmol) e agitar em temperatura ambiente 3 horas. Diluir com água e extrair com diclorometano. Secar os extratos de diclorometano sobre sulfato de sódio, filtrar e concentrar sob pressão reduzida. Purificar o resíduo por cromatografia de sílica-gel elutriando com acetato de etila : hexanos (5 a 50% de gradiente) para dar o composto do título (4,70 g, 8,43 mmol). MS (m/z): 556 (M+1). Preparação 14

[00146] Síntese de (2E)-3-{(1S,3R)-3-({[terc-butil(dimetil) silil] óxi} metil)-2-[(2,6-diclorofenil)acetil]-1-metil-1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolin-5- il} prop-2-enoato de etila.

[00147] Borbulhar nitrogênio através de acetonitrilo. Colocar tri-o- tolilfosfina (72,3 mg, 0,23 mmol), acetato de paládio (II) (11,8 mg, 0,052 mmol) e acetonitrilo (0,96 mL) em um recipiente de micro-ondas. Agitar por 10 min. Adicionar etil acrilato ( 0,31 mL, 2,88 mmol). Adicionar 1-[(1S,3R)-5-bromo-3-({[terc-butil(dimetil)silil]óxi}metil)-1- metil-3,4-di- hidroisoquinolin- 2(1H) -il]-2- (2,6- diclorofenil) etanona (0,54 g, 0,96mmol). Adicionar trietilamina (0,40 mL, 2,88 mmol) e agitar vigorosamente. Soprar nitrogênio através da superfície da reação. Selar o recipiente e aquecer até 160°C por 35 min em um microondas. Arrefecer até a temperatura ambiente e diluir com acetato de etila. Filtrar o precipitado e lavar com acetato de etila. Concentrar o filtrado sob pressão reduzida para dar um óleo marrom. Combinar com o produto bruto de substancialmente uma mesma reação realizada com 0,27mmol de 1-[(1S,3R)-5-bromo-3-({[terc- butil(dimetil)silil]óxi}metil)-1-metil-3,4-di-hidroisoquinolin-2(1H)-il]-2- (2,6-diclorofenil)etanona. Purificar os resíduos combinados por cromatografia de sílica-gel, elutriando com acetato de etila : hexanos (gradiente, 0 a 10%) para dar o composto do título (0,54 g, 0,93 mmol). MS (m/z): 576 (M+1).

[00148] O composto que se segue é preparado essencialmente pelo método da Preparação 14.

Preparação 16

[00149] Síntese de (1S,3R)-3-[[terc-butil(dimetil)silil]oximetil]-5-(3- etóxi-3-oxo-propil)-1-metil-3,4-di-hidro-1H-isoquinolina-2-carboxilato de terc-butila.

[00150] Adicionar 10% de paládio sobre carbono (0,09 g) a um frasco Parr de 100 mL. Purgar com nitrogênio. Adicionar etanol (5 mL) para umedecer o catalisador. Adicionar (1S,3R)-3-[[terc-butil (dimetil) silil] oximetil]-5-[(E)-3-etóxi-3-oxo-prop-1-enil]-1-metil-3,4-di-hidro-1H- isoquinolina- 2-carboxilato de terc-butila (330 mg, 0,67 mmol) como uma solução em etanol (15 mL). Selar o frasco e purgar com nitrogênio. Purgar o vaso com hidrogênio e pressurizar até 414 kPa de hidrogênio. Agitar em temperatura ambiente por 1,5 hora. Ventilar e abrir o vaso. Filtrar a mistura da reação. Concentrar o filtrado sob pressão reduzida. Purificar o resíduo por cromatografia de sílica-gel, elutriando com acetato de etila : hexanos (0 a 10% de gradiente) para dar o composto do título como um óleo incolor claro (252 mg, 0,51 mmol). MS (m/z): 392,2 (M-BOC+1). Preparação 17

[00151] Síntese de 3-{(1S,3R)-3-({[terc-butil(dimetil)silil]óxi}metil)-2- [(2,6-diclorofenil) acetil]- 1-metil- 1,2,3,4- tetra- hidroisoquinolin-5-il} propanoato de etila.

[00152] Na caixa seca a uma autoclave Parr de 85 mL com barra de agitação e revestimento de vidro, acrescentar 1,1'-bis(di-i-propilfosfino) ferroceno (1,5-ciclo-octadieno) ródio(I) tetrafluoroborato (7mg, 0,010mmol). Adicionar (2E)-3-{(1S,3R)-3-({[terc-butil (dimetil) silil] óxi} metil)-2-[(2,6-diclorofenil)acetil]-1-metil-1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolin -5- il} prop-2-enoato de etila (133 mg, 0,23 mmol) como uma solução em metanol anídrico (5 mL). Selar o autoclave e remover da caixa seca. Purgar o vaso com hidrogênio e pressurizar até 690 kPa de hidrogênio. Agitar em temperatura ambiente de um dia para o outro. Ventilar e abrir o vaso. Concentrar a mistura da reação sob pressão reduzida. Purificar o resíduo por cromatografia de sílica-gel, elutriando com 25% de éter metil t-butílico : hexanos para dar o composto do título como um óleo incolor claro (121 mg, 0,21 mmol). MS (m/z): 578 (M+1).

Preparação 18

[00153] Síntese de (1S,3R)-5-bromo-3-({[terc-butil (dimetil) silil] óxi} metil) -1-metil-1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolina cloridrato.

[00154] Adicionar ácido clorídrico (267,24 g, 1,02 mol, 4M em 1,4dioxana) a (1S,3R)-5-bromo-3-({[terc-butil(dimetil)silil]óxi}metil)-1-metil- 1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolina (419 g, 1,02 mol) em acetato de isopropila (4,19 L) a 10°C e agitar por 15 minutos em um vaso apropriado. Filtrar a mistura e lavar a torta do filtrado com acetato de isopropila (2,5 L), secar sobre o filtro por 30 minutos, em seguida sob vácuo em um forno a 40°C por 16 horas para dar o composto do título (380 g, 0,89 mol). MS (m/z): 370(M-Cl (79Br)), 372(M-Cl (81Br)). Preparação 19

[00155] Síntese de (E)-4-[(1S,3R)-3-[[terc-butil(dimetil)silil]oximetil]- 1-metil-1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolin-5-il]-2-metil-but-3-en-2-ol.

[00156] Adicionar (1S,3R)-5-bromo-3-({[terc-butil (dimetil) silil] óxi} metil)-1-metil-1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolina cloridrato (310 g, 723,83 mmol) e 2-metilbut-3-en-2-ol (508,95 g, 5,79 mol) a N,N-dimetilformamida (1,08 L) em um vaso apropriado e desgaseificar borbulhando nitrogênio através da solução por 10 minutos. Adicionar carbonato de potássio (315,12 g, 2,28 mol), 2-diciclo-hexilfosfino-2‘,6‘-dimetoxibifenila (15,32 g, 36,19 mmol) e acetato de paládio (II) (8,29 g, 36,19 mmol) e desgaseificar borbulhando nitrogênio através da mistura por 15 minutos e em seguida aquecer até 125°C. Depois de 16 horas, arrefecer a mistura até 20°C e diluir com acetato de etila (1,5L) e água (2,5 L). Lavar a camada de acetato de etila com salmoura (2,5 L), em seguida secar sobre sulfato de sódio e concentrar sob pressão reduzida para dar um resíduo. Purificar o resíduo por cromatografia por cintilação, elutriando com 0 a 50% de acetato de etila em isso-hexanos para dar o composto do título (193 g, 459,1 mmol). MS (m/z): 376(M+1).

Preparação 20

[00157] Síntese de 4-[(1S,3R)-3-[[terc-butil(dimetil)silil]oximetil]-1- metil -1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolin-5-il]-2-metil-butan-2-ol.

[00158] Adicionar uma solução de (E)-4-[(1S,3R)-3-[[terc-butil (dimetil)silil]oximetil]-1-metil-1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolin-5-il]-2-metil- but-3-en-2-ol (68 g, 168,83 mmol) em etanol (816 mL) a um vaso de hidrogenação de pressão e adicionar 5% de paládio sobre carvão ativado (35,83 g, 16,84 mmol). Purgar o vaso com gás hidrogênio, pressurizar até 470 kPa de gás hidrogênio e agitar a 25°C. Depois de 16 horas, ventilar o vaso e filtrar a mistura da reação através de terra diatomácea. Lavar a terra diatomácea com acetato de etila e concentrar o filtrado sob pressão reduzida para dar um óleo. Dissolver o óleo em acetato de etila (1 L) e concentrar sob pressão reduzida para dar o composto do título (64 g, 161 mmol). MS (m/z): 378,2 (M+1).

Preparação 21

[00159] Síntese de 1-[(1S,3R)-3-({[terc-butil(dimetil)silil]óxi}metil)-5- (3-hidróxi-3-metilbutil)-1-metil-3,4-di-hidroisoquinolin-2(1H)-il]-2-(2,6- diclorofenil)etanona.

[00160] Dissolver 4-[(1S,3R)-3- [[terc- butil (dimetil) silil] oximetil]-1- metil -1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolin-5-il]-2-metil-butan-2-ol (0,21 g, 0,36mmol) em THF (2,0 mL). Arrefecer sobre um banho de gelo seco e acetona. Adicionar metil lítio (0,67 mL, 1,07 mmol, 1,6 M em éter dietílico) lentamente e agitar sobre o banho de gelo seco e acetona por 4 horas. Adicionar solução saturada de cloreto de amônio (2 mL). Remover o banho de gelo seco e acetona e deixar a mistura aquecer até a temperatura ambiente. Extrair com acetato de etila. Combinar os extratos de acetato de etila; lavar com salmoura, secar sobre sulfato de sódio, filtrar, e concentrar sob pressão reduzida para dar óleo incolor claro. Purificar o resíduo por cromatografia de sílica-gel, elutriando com acetato de etila : hexanos (gradiente, 0 a 30%) para dar o composto do título como óleo incolor claro (0,16 g, 0,29 mmol). MS (m/z): 564 (M+1).

[00161] Síntese alternativa de 1-[(1S,3R)-3-({[terc-butil (dimetil) silil] óxi}metil)-5-(3-hidróxi-3-metilbutil)-1-metil-3,4-di-hidroisoquinolin-2(1H)- il]-2-(2,6-diclorofenil)etanona.

[00162] Adicionar 1,1’-carbonildiimidazol (112,9 g, 682,36 mmol) a uma mistura de ácido 2,6-diclorofenilacético (173,09 g, 818,83 mmol) em tetra-hidrofurano (1,63 L) em um vaso apropriado e agitar a 25°C. Depois de 1 hora acrescentar uma solução de 4-[(1S,3R)-3-[[terc- butil(dimetil)silil]oximetil]-1-metil-1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolin-5-il]-2- metil-butan-2-ol (217 g, 545,89 mmol) em tetra-hidrofurano (1,63 L) à mistura, aquecer a mistura até 45°C e agitar. Depois de 24 horas, arrefecer a mistura até 20°C, remover 2 L de tetra-hidrofurano concentrando sob pressão reduzida e diluir os resíduos com acetato de etila (2,5 L). Lavar a solução de acetato de etila com solução aquosa saturada de cloreto de amônio (1,5 L), 1M de hidróxido de sódio aquoso (1 L), água (1 L) e salmoura (1,5 L). Secar os orgânicos sobre sulfato de sódio anídrico e concentrar sob pressão reduzida para dar o composto do título (376 g, 532,70 mmol). MS (m/z): 564,2(M+1 (35Cl)), 566,2 (M+1 (37Cl)).

[00163] O composto que se segue é preparado essencialmente pelo método da Preparação 21.

Exemplo 1

[00164] Síntese de 2-(2,6-diclorofenil)-1-[(1S,3R)-3-(hidroximetil)-5- (3-hidróxi-3-metilbutil)-1-metil-3,4-di-hidroisoquinolin-2(1H)-il]etanona.

[00165] Dissolver 1- [(1S,3R)-3- ({[terc-butil(dimetil) silil] óxi} metil)- 5-(3-hidróxi-3-metilbutil)-1-metil-3,4-di-hidroisoquinolin-2(1H)-il]-2-(2,6- diclorofenil)etanona (0,16 g, 0,28 mmol) em THF (2,8 mL). Adicionar fluoreto de tetrabutilamônio (0,30 mL, 0,30 mmol, 1M em THF). Agitar por 40 min. Adicionar solução saturada de cloreto de amônio e extrair com acetato de etila. Combinar os extratos de acetato de etila; lavar com água e salmoura, secar sobre sulfato de sódio, filtrar, e concentrar sob pressão reduzida para dar um resíduo. Purificar o resíduo por cromatografia de sílica-gel, elutriando com acetato de etila : hexanos (gradiente, 0 a 60%) para dar o composto do título como uma espuma branca (0,12 g, 0,26 mmol). MS (m/z): 450 (M+1).

[00166] Síntese alternativa de 2-(2,6-diclorofenil)-1-[(1S,3R)-3- (hidroximetil)-5-(3-hidróxi-3-metilbutil)-1-metil-3,4-di-hidroisoquinolin- 2(1H)-il]etanona.

[00167] Adicionar fluoreto de tetra-n-butilamônio (651,71 mL, 651,71 mmol, 1M em THF) a uma solução de 1-[(1S,3R)-3-[[terc- butil (dimetil) silil] oximetil] -5- (3-hidróxi -3-metil-butil) -1-metil -3,4- di-hidroisoquinolin- 2(1H)-il] -2- (2,6-diclorofenil) etanona (400 g, 566,71 mmol) em tetra-hidrofurano (4 L) a 5°C em um vaso apropriado. Aquecer a mistura até 20°C e agitar. Depois de 3 horas, remover 3 L de tetra-hidrofurano concentrando sob pressão reduzida e diluir os resíduos com acetato de etila (2,5 L). Lavar os orgânicos com solução aquosa saturada de cloreto de amônio (2 L), água (2 L) e salmoura (2 x 2 L). Secar a solução de acetato de etila sobre sulfato de sódio anídrico e concentrar sob pressão reduzida para dar um óleo. Dissolver este óleo em 2-propanol (2,5 L) e concentrar sob pressão reduzida para dar um óleo. Purificar por SFC quiral usando coluna AS-H (50 x 250 mm, tamanho de partícula de 5 micra) elu- triando com 80 % de dióxido de carbono supercrítico e 20% de uma solução a 0,2% de dietilmetilamina em álcool isopropil a 280 g/min. para dar o composto do título (182,8 g, 389,62 mmol). MS (m/z): 450,2(M+1 (35Cl)), 452,2 (M+1 (37Cl)). Rotação ótica: [α] 20 D -39,4° (c = 0,95, MeOH).

Exemplo 2

[00168] Cocristallização de 2- (2,6-diclorofenil) -1- [(1S,3R) -3- (hidroximetil) -5- (3-hidróxi- 3-metilbutil) -1-metil-3,4-di-hidroisoquinolin- 2(1H)-il] etanona e ácido 4-hidroxibenzoico.

[00169] Os compostos 2-(2,6-diclorofenil)-1-[(1S,3R)-3-(hidroximetil) -5-(3-hidróxi-3-metilbutil)-1-metil-3,4-di-hidroisoquinolin-2(1H)-il] etanona (402,56 mg) e ácido 4-hidroxibenzoico (144,7 mg) são colocados em um frasco de 40 mL junto com uma barra de agitação. O frasco é preenchido até a borda com água (39 mL). A amostra é agitada a 1200 rpm a 50°C (configuração da placa de agitação). Óleo de silicone é gotejado em torno da base do frasco para assegurar boa transferência térmica com a placa aquecida. Resulta uma pasta branca espessa com pedaços de sólido acinzentado. Depois de uma hora de empastação, um termômetro inserido através do septo do frasco leu 40,5°C, e a amostra havia se transformado em uma pasta homogênea de sólido branco brilhante. Depois de empastação de um dia para o outro, a amostra é uma pasta homogênea de sólido branco floculento. O termômetro lê 43,1°C. Microscopia ótica polarizada mostra bi- refringência completa. O sólido branco brilhante é isolado por filtração a vácuo e é seco no local sob corrente de ar por 10 minutos. A amostra é colocada no forno a vácuo a 75°C por duas horas para proporcionar a composição do título como um sólido cristalino branco (484 mg, 94,9% de rendimento).

[00170] Início do ponto de fusão = 160,0oC (calorimetria de varredura diferencial). Difração de Pó de Raios X

[00171] Os padrões de difração de raios X (XRD) de sólidos cristalinos são obtidos em um difractômetro de pó de raios X Bruker D4 Endeavor, equipado com uma fonte de CuKa À = 1,54060 Â) e um detector Vantec, operando a 35 kV e 50 mA. A amostra é escaneada entre 4 e 40° em 2θ, com um tamanho da etapa de 0,009° em 2θ e uma taxa de varredura de 0,5 segundos/etapa, e com 0,6 mm de divergência, 5,28 antidispersão fixa, e fendas do detector de 9,5 mm. O pó a seco é acondicionado sobre um suporte de amostras de quartzo e é obtida uma superfície lisa usando uma lâmina de vidro. Os padrões de difração das formas cristalinas são coletados em temperatura ambiente e umidade relativa. É de conhecimento geral na técnica da cristalografia que, para qualquer forma cristalina dada, as intensidades relativas dos picos de difração podem variar devido à orientação preferencial resultante de fatores tais como morfologia do cristal ou hábito. Em que estão presentes os efeitos de orientação preferencial, as intensidades de pico são alteradas, mas as posições de pico características do polimorfo são inalteradas. Além disso, também é de conhecimento geral na técnica da cristalografia que para qualquer forma cristalina dada as posições de pico angular podem variar ligeiramente. Por exemplo, as posições de pico podem se deslocar devido a uma variação na temperatura ou na umidade na qual uma amostra é analisada, devido a deslocamento da amostra, ou à presença ou ausência de um padrão interno. No presente caso, uma variabilidade da posição de pico de 0,2 em 2θ vai levar em conta estas potenciais variações sem prejudicar a identificação inequívoca da forma cristalina indicada. A confirmação de uma forma cristalina pode ser feita com base em qualquer combinação única de picos distintivos (em unidades de ° 2θ), tipicamente os picos mais proeminentes. (United States Pharmacopeia #35, National Formulary #30, Chapter <941>, pages 427-432, 2012). Os padrões de difração das formas cristalinas, coletados em temperatura ambiente e umidade relativa, são ajustados com base no material de referência do padrão NBS 675 (mica) com picos a 8,853 e 26,774 graus 2-Theta.

[00172] Uma amostra preparada a partir do co-cristal do Exemplo 2 é caracterizada por um padrão de difração de raio X usando radiação CuKα como tendo picos de difração (valores 2-Theta) conforme descrito na Tabela 3 abaixo, e em particular tendo picos a 18,2 em combinação com um ou mais dos picos selecionados entre o grupo consistindo em 16,0, 25,4, e 7,0; com uma tolerância para os ângulos de difração de 0,2 graus. Tabela 3

[00173] Preparação alternativa de cocristal de 2-(2,6-diclorofenil)-1- [(1S,3R)-3-(hidroximetil)-5-(3-hidróxi-3-metilbutil)-1-metil-3,4-di- hidroisoquinolin-2(1H)-il]etanona e ácido 4-hidroxibenzoico.

[00174] A um frasco de 20 mL é adicionado 2-(2,6-diclorofenil)-1- [(1S,3R)-3-(hidroximetil)-5-(3-hidróxi-3-metilbutil)-1-metil-3,4-di- hidroisoquinolin-2(1H)-il]etanona (2,00 g, 1,00 equiv; 4,44 mmol). Acetona (4 mL) é adicionada enquanto agitando em temperatura ambiente. Forma-se uma solução límpida. Ácido 4-hidroxibenzoico (0,756 g; 1,23 equiv; 5,47 mmol) é adicionado enquanto agitando em temperatura ambiente. Forma-se uma suspensão leve e em seguida uma suspensão espessa. A mistura é aquecida sobre placa quente até 60°C. Acetona em alíquotas de 1 mL é adicionada até ser observada uma suspensão de mistura agradável a 60°C. O total de acetona adicionado é de 9,00 mL (122,43 mmol, 7,11 g). A temperatura é mantida a ~60oC por várias horas. A mistura é arrefecida até a temperatura ambiente e colocada no refrigerador para aumentar a recuperação. O sólido resultante é coletado por filtração a vácuo, enxaguado com 2 mL de acetona e é seco em um forno a vácuo de um dia para o outro a 40oC para proporcionar a composição do título como um sólido cristalino branco. Análise por HPLC demonstra a proporção molar de 2-(2,6-diclorofenil)-1-[(1S,3R)-3-(hidroximetil)-5-(3- hidróxi-3-metilbutil)-1-metil-3,4-di-hidroisoquinolin-2(1H)-il]etanona para ácido 4-hidroxibenzoico no cocristal é de um para um.

Análise por HPLC

[00175] Coluna: Agilent ZORBAX Bonus-RP, Rapid Resolution, 4,6x75 mm, 3,5 μ

[00176] Temperatura da coluna: 30°C

[00177] Volume de injeção: 2 μL

[00178] Detecção: UV

[00179] 2-(2,6-diclorofenil)-1-[(1S,3R)-3-(hidroximetil)-5-(3-hidróxi-3- metilbutil)-1-metil-3,4-di-hidroisoquinolin-2(1H)-il]etanona (Exemplo 1) @ 219 nm

[00180] ácido 4-hidroxibenzoico @ 256 nm

[00181] Taxa de fluxo: 1,5 mL/min

[00182] Fase móvel: A) 0,1% de TFA em água

[00183] B) 0,1% de TFA em acetonitrila Tabela de Gradiente

[00184] Segunda preparação alternativa de cocristal de 2-(2,6- diclorofenil)-1-[(1S,3R)-3-(hidroximetil)-5-(3-hidróxi-3-metilbutil)-1-metil- 3,4-di-hidroisoquinolin-2(1H)-il]etanona e ácido 4-hidroxibenzoico.

[00185] Os compostos 2-(2,6-diclorofenil)-1-[(1S,3R)-3-(hidroximetil) -5-(3-hidróxi-3-metilbutil)-1-metil-3,4-di-hidroisoquinolin-2(1H)-il] etanona (45,06 g, 0,1 mol) e ácido 4-hidroxibenzoico (14,5 g, 1,05 mol eq) são empastados a 23°C em 53:47 de álcool isopropílico : heptano (236mL, 4 volumes) e aquecidos até 65°C. A solução resultante é semeada com cocristais de 2-(2,6-diclorofenil)-1-[(1S,3R)-3- (hidroximetil)-5-(3-hidróxi-3-metilbutil)-1-metil-3,4-di-hidroisoquinolin- 2(1H)-il]etanona e ácido 4-hidroxibenzoico (553 mg, 1,0 % em peso de carga de semente) e agitada a 65°C por 30 minutos. Heptano (943 mL, 16 volumes3) é adicionado a 65°C durante 4,6 horas. A pasta semifluida é agitada a 65°C por um adicional de 30 minutos, arrefecida até 23°C durante 2 horas, agitada de um dia para o outro a 23°C, e filtrada a vácuo. Os sólidos do produto são enxaguados com 10:90 de álcool isopropílico : heptano (2 x 50 mL) e heptano (50 mL) e em seguida são secos em um forno a vácuo a 40°C por 2 horas para produzir a composição do título como um produto cristalino branco (51,3 g, 86,3 % em peso de rendimento).

[00186] Início do ponto de fusão = 162,2°C (calorimetria de varredura diferencial). Preparação 23

[00187] Síntese de cloridrato de 4-[(1S,3R)-3-(hidroximetil)-1-metil- 1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolin-5-il]-2-metil-butan-2-ol.

[00188] Dissolver (1S,3R)-3-[[terc-butil(dimetil)silil]oximetil]-5-(3- hidróxi -3-metil-butil)-1-metil-3,4-di-hidro-1H-isoquinolina-2-carboxilato de terc-butila (161 mg, 0,34 mmol) em acetato de etila (962 μL). Arrefecer sobre um banho de gelo. Adicionar ácido clorídrico (843 μL, 3,37mmol, 4M em dioxana) e agitar sobre o banho de gelo por 4 horas. Concentrar sob pressão reduzida. Dissolver em etanol e concentrar sob pressão reduzida para dar o composto do título (100 mg, 0,34mmol). MS (m/z): 264,2 (M+1).

[00189] O composto que se segue é preparado essencialmente pelo método da Preparação 23.

Preparação 25

[00190] Síntese de 1-[(1S,3R)-3-[[terc-butil(dimetil)silil]oximetil]-5-(3- hidróxi-3-metil-butil)-1-metil-3,4-di-hidro-1H-isoquinolin-2-il]-2-(2-cloro-

[00191] Dissolver 4-[(1S,3R) -3- [[terc-butil(dimetil) silil] oximetil]-1-metil- 1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolin-5-il]-2-metil-butan-2-ol (0,36 g, 0,95 mol em diclorometano (9,5 mL). Adicionar di-isopropiletilamina (499 μL, 2,86mmol). Adicionar ácido 2-(2-cloro-5-metóxi-fenil)acético (229,5 mg, 1,14 mmol). Adicionar O-(7-aza-1H-benzotriazol-1-il)-N, N, N’, N’- tetrametilurônio hexafluorofosfato (561 mg, 1,40 mmol) e agitar em temperatura ambiente de um dia para o outro. Diluir a mistura da reação com diclorometano e lavar com água e salmoura, secar sobre sulfato de sódio, filtrar, e concentrar sob pressão reduzida para dar um óleo marrom. Purificar o resíduo por cromatografia de sílica-gel, elutriando com acetona : hexanos (gradiente, 0-20%) para dar o composto do título como um óleo opaco (0,46 g, 0,82 mmol). MS (m/z): 560,2 (M+1).

[00192] Os compostos que se seguem são preparados essencialmente pelo método da Preparação 25.

Preparação 28

[00193] Síntese de 1-((1S,3R)-3-(((terc-butildimetilsilil)óxi)metil)-1- metil-5-vinil-3,4-di-hidroisoquinolin- 2(1H)-il)-2- (2,6-diclorofenil) etan-1- ona.

[00194] Dissolver 1-[(1S,3R)-5-bromo-3-({[terc-butil(dimetil) silil]óxi} metil) -1-metil-3,4-di-hidroisoquinolin-2(1H)-il]-2-(2,6-diclorofenil) etanona (300 mg, 0,54 mmol) e éster dibutílico de ácido vinilborônico (0,24 mL, 1,08 mmol) em 1,4-dioxana (5,4 mL). Adicionar solução aquosa de Na2CO3 (2,7 mL, 2M em água). Desgaseificar com nitrogênio por 10 min. Adicionar cloreto de bis(trifenilfosfina)paládio(II) (76mg, 0,11 mmol). Aquecer até 80 oC. Agitar por 2 horas. Adicionar água e extrair com acetato de etila três vezes. Combinar os extratos de acetato de etila, secar sobre sulfato de sódio, filtrar, e concentrar sob pressão reduzida para dar um resíduo. Purificar o resíduo por cromatografia de sílica-gel, elutriando com acetato de etila : hexanos (gradiente, 5 a 80%) para dar o composto do título como uma espuma branca (220mg, 0,44 mmol). MS (m/z): 504 (M+1).

Preparação 29

[00195] Síntese de 1-((1S,3R)-3-(((terc-butildimetilsilil)óxi)metil)-5- (1-hidroxietil)-1-metil-3,4-di-hidroisoquinolin-2(1H)-il)-2-(2,6- diclorofenil)etan-1-ona (mistura de diastereômeros) e 1-((1S,3R)-3- (((terc-butildimetilsilil)óxi)metil)-5-(2-hidroxietil)-1-metil-3,4-di- hidroisoquinolin-2(1H)-il)-2-(2,6-diclorofenil)etan-1-ona.

[00196] Dissolver 1-((1S,3R)-3- (((terc- butildimetilsilil) óxi)metil)- 1-metil- 5-vinil-3,4-di-hidroisoquinolin-2(1H)-il)-2-(2,6- diclorofenil)etan-1-ona (477 mg, 0,95 mmol) em THF (9,5 mL). Arrefecer até 0oC. Adicionar BH3 (1,9 mL, 1,89 mmol, 1M em THF). Agitar por 4 h em temperatura ambiente. Arrefecer até 0oC. Adicionar NaOH (3,8 mL, 3 M em água) e H2O2 (0,58 mL, 30% em peso / peso em água). Agitar de um dia para o outro em temperatura ambiente. Adicionar acetato de etila, lavar com solução saturada de NaHCO3 e salmoura, secar sobre sulfato de sódio, filtrar, e concentrar sob pressão reduzida para dar um resíduo. Purificar o resíduo por cromatografia de sílica-gel, elutriando com acetato de etila : hexanos (gradiente, 5 a 60%) para dar 1-((1S,3R)-3-(((terc- butildimetilsilil)óxi)metil)-5-(1-hidroxietil)-1-metil-3,4-di- hidroisoquinolin-2(1H)-il)-2-(2,6-diclorofenil)etan-1-ona (mistura de diastereômeros) como uma espuma branca (92 mg, 0,19 mmol). MS (m/z): 522 (M+1); e 1-((1S,3R)-3-(((terc-butildimetilsilil)óxi)metil)-5- (2-hidroxietil)-1-metil-3,4-di-hidroisoquinolin-2(1H)-il)-2-(2,6- diclorofenil) etan-1-ona como uma espuma branca (254 mg, 0,49 mmol). MS (m/z): 522 (M+1).

Preparação 30

[00197] Síntese de 1-((1S,3R)-5-acetil-3-(((terc-butildimetilsilil) óxi) metil) -1-metil-3,4-di-hidroisoquinolin-2(1H)-il)-2-(2,6-diclorofenil)etan-1- ona.

[00198] Dissolver 1-((1S,3R)-3-(((terc-butildimetilsilil)óxi)metil)-5-(1- hidroxietil)-1-metil-3,4-di-hidroisoquinolin-2(1H)-il)-2-(2,6-diclorofenil) etan-1-ona (92 mg, 176 μmol, mistura de dois diastereômeros) em CH2Cl2 (1,8 mL). Adicionar NaHCO3 (92 mg, 1,1mmol) e 3,3,3- Triacetóxi-3-iodoftalida (90 mg, 211 μmol) em temperatura ambiente. Agitar 40 min. Adicionar solução saturada de NaHCO3 e solução saturada de Na2S2O3, extrair com acetato de etila três vezes. Combinar os extratos de acetato de etila, secar sobre sulfato de sódio, filtrar, e concentrar sob pressão reduzida para dar um resíduo. Purificar o resíduo por cromatografia de sílica-gel, elutriando com acetato de etila : hexanos (gradiente, 5 a 60%) para dar o composto do título como uma espuma branca (0,068 g, 130 μmol). MS (m/z): 522 (M+1).

[00199] Os compostos que se seguem são preparados essencialmente pelo método da Preparação 30.

Preparação 33

[00200] Síntese de 2-((1S,3R)-3-(((terc-butildimetilsilil)óxi)metil)-2- (2-(2,6-diclorofenil)acetil)-1-metil-1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolin-5-il) acetaldeído.

[00201] Dissolver 1-((1S,3R)-3-(((terc-butildimetilsilil)óxi)metil)-5-(2- hidroxietil)-1-metil-3,4-di-hidroisoquinolin-2(1H)-il)-2-(2,6-diclorofenil) etan-1-ona (160 mg, 0,31 mmol) em CH2Cl2 (3,1 mL). Adicionar NaHCO3 (160 mg, 1,90 mmol) e 3,3,3-Triacetóxi-3-iodogtalida (156mg, 0,37 mmol) em temperatura ambiente. Agitar por 40 min. Adicionar solução saturada de NaHCO3 e solução saturada de Na2S2O3, extrair com acetato de etila três vezes. Combinar os extratos de acetato de etila, secar sobre sulfato de sódio, filtrar, e concentrar sob pressão reduzida para dar um resíduo. Purificar o resíduo por cromatografia de sílica-gel, elutriando com acetato de etila : hexanos (gradiente, 5 a 60%) para dar o composto do título como uma espuma branca (140mg, 0,27 mmol). MS (m/z): 520,2 (M+1).

Preparação 34

[00202] Síntese de 1-((1S,3R)-3-(((terc-butildimetilsilil)óxi)metil)-5- (2-hidroxipropil)-1-metil-3,4-di-hidroisoquinolin-2(1H)-il)-2-(2,6- diclorofenil)etan-1-ona (mistura de dois diastereômeros).

[00203] Dissolver 2-((1S,3R)-3-(((terc-butildimetilsilil)óxi)metil)-2-(2- (2,6-diclorofenil)acetil)-1-metil-1,2,3,4- tetra- hidroisoquinolin-5-il) acetaldeído (138 mg, 0,27 mmol) em THF (2,7 mL). Arrefecer até 0oC, acrescentar MeMgCl (0,097 mL, 0,29 mmol, 3M em Et2O). Agitar por 30 min a 0 oC. Adicionar água e extrair com acetato de etila três vezes. Combinar os extratos de acetato de etila, secar sobre sulfato de sódio, filtrar, e concentrar sob pressão reduzida para dar um resíduo. Purificar o resíduo por cromatografia de sílica-gel, elutriando com acetato de etila : hexanos (gradiente, 2 a 60%) para dar o composto do título como uma espuma branca (122 mg, 0,23 mmol). MS (m/z): 536,2 (M+1).

[00204] O composto que se segue é preparado essencialmente pelo método da Preparação 34.

Preparação 36

[00205] Síntese de 1-((1S,3R)-5-bromo-3-(((terc-butildimetilsilil) óxi) metil)-1-metil-3,4-di-hidroisoquinolin-2(1H)-il)-2-(2-cloro-6-fluorofenil) etan-1-ona.

[00206] Dissolver (1S,3R)-5-bromo-3-(((terc-butildimetilsilil) óxi) metil) -1-metil-1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolina (1,85 g, 4,99 mmol) e ácido 2-cloro-6-fluorofenilacético (1,04 g, 5,49 mmol) em diclorometano (50mL). Adicionar O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametilurônio hexafluorofosfato (2,85 g, 7,49 mmol) e di-isopropiletilamina (1,3 mL, 7,49 mmol) em temperatura ambiente. Agitar por 3 horas. Adicionar água e extrair com diclorometano três vezes. Combinar os extratos de diclorometano, secar sobre sulfato de sódio, filtrar, e concentrar sob pressão reduzida para dar um resíduo. Purificar o resíduo por cromatografia de sílica-gel, elutriando com acetato de etila : hexanos (gradiente, 5 a 60%) para dar o composto do título como uma espuma branca (2,2 g, 4,07 mmol). MS (m/z): 540,2 (M+1).

[00207] Síntese de 1-((1S,3R)-3-(((terc-butildimetilsilil)óxi)metil)-1- metil-5-vinil-3,4-di-hidroisoquinolin-2(1H)-il)-2-(2-cloro-6-fluorofenil) etan-1-ona.

[00208] Dissolver 1-((1S,3R)-5-bromo-3-(((terc-butildimetilsilil) óxi) metil)- 1-metil- 3,4- di-hidroisoquinolin-2(1H)-il)-2-(2-cloro-6-fluorofenil) etan-1-ona (1,8 g, 3,33 mmol) e éster dibutílico de ácido vinilborônico (1,5 mL, 6,65 mmol) em 1,4-dioxana (22 mL). Adicionar solução aquosa de Na2CO3 (11 mL, 2M em água). Desgaseificar com nitrogênio por 10 min. Adicionar cloreto de bis(trifenilfosfina)paládio(II) (467 mg, 0,67mmol). Aquecer até 80 oC. Agitar por 2 horas. Adicionar água e extrair com acetato de etila três vezes. Combinar os extratos de acetato de etila, secar sobre sulfato de sódio, filtrar, e concentrar sob pressão reduzida para dar um resíduo. Purificar o resíduo por cromatografia de sílica-gel, elutriando com acetato de etila : hexanos (gradiente, 5 a 40%) para dar o composto do título como uma espuma branca (1,54g, 3,15 mmol). MS (m/z): 488,2 (M+1).

Preparação 38

[00209] Síntese de 1-((1S,3R)-3-(((terc-butildimetilsilil)óxi)metil)-5- (2-hidroxietil)-1-metil-3,4-di-hidroisoquinolin-2(1H)-il)-2-(2-cloro-6- fluorofenil)etan-1-ona.

[00210] Dissolver 1-((1S,3R)-3- (((terc-butildimetilsilil) óxi) metil) -1- metil- 5-vinil- 3,4-di- hidroisoquinolin -2(1H)-il) -2-(2-cloro-6- fluorofenil) etan -1-ona (1,54 g, 3,15 mmol) em THF (31 mL). Arrefecer até 0 oC. Adicionar BH3 (6,3 mL, 6,3 mmol, 1M em THF). Agitar por 4 h em temperatura ambiente. Arrefecer até 0 oC. Adicionar NaOH (12,6 mL, 3 M em água) e H2O2 (1,92 mL, 30% em peso em água). Agitar de um dia para o outro em temperatura ambiente. Adicionar acetato de etila, lavar com solução saturada de NaHCO3 e salmoura, secar sobre sulfato de sódio, filtrar, e concentrar sob pressão reduzida para dar um resíduo. Purificar o resíduo por cromatografia de sílica-gel, elutriando com acetato de etila : hexanos (gradiente, 5 a 60%) para dar 1- ((1S,3R)-3-(((terc-butildimetilsilil)óxi)metil)-5-(2-hidroxietil)-1-metil-3,4- di-hidroisoquinolin-2(1H)-il)-2-(2-cloro-6-fluorofenil)etan-1-ona como uma espuma branca (1,08 g, 2,13 mmol). MS (m/z): 506,2 (M+1). Preparação 39

[00211] Síntese de 2-((1S,3R)-3-(((terc-butildimetilsilil)óxi)metil)-2- (2-(2-cloro-6-fluorofenil)acetil)-1-metil-1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolin-5-il) acetaldeído.

[00212] Dissolver 1-((1S,3R)-3-(((terc-butildimetilsilil)óxi)metil)-5-(2- hidroxietil)-1-metil-3,4-di-hidroisoquinolin-2(1H)-il)-2-(2-cloro-6- fluorofenil)etan-1-ona (1,08 g, 2,13 mmol) em CH2Cl2 (21 mL). Adicionar NaHCO3 (1,08 g, 12,9 mmol) e 3,3,3-triacetóxi-3-iodoftalida (1,09g, 2,56 mmol) em temperatura ambiente. Agitar por 40 min. Adicionar solução saturada de NaHCO3 e solução saturada de Na2S2O3, extrair com acetato de etila três vezes. Combinar os extratos de acetato de etila, secar sobre sulfato de sódio, filtrar, e concentrar sob pressão reduzida para dar um resíduo. Purificar o resíduo por cromatografia de sílica-gel, elutriando com acetato de etila : hexanos (gradiente, 5 a 60%) para dar o composto do título como uma espuma branca (0,87 g, 1,73 mmol).

Preparação 40

[00213] Síntese de 1-((1S,3R)-3-(((terc-butildimetilsilil) óxi) metil)-1- metil-1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolin-5-il)propan-2-ona.

[00214] Misturar (1S,3R)-5-bromo-3-(((terc-butildimetilsilil)óxi)metil)-1- metil-1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolina cloridrato (2,5 g, 6,14 mmol), acetona (30 mL), fosfato de potássio, Tribásico, N-hidrato (3,99 g, 18,4mmol), CataCXium A (di(1-adamantil)-n-butilfosfina, 220 mg, 0,61mmol) e tris(dibenzilidenoacetona)dipaládio(0) (290 mg, 0,31mmol). Agitar por 2 dias a 70 oC. Arrefecer até 0 oC. Adicionar água e extrair com acetato de etila três vezes. Combinar os extratos de acetato de etila, secar sobre sulfato de sódio, filtrar, e concentrar sob pressão reduzida para dar um resíduo. Purificar o resíduo por cromatografia de sílica-gel, elutriando com acetato de etila : hexanos (gradiente, 10 a 100%) para dar o composto do título como uma espuma branca (1,3 g, 3,74 mmol). MS (m/z): 348 (M+1).

Preparação 41

[00215] Síntese de 1-((1S,3R)-3-(((terc-butildimetilsilil) óxi) metil) -2(2- (6- cloro -2- fluoro -3- metoxifenil) acetil)- 1-metil- 1,2,3,4- tetra- hidroisoquinolin -5-il) propan-2-ona.

[00216] Dissolver 1-((1S,3R)-3-(((terc-butildimetilsilil)óxi)metil)-1- metil-1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolin-5-il)propan-2-ona (1,3 g, 3,74 mmol) em diclorometano (37 mL). Adicionar di-isopropiletilamina (2,0 mL, 11,22 mmol), ácido 2-(6-cloro-2-fluoro-3-metoxifenil)acético (1,06 g, 4,86 mmol), O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametilurônio hexafluorofosfato (1,91 g, 4,86 mmol) e em temperatura ambiente. Agitar por 16 horas. Lavar com solução aquosa saturada de NaHCO3, secar sobre sulfato de sódio, filtrar, e concentrar sob pressão reduzida para dar um resíduo. Purificar o resíduo por cromatografia de sílica- gel, elutriando com acetato de etila : hexanos (gradiente, 5 a 50%) para dar o composto do título como uma espuma branca (1,6 g, 2,69 mmol). MS (m/z): 548,6 (M+1). Preparação 42

[00217] Síntese de 1-((1S,3R)-3-(((terc-butildimetilsilil)óxi)metil)-5- (2-hidroxipropan-2-il)-1-metil-3,4-di-hidroisoquinolin-2(1H)-il)-2-(2,6- diclorofenil)etan-1-ona.

[00218] Dissolver 1-((1S,3R)-5-acetil-3-(((terc-butildimetilsilil) óxi) metil)-1-metil-3,4-di-hidroisoquinolin-2(1H)-il)-2-(2,6-diclorofenil)etan-1- ona (68 mg, 130 μmol) em THF (1,3 mL). Arrefecer até 0 oC, acrescentar MeMgCl (87 μL, 261 μmol, 3M em Et2O). Agitar por 30 min a 0 oC e por 30 min em temperatura ambiente. Adicionar MeMgCl (87 μL, 261μmol, 3M em Et2O) em temperatura ambiente. Agitar por 60 min. Adicionar água e extrair com acetato de etila três vezes. Combinar os extratos de acetato de etila, secar sobre sulfato de sódio, filtrar, e concentrar sob pressão reduzida para dar o composto do título como uma espuma branca (0,054 g, 100 μmol). MS (m/z): 536,2 (M+1).

[00219] Os compostos que se seguem são preparados essencialmente pelo método da Preparação 42.

Exemp o 3

[00220] Síntese de 2-(2,6-diclorofenil)-1-((1S,3R)-3-(hidroximetil)-5- (2-hidroxipropan-2-il)-1-metil-3,4-di-hidroisoquinolin-2(1H)-il)etan-1- ona.

[00221] Dissolver 1-((1S,3R)-3-(((terc-butildimetilsilil)óxi)metil)-5-(2- hidroxipropan-2-il)-1-metil-3,4-di-hidroisoquinolin-2(1H)-il)-2-(2,6- diclorofenil)etan-1-ona (0,054 g, 100 μmol) em THF (1,0 mL). Adicionar fluoreto de tetrabutilamônio (0,11 mL, 110 μmol, 1M em THF). Agitar por 30 min. Adicionar solução saturada de cloreto de amônio e extrair com acetato de etila três vezes. Combinar os extratos de acetato de etila, secar sobre sulfato de sódio, filtrar, e concentrar sob pressão reduzida para dar um resíduo. Purificar o resíduo por cromatografia de sílica-gel, elutriando com acetato de etila : hexanos (gradiente, 10 a 100%) para dar o composto do título como uma espuma branca (0,03g, 71 μmol). MS (m/z): 422 (M+1).

Exemplo 3a

[00222] Preparação de 2-(2,6-diclorofenil)-1-((1S,3R)-3-(hidroximetil) - 5-(2-hidroxipropan-2-il)-1-metil-3,4-di-hidroisoquinolin-2(1H)-il)etan-1-ona cristalina.

[00223] Dissolver 1,932 g de 2-(2,6-diclorofenil) -1-((1S,3R)-3- (hidroximetil)-5-(2-hidroxipropan-2-il)-1-metil-3,4-di-hidroisoquinolin- 2(1H)-il)etan-1-ona em uma concentração de 128 mg/mL em éter ciclopentil metílico enquanto agitando a 80°C/1000 rpm. A solução comaça a precipitar um sólido branco o qual é em seguida arrefecido até a temperatura ambiente depois de um breve período de empastação. O sólido é isolado por filtração a vácuo e é seco sob nitrogênio rapidamente antes de continuar em um forno a vácuo a 65°C por 2 horas. 1,606 g do composto do título é recuperado para uma produção de 86,8%. Difração de Pó de Raios X

[00224] Os padrões de XRD de sólidos cristalinos são obtidos em um difractômetro de pó de raios X Bruker D4 Endeavor, equipado com uma fonte de CuKa (À = 1,54060 Â) e um detector Vantec, operando a 35 kV e 50 mA. A amostra é escaneada entre 4 e 40° em 2θ, com um tamanho da etapa de 0,0087° em 2θ e uma taxa de varredura de 0,5 segundo/etapa, e com 0,6 mm de divergência, 5,28 antidispersão fixa, e fendas do detector de 9,5 mm. O pó a seco é acondicionado sobre um suporte de amostras de quartzo e é obtida uma superfície lisa usando uma lâmina de vidro. É de conhecimento geral na técnica da cristalografia que, para qualquer forma cristalina dada, as intensidades relativas dos picos de difração podem variar devido a orientação preferencial resultante de fatores tais como morfologia do cristal ou hábito. Em que estão presentes os efeitos de orientação preferencial, as intensidades de pico são alteradas, mas as posições de pico características do polimorfo são inalteradas. Vide, por exemplo, The U. S. Pharmacopeia 35 - National Formulary 30 Chapter <941> Characterization of crystalline e partially crystalline solids by X-ray powder diffraction (XRPD) Official December 1, 2012-May 1, 2013. Além disso, também é de conhecimento geral na técnica da cristalografia que para qualquer forma cristalina dada as posições de pico angular podem variar ligeiramente. Por exemplo, as posições de pico podem se deslocar devido a uma variação na temperatura ou na umidade na qual uma amostra é analisada, devido a deslocamento da amostra, ou à presença ou ausência de um padrão interno. No presente caso, a variabilidade da posição de pico de ± 0,2 em 2θ vai levar em conta estas potenciais variações sem prejudicar a identificação inequívoca da forma cristalina indicada. A confirmação de uma forma cristalina pode ser feita com base em qualquer combinação única de picos distintivos (em unidades de ° 2θ), tipicamente os picos mais proeminentes. Os padrões de difração das formas cristalinas, coletados em temperatura ambiente e umidade relativa, são ajustados com base no padrão NIST 675 com picos a 8,85 e 26,77 graus 2-Teta.

[00225] Uma amostra preparada a partir do composto cristalino do Exemplo 3a é caracterizada por um padrão de XRD usando radiação CuKα como tendo picos de difração (valores 2-Teta) conforme descrito na Tabela 10 abaixo. Especificamente o padrão contém um pico a 14,3 em combinação com um ou mais dos picos selecionados entre o grupo consistindo em 15,7, 18,0, 18,7, 22,4 e 25,1 com uma tolerância para os ângulos de difração de 0,2 grau. Tabela 10. Picos de difração de pó de raios X do Exemplo 3a

[00226] Os compostos que se seguem são preparados essencialmente pelo método do Exemplo 3.

Exemplo 4a

[00227] Preparação de 2-(2,6-diclorofenil)-1-((1S,3R)-5-(2-hidróxi-2- metilpropil)-3-(hidroximetil)-1-metil-3,4-di-hidroisoquinolin-2(1H)-il)etan- 1-ona cocristalina e ácido 4-hidroxibenzoico.

[00228] Colocar 2-(2,6- diclorofenil) -1-((1S,3R) -5- (2- hidróxi-2- metilpropil) -3-(hidroximetil)-1-metil-3,4-di-hidroisoquinolin-2(1H)-il) etan- 1-ona (98,33 mg) e de ácido 4-hidroxibenzoico (35,40 mg) em um frasco de 20 mL equipado com uma barra de agitação. O frasco é preenchido até a borda com água (~20 mL) e empastado a 45°C (configuração da placa de agitação) de um dia para o outro. A amostra é empastada adicionalmente durante as 48 horas a 60°C sem formação de cristais. Acetona (1mL) é adicionada, e a amostra é empastada de um dia para o outro a 40°C/1000 rpm. O material aparece cristalino. O sólido branco resultante é isolado por filtração a vácuo e é seco no local sob vácuo e corrende de ar por 10 minutos.

Difração de Pó de Raios X

[00229] Os padrões de difração de raios X (XRD) de sólidos cristalinos são obtidos em um difractômetro de pó de raios X Bruker D4 Endeavor, equipado com uma fonte de CuKa À = 1,54060 Â e um detector Vantec, operando a 35 kV e 50 mA. A amostra é escaneada entre 4 e 40° em 2θ, com um tamanho da etapa de 0,009° em 2θ e uma taxa de varredura de 0,5 segundos/etapa, e com 0,6 mm de divergência, 5,28 anti-dispersão fixa, e fendas do detector de 9,5 mm. O pó a seco é acondicionado sobre um suporte de amostras de quartzo e é obtida uma superfície lisa usando uma lâmina de vidro. Os padrões de difração das formas cristalinas são coletados em temperatura ambiente e umidade relativa. É de conhecimento geral na técnica da cristalografia que, para qualquer forma cristalina dada, as intensidades relativas dos picos de difração podem variar devido à orientação preferencial resultante de fatores tais como morfologia do cristal ou hábito. Em que estão presentes os efeitos de orientação preferencial, as intensidades de pico são alteradas, mas as posições de pico características do polimorfo são inalteradas. Além disso, também é de conhecimento geral na técnica da cristalografia que para qualquer forma cristalina dada as posições de pico angular podem variar ligeiramente. Por exemplo, as posições de pico podem se deslocar devido a uma variação na temperatura ou na umidade na qual uma amostra é analisada, devido a deslocamento da amostra, ou à presença ou ausência de um padrão interno. No presente caso, uma variabilidade da posição de pico de 0,2 em 2θ vai levar em conta estas potenciais variações sem prejudicar a identificação inequívoca da forma cristalina indicada. A confirmação de uma forma cristalina pode ser feita com base em qualquer combinação única de picos distintivos (em unidades de ° 2θ), tipicamente os picos mais proeminentes. (United States Pharmacopeia #35, National Formulary #30, Chapter <941>, pages 427-432, 2012). Os padrões de difração das formas cristalinas, coletados em temperatura ambiente e umidade relativa, são ajustados com base no material de referência do padrão NBS 675 (mica) com picos a 8,85 e 26,77 graus 2-Teta.

[00230] Uma amostra preparada a partir do co-cristal do Exemplo 4a é caracterizada por um padrão de difração de raio X usando radiação CuKα como tendo picos de difração (valores 2-Teta) conforme descrito na Tabela 11 abaixo, e em particular tendo picos a 7,0 em combinação com um ou mais dos picos selecionados entre o grupo consistindo em 18,8, 16,1, e 19,3; com uma tolerância para os ângulos de difração de 0,2 grau. Tabela 11: Picos de difração de pó de raios X do Exemplo 4a

Exemplo 7

[00231] Síntese de 2-(2-cloro-6-metóxi-fenil)-1-[(1S,3R)-3-(hidroximetil) -5-(3-hidróxi-3-metil-butil)-1-metil-3,4-di-hidro-1H-isoquinolin -2-il]etanona.

[00232] Dissolver 1-[(1S,3R)-3-[[terc-butil(dimetil)silil]oximetil]-5-(3- hidróxi-3-metil-butil)-1-metil-3,4-di-hidro-1H-isoquinolin-2-il]-2-(2-cloro- 6-metóxi-fenil)etanona (0,58 g, 1,04 mmol) em THF (5,3 mL). Adicionar ácido acético (16 mL, 279 mmol) e água (5,3 mL). Agitar a 50°C por 1,5 hora. Concentrar sob pressão reduzida. Dissolver o resíduo em acetato de etila e lavar com solução saturada de bicarbonato de sódio, água, e salmoura. Secar sobre sulfato de sódio, filtrar, e concentrar sob pressão reduzida. Purificar o resíduo por cromatografia de sílica- gel, elutriando com acetona : hexanos (gradiente, 0 a 30%) para dar o composto do título como uma espuma branca (0,34 g, 0,76 mmol). MS (m/z): 446,0 (M+1).

[00233] O composto que se segue é preparado essencialmente pelo método do Exemplo 8.

Exemplo 10

[00234] Síntese de 2-(2-clorofenil)-1-[(1S,3R)-3-(hidroximetil)-5-(3- hidróxi-3-metil-butil)-1-metil-3,4-di-hidro-1H-isoquinolin-2-il]etanona.

[00235] Dissolver ácido 2-(2-clorofenil)acético (96,8 mg, 0,56 mmol) e O-(7-aza-1H-benzotriazol-1-il)-N, N, N’, N’-tetrametilurônio hexafluorofosfato (200 mg, 0,52 mmol) em diclorometano (2 mL). Adicionar di-isopropiletilamina (183 μL, 1,05 mmol). Agitar em temperatura ambiente por 20 min. Adicionar esta mistura da reação a uma solução de 4-[(1S,3R)-3-(hidroximetil)-1-metil-1,2,3,4-tetra- hidroisoquinolin-5-il]-2-metil-butan-2-ol (92 mg, 0,35 mol) em diclorometano (0,4 mL). Enxaguar com diclorometano (1 mL) e agitar em temperatura ambiente por 3,5 horas. Diluir a mistura da reação com água e agitar. Extrair com diclorometano e secar os extratos sobre sulfato de sódio, filtrar, e concentrar sob pressão reduzida. Purificar o resíduo por cromatografia de sílica-gel, elutriando com acetato de etila : hexanos (gradiente, 0 a 60%) para dar um resíduo. Purificar o resíduo por cromatografia de sílica-gel, elutriando com 10% (2N amônia em metanol): diclorometano para dar o composto do título como uma espuma branca (78 mg, 0,19mmol). MS (m/z): 416,2 (M+1).

[00236] O composto que se segue é preparado essencialmente pelo método do Exemplo 10.

Exemplo 1 2

[00237] Síntese de 3-cloro-2-[2-[(1S,3R)-3-(hidroximetil)-5-(3-hidróxi -3-metil-butil)-1-metil-3,4-di-hidro-1H-isoquinolin-2-il] -2-oxo-etil] benzonitrilo.

[00238] Em um frasquinho empastar ácido 2-(2-cloro-6-ciano- fenil)acético (75,4 mg, 0,37 mmol) em acetonitrila (0,3 mL). Adicionar trietilamina (114 μL, 0,82 mmol) e agitar até os sólidos dissolverem. Adicionar O-(benzotriazol-1-il)-N, N, N’, N’-tetrametilurônio tetrafluoroborato (165 mg, 0,51 mmol) e agitar em temperatura ambiente por 10 min. Em um frasco separado empastar cloridrato de 4-[(1S,3R)-3-(hidroximetil)-1-metil-1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolin-5-il]-2- metil-butan-2-ol (102 mg, 0,34 mol) em acetonitrila (0,3 mL). Adicionar trietilamina (227 μL, 1,63 mmol) e se forma um precipitado. Agitar 10 min em temperatura ambiente. Transferir a mistura da reação de ácido 2-(2-cloro-6-ciano-fenil)acético, acetonitrilo, trietilamina, e O- (benzotriazol-1-il)-N, N, N’, N’-tetrametilurônio tetrafluoroborato do frasquinho para o frasco contendo a mistura da reação de cloridrato de 4-[(1S,3R)-3-(hidroximetil)-1-metil-1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolin-5-il]-2- metil-butan-2-ol, acetonitrila e trietilamina. Enxaguar com acetonitrilo (0,9 mL) e agitar a mistura da reação homogênea em temperatura ambiente de um dia para o outro. Diluir a mistura da reação com água e extrair com acetato de etila. Lavar os extratos de acetato de etila com água, solução saturada de bicarbonato de sódio e salmoura. Secar os extratos sobre sulfato de sódio, filtrar, e concentrar sob pressão reduzida. Purificar o resíduo por cromatografia de sílica-gel, elutriando com acetato de etila : hexanos (0 a 60% de gradiente) para dar um resíduo. Purificar por cromatografia de fase reversa sobre sílica modificada com C18 para produzir o composto do título como um óleo verde (34 mg, 0,08mmol): (m/z): 441,2 (M+1).

Preparação 46

[00239] Síntese de ácido 2-(2-cloro-6-metil-fenil)acético.

[00240] A um frasco de tampa de rosca de 100 mL adicionar 2-(2- cloro-6-metil-fenil)acetonitrilo (8,0 g, 48,30 mmol) e hidróxido de sódio aquoso a 3 N (80 mL, 240,00 mmol). Aquecer a mistura a 110°C por 18 horas. Arrefecer a mistura até 10°C e acidificar até pH 1 com ácido clorídrico concentrado (15 mL). Extrair a mistura com acetato de etila. Separar e secar a fase orgânica sobre sulfato de sódio. Filtrar, e concentrar até a secagem. Cristallizar a partir de éter dietílico para produzir o composto do título como um sólido acinzentado (7,20 g, 39,00mmol): MS (m/z): 184,8 (M+1).

Preparação 47

[00241] Síntese de terc-butil 2-(2-cloro-5-isopropil-fenil)acetato.

[00242] Adicionar bis(dibenzilidenoacetona)paládio (49,2 mg, 85,6μmol) a um frasco de fundo redondo e selar com um septo. Jatear com nitrogênio. Adicionar tri-terc-butilfosfina (85,6 μL, 85,6 μmol, 1M em tolueno) e bis(trimetilsilil)amida de lítio (12,8 mL, 11,56 mmol, 0,9M em metilciclo-hexanos) através de uma seringa. Adicionar 2-bromo-1- cloro-4-isopropil-benzeno (1,0 g, 4,28 mmol) e acetato de t-butila (865,2 μL, 6,42 mmol) através de uma seringa. Adicionar tolueno (10,7mL) através de uma seringa e a mistura da reação se torna quente ao toque. Colocar sobre um banho de água em temperatura am-biente e agitar por 3 horas. Armazenar a mistura da reação no freezer durante o fim de semana. Aquecer a mistura da reação até a temperatura ambiente. Diluir a mistura da reação com éter dietílico e adicionar solução saturada de cloreto de amônio. Separar as camadas e lavar a camada de éter dietílico com solução saturada de cloreto de sódio. Secar sobre sulfato de sódio, filtrar e concentrar sob pressão reduzida. Purificar o resíduo por cromatografia de sílica-gel elutriando com acetona : hexanos (0 a 2% de gradiente) para dar o composto do título (1,04 g). Purificar novamente por cromatografia de sílica-gel elutriando com diclorometano : hexanos (0 a 20% de gradiente) para dar o composto do título (490 mg, 1,82 mmol). MS (m/z): 213,0 (M- tBu+1).

[00243] O composto que se segue é preparado essencialmente pelo método da Preparação 47.

Preparação 49

[00244] Síntese de ácido 2-(2-cloro-5-isopropil-fenil)acético.

[00245] Dissolver terc-butil 2-(2-cloro-5-isopropil-fenil)acetato (483mg, 1,80 mmol) em diclorometano (5,1 mL). Adicionar ácido trifluoroacético (1,09 mL, 14,4 mmol) lentamente e agitar a mistura da reação por 3 horas em temperatura ambiente. Concentrar sob pressão reduzida para dar o composto do título (380 mg, 1,79 mmol). MS (m/z): 229,8 (M+18).

[00246] O composto que se segue é preparado essencialmente pelo método da Preparação 49.

Preparação 51

[00247] Síntese de isopropil 2-(3-isopropoxifenil)acetato.

[00248] Dissolver ácido 2-(3-hidroxifenil)acético (5,04 g, 32,8 mmol) em dimetilformamida (49,9mL). Adicionar carbonato de potássio (15,1g, 108,2 mmol) e 2-iodopropano (15,1 mL, 150,8 mmol). Aquecer a mistura da reação até 80°C por 6 horas. Agitar em temperatura ambiente por 64 horas. Aquecer a mistura da reação até 95°C por 6 horas.

[00249] Adicionar carbonato de potássio adicional (9,2 g, 65,6mmol) e 2- iodopropano (15,1 mL, 150,8 mmol) e aquecer a mistura da reação até 90°C de um dia para o outro. Aumentar a temperatura da mistura da reação até 150°C e aquecer de um dia para o outro. Arrefecer até a temperatura ambiente e concentrar sob pressão reduzida. Diluir o resíduo com água e acetato de etila. Separar as camadas e extrair a camada de água com acetato de etila. Combinar os extratos de acetato de etila e lavar com água e salmoura, secar sobre sulfato de sódio, filtrar e concentrar sob pressão reduzida. Purificar o resíduo por cromatografia de sílica-gel elutriando com acetona : hexanos (0 a 20% de gradiente) para dar o composto do título (4,79 g, 20,27 mmol). MS (m/z): 237,0 (M+H), 254,0 (M+18).

[00250] O composto que se segue é preparado essencialmente pelo método da Preparação 51.

[00251] Síntese de ácido 2-(3-isopropoxifenil)acético.

[00252] Dissolver isopropil 2-(3-isopropoxifenil)acetato (4,2 g, 17,8mmol) em tetra-hidrofurano (35,6 mL). Adicionar água (35,6 mL) e hidróxido de lítio (6,05 g, 248,8 mmol). Aquecer a mistura da reação até 66°C de um dia para o outro. Concentrar sob pressão reduzida para remover o tetra-hidrofurano. Diluir a mistura da reação com água e lavar com éter dietílico. Acidificar a camada de água com HCl a 5 N até pH 1. Extrair a camada de água com éter dietílico. Lavar o éter dietílico, extrair com água e salmoura, secar sobre sulfato de sódio, filtrar e concentrar sob pressão reduzida para dar o composto do título (3,37 g, 17,35 mmol). MS (m/z): 195,0 (M+1), 212,0 (M+18).

[00253] O composto que se segue é preparado essencialmente pelo método da Preparação 53.

Preparação 55

[00254] Síntese de ácido 2-(2-cloro-5-isopropóxi-fenil)acético.

[00255] Dissolver ácido 2-(3-isopropoxifenil)acético (3,24 g, 16,6mmol) em dimetilformamida (11,1 mL). Arrefecer sobre um banho de gelo e adicionar uma solução de N-clorossuccinimida (2,44 g, 18,3mmol) em dimetilformamida (12,2 mL). Agitar de um dia para o outro deixando a reação atingir a temperatura ambiente. Diluir a mistura da reação com éter dietílico. Lavar com água. Extrair a água de lavagem com éter dietílico. Combinar os extratos de éter dietílico e lavar com água e salmoura, secar sobre sulfato de sódio, filtrar e concentrar sob pressão reduzida. Purificar o resíduo por cromatografia de sílica-gel elutriando com acetona : hexanos (0 a 25% de gradiente) para dar o composto do título (3,08 g, 13,47 mmol). MS (m/z): 245,8 (M+18).

[00256] O composto que se segue é preparado essencialmente pelo método da Preparação 55.

Preparação 57

[00257] Síntese de ácido 2-(2-cloro-6-ciano-fenil)acético de metila.

[00258] Adicionar uma solução a 2 M de di-isopropilamida de lítio em tetra-hidrofurano (62,6 mL, 461,8 mmol) a tetra-hidrofurano (1 L) a -78°C. Lentamente acrescentar 1,3-dimetil-3,4,5,6-tetra-hidro-2(1H)- pirimidinona (19,94 mL, 164,91 mmol) seguida por adição gota a gota de 3-cloro-2-metil-benzonitrila (20 g , 131,93 mmol). Manter a mistura a -78°C com agitação por 5 min. Purgar o vaso de reação com dióxido de carbono (1 L; 25,65 mol) por 15 min. Adicionar água (100 mL) e agitar por 2 horas. Adicionar solução aquosa de hidróxido de sódio a 10 M para aumentar o pH da fase aquosa para >12. Separar a camada aquosa e lavar com éter dietílico. Acidificar a camada aquosa com ácido clorídrico concentrado até pH-1 e extrair com acetato de etila. Separar a fase orgânica e secar sobre sulfato de sódio. Filtrar e concentrar até a secagem para produzir o composto do título como um sólido acinzentado (16,0 g; 81,80 mmol). MS (m/z): 195,9 (M+1).

Preparação 58

[00259] Síntese de metil (1S,3R)-3-[[terc-butil(dimetil)silil]oximetil]-1- metil-1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolina-5-carboxilato.

[00260] Em um vaso de pressão de vidro, contendo uma barra de agitação magnética, suspender (1S,3R)-5-bromo-3-((terc- butildimetilsililóxi) metil)-1-metil-1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolina (30 g, 81,0 mmol), acetato de paládio (1,8 g, 8,1 mmol), bis-(1,3- difenilfosfino)propano (6,7 g, 16,2mmol) e carbonato de sódio (34,3 g, 324,0 mmol) em uma mistura de dimetil sulfóxido (360 mL) e metanol (180 mL). Carregar o vaso com monóxido de carbono (410 kPa) e aquecer até 100°C com agitação. Manter a temperatura a 100°C por 19 horas. Deixar a mistura arrefecer até a temperatura ambiente. Filtrar a suspensão resultante e diluir o filtrado com éter metil terc-butílico (1000 mL). Lavar a solução com salmoura (3 x 500 mL). Secar sobre sulfato de sódio, filtrar e concentrar sob pressão reduzida para produzir o composto do título como um óleo laranja escuro (26,7 g, 76,4 mmol): MS (m/z): 350,0 (M+1).

Preparação 59

[00261] Síntese de (1S,3R)-3-[[terc-butil(dimetil)silil]oximetil]-2-[2-(6- cloro-2-fluoro-3-metóxi-fenil)acetil]-1-metil-3,4-di-hidro-1H-isoquinolina- 5-carboxilato de metila.

[00262] Acrescentar trietilamina (0,36 mL, 2,57 mmol) a uma solução agitada de (1S,3R)-3-[[terc-butil(dimetil)silil]oximetil]-1-metil-1,2,3,4-tetra- hidroisoquinolina-5-carboxilato de metila (500 mg, 1,29 mmol), hexafluorofosfato de (benzotriazol-1-ilóxi)tripirrolidinofosfônio (1,02 g, 1,93 mmol) e ácido 2-(6-cloro-2-fluoro-3-metóxi-fenil)acético (356 mg, 1,54 mmol) em dimetilformamida (6,4 mL). Agitar em temperatura ambiente por 16 horas. Adicionar solução aquosa saturada de cloreto de amônio (60 mL). Extrair com acetato de etila (3 x 50 mL). Lavar as camadas orgânicas combinadas com salmoura. Secar sobre sulfato de magnésio, filtrar e concentrar sob pressão reduzida. Purificar por cromatografia por cintilação para produzir o composto do título como um sólido amarelo amorfo (703 mg, 1,15mmol): MS (m/z): 550,0 (M+1).

[00263] Os compostos que se seguem são preparados essencialmente pelo método da Preparação 59.

Exemplo 13

[00264] Síntese de 2-(6-cloro-2-fluoro-3-metóxi-fenil)-1-[(1S,3R)-3- (hidroximetil)-5-(1-hidróxi-1-metil-etil)-1-metil-3,4-di-hidro-1H- isoquinolin-2-il]etanona.

[00265] Adicionar 0,6 M de solução de complexo de cloreto de lantânio (III) bis(lítio cloreto) em tetra-hidrofurano (1,92 mL, 1,15 mmol) a uma solução agitada de (1S,3R)-3-[[terc-butil(dimetil)silil]oximetil]-2- [2-(6-cloro-2-fluoro-3-metóxi-fenil)acetil]-1-metil-3,4-di-hidro-1H- isoquinolina-5-carboxilato de metila (703 mg, 1,15 mmol) em tetra- hidrofurano (5 mL). Agitar em temperatura ambiente por 40 minutos. Adicionar 3 M de solução de brometo de metil magnésio em éter dietílico (3,50 equiv; 4,03 mmol; 1,34 mL; 1,39 g) gota a gota. Agitar a mistura da reação por 1,5 h. Extinguir com salmoura (25 mL). Depois de ter cessado a evolução de gás, extrair com acetato de etila (3 x 25mL). Lavar as camadas orgânicas combinadas com salmoura. Secar sobre sulfato de magnésio, filtrar e concentrar sob pressão reduzida. Redissolver o resíduo em tetra-hidrofurano (10 mL) e adicionar fluoreto de tetrabutilamônio, triidrato (492 mg, 1,73 mmol). Agitar por 2 horas em temperatura ambiente. Concentrar sob pressão reduzida. Lavar o resíduo através de um bloco de sílica de cintilação curto (short flash silica pad) (15 g) com acetato de etila (50 mL). Concentrar sob pressão reduzida. Purificar por cromatografia de fase reversa sobre sílica modificada com C18 para produzir o composto do título como um sólido branco (349 mg, 0,76 mmol): (m/z): 436,0 (M+1).

[00266] Os compostos que se seguem são preparados essencialmente pelo método do Exemplo 13.

Claims (14)

1. Composto, caracterizado pelo fato de que apresenta a Fórmula

na qual n é 0, 1 ou 2; R1 é halogênio; R2 é halogênio, H, CN, C1 - C3 alcóxi ou C1 - C3 alquila; e R3 é H, halogênio, C1 - C3 alcóxi ou C1 - C3 alquila.

2. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que apresenta a Fórmula

na qual n é 0, 1 ou 2; R1 é halogênio; R2 é halogênio, H, CN, C1 - C3 alcóxi ou C1 - C3 alquila; e R3 é H, halogênio, C1 - C3 alcóxi ou C1 - C3 alquila.

3. Composto, de acordo com ou a reivindicação 1 ou 2, caracterizado pelo fato de que: n é 0, 1 ou 2; R1 é halogênio; R2 é halogênio; e R3 é hidrogênio ou C1 - C3 alcóxi.

4. Composto, de acordo com ou a reivindicação 1 ou 2, caracterizado pelo fato de que: n é 0, 1 ou 2; R1 é Cl, F ou Br; R2 é Cl, OCH3, H, F, CN ou CH3; e R3 é OCH3, H, CH2CH3, Cl, OCH(CH3)2, OCH2CH3, F, CH(CH3)2 ou CH3.

5. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, caracterizado pelo fato de que: n é 0 ou 2; R1 é Cl; R2 é Cl ou F; e R3 é H ou OCH3.

6. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que é 2-(2,6-diclorofenil)-1-[(1S,3R)-3- (hidroximetil)-5-(3-hidróxi-3-metilbutil)-1-metil-3,4-di-hidroisoquinolin- 2(1H)-il]etanona.

7. Composição, caracterizada pelo fato de que compreende 2-(2,6-diclorofenil)-1-[(1S,3R)-3-(hidroximetil)-5-(3-hidróxi-3-metilbutil)- 1-metil-3,4-di-hidroisoquinolin-2(1H)-il]etanona e ácido 4- hidroxibenzóico.

8. Forma cocristalina, caracterizada pelo fato de que é da composição, como definida na reivindicação 7, em que a forma cocristalina compreende um padrão de difração de pó de raio X usando radiação CuKα apresetando um pico de difração em ângulo 2- Teta de difração de 7,0°, 16,0°, 18,2° e 25,4°, com uma tolerância para os ângulos de difração de 0,2 grau e um início do ponto de fusão de 160°C ou 162,2°C determinado por calorimetria de varredura diferencial.

9. Forma cocristalina, de acordo com a reivindicação 8, caracterizada pelo fato de que o padrão de difração de pó de raios X tem ainda um pico de difração no ângulo de difração 2-teta de 15,0°, 17,4°, 19,7°, 20,2°, 21,0° e 23,4°, com uma tolerância para os ângulos de difração de 0,2 graus.

10. Composição farmacêutica, caracterizada pelo fato de que compreende um composto, como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 6, e um veículo, diluente ou excipiente farmaceuticamente aceitável.

11. Uso de uma quantidade eficaz de um composto, como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 6, caracterizado pelo fato de que é para fabricação de um medicamento para tratar doença de Parkinson e/ou para tratar esquizofrenia, em um paciente que necessite do mesmo.

12. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 6, caracterizado pelo fato de que é para uso como um medicamento.

13. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 6, caracterizado pelo fato de que é para uso em terapia, e/ou no tratamento da doença de Parkinson.

14. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 6, caracterizado pelo fato de que é para uso em terapia, e/ou no tratamento de esquizofrenia.