EA022472B1 - Соединения, активирующие теломеразу, и способы их применения - Google Patents

Соединения, активирующие теломеразу, и способы их применения Download PDF

Info

Publication number
EA022472B1
EA022472B1 EA200971141A EA200971141A EA022472B1 EA 022472 B1 EA022472 B1 EA 022472B1 EA 200971141 A EA200971141 A EA 200971141A EA 200971141 A EA200971141 A EA 200971141A EA 022472 B1 EA022472 B1 EA 022472B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
telomerase
compound
disease
cells
compounds
Prior art date
Application number
EA200971141A
Other languages
English (en)
Other versions
EA200971141A1 (ru
Inventor
Авив Гацит
Шимон Славин
Эстер Приель
Сара Йитцчак
Original Assignee
Бен-Гурион Юниверсити Оф Дзе Негев Рисерч Энд Дивелопмент Оторити
Шимон Славин
Авив Гацит
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Бен-Гурион Юниверсити Оф Дзе Негев Рисерч Энд Дивелопмент Оторити, Шимон Славин, Авив Гацит filed Critical Бен-Гурион Юниверсити Оф Дзе Негев Рисерч Энд Дивелопмент Оторити
Publication of EA200971141A1 publication Critical patent/EA200971141A1/ru
Publication of EA022472B1 publication Critical patent/EA022472B1/ru

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C43/00—Ethers; Compounds having groups, groups or groups
    • C07C43/02—Ethers
    • C07C43/20—Ethers having an ether-oxygen atom bound to a carbon atom of a six-membered aromatic ring
    • C07C43/23—Ethers having an ether-oxygen atom bound to a carbon atom of a six-membered aromatic ring containing hydroxy or O-metal groups
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C215/00—Compounds containing amino and hydroxy groups bound to the same carbon skeleton
    • C07C215/74—Compounds containing amino and hydroxy groups bound to the same carbon skeleton having hydroxy groups and amino groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings of the same carbon skeleton
    • C07C215/76—Compounds containing amino and hydroxy groups bound to the same carbon skeleton having hydroxy groups and amino groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings of the same carbon skeleton of the same non-condensed six-membered aromatic ring
    • C07C215/80—Compounds containing amino and hydroxy groups bound to the same carbon skeleton having hydroxy groups and amino groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings of the same carbon skeleton of the same non-condensed six-membered aromatic ring containing at least two amino groups bound to the carbon skeleton
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/02—Halogenated hydrocarbons
    • A61K31/025—Halogenated hydrocarbons carbocyclic
    • A61K31/03—Halogenated hydrocarbons carbocyclic aromatic
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/045—Hydroxy compounds, e.g. alcohols; Salts thereof, e.g. alcoholates
    • A61K31/05—Phenols
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/045—Hydroxy compounds, e.g. alcohols; Salts thereof, e.g. alcoholates
    • A61K31/05—Phenols
    • A61K31/055—Phenols the aromatic ring being substituted by halogen
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/075—Ethers or acetals
    • A61K31/085—Ethers or acetals having an ether linkage to aromatic ring nuclear carbon
    • A61K31/09—Ethers or acetals having an ether linkage to aromatic ring nuclear carbon having two or more such linkages
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/13—Amines
    • A61K31/135—Amines having aromatic rings, e.g. ketamine, nortriptyline
    • A61K31/136—Amines having aromatic rings, e.g. ketamine, nortriptyline having the amino group directly attached to the aromatic ring, e.g. benzeneamine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/66—Phosphorus compounds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/695—Silicon compounds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
    • A61P15/08—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives for gonadal disorders or for enhancing fertility, e.g. inducers of ovulation or of spermatogenesis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/02—Drugs for dermatological disorders for treating wounds, ulcers, burns, scars, keloids, or the like
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/14—Drugs for dermatological disorders for baldness or alopecia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
    • A61P19/10—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease for osteoporosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P39/00—General protective or antinoxious agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/06—Antianaemics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/14—Vasoprotectives; Antihaemorrhoidals; Drugs for varicose therapy; Capillary stabilisers
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C215/00—Compounds containing amino and hydroxy groups bound to the same carbon skeleton
    • C07C215/46—Compounds containing amino and hydroxy groups bound to the same carbon skeleton having hydroxy groups bound to carbon atoms of at least one six-membered aromatic ring and amino groups bound to acyclic carbon atoms or to carbon atoms of rings other than six-membered aromatic rings of the same carbon skeleton
    • C07C215/48—Compounds containing amino and hydroxy groups bound to the same carbon skeleton having hydroxy groups bound to carbon atoms of at least one six-membered aromatic ring and amino groups bound to acyclic carbon atoms or to carbon atoms of rings other than six-membered aromatic rings of the same carbon skeleton with amino groups linked to the six-membered aromatic ring, or to the condensed ring system containing that ring, by carbon chains not further substituted by hydroxy groups
    • C07C215/50—Compounds containing amino and hydroxy groups bound to the same carbon skeleton having hydroxy groups bound to carbon atoms of at least one six-membered aromatic ring and amino groups bound to acyclic carbon atoms or to carbon atoms of rings other than six-membered aromatic rings of the same carbon skeleton with amino groups linked to the six-membered aromatic ring, or to the condensed ring system containing that ring, by carbon chains not further substituted by hydroxy groups with amino groups and the six-membered aromatic ring, or the condensed ring system containing that ring, bound to the same carbon atom of the carbon chain
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C39/00—Compounds having at least one hydroxy or O-metal group bound to a carbon atom of a six-membered aromatic ring
    • C07C39/24—Halogenated derivatives
    • C07C39/367—Halogenated derivatives polycyclic non-condensed, containing only six-membered aromatic rings as cyclic parts, e.g. halogenated poly-hydroxyphenylalkanes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C43/00—Ethers; Compounds having groups, groups or groups
    • C07C43/02—Ethers
    • C07C43/20—Ethers having an ether-oxygen atom bound to a carbon atom of a six-membered aromatic ring
    • C07C43/225—Ethers having an ether-oxygen atom bound to a carbon atom of a six-membered aromatic ring containing halogen
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/06—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom containing only hydrogen and carbon atoms in addition to the ring nitrogen atom
    • C07D213/16—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom containing only hydrogen and carbon atoms in addition to the ring nitrogen atom containing only one pyridine ring
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/24—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with substituted hydrocarbon radicals attached to ring carbon atoms
    • C07D213/28—Radicals substituted by singly-bound oxygen or sulphur atoms
    • C07D213/30—Oxygen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D295/00—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms
    • C07D295/04—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring nitrogen atoms
    • C07D295/08—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring nitrogen atoms substituted by singly bound oxygen or sulfur atoms
    • C07D295/096—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring nitrogen atoms substituted by singly bound oxygen or sulfur atoms with the ring nitrogen atoms and the oxygen or sulfur atoms separated by carbocyclic rings or by carbon chains interrupted by carbocyclic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D295/00—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms
    • C07D295/04—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring nitrogen atoms
    • C07D295/12—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring nitrogen atoms substituted by singly or doubly bound nitrogen atoms
    • C07D295/135—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring nitrogen atoms substituted by singly or doubly bound nitrogen atoms with the ring nitrogen atoms and the substituent nitrogen atoms separated by carbocyclic rings or by carbon chains interrupted by carbocyclic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic Table
    • C07F9/02—Phosphorus compounds
    • C07F9/28—Phosphorus compounds with one or more P—C bonds
    • C07F9/50—Organo-phosphines
    • C07F9/5022—Aromatic phosphines (P-C aromatic linkage)

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Reproductive Health (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Psychiatry (AREA)
  • Ophthalmology & Optometry (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Gynecology & Obstetrics (AREA)

Abstract

Настоящее изобретение направлено на применение соединений формулы I, где R-R; Z раскрыты в формуле изобретения, и включающих их композиций для стимуляции или повышения экспрессии, активности теломеразы или их комбинации в клетке или ткани субъекта, имеющего заболевание, опосредованное активностью/экспрессией теломеразы или их комбинации.

Description

Настоящее изобретение направлено на применение ряда соединений и композиций, содержащих такие соединения, для усиления экспрессии и/или активации теломеразы и для лечения относящихся к ним заболеваний, расстройств и/или состояний.
Предпосылки изобретения
Теломераза является рибонуклеопротеином, который катализирует присоединение теломерных повторов к концам теломеров. Теломеры являются длинными протяженными участками повторяющихся последовательностей, которые блокируют концы хромосом. У человека теломеры обычно имеют длину 7-10 т.п.о. и содержат множественные повторы. Теломераза не экспессируется в большинстве взрослых клеток, и длина теломера уменьшается с повторением циклов репликации.
Теломераза действует как обратная транскриптаза при удлинении теломеров, которое предотвращает потерю теломеров вследствие проблем концевой репликации. Без теломеразы теломеры укорачиваются при каждом делении клетки, что ведет к старению, апоптозу и гибели клетки, вызванной хромосомной нестабильностью. Теломераза неактивна в соматических клетках, но активна в 90% раковых клеток, в которых теломераза реактивируется. Несмотря на то, что активация теломеразы может быть опасной, поскольку она может моделировать процесс развития рака, агенты, активирующие теломеразу, теоретически могут иметь применение в качестве агентов против старения и быть клинически полезными при некоторых патологических состояниях. В противоположность этому ингибиторы теломеразы могут быть полезны в борьбе с раком. Рак и старение тесно взаимосвязаны: вмешательства, которые предотвращают рак, могут приводить к преждевременному старению, тогда как превращение клеток в бессмертные приводит к образованию злокачественных раковых клеток. Несмотря на теоретический риск активации канцерогенеза, активация теломеразы может привести к пониженной скорости старения.
Оценка длины теломера важна для понимания его биологической и клинической важности. Длина теломера служит полезным индикатором при изучении хромосомной стабильности, активности теломеразы и/или экспрессии, пролиферативной способности и процесса старения клеток. Клиническая значимость теломеров может быть продемонстрирована на примере их важности при раке, синдроме преждевременного старения или сегментальной прогерии; генетических аномалиях, заболеваниях, возникающих вследствие хромосомной нестабильности, таких как синдром Блума (редкое наследственное расстройство, характеризуемое высокой частотой разрывов и перегруппировок в хромосомах подверженного ему человека), и возрастных заболеваниях, таких как синдром Уормера (редкое заболевание, проявляющееся как ускоренное старение молодых людей). Динамика длины теломера имеет отличительные участки экспрессии при определенном прогрессировании заболевания. Поэтому она имеет большое значение в прогнозе заболевания.
Длина теломера может быть измерена саузерн-блоттингом, исследованием гибридизационной защиты, флуоресцентной гибридизацией ίη Фи, инициированной ίη δίίπ цитометрией в потоке, количественной цепной реакцией полимеразы и анализом длины единственного теломера.
Недостаток активности и/или экспрессии теломеразы и короткие теломеры могут вызвать врожденный дискератоз, апластическую анемию, рост смертности вследствие сердечно-сосудистых заболеваний, удара или инфекций, гипертензии или хронического стресса.
Было показано, что передача теломеразы предотвращает поражение печени у теломеразнонокаутированных мышей.
В дополнение к роли теломеразы в поддержании длины теломера накапливающиеся данные позволяют предположить, что белок обратной транскриптазы теломеразы (ТЕРТ) имеет дополнительные физиологические функции, то есть защищает клетки и мышей от различных поражений по (не установленному еще) механизму, в который не вовлечено удлинение теломера.
Соединения, которые активируют теломеразу, таким образом, найдут применение во множестве приложений, имеющих отношение к клинической практике.
Краткое описание изобретения
В одном из воплощений данное изобретение обеспечивает способ стимуляции или повышения активности и/или экспрессии теломеразы в клетке или ткани, включающий контактирование указанной клетки или ткани с соединением, представленным структурной формулой I
где Ζ представляет углерод или фосфор;
заместители Р1, Р3, Рд, Р6, Р7 и Р9, одинаковые или разные, представляют Н, ОН, галоген, С1-6ал- 1 022472 кокси, (С1_балкиламино)2(С1_балкил), (С1-6алкил)гетероциклоалкил, где гетероциклоалкил представляет собой насыщенный 6-членный гетероцикл, содержащий от одного до трех гетероатомов, выбранных из азота и кислорода, и необязательно замещенный С1-6алкилом;
К2, К5 и К8, одинаковые или разные, представляют Н, ОН, галоген, С1-6алкил, С1-6алкокси, ОСН2СООЕ1, 6-10-членный ароматический гетероцикл, содержащий гетероатом азота; и
К10 отсутствует или представляет собой метил; или его фармацевтически приемлемой солью.
В другом воплощении указанное дегенеративное заболевание представляет собой нейродегенеративное заболевание, дегенеративное заболевание суставов, дегенерацию желтого пятна или анемию. В одном воплощении указанное состояние представляет собой воспалительное заболевание. В другом воплощении состояние представляет собой апластическую анемию. В другом воплощении состояние представляет собой рак.
В одном из воплощений данное изобретение обеспечивает способ лечения острого или хронического состояния кожи, включающий контактирование кожи с соединением, представленным структурной формулой I
где Ζ представляет углерод или фосфор;
заместители К1, К3, Кд, К6, К7 и К9, одинаковые или разные, представляют Н, ОН, галоген, С1-6алкокси, (С1-6алкиламино)2(С1-6алкил), (С1-6алкил)гетероциклоалкил, где гетероциклоалкил представляет собой насыщенный 6-членный гетероцикл, содержащий от одного до трех гетероатомов, выбранных из азота и кислорода, и необязательно замещенный С1-6алкилом;
К2, К5 и К8, одинаковые или разные, представляют Н, ОН, галоген, С1-6алкил, С1-6алкокси, ОСН2СООЕ1, 6-10-членный ароматический гетероцикл, содержащий гетероатом азота; и
К10 отсутствует или представляет собой метил; или его фармацевтически приемлемой солью.
В другом воплощении указанное острое или хроническое состояние кожи является раной, ожогом, ссадиной, порезом, местом пересадки, сосудистым повреждением, повреждением, вызванным инфекционным агентом, хронической венозной язвой, диабетической язвой, компрессионной язвой, раной от сдавливания, язвой или раной слизистой оболочки и келоидным образованием.
В одном из воплощений данное изобретение обеспечивает способ ингибирования, остановки или отсрочки клеточного старения у субъекта, включающий введение указанному пациенту соединения, представленного структурной формулой I
где Ζ представляет углерод или фосфор;
заместители К1, К3, Кд, К6, К7 и К9, одинаковые или разные, представляют Н, ОН, галоген, С1-6алкокси, (С1-6алкиламино)2(С1-6алкил), (С1-6алкил)гетероциклоалкил, где гетероциклоалкил представляет собой насыщенный 6-членный гетероцикл, содержащий от одного до трех гетероатомов, выбранных из азота и кислорода, и необязательно замещенный С1-6алкилом;
К2, К5 и К8, одинаковые или разные, представляют Н, ОН, галоген, С1-6алкил, С1-6алкокси, ОСН2СООЕ1, 6-10-членный ароматический гетероцикл, содержащий гетероатом азота; и
К10 отсутствует или представляет собой метил; или его фармацевтически приемлемой соли.
В другом воплощении данное изобретение обеспечивает способ ингибирования, остановки или от- 2 022472 срочки клеточного старения у пациента, увеличивает продолжительность жизни указанного пациента.
В одном из воплощений данное изобретение обеспечивает способ снижения или остановки эффектов старения у пациента, включающий введение указанному пациенту соединения, представленного структурной формулой I
где Ζ представляет углерод или фосфор;
заместители Еь Е3, Ед, Е6, Е7 и Е9, одинаковые или разные, представляют Н, ОН, галоген, С1-6алкокси, (С1-6алкиламино)2(С1-6алкил), (С1-6алкил)гетероциклоалкил, где гетероциклоалкил представляет собой насыщенный 6-членный гетероцикл, содержащий от одного до трех гетероатомов, выбранных из азота и кислорода и необязательно замещенный С1-6алкилом;
Е2, Е5 и Е§, одинаковые или разные, представляют Н, ОН, галоген, С1-6алкил, С1-6алкокси, ОСН2СООЕ1. 6-10-членный ароматический гетероцикл, содержащий гетероатом азота; и
Е10 отсутствует или представляет собой метил; или его фармацевтически приемлемой соли.
В другом воплощении структурная формула I представлена структурой формулы IV
где Е1, Е3, Ед, Е6, Е7 и Е9 такие, как определено выше для формулы I.
В другом воплощении структурная формула I представлена структурой формулы VI
где Е'1, Е'3, Е'4, Е'6, Е'7 и Е'9, одинаковые или разные, включают галоген, гетероциклоалкил, С1-6алкокси, (С1-6алкиламино)2(С1-6алкил), где гетероциклоалкил определен в п.1, и гетероцикл и Е10 такие, как определено выше для формулы I.
В другом воплощении структурная формула I представлена структурой формулы VII
В другом воплощении структурная формула I представлена структурой формулы VIII
- 3 022472
В другом воплощении структурная формула I представлена структурой формулы IX
В другом воплощении структурная формула I представлена структурой формулы X
В другом воплощении структурная формула I представлена структурой формулы XI
В другом воплощении структурная формула I представлена структурой формулы XII
В другом воплощении структурная формула I представлена структурой формулы XIII
- 4 022472
В другом воплощении структурная формула I представлена структурой формулы XIV
В другом воплощении структурная формула I представлена структурой формулы XV
В другом воплощении структурная формула I представлена структурой формулы XVI
Краткое описание фигур
Объект, к которому относится изобретение, в частности, раскрыт и однозначно заявлен в заключительной части описания. Однако изобретение как в части организации, так и способов реализации, совместно с его объектами, признаками и преимуществами может быть лучше понято со ссылкой на следующее подробное описание, рассматриваемое вместе с сопровождающими его фигурами, на которых фиг. 1 - обработка клеток И-251 соединениями настоящего изобретения и измерение активности теломеразы в исследовании ТКЛР. Активность теломеразы в клетках, обработанных соединением 68. В. Количественная оценка результатов и % активации теломеразы;
фиг. 2 - зависящее от времени увеличение уровня белка теломеразы под действием соединений настоящего изобретения. А. Анализ вестерн-блоттингом с антителом к теломеразе человека. В. Количественная оценка уровня белка теломеразы;
фиг. 3 - соединение 68 увеличивает экспрессию теломеразной РНК. А.Норзерн-блоттинг анализ с применением ЬТЕКТ-специфического кДНК-зонда. АО представляет актиномицин Д. В. Количественная оценка уровня РНК;
фиг. 4 - влияние лечения соединениями настоящего изобретения на выживаемость и пролиферацию ЬМ8С;
фиг. 5 - активация экспрессии теломеразы в ЬМ8С соединениями настоящего изобретения. А. ЬМ8С обрабатывают 250 нМ соединений 79, 77 и 68 в течение 6 ч. Иммунофлуоресцентный анализ проводят с применением антитела к НТЕРТ (красное), а ядра окрашивают ЭАР! (синий). НМ8С обрабатывают соединением 79 в течение 6 и 24 ч. Активность теломеразы измеряют ПЦР в реальном времени с применением набора для количественного определения теломеразы (АШе4 Вю1есН йю.. И8А);
фиг. 6 - влияние соединений настоящего изобретения на стареющие кератиноциты человета ίη νίΐτο; фиг. 7 - влияние соединений настоящего изобретения на пигментированные эпителиальные клетки сетчатки человека при окислительном стрессе. В. Влияние соединений на активность теломеразы в РРЕ клетках (измерено набором для количественного определения теломеразы ПЦР в реальном времени);
- 5 022472 фиг. 8 - увеличение продолжительности жизни С. е1едап8 соединениями 68 и 77, активирующими теломеразу;
фиг. 9 - активация экспрессии теломеразы соединениями настоящего изобретения в эндометриальных клетках крыс. А, В. Гистологический анализ. С-Р. Иммуно-гистохимический анализ со специфическим антителом к ЬТЕКТ. О. Активность теломеразы в экстрактах ядер, полученных из эндометрия крыс, в который были введены соединения настоящего изобретения. О(В). Активность теломеразы в экстрактах ядер, полученных из эндометрия крыс, в который были введены соединения настоящего изобретения, измеренная ПЦР в реальном времени набором для количественного определения теломеразы (А1Ье4 Βίο1есй 1пс., И8А);
фиг. 10 - активация теломеразы в клетках коры головного мозга крыс соединениями настоящего изобретения;
фиг. 11 - активация теломеразы в ЦНС мышей соединениями настоящего изобретения;
фиг. 12 - содержание теломеразного белка у крыс повышается соединениями настоящего изобретения;
фиг. 13 - предотвращение индуцированного глутаматом апоптоза в мозжечке мышей соединением 79;
фиг. 14 - экспрессия теломеразы активируется в сердце мышей соединением 79;
фиг. 15 - соединение 68 предотвращает повреждающее действие лекарства на развитие эмбриона крыс.
Подробное описание настоящего изобретения
В следующем подробном описании многочисленные частные подробности приведены с целью обеспечения полного понимания изобретения. Однако специалист в данной области должен понимать, что настоящее изобретение может быть осуществлено и без данных подробностей. В иных случаях общеизвестные способы, методики и компоненты подробно не описаны для того, чтобы не давать неясного описания настоящего изобретения.
Настоящее изобретение в некоторых воплощениях относится к применению нового класса трифенильных соединений и содержащих их композиций для лечения, помимо прочего, заболеваний или состояний, на которые возможно воздействовать увеличением экспрессии и/или активации теломеразы.
Изобретение обеспечивает применение соединений, которые стимулируют и/или увеличивают экспрессию и/или активность теломеразы в клетках и тканях пациента, у которого такая активность является сниженной, утраченной, измененной или нормальной. Помимо прочего, такие расстройства включают а) болезнь Альцгеймера, Ь) болезнь Паркинсона, с) болезнь Хантингтона, 4) повреждение нервов, болезнь двигательных нейронов, рассеянный склероз (М§), поражение периферической и центральной нервной системы, включая поражение спинного мозга и патологии сосудов головного мозга, е) удар, ί) заболевания или состояния, связанные со старением, такие как, например, старение кожи, такое как атрофия или истончение кожи, эластолиз и образование кожных морщин, гиперплазия или гипоплазия себациновой железы, возрастное лентиго, аномалии пигментации, поседение волос и потерю или истончение волос (облысение, алопеция), или хронические кожные язвы, д) дегенеративное заболевание суставов, й) остеопороз, остеоартрит и другие дегенеративные заболевания опорной системы, ί) заболевания сердечнососудистой системы, связанные с возрастом или стрессом, включая атеросклероз, кальцификацию, тромбоз и аневризмы, к) возрастную дегенерацию желтого пятна, 1) СПИД; т) повреждения иммунной системы, связанные с возрастом или стрессом, включая повреждение круговорота тканей, которое происходит при естественном старении, раке, терапии рака, острых или хронических инфекциях, дегенеративных воспалительных заболеваниях или генетических расстройствах, вызывающих ускоренный круговорот тканей и родственные анемии, и другие дегенеративные состояния, п) заживление ран, ожогов, ссадин или других острых или хронических состояний эпидермиса, о) врожденый дискератоз, р) дефект лютеиновой фазы, с|) преждевременный отказ яичников (преждевременную недостаточность яичников или гипергонадотропный гипогонадизм) и/или г) увеличение экспресии и/или активности теломеразы в запоминающих Т-клетках, за счет чего усиливается ответ иммунной памяти и ответ на вакцины, 8) увеличение экспрессии и/или активности теломеразы в здоровой ткани, за счет чего продлевается срок жизни субъекта, сохраняя указанного субъекта в добром здравии.
Соединения изобретения
В одном из воплощений способы данного изобретения включают применение трифенильных соединений, представленных структурной формулой I
- 6 022472
где Ζ представляет углерод или фосфор;
заместители Кь К3, К4, К6, К7 и К9, одинаковые или разные, представляют Н, ОН, галоген, С1-6алкокси, (С1-6алкиламино)2(С1-6алкил), (С1-6алкил)гетероциклоалкил, где гетероциклоалкил представляет собой насыщенный 6-членный гетероцикл, содержащий от одного до трех гетероатомов, выбранных из азота и кислорода, и необязательно замещенный С1-6алкилом;
К2, К5 и К8, одинаковые или разные, представляют Н, ОН, галоген, С1-6алкил, С1-6алкокси, ОСН2СООЕ1. 6-10-членный ароматический гетероцикл, содержащий гетероатом азота; и
К.10 отсутствует или представляет собой метил; или его фармацевтически приемлемой соли.
В одном из воплощений способы данного изобретения включают применение трифенильных соединений, представленных структурной формулой IV
где К1, К3, К4, К6, К7 и К9 определены выше, или их фармацевтически приемлемой соли.
В одном из воплощений способы данного изобретения включают применение трифенильных соединений, представленных структурной формулой VI
где где К'1, К'3, К'4, К'6, К'7 и К'9, одинаковые или разные, включают галоген, гетероциклоалкил, С1-6алкокси, (С1-6алкиламино)2(С1-6алкил), где гетероциклоалкил определен в п.1, и гетероциклоалкил и К10 такие, как определено выше для формулы I, или их фармацевтически приемлемой соли.
В одном из воплощений способы данного изобретения включают применение трифенильных соединений, представленных структурной формулой VII
или их фармацевтически приемлемой соли.
В одном из воплощений способы данного изобретения включают применение трифенильных соединений, представленных структурной формулой VIII
- 7 022472
или их фармацевтически приемлемой соли.
В одном из воплощений способы данного изобретения включают применение трифенильных соединений, представленных структурной формулой IX
или их фармацевтически приемлемой соли.
В одном из воплощений способы данного изобретения включают применение трифенильных соединений, представленных структурной формулой X
или их фармацевтически приемлемой соли.
В одном из воплощений способы данного изобретения включают применение трифенильных соединений, представленных структурной формулой XI
или их фармацевтически приемлемой соли.
В одном из воплощений способы данного изобретения включают применение трифенильных соединений, представленных структурной формулой XII
- 8 022472
или их фармацевтически приемлемой соли.
В одном из воплощений способы данного изобретения включают применение трифенильных соединений, представленных структурной формулой XIII
или их фармацевтически приемлемой соли.
В одном из воплощений структура соединения формулы I представлена структурой соединений формулы XIV
или его фармацевтически приемлемой соли.
В одном из воплощений структура соединения формулы I представлена структурой соединений формулы XV
или его фармацевтически приемлемой соли.
В одном из воплощений структура соединения формулы I представлена структурой соединений формулы XVI
или его фармацевтически приемлемой соли.
Термин алкил в одном из воплощений относится к насыщенному алифатическому углеводороду, включающему нормальную цепь, разветвленную цепь или циклические алкильные группы. В одном из воплощений алкильная группа имеет 1-6 атомов углерода. В другом воплощении разветвленный алкил
- 9 022472 является алкилом, замещенным алкильными боковыми цепями из 1-5 атомов углерода.
Алкоксигруппа в одном из воплощений относится к определенной выше алкильной группе, которая связана с кислородом. Примерами алкоксигрупп являются этокси, пропокси, трет-бутокси и т.п.
Галогеналкильная группа в одном из воплощений относится к определенной выше алкильной группе, которая замещена одним или более атомами галогена, например Р, С1, Вг или I.
Гетероарильная группа в другом воплощении относится к ароматической группе, имеющей по меньшей мере одну гетероциклическую ароматическую группу. В другом воплощении гетероарильная группа имеет кольцо(кольца) от 6 до 10 атомов. В другом воплощении гетероарильная группа является 6членным кольцом. В другом воплощении гетероарильная группа является конденсированной системой колец, включающей 2-3 кольца. Неограничивающими примерами арильных колец являются пирролил, пиранил, индолил, изоиндолил, индолизинил, изоиндолизинил, пиридил, пиримидинил и тому подобные.
Гидроксильная группа в одном из воплощений относится к ОН-группе. В некоторых воплощениях, если К1, К2 или К3 в соединениях настоящего изобретения являются ОК, то К не является ОН.
В одном воплощении термин галоген относится к галогену, такому как Р, С1, Вг или I.
В другом воплощении термин фенол относится к спиртовому (ОН) производному бензола.
Аминогруппа в одном из воплощений относится к атому азота, связанному одинарными связями с атомами водорода, алкильными группами или арильными группами, как это описано выше, или с их комбинациями. Неограничивающими примерами аминогрупп являются ΝΗ2, Ы(Ме)2, Ν(Εΐ)2, Ν(Ρ1ι)2 и тому подобные.
Гетероциклоалкильная группа в одном из воплощений относится к неароматическому насыщенному 6-членному моноциклическому кольцу, включающему атомы углерода и в качестве части кольца, в дополнение к углероду, от 1 до 3 гетероатомов, выбранных из кислорода и азота. Примеры гетероциклоалкильных групп включают, но без ограничения, пиперидин, пиперазин, пиран, морфолин. В другом воплощении гетероциклоалкильная группа может быть замещенной С1-С6алкилом.
Термины алкилалкокси, алкилгалогеналкил, алкиларил, алкилциклоалкил, алкилгетероциклоалкил, алкилгетероарил и алкиламино в одном из воплощений относятся к определенной выше алкильной группе, присоединенной соответственно к алкокси, галогеналкилу, арилу, циклоалкилу, гетероциклоалкилу, гетероарилу или аминогруппе. Алкокси, галогеналкил, арил, циклоалкил, гетероциклоалкил, гетероарил или аминогруппа определены в описании выше. Примеры включают, но без ограничения, СН2-ОЕ1, СН2-^пиперидин, СН2-^пиперазин, СН2-^Ме)2 и т.д.
В одном из воплощений изобретение обеспечивает применение раскрытого в описании соединения и/или его фармацевтически приемлемой соли.
Изобретение включает фармацевтически приемлемые соли соединений данного изобретения, которые в одном из воплощений могут быть получены с образованием солей щелочных металлов и с образованием аддитивных солей свободных кислот или свободных оснований. Подходящие фармацевтически приемлемые аддитивные соли кислот соединений настоящего изобретения могут быть получены из неорганической кислоты или из органической кислоты. В одном из воплощений примерами неорганических кислот являются хлористо-водородная, бромисто-водородная, иодисто-водородная, азотная, угольная, серная и фосфорная кислоты. В одном из воплощений органические кислоты могут быть выбраны из алифатических, циклоалифатических, ароматических, аралифатических, гетероциклических, карбоновых и сульфоновых органических кислот, примерами которых являются муравьиная, уксусная, пропионовая, янтарная, гликолевая, глюконовая, молочная, яблочная, винная, лимонная, аскорбиновая, глюкуроновая, малеиновая, фумаровая, пировиноградная, аспартовая, глутамовая, бензойная, антраниловая, щавелевая, п-толуолсульфоновая, метансульфоновая, салициловая, п-гидроксибензойная, фенилуксусная, миндальная, эмбоновая (памовая), метансульфоновая, этилсульфоновая, бензолсульфоновая, сульфаниловая, стеариновая, циклогексиламиносульфоновая, альгиновая, галактуроновая кислота. В одном из воплощений подходящие фармацевтически приемлемые аддитивные соли оснований соединений данного изобретения включают металлические соли алюминия, кальция, лития, магния, калия, натрия и цинка или органические соли, полученные из Ν,Ν'-дибензилэтилендиамина, холина, хлорпрокаина, диэтаноламина, этилендиамина, меглумина (Ν-метилглюкамина) и прокаина. Все эти соли могут быть получены общепринятыми способами из соответствующих соединений.
В других воплощениях фармацевтически приемлемые соли могут быть получены из фенольных соединений обработкой неорганическими основаниями, например гидроксидом натрия. В другом воплощении сложные эфиры фенольных соединений могут быть получены с алифатическими и ароматическими карбоновыми кислотами, например сложные эфиры уксусной и бензойной кислот.
В некоторых воплощениях изобретение обеспечивает композиции, включающие соединение данного изобретения, или применение соединения данного изобретения для увеличения активности и/или экспрессии теломеразы в клетке или ткани; и/или лечение состояния за счет увеличения активности и/или экспрессии теломеразы в клетке или ткани пациента; и/или лечение острого или хронического состояния эпидермиса; и/или увеличение продолжительности жизни; и/или лечение заболеваний сосудистой системы, связанных с возрастом или стрессом, включая атеросклероз, кальцификацию, тромбоз, гипертензию или аневризму; и/или лечение связанной с возрастом дегенерации желтого пятна и/или связанных с воз- 10 022472 растом заболеваний кожи; и/или лечение повреждения иммунной системы, связанного с возрастом или стрессом; и/или усиление иммунного ответа против инфекционно-устойчивых организмов.
В некоторых воплощениях изобретение предоставляет композиции, включающие соединение настоящего изобретения и/или лечение относящихся к бесплодию женских состояний, включая дефект лютеиновой фазы или преждевременный отказ яичников (преждевременную недостаточность яичников или гипергонадотропный гипогонадизм); и/или сниженную активность теломеразы гранулозных клеток; и/или лечение связанных с бесплодием мужских состояний, включая нарушенное производство спермы или нарушенную доставку спермы; и/или вспомогательное применение в методиках оплодотворения ίη νίίτο (ΐνΡ); и/или улучшение качества спермы и/или качества яйцеклеток. Например, в некоторых воплощениях соединения данного изобретения продлевают жизнь бластоцитов в культуре ех νίνο, что, в свою очередь, улучшает эффективность имплантации. В некоторых воплощениях лечение населения раскрытыми в описании соединениями делает его более восприимчивым к другим видам ΐνΡ-терапии, или в некоторых воплощениях позволяет оценить комбинированную терапию или новые соединения.
В одном из воплощений данное изобретение обеспечивает способ лечения с применением соединения данного изобретения или включающей его композиции, раскрытых в описании. В некоторых воплощениях изобретение обеспечивает способы применения соединения данного изобретения для лечения указанных заболеваний, расстройств или состояний и включает применение включающей его композиции.
В одном из воплощений данное изобретение обеспечивает способы лечения, подавления, ингибирования, снижения тяжести, уменьшения распространенности, снижение патогенеза или отсрочку начала, помимо прочего, (а) болезни Альцгеймера, (Ь) болезни Паркинсона, (с) болезни Хантингтона, (б) удара, (е) повреждения нервов, болезни двигательных нейронов, рассеянного склероза (М8), поражения периферической и центральной нервной системы, включая поражение спинного мозга и патологии сосудов головного мозга, (Г) связанных со старением заболеваний кожи, таких как атрофия и истончение, эластолиз и образование кожных морщин, гиперплазия или гипоплазия себациновой железы, возрастное лентиго, аномалии пигментации, поседение волос и потерю или истончение волос (облысение, алопеция), или хронические кожные язвы, (д) дегенеративного заболевания суставов, (й) остеопороза, остеоартрита и других дегенеративных заболеваний опорной системы, (ΐ) заболеваний сердечно-сосудистой системы, связанных с возрастом или стрессом, включая атеросклероз, кальцификацию, тромбоз, гипертензию и аневризмы, (]) возрастной дегенерации желтого пятна, (к) СПИДа; (1) повреждений иммунной системы, связанных с возрастом или стрессом, включая повреждение круговорота тканей, которое происходит при естественном старении, раке, терапии рака, острых или хронических инфекциях, дегенеративных воспалительных заболеваниях или генетических расстройствах, вызывающих ускоренный круговорот тканей, и родственных анемий и других дегенеративных состояний, (т) заживления ран, ожогов, ссадин или других острых или хронических состояний эпидермиса, (η) врожденного дискератоза, (о) дефекта лютеиновой фазы, (р) преждевременного отказа яичников (преждевременной недостаточности яичников или гипергонадотропного гипогонадизма), (с|) нарушенного производства спермы или нарушенной доставки спермы, (г) инфицирования инфекционно-устойчивыми организмами путем введения любого из соединений, раскрытых в описании, и, необязательно, других терапевтических агентов или содержащих их композиций.
В одном из воплощений термины лечить или лечение включают профилактическое лечение, а также лечение, направленное на ремиссию расстройства. Термины снижение, подавление и ингибирование имеют свои общеизвестные значения уменьшения или снижения, или в других воплощениях отсрочки, или в других воплощениях снижения тяжести, патогенеза, уменьшения распространенности заболевания, расстройства или состояния. В одном воплощении термин лечение относится к задержке прогрессирования, продления ремиссии, уменьшению распространенности или улучшению симптомов, связанных с заболеванием, расстройством или состоянием. В одном из воплощений термины лечение, снижение, подавление или ингибирование относятся к снижению заболеваемости, смертности или их комбинации в сочетании с указанным заболеванием, расстройством или состоянием. В одном из воплощений термин прогрессирование относится к увеличению масштаба или тяжести, развитию, росту или ухудшению. Термин рецидив в другом воплощении означает возвращение заболевания после ремиссии. В одном из воплощений способы лечения в соответствии с изобретением снижают тяжесть заболевания, или в другом воплощении симптомы, связанные с заболеванием, или в другом воплощении снижают число биомаркеров, экспрессируемых при течении заболевания.
В одном из воплощений термин лечение и его аспекты относится к введению пациенту с указанным заболеванием, расстройством или состоянием или в некоторых воплощениях субъекту, предрасположенному к указанному заболеванию, расстройству или состоянию. Термин предрасположенный, помимо прочего, следует понимать как относящийся к генетическому профилю или семейному родству, которые связаны с трендом или статистическим увеличением распространенности, тяжести и т.д. указанного заболевания. В некоторых воплощениях термин предрасположенный, помимо прочего, следует понимать как относящийся к образу жизни, который связан с повышенным риском указанного заболевания. В некоторых воплощениях термин предрасположенный, помимо прочего, следует понимать как
- 11 022472 относящийся к присутствию биомаркеров, которые связаны с указанным заболеванием, например при раке, термин предрасположенный к раку может включать присутствие предраковых предшественников указанного рака.
В некоторых воплощениях термин снижение патогенеза следует понимать как включающий снижение повреждения ткани или повреждения органа, связанного с конкретным заболеванием, расстройством или состоянием. В другом воплощении термин снижение патогенеза следует понимать как включающий снижение распространенности или тяжести связанного с ними рассматриваемого конкретного заболевания, расстройства или состояния. В другом воплощении термин снижение патогенеза следует понимать как включающий уменьшение числа связанных с указанным заболеваний, расстройств или состояний или связанных с ним симптомов.
Термин введение в другом воплощении относится к приведению субъекта в контакт с соединением настоящего изобретения. Введение может быть произведено ίη νίίτο, т.е. в пробирке, или ίη νίνο, т.е. в клетках или тканях живых организмов, например людей. В одном из воплощений настоящее изобретение охватывает введение субъекту соединений настоящего изобретения.
В одном из воплощений способы данного изобретения обеспечивают применение описанного соединения данного изобретения, контактирующего или связывающегося с ферментом теломеразы в количестве, эффективном для повышения активности и/или экспрессии теломеразы, опосредуя, таким образом, описанные эффекты. В некоторых воплощениях способы данного изобретения могут включать предварительную стадию идентификации клетки или ткани, в которых желательно увеличение активности и/или экспрессии теломеразы. Клетка может находиться в культуре, т.е. ίη νίίτο или ех νίνο, или внутри субъекта или пациента ίη νίνο. В одном из воплощений повышение активности и/или экспрессии теломеразы в клетке или ткани включает, например, увеличение репликативного потенциала и/или продолжительности жизни контактирующих клеток.
Фармацевтические композиции
В некоторых воплощениях данное изобретение обеспечивает способы применения, которые включают введение композиции, включающей желаемые соединения. Используемый здесь термин фармацевтическая композиция означает терапевтически эффективное количество активного ингредиента, т.е. соединения данного изобретения вместе с фармацевтически приемлемым носителем или разбавителем. Используемый здесь термин терапевтически эффективное количество относится к количеству, которое производит терапевтический эффект при данном состоянии или схеме введения.
В некоторых воплощениях данное изобретение обеспечивает композиции, которые могут включать по меньшей мере одно соединение данного изобретения в любой форме или воплощении, раскрытых в описании. В некоторых воплощениях форму единственного числа следует рассматривать как охватывающую единственное и множественное числа указанного объекта. В некоторых воплощениях форма единственного числа относится к по меньшей мере одному.
В некоторых воплощениях любая из композиций данного изобретения будет состоять из соединения данного изобретения в любой форме или воплощении, раскрытых в описании. В некоторых воплощениях любая из композиций данного изобретения будет главным образом состоять из соединения данного изобретения в любой форме или воплощении, раскрытых в описании.
В некоторых воплощениях термин включать относится к включению указанного активного ингредиента, такого как соединения изобретения, а также к включению других активных агентов и фармацевтически приемлемых носителей, эксципиентов, эмульгаторов, стабилизаторов и т.д., которые известны в фармацевтической промышленности. В некоторых воплощениях любая из композиций данного изобретения будет включать соединение формулы I-XVI в любой форме или воплощении, раскрытых в описании. В некоторых воплощениях любая из композиций данного изобретения будет состоять главным образом из соединения данного изобретения в любой форме или воплощении, раскрытых в описании. В некоторых воплощениях термин включать относится к включению указанного активного ингредиента, такого как соединения изобретения, а также к включению других активных агентов и фармацевтически приемлемых носителей, эксципиентов, эмульгаторов, стабилизаторов и т.д., которые известны в фармацевтической промышленности. В некоторых воплощениях термин состоящий главным образом относится к композиции, единственный активный ингредиент которой является указанным активным ингредиентом, однако могут быть включены и другие соединения, предназначенные для стабилизации, консервации и т.д. состава, но непосредственно не вовлечены в терапевтическое действие указанного активного ингредиента. В некоторых воплощениях термин состоящий главным образом относится к композиции, единственный активный ингредиент которой с сопоставимым видом действия или сопоставимой молекулярной мишенью является указанным активным ингредиентом, однако могут быть включены и другие активные ингредиенты, такие вторичные активные ингредиенты действуют на различные мишени, или паллиативно. В некоторых воплощениях термин состоящий главным образом может относиться к компонентам, которые облегчают высвобождение активного ингредиента. В некоторых воплощениях термин состоящий относится к композиции, которая содержит раскрытое в описании соединение в качестве единственного активного ингредиента и фармацевтически приемлемого носителя или эксципиента.
- 12 022472
В другом воплощении изобретение обеспечивает композицию, включающую соединение данного изобретения, раскрытое в описании, или его пролекарство, аналог, изомер, метаболит, производное, фармацевтически приемлемую соль, фармацевтический продукт, полиморф, кристалл, продукт, содержащий примесь, Ν-оксид, сложный эфир, гидрат или любую их комбинацию и подходящий носитель или разбавитель.
Актвный компонент может быть представлен в композиции в виде нейтральных фармацевтически приемлемых солевых форм.
Фармацевтически приемлемые соли включают аддитивные соли кислот, которые образованы с неорганическими солями, такими как, например, хлористо-водородная или фосфорная кислоты, или с такими органическими кислотами, как уксусная, щавелевая, винная, миндальная и тому подобные. Соли, полученные из свободных карбоксильных групп, также могут быть производными неорганических оснований, таких как, например, натрий, калий, аммоний, кальций или гидроксиды железа, и такими органическими основаниями, как изопропиламин, триметиламин, 2-этиламиноэтанол, гистидин, прокаин и т.п.
Фармацевтические композиции, содержащие соединение данного изобретения, могут быть введены субъекту любым способом, известным специалисту в данной области, например, перорально, парентерально, внутрисосудисто, в раковую область, через слизистую, чрескожно, внутримышечно, интраназально, внутривенно, внутрикожно, подкожно, сублингвально, внутрибрюшинно, интравентрикулярно, интракраниально, интравагинально, ингаляцией, ректально, внутрь опухоли или любыми средствами, которыми рекомбинантный вирус/композиция могут быть доставлены в ткань (например, иглой или катетером). Альтернативно, может быть желательно местное введение для применения на клетках слизистой, на коже или глазу. Другим методом введения является аспирация или аэрозольный состав.
В одном из воплощений композиции настоящего изобретения составлены для пероральной доставки, где активные соединения могут быть введены вместе с эксципиентами и применяться в форме проглатываемых таблеток, таблеток для рассасывания, порошков, капсул, эликсиров, суспензий, сиропов, пастилок и т.п. Таблетки, порошки, пилюли, капсулы и т.п. могут также содержать следующее: связующее, такое как трагантовая смола, камедь, кукурузный крахмал или желатин; эксципиенты, такие как фосфат дикальция; дезинтегрирующий агент, такой как кукурузный крахмал, картофельный крахмал, альгиновую кислоту и тому подобное; смазывающее вещество, такое как стеарат магния, и подсластитель, такой как сахароза, лактоза или сахарин, может быть добавлен вкусовой агент, такой как перечная мята, масло можжевельника или со вкусом вишни. Если дозированная единица представляет капсулу, она в дополнение к веществам указанного выше типа может содержать жидкий носитель. Различные другие материалы могут присутствовать в качестве покрытий или с целью иным образом модифицировать физическую форму дозированной единицы. Например, таблетки, пилюли или капсулы могут быть покрыты шеллаком, сахаром или тем и другим. Сироп или эликсир могут содержать активное соединение, сахарозу в качестве подсластителя, метил- и пропилпарабены в качестве консервантов, краситель и вкусовой агент, такой как агент со вкусом вишни или апельсина. Кроме того, активные соединения могут быть включены в препараты и составы с замедленным высвобождением, периодическим высвобождением, контролируемым высвобождением или отсроченным высвобождением.
В другом воплощении композиции данного изобретения включают один или более фармацевтически приемлемых носителей.
В одном воплощении носители для применения в таких композициях являются биосовместимыми, а в другом воплощении - биоразлагаемыми. В других воплощениях препарат может обеспечивать относительно стабильный уровень высвобождения одного активного компонента. Однако в других воплощениях может быть желательна более высокая скорость высвобождения непосредственно после введения. В других воплощениях высвобождение активных соединений может быть запущено событием. События, запускающие высвобождение активных соединений, могут быть одинаковыми в одном воплощении или разными в другом воплощении. Событиями, запускающими высвобождение активных соединений, могут быть воздействие влаги в одном воплощении, снижение рН в другом воплощении или температурный порог в другом воплощении. Составление таких композиций входит в уровень компетентности среднего специалиста в данной области, использующего известные методики. Примеры носителей, полезных в этом отношении, включают микрочастицы поли(лактид-согликолида), полиакрилата, латекса, крахмала, целлюлозы, декстрана и тому подобного. Другие примеры носителей, замедляющих высвобождение, включают супрамолекулярные биовекторы, которые состоят из нежидкостного гидрофильного ядра (например, поперечно-сшитого полисахарида или олигосахарида) и, необязательно, внешнего слоя, включающего амфифильное соединение, такое как фосфолипид. В одном из воплощений количество активного соединения, содержащееся в препарате с замедленным высвобождением, зависит от места введения, скорости и ожидаемой длительности высвобождения и природы состояния, подлежащего лечению, подавлению или ингибированию.
В одном из воплощений желательно доставлять композиции, раскрытые в описании, парентерально, внутривенно, внутримышечно или даже внутрибрюшинно. Такие подходы хорошо известны специалисту в данной области, и некоторые из них далее раскрыты, например, в патентах США №№ 5543158, 5641515 и 5399363 - все патенты полностью включены посредством ссылки. В некоторых воплощениях
- 13 022472 растворы активных соединений в виде свободного основания или фармацевтически приемлемых солей могут быть приготовлены в воде, подходящим образом смешанной с поверхностно-активным веществом, таким как гидроксипропилцеллюлоза. Также могут быть приготовлены дисперсии в глицерине, жидких полиэтиленгликолях и их смесях и в маслах. Они должны быть устойчивы в условиях производства и хранения и должны быть предохранены от загрязняющего действия микроорганизмов, таких как бактерии и грибки.
В другом воплощении предпочтительно включать изотонические агенты, например сахара или хлорид натрия. В других воплощениях желательна продолжительная абсорбция композиций, вводимых инъекцией. Продолжительная абсорбция композиций, вводимых инъекцией, может быть достигнута применением в композициях агентов, задерживающих абсорбцию, например, моностеарата алюминия и желатина.
Парентеральные носители в некоторых воплощениях включают раствор хлорида натрия, декстрозу Рингера, декстрозу и хлорид натрия, раствор Рингера с лактатом и нелетучие масла. Внутривенные носители включают жидкостные и питательные восполнители, восполнители электролитов, основанные на декстрозе Рингера, и тому подобные. Также могут присутствовать консерванты и другие добавки, такие как, например, антимикробные, антиоксидантные, структурирующие агенты, инертные газы и т.п.
В некоторых воплощениях соединения данного изобретения могут быть введены субъекту в различных дозах, в одном из воплощений субъектом является человек. В одном воплощении соединения данного изобретения вводят в дозе 0,1-200 мг в день. В одном воплощении соединения данного изобретения вводят в дозе 0,1-10 мг, или в другом воплощении - 0,1-25 мг, или в другом воплощении - 0,1-50 мг, или в другом воплощении - 0,3-15 мг, или в другом воплощении - 0,3-30 мг, или в другом воплощении -0,5-25 мг, или в другом воплощении - 0,5-50 мг, или в другом воплощении - 0,75-15 мг, или в другом воплощении - 0,75-60 мг, или в другом воплощении - 1-5 мг, или в другом воплощении - 1-20 мг, или в другом воплощении - 3-15 мг, или в другом воплощении - 1-30 мг, или в другом воплощении - 30-50 мг, или в другом воплощении - 30-75 мг, или в другом воплощении - 100-2000 мг. В некоторых воплощениях соединения данного изобретения могут вводиться в различных дозах как функция времени или тяжести заболевания/симптома/состояния, или возраста, или других факторов, что понятно специалисту в данной области.
Соединения данного изобретения могут быть введены в различных дозировках. В одном из воплощений соединения данного изобретения вводят в дозировке 1 мг. В другом воплощении соединения данного изобретения вводят в дозировке 5 мг, или в другом воплощении 3 мг, или в другом воплощении 10 мг, или в другом воплощении 15 мг, или в другом воплощении 20 мг, или в другом воплощении 25 мг, или в другом воплощении 30 мг, или в другом воплощении 35 мг, или в другом воплощении 40 мг, или в другом воплощении 45 мг, или в другом воплощении 50 мг, или в другом воплощении 55 мг, или в другом воплощении 60 мг, или в другом воплощении 65 мг, или в другом воплощении 70 мг, или в другом воплощении 75 мг, или в другом воплощении 80 мг, или в другом воплощении 85 мг, или в другом воплощении 90 мг, или в другом воплощении 95 мг, или в другом воплощении 100 мг.
Наряду с тем, что соединения изобретения могут быть введены в виде единственного активного фармацевтического агента, они также могут применяться в комбинации с одним или более другими соединениями и/или в комбинации с другими агентами, применяемыми для лечения и/или профилактики заболеваний, растройств и/или состояний, что понятно специалисту в данной области. В другом воплощении соединения настоящего изобретения могут быть введены последовательно с одним или более агентами для обеспечения продолжительного терапевтического или профилактического эффектов. В другом воплощении соединения могут быть введены различными путями, в различное время или в их комбинации.
Кроме того, соединения настоящего изобретения могут применяться как по отдельности, так и в комбинации с другими способами предотвращения или лечения состояний, заболеваний или расстройств. В некоторых воплощениях указанные другие способы могут включать без ограничения хирургию, облучение, восполнение гормонов, подбор диеты, очистку раны и т.д. в соответствии с подвергаемым лечению состоянием. Это может быть выполнено последовательно (например, лечение соединением изобретения с последующей хирургией или облучением) или в комбинации (например, в дополниние к курсу диеты).
Дополнительные активные агенты обычно могут быть использованы в терапевтических количествах, как указано в РЬукШаи'к Эсхк РсГсгспес (РЭР). 531'1 Εάίίίοη (1999), или такие терапевтические количества могут быть известны среднему специалисту в данной области. Соединения изобретения и другие терапевтически активные агенты могут быть введены в рекомендованных максимальных клинических дозировках или в более низких дозах. Уровни дозировки активных соединений изобретения можно варьировать для достижения желаемого терапевтического ответа в зависимости от пути введения, тяжести заболевания и реакции пациента. Комбинации можно вводить как отдельные композиции или как единичные дозированные формы, содержащие оба агента. При введении в виде комбинации терапевтические агенты могут быть представлены как отдельные композиции, которые вводят в одно время или в различное время, или как терапевтические агенты, которые можно вводить в виде единой композиции.
- 14 022472
Фармацевтическая композиция может включать соединения данного изобретения как таковые, или может дополнительно включать фармацевтически приемлемый носитель, и может находиться в твердой или жидкой форме, такой как таблетки, порошки, капсулы, шарики, растворы, суспензии, эликсиры, эмульсии, гели, кремы или суппозитории, включая ректальные и уретральные суппозитории. Фармацевтически приемлемые носители включают смолы, крахмалы, сахара, целлюлозные материалы и их смеси. Фармацевтические препараты, содержащие соединения данного изобретения, могут быть введены субъекту, например, подкожной имплантацией шарика; в другом воплощении шарик обеспечивает контролируемое высвобождение соединения данного изобретения в течение периода времени. Препарат также может быть введен внутривенной, внутриартериальной или внутримышечной инъекцией жидкого препарата, пероральным введением жидкого или твердого препарата или местным нанесением. Введение также может быть осуществлено с применением ректального суппозитория или уретрального суппозитория. Фармацевтическая композиция также может быть парентеральным составом; в одном из воплощений состав включает липосому, которая содержит комплекс соединения данного изобретения.
Фармацевтическая композиция изобретения может быть приготовлена известным способом растворения, смешивания, гранулирования или таблетирования. Для перорального введения соединения данного изобретения или их физиологически переносимые производные, такие как соли, сложные эфиры, Νоксиды и тому подобные, смешивают с добавками, применяемыми с такой целью, такими как носители, стабилизаторы или инертные разбавители, и общеизвестными способами превращают в подходящую форму для введения, такую как таблетки, таблетки, покрытые оболочкой, жесткие или мягкие желатиновые капсулы, водные, спиртовые или масляные растворы. Примерами подходящих инертных носителей являются общепринятые основы для таблеток, такие как лактоза, сахароза или кукурузный крахмал в комбинации со связующими, подобные камеди, кукурузному крахмалу, желатину, или с дезинтегрирующими агентами, такими как кукурузный крахмал, картофельный крахмал, альгиновая кислота, или со смазывающим веществом, таким как стеариновая кислота или стеарат магния. Примерами подходящих масляных носителей или растворителей являются растительные или животные масла, такие как масло подсолнечника или масло рыбьей печени. Препараты могут быть получены в виде сухих или влажных гранул. Для парентерального введения (подкожная, внутривенная, внутриартериальная или внутримышечная инъекция) соединения данного изобретения или их физиологически переносимые производные, такие как соли, сложные эфиры, Ν-оксиды и тому подобные, превращают в раствор, суспензию или эмульсию, при необходимости, с общепринятыми веществами, подходящими для данной цели, например солюбилизаторами или другими вспомогательными веществами. Примерами являются: стерильные жидкости, такие как вода и масла, с добавлением или без добавления поверхностно-активного вещества и других фармацевтически приемлемых адьювантов. Примерами масел являются масла нефтяного, животного, растительного или синтетического происхождения, например масло земляного ореха, соевое масло или минеральное масло. Обычно предпочтительными жидкими носителями, особенно для растворов, вводимых инъекцией, являются вода, солевой раствор, водная декстроза и родственные растворы сахаров.
Приготовление фармацевтических композиций, содержащих активный компонент, вполне понятно из уровня техники. Обычно такие композиции готовят в виде аэрозоля полипептида, доставляемого в носоглотку, или инъецируемых препаратов в виде липидных растворов или суспензий, однако предварительно перед инъекцией также могут быть приготовлены твердые формы, подходящие для растворения или суспендирования в жидкости. Препарат также может быть эмульгирован. Активный терапевтический ингредиент часто смешивают с эксципиентами, которые являются фармацевтически приемлемыми и совместимыми с активным ингредиентом. Подходящими эксципиентами являются, например, вода, солевой раствор, декстроза, глицерин, этанол или тому подобное и их комбинации. Кроме того, при необходимости, композиция может содержать незначительные количества вспомогательных веществ, таких как смачивающие или эмульгирующие агенты или рН буферные агенты, которые повышают эффективность активного ингредиента.
Для местного введения на поверхность тела применяют, например, кремы, гели, капли и тому подобное, соединения данного изобретения или их физиологически переносимые производные, такие как фармацевтически приемлемые соли, готовят и наносят в виде растворов, суспензий или эмульсий в физиологически приемлемом разбавителе с фармацевтическим носителем или без него.
В другом воплощении активное соединение может быть доставлено в везикуле, в частности, в липосоме (см., Ьапдег, §шеисе 249: 1527-1533 (1990); Тгеа! е! а1., в Ыро8оте8 ίη !Ье ТЬегару о£ ШесЬоик Э|8еа8е апб Сапсег, Ь-орех-БегеМет апб РМ1ег (редакторы), П88, №\\-Уогк, рр. 353-365 (1989); Ьоре/Веге81еш, там же, рр. 317-327), а также см. выше.
В одном из воплощений настоящее изобретение обеспечивает комбинированные препараты. В одном из воплощений термин комбинированные препараты особо определяет набор частей в том смысле, что партнеры по комбинации, как определено выше, могут быть дозированы независимо или с применением различных фиксированных комбинаций с отличающимися количествами партнеров по комбинации, т.е. одновременно, совместно, раздельно или последовательно. В некоторых воплощениях части набора частей могут быть, например, введены одновременно или хронологически ступенчато, то есть в
- 15 022472 различные моменты времени с равными или различными интервалами для любой части набора частей. Соотношение общих количеств партнеров по комбинации в некоторых воплощениях может быть реализовано для введения в объединенном препарате. В одном воплощении объединенный препарат можно изменять, например, чтобы справиться с потребностями подгруппы подвергаемых лечению пациентов или потребностями одного пациента, различные потребности которого возникают вследствие вида заболевания, тяжести заболевания, возраста, пола или массы тела, что может быть легко осуществлено специалистом в данной области.
Следует понимать, что данное изобретение направлено на композиции и виды комбинированной терапии, раскрытые в описании, на любое подходящее заболевание, расстройство или состояние, что может быть легко осуществлено специалистом в данной области. Некоторые применения таких композиций и видов комбинированной терапии были описаны выше для частных заболеваний, расстройств и состояний, представляя воплощения данного изобретения, и методы лечения таких заболеваний, расстройств и состояний у субъекта введением соединения, как раскрыто в описании, как такового или как части комбинированной терапии, или применение композиций данного изобретения представляет дополнительные воплощения данного изобретения.
Лечение состояний или заболеваний, на которые возможно воздействовать активацией и/или экспрессией теломеразы
В некоторых воплощениях данное изобретение обеспечивает соединения и включающие их фармацевтические композиции для лечения состояний и/или заболеваний, на которые возможно воздействовать, повышая активность и/или экспрессию теломеразы. Эти соединения взаимодействуют с теломеразным ферментом и стимулируют и/или повышают активность и/или экспрессию теломеразы в тканях и клетках субъекта. В некоторых воплощениях такая активность понижена или отсутствует, приводя к развитию или усилению патогенеза или симптомов, связанных с заболеванием, расстройством или состоянием у субъекта. Такое заболевание, расстройство или состояние может включать, помимо прочего, а) болезнь Альцгеймера, б) болезнь Паркинсона, в) болезнь Хантингтона, г) удар, болезнь двигательных нейронов, рассеянный склероз (М§), поражение периферической и центральной нервной системы, включая поражение спинного мозга и патологии сосудов головного мозга, д) связанные со старением заболевания кожи, такое как атрофия или истончение кожи, эластолиз и образование кожных морщин, гиперплазия или гипоплазия себациновой железы, возрастное лентиго, аномалии пигментации, поседение волос и потерю или истончение волос (облысение, алопеция), или хронические кожные язвы, е) дегенеративное заболевание суставов, ж) остеопороз, остеоартрит и другие дегенеративные заболевания опорной системы, з) заболевания сосудистой системы, связанные с возрастом или стрессом, включая атеросклероз, кальцификацию, тромбоз, гипертензию и аневризмы, и) возрастную дегенерацию желтого пятна, к) СПИД, л) повреждения иммунной системы, связанные с возрастом или стрессом, включая повреждение круговорота тканей, которое происходит при естественном старении, раке, терапии рака, острых или хронических инфекциях, дегенеративных воспалительных заболеваниях или генетических расстройствах, вызывающих ускоренный круговорот тканей и родственные анемии, и другие дегенеративные состояния, м) заживление ран, ожогов, ссадин или других острых или хронических состояний эпидермиса, н) врожденный дискератоз, о) саркопению и/или другое мышечное заболевание или состояние, п) дефект лютеиновой фазы, р) преждевременный отказ яичников (преждевременную недостаточность яичников или гипергонадотропный гипогонадизм), с) нарушенное производство спермы, т) нарушенную доставку спермы и/или у) увеличение экспресии и/или активности теломеразы в запоминающих Т-клетках, за счет чего усиливается ответ иммунной памяти и ответ на вакцины, и/или ф) увеличение экспресии и/или активности теломеразы в здоровой ткани, за счет чего продлевается срок жизни субъекта, сохраняя указанного субъекта в добром здравии, и/или другие клинические терапевтические и/или диагностические области, включая любое воплощение, которое охватывается термином лечение, раскрытым в описании.
В некоторых воплощениях изобретение обеспечивает способ повышения экспрессии и/или активности теломеразы в клетке или ткани посредством контактирования клетки или ткани с композицией, включающей соединение данного изобретения. В одном из воплощений способы могут включать стадию идентификации клетки или ткани, в которой повышение экспрессии и/или активности теломеразы является желательным.
Теломераза обычно определяется на низких уровнях в нормальных соматических клетках. В коже, лимфоцитарных тканях, эндометриальной ткани, фолликулах волос и желудочных криптах, активных митотических клетках и стволовых клетках экспрессия и/или активность теломеразы проявляются на низких уровнях. Экспрессия и/или активность теломеразы регулируется на различных молекулярных уровнях, включая транскрипцию, сплайсинг мРНК и путем созревания и модификации обратной транскриптазы теломеразы (ТЕКТ) и теломерного компонента РНК (ТЕКС).
В одном из воплощений соединения и композиции данного изобретения активируют теломеразу, поэтому раскрытые в описании способы являются полезными.
Способность соединений повышать экспрессию и/или активность теломеразы в клетке может быть определена с использованием исследования ТКАР (протокола амплификации теломерного повтора), который известен из уровня техники (например, К1ш с1 а1., патент США № 5629154; Наг1еу с1 а1., патент
- 16 022472
США № 5891639). Активность обычно сравнивают со сходным образом измеренной активностью в контрольном исследовании таких клеток (например, активность теломеразы на 50% выше, чем наблюдается в контроле с растворителем). Клеточные линии, подходящие для применения в исследовании, могут включать нормальные фибробласты человека (ΝΟν) или нормальные кератоциты человека (ΝΗΚ).
В некоторых воплощениях длина теломера может служить полезным индикатором экспрессии и/или активности теломеразы. В одном из воплощений экспрессия и/или активность теломеразы важна для лечения рака, синдрома преждевременного старения или сегментарной прогерии, генетических аномалий и заболеваний, связанных с возрастом. Длина теломера имеет четкие характеры экспрессии при прогрессировании конкретного заболевания и является функцией активации, таким образом, измерение этой длины как функции лечения в некоторых воплощениях имеет ценность в плане прогноза различных заболеваний.
В одном воплощении длина теломера может быть измерена саузерн-блоттингом, исследованием гибридизационной защиты, флуоресцентной гибридизацией ίη δίΐιι, инициированной ίη δίΐιι цитометрией в потоке, количественной цепной реакцией полимеразы и анализом длины единственного теломера, которые являются методиками, известными из уровня техники (ΙΚ·ι1ι-\ν;·ιί Ып апД 1и Уап, 1. Се11. Мо1. МеД., 2005, 9 Νο. 4, 977-989).
В некоторых воплощениях данное изобретение обеспечивает способы лечения состояний, на которые возможно влиять экспрессией и/или активностью теломеразы у субъекта, способ включает введение субъекту эффективного количества соединения данного изобретения, где соединение стимулирует или улучшает экспрессию и/или активность теломеразы в клетках или ткани субъекта.
В одном из воплощений такие состояния могут включать, например, состояния, связанные с клеточным старением или с повышенной скоростью пролиферации клеток в отсутствие теломеразы, что приводит к ускоренной потере теломерного повтора. Термин повышенная скорость пролиферации относится к более высокой скорости клеточного деления по сравнению с нормальными клетками данного типа или по сравнению с нормальными клетками данного типа у других индивидуумов. Старение этих групп клеток в аномально раннем возрасте может иногда приводить к заболеванию.
В некоторых воплощениях состояния, которые можно лечить повышением экспрессии и/или активности теломеразы, могут включать применение соединений, раскрытых в описании, в клеточной терапии ех νίνο, что будет раскрыто ниже, используя подходящие типы клеток. В одном из воплощений состояние является болезнью Альцгеймера, болезнью Паркинсона, болезнью Хантингтона, ударом, повреждением нервов, болезнью двигательных нейронов, рассеянным склерозом (М8) или поражением периферической и центральной нервной системы, включая поражение спинного мозга и патологии сосудов головного мозга, где клетки, которые могут быть задействованы, являются клетками центральной нервной системы, включая нейроны и/или глиальные клетки, например астроциты, эндотелиальные клетки и/или фибробласты. В другом воплощении состояние является апоптозом в мозжечке, вызванным глутаматом.
В другом воплощении состоянием является связанное с возрастом заболевание кожи, такое как кожная атрофия и истончение, эластолиз и образование кожных морщин, гиперплазия или гипоплазия себациновой железы, старческое лентиго и/или аномалии пигментации, поседение волос и потеря или истончение волос (облысение, аллопеция) или хронические кожные язвы; где клетки, которые могут быть задействованы, являются фибробластами, клетками себациновой железы, меланоцитами, кератиноцитами, клетками Лангерганса, эндотелиальными клетками микрососудов и/или клетками фолликул волос.
В другом воплощении состоянием является дегенеративное заболевание суставов, где клетки, которые могут быть задействованы, являются клетками суставного хряща, такими как хондроциты и лакунарные и/или синовиальные фибробласты.
В другом воплощении состоянием является остеопороз, остеоартрит и/или другие дегенеративные состояния опорной системы, где клетки, которые могут быть задействованы, являются клетками опорной системы, такими как остеобласты, стромальные или мезенхимальные клетки костного мозга и/или клетки-предшественники остеопластов клетки.
В другом воплощении состоянием является саркопения и/или другие дегенеративные состояния мышц, где клетки, которые могут быть задействованы, являются мышечными клетками или их клеткамипредшественниками, или мезенхимальными клетками.
В другом воплощении состоянием является заболевание сосудистой системы, связанное со старением и/или стрессом, включая атеросклероз, кальцификацию, тромбоз, гипертензию и аневризмы, где клетки, которые могут быть задействованы, являются клетками сердца и сосудистой системы, включая эндотелиальные клетки, клетки гладких мышц и/или побочные фибробласты.
В другом воплощении состоянием является возрастная дегенерация желтого пятна, где клетки, которые могут быть задействованы, являются клетками глаза, такими как пигментированный эпителий и/или сосудистые эндотелиальные клетки.
В другом воплощении состоянием является приобретенный иммунный дефицит или СПИД, где клетки, которые могут быть задействованы, являются Т-лимфоцитами, такими как Т-клетки СИ4+ или СИ8+. В другом воплощении состоянием является врожденный иммунный дефицит.
- 17 022472
В другом воплощении состоянием является заболевание трансплантат против хозяина (ΟνΗΌ). В другом воплощении состоянием является заболевание трансплантат против лейкемии (С\Ъ).
В другом воплощении состоянием является связанное со старением и/или стрессом повреждение иммунной системы, включая повреждение круговорота тканей, которое происходит при естественном старении, раке, терапии рака, острых или хронических инфекциях, дегенеративных воспалительных заболеваниях или при генетических расстройствах, вызывающих ускоренный круговорот клеток, и родственные анемии и другие дегенеративные состояния, где клетки, которые могут быть задействованы, являются другими клетками иммунной системы, включая клетки лимфоидного, миелоидного и эритроидного происхождения, такие как В- и Т-лимфоциты, моноциты, циркулирующие и специализированные макрофаги тканей, нейтрофилы, эозинофилы, базофилы, ΝΚ-клетки и их соответствующие предшественники.
В некоторых воплощениях способы и/или композиции данного изобретения находят применение для улучшения иммунной функции у больных или здоровых. В некоторых воплощениях способы и/или композиции данного изобретения находят применение для повышения активности Т-клеток, например активности или отклика цитотоксичных Т-лимфоцитов, или спасения от анергии, что может найти применение при лечении множества заболеваний, например инфекции или неоплазии. В некоторых воплощениях такие способы и/или композиции особенно полезны при лечении патогенов, высокоустойчивых к общепринятой терапии, в частности вирулентных организмов или организмов, для которых не существует других видов терапии, например организмов, устойчивых ко многим лекарствам.
В другом воплощении состоянием является состояние, связанное с женской репродуктивной функцией, включая недостаточность лютеиновой фазы, где нарушение нормального женского менструального цикла и организма не дает производить достаточно прогестерона, что приводит к задержке развития оболочки матки (эндометрия), или преждевременному отказу яичников (преждевременной недостаточности яичников или гипергонадотропному гипогонадизму), где существует утрата нормального функционирования яичников у женщин моложе 40 лет.
В другом воплощении состоянием является состояние, связанное с мужской репродуктивной функцией, включая повреждение производства спермы или повреждение доставки спермы.
В другом воплощении типы клеток, в которых повышение экспрессии и/или активности теломеразы может быть терапевтически желательно, включают, но без ограничения, клетки печени, желез внутренней и внешней секреции, гладких мышц или скелетных мышц.
В одном из воплощений полагают, что СПИД вызван ранним старением клеток С.О8+. Старение таких клеток приписывают не просто аномальному увеличению потери теломерных последовательностей за клеточное деление, но, кроме того, увеличению репликативной скорости клеток, так что истощение теломера для данной группы клеток выше нормы. Таким образом, изобретение предоставляет способ лечения субъекта, инфицированного ВИЧ, а более конкретно уменьшения раннего старения клеток СЭ8+, ограниченных ВИЧ, у субъекта, инфицированного ВИЧ, включающий введение указанному субъекту соединения данного изобретения или включающей его композиции.
В одном из воплощений повышение экспрессии и/или активности теломеразы может благотворно влиять на неделящиеся клетки, а также на пролиферирующие клетки, например, в условиях, связанных с повышенной подверженностью клеточной гибели вследствие стресса, таких как ишемия при сердечной недостаточности или ударе (ЗсЬпеШег, ί. Мо1. Се11 Саг4ю1. 34(7):717-24; Майкоп, Ехр. Сегоп1о1. 35(4):489502). Данное изобретение обеспечивает способы снижения клеточной гибели, вызванной стрессом или повреждением ДНК, у субъекта с ишемическим состоянием ткани вследствие сердечной недостаточности или удара за счет повышения экспрессии и/или активности теломеразы в клетках субъекта, включающий введение указанному субъекту композиции, содержащей соединение данного изобретения.
В одном из воплощений данное изобретение обеспечивает способы увеличения продолжительности жизни субъекта, его жизнь может быть продлена за счет продления способности его клеток к репликации или противостоянию клеточной гибели, вызванной стрессом. Одним из примеров такой группы клеток являются лимфоциты, присутствующие у пациентов с синдромом Дауна. Таким образом, изобретение обеспечивает способ повышения репликативного потенциала и/или продолжительности жизни лимфоцитов, присутствующие у пациентов с синдромом Дауна, за счет повышения экспрессии и/или активности теломеразы в указанных клетках пациента, включающий введение указанному субъекту композиции, содержащей соединение данного изобретения. Композиции также могут быть применены для повышения устойчивости к клеточной гибели, вызванной стрессом, возникающей при нормальном старении.
В одном из воплощений данное изобретение обеспечивает способы повышения экспрессии и/или активности теломеразы, способствуя, тем самым, заживлению ран, ожогов, ссадин или других острых или хронических состояний кожи, и в некоторых воплощениях особенно эпидермиса. Таким образом, изобретение обеспечивает способ лечения острого или хронического состояния кожи введением указанному субъекту соединения, раскрытого в описании, и/или содержащей его композиции. В одном из воплощений композиция вводится местно на пораженную поверхность.
В другом воплощении острые или хронические состояния кожи, подвергаемые лечению способами данного изобретения, могут включать повреждения при травме, ожоге, трении, хирургическом разрезе,
- 18 022472 места взятия донорского трансплантата и/или повреждения, вызванные инфекционными агентами.
В другом воплощении острые или хронические состояния кожи могут включать хроническую венозную язву, диабетическую язву, компрессионную язву, болячки от сдавливания, болячки или язвы слизистой оболочки.
В другом воплощении острые или хронические состояния кожи могут включать поверхностные повреждения, вызванные продолжающимися воспалительными состояниями или инфекцией, или генетическим дефектом (таким как образование Галоида и аномалии коагуляции).
В одном из воплощений способы лечения ран, ожогов, ссадин или других острых или хронических состояний кожи включают введение композиции, содержащей соединение, раскрытое в описании, для стимуляции или улучшения пролиферации или миграции на участке лечения, повышения плотности эпителиальных клеток на участке в результате применяемой терапии, таким образом, закрывая рану, если она имеется, или восстанавливая нормальную физиологическую функцию.
В одном из воплощений данное изобретение охватывает манипуляции на коже и исправление дефектов поверхности кожи в других целях, таких как косметическое улучшение.
В другом воплощении соединения и композиции, раскрытые в описании, могут быть применены для защиты кожи от УФ-излучения или паллиативного лечения нанесенного им повреждения.
В другом воплощении соединения и композиции изобретения могут быть применены для лечения состояний волос, для сохранения цвета волос, блеска и качества волос. В некоторых воплощениях способы и композиции изобретения могут быть применены для лечения потери волос или как вспомогательная терапия при пересадке волос и в методиках лечения потери волос.
В одном из воплощений способы и композиции изобретения могут быть применены для повышения репликативного потенциала и/или увеличения продолжительности жизни клеток в культуре, например, при клеточной терапии ех νίνο или в производстве моноклональных антител за счет повышения экспрессии и/или активности теломеразы в клетках. Повышение экспрессии и/или активности теломеразы увеличивает репликативный потенциал таких клеток за счет замедления потери теломерных повторов и/или повышения устойчивости к клеточной гибели, вызванной стрессом, во время клеточной пролиферации.
В одном из воплощений способы и композиции изобретения могут быть полезны при аллогенной клеточной терапии, которая в одном воплощении может включать пересадку стволовых клеток, пересадку донорских клеток или иммунотерапию рака. В другом воплощении способы и композиции изобретения могут быть полезны для активации и/или мобилизации стволовых клеток. Например, в некоторых воплощениях способы и композиции изобретения могут быть полезны для повышения выживаемости стволовых клеток в культуре ех νίνο. В некоторых воплощениях способы и композиции изобретения могут продлевать культуральное время, таким образом поддерживая разрастание клеточной популяции, что, в свою очередь, повышает эффективность трансплантации, а в других воплощениях способы и композиции изобретения могут увеличивать живучесть клеток и/или могут увеличивать продолжительность жизни клеток на стадии стволовых клеток перед дифференцировкой клеток. В некоторых воплощениях обработка популяции соединениями, раскрытыми в описании, делает ее более восприимчивой к другим манипуляциям со стволовыми клетками, например, трансформации или трансдукции.
В одном из воплощений стволовые клетки могут быть стволовыми клетками эмбриона, а в другом воплощении стволовые клетки могут быть стволовыми клетками взрослого. В одном из воплощений способы и композиции изобретения могут быть полезны для культивирования клеток ίη νίΐΓο. В другом воплощении способы и композиции изобретения могут быть полезны для культивирования нестволовых клеток ίη νίΐΓο. В одном воплощении способы и композиции изобретения могут быть полезны для культивирования, помимо прочего, β-клеток поджелудочной железы ίη νίΐτο. В других воплощениях способы и композиции изобретения могут быть полезны в инженерии тканей. В другом воплощении стволовыми клетками могут быть стволовые клетки рака. В одном воплощении способы и композиции изобретения могут быть полезны для лечения апластической анемии.
В некоторых воплощениях способы и композиции изобретения могут быть полезны в качестве вспомогательной терапии при лечении рака в сочетании с хирургическими, радиационными, химиотерапевтическими и иммунотерапевтическими способами/соединениями и для улучшения ответа на другие виды терапии рака. В некоторых воплощениях соединения данного изобретения подавляют латентный рак, т.е. поддерживают неопластические клетки в активном состоянии, за счет чего дополнительные соединения, являющиеся токсичными для раковых клеток, становятся более эффективными. В некоторых воплощениях способы и композиции данного изобретения, когда включают вспомогательную терапию рака, увеличивают вероятность выживания субъекта, имеющего рак. В некоторых воплощениях способы и композиции данного изобретения могут предотвращать повреждение развивающегося эмбриона, вызванное лекарственной терапией, которая, в одном из воплощений может быть противораковой лекарственной терапией. В некоторых воплощениях способы и композиции данного изобретения полезны для развития диагностики рака. Например, в некоторых воплощениях соединения данного изобретения расширяют популяцию труднообнаруживаемых раковых клеток, помогая их обнаружению, являясь, таким образом, средством/способом диагностики рака. В некоторых воплощениях стадии рака могут быть отражением ответа на соединения, раскрытые в описании.
- 19 022472
В некоторых воплощениях способы и композиции данного изобретения полезны при разработке новых схем лечения. Например, в некоторых воплощениях соединения данного изобретения расширяют популяцию трудно обнаруживаемых или мало поддающихся лечению раковых клеток, что, в свою очередь, позволяет разрабатывать противораковые соединения, более подходящие для лечения конкретных популяций раковых клеток. В некоторых воплощениях обработка популяции соединениями, раскрытыми в описании, делает ее более восприимчивой к другим противораковым терапевтическим агентам или в некоторых воплощениях позволяет оценить комбинированную терапию или новые соединения.
В некоторых воплощениях способы и композиции данного изобретения полезны для разрастания стволовых раковых клеток, что, в свою очередь, полезно при разработке терапии и лечении видов рака, включающих такие клетки. В некоторых воплощениях способы и композиции данного изобретения полезны для разрастания стволовых раковых клеток, определения стадии заболевания и диагностики рака.
В одном из воплощений способы и композиции данного изобретения могут быть полезны для облегчения трансдифференцировки клеток, а в другом воплощении они могут быть полезны при клонировании клеток и/или трансдукции или трансформации. В другом воплощении способы и композиции данного изобретения могут быть полезны для повышения захвата клетками плазмидных или голых ДНК, захвата липосом и т.д., приводя в некоторых воплощениях к повышенной эффективности трансформации нуклеиновой кислоты.
В одном из воплощений данное изобретение предоставляет способы повышения репликативного потенциала и/или продолжительности жизни клеток в применениях ех νίνο, где соединение данного изобретения добавляют к пересаживаемым клеткам, полученным у субъекта, таким образом, увеличивая репликативную емкость и/или продолжительность жизни клеток.
Пересаживаемые клетки могут включать, например, стволовые клетки, такие как стволовые клетки костного мозга (патент США № 6007989), стромальные клетки костного мозга (Ышоп^еп е1 а1., Ναι. Βίο1ес1то1. 20(6):592-6, 2002) или адренокортикальные клетки (ТЬотак е1 а1., Ναι. В|о1есНпо1. 18(1):39-42, 2000). Болезненные состояния данного изобретения также могут быть подвергнуты терапии ех γί\Ό, основанной на клетках. Примеры включают применение мышечных клеток-спутников для лечения мышечной дистрофии, остеобластов для лечения остеопороза, клеток пигментированного эпителия сетчатки для лечения дегенерации желтого пятна, связанной с возрастом, хондроцитов при остеоартрите и т.д.
В одном из воплощений данное изобретение обеспечивает способы лечения врожденного дискератоза, включающие введение соединения или композиции, включающей соединение данного изобретения.
Врожденный дискератоз (ΌΚ£), также известный как синдром Цинссера-Энгмана-Коула, является редким прогрессирующим синдромом, связанным с отказом костного мозга, характеризующимся триадой из сетчатой гиперпигментации, дистрофии ногтей и пероральной лейкоплакии. Ген, мутировавший при Х-связанном ЭКС (ЮКС1), кодирует сильно сохраняющийся нуклеолярный белок, называемый дискерином. Существуют доказательства дисфункции теломеразы, дефицита рибосом и дисфункции синтеза белка при данном расстройстве. Ранняя смертность часто связана с отказом костного мозга, инфекциями, фатальными легочными осложнениями или злокачественными образованиями.
Пациенты с ЭКС имеют пониженную экспрессию и/или активацию теломеразы и аномально короткие тракты теломерной ДНК по сравнению с нормальным контролем. Поскольку теломеры функционируют для поддержания хромосомной стабильности, теломераза играет ключевую роль в предотвращении клеточного старения и прогрессирования рака. Как ЭКС, так и подвид апластической анемии происходят от дефекта теломеразы.
В одном воплощении изобретение обеспечивает способ пролиферации стволовых клеток, в котором популяцию стволовых клеток обрабатывают соединением данного изобретения, таким образом повышая репликативную емкость и/или продолжительность жизни клеточной популяции.
В некоторых воплощениях изобретение обеспечивает применение соединений и/или композиций, раскрытых в описании, в качестве терапевтических агентов для предупреждения и обращения клеточного старения, включая, но без ограничений, состояния, связанные с клеточным старением. В некоторых воплощениях соединения и/или композиции, раскрытые в описании, могут быть использованы в культуральной среде клеток или органа для расширения первичных клеточных культур, помимо прочего, в целях диагноза, анализа или производства вакцины, или для поддержания жизнеспособности органа/клеток перед трансплантацией (во время ишемии, во время между прекращением и восстановлением поступления крови). В некоторых воплощениях изобретение обеспечивает применение соединений и/или композиций, раскрытых в описании, полезных для продления выживания клеток или ткани для трансплантации, и/или в некоторых воплощениях, чтобы способствовать большему включению таких трансплантатов. В некоторых воплощениях такие свойства находят применение, в частности, в пересадках островковых клеток или клеток костного мозга, пересадке стволовых клеток или инженерии тканей.
В некоторых воплощениях изобретение обеспечивает применение соединений и/или композиций, раскрытых в описании, в качестве стимуляторов (а) клеток с репликативной емкостью в центральной нервной системе, включая астроциты, эндотелиальные клетки и фибробласты, которые играют роль в таких связанных с возрастом заболеваниях, как болезнь Альцгеймера, болезнь Паркинсона, болезнь Хантингтона и удар, или при восстановлении повреждения нервов, болезнь двигательных нейронов, пораже- 20 022472 ние периферической и центральной нервной системы, включая поражение спинного мозга и патологии сосудов головного мозга (СУ) таких как удар, и заболеваниях, таких как рассеянный склероз (М§) (Ь) клеток с ограниченной репликативной емкостью в наружном покрове, включая фибробласты, клетки себациновой железы, меланоциты, кератиноциты, клетки Лангерганса и клетки фолликул волос, которые играют роль в связанных с возрастом заболеваниях наружнего покрова, таких как кожная атрофия, эластолиз и образование кожных морщин, гиперплазия себациновой железы, возрастное лентиго, поседение волос и потерю или истончение волос (облысение, алопеция), хронические кожные язвы, кератоз и связанное с возрастом нарушение заживления ран; (с) клеток с ограниченной репликативной емкостью в суставном хряще, таких как хондроциты и лакунарные и синовиальные фибробласты, которые играют роль в дегенеративных болезнях суставов; (б) клеток с ограниченной репликативной емкостью в костях, таких как остеобласты и клетки-предшественники остеопластов, которые играют роль при остеопорозе; (е) клеток с ограниченной репликативной емкостью в иммунной системе, таких как В- и Т-лимфоциты, моноциты, нейтрофилы, эозинофилы, базофилы, ΝΚ-клетки и их соответствующие предшественники, которые играют роль в повреждениях иммунной системы, связанных с возрастом; (ί) клеток с ограниченной репликативной емкостью в сосудистой системе, включая эндотелиальные клетки, клетки гладких мышц и побочные фибробласты, которые играют роль в связанных с возрастом заболеваниях сосудистой системы, включая атеросклероз, кальцификацию, тромбоз, гипертензию и аневризмы; (д) клеток с ограниченной репликативной емкостью в органах тела, включая, но без ограничения, печень, легкие и поджелудочную железу (клетки островков), которые могут играть роль в заболеваниях печени (цирроз), заболевании легких или диабете; (Ь) клеток с ограниченной репликативной емкостью в репродуктивной системе, включая фолликулярные клетки яичников и клетки желтого тела; (ί) клеток с ограниченной репликативной емкостью в ухе, включая внутренние и внешние ресничковые слуховые клетки аппарата Корти; и (]) клеток с ограниченной репликативной емкостью в глазу, таких как клетки пигментированного эпителия и сосудистые эндотелиальные клетки, которые играют важную роль в связанной с возрастом дегенерации желтого пятна.
Следующие примеры представлены с целью более полной иллюстрации предпочтительных воплощений изобретения. Однако их никоим образом не следует рассматривать как ограничивающие объем изобретения.
Примеры
Пример 1. Синтез соединения 77.
1,1,1-трис(4-Гидроксифенил)этан (4 г, 13 мМ), формальдегид (3,6 г, 120 мМ) и 40% раствор диметиламина в воде (15 мл) добавляют к раствору, содержащему 50 мл воды и 60 мл ΕΐΘΗ. Раствор 2,5 ч кипятят с обратным холодильником. Частичным выпариванием растворителя осаждают белое твердое вещество, которое отфильтровывают, промывают водой и высушивают, получая 7,85 г белого твердого вещества с выходом 77,93%, т.пл. 169°С.
ЯМР С1)С1; δ 6,64 (6Н, с, АгН), 3,40 (12Н, с, СН2), 2,22 (36Н, с, Ν-СНД 2,06 (3Н, с, С-СН3).
Пример 2. Синтез соединения 84.
Соединение 84 синтезируют способом, подобным способу, описанному в примере 1.
ЯМР СОСЪ δ 6,71 (6Н, с, АгН), 3,58 (12Н, с, СН2), 2,54 (24Н, кв, 1=7,0 Гц), 1,04 (24Н, т, 1=7,0 Гц).
Пример 3. Синтез соединения 78.
1,1,1-трис(4-Гидроксифенил)этан (1,53 г, 5 мМ), формальдегид (1,35 г, 45 мМ) и 1-метилпиперазин (2,5 мл, 50 мМ) в 20 мл воды и 25 мл ΕΐΘΗ 3 ч кипятят с обратным холодильником. Выпаривание дает твердое вещество, которое по данным ТСХ и ЯМР содержит 2 продукта, которые не являются исходными веществами. Формальдегид (0,75 г, 25 мМ) и 1-метилпиперазин (1,5 мл, 30 мМ) добавляют к 5 мл воды и 10 мл ΕίΘΗ и реакционную смесь кипятят 4 ч. Выпаривание и обработка дают 3,3 г бледно-желтого твердого вещества с выходом 67%, т.пл. 63°С. Продукт растворим в этаноле, имеет очень хорошую растворимость в воде.
ЯМР СЭС13 δ 6,67 (6Н, с, АгН), 3,53 (12Н, с, СН2), 2,44 (48Н, ушир.м, пиперазиновое кольцо), 2,26 (18Н, с, Ν-СНз), 2,00 (3Н, с, С-СН3).
Пример 4. Синтез соединения 83.
Соединение 83 синтезируют способом, подобным способу, описанному в примере 1. Получают белое твердое вещество. Т.пл. 178°С.
ЯМР С1)С1; δ 6,68 (6Н, с, АгН), 3,55 (12Н, с, СН2), 2,51 (24Н, ушир.т, Ν-СН кольца), 2,03 (3Н, с, ССН3), 1,55 (24Н, ушир.т, Ν-СН кольца), 1,42 (12Н, ушир.с).
Пример 5. Синтез соединения 81.
Соединение 81 синтезируют способом, подобным способу, описанному в примере 1. Получают белое твердое вещество. Т.пл. 135°С.
ЯМР СОСЪ δ 6,68 (6Н, с, АгН), 3,61 (12Н, с, СН2), 2,51 (24Н, ушир.т, Ν-СН кольца), 2,03 (3Н, с, ССН3), 1,76 (24Н, ушир.т, Ν-ί'Ή2 кольца).
Пример 6. Синтез соединения 82.
Соединение 82 синтезируют способом, подобным способу, описанному в примере 1. Получают бе- 21 022472 лое твердое вещество. Т.пл. 212°С.
ЯМР СПС13 δ 6,68 (6Н, с, АгН), 3,69 (12Н, т, 1=4,5 Гц, Ы-СН2 кольца), 3,52 (12Н, с, СН2), 2,45 (24Н, ушир.т, О-СН2 кольца), 2,03 (3Н, с, С-СН3).
Пример 7. Синтез соединения 79.
Стадия 1. Соединение 77 (2,98 г, 4,6 мМ), полученное способом, описанным в примере 1, добавляют к 20 мл уксусного ангидрида и нагревают 4 ч при 100°С. Смесь охлаждают и добавляют воду. Смесь оставляют на ночь при перемешивании при комнатной температуре, а затем экстрагируют СН2С12. Растворитель выпаривают, получают нона-ацетатное производное в виде желтого масла и далее очищают хроматографией (силикагель; 1% МеОН/СН2С12), получают 3,2 г вязкого желтого масла, выход 80%.
Стадия 2. КОН (4 г), растворенный в воде, добавляют к раствору нона-ацетата со стадии 1 (2,5 г) в 20 мл ЕЮН. Смесь перемешивают 20 ч при комнатной температуре. Смесь подкисляют НС1 и экстрагируют СН2С12. Растворитель выпаривают, получают 2,2 г желтого масла, которое далее очищают колоночной хроматографией (силикагель; 2% МеОН/СН2С12) и перекристаллизовывают из смеси толуолгексан, получают 1 г соединения 79, выход 53%. Белое твердое вещество, т.пл. 78°С. ТСХ- Κί=0,55 в 5% МеОН/СН2С12.
ЯМР СПС13 δ 7,93 (3Н, с, ОН), 6,79 (6Н, с, Аг-Н), 4,54 (12Н, с, Аг-СН2), 3,55 (12Н, кв, 1=7,0 Гц, СН2), 2,05 (3Н, с, С-СН3), 1,22 (18Н, т, 1=7,0 Гц, СН3).
Пример 8. Синтез 1,1,1-трис(4-гидрокси-3,5-дибромфенил)этана (соединение 68).
Стадия 1. Раствор №ЮН (1 г, 25 мМ) в 10 мл воды и диметилсульфат (5,1 г, 40 мМ) (молярное соотношение 1:8) в течение 1 ч порциями добавляют к раствору 1,1,1-трис(4-гидроксифенил)этана (1,53 г, 5 мМ) в 20 мл этанола и 10 мл воды. Затем раствор 1 ч кипятят с обратным холодильником и 70 ч перемешивают при комнатной температуре. Белый осадок отфильтровывают, промывают водой и высушивают, получая 1,74 г 1,1,1-трис(4-метоксифенил)этана. Двукратная перекристаллизация из 50 мл этанола дает 1,15 г белых кристаллов, выход 66%, т.пл. 160°С. ТСХ. КТ=0,85 в СН2С12.
ЯМР СПС13 δ 6,99, 6,79 (12Н, АВ кв., 1АВ=8,8 Гц, СН2), 3,78 (9Н, с, ОСН3), 2,11 (3Н, с, СН3).
Стадия 2. К раствору 1,1,1-трис(4-метоксифенил)этана (0,49 г, 1,4 мМ) со стадии 1 в 22 мл 1,2дихлорэтана порциями добавляют раствор брома (1,65 г, 10,2 мМ) (соотношение 7,3:1) в 5 мл 1,2дихлорэтана. Раствор оставляют на ночь при перемешивании при комнатной температуре и 3 ч нагревают при 70°С, обрабатывают (тиосульфат натрия), получая 1,0 г неочищенного продукта. ТСХ не показывает присутствия исходного вещества, но ЯМР показывает примеси, указывающие на то, что бромирование не завершено (м при 6,90 м.д. и 4 метокси). Твердое вещество бромируют повторно 1 г брома и кипятят с обратным холодильником 18 ч. Смесь обрабатывают, как указано выше, и растирают с горячим этанолом, получая 0,27 г белого вещества, выход 23%, т.пл. 160°. ТСХ. РТ=0,95 в СН2С12.
ЯМР СПС13 δ 7,16 (6Н, с, АгН), 3,92, 3,91 (соотношение 6:4) (9Н, 2с, ОСН3), 2,04, 2,03 (соотношение 4:6) (3Н, с, СН3).
Пример 9. Синтез 1,1,1-трис(4-гидрокси-3,5-дииодфенил)этана.
1,1,1-трис(4-Гидроксифенил)этан (1,53 г, 5 мМ) в 40 мл этанола и 40 мл воды охлаждают во льду, добавляют КОН (2,2 г, 39,2 мМ), а затем К1 (5,8 г, 34,8 мМ) и иод (8,8 г, 34,7 мМ). Цвет изменяется от фиолетового до коричневого. Реакционную смесь перемешивают 3 ч при комнатной температуре. Смесь выливают на колотый лед. Добавляют концентрированную НС1 до получения кислого рН и обрабатывают раствором тиосульфата натрия. Выпаривание дает 5,1 г бледно-коричневого твердого вещества, гексаиодированного продукта, последующее растирание с этанолом дает 3 г белого твердого вещества, выход 61%, т.пл. 230°С. Κί=0,8 (в 5% МеОН-СН2С12).
ЯМР СПС13 δ 7,3 (6Н, с), 5,77 (ушир.с, ОН), 1,97 (3Н, с, СН3).
Пример 10. Восстановление двухцепочечных фрагментов ДНК с помощью теломеразы.
Для оценки активации и/или экспрессии теломеразы было выполнено исследование восстановления ДНК. Фрагменты ДНК генерированы ионной радиацией. Все соединения улучшали восстановление. Данные результаты показывают, что активация и/или экспрессия теломеразы обеспечивает стабильность в стрессовых условиях.
Пример 11. Влияние трифенильных соединений, активирующих теломеразу, на увеличение продолжительности жизни нематод.
Нематодам (С. е1едаи§) вводили трифенильные соединения, активирующие теломеразу, представленные в нижеследующих таблицах, и активность и/или экспрессию теломеразы измеряли по увеличению продолжительности жизни нематод. Нематод выращивали с активаторами в 50 микромолярной концентрации и вычисляли среднее, максимум и полупериод жизни для соединения 68 и соединения 77, двух типичных молекул, по сравнению с контролем (фиг. 8). Значения представляют среднюю продолжительность жизни.
- 22 022472
Κι
Таблица 1
Соед. № Κι Кг К, К4 Увелич. продолжит. жизни, %
1 ОН ОН ОН СН, 30
2 ОАс ОАс ОАс СН,
3 Η Н Н С1
4 Η Н Н СН,
5 ОСН, ОСН, ОСН, СН, 12
$ осн, ОСН, Н СН,
Ί ОСН, Н н ОН
3 С1
9 СН,
10 СН, Н н СН, -1
11 ОСН, СН, СН, он
12 С1
13 СН,
14 ОСН, ОСН, СН, он
15 С1
16 СН,
17 ОСН, ОСН, Р он
18 С1
19 СН,
20 СН, СН, СН, он
21 С1
22 СН, 21
23 1-нафтил ОСН, ОБЕ он
24 С1
25 СН,
26 1-нафтил 1-нафтил 1-нафтил он
27 С1
28 СН,
29 9-флуорен ОСН, он
30 9-флуорен ОСН, С1
31 СН, 23
32 9-ксантен н С1
33 СН, -26
34 Нас. 7-цикл ОСН, он
35 С1
36 СН,
37 Ненас. 7-цикл ОСН, он
38 С1
39 СН,
40
41 Τοί Βζ Τοί Βζ Τοί Βζ СН,
42 ОСНгСООЕЬ ОСНгСООЕД ОСНгСООЕС СН, -7
43 ОСН2СООН ОСНгСООН ОСН2СООН СН,
44 Н Н н С1
45 Н Н н СН,
- 23 022472
46 Н Ή Н ОЕЬ
47 Н Н Н 0-изо-пролил
48 Н Н Н О-н-бутил
49 Н н Н СН3 16
50 з-пгооь 3-ΙΝΏΟΙι ОСНз Н 4
51 з-пгооь 3 - ΙΝΌΟΙι ОСН3 СНз
52 Дезтетрадимегил амино -25
53 4-Ру ОН ОН СНз 13
54 3-ΡΥ ОН ОН СН3 15
55 4-Ру Н Н СНз
56 4-Ру СНЭ СН3 СНЭ
57 4-Ру ОСНз ОСНз СНз
58 4-Ру ОСН3 ОН СН,
59
я
Соединение Н> К X Продолж. жизни, %
60 ОН Р -2
61 он Р=О 30
62 ОСНз Р 29
63 ОСНз Р=О 0
64 н Р 19
65 СНз Р 42
66 Вг N 19
Соед. № Κι К2 К3 Продолжит. жизни, %
67 С1 он С1
68 Вг он Вг 13
69 Вг он н -5
- 24 022472
70 Вг ОСН3 ВГ 41
71 νο2 он н 8
72 Ж>2 0СН3 н 4
73 I ОСНз I -7
74 I ОН н
75 он он он
76 νη2 он н
77 СН2-диметиламино он СН2-диметиламино 43
78 СН2 -метилпиперазин он СН2-метилпиперазин 36
79 СН20ЕЁ он СН2ОЕЪ 16
80 СН2ОАс ОАс СН20Ас
81 СН2-пирролидин он СН2 -пирролидин
82 СН2-морфолин он СН2-морфолин
83 СН2-пиперидин СН2 -пиперидин
84 СН2-диэтиламин СН2-диэтиламин
Пример 12. Влияние трифенильных соединений, активирующих теломеразу, на клетки глиобластомы человека.
Соединения 1, 62, 68, 77 и 79 (указанные в таблицах выше) исследовали на предмет активации и/или экспрессии теломеразы в клетках глиобластомы. Соединения 79 и 68 были синтезированы, как указано в описании. Соединения 1 и 62 доступны в продаже. 1 мкМ белков нуклеарных клеток (в качестве источника теломеразы) добавляют к конкретной реакционной смеси теломеразы и проводят исследование амплификации теломерного повтора (ТКАР) в присутствии и в отсутствие активаторов теломеразы (соединения 79, 68, 1 и 62). Продукты реакции анализируют на РАСЕ с последующей авторадиографией. Вычисляют процент активации/экспрессии теломеразы.
Клетки глиобластомы И-251 1 или 3 ч обрабатывают различными концентрациями соединений настоящего изобретения. Удаляют культуральную среду и клетки несколько раз промывают РВ8. Экстракты ядер получают по стандартной методике, и активность теломеразы определяют ТКАР с использованием радиоактивных нуклеотидов. Типичная картина нескольких экспериментов, демонстрирующая продукты теломеразной активности, наблюдаемые в исследовании ТКАР, представлена на фиг. 1А. Клетки обрабатывают соединением 68 при 1 (дорожки 2 и 4) или 0,25 мкМ (дорожки 3 и 5) в течение 1 (дорожки 2 и 3) или 3 (дорожки 4-5) ч соответственно. Дорожка 1 показывает обработку только растворителем. Количественную оценку активности теломеразы из множества экспериментов проводили с помощью β-сцинтилляционного счетчика измерением общей радиоактивности меченных теломеразных продуктов, а активность теломеразы в каждом образце вычисляли относительно внутреннего стандарта. Для соединений настоящего изобретения определяли процент активации теломеразы (из контрольных клеток, обработанных только растворителем) (фиг. 1В). Соединения настоящего изобретения существенно повышают активность теломеразы в обработанных клетках, а уровень активации зависит от природы соединения, концентрации и времени воздействия на клетки соединением настоящего изобретения.
Воздействие соединений настоящего изобретения на уровень теломеразного белка и долгосрочной обработки единственной дозой соединения 68 на теломеразу измеряли, подвергая клетки в течение различных интервалов (3-24 ч) действию 1 мкМ соединения и определяя уровень теломеразного белка вестерн-блоттингом с антителомеразным антителом. Соединение 68 увеличивает уровень теломеразного белка в обработанных клетках (фиг. 2А). Наблюдается зависящее от времени повышение теломеразы с пиком активации при 1-3 ч обработки, а затем происходит постепенное снижение. Уровень активности теломеразы лишь незначительно превышает уровень, определенный в клетках, обработанных растворителем, через 24 ч (фиг. 2В). Изменений уровня белка β-актина (нижнее поле) или других ферментов ядер, таких как топоизомераза ΐ, не наблюдается, и это позволяет предположить, что единственная доза вызывает быструю, специфичную активацию теломеразы, однако эта активация является преходящей, а уровень теломеразы возвращается к исходному значению через 24 ч после обработки, указывая на способность соединений настоящего изобретения регулировать активацию теломеразы.
Также были проведены эксперименты для определения действия соединений настоящего изобретения на уровень теломеразной мРНК (включая полный и срощенный вариант тело-мРНК). Клетки обрабатывали единственной дозой 1мкМ соединения 68 в течение различных интервалов (1-24 ч). Были приготовлены полные экстракты РНК, и равные концентрации РНК анализировали норзерн-блоттингом со
- 25 022472 специфическим датчиком ЬТЕКТ. На фиг. ЗА представлены вариант мРНК полной длины и срощенный вариант в необработанных клетках контроля (дорожки 1, 2). Уровень мРНК полной длины, а также срощенного варианта мРНК существенно увеличивается со временем в клетках, обработанных соединениями настоящего изобретения (до 4,5-кратного против контроля) (фиг. 3В, дорожки 3-7). Повышенная экспрессия теломеразы является специфической, поскольку не наблюдается воздействия на ΟΑΡΌΗ мРНК (нижнее поле). Добавление актиномицина Ό (ингибитора транскрипции РНК) во время обработки соединениями настоящего изобретения (в течение 3 ч) отменяет активацию экспрессии теломеразы (фиг. 3А и В, сравни дорожки 8 и 4), и это позволяет предположить, что соединения настоящего изобретения активируют экспрессию теломеразного гена.
Пример 13. Влияние соединений настоящего изобретения на стволовые клетки мезенхимы человека.
Стволовые клетки мезенхимы человека выделяют аспирацией из подвздошного гребня и 6 месяцев выращивают в клеточной культуре (цикл 19) перед тем, как отмечается существенное снижение роста клеток. Соединения данного изобретения ежедневно в течение 3 дней добавляют непосредственно в культуральную среду. После обработки различными соединениями настоящего изобретения наблюдается существенное увеличение выживаемости и пролиферация ЬМ8С (фиг. 4).
Возможность того, что соединения настоящего изобретения увеличивают выживаемость и пролиферацию ЬМ8С, исследована культивированием ЬМ8С (цикл 3) в камере со срезом тканевой культуры при 17х103 клеток/лунка в течение 60 ч. Соединения настоящего изобретения добавляли в течение 6 ч со свежей средой. Были выполнены иммунофлуоресцентные исследования с антителом анти-ЬТЕКТ (первое антитело) и вторичным флуоресцентным антителом су3. Ядро окрашивали ΌΑΡΙ. Соединения настоящего изобретения активируют экспрессию теломеразы в ЬМ8С (фиг. 5). Экспрессия теломеразного белка наблюдается как в цитоплазме, так и в ядре. Степень активации экспрессии теломеразы: соединение 68 > 79 > 77. Количественную оценку активности теломеразы в ЬМ8С выполняли с помощью ПЦР в реальном времени (набор для количественного определения теломеразы) в экстрактах ядер, полученных из ЬМ8С, обработанных соединением 79 (250 нМ) в течение 6 или 24 ч. Соединение 79 повышает активность теломеразы в ЬМ8С от 12 до 6 раз в зависимости от времени (фиг. 5В).
Пример 14. Влияние соединений настоящего изобретения на кератиноциты человека.
Кератиноциты человека, утратившие свою способность к пролиферации (на их пятом цикле), получали из местного среза кожи и обрабатывали соединением 68 в течение 24 ч. Определяли выживаемость клеток, число клеток и их морфологию. Клетки, обработанные соединениями настоящего изобретения, показывают существенную (2-4-кратную) пролиферацию, и были обнаружены жизнеспособные клетки (фиг. 6). Соединение 79 проявляет лучшее действие на выживаемость клеток, чем соединение 68. Данные результаты позволяют предположить роль соединений настоящего изобретения при пересадке кожи, заживлении ран, хронических кожных язвах и других состояниях кожи.
Пример 15. Влияние соединений настоящего изобретения на пигментированные эпителиальные клетки сетчатки (КРЕ) человека.
Хроническое воздействие окислительного стресса на пигментированные эпителиальные клетки сетчатки человека предрасполагает их к развитию связанной с возрастом дегенерации желтого пятна (АМЭ). Клетки КРЕ человека были подвергнуты окислительному стрессу обработкой Н2О2 (1 мМ) в течение 24 ч и Н2О2 (0,5 мМ) в течение следующих 24 ч. Затем клетки в течение двух дней ежедневно обрабатывали указанными концентрациями соединений в отсутствие Н2О2. Наблюдается повышенный рост клеток как следствие обработки соединениями (фиг. 7А). Активность теломеразы в клетках КРЕ была повышена соединениями 68 и 79 в 30 и 50 раз соответственно (фиг. 7В). Данные позволяют предположить роль соединений настоящего изобретения при лечении дегенерации желтого пятна и других заболеваний сетчатки.
Пример 16. Увеличение времени выживания С. е1едаи8.
Выживание С. е1едаи§, нематод, которые обычно живут 12-14 дней, представляет приемлемую модель для изучения продления продолжительности жизни. Нематодам вводили трифенильные соединения, активирующие теломеразу, и определяли их влияние на увеличение времени выживания нематод. Нематод выращивали с активаторами в 50 микромолярной концентрации и вычисляли среднее, максимум и полупериод жизни по сравнению с необработанным контролем. Продолжительность жизни увеличилась на 13-43% (табл. 2), а средняя продолжительность жизни увеличилась приблизительно в 2 раза (с 12 дней до 22 дней, как показано на фиг. 8).
- 26 022472
Таблица 2
Увеличение времени выживания С. е1едапа теломеразными соединениями
Соединение № Увеличение времени выживания, %
61 30
62 29
69 13
77 43
78 36
79 16
Пример 17. Активация экспрессии теломеразы соединениями настоящего изобретения в эндометриальных клетках крыс.
Самкам крыс в диэстре (стадия, при которой эпителиальный слой эндометрия крыс претерпевает распад) подкожно вводят 6 мг/кг соединения 68 или носитель. Крыс умерщвляют через 24 ч и готовят иссечения эндометрия из рогов матки обработанных или необработанных крыс и анализируют по гистологическим методикам и иммуногистохимическим окрашиванием. Срезы эндометрия окрашивают гематоксилином-эозином. Обработка соединениями настоящего изобретения предотвращает распад эпителиального слоя эндометрия. Кроме того, морфологически эндометриальная ткань напоминает структуру на стадии пролиферации (проэструс и эструс) (фиг. 9А, В). Активация экспрессии теломеразы в эндометриальных клетках обработанных крыс была исследована иммуногистохимически с помощью антителомеразного антитела (фиг. 9С-Р). Наблюдается существенное усиление окрашивания теломеразы в эндометриальной ткани у крыс, которым инъецировали соединение настоящего изобретения, особенно в эпителиальном слое эндометриального просвета и в эпителиальном слое секретирующих желез (сравни фиг. 9С и Ό, Е и Р). Кроме того, активности теломеразы измеряли в экстрактах ядер, полученных из эндометрия различных обработанных групп. Наблюдается существенное, 4-8-кратное увеличение активности теломеразы у крыс, которым инъецировали соединение настоящего изобретения (фиг. 9С), указывающее на то, что соединения настоящего изобретения, введенные подкожно в шею, достигают эндометриальной ткани, активируют теломеразу и вызывают пролиферацию ткани. Эти данные подтверждают роль соединений настоящего изобретения, активирующих теломеразу у животных и влияющих на пролиферацию ткани ίη νίνο. В некоторых воплощениях изобретения данные подтверждают роль соединений настоящего изобретения в лечении эндометриоза.
Пример 18. Активация теломеразы в клетках коры головного мозга крыс соединениями настоящего изобретения.
Исследовано действие соединений настоящего изобретения, инъецируемых подкожно самкам крыс и взрослым самцам мышей на экспрессию теломеразы в различных отделах мозга. Совместная локализация теломеразы и ЭЛИ (ЭЛИ или 4',6-диамидино-2-фенилиндол), флуоресцентного красителя, связывающегося с ДНК, указывает на активацию и/или экспрессию этих клеток как следствие обработки. Крайне низкая экспрессия теломеразы наблюдается в конкретных клетках различных отделов ЦНС (фиг. 10 и 11). Инъекции соединений 79 и 77 крысам существенно активируют экспрессию теломеразы в коре головного мозга, но соединение 68 этого не делает, отмечается, что соединения 79 и 77, но не соединение 68, могут преодолевать гематоэнцефалический барьер (ВВВ) (фиг. 10).
Соединение 79 вводили подкожно самцам мышей в возрасте трех месяцев. Мышей умерщвляли через 24 ч и отделяли кору, мозжечок, гиппокамп, гипоталамус, мозговой столб и обонятельную луковицу, и подвергали их иммунофлуоресцентному исследованию. Низкая экспрессия теломеразы наблюдается в большинстве обследованных отделов мозга за исключением клеток Пуркинье в мозжечке (фиг. 11). Инъекция соединений настоящего изобретения существенно и коренным образом усиливает экспрессию теломеразы в различных отделах мозга. Представляется, что данная активация является специфической для центральных нейронных клеток. Соединение 79, например, повышает экспрессию теломеразы в двигательных нейронных клетках, присутствующих в мозговом столбе.
Подтверждение результатов иммуноферментного исследования было получено при определении уровня фермента белка ТЕКТ в белковых экстрактах ядер из мозга, удаленного у крыс, обработанных или необработанных соединениями настоящего изобретения. Был выполнен анализ вестерн-блоттингом с использованием специфического антитела к НТЕКТ и был определен и вычислен % активации теломеразы по отношению к результатам, полученным с носителем. Наблюдается существенное увеличение (9-13 раз) теломеразного белка в клетках коры головного мозга крыс, обработанных соединениями настоящего изобретения (фиг. 12), подтверждающий роль применения соединений настоящего изобретения в лечении заболеваний, относящихся к головному мозгу.
Пример 19. Предотвращения вызванного глутаматом апоптоза в мозжечке мышей.
Была исследована способность соединений настоящего изобретения предотвращать вызванного глутаматом апоптоза в мозжечке мышей. Мышам вводили 6 мг/кг соединения 79 или только носитель. Мышей умерщвляли через 24 ч после обработки и удаляли их мозг. Готовили срезы мозжечка и подвер- 27 022472 гали обработке глутаматом с различной концентрацией в течение 30 мин. Срезы окрашивали пропидийиодидом и подсчитывали число клеток, испытавших апоптоз, и производили расчет с помощью специального программного обеспечения (Лтаде). Предотврещение апоптоза у мышей, обработанных соединениями настоящего изобретения, рассчитывали как процент по отношению к контрольным мышам (фиг. 13). Это подтверждает роль соединений настоящего изобретения в лечении припадков, удара, болезни Альцгеймера, эпилепсии, шизофрении и алкогольной и опиатной зависимости.
Пример 20. Активация теломеразы в кледках сердца мышей соединениями настоящего изобретения.
Была измерена активация теломеразы соединениями настоящего изобретения в протеиновых экстрактах, полученных от одной мыши (фиг. 14). Имеется существенное повышение экспрессии теломеразы в сердце после инъекции соединения 79. Это подтверждает роль соединений настоящего изобретения в лечении инфаркта, ишемии, миокардита и т.п.
Пример 21. Предотвращение повреждающего действия лекарств на эмбрионы соединениями настоящего изобретения.
Способность соединений настоящего изобретения предотвращать повреждающее действие лекарств на развитие эмбрионов была исследована на крысах. Самок крыс обрабатывали камптотецином (СРТ) (5 мг/кг), противораковым лекарством, а затем инъецировали соединение 68 (6 мг/кг) или носитель. Эмбрионы извлекали на 14-15 день беременности и исследовали на предмет повреждений. Эмбрионы, обработанные СРТ и соединением 68, развивались нормально, тогда как эмбрионы, обработанные только СРТ, проявляли признаки аномалий в развитии (фиг. 15).
Пример 22. Действие соединений настоящего изобретения на образование опухоли ВСЬ1.
Мышей ВАЬВ/с х С57ВЬ/6)Р1 инокулировали 105 клеток В-клеточной лейкемийной лимфомы мышей (ВСЬ1). Спленомегалия и лимфоцитоз (лейкемия) развились во всей контрольной группе, и у мышей, обработанных соединениями, активирующими теломеразу (40 или 80 мг/кг).
Таблица 3
Экспериментальная группа Медианная выживаемость (интервал)
Только ВСЫ 29 (21-35)
ВСЫ + Соединение 77 (10 нМ) 26 (22-41)
Соединения, активирующие теломеразу, не улучшают развитие лейкемии и не сокращают выживаемость мышей, которые были инокулированы лейкемией. Соединения настоящего изобретения, активирующие теломеразу, не способствуют прогрессированию существующего рака, но также и долговременное введение соединений не приводит к развитию рака.
Пример 23. Действие соединений настоящего изобретения на заболевание трансплантат против хозяина (СУНР) как пример функции Т-клеток.
Мышей ВАЬВ/с х С57ВЬ/6)Р1 инокулировали 30х106 клеток селезенки С57ВБ/6, чтобы индуцировать СУНБ. Мыши, обработанные соединением 77, показали более тяжелые признаки острого СУНБ, что отмечалось по потере массы по сравнению с необработанными контрольными животными. Эти результаты позволяют предположить, что соединения настоящего изобретения могут применяться в качестве сильных адъювантов.
Пример 24. Действие соединений настоящего изобретения на заболевание трансплантат против лейкемии (СУЬ) как характерный пример иммунотерапии Т-клетками.
Мышей ВАЬВ/с х С57ВЬ/6)Р1 инокулировали 105 клеток ВСЬ1 с последующим полным облучением тела 400 сГр, что позволяет внедриться аллогенным лимфоцитам для индуцирования эффектов трансплантат против лейкемии (СУЬ), опосредуемых 30х106 клеток селезенки С57ВЬ/6. Выживаемость необработанных контрольных животных составляет 21-35 дней (медиана - 29). Выживаемость мышей, обработанных аллогенными стволовыми клетками, составляет 13-22 дня, поскольку лейкемия активирует тяжелое СУНБ. В противоположность, выживаемость мышей, обработанных соединениями настоящего изобретения, составляет 37-74 дня, одна мышь прожила 125 дней. Это подтверждает роль соединений настоящего изобретения в лечении лейкемии.
Так как определенные признаки изобретения были проиллюстрированы и раскрыты в описании, многочисленные модификации, замены, изменения и эквиваленты теперь будут очевидны для среднего специалиста в данной области. Поэтому следует понимать, что прилагаемая формула изобретения предназначена для охвата всех подобных модификаций и изменений, которые входят в истинный замысел изобретения.

Claims (13)

  1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
    1. Применение соединения, представленного структурной формулой I
    - 28 022472 где Ζ представляет углерод или фосфор;
    заместители К.1, К3, К4, К6, К7 и К9, одинаковые или разные, представляют Н, ОН, галоген, С16алкокси, (С1-6алкиламино)2(С1-6алкил), (С1-6алкил)гетероциклоалкил, где гетероциклоалкил представляет собой насыщенный 6-членный гетероцикл, содержащий от одного до трех гетероатомов, выбранных из азота и кислорода, и необязательно замещенный С1-6алкилом;
    К2, К5 и К8, одинаковые или разные, представляют Н, ОН, галоген, С1-6алкил, С1-6алкокси, ОСН2СООЕ1, 6-10-членный ароматический гетероцикл, содержащий гетероатом азота; и
    К10 отсутствует или представляет собой метил; или его фармацевтически приемлемой соли, для приготовления лекарственного средства, используемого для стимуляции или повышения экспрессии, активности теломеразы или их комбинации, в клетке или ткани, где указанная клетка или ткань выделена из субъекта или находится в субъекте, имеющем заболевание, опосредованное активностью/экспрессией теломеразы или их комбинации, выбранное из группы, включающей нейродегенеративное заболевание, повреждение нервной системы, сосудистое заболевание, заболевание, связанное со старением, дегенеративное заболевание суставов, дегенеративное заболевание опорной системы, дегенеративное заболевание мышц, дегенерацию желтого пятна, диабет, инфекцию, повреждение иммунной системы, рак, дегенеративное воспалительное заболевание, генетическое расстройство, вызывающее ускоренное обновление клеток, анемию или мужское или женское бесплодие.
  2. 2. Применение по п.1, где указанное состояние представляет нейродегенеративное заболевание, повреждение нервной системы, сердечно-сосудистое заболевание, заболевание, связанное со старением, дегенеративное заболевание суставов, дегенеративное заболевание опорной системы, дегенеративное заболевание мышц, дегенерацию желтого пятна, диабет, инфекцию, повреждение иммунной системы, рак, дегенеративное воспалительное заболевание, генетическое расстройство, вызывающее ускоренное обновление клеток, анемию или мужское или женское бесплодие.
  3. 3. Применение соединения, представленного структурной формулой I, определенной в п.1, для приготовления лекарственного средства, используемого для лечения заболевания, опосредованного активностью/экспрессией теломеразы или их комбинации, выбранного из группы, включающей острое или хроническое состояние кожи.
  4. 4. Применение по п.3, где указанное острое или хроническое состояние кожи является раной, ожогом, ссадиной, порезом, местом пересадки, повреждением, вызванным инфекционным агентом, хронической венозной язвой, диабетической язвой, компрессионной язвой, раной от сдавливания, язвой или раной слизистой оболочки, меланомой или келоидным образованием.
  5. 5. Применение соединения, представленного структурной формулой I, определенной в п.1, для приготовления лекарственного средства, применяемого для ингибирования, остановки или отсрочки клеточного старения, опосредованного активностью/экспрессией теломеразы или их комбинации в клетке или ткани субъекта.
  6. 6. Применение по п.5, где клетка или ткань включает клетку или ткань для трансплантации указанному субъекту.
  7. 7. Применение по п.5, где клетка или ткань выделена из субъекта или находится в субъекте, имеющем нейродегенеративное заболевание, заболевание или состояние, связанное со старением, поседением волос или потерей волос, дегенеративное заболевание суставов, дегенеративное заболевание опорной системы, дегенеративное заболевание мышц, дегенерацию желтого пятна, дегенеративное воспалительное заболевание или генетическое расстройство, вызывающее ускоренное обновление клеток.
  8. 8. Применение соединения, представленного структурной формулой I, определенной в п.1, для приготовления лекарственного средства, используемого для уменьшения или остановки эффектов старения, опосредованных активностью/экспрессией теломеразы или их комбинации, у субъекта.
  9. 9. Применение по п.8, где указанные эффекты старения включают эффекты на коже, волосах, глазах, мышцах или костях субъекта.
  10. 10. Применение по любому из пп.1-3, где указанное соединение представлено структурой формулы IV
    - 29 022472 где К1, К3, К4, К6, К7 и К9 такие, как определено выше для формулы I.
  11. 11. Применение по любому из пп.1-3, где указанное соединение представлено структурой формулы
    VI где К'1, К'3, К'4, К'6, К'7 и К'9, одинаковые или разные, включают галоген, гетероциклоалкил, С1-6алкокси, (С1-6алкиламино)2(С1-6алкил), где гетероциклоалкил определен в п.1, и гетероциклоалкил и К10 такие, как определено выше для формулы I.
  12. 12. Применение по п.11, где указанное соединение представлено структурой формулы VII или структурой формулы X
    - 30 022472
  13. 13. Применение по любому из пп.1-3, где указанное соединение представлено структурой формулы
    XIV или структурой формулы XVI
    Фиг. 1(А, В)
    Фиг. 2(А, В)
    - 32 022472
    Фиг. 3(А, В)
    Необработанный
    Носитель
    Соединение 79 250 нМ
    Соединение 77 250 нМ
    Соединение 68 250 нМ 'Соединение 68 1 мкМ
    - 33 022472
    Активация теломеразы в ИМЗС
    Соединение 79 250 нМ (6 час) Соединение 77 1 нМ (6 час)
    Соединение 68 250 нМ (6 час) Носитель (1 %)
    Активация теломеразы в ПМ8С (ПЦР в реальном времени)
    Клетки обработаны Соединением 79 (250 нМ)
    А - иммунофлуоресценция с антителом анти-НТЕРТ АВ В - активность теломеразы с использованием специфического набора для ПЦР в реальном времени
    Фиг. 5(А, В)
    - 34 022472
    Активация теломеразы в клетках РРЕ (обработка 24 часа) с использованием специфического набора для ПЦР в реальном времени
    7$ носитель
    Обработка
    Фиг. 7В
    Увеличение продолжительности жизни С. е1едап5
    Фиг. 8
    АКТИВАТОРЫ ТЕЛОМЕРАЗЫ, ИНЪЕЦИРОВАННЫЕ ПОДКОЖНО САМКАМ КРЫС АКТИВИРУЮТ ЭКСПРЕССИЮ ТЕЛОМЕРАЗЫ В ЭНДОМЕТРИАЛЬНЫХ КЛЕТКАХ
    Фиг. 9А ДМСО Фиг. 9В Соединение 79 Фиг. 9(3
    Фиг. 9
    - 35 022472
    Активация теломеразы в коре головного мозга (МО)
    Окрашивание ядер Окрашивание теломеразы Перекрывание
    Фиг. 10
    Мозжечок (носитель) Мозжечок (79) Мозжечок (носитель) Мозжечок (79)
    Кора (носитель) Кора (79) Мозговой столб (носитель) Мозговой столб (79)
    Фиг. 11
    77 7®
    Обработки
    Фиг. 12
    - 36 022472
    ПРЕДОТВРАЩЕНИЕ ВЫЗВАННОГО ГЛУТАМАТОМ АПОПТОЗА В МОЗЖЕЧКЕ МЫШЕЙ
    Предотвращение апоптоза Соединением 79 в мозжечке мышей
    250 нМ 150 нМ 50 нМ
    Обработка глутаматом Фиг. 13
    Экспрессия теломеразы активируется в сердце мышей
    Фиг. 14
    Соединение 68 предотвращает повреждающее действие лекарств на развитие эмбриона у крыс
    Фиг. 15
EA200971141A 2007-06-04 2008-06-04 Соединения, активирующие теломеразу, и способы их применения EA022472B1 (ru)

Applications Claiming Priority (5)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US92487507P 2007-06-04 2007-06-04
US92952407P 2007-07-02 2007-07-02
US92952507P 2007-07-02 2007-07-02
US692408P 2008-02-06 2008-02-06
PCT/IL2008/000756 WO2008149353A2 (en) 2007-06-04 2008-06-04 Telomerase activating compounds and methods of use thereof

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA200971141A1 EA200971141A1 (ru) 2010-10-29
EA022472B1 true EA022472B1 (ru) 2016-01-29

Family

ID=40094272

Family Applications (4)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA201401193A EA201401193A1 (ru) 2007-06-04 2008-06-03 Триарильные соединения и композиции, их содержащие
EA200971140A EA021544B1 (ru) 2007-06-04 2008-06-03 Триарильные соединения и фармацевтические композиции, их содержащие
EA200971141A EA022472B1 (ru) 2007-06-04 2008-06-04 Соединения, активирующие теломеразу, и способы их применения
EA201500403A EA201500403A1 (ru) 2007-06-04 2008-06-04 Соединения, активирующие теломеразу, и способы их применения

Family Applications Before (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA201401193A EA201401193A1 (ru) 2007-06-04 2008-06-03 Триарильные соединения и композиции, их содержащие
EA200971140A EA021544B1 (ru) 2007-06-04 2008-06-03 Триарильные соединения и фармацевтические композиции, их содержащие

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA201500403A EA201500403A1 (ru) 2007-06-04 2008-06-04 Соединения, активирующие теломеразу, и способы их применения

Country Status (19)

Country Link
US (7) US8604245B2 (ru)
EP (3) EP2152663B1 (ru)
JP (6) JP5508258B2 (ru)
KR (4) KR101560844B1 (ru)
CN (4) CN101742906A (ru)
AU (2) AU2008259342B2 (ru)
CA (4) CA2690004C (ru)
CY (1) CY1115919T1 (ru)
DK (2) DK2152663T3 (ru)
EA (4) EA201401193A1 (ru)
ES (2) ES2465216T3 (ru)
HR (2) HRP20140394T1 (ru)
IL (4) IL202424A (ru)
MX (2) MX2009013354A (ru)
PL (2) PL2152663T3 (ru)
PT (2) PT2152663E (ru)
SI (2) SI2152663T1 (ru)
TW (1) TWI430796B (ru)
WO (3) WO2008149346A2 (ru)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2714886C1 (ru) * 2017-11-30 2020-02-20 Оптиджинекс, Инк Увеличение длины теломеры в клетке

Families Citing this family (15)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AU2008259342B2 (en) 2007-06-04 2014-07-10 Ben-Gurion University Of The Negev Research And Development Authority Tri-aryl compounds and compositions comprising the same
TWI480055B (zh) * 2008-12-22 2015-04-11 Pola Chem Ind Inc 黑色素產生抑制劑
WO2010135247A1 (en) 2009-05-18 2010-11-25 TA Therapeutics, Ltd. Compositions and methods for increasing telomerase activity
CA2928725A1 (en) 2013-11-05 2015-05-14 Esther Priel Compounds for the treatment of diabetes and disease complications arising from same
WO2017176087A1 (ko) 2016-04-07 2017-10-12 주식회사 젬백스앤카엘 텔로머라제 활성 증가 및 텔로미어 연장 효능을 가지는 펩티드 및 이를 포함하는 조성물
US11857516B2 (en) 2017-02-12 2024-01-02 Neuromagen Pharma, Ltd. Telomerase activating compounds for use in fertility and related applications
IL257470B2 (en) * 2018-02-11 2023-12-01 Ben Gurion Univ Of The Negev Research And Development Authority Telomerase activator compounds for use in fertility and related applications
KR102099335B1 (ko) 2017-11-03 2020-04-09 한국과학기술연구원 Prox1의 발현 또는 활성 조절제를 포함하는 텔로머라제 역전사효소의 발현 조절용 조성물 또는 텔로머라제 역전사효소 조절제의 스크리닝 방법
KR20210047822A (ko) * 2018-08-24 2021-04-30 미쯔비시 가스 케미칼 컴파니, 인코포레이티드 화합물, 및 그것을 포함하는 조성물, 그리고, 레지스트패턴의 형성방법 및 절연막의 형성방법
EP3906113A4 (en) * 2018-12-31 2022-09-21 B.G. Negev Technologies and Applications Ltd., at Ben-Gurion University CATCH FLOW TEST APPARATUS AND METHOD
US20220136011A1 (en) * 2019-02-08 2022-05-05 Board Of Regents, The University Of Texas System Telomerase-containing exosomes for treatment of diseases associated with aging and age-related organ dysfunction
KR102214612B1 (ko) 2020-03-23 2021-02-15 한국과학기술연구원 Prox1의 발현 또는 활성 조절제를 포함하는 텔로머라제 역전사효소의 발현 조절용 조성물 또는 텔로머라제 역전사효소 조절제의 스크리닝 방법
KR102666469B1 (ko) 2023-05-04 2024-05-17 주식회사 아리바이오 텔로머라제 활성화제와 나노 입자를 포함하는 약물 전달용 조성물 및 이를 포함하는 탈모 예방, 개선 또는 치료용 조성물
KR102666470B1 (ko) 2023-05-04 2024-05-17 주식회사 아리바이오 텔로머라제 활성화제와 나노 입자를 포함하는 약물 전달용 조성물 및 이를 포함하는 탈모 예방, 개선 또는 치료용 조성물
KR102647264B1 (ko) 2023-11-01 2024-03-14 주식회사 아리바이오 텔로머라제 활성화제와 나노 입자를 포함하는 약물 전달용 조성물 및 이를 포함하는 탈모 예방, 개선 또는 치료용 조성물

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4093557A (en) * 1976-09-16 1978-06-06 Hercules Incorporated Process for inhibiting corrosion of metals in aqueous systems
US5198531A (en) * 1991-06-14 1993-03-30 Research Diagnostic Antibodies Polymeric resin for peptide synthesis
US20060111365A1 (en) * 2001-10-18 2006-05-25 Tetsuzo Tauchi Combinations comprising N- {5-[4- [4-methy L-piperazino-methyl) -benzoylamido] -2-methylphenyl) -4- (3-pyridyl) -2-pyrimidine-amine and at least one telomerase inhibitor
US7115619B2 (en) * 2000-10-12 2006-10-03 Cancer Research Technology Limited N8, N13 -disubstituted quino[4,3,2-kl]acridinium salts as therapeutic agents
US20070042962A1 (en) * 2002-02-04 2007-02-22 Adams David S Peptide dependent upregulation of telomerase expression

Family Cites Families (92)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4666828A (en) 1984-08-15 1987-05-19 The General Hospital Corporation Test for Huntington's disease
AR240698A1 (es) 1985-01-19 1990-09-28 Takeda Chemical Industries Ltd Procedimiento para preparar compuestos de 5-(4-(2-(5-etil-2-piridil)-etoxi)benzil)-2,4-tiazolidindiona y sus sales
US4683202A (en) 1985-03-28 1987-07-28 Cetus Corporation Process for amplifying nucleic acid sequences
US4801531A (en) 1985-04-17 1989-01-31 Biotechnology Research Partners, Ltd. Apo AI/CIII genomic polymorphisms predictive of atherosclerosis
US4740330A (en) * 1986-09-03 1988-04-26 The Dow Chemical Company Method for allylating aromatic hydroxyl-containing compounds
US4835202A (en) * 1987-11-20 1989-05-30 Ciba-Geigy Corporation (Hydroxyphenyl) phosphine stabilized compositions
US4783495A (en) * 1987-11-20 1988-11-08 Ciba-Geigy Corporation (Hydroxyphenyl) silane stabilizers
US5272057A (en) 1988-10-14 1993-12-21 Georgetown University Method of detecting a predisposition to cancer by the use of restriction fragment length polymorphism of the gene for human poly (ADP-ribose) polymerase
JPH02121941A (ja) * 1988-10-28 1990-05-09 Teijin Chem Ltd ハロゲン化トリスフェニル誘導体および難燃性熱可塑性樹脂組成物
IE61928B1 (en) 1988-11-29 1994-11-30 Boots Co Plc Treatment of obesity
US5219727A (en) * 1989-08-21 1993-06-15 Hoffmann-Laroche Inc. Quantitation of nucleic acids using the polymerase chain reaction
US5192659A (en) 1989-08-25 1993-03-09 Genetype Ag Intron sequence analysis method for detection of adjacent and remote locus alleles as haplotypes
US5399363A (en) 1991-01-25 1995-03-21 Eastman Kodak Company Surface modified anticancer nanoparticles
JPH04268328A (ja) * 1991-02-22 1992-09-24 Idemitsu Petrochem Co Ltd 分岐ポリカーボネート
JPH04328555A (ja) * 1991-04-26 1992-11-17 Fuji Photo Film Co Ltd ポジ型フオトレジスト組成物
EP0625971A4 (en) 1992-02-03 1995-01-04 Hoechst Celanese Corporation Uv light stabilizing, antioxidant and colorant compounds.
US6007989A (en) 1992-05-13 1999-12-28 Board Of Regents, The University Of Texas System Methods of screening for compounds that derepress or increase telomerase activity
US5629154A (en) 1993-11-12 1997-05-13 Geron Corporation Telomerase activity assays
FR2692575B1 (fr) 1992-06-23 1995-06-30 Sanofi Elf Nouveaux derives du pyrazole, procede pour leur preparation et compositions pharmaceutiques les contenant.
GB9218830D0 (en) 1992-09-05 1992-10-21 Smithkline Beecham Plc Novel compounds
JP2845743B2 (ja) 1992-12-28 1999-01-13 三菱化学株式会社 新規なナフタレン誘導体
JP3534787B2 (ja) * 1993-05-06 2004-06-07 本州化学工業株式会社 トリスフェノールへのヒドロキシベンジル基付加体
US5543158A (en) 1993-07-23 1996-08-06 Massachusetts Institute Of Technology Biodegradable injectable nanoparticles
JP3026707B2 (ja) * 1993-10-05 2000-03-27 出光石油化学株式会社 分岐状ポリカーボネートの製造方法
US5863726A (en) 1993-11-12 1999-01-26 Geron Corporation Telomerase activity assays
US5583016A (en) 1994-07-07 1996-12-10 Geron Corporation Mammalian telomerase
US6028103A (en) * 1994-09-16 2000-02-22 Children's Medical Center Corporation Triaryl methane compounds and analogues thereof useful for the treatment or prevention of sickle cell disease or diseases characterized by abnormal cell proliferation
WO1996008240A1 (en) * 1994-09-16 1996-03-21 President And Fellows Of Harvard College Use of aromatic halides for treating mammalian cell proliferation
AU732881C (en) 1994-09-16 2002-11-07 Children's Medical Center Corporation Triaryl and diaryl compounds, their analogues and uses thereof
DE4439947A1 (de) 1994-11-09 1996-05-15 Boehringer Mannheim Gmbh 2,2-Dichloralkancarbonsäuren, Verfahren zu ihrer Herstellung und diese enthaltende Arzneimittel
US5571825A (en) * 1995-03-31 1996-11-05 Warner-Lambert Company Method of selectively inhibiting prostaglandin G/H synthase-2
IE80468B1 (en) 1995-04-04 1998-07-29 Elan Corp Plc Controlled release biodegradable nanoparticles containing insulin
IL118474A (en) 1995-06-01 2001-08-08 Sankyo Co Benzimideol derivatives and pharmaceutical preparations containing them
US5880146A (en) * 1995-06-07 1999-03-09 Fuji Immunopharmaceuticals Corporation Inhibition of IL-12-induced IFN-γ synthesis by specific bis-phenol compounds as a method of immune modulation
GB9604242D0 (en) 1996-02-28 1996-05-01 Glaxo Wellcome Inc Chemical compounds
US5889038A (en) * 1996-03-20 1999-03-30 Children's Hospital Methods and products for treating diarrhea and scours: use of clotrimazole and related aromatic compounds
US6191165B1 (en) * 1996-05-31 2001-02-20 Allelix Neuroscience Inc. Pharmaceutical for treatment of neurological and neuropsychiatric disorders
RU2214419C2 (ru) 1996-08-30 2003-10-20 Ново Нордиск А/С Glp-1 производные
JP4128247B2 (ja) 1996-11-01 2008-07-30 株式会社リコー フェノール系化合物及び電子写真感光体
JPH10153884A (ja) * 1996-11-25 1998-06-09 Minolta Co Ltd 静電潜像現像用トナー
WO1998035033A1 (en) 1997-02-05 1998-08-13 1149336 Ontario Inc. Polynucleotides encoding proexendin, and methods and uses thereof
DE19711617A1 (de) 1997-03-20 1998-09-24 Boehringer Mannheim Gmbh Neue Thiazolidindione, Verfahren zu ihrer Herstellung und diese enthaltende Arzneimittel
DE19823831A1 (de) 1998-05-28 1999-12-02 Probiodrug Ges Fuer Arzneim Neue pharmazeutische Verwendung von Isoleucyl Thiazolidid und seinen Salzen
WO2000001495A1 (en) 1998-07-02 2000-01-13 Millipore Corporation Process for coating a solid surface with a liquid composition
FR2783246B1 (fr) 1998-09-11 2000-11-17 Aventis Pharma Sa Derives d'azetidine, leur preparation et les medicaments les contenant
DE19844547C2 (de) 1998-09-29 2002-11-07 Aventis Pharma Gmbh Polycyclische Dihydrothiazole, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Verwendung als Arzneimittel
KR100353014B1 (ko) 1998-11-11 2002-09-18 동아제약 주식회사 발기부전 치료에 효과를 갖는 피라졸로피리미디논 화합물
CO5150173A1 (es) 1998-12-10 2002-04-29 Novartis Ag Compuestos n-(glicilo sustituido)-2-cianopirrolidinas inhibidores de peptidasa de dipeptidilo-iv (dpp-iv) los cuales son efectivos en el tratamiento de condiciones mediadas por la inhibicion de dpp-iv
US6380378B1 (en) * 1998-12-24 2002-04-30 Toagosei Company, Ltd. Nucleotide compound, nucleotide block oligonucleotide, and method for producing them
GB9900416D0 (en) 1999-01-08 1999-02-24 Alizyme Therapeutics Ltd Inhibitors
FR2789079B3 (fr) 1999-02-01 2001-03-02 Sanofi Synthelabo Derive d'acide pyrazolecarboxylique, sa preparation, les compositions pharmaceutiques en contenant
US6417208B1 (en) 1999-02-05 2002-07-09 Albert Einstein College Of Medicine Of Yeshiva University Method of identification of inhibitors of PDE1C
JP4195145B2 (ja) * 1999-04-01 2008-12-10 出光興産株式会社 ポリカーボネートの製造方法
US6262118B1 (en) 1999-06-04 2001-07-17 Metabolex, Inc. Use of (-) (3-trihalomethylphenoxy) (4-halophenyl) acetic acid derivatives for treatment of insulin resistance, type 2 diabetes and hyperlipidemia
EP1076066A1 (en) 1999-07-12 2001-02-14 Zealand Pharmaceuticals A/S Peptides for lowering blood glucose levels
CA2380007A1 (en) * 1999-07-28 2001-02-08 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Methods of inhibiting osteoclast activity
HU225917B1 (en) 1999-09-16 2007-12-28 Tanabe Seiyaku Co Pyrimidine and pyrazine derivatives, pharmaceutical compositions containing them and their use
TW200514783A (en) 1999-09-22 2005-05-01 Bristol Myers Squibb Co Substituted acid derivatives useful as antiodiabetic and antiobesity agents and method
AU7961800A (en) * 1999-10-28 2001-05-08 Kyowa Hakko Kogyo Co. Ltd. Thiazolidinedione derivatives
SE9904413D0 (sv) 1999-12-03 1999-12-03 Astra Ab Comminuted form
JP2003519154A (ja) 1999-12-22 2003-06-17 メタバシス・セラピューティクス・インコーポレイテッド 新規なビスアミダートホスホネートプロドラッグ
US6803375B1 (en) * 2000-01-06 2004-10-12 The Regents Of The University Of California Non-peptide inhibition of T-lymphocyte activation and therapies related thereto
JP4187934B2 (ja) * 2000-02-18 2008-11-26 富士フイルム株式会社 ポジ型レジスト組成物
US6395767B2 (en) 2000-03-10 2002-05-28 Bristol-Myers Squibb Company Cyclopropyl-fused pyrrolidine-based inhibitors of dipeptidyl peptidase IV and method
JP2004506009A (ja) 2000-08-11 2004-02-26 ファイザー・インク インスリン抵抗性症候群の治療
GB0031103D0 (en) 2000-12-20 2001-01-31 Glaxo Group Ltd Chemical compounds
WO2002056880A1 (en) * 2001-01-19 2002-07-25 Cytokinetics, Inc. Triphenylmethane kinesin inhibitors
MXPA03006936A (es) 2001-02-02 2003-11-18 Pfizer Tratamiento de diabetes mellitus.
CA2449256A1 (en) 2001-06-07 2002-12-19 Eli Lilly And Company Modulators of peroxisome proliferator activated receptors
DE60235212D1 (de) 2001-06-27 2010-03-11 Smithkline Beecham Corp Fluoropyrrolidine als Dipeptidylpeptidasehemmer
UA74912C2 (en) 2001-07-06 2006-02-15 Merck & Co Inc Beta-aminotetrahydroimidazo-(1,2-a)-pyrazines and tetratriazolo-(4,3-a)-pyrazines as inhibitors of dipeptylpeptidase for the treatment or prevention of diabetes
CA2465632A1 (en) 2001-11-02 2003-05-08 Pfizer Products Inc. Treatment of insulin resistance syndrome and type 2 diabetes with pde9 inhibitors
AU2002364587A1 (en) 2001-12-21 2003-07-30 Human Genome Sciences, Inc. Albumin fusion proteins
MXPA04008195A (es) 2002-03-14 2004-11-26 Bayer Pharmaceuticals Corp Metodos para el tratamiento de la diabetes empleando inhibidores de pde11a.
EP1605925A1 (en) 2003-03-17 2005-12-21 Pfizer Products Inc. Treatment of type 1 diabetes with pde5 inhibitors
US20040220186A1 (en) 2003-04-30 2004-11-04 Pfizer Inc. PDE9 inhibitors for treating type 2 diabetes,metabolic syndrome, and cardiovascular disease
JP4517723B2 (ja) 2003-05-22 2010-08-04 住友ベークライト株式会社 ナフトキノンジアジドスルホン酸エステル、それを用いたポジ型感光性樹脂組成物、半導体装置及び表示素子
KR101465515B1 (ko) * 2003-06-23 2014-11-26 텔로머레이스 엑티베이션 사이언시즈, 인코퍼레이티드 텔로머라제 활성을 증가시키기 위한 조성물 및 방법
UA86591C2 (ru) 2003-06-30 2009-05-12 Алтана Фарма Аг Пирролодигидроизохинолины как ингибиторы pde10, фармацевтическая композиция на их основе
EP1651251A4 (en) 2003-07-31 2008-06-18 Bayer Pharmaceuticals Corp METHOD FOR THE TREATMENT OF DIABETES AND RELATED DISEASES USING PDE 10A INHIBITORS
US20050049208A1 (en) 2003-09-03 2005-03-03 Kaufmann Doug A. Method of treating and method of preventing diabetes
CN102134231B (zh) 2004-03-15 2020-08-04 武田药品工业株式会社 二肽基肽酶抑制剂
US8192960B2 (en) * 2004-04-07 2012-06-05 Qiagen North American Holdings One component and two component DNA Pol III replicases and uses thereof
JP2008501776A (ja) 2004-06-07 2008-01-24 ファイザー・プロダクツ・インク 肥満に関連し、かつメタボリックシンドロームに関連する状態の治療としてのホスホジエステラーゼ１０の阻害
WO2006007864A1 (en) * 2004-07-17 2006-01-26 Max Planck Geselllschaft Zur Förderung Der Wissenschaft Treating neurodegenerative conditions
JP4929569B2 (ja) * 2004-08-20 2012-05-09 東レ株式会社 高分子電解質材、ならびにそれを用いた高分子電解質膜、膜電極複合体および高分子電解質型燃料電池
US7541392B2 (en) * 2004-09-14 2009-06-02 E.I. Du Pont De Nemours And Company Materials leading to improved dental composites and dental composites made therefrom
EP2305246B1 (en) * 2005-01-31 2015-08-26 The Trustees of the University of Pennsylvania Tumor necrosis factor inhibitors
US7709533B2 (en) * 2005-02-01 2010-05-04 Icagen, Inc. Imines as ion channel modulators
JP5211438B2 (ja) * 2005-06-09 2013-06-12 東レ株式会社 樹脂組成物およびそれを用いた表示装置
NZ575904A (en) * 2006-09-28 2011-11-25 Univ Otago Triphenylphosphonium thionitrite nitric oxide donors
AU2008259342B2 (en) 2007-06-04 2014-07-10 Ben-Gurion University Of The Negev Research And Development Authority Tri-aryl compounds and compositions comprising the same

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4093557A (en) * 1976-09-16 1978-06-06 Hercules Incorporated Process for inhibiting corrosion of metals in aqueous systems
US5198531A (en) * 1991-06-14 1993-03-30 Research Diagnostic Antibodies Polymeric resin for peptide synthesis
US7115619B2 (en) * 2000-10-12 2006-10-03 Cancer Research Technology Limited N8, N13 -disubstituted quino[4,3,2-kl]acridinium salts as therapeutic agents
US20060111365A1 (en) * 2001-10-18 2006-05-25 Tetsuzo Tauchi Combinations comprising N- {5-[4- [4-methy L-piperazino-methyl) -benzoylamido] -2-methylphenyl) -4- (3-pyridyl) -2-pyrimidine-amine and at least one telomerase inhibitor
US20070042962A1 (en) * 2002-02-04 2007-02-22 Adams David S Peptide dependent upregulation of telomerase expression

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2714886C1 (ru) * 2017-11-30 2020-02-20 Оптиджинекс, Инк Увеличение длины теломеры в клетке

Also Published As

Publication number Publication date
DK2152663T3 (da) 2014-06-23
EP2152256B1 (en) 2014-10-15
WO2008149353A2 (en) 2008-12-11
EP2152663B1 (en) 2014-03-19
IL202424A (en) 2017-01-31
EP2826472A2 (en) 2015-01-21
EP2152256A4 (en) 2011-11-02
JP6134824B2 (ja) 2017-05-24
KR101560844B1 (ko) 2015-10-15
HRP20141264T1 (hr) 2015-05-08
JP5922328B2 (ja) 2016-05-24
IL249838A0 (en) 2017-02-28
JP2010529961A (ja) 2010-09-02
HRP20140394T1 (hr) 2014-08-01
JP5508258B2 (ja) 2014-05-28
CN101742994B (zh) 2014-06-11
WO2008149346A3 (en) 2010-02-25
TWI430796B (zh) 2014-03-21
PT2152663E (pt) 2014-06-03
WO2008149345A2 (en) 2008-12-11
CA2963857A1 (en) 2008-12-11
EA021544B1 (ru) 2015-07-30
EA201401193A1 (ru) 2015-08-31
AU2008259350A1 (en) 2008-12-11
TW200916101A (en) 2009-04-16
SI2152663T1 (sl) 2014-08-29
JP2017019774A (ja) 2017-01-26
IL240895A0 (en) 2015-10-29
EP2152663A2 (en) 2010-02-17
SI2152256T1 (sl) 2015-04-30
EA200971140A1 (ru) 2010-10-29
US20100256382A1 (en) 2010-10-07
IL202425A (en) 2015-09-24
JP2010529107A (ja) 2010-08-26
CA2690013C (en) 2016-02-09
CA2690013A1 (en) 2008-12-11
CN103553939B (zh) 2018-02-02
EP2152256A2 (en) 2010-02-17
WO2008149346A2 (en) 2008-12-11
KR20160051682A (ko) 2016-05-11
MX2009013353A (es) 2010-07-06
US20140142068A1 (en) 2014-05-22
JP2017149762A (ja) 2017-08-31
US10214481B2 (en) 2019-02-26
ES2527759T3 (es) 2015-01-29
WO2008149345A3 (en) 2010-02-25
KR20100039828A (ko) 2010-04-16
US9670138B2 (en) 2017-06-06
US9670139B2 (en) 2017-06-06
MX2009013354A (es) 2010-07-06
AU2008259350B2 (en) 2013-06-06
CA2913459A1 (en) 2008-12-11
KR20170029015A (ko) 2017-03-14
CN101742906A (zh) 2010-06-16
CN104000806B (zh) 2017-09-15
EP2826472A3 (en) 2015-05-20
DK2152256T3 (en) 2015-01-19
CN104000806A (zh) 2014-08-27
CN101742994A (zh) 2010-06-16
US20170305837A1 (en) 2017-10-26
US20140107336A1 (en) 2014-04-17
KR101600374B1 (ko) 2016-03-07
US20170305836A1 (en) 2017-10-26
JP2015007068A (ja) 2015-01-15
JP5964898B2 (ja) 2016-08-03
EP2152663A4 (en) 2011-11-09
US8609736B2 (en) 2013-12-17
PL2152663T3 (pl) 2014-09-30
EA201500403A1 (ru) 2016-01-29
US8604245B2 (en) 2013-12-10
IL202424A0 (en) 2010-06-30
IL202425A0 (en) 2010-06-30
US9663448B2 (en) 2017-05-30
AU2008259342B2 (en) 2014-07-10
CN103553939A (zh) 2014-02-05
WO2008149353A3 (en) 2010-02-25
PT2152256E (pt) 2015-02-04
CY1115919T1 (el) 2017-01-25
JP2016145199A (ja) 2016-08-12
ES2465216T3 (es) 2014-06-05
US20100267667A1 (en) 2010-10-21
KR20100039830A (ko) 2010-04-16
CA2690004A1 (en) 2008-12-11
PL2152256T3 (pl) 2015-03-31
CA2690004C (en) 2018-01-23
AU2008259342A1 (en) 2008-12-11
EA200971141A1 (ru) 2010-10-29
US20140142067A1 (en) 2014-05-22

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EA022472B1 (ru) Соединения, активирующие теломеразу, и способы их применения
JP2017039747A (ja) ジグリシドエーテル誘導体治療剤およびその使用方法
KR101819567B1 (ko) 혈관신생-매개된 질환의 치료용 화합물
CA3112695C (en) Composition for treating fibrotic diseases, comprising benzhydryl thioacetamide compound as active ingredient
KR102034276B1 (ko) Idf-11774 및 자가용해소체 형성 저해제를 포함하는 암의 예방 또는 치료용 조성물
EP4357351A1 (en) Trap1 inhibitor and use thereof
RU2801811C1 (ru) Новое соединение и содержащая это соединение фармацевтическая композиция для предотвращения или лечения рака
CN118526503A (zh) 治疗或预防败血症或与败血症相关的病情的化合物
KR20100004681A (ko) ｐ21의 발현을 증가시키는 활성을 갖는 화합물5,4'-디메톡시플라본의 항암제로서의 용도

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): AM AZ BY KZ KG MD TJ TM

MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): RU