EA020251B1 - Биосовместимые и биоразлагаемые конъюгаты аналогов фумагиллина - Google Patents

Биосовместимые и биоразлагаемые конъюгаты аналогов фумагиллина Download PDF

Info

Publication number
EA020251B1
EA020251B1 EA201070657A EA201070657A EA020251B1 EA 020251 B1 EA020251 B1 EA 020251B1 EA 201070657 A EA201070657 A EA 201070657A EA 201070657 A EA201070657 A EA 201070657A EA 020251 B1 EA020251 B1 EA 020251B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
alkyl
cancer
fumagillin
conjugate
pharmaceutically acceptable
Prior art date
Application number
EA201070657A
Other languages
English (en)
Other versions
EA201070657A1 (ru
Inventor
Лора К. Экаллиан
Расселл К. Петтер
Джон Дж. Кейн
Чарльз Э. Хаммонд
Мао Йин
Александр Юрковетский
Чери А. Стивенсон
Original Assignee
Мерсана Терапьютикс, Инк.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Мерсана Терапьютикс, Инк. filed Critical Мерсана Терапьютикс, Инк.
Publication of EA201070657A1 publication Critical patent/EA201070657A1/ru
Publication of EA020251B1 publication Critical patent/EA020251B1/ru

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D303/00—Compounds containing three-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom
    • C07D303/02—Compounds containing oxirane rings
    • C07D303/38—Compounds containing oxirane rings with hydrocarbon radicals, substituted by carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C07D303/40—Compounds containing oxirane rings with hydrocarbon radicals, substituted by carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals by ester radicals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/56—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule
    • A61K47/59—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D303/00—Compounds containing three-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom
    • C07D303/02—Compounds containing oxirane rings
    • C07D303/12—Compounds containing oxirane rings with hydrocarbon radicals, substituted by singly or doubly bound oxygen atoms
    • C07D303/18—Compounds containing oxirane rings with hydrocarbon radicals, substituted by singly or doubly bound oxygen atoms by etherified hydroxyl radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D303/00—Compounds containing three-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom
    • C07D303/02—Compounds containing oxirane rings
    • C07D303/12—Compounds containing oxirane rings with hydrocarbon radicals, substituted by singly or doubly bound oxygen atoms
    • C07D303/18—Compounds containing oxirane rings with hydrocarbon radicals, substituted by singly or doubly bound oxygen atoms by etherified hydroxyl radicals
    • C07D303/20—Ethers with hydroxy compounds containing no oxirane rings
    • C07D303/22—Ethers with hydroxy compounds containing no oxirane rings with monohydroxy compounds
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D303/00—Compounds containing three-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom
    • C07D303/02—Compounds containing oxirane rings
    • C07D303/36—Compounds containing oxirane rings with hydrocarbon radicals, substituted by nitrogen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/14—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/08—Bridged systems

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Polyethers (AREA)

Abstract

Предложены конъюгаты аналогов фумагиллина с полимерами, способы получения конъюгатов аналогов фумагиллина с полимерами, композиции, содержащие конъюгат аналога фумагиллина с полимером, и способы лечения рака или лечения ангиогенного заболевания, включающие введение субъекту эффективного количества конъюгата аналога фумагиллина с полимером. Также описаны новые аналоги фумагиллина, способы получения аналогов фумагиллина и способы лечения рака или лечения ангиогенного заболевания, включающие введение субъекту, нуждающемуся в этом, эффективного количества аналога фумагиллина.

Description

Перекрестная ссылка на родственные заявки
Заявка на данный патент испрашивает приоритет согласно 35 §119 Свода законов США по находящейся одновременно на рассмотрении заявке США № 61/004582, поданной 28 ноября 2007 г., озаглавленной Биосовместимые и биоразлагаемые конъюгаты аналого фумагиллина, содержание которой включено в настоящее описание посредством ссылки.
В тексте настоящего описания содержатся ссылки на различные публикации. Раскрытие этих публикаций полностью включено в настоящее изобретение по ссылке с целью более полного описания уровня техники, известного специалистам в данной области на дату создания описанного в данном патенте изобретения.
Настоящее описание содержит материалы, защищенные авторскими правами. Обладатель авторских прав не возражает против факсимильного воспроизведения любых патентных документов или описания патента в том виде, в котором они присутствуют в архиве или в реестре патентного ведомства США, но в остальном оставляет все права за собой.
Область техники
В настоящем описании предложены конъюгаты аналогов фумагиллина и аналогов фумагиллина с полимерами. Также описаны способы лечения или предотвращения рака либо лечения или предотвращения ангиогенного заболевания, включающие введение эффективного количества конъюгатов аналогов фумагиллина. Также описаны способы лечения или предотвращения рака либо лечения или предотвращения ангиогенного заболевания, включающие введение эффективного количества аналогов фумагиллина.
Уровень техники
Ангиогенез представляет собой фундаментальный процесс образования новых кровеносных сосудов, который играет ключевую роль в различных видах нормальной активности организма (таких как воспроизводство, развитие и восстановление повреждений). Хотя этот процесс еще не полностью понят, считают, что он включает сложные взаимодействия между молекулами, которые стимулируют и ингибируют рост клеток эндотелия, первичных клеток кровеносных капилляров. В нормальных условиях эти молекулы, видимо, поддерживают микрососудистую сеть в стабильном состоянии (т.е. в таком состоянии, когда рост капилляров отсутствует) на протяжении длительных периодов, которые могут составлять недели, а в некоторых случаях десятилетия. Однако в случае необходимости (например, в процессе заживления раны) те же самые клетки могут быстро пролиферировать и обновляться в течение пяти дней (Бо1ктаи, 1. аиб 8Ыид, Υ. (1992), 1оитиа1 о£ Вю1од1са1 Сйет181ту, 267(16): 10931-10934; Бо1ктаи, 1., К1ад§Ьгип, М. (1987), 8с1еисе, 235: 442-447).
Хотя в норме ангиогенез является жестко контролируемым процессом, в развитии многих заболеваний (называемых ангиогенными заболеваниями) играет роль непрерывный неконтролируемый ангиогенез. Другими словами, нерегулируемый ангиогенез может либо напрямую вызывать какое-либо заболевание, либо усугублять существующее патологическое состояние. Например, рост и метастазирование солидных опухолей являются ангиогенез-зависимыми (Бо1ктаи, 1. (1986), Сапсег Векеатсй, 46: 467473 и Бо1ктап, 1. (1989), 1оитпа1 о£ 111е Мабопа1 Сапсег 1п81Ии1е, 82: 4-6). Было показано, что опухоли, достигающие размера более 2 мм, должны получать собственное кровоснабжение, которое обеспечивается стимуляцией роста новых кровеносных капилляров. После того как новые кровеносные капилляры прорастают в опухоль, они обеспечивают возможность попадания клеток опухоли в кровеносное русло и метастазировать в отдаленные участки, такие как печень, легкое или кость (\Уе1бпег. Ν., е1 а1. (1991), ТНе №\ν Епд1апб 1оитпа1 о£ Мебкше, 324(1): 1-8). В качестве другого примера, неоваскуляризацию глаза считают наиболее частой причиной слепоты, которая играет ключевую роль в более чем 20 глазных заболеваниях. При некоторых существующих состояниях, таких как артрит, образующиеся новые кровеносные капилляры проникают в сосуды и разрушают хрящ. При диабете новые капилляры, образующиеся в сетчатке, проникают в стекловидное тело, кровоточат и вызывают слепоту.
Фумагиллин известен как соединение, которое использовалось в качестве противомикробного средства и средства для борьбы с простейшими. Его физико-химические свойства и способ получения хорошо известны (патент США № 2803586 и Титпет, 1., ТагЬе11, 1. (1962), Ргос. Ν;·ιΓ Асаб. 8ск И8А, 48: 733735). Также сообщалось, что фумагиллин и некоторые типы аналогов фумагиллина демонстрируют антиангиогенную активность. Однако использование таких ингибиторов (например, ΤΝΡ-470) может быть ограничено быстрым разрушением в ходе метаболизма, нестабильным уровнем в крови и побочными эффектами со стороны центральной нервной системы (ЦНС), обусловливающими необходимость ограничения дозы. Кроме того, эти молекулы обладают химическими и физическими свойствами, которые могут обусловливать нежелательность их применения в качестве терапевтических веществ, например низкая растворимость в воде, очень непродолжительное время полужизни, неприемлемые нейротоксические побочные эффекты и, возможно, нарушение нормального процесса ангиогенеза.
Одной из задач в области систем для доставки лекарственных средств является доставка лекарственных средств в целевые участки организма неповрежденными при помощи систем, которые позволяют контролировать скорость и время введения терапевтического агента посредством физиологического или химического механизма запуска (триггера). За последнее десятилетие было показано, что такие материа
- 1 020251 лы, как полимерные микросферы, полимерные мицеллы, растворимые полимеры и материалы типа гидрогелей, эффективно улучшают специфичность нацеливания лекарственных средств, снижают системную токсичность лекарственных средств и обеспечивают защиту фармацевтических средств от биохимического разрушения, таким образом обладают большим потенциалом использования в биомедицинских приложениях, в частности, в качестве компонентов устройств для доставки лекарственных средств.
Несмотря на то что полезность аналогов фумагиллина известна, до сих пор они не были успешно использованы в качестве средств лечения, поскольку не удалось преодолеть проблемы низкой растворимости в воде, короткого времени полужизни и побочных нейротоксических эффектов данных соединений. Соответственно, все еще существует потребность в ингибиторах ангиогенеза, которые были бы более эффективными, менее нейротоксичными, более стабильными и/или обладали более продолжительным временем полужизни в сыворотке, чем ингибиторы ангиогенез, известные в настоящее время. Комбинация технологии получения средств доставки лекарств и производных фумагиллина обеспечивает новые агенты, пригодные для лечения заболеваний и болезненных состояний, связанных с ангиогенезом.
Описание чертежей
На фиг. 1 изображена активность конъюгатов фумагиллина в отношении клеток меланомы В16 в модели с использованием мышей.
На фиг. 2 изображена активность конъюгатов фумагиллина в отношении клеток меланомы человека А2058 в модели с использованием мышей.
На фиг. 3 изображена активность конъюгатов фумагиллина в отношении клеток рака простаты человека РС3 в модели с использованием мышей.
На фиг. 4 и 5 показано влияние конъюгатов фумагиллина на характер поведения мышей, определенной в поведенческом тесте открытое поле.
На фиг. 6 показано накопление конъюгатов фумагиллина (Рт-аналог) в крысах С8Р.
Сущность изобретения
Согласно одному аспекту настоящего изобретения предложены биосовместимые биоразлагаемые конъюгаты, которые включают по меньшей мере один аналог фумагиллина, конъюгированный напрямую или не напрямую с водорастворимым полиальдегидом, причем указанный конъюгат имеет структуру формулы I [аналог фумагиллина]т-полиальдегидид I где аналог фумагиллина представляет собой любую основную структуру фумагиллина, которая демонстрирует ингибирование Ме1АР-2;
т представляет собой целое число от 1 до 40;
полиальдегид представляет собой полимер, содержащий по меньшей мере один атом кислорода в ацетальной группе или атом кислорода в кетальной группе в каждом мономерном звене, расположенном в основной цепи полимера.
В некоторых вариантах осуществления аналог фумагиллина представлен формулой ΙΙΑ
2-метилгепта-2,5-диен,
О-бензилоксим, С2ПА где X представляет собой О, 8(=О)д, возможно имеющий заместители СН2 или возможно имеющий заместители ΝΗ;
К представляет собой (28,3К)-2-метил-3-(3-метилбут-2-енил)оксиран, (2К,38)-2-изопентил-3-метилоксиран, 6-метилгепт-2-ен, (2)-ацетальдегид гетероциклический-С1-С6-алкил, С2-гетероциклический-С2-С6-алкенил, С1-С6-алкил, С2-С6-алкенил, С2гетероциклический-С1-С6-алкенил-СОО-С1-С6-алкил, С2-гетероциклический-С1-С6-алкил-СОО-С1-С6алкил, СгС6-алкилАА)-СгС6-алки.1ари.1, С(О)С1-С6-алкил, СN или галоген;
М представляет собой О или р представляет собой 0, 1 или 2;
основная структура фумагиллина возможно содержит в положениях С-7 и С-8 заместители, независимо представляющие собой С1-С6-алкил, С2-С6-алкенил, С2-С6-алкинил, ОН, кетон или алкокси.
В некоторых вариантах осуществления аналог фумагиллина, входящий в состав конъюгата, имеет основную структуру А
- 2 020251
где С-7 и С-8 возможно имеют заместители;
X представляет собой О, 8(=О)Ч, возможно имеющий заместитель ΝΗ или возможно содержащий заместители СН2;
М представляет собой О или
с.| представляет собой 0, 1 или 2;
аналог фумагиллина напрямую или не напрямую присоединен к полиальдегиду через X.
В других вариантах осуществления аналог фумагиллина, входящий в состав конъюгата, имеет основную структуру В
где С-7 и С-8 возможно имеют заместители;
X представляет собой О, 8(=О)Ч, возможно имеющий заместитель ΝΗ или возможно содержащий заместители СН2;
М представляет собой О или
с.| представляет собой 0, 1 или 2;
аналог фумагиллина напрямую или не напрямую присоединен к полиальдегиду через X.
В других вариантах осуществления аналог фумагиллина, входящий в состав конъюгата, имеет основную структуру С
где С-7 и С-8 возможно имеют заместители;
X представляет собой О, 8(=О)Ч, возможно имеющий заместитель ΝΗ или возможно содержащий заместители СН2;
М представляет собой О или
с.| равен 0, 1 или 2;
аналог фумагиллина напрямую или не напрямую присоединен к полиальдегиду через X. В некоторых вариантах осуществления полиальдегид имеет структуру
- 3 020251
при этом в каждом случае в структуре в скобках, за которыми стоит п, либо один из А и Я2 представляет собой водород, а второй представляет собой биосовместимую группу и включает атом углерода, ковалентно связанный с С1, либо в каждом случае Κι и Я2 представляют собой биосовместимую группу и включают атом углерода, ковалентно связанный с С1, либо
Я, включает атом углерода, ковалентно связанный с С2;
п представляет собой целое число;
в каждом случае Я3, Я4, Я5 и Я6 представляют собой биосовместимую группу и независимо представляют собой водород или органическую группировку;
в каждом случае в структуре в скобках, за которыми стоит п, по меньшей мере один из Я1, Я2, Я3, Я4, Я5 и Я6 включает функциональную группу, предложенную для прямого или непрямого связывания с аналогом фумагиллина.
Согласно другому аспекту предложены биосовместимые биоразлагаемые конъюгаты, которые включают по меньшей мере один аналог фумагиллина формулы II, конъюгированный с водорастворимым полиальдегидом
II где X представляет собой О, 8(=О)Ч, возможно имеющий заместители СН2 или возможно имеющий заместители ΝΗ;
Я представляет собой (28,3Я)-2-метил-3-(3-метилбут-2-енил)оксиран, 2-метилгепта-2,5-диен, (2Я,38)-2-изопентил-3-метилоксиран, 6-метилгепт-2-ен (2)-ацетальдегид О-бензилоксим, С2гетероциклический-С1-С6-алкил, С2-гетероциклический-С2-С6-алкенил, С1-С6-алкил, С2-С6-алкенил, С2гетероциклический-С1 -С6-алкенил-СОО-С1 -С6-алкил, С2-гетероциклический-С1 -С6-алкил-СОО-С1 -С6алкил, С|-С6-алкил^-О-С|-С6-алкиларил. С(О)С1-С6-алкил, ΟΝ или галоген;
М представляет собой О или ’
с.| равен 0, 1 или 2;
при этом основная структура фумагиллина возможно содержит при С-7 и С-8 заместители, независимо выбранные из следующих: С1-С6-алкил, С2-С6-алкенил, С2-С6-алкинил, ОН, кетон или алкокси;
при этом аналог фумагиллина конъюгирован путем ковалентного присоединения X к свободному гидроксилу полиальдегида через спейсерный фрагмент формулы III
III где Тэфир (Тс111сг) представляет собой органический фрагмент с молекулярной массой от приблизительно 0 до приблизительно 1000, ковалентно связанный и с X в формуле II, и с Линкером;
при этом Линкер представляет собой органический фрагмент, ковалентно связанный и с Тэфиром, и со свободным гидроксилом в полиальдегиде, имеющий молекулярную массу от приблизительно 0 до приблизительно 1000;
при этом спейсерный фрагмент в формуле III содержит один или более лабильных связей, способных к химическому или ферментативному расщеплению, благодаря чему конъюгат аналога фумагиллина обладает либо более высокой растворимостью в воде, либо более продолжительным периодом биологической полужизни, либо более низкой нейротоксичностью, чем неконъюгированный аналог фумагиллина.
Согласно другому аспекту предложены биосовместимые биоразлагаемые конъюгаты с полимером
- 4 020251 формулы IV
IV где X представляет собой О, 8(=0),,, возможно имеющий заместители СН2 или возможно имеющий заместители ΝΗ;
Я представляет собой (28,3Я)-2-метил-3-(3-метилбут-2-енил)оксиран, 2-метилгепта-2,5-диен, (2Я,38)-2-изопентил-3-метилоксиран, 6-метилгепт-2-ен (2)-ацетальдегид О-бензилоксим, С2гетероциклический-С1-С6-алкил, С2-гетероциклический-С2-С6-алкенил, С1-С6-алкил, С2-С6-алкенил, С2гетероциклический-С1 -С6-алкенил-С00-С1 -С6-алкил, С2-гетероциклический-С1 -С6-алкил-СОО-С1 -С6алкил, Ц-Сз-алкил^-О-Ц-Сз-алкиларил, С(0)С1-С6-алкил, СN или галоген;
отсутствует либо представляет собой связь, -С(0)-, -ΝΗ-, -С1-С6-алкил-, -С2-С6-алкенил-, -С2-С6алкинил-, -С1-С6-алкокси-, -арил-, -гетероарил-, -циклоалкил-, -С(0)бициклоалкил-С(0)-, -802бициклоалкил-, -гетероциклоалкил-, -гетеробициклоалкил-, -С(0)С1-С6-алкилгетероарил-0-, -С(О)-С1-С6алкениларил-0-МС| -С6-алкил)2-, -С(0)-гетероциклоалкил-С1 -С6-алкил-0-, -С(0)-гетероциклоалкил-С1 С6-алкил-СОО-, -С(0)-гетеробициклоалкил-С1 -С6-алкил-СОО-, -С(0)-гетеробициклоалкил-С1 -С6-алкилС(0)-, -С(О)NΗ(С1-С6-алкил)гетероарил(О)-, -СЩ^НЩ-Оз-алкилЦрилЩ)-, -С(0)С1-С6-алкиларил-, -ΝΗ0(0)0ι -С6-алкиларил-, -С(0)С1 -С6-алкениларил-О-NΗ(С1 -С6-алкил)-, -0(0)ΝΗ(0ι -С6алкил)циклоалкил-СОО-, -С^циклоалкил-Ц-Оз-алкил-ХИ-, -NΗС(О)С1-С6-алкил-, -ХИС^ХИЦ-С^ алкил-, -802ΝΗ-, -8О2NΗС1-С6-алкил-, -802Х(С1-С6-алкил)2-, -ХΗ8О2С1-С6-алкил-, -С02С1-С6-алкил-, -С0ХЫЦ -С6-алкил-, -^Ν^ -С6-алкил)-, -С1 -С6-алкиларил-0-С1 -Оз-алкил-^Ц -С6-алкил)2-,
-С(0)ХΗС(0)С1-С6-алкил-8-Сο-С6-алкиларил-, -С1-С6-алкил-NΗ-8О2-гетероцикло-С1-С6-алкил-О-,
-С(0)NΗС(0)С1-С6-алкил-8-Сο-С6-алкил-NΗ-, -С(О)NΗ-С1-С6-алкиларил-, -С(0)гетероциклоалкил-, -С(0)-С1-С6-алкил-8-арил-, -С(0)гетеробициклоалкил-, -С(О)-NΗ-С(О)-С1-С6-алкил- или -С(О)-NΗ-С(О)Со-С6-алкил-8-арил-, каждый из которых возможно содержит заместители;
О отсутствует или представляет собой -ΝΗ-, -аминокислоту-, -ΝΗ-аминокислоту-, -(С1-С6-алкилС00)-, -(00СС1-С6-алкил-С00)-, -(С1-С6-алкил-0-аминокислота)- или -(С1-С6-алкил-О)-;
Υ отсутствует или представляет собой щавелевую, малоновую, янтарную, глутарову, адипиновую, пимелиновую, субериновую, азелаиновую, себациновую, фталевую, изофталевую, терефталевую, дигликолевую кислоты, фрагмент оксаглютаровой, тартаровой, глютаминовой, фумаровой или аспарагиновой кислот, включая их амидные, имидные или циклоимидные производные, каждый из которых возможно содержит заместители;
Ζ представляет собой полиальдегид структуры
Е?з Р6 пр г I II] , ? % ^4 Γθ К2 Кд причем в каждом случае в структуре в скобках, за которыми стоит п, либо один из Я1 и Я2 представляет собой водород, а второй представляет собой биосовместимую группу и включает атом углерода, ковалентно связанный с С1, либо в каждом случае Я1 и Я2 представляют собой биосовместимую группу и включают атом углерода, ковалентно связанный с С1;
Ях включает атом углерода, ковалентно связанный с С2;
п представляет собой целое число;
в каждом случае Я3, Я4, Я5 и Я6 представляют собой биосовместимую группу и независимо представляют собой водород или органическую группировку;
в каждом случае в структуре в скобках, за которыми стоит п, по меньшей мере один из Я1, Я2, Я3, Я4, Я5 и Я<5 включает функциональную группу, пригодную для связывания с ^, Υ и О.
- 5 020251
В другом аспекте предложены соединения формулы V
ν где X представляет собой О, 8(=О)Ч, возможно имеющий заместители СН2 или возможно имеющий заместители ΝΗ;
ц равен 0, 1 или 2;
К представляет собой (28,3К)-2-метил-3-(3-метилбут-2-енил)оксиран, 2-метилгепта-2,5-диен, (2К,38)-2-изопентил-3-метилоксиран, 6-метилгепт-2-ен (2)-ацетальдегид О-бензилоксим, С2гетероциклический-С1-Сб-алкил, С2-гетероциклический-С2-Сб-алкенил, С1-Сб-алкил, С2-Сб-алкенил, С2гетероциклический-С1-Сб-алкенил-СОО-С1-Сб-алкил, С2-гетероциклический-С1-Сб-алкил-СОО-С1-Сбалкил, С1-Сб-алкил-№О-С1-Сб-алкиларил, С(О)С1-Сб-алкил, СN или галоген;
К8 выбран из группы, состоящей из VI, VII, VIII, IX, X, XI, XII и ΧΙΙΑ, формулы которых представлены ниже:
К' представляет собой -СО2Н, возможно содержащий заместители -ΝΗ2 или -Ν циклический имид, NНС(О)(С1-Сб-алкил)-С(О)К'', К' находится в мета- или пара-положении относительно атома -8-;
К представляет собой -ОН, -О-С1-Сб-алкил или -ΝΗ2, возможно ацилированный карбоксильной группой аминокислоты;
где К9 представляет собой Н или С(О)КП;
К10 представляет собой -ΝΗ2, -ЫНСН(СгСб-алкил)-, -ЫНС(О)(СгСб-алкил), Ν-циклизованный имид; -ЫН, ацилированный карбоксильной группой аминокислоты, причем азот аминогруппы аминокис лоты возможно защищен;
К11 представляет собой ОН, ОС1-Сб-алкил или возможно содержащий заместители -Ν^;
VIII где К12 представляет собой Н, СгСб-алкил, -(С1-Сб)-СООН, -(С1-Сб)-С(О)О-(С1-Сб), -СН2СН2О-К13, -С(О)(С1-Сб-алкил) или аминокислоту, присоединенную через карбоксильную группу аминокислоты;
К13 представляет собой -Н или аминокислоту, присоединенную через карбоксильную группу аминокислоты, при этом азот аминокислоты возможно защищен, С(О)(С1-Сб-алкил)-СОК'';
К представляет собой ОН, -ОС1-Сб-алкил или -Ν^, возможно ацилированный карбоксильной группой аминокислоты;
[-----------] представляет собой необязательный метиленовый мостик (-СН2-) между атомами углерода 2 и 5 пиперазиновой группы;
Ζ' представляет собой связь, -С1-Сб-алкил, -ЫНС(О)- или -ЫН8О2-;
При этом Я14 представляет собой -Н, -СО2Н, -СО2(С1-С6-алкил), -С(Ο)NН-С1-С6-алкил-ОН, причем О в -С(Ο)NН-С1-С6-алкил-ОН возможно ацилирован карбоксильной группой аминокислоты; возможно замещенный - ЛН2, С1 -С6-алкил-NН2, причем Ν42 возможно имеет заместители;
[------------] представляет собой необязательный этиленовый мостик (-СН2СН2-) между атомами углерода 1 и 4 в циклогексановом фрагменте;
Ζ' представляет собой связь, -СН2-, -СН2-§-, -СН2СН2-, -С(Н)(Ме)-, -ХНС.’Н2-. -ЫНСН(СН3)- или -ΝΟΟЯ15 представляет собой Н, возможно замещенный -ΝΉ2, ХНС(О)(С1-С6-алкил), -Ν циклизованный имид, возможно содержащий гетероатом в циклической структуре, -NНС(О)СН2ОСН2С(О)ОН, NНС(О)СН(С1-С6-алкил)-N циклизованный имид, -NНС(Ο)СН(Я'')NНС(Ο)-(С1-С6-алкил)-С(Ο)ОН, -]МНС(О)-(С1-С6-алкил)-С(О)ОН, -С(О)О(С1-С6-алкил), -С(О)ВДН)(С1-Сб-алкил)-ОН или ΝΟ<
Я представляет собой -Н или -С1-С6-алкил;
где Υ' представляет собой Ц-С3-алкил или ХН-С|-С3-алкил и присоединен к положению 1, 2 или 3 индола;
Я16 представляет собой Н, С1-С6-алкил, -СН2СООН или -СН2СН2ОН, где О в -СН2СН2ОН возможно ацилирован аминокислотой;
где Я представляет собой -ОН, -ОС1 -С6-алкил или -ХН2. возможно ацилированный карбоксильной группой аминокислоты;
О
γ.
ХНА где Υ представляет собой С(ОМСН3)(ОСН3), С(О)ОСН3, СН2С1 или 1МНС(О)СН2С1.
Описаны фармацевтически композиции, содержащие эффективное количество конъюгата аналога фумагиллина и фармацевтически приемлемый носитель.
Описаны фармацевтически композиции, содержащие эффективное количество аналога фумагиллина и фармацевтически приемлемый носитель. Также предложены аналоги фумагиллина в форме фармацевтически приемлемого пролекарства, гидрированной соли, такой как фармацевтически приемлемая соль, и их комбинации.
Согласно другому аспекту предложены способы лечения рака или лечения ангиогенного заболева
- 7 020251 ния, включающие введение эффективного количества конъюгата аналога фумагиллина.
Согласно еще одному аспекту предложены способы лечения рака или лечения ангиогенного заболевания, включающие введение эффективного количеств аналога фумагиллина.
Подробное описание изобретения
Приведенные ниже определения приведены в связи с конъюгатами аналогов фумагиллина, описанных в настоящем изобретении.
Алкил относится к углеводородной цепи, которая может быть линейной или разветвленной, содержащей указанное число атомов углерода. Например, С1-С6 указывает на то, что данная группа может содержать от 1 до 6 (включительно) атомов углерода.
Арил относится к циклической ароматической системе колец из атомов углерода, содержащей от 6 до 18 атомов углерода. Примеры арильных групп включают, но не ограничиваются перечисленными, фенил, нафтил, антраценил, тетраценил или фенантренил. Арильная группа может быть незамещенной или содержать в качестве заместителей одну или более из следующих групп: Н, галоген, ΟΝ, ОН, арил, арилалкил, гетероарил, гетероарилалкил, С1-6алкил, С2-6алкенил, С2-6алкинил, С1-3 фторированный алкил, С3-6циклоалкил, С3-6циклоалкил-С1-3алкил, ΝΟ2, ΝΗ2, МНС1-6алкил, ^С1.6алкил)2, МНС3-6циклоалкил, ^С3-6циклоалкил)2, NΗС(О)С1-6алкил, NΗС(Ο)С3-6циклоалкил, NΗС(Ο)NΗС1-6алкил,
NΗС(Ο)NΗС3-6циклоалкил, 8Ο2ΝΗ2, 8Ο2NΗС1-6алкил, 8Ο2NΗС3-6циклоалкил, 8О^(С!-6алкил)2, 8О^(С3-6циклоалкил)2, NΗ8Ο2С1-6алкил, NΗ8Ο2С3-6циклоалкил, СО2С1-6алкил, СО2С3-6циклоалкил, СΟNΗС1-6алкил, СΟNΗС3-6циклоалкил, СОМС|-6алкил)2. СΟN(С3-6циклоалкил)2ΟΗ, ОС1-3алкил, С1-3 фторированный алкил, ОС3-6циклоалкил, ОС3-6циклоалкил-С1-3алкил, 8Η, 8ОхС1-3алкил, С3-6циклоалкил или 8ОхС3-6циклоалкил-С1-3алкил, где х равен 0, 1 или 2.
Гетероарил относится к моно- и бициклическим ароматическим группам, содержащим от 4 до 10 атомов и включающих по меньшей мере один гетероатом. Гетероатом в рамках термина гетероарил относится к кислороду, сере и азоту. Примеры моноциклических гетероарилов включают, но не ограничены перечисленными, оксазинил, тиазинил, диазинил, триазинил, тетразинил, имидазолил, тетразолил, изоксазолил, фуранил, фуразанил, оксазолил, тиазолил, тиофенил, пиразолил, триазолил и пиримидинил. Примеры бициклических гетероарилов включают, но не ограничены перечисленными, бензимидазолил, индолил, изохинолинил, индазолил, хинолинил, хиназолинил, пуринил, бензизоксазолил, бензоксазолил, бензтиазолил, бензодиазолил, бензотриазолил, изоиндолил и индазолил. Гетероарильная группа может быть незамещенной или содержать в качестве заместителей одну или более из следующих групп: Н, галоген, ΟΝ, ОН, арил, арилалкил, гетероарил, гетероарилалкил, С1-6алкил, С2-6алкенил, С2-6алкинил, С1-3 фторированный алкил, С3-6циклоалкил, С3-6циклоалкил-С1-3алкил, NΟ2, ΝΗ2, NΗС1-6алкил, К(С1.6алкил)2, NΗС3-6циклоалкил, Н(С3-6циклоалкил)2, NΗС(Ο)С1-6алкил, NΗС(Ο)С3-6циклоалкил, NΗС(Ο)NΗС1-6алкил, NΗС(Ο)NΗС3-6циклоалкил, 8Ο2NΗ2, 8Ο2NΗС1-6алкил, 8Ο2NΗС3-6циклоалкил, ЗО^С^алкилЦ ЗО^^С^циклоалкилЦ NΗ8Ο2С1-6алкил, NΗ8Ο2С3-6циклоалкил, СО2С1-6алкил, СО2С3-6циклоалкил, СΟNΗС1-6алкил, СΟNΗС3-6циклоалкил, СО^С^алкилЦ СΟN(С3-6циклоалкил)2ΟΗ, ОС1-3алкил, С1-3 фторированный алкил, ОС3-6циклоалкил, ОС3-6циклоалкил-С1-3алкил, 8Η, 8ОхС1-3алкил, С3-6циклоалкил или 8ОхС3-6циклоалкил-С1-3алкил, где х равен 0, 1 или 2.
Арилалкил относится к арильной группе, содержащей по меньшей мере один заместитель-алкил. Примеры арилалкилов включают, но не ограничены перечисленными, толил, фенилэтил, фенилбутил, ксиленил, фенилпентил этилнафтил. Арилалкильная группа может быть незамещенной или содержать в качестве заместителей одну или более из следующих групп: Н, галоген, СК, ОН, арил, арилалкил, гетероарил, гетероарилалкил, С1-6алкил, С2-6алкенил, С2-6алкинил, С1-3 фторированный алкил, С3-6циклоалкил, С3-6циклоалкил-С1-3алкил, NΟ2, ΝΗ2, NΗС1-6алкил, N(С1-6алкил)2, NΗС3-6циклоалкил, ^С^циклоалкилЦ NΗС(Ο)С1-6алкил, NΗС(Ο)С3-6циклоалкил, NΗС(Ο)NΗС1-6алкил, NΗС(Ο)NΗС3-6циклоалкил, 8Ο2NΗ2, 8Ο2NΗС1-6алкил, 8Ο2NΗС3-6циклоалкил, 8О2К(С1-6алкил)2, ЗО^С^циклоалкилЦ NΗ8Ο2С1-6алкил, NΗ8Ο2С3-6циклоалкил, СО2С1-6алкил, СО2С3-6циклоалкил, СΟNΗС1-6алкил, СΟNΗС3-6циклоалкил, СОМСм-алкилу, СΟN(С3-6циклоалкил)2ΟΗ, ОС1-3алкил, С1-3 фторированный алкил, ОС3-6циклоалкил, ОС3-6циклоалкил-С1-3алкил, 8Η, 8ОхС1-3алкил, С3-6циклоалкил или 8ОхС3-6циклоалкил-С1-3алкил, где х равен 0, 1 или 2.
Гетероарилалкил относится к гетероарильной группе, содержащей по меньшей мере один заместитель-алкил. Гетероарилалкильная группа может быть незамещенной или содержать в качестве заместителей одну или более из следующих групп: Н, галоген, СЫ, ОН, арил, арилалкил, гетероарил, гетероарилалкил, С1-6алкил, С2-6алкенил, С2-6алкинил, С1-3 фторированный алкил, С3-6циклоалкил, С3-6циклоалкил-С1-3алкил, НО2, ΝΗ2, NΗС1-6алкил, Н^^алкилЦ, NΗС3-6циклоалкил, Н(С3-6циклоалкил)2, NΗС(Ο)С1-6алкил, NΗС(Ο)С3-6циклоалкил, NΗС(Ο)NΗС1-6алкил, NΗС(Ο)NΗС3-6циклоалкил, 8Ο2NΗ2, 8Ο2NΗС1-6алкил, 8Ο2NΗС3-6циклоалкил, 8О2К(С1-6алкил)2, 8О2К(С3-6циклоалкил)2, NΗ8Ο2С1-6алкил, NΗ8Ο2С3-6циклоалкил, СО2С1-6алкил, СО2С3-6циклоалкил, СΟNΗС1-6алкил, СΟNΗС3-6циклоалкил, СО^С^алкилЦ, СОН(С3-6циклоалкил)2ОН, ОС1-3алкил, С1-3 фторированный алкил, ОС3-6циклоалкил, ОС3-6циклоалкил-С1-3алкил, 8Η, 8ОхС1-3алкил, С3-6циклоалкил или 8ОхС3-6циклоалкил-С1-3алкил, где х равен 0, 1 или 2.
С1-С6-алкил относится к линейной или разветвленной цепи насыщенного углеводорода, содержа
- 8 020251 щей 1-6 атомов углерода. Примеры С1-Сб-алкильных групп включают, но не ограничиваются перечисленным, метиол, этил, пропил, изопропил, п-пентил, изопентил, неопентил и гексил.
С2-С6-алкенил относится к линейной или разветвленной цепи ненасыщенного углеводорода, содержащей 2-6 атомов углерода и по меньшей мере одну двойную связь. Примеры С2-С6-алкенильных групп включают, но не ограничиваются перечисленным, этилен, пропилен, 1-бутилен, 2-бутилен, изобутилен, сек-бутилен, 1-пентен, 2-пентен, изопентен, 1-гексен, 2-гексен, 3-гексен и изогексен.
С3-С6-алкенил относится к линейной или разветвленной цепи ненасыщенного углеводорода, содержащей 3-6 атомов углерода и по меньшей мере одну двойную связь. Примеры С3-С6-алкенильных групп включают, но не ограничиваются перечисленным, пропилен, 1-бутилен, 2-бутилен, изобутилен, сек-бутилен, 1-пентен, 2-пентен, изопентен, 1-гексен, 2-гексен, 3-гексен и изо гексен.
С1-С6-алкокси относится к линейной или разветвленной цепи насыщенного или ненасыщенного углеводорода, содержащей 1-6 атомов углерода и по меньшей мере один атом кислорода. Примеры С1С6-алкокси включают, но не ограничиваются перечисленным, метокси, этокси, изопропокси, бутокси, ппентокси, изопентокси, неопентокси и гексокси.
Циклоалкил относится к циклическому насыщенному углеводороду. Примры циклоалкильных групп включают, но не ограничиваются перечисленным, циклопропан, циклобутан, циклопентан, циклогексан, циклогептан и циклооктан.
С1-С3 фторированный алкил относится к насыщенной линейной или разветвленной углеводородной цепи, содержащей 1-3 атома углерода, которые могут дополнительно содержать в качестве заместителей одну или более других функциональных групп. Примеры С1-С3 фторированного алкила включают трифторметил, 2,2,2-трифторэтил и трифторацетил.
Галоген относится к атому фтора, хлора, брома или йода.
Бициклоалкил относится к системе из двух насыщенных углеводных колец, имеющих пару общих мостиковых атомов углерода, которая может дополнительно содержать в качестве заместителей одну или более других функциональных групп. Примеры бициклоалкилов включают, но не ограничиваются перечисленным, бицикло[2.2.1]гептан (норборнан), бицикло[4.3.2]ундекан, бицикло[4.1.0]гептан, бицикло[4.4.0]декан (декалин) и бицикло[2.2.2]октан.
Гетеробициклоалкил относится к системе из двух насыщенных углеводных колец, имеющих пару общих мостиковых атомов углерода, которая содержит по меньшей мере один гетероатом. Гетероатом в рамках термина гетероарил относится к кислороду, сере и азоту. Примеры гетеробициклоалкилов включают, но не ограничиваются перечисленным, 2,5-диазабицикло[2.2.1]гептанил, 2азабицикло[2.2.1]гептанил, 3-азабицикло[4.1.0]гептанил и 1,4-диоксаспиро[4.4]нонил.
Циклизованный имид и циклический имид обозначают насыщенное или ненасыщенное циклическое или гетероциклическое соединение, которое содержит имидную функциональную группу, которая состоит из двух карбонильных групп, связанных с атомом азота. Циклические имиды могут дополнительно содержать в качестве заместителей другие функциональные группы. Примеры циклических имидов включают, но не ограничиваются перечисленным, пиперидил-2,6-дион, морфолил-3,5-дион и пирролидил-2,5-дион.
Термин возможно замещенный (возможно содержащий заместители) ΝΗ возможно замещенный ΝΗ2 в настоящем описании означает, что один или более атомов водорода заменены на одну из следующих групп: С1-С6-алкил, С2-С6-алкенил, С2-С6-алкинил, С1-С3 фторированный алкил, 8Θ2ΝΗ2, 8Ο2NΗС1-С6-алкил, 8О;МС|-С6-алкил);. С(О)ОС1-С6-алкил, СΟNΗС1-С6-алкил, СО^С1-С6-алкил)2, -ί'(ϋ)-ίΉ(Κ)ΝΗ2. где Я в данном контексте обозначает боковую цепь любой природной аминокислоты.
Фраза одна или более лабильных связей, способных к ферментативному или химическому гидролизу в настоящем описании означает, что связь является способной к химическим реакциям в биологических условиях в клетке или в крови, или известно, что данная связь гидролизуется ферментами. Неограничивающие примеры лабильных связей, способных к химическому или ферментативному гидролизу, включают сложные эфиры, амиды, имиды, ангидриды, азиды, карбаматы и карбонаты.
Термин возможно замещенный (возможно имеющий заместители) СН2 в настоящем описании обозначает, что один или более атомов водорода возможно заменены одной или более из следующих групп: ОН, галоген, ΟΝ, С1-С6-алкил, С2-С6-алкенил, С2-С6-алкинил, С1-С6-алкокси, С1-С3фторированный алкил, NО2, ΝΗ2, NΗС1-С6-алкил, ^С1-С6-алкил)2, NΗС(О)С1-С6-алкил, NΗС(О)NΗС1С6-алкил, 8О2NΗ2, 8О^НС1-С6-алкил, 8О^(С1-С6-алкил)2, NΗ8О2С1-С6-алкил, С(О)ОС1-С6-алкил, СОNΗС1-С6-алкил, СО^С1-С6-алкил)2, С1-С6-алкил, или оба атома водорода возможно заменены другими группами и при этом замещающие группы вместе с атомом углерода, к которому они присоединены, образуют циклоалкил или гетероциклоалкил, каждый из которых возможно содержит заместители: С1С6-алкил, С2-С6-алкенил, С2-С6-алкинил, С1-С6-алкокси, СО2С1-С6-алкил, ΟΝ, ОН, циклоалкил, ΤΌΝ^, арил, гетероарил, СО-арил или трифторацетил.
Субъект представляет собой млекопитающее, например человека, мышь, крысу, морскую свинку, собаку, кошку, лошадь, корову, свинью или примата, не являющегося человеком, такого как мартышка, шимпанзе, бабуин или макака-резус.
Термин фармацевтически приемлемые соли включает, например, водорастворимые и нераство
- 9 020251 римые в воде соли, такие как ацетат, амсонат (4,4-диаминостилбен-2,2-дисульфонат), бензолсульфонат, бензоат, бикарбонат, бисульфат, битартрат, борат, бромид, бутират, кальция эдетат, камзилат, карбонат, хлорид, цитрат, клавуариат, дигидрохлорид, эдетат, эдизилат, эстолат, эзилат, фумарат, глюцептат, глюконат, глютамат, гликоллиларсанилат, гексафлуорофосфат, гексилрезорцинат, гидрабамин, гидробромид, гидрохлорид, гидроксинафтоат, иодид, изотионат, лактат, лактобионат, лаурат, малат, малеат, манделат, мезилат, метилбромид, метилнитрат, метилсульфат, мукат, напсилат, нитрат, Ν-метилглюкамин аммониевая соль, 3-гидрокси-2-нафтоат, олеат, оксалат, пальмитат, памоят (1,1-метен-бис-2-гидрокси-3нафтоят, эинбонат), пантотенат, фосфат/дифосфат, пикрат, полигалактолактуронат, пропионат, ртолуолсульфонат, салицилат, стеарат, субацетат, сукцинат, сульфат, сульфосалицилат, сурамат, таннат, тартрат, теоклат, тозилат, трэтиодид и вальтерат.
Эффективное количество применительно к конъюгату аналога фумагиллина или аналогу фумагиллина обозначает количество, эффективное для лечения или предотвращения ангиогенных заболеваний.
Аминопептидаза включает, но не ограничена перечисленным, белковую метионинаминопептидазу типа 2.
Термин основная структура фумагиллина, которая демонстрирует ингибирование Ме!АР-2 обозначает любую основную структуру фумагиллина, которая ингибирует способность Ме!АР-2 удалять ЫН2-концевые метионины из белков, описанных в КобексЫш е1 а1., 1. Огд. СЬет., 69, 357-373, 2004 и Ыи, е1 а1., 8с1еисе 282, 1324-1327, 1998. Неограничивающие примеры основных структур фумагиллина раскрыты в 1. Огд. СЬет., 69, 357, 2004; 1. Огд. СЬет., 70, 6870, 2005; Европейская заявка на патент 0354787; 1. Меб. СЬет., 49, 5645, 2006; Вюогд. Меб. СЬет., 11, 5051, 2003; Вюогд. Меб. СЬет., 14, 91, 2004; Те!. Ьеб. 40, 4797, 1999; АО 99/61432; ϋδ 6603812; ϋδ 5789405; ϋδ 5767293; ϋδ 6566541; ϋδ 6207704.
Фраза сниженная токсичность в настоящем описании употребляется в обычном значении, как это понимает специалист в данной области. Исключительно в качестве примера и без намерения ограничить данный термин, введение конъюгатов аналогов фумагиллина вызывают меньше побочных эффектов в тесте открытое поле на мышах, чем аналог фумагиллина, вводимый отдельно.
Фраза улучшенная растворимость в воде имеет обычное для специалистов в данной области значение. Исключительно в качестве примера и без намерения ограничить данный термин, приведенное ниже описание термина является справочным: ковалентное введение аналога фумагиллина в конъюгат приведет к тому, что в воде будет растворяться количеств аналога фумагиллина, повышенное по сравнению с количеством растворяющегося в воде неконъюгированного аналога фумагиллина.
Фраза увеличенное время полужизни имеет обычное для специалиста в данной области значение. Исключительно в качестве примера и без намерения ограничить данный термин, приведенное ниже описание термина является справочным: любое заметное увеличение продолжительности времени, необходимого для того, чтобы деактивировать конъюгат фумагиллина ίη νίνο или ίη νίΐτο, по сравнению с временем полужизни аналога фумагиллина ίη νίνο или ίη νίΐτο.
Термин полиальдегид относится к полимеру, содержащему по меньшей мере один атом кислорода в альдегидной или кетонной группе в каждом мономерном звене главной цепи. Примеры полиальдегидов описаны в патентах США 5811510, 5863990, 5958398 и в международной заявке на патент РСТ/ЦБ2004/029130, которая полностью включена в настоящее описание по ссылке. В некоторых вариантах осуществления биоразлагаемые биосовместимые полимерные носители, пригодные для получения конъюгатов полимеров, описанных в настоящем изобретении, представляют собой природные полисахариды, гликополисахариды и синтетические полимеры, полученные из полигликозида, полиацеталя, полиамида, полиэфира и полиэстера, а также продукты их окисления, функционализации, модификации, поперечной сшивки и конъюгации.
Термин аналог фумагиллина в настоящем описании включает основную структуру фумагиллина, которая демонстрирует ингибирование Ме!АР-2 (как определено выше) вместе со спейсерным фрагментом, который обеспечивает ковалентную связь основной структуры фумагиллина через С-6 основной структуры фумагиллина через с ОН полиальдегида. Химический спейсерный фрагмент обладает молекулярной массой от приблизительно 100 до приблизительно 1000.
В настоящем описании термин ангиогенное заболевание включает заболевание, нарушение или состояние, вызванное аномальным или нежелательным, например, активированным или сниженным, образованием кровеносных сосудов (ангиогенезом). Аномальный или нежелательный ангиогенез может либо напрямую вызывать конкретное заболевание, либо усугублять существующее патологическое состояние. Примеры ангиогенных заболеваний включают рак, например карциномы и саркомы, прогрессирующий рост которых зависит от непрерывной стимуляции ангиогенеза клетками этих опухолей, педиатрические нарушения, например ангиофиброму воспаление суставов, вызванное гемофильной палочкой; заболевания кровеносных сосудов, такие как гемангиомы, и пролиферация капилляров в атеросклеротических бляшках; нарушения, связанные с хирургическими вмешательствами, например гипертрофические шрамы, грануляция ран и адгезия сосудов; аутоиммунные заболевания, такие как ревматоидный, иммунный и дегенеративный артрит, при которых новые сосуды в суставах могут разрушить суставный хрящ; и склеродермические заболевания и патологические состояния глаз, например диабетическая ре
- 10 020251 тинопатия, ретинопатия недоношенных, отторжение трансплантата роговицы, ретролентальная фиброплазия, неоваскулярная глаукомы, рубеоз, неоваскуляризация сетчатки вследствие атрофии желтого пятна, гипоксии, ангиогенеза в глазе, связанного с инфекцией или хирургическим вмешательством, опухолями и трахомами глаза, а также других глазных заболеваний, связанных с аномальной неоваскуляризацией, при этом неоваскуляризация может приводить к слепоте; и заболевания, поражающие кожу, например псориаз и пиогенная гранулема, ожирение, при котором адипогнез связан с неоваскуляризацией, и активированные адипоциты продуцируют различные проангиогенные факторы, которые могут стимулировать неоваскуляризацию в процессе роста жировой массы; эндометриоз, при котором повреждения эндометрия поддерживаются ростом новых кровеносных сосудов, и в эндометрии пациента с эндометриозом наблюдается повышенная пролиферация клеток эндотелия.
Термин ангиогенное заболевание также включает заболевания, характеризующиеся избыточной или аномальной стимуляцией эндотелиальных клеток, включая, но не ограничиваясь перечисленными, спайки в кишечнике, болезнь крона, атеросклероз, склеродермию и гипертрофические шрамы, т.е. келоиды; заболевания, при которых ангиогенез является патологическим следствием, таких как доброкачественный вирусный лимфаденит (Косйе1е шпайа дшпФза) и язвы (Не11соЬас!ег ру1ог1). Кроме того, соединения, ингибирующие ангиогенез, согласно настоящему изобретению применимы в качестве агентов для контроля рождаемости (благодаря их способности подавлять овуляцию и развитие плаценты, зависимые от ангиогенеза), и возможно также пригодны для уменьшения кровотечения при введении субъекту перед проведением хирургической операции.
Ниже приведены определения сокращений, встречающихся в настоящем тексте: ЕЭС (1-этил-3-(3диметиламинопропил)карбодиимид гидрохлорид), НОВ! (Ν-гидроксибензотриазол гидрат), СН2С12 (дихлорметан), Μ^Ν (ацетонитрил), МеОН (метанол), ТГФ (тетрагидрофуран), ОМАР (диметиламинопиридин), ЕЮАс (этилацетат), РНР-ОА (поли(1-гидроксиметилэтилен гидроксиметил-формаль), конъюгированный с глутаровой кислотой), ДМФ (диметилформамид), ДМЭ (диметиловый эфир), ЖХМС (жидкостная хроматография/масс-спектрометрия).
Конъюгаты аналогов I, II и IV, а также формулы V.
Согласно одному аспекту предложен биосовместимый биоразлагаемый конъюгат, который содержит по меньшей мере один аналог фумагиллина, конъюгированный с водорастворимым полиальдегидом, причем указанный конъюгат имеет структуру формулы I [аналог фумагиллина] т-полиальдегидид I где аналог фумагиллина представляет собой любую основную структуру фумагиллина, которая демонстрирует ингибирование Ме!АР-2;
т представляет собой целое число от 1 до 40;
полиальдегид представляет собой любой полимер, содержащий по меньшей мере один атом кислорода в ацетальной группе или атом кислорода в кетальной группе в каждом мономерном звене, расположенном в основной цепи полимера.
Неограничивающие примеры соединений, способных ингибировать удаление пептидазой Ме!АР-2 ХН2-концевых метионинов из белков, представлены формулой НА
НА где X представляет собой О, 8(=О)д, возможно имеющий заместители СН2 или возможно имеющий заместители ИН;
К представляет собой (28,3К)-2-метил-3-(3-метилбут-2-енил)оксиран, 2-метилгепта-2,5-диен, (2К,38)-2-изопентил-3-метилоксиран, 6-метилгепт-2-ен (2)-ацетальдегид О-бензилоксим, С2гетероциклический-С1-С6-алкил, С2-гетероциклический-С2-С6-алкенил, С1-С6-алкил, С2-С6-алкенил, С2гетероциклический-С1-С6-алкенил-СОО-С1-С6-алкил, С2-гетероциклический-С1-С6-алкил-СОО-С1-С6алкил, СгС6-ал1<ил-\-О-СгС6-ал1<илари.1, С(О)С1-С6-алкил, СN или галоген;
М представляет собой О или
ς равен 0, 1 или 2;
основная структура фумагиллина возможно содержит в положениях С-7 и С-8 заместители, независимо выбранные из следующих: С1-С6-алкил, С2-С6-алкенил, С2-С6-алкинил, ОН, кетон или алкокси.
- 11 020251
В некоторых вариантах осуществления аналог фумагиллина, входящий в состав конъюгата, имеет основную структуру А
где С-7 и С-8 возможно имеют заместители;
X представляет собой О, 8(=О)Ч, возможно имеющий заместитель ΝΗ или возможно содержащий заместители СН2;
М представляет собой О или д равен 0, 1 или 2;
аналог фумагиллина напрямую или не напрямую присоединен к полиальдегиду через X.
В других вариантах осуществления аналог фумагиллина, входящий в состав конъюгата, имеет основную структуру В
где С-7 и С-8 возможно имеют заместители;
X представляет собой О, 8(=0),,. возможно имеющий заместитель ΝΗ или возможно содержащий заместители СН2;
М представляет собой О или д равен 0, 1 или 2;
аналог фумагиллина напрямую или не напрямую присоединен к полиальдегиду через X.
В других вариантах осуществления аналог фумагиллина, входящий в состав конъюгата, имеет основную структуру С
где С-7 и С-8 возможно имеют заместители;
X представляет собой О, 8(=0),,, возможно имеющий заместитель ΝΗ или возможно содержащий заместители СН2;
М представляет собой О или д равен 0, 1 или 2;
аналог фумагиллина напрямую или не напрямую присоединен к полиальдегиду через X.
- 12 020251
В некоторых вариантах осуществления полиальдегид имеет структуру
причем в каждом случае в структуре в скобках, за которыми стоит п, либо один из В1 и В2 представляет собой водород, а второй представляет собой биосовместимую группу и включает атом углерода, ковалентно связанный с С, либо в каждом случае В1 и представляют собой биосовместимую группу и включают атом углерода, ковалентно связанный с С1;
В, включает атом углерода, ковалентно связанный с С2;
п представляет собой целое число;
в каждом случае В3, В4, В5 и В6 представляют собой биосовместимую группу и независимо представляют собой водород или органическую группировку;
причем в каждом случае в структуре в скобках, за которыми стоит п, по меньшей мере один из В1, В2. В3, В4, В5 и К.6 содержит функциональную группу, пригодную для прямого или непрямого связывания с аналогом фумагиллина.
Согласно одному аспекту предложен биосовместимый биоразлагаемый конъюгат, который содержит по меньшей мере один аналог фумагиллина формулы II, конъюгированный с водорастворимым полиальдегидом,
II где X представляет собой О, 8(=0),,, возможно имеющий заместители СН2 или возможно имеющий заместители ΝΗ;
В представляет собой (28,3В)-2-метил-3-(3-метилбут-2-енил)оксиран, 2-метилгепта-2,5-диен, (2В,38)-2-изопентил-3-метилоксиран, 6-метилгепт-2-ен (2)-ацетальдегид О-бензилоксим, С2гетероциклический-С1-С6-алкил, С2-гетероциклический-С2-С6-алкенил, С1-С6-алкил, С2-С6-алкенил, С2гетероциклический-С1-С6-алкенил-СОО-С1-С6-алкил, С2-гетероциклический-С1-С6-алкил-С00-С1-С6алкил, Ц-Сз-алкил^-О-Ц-Сз-алкиларил, С(0)С1-С6-алкил, СN или галоген;
М представляет собой О или ’ ς равен 0, 1 или 2;
при этом основная структура фумагиллина возможно содержит при С-7 и С-8 заместители, независимо выбранные из следующих: С1-С6-алкил, С2-С6-алкенил, С2-С6-алкинил, ОН, кетон или алкокси;
при этом аналог фумагиллина конъюгирован путем ковалентного присоединения X к свободному гидроксилу полиальдегида через спейсерный фрагмент формулы III —Тэфир—Линкерπι где Тэфир (Тс111сг) представляет собой органический фрагмент с молекулярной массой от приблизительно 0 до приблизительно 1000, ковалентно связанный и с X в формуле II, и с Линкером;
при этом Линкер представляет собой органический фрагмент, ковалентно связанный и с Тэфиром, и со свободным гидроксилом в полиальдегиде, имеющий молекулярную массу от приблизительно 0 до приблизительно 1000;
при этом спейсерный фрагмент в формуле III содержит один или более лабильных связей, способных к химическому или ферментативному расщеплению, благодаря чему конъюгат аналога фумагиллина обладает либо более высокой растворимостью в воде, либо более продолжительным периодом биологической полужизни, либо более низкой нейротоксичностью, чем неконъюгированный аналог фумагиллина.
Без определенного теоретического обоснования химический состав Линкера может обеспечивать
- 13 020251 высвобождение аналога фумагиллина от полиальдегида посредством химического или ферментативного отщепления.
В некоторых вариантах осуществления К представляет собой (28,3К)-2-метил-3-(3-метилбут-2енил)оксиран.
В некоторых вариантах осуществления К представляет собой 2-метилгепта-2,5-диен.
В других вариантах осуществления К представляет собой (2К,38)-2-изопентил-3-метилоксиран.
В других вариантах осуществления К представляет собой (2)-ацетальдегид О-бензилоксим.
В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой фрагмент щавелевой, малоновой, янтарной, глутаровой, адипиновой, пимелиновой, суберовой, азелаиновой, себациновой, фталовой, изофталовой, терефталовой, дигликолевой, тартаровой, глутаминовой или аспарагиновой кислот, включая производные амида, имида или циклического имида каждого из фрагментов, при этом каждый из фрагментов возможно содержит заместители.
В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой
где Ь представляет собой связь, возможно замещенный -СН2-, -СН(ОН)-, возможно замещенный -ΝΗ-, -0-, -8-, -80-, -8О2-, -С(СН3)2-, -СНО- или -СОСН2-;
пунктирная линия между атомами углерода в положениях а и Ь представляет углерод-углеродную связь или углерод-углеродную двойную связь;
метиленовые блоки, соседние с Ь возможно имеют заместители.
В некоторых вариантах осуществления Ь представляет собой -СН2-.
В других вариантах осуществления Ь представляет собой -0-.
В других вариантах осуществления полиальдегид имеет структуру К5 ПР ί 1 1 И г? и
Ρ2 Кб где в каждом случае в структуре в скобках, за которыми стоит п, любо один из Κι и К2 представляет собой водород, а второй представляет собой биосовместимую группу и включает атом углерода, ковалентно связанный с С1, либо в каждом случае К1 и К2 представляют собой биосовместимую группу и включают атом углерода, ковалентно связанный с С1;
Кх включает атом углерода, ковалентно связанный с С2;
п представляет собой целое число;
в каждом случае К3, К4, К5 и К6 представляют собой биосовместимую группу и независимо представляют собой водород или органическую группировку;
в каждом случае в структуре в скобках, за которыми стоит п, по меньшей мере один из К1, К2, К3, К4, К5 и К6 включает функциональную группу, подходящую для связи с линкером.
В другом варианте осуществления полиальдегид представляет собой поли(1-гидроксиметилэтилен гидроксиметилформаль) (здесь и далее обозначается РНЕ).
В другом варианте осуществления РНЕ имеет молекулярную массу от приблизительно 40 до приблизительно 100 кДа.
В другом варианте осуществления РНЕ имеет молекулярную массу от приблизительно 45 до приблизительно 95 кДа.
В другом варианте осуществления РНЕ имеет молекулярную массу от приблизительно 50 до приблизительно 90 кДа.
В другом варианте осуществления РНЕ имеет молекулярную массу от приблизительно 55 до приблизительно 85 кДа.
В другом варианте осуществления РНЕ имеет молекулярную массу от приблизительно 60 до приблизительно 80 кДа.
- 14 020251
В другом варианте осуществления ΡΗΡ имеет молекулярную массу от приблизительно 65 до приблизительно 75 кДа.
В другом варианте осуществления ΡΗΡ имеет молекулярную массу от приблизительно 68 до приблизительно 72 кДа.
В другом варианте осуществления ΡΗΡ имеет молекулярную массу приблизительно 70 кДа.
В другом аспекте предложены биосовместимые биоразлагаемые конъюгаты формулы IV
X—V/—о—Υ—Ζ
IV где Я, X, ^, О и Υ имеют значения, определенные выше;
Ζ представляет собой полиальдегид структуры
1?1 Кз 1д_ I 111 ,?7,
Я* Вб или в каждом случае в структуре в скобках, за которыми стоит п, один из Я1 и Я2 представляет собой водород, а второй представляет собой биосовместимую группу и включает атом углерода, ковалентно связанный с С1;
Я, включает атом углерода, ковалентно связанный с С2;
п представляет собой целое число от 1 до 3000;
в каждом случае Я3, Я4, Я5 и Я6 представляют собой биосовместимую группу и независимо представляют собой водород или аналог фумагиллина;
в каждом случае в структуре в скобках, за которыми стоит п, по меньшей мере один из Яь Я2, Я3, Я4, Я5 и Я6 включает функциональную группу, подходящую для связи с ^, Υ или О.
В некоторых вариантах осуществления Ζ представляет собой ΡΗΡ.
В некоторых вариантах осуществления ΡΗΡ имеет молекулярную массу приблизительно 70 кДа.
В некоторых вариантах осуществления X представляет собой О.
В некоторых вариантах осуществления X представляет собой ΝΗ.
В некоторых вариантах осуществления Υ представляет собой -^0^4^¾^)^.
В некоторых вариантах осуществления Υ представляет собой -^0^¾^^^^¾^)^.
В некоторых вариантах осуществления Υ представляет собой -^0^Η20Η^Η2(0)^.
В некоторых вариантах осуществления Я представляет собой (28,3Я)-2-метил-3-(3-метилбут-2енил)оксиран.
В некоторых вариантах осуществления Я представляет собой 2-метилгепта-2,5-диен.
В других вариантах осуществления Я представляет собой (2Я,38)-2-изопентил-3-метилоксиран.
В других вариантах осуществления Я представляет собой ^(-ацетальдегид О-бензил оксим.
В некоторых вариантах осуществления О представляет собой -ΝΗ-.
В некоторых вариантах осуществления О представляет собой аминокислоту.
В некоторых вариантах осуществления О представляет собой ΝΗ-аминокислоту.
В некоторых вариантах осуществления представляет собой -С^МИ-Ц-Сз-алкиларил-.
В некоторых вариантах осуществления представляет собой -С(О)-NΗ-С(О)-С0-С6-алкил-8-арил-.
В некоторых вариантах осуществления представляет собой -С(0)-гетероциклоалкил-С1-С6алкил-0-.
В другом варианте осуществления
- 15 020251
- 16 020251
- 17 020251
- 18 020251
о
о
- 19 020251
- 20 020251
- 21 020251
- 22 020251
- 23 020251
Ниже перечислены примеры конъюгатов формулы IV.
Конъюгат Ж Ζ 1 ___2 8Г'3'Т**К оме X—и—0—γ—
1 РНР О Η Н ХЛЖЖ3ЖМ¥° °0%й 0 0 ,
2 РНР Нз 0 Ж 0 0 сЖон ,
3 РНР н ,
4 РНР 5 Υ^-^'Ν'% 'ОСН} 4^Νγδ 0 ,
5 РНР . 0 ΉχΝ,Υι 0 ,
6 РНР νΛΧΤΎ О н .
7 РНР 0 кЖжт° 0 0 »
8 РНР Υ^^ΥΊ н 0 0 о о э
9 РНР ϋΛ^·ύΜ * 0 0 0 {
- 24 020251
10 РНК о Χ-Νγό О .
11 РНР ^ΓΟ^,η. 0 ,
12 РНР 6ίχ^^ΥΝγΧι н 0 0 0 ,
13 РНР н Гд^^^4^44 :ιΧ'ο'ΧΓνΎΧ] н 'осн> 0 ° 0 0 ,
14 РНР Х\п И ^β-'-ντ0 0 0 ,
15 РНР ίίγ^οχχγΝγ!!> Ι^τ^οοηΓ^^ Υ 0 ,
- 25 020251
16 РНР Αυί/χΥ
17 РНР ήΤ'οΎΥΊι н 0 0 0 0 >
18 РНР У'+Лгу В^АА ο 4Λ3^ΠγΝΗ 0 0 ,
19 РНР 0 0 4/<8χχ^ΝγΝΗ . 0 ° -
20 РНР ^φτ>^Α. ^Αγ—Ά“ 0 0 0 <
21 РНР γΑ Υ^^τΑ™ “*
- 2б 020251
22 РНР О О ЧЛ-дХ-γΝΗ О ,
23 РНР *\?н ϊ 1 О ,
24 РНР м = Η _
25 РНР н 'ύ'^ΟοηΓ'^4 , и χ £Г¥ 0 о = Η ,
26 РНР νΆ α°^ό 0 π 0 0 ,
27 РНР уА ° Ύ *νΧ
- 27 020251
28 РНР 0 = Χγ,ΝγΟ О ,
29 РНР ζν Α.“%·— о 0 ν .
30 РНР 0 .
31 РНР ЯХАА н Η Т °снз ΐν^νγο А о 00 < .
32 РНР О] н н ф^нГ^ ΥΥ^Ύτ0 Α,ο о 0 к .
- 28 020251
33 РНР о о Υ 0 ,
34 РНР Оолоси, ' ’ ,
35 РНР . й И 4'°'^τΜτ^8'%Γ-ν° о о .X А А СЛОСНз д °
36 РНР 0 %Лэсн3 0 ° ,
37 РНР ./'•к'
38 РНР .^«τί^ О О ,
- 29 020251
39 РНР 0 0 ,
40 РНР ОН 0 0 ί
41 РНР α ,
42 РНР 0 н 0 0 0 0 ΟΟΗ3
43 РНР л-лХГ'л Η и
44 РНР 0 0 0 ο СГОСНз υ
Согласно еще одному аспекту предложены соединения формулы V
где X представляет собой О, 8(=0),,, возможно имеющий заместители СН2 или возможно имеющий заместители ΝΗ;
ς равен 0, 1 или 2;
В представляет собой (28,3В)-2-метил-3-(3-метилбут-2-енил)оксиран, 2-метилгепта-2,5-диен, (2В,38)-2-изопентил-3-метилоксиран, 6-метилгепт-2-ен (2)-ацетальдегид О-бензилоксим, С2гетероциклический-С1-С6-алкил, С2-гетероциклический-С2-С6-алкенил, С1-С6-алкил, С2-С6-алкенил, С2гетероциклический-С1-С6-алкенил-СОО-С1-С6-алкил, С2-гетероциклический-С1-С6-алкил-С00-С1-С6алкил, С1-С6-алкнл-№0-С1-С6-алкиларил, С(О)С1-С6-алкил, СN или галоген;
В8 выбран из группы, состоящей из VI, VII, VIII, IX, X, XI, XII и XIIΑ, формулы которых представлены ниже:
В' представляет собой -СО2Н, возможно замещенный -ΝΗ2 или -Ν циклический имид, ΝΗϋ(0)(01- 30 020251
С6-алкил)-С(О)К'', К' находится в мета- или пара-положении относительно атома 8;
К представляет собой -ОН, -О-С1-С6-алкил или -ΝΉ2, возможно ацилированный карбоксильной группой аминокислоты;
где К9 представляет собой Н или С(О)К11;
К10 представляет собой -ΝΉ2, -ЖСН^-С^алкил)-, -ЖЦОХС-С^алкил), Ν-циклизованный имид; -ΝΉ, ацилированный карбоксильной группой аминокислоты, причем азот аминогруппы возможно защищен;
К11 представляет собой ОН, ОС1-С6-алкил или возможно замещенный -ΝΉ2;
где К12 представляет собой Н, С1-С6-алкил, -(С1-С6)-СООН, -(С1-С6)-С(О)О-(С1-С6), -СН2СН2О-К13, -С(О)(С1-С6-алкил), или аминокислоту, присоединенную через атом азота аминокислоты;
К13 представляет собой -Н или аминокислоту, присоединенную через карбоксильную группу аминокислоты, при этом атом азота аминокислоты возможно защищен, или С(О)(С1-С6-алкил)-СОК'';
К представляет собой -ОН, -ОС1-С6-алкил или -ΝΉ2, возможно ацилированный карбоксильной группой аминокислоты;
[-----------] представляет собой необязательный метиленовый мостик (-СН2-) между атомами углерода 2 и 5 пиперазиновой группы;
Ζ' представляет собой связь, -С1-С6-алкил, -КЙС(О|- или -Ж8О2-;
где К14 представляет собой -Н, -СО2Н, -СО2(С1-С6-алкил), -СХО)НН-С|-С6-алкил-ОН. при этом О в -С(О)NН-С1-С6-алкил-ОН возможно ацилирован карбоксильной группой аминокислоты; возможно замещенный -ΝΉ2, С1 -С6-алкил-МН2, где ΝΉ2 возможно имеет заместители;
[------------] представляет собой необязательный этиленовый мостик (-СН2СН2-) между атомами углерода 1 и 4 в циклогексановом фрагменте;
-СН2-8-, СН2СН2-, -С(Н)(Ме)-, ХНСН-. -1МНСН(СН3)-,
Ζ' представляет собой связь, -СН2-, -ЖСН2СН2-;
К15 представляет собой Н, возможно замещенный -ΝΉ2, -NНС(О)(С1-С6-алкил), -Ν циклизованный имид, возможно содержащий гетероатом в циклической структуре, -NНС(О)СН2ОСН2С(О)ОН, NНС(О)СН(С1-С6-алкил)-N циклизованный имид, -NНС(О)СН(К'')NНС(О)-(С1-С6-алкил)-С(О)ОН, -1ХНС(ОНС1-С6-алкил)-С(О)ОН, -С(О)О(С1-С6-алкил), -С(О^(Н)(С1-Сб-алкил)-ОН или \О<
К'' представляет собой Н или -С1-С6-алкил;
- 31 020251
XI где Υ' представляет собой С1-С3-алкил или ИН-С^С^алкил и присоединен к положениям 1, 2 или 3 индола;
К16 представляет собой Н, С1-С6-алкил, -СН2СООН и -СН2СН2ОН, при этом О в -СН2СН2ОН возможно ацилирован аминокислотой;
XII где К представляет собой -ОН, -ОС1 -С6-алкил или -ИН2, возможно ацилированный карбоксильной группой аминокислоты;
о
ХНА где Υ представляет собой С(О)И(СН3)(ОСН3), С(О)ОСН3, СН2С1 или ИНС(О)СН2С1.
В некоторых вариантах осуществления К в формуле V представляет собой (28,3К)-2-метил-3-(3метилбут-2-енил)оксиран.
Типичные примеры соединений формулы V включают следующие соединения, выбранные из группы, состоящей из:
- 32 020251
; ОСК3 МеОтПт° о о
снэ о
- 33 020251
- 34 020251
- 35 020251
- 36 020251
- 37 020251
- 38 020251
- 39 020251
В другом варианте осуществления соединения формулы V, высвобождаемые конъюгатами фумагиллина согласно настоящему изобретению, выбраны из группы, состоящей из:
Способы применения конъюгатов аналогов фумагиллина
В другом аспекте настоящего изобретения предложены композиции, содержащие по меньшей мере один конъюгат аналога фумагиллина или его фармацевтически приемлемую соль и фармацевтически приемлемый носитель.
В другом аспекте настоящего изобретения предложены способы лечения ангиогенного заболевания, включающие введение пациенту, который в этом нуждается, количества конъюгата аналога фумагиллина или его фармацевтически приемлемой соли, эффективного для подавления ангиогенеза.
- 40 020251
В некоторых вариантах осуществления ангиогенное заболевание выбрано из группы, включающей рак, неоваскуляризацию сетчатки вследствие дегенерации желтого пятна, псориаз и пиогенную гранулему, ревматоидный, иммунный и дегенеративный артрит.
В другом аспекте настоящего изобретения описаны способы лечения рака, включающие введение пациенту, который в этом нуждается, эффективного для лечения рака количества конъюгата аналога фумагиллина или его фармацевтически приемлемой соли.
В некоторых вариантах осуществления рак выбран из группы, включающей рак анального канала, астроцитому, лейкемию, лимфому, рак головы и шеи, рак печени, рак яичка, цервикального канала, саркому, гемангиому, рак пищевода, рак глаза, рак гортани, полости рта, мезотелиому, рак кожи, миелому, рак прямой кишки, горла, мочевого пузыря, молочной железы, матки, яичника, предстательной железы, легких, прямой кишки, поджелудочной железы, почек и желудка.
В другом аспекте настоящего изобретения описан способ лечения рака, включающий совместное введение пациенту, который в этом нуждается, конъюгата аналога фумагиллина или его фармацевтически приемлемой соли и известного противоракового агента, при этом оба вещества действуют синергетически.
В другом аспекте настоящего изобретения описан способ лечения рака, включающий совместное введение пациенту, который в этом нуждается, конъюгата аналога фумагиллина или его фармацевтически приемлемой соли и известного противоракового агента, в результате чего конъюгат и агент действуют аддитивно.
В некоторых вариантах осуществления первым можно вводить противораковый агент, а вторым конъюгат аналога фумагиллина, или же сначала можно вводить аналог конъюгата фумагиллина, а затем противораковый агент.
В другом аспекте настоящего изобретения описывается способ лечения рака, включающий регулярное введение пациенту, который в этом нуждается, конъюгата аналога фумагиллина или его фармацевтически приемлемой соли. В других вариантах осуществления также предусмотрено введение интерферона-α, интерферона-β или ингибитора СОХ-2.
В другом аспекте настоящего изобретения описан способ лечения рака, включающий введение пациенту, который в этом нуждается, конъюгата аналога фумагиллина или его фармацевтически приемлемой соли, при этом любое из этих веществ инактивирует аминопептидазу.
В некоторых вариантах осуществления аминопептидаза представляет собой метионинаминопептидазу 2 типа (Ме!ЛР-2).
В другом аспекте настоящего изобретения описывается способ уменьшения влияния на центральную нервную систему или токсичности ίη νίνο или ίη νίίΓΟ аналога фумагиллина, который включает конъюгирование указанного аналога фумагиллина с полиальдегидом, включая, но не ограничиваясь, ΡΗΡ, перед введением аналога фумагиллина пациенту.
В другом аспекте настоящего изобретения описывается способ уменьшения влияния на центральную нервную систему или токсичности ίη νίνο или ίη νίίτο аналога фумагиллина по сравнению с ΤΝΡ470, включающий конъюгирование указанного аналога фумагиллина с ΡΗΡ перед введением аналога фумагиллина пациенту.
Преимущества объединения лекарственного средства с макромолекулой носителя частично связаны со следующими факторами: (1) придание растворимости лекарственному средству; (2) ограничение доступа лекарственного средства к нормальному интерстицию благодаря большому гидродинамическому размеру конъюгата, (3) доставка конъюгата в опухолевую ткань благодаря эффекту повышенной проницаемости и задержания (ЕРЯ); и (4) сохранение постоянного уровня лекарственного средства с течением времени, больше клеточного цикла раковой клетки.
Способы использования аналогов фумагиллина
В другом аспекте настоящего изобретения описаны композиции, содержащие по меньшей мере один аналог фумагиллина или его фармацевтически приемлемую соль и фармацевтически приемлемый носитель.
В другом аспекте настоящего изобретения описаны способы лечения ангиогенного заболевания, включающие введение пациенту, который в этом нуждается, аналога фумагиллина или его фармацевтически приемлемой соли в количестве, эффективном для подавления ангиогенеза.
В некоторых вариантах осуществления ангиогенное заболевание выбрано из группы, включающей рак, неоваскуляризацию сетчатки из-за дегенерации макулы, псориаз и пиогенную гранулему, ревматоидный, иммунный и дегенеративный артрит.
В другом аспекте настоящего изобретения обеспечиваются способы лечения рака, включающие введение пациенту, который в этом нуждается, аналога фумагиллина или его фармацевтически приемлемой соли в количестве, эффективном для лечения рака.
В некоторых вариантах осуществления раковое заболевание выбрано из группы, включающей рак анального канала, астроцитому, лейкемию, лимфому, рак головы и шеи, рак печени, рак яичка, цервикального канала, саркому, гемангиому, рак пищевода, рак глаза, рак гортани, полости рта, мезотелиому, рак кожи, миелому, рак прямой кишки, горла, мочевого пузыря, рак молочной железы, матки, яичника,
- 41 020251 простаты, легких, прямой кишки, поджелудочной железы, почек, желудка и мозга.
В другом аспекте настоящего изобретения описывается способ подавления ангиогенеза, включающий введение пациенту, который в этом нуждается, аналога фумагиллина или его фармацевтически приемлемой соли в количестве, эффективном для подавления ангиогенеза.
В другом аспекте настоящего изобретения описан способ лечения рака, включающий совместное введение пациенту, который в этом нуждается, аналога фумагиллина или его фармацевтически приемлемой соли и известного противоракового агента, при этом оба вещества действуют синергетически.
В другом аспекте настоящего изобретения описан способ лечения рака, который включает совместное введение пациенту, который в этом нуждается, аналога фумагиллина или его фармацевтически приемлемой соли и известного противоракового агента, при этом оба вещества действуют аддитивно.
В некоторых вариантах осуществления первым можно вводить противораковый агент и вторым аналог фумагиллина, или же первым можно вводить аналог фумагиллина и вторым противораковый агент.
В другом аспекте настоящего изобретения описан способ лечения рака, включающий регулярное введение пациенту, который в этом нуждается, аналога фумагиллина или его фармацевтически приемлемой соли. В других вариантах реализации также можно вводить талидомид, интерферон-α, интерферон-β или ингибитор СОХ-2.
В другом аспекте настоящего изобретения описывается способ лечения рака, включающий введение пациенту, который в этом нуждается, аналога фумагиллина или его фармацевтически приемлемой соли, любой из которых инактивирует аминопептидазу.
В некоторых вариантах осуществления аминопептидаза представляет собой метионинаминопептидазу 2 типа (Ме!ЛР-2).
Терапевтическое введение конъюгата аналога фумагиллина
В случае введения пациенту конъюгат аналога фумагиллина или его фармацевтически приемлемую соль можно применять в виде компонента композиции, которая содержит физиологически приемлемый носитель. Композиции согласно настоящему изобретению могут быть приготовлены методом, включающим смешивание конъюгата аналога фумагиллина или его фармацевтически приемлемой соли с физиологически приемлемым носителем, наполнителем или растворителем. Смешивание можно осуществлять с помощью способов, известных в данной области для конъюгата аналога фумагиллина или его фармацевтически приемлемой соли и физиологически приемлемого носителя, наполнителей или растворителей.
Конъюгаты аналога фумагиллина или их фармацевтически приемлемые соли можно вводить любым традиционным путем, например путем инфузии или болюсной инъекции, также их можно вводить совместно с другим терапевтическим средством. Введение конъюгата аналога фумагиллина приводит к высвобождению аналога фумагиллина в кровоток.
В некоторых вариантах осуществления конъюгат аналога фумагиллина или его фармацевтически приемлемую соль вводят внутривенно.
Представленные композиции могут по желанию содержать соответствующее количество фармацевтически приемлемого наполнителя.
В вариантах реализации изобретения может быть желательно включать другие фармацевтически активные соединения, например противовоспалительные средства, стероиды, которые часто используют для снятия воспаления, антибиотики, противовирусные средства или антитела. Можно включать другие компоненты: консерванты, антиоксиданты и наполнители, покрытия или объемообразующие препараты, которые можно применять для того, чтобы изменить стабильность полимерного матрикса и/или скорость высвобождения лекарственного средства.
Для корректировки рН композиции можно использовать буферы, кислоты и основания.
Наполнители представляют собой растворимые в воде или нерастворимые материалы, включенные в композицию для добавления объема. К типам наполнителей относятся сахара, крахмал и целлюлоза. Количество наполнителя в лекарственной форме обычно составляет от 1 до 90 по весу.
Такими физиологически приемлемыми наполнителями являются жидкости, например вода или масло, включая нефтепродукты, растительные масла, животные, синтетические, например масло арахиса, сои, минеральное масло, кунжутное и т.д. Физиологически приемлемые наполнители могут представлять собой физиологический раствор, гуммиарабик, крахмальный клей, желатин, тальк, кератин, коллоидный кремнезем, мочевина и т.д. Также можно добавлять стабилизаторы, лубриканты, загустители и красители. В некоторых вариантах осуществления физиологически приемлемые наполнители должны быть стерильными, в случае введения пациенту. Физиологически приемлемый наполнитель должен оставаться стабильным при условиях изготовления и хранения, должен быть консервированным для защиты против микроорганизмов. Вода является особенно полезным наполнителем, если конъюгат аналога фумагиллина или его фармацевтически приемлемую соль вводят внутривенно. Также в качестве жидких наполнителей, особенно для вводимых в виде инъекции растворов можно использовать водные растворы декстрозы и глицерина. Подходящие физиологически приемлемые наполнители также включают объемообразующие агенты, например сорбитол, маннитол, поверхностно-активные вещества, например полисорбаты,
- 42 020251 гидроксипропил-в-циклодекстрин и полоксамер. Представленные композиции возможно также могут содержать незначительные количества буферных агентов.
Для приготовления растворов также можно использовать жидкие носители. Конъюгат аналога фумагиллина или его фармацевтически приемлемую соль можно растворять или суспендировать в фармацевтически приемлемом жидком носителе, например воде, органических растворителях, их смеси или фармацевтически приемлемых маслах или жирах. Жидкие носители могут содержать другие фармацевтически приемлемые добавки, включая солюбилизаторы, эмульгаторы, буферы, консерванты, красители, регуляторы вязкости, стабилизаторы или осморегуляторы.
Представленные композиции могут иметь форму растворов для инъекций или любую другую подходящую для использования форму. Другие примеры подходящих физиологически приемлемых наполнителей описаны в Кетгпд1оп'8 Рйагтасеибса1 8с1спсс5. р. 1447-1676 (Л1Гоп5О К. Ссппаго. Еб., 19(П еб. 1995).
В другом варианте осуществления конъюгат аналога фумагиллина или его фармацевтически приемлемая соль могут быть сформулированы для внутривенного введения. Традиционно композиции для внутривенного введения содержат стерильный изотонический водный буфер. При необходимости композиции также могут содержать солюбилизирующий агент. Композиции для внутривенного введения могут при желании содержать местный анестетик, например лидокаин для снятия боли в месте введения. Обычно, ингредиенты вводят либо по отдельности, либо в смешанном виде в дозированной лекарственной форме, например в виде сухого лиофилизированного порошка или безводного концентрата в герметичном запаянном контейнере, например в ампуле или пакетике, на котором указано количество активного агента. Если конъюгат аналога фумагиллина или его фармацевтически приемлемую соль предстоит вводить путем инфузии, его можно распределять по бутылкам, содержащим стерильную воду фармацевтического класса качества или физиологический раствор. Если конъюгат аналога фумагиллина или его фармацевтически приемлемую соль следует вводить путем инъекций, следует обеспечить ампулу со стерильной водой для инъекций или физиологический раствор, так, чтобы ингредиенты можно было смешать перед введением.
Количество конъюгата аналога фумагиллина или его фармацевтически приемлемой соли, которое эффективно для предотвращения рака или подавления ангиогенеза, определяют с помощью стандартных клинических методик. Также для определения оптимальной дозы возможно использовать анализы ш νί1го или ίπ νίνο. Точная доза также зависит от пути введения, условий, тяжести заболевания, которое лечат, а также от различных физических факторов, зависящих от пациента, и ее можно выбрать по совету лечащего врача. Обычно доза варьирует от приблизительно 0.001 до приблизительно 250 мг/кг массы тела в день. В некоторых вариантах осуществления доза варьирует от 1 до приблизительно 250 мг/кг массы тела в день, в другом варианте осуществления - от 1 до приблизительно 50 мг/кг массы тела в день и в другом варианте осуществления - от приблизительно 1 до приблизительно 20 мг/кг массы тела в день. Дозы основаны на представленном в конъюгате количестве эквивалентов аналогов фумагиллина. Можно вводить эквивалентные дозы через различные промежутки времени, включая, но не ограничиваясь перечисленными, каждые 2 ч, каждые 6 ч, каждые 8 ч, каждые 12 ч, каждые 24 ч, каждые 36 ч, каждые 48 ч, каждые 72 ч, каждую неделю, каждые 2 недели, каждый месяц, каждые 2 месяца. Количество и частота доз, соответствующее полному курсу терапии, может быть определено лечащим врачом. Значения эффективной дозы, описанные в настоящем изобретении, относятся к общему вводимому количеству, т.е. если вводят более одного конъюгата аналога фумагиллина или его фармацевтически приемлемой соли, количества эффективной дозы соответствует общему введенному количеству.
Эффективные количества других профилактических или терапевтических агентов известны специалисту в данной области. Однако специалист в данной области сможет определить оптимальные пределы эффективного количества другого профилактического или терапевтического агента. В некоторых вариантах осуществления, если пациенту вводят другой профилактический или терапевтический агент, эффективное количество конъюгата фумагиллина меньше, чем было бы, если не вводили другой профилактический или терапевтический агент. В таком случае, без теоретического обоснования, считают, что конъюгат аналога фумагиллина и другой терапевтический или профилактический агент действуют в лечении рака, воспалительных заболеваний или подавления ангиогенеза аддитивно или синергетически.
Представленные способы лечения рака, подавления ангиогенеза могут дополнительно включать введение другого терапевтического агента пациенту, которому вводят конъюгат аналога фумагиллина. В некоторых вариантах осуществления вводят другой терапевтический агент в эффективном количестве.
Другие подходящие терапевтические агенты, которые можно применять в способах и композициях, включают, но не ограничиваются перечисленными, противораковые агенты, антиангиогенные агенты, противовоспалительные агенты и вещества, действие которых направлено против синдрома раздраженного кишечника.
Подходящие противораковые агенты, которые можно применять в способах и композициях, включают, но не ограничиваются перечисленными, темозоломид, ингибитор топоизомеразы I, прокарбазин, дакарбазин, гемцитабин, капецитабин, метотрексат, таксол, таксотер, меркаптопурин, тиогуанин, гидроксимочевина, цитарабин, циклофосфамид, ифосфамид, нитрозомочевина, цисплатин, карбоплатин, ми
- 43 020251 томицин, дакарбазин, прокарбизин, этопозид, тенипозид, камптотецин, блеомицин, доксорубицин, идарубицин, даунорубицин, дактиномицин, пликамицин, митоксантрон, Б-аспарагиназа, эпирубицин, 5фторурацил, таксаны, например доцетаксел и паклитаксел, лейковорин, левамизол, иринотекан, эстрамустин, этопозид, азотистый иприт, 1,3-бис-(2-хлорэтил)-1-нитрозомочевина (ВСЫИ), нитрозомочевина, например кармустин и ломустин, алкалоиды барвинка, например винбластин, винкристин, винорэльин, комплексы платины, например цисплатин, карбоплатин и оксалиплатин, мезилат иманитиба, гексметилмеламин, топотекан, ингибиторы тирозиновой киназы, тирфостины, гербимицин А, генистейн, эрбстатин и лавендустин А.
Другие терапевтические агенты, которе можно применять в способах и композицях, включают, но не ограничиваются перечисленными, гидроксизин, глатирамер ацетат, интерферон в-1а, интерферон β-ГЬ и наталицумаб.
Антиангиогенные агенты также представляют собой терапевтические агенты, полезные для способов и композиций, описанных в настоящем изобретении. Примеры антиангиогенных агентов включают, но не ограничиваются перечисленными, бевацизумаб (ΛναδΙίη®), сунитиниб (διι^ηΐ®), сорафемиб (Ыехагаг®), талидомид (ТЬа1от1б®), леналидомид (Веу11т1б®), панитумумаб (УесйЫх®), цетуксимаб (ЕгЬ11их®) и эрлотиниб (Тагсеха®).
В некоторых вариантах осуществления конъюгат аналога фумагиллина или его фармацевтически приемлемую соль вводят параллельно с другим терапевтическим агентом.
В некоторых вариантах осуществления можно вводить композицию, содержащую эффективное количество конъюгата аналога фумагиллина или его фармацевтически приемлемой соли, и эффективное количество другого терапевтического агента в составе композиции.
В другом варианте осуществления можно параллельно вводить композицию, содержащую эффективное количество конъюгата аналога фумагиллина или его фармацевтически приемлемую соль, и отдельную композицию, содержащую эффективное количество другого терапевтического агента.
В другом варианте осуществления эффективное количество конъюгата аналога фумагиллина или его фармацевтически приемлемую соль вводят перед или после введения эффективного количества другого терапевтического агента. В этом варианте реализации изобретения конъюгат аналога фумагиллина или его фармацевтически приемлемую соль вводят в том время, как другой терапевтический агент оказывает свое терапевтическое действие, или другой терапевтический агент вводят в то время, как конъюгат аналога фумагиллина или его фармацевтически приемлемая соль оказывает свое профилактическое или терапевтическое действие при лечении рака или подавлении ангиогенеза.
Терапевтическое применение аналогов фумагиллина
В случае введения субъекту аналог фумагиллина или фармацевтически приемлемая соль аналога фумагиллина можно вводить в виде компонента композиции, которая включает физиологически приемлемый носитель или средство доставки. Композицию можно получить с применением способа, включающего смешивание аналога фумагиллина или фармацевтически приемлемой соли аналога фумагиллина и физиологически приемлемого носителя, наполнителя или растворителя.
Способы введения аналогов включают, но не ограничиваются перечисленными, внутрикожный, внутримышечный, внутрибрюшинный, внутривенный, подкожный, интраназальный, эпидуральный, пероральный, сублингвальный, интрацеребральный, интравагинальный, трансдермальный, ректальный, ингаляционный или способ местного введения, в частности, через уши, нос, глаза или кожу.
Аналог фумагиллина или фармацевтически приемлемую соль аналога фумагиллина можно вводить любым другим удобным путем, например путем инфузии или болюсной инъекции, и можно вводить вместе с другим терапевтическим агентом. Введение может быть системным или местным. Можно использовать различные известные средства доставки, включая инкапсуляцию в липосомы, микрочастицы, микрокапсулы и капсулы.
В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения аналог фумагиллина или фармацевтически приемлемую соль аналога фумагиллина вводят перорально.
В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения аналог фумагиллина или фармацевтически приемлемую соль аналога фумагиллина вводят внутривенно.
В другом варианте осуществления настоящего изобретения аналог фумагиллина или фармацевтически приемлемую соль аналога фумагиллина можно вводить местно. Такое введение можно осуществить, например, путем местной инфузии во время местной хирургической операции, например, в дополнение к перевязке раны после операции, путем инъекции, с помощью катетера, суппозитория или клизмы, или посредством имплантата, где указанный имплантат представляет собой пористый, непористый или гелевый материал или волокна.
В еще одном варианте осуществления настоящего изобретения аналог фумагиллина или фармацевтически приемлемую соль аналога фумагиллина можно вводить в системе контролируемого высвобождения или системе длительного высвобождения (см., например, Сообхои, в Мебюа1 АррИсаНоох о£ Соп1го11еб Ве1еазе, хо1. 2, р. 115-138 (1984)). Можно использовать другие системы управляемого или длительного высвобождения, обсуждаемые в обзоре Байде!·, В. (1990), δ^ι^, 249:1527-1533. В некоторых
- 44 020251 вариантах осуществления настоящего изобретения можно использовать насос (Ьапдег, Я. (1990), 8с1епсе, 249:1527-1533; 8ейоп, М. (1987), СЯС Си1. ЯеГ. Бюшей. Епд., 14: 201; ВисЬ^аМ Η., е! а1. (1980), 8игдегу, 88: 507; и 8аибек С, е! а1. (1989), Ν. Епд1. I. Мей., 321: 574). В другом варианте осуществления настоящего изобретения можно использовать полимерные материалы (см. Мебюа1 Аррйсайопз оГ Соп1го11еб Яе1еа§е (Ьапдег апб ХУке еб§., 1974); Соп!го11еб Эгид ВюауайаЬййу, Эгид Ггобис! Эе^дп апб ГегГогтапсе, (8то1еп апб Ва11 еб§., 1984); Яапдег апй Ееррах (1983), I. Масгото1. 8ск Яеу. Масгото1. СЬет., 2: 61; Ьеуу е! а1. (1985), 8с1епсе, 228: 190; Эиппд е! а1. (1989), Апп. №ига1., 25: 351; и Ыо^агб е! а1. (1989), I. №иго§игд., 71: 105).
Композиции согласно настоящему изобретению могут дополнительно включать пригодное количество физиологически приемлемых наполнителей.
В различных вариантах осуществления настоящего изобретения может оказаться желательным включение других фармацевтически активных соединений, таких как противовоспалительные вещества или стероиды, которые используют для уменьшения распухания, антибиотики, противовирусные препараты или антитела. Другие соединения, которые могут быть включены, представляют собой консерванты, антиоксиданты и наполнители, оболочки или объемные наполнители, которые также можно использовать для изменения стабильности матрикса и/или скорости высвобождения лекарства из полимера.
Наполнители и растворимые или нерастворимые в воде материалы включают в лекарственную форму для увеличения объема. Типы наполнителей включают сахара, крахмалы и целлюлозы. Количество наполнителя в лекарственной форме обычно находится в диапазоне приблизительно от 1 до 90% по весу.
Такие физиологически приемлемые наполнители могут представлять собой жидкости, такие как вода и масло, включая масла нефтяного, животного, растительного или синтетического происхождения, такие как арахисовое масло, соевое масло, минеральное масло, кунжутное масло и т.п. Физиологически приемлемые наполнители могут представлять собой соли, камеди, желатин, крахмальные пасты, тальк, кератин, коллоидный кремнезем, мочевину и т.п. Кроме того, можно использовать вспомогательные, стабилизирующие, загущающие, смазывающие и окрашивающие вещества. В некоторых вариантах осуществления физиологически приемлемые наполнители являются при введении субъекту стерильными. Физиологически приемлемый наполнитель должен быть стабильным при условиях производства и хранения и должен быть устойчивым против заражающего действия микроорганизмов. В качестве жидких наполнителей можно также применять солевые растворы и водные растворы декстрозы и глицерола, особенно для инъекционных растворов. Пригодные физиологически приемлемые наполнители также включают придающие объем вещества, такие как сорбитол и маннитол и поверхностно-активные вещества, такие как полисорбаты, гидроксипропил-в-циклодекстрин и полоксамер. Композиции согласно настоящему изобретению при желании также могут содержать небольшое с количество поддерживающих ρΗ буферных соединений.
Жидкие носители можно использовать при производстве растворов, суспензий, эмульсий, сиропов и эликсиров. Аналоги фумагиллина или их фармацевтически приемлемых соли можно растворять или суспендировать в фармацевтически приемлемом жидком носителе, таком как вода, органический растворитель, их смесь или фармацевтически приемлемые масла или жиры. Жидкий носитель может содержать другие пригодные фармацевтические добавки, включая растворители, эмульгаторы, буферы, консерванты, подсластители, ароматизаторы, суспендирующие вещества, загустители, красители, регуляторы вязкости, стабилизаторы или осморегуляторы. Пригодные примеры жидких носителей для перорального и парентерального введения включают воду (в частности, содержащую описанные ранее добавки, например производные целлюлозы, включая раствор натриевой карбоксиметил целлюлозы), спирты (включая одноатомные спирты и полиатомные спирты, например гликоли) и их производные, масла (например, фракционированное кокосовое масло и арахисовое масло). Для парентерального введения носитель также может представлять собой сложный эфир масла, например этилолеат и изопропил миристат. В стерильных жидких формах композиций для парентерального введения используют стерильные жидкие носители. Жидким носителем для композиций под давлением может служить галогенированный углеводород или другой фармацевтически приемлемый наполнитель аэрозолей.
Композиции согласно настоящему изобретению могут иметь форму растворов для инъекции, или любую другую форму, пригодную для использования. Другие примеры пригодных физиологически приемлемых наполнителей описаны в Яет1ид!оп'8 ΡЬа^тасеиΐ^са1 8с1епсе5, р. 1447-1676 (Айбпзо Я. Сеппаго, еб., 19!Ь еб. 1995).
Модифицирующие поверхность агенты включают агенты, модифицирующие неионные и анионные поверхности. Представительные примеры модифицирующих поверхности агентов включают, но не ограничиваются перечисленным, полоксамер 188, бензалкониум хлорид, стеарат кальция, цетостеариловый спирт, цетомакроголовый эмульсионный воск, сложные эфиры сорбитана, коллоидный кремнезем, фосфаты, додецилсульфат натрия, алюмосиликат магния и триэтаноламин.
В другом варианте осуществления аналог фумагиллина или фармацевтически приемлемую соль аналога фумагиллина можно поместить в форму для внутривенного введения. Обычно, композиции для внутривенного введения включают стерильный изотонический водный буфер. При необходимости ком
- 45 020251 позиции могут также включать солюбилизующий агент. Композиции для внутривенного введения могут дополнительно включать местное анестезирующее вещество, такое как лигнокаин, для уменьшения боли в месте инъекции. Обычно компоненты поставляют раздельно или объединенными в одной лекарственной форме, например в виде сухого лиофилизированного порошка или безводного концентрата в герметически запечатанном контейнере, таком как ампула или саше с указанным количеством активного агента. Если аналог фумагиллина или фармацевтически приемлемую соль аналога фумагиллина вводят путем инфузии, его можно поместить, например, в сосуд для инфузии, содержащий стерильную воду фармацевтической категории или солевой раствор. Если аналог фумагиллина или фармацевтически приемлемую соль аналога фумагиллина вводят путем инъекции, может быть предусмотрена ампула со стерильной водой для инъекций или солевым раствором, для того чтобы компоненты могли быть смешаны до инъекции.
Количество аналога фумагиллина или фармацевтически приемлемой соли аналога фумагиллина, которое является эффективным для лечения или предотвращения рака или подавления ангиогенеза, можно определить с применением стандартных клинических методов. Кроме того, для определения оптимального диапазона доз можно дополнительно применить тесты ίη νίίτο или ίη νίνο. Точная доза, которую нужно применять, может также зависеть от пути введения, состояния, остроты излечиваемого состояния, а также различных физических факторов, относящихся к личности пациента, и может быть определена в соответствии с решением лечащего врача. Типичная доза колеблется от приблизительно 0,001 до приблизительно 250 мг/кг массы тела в день, в некоторых вариантах осуществления приблизительно от 1 до 250 мг/кг веса тела в день, в другом варианте осуществления приблизительно от 1 до 50 мг/кг веса тела в день и в другом варианте осуществления приблизительно от 1 до 20 мг/кг массы тела в день. Эквивалентные дозировки можно вводить через различные периоды времени, включая, но не ограничиваясь, приблизительно каждые 2 ч, приблизительно каждые 6 ч, приблизительно каждые 8 ч, приблизительно каждые 12 ч, приблизительно каждые 24 ч, приблизительно каждые 36 ч, приблизительно каждые 48 ч, приблизительно каждые 72 ч, приблизительно каждую неделю, приблизительно каждые две недели, приблизительно каждые три недели, приблизительно каждый месяц и приблизительно каждые два месяца. Количество и частоту дозировок, соответствующие полному курсу терапии, можно определить в соответствии с решением лечащего врача. Описанные в настоящем изобретении эффективные количества дозировки относятся к общему вводимому количеству; т.е. в случае применения более чем одного аналога фумагиллина или более чем одной фармацевтически приемлемой соли аналога фумагиллина, эффективные количества дозировки относятся к общему вводимому количеству.
Эффективные количества других профилактических или терапевтических агентов хорошо известны специалистам в данной области техники. Тем не менее, хорошо, если квалифицированный в данной области специалист определит другой профилактически или терапевтически оптимальный диапазон эффективного количества агента. В некоторых вариантах осуществления изобретения, если субъект получает другой профилактический или терапевтический агент, эффективное количество аналога фумагиллина является меньшим, чем эффективное количество, которое должно было быть, если бы другой профилактический или терапевтический агент не применяли. В этом случае, без теоретического обоснования, предполагается, что аналог фумагиллина и другой профилактический или терапевтический агент будут действовать аддитивным или синергетическим образом в лечении рака, воспалительных заболеваний или подавлении ангиогенеза.
В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения фармацевтическая композиция, включающая аналог фумагиллина, находится в форме дозированной единицы, такой как таблетка, капсула, порошок, раствор, суспензия, эмульсия, гранула или суппозиторий. В такой форме композиция поделена на дозированные единицы, содержащие подходящие количества активного компонента; форма единицы дозировки может представлять собой упакованные композиции, например пакетированные порошки, флаконы, ампулы, предварительно заполненные шприцы или саше, содержащие жидкости. Форма единицы дозировки может быть, например, капсула или таблетка сама по себе или она же в подходящим количестве любых таких композиций в пакетной форме. Такая форма единицы дозировки могут содержать от приблизительно 1 до приблизительно 250 мг/кг аналога фумагиллина и могут быть приняты в единственной дозе или в двух или более раздельных дозах.
Аналог фумагиллина или фармацевтически приемлемую соль аналога фумагиллина до введения людям можно протестировать в экспериментах ίη νίίτο или ίη νίνο на желаемую терапевтическую или профилактическую активность. Для демонстрации безопасности и биологической активности можно применять системы с животными моделями.
Настоящие способы лечения рака или подавления ангиогенеза могут далее включать введение другого терапевтического агента субъекту, получающему аналог фумагиллина. В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения другой терапевтический агент вводят в эффективном количестве.
Пригодные другие терапевтические агенты, применимые в описанных выше способах и композициях, включают, но не ограничиваются перечисленным, противораковые агенты, антиангиогенные агенты, противовоспалительные агенты и агенты против синдрома раздражения кишечника.
Пригодные противораковые агенты, полезные в способах, и композиции, описанные в настоящем
- 46 020251 изобретении, включают, но не ограничиваются перечисленным, темозолимид, ингибитор топоизомеразы I, прокарбазин, дакарбазин, гемцитабин, капецитабин, метотрексат, таксол, таксотер, меркаптопурин, тиогуанидин, гидроксимочевину, цитарабин, циклофосфамид, изофосфамид, нитросомочевину, цисплатин, карбоплатин, митомицин, дакарбазин, прокарбазин, этопозид, тенипозид, камптотецины, блеомицин, доксорубицин, идарубицин, даунорубицин, дактиномицин, пликамицин, митоксантрон, Ьаспарагиназу, эпирубицин, 5-фторурацил, таксаны, такие как доцетаксел и паклитаксел, лейковорин, левамисол, иринотекан, эстрамустин, этопозид, азотистые иприты, 1,3-бис-(2-хлорэтил)-1-нитромочевину (ΒϋΝϋ), нитрозомочевины, такие как кармустин и ломустин, винкаалкалоиды, такие как винбластин, винкристин и винорелбин, комплексы платины, такие как цисплатин, карбоплатин и оксалиплатин, иматиниб мезилат, гексаметилмеламин, топотекан, ингибиторы тирозинкиназ, тирфостины, гербимицин А, генистеин, эрбстатин и лавендустин А.
Другие терапевтические агенты, применимые в способах и композициях настоящего изобретения, включают, но не ограничиваются перечисленным, гидроксизин, глатирамер ацетат, интерферон бета-1а, интерферон бета-1Ь и натализумаб.
Пригодные антиангиогенные агенты, применимые в способах и композициях настоящего изобретения, включают бевацизумаб (ΑναδΙίη®). сунитиниб (8и1сп1®). сорафениб (Чехауаг®), талидомид (ТйаΙοιηίά®) и леналидомид (Кеу11Ш1б®), панитумумаб, эрбутикс и эрлотиниб (Татееуа®).
В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения аналоги фумагиллина или их фармацевтически приемлемые соли вводят параллельно с другим терапевтическим агентом.
В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения композицию, включающую эффективное количество аналога фумагиллина или его фармацевтически приемлемой соли и эффективное количество другого терапевтического агента, можно вводить в одной композиции.
В другом варианте осуществления настоящего изобретения можно параллельно применять композицию, включающую эффективное количество аналога фумагиллина или его фармацевтически приемлемой соли, и отдельную композицию, включающую эффективное количество другого терапевтического агента.
В другом варианте осуществления настоящего изобретения эффективное количество аналога фумагиллина или его фармацевтически приемлемой соли вводят до или после применения эффективного количества другого терапевтического агента. В этом варианте осуществления настоящего изобретения аналог фумагиллина или его фармацевтически приемлемую соль вводят в то время, когда другой терапевтический агент оказывает свое терапевтическое действие, или другой терапевтический агент вводят в то время, когда аналог фумагиллина или его фармацевтически приемлемая соль оказывают свое профилактическое или терапевтическое действие при лечении рака или подавлении ангиогенеза.
Конъюгаты аналогов фумагиллина и фармацевтически приемлемые соли конъюгатов аналогов фумагиллина можно получить, используя ряд способов и исходные коммерчески доступные соединения, известные соединения или соединения, полученные известными способами. Аналоги фумагиллина и их фармацевтически приемлемые соли можно получить с использованием ряда способов, используя в качестве исходного материала коммерчески доступные соединения, известные соединения или соединения, полученные известными способами. Общие пути синтеза для многих описанных соединений включены в нижеследующие схемы. Для специалиста в данной области техники понятно, что для этого синтеза могут быть необходимы этапы защиты и снятия защиты, не показанные на схемах, а также, что порядок этапов можно изменить для изменения функциональности целевой молекулы.
Способы, применимые для получения конъюгатов аналогов фумагиллина и аналогов фумагиллина, изложены ниже в примерах и кратко описаны на следующих схемах.
Схема 1
На ОН
Ά'''ОСН3 НгО/Е1аО Т^'ОСНз
23°С.1Ч ОН
о н2
σΌ Фумагиллол
Фумагиллин
Как показано на схеме 1, фумагилол можно получить путем суспендирования соли фумагиллин дициклогексиламмония в ЕьО и перемешивании в 0,5 Ν водном растворе №1ОН. После стандартной обработки и очистки на колонках фумагиллол выделяют с выходом приблизительно 70%.
- 47 020251
где К имеет значение, определенное выше для формулы II.
Как показано на схеме 2, соединение формулы XIII может вступать в реакцию с р-нитрофенил хлороформатом в органическом растворителе, таком как хлорид метилена с основанием, таким как пиридин при приблизительно 0°С и перемешивании. После огашения реакции стандартная обработка дает соединение формулы XIV. Кроме того, замена р-нитрофенил хлороформата на карбонил диимидозол дает соединение формулы XV.
Схема 3
где К имеет значение, определенное выше для формулы II.
Как показано на схеме 3, соединение формулы XIV может вступать в реакцию с амином, таким как этил 3-(пиперазин-1-ил)пропаноат при комнатной температуре в течение 12 ч. Стандартные экстрагирование и очистка реакционной смеси обеспечивают соединение формулы XVI.
Схема 4
где К имеет значение, определенное выше для формулы II.
Как показано на схеме 4, соединение формулы XV может вступать в реакцию с первичным амином, таким как 4-анилин(аминометил) при 65°С в подходящем органическом растворителе, таком как ацетонитрил, обеспечивая соединение формулы XVII.
где р=т; т и К были определены выше для формул I и II соответственно.
Как показано на схеме 5, конъюгаты могут быть синтезированы путем растворения РНР-СА (сделанным в соответствии с патентом США 2007/0190018) с соединением формулы XVII в смеси органических растворителей, таких как ДМФ или ацетонитрил и воды. Корректируют рН между 5,9 и 6,0 и реак
- 48 020251 ционную смесь охлаждают до 0°С. Затем добавляют 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимид (БЭС), и смесь перемешивают приблизительно от 2,5 до 4 ч. Реакционную смесь подкисляют до рН 5 с помощью 1,0 N НС1, смесь фильтруют через мембрану 0,2 мкм и очищают с помощью гельхроматографии, при этом получают, например, Конъюгат 12, в котором Я представляет собой (28,3Я)-2метил-3-(3-метилбут-2-енил)оксиран.
Схема 6
где Я имеет значение, определенное выше для формулы II.
Как показано на схеме 6, соединение формулы ХУП-Л может быть связано с органической кислотой, такой как аминокислота, путем растворения его с органической кислотой, такой как Етосзащищенный Ь-аланин, и БОС в апротонном органическом растворителе, таком как хлористый метилен. Впоследствии, защитную Етос-группу можно удалить путем реакции с пиперидином в апротонном растворителе, таком как ацетонитрил. Экстрагирование и хроматографическая очистка дают соединение формулы XVIII.
где р=т, т и Я были определены выше для формул I и II соответственно.
Как показано на схеме 7, альтернативный способ связывания аналога фумагиллина с полиальдегидами включает растворение соединения формулы XVI-Л в ТГФ и охлаждение реакционной смеси до 0°С. Добавляют основания, такие как триэтиламин и изобутил хлороформат, смесь пермешивают. Во втором сосуде растворяют РНЕ в безводном пиридине. Затем содержание обоих сосудов объединяют и перемешивают, нагревая до комнатной температуры более 12 ч. Смесь фильтруют так, как было описано выше, и очищают на основании молекулярной массы, получают, например, конъюгат 4, в котором Я представляет собой (28,3Я)-2-метил-3-(3-метилбут-2-енил)оксиран.
Схема 8
СЮ /пиридин
СН2С12, 25 °С
ОН о
С-4 аналог фумагиллола С-4 аналог фумагиллона
где Я имеет значение, определенное выше для формулы II.
Как показано на схеме 8, фумагиллон и аналоги С-4 можно получить в реакции фумагиллола и его С-4 аналогов с окислителем, таким как оксид хрома (VI) в пиридине при помешивании в течение ночи при комнатной температуре. С помощью стандартной обработки путем экстрагирования и хроматографии в силикагеле получают фумагиллон и его С-4 аналоги.
- 49 020251
Схема 9
где К имеет значение, определенное выше для формулы II.
Как показано на схеме 9, фумагилламин и его С-4 аналоги можно получать при реакции аналога фумагиллона в безводном МеОН с ацетатом аммония и цианоборгидридом натрия.
Схема 10
где К имеет значение, определенное выше для формулы II.
Как показано на схеме 10, соединение формулы XIX может вступать в реакцию с р-нитрофенил хлороформатом в органическом растворителе, таком как хлористый метилен, с основанием, таким как триэтиламин при 0°С, перемешивании и нагревании до комнатной температуры. После этого добавляют раствор 2-(4-аминофенил)этиламина и затем перемешивают в течение 2 ч, реакцию прекращают, после чего получают соединение формулы XX.
Схема 11
где К имеет значение, определенное выше для формулы II.
Как показано на схеме 11, соединение формулы XXI может вступать в реакцию с ангидридом, таким как янтарный ангидрид, в присутствии ОМАР в СН2С12, с образованием соединения формулы XXII.
где К имеет значение, определенное выше для формулы II.
Как показано на схеме 12, синтез С-6 карбо-производного фумагиллина можно проводить, начиная с фумагиллона, в котором спиро-эпоксид несет защиту в форме хлоргидрина XXIII (Вюогд. Меб. СНет. Бе11. 2003, 11, 5051-5058). Затем проводят реакцию Хорнера-Виттига (1оигиа1 о! СНет. 8ос. 1988, 11, 1184-1186), получают такие соединения, как XXIV, после чего проводят гидролиз полученного метиленолового эфира (8уп!Н. Соттип. 2001, 31, 939-946), и, наконец, проводят риформинг спиро-эпоксида трет-бутоксидом калия (Вюогд. Меб. СНет. Бе11. 2004, 14, 91-94), получают аналог фумагиллина с С-6 метиленом, такой как соединение формулы XXV.
- 50 020251
Схема 13
1) реагент Лоуссона , РМЕ.
ГТ 2) МаВН41 ЭМЕ
Υ ''ОСНз
О где К имеет значение, определенное выше для формулы II.
Как показано на схеме 13, С-6 тиоаналог соединения XXVI можно синтезировать путем реакции С6 кетоаналога с реагентом Лоуссона в диметоксиэтане (ΌΜΕ) с последующим восстановлением с использованием боргидрида натрия. Стандартная обработка дает С-6 тиоаналог фумагиллина.
Примеры
Общие процедуры: методы ЖХ-МС.
Данные ЖХ-МС регистрировали с использованием системы 1200 8спс5 БС/М8Э-8Б. оборудованной диодно-матричным детектором 1100/1200 и колонкой С18 Била 2,5 мкм 100x3,0 мм. Подвижная фаза А: 0,1% муравьиной кислоты в воде; Подвижная фаза В: 0,1% муравьиной кислоты в 98% водном растворе МеСЛ. Для разделения использовали линейный градиент 10-90% подвижной фазы В при скорости 1 мл/мин и при температуре колонки 45°С. Детектирование осуществляли на 254 и 215 нм. Метод А: время градиент 10 мин, Метод В: время градиента 12 мин, Метод С: время градиента 15 мин.
Пример 1.
Процедура получения фумагиллола:
Соль фумагиллин дициклогексиламмоний (15,0 г, 23,4 ммоль) суспендировали в Εΐ2Ο (300 мл) и интенсивно перемешивали. К интенсивно перемешиваемой суспензии добавляли 0,5 N водный раствор ЛаОН (300 мл) в течение 15 мин. Полученную двухфазную реакционную смесь интенсивно перемешивали при 23°С в течение 1 ч, после чего разбавляли Εΐ2Ο (500 мл) и водой (500 мл) и отделяли органическую фазу. Водную фазу промывали Εΐ2Ο (2x100 мл), а объединенные органические фазы промывали насыщенным водным раствором ЛаС1, сушили при помощи Мд§О4 и концентрировали под вакуумом с получением оранжевого масла. Очистка путем хроматографии на силикагеле (120 г: 0^ 100%, ΕΐΟΑε в гексанах, 35 мин) дала фумагиллол (4,68 г, 16,6 ммоль, 71%) в форме оранжевого масла или твердого вещества.
ЖХ/МС, метод А: т/ζ 283 [М+Н]+, К 9,7 мин.
Пример 2.
Синтез соединения ВВ:
Карбонил димидазол (45,7 г, 282 ммоль) суспендировали в СН2С12 (469 мл) и охлаждали до 0°С при интенсивном перемешивании. При помощи воронки, выравнивающей давление, добавляли раствор фумагиллола (26,5 г, 94,0 ммоль) в СН2С12 (100 мл) в течение 30 мин, поддерживая температуру реакционной смеси, равной 0°С. Смесь оставляли для перемешивания при 0°С на еще 2 ч, после чего реакцию гасили путем добавления воды (100 мл, 1 ч) к охлажденной реакционной смеси. Тщательно следили за тем, чтобы температура реакционной смеси была 0°С в ходе экзотермического процесса добавления воды. Органическую фазу промывали водой (3x100 мл), а объединенные водные фазы промывали СН2С12. Объединенные органические фазы сушили с использованием Μ§δΟ4 и концентрировали под вакуумом с получением соединения АА (38,5 г, 102 ммоль, >98%) в форме вязкого коричневого масла, которое использовали далее в реакции сочетания без очистки.
ЖХ/МС, метод В: т/ζ 377 [М+Н]+, К 5,9 мин.
- 51 020251
К перемешиваемому раствору соединения АА (10,2 г, 27,2 ммоль) в МеСN (175 мл) добавляли 4аминобензиламин (3,32 г, 27,2 ммоль) и нагревали раствор до 65°С в течение 2 ч. Затем раствору позволяли остыть до 23°С и концентрировали под вакуумом с получением вязкого оранжевого масла. Очистка путем хроматографии на силикагеле (80 г: 0^100% ЕЮАс в гексанах, 30 мин) дала ВВ в форме белого твердого вещества (7,50 г, 17,4 ммоль, 64%).
ЖХ/МС, метод В: т/ζ 453 |М-\а|'. К4,75 мин.
1Н-ЯМР (400 МГц): δ 7,07 (д, 2Н); 6,63 (д, 2Н); 5,51 (шир.с, 1Н, ΝΗ); 5,19 (дд, 1Н); 5,01-4,99 (м, 1Н); 4,27 (дд, 1Н); 4,17 (дд, 1Н), 4,14 (дд, 1Н); 3,68 (шир.с, 2Н, ΝΗ2); 3,64 (дд, 1Н); 3,45 (с, 3Н); 2,96 (д, 1Н); 2,54 (д, 1Н); 2,53 (д, 1Н); 2,38-2,31 (м, 1Н); 2,19-2,12 (м, 1Н); 2,08-1,99 (м, 2Н); 1,91 (д, 1Н); 1,85-1,75 (м, 1Н); 1,73 (с, 3Н); 1,64 (с, 3Н); 1,20 (с, 3Н); 1,06-1,02 (м, 1Н).
Пример 3.
Синтез соединения СС:
Етос-Ь-А1а (15,4 г, 49,5 ммоль), ЕЭС (9,49 г, 49,5 ммоль) и НОВ! (7,58 г, 49,5 ммоль) экстрагировали в СН2С12 (225 мл) и перемешивали при 23°С. К полученной суспензии добавляли раствор соединения ВВ (20,0 г, 45,0 ммоль) в СН2С12 (50 мл). Реакционную смесь перемешивали при 23°С на 3 ч, после чего реакцию гасили путем добавления водного 10% раствора лимонной кислоты (100 мл). Отделяли органическую фазу и водную фазу промывали СН2С12 (3x100 мл). Объединенные органические фазы промывали последовательно 10% водным раствором лимонной кислоты, насыщенным водным раствором NаΗСОз и насыщенным водным раствором №С1. Органические фазы сушили Мд8О4 и концентрировали под вакуумом с получением белого твердого вещества. Очистка путем хроматографии на силикагеле (330 г: 0^75% ЕЮАс в гексанах, 45 мин) давала защищенное Ртос производное соединения СС в форме белого твердого вещества (8,64 г, 11,7 ммоль, 42%).
ЖХ/МС, метод В: т/ζ 760 |М-\а|'. К 10,0 мин.
Защищенное Ртос производное соединения СС (8,50 г, 11,5 ммоль) растворяли в МеСN (115 мл) и охлаждали раствор до 0°С. К раствору добавляли пиперидин (11,4 мл, 115 ммоль) и оставляли реакционную смесь для перемешивания при 0°С в течение 1 ч. Путем концентрирования реакционной смеси в вакууме получили белое твердое вещество. Очисткой путем хроматографии на силикагеле (330 г: 0^20% МеОН (0,5% Εΐ3Ν) в СН2С12 (0,5% Εΐ3Ν), 45 мин) получили соединение СС в форме белого твердого вещества (2,73 г, 5,30 ммоль, 46%).
Ή-ЯМР (400 МГц): δ 9,43 (шир.с, 1Н, ЫН), 7,53 (д, 2Н), 7,22 (д, 2Н), 5,47 (шир.с, 1Н, ЫН), 5,20 (дд, 1Н), 4,78 (дд, 1Н), 3,64-3,58 (м, 2Н), 3,44 (с, 3Н), 3,44-3,38 (м, 2Н), 2,96 (д, 1Н), 2,77 (дд, 2Н), 2,57-2,52 (м, 2Н), 2,40 (ддд, 1Н), 2,16 (ддд, 1Н), 2,06-1,99 (м, 2Н), 1,90 (д, 1Н), 1,84-1,80 (м, 1Н), 1,74 (с, 3Н), 1,65 (с, 3Н), 1,42 (д, 3Н), 1,20 (с, 3Н), 1,14-1,03 (м, 1Н).
ЖХ/МС, метод В: т/ζ 516 [М+Н]+, К1 4,4 мин.
Пример 4.
Синтез соединения ΌΌ:
Фумагиллол (10,0 г, 35,4 ммоль) растворяли в СН2С12 (120 мл). Добавляли пиридин (8,59 мл, 106 ммоль) и охлаждали раствор до 0°С при постоянном перемешивании. К перемешиваемому раствору при 0°С, по каплям порциями добавляли р-нитрофенил хлорформат (9,77 г, 46,0 ммоль) в СН2С12 (55 мл), а
- 52 020251 затем через 1,5 ч реакционную смесь перемешивали в течение дополнительных 30 мин при 0°С. Затем суспензию разбавляли ЕЮАс и промывали последовательно 10% водным раствором лимонной кислоты (3x150 мл, 100 мл, 50 мл), водой и насыщенным водным раствором №С1. Органические фазы сушили с использованием Мд§О4 и концентрировали под вакуумом с получением темно-коричневого твердого вещества. Очистка путем хроматографии на силикагеле (330 г: 10^30% ЕЮАс в гексанах, 45 мин) давала фумагиллола р-нитрофенил карбонат - соединение ΌΌ (12,3 мг, 27,6 ммоль, 78%) в форме белого твердого вещества.
ЖХ/МС, метод С: т/ζ 448 [М+Н]+, 18,4 мин.
Пример 5.
Синтез соединения ЕЕ:
К перемешиваемой суспензии соединения ΌΌ (100 мг, 0,223 ммоль) добавляли раствор этилового эфира 3-(пиперазин-1-ил)пропионовой кислоты (41,6 мг, 0,223 ммоль) в МеСN (1 мл) и перемешивали раствор 12 ч при 23°С. Реакционную смесь разбавляли СН2С12 (50 мл), промывали 0,5 М водным раствором №ЮН, сушили с использованием Мд§О4 и концентрировали под вакуумом с получением желтого масла. Очистка путем хроматографии на силикагеле (12 г: 0^20% МеОН в СН2С12, 20 мин) давала соединение ЕЕ (42,5 мг, 0,086 ммоль, 38%) в форме бесцветного масла.
ЖХ/МС, метод С: т/ζ 495 [М+Н]+, Κί 10,5 мин.
Пример 6.
Процедура получения фумагиллона:
Оксид хрома (VI) (6,37 г, 63,7 ммоль) несколькими порциями добавляли к перемешиваемому раствору пиридина (15 мл, 185 ммоль) в СН2С12 (70 мл), что приводило к немедленной смене окраски на желтую, а затем на темно-красную. Суспензию перемешивали в течение 10 мин при 0°С, а затем при 25°С в течение 20 мин; за это время большая часть твердого вещества растворялась. Затем к смеси добавляли фумагиллол (3,00 г, 10,6 ммоль) в СН2С12 (20,0 мл), что приводило к мгновенной смене окраски на тускло-коричневую с образованием преципитата. После перемешивания в течение ночи при 25°С раствор декантировали в лабораторный стакан и смывали дегтеобразный осадок диэтиловым эфиром (200 мл). Объединенные органические вещества промывали 1 N вод. ΝηΟΗ (50 мл), 10% водным раствором лимонной кислоты (2x50 мл) и солевым раствором (50 мл). Органический экстракт сушили над Мд§О4, фильтровали и концентрировали под вакуумом с получением 3,8 г неочищенного продукта в форме желтого масла. Очистка путем хроматографии на силикагеле (40 г) м элюированием в градиенте этилацетат/гексан (0^30%, 5 мин; 30%, 5 мин; 30^40%, 5 мин; 40%, 10 мин; 40-50%, 3 мин) дала 2,297 г (77%) желаемого продукта в форме желтого масла.
ЖХ/МС, метод В: т/ζ 281 [М+Н]+, 8,40 мин.
Пример 7.
Процедура получения фумагилламина:
К раствору фумагиллона (903 мг, 3,07 ммоль) в безводном МеОН (20,0 мл), охлажденному до 0°С, добавляли ацетат аммония (2,49 г, 31,3 ммоль) и цианоборогидрид натрия (254 мг, 3,84 ммоль).
Полученный желтый раствор перемешивали при 0°С. Через 3 ч реакционную смесь концентрировали в вакууме с получением желтой жидкости, которую разбавляли ЕЮАс и промывали насыщенным водным раствором №1НСО3 (10 мл). Водную фазу солили твердым Ν;·ιΟ1 и подвергали обратной экстрак
- 53 020251 ции с использованием ЕЮЛс (4x25 мл). Объединенные органические экстракты сушили (Мд§О4), фильтровали и концентрировали под вакуумом с получением 1,047 г светло-желтого порошка, который сразу использовали на следующем этапе без очистки.
Пример 8.
Синтез соединения ЕЕ:
К перемешиваемому раствору фумагилламина (1,00 г, 3,55 ммоль) в 0Η2Ο2 (15 мл) при 0°С добавляли Εΐ3Ν (0,545 мл, 3,91 ммоль), а затем - раствор р-натрофенил хлорформата (0,788 г, 3,91 ммоль) в ΟΗ202 (2 мл). Реакционной смеси позволяли нагреться до 23°С в течение 1,5 ч, после чего добавляли раствор 2-(4-аминофенил)этиламина (0,458 мл, 3,55 ммоль) в ΟΗ2α2 (2 мл) и перемешивали смесь при 23°С в течение еще 2 ч. Реакционную смесь разбавляли ΟΗ202, промывали насыщенным водным раствором NаΗСΟ3, сушили над Мд§О4 и концентрировали под вакуумом с получение желтого твердого вещества. Очистка путем хроматографии на силикагеле (12 г: 0^5% МеОН (0,05% Εΐ3Ν) в С'ШСЕ (0,05% Εΐ3Ν), 26 мин) давала соединение ЕЕ (0,890 г, 2,00 ммоль, 57%) в форме светло-желтого твердого вещества.
ЖХ/МС, метод А: т/ζ 444 [М+Н]+, К1 4,1 мин.
Пример 9.
Синтез соединения СС:
Соединение ЕЕ (0,890 г, 2,01 ммоль), Етос-Ь-А1а моногидрат (0,687 г, 2,21 ммоль), ΗΟΒΐ (0,338 г, 2,21) и ЕЭС’ (0,423 г, 2,21 ммоль) растворяли в СШСЕ (5 мл) и перемешивали при 23°С в течение 4 ч. Реакцию гасили путем добавления 10% водного раствора лимонной кислоты (5 мл) и водную фазу промывали ΟΗ2α2 (2x10 мл). Объединенные органические фазы промывали последовательно 10% водным раствором лимонной кислоты (20 мл), насыщенным водным раствором NаΗСΟ3 и насыщенным водным раствором ХаС1, после чего их сушили с использованием Мд§О4 и концентрировали под вакуумом с получением желтого масла. Очистка путем хроматографии на силикагеле (12 г: 0^5% МеОН в 0Η2Ο2, 26 мин) давала производное соединения СС, защищенное группой Етос (0,634 г, 0,860 ммоль, 43%) в форме белого твердого вещества.
ЖХ/МС, метод А: т/ζ 737 [М+Н]+, К1 8,1 мин.
Производное соединения СС, защищенное группой Етос, (0,634 г, 0,860 ммоль) растворяли в ДМФ (5 мл) и охлаждали раствор до 0°С. К перемешиваемому раствору добавляли пиперидин (0,852 мл., 8,60 ммоль) и оставляли смесь при перемешивании при 0°С на 1 ч, после чего ее концентрировали в вакууме с получением белого твердого вещества. Очистка путем хроматографии на силикагеле (4 г: 0^50% МеОН (0,5% Εΐ3Ν) в СШСЕ (0,5% Εΐ3Ν), 30 мин) давала соединение Сс (0,336 г, 0,653 ммоль, 76%) в форме белого твердого вещества.
ЖХ/МС, метод А: т/ζ 515 [М+Н]+, К1 3,9 мин.
- 54 020251
Пример 10.
Синтез соединения 11:
Соединение НН (0,459 г, 1,05 ммоль), которое получали, следуя процедуре, аналогичной процедуре получения соединения ЕЕ, описанной выше, растворяли в СН2С12 (10,5 мл) и добавляли ангидрид янтарной кислоты (0,105 г, 1,05 ммоль), а затем ОМАР (0,013 г, 0,105 ммоль). Смесь перемешивали при 23°С в течение 24, после чего добавляли еще ангидрид янтарной кислоты (0,105 г, 1,05 ммоль) и перемешивали смесь в течение еще 1 ч при 23°С. Реакционную смесь концентрировали в вакууме с получением соединения Л (0,564 г, 1,05 ммоль, >98%) в форме бледно-желтого масла, которое использовали в последующей реакции сочетания без очистки.
ЖХ/МС, метод А: т/ζ 538 [М+Н]+, К 3,7 мин.
Пример 11.
Пример процедуры: получение конъюгата 12 (аналогичным образом, с использованием подходящих исходных материалов/реагентов могут быть получены конъюгаты 3, 6, 11, 15, 16, 24, 25, 26, 27, 28, 33, 37 и 43)
где р=т, а т имеет значение, определенное выше для формулы I.
РНЕ-СА (11,4 г, 78,0 ммоль) растворяли в 20% растворе ДМФ в воде (114 мл). К перемешиваемой смеси при 23°С добавляли раствор соединения ВВ (1,02 г, 2,72 ммоль) в ДМФ (20 мл) и доводили рН до 5,9-6,0. Реакционную смесь охлаждали до 0°С при постоянном перемешивании, после чего добавляли ЕЭС (1,04 г, 5,44 ммоль) тремя порциями с интервалами 30 мин. После добавления последней порции ЕЭС перемешивание продолжали в течение 2,5-4,0 ч при 0°С. Доводили рН до 4,5-5,0 при помощи 1,0 Ν НС1 и фильтровали смесь через мембрану с размером отверстий 0,2 мкм и очищали путем гельхроматографии. Собирали фракции, содержащие желаемый продукт, и лиофилизировали полученный раствор с получением Конъюгата 12 в форме белого твердого вещества (12,6 г). 1Н-ЯМР показала, содержание ВВ 8,0% (мас./мас.).
- 55 020251
Пример 12.
Пример процедуры: получение конъюгата 4 (при использовании подходящих исходных материалов/реагентов, аналогичный образом могут быть получены конъюгаты 5, 10, 14 и 41)
Соединение КК (200 мг, 0,429 ммоль) растворяли в ТГФ (15 мл) и охлаждали до 0°С. Εΐ3Ν (0,119 мл, 0,857 ммоль) добавляли, а затем изобутил хлорформат (0,51 л, 0,386 ммоль) и перемешивали смесь 2 ч при 0°С. В отдельном сосуде ΡΗΤ (579 мг, 4,9 ммоль) растворяли в безводном пиридине. Объединяли два указанных раствора, перемешивали и нагревали до 23°С за 12 ч. Неочищенную реакционную смесь концентрировали в вакууме и разбавляли 100 мл воды. Смесь фильтровали через мембрану с размером отверстий 0,2 мкм и очищали путем гель-хроматографии. Собирали фракции, содержащие желаемые продукт, и лиофилизировали полученный раствор с получением конъюгата 4 в форме белого твердого вещества (550 мг). 1Н-ЯМР показала содержание 5,0% (мас./мас.) соединения КК.
Пример 13.
Синтез соединения ЬЬ:
К раствору фумагиллона (6,0 г, 21,4 ммоль) в безводном МеОН (150 мл) охлаждали до 0°С добавляли ацетат аммония (17,0 г, 214 ммоль) и цианоборогидрид натрия (2831 мг, 42,8 ммоль), в результате чего получили светло-желтый раствор, который перемешивали при 0°С. Через 1 ч 40 мин к реакционной смеси добавляли еще одну порцию цианоборогидрида натрия (500 мг, 7,56 ммоль). Перемешивание продолжали на протяжении в общей сложности 2,5 ч при 0°С, после чего нагревали до 25°С в течение 15 мин. После этого осуществляли разбавление ЕЮАс (100 мл) и концентрирование в вакууме для удаления МеОН, после чего добавляли еще ЕЮАс (100 мл) и промывали насыщенным водным раствором ХаΗСОз (50 мл). Водную фазу солили №С1 (раств.), а затем подвергали обратной экстракции с использованием ЕЮАс (3x70 мл). Объединенные органические экстракты сушили (Мд804), фильтровали и концентрировали под вакуумом с получением 6,153 г светло-желтого твердого вещества. К твердому веществу добавляли СЫ2С12 (130 мл) и охлаждали до 0°С, после чего добавляли хлорацетилизоцианат (3,60 мл, 42 ммоль) и получали желтый раствор, которому позволяли медленно нагреться до 25°С. После перемешивания на протяжении ночи реакционную смесь разбавляли насыщенным водным раствором ΝΗ^Ι (50 мл), интенсивно перемешивали в течение 10 мин, а затем разбавляли дополнительным количеством ЕЮАс (100 мл) и концентрировали под вакуумом, чтобы удалить СЫ2С12. Разделяли фазы, водную фазу солили №1С1 (р.), а затем подвергали обратной экстракции с использованием ЕЮАс (2x70 мл). Смешанные органические экстракты промывали солевым раствором (30 мл), сушили (Мд804), фильтровали и концентрировали под вакуумом с получением грязно-белого твердого вещества. Очистка путем хроматографии на силикагеле (120 г) с элюированием в градиенте ЕЮАс/гексан [0^30%, 7 мин; 30%, 7 мин; 30 ^50%, 7 мин; 50%, 10 мин; 50^ 100%, 5 мин; 100%, 3 мин] дала 4,17 г (49%) желаемого продукта в форме белого твердого вещества.
ЖХ/МС, метод В: т/ζ 282 [М-С=ОХΗС=ОСΗ2С1]+, Я 7,36 мин.
- 56 020251
Пример 14.
К раствору алкилхлорида (3810 мг, 9,50 ммоль) в безводном ДМФ (70 мл), охлажденному до 0°С, в инертной атмосфере добавляли основание Хунига (2,00 мл, 11,40 ммоль), а затем 4-аминотиофенол (1360 мг, 10,45 ммоль), в результате чего получали прозрачный желтый раствор. Перемешивали при 0°С в течение 1,5 ч, а затем при 25°С в течение 15 мин. Затем раствор разбавляли ЕЮАс (100 мл) и Н2О (70 мл), разделяли фазы и водную фазу экстрагировали ЕЮАс (2x100 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором (25 мл), сушили, фильтровали и концентрировали в вакууме с получением густого желтого масла. Очистка путем хроматографии на силикагеле (120 г) с элюированием в градиенте ЕЮАс/гексан [0^40%, 5 мин; 40%, 4 мин; 40^60%, 4 мин; 60%, 10 мин; 60^80%, 3 мин; 80%, 5 мин; 80-100%, 3 мин] дало 2,05 г (44%) соединения ММ.
ЖХ/МС, метод В: т/ζ 490 [М+Н]+, Κί 7,134 мин.
Пример 15.
Синтез соединения ΝΝ:
К раствору карбоновой кислоты (607 мг, 2,86 ммоль) в безводном ДМФ (13,0 мл), в инертной атмосфере добавляли диизопропилэтиламин (ΌΙΡΕΑ) (1,50 мл, 8,61 ммоль), а зззатем бензотриазол-1-ил-окситрис-(диметиламино)-фосфония гексафторфосфат (ВОР) (1,44 г, 3,12 ммоль). Полученный прозрачный раствор перемешивали при 25°С в течение 5 мин, затем охлаждали до 0°С, после чего добавляли фумагилламин (875 мг, 3,11 ммоль, который непосредственно перед этим готовили из фумагиллона и использовали без очистки) в ДМФ (3,0 мл), в результате чего получали желтый раствор. Раствор перемешивали при 0°С и оставляли медленно нагреваться до 25°С в течение ночи. Через 14 ч реакционную смесь разбавляли ЕЮАс и водой (по 25 мл каждого), разделяли фазы и водную фазу экстрагировали дополнительным количеством ЕЮАс (2x50 мл). Объединенные органические экстракты промывали водой (2x15 мл), насыщенным водным NаΗСОз и солевым раствором (по 15 мл каждого), сушили (Мд§О4), фильтровали и концентрировали под вакуумом с получением оранжево-желтого масла. Очистка путем хроматографии на силикагеле (40 г) с элюированием в градиенте ЕЮАс/гексан [0^30%, 5 мин; 30%, 4 мин; 30^50%, 4 мин; 50%, 5 мин; 50^80%, 3 мин] давала 924 мг (69%) соединения ΝΝ в форме светло-желтого масла.
ЖХ/МС, метод В: т/ζ 476 [М+Н]+, Я 9,85 мин.
Пример 16.
Синтез соединения ОО:
К раствору метилового эфира (1,2 г, 2,52 ммоль) в трет-бутаноле (16,0 мл) и воде (8,0 мл), охлажденному до 0°С, одной порцией добавляли ЫОН (215 мг, 5,12 ммоль), в результате чего получали суспензию. Через 30 мин реакционная смесь густела и становилась непрозрачной. Реакционной смеси позволяли медленно нагреться до 25°С в течение ночи. Через 22 ч реакцию гасили путем добавления 1,0 М №1Н8О4 (7,0 мл, 7,0 ммоль) до рН 4. Летучие вещества удаляли в вакууме, после чего получали несколько миллилитров непрозрачной жидкости, которую разбавляли водой (25 мл) и ЕЮАс (50 мл), разделяли фазы. Водную фазу подсаливали №1С1 (р.) и экстрагировали ЕЮАс (2x50 мл). Объединенные органические экстракты сушили (Мд§О4), фильтровали и концентрировали под вакуумом с получением 1,38 г соединения ОО в форме желтого масла. Очистка путем хроматографии на силикагеле (40 г) с элюирова
- 57 020251 нием в градиенте МеОН/СН2С12 [2%, 5 мин; 2^10%, 10 мин] давала 943 мг (81%) соединения ОО в форме белого твердого вещества.
ЖХ/МС, метод В: т/ζ 462 [М+Н]+, Я£ 7,76 мин.
Пример 17.
Синтез соединения РР:
К раствору карбоновой кислоты ОО (440 мг, 0,953 ммоль) в безводном ДМФ (4,0 мл) добавляли диизопропилэтиламин (500 мкл, 2,86 ммоль) и НАТи (448 мг, 1,144 ммоль) при 25°С в инертной атмосфере. Полученный желтый раствор перемешивали при 25°С в течение 10 мин, затем охлаждали до 0°С и добавляли 3-амино-1-пропанол (80 мкл, 1,050 ммоль), в результате чего раствор становился яркожелтым. Раствор перемешивали при 0°С в течение 10 мин, затем нагревали до 25°С и продолжали перемешивать. Через 2 ч реакционную смесь разбавляли ЕЮАс и Н2О (по 10 мл каждого), разделяли фазы и экстрагировали водную фазу ЕЮАс (2x20 мл). Объединенные органические экстракты сушили (Мд§О4), фильтровали и концентрировали под вакуумом с получением оранжевого масла. Очистка путем хроматографии на силикагеле (12 г) с элюированием в градиенте МеОН/ЕЮАс [0%, 1 мин; 0^5%, 1 мин; 5%, 3 мин; 5-10%, 10 мин], дала 411 мг (83%) желаемого продукта РР в форме желтого масла.
ЖХ/МС, метод В: т/ζ 519 [М+Н]+, Я£ 6,76 мин.
Пример 18.
К раствору спирта РР (404 мг, 0,779 ммоль) в СН2С12 (5,0 мл) добавляли аминокислоту Етос-ЭПролин (312 мг, 0,925 ммоль) одной порцией и ОМАР (27 мг, 0,221 ммоль), в результате чего получали прозрачный раствор. К полученному раствору добавляли ди-2-(пиридил)тиокарбонат (ЭРТС) (366 мг, 1,542 ммоль) и полученный оранжевый раствор перемешивали при 25°С в инертной атмосфере. Через 2 мин раствор приобретали глубокий красно-оранжевый цвет. Через 2,5 ч к реакционной смеси добавляли дополнительную порцию ЭРТС (50 мг, 0,211 ммоль). Через 5,5 ч реакционную смесь разбавляли ЕЮАс и Н2О (по 10 мл каждого), разделяли фазы, водную фазу экстрагировали ЕЮАс (2x20 мл). Объединенные органические экстракты промывали насыщенным водным NаΗСОз и солевым раствором (по 10 мл каждого), сушили, фильтровали и концентрировали под вакуумом с получением оранжево-коричневого масла. Очистка путем хроматографии на силикагеле (12 г) элюирование градиентом ЕЮАс/гексан [0^50%, 5 мин; 50%, 5 мин; 50 ^100%, 5 мин] давала 431 мг (67%) желаемого производного 00, защищенного Етос, в форме темно-желтого масла.
ЖХ/МС, метод В: т/ζ 838 [М+Н]+, Я£ 10,19 мин.
Етос-защищенный 00 (277 мг, 0,331 ммоль) растворяли в ДМФ (1,30 мл) и охлаждали раствор до 0°С. К перемешиваемому раствору добавляли пиперидин (0,330 мл, 3,34 ммоль) и перемешивали раствор при 0°С. Через 20 мин образовывался осадок. Через 4 ч отфильтровывали твердые вещества на керамическом фильтре, смывали метанолом и концентрировали фильтрат в вакууме с получением белого твердого вещества. Очистка путем хроматографии на силикагеле (4 г) с элюированием в градиенте МеОН/СН2С12+0,5% ЕΐзN [0^50%, 30 мин], давала 185 мг (91%) соединения 00 в форме желтого масла.
ЖХ/МС, метод В: т/ζ 616 [М+Н]+, Я£ 4,44 мин.
- 58 020251
Пример 19.
Пример процедуры: получение конъюгата 19 (с использованием подходящих исходных материалов/реагентов, аналогичный образом могут быть получены конъюгаты 1, 2, 7, 8, 9, 13, 11, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 30, 34, 35, 36, 39, 40, 42 и 44)
о о
ММ Коиъюгант 19 где р=т и имеет значение, определенное выше для формулы I.
К РНР-СА (7,30 г) добавляли воду (140 мл) и интенсивно перемешивали полученный раствор в течение 1 ч, в результате чего получали желтый раствор. Затем добавляли производное фумагиллина мМ (852 мг) в МеСЫ (8,3 мл) при 25°С. Добавляли дополнительную порцию МеСЫ (33,7 мл) и получали общий объем 42 мл. Раствор охлаждали до 0°С, после чего порциями добавляли БОС (475 мг) в течение 5 мин, после чего доводили рН реакционной смеси до 6,0. Через 30 мин нагревали раствор 25°С. Через 2 ч (200 мг) и 3 ч (100 мг) добавляли дополнительные порции ЕЭС. Через 4,5 ч реакционную смесь подкисляли 1,0 N НС1 до рН 5,0. Реакционную смесь водой разбавляли до объема ~300 мл, фильтровали через мембрану с размером отверстий 0,2 и очищали путем гель-хроматографии. Фракции, содержащие целевой продукт, объединяли и лиофилизировали с получением 6,6 г конъюгата 19 в форме белого твердого вещества. УФ-анализ (254 нм) показал содержание соединения ММ 9,8%.
Пример 20.
Ингибирование МЕТАР-2 основной структурой фумагиллина.
Пробы тестировали на способность ингибировать фермент Ме1АР-2 человека. Соединения добавляли к различным концентрациям фермента Ме!АР-2 человека (6 нм) в забуференной среде, содержащей 20 мМ Нерек, рН 7,4, 100 мМ КС1, 0,1 мМ Со(11), 10% глицерина, 5 мг/мл оксидазы Ь-аминокислот, 10 мг/мл пероксидазы, 10 мг/мл о-дианизидина и 2 мМ Ме!-8ег-А1а при 37°С. Через 10 мин начинали анкубирование реакционной смеси путем добавления субстрата Ме!-С1у-Рго-АМС до 2 мМ и измеряли высвобождение АМС на считывающем устройстве Иесаи Р1а!е (возбуждение на 345 нм, испускание на 445 нм). Параметры кинетики регистрировали в течение интервалов продолжительностью 30 с на протяжении 30 мин. В табл. 1 приведен список некоторых из исследованных конъюгатов и приблизительные значения для 1С50 для этих конъюгатов в тесте с ингибированием Ме!-АР2.
Таблица 1
Соединение или конъюгат 1С50
Соединение 8 <10 нм
Конъюгат 12 <1000 нм
Соединение 63 <10 нм
Соединение 39 <10 нм
Конъюгат 19 <50 нм
Соединение 65 <10 нм
Соединение 8 <10 нм
Конъюгат 15 <50 нм
Соединение 60 <10 нм
Соединение 61 <10 нм
Соединение 51 <10 нм
Конъюгат 24 <50 нм
Соединение 59 <10 нм
Соединение 58 <10 нм
ΤΝΡ-470* ** <10 нм
ΡΡΙ-2458 <10 нм
* Химическая структура ТЫР-470 ** Химическая структура РР1-2458
- 59 020251
ΡΡΙ-2458
ΤΝΡ-470
Пример 21.
Ингибирующее действие конъюгатов и аналогов фумагиллина на рост клеток.
Оценивали влияние конъюгатов аналогов фумагиллина и аналогов фумагиллина на рост клеток с использованием клеток эндотелия пупочной вены человека (НПУЕС).
Клетки 1П/УЕС добавляли в среду М199, дополненную 20% ФБР, после чего клетки инкубировали при 37°С в атмосфере, содержащей 5% С02. В 96-луночные планшеты засевали клетки в концентрации 5,000 клеток/лунку в общем объеме 100 мкл. Клетки оставляли на ночь для прикрепления к планшетам. Перед утилизацией клетки пересевали не более 15 раз.
Для оценки ингибирующего действия конъюгатов фумагиллина и конъюгатов аналогов фумагиллина на рост клеток НПУЕС, конъюгат или аналог фумагиллина растворяли в необходимом количестве 0.9% физиологического раствора, перемешивали в вихревом устройстве, чтобы обеспечить смачивание и диспергирования твердых частиц, после чего перемешивали в общей сложности 30 мин. 2х маточные растворы каждого конъюгата и аналога фумагиллина разводили до концентрация от 12 до 0,06 мкМ. К клеткам добавляли растворы конъюгата или аналога фумагиллина в различных концентрациях в диапазоне от 30 до 0,01 нм, и культивировали в течение 5 дней при 37°С.
Проводили колориметрический анализ для определения степени роста: в каждую лунку добавляли 20 мкл реагента МТ8/РЕ8, инкубировали в течение 4 ч при 37°С, после чего измеряли поглощение на 490 нм. В табл. 2 собраны результаты экспериментов с некоторыми конъюгатами и соединениями согласно настоящему изобретению и другими эталонными соединениями.
- 60 020251
Таблица 2 Ингибирующее действие конъюгатов и аналогов фумагиллина на рост клеток
Агент 1С50 (нМ)
Конъюгат 1 ηά
Конъюгат 2 ηά
Конъюгат 3 ηά
Конъюгат 4 <25
Конъюгат 5 ηά
Конъюгат 6 <25
Конъюгат 7 <25
Конъюгат 8 ηά
Конъюгат 9 ηά
Конъюгат 10 ηά
Конъюгат 11 <25
Конъюгат 12 25-100
Конъюгат 13 25-100
Конъюгат 14 ηά
Конъюгат 15 100-300
Конъюгат 16 >300
Конъюгат 17 ηά
Конъюгат 18 <25
Конъюгат 19 >300
Конъюгат 20 100-300
Конъюгат 21 ηά
Конъюгат 22 >300
Конъюгат 23 >300
Конъюгат 24 100-300
Конъюгат 25 25-100
Конъюгат 26 ηά
Конъюгат 27 ηά
Конъюгат 28 ηά
- 61 020251
Конъюгат 29 100-300
Конъюгат 30 >300
Конъюгат 31 <25
Конъюгат 32 <25
Конъюгат 33 >300
Конъюгат 34 >300
Соединение 1 <25
Соединение 2 <25
Соединение 3 <25
Соединение 4 >30
Соединение 5 <25
Соединение 6 <25
Соединение 7 <25
Соединение 8 <25
Соединение 9 <25
Соединение 10 <25
Соединение 11 <25
Соединение 12 <25
Соединение 13 >30
Соединение 14 <25
Соединение 15 >30
Соединение 16 >3 0
Соединение 17 <25
Соединение 18 <25
Соединение 19 <25
Соединение 20 <25
Соединение 21 <25
Соединение 22 <25
Соединение 23 <25
Соединение 24 <25
Соединение 25 >30
Соединение 26 <25
Соединение 27 <25
- 62 020251
Соединение 28 <25
Соединение 29 <25
Соединение 30 <25
Соединение 31 <25
Соединение 32 <25
Соединение 33 >30
Соединение 34 <25
Соединение 35 <25
Соединение 36 <25
Соединение 37 25-100
Соединение 38 25-100
Соединение 39 <25
Соединение 40 25-100
Соединение 41 100-300
Соединение 42 100-300
Соединение 43 <25
Соединение 44 <25
Соединение 45 <25
Соединение 46 <25
Соединение 47 <25
Соединение 48 <25
Соединение 49 100-300
Соединение 50 <25
Соединение 51 <25
Соединение 52 <25
Соединение 53 25-100
Соединение 54 <25
Соединение 55 <25
Соединение 56 <25
Соединение 57 <25
пб=не определено.
- 63 020251
Структуры конъюгатов можно найти в списке примеров конъюгатов формулы IV. Структуры соединений, указанных в табл. 2, приведены ниже.
Соединение №. Структура
1 О 0
2 н ф^Ъац^^ ο'Ύτό О 0
3 н Ф^Осщ^^ Η2ΝΤΛ'5Ά'Ύό О^ОСНз ° °
4 η°ύ^ι] ФФг^ О
5 : Л. Н| Η ϊ °сн3 ЧА^-ΝγΟ О
6 П| СН3 θ
7 фФф^ О
- 64 020251
8 0
9 'осн, СхНуО 0
10 ΑεΝ ν-Νγδ 0
11 н φΖ^ ρρ,Νγό
12 Η Η 4Αν^ΝγΟ СНз 0
13 ф^ЪснГ^^' 4Α^γθ 0
14 Η ФФт^ ^γν-νν с> осн3 ° 0
- 65 020251
15 η '''Υ'^'οοηΓ^ 1 0
16 н3соА° 0
17 Α0ΗΝΥΊ Η фФнГ^ 4Α\χΝγδ 0
18 н (ΑΥ ΑαΗΝ^ 0
19 °2Νγλΐ ф^ос»Г^' ЧхА-νη 0
20 0
21 0СН3 У'/У''''''^'''' -“Ά α Η,οο-θα<γ0 0
- 66 020251
22 ΕΙΟ'^^^ν'^Ι ''ОСНз к^-Νγό 0
23 /=η Н3со-\А ”
24 9 0у^А^^чАон 0
25 он
26 НиТ] ΆΝγΟ 0
27
28 н °Ύυ^ 0 0
29 Ж-- = ειο γ η н ''осн3 ЧА^-Ηγό 0
- 67 020251
30 н фФС ^3-γΝγ° 0 0
31 ? 1 ΛΊ Η Η τ Ьснз ώτΝ—3ΎΥ 0 0 0
32 осн3°<?ц ' 1 0 Γ~< ; 'ОСНз ΗΝ^4^δ 0
33 ΡιηοοΜΝ^ν^Α ^ϊ5 0
34 ^5^υΎ° 0 0
35 Η1 Η φφτ^ η,ν^ΑϊΎυ0 0 0
36 (НзС)^ 0
- 68 020251
37 ΗΜ'! ФФГ^~ О
38 “ААл». 0
39 Η2ΝΥΊ н Α·^ΝγΝΗ о о
40 ф^осн^ф^ он О
41 А—ауУ
42 А— ° О
43 НЙГ>У> 0СНз О
- 69 020251
44 %?н | 1 Т 'оси 0
45 ЧАз^н 0
46 °<?Н = I » Н3СО'уй|1 ТФСНз ЧА>Н О
47 X . Н3С Υ 'ОСН3 <-Ν·5.Νγ0 θ2 О
48 ηο'^^ν'^ΥΑι кАуЙН О
49 φ^ΟΟΗίφ^
50 о ЧХ^-Νγ-Ο О
- 70 020251
51 Я ίΎ Υ έ н
52 θ'”3 О Н О о
53 о
54 0 0
55 Ж Муб 0
56 = ΥχΝγό 0
57 н Ιι ί Υ АЭ о η2ν
Пример 22.
Ингибирующее действие конъюгатов фумагиллина на скорость роста опухоли в меланоме мышей В16Е10.
Самок мышей ΒΌΕ1 (Ν=6), которым под кожу на боку предварительно вводили 1х106 клеток опухоли В16Е10, обрабатывали различными конъюгатами фумагиллина согласно настоящему изобретению. Осуществляли мониторинг роста опухоли параллельно с положительным и отрицательным контролем, представленными циклофосфамидом и физиологическим раствором соответственно. Обработку начинали, когда опухоль достигала в среднем размера 80-120 мг, объемы опухоли измеряли дважды в неделю до тех пор, пока не была достигнута конечная точка, соответствующая размеру опухоли 2 г или 45 дней, в зависимости от того, что наступало раньше. Конъюгаты вводили внутривенно в форме растворов в дозировке 30-100 мг/кг (в расчете на эквиваленты аналога фумагиллина) в режиме с.|3б/4 (каждые 3 дня). Результаты обработки оценивали в терминах процентной задержки роста опухоли (%ΤΟΌ) (см. фиг. 1), которую определяли как процентное увеличение медианы времени до конечной точки для мышей, которым вводили исследуемый агент, по сравнению с мышами, которых обрабатывали физиологическим раствором.
Конъюгаты, представленные в табл. 3 и на фиг. 1, продемонстрировали задержку роста опухоли в диапазоне 5-20, 20-50 и >50%. Ряд конъюгатов фумагиллина значительно задерживали рост опухоли у мышей с опухолями В16Е10, что указывает на биологическую активность данных агентов в отношении меланомы мышей.
- 71 020251
Таблица 3
Ингибирующее действие конъюгатов фумагиллина на скорость роста опухоли в линии клеток меланомы мышей В16Р10
Конъюгат. мг/кг1 Путь Режим %тсэ
6 80 IV 43(1*4 5-20
7 80 IV 430*4 5-20
9 100 IV чза*4 20-50
10 60 IV 434*4 20-50
11 65 IV 434*4 20-50
12 80 IV дЗ<1х4 5-20
13 80 IV чза*4 5-20
15 80 IV дЗс!*4 >50
16 80 IV 434*4 20-50
18 80 IV 434*4 5-20
19 40 IV 43(1x4 20-50
22 30 IV ς34*4 5-20
23 80 IV 434*4 5-20
25 80 IV 434*4 20-50
26 60 IV 434*4 5-20
27 50 IV 434*4 5-20
31 80 IV 43(1*4 20-50
32 80 IV 43(1*4 20-50
33 65 IV 43(1*4 5-20
35 80 IV 434*4 20-50
38 80 IV чза*4 5-20
40 80 IV 43(3*4 20-50
44 80 IV д34*4 5-20
1 Диапазон доз - 30-100 мг/кг в экв. аналога фумагиллина, что соответствует 300 мг-1,2 г конъюгата.
Пример 23.
Ингибирующее действие конъюгатов фумагиллина на скорость роста опухоли в исследованиях с ксенографтом меланомы человека А2058.
Самок мышей ΗΡΕΝ (N=8), которым под кожу на боку предварительно вводили 1/107 клеток опухоли А2058, обрабатывали различными конъюгатами фумагиллина согласно настоящему изобретению. Осуществляли мониторинг роста опухоли параллельно с положительным и отрицательным контролем, представленными дакарбазином и физиологическим раствором соответственно. Обработку начинали, когда опухоль достигала в среднем размера 80-120 мг, объемы опухоли измеряли дважды в неделю до тех пор, пока не была достигнута конечная точка, соответствующая размеру опухоли 2 г или 45 дней, в зависимости от того, что наступало раньше. Конъюгаты вводили внутривенно в форме растворов в дозировке 10-60 мг/кг (в расчете на эквиваленты аналога фумагиллина) в режиме с.|4б/5 (каждые 4 дня). Результаты обработки оценивали в терминах процентной задержки роста опухоли (% ТОЙ), которую определяли как процентное увеличение медианы времени до конечной точки для мышей, которым вводили исследуемый агент, по сравнению с мышами, которых обрабатывали физиологическим раствором.
Как показано на фиг. 2, конъюгаты демонстрировали задержку роста опухоли в диапазоне 0-40%. Ряд конъюгатов фумагиллина значительно задерживали рост опухоли у мышей с опухолями А2058, что указывает на биологическую активность данных агентов в отношении меланомы А2058 у мышей.
Пример 24.
Ингибирующее действие конъюгатов фумагиллина на скорость роста опухоли в исследованиях с ксенографтом раковой опухоли предстательной железы человека РС3.
Самок мышей ΗΡΕΝ (Ν=8), которым под кожу на боку предварительно вводили фрагменты опухоли РС3 объемом 1 мм3, обрабатывали различными конъюгатами фумагиллина согласно настоящему изобретению. Осуществляли мониторинг роста опухоли параллельно с положительным и отрицательным контролем, представленными доцетакселом и физиологическим раствором соответственно. Обработку начинали, когда опухоль достигала в среднем размера 80-120 мг, объемы опухоли измеряли дважды в неделю до тех пор, пока не была достигнута конечная точка, соответствующая размеру опухоли 2 г или
- 72 020251 дней, в зависимости от того, что наступало раньше. Конъюгаты вводили внутривенно в форме растворов в дозировке 20-60 мг/кг (в расчете на эквиваленты аналога фумагиллина) в режиме с.|4бх5 (каждые 4 дня). Результаты обработки оценивали в терминах процентной задержки роста опухоли (%Τ6Ό) которую определяли как процентное увеличение медианы времени до конечной точки для мышей, которым вводили исследуемый агент, по сравнению с мышами, которых обрабатывали физиологическим раствором.
Конъюгаты, представленные на фиг. 3, демонстрировали задержку роста опухоли в диапазоне 20-50 процентов. Ряд конъюгатов фумагиллина значительно задерживали рост опухоли у мышей с раковыми опухолями предстательной железы РС3, что указывает на биологическую активность данных агентов в отношении опухоли предстательной железы человека РС3 у мышей.
Пример 25.
Влияние конъюгатов фумагиллина на уровень активности мышей, оцениваемый в тесте открытое поле.
Самок мышей С57В1/6 (Ν=8) содержали до достижения возраста 11 недель. Животным регулярно вводили конъюгаты фумагиллина или ΤΝΓ-470 и отслеживали уровень активности на участке открытое поле. Уровень активности оценивали в сравнении с физиологическим раствором (контроль). Конъюгаты вводили в форме растворов в дозировках 50-100 мг/кг (в расчете на эквиваленты аналога фумагиллина), и ΤΝΓ-470 вводили подкожно в дозировках 50-100 мг/кг. Введение осуществляли на протяжении четырех недель в режимах, варьирующихся от с.|2б (каждые 2 дня) до одного раза в неделю, уровни активности исследовали четыре раза на протяжении исследования: (1) перед введением соединения, (2) через неделю после введения, (3) через две недели после введения и (4) в последнюю неделю введения. Животных помещали на участок открытое поле на 10 мин в каждом тесте и отслеживали их активность, оцениваемую по длине перемещения, количеству пересеченных периферических квадратов, количеству пересеченных центральных квадратов и число вертикальных стоек.
Как показано на фиг. 4 и 5, у животных, которым вводили конъюгаты фумагиллина, наблюдали активность вертикальных стоек, близкую к активности вертикальных стоек у мышей, которым вводили физиологический раствор. У мышей, которым вводили ΤΝΓ-470, напротив, наблюдали, повышенную активность вертикальных стоек.
В модели нейроповедения открытое поле животные, которым вводили конъюгаты фумагиллина, вели себя аналогично животным, которым вводили физиологический раствор. Изменения активности, которые наблюдали в описанных выше моделях в случае использования ΤΝΓ-470, возможно, отвечают наблюдаемым в клинике побочным эффектам ΤΝΓ-470. Поскольку у животных, котором вводили конъюгаты фумагиллина, не наблюдали повышенной активность, связанной с вертикальными стойками, описанные результаты свидетельствуют о той повышенной неврологической безопасности конъюгатов фумагиллина по сравнению с их низкомолекулярными аналогами/предшественниками, такими как ΤΝΓ470.
Пример 26.
Конъюгаты аналогов фумагиллина: параметры фармакокинетики в спинно-мозговой жидкости и плазме.
Самцам крыс 8ргадие Эа\\'1еу (далее: 8Ό) вводили катетеры для независимого отбора плазмы и спинно-мозговой жидкости, и вводили конъюгаты фумагиллина или ΤΝΓ-470, при целевой дозе активного соединения 40 мг/кг (в расчете на эквиваленты аналога фумагиллина) и объеме 10 мл/кг. Пробы плазмы исследовали на содержание низкомолекулярных и конъюгированных соединений фумагиллина. В случае 470 измеряли и исходный ΤΝΓ-470 и его известный метаболит Μ-ΐν. Пробы спинно-мозговой жидкости исследовали только на содержание низкомолекулярных аналогов фумагиллина, т.е. аналогов фумагиллина, высвобождаемых из соответствующих конъюгатов. Анализ аналогов фумагиллина проводили после выделения из плазмы путем совместного осаждения с белками плазмы и последующего превращения в низкомолекулярные формы фумагиллина путем гидролиза в основании. Для детектирования фамагиллина в биологических жидкостях использовали тандемный анализ методом жидкостной хроматографии-масс-спектроскопии (ЖХ/МС/М8).
Ниже приведены данные для конъюгатов 12, 15, 19 и 24, а также ΤΝΓ-470. Протокол эксперимента вкратце описан в табл. 4, время взятия проб описано в табл. 5.
Таблица 4
Протокол
Груп- па Кол- ВО Режимы лечения
Агент Тип катетера мг/кг Путь Режим
1 3 без лечения Интрацистер- ниальный - IV(внутривенно) дс!х1
2 3 Конъюгат 12 Яремный 40 IV ςάχΙ
- 73 020251
3 4 Конъюгат 12 Интрацистерниальный 40‘ IV ςά*ι
4 4 Конъюгат 12 Интрацистерниальный 40' IV да* 1
2' 3 Конъюгат 15 Яремный 40 IV ηάχΐ
3' 4 Конъюгат 15 Интрацистерниальный 40 IV ηάχΐ
4' 4 Конъюгат 15 Интрацистерниальный 40 IV Я<1><1
2' ' 3 Конъюгат 19 Яремный 10 IV ςά*1
3 4 Конъюгат 19 Интрацистер- ниальный 10 IV ςά*Ι
4' ' 4 Конъюгат 19 Интрацистерниальный 10 IV ςά*1
2 г г > 3 Конъюгат 2 4 Яремный 40 IV 4<3*1
3' '' 4 Конъюгат 24 Интрацистерниальный 40 IV
4 ' 4 Конъюгат 24 Интрацистерниальный 40 IV
5 3 ΤΝΡ-470 Яремный 40 IV ЯСЙ1
6 4 ΤΝΡ-470 Интрацистерниальный 40 IV ςά*1
7 4 ΤΝΡ-470 Интрацистер- ниальный 40 IV 4ά*1
* В некоторых случаях дозу доводили до 10 мг/кг из-за вязкости, а объем увеличивали до 20 мл/кг.
Пробы для определения параметров фармакокинетики брали, как описано в табл. 5. Таблица 5
Время забора проб по группам и тканям
Время Плазма Спинномозговая жидкость
В любое время 01 01
5 минут 62, 62' , 02 , 62'
10 минут 05 63, 63', 63, 63', 66
1 час 02, 62', 02, 62',65
2 часа 02, 62', 62, 62',65 64, 04', 04, 04' , 67
4 часов 62, 62', 62, 62',65
6 часов 62, 02' , 62, 62'
8 часов 62, 62', 62, 62 ',05 63, 63', 63, 63', 66
10 часов 62, 62', 62, 02'
12 часов 02, 62', 62, 62'
24 часов 62, 62' , С2, 62' С4, 64', 04, 64', 67
Результаты данного эксперимента, описанного в примере 26, показаны в табл. 6 и 7 ниже.
- 74 020251
Таблица 6
Параметры фармакокинетики для конъюгатов и производных фумагиллина, высвобождаемых из конъюгатов #
Конъюгат/ Соединение Параметры фармакокинетики конъюгированного аналога фумагиллина Параметры фармакокинетики в плазма высвобожденного/свободного фумагиллина
= * н — сч · гЧ У 3 15 Е Η ч й е < ° £ ΟΙ · -0 — 4-> § ° Ί? У § 1 Е С\| 3 1 О ЕГ О 1ч О 24 < £ « — □ к 0) 2 О 1 ? о \ η и о 2 < —
Конъюгат 12 0,083 19,4 0,083 421 20,4 2,9 2,9 5,4
Конъюгат 15 0, 083 3,5 0, 083 20203 3,7 40, 5 40,5 41, 6
Конъюгат 19 0, 083 12,2 0, 083 1775 8, 1 1,8 1,8 2, 2
Конъюгат 24 0, 083 5, 0 0, 083 7067 5,3 17, 4 17,4 19, 1
ΤΝΡ-470 метаболит Μ-ιν п/а п/а 1 318 0, 6 0,4 0,4 0, 4
# (среднее, Ν=3). Данные выражены в эквивалентах аналога фумагиллина, нормированных на дозу 40 мг/кг в эквивалентах аналога фумагиллина.
Как показывают данные в табл. 6, конъюгаты фумагиллина обладают значительно более продолжительным временем полужизни, чем ΤΝΡ-470. В результате конъюгирования доставка аналога фумагиллина в плазму приобретает пролонгированные характер, что приводит к значительному увеличению времени экспозиции в плазме по сравнению с ΤΝΡ-470.
Таблица 7
Параметры фармакокинетики в спинно-мозговой жидкости
Вводимый конъюгат·/ соединение Накопление аналога фумагиллина ф спинномозговой жидкости
Τ (ч . > с „их (нг/мл) дис о-г (мкг/ч/мл) АПС 0-24 (мкг/ч/мл) Аис 0-24 (мкг/ч/мл) АОС 0-беск (мкг/ч/мл)
Конъюгат 12 2,0 26 п/а* п/а* п/а* п/а*
Конъюгат 15 0, 17 1084 п/а* п/а* п/а* п/а*
Конъюгат 19 0, 17 п/а* п/а* п/а* п/а* п/а*
Конъюгат 24 0, 17 128 1,10 1, 10 1,10 1,29
ΤΝΡ-470 метаболит МГУ 0, 17 1642 1,67 1,72 1,72 1,72
* Нижний предел измерения (НПИ) для аналогов фумагиллина составлял 5 нг/мл. В случаях, когда концентрации в различные моменты времени была ниже НПИ, Стах и/или АИС не могли быть рассчитаны.
## Данные соответствуют аналогу фумагиллина, высвобождаемого из соответствующего конъюгата; данные нормированы на вводимую дозу 40 мг/кг и выражены в эквивалентах аналога фумагиллина.
Как показывают данные в табл. 7, после введения 40 мг/кг крысам концентрации аналогов фумагиллина, измеренные в спинно-мозговой жидкости, были очень низкими: при этом значения Стах были ниже уровня, наблюдаемого для метаболита ΤΝΡ-470 Μίν. График уровней, наблюдаемых в спинномозговой жидкости, показан на фиг. 6.
Очень низкие уровни аналога фумагиллина, наблюдаемые в спинно-мозговой жидкости крыс после 5 введения соответствующего конъюгата, согласуются с предположением, что конъюгаты с полимерами не проникают через гематоэнцефалический барьер, что является причиной очень низких уровней (во многих случаях ниже НПИ) соответствующего аналога фумагиллина, регистрируемых в спинномозговой жидкости. Приведенные данные демонстрируют, что конъюгирование аналогов фумагиллина может обеспечить очень низкие уровни аналогов фумагиллина, проникающих в ЦНС, что соответствен- 75 020251 но приводит к снижению токсичности для ЦНС по сравнению с низкомолекулярным аналогом фумагиллина ΤΝΡ-470.
В настоящем описании приведены конкретные варианты осуществления настоящего изобретения, однако для специалиста в данной области будут очевидны различные изменения и модификации, которые можно внести, не выходя при этом за рамки идеи и объема настоящего изобретения. Соответственно, предполагается, что такие изменения и модификации охвачены формулой изобретения, определяющей его объем.

Claims (25)

  1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
    1. Конъюгат формулы I или его фармацевтически приемлемая соль [аналог фумагиллина] т-полиальдегидид
    I где аналог фумагиллина содержит основную структуру фумагиллина, которая ингибирует МеίАΡ-2; т представляет собой целое число от 1 до 40;
    полиальдегид имеет структуру где п представляет собой целое число от 1 до 3000;
    аналог фумагиллина напрямую или опосредованно присоединен к Я!, Я2, Я3, Кд, Я5 или Я6;
    один из Я! и Я2 представляет собой водород, а второй включает атом углерода, ковалентно связанный с С1, или в каждом случае Я! и Я2 включают атом углерода, ковалентно связанный с С1;
    Ях включает атом углерода, ковалентно связанный с С2 или атомом кислорода;
    в каждом случае Я3, Ед, Я5 и Я6 независимо представляют собой водород или включают атом углерода, ковалентно связанный с С2 или Ях.
  2. 2. Конъюгат по п.1 или его фармацевтически приемлемая соль, в котором основная структура фумагиллина имеет формулу А где С-7 и С-8 возможно имеют заместители;
    X представляет собой О, 8(=0)α, ΝΗ или возможно замещенный СН2;
    М представляет собой О или ς равен 0, 1 или 2;
    основная структура фумагиллина напрямую или опосредованно присоединена к полиальдегиду через X.
  3. 3. Конъюгат по п.1 или его фармацевтически приемлемая соль, в котором полиальдегид имеет структуру
  4. 4. Конъюгат соединения формулы II или его фармацевтически приемлемая соль
    - 76 020251 п
    где X представляет собой О, 8(=0),,, возможно замещенный СН2 или ЫН;
    Я представляет собой (28,3Я)-2-метил-3-(3-метилбут-2-енил)оксиран, 2-метилгепта-2,5-диен, (2Я,38)-2-изопентил-3-метилоксиран, 6-метилгепт-2-ен, (2)-ацетальдегид О-бензилоксим, С1-С6-алкил, С2-С6-алкенил, С1-С6-алкил=Ы-0-С1-С6-алкиларил, С(0)С1-С6-алкил, СЫ или галоген;
    М представляет собой О или '
    с.| равен 0, 1 или 2;
    при этом основная структура фумагиллина возможно содержит при С-7 и С-8 заместители, независимо выбранные из С1-С6-алкила, С2-С6-алкенила, С2-С6-алкинила, ОН, кетона или алкокси;
    —5' где представляет ковалентное присоединение X к свободному гидроксилу полиальдегида через спейсерный фрагмент формулы III —5—Т эфир---Линкер—?III где Тэфир имеет молекулярную массу от 0 до 1000 и ковалентно связан и с X в формуле II, и с Линкером;
    Линкер имеет молекулярную массу от 0 до 1000 и ковалентно связан и с Тэфиром, и со свободным гидроксилом в полиальдегиде;
    при этом спейсерный фрагмент в формуле III имеет молекулярную массу от 100 до 1000 и содержит одну или более лабильных связей, способных к химическому или ферментативному расщеплению, полиальдегид имеет структуру где η представляет собой целое число от 1 до 3000;
    спейсерный фрагмент в формуле III напрямую или опосредованно присоединен к Яь Я2, Я3, Я4, Я5 или Я·,;
    один из Я! и Я2 представляет собой водород, а второй включает атом углерода, ковалентно связанный с С1, или в каждом случае Я1 и Я2 включают атом углерода, ковалентно связанный с С1;
    Ях включает атом углерода, ковалентно связанный с С2 или атомом кислорода;
    в каждом случае Я3, Я4, Я5 и Я6 независимо представляют собой водород или включают атом углерода, ковалентно связанный с С2 или Ях.
  5. 5. Конъюгат по п.4 или его фармацевтически приемлемая соль, в котором Я представляет собой (28,3Я)-2-метил-3-(3-метилбут-2-енил)оксиранил.
  6. 6. Конъюгат по п.4 или его фармацевтически приемлемая соль, в котором Линкер представляет собой
    - 77 020251
    Ь представляет собой связь, возможно замещенный -СН2-, -СН(ОН)-, -ИН-, -О-, -8-, -8О-, -8О2-, -С(СН3)2-, -СНО- или -СОСН2-;
    пунктирная линия между атомами углерода в положениях а и Ь представляет углерод-углеродную связь или углерод-углеродную двойную связь;
    углеродные атомы, соседние с Ь, каждый, возможно имеют заместители.
  7. 7. Конъюгат по п.б или его фармацевтически приемлемая соль, в котором Ь представляет собой -СН2- или -О-.
  8. 8. Конъюгат по п.5 или его фармацевтически приемлемая соль, в котором полиальдегид имеет структуру
  9. 9. Конъюгат формулы IV или его фармацевтически приемлемая соль х—νν—О-Υ—Ζ
    IV где X представляет собой О, 8(=О),|, возможно замещенный СН2 или ЧН;
    с.| равен 0, 1 или 2;
    К представляет собой (28,3К)-2-метил-3-(3-метилбут-2-енил)оксиран, 2-метилгепта-2,5-диен, (2К,38)-2-изопентил-3-метилоксиран, б-метилгепт-2-ен, (^)-ацетальдегид О-бензилоксим, С1-Сб-алкил, С2-Сб-алкенил, С1-С6-алкил=N-О-С1-С6-алкиларил, С(О)С1-Сб-алкил, СN или галоген;
    отсутствует либо представляет собой связь, -С(О)-, -С1-Сб-алкил-, -С2-Сб-алкенил-, -С2-Сбалкинил-, -С1-Сб-алкокси-, -арил-, -гетероарил-, -циклоалкил-, -С(О)бициклоалкил-С(О)-, -8О2бициклоалкил-, -гетероциклоалкил-, -гетеробициклоалкил-, -С(О)С1-Сб-алкилгетероарил-О-, -С(О)-С1-Сбалкениларил-О-ИЮ-Сб-алкил)2-, -С(О)-гетероциклоалкил-С1 -Сб-алкил-О-, -С(О)-гетероциклоалкил-С1 Сб-алкил-СОО-, -С(О)-гетеробициклоалкил-С1 -Сб-алкил-СОО-, -С(О)-гетеробициклоалкил-С1 -Сб-алкилС(О)-, -СХО)ХН(СУС>,-алкил)гет'ероарил(О)-, -ЦО^НЮ-С^алкилЦрил^)-, -С(О)С1-Сб-алкиларил-, -ХНС(О)С| -Сб-алкиларил-, -С(О)С1 -Сб-алкениларил-О-МН(С1 -Сб-алкил)-, -С^МНЮ -Сбалкил)циклоалкил-СОО-, -С(О)циклоалкил-С1-Сб-алкил-NΗ-, -ННС(О)С1-Сб-алкил-, -NΗС(О)NΗС1-Сбалкил-, -8О2NΗ-, -8О2NΗС1-Сб-алкил-, -8О2Н(С1-Сб-алкил)2-, -NΗ8О2С1-Сб-алкил-, -СО2С1-Сб-алкил-, -СОХНС/ -Сб-алкил-, -ΟΘΝ(Οι -Сб-алкил)-, -С1 -Сб-алкиларил-О-С1 -Сб-алкил-Н(С1 -Сб-алкил)2-,
    -С^ЯНЦО^ -Сб-алкил-8С0-Сб-алкиларил-, -С1 -Сб-алкил-NΗ-8О2-гетероцикло-С1 -Сб-алкил-О-,
    -С^ЯНЦО^ -Сб-алкил-8С0-Сб-алкил-NΗ-, -С^ХН-С! -Сб-алкиларил-, -С(О)гетероциклоалкил-, -С(О)-С1-Сб-алкил-8-арил-, -С(О)гетеробициклоалкил-, -СО-НН-СО-СгСгалкил- или -С(О)-NΗ-С(О)С0-Сб-алкил-8-арил, где гетероцикло относится к кольцевой системе по меньшей мере с одним гетероатомом, гетероциклоалкил относится к насыщенной системе углеводного кольца по меньшей мере с одним гетероатомом, где гетеробициклоалкил относится к системе из двух насыщенных углеводных колец, имеющих пару общих мостиковых атомов углерода по меньшей мере с одним гетероатом, и где гетероатом относится к кислороду, сере и азоту;
    0 отсутствует или представляет собой -ΝΜ-, -аминокислоту-, -КН-аминокислоту-, -(С1-Сб-алкилСОО)-, -(ООСС1-Сб-алкил-СОО)-, -(С1-Сб-алкил-О-аминокислоту)- или -(С1-Сб-алкил-О)-;
    Υ отсутствует или представляет собой щавелевую, малоновую, янтарную, глутаровую, адипиновую, пимелиновую, субериновую, азелаиновую, себациновую, фталевую, изофталевую, терефталевую, дигли
    - 78 020251 колевую кислоты, фрагмент оксаглютаровой, тартаровой, глютаминовой, фумаровой или аспарагиновой кислот;
    Ζ представляет собой полиальдегид структуры
    Βι В3 Кэ 1 к ί 1 I 11 г? η
    В2 ^4 Ёб или Р2 Рд где п представляет собой целое число от 1 до 3000;
    X, О или Υ связаны с Я1, Я2, Я3, Яд, Я5 или Я6;
    один из Я1 и Я2 представляет собой водород, а второй включает атом углерода, ковалентно связанный с С1, или каждый из Я1 и Я2 включает атом углерода, ковалентно связанный с С1;
    Ях включает атом углерода, ковалентно связанный с С2 или атомом кислорода;
    каждый из Я3, Я4, Я5 и Я6 независимо представляет собой водород или включает атом углерода, ковалентно связанный с С2 или Ях.
  10. 10. Конъюгат по пп.3, 8 или 9 или его фармацевтически приемлемая соль, в котором полиальдегид представляет собой конъюгированный продукт.
  11. 11. Конъюгат по п.9 или его фармацевтически приемлемая соль, в котором полиальдегид представляет собой конъюгированный продукт и X представляет собой О или ΝΗ; Υ представляет собой -ОДСВДВДС-, -С^^С^^СЩО^- или -^0)^2^2^(0)^ Я представляет собой (28,3Я)-2-метил-3-(3-метилбут-2-енил)оксиранил; О представляет собой ΝΗ; представляет собой -С(О)NΗ-С1-С6-алкиларил- или -С(О)-NΗ-С(О)-С0-С6-алкил-8-арил-.
  12. 12. Конъюгат по п.11 или его фармацевтически приемлемая соль, в котором X представляет собой О; Υ представляет собой -^0)0Η^Η20Η2(0)^; Я представляет собой (28,3Я)-2-метил-3-(3-метилбут-2енил)оксиранил; О представляет собой ΝΗ и представляет собой -С(О)NΗ-С1-С6-алкиларил-.
  13. 13. Конъюгат аналога фумагиллина, имеющий структуру конъюгированный с ΡΗΕ-СА, где ΡΗΕ-СА является полиальдегидом, который представляет конъюгированный продукт поли(1-гидроксиметилэтилен гидроксиметил-формаля), конъюгированного с глутаровой кислотой, а также его фармацевтически приемлемая соль.
  14. 14. Конъюгат по п.10 или его фармацевтически приемлемая соль, в котором конъюгированный продукт представляет собой поли(1-гидроксиметилэтилен гидроксиметил-формаль), конъюгированный с глутаровой кислотой.
  15. 15. Конъюгат или его фармацевтически приемлемая соль по п.13 или 14, в котором ΡΗΕ имеет молекулярную массу от 40 до 100 кДа, предпочтительно 70 кДа.
  16. 16. Фармацевтическая композиция, содержащая конъюгат или фармацевтически приемлемую соль конъюгата по любому из пп.1, 4, 9 или 13 и фармацевтически приемлемый носитель, где фармацевтически приемлемый носитель пригоден для введения путем инъекции, и композиция включена в инъецируемую лекарственную форму.
  17. 17. Фармацевтическая композиция по п.16, дополнительно содержащая один или несколько буферов, где буфер представляет собой лимонную кислоту, муравьиную кислоту или ΗΕΡΕ8, дополнительно содержащая наполнитель, где наполнитель представляет собой сорбитол или маннитол, и дополнительно содержащая поверхностно-активное вещество, где поверхностно-активное вещество представляет собой полисорбат, гидроксипропил-в-циклодекстрин или полоксамер.
  18. 18. Фармацевтическая композиция по п.16 или 17, которая представляет собой сухой лиофилизированный порошок или безводный концентрат.
  19. 19. Способ получения конъюгата по п.13, включающий:
    a) растворение поли(1-гидроксиметилэтилен гидроксиметил-формаля), конъюгированного с глутаровой кислотой (ΡΗΕ-СА), в растворе диметилформамида (ДМФ) в воде;
    b) добавление к раствору, полученному на стадии а), соединения, имеющего структуру
    - 79 020251
    с) охлаждение раствора, полученного на стадии Ь), и добавление раствора 1-этил-3-(3диметиламинопропил)карбодиимид гидрохлорида (ЕЭС);
    б) очистку конъюгата.
  20. 20. Способ по п.19, в котором на стадии Ь) рН доводят до 5,9-6,0 с последующим добавлением указанного соединения.
  21. 21. Способ по п.19, в котором на стадии с) охлаждение осуществляют при 0°С, и раствор на стадии с) перемешивают в течение 2,5-4,0 ч.
  22. 22. Применение конъюгата по любому из пп.1-15 для лечения рака, выбранного из группы, состоящей из рака анального канала, астроцитомы, лейкемии, лимфомы, рака головы и шеи, рака печени, рака яичек, рака шейки матки, саркомы, гемангиомы, рака пищевода, рака глаза, рака гортани, рака ротовой полости, мезотелиомы, рака кожи, миеломы, рака прямой кишки, рака горла, рака мочевого пузыря, рака молочной железы, рака матки, рака яичника, рака простаты, рака легкого, рака толстого кишечника, рака поджелудочной железы, рака почки и рака желудка.
  23. 23. Применение фармацевтической композиции по любому из пп.16-18 для лечения рака, выбранного из группы, состоящей из рака анального канала, астроцитомы, лейкемии, лимфомы, рака головы и шеи, рака печени, рака яичек, рака шейки матки, саркомы, гемангиомы, рака пищевода, рака глаза, рака гортани, рака ротовой полости, мезотелиомы, рака кожи, миеломы, рака ротовой полости, рака прямой кишки, рака горла, рака мочевого пузыря, рака молочной железы, рака матки, рака яичника, рака простаты, рака легкого, рака толстого кишечника, рака поджелудочной железы, рака почки и рака желудка.
  24. 24. Применение конъюгата по любому из пп.1-15 для лечения ангиогенного заболевания.
  25. 25. Применение фармацевтической композиции по любому из пп.16-18 для лечения ангиогенного заболевания.
EA201070657A 2007-11-28 2008-11-24 Биосовместимые и биоразлагаемые конъюгаты аналогов фумагиллина EA020251B1 (ru)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US458207P 2007-11-28 2007-11-28
PCT/US2008/084539 WO2009073445A2 (en) 2007-11-28 2008-11-24 Biocompatible biodegradable fumagillin analog conjugates

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA201070657A1 EA201070657A1 (ru) 2010-12-30
EA020251B1 true EA020251B1 (ru) 2014-09-30

Family

ID=40600044

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA201070657A EA020251B1 (ru) 2007-11-28 2008-11-24 Биосовместимые и биоразлагаемые конъюгаты аналогов фумагиллина

Country Status (13)

Country Link
US (2) US8399512B2 (ru)
EP (1) EP2217283A2 (ru)
JP (1) JP5557746B2 (ru)
CN (1) CN101990441A (ru)
AU (1) AU2008331516B2 (ru)
BR (1) BRPI0820229A2 (ru)
CA (1) CA2706914A1 (ru)
EA (1) EA020251B1 (ru)
IL (1) IL206057A0 (ru)
MX (1) MX2010005857A (ru)
NZ (2) NZ600039A (ru)
WO (1) WO2009073445A2 (ru)
ZA (1) ZA201003819B (ru)

Families Citing this family (84)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
ES2365918T3 (es) 2003-09-05 2011-10-13 The General Hospital Corporation Conjugados de poliacetal-fármaco como sistema de liberación.
AU2008331516B2 (en) 2007-11-28 2014-01-09 Mersana Therapeutics, Inc. Biocompatible biodegradable fumagillin analog conjugates
US8865746B2 (en) * 2008-07-18 2014-10-21 Zafgen, Inc. Methods of treating an overweight or obese subject
WO2010065877A2 (en) 2008-12-04 2010-06-10 Zafgen Corporation Methods of treating an overweight or obese subject
US8642650B2 (en) 2008-12-04 2014-02-04 Zafgen, Inc. Methods of treating an overweight or obese subject
US8491880B2 (en) * 2008-12-10 2013-07-23 Mersana Therapeutics, Inc. Pharmaceutical formulations of biodegradable biocompatible camptothecin-polymer conjugates
KR20120057588A (ko) * 2009-05-28 2012-06-05 메르사나 테라퓨틱스, 인코포레이티드 가변 속도 방출 링커를 포함하는 폴리알 약물 접합체
MX337575B (es) 2009-10-09 2016-03-10 Zafgen Corp Compuestos de sulfona y métodos para lafabricación y uso de éstos.
BR112012016793A2 (pt) 2010-01-08 2018-07-31 Zafgen Corp compostos tipo fumagilol e métodos de fazer e usar os mesmos
WO2011085198A1 (en) 2010-01-08 2011-07-14 Zafgen Corporation Metap-2 inhibitor for use in treating benign prostatic hypertrophy (bph)
WO2011120053A1 (en) 2010-03-26 2011-09-29 Mersana Therapeutics, Inc. Modified polymers for delivery of polynucleotides, method of manufacture, and methods of use thereof
WO2011127304A2 (en) 2010-04-07 2011-10-13 Zafgen Corporation Methods of treating an overweight subject
US9895449B2 (en) 2010-05-25 2018-02-20 Syndevrx, Inc. Polymer-conjugated MetAP2 inhibitors, and therapeutic methods of use thereof
CN107158398B (zh) 2010-05-25 2022-02-18 辛德弗雷克斯公司 聚合物缀合的MetAP2抑制剂及其应用的治疗方法
BR112013001613A2 (pt) 2010-07-22 2016-05-24 Zafgen Inc compostos tricíclicos e métodos para fazer e usar os mesmos.
EP2638023B1 (en) 2010-11-09 2016-09-07 Zafgen, Inc. Crystalline solids of a metap-2 inhibitor and methods of making and using same
CN103379905A (zh) 2010-11-29 2013-10-30 扎夫根股份有限公司 使用非每天施用的6-0-(4-二甲基氨基乙氧基)肉桂酰烟曲霉醇治疗肥胖症
US9321740B2 (en) 2011-01-26 2016-04-26 Zafgen, Inc. Tetrazole compounds and methods of making and using same
KR101875988B1 (ko) 2011-03-08 2018-07-06 자프겐 인크. 옥사스피로[2.5]옥탄 유도체 및 유사체
CA2835195A1 (en) 2011-05-06 2012-11-15 Zafgen, Inc. Tricyclic sulfonamide compounds and methods of making and using same
JP6035327B2 (ja) 2011-05-06 2016-11-30 ザフゲン，インコーポレイテッド 三環式ピラゾールスルホンアミド化合物ならびにその製造および使用方法
EA025526B1 (ru) 2011-05-06 2017-01-30 Зафджен Инк. Частично насыщенные трициклические соединения и способы их получения и применения
US8815226B2 (en) 2011-06-10 2014-08-26 Mersana Therapeutics, Inc. Protein-polymer-drug conjugates
KR101972303B1 (ko) 2011-06-10 2019-04-25 메르사나 테라퓨틱스, 인코포레이티드 단백질-중합체-약물 접합체
EP2763671A2 (en) 2011-10-03 2014-08-13 Zafgen, Inc. Methods of treating age related disorders
WO2013067055A1 (en) 2011-11-01 2013-05-10 Bionomics, Inc. Methods of blocking cancer stem cell growth
UY34542A (es) * 2011-12-23 2013-07-31 Mersana Therapeutics Inc ?formulaciones farmacéuticas para conjugados de derivados de fumagilina y phf?.
KR20140112565A (ko) 2012-01-18 2014-09-23 자프겐 인크. 삼환식 설폰아마이드 화합물 그리고 그의 제조방법 및 그를 이용하는 방법
JP2015509102A (ja) 2012-01-18 2015-03-26 ザフゲン，インコーポレイテッド 三環式スルホン化合物並びにその作製および使用方法
BR112014027808A2 (pt) 2012-05-07 2017-06-27 Zafgen Inc sal polimórfico do sal de oxalato de 6-o-(4-dimetilaminoetoxi) cinaroil fumagilol e métodos de produção e utilização do mesmo
MX2014013599A (es) 2012-05-08 2015-05-11 Zafgen Inc Tratamiento de la obesidad hipotalamica con inhibidores de metap2.
CN104364251B (zh) 2012-05-09 2017-02-22 扎夫根股份有限公司 烟曲霉醇型化合物及其制备和使用方法
BR112015010223A2 (pt) 2012-11-05 2017-07-11 Zafgen Inc compostos tricíclicos para o uso no tratamento e/ou controle de obesidade
KR20150079952A (ko) 2012-11-05 2015-07-08 자프겐 인크. 트리시클릭 화합물 및 그의 제조 및 사용 방법
EP2916833A1 (en) 2012-11-05 2015-09-16 Zafgen, Inc. Methods of treating liver diseases
WO2014152861A2 (en) 2013-03-14 2014-09-25 Zafgen, Inc. Methods of treating renal disease and other disorders
MX371095B (es) 2013-04-10 2020-01-16 Syndevrx Inc Inhibidores de metionina aminopeptidasa-2 y metodos de tratamiento de la obesidad.
AU2014331714B2 (en) 2013-10-11 2019-05-02 Mersana Therapeutics, Inc. Protein-polymer-drug conjugates
CN115068626A (zh) 2013-10-11 2022-09-20 阿萨纳生物科技有限责任公司 蛋白-聚合物-药物缀合物
JP6493868B2 (ja) * 2014-09-24 2019-04-03 日東電工株式会社 ジグリコールアミド酸型配位子を有するビニルモノマー
WO2016070089A2 (en) 2014-10-31 2016-05-06 Abbvie Biotherapeutics Inc. Anti-cs1 antibodies and antibody drug conjugates
JP2018508463A (ja) 2014-12-09 2018-03-29 アッヴィ・インコーポレイテッド 低細胞透過性を有するＢｃｌ−ｘＬ阻害性化合物およびこれを含む抗体薬物コンジュゲート
CN107249643A (zh) 2014-12-09 2017-10-13 艾伯维公司 具有细胞渗透性的bcl‑xl抑制剂的抗体药物缀合物
TW201636342A (zh) 2014-12-19 2016-10-16 武田藥品工業有限公司 煙黴醇衍生物
AR105671A1 (es) * 2015-08-11 2017-10-25 Zafgen Inc Compuestos heterocíclicos de fumagillol y sus métodos de elaboración y uso
CN106432255A (zh) 2015-08-11 2017-02-22 扎夫根公司 烟曲霉素醇螺环化合物和制备和使用其的方法
US10195209B2 (en) 2015-11-30 2019-02-05 Abbvie Inc. Anti-huLRRC15 antibody drug conjugates and methods for their use
EP3383909B1 (en) 2015-11-30 2020-06-17 AbbVie Inc. Anti-human lrrc15 antibody drug conjugates and methods for their use
ES2893749T3 (es) 2015-12-10 2022-02-10 Syndevrx Inc Derivados de fumagilol y polimorfos de los mismos
CA3008960A1 (en) 2016-01-11 2017-07-20 Syndevrx, Inc. Treatment for tumors driven by metabolic dysfunction
WO2017161414A1 (en) 2016-03-22 2017-09-28 Bionomics Limited Administration of an anti-lgr5 monoclonal antibody
CN109562189B (zh) 2016-05-17 2021-12-31 艾伯维生物制药股份有限公司 抗cMet抗体药物偶联物及其使用方法
BR112018075649A2 (pt) 2016-06-08 2019-04-09 Abbvie Inc. anticorpos anti-b7-h3 e conjugados de fármaco de anticorpo
WO2017214462A2 (en) 2016-06-08 2017-12-14 Abbvie Inc. Anti-cd98 antibodies and antibody drug conjugates
IL300274A (en) 2016-06-08 2023-04-01 Abbvie Inc Antibodies against B7–H3 and conjugates of drug and antibody
MX2018015280A (es) 2016-06-08 2019-08-12 Abbvie Inc Conjugados de anticuerpo y farmaco anti-egfr.
MX2018015274A (es) 2016-06-08 2019-10-07 Abbvie Inc Anticuerpos anti-cd98 y conjugados de anticuerpo y farmaco.
MX2018015277A (es) 2016-06-08 2019-09-06 Abbvie Inc Anticuerpos anti-b7-h3 y conjugados de anticuerpo y farmaco.
TW202320860A (zh) 2016-06-08 2023-06-01 美商艾伯維有限公司 抗egfr抗體藥物結合物
EP3468599A2 (en) 2016-06-08 2019-04-17 AbbVie Inc. Anti-cd98 antibodies and antibody drug conjugates
US20190153107A1 (en) 2016-06-08 2019-05-23 Abbvie Inc. Anti-egfr antibody drug conjugates
US20190169181A1 (en) * 2016-08-11 2019-06-06 Zafgen, Inc. Fumagillol compounds and methods of making and using same
AU2017345454A1 (en) 2016-10-19 2019-05-30 Invenra Inc. Antibody constructs
WO2018115485A1 (en) 2016-12-22 2018-06-28 Pierfrancesco Tassone A monoclonal antibody targeting a unique sialoglycosilated cancer-associated epitope of cd43
CN106831662B (zh) * 2016-12-29 2018-12-18 中国农业科学院蜜蜂研究所 一种胺基多元醇代烟曲霉素及其合成方法与应用
JP7320458B2 (ja) 2017-06-22 2023-08-03 メルサナ セラピューティクス インコーポレイテッド 薬物担持ポリマースキャフォールドおよびタンパク質－ポリマー－薬物コンジュゲートを製造する方法
WO2019118612A1 (en) * 2017-12-12 2019-06-20 Zafgen, Inc. Targeting compounds
WO2019229701A2 (en) 2018-06-01 2019-12-05 Novartis Ag Binding molecules against bcma and uses thereof
CN113227127A (zh) 2018-06-05 2021-08-06 伦敦大学国王学院 向胃肠系统递送酬载的btnl3/8导引构建体
US11612577B2 (en) 2018-10-26 2023-03-28 Syndevrx, Inc. Biomarkers of METAP2 inhibitors and applications thereof
MX2021014164A (es) 2019-05-21 2022-01-04 Novartis Ag Moleculas de union a cd19 y usos de las mismas.
WO2020236797A1 (en) 2019-05-21 2020-11-26 Novartis Ag Variant cd58 domains and uses thereof
BR112022002067A2 (pt) 2019-08-08 2022-06-14 Regeneron Pharma Formatos de molécula de ligação ao antígeno
EP4054646A1 (en) 2019-11-05 2022-09-14 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. N-terminal scfv multispecific binding molecules
AU2021205893A1 (en) 2020-01-08 2022-06-23 Synthis Therapeutics, Inc. ALK5 inhibitor conjugates and uses thereof
WO2021178896A1 (en) 2020-03-06 2021-09-10 Go Therapeutics, Inc. Anti-glyco-cd44 antibodies and their uses
US20230128499A1 (en) 2020-03-27 2023-04-27 Novartis Ag Bispecific combination therapy for treating proliferative diseases and autoimmune diseases
UY39610A (es) 2021-01-20 2022-08-31 Abbvie Inc Conjugados anticuerpo-fármaco anti-egfr
WO2022187591A1 (en) 2021-03-05 2022-09-09 Go Therapeutics, Inc. Anti-glyco-cd44 antibodies and their uses
CA3228178A1 (en) 2021-08-05 2023-02-09 Go Therapeutics, Inc. Anti-glyco-muc4 antibodies and their uses
KR20240109604A (ko) 2021-09-03 2024-07-11 고 테라퓨틱스, 인크. 항-글리코-cMET 항체 및 그의 용도
CA3230933A1 (en) 2021-09-03 2023-03-09 Go Therapeutics, Inc. Anti-glyco-lamp1 antibodies and their uses
AU2023220104A1 (en) * 2022-02-16 2024-08-08 Yissum Research Development Company Of The Hebrew University Of Jerusalem Ltd. Metap2 inhibitors and uses thereof
US20240247069A1 (en) 2023-01-13 2024-07-25 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Fgfr3 binding molecules and methods of use thereof

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5290807A (en) * 1989-08-10 1994-03-01 Children's Medical Center Corporation Method for regressing angiogenesis using o-substituted fumagillol derivatives
WO2003086382A1 (en) * 2002-04-11 2003-10-23 Children's Medical Center Corporation Tnp-470 polymer conjugates and use thereof
US20040105840A1 (en) * 2002-07-19 2004-06-03 Kinstler Olaf B. Protein conjugates with a water-soluble biocompatible, biodegradable polymer
WO2005023294A2 (en) * 2003-09-05 2005-03-17 The General Hospital Corporation Polyacetal drug conjugates as release system

Family Cites Families (36)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US2803586A (en) 1953-06-29 1957-08-20 Abbott Lab ph control in production of fumagillin
US5164410A (en) 1988-01-09 1992-11-17 Takeda Chemical Industries, Ltd. Fumagillol derivatives and pharmaceutical compositions thereof
PH26256A (en) 1988-08-12 1992-04-01 Fujisawa Pharmaceutical Co Oxaspiro [2,5] octane derivative
DE68927904T2 (de) 1988-09-01 1997-09-04 Takeda Chemical Industries Ltd Fumagillol-Derivate
US5180738A (en) 1988-09-01 1993-01-19 Takeda Chemical Industries Fumagillol derivatives and pharmaceutical compositions thereof
JP2858724B2 (ja) * 1988-09-01 1999-02-17 武田薬品工業株式会社 血管新生阻害剤
US6017954A (en) 1989-08-10 2000-01-25 Children's Medical Center Corp. Method of treating tumors using O-substituted fumagillol derivatives
EP0415294A3 (en) 1989-08-31 1991-06-12 Takeda Chemical Industries, Ltd. Cyclohexanol derivatives, production and use thereof
DE69311278T2 (de) 1992-12-16 1997-10-30 Takeda Chemical Industries Ltd Stabile pharmazeutische Zubereitung mit Fumagillolderivaten
KR100286920B1 (ko) 1995-03-27 2001-04-16 디. 꼬쉬 장감염에 대한 약물제조용 푸마길올 및 그의 유도체의 용도
US5811510A (en) 1995-04-14 1998-09-22 General Hospital Corporation Biodegradable polyacetal polymers and methods for their formation and use
US6207704B1 (en) 1997-06-09 2001-03-27 Massachusetts Institute Of Technology Type 2 methionine aminopeptidase [MetAP2] inhibitors and uses thereof
WO1999061432A1 (en) 1998-05-12 1999-12-02 Biochem Pharma Inc. Fumagillin analogs and their use as angiogenesis inhibitors
KR100357542B1 (ko) 1998-05-15 2002-10-18 주식회사종근당 푸마질롤 유도체 및 그 제조방법
KR100357541B1 (ko) 1998-05-15 2002-10-18 주식회사종근당 5-데메톡시 푸마질롤 유도체 및 그 제조방법
US6603812B1 (en) 1998-08-17 2003-08-05 Linear Technology Corporation Hardware implementation of a decimating finite impulse response filter
WO2000018232A1 (en) 1998-10-01 2000-04-06 Children's Medical Center Corporation Method of treatment of cardiovascular injuries
AU2811400A (en) 1999-02-26 2000-09-14 Sanofi-Synthelabo Stable formulation containing fumagillin
HUP9901943A2 (hu) 1999-06-11 2001-12-28 Sanofi-Synthelabo Eljárás fumagillin előállítására
US8106098B2 (en) 1999-08-09 2012-01-31 The General Hospital Corporation Protein conjugates with a water-soluble biocompatible, biodegradable polymer
US6822086B1 (en) 1999-08-09 2004-11-23 The General Hospital Corporation Drug-carrier complexes and methods of use thereof
GB0012179D0 (en) 2000-05-20 2000-07-12 Imp Cancer Res Tech Assays and drug screening systems
US6548477B1 (en) 2000-11-01 2003-04-15 Praecis Pharmaceuticals Inc. Therapeutic agents and methods of use thereof for the modulation of angiogenesis
CN1505617A (zh) 2000-11-01 2004-06-16 ������˹ҩƷ��˾ 作为Met-AP2抑制剂的肽
US6919307B2 (en) 2000-11-01 2005-07-19 Praecis Pharmaceuticals, Inc. Therapeutic agents and methods of use thereof for the modulation of angiogenesis
US7105482B2 (en) 2000-11-01 2006-09-12 Praecis Pharmaceuticals, Inc. Methionine aminopeptidase-2 inhibitors and methods of use thereof
WO2003027104A1 (en) * 2001-09-27 2003-04-03 Idrtech Inc. Fumagillol derivatives and preparing method thereof
US6803382B2 (en) 2001-11-09 2004-10-12 Galderma Research & Development, S.N.C. Angiogenesis inhibitors and pharmaceutical and cosmetic use thereof
AU2003209227A1 (en) 2002-01-14 2003-07-30 The General Hospital Corporation Biodegradable polyketal polymers and methods for their formation and use
AU2003219796A1 (en) 2002-02-20 2003-09-09 Beth Israel Deaconess Medical Center Conjugates comprising a biodegradable polymer and uses therefor
WO2004009082A1 (en) 2002-07-19 2004-01-29 The General Hospital Corporation Oxime conjugates and methods for their formation and use
FR2872511B1 (fr) 2004-06-30 2006-08-11 Galderma Res & Dev Nouveaux inhibiteurs de l'angiogenese et leur utilisation pharmaceutique et cosmetique
US20090246211A1 (en) 2005-05-12 2009-10-01 Henri John T Molecular constructs suitable for targeted conjugates
ES2457418T3 (es) 2007-07-16 2014-04-25 Abbvie Inc. Indazoles, bencisoxazoles y bencisotiazoles como inhibidores de proteína cinasas
AU2008331516B2 (en) 2007-11-28 2014-01-09 Mersana Therapeutics, Inc. Biocompatible biodegradable fumagillin analog conjugates
KR20120057588A (ko) 2009-05-28 2012-06-05 메르사나 테라퓨틱스, 인코포레이티드 가변 속도 방출 링커를 포함하는 폴리알 약물 접합체

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5290807A (en) * 1989-08-10 1994-03-01 Children's Medical Center Corporation Method for regressing angiogenesis using o-substituted fumagillol derivatives
WO2003086382A1 (en) * 2002-04-11 2003-10-23 Children's Medical Center Corporation Tnp-470 polymer conjugates and use thereof
US20040105840A1 (en) * 2002-07-19 2004-06-03 Kinstler Olaf B. Protein conjugates with a water-soluble biocompatible, biodegradable polymer
WO2005023294A2 (en) * 2003-09-05 2005-03-17 The General Hospital Corporation Polyacetal drug conjugates as release system
US20070190018A1 (en) * 2003-09-05 2007-08-16 Papisov Mikhail I Dual phase drug release system

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
AKULLIAN L.C. ET AL.: "Abstract 2327: Fumagiii in-derived polymeric pro-drugs exhibit anti-tumor activity in B16 murine melanoma and in A2058 and PC3 human tumor xenograft models", 99TH AACR ANNUAL MEETING, [Online] 12 April 2008 (2008-04-12), - 16 April 2008 (2008-04-16), XP002543987, San Diego, CA US Retrieved from the Internet: URL:http://www.aacrmeetingabstracts.org/cgi/content/meeting_abstract/2008/l_Annual_Meeting/2327?maxtoshow=&HITS=10&hits=10&RESULTFORMAT=l&andorexacttitle=and&andorexacttitleabs=and&searchid=l&FIRSTINDEX=0&sortspec=relevance&fdate=l/l/2004&tdate=12/31/2008&resourcetype=HWCIT> [retrieved on 2009-09-01], abstract *
BERNIER S.G. ET AL.: "Fumagillinclass inhibitors of methionine aminopeptidase-2", DRUGS OF THE FUTURE, vol. 30, no. 5, May 2005 (2005-05), pages 497-508, XP008097519, ISSN: 0377-8282, the whole document *
PYUN H.-J. ET AL.: "Investigati on of novel fumagillin analogues as angiogenesis inhibitors" BIOORGANIC AND MEDICINAL CHEMISTRY LETTERS, vol. 14, no. 1, 5 January 2004 (2004-01-05), pages 91-94, XP002543988, GB, ISSN: 0960-894X, cited in the application, figure 1; compound 3D, page 93, column 2, paragraph 2 - paragraph 3 *
YASUKAWA T. ET AL.: "Targeted delivery of anti-angiogenic agent TNP-470 using water-soluble polymer in the treatment of choroidal neovascularization", INVESTIGATIVE OPHTHALMOLOGY & VISUAL SCIENCE, ASSOCIATION FOR RESEARCH IN VISION AND OPHTHALMOLOGY, vol. 40, no. 11, 1 October 1999 (1999-10-01), pages 2690-2696, XP002382876, US, ISSN: 0146-0404, the whole document *

Also Published As

Publication number Publication date
US8399512B2 (en) 2013-03-19
US20130158046A1 (en) 2013-06-20
AU2008331516B2 (en) 2014-01-09
WO2009073445A2 (en) 2009-06-11
WO2009073445A3 (en) 2010-01-28
JP5557746B2 (ja) 2014-07-23
JP2011504964A (ja) 2011-02-17
BRPI0820229A2 (pt) 2017-05-09
ZA201003819B (en) 2013-09-25
IL206057A0 (en) 2010-11-30
EA201070657A1 (ru) 2010-12-30
EP2217283A2 (en) 2010-08-18
NZ600039A (en) 2013-11-29
US20090148396A1 (en) 2009-06-11
NZ585547A (en) 2012-12-21
CA2706914A1 (en) 2009-06-11
CN101990441A (zh) 2011-03-23
MX2010005857A (es) 2010-11-22
AU2008331516A1 (en) 2009-06-11

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EA020251B1 (ru) Биосовместимые и биоразлагаемые конъюгаты аналогов фумагиллина
CA2695297C (en) Substituted cc-1065 analogs and their conjugates
US20230165892A1 (en) Polymer-conjugated metap2 inhibitors, and therapeutic methods of use thereof
US10759803B2 (en) Asparagine endopeptidase (AEP) inhibitors for managing cancer and compositions related thereto
JP2012528240A (ja) 可変速度放出リンカーを含むポリアル−薬物コンジュゲート
JP2016532710A (ja) 免疫調節剤としての１，２，４−オキサジアゾール誘導体
JP2016532711A (ja) 免疫調節剤としての１，３，４−オキサジアゾール及び１，３，４−チアジアゾールの誘導体
JP7425606B2 (ja) 四級化ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドサルベージ経路阻害剤コンジュゲート
CN106715533A (zh) 聚恶唑啉抗体药物结合物
AU2002328093B2 (en) Pharmaceutical compositions comprising polysaccharide conjugates for inhibiting the metastsis or preventing the recurrence of maligant tumor
US9895449B2 (en) Polymer-conjugated MetAP2 inhibitors, and therapeutic methods of use thereof
CN115298198A (zh) 用于肾相关癌症靶向治疗的新型化合物和组合物
WO2017086392A1 (ja) 新規なグルタミン酸誘導体とブロック共重合体を含有する組成物及びその用途
CA3141720A1 (en) Asparagine endopeptidase (aep) inhibitors, compositions, and uses related thereto
WO2008153967A1 (en) Bk1 antagonist conjugates

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): AM AZ BY KZ KG MD TJ TM

MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): RU